Сезонная динамика накопления фенольных соединений в траве ортилии однобокой

ФАРМАКОГНОЗИЯ И БОТАНИКА

Н.А. Кузьмичева

СЕЗОННАЯ ДИНАМИКА НАКОПЛЕНИЯ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ В ТРАВЕ ОРТИЛИИ ОДНОБОКОЙ

УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»

Изучена сезонная динамика накопления арбутина, а также суммы фенолгли-козидов, флавоноидов, гидроксикоричных кислот и проантоцианидинов в листьях и генеративных органах ортилии однобокой с помощью спектрофотометрического и денситометрического методов. Показано, что оба метода могут использоваться с равным успехом для количественного определения суммы фенолгликозидов и флавоноидов. Обнаружены три максимума накопления различных групп фенольных соединений в листьях ортилии, соответствующие фазам массового цветения, плодоношения и конца вегетации. Максимальное суммарное количество фенольных соединений накапливается в листьях и цветках ортилии однобокой в фазу массового цветения, достигая 28% в листьях (из них арбутина 4,6%) и 22% в цветках (из них арбутина 4%, суммы флавоноидов 10,7%),что позволяет определить в качестве оптимального времени для заготовки травы в Витебской области середину июня.

Ключевые слова: OrthШa secunda, арбутин, фенольные соединения, сезонная динамика.

ВВЕДЕНИЕ

Ортилия однобокая (боровая матка) -Orthilia secunda L. (House) или рамишия однобокая - Ramischia secunda (L.) Garcke (Pyrola secunda L.), семейство вересковые

- Ericaceae - многолетнее зимнезеленое растение с длинным разветвленным корневищем. Стебель высотой от 5 до 25 см, листья светло-зеленые, остропильчатые, продолговато-яйцевидные, длиной до 5 см, шириной до 3 см, образуют розетку в нижней части стебля, в верхней растут мелкие темно-зеленые или даже бурые чешуевидные очередные листочки менее сантиметра в длину [1].

Цветки поникающие, собраны по 8-18 в густом многоцветковом кистевидном однобоком соцветии. Венчик зеленоватобелый, почти колокольчатый, правильный, 4-5 мм длиной, со сходящимися лепестками, по краям мелкозубчатыми. Лепестков и чашелистиков по 5, доли чашечки треугольные, мелкозубчатые. Столбик длиннее венчика, без кольца, прямой. Рыльце широкое, почти звёздчатое, пятиугольное. Пыльники без рожков. В основании завязи

- железистый подпестичный диск с 10 зубчиками. Плод - овальная коробочка длиной до 6 мм, раскрывается снизу вверх. В Республике Беларусь цветёт в июне, пло-

доносит в августе - сентябре [1].

Растет преимущественно в сухих хвойных лесах, часто встречается в смешанных хвойно-лиственных лесах, березняках с примесью хвойных пород, а также осины, образуя местами значительные скопления. Встречается преимущественно в западных районах Восточной Сибири до Байкала и вокруг Байкала, на Дальнем Востоке и Предкавказье [1,2]. Произрастает также в Северной Америке: в Берингии, прибрежных районах Аляски и Британской Колумбии, Вашингтоне, северо-западе США [3]. Распространена в европейской части России, в Украине и Беларуси в хвойных и смешанных лесах [2,4].

Трава боровой матки содержит дубильные вещества, иридоиды (монотропе-ин), арбутин, метиларбутин, гидрохинон, ренифолин, химафилин, флавоноиды, смолы, кумарины, сапонины, горечи, органические кислоты (виннокаменная и лимонная), витамин С. Основные действующие вещества - фенольные соединения (арбутин, метиларбутин, гидрохинон, флавоно-иды, дубильные вещества) [1,2,4].

В начале 2003 года Минздравом РФ на это растение и способ его применения была официально утверждена нормативно-техническая документация. В Республике Беларусь ортилия однобокая не

разрешена к медицинскому применению в установленном порядке, присутствует в аптечном ассортименте в виде БАДов [5]:

1. Боровая матка (ортилия однобокая), 25 г, сырье растительное фасованное; производители: «Фармпродукт», «Алтай-фарм ООО» (Россия).

2. Боровая матка (ортилия однобокая), 30 г, сбор растительный; производитель «Эвалар ЗАО» (г. Бийск, Россия).

3. Боровая матка, 2 г, №20, в фильтр-пакетах; производитель «Эвалар» (Россия).

4. Боровая матка, 1,5 г, №20, в фильтр-пакетах; производитель «Алтай-фарм ООО» (Россия).

Во всех вышеперечисленных БАДах используется трава ортилии, которая представляет собой олиственные четырехгранные стебли и их кусочки, длиной от 4 до 14 см, цельные или частично измельченные, плотные. Стебли тонкие (диаметром до 1,5 мм), не ветвистые. Сильно выступают два ребра, расположенные друг напротив друга. Листья коротко-черешковые, продолговато-яйцевидные с острой верхушкой, по краю городчато-пильчатые, сверху темнозеленые, снизу - светлее. Длиной от 2 до 3,7 см и шириной от 1 до 3 см. Черешки длиной 1,5 см, сверху желобоватые, голые, зеленые. Жилкование перисто-сетчатое, главная жилка слегка выступает с верхней и нижней стороны листа. Плод - повислая коробочка. Запах слабый. Вкус слегка вяжущий [6].

Обладает противовоспалительным, мочегонным, иммуностимулирующим, обезболивающим, противоопухолевым, противомикробным действием, способствует улучшению репродуктивной способности женского организма [7].

Боровая матка увеличивает функциональную активность матки. Применяется как средство лечения гинекологических заболеваний воспалительного характера, аднексита, миомы и фибромы матки, при маточных кровотечениях, инфантилизме, эрозии шейки матки, спаечных процессах, непроходимости и воспалении маточных труб. При нарушениях менструального цикла, аменорее является одним из наиболее действенных средств. С давних пор применяется для лечения бесплодия у женщин [1]. Кроме того, используется как дезинфицирующее средство при воспалительных процессах в почках, при цисти-

тах, воспалении предстательной железы, геморрое, недержании мочи у взрослых и детей, остром гнойном воспалении уха [8].

Боровую матку чаще всего применяют в виде спиртовой настойки или водного настоя. При лечении женских заболеваний рекомендуется принимать боровую матку в сочетании с грушанкой, сабельником, красной щеткой и копеечником чайным [4].

Противопоказаний для приема орти-лии однобокой практически нет, кроме индивидуальной непереносимости, беременности и лактации [1].

Таким образом, ортилия однобокая заслуживает обстоятельного изучения как перспективное средство лечения женских заболеваний.

Наиболее дискуссионным вопросом по литературным источникам является время заготовки травы ортилии. В целом рекомендуются весьма широкие временные рамки: с весны, как только стает снег, и до глубокой осени, пока снеговой покров полностью не укроет растения. Одни считают лучшим периодом сбора позднюю осень (конец октября - начало ноября) [4], когда в траве ортилии обнаружено максимальное количество арбутина [9]. Другие указывают на максимальное содержание флавоноидов в траве ортилии в фазу бутонизации - начала цветения [10]. И, наконец, имеются сведения о максимальном накоплении экстрактивных веществ в траве ортилии в фазу плодоношения [11] и суммы фенольных соединений в траве гру-шанки круглолистной в конце лета - начале осени (август-сентябрь) [12].

Поскольку данные о динамике накопления действующих веществ в траве ор-тилии однобокой и рекомендуемые сроки заготовки по разным источникам противоречивы, целью нашего исследования явилось изучение сезонной динамики накопления фенольных соединений в траве ортилии однобокой.

МА ТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В качестве материала для исследования использовалась трава ортилии однобокой, заготовленная в период с апреля по декабрь 2011 года в сосновом лесу в окрестностях г.п. Руба Витебского района. Фенофазы определяли по общепринятым методикам [13]. Выделяли следующие фе-нофазы (табл. 1):

Таблица 1 - Сроки заготовки образцов травы ортилии однобокой

№ образца Дата Фенофаза

1 16.04.11 Начало роста побегов

2 23.04.11 Начало облиствения

3 23.06.11 Массовое цветение

4 09.07.11 Начало созревания плодов и семян

5 12.08.11 Начало опадения плодов

6 15.09.11 Одревеснение побегов

7 15.10.11 Окончание вегетационного периода

8 12.11.11 Фаза зимнего покоя

9 11.12.11 Фаза зимнего покоя

Образцы отбирались в соответствии с фазами вегетации. Поскольку в 2011 году снеговой покров установился позже обычных сроков, были взяты два образца травы ортилии в фазе зимнего покоя: в ноябре и декабре. Сушка воздушно-теневая. До проведения анализов образцы хранились в сухом помещении в плотных бумажных пакетах. Непосредственно перед количественным определением из образцов травы выделили листья и цветки или плоды. Стебли в анализе не участвовали, поскольку содержание действующих веществ в них обычно значительно ниже, чем в листьях и генеративных органах. Сырье измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм.

Был проведен хроматографический анализ в условиях, описанных для листьев брусники [14], определены потеря в массе при высушивании и содержание действующих веществ. Методики фитохимического анализа адаптировали к данному виду сырья на основе имеющихся в литературе.

Получение извлечений.

1. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл 70% этанола. Колбу с содержимым соединяли с обратным холодильником и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через вату в мерную колбу вместимостью 50 мл. Вату промывали небольшим количеством 70% этанола и доводили им же до метки (раствор А).

2. Около 0,1 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в стеклянный флакон вместимостью 10 мл, прибавляли 5 мл воды очищенной, закрывали пробками, помещали в специальное устройство для герметизации и нагревали на кипящей водяной бане в течение 40 минут. К горячему

извлечению прибавляли 0,1 г основного ацетата свинца, перемешивали и центрифугировали при 4000 об/мин в течение 7 минут. Центрифугат переносили в сухие флаконы (раствор Б).

Определение содержания фенолглико-зидов.

1. Содержание суммы фенолгликози-дов в пересчете на арбутин определяли методом прямой спектрофотометрии растворов А и Б при длине волны 285 нм [15].

2. Содержание арбутина и суммы фе-нолгликозидов определяли также в растворах Б денситометрическим способом, разработанным для листьев брусники [14].

Определение содержания суммы ги-дроксикоричных кислот.

Содержание суммы гироксикоричных кислот определяли методом прямой спек-трофотометрии растворов А при длине волны 325 нм [15].

Определение содержания суммы фла-воноидов.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин определяли методом дифференциальной спектрофотометрии растворов А с использованием в качестве комплексообразователя алюминия хлорида при длине волны 410 нм [16], а также денситометрическим методом [17]. В качестве стандарта использовали Рутин-стан-дарт Rotichrom Аг!.7176.1.

Определение содержания суммы про-антоцианидинов.

Содержание суммы проантоцианиди-нов в пересчете на цианидин определяли методом дифференциальной спектрофото-метрии растворов А с использованием нагревания в среде 5% кислоты хлористоводородной в бутаноле (по методике определения проантоцианидинов в корневищах с корнями сабельника болотного) [16].

Оптическую плотность растворов из-

меряли на спектрофотометре СФ-26. Данные подвергали статистической обработке с использованием программы Microsoft Office Excel 2007.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Хроматографический анализ проводили с очищенными водными извлечениями (раствор Б). По 3 мкл извлечений, полученных из листьев и генеративных органов рамишии однобокой, заготовленных в разные фазы развития, наносили на пластинки TLC Silica gel 60 F254 Merck в виде полос. В качестве стандарта использовали водный раствор арбутина-стандарта в концентрации 500 мкг/мл. Пластинки помещали в камеру с системой растворителей Этилацетат - метанол - вода (10:1,35:1). После прохождения фронта растворителей на 8 см пластинки высушивали при комнатной температуре и обрабатывали 0,5% раствором 2,6-дихлорхинон-4-хлоримида в метаноле. После высушивания выдерживали в парах аммиака в течение 2 минут. Фенолгликозиды проявлялись в виде пятен синего и темно-серого цвета на розовом фоне. Rf арбутина = 0,43. Два другие фе-нолгликозида неустановленного строения, проявляющиеся в виде синих пятен, имеют Rf соответственно 0,57 и 0,60.

Обнаружены также 2 вещества, проявляющиеся в виде пятен темно-серого цвета, с Rf соответственно 0,73 и 0,86.

При сравнении результатов спектрофотометрического определения суммы фе-нолгликозидов в растворах А и Б оказалось, что 70% спирт извлекает в 4 раза меньше производных арбутина, чем вода очищенная (табл. 2), поэтому далее для исследо-

вания динамики накопления этой группы действующих веществ использовали только раствор Б, полученный с использованием в качестве экстрагента воды очищенной и свинца ацетата основного для осаждения других фенольных соединений (флавонои-дов и дубильных веществ).

При сравнении результатов спектрофотометрического и денситометрическо-го определения суммы фенолгликозидов в растворе Б и суммы флавоноидов в растворе А обнаружена практически полная взаимозаменяемость этих методов. Итоговое содержание фенолгликозидов и флавонои-дов представлено как среднее значение из данных, полученных обоими методами.

Результаты количественного определения биологически активных веществ в листьях рамишии однобокой в зависимости от сроков заготовки сырья представлены в таблице 3.

Как видно из представленных данных, листья ортилии однобокой накапливают весьма значительные количества фенольных соединений, в сумме до 28%, что говорит о данном сырье как о перспективном в плане создания лекарственных средств на его основе. Больше всего в листьях орти-лии фенольных гликозидов (до 21%, из них арбутина до 4,6%), меньше флавоноидов и проантоцианидинов (до 2,76% и до 5,73% соответственно). Содержание гидроксико-ричных кислот не превышает 0,68%.

Содержание арбутина колеблется в течение вегетационного периода от 2,75% до 4,60% с максимумом в фазу массового цветения и минимумом в фазу одревеснения побегов (рис.1). Наблюдаются еще два максимума накопления, практически равнозначных первому: в фазу плодоношения

Таблица 2 - Содержание суммы фенолгликозидов в листьях рамишии однобокой в зависимости от природы экстрагента и метода очистки

№ образца Содержание суммы фенолгликозидов, %

70% этанол

1 2,92±0,11 8,9±0,3

2 2,90±0,08 12,1±0,1

3 2,96±0,02 21,8±0,9

4 3,08±0,06 12,3±1,1

5 2,93±0,16 16,4±1,2

6 2,96±0,22 10,2±1,4

7 3,01±0,08 13,1±0,3

8 3,87±0,16 11,3±0,4

9 3,72±0,20 8,8±0,8

Среднее 3,17±0,12 12,77±1,37

и в конце вегетационного периода.

Еще более четко определяются те же максимумы для накопления в листьях ор-тилии суммы фенольных гликозидов, но с явным преобладанием первого (рис. 2). Максимум в фазу бутонизации - начала

цветения для содержания флавоноидов в траве ортилии однобокой описан в литературе Ломбоевой С.С. (середина июня-се-редина июля для Иркутской области) [10].

По нашим данным, для накопления флавоноидов характерны три более или

Таблица 3 - Содержание арбутина, суммы фенольных гликозидов (ФГ), флавоноидов (ФЛ), гидроксикоричных кислот (ГКК) и проантоцианидинов (ПА) в листьях рамишии однобокой в зависимости от сроков заготовки*

№ Дата Содержание, %

Арбутин Сумма ФГ Сумма ФЛ Сумма ГКК Сумма ПА

1 16.04.2011 3,80±0,08 8,9±0,3 2,12±0,09 0,37±0,01 2,58±0,03

2 23.04.2011 3,71±0,06 12,1±0,1 2,44±0,03 0,36±0,04 3,31±0,08

3 23.06.2011 4,60±0,02 21,8±0,9 1,75±0,02 0,45±0,01 4,21±0,07

4 09.07.2011 4,33±0,03 12,3±1,1 2,76±0,12 0,48±0,06 4,14±0,07

5 12.08.2011 4,58±0,05 16,4±1,2 2,36±0,05 0,56±0,04 5,73±0,37

6 15.09.2011 2,75±0,03 10,2±1,4 2,18±0,03 0,53±0,03 3,61±0,05

7 15.10.2011 3,85±0,04 13,1±0,3 2,49±0,15 0,68±0,09 2,90±0,18

8 12.11.2011 4,41±0,07 11,3±0,4 2,43±0,16 0,50±0,11 3,72±0,32

9 11.12.2011 3,86±0,06 8,8±0,8 2,13±0,06 0,40±0,02 3,17±0,13

вегетации указаны в,

Рисунок 1 - Сезонная динамика накопления арбутина в листьях ортилии однобокой, %

Рисунок 2 - Сезонная динамика накопления суммы фенольных гликозидов в листьях

ортилии однобокой, %

менее равнозначных максимума: в фазы отрастания побегов, плодоношения и прекращения роста побегов (рис. 3).

Что касается проантоцианидинов, то максимум их накопления приходится на фазу плодоношения. Максимум в конце

вегетации выражен меньше и смещен в сторону периода зимнего покоя (рис. 4). В литературе описано максимальное накопление экстрактивных веществ в траве ортилии в фазу плодоношения [11].

Содержание гидроксикоричных кис-

Рисунок 3 - Сезонная динамика накопления суммы флавоноидов в листьях ортилии однобокой, %

Рисунок 4 - Сезонная динамика накопления суммы проантоцианидинов в листьях ортилии однобокой, %

лот изменяется от 0,36% до 0,68% с максимумом в конце вегетационного периода (рис. 5). Этот максимум согласуется с рекомендованными в литературе сроками заготовки травы ортилии, определенными в Алтайском крае Пензиной Т.Н. [9].

Таким образом, в сезонной динамике накопления фенольных соединений в листьях ортилии однобокой обнаружены три максимума, соответствующие фазам массового цветения, плодоношения и конца вегетации. Этим в основном и объясняется противоречивость литературных данных о сроках заготовки травы ортилии. Для флавоноидов и арбутина

они приблизительно равны между собой, для суммы феногликозидов, проантоци-анидинов и гидроксикоричных кислот преобладают соответственно первый, второй и третий.

Суммарная динамика накопления фенольных соединений представлена на рис.

6. В соответствии с полученными данными рекомендуется проводить заготовку листьев ортилии однобокой в середине июня (фаза массового цветения).

Результаты количественного определения действующих веществ в генеративных органах ортилии однобокой представлены в таблице 4.

0,80

0,70

0,60

0,50

0,40

0,30

0,20

0,10

0,00

Рисунок 5 - Сезонная динамика накопления суммы гидроксикоричных кислот

в листьях ортилии однобокой, %

гк

к

ПА НФЛ

ФГ

1 23456789

Рисунок 6 - Сезонная динамика накопления суммы фенольных гликозидов

Таблица 4 - Содержание арбутина, суммы фенолгликозидов (ФГ), флавоноидов (ФЛ) и гидроксикоричных кислот (ГКК) в цветках и плодах ортилии однобокой в зависимости от сроков заготовки

№ Дата Содержание арбутина, % Содержание суммы ФГ, % Содержание ФЛ, % Содержание ГКК, %

1 23.06.2011 4,05±0,12 10,72±0,18 10,86±0,33 0,16±0,02

2 09.07.2011 3,32±0,29 6,62±0,07 9,25±0,65 0,12±0,01

3 12.08.2011 2,91±0,01 7,04±0,14 9,18±0,66 0,13±0,01

4 15.09.2011 2,89±0,06 5,32±0,11 9,76±0,29 0,16±0,01

5 15.10.2011 1,43±0,07 2,51±0,10 6,27±0,12 0,16±0,01

Очевидно, что содержание арбутина, держание гидроксикоричных кислот в ге-

суммы фенолгликозидов и флавоноидов неративных органах ортилии однобокой

выше в цветках в фазу массового цвете- почти не изменяется (рис.7).

ния, чем в зеленых и зрелых плодах. Со-

Рисунок 7 - Сезонная динамика накопления суммы фенольных гликозидов

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для подтверждения подлинности сырья рекомендуется ТСХ на пластинках с силикагелем в системе Этилацетат-мета-нол-вода (10:1,35:1). После опрыскивания 0,5% раствором 2,6-дихлорхинон-4-хлоримида в метаноле и выдерживания в парах аммиака фенолгликозиды ортилии однобокой проявляются в виде синих пятен на розовом фоне с = 0,43 (арбутин);

0,53 и 0,60.

Разработаны методики спектрофотометрического определения суммы фенолгли-козидов, флавоноидов, гидроксикоричных кислот и проантоцианидинов в листьях и генеративных органах ортилии однобокой, а также денситометрические методики определения арбутина, суммы фенолгли-козидов и флавоноидов. Спектрофотометрический и денситометрический способы определения количественного содержания суммы фенолгликозидов и флавоноидов в листьях ортилии однобокой могут использоваться равнозначно.

В сезонной динамике накопления различных групп фенольных соединений в листьях ортилии однобокой обнаружены три максимума, соответствующие фазам массового цветения, плодоношения и конца вегетации. Этим в основном и объясняется противоречивость литературных данных о сроках заготовки травы орти-лии.

В фазу цветения в листьях и цветках ортилии однобокой накапливается макси-

мальное суммарное количество фенольных соединений, что позволяет определить в качестве оптимального времени для заготовки травы середину июня.

SUMMARY

N.A. Kuzmichova SEASONAL DYNAMICS OF PHENOLIC COMPOUNDS ACCUMULATION IN ORTHILIA SECUNDA GRASS Seasonal dynamics of arbutin (and phe-nolglycosides, flavonoids, proanthocyani-dins, and hydroxicinnamic acids) accumulation in leaves and generative organs of Orthilia secunda was researched by means of spectrophotometric and densitometric methods. It is disclosed that both of methods can be used equally for quantitative determination of phenolglycosides and flavonoids sum. It was discovered three maxi-mums of different phenolic compounds groups accumulation in Orthilia secunda leaves that correspond to phases of massive florescence, fruiting and vegetation end. Maximum total quantity of phenolic compounds accumulates in leaves and flowers of Orthilia secunda in massive florescence phase and achieve 28% in leaves (thereof arbutin is 4,6%) and 22% in flowers (thereof arbutin is 4,6%, flavonoids sum is 10,7%).

That allows to determine the middle of June as optimum grass harvesting time in Vitebsk region.

Keywords: Orthilia secunda, arbutin, phenolic compounds, seasonal dynamics.

Вестник фармации №3 (57) 2012 ЛИТЕРАТУРА

1. Боровая матка (ортилия) - Aлтай-

ский травник // [Электрон. ресурс]. - Режим доступа: http://travnick-altay.com/

borovaja-matka-ortilija-odnobokaja.html. -Дата доступа: 26.11.11.

2. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т.2. Сем. Actinidiaceae-Malvaceae, Euphorbiaceae - Haloragaceae / Отв. ред A^. Буданцев. - СПб.; М.: Товарищество научных изданий КМК. - 2009. - 513 с.

3. Beatty, G.E. Refugial persistence and postglacial recolonization of North America by the cold-tolerant herbaceous plant Orthilia secunda / G.E. Beatty, J. Provan // Molecular Ecology. - 2010. - C. 5009-5021.

4. Aставина, Н.И. Трава от 40 болезней / Н.И. Aставина / Consilium Provisorum. -2009. - №1. - С. 57

5. Медицинский портал Беларуси -Биологически активные добавки и травы [Электрон.ресурс]. - Режим доступа: http://103.by/pharmacy. - Дата доступа: 09.11.11.

6. Кахерская, Ю.С. Сравнительная морфолого-анатомическая характеристика сырья ортилии однобокой и грушанки круглолистной / Ю.С. Кахерская, Е.Г. Горячкина, Г.М. Федосеева // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - Т.76, №1. - С. 84-85.

7. Ботоева, E.A. Экспериментальная фармакотерапия повреждений матки и ее придатков сухим экстрактом ортилии однобокой: автореф. дис.... канд. мед. наук/ ЕА.Ботоева.- Улан-Удэ, 2003. - 23 с.

8. Левченко, Н.В. Боровая матка для здоровья женщины / Н.В. Левченко. -СПБ.: Вектор, 2005.- 10-12 с.

9. Пензина, Т. Н. Динамика содержания фенольных соединений в листьях ортилии однобокой, произрастающей в ленточном сосновом бору в окрестностях Барнаула / Т.Н. Пензина, Н.И. Шелестова // Aктуаль-ные проблемы теории и практики фармации: Сб. науч. ст. - 2000. - С. 158-160.

10. Ломбоева, С.С. Динамика накопления флавоноидов в надземной части ортилии однобокой (Orthilia secunda (L.) House) / С.С. Ломбоева, Л.М. Танхаева, Д.Н. Оленников // Химия растительного сырья. - 2008. - №3. - С. 83-88.

11. Плынская, ЖА. Динамика экстрак-

тивных веществ Orthilia secunda (L.) в летний период / Ж.А. Плынская, Н.А. Величко // [Электронный ресурс] Режим доступа: http://212.41.20.10/img/konferenc/2011/f20. doc. - Дата доступа: 07.02.12.

12. Мазепина, Л.С. Сравнительное фармакогностическое изучение грушанки круглолистной, зимолюбки зонтичной и толокнянки обыкновенной: дис. ... канд. фарм. наук / Л.С. Мазепина. - Москва, 2011. - 172 с.

13. Юркевич, И.Д. Фенологические исследования древесных и травянистых растений (методическое пособие) / И.Д.Юркевич, Д.С.Голод, Э.П.Ярошевич.

- Минск: Наука и техника. - 1980. - 88 с.

14. Иванкова, М.Н. Количественное определение арбутина в листьях брусники видеоденситометрическим методом и методом ВЭЖХ / Достижения фундаментальной медицины и фармации. Материалы 67-ой научной сессии сотрудников университета. 2-3 февраля 2012 г. Витебск.

- ВГМУ - 2012. - С. 276.

15. Сравнительное изучение содержания фармакологически активных фенольных веществ в видах и разновидностях рода багульник, произрастающих в Сибири, на Дальнем Востоке и в Беларуси / Н.С. Фурса [и др.] // Вестник фармации. - 2004.

- №2. - С. 28-30.

16. Государственная фармакопея Республики Беларусь. В 3 т. Т 2. Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья / Министерство здравоохранения Республики Беларусь, УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении»; под общ.ред. А.А. Шерякова. - Молодечно: Типография «Победа», 2009. - С. 430-431.

17. Бузук, Г.Н. Цветометрический и денситометрический методы анализа в стандартизации таблеток «Аскорутин» и «Рутаскорбин» / Г.Н. Бузук, Н.А. Кузьмичева // Вестник фармации. - 2011. - №3. - С. 12-18.

Адрес для корреспонденции:

210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,

Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, кафедра фармакогнозии с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8(0212) 37-09-29.

Кузьмичева Н.А.

Поступила 17.09.2012 г.