ЛИПОПЕПТИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ И РОДСТВЕННЫЕ СПОСОБЫ
LIPOPEPTIDE COMPOSITION AND RELATED METHODS

Родственные заявки
Настоящая заявка испрашивает приоритет к заявке на патент США № 61/263784, поданной 23 ноября 2009, которая включена в настоящее описание в полном объеме посредством ссылки.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к улучшенным липопептидным композициям для восстановления в жидком разбавителе для получения фармацевтической композиции для парентерального введения, так же как к способам получения твердых липопептидных композиций. Предпочтительные улучшенные липопептидные композиции включают твердый препарат на основе даптомицина с увеличенными скоростями восстановления в водных жидкостях и/или увеличенной химической стабильностью даптомицина.
Уровень техники
Staphylococcus aureus
Даптомицин представляет собой циклический липопептидный антибиотик, предназначенный для лечения сложных инфекций кожи и структуры кожи и бактериемии, включая бактериемию с подозреваемым или доказанным инфекционным эндокардитом. Даптомицин для инъекции можно вводить внутривенно для лечения обозначенных инфекций, вызванных чувствительными штаммами многочисленных грамположительных микроорганизмов, включая метициллин-резистентный  (MRSA). Даптомицин для инъекции (CUBICIN, Cubist Pharmaceuticals, Inc., Lexington, MA) поставляют в виде лиофилизированного порошка, который восстанавливают и готовят смесь как фармацевтическую композицию для парентерального введения. Восстановленная композиция на основе даптомицина может быть получена как фармацевтическая композиция для парентерального введения, например, с помощью комбинирования с медицинской точки зрения с соответствующим количеством фармацевтического разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия). Разбавитель может быть одинаковым или различным. Парентеральную фармацевтическую композицию, содержащую даптомицин, можно вводить с помощью внутривенной инфузии. Для восстановления в фармацевтическом разбавителе лиофилизированного порошка, содержащего даптомицин, может потребоваться 15-45 минут в зависимости от методики восстановления.
Streptomyces roseosporus
Biotechnology of Antibiotics
Даптомицин (Фигура 1) может быть получен из продукта ферментации микроорганизма  с подпиткой н-декановой кислотой. Baltz in . 2nd Ed., ed. W. R. Strohl (New York: Marcel Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435. Первоначальные попытки отделить даптомицин от структурно подобных компонентов в продукте ферментации приводят к идентификации других структурно подобных соединений, включающих ангидро-даптомицин (Фигура 2), бета-изомер даптомицина (Фигура 3) и продукт гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4). Ангидро-даптомицин (Фигура 2) может быть получен при проведении методик для отделения даптомицина от структурно подобных компонентов в продукте ферментации. Регидратация ангидро-сукцинимидо формы производит второй продукт разложения, который содержит β-аспартил группу и определяется как β-изомерная форма даптомицина (Фигура 3). Кирш и др. (Pharmaceutical Research, 6:387-393, 1989, «Kirsch») раскрывает ангидро-даптомицин и бета-изомер даптомицина, полученные при очистке даптомицина. Кирш описал способы минимизации уровней ангидро-даптомицина и β-изомера с помощью управления условиями pH и температурными условиями. Однако Кирш не смог стабилизировать даптомицин и предотвратить превращение даптомицина в ангидро-даптомицин и его последующую изомеризацию в β-изомер. Кирш также не смог предотвратить разложение даптомицина на другие продукты разложения, несвязанные с ангидро-даптомицином и β-изомером.
Патент США № 6696412 раскрывает несколько дополнительных соединений, присутствующих в продукте ферментации, из которого получают даптомицин, и обеспечивает способы очистки даптомицина с увеличенной чистотой. Дополнительные соединения включают продукт гидролиза лактона даптомицина, имеющий химическую структуру, изображенную на Фигуре 4. Способы очистки даптомицина могут включать образование мицелл даптомицина, удаление загрязнителей с низкой молекулярной массой с помощью фильтрования и затем превращение фильтрата мицеллы, содержащей даптомицин, в состояние немицеллы с последующим анионным обменом и диафильтрованием с обратным осмосом для получения даптомицина с высокой чистотой, который затем может быть лиофилизирован.
Одно измерение химической стабильности даптомицина в лиофилизированном порошке даптомицина представляет собой количество даптомицина (Фигура 1), присутствующее в восстановленной композиции на основе даптомицина относительно количества структурно подобных соединений, включающих ангидро-даптомицин (Фигура 2), бета-изомер даптомицина (Фигура 3) и продукт гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4). Количество даптомицина относительно количества этих структурно подобных соединений может быть измерено с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) после восстановления в водном разбавителе. Чистоту даптомицина и количества структурно подобных соединений (например, Фигуры 2-4) могут определить из площадей пиков, полученных с помощью ВЭЖХ (например, в соответствии с Примером 4 в настоящем описании), для обеспечения измерения химической стабильности даптомицина в твердой форме. Чистота и химическая стабильность даптомицина может также быть измерена в пределах жидкой восстановленной композиции на основе даптомицина в течение некоторого времени как измерение химической стабильности восстановленного даптомицина в жидкой форме.
Существует потребность в твердых липопептидных композициях, которые быстро восстанавливаются (например, через менее чем приблизительно 5 минут) в фармацевтическом разбавителе для получения восстановленных липопептидных композиций, которые могут быть приготовлены как фармацевтические композиции. Например, для восстановления 500 мг виалы лиофилизированного даптомицина для инъекции (CUBICIN) лиофилизированный порошок объединяют с 10 мл 0,9% водного хлорида натрия, оставляют на 10 минут (или более) и затем мягко вращают или циркулируют «несколько минут» для образования восстановленной композиции на основе даптомицина для получения парентеральной фармацевтической композиции на основе даптомицина.
Существует также потребность в твердых композициях даптомицина с улучшенной химической стабильностью в твердой и/или восстановленной форме (то есть, более высокий общий процент чистоты даптомицина в течение некоторого времени), обеспечивающих преимущества более длинного срока годности, увеличенную толерантность к более различным условиям хранения (например, более высокая температура или влажность) и увеличенную химическую стабильность после восстановления в качестве жидкого состава для парентерального введения.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к твердым липопептидным композициям для восстановления в водном разбавителе для образования фармацевтических композиций. Липопептидные композиции получают с помощью превращения фармацевтически приемлемого водного раствора, содержащего липопептид, в твердую липопептидную композицию (например, с помощью лиофилизации, сушки распылением или подобного). Твердая липопептидная композиция в дальнейшем может быть восстановлена в водном фармацевтически приемлемом разбавителе для получения фармацевтического продукта для парентерального введения.
В первом варианте осуществления время для восстановления твердых липопептидных композиций в водном разбавителе может быть неожиданно уменьшено с помощью увеличения pH водного липопептидного раствора (предпочтительно до pH приблизительно 6,5-7,5, более предпочтительно приблизительно 7,0) до лиофилизации раствора для образования твердой липопептидной композиции. Например, твердые композиции на основе даптомицина, полученные с помощью лиофилизации жидких растворов даптомицина (без сахара или глицина) при pH приблизительно 7,0, восстанавливали более быстро в 0,9% водном хлориде натрия, чем иначе сопоставимые составы даптомицина, лиофилизированные при pH приблизительно 4,7.
Скорость восстановления определенных твердых липопептидных композиций в водном разбавителе была также ускорена с помощью комбинирования липопептида с глицином или сахаром (предпочтительно, невосстанавливающим сахаром) до превращения раствора в твердый липопептид. Например, 500 мг лиофилизированных фармацевтических композиций на основе даптомицина в Таблице 6, полученных из растворов, включающих даптомицин и невосстанавливающий сахар или глицин при pH приблизительно 7,0, восстанавливали в 0,9% водном хлориде натрия через менее чем 2 минуты, причем большинство композиций восстанавливали через менее чем 1 минуту.
Твердые фармацевтические липопептидные перпараты могут быть продуктом, полученным с помощью следующего способа: (a) образование водного раствора липопептида при pH выше изоэлектрической точки липопептида (например, выше приблизительно 3,8 для даптомицина); (b) растворение глицина или сахара (предпочтительно невосстанавливающего сахара) в водном растворе с липопептидом для образования жидкого липопептидного состава; (c) доведение pH жидкого липопептидного состава до приблизительно от 6,5 до 7,5; и (d) превращение жидкого липопептидного состава в твердую фармацевтическую липопептидную композицию (например, с помощью лиофилизации). Например, лиофилизированный препарат на основе даптомицина, который восстанавливается через менее чем приблизительно 2 минуты в водном разбавителе 0,9% водном хлориде натрия, может быть получен с помощью: (a) образования водного раствора даптомицина при pH приблизительно 4,5-5,0 (например, pH приблизительно 4,7); (b) добавления буферного агента, включающего фосфат, цитрат, малеат или их комбинацию, к водному раствору даптомицина для получения буферного состава даптомицина; (c) растворения одного или более сахаров в буферном составе даптомицина для получения буферного состава сахара даптомицина, содержащего приблизительно от 2,5% масс./об. до приблизительно 25% масс./об. сахара(ов) (например, приблизительно 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23% или 24%), причем сахар(а) выбран из группы, состоящей из трегалозы, сахарозы, маннита и их комбинаций; (d) доведения pH буферного состава сахара даптомицина до pH приблизительно от 6,5 до 7,5 (например, 7,0); и (e) лиофилизации буферного состава сахара даптомицина для получения твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина. Предпочтительно, сахар(а) включает сахарозу, сахарозу и маннит или трегалозу.
Во втором варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает композиции на основе даптомицина с улучшенной химической стабильностью даптомицина, измеренной как более высокий общий процент чистоты даптомицина в течение некоторого времени (как определено с помощью ВЭЖХ в соответствии со способом Примера 4). Удивительно, что даптомицин, содержащийся в твердых препаратах с определенными предпочтительными композициями (например, даптомицин, объединенный с сахарозой или трегалозой), был химически более стабилен, чем даптомицин в твердых препаратах на основе даптомицина без сахара или глицина. Химическую стабильность даптомицина в форме твердого вещества измеряли с помощью сравнения измерений общей чистоты даптомицина у многочисленных твердых препаратов на основе даптомицина, каждый из которых получен в соответствии с Примером 4. Более высокую химическую стабильность измеряли как более высокие сравнительные измерения общей чистоты даптомицина между двумя образцами в соответствии с Примером 4. Например, химическая стабильность даптомицина, измеренная у твердых композиций на основе даптомицина, содержащих один или более невосстанавливающих сахаров, таких как сахароза, была неожиданно увеличена от 10% и более чем 90% в течение 6-месячного периода хранения до растворения в 0,9% водном хлориде натрия (по сравнению с химической стабильностью даптомицина, измеренной у твердых композиций на основе даптомицина без любого сахара).
Также удивительно, что более высокую химическую стабильность даптомицина наблюдали в течение вплоть до 14 дней в восстановленных жидких растворах даптомицина при различных температурах в препаратах на основе даптомицина, содержащих один или более определенных невосстанавливающих сахаров (например, сахарозу), чем для сопоставляемых составов даптомицина без сахара или глицина. Например, химическая стабильность даптомицина в восстановленном растворе более чем 14 дней была также неожиданно увеличена для композиций, содержащих даптомицин с определенными невосстанавливающими сахарами (например, сахарозой).
2
4
Предпочтительные примеры твердых фармацевтических препаратов на основе даптомицина включают от приблизительно 2,5% до 25,0% одного или более невосстанавливающих сахаров или глицина. Другие предпочтительные примеры твердых фармацевтических препаратов на основе даптомицина включают от приблизительно 2,5% до 25,0% сахара, выбранного из группы, состоящей из сахарозы, маннита и трегалозы. Наиболее предпочтительные твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина состоят по существу из даптомицина, сахарозы, буферного агента фосфата натрия (например, двухосновный фосфат натрия, NaHPO) и вплоть до 8% других материалов (например, как измерено с помощью площади пика ВЭЖХ при 214 нм в соответствии с Примером 4).
Твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина могут получить с помощью превращения водного раствора, содержащего даптомицин и невосстанавливающий сахар (например, 15-20% масс./об. сахарозы в растворе) при pH выше изоэлектрической точки даптомицина (например, pH приблизительно 3,7 или выше). Предпочтительно, pH водного раствора, содержащего даптомицин и невосстанавливающий сахар (например, сахарозу), представляет собой приблизительно 4,5-8,0 (включая, например, значения pH 4,5-7,5, 4,7-7,5, 5,0-7,5, 5,5-7,5, 4,7-7,0, 5,0-7,0, 5,5-7,0, 6,0-7,0 и 6,5-7,0 и значения между ними) при превращении в твердый фармацевтический препарат на основе даптомицина (например, порошок). Предпочтительно, лиофилизированный препарат на основе даптомицина, имеющий время восстановления приблизительно 2 минуты или менее в водном разбавителе получают с помощью: (a) образования водного раствора даптомицина при pH приблизительно 4,7-5,0; (b) добавления буферного агента, включающего фосфат, цитрат, ТРИС, малеат или их комбинацию, к водному раствору даптомицина; (c) растворения сахара (например, невосстанавливающего сахара, такого как сахароза) в водном растворе с даптомицином для получения буферного состава сахара даптомицина; (d) доведения pH буферного состава сахара даптомицина до приблизительно от 6,5 до 8,0 (включая, например, значения pH 6,5-7,5, 6,5-7,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0, 7,0-8,0, 7,0-7,5 и значения между ними); и (e) лиофилизации буферного состава сахара даптомицина для получения твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина.
Если не указано иначе, используемые в настоящем описании все технические и научные термины имеют то же самое значение, как обычно понимает специалист в данной области техники, к которой принадлежит настоящее изобретение. Хотя методы и материалы, подобные или эквивалентные материалам, описанным в настоящей заявке, могут быть использованы на практике или при исследовании настоящего изобретения, соответствующие методы и материалы описаны ниже. Все публикации, заявки на патент, патенты и другие ссылки, упомянутые в настоящем описании, включены в полном объеме посредством ссылки. В случае конфликта настоящая спецификация, включающая определения, будет иметь преимущественную силу. Кроме того, материалы, способы и примеры являются только иллюстративными и не предназначены ограничивать настоящее изобретение.
Другие характерные особенности и преимущества изобретения будут очевидны из следующего подробного описания и из формулы изобретения.
Краткое описание чертежей
Фигура 1 представляет собой химическую структуру даптомицина.
Фигура 2 представляет собой химическую структуру ангидро-даптомицина.
Фигура 3 представляет собой химическую структуру бета-изомера даптомицина.
Фигура 4 представляет собой химическую структуру продукта гидролиза лактона даптомицина.
Фигура 5 представляет собой Таблицу 6, перечисляющую примеры предпочтительных композиций на основе даптомицина. Эти композиции получали в виде жидких растворов, затем лиофилизировали для получения твердых фармацевтических препаратов на основе даптомицина, которые восстанавливают в водном фармацевтическом разбавителе в течение менее чем 2 минут (включая композиции, которые восстанавливают через менее чем 1 минуту). В Таблице 6 «Время восстан» относится ко времени, необходимому для растворения приблизительно 500 мг лиофилизированной композиции на основе даптомицина, описанной в колонке «Состав (состояние твердого вещества)», в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия при комнатной температуре (приблизительно 25°C).
Фигура 6 представляет собой Таблицу 7, перечисляющую примеры других композиций на основе даптомицина. Эти композиции получали в виде жидких растворов, затем лиофилизировали для получения твердых фармацевтических липопептидных препаратов, которые восстанавливают в водном фармацевтическом разбавителе в течение 2 минут или более. В Таблице 7 «Время восстан» относится ко времени, необходимому для растворения приблизительно 500 мг лиофилизированного раствора даптомицина в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия при комнатной температуре (приблизительно 25°C).
Фигура 7 представляет собой Таблицу 8, перечисляющую примеры композиций на основе даптомицина, содержащих сахар.
Фигура 8 представляет собой Таблицу 9, показывающую процентное изменение в общей чистоте даптомицина, измеренное и вычисленное для различных составов даптомицина в соответствии с Примером 4.
Подробное описание изобретения
Липопептидные композиции с ускоренным восстановлением
В первом варианте осуществления изобретения обеспечивают твердые фармацевтические липопептидные препараты, которые имеют время восстановления менее чем 5 минут в водном фармацевтическом разбавителе. Например, 500 мг твердых фармацевтических липопептидных препаратов на основе даптомицина, полученных с помощью лиофилизации раствора даптомицина, содержащего глицин или сахар(а), могут растворить в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия при комнатной температуре (приблизительно 25°C) через 4 минуты или менее (включая время растворения 4, 3, 2, 1 и менее чем 1 минуту).
Неожиданно, что определенные твердые фармацевтические липопептидные препараты, полученные из жидкого липопептидного состава при pH приблизительно 7,0, восстанавливают в водном фармацевтическом разбавителе при более быстрой скорости, чем иначе идентичные твердые фармацевтические липопептидные препараты, полученные из сопоставимого жидкого липопептидного состава при более низком pH (например, 4,7). Например, два водных раствора даптомицина с идентичными композициями (без сахара или глицина) при значениях pH 4,7 и 7,0 в результате лиофилизации образовали порошки, которые восстанавливали в разбавителе 0,9% водном хлориде натрия через 5,0 минут (для pH 4,7) по сравнению с 1,4 минутами (для pH 7,0) (См. Таблицу 6 и Таблицу 7). Кроме того, добавление глицина или сахаров (предпочтительно, одного или более невосстанавливающих сахаров) к составу даптомицина также увеличивало скорость восстановления результирующего твердого фармацевтического липопептидного препарата.
Твердые фармацевтические липопептидные препараты, имеющие увеличенную скорость восстановления, доступны из водного раствора липопептида при подходящем pH (например, 4,7-7,0) и температуре (например, 2-10°C). Обычно, твердые фармацевтические липопептидные препараты могут быть получены из водного раствора липопептида при pH выше изоэлектрической точки липопептида. Предпочтительно, липопептид включает даптомицин (Фигура 1). Предпочтительные способы получения твердых фармацевтических препаратов на основе даптомицина описаны в Примере 2a и 2b. Твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина могут быть получены из водного раствора даптомицина при pH выше изоэлектрической точки даптомицина (например, pH выше приблизительно 3,7 или 3,8, включая значения pH 4,5, 4,7, и другие более высокие значения pH, раскрытые в настоящем описании) и при температуре 2-10°C. Даптомицин может быть получен в замороженном растворе в стерильной воде для инъекции (sWFI) при концентрации 125-130 мг/мл, при pH 3,0 и в дальнейшем pH, доведенном до желательного pH с помощью добавления гидроксида натрия (например, 3,0-10,0 N, включая 3,0 N и 10,0 N) при температуре приблизительно 2-10°C. pH могут доводить до желательного значения, например, с помощью добавления гидроксида натрия, хлористоводородной кислоты, фосфорной кислоты и/или уксусной кислоты.
2
4
Буферный агент необязательно добавляют к водным липопептидным растворам выше pH приблизительно 4,7. Буферные агенты могут включать, например, агенты, включающие части фосфата, цитрата, малеата или карбоната или их комбинации, и фармацевтически соответствующие противоионы. Количество буферного агента может быть выбрано на основании молярного отношения буферного агента к даптомицину (например, как описано в Таблице 6). Буферный агент может быть добавлен в безводной или водной форме. Определенные примеры буферных агентов представляют собой соль натрия или калия фосфорной кислоты, соль натрия или калия борной кислоты, соль натрия или калия лимонной кислоты, соль натрия или калия карбоновой кислоты, фосфат натрия (например, двухосновный фосфат натрия), ТРИС (трис(гидроксиметил)аминометан и соль малеиновой кислоты. В одном аспекте буферный агент выбран из двухосновного фосфата натрия (NaHPO), цитрата натрия, бикарбоната натрия, моногидрохлорида гистидина ТРИС и малеата. Для водных растворов даптомицина буфер предпочтительно включает приблизительно 50 мМ фосфатного буферного агента (например, двухосновного фосфата натрия), добавленного к водному раствору даптомицина при pH приблизительно 4,5-6,0 (предпочтительно при pH приблизительно 5,0). pH кислого водного липопептидного раствора (например, pH приблизительно 3,0) могут поднять до добавления буферного агента с помощью добавления 3N гидроксида натрия при условиях охлаждения (2-10°C) до добавления буферного агента(ов).
Один или более сахаров (например, невосстанавливающие сахара) и/или глицин могут добавить к водному липопептидному раствору до превращения раствора в фармацевтические липопептидные препараты (например, с помощью лиофилизации). Количество и способ комбинирования глицина или сахара(ов) с водным липопептидным раствором предпочтительно выбирают для получения жидкого липопептидного раствора, который может быть в дальнейшем доведен до pH приблизительно от 6,5 до 7,5 (например, с помощью добавления 3N гидроксида натрия при приблизительно 2-10°C). Для жидкого состава даптомицина глицин и/или один или более сахаров предпочтительно объединяют с помощью перемешивания при соответствующей температуре (например, 2-10°C). Сахар(а) представляет собой предпочтительно невосстанавливающие сахара, хотя водные растворы даптомицина могут получить с глицином, трегалозой, сахарозой, маннитом, лактозой, мальтозой, фруктозой, декстрозой и их комбинациями при pH приблизительно 5,0 или выше. Молярное отношение липопептида к общему количеству глицина и/или одного или более сахаров может быть выбрано для получения твердых композиций с увеличенными скоростями восстановления в водных растворителях (таких как, например, композиции, описанные в Таблице 6). Например, жидкие растворы сахара даптомицина растворы предпочтительно включают даптомицин и сахарозу при молярном отношении даптомицин:сахароза от [1,00:1,12] до приблизительно [1,00:8,98].
pH липопептидного раствора может быть доведен до приблизительно 6,5-7,5 после комбинирования липопептида, сахара(ов) или глицина и буферного агента(ов), но до превращения жидкого липопептидного раствора в твердый фармацевтический препарат. Предпочтительно, липопептид включает даптомицин и жидкий состав даптомицина доводят до pH приблизительно 6,5-7,0 и наиболее предпочтительно до pH приблизительно 7,0 до превращения в форму твердого вещества, но после добавления буферного агента(ов) и глицина и/или сахара(ов). Фигура 5 (Таблица 6) описывает примеры предпочтительных жидких композиций на основе даптомицина, которые были лиофилизированы для получения твердых фармацевтических липопептидных препаратов, которые быстро восстанавливаются (растворяются) в водном разбавителе. Для каждой из композиций, содержащих глицин и невосстанавливающий сахар, в Таблице 6 500 мг твердой композиции сахара даптомицина растворяли в 0,9% водном хлориде натрия через менее чем 1 минуту. Для сравнения многие из твердых фармацевтических препаратов, описанных в Таблице 7 (Фигура 3), полученных из жидких композиций на основе даптомицина при pH приблизительно 4,7, имели более длительное время восстановления, чем композиции в Таблице 6 (например, для восстановления в 10 мл разбавителя 0,9% водного хлорида натрия при 25°C 500 мг твердых фармацевтических композиций на основе даптомицина, описанных в Таблице 7, требовалось 2 минуты или более).
Жидкий липопептидный состав могут превратить в твердую фармацевтическую липопептидную композицию с помощью любого соответствующего способа, включающего лиофилизацию, сушку распылением или сушку в псевдоожиженном слое. Пример 3 описывает методы лиофилизации, используемые для превращения определенных жидких составов даптомицина в Таблице 6 в твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина до измерения времени восстановления, также представленного в Таблице 6. Твердые композиции на основе даптомицина могут быть лиофилизированными, высушенными сублимацией, высушенными распылением, высушенными в псевдоожиженном слое, затвердевшими при распылении, осажденными или кристаллизованным порошком или аморфным твердым веществом. В одном аспекте порошок представляет собой лиофилизированный или высушенный распылением порошок. В другом аспекте изобретения порошок представляет собой лиофилизированный порошок.
Молярное отношение даптомицина к сахару в твердом фармацевтическом препарате даптомицина находится предпочтительно в диапазоне от приблизительно [1:1,12] до приблизительно [1:21,32]. Например, твердый фармацевтический препарат на основе даптомицина может включать сахарозу с молярным отношением даптомицина к сахарозе от приблизительно [1:1,12] до приблизительно [1:8,98], включая молярные отношения даптомицин:сахароза от [1:4,49] до [1:8,98], от [1:6,73] до [1:8,98], [1:1,12], [1:1,344], [1:1,792], [1:2,24], [1:2,688], [1:3,136], [1:3,584], [1:4,032], [1:4,49], [1:4,928], [1:5,376], [1:5,824], [1:6,272], [1:6,73], [1:7,168], [1:7,616], [1:8,064], [1:8,512] или [1:8,98]. В одном аспекте эксципиент представляет собой маннит и молярное отношение даптомицина к манниту представляет собой от приблизительно [1:2,52] до приблизительно [1:5,04]. В другом аспекте молярное отношение даптомицина к манниту представляет собой [1:2,52], [1:3,36], [1:4,20] или [1:5,04]. В другом аспекте эксципиент представляет собой сахарозу и молярное отношение даптомицина к сахарозе представляет собой от приблизительно [1:1,12] до приблизительно [1:8,98]. В другом аспекте молярное отношение даптомицина к сахарозе представляет собой от [1:4,49] до приблизительно [1:8,98]. В другом аспекте молярное отношение даптомицина к сахарозе представляет собой от приблизительно [1:6,73] до приблизительно [1:8,98]. В другом аспекте молярное отношение даптомицина к сахарозе представляет собой [1:1,12], [1:1,344], [1:1,792], [1:2,24], [1:2,688], [1:3,136], [1:3,584], [1:4,032], [1:4,49], [1:4,928], [1:5,376], [1:5,824], [1:6,272], [1:6,73], [1:7,168], [1:7,616], [1:8,064], [1:8,512] или [1:8,98]. В другом аспекте эксципиент представляет собой трегалозу и молярное отношение даптомицина к трегалозе представляет собой от [1:2,13] до приблизительно [1:21,32]. В другом аспекте молярное отношение даптомицина к трегалозе представляет собой [1:2,13], [1:2,556], [1:3,408]. [1:4,26], [1:5,112], [1:5,964], [1:6,816], [1:7,668], [1:8,53], [1:9,372], [1:10,224], [1:11,076], [1:11,928], [1:12,78], [1:13,632], [1:14,484], [1:14,91], [1:15,336], [1:16,188], [1:17,04], [1:17,892], [1:18,744], [1:19,592], [1:20,448] или [1:21,32].
Remington's Pharmaceutical Sciences
th
Твердая фармацевтическая липопептидная композиция может быть восстановлена и объединена с одним или более фармацевтически приемлемыми разбавителями для получения фармацевтической композиции для парентерального введения. Отношение даптомицина в восстановленной жидкой композиции к разбавителю представляет собой предпочтительно от 25 мг/мл до 200 мг/мл. Например, лиофилизированная композиция, включающая даптомицин, может быть восстановлена в виале с помощью добавления 0,9% водного хлорида натрия в лиофилизированную композицию. Восстановленный раствор даптомицина может быть объединен с медицинской точки зрения с соответствующим разбавителем и вводиться внутривенно. Фармацевтически приемлемый разбавитель включает стерильную воду для инъекции (sWFI), 0,9% стерильную инъекцию хлорида натрия (sSCl), бактериостатическую воду для инъекции (bWFI) и раствор Рингера. Дополнительные примеры подходящего разбавителя могут быть найдены в , 17 Ed., A.R. Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA 1985. Разбавителем может быть стерильная вода для инъекции или стерильная инъекция хлорида натрия. Предпочтительный разбавитель представляет собой sWFI или раствор Рингера с лактатом. Предпочтительно, разбавитель не добавляют медленно, при вращении под углом 45°. Также предпочтительно, после добавления разбавителя сосуд, содержащий даптомицин, не оставляют в неподвижности в течение 10 минут до перемешивания.
Необязательно, разбавитель дополнительно включает фармацевтически приемлемый консервант. В одном аспекте консервант представляет собой бензиловый спирт, хлорбутанол, м-крезол, метилпарабен, фенол, феноксиэтанол, пропилпарабен, тимеросал, фенилмеркурацетат, фенилмеркурнитрат, бензалкония хлорид, хлоркрезол, соли фенилртути и метилгидроксибензоат.
Один способ восстановления включает быстрое добавление разбавителя в сосуд, содержащий лиофилизированную композицию на основе даптомицина Таблицы 6, с последующим вращением сосуда при необходимости. Разбавитель представляет собой предпочтительно sWFI или sSCI. Например, разбавитель могут добавить в течение периода 1-60 секунд, более предпочтительно 1-30 секунд и наиболее предпочтительно разбавитель добавляют через менее чем 20 секунд. Предпочтительно, масса даптомицина в композиции к объему разбавителя находится в диапазоне от 25 мг/мл до 200 мг/мл.
Парентеральную фармацевтическую композицию, содержащую даптомицин, можно вводить с помощью внутривенной инфузии в соответствии с зарегистрированными показаниями. Например, даптомицин в виде инъекции можно вводить внутривенно в 0,9% хлориде натрия один раз каждые 24 часа в течение 7-14 дней для лечения сложных инфекций кожи и структуры кожи.
Композиции с увеличенной химической стабильностью даптомицина
Неожиданно, что комбинирование даптомицина с одним или более невосстанавливающими сахарами (например, сахарозой, трегалозой, сахарозой и маннитом) в твердом фармацевтическом препарате увеличивало химическую стабильность даптомицина как в форме твердого вещества, так и в восстановленных жидких фазах. Химические стабильности даптомицина измеряли с помощью сравнения измерений общей чистоты даптомицина у многочисленных твердых образцов, сохраненных в течение известных периодов времени (например, до 12 месяцев) при известных условиях (например, постоянные температуры). Общую чистоту даптомицина для каждого образца измеряли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (используя параметры в Таблице 3) в соответствии с Примером 4. Кроме того, количество даптомицина (Фигура 1) в восстановленном растворе даптомицина измеряли относительно количества веществ, выбранных из группы, состоящей из ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и продукта гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4). Подобным образом для определения химической стабильности даптомицина в восстановленном растворе даптомицина измерение ВЭЖХ и вычисление чистоты даптомицина в восстановленном растворе даптомицина повторяли в соответствии с Примером 4 при различных интервалах времени вплоть до 14 дней после получения восстановленного раствора даптомицина.
В одном аспекте твердый фармацевтический препарат на основе даптомицина, обладающий увеличенной стабильностью даптомицина, может включать даптомицин и невосстанавливающий сахар в количестве, эффективном для увеличения общей стабильности даптомицина в твердом препарате на основе даптомицина, как измерено с помощью общей чистоты даптомицина в соответствии с Примером 4. В другом аспекте твердый фармацевтический препарат на основе даптомицина, обладающий увеличенной стабильностью даптомицина, может включать даптомицин и невосстанавливающий сахар в количестве, эффективном для уменьшения количества веществ, выбранных из группы, состоящей из ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и продукта гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4) в препарате на основе даптомицина (как измерено в соответствии с Примером 4), и в форме твердого вещества, и/или в жидкой восстановленной форме по сравнению со стабильностью препарата на основе даптомицина без глицина или сахара.
Твердый фармацевтический препарат на основе даптомицина, обладающий увеличенной стабильностью даптомицина, может включать даптомицин и сахар в количестве, эффективном для увеличения химической стабильности даптомицина, как измерено с помощью изменений в общей чистоте даптомицина в препарате на основе даптомицина в твердой форме по сравнению с препаратом на основе даптомицина без глицина или сахара, где чистоту даптомицина измеряют в соответствии с Примером 4.
В Примере 5 описано, что твердые липопептидные композиции с увеличенной химической стабильностью липопептида включают невосстанавливающий сахар (например, такой как сахароза или трегалоза) или комбинации невосстанавливающих сахаров (например, сахарозы и трегалозы). Чистоту даптомицина в каждом твердом фармацевтическом препарате на основе даптомицина измеряли после восстановления в соответствии с Примером 4 (или восстановленный раствор замораживали и чистоту даптомицина в соответствии с Примером 4 определяли позже после размораживания восстановленного раствора). Твердые фармацевтические составы даптомицина, включающие невосстанавливающие сахара, могут содержать большее количество даптомицина (Фигура 1) после восстановления относительно веществ, выбранных из группы, состоящей из ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и продукт гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4). Предпочтительные твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина с невосстанавливающим сахаром обладают увеличенной чистотой даптомицина (и увеличенной стабильностью при хранении) в течение периода по меньшей мере 6 месяцев по сравнению с твердыми препаратами на основе даптомицина без невосстанавливающего сахара. В Примере 5 описано, что твердые препараты на основе даптомицина хранили в виалах в течение различных периодов времени (например, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца и 6 месяцев) при различных диапазонах температур (например, 2-8°C, 25°C и 40°C), с последующим восстановлением твердого препарата, с последующим определением количества даптомицина и веществ, структурно подобных даптомицину, в восстановленной жидкой композиции, как описано в Примере 4.
В Примере 6 описано, что даптомицин в восстановленных жидких фармацевтических препаратах на основе даптомицина, содержащих невосстанавливающий сахар(а), неожиданно показал улучшенную химическую стабильность, чем восстановленные препараты на основе даптомицина без любого сахара. Увеличенную химическую стабильность в восстановленных составах даптомицина, содержащих невосстанавливающие сахара, измеряли с помощью разницы в измерениях общей чистоты даптомицина в соответствии с Примером 4 в течение 14 дней на образцах, сохраненных при температурах 5°C, 25°C и 40°C. Например, чистота даптомицина (измеренная и вычисленная в соответствии с Примером 4) в охлажденных (например, 2-10°C) восстановленных препаратах на основе даптомицина, содержащих приблизительно 15,0-20,0% сахарозы, была неожиданно выше в течение периода вплоть до 14 дней, по сравнению с восстановленными составами даптомицина без любого сахара. Восстановленные препараты на основе даптомицина могут объединить с одним или более фармацевтически приемлемым разбавителем для получения фармацевтической композиции для парентерального введения (например, полученной или сохраненной в сосудах для внутривенного введения, таких как пакеты или шприцы).
Для оценки химической стабильности даптомицина в восстановленном растворе чистоту даптомицина измеряли через многократные интервалы времени после восстановления (или размораживания, если заморожено), включая периоды времени вплоть до 14 дней (3, 7 и 14 дней). Химическую стабильность даптомицина в восстановленной жидкой композиции измеряли после различных периодов времени, как описано в Примере 6, с помощью измерения чистоты даптомицина в соответствии с Примером 4. Композиции с увеличенной химической стабильностью даптомицина имели более высокое детектированное содержание даптомицина относительно выявленных общих количеств веществ, структурно подобных даптомицину на Фигурах 2-4 (как измерено в соответствии со способом Примера 4), чем композиции с более низкой химической стабильностью даптомицина.
Твердые препараты на основе даптомицина с улучшенной химической стабильностью (в виде твердых веществ и/или в восстановленных жидкостях) были получены с помощью комбинирования даптомицина с невосстанавливающими сахарами, включающими сахарозу и трегалозу и комбинации невосстанавливающих сахаров, таких как сахароза и маннит.
В некоторых вариантах осуществления твердые и жидкие препараты на основе даптомицина включают по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98% чистого даптомицина, как измерено в соответствии с Примером 4. Предпочтительно, твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина охарактеризованы в том, что по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98% общей площади пика ВЭЖХ, детектированного при 214 нм в соответствии с Таблицей 3, получены от даптомицина в восстановленной форме твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина в соответствии с методикой Примера 4.
В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата состоят из даптомицина и глицина или одного или более невосстанавливающих сахаров, где фармацевтический препарат на основе даптомицина охарактеризован в том, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяют в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 2 минуты.
Предпочтительный твердый препарат на основе даптомицина, обладающий улучшенным восстановлением и увеличенной стабильностью даптомицина в порошке и восстановленных формах, включает твердый препарат на основе даптомицина, содержащий даптомицин, сахарозу и фосфатный буферный агент; в котором
a. твердый препарат на основе даптомицина включает по меньшей мере 92% чистого даптомицина, как вычислено с помощью отношения абсорбционной способности (площадь под кривой) при 214 нм для даптомицина, разделенной на общую площадь под кривой, измеренную с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) восстановленного раствора даптомицина при 214 нм в соответствии с Таблицей 3; и
b. твердый препарат на основе даптомицина доступен для получения с помощью:
i. образования водного раствора даптомицина, содержащего 105 мг/мл (10,5% масс./об.) даптомицина, 7,1 мг/мл (50 мМ) буферного агента двухосновного фосфата натрия и 150 мг/мл (15% масс./об.) сахарозы при pH приблизительно 7,0; и
ii. превращение водного состава даптомицина в твердый препарат на основе даптомицина.
Предпочтительные твердые препараты на основе даптомицина получают из растворов даптомицина, содержащих приблизительно 2,5-25,0% масс./об. одного или более невосстанавливающих сахаров (например, сахарозы, трегалозы и маннита) и необязательно дополнительно содержащие один или более буферных агентов, таких как двухосновный фосфат натрия. Наиболее предпочтительные твердые препараты на основе даптомицина могут получить с помощью лиофилизации или сушки распылением жидких растворов, содержащих даптомицин и сахарозу (и необязательно дополнительно содержащих приблизительно 50 мМ двухосновного фосфата натрия) при pH приблизительно от 4,5 до 7,0 (включая, например, значения pH 4,7-7,0).
Получают также изделия промышленного производства, содержащие твердый препарат на основе даптомицина (например, закрытые запечатанные виалы со средствами для введения водного разбавителя в виалу, такими как самогерметизирующаяся способная к прокалыванию мембрана), так же как продукты, содержащие продукт на основе даптомицина, приготовленный для парентерального введения и включающий твердый препарат на основе даптомицина, растворенный в водном разбавителе (например, пакет или шприц, предназначенный для внутривенного введения продукта на основе даптомицина).
Предпочтительно, 500 мг твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина растворяется в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия через 1 минуту или менее при 25°C. pH водного раствора даптомицина может быть доведен до pH по меньшей мере 4,7 до растворения невосстанавливающего сахара в водном растворе с даптомицином. Необязательно, препарат на основе даптомицина получают с помощью добавления буферного агента к водному раствору даптомицина до растворения невосстанавливающего сахара в водном растворе с даптомицином. Жидкий состав даптомицина может иметь концентрацию даптомицина приблизительно 105 мг/мл. Сахар в жидком составе даптомицина может быть выбран из группы, состоящей из трегалозы, сахарозы, маннита, лактозы, мальтозы, фруктозы, декстрозы и их комбинаций. В одном предпочтительном примере 500 мг твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина растворяется в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия через 1 минуту или менее при 25°C и твердый фармацевтический препарат на основе даптомицина получают с помощью:
a. образования водного раствора даптомицина при pH приблизительно 4,7-5,0;
b. добавления буферного агента, содержащего фосфат, цитрат, малеат или их комбинацию, к водному раствору даптомицина;
c. растворения невосстанавливающего сахара в водном растворе с даптомицином для получения буферного состава сахара даптомицина;
d. доведения pH буферного состава сахара даптомицина до приблизительно 7,0; и
e. лиофилизации буферного состава сахара даптомицина для получения твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина.
Другие примеры твердых фармацевтических препаратов на основе даптомицина могут получить с помощью:
a. образования водного раствора даптомицина при pH приблизительно 4,7-5,0;
b. добавления буферного агента, содержащего фосфат, цитрат, малеат или их комбинацию, к водному раствору даптомицина;
c. растворения сахара в водном растворе с даптомицином для получения состава сахара даптомицина, сахар, выбранный из группы, состоящей из трегалозы, сахарозы, маннита, лактозы, мальтозы, фруктозы, декстрозы и их комбинаций;
d. доведения pH состава сахара даптомицина до приблизительно 7,0; и
e. лиофилизации состава сахара даптомицина для получения твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина.
Способы получения лиофилизированного препарата на основе даптомицина, обладающего улучшенным временем восстановления в водном разбавителе 0,9% водном хлориде натрия, могут включать следующие стадии:
a. образование водного раствора даптомицина при pH приблизительно 4,7-5,0;
b. добавление буферного агента, содержащего фосфат, цитрат, малеат или их комбинацию, к водному раствору даптомицина;
c. растворение сахара в водном растворе с даптомицином для получения буферного состава сахара даптомицина, содержащего от приблизительно 2,5% до приблизительно 25% сахара, сахар, выбранный из группы, состоящей из трегалозы, сахарозы, маннита, лактозы, мальтозы, фруктозы, декстрозы и их комбинаций;
d. доведение pH буферного состава сахара даптомицина до приблизительно 6,5-7,5; и
e. лиофилизация буферного состава сахара даптомицина для получения твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина.
Предпочтительно, 500 мг лиофилизированной композиции на основе даптомицина растворяется в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия через 1 минуту или менее при 25°C. Буферный состав сахара даптомицина предпочтительно включает фосфат и от приблизительно 2,5% до приблизительно 25% сахара.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры являются иллюстративными и не ограничивают изобретение, описанное в настоящей заявке.
Улучшенные твердые препараты на основе даптомицина получали с помощью (a) образования твердого фармацевтического препарата из раствора, содержащего даптомицин и один или более сахаров или глицин, как описано в Примерах 2a и 2b, и (b) превращения раствора даптомицина в твердый фармацевтический препарат (например, с помощью лиофилизации или сушки распылением), как описано в Примере 3. Твердый фармацевтический препарат затем может быть восстановлен с помощью добавления водного разбавителя для растворения твердого фармацевтического препарата приблизительно через 4 минуты или менее. Предпочтительно, твердые фармацевтические препараты на основе даптомицина растворяют в водном разбавителе приблизительно через 1 минуту или менее при 25°C (необязательно при осторожном перемешивании).
В соответствии с инструкцией по применению препарата на основе даптомицина для инъекции, продаваемого под торговой маркой CUBICIN (то есть даптомицин без глицина или сахара):
«Содержимое CUBICIN 500 мг виалы следует восстановить, используя стерильную методику, следующим образом:
Примечание: Для сокращения вспенивания ИЗБЕГАЙТЕ интенсивного перемешивания или встряхивания виалы в течение или после восстановления.
1. Удалите полипропиленовый колпачок флип-офф из виалы CUBICIN для подвергания воздействию центральной части резиновой пробки.
2. Медленно переносите 10 мл инъекции 0,9% хлорида натрия через центр резиновой пробки в виалу CUBICIN, направляя иглу для переноса к стенке виалы.
3. Убедитесь, что весь продукт CUBICIN смочен с помощью осторожного вращения виалы.
4. Оставьте продукт на 10 минут.
5. Осторожно вращайте или крутите содержимое виалы в течение нескольких минут при необходимости для получения полностью восстановленного раствора».
Для сравнения, улучшенные твердые препараты на основе даптомицина восстанавливаются быстрее в водном разбавителе, чем даптомицин без сахара или глицина. Наиболее предпочтительные твердые препараты могут быть восстановлены в водном разбавителе через менее чем 2 минуты при 25°C, более предпочтительно через менее чем приблизительно 1 минуту при 25°C. Таблица 6 (Фигура 5) и Таблица 5 (Фигура 6) показывают время восстановления для различных твердых препаратов на основе даптомицина, полученное с помощью измерения времени, необходимого для растворения 500 мг твердого препарата на основе даптомицина в 10 мл разбавителя 0,9% водного хлорида натрия при приблизительно 25°C.
Кроме того, Примеры описывают улучшенные твердые препараты на основе даптомицина, которые обеспечивают более высокую химическую стабильность даптомицина в твердой форме, как описано в Примере 5, и в восстановленной жидкой форме, как описано в Примере 6. Улучшенные препараты на основе даптомицина могут содержать больше даптомицина относительно веществ, выбранных из группы, состоящей из ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и продукта гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4), как измерено с помощью метода ВЭЖХ Примера 4. Предпочтительно, твердый препарат на основе даптомицина получают с помощью превращения жидкого раствора даптомицина в твердую форму с последующим восстановлением твердой формы в соответствии с Примером 4 и измерением общей площади пика ВЭЖХ при 214 нм в соответствии с параметрами ВЭЖХ в Таблице 3 в восстановленной жидкости, которая является по меньшей мере на 92%, полученной из даптомицина в восстановленном растворе. Твердый препарат на основе даптомицина может состоять из даптомицина, одного или более сахаров, выбранных из группы, состоящей из сахарозы, трегалозы и маннита, фармацевтически соответствующих солей (например, хлорид натрия), одного или более буферных агентов, таких как двухосновный фосфат натрия и материалов, обеспечивающих вплоть до 8% общей площади пика ВЭЖХ при 214 нм в соответствии с параметрами ВЭЖХ в Таблице 3 в восстановленной жидкости, образованной в соответствии с Примером 4.
Таблица 8 (Фигура 7) описывает различные фармацевтические композиции на основе даптомицина. В Таблице 8 обозначение «Молярное отношение существующих компонентов, соответственно» относится к молярному отношению даптомицина к другим компонентам, перечисленным как [B], [C] и [D] (если присутствует) в указанном порядке. Например, если композиция будет содержать даптомицин [А] и один эксципиент [B], молярное отношение будет выражено как [А]:[B]. Если композиция будет содержать два эксципиента [B] и [C], тогда молярное отношение будет выражено как даптомицин [А]: эксципиент [B]: эксципиент [C] и так далее. Если композиция будет содержать даптомицин [А], и эксципиент [B], и буферный агент [D], молярное отношение будет выражено как [А]:[B]:[D].
Таблица 6 (Фигура 5) обеспечивает неограничивающие примеры композиций на основе даптомицина, которые восстанавливают в водном разбавителе через менее чем 2 минуты. Таблица 7 (Фигура 6) обеспечивает примеры других композиций на основе даптомицина, которые восстанавливают в водном разбавителе приблизительно через 2 минуты или более. Композиции на основе даптомицина без сахара или глицина в Таблице 6 и Таблице 7 получали с помощью или Способа А (Пример 1a), или Способа B (Пример 1b) с последующей лиофилизацией в соответствии с Примером 3. Композиции на основе даптомицина с сахаром или глицином в Таблице 6 и Таблице 7 получали с помощью или Способа А (Пример 2a), или Способа B (Пример 2b) с последующей лиофилизацией в соответствии с Примером 3. Молярные отношения в Таблицах 6 и 7 вычисляли на основании молекулярных масс в Таблице 1.
Таблица 1Молекулярные массы даптомицина и эксципиентов
Даптомицин
1620,67
Фосфатный буфер
141,96
Сахароза
342,3
Лактоза
342,3
Мальтоза
342,12
Трегалоза
180,16
Фруктоза
180,16
Декстроза
180,16
Маннит
182,17
Глицин
75,07
Настоящее изобретение будет дополнительно пониматься, исходя из следующих неограничивающих примеров. Следующие примеры представлены только в иллюстративных целях и никаким образом не должны быть рассмотрены как ограничение объема изобретения.
Пример 1A
: Сравнительный способ получения А (Лиофилизация даптомицина при pH 4,7 без сахара или глицина)
Приготовление сравнительного состава даптомицина без сахара или глицина проводили при условиях охлаждения (2-10°C). Даптомицин активный фармацевтический ингредиент (АФИ) поставляли в виде замороженной жидкости при диапазоне концентрации 125-130 мг/мл, pH 3,0. Приготовление начинали с помощью получения жидкого даптомицина АФИ (например, размораживание замороженного даптомицина АФИ при условии pH приблизительно 3,0) с последующим доведением pH до целевого pH приблизительно 4,7, используя 3N NaOH. Объемный раствор дополнительно разбавляли до целевой концентрации 105 мг/мл с помощью sWFI и смешивали для обеспечения гомогенности раствора (также при 2-10°C). Объемный готовый раствор 0,2 мкм отфильтровывали и заполняли в 10 мл виалы с последующей лиофилизацией в соответствии с текущим циклом лиофилизации, как изложено в Примере 3. Состав готового лекарственного средства закрывали пробкой под азотом и запечатывали.
Пример 1В
Сравнительный способ получения B (Лиофилизация даптомицина при pH 7,0 без сахара или глицина)
:
Приготовление объемного состава проводили при условиях охлаждения (2-10°C). Даптомицин АФИ поставляли в виде замороженной жидкости при диапазоне концентрации 125-130 мг/мл, pH 3,0. При приготовлении объемного состава использовали размораживание АФИ с последующим доведением pH до целевого pH 7,0, используя 3N NaOH при условиях охлаждения (2-10°C), с последующим разбавлением до целевой концентрации 105 мг/мл с помощью sWFI и смешиванием для обеспечения гомогенности раствора. Составленное готовое лекарственное средство 0,2 мкм отфильтровывали и заполняли в 10 мл виалы с последующей лиофилизацией в соответствии с модифицированным циклом лиофилизации, как изложено в Примере 3. Состав готового лекарственного средства закрывали пробкой под азотом и запечатывали.
Пример 2A
Способ получения А (Лиофилизация при pH 4,7)
:
Приготовление улучшенного состава даптомицина проводили при условиях охлаждения (2-10°C). Даптомицин активный фармацевтический ингредиент (АФИ) поставляли в виде замороженной жидкости при диапазоне концентрации 125-130 мг/мл, pH 3,0. Приготовление начинали с помощью получения жидкого даптомицина АФИ (например, размораживание замороженного даптомицина АФИ при условии pH приблизительно 3,0) с последующим доведением pH до целевого pH приблизительно 4,7, используя 3N NaOH, с последующим добавлением сахара(ов) (например, сахарозы). Объемный раствор дополнительно разбавляли до целевой концентрации 105 мг/мл с помощью sWFI и смешивали для обеспечения гомогенности раствора (также при 2-10°C). Объемный готовый раствор 0,2 мкм отфильтровывали и заполняли в 10 мл виалы с последующей лиофилизацией в соответствии с текущим циклом лиофилизации, как изложено в Примере 3. Состав готового лекарственного средства закрывали пробкой под азотом и запечатывали. Сахара добавляли или в виде порошка, или в подходящем растворе, таком как sWFI.
Пример 2B
Способ получения B (Лиофилизация при pH 7,0)
:
Приготовление улучшенных составов даптомицина проводили при условиях охлаждения (2-10°C). Даптомицин АФИ поставляли в виде замороженной жидкости при диапазоне концентрации 125-130 мг/мл, pH 3,0. При приготовлении объемного состава использовали размораживание АФИ с последующим доведением pH до целевого pH 4,7, используя 3N NaOH при условиях охлаждения (2-10°C), с последующим добавлением буферных агентов (фосфата, цитрата и подобных) с дальнейшим добавлением глицина или сахара(ов) (сахарозы, трегалозы, маннита). Как только полностью растворяли эксципиенты (сахара, буферные агенты), раствор pH 4,7 доводили до 7,0 с помощью 3N NaOH и разбавляли до целевой концентрации 105 мг/мл с помощью sWFI и смешивали для обеспечения гомогенности раствора. Полученное готовое лекарственное средство 0,2 мкм отфильтровывали и заполняли в 10 мл виалы с последующей лиофилизацией в соответствии с модифицированным циклом лиофилизации, как изложено в Примере 3. Состав готового лекарственного средства закрывали пробкой под азотом и запечатывали.
Пример 3
: Лиофилизация композиций, полученных с помощью Способов A и B
Виалы с продуктом загружали в лиофилизатор при 5±4°C и диспергировали беспорядочно поперек каждой полки. Композицию лиофилизировали досуха, заполняли назад азотом и закрывали пробкой под вакуумом. После завершения закрытия из объекта лиофилизации стравливали атмосферное давление, используя отфильтрованный азот, и виалы с продуктом удаляли для установки алюминиевой крышки. Параметры цикла для различных составов суммированы в Таблице 2.
Таблица 2
<b>Суммирование параметров цикла лиофилизации для различных композиций</b>
Стадия No.
Цикл AСоставы 1-8, 16, 17, 18, 70-79
Цикл BСоставы 9-11, 13-15, 19
Цикл CСоставы 12, 20-27
Цикл DСоставы 35, 45, 50-69
1
Загрузка продукта при 5°C и выдерживание в течение 60 минут
Загрузка продукта при 5°C и выдерживание в течение 60 минут
Загрузка продукта при 5°C и выдерживание в течение 60 минут
Загрузка продукта при 5°C и выдерживание в течение 60 минут
2
Наклонная полка до -50°C более 180 минут и выдерживание в течение 4 часов
Наклонная полка до -50°C более 180 минут и выдерживание в течение 4 часов
Наклонная полка до -50°C более 180 минут и выдерживание в течение 4 часов
Наклонная полка до -50°C более 180 минут и выдерживание в течение 4 часов
3
Применение вакуума до 90 мТорр и поддержание вакуума до закрытия пробкой
Применение вакуума до 90 мТорр и поддержание вакуума до закрытия пробкой
Применение вакуума до 90 мТорр и поддержание вакуума до закрытия пробкой
Применение вакуума до 90 мТорр и поддержание вакуума до закрытия пробкой
4
Наклонная полка до -10°C более 6 часов и выдерживание в течение NLT<sup><b>1</b></sup> 40 часов
Наклонная полка до -17°C более 6 часов и выдерживание в течение NLT 40 часов
Наклонная полка до -25°C более 6 часов и выдерживание в течение NLT 40 часов
Наклонная полка до -15°C более 6 часов и выдерживание в течение NLT 40 часов
5
Наклонная полка до 40°C более 4 часов и выдерживание в течение 6 часов
Наклонная полка до 40°C более 4 часов и выдерживание в течение 6 часов
Наклонная полка до 40°C более 4 часов и выдерживание в течение 6 часов
Наклонная полка до 40°C более 4 часов и выдерживание в течение 6 часов
6
Камера с обратным потоком азота
Камера с обратным потоком азота
Камера с обратным потоком азота
Камера с обратным потоком азота
7
Закрытие пробкой виал при 12,5 фунт/дюйм<sup>2</sup> и нарушение вакуума
Закрытие пробкой виал при 12,5 фунт/дюйм<sup>2</sup> и нарушение вакуума
Закрытие пробкой виал при 12,5 фунт/дюйм<sup>2</sup> и нарушение вакуума
Закрытие пробкой виал при 12,5 фунт/дюйм<sup>2</sup> и нарушение вакуума
<sup>1</sup>NLT = не менее чем
Пример 4
. Измерение количества даптомицина и веществ, структурно подобных даптомицину
Если не указано иначе, количество даптомицина и трех соединений, структурно подобных даптомицину (Фигуры 2-4) измеряли, используя анализ ВЭЖХ в водных восстановленных жидких растворах, содержащих даптомицин, используя систему Agilent 1100 или 1200 высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым (УФ) детектором. Площади пиков измеряли, используя программное обеспечение Waters Empower2 FR5 SPF build 2154. Если не указано иначе, процент чистоты твердого препарата на основе даптомицина определяли с помощью восстановления 500 мг твердого препарата на основе даптомицина в 10 мл водного разбавителя для получения восстановленного раствора даптомицина, затем измеряя абсорбционную способность восстановленного образца при 214 нм с помощью ВЭЖХ, используя параметры ВЭЖХ Таблицы 3. Процент чистоты даптомицина в твердом препарате на основе даптомицина вычисляли с помощью отношения абсорбционной способности (площадь под кривой) при 214 нм для даптомицина, разделенной на общую площадь под кривой, измеренную с помощью ВЭЖХ, восстановленного раствора даптомицина при 214 нм в соответствии с Таблицей 3 и формулой ниже. Для 92% образца чистого даптомицина, 92% общей площади пика от всех пиков ≥0,05 площади % было приписано даптомицину.
Кроме того, количество трех веществ, структурно подобных даптомицину, может быть обнаружено с помощью ВЭЖХ при 214 нм в соответствии с Таблицей 3: ангидро-даптомицин (Фигура 2), бета-изомер даптомицина (Фигура 3) и продукт гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4). Если не указано иначе, количество этих веществ в твердых препаратах на основе даптомицина измеряют с помощью ВЭЖХ в соответствии с Таблицей 3 после восстановления 500 мг твердого препарата на основе даптомицина в 10 мл водного разбавителя для образования восстановленного раствора даптомицина, затем измеряя абсорбционную способность при 214 нм восстановленного даптомицина с помощью ВЭЖХ, используя параметры Таблицы 3.
Таблица 3
1.
Система доставки растворителя:
Режим:
Изократический насос
Скорость потока:
1,5 мл/мин
Время анализа:
75 минут
2.
Растворитель A: 50% ацетонитрила в 0,45% NH<sub>4</sub>H<sub>2</sub>PO<sub>4</sub> при pH 3,25Растворитель B: 20% ацетонитрила в 0,45% NH<sub>4</sub>H<sub>2</sub>PO<sub>4</sub> при pH 3,25Целевое условие представляет собой приблизительно 45% Растворителя A и 55% Растворителя B для удерживания даптомицина в течение 36,0 ± 1,5 минуты; однако, отношение растворителей может быть установлено для достижения желательного времени удерживания.
3.
Охлаждение автодозатора:
5 (2-8)°C
4.
Объем инъекции:
20 мкл
5.
Колонка:
IB-SIL (Phenomenex), C-8-HC, 5 мкм, 4,6 мм × 250 мм (или эквивалентная)
6.
Предколонка:
IB-SIL (Phenomenex), C-8, 5 мкм, 4,6 мм × 30 мм (или эквивалентная)
7.
Длина волны детектирования:
214 нм
8.
Температура колонки:
25 (22-28)°C
9.
Интегрирование:
Компьютерная система или интегратор, способный измерить площадь пика
Чистоту даптомицина определяли на основании данных ВЭЖХ, вычисленных следующим образом:
- Площадь % индивидуальных веществ, структурно подобных даптомицину, вычисляют, используя следующее уравнение:
Площадь % даптомицина и всех веществ, структурно подобных даптомицину, определяют, используя абсорбционную способность при 214 нм
Вычисление площади даптомицина и всех других пиков ≥ 0,05 площади %,
i
tot
x
% площади = (A/A) 100%
где:
% площади = Площадь % индивидуального пика;
i
A = Пик индивидуального пика; и
tot
A = общая выборка площади пика, включая даптомицин.
- Площадь % всех веществ, структурно подобных даптомицину, вычисляют, используя следующее уравнение:
Площадь % всех веществ, структурно подобных даптомицину, равняется сумме всех описанных величин площади % от индивидуальных веществ (сумма всех примесей =/> 0,05%)
- *Вычисление % чистоты даптомицина в % Площади, используя следующее уравнение:
% Даптомицина = 100% - % общего количества веществ, структурно подобных даптомицину.
Пример 5
. Измерение химической стабильности даптомицина в твердых фармацевтических композициях
Этот пример показывает увеличенную химическую стабильность даптомицина твердых фармацевтических композиций на основе даптомицина в определенных предпочтительных композициях, содержащих сахарозу, маннит, трегалозу и глицин, по сравнению с композициями даптомицина без сахара или глицина и композициями даптомицина с определенными восстанавливающими сахарами.
Химическую стабильность различных твердых фармацевтических композиций на основе даптомицина оценивали с помощью помещения композиции в виалы при различных температурах (2-8°C, 25°C и 40°C). Твердые фармацевтические композиции на основе даптомицина получали с помощью лиофилизации или сушки распылением жидких композиций, полученных в соответствии с Примером 2a (Способ A, при pH 4,7) или Примером 2b (Способ B, при pH 7,0). Лиофилизацию проводили в соответствии с Примером 3. Количество даптомицина и трех связанных с даптомицином примесей измеряли, используя метод ВЭЖХ Примера 4 в восстановленных растворах, образованных с помощью растворения приблизительно 500 мг твердых препаратов на основе даптомицина в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия. Для общей чистоты даптомицина, вычисленной в соответствии с Примером 4, представляли данные графически для измерений через 0, 1, 2, 3 и 6 месяцев для виал различных твердых фармацевтических композиций на основе даптомицина, поддерживаемых при 40°C. Наклон линейной регрессии, наиболее соответствующий графику общей чистоты даптомицина в месяц вычисляли для каждого твердого фармацевтического состава даптомицина (наклон в % общей чистоты даптомицина/месяц).
Данные в Таблице 4 показывают отношение наклонов для каждого твердого препарата на основе даптомицина, нормализованных к наклону, полученному от восстановленного твердого вещества даптомицина для инъекции, которое не содержит сахарозу. Ссылаясь на Таблицу 4, отношения в колонке A получали для твердых препаратов, полученных в соответствии со Способом А в Примере 2a (то есть полученных из растворов, содержащих даптомицин при pH 4,7), в то время как отношения в колонке B получали для твердых препаратов, полученных в соответствии со Способом B в Примере 2b (то есть полученных из растворов, содержащих даптомицин при pH 7,0, которые дополнительно содержат буферный агент 50 мМ фосфат натрия). Отношения с «*» были для твердых препаратов на основе даптомицина, первоначально превращенных в твердые вещества с помощью сушки распылением; все другие образцы получали для твердых препаратов на основе даптомицина, первоначально превращенных в твердые вещества с помощью лиофилизации (Пример 3). Табличные данные с «NT» в Таблице 4 не проверяли. Все отношения в Таблице 4 получали из линейной регрессии измерений общей чистоты даптомицина (Фигура 1) относительно веществ, структурно подобных даптомицину, показанных на Фигурах 2-4 после 0 (то есть после образования твердого материала), 1 месяца, 2 месяцев, 3 месяцев и 6 месяцев хранения при 40°C, где количество даптомицина и веществ, структурно подобных даптомицину, определяли и вычисляли в соответствии с Примером 4. Отношения в Таблице 4 представляют собой изменения в степени общей чистоты даптомицина относительно даптомицина для инъекции (нормализованного до 1,00 для Способа A и Способа B получения). Отношения ниже 1,00 представляют собой уменьшенные степени в восстановлении общей чистоты даптомицина или увеличенной химической стабильности даптомицина в составе относительно химической стабильности даптомицина при отсутствии сахарозы в даптомицине для продукта инъекции. Соответственно, чем ниже отношение в Таблице 4, тем более стабилен даптомицин в соответствующем составе относительно веществ, структурно подобных даптомицину на Фигурах 2-4.
Таблица 4Отношение % изменения в общей чистоте даптомицина в месяц относительно даптомицина для инъекции (6 месяцев)
Состав (% масс./об. в растворе до лиофилизации или сушки распылением)
Способ синтеза Пр. 2A
Способ синтеза Пр. 2B
15,0% Сахарозы
0,16
0,04
15,0% Сахарозы*
NT
0,04
15,0% Сахарозы
NT
0,10
5,0% Сахарозы + 3,0% Маннита
0,48
0,10
10,0% Сахарозы + 3,0% Маннита
0,22
0,13
20,0% Сахарозы
0,22
0,13
10,0% Сахарозы
0,21
0,15
5,0% Сахарозы + 6,0% Маннита
0,45
0,16
2,5% Сахарозы + 3,0% Маннита
0,60
0,17
2,5% Сахарозы + 6,0% Маннита
0,56
0,18
10,0% Сахарозы + 6,0% Маннита
0,24
0,20
25,0% Трегалозы
0,41
0,22
10,0% Трегалозы
0,47
0,26
6,0% Маннита
0,95
0,27
5,0% Сахарозы
0,35
0,27
2,5% Сахарозы
0,61
0,32
5,0% Трегалозы
0,67
0,35
2,5% Трегалозы
NT
0,42
5% Глицина
0,97
0,74
<b>Даптомицин (без сахара или глицина)</b>
<b>1,00</b>
<b>1,00</b>
20% Лактозы
2,02
1,01
2,5% Лактозы
2,85
1,19
2,5% Мальтозы
2,73
1,28
5% Мальтозы
2,29
1,37
5% Лактозы
2,44
1,41
2,5% Фруктозы
NT
1,41
5% Фруктозы
NT
1,57
5% Декстрозы:Фруктозы
7,03
2,66
2,5% Декстрозы:Фруктозы
8,11
2,69
5% Декстрозы
8,08
3,38
2,5% Декстрозы
9,90
3,51
15,0% Сахарозы + 3,0% Маннита
0,14
NT
15,0% Сахарозы + 6,0% Маннита
0,25
NT
17,5% Трегалозы
0,31
NT
NT = не проверяли* = получали с помощью сушки распылением, не лиофилизации
Данные в Таблице 4 показывают, что даптомицин в твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина, содержащей 15,0% сахарозы, показал увеличение на приблизительно 84% химической стабильности даптомицина по сравнению с даптомицином для инъекции в составах, полученных в соответствии со Способом А (Пример 2a), и увеличение на 96% химической стабильности даптомицина по сравнению с даптомицином для инъекции в составах, полученных в соответствии со Способом B (Пример 2b). Подобно этому твердая фармацевтическая композиция на основе даптомицина, содержащая 20,0% сахарозы, показала увеличения в химической стабильности даптомицина относительно даптомицина без сахарозы (то есть, даптомицин для инъекции) приблизительно на 78% (Способ A) и 87% (Способ B). Таким образом, комбинирование 15-20% сахарозы с лиофилизированной композицией даптомицина увеличивало химическую стабильность даптомицина, по меньшей мере на 78% и вплоть до 96%. Напротив, Таблица 4 также показывает, что даптомицин был приблизительно в 2-9 раз менее стабилен в составах, содержащих даптомицин и лактозу, мальтозу, фруктозу и/или декстрозу. Таблица 4, следовательно, показывает, что даптомицин, полученный с помощью Способов Примера 2a и 2b (Способы A и B соответственно) был стабилизирован при комбинировании с невосстанавливающими сахарами или глицином (относительно даптомицина без сахара или глицина), в то время как даптомицин был менее стабилен в составах, содержащих восстанавливающие сахара.
Фигура 8 представляет собой Таблицу 9, показывающую процентное изменение в общей чистоте даптомицина, измеренное и вычисленное для различных составов даптомицина в соответствии с Примером 4. Перечисление «PO4» в Таблице 9 относится к составам, которые содержат буферный агент двухосновный фосфат натрия. Перечисление значения «pH» в Таблице 9 относится к pH, при котором был приготовлен состав (то есть, pH раствора состава даптомицина, который был лиофилизирован для получения твердых составов даптомицина, которые проверяли для получения данных в Таблице 9). NT = не проверяли.
Для получения данных в Таблице 9 каждый твердый состав даптомицина выдерживали при 40°C в течение различных периодов времени (1, 2, 3 или 6 месяцев) перед восстановлением твердого состава даптомицина и измерением чистоты даптомицина в соответствии со способом Примера 4.
Таблица 9 показывает отношение стабильности даптомицина, вычисленное следующим образом:
1. Подготовить контрольный образец (даптомицин для инъекции коммерческий продукт без сахара или глицина), полученный в соответствии с Примером 1b, и измерить в соответствии с Примером 4 общий процент чистоты даптомицина для контрольного образца после получения;
2. Измерить общий процент чистоты даптомицина для контрольного образца в соответствии с Примером 4 после хранения контрольного образца в течение данного периода времени при 40°C и вычесть общий процент чистоты даптомицина после хранения в течение такого периода времени из общей чистоты даптомицина после приготовления состава для получения общего процента потери чистоты контроля;
3. Измерить общий процент чистоты даптомицина для каждого состава в соответствии с Примером 4 после хранения состава в течение периода времени при 40°C (например, 1 месяц, 2 месяца и т.д.) и вычесть общий процент чистоты после хранения в течение такого периода времени из общей чистоты даптомицина контрольного образца после приготовления состава для получения общего процента потери чистоты состава даптомицина;
4. Вычислить отношение стабильности даптомицина при 40°C с помощью деления общего процента потери чистоты состава даптомицина, полученной для каждого состава после одинакового периода хранения (из стадии 3), на общий процент потери чистоты контроля (из стадии 2) после данного периода хранения:
Стадии 2-4 повторяют для вычисления каждого отношения стабильности даптомицина. Отношение стабильности даптомицина вычисляют с отдельным контрольным образцом, который хранили в течение такого же периода времени, как и состав. Например, величины отношения стабильности даптомицина, вычисленные для состава после 1 месяца хранения при 40°C, получали с помощью деления величины из стадии 3 для состава на величину, полученную из стадии 2 для контроля, который хранили в течение 1 месяца при 40°C (то есть одинаковый период хранения и условия хранения как для состава, проанализированного на стадии 3). Подобно этому, величины отношения стабильности даптомицина через 2 месяца могли быть вычислены с контрольным образцом, который хранили в течение 2 месяцев при тех же самых условиях, как состав, используемый на стадии 3.
Величины отношения стабильности даптомицина менее чем 1,000 в Таблице 9 указывают, что соответствующий состав имеет более высокую химическую стабильность даптомицина, измеренную как более высокий общий процент чистоты даптомицина (измеренный с помощью Примера 4) в образце состава, чем в контрольном образце даптомицина без сахара или глицина (приготовленный в соответствии со стадией 1 выше) после соответствующего периода хранения при 40°C. Предпочтительные композиции имеют отношения стабильности даптомицина менее чем 0,800, более предпочтительно менее чем 0,500 и наиболее предпочтительно отношения стабильности даптомицина менее чем 0,300.
Данные в Таблице 9 показывают, что даптомицин обычно был химически более стабилен (как измерено с помощью улучшенной чистоты даптомицина в соответствии с Примером 4 после восстановления в водном разбавителе) для композиций на основе даптомицина, содержащих невосстанавливающий сахар, приготовленный при pH 7,0 с буферным агентом, чем для даптомицина без сахара. В частности, составы, содержащие 15% сахарозы, полученные в соответствии со Способом А (Пример 2a) или Способом B (Пример 2b), обеспечивали очень высокие уровни химической стабильности даптомицина среди исследуемых образцов и значительно более высокие уровни химической стабильности даптомицина более 12 месяцев, чем наблюдаемые для сравнительного состава 0 даптомицина без сахара или глицина. Составы сахарозы-маннита также обеспечили улучшение химической стабильности даптомицина, чем сравнительный состав 0 даптомицина без сахара или глицина. Например, 10% сахарозы/3% маннита, 10% сахарозы/6% маннита и 15% сахарозы/6% маннита, все полученные в соответствии со Способом А (Пример 2a), обеспечивали значительно улучшенную химическую стабильность даптомицина, в отличие от составов 15 сахарозы/6% маннита, полученных в соответствии со Способом А (Пример 2a). Состав 5% глицина, полученный в соответствии со Способом В (Пример 2b) также обеспечивал значительную стабилизацию даптомицина, в то время как соответствующий препарат 5% глицина из Способа А (Пример 2a) был менее стабилен, чем даптомицин без сахара или глицина (Состав 0). Все составы даптомицина в Таблице 9, содержащие сахарозу, показали увеличенную химическую стабильность даптомицина по сравнению с даптомицином без сахара или глицина в сравнительном составе 0 (как измерено с помощью Примера 4).
Пример 6
. Измерение химической стабильности даптомицина в жидких восстановленных фармацевтических композициях
Этот пример показывает увеличенную химическую стабильность даптомицина в восстановленных фармацевтических композициях на основе даптомицина в композициях, содержащих сахарозу, по сравнению с сопоставляемыми композициями без сахарозы.
Химическую стабильность различных жидких фармацевтических композиций на основе даптомицина оценивали с помощью помещения композиции в виалы при различных температурах (5°C и 40°C). Жидкие восстановленные фармацевтические композиции на основе даптомицина получали с помощью восстановления приблизительно 500 мг твердых препаратов на основе даптомицина в 10 мл sWFI. Каждый твердый препарат на основе даптомицина получали с помощью лиофилизации или сушки распылением жидких композиций, полученных в соответствии с Примером 1 (Способ A, при pH 4,7) или Примером 2 (Способ B, при pH 7,0). Лиофилизацию проводили в соответствии с Примером 3. Количество даптомицина и связанных с даптомицином примесей измеряли, используя метод ВЭЖХ Примера 4 в восстановленных растворах, полученных с помощью растворения. % даптомицина измеряли и вычисляли в соответствии с Примером 4 для измерений через 0, 3, 7 и 14 дней для виал с различными твердыми фармацевтическими композициями на основе даптомицина, сохраненными при 5°C или 40°C.
Данные в Таблице 5 показывают количество % даптомицина при каждом измерении, нормализованном к % даптомицина, полученного от восстановленного твердого даптомицина для инъекции, который не содержит сахарозу. Что касается Таблицы 5, каждый образец восстановлен из твердой фармацевтической композиции на основе даптомицина, полученной с помощью Способа А в Примере 1 (то есть, полученной из растворов, содержащих даптомицин при pH 4,7) или Способа B в Примере 2 (то есть, полученной из растворов, содержащих даптомицин при pH 7,0, которые дополнительно содержат буферный агент 50 мМ фосфат натрия), как обозначено в колонке «Способ». Температура в °C восстановленной жидкости обозначена в «Темп (°C)». Числа ниже 1,000 в Таблице 5 указывают более низкий % чистоты даптомицина, чем даптомицин для инъекции при 0 дней для данной температуры. Все приводимые данные нормализованы к измерению для даптомицина для инъекции при соответствующей температуре (например, все измерения, взятые при 5°C нормализованы к % даптомицина, измеренному для даптомицина для инъекции при 5°C). Соответственно, чем ближе число в Таблице 5 к 1,000, тем более стабильный даптомицин находится в восстановленной жидкой форме в соответствующем составе относительно веществ, структурно подобных даптомицину на Фигурах 2-4.
Таблица 5% даптомицина, измеренный в восстановленном растворе
Способ
Темп (°C)
0
3 дня
7 дней
14 дней
Даптомицин для инъекции
A
5
1,0000
0,9957
0,9900
0,9822
15,0% Сахарозы
B
5
0,9998
1,0003
0,9974
0,9977
6,0% Маннита
B
5
1,0003
0,9998
0,9992
0,9974
Даптомицин для инъекции
A
25
1,0000
0,9394
0,8618
0,7410
15,0% Сахарозы
B
25
0,9998
0,9844
0,9609
0,9184
6,0% Маннита
B
25
1,0003
0,9846
0,9609
0,9196
Даптомицин для инъекции
A
40
1,0000
0,6711
0,4145
NT
15,0% Сахарозы
B
40
0,9998
0,8752
0,7241
NT
6,0% Маннита
B
40
0,9996
0,8753
0,7207
NT
NT = не проверяли
Данные в Таблице 5 показывают, что общий % даптомицина в жидкой восстановленной фармацевтической композиции на основе даптомицина, содержащей 15,0% сахарозы, был значительно более стабилен, чем даптомицин для инъекции (без сахарозы) при 25°C после 14 дней (0,9184 для состава с сахарозой по сравнению с 0,7410 для состава даптомицина для инъекции без сахарозы). Это представляет собой приблизительно на 23% увеличение химической стабильности даптомицина в восстановленном растворе в присутствии восстановленной композиции, состоящей по существу из даптомицина, приблизительно 15% сахарозы и 50 мМ фосфата натрия. Соответственно, состав даптомицина с 15,0% сахарозы продемонстрировал удивительно увеличенную химическую стабильность даптомицина при комнатной температуре и улучшенный срок хранения после восстановления.
Дополнительные примеры вариантов осуществления
Некоторые определенные варианты осуществления изобретения, подтвержденные с помощью примеров, включают следующие:
1. Твердая фармацевтическая композиция, содержащая даптомицин и глицин или невосстанавливающий сахар, в которой композиция имеет увеличенную скорость восстановления, причем увеличенная скорость восстановления характеризуется с помощью растворения 500 мг композиции в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия при аккуратном вращении при 25°C через 5 минут или менее, в частности менее чем 2 минуты или менее чем 1 минуту.
2. Фармацевтическая композиция определенного варианта осуществления 1, в которой композиция имеет увеличенную химическую стабильность при восстановлении по сравнению с лиофилизированным даптомицином, восстановление, имеющее место в 0,9% водном хлориде натрия при 25°C, в которой увеличенная химическая стабильность при восстановлении характеризуется с помощью количества даптомицина относительно ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и/или продукта гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4), которое представляет собой больше, чем соответствующее количество для лиофилизированного даптомицина.
3. Фармацевтическая композиция по любому из определенных вариантов осуществления 1-2, в которой композиция имеет увеличенную химическую стабильность при хранении по сравнению с лиофилизированным даптомицином, в которой увеличенная химическая стабильность при хранении характеризуется с помощью количества даптомицина относительно ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и/или продукта гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4), которое представляет собой больше, чем соответствующее количество для лиофилизированного даптомицина при восстановлении обоих образцов в 0,9% водном хлориде натрия после хранения композиций в течение по меньшей мере 3 месяцев при 40°C под атмосферой азота.
4. Фармацевтическая композиция по любому из определенных вариантов осуществления 1-4, в которой композицию получают с помощью способа, включающего:
a. образование водного раствора даптомицина, содержащего даптомицин, буферный агент и невосстанавливающий сахар или их смеси; или глицин, и доведение pH до приблизительно 5-8, в частности 6,5-7,5 или приблизительно 7, и
b. превращение водного раствора даптомицина в твердую композицию, в частности с помощью лиофилизации.
5. Фармацевтическая композиция по любому из определенных вариантов осуществления 1-5, в которой композиция содержит невосстанавливающий сахар или его смеси, в количестве, эффективном для уменьшения скорости разложения даптомицина по сравнению с по существу идентичной композицией, не содержащей указанный невосстанавливающий сахар, в которой скорость разложения определяется как соответствующая потеря даптомицина после хранения композиций в течение по меньшей мере 3 месяцев при 40°C под атмосферой азота.
6. Фармацевтическая композиция по любому из определенных вариантов осуществления 1-6, в которой сахар выбран из невосстанавливающих дисахаридов, сахаров, которые являются по существу аморфными после лиофилизации, сахарозы, декстранов, трегалозы, маннита, сорбита или их комбинаций.
7. Фармацевтическая композиция по любому из определенных вариантов осуществления 1-7, в которой сахар или глицин используют в количествах приблизительно от 1 до 40 масс.%, в частности приблизительно 5-20 масс.% или приблизительно 15 масс.%, исходя из массы общей композиции.
8. Жидкая фармацевтическая композиция, содержащая даптомицин и сахар, выбранный из сахарозы, трегалозы, маннита или их смесей, в количестве, эффективном для уменьшения скорости разложения даптомицина по сравнению с раствором, полученным с помощью восстановления лиофилизированного даптомицина в 0,9% водном хлориде натрия, в которой скорость разложения определяют как соответствующую потерю даптомицина после хранения жидких композиций в течение по меньшей мере 7 дней при 25°C.
9. Способ получения композиции по любому одному из определенных вариантов осуществления 1-8, включающий:
a. обеспечение препарата на основе даптомицина;
b. добавление по меньшей мере одного эксципиента, необязательно выбранного из сорбита, маннита, сахарозы, глицина, трегалозы, лактозы, мальтозы, фруктозы и декстрозы;
c. необязательно добавление регулятора pH для получения желательного pH;
d. необязательно разбавление раствора стадии с помощью sWFI;
e. необязательно фильтрование раствора стадии d; и
f. превращение композиции в порошковую форму.
10. Твердая фармацевтическая композиция, содержащая даптомицин и глицин или невосстанавливающий сахар, в которой композиция имеет увеличенную скорость восстановления, причем увеличенная скорость восстановления характеризуется с помощью растворения 500 мг композиции в 10 мл 0,9% водного хлорида натрия при аккуратном вращении при 25°C через 5 минут или менее, в частности менее чем 2 минуты или менее чем 1 минуту; и где твердая фармацевтическая композиция дополнительно отличается тем, что препарат на основе даптомицина имеет более низкое количество одного или более веществ, выбранных из группы, состоящей из ангидро-даптомицина (Фигура 2), бета-изомера даптомицина (Фигура 3) и продукта гидролиза лактона даптомицина (Фигура 4) после хранения в течение 1 месяца при 40°C под азотом, по сравнению с твердым фармацевтическим препаратом на основе даптомицина, полученным с помощью лиофилизации даптомицина и связанных с даптомицином соединений в разбавителе 0,9% водном хлориде натрия, где количество веществ детектируют с помощью ВЭЖХ при 214 нм в соответствии со способом Примера 4.
Любой из определенных вариантов осуществления 1-10 может относиться к твердому препарату на основе даптомицина, имеющему отношение стабильности даптомицина менее чем 1,000, менее чем 0,900, менее чем 0,800, менее чем 0,700, менее чем 0,600, менее чем 0,500, менее чем 0,400, менее чем 0,300, менее чем 0,200 или менее чем 0,100, где отношение стабильности даптомицина вычисляют при 40°C в соответствии с Примером 5.
Другие композиции включают порошок, фармацевтическую композицию, содержащую даптомицин и по меньшей мере один эксципиент, выбранный из сорбита, маннита, сахарозы, глицина, трегалозы, лактозы, мальтозы, фруктозы и декстрозы.
Композиция по п.1, содержащая:
a. 500 мг даптомицина;
b. 714,3 мг сахарозы; и
c. 35,5 мг двухосновного фосфата натрия
где композицию готовят при pH приблизительно 7.
Композиция по п.1, содержащая:
a. 500 мг даптомицина;
b. 476,2 мг сахарозы;
c. 142,9 мг маннита; и
d. 35,5 мг двухосновного фосфата натрия
где композицию готовят при pH приблизительно 7.
Композиция по п.1, содержащая:
a. 500 мг даптомицина;
b. 476,2 мг сахарозы;
c. 285,8 мг маннита; и
d. 35,5 мг двухосновного фосфата натрия
где композицию готовят при pH приблизительно 7.
В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина и сахарозы, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH менее чем 7,0. В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина, сахарозы и буферного агента фосфата натрия, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH приблизительно 7,0. В одном твердом фармацевтическом препарате на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина, сахарозы и буферного агента, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH приблизительно 7,0 и препарат на основе даптомицина получают с помощью превращения раствора даптомицина, содержащего 15-20% масс./об. сахарозы, в препарат на основе даптомицина (например, с помощью лиофилизации или сушки распылением). В одном твердом фармацевтическом препарате на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина, сахарозы и двухосновного фосфата натрия, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH приблизительно 7,0 и препарат на основе даптомицина получают с помощью превращения раствора даптомицина, содержащего 15-20% масс./об. сахарозы и 50 мМ двухосновного фосфата натрия, в препарат на основе даптомицина (например, с помощью лиофилизации или сушки распылением).
В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98% площади пика ВЭЖХ, детектированного при 214 нм (измеренного после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) обеспечивается даптомицином, и композиция состоит из даптомицина, других материалов, детектированных при 214 нм с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 3, глицина или одного или более сахаров и буферного агента фосфата натрия, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH приблизительно 7,0.
В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина и трегалозы, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH менее чем 7,0. В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина, трегалозы и буферного агента фосфата натрия, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH приблизительно 7,0.
В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата (например, измеренное после восстановления как масса к объему с помощью ВЭЖХ в соответствии с Примером 4) состоит из даптомицина и глицина, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH менее чем 7,0.
В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата состоит из даптомицина, маннита и сахарозы, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH менее чем 7,0. В некоторых твердых фармацевтических препаратах на основе даптомицина по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 98 масс.% препарата состоит из даптомицина, маннита, сахарозы и буферного агента фосфата натрия, где фармацевтический препарат на основе даптомицина отличается тем, что приблизительно 500 мг твердого фармацевтического препарата на основе даптомицина растворяется в приблизительно 10 мл водного разбавителя (например, 0,9% водного хлорида натрия) через менее чем приблизительно 1 минуту при pH приблизительно 7,0.
Обеспечивают также способы получения фармацевтической композиции на основе даптомицина для парентерального введения. Способ может включать восстановление твердого препарата на основе даптомицина, содержащего невосстанавливающий сахар или глицин в фармацевтически приемлемом разбавителе для получения композиции для парентерального введения.
Композиции настоящего изобретения могут получить с помощью множества способов. В одном аспекте композиции получают с помощью:
a. обеспечения препарата на основе даптомицина
b. добавления по меньшей мере одного эксципиента, выбранного из сорбита, маннита, сахарозы, глицина, трегалозы, лактозы, мальтозы, фруктозы и декстрозы;
c. добавления регулятора pH для получения желательного pH
d. разбавления раствора стадии с помощью sWFI
e. фильтрования раствора стадии d; и
f. превращения композиции в порошковую форму.
В другом аспекте изобретения обеспечивают способ получения композиций по п.1, которые получают с буфером, например, при pH 7. Этот способ включает стадии
a. обеспечение препарата на основе даптомицина
b. добавление регулятора pH для получения раствора приблизительно pH 4,7-6,0;
c. добавление буферного агента;
d. добавление по меньшей мере одного эксципиента, выбранного из сорбита, маннита, сахарозы, глицина, трегалозы, лактозы, мальтозы, фруктозы и декстрозы;
e. добавление регулятора pH для получения pH приблизительно 7,0
f. разбавление объемного раствора с помощью sWFI
g. фильтрование раствора стадии f; и
h. превращение композиции в порошковую форму для получения твердой композиции на основе даптомицина.
В другом аспекте изобретения обеспечивают способ получения композиций по п.1, которые получают с буфером, например, при pH 7. Этот способ включает стадии
a. обеспечение препарата на основе даптомицина
b. добавление регулятора pH для получения раствора приблизительно pH 4,7-6,0;
c. добавление буферного агента;
d. добавление по меньшей мере одного эксципиента, выбранного из сорбита, маннита, сахарозы, глицина, трегалозы, лактозы, мальтозы, фруктозы и декстрозы;
e. добавление регулятора pH для получения pH приблизительно 7,0
f. разбавление объемного раствора с помощью sWFI
g. фильтрование раствора стадии f; и
h. превращение композиции в порошковую форму для получения композиции по п.1.
Был описан ряд других вариантов осуществления изобретения. Однако следует понимать, что различные модификации могут быть сделаны без отступления от сущности и объема изобретения. Соответственно, другие варианты осуществления находятся в объеме следующей формулы изобретения.