Получение нанодисперсий полимер-коллоидных комплексов на основе модифицированного полисульфонилпирролидиний хлорида

М. С. Бабаев, А. И. Воробьева, С. В. Колесов,

Л. Ф. Стоянова, Г. Е. Заиков

ПОЛУЧЕНИЕ НАНОДИСПЕРСИЙ ПОЛИМЕР-КОЛЛОИДНЫХ КОМПЛЕКСОВ

НА ОСНОВЕ МОДИФИЦИРОВАННОГО ПОЛИСУЛЬФОНИЛПИРРОЛИДИНИЙ ХЛОРИДА

Ключевые слова: модификация полиэлектролитов, самоорганизация, полимер-коллоидные комплексы, наночастицы.

Получены и исследованы частицы полимер-коллоидных комплексов на основе полиэлектролита -полисульфонилпирролидиний хлорида, модифицированного молекулами ацетилсалициловой кислоты, и мицеллообразующего ионогенного поверхностно-активного вещества - додецилсульфата натрия. Изучено влияние модификации полиэлектролита на распределение частиц поликомплексов по размерам и агрегативную устойчивость систем.

Keywords: modification of polyelectrolytes, self-assemble, polymer colloid complexes, nanoparticles.

Prepared and investigated particles ofpolymer-colloidal complexes based on polyelectrolyte - polysulfonylpyrrolidine chloride modified molecules of acetylsalicylic acid, and micelle forming ionogenic surfactant - sodium dodecyl sulfate. The effect of modifying polyelectrolyte on the article-size distribution ofpolycomplexes and aggregate stability systems was studied.

Введение

Использование наночастиц в качестве средств доставки лекарственных и диагностических субстанций - важный шаг в развитии медицинской химии. Известно более двух десятков

лекарственных препаратов, которые содержат частицы размером меньше микрометра [1-2].

Формирование самоорганизующихся наночастиц полимер-коллоидных комплексов

полиэлектролитов с электростатически

комплементарными поверхностно-активными

веществами (ПАВ) выгодно отличается от известных методик получения носителей лекарственных субстанций [3] доступностью и простотой проведения процесса, который осуществляется в водных растворах. Химическое строение полиэлектролитов предоставляет широкие возможности для закрепления на них лекарственных веществ методами химической модификации

макромолекул. Получение нанодисперсий на основе модифицированных таким образом

полиэлектролитов является практически

единственным способом, позволяющим добиться регулируемого количества закрепленного лекарственного вещества вплоть до максимально возможного [4].

Для формирования полиэлектролитных оболочек на коллоидных частицах в основном используют различные синтетические

полиэлектролиты, в том числе, и их комбинации [5]. В качестве полианионов могут выступать сильные полиэлектролиты, такие как полистиролсульфонат натрия, поли(анилинпропансульфоновая) кислота [6], а также слабые полиэлектролиты, например, полиакриловая кислота [7]. В качестве поликатионных компонент, в основном, используют М-содержащие полимеры с различным числом заместителей при атоме азота, среди которых чрезвычайно перспективными представляются (со)полимеры на основе М,М-диаллил-М,М-диметиламмоний хлорида (АМАХ). К настоящему времени детально описаны методы синтеза

гомополимера [8], различных сополимеров [9-11], показана возможность управления составом сополимеров [12,13], а также свойствами полимеров, в том числе их биологической активностью [14-16].

В настоящей работе в качестве полиэлектролита (ПЭ) использовали нетоксичный водорастворимый катионный сополимер АМАХ с диоксидом серы - полисульфонилпирролидиний хлорид (ПСПХ), синтез которого детально изучен [17,18]. Для модификации ПСПХ применяли лекарственное вещество - ацетилсалициловую кислоту (АСК), являющуюся нестероидным противовоспалительным препаратом,

ненаркотическим анальгетиком и антиагрегантом. Работа посвящена исследованию возможности формирования наноразмерных ПКК на основе ПСПХ, АСК, и мицеллообразующего ионогенного ПАВ - додецилсульфата натрия (ДДС). Основное внимание уделено оценке влияния степени функционализации полиэлектролита

ацетилсалициловой кислотой на размеры и агрегативную устойчивость систем.

Экспериментальная часть

АМАХ получали из диметиламина и аллилхлорида по известной методике [19]. Чистоту АМАХ контролировали элементным анализом, по содержанию двойных связей и методом ЯМР-спектроскопии.

АСК - фармацевтический препарат и ПАВ -ДДС 99% фирмы “Aldrich” использовали без дополнительной очистки. Чистоту контролировали методом ЯМР-спектроскопии. Все используемые в работе реактивы - инициатор, растворители после очистки общепринятыми методами имели характеристики, соответствующие литературным данным.

ПСПХ получали по известной методике [20]. Молекулярная масса сополимера по данным светорассеяния составила 17,6 х103. Чистоту контролировали элементным анализом и методом

ЯМР С. Производное ПСПХ -

полисульфонилпирролидиний гидроксид (ПСПГ) получали следующим образом. В водный раствор ПСПХ 30%-ной концентрации прикапывали 40%-ный водный раствор гидроксида натрия при перемешивании и комнатной температуре в соотношении ПСПХ : №ОИ = 1 : 0.5 ^ 1 и выдерживали в течение 2 ч. Далее полученные продукты осаждали ацетоном, трижды переосаждали из водного раствора в ацетон, дважды промывали ацетоном и сушили в вакууме до постоянной массы при 50°С. Состав полученного продукта рассчитывали по результатам элементного анализа. При эквимольном соотношении ПСПХ к №ОИ замена иона С1 на ион ОН протекает на 23-25 мол. %, и на 18-20 мол.% при соотношении 1: 0,5. Полное замещение иона С1 в ПСПХ на ион ОН осуществили методом ионной хроматографии на сильноосновном анионите АВ-17-8 по методике, разработанной нами ранее [20]. Чистоту ПСПГ контролировали по элементному анализу и методом спектроскопии ЯМР 13С.

Иммобилизацию АСК на макромолекулы полиэлектролита проводили методом ионного обмена действием на ПСПГ или сополимер ПСПХ-ПСПГ АСК описанным нами в работе [21].

Водные дисперсии ПКК получали путем добавления к водному раствору

(не)модифицированного ПЭ с концентрацией 0.02 М по каплям 0.003 М раствора ДДС при перемешивании с интенсивностью 500 об/мин и температуре 25°С. Состав реакционной смеси выражали через мольное соотношение г:

[пав]. уп

ъ — -

[пэ]. Уп

где

[ПЭ]

молярная

концентрация повторяющегося звена

полиэлектролита, [ПАВ] - молярная концентрация додецилсульфата натрия, УПАВ и ¥ПЭ - объемы соответствующих компонентов. Состав

реакционной смеси свыше которого система начинает претерпевать фазовое разделение

принимали за 2пред. Концентрация ДДС в полученных растворах была в 4 раза меньше значения критической концентрации

мицеллообразования ПАВ в воде (0.008 М).

Турбидиметрические измерения выполняли на УФ-спектрофотометре “Shimadzu иУУКМЯ 3100” (Япония) в кварцевых кюветах толщиной 1 см при длине волны 500 нм, при которой все компоненты оптически прозрачны. Титрование проводили раствором ДДС с концентрацией 0.003М с интервалом прикапывания 5 минут - время, превышение которого не приводит к дальнейшему изменению оптической плотности в системе ПЭ-ПАВ. Мутность рассчитывали по формуле:

В-[VПЭ + VПАВ) т = 2.3----ПЭ----- В , где В - оптическая

1 - VПЭ

плотность раствора, VПЭ - объем раствора ПЭ, VПАВ - объем прибавленного раствора ДДС в момент титрования, I - толщина кюветы (см). Результат титрования представлен в виде зависимости нормированного значения т/ттах (где ттах-максимальное значение мутности системы, достигаемое в процессе титрования) от мольного соотношения компонентов z.

Определение размеров ПКК проводили на лазерном анализаторе размеров частиц Shimadzu SALD-7101 (Япония) при длине волны 375 нм и температуре 25°С. Для характеристики среднего размера частиц использовали медианный размер -значение размера частиц, которое разделяет популяцию распределения, точно на две равные части, т.е. точка на кривой где 50% распределения находится слева от этой точки, а 50% - справа.

Экспериментальные результаты и их обсуждения

Комплексы ПСПХ-ДДС образуются в результате реакции ионного обмена между ионизованными группами ПЭ и ионогенными группами ПАВ.

х Ма0803С,,И„

'\Т "СІ / \

ИзС СИ3

802

/ \

ИзС СИ3

гг

І\+ "СІ / \

ИзС СИз

п-х + х ИаСІ

п

х

+

Для определения предельного соотношения компонентов 2пргд использован тот же метод обработки материала, как в [22]. Предельный состав комплексов соответствует предельному содержанию ПАВ в частице комплекса, сохраняющей свою агрегативную устойчивость. Дальнейшее увеличение количества ПАВ в системе свыше гпргд приводит к фазовому разделению в системе, в результате которого в осадок выделяется нерастворимый в водных средах комплекс, а в растворе остается комплекс предельного состава.

На рис. 1 представлены зависимости

нормированной величины мутности т/ттах водных дисперсий ПКК, полученных на основе растворов

сополимера ПСПХ-ПСПГ с различным соотношением звеньев ПСПХ:ПСПГ, от мольного соотношения г. Видно, что по мере увеличения степени гидроксилирования ПСПХ происходит закономерное уменьшение гпр<,д. Так, в частности, при титровании исходного ПСПХ мутность системы начинает резко расти при г равном 0.6 (рис. 1, кривая 1), а в случае ПСПГ мутность резко возрастает уже при г равном 0.05 (рис. 1, кривая 4). Из данных рис. 1 для ряда полимеров значения 2пред равны 0.47, 0.24, 0.2, 0.04, соответственно. Во всех случаях системы ПКК, за исключением системы на основе полностью гидроксилированного ПЭ, полученные при значениях мольного соотношения г

меньше гпред, оказываются устойчивыми, о чем свидетельствуют результаты наблюдения за ними в течение 2 месяцев. В случае ПКК, полученных на основе полностью гидроксилированного ПЭ при г < гпред, системы являются неустойчивыми и в них наблюдается появление осадков. Поскольку в этих системах протекают процессы агрегирования даже при г < 2пред, определять размеры для них посчитали нецелесообразным.

т/ттах

г

Рис. 1 - Турбидиметрическое титрование

растворов сополимера ПСПХ-ПСПГ с различным содержанием звеньев ПСПГ (мол.%) раствором ДДС: 1 - 0; 2 - 19; 3 -23; 4 - 100. Во всех случаях общая исходная концентрация ПЭ равна 0.02 М

При переходе к модифицированному ПЭ способность к образованию ПКК сохраняется. Значение 2пред смещается в область больших значений, что видно при сравнении рис. 1 и рис. 2. При степени функционализации 19 и 23% кривые титрования практически совпадают, а значения гпред, соответственно, равны 0.45 и 0.43. В случае 100% функционализации хпред составляет 0.21. Во всех случаях системы ПКК, полученные при значениях г меньше гпред, оказываются также устойчивыми, а ПКК на основе полностью модифицированного ПСПХ остаются устойчивыми даже при значениях мольного соотношений компонентов свыше гпред.

Т//Ттах

г

Рис. 2 - Турбидиметрическое титрование

растворов ПСПХ с различным соотношением звеньев, модифицированных ацетилсалициловой кислотой (мол.%), раствором ДДС: 1 - 0; 2 - 19; 3 - 23; 4 - 100. Во всех случаях общая исходная концентрация ПЭ равна 0,02 М

Увеличение стабильности системы ПКК в

присутствии молекул АСК свидетельствует о том,

что АСК связывается в поликомплексы, скорее всего, располагаясь гидрофобными участками в мицеллярной фазе, тем самым усиливая кооперативные взаимодействия в пределах одной частицы, что препятствует ее дальнейшей агрегации с другими частицами поликомплексов.

На рис. 3 представлены кривые

дифференциально-числового распределения

диаметров частиц ПКК, сформированных на основе сополимеров ПСПХ-ПСПГ с различной степенью гидроксилирования. Размеры частиц определяли при соотношении компонентов ПАВ : ПЭ,

соответствующем интервалу устойчивости комплексов, равным 0.3. Неполная замена (19-23%) хлорид ионов на гидроксид ионы приводит к увеличению размеров частиц в среднем на 10 нм в отличие от комплексов на основе исходного ПСПХ.

Я, %

С, нм

Рис. 3 - Кривые дифференциально-числового распределения диаметров частиц ПКК, сформированных на основе растворов сополимера ПСПХ-ПСПГ с различным содержанием звеньев ПСПГ (мол.%): 1 - 0; 2 -19; 3 - 23. Во всех случаях г = 0.3. Для наглядности ось абсцисс представлена в логарифмическом масштабе

Из рис. 4 видно, что модификация

макромолекул лекарственным веществом приводит к увеличению размеров ПКК, в отличие от поликомплексов на основе немодифицированного ПСПХ, однако размеры при дальнейшей модификации закономерно уменьшаются. При степени модификации ПЭ равной 19% модальный размер частиц увеличивается с 49 до 141 нм, по сравнению с исходным ПСПХ. ПКК на основе ПЭ со степенью модификации 23 и 100% имеют модальный размер частиц 89 и 71 нм, соответственно. Закономерное уменьшение размеров частиц при дальнейшей модификации, видимо, связано с тем, что увеличение содержания АСК вызывает сжатие мицеллярной фазы и компактизацию цепей ПЭ в пределах частиц.

Таким образом, показана возможность формирования наночастиц полимер-коллоидных комплексов на основе ПСПХ, модифицированного молекулами АСК. Увеличение степени гидроксилирования ПЭ сопровождается уменьшением гпред, т. е. приводит к уменьшению лиофилизирующей способности ПЭ, входящего в состав ПКК. Кроме того, с увеличением степени

гидроксилирования ПЭ происходит усиление кооперативных взаимодействий в системе ПАВ -ПЭ, о чем свидетельствует увеличение размеров частиц ПКК на 10 нм. При переходе к ПКК от гидроксилированного к модифицированному лекарственным веществом ПЭ, входящему в состав ПКК, гпред смещается в область больших значений, но все же остается меньше, чем в случае немодифицированного ПЭ. При этом системы, полученные при г меньше гпред, остаются устойчивыми. Увеличение количества

закрепленного лекарственного вещества на макромолекулах ПЭ с 19 до 100% приводит практически к двукратному уменьшению размеров частиц с 141 до 71 нм. Уменьшение размеров частиц при большей степени модификации, видимо, связано с тем, что увеличение содержания АСК вызывает сжатие мицеллярной фазы и компактизацию цепей ПЭ в пределах частиц.

Я, %

d, нм

Рис. 4 - Кривые дифференциально-числового распределения диаметров частиц ПКК, сформированных на основе растворов ПСПХ с различным мольным соотношением звеньев, модифицированных ацетилсалициловой

кислотой (мол.%): 1 - 0; 2 - 19; 3 - 23; 4 -100. Во всех случаях z = 0.3

Результаты, полученные в настоящей работе, представляют интерес для создания новых лекарственных форм на основе синтетических полиэлектролитов. Метод модификации,

используемый в работе, позволяет получить водорастворимые конъюгаты с различным

содержанием лекарственного вещества, что

особенно привлекательно для закрепления плохорастворимых лекарственных веществ на макромолекулах полиэлектролитов.

Работа выполнена при финансовой поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009 - 2013 годы (мероприятие 1.1), номер заявки 2012-1.1-12-0001015-027

Литература

1. Jong D., Borm J. Drug delivery and nanoparticles: Applications and hazards// Int. J. Nanomed. 2008. V. 3. №

2. P. 133-149.

2.Packhaeuser C.,Schinieders J., Oster C., Kissel T. In situ forming parenteral drug delivery systems: an overview // Eur. J. Pharm. Biopharm. 2004. V. 5В. P. 445-455.

3.Швец В.И., Каплун А.П., Краснопольский Ю.М., Степанов А.Е., Чехонин В.П. От липосом семидесятых к нанобиотехнологии XXI века // Росс. нанотехнол. 200В. Т.3. № 11-12. С. 52-бб.

4.Peters K., Leitzke S., Diederichs J.E., Borner K., Hahn H., Muller R.H., Ehlers S. Preparation of clofaziminenanosuspension for intravenous use and evaluation of its therapeutic efficacy in murine Mycobacterium avium infection // J. Antimicrob. Chemother. 2000. V. 45. P. 77-В3.

5. Иноземцева О.А., Портнов С.А., Колесникова Т.А., Горин Д. А. Формирование и физико-химические свойства полиэлектролитных нанокомпозитных микрокапсул // Росс. нанотехнол. 2007. Т. 2. № 9-10. С. бВ-В0.

6. Lvov Y., Ariga K. Formation of Ultrathin Multilayer and Hydrated Gel from Montmorillonite and Linear Polycations // J. Amer. Chem. Soc. 1995. V. 117. P. б117

7. Dubas S.T., Schlenoff J.B. Polyelectrolyte Multilayers

Containing a Weak Polyacid: Construction and

Deconstruction // Macromolecules. 2001. V. 34. P. 373б

В. Кабанов В.А., Тончиев Д.А. Кинетика и механизм радикальной полимеризации ^^диалкил- N,N-диаллиламмоний галогенидов // Высокомолек. соед. А. 19ВВ. Т. 30. №4. С. б75-бВ5.

9. Воробьева А.И., Сагитова Д.Р., Садыкова Г.Р., Паршина Л. Н., Трофимов Б.А., Монаков Ю.Б. Сополимеризация ^№диаллил-Ы",Ы-диметиламмоний хлорида с виниловым эфиром этиленгликоля в водной среде // Высокомолек. соед. Б. 2007. Т. 49. № 3. С. 571-57б.

10. Воробьева А.И., Кутушева Э.Р., Леплянин Г.В., Гайсина Х.А., Прочухан Ю.А. Сонолимеризация^^ диметил-М,Ы-диаллиламмоний хлорида с виниловыми мономерами // Высокомолек. соед. Б. 2002. Т. 44. № 5. С. ВбВ-В71.

11. Wandrey Ch., Jaeger W. Copolymerization of dimethyl diallyl ammonium chloride and acryl amidePresented at the бШ International Conference on Modified Polymers // Acta Polymerica. 19В5. V. 3б. № 2. P. 100-102.

12. Воробьева А.И., Сагитова Д.Р., Колесов С.В., Монаков Ю.Б. Влияние природы растворителя на радикальную сополимеризацию ^№диаллил-М,Ы-диметиламмоний хлорида и винилацетата // Журнал прикладной химии. 2009. Т. 82. № В. С. 13б1-13б7.

13. Воробьева А. И., Сагитова Д. Р., Кузнецов С. И., Кунакова Р. В., Монаков Ю. Б. Влияние природы растворителя на радикальную сополимеризацию N,N-диаллил-М,Ы-диметиламмоний хлорида и малеиновой кислоты // Высокомолек. соед. А. 200В. Т. 50. № 2. С. 230-23б.

14. Леплянин Г.В., Воробьева А.И., Толстиков Г.А.,

Зайнчковский В.И., Сороковой В.С., Черемисинов Г.А., Шахов Е.В. Пат. 209505б Россия. 1997.

15. Гилязетдинов Ш.Я., Балахонцев Е.Н., Леплянин Г.В., Воробьева А.И., Исхаков Ф.Ф., Радцева О.В. А.с. 1744797 СССР // Б.И. 1992. № 24. С. 205.

16. Леплянин Г.В., Воробьева А.И., Толстиков Г.А.,

Зайнчковский В.И., Сороковой В.С., Черемисинов Д.А., Шахов А.Г. Пат. 209505б Россия. 199В.

17. Воробьева А.И., Васильева Е.В., Гайсина Х.А. и др. // Высокомолек. соед. А. 199б. Т. 3В. № 10. С. 1бб3-1бб7.

1В. Леплянин Г.В., Толстиков Г.А., Воробьева А.И.,

Шурунов Е.В., Абдрашитов Ю.М., Бикбаева Г.Г.,

Сатаева Ф.А., Козлов В.Г. А.с. 1530б31 СССР // Б.И. 19В9. № 47. С. 122.

19. Harada S., Arai K. The cyclo-copolymerization of diallyl compounds and sulfur dioxide. 2.

Diallyldimethylammonium chloride and sulfur dioxide // Die Makromol. Chem. 1967. - V. 107. - P. 64-77.

20. Воробьева А.И.,Сагитова ДР., Колесов С.В.,

Спирихин Л.В., Монаков Ю.Б. Оптически активные полимерные соли на основе

полисульфонилпирролидиний хлорида и аминокислот // Журнал прикладной химии. 2008.Т. 81. № 1. С. 300-303.

21. Воробьева А.И., Бабаев М.С., Сатаева Ф.А., Спирихин Л.В., Муслухов Р.Р., Колесов С.В. Сополимер N,N-

диаллил-К,К-диметиламмоний хлорида с диоксидом серы в качестве носителя лекарственных средств. // Журнал прикладной химии. Т. 85. № 11. с. 1853-1858.

22. Шулевич Ю. В., Тхуи Хыу Нгуен, Червятина М. Е., Навроцкий А. В., Новаков И. А. Применение комплексов полиэлектролит - ПАВ для очистки жиросодержащих сточных вод // Известия Волгоградского государственного технического университета. 2011. Т. 2. №8. С. 177-182.

©М. С. Бабаев - сотр. Башкирского госуд. университета; А. И. Воробьева - сотр. Башкирского госуд. университета;

С. В. Колесов - сотр. Башкирского госуд. университета; Л. Ф. Стоянова - канд. хим. наук, доц. каф. общей химической технологии КНИТУ, ov_stoyanov@mail.ru; Г. Е. Заиков - д-р хим. наук, проф., зав. отделом ИБХФ РАН.