Выделение и идентификация флавоноидов золотарника даурского

osteoporosis / Ed. H.W. Deng. — Hackensack, NJ: World Scientific Publisher. — 2005. — P. 513-531.

17. Singh L.M., Della Rosa R.J., Dumphy J.E. Mobilization of calcium in fractured bones in rats // Surg. Gynecol. Obstet. — 1963. — Vol. 126(2). — P.243-248.

18. Scmimmaier G., Widelmann B., Ostapowicz D., et al. Long term effects of local growth factor (IGF-I and TGF-p1) treatment on fracture healing A safety study for using growth factors // Journal of Orthopaedic Research. — 2004. — Vol.22. — P. 514-519.

19. Kokubu T., Hak D.J., Hazelwood S.J., Reddi A.H.

Development of an atrophic nonunion model and comparison to a closed healing fracture in rat femur // Journal of Orthopaedic Research. — 2003. — Vol. 21. — P. 503-510.

20. Warden S.J., Komatsu D.E., Redberg J., et al. Recombinant human parathyroid hormone (PTH1-43) and low intensity pulsed ultrasound have contrasting additive effects during fracture healing // Bone. — 2009. — Vol.44. — P.485-494.

21. Zhang R., Liu Z.G., Li C., et al. Du-Zhong (Eucomia ulmoides Oliver) cortex extract prevent OVX-induced osteoporosis in rats // Bone. — 2009. — Vol.45. — P. 553-559.

Информация об авторах: Ариунжаргал Нямсгрэн — преподаватель, докторант Восточно-Гобийского Филиала Университета Науки Здоровья Монголии, адрес: 1 баг, Сайншанд сум, Дорногоби аймаг, Монголия, e-mail: ariukaa_13@yahoo.com; Сэсрэгдорж Сурэнжид — профессор, д.м.н.;

Барху Доржнамжим — врач лучевой диагностики.

© БУИНОВ М.В., ГОРЯЧКИНА Е.Г., ФЕДОСЕЕВА Г.М. — 2013 УДК: 615.322

ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ФЛАВОНОИДОВ ЗОЛОТАРНИКА ДАУРСКОГО

Максим Владимирович Буинов, Елена Геннадьевна Горячкина, Галина Михайловна Федосеева

Резюме. В работе отражены результаты выделения и идентификации флавоноидов, содержащихся в надземной части золотарника даурского. Представлены результаты хроматографического исследования — бумажной и колоночной, а также ИК- и УФ-спектральные характеристики выделенных индивидуальных флавоноидов. Результаты исследования показали, что в надземной части золотарника даурского присутствуют флавоноиды как в виде агли-конов так и в виде гликозидов. Причём гликозиды являются производными кверцетина и лютеолина.

Ключевые слова: выделение флавоноидов, идентификация флавоноидов, золотарник даурский.

ISOLATION AND IDENTIFICATION OF THE FLAVONOIDS OF SOLIDAGO DAURICA

M.V. Buinov, E.G. Goryachkina, G.M. Fedoseeva

Summary. In the work the results of selection and identification of the flavonoids, contained in the ground part of Solidago daurica are disscussed. The results of chromatographic research — paper and columnar, and also IK and UF-spectral characteristics of extracted individual flavonoids are presented. The results of research showed that in the ground part of Solidago daurica are present flavonoids both in the form of aglycons and in the form of glycosides. And glycosides are derivants of Quercetinum and Luteolinum.

Key words: Selection of flavonoids, identification of flavonoids , Solidago daurica.

Золотарник даурский (Solidago daurica) представитель семейства астровых (сложноцветных), широко распространён на территории Восточной Сибири. Траву золотарника даурского применяют в народной медицине в качестве эффективного мочегонного, камневыводящего и противовоспалительного средства. В офици-нальной медицине используется золотарник канадский, произрастающий в западной части нашей страны и в зарубежных странах. Хемотаксономический принцип позволяет предположить наличие сходных химических и фармакологических показателей этих двух видов золотарников.

Цель работы: выделить и идентифицировать фла-воноиды надземной части золотарника даурского как основные биологически активные вещества данного растения.

Материалы и методы

Образцы сырья — надземная часть золотарника даурского (Solidago daurica — были собрана в период цветения в районе деревни Большое Голоустное, Пиво-вариха, Оёк и Горячие Ключи (Иркутская область). Для идентификации использовали инфракрасные (ИК) и ультрафиолетовые (УФ) спектры поглощения выделенных веществ [2, 3, 5].

Для извлечения и очистки флавоноидов измельчённое сырьё (размер частиц 2-3 мм) помещали в колбу и

заливали 70% этанолом до зеркала. Извлечение проводили на водяной бане с обратным холодильником до полного истощения сырья. Объединённый экстракт в вакуум-роторном испарители освобождали от спирта и сгущали до небольшого объёма и фильтровали. Фильтрат переносили в делительную воронку и подвергали очистке от пигментов и смол при помощи хлороформа, далее — от дубильных веществ путём осаждения последних желатином (5% раствор желатина на изотоническом растворе). Сухой остаток хлороформной фракции, после отгонки отработанного хлороформа, проверяли на присутствие изучаемых биологически активных веществ (флавоноидов) методом бумажной хроматографии. Данных веществ на хроматограммах не обнаружено. Водную фракцию (содержащую сумму флавоноидов и фенолкарбоновых кислот) подвергали дополнительному упариванию под вакуумом и использовали для непосредственного разделения и идентификации методами бумажной и адсорбционной колоночной хроматографии (на колонке с полиамидным адсорбентом) [1].

Для проведения бумажно- хроматографического исследования: брали 5,0 г сырья, очищенное водное извлечение упаривали почти досуха, а затем разбавляли этанолом и хроматографировали. Разделение суммы флавоноидов (ФЛ) и фенолкарбоновых кислот (ФКК) проводили с помощью одномерной и двумерной бумажной хроматографии восходящим способом в системах

системах бутанол:уксусная кислота: вода в соотношениях 4:1:2 БУВ (4:1:2) и 15% кислота уксусная. Идентификацию веществ проводили по значениям М, свечении. В УФ-свете и окраске пятен до и после проявления различными хромогенными реактивами в сравнении с достоверными образцами предполагаемых веществ. Наличие агликонов в структуре флавоноидов — гликози-дов устанавливали после предварительного кислотного гидролиза.

Для проведения адсорбционной хроматографии брали 500,0 г растительного сырья, очищенные водные извлечения упаривали до небольшого объёма, смешивали с порошком полиамида, суспендировали в дистиллированной воде и наносили на поверхность столба адсорбента в стеклянной колонке диаметром 5 см. С целью разделения суммы ФЛ и ФКК проводили элюирование сначала дистиллированной водой, а затем спир-то-водными смесями с возрастающей концентрацией спирта. Элюаты последовательно отбирали в колбочки по 15-20 мл. Полноту элюирования по фракциям контролировали бумажной хроматографией в системе 15% уксусной кислоты. При этом элюаты, имеющие сходную хроматографическую картину объединяли. Элюаты, содержащие чистые (индивидуальные) вещества упаривали, остаток растворяли в 96% этаноле и кристаллизовали [3, 6].

Элюаты со смесью веществ с целью разделения подвергали рехроматографированию на колонках диаметром 1,5 см с полиамидным сорбентом. При этом в качестве элюента использовали спирто-водные и спиртохлороформные смеси. Элюаты отбирали в объёме 10 мл. Для контроля процесса также использовали бумажную хроматографию в 15% уксусной кислоте. Индивидуальные вещества получали перекристаллизацией из 96% этанола после отгонки элюента.

Выделенные индивидуальные соединения идентифицировали по значениям М (двумерная бумажная хроматография) и результатам окраски пятен в видимом и УФ-свете до и после обработки хромогенными реактивами, а также по результатам УФ- и ИК-спектроскопии. Структура выделенных веществ была подтверждена результатами изучения продуктов щелочного, кислотного и ферментативного гидролизов, а также сравнением с достоверными образцами индивидуальных веществ.

Результаты и обсуждение

В ИК-спектрах выделенных соединений имеются полосы поглощения, характерные для ароматической части флавоноидов: 1628-1495 см-1 (скелетные колебания ароматических колец), 3250 см-1 (фенольные гидроксилы), 1685-1615 см-1 (карбонильная группа у-пирона). С помощью качественных реакций с хлористым алюминием, по окраске пятен на хромтаограммах, флюоресцированию их в УФ-свете устанавливали принадлежность выделенных веществ к группе флавонолов.

Вещество ФА-1 представляет собой кристаллы жёлтого цвета, хорошо растворимые в этаноле и нерастворимые в воде и хлороформе. Температура плавления 310-3130 С. Состав С15Н10О7. Указанное вещество образует малиновое окрашивание с магнием в присутствии соляной кислоты, причём при добавлении октанола продукты восстановления полностью переходят в органический слой. Появление зелёного окрашивания со спиртовым раствором хлорида железа (III) и жёлтого окрашивания с хлористым алюминием, исчезающего при обработке лимонной кислотой, свидетельствует о наличии свободных оксигрупп в положениях 3 и 5, что даёт возможность отнести вещество ФА-1 к флавонолам.

Положение свободных оксигрупп определяли УФ-спектроскопией с использованием ионизирующих и комплексообразующих реагентов. В УФ-области спектра в абсолютном этаноле указанные вещества имеют 2 максимума: 259 нм, 270 нм плечо в коротковолновой и

373 нм в длинноволновой части. Соотношение интенсивностей максимумов примерно одинаковое, что характерно для флавонолов.

Под влиянием этилата натрия происходит гипсох-ромный сдвиг, что говорит о свободной ОН-группе в 3 положении, кроме того наличие максимума и плеча во второй полосе указывает на присутствие 3141-ортодиоксигруппы в кольце В.

Батохромный сдвиг под влиянием хлорида алюминия позволяет предположить наличие свободных окси-групп в положениях 3 и 5.

При добавлении свежеплавленного ацетата натрия возникает батохромный сдвиг первой полосы, то указывает на наличие свободной гидроксильной группы в 7 положении.

Спектральные исследования вещества ФА-1 в сравнении с достоверным образцом кверцетина показали их идентичность. Проба смешения с кверцетином не дала депрессии температуры плавления.

В продуктах щелочной деструкции анализируемого вещества ФА-1 обнаружены флороглюцин (окраска с 1% раствором ванилина в концентрированной серной кислоте) и протокатеховая кислота (окраска с железа III хлоридом, что также подтверждает их идентичность с агликоном кверцетином (5, 7, 3', 4! —тетраоксифлавоно-лом).

Вещество ФА-2 представляет собой кристаллическое соединение жёлтого цвета с температурой плавления 2 73-2 740С, состава С15Н10О6, не растворимое в воде и хлороформе, также как и предыдущее вещество, по качественным реакциям относится к агликонам, производным флавонола и имеет свободные оксигруппы в положениях 3 и 5. Значения М в системах (4:1:2) — 0,76, 15% кислота уксусная — 0,03.

При сплавлении со щёлочью обнаружены п-оксибензойная кислота и флороглюцин.

Положение свободных ОН-групп в структуре этого вещества установлено по УФ-спектру с добавками диагностирующих реагентов, в частности характерное отсутствие плеча во второй полосе поглощения.

Устойчивый комплекс соединения с хлористо-водородной кислотой и алюминия (III) хлоридом указывает на свободные ОН-группы в 3 и 5 положениях.

Сравнение УФ-спектров выделенного вещества ФА-2 и спектра достоверного образца, а также отсутствие депрессии температуры плавления при смешении даёт основание идентифицировать выделенное вещество как кемпферол — 5,74!-триоксифлавонол.

Вещество ФА-3 — кристаллы жёлтого цвета хорошо растворимые в в этиловом и метиловом спирте, эфире, этилацетате, не растворимые в воде и хлороформе. Температура плавления 3300С (кристаллизация из этилового спирта). Значения в системах: 15% кислоты уксусной — 0,02, БУВ (4:1:2) — 0,79. В ИК-спектре вещества ФА-3 имеются полосы поглощения: 3400 —3040 см-1 валентные колебания ОН-групп; 1660 см-1 валентные колебания >С=группы; 1610, 1520 см-1 валентные колебания >С=О< группы; 858 см-1 в плоскостные деформационные колебания <С-Н пиронового кольца флавона.

В УФ — спектре в абсолютном этаноле имеются максимумы при 351 и 255 нм, хорошо выраженное плечо при 270 нм, что указывает на присутствие гидроксильных групп в 3' и 41 положениях кольца В. По соотношению максимумов I и II полосы и расстоянию между ними соединение ФА-3 можно отнести к флавонам.

Батохромный сдвиг максимума I полосы на 69 нм под действием этилата натрия указывает на присутствие гидроксильной группы в 4' положении, а батохромный сдвиг максимума II полосы поглощения на 17 нм вызывает гидроксильная группа в 7 положении.

Алюминия хлорид вызывает батохромный сдвиг максимума I полосы на 49 нм, который устойчив при добавлении кислоты хлористоводородной, что характерно для гидроксильной группы только в 5 положении.

Батохромный сдвиг максимума I полосы на 28 нм от добавления натрия ацетата свидетельствует о наличии гидроксильной группы в 7 положении. В сравнении с достоверным образцом соединение ФА-3 идентифицировано как 5, 7, 31, 4'-тетраоксифлавон или лютеолин

Вещество ФГ-1 — жёлтые кристаллы с температурой плавления 236-2390С, растворимы в воде, 50% этаноле, не растворимые в хлороформе. Состав С12Н20О12. Значения М в системах БУВ (4:1:2) — 0,62, 15 уксусной кислоте — 0,44. В УФ-спектре исследуемого вещества при добавлении этилата натрия наблюдается батохром-ный сдвиг максимума I полосы на 57 нм, что обусловлено наличием свободной ОН-группы в 4'-положении. В присутствии алюминия хлорида батохромный сдвиг I полосы на 51 нм, неустойчивый в кислоте хлористоводородной, что объясняется гликозидированием гидроксильной группы в 3 положении. При добавлении кислоты борной и натрия ацетата происходит сдвиг максимума I полосы на 35 нм, что указывает на свободную 3', 4-ортодиоксигруппировку кольца В. Добавление натрия ацетата вызывает батохромное смещение I полосы на 29 нм, обусловленное незамещённой ОН-группой в 7 положении.

Кислотный гидролиз, прошедший за 25 мин (хроматографический контроль) указывает на присутствие 3 гликозида, агликоном которого является кверцетин (результаты хроматографического исследования и определение температуры плавления в пробе смешения с достоверным образцом).

При исследовании сахара в гидролизате, предварительно нейтрализованном карбонатом бария, в сравнении со свидетелями по поведению на хроматограммах была идентифицирована галактоза.

В ИК-спектре вещества ФГ-2 обнаруживаются полосы валентных колебаний, соответствующие ОН-группам (3300-2900 см-1), >С=О (1660-1620 см-1) и >С=С< (1910-1800 см-1). Валентные колебания в области 1086 см-1, 1065 см-1 и 101 см-1 на пиранозную форму сахара в ^-конфигурации (896-884 см-1).

Таким образом, выделенное вещество идентифицировано нами на основании сравнения с достоверным образцом как кверцетин — 3-О-в-Б-галактопиранозид или гиперозид.

Вещество ФГ-2 — кристаллы жёлтого цвета, хорошо растворимые в воде, 50% этаноле, нерастворимые в хлороформе и этиловом эфире. Температура плавления 187-1920 С, значения М в системах БУВ (4:1:2) — 0,53, 15 уксусной кислоты — 0,45. На основании цианидиновой реакции по Брианту, данных бумажно-хроматографического исследования, свечению в УФ-свете и окраске пятен до и после проявления различными реактивами это вещество было отнесено к флавоноловым гликози-дам. УФ-спектр исследуемого соединения показал, что оно является биозидом флавонола с максимумом поглощения I полосы 364, 320, 267 плечо и II полосы 267 нм.

Свободные оксигруппы обнаруживаются по батохромному сдвигу максимума поглощения I полосы в длинноволновую область спектра при добавлении специфичных хромогенных реактивов. Наличие орто-диоксигруппировки в кольце Б в положениях 3! и 4 доказывается присутствием плеча и максимума во второй полосе, а также батохромией I полосы при добавлении борной кислоты. В присутствии алюминия хлорида батохромный сдвиг максимума I полосы вызывает ОН-группа в положении 5. Добавка натрия ацетата приводит к батохромному сдвигу максимума I полосы, указывающему на свободную ОН-группу в 7 положении, а разрушение комплекса с алюминия хлоридом после введения кислоты соляной говорит о замещении гидроксильной группы в 3 положении (гликозидирование).

При кислотном гидролизе установлено, что содержание агликона составляет 48,5%, что также характеризует данное соединение как биозид. В продуктах гидролиза обнаружены кверцетин, Ъ-рамноза и Б-глюкоза (значение М, соответственно 1,0 и 2,02 по отношению

к гликозиду в системе БУВ). В ИК-спектрах отмечаются интенсивные широкие полосы макисмумами при 33002900 см-1, которые обусловлены валентными колебаниями спиртовых и фенольных групп. Колебания групп >СН и —СН рамногликозида показаны полосами при 3000 см-1.

Область «отпечатков пальцев» выделенного вещества и достоверного образца рутина совпадает, что подтверждает их идентичность.

Вещество ФГ-3 — кристаллы жёлто-лимонного цвета, хорошо растворимые в воде, этаноле низкой концентрации, нерастворимые в хлороформе и этиловом эфире.

Температура плавления 190 —193 0 С, значения И7 в 15% уксусной кислоте — 0,24, БУВ (4:1:2) — 0,38.

Кислотный гидролиз проводили с помощью 6% кислоты серной и нагревали при температуре 1100 С. Процесс гидролиза контролировали хроматографически, нанося пробы через каждые 30 мин. После охлаждения смеси осадок агликона отфильтровывали. В УФ-свете агликона имеются максимумы 255, 270 плечо, 291, 351 нм. Агликон по УФ-спектральной характеристике, хроматографическому поведению идентичен лютеолину. В фильтрате, после осаждения сульфат-ионов бария карбонатом, хроматографически обнаружена глюкоза.

Кроме того в результата ферментативного гидролиза препаратом «Пектавомарин Г10х» были также получены лютеолин и глюкоза.

Для определения положения присоединённого сахарного компонента использовали влияние на хромофорную систему флавоноида в УФ-спектре различных реагентов. В УФ-спектре соединения ФГ-3 в присутствии натрия этилата наблюдается сдвиг I полосы на 50 нм, что обусловлено свободной ОН-группой в 4! положении. По батохромному сдвигу на 42 нм максимума I полосы под влиянием алюминия хлорида и кислоты хлористоводородной можно судить о присутствии свободной 5-оксигруппы. Наличие плеча во II полосе УФ-спектра соединения ФГ-3 объясняется ортодиокси-группой в 3! и 4! положениях кольца Б. При добавлении натрия ацетата наблюдается гипсохромный сдвиг максимума I полосы, что говорит о наличии заместителя в 7 положении. В пробе смешения соединения ФГ-2 с достоверным образцом лютеолин-7-в-Б-глюкозидом депрессии температуры плавления не наблюдали.

В ИК-спектре соединения ФГ-3 имеются следующие полосы поглощения: 3520 — 3333 см-1 — валентые колебания ОН-групп, 2908 см-1 — валентные колебания —С-Н сахарного компонента; 1710 см-1 — валентные колебания карбоксильной группы; 1654 см-1 — валентные колебания >С=С< групп ароматического кольца; 1100, 1070, 1031 см-1 — пиранозный цикл сахарного компонента; 890 см-1 —^- конфигурация гликозидной связи; 840 см-1 — внеплоскостные деформационные колебания >С-Н группы пиронового кольца флавона; 824 см-1 — замещение в бензольном кольце [4].

Таким образом, исследуемое соединение ФГ-3 идентифицировано как лютеолин-7- ^-Б-глюкопиранозид.

Вещество ФГ-4 — светло- желтые кристаллы с температурой плавления 220-2220С. Значение в системах: 15% уксусная кислота — 0,33, БУВ (4:1:2) — 0, 57.

После кислотного гидролиза, прошедшего в жёстких условиях, даёт кверцетин (66,5%) и Б-глюкозу.

В УФ — спектре обнаруживаются максимумы поглощения при 255 и 365 нм. Батохромный сдвиг максимума I полосы при добавлении свежеплавленного натрия ацетата указывает на свободную 7-ОН группу.

Сдвиг первой полосы в присутствии натрия ацетата и борной кислоты, а также наличие максимума и плеча в коротковолновой области спектра, снятом в абсолютном этаноле, свидетельствует о наличии ортодиок-сигруппировки в положениях 3! и 4!. Ферментативный гидролиз препаратом «Пентакваморином» прошёл с выделение кверцетина и Б-глюкозы.

Вещество ФГ-4 в пробе смешения с достоверным об-

разцом изокверцетина не дало депрессии температуры плавления и ориентировочно было идентифицировано как изокверцитрин.

Результаты исследований показали, что флавоноид-

ный комплекс золотарника даурского представлен как агликонами (кверцетин, кемпферол, лютеолин), так и гликозидами, производными кверцетина (рутин, гипе-розид) и лютеолина (лютеолин-7-глюкозид).

ЛИТЕРАТУРА

1. Гринкевич Н.И., Сафронович Л.М. Химический анализ лекарственных растений. — М., 1983. — 176 с.

2. Ковалёв И.П., Титов Е.В. Инфракрасные спектры поглощения некоторых групп природных соединений (Атлас спектров). — Харьков, 1966. — 266 с.

3. Максютина Н.П., Литвиненко В.И. Методы выделения и исследования флавоноидных соединений //Фенольные соединения и их биологические функции. — М., 1968. — С. 7-26.

4. Мирович В.М. Фармакогностическое изучение родов Origanum L. и Rhododendrum L. флоры Восточной Сибири: Автореф. дисс. ... д-ра фарм. наук. — Улан-Удэ, 2010. — 40 с.

5. Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений. — М.: Мир, 1965. — 216 с.

6. Тюкавкина Г.А., Литвиненко В.И., Шостаковский М.Ф. Хроматография на полиамидных сорбентах в органической химии. — Новосибирск: Наука, 1973. — 176 с.

Информация об авторах: Горячкина Елена Геннадьевна — доцент, к.ф.н., 664003 г. Иркутск ул. Красного Восстания, 1, ИГМУ, кафедра фармакогнозии и ботаники, тел. (3952) 243447, e-mail: rosforest@mail.ru; Буинов Максим Владимирович — аспирант; Федосеева Галина Михайловна — профессор, д.ф.н.

© СМАГУЛОВА Т.Б., ХОБРАКОВА В.Б. — 2013 УДК: 615.322

ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «ФИТОТОН» ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ИММУНОДЕФИЦИТЕ

Туяна Базаржаповна Смагулова1, Валентина Бимбаевна Хобракова2 ^Бурятский государственный университет г. Улан-Удэ, ректор — чл.-корр. РАО, проф. С.В. Калмыков;

2Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов)

Резюме. В опытах на мышах линии F1 (СВАхС57В1/6) установлена фармакотерапевтическая эффективность растительного средства «Фитотон» при азатиоприновой иммуносупрессии. Показано, что испытуемое средство способно ослаблять супрессивное действие цитостатика азатиоприна на антителогенез, клеточноопосредованную иммунную реакцию гиперчувствительности замедленного типа и фагоцитоз макрофагов, что выражается в повышении иммунологических показателей.

Ключевые слова: растительное средство «Фитотон», иммунитет, иммуномодулятор, иммунодефицит, азатиоприн, антителообразование, гиперчувствительность замедленного типа, фагоцитоз.

PHARMACOTHERAPEUTIC EFFICIENCY OF THE PLANT REMEDY "PHYTOTON" IN EXPERIMENTAL IMMUNODEFICIENCY

T.B. Smagulova1, V.B.Khobrakova2 (1Buryat State University, Ulan-Ude; 2Institute of General and Experimental Biology,

Siberian Division, Russian Academy of Sciences, Ulan-Ude, Russia)

Summary. The pharmacotherapeutic efficiency of the plant remedy «Phytoton» in azatioprin immunosupression has been established in experiments on the F1 (СВАхС57В1/6) mice. The remedy «Phytoton» is capable to decrease suppressive effect of cytostatic azatioprin on antibody genesis, cellularindirect immune reaction — hypersensitivity of slow type and phagocytosis of macrophages, what is expressed by the increasing the immune indices.

Key words: plant remedy «Phytoton», immunity, immunomodulator, immunodeficiency, azatioprin, antibody genesis, hypersensitivity of slow type, phagocytosis.

Ухудшение экологической обстановки, нарушение питания, изменение темпа жизни в условиях повышенного потока информации, особенно в городах, на фоне гиподинамии, а также при злоупотреблении алкоголем, курении могут привести к ослаблению защитных механизмов организма. Необходимость повышения адаптации организма человека обусловливает актуальность поиска новых эффективных растительных средств, повышающих иммунологическую реактивность организма. Применяемые в качестве иммуномодуляторов лекарственные растения отличаются от синтетических иммуностимуляторов мягким действием, низкой токсичностью, отсутствием побочных эффектов. Их действие определяется разнообразием биологически активных веществ (флаво-ноидов, полисахаридов, дубильных веществ, витаминов и т.д.) [1,3]. Объектом настоящего исследования явилось многокомпонентное растительное адаптогенное средство «Фитотон» — сухой экстракт из надземной части лабазника вязолистного Filipendula ulmaria (L.) Maxim, мяты перечной Mentha piperita L, корней бадана толстолистного Bergenia crassifolia (L.). Ранее для этого средства в экспериментальных работа была продемонстрированы адапто-

генные свойства [] и нейропротекторная активность [8].

Целью настоящего исследования явилось определение иммуномодулирующих свойств многокомпонентного растительного адаптогенного средства «Фитотон» в реакциях клеточного, гуморального и макрофагального звеньев иммунного ответа.

Материалы и методы

Эксперименты проведены на мышах-самцах линии Б1 (СВА хС57В1/6) массой 18-20г. Эксперименты проводили в соответствии с «Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и научных целях». Иммунодефицитное состояние у мышей контрольной и опытной групп воспроизводили путем внутрижелудочного введения азатиоприна в дозе 50м/кг 1раз в сутки в течение 5 дней [2]. Животным опытной группы на фоне азатиприновой иммуносупрессии внутрижелудочно вводили «Фитотон» в экспериментально-терапевтической дозе 300 мг/кг. Первое введение осуществляли по окончании введения азатиоприна, на 6 день эксперимента и далее в течение 14 дней 1 раз в сутки.