Полиморфизмы С-2578А и c+936t гена vegf среди мужчин европеоидного происхождения с коронарными осложнениями атеросклероза

ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2013

infection in a Japanese population. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000; 162 (1): 316-8.

98. Thio C.L., Carrington M., Marti D., O’Brien S.J., Vlahov D., Nelson K.E. et al. Class II HLA alleles and hepatitis B virus persistence in African Americans. J. Infect. Dis. 1999; 179 (4): 1004-6.

99. ThurszM.R., Thomas H.C., GreenwoodB.M. et al. Heterozygote advantage for HLA class-II type in hepatitis B virus infection. Nature Genet. 1997; 17; 1: 11-2.

100. ThurszM., YallopR., GoldinR., Trepo C., ThomasH.C. Influence of MHC class II genotype on outcome of infection with hepatitis C virus. The HENCORE group. Hepatitis C European Network for Cooperative Research. Lancet. 1999; 354 (9196): 2094-5.

101. Van Eden W., de Vries R.R., Mehra N.K. et al. HLA segregation of tuberculoid leprosy: confirmation of the DR2 marker. J. Infect. Dis. 1980; 141 (6): 693-701.

102. Wawrzynowicz-Syczewska M., Underhill J.A., Clare M.A., Boron-Kaczmarska A., McFarlane I.G., Donaldson R.T. HLA class II genotypes associated with chronic hepatitis C virus infection and response to alfa-interferon treatment in Poland. Liver. 2000; 20 (3): 234-9.

103. Zinkernagel R.M., Doherty P.C. Immunological surveillance against altered self components by sensitized T lymphocytes in lymphocytic choriomeningitis. Nature. 1974; 251 (5475): 547-8.

Поступила 18.01.13

МОЛЕКУЛЯРНАЯ ИММУНОЛОГИЯ И ИММУНОГЕНЕТИКА

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013

УДК 616.13-004.6-06:616.127]-092:612.6.05-055.1

А.В. Шевченко1, В.И. Коненков1, A.M. Караськов2

ПОЛИМОРФИЗМЫ С-2578А И С+936Т ГЕНА VEGF СРЕДИ МУЖЧИН

европеоидного происхождения с коронарными осложнениями атеросклероза

Лаборатория клинической иммуногенетики ФГБУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, 630117, г. Новосибирск

Проанализирована ассоциированность функционального полиморфизма гена VEGFA в позиции А-2578С (rs699947) промоторного региона и в позиции С-936Т (rs3025039) 3'-нетранслируемого региона у здоровых лиц, а также пациентов с нестабильной стенокардией (НС) и случаем инфаркта миокарда (ИМ) в анамнезе. Выявлены определенные закономерности в распределении частот генотипов -2578/+936 гена VEGF у пациентов, перенесших ИМ. Показано, что частота сложного генотипа АС/СС С-2578А/С-936T гена VEGFA достоверно выше у пациентов, перенесших ИМ, относительно таковой в контроле (здоровые лица). У пациентов с генотипом АС/СС с ИМ в возрасте после 55 лет риск развития ИМ возрастает. Результаты данного исследования подтверждают ранее высказанное нами положение о том, что увеличение количества генотипов цитокинов и ростовых факторов в составе анализируемых комбинированных генетических комплексов, выявляемых у одного пациента, значительно повышает клиническую значимость результатов иммуногенетического анализа.

Ключевые слова: полиморфизм VEGF, инфаркт миокарда A.V Shevchenko, V.I. Konenkov, A.M. Karas'kov

C-2578A AND C+936T VEGF GENE POLYMORPHISM AMONG MEN OF EUROPEAN DESCENT WITH CORONARY COMPLICATIONS OF ATHEROSCLEROSIS

Analyzed associativity functional polymorphism in the gene VEGFA in the position of A-2578C (rs699947) promotive region and in position C+936T (rs3025039) 3" nonbroadcast region in healthy persons and patients with instable angina pectoris and the case of myocardial infarction (MI) in history. We revealed certain regularities in the distribution of frequencies of genotypes-2578/+936 VEGF gene in patients who have had MI. It is shown that the frequency of the complex genotype AC/SS-2578A/ C+936T gene VEGFA significantly higher in patients treated with MI concerning the control group (healthy persons). In patients with genotype AC/MOP with MI after the age of 55 years, the value of the ratio of the development opportunities of MI increase. The results of this study confirm the previously expressed our position that the increase in the number of genotypes of cytokines and growth factors in the analyzed combined genetic complexes, detected in one patient, significantly increases the clinical significance of the results иммуногенетического analysis.

Key words: polymorphism VEGF, myocardial infarction

Введение. Ряд исследователей оценивают фактор роста эндотелия сосудов (VEGFA) как основной стимулятор клеток эндотелия сосудов, играющий двоякую роль в развитии атеросклероза. С одной стороны, VEGF может выступать

Шевченко Алла Владимировна - канд. биол. наук, ст. науч. сотр., тел. 8(383)227-01-94, e-mail: shalla64@mail.ru

определенным фактором защиты, активирующим неоваскуляризацию при ишемии тканей атеросклерозированных сосудов, с другой - ангиогенез, активированный VEGF, может приводить к росту атеросклеротических бляшек, которые могут быть нестабильны и способствовать развитию острых коронарных событий [7, 24]. Показано, что инъекции ДНК, содержащей ген VEGF, в миокард приводили к нормализации общего состояния при стенокардии и способствовали

- 144 -

МОЛЕКУЛЯРНАЯ ИММУНОЛОГИЯ И ИММУНОГЕНЕТИКА

улучшению сокращающей функции миокарда [10, 22]. В то же время есть данные о том, что неоваскуляризация атеросклеротических повреждений аорты может коррелировать с риском их разрыва [19]. Об этом свидетельствует то, что в эндотелиальных клетках, полученных из зоны сильного атеросклеротического повреждения, уровень экспрессии VEGF выше, чем уровень экспрессии VEGF эндотелиальными клетками при слабом атеросклеротическом поражении, причем эндотелиальные клетки нормальных артерий, по некоторым данным, не экспрессируют VEGF [20].

Плазменный уровень VEGF не только повышен у пациентов с множественными поражениями сосудов [21] , но и независимо ассоциирован с риском смерти при сердечнососудистых заболеваниях (ССЗ), как показано при проспективном популяционном анализе в когортных исследованиях [6]. Низкий уровень VEGF, напротив, обеспечивает стабилизацию атеросклеротических бляшек у пациентов с ССЗ [13]. При исследовании уровня VEGF у больных с острым инфарктом миокарда (ИМ) показано, что содержание сывороточного VEGF у них постепенно растет после приступа, достигая максимума на 14-е сутки, a уровень VEGF, секретируемый мононуклеарами периферической крови, - на 7-е сутки после приступа. Максимальный уровень сывороточного VEGF показал высокую корреляционную связь с максимальным уровнем креатинфосфокиназы (+0,7). Уровень VEGF в моно-нуклеарах повышался у больных, у которых отмечено улучшение левожелудочковой систолической функции, в отличие от такового у больных, у которых такого улучшения не наблюдали. Авторы считают, что VEGF, продуцируемый ИМ, способствует ангиогенезу и реэндотелизации [8].

Предполагается, что плазменный уровень VEGF, ассоциированный с тяжестью протекания ССЗ и риском острого коронарного случая, опосредован полиморфизмом гена VEGF [4, 9, 12]. Основное внимание направлено на исследование регуляторных сайтов гена как в области 5’-региона, так и в нетранслируемом З’-регионе гена. По данным ряда исследований, полиморфизм промоторного региона гена VEGF в позиции -2578А > С (rs699947) ассоциирован с уровнем экспрессии VEGF и степенью коронарного атеросклероза, оцененным при ангиографии у пациентов без случая острого ИМ в анамнезе. Аллель С связывают с высоким уровнем экспрессии VEGF, а генотип СС - с более умеренной степенью коронарного атеросклероза [12,

25]. Генотип Сс в позиции -634С > G (rs2010963) ассоциирован с высоким сывороточным уровнем VEGF, а аллель Т в позиции +936С > Т нетранслируемого региона гена (rs3025039) связывают с низким уровнем продукта [2, 16, 23].

Учитывая важное значение уровня VEGF в состоянии системы регуляции ангиогенеза и ассоциированность этого параметра с аллельными вариантами полиморфных участков регуляторных областей кодирующего его гена, мы проанализировали ассоциированность функционального полиморфизма гена VEGFA в позиции -2578 промоторного региона и в позиции +936 З’-нетрансли-руемого региона у здоровых лиц, а также пациентов с нестабильной стенокардией (НС) и случаем ИМ в анамнезе.

Материалы и методы. Обследовали 43 пациентов с НС (возраст от 35 до 83 лет) и 163 больных (перенесших острый ИМ в возрасте от 36 до 84 лет), находящихся на диспансерном

учете в кардиологическом центре городской клинической больницы № 29 Новокузнецка. В контрольную рандомизированную группу включили 92 практически здоровых лиц, этнически и географически соответствующих пациентам. Кроме того, с учетом того, что такие внешние факторы, как неблагоприятные условия труда, физическая нагрузка и профессиональная вредность, являются существенным фактором риска развития ССЗ, контрольную группу составляли с учетом этих особенностей.

Генотипирование полиморфизмов С-2578А и С+936Т VEGFA осуществляли методом рестриктазного анализа продуктов амплификации (ПДРФ-анализ) с использованием специфичных праймеров [3, 15] и эндонуклеаз рестрикции BglII и FaeI («СибЭнзим», Новосибирск). Электрофорез проводили в 2% агарозном геле.

Статистическая обработка результатов предусматривала тестирование распределения частот генотипов на соответствие равновесию Харди-Вайнберга, расчет частот генотипов регуляторных регионов генов. Об ассоциации генотипов с предрасположенностью к развитию патологии судили по величине отношения шансов (odds ratio - OR) и его 95% доверительного интервала (95% CI), достоверность различий между группами проводили методом точной оценки Фишера [5].

Результаты. Нами охарактеризовано распределение частот генотипов VEGFA в популяции практически здоровых мужчин Сибирского региона. Частота генотипов С-2578А и С+936Т VEGFA в популяционном контроле соответствует распределению частоты в европеоидных популяциях и равновесию Харди-Вайнберга в исследуемых группах. Характер распределения генотипов С+936Т VEGFA среди здоровых лиц европеоидного населения России практически совпадает и с нормативными значениями, полученными для монголоидов, тогда как распределение генотипов С-2578А отличается этническими особенностями. Так, в отличие от наших данных о преобладании гетерозиготного варианта АС среди корейцев преобладает гомозиготный вариант СС

Таблица 1

Частота генотипов VEGFA в популяции практически здоровых мужчин Сибирского региона и у пациентов с нс и ИМ в анамнезе

VEGFA НС, % ИМ, % Здоровые лица, % НС/здоровые лица, 95% CI ИМ/здоровые лица, 95% CI

С-2578А n = 43 n = 163 n = 92

АА 34,88 20,25 21,73 0,78 < 1,86 < 4,44 0,47 < 0,91 < 1,79

АС 48,84 59,50 48,91 0,44 < 0,95 < 2,08 0,89 < 1,54 < 2,65

СС 16,28 20,25 29,36 0,16 < 0,46 < 1,24 0,33 < 0,61 < 1,15

С+936Т n = 35 n = 137 n = 93

СС 77,14 79,56 72,04 0,49 < 1,31 < 3,60 0,78 < 1,51 < 2,92

СТ 22,86 18,98 26,88 0,29 < 0,81 < 2,17 0,33 < 0,64 < 1,25

ТТ 0 1,46 1,08 Ns 0,10 < 1,36 < 8,54

С-2578А/С+936Т n = 32 n = 130 00 00 II К

АА/СС 25,00 16,92 17,05 0,55 < 1,62 < 4,74 0,46 < 0,99 < 2,17

АА/СТ 0 1,54 5,68 Ns 0,03 < 0,26 < 1,55

АА/ТТ 0 0,77 0 Ns Ns

АС/СС 34,37 45,38 29,55 0,48 < 1,25 < 3,21 1,07 < 1,98 < 3,67

АС/СТ 18,75 12,32 15,90 0,54 < 1,22 < 2,72 0,32 < 0,74 < 1,72

АС/ТТ 0 0 1,14 Ns Ns

СС/СС 15,63 16,92 25,00 0,24 < 0,56 < 1,25 0,30 < 0,61 < 1,25

СС/СТ 6,25 5,38 5,68 0,28 < 1,11 < 4,04 0,26 < 0,94 < 3,57

СС/ТТ 0 0,77 0 Ns Ns

Примечание. Здесь и в табл. 2, 3: Ns - несущественно.

- 145 -

ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2013

Частота генотипов VEGFA у пациентов с ИМ двух возрастных групп Таблица 2

VEGFA ИМ до 55 лет, % ИМ после 55 лет, % Здоровые лица, % ИМ до 55 лет/ здоровые лица ИМ после 55 лет/ здоровые лица ИМ до 55 лет/ИМ после 55 лет

С-2578А n = 75 00 00 II к n = 92

АА 20,00 20,45 21,73 0,34 < 0,77 < 1,76 0,43 < 0,93 < 2,01 0,42 < 0,97 < 2,24

АС 60,00 59,09 48,91 0,81 < 1,57 < 3,05 0,80 < 1,51 < 2,84 0,53 < 1,04 < 2,04

CC 20,00 20,45 29,36 0,27 < 0,60 < 1,31 0,34 < 0,72 < 1,52 0,42 < 0,97 < 2,24

С+936Т n = 63 С-'- ll к n = 93

СС 77,78 81,08 72,04 0,61 < 1,36 < 3,07 0,75 < 1,66 < 3,71 0,33 < 0,82 < 2,03

СТ 19,05 18,92 26,88 0,27 < 0,64 < 1,48 0,28 < 0,63 < 1,41 0,39 < 1,01 < 2,57

tt 3,17 0 1,08 Ns Ns Ns

0-2578/С+936Т n = 60 О с- II к 00 00 II к

АА/СС 15,00 18,57 17,05 0,32 < 0,86 < 2,29 0,45 < 1,11 < 2,71 0,28 < 0,77 < 2,14

АА/СТ 1,67 1,43 5,68 0,01 < 0,28 < 2,58 0,01 < 0,24 < 2,20 Ns

АА/ТТ 1,67 0 0 Ns Ns Ns

АС/СС 43,33 47,14 29,55 0,87 < 1,82 < 3,84 1,05 < 2,13 < 4,33 0,40 < 0,86 < 1,82

АС/СТ 13,33 11,43 15,90 0,29 < 0,85 < 2,26 0,24 < 0,68 < 1,88 0,37 < 1,19 < 3,80

АС/ТТ 0 0 1,14 Ns Ns Ns

СС/СС 20,00 14,28 25,00 0,31 < 0,75 < 1,78 0,20 < 0,50 < 1,22 0,55 < 1,50 < 4,15

СС/СТ 3,33 7,15 5,68 0,07 < 0,57 < 3,49 0,30 < 1,28 < 5,36 0,06 < 0,45 < 2,75

СС/ТТ 1,67 0 0 Ns Ns Ns

Частота генотипов VEGFA у пациентов с ИМ с зубцом Q и без зубца Q

Таблица 3

VEGFA ИМ с зубцом Q, % ИМ с зубцом Q/здоро-вые лица, OR ИМ без зубца Q, % ИМ без зубца Q/ здоровые лица, OR Здоровые лица, % ИМ с зубцом Q/ИМ без зубца Q, OR

С-2578А n = 69 n = 19 n = 92

АА 23,19 0,48 < 1,09 < 2,44 21,05 0,24 < 0,96 < 3,59 21,73 0,21 < 0,88 < 3,43

АС 55,07 0,65 < 1,28 < 2,51 57,90 0,48 < 1,44 < 4,36 48,91 0,36 < 1,12 < 3,53

СС 21,74 0,21 < 0,46 < 1,04 21,05 0,11 < 0,44 < 1,64 29,36 0,23 < 0,96 < 3,76

С+936Т n = 61 n = 16 n = 93

СС 75,41 0,54 < 1,19 < 2,66 87,50 0,53 < 2,72 < 8,63 72,04 0,42 < 2,28 < 8,38

СТ 24,59 0,40 < 0,89 < 1,98 12,50 0,06 < 0,32 < 2,00 26,88 0,06 < 0,44 < 1,40

ТТ 0 Ns 0 Ns 1,08 Ns

С-2578А/С+936Т n = 57 n = 14 00 00 II к

АА/СС 21,05 0,51 < 1,30 < 3,27 21,43 0,26 < 1,33 < 6,10 17,05 0,33 < 1,02 < 3,06

АА/СТ 0 Ns 0 Ns 5,68 Ns

АА/ТТ 0 Ns 0 Ns 0 Ns

АС/СС 36,84 0,65 < 1,39 < 2,99 42,86 0,49 < 1,79 < 6,46 29,55 0,34 < 1,29 < 4,87

АС/СТ 19,30 0,49 < 1,26 < 3,28 14,28 0,23 < 0,88 < 4,92 15,90 0,18 < 0,70 < 2,42

АС/ТТ 0 Ns 0 Ns 1,14 Ns

СС/СС 15,79 0,22 < 0,56 < й,43 21,43 0,16 < 0,82 < 3,61 25,00 0,45 < 1,45 < 4,50

СС/СТ 7,02 0,27 < 1,25 < 5,70 0 Ns 5,68 Ns

СС/ТТ 0 Ns 0 Ns 0 Ns

(55,7%) при значительно более низкой встречаемости гомозиготного варианта АА [11].

При проведении анализа не выявили достоверной разницы в частоте генотипов двух исследуемых позиций между пациентами с НС, ИМ в анамнезе и лицами контрольной группы. Однако частота сложного генотипа АС/СС С-2578А/ С+936Т гена VEGFA оказалась достоверно выше у пациентов, перенесших ИМ, чем в группе контроля (OR = 1,98; р = 0,027) (табл. 1). В составе этого генотипа присутствует высокоэкспрессирующий аллельный вариант в позиции -2578,

а в позиции +936 вариант СС, ассоциированный с высоким уровнем белка, находится в гомозиготном виде. У индивидов с таким генотипом, вероятно, более высокая способность клеток продуцировать этот стимулятор ангиогенеза, что может способствовать развитию не только коронарного атеросклероза, но и нестабильности атеросклеротических бляшек, приводящих к развитию острого ИМ.

При выделении среди пациентов с ИМ подгрупп с ранним случаем ИМ (до 55 лет включительно) и с ИМ после 55 лет и старше выявили достоверное повышение в старшей возраст-

- 146 -

МОЛЕКУЛЯРНАЯ ИММУНОЛОГИЯ И ИММУНОГЕНЕТИКА

ной группе частоты генотипа АС/СС относительно таковой у здоровых лиц (OR = 2,13; р = 0,035). В младшей возрастной группе процентное соотношение генотипов С-2578А/С+936Т VEGFA приближается к распределению в группе здоровых лиц (табл. 2). При проведенном нами анализе с учетом возраста пациентов ассоциативные связи оказались неразрушенными, напротив, показали, что у пациентов с генотипом АС/СС с ИМ в возрасте после 55 лет риск развития ИМ возрастает. Подобные результаты, вероятно, связаны с тем, что физиологические функции VEGF зависят от определенного уровня VEGF. Такое предположение подтверждается результатами экспериментальных исследований, в которых показано, что защитными протективными свойствами отличается именно низкий уровень VEGF [26, 28].

При дальнейшем клинико-генетическом обследовании пациентов мы не выявили достоверных различий в характере распределения частоты анализируемых генотипов гена VEGFA у пациентов с ИМ без зубца Q относительно здоровых, с зубцом Q относительно здоровых и между этими двумя группами пациентов (табл. 3). Вероятно, это свидетельствует о том, что нарушения электрофизиологических параметров функционирования миокарда не связаны с уровнем продукции стимуляторов ангиогенеза.

Обсуждение. Основное внимание при анализе вклада генетических факторов в развитие ССЗ уделяется генам, кодирующим продукты, которые участвуют в метаболических процессах, и лишь в последнее время появляются немногочисленные публикации, затрагивающие генетические особенности фактора роста эндотелия сосудов. Показаны ассоциации развития процесса атеросклероза и его последующих осложнений с уровнем VEGF в плазме и сыворотке крови, и выявлен ряд полиморфизмов регуляторных областей гена, ассоциированных с уровнем белкового продукта [27]. В немногочисленных исследованиях полиморфизма гена чаще не обнаруживают достоверных различий между пациентами с такими ССЗ, как атеросклероз, ИМ, стенокардия, относительно здоровых лиц по единичным полиморфным позициям. Так, не выявлено ассоциаций между полиморфизмом VEGF-2578 и развитием атеросклероза в китайской популяции [18]. Мы также не отметили достоверных различий ни по одной из анализируемых позиций ни в одной из групп пациентов. Если подобные различия выявляются, авторы не склонны считать их независимыми предикторами заболевания, полагая, что, скорее, они связаны с такими факторами, как курение, гипертония, диабет, уровень холестерина. В ряде работ указывают на достоверные различия среди пациентов с ССЗ, связанные с количеством пораженных атеросклеротическими бляшками сосудов или степенью их поражения [12]. Тем не менее получившие подобные результаты бразильские исследователи (более высокая частота генотипа VEGF-2578AA у индивидов с тремя пораженными артериями (р = 0,044) в сравнении с одной и двумя артериями и более высокая частота генотипа VEGF-2578СA у пациентов с < 95 % стенозом (р = 0,010)) отмечают, что положительная ассоциация VEGF полиморфизма С-2578А и описанных факторов терялась при учете других факторов - возраста, курения и т. п. в мультивариантной модели [9]. Определенные закономерности в распределении частоты между больными и здоровыми лицами выявляют при анализе нескольких полиморфных позиций гена. Так, у пациентов с гаплотипом AGT (-2578/-634/+936) показан сниженный риск острого ИМ (OR = 0,46; 95% CI 0,25-0,86; p = 0,015) [14]. Авторы объясняют это тем, что гаплотип AG (-2578/-634) ассоциирован с более низким уровнем VEGF, как показано в более ранних публикациях [17].

Таким образом, мы выявили определенные закономерности в распределении частоты генотипов -2578/+936 гена VEGF у пациентов, перенесших ИМ, и связь полиморфизма с развитием патологий реализуется, вероятно, именно через регулирование уровня продукции VEGF. Кроме того, результаты данного исследования подтверждают ранее высказанное

нами положение о том, что увеличение количества генотипов цитокинов и ростовых факторов в составе анализируемых комбинированных генетических комплексов, выявляемых у одного пациента, значительно повышает клиническую значимость результатов иммуногенетического анализа [1].

ЛИТЕРАТУРА

1. Коненков В.И. Цитокиновые полигенные комплексы - маркеры индивидуальной настройки состояния цитокиновой сети здорового человека и пациентов с заболеваниями различной природы. Аллергология и иммунология. 2011; 12 (2): 191-4.

2. Awata T., Inoue K., Kurihara S., Ohkubo T., WatanabeM., Inukai

K. et al. A common polymorphism in the 5’-untranslated region of the VEGF gene is associated with diabetic retinopathy in type 2 diabetes. Diabetes. 2002; 51: 1635-9.

3. BanyaszI., Szabo S., Bokodi G., Bokodi G., VannayA., Vasarhelyi B. et al. Genetic polymorphisms of vascular endothelial growth factor in severe preeclampsia. Мо1. Hum. Reprod. 2006; 12: 233-6.

4. Biselli P.M., Guerzoni A.R., de Godoy M.F., Pavarino-Bertelli E.C., Goloni-Bertollo E.M. Vascular endothelial growth factor genetic variability and coronary artery disease in Brazilian population. Heart Vessels. 2008; 23: 371-5.

5. Bland J., Altman D. Education and debate. The odds ratio. Br. Med. J. 2000; 320: 1468.

6. Eaton C.B., Gramling R., Parker D.R., Roberts M.B., Lu B., Ridker P.M. Prospective association of vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A) with coronary heart disease mortality in southeastern New England. Atherosclerosis. 2008; 200: 221-7.

7. Ferrara N., Gerber H.P., LeCouter J. The biology of VEGF and its receptors. Nature Med. 2003; 9: 669-76.

8. GiurgeaA.G., Margeta С., Maca T., Rezaie-Majd A., BucekR.A., Manavi M. et al. Simvastatin reduces serum level of VEGF in hypercholesterolemic patients. J. Cardiovasc. Pharmacol. 2006; 47: 30-6.

9. GuerzoniA.R., BiselliP.M., GodoyM.F., SouzaD.R., HaddadR., Eberlin M.N. et al. Homocysteine and MTHFR and VEGF gene polymorphisms: impact on coronary artery disease. Arq. Bras. Cardiol. 2009; 92: 249-54.

10. GyongyosiМ., Khorsand A., ZaminiS., Sperker W., Strehblow С., Kastrup J. et al. NOGA-guided analysis of regional myocardial perfusion abnormalities treated with intramyocardial injections of plasmid encoding vascular endothelial growth factor A-165 in patients with chronic myocardial ischemia: subanalysis of the EUROINJECT-ONE multicenter double-blind randomized study. Circulation. 2005; 112: I157-65.

11. Han S.W., Kim G.W., Seo J.S., Kim S.J., Sa K.H., Park J.Y. et al. VEGF gene polymorphisms and susceptibility to rheumatoid arthritis. Rheumatology. 2004; 43; 1173-7.

12. Howell W.M., AliS., Rose-Zerilli M.J., YeS. VEGF polymorphisms and severity of atherosclerosis. J. Med. Genet. 2005; 42: 485-90.

13. Jaumdally R.J., Goon P.K., Varma C., Blann A.D., Lip G.Y. Effects of atorvastatin on circulating CD34+/CD133+/. J. Intern. Med. 2010; 267: 385-93.

14. Kangas-Kontio T., Tapanainen J.M., Huikuri H., Savolainen E.R., Paivansalo M., Kauma H. et al. Variation in the vascular endothelial growth factor gene, carotid intima-media thickness and the risk of acute myocardial infarction. Scand. J. Clin. Lab. Invest. 2009; 69: 335-43.

15. Kim J.K., Oh D., Kwak S.Y., Han J.H., Chung Y.S., Kim N.K. Genetic polymorphism of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF C936T) in the Korean population. Korean J. Biol. Sci. 2003; 7: 261-4.

16. Krippl P., Langsenlehner U., Renner W., Yazdani-Biuki B., Wolf G., Wascher T.C. et al. A common 936 C/T gene polymorphism of vascular endothelial growth factor is associated with decreased breast cancer risk. Int. J. Cancer. 2003; 106: 468-71.

17. Lambrechts D., Storkebaum E., Morimoto M., Del-Favero J., DesmetF., MarklundS.L. et al. VEGF is a modifier of amyotrophic

- 147 -

ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2013

lateral sclerosis in mice and humans and protects motoneurons against ischemic death. Nature Genet. 2003; 34: 383-94.

18. Lin T.H., Su H.M., Wang C.L., Voon W.C., Shin S.J., Lai W.T., Sheu

S.H. Vascular endothelial growth factor polymorphisms and extent of coronary atherosclerosis in Chinese population with advanced coronary artery disease. Am. J. Hypertens. 2010; 23: 960-6.

19. Moreno P.R., Purushothaman K.R., Fuster V, Echeverri D, Truszc-zynska H., Sharma S.K. et al. Plaque neovascularization is increased in ruptured atherosclerotic lesions of human aorta: implications for plaque vulnerability. Circulation. 2004; 110: 2032-8.

20. Morsi W.G., Shaker O.G., IsmailE.F., AhmedH.H., El-Serafi T.I., Maklady F.A. et al. HO-1 and VGEF gene expression in human arteries with advanced atherosclerosis. Clin. Biochem. 2006; 39: 1057-62.

21. Nakajima K., Tabata S., Yamashita T., KusuharaM., Arakawa K., Ohmori R. et al. Plasma vascular endothelial growth factor level is elevated in patients with multivessel coronary artery disease. Clin. Cardiol. 2004; 27: 281-6.

22. Reilly J.P., GriseM.A., FortuinF.D., ValeP.R., Schaer G.L., Lopez J. et al. Long-term (2-year) clinical events following transthoracic intramyocardial gene transfer of VEGF-2 in nooption patients. J. Interv. Cardiol. 2005; 18: 27-31.

23. Renner W., Kotschan S., Hoffmann C., Obermaye-Pietsch B., Pilger E. A common 936 C/T mutation in the gene for vascular endothelial growth factor is associated with vascular endothelial growth factor plasma levels. J. Vasc. Res. 2000; 37: 443-8.

24. Roy H., Bhardwaj S., Yla-Herttuala S. Biology of vascular endothelial growth factors. FEBS Lett. 2006; 580: 2879-87.

25. ShahbaziM., Fryer A.A., Pravica V., Brogan I.J., Ramsay H.M., Hutchinson I.V., Harden P. N. Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms are associated with acute renal allograft rejection. J. Am. Soc. Nephrol. 2002; 13: 260-4.

26. Tsutsumi Y., Losordo D.W. Double face of VEGF. Circulation. 2005; 112: 1248-50.

27. Van Belle E., Tio F.O., Chen D., Maillard L., Chen D., Kearney M., Isner J.M. Passivation of metallic stents after arterial gene transfer of phVEGF165 inhibits thrombus formation and intimal thickening. J. Am. Coll. Cardiol. 1997; 29: 1371-9.

28. Zachary I., Mathur A., Yla-Herttuala S., Martin J. Vascular protection: a novel nonangiogenic cardiovascular role for VEGF. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2000; 20: 1512-20.

Поступила 26.09.12

РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013

УДК 616-006.04+616.9-002.6]-092:612.017.1]-078.33

О. В. Уткин12, А. А. Бабаев12, Е. Н. Филатова1, О. С. Янченко3, В. Д. Старикова12,

И. В. Евсегнеева4, А. В. Караулов4, В. В. Новиков12

ОЦЕНКА СЫВОРОТОЧНОГО УРОВНЯ РАСТВОРИМОГО РЕЦЕПТОРА DR3/LARD

при заболеваниях разного генеза

1ФБУН Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной Роспотребнадзора, 603950, г. Нижний Новгород; 2НИИ молекулярной биологии и региональной экологии ФГБОУ ВПО Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, 603006, г Нижний Новгород; 3ГБОУ ВПО Нижегородская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития РФ, 603005, г. Нижний Новгород; 4ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России, 119991, Москва

С помощью иммуноферментного анализа определено присутствие растворимого DR3/LARD (sDR3/sLARD) в сыворотке крови у здоровых лиц, больных раком толстой кишки (РТК), и лиц, инфицированных герпес-вирусами. Обнаружено, что сывороточный уровень sDR3/sLARD повышался при инфицировании вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и не менялся при инфицировании цитомегаловирусом (ЦМВ) и вирусом ветряной оспы (ВВО). Выявлено повышение сывороточного уровня sDR3/sLARD на II стадии РТК. Показано, что сывороточный уровень sDR3/sLARD менялся в зависимости от степени агрессивности опухоли. Он превышал показатели нормы при низкодифференцированной опухоли и сохранялся в пределах нормы при высокодифференцированной опухоли.

Ключевые слова: апоптоз, растворимые формы белков, DR3/LARD, CD95/Fas, герпес-вирусная инфекция, рак толстой кишки

O.V. Utkin, А.А. Babaev, E.N. Filatova, O.S. Yanchenko, V.D. Starikova, I .V. Evsegneeva, A.V Karaulov, V.V. Novikov EVALUATION OF SERUM LEVELS OF SOLUBLE DR3/LARD IN DISEASES OF DIFFERENT GENESIS

Using the immunoassay, the presence of soluble DR3/LARD (sDR3/sLARD) was determined in blood serum of healthy volunteers and patients with colon cancer and herpesviral infection various etiology. The sDR3/sLARD blood serum level increase in patients with Epstein-Barr virus infection (EBV) was detected. However, patients with cytomegalovirus (CMV) and varicella zoster virus (VZV) infection did not display significant change of the sDR3/sLARD blood serum level. The sDR3/sLARD blood serum level increase in patients with stage 2 colon cancer was detected. It was shown that the sDR3/ sLARD blood serum level change correlates with the cancer malignity. It was increased in patients with low differentiated colon cancer and did not change in patients with high differentiated colon cancer compared with healthy volunteers.

Key words: apoptosis, soluble proteins forms, DR3/LARD, CD95/Fas, herpesviral infection, colon cancer

- 148 -