Профиль метилирования цитозинов промоторной области гена GSTP1 в крови и моче больных раком простаты

Результаты. Терапевтический эффект отмечен у всех 16 (100 %) больных. Полная резорбция - у 60,8 %, частичная - у 39,2 % больных. После проведения ФДТ полых органов просвет восстанавливался до 1,5-2,0 см. Осложнений лечения нами не отмечено, однако ФДТ сопряжена с болевым синдромом, интенсивность которого зависит как от индивидуальной реакции пациента, так и от размера поля облучения и плотности мощности лазерного облучения. При сеансах ФДТ больными отмечались боле-

вые ощущения разной степени выраженности - от чувства жжения до резких болей в зоне облучения, поэтому нами использовалась потенцированная анестезия.

Выводы. Набор клинического материала продолжается, но можно сделать вывод, что эндоскопическая фотодинамическая терапия имеет большие перспективы как в радикальном, так в паллиативном лечении опухолей, особенно в тех случаях, когда исчерпаны возможности традиционных методов.

ПРОФИЛЬ МЕТИЛИРОВАНИЯ ЦИТОЗИНОВ ПРОМОТОРНОЙ ОБЛАСТИ ГЕНА GSTP1 В КРОВИ И МОЧЕ БОЛЬНЫХ РАКОМ ПРОСТАТЫ

О.Е. Брызгунова1, Е.С.Морозкин1, С.В. Ярмощук2, В.И. Пермякова3, А.А. Отпущенников3, В.В. Чернышов3, В.В. Власов1, П.П. Лактионов1

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН1,

ГУЗ Областной онкологический диспансер2,

Центральная клиническая больница СО РАН3, г. Новосибирск

Актуальность. В последние годы прирост заболевших раком предстательной железы (РПЖ) в мире составляет в среднем 3 % в год, что позволяет прогнозировать удвоение числа случаев заболевания РПЖ в 2030 г. Из-за отсутствия ранних клинических симптомов злокачественные опухоли простаты распознаются, как правило, на стадии генерализации онкологического процесса, что является причиной высоких показателей летальности больных РПЖ. Актуальной проблемой при онкологических заболеваниях ПЖ является разработка диагностических методов, обеспечивающих выявление предраковых заболеваний (облигатных и факультативных) и ранних стадий развития злокачественной опухоли. Показано, что метилирование промоторной области гена GSTP1 в опухолевых тканях с вероятностью 90 % коррелирует с РПЖ и, таким образом, является перспективным маркером этого заболевания.

Целью исследования является изучение профиля метилирования цитозинов в составе СрG-островков промоторной области гена GST-Р1 во внеклеточной ДНК крови и мочи здоровых

доноров, больных раком предстательной железы и доброкачественной гиперплазией простаты для разработки методов ранней диагностики заболеваний предстательной железы, основанных на ПЦР-анализе внеклеточных ДНК крови и мочи.

Материал и методы. В работе были использованы образцы ДНК, полученные от здоровых доноров, больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы и раком простаты. Профиль метилирования цитозинов в промоторной области гена GSTP1 исследовали при помощи секвенирования методом Сенге-ра внеклеточной ДНК мочи, плазмы крови и элюатов с поверхностей клеток крови после бисульфидной обработки.

Результаты. Выбор праймеров для анализа метилирования промоторной области гена GSTP1 обычно выполняется на основе данных о метилировании этого гена в клетках линии LNCaP, которое зачастую не совпадает с метилированием гена GSTP1 у больных. Нами было показано, что у больных раком предстательной железы в промоторной области гена GSTP1 ме-

тилирование отличается от такового в клетках линии LNCaP, при этом профиль метилирования не отличается во фракциях циркулирующей ДНК и между больными РПЖ. Тем не менее наблюдаются отличия в сайтах и степени метилирования внеклеточной ДНК между исследуемыми группами больных пациентов и здоровых доноров.

Выводы. Полученные данные позволяют выбрать праймеры для разработки анализа, основанного на использовании внеклеточной ДНК и направленного на выявление метили-

рованных цитозинов в составе CpG-островков промоторной области гена GSTP1. Литерату-трые данные о диагностическом потенциале внеклеточной ДНК и полученные нами данные о метилировании цитозинов в составе CpG-островков промоторной области гена GSTP1 при РПЖ позволяют надеяться на создание анализа, пригодного для ранней диагностики и мониторинга рака предстательной железы.

Работа поддержана грантом Фонда содействия отечественной науке.

ВЛИЯНИЕ ИМПУЛЬСНО-ПЕРИОДИЧЕСКОГО СВЧ-ИЗЛУЧЕНИЯ НА ОПУХОЛЕВЫЕ И НОРМАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ. МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ

М.А. Булдаков1, Н.В. Литвяков1, А.Н. Астапенко3, К.В. Афанасьев2

ГУ «НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН», г. Томск1 Институт сильноточной электроники СО РАН, г. Томск2 Томский государственный университет3

Актуальность. В настоящее время в лучевой терапии злокачественных новообразований используются различные виды излучения - рентгеновское, нейтронное, у-излучение. Попытки использовать электромагнитное излучение не увенчались успехом, поскольку эффекты после воздействия такого излучения обусловливались температурными изменениями в облучаемых объектах, а сама эффективность оказывалась невысокой. Рядом авторов было показано, что биологическое действие импульсно-периодических источников электромагнитного излучения (ИП ЭМИ) существенно отличается от биологических эффектов стационарных излучателей (Bol’shakov et al., 2004). Причем эффективность ИП ЭМИ обеспечивалась при очень маленьких интенсивностях воздействия. Кроме того, мы показали, что импульсно-периодическое рентгеновское излучение (ИПРИ) в диапазоне доз от 0,2 до 200 мГр, в отличие от стационарного рентгеновского излучения, тормозит рост экспериментальных опухолей. Таким образом, импульсно-периодический режим воздействия оказывается в несколько раз эффективнее по сравнению со стационарным. В этой связи пред-

ставлялось необходимым изучить влияние на опухолевые клетки импульсно-периодического электромагнитного излучения.

Цель работы. Исследование влияния импульсно-периодического СВЧ-излучения (ИП-СВЧ) на опухолевые и здоровые клетки, а также изучение механизма действия ИП-СВЧ.

Материал и методы. В качестве источника импульсно-периодического СВЧ-излучения использовался разработанный в Институте сильноточной электроники СО РАН импульсный магнетронный генератор «МИ-505» (длительность импульса 730 нс, напряженность электрического поля 1,6-2,0*103 В/см, плотность потока мощности 3,5-5,7 кВт/см2, длина волны 3 см). Облучение проводили на частотах повторения импульсов 10, 13, 16, 19 и 22 Гц. В качестве объекта исследований использовался асцитный вариант карциномы Эрлиха, поддерживаемый

на мышах линии С57ВЦ и клетки селезенки

б7

интактных мышей этой же линии. Уровень пролиферативной активности оценивали по включению в ДНК клетки Н3-тимидина с использованием Р-счетчика (MicroBeta ТгПих, Wallac). Активность каспазы-3 определяли с помощью