ИНГИБИТОР РФРФ4, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
RFRF4 INHIBITOR, METHOD OF ITS PREPARATION AND ITS PHARMACEUTICAL APPLICATION

Область техники
Настоящее изобретение относится к области синтеза лекарственных средств и, в частности, относится к ингибитору РФРФ4, способу его получения и его фармацевтическому применению.
Уровень техники
Фактор роста фибробластов (ФРФ) представляет собой семейство 22 структурно родственных полипептидов с разнообразной биологической активностью, которые могут регулировать пролиферацию, дифференцировку и миграцию клеток, и играют важную роль в процессе развития конечностей, ангиогенеза, восстановления тканей, образования опухолей и т.д. (Eswarakumar et al., 2005 Cytokine Growth Factor Rev16: 139-149; Ornitz и Itoh, 2001 Genome Bio12: Reviews 3005).
Рецепторы для ФРФ (РФРФ) принадлежат к семейству рецепторной протеин тирозинкиназы рецепторных тирозинкиназ.
На сегодняшний день идентифицировано четыре РФРФ: РФРФ1, РФРФ2, РФРФ3 и РФРФ4 (Ullrich и Schlessinger, 1990 Cell 61:203). Взаимодействие рецепторов и соответствующих лигандов ФРФ приводит к димеризации и аутофосфорилированию рецепторов, тем самым инициируя множественные нисходящие сигнальные каскады, включая митоген-активируемую протеинкиназу и протеинкиназу В (Powers et al., 2000 Endocr Relat Cancer7: 165-197).
Было выявлено, что РФРФ1-3 избыточно экспрессируется, мутирует или транслоцируется в различных опухолях (включая миелому, рак молочной железы, рак желудка, рак толстой кишки, рак мочевого пузыря, рак поджелудочной железы и гепатоцеллюлярную карциному), и считается драйверным геном при раке. (Chesi et al., 2001 Blood 97:729-726; Gowardhan et al., 2005 Br J Cancer 92: 320-327; Jaakkola et al., 1993 Int J Cancer 54:378-282; Jang et al., 2001 Cancer Res 61: 3541-3543). Также в процессе клинической и доклинической разработки были созданы некоторые ингибиторы РФРФ.
Тем не менее, предыдущие исследования показали, что РФРФ1 может регулировать уровень фосфата, поэтому пан-РФРФ ингибиторы могут представлять угрозу безопасности.
Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) является одной из основных причин смертности от рака в Китае и является одним из самых ежегодно быстрорастущих раковых заболеваний (Shariff et al., 2009 Expert Rev Gastroenterol Hepato 13: 353-367). В настоящее время сорафениб представляет собой вариант лечения первой линии; одобренной терапии второй линии нет, и все еще существует потребность в целевой терапии противоопухолевыми средствами.
Сверхэкспрессия ФРФ19 присутствует у 5-10% пациентов с гепатоцеллюлярной карциномой, тогда как РФРФ4 является доминантным РФРФ, присутствующим в гепатоцитах человека, и установлено, что его высокая экспрессия в гепатоцитах связана с агрессивностью гепатоцеллюлярных опухолей. Следовательно, РФРФ4 играет очень важную роль при раке печени. Также считается, что взаимодействие ФРФ19 и РФРФ4 связано с агрессивностью других видов рака (таких как рак желудка, рак простаты, рак легких, колоректальный рак, рак поджелудочной железы и рак яичников) (Ye et al, 2011 Cancer 5304-5313; Xu et al, 2011 BMC Cancer 11:84; Fawdar et al, 2013 PNAS 110:12426-12431).
В настоящее время некоторые ингибиторы РФРФ используются в клинических исследованиях в качестве противоопухолевых препаратов, но в основном это ингибиторы против РФРФ1, 2 и 3, с более слабым ингибированием активности РФРФ4. Ингибирование РФРФ1-3 имеет прогнозируемые побочные эффекты, такие как гиперфосфатемия. Высокоселективный ингибитор РФРФ4 может эффективно лечить рак, вызванный аномальной передачей сигналов РФРФ4, и может избежать побочных эффектов, вызванных ингибированием РФРФ1-3, таких как гиперфосфатемия. Высокоселективные низкомолекулярные ингибиторы против РФРФ4 имеют значительные перспективы применения в области противоопухолевой таргетной терапии. Таким образом, разработка нового противоопухолевого средства, которое может селективно воздействовать на РФРФ4 в качестве хорошего потенциального лекарственного средства, будет отвечать потребностям отечественной терапии рака печени и другой противоопухолевой целевой терапии, а также будет иметь преимущества лучшей безопасности и более высокой селективности.
Сущность изобретения
Задачей настоящего изобретения является создание ингибитора РФРФ4, способа его получения и фармацевтического применения.
Первый аспект изобретения представляет собой соединение формулы (I), стереоизомер или его фармацевтически приемлемую соль:
1
7
где X представляет собой -C(R)- или N;
2
3
5
8
9
Х, Х и Х каждый независимо выбран из группы, состоящей из -(CR)n-, -С(O)-, -N(R)-, N, О и S;
4
Х представляет собой С или N;
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Z выбран из группы, состоящей из C алкилена, С алкенилена, С алкинилена, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила и 5-10-членного гетероарила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -С-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR, указанные группы при этом могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила,, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR;
1
1-8
1-8
1-8
3-8
1-8
3-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
1-8
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, C алкокси C алкила, С циклоалкилокси C алкила, С циклоалкил C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила и С алканоила;
2
3
4
5
6
7
1-8
2-8
2-8
3-8
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
2
4
3
5
4
6
5
6
5-10
R, R, R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, -C-S(O)rR, - C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, - C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR, или R и R, R и R, R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют С циклоалкил, 5-10-членный гетероциклил, 5-10-членный арил или 5-10-членный гетероарил,
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, C арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, - C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, - C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR;
8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, - C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, - C-N(R)-C(O)R и -СN(R)-C(O)OR,
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, - C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR, указанные группы при этом могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, - C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
9
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
5-10
1-8
1-8
2-8
2-8
1-8
2-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С алкенила, С алкинила, C алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила и C алканоила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR;
10
1-8
2-8
3-8
1-8
5-10
1-8
1-8
1-8
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С алкенила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, C галогеналкила, С арила, 5-10-членного гетероарила, амино, моно- C алкиламино, ди-С алкиламино и С алканоиламино;
11
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
1-8
1-8
1-8
3-8
5-10
1-8
1-8
1-8
1-8
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила и 5-10-членного гетероарила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, C алкила, C алкокси, C алкилтио, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, C алкилсульфонила, C алкилсульфониламино, амино, моно-C алкиламино, ди-С алкиламино, =O или гидроксила;
12
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
3-8
5-10
5-10
1-8
1-8
1-8
3-8
5-10
1-8
1-8
1-8
1-8
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С алкенила, С алкинила, C алкокси, С циклоалкила, С циклоалкилокси, 3-10-членного гетероциклила, 3-10-членного гетероциклилокси, С арила, 5-10-членного гетероарила, С арилокси и 5-10-членного гетероарилокси, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, C алкила, C алкокси, C алкилтио, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, C алкилсульфонила, C алкилсульфониламино, амино, моно-C алкиламино, ди-С алкиламино, =O или гидроксила;
13
14
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
1-8
1-8
13
14
R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, C алкилсульфонила и C алканоила, или R и R вместе с атомом азота, с которым они непосредственно связаны, образуют 4-10-членный гетероциклил,
1-8
1-8
1-8
3-8
5-10
1-8
1-8
1-8
1-8
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, C алкила, C алкокси, C алкилтио, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, C алкилсульфонила, C алкилсульфониламино, амино, моно-C алкиламино, ди-С алкиламино, =O или гидроксила;
m - 0 или 1;
n - 0, 1 или 2;
r - 0, 1 или 2;
3
8
2
4
5
9
при условии, что, когда Х представляет собой -(CR)n-, Х представляет собой -С(O)-, Х представляет собой С, Х выбран из группы, состоящей из -N(R)-, N, О и S;
3
2
9
1-8
2-8
2-8
когда Х представляет собой -С(O)-, Х представляет собой -N(R)-, и Z выбран из группы, состоящей из C алкила, С алкенила, С алкинила и фенила.
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения, в соединении формулы (I), его стереоизомере или фармацевтически приемлемой соли, Z выбран из группы, состоящей из С алкилена, C алкенилена, С алкинилена, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила и 5-8-членного гетероарила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, - C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR, указанные группы при этом могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, - C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-OC(O)R, -С-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -CN(R)-C(O)OR;
1
1-4
1-4
1-4
3-6
1-4
3-6
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
1-4
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, C алкоксиС алкила, С циклоалкилоксиС алкила, С циклоалкилС алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила и C алканоила;
2
3
4
5
6
7
1-4
2-4
2-4
3-6
0-4
10
0-4
9
10
0-4
10
2
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
2
4
3
5
4
6
5
6
5-8
R, R, R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, -C-S(O)rR, -C-S(O)(NR)R, -C-P(O)(R), -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -С-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, или R и R, R и R, R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют С циклоалкил, 5-8-членный гетероциклил, 5-8-членный арил или 5-8-членный гетероарил,
1-4
2-4
2-4
1-4
3-4
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -С-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
1-2
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения в соединении формулы (I), его стереоизомере или фармацевтически приемлемой соли, Z выбран из группы, состоящей из C алкилена и следующих структур:
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, указанные группы при этом могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
1
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения, в соединении формулы (I), его стереоизомере или его фармацевтически приемлемой соли, R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, метила, изопропила, метоксиэтила, циклопропилоксиметила, циклопропилметила, аллила, циклопропила и ацетила;
2
3
4
5
1-4
2-4
2-4
3-6
0-4
11
0-4
13
14
2
4
3
5
5-8
1-4
2-4
2-4
1-4
3-4
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, галогена, C алкила, C алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, - C-O-R и -C-NRR, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют С циклоалкил, 5-8-членного гетероциклил, 5-8-членный арил или 5-8-членный гетероарил, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, С галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
6
R представляет собой Н или дейтерий.
1
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения, в соединении формулы (I), его стереоизомере или фармацевтически приемлемой соли R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, метила и циклопропилметила;
2
3
4
5
0-4
11
0-4
13
14
2
4
3
5
1-4
2-4
2-4
1-4
3-4
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, F, Cl, метила, изопропила, аллила, этинила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила, -C-O-R и - C-NRR, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членный гетероциклил, гетероатом представляет собой N или О, 5-8-членный гетероциклил в ряде случаев замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -С-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
6
R - H или дейтерий.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль представляет собой соединение следующей формулы (IIa):
3
9
в котором Х выбран из группы, состоящей из -N(R)-, N, О и S;
1-2
Z выбран из группы, состоящей из C алкилена и следующих структур:
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR,, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, указанные группы могут быть при этом необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, --C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
2
3
4
5
0-4
11
0-4
13
14
2
4
3
5
1-4
2-4
2-4
1-4
3-4
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из H, дейтерия, F, Cl, метила, изопропила, аллила, этинила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила, -C-O-R и -C-NRR, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членный гетероциклил, гетероатом представляет собой О или N, 5-8-членный гетероциклил может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, Салкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, - C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
7
0-4
11
0-4
13
14
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, аллила, этинила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила, -C-O-R и -C-NRR;
9
1-4
3-6
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С циклоалкила и 3-8-членного гетероциклила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -С-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
1
2
5
8
10
11
12
13
14
X, X, Х, R, R, R, R, R, R, m, n и r такие, как описано выше.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из группы, состоящей из следующих соединений формулы (IIIa-1), (IIIa-2), (IIIa-3) и (IIIa-4):
1-2
в котором Z выбран из группы, состоящей из C алкилена и следующих структур:
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, Салкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, - C-S(O)rR, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, указанные группы могут быть при этом необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
2
3
4
5
11
2
4
3
5
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, метила, изопропила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила и -O-R, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членный гетероциклил, гетероатом представляет собой N или О;
7
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, циклопропила и -O-R;
9
1-4
3-6
1-4
1-4
3-6
0-4
11
0-4
13
14
0-4
13
14
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С циклоалкила и 3-8-членного гетероциклила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, C алкила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, -C-O-R, -C-NRR и -C-C(O)NRR;
1
5
8
10
11
12
13
14
X, Х, R, R, R, R, R, R, m, n и r описаны в п. 1.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из соединения формулы (IVa-1):
5
в котором Х представляет собой -СН- или N;
1-2
Z выбран из группы, состоящей из C алкилена и следующих структур:
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, указанные группы могут быть при этом необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
2
3
4
5
11
2
4
3
5
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, метила, изопропила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила и -O-R, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членный гетероциклил, гетероатом представляет собой N или О;
7
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, циклопропила и -O-R;
8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
9
10
0-8
10
2
0-8
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-S(O)(NR)R, -C-P(O)(R), -C-O-R,
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
-C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR,
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, указанные группы могут быть при этом необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
1
10
11
12
13
14
X, R, R, R, R, R, m, n и r такие, как описано выше.
8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
11
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения в соединении формулы (I), его стереоизомере или фармацевтически приемлемой соли, R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, галогена, циано, C алкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -С-O-R, -C-NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR,
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR, указанные группы могут быть при этом необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, C галоалкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из соединения формулы (IIb):
3
8
где Х представляет собой -(CR)n- или -С(O)-;
1-2
Z выбран из группы, состоящей из C алкилена и следующих структур:
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
2
3
4
5
0-4
11
0-4
13
14
2
4
3
5
1-4
2-4
2-4
1-4
3-4
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, F, Cl, метила, изопропила, аллила, этинила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила, - C-O-R и - C-NRR, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членного гетероциклила, гетероатом представляет собой N или О, 5-8-членный гетероциклил может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, С алкинила, С галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
7
0-4
11
0-4
13
14
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, аллила, этинила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила, -C-O-R и - C-NRR;
9
1-4
3-6
1-4
2-4
2-4
1-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С циклоалкила и 3-8-членного гетероциклила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C алкенила, C алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -С-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
1
2
5
8
10
11
12
13
14
X, X, Х, R, R, R, R, R, R, m, n и r такие, как описано выше.
3
8
2
5
9
при условии, что когда Х представляет собой -(CR)n-, X представляет собой -С(O)-, Х представляет собой -N(R)-, N, О или S;
3
2
9
1-4
когда Х представляет собой -С(O)-, X представляет собой -N(R)-, и Z представляет собой C алкил или фенил.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из группы, состоящей из следующих соединений формулы (IIIb-1) и (IIIb-2):
1-2
где Z выбран из группы, состоящей из C алкилена и следующих структур:
1-4
2-4
2-4
3-6
5-8
0-4
10
0-4
11
0-4
11
0-4
12
0-4
12
0-4
13
14
0-4
13
14
0-4
13
12
0-4
13
11
указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, C алкинила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, С арила, 5-8-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -С-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR;
2
3
4
5
11
2
4
3
5
R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, метила, изопропила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила и -O-R, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членный гетероциклил, гетероатом представляет собой N или О;
7
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, циклопропила и -O-R;
1
10
11
12
13
14
X, R, R, R, R, R, m и r такие, как описано выше.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль выбраны из соединения формулы (IIIb-3):
2
3
4
5
11
2
4
3
5
в котором R, R, R и R каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, метила, изопропила, циклопропила, 3-оксациклобутила, трифторметила, тридейтерометила и -O-R, или R и R, R и R вместе с атомами углерода, с которыми они непосредственно связаны, образуют 5-8-членный гетероциклил, гетероатом представляет собой N или О;
7
11
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, Cl, F, гидроксила, циклопропила и -O-R;
9
1-4
3-6
1-4
1-4
3-6
0-4
11
0-4
13
14
0-4
13
14
R выбран из группы, состоящей из Н, дейтерия, C алкила, С циклоалкила или 3-8-членного гетероциклила, указанные группы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из дейтерия, галогена, С алкила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-8-членного гетероциклила, -C-O-R, -C-NRR и -C-C(O)NRR;
1
8
10
11
13
14
X, R, R, R, R, R и n такие, как описано выше.
В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль включает, без ограничений, следующие соединения:
Во втором аспекте изобретения предложен способ получения упомянутого соединения формулы (I), его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли, который осуществляют следующим образом в соответствии со стадиями реакции аллиламидной группы, когда m=1:
или
или
или
или следующим образом, когда m=0:
в некоторых случаях реакция конверсии проводится кроме того между другими заместителями в соответствии с другим заместителем;
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
при этом X представляет собой замещаемую группу, и предпочтительно выбран из группы, состоящей из Cl, Br, метилтио, метилсульфонила и метокси; R выбран из группы, состоящей из нитро, циано и азидо; Pg представляет собой амино-защитную группу и предпочтительно выбран из группы, состоящей из третбутилоксикарбонила, бензилоксикарбонила, 2-бифенил-2-пропоксикарбонила и p-толуолсульфонила; a X, Х, Х, Х, Х, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, m, n и r соответствуют описанным выше.
В дополнительном предпочтительном варианте осуществления изобретения, когда X представляет собой метилсульфонил, соответствующее соединение может быть получено путем реакции окисления метилтио, когда R представляет собой окислитель, такой как m-ХПБК (m-хлорпероксибензойная кислота).
В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения реакция конверсии между другими заместителями в соответствии с другим заместителем означает, что, если необходимо, конверсия заместителей может быть проведена путем обычного эксперимента в данной области техники в условиях, соответствующих условиям
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
принципа химического синтеза в соответствии с различными определениями X, Х, Х, Х, Х, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, R, после реакции конденсации.
Третий аспект настоящего изобретения обеспечивает получение фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество упомянутого соединения формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
Четвертый аспект настоящего изобретения обеспечивает применение упомянутого соединения формулы (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли или упомянутой фармацевтической композиции для приготовления лекарственного средства в качестве ингибитора РФРФ4.
Пятый аспект настоящего изобретения обеспечивает применение упомянутого соединения формулы (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли или упомянутой фармацевтической композиции для приготовления лекарственного средства для лечения рака.
Предпочтительно, рак представляет собой рак предстательной железы, рак печени, рак поджелудочной железы, рак пищевода, рак желудка, рак легкого, рак молочной железы, рак яичников, рак толстой кишки, рак кожи, глиобластому или рабдомиосаркому.
Шестой аспект изобретения относится к упомянутому соединению формулы (I), его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли или упомянутой фармацевтической композиции для применения в качестве ингибитора РФРФ4.
Седьмой аспект изобретения относится к упомянутому соединению формулы (I), его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли или упомянутой фармацевтической композиции для применения при лечении рака.
Предпочтительно, рак представляет собой рак предстательной железы, рак печени, рак поджелудочной железы, рак пищевода, рак желудка, рак легкого, рак молочной железы, рак яичников, рак толстой кишки, рак кожи, глиобластому или рабдомиосаркому.
Восьмой аспект изобретения относится к способу ингибирования РФРФ4, который включает в себя введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества упомянутого соединения формулы (I), его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли или упомянутой фармацевтической композиции.
Девятый аспект изобретения относится к способу лечения рака, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, лечения терапевтически эффективного количества упомянутого соединения формулы (I), его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли или упомянутой фармацевтической композиции.
Предпочтительно, рак представляет собой рак предстательной железы, рак печени, рак поджелудочной железы, рак пищевода, рак желудка, рак легкого, рак молочной железы, рак яичников, рак толстой кишки, рак кожи, глиобластому или рабдомиосаркому.
Серия соединений, разработанных в соответствии с настоящим изобретением, оказывает сильное ингибирующее действие на активность киназы РФРФ4 и очень высокую селективность, и может широко использоваться для приготовления лекарственного средства для лечения рака, особенно рака простаты, рака печени, рака поджелудочной железы, рака пищевода, рака желудка, рака легких, рака молочной железы, рака яичников, рака толстой кишки, рака кожи, глиобластомы или рабдомиосаркомы. Ожидается, что соединения будут разработаны в качестве лекарственного средства нового поколения ингибитора РФРФ4.
Следует понимать, что в пределах сферы применения настоящего изобретения упомянутые различные технические признаки настоящего изобретения и технические признаки, конкретно описанные ниже (в приведенных примерах), могут быть объединены друг с другом, чтобы составить новое или предпочтительное техническое решение. В виду ограниченного объема они не будут описаны по одному.
Осуществление изобретения
Основываясь на долгосрочном и углубленном исследовании, авторы изобретения впервые разработали ингибитор РФРФ4 со структурой формулы (I), предлагаемый ряд соединений оказывает очень сильное ингибирующее действие на активность киназы РФРФ4 и очень высокую селективность и может быть широко использован для приготовления лекарственного средства для лечения рака, особенно рака предстательной железы, рака печени, рака поджелудочной железы, рака пищевода, рака желудка, рака легких, рака молочной железы, рака яичника, рака толстой кишки, рака кожи, глиобластомы или рабдомиосаркомы. Ожидается, что эти соединения будут разработаны в качестве лекарственного средства нового поколения ингибитора РФРФ4. На этой основе и было создано настоящее изобретение.
Подробное описание: Если не указано иное, следующие термины, используемые в описании и формуле изобретения, имеют следующие значения.
1-8
«Алкил» означает насыщенную алифатическую углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, например, «C алкил» означает алкил с прямой или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, включая, без ограничений, метил, этил, n-пропил, изопропил, n-бутил, изобутил, третбутил, втор-бутил, n-пентил, 1,1-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, 2-метилбутил, 3-метилбутил, n-гексил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2-триметилпропил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2-этилбутил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 4-метилпентил, 2,3-диметилбутил, n-гептил, 2-метилгексил, 3-метилгексил, 4-метилгексил, 5-метилгексил, 2,3-диметилпентил, 2,4-диметилпентил, 2,2-диметилпентил, 3,3-диметилпентил, 2-этилпентил, 3-этилпентил, n-октил, 2,3-диметилгексил, 2,4-диметилгексил, 2,5-диметилгексил, 2,2-диметилгексил, 3,3-диметилгексил, 4,4-диметилгексил, 2-этилгексил, 3-этилгексил, 4-этилгексил, 2-метил-2-этилпентил, 2-метил-3-этилпентил или его различные разветвленные изомеры и так далее.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Алкил может быть в ряде случаев замещен или не замещен, и когда он замещен, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, C арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -С-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
3-8
«Циклоалкил» означает насыщенный или частично ненасыщенный моноциклический или полициклический углеводородный заместитель, например, «С циклоалкил» относится к циклоалкилу, имеющему 3-8 атомов углерода, который может представлять собой моноциклический циклоалкил и полициклический циклоалкил, где моноциклический циклоалкил включает в себя, без ограничений, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогексадиенил, циклогептил, циклогептатриенил, циклооктил и тому подобное; полициклический циклоалкил включает в себя спиро-, конденсированный и мостиковый циклоалкил.
«Спироциклоалкил» относится к полициклической группе, которая разделяет атом углерода (называемый спироатом) между моноциклическими кольцами. Эти группы могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы. Спироциклоалкил может представлять собой моноспироциклоалкил, биспироциклоалкил или полиспироциклоалкил в соответствии с числом общих спиро атомов между кольцами, спироциклоалкил включает в себя, без ограничений:
«Конденсированный циклоалкил» означает полностью углеродную полициклическую группу, в которой каждое кольцо имеет общую смежную пару атомов углерода с другими кольцами в системе, причем одно или несколько колец могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженную π-электронную систему. В зависимости от количества колец он может быть бициклическим, трициклическим, тетрациклическим или полициклическим, конденсированный циклоалкил включает в себя, без ограничений:
«Мостиковый циклоалкил» относится к полностью углеродной полициклической группе, в которой любые два кольца имеют два атома углерода, которые не связаны непосредственно, которые могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженную π-электронную систему. В зависимости от количества колец он может быть бициклическим, трициклическим, тетрациклическим или полициклическим, мостиковый циклоалкил включая, без ограничений:
Кольцо циклоалкила может быть конденсировано с кольцом арила, гетероарила или гетероциклоалкила, где кольцо, присоединенное к родительской структуре, представляет собой циклоалкил, включая, без ограничений, инданил, тетрагидронафтил, бензоциклогептил и т.д.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Циклоалкил может быть в ряде случаев замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -С-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
«Гетероциклил» означает насыщенный или частично ненасыщенный моноциклический или полициклический циклический углеводородный заместитель, где один или несколько атомов кольца представляют собой гетероатомы, выбранные из азота, кислорода или S(O)r (где r представляет собой целое число 0, 1, 2), но с исключением кольцевого фрагмента -O-O-, -O-S- или -S-S-, а остальные кольцевые атомы представляют собой атомы углерода. Например, «5-10-членный гетероциклил» означает циклическую группу, содержащую от 5 до 10 атомов кольца, а «3-10-членный гетероциклил» означает циклическую группу, содержащую от 3 до 10 атомов кольца.
Моноциклический гетероциклил включает в себя, без ограничений, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, гомопиперазинил и т.д.
Полициклический гетероциклил включает спиро-, конденсированный и мостиковый гетероциклил. «Спирогетероциклил» относится к полициклическому гетероциклилу, который разделяет атом углерода (называемый спироатом) между моноциклическими кольцами, где один или несколько атомов кольца представляют собой гетероатомы, выбранные из азота, кислорода или S(O)r (где r представляет собой целое число 0, 1, 2), а остальные атомы кольца являются атомами углерода. Эти группы могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы. Спирогетероциклил может представлять собой моноспирогетероциклил, биспирогетероциклил или полиспирогетероциклил в соответствии с числом общих спиро атомов между кольцами, спирогетероциклил включает в себя, без ограничений:
«Конденсированный гетероциклил» означает полициклический гетероциклил, в котором каждое кольцо имеет общую прилегающую пару атомов углерода с другими кольцами в системе, причем одно или несколько колец могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы, в которой один или несколько атомов кольца представляют собой гетероатомы, выбранные из азота, кислорода или S(O)r (где r представляет собой целое число 0, 1, 2), а остальные атомы кольца представляют собой атомы углерода. В зависимости от количества колец он может быть бициклическим, трициклическим, тетрациклическим или полициклическим, конденсированный гетероциклил включает в себя, без ограничений:
«Мостиковый гетероциклил» относится к полициклическому гетероциклилу, в котором любые два кольца имеют два общих атома углерода, которые не связаны непосредственно, которые могут содержать одну или несколько двойных связей, но ни одно из колец не имеет полностью сопряженной π-электронной системы, в которой один или больше атомов кольца представляют собой гетероатомы, выбранные из азота, кислорода или S(O)r (где r представляет собой целое число 0, 1, 2), а остальные атомы кольца представляют собой атомы углерода. В зависимости от количества колец он может быть бициклическим, трициклическим, тетрациклическим или полициклическим, мостиковый гетероциклил включает в себя, без ограничений:
Кольцо гетероциклила может быть конденсировано с кольцом арила, гетероарила или циклоалкила, где кольцо, присоединенное к родительской структуре, представляет собой гетероциклил, включая, без ограничений:
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Гетероциклил может быть в ряде случаев замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -С-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -C-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
5-10
«Арил» означает полностью состоящую из атомов углерода моноциклическую или конденсированную полициклическую группу (т.е. кольцо, которое разделяет пару соседних атомов углерода) и полициклическую  имеющую сопряженную π-электронную систему (т.е. кольцо с соседними парами атомов углерода), например, «С арил» означает полностью состоящий из атомов углерода арил с 5-10 атомами углерода, и «5-10-членный арил» означает полностью состоящий из атомов углерода арил с 5-10 атомами углерода, включая, но не ограничиваясь, фенил и нафтил. Кольцо арила может быть конденсировано с кольцом гетероарила, гетероциклила или циклоалкила, где кольцо, присоединенное к родительской структуре, представляет собой кольцо арила, включая, но не ограничиваясь:
1-8
2-8
2-8
1-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Арильная группа может быть в ряде случаев замещенной или не замещенной, и когда она замещенная, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, С алкенила, С алкинила, C галогеналкила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
«Гетероарил» относится к гетероароматической системе, содержащей от 1 до 4 гетероатомов, включая гетероатом, выбранный из азота, кислорода или S(O)r (причем г представляет собой целое число 0, 1, 2), например, 5-7-членный гетероарил относится к гетероароматической системе, содержащей от 5 до 7 атомов кольца, а 5-10-членный гетероарил относится к гетероароматической системе, содержащей от 5 до 10 атомов кольца, включая, но не ограничиваясь, фурил, тиофенил, пиридил, пирролил, N-алкилпирролил, пиримидинил, пиразинил, имидазолил, тетразолильную группу или им подобные. Кольцо гетероарила может быть конденсировано с кольцом арила, гетероциклила или циклоалкила, где кольцо, присоединенное к родительской структуре, представляет собой кольцо гетероарила, включая, без ограничений:
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Гетероарил может быть в ряде случаев замещен или не замещен, и когда он замещен, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, C арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
2-8
«Алкенил» относится к алкильной группе, как определено выше, состоящей, по меньшей мере, из двух атомов углерода и, по меньшей мере, одной углерод-углеродной двойной связи, например, С-алкенил относится к прямому или разветвленному алкенилу, содержащему от 2 до 8 атомов углерода. Алкенил включает в себя, без ограничений, винил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-, 2- или 3-бутенил и т.д.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Алкенильная группа может быть в ряде случаев замещенной или не замещенной, и когда она замещенная, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, С алкила, С галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, Cарила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
2-8
«Алкинил» относится к алкильной группе, как определено выше, состоящей из, по меньшей мере, двух атомов углерода и, по меньшей мере, одной углерод-углеродной тройной связи, например, С алкинил относится к прямому или разветвленному алкинилу, содержащему от 2 до 8 атомов углерода. Алкинил включает в себя, без ограничений, этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-, 2- или 3-бутинил и т.д.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Алкинил может быть замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, С алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
1-8
«Алкокси» означает -О-(алкил), где алкил такой, как определено выше, например, «С алкокси» относится к алкилокси, содержащему от 1 до 8 атомов углерода. Алкокси включает в себя, без ограничений, метокси, этокси, пропокси, бутокси и т.д.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Алкокси может быть замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
3-8
«Циклоалкилокси» означает-O-(незамещенный циклоалкил), где циклоалкил такой, как определено выше, например, «С циклоалкилокси» относится к циклоалкилокси, содержащему от 3 до 8 атомов углерода. Циклоалкилокси включает в себя, без ограничений, циклопропилокси, циклобутилокси, циклопентилокси, циклогексилокси и т.д.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
Циклоалкилокси может быть замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
«3-10-членный гетероциклилокси» означает O-(незамещенный 3-10-членный гетероциклил), где 3-10-членный гетероциклил такой, как определено выше, 3-10-членный гетероциклилокси может быть замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, C алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
5-10
5-10
5-10
5-10
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
«С арилокси» означает -O-(незамещенный C арил), где С арил такой, как определено выше, С арилокси может быть замещенным или незамещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
1-8
1-8
2-8
2-8
3-8
5-10
0-8
10
0-8
11
0-8
11
0-8
12
0-8
12
0-8
13
14
0-8
13
14
0-8
13
12
0-8
13
11
«5-10-членный гетероарилокси» означает O-(незамещенный 5-10-членный гетероарил), где 5-10-членный гетероарил такой, как определено выше, 5-10-членный гетероарилокси может быть замещенным или не замещенным, и когда он замещенный, заместитель предпочтительно представляет собой одну или несколько из следующих групп, независимо выбранных из группы, состоящей из дейтерия, галогена, циано, нитро, азидо, C алкила, C галогеналкила, С алкенила, С алкинила, С циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, С арила, 5-10-членного гетероарила, -C-S(O)rR, -C-O-R, -C-C(O)OR, -C-C(O)R, -С-O-C(O)R, -C-NRR, -C-C(O)NRR, -C-N(R)-C(O)R и -C-N(R)-C(O)OR.
1-8
1-8
0-7
1
2
3
«С алканоил» относится к одновалентной группе, получаемой удалением гидроксила из С алкиловой кислоты, также обычно обозначается как «С-С (О)-», например, «C-С(О)-» обозначает ацетил; «C-C(O)-» обозначает пропионил; и «С-С(О)-» обозначает бутирил или изобутирил.
0-8
10
10
0-8
0
1-8
«-C-S(O)rR» означает, что атом серы в -S(O)rR связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
11
11
0-8
0
1-8
«-С-O-R» означает, что атом кислорода в -O-R связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
11
11
0-8
0
1-8
«-C-C(O)OR» означает, что карбонильная группа в -C(O)OR связана с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
12
12
0-8
0
1-8
«-C-C(O)R» означает, что карбонильная группа в -C(O)R связана с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
12
12
0-8
0
1-8
«-C-O-C(O)R» означает, что атом кислорода в -O-C(O)R связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
13
14
13
14
0-8
0
1-8
«-C-NRR» означает, что атом азота в -NRR связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
13
14
13
14
0-8
0
1-8
«-C-C(O)NRR» означает, что карбонил в -C(O)NRR связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
13
12
13
12
0-8
0
1-8
«-C-N(R)-C(O)R» означает, что атом азота в -N(R)-C(O)R связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
0-8
13
11
13
11
0-8
0
1-8
«-C-N(R)-C(O)OR» означает, что атом азота в -N(R)-C(O)OR связан с C алкилом, где С алкил означает связь, a C алкил является таким, как определено выше.
1-8
«С галогеналкил» означает алкильную группу, имеющую от 1 до 8 атомов углерода, в которой любой атом водорода, замещен F, Cl, Br или I, включая, без ограничений, дифторметил, дихлорметил, дибромметил, трифторметил, трихлорметил, трибромметил и т.д.
1-8
«С галогеналкокси» означает алкокси, имеющий от 1 до 8 атомов углерода, в котором любой атом водорода, замещен F, Cl, Br или I, включая, без ограничений дифторметокси, дихлорметокси, дибромметокси, трифторметокси, трихлорметокси, трибромметокси и т.д.
3
2
2
3
4
2
2
3
3
2
4
2
3
3
2
4
2
3
2
2
2
3
3
2
2
2
3
2
3
4
«Галоген» означает F, Cl, Br или I. «ТГФ» означает тетрагидрофуран. «ЭА/ЭтАц» означает этилацетат. «МеОН» означает метанол. «EtOH» означает этанол. «PivOH» означает триметилуксусная кислота. «ДМСО» означает диметил сульфоксид. «ДМФА» означает N, N-диметилформамид. «ДИПЭА» означает диизопропилэтиламин. «CHCN» означает ацетонитрил. «ПЭ» означает петролейный эфир. «ДХМ/CHCl» означает дихлорометан. «ДХЭ» означает дихлорэтан. «ДМА» означает диметилацетамид. «EtN» означает триэтиламин. «NHCl» означает хлорид аммония. «NMP» означает N-метилпирролидон. «НОАс» означает уксусная кислота. «ТФК» означает трифторуксусная кислота. «MeI» означает йодистый метил. «KI» означает калия йодид. «MsCl» означает метилсульфонила хлорид. «SOCl» означает сульфонила хлорид. «POCl» означает фосфора оксихлорид. «MeONa» означает натрия метоксид. «NaHCO» означает натрия бикарбонат.«NaSO» означает натрия сульфат. «KCO» означает калия карбонат. «NaN» означает натрия азид. «NaH» означает натрия гидрид. «CuI» означает йодид меди. «ПФК» означает полифосфорная кислота. «m-ХПБК» означает m-хлорпероксибензойная кислота. «MnO» означает диоксид марганца. «LiAlH» означает алюмогидрид лития. «LiOH» означает гидроксид лития. «NaOAc» означает натрия ацетат. «NaNO» означает натрия нитрит. «AgNO» означает нитрат серебра. «BocO» означает ди-третбутил дикарбонат.«LiCl» означает лития хлорид. «Zn(CN)» означает цианид цинка. «ЙБК» означает 2-йодоксибензойная кислота. «Pd/С» означает палладий на уголе. «Pd(OAc)» означает ацетат палладия. «PPh» означает трифенилфосфин. «Pd(PPh)Cl» означает палладия бис(трифенилфосфин) дихлорид. «Pd(dba)» означает трис(дибензилиденацетон) дипалладий. «Pd(dppf)Cl» означает [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия дихлорид. «Pd(PPh)» означает тетракис(трифенилфосфин) палладий. «Бретт-фос» означает дициклогексил [3,6-диметокси-2',4',6'-триизопропил[1,1'-бифенил]-2-ил]фосфин.
«Необязательно» или «в ряде случаев» означает, что событие или среда, описанные впоследствии, могут происходить, но не обязательно, в том числе там, где имеет место или не имеет место событие или среда. Например, «гетероциклил в ряде случаев замещен алкилом» означает, что алкильная группа может присутствовать, но не обязательно присутствует, и описание включает в себя случай, когда гетероциклил замещается алкилом, и случай, когда гетероциклил не замещается алкилом.
«Замещенный» означает, что один или несколько атомов водорода в группе каждый независимо замещен соответствующим числом заместителей. Разумеется, что заместитель находится только в своем возможном химическом положении, и специалисты в данной области техники смогут без лишних усилий определить (путем эксперимента или теоретически) возможную или невозможную замену. Например, присоединение аминогруппы или гидроксигруппы, имеющей свободный водород, к атому углерода, имеющему ненасыщенную связь (такую как олефин), может быть нестабильно.
«Фармацевтическая композиция» означает смесь, включающую одно или несколько соединений, описанных в настоящем документе, или их физиологически/фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и другие химические компоненты, например, физиологические/фармацевтически приемлемые носители и вспомогательные вещества. Назначение фармацевтической композиции состоит в том, чтобы способствовать введению в организм, что облегчает всасывание активного ингредиента, тем самым вызывая биологическую активность.
Настоящее изобретение будет дополнительно подробно описано ниже в связи с вариантами осуществления, которые не предполагают ограничение настоящего изобретения. Настоящее изобретение также не ограничено содержанием вариантов осуществления.
6
3
3
Структура соединения по настоящему изобретению определяется посредством ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и/или жидкостной хромато-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Химический сдвиг ЯМР (δ) приведен в частях на миллион (ч./млн.). ЯМР измеряется ядерно-магнитным аппаратом Bruker AVANCE-400, а растворитель представляет собой дейтерированный диметил сульфоксид (ДМСО-d), дейтерированный метанол (CDOD) и дейтерированный хлороформ (CDCl), а внутренним стандартом является тетраметилсилан (ТМС).
Измерение ЖХ-МС проводится с помощью масс-спектрометра Agilent 6120. Измерение ВЭЖХ проводится с использованием жидкостного хроматографа высокого давления Agilent 1200 DAD (колонка Sunfire С18 150×4,6 мм) и жидкостного хроматографа высокого давления Waters 2695-2996 (колонка Gimini С18 150×4,6 мм).
Пластина силикагеля для тонкослойной хроматографии представляет собой пластину силикагеля Yantai Yellow Sea HSGF254 или Qingdao GF254. Спецификация ТСХ составляет 0,15 мм - 0,20 мм, а спецификация разделения и очистки тонкослойной хроматографией составляет 0,4 мм - 0,5 мм. В колоночной хроматографии обычно используют силикагель с сеткой на 200-300 (силикагель Yantai Huanghai) в качестве носителя.
Исходные материалы в примерах настоящего изобретения известны и коммерчески доступны или могут быть синтезированы в соответствии со способами, известными в данной области.
Если не указано иное, все реакции по настоящему изобретению проводят при непрерывном магнитном перемешивании в атмосфере сухого азота или аргона, растворитель представляет собой сухой растворитель, и единица измерения температуры составляет градусы Цельсия.
Приготовление промежуточных соединений
Промежуточное соединение 1: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2Н-пирано[3,2-с]пиридин-2-она
Этап 1: Приготовление этил 6-хлор-4-метоксиникотината
2
4
+
Этил 4,6-дихлорникотинат (10,0 г, 45,4 ммоль) добавляли к безводному ТГФ (100 мл) и охлаждали до 0°С ледяной водой, затем добавляли MeONa (2,8 г, 51,8 ммоль). После завершения добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления ТГФ. Неочищенный продукт растворяли в этил ацетате  дважды промывали водой и сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали с получением этил 6-хлор-4-метоксиникотината (8,2 г, выход: 84%). Масс-спектрометрия (ионизация электрораспылением, ИЭР): масса/заряд 216,,3 [М+1].
Этап 2: Приготовление (6-хлор-4-метоксипиридин-3-ил)метанола
4
+
Этил 6-хлор-4-метоксиникотинат (8,2 г, 38,1 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (200 мл), затем добавляли LiAH (3,0 г, 81,1 ммоль) на ледяной бане. После завершения добавления смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции для экстракции добавляли 2N водного NaOH (25 мл). Сухой остаток удаляли фильтрацией и фильтрат концентрировали с получением соединения (6-хлор-4-метоксипиридин-3-ил)метанола (6,0 г, выход: 91%). МС (ИЭР): м/з 174.2 [М+1].
Этап 3: Приготовление 6-хлор-4-метоксиникотинальдегида
+
(6-хлор-4-метоксипиридин-3-ил)метанол (6,0 г, 34,6 ммоль) растворяли в ацетоне (100 мл), затем добавляли ЙБК (12,0 г, 42,9 ммоль). Смесь нагревали до появления конденсата в течение 18 часов. После завершения реакции смесь фильтровали и концентрировали с получением соединения 6-хлор-4-метоксиникотинальдегид (4,2 г, выход: 71%). МС (ИЭР): м/з 172,2 [М+1].
Этап 4: Приготовление 6-хлор-4-гидроксилникотинальдегида
6-хлор-4-метоксиникотинальдегид (4,2 г, 24,5 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (30 мл), затем добавляли концентрированную соляную кислоту (10 мл). Смесь нагревали до 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции смесь концентрировали. Неочищенный продукт разделяли колоночной хроматографией на силикагеле для получения соединения 6-хлор-4-гидроксилникотинальдегида (1,5 г, выход: 39%).
1
3
Н ЯМР (400 МГц, CDCl): δ ч./млн. 11,37 (s, 1H), 9,99 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 6,99 (s, 1H).
Этап 5: Приготовление 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2Н-пирано[3,2-с]пиридин-2-она
+
6-хлор-4-гидроксилникотинальдегид (0,60 г, 3,82 ммоль) добавляли к уксусному ангидриду (10 мл), затем добавляли 2-(3,5-диметоксифенил) уксусную кислоту (0,80 г, 4,08 ммоль) и триэтиламин (1,5 г, 10,7 ммоль), смесь нагревали до 110°С в течение 40 мин. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Полученные твердые вещества промывали петролейным эфиром/этилацетатом (3:1) с получением соединения 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2Н-пирано[3,2-]спиридин-2-она (0,35 г, выход: 29%). МС (ИЭР): м/з 318,3 [М+1].
Этап 6: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2Н-пирано[3,2-с]пиридин-2-она
2
2
3
+
7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2Н-пирано[3,2-с]пиридин-2-он (0,35 г, 1,1 ммоль) растворяли в безводном ацетонитриле (10 мл), смесь охлаждали до -30°С, затем по каплям добавляли SOCl (1,0 г, 7,4 ммоль), смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 часа. Для остановки реакции добавляли насыщенный водный раствор NaHCO, и затем ацетонитрил удаляли путем концентрирования. После фильтрации твердые вещества промывали водой и затем петролейным эфиром/этилацетатом (3:1) с получением 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2Н-пирано[3,2-с]пиридин-2-она (0,21 г, выход: 49%). МС (ИЭР): м/з 386,3 [М+1].
Промежуточное соединение 2: Приготовление 2-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина
Этап 1: приготовление 2-хлор-5-нитроизоникотиновой кислоты
-
Триоксид хрома (40,0 г, 40 ммоль) добавляли к раствору 2-хлор-4-метил-5-нитропиридина (20,0 г, 11,6 ммоль) в серной кислоте (200 мл) при 0°С. После завершения добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа, затем медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи, а затем выливали в ледяную воду (1 л) и фильтровали с получением 2-хлор-5-нитроизоникотиновой кислоты (18 г, выход: 77%). МС (ИЭР): м/з 201,1 [М-1].
Этап 2: Приготовление метил 2-хлор-5-нитроизоникотината
Оксалил хлорид (12,7 г, 100 ммоль) добавляли к суспензии 2-хлор-5-нитроизоникотиновой кислоты (16 г, 80 ммоль) в дихлорометане (150 мл) при 0°С. После завершения добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Добавляли метанол (100 мл), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 4 ч и затем концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в дихлорометане (200 мл), смесь промывали раствором бикарбоната натрия (100 мл*2), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением метил 2-хлор-5-нитроизоникотината (17,2 г, выход: 98%).
Этап 3: Приготовление метил 2-(3,5-диметоксифенил)-5-нитроизоникотината
2
2
2
+
3,5-диметоксифенилбороновую кислоту (8,47 г, 46 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (5 г, 4,6 ммоль) и карбонат натрия (5 г, 16 ммоль) добавляли к раствору метил 2-хлор-5-нитроизоникотината (10,0 г, 46,0 ммоль) в смеси диоксана (200 мл) и воды (50 мл). После завершения добавления смесь перемешивали в атмосфере N при 110°С до завершения реакции исходных материалов. Реакционный раствор концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: CHCl/ПЭ 20:1) с получением соединения метил 2-(3,5-диметоксифенил)-5-нитроизоникотинат (6 г, выход: 41%). МС (ИЭР): м/з 318,9 [М+1].
Этап 4: Приготовление метил 5-амино-2-(3,5-диметоксифенил)изоникотината
+
Палладий на угле (10%, 500 мг) добавляли к раствору метил 2-(3,5-диметоксифенил)-5-нитроизоникотината (6 г, 18,8 ммоль) в метаноле (100 мл). Затем смесь перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 4 ч, фильтровали и концентрировали с получением метил 5-амино-2-(3,5-диметоксифенил)нитроизоникотината (5 г, выход: 92,3%). МС (ИЭР): м/з 289,3 [М+1].
Этап 5: Приготовление 6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,4(1Н, 3Н)-диона
+
Смесь метил 5-амино-2-(3,5-диметоксифенил)изоникотината (5 г, 17,4 ммоль) и мочевины (12 г, 200 ммоль) нагревали до 160°С и перемешивали в течение 4 ч. Затем смесь выливали в ледяную воду (100 мл) и фильтровали с получением 6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,4(1Н, 3Н)-диона (6 г, выход: 99%). МС (ИЭР): м/з 300,3 [М+1].
Этап 6: Приготовление 2,4-дихлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина
+
N,N-диэтиланилин (3 мл) добавляли к суспензии 6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона (5,0 г, 16,7 ммоль) в оксихлориде фосфора (50 мл). Затем смесь перемешивали при 110°С в течение ночи. Растворитель выпаривали, добавляли ледяную воду (200 мл), и рН доводили до 7 водным раствором бикарбоната натрия. Водный раствор трижды экстрагировали ЭтАц (50 мл). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией [элюент: (ЭА: ПЭ=1:5)] для получения соединения 2,4-дихлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина (2,5 г, выход: 44,5%). МС (ИЭР): м/з 336,2 [М+1].
Этап 7: Приготовление 2-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4-амина
+
Концентрированный водный раствор аммиака (2 г) добавляли к раствору 2,4-дихлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина (2,5 г, 7,5 ммоль) в метаноле (100 мл). Затем смесь перемешивали при 25°С в течение 4 часов. рН доводили до 7 соляной кислотой (1N), затем метанол удаляли в вакууме, после фильтрации был получен 2-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4-амин (2 г, выход: 84%). МС (ИЭР): м/з 317. 1 [М+1].
Этап 8: Приготовление 2-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина
Третбутил нитрита (720 мг, 6,2 ммоль) добавляли к раствору 2-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4-амина (1 г, 3,1 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл). Затем смесь нагревали до появления конденсата и перемешивали в течение 48 часов. Реакционную смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией [элюент: (ЭА: ПЭ=1:5-1:2)] с получением соединения 2-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина (400 мг, выход: 41%).
6
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ 9,7 (s, 1H), 9,53 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 7,4 (s, 2Н), 6,64 (s, 1H), 3,88 (s, 6Н);
+
МС (ИЭР): м/з 302,0 [М+1].
Этап 9: Приготовление 2-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина
Соединение было получено с использованием метода синтеза этапа 6 промежуточного соединения 1.
Промежуточное соединение 3 и Промежуточное соединение 4: Приготовление 2-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина и 2-хлор-6-(2-фтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина
3
+
+
2-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин (120 мг, 0,4 ммоль) растворяли в безводном ацетонитриле (20 мл), затем смесь охлаждали до 0°С на ледяной бане. По каплям добавляли 1-хлорметил-4-фтор-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-бис(тетрафторборат)(селект-фтор, 283 мг, 0,8 ммоль). После завершения добавления реакционный раствор нагревали до комнатной температуры в течение 6 часов. Реакция была завершена под контролем ТСХ. Для остановки реакции добавляли насыщенный водный раствор NaHCO и затем большую часть ацетонитрила удаляли. Смесь экстрагировали этилацетатом, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ/ЭА=10/11, корректировали добавлением 10% ДХМ) с получением 2-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидина (20 мг, выход: 15%), МС м/з (ИЭР): 338 [М+Н]. В это же время также был получен 2-хлор-6-(2-фтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин (70 мг, выход: 55%), МС м/з (ИЭР): 320 [М+Н].
Промежуточные соединения 5-10 были получены с использованием метода синтеза промежуточного соединения 2.
Промежуточное соединение 11: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1Н-пирано[4,3-с]пиридин-1-она
Этап 1: Приготовление метил 5-бром-2-хлоризоникотината
2
3
2
4
+
5-бром-2-хлоризоникотиновую кислоту (30,0 г, 12,6 ммоль) растворяли в метаноле (300 мл), затем добавляли SOCl (18,0 г, 15 ммоль), смесь нагревали до 75°С в течение 8 часов. Завершение реакции контролировали с помощью ЖХМС (жидкостная хроматомасс-спектрометрия). Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении, а затем к остатку добавляли ЭтАц (300 мл). Смесь промывали насыщенным водным раствором NaHCO, сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали с получением метил 5-бром-2-хлоризоникотината (32,0 г, выход: 99%). МС (ИЭР): м/з 251,9 [М+1].
Этап 2: Приготовление метил 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотината
2
3
2
+
Метил 5-бром-2-хлоризоникотинат (30 г, 120 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (300 мл) и 3,5-диметоксифенилацетилене (20,4 г, 120 ммоль), добавляли CuI (2,28 г, 12 ммоль), Pd(1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)Cl (4,2 г, 6 ммоль) и EtN (12,0 г, 120 ммоль) и смесь нагревали до 60°С в атмосфере N в течение 6 ч. После завершения реакции смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт отделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ДХМ:ПЭ=20:1) для получения соединения метил 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотинат (22 г, выход: 55%). МС (ИЭР): м/з 332,1 [М+1].
Этап 3: Приготовление 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-1Н-пирано[4,3-с]пиридин-1-она
+
Метил 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотинат (21,0 г, 63 ммоль) добавляли к ПФК (200 мл), и смесь нагревали до 80°С в течение 8 часов. Завершение реакции контролировали с помощью ЖХМС (жидкостная хроматомасс-спектрометрия). Реакционную смесь выливали в ледяную воду (1000 мл) и затем фильтровали с получением твердого соединения 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-1Н-пирано[4,3-с]пиридин-1-он (15,0 г, выход: 75%). МС (ИЭР): м/з 318,2 [М+1].
Этап 4: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1Н-пирано[4,3-с]пиридин-1-она
Соединение было получено в соответствии с методом синтеза этапа 6 промежуточного соединения 1.
Промежуточное соединение 12: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она
Этап 1: Приготовление 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она
7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-1Н-пирано[4,3-с]пиридин-1-он (15 г, 47,3 ммоль) растворяли в ДМФА (200 мл), затем добавляли концентрированный водный аммиак (150 мл). Реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 48 часов. Реакцию завершали с помощью ЖХМС, затем фильтровали с получением твердого соединения 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она (7,5 г, выход: 50,5%).
1
6
Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ ч./млн. 11,7 (m, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,97 (s, 2Н), 6,61 (s, 1H), 3,86 (s, 6Н).
+
МС (ИЭР): м/з 317,2 [М+1].
Этап 2: Приготовление 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она
7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (2 г, 6,32 ммоль) растворяли в ДМФА (30 мл) и добавляли NaH (758 мг, 18,95 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 минут, затем по каплям добавляли MeI (8,967 г, 63,151 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После того, как реакция была завершена, ее останавливали водой. Смесь трижды экстрагировали этилацетатом и органические фазы объединяли и промывали водой, насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли посредством колоночной хроматографии (элюент: ПЭ/ЭтАц=2:1) для получения соединения 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (1,35 г, выход: 65%).
+
МС м/з (ИЭР): 331,0 [М+Н].
Этап 3: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она
+
Соединение было получено в соответствии с методом синтеза этапа 6 промежуточного соединения 1. МС м/з (ИЭР): 399,2 [М+Н].
Промежуточные соединения 13-19 были получены с использованием метода синтеза промежуточного соединения 12.
Промежуточное соединение 20: Приготовление 6-хлор-2-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-она
Этап 1: Приготовление 5-амино-2-хлоризоникотинамида
2
2
2
К SOCl (50 мл) добавляли 5-амино-2-хлоризоникотиновую кислоту (4,0 г, 23 ммоль), смесь нагревали до 80°С в течение 4 часов. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в безводном ТГФ (20 мл) и затем смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли концентрированный водный аммиак (100 мл). После завершения реакции смесь экстрагировали пять раз с использованием СНCl (100 мл). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения 5-амино-2-хлоризоникотинамида (3,5 г, выход: 88%).
Этап 2: Приготовление 6-хлор-2-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-она
2
2
2
5-амино-2-хлоризоникотинамид (3,5 г, 20,4 ммоль) и 3,5-диметоксибензальдегид (3,7 г, 22,3 ммоль) растворяли в EtOH (50 мл), затем добавляли НОАс (10 мл), смесь нагревали в течение 2-х дней до 80°С. Реакционную жидкость концентрировали, остаток растворяли в смеси СНCl (100 мл) и ТГФ (100 мл). Затем добавляли MnО (17,0 г, 87,0 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4-х дней. После завершения реакции смесь фильтровали и концентрировали. Остаток добавляли к ЭтАц (100 мл), перемешивали и фильтровали с получением соединения 6-хлор-2-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он (4,0 г, выход: 63%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ ч./млн. 12,78 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 3,84 (s, 6H).
Этап 3: Приготовление 6-хлор-2-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-она
3
2
2
3
+
6-хлор-2-(3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он (1,0 г, 3,2 ммоль) растворяли в CHCN (50 мл), затем смесь охлаждали до -20°С, добавляли SOCl (0,85 г, 6,3 ммоль), смесь подвергалась реакции при этой температуре в течение 3 часов. После завершения реакции добавляли насыщенный водный раствор NaHCO для остановки реакции, и смесь фильтровали с получением соединения 6-хлор-2-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он (1,1 г, 92%). МС (ИЭР): м/з 386 [М+Н].
Промежуточное соединение 21: Приготовление 6-хлор-2-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-3-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-она
+
6-хлор-2-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он (0,65 г, 1,68 ммоль) растворяли в ДМФА (20 мл), затем смесь охлаждали до 0°С на ледяной бане, добавляли NaH (134 мг, 3,36 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции для остановки реакции добавляли воду (50 мл). Смесь фильтровали, промывали водой и сушили с получением соединения 6-хлор-2-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-3-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он (0,65 г, выход: 96%). МС м/з (ИЭР): 400 [М+Н].
Промежуточное соединение 22: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-1,6-нафтиридин-2(1Н)-она
Этап 1: Приготовление этил 6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)никотината
3
+
Этил 4,6-дихлороникотинат (4,0 г, 18,18 ммоль) и трифторэтиламин (2,7 г, 27,27 ммоль) растворяли в ДМСО (50 мл), затем добавляли EtN (5,5 г, 54,55 ммоль), смесь нагревали до 120°С в течение 12 часов. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (200 мл) и затем смесь трижды экстрагировали с использованием ЭтАц (50 мл). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт отделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ : ЭА = 3:1) с получением соединения этил 6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)никотината (1,5 г, выход: 29,1%). МС (ИЭР): м/з 283,0 [М+1].
Этап 2: Приготовление (6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)пиридин-3-ил)метанола
4
2
4
2
Этил 6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)никотинат (1,5 г, 5,32 ммоль) растворяли в высушенном ТГФ (30 мл), затем смесь охлаждали на ледяной бане. Медленно добавляли LiAlH (0,39 г, 10,64 ммоль) и смесь перемешивали при 0°С в течение 2 часов. После завершения реакции был добавлен NaSO⋅10НО для остановки реакции. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали с получением соединения (6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)пиридин-3-ил)метанола (1,1 г, выход: 86%).
Этап 3: Приготовление 6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)никотинальдегида
2
2
2
(6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)пиридин-3-ил)метанол (1,1 г, 4,58 ммоль) растворяли в смеси СНCl и ТГФ (30 мл/10 мл), затем добавляли MnО (4,78 г, 54,9 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта 6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)никотинальдегида (0,86 г, выход: 79%).
Этап 4: Приготовление 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-1,6-нафтиридин-2(1Н)-она
2
3
+
6-хлор-4-((2,2,2-трифторэтил)амино)никотинальдегид (0,86 г, 3,61 ммоль) растворяли в ДМФА (20 мл), затем добавляли метил 3,5-диметоксифенилацетат (760 мг, 3,61 ммоль) и KСО (1,5 г, 10,84 ммоль), смесь нагревали до 110°С в течение 3-х часов. После завершения реакции смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ : ЭА = 10:1) для получения 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-1,6-нафтиридин-2(1Н)-он (960 мг, выход: 67%). МС (ИЭР): м/з 399,0 [М+1].
Этап 5: Приготовление 7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-1,6-нафтиридин-2(1Н)-она
Соединение было получено в соответствии с методом синтеза этапа 6 промежуточного соединения 1. Промежуточные соединения 23-25 были получены в соответствии с методом синтеза промежуточного соединения 22.
Промежуточное соединение 26: Приготовление 3-хлор-7-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридина
Этап 1: Приготовление 5-бром-2-хлоризоникотинальдегида
2
Диизопропиламин (8,95 г, 88 ммоль) растворяли в высушенном ТГФ (100 мл) в атмосфере N, затем смесь охлаждали до -78°С. По каплям добавляли N-бутиллитий (50 мл, 78 ммоль) и затем смесь перемешивали при 0°С в течение 10 минут. Смесь охлаждали до -78°С, затем добавляли 2-хлор-5-бромопиридин (10,0 г, 52 ммоль), смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч, затем сушили ДМФА (11,4 г, 0,16 моль), смесь перемешивали при той же температуре еще 1 час. Для остановки реакции добавляли раствор хлорида аммония, и смесь разбавляли ЭтАц (300 мл), трижды промывали водой (50 мл), промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭтАц 9:1) для получения соединения 5-бром-2-хлоризоникотинальдегид (7,0 г, выход: 61%).
1
Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,3 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 7,73 (s, 1H).
+
МС м/з (ИЭР): 252,0, 254,0, 256,0 [М+МеОН+Н].
Этап 2: Приготовление 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотинальдегида
3
2
2
+
5-бром-2-хлоризоникотинальдегид (2,5 г, 11,3 ммоль), 1-этинил-3,5-диметоксибензол (1,93 г, 11,9 ммоль), ДИПЭА (3,66 г, 28,4 ммоль), CuI (108 мг, 0,6 ммоль), и Pd(PPh)2Cl (398 мг, 0,6 ммоль) добавляли к 1,4-диоксану (50 мл) в атмосфере N, смесь нагревали до 50°С в течение 1 часа. После завершения реакции смесь разбавляли ЭтАц (300 мл), последовательно промывали водой (по 50 мл 3 раза) и насыщенным солевым раствором (100 мл), концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭтАц 9:1) для получения соединения 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотинальдегида (3,0 г, выход: 75%). МС м/з (ИЭР): 302,2, 304,2 [М+Н].
Этап 3: Приготовление 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотин альдегид оксима
2
2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотинальдегид (0,6 г, 2 ммоль), NaOAc (245 мг, 3,0 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (207 мг, 3,0 ммоль) растворяли в смеси этанола и 1,2-дихлорэтана (20 мл/11,2 мл) в атмосфере N, смесь нагревали до 50°С в течение 50 мин. После завершения реакции смесь разбавляли ЭтАц (200 мл), последовательно промывали водой (по 50 мл 2 раза) и насыщенным солевым раствором (80 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения 2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотин альдегид оксим (612 мг, выход: 100%).
Этап 4: Приготовление 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-2-оксида
3
2
2
2-хлор-5-((3,5-диметоксифенил)этинил)изоникотин альдегидоксим (612 мг, 1,9 ммоль) и AgNO (66 мг, 0,38 ммоль) добавляли к хлороформу (20 мл), смесь нагревали до 60°С в течение 1 часа. После завершения реакции смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: CHCl/МеОН 35:1) с получением соединения 7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-2-оксида (580 мг, выход: 95%).
+
МС м/з (ИЭР): 317,2, 319,2 [М+Н].
Этап 5: приготовление 3-хлор-7-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридина
3
2
2
+
7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-2-оксид (200 мг, 0,63 ммоль) растворяли в дихлорометане (10 мл) на ледяной бане, затем добавляли трихлорид фосфора (0,7 мл, 1,4 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором NaHCO (20 мл), ДХМ (80 мл), насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: CHCl/МеОН 50:1) с получением соединения 3-хлор-7-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин (60 мг, выход: 32%). МС м/з (ИЭР): 301,2, 303,2 [М+Н].
Этап 6: Приготовление 3-хлор-7-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридина
Соединение получали в соответствии с методом синтеза промежуточного соединения 1. Промежуточные соединения 27-32 были получены с использованием метода синтеза промежуточного соединения 26.
Промежуточное соединение 33: Приготовление 7-хлор-N-(циклопропилметил)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1-амина
Этап 1: Приготовление 7-хлор-1-((циклопропилметил)амино)-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин 2-оксида
7-хлор-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин 2-оксид (4,0 г, 12,6 ммоль) растворяли в толуоле (80 мл), последовательно добавляли циклопропилметиламин (7,19 г, 0,1 моль) и CuI (241 мг, 1,26 ммоль), смесь нагревали до 50°С в течение ночи в атмосфере кислорода. После завершения реакции реакционную жидкость фильтровали и концентрировали. Остаток разделяли колоночной хроматографией (элюент: дихлороэтан/метанол 25:1) с получением соединения 7-хлор-1-((циклопропилметил амино)-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин 2-оксида (2,8 г, 57%).
+
МС м/з (ИЭР): 386,4 [М+Н].
Этап 2: Приготовление 7-хлор-N-(циклопропилметил)-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1-амина
3
7-хлор-1-((циклопропилметил)амино)-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин 2-оксид (2,8 г, 5,1 ммоль) растворяли в дихлорметане (40 мл), РCl (3 мл, 6,1 ммоль) добавляли по каплям на ледяной бане, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли насыщенный раствор гидрокарбоната натрия (50 мл), затем смесь экстрагировали дихлорметаном (по 100 мл 3 раза), органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: дихлорметан/метанол 50:1) для получения соединения 7-хлор-N-(циклопропилметил)-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1-амин (570 мг, 21%).
+
МС м/з (ИЭР): 370,4 [М+Н].
Этап 3: Приготовление 7-хлор-N-(циклопропилметил)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1-амина
7-хлор-N-(циклопропилметил)-3-(3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1-амин (550 мг, 0,27 ммоль) добавляли к ацетонитрилу (20 мл), затем добавляли по каплям сульфонил хлорид (73 мг, 0,54 ммоль) при -30°С, смесь перемешивали при той же температуре в течение 1 часа.
Добавляли насыщенный раствор гидрокарбоната натрия (30 мл), затем смесь экстрагировали этилацетатом (по 50 мл 3 раза), органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: петролейный эфир/этилацетат 10:1) для получения соединения 7-хлор-N-(циклопропилметил)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2,6-нафтиридин-1-амин (337 мг, 52%).
+
МС: м/з (ИЭР + химическая ионизация при атмосферном давлении): 438,2/440,2 [М+Н].
Промежуточные соединения 34-131 были получены в соответствии со способом синтеза промежуточного соединения 33.
Промежуточное соединение 132: Приготовление 6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-метокси-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
Этап 1: Приготовление метил 5-((3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоксилата
Метил 5-бром-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоксилат (2631 мг, 10,0 ммоль) и 1-этинил-3,5-диметоксибензол (1622 мг, 10,0 ммоль) растворяли в высушенном ТГФ (50 мл).
2
3
3
2
2
3
2
3
+
Газ заменяли на N, последовательно добавляли EtN (2,8 мл, 20,0 ммоль), Pd(PPh)Cl (702 мг, 1,0 ммоль), PPh (525 мг, 2,0 ммоль) и CuI (190 мг, 1,0 ммоль) при N, смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли насыщенный водный раствор NaHCO (100 мл), дважды экстрагировали с использованием ЭтАц (100 мл), органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ : ЭА 4:1) с получением соединения метил 5-((3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоксилата (2,5 г, выход: 73%). МС м/з (ИЭР): 345,2 [М+Н].
Этап 2: Приготовление 5-((3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоновой кислоты
+
Метил 5-((3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоксилат (600 мг, 1,742 ммоль) растворяли в метаноле (15 мл), затем добавляли водный моногидрат гидроокиси лития (366 мг, 8,711 ммоль) в воде (5 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакция была завершена. Органический растворитель выпаривали при пониженном давлении, к остатку добавляли ЭтАц (30 мл), и рН доводили с помощью 1N раствора соляной кислоты до 3~4. Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения 5-((3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоновой кислоты (584 мг, количественный выход). МС м/з (ИЭР): 331.2 [М+Н].
Этап 3: приготовление 6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)-8Н-пирано[3,4-d]пиримидин-8-она
3
+
5-((3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоновая кислота (584 мг, 1,768 ммоль) была суспендирована в ацетоне (25 мл), и к суспензии добавляли AgNO (180 мг, 1,059 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4-х часов, и зеленое твердое вещество осаждали, фильтровали с получением 6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)-8Н-пирано[3,4-d]пиримидин-8-он (600 мг, сырой продукт) МС м/з (ИЭР): 331.2 [М+Н].
Этап 4: приготовление 6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8(7Н)-она
2
2
+
6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)-8Н-пирано[3,4-d]пиримидин-8-он (600 мг, неочищенный продукт) добавляли к ледяной уксусной кислоте (50 мл), затем добавляли ацетат аммония (2,1 г, 27,243 ммоль), смесь нагревали до 115°С в течение 16 часов. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, медленно выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и экстрагировали с использованием ЭтАц (100 мл). Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: СНCl/МеОН 0~6%) с получением соединения 6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8(7Н)-он (298 мг, двухэтапный выход: 50%). МС м/з (ИЭР): 330,2 [М+Н].
Этап 5: приготовление 6-(3,5-диметоксифенил)-8-метокси-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
+
6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8(7Н)-он (100 мг, 0,30 4 ммоль) и карбонат серебра (109 мг, 0,395 ммоль) суспендировали в толуоле (3 мл), затем добавляли метил йодид (431 мг, 3,036 ммоль). Смесь нагревали до 100°С в закрытой пробирке в течение 3 часов. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с использованием ЭтАц и фильтровали для удаления соли. Фильтрат концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭтАц 10-80%) для получения соединения 6-(3,5-диметоксифенил)-8-метокси-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин (47 мг, выход: 45%). МС м/з (ИЭР): 344,3 [М+Н].
Этап 6: приготовление 6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-метокси-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
Соединение получали в соответствии с методом синтеза промежуточного соединения 1. Промежуточные соединения 133-134 были получены в соответствии с методом синтеза примера 132.
Промежуточное соединение 135: Приготовление 6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-(2-метоксиэтил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина
Этап 1: приготовление 8-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
3
6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8(7Н)-он (20,0 мг, 0,061 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (78 мг, 0,610 ммоль) добавляли к ацетонитрилу (2 мл), затем добавляли РОCl (0,8 мл), смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток разбавляли с использованием ЭтАц (10 мл) и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭтАц 0-40%) для получения соединения 8-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина (6 мг, выход: 28%).
+
МС м/з (ИЭР): 348,2 [М+Н].
Этап 2: приготовление 6-(3,5-диметоксифенил)-N-(2-метоксиэтил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина
8-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин (6 мг, 0,017 моль) и N,N-диизопропилэтиламин (6,5 мг, 0,052 ммоль) растворяли в ацетонитриле (1,5 мл), затем добавляли 2-метоксиэтил-1-амин (4 мг, 0,052 ммоль), смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЭтАц (5 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: ПЭ/ЭтАц 0-50%) для получения соединения 6-(3,5-диметоксифенил)-N-(2-метоксиэтил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина (4 мг, выход: 61%).
+
МС м/з (ИЭР): 387,4 [М+Н].
Этап 3: приготовление 6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-(2-метоксиэтил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина
Соединение получали в соответствии с методом синтеза промежуточного соединения 1.
Промежуточное соединение 139: Приготовление 4-(6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)морфолина
Этап 1: приготовление 2,4-дифтор-3-йод-1,5-диметоксибензола
2
2,6-дифтор-3,5-диметоксианилин (27,0 г, 143 ммоль) добавляли к 6,0 М раствору соляной кислоты (240 мл) и медленно по каплям добавляли водный раствор NaNO (10,35 г, 150 ммоль, 30 мл воды) с ледяной водой для охлаждения в течение 25 мин. После завершения добавления смесь реагировала в течение еще 15 мин. с получением оранжево-красной суспензии, и затем ее добавляли к водному раствору KI (94,9 г, 570 ммоль, 150 мл воды), смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. для осаждения твердого вещества. Смесь фильтровали и промывали водой для получения неочищенного продукта. К неочищенному продукту добавляли МеОН (60 мл), затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, фильтровали и сушили с получением 2,4-дифтор-3-йод-1,5-диметоксибензола (29,3 г, выход: 68%).
Этап 2: приготовление (2,6-дифтор-3,5-диметоксифенилацетилен)триметилсилана
2
4
2
4
2,4-дифтор-3-йод-1,5-диметоксибензол (25,8 г, 86,0 ммоль), триметилсилилацетилен (36,5 мл, 258 ммоль), CuI (817 мг, 4,3 ммоль) и триэтиламин (35,8 мл, 258 ммоль) добавляли к ДМФА (250 мл) в атмосфере N, затем добавляли Pd(PPh3)2Cl2 (3,15 г, 4,3 ммоль), и смесь нагревали до 50°С в течение 2-х часов. После завершения реакции для остановки реакции был добавлен насыщенный водный раствор NHCl, смесь трижды экстрагировалась дихлорметаном, и органические фазы объединялись, их сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта (27,0 г), который был использован непосредственно на следующем этапе.
Этап 3: приготовление 3-этинил-2,4-дифтор-1,5-диметоксибензола
4
(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенилацетилен)триметилсилан (27,0 г, неочищенный продукт) добавляли к смеси ТГФ и МеОН (200/200 мл), затем добавляли водный раствор NaOH (8,6 мл, 8,6 ммоль, 1,0 N) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. После завершения реакции для остановки реакции был добавлен насыщенный водный раствор NHCl, и смесь трижды экстрагировалась дихлорметаном, органические фазы объединялись, их сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. МеОН (50 мл) добавляли к неочищенному продукту, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, фильтровали с получением целевого продукта (15,0 г, двухэтапный выход: 88%).
Этап 4: приготовление метил 5-((2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоксилата
3
4
3
2
4
3
1
3-этинил-2,4-дифтор-1,5-диметоксибензол (10,0 г, 50,5 ммоль) и метил 5-бром-2-метилтио-пиримидин-4-карбоксилат (13,0 г, 49,5 ммоль) растворяли в ДМФА (100 мл), затем добавляли CuI (479 мг, 2,52 ммоль), Pd(PPh) (2,91 г, 2,52 ммоль) и EtN (35,0 мл, 252,5 ммоль), смесь нагревали до 100°С в течение 1,5 ч при N. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли насыщенный водный раствор NHCl для остановки реакции, затем смесь трижды экстрагировали дихлорметаном, органические фазы объединяли, их сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали для получения неочищенного продукта, затем неочищенный продукт отделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ : ЭА : ДХМ = 10:2:1) для получения целевого продукта (15,4 г, выход: 82%). Н ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8.82 (s, 1H), 6.69 (t, J=8.0 Гц, 1H), 4.03 (s, 3Н), 3.90 (s, 6Н), 2.63 (s, 3Н).
Этап 5: приготовление 5-((2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоновой кислоты
2
Метил 5-((2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоксилат (30,0 г, 78,9 ммоль) растворяли в ТГФ (300 мл), затем добавляли LiOH/НО (236,8 мл, 236,8 ммоль, 1 М) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2-х часов. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления ТГФ, затем подкисляли разбавленной соляной кислотой до рН 3 для осаждения твердого вещества. Смесь фильтровали, промывали водой и сушили с получением целевого продукта (28,5 г, выход: 99%).
Этап 6: приготовление 6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)-8Н-пирано[3,4-d]пиримидин-8-она
1
6
5-((2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)этинил)-2-(метилтио)пиримидин-4-карбоновую кислоту (2,5 г, 6,83 ммоль) растворяли в ДХЭ (50 мл), затем добавляли ТФК (0,5 мл), смесь нагревали до появления конденсата в течение ночи. После завершения реакции смесь концентрировали, добавляли МеОН (50 мл), затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Смесь фильтровали, и твердое вещество промывали с использованием МеОН (10 мл) с получением целевого продукта (2,0 г, выход: 80%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.23 (s, 1H), 7.22 (t, J=8.4 Гц, 1H), 7.17 (s, 1H), 3.93 (s, 6Н), 2.63 (s, 3Н).
Этап 7: приготовление 6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8(7Н)-она
Соединение было получено в соответствии с методом синтеза этапа 4 промежуточного соединения 132.
Этап 8: приготовление 8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
+
6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8(7Н)-он (1 г, 2,74 ммоль) растворяли в ДХЭ (80 мл), смесь нагревали до 90°С, затем добавляли фенилфосфоновый дихлорид (3,0 мл, 21,92 ммоль), смесь нагревали и перемешивали в течение 16 ч, а затем охлаждали. рН доводили до нейтрального на ледяной бане. Смесь экстрагировали с использованием ДХМ и затем разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (МеОН/ДХМ 1/20) с получением соединения 8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин (930 мг, выход: 88%). МС м/з (ИЭР): 384 [М+Н].
Этап 9: приготовление N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина
Соединение было получено в соответствии с методом синтеза этапа 2 промежуточного соединения 135. Промежуточные соединения 136-330 были получены в соответствии со способом синтеза промежуточного соединения 135 или 139.
Промежуточное соединение 331: Приготовление 8-циклопропил-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
Этап 1: приготовление 8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
2
2
+
8-хлор-6-(3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин (500 мг, 1,43 ммоль) добавляли к дихлорметану (30 мл), затем смесь охлаждали до -30°С. SOCl (0,35 мл, 4,31 ммоль) растворяли в дихлорметане (30 мл) и медленно по каплям при перемешивании добавляли к вышеуказанной реакционной жидкости. После добавления смесь перемешивали в течение еще 0,5 ч. Реакцию завершали, затем останавливали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Смесь экстрагировали, промывали водой и затем насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением 8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина (620 мг, 88%). МС м/з (ИЭР): 416,2 [М+Н].
Этап 2: приготовление 8-циклопропил-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина
2
3
3
4
+
8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин (83 мг, 0,20 ммоль), циклопропилбороновая кислота (26 мг, 0,30 ммоль), Pd(OAc) (5 мг, 0,02 моль), РСу (11 мг, 0,04 ммоль) и KPO (127 мг, 0,60 ммоль) были добавлены в смесь толуола и воды (6:1, 5 мл), смесь нагревали до 100°С и перемешивали в течение ночи. Реакцию завершали, затем смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с использованием ЭтАц, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением 8-циклопропил-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидина (60 мг, 71%). МС м/з (ИЭР): 422,2 [М+Н].
Промежуточные соединения 332-364 были получены в соответствии со способом синтеза 331.
Промежуточное соединение 365: Приготовление (3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-амин гидрохлорида
Этап 1: приготовление третбутил ((3S,4S)-4-гидроксилтетрагидро-2Н-пиран-3-ил)карбамата
3
2
(3R,4R)-3-аминотетрагидро-2Н-пиран-4-ол (5,00 г, 42,7 ммоль) растворяли в МеОН (100 мл), затем последовательно добавляли EtN (4,75 г, 47,0 ммоль) и ВосО (10,25 г, 47,0 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Завершение реакции контролировали с помощью ЖХМС. Смесь концентрировали для удаления метанола, и неочищенный продукт промывали петролейным эфиром (100 мл) и затем фильтровали с получением трет-бутил((3S,4S)-4-гидроксилтетрагидро-2Н-пиран-3-ил)карбамата (8,50 г, выход: 92%).
1
3
Н ЯМР (400 МГц, CDCl): δ ч./млн. 4.68 (m, 1H), 4.03 (m, 1H). 3.93 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.45 (m, 2Н), 3.19 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 2.04 (m, 1H), 1.68 (m,1Н), 1.61 (s, 9Н).
Этап 2: приготовление (3R,4R)-3-((трет-бутоксикарбонил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил метансульфоната
2
2
3
Третбутил ((3S,4S)-4-гидроксилтетрагидро-2Н-пиран-3-ил)карбамат (8,5 г, 39,2 ммоль) растворяли в CHCl (100 мл), смесь охлаждали на ледяной бане и затем последовательно добавляли EtN (4,30 г, 43,0 ммоль) и MsCl (4,98 г, 43,0 ммоль), смесь перемешивали при 0°С в течение 6 часов. После завершения реакции смесь промывали водой (20 мл), затем органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением (3R,4R)-3-((трет-бутоксикарбонил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил метансульфоната (10,2 г, выход: 88%).
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ ч./млн. 4.90 (m, 1H), 4.76 (m, 1H). 4.03 (m, 1H), 3.98 (m, 1H), 3.67 (m, 2Н), 3.47 (m, 1H), 3.14 (s, 3Н), 2.18 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.44 (s, 9Н).
Этап 3: приготовление третбутил((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)карбамата
3
(3R,4R)-3-((трет-бутоксикарбонил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-илметансульфонат (10,2 г, 34,6 ммоль) растворяли в высушенном ДМФА (100 мл), последовательно добавляли NaOAc (9,38 г, 69,0 ммоль) и NaN (4,49 г, 69,0 ммоль), смесь нагревали при 90°С в течение ночи. Реакцию завершали, затем реакционный раствор выливали в воду (200 мл) и дважды экстрагировали с применением ЭтАц (50 мл), органические фазы объединяли, дважды промывали водным раствором LiCl (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения третбутил ((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)карбамата (6,8 г, выход: 81%).
1
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ ч./млн. 4.85 (m, 1H), 3.89 (m, 2Н). 3.77 (m, 1H), 3.63(m, 2Н), 3.51 (m, 1H), 1.93 (m,2Н), 1.45 (s, 9Н).
Этап 4: приготовление (3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-амин гидрохлорида
Третбутил ((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)карбамат (6,8 г, 28,0 ммоль) добавляли к смеси HCl и ЭтАц (100 мл), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 ч. Завершение реакции контролировали с помощью ЖХМС (жидкостная хроматомасс-спектрометрия). Смесь концентрировали с получением соединения (3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-амин гидрохлорид (4,0 г, выход: 80%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ ppm 8.47 (m, 3Н), 4.36 (m, 1H), 3.80 (m, 2Н), 3.63 (m, 3Н), 2.0 (m, 2Н).
Промежуточное соединение 366: Приготовление (3S,4R)-4-азидотетрагидрофуран-3-амин гидрохлорида
Промежуточное соединение 366 было получено в соответствии с методом синтеза промежуточного соединения 365 из (3S,4R)-4-аминотетрагидрофуран-3-ола.
Промежуточное соединение 367: Приготовление третбутил((3R,4S)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)карбамата
Этап 1: приготовление третбутил((3S,4R)-4-гидроксилтетрагидрофуран-3-ил)карбамата
2
(3R,4S)-4-аминотетрагидрофуран-3-ол (5,00 г, 48,487 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл), затем добавляли триэтиламин (12,24 г, 121,2 ммоль), смесь охлаждали на ледяной бане, затем добавляли ВосО (11,64 г, 53,34 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции органическую фазу концентрировали для удаления большей части растворителя. Добавляли воду (100 мл), и смесь перемешивали для осаждения большого количества белого твердого вещества. Смесь фильтровали и промывали водой с получением соединения третбутил ((3S,4R)-4-гидроксилтетрагидрофуран-3-ил)карбамата (8,00 г, выход: 81%).
1
Н ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 4.72 (s, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 4.08-4.02 (m, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.69 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 1.45 (s, 9Н).
Этап 2: приготовление третбутил ((3R,4S)-4-(1,3-дикарбонилизоиндолин-2-ил)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата
Третбутил ((3S,4R)-4-гидроксилтетрагидрофуран-3-ил)карбамат (200 мг, 0,984 ммоль), трифенилфосфин (620 мг, 2,364 ммоль) и изоиндолин-1,3-дион (173 мг, 1,181 ммоль) были растворены в тетрагидрофуране (10 мл), смесь охлаждали на ледяной бане, затем медленно по каплям добавляли диизопропил азодикарбоксилат (717 мг, 3,546 ммоль). После добавления смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. Реакционную жидкость непосредственно концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭА 15-30%) для получения неочищенного продукта соединения третбутил((3R,4S)-4-(1,3-дикарбонилизоиндолин-2-ил)тетрагидрофуран-3-ил)карбамат (950 мг).
1
Н ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7.87 (m, 2Н), 7.75 (m, 2Н), 4.84 (d, J=9.5 Гц, 1H), 4.51 (t, J=8.0 Гц, 1H), 4.37 (t, J=8.3 Гц, 1H), 4.21-4.15 (m, 1H), 4.09 (t, J=8.8 Гц, 1H), 3.85 (m, J=9.2, 6.4 Гц, 1H), 1.11 (s, 9Н).
+
МС м/з (ИЭР): 559.5 [М+Н].
Этап 3: приготовление третбутил((3R,4S)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)карбамата
Третбутил((3R,4S)-4-(1,3-дикарбонилизоиндолин-2-ил)тетрагидрофуран-3-ил)карбамат (950 мг, 21%, 0,600 ммоль) растворяли в этаноле (6 мл), затем добавляли гидразингидрат (45 мг, 0,900 ммоль), смесь нагревали до 75°С и перемешивали в течение 2 часов. После завершения реакции смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ДХМ/МеОН 0-5%) с получением соединения третбутил((3R,4S)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)карбамат (120 мг, двухэтапный выход: 60%).
1
Н ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 5.24 (s, 1H), 4.11 (s, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.63-3.52 (m, 2Н), 3.49 (m, 1H), 1.46 (s, 9Н).
Промежуточные соединения 368-375 были получены в соответствии со способом синтеза промежуточного соединения 367.
Приготовление конкретных примеров
Пример 1. Получение N-(2-((7-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидро-2,6-нафтиридин-3-ил)амино)-3-метил фенил)акриламида
Этап 1: приготовление 3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-7-((2-метил-6-нитрофенил)амино)-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она
2
3
2
+
7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (150 мг, 0,375 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (20 мл), затем добавляли 2-метил-6-нитроанилин (114 мг, 0,751 ммоль), карбонат цезия (367 мг, 1,126 ммоль), бретт-фос (161 мг, 0,3 моль) и Pd(dba) (172 мг, 0,188 ммоль). Газ заменяли на N, и смесь нагревали до 120°С в течение 2 часов. После завершения реакции смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: ПЭ/ЭтАц=2:1) для получения соединения 3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-7-((2-метил-6-нитрофенил)амино)-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (40 мг, выход: 21%). МС м/з (ИЭР): 516 [М+Н].
Этап 2: приготовление 7-((2-амино-6-метилфенил)амино)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-она
2
2
3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-7-((2-метил-6-нитрофенил)амино)-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (40 мг 0,078 ммоль) растворяли в 10 мл метанола, затем добавляли 10 мг Pd-C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Н2 в течение 30 минут. После завершения реакции смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CHCl/МеОН=10:1) с получением соединения 7-((2-амино-6-метилфенил)амино)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (9,5 мг, выход: 25%).
+
МС м/з (ИЭР): 486,4 [М+Н].
Этап 3: приготовление N-(2-((7-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидро-2,6-нафтиридин-3-ил)амино)-3-метил фенил)акриламида
2
7-((2-амино-6-метилфенил)амино)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-метил-2,6-нафтиридин-1(2Н)-он (9,5 мг 0,02 ммоль) растворяли в смеси ТГФ и HO (4 мл/1 мл), затем добавляли бикарбонат натрия (9 мг, 0,104 ммоль), смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли по каплям раствор акрилоилхлорида в ТГФ (2 мг/2 мл, 0,02 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин. После завершения реакции смесь трижды экстрагировали дихлорметаном. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт отделяли колоночной хроматографией на силикагеле с получением соединения N-(2-((7-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидро-2,6-нафтиридин-3-ил)амино)-3-метилфенил)акриламид (1 мг, выход: 9%).
1
+
Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 8.30 (d, J=8.1 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.10-7.05 (m, 2Н),6.68 (s, 1H), 6.52-6.48 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.39 (s, 1H), 6.33 (d, J=1.4 Гц, 1H), 6.19 (d, J=10.2 Гц, 1H), 5.68 (dd, J=10.2, 1.4 Гц, 1H), 3.99 (s, 6Н), 3.25 (s, 3Н), 2.21 (s, 3Н). МС м/з (ИЭР): 541.4 [М+Н].
Примеры 2-75 были приготовлены в соответствии с методом синтеза примера 1.
Пример 76. Приготовление N-(3-((8-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)акриламида
Этап 1: приготовление N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина
N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амин (210 мг, 0,465 ммоль) растворяли в дихлорметане (6 мл), затем добавляли m-хлорпероксибензойную кислоту (200 мг, 1,163 ммоль) и смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. После завершения реакции добавляли насыщенный раствор сульфита натрия (5 мл), и смесь перемешивали в течение 5 минут и экстрагировали дихлорметаном, органическую фазу последовательно промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и затем насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭА=2/1) с получением соединения N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина (186 мг, выход: 82,7%).
+
МС м/з (ИЭР): 483,4 [М+Н].
8
2
Этап 2: приготовление N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-3-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина
8
2
+
N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амин (90 мг, 0,186 ммоль) растворяли в высушенном ДМФА (5 мл), добавляли NaH (15 мг, 0,372 ммоль) при 0°С, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Затем добавляли 1-метил-4-нитро-1H-пиразол-3-амин (32 мг, 0,223 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3-х часов. Реакцию смеси останавливали насыщенным водным раствором хлорида аммония, экстрагировали этилацетатом и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ/ЭА=1/1) с получением соединения N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-3-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина (100 мг, выход: 98%). МС м/з (ИЭР): 545 [М+Н].
2
8
Этап 3: приготовление N-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-3-ил)-N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина
8
2
2
8
+
N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-3-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамин (40 мг, 0,074 ммоль) растворялся в метаноле (10 мл), затем последовательно добавляли триэтиламин (3 капли) и Pd/C (20 мг, 10%-ное содержание), и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере 1H в течение 45 минут. После завершения реакции смесь фильтровали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ДХМ/МеОН) с получением соединения N-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина (30 мг, выход: 80%). МС м/з (ИЭР): 515 [М+Н].
Этап 4: приготовление N-(3-((8-((циклопропилметил амино))-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)акриламида
2
8
+
2
3
N-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамин (30 мг, 0,058 ммоль) растворяли в смеси ТГФ и HO (8 мл/2 мл), затем добавляли NaHCO (33 мг, 0,39 ммоль), ацетил хлорид (7 мг, 0,078 ммоль, растворенный в 1 мл ТГФ) добавляли по каплям на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут. Добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), смесь экстрагировали этил ацетатом и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ПЭ/ЭА=1/1) с получением соединения N-(3-((8)-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)акриламид (10 мг, выход: 22%). МС м/з (ИЭР): 569 [М+Н].
1
Н ЯМР (400 МГц, CDCb) 59.03 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.38 (d, J=16.6 Hz, 2H), 6.33-6.24 (m, 1H), 5.70 (d, J=10.1 Hz, 1H), 3.95 (s, 6H), 3.87 (s, 3H), 3.53-3.36(m, 2H), 1.19-1.10 (m, 1H), 0.55-0.41(m, 2H), 0.42-0.29 (m, 2H).
Примеры 77-117 были подготовлены в соответствии с методом синтеза примера 76.
Пример 118 Приготовление (±)-N-((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
3
Этап 1: приготовление (+)-(3S,4R)-N-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидрофуран-3,4-диамина
2
2
3
+
2-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин (40,0 мг, 0,108 моль) и транс-тетрагидрофуран-3,4-диамин дигидрохлорид (28,3 мг 0,162 ммоль) растворяли в ацетонитриле (2 мл), затем добавляли N,N-диизопропилэтиламин (70 мг, 0,543 ммоль), смесь нагревали до появления конденсата в течение 16 часов. После охлаждения реакционную жидкость разбавляли ЭтАц (10 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли с помощью препаративной тонкослойной хроматографии (элюент: CHCl/МеОН=10:1) с получением соединения (3S,4R)-N-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидрофуран-3,4-диамин (30 мг, выход: 64%). МС м/з (ИЭР): 436,1 [М+Н].
Этап 2: приготовление (+)-N-((3N,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
3
2
3
2
2
(±)-(3S,4R)-N-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидрофуран-3,4-диамин (30,0 мг, 0,069 ммоль) растворяли в смеси ТГФ и HO (1,2/0,3 мл), добавляли NaHCO (23,0 мг, 0,276 ммоль) и смесь охлаждали на ледяной бане, а затем добавляли акрилоилхлорид (6,8 мг, 0,076 ммоль). После добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин. Реакционную жидкость разбавляли ЭтАц (5 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт разделяли посредством препаративной тонкослойной хроматографии (элюент: CHCl/МеОН=10:1) с получением соединения N-((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида (17,4 мг, выход: 52%).
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 9.21 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.45 (d, J=7.3 Гц, 1H), 6.27 (dd, J=17.0, 1.4 Гц, 1H), 6.07 (dd, J=16.9, 10.3 Гц, 1H), 5.63 (dd, J=10.2, 1.4 Гц, 1H), 4.94 (dd, J=11.6, 4.9 Гц, 1H), 4.90-4.79 (m, 1H), 4.34-4.19 (m, 2Н), 3.98 (s, 6Н), 3.90-3.79 (m, 2H). MS m/z (ESI): 490.1 [M+H].
Пример 119. Приготовление N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)акриламида
Этап 1: приготовление N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амина
2
3
2-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин (100 мг, 0,27 моль) растворяли в N-метилпирролидоне (3 мл) и добавляли NaCO (143 мг, 1,349 ммоль) и (3S,4S)-4-азидодетрагидро-2Н-пиран-3-амин гидрохлорид (72 мг, 0,405 ммоль), смесь нагревали до 120°С в течение 2-х часов. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду и трижды экстрагировали этилацетатом.
+
Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: петролейный эфир/этил ацетат 2:1) с получением соединения N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амина (38 мг, выход: 29%). МС м/з (ИЭР): 478.4 [М+Н].
3
Этап 2: приготовление (3S,4S)-N-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидро-2Н-пиран-3,4-диамина
2
3
+
N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амин (38 мг, 0,08 ммоль) растворяли в МеОН (8 мл), затем добавляли Pd/C (10 мг) и смесь перемешивали в атмосфере H при комнатной температуре в течение 30 минут. После завершения реакции смесь концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: дихлорметан/метанол 10:1) для получения соединения (3S,4S)-N-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидро-2Н-пиран-3,4-диамина (12 мг, выход: 33%). МС м/з (ИЭР): 451.2 [М+Н].
Этап 3: приготовление N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)акриламида
3
2
3
(3S,4S)-N-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидро-2Н-пиран-3,4-диамин (12 мг, 0,027 ммоль) растворяли в смеси ТГФ и HO (4 мл/1 мл), затем добавляли NaHCO (12 мг, 0,141 ммоль), смесь охлаждали на ледяной бане, и добавляли по каплям раствор акрилоилхлорида (3 мг, 0,027 ммоль) в ТГФ (2 мл), смесь перемешивали при низкой температуре в течение 10 мин. После завершения реакции смесь трижды экстрагировали дихлорметаном. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: дихлорметан/петролейный эфир (10:1)) с получением соединения N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)акриламида (6,3 мг, выход: 47%).
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 9.17 (s, 2Н), 7.56 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.25 (dd, J=16.9, 1.4 Гц, 1H), 6.01 (dd, J=17.0, 10.3 Гц, 1H), 5.60 (dd, J=10.3, 1.4 Гц, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.11-4.00 (m, 2Н), 3.98 (s, 6Н), 3.78 (d, J=12.1 Гц, 1H), 3.64 (dd, J=13.4, 10.9 Гц, 1H), 2.24-2.20 (m, 2Н), 2.02-1.99 (m, 2H). MS m/z (ESI): 505.4 [M+H].
Примеры 120-420 и 752 были подготовлены в соответствии с методом синтеза примеров 118 или 119.
Пример 421. Приготовление N-((3R,4S)-4-((8-(циклопропилметиламино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
Этап 1: приготовление N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина
N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо [3,4-d]пиримидин-8-амин (210 мг, 0,465 ммоль) растворяли в дихлорметане (6 мл), затем добавляли мета-хлорпероксибензойную кислоту (200 мг, 1,163 ммоль), смесь перемешивали
при комнатной температуре в течение 18 часов. После завершения реакции добавляли насыщенный раствор сульфита натрия, и затем смесь перемешивали в течение 5 минут и экстрагировали дихлорметаном, органическую фазу промывали насыщенным бикарбонатом натрия и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией (элюент: ПЭ/ЭА=2/1) для получения соединения N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амина (186 мг, выход: 82,7%).
+
МС м/з (ИЭР): 483,4 [М+Н].
+
2
8
Этап 2: приготовление ()-N-((3S,4R)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)-N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина
2
2
8
N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин-8-амин (190 мг, 0,393 ммоль) и (3R,4S)-тетрагидрофуран-3,4-диамин дигидрохлорид (206 мг, 1,179 ммоль) растворяли в ацетонитриле (6 мл), затем добавляли N,N-диизопропилэтиламин (507 мг, 3,93 ммоль), смесь нагревали до появления конденсата и перемешивали в течение 20 ч. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную жидкость разбавляли ЭтАц (20 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и отделяли посредством ТСХ (проявитель: CHCh/МеОН 10/1) для получения соединения (±)-N-((3S,4R)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)-N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина (120 мг, выход: 60%).
+
МС м/з (ИЭР): 505.4 [М+Н].
Этап 3: приготовление (±)-N-((3R,4S)-4-((8-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
2
8
2
2
При 0°С акрилоилхлорид (22,6 мг, 0,249 ммоль) добавляли к раствору (±)-N-((3S,4R)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)-N-(циклопропилметил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамина (120 мг, 0,237 ммоль) и бикарбонат натрия (79,6 мг, 0,948 ммоль) в смеси тетрагидрофурана (6,4 мл) и воды (1,6 мл). После добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин. Реакционную жидкость разбавляли ЭтАц (10 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разтделяли посредством ТСХ (элюент: CHCl/МеОН=20/1) для получения соединения (±)-N-((3R,4S)-4-((8-(циклопропилметиламино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида (93 мг, выход: 70%).
1
+
3
Н ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8.89 (s, 1H), 6.80 (brs, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.38 (brs, 1H), 6.21 (dd, J=17.0, 1.5 Гц, 1H), 6.02 (dd, J=17.0, 10.2 Гц, 1H), 5.56 (dd, J=10.1, 1.5 Гц, 1H), 4.93-4.83 (m, 2Н), 4.30-4.18(m, 2Н), 3.96 (s, 6Н), 3.90 (dd, J=9.7, 3.2 Гц, 1H), 3.79 (dd, J=9.2, 5.2 Гц, 1H), 3.52-3.37 (m, 2Н), 0.88 (t, J=6.0 Гц, 1H), 0.57-0.48 (m, 2Н), 0.36-0.26 (m, 2H).MS m/z (ESI): 559.5 [М+Н].
Этап 4: приготовление N-((3R,4S)-4-((8-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-д]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
(±)-N((3R,4S)-4-((8-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламид (93 мг, 0,166 ммоль) был разделен с помощью хиральной ВЭЖХ с получением N-((3R,4S)-4-((8-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида (43,5 мг, значение э.и. >98%, выход: 46,8%) и N-((3S,4R)-4-((8-((циклопропилметил)амино)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида (39 мг, значение э.и. >98%, выход: 41,9%).
Пример 433. Приготовление N-((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-(метиламино)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
Этап 1: приготовление 8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидина
Соединение было получено в соответствии с методом синтеза этапа 1 примера 421.
Этап 2: приготовление третбутил((3R,4S)-4-((8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата
2
2
+
8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин (409 мг, 0,912 ммоль) и третбутил ((3R,4S)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)карбамат (553 мг, 2,736 ммоль) растворяли в ацетонитриле (50 мл), затем добавляли трифторуксусную кислоту (31 мг, 0,274 ммоль). Реакционную жидкость перемешивали при 95°С в течение 4-х часов. После охлаждения смесь разбавляли этилацетатом (50 мл), промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и разделяли с помощью колоночной хроматографии (CHCl/МеОН 0-4%) для получения соединения третбутил((3R,4S)-4-((8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата (414 мг, выход: 79,6%). МС м/з (ИЭР): 570.4, 57 2.4 [М+Н].
Этап 3: приготовление третбутил((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-(метиламино)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата
+
Раствор третбутил((3R,4S)-4-((8-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата (60 мг, 0,105 ммоль) и метиламина (1,5 мл, 33% раствор этанола) в N-метилпирролидоне (1 мл) нагревали до 110°С и перемешивали в течение 18 ч. Реакционную жидкость разбавляли этилацетатом (5 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и отделяли с использованием препаративной ТСХ (ПЭ/ЭА=1:1) с получением соединения третбутил((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-(метиламино)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата (32 мг, выход: 54%). МС м/з (ИЭР): 565.4, 567.4 [М+Н].
2
8
Этап 4: приготовление N-((3S,4R)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диамин трифторацетата
+
Раствор третбутил((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-(метиламино)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)карбамата (32 мг, 0,057 ммоль) в растворе трифторуксусной кислоты в дихлорметане (2 мл, 20%) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем концентрировали с получением маслянистого продукта, который непосредственно использовали на следующем этапе. МС м/з (ИЭР): 465.4, 467.4 [М+Н].
Этап 5. Приготовление N-((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-(метиламино)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида
2
8
3
2
2
При 0°С акрилоилхлорид (5,7 мг, 0,063 ммоль) добавляли к раствору N-((3S,4R)-4-аминотетрагидрофуран-3-ил)-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-N-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-2,8-диаминтрифторацетата (неочищенный продукт) и NaHCO (57 мг, 0,684 ммоль) в смеси тетрагидрофурана (3,2 мл) и воды (0,8 мл). После добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин. Реакционную жидкость разбавляли ЭтАц (мл), промывали насыщенным бикарбонатом натрия и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и отделяли с использованием препаративной ТСХ (CHCl/МеОН 20:1) с получением соединения N-((3R,4S)-4-((6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-8-(метиламино)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидрофуран-3-ил)акриламида (17,6 мг, выход: 59,5%).
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8.88 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.30 (brs, 1H), 6.19 (d, J=16.9 Гц, 1H), 5.97 (dd, J=17.0, 10.3 Гц, 1H), 5.88 (brs, 1H), 5.54 (d, J=10.4 Гц, 1H), 4.95-4.83 (m, 2H), 4.29-4.18 (m, 2H), 3.95 (s, 6H), 3.89 (dd, J=9.7, 3.0 Гц, 1H), 3.77 (dd, J=9.3, 5.5 Гц, 1H), 3.14 (d, J=4.4 Гц, 3H).MS m/z (ESI): 519.4, 521.4 [M+H].
Пример 775 N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)акриламида
Этап 1: приготовление 8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидина
+
8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилтио)пиридо[3,4-d]пиримидин (930 мг, 2,42 ммоль) растворяли в ДХМ (50 мл), добавляли m-ХПБК (1,23 г, 6,05 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2-х часов. После завершения реакции был добавлен тиосульфат натрия для остановки реакции. Смесь экстрагировали ДХМ и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле для получения соединения 8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d] пиримидина (800 мг, выход: 79%). МС м/з (ИЭР): 416 [М+Н].
Этап 2: приготовление N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амина
+
8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-2-(метилсульфонил)пиридо[3,4-d]пиримидин (1 г, 2,41 ммоль) растворяли в смеси третбутилового спирта (80 мл) и ДХЭ (20 мл), затем добавляли ДИПЭА (1,55 г, 12,05 ммоль), смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение ночи. Смесь экстрагировали ДХМ и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле с получением соединения N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амина (650 мг, выход: 56%). МС м/з (ИЭР): 478 [М+Н].
Этап 3: приготовление N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амина
+
N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-8-хлор-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амин (325 мг, 0,68 ммоль), 3-метоксиазетидин гидрохлорид (252 мг, 2,04 ммоль) и ДИПЭА (439 мг, 3,4 ммоль) растворяли в н-бутаноле (15 мл), смесь нагревали до 100°С в течение 4 ч, затем смесь концентрировали, экстрагировали этилацетатом и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле с получением соединения N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амина (350 мг, выход: 97%). МС м/з (ИЭР): 529 [М+Н].
Этап 4: приготовление (3S,4S)-N3-(6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил) тетрагидро-2Н-пиран-3,4-диамина
3
+
N-((3S,4S)-4-азидотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)-6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-амин (350 мг, 0,662 ммоль) растворяли в смеси ТГФ (10 мл) и воды (1 мл) и затем добавляли трифенилфосфин (521 мг, 1,99 ммоль), смесь нагревали до 80°С и перемешивали в течение 16 ч. Смесь охлаждали, непосредственно сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле с получением соединения (3S,4S)-N-(6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидро-2Н-пиран-3,4-диамина (290 мг, выход: 87%). МС м/з (ИЭР): 503 [М+Н].
Этап 5: приготовление N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-д]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)акриламида
3
3
(3S,4S)-N-(6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)тетрагидро-2Н-пиран-3,4-диамин (290 мг, 0,58 ммоль) растворяли в смеси ТГФ (20 мл) и воды (5 мл), затем добавляли NaHCO (243 мг, 2,89 ммоль) и добавляли по каплям раствор акрилоилхлорида (63 мг, 0,69 ммоль, растворенный в 1 мл ТГФ) при комнатной температуре, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут.
3
+
Реакцию завершали, определяли посредством ТСХ, для остановки реакции добавляли насыщенный водный раствор NaHCO, смесь экстрагировали этилацетатом, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией на силикагеле с получением соединения N-((3S,4S)-3-((6-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-8-(3-метоксиазетидин-1-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)амино)тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)акриламид (204 мг, выход: 63%). МС м/з (ИЭР): 557 [М+Н].
1
Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.69 (t, J=8.0 Гц, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.25 (dd, J=17.0, 1.4 Гц, 1H), 6.08 (s, 1H), 6.02 (dd, J=16.9, 10.3 Гц, 1H), 5.60 (dd, J=10.3, 1.4 Гц, 1H), 4.73 (brs, 1H), 4.56 (brs, 1H), 4.42 (d, J=8.5 Гц, 1H), 4.39-4.22 (m, 4Н), 4.05 (dd, J=12.0, 4.5 Гц, 1H), 3.99 (d, J=11.7 Гц, 1H), 3.92 (s, 6Н), 3.75 (dd, J=11.9, 1.6 Гц, 1H), 3.65-3.57 (m, 1H), 3.33 (s, 3Н), 2.09-2.02 (m, 1H), 1.91-1.81 (m, 1H).
Примеры 422-714 и 753-806 были подготовлены в соответствии со способом синтеза примеров 433, 421 или 775.
Пример 715 Приготовление N-(5-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)акриламида
Этап 1: Приготовление 6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(1-(2-метоксиэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиридо[3,4-d]пиримидина
2
3
3
2
2
2
1-(2-метоксиэтил)-4-нитро-1Н-пиразол (84 мг, 0,49 ммоль) и 2-хлор-6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин (200 мг, 0,54 ммоль) растворяли в ДМА (15 мл), затем добавляли CuI (112 мг, 0,59 ммоль), PivOH (15 мг, 0,15 ммоль), KCO (88 мг, 0,64 ммоль) и Pd(PPh)Cl (34 мг, 0,05 ммоль), смесь нагревали до 140°С при N и перемешивали в течение 1 часа. После завершения реакции смесь концентрировали для удаления растворителя путем понижения давления и разделения быстрой хроматографией с колонкой на основе силикагеля (ПЭ/ЭА 2:1) для получения соединения 6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(1-(2-метоксиэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиридо[3,4-(1]пиримидина (103 мг, выход 42%).
+
МС м/з (ИЭР): 505 [М+1].
Этап 2: Приготовление 5-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразолил-4-амина
2
4
2
2
+
6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-2-(1-(2-метоксиэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиридо[3,4-d]пиримидина (103 мг, 0,20 ммоль) растворяли в смеси EtOH и НО (10/3 мл), затем добавляли порошок Fe (114 мг, 2,04 ммоль) и NHCl (109 мг, 2,04 ммоль), смесь нагревали до появления конденсации и перемешивали в течение 2 часов. После завершения реакции реакционную жидкость трижды экстрагировали дихлорметаном. Органические фазы объединяли, промывали водой, затем насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт отделяли быстрой хроматографией с колонкой на основе силикагеля (CHCl/МеОН 10:1), с получением соединения 5-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)-1H-пиразолил-4-амина (12 мг, выход 12%). МС м/з (ИЭР): 476 [М+1].
Этап 3: Приготовление N-(5-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)акриламида
2
3
2
2
+
5-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразолил-4-амин (12 мг, 0,025 ммоль) растворяли в смеси ТГФ и HO (4:1, 4 мл), затем добавляли NaHCO (11 мг, 0,13 ммоль), смесь охлаждали в ледяной бане, добавляли акрилоилхлорид (2,3 мг, 0,025 ммоль) и смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин. После завершения реакции реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, разделяли хроматографией с колонкой на основе силикагеля (Ch Cl/МеОН 10:1) с получением соединения N-(5-(6-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)пиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-1-(2-метоксиэтил)-1H-пиразол-4-ил)акриламид (4,8 мг, выход 36%). МС м/з (ИЭР): 529 [М+1].
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 10.71 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 9.60 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.49 (d, J=16.7 Гц, 1H), 6.40 (dd, J=16.9, 9.7 Гц, 1H), 5.84 (d, J=9.7 Гц, 1H), 5.21 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 4.00 (s, 7Н), 3.89 (t, J=5.9 Гц, 2Н), 3.35 (s, 3Н).
Примеры 716-729 были получены в соответствии с методом синтеза Примера 715.
Пример 730 Приготовление N-((3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-7-ил)метил)акриламида
Этап 1: Приготовление 3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидр-1,6
2
2
2
3
2
+
7-хлор-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-1,6-нафтиридин-2(1Н)-он (250,0 мг, 0,626 ммоль), Zn(CN) (110 мг, 0,938 ммоль) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (34,7 мг, 0,063 ммоль) добавляли в смесь ДМФ и HO (5 мл, 100:1), затем добавляли Pd(dba) (28,7 мг, 0,031 ммоль) при N, смесь нагревали до 120°С и перемешивали в течение 20 часов. После завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали ЭтАц. Органическую фазу насыщали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и отделяли хроматографией с колонкой на основе силикагеля (элюент: ПЭ/ЭтАц=10-25%) для получения соединения 3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-7-карбонитрил (75 мг, выход: 28%). МС м/з (ИЭР): 390.0 [М+Н].
Этап 2: Приготовление 7-(аминометил)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-1,6-нафтиридин-2(1Н)-она
2
+
3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-2-карбонил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-7-карбонитрил (15 мг, 0,038 ммоль) растворяли в метаноле (3 мл), и добавляли концентрированную соляную кислоту (15 мл) и 10% Pd/C (каталитическое количество), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2-х часов при H, реакция была завершена. Реакционную жидкость фильтровали и выпаривали в вакууме с получением неочищенного продукта 7-(аминометил)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-1,6-нафтиридин-2(1Н)-он, который может быть использован непосредственно в следующей реакции. МС м/з (ИЭР): 394.0 [М+Н].
Этап 3: Приготовление N-((3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-7-ил)метил)акриламида
3
2
2
2
При 0°С акрилоилхлорид (3,8 мг, 0,042 ммоль) добавляли к раствору 7-(аминометил)-3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-1,6-нафтиридин-2(1Н)-он (неочищенный продукт, 0,038 ммоль) и NaHCO (19,0 мг, 0,230 ммоль) в смеси ТГФ и HO (0,8 мл/0,2 мл), смесь перемешивали в течение 10 мин при 0°С. Реакционную жидкость разбавляли ЭтАц (5 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли препаративной ТСХ (элюент: CHCl/МеО Н=10:1) с получением соединения N-((3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-7-ил)метил)акриламид (1,1 мг, двухэтапный выход: 6%).
1
H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8.75 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.38 - 6.32 (m, 1H), 6.27 - 6.21 (m, 1H), 5.73 - 5.69 (m, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.81 (d, J=5.6 Гц, 2Н), 3.96 (s, 6Н), 3.78 (s, 3Н);
+
МС м/з (ИЭР): 448.0 [М+Н].
Примеры 731-751 были подготовлены в соответствии с методом синтеза Примера 730.
Биологический тест и оценка
I. Биохимический анализ киназы РФРФ4 in vitro
В настоящем изобретении для определения ингибирующей активности соединений в отношении РФРФ4 использовали анализ Caliper Assay РФРФ4. Подробная процедура эксперимента была следующей.
1. В настоящем изобретении реакцию киназы проводили в 384-луночном планшете, и в следующую реакционную систему соответственно добавляли 12,5 мкМ РФРФ4, 65 мкМ АТФ и 1 мкМ пептида (5 Fluo Ahx KKKKEEIYFFFG NH2).
2
2. Реакционная система представляет собой раствор смеси 50 mMHEPES, рН 7,5, 1 мМ ДТТ, 0,02% Твин-20, 0,02% Б С А, 0,6% ДМСО, 10 мМ бета-глицеролфосфата и 10 мкМ ортованадата натрия и 16 мМ MgCl.
3. Реакционную систему инкубировали при 30°С в течение 40 минут.
4. Реакцию прекращали добавлением стоп-раствора (100 мМ HEPES, рН 7,5, 5% ДМСО, 0,1% реагент для нанесения покрытия из Caliper, 10 мМ ЭДТК и 0,015% Brij35).
5. Планшет для культивирования с прекращенной киназной реакцией переносили на рабочую станцию Caliper LC 3000 для считывания данных, фосфорилированные и нефосфорилированные пептиды разделяли с использованием техники сдвига миграции микрожидкостей Caliper, и аналит переносили, обеспечивая постоянный буферный поток через чип, миграцию субстратного пептида контролировали по меченому флуоресцентному сигналу, а активность киназы рассчитывали с использованием количества образовавшегося фосфатного пептида.
50
6. В завершение определяли значения IC с помощью нелинейного регрессионного анализа процента ингибирования при различных концентрациях соединения. Результаты испытаний на ферментативную активность соединений конкретных примеров приведены в таблице 1.
II. Эксперимент по пролиферации клеток РФРФ4
2
В настоящем изобретении для оценки функциональных эффектов соединений на пролиферацию клеток был использован эксперимент Cell Titer Glo (CTG). Клетки гепатоцеллюлярной карциномы Huh7 (№ в каталоге TChU182) из банка клеток Китайской академии наук культивировали в DMEM с высоким содержанием глюкозы (Gibco, кат. №1773536), 10% фетальная бычья сыворотка (Gibco, 10099-141) при 37°С, в 5% CO-инкубаторе. Опосредованное соединением ингибирование пролиферации/выживания клеток оценивали путем количественного определения уровней АТФ в клетках с использованием реагента CTG (Promega, №G7573). Конкретная процедура эксперимента была следующей.
1. Клетки высевали в 96-луночный планшет, обработанный средой для тканевых культур (Costar №3904), в количестве 3500 клеток/лунку/90 мкл свежей среды;
2. Добавляли 10 мкл среды, содержащей концентрацию соединения, в 10 раз превышающую его конечную концентрацию при тестировании;
3. Эффект дозы оценивали 5-кратным серийным разведением испытуемого соединения, начиная с 10 мкМ.
2
4. После инкубации клеток в течение 3-х дней при 37°С в атмосфере с 5% CO количественно оценивали влияние ингибитора на пролиферацию клеток после добавления 50 мкл CTG и тестирования с люминесценцией.
50
50
5. Концентрацию соединения (EC), приводящую к полумаксимальному ингибированию роста, и концентрацию соединения (абсолютную IC), приводящую к абсолютному половинному ингибированию роста, определяли с использованием подбора кривой с четырьмя параметрами в Graphpad Prism в спектрофотометре для прочтения планшетов (M1000, Tecan). Результаты испытаний активности клеток для соединений конкретных примеров приведены в таблице 1.
Из данных по ферментативной активности соединений конкретных примеров можно видеть, что соединения по настоящему изобретению оказывают сильное ингибирующее влияние на активность киназы РФРФ4. Из данных клеточной активности соединений конкретных примеров видно, что соединения по настоящему изобретению оказывают сильное ингибирующее влияние на пролиферативную активность клеток НиН-7, высоко экспрессирующих РФРФ4.
Все документы, упомянутые в настоящей заявке, полностью включены в настоящее описание посредством ссылки, и каждый документ тоже цитируется отдельно в качестве ссылки. Также следует понимать, что специалисты в данной области техники могут сделать различные модификации и изменения после прочтения упомянутых принципов настоящего изобретения, и на эти эквиваленты также распространяется действие прилагаемой формулы изобретения.