Пробиотик в качестве профилактического средства при афлатоксикозе поросят

5. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник/ Под ред. И.П. Кондра-хина - М.: Колос., 2004. - 520 с.

TOXICOLOGICAL EVALUATION OF COMBINED EFFECTS OF DECIS AND T-2 TOXIN

IN THE ANIMAL ORGANISM V.I. Egorov, G.G. Galjautdinova, I.M. Eremeev, A.V. Ivanov

Summary. Conducted a toxicological assessment of combined effects of Decis and T-2 toxin on the body of animals. The studies yielded the following results. Average lethal dose of Decis and T-2 toxin to albino rats for the separate effects of: 45.8 and 3.0 mg / kg, respectively, when combined - 38.3 and 1.8 mg / kg for rabbits in the division: 356.7 and 0.54 mg / kg, combined - 290.0 and 0.46 mg / kg, indicating a synergistic action of toxicants, the coefficient of accumulation is 4.8, which is typical for substances with moderate cumulation. The combined effects of Decis and T-2 toxin at the level of current MACs for each toxin exerts embryotoxic and teratogenic effects on the body of white rats: pre-implantation loss of fetuses increases relative to controls by 40.5% postimplantation death - by 47.1%, the overall fetal mortality rate - by 40.6%. The highest percentage of stillbirths was observed with respect to the control group, subjected to combined effects of Decis and T-2 toxin - 2.2 times, in groups treated separately decis and T-2 toxin, - 1.7 and 2.1 times, respectively . On such indicators as the time of detachment of ears, the term of pubescence, insights, and the eruption of the incisors significant differences in the experimental groups relative to controls were observed. The combined effects of Decis and T-2 toxin after a single and repeated administration is characterized by more severe clinical, hematological, biochemical and pathological changes than when the effects of toxicants. Accompanied by a decrease in the number of leukocytes, erythrocytes and hemoglobin of 26.3,

27.8 and 33.6%, respectively, decrease in total protein by 19.2%.

Key words: synthetic pyrethroids, mycotoxins, decis, T-2 toxin.

УДК 619:615.3+619:615.9:636.4

ПРОБИОТИК - В КАЧЕСТВЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ПРИ АФЛАТОКСИКОЗЕ ПОРОСЯТ

Т.А. ШАМИЛОВА, младший научный сотрудник Л.Е. МАТРОСОВА, кандидат биологических наук, зав. сектором

Э.И. СЕМЕНОВ, кандидат биологических наук, зав. лабораторией

А.В. ИВАНОВ, член-корреспондент Россельхоза-кадемии, директор

ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»

E-mail: vnivi@mail.ru

Резюме. Исследования проводили с целью изучения профилактической эффективности пробиотика Энтероспорин при афлатоксикозе. Опыт поставлен на поросятах-отъемышах крупной белой породы, в рационе которых присутствовал афлатоксин В1 в концентрации 80±5,0 мкг/кг. Первая группа служила контролем и получала обычный рацион. Поросятам второй группы дополнительно давали пробиотик Энтеро-спорин в дозе 3 мл. Использование пробиотика снижало негативное влияние афлатоксина на увеличение живой массы: среднесуточный прирост составил - 463 г/гол., против 420 г в контроле. Энтероспорин благоприятно влиял на содержание эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в крови, которое было выше, чем в контроле, на 8,4, 17,3 и 8,2 % соответственно. Концентрация АЛТ и АСТ в профилактируемой группе оставалась ниже относительно контроля на 20,2 и 31,9 % соответственно. Положительное действие пробиотика выражалось также в нормализации показателей белкового обмена, фагоцитарной активности нейтрофилов крови, содержания глюкозы.

Бактериологическое исследование содержимого толстого отдела кишечника показало увеличение численности условнопатогенных микроорганизмов и уменьшение популяционного уровня резидентной микрофлоры в контрольной группе. При использовании пробиотика количество бифидобактерий было выше, чем в контроле, на 53 %, лактобактерий - на 41,4 %. Популяционный уровень золотистого стафилококка, сальмонелл, дрожжей и плесени на 30 сут. исследования был ниже, чем в непрофилактированной группе, на 56, 48 и 25,4 %.

Ключевые слова: афлатоксикоз, пробиотик, поросята, микрофлора кишечника.

Исследования последних лет свидетельствуют о нарастающем поражении зерновых грибами рода Aspergillus, продуцирующими один из наиболее опасных микотоксинов, - афлатоксин В1. Потребление корма, содержащего афлатоксины, приводит к афла-токсикозу животных, который сопровождается снижением прироста массы тела, поражением желудочнокишечного тракта, уменьшением резистентности организма [1...3].

Поэтому вопросы его профилактики, включающие поиск эффективных и безопасных средств, остаются актуальными. Перспективное направление лечебнопрофилактических мероприятий при токсикозах животных - использование пробиотиков - стабилизированных культур симбионтных микроорганизмов или продуктов их ферментации [4...6].

Пробиотические препараты способствуют детоксикации микотоксинов, лучшему течению метаболических процессов в организме и усвоению питательных веществ, жизненно необходимых для хозяина, активизации иммунологического статуса и повышению его резистентности к неблагоприятным факторам окружающей среды [7, 8].

Цель нашей работы состояла в изучении профилактической эффективности пробиотика Энтероспорин на основе Bacillus subtilis-93 при афлатоксикозе поросят.

Условия, материалы и методы. Профилактическую эффективность пробиотика изучали на свинокомплексе ООО «Новая жизнь» Кукморского района республики Татарстан. При исследовании фуража,

входящего в состав рациона поросят-отъемышей, был обнаружен афлатоксин В1 в концентрации 80±5,0 мкг/кг. Для проведения опыта сформировали 2 группы подсвинков крупной белой породы средней живой массой 20...25 кг по 15 гол. в каждой. Первая группа служила контролем и получала обычный рацион. Поросятам второй группы дополнительно давали пробиотик Энтероспорин в дозе 3 мл с содержанием 1 млрд микробных клеток в 1 мл. Продолжительность эксперимента 30 суток.

Эффективность пробиотика определяли на основании клинических данных, показателей общей живой массы, результатов гемато-биохимического анализа крови и бактериологического исследования содержимого толстого отдела кишечника. Кровь для гематологических и биохимических исследований брали из хвостовой вены утром до кормления. Содержание гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов определяли общепринятыми методами (Кудрявцев

A.А. и соавт., 1974), фагоцитарную способность нейтрофилов в периферической крови - по методике Кост и Стенко (1967), активность лизоцима в сыворотке крови - нефелометрическим методом по

B.Г. Дорофейчуку.

Микробиологические исследования фецесс проводили согласно методике, изложенной в методических рекомендациях по диагностике дисбактериоза кишечника (Грачева Н.М., Гончарова Г.Л., Аваков А.А., 1986). Популяционный уровень каждой группы микроорганизмов выражали в десятичных логарифмах.

Результаты и обсуждение. У поросят в контроле наблюдали понижение аппетита, угнетение общего состояния. К концу опыта одна особь пала, остальные заметно отставали в росте. Животные этой группы были более подвержены расстройствам желудочнокишечного тракта и бронхопневмониям. Использование пробиотика снижало негативное влияние афлатоксина на прирост живой массы. Кроме того, клиническая картина интоксикации была менее выраженной и проявлялась в более поздние сроки.

Так, к концу эксперимента абсолютный прирост живой массы поросят в контроле составил 12,6 кг, или меньше, чем в профилактируемой пробиотиком группе, на 10,3 %, среднесуточный прирост живой массы был равен 420 и 463 г/гол. соответственно.

Наличие в рационе подопытных животных афлатоксина В1 негативно сказывалось на гематологических и биохимических показателях крови на всем протяжении эксперимента, что выражалось в уменьшении количества форменных элементов крови, гемоглобина и общего белка (см. табл.). Под влиянием Энтероспо-рина они нормализовались.

К концу эксперимента в группе, получавшей пробиотик, количество эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина было выше, чем в контроле, на 8,4, 17,3 и 8,2 % соответственно.

Введение пробиотика благоприятно влияло на динамику содержания глюкозы и показатели белкового обмена. Концентрация глюкозы на 30 сут. исследования в опытной группе выросла на 7,7 %, по сравнению с контролем. Количество общего белка, альбуминов и а-глобулинов в сыворотке крови поросят профилак-тированной группы к концу исследования было выше на 14,4, 9,2 и 7,6 % соответственно. Положительное влияние Энтероспорина на гемато-биохимические показатели поросят при афлатоксикозе, на наш взгляд, связано с действием ВааШив виЫШв, входящих в

Таблица. Гемато-биохимические показатели крови поросят при профилактическом применении пробиотика

Показатель Группа животных

контроль 1 Энтероспорин

Эритроциты, *1012/л 5,73±0,25 6,21±0,22

Лейкоциты, *109/л 10,43±1,84 12,23±2,26*

Гемоглобин, г/л 93,36±2,31 101,05±2,53

Глюкоза, ммоль/л 4,15+0,17 4,47+0,22

Общий белок, г/л 53,50+1,36 61,20+1,60

Фракции белка, %

альбумины 33,3+1,14 36,4+1,26

а-глобулины 16,6+0,49 17,9+0,82

Р-гпобулины 22,5+1,24 18,5+0,96*

у-глобулины 27,6+1,34 27,2+1,28

Фагоцитарная актив-

ность, % 45,20±2,67 49,63±3,04

Активность лизоцима,

% 15,72±0,74 17,32±0,96

АЛТ, Е/л 93,59+3,05 74,72+2,41**

АСТ, Е/л 137,45+4,12 93,56+4,03***

* р<0,05 **р <0,01 ***р<0,001

состав пробиотика. В желудочно-кишечном тракте они прорастают и переходят в вегетативные формы, что сопровождается интенсивной продукцией антитоксических веществ и ряда биологически активных ферментов (протеаз, амилаз, липаз и др.), которые не только трансформируют токсин в менее активные метаболиты, но и способствуют более качественному расщеплению корма.

Фагоцитарная активность нейтрофилов - филогенетически более древняя клеточная форма неспецифической защиты, которая отражает как защитные, так и адаптивные возможности организмов в патологическом процессе. Известно, что афлатоксины относятся к числу сильнейших веществ, подавляющих иммунную систему. Введение в рацион животных Энтероспорина способствовало повышению факторов естественной резистентности. Так, фагоцитарная активность нейтрофилов крови поросят возросла после его применения, по сравнению с контролем, на 9,8 %.

Активность АЛТ и АСТ в сыворотке крови поросят при афлатоксикозе повышалась, по сравнению с исходными величинами, у животных обеих групп в течение всего срока исследования.

В контроле ее рост был более выраженным, чем в опытной группе. Так, на 30 сут. эксперимента содержание АЛТ и АСТ в опытной группе оставалось ниже, чем в контроле, на 20,2 и 31,9 %, соответственно.

Повышение в сыворотке крови концентрации таких гепатобилиарных ферментов как АСТ и АЛТ, на наш взгляд, свидетельствует о нарушении под влиянием афлатоксинов целостности мембран гепатоцитов, а также может быть обусловлено токсическим воздействием на печень продуктов жизнедеятельности условно-патогенной и патогенной микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Размножению гнилостной и патогенной микрофлоры способствует нарушение моторной функции кишечника вследствие недостаточного поступления желчи, наблюдаемое при функциональных и органических изменениях в желчевыделительной системе.

Бактериологическое исследование содержимого толстого отдела кишечника на 30 сут. эксперимента позволило установить, что в кишечном микробиоценозе поросят контрольной группы популяционный уровень бифидо- и лактофлоры, а также эшерихий с

нормальной ферментативной активностью уменьшился Выводы. Производственные испытания подтвер-соответственно до 4,28±0,18, 3,48±0,53 и 3,13±0,44 1д дили высокую профилактическую эффективность КОЕ/г, в опытной группе количество бифидобактерий применения пробиотика Энтероспорин поросятам-

было выше на 53 %, лактобактерий - на 41,4 %. Со- отъёмышам при афлатоксикозе. Полученные резуль-

держание эшерихий с нормальной ферментативной таты свидетельствуют, что ежедневное введение активностью у поросят, получавших пробиотик, нахо- препарата снижает признаки токсикоза, улучшает

дилось на уровне 4,72±0,31 1д КОЕ/г. общее клиническое состояние животных, оказывает

Фактор токсикоза вызвал увеличение популяцион- благоприятное действие на течение физиологических

ного уровня золотистого стафилококка, сальмонелл, процессов организма, обеспечивая коррекцию мор-

дрожжей и плесени в контрольной группе. В опытной фологических, биохимических и микробиологических

группе количество микроорганизмов этих видов было показателей крови, стимулируя рост, развитие и про-

значительно ниже - на 56, 48 и 25,4 % соответственно. дуктивность животных.

Литература.

1. Смирнов А.М., Дорожкин В.И., Таланов Г.А. Ветеринарносанитарные мероприятия на территориях, загрязненных экотоксикантами // Материалы 1-го съезда вет. фармакологов России. - Воронеж, 2007. - С. 229.

2. Шамилова Т.А., Матросова Л.Е., Ахметов Ф.Г. Состояние кишечного микробиоценоза поросят при микотоксикозе на фоне применения пробиотика //Ветеринарный врач. - 2011. - № 1. - С. 4-6.

3. Коваленко А. Микотоксины в кормах: растет их пагубное влияние на свиноматок//Животноводство России. - 2008. -№ 5. - С. 27.

4. Анохина О.В., Тихонов И.В., Волков М.Ю. Новые пробиотические препараты с гепатопротективной активностью//Гастро-2008: сб. науч. тр. 10-го Юбилейного междунар. Славяно-Балтийского научного форума. - Спб.: ООО «Гастро», 2008. - № 2-3. - С. 5.

5. Былгаева А.А., Татаринова С.С., Неустроев М.П. и др. Пробиотик «Сахабактисубтил» в профилактике микотоксикозов и послеродовых осложнений у коров в условиях Якутии // Материалы 2-го междунар. конгресса по пробиотикам и 6-й объединенной науч. сессии института гастроэнтерологии и клинической фармакологии СПбГМА им. И.И. Мечникова. - СПб., 2009. - С. 6-7.

6. Панин А., Малик Н. Пробиотики - неотъемлемый компонент рационального кормления животных // Ветеринария с.-х. животных. - 2010. - № 10. - С. 5-10.

7. Малик Н.И., Панин А.Н. Пробиотики: теоретические и практические аспекты// Ветеринария с.-х. животных. - № 6. -2006. - С. 48-50.

8. Тремасов М.Я., Матросова Л.Е., Тарасова Е.Ю. Опыт применения пробиотика при микотоксикозах// Вестник ветеринарии. - 2009. - № 50 (3). - С. 38-41.

PROBIOTIC - IN QUALITY PROPHYLACTIC AT AFLATOXICOSIS PIGS T.A. Shamilova, L.E. Matrosova, E.I. Semenov, A.V. Ivanov

Summary. The work purpose was studying of preventive efficiency probiotic Enterosporin at aflatoxicosis. Experience spent on pigs of large white breed in which diet aflatoxin B1 in concentration 80±5,0 mkg/kg has been found out. The first group served as control and received a usual diet. Pigs of the second group in addition with a usual diet received probiotic Enterosporin in a dose of 3 ml. It is established, that introduction in a diet of pigs probiotic reduced negative influence of an aflatoxin on a gain of live weight: the daily average gain on an animal has made - 463 g, against 420 g in control group. Enterosporin rendered beneficial effect on dynamics of the maintenance of quantity erythrocytes, leukocytes and hemoglobin in the blood which values were above concerning control group on 8,4; 17,3 and 8,2 %, accordingly. Maintenance ALT and AST in prophylactical group remains more low concerning control - on 20,2 and

31,9 %, accordingly. Positive action probiotic was marked also in normalization of indicators of an albuminous exchange, phagocytical activity of neutrophils of blood of pigs, the glucose maintenance.

At bacteriological research of contained thick department of intestines the increase is conditional-pathogenic and reduction of population level of resident microflora in control group has been established. Whereas in prophylactical probiotic Enterosporin the quantity bifidobacterium remains to group above on 53 %; lactobacterium - on 41,4 %, accordingly. Population level golden staphylococcus, salmonellas, yeast and a mold on 30 days researches was more low on 56; 48 and 25,4 %, in comparison with not prophylactical groups.

The cited data testifies to positive results of application probiotic Enterosporin as a prophylactic at aflatoxicosis pigs.

Key words: aflatoxicos, probiotic, pigs, microflora intestines.

УДК619:615.S+619:615.9

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МИКОСУБТИЛА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ МИКОТОКСИКОЗОВ ЖИВОТНЫХ

Е.Н. ИВАНОВ, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник И.М. ЕРЕМЕЕВ, аспирант

М.Я. ТРЕМАСОВ, доктор биологических наук, зав. отделом

ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» E-mail: vnivi@mail.ru

Резюме. Безвредность корма, загрязненного Т-2 токсином и афлатоксином В1 после обработки препаратом Микосубтил, определяли на 15 овцах, биологическую оценку мяса проводили на 30 белых крысах. Особи I группы служили биологическим контролем и получали обычный рацион, во II группе ежедневно задавали корм, содержащий Т-2 токсин в дозе 450 мкг/кг, в III -афлатоксин В1 в дозе 200 мкг/кг, в IV и V группах - корм, содержащий соответственно Т-2 и афлатоксин в аналогичных дозах, но обработанный препаратом Микосубтил (2 млрд кл/мл).