Характеристика субпопуляционного состава продукта афереза и секретируемых цитокинов у больных лимфомами

Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3

ретикулоцитах. При статистической обработке данных различие между средними значениями показателей оценивали парным критерием Стьюдента; данные представлены в виде средних значений и их 95% доверительных интервалов; результаты считались статистически значимыми прир < 0,05.

Результаты и обсуждение. По результатам исследования все показатели могут быть разделены на две группы: те, статистически значимое изменение (непосредственно после кроводачи) которых (при имеющейся разрешающей способности анализатора) не было выявлено, и те, изменение которых было статистически значимо. После кроводачи значимо изменились следующие показатели: 1) снизились: показатели гемоглобина на 3,0 (95% ДИ 1,0—6,0) г/л, разница содержания гемоглобина в эритроцитах и ретикулоцитах на 0,4 (95% ДИ 0,2 - 0,6) пг, лейкоцитов на 0,6 (95% ДИ 0,2 - 0,9) х 103/мкл

и тромбоцитов на 10,2 (95% ДИ 2,2-18) х 103/мкл; 2) повысились: показатели фракции незрелых ретикулоцитов на 1,2 (95% ДИ 0,6 - 1,8)% и содержания гемоглобина в ретикуло-ците на 1,3 (95% ДИ 0,5 - 2,0) пг. По остальным показателям значимых изменений не обнаружено.

Заключение. Выявлены показатели периферической крови, которые сразу заметным образом реагируют на процедуру кроводачи. Взаимосвязанная совокупность выявленных изменений является проявлением единого адаптационного ответа системы кроветворения организма на кровопотерю: практически немедленно запускается компенсаторный механизм генерации и выхода в кровоток молодых эритроцитов (рети-кулоцитов) с повышенным содержанием гемоглобина (этот процесс, динамически развиваясь во времени, полностью компенсирует относительную анемию, вызванную донацией).

Изучение эффективности иматиниба у больных хроническим миелоидным лейкозом в хронической фазе:

результаты 6-летнего исследования

Г.Ч. Бадалова, Р.Ш. Рустамов

Азербайджанский НИИ гематологии и трансфузиологии, Баку

Введение. В работе представлены результаты 6-летнего наблюдения за больными хроническим миелоидным лейкозом в хронической фазе (ХМЛ), получевшими иматиниб. Целью работы явилось изучение эффективности иматиниба по частоте, степени и стабтльности достижения клинико-гематологической и цитогенетической ремиссии, длительности течения хронической фазы болезни по показателям выживаемости у больных ХМЛ, находящихся в хронической фазе болезни.

Материалы и методы. Под нашим наблюдением находились 94 больных (46 мужчин и 48 женщин) в возрасте от 18 до 68 лет (41,9 ± 1,4 года). Средняя длительность заболевания до начала терапии иматинибом составила 8,7 ± 1,1 мес (0-84). У больных с хронической фазой ХМЛ применяли стандартную дозу иматиниба - 400 мг в сутки. У 77 больных иматиниб применяли впервые, а в остальных случаях больные на предыдущих этапах течения болезни получали терапию миелосаном, гидроксимочевиной, интерфероном-а.

Результаты и обсуждение. Как показали результаты исследований, к концу 3-го месяца монотерапии иматинибом у 91 (96,8%) больного была получена полная клинико-гематологическая ремиссия. У 3 больных ответ на терапию был частичный, у них на фоне клинического улучшения состояния,

болезнь постепенно прогрессировала сначала в фазу акселерации, а затем в фазу бластного криза. Полный цитогенетический ответ (ПЦО) наблюдался у 27 больных через 6 мес после начала лечения. К 12-му месяцу терапии ПЦО достигнут у 67 (71,27%) больных. Общая выживаемость больных с хронической фазой ХМЛ составила 81,9%. Изучение влияния давности ХМЛ, предшествующей терапии иматинибом, основных клинических и лабораторных признаков болезни, показателей пола и возраста показало, что они не оказывают достоверного влияния на общий показатель выживаемости. Результаты исследований показали низкую частоту и степень гематологической и негематологической токсичности препарата. Проявления гематологической токсичности (анемия, нейтропения, тромбоцитопения) наблюдалась у 7% больных. Лишь у 3% больных наблюдалось выраженное повышение уровня ферментов печени. Периорбитальные отеки, мышечные судороги, оссалгии, кожная сыпь встречалась у 22% больных, в большинстве случаев для их устранения специфическое лечение не требовалось.

Заключение. Результаты прведенных исследований подтверждают эффективность иматиниба как препарата 1-й линии в лечении хронической фазы ХМЛ.

Характеристика субпопуляционного состава продукта афереза и секретируемых цитокинов у больных лимфомами

Д.С. Баранова 1, И.В. Крючкова 1, Н.В. Пронкина 1, Л.В. Сахно 1, М.А. Тихонова 1, Е.В. Баторов 1, А.В. Гилевич 1, В.В. Сергеевичева 1,

С.А. Сизикова 1, Г.Ю. Ушакова 1, А.А. Останин 1, Т.И. Поспелова 2, Е.Р. Черных 1 1 ФГБУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, 2 ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет

Минздравсоцразвития России

Введение. Раннее восстановление лимфоцитов, являющееся независимым предиктором выживаемости после трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток (ауто-ТГСК) при ряде лимфопролиферативных заболеваний, в раннем посттрансплантационном периоде в значительной степени происходит за счет гомеостатической пролиферации Т-клеток, инфузируемых в составе продукта афереза.

Материалы и методы. Цель исследования - сравнительная оценка клеточного состава периферической крови (ПК) и продукта афереза у 40 больных лимфомами (12 - неходжкин-скими лимфомами, 14 - лимфомой Ходжкина, 14 - множественной миеломой), характеристика субпопуляций и цито-кинового профиля клеток продукта афереза в зависимости от содержания регуляторных Т-клеток (Т ) и типа используемого в режимах мобилизации Г-КСФ (несвязанной формы и ПЭГ-коньюгированной).

Результаты и обсуждение. Сравнительное исследование клеточного состава ПК и продукта афереза у больных лимфомами позволило заключить, что процедура сепарации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) сопровождается обо-

гащением продукта афереза Т-клетками памяти: 28,9 ± 1,9% против 23,5 ± 2,2% в ПК (рп = 0,009) и 9,2 ± 0,8% против 7,1 ± 1,0% в ПК p = 0,016) CD4+CD45RO+ и CD8+CD45RO+-клеток соответственно. При этом образцы сепарата с повышенным относительно медианы содержанием CD4+CD25high (>1,4%; n = 19) и CD4+CD25+CD127- (>5,2%; n = 20) Трег характеризовались более низкой продукцией провоспалительных цитокинов (IL-1, IL-6, IL-17 и G-CSF). Относительное количество CD4+FOXP3+-клеток обратно коррелировало с относительным содержанием CD16+ NK-клеток (г = -0,53; p = 0,001; n = 37) и активированных (CD14+HLA-DR+) моноцитов (г = -0,47; p = 0,005; n = 33) и положительно - с количеством лейкоцитов (г = 0,42; p = 0,009; n = 38). Сравнение образцов сепара-тов, полученных при использовании для мобилизации ГСК различных препаратов Г-КСФ показало, что при режиме мобилизации с ПЭГ-Г-КСФ (n = 15) регистрировалось более высокое количество CD4+FOXP3+-клеток и более высокая продукция клетками сепарата IL-2, IL-7 и IL-10, цитокинов, необходимых для пролиферации и дифференцировки лимфоцитов. При использовании ПЭГ-Г-КСФ для мобилизации в продукте

30

Приложение

афереза выявляется более низкое количество активированных моноцитов и более низкая продукции провоспалительных цитокинов (IL-6 и IL-8). Анализ сроков реконституции лимфоцитов и ранних исходов трансплантации ГСК в группах больных, получивших мобилизацию ГСК с использованием разных форм Г-КСФ, не выявил статистически значимых различий.

Заключение. Анализ исходов ауто-ГСК у больных лимфо-

мами с различными режимами мобилизации, а также изучение взаимосвязи исходов с особенностями субпопуляционного состава и функциональной активностью трансплантируемых клеток, возможно, позволит выявить новые предикторы исходов и обосновать новые стратегии оптимизации ТГСК, связанные с регуляцией субпопуляционного состава и функциональной активности клеток продукта афереза.

Особенности распространения полиморфизмов гена VKORC1 среди коренного населения европейской части Крайнего Севера Российской Федерации

Н.И. Белова, П.А. Лавринов, Н.А. Воробьева, А.И. Воробьева, Т.Н. Зуева ФБГУ Северный филиал Гематологического научного центра Минздравсоцразвития России; ГБОУ ВПО Северный государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, Архангельск

Введение. Витамин K играет важную роль в механизмах поддержания нормальной активности системы гемостаза, и механизмов развития патологии, приводящей к повышению риска кровотечений и тромбозов. Наследственные дефекты генов ферментов, участвующих в превращении витамина K могут влиять не только на риск тромбозов и кровотечений, но и на формирование плаценты и плацентарного кровообращения, риск осложнений беременности. Исследования в других странах выявили наличие межпопуляционных различий в частотах встречаемости основных полиморфизмов гена VKORC1. Подобных исследований на Крайнем Севере РФ не проводили. Ввиду исторической обособленности популяции ненцев и других народов Крайнего Севера, на них нельзя экстраполировать результаты исследований, проводимых в отношении представителей других популяций.

Цель работы - выявить особенности распространения полиморфизмов гена VKORC1 среди популяции коренных жителей европейской части Крайнего Севера РФ. Задачи -определить частоту встречаемости полиморфизмов C1173T и G3730A гена VKORC1 среди популяции жителей Ненецкого автономного округа (НАО); сравнить полученные данные с распространенностью полиморфизмов C1173T и G3730A гена VKORC1 в популяции жителей Северо-Запада России.

Материалы и методы. Исследование проводили на базе лаборатории ДНК-диагностики ЦНИЛ СГМУ Было исследовано 88 коренных жителей НАО. Объектом исследования являлась геномная ДНК, полученная из лейкоцитов периферической венозной крови. Генотипирование проводилось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью

аллельспецифичных праймеров с детекцией методом электрофореза в агарозном геле.

Результаты и обсуждение. Полиморфный аллель 1173Т гена VKORC1 обнаружен у 76,1% обследованных, а аллель 3730А - у 53,2%. Соответствующие показатели для популяции Северо-Западного региона, по данным литературы, составляют 56,5% и 61,7%. Распространенность полиморфизмов гена VKORC1 среди популяции коренных жителей европейской части Крайнего Севера РФ отличается от таковой среди жителей Северо-Западного региона РФ. Наиболее распространеным (76,1%) является аллель гена VKORC1 1173T. У людей с генотипом Т/Т скорость синтеза, а поэтому и концентрация фермента витамин К-эпоксидредуктазы минимальна. Это обуславливает склонность к гипокоагуляции, но и в свою очередь является протективным к венозной тромбоэмболии (K.Lacut, et al.). Не стоит забывать, что эпоксидредуктаза витамина К играет важную роль в обызвествлении сосудов. M. Teichert et al. выявили взаимосвязь полиморфизма 1173 с обызвествлением артерий (риск обызвествления увеличивается на 19% для носителей хотя бы одного Т-аллеля). У людей с генотипом VKORC1 1173 С/C активность фермента максимальна, и риск к гиперкоагуляции увеличен. Полиморфизм VKORC1 3730 A/A также повышает активность фермента и склонность к гиперкоагуляции.

Заключение. Исследования распространенности полиморфизмов гена VKORC1 в отдельных популяциях населения, а также анализ риска развития тромботических эпизодов в зависимости от региона проживания позволит более эффективно работать в сфере предупреждения тромбозассо-циированных заболеваний и проблем беременности.

Роль генов фолатного цикла и второй фазы системы биотрансформации ксенобиотиков у больных

агрессивными и индолентными лимфомами

О.В. Березина, А.С. Вайнер, Е.Н. Воронина, Т.И. Поспелова, М.Л. Филипенко ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России; НИИ химической биологии

и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск

Введение. Неходжкинские злокачественные лимфомы (НХЗЛ) - это гетерогенная группа злокачественных лимфопролиферативных заболеваний, которые имеют различную скорость опухолевой прогрессии, что может быть связано не только с мутациями, приобретенными подвергшимися озлокачествлению клетками в фазу инициации, промоции и прогрессии лимфомы, но и с исходными генетическими характеристиками клеток, т. е. полиморфизмами генов. Цель работы - изучение связи аллельных вариантов генов ключевых ферментов фолатного цикла C677T и A1298C гена MTHFR, A2756G генаMTR, А66G генаMTRR, G1958A генаMTHFD1, С1420Т гена SHMT1, T833C/844ms68 гена CBS и генов биотрансформации ксенобиотиков GSTT1 и GSTM1 у больных НХЗЛ с риском развития заболевания.

Материал и методы. Обследованы 146 больных НХЗЛ. Контрольную группу для генов фолатного цикла составили 549 доноров, для полиморфных локусов GSTM1 и GSTT1 -177 доноров Новосибирского центра крови. Определение полиморфных вариантов генов MTHFD1 и CBS проводили методом ПЦР-ПДРФ; генов MTHFR, MTRR, MTR и SHMT -

методом ПЦР в режиме реального времени (ПЦР-РВ) с использованием конкурирующих TaqMan-зондов, комплементарных полиморфной последовательности ДНК. Для определения делеции в генах GSTM1 и GSTT1 также использовали метод ПЦР-РВ с использованием интеркалирующего красителя SYBR Green с дальнейшей регистрацией кривых плавления.

Результаты и обсуждение. В обеих группах распределение генотипов для всех исследуемых полиморфных локусов соответствовало распределению Харди-Вайнберга. Не выявлено статистически значимых различий в частотах встречаемости аллелей и генотипов полиморфных локусов генов MTHFR, MTRR, CBS, MTR и GSTT1 между больными НХЗЛ и контролем. Для полиморфного локуса G1258A гена MTHFD1 выявлена ассоциация мутантного 1958A-аллеля (OR = 0,578, C.I. [0,415-0,805]; p < 0,001) и A/A-генотипа (OR = 0,283, C.I. [0,130-0,613]; p < 0,00079) со снижением риска возникновения агрессивных лимфом. В тоже время, сочетание мутантных l420T-аллелей в гомозиготном T/T-генотипе SHMT1 обуславливает повышение риска развития данной

31