КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ НЕПАТОГЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ, ОБЛАДАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬЮ НОРМАЛИЗОВАТЬ МИКРОФЛОРУ КИШЕЧНИКА (ВАРИАНТЫ)
ORAL COMPOSITION CONTAINING NONPATHOGENIC MICROORGANISMS SHOWING ABILITY TO NORMALISE INTESTINAL MICROFLORA (VERSIONS)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и к медицине и может быть использовано в производстве и использовании медицинских иммунобиологических препаратов, содержащих непатогенные микроорганизмы.
Возможность использования сухих композиций, содержащих непатогенные микроорганизмы, в качестве наполнителя емкостей для лекарственных средств, например: твердых капсул, флаконов и саше, зависит от структурно-механических свойств данных сухих композиций, обеспечивающих их продвижение без закупорки по продуктопроводам и изотропное заполнение заданного объема емкостей.
1
2
Известен продукт, включающий кальций, фосфор, витамины B, В, витамины Е, С, кислоту фолиевую, калий, магний, железо, цинк, изолейцин, лейцин, валин, метионин, цистеин, фенилаланин, тирозин, треонин, триптофан, лизин, гистидин, аргинин, связанные в молочной сыворотке, кислоту лимонную, лиофильно высушенные виды Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Bifidobacterium bifidum в энтеросолюбильных твердых желатиновых капсулах (DE патент 4033996 A1, C12N 1/20, C12P 7/56, C12N 13/00, B02C 19/18, 1992).
Известна композиция на основе бактериофага, обеспечивающая стабилизацию бактериофага, в которой бактериофаг стабилизирован адсорбцией на матрице, причем матрица выбрана из группы, состоящей из: порошка снятого молока, порошка белка сои, порошка белка молочной сыворотки, порошка альбумина, казеина, желатина, протеина клона клеток, трегалозы, маннитола, порошкового сахара, сахарного спирта, активированного угля, гранул латекса, материала, содержащего углеводы, талька, хитина и рыбного хряща. В композиции стабилизированный бактериофаг инкапсулирован с использованием материала, выбранного из группы: растительные жирные кислоты, кислота жирного ряда, стеариновая кислота, пальмитиновая кислота, животный воск, пчелиный воск, растительный воск, карнаубский воск, канделильский воск, производное воска, полимер, основанный на материале из целлюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы фталат, фталат ацетилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы ацетатный сукцинат, материал, основанный на углеводе, шеллак, метакрилаты, метакриловая кислота и сахар. Согласно известному изобретению композиция на основе бактериофага может быть изготовлена в виде капсулы (РСТ патент WO 2006/047872 Al, A61K 9/48, A61J 3/07, 2006).
Однако в известных решениях не указаны структурно-механические свойства вышеуказанных композиций, обеспечивающие возможность их использования в качестве наполнителя емкостей для лекарственных средств.
3
9
Известна биологически активная добавка, содержащая протектор в количестве 0,5-90,0 мас.%, выбранный из ряда аскорбиновая кислота и/или лактоза, и/или глюкоза, и/или сахароза, и/или желатин, и/или полиглюкин, и/или альбумин, и/или иммуноглобулины, а также биомассу непатогенных микроорганизмов в количестве 10-10 КОЕ и целевые добавки в количестве 0,5-90,0 мас. %. Биологически активная добавка может содержать сухие ингредиенты в измельченном состоянии с размером частиц не более 250 мкм. Биологически активная добавка в качестве целевых добавок может содержать компоненты для капсулирования и быть представлена в виде капсулы. Капсула может быть покрыта оболочкой, устойчивой к действию секретов желудка и двенадцатиперстной кишки (RU патент 2164765 С1, A23L 1/30, A23D 9/00, A23L 1/24, A61K 9/00, 2001).
Вышеуказанная биологически активная добавка обладает только одним из структурных свойств, способствующих в сочетании ее продвижению без закупорки по продуктопроводам и изотропному заполнению заданного объема емкостей для лекарственных средств, а именно необходимым размером частиц, что не полностью предотвращает неизотропное заполнение заданного объема емкостей для лекарственных средств.
Задачей заявляемого изобретения является получение композиции для перорального применения, содержащей непатогенные микроорганизмы, обладающей способностью нормализовать микрофлору кишечника, обеспечивающей при ее использовании изотропное заполнение заданного объема емкостей для лекарственных средств.
6
10
6
10
-4
-4
3
24
1
Задача решена тем, что композиция для перорального применения, обладающая способностью нормализовать микрофлору кишечника, представляет собой порошок, включающий субстанции, содержащие непатогенные микроорганизмы, высушенные в среде культивирования, выбранные из ряда: бактерии рода Bifidobacterium и/или бактерии рода Lactobacillus, и/или видоспецифические вирулентные бактериофаги, и/или видоспецифические бактериофаги с индуцированной вирулентностью или их комбинации, при этом композиция содержит целевые добавки, способные образовывать стабильную пеноструктуру, выбранные из ряда: полиэтиленгликоль, альбумин, желатин, пектин, казеин, казеинат, гидролизат казеина, гидроксипропилцеллюлоза, полиглюкин, декстрин, трагакант, аэросил, манит, лактоза или их смеси, характеризуется пористой структурой и хрупкостью, имеет при дезинтеграции относительную усадку не менее 10%, эквивалентный диаметр пор 10-110 мкм при размере частиц не более 100 мкм и угол покоя менее 50°, при следующем соотношении компонентов на 1,0 г композиции: бактерии рода Bifidobacterium 10-10 КОЕ и/или бактерии рода Lactobacillus 10-10 КОЕ, и/или видоспецифические вирулентные бактериофаги с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий, и/или видоспецифические бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий, целевые добавки - остальное. Композиция может быть выполнена в форме твердой капсулы, и оболочка твердой капсулы может быть выполнена на основе, выбранной из ряда: желатин, сополимеры полиакриловой кислоты, крахмал, производные крахмала, полимеры поливинилового спирта, сополимеры поливинилового спирта, целлюлоза и производные целлюлозы. Оболочка твердой капсулы может быть покрыта слоем кишечнорастворимого вещества, выбранного из ряда: шеллак, олеиновая кислота, гидроксипропилцеллюлоза, ацетатфталатцеллюлоза, воск пчелиный, твин-20, твин-80, касторовое масло, полиэтиленоксид или их смеси. Композиция содержит смесь целевых добавок, способных образовывать стабильную пеноструктуру, предпочтительно в равных соотношениях. Композиция может содержать в качестве бактерий рода Bifidobacterium бактерии, выбранные из ряда: Bifidobacterium bifidum 1, Bifidobacterium bifidum 1C, Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium longum B379M, Bifidobacterium breve 79-88, Bifidobacterium infantis 79-43, Bifidobacterium longum Я-3, Bifidobacterium adolescentis ГО-13, Bifidobacterium breve 79-119, Bifidobacterium infantis 73-15, Bifidobacterium bifidum ЛВА-3, Bifidobacterium adolescentis Г7513, Bifidobacterium longum 2C или их смеси. Композиция может содержать в качестве бактерий рода Lactobacillus бактерии, выбранные из ряда: Lactobacillus acidophilus 100 аш, Lactobacillus acidophilus 100 аш ПА, Lactobacillus acidophilus КШ, Lactobacillus acidophilus NK или их смеси. Композиция может содержать в качестве бактериофагов бактериофаги, выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг, клебсиеллезный бактериофаг или их смеси. Композиция может дополнительно содержать добавки, не входящие в состав порошка (включающего субстанции, содержащие непатогенные микроорганизмы), выбранные из ряда: меди сульфат, меди глюконат, цинка сульфат, натрия селенит, глицин, цистеин, пектин, декстрин, альбумин, желатин, кальция стеарат, титана двуокись, токоферола ацетат, тиамин, рибофлавин, пиридоксин, цианокобаламин, ниацинамид, кислота аскорбиновая, лактулоза, хинозол, хитозан, инулин, поливинилпирролидон, целлюлоза микрокристаллическая, крахмал, тальк, целлюлоза, метилцеллюлоза, ацетатфталатцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза, натрий кроскармеллоза, натрия гликолят крахмала, карбоксиметилцеллюлоза, кросповидон, поперечно-сшитый карбоксиметил-крахмал или их смеси.
В результате впервые проведенных нами исследований установлено, что продвижение порошка без закупорки по продуктопроводам и изотропное заполнение заданного объема емкостей для лекарственных средств обеспечивается сочетанием необходимого размера частиц, наличием эквивалентного диаметра пор в композиции, ее хрупкостью, достаточной для дезинтеграции композиции при легком встряхивании (небольшой механической нагрузке), способностью давать усадку при дезинтеграции, определяющим дополнительное разрушение структуры порошка при любой небольшой механической нагрузке, а также определенным углом покоя порошка. Данные структурно-механические свойства композиция приобретает при использовании подобранных параметров вакуумной пеносушки в сочетании с вариантами состава целевых добавок композиции, способных образовывать стабильную пеноструктуру.
Заявляемая композиция для перорального применения, содержащая непатогенные микроорганизмы и целевые добавки, обладающая способностью нормализовать микрофлору кишечника, является новой и в литературе не описана.
Техническим результатом заявляемого изобретения является обеспечение при использовании композиции изотропного заполнения 100% заданного объема емкостей для лекарственных средств, что превышает не менее чем на 5% результаты использования композиции аналогичного назначения, не обладающей сочетанием структурно-механических свойств заявляемой композиции. Максимальное достижение изотропного заполнения заданного объема емкостей для лекарственных средств обеспечивает точность дозировки непатогенных микроорганизмов.
Субстанции, содержащие непатогенные микроорганизмы, в сочетании с целевыми добавками, способными образовывать стабильную пеноструктуру, получаются при применении вакуумного сушильного оборудования (например, модернизированный вакуумный сушильный шкаф ШСВ-65В/5,0, ЗАО «МИУС», РФ, http://www.zaomius.ru/thermal/products/detail.php?ID=1588&print=Y), в котором образуется стабильная пеноструктура, обладающая необходимым сочетанием структурно-механических свойств, за счет самоиспарения и дегазации равномерно нанесенных по толщине слоя на рабочую поверхность сушильного оборудования высушиваемых субстанций в вакууме при инфракрасном энергоподводе и при подобранных температурных режимах, максимально исключающих инактивацию непатогенных микроорганизмов.
Композицию для перорального применения, представляющую собой порошок, содержащий вышеуказанные субстанции, получают путем смешивания перед процессом высушивания высушиваемых субстанций, содержащих непатогенные микроорганизмы и целевые добавки, и/или смешиванием высушенных субстанций, содержащих непатогенные микроорганизмы, в сочетании с целевыми добавками.
Наполнение порошком, включающим субстанции, содержащие непатогенные микроорганизмы в сочетании с целевыми добавками, емкостей для лекарственных средств происходит согласно инструкциям по эксплуатации, прилагаемым к машинам для наполнения емкостей для лекарственных средств (например: автомат для наполнения твердых желатиновых капсул IN-CAP, DOTT. BONAPACE & С. s.r.l., Италия, http://www.ift.ru/clients/products/index.php?c=108&m=8; капсулонаполнительная машина DGM-800, DGM PHARMA APPARATE, Швейцария, http://www.dgmrussia.ru/catalog.php?item=27).
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих обеспечение при использовании композиции изотропного заполнения заданного объема емкостей для лекарственных средств. При этом приведенные в примерах комбинации ингредиентов заявляемой композиции показывают конкретную реализацию заявляемого изобретения, но не ограничивают объем притязаний формулы заявляемого изобретения.
10
10
Пример 1. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Bifidobacterium longum 2C в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Lactobacillus acidophilus 100 аш ПА в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: пектин, аэросил и манит в равных соотношениях, в количестве - до 1,0 г композиции. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 40%, эквивалентный диаметр пор 30-80 мкм при размере частиц 60-90 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 37-45°.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема саше в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 95% заданного объема саше.
8
-4
Пример 2. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Bifidobacterium bifidum 791 в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стафилококковый бактериофаг с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: полиглюкин, пектин и лактозу, в равных соотношениях, в количестве - до 1,0 г композиции. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 10%, эквивалентный диаметр пор 10-30 мкм при размере частиц 50-100 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 45-50° и была выполнена в форме твердой капсулы. Оболочка твердой капсулы была выполнена на основе желатина и была покрыта слоем кишечнорастворимого покрытия, содержащего шеллак.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема твердых капсул в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 93% заданного объема твердых капсул.
10
-4
-4
Пример 3. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Lactobacillus acidophilus 100 аш ПА в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стафилококковый вирулентный бактериофаг с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стафилококковый бактериофаг с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: полиглюкин, аэросил и лактозу, в равном соотношении, в количестве - до 1,0 г композиции. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 30%, эквивалентный диаметр пор 30-60 мкм при размере частиц 50-100 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 40-45° и была выполнена в форме твердой капсулы. Оболочка твердой капсулы была выполнена на основе производных крахмала и была покрыта слоем кишечнорастворимого покрытия, содержащего шеллак и олеиновую кислоту.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема твердых капсул в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 95% заданного объема твердых капсул.
8
8
8
-4
-4
Пример 4. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Bifidobacterium bifidum 1 в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Bifidobacterium bifidum 791 в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Lactobacillus acidophilus 100 аш ПА в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стрептококковый вирулентный бактериофаг с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стрептококковый бактериофаг с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: полиглюкин, аэросил и лактозу, в равном соотношении. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 50%, эквивалентный диаметр пор 60-110 мкм при размере частиц 80-100 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 35-40°. Композиция дополнительно содержала добавки, не входящие в состав порошка субстанции, а именно: кальция стеарат, титана двуокись, поливинилпирролидон и целлюлозу микрокристаллическую, крахмал. Количество добавок составляло до 1,0 г композиции. Композиция была выполнена в форме твердой капсулы. Оболочка твердой капсулы была выполнена на основе сополимеров полиакриловой кислоты и была покрыта слоем кишечнорастворимого покрытия, содержащего ацетатфталатцеллюлозу, воск пчелиный и твин-80.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема твердых капсул в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 95% заданного объема твердых капсул.
10
Пример 5. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Bifidobacterium bifidum 1 в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: пектин, аэросил и манит в равных соотношениях, в количестве - до 1,0 г композиции. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 40%, эквивалентный диаметр пор 30-80 мкм при размере частиц 60-90 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 37-45°.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема саше в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 95% заданного объема саше.
8
Пример 6. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенные в среде культивирования Lactobacillus acidophilus 100 аш в количестве 10 KOE на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: полиглюкин, пектин и лактозу, в равных соотношениях, в количестве - до 1,0 г композиции. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 10%, эквивалентный диаметр пор 10-30 мкм при размере частиц 50-100 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 45-50° и была выполнена в форме твердой капсулы. Оболочка твердой капсулы была выполнена на основе желатина и была покрыта слоем кишечнорастворимого покрытия, содержащего шеллак.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема твердых капсул в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 93% заданного объема твердых капсул.
-4
Пример 7. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стафилококковый вирулентный бактериофаг с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: полиглюкин, аэросил и лактозу, в равном соотношении, в количестве - до 1,0 г композиции. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 30%, эквивалентный диаметр пор 30-60 мкм при размере частиц 50-100 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 40-45° и была выполнена в форме твердой капсулы. Оболочка твердой капсулы была выполнена на основе производных крахмала и была покрыта слоем кишечнорастворимого покрытия, содержащего шеллак и олеиновую кислоту.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема твердых капсул в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 95% заданного объема твердых капсул.
-4
Пример 8. Получена композиция для перорального применения, представляющая собой порошок, включающий субстанцию, содержащую высушенный в среде культивирования стрептококковый бактериофаг с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий на 1,0 г композиции, при этом композиция содержала целевые добавки: полиглюкин, аэросил и лактозу, в равном соотношении. Композиция характеризовалась пористой структурой и хрупкостью, имела при дезинтеграции относительную усадку 50%, эквивалентный диаметр пор 60-110 мкм при размере частиц 80-100 мкм и угол покоя при трех повторностях измерений 35-40°. Композиция дополнительно содержала добавки, не входящие в состав порошка субстанции, а именно: кальция стеарат, титана двуокись, поливинилпирролидон и целлюлозу микрокристаллическую, крахмал. Количество добавок составляло до 1,0 г композиции. Композиция была выполнена в форме твердой капсулы. Оболочка твердой капсулы была выполнена на основе сополимеров полиакриловой кислоты и была покрыта слоем кишечнорастворимого покрытия, содержащего ацетатфталатцеллюлозу, воск пчелиный и твин-80.
Данная композиция отличалась изотропным заполнением 100% заданного объема твердых капсул в отличие от композиции аналогичного назначения, не обладающей вышеуказанным сочетанием структурно-механических свойств наполнителя, с изотропным заполнением только 95% заданного объема твердых капсул.
Пример 9. Композицию по примеру 4 применяли при лечении 10 особей макак резус с диарейным синдромом неустановленной этиологии, сопровождающимся дисбактериозом кишечника, выражающимся в резком снижении количества бифидобактерий и увеличении количества условно-патогенных бактерий (рода Proteus, рода Clebsiella, рода Enterobacter). Композицию вводили перорально один раз в сутки. Диарейный синдром у всех животных разрешился в течение 7 суток и нормализовалась микрофлора кишечника: повысился уровень бифидобактерий и элиминировались или уменьшились в количестве условно-патогенные бактерии, что подтверждало способность композиции нормализовать микрофлору кишечника.