Изменения параметров кислородного гомеостаза крови после сочетанного электроимпульсного чрескожного воздействия с электрофоретическим введением активных форм кислорода в эксперименте

ИЗМЕНЕНИЯ ПАРАМЕТРОВ КИСЛОРОДНОГО ГОМЕОСТАЗА КРОВИ ПОСЛЕ СОЧЕТАННОГО ЭЛЕКТРОИМПУЛЬСНОГО ЧРЕСКОЖНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ С ЭЛЕ КТРОФОРЕ ТИЧЕ СКИ\I ВВЕДЕНИЕМ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

С.П. Перетяган. А.Г. Соловьёва. С.А. Соколов, С. А. Жильцов. О.А. Гречканёва. П.В. Перетяган. Н.В. Диденко

Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр, Нижний Новгород,. Россия

Ассоциация российских озонотерапевтов, Нижний Новгород, Россия

Abstract

The article presents the results of experimental studies on the combined effect of low-frequency electric pulse impacts and cream containing the active forms of oxygen on the organism of experimental animals. Under our supervision there were 50 rats in General anesthesia the procedure is performed electric pulse impact on the skin of the back with the simultaneous electrophoretic transcutaneous introduction reactive oxygen species (ozonides) of the interelectrode space of a low frequency electric pulse massager. The comparison group consisted of animals that carried out the electrical stimulation based on the standard procedure EMS. Shows the advantages of combined pharmacological and physiotherapeutic impact of ozonides on the oxygen homeostasis of the body.

Key Avoids: low frequency electric pulse stimulation ozonide. aerobic metabolism

В статье представлены результаты экспериментальных исследований по сочетанному влиянию ни зкочастотных электроимпульсных воздействий и крема, содержащего активные формы кислорода на организм подопытных животных. Под нашим наблюдением находились 50 крыс, которым в условиях общей анестезии выполнялась процедура электроимпульсного воздействия на кожные покровы спины с одновременным электрофоретическнм транс кутанным введением активных форм кислорода (озонидов) из межэлектродного пространства низкочастотного электроимпульсного массажёра. Группу сравнения составили животные, которым выполнялась обычная электростимуляция по стандартной процедуре ЭМС/1 hNS-терапни. Показаны преимущества сочетанного физиотерапевтического и фармакологического воздействия озонидов на кислородный гомеостаз организма.

Ключевые слова: низкочастотная электроимпульсная стимуляция.озониды. аэробный метаболизм

Современные тенденции развития восстановительной медицины основаны

на персоналнзацин программ применения нелекарственных технологий в процессе медицинской реабилитации и профилактики обострений хронических заболеваний (Бобровницкий И.П. с соавт.. 2011, 2012). Импульсная электротерапия в виде чрескожной эаектронейростимуляции давно применяется при различных видах острых и хронических болевых синдромов, позволяя снижать потребность, а иногда и полностью отказаться от приёма анальгетиков (Василенко A.M.. 2006; Даминов Р.Г.. Даминов М.Р., 2009; Nizard et al., 2012; Wright, 2012). Под электронейростимуляцией понимают применение электрического тока с целью возбуждения или усиления деятельности двигательных нервов и мышц. Для этого используют постоянные импульсные токи с различной формой импульсов. Электрический ток, изменяя концентрацию тканевых ионов у клеточной оболочки и её проницаемость, действует по принципу естественных биотоков. Импульсные электрические токи, вызывая двигательное возбуждение и сокращение мышц, одновременно рефлекторно усиливают кровоснабжение и весь комплекс обменно-трофнческих процессов, направленных на энергетическое обеспечение работающих мышц. Одновременно повышается активность регулирующих систем, в том числе клеток коры большого мозга. Наряду с улучшением кровообращения стимулируемых мышц, активируются пластические процессы, синтез нуклеиновых кислот, в том числе РНК (Боголюбов В.М.. Ясногородский В.Г., 2007).

В клинической физиотерапевтической практике известны также лечебные возможности лекарственного электрофореза, являющего собой сочетанное воздействие на организм постоянного электрического тока и вводимого с его помощью лекарственного вещества. При использовании данного метода к перечисленным выше механизмам биологического действия электрического тока добавляются лечебные эффекты вводимого им лекарства. Они определяются форетической подвижностью вещества, способом его введения, его количеством, поступающим в организм, а также областью его введения (Боголюбов В.М.. Пономаренко Г.Н. 1998).

Одним из ведущих патогенетических факторов в возникновении болевой симптоматики. требующим быстрого применения лекарственной и немедикаментозной терапии для её купирования, является снижение уровня кислородного дыхания тканей. Нарушение окислительных процессов в тканях или прекращение доступа крови (основного переносчика кислорода к тканям) приводит к возникновению боли (Судаков К В. и др.. 2009).

В этой связи может оказаться перспективным использование в клинической физиотерапевтической практике при технологиях электронейромиостнмуляции (ЭМС) и на основании электрофоретическнх возможностей низкочастотного постоянного импульсного тока средств, содержащих активные формы кислорода. К таким средствам относится медицинский озон, мази и крема, содержащие озониды (Bitkma O.A. at al. 2015: Гречканёва О.А..Бнткина O.A.. Богомолова Е.Б. н др.. 2017).

Целью работы явитось обоснование сочетанного применения низкочастного электроимпульного воздействия и одновременного электрофоретического транс кутанного введения крема с активными формами кислорода (АФК) -

озонидами во время выполнения процедур ЭМС/ IhJN'S-терапии в эксперименте на животных.

Материал и методы исследования

Работа проведена в отделении экспериментальной медицины с виварием ФГБУ «Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр» Минздрава России н на кафедре неорганической химии НнжГМА.

Исследования выполнялись согласно «Принципам надлежащей лабораторной практики» (ГОСТ 33044-2014).

Эксперимент выполнен на 50 белых крысах линии Вистар весом 250 г. Животных разделили на 5 групп: 1 группа - ннтактные здоровые крысы (п=10); 2 группа - контрольная (п =10) - животные, которым проводили стандартную процедуру TENS-терапии: 3, 4, 5 группы - опытные (по п=10 в каждой) - крысы, которые получали TENS-терапию с одновременным использованием во время ее осуществления крем-гелей, содержащих 3%, 10% или 30% АФК соответственно.

Процедуру TENS -терапии с применением крем-гелей осуществляли следующим образом: после премеднкацни и внутримышечного наркоза (Ксила + Золетил) животных фиксировали на операционном столе, участок кожи спины депилировали и наносили на него равные количества крема с помощью шприца, затем крем равномерно распределяли, после чего на него фиксировали электроды низкочастотного элекгронмпульсного массажёра модели МН 8002 Комбо. Процедура выполнялась в течение 30 минут. Параметры, задаваемые на аппарате: S, частота 50-75 Гц: N, частота 50-75 Гц; М, частота 15-25 Гц; В. частота 2-4 Гц: SD. частота 15-25 Гц: MR. частота 15-25 Гц.

Во избежание эффекта «привыкания» адаптации рецепторных полей нервно-мышечного контура через каждые 5 минут последовательно переходили на новый режим работы аппарата. Животных выводили ив эксперимента под общей анестезией декапнтацией через 1 час после окончания процедуры с забором крови на биохимические исследования.

В плазме крови и эритроцитах изучали активность процессов свободно-радикального окисления (СРО) с помощью метода индуцированной бнохемилюминесценции (Кузьмина и др.. 1983) на БХЛ-06 (Н. Новгород). Оценивали следующие параметры хемилюминограммы: tg2a - показатель, характеризующий скорость спада процессов СРО в плазме и свидетельствующий об общей антноксидантной активности (АОА). S - светосумма хемилюминесценцни за 30 сек. - отражает способность биообъекта к СРО. Содержание малонового диальдегида (МДА) определяли в плазме и эритроцитах по Ucliiyama M. и Michara M. (1978). Концентрацию глюкозы и лактата измеряли на приборе Super GL ambulance (Германия) в плазме крови. В гемолиза те отмытых эритроцитов определяли активность супероксиддисмутазы (СОД) (Сирота Т.В.. 1999). лактатдегидрогеназы в прямой (ЛДГпр) и обратной реакции (ЛДГобр) (Кочетов Г.А., 1989). Газы крови и кислотно-щелочное состояние определяли с помощью анализатора ABL-77 series/

Результаты обрабатывали с помощью Statistic а 6.0. Различия между группами определяли с помощью t-критерия Стьюдента. Достоверными считались различия при р<0,05.

Результаты исследования

Результаты исследования биохимических показателей кислородного гомеостаза после процедур сочетанного применения электроимпульсного воздействия и «электрофоретического» введения средства, содержащего активные формы кислорода свидетельствовали о значимом стимулирующем влиянии на кислородный гомеостаз такого совместного воздействия (табл. 1).

Таблица 1 Изменения метаболических параметров крови крыс при процедуре _ОЗОТЕК£ -терапии_

Показатель Интактные крысы п=10 ЭМС/ТЕГО (контроль) п=10 Крем сЗ%Оз +-ЭМС 0=10 Крем сЮ%Оз+ ЭМС п=10 Крем сЗО%Оз-ь ЭМС 11=10

ПОЛ 11,96=0.9 11,94=1.1 12,36±1,12 12.69=4=1,15 12,99=1.2

АОА 0.704=0.06 0.740=0.067 0.741=0.07 0,744±0.07 0,78=0.07

ПРЭ 12,1941,1 9.8±0.89* 8.7±0,79* 7,2±0,65* 8.06=0.73*

Глюкоза 11,940,9 6,3=±Ю,57* 9.8±0.89* 6.75=4=0,61* 4.03=0.36*

Лактат 1,64=0.14 1,97=4=0,17* 2,1=4=0.19* 2,5=0.92* 1.49=0.13

СОД 1749.74=159 1122=4=102* 1229=112* 976=88* 1314=4=119*

ЛДГпр 31,15=2,83 66.4=4*5,0* 49.7±4,5* 81,7±7,4* 53,5=4,9*

ЛДГобр 178,39=16.2 138±12,5* 181=165 15Ы3.8* 131=4=11.9*

МДАпл 0.857±0.07 0.75±0,07 0.б2±0,05* 0,64±0.0б* 0.53=0.05 !!!

МДАэр-ты 10.746=0.97 8,21=40,75* 10,5±0,9 9.8=0.8 3.97=0.36*

рН 7,181=0.65 7,136=0.65 7,105^0.64 7,11±0,6 7,172=0.6

р02 46.7=ь4,2 43,5±3,9 57,25±5,2* 64.5±5,9* 62,5=5,7*

ВЕ -8,07=0.7 -11,5&ь1,05 -12,7=4=1.1 -10,57±0Т9 -14.7±1,8*

N3+ 182,19±16,5 200±18,2 194.5±17,6 192,7±17,5 200±18,2

К+ 2,89±0,2б 2,68±0,24 2,85±0,25 2,86±0.3 1.86=0.17*

рС02 56,51±5,1 52,83=4.8* 55,78=4=5,1 62.78±5.7 35.9=3.26*

Примечание: * достоверность различии по отношению к интактным животным

Через 60 минут после окончания процедуры сочетанного воздействия электрического поля и озонидов в крови подопытных животных отмечено

дозозависимое возрастание содержания кислорода. Напряжение кислорода в смешанной крови было увеличенным до 123%,138%, 133 % (Р<0.05) в опытных сериях. В контроле отмечено снижение этого показателя (рис. 1).

Ингактыс крысы

ЭМС контроль}

3%Оз»ЭМС

10%03«ЭМС

Ю%0з+ЭМС

Рис. 1. Изменения напряжения кислорода в крови животных в результате сочетанного применения электроимпульсной стимуляции и влияния активных

форм кислорода

Одновременно с этим оказался значительно сниженным уровень содержания углекислоты в крови, особенно в 5 группе крыс с использованием крема с 30% содержанием озонидов. где рСО: уменьшилось на 63% от исходного до процедуры уровня (Р<0,05). Такая динамика показателей содержания газов крови повторяла эффект влияния озона и озонидов при системной озонотерапии (большая аутогемотерапия с озоном, ннфузин озонированного физиологического раствора) на дыхательную функцию крови (Перетяган С.П.? 1991: Иокиагаку О., 1982). Наравне с этим в компенсаторных механизмах корригирующего влияния на дыхательную функцию крови играли также стимулирующие элекгроимпульсные воздействия на дыхательную мускулатуру грудной клетки, обуславливающие более эффективное её участие в акте дыхания. Усиление активности дыхательного акта сопровождалось заметным снижением уровня рСО: в кровн животных с относительной гнпернатриемией и гипокалиемией при использовании крема с 30% содержанием активного кислорода во время процедуры электромностимуляции.

Изменения кислородного бюджета на фоне электромиостнмулирующих-воздействии. и форетического введения АФК. отмеченные у животных, сопровождались сдвигами про-и антиоксидантных свойств кровн. хотя и не так же значимо выраженными (табл. 1). Обращала на себя внимание тенденция к однонаправленному возрастанию параметров про-н антиоксидантного потенциала крови (рис. 2). При этом было отмечено однозначное снижение энзиматической активности СОД.

Любые физические воздействия, в том числе, электромио-стимуляция приводят к образованию АФК. Наибольший выход имеют гидроксил-радикал и гидратиров анный электрон, которые, обладая высокой реакционной

р02

способностью. взаимодействуют с молекулярным кислородом и макромолекулами, образуя долгоживущие СЬ ~ и Н2О2. Последние способны к миграции через мембраны н инициируют процессы перекнсного окисления. Избыток супероксидного анион-радикала, по-видимому, способствовал в данной ситуации субстратному ингибнрованню СОД.

ПОЛ АОА СОД МДАпл.

Рис. 2. Изменения про- и антноксидантного потенциала после процедуры OЗOTEN$ терапии в эксперименте

С другой стороны, снижение активности СОД было обусловлено затратностью энергетически значимых электростимулирующих влияний на каталитические свойства фермента, что привело к уменьшению концентрации МДА в плазме и эритроцитах крови (табл. 1).

Наиболее значимыми и показательными оказались сдвиги блока метаболических параметров, связанные с энергетической составляющей кислородного гомеостаза. Так было отмечено, что активность ЛДГпр достоверно возросла во всех исследуемых группах животных Причём активирующее влияние оказывала как стандартная процедура ЭМС-стимуляции. так и сочетание её с модулирующим влиянием активных форм кислорода. Увеличение активности фермента, ответственного за биотрансформацию глюкозы, её преобразование в молочную кислоту на пути получения энергии из углеводов в цикле Кребса. сопровождается увеличением потребления сахара в крови. Данная ситуация подтверждалась достоверно сниженным уровнем глюкозы у животных всех испытуемых групп. Максимально низкий уровень глюкозы отмечен в серии с сочетанным применением низкочастотного импульсного воздействия и крема с самым высоким содержанием активных форм кислорода — 30% { Р<0.05 ) (табл. 1. рис. 3).

300% -250% -200% 150%

100% Ш '

а

50% -

0% —1

П 1

П I

1Интактные крысы |ЭМС (контроль) |3%Оз+ЭМС 10%03+ЭМС 130%03+ЭМС

Глюкоза

Лакгат

ЛДГпр

Рис. 3. Показатели энергетического метаболизма крыс после процедуры

ОЗОТЕКЗ -терапии

Интенсификация мышечной работы н кислородного метаболизма за счёт сочетанного влияния ЭМС/ТЕМ$-воздействий и каталитического действия активного кислорода из крема, содержащего озониды. положительно модулируя процесс получения энергии, тем не менее быстро его лимитировала. Об этом свидетельствовали показатели уровня лактата в контрольной серии опытов и в сериях с использованием кремов с 3% и 10% содержанием активного кислорода (Р<0,05). Возрастание содержания молочной кислоты в крови при интенсивной мышечной работе, как правило, приводит к снижению процессов энергообразования, затрудняет этап преобразования молочной кислоты в пировиноградную н её дальнейшую трансформацию через Ацетил-Коэнзим А в цикле трикарбоновых кислот. И только использование крема со значительно более высоким содержанием активных форм кислорода (30%) при его сочетанном применении с возбуждающим влиянием электрического поля на биологические ткани (ЭМС/ТЕК$-стимуляцией) включало эту непрерывную цепь преобразования энергетических субстратов и способствовало положительному проявлению модулирующего сочетанного влияния на все этапы процесса получения энергии: глюкоза - молочная кислота - пировиноградная кислота - Ацетил-коэнзимА - ЦТК.

Обсуждение результатов Результаты исследований сочетанного применения низкочастотных электроимпульсных воздействий и кремов, содержащих активные формы кислорода на экспериментальных животных показали потенцирование основных механизмов лечебного действия и возможность их более эффективного использования для достижения положительных биологических ответных реакций как местного, так и системного значения. При сочетанном применении этих двух

факторов физического (электроимпульсное воздействие) и биологического (биосубстраты крем-геля, содержащего активные формы кислорода в виде озонидов) механизм их саногенетнческого действия базируется на двух составляющих:

1. активизации функционирования нервно-мышечного компонента тканей путём передачи на него возбуждения за счёт имитируемых аппаратом аутогенных импульсов, повышающих тканевую проницаемость, усиливающих многенную активность и. как следствие этого, кровообращение в зоне воздействия (Ясногородский В.Г.. 2007);

2. применение импульсной методики обработки ткани позволяет модулировать в биологическом объекте две функции поля - электропорационную и электрофоретическую. При электропорацин в бислойной липидной мембране возникает локальная перестройка структуры, приводящая к появлению сквозного водного канала, что дает возможность осуществлять трансдермальный перенос лекарственных веществ ннтракорпорально

Проникающие в результате такого механизма в организм озониды крема могут оказывать как местные, так н системные ответные реакции со стороны организма.

При проведении экспериментальных исследований на животных с оценкой местных и системных ответных реакций организма на выполнение процедур ТЕШ-терапии с использованием кремов, содержащих активные формы кислорода, установлено, что первичными функционально-биохимическими реакциями быта усиление газообмена с возрастанием напряжения кислорода (р02) в смешанной крови и снижением в ней количества углекислого газа. Механизмами этих процессов явились электромностимуляция функции аппарата внешнего дыхания и улучшение дыхательной функции крови за счёт ускоренной транскутанной контаминации крема с озонндамн вглубь тканей, поступления активных форм кислорода в системный кровоток, стимуляции ими внутрнэритроцитарных путей накопления 2,3-дифосфоглицерат в эритроцитах и. как следствие этого. - большей способности оксигемоглобинообразования в малом круге кровообращения.

Проявлением системного действия озонидов на фоне сочетанного применения в методике процедуры электромагнитного импульсного поля и активных форм кислорода, содержащихся в креме, было усиление активности про- и антноксидантных систем, проявившееся в виде тенденции у животных с применением процедур ТЕК$-терапин и при сочетании их с транскутанным электрофоретическнм введением озонидов крема. Более убедительные достоверные изменения ПОЛ и АОА по данным бнохемилюминисценцнн были получены в серии с использованием крема с высоким содержанием активного кислорода (30 %). Подтверждением антиоксидантной направленности в проявлениях системного метаболического влияния на организм выполнявшихся сочетанных процедур стало однонаправленное дозозависимое снижение уровня одного из основных продуктов ПОЛ — МДА тазмы. который составил 88% (р <0,05), 71% (р < 0,05), 75%(р < 0,05) и 62% (р < 0,05) в соответствующих

сериях экспериментов: с ТЕ£>1$-электронмпульсным воздействием, и сочетанием его с кремами, содержащими 3%, 10% и 30% активных форм кислорода. Ранее нами была отмечена эта закономерность при проведении озонотерапин. как одной из ведущих стартовых проявлений системного влияния озона на организм (Конторщикова КН.. Перетяган С .П., 2006).

Одной из центральных и наиболее важных точек реализации сочетанного воздействия при проведении данных процедур явилось их синергическое влияние на энергетику гликолитического этапа кислород зависимого метаболизма углеводных субстратов в процессах энергообразования. Само по себе низкочастотное электроимпульсное воздействие сопровождалось увеличением активности ЛДГпр по сравнению с исходным уровнем. Это каталитически влияло на содержание глюкозы, которая уменьшилась на 53% от исходного (р < 0,05) и способствовало биотрасформации ее в молочную кислоту-. В дальнейшем судьба лактата заключалась в его метаболизированин, биотрансформации в пировиноградную кислоту. которая превращается в ацетил-КоА. претерпевающего своё метаболизирование в цикле трнкарбоновых кислот и электронно-транспортных цепях, становясь источником энергообразования. Это основной и наиболее быстрый путь получения энергии в цикле Кребса. Но для адекватного функционирования этой цепи получения энергии из углеводов необходим достаточный уровень присутствия кислорода и его эндогенных активных форм как катализаторов энзнматической активности оксиредуктаз. По всей видимости именно недостаточный уровень кислородообеспечения (в контрольной сернн с одним ТЕШ-воздействнем был снижен на 8% рОо (р<0,05).

Присутствие в опытных сериях экспериментов наряду с

элекгроимпульсным воздействием активных форм кислорода доставляемых транскутанно электрофорезоподобным путём из крема с озонидами за счёт механизмов электропорацин обеспечивало больший уровень содержания кислорода в крови и создавало условия для более эффективного использования молочной кислоты в процессах энергообразования — максимальное снижение уровня лактата в крови (90%) оказалось у животных с использованием крема с 30% активного кислорода (р<0,05).

Анализ результатов исследования метаболических параметров гомеостаза животных, полученных через час после окончания процедур 1 ЫЧ$-терапии показал преимущества сочетанного с присутствием озонндов крема применение электроимпульсного воздействия на организм подопытных животных. Решающим моментом явилось возрастание содержания кислорода и его активных форм в кровеносном русле животных, подвергшихся накожному сочетанному воздействию электрических полей н активного кислорода кремов. Максимальным преимуществом при этом обладали крема с 30% содержанием активного кислорода, на фоне которых отмечено наиболее выгодное модулирующее влияние процедур ОЗОТЕК$-терапии. Оно заключалось в значимом усилении энзнматической лактатдегидрогеназной активности на фоне интенсификации про- и антиоксидантного баланса и максимальной утилизации энергетических субстратов (глюкозы и молочной кислоты) в сосудистом русле. Это обеспечивало эффективную выработку АТФ в цикле Кребса, делало более

выгодным и рациональным функциональное состояние жнзненноважных органов и систем на примере анализа вариабельности сердечного ритма.

Применение процедур сочетанного воздействия низкочастотной электроимпульсной стимуляции и крема с высоким содержанием активных форм кислорода от исходного сырья (30%) позволяет: получать положительные эффекты присущие ЭМС- ТЕЖтерапии в виде увеличения двигательной активности и за счёт этого усилению притока крови к возбуждаемым мышцам, к интенсификации обменных процессов. активизации пластических биосннтетических процессов, синтезу нуклеиновых кислот. В результате стимуляции мышечной деятельности и усиливающейся афферентации с мышц в центральную нервную систему в больших пирамидных клетках увеличивается количество ДНК. возрастает их плоидность. Это свидетельствует о повышении функционального уровня ЦНС. В крови повышается содержание соматотропного гормона, иммунореактивного инсулина и С-пептида. Стимулирование мышечных элементов многих внутренних органов ведёт к улучшению их деятельности и уменьшению имеющихся патологических проявлений. Миостимуляция сопровождается усилением венозного кровообращения и лимфотока.

Наряду с этим, одновременное применение с процедурой миостимуляции кремов, содержащих озониды. за счёт механизмов электропорации и электрофорезоподобного действия сопровождается целенаправленным воздействием активных форм кислорода на состояние кислородзависимого гомеостаза как на местном, так и на системном уровне. Причём такой безинъекциоиный путь трансдермального переноса в организм субстратов, содержащих озониды, создаёт возможность системного проявления многих механизмов многофакторного лечебного действия системной озонотерапни.

Список литературы;

1. Бобровницкий И.П.. Василенко А.М. Принципы персонализации и предсказательности в восстановительной медицине // Вестник восстановительной медицины. 2013. №1. С. 2—6.

2. Бобровницкий И. П., Нагорнев С. Н., Лебедева О. Д.. Яковлев М. Ю., Татаринова Л. В., Бадтиева В. А., Эфендиева М. Т., Полунин А. А. Персонализация программ медицинской реабилитации больных распространенными соматическими заболеваниями // Курортные ведомости.

2012. №4. С. 4-5.

3. Бобровницкий И. П., Лебедева О. Д., Яковлев М. Ю. Применение аппаратно-программного комплекса оценки функциональных резервов для анализа эффективности лечения // Вестник восстановительной медицины. 2011. №6. С. 7-9.

4. Василенко А.М. Интегративная медицина и электронейростнмуляция // Рефлексология. 2006. №2. С. 5-12.

5. Дамннов Р.Г.. Даминов М.Р. Электростимуляция у больных с травмами и заболеваниями нервной системы // В кн.: Практическое руководство по хирургии нервов / Под ред. В.П.Берснева в 2т. СПб.: ФГУ «РНХИ им. проф. А.Л.Поленова». 2009. Т.1. С. 149-179.

6. Nizard J.. Lefaucheur J.P.. Helbert M.. de Chauvigny E., Nguyen J.P. Noninvasive stimulation therapies for the treatment of refractory pain // Discov. Med. 2012. Vol. 14. P. 21—31.

7. Wright A. Exploring the evidence for using TENS to relieve pain // Nurs Times. 2012.Vol. 108. N11. P. 20-23.

8. Боголюбов В.М.Ясногородскнй В. Г. Электролечение Медицинская реабилитация (Руководство) / под ред. В.М.Боголюбова. М.? 2007. Т. I. С. 194-296.

9. Боголюбов В.М.. Пономаренко Г.Н. Общая физиотерапия. СПб.. 1998. 480 с.

10 Судаков КВ.. Адрианов В.В.. Вагин Ю.Е.. Киселёв И.И. Физиология человека. Атлас динамических схем. М., 2009. 416 с.

11 Bitkina О.. Peretyagin S., Soloveva A., Grechkaneva О.. Martusevich А., Bugrova М., Peretyagin P., Prodanets N First experience of laboratory control of ozonids-containing cosmetic gels action // International meeting of the Madrid declaration on ozone therapy. Madrid. Spane. 2015.

12 Bitkina OA.. Peretyagin S.P, Soloveva AG, Grechkaneva O.A., Martusevich A.K.. Bugrova M.L.,Peretyagin P.V., Prodanets N.N. Local and systemic actions of ozonids contained cosmetic gels on organism // Book of abstracts of 22nd World Congress & Exhibition "Ozone and Advanced Oxidation Leading-edge science and technologiesBarcelona. Spain. 2015. P. 36.

13 Гречканёва OA., Биткина O.A., Богомолова Е.Б.. Перетягнн С.П., Перетяган П.В. Cardiology and internal vedicine. XXI N 1-2 (LVII-LX) Tbilisi. 2017. V/ 156-153

14. Перетягин С.П. Патофизиологическое обоснование озонотерапни постгеморрагического периода. Автореферат докт. дисс. Казань. 1991. 29с.

15. Rokitansky О. Khnik und biochemic der ozon therapy // Hospitalis. 1982. N52. P. 643-711.

16 Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы // Вопросы медицинской химии. 1999. Т.45. №3. С. 109-116.

17 Конторщнкова К.Н..Перетяган С.П. Закономерность формирования адаптационных механизмов организмов млекопитающих при системном воздействии низкими дозами озона. Диплом на открытие N 309 2006 .

18. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. - М.: ВШ.. 1980. 272с.

19 Кузьмина Е.И.. Нелюбин А.С., Щенникова М.К. Применение индуцированной хемилюминесценции для оценок свободнорадикальных реакций в биологических субстратах // Биохимия и биофизика микроорганизмов. Горький. 1983. С. 4148.

20 Uchiyama М.. Michara М. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbiturie acid test // Analytical Biochemistry. 1978, №86. P. 271.

21. Klenchin V.A., Sukharev S.I., Serov S.M.. Chernomordik L.V.. Chizinadzliev Y.A. Electrically induced DNA uptake by cells is a fast process involving DNA electrophoresis //Biophys. J. 1991. Vol. 60. P. 804-811.