СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ ПРИСУТСТВИЯ МИКОБАКТЕРИАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА В ОБРАЗЦЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПО МЕНЬШЕЙ МЕРЕ ДВУХ АНТИГЕНОВ

1. Способ детекции присутствия антител против микобактериального материала в образце, включающий стадии: получения образца от человека или животного; и детекции связывания антител в указанном образце по меньшей мере с двумя типами иммобилизованных антигенов, способными связываться с антителом, являющимся показателем присутствия микобактериального материала у человека или животного, выбранными из следующей группы:
A) происходящий из миколовой кислоты антиген, необязательно, модифицированный с использованием одной или более функциональных групп, позволяющих иммобилизацию на твердом субстрате,
B) антиген диацилгликолипид; представленный следующей формулой (I)
(I),
где:
2
3
3
3-
3-
+
+
R и R, идентичные или различные, независимо выбраны из H, SOH, SO или SO/M, где M представляет собой катион; и
2'
3'
Rи R, идентичные или различные, представляют собой ацильные группы,
где антиген, представленный формулой (III), необязательно, является модифицированным с использованием одной или более функциональных групп, позволяющих иммобилизацию на твердом субстрате, и энантиомеры, диастереоизомеры и их смеси; и
C) антиген туберкулезиниладенозин; представленный следующей формулой (II):
(II),
1
где в формуле (III) R представляет собой H или группу с формулой (III)
(III),
2
1
2
R отсутствует или представляет собой группу с формулой (III), при условии, что один из R и R представляет собой группу с формулой (III),
3
4
R и R независимо выбраны из водорода, OH, группы карбоновой кислоты или ацильной группы, в любой их комбинации, где указанный антиген туберкулезиниладенозин, необязательно, является модифицированным с использованием одной или более функциональных групп, позволяющих иммобилизацию на твердом субстрате, и энантиомеры, диастереоизомеры антигенов и их смеси.
2. Способ по п. 1, где антиген диацилгликолипид представлен формулой VII:
(VII),
2'
3'
где R и R являются такими, как указано в п. 12.
2'
3'
3. Способ по п. 1 или 2, где в антигене диацилгликолипиде, в соответствии с формулой (III), один из R и R представляет собой группу, представленную следующей формулой (IV)
(IV),
4
5
2'
3'
n
n+1
n
n+1
где R представляет собой линейную насыщенную углеводородную цепь с формулой CH, где n представляет собой целое число между 1 и 20, необязательно модифицированную с использованием одной или более функциональных групп, и где Y представляет собой целое число между 1 и 10, и где Rпредставляет собой H или OH, и другой из R и Rпредставляет собой линейную насыщенную углеводородную цепь с формулой CH, где n представляет собой целое число между 1 и 20, необязательно, модифицированную с использованием одной или более функциональных групп.
2
2
4. Способ по пп. 1 или 3, где антиген диацилгликолипид, в соответствии с пп. 1 или 3, представляет собой диацилированный сульфогликолипид (AcSGL), как обнаружено в Mycobacterium tuberculosis, необязательно, модифицированный с использованием одной или более функциональных групп, предпочтительно, где указанный AcSGL представляет собой 2-пальмитоил-3-гидроксифтиоцераноил-2'-сульфат-α-α'-D-трегалозу или 2-стеароил-3-гидроксифтиоцераноил-2'-сульфат-α-α'-D-трегалозу, необязательно, модифицированную с использованием одной или более функциональных групп.
4
3
5. Способ по любому из пп. 1-4, где в формуле (II) указанного антигена туберкулезиниладенозина антиген R4 представляет собой OH, предпочтительно, где R и R представляют собой OH.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где указанный антиген туберкулезиниладенозин представлен соединением формулы (XIV) или (XV), или комбинацией антигенов туберкулезиниладенозинов в соответствии с формулой (XIV), содержащими соединение формулы (XVI) или (XVII), или их комбинацию,
(XIV),
(XV),
необязательно, модифицированные с использованием одной или более функциональных групп, позволяющих иммобилизацию на указанном твердом субстрате.
7. Способ по любому из пп. 1-6, где указанные антигены туберкулезиниладенозины выбраны из группы из 1-туберкулезиниладенозина, 1-туберкулезинил-2'-дезоксиаденозина, 1-туберкулезинил-O-ацетиладенозина или их комбинации, необязательно, модифицированных с использованием одной или более функциональных групп, позволяющих иммобилизацию на указанном твердом субстрате.
8. Способ по любому из пп. 1-7, включающий детекцию связывания антител в указанном образце с
указанным C) антигеном туберкулезиниладенозином и
указанным B) антигеном диацилгликолипидом.
9. Способ по любому из пп. 1-7, включающий детекцию связывания антител в указанном образце с
указанным C) антигеном туберкулезиниладенозином и
указанным A) происходящим из миколовой кислоты антигеном.
10. Способ по любому из пп. 1-7, включающий детекцию связывания антител в указанном образце с
указанным B) антигеном диацилгликолипидом, и
указанным A) происходящим из миколовой кислоты антигеном.
11. Способ по пп. 1-10, включающий детекцию связывания антител в указанном образце с
указанным C) антигеном туберкулезиниладенозином,
указанным B) антигеном диацилгликолипидом и
указанным A) происходящим из миколовой кислоты антигеном.
12. Способ по любому из предшествующих пунктов, где указанные антигены являются выделенными из Mycobacterium tuberculosisили продуцирующего микроорганизма-хозяина, отличного от микобактерии, илигде антигены являются химически синтезированными.
13. Способ по любому из предшествующих пунктов, где антигены являются иммобилизванными на одном или более твердых субстратах.
14. Способ по любому из предшествующих пунктов, где детекция связывания антител с иммобилизованными антигенами включает измерение изменения массы на субстрате, изменения показателя преломления, изменения энтропии, изменения энтальпии, изменения вязкости, изменения температуры или изменения окраски.
15. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором детекцию связывания антител с иммобилизованным антигеном проводят в реальном времени.
16. Способ по п. 15, где детекцию проводят с использованием поверхностного плазмонного резонанса или электрохимической импедансной спектроскопии, изотермической титрационной калориметрии, интерферометрии биослоя, оптических решеток, фотонных кристаллов, получения профиля акустического резонанса, кварцевых микровесов.
17. Способ по любому из пп. 1-14, в котором детекцию связывания антител с иммобилизованным антигеном проводят посредством анализа конечных точек.
18. Способ по п. 17, где анализ конечных точек выбран из группы, состоящей из твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA), Вестерн-блоттинга, анализа радиоактивного мечения, фотоспектрометрического анализа, иммунофлуоресценции, иммунопреципитации, иммуноцитохимического анализа, иммуногистохимического анализа, электрохимической импедансной спектроскопии.
19. Твердый субстрат, содержащий комбинацию 2 или более из антигенов туберкулезиниладенозинов, антигенов диацилгликолипидов и происходящих из миколовой кислоты антигенов, как определено в любом из пп. 1-7, иммобилизованных на указанном субстрате.
20. Твердый субстрат по п. 19, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов туберкулезиниладенозинов и указанных антигенов диацилгликолипидов.
21. Твердый субстрат по п. 19, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов туберкулезиниладенозинов и указанных происходящих из миколовой кислоты антигенов.
22. Твердый субстрат по п. 19, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов диацилгликолипидов и указанных происходящих из миколовой кислоты антигенов.
23. Твердый субстрат по п. 19, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов туберкулезиниладенозинов, указанных антигенов диацилгликолипидов и указанных происходящих из миколовой кислоты антигенов.
24. Твердый субстрат по любому из пп. 19-23, где указанный субстрат представляет собой сенсорную поверхность в устройстве для поверхностного плазмонного резонанса, устройстве для электрохимической импедансной спектроскопии, устройстве для изотермической титрационной калориметрии, устройстве для интерферометрии биослоя, устройстве с оптической решеткой, устройстве с фотонными кристаллами, устройстве для получения профиля акустического резонанса или устройстве с кварцевыми микровесами.
25. Твердый субстрат по любому из пп. 19-23, где указанный субстрат представляет собой поверхность для детекции в твердофазном иммуноферментном анализе (ELISA), анализе Вестерн-блоттинга, анализе радиоактивного мечения, фотоспектрометрическом анализе, иммунофлуоресценции, анализе иммунопреципитации, иммуноцитохимическом анализе, иммуногистохимическом анализе, анализе с амперометрической детекцией, анализе с вольтаметрической детекцией или анализе электрохимической импедансной спектроскопии.
26. Биосенсор, содержащий комбинацию 2 или более из антигенов туберкулезиниладенозинов, антигенов диацилгликолипидов и происходящих из миколовой кислоты антигенов, как определено в любом из пп. 1-7, иммобилизванных на одном или более твердых субстратах.
27. Биосенсор по п. 26, где множество типов антигенов являются иммобилизованными на одном и том же субстрате.
28. Биосенсор по п. 26, где каждый тип антигена является иммобилизованным на отдельном субстрате.
29. Биосенсор по любому из пп. 26-28, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов туберкулезиниладенозинов и указанных антигенов диацилгликолипидов.
30. Биосенсор по любому из пп. 26-28, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов туберкулезиниладенозинов и указанных происходящих из миколовой кислоты антигенов.
31. Биосенсор по любому из пп. 26-28, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов диацилгликолипидов и указанных происходящих из миколовой кислоты антигенов.
32. Биосенсор по любому из пп. 26-28, где указанная комбинация представляет собой комбинацию указанных антигенов туберкулезиниладенозинов, указанных антигенов диацилгликолипидов и указанных происходящих из миколовой кислоты антигенов.