Эндокринотерапия саркомы матки в эксперименте

отметить факт некоторого увеличения числа животных с опухолью в группе крыс, получивших канцероген совместно с циннабарином. Причем если в случае общей частоты возникновения новообразований это увеличение было незначительным (36% против 32%), то действие циннабарина на индуцированные АМНМ опухоли почек было более выражено (32% против 16%). Однако сделать вывод об усилении циннабарином химического канцерогенеза почек у крыс, индуцированных АМНМ, не позволяют результаты статистического анализа, свидетельствующие о том, что эти различия являются недостоверными.

ЛИТЕРАТУРА /REFERENCES

1. Беспалое В. Г. // Экспср. онкол. — 1994. — Т. 16, № 1. — С. 3—11.

2. Бланко Ф. Ф., Дерябин В. В., Пименов А. А., Бовина Е. В. //Антибиотики и мед. биотсхнол. — 1987. —Т. 32, № 12. —С. 925—938.

3. Бланко Ф. Ф.11 А. с. № 1775896 от 15.07.92.

4. Ермольева 3. В., Навышии С. М. // Актуальные вопр. соврем, онкол. — 1970. № 2. — С. 297—299.

5. Турусов В. С., Парфенов Ю. Д. /I Методы выявления и регламентирования химических канцерогенов. — М., 1986.

6. Шеренешева Н. И., Финько В. Е., Клочкова Т. И. // Бюл. экспср. биол. — 1996. —№ 4. —С. 453—455.

7. Chihara G. S. // Canccr Res. — 1970. — Vol. 30. — P. 2776—2779.

8. Sasaki T„ Takasuka N. // Carbohidr. Res. — 1976, — N 2. — P. 99—104.

Поступила 14.05.97 / Submitted 14.05.97

© Коллектив авторов, 1998 УДК 618.14-006.36-085.357-082.9

И. О. Смирнова, И. М. Валуева, И. С. Буренин,

О. Г. Кривошеев

ЭНДОКРИНОТЕРАПИЯ САРКОМЫ МАТКИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей

Известно, что основным методом лечения саркомы матки является хирургическое вмешательство, однако меноррагия и анемия, сопровождающие развитие этих опухолей, требуют предварительных, до оперативного лечения, консервативных мероприятий [3]. Клиническими наблюдениями было установлено, что у больных опухолями матки при введении агонистов гонадолиберина удается избежать анемии [4], причем в некоторых случаях это объясняли снижением уровня эстрогенов, вследствие чего размеры опухоли уменьшались [2, 5, 6]. Наряду с этим в эксперименте выявлена гормоночувствительность саркомы матки: по нашим предварительным данным, под влиянием агонистов люлиберина уменьшаются размеры опухолей, 17-оксипрогестерона капронат (17-ОКП) в 3 раза снижает частоту индуцированных опухолей матки, а при введении эстрадиола дипропионата или при повышенном уровне эндогенных эстрогенов рост этих опухолей резко стимулируется [1, 8]. Все это позволяет предполагать, что саркомы матки могут реагировать на гормональные воздействия, поэтому задача нашего исследования сводилась к разработке эффективных методов эндокринной терапии саркомы матки в эксперименте с использованием регуляторных пептидов, антиэсгрогенов и прогестинов.

Материалы и методы. Исследование проводили на самках мышей линии СВА массой 22—25 г с перевиваемой саркомой матки, первично

19 rats from group 2, i. e. 32% and 36%, respectively. There were no significant differences in tumor rate between groups 1 and 2.

The tumor sites were mostly kidneys, rarer other organs and tissues. By histology they were mesenchymal tumors with a variety of tissue differentiation types. An intravenous single administration of AMNU at 200 mg/kg body weight induced renal tumors in 3 (16%) of 19 rats in group 1. In group 2 receiving AMNU together with cinnabarin the tumor occurrence was twofold as great as in group 1 (32% vs 16%). The tumor sites and morphology were characteristic of AMNU induction [6]. Cinnabarin failed to influence sites or histology of the AMNU-induced tumors. Our findings suggest that cinnabarin does not provide protection against AMNU-induced carcinogenesis. Of note is a somewhat increased tumor occurrence in rats receiving the carcinogen and cinnabarin. It should also be emphasized that though the increase in total carcinogenesis was not great (36% vs 32%), the cinnabarin effect on AMNU-induced renal carcinogenesis was much more marked (32% vs 16%). However, the conclusion that cinnabarin enhances AMNU-induced renal carcinogenesis in rats can hardly be made since the differences were not statistically significant.

I. O. Smirnova, I. M. Valuyeva, I. S. Burenin,

O. G. Krivosheyev

ENDOCRINE THERAPY FOR EXPERIMENTAL UTERINE SARCOMA

Research Institute of Experimental Diagnosis and Therapy of Tumors

Surgery is the principal modality of treatment for uterine sarcoma, though menorrhagia and anemia accompanying this disease require preliminary preoperative therapy [3]. It was clinically demonstrated that anemia in patients with tumors of the womb may be countered by administration of gonadoliberin agonists [4], in some cases the effect is supposedly due to decrease in estrogen level and consequent reduction in tumor size [2, 5, 6]. As demonstrated experimentally the tumor is sensitive to hormones.

Uterine sarcoma: luliberin antagonists reduce tumor size; administration of 17-oxyprogesterone capronate (17-OPC) results in a 3-fold fall in uterine tumor induction, while administration of estradiol dipropionate or increased endogenous estrogen levels enhance the tumor growth [1, 8]. These observations suggest that sarcoma of the womb may respond to hormones. The purpose of this study was to develop effective endocrine therapy for experimental uterine sarcoma including regulatory peptides, antiestrogens and progestines.

Materials and Methods. The study was performed in CBA female micc with a body weight 22-25 g bearing a transplanted sarcoma of the uterus primarily induced by the method described in [10]. The induced uterine sarcoma was transplanted into intact CBA female micc, at 2 weeks the animals were dccapitatcd to remove the tumor, which was further triturated and transplanted into intact micc as suspension in medium 199. The tumor-bearing micc received different

Experimental Investigations

Таблица Table

Влияние гормональных препаратов на лейомиосаркому матки мышей Hormone effect on leiomyosarcoma of the uterus in mice

Торможение или Увеличение

Препарат или комбинация препаратов Доза, количество введений Число мышей стимуляция роста опухоли, % продолжительности жизни, %

Трипептид пролактина 10 мкг/кг, 30 /10 mcg/kg, 30 20 +30 + 4

Tripeptide prolactin 50 « « 19 +16 + 6 -

100 « « 24 69 + 3 44 + 6

500 « « 25 84 ±6 49 ±7

Сурфагон 50 мкг/кг, 30 / 50 mcg/kg, 30 20 +21 +4 -

Surfagone 100 « « 19 +22 + 3 -

200 « « 21 54 + 1 23 + 7

500 « « 20 64 ±7 41 ±11

Тамоксифен 0,1 мг, 30/0.1 mg, 30 15 33 + 9 14 + 5

Tamoxifen 0,5 « « 17 56 + 5 15 ±2

1 « « 18 80 ±7

17-Оксипрогестерона капронат 1,25 мг, 9/1.25 mg, 9 20 49 + 6 12 + 6

7-Oxyprogesterone capronate 2,5 « « 18 67 ±3 20 ±5

Элеутерококк / Eleutherococcus 0,05 мл 20% раствора, 30 26 33 ±4 25 ±4

0.05 ml, 20% solution, 30

Сурфагон + элеутерококк 500 мкг/кг, 30 / 500 mcg/kg, 30 24 83 ±7 52 ±9

Surfagone+eleutherococcus 0,05 мл 20% раствора, 30 0.5 ml, 20% solution

Сурфагон + тамоксифен 50 мкг/кг, 30 / 50 mcg/kg, 30 20 57 ±8 29 ±3

Surfagone+tamoxifen 0,1 мг, 30 /0.1 mg, 30

Сурфагон + тамоксифен 500 мкг/кг, 30 / 500 mcg/kg, 30 21 79 ±3 36 ±7

Surfagone+tamoxifen 0,5 мг, 30 / 0.5 mg, 30

Сурфагон + 17-оксипрогестерона капронат 200 мкг/кг, 30 / 200 mcg/kg, 30 20 72 ±7 27 + 6

Surfagone+17-oxyprogesterone capronate 1,25 мг, 9 /1.25 mg, 9

Сурфагон + 17-оксипрогестерона капронат 500 мкг/кг, 30 / 500 mcg/kg, 30 19 82 ±5 48 ±8

Surfagone+17-oxyprogesterone capronate 2,5 мг, 9 / 2.5 mg, 9

Тамоксифен + 17-оксипрогестерона капронат 1 мг, 30 /1 mg, 30 17 33 ±9

Tamoxifen +17-oxyprogesterone capronate 2,5 мг, 9 / 2.5 mg,9

Тамоксифен + через 10 дней после первого 1 мг, 30 /1 mg, 30 21 55 ±7 12  0

введения

Tamoxifen+17-oxyprogesterone capronate at

10 days after the first administration

17-оксипрогестерона капронат 2,5 мг, 9

Tamoxifen+17-oxyprogesterone capronate

Drug or drug combination Dose, No. of administrations No. of mice Tumor growth inhibition/stimulation, % Increase in life span, %

индуцированной нами по методике Тигшоу V. Б. и соавт. [10]. Индуцированные опухоли матки перевивали интактным самкам СВА, через 2 нсд животных умерщвляли, извлекали опухоль, которую измельчали и в виде взвеси в среде 199 перевивали другим интактным самкам. У животных с опухолями изучали противоопухолевый эффект при различных схемах эндокринной терапии е использованием трипептида пролактина, аналога рилизинг-гормона люлиберина — сурфагона, 17-ОКП, антиэстрогена тамоксифсна и адаптогена элеутерококка. Введение препаратов начинали через 7 сут после перевивки и осуществляли на протяжении 30 дней. Растворенный в изотоническом растворе хлорида натрия сурфагон и трипептид пролактина вводили подкожно в дозах 10—500 мкг/кг. Тамоксифен (0,1—1 мг) и экстракт элеутерококка (0,05 мл 20% раствора) животные получали внутрь. 17-ОКП (1,25—2,5 мг в масляном растворе) вводили подкожно дважды в неделю (см. таблицу). Контрольную группу составили 79 самок с перевитыми опухолями, не получавшие никакого лечения. По ходу исследования проводили измерение опухолей. Противоопухолевое действие препаратов оценивали по проценту торможения роста опухоли по отношению к контролю и по увеличению продолжительности жизни. Морфологическое изучение опухолей проводили, используя обычную гистологическую методику с фиксацией материала в формалине, заливкой в парафин; срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Результаты опытов обрабатывали статистически с использованием критериев / и у}.

Результаты и обсуждение. Опухоли матки морфологически имели смешанный характер и были идентифицированы как саркомы. Результаты терапевтической эффективности препаратов и их комбинаций приведены в таблице.

Так, выраженное противоопухолевое действие в высоких дозах оказывал трипептид пролактина. Препарат

hormone therapies including tripcplidc prolactin, surfagone - a luliberin (releasing hormone) analog, 17-OPC, anticstrogcn tamoxifen and adap-togcn eleutherococcus; their therapeutic effects were recorded. Treatment was started at 7 days after transplantation to be continued for 30 days. Surfagone and tripcplidc prolactin saline solutions were administered subcutancously at 10-500 mcg/kg. Tamoxifen (0.1-1 mg) and eleutherococcus extract (0.05 ml of 20% solution) were administered per os. 17-OPC (1.25-2.5 mg in oil) was administered subcutaneously two times a week (sec the table). Female mice with transplanted tumors receiving no treatment were used as control. Tumor measurement was performed in the course of treatment. Drug antitumor potential was assessed by percentage of tumor growth inhibition in relation to the control and by increase in life span. Morphological study of the tumors was performed by routine histological technique in formalin-fixed and paraffin-embedded specimens; the sections were stained with hematoxylin and eosin. Statistical analysis of differences was performed using I and %2 tests.

Results and Discussion. The uterine tumors demonstrated mixed morphology and were identified as sarcoma. The table summarizes data on therapeutic response to the drugs and their combinations.

The tripeptide prolactin was shown to produce the highest antitumor effect. The drug at 100 mcg/kg induced a tumor growth inhibition 57% at 1 week, 67% at 2 weeks and 69% at 4 weeks. If administered at 500 mcg/kg the drug antitumor effect reached 84%. According to V. I. Kiselev besides a strong inhibition of tumor growth the drug (at 100 and 500 mcg/kg) reduced considerably blood proges-

в дозе 100 мкг/кг через 1 нед введения тормозил рост опухоли на 57%, через 2 нед — на 67% и через 4 нед — на 69%. В дозе 500 мкг/кг противоопухолевый эффект трипептида пролактина усиливался до 84%. На фоне резкого подавления роста опухоли препарат (100 и 500 мкг/кг), по данным В. И. Киселева, резко снижал уровень прогестерона в крови (25,7 ± 9 и 24,5 ± 8 нг/мл соответственно против 52,3 ± 7,2 нг/мл у мышей с нелечеными опухолями).

Выраженное противоопухолевое действие оказывал также агонист люлиберина сурфагон, который в дозах 200 и 500 мкг/кг тормозил рост опухоли на 54 и 67% соответственно. Усиление терапевтического эффекта сурфагона до 83% отмечали при его комбинированном введении с элеутерококком. Торможение роста опухоли у этих животных сопровождалось увеличением продолжительности жизни в 1,2—2 раза. Введение одного элеутерококка оказалось неэффективным. Отсутствие терапевтического эффекта элеутерококка, видимо, связано с тем, что в проводимом нами исследовании лейомио-саркома характеризовалась быстротой роста, тогда как антиканцерогенное действие этого препарата установлено на медленно растущих опухолях [9]. Эффективность применения сурфагона в комбинации с элеутерококком указывает на целесообразность использования элеутерококка в силу его адаптогенного действия в комплексной терапии сарком матки.

17-ОКП (1,25 мг) вызывал торможение роста опухоли на 67%, а тамоксифен (0,5 и 1 мг) — на 56 и 80% соответственно. При различном сочетанном воздействии тамоксифена и 17-ОКП противоопухолевый эффект по сравнению с действием каждого из этих препаратов усиливался.

После отмены тамоксифена отмечали тенденцию к возобновлению роста опухоли и уменьшению продолжительности жизни, что, видимо, связано с некоторой эстрогенной активностью препарата. Однако неэффективные при раздельном введении дозы тамоксифена (0,1 мг) и сурфагона (50 мкг/кг) в комбинации вызывали противоопухолевый эффект (57%) и увеличивали продолжительность жизни животных почти в 2 раза. Усиление противоопухолевого эффекта до 79% наблюдали при комбинированном лечении высокими дозами сурфагона и тамоксифена, что мы связываем с подавлением сурфагоном уровня половых гормонов [5—7]. Увеличение противоопухолевого действия отмечали также при сочетанном воздействии разных доз 17-ОКП и сурфагона по сравнению с эффектом каждого из этих препаратов.

Таким образом, установлен высокий противоопухолевый эффект белковых регуляторов — трипептида пролактина и сурфагона на саркомы матки мышей. Обнаруженное снижение уровня стероидных гормонов в крови под влиянием этих препаратов является, возможно, одним из механизмов терапевтического эффекта этих регуляторов. Полученные результаты согласуются с имеющимися клиническими наблюдениями о возможности эффективного использования агонистов гонадо-либерина при других опухолях матки [2, 5]. По нашим данным, наряду с применением регуляторных пептидов при саркомах матки целесообразным является также использование комбинированной терапии сурфагоном с прогестинами, антиэстрогенами или адаптогенами, что может облегчить дальнейшее хирургическое лечение этой формы опухоли.

terone (25.7 + 9 and 24.5 ± 8 ng/ml, respectively, versus 52.3 ± 7.2 ng/ml in untreated tumor-bearing mice).

Surfagone, a luliberin agonist, also demonstrated a marked antitumor effect. The drug at 200 and 500 mcg/kg induced a tumor growth inhibition 54% and 67%, respectively. Surfagone in combination with eleutherococcus induced a 83% tumor growth inhibition in parallel with a 1.2-2-fold increase in the animal life span. Eleutherococcus alone was not effective. The absence of eleutherococcus therapeutic effect may be due to the use of fast growing leiomyosarcoma as a tumor model while eleutherococcus is effective in slow growing neoplasms [9]. The effect of the surfagone+eleutherococcus combination may be due to adaptogenic effect of eleutherococcus in comlex therapy for sarcoma of the uterus.

17-OPC (1.25 mg) induced a 67% tumor growth inhibition, tamoxifen (0.5 and 1 mg) a 56% and a 80% inhibition, respectively. Associated administration of these two drugs increased the therapeutic effect as compared to each agent administered separately.

Discontinuation of tamoxifen therapy resulted in renewal of tumor growth and decrease in life span seemingly due to the drug estrogenic activity. Combination of tamoxifen (0.1 mg) and surfagone (50 mcg/kg) at doses that were ineffective if the drugs were administered separately produced a 57% antitumor effect and increased life span almost by 2-fold. Combined administration of high-dose surfagone and tamoxifen enhanced the effect up to 79% which we relate to surfagone inhibition of sex hormones [5-7]. Enhancement of antitumor effect was also observed after associated administration of 17-OPC and surfagone as compared to the effects of each of the drags alone.

Thus, our study established high antitumor effects of protein regulators such as tripeptide prolactin and surfagone on sarcoma of the uterus. Decrease in steroid hormones under the effect of the drugs may be one of the mechanisms of their therapeutic action. Our findings are in agreement with the published clinical data on efficiency of gonadoliberin agonists in other tumors of the uterus [2, 5]. Combination therapy with surfagone and progestin, antiestrogens or adaptogens may facilitate further surgical treatment for sarcoma of the uterus.

ЛИТЕРАТУРА /REFERENCES

1. Ирд E. А., Смирнова И. О. //Экспср. онкол. — 1979. —№ 1. — С. 68—69.

2. Benagiano G., Morini A., Piccinno F. ct al. // Ini. J. Gynecol. Ob-stel. — 1990. — Vol. 33, N 4. — P. 333—343.

3. Bennani O., Himmi A., Lughzaoni М., Aclerdour M. II Rev. Gyne-col. Obstct. — 1995. — Vol. 90, N 1. — P. 12—16.

4. Candiani G. B., Vercellini H„ Fedele L. ct al. // Acta obstct. gync-col. scand. — 1990. — Vol. 69, N 5. — P. 413—415.

5. Friedman A., Rein М., Padian M. R., Barbien R. Z. // Fcrtil. and Stcril. — 1990. — Vol. 53, N 2.— P. 250—253.

6. Nakamura Y., Ubukata J., Yoshimura J. ct al. II Ibid. — 1991. — Vol. 55, N 5.— P. 900—905.

7. Pasgualini I. R., Cornier E., Grenier I. ct al. // Ibid. — 1990. — Vol. 53, N 6.— P. 1012—1017.

8. Smirnova I. O., Turusov V. S. II Carcinogenesis. — 1988. — Vol.

9, N 11, —P. 1927—1929.

9. Jaik-Koo Yun, Soo Young Choi//Int. J. Epidemiol. — 1990.— Vol. 19, N 4.—P. 871—876.

10. Turusov V. S., Baslova L. S., Lanko N. S. II Canccr Lett. — 1977. — N 3. — P. 37—44.

Поступила 21.01.97 / Submitted 21.01.97