Состояние лимфатической системы при токсическом гепатите и на фоне коррекции антиоксидантами

СОСТОЯНИЕ ЛИМФАТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ

ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И НА ФОНЕ КОРРЕКЦИИ АНТИОКСИДАНТАМИ

Абдрешов С.Н., Булекбаева Л.Э., Демченко Г.А., Ерлан А.Е.

Институт физиологии человека и животных ЦБИ МОН РК, Алматы

В последние десятилетия ХХ и начала XXI века, в связи с интенсивной деятельностью человечества на планете, усилилось влияние негативных факторов на окружающую среду и установлена прямая связь между ухудшением экологической обстановки в том или ином регионе и здоровьем населения. Особую опасность для здоровья человека представляют отходы нефтяной и химической промышленности, содержащие токсические летучие органические вещества. Установлено, что летучее органическое вещество - 4-ххлористый углерод оказывает отрицательное влияние на состав крови, висцеральные функции, на ЦНС и периферическую нервную систему, нарушает функции печени [Забродский, 2002]. Он усиливает в организме процессы перекисного окисления липидов и образование свободных радикалов.

В наших предыдущих исследованиях при остром отравлении крыс 4-ххлористым углеродом были обнаружены угнетение лимфотока и сократительной активности лимфатических узлов [Демченко и др., 2005].

Представляет интерес изучить биохимические показатели лимфы при токсическом гепатите, вызванном введением 4-ххлористого углерода, и при коррекции выявленных нарушений протекторными веществами, что явилось целью настоящей работы.

В экспериментах было использовано 65 лабораторных крыс. Были сформированы 3 группы крыс: 1-я группа -контрольная, 2-я группа получала 50% масляный раствор CCl4 по 0,3 мл на 100 г массы четыре раза через день. 3-я группа крыс предварительно в течение 7 суток получала селенит натрия per os с водой (1,25 г/л) и в/м а-токо-ферол в масляном растворе (1,5 мкг/кг), затем вводили CCl4 по вышеуказанной схеме и продолжали давать селен и антиоксидант животным в течение 21 дня. Селен, как часть селенопротеинов, выполняет функции антиоксиданта и иммуномодулятора [Aaseth, 1993]. Через 30 дней брали животных на опыт. Прижизненно под эфирным наркозом регистрировали лимфоток из кишечного лимфатического сосуда и брали пробы крови и лимфы для биохимических исследований.

Содержание общего белка в лимфе и плазме крови определяли биуретовым методом, мочевины и креатинина -с помощью набора препаратов фирмы «Bio-Lachema-Test», ионов натрия и калия - ионо-селективным методом на анализаторе Vitros-D, активность ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) - методом Райтмана-Френкеля [Колб, 1976]. Содержание билирубина общего в плазме крови определяли методом Иендрашика-Гофа, тимоловой пробы - с помощью тимолово-вероналового буфера [Камышников, 2002]. После декапитации крыс брали кусочки печени, которые фиксировали в 10% растворе формальдегида и заливали парафином. Срезы толщиной 4-5 мк окрашивали гематоксилином и эозином, изучали под микроскопом Axio Imager A1 (Цейс).

Согласно полученным данным, во второй группе крыс через 21 день после введения CCl4 масса печени в среднем возрастала от 10,2±0,2 (в контроле) до 12,5±0,5 г, что характерно для жировой дистрофии печени. У крыс группы 3 масса печени составила в среднем 10,9±0,2 г, мало отличаясь от контрольного значения.

Гистологические исследования показали, что при токсическом гепатите (группа 2) на срезах печени обнаружены значительные изменения структуры гепатоцитов по сравнению с контрольной группой, в частности, большое число соединительнотканных образований. Отмечено резкое неравномерное расширение и кровенаполнение центральных вен, междольковых кровеносных сосудов и некоторых синусоидов. При проведении коррекции токсического гепатита (группа 3) на срезах печени резких нарушений в строении гепатоцитов не отмечено. Печеночные дольки представлены сетью балок с четко выраженными границами, размеры синусоидов достигали контрольных величин.

В группе 2 у крыс лимфоток равнялся 0,17±0,02 мл/час, что было ниже его уровня в контроле (0,31±0,04 мл/час) на 44%. В группе 3 после применения антиоксидантов лимфоток у крыс по объему был выше, чем в группе 2, он достигал в среднем 0,0,27±0,03 мл/час.

Содержание билирубина общего в плазме крови крыс 2-й группы повышалось на 20% и тимоловой пробы на 62% от контрольного уровня. Возрастал уровень АЛТ на 305% и АСТ в плазме крови на 252% по сравнению с контрольной группой. Эти данные свидетельствуют о развитии у крыс 2 -ой группы токсического гепатита. Считают, что содержание билирубина общего в крови при токсическом гепатите возрастает обычно на более поздних стадиях нарушения функции печени [Пупышев, 2002 ].

После применения per os селен-актива и антиоксиданта а-токоферола у крыс 3-й группы наблюдался сдвиг этих показателей лимфы и плазмы крови в сторону нормализации. Содержание билирубина в плазме крови после коррекции антиоксидантами было в пределах контрольных величин (9,8 ммоль/л). Уровень тимоловой пробы у группы 3 после коррекции протекторными веществами (группа 3) снизился, но оставался еще повышенным от контрольного уровня на 25%. Содержание цитолитических ферментов АЛТ и АСТ в плазме крови крыс группы 3 снижалось после коррекции, но оставалось еще довольно высоким по сравнению контрольным уровнем на 54% и 43% соответственно (рис. 1).

Содержание ионов натрия в плазме крови повышалось от 132±1,50 в контроле до 142,3±2,2 ммоль/л (p<0,05) во второй группе, а ионов калия снижалось от 6,10±0,38 до 5,4±0,29 моль/л (р < 0,05). Отмечено достоверное снижение содержания общего белка в лимфе и плазме крови. В лимфе содержание общего белка снижалось до 56%, а в плазме

крови до 68% по сравнению с контролем (40,3±0,3 и 65,1±0,5 г/л соответственно). У крыс после коррекции выявленных нарушений с применением селена а антиоксиданта содержание ионов натрия и калия было в пределах контроля, содержание общего белка в лимфе и плазме крови было выше, чем в группе 2, однако было снижено от контрольных величин на 8-10 г/л.

Концентрация мочевины в плазме крови у 2-й группы крыс уменьшалась с 8,2±0,2 в контроле до 5,4±0,3 ммоль/л (р <0,01), креатинина от 67,2±3,1 до 51,8,6±4,3 (р< 0,01) ммоль/л, а в лимфе содержание мочевины снижалось с 8,6±0,7 (контроль) до 6,7±0,3 (р <0,01) ммоль/л, креатинина от 80,5±4,3 до 65,2±3,2 ммоль/л (р< 0,01).

%

350

300

250

200

150

100

50

0

1 2 3

1 2 3

1 2 3

1 2 3

А Б В Г

Рис. 1. Сдвиги биохимических показателей плазмы крови у крыс при токсическом гепатите и при коррекции протекторными веществами

Обозначения: А - билирубин общий, Б - тимоловая проба, В - АЛТ, Г - АСТ. По оси ординат: сдвиги показателей в %, по оси абсцисс: 1 - исходный фон в контрольных опытах, принятый за 100%, 2 - при токсическом гепатите,

3 - группа, получавшая селенит натрия и антиоксидант

Полученные данные показали, что у крыс 3-й группы с токсическим гепатитом выявляется снижение лимфотока, содержания общего белка в плазме крови и лимфе, что связано со снижением синтеза белка в печени и этим обусловлено снижение процессов лимфообразования. Обнаружено изменение содержания ионов натрия и калия в плазме крови, увеличение уровня тимоловой пробы, незначительное повышение уровня билирубина, что характерно для токсического гепатита. Коррекция выявленных нарушений в биохимическом составе плазмы крови и лимфы при токсическом гепатите, достигаемой путем применения селен-актива и а-токоферола в течение 28 суток (группа 3), снижала негативное действие токсического гепатита на показатели лимфодинамики и биохимического состава лимфы и плазмы крови.

Уровни большинства биохимических показателей в группе 3 находились в границах физиологических норм с небольшими отклонениями. Однако, содержание ферментов АЛТ и АСТ в плазме крови еще оставались значительно высоким по сравнению с их уровнем в контрольной группе крыс. Эти показатели указывают на то, что цитолитические процессы в печени еще присутствуют.

Таким образом, развитие токсического гепатита у крыс, помимо, увеличения массы печени и нарушений структуры и функции печени, сопровождалось снижением транспортной функции лимфатических сосудов и сдвигами биохимического состава лимфы. Коррекция наблюдаемых нарушений путем применения селен-актива и а-токо-ферола, оказывая защитное действие на клеточные мембраны, значительно ослабляла развитие токсического гепатита и его угнетающее влияние на лимфоток, процессы лимфообразования и биохимический состав лимфы.

ЛИТЕРАТУРА

1. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2007. Т. 9. № 4.

2. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2006. Т. 8. № 4.

3. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2005. Т. 7. № 4.

4. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2004. Т. 6. № 4.

5. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2003. Т. 5. № 4.

6. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2002. Т. 4. № 4.

7. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2001. Т. 3. № 4.

8. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2000. Т. 2. № 4.

9. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 12. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

10. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 12. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

11. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 12. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

12. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 12. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

13. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 12. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

14. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 12. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

15. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 1. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.

16. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». 2000. Т. 2. № 1. URL: http ://e-pubmed. org/isu. html.