Универсальная противогриппозная вакцина

1. Вакцина широкого спектра действия против вируса гриппа А, содержащая рекомбинантные псевдоаденовирусные частицы, на основе аденовируса человека пятого серотипа, несущие под контролем индуцибельного промотора ген полноразмерного белка М2 и ген полноразмерного белка NP, модифицированного мотивом PEST и удалением сигнала ядерной локализации, соединенных между собой нуклеотидной последовательностью пептида 2А вируса ящура.
2. Вакцина по п. 1, содержащая ген полноразмерного белка М2 с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 4 (фиг. 4), при этом аминокислотная последовательность белка представлена SEQ ID NO: 1 (фиг. 1).
3. Вакцина по пп. 1 и 2, содержащая ген полноразмерного белка NP с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 5 (фиг. 5), модифицированный мотивом PEST и удалением сигнала ядерной локализации, при этом аминокислотная последовательность белка представлена SEQ ID NO: 2 (фиг. 2).
4. Вакцина по пп. 1, 3 характеризующаяся тем, что гены белков М2 и NP отделены нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 6 (фиг. 6), кодирующей саморасщепляющийся пептид 2А вируса ящура SEQ ID NO: 3 (фиг. 3), обеспечивающий экспрессию генов белков М2 и NP отдельно в общей генетической конструкции.
5. Вакцина по пп. 1, 3 характеризующаяся тем, что гены белков М2 (SEQ ID NO: 4) и NP (SEQ ID NO: 5), экспрессируются под контролем индуцибельного промотора Tet-off, позволяющего блокировать экспрессию подконтрольных генов при помощи антибиотика доксициклина или тетрациклина.
6. Вакцина по п. 1, содержащая на дозу
6
9
рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих гены белков М2 и NP 10-10 БОЕ/мл;
фармацевтически приемлемый буфер до 0,5 мл.
2
7. Вакцина по п. 6, содержащая в качестве фармацевтически приемлемого буфера раствор: 10 mM TrisHCl, 75 mМ NaCl, 1 mM MgCl, 5% сахароза, 0,05% полисорбат 80, 0,5% этанол, 100 мкм ЭДТА, рН 8,0.
8. Вакцина по п. 6 вводится преимущественно интраназально в виде капель или спрея.
9. Способ получения вакцины по п. 6, предусматривающий получение рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц Ad5-tet-M2NP-PEST в культуре клеток линии 293НЕК, концентрирование и очистку рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц с помощью ультрафильтрации и высокоэффективной жидкостной хроматографии, доведение фармацевтически приемлемым буфером до нужной концентрации.