АДАПТОГЕННОЕ СРЕДСТВО
ADAPTOGENIC MEDICATION

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средства, обладающего адаптогенными свойствами.
Проблема адаптации человека, заключающаяся в способности организма поддерживать определенный уровень устойчивости к воздействию неблагоприятных и в том числе экстремальных факторов, представляет собой важную медико-социальную задачу [Меерсон Ф.З., 1973]. Причиной снижения неспецифической резистентности организма служат избыточные психоэмоциональные и информационные нагрузки, гиподинамия, токсические, стрессорные и др. факторы, действующие на человека современного общества.
Создание эффективных и безопасных средств, способных влиять на процессы адаптации, - одна из ключевых задач современной медицины. Известны обще-укрепляющие средства синтетического, растительного и животного происхождения, повышающие неспецифическую резистентность организма, так называемые адаптогены. Прежде всего это препараты растительного происхождения: женьшеня, элеутерококка, родиолы розовой, аралии, лимонника; животного происхождения: пантокрин, рантарин, пантовит [Суслов Н.И., 1995; Яременко К.В., 1990]. Вместе с тем, недостатком классических адаптагенов являются ограничения к приему при гипертонии, возбуждении, бессоннице, лихорадке [Венгеровский A.M., 2001]. Классические адаптогены также не являются универсальными лекарственными средствами, а обладают определенной специфической избирательностью [Пашинский В.Г., 1989], в первую очередь, зависящей от природы действующего экстремального фактора.
Наиболее близким (прототипом) по достигаемому эффекту является экстракт бадана (Bergenia crassifolia), обладающий адаптогенными свойствами. Экстракт бадана проявляет антистрессорное, ноотропное, антигипоксическое действие [Суслов Н.И., 1995], вместе с тем он не является классическим адаптогеном.
Задачей изобретения является расширение арсенала адаптогенных средств природного происхождения.
Поставленная задача достигается использованием в качестве средства-адаптогена с противовоспалительной, стресспротекторной и антигипоксической активностью комплекса соединений растительного и природного происхождения, исходно не являющихся классическими адаптогенами - экстракта бадана и каменного масла в соотношении компонентов, вес.ч., от 1:100 до 20:1.
Экстракт бадана обладает противовоспалительным, вяжущим, кровоостанавливающим, диуретическим и бактерицидным действием, укрепляет стенки сосудов, умеренно понижает артериальное давление, незначительно увеличивает частоту сердечных сокращений [Виноградова Т.А и др., 1998]. Установлено, что экстракт бадана увеличивает физическую работоспособность, ускоряет адаптацию к физическим нагрузкам. Экстракт обладает антистрессорным действием и способен уменьшать состояние тревоги, ускорять привыкание к изменению окружающей обстановки, в том числе и в условиях хронического стресса. Экстракт бадана улучшает условно-рефлекторную деятельность при стрессе и в конфликтной ситуации, оказывает благоприятное влияние на процессы обучения и памяти, особенно при различных патологических состояниях [Суслов Н.И., 1995].
Каменное масло является средством, содержащим природные минералы и микроэлементы, обладающим противовоспалительным, противомикробным, регенерирующим, ускоряющим обменные процессы свойствами [Горбачев В.В., Горбачева В.Н., 2002]. В народной медицине каменное масло применяют при язвенной болезни желудка, заболеваниях желудочно-кишечного тракта, при переломах, воспалительных заболеваниях мочеполовой системы и кожи, сахарном диабете, онкологических и инфекционных заболеваниях. Адаптогенные свойства каменного масла в литературе не описаны.
Использование смеси экстракта бадана и каменного масла стало возможным благодаря обнаружению у нее компонентов адаптогенных свойств - противовоспалительных, стресспротекторных и антигипоксичсских, превосходящих таковые у исходных компонентов. Данные свойства были установлены в результате проведенных нами экспериментов, они не вытекают из уровня техники и неочевидны для специалистов. Адаптогенные свойства смеси экстракта бадана и каменного масла не найдены в патентной и научно-медицинской литературе. Предлагаемое в качестве изобретения средство может быть использовано в практической медицине. Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Исследование противовоспалительного действия проводилось на модели острого воспалительного отека, вызванного введением формалина у 80 беспородных белых мышей-самцов массой 20-24 г, и экссудативного перитонита у 60 беспородных крыс-самцов массой 180-200 г.
Острый воспалительный отек у мышей контрольной группы вызывали введением субплантарно под подошвенный апоневроз правой лапы 0,05 мл 2% раствора формалина в изотоническом растворе натрия хлорида. Опытные группы животных до развития воспаления получали смесь экстракта бадана толстолистного и каменного масла внутрижелудочно в дозах 2-200 и 10-100 мг/кг соответственно в соотношениях 1:100, 1:2, 1:1, 3:1, 20:1 курсом 4 суток и пятый раз - за 1 час до индукции воспаления (табл.1), а также экстракт бадана и каменное масло отдельно, в эффективных дозах 50 и 100 мг/кг. Через 1 час после введения исследуемых соединений мышам инъецировали субплантарно в правую лапу 0,05 мл 2% раствора формалина в изотоническом растворе натрия хлорида. В левую лапу вводили эквиобъемное количество растворителя. Через 3,5 часа, на пике воспаления, животных забивали путем дислокации шейных позвонков. Сравнивали массу отечной и здоровой лап и определяли степень подавления отека в опытных группах по сравнению с контролем по формуле:
Показано, что через 3,5 часа в контрольной группе нелеченных животных наблюдался существенный прирост массы отечной лапы по сравнению со здоровой (на 105,45 мг), что свидетельствует о развитии острой воспалительной реакции (табл.1).
После курсового внутрижелудочного введения смеси экстракта бадана и каменного масла в дозе 50 и 100 мг/кг соответственно выраженность формалинового отека конечностей у мышей исследуемой группы уменьшилась на 37%, что свидетельствует о противовоспалительном действии смеси, сохраняющемся при используемых соотношениях компонентов от 1:100 до 20:1. Каменное масло обладает незначительным противовоспалительным действием, уступающим таковому у смеси компонентов, а экстракт бадана не проявляет противовоспалительных свойств (табл.1).
Таким образом, смесь экстракта бадана и каменного масла обладает противовоспалительным действием на модели формалинового отека у крыс, превосходящим таковое у каменного масла.
Таблица 1
Влияние комплекса каменного масла и экстракта бадана на воспалительный отек конечностей у мышей (X±S<sub>x</sub>, n=10)
Группы
Соотношение
Прирост массы конечности, мг
Подавление отека, % к контролю
Контроль
-
105,47±4,88
0
ЭБ+КМ, 2 и 200 мг/кг
1:100
93,87±4,15*
-11
ЭБ+КМ,50и 100 мг/кг
1:2
66,47±1,55*<sup>+</sup>
-37
ЭБ+КМ, 100 и 100 мг/кг
1:1
73,83±2,05*<sup>+</sup>
-30
ЭБ+КМ, 150 и 50 мг/кг
3:1
80,16±1,85*<sup>+</sup>
-24
ЭБ+КМ, 200 и 10 мг/кг
20:1
92,60±1,45*
-12,2
Экстракт бадана, 50 мг/кг
-
102,60±2,11
+2,8
Каменное масло, 100 мг/кг
-
90,70±1,28*
-14
Примечание. Здесь и в табл.2-3: ЭБ - экстракт бадана, КМ - каменное масло. * - р<0,05 по сравнению с контролем, <sup>+</sup> - р<0,05 по сравнению с группой, получавшей каменное масло.
В качестве дополнительной модели, позволяющей оценить влияние исследуемой смеси на течение воспалительного процесса, использовали модель экссудативного перитонита, которую воспроизводили внутрибрюшинным введением крысам массой 180-200 г 1% раствора уксусной кислоты в дозе 1 мл на 100 г массы тела. Через 3 часа животных декапитировали, измеряли количество экссудата в брюшной полости. Комплекс каменного масла и экстракта бадана в дозах 2-200 и 10-100 мг/кг соответственно в соотношениях 1:100, 1:2, 1:1, 3:1, 20:1 вводили животным внутрижелудочно курсом 4 суток и пятый раз за 1 час до инъекции уксусной кислоты, крысы групп сравнения получали экстракт бадана (50 мг/кг) или каменное масло (100 мг/кг). Антиэкссудативную активность препаратов выражали в % по отношению к контролю, принятому за 100%.
В контрольной группе (нелеченные животные) через 3 часа после введения раствора уксусной кислоты в брюшной полости появлялся экссудат красновато-бурого цвета в количестве 2,28±0,11 мл. В группе животных, получавших комплекс каменного масла и экстракта бадана в соотношении 1:2, выделившийся экссудат имел светло-желтую окраску, и его количество достоверно уменьшалось - процент угнетения экссудации составил 43,8% (табл.2).
Таблица 2
Антиэкссудативное действие комплекса экстракта бадана и каменного масла (X±S<sub>x</sub>; n=6-8)
Группы
Соотношение
Количество экссудата, мл
Количество экссудата в % к контролю, принятому за 100%
Угнетение экссудации в %
Фон
-
0,50±0,10
-
-
Контроль
-
2,28±0,11
100,0±4,82
0
ЭБ+КМ, 2 и 200 мг/кг
1:100
1,50±0,14*
66,0±9,33*
34,0
ЭБ+КМ, 50 и 100 мг/кг
1:2
1,28±0,18*<sup>+</sup>
56,2±14,06*
43,8
ЭБ+КМ, 100 и 100 мг/кг
1:1
1,40±0,12*<sup>+</sup>
61,5±8,57*
38,5
ЭБ+KM, 150 и 50 мг/кг
3:1
1,72±0,14*
75,7±8,14*
24,3
ЭБ+КМ, 200 и 10 мг/кг
20:1
2,05±0,08*
89,8±3,9*
10,2
Экстракт бадана, 50 мг/кг
-
2,19±0,10
96,2±4,57
3,8
Каменное масло, 100 мг/кг
-
1,72±0,09*
75,5±5,23*
24,5
Угнетение экссудации сохранялось также во всех группах животных, получавших исследуемую смесь. Судя по полученным данным, экстракт бадана на данной модели не проявлял противовоспалительных свойств. Противовоспалительные свойства каменного масла уступали таковым у смеси компонентов в соотношении 1:2 и 1:1.
Следовательно, смесь каменного масла с экстрактом бадана проявляла выраженные противовоспалительные свойства, превосходящие таковые у каменного масла, ограничивая воспалительную инфильтрацию на модели острого экссудативного перитонита у крыс.
Пример 2. Исследование антигипоксического действия проводили на 80 белых беспородных мышах-самцах массой 22-25 г. Животным вводили комплекс экстракта бадана и каменного масла внутрижелудочно профилактически курсом 4 суток и пятый раз за 1 час до гипоксии в дозах 2-200 и 10-100 мг/кг и соотношениях 1:100, 1:2, 1:1, 3:1, 20:1, а также каменное масло и экстракт бадана раздельно в дозах 100 и 50 мг/кг [Суслов Н.И., 1995]. На 5-й день животных помещали в герметическую камеру объемом 0,2 л и фиксировали продолжительность их жизни до первого агонального вдоха в минутах. Контролем служила группа мышей, получавших растворитель 1% крахмальный гель.
Таблица 3
Влияние комплекса экстракта бадана и каменного масла на продолжительность жизни мышей в условиях гипоксии (Х±S<sub>х</sub>, n=10)
Группы
Соотношение
Время жизни, мин
Изменение времени жизни по отношению к контролю, %
Гипоксия
-
24,7±2,1
0
ЭБ+КМ, 2 и 200 мг/кг
1:100
27,4±1,5
+11
ЭБ+КМ, 50 и 100 мг/кг
1:2
31,4±3,7*<sup>+</sup>
+27
ЭБ+КМ, 100 и 100 мг/кг
1:1
33,8±1,2*<sup>+</sup>
+37
ЭБ+КМ, 150 и 50 мг/кг
3:1
30,9±1,6*<sup>+</sup>
+25
ЭБ+КМ, 200 и 10 мг/кг
20:1
29,9±1,2*<sup>+</sup>
+21
Экстракт бадана, 50 мг/кг
-
28,2±2,1*
+14
Каменное масло, 100 мг/кг
-
24,4±1,8
-1,3
Судя по показателям, комплекс экстракта бадана и каменного масла в соотношении 1:2 проявлял наиболее выраженную антигипоксическую активность (табл.3), увеличивая время жизни животных в условиях гипоксии. Коэффициент защиты для исследуемого комплекса составил 1,37. Антигипоксическая активность также была обнаружена у экстракта бадана, однако она уступала по степени проявления эффектам смеси экстракта бадана и каменного масла в соотношениях 1:2, 1:1, 3:1, 20:1. Каменное масло не проявило антигипоксической активности. Следовательно, смесь экстракта бадана и каменного масла обладает антигипоксическим действием, превосходящим таковое у экстракта бадана.
Пример 3. Исследование антистрессорных свойств комплекса экстракта бадана и каменного масла выполнено на 60 белых половозрелых беспородных мышах-самцах возраста 3 мес массой 22-28 г.Мыши профилактически внутрижелудочно получали комплекс экстракта бадана и каменного масла в дозах 2-200 и 10-100 мг/кг и соотношениях 1:100, 1:2, 1:1, 3:1, 20:1, а также каменное масло и экстракт бадана раздельно в дозах 100 и 50 мг/кг курсом 5 суток. Для моделирования стресс-реакции мышей подвергали иммобилизационному стрессу путем подвешивания за шейную складку продолжительностью 24 часа. По нашим данным эта модель стресса приводит к инволюции тимико-лимфатической системы и развитию стадии истощения общего адаптационного синдрома [Зимина Т.А., 1989]. Контрольные и стресс-контрольные животные получали в эквиобъемном количестве растворитель 1% крахмальный гель.
После этого у мышей забирали кровь из хвостовой вены, животных декапитировали, вскрывали и оценивали тяжесть стресса по Г.Селье [Сслье Г., 1982]. Для этого выделяли и взвешивали тимус, селезенку и надпочечники и определяли их относительную массу (отношение массы органа в мг к массе тела животного в г). Количество лейкоцитов в периферической крови оценивали стандартными гематологическими методиками, используя камеру Горяева [Волчегородский И.А. и др., 2000].
Судя по относительной массе исследуемых органов у мышей и картине белой крови (табл.4), иммобилизационный стресс продолжительностью 24 часа вызывает выраженную инволюцию тимико-лимфоидных органов - тимуса, селезенки и приводит к гипертрофии надпочечников.
9
9
Количество лейкоцитов при 24-часовом иммобилизационном стрессе в периферической крови у мышей уменьшалось с 8,75±0,35·10/л до 4,14±0,23·10/л, что свидетельствует о развитии выраженной лейкопении и наряду со снижением массы тимуса и селезенки (кроветворных органов у этого вида животных) говорит о значительном иммунодепрессивном действии применяемой модели патологии [Селье Г., 1982; Зимина Т.А., 1989].
Таблица 4Влияние комплекса экстракта бадана и каменного масла на развитие стресс--реакции у мышей (X±S<sub>X</sub>, n=6-7)
Группы
Соотношение
Масса тимуса, мг/г массы тела
Масса селезенки, мг/г массы тела
Масса обоих надпочечников, мг/г массы тела
Кол-во лейкоцитов в крови, ·10<sup>9</sup>/л
Контроль
-
2,39±0,16
3,89±0,18
0,28±0,02
8,75±0,35
Стресс,24 ч
-
1,34±0,15*
2,41±0,17*
0,48±0,01*
4,14±0,23*
ЭБ+КМ, 2 и 200 мг/кг
1:100
1,88±0,05<sup>#</sup>
2,95±0,07<sup>#</sup>
0,40±0,02<sup>#</sup>
5,35±0,31<sup>#</sup>
ЭБ+КМ,50 и 100 мг/кг
1:2
2,03±0,20<sup>#,+</sup>
3,46±0,35<sup>#,+</sup>
0,34±0,025<sup>#</sup>
6,54±0,30<sup>#</sup>
ЭБ+КМ, 100 и 100 мг/кг
1:1
2,25±0,10<sup>#,+</sup>
3,78±0,22<sup>#,+</sup>
0,26±0,04<sup>#,+</sup>
7,50±0,20<sup>#,+</sup>
ЭБ+КМ, 150 и 50 мг/кг
3:1
2,10±0,10<sup>#,+</sup>
3,56±0,15<sup>#,+</sup>
0,34±0,03<sup>#,+</sup>
7,20±0,10<sup>#,+</sup>
ЭБ+КМ, 200 и 10 мг/кг
20:1
2,15±0,11<sup>#,+</sup>
3,30±0,08<sup>#,+</sup>
0,30±0,01<sup>#,+</sup>
7,15±0,23<sup>#,+</sup>
Экстракт бадана, 50 мг/кг
-
1,78±0,10<sup>#</sup>
3,05±0,22<sup>#</sup>
0,35±0,03<sup>#</sup>
6,33±0,55<sup>#</sup>
Каменное масло, 100 мг/кг
-
1,45±0,16
2,22±0,12
0,51±0,06
4,85±0,40
Примечание. * - р<0,05 с контролем, # - р<0,05 с группой, подвергнутой стрессу, + - р<0,05 получавшей экстракт бадана до стресса.
Комплекс экстракта бадана и каменного масла при профилактическом введении экспериментальным животным в соотношении 1:1 предотвращал инволюцию селезенки, тимуса, вызванную 24-часовым иммобилизационным стрессом (табл.3); предотвращал гипертрофию надпочечников и нормализовал их массу, обладал наиболее выраженным антистрессорным действием. Защитное (антистрессорное) действие реализовалось также у экстракта бадана, однако оно уступало таковому у смеси компонентов в соотношениях 1:2, 1:1, 3:1, 20:1. Каменное масло согласно полученным данным не обладало антистрессорным действием на применяемой модели стресса.
Из полученных данных видно, что применяемый комплекс экстракта бадана и каменного масла при курсовом введении мышам обладает антистрессорным действием, проявляющимся при тяжелом иммобилизационном стрессе продолжительностью 24 часа. Антистрессорное действие смеси экстракта бадана и каменного масла превосходило таковое у экстракта бадана.
Источники литературы
1. Венгеровский А.И. Лекции по фармакологии. - Томск, STT, 2001, - 576 с.
2. Зимина Т.А. Влияние п-тирозола на окислительный метаболизм сукцината и процессы перекисного окисления липидов в митохондриях мозга крыс при стрессе: Автореф. дис… канд. мед. наук. - Томск, 1989, - 21 с.
3. Суслов Н.И. Патогенетическое обоснование психофармакологических эффектов препаратов природного происхождения (экспериментальное исследование): Автореф. дис… д-ра мед. наук. Томск, 1995, - 48 с.
4. Селье Г. Стресс без дистресса. - М.: Прогресс, 1982, - 128 с.
5. Волчегородский И.А., Долгушин И.И., Колесников О.Л., Цейликман В.Э. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма. - Челябинск, Изд-во Челябинского пед. ун-та, 2000, - 167 с.
6. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и профилактики. - М.: Медицина, 1973, - 360 с.
7. Горбачев В.В., Горбачева В.Н. Витамины, микро- и макроэлементы. Справочник. - Минск, Книжный дом; Интерпериодика, 2002, - 544 с.
8. Виноградова Т.А., Гажев Б.Н., Виноградов В.М., Мартынов В.К. Практическая фитотерапия. - М., «ОЛМА-ПРЕСС», 1998, - 640 с.
9. Пашинский В.Г. Растения в терапии и профилактике заболеваний. Томск, 1989.
10. Яременко К.В. Адаптогены как средство профилактической медицины. Томск, Изд-во ТГУ, 1990, - 96 с.