КАРТА СРАВНЕНИЯ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ТЕСТОВ

Полезная модель относится к иммунохроматографическим методам определения различных антигенов и может быть использована для цифровой бесприборной обработки результатов анализов с использованием любых быстрых тестов с детектируемыми в видимой части спектра маркерами.
Ключевой тенденцией в мировой аналитической практике является использование «быстрых тестов» - тест-систем, позволяющих проводить анализ без привлечения специалистов и лабораторной инфраструктуры. В этой связи крайне востребованы быстрые иммунохроматографические тесты, активно применяемые для контроля различных соединений в медицине и ветеринарии, сельском хозяйстве, мониторинге окружающей среды и контроле качества. Однако данные тесты ориентированы на качественную визуальную оценку результатов - наличие или отсутствие окрашивания определенных зон тест-полоски, что ограничивает информационную значимость анализа и приводит к существенной субъективности заключений. Поэтому значительный интерес представляют методические решения, сохраняющие достоинства иммунохроматографии -простоту и экспрессность, но позволяющие получить достоверную количественную информацию о содержании в пробе контролируемого аналита. Чаще всего для этого используются различные приборы, однако они требуют особых условий эксплуатации, наличия электропитания или иных условий. Это снижает мобильность тест-систем и ограничивает возможности их использования. Компромиссный и удобный вариант -использование карт сравнения, которые сохраняют визуальную оценку, но при этом позволяют перейти к количественным результатам анализа.
Карты сравнения активно используются для ряда тест-систем. Обычно они представляют собой карту из плотной бумаги с напечатанными на ней полосами разной интенсивности. Каждая полоса имеет маркировку соответствующей концентрации определяемого аналита. Для измерения необходимо совместить аналитическую зону проявленного теста и соответствующую по интенсивности окрашивания полосу на карте сравнения. Совпадение интенсивностей будет свидетельствовать о наличии в пробе аналита в концентрации, выбранной по карте сравнения.
Предлагаемая карта сравнения изготавливается из прозрачного плотного материала, на который наносятся окрашенные линии (не менее 3 шт, разной интенсивности и с соответствующей маркировкой). Каждая линия имеет разрыв шириной 2 мм. Таким образом, совмещение производится не прикладыванием карты сравнения напротив аналитической зоны тест-полоски, а накладыванием карты на тест-полоску. При оптимальном соответствии окрашивания аналитической зоны и линии сравнения будет наблюдаться слияние полосы в одну единую гладкую линию, что визуально контролировать гораздо проще, чем соответствие полос, расположенных напротив друг друга.
Наиболее близкими аналогами заявляемой полезной модели являются две разработки:
1. Карта сравнения в комплекте с тестом для определения положительного-отрицательного результата - Патент US9115382B2 Kit for detection of hemolytic Streptococcus (https://patents.google.com/patent/US9115382B2)
2. Карта сравнения иммунохроматографического теста на прокальцитонин компании ThermoFicher (https://www.procalcitonin.com/pct-assays/pct-q-rapid.html#test-procedure).
Описанная в патенте US9115382B2 карта сравнения работает следующим образом. Аналитическая зона тест-полоски сравнивается с отпечатанной на упаковке картой сравнения и делается вывод о наличии или отсутствия антигена в пробе. Данная карта сравнения не позволяет получить количественную оценку, а служит только для более точной констатации качественного результата.
Карта сравнения компании ThermoFicher выполнена на плотной бумаге; ее применение требует прикладывания тест-полоски напротив нанесенных линий с выбором линии, наиболее подходящей по интенсивности окрашивания.
Предлагаемое устройство представляет собой карту сравнения, отпечатанную на прозрачном пластике. На нее нанесены линии различной интенсивности с указанием концентраций определяемого соединения. Линии выполнены с разрывом посередине шириной 2 мм, что дает возможность наложить прозрачную карту на использованный тест и оценить интенсивность окрашивания аналитической зоны.
Технической задачей полезной модели является получение количественных результатов иммунохроматографического анализа. Технический результат полезной модели заключается в быстром и простом визуальном (бесприборной) получении количественных результатов иммунохроматографического анализа. Указанный технический результат достигается тем, что:
- Карта сравнения изготовлена из прозрачного материала
- Лии на карте напечатаны с разрывом шириной 2 мм, который может быть наложен на аналитическую зону тест-полоски
- Рядом с каждой линией указана соответствующая концентрация определяемого соединения.
Заявляемое устройство представлено на прилагаемом чертеже (рис. 1). Анализ с его использованием проводят следующим образом:
1. На иммунохроматографическую тест-полоску наносят жидкую пробу.
2. Тест-полоску инкубируют в соответствии с инструкцией производителя.
3. Помещают тест-полоску на сухую горизонтальную поверхность.
4. Прикладывают к аналитической зоне тест-полоски прозрачную карту сравнения и выбирают линию, чтобы при совмещении с ней не было видно границы между отпечатанными компонентами и окрашиванием аналитической зоны.
5. На основе маркировки линий устанавливают концентрацию определяемого соединения в пробе.
Эффективность данного подхода подтверждается представленным ниже примером.
Определение концентрации охратоксина А иммунохроматографическим тестом.
Тест-полоска для определения охратоксина А используется в соответствии с инструкцией производителя для формирования окрашенной аналитической зоны. После этого к тест-полоске прикладывают карту сравнения таким образом, чтобы две части линии сравнения совпали с аналитической зоной и перепада в интенсивности окрашивания не наблюдалось. По маркировке выбранной линии определяют концентрацию охратоксина А в пробе. Как видно из представленных результатов (см. таблицу 1), предложенный метод обеспечивает высокую степень сходимости с референтными значениями концентраций. Метод удобен, быстр и не требует дополнительного оборудования.
В таблице 1 представлены результаты количественного измерения концентрации охратоксина А (нг/мл), проведенного с использованием иммунохроматографических тестов и предлагаемой карты сравнения.
Краткое описание чертежей
На рис. 1 представлен внешний вид карты сравнения, где: 1 - прозрачный пластик, 2 -маркировка концентраций, 3 - полосы разной интенсивности окрашивания (размеры карты примерные и могут варьироваться в зависимости от задач анализа).