ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ СЛИТОГО БЕЛКА РЕЦЕПТОРА ТРАНСФОРМИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА БЕТА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Фармацевтическая композиция, содержащая
слитый белок рецептора трансформирующего фактора роста бета (TGF-β) и буфер;
где данный буфер выбран из группы, состоящей из буфера на основе соли гистидина, сукцинатного буфера и цитратного буфера.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой
буфер на основе соли гистидина представляет собой буфер гистидин-соляная кислота,
сукцинатный буфер представляет собой буфер янтарная кислота-сукцинат натрия,
цитратный буфер представляет собой буфер лимонная кислота-цитрат натрия;
предпочтительно данный буфер представляет собой буфер лимонная кислота-цитрат натрия.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, в которой концентрация буфера составляет от примерно 5 мМ до примерно 30 мМ, предпочтительно от примерно 5 мМ до примерно 20 мМ, наиболее предпочтительно примерно 10 мМ.
4. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-3, в которой концентрация слитого белка рецептора TGF-β составляет от примерно 0,5 мг/мл до примерно 100 мг/мл, предпочтительно от примерно 30 мг/мл до примерно 70 мг/мл, наиболее предпочтительно примерно 50 мг/мл.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-4, в которой рН данной фармацевтической композиции составляет от примерно 5,0 до примерно 7,5, предпочтительно от примерно 6,0 до примерно 6,5, наиболее предпочтительно примерно 6,2.
6. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-5, где
данная фармацевтическая композиция дополнительно содержит сахарид,
предпочтительно данный сахарид выбран из группы, состоящей из трегалозы и сахарозы,
наиболее предпочтительно данный сахарид представляет собой сахарозу.
7. Фармацевтическая композиция по п. 6, в которой концентрация сахарида составляет от примерно 50 мг/мл до примерно 100 мг/мл, предпочтительно от примерно 60 мг/мл до примерно 90 мг/мл, наиболее предпочтительно примерно 80 мг/мл.
8. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-7, где
данная фармацевтическая композиция дополнительно содержит поверхностно-активное вещество,
предпочтительно данное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат,
наиболее предпочтительно данное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80.
9. Фармацевтическая композиция по п. 8, в которой концентрация поверхностно-активного вещества составляет от примерно 0,1 мг/мл до примерно 0,8 мг/мл, предпочтительно от примерно 0,4 мг/мл до примерно 0,8 мг/мл, наиболее предпочтительно примерно 0,4 мг/мл.
10. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, содержащая
от примерно 0,5 мг/мл до примерно 100 мг/мл
слитого белка рецептора TGF-β
от примерно 5 мМ до примерно 30 мМ
цитратного буфера
от примерно 50 мг/мл до примерно 100 мг/мл
сахарозы
от примерно 0,1 мг/мл до примерно 0,8 мг/мл
полисорбата 8;
предпочтительно рН данной фармацевтической композиции составляет от примерно 5,0 до примерно 7,5;
наиболее предпочтительно рН данной фармацевтической композиции составляет от примерно 6,0 до примерно 6,5;
предпочтительно данная фармацевтическая композиция содержит
от примерно 30 мг/мл до примерно 70 мг/мл
слитого белка рецептора TGF-β
от примерно 5 мМ до примерно 20 мМ
буфера лимонная кислота-цитрат натрия
от примерно 60 мг/мл до примерно 90 мг/мл
сахарозы
от примерно 0,4 мг/мл до примерно 0,8 мг/мл
полисорбата 80;
предпочтительно рН данной фармацевтической композиции составляет от примерно 6,0 до примерно 6,5;
наиболее предпочтительно данная фармацевтическая композиция содержит
примерно 50 мг/мл
слитого белка рецептора TGF-β
примерно 10 мМ
буфер лимонная кислота-цитрат натрия
примерно 80 мг/мл
сахарозы
примерно 0,4 мг/мл
полисорбата 80;
предпочтительно рН данной фармацевтической композиции составляет примерно 6,2.
11. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-10, в которой слитый белок рецептора TGF-β показан в виде общей формулы (I):
,
где внеклеточный домен (ECD) TGF-βRII представляет собой усеченную форму внеклеточной области TGF-βRII;
Ab представляет собой антитело против лиганда-1 запрограммированной смерти клетки (PD-L1) или его антигенсвязывающий фрагмент;
L представляет собой линкерную последовательность.
4
x
12. Фармацевтическая композиция по п. 11, в которой линкерная последовательность показана как (GS)G, где х равен 3, 4, 5 или 6, предпочтительно х равен 4.
13. Фармацевтическая композиция по п. 11 или 12, в которой усеченная форма внеклеточной области TGF-βRII представляет собой последовательность внеклеточного домена TGF-βRII с делецией самое большее 26 последовательных аминокислотных остатков на амино конце;
предпочтительно последовательность внеклеточного домена TGF-βRII с делецией 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или 26 последовательных аминокислотных остатков на амино конце;
более предпочтительно последовательность ECD TGF-βRII показана как SEQ ID NO: 14, 15, 16 или 17; предпочтительно показана как SEQ ID NO: 15.
14. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 11-13, в которой антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:
(А) определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) HCDR1, HCDR2 и HCDR3, показанные как SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3, соответственно; и
определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) LCDR1, LCDR2 и LCDR3, показанные как SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6, соответственно; или
(В) HCDR1, HCDR2 и HCDR3, показанные как SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 3, соответственно; и
LCDR1, LCDR2 и LCDR3, показанные как SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6, соответственно.
15. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 11-14, в которой антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:
(C) вариабельную область тяжелой цепи, показанную как SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, показанную как SEQ ID NO: 8; или
(D) вариабельную область тяжелой цепи, показанную как SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, показанную как SEQ ID NO: 11.
16. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 11-15, в которой:
аминокислотная последовательность тяжелой цепи антитела против PD-L1 показана как SEQ ID NO: 12 или имеет по меньшей мере 85%-ную идентичность с аминокислотной последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 12;
аминокислотная последовательность легкой цепи антитела против PD-L1 показана как SEQ ID NO: 13 или имеет по меньшей мере 85%-ную идентичность с аминокислотной последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 13.
17. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 11-16, в которой ECD TGF-βRII слит с карбоксильным концом тяжелой цепи антитела против PD-L1 через линкерную последовательность;
предпочтительно слитый белок рецептора TGF-β содержит:
(E) слитый пептид, образованный тяжелой цепью антитела против PD-L1 и ECD TGF-βRII, последовательность которого показана как SEQ ID NO: 23 или имеет по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 23, и
легкую цепь антитела против PD-L1, последовательность которой показана как SEQ ID NO: 13 или имеет по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 13; или
(F) слитый пептид, образованный тяжелой цепью антитела против PD-L1 и ECD TGF-βRII, последовательность которого показана как SEQ ID NO: 24 или имеет по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 24, и
легкую цепь антитела против PD-L1, последовательность которой показана как SEQ ID NO: 13 или имеет по меньшей мере 85%-ную идентичность с последовательностью, показанной как SEQ ID NO: 13.
18. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп. 1-17, причем данный способ включает: стадию приведения в контакт слитого белка рецептора TGF-β с буфером;
предпочтительно данный буфер представляет собой буфер лимонная кислота-цитрат натрия,
предпочтительно концентрация данного буфера составляет от примерно 5 мМ до примерно 20 мМ, и рН данного буфера составляет от примерно 6,0 до примерно 6,5.
19. Лиофилизированный препарат, содержащий слитый белок рецептора TGF-β, который получают лиофилизацией фармацевтической композиции по любому из пп. 1-17.
20. Лиофилизированный препарат, содержащий слитый белок рецептора TGF-β, который может быть восстановлен с образованием фармацевтической композиции по любому из пп. 1-17.
21. Восстановленный раствор, содержащий слитый белок рецептора TGF-β, который получают восстановлением лиофилизированного препарата по п. 19 или 20.
22. Изделие, содержащее один или более чем один контейнер, содержащий: фармацевтическую композицию по любому из пп. 1-17 или
лиофилизированный препарат, содержащий слитый белок рецептора TGF-β по п. 19 или п. 20, или
восстановленный раствор, содержащий слитый белок рецептора TGF-β по п. 21.
23. Применение любого, выбранного из следующего, в получении лекарственного средства:
фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-17 или лиофилизированный препарат, содержащий слитый белок рецептора TGF-β по п. 19 или 20, или восстановленный раствор, содержащий слитый белок рецептора TGF-β по п. 21, или изделие по п. 22;
предпочтительно данное лекарственное средство используется для лечения или ингибирования заболевания(ний) или расстройства(расстройств), относящегося(щихся) к пролиферации опухолевой клетки или метастазу опухолевой клетки,
более предпочтительно данное заболевание(ния) или расстройство(ва) представляет(ют) собой опухоль;
более предпочтительно данное заболевание(ния) или расстройство(ва) выбрано(ны) из группы, состоящей из рака головы и шеи, глиобластомы, глиомы, назофарингеальной карциномы, рака щитовидной железы, рака легкого, миеломного рака, миелодиспластического синдрома, нейроэндокринного рака, лимфомы, лейкоза, меланомы, базальноклеточной кожной карциномы, плоскоклеточной кожной карциномы, возвышающейся дерматофибросаркомы, карциномы из клеток Меркеля, саркомы, мезотелиомы, рака желудка, рака печени, рака поджелудочной железы, рака почки, рака мочевого пузыря, коло ректального рака, рака молочной железы, рака эндометрия, рака матки, рака шейки матки, рака яичника, рака простаты и рака яичка; рак легкого выбран из группы, состоящей из мелко клеточного рака легкого и немел коклеточного рака легкого.