ГЕН ФОСФАТАЗЫ ФОСФАТИДНОЙ КИСЛОТЫ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

1. Нуклеиновая кислота по любому из пп. от (a) до (g) ниже:
(a) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(b) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, при строгих условиях, и кодирует белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(c) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 70% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, и кодирует белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(d) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности, на 70% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(e) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, при строгих условиях, и кодирует белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(f) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, при строгих условиях, и включает экзон, кодирующий белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; и
(g) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 70% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, и включает экзон, кодирующий белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
2. Нуклеиновая кислота по п.1, где нуклеиновая кислота представляет собой любую из пп. от (a) до (g) ниже:
(a) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением от 1 до 130 аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(b) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность, комплементарную нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, в условиях 2×SSC при 50°C, и кодирует белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(c) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 90% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, и кодирует белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(d) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности, на 90% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(e) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, в условиях 2×SSC при 50°C, и кодирует белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(f) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, в условиях 2×SSC при 50ºC, и включает экзон, кодирующий белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; и
(g) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 90% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, и включает экзон, кодирующий белок с активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
3. Нуклеиновая кислота по любому из пп. от (a) до (d) ниже:
(a) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, или ее фрагмент;
(b) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, стоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, или ее фрагмент;
(c) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 9, или ее фрагмент; и
(d) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, или ее фрагмент.
4. Нуклеиновая кислота по любому из пп. от (a) до (g) ниже:
(a) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью, которая усиливает выработку диацилглицерина (DG) и/или триглицерида (TG) из фосфатидной кислоты (PA) в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(b) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, при строгих условиях, и кодирует белок, обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(c) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 70% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, и кодирует белок с активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(d) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности, на 70% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(e) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, при строгих условиях, и кодирует белок, обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(f) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, при строгих условиях, и включает экзон, кодирующий белок, обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1; и
(g) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 70% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, и включает экзон, кодирующий белок, обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1.
5. Нуклеиновая кислота по п.4, где нуклеиновая кислота представляет собой любую из пп. от (a) до (g) ниже:
(a) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением от 1 до 130 аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью, которая усиливает выработку диацилглицерина (DG) и/или триглицерида (TG) из фосфатидной кислоты (PA) в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(b) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, в условиях 2×SSC при 50ºC, и кодирует белок, обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(c) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 90% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, и кодирует белок с активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(d) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, который состоит из аминокислотной последовательности, на 90% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладает активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(e) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, в условиях 2×SSC при 50°C, и кодирует белок с активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1;
(f) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая может быть гибридизована с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, в условиях 2×SSC при 50ºC, и включает экзон, кодирующий белок с активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1; и
(g) нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, на 90% или более идентичной нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 10, и включает экзон, кодирующий белок с активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1.
6. Белок по п. (a) или (b) ниже:
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; и
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, на 70% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
7. Белок по п. (a) или (b) ниже:
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением от 1 до 130 аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; и
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, на 90% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
8. Белок по п. (a) или (b) ниже:
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью, которая усиливает выработку диацилглицерина (DG) и/или триглицерида (TG) из фосфатидной кислоты (PA) в штамме дрожжей с дефицитом PAH1; и
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, на 70% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1.
9. Белок по п. (a) или (b) ниже:
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением от 1 до 130 аминокислот в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью, которая усиливает выработку диацилглицерина (DG) и/или триглицерида (TG) из фосфатидной кислоты (PA) в штамме дрожжей с дефицитом PAH1; и
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, на 90% или более идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7, и обладающий активностью, которая усиливает выработку DG и/или TG из PA в штамме дрожжей с дефицитом PAH1.
10. Белок, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7.
11. Рекомбинантный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп.1-5.
12. Трансформант, трансформированный с помощью рекомбинантного вектора по п.11.
13. Композиция жирной кислоты, содержащая жирную кислоту или липид, полученные при культивировании трансформанта по п.12.
14. Способ получения композиции жирной кислоты, характеризующийся сбором жирной кислоты или липида из культуры, полученной при культивировании трансформанта по п.12.
15. Пищевой продукт, содержащий композицию жирной кислоты по п.13.