СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИКОПРОТЕИНА И СПОСОБ СКРИНИНГА

1. Способ получения гликопротеина, имеющего однородные аминокислотную последовательность, структуру сахаридной цепочки и структуру высшего порядка, который включает следующие стадии от (а) до (с):
(a) укладывание гликопротеина, имеющего однородные аминокислотную последовательность и сахаридную цепочку;
(b) фракционирование уложенного гликопротеина с использованием колоночной хроматографии; и
(c) сбор фракции, имеющей заданную активность.
2. Способ по п.1, который после стадии (с) дополнительно включает стадии:
(d) разворачивание гликопротеина, содержащегося во фракции, не собранной на стадии (с);
(e) повторное укладывание развернутого гликопротеина;
(f) фракционирование повторно уложенного гликопротеина с использованием колоночной хроматографии и сбор фракции, имеющей заданную активность; и
(g) повторение стадий от (d) до (f), в случае необходимости.
3. Способ скрининга на гликопротеин, имеющий заданную физиологическую активность, который включает следующие стадии: (i) - (iii):
(i) укладывание гликопротеина, имеющего однородные аминокислотную последовательность и сахаридную цепочку;
(ii) фракционирование уложенного гликопротеина с использованием колоночной хроматографии; и
(iii) измерение активности каждой фракции с целью определения, обладает ли фракция заданной активностью.
4. Способ получения смеси гликопротеинов, имеющей желательную физиологическую активность, который включает следующие стадии от (А) до (D):
(A) укладывание гликопротеина, имеющего однородные аминокислотную последовательность и сахаридную цепочку;
(B) фракционирование уложенного гликопротеина с использованием колоночной хроматографии; и
(C) измерение активности каждой фракции; и
(D) определение коэффициента смешивания фракций с целью получения желательной активности и смешивание полученных таким образом фракций в соответствии с полученным таким образом коэффициентом.
5. Способ по любому из пп.1-4, в котором, по меньшей мере, часть гликопротеинов, имеющих однородные аминокислотную последовательность и сахаридную цепочку, получают по способу, который включает в себя следующие стадии (1) - (6):
(1) этерификация гидроксильной группы смолы, имеющей гидроксильную группу, и карбоксильной группы аминокислоты, имеющей аминогруппу, защищенную жирорастворимой защитной группой, или карбоксильной группы гликозилированной аминокислоты, имеющей аминогруппу, защищенную жирорастворимой защитной группой;
(2) удаление жирорастворимой защитной группы для того, чтобы образовалась свободная аминогруппа;
(3) амидирование свободной аминогруппы и карбоксильной группы аминокислоты, имеющей аминогруппу, защищенную жирорастворимой защитной группой, или карбоксильной группы гликозилированной аминокислоты, имеющей аминогруппу, защищенную жирорастворимой защитной группой;
(4) после стадии (3) удаление жирорастворимой защитной группы для того, чтобы образовалась свободная аминогруппа;
(5) повторение стадий (3) и (4) один раз или более; и
(6) расщепление сложноэфирной связи, образовавшейся на стадии (1), с помощью кислоты.
6. Способ по п.5, в котором часть гликопротеина, имеющего однородные аминокислотную последовательность и сахаридную цепочку, получают на стадиях (1) - (6), и в котором гликопротеин получают по способу, который дополнительно включает следующую стадию (7):
(7) связывание части гликопротеина, полученного на стадии (6), с другими пептидами или гликопептидами с использованием метода лигирования.