СПОСОБ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ДИАГНОСТИКИ МИТОХОНДРИАЛЬНЫХ ПАТОЛОГИЙ НА ОСНОВЕ ТЕХНОЛОГИИ ПИРОСЕКВЕНИРОВАНИЯ

1. Способ молекулярной диагностики митохондриальных патологий на основе технологии пиросеквенирования для выявления патогенных мутаций митохондриальной ДНК, который реализуют при использовании мтДНК выделенной периферической крови путем проведения реакции просеквенирования с системой, состоящей из прямого праймера, обратного праймера, меченного биотином, и секвенирующего праймера, причем всего разработано четыре системы праймеров для четырех типов мутаций мтДНК m.11778G>A, m.8993T>G, m.3243A>G, m.8344A>G ассоциированных с наследственными митохондриальными заболеваниями: для выявления мутации m.11778G>A система, состоящая из праймеров For11778 SEQ ID N1, Rev11778 SEQ ID N2 и PS11778 SEQ ID N3; для выявления мутации m.8993T>G система состоящая из праймеров For8993 SEQ ID N4, For8993 SEQ ID N5 и PS8993 SEQ ID N6; для выявления мутации m.3243A>G система, состоящая из праймеров For3243 SEQ ID N7, Rev3243 SEQ ID N8 и PS3243 SEQ ID N9, для выявления мутации m.8344A>G система, состоящая из праймеров For8344 SEQ ID N10, Rev8344 SEQ ID N11 и PS8344 SEQ ID N12, представленные в виде лиофилизированных веществ.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для положительного контроля и количественной оценки используют четыре системы смесей плазмид, содержащих вставки последовательностей мтДНК, соответствующих нормальной и мутантоной последовательности по локусам m.11778G>A (11778G SEQ ID N20, 11778А SEQ ID N19), m.8993T>G (8993T SEQ ID N18, 8993G SEQ ID N17), m.3243A>G (3243A SEQ ID N13, 3243G SEQ ID N14), m.8344A>G (8344A SEQ ID N15, 8344G SEQ ID N16) в соотношениях от 0 до 100% каждой из плазмид с шагом в 10% и от 10 до 1% с шагом в 1% в виде в лиофилизированных веществ, причем указанные системы смесей плазмид используют в качестве матрицы для проведения реакции пиросеквенирования с использованием вышеописанных систем праймеров в соответствии с типом мутации.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для оценки уровня гетероплазмии по каждому типу митохондриальных мутаций пирограммы, полученные для образцов соотносят с пирограммами, полученными для системы смесей плазмид.