СПОСОБ ОЦЕНКИ И/ИЛИ МОНИТОРИНГА IN VITRO ЧИСТОТЫ ПРЕПАРАТА КЛЕТОК, ПРИМЕНЕНИЕ ФАКТОРА РОСТА, ПОПУЛЯЦИИ КЛЕТОК, НАБОР

1. Способ in vitro определения, оценки и/или мониторинга чистоты клеточного препарата, содержащего мезенхимальные стволовые клетки (МСК), который включает измерение уровня экспрессии упомянутым клеточным препаратом, по меньшей мере, одного фактора роста, которым является ФСК-1α и/или ФРСЭ.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что включает сравнение измеренного уровня экспрессии с контрольным уровнем экспрессии.
3. Способ по любому из пп. 1 или 2, в котором мезенхимальные стволовые клетки выделены из тканей, выбранных из группы, включающей жировую ткань, костный мозг, пуповинную кровь, околоплодные воды, вартонов студень, плаценту, периферическую кровь, фаллопиевую трубу, роговичную строму, легкие, мышцы и плодную печень.
4. Способ по п. 1, в котором мезенхимальными стволовыми клетками являются стволовые клетки жировой ткани (СКЖТ).
5. Способ по любому из пп. 1-4, в котором оценивают уровень экспрессии на уровне белка, предпочтительно путем обнаружения и/или количественного определения упомянутого, по меньшей мере, одного фактора роста, секретируемого в супернатанте клеточной культуры.
6. Способ по любому из пп. 1-4, в котором оценивают уровень экспрессии на уровне РНК, предпочтительно методами ПЦР в реальном времени, количественной ПЦР в реальном времени, нозерн-блоттинга и/или гибридизации.
7. Способ по любому из пп. 1-6, в котором клеточный препарат является преимущественно чистым, когда уровень экспрессии ФСК-1α составляет не более 100 пг/мл, предпочтительно не более 50, 40, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 пг/мл.
2
8. Способ, по любому из пп. 1-7, в котором клеточный препарат является преимущественно чистым, когда уровень экспрессии ФСК-1α составляет не более 100 пг/мл, предпочтительно не более 50, 40, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11,10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 пг/мл и/или уровень экспрессии ФРСЭ в клеточной культуральной среде составляет, по меньшей мере, 200 пг/мл, предпочтительно, по меньшей мере, 250, 260, 270, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289 или 290 пг/мл; при этом культивируют клеточный препарат в условиях гипоксии, предпочтительно при содержании O около 0,1% и при высокой концентрации глюкозы, предпочтительно около 4,5 г/л глюкозы до измерения уровня экспрессии.
2
9. Способ по любому из пп. 1-7, в котором клеточный препарат является преимущественно чистым, когда уровень экспрессии ФСК-1α составляет не более 100 пг/мл, предпочтительно не более 50, 40, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 пг/мл; и/или уровень экспрессии ФРСЭ в клеточной культуральной среде составляет, по меньшей мере, 90 пг/мл, предпочтительного меньшей мере, 95, 100, 105, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119 или 120 мкг/мл, при этом культивируют клеточный препарат при тканевом кислородном потенциале, предпочтительно при содержании O около 5% и при высокой концентрации глюкозы, предпочтительно около 4,5 г/л до измерения уровня экспрессии.
10. Способ по любому из пп. 1-9, предназначенный для оценки качества или чистоты клеточного препарата, содержащего мезенхимальные стволовые клетки (МСК), при этом содержащий МСК клеточный препарат предназначен для применения в качестве продукта клеточной терапии на основе МСК в регенеративной медицине.
11. Применение фактора роста, предпочтительно ФСК-1α и/или ФРСЭ, в качестве биомаркера качества клеточного препарата, содержащего мезенхимальные стволовые клетки (МСК), в частности, содержащего МСК клеточного препарата для применения в качестве продукта клеточной терапии на основе МСК в регенеративной медицине.
12. Клеточная популяция, идентифицированная способом in vitro по любому из пп. 1-10.
13. По существу чистая популяция мезенхимальных стволовых клеток, предпочтительно популяция стволовых клеток жировой ткани, причем уровень экспрессии ФСК-1α составляет не более 100 пг/мл SDF-1α, преимущественно не более 50, 40, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 пг/мл.
14. Набор для осуществления способа in vitro по любому из пп. 1-10, содержащий средство определения или измерения уровня экспрессии, по меньшей мере, одного фактора роста, необязательно дополнительно содержащий контроль для сравнения уровня экспрессии упомянутого, по меньшей мере, одного фактора роста.