Способ катетеризации наружной яремной вены для забора венозной крови у кроликов в хроническом эксперименте
METHOD OF EXTERNAL JUGULAR VEIN CATHETERISATION FOR VENOUS BLOOD SAMPLING IN RABBITS IN CHRONIC EXPERIMENT

Изобретение относится к области медицины, а именно к катетеризации наружной яремной вены для забора венозной крови у кроликов в хроническом эксперименте.
Наиболее близким к предлагаемому способу является способ забора крови у лабораторных животных, изложенный в «Руководстве по работе с лабораторными животными для сотрудников ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, занятых проведением доклинических испытаний», разработанный Университетской комиссией по контролю за содержанием и использованием лабораторных животных РНИМУ им. Пирогова. Способ заключается в том, что для взятия крови у кроликов используют ушную вену [Руководство по работе с лабораторными животными для сотрудников ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава России, занятых проведением доклинических испытаний / Университетская комиссия по контролю за содержанием и использованием лабораторных животных РНИМУ им. Пирогова. – М., 2015. – 42с.].
Основными недостатками указанного выше способа является риск возникновения флебитов при частом пунктировании ушной вены, так как данный сосуд является мелким и хрупким, что приводит к его значительной травматизации при многократном заборе крови. Также возможно формирование тромбов в ушной вене при многократном её пунктировании, что ведет к закупорке просвета сосуда и невозможности использования ушной вены в дальнейшем для забора крови. Важным недостатком является вероятность травматизации животного в условиях отсутствия фиксации и анальгезии перед и во время выполнения данной манипуляции и персонала, осуществляющего забор крови.
Техническим результатом изобретения является разработка визуально контролируемого способа катетеризации наружной яремной вены для забора венозной крови у кроликов в хроническом эксперименте, позволяющего осуществлять забор венозной крови в течение длительного периода времени согласно срокам эксперимента.
Технический результат достигается тем, что для забора венозной крови у кроликов в хроническом эксперименте под ингаляционным масочным наркозом выполняют продольный разрез по боковой поверхности шеи на границе средней и задней трети ключично-сосцевидной мышцы, отступив на 1 см латеральнее от средней линии в проекции наружной яремной вены.  После чего тупо послойно выделяют наружную яремную вену, катетеризируют её центральным венозным катетером под визуальным контролем (длина как внутрисосудистой, так и внесосудистой части которого составляет не менее 10 см), который фиксируют к вене двумя лигатурами. Производят перевязку вены непосредственно выше места катетеризации, формируют канал в подкожно-жировой клетчатке, направленный в межлопаточную область, где делают разрез длиной достаточной для выведения канюли катетера, после чего фиксируют ее к коже двумя швами. Забор крови через катетер производят на разных сроках эксперимента с последующим удалением катетера из наружной яремной вены после его окончания.
Данный способ катетеризации наружной яремной вены у кроликов не влияет на гемодинамику животного. Это достигается тем, что забор крови производится с учетом максимально допустимого объёма крови для забора каждые 24 часа (1% объёма циркулирующей крови), а также тем, что толщина вены значительно превышает толщину катетера, вследствие чего последний не нарушает естественного кровообращения также благодаря наличию хорошо развитых анатомических коллатералей.
СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ
Катетеризация наружной яремной вены у кролика осуществляют с соблюдением международных и отечественных норм гуманного обращения с лабораторными животными, с соблюдением мер асептики и антисептики при выполнении хирургических манипуляций. При обеспечении анестезиологического пособия ингаляционным масочным наркозом (концентрация изофлурана во вдыхаемой газовой смеси – 3%, поток воздуха – 0,8 л/мин) выполняют разрез по боковой поверхности шеи на границе средней и задней трети ключично-сосцевидной мышцы, отступив на 1 см латеральнее от средней линии в проекции наружной яремной вены, затем послойно тупым способом с помощью сосудистого диссектора выделяют наружную яремную вену. После чего осуществляют её катетеризацию центральным венозным катетером (длина как внутрисосудистой, так и внесосудистой части которого составляет не менее 10 см) по методике Сельдингера под визуальным контролем. Вену перевязывают непосредственно выше места катетеризации, катетер фиксируют к вене двумя лигатурами, затем тупым способом формируют канал в подкожно-жировой клетчатке, направленный в межлопаточную область, где делают кожный разрез длиной достаточной для выведения канюли катетера, через который выводят канюлю катетера, шовным материалом фиксируют к коже. Операционные раны ушивают послойно и обрабатывают растворами антисептиков. Осуществляют контроль проходимости катетера путем забора 1 мл венозной крови шприцем, после чего в катетер вводится 1 мл 0,1% раствора гепарина («гепариновая пробка»). Перед последующими заборами крови гепарин удаляется из катетера, а после завершения забора крови его вводят вновь. После окончания эксперимента катетер удаляют из вены, вену перевязывают лавсаном выше и ниже места катетеризации.
ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
Катетеризация была проведена 5 кроликам-самцам породы «Советская шиншилла» массой 3,5-4 кг.  Животные содержались в условиях экспериментально-биологической клиники ФГБОУ ВО КГМУ Минздрава России, где они имели неограниченный доступ к еде и воде на всём протяжении эксперимента. Апробацию метода проводили в стерильных условиях операционного блока лаборатории экспериментальной хирургии и онкологии НИИ ЭМ КГМУ.  Для обеспечения анестезиологического пособия использовали ингаляционный масочный наркоз (наркозный аппарат RWD Life Science R340 Isoflurane, производитель: Hi Tech North Rd, Nanshan Dist., Shenzhen, Guangdong Province, КНР), концентрация изофлурана во вдыхаемой газовой смеси – 3%, поток воздуха – 0,8 л/мин, с соблюдением международных и отечественных норм гуманного обращения с лабораторными животными. Манипуляция осуществлялась на операционном столе, животное фиксировали в положении на спине.
Операционное поле обрабатывали стандартным способом. Выполняли разрез по боковой поверхности шеи на границе средней и задней трети ключично-сосцевидной мышцы, отступив на 1 см латеральнее от средней линии в проекции наружной яремной вены, затем послойно тупым способом с помощью сосудистого диссектора выделяли наружную яремную вену. Катетеризацию наружной яремной вены осуществляли с помощью одноканального катетера для катетеризации центральных вен по методике Сельдингера ZKDN 3F10 (Balton, Польша, г. Варшава) под визуальным контролем (длина как внутрисосудистой, так и внесосудистой части которого составляет по 10 см соответственно). После введения катетера в наружную яремную вену ее перевязывали непосредственно выше места катетеризации, катетер фиксировали к вене двумя лигатурами, затем животное фиксировали в положении на боку, тупым способом с помощью кровоостанавливающего зажима типа «Москит» формировали канал в подкожно-жировой клетчатке, делали кожный разрез длиной 1 см (длина достаточная для выведения канюли катетера), через который канюлю катетера выводили в межлопаточную область. Катетер фиксировали к коже двумя швами. Операционные раны ушивали послойно: в области шеи – наглухо, в межлопаточной области – до катетера, после чего обрабатывали растворами антисептиков.
Осуществляли контроль проходимости катетера путем забора 1 мл венозной крови шприцем, после чего в катетер вводили 0,5 мл 0,1% раствора гепарина («гепариновая пробка»). Перед последующими заборами крови гепарин удаляли из катетера, а после завершения забора крови его вводили вновь. После окончания эксперимента катетер удаляли из вены, вену перевязывали лавсаном выше и ниже места катетеризации.
Забор крови осуществляли, учитывая, что максимально допустимый объем крови для забора каждые 24 часа составляет 0,01×объем циркулирующей крови (мл/день), что примерно равно 0,6 мл/кг/день, так как объем циркулирующей крови – 44-70 мл/кг массы кролика.
Таким образом, разработан визуально контролируемый способ катетеризации наружной яремной вены для забора венозной крови у кроликов в хроническом эксперименте, позволяющий осуществлять забор венозной крови в течение длительного периода времени согласно срокам эксперимента.