Активность внеклеточных ловушек макрофагов различных компартментов у потомства самок крыс с лекарственным поражением печени

ИММУНОЛОГИЯ № 6, 2013

and bacterial vaginosis: preliminary evidence of gene-environment interaction in the etiology of spontaneous preterm birth. Am. J. Obstet. Gynecol. 2004; 190: 1504-8.

20. Rad’kov O.V, Kalinkin M.N., Zavarin V.V. Endothelial dysfunction in pregnant women with preeclampsia depending on cytokine genes polymorphism. Tsitokiny i vospalenie. 2010; 9 (3): 15-8 (in Russian).

21. Chen Y.-P., Pfab T., Slowinski T., Richter C-M., GodesM., Hoch-er B. Impact of genetic variation of tumor necrosis factor-а on gestational hypertension. Chin. Med. J. 2006; 119: 719-24.

22. Makarycheva O.Yu., Tsarkva E.Yu., Sudomoina M.A. Kulakova O.G., Bykova O.V., Goltsova N.V. et al. Linkage and association of proinflammatory cytokines genes IL-6, IFNG and TNF with multiple sclerosis. Molekulyarnaya biologiya. 2010; 44 (5): 26-36 (in Russian).

23. Qidwai T., Khan E.F. Tumor necrosis factor gene polymorphism and disease prevalence. Scand. J. Immunol. 2011; 74: 522-47.

24. Wahner A.D., Sinsheimer J.S., Bronstein J.M., Ritz B. Inflammatory cytokine gene polymorphisms and increased risk of Parkinson disease. Arch. Neurol. 2007; 64: 836-40.

25. Ostrovskaya O.V., Ivakhnishina M.N., Budko N.M. Vlasova M.A.,

Nagovitsina E.B, Morozova I.O. Maternal infections - one of the sections of multifactorial congenital defects nature. Spravochnik pediatra. 2010; 4: 31-41 (in Russian).

26. Popova O.V., BokonbaevaS.Dzh. Features perinatal CNS lesions in persistent viral infections. Vestnik KRSU. 2006; 6 (2): 85-90 (in Russian).

27. Bushtyreva I.O., Kurochka M.P., Gayda O.V., Volokitina E.I. Preeclampsia: an infectious disease or not? In.: Materials X Russian scientific forum “Mother and Child”. September 29-October

2. Moscow; 2009: 32 (in Russian).

28. Pavic I., Polic B., Crnkovic I., Lucin P., Jonjic S, Koszinowski U.H. Participation of endogenous tumor necrosis factor a in host resistance to cytomegalovirus infection. J. Gen. Virol. 1993; 74: 2215-23.

29. Sukhalentseva A.N., Naslednikova I.O., Chernov A.S., Reshetnik-ov V.I., Urazova O.I., Novitskiy V.V. et al. Immunogenetic markers of slow virus infections. Molekulyarnaya meditsina. 2011; 3: 23-7 (in Russian).

30. Herbein G., O’Brien W.A. Tumor necrosis factor (TNF)-a and TNF-receptors in viral pathogenesis. Proc. Soc. Exp. Biol. (N. Y.). 2000; 223: 241-7.

Поступила 06.09.13

ВРОЖДЕННЫЙ ИММУНИТЕТ

© Г.в. БРЮХИН, А.в. ШОПОВА

УДК 616.36-02:615.2/.3]-092:612.112.95]:618.3-092:9

Г.В. Брюхин, А.В. Шопова

АКТИВНОСТЬ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛОВУШЕК МАКРОФАГОВ РАЗЛИЧНЫХ

компартментов у потомства самок крыс с лекарственным поражением печени

Кафедра гистологии, эмбриологии и цитологии ГБОУ ВПО Челябинская государственная медицинская академия Минздрава России, 454092, г Челябинск, ул. Воровского, 64, тел. 232-01-50 viktoriya malinina@list.ru

Проведено исследование влияния экспериментального лекарственного поражения печени матери на способность к ловушкообразованию, а также активности внеклеточных ловушек макрофагов различных компартментов у потомства. Ловушкообразующую способность оценивали по двум параметрам. Количество ловушек было снижено в опытной группе, а длина хвоста внеклеточных сетей, напротив, оказалась большей в фагоцитирующих клетках, выделенных от крысят опытной группы. Установили угнетение активности макрофагальных внеклеточных ловушек у потомства самок крыс опытной группы, что проявляется снижением количества активных ловушек, индекса макрофагальной ловушки и киллинговой активности изучаемых мононуклеаров. Результаты исследования позволяют сделать вывод о том, что у матерей с лекарственным поражением печени рождается физиологически незрелое потомство с угнетением защитных реакций, что в последствии приводит к нарушению неспецифической резистентности организма плода.

Ключевые слова: активность макрофагальных ловушек, способность к ловушкообразованию, киллинг, поражение печени, потомство

G.V Bryuhin, A.V Shopova

THE ACTIVITY oF TRAPS FoRMATIoN of MAKRoFAGES of DIFFERENT KoMPARTMENTS of THE

posterity of female rats with medicinal liver defeat

The investigation of effect of the experimental drug liver defeat of mother's on ability to trap and the activity of macrophage extracellular traps of different compartments in the posterity was studied. Trap ability was assessed in two ways. Number of traps was reduced in the experimental group, and the length of the tail of extracellular networks, by contrast, was greater in the phagocytic cells isolated from experimental rats. Inhibition of macrophage extracellular traps in the posterity of female rats of the experimental group, which manifested by reduced number of active traps, index of a makrophage trap and killing activity of studied mononuclear cells was found. Results of the study suggest that the mothers with drug liver defeat have physiologically immature posterity with depression of protective reactions, which, in consequence, leads to defeat of non-specific resistance of the fetus.

Key words: macrophage traps activity, the ability to traps, killing, liver defeat, posterity

- 304 -

врожденный иммунитет

При попадании в организм чужеродных агентов макрофаги формируют мощный иммунный ответ, реализуемый за счет взаимодействия антигенов с рецепторным аппаратом клеток системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ), активируя их и создавая условия для успешного фагоцитирования этих агентов. Фагоцитоз является первичным механизмом, с помощью которого иммунная система устраняет внеклеточные патогенные микроорганизмы [1]. Макрофаги даже называют клетками-мусорщиками из-за их способности захватывать, поглощать, убивать и переваривать все, с чем они соприкасаются [2]. В процессе фагоцитоза поглотительная способность постепенно снижается, что связано с нарушением рецепторного поля мононуклеаров и истощением функциональных резервов фагоцита и как следствие приводит к невозможности адекватного реагирования на внедрение чужеродных агентов. Открытие нейтрофильных внеклеточных ловушек и установление их антимикробного эффекта как важнейшего звена врожденного иммунитета стало началом нового этапа в понимании жизненного цикла и функции ней-трофильных гранулоцитов [3]. Установлено, что внеклеточные ловушки могут образовывать не только нейтрофилы, но и клетки СМФ [4-6]. Внеклеточные макрофагальные ловушки представляют собой сетеподобные структуры, состоящие из нитей ДНК, различных белков и ферментов, способных к киллингу микроорганизмов во внеклеточном пространстве [2]. Именно этот механизм представляется особо интересным и новым, так как является одним из звеньев врожденного иммунитета [7].

Ранее в условиях эксперимента мы установили, что хроническая патология печени матери различной этиологии обусловливает нарушение становления у потомства систем жизнеобеспечения, в том числе кроветворной, иммунной и репродуктивной [8], протекающее на фоне снижения жизнеспособности потомства [9, 10]. В последние годы клиницистов все больше интересует лекарственная болезнь, при которой очень часто происходит поражение печени [11]. В связи с этим целью данного исследования стал анализ влияния лекарственной патологии печени самок крыс на способность к ловушкообразованию и активности внеклеточных ловушек макрофагов различных компартментов у потомства.

Материалы и методы. Экспериментальное исследование выполнено на самках белых лабораторных крыс «Ви-стар» (18 взрослых самок) и их потомстве (37 животных из 18 пометов). Для создания модели лекарственного гепатита использовали парацетамол, который вводили 1 раз в сутки в течение 2 дней в дозе 2,5 г на 1 кг массы тела интрагастраль-но. Поражение печени верифицировали с помощью морфологических (центролобулярные некрозы печеночных долек, периваскулярная гиперплазия и гипертрофия купферовских клеток, расширение синусоидных капилляров, лимфогистио-цитарная инфильтрация портальных трактов, увеличение количества двуядерных и полиплоидных гепатоцитов), биохимических (повышение активности ферментов АлАТ, АсАТ, ЛДГ, повышение уровня свободного билирубина) и иммунологических (повышение титра противопеченочных антител 1:280, 1:560) критериев.

Объектом исследования стало 60-дневное потомство самок крыс с экспериментальным лекарственным поражением

Рис. 1. Активность внеклеточных макрофагальных ловушек различных компартментов у потомства самок крыс с лекарственным поражением печени матери.

К - контрольная группа, О - опытная.

А - альвеолярные макрофаги; М - моноциты периферической крови; П -перитонеальные макрофаги; МВЛ - макрофагальные клеточные ловушки; * - результат статистически достоверен по сравнению с контролем (р < 0,05).

печени. Всего исследовали 10 крысят из 9 пометов. Интактную группу составили 9 крысят из 9 пометов.

Животные содержались в одинаковых условиях. Работу с экспериментальными животными проводили в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием лабораторных животных», утвержденными приказом Минздрава СССР № 755 от 12.08.77. Исследованию были подвергнуты моноциты периферической крови, а также перитонеальные и альвеолярные макрофаги, которые выделяли по общепринятой методике [12]. Для исследования фагоцитарных свойств использовали суточную культуру S. aureus.

Прежде всего определяли количество макрофагов, способных к образованию ловушек, и их размер. Принадлежность внеклеточной ловушки к клеткам СМФ дифференцировали по форме ядра, при этом нейтрофильные ловушки не учитывали. Об активности внеклеточных макрофагальных ловушек судили по количеству активных ловушек (количество внеклеточных структур, захвативших S. aureus), индексу макрофагальной ловушки (количество бактерий в 100 подсчитанных внеклеточных ловушках в пересчете на 1 ловушку) и киллинговой активности [13] (процент убитых поглощенных микроорганизмов из расчета на 1 макрофагальную ловушку). Контроль реакции ловушкообразования проводили с помощью фермента 0,02% раствора ДНКазы на 0,01 М трис-буфере (рН 7,6), при этом внеклеточные нити под действием указанного фермента разрушались. Полученные цифровые данные обрабатывали на компьютере с использованием программы Statistica 17.0 (Statsoft, Inc.). Учитывая небольшую выборку животных, достоверность полученных результатов опреде-

Таблица 1

Способность к ловушкообразованию у потомства самок крыс с лекарственным поражением печени на 60-е сутки постнатального онтогенеза

Группа животных Количество ловушек Длина хвоста

моноциты периферической крови перитонеальные макрофаги альвеолярные макрофаги моноциты периферической крови перитонеальные макрофаги альвеолярные макрофаги

К (n = 9) 8,35 ± 1,03 13,74 ± 0,76 14,21 ± 0,95 9,56 ± 1,52 13,62 ± 2,31 16,81 ± 2,09

О Is4 и о 5,11 ± 0,79 10,83 ± 0,65 9,9 ± 0,58* 20,22 ± 9,76 29,92 ± 6,97* 31,28 ± 11,29

Примечание. Здесь и в табл. 2: К - контрольная группа, О - опытная ; * - результат статистически достоверен по сравнению с контролем (р < 0,05).

- 305 -

ИММУНОЛОГИЯ № 6, 2013

Таблица 2

Активность внеклекточных ловушек макрофагов различных компартментов у потомства самок крыс с лекарственным поражением печени

Группа Активность МВЛ Индекс МВЛ Киллинг

ных А П М А П М А П М

К О 73,67 ± 9,46 43,5 ± 3,62* 52,33 ± 3,44 36,31 ± 4,39* 32,33 ± 4,63 24,17 ± 4,16 3,98 ± 0,39 2,37 ± 0,4* 6,08 ± 0,24 4,81 ± 0,51 3,14 ± 0,31 2,12 ± 0,13* 65,98 ± 10,64 23,51 ± 6,76* 60,07 ± 17,66 22,61 ± 7,79 52,92 ± 7,85 18,06 ± 3,59*

Примечание. А - альвеолярные макрофаги; М - моноциты периферической крови; П - перитонеальные макрофаги; МВЛ - макрофагальные внеклеточные ловушки.

ляли при помощи непараметрического метода - критерия Манна-Уитни.

Результаты и обсуждение. Прежде всего мы установили, что перитонеальные и альвеолярные макрофаги, а также моноциты периферической крови экспериментальных животных способны образовывать внеклеточные ловушки (табл. 1).

Как видно из таблицы, ловушкообразующая способность выражена в большей степени у макрофагов (как перитонеальных, так и альвеолярных) по сравнению с таковой у моноцитов периферической крови. Обращает на себя внимание то, что у подопытных крысят ловушкообразующая способность исследуемых мононуклеаров ниже, чем в контроле.

Одним из показателей ловушкообразующей способности является длина внеклеточных нитей ДНК [14].

При анализе величины хвоста макрофагальных внеклеточных ловушек выявили следующую закономерность. У интактных животных наибольшая величина хвоста характерна для альвеолярных макрофагов, а у подопытных животных максимальную длину хвоста зарегистрировали у макрофагов брюшной полости и альвеолярных макрофагов. При этом исследуемый показатель у опытных крысят существенно превышает таковой в контроле (табл. 2).

Активность макрофагальных ловушек оценивали прежде всего по содержанию в них стафилококков (рис. 1-7).

Установили, что наибольшее количество ловушкообразующих клеток у интактных крысят имеется среди альвеолярных (73,67 ± 9,46%) и перитонеальных (52,33 ± 3,44) макрофагов. Аналогичную закономерность выявлена и у подопытных животных, у которых наибольшее количество клеток, способных к образованию ловушек, определили среди альвеолярных (43,5 ± 3,62) и перитонеальных макрофагов (36,31 ± 4,39), а наименьшее - у моноцитов периферической крови (24,17 ± 4,16%). Обращает на себя внимание то, что

Рис. 2. Начало формирования моноцитарной внеклеточной ловушки (стрелка).

Здесь и на рис. 3, 4: окраска акридиновым оранжевым. Ув. 900 (об. х90; ок. х10).

у подопытных животных количество ловушкообразующих клеток среди макрофагов и моноцитов периферической крови ниже, чем в контроле.

Другим показателем активности ловушек является индекс макрофагальных ловушек, отражающий среднее содержание S. aureus из расчета на 1 ловушку.

У интактных крысят наибольший индекс макрофагальной ловушки выявили у перитонельных макрофагов (6,08 ± 0,24), в то время как у альвеолярных макрофагов и моноцитов периферической крови исследуемый показатель оказался сниженным, составив соответственно 3,98 ± 0,39 и 3,14 ± 0,31.

Подобную закономерность отметили и у подопытных животных, у которых наибольший индекс макрофагальной ловушки оказался также у макрофагов перитонеального экссудата (4,81 ± 0,51), а наименьший - у альвеолярных макрофагов и моноцитов периферической крови (соответственно 2,37 ± 0,4 и 2,12 ± 0,13).

Оценка киллинговой активности позволила установить, что у интактных животных наибольшая киллинговая активность ловушек наблюдается у альвеолярных (65,98 ± 10,64) и перитонеальных (60,07 ± 17,66) макрофагов, а наименьшая - у моноцитов периферической крови (52,92 ± 7,85). У подопытных животных киллинговая активность внеклеточных ловушек перитонеальных и альвеолярных макрофагов приблизительно одинакова и составляет соответственно 22,61 ± 7,79 и 23,51 ± 6,76. В то же время киллинговая активность моноцитов периферической крови у подопытных животных оказалась несколько сниженной (18,06 ± 3,59). Обращает на себя внимание то, что киллинговая активность внеклеточных ловушек макрофагов и моноцитов периферической крови у подопытных животных существенно снижена.

Известно, что процессы фагоцитоза являются главным способом устранения чужеродных бактерий из организма, а открытие макрофагальных ловушек только подтверждает его эффективность. Полученные нами результаты, свидетельствующие о нарушении ловушкообразующей способности

Рис. 3. Перитонеальный макрофаг на стадии формирования внеклеточной ловушки (внеклеточные нити ДНК указаны стрелкой).

- 306 -

врожденный иммунитет

Рис. 4. Альвеолярный макрофаг на стадии формирования внеклеточной ловушки (внеклеточные нити ДНК указаны стрелками).

Рис. 5. Печень взрослой крысы с экспериментальным лекарственным поражением печени, вызванным введением парацетамола. Умеренное разрастание междольковой соединительной ткани (стрелка). Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100 (об. х10, ок. х10).

макрофагов различных компартментов и моноцитов периферической крови потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени, тесно согласуются с ранее опубликованными данными, указывающими на изменение резистентности и реактивности у данной группы животных [9]. Вместе с тем имеются данные [15], свидетельствующие о нарушении миелоидного кроветворения у потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени, что нашло проявление, с одной стороны, в уменьшении количества клеточных элементов костно-мозгового миелоидного ростка, а с другой - в депрессии их функционального состояния. В результате исследований Г.В. Брюхина и Е.Ю. Шавриной [16] установлено, что для потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением гепатобилиарной системы характерны снижение количества и депрессия функционального состояния моноцитов периферической крови, что проявляется в угнетении миграционной, адгезивной, фагоцитарной и киллинговой активности.

Рис. 6. Печень взрослой крысы с экспериментальным лекарственным поражением печени, вызванным введением парацетамола. Многочисленные очаговые некротические изменения (1), дистрофия, разброс ядер гепатоцитов (2). Здесь и на рис. 7 окраска: гематоксилином и эозином. Ув. 400 (об. х40, ок. х10).

Рис. 7. Печень взрослой крысы с экспериментальным лекарственным поражением печени, вызванным введением парацетамола. Лимфогистициоцитарная инфильтрация портальных трактов и перива-скулярная инфильтрация (1), увеличение количества двуядерных и полиплоидных гепатоцитов (2, 3).

Заслуживают внимания результаты, полученные рядом авторов [14], при изучении факторов, которые влияют на ловушкообразующую способность макрофагов. В частности, ими была изучена роль цитоскелета, кальциевых каналов и мембран в данном процессе. При этом к клеткам добавляли лекарственные препараты, так или иначе регулирующие функции цитоскелета, - цитохалазин, являющийся ингибитором актиновых филаментов, колхицин, который связывается с внутриклеточным белком тубулином и нарушает об-

- 307 -

ИММУНОЛОГИЯ № 6, 2013

разование и функции микротрубочек, верапамил - блокатор кальциевых каналов, циклогексимид - блокатор синтеза белка и преднизолон, оказывающий стабилизирующее действие на мембраны [14]. В результате исследования авторы установили, что данные вещества блокируют формирование внеклеточных ловушек, что свидетельствует об участии микротрубочек, кальциевых каналов и плазмолеммы в процессе формирования внеклеточных ловушек.

В целом полученные результаты свидетельствуют о том, что хроническая патология печени матери в условиях эксперимента обусловливает угнетение ловушкообразующей способности макрофагов различных компартментов и моноцитов периферической крови потомства.

Все вышеизложенное позволяет предположить, что при моделировании хронической патологии печени у самок крыс происходит изменение оптимальных условий внутриутробного развития, что обусловливает нарушение становления систем жизнеобеспечения потомства, в том числе кроветворной. В свою очередь нарушение моноцитопоэза вызывает депрессию функционального состояния моноцитов и нарушает их способность образовывать полноценные тканевые макрофаги.

Таким образом, полученные результаты научно обосновывают необходимость выделения детей, рожденных от матерей с патологией печени, в группы диспансерного наблюдения по иммунологическому профилю.

ЛИТЕРАТУРА

1. Милюкене В.В., Бизюлявичене Г.Ю., Хаустова Л.П. и др. Определение количественных параметров фагоцитоза Esher-ichia coli перитонеальными макрофагами мыши. Цитология. 2007; 49 (10): 853-7.

2. Фрейдлин И.С. Цитокины и межклеточные контакты в противоинфекционной защите организма. Соросовский образовательный журнал. 1996; 7: 19-25.

3. Долгушин И.И., Андреева Ю.С., Савочкина АЮ. Нейтрофиль-ные внеклеточные ловушки и методы оценки функционального статуса нейтрофилов. М.: Издательство РАМН. 2009.

4. Chow O.A., von Kockritz-Blickwede M., TaylorA.B. Enhance formation of phagocyte extracellular traps. Cell Host Microbe. 2010; 8: 445-54.

5. Webster S.J., Daigneault M., Bewley M. A. et al. Distinct cell death programs in monocytes regulate innate responses following challenge with common causes of invasive bacterial disease. J. Immunol. 2010; 185 (5): 2968-79.

6. von Kockritz-Blickwede M., Nizet V. Innate immunity turned inside - out: antimicrobial defense by phagocyte extracellular traps. J. Mol. Med. 2009; 87 (8): 775-83.

7. Нестерова И.В. Нейтрофильные экстрацеллюлярные сети: протекция и защита. Int. J. Immunorehabil. (Международный журнал по иммунореабилитации). 2009; 11 (1): 25.

8. Сизоненко М.Л., Брюхин Г.В. Особенности становления эндокринного компонента мужских половых желез потомства самок крыс с хроническим лекарственным поражением гепато-билиарной системы. Проблемы репродукции. 2012; 1: 31-5.

9. Брюхин Г.В. Сравнительный анализ субпопуляционного состава тимоцитов и Т-лимфоцитов периферической крови потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза. Иммунология. 2004; 2: 83-6.

10. Брюхин Г.В., Сизоненко М.Л. Роль экспериментального поражения печени матери в развитии физиологической незрелости потомства. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2012; 154 (11): 544-7.

11. Буеверов А.О. Лекарственные поражения печени. Российский медицинский журнал.. 2001; 9: 13-4.

12. Фримель Г., ред. Иммунологические методы: Пер. с нем. А.П. Таросова. М.: Медицина, 1987.

13. Рудик Д.В., Тучина Е.С., Тихомирова Е.И., Сенотов А.С. Оценка функционально-метаболического статуса фагоцити-рующихклеток под действием низкоинтенсивного лазерного излучения ИК-диапазона (850 нм). Фундаментальные исследования. 2006; 5: 100-1.

14. Савочкина АЮ. Нейтрофильные внеклеточные ловушки: механизмы образования, методы обнаружения, биологическая роль: Дис. Челябинск; 2012.

15. Невзорова Н.В., Брюхин Г.В. Характеристика ШИК - позитивного материала в клетках нейтрофилоцитарного пула костного мозга у потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени. Фундаментальные исследования. 2012; 8: 116-21.

16. Брюхин Г.В., Шаврина ЕЮ. Исследование поверхностнорецепторного аппарата мононуклеарных фагоцитов различных компартментов у потомства матерей с экспериментальным поражением гепатобилиарной системы. Вестник Уральской медицинской академической науки. 2011; 2/1 (35): 76-7.

REFERENCES

1. Milukene V.V., BizyulyavicheneG.Yu., Khaustova L.P. et al. Determination of quantitative parameters of phagocytosis Esherichia coli peritoneal macrophages mouse. cytology. 2007; 49 (10): 853-7.

2. Freydlin I.S. Cytokines and intercellular contacts in protecting the organism from infections. Soros educational journal. 1996; 7: 19-25.

3. Dolgushin I.I., Andreeva Yu.S., Savochkina A.Yu. Neutrophil extracellular traps and methods for the assessment of functional status of neutrophils. M: Publishing house of Russian Academy of medical sciences. 2009.

4. Chow O.A., von Kockritz-Blickwede M., Taylor A.B. Enhance formation of phagocyte extracellular traps. Cell HostMicrobe. 2010; 8: 445-54.

5. WebsterS.J., Daigneault M., Bewley M.A. et al. Distinct cell death programs in monocytes regulate the innate responses following challenge with common causes of invasive bacterial disease. J. Immunol. 2010; 185 (5): 2968-79.

6. von Kockritz-Blickwede M., Nizet V. Innate immunity turned inside - out: antimicrobial defense by phagocyte extracellular traps. J. Mol. Med. 2009; 87 (8): 775-83.

7. Nesterova I.V Neutrophil extracellular network: patronage and protection. Int. J. Immunorehabil. (International Journal on Immunorehabilitation). 2009; 11 (1): 25.

8. Sizonenko M.L., Brukhin G.V. Features of the formation of endocrine component of male sexual glands offspring of female rats with chronic drug defeat of the hepatobiliary system. Problems of reproduction. 2012; 1: 31-5.

9. Brukhin G.V. Comparative analysis subpopulation composition of thymocytes and peripheral blood T lymphocytes offspring of female rats with chronic experimental liver disease different Genesis. Immunology. 2004; 2: 83-6.

10. Brukhin G.V., SizonenkoM.L. Role experimental liver mother in the development of the physiological immaturity of the offspring. Bulletin of experimental biology and medicine. 2012; 154 (11): 544-7.

11. Bueverov O.A. Drugs damage the liver. Russian medical journal.. 2001; 9: 13-4.

12. Frimel ’G. Immunological methods. Ed., G Frimel, M: Medicine. 1987; 472.

13. RudikD.V., Tuchina E.S., Tikhomirova E.I., Senotov A.S. Assessment of functional - metabolic status phagocyte cells under the action of low-intensity laser radiation infrared band (850 nm). Fundamental research. 2006; 5: 100-1.

14. Savochkina A.Yu. Neutrophil extracellular traps: mechanisms of formation, detection methods, biological role: Dis. Chelyabinsk; 2012.

15. Nevzorova N.V., Brukhin G.V. Feature CHIC - positive material in the cells нейтрофилоцитарного the bone marrow in the offspring of female rats with experimental liver damage. Fundamental research. 2012; 8: 116-21.

16. Brukhin G.V., Shavrina E.Yu. The study of surface-receptor apparatus of mononuclear phagocytes various compartments in the offspring of mothers with experimental defeat of the hepatobiliary system. Bulletin of Ural Academy of medical sciences. 2011; 2/1 (35): 76-7.

Поступила 31.10.13

- 308 -