Способ получения L-изолейцина с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, в которой сверхэкспрессирован ген cycA

1. Способ получения L-изолейцина или его соли, включающий:
(i) выращивание бактерии семейства Enterobacteriaceae, которая способна продуцировать L-изолейцин в питательной среде, для продукции и накопления L-изолейцина или его соли в культуральной жидкости или бактериальных клетках, или обоих; и
(ii) выделение L-изолейцина или его соли из культуральной жидкости или бактериальных клеток, или обоих,
отличающийся тем, что бактерия модифицирована таким образом, что ген cycA сверхэкспрессирован.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный ген cycA кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из:
(A) белка, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(B) белка, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, но которая содержит одну или более мутаций, включающих замену, делецию, вставку и/или добавление одного или нескольких аминокислотных остатков, причем указанный белок обладает активностью транспортера, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; и
(C) белка, имеющего гомологию не менее чем 70% по сравнению с полной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2 и обладающего активностью транспортера, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный ген cycA кодируется ДНК, выбранной из группы, состоящей из:
(A) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1;
(B) ДНК, кодирующей белок, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, но которая содержит одну или более мутаций, включающих замену, делецию, вставку и/или добавление одного или нескольких аминокислотных остатков, причем указанный белок обладает активностью транспортера, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; и (С) ДНК, являющейся вариантом нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 1 ввиду вырожденности генетического кода.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный ген cycA сверхэкспрессирован увеличением числа копий гена cycA и/или модификацией регулирующего экспрессию гена cycA участка, так что экспрессия указанного гена усилена по сравнению с немодифицированной бактерией.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная бактерия принадлежит к роду Escherichia.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанная бактерия есть Escherichia coli.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная бактерия принадлежит к роду Pantoea.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что указанная бактерия есть Pantoea ananatis.
9. Способ по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что количество побочной аминокислоты L-изолейцина снижено по сравнению с немодифицированной бактерией.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что побочная аминокислота выбрана из группы, состоящей из L-валина, L-лейцина, L-норвалина, L-норлейцина, α-аминобутановой кислоты и их комбинаций.