СТАБИЛЬНЫЕ КОМПОЗИЦИИ АНТИГЕНОВ NEISSERIA MENINGITIDISRLP 2086

1. Иммуногенная композиция, содержащая полипептид подсемейства B LP2086 (fHBP), приготовленная таким образом, что эффективность полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP) стабильна с течением времени.
2. Иммуногенная композиция, содержащая детергент и полипептид подсемейства B LP2086 (fHBP) в молярном соотношении детергент:белок менее 10:1.
3. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, где по меньшей мере 50%-ная эффективность полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP) сохраняется в течение по меньшей мере 1 месяца, 2 месяцев, 3 месяцев, 4 месяцев, 5 месяцев, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев, 18 месяцев, 24 месяцев, 30 месяцев, 36 месяцев, 42 месяцев, 48 месяцев, 54 месяцев или 60 месяцев.
4. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, дополнительно содержащая полипептид подсемейства A LP2086 (fHBP).
5. Иммуногенная композиция по п.1, дополнительно содержащая детергент.
6. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 0,5:1 до примерно 10:1.
7. Иммуногенная композиция по п.6, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 1:1 до примерно 5:1.
8. Иммуногенная композиция по п.7, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 1,4:1 до примерно 4,2:1.
9. Иммуногенная композиция по п.8, где молярное отношение детергент:белок составляет примерно 2,8:1.
10. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, где количество детергента является достаточным для снижения связывания полипептида с кремнием в контейнере.
11. Иммуногенная композиция по п.10, где контейнер представляет собой шприц или флакон.
12. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, где детергент представляет собой неионный детергент.
13. Иммуногенная композиция по п.12, где детергент представляет собой полисорбатный детергент.
14. Иммуногенная композиция по п.13, где детергент представляет собой Полисорбат 80.
15. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, дополнительно содержащая многовалентный катион.
16. Иммуногенная композиция по п.15, где многовалентным катионом является кальций или алюминий.
3
4
2
17. Иммуногенная композиция по п.16, которая содержит (Ca)(PO).
18. Иммуногенная композиция по п.16, где концентрация алюминия составляет от примерно 0,1 мг/мл до примерно 1 мг/мл.
19. Иммуногенная композиция по п.18, где концентрация алюминия составляет примерно 0,5 мг/мл.
4
3
2
4
3
20. Иммуногенная композиция по п.16, которая содержит один или более из AlPO, Al(OH), Al(SO) и квасцов.
21. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, дополнительно содержащая гистидин.
22. Иммуногенная композиция по п.21, где концентрация гистидина составляет от примерно 2 мМ до примерно 20 мМ.
23. Иммуногенная композиция по п.22, где концентрация гистидина составляет от примерно 5 мМ до примерно 15 мМ.
24. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, дополнительно содержащая сукцинат.
25. Иммуногенная композиция по п.24, где концентрация сукцината составляет от примерно 2 мМ до примерно 10 мМ.
26. Иммуногенная композиция по п.25, где концентрация сукцината составляет от примерно 3 мМ до примерно 7 мМ.
27. Иммуногенная композиция по п.25, где концентрация сукцината составляет примерно 5 мМ.
28. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, где pH составляет от примерно 5,0 до примерно 8,0.
29. Иммуногенная композиция по п.28, где pH составляет от примерно 5,8 до 6,0.
30. Иммуногенная композиция по п.29, где концентрация гистидина составляет примерно 10 мМ, pH 6,0.
31. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, которая является лиофилизированной.
32. Иммуногенная композиция по п.31, где лиофилизированная композиция ресуспендирована в буфере, содержащем алюминий.
4
3
2
4
3
33. Иммуногенная композиция по п.32, где буфер содержит AlPO, Al(OH), Al(SO) или квасцы.
4
34. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, содержащая Полисорбат 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 10 мМ гистидина pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
35. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, по существу состоящая из 200 мкг/мл полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP), Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 10 мМ гистидина pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
36. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, по существу состоящая из 200 мкг/мл полипептида подсемейства A rLP2086 (fHBP), 200 мкг/мл полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP), Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 10 мМ гистидина pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
37. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, содержащая Полисорбат 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 5 мМ сукцината pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
38. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, по существу состоящая из 200 мкг/мл полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP), Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 5 мМ сукцината pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
39. Иммуногенная композиция по п.1 или 2, по существу состоящая из 200 мкг/мл полипептида подсемейства A rLP2086 (fHBP), 200 мкг/мл полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP), Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 5 мМ сукцината pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
40. Способ стабилизации эффективности полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP) в иммуногенной композиции, включающий стадию (a) приготовления полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP) в виде композиции с молярным отношением детергент:белок от примерно 0,5:1 до примерно 10:1.
41. Способ по п.40, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 1:1 до примерно 5:1.
42. Способ по п.41, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 1,4:1 до примерно 4,2:1.
43. Способ по п.42, где молярное отношение детергент:белок составляет примерно 2,8:1.
44. Способ по п.40, где количество детергента является достаточным для снижения связывания полипептида с кремнием в контейнере.
45. Способ по п.44, где контейнер представляет собой шприц или флакон.
46. Способ по п.40, где детергент представляет собой неионный детергент.
47. Способ по п.46, где детергент представляет собой полисорбатный детергент.
48. Способ по п.47, где детергент представляет собой Полисорбат 80.
49. Способ по п.40, где композиция дополнительно содержит многовалентный катион.
50. Способ по п.49, где многовалентным катионом является кальций или алюминий.
3
4
2
51. Способ по п.50, где композиция содержит (Ca)(PO).
52. Способ по п.50, где концентрация алюминия составляет от примерно 0,1 мг/мл до примерно 1 мг/мл.
53. Способ по п.52, где концентрация алюминия составляет примерно 0,5 мг/мл.
4
3
2
4
3
54. Способ по п.49, где композиция содержит AlPO, Al(OH), Al(SO) или квасцы.
55. Способ по п.40, дополнительно включающий гистидин.
56. Способ по п.55, где концентрация гистидина составляет от примерно 2 мМ до примерно 20 мМ.
57. Способ по п.56, где концентрация гистидина составляет от примерно 5 мМ до примерно 15 мМ.
58. Способ по п.40, дополнительно включающий сукцинат.
59. Способ по п.58, где концентрация сукцината составляет от примерно 2 мМ до примерно 10 мМ.
60. Способ по п.59, где концентрация сукцината составляет от примерно 3 мМ до примерно 7 мМ.
61. Способ по п.40, где pH составляет от примерно 5,0 до примерно 8,0.
62. Способ по п.61, где pH составляет от примерно 5,8 до 6,0.
63. Способ по п.62, где концентрация гистидина составляет примерно 10 мМ, pH 6,0.
64. Способ по п.62, где концентрация сукцината составляет примерно 5 мМ, pH 6,0.
65. Способ по п.40, дополнительно включающий стадию (б) лиофилизации иммуногенной композиции.
66. Способ по п.65, дополнительно включающий стадию (в) ресуспендирования лиофилизированной композиции в буфере, содержащем алюминий.
4
3
2
4
3
67. Способ по п.66, где буфер содержит AlPO, Al(OH), Al(SO) или квасцы.
4
68. Способ по п.40, где белок подсемейства B готовят в виде композиции, по существу состоящей из Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 10 мМ гистидина pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
69. Способ по п.40, где белок подсемейства B готовят в виде композиции, по существу состоящей из Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 5 мМ сукцината pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
70. Способ стабилизации эффективности полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP) в иммуногенной композиции, включающий стадию (а) приготовления полипептида подсемейства B LP2086 (fHBP) в виде композиции с алюминием в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 1 мг/мл и с молярным отношением детергент:белок от примерно 0,5:1 до примерно 10:1.
71. Способ по п.70, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 1:1 до примерно 5:1.
72. Способ по п.71, где молярное отношение детергент:белок составляет от примерно 1,4:1 до примерно 4,2:1.
73. Способ по п.72, где молярное отношение детергент:белок составляет примерно 2,8:1.
74. Способ по п.70, где количество детергента является достаточным для снижения связывания полипептида с кремнием в контейнере.
75. Способ по п.74, где контейнер представляет собой шприц или флакон.
76. Способ по п.70, где детергент представляет собой неионный детергент.
77. Способ по п.76, где детергент представляет собой полисорбатный детергент.
78. Способ по п.77, где детергент представляет собой Полисорбат 80.
79. Способ по п.70, где концентрация алюминия составляет примерно 0,5 мг/мл.
4
3
2
4
3
80. Способ по п.70, где композиция содержит AlPO, Al(OH), Al(SO) или квасцы.
81. Способ по любому из п.п.70-80, дополнительно включающий гистидин.
82. Способ по п.81, где концентрация гистидина составляет от примерно 2 мМ до примерно 20 мМ.
83. Способ по п.82, где концентрация гистидина составляет от примерно 5 мМ до примерно 15 мМ.
84. Способ по п.70, дополнительно включающий сукцинат.
85. Способ по п.84, где концентрация сукцината составляет от примерно 2 мМ до примерно 10 мМ.
86. Способ по п.85, где концентрация сукцината составляет от примерно 3 мМ до примерно 7 мМ.
87. Способ по п.70, где pH составляет от примерно 5,0 до примерно 8,0.
88. Способ по п.87, где pH составляет от примерно 5,8 до 6,0.
89. Способ по п.88, где концентрация гистидина составляет примерно 10 мМ, pH 6,0.
90. Способ по п.70, дополнительно включающий стадию (б) лиофилизации иммуногенной композиции.
91. Способ по п.90, дополнительно включающий стадию (в) ресуспендирования лиофилизированной композиции в буфере, содержащем алюминий.
4
3
2
4
3
92. Способ по п.91, где буфер содержит AlPO, Al(OH), Al(SO) или квасцы.
4
93. Способ по п.70, где белок подсемейства B готовят в виде композиции, по существу состоящей из Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 10 мМ гистидина pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
4
94. Способ по п.70, где белок подсемейства B готовят в виде композиции, по существу состоящей из Полисорбата 80 в молярном отношении к белку примерно 2,8:1, 0,5 мг/мл алюминия в виде AlPO, 5 мМ сукцината pH 6,0 и 150 мМ NaCl.
95. Способ определения эффективности полипептида 2086 (fHBP) в иммуногенной композиции, включающий следующие стадии: (1) инкубирование первого моноклонального антитела (mAb) и второго mAb с иммуногенной композицией, содержащей белок 2086, где первое mAb конъюгировано с первой меткой, которую используют для иммобилизации mAb, и второе mAb конъюгировано со второй меткой, которая детектируется, и где первое и второе mAb направлены на разные конформационные эпитопы на эталонном белке 2086; (2) иммобилизация белка 2086, связанного с первым mAb, с использованием первой метки; и (3) детектирование и определение количества иммобилизованного белка 2086, связанного со вторым mAb, с использованием второй метки.
96. Способ по п.95, где первой меткой является биотин, GST (глутатион-S-трансфераза), 6xHis метка или гранулы.
97. Способ по п.96, где гранулы представляют собой гранулы из карбоксилированного полистирола или парамагнитные гранулы.
98. Способ по п.96, где первая метка иммобилизована на стрептавидиновых гранулах, стрептавидиновой колонке, глутатионовых гранулах, глутатионовой колонке, никелевых гранулах, никелевой колонке, с использованием центрифугирования или с использованием магнитного поля.
99. Способ по п.95, где второй меткой является биотин, HRP (пероксидаза хрена), флуорофор или радиоактивная метка.
100. Способ по п.99, где вторую метку детектируют с использованием стрептавидина, конъюгированного с флуорофором или HRP, посредством электрохемилюминесценции, детектирования флюоресценции или детектирования радиоактивности.
101. Способ по п.95, где полипептид 2086 представляет собой полипептид подсемейства A.
102. Способ по п.95, где полипептид 2086 представляет собой полипептид подсемейства В.
103. Способ по п.95, где полипептид 2086 липидирован.
104. Способ по п.95, где полипептид 2086 не липидирован.
105. Способ по п.95, где полипептид 2086 является рекомбинантным.
106. Способ по п.95, где полипептиды, презентирующие эпитопы, распознаваемые обоими антителами, могут быть количественно определены.
107. Способ по п.95, где эффективность образца сравнивают с эффективностью эталонного вещества.