Сравнительное изучение антимикробной активности спиртовых извлечений из плодов софоры японской

Несмотря на видимую изученность различных аспектов микробиоценоза влагалища у беременных, практикующие гинекологи и бактериологи сталкиваются с проблемой трактовки критериев нормоценоза. Понятие некой стабильности нормоценоза весьма иллюзорно и зависит при обследовании условно здоровых беременных от многочисленных факторов: возраста, применения гормональных и внутриматочных контрацептивов до беременности, количества абортов, инфекционных заболеваний в анамнезе и др., а также от экологических, климатических, социальных и многих других факторов.

В литературе в основном обращают внимание на частоту обнаружения различных представителей микрофлоры влагалища. Однако количественные параметры нормы у различных авторов варьируют [9, 11]. Данное обстоятельство крайне затрудняет интерпретацию результатов бактериологического исследования. К сожалению, отсутствуют четкие критерии видового состава резидентной и факультативной микрофлоры влагалища, которые существуют в описании микрофлоры толстого кишечника. Основной акцент в изучении микробиоценоза репродуктивного тракта женщины поставлен на лактобактерии, что, бесспорно, справедливо. Однако отсутствуют регламентированные рекомендации по поводу количественного уровня лактобактерий, являющегося показателем для проведения корригирующей терапии. Бесспорно, каждый специалист априори определил для себя эти показатели, но отсутствие единой позиции в данном вопросе может приводить как к гипер-, так и к гиподиагностике дисбиоза влагалища.

При обследовании беременных без отягощенного анамнеза в различные сроки гестации наблюдали тенденцию увеличения количества лактобактерий к периоду родоразрешения. Несмотря на то что к 38-й неделе лактобактерии обнаруживали у всех беременных, у 70% они были снижены. Однако женщины не предъявляли никаких жалоб, их состояние было компенсировано. Вопрос о необходимости корригирующей терапии в этом случае остается открытым.

Состав микрофлоры влагалища помимо лактобацилл представлен разнообразными видами аэробных и анаэробных бактерий. Какое количество анаэробов является предельно допустимым и каковы при этом должны быть показатели лактобактерий для назначения превентивного лечения, чтобы не было осложнения в родах? На этот вопрос каждый практикующий врач отвечает только исходя из собственного опыта.

Все эти факты заставляют задуматься о критериях дифференцировки нормоценоза.

При нормально протекающей беременности наблюдались дисбиотические нарушения и для кишечной микрофлоры, которые у всех женщин также были компенсированы. Таким образом, у условно здоровых первородящих беременных регистрируются дисбиотические изменения как во влагалищной, так и в кишечной микрофлоре, которые протекают на субклиничес-ком уровне.

На наш взгляд, необходимы многоцентровые исследования хотя бы один раз в 5 лет с четким подбором контингента обследуемых, для того чтобы выработать единый взгляд на проблему «нормоценоза» и интерпретацию полученных результатов бактериологического исследования, что особенно актуально для беременных.

ЛИТЕРАТУРА

1. Adlerberth E., Lindenberg N., Aberg et al. Reduced enterobacterial and increased staphylococcal colonization of the infantile bovel: an effect of hygienic lifestyle. - № 1. - Р. 96-101.

2. Fanaro S., Chierici R., Guerrini P. et al. Intestinal microflora in early infancy: composition and development // Acta pediatr. -2003. - Vol. 91. - P. 48-55.

3. Kawada M., Okuzumi K., Hitomi S. et al. Transmission of staphylococcus aureus between healthy, lactating mothers and their infants by breastfeeding.

4. Трачук Т. Ю. Биоценоз влагалища и коррекция его нарушений у беременных // Мать и дитя в Кузбассе. - 2001. - № 1 (2), январь. - С. 17.

5. Калмыкова А. И. Пробиотики: терапия и профилактика заболеваний. Укрепление здоровья // НПФ «Био-Веста»; СибНИП-ТИП СО РАСХН. - Новосибирск, 2001. - С. 13.

6. Николаев А. В., Бодаренко В. М., Фиалкина С. В., Коновалова Г. Н., Купчихина Л. А., Анохин В. А. Влияние микрофлоры матери на состав микроценоза кишечника ребенка в период грудного вскармливания // Журнал микробиологии. - 2008. - № 5. - С. 87-92.

7. Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника: отраслевой стандарт. ОСТ 91500.11.0004-2003. Приказ М-ва здравоохранения Рос. Федерации от 9 сент. 2003 г. № 231. - М., 2003. - С. 65.

8. Кира Е. Ф. Бактериальный вагиноз. - СПб: «Нева-Люкс», 2001. - С. 50-63.

9. Ворошилина Е. С. Биоценоз влагалища с точки зрения количественной полимеразной цепной реакции: что есть норма? // Акушерство и гинекология. - № 1/2011. - C. 58.

10. Кудрявцева Л. В., Ильина Е. Н., Говорун В. М. и др. Бактериальный вагиноз: Пособие для врачей. - М., 2002. - C. 56.

11. Human J. Lactat. - 2003. - Vol. 19. № 4. - P. 411-417.

Поступила 12.10.2011

А. М. САМПИЕВ, Л. Г. КОВАЛЕВА, О. А. КАЧАНОВА, М. Р. ХОЧАВА, Е. Б. НИКИФОРОВА

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ

спиртовых извлечений из плодов софоры японской

Кафедра фармации Кубанского государственного медицинского университета,

Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: farmdep@mail.ru, тел. 268-44-39

Плоды софоры японской хорошо известны в народной и клинической медицине. Отечественной промышленностью производится настойка плодов софоры японской, рекомендуемая для применения в качестве антисептического средства. Вместе с тем до сих пор нет убедительных научных данных о рациональности использования в технологии настойки плодов софоры (1:2) 48%-ного спирта этилового в качестве экстрагента. Целью исследования являлось проведение сравнительной

Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011 УДК 61528.07

Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011

оценки антимикробного действия извлечений из плодов софоры японской (1:2), полученных экстрагированием спиртом этиловым различных концентраций.

Ключевые слова: плоды софоры японской, настойка, экстрагент, действующие вещества, антимикробное действие.

A. M. SAMPIEV, L. G. KOVALEVA, O. A. KACHANOVA, M. R. HOCHAVA, E. B. NIKIFOROVA

COMPARATIVE STUDY OF ANTIMICROBIAL ACTIVITY ALCOHOLIC EXTRACTS FROM THE FRUITS

OF PAGODA TREE

Chair of pharmacy the Kuban state medical university,

Russia, 350063, Krasnodar, Sedina str., 4. E-mail: farmdep@mail.ru, tel. 268-44-39

Pagoda Tree fruits are well known in folk and clinical medicine. Domestic industry produced fruit liqueur Japanese Sophora recommended for use as an antiseptic. However, there is still no convincing scientific evidence of rationality in the use of technology infusion Sophora fruit (1:2) 48% ethyl alcohol as an extractant. Aim of this study was to conduct a comparative evaluation of antimicrobial activity of extracts from the fruits of Japanese Sophora (1:2), obtained by extraction with ethyl alcohol of various concentrations.

Key words: Pagoda Tree fruits, tincture, extractant, working substances , an antimicrobial effect.

Введение

Плоды софоры японской как лекарственное растительное сырье (ЛРС) в течение нескольких десятилетий применяются в медицине в форме настойки в качестве антисептического средства [1]. Но, несмотря на давнюю известность этого лекарственного средства, до сих пор нет убедительных научных доказательств рациональности выбора для получения настойки плодов софоры (1:2) экстрагента - 48%-ного спирта этилового.

Как известно, одним из основных критериев выбора экстрагента при получении фитопрепарата является его селективность, то есть способность максимально извлекать из растительного сырья вещества, определяющие фармакотерапевтическую ценность продукта (так называемые действующие вещества), и в минимальной степени - сопутствующие [4, 5]. В этой связи открытым остается вопрос селективности 48%-ного спирта этилового по отношению к веществам антимикробного действия, ответственным за антисептический эффект настойки плодов софоры японской, поскольку не исключено, что при использовании в качестве экстрагента этанола другой концентрации будет обеспечиваться более высокое содержание антимикробных биологически активных веществ (БАВ) в целевом продукте.

Наиболее часто в фармацевтической промышленности для получения настоек используют спирт этиловый в концентрациях 40%, 70% и реже - 95%.

Исходя из вышесказанного, целью исследования являлось проведение сравнительной оценки антимикробного действия извлечений из плодов софоры японской, полученных спиртом этиловым 48%, 70% и 95%-ной концентраций. Изучать этанол в концентрации 40% в качестве экстрагента плодов софоры не представлялось целесообразным, поскольку 48%-ный спирт обладает сходной экстрагирующей способностью.

Методика исследования

Извлечения из плодов софоры японской (1:2) получали методом классической перколяции [3].

Для оценки антибактериальной активности полученных извлечений использовали метод серийных разведений в питательной среде АГВ. Все исследования выполнены в соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным

препаратам» [2]. В качестве тест-штаммов использовали клинические изоляты наиболее распространенных возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний, относящихся к грамположительным коккам (S. aureus - 10 культур, коагулазонегативные стафилококки (КНС) - 10 культур), неферментирующим грамотрицательным бактериям (НГОБ - 10 культур), энтеробактериям - 10 культур).

Питательную среду АГВ готовили из сухой среды промышленного производства в соответствии с инструкцией изготовителя и автоклавировали в течение 20 мин при 121° С. Затем асептически добавляли исследуемые спиртовые извлечения из плодов софоры японской таким образом, чтобы концентрация сухого остатка извлечений в конечном объеме среды составила 0,1%, 0,5%, 1% и 2%. Под сухим остатком извлечения следует понимать сумму БАВ, извлекаемых соответствующим экстрагентом из плодов софоры японской.

Для посева использовали 5-6-часовые бульонные культуры тест-штаммов с концентрацией 107 КОЕ/мл. Такую суспензию получали путем разведения в 10 раз стандартной бактериальной суспензии, соответствующей стандарту мутности 0,5 по МакФарланду. Инокулюм использовали в течение 15 мин после изготовления.

Посев индикаторных штаммов осуществляли методом реплик на чашки с питательной средой АГВ, содержащей и не содержащей извлечений из плодов софоры японской. Опытные и контрольные посевы инкубировали в течение 24 часов при температуре 37° С. Антибактериальную активность оценивали по наличию или отсутствию роста индикаторных штаммов. Контролем служила питательная среда АГВ с добавлением адекватного количества спирта соответствующей крепости, не содержащая БАВ плодов софоры.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты сравнительного изучения антибактериальной активности спиртовых извлечений из плодов софоры японской представлены в таблице.

Приведенные в таблице данные свидетельствует о том, что извлечение из плодов софоры, полученное с использованием 95%-ного этанола, в концентрации 2% сухого остатка в питательной среде полностью подавляло рост и грамположительных, и грамотрицательных индикаторных штаммов. В случае 1%-ной концентра-

Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011

48% 70% 95% Концентрация спирта этилового

0,1% 0,5% 1% 2% 0,1% 0,5% 1% 2% 0,1% 0,5% 1% 2% Концентрация сухого остатка извлечения в питательной среде

% % % % % % +++ % %  -

% % % % % % ' % %  N3

% % % % % % ' % %  СО

% % % % % % ' % %  4ь С/5

% % % % % % % % %  СЛ и С

% % % % % % % % %  а> о с (0

% % % % % % % % %  ->|

% % % % % % % % %  00

% % % % % % % % %  со

% % % % % % % % %  о

% % % % % % + % %

% % % % % % ' % %  N3

% % % % % % + % %  СО

% % % % % % % %  4ь

% % % % % % % %  СЛ =с

% % % % % % % %  а> о

% % % % % % % %  ->|

% % % % % % % %  00

% % % % % % % %  со

' ' ' ' ' ' ' '  20 Е й 2 2

% % % % % % % % % + N3

% % % % % % + + % %  22

% % % % % % + % %  23

% % % % % % % % %  24

% % % % % % % % % + 25

% % % % % % % % %  26 1ГОБ

% % % % % % + % + + +  27

% % % % % % ' ++ + ++ +  28

% % % % % % ' + + + + + +  29

% % % % % % ' + + + + + +  30

% % % % % % % % %  СО

% % % % % % % % %  32

% % % % % % % % % + 33

% % % % % % % % %  34 3 о

% % % % % % % % %  35 о О- и

% % % % % % % % %  36 о 2,

% % % % % % % % % + 37 о о и

% % % % % % % % %  38 о

% % % % % % % % %  39

% % % % % % % % %  40

Результаты исследования антимикробной активности извлечений из плодов софоры японской

УДК 618.215-008.846.4:576.8 Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011

ции сухого остатка данного извлечения в питательной среде наблюдался слабый рост только 4 штаммов, относящихся к неферментирующим грамотрицательным бактериям и энтеробактериям.

Извлечение, полученное на 70%-ном спирте, уступало по антимикробной активности предыдущему. Оно подавляло рост всех штаммов в концентрации 2% сухого остатка извлечения в питательной среде, но в концентрации 1% к ней уже были не чувствительны все использованные в исследовании штаммы энтеробактерий, 7 штаммов неферментирующих грамотрицательных бактерий и 9 штаммов стафилококков, 7 из которых относятся к S. aureus.

Изучение антибактериальной активности извлечения из плодов софоры японской на 48%-ном спирте показало, что в аналогичных вышеуказанным концентрациях сухого остатка соответствующего извлечения оно оказалось полностью неактивным. Во всех случаях на питательных средах наблюдался рост индикаторных штаммов, не уступавший по интенсивности контролю.

Таким образом, проведенные исследования по оценке антибактериальной активности этанольных извлечений из плодов софоры японской показали, что в случае использования 95%-ного этанола в качестве экстрагента наблюдалось более эффективное подавление роста и грамположительных, и грамотрицательных индикаторных

штаммов по сравнению с 48%- и 70%-ным спиртовыми растворами. Этот факт говорит о том, что 95%-ный спирт извлекает антимикробные вещества из плодов софоры больше и селективнее, нежели другие сравниваемые экстрагенты. В этой связи использование 95%-ного спирта этилового для получения антисептической настойки софоры представляется более обоснованным, чем применяемого в настоящее время 48%-ного этанола.

ЛИТЕРАТУРА

1. Государственный реестр лекарственных средств. - М.: Медицина, 2001. - С. 1004.

2. МУК 4.2.1890-04 «Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».

3. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / Под ред. В. Л. Багировой, В. А. Северцева. - СПб: СпецЛит, 2001. - 223 с.

4. Пономарев В. Д. Экстрагирование лекарственного сырья. -М.: Медицина, 1976. - 204 с.

5. Попова Т. П. Некоторые общие закономерности извлечения действующих веществ из лекарственного растительного сырья. Сообщение 1. / Т. П. Попова, В. И. Литвиненко // Фарма-ком. - 1993. - № 1. - С. 13-16.

Поступила 07.11.2011

М. Г. СВИНАРЕВА, Н. В. КОЛЕСНИКОВА, Е. И. КЛЕЩЕНКО,

И. В. НЕСТЕРОВА, С. В. СТОРОЖУК

клинико-иммунологическая эффективность виферона В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ НОВОРОЖДЕННыХ С СИДРОМОМ УВЕЛИЧЕНИЯ ВИЛОЧКОВОЙ ЖЕЛЕЗы

Кафедра педиатрии с курсом неонатологии центральной научно-исследовательской лаборатории, ФПК и ППС ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет»

Минздравсоцразвития России,

Россия, 350065, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: akulinka.81@mail.ru, тел. 8-918-33-78-253

В работе исследована клинико-иммунологическая эффективность виферона в составе традиционной терапии новорожденных с синдромом увеличения вилочковой железы (СУВЖ) и внутриутробной инфекцией (ВУИ). Показано, что для новорожденных с СУВЖ характерно сниженное содержание про- и противовоспалительных цитокинов, сопровождающееся клиническими проявлениями сочетанной ВУИ (врожденная пневмония с везикулопустулезом или конъюнктивитом). Включение в традиционную терапию новорожденных с СУВЖ и ВУИ рекомбинантного препарата «виферон» позволяет наблюдать позитивные клинические и иммуномодулирующие эффекты в динамике наблюдения с самых ранних сроков (14 дней от начала терапии) и в более отдаленный период мониторинга (3-12 месяцев), когда имеет место нормализация исследуемых параметров.

Ключевые слова: СУВЖ, ВУИ, виферон, иммуномодулирующая терапия, цитокины.

M. G. SVINAREVA, N. V. KOLESNIKOVA,

E. I. KLESHCHENKO, I. V. NESTEROV, S. V. STOROZHUK

CLINICAL AND IMMUNOLOGICAL EFFICIENCY VIFERON IN COMPLEX THERAPY OF NEWBORNS WITH SYNDROME OF MAGNIFICATION OF THE THYMIC GLAND

The central research laboratory the Kuban state medical university,

Russia, 350065, Krasnodar, str. Sedina, 4. E-mail: akulinka.81@mail.ru, tel. 8-918-33-78-253

In job effectiveness Viferon in structure of traditional therapy of newborns with a syndrome of magnification of thymic enlargement (SMTE) and a prenatal infection contamination (PIC) is investigated clinical and immunological. It is shown, that for newborns with SMTE the lowered content cytokines, accompanied clinical exhibitings mix-infection (a congenital pneumonia