ПИРРОЛОТРИАЗИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРА КИНАЗЫ
PYRROLOTRIAZINE DERIVATIVES AS KINASE INHIBITOR

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к пирролотриазиновому производному, обладающему киназа-ингибирующей активностью, к способу его получения и его применению.
Предпосылки создания изобретения
Протеинкиназа является ферментом, который катализирует фосфорилирование специфических остатков других белков и играет важную роль в путях сигнальной трансдукции, которые передают внеклеточные сигналы в ядро. Кроме того, он вовлечен в различные заболевания in vivo. Имеются различные свидетельства того, что Т-клетки (или Т-лимфоциты) и В-клетки (или В-лимфоциты) играют важную роль в возникновении или развитии воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания, пролиферативного заболевания или гиперпролиферативного заболевания и/или иммуноопосредованного заболевания.
Янус-киназа (далее указанная как "JAK") представляет собой цитоплазматическую протеинтирозинкиназу, которая играет ключевую роль в регуляции клеточных функций в лимфогематопоэтической системе. Известно, что цитокины играют важную роль в регуляции воспаления, иммунитета и нормальной клеточной функции, и JAK активирует белки STAT (переносчики сигнала и активаторы транскрипции) через фосфорилирование тирозина для обеспечения быстрых сигнальных путей цитокинам. Известно, что передача сигналов JAK/STAT связана с аллергией, астмой, аутоиммунными заболеваниями (например, отторжение трансплантата, ревматоидный артрит, боковой амиотрофический склероз, рассеянный склероз и т.д.), солидным раком, раковыми заболеваниями крови (например, лейкозом, лимфомой и т.д.).
Семейство JAK подразделяется на четыре члена: JAK 1, JAK 2, JAK 3 и TYK 2. Члены JAK семейства соединяются в пары друг с другом для передачи сигналов от различных цитокинов. Они включают JAK2 и JAK1, ассоциированные с передачей сигналов гематопоэтических факторов роста, а комбинация TYK2 и AK2 имеет важное значение для передачи сигналов интерферона и способствует толерантности хозяина. JAK2 может вызывать анемию, тромбоцитопению, лейкопению, особенно когда она вовлечена в передачу сигналов гематопоэтических факторов роста и вызывает чрезмерное ингибирование.
Было обнаружено, что экспрессия JAK1, JAK2 и TYK2 широко распространена, тогда как экспрессия JAK3 ограничивалась лимфоцитами и связана с передачей сигналов для общих гамма-цепей, членов IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 и IL-21 рецепторов, в частности общей гамма-цепи семейства IL-2. Как только цитокин связывается, рецептор переносит находящуюся рядом JAK3 в непосредственной близости, что вызывает аутофосфорилирование С-конца β-цепи. В результате это вызывает активацию белка STAT, что является важным шагом в повторной передаче сигнала в ядро. JAK3 контролирует сигнальные пути различных цитокинов через этот процесс. Это делает JAK3 привлекательной мишенью для иммуносупрессии.
В-клетки играют важную роль в развитии аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. Терапевтические средства на основе белков, которые уменьшают количество В-клеток, например, ритуксан, эффективны при аутоантитело-индуцируемых воспалительных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит. Таким образом, ингибиторы протеинкиназы, которые играют роль в активации B-клеток, являются полезными терапевтическими средствами для лечения заболеваний, опосредованных B-клетками, например, для продукции аутоантител.
Сигнальная трансдукция через B-клеточный рецептор (BCR) регулирует различные B-клеточные ответы, включая пролиферацию и дифференцировку в зрелые антитело-продуцирующие клетки. BCR является важным регуляторным элементом B-клеточной активности, и аномальная сигнальная трансдукция может вызывать образование патогенных аутоантител, приводя к множеству аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний и пролиферации дерегулированных B-клеток.
Тирозинкиназа Брутона (далее указанная как "ВТК") является важным регулятором развития, активации, передачи сигналов и выживания В-клеток. BTK участвует в путях сигнальной трансдукции, инициируемых связыванием различных внеклеточных лигандов с их рецепторами клеточной поверхности. После лигирования рецептора В-клеточного антигена (BCR) активность BTK при одновременном действии протеинтирозинкиназ Lyn и Syk необходима для индукции фосфолипаза C-γ2-опосредованной мобилизации кальция. Следовательно, ингибирование BTK может быть полезным терапевтическим подходом в блокировании начального процесса B-клеточноопосредованных заболеваний.
Как указано выше, Janus киназы и киназы на основе TEC играют важную роль в активации T-клеток и/или B-клеток, вовлеченных в развитие воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, пролиферативных заболеваний или гиперпролиферативных заболеваний и иммуноопосредованных заболеваний. Следовательно, разработка веществ, которые эффективно ингибируют эти заболевания, может быть полезна в качестве соответствующего терапевтического средства. Конкретные примеры заболеваний, которые можно лечить и предотвратить, включают рак, отторжение трансплантата, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, псориатический артрит, псориаз, астму, аллергический дерматит, атопический дерматит, экзему, диабет I типа, диабетическое осложнение, язвенный колит, болезнь Крона, аутоиммунное заболевание щитовидной железы, системную депиляцию, синдром Шегрена и т.п.
Ингибитор JAK3 киназы тофацитиниб (CP-690550) (Pfizer Inc.) в настоящее время одобрен и продается для лечения ревматоидного артрита. Кроме того, ингибитор BTK киназы ибрутиниб (PCI-32765) (Pharmacyclics) находится в клинической стадии, но в клинических случаях сообщалось о серьезных побочных эффектах, таких как кожная сыпь и диарея. Таким образом, существует необходимость в разработке более стабильного и эффективного вещества, которое ингибирует JAK и/или BTK (см. Nat Rev Rheumatol. 2009 Jun 5 (6) 317-24; Expert Opin Investig Drugs. 2014 Aug 23 (8) 1067-77; Drug Discov Today 2014 Aug 19 (8) 1200-4; WO 2002/096909; WO2010-009342).
Поэтому авторы настоящего изобретения обнаружили новое пирролотриазиновое производное, обладающее превосходной ингибирующей активностью в качестве ингибитора киназы, тем самым завершив настоящее изобретение.
Подробное описание изобретения
Техническая задача
Целью настоящего изобретения является обеспечение нового пирролотриазинового производного, обладающего киназа-ингибирующей активностью, и способа для его получения.
Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтической композиции, включающей пирролотриазиновое производное в качестве активного ингредиента.
техническое решение
Для достижения указанных выше целей настоящее изобретение обеспечивает соединение, представленное следующей химической формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль:
[химическая формула 1]
в химической формуле 1:
X представляет собой O или NH,
6-10
2-10
Aпредставляет собой двухвалентное Cароматическое кольцо или двухвалентное C гетероароматическое кольцо, содержащее один-три гетероатома, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из N, O и S,
1
1-4
1-4
1-4
2
1-4
1-4
1-4
3-6
1-4
2
1-4
R представляет собой водород; C алкил, незамещенный или замещенный одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из C алкокси, N(Cалкил), циано и (C алкил)-NHCO; Cалкокси; Cгалогеналкил; Cциклоалкил; N(Cалкил); бензоил; пиразолил, незамещенный или замещенный одной или двумя Cалкильными группами; или ,
1
1-4
2
1-4
где Y представляет собой NH, N(Cалкил) или O; Y представляет собой CH или N; L представляет собой связь, Cалкилен или CO,
2
1-4
R представляет собой водород, Cалкил или галоген, и
3
1-4
2-4
2-4
R представляет собой Cалкил, замещенный галогеном или циано; Cалкенил, незамещенный или замещенный галогеном; или Cалкинил.
Предпочтительно, A представляет собой двухвалентное кольцо, выбранное из группы, состоящей из бензола, бензотиазола, изотиазола, изоксазола, пиразола, пиридина, пиррола, тиазола, тиофена и 4,5,6,7-тетрагидропиразолo[1,5-a]пиразина.
1
Предпочтительно R представляет собой водород, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, метоксиэтил, диметиламинометил, диэтиламиноэтил, цианометил, метиламинокарбонилметил, метокси, дифторметил, 2,2-дифторэтил, 2,2,2-трифторэтил, циклопропил, диметиламино, бензоил или 3,5-диметил-1H-пиразол-1-ил.
1
Предпочтительно R представляет собой пиперидин-4-ил, 1-метил-пиперидин-4-ил, 4-метилпиперазин-1-ил, тетрагидро-2H-пиран-4-ил, морфолино, 2-морфолиноэтил или морфолин-4-карбонил.
2
Предпочтительно R представляет собой водород, метил, хлор или фтор.
3
2
2
2
3
2
2
3
Предпочтительно R представляет собой -CH-Cl, -CH=CH, -CH=CHCHCH, -CH=CHCHCl или -C≡CCHCH.
Типичные примеры соединений, представленных химической формулой 1, являются следующими:
1) N-(3-((2-((1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
2) N-(3-((2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
3) N-(3-((2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
4) N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
5) N-(3-((2-((3-метилизотиазол-5-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
6) N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
7) N-(4-фтор-3-((2-((3-метилизотиазол-5-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
8) N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
9) N-(4-фтор-3-((2-((1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
10) N-(4-фтор-3-((2-((1-изобутил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
11) N-(3-((2-((1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
12) N-(3-((2-((4-(диметиламино)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
13) N-(4-фтор-3-((2-((4-феноксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
14) N-(3-((2-((бензо[d]тиазол-6-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
15) N-(4-фтор-3-((2-((пиридин-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
16) N-(3-((2-((4-изопропилфенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
17) N-(3-((2-((4-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
18) N-(3-((2-((4-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
19) N-(3-((2-((тиофен-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
20) N-(3-((2-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
21) N-(3-((2-((4-((диметиламино)метил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
22) N-(3-((2-((4-морфолинофенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
23) N-(3-((2-((4-(диметиламино)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
24) N-(3-((2-((5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразолo[1,5-a]пиразин-2-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
25) N-(4-фтор-3-((2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
26) N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
27) N-(4-фтор-3-((2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
28) N-(4-фтор-3-((2-((4-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
29) N-(4-фтор-3-((2-((4-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
30) N-(4-фтор-3-((2-((тиофен-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
31) N-(4-фтор-3-((2-((4-морфолинофенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
32) N-(4-фтор-3-((2-((1-пропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
33) N-(3-((2-((1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
34) N-(4-фтор-3-((2-((1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
35) N-(4-фтор-3-((2-((1-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
36) N-(4-фтор-3-((2-((1-изопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
37) N-(4-фтор-3-((2-((1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
38) N-(4-фтор-3-((2-((1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
39) N-(3-((2-((4-(3,5-диметил-1H-пиразол-1-ил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид,
40) N-(4-фтор-3-((2-((1-(2-метоксиэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
41) 2-хлор-N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)ацетамид,
42) 2-хлор-N-(4-фтор-3-((2-((1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)ацетамид,
43) 2-хлор-N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)ацетамид,
44) (E)-4-хлор-N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)бут-2-енамид,
45) N-(4-фтор-3-(2-(изоксазол-4-иламино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-илокси)фенил)акриламид,
46) N-(4-хлор-3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид,
47) N-(5-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-2-метилфенил)акриламид,
48) N-(5-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-2-метилфенил)акриламид и
49) N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)пент-2-инамид.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут существовать в форме солей, в частности, фармацевтически приемлемых солей. В качестве солей можно использовать, без ограничения, соли, обычно используемые в данной области, такие как кислотно-аддитивные соли, образованные фармацевтически приемлемыми свободными кислотами. Используемый в настоящей заявке термин ʺфармацевтически приемлемая сольʺ относится к любой органической или неорганической аддитивной соли соединения, представленного химической формулой 1, концентрация которой является относительно нетоксичной и безвредной для пациента, и которая эффективно активируется, а побочные эффекты которой не снижают полезную эффективность вышеуказанного соединения.
Фармацевтически приемлемые соли можно получить обычными способами с использованием неорганических или органических кислот. Например, фармацевтически приемлемую соль можно получить путем растворения соединения, представленного химической формулой 1, в смешивающемся с водой органическом растворителе, например, ацетоне, метаноле, этаноле или ацетонитриле, с последующим добавлением органической кислоты или неорганической кислоты и фильтрованием и сушкой осажденных кристаллов. Альтернативно, ее можно получить, подвергая растворитель или избыточное количество кислоты из реакционной смеси с добавленной кислотой условиям пониженного давления с последующей сушкой остатка, или путем добавления другого органического растворителя и затем фильтрования осажденной соли. При этом, предпочтительные соли могут включать соли, образованные из хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, азотной кислоты, уксусной кислоты, гликолевой кислоты, молочной кислоты, пировиноградной кислоты, малоновой кислоты, янтарной кислоты, глутаровой кислоты, фумаровой кислоты, яблочной кислоты, миндальной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, аскорбиновой кислоты, пальмитиновой кислоты, малеиновой кислоты, гидроксималеиновой кислоты, бензойной кислоты, гидроксибензойной кислоты, фенилуксусной кислоты, коричной кислоты, салициловой кислоты, метансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты или толуолсульфоновой кислоты и т.п.
Фармацевтически неприемлемую соль или сольват соединения химической формулы 1 можно использовать в качестве промежуточного соединения при получении соединения химической формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Соединение химической формулы 1 в соответствии с настоящим изобретением включает не только его фармацевтически приемлемые соли, но также все сольваты и гидраты, которые могут быть из него получены, а также включает все возможные стереоизомеры. Сольват, гидрат и стереоизомер соединения, представленного химической формулой 1, можно получить и использовать из соединения химической формулы 1 с использованием обычных способов.
Кроме того, соединение, представленное химической формулой 1 в соответствии с настоящим изобретением, можно получить либо в кристаллической форме, либо в некристаллической форме, и когда соединение, представленное химической формулой 1, получают в кристаллической форме, оно может быть необязательно гидратированным или сольватированным. В настоящем изобретении соединение, представленное химической формулой 1, может не только включать стехиометрический гидрат, но может включать соединение, содержащее различные количества воды. Сольват соединения, представленного химической формулой 1 в соответствии с настоящим изобретением, включает как стехиометрические сольваты, так и нестехиометрические сольваты.
Кроме того, в качестве примера, настоящее изобретение может обеспечить получение соединения, представленного химической формулой 1, в соответствии со схемой реакций 1, приведенной ниже.
[Схема реакций 1]
1
3
1
2
(в схеме реакций 1 X, A и R-Rимеют значения, определенные выше, Z и Zкаждый независимо представляет собой галоген, и Y представляет собой галоген или OH)
Стадия i представляет собой стадию получения соединения, представленного химической формулой 1-3 или химической формулой 1, путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 1-1 или 1-10, с соединением (Y=Cl), представленным химической формулой 1-2. Реакцию предпочтительно осуществляют в условиях использования триэтиламина или гидрокарбоната натрия. Температура реакции предпочтительно находится в пределах от -20°C до 0°C, и время реакции составляет предпочтительно от 30 минут до 24 часов. Растворитель для реакции предпочтительно представляет собой смешанный раствор дихлорметана или тетрагидрофурана и воды.
Альтернативно, стадию i можно осуществить путем взаимодействия Y=OH вместо Y=Cl в химической формуле 1-2. В этом случае реакцию предпочтительно осуществляют в условиях использования диизопропилэтиламина, O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфата (O-HATU) при комнатной температуре в течение 24 часов, и растворитель для реакции предпочтительно представляет собой тетрагидрофуран, диметилформамид или диметилсульфоксид.
Стадия ii представляет собой стадию получения соединения, представленного химической формулой 1-5 или 1-7, путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 1-4, с соединением, представленным химической формулой 1-3 или 1-6. Реакцию предпочтительно осуществляют в присутствии основания. Кроме того, температура реакции предпочтительно представляет собой комнатную температуру или температуру от 40 до 60°C. Кроме того, время реакции составляет предпочтительно от 1 часа до 6 часов. Растворитель для реакции предпочтительно представляет собой диметилформамид, 1,4-диоксан, диметилсульфоксид или толуол. Кроме того, основание предпочтительно представляет собой карбонат калия, карбонат цезия, диизопропиламин или гидрид натрия.
2
3
2
2
Стадия iii представляет собой стадию получения соединения, представленного химической формулой 1 или 1-9, путем взаимодействия соединения, представленного химической формулой 1-5 или 1-7, с соединением, представленным химической формулой 1-8. Реакцию можно осуществить в присутствии основания, такого как трис(дибензилиденацетон)дипалладий (Pd(dba)), ацетат палладия (Pd(OAc)) или [1,1'-бис(дифенилфосфин)ферроцен]палладий дихлорид ((Pd(Dppf)Cl), в щелочных условиях. Температура реакции предпочтительно находится в пределах 50°C-150°C. Кроме того, растворитель для реакции предпочтительно представляет собой 1,4-диоксан, толуол, трет-бутанол или диметилформамид. Кроме того, основание предпочтительно представляет собой неорганическое основание, такое как карбонат цезия, карбонат кальция, карбонат натрия, фосфат калия или т.п.
Стадия iv представляет собой стадию получения соединения, представленного химической формулой 1-10, путем восстановления соединения, представленного химической формулой 1-9. Реакцию предпочтительно осуществляют в смеси хлорида аммония, 1,4-диоксана и воды в присутствии олова. Кроме того, температура реакции предпочтительно находится в пределах от 0°C до комнатной температуры. Кроме того, время реакции составляет предпочтительно от 30 минут до 3 часов. Кроме того, реакцию можно осуществить с использованием метанола в присутствии 10% палладия на углероде или с использованием металла (железо) или соли металла (хлорид олова) в хлористоводородной кислоте или этаноле.
Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для профилактики или лечения заболеваний, которая является полезной для ингибирующих киназу действий, включающую соединение, представленное химической формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат, сольват или изомер в качестве активного ингредиента.
В этом случае заболевания, ассоциированные с киназа-ингибирующими действиями, включают воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания, пролиферативные заболевания или гиперпролиферативные заболевания и иммуноопосредованные заболевания, рак, опухоли или т.п.
Термин ʺпрофилактикаʺ в контексте настоящей заявки относится к любому действию, направленному на задержку или ингибирование возникновения, распространения или рецидива указанных выше заболеваний путем введения композиции по настоящему изобретению, а термин ʺлечениеʺ в контексте настоящей заявки относится к любому действию для улучшения или изменения симптомов вышеуказанных заболеваний в лучшую сторону путем введения композиции по настоящему изобретению.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно сформулировать для перорального или парентерального введения в соответствии со стандартной фармацевтической практикой. Эти композиции могут содержать добавки, такие как фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или разбавитель, в дополнение к активному ингредиенту.
Подходящие носители включают, например, физиологический раствор, полиэтиленгликоль, этанол, растительное масло и изопропилмиристат и т.п. Разбавители включают, например, лактозу, декстрозу, сахарозу, маннит, сорбит, целлюлозу и/или глицин и т.п., но не ограничиваются этим. Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть растворены в маслах, пропиленгликоле или других растворителях, обычно используемых для получения инъекционных растворов. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно сформулировать в виде мазей или кремов для местного применения.
Фармацевтические лекарственные формы соединений по настоящему изобретению могут включать использование соединений в форме их фармацевтически приемлемых солей или сольватов, а также использование соединений отдельно или в виде комбинации и/или подходящей смеси с другими фармацевтически активными соединениями.
Соединения по настоящему изобретению можно сформулировать в виде растворов для инъекций путем растворения, суспендирования или эмульгирования соединений в водорастворимом растворителе, таком как физиологический раствор, 5% раствор декстрозы, или в неводном растворителе, таком как синтетический глицерид жирной кислоты, сложный эфир высшей жирной кислоты или пропиленгликоль. Композиции по настоящему изобретению могут включать обычные добавки, такие как солюбилизирующие вещества, изотонические агенты, суспендирующие агенты, эмульгаторы, стабилизаторы и консерванты.
Предпочтительная доза соединения по настоящему изобретению может варьироваться в зависимости от состояния и массы тела пациента, тяжести заболевания, типа лекарственного средства и пути и продолжительности введения, но ее может подходящим образом выбрать специалист в данной области. Однако для достижения желаемых эффектов соединение по настоящему изобретению можно вводить ежедневно при дозе от 0,0001 до 100 мг/кг (массы тела) и предпочтительно от 0,001 до 100 мг/кг (массы тела). Введение можно осуществлять один раз в день или в виде дробных доз каждый день пероральным или парентеральным путем. В зависимости от способа введения композиция может содержать соединение по настоящему изобретению в количестве от 0,001 до 99% масс., предпочтительно от 0,01 до 60% масс.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить млекопитающим, таким как крыса, мышь, домашнее животное, человек, различными путями. Введение можно осуществлять любыми возможными способами, например, пероральным, ректальным, путем внутривенной, внутримышечной, подкожной, интраэндометриальной, интрацеребровентрикулярной инъекции.
Полезные эффекты
Соединение, представленное химической формулой 1 в соответствии с настоящим изобретением, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат, сольват или изомер можно полезным образом использовать для профилактики или лечения заболеваний, которые ассоциированы с действиями, ингибирующими киназу.
Подробное описание вариантов осуществления
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно при помощи примеров. Однако эти примеры представлены только для иллюстративных целей, и эти примеры не следует рассматривать как ограничивающие объем настоящего изобретения.
Пример 1: Получение N-(3-((2-((1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
Стадия 1) Получение N-(4-фтор-3-гидроксифенил)акриламида
После растворения 5-амино-2-фторфенола (1000,0 мг, 1,0 экв.) и бикарбоната натрия (712,0 мг, 1,5 экв.) в THF/дистиллированной воде (15,0 мл/3,0 мл) к смеси добавляли акрилоилхлорид (712,0 мг, 1,0 экв.). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов, затем реакцию завершали. Экстракцию осуществляли путем добавления дихлорметана и затем добавления водного раствора хлорида аммония. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением N-(4-фтор-3-гидроксифенил)акриламида (1,135,0 мг, 79,6%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,40-7,39 (м, 1H), 6,99-6,98 (м, 2H), 6,44-6,33 (м, 2H), 5,77-5,75 (м, 1H)
Стадия 2) Получение N-(3-((2-хлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
2
3
После растворения N-(4-фтор-3-гидроксифенил)акриламида (505,9 мг, 1,1 экв.) и 2,4-дихлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазина (500,0 мг, 1,0 экв.) в N,N-диметилформамиде (10,0 мл) к смеси добавляли KCO (385,9 мг, 1,1 экв.). Реакционный раствор перемешивали при 50°C в течение 2 часов и затем охлаждали до комнатной температуры. Экстракцию осуществляли путем добавления дихлорметана и затем добавления дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением N-(3-((2-хлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида 640,0 мг, 72,3%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,92-7,91 (м, 1H), 7,85-7,83 (м, 1H), 7,56-7,52 (м, 1H), 7,29 (т, 1H), 7,14-7,13 (м, 1H), 6,96-6,95 (м, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H)
Стадия 3) Получение N-(3-((2-((1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
2
2
3
2
N-(3-((2-Хлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид (30,0 мг, 1,0 экв.) и 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амин (11,1 мг, 1,0 экв.) растворяли в 1,0 мл 1,4-диоксана. После добавления Pd(OAc) (1,0 мг, 0,05 экв.), Xanthphos (5,2 мг, 0,1 экв.) и CsCO (58,6 мг, 2,0 экв.) осуществляли продувку газообразным N в течение 30 минут. Реакционный раствор подвергали взаимодействию в условиях микроволнового облучения (150°C, 30 минут, нормальн.). Реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрированный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением N-(3-((2-((1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида (3,5 мг, 9,3%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,80-7,78 (м, 2H), 7,66-7,65 (м, 1H), 7,58-7,55 (м, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,89 (дд, 1H), 6,66 (дд, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 3,53-3,50 (м, 1H), 1,00-0,99 (м, 4H)
Сравнительный Пример 2: Получение N-(3-((2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (12,8 мг, выход: 28,6%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,70 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,56-7,54 (м, 1H), 7,47-7,45 (м, 2H), 7,43-7,40 (м, 1H), 7,04-7,03 (м, 1H), 6,90-6,86 (м, 2H), 6,84-6,83 (м, 1H), 6,62-6,61 (м, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,79-5,77 (м, 1H), 3,11-3,09 (м, 4H), 2,64-2,62 (м, 4H), 2,35 (с, 3H)
Пример 3: Получение N-(3-((2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (3,7 мг, выход: 10,3%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-метил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,74 (шир.с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,56-7,54 (м, 1H), 7,43 (т, 1H), 7,36 (с, 1H), 7,04-7,02 (м, 1H), 6,85-6,84 (м, 1H), 6,63-6,62 (м, 1H), 6,45-6,34 (м, 2H), 5,79-5,77 (м, 1H), 3,79 (с, 3H)
Пример 4: Получение N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (4,1 мг, выход: 10,1%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,88 (шир.с, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,56-7,54 (м, 1H), 7,45-7,41 (м, 2H), 7,05-7,03 (м, 1H), 6,86-6,85 (м, 1H), 6,64-6,63 (м, 1H), 6,45-6,34 (м, 2H), 6,21-5,98 (м, 1H), 5,78 (дд, 1H), 4,43 (тд, 2H)
Пример 5: Получение N-(3-((2-((3-метилизотиазол-5-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Промежуточное соединение N-(3-((2-N-хлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
2
3
2
3
2
N-(3-((2-N-хлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламид (50,0 мг, 1,0 экв.) растворяли в трет-бутаноле/N,N-диметилформамиде (3,0 мл/0,6 мл). После добавления 3-метилизотиазол-5-амина (16,3 мг, 0,9 экв.), Pd(dba) (7,3 мг, 0,05 экв.), Xphos(7,6 мг, 0,1 экв.) и KCO (48,3 мг, 2,2 экв.) осуществляли продувку газообразным N в течение 30 минут. Реакционный раствор перемешивали при 150°C в течение 16 часов и реакцию завершали. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении. Экстракцию осуществляли путем добавления этилацетата и дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением N-(3-((2-((3-метилизотиазол-5-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида (3,5 мг, 6,2%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,75-7,74 (м, 2H), 7,55-7,53 (м, 1H), 7,44 (т, 1H), 7,06-7,05 (м, 1H), 6,99-6,98 (м, 1H), 6,76-6,75 (м, 1H), 6,50 (с, 1H), 6,45-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 2,28 (с, 3H)
Пример 6: Получение N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (7,3 мг, выход: 19,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-этил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,75 (шир.с, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,57-7,55 (м, 1H), 7,43 (т, 1H), 7,37 (с, 1H), 7,04-7,03 (м, 1H), 6,85-6,84 (м, 1H), 6,63-6,62 (м, 1H), 6,45-6,34 (м, 2H), 5,79-5,77 (м, 1H), 4,06-4,04 (м, 2H), 1,38 (т, 3H)
Пример 7: Получение N-(4-фтор-3-((2-((3-метилизотиазол-5-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (3,6 мг, выход: 6,5%) получали таким же способом, как в Примере 5, за исключением того, что использовали 5-амино-2-фторфенол вместо 5-аминофенола в Примере 5.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,87-7,86 (м, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,56-7,55 (м, 1H), 7,29 (т, 1H), 7,03-7,02 (м, 1H), 6,79 (с, 1H), 6,51 (с, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79-5,78 (м, 1H), 2,28 (с, 3H)
Пример 8: Получение N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (4,9 мг, выход: 13,3%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-этил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,80-7,78 (м, 2H), 7,65 (с, 1H), 7,57-7,54 (м, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,89-6,88 (м, 1H), 6,66-6,64 (м, 1H), 6,40-6,35 (м, 2H), 5,80-5,77 (м, 1H), 4,07 (кв., 2H), 1,40 (т, 3H)
Пример 9: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (9,6 мг, выход: 20,0%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-метил-1H-пиррол-3-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,76-7,74 (м, 1H), 7,59-7,54 (м, 2H), 7,26 (т, 1H), 6,95 (шир.с, 1H), 6,84 (дд, 1H), 6,61 (дд, 1H), 6,42-6,35 (м, 3H), 5,89-5,88 (м, 1H), 5,78 (дд, 1H), 3,57 (с, 3H)
Пример 10: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-изобутил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (2,0 мг, выход: 5,1%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-изобутил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,79-7,78 (м, 1H), 7,72-7,71 (м, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,59-7,57 (м, 1H), 7,40-7,38 (м, 1H), 7,28 (т, 1H), 6,89 (д, 1H), 6,66-6,65 (м, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 3,93 (дд, 1H), 3,81 (д, 2H), 2,03-2,02 (м, 6H)
Пример 11: Получение N-(3-((2-((1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (7,8 мг, выход: 15,3%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,76 (шир.с, 1H), 7,70-7,69 (м, 1H), 7,62 (т, 1H), 7,56 (д, 1H), 7,43 (т, 1H), 7,36 (с, 1H), 7,03 (дд, 1H), 6,85 (дд, 1H), 6,63 (дд, 1H), 6,45-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,50-3,49 (м, 1H), 0,99-0,97 (м, 4H)
Пример 12: Получение N-(3-((2-((4-(диметиламино)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
1
1
Указанное в заголовке соединение (5,3 мг, выход: 13,6%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали N,N-диметилбензол-1,4-диамин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,78 (дд, 1H), 7,60-7,59 (м, 1H), 7,57-7,54 (м, 1H), 7,42-7,40 (м, 2H), 7,26 (т, 1H), 6,87-6,86 (м, 1H), 6,77-6,74 (м, 2H), 6,64-6,63 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 2,84 (с, 6H)
Пример 13: Получение N-(4-фтор-3-((2-((4-феноксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (9,2 мг, выход: 21,2%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-феноксианилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
H ЯМР (500 МГц, CD3OD) δ 7,81-7,79 (м, 1H), 7,64-7,63 (м, 1H), 7,57-7,51 (м, 3H), 7,31-7,24 (м, 3H), 7,03 (т, 1H), 6,91-6,86 (м, 5H), 6,66 (дд, 1H), 6,40-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H)
Пример 14: Получение N-(3-((2-((бензо[d]тиазол-6-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (8,6 мг, выход: 21,4%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-бензо[d]тиазол-6-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 9,01 (с, 1H), 8,55 (д, 1H), 7,86-7,84 (м, 2H), 7,76-7,75 (м, 1H), 7,59-7,56 (м, 1H), 7,50 (дд, 1H), 7,30 (т, 1H), 6,98 (дд, 1H), 6,73 (дд, 1H), 6,41-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H)
Пример 15: Получение N-(4-фтор-3-((2-((пиридин-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Осуществляли такие же процедуры, как в Примере 1, за исключением того, что стадию 3 в Примере 1 заменяли следующей процедурой.
2
2
3
N-(3-((2-хлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламид (20,0 мг, 1,0 экв.) и пиридин-3-амин (9,6 мг, 1,7 экв.) растворяли в 2,0 мл 1,4-диоксана. После добавления Pd(OAc) (1,2 мг, 0,09 экв.), BINAP (6,4 мг, 0,2 экв.) и CsCO (50,9 мг, 2,6 экв.) реакционному раствору давали прореагировать при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов. Экстракцию осуществляли путем добавления этилацетата, а затем добавления дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением N-(4-фтор-3-((2-((пиридин-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида (3,0 мг, 12,8%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 8,70 (с, 1H), 8,20-8,19 (м, 1H), 8,07-8,06 (м, 1H), 7,83-7,82 (м, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,55-7,53 (м, 1H), 7,33-7,27 (м, 2H), 6,96-6,95 (м, 1H), 6,74-6,73 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H)
Сравнительный Пример 16: Получение N-(3-((2-((4-изопропилфенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (6,2 мг, выход: 15,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-изопропиланилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 3-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,71-7,70 (м, 1H), 7,62-7,61 (м, 1H), 7,57-7,55 (м, 1H), 7,47 (д, 2H), 7,46 (т, 1H), 7,08-7,04 (м, 3H), 6,86 (дд, 1H), 6,65-6,63 (м, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 2,85-2,79 (м, 1H), 1,20 (д, 6H)
Сравнительный Пример 17: Получение N-(3-((2-((4-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (3,5 мг, выход: 24,8%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-метоксианилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,70 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,55-7,53 (m,1H), 7,46 (д, 2H), 7,42 (т, 1H), 7,04 (дд, 1H), 6,84 (дд, 1H), 6,78 (д, 2H), 6,62-6,61 (м, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,74 (с, 3H)
Сравнительный Пример 18: Получение N-(3-((2-((4-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (4,0 мг, выход: 8,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали (4-аминофенил)(морфолино)метанон вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,72-7,68 (м, 4H), 7,55 (д, 1H), 7,44 (т, 1H), 7,30 (д, 2H), 7,06 (дд, 1H), 6,90 (дд, 1H), 6,70-6,68 (м, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,67-3,34 (м, 8H)
Пример 19: Получение N-(3-((2-((тиофен-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (7,8 мг, выход: 21,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали тиофен-3-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,69 (с, 1H), 7,65 (т, 1H), 7,55-7,51 (м, 2H), 7,44-7,40 (м, 1H), 7,20 (дд, 1H), 7,04 (дд, 1H), 6,93 (дд, 1H), 6,86 (дд, 1H), 6,65 (дд, 1H), 6,46-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H)
Пример 20: Получение N-(3-((2-((1-метил-1H-пиразол-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (8,6 мг, выход: 24,0%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-метил-1H-пиразол-3-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,70 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 7,55 (д, 1H), 7,42 (т, 1H), 7,35 (д, 1H), 7,04 (дд, 1H), 6,87-6,86 (м, 1H), 6,65-6,64 (м, 1H), 6,45-6,34 (м, 3H), 5,77 (дд, 1H), 3,73 (с, 3H)
Сравнительный Пример 21: Получение N-(3-((2-((4-((диметиламино)метил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (4,3 мг, выход: 10,5%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-((диметиламино)метил)анилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,72-7,70 (м, 1H), 7,66-7,63 (м, 3H), 7,56-7,54 (м, 1H), 7,45-7,42 (м, 2H), 7,22 (д, 1H), 7,06 (дд, 1H), 6,89 (дд, 1H), 6,68 (дд, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 3,73 (с, 2H), 2,46 (с, 6H)
Сравнительный Пример 22: Получение N-(3-((2-((4-морфолинофенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (3,9 мг, выход: 9,0%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-морфолиноанилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,69 (т, 1H), 7,59-7,55 (м, 2H), 7,48-7,46 (м, 2H), 7,42 (т, 1H), 7,04 (дд, 1H), 6,88-6,84 (м, 3H), 6,63 (дд, 1H), 6,43-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,81 (т, 4H), 3,04 (т, 4H)
Сравнительный Пример 23: Получение N-(3-((2-((4-(диметиламино)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
1
1
Указанное в заголовке соединение (1,8 мг, выход: 4,6%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали N,N-диметилбензол-1,4-диамин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,69 (т, 1H), 7,57-7,55 (м, 2H), 7,44-7,40 (м, 3H), 7,04 (дд, 1H), 6,84 (дд, 1H), 6,75 (д, 2H), 6,61 (дд, 1H), 6,46-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 2,84 (с, 6H)
Пример 24: Получение N-(3-((2-((5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразолo[1,5-a]пиразин-2-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (6,7 мг, выход: 16,3%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразолo[1,5-a]пиразин-2-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-аминофенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,68-7,67 (м, 1H), 7,63-7,59 (м, 2H), 7,44 (с, 1H), 7,05-7,03 (м, 1H), 6,88 (дд, 1H), 6,66 (дд, 1H), 6,43-6,38 (м, 2H), 6,20 (с, 1H), 5,79 (дд, 1H), 4,00 (т, 2H), 3,58 (с, 2H), 2,92 (т, 2H), 2,47 (с, 3H)
Пример 25: Получение N-(4-фтор-3-((2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (14,6 мг, выход: 33,2%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,78 (дд, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,57-7,54 (м, 1H), 7,46 (д, 2H), 7,26 (т, 1H), 6,89-6,87 (м, 3H), 6,65-6,64 (м, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,12 (т, 4H), 2,64 (т, 4H), 2,36 (с, 3H)
Пример 26: Получение N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (16,7 мг, выход: 14,8%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,90 (с, 1H), 7,79 (дд, 1H), 7,66-7,65 (м, 1H), 7,56-7,53 (м, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,26 (т, 1H), 6,89 (дд, 1H), 6,65 (дд, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 6,10 (тд, 1H), 5,79 (дд, 1H), 4,44 (тд, 2H)
Пример 27: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (12,6 мг, выход: 35,5%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-метил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,79-7,77 (м, 2H), 7,65-7,64 (м, 1H), 7,56-7,53 (м, 1H), 7,37 (с, 1H), 7,26 (т, 1H), 6,88 (дд, 1H), 6,64 (дд, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,79 (с, 3H)
Пример 28: Получение N-(4-фтор-3-((2-((4-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (9,0 мг, выход: 23,8%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-метоксианилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,78 (дд, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,56-7,53 (м, 1H), 7,46 (д, 2H), 7,27 (т, 1H), 6,88 (дд, 1H), 6,79 (д, 2H), 6,66-6,64 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 3,74 (с, 3H)
Пример 29: Получение N-(4-фтор-3-((2-((4-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (14,2 мг, выход: 31,3%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали (4-аминофенил)(морфолино)метанон вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,81 (дд, 1H), 7,71-7,67 (м, 3H), 7,57-7,52 (м, 1H), 7,39-7,27 (м, 3H), 6,94 (дд, 1H), 6,73-6,71 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 3,70-3,62 (м, 8H)
Пример 30: Получение N-(4-фтор-3-((2-((тиофен-3-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (8,2 мг, выход: 22,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали тиофен-3-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,79 (дд, 1H), 7,69-7,56 (м, 1H), 7,56-7,52 (м, 2H), 7,27 (т, 1H), 7,20 (дд, 1H), 6,92 (дкв, 2H), 6,68 (дд, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,77 (дд, 1H)
Пример 31: Получение N-(4-фтор-3-((2-((4-морфолинофенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (5,6 мг, выход: 13,1%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-морфолиноанилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,78 (дд, 1H), 7,62-7,61 (м, 1H), 7,57-7,54 (м, 1H), 7,46 (д, 2H), 7,27 (т, 1H), 6,89-6,86 (м, 3H), 6,65 (дд, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 3,81 (т, 4H), 3,04 (т, 4H)
Пример 32: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-пропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (6,5 мг, выход: 17,1%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-пропил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,79 (дд, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,65-7,64 (м, 1H), 7,58-7,55 (м, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,89 (дд, 1H), 6,65 (дд, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 3,98 (т, 2H), 1,80 (кв., 2H), 0,88 (т, 3H)
Пример 33: Получение N-(3-((2-((1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (6,1 мг, выход: 15,8%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 8,17 (с, 1H), 7,81 (дд, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,60 (с, 1H), 7,55-7,52 (м, 1H), 7,37-7,34 (м, 1H), 7,26 (т, 1H), 6,92 (д, 1H), 6,69 (дд, 1H), 6,44-6,31 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H)
Пример 34: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (3,5 мг, выход: 8,4%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,81-7,79 (м, 2H), 7,65-7,64 (м, 1H), 7,58-7,56 (м, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,88 (дд, 1H), 6,66-6,64 (м, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 4,26-4,22 (м, 1H), 4,04-4,02 (м, 2H), 3,56-3,50 (м, 2H), 1,99-1,94 (м, 4H)
Пример 35: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (5,4 мг, выход: 12,2%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,89 (с, 1H), 7,78 (дд, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,58-7,55 (м, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,89 (дд, 1H), 6,65 (дд, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 4,19 (т, 2H), 3,67 (т, 4H), 2,75 (т, 2H), 2,46 (т, 4H)
Пример 36: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-изопропил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (16,6 мг, выход: 43,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-изопропил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,80-7,78 (м, 2H), 7,65-7,64 (м, 1H), 7,57-7,55 (м, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,26 (т, 1H), 6,88-6,87 (м, 1H), 6,65-6,64 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,78 (дд, 1H), 4,41-4,38 (м, 1H), 1,43 (д, 6H)
Пример 37: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (1,0 мг, выход: 2,4%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали трет-бутил 4-(4-амино-1H-пиразол-1-ил) пиперидин-1-карбоксилат вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,81-7,80 (м, 1H), 7,75-7,74 (м, 1H), 7,64-7,54 (м, 2H), 7,42 (с, 1H), 7,28 (т, 1H), 6,90-6,89 (м, 1H), 6,67-6,66 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 4,17-4,16 (м, 1H), 3,20-3,16 (м, 4H), 2,78-2,73 (м, 4H)
Пример 38: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (7,5 мг, выход: 18,0%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,97 (шир.с, 1H), 7,78 (дд, 1H), 7,68-7,67 (м, 1H), 7,57-7,54 (м, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,91-6,90 (м, 1H), 6,68-6,66 (м, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 4,82-4,79 (м, 2H)
Пример 39: Получение N-(3-((2-((4-(3,5-диметил-1H-пиразол-1-ил)фенил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (6,0 мг, выход: 13,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 4-(3,5-диметил-1H-пиразол-1-ил)анилин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,83-7,81 (м, 1H), 7,73-7,70 (м, 3H), 7,56-7,53 (м, 1H), 7,30-7,26 (м, 1H), 7,23-7,22 (м, 2H), 6,94-6,93 (м, 1H), 6,72-6,70 (м, 1H), 6,45-6,34 (м, 2H), 6,01 (с, 1H), 5,79-5,77 (м, 1H), 2,22-2,21 (м, 6H)
Пример 40: Получение N-(4-фтор-3-((2-((1-(2-метоксиэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (1,8 мг, выход: 4,6%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(2-метоксиэтил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,82-7,77 (м, 2H), 7,66-7,65 (м, 1H), 7,57-7,55 (м, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,89-6,88 (м, 1H), 6,66-6,65 (м, 1H), 6,44-6,34 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H), 4,19 (т, 2H), 3,69 (т, 2H), 2,01 (с, 3H)
Пример 41: Получение 2-хлор-N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)ацетамида
Стадия 1) Получение 2-хлор-4-(2-фтор-5-нитрофенокси)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазина
2
3
После растворения 2,4-дихлорпирроло[2,1-f][1,2,4]триазина (500,0 мг, 1,0 экв.) и 2-фтор-5-нитрофенола (438,7 мг, 1,05 экв.) в N,N-диметилформамиде (10,0 мл) к смеси добавляли KCO (385,9 мг, 1,05 экв.). Реакционный раствор перемешивали при 50°C в течение 2 часов и затем охлаждали до комнатной температуры. Экстракцию осуществляли путем добавления дихлорметана, а затем добавления дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением 2-хлор-4-(2-фтор-5-нитрофенокси)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазина (800,7 мг, 97,6%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 8,44-8,42 (м, 1H), 8,36-8,33 (м, 1H), 7,96-7,95 (м, 1H), 7,61 (т, 1H), 7,20-7,19 (м, 1H), 6,70-6,99 (м, 1H)
Стадия 2) Получение N-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-4-(2-фтор-5-нитрофенокси)пирроло[1,2-b]триазин-2-амина
2
2
3
2
2-Хлор-4-(2-фтор-5-нитрофенокси)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин (200,0 мг, 1,0 экв.) и 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амин (95,3 мг, 1,0 экв.) растворяли в 9,0 мл 1,4-диоксана. После добавления Pd(OAc) (7,3 мг, 0,05 экв.), Xanthphos (37,5 мг, 0,1 экв.) и CsCO (422,3 мг, 2,0 экв.) осуществляли продувку газообразным N в течение 30 минут. Реакционный раствор подвергали взаимодействию в условиях микроволнового облучения (150°C, 30 минут, нормальн.). Реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрированный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением N-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-4-(2-фтор-5-нитрофенокси)пирроло[1,2-b]триазин-2-амина (210,0 мг, 77,5%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 8,40-8,39 (м, 1H), 8,32-8,30 (м, 1H), 8,03-7,99 (м, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,59 (т, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,94-6,93 (м, 1H), 6,69-6,68 (м, 1H), 6,24-6,01 (м, 1H), 4,47 (тд, 2H)
Стадия 3) Получение 4-(5-амино-2-фторфенокси)-N-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-2-амина
4
N-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-4-(2-фтор-5-нитрофенокси)пирроло[1,2-b]триазин-2-амин (210,0 мг, 1,0 экв.) растворяли в 1,4-диоксане/дистиллированной воде (3,0 мл/3,0 мл) и затем к смеси добавляли NHCl (214,7 мг, 8,0 экв.). Реакционный раствор охлаждали до 0°C и к смеси добавляли порошок Zn (262,6 мг, 8,0 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа реакционный раствор фильтровали. Экстракцию осуществляли путем добавления дихлорметана к фильтрату, а затем добавления дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением 4-(5-амино-2-фторфенокси)-N-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-2-амина (145,4 мг, 74,6%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,90 (шир.с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,13 (т, 1H), 6,95 (м,1H), 6,88-6,85 (м, 2H), 6,72-6,63 (м, 1H), 6,23-5,99 (м, 1H), 4,45 (тд, 2H)
Стадия 4) Получение 2-хлор-N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)ацетамида
4-(5-амино-2-фторфенокси)-N-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-2-амин (20,0 мг, 1,0 экв.) и 2-хлоруксусную кислоту (6,7 мг, 1,2 экв.) растворяли в 5,0 мл THF. К смеси добавляли O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфат (O-HATU, 27,0 мг, 1,2 экв.) и N,N-диизопропилэтиламин (15,3 мг, 2,0 экв.). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов и затем реакцию завершали. Экстракцию осуществляли путем добавления этилацетата, а затем добавления дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:гексан=1:1) с получением 2-хлор-N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)ацетамида (9,3 мг, 33,8%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,90 (шир.с, 1H), 7,72-7,70 (м, 1H), 7,66-7,65 (м, 1H), 7,53-7,50 (м, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,89-6,88 (м, 1H), 6,66-6,65 (м, 1H), 6,11 (тт, 1H), 4,45 (тд, 2H), 4,18 (с, 2H)
Пример 42: Получение 2-хлор-N-(4-фтор-3-((2-((1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)ацетамида
Указанное в заголовке соединение (9,0 мг, выход: 37,9%) получали таким же способом, как в Примере 41, за исключением того, что использовали 1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амина в Примере 41.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,79-7,71 (м, 2H), 7,66 (с, 1H), 7,55-7,53 (м, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,29 (т, 1H), 6,89-6,88 (м, 1H), 6,66-6,65 (м, 1H), 4,30-4,24 (м, 1H), 4,18 (с, 2H), 4,06-4,04 (м, 2H), 3,58-3,53 (м, 2H), 2,03-1,96 (м, 4H)
Пример 43: Получение 2-хлор-N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)ацетамида
Указанное в заголовке соединение (9,1 мг, выход: 43,3%) получали таким же способом, как в Примере 41, за исключением того, что использовали 1-этил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амина в Примере 41.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,77 (шир.с, 1H), 7,72-7,70 (м, 1H), 7,66-7,65 (м, 1H), 7,54-7,51 (м, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,28 (т, 1H), 6,89-6,87 (м, 1H), 6,65-6,64 (м, 1H), 4,18 (с, 2H), 4,08 (кв., 2H), 1,40 (т, 3H)
Пример 44: Получение (E)-4-хлор-N-(3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)бут-2-енамида
Указанное в заголовке соединение (8,1 мг, выход: 36,4%) получали таким же способом, как в Примере 41, за исключением того, что использовали 1-этил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амина и использовали (E)-4-хлорбут-2-еновую кислоту вместо 2-хлоруксусной кислоты.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,77 (с, 1H), 7,70-7,68 (м, 1H), 7,65-7,64 (м, 1H), 7,49-7,47 (м, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,25 (т, 1H), 6,88-6,87 (м, 1H), 6,65-6,64 (м, 1H), 6,35-3,33 (м, 1H), 6,13-6,10 (м, 1H), 4,07 (кв., 2H), 3,39-3,37 (м, 2H), 1,40 (т, 3H)
Пример 45: Получение N-(4-фтор-3-(2-(изоксазол-4-иламино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-илокси)фенил)акриламида
Промежуточное соединение N-(4-(5-амино-2-фторфенокси)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-2-ил)изоксазол-4-амин получали таким же способом, как в Примере 41, за исключением того, что использовали изоксазол-4-амин вместо l-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амина в Примере 41.
N-(4-(5-амино-2-фторфенокси)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-2-ил)изоксазол-4-амин (7,5 мг, 1,0 экв.) растворяли в 1,0 мл дихлорметана и затем охлаждали до 0°C. Добавляли N,N-диизопропилэтиламин (5,9 мг, 2,0 экв.) и затем добавляли по каплям акрилоилхлорид (2,2 мг, 1,05 экв.). Реакционный раствор перемешивали при 0°C в течение 30 минут для завершения реакции. Экстракцию осуществляли путем добавления этилацетата, а затем добавления дистиллированной воды. Затем экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (дихлорметан:метанол=10:1) с получением N-(4-фтор-3-(2-(изоксазол-4-иламино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-илокси)фенил)акриламида (1,7 мг, 19,5%).
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 8,95 (шир.с, 1H), 8,32 (с, 1H), 7,81 (дд, 1H), 7,74-7,73 (м, 1H), 7,54-7,53 (м, 1H), 7,27 (т, 1H), 6,94-6,93 (м, 1H), 6,71-6,70 (м, 1H), 6,44-6,35 (м, 2H), 5,79 (дд, 1H)
Пример 46: Получение N-(4-хлор-3-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)фенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (1,4 мг, выход: 3,8%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали этил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 5-амино-2-хлорфенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500МГц, CDOD) δ 7,83-7,81 (м, 1H), 7,72-7,70 (м, 1H), 7,66-7,65 (м, 1H), 7,61-7,56 (м, 1H), 7,51-7,50 (м, 1H), 7,37-7,36 (м, 1H), 6,90-6,89 (м, 1H), 6,66-6,65 (м, 1H), 6,44-6,36 (м, 2H), 5,80 (дд, 1H), 4,09-4,05 (м, 2H), 1,44-1,41 (м, 3H)
Пример 47: Получение N-(5-((2-((1-этил-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-2-метилфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (3,4 мг, выход: 9,2%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-этил-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 3-амино-4-метилфенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,77 (шир.с, 1H), 7,61-7,60 (м, 1H), 7,49-7,48 (м, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,35-7,34 (м, 1H), 7,08-7,06 (м, 1H), 6,84-6,83 (м, 1H), 6,62-6,61 (м, 1H), 6,53-6,51 (м, 1H), 6,39-6,35 (м, 1H), 5,79 (дд, 1H), 4,07 (кв., 2H), 2,31 (с, 3H), 1,39 (т, 3H)
Пример 48: Получение N-(5-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-2-метилфенил)акриламида
Указанное в заголовке соединение (6,3 мг, выход: 15,7%) получали таким же способом, как в Примере 1, за исключением того, что использовали 1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-амин вместо 1-циклопропил-1H-пиразол-4-амина и использовали 3-амино-4-метилфенол вместо 5-амино-2-фторфенола в Примере 1.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,87 (шир.с, 1H), 7,62-7,61 (м, 1H), 7,48-7,44 (м, 2H), 7,35-7,33 (м,1H), 7,08-7,06 (м, 1H), 6,85-6,84 (м, 1H), 6,63-6,62 (м, 1H), 6,56-6,51 (м, 1H), 6,39-6,35 (м, 1H), 6,20-5,98 (м, 1H), 5,80-5,78 (м, 1H), 4,43 (тд, 2H), 2,31 (с, 3H)
Пример 49: Получение N-(3-((2-((1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)амино)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)окси)-4-фторфенил)пент-2-инамида
Указанное в заголовке соединение (2,1 мг, выход: 7,6%) получали таким же способом, как в Примере 41, за исключением того, что использовали пент-2-еновую кислоту вместо 2-хлоруксусной кислоты в Примере 41.
1
3
H ЯМР (500 МГц, CDOD) δ 7,91 (шир.с, 1H), 7,67-7,65 (м, 2H), 7,53-7,50 (м, 1H), 7,47 (с, 1H), 7,25 (т, 1H), 6,92-6,88 (м, 1H), 6,68-6,65 (м, 1H), 6,23-5,99 (м, 1H), 4,45 (тд, 2H), 2,41 (кв., 2H), 1,23 (т, 3H)
Экспериментальный пример: Измерение ингибиторной активности в отношении ферментов JAK 3 и BTK
Ингибиторные активности в отношении киназ JAK3 и BTK измеряли для соединений, полученных в описанных выше Примерах, с использованием анализа in vitro на платформе ADP Glow (Glo).
2
2
2
50
В частности, ингибиторные активности в отношении киназ JAK3 и BTK измеряли с использованием набора для анализа JAK3 киназы (Promega, V9441) и набора для анализа BTK киназы (Promega, V9071), которые закупали у Promega. Рекомбинантные очищенные человеческие JAK3 и BTK разбавляли 1 x буфером для киназной реакции (JAK3: 40 мМ Трис-Cl, pH 7,5, 20 мМ MgCl, 0,1 мг/мл BSA и 50 мкМ DTT/BTK: 40 мМ Трис-Cl, pH 7,5, 20 мМ MgCl, 0,1 мг/мл BSA, 2 мМ MnCl и 50 мкМ DTT) и добавляли в 96-луночный планшет (JAK3: конечная концентрация 4 нг на реакцию/BTK: конечная концентрация 8 нг на реакцию). Соединения обрабатывали так, чтобы получить водный раствор с конечной концентрацией DMSO 1%, и коктейль субстратов, содержащий АТФ (JAK3: конечная концентрация 5 мкМ/BTK: конечная концентрация 10 мкМ) и 0,2 мкг/мкл Поли(Glu4, Tyr1)пептида (JAK3 и BTK конечная концентрация), в общем объеме 25 мкл добавляли в 96-луночный планшет для инициирования ферментной реакции. После инкубации (30°C) в течение 1 часа добавляли эквивалентный объем (25 мкл на реакцию) ADP Glo и инкубировали (30°C) в течение 40 минут при комнатной температуре. Затем добавляли реагент для детекции киназы (50 мкл на реакцию) и инкубировали (30°C) в течение 30 минут при комнатной температуре. Киназную активность измеряли методом хемилюминесценции в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к набору для анализа киназы ADP Glo, и рассчитывали ингибиторную активность соединений в соответствии с настоящим изобретением. Для анализа результатов каждого соединения использовали Microsoft Excel, а IC значения рассчитывали с использованием программы SigmaPlot. Результаты представлены в Таблице 1 ниже.
Таблица 1
Пример №
JAK3 IC<sub>50</sub>(нМ)
BTK IC<sub>50</sub>(нМ)
Пример №
JAK3 IC<sub>50</sub>(нМ)
BTK IC<sub>50</sub>(нМ)
Пример №
JAK3 IC<sub>50</sub>(нМ)
BTK IC<sub>50</sub>(нМ)
1
1,1
13,6
21
11,7
103,8
41
0,7
1,2
2
2,8
22,7
22
5,3
35,4
42
0,5
1,3
3
0,6
12,7
23
10,4
60,2
43
0,7
1,2
4
0,7
13,4
24
18,8
166,4
44
99,5
114,2
5
0,6
8,7
25
1,4
7,9
45
32
205,8
6
0,5
10,0
26
0,9
6,2
46
56,8
269,1
7
0,5
10,7
27
0,7
5,0
47
13,0
52,2
8
0,6
7,7
28
9,2
52,0
48
13,8
73,4
9
16,8
243,4
29
2,0
23,1
49
>400
30
10
9,6
112,9
30
7,6
66,6
Тофацитиниб
1,1~3,3
-
11
10,3
107,2
31
4,5
27,4
Ибрутиниб
-
0,5~2,7
12
0,7
7,5
32
1,4
9,1
13
41,7
622,4
33
2,8
15,3
14
9,8
43,3
34
0,5
2,4
15
15,5
103,5
35
0,7
3,5
16
20,0
123,1
36
1,1
4,4
17
5,9
68,6
37
11,5
63,6
18
2,2
37,8
38
1,8
16,5
19
5,3
62,9
39
23,5
111,3
20
57,7
647,3
40
2,8
23,0