Результаты предварительного анализа структуры наследственного рака молочной железы у женщин кыргызской популяции

Результаты предварительного анализа структуры наследственного рака молочной железы у женщин

кыргызской популяции

К.Б. Макиева1, С.В. Головачев2, Б.Б. Султангазиева3, Н.М. Букуев3

1ГОУВПО «Кыргызско-российский славянский университет им. первого Президента России Б.Н. Ельцина», Бишкек; 2ГБОУ ВПО «Ярославская государственная медицинская академия» Минздрава России; 3Национальный центр онкологии МЗ КР, Бишкек

Контакты: Сергей Владимирович Головачев cotsergio@mail.ru

Фенотипические и морфологические особенности наследственного рака молочной железы в зависимости от патологического BRCA-генотипа среди женщин кыргызской национальности в настоящее время остаются практически не освещенными. В настоящей работе представлены результаты проведенного впервые в Кыргызской Республике медико-генетического исследования, позволившего получить предварительные данные о спектре мутаций, ассоциированных с наследственной формой рака молочной железы у женщин кыргызской популяции. Полученные данные указывают на возможность и целесообразность дальнейшего изучения проблемы наследственного рака молочной железы для обоснования скрининговых исследований наследственной предрасположенности к этому заболеванию с целью формирования групп риска и своевременного проведения первичной профилактики.

Ключевые слова: наследственность, рак молочной железы, мутации в генах BRCA1/BRCА2, полиморфизм генов

Results of a preliminary analysis of the pattern of hereditary breast cancer in the women of a Kyrgyz population

K.B. Makieva1, S.V. Golovachev2, B.B. Sultangazieva3, N.M. Bukuyev3

1First President of Russia B.N. Yeltsin Kyrgyz-Russian Slavic University, Bishkek;

2Yaroslavl State Medical Academy, Ministry of Health of Russia;

3National Oncology Center, Ministry of Health, Ministry of Health of the Kyrgyz Republic, Bishkek

The phenotypic and morphological features of hereditary breast cancer in relation to abnormal BRCA genotype among Kyrgyz women remain virtually unelucidated now. This paper presents the results of the first medical genetic study conducted in the Kyrgyz Republic, which has yielded preliminary data on the spectrum of mutations associated with hereditary breast cancer in the Kyrgyz female population. The findings suggest that it is possible and expedient to further study the problem of hereditary breast cancer for substantiation of screening for a genetic predisposition to this disease in order to form risk groups and to timely undertake primary prevention.

Key words: heredity, breast cancer, BRCA1/BRCА2 gene mutations, gene polymorphism

Введение

Рак молочной железы (РМЖ) является наиболее частым онкологическим заболеванием во многих странах, включая развитые. В 2006 г. общая частота РМЖ в странах Европейского союза составила 109,8 случая на 100 тыс. населения, а смертность от этой патологии — 38,4 случая на 100 тыс. населения. С 1990 г. заболеваемость ежегодно увеличивается на 1,5 %. С начала 1990-х гг. благодаря ранней диагностике и адъювантной терапии смертность в большинстве западных стран стабильно снижается. Между тем РМЖ остается ведущей причиной смерти от онкологических заболеваний среди женщин [1].

Показатель распространенности РМЖ в Российской Федерации в 2010 г. составил 355,7 на 100 тыс. населения (для сравнения, в 2000 г. — 243,3). В абсолютном выражении это 54 872 больные, из которых 35,8 % имели III—IV стадию заболевания. Летальность на первом году с момента установления диагноза составила 9,1 % [2].

В Кыргызстане в 2009 г. показатель распространенности РМЖ составил 59,9 на 100 тыс. населения (удельный вес в структуре первичной заболеваемости вырос с 16,9 % в 1999 г. до 20,6 % в 2009 г.), 41,3 % заболевших имели Ш—ГУ стадию заболевания. Первичная заболеваемость РМЖ оказалась ниже среднероссийской более чем в 2 раза (19,5 и 44,2 на 100 тыс. населения соответственно). Показатель одногодичной летальности составил 21,5 %. В общей структуре онкологической смертности на РМЖ пришлось 6,8 % случаев [3].

С эпидемиологических позиций в настоящее время РМЖ — одна из самых изученных и изучаемых опухолей. С 1982 г. В качестве самостоятельной нозологической единицы выделен наследственный РМЖ (НРМЖ) [4]. НРМЖ, или генетически детерминированный РМЖ, встречается в 5—10 % случаев, четко ассоциирован с наличием поломки генного аппарата, в частности — наследуемой мутации в генах BRCA1 или

BRCA2. В современном аспекте проблемы НРМЖ наиболее значимыми и перспективными считаются мутации и однонуклеотидные полиморфные варианты в генах BRCA1 и BRCA2, а также CHEK2 и TP53 [5, 6].

Риск развития РМЖ в течение всей жизни у женщин с мутациями в генах BRCA1 и BRCA2 высок и составляет 67—87 %. Кроме того, установлено, что сочетание экспрессии BRCA1 и терминальных BRCA-мутаций увеличивает риск развития НРМЖ в 33—50 % случаев в возрасте до 50 лет и в 56—87 % случаев в возрасте до 70 лет [7]. Возрастной пик выявления РМЖ у носителей мутаций BRCA1 приходится на 35—39 лет, BRCA2 — на 43 и 54 года [8]. Кроме того, носители BRCA-мутаций имеют повышенный риск прогресси-рования заболевания в виде развития вторых первичных ипсилатеральных (39 %) и контралатеральных (64 %) опухолей молочной железы [9].

Встречаемость этих мутаций зависит от географического региона проживания и этнической группы. Наиболее часто встречающиеся мутации в гене BRCA1: 53821шС, ШёеШЗ, 4154ёе1А, С6Ю; в гене BRCA2: 6174<!е1Т, К3326Х, 3036ёе14, 6503<МТТ [10].

Многие авторы считают, что герминальные мутации в генах BRCA1 и BRCA2 обусловливают предрасположенность к РМЖ и раку яичников в 27—70 % случаев при 2 основных синдромах: синдроме семейного РМЖ и синдроме семейного РМЖ/раке яичников. Тем не менее, установлено, что герминальные мутации в генах BRCA1 и BRCA2 не объясняют весь спектр наследственных форм РМЖ и опухолей органов женской репродуктивной системы — у 20—55 % больных с другими семейными синдромами мутации в этих генах не выявляются [11].

Материалы и методы

Материалом нашего исследования явились образцы ДНК 50 больных РМЖ, находившихся на стационарном лечении в отделении опухолей женской репродуктивной системы Национального центра онкологии МЗ КР. При генетическом анализе ДНК была применена технология гелевых микрочипов «ПФ-Биочип (РМЖ)», разработанная в Институте молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАМН. Готовый ми-крочип представлял собой микроматрицу из иммобилизованных на стекле или пластинке полусфер поли-

акриламидного геля диаметром около 100 мкм, содержащих олигонуклеотиды, химически пришитые к гелю. Олигонуклеотидные пробы, расположенные в ячейках микрочипа, представляли собой участки генов BRCA1, BRCA2 и CHEK2 [12]. Регистрацию изображения проводили на портативном видеоанализаторе микрочипов («Биочип-ИМБ»). Генетические исследования проводились на базе НИИ молекулярной биологии и медицины при Национальном центре кардиологии и терапии МЗ КР.

Результаты и обсуждение

Для постановки диагноза НРМЖ мы использовали следующие критерии: ранний возраст возникновения заболевания; наличие 2 и более родственников, страдающих РМЖ и/или раком яичников; двустороннее поражение; специфические опухолевые ассоциации — генетически детерминированные формы, сочетающие РМЖ со злокачественными новообразованиями других органов; первично-множественные новообразования у пациентки и/или ее родственников [13, 14].

Сведения о каждой пациентке (на основании данных историй болезни, амбулаторных карт, опроса пациенток и их родственников) заносились в специально разработанную нами формализованную карту, на основании которой создана компьютерная база данных. Формализованную карту заполняли индивидуально на каждую пациентку для последующего занесения в генетический регистр. Возраст пациенток колебался от 28 до 75 лет. Случаи возникновения РМЖ по мужской линии не встречались. Стадирование заболевания проводилось после полного послеоперационного гистологического исследования в соответствии с классификацией TNM 7-го пересмотра [15].

Все заболевшие имели II—III стадию опухолевого процесса. Распределение больных по стадиям представлено в табл. 1.

После медико-генетического обследования данной группы больных с использованием технологии биочипов нами выявлены 9 мутаций гена BRCA1 (мутаций гена BRCA2 не выявлено). Основной составляющей спектра мутаций гена BRCA1 явилась мутация 5382insC (5 пациенток), остальные генотипические варианты мутаций BRCA1 встречались единично. Структура мутаций представлена на рисунке.

Таблица 1. Распределение больных РМЖ в группе наблюдения

imrn II стадия III стадия

о л Показатель IIA IIB IIIA IIIB IIIC

о S T1N1 T2N0 T2N1 T3N0 T2N2 T3N1 T4N1 ^любоеШ

S Число пациенток 14 7 9 8 4 3 3 2

а s Всего 38 12

2080 delA 11 %

5382 ¡ПБС 185 delAG 4154 delA C61G 2080 delA

Структура выявленных мутаций в гене BRCA1

В соответствии с рекомендованной ВОЗ Международной классификацией онкологических заболеваний (МКБ 0, 3-й пересмотр) изучена гистологическая структура РМЖ в группе наблюдения, в том числе среди носителей мутаций гена BRCA1; результаты представлены в табл. 2.

В нашем исследовании среди носителей мутаций в гене В&СА1 по гистологической структуре преобладала инвазивная протоковая аденокарцинома (55 % всех случаев). В остальных случаях имела место низ-кодифференцированная аденокарцинома. Эти данные полностью соответствуют современной общепринятой характеристике BRCA1-ассоциированного РМЖ [16].

Определенный интерес представляет информация о наследственности пациенток в группе наблюдения — во всех случаях имелся отягощенный наследственный анамнез. Условно все больные разделены нами на 2 группы — НРМЖ (9 пациенток, у которых выявлена

мутация гена BRCA1) и семейный РМЖ (пациентки, в семьях которых отмечались 2 и более больных РМЖ и злокачественными новообразованиями других локализаций, но не было выявлено мутаций генов), данные представлены в табл. 3.

Наибольший удельный вес в группе НРМЖ составил синдром семейного РМЖ и опухолей женской репродуктивной системы — яичников (33,3 %) и эндометрия (22,2 %). Кроме того, наблюдались случаи синдрома Линч II (ассоциация РМЖ и колоректаль-ного рака), органоспецифического РМЖ (накопления в 3 поколениях родственников первой линии случаев РМЖ), а также 2 случая накопления в 3 поколениях среди родственников первой линии заболеваний раком пищевода, желудка, поджелудочной железы, головного мозга (глиобластома), шейки матки (так называемая «раковая» семья). В группе семейного РМЖ в большинстве случаев отмечались синдром органоспецифи-ческого РМЖ — накопление в семьях только злокачественных новообразований молочной железы — 20 (49 %) наблюдений, и «раковые» семьи — 12 (29 %).

Таким образом, как было отмечено выше, НРМЖ составляет 5—10 % в общей структуре онкологической патологии молочной железы, поэтому для того, чтобы обнаружить какую-либо характерную мутацию среди женщин кыргызской популяции, необходимо продолжить набор пациенток. Положительные результаты этих исследований дадут возможность повысить эффективность ранней диагностики, индивидуализации

Таблица 2. Гистологическая структура РМЖ в группе наблюдения

Гистологический тип опухоли Всего в исследованной В том числе среди носителей мутаций BRCA1, абс.

группе, абс. (%) 5382insC 185delAG 4154delA C61G 2080delA

Внутрипротоковая аденокарцинома 9 (18) - - - - -

Дольковая неинвазивная аденокар-цинома 5 (10) - - - - -

Протоковая инфильтрирующая аденокарцинома 19 (38) 3(33,3) - 1(11,1) 1(11,1) -

Дольковая инфильтрирующая аденокарцинома 10 (20) - - - - -

Низкодифференцированная аденокарцинома 7

Таблица 3. Наследственные синдромы у пациенток в группе наблюдения

Наследственные синдромы НРМЖ Семейный РМЖ Всего

абс. % абс. % абс. %

РМЖ + колоректальный рак 1 11,1 3 7 4 8

РМЖ + рак яичников 3 33,3 2 5 5 10

РМЖ + рак эндометрия 2 22,2 4 10 6 12

Органоспецифический РМЖ 1 11,1 20 49 21 42

«Раковая» семья 2 22,2 12 29 14 28

Всего 9 100 41 100 50 100

специфического лечения и, возможно, увеличить выживаемость больных.

Выводы

В настоящее время фенотипические и морфологические особенности наследственного, семейного и спорадического РМЖ в зависимости от патологического BRCA-генотипа среди женщин кыргызской национальности остаются практически не освещенными, что представляет определенный научный интерес — создание алгоритма ДНК-диагностики с учетом индивидуального и семейного анамнеза

для выявления наследственной предрасположенности к РМЖ формирует базу для медико-генетического консультирования на принципиально новой основе. По результатам предварительного медико-генетического обследования с использованием технологии биочипов группы больных, имеющих факторы риска НРМЖ, не выявлено значимых эпидемиологических особенностей распространенности BRCA-мутаций. Предполагается, что это обусловлено малым количеством выборки, необходимо дальнейшее изучение данной проблемы на более широкой выборке больных.

1. Минимальные клинические рекомендации Европейского Общества Медицинской Онкологии (ESMO). Под ред.

С.А. Тюляндина, Д.А. Носова, Н.И. Переводчиковой. М.: Издательская группа РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, 2010. 436 с.

2. Состояние онкологической помощи населению Российской Федерации в 2010 году. Под ред. В.И. Чиссова,

В.В. Старинского, Г.В. Петровой. М.: ФГУ МНИОИ им. П.А. Герцена Минздравсоц-развития России, 2011. 188 с.

3. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2009 году. Под ред. М.И. Давыдова,

Е.М. Аксель. Вестн РОНЦ 2011;22 (3 Прил 1):3—170.

4. Albano W., Recabaren J., Lynch H. et al. Natural history of hereditary cancer of the breast and colon. Cancer 1982;50(2):360-3.

5. Сытенкова К.В., Гузиева Ж.М., Казаков М.П. и др. Аллельные варианты в генах BRCA1, BRCA2, TP53, ассоциированные с развитием рака молочной железы. Клин онкол 2011;13(3):22—6.

ЛИТЕРАТУРА

6. Будик Ю.А., Крохина О.В., Соболевский В.А., Любченко Л.Н. Генетически обусловленный рак молочной железы: особенности, хирургическая профилактика. Вестн РОНЦ 2012;23(2):14-20.

7. Fackental J.D., Olopade O.I. Breast cancer risk associated with BRCA1 and BRCA2 in diverse populations. Nat Rev Cancer 2007;7(12):937-48.

8. Киселев В.И., Муйжнек Е.Л. Наследственный рак и современные возможности лекарственной коррекции генетических дефектов. М., 2011. 16 с.

9. Pierce L.J., Levin A.M., Rebbeck T.R. et al. Ten-year multi-institutional results of breast-conserving surgery and radiotherapy in BRCA1/2-associated stage I/II breast cancer. J Clin Oncol 2006;24(16):2437-43.

10. Genetics of Breast and Ovarian Cancer (PDQ). http://www.cancer.gov/cancertopics/ pdq/genetics/breast-and-ovarian/ HealthProfessional.

11. Поспехова Н.И. Комплексный анализ наследственной формы рака молочной железы и/или яичников: молекулярно-гене-тические и фенотипические характеристи-

ки. Автореф. дис. ... д-ра биол. наук. М., 2011. 47 с.

12. Иванова О.С. Клинико-морфологиче-ские особенности наследственного рака молочной железы. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 2007. 22 с.

13. Гарькавцева Р.Ф., Казубская Т.П., Любченко Л.Н. Наследственный рак: идентификация, генетическая гетерогенность, медико-генетическое консультирование. Вестн РАМН, 2001;(9):27-32.

14. Любченко Л.Н., Гарькавцева Р.Ф. Кли-нико-генетическая гетерогенность семейного рака молочной железы. Совр онкол 2004;6(22):67-9.

15. TNM: классификация злокачественных опухолей, 7-й пересмотр. Под ред.

Л.Х. Собина и др. М.: Логосфера, 2011. 304 с.

16. Любченко Л.Н., Гарькавцева Р.Ф., Поспехова Н.И. и др. ДНК-диагностика и медико-генетическое консультирование при наследственной предрасположенности к раку молочной железы. В кн.: Возможности современной онкологии в диагностике и лечении злокачественных заболеваний. М., 2003. С. 44-7.