БЕЛОК-ФАКТОР ТРАНСКРИПЦИИ DST С ДОМЕНОМ "ЦИНКОВЫЕ ПАЛЬЦЫ" РИСА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ РЕГУЛЯЦИИ УСТОЙЧИВОСТИ К ЗАСУХЕ И К ДЕЙСТВИЮ СОЛЕЙ

1. Белок-фактор транскрипции с доменом «цинковые пальцы», отличающийся тем, что фактор транскрипции включает: полипептид, содержащий аминокислотную последовательность 42-85 SEQ ID NO: 2, его консервативный мутантный полипептид или его полипептидный гомолог.
2. Фактор транскрипции по п.1, отличающийся тем, что полипептид выбран из:
(a) полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
(b) полипептида, происходящего из (a), содержащего один или несколько замещенных аминокислотных остатков, делеций или вставок и способного увеличивать чувствительность растений к засухе и действию солей; или
(c) полипептидного гомолога полипептидов (a)-(b), содержащего структурный домен «цинковые пальцы» типа Cys-2/His-2 и способного увеличивать чувствительность растений к засухе и действию солей.
3. Полинуклеотид, отличающийся тем, что полинуклеотид содержит полинуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид по п.1.
4. Полинуклеотид по п.3, отличающийся тем, что последовательность полинуклеотида выбрана из:
(a) последовательности, содержащей последовательность SEQ ID NO: 1;
(b) последовательности, содержащей последовательность 1-435 SEQ ID NO: 1; или
(c) последовательности, комплементарной одной из последовательностей (a)-(b).
5. Вектор, отличающийся тем, что вектор содержит полинуклеотид по п.3.
6. Генетически сконструированная клетка-хозяин, отличающаяся тем, что клетка-хозяин содержит вектор по п.5 или геном, содержащий полинуклеотид по п.3, включенный в него.
7. Цис-действующий элемент, где цис-действующий элемент содержит последовательность SEQ ID NO:3 и может связываться с фактором транскрипции по п.1.
8. Ингибитор или неконсервативная мутантная последовательность белка-фактора транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1 или полинуклеотида по п.3.
9. Способ увеличения устойчивости растений к засухе и действию солей, где способ включает:
ингибирование белка-фактора транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1,
ингибирование экспрессии полинуклеотида по п.3, или
ингибирование связывания между цис-действующим элементом по п.7 и белком-фактором транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1;
где способ, предпочтительно, включает применение ингибитора по п.8 или получение неконсервативной мутантной последовательности по п.8 у растения, более предпочтительно, встраивание неконсервативных мутаций в нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, или применение ингибиторов нуклеотидной последовательности или аминокислотной последовательности, более предпочтительно, введение мутации в нуклеотид 205 с A на G и мутации в положение 484 с G на A в нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 1, или введение мутации в аминокислоте 69 с аспарагина на аспарагиновую кислоту и мутации аминокислоте 162 с аланина на треонин в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2.
10. Способ отбора устойчивого к засухе и к действию солей растения, где способ включает:
(i) определение в растении-кандидате уровня белка-фактора транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1, уровня экспрессии полинуклеотида по п.3 и/или уровня связывания цис-действующего элемента по п.7 с белком-фактором транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1; и
(ii) сравнение уровня в растении-кандидате, определенном на стадии (i), с соответствующим уровнем в контрольном растении, если уровень в растении-кандидате ниже, чем уровень в контрольном растении, то растение-кандидат представляет собой устойчивое к засухе и к действию солей растение.
11. Применение ингибитора или неконсервативной мутантной последовательности белка-фактора транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1 или нуклеотидной последовательности по п.3 для увеличения устойчивости растений к засухе и действию солей;
где ингибитор предпочтительно представляет собой низкомолекулярную интерферирующую РНК, антитело или антисмысловой олигонуклеотид, направленный на фактор транскрипции или нуклеотидную последовательность.
12. Применение по п.11, отличающееся тем, что увеличение устойчивости растений к засухе и действию солей включает:
(i) взаимодействие растения непосредственно с ингибитором;
(ii) введение неконсервативной мутантной последовательности в растение; или
(iii) конструирование молекулярного маркера, специфичного для неконсервативной мутантной последовательности, применение молекулярного маркера для того, чтобы выбрать из потомства в результате гибридизации между мутантом, содержащим неконсервативную мутантную последовательность, и вариантом риса отдельное растение, содержащее неконсервативную мутантную последовательность;
где молекулярный маркер содержит пару праймеров SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 11 и/или пару праймеров SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13.
13. Способ увеличения устойчивости растений к засухе и действию солей, где способ включает:
(A) получение ингибитора или неконсервативной мутантной последовательности белка-фактора транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1 или нуклеотидной последовательности по п.3;
(B) воздействие на растение одной или несколькими обработками, выбранными из:
(i) непосредственного взаимодействия растения с ингибитором;
(ii) введения неконсервативной мутантной последовательности в растение; или
(iii) конструирования молекулярного маркера, специфичного для неконсервативной мутантной последовательности, применения молекулярного маркера для того, чтобы выбрать из потомства в результате гибридизации между мутантом, содержащим неконсервативную мутантную последовательность, и вариантом риса отдельное растение, содержащее неконсервативную мутантную последовательность;
где молекулярный маркер содержит пару праймеров SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 11 и/или пару праймеров SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13.
14. Способ получения трансгенного растения, отличающийся тем, что способ включает:
(1) трансформацию растительной клетки, ткани растения или части растения конструкцией, содержащей неконсервативную мутантную последовательность белка-фактора транскрипции с доменом «цинковые пальцы» по п.1 или неконсервативную мутантную последовательность полинуклеотида по п.3;
(2) отбор растительной клетки, ткани растения или части растения, трансформированной неконсервативной мутантной последовательностью; и
(3) восстановление растения из растительной клетки, ткани растения или части растения со стадии (2),
где восстановленное растение обладает более высокой устойчивостью к засухе и к действию солей, чем нетрансформированное растение.