РЕЦЕПТОРЫ АУТО/АЛЛОИММУННОЙ ЗАЩИТЫ ДЛЯ СЕЛЕКТИВНОГО ТАРГЕТИРОВАНИЯ АКТИВИРОВАННЫХ ПАТОГЕННЫХ T-КЛЕТОК И NK-КЛЕТОК

1. Выделенный полинуклеотид, включающий последовательность, кодирующую полипептид, где указанный полипептид включает:
(1) один или более из OX40-специфического лиганда, 4-1BB-специфического лиганда, CD40L-специфического лиганда или их функциональных производных; который функционально связан с
(2) сигнальным доменом, промотирующим T-клеточную активацию.
2. Полинуклеотид по п. 1, где полипептид включает OX40-специфический лиганд.
3. Полинуклеотид по п. 1, где полипептид включает 4-1BB-специфический лиганд.
4. Полинуклеотид по п. 1, где полипептид включает CD40L-специфический лиганд.
5. Полинуклеотид по любому из пп. 1, 2, где OX40-специфический лиганд представляет собой OX40L, антитело, которое таргетирует OX40, OX40L-Fc слияние или их комбинацию.
6. Полинуклеотид по любому из пп. 1 и 3, где 4-1BB-специфический лиганд представляет собой 4-1BBL, антитело, которое таргетирует 4-1BB, 4-1BBL-Fc слияние или их комбинацию.
7. Полинуклеотид по любому из пп. 1 и 4, где CD40L-специфический лиганд представляет собой CD40, антитело, которое таргетирует CD40L, CD40-Fc слияние или любой другой сконструированный белок, способный специфически связываться с CD40L.
8. Полинуклеотид по любому из пп. 1-7, где полипептид также включает 1, 2 или более костимулирующих доменов.
9. Полинуклеотид по любому из пп. 1-8, где полинуклеотид также включает последовательность, которая кодирует спейсер между (1) и (2).
10. Полинуклеотид по п. 9, где спейсер имеет длину от 10 до 220 аминокислот.
11. Полинуклеотид по п. 10, где спейсер имеет последовательность, которая способствует детекции на поверхности антителом.
12. Полинуклеотид по п. 11, где спейсер может детектироваться анти-Fc Ab.
13. Полинуклеотид по п. 12, где спейсер включает IgG Fc часть.
14. Полинуклеотид по любому из пп. 1-13, где полинуклеотид также кодирует химерный антигенный рецептор, T-клеточный рецептор или оба.
15. Полинуклеотид по п. 14, где присутствует 2A элемент или IRES элемент на полинуклеотиде, который кодирует полипептид по п. 1, и полинуклеотиде, который кодирует химерный антигенный рецептор, T-клеточный рецептор или оба.
16. Полинуклеотид по п. 15, где химерный антигенный рецептор включает 1, 2 или более костимулирующих доменов.
17. Полинуклеотид по любому из пп. 1-16, где полинуклеотид присутствует на векторе.
18. Полинуклеотид по п. 17, где вектор представляет собой вирусный вектор или невирусный вектор.
19. Полинуклеотид по п. 18, где вирусный вектор представляет собой ретровирусный вектор, лентивирусный вектор, аденовирусный вектор или аденоассоциированный вирусный вектор.
20. Полинуклеотид по любому из пп. 1-19, где полинуклеотид присутствует в клетке.
21. Полинуклеотид по п. 20, где клетка представляет собой эукариотическую клетку или бактериальную клетку.
22. Полинуклеотид по п. 20 или 21, где клетка представляет собой иммунную клетку.
23. Полинуклеотид по любому из пп. 20-22, где клетка является сконструированной.
24. Полинуклеотид по п. 22, где иммунная клетка представляет собой T-клетку.
25. Полинуклеотид по п. 24, где T-клетка включает один или более химерных антигенных рецепторов.
26. Полинуклеотид по п. 25, где химерный антигенный рецептор включает 1, 2 или более костимулирующих доменов.
27. Полинуклеотид по п. 24, где T-клетка включает один или более сконструированных T-клеточных рецепторов (TCR).
28. Полипептид, экспрессируемый полинуклеотидом по любому из пп. 1-27.
29. Полипептид, включающий:
(1) один или более из OX40-специфического лиганда, 4-1BB-специфического лиганда и CD40; который функционально связан с
(2) сигнальным доменом, промотирующим T-клеточную активацию.
30. Полипептид по п. 29, где сигнальный домен, промотирующий T-клеточную активацию, происходит из CD3 зета субъединицы, DAP12, Fc рецептора или их комбинации.
31. Полипептид по п. 29 или 30, где полипептид также включает 1, 2 или более костимулирующих доменов.
32. Экспрессирующая химерный рецептор клетка, включающая полинуклеотид по любому из пп. 1-27 или полипептид по любому из пп. 29-31.
33. Клетка по п. 32, где клетка представляет собой иммунную клетку.
34. Клетка по п. 32 или 33, где клетка является сконструированной.
35. Клетка по п. 33, где иммунная клетка представляет собой T-клетку.
36. Клетка по п. 35, где T-клета представляет собой CAR-трансдуцированную T-клетку.
37. Клетка по п. 35, где T-клетка представляет собой T-клеточный рецептор (TCR)-трансдуцированную T-клетку.
38. Клетка по любому из пп. 32-37, где клетка сконструирована так, чтобы отсутствовала эндогенная экспрессия одного или более генов.
39. Клетка по п. 38, где клетка сконструирована так, чтобы отсутствовала эндогенная экспрессия 4-1BB, OX40 и/или CD40L.
40. Клетка по п. 38 или 39, где клетка сконструирована с использованием CRISPR/Cas9, нуклеаз “цинковые пальцы”, TALE нуклеаз или мегануклеаз.
41. Клетка по любому из пп. 32-40, где клетка помещена в клеточный депозитарий.
42. Способ получения клеток для клеточной терапии, включающий стадию трансфекции иммунных эффекторных клеток полинуклеотидом по любому из пп. 1-27.
43. Способ по п. 42, дополнительно включающий стадию депонирования клеток в клеточном депозитарии.
44. Способ по п. 42 или 43, дополнительно включающий стадию модификации клеток для экспрессии одного или более химерных антигенных рецепторов и/или одного или более рекомбинантных T-клеточных рецепторов.
45. Способ по любому из пп. 42-44, дополнительно включающий стадию доставки эффективного количества клеток субъекту, нуждающемуся в этом.
46. Способ по п. 45, где клетки являются аллогенными по отношению к субъекту.
47. Способ лечения медицинского состояния у субъекта с использованием аллогенных терапевтических клеток, включающий стадию доставки субъекту терапевтически эффективного количества аллогенных клеток, где указанные клетки экспрессируют полипептид, включающий (1) один или более из OX40-специфического лиганда, 4-1BB-специфического лиганда, CD40L-специфического лиганда или их функциональных производных; который функционально связан с (2) сигнальным доменом, промотирующим T-клеточную активацию.
48. Способ по п. 47, где клетки получены из клеточного депозитария.
49. Способ по п. 47 или 48, где клетки экспрессируют один или более химерных антигенных рецепторов и/или один или более рекомбинантных T-клеточных рецепторов.
50. Способ предотвращения отторжения аллогенных клеток, ткани или органов у субъекта, включающий стадию доставки субъекту эффективного количества аллогенных иммунных клеток, экспрессирующих сконструированный химерный рецептор, который включает внеклеточный домен, который нацелен на соединения, которые селективно присутствуют на активированных T-клетках, и который включает CD3 зета,
где стадия доставки приводит к следующему у субъекта:
(1) ингибирование эндогенных аллореактивных T-клеток у субъекта; и/или
(2) супрессия активации NK-клеток у субъекта.
51. Способ по п. 50, где аллогенные клетки представляют собой аллогенные иммунные клетки, экспрессирующие химерный рецептор.
52. Способ по п. 50 или 51, где аллогенные клетки экспрессируют химерный антигенный рецептор или сконструированный T-клеточный рецептор.
53. Способ по п. 50, где аллогенные иммунные клетки доставляются субъекту до, во время и/или после трансплантаци ткани и/или органа у субъекта.
54. Способ по любому из пп. 50-53, где активированные T-клетки являются патогенными T-клетками.
55. Способ селективного таргетирования активированных T-клеток у субъекта, включающий стадию доставки субъекту эффективного количества иммунных клеток, экспрессирующих сконструированный химерный рецептор, где указанный химерный рецептор включает:
(1) внеклеточный домен, который нацелен на соединения, которые селективно присутствуют на активированных T-клетках; и
(2) сигнальный домен, промотирующий T-клеточную активацию.
56. Способ по п. 55, где сигнальный домен, промотирующий T-клеточную активацию, получен из CD3 зета субъединицы, DAP12, Fc рецептора или их комбинации.
57. Способ по п. 55 или 56, где активированные T-клетки являются патогенными T-клетками.
58. Способ профилактики или лечения медицинского состояния, связанного с активированными T-клетками, у субъекта, включающий стадию доставки субъекту эффективного количества иммунных клеток, экспрессирующих сконструированный химерный рецептор, который селективно таргетирует указанные активированные T-клетки, где указанный химерный рецептор включает:
(1) внеклеточный домен, который нацелен на соединения, которые селективно присутствуют на активированных T-клетках; и
(2) сигнальный домен, промотирующий T-клеточную активацию.
59. Способ по п. 58, где химерный рецептор также включает 1, 2 или более костимулирующих доменов.
60. Способ по п. 58 или 59, где медицинское состояние представляет собой аутоиммунное расстройство.
61. Способ по любому из пп. 58-60, где медицинское состояние включает отторжение трансплантата, болезнь трансплантат против хозяина, диабет I типа, рассеянный склероз, аутоиммунный колит или их комбинацию.
62. Способ предотвращения NK-клеточно-опосредованного отторжения хозяином аллогенных T-клеток, тканей или органов у субъекта, включающий стадию доставки субъекту эффективного количества иммунных клеток, экспрессирующих сконструированный химерный рецептор, который включает внеклеточный домен, который нацелен на соединения, которые селективно присутствуют на активированных T-клетках, и который также включает сигнальный домен, промотирующий T-клеточную активацию.
63. Способ по п. 62, где иммунные клетки, экспрессирующие сконструированный химерный рецептор, представляют собой аллогенные T-клетки.
64. Способ по п. 62 или 63, где иммунные клетки экспрессируют химерный антигенный рецептор или сконструированный T-клеточный рецептор.
2
12
2
65. Способ по любому из пп. 62-64, где количество иммунных клеток, экспрессирующих сконструированный химерный рецептор, которые доставляются субъекту, находится в пределах 10-10 на м.
66. Способ по любому из пп. 47-65, где клетки, экспрессирующие химерный рецептор, доставляются субъекту системно или местно.
67. Способ по любому из пп. 47-66, где иммунные клетки являются T-клетками.
68. Способ по любому из пп. 47-67, где иммунные клетки доставляют субъекту один или более раз.