Структурные преобразования пейеровой бляшки крыс при воздействии химиопрепарата бортезомиба

зависимости «доза - эффект». По результатам корреляционного адаптометрического анализа можно сказать, что любая доза у-облучения выводит из состояния гомеостаза, и развивающаяся через сутки компенсаторно-приспособительная реакция, поддерживающая адаптивное состояние слизистой оболочки тощей кишки по ряду показателей несостоятельна в отдаленном пострадиационном периоде. Снижение функциональной активности слизистой оболочки тощей кишки по всем морфологическим показателям с отдаленностью сроков от начала воздействия в эксперименте на весь жизненный цикл животных предполагает преждевременное старение на уровне организма.

Литература

1.Белоус Д.А. Радиация, биосфера, технология / Д.А. Белоус. СПб. : ДЕАН, 2004. 448 с.

2.Бурлакова Е.Б. Эффект малых доз / Бурлакова Е.Б. // Гражданская защита. М., 2001. № 4. С. 38.

3.Грачев Н.Н. Защита человека от опасных излучений / Н.Н. Грачев, Л.О. Мырова - М. : БИНОМ. Лаборатория знаний, 2005. 317 с.

4.Давыдов Б.И. Авиакосмическая радиобиология : основные итоги, люди, события / Давыдов Б.И. ; /Под ред. И.Б. Ушакова. М.; Воронеж : Истоки, 2007. 164 с.

5.Зубовский Г.А. Прогноз онкологической заболеваемости для участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС / Г.А. Зубовский, В.П. Харченко, О.Б. Тарарухина // Вопросы онкологии. 2000. Т.46, № 6. С. 650-653

б.Деев Р.В. Клеточное обновление в кишечном эпителии в условиях реактивных изменений слизистой оболочки / Р.В. Деев, Т.А. Ахмедов, Б.К. Комяков // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2009. Т. 4, № 1. С. 69-73.

7..Иванова О.В. Эндоскопическая диагностика заболеваний желудочно-кишечного тракта у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС в отдалённом периоде : автореф. дис. ... канд. мед. наук / Иванова О.В. М., 2005. 23 с.

8.Ильин Л.А. Радиационная медицина / Л.А. Ильин. М.: ИздАТ, 2001. 432 с.

9.Кудряшов Ю.Б. Основные принципы в радиобиологии / Ю.Б. Кудряшов // Радиационная биология. Радиоэкол. 2001. Т. 41, № 5. С. 531-547.

10.Лютых В.П. Клинические аспекты действия малых доз ионизирующего излучения на человека (общесоматические заболевания) / В.П. Лютых, А.П. Долгих // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 1998. Т. 42, № 2. С. 28-34.

11.Нейфах Е.А. Большие радиопатогенные нагрузки детей от «малых доз» техногенной хронической радиации / Е.А. Нейфах // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. Т. 43, № 2. С. 193-196.

12.Основные подходы к оценке влияния радиационного фактора на организм человека / Р.М. Тахауов и [др.] //Бюллетень сибирской медицины. 2005. № 2. С. 88-99.

13.Основы медицинской радиобиологии / Бутомо Н.В [и др.] ; под ред. И.Б. Ушакова. СПб. : Фолиант, 2004. 384 с.

14.Особенности действия радиации в малых дозах / И.И. Пелевина [и др.] // V съезд по радиационным исследованиям : тез. докл. (Москва 1014 апр. 2001 г.). М., 2001. Т. 1. С. 13.

15.Быков В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток / В.Л. Быков // Морфология. 2000. № 3. С. 86-92.

DOSE-EFFECT OF IONIZING RADIATION AND CONDITION OF HOMEOSTASIS TUNICA MUCOUSA OF JEJUNUM IN DINAMIC OF LONG TIME OBSERVATION

O.A. SLYUSAREVA, Z.A. VORONTSOVA

Voronezh State Medical Academy after N.N. Burdenko, Russia Histology Department

In experiments on 225 male rats after у irradiation in the doses of 10, 20, 50 and 100sGr, 1,180,365,545 and 730 days later morpho-functional condition of tunica mucosa jejunum was studied. The results of this research showed, that the decrease in all morphoenzy-mological indices and dose increase of y-irradiation and longer time observation allow to estimate indirectly and characterize adequately final alternative effect and accordingly the whole complex study of «dose-effect» dependence . The ecrease in functional activity of the lean gut mucous membrane on all morphological indices with remoteness of terms from the influence beginning in the experiment on all life cycle of animals assumes presenilation on the organism level.

Keywords: у - irradiation, mast cells, mitoses, jejunum

УДК 611.4.018:615.28:616-003.93-092.9

СТРУКТУРНЫЕ ПРЕОБРАЗОВАНИЯ ПЕЙЕРОВОЙ БЛЯШКИ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ХИМИОПРЕПАРАТА БОРТЕЗОМИБА

Н.И. СИДЕНКО, И.Н. ПУТАЛОВА*

В эксперименте выявлены структурные преобразования пейеровой бляшки интактных крыс после курсового внутрибрюшинного введения терапевтической дозы противоопухолевого препарата борте-зомиба. Обратимый характер выявленных изменений свидетельствует о высокой резистентности интактного организма и его способности без дополнительной помощи самостоятельно восстановиться. Ключевые слова: бортезомиб, лимфатические узлы

Химиотерапия рака - важное достижение в эволюции медицины. В исследованиях показано, что комбинация химиотерапевтических препаратов оказывается более эффективной, по сравнению с применением одного антибиотика [13]. Бортезомиб - это новый, первый в своем классе, ингибитор активности про-теосомы, который разработан для подавления активности протео-сомы 268 клеток млекопитающих [14]. В предклинических исследованиях показано, что вызываемое бортезомибом угнетение активности протеосомы предотвращает расщепление внутриклеточных белков, что влияет на многие пути передачи сигнала в клетке. Поскольку пролиферация, метастазирование и выживание опухолевых клеток зависят от белков, расщепляемых в протеосо-ме, то нарушение этих каскадов реакций может приводить к гибели клеток и торможению опухолевого роста. Поскольку активность протеосомы влияет на множество процессов, то продолжаются исследования структурных изменений тканей организма при воздействии химиопрепарата бортезомиба [10].

Различные химиотерапевтические препараты для лечения рака по-разному воздействуют на иммунную систему, одни вызывают иммуносупрессию, а другие способствуют иммуностимуляции [7]. При химиотерапии рака для достижения эффекта надо соблюдать баланс между противоопухолевым действием препаратов и их иммуносупрессивным эффектом [15]. Результаты многих исследований свидетельствуют о том, что химиотерапевтические препараты на лимфоидные органы оказывают в основном иммуносупрессивный эффект [4]. Вместе с тем, установлено, что полихимиотерапия часто вызывает поражение тканей тонкой и толстой кишки [1-4]. Причинами этого большинство авторов считают развитие нейтропении и снижение иммунитета в целом [5,6,8,9,11,12]. Это обстоятельство и послужило снованием для настоящего исследования.

Цель исследования - выявление в эксперименте особенностей структурных преобразований пейеровой бляшки интактного животного в различные сроки после курсового введения противоопухолевого препарата бортезомиба для оценки реакции лимфоидной ткани тонкой кишки.

Материалы и методы исследования. В качестве подопытных животных использовали белых крыс-самцов породы Wistаr 5-6 мес. Животным внутрибрюшинно вводили в терапевтической дозе противоопухолевый препарат бортезомиб на 1, 4, 8 и 11 сутки (так проводится 1 курс химиотерапии). Материал для морфологического исследования (пейеровы бляшки подвздошной кишки) забирали на 12 сутки (по завершении курса), на 21 сутки (перед началом 2-го курса химиотерапии) и на 90 сутки (в отдаленный период). Интактные крысы служили контролем. Далее опытный материал подвергали классической гистологической обработке: фиксировали в жидкости Теллесницкого, обезвоживали и обезжиривали в серии восходящих спиртов, просветляли в ксилолах, заливали в парафин-воск, на ротационном микротоме изготавливали срезы, толщиной 7 мкм. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Анализ структурных компонентов пейеровой бляшки вели с помощью МБС-10 и стандартной окулярной тестовой системы при увеличении в 32 раза.

Полученные данные обрабатывали с помощью методов вариационной статистики. Вычисляли средние арифметические величины (М) в абсолютных и относительных единицах и среднее квадратичное отклонение. Учитывая, что форма распределения была близкой к нормальной, достоверность отличий при парном сравнении величин определяли по критерию Стьюдента @). При всех подсчетах достоверными считали различия р<0,05. При использовании методов множественного сравнения вводили поправку Бонферрони. При морфометрическом исследовании

* ГОУ ВПО «Омская ГМА» Росздрава Каф.анатомии человека 644043, г. Омск, ул.Партизанская, 20, (3812) 244384

общая площадь среза пейеровой бляшки на 12 сутки опыта составила 3,75±0,17 мм2, что больше показателя животных контрольной группы на 7%, на 21 сутки отмечали увеличение площади пейеровой бляшки в сравнении с контролем на 21%, а на 90 сутки площадь групповых лимфоидных узелков в стенке подвздошной кишки вновь соответствовала контрольной (3,5±0,26 мм2).

В их составе количество первичных лимфоидных узелков на протяжении всего эксперимента не менялось, однако площадь их снижалась на 47%, только на 21 сутки эксперимента. На 90 сутки этот показатель возвращался к контрольным значениям и составлял 0,20±0,04 мм2. Доля первичных лимфоидных узелков в структуре пейеровой бляшки изменялась аналогично і уменьшалась (на 59%) только на 21 сутки, а на 12 и 90 сутки не отличалась от показателей интактных животных.

Количество вторичных лимфоидных узелков уже на 12 сутки уменьшалось на 11%, на 21 сутки эксперимента этот показатель возвращался к контрольным значениям и составлял 10,00±0,86 мм2, а на 90 сутки количество вторичных лимфоидных узелков уменьшалось вновь (на 17%) по сравнению с контрольными значениями и составляло 8,60±1,29 мм2. Площадь вторичных лимфоидных узелков на 12 сутки эксперимента, наоборот, увеличилась (на 14%), на 21 сутки площадь их, по отношению к контролю, возросла уже на 32%, а на 90 сутки она уменьшилась до контрольных значений и составила 2,28±0,26 мм2. Доля, которую вторичные лимфоидные узелки занимают в структуре пейеровой бляшки, возросла после курсового внутрибрюшинного введения на 12 сутки (на 8%), а на 21 сутки эта разница уже составила 14%. На 90 сутки эксперимента относительная площадь вторичных лимфоидных узелков в структуре пейеровой бляшки от контроля не отличалась.

В структуре вторичных лимфоидных узелков площадь герминативного центра увеличивалась на 12 сутки (на 19%) и составила 0,68±0,06 мм2, на 21 сутки продолжала повышаться до 0,84±0,06 мм2, что на 35% больше контрольных значений, а на 90 сутки восстанавливалась до контрольных значений (0,67±0,17 мм2). Доля герминативного центра возрастала, на 12 сутки (на 13%), на 21 сутки она превышала контрольные значения на 17%, а на 90 сутки восстанавливалась до контрольных значений. Площадь мантийной зоны в динамике возрастала и на 21 сутки эксперимента составила 2,33±0,15 мм2, это на 31% больше, чем в контроле и на 29% больше, чем на 12 сутки, на 90 сутки наблюдения она соответствовала показателям интактных животных. Площадь межузелковой зоны на 12 и 21 сутки эксперимента составила 1,05±0,04 мм2 и 1,13±0,04 мм2, что не отличалось от показателей группы контроля. А на 90 сутки этот показатель уменьшался по сравнению с контрольными значениями на 7%. Доля межузелковой зоны после курсового внутрибрюшинного введения бортезомиба уменьшается по сравнению с интактными животными и на 12, и 21 сутки (на 13% и 22%, соответственно).

Таким образом, после курсового внутрибрюшинного введения противоопухолевого препарата бортезомиба и перед началом второго курса химиотерапии в пейеровой бляшке отмечали увеличение общей площади сечения ее за счет увеличения площади и доли вторичных лимфоидных узелков относительно контрольных значений. В последних увеличивалась и площадь герминативного центра, и мантийной зоны. Такая перестройка архитектоники пейеровой бляшки может говорить об активации ее де-токсикационной функции. Доля межузелковой зоны снижалась в эти сроки, что можно расценивать как ослабление дренажной функции регионарных скоплений лимфоидной ткани.

Вышеперечисленные изменения носят обратимый характер, так как в отдаленном периоде (на 90 сутки) после отмены противоопухолевого препарата бортезомиба измененные показатели структурных компонентов пейеровой бляшки возвращались к значениям контрольной группы. Это свидетельствует о том, что интактный организм обладает высокой резистентностью и способен без дополнительной помощи самостоятельно восстановиться.

Литература

1. Майбородина В.И. Лимфатический регион тонкой и толстой кишки крыс после полихимиотерапии Дис...канд. мед. наук. Новосибирск, 2003, 224 с.

2. Майбородина В.И., Позднякова С.В., Грек О.Р. // Журнал эксперимен. и клин. медиц. 2006. № 1-2. С. 18-24.

3. Майбородин И.В., Майбородина В.И., Позднякова С.В., Грек О.Р. // Антибиотики и химиотерапия. 2005. Т.50, № 2-3. С. 8-13.

4. Майбородин И.В., Струкин Д.Н., Майбородина В.И. // Морфология. 2007. Т.132, № 5. С. 68-73.

5. Blijlevens N.M., Van’t LandB., Donnelly J.P. // Support Care Cancer. 2004. Vol. 12, № 4. P. 227-233.

6. Blijlevens N.M., Donnelly J.P., Pauw de B.E. // Bone Marrow Transplant. 2005. Vol. 35, № 7. P. 707-711.

7. Bodenheimer HJr., Charland C., Leith J. // J. Leukoc. Biol. 1988. Vol.43, № 3. P. 265-270.

8. Brain E.G., Bachelot T., Serin D. // JAMA. 2005. Vol. 293, № 19. P.2367-2371.

9. Danno S., Chizaki R., Fukui S. // Hinyokika Kiyo. 2005. Vol. 51, № 6. P. 389-392.

10. Glickman M.H. and Ciechanover A. The ubiquitin-proteasome proteolytic pathway: destruction for the sake of construction. Physiol Rev.2002; 82 (2): 373.

11. Kim S.J., Taguchi T., Miyoshi Y. // Gan To Kagaku Ryoho. 2005. Vol.32, № 12. P. 1919-1923.

12. Levenga H., Donnelly P., Blijlevens N. // Ann. Hematol. 2004. Vol.83, № 7. P. 447-449.

13. Macdonald J.S., Gohmann J.J. // Semin. Oncol. 1988. Vol. 15, №3. Suppl. 4. P. 42-49.

14. Myung J., Kim K.B. and Crews CM. The ubiquitin-proteasome pathway and proteasome inhibitors. Med Res Rev. 2001; 21 (4): 245.

15.Sakita M., Kasuga M., YamaneT. // Gann. 1982. Vol. 73, № 6. P. 31.

STRUCTURAL TRANSFORMATIONS OF PEYER'S A PLAQUE IN RATS AT THE INFLUENCE OF BORTEZOMIB

N.I. SIDENKO, I.N.PUTALOVA

Omsk State Medical Academy Anthroponomy Department

In the experiment described structural transformations of Peyer's plaques in intact rats after course of intraperitoneal introductions of the therapeutic dose of an antitumoral preparation of borte-zomib were revealed. The reversible character of the revealed changes testifies to high resistance of intact organisms and their ability to be restored independently without any additional help.

Key words: bortezomib, intraperitoneum, lymphoid nodules.

УДК 616.61 132.2-092.9:546.46

СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ЭНДОТЕЛИЯ АРТЕРИЙ И МИОКАРДА КРЫС В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ДЕФИЦИТА МАГНИЯ

А.В. СМИРНОВ, Н.Г.ПАНЬШИН, А.А. СПАСОВ, М.В. ХАРИТОНОВА

При изучении стркутурных изменений эндотелия артерий сердца крыс в условиях экспериментального дефицита магния обнаружено повреждение эндотелия, признаки продуктивного воспаления во всех оболочках артерий, развитие фиброза и периваскулярного склероза, и ишемические повреждения миокарда.

Ключевые слова: эндотелий; магний; дефицит; воспаление; крыса.

В структуре патологии элементного статуса у населения России недостаточность магния занимает лидирующую позицию, наряду с распространенностью дефицита йода, кальция, железа и цинка [1]. Магний служит обязательным кофактором для более трехсот ферментов, регулирующих различные функции организма. Дефицит магния стимулирует выработку целого ряда цитоки-нов и других гуморальных факторов, активацию оксидантных процессов [2]. Первой мишенью для всех этих воздействий становятся выстилающий сосуды эндотелий, повреждение которого, по современным представлениям, является ключевым звеном атеросклероза, воспаления и тромобообразования [3]. Проведено множество исследований, подтверждающих тесную взаимосвязь дисфункции эндотелия и формированием атеросклеротического поражения сосудов [4]. Дисфункция эндотелия сопровождается повышением уровня молекул адгезии, что приводит к адгезии лейкоцитов, росту концентрации провоспалительных цитокинов, высокой сосудистой проницаемости, усилению окисления липо-протеинов низкой плотности (ЛПНП), пролиферации и миграции гладкомышечных клеток, а также активации тромбоцитов. В связи с этим, в последнее время, значительно вырос интерес к выявлению механизмов взаимосвязи между недостаточностью