БЕЛОК ДЛЯ ТРАНСПОРТА В МОЗГ

1. Белок для транспорта в мозг, содержащий
антитело, связывающееся с мишенью, которое связывается с мишенью в мозге млекопитающего;
две несущие группировки, каждая из которых способна к моновалентному взаимодействию с белком, экспрессирующимся на эндотелиальной клетке гематоэнцефалического барьера (ГЭБ),
где каждая из указанных несущих группировок связана с С-концом антитела, связывающегося с мишенью.
2. Белок по п. 1, где одна из указанных двух несущих группировок связывается в каждый отдельно взятый момент времени с указанным белком, экспрессирующимся на эндотелиальной клетке ГЭБ.
3. Белок по п. 1 или 2, где каждая из указанных несущих группировок связана с антителом, связывающимся с мишенью, посредством линкера.
4. Белок по п. 3, где каждый из указанных линкеров в отдельности содержит пептид, имеющий аминокислотную последовательность, состоящую из 1-30 аминокислотных остатков, предпочтительно, из 1-25 аминокислотных остатков, предпочтительно, из 1-19 аминокислотных остатков, предпочтительно, из 3-19 аминокислотных остатков, предпочтительно, из 3-15 аминокислотных остатков, предпочтительно, из 5-15 аминокислотных остатков.
5. Белок по любому из предшествующих пунктов, где каждая из указанных несущих группировок связана с С-концом легкой цепи антитела, связывающегося с мишенью.
6. Белок по любому из пп. 1-4, где каждая из указанных несущих группировок связана с С-концом тяжелой цепи антитела, связывающегося с мишенью.
7. Белок по любому из пп. 1-4, где первая несущая группировка связана с С-концом тяжелой цепи антитела, связывающегося с мишенью, а вторая несущая группировка связана с С-концом легкой цепи антитела, связывающегося с мишенью.
8. Белок по любому из предшествующих пунктов, где каждая из указанных несущих группировок связана с антителом, связывающимся с мишенью, посредством линкера, указанный линкер содержит пептид, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1.
HH
9. Белок по любому из предшествующих пунктов, где каждая из указанных несущих группировок содержит фрагмент антитела, который выбран из scFv, Fv, scFab или V; трансферрин или его мутант или вариант или вариант белка Z, происходящего из домена В белка А стафилококка.
10. Белок по п. 9, где каждая из указанных несущих группировок содержит scFv.
11. Белок по любому из предшествующих пп., где указанный белок, экспрессирующийся на эндотелиальной клетке ГЭБ, выбран из: рецептора трансферрина (TfR), рецептора инсулина, рецептора инсулиноподобного фактора роста, родственного рецептору липопротеинов низкой плотности белка 8 (Lrp8), родственного рецептору липопротеинов низкой плотности белка 1 (Lrp1), CD98, трансмембранного белка 50А (ТМЕМ50А), глюкозного транспортера 1 (Glut1), базигина (BSG) и также гепарин-связывающего фактора роста, подобного эпидермальному фактору роста.
12. Белок по п. 11, где указанный белок, экспрессирующийся на эндотелиальной клетке ГЭБ, представляет собой TfR.
2
13. Белок по любому из предшествующих пп., где указанное антитело, связывающееся с мишенью, представляет собой полноразмерное антитело, Fab, F(ab') или Fv.
14. Белок по п. 13, где указанное антитело, связывающееся с мишенью, представляет собой полноразмерное антитело.
15. Белок по любому из предшествующих пп., где указанная мишень в головном мозге выбрана из пептида β-амилоида (Аβ), синуклеина альфа, супероксиддисмутазы (SOD), хантингтина, транстиретина, Р-секретазы 1, эпидермального фактора роста, рецептора эпидермального фактора роста 2, белка тау, фосфорилированного белка тау, аполипопротеина Е4, CD20, прионного белка, богатой лейциновыми повторами киназы 2, паркина, пресенилина 2, гамма-секретазы, рецептора смерти 6, белка-предшественника амилоида, рецептора нейротрофина р75, нейрегулина и каспазы 6.
16. Белок по п. 15, где указанная мишень в головном мозге представляет собой пептид Аβ, предпочтительно растворимый агрегат Аβ, такой как растворимый агрегат Аβ, выбранный из олигомеров и протофибрилл.
17. Белок по п. 16, указанный белок содержит антитело, связывающееся с Аβ, и две несущих группировки, представляющие собой фрагменты антител к TfR.
18. Белок по п. 17, где указанное антитело, связывающееся с Аβ, представляет собой mAb158/BAN2401 или его мутант или вариант, и каждая из несущих группировок представляет собой scFv8D3, где каждый из указанных scFv8D3 присоединен к С-концу легкой цепи указанного mAb158/BAN2401 или его мутанта или варианта, указанный белок возможно дополнительно содержит два линкера, каждый линкер имеет аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, для присоединения указанного scFv8D3 к указанному mAb158/BAN2401 или его мутанту или варианту.
19. Белок по п. 15, где указанная мишень в головном мозге представляет собой синуклеин альфа, предпочтительно растворимый синуклеин альфа, такой как растворимый синуклеин альфа, выбранный из олигомеров и протофибрилл.
20. Белок по п. 19, содержащий антитело, связывающееся с синуклеином альфа, и две несущих группировки, представляющие собой фрагменты антител к TfR.
21. Белок по п. 20, где указанное антитело, связывающееся с синуклеином альфа, связывается с протофибриллами человеческого синуклеина альфа, предпочтительно указанное антитело, связывающееся с синуклеином альфа, не связывается с мономерами синуклеина альфа.
22. Белок по п. 20 или 21, где указанное антитело, связывающееся с синуклеином альфа, представляет собой mАb48 или его мутант или вариант, и каждая из указанных несущих группировок представляет собой scFv8D3, где каждый из указанных scFv8D3 присоединен к С-концу легкой цепи указанного mAb48 или его мутанта или варианта, указанный белок возможно дополнительно содержит два линкера, каждый линкер имеет аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, для присоединения указанного scFv8D3 к указанному mAb48 или его мутанту или варианту.
23. Белок по любому из предшествующих пп., представляющий собой слитый белок.
24. Белок по любому из предшествующих пп. для применения в профилактике и/или терапии.
25. Белок по п. 24 для применения в лечении и/или профилактике и/или диагностике in vivo нейродегенеративного нарушения, предпочтительно, нейродегенеративного нарушения, выбранного из группы, состоящей из болезни Альцгеймера и других нарушений, ассоциированных с агрегацией белка Аβ, таких как травматическое повреждение мозга (ТПМ), деменция с тельцами Леви (ДТЛ), синдром Дауна (СД), боковой амиотрофический склероз (БАС), лобно-височная деменция, таупатии, системный амилоидоз, атеросклероз и деменция при болезни Паркинсона (ДБП), вариант болезни Альцгеймера с тельцами Леви, множественная системная атрофия, психоз, шизофрения, болезнь Крейцфельда-Якоба, болезнь Хантингтона и семейная амилоидная нейропатия.
26. Белок по п. 25 для применения в лечении и/или профилактике и/или диагностике in vivo болезни Альцгеймера.
27. Белок по п. 26 для применения в лечении и/или профилактике и/или диагностике in vivo болезни Паркинсона.
28. Способ для лечения и/или профилактики мозгового нарушения у млекопитающего, имеющего указанное нарушение или подверженного риску развития указанного нарушения, включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества белка для транспорта в мозг по любому из пп. 1-23.
29. Способ для диагностирования и/или обнаружения мозгового нарушения у млекопитающего, у которого подозревают наличие или подверженность риску развития указанного нарушения, включающий введение указанному млекопитающему белка для транспорта в мозг по любому из пп. 1-23 в количестве, достаточном для диагностирования и/или обнаружения.
30. Способ для лечения или профилактики по п. 28 или для диагностирования и/или обнаружения по п. 29, где указанное нарушение представляет собой нейродегенеративное нарушение, такое как нейродегенеративное нарушение, выбранное из группы, состоящей из болезни Альцгеймера и других нарушений, ассоциированных с агрегацией белка Аβ, таких как травматическое повреждение мозга (ТПМ), деменция с тельцами Леви (ДТЛ), синдром Дауна (СД), боковой амиотрофический склероз (БАС), лобно-височная деменция, таупатии, системный амилоидоз, атеросклероз и деменция при болезни Паркинсона (ДБП), вариант болезни Альцгеймера с тельцами Леви, множественная системная атрофия, психоз, шизофрения, болезнь Крейцфельда-Якоба, болезнь Хантингтона и семейная амилоидная нейропатия.