ДИСПИРО 1,2,4-ТРИОКСОЛАНЫ КАК ПРОТИВОМАЛЯРИЙНЫЕ СРЕДСТВА
DISPIRO 1,2,4-TRIOXOLANES AS ANTI-MALARIA AGENTS

Область техники, к которой относится изобретение
Данное изобретение относится к композициям и способам лечения малярии. В частности данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим диспиротриоксоланы и способам их применения и производства.
Уровень техники
Малярия представляет собой острую и часто хроническую инфекционную болезнь, происходящую в результате присутствия простейших паразитов в эритроцитах. Вызываемая одноклеточными паразитами рода Plasmodium, малярия передается от человека к человеку через укус самок комаров.
Хотя когда-то малярия была распространена в Северной Америке и умеренных областях мира, в наше время она встречается главным образом в тропических и субтропических странах. Каждый год от 400 миллионов до 600 миллионов человек заражается этой болезнью и от 1,5 миллионов до 2,7 миллионов умирает от этой болезни.
Как правило, ответственными за малярию являются четыре вида простейших паразитов Plasmodium, включая Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae и Plasmodium ovale. Наиболее опасным из четырех видов и отвечающим за половину из всех клинических случаев малярии и 90% смертельных случаев от этой болезни является Plasmodium falciparum.
Передача малярии начинается, когда самка комара жалит человека, уже инфицированного малярийным паразитом. Когда инфицированный комар жалит другого человека, спорозоиты из слюны комаров переносятся в кровь, которые затем премещаются в печень. В печени спорозоиты быстро делятся, затем поступают в кровообращение, где они проникают в эритроциты. Внутри этих клеток крови мерозоиты быстро размножаются, до тех пор пока не вызывают разрыв эритроцитов, высвобождая в кровоток новую генерацию мерозоитов, которые затем заражают другие эритроциты.
Симптомы, ассоциированные с малярией, главным образом связаны с разрывом эритроцитов. Разрушение эритроцитов приводит к сбрасыванию продуктов жизнедедятельности, токсинов и других продуктов распада в кровь. Это в свою очередь вызывает сильную лихорадку, которая приводит инфицированного индивидуума к истощению и ослаблению. Более тяжелые симптомы, связанные с повторными инфекциями и/или инфекцией Plasmodium falciparum, включают анемию, тяжелые головные боли, судороги, бред и, в некоторых случаях, смерть.
Лечение малярии особенно трудно из-за способности малярийных паразитов развивать устойчивость к лекарственным препаратам. Хинин, противомалярийное средство, которое извлекают из коры южноамериканского хинного дерева, является одним из старейших и наиболее эффективных существующих фармацевтических препаратов. Недостатком хинина является то, что он действует кратковременно и не предотвращает рецидивы болезни. Более того, хинин связан с побочными явлениями в диапазоне от головокружения до глухоты.
Хлорохин является синтетическим химическим препаратом, подобным хинину. Его выбрали в качестве лекарственного средства для лечения малярии после его разработки в 1940-х годах вследствие его эффективности, легкости производства и, в общем, отсутствия побочных эффектов. Однако в течение последних десятилетий малярийные паразиты во многих областях мира стали устойчивыми к хлорохину.
Мефлохин является другим синтетическим аналогом хинина, который используют для лечения малярии. Однако малярийный паразит также выработал устойчивость к мефлохину. К тому же мефлохин связан с нежелательными побочными эффектами на центральную нервную систему у некоторых пациентов, включая галлюцинации и образные кошмарные сновидения.
Антифолатные лекарственные средства являются эффективными в отношении малярийных паразитов, действуя путем подавления их размножения. Несмотря на то, что паразиты также выработали устойчивость к антифолатным лекарственным препаратам, данные лекарственные средства еще можно эффективно использовать в комбинации с другими типами противомалярийных средств. Однако применение комбинированной терапии при лечении малярии имеет недостатки, так как является неудобным и дорогим.
Более поздние разработки для лечения малярии касаются использования пероксидной функциональной группы, как показано на примере лекарственного средства артемизинина, который содержит уникальный 1,2,4-триоксановый гетероциклический фармакофор. Полагают, что противомалярийное действие артемизинина является следствием его реакции с железом в свободных гемсодержащих молекулах малярийного паразита с образованием свободных радикалов, приводящих к разрушению клеток.
Открытие артемизинина (qinghaosy), природного эндопероксидного сесквитерпенового лактона (Meshnick et al., 1996; Vroman et al. 1999; Dhingra et al., 2000) вызвало существенную попытку объяснить его молекулярный механизм действия (Jefford, 1997; Cumming et al., 1997) и установить новые противомалярийные пероксиды (Dong и Vennerstrom, 2001). Получены многие синтетические 1,2,4-триоксаны, 1,2,4,5-тетраоксаны и другие эндопероксиды.
Хотя клинически пригодные полусинтетические производные артемизинина являются быстродействующими и сильными противомалярийными лекарственными средствами, они имеют несколько недостатков, включая рецидив, нейротоксичность, (Wesche et al., 1994) и метаболическую неустойчивость (White, 1994). Значительное число из этих соединений являются весьма активными in vitro, но большинство страдает от низкой пероральной активности (White, 1994; van Agtmael et al., 1999). Несмотря на то, что с тех пор получены многие синтетические противомалярийные 1,2,4-триоксаны (Cumming et al., 1996; Jefford, 1997), в данной области техники существует необходимость найти новые пероксидные противомалярийные средства, особенно те, которые легко синтезировать, которые не имеют нейротоксичности и обладают улучшенными фармакокинетическими свойствами, например, улучшенной стабильностью, оральной абсорбцией и т.д.
Раскрытие изобретения
Данное изобретение описывает способ и композицию для лечения малярии с помощью диспиро 1,2,4-триоксоланов, их пролекарств и аналогов. За несколькими исключениями, предпочтительные триоксоланы данного изобретения содержат цис-8'-фенильный заместитель в циклогексильном кольце. Соединения изобретения относятся к следующим трем структурным классам:
Первый класс:
Данное изобретение включает аналоги, ахиральные, ахиральные диастереомеры, рацемические смеси, а также энантиомерные формы соединения.
Триоксоланы данного изобретения обладают отличной потенциальной активностью и эффективностью против паразитов Plasmodium. Кроме того, в противоположность ранее синтезированным триоксоланам, соединения данного изобретения демонстрируют профилактическую активность против малярии и во многих случаях обеспечивают эффективность одократной дозы. Более того, некоторые из триоксоланов пригодны для перорального применения. Кроме того, по сравнению с полусинтетическими производными артемизинина соединения данного изобретения являются структурно простыми, удобными и недорогими для синтеза и могут быть эффективно использованы отдельно или совместно с другими противомалярийными средствами.
Осуществление изобретения
Настоящее изобретение относится к разработке спиро и диспиро 1,2,4-триоксоланов для применения в профилактике и лечении малярии. Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии, что Триоксоланы, имеющие особые заместители на одной стороне гетероцикла триоксолана, обеспечивают метаболическую и химическую стабильность кольцу триоксолана, при этом обеспечивая лучшую активность in vivo, особенно в отношении перорального применения. В отличие от ранее известных триоксоланов соединения данного изобретения обеспечивают неожиданно хорошие противомалярийные профилактические свойства, а также лечение болезни однократной дозой во многих случаях.
При использовании здесь термин "профилактически-эффективное количество" относится к концентрации соединения данного изобретения, которая является эффективной для ингибирования, уменьшения вероятности или предупреждения инфекции и последующей болезни под влиянием малярийных паразитов. Таким же образом, термин "лечебно-эффективное количество" относится к концентрации соединения, которая является эффективной для лечения малярии в плане предотвращения увеличения концентрации малярийных паразитов, снижения концентрации малярийных паразитов и/или "лечения" малярийной инфекции, т.е. на стандартной модели малярии у мышей это было бы равно выживаемости в течение 30 дней после инфекции.
В предшествующих заявках настоящие изобретатели раскрыли определенные новые четырехзамещенные Триоксоланы, имеющие следующую структурную формулу:
1
2
3
4
в которой R, R, R и R представляют комбинации кольцевых систем, ациклических систем и функциональных групп, которые обеспечивают достаточное стерическое затруднение около кольца триоксолана для предоставления химической и метаболической стабильности кольцу.
Соединения триоксолана настоящего изобретения неожиданно являются железо-стабильными и, как было обнаружено, дают неожиданно хорошую противомалярийную активность. Соединения данной структуры являются активными при пероральном приеме, и даже, как было обнаружено, определенные репрезентативные соединения являются лечебными при малярии в единственной дозе. Более того, предпочтительные соединения данного изобретения имеют улучшенный профиль безопасности по сравнению с ранее открытыми соединениями триоксаланов.
В одном варианте осуществления изобретения соединения имеют следующую общую структуру, причем R группы перечислены ниже главной структуры. "OZ" (что обозначает "озонид") является собственным обозначением этих соединений, которое будет использоваться на всем протяжении оставшейся части заявки для удобства.
Предпочтительные соединения настоящего изобретения, определенные до сих пор, включают:
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5] декан мезилат (OZ439);
- цис;-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(4'-морфолинил)пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5]декан мезилат (OZ461);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(4'-тиоморфолинил)пропокси] фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ462);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(1'-оксидо-4'-морфолинил)пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ466);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-[4'-(метилсульфонил)-1'-пиперазинил]пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5] декан p-тозилат (OZ482);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(цис-4'-аминоциклогексилокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ493);
-цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-морфолинил)циклогексил]-1',2',4'-триоксаспиро[4,5]декан мезилат (OZ499);
- цис-Адамантан-2~спиро-3'-8'-(4'-гидроксициклогексил)-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан (OZ508);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]метил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5] декан p-тозилат (OZ527);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(транс-4'-аминоциклогексилокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ537);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(3'-амино-3'-метилбутокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5] декан p-тозилат (OZ539);
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(тетрагидро-1',4'-оксазепин-4'(5'H)-ил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5] декан p-тозилат(OZ543); и
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[(транс-4'-аминоциклогексил)метокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ545).
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[4'-(4'-морфолинил)бутокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ555).
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[4'-[4'-(1'-гидрокси-1'-метилэтил)-1'-пиперидинил]бутокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4,5] декан p-тозилат(0 г571).
- цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[1'-(2'-гидрокси-2'-метилпропил)-4'-пиперидинилокси] фенил]-1',2',4'триоксаспиро [4.5] декан р-тозилат (OZ5 72).
Наиболее предпочтительными из этих соединений являются OZ439, OZ466, OZ493, OZ527, OZ537, OZ539 и OZ555, так как, как было обнаружено, они являются лечебными в отношении малярии в некоторых случаях с помощью единственной дозы.
Примечательной особенностью этих спиро и диспиро 1,2,4-триоксоланов по сравнению с полусинтетическими производными артемизинина является их структурная простота и легкость синтеза. Например, диспиротриоксоланы могут быть легко синтезированы с помощью совместного озонолиза (coozonolysis) 0-метилоксимов циклоалканонов в присутствии соответствующих производных циклоалканонов согласно методу Griesbaum et al. (1997a; 1997b), как проиллюстрировано ниже для симметричного диспироциклогексилтриоксолана:
1
13
Если в этой реакции совместного озонолиза выходы низкие, их можно заметно улучшить, когда O-метилоксим и кетон являются "повернутыми". Этот новый способ предоставляет однозначно удобный метод синтеза спиро и диспиро триоксоланов. Преимущества пути эфиров оксимов по сравнению с подходом с помощью алкенов включают удобный синтез исходных веществ (эфиры оксимов против четырезамещенных алкенов), высокий выход и селективность образования желательных триоксоланов посредством правильного выбора парных субстратов реакции. Триоксоланы можно очистить с помощью кристаллизации или колоночной флэш-хроматографии. Их структуру и чистоту можно подтвердить с помощью аналитической ВЭЖХ, H и C ЯМР, ИК, температуры плавления и элементарного анализа.
Полагают, что образование триоксолана из эфира оксима и кетона является трехступенчатым процессом. Порядок выполнения начинается электрофильным присоединением озона к двойной связи оксима для образования первичного озонида. Во-вторых, очень нестабильный первичный аддукт распадается до химически активного карбонил оксида, направляемый отчасти сопутствующим вытеснением относительно стабильного метилнитрита. B-третьих, карбонил оксид подвергается [3+2] циклоприсоединению с кетоном с получением вторичного озонида или 1,2,4-триоксолана. Остается определить, является ли это
периодическим или согласованным рекомбинационным процессом.
Многие из новых диспиротриоксоланов содержит спироадамантан и могут быть синтезированы с помощью совместного озонолиза адамантанон O-метилоксима в присутствии необходимого производного циклоалканона. Предпочтительными реакционными растворителями для реакции совместного озонолиза являются углеводородные растворители, такие как пентан или циклогексан; более полярные растворители имеют склонность к уменьшению выхода реакции. Когда кетоны не являются легко растворимыми в пентане или циклогексане, можно использовать смешанный растворитель (пентан/метиленхлорид) или только метиленхлорид. Несколько факторов влияют на отношение эфира оксима к кетону. В некоторых реакциях, для того, чтобы избежать образования дипероксида (1,2,4,5-тетраоксан), предотвратить образование диозонида из дикетонов и способствовать реакции с легко растворимыми в петане кетонами, используется избыток кетона (2:1). Чаще всего в стадии получения при синтезе, и особенно в случаях, когда кетоны не являются легко растворимыми в пентане, дорогими или трудными для удаления в реакции обработки, можно использовать отношение кетона к эфиру оксима 1:1. В крупномасштабном синтезе триоксоланов может быть использован 1,5-кратный избыток эфира оксима для достижения более высоких концентраций кетонов в желательном продукте триоксоланов, не вызывая проблем очистки.
Композиции диспиро триоксолана настоящего изобретения в целом можно использовать для профилактики и лечения малярии. Композиции триоксолана настоящего изобретения вводят вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Для этой цели в большинстве случаев можно использовать любой фармацевтически приемлемый носитель, при условии, что носитель не затрагивает значительно стабильность или биодоступность соединения триоксолана данного изобретения.
Триоксоланы данного изобретения можно применять в любой эффективной фармацевтически приемлемой форме для теплокровных животных, включая человека и других животных, например, в форме для местного использования, форме для промывания, оральной форме, в форме суппозитория, парентеральной или инфузионной лекарственных формах, как местную, щечную (буккальную), подъязычную или в форме назального спрея или любым другим способом, эффективным для доставки веществ. Путь введения предпочтительно разрабатывают с целью оптимизировать доставку и/или локализацию препаратов в целевых клетках.
В дополнение к активным соединениям, то есть триоксоланам, фармацевтические композиции данного изобретения могут содержать подходящие эксципиенты и вспомогательные вещества, которые содействуют переработке активного соединения в препараты, которые можно использовать фармацевтически. Лекарственные формы для орального применения включают таблетки, капсулы и гранулы. Препараты, которые могут быть введены ректально, включают суппозитории. Препараты, которые можно вводить ректально, включают суппозитории. Другие лекарственные формы включают подходящие растворы для парентерального или орального применения, и композиции, которые могут быть введены щечным или подъязычным способом.
Фармацевтические препараты настоящего изобретения изготавливают способом, который хорошо известен в данной области техники. Например, фармацевтические препараты могут быть сделаны с помощью обычного процесса смешивания, гранулирования, изготовления драже, растворения, лиофилизации. Процессы, которые используются, в конечном счете, зависят от физических свойств используемого активного ингредиента.
Подходящими эксципиентами являются в частности такие наполнители, как сахара, например, лактоза или сахароза, маннитол или сорбитол, препараты целлюлозы и/или фосфаты кальция, например, трикальцийфосфат или вторичный кислый фосфат кальция, а также связующие вещества, такие как крахмал, паста, с использованием, например, кукурузного крахмала, пшеничного крахмала, рисового крахмала, картофельного крахмала, желатина, трагакантовой камеди, метилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, натрий карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинил пирролидона. При желании можно добавить вещества для улучшения распадаемости таблеток, такие как вышеупомянутые крахмалы, а также карбоксиметил крахмал, поперечно связанный поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия. Вспомогательными средствами являются вещества, регулирующие текучесть, и смазочные вещества, например, такие как кремнезем, тальк, стеариновая кислота или их соли, такие как стеарат магния или стеарат кальция и/или полиэтиленгликоль. Лекарственные формы для перорального применения могут иметь подходящие покрытия, которые, если желательно, могут быть устойчивыми к желудочным сокам.
Для этой цели можно использовать концентрированные растворы сахаров, которые необязательно могут содержать аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль и/или титан диоксид, лакирующие растворы и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Например, для получения покрытий, устойчивых к желудочным сокам, к покрытиям для таблеток можно добавить растворы подходящих препаратов целлюлозы, таких как фталат ацетилцеллюлозы или фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, а для распознавания или для того, чтобы отличить разные комбинации доз соединения - красители и пигменты.
Другие фармацевтические препараты, которые можно использовать перорально, включают вставные капсулы, сделанные из желатина, а также мягкие, герметичные капсулы, сделанные из желатина и пластифицирующей добавки, такой как глицерин или сорбитол. Вставные капсулы могут содержать активные соединения в форме гранул, которые могут быть смешаны с наполнителями, такими как лактоза, связующими веществами, такими как крахмалы, и/или смазывающими веществами, такими как тальк или стеарат магния и, необязательно, стабилизирующими веществами. В мягких капсулах активные соединения предпочтительно являются растворенными или суспендированными в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли. В дополнение могут быть добавлены стабилизирующие вещества. Возможные фармацевтические препараты, которые можно использовать ректально, включают, например, суппозитории, которые состоят из комбинации активных соединений с основой суппозитория. Подходящими основами для суппозитория являются, например, природные или синтетические триглицериды, парафиновые углеводороды, полиэтиленгликоли или высшие спирты. Кроме того, также возможно испльзовать желатиновые ректальные капсулы, которые состоят из комбинации активного соединения с основой. Возможный материал для основы включает, например, жидкие триглицериды, полиэтиленгликоли или парафиновые углеводороды.
Композиции, подходящие для парентерального введения, включают водные растворы активных соединений в водорастворимой форме или в форме, диспергируемой в воде. Кроме того, суспензии активных соединений можно использовать в виде соответствующих масляных суспензий для инъекций. Подходящие липофильные растворители или носители включают жирные масла, например, кунжутное масло, или синтетические сложные эфиры жирных кислот, например, этилолеат или триглицериды. Водные суспензии для инъекций могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, включая, например, натрий карбоксиметилцеллюлозу, сорбит и/или декстран. Такие композиции также могут включать вспомогательные средства, такие как консервирующие, увлажняющие, эмульгирующие и распыляющие вещества. Также композиции можно стерилизовать, например, с помощью фильтрования через фильтр, удерживающий бактерии, или посредством включения стерилизующих средств в композиции. Также композиции можно изготовить в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворить или суспендировать в стерильной воде, физиологическом растворе или другой среде для инъекций перед применением.
В дополнение к введению с помощью обычных носителей активные ингредиенты можно вводить с помощью целого ряда специализированных способов доставки лекарственных препаратов, которые известны специалистам в данной области техники, таких, как портативные инфузионные дозаторы.
Композиции триоксолана настоящего изобретения вводят вместе с фармацевтически подходящим носителем в количестве, достаточном для предотвращения малярийной инфекции и/или лечения активной инфекции. Соединения триоксолана данного изобретения имеют очень низкую токсичность и низкую степень побочных эффектов даже в высоких дозах. Предел дозирования композиций триоксолана будет изменяться в зависимости от некоторого количества факторов, таких как, используют ли их для профилактики или лечения активной инфекции, способа введения, режима дозирования и т.д. В большинстве случаев терапевтическая доза триоксолана может находиться в пределах примерно 0,1-1000 мг/кг/день, доза примерно между 1-100 мг/кг/день является предпочтительной. Вышеупомянутые дозы могут быть введены как однократная доза или могут быть поделены на многократные дозы для введения. Для однократного дозирования возможный предел дозирования составляет около 0,5-5,0 мг/кг. Однако этот предел дозирования может продолжаться значительно выше.
Композиции триоксолана могут быть введены от одного до нескольких раз ежедневно. Для предотвращения малярии, обычный режим дозирования может быть, например (отличным от режима для лечения однократной дозой), 2,0-1000 мг/кг еженедельно, начиная за 1-2 недели до подвергания воздействию малярии до 1-2 недель после воздействия.
Спиро и диспиро триоксоланы данного изобретения могут быть введены в форме любой фармацевтически эффективной соли. Такие соли хорошо известны в данной области техники и включают, но не ограничиваются этим, такие соли, как ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, сульфонат камфары, диглюконат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат (изотионат), лактат, малеат, метансульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, пальмитат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, фосфат, глютамат, бикарбонат, р-толуол-сульфонат и ундеканоат. Предпочтительными солями являются соли, которые увеличивают биодоступность соединений триоксолана. Это будет зависеть от некоторого количества факторов, включая химическую структуру триоксолана, носитель, с которым он объединен, способ введения и т.д.
Как правило, предпочтительным является введение соединений настоящего изобретения, так же как и других противомалярийных средств, как части комбинированной терапии для того, чтобы предотвратить резистентность. Преимущества такой комбинированной терапии при лечении малярии хорошо известны в данной области техники. Комбинированная терапия с противомалярийными средствами представляет собой одновременное применение двух или более кровяных шизонтоцидных лекарственных препаратов с независимыми механизмами действия и разными биохимическими мишенями у паразита. Концепция комбинированной терапии основывается на синергическом или дополнительном потенциале двух или более лекарственных препаратов, для того, чтобы улучшить терапевтическую эффективность и также избежать развития резистентности к отдельным компонентам комбинации. Примеры современных комбинаций противомалярийных лекарственных препаратов включают комбинации артемизинина с хлорохином и мефлохином и комбинации на основе хинина с тетрациклином и клиндамицином. Предполагается, что триоксоланы настоящего изобретения будут вводиться в комбинации со многими другими противомалярийными средствами включая, но, не ограничиваясь этим, артеметер, хлорохин, мефлохин, пипераквин и пиронаридин.
Обнаружено, что спиро и диспиро триоксоланы данного изобретения являются эффективными при лечении шистосомоза. Шистосомоз занимает второе место после малярии в социально-экономическом отношении и в аспекте здравоохранения в тропических и субтропических областях. Данное заболевание является эндемическим в 74 развивающихся странах и приводит к заражению более чем 200 миллионов человек в сельских земледельческих и пригородных районах. По оценкам 500-600 миллионов человек во всем мире находятся под угрозой заболевания.
Основные формы шистосомоза у человека вызывают пять видов передающихся через воду плоских червей, или кровяных сосальщиков, называемых шистосомами. Одним из этих видов является Schistosoma mansoni, который распространен в 53 странах в Африке, в зоне Восточного Средиземноморья, в зоне Карибского моря и в Южной Америке. Паразиты попадают в тело через контакт с инфицированной поверхностью воды, главным образом среди людей, занятых в сельском хозяйстве и рыболовстве. Паразиты обычно заражают хозяина на стадии церкарии или стадии личинки. Внутри хозяина церкарии развиваются во взрослых особей или шистосомы.
Современные виды лечения шистосомоза главным образом фокусируются на профилактике, т.е. предотвращении заражения хозяина церкарией. В настоящее время для лечения шистосомоза наиболее широко применяемым лекарственным препаратом является празиквантел. Несмотря на то, что артеметер продемонстрировал активность в профилактике шистосомоза, он не показал какой-либо активности против взрослых S. mansoni.
Теперь неожиданно было обнаружено, что спиро и диспиро триоксоланы данного изобретениея активны и против церкарии и против зрелых S. Mansoni и S. Japonicum при введении в дозировках и способом, изложенным выше в отношении лечения малярийных паразитов. Также предполагается, что триоксоланы данного изобретения будут активны против S. haematobium. Предпочтительные уровни дозирования диспиро триоксоланов данного изобретения составляют примерно около 100-200 мг/кг/день перорально.
Кроме триоксоланов в носитель также могут быть включены другие лекарственные препараты, которые совместимы с компонентами-носителями. Средние специалисты в данной области техники могут легко установить подобные лекарственные препараты, которые могут включать, например, антибиотики, другие противомалярийные препараты, противовоспалительные средства и т.д.
Понятно, что настоящее изобретение рассматривает применение не только самих вышеупомянутых соединений триоксолана, но их пролекарства, которые метаболизируют в соединения и аналоги и биологически активные формы их солей, а также оптические изомеры, которые обеспечивают сходные фармацевтические результаты.
Следующие примеры предложены для иллюстрации, а не ограничения изобретения. Таким образом, они предоставлены с пониманием, что могут быть сделаны различные модификации композиции, а также модификации способа доставки и, тем не менее, они находятся в рамках сущности изобретения.
Пример 1
Противомалярийная активность
Действие 1,2,4-триоксоланов против Р. falciparum in vitro. Провели проверку каждого триоксолана на штамме K1 Plasmodium falciparum, устойчивом к хлорохину, и штамме NF54, чувствительном к хлорохину, in vitro.
Действие 1,2,4-триоксоланов против Р. berghei in vivo. При проведении проверки однократной дозы in vivo мышей NMRI, инфицированных штаммом ANKA P. berghei (группы из пяти мышей), на следующий день после инфицирования обработали триоксоланами, растворенными или суспендированными в стандартном суспендирующем носителе (SSV). SSV состоит или из 0,5% вес./об. карбокиметил целлюлозы, 0,5% об./об. бензилового спирта, 0.4% об./об. Твина 80 и 0,9% вес./об. хлорида натрия в воде или из 0,5% гидроксипропилметилцеллюлозы 0,4% v/s Твин 80 и 0,5% об/об бензилового спирта в воде. Триоксоланы вводили в виде однократных ро доз 30 мг/кг. Противомалярийную активность измеряли с помощью процента уменьшения паразитемии на третий день после заражения и времени выживания по сравнению с необработанной контрольной группой. Выживаемость на 30 день после заражения считалась излечением на этой модели. Также включены сравнительные данные для противомалярийных контрольных лекарственных препаратов артесуната (AS), артеметера (AM), хлорохина (CQ) и мефлохина (MQ).
Таблица 1
Противомалярийная активность триоксоланов в отношении P. falciparum in vitro и P. berghei in vivo.
Соедине-ние
IC<sub>50</sub> (нг/мл) K1/NF54
Активность (%) 30 мг/кг SSVpo
Выживаемость (дни) 30 мг/кг SSVpo
Излечение 30 мг/кг SSVpo
Контроль
0
6-7
OZ429
0.52/1.3
99.97
27.8
4/5
OZ439
1.5/2.0
98
>30
5/5
OZ453
0,66/1.1
>99.9
24.0
3/5
OZ460
3.5/3.3
99
25.0
3/5
OZ461
2.8/2.8
99.8
>30
5/5
OZ462
3.2/3.1
99.7
>30
5/5
OZ464
3.5/3.3
99.8
>30
5/5
OZ466
3.2/2.5
>99.9
>30
5/5
OZ482
4.2/4.3
99.9
>30
5/5
OZ485
6.1/5.6
99,9
24.8
2/5
OZ493
1.1/2.1
99.7
>30
5/5
OZ495
1.9/3.8
99.3
26.8
3/5
OZ498
1.6/2.5
99.0
24.8
2/5
OZ499
1.0/1.5
99.8
25.2
1/5
OZ505
2.1/1.9
99.7
27.4
4/5
OZ508
1.2/1.4
99.8
24.4
3/5
OZ513
1.1/0.82
99.9
21.0
1/5
OZ527
3.6/2.9
99.7
>30
5/5
OZ534
2.1/1.7
99.8
22.8
1/5
OZ535
1.8/1.6
99.7
26.4
3/5
OZ537
2.1/2.4
99.9
>30
5/5
OZ539
1.5/1.4
99.7
25.2
3/5
OZ543
1.3/2.2
99.6
>30
5/5
OZ545
3.3/3.9
99.5
27.6
4/5
OZ547
3.9/7.9
99.7
24.8
3/5
OZ549
1.3/3.1
99.8
22.4
2/5
OZ555
1.7/1.5
>99.9
>30
5/5
OZ571
1.7/1.9
99.9
24.0
3/5
OZ572
1.2/1.4
99.9
30.0
4/5
OZ575
1.2/1.6
99.7
22.2
1/5
OZ277
1.0/0.91
99.7
8.0
0/5
OZ401
1.9/1.7
98
23.7
3/5
AS
1.3/1.6
92
9.0
0/5
AM
0.74/1.2
99.7
9.0
0/5
CO
62/5.1
99.9
9.6
0/5
MQ
3.0/5.8
99.6
21.8
0/5
Данные в Таблице 1 демонстрируют неожиданные лечебные свойства однократной дозы этих новых триоксоланов на мышиной модели, инфицированной P. berghei. В этих экспериментах соединения вводили перорально в носителе SSV в однократных дозах 30 мг/кг через 24 часа после заражения. По сравнению с OZ277 (описанный в более раннем патенте изобретателей) и всеми контрольными противомалярийными лекарственными препаратами эти новые триоксоланы вылечивают от 1/5 до 5/5 инфицированных мышей. OZ439, OZ461, OZ462, OZ464, OZ466, OZ482, OZ493, OZ527, OZ537 успешно вылечили болезнь у всех из пяти реципиентов.
Пример 2
Противомалярийная активность
Действие 1,2,4-триоксоланов против P. falciparum in vitro. Провели проверку каждого триоксолана на штамме K1 Plasmodium falciparum, устойчивом к хлорохину, и штамме NF54, чувствительном к хлорохину, in vitro.
Действие 1,2,4-триоксоланов против P. berghei in vivo. При проведении проверки однократной дозы in vivo мышей NMRI, инфицированных штаммом ANKA Р. berghei (группы из пяти мышей), на следующий день после инфицирования обработали триоксоланами, растворенными или суспендированными в стандартном суспендирующем носителе (SSV). SSV состоит или из 0,5% вес/об карбокиметил целлюлозы, 0,5% об/об бензилового спирта, 0.4% об/об Твина 80 и 0,9% вес/об хлорида натрия в воде или из 0,5% гидроксипропилметилцеллюлозы 0,4% v/s Твин 80 и 0,5% об/об бензилового спирта в воде. Триоксоланы вводили в виде однократных ро доз 10 мг/кг. Противомалярийную активность измеряли посредством процента уменьшения паразитемии на третий день после заражения и времени выживания по сравнению с необработанной контрольной группой. Выживаемость на 30 день после заражения считалась излечением на этой модели.
Также включены сравнительные данные для противомалярийных контрольных лекарственных препаратов артесуната (AS), артеметера (AM), хлорохина (CQ) и мефлохина (MQ).
Таблица 2
Противомалярийная активность различных форм солей OZ439 в отношении P. falciparum in vitro и P. berghei in vivo.
Соединение
Форма соли
IC<sub>50</sub> (нг/мл) K1/NF54
Активность(%) 10 мг/кг SSV po
Выживаемость (дни) 10 мг/кг SSVpo
Контроль
-
-
0
6-7
OZ439
Мезилат
1.5/2.0
99.9
14.4
OZ558
Тозилат
1.4/1.2
99.7
13.8
OZ559
Гидроген малеат
1.5/1.4
99.9
14.6
OZ560
Гидрохлорид
1.3/1.2
99.9
14.6
OZ561
Изотионат
1.6/1.5
99.9
19.0
OZ562
Гидроген Фумарат
1.7/1.6
99.8
24.0
OZ563
Дигидроген фосфат
1.8/1.7
99.7
14.4
OZ568
Гидроген тартрат
1.3/1.2
99.8
14.0
AS
-
1.3/1.6
67
7.4
AM
-
0.74/1.2
99.4
9.7
CQ
-
62/5.1
99.9
8.9
MQ
-
3.0/5.8
99.8
18.3
Таблица 3
Противомалярийная активность различных форм солей OZ493 в отношении Р. falciparum in vitro и Р. Berghei in vivo.
Соединение
Форма соли
IC<sub>50</sub>(нг/мл) K1/NF54
Активность (%) 10 мг/кг SSVpo
Выживаемость (дни) 10 мг/кг SSVpo
Контроль
-
-
0
6-7
OZ493
Мезилат
1.1/2.1
99.8
12.6
OZ556
Гидрохлорид
1.7/1.5
99.7
13.0
OZ557
Гидроген малеат
1.7/1.6
99.9
13.6
AS
1.3/1.6
67
7.4
AM
0.74/1.2
99.4
9.7
CQ
62/5.1
99.9
8.9
MQ
3.0/5.8
99.8
18.3
Данные, представленные в этих таблицах, показывают, что различные формы солей OZ439 и OZ493 обладают хорошей противомалярийной активностью, и что активность не зависит от формы соли.
Пример 3
Эффективность некоторых OZ соединений при лечении и профилактике малярийных инфекций
Профилактическая активность 1,2,4-триоксоланов против Р. berghei in vivo:
Дозы соединений давали мышам перорально в носителе SSV, описанном в Примере 1. Соединения вводили перорально в однократной дозе 100 мг/кг/день за 48, 72 или 96 часов до инфицирования или в виде однократной дозы 30 мг/кг/день за 24 часа до заражения. Все группы (n=5 мышей на группу), включая необработанную контрольную группу, были заражены в одно и то же время, причем паразитемию определяли для каждого животного на 3 день полсе заражения и сравнивали с уровнем паразитемии у контрольных животных.
Таблица 4
Профилактическая активность некоторых триоксоланов при приеме за 24 или 48 часов до заражения у мышей, инфицированных Р. berghei
48 час до заражения (100 мг/кг)
24 час до заражения (30 мг/кг)
Соединение
Активность(%)
Излечено
Активность (%)
Излечено
OZ429
99.8
5/5
99.8
2/5
OZ439
99.6
5/5
99.8
5/5
OZ453
99.7
5/5
99.9
0/5
OZ460
99.6
5/5
99.8
3/5
OZ461
99.7
5/5
99.9
5/5
OZ462
99.7
5/5
99.8
5/5
OZ464
99.7
5/5
99.9
3/5
OZ466
99.7
5/5
99.8
5/5
OZ482
>99.9
5/5
>99.9
3/5
OZ485
>99.9
5/5
>99.9
3/5
OZ493
99
5/5
>99.9
3/5
OZ495
>99.9
0/5
>99.9
1/5
OZ498
99.8
5/5
99.8
4/5
OZ499
99.6
5/5
99.8
5/5
OZ505
99.5
5/5
>99.9
2/5
OZ508
99.8
4/5
99.7
4/5
OZ513
99.7
5/5
99.9
1/5
OZ527
99
5/5
99.4
5/5
OZ534
>99.9
5/5
>99.9
1/5
OZ535
>99.9
5/5
>99.9
0/5
OZ537
>99.9
5/5
>99.9
5/5
OZ539
>99.9
5/5
>99.9
4/5
OZ277
0
0/5
13
0/5
OZ323
99.5
5/5
99.7
0/5
OZ401
99.6
5/5
99.8
1/5
артезунат
0
0/5
21
0/5
хлорохвин
57
0/5
37
0/5
мефлохин
99.9
3/5
>99.9
3/5
Таблица 5
Профилактическая активность некоторых триоксоланов при приеме за 72 или 96 час до заражения у мышей, инфицированных Р. berghei
72 час до заражения (100 мг/кг)
96 час до заражения (100 мг/кг)
Соединение
Активность(%)
Излечено
Активность (%)
Излечено
OZ439
99.6
5/5
99.5
5/5
OZ461
99.6
5/5
99.4
4/5
OZ462
99.6
5/5
99.6
3/5
OZ466
99.2
5/5
99.1
5/5
OZ482
99.6
4/5
99.6
3/5
OZ493
99.9
5/5
99.5
3/5
OZ323
>99.9
1/5
90
0/5
Z401
99.6
3/5
99.5
0/5
мефлохин
>99.9
0/5
Не определено
Не определено
Как показывают данные в Таблицах 2 и 3, настоящие изобретатели обнаружили неожиданный профилактический потенциал этих новых триоксаланов. По сравнению с некоторыми более активными триоксоланами (OZ277, OZ323, OZ401), описанными в более ранних патентных заявках, новые триоксоланы обладают лучшими профилактическими свойствами, чем свойства контрольных противомалярийных лекарственных препаратов, превосходящими даже свойства мефлохина, лекарственного средства, известного своими сильными профилактическими свойствами.
Исследования стабильности в крови: Соединения инкубировали при 37°С в только что собранных образцах крови крыс. В определенные временные точки отбирали аликвоты цельной крови в двух экземплярах, центрифугировали и плазму анализировали на исходное соединение с помощью LC-MS.
Фармакокинетические исследования на крысах: Соединения вводили крысам (n=2) перорально в дозе 10 мг/кг в суспензионной композиции, содержащей гидроксипропилметилцеллюлозу, Твин 80, бензиловый спирт и воду. Периодически отбирали образцы крови на протяжении 48 часов, сразу после отбора центрифугировали и исследовали плазму на исходное соединение с помощью LC-MS. Биодоступность каждого соединения при пероральном приеме вычисляли относительно IV дозы для каждого соединения в подходящем носителе.
Таблица 6
Фармакокинетические свойства некоторых триоксаланов у крыс
Соединение
Стабильность в крови крыс (t<sub>1/2</sub>) при 37°С
t<sub>1/2</sub> при пероральном приеме в дозе 10 мг/кг (час) in vivo
Биодоступность при пероральном приеме в дозе 10 мг/кг (%)
OZ209
0.8
1.2
12
OZ277
0.8
1.6
19
OZ323
7.7
5.2
100
OZ401
5.7
5.3
80
OZ429
5.5
5.3
73
OZ439
13
15.2
94
OZ453
6.1
Не оценено in vivo
OZ461
>17
14
71
OZ462
>17
1.2
35
OZ466
>17
2.6
90
OZ482
>17
9.6
100
OZ493
>17
7.7
51
OZ527
5
15.4
66
OZ537
>17
11.8
29
Данные в Таблице 4 показывают, что триоксоланы, содержащие цис-8'-фенильный заместитель в циклогексильном кольце продемонстрировали неожиданно улучшенную стабильность в крови крыс при 37°С по сравнению с более ранними соединениями, содержащими цис-8'-алкильный заместитель. За исключением OZ462, который, как было показано, является метаболически нестабильным, все проверенные цис-8'-фенильные соединения имели значительно более длинные периоды полувыведения у крыс после перорального применения, и соответственно более высокую биодоступность при пероральном приеме, по сравнению с соединениями, содержащими цис-8'-алкильный заместитель.
(weak base functional group - функциональная группа слабого основания) цис-8'-алкильный заместитель цис-8'-фенильный заместитель
Пример 4
Предпочтительные способы получения соединений
Далее описаны предпочтительные методы синтеза соединений настоящего изобретения. В некоторых случаях упоминаются предшествующие OZ соединения изобретателей, объект изобретения которых раскрывается в одном или более из Патентов США №6486199, 6825230 и 6906205, а также в родственной заявке Порядковый №11/121,451, раскрытия которых все специально включены путем отсылки.
1
13
3
3
28
41
7
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-пиперидинилокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ429). К раствору OZ288 (1,426 г; 4 ммоль), 1-Вос-4-гидроксипиперидина (0,966 г; 4.8 ммоль) и трифенилфосфина (2,10 г; 8 ммоль) в THF (50 мл) при комнатной температуре (к.т.) добавили по каплям DIPAD (1,618 г; 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т.в течение 72 час и концентрировали. Осадок выкристаллизовывали из этанола (30 мл), содержащего триэтиламин (404 мг) с получением Вос-защищенного промежуточного соединения триоксолана. К раствору метансульфоновой кислоты в THF (1,5 М; 12 мл) добавили вышеуказанное промежуточное соединение. Смесь перемешивали при к.т.в течение 24 час перед тем, как ее разбавили эфиром (100 мл). Полученный осадок собрали фильтрованием, промыли эфиром (100 мл) и EtOAc (50 мл) и высушили с получением триоксолана OZ429 (0,79 г; 37%) в виде белого твердого вещества, mp (температура плавления) 148-150°С; Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.61-2.29 (m, 26H), 2.44-2.53 (m, 1H), 2.81 (s, 3Н), 3.21-3.45 (m, 4H), 4.58 (s, 1H), 6.81 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.12 (d, J=8.8 Гц, 2H), 8.65 (brs, 1H), 8.86 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.48, 26.68, 26.89, 31.59, 34.71, 34.81, 36.41, 36.80, 39.33, 39.96,42.06,67.72, 108.36, 111.40, 115.88, 127.94, 139.50,154.66. Аналитический расчет для CHNOS: С, 62.78; Н, 7.71; N, 2.61. Найдено: С, 62.94; Н, 7.63; N, 2.75.
2
2
4
2
2
3
3
29
43
8
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ439). К раствору OZ288 (1,0 г; 2,81 ммоль) в безводном ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный NaOH (0,45 г; 11,23 ммоль) и тетрабутиламмоний гидросульфат (0,19 г; 0,562 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 30 мин перед добавлением N-(2-хлорэтил)морфолин гидрохлорида (1,05 г; 5,62 ммоль). После, добавления смесь перемешивали при 60°С в течение ночи. Неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли CHCl. После удаления растворителей, осадок растворили в EtOAc (50 мл). Органический слой промыли водой и рассолом и высушили над MgSO. Удаление растворителя давало свободное основание в виде бесцветного твердого вещества. К раствору вышеуказанного свободного основания в CHCl (10 мл) при 0°С добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,216 г; 2,25 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество отфильтровали, промыли эфиром (25 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ439 (1,09 г; 78%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 152-154°С; Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.61-2.11 (т, 22Н), 2.46-2.56 (m, 1H), 2.81 (s, 3Н), 3.09 (brs, 2H), 3.52-3.56 (m, 2Н), 3.61-3.68 (m, 2H), 3.97-4.19 (m, 4Н), 4.45-4.50 (m, 2H), 6.84 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7,14 (d, J=8.8 Гц, 2H), 11.74 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.43, 26.83, 31.54, 34.63, 34.75, 36.36, 36.75, 39.37, 41.98, 52.85, 56.74, 62.81, 63.79, 108.28, 111.38, 114.43, 127.94, 139.96, 155.34. Аналитический расчет для CHNOS: С, 61.57; Н, 7.66; N, 2.48. Найдено: С, 61.80; Н, 7.48; N, 2.48.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-амино-1',1'-диметилэтокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ453).
2
3
3
1
Стадия 1. Диизопропил азодикарбоксилат (0,36 мл; 1,83 ммоль) по каплям добавили к смеси OZ450 (0,31 г; 0,72 ммоль), фталимида (0,22 г; 1,49 ммоль) и трифенилфосфина (0,48 г; 1,83 ммоль) в THF (12 мл) при 0°С в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при к.т.в течение 2 дней, и затем реакцию гасили 5% водным NaHCO (10 мл). Твердое вещество собрали фильтрованием и промыли водой, THF и эфиром с получением фталимидного промежуточного соединения (0,30 г; 75%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 162-163°С. Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.31 (s, 6H), 1.60-2.08 (m, 22Н), 2.46-2.56 (m, 1H), 3.94 (s, 2H), 6.92 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.06 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.70-7.76 (m, 2H), 7.85-7.91 (m, 2H).
2
2
4
2
2
6
6
27
41
7
1
13
Стадия 2. Смесь вышеупомянутого фталимидного промежуточного соединения (0,21 г; 0,38 ммоль) и гидразинмоногидрата (1,0 мл) в хлороформе (20 мл) и метаноле (3 мл) нагревали при 50°С в течение 24 час.Реакционную смесь охладили до к.т., профильтровали для удаления твердого побочного продукта и концентрировали. Осадок растворили в CHCl (30 мл), промыли водой и рассолом и высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. Осадок растворили в CHCl (5 мл) и затем добавили раствор метансульфоновой кислоты (40 мг; 0,42 ммоль) в эфире (20 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ453 (0,15 г; 75%) в виде бесцветного твердого вещества, тр 146-148°С; Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.25 (s, 6H), 1.47-1.62 (m, 2H), 1.63-1.99 (m, 20Н), 2.31 (s, 3Н). 2.47-2.67 (m, 1H), 3.04 (q, J=5.8 Гц, 2H), 6.97 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.17 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.94 (brs, 3Н); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 23.95, 25.98, 26.39, 31.33, 34.26, 34.43, 35.96, 36.25, 39.94, 40.12, 41.03, 48.07, 77.24, 108.27, 110.73, 123.90, 127.37, 141.70, 151.84. Аналитический расчет для CHNOS: С, 61.92; Н, 7.89; N, 2.67. Найдено: С, 62.14; Н, 7.98; N, 2.81.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-12'-(4'-тиоморфолинил)этокси|фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ460).
2
3
6
1
Стадия 1. К раствору тиоморфолина (2,0 г; 19,4 ммоль) и 2-бромэтанола (2,9 г; 23,3 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный KCO (13,4 г; 96,9 ммоль). Затем реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи, смесь фильтровали и концентрировали. Осадок растворили в воде (50 мл) и экстрагировали с EtOAc (2 х 25 мл). Затем водный слой профильтровали, воду удалили под вакуумом. Осадок растворили в 1,2-дихлорэтане (50 мл) перед тем, как добавили тионилхлорид (5 мл). Затем реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов, полученный осадок отфильтовали, промыли эфиром (3×25 мл) и высушили при 50°C с получением 4-(2-хлорэтил)тиоморфолин гидрохлорида (2,2 г; 87%) в виде бесцветного твердого вещества. Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 2.78-2.86 (m, 2Н), 3.16-3.30 (m, 4H), 3.49 (t, J=6.8 Гц, 2Н), 3,70-3.78 (m, 2H), 4.08 (t, J=7.1 Гц, 2Н), 11.8 (brs, 1H).
4
3
3
29
43
7
2
1
13
Стадия 2. К раствору OZ288 (0,50 г; 1,40 ммоль) в безводном ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный NaOH (0,225 г; 5,61 ммоль) и тетрабутиламмоний гидросульфат (0,10 г; 0.28 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при к.т.в течение 30 мин добавили 4-(2-хлорэтил)тиоморфолин гидрохлорид (0,25 г; 1,26 ммоль). Смесь перемешивали при 60°С в течение ночи до того, как отфильтровали неорганическое твердое вещество и промыли EtOAc (2×25 мл). После удаления растворителей в вакууме осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой и рассолом и высушили над MgSO. Удаление растворителей в вакууме давало свободное основание OZ460 (0,60 г; 88%) в виде бесцветного твердого вещества. К раствору свободного основания OZ460 (0,60 г; 1,23 ммоль) в EOtAc (10 мл) при 0°С по каплям добавили раствор метансульфоновой кислоты (0,14 г; 1,4 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество отфильтровли, промыли эфиром (25 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ460 (0,56 г; 78%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 155-157°С; Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.61-2.08 (m, 22Н), 2.46-2.55 (m, 1H), 2.70 (d, J=14.6 Гц, 2Н), 2.81 (s, 3H), 3.12-3.24 (m, 2Н), 3.44 (t, J=13.3 Гц, 2Н), 3.52-3.60 (m, 2Н), 3.95 (d, J=12.2 Гц, 2Н), 4.42-4.49 (m, 2Н), 6.83 (d, J=8.8 Гц, 2Н), 7.14 (d, J=8.8 Гц, 2Н), 11.42 (s, 1H); С ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 24.98, 26.44, 26.84, 31.55, 34.63, 34,76, 36.37, 36.75, 39.39, 41.98, 54.76, 57.13, 62.58, 108.28, 111.40, 114.42, 127.96, 139.99, 155.33. Аналитический расчет для CHNOS: С, 59.87; H, 7.45; N, 2.41. Найдено: С, 60.03; Н, 7.59; N, 2.32.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(4'-морфолинил)пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ461).
3
4
6
1
Стадия 1. К раствору морфолина (1,0 г; 11,47 ммоль) и 1-хлор-3-иодпропана (2,35 г; 11,5 ммоль) в безводном THF (30 мл) добавили активированный цинковый порошок (0,75 г; 11,47 ммоль). После перемешивания смеси при к.т.в течение ночи, ее профильтровали, промыли EtOAc (20 мл) и концентрировали. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли 10% водным NaHCO (10 мл), водой (2×10 мл), высушили над MgSO и концентрировали. Осадок растворили в эфире (20 мл) перед тем как по каплям добавили 1 М эфирный HCl раствор (11,5 мл, 11,5 ммоль) при 0°C. Полученный осадок отфильтровали, промыли эфиром (2×10 мл) и высушили с получением 4-(3-хлорпропил)морфолин гидрохлорида (0,70 г; 31%) в виде бесцветного твердого вещества. Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 2.17-2.28 (m, 2H). 3.01-3.09 (m, 2H), 3.15-3.19 (m, 2H), 3.39-3.42 (m, 2H), 3.76 (t, J=6.4 Гц, 2H), 3.81-3.86 (m, 2H), 3.92-3.96 (m, 2H), 11.46 (brs, 1H).
4
3
3
30
45
8
1
13
Стадия 2. К раствору OZ288 (0,50 г; 1,40 ммоль) в безводном ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный NaOH (0,225 г; 5,61 ммоль) и тетрабутиламмоний гидросульфат (0,1 г; 0.28 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при к.т.в течение 30 мин добавили 4-(3-хлорпропил)морфолин гидрохлорид (0,25 г; 1,26 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение ночи перед тем, как неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). После удаления растворителей под вакуумом осадок растворили в EtOAc (50 мл). Органический слой промыли водой, рассолом, высушили над MgSO и концентрировали. После того, как осадок растворили в EtOAc (20 мл), добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,14 г; 1,40 ммоль) в эфире (10 мл) при 0°C. Полученный осадок отфильтровали, промыли эфиром (25 мл) и высушили в вакууме при 40°C с получением триоксолана OZ461 (0.475 г; 58%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 158-160°С; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.61-2.07 (m, 22Н), 2.32-2.40 (m, 2H), 2.44-2.55 (m, 1Н), 2.79 (s, 3H), 2.88-2.98 (m, 2H), 3.22-3.31 (m, 2H). 3.57 (d, J=12.2 Гц, 2H), 3.97-4.18 (m, 6Н). 6.79 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.8 Гц, 2H), 11.39 (brs, 1Н); С ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 23.63, 26.41, 26.80, 31.54, 34.63, 34.73, 36.34, 36.72, 39.37, 41.93, 52.23, 55.81, 63.69, 64.51, 108.29, 111,32, 114.20, 127.71, 139.10, 156.40. Аналитический расчет для CHNOS: C, 62.15; Н, 7.82; N, 2.42. Найдено: C, 62.05; H, 7.63; N,2.51.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(4'-тиоморфолинил)пропокси]фенил]-1'-2'-4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ462).
3
4
6
1
Стадия 1. К раствору тиоморфолина (1,0 г; 9,7 ммоль) и 1-хлор-3-иодпропана (1,98 г; 9.7 ммоль) в безводном THF (30 мл) добавили активированный цинковый порошок (0,64 г; 9,7 г атом). После перемешивания реакционной смеси при к.т.в течение ночи, ее профильтровали, промыли EtOAc (20 мл) и концентрировали. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли 10% водной NaHCO (10 мл), водой (2×10 мл), высушили над MgSO и концентрировали. Осадок растворили в эфире (20 мл) перед добавлением по каплям 1 М эфирного HCl раствора (9,7 мл; 9,7 ммоль) при 0°С. Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (2×10 мл) и высушили с получением 4-(3-хлорпропил)тиоморфолин гидрохлорида (0,40 г; 19%) в виде бесцветного твердого вещества. Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 2.20-2.25 (m, 2H), 2.78-2.81 (m, 2H), 3.09-3.27 (m, 6H), 3.68-3.71 (m, 2H), 3.74 (t, J=6.4 Гц, 2H), 11.20 (brs, 1H).
4
3
3
30
45
7
2
1
13
Стадия 2. К раствору OZ288 (0,38 г; 1,07 ммоль) в безводном ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный NaOH (0,09 г; 2,13 ммоль) и тетрабутиламмоний гидросульфат (0,07 г; 0,21 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при к.т.в течение 30 минут добавили 4-(3-хлорпропил)тиоморфолин гидрохлорид (0,23 г; 1,07 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение ночи пере тем, как отфильтровали неорганическое твердое вещество и промыли EtOAc (2×25 мл). После удаления растворителей в вакууме осадок растворили в EtOAc (50 мл). Органический слой промыли водой, рассолом, высушили над MgSO и концентрировали с получением свободного основания OZ462 (0,433 г; 81%) в виде бесцветного твердого вещества. К раствору свободного основания (0,41 г; 0,82 ммоль) в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,08 г; 0,82 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (25 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ462 (0,42 г; 86%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 156-158°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.64-2.08 (m, 22H), 2.32-2.41 (m, 2H), 2.46-2.54 (m, 1H), 2.70 (d, J=14.7 Гц, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.96-3.07 (m, 2H), 3.24-3.34 (m, 2H), 3.45-3.54 (m, 2H), 3.87 (d, J=11.8 Гц, 2H), 4.06 (t, J=5.4 Гц, 2H), 6.79 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.12 (d, J=8.3 Гц, 2H), 11.19 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 23.66, 24.86, 26.44, 26.84, 31.57, 34.66, 34.76, 36.37, 36.75, 39.42, 41.97, 54.35, 56.23, 64.61, 108.32, 111.36, 114.22, 127.74, 139.14, 156.40. Аналитический расчет для CHNOS: С, 60.48; Н, 7.61; N, 2.35. Найдено: C, 60.60; H, 7.54; N,2.17.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(1'-оксидо-4'-тиоморфолинил)этокси]-фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ464).
1
3
Стадия 1. К раствору этаноламина (0,54 г; 8,82 ммоль) в воде (20 мл) добавили дивинилсульфоксид (1.0 г; 9.8 ммоль). После кипячения с обратным холодильником в течение 0,5 час реакционную смесь концентрировали и высушивали при 50°C с получением 4-(2-гидроксиэтил)тиоморфолин-1-оксида (1,50 г; 94%) в виде бесцветной жидкости. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 2.65 (t, J=5.4 Гц, 2H), 2.75-3.02 (m, 6H), 3.05-3.31 (m, 3H), 3.66 (t. J=5.4 Гц, 2H).
4
6
6
29
43
8
2
1
13
Стадия 2. К раствору OZ288 (0,50 г; 1, ммоль), 4-(2-гидроксиеэтил)тиоморфолин-1-оксида (0,34 г; 2,1 ммоль), трифенилфосфина (0,55 г; 2,1 ммоль) и триэтиламина (0,29 мл, 2,1 ммоль) в безводном THF (50 мл) при 0°C добавили по каплям раствор DIAD (0,43 г; 2,1 ммоль) в THF (10 мл). После перемешивания при к.т. в течение ночи растворители удалили под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой (3×50 мл), высушили над MgSO и концентрировали. Осадок очистили с помощью хроматографии (силикагель, 50% EtOH в EtOAc) с получением свободного основания OZ464 (0,51 г; 73%) в виде бесцветного твердого вещества. К раствору свободного основания OZ464 (0,51 г; 1,0 ммоль) в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,14 г; 1,4 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадоек профильтровали, промыли эфиром (25 мл) и высушили в вакууме при 40°C с получением триоксолана OZ464 (0,51 г; 85%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 139-141°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.45-1.98 (m, 22H), 2.37 (s, 3H), 2.53-2.64 (m, 1H), 3.08-3.26 (m, 4H), 3.41-3.92 (m, 6H), 4.36 (brs, 2H), 6.95 (J=8.8 Гц, 2H), 7.17 (J=8.3 Гц, 2H), 10.06 (s, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 26.00, 26.41, 31,47, 34.26, 34.44, 35.97, 36.27, 39.90, 40.90, 42.09, 42.46, 55.80, 62.12, 108.29, 110.72, 114.89, 127.72, 139.13, 155.99. Аналитический расчет для CHNOS: C, 58.27; H, 7.25; N, 2.34. Найдено: C, 58.46; H, 7.14; N, 2.36.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(1'-оксидо-4'-морфолинил)пропокси]-фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ466).
1
3
Стадия 1. К раствору 3-амино-1-пропанола (1,33 г; 17,64 ммоль) в воде (30 мл) добавили дивинилсульфоксид (2,0 г; 19,6 ммоль). После кипячения с обратным холодильником в течение 0,5 час реакционную смесь концентрировали и высушивали в вакууме при 50°C с получением 4-(3-гидроксипропил)тиоморфолин-1-оксида (3,0 г; 96%) в виде бесцветной жидкости. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.71-1.85 (m, 2H), 2.65 (t, J=6.4 Гц, 2H), 2.75-2.99 (m, 6H), 3.01-3.27 (m, 2H), 3.73 (t, J=5.9 Гц, 2H), 4.22 (brs, 1H).
1
13
6
6
30
45
8
2
Стадия 2. К раствору OZ288 (0,50 г; 1,4 ммоль), 4-(3-гидроксипропил)тиоморфолин-1-оксида (0,50 г; 2,8 ммоль), трифенилфосфина (0,74 г; 2,8 ммоль) и триэтиламина (0,4 мл; 2,8 ммоль) в безводном THF (50 мл) при 0°C добавили по каплям раствор DIAD (0,57 г; 2,8 ммоль) в THF (10 мл). После перемешивания при к.т.в течение ночи растворитель удалили под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (50 мл) и промыли водой (3×50 мл), высушили над MgSO4 и концентрировали. Осадок очистили с помощью хроматографии (силикагель, 50% EtOH в EtOAc) с получением свободного основания OZ466 (0,47 г; 65%) в виде бесцветного твердого вещества. К раствору свободного основания OZ466 (0,47 г; 0,91 ммоль) в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,09 г; 0,91 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (25 мл) и высушили в вакууме при 40°C с получением триоксолана OZ466 (0,50 г; 90%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 156-158°C; Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.45-1.98 (m, 22Н), 2.12-2.21 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.51-2.61 (m, 1H), 3.04-3.85 (m, 10H), 4.02 (t, J=6.1 Гц, 2H), 6.87 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.13 (d, J=8.8 Гц, 2H), 9.78 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 23.50, 26.01, 26.42, 31.49, 34.29, 34.45, 35.98, 36.28, 40.89, 42,13, 54.50, 64.91, 108.32, 110.73, 114.63, 127.65, 138.48, 156.68. Аналитический расчет для CHNOS: C, 58.89; H, 7.41; N, 2.29. Найдено: C, 57.47; H, 6.94; N, 2.23.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-[4'-(метилсульфонил)-1'-пиперазинил]-пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан р-тозилат(OZ482).
2
2
2
2
4
6
1
Стадия 1. К растволру 1-(3-хлоропропил)пиперазин дигидрохлорида (2,0 г; 8,18 ммоль) в CHCl (50 мл) при 0°C добавили по каплям триэтиламин (11,4 мл; 81,8 ммоль), а затем раствор метансульфохлорида (0,8 мл, 9,81 ммоль) в CHCl (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, и гасили реакцию водой. Органический слой промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO и профильтровали. После удаления растворителя под вакуумом осадок растворили в эфире (50 мл) и эфирной HCl (6,0 мл, 1M в эфире, 6,0 ммоль) добавили по каплям при 0°C. Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили при 40°C с получением 1-(3-хлоропропил)-4-(метансульфонил)пиперазин гидрохлорида (1,35 г; 60%). H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 2.18-2.26 (m, 2H), 3.00 (s, 3H), 3.04-3.18 (m, 2H), 3.18-3.23 (m, 2H), 3.32 (t, J=12.2 Гц, 2H), 3.55-3.58 (m, 2H), 3.67-3.69 (m, 2H), 3.76 (t, J=6.4 Гц, 2H), 11.6 (brs, 1H).
4
6
37
52
2
9
2
1
13
Стадия 2. К раствору OZ288 (0,50 г; 1,4 ммоль) в безводном ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный NaOH (0,225 г; 5,61 ммоль) и тетрабутиламмоний гидросульфат (0,095 г; 0,28 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при к.т. в течение 30 мин добавили 1-(3-хлоропропил)-4-(метансульфонил)пиперазин гидрохлорид (0,39 г; 1,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение ночи и охладили до к.т. Неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). После удаления растворителей под вакуумом осадок растворили в EtOAc (50 мл). Органический слой промыли водой и рассолом, высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. Осадок очистили с помощью хроматографии (силикагель, 50% EtOH в EtOAc) с получением свободного основания (0,17 г; 22%) в виде бесцветного твердого вещества. К раствору вышеуказанного свободного основания (0,17 г; 0,30 ммоль) в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям p-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (0,060 г; 0,30 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (25 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ482 (0,20 г; 88%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 148-150°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) δ 1.48-1.59 (m, 2H), 1.62-1.96 (m, 20H), 2.06-2.15 (m, 2H). 2.29 (s, 3H), 2.51-2.59 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 3.05-3.21 (m, 4H), 3.26-3.36 (m, 2H), 3.59-3.78 (m, 4H), 4.01 (t, J=5.8 Гц, 2H), 6.86 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.12 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.13 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.49 (d, J=7.8 Гц, 2H), 9.51 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 20.95, 23.69, 25.98, 26.39, 31.48, 34.26, 34.43, 35.27, 35.96, 36.25, 40.86, 42.70, 50.77, 53.32, 64.82, 108.30, 110.72, 114.59, 125.66, 127.65, 128,27, 137.89, 138.49, 145.72, 156.64. Аналитический расчет для CHNOS: C, 60.63; H, 7.15; N, 3.82. Найдено: C, 60.50; H, 7.31; N, 3.40.
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-[4'-(метилсульфонил)-1'-пиперазинил]-этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ485).
Стадия 1. К раствору N-(2-гидроксиэтил)пиперазина (2,00 г; 15,36 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (50 мл) при 0°C добавили по каплям раствор тионилхлорида (5 мл) в 1,2-дихлорэтане (5 мл). После добавления реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 час и охладили до к.т. После удаления растворителя под вакуумом осадок растерли в порошок с эфиром (50 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (3×25 мл) и высушили при 50°C с получением N-(2-хлорэтил)пиперазин дигидрохлорида (3,20 г; 95%) в виде бесцветного твердого вещества.
4
3
1
Стадия 2. К раствору N-(2-[хлорэтил)пиперазиндигидрохлорида (1,00 г; 4,54 ммоль) и триэтиламина (6,3 мл, 45,5 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (25 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфохлорида (1,04 г; 9,08 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл). После перемешивания реакционной смеси при к.т.в течение ночи реакцию тушили водой (25 мл). Органический слой промыли водой (3×25 мл) и высушили над MgSO. Удаление растворителя под вакуумом предоставляло 1-(2-хлорэтил)-4-(метансульфонил)пиперазин (0,87 г; 85%) в виде вязкого масла. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 2.63-2,65 (m, 4H), 2.77-2.8 (m, 5H), 3.27 (t, J-4.9 Гц, 4H), 3.59 (t, J-6.8 Гц, 2H).
Стадия 3. К раствору OZ288 (0,50 г; 1,40 ммоль) в безводном ацетонитриле (50 мл) добавили порошкообразный NaOH (0,17 г; 4,21 ммоль) и тетрабутиламмоний гидросульфат (0,10 г; 0,28 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при к.т.в течение 30 мин добавили раствор 1-(2-хлорэтил)-4-(метансульфонил)пиперазина (0,48 г;
4
3
6
6
30
46
2
9
2
2
1
1H
13
2,10 ммоль) в ацетонитриле (5 мл). После перемешивания реакционной смеси при 60°C в течение ночи и охлаждения до к.т. неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Затем фильтрат концентрировали, осадок растворили в EtOAc (50 мл). Органический слой промыли водой и рассолом и высушили над MgSO. После удаления растворителя осадок очистили с помощью хроматографии (силикагель, 50% EtOH в EtOAc) с получением свободного основания (0,49 г; 64%) в виде бесцветного твердого вещества. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.62-2.04 (m, 22H), 2.46-2.54 (m, 1H), 2.69 (t, J-4.9 Гц, 4H), 2.77 (s, 3H), 2.84 (t, J=5.4 Гц, 2H), 3.26 (t, J=4.9 Гц, 4H), 4.07 (t, J=5.4 Гц, 2H), 6.82 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.3 Гц, 2H). К раствору вышеуказанного свободного основания (0,49 г; 0,9 ммоль) в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,08 г; 0,81 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ485 (0,52 г; 90%) в виде бесцветного, твердого вещества, mp 140-142°C;  ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.48-1.59 (m, 2H), 1.61-1.96 (m, 20H), 2.37 (s, 3H), 2.52-2.62 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 3.11-3.34 (m, 4Н), 3.57-3.79 (m, 6H), 4.33 (brs, 2H), 6.95 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.17 (d, J=7.8 Гц, 2H), 9.95 (brs, 1H); C ЯМР (125,7 МГц, DMSO-d) δ 25.99, 26.40, 31.47, 34.26, 34.44, 35,26, 35.97, 36.26, 39.94, 40.89, 42.52, 51.21, 54.73, 62.24, 108.30, 110.74, 114.89, 127.74, 139.14, 155.99. Аналитический расчет для CHNOS·0.3HO: C, 56.05; H, 7.21; N, 4.36. Найдено: C, 55.48; H, 7.25; N, 4,04.
2
3
3
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(цис-4'-аминоциклогексилокси)фенил]-1'-2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ493). Стадия 1. Диизопропил азодикарбоксилат (0,69 мл, 3,51 ммоль) добавили по каплям к смеси OZ288 (1,00 г; 2,81 ммоль), N-(trans-4-гидроксициклогексил)фталимида (0,85 г; 3,47 ммоль) и трифенилфосфина (0,92 г; 3,51 ммоль) в THF (50 мл) при 0°C в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при к.т.в течение 24 час. После удаления растворителя сырой продукт очистили с помощью кристаллизации из EtOH с получением искомого простого эфира фенола (0,95 г; 58%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 145-146°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.51-2.08 (m, 26H), 2.16-2.25 (m, 2H), 2.44-2.54 (m, 1H), 2.66-2.78 (m, 2H), 4.15-4.24 (m, 1H), 4.53-4.58 (m, 1H), 6.90-6.96 (m, 2H), 7.09-7.15 (m, 2H), 7.67-7.73 (m, 2H), 7.79-7.86 (m, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 23.95, 26.50, 26.89, 29.27, 31.65, 34.77, 34.81, 36.41, 36.82, 42.10, 50,17, 69.55, 108.48, 111.34, 116.26, 123.03, 127.61, 132.07, 133.79, 138.40, 155.60, 168,33.
4
2
2
6
6
29
43
7
1
13
Стадия 2. Смесь вышеуказанного простого эфира фенола (1,45 г; 2,49 ммоль) и гидразинмоногидрата (2 мл) в хлороформе (40 мл) и метаноле (6 мл) нагревали при 50°C в течение 24 часов. Затем реакционную смесь охладили до к.т., профильтровали для удаления твердого побочного продукта, а фильтрат промыли водой (2×20 мл) и рассолом (20 мл) и высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. Осадок растворили в CHCl (5 мл) и затем добавили раствор метансульфоновой кислоты (0,23 г; 2,4 ммоль) в этилацетате (20 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ493 (1.11 г; 81%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 158-159°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.48-1.96 (m, 30H). 2.32 (s, 3H), 2.51-2.60 (m, 1H), 3.04-3.17 (m, 1H), 4.52 (s, 1H), 6.86 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.12 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.78 (brs, 3H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 24.93, 25.98, 26.39, 27.14, 31.46, 34.28, 34.43, 35.95, 36.25, 40.88, 48.51, 69.73, 108.30, 110.71, 116.11, 127.72, 138.32, 155.31. Аналитический расчет для CHNOS: C, 63.36; H, 7.88; N, 2.55. Найдено: C, 64.26; H, 7.88; N, 2.26.
2
2
2
3
3
22
32
4
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-(4'-оксоциклогексил)-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]-декан (OZ495). Раствор O-метил-2-адамантаноноксима (2,00 г; 11.2 ммоль) и 4,4'-бициклогексанона (4.34 г; 22.4 ммоль) в циклогксане (150 мл) и CHCl (75 мл) обработали озоном по общепринятой методике. После удаления растворителей сырой продукт очистили с помощью кристаллизации из EtOH/HO (10:3) с получением триоксолана OZ495 (2,50 г; 63%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 90-91°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.05-2.11 (m, 28H), 2.21-2.49 (m, 4H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.47, 26.87, 27.28, 29.87, 34.39, 34.79, 36.39, 36.79, 40.42, 40.84, 41.02, 108.68, 111.34, 212.17. Аналитический расчет для CHO: C, 73.30; H, 8,95. Найдено: C, 73.80; H, 8.92.
1
3
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(5'-аминопентокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ498). Стадия 1. Смесь фталевого ангидрида (1,48 г; 10 ммоль) и 5-амино-1-пентанола (1,03 г; 10 ммоль) в толуоле (20 мл) кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель удалили под вакуумом и осадок очистили с помощью хроматографии с получением N-(5-гидроксипентил)фталимида (2,00 г; 88%) в виде бесцветного масла. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.37-1.48 (m, 2H), 1.56-1.67 (m, 2H), 1.67-1.79 (m, 2H), 3.64 (t, J-6.5 Гц, 2H), 3.70 (t, J=7.5 Гц, 2H), 7.66-7.76 (m, 2H), 7.80-7.99 (m, 2H).
2
3
3
1
13
Стадия 2. Диизопрпил азодикарбоксилат (0,69 мл, 3,51 ммоль) добавили по каплям к смеси OZ288 (0,50 г; 1,4 ммоль), N-(5-гидроксипентил)фталимида (0,65 г; 2,79 ммоль), трифенилфосфина (0,92 г; 3,51 ммоль) и триэтиамина (0,5 мл; 3,51 ммоль) в THF (50 мл) при 0°C в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 24 час. После удаления растворителя сырой продукт очистили кристаллизацией из EtOH с получением искомого простого эфира фенола (0,35 г; 44%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 115-116°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.46-2.08 (m, 28H), 2.43-2.53 (m, 1H), 3.71 (t, J=7.0 Гц, 2H), 3.92 (t, J=6.5 Гц, 2H), 6.79 (d, J=9.0 Гц, 2H), 7.09 (d, J=9.0 Гц, 2H), 7.67-7,75 (m, 2H), 7.80-7.99 (m, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 23.42, 26.49, 26.89, 28.33, 28.85, 31.65, 34.76, 34.81, 36.41, 36.81, 37.85, 42.05, 67.55, 108.46, 111.34, 114.34, 123.18, 127.56, 132.15. 133.86, 138.20, 157.34, 168,43.
4
2
2
6
6
28
43
7
1
13
Стадия 3. Смесь вышеуказанного простого эфира фенола (0,30 г; 0,53 ммоль) и гидразин моногидрата (1 мл) в хлороформе (30 мл) и метаноле (3 мл) нагревали при 50°C в течение 24 час. После охлаждения реакционной смеси до к.т.и фильтрования для удаления твердого побочного продукта фильтрат промыли водой (2×10 мл) и рассолом (10 мл), высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. Осадок растворили в CHCl (5 мл) и добавили раствор метансульфоновой кислоты (0,05 г; 0,52 ммоль) в этилацетате (20 мл). Осадок собирали фильтрованием с получением триоксолана OZ498 (0,19 г; 68%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 155-156°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.38-1.98 (m, 28Н), 2.30 (brs, 3H), 2.50-2.59 (m, 1H), 2.76-2.85 (m, 2Н), 3.92 (t, J=6.3 Гц, 2Н), 6.83 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.11 (d,=8.3 Гц, 2H), 7.63 (brs, 3H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 22.72, 25.98, 26.39, 26.90, 28.35, 31.49, 34.28, 34.44, 35.96, 36.25, 38.97, 40.86, 67.22, 108.32, 110.71, 114.44, 127.58, 138.04, 157.08. Аналитический расчет для CHNOS: C, 62.54; H, 8.06; N, 2.60. Найдено: C, 62.55; H, 7.93; N, 2.76.
2
2
2
2
4
2
2
3
3
27
45
7
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-морфолинил)циклогексил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5] декан мезилат (OZ499). К растовру OZ495 (0,23 г; 0,64 ммоль) в CHCl (10 мл) и ClCHCHCl (10 мл) добавили морфолин (1,0 мл; ммоль) и уксусную кислоту (2,5 мл). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 час перед тем, как добавили натрий триацетоксиборогидрид (0,22 г; 1,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, и затем реакцию тушили с помощью 1 М водного NaOH (2 мл). Органический слой отделили и промыли водой (10 мл) и рассолом (10 мл), высушили над MgSO и концентрировали. Осадок растворили в CHCl (5 мл) и добавили раствор метансульфоновой кислоты (0,06 г; 0,63 ммоль) в этилацетате (20 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ499 (0,11 г; 32%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 150-152°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.02-1.51 (m, 6H), 1.61-2.08 (m, 26H), 2.82 (s, 3H), 2.83-2.94 (m, 2H), 2.99-3.09 (m, 1H), 3.49 (d, J=11.2 Гц, 2H), 4.00 (dd, J=13.2, 2.9 Гц, 2H), 4.23 (t, J=12.0 Гц, 2H), 11.05 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.87, 26.15, 26.49, 26.87, 27.98, 33.41, 33.99, 34.78, 36.40, 36.51, 36.80, 39.58, 48.99, 63.82, 66.51, 108.59, 111.34. Аналитический расчет для CHNOS: C, 61.45; H, 8.60; N, 2.65. Найдено: C, 61.53; H, 8.44; N, 2.57.
4
6
6
36
51
8
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-[(2'-гидрокси-2'-метилпропил)амино]-пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан р-тозилат (OZ505). Раствор 1,2-эпокси-2-метилпропана (1 мл, 11 ммоль) и свободного основания OZ401 (620 мг; 1,5 ммоль) в этаноле (10 мл) в атмосфере аргона перемешивали при к.т. в течение 2 дней и затем выпарили до сухости. Осадок растворили в DCM (30 мл), промыли водой (5×30 мл), высушили над MgSO и выпарили до сухости. Сырой продукт растворили в DCM (10 мл), охладили на ледяной бане и обработали раствором р-толуолсульфоновой кислоты моногидратом (250 мг; 1,3 ммоль) в этиловом эфире (30 мл). Полученный осадок собрали фильтрованием, промыли эфиром и высушили на воздухе с получением триоксолана OZ505 (660 мг; 67%) в виде желтоватого твердого вещества, mp 160-162°C, H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.20 (s, 6H), 1.45-1.61 (m, 2H), 1.62-1.98 (m, 20H), 2.04-2.13 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.50-2.63 (m, 1H), 2.89-2.95 (m, 2H), 3.02-3.12 (m, 2H), 4.02 (t, J=5.9 Гц, 2H), 5.17 (s, 1H), 6.85 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.13 (d, J=9.3 Гц, 2H), 7.48 (d, J=7.8 Гц, 2), 8.20 (brs, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 20.95, 25.13, 25.99, 26.39, 27.54, 31.49, 34.27, 34.44, 35.96, 36.26, 40.86, 45.95, 57.15, 64.98, 67.25, 108.31, 110.72, 114.54, 125.66, 127.64, 128.21, 137.75, 138.41, 145.93, 156.67. Аналитический расчет для CHNOS: C, 65.73; H, 7.81; N, 2.13. Найдено: C, 65.60; H, 7.63; N, 2.30.
4
3
4
3
3
22
34
4
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-(4'-гидроксициклогексил)-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан (OZ508). Раствор NaBH (42 мг; 1,1 ммоль) в этаноле (10 мл), содержащем 3 капли 1,0 М водного NaOH добавили к раствору OZ495 (0,36 г; 1,0 ммоль) в THF (5 мл) при 0°C в течение периода времени 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при к.т.в течение 1 часа до того, как потушить реакцию с помощью EtOAc (10 мл). После удаления растворителей осадок растворили в EtOAc (50 мл) и промыли насыщенным водным NaHCO (10 мл), водой (10 мл) и рассолом (10 мл). Органический слой высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали с получением триоксолана OZ508 (0,30 г; 83%, 10:1 смесь из двух диастереомеров) в виде бесцветного твердого вещества, mp 138-140°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 0.98-2.05 (m, 33H), 3.48-3.55 (m, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.48, 26.88, 27.21, 28.15, 34.52, 34.79, 35.77, 36.38, 36.81, 41.18, 41.35, 71.08, 108.94, 111.18. Аналитический расчет для CHO: С, 72.89; H, 9.45. Найдено: C, 73.02; H, 9.22.
2
3
3
3
29
41
5
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-гидрокси-1'-пиперидинил)этокси]-фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан (OZ513). Смесь цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(2'-бромэтокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,50 г; 1,08 ммоль), 4-гидроксипиперидина (0,25 г; 2,5 ммоль), и KCO (2,0 г) в безводном ацетонитриле (80 мл) нагревали при 60°C в течение 2 дней. После охлаждения реакционной смеси до к.т. и удаления твердого вещества фильтрат концентрировали. Осадок промыли водой (50 мл) и высушили в вакууме с получением триоксолана OZ513 (0,46 г; 88%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 89-90°C; Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.59-2.09 (m, 27H), 2.25-2.35 (m, 2H), 2.44-2.56 (m, 1H), 2.79 (t, J=6.1 Гц, 2H), 2.81-2.89 (m, 2H), 3.65-3.77 (m, 1H), 4.07 (t, J=5.8 Гц, 2H), 6.83 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.8 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.49, 26.89, 31.65, 34.47, 34.75, 34.81, 36.41, 36.82, 42.06, 51.52, 57.10, 66.08, 108.44, 111.37, 114.46, 127.61, 138.49, 157.10. Аналитический расчет для CHNO: C, 72.02; H, 8,54; N, 2.90. Найдено: C, 69.37; H, 8.06; N, 2.58.
4
4
2
4
3
3
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[[4'-[2'-(4'-орфолинил)этокси]фенил]метил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5]декан p-тозилат (OZ527). Смесь OZ514 (780 мг; 1,81 ммоль), NaOH (504 мг; 12,6 ммоль) и BuNHSO (150 мг; 0,42 ммоль) в MeCN (65 мл) перемешивали при к.т. в течение 30 минут перед добавлением N-(2-хлорэтил)морфолин гидрохлорида (1,18 г; 6,3 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 60°C в течение 16 час, гасили ледяной водой (75 мл) и экстрагировали с помощью DCM (6×30 мл). DCM слои объединили, промыли 10% водным EtOH (2×30 мл), высушили над NaSO, и выпарили до сухости. Осадок выкристаллизовывали из МеОН до получения искомого свободного основания (510 мг; 58%) в виде игольчатых кристаллов, mp 105-106°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.17-1.26 (m, 2H), 1.45-1.98 (m, 21H), 2.44 (d, J=6.8 Гц, 2H), 2.58 (t, J=4.4 Гц, 4H), 2.79 (t, J=5.9 Гц. 2H), 3.73 (t, J=4.6 Гц, 4H), 4.09 (d, J=5.8 Гц, 2Н) 6.82 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.03 (d, J=8.3 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.5, 26.9, 29.9, 34.2, 34.775, 34.782, 36.4. 36.8, 38.3, 41.9, 54.1, 57.7, 65.7, 66.9. 109.0, 111.2, 114.3,125.9, 130.0,133.2, 156.9. Смесь вышеуказанного свободного основания (310 мг; 0,64 ммоль) и p-толуолсульфоновой кислоты моногидрата (123 мг; 0,64 ммоль) в DCM (10 мл) и эфире (10 мл) премешивали при к.т.в течение ночи. Осадок собрали фильтрованием, промыли эфиром (10 мл) и высушили под вакуумом с получением триоксолана OZ527 (350 мг;
1
13
3
3
36
49
8
83%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 146-147°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.16-1.31 (m, 2H), 1.42-2.06 (m, 21H), 2.38 (s, 3H), 2.46 (d, J=6.8 Гц, 2H), 3.02-3.16 (m, 2H). 3.52-3.62 (m, 2H), 3.70 (d, J=12.2 Гц, 2H), 3.92-4.03 (m, 2H), 4.10 (t, J=12.0 Гц, 2H), 4.39-4.49 (т, 2Н), 6.75 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.04 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.21 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.79 (d, J=8.3 Гц, 2H), 11.73 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.35, 26.46, 26.85, 29.80, 34.11, 34.77, 36.36, 36.78, 38.20, 41.88, 53.04, 56.97,62.89, 63.85, 108.90, 111.24, 114.21, 125.88, 128.93, 130.25, 134.50, 140.38, 141.78, 155.21. Аналитический расчет для CHNOS: C, 65.93; H, 7.53; N, 2.14. Найдено: C, 65.76; H, 7.38; N,2.13.
4
6
6
31
46
2
8
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(4'-формил-1'-пиперазинил)пропокси]-фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ534). К перемешиваемой смеси цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(3'-бромпропокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,60 г; 1,26 ммоль) и карбоната калия (2,00 г) в ацетонитриле (50 мл) при к.т. добавили 1-пиперазинкарбоксальдегид (0,29 г; 2,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 48 час при 60°C и охладили до к.т. Неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Объединенный фильтрат выпарили до сухости под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO и профильтровали. Удаление растворителя давало искомое свободное основание в виде бесцветного твердого вещества. К раствору вышеуказанного свободного основания в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,12 г; 1,26 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ534 (0,65 г; 85%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 156-158°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.45-1.59 (m, 2H), 1.61-1.96 (m, 20H), 2.08-2.17 (m, 2H), 2.34 (s, 3Н), 2.48-2.60 (m, 1H), 2.91-3.09 (m, 3H), 3.24-3.33 (m, 2H), 3.34-3.44 (m, 1H), 3.51-3.64 (m, 2H), 3.96 (d, J=14.1 Гц, 1H), 4.02 (t, J=6.1 Гц, 2H), 4.28 (d, J=12.2 Гц, 1H), 6.86 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.14 (d, J=8.8 Гц, 2H), 8.08 (s, 1H), 9.70 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 23.63, 26.00, 26.40, 31.48, 34.27, 34.44, 35.97, 36.13, 36.27, 39.93, 40.87, 41.64, 50.68, 51.51, 53.63, 64.86, 108.31, 110.72, 114.60, 127.65, 138.48, 156.67, 161.30. Аналитический расчет для CHNOS: C, 61.36; H, 7.64; N, 4.62. Найдено: C, 59.91; H, 7.43; N, 3.76.
I
1
13
4
6
6
38
53
8
3
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3-[(транс-4'-гидроксициклогексил)амино]-пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат (OZ535). К перемешиваемой смеси цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(3'-бромпропокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,60 г; 1,26 ммоль) и карбоната калия (2,00 г) в ацетонитриле (50 мл) при к.т. добавили отрднс-4-аминоциклогексанол (0,29 г; 2,52 ммоль). Реакционную смесь перемешали в течение 48 часов при 60°C охладили до к.т. Неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Объединенный фильтрат выпарили до сухости под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO и профильтровали. Удаление растворителя давало желаемое свободное основание в виде бесцветного твердого вещества. К раствору вышеуказанного свободного основания в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,24 г; 1,26 ммоль) в эфире (10 мл). Полученный осадок профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ535 (0,79 г; 92%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 138-140°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1. 11-1.23 (m, 2H), 1.24-1.38 (m, 2H), 1.45-1.59 (m, 2H), 1.61-1.96 (m, 27H). 2.29 (s, 3H), 2.47-2.60 (m, 1H), 2.91-3.12 (m, 3H), 4.01 (brs, 2Н), 4.70 (brs, 1H), 6.85 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.12 (d, J=6.8 Гц, 2H), 7.13 (d, J=6.8 Гц, 2H), 7.49 (d, J=7.8 Гц, 2H), 8.32 (brs, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 20.99, 25.93, 26.03, 26.44, 26.87, 31.53, 33.06, 34.31, 34.47, 36.00, 36.29, 40.91, 41.84, 55.48, 64.70, 67.82, 108.34, 110.75, 114.58, 125.68, 127.66, 128.37, 138.13, 138.40, 145.48, 156.73. Аналитический расчет для CHNOS: C, 66.74; H 7.81; N, 2.05. Найдено: C, 66.67; H, 7.92; N, 2.07.
2
2
2
3
1
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(тнранс-4'-аминоциклогексилокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ537). Стадия 1. К перемешиваемому раствору цис-4-аминоциклогексанол гидрохлорида (1,0 г; 6,6 ммоль) и триэтиламина (2 мл) в CHCl (25 мл) добавили BocO (1,44 г; 6,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т.в течение 3 часов. После удаления растворителя осадок промыли водой (30 мл) и высушили под вакуумом с получением трет-бутил-цис-4-гидроксициклогексил карбамата (0,80 г; 56%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 85-86°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.30-1.74 (m, 8H), 1.45 (s, 9H), 3.48-3.60 (m, 1H), 3.86-3.94 (m, 1H), 4.46-4.60 (m, 1H).
2
3
3
1
13
Стадия 2. Диизопропил азодикарбоксилат (0,32 мл; 1,68 ммоль) добавили по каплям к смеси OZ288 (0,5 г; 1,4 ммоль), трет-бутил-цис-4-гидроксициклогексил карбамата (0,3 г; 1,4 ммоль) и трифенилфосфина (0,44 г; 1,68 ммоль) в THF (50 мл) при 0°C в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 24 часов. После удаления растворителя сырой продукт очистили с помощью кристаллизации из EtOH с получением искомого простого эфира фенола (0,60 г; 77%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 150-151°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.18-1.30 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.48-2.16 (m, 30H), 2.43-2.54 (m, 1Н), 3.45-3.58 (m, 1H), 4.07-4.17 (m, 1H), 4.34-4.48 (m, 1H). 6.80 (d, J=9.0 Гц, 2H), 7.09 (d, J=9.0 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.47, 26.87, 28.40, 30.27, 30.86, 31.62, 34.74, 34.79, 36.39, 36.79, 42.05, 48.76, 75.07, 108.44, 111.36, 115.90, 127.64, 138.54, 155.94, 162.77.
1
16
6
6
29
43
7
Стадия 3. Смесь вышеуказанного простого эфира фенола (0,50 г; 0,90 ммоль) и 1,5 М MsOH в THF (6 мл) перемешивали при к.т.в течение 6 часов. Полученный осадок отфильтровали, промыли эфиром (30 мл) и высушили под вакуумом с получением триоксолана OZ537 (0,48 г; 96%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 167-168°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.35-1.59 (m, 6H), 1.61-1.96 (m, 22H), 2.02-2.15 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2.47-2.60 (m, 1H), 3.01-3.15 (m, 1H), 4.17-4.27 (m, 1H), 6.86 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.10 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.78 (brs, 3H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 25.99, 26.40, 28.16, 29.31, 31.49, 34.29, 34,45, 35.96, 36.27, 40.88, 48.57, 73.81, 108.34, 110.73, 115.85, 127.70, 138.27, 155.60. Аналитический расчет для CHNOS: C, 63.36; H, 7.88; N, 2.55. Найдено: C, 63.76; H, 7.78; N,2.31.
2
4
2
3
3
3
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(3'-амино-3'-метилбутокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5] декан p-тозилат (OZ539). Стадия 1. К раствору HSO (60 мл, 98%, 1,10 моль) при -5°C добавили по каплям MeCN (25 мл; 0,48 мол), а затем 3-метил-1,3-бутандиол (48 мл; 0,40 моль). Полученный раствор перемешивали при 0°С в течение 1 часа, вылили в лед (300 мл) и промыли эфиром (2×50 мл). Водный слой подщелачивали 15 М водным NaOH (150 мл) до значения рН 12 и экстрагировали эфиром (3×150 мл). Эфирные слои объединили, промыли насыщенным Nad (2×50 мл), высушили над KCO и выпарили до сухости с получением 2,4,4-триметил-5,6-дигидро-1,3(4H)-оксазина (46,5 г; 91,4%) в виде бесцветного масла (нестабильное). H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.18 (s, 6H), 1.69 (t, J=5.9 Гц, 2H), 1.86 (8, 3H), 4.11 (t, J=5.9 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.0, 29.7, 33.1, 47.2, 61.0, 154.8.
4
3
3
1
13
Стадия 2. 2,4,4-триметил-5,6-дигидро-1,3(4H)-оксазин (46,0 г; 0,362 моль) добавили по каплям к 6 М водному NaOH (150 мл) при к.т. Полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 20 часов, затем охладили до к.т. и экстрагировали с помощью DCM (3×100 мл). Слои DCM объединили, промыли рассолом (3×100 мл), высушили над MgSO и выпарили до получения 3-амино-3-метил-1-бутанол (11,0 г; 29%) в виде коричневого масла. [Примечание, рассол (концентрированный соляной раствор) экстрагировали DCM (5×100 мл) для получения обратно 3-амино-3-метил-1-бутанола (10,0 г; 27%)]. Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.20 (s, 6H), 1.59 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2.81 (brs, 3H), 3.83 (t, J=5.6 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 30.9, 42.6, 50.6, 60.2.
3
2
2
4
3
3
1
13
Стадия 3. К раствору 3-амино-3-метил-1-бутанола (7,20 г; 70 ммоль) и EtN (8 мл) в DCM (40 мл) при 0°C добавили по каплям раствор BocO (15,2 г; 70 ммоль) в DCM (20 мл). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 дней, экстрагировали водой (3×20 мл), высушили над NaSO и концентрировали. Осадок очистили с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0-50% EtOAc в гексане) с получением 3-трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-1-бутанола (2,20 г; 15%) в виде бесцветного масла. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.32 (s, 6H), 1.43 (s, 9H), 1.87 (t, J=6.3 Гц, 2H), 2.33 (brs, 1H), 3.76 (t, J=6.3 Гц, 2H), 4.98 (brs, 1H); С ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 27.7, 28.4, 43.2, 51.8, 59.3, 78.9 (br),155.0 (br).
1
13
3
3
Стадия 4. К раствору OZ288 (890 мг; 2,50 ммоль), трифенилфосфина (986 мг; 3,75 ммоль), 3-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метил-1-бутана (761 мг; 3,75 ммоль) и EtsN (0,83 мл; 6,00 ммоль) в DCM (30 мл) при 0°C по каплям добавили диизопропил азодикарбоксилат (0,80 мл; 3,75 ммоль) в DCM (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение ночи, затем промыли водой (3×20 мл) и концентрировали. Осадок очистили с помощью флэш-хроматографии (силикагель, 0-9% эфир в гексане) с получением простого эфира фенола (0,77 г; 57%) в виде белого полутвердого вещества. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.35 (s, 6H), 1.43 (s, 9H), 1.66-2.04 (m, 22H), 2.11 (t, J-6.1 Гц, 2H), 2.46-2.51 (m, 1H), 4.04 (t, J=6.1 Гц, 2H), 4.88 (brs, 1H), 6.82 (d, J=8.3 Гц, 2Н), 7.11 (d, J=8.3 Гц, 2Н); С ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.4, 26.8, 27.5 (br), 28.4, 31.6, 34.6, 34.7, 36.3, 36.7, 39.2 (br), 41.9, 51.7, 64.6, 78.5 (br), 108,3, 111.2, 114.2, 127.5, 138.3, 154.4 (br), 157.0.
2
4
3
3
34
47
7
1
13
Стадия 5. Смесь вышеуказанного простого эфира фенола (410 мг; 0,757 ммоль) и моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (3,10 г; 15 ммоль) в THF (10 мл) перемешивали при к.т. в течение 9 часов, затем охладили до 5°C и подщелачили 0,5M водным NaOH до значения рН 12. После удаления под вакуумом THF водную суспензию экстрагировали с помощью DCM (3×30 мл). Слои DCM объединили, промыли водой (2×20 мл), высушили над NaSO и выпарили с получением свободного основания. Смесь свободного основания (350 мг; чистота 80%; 0,637 ммоль) и моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (123 мг; 0,637 ммоль) в эфире (20 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Осадок собрали фильтрованием, промыли эфиром и высушили под вакуумом до выхода триоксолана OZ539 (340 мг; 73%) в виде белого порошка, mp 152-153°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.38 (s, 6Н), 1,61-2.03 (m, 22H), 2.07 (t, J-6.1 Гц, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.41-2.50 (m, 1H), 3.98 (t, J=6.1 Гц, 2H). 6.73 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.01 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.11 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.74 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.86 (brs, 3Н); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.32, 25.76, 26.50, 26.89, 31.64, 34.74, 34.81, 36.41, 36.82, 38.75, 42.02, 54.25, 63.60, 108.40, 111.33, 114.39, 125.98, 127.51, 128.96, 138.51, 140.45, 141.51, 156.71. Аналитический расчет для CHNOS: C, 66.53; H, 7.72; N, 2.28. Найдено: C, 66.73; H, 7.90; N, 2.02.
3
3
2
2
3
3
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(тетрагидро-1',4'-оксазепин-4'(5'Н)-ил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат (OZ543). Смесь цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(2'-бромэтокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,50 г; 1,08 ммоль), гомоморфолина гидрохлорида (0,25 г; 1,82 ммоль) и KCO (2,00 г; 14,5 ммоль) в безводном ацетонитриле (80 мл) нагревали при 60°C в течение 24 часов. После охлаждения до к.т. реакционную смесь профильтровали для удаления твердого вещества, затем фильтрат концентрировали. Осадок промыли водой (50 мл) и высушили под вакуумом. Сырой продукт (0,50 г) растворили в CHCl (5 мл) и затем добавили раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,20 г; 1,1 ммоль) в этилацетате (20 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ543 (0,51 г; 72%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 140-141°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.54-2.16 (m, 23H), 2.37 (s, 3H), 2.46-2.54 (m, 1H), 2.56-2.69 (m, 1H), 3.16-3.26 (m, 1H), 3.32-3.42 (m, 1H), 3.59-3.68 (m, 2H), 3.72-4.08 (m, 6H), 4.37-4.44 (m, 2H), 6.76 (d, J=8.0 Гц, 2H), 7.11 (d. J=8.0 Гц, 2H), 7.18 (d, J=7.5 Гц, 2H), 7.77 (d, J=7.5 Гц, 2H), 11.31 (br, s, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.35, 25.35, 26.48, 26.88, 31.59, 34.68, 34.80, 36.41, 36.79, 42.04, 53.89, 56.68, 58.02. 63.02, 63.27, 67.28, 108.32, 111.44, 114.42, 125.90, 127.93, 128.89, 139.93, 140.25, 141.93, 155.40.
2
2
2
3
3
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[(транс-4'-миноциклогексил)метокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ545). Стадия 1. К перемешиваемому раствору гидрохлорида сложного метилового эфира тиранс-4-аминоциклогексан карбоновой кислоты (1,0 г; 5,17 ммоль) и триэтиламина (2 мл) в CHCl (30 мл) добавили BocO (1,20 г; 5,50 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. После удаления растворителя осадок промыли водой (30 мл) и высушили под вакуумом с получением сложного метилового эфира транс-4-(трет-бутоксикарбониламино)циклогексан карбоновой кислоты (1,10 г; 83%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 80-81°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.05-1.16 (m, 2H), 1.46-1.58 (m, 2H), 1.44 (s, 9Н), 1.97-2.11 (m, 4H), 2.18-2.27 (m, 1H), 3.41 (brs, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.38 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 27.79, 28.39, 32.53, 42.35, 48.95, 51.63, 79.22, 155.13, 175.86.
4
3
3
1
13
Стадия 2. К раствору сложного метилового эфира транс-4-(трет-бутоксикарбониламино)циклоциклогексанкарбоновой кислоты (1,00 г; 3,89 ммоль) в эфире (40 мл) и THF (8 мл) добавили по каплям 2 М борогидрид лития в THF (1,95 мл; 3,89 ммоль), а затем 1 М триэтилборогидрид лития в THF (0,40 мл; 0,39 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 24 час и затем разбавили эфиром (30 мл). Смесь промыли 2 М водным NaOH (2×5 мл), водой (2×5 мл) и рассолом (5 мл), высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали с получением трет-бутил транс-(4-гидроксиметил)циклогексил карбамата в виде бесцветного твердого вещества (0,89 г; 99%). mp 124-125°C. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.00-1.15 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.50-1.64 (m, 2H), 1.79-1.86 (m, 2H), 2.02-2.08 (m, 2H), 3.39 (brs, 1H), 3.46 (d, J=6.0 Гц, 2H), 4.39 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 28.18, 28.40, 32.89, 39.58, 49.84, 68.06, 79.07, 155.20.
1
13
3
3
Стадия 3. Диизопропил азодикарбоксилат (0,69 мл; 3,24 ммоль) добавили по каплям к смеси OZ288 (1.00 г; 2,80 ммоль), трет-бутил транс-(4-гидроксиметил)циклогексил карбамата (0,64 г; 2,80 ммоль) и трифенилфосфина (0,85 г; 3,24 ммоль) в THF (50 мл) при 0°C в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 24 час. После удаления растворителя сырой продукт очистили с помощью кристаллизации из EtOH с получением искомого ВОС-производного (0,52 г; 33%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 157-158°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.07-1.20 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.64-2.10 (m, 29H), 2.44-2.54 (m, 1H), 3.42 (brs, 1H), 3.72 (d, J=6.0 Гц, 2H), 4.39 (brs, 1H), 6.80 (d, J=9.0 Гц, 2H), 7.10 (d, J=9.0 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.46, 26.87, 28.42. 28.54, 31.65, 32.90, 34.74, 34.79, 36.38, 36.79, 36.93, 42.04, 49.79, 72.78, 79.11, 108.45, 111.36, 114.26, 127.58. 138.22, 155.20, 157.43.
1
13
3
3
Стадия 4. Смесь BOC-производного (0,40 г; 0,71 ммоль) и MsOH (1,5 М в THF, 12 мл, 180 моль) перемешивали при к.т.в течение 4 час. Полученный осадок отфильтровали, промыли эфиром (30 мл) и высушили под вакуумом с получением триоксолана OZ545 (0,32 г; 81%) в виде бесцветного твердого вещества, mp 168-169°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.11-1.27 (m, 2H), 1.45-1.59 (m, 2H), 1.64-2.25 (m, 27H), 2.44-2.54 (m, 1H), 2.80(s, 3H), 3.04-3.16 (m, 1H), 3.73 (d, J-6.0 Гц, 2H), 6.79 (d, J=9.0 Гц, 2H), 7.10 (d. J=9.0 Гц, 2H), 7.61 (brs, 3H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.48, 26.88, 27.65, 30.20, 31.65, 34.74, 34.80, 36.40, 36.80, 42.04, 72.24. 108.44, 111.36, 114.29, 127.62, 138.39, 157.30.
2
3
2
3
3
39
52
2
9
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-[4'-(этоксикарбонил)-1'-пиперазинил]этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат (OZ547). Смесь цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(2'-бромэтокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,50 г; 1,08 ммоль), этил-1-пиперазин-карбоксилата (0,40 г; ммоль) и KCO (2 г) в безводном ацетонитриле (80 мл) нагревали при 60°C в течение 24 час. Реакционную смесь охладили до к.т., профильтровали, чтобы удалить твердое вещество, и концентрировали. Осадок очистили с помощью кристаллизации из EtOH/HO (1:1) с получением чистого свободного основания в виде бесцветного твердого вещества (0,40 г). После растворения свободного основания в эфире (10 мл) добавили раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,15 г) в этилацетате (30 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ547 в виде бесцветного твердого вещества (0,42 г; 52%). mp 154-155°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.27 (t, J=7.5 Гц, 3H), 1.56-2.10 (m, 22H), 2.37 (s, 3H), 2.46-2.56 (m, 1H), 2.84-3.02 (m, 2H), 3.44-3.64 (m, 4H), 3.66-3.84 (m, 2H), 4.10-4.34 (m, 4H), 4.38-4.48 (m, 2H), 6.75 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.19 (d, J=8.0 Гц, 2H), 7.76 (d, J=8.0 Гц, 2H), 11.77 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 14.54, 21.36, 26.46, 26.85, 31.58, 34.66, 34.79, 36.39, 36.77, 40.72, 15 42.01, 52.78, 56.68, 62.33, 62.85, 108.32, 111.43, 114.38, 125.84, 127.94, 128.95, 139.97, 140.41, 141.69, 154.63, 155.26. Аналитический расчет для CHNOS: C, 64.02; H, 7.35; N, 3.93. Найдено: C, 63.93; H, 7.15; N,3.62.
4
3
3
37
51
8
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[3'-(тетрагидро-1',4'-оксазепин-4'(5'H)-ил)пропокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат (OZ549). К перемешиваемой смеси цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(3'-бромпропокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,60 г; 1,26 ммоль) и карбоната калия (2,0 г) в ацетонитриле (50 мл) добавили гомоморфолина гидрохлорид (0,345 г; 2,52 ммоль) при к.т. После перемешивания реакционной смеси в течение 48 часов при 60°C неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Объединенный фильтрат выпарили до сухости в вакууме. Осадок растворили в EtOAC (50 мл), промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. К раствору сырого продукта в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,23 г; 1,25 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ549 в виде бесцветного твердого вещества (0,68 г; 82%). mp 158-160°С. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.65-2.05 (m, 25H), 2.28-2.32 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.47-2.52 (m, 3H), 3.32-3.35 (m, 3H), 3.82 (t, J=5.9 Гц, 2H), 3.97 (t, J=5.4 Гц, 4H), 6.75 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.10 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.17 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.77 (d, J=8.3 Гц, 2H), 10.81 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.28, 24.48, 25.11, 26.40, 26.79, 31.56, 34.63, 34.72, 36.32, 36.71, 41.93, 53.14, 55.63, 57.33, 63.22, 64.56, 67.28, 108.31, 111.34, 114.16, 125.79, 127.67, 128.83, 138.97, 140.13, 142.01, 156.43. Аналитический расчет для CHNOS: C, 66.34; H, 7.67; N, 2.09. Найдено: C, 66.57; H, 7.69; N, 1.98.
4
3
1
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[4'-(4'-морфолинил)бутокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ555). Стадия 1. К раствору OZ288 (3,00 г; 8,42 ммоль), 4-бром-1-бутанола (1,94 г; 12,64 ммоль), трифенилфосфина (3,32 г; 12,64 ммоль) и триэтиламина (1,76 мл, 12,64 ммоль) в безводном THF (75 мл) при 0°C добавили по каплям раствор DIAD (2,56, 12,64 ммоль) в THF (25 мл). После перемешивания при к.т. в течение ночи растворитель удалили под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (100 мл), промыли водой (3×50 мл), высушили над MgSO и концентрировали. Осадок выкристаллизовывали из EtOH (75 мл) с получением цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-бромбутокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана в виде бесцветного твердого вещества (3,60 г; 87%). H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.66-2.09 (m, 26H), 2.47-2.51 (m, 1H), 3.48 (t, J=6.4 Гц, 2H), 3.96 (t, J-6.4 Гц, 2H), 6.81 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.3 Гц, 2H).
4
3
3
13
47
8
1
13
Стадия 2. К перемешиваемой смеси цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-бромбутокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,6 г; 1,22 ммоль) и карбоната калия (2,0 г) в ацетонитриле (50 мл) добавили морфолин (0,533 г; 6,12 ммоль) при к.т. После перемешивания реакционной смеси в течение 48 часов при 60°C неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Объединенный фильтрат выпарили до сухости в вакууме. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали с получением свободного основания. К раствору вышеуказанного сырого продукта в EtOAc (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,12 г; 1,22 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ555 в виде бесцветного твердого вещества (0,55 г; 76%). mp 146-148°C. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.64-2.08 (m, 26H), 2.44-2.52 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.83-2.92 (m, 2H), 3.12-3.16 (m, 2H), 3.48-3.54 (m, 2H), 3.94-4.01 (m, 4H), 4.11 (t, J=12.2 Гц, 2H), 6.77 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.09 (d, J=8.8 Гц, 2H), 11.30 (brs, 1h); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 20.62, 26.25, 26.38, 26.78, 31.55, 34.63, 34.71, 36.30, 36.70, 39.38,41.91, 51.90, 57.55, 63.65, 66.63, 108.31, 111.31, 114.19, 127.64, 138.69, 156.75. Аналитический расчет для CHNOS: C, 62.71; H, 7.98; N, 2.36. Найдено: C, 62.69; H, 7.80; N,2.15.
1
13
6
6
28
40
4
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(цис-4'-аминоциклогексилокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан гидрохлорид (OZ556). После растворения свободного основания OZ493 (0,40 г; 0,88 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавили 1 М HCl эфирный раствор (0,60 г; 0,60 ммоль). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ556 в виде бесцветного твердого вещества (0,28 г; 97%). mp 138-139°C; Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.47-1.97 (m, 30Н), 2.46-2.60 (m, 1H), 3.04-3.17 (m, 1H), 4.49-4.56 (m, 1H), 6.86 (d, J=8.0 Гц, 2H), 7.12 (d, J=8.0 Гц, 2H), 7.93 (brs, 3H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 24.97, 26.00, 26.41, 27.16, 31.50, 34.30, 34.45, 35.97, 36.28, 40.91, 48.46, 69.75, 108.34, 110.74, 116.13, 127.79, 138.33, 155.33. Аналитический расчет для CHClNO: C, 68.62; H, 8.23; N, 2.86. Найдено: C, 68.40; H, 8.19; N, 2.74.
1
13
6
6
32
43
8
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(цис-4'-аминоциклогексилокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан гидрогенмалеат (OZ557). После растворения свободного основания OZ493 (0,40 г; 0,88 ммоль) в этилацетате (20 мл), добавили раствор малеиновой кислоты (0,10 г; 0,86 ммоль) в этилацетате (10 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ557 в виде бесцветного твердого вещества (0,26 г; 53%). mp 146-147°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1-46-1.98 (m, 30H), 2.46-2.60 (m, 1H), 3.06-3.17 (m, 1H), 4.49-4.55 (m, 1H), 6.02 (s, 2H), 6.86 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.12 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.78 (brs, 3H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) 8 24.97, 26.00, 26.41, 27.16, 31.50, 34.31, 34.45, 35.98, 36.27, 40.91, 48.53, 69.69, 108.34, 110.74, 116.11, 127.77, 136.18, 138.34, 155.33, 167.35. Аналитический расчет для CHNO: C, 67.47; H, 7.61; N, 2.46. Найдено: C, 67.25; H, 7.53; N, 2.56.
1
13
3
3
35
47
8
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат (OZ558). К раствору свободного основания OZ439 (0,60 г; 1,28 ммоль) в EtOAc (20 мл) при 0°C добавили по каплям раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,22 г; 1,15 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили в вакууме при 40°C с получением триоксолана OZ558 в виде бесцветного твердого вещества (0,66 г; 81%). mp 149-151°C; Н ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.65-2.05 (m, 22H), 2.37 (s, 3H), 2.47-2.52 (m, 1H), 3.04-3.12 (m, 2H), 3.52-3.58 (m, 2H), 3.64-3.7 (m, 2H), 3.94-4.00 (m 2H), 4.04-4.12 (m 2H), 4.40 (t, J=3.7 Гц, 2H), 6.74 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.1 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.18 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.77 (d, J=7.8 Гц, 2H), 11.60 (brs, 1H); С ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.29, 26.38, 26.78, 31.52, 34.59, 34.71, 36.31, 36.69, 41.91, 52.82, 56.67, 62.69, 63.73, 108.25, 111.34, 114.33, 125.76, 127.79, 128.88, 5 139.71, 140.25, 141.93, 155.31. Аналитический расчет для CHNOS: C, 65.50; H, 7.38; N, 2.18. Найдено: C, 65.72; H, 7.42; N, 2.13.
1
13
3
3
32
43
9
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси|фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан гидрогенмалеат (OZ559). К раствору свободного основания OZ439 (0,60 г; 1,28 ммоль) в EtOAc (20 мл) при 0°C добавили по каплям раствор малеиновой кислоты (0,15 г; 1,28 ммоль) в EtOAc (20 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли EtOAc (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ559 в виде бесцветного твердого вещества (0,60 г; 80%). mp 155-157°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.69-2.08 (m, 22H), 2.48-2.53 (m, 1H), 2.90-3.60 (brs, 4H), 3.48 (t, J=4.2 Гц, 2H), 3.96-4.04 (m, 4H), 4.36 (t, J=4.2 Гц, 2H), 6.29 (s, 2H), 6.8 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.14 (d, J=8.3 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.39, 26.78, 31.51, 34.59, 34.72, 36.32, 36.70, 41.92, 52.45, 56.30, 62.57, 63.89, 108.26, 111.36, 114.29, 127.91, 135.50, 139.88, 155.35, 169.38. Аналитический расчет для CHNO: C, 65.62; H, 7.40; N, 2.39. Найдено: C, 65.38; H, 7.28; N, 2.32.
1
13
3
3
28
40
5
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан гидрохлорид (OZ560). К раствору свободного основания OZ439 (0,80 г; 1,71 ммоль) в EtOAc (50 мл) при 0°C добавили по каплям 1M эфирной HCl (1,2 мл; 1,19 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли EtOAc (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ560 в виде бесцветного твердого вещества (0,59 г; 69%). mp 150-152°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.64-2.05 (m, 22H), 2.48-2.53 (m, 1H), 3.11-3.2 (m, 2H), 3.44-3.68 (m, 4H), 3.92-4.06 (m, 2H), 4.20-4.34 (m, 2H), 4.52-4.60 (m, 2H), 6.83 (d, J=8.24 Гц, 2H), 7.13 (d, J=8.24 Гц, 2H), 13.31 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.36, 26.75, 31.48, 34.56, 34.69, 36.28, 36.67, 41.90, 52.56, 56.60, 62.60, 63.62, 108.23, 111.32, 114.36, 127.85, 139.83, 155.25. Аналитический расчет для CHClNO: C, 66.45; H, 7.97; N, 2.77. Найдено: C, 66.64; H, 7.74; N, 2.59.
1
13
3
3
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан изотионат (OZ561). К раствору изотионовой кислоты (80%, 0,22 г; 1,71 ммоль) в эфире (10 мл) при 0°C добавили по каплям раствор свободного основания OZ439 (0,80 г; 1,71 ммоль) в EtOAc (25 мл). После перемешивания смеси в течение ночи твердое вещество отфильтровали, промыли EtOAc (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ561 в виде бесцветного твердого вещества (0,15 г; 15%). mp 112-115°С; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.65-2.05 (m, 22H), 2.48-2.53 (m, 1H), 3.06-3.18 (m, 5H), 3.52-3.58 (m, 2H), 3.62-3.72 (m, 2H), 3.98-4.12 (m, 6H), 4.44-4.52 (m, 2H), 6.84 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7,14 (d, J=8.3 Гц, 2H), 11.30 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 6.41, 26.81, 31.53, 34.61, 34.75, 36.34, 36.73, 41.96, 52.95, 53.09, 56.82, 58.31, 62.68, 63.79, 108.27, 111.39, 114.37, 127.98, 140.02, 155.26.
1
13
6
6
32
43
9
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил|-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан гидрогенфумарат (OZ562). К раствору свободного основания OZ439 (0,60 г; 1,28 ммоль) в EtOAc (25 мл) при 0°C добавили по каплям раствор фумаровой кислоты (0,15 г; 1,28 ммоль) в EtOH (2 мл). После перемешивания в течение 0,5 часа при к.т. растворители удалили под вакуумом. Осадок растерли в порошок с EtOAc (50 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли EtOAc (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ562 в виде бесцветного твердого вещества (0,65 г; 87%). mp 148-150°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ 1.48-1.6 (m, 2H), 1.64-1.98 (m, 20H), 2.48-2.58 (m, 5H), 2.71 (t, J=5.1 Гц, 2H), 3.59 (brs, 4H), 4.05 (t, J=5.1 Гц, 2H), 6.62 (brs, 2H). 6.83 (d, J=7.7 Гц, 2H), 7.09 (d, J=7.7 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 26.01, 26.41, 31.45, 34.29, 34.42, 35.95, 36.31, 41.01, 53.69, 57.13, 65.28, 66.21, 108.18, 110.64, 114.42, 127.50, 134.18, 138.07, 156.83, 166.21. Аналитический расчет для CHNO: C, 65.62; H, 7.40; N, 2.39. Найдено: C, 65.89; H, 7.12; N, 2,36.
1
13
6
6
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан дигидрогенфосфат (OZ563). К раствору ортофосфорной кислоты (85%; 0,125 г; 1,28 ммоль) в безводном бензоле (25 мл) при 0°C добавили по каплям раствор свободного основания OZ439 (0,60 г; 1,28 ммоль) в безводном бензоле (25 мл). После перемешивания смеси в течение ночи при 0°C полученное твердое вещество профильтровали, промыли бензолом (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ563 в виде бесцветного твердого вещества (0,55 г; 76%). mp 142-144°C; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) 6 1.50-1.60 (m, 2H), 1.64-1.96 (m, 20H), 2.51-2.58 (m, 1H), 2.62-2.68 (brs, 4H), 2.86 (t, J=5.1 Гц, 2H), 3.65 (t, J=4.0 Гц, 4H), 4.11 (t, J=5.5 Гц, 2H), 6.84 (d, J=8.1 Гц, 2H), 6.98 (brs, 3H), 7.10 (d, J=8.4 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, DMSO-d) δ 26.00,26.41, 31.43, 34.28, 34.42, 35.95, 36.31, 41.04, 53.30, 56.73, 64.73, 65.65, 108.13, 110.63, 114.44, 127.49, 138.21, 156.63.
1
13
3
3
32
45
11
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[2'-(4'-морфолинил)этокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро [4.5] декан гидроген L-тартрат (OZ568). После растворения свободного основания OZ439 (0,93 г; 1,98 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавили раствор винной кислоты (0,30 г; 2.0 ммоль) в этаноле (20 мл). После удаления растворителей осадок выкристаллизовывали из EtOH с получением триоксолана OZ568 в виде бесцветного твердого вещества (1,00 г; 81%). mp 145-146°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.46-1.58 (m, 2H), 1.62-1.96 (m, 20H), 2.46- 2.60 (m, 5H), 2.68-2.78 (m, 2H), 3.54-3.64 (m, 4H), 4.02-4.08 (m, 2H), 4.28 (s, 2H), 6.85 (d, J-8.0 Гц, 2H), 7.11 (d, J=8.0 Гц, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 26.00, 26.42, 31.51, 34.30, 34.46, 35.97, 36.28, 40.89, 53.69, 57.12, 65.21, 66.18, 72.27, 108.34, 110.73, 114.56, 127.64, 138.19, 156.88, 173.39. Аналитический расчет для CHNO: C, 62.02; H, 7.32; N, 2.26. Найдено: C, 61.88; H, 7.34; N, 2.17.
4
3
3
41
59
8
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[4'-[4'-(1'-гидрокси-1'-метилэтил)-1'-пиперидинил]бутокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат(OZ571). К перемешиваемой смеси цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-бромбутокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,70 г; 1,43 ммоль) и карбоната калия (2,0 г) в ацетонитриле (50 мл) добавили 2-(4-пиперидинил)-2-пропанол (0,41 г; 2,86 ммоль) при к.т. После перемешивания реакционной смеси в течение 48 час при 60°C неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Объединенный фильтрат выпарили до сухости под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. К раствору вышеуказанного сырого продукта в EtOAc (20 мл) при 0°C добавили по каплям раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,22 г; 1,14 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили в вакууме при 40°C с получением триоксолана OZ571 в виде бесцветного твердого вещества (0,79 г; 76%). mp 152-154°C; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.11 (s, 6H), 1.62-2.06 (m, 30H), 2.30 (s, 3H), 2.46-2.54 (m, 1H), 2.62-2.70 (m, 2H), 2.74-2.86 (m, 1H), 2.96-3.04 (m, 2H), 3.52-3.60 (m, 2H), 3.83 (t, J=5.9 Гц, 2H), 6.75 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.09 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.12 (d, J=7.8 Гц, 2H), 7.74 (d, J=7.8 Гц, 2H), 9.81 (brs, 1H); C ЯМР (125.7МГц, CDCl) δ 20.95, 21.20, 24.14, 26.33, 26.38, 26.65, 26.77, 31.56, 34.62, 34.70, 36.30, 36.69, 41.89, 44.54, 53.19, 57.00, 66.69, 71.12, 108.32, 111.29, 114.21, 125.76, 127.56, 128.72, 138.48, 139.91, 142.49, 156.86. Аналитический расчет для CHNOS: C, 67.83; H, 8.19; N, 1.93. Найдено: C, 67.60; H, 7.96; N, 1.77.
1
3
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[1'-(2'-гидрокси-2'-1'-пиетилпропил)-4'-пиперидинилокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан p-тозилат (OZ572). Стадия 1. К раствору 4-гидроксипиперидина (1,0 г; 10 ммоль) в EtOH (15 мл) добавили изобутилен оксид (1,5 мл; 16,7 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 24 часов и концентрировали с получением 4-гидрокси-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиперидина (1,70 г; 99%). H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.15 (s, 6H), 1.54-1.64 (m, 2H), 1.83-1.92 (m, 2H), 2.31 (s, 2H), 2.40-2.48 (m, 2H), 2.81-2.90 (m, 2H), 3.65-3.76 (m, 1H).
2
2
3
3
38
53
8
1
13
Стадия 2. Диизопропил азодикарбоксилат (1,20 г; 5,9 ммоль) добавили по каплям к смеси OZ288 (1,0 г; 2,81 ммоль), 4-гидрокси-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиперидина (1,0 г; 5,8 ммоль), и трифенилфосфина (1,55 г; 5,9 ммоль) в THF (50 мл) при 0°C в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 24 час. После удаления растворителя осадок очищали кристаллизацией из EtOH/HO (1:1) с получением чистого свободного основания в виде бесцветного твердого вещества (0,50 г). После растворения свободного основания в эфире (10 мл) добавили раствор моногидрата p-толуолсульфоновой кислоты (0,19 г) в эфире (10 мл). Осадок собрали фильтрованием с получением триоксолана OZ572 в виде бесцветного твердого вещества (0,58 г; 30%). mp 152-153°C. H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.45 (s, 6H), 1.66-2.16 (m, 24H), 2.36 (s, 3H), 2.46-2.54 (m, 1H). 2.56-2.67 (m, 2H), 3.04-3.10 (m, 2H), 3.17-3.28 (m, 2H), 3.65-3.73 (m, 2H), 4.61-4.65 (m, 1H), 6.80 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.13 (d, J=8.5 Гц, 2H), 7.19 (d, J=8.0 Гц, 2H), 7.78 (d, J=8.0 Гц, 2H), 9.75 (brs, 1H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 21.34, 26.44, 26.80, 26.84, 29.26, 31,57, 34.66, 34.77, 36.37, 36.76, 42.00, 51.05, 65.96, 68.08, 68.65, 108.30, 111.43, 115.57, 125.91, 128.04, 128.85, 139.60, 140.26, 141.69, 154.45. Аналитический расчет для CHNOS: C, 66.74; H, 7.81; N, 2.05. Найдено: C, 66.49; H, 7.69; N, 1.88.
4
3
3
33
51
8
1
13
цис-Адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-[4'-[(транс-4'-гидроксициклогексил)амино]бутокси]фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декан мезилат (OZ575). К перемешиваемой смеси цис-адамантан-2-спиро-3'-8'-[4'-(4'-бромбутокси)фенил]-1',2',4'-триоксаспиро[4.5]декана (0,60 г; 1,2 ммоль) и карбоната калия (2,0 г) в ацетонитриле (50 мл) добавили транс-4-аминоциклогексанол (0,21 г; 1,84 ммоль) при к.т. После перемешивания реакционной смеси в течение 48 час при 60°C неорганическое твердое вещество отфильтровали и промыли EtOAc (2×25 мл). Объединенный фильтрат выпарили до сухости под вакуумом. Осадок растворили в EtOAc (50 мл), промыли водой (3×25 мл), высушили над MgSO, профильтровали и концентрировали. К раствору вышеуказанного сырого продукта в EtOAc (20 мл) при 0°C добавили по каплям раствор метансульфоновой кислоты (0,12 г; 1,22 ммоль) в эфире (10 мл). Полученное твердое вещество профильтровали, промыли эфиром (3×10 мл) и высушили под вакуумом при 40°C с получением триоксолана OZ575 в виде бесцветного твердого вещества (0,60 г; 79%). mp 152-154°С; H ЯМР (500 МГц, CDCl) δ 1.24-1.36 (m, 2H), 1.60-2.06 (m, 30H), 2.15-2.17 (m, 2H), 2.45-2.50 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.78-2.88 (m, 1H), 2.92-3.02 (m 3H), 3.56-3.64 (m, 1H), 3.91 (t, J=5.9 Гц, 2H), 6.77 (d, J=8.3 Гц, 2H), 7.08 (d, J=8.8 Гц, 2H), 8.44 (brs, 2H); C ЯМР (125.7 МГц, CDCl) δ 23.07, 26.43, 26.75, 26.83, 31.60, 32.92, 34.67, 34.76, 36.35, 36.76, 39.64, 41.94, 44.88, 56.05, 66.92, 68.56, 108.36, 111.32, 114.25, 127.63, 138.55, 156.95. Аналитический расчет для CHNOS: C, 63.74; H, 8.27; N, 2.25. Найдено: C, 63.60; H, 8.06; N, 2.15.
Пример 5
Показатели эмбриотоксичности
Некоторые 1,2,4-триоксоланы (OZ) были проверены на крысиной модели полной эмбриональной культуры (WEC) (Longo et al., 2006), и было обнаружено, что они оказывают влияние на развитие в некоторой степени подобно дигидроартемизинину и артемизинину, хотя ненаблюдаемые уровни неблагоприятных эффектов (NOAEL) были значительно выше для новых OZ соединений по сравнению OZ277. Первичной мишенью являлись эмбриональные эритроциты (RBC), что приводило к анемии и последующей гипоксии в эмбриональных тканях. NOAEL для эмбриональных RBC составлял 0,01 мкг/мл для дигидроартемизинина, 0,1 мкг/мл для артемизинина и 0,2 мкг/мл для OZ277, тогда как он был значительно выше для новых OZ соединений (5 мкг/мл для OZ439 и 1 мкг/мл для OZ493).
Longo, M.; Zanoncelli, S.; Manera, D.; Brughera, M.; Colombo, P.; Lansen J.; Mazue, G.; Gomes, M.; Taylor W.R.J.; Olliaro, P. Effects of the Antimalarial Drug Dihydi-оартемизинин (DHA) on R при Embryos In Vitro. Repro. Tox. 2006, 21, 83-93.
Следует понимать, что спиро и диспиро 1,2,4-триоксолановые соединения данного изобретения могут содержать триоксоланы в рамках формул, описанных выше, или пролекарства или аналоги этих соединений или рацемическую смесь из или D или L формы. Изобретение также включает все биологически активные формы солей данных соединений. К тому же, могут быть сделаны меньшие дозировки и модификации состава композиции и пределов, сформулированных в данном описании, которые, тем не менее, входят в рамки и сущность настоящего изобретения.
При наличии описанного изобретения с учетом отдельных композиций, теорий эффективности и тому подобного, специалистам в данной области техники будет понятно, что не предполагается, что изобретение будет ограничиваться такими иллюстративными вариантами осуществления или механизмами, и что модификации могут быть сделаны без отступления от объема и сущности изобретения, как определено прилагаемыми пунктами формулы изобретения. Предполагается, что все такие очевидные модификации и варианты включены в рамки настоящего изобретения, как определено в прилагаемых пунктах формулы изобретения. Пункты формулы изобретения предназначаются для того, чтобы включить заявленные компоненты и стадии в любой последовательности, которая является эффективной для удовлетворения предполагаемых здесь целей, если контекст специально не указывает нечто обратное.