Характеристика субпопуляционного состава лимфоцитов и особенности цитокинопродукции у больных с коксартрозом при оперативном лечении

Нами установлено, что в качестве заготовки аутогемопрепаратов предоперационная эксфузия крови показала положительные результаты: коррекция сосудисто-тромбоцитарного звена гемостаза, функциональная стабильность сердечно-сосудистой системы, уменьшение потребления миокардом кислорода, протекторное антиишемическое влияние на миокард, активация эритропоэза ещё до этапа кро-вопотери, снижение периоперационной геморрагии, улучшение кислородно-транспортной функции крови, формирование толерантной стратегии адаптации.

Методика предоперационной заготовки препаратов аутокрови в комплексе с реинфузией дренажной крови в программе восполнения массивной кровопотери при операциях тотального эндопротезирования тазобедренного сустава использована впервые. Данный метод восполнения кровопотери является кровосберегающим, безопасным, технически простым и экономичным, а значит актуальным и перспективным, и даёт возможность полностью исключить трансфузию донорской крови.

Л.А. Дмитриева, В.В. Малышев

ХАРАКТЕРИСТИКА СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ И ОСОБЕННОСТИ ЦИТОКИНОПРОДУКЦИИ У БОЛЬНЫХ С КОКСАРТРОЗОМ ПРИ ОПЕРАТИВНОМ ЛЕЧЕНИИ

ГУ НЦ РВХ ВСНЦ СО РАМН

В основе развития многих заболеваний и патологических состояний лежат нарушения в организме иммунорегуляторных процессов, осуществляемых с помощью лимфоидной популяции клеток, в частности, Т-лимфоцитов-хелперов 1 типа (Thl) и Т-хелперов 2 типа (Th2). Эти клетки посредством синтезируемых ими цитокинов обеспечивают широкий спектр биологических сигналов, участвующих в формировании и регуляции иммунного гомеостаза.

Целью исследования явилось определение субпопуляционного состава лимфоцитов и особенностей их цитокинсинтетической функции у больных с диспластическим коксартрозом III — IV степени тяжести при реконструктивных операциях на тазобедренном суставе.

Исследования были выполнены в группе 39 больных в возрасте 27 — 63 лет (средний возраст — 48,2 ± 2,8лет) до оперативного лечения и на 3-е, 14-е, 21-е сутки после тотального эндопротезирования тазобедренного сустава (ТЭТС). Определение субпопуляционного состава лимфоцитов осуществляли с использованием стандартного набора моноклональных антител методом проточной лазерной цитометрии. Концентрацию цитокинов (ИЛ-2, ИЛ-4 и ИФ-у) определяли в супернатантах, полученных после инкубации клеточной взвеси в условиях базовой активации и при стимуляции фитогемагглютини-ном (ФГА) методом иммуноферментного анализа. В качестве контрольных иммунологических показателей были использованы результаты, полученные при обследовании 23 практически здоровых лиц (средний возраст — 45,4 ± 3,2 лет).

При исследовании субпопуляционного состава лимфоцитов в группе больных, по сравнению с контрольной группой, было выявлено снижение общего содержания Т-лимфоцитов (CD3), преимущественно за счет хелперной субпопуляции Т-клеток (р < 0,05), и в меньшей степени — снижение содержания киллерно-супрессорной субпопуляции (CD8). Прослеживалась тенденция к увеличению абсолютного содержания натуральных киллеров (CD 16) и количества CD95 +-клеток, экспрессирующих рецептор anonT03aFas (р < 0,1).

В послеоперационном периоде наблюдалось снижение относительного и абсолютного содержания лимфоидной популяции клеток в ранние сроки (3 сутки) с последующим незначительным увеличением. Тем не менее, уровень их не восстанавливался до исходного и к концу периода наблюдения. Процентное содержание Т-лимфоцитов значимо не отличалось от дооперационных показателей во все сроки, абсолютное их количество снижалось с минимальным значением на 21 сутки. Аналогичная тенденция прослеживалась в отношении хелперной субпопуляции лимфоцитов и клеток с кил-лерно-супрессорной активностью. Содержание клеток с маркером апоптоза оставалось повышенным во все сроки периода наблюдения и восстанавливалось до значений этого показателя в группе сравнения к 21 суткам.

При исследовании цитокинсинтетической функции лимфоцитов выявлены следующие особенности. Спонтанная продукция ИЛ-2 у больных до операции составляла 144,22 ± 12,02 пг/мл, что в несколько раз превышало данный показатель в группе сравнения (25,87 ± 3,89 пг/мл). Стимуляция ФГА приводила к парадоксальному угнетению синтеза этого цитокина. Уровень базовой продукции ИЛ-4, синтезируемого преимущественно Th2, значимо не отличался от показателей контрольной группы. При введении в культуру клеток митогена наблюдалась выраженная депрессия этих кле-

ток с подавлением синтеза ИЛ-4. Концентрация у-ИФ в спонтанном варианте составила 124,87 ± 66,02 пг/мл (в контрольной группе — 77,43 ± 24,72) и в стимулированных пробах — 422,76 ± 174,82 пг/мл (в контроле — 151,57 ± 39,94) и определялась в 100 % случаев. Достоверно более высокое содержание у-ИФ у больных, по сравнению с контрольной группой, свидетельствует о функциональном напряжении ТЫ клеток, которые осуществляют контроль за клеточными иммунными реакциями.

В послеоперационном периоде имело место снижение как спонтанной, так и стимулированной продукции ИЛ-2 во все сроки наблюдения. Уровень синтеза и секреции ИЛ-4 нестимулированными клетками нарастал с максимальными значениями на 21 сутки. Однако при стимуляции ФГА происходило подавление его продукции. Концентрация у-ИФ на 3 сутки послеоперационного периода уменьшилась практически в 2 раза, по сравнению с исходным уровнем как в интактных, так и в стимулированных пробах. В дальнейшем (14 и 21 сутки) происходило прогрессирующее падение его продукции, причем в половине исследуемых образцов концентрация у-Иф не определялась. Подавление цитокинопродукции в послеоперационном периоде характеризует состояние иммунодепрессии клеток, продуцирующих эти цитокины.

Таким образом, у больных с диспластическим коксартрозом III —IV степени тяжести имеет место нарушение баланса взаимодействия между ТЫ - и Т112-лимфоцитами, который усугубляется на фоне хирургического вмешательства. Наличие дисбаланса между ТЫ и ТЬ2, опосредованного нарушением спонтанной и индуцированной цитокинопродукции, может являться иммунологическим маркером прогнозирования развития послеоперационных осложнений при реконструктивных операциях на тазобедренном суставе.

Б.Т. Доманова, В.В. Зобнин, Н.Н. Цыбиков

СОСТАВ И СВОЙСТВА ДЕСНЕВОЙ ЖИДКОСТИ В НОРМЕ И ПАТОЛОГИИ

ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия Росздрава

Известно, что в формировании резистентности полости рта существенная роль принадлежит десневой жидкости, в состав которой входят факторы специфической и неспецифической резистентности, в том числе значительное количество нейтрофилов. Вместе с тем, в случае развития патологии в полости рта состав и свойства десневой жидкости претерпевают значительные изменения, которые окончательно не исследованы.

Целью нашей работы явилось изучение иммуноглобулинов, цитокинов, факторов свертывания крови. Кроме того, исследовалось влияние десневой жидкости на лейкоциты и лимфоцитарно-тромбаци-тарную адгезию (ЛТА).

Под нашим наблюдением находились 30 относительно здоровых людей в возрасте 20 — 30 лет, 30 человек с диагнозом «Хронический катаральный гингивит средней степени тяжести» и 30 человек с диагнозом «Хронический генерализованный пародонтит средней степени тяжести». Материалом для исследования служила десневая жидкость.

Установлено, что в норме в десневой жидкости содержится 1дА, 1дА-з, 1дМ, 1дС и подклассы, не определяется 1дЕ. Методом твердофазного ИФА было выявлено содержание ИЛ-6, ФНО-а и значительное количество ИЛ-8. Десневая жидкость существенно активировала время рекальцификации плазмы, каолиновое время, Хагеманзависимого и эуглобулинового фибринолиза, активировала фагоцитоз и ЛТА.

При катаральном гимгивите увеличивалось содержание 1дА, 1дА-з, 1дМ, увеличивался уровень ФНО-а, ИЛ-6, 8, а суммарное содержание 1дС снижалось. При этом заболевании десневая жидкость в значительной степени повышала время свертывания плазмы, ускоряла фибринолиз и активировала ЛТА.

При парадонтите в десневой жидкости повышался уровень 1дЕ, резко повышалось содержание 1дА и 1дА-э и уменьшалось содержание 1дС общего и подклассов. Цитокиновый профиль при парадонтите изменялся следующим образом: происходит кратное увеличение ФНО-а и ИЛ-6 в 6 раз, а уровень ИЛ-8 снижается в 3 раза по сравнению с нормой. Десневая жидкость при парадонтите в еще большей степени активирует каолиновое время, активирует фибринолиз, но снижает фагоцитарную активность нитрофилов и ингибирует ЛТА.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о значительных изменениях состава и свойствах десневой жидкости при патологиях полости рта.