КОМПОЗИЦИЯ ДНК ДЛЯ ВЫЗОВА ИММУННОГО ОТВЕТА ПРОТИВ ОПУХОЛЕАССОЦИИРОВАННЫХ МАКРОФАГОВ

1. Композиция ДНК, включающая минигенную конструкцию ДНК, которая кодирует полипептид, включающий множество иммуногенных фрагментов цистеиновой эндопептидазы, экспрессируемой в опухолеассоциированных клетках, где множество иммуногенных фрагментов соединены последовательно вместе с помощью линкерного пептида с каждым последующим фрагментом в полипептиде, где полипептид способен вызывать иммунный ответ против опухолеассоциированных клеток, экспрессируется в иммунных клетках, и заключен в фармацевтически приемлемый носитель.
2. Композиция ДНК по п.1, в которой цистеиновой эндопептидазой является легумаин.
3. Композиция ДНК по п.1, где минигенная конструкция ДНК кодирует иммуногенные фрагменты человеческого легумаина (SEQ ID NO: 2).
4. Композиция ДНК по п.1, где пептидный линкер между каждыми из последовательных иммуногенных фрагментов включает по меньшей мере три аминокислотных остатка.
5. Композиция ДНК по п.1, где конструкция ДНК встроена в аттенуированный бактериальный вектор AroA-, dam- Salmonella typhimurium.
6. Композиция ДНК по п.1, где минигенная конструкция ДНК содержит части SEQ ID NO: 1, кодирующие иммуногенные фрагменты человеческого легумаина.
7. Композиция ДНК по п.1, которая дополнительно содержит конструкцию ДНК, кодирующую иммунный эффекторный белок, экспрессируемый в иммунных клетках.
8. Композиция ДНК по п.7, где иммунный эффекторный белок является цитокином.
9. Композиция ДНК по п.8, где цитокином является CCL21, IL-2 или CD40LT.
10. Композиция ДНК по п.1, где минигенная конструкция ДНК дополнительно кодирует последовательность лидерного пептида эндоплазматического ретикулума, связанную с N-концом полипептида.
11. Способ ингибирования роста опухоли или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающий введение млекопитающему композиции ДНК по п.1, включающей минигенную конструкцию ДНК, кодирующую множество иммунногенных фрагментов цистеиновой эндопептидазы, экспрессирующейся в опухолеассоциированных клетках; где композицию вводят в количестве, достаточном для вызова иммунного ответа против опухолеассоциированных клеток.
12. Способ по п.11, где опухолеассоциированные клетки являются опухолеассоциированными макрофагами.
13. Способ ингибирования опухолевого роста или опухолевых метастазов у млекопитающего, включающий стадии:
введения млекопитающему композиции ДНК по п.1, содержащей минигенную конструкцию ДНК, кодирующую множество иммуногенных фрагментов цистеиновой эндопептидазы, экспрессирующейся в опухолеассоциированных клетках; и
последовательное введение млекопитающему противоопухолевого эффективного количества противоопухолевого химиотерапевтического средства; где композицию ДНК вводят млекопитающему в количестве, достаточном для вызова иммунного ответа у млекопитающего против опухолеассоциированных макрофагов, экспрессирующих цистеиновую эндопептидазу.
14. Способ по п.13, где химиотерапевтическим средством является доксорубицин.
15. Способ ингибирования продукции опухолеассоциированного макрофага у млекопитающего, получающего пользу от вышеуказанного ингибирования, который включает введение млекопитающему количества композиции ДНК по п.1, вызывающего иммунный ответ, содержащей минигенную конструкцию ДНК, которая кодирует множество иммуногенных фрагментов цистеиновой эндопептидазы, экспрессируемой в опухолеассоциированных макрофагах.
16. Изделие, содержащее композицию ДНК по п.1, упакованную в герметично запечатанный, стерильный контейнер, содержащий прикрепленную к нему этикетку, несущую напечатанный материал, идентифицирующий композицию, и обеспечивающую информацию для индивидуального введения вышеуказанной композиции пациенту.
17. Плазмидный вектор, включающий минигенную конструкцию ДНК, которая кодирует полипептид, содержащий множество иммуногенных фрагментов легумаина, последовательно соединенных линкерным пептидом между каждыми из последовательных фрагментов в полипептиде, и способный экспрессироваться в иммунных клетках и вызывать иммунный ответ против опухолеассоциированных клеток, сверхэкспрессирующих легумаин.
18. Вектор по п.17, где легумаин является человеческим легумаином, имеющим последовательность аминокислотных остатков, состоящих из SEQ ID NO: 2 или белка, обладающего по меньшей мере 80% идентичностью с ним.
19. Вектор по п.17, дополнительно содержащий конструкцию ДНК, кодирующую иммунный эффекторный белок.
20. Вектор по п.19, где иммунный эффекторный белок является цитокином.
21. Вектор по п.20, где цитокином является CCL21, IL-2 или CD40LT.
22. Вектор по п.17, где линкерный пептид содержит по меньшей мере три аминокислотных остатка.
23. Вектор по п.22, где каждый линкерный пептид содержит последовательность аминокислотных остатков AAA или AAY.
24. Композиция ДНК, содержащая конструкцию ДНК, кодирующую экспрессируемую в опухолеассоциированных клетках цистеиновую эндопептидазу, или, по меньшей мере, один ее фрагмент, способный вызывать иммунный ответ против опухолеассоциированных клеток, которая экспрессируется в иммунных клетках и заключена в фармацевтически приемлемый носитель.
25. Композиция ДНК по п.24, где цистеиновая эндопептидаза является человеческим легумаином.