НОВЫЕ ИНЪЕКЦИОННЫЕ КОМПОЗИЦИИ ЭПРИНОМЕКТИНА
NEW INJECTABLE COMPOSITIONS OF EPRINOMECTIN

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к новым композициям, пригодным в области ветеринарной медицины, и, более конкретно, в отношении противопаразитарных составов, содержащих макроциклические лактоны, подобные эприномектину, обладающие улучшенной биодоступностью и продолжительными терапевтическими эффектами.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Теплокровные животные подвергаются нападению паразитов, и человек в течение длительного времени пытался бороться с такими паразитами, поражающими домашних животных-компаньонов, фермерский скот и экзотических животных, чтобы облегчить страдания, а также для коммерческой выгоды. Внутренние и внешние паразиты, такие как желудочно-кишечные черви и вши, являются организмами, питающимися тканями животного-хозяина, кровью и тканевыми жидкостями, и они могут отрицательно влиять на производительность. Внутренние паразиты могут вызывать угнетение аппетита, снижение усвояемости кормов и всасывания питательных веществ, потерю крови и анемию, что, в свою очередь, может приводить к пониженному приросту веса и производству молока, ослаблению иммунной системы, а также повреждению тканей и органов. Наружные паразиты могут вызывать выпадение волос и появление струпьев, потерю крови и анемию, раздражение кожи, а также могут выступать в качестве переносчиков болезней. Воздействия наружных паразитов на производительность могут включать пониженный прирост веса и производство молока, повреждение шкуры и повреждения средств обслуживания и ограждений в результате трения и расчесывания.
Макроциклические лактоны, такие как, например, авермектины и милбемицины, являются очень сильнодействующими противопаразитарными средствами при низкой дозе и применимы против широкого спектра эндопаразитов и эктопаразитов млекопитающих, а также имеют применения в сельском хозяйстве против различных паразитов, обнаруживаемых в и на сельскохозяйственных культурах и почвах. Они активны в отношении многих незрелых нематод (в том числе гипобионтных личинок) и членистоногих. Кроме того, одна терапевтическая доза может сохраняться в концентрациях достаточных, чтобы быть эффективными против существующих нематодных инфекций в течение продолжительных периодов после обработки.
Авермектинами, находящимися в коммерческом применении, являются ивермектин, абамектин, дорамектин, эприномектин и селамектин. Коммерчески доступными милбемицинами являются милбемицин оксим и моксидектин. Основные соединения авермектина выделяют из ферментативного бульона почвенного микроорганизма Streptomyces avermitilis, и эти соединения описаны в патенте США № 4310519. Кроме того, производные этих основных соединений авермектина были получены с помощью ряда химических средств.
В частности, эприномектин, который также называют 4'-эпи-ацетиламино-4'-дезоксиавермектин B1, является новым полусинтетическим производным семейства авермектина и характеризуется следующей структурой:
Эприномектин представляет собой смесь двух гомологов, эприномектина B1a (90%) и эприномектина B1b (10%), различие между которыми состоит в наличии метиленовой группы в положении С-25. Эти структуры обладают широким спектром активности против нематод и членистоногих и благодаря их эффективности как против эндо-, так и против эктопаразитов они называются эндэктоцидами.
Фармацевтическая активность этих молекул повышает проницаемость мышц и нервных клеток паразитов к ионам хлора, тем самым вызывая паралич паразита и его смерть. Эти молекулы связываются с глутамат-зависимыми каналами для ионов хлора клеток беспозвоночных. Они также могут связываться с другими ГАМК-зависимыми каналами для ионов хлора. Поскольку млекопитающие не обладают этим типом глутамат-зависимого канала для ионов хлора, эти молекулы обеспечивают высокую степень безопасности, даже если применяются при высоких дозах.
1/2
Макроциклические лактоны являются в целом липофильными соединениями с достаточно высокими коэффициентами распределения или значениями log Р; к примеру, эти значения составляют приблизительно 6 для моксидектина, приблизительно 5,6 для дорамектина и приблизительно 4,8 для ивермектина, за исключением эприномектина, который имеет самое низкое значение log Р приблизительно 4,4 (см. пример 2 и Kaliszan R. and al., Pure Appl. Chem., Vol.73, No. 9, p. 1465-1475, IUPAC 2001). Таким образом, они в целом хорошо всасываются при введении орально, парентерально или в форме составов для нанесения ограниченного объема препарата. Они широко распространяются по организму, включая желудочно-кишечный тракт, легкие и кожу, и особенно концентрируются в жировой ткани, имея большое время пребывания и период полувыведения (T) в тканях животных.
На время пребывания и период полувыведения этих макроциклических лактонов, однако, может воздействовать состояние организма животного, путь введения, а также от состава и/или растворителей. Например, известно, что масляные составы имеют большее время пребывания, нежели водные составы. Также парентеральные и местные составы, как правило, имеют лучшее время пребывания, нежели пероральные составы. Например, время пребывания макроциклических лактонов при введении в виде составов для нанесения ограниченного объема препарата может составлять приблизительно 12,8 суток для моксидектина и дорамектина, приблизительно 8,4 суток для ивермектина и приблизительно 4,16 суток для эприномектина.

Продукты на основе эприномектина, доступные в настоящее время на рынке, включают составы для наружного применения, как, например, составы для нанесения ограниченного объема препарата, содержащие 0,5% вес/объем раствор эприномектина, который можно наносить на кожу животного. Было получено разрешение на допуск на рынок эприномектина для местного введения путем нанесения ограниченного объема препарата, и в настоящее время он представлен на рынке компанией Merial под торговой маркой Eprinex для лечения и/или предотвращения поражения круглыми червями, легочными нематодами, червовидными личинками, вшами, клещами и малыми коровьими жигалками у крупного рогатого скота. Состав для нанесения ограниченного объема препарата Eprinex в настоящее время включает 5 мг эприномектина, 0,10 мг бутилгидрокситолуола, 0,06 мг витамина Е и наполнители.
Хотя способы нанесения ограниченного объема препарата имеют ряд преимуществ в плане безопасности специалиста по нанесению пестицидов, на них также значительно воздействуют несколько факторов, которые могут снизить их эффективность вследствие неточности дозирования.
На эффективность поглощения или адсорбцию средства, как правило, воздействуют состояния кожи животного такие, как наличие меха, порезов, ран, ожогов, а также чистота кожи животных (наличие пыли, грязи и т.д.). Также факторы окружающей среды, включая климатические условия, подобные дождям, солнечной радиации и т.д., могут воздействовать на эффективность адсорбции.
Все эти неблагоприятные условия вызывают вынужденное более чем двукратное превышение необходимого количества средств с целью борьбы с паразитом. Требование этого дополнительного добавления эприномектина имеет экономические последствия в отношении затрат на обработанное животное, оно может оказывать отрицательное воздействие на окружающую среду и дополнительно может вести к потенциальным побочным эффектам, возникающим в результате применения высоких доз средства.
Эприномектин был предложен для использования в качестве подкожных или внутримышечных инъекционных составов. В действительности, дополнительно к его эндэктоцидной активности эприномектин, как было показано, не выделяется с молочным жиром у продуктивных животных. В исследованиях пришли к выводу, что только 0,1% от нанесенного средства выделяется с молоком, то есть в 50 раз меньше по сравнению с другими известными макроциклическими лактонами, такими как, например, ивермектин или моксидектин.
Хотя эприномектин мог бы теоретически быть предпочтительным макроциклическим лактоном, особенно для обработки молочного скота, он обладает слабыми липофильными свойствами, низким временем пребывания и более коротким по длительности эффектом или меньшей продолжительностью действия по сравнению с другими макроциклическими лактонами.
Таким образом, существует явная потребность улучшения биодоступности и увеличения времени пребывания или периода полувыведения средства на основе эприномектина в организме животного, а также обеспечения способов введения средств с низкой токсичностью и высокой переносимостью. Также при выборе сред для состава специалист должен рассмотреть ряд вопросов, включая растворимость эприномектина, сродство средства к определенным средам, будет ли оно воздействовать на основные вспомогательные вещества, рН, стабильность со временем, вязкость и, естественно, риск любого токсического действия на подвергаемых обработке животных, но все еще сохранять очень низкое содержание остатков в молоке. Таким образом, составление этого паразитицида является сложной задачей, а не обычным экспериментированием.
В связи с этим, патент США № 5773422 описывает составы для парентерального или местного введения авермектина на основе применения N-метилпирролидона или 2-пирролидона или их смесей для растворения авермектина, такого как ивермектин. Также европейская заявка № ЕР 873127 описывает инъекционные противогельминтные составы на основе макроциклического лактона, содержащие макроциклический лактон, растительное масло и ароматический спирт, имеющий четыре или более атомов углерода, в качестве растворителя. Предпочтительные ароматические спирты-растворители включают бензиловый спирт, этилбензиловый спирт, фенэтиловый спирт и другие ароматические одноатомные спирты. Также предпочтительными растительными маслами являются соевое масло, кунжутное масло и кукурузное масло. Раскрыто, что применение этих конкретных составов дает возможность противоглистному средству оставаться в неизменном виде на наружных и внутренних паразитах. Тем не менее, ни один из этих ранее известных составов не решил проблему увеличения времени пребывания и биодоступности средства у обработанных млекопитающих, отличных от человека.
Хотя полиэтиленгликоль (PEG) никогда не описывался как вещество для увеличения биодоступности и времени пребывания средства, в настоящем изобретении было неожиданно обнаружено, что включение эффективного количества PEG оказало значительное влияние на биодоступность эприномектина в паразитицидных составах. В инъекционных составах, таким образом, требовались более низкие доли эприномектина. Новые композиции эприномектина согласно настоящему изобретению также неожиданно показали более длительный эффект и большую эффективность особенно в отношении стронгилид желудочно-кишечного тракта и эктопаразитов у жвачных животных и молочного скота. Кроме того, композиции эприномектина давали его стабильные концентрации в плазме после введения, что приводило к большей общей эффективности в пределах всего стада крупного рогатого скота в сочетании с меньшим риском индукции устойчивости к активному средству.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Соответственно, целью настоящего изобретения является обеспечение улучшенной ветеринарной инъекционной композиции долговременного действия, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина в системе растворителей, содержащей полиэтиленгликоль (PEG) и необязательно другие растворители и наполнители.
В частности, целью изобретения является обеспечение ветеринарной инъекционной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG в качестве растворителя, для контроля широкого диапазона эндопаразитов и эктопаразитов у отличных от человека млекопитающих.
Дополнительной целью изобретения является обеспечение ветеринарной инъекционной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG в качестве растворителя, для лечения и/или предотвращения инфекций, вызванных эндопаразитами и/или эктопаразитами у отличных от человека млекопитающих, особенно молочного скота. Композиции согласно настоящему изобретению являются особенно эффективными для контроля стронгилид пищеварительного тракта и легких.
1/2
Еще одной дополнительной целью изобретения является обеспечение ветеринарной инъекционной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG, где активное соединение эприномектина имеет улучшенную биодоступность и больший период полувыведения (T) по сравнению с известными макроциклическими лактонами, как, например, ивермектин, дорамектин и моксидектин, и по сравнению с составами эприномектина для нанесения ограниченного объема препарата.
Основной целью изобретения является обеспечение ветеринарной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG в качестве растворителя, для парентерального введения бычьим, более конкретно лактирующим коровам таким образом, что в молоке или мясе и субпродуктах коров находится меньше остатков макроциклического лактона, особенно эприномектина, по сравнению с применением эприномектина для нанесения ограниченного объема препарата.
Альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения обеспечивает инъекционную паразитицидную композицию, приготовленную для обработки животных, содержащую слаболипофильный макроциклический лактон, то есть имеющий коэффициент распределения или log P менее 5, предпочтительно от приблизительно 4 до приблизительно 5 и наиболее предпочтительно приблизительно 4,4 или приблизительно 4,5 в физиологически приемлемой системе растворителей, пригодной для инъекции, где композиция содержит полиэтиленгликоль, который является эффективным для улучшения биодоступности и обеспечивает долговременный эффект или большую продолжительность действия менее липофильного макроциклического лактона.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Фигура 1 представляет собой график, показывающий на линейной шкале профили концентрации эприномектина (нг/мл) в плазме, построенные на основании среднего значения и с учетом стандартного отклонения, полученные после однократного подкожного введения 200 мкг/кг EPRINOJECT и однократного нанесения ограниченного объема препарата на коров 500 мкг/кг EPRINEX.
Фигура 2 представляет собой график, показывающий на логарифмической шкале профили концентрации эприномектина (нг/мл) в плазме, построенные на основании среднего значения и с учетом стандартного отклонения, полученные после однократного подкожного введения 200 мкг/кг EPRINOJECT и однократного нанесения ограниченного объема препарата на коров 500 мкг/кг EPRINEX.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к улучшенной ветеринарной инъекционной композиции долговременного действия, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина в системе растворителей, содержащей полиэтиленгликоль (PEG) и необязательно другие растворители и наполнители.
Было неожиданно обнаружено, что хотя эприномектин является слаболипофильным по сравнению с другими макроциклическими соединениями (то есть, моксидектином, дорамектином или ивермектином), инъекционные составы на основе эприномектина могут быть получены с эффективным количеством растворителя-PEG, и эти составы обладают, о чем ранее не сообщалось, улучшенными свойствами относительно времени пребывания и, следовательно, более длительным эффектом/большей продолжительностью действия по сравнению с другими макроциклическими соединениями. Дополнительно, композиции эприномектина согласно настоящему изобретению показали превосходную биодоступность, улучшенные свойства растворения эприномектина перед введением, а также более быструю доставку эприномектина к целевым участкам.
Новые составы согласно настоящему изобретению содержат от приблизительно 0,1% до приблизительно 10%, предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 5%, наиболее предпочтительно приблизительно 1% эприномектина. Эприномектин будет, как правило, полностью растворенным в составе. Состав согласно изобретению может содержать по меньшей мере 20% PEG по весу. Состав согласно настоящему изобретению может также включать от 20 до 98% PEG по весу, предпочтительно приблизительно от 40% до 95% и наиболее предпочтительно приблизительно 93% PEG по весу.
Коммерчески доступным является ряд PEG-растворителей в соответствии с молекулярным весом, и любой из них или другие, которые еще могут стать доступными, можно выбрать для удобства при условии, что PEG присутствует или оказывается доступным в виде жидкости во время составления. Как правило, PEG 200-1500 можно применять для целей, описанных в настоящем документе, предпочтительно низкомолекулярный PEG 200-600 можно эффективно использовать в настоящем изобретении. Предпочтительная система растворителей включает PEG-200. PEG для применения в настоящем изобретении является коммерчески доступным из различных источников, как, например, Sigma Chemical Co. или Fisher Scientific Со.
В наиболее предпочтительном варианте осуществления инъекционная ветеринарная композиция эприномектина согласно настоящему изобретению содержит эприномектин, PEG, N-метилпирролидон и бензиловый спирт.
Дополнительно, регулятор рН можно применять для регулирования рН в диапазоне от приблизительно 5,5 до приблизительно 9,5. Примеры регуляторов рН для применения согласно настоящему изобретению включают лимонную кислоту, ацетат, фосфорную кислоту, аскорбиновую кислоту, глюконовую кислоту, янтарную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту и т.п., их соли и их смеси.
Изобретение дополнительно относится к ветеринарной инъекционной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG в качестве растворителя, необязательно вместе с другими растворителями и наполнителями, для лечения и/или предотвращения инфекций, вызванных эндопаразитами и/или эктопаразитами у отличных от человека млекопитающих.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к ветеринарной инъекционной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и систему растворителей, содержащую PEG, N-метилпирролидон и бензиловый спирт, для лечения и/или предотвращения инфекций, вызванных эндопаразитами и/или эктопаразитами у отличных от человека млекопитающих.
Инъекционная ветеринарная композиция согласно настоящему изобретению может содержать терапевтически эффективное количество эприномектина от приблизительно 0,5% до приблизительно 5%, бензиловый спирт в количестве от приблизительно 0,5% до приблизительно 5%, N-метилпирролидон в количестве от приблизительно 0,5% до приблизительно 5% и является составленной в полиэтиленгликоле. Предпочтительно, инъекционная ветеринарная композиция содержит эприномектин в количестве от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%, бензиловый спирт в количестве от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%, N-метилпирролидон в количестве от приблизительно 0,5% до приблизительно 5% и является составленной в полиэтиленгликоле.
Инъекционный ветеринарный эприномектин может содержать дополнительно к PEG, N-метилпирролидону и бензиловому спирту один или несколько фармацевтически приемлемых компонентов, которые являются подходящими для применения у отличных от человека млекопитающих без излишних побочных эффектов (как, например, токсичность, раздражение и аллергическая реакция) соответственно приемлемому соотношению польза/риск.
Например, композиция может включать жидкий наполнитель, или фармацевтически приемлемый растворитель, или сочетание растворителей или сорастворителей, выбранных из группы, включающей пирролидон, пропиленгликоль, формальглицерин, диметиловый эфир изосорбида, этанол, диметилсульфоксид, глицерин, триэтиленгликоль, тетрагидрофурфуриловый спирт, триацетин и т.п.
Стандартный параметр липофильности, а именно коэффициент распределения или log P, обеспечивает термодинамическую меру гидрофильно-липофильного баланса химического соединения в системе, содержащей две несмешивающиеся жидкости, включающие водную фазу и органическую фазу. Как только соединение достигает полного равновесия с двумя растворителями, коэффициент распределения может быть вычислен путем деления количества соединения, присутствующего в органической фазе, на количество соединения, присутствующего в водной фазе, и взятия логарифмов. Как обсуждалось выше, эприномектин имеет низкое значение log P приблизительно 4,4 по сравнению с другими известными макроциклическими лактонами и, следовательно, имеет малое время пребывания или период полувыведения после инъекции отличным от человека млекопитающим.
Как станет ясно из следующих примеров, неожиданно более высокий период полувыведения приблизительно 12 дней был получен при подкожной инъекции композиции эприномектина согласно настоящему изобретению.
Под «инъекционным составом» или «инъекционной композицией» понимают состав или композицию, которую можно втянуть в шприц и ввести инъекцией подкожно, внутривенно, внутрибрюшинно или внутримышечно отличным от человека млекопитающим, не вызывая побочных эффектов. В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения ветеринарную композицию эприномектина вводят отличным от человека млекопитающим с помощью подкожных инъекций.
Как применяется в настоящем документе, «биодоступность» означает степень или скорость, с которой активное вещество всасывается в живую систему или становится доступным в участке с физиологической активностью. Что касается активных веществ, которые должны всасываться в кровоток, данные биодоступности для данного состава могут обеспечить оценку относительной доли от введенной дозы, которая всасывается в системный кровоток. «Биодоступность» можно охарактеризовать одним или несколькими фармакокинетическими параметрами.
макс
n
24
макс
макс
мин
0-t
0-∞
0-INF
0-τ
e
el
1/2
el
∞
area
∞
el
«Фармакокинетические параметры» описывают характеристики in vivo активного вещества с течением времени, такие как концентрация в плазме (C), C, C, C, T и AUC. «C» является измеренной концентрацией активного вещества в плазме в точке максимальной или пиковой концентрации. «C» является измеренной концентрацией активного вещества в плазме в точке минимальной концентрации. «AUC» представляет собой площадь под кривой графика измеренной концентрацией активного вещества в плазме, измеряемая от одного момента времени до другого. Например, AUC представляет собой площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени во временном диапазоне от момента времени 0 до момента времени t, где t может быть последним моментом времени с измеримой концентрацией в плазме для отдельного состава. AUC или AUC представляет собой расчетную площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени во временном диапазоне от момента времени 0 до бесконечности. В стационарных исследованиях AUCпредставляет собой площадь под кривой концентрации в плазме в интервале дозирования (то есть во временном диапазоне от момента времени 0 до момента времени τ (тау), где тау представляет собой длину интервала дозирования). Другими фармакокинетическими параметрами являются параметр K или K, константа конечной скорости элиминации, которая рассчитывается из полулогарифмического графика кривой зависимости концентрации в плазме от времени; T представляет собой конечный элиминационный период полувыведения, вычисляемый как 0,693/K; CL/F обозначает кажущийся общий клиренс после введения, рассчитывается как отношение общая доза/общая AUC; и V/F означает кажущийся общий объем распространения после введения, рассчитывается как отношение общая доза/(общая AUC×K).
макс
Как применяется в настоящем документе, «T» относится к наблюдаемому времени (сутки) достижения максимальной концентрации эприномектинового средства в плазме животного после инъекции отличным от человека млекопитающим.
макс
1/2
Как применяется в настоящем документе, «пиковая концентрация (C) эприномектина в плазме крови», «площадь под кривой (AUC) эприномектина в плазме крови», «период полувыведения эприномектина (T) в плазме крови» являются фармакокинетическими параметрами, известными специалисту в данной области (Pharmaceutical Research, Volume 8, Number 4/April, 1991 Laursen et al., Eur. J. Endocrinology, 135:309-315, 1996).
макс
«Площадь под кривой (AUC)» измеряет концентрацию эприномектина в сыворотке крови субъекта с течением времени после введения дозировки эприномектина субъекту любым инъекционным путем. «C» представляет собой максимальную концентрацию эприномектина в сыворотке крови субъекта после одного дозирования эприномектина.
Как применяется в настоящем документе, «приблизительно» будет толковаться специалистом в данной области и будет изменяться в некоторой степени в зависимости от контекста, в котором оно используется. Если существуют применения этого значения, которые не ясны специалистам в данной области техники с учетом контекста, в котором оно применяется, то «приблизительно» будет означать до плюс или минус 10% конкретного значения.
В формуле согласно настоящему изобретению эприномектиновое средство, связанное с PEG, характеризуется улучшенной биодоступностью и увеличенным временем пребывания, что дает в результате медленное высвобождение и обеспечивает долговременный эффект средства. Таким образом, противопаразитарное действие средства длится в течение более длительного периода вследствие его присутствия в крови. Дополнительно было установлено, что существует меньшая вариация концентраций эприномектина в плазме, что преобразовывается в лучшую эффективность в стаде, а также в меньший риск индукции резистентности.
Ветеринарная композиция эприномектина для парентерального введения отличным от человека млекопитающим доставляет менее приблизительно 0,5 мг/кг эприномектина и предпочтительно менее приблизительно 0,4 мг/кг или от приблизительно 0,1 до приблизительно 0,4 мг/кг. Предпочтительно, доза эприномектина в композиции находится в диапазоне от приблизительно 0,1-0,3 мг/кг до приблизительно 0,3 мг/кг и составляет приблизительно 0,2 мг/кг. Необходимая дозировка инъекционной ветеринарной композиции, таким образом, ниже, чем дозировка для существующих составов для нанесения ограниченного объема препарата. Действительно, как указано выше, рекомендуемая подкожная доза эприномектина составляет приблизительно 0,2 мг/кг. В одном из вариантов осуществления такие дозировки вводят животному только один раз (однократное введение) за период 40 суток, не давая в этот период никаких других доз эприномектина. Это меньше по сравнению с 14, 21, 28 сутками для составов для нанесения ограниченного объема препарата или подкожных составов эприномектина и ивермектина.
макс
1/2
макс
Инъекционные ветеринарные составы эприномектина согласно настоящему изобретению демонстрируют повышение пиковой концентрации эприномектина в плазме (C) и увеличение площади под кривой изменения концентрации в плазме (AUC) с течением времени и дополнительно превосходный период полувыведения (T) по сравнению с существующими составами на основе макроциклических лактонов. Увеличение C и AUC ведет к большей эффективности композиции на основе макроциклического лактона согласно настоящему изобретению и дает возможность применять более низкие вводимые дозы, которые могут при этом все еще быть эффективным при удалении паразитов.
макс
1/2
макс
В предпочтительном варианте осуществления способы и композиции согласно настоящему изобретению характеризуются (i) пиковой концентрацией (C) эприномектина в плазме крови указанных отличных от человека млекопитающих от приблизительно 45 до приблизительно 75 нг/мл или от приблизительно 45 до приблизительно 60 нг/мл и предпочтительно приблизительно 50 нг/мл; (ii) площадью под кривой изменения концентрации (AUC) эприномектина в плазме крови указанных отличных от человека млекопитающих от приблизительно 7000 до приблизительно 9000 (нг/мл)×ч или от приблизительно 8000 до приблизительно 8500 (нг/мл)×ч, предпочтительно приблизительно 8300 (нг/мл)×ч; (iii) периодом полувыведения (T) эприномектина в плазме крови приблизительно 10-15 суток или 11-13 суток и предпочтительно по меньшей мере 12 суток; и/или (iv) T более 1,5 суток или от приблизительно 2 до приблизительно 3 суток и предпочтительно приблизительно 2,5 или приблизительно 2,3 суток. Способы измерения концентрации эприномектина в плазме крови хорошо известны специалисту в данной области техники и описаны в приведенных ниже примерах с применением ранее опубликованного способа (Danaher et al., “Development and optimization of an improved derivatisation procedure for the determination of avermectins and mylbemycins in bovine liver”, The Analyst, 126, 576-580).
Эти увеличенные скорости и уровни доставки коррелируют с повышенной терапевтической эффективностью способов и составов согласно настоящему изобретению для профилактики и/или лечения указанных паразитарных заболеваний и состояний у отличных от человека млекопитающих.
1/2
Настоящее изобретение, таким образом, обеспечивает ветеринарную инъекционную композицию, содержащую терапевтически эффективное количество эприномектина, растворитель-PEG и необязательно другие растворители и наполнители, где активное соединение эприномектина имеет повышенную биодоступность и больший период полувыведения (T), как показано в примерах, и/или по сравнению с известными макроциклическими лактонами, такими как ивермектин, дорамектин и моксидектин.
Составы согласно настоящему изобретению могут быть стерильными и/или нестерильными инъекционными составами. Например, состав может представлять собой водную или масляную суспензию. Суспензии могут быть составлены в соответствии с методиками, известными в уровне техники, с применением пригодных диспергаторов или увлажняющих средств и суспендирующих средств. Инъекционный состав может также представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе. Пригодные разбавители и растворители для инъекционных составов включают 1,3-бутандиол, воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Стерильные нелетучие масла традиционно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Пригодные нелетучие масла включают без ограничения синтетические моно- или диглицериды; жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, а также натуральные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло, касторовое масло и их полиоксиэтилированные производные (Sigma Chemical Co., Fisher Scientific).
Дополнительно, инъекционный состав может дополнительно включать один или несколько дополнительных противопаразитарных средств, таких, без каких-либо ограничений, как соединения салициланилидов, авермектины и/или милбемицины.
Кроме того, инъекционный состав может дополнительно включать любые из следующих многих других ингредиентов в фармацевтически приемлемом количестве, такие как, например, один или несколько защитных светостабилизаторов, ингибиторы кристаллизации, коллоиды, адгезивы, загустители, тиксотропные средства, смачивающие средства, стабилизаторы, секвестрирующие антиоксиданты, солюбилизаторы, ожижающие средства, комплексообразователи, витамины, минералы, консерванты, буферные средства, антисептические средства или их сочетания. В более общем смысле, активные ингредиенты можно сочетать с любыми твердыми или жидкими добавками в соответствии с обычными методиками разработки состава. Примеры антиоксидантов включают без ограничения сульфатные соединения, L-цистеин, тиодипропионовую кислоту, тиомолочную кислоту, монотиоглицерин, пропилгаллат метабисульфит натрия, формальдегид натрия, сульфоксилат-ацетат, бутилированный гидроксианизол (ВНА) и бутилированный гидрокситолуол (BHT), витамин Е, аскорбиновую кислоту (витамин С), витамин В12 или сочетания этих средств. Иллюстративные загустители включают метилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия, гидроксипропилцеллюлозу, поливинилпирролидон и их смеси. Иллюстративные комплексообразователи включают ЭДТА и ее соли, фосфаты, нитраты, ацетаты, цитраты и их смеси. Иллюстративные антисептики включают метил-p-оксибензоат, пропил-p-оксибензоат, сложный эфир PHB, хлорбутанол, бензиловый спирт, бутанол, бутан-1,3-диол, соли хлоргексидина, бензойную кислоту и ее соли, сорбиновую кислоту и их смеси.
Составы согласно настоящему изобретению можно вводить не являющимся человеком млекопитающим, особенно млекопитающим, включающим без ограничения жвачных млекопитающих, например бычьих или овечьих, в более общем смысле, коров, овец, коз, буйволов, волов, быков, лошадей, свиней, кошек, собак, хомяков, мышей, крыс, обезьян, кроликов, оленей, лам и яков и, более конкретно, молочный и/или племенной крупный рогатый скот, как, например, коровы и козы. В предпочтительном варианте осуществления отличные от человека млекопитающие представляют собой бычьих. В наиболее предпочтительных вариантах осуществления отличные от человека млекопитающие представляют собой дойных коров, лактирующих коров или молочных коров.
Настоящее изобретение дополнительно относится к ветеринарной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG в качестве растворителя, необязательно вместе с другими растворителями и наполнителями, для парентерального введения бычьим, более конкретно для молочных коров, таким образом, что в молоке или мясе и субпродуктах коров находится меньше остатков макроциклического лактона, особенно эприномектина, по сравнению с применениями для нанесения ограниченного объема препарата.
В действительности, удивительным признаком настоящего изобретения является то, что после введения инъекционного ветеринарного состава эприномектина согласно настоящему изобретению, коровы продолжали давать молоко без задержки с меньшим количеством остатков макроциклического лактона в молоке.
Настоящее изобретение также относится к ветеринарной инъекционной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество эприномектина и PEG в качестве растворителя, необязательно вместе с другими растворителями и наполнителями, для контроля широкого спектра эндопаразитов и эктопаразитов у отличных от человека млекопитающих. Такие составы эприномектина, таким образом, особенно полезны для лечения и/или предотвращения инфекций, вызванных эндопаразитами и/или эктопаразитами у отличных от человека млекопитающих, особенно у молочного скота. Таким образом, состав можно давать здоровому животному с целью предотвращения паразитарной инфекции. Состав можно давать уже инфицированному животному, такому как животное, страдающее потерей веса вследствие инфекции.
В различных вариантах осуществления композиции, применяемые в способах согласно настоящему изобретению, могут дополнительно содержать второе фармацевтически активное соединение. Типичные классы вторых фармацевтически активных соединений включают без ограничения другие антибактериальные, противогрибковые, противопаразитарные, противовирусные, противовоспалительные средства.
Композиции и способы согласно настоящему изобретению являются особенно эффективными для контроля стронгилид пищеварительного тракта и легких и эктопаразитов.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения и/или предотвращения инфекций, вызванных эндопаразитами и/или эктопаразитами, при котором вводят отличным от человека млекопитающим эффективное количество противопаразитарного состава, описываемого в настоящем документе.
Согласно этому аспекту млекопитающие, которых можно обрабатывать, включают без ограничения жвачных млекопитающих, например бычьих или овечьих, в более общем смысле - коров, овец, коз, буйволов, волов, быков, лошадей, свиней, кошек, собак, хомяков, мышей, крыс, обезьян, кроликов, оленей, лам и яков, и более конкретно молочного и/или племенного крупного рогатого скота. В наиболее предпочтительных вариантах осуществления отличные от человека млекопитающие представляют собой дойную корову или козу.
В другом варианте осуществления обработки против эктопаразитов эктопаразит может быть одним или несколькими насекомыми или паукообразными, включая таковых из родов Ctenocephalides, Rhipicephalus, Dermacentor, Ixodes, Ambylomma, Haemaphysalis, Hyalomma, Sarcoptes, Psoroptes, Otodectes, Chorioptes, Hypoderma, Damalinia, Linognathus, Haematopinus, Solenoptes, Trichodectes и Felicola.
В еще одном варианте осуществления обработки против эктопаразитов эктопаразит может быть из родов Ctenocephalides, Rhipicephalus, Dermacentor, Ixodes и/или Boophilus. Обрабатываемые эктопаразиты включают без ограничения блох, иксодовых клещей, зудней, комаров, мух, вшей, мясных мух и их сочетания. Конкретные примеры включают без ограничения кошачьих и собачьих блох (Ctenocephalides felis, Ctenocephalides sp. и т.п.), иксодовых клещей (Boophilus sp., Ixodes sp., Dermacentor sp., Amblyoma sp. и т.п.) и зудней (Demodex sp., Sarcoptes sp., Otodectes sp. и т.п.), вшей (Trichodectes sp., Cheyletiella sp., Lignonathus sp. и т.п.), комаров (Aedes sp., Culex sp., Anopheles sp. и т.п.) и мух (Hematobia sp., Musca sp., Stomoxys sp., Dermatobia sp., Coclyomia sp. и т.п.). В еще одном варианте осуществления обработки против эктопаразитов эктопаразитом является блоха и/или иксодовый клещ.
Дополнительные примеры эктопаразитов включают без ограничения иксодовых клещей рода Boophilus, особенно таковых из видов microplus (клещ боофилюс), decoloratus и anulatus; миазных мух, таких как Dermatobia hominis (известная как Берне в Бразилии) и Cochlyomia hominivorax (зеленая падальница); овечьих миазных мух, таких как Lucilia sericata, Lucilia cuprina (известная как мясная миазная муха в Австралии, Новой Зеландии и Южной Африке); мух, являющихся паразитами во взрослом состоянии, Haematobia irritans (малая коровья жигалка); вшей, таких как Linognathus vitulorum и т.д., и зудней, таких как Sarcoptes scabici и Psoroptes ovis. Приведенный выше перечень не является исчерпывающим, и другие эктопаразиты являются хорошо известными в данной области как вредные для животных и людей. Они включают, например, мигрирующие личинки двукрылых.
Композицию также можно применять для обработки против эндопаразитов, таких как гельминты из группы, включающей роды Anaplocepheda, Ancylostoma, Anecator, Ascaris, Capillaria, Cooperia, Dipyllidinum, Dirofilaria, Echinococcus, Enterobius, Fasciola, Haemonchus, Oesophagostumum, Ostertagia, Toxocara, Strongyloides, Toxascaris, Trichinella, Trichuris и Trichostrongylus. Конкретно, личинки овода, стронгилиды, аскариды и острицы, круглые черви, как проволочники (Haemonchus placei), остертагия (Ostertagia spp.), узелковый червь (Oesophagostomum spp.), анкилостома (Bunostomum spp.), куперия (Cooperia spp.), парафилярия (Parafilaria bovicola); ленточные черви, подобные мониезии (Moniezia spp.). Трематоды, группа трематод включает печеночных сосальщиков (Fasciola spp. - печеночный сосальщик и гигантский печеночный сосальщик) и конусовидных сосальщиков (Calicophoron - бывший Paramphistomum), последний из которых встречается в желудочно-кишечном тракте.
Дополнительно, с или без добавления дополнительных пестицидных средств композицию согласно настоящему изобретению также можно применять для обработки против других вредителей, которые включают без ограничения следующих вредителей:
из отряда Isopoda, например, Oniscus asellus, Armadillidium vulgare и Porcellio scaber;
из отряда Diplopoda, например Blaniulus guttulatus;
из отряда Chilopoda, например, Geophilus carpophagus и Scutigera spp.;
из отряда Symphyla, например Scutigerella immaculata;
из отряда Thysanura, например Lepisma saccharina;
из отряда Collembola, например Onychiurus armatus;
из отряда Orthoptera, например, Acheta domesticus, Gryllotalpa spp., Locusta migratoria migratorioides, Melanoplus spp. и Schistocerca gregaria;
из отряда Blattaria, например, Blatta orientalis, Periplaneta americana, Leucophaea maderae и Blattella germanica;
из отряда Dermaptera, например Forficula auricularia;
из отряда Isoptera, например Reticulitermes spp.;
из отряда Phthiraptera, например, Pediculus humanus corporis, Haematopinus spp., Linognathus spp., Trichodectes spp. и Damalinia spp.;
из отряда Thysanoptera, например, Hercinothrips femoralis, Thrips tabaci, Thrips palmi и Frankliniella accidentalis;
из отряда Heteroptera, например, Eurygaster spp., Dysdercus intermedins, Piesma quadrata, Cimex lectularius, Rhodnius prolixus и Triatoma spp.;
из отряда Homoptera, например, Aleurodes brassicae, Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum, Aphis gossypii, Brevicoryne brassicae, Cryptomyzus ribis, Aphis fabae, Aphis pomi, Eriosoma lanigerum, Hyalopterus arundinis, Phylloxera vastatrix, Pemphigus spp., Macrosiphum avenae, Myzus spp., Phorodon humuli, Rhopalosiphum padi, Empoasca spp., Euscelis bilobatus, Nephotettix cincticeps, Lecanium corni, Saissetia oleae, Laodelphax striatellus, Nilaparvata lugens, Aonidiella aurantii, Aspidiotus hederae, Pseudococcus spp. и Psylla spp.;
из отряда Lepidoptera, например, Pectinophora gossypiella, Bupalus piniarius, Cheimatobia brumata, Lithocolletis blancardella, Hyponomeuta padella, Plutella xylostella, Malacosoma neustria, Euproctis chrysorrhoea, Lymantria spp., Bucculatrix thurberiella, Phyllocnistis citrella, Agrotis spp., Euxoa spp., Feltia spp., Earias insulana, Heliothis spp., Helicoverpa spp., Mamestra brassicae, Panolis flammea, Spodoptera spp., Trichoplusia ni, Carpocapsa pomonella, Pieris spp., Chilo spp., Pyrausta nubilalis, Ephestia kuehniella, Galleria mellonella, Tineola bisselliella, Tinea pellionella, Hofmannophila pseudospretella, Cacoecia podana, Capua reticulana, Choristoneura fumiferana, Clysia ambiguella, Homona magnanima, Tortrix viridana и Cnaphalocerus spp.;
из отряда Coleoptera, например, Anobiur punctatum, Rhizopertha dominica, Bruchidius obtectus, Acanthoscelides obtectus, Hylotrupes bajulus, Agelastica alni, Leptinotarsa decerlineata, Phaedon cochleariae, Diabrotica spp., Psylliodes chrysocephala, Epilachna varivestis, Atomaria spp., Oryzaephilus surinamensis, Anthonomus spp., Sitophilus spp., Otiorrhynchus sulcatus, Cosmopolites sordidus, Ceuthorrhynchus assimilis, Hypera postica, Dermestes spp., Trogoderma spp., Anthrenus spp., Attagenus spp., Lyctus spp., Meligethes aeneus, Ptinus spp., Niptus hololeucus, Gibbiur psylloides, Tribolium spp., Tenebrio molitor, Agriotes spp., Conoderus spp., Melolontha melolontha, Amphimallon solstitialis и Costelytra zealandica;
из отряда Hymenoptera, например, Diprion spp., Hoplocampa spp., Lasius spp., Monomorium pharaonis и Vespa spp.;
из отряда Diptera, например, Aedes spp., Anopheles spp., Culex spp., Drosophila melanogaster, Musca spp., Fannia spp., Calliphora erythrocephala, Lucilia spp., Chrysomyia spp., Cuterebra spp., Gastrophilus spp., Hyppobosca spp., Stomoxys spp., Oestrus spp., Hypoderma spp., Tabanus spp., Tannia spp., Bibio hortulanus, Oscinella frit, Phorbia spp., Pegomyia hyoscyami, Ceratitis capitata, Dacus oleae, Tipula paludosa, Hylemyia spp. и Liriomyza spp.;
из отряда Siphonaptera, например, Xenopsylla cheopis и Ceratophyllus spp.;
из класса паукообразных, например, Scorpio maurus, Latrodectus mactans, Acarus siro, Argas spp., Ornithodoros spp., Dermanyssus gallinae, Eriophyes ribis, Phyllocoptruta oleivora, Boophilus spp., Rhipicephalus spp., Amblyomma spp., Hyalomma spp., Ixodes spp., Psoroptes spp., Chorioptes spp., Sarcoptes spp., Tarsonemus spp., Bryobia praetiosa, Panonychus spp., Tetranychus spp., Hemitarsonemus spp. и Brevipalpus spp.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Получение инъекционного ветеринарного состава эприномектина
Инъекционную ветеринарную композицию эприномектина получили путем смешивания следующих компонентов, как показано в таблице 1 ниже:
Таблица
1
Ингредиенты
Количество на 100 мл
Эприномектин
1,0 г
Бензиловый спирт
1,0 г
N-метилпирролидон
5,0 г
PEG 200
сколько потребуется до 100 мл
Пример 2. Сравнение фармакокинетических свойств состава настоящего изобретения с существующими составами
Таблица 2
Моксидектин
Дорамектин
Ивермектин
Эприномектин (EPRINOJECT)
Способ введения
Inj SC
Inj SC
Inj SC
Inj SC
Дозировка
(0,2 мг/кг)
(0,2 мг/кг)
(0,2 мг/кг)
(0,2 мг/кг)
Путь введения
нанесение ограниченного объема препарата
нанесение ограниченного объема препарата
нанесение ограниченного объема препарата
Дозировка
(0,5 мг/кг)
(0,5 мг/кг)
(0,5 мг/кг)
Липофильность (log P)
6,0
5,6
4,8
4,4
Состав:
Как обеспечено в примере 1
Inj
водный
масляный
органический растворитель
PО
масляный
спиртовой
масляный
Tмакс (сутки)
Inj
1,5
6
2,12
2,3
PO
4,3
4,3
3,4
-
Cмакс (нг/мл)
Inj
18,3
32,6
46,4
47,8
PO
2,33
12,2
12,2
-
Т<sub>1/2el</sub> (сутки)
Inj
14,5
5,4
5
12,2
PO
-
9,82
5,3
-
MRT (среднее время пребывания) (сутки)
Inj
25,7
11,8
5,4
12
PO
12,8
12,8
8,4
-
AUC 0-inf ((нг/мл)×час)
6719/549,6
12264/4334
6384/2919
8326/-
Источники
Alvinerie et al, J Vet Pharmacol Ther. 1997 Apr;20(2):91-9. Sallovitz et al, 2000. J. Vet. Pharmacol. Ther, 23, Supp. 1, abstract H17
Toutain et al, Vet Parasitol. 1997 Sep;72(1):3-8. Gayrard et al, 1999. Vet Parasitol, 81:47 - 55
Lifschitz et al, Vet Parasitol. 2007 Jul 20; 147(3-4):303-10. Gayrard et al, 1999. Vet Parasitol, 81:47-55
Пример 1
*Inj SC - подкожная инъекция; Inj - инъекция; PO: нанесение ограниченного объема препарата.
макс
Результаты показывают, что применение подкожной композиции эприномектина в половинной дозе по сравнению с соответствующим местным составом для нанесения ограниченного объема препарата привело в результате к улучшенным результатам фармакокинетических показателей, включая большую C и/или большую биодоступность (AUC) эприномектина.
Пример 3. Определение фармакокинетических данных
Инъекционную композицию эприномектина, обозначаемую как EPRINOJECT, вводили 5 лактирующим коровам. Образцы крови объемом 10 мл собирали путем пункции передней полой вены в гепаринизированные пробирки до обработки, а также через 6, 12, 24, 40, 48, 60 часов, 3, 5, 7, 11, 16, 21, 25, 35 и 43 суток после обработки. Пробы немедленно центрифугировали при 10000 об/мин. в течение 10 мин.
Концентрации эприномектина в плазме крови определяли по валидированному способу ВЭЖХ после дериватизации и применения флуоресцентной детекции.
max
макс
Результаты представлены в следующей таблице 3. В частности, соотношение в таблице 3: эти значения означают соотношение нанесение ограниченного объема препарата/инъекция. Значения t эквивалентны (отношение=0,8), значение C в 2,4 раза выше при инъекции, значение AUC в 3 раза выше при инъекции.
Таблица 3
Фармакокинетические параметры
Параметры
Единица
EPRINOJECT
Среднее значение ±стандартное отклонение
Отношение
t<sub>max</sub>
(ч)
55±11
0,8
C<sub>мак</sub>с
(нг/мл)
47,8±9,58
2,4
AUC<sub>0-t</sub>
(ч×нг/мл)
7783±1703
3
AUC<sub>0-∞</sub>
(ч×нг/мл)
8309±1775
3,1
Время пребывания
(ч)
300±72
-
Также время, пока концентрация превышала 1 нг/мл, для эприномектина, рассчитываемое после однократного подкожного введения 200 мг/кг инъекционной композиции эприномектина согласно настоящему изобретению, представлено в следующих таблицах 4.1 и 4.2.
Таблица 4.1
Отдельные значения
Животное
Время, пока концентрация превышала 1 нг/мл (часы)
An_261
858
An_296
1015
An_4022
795
An_768
1016
An_9305
1031
Таблица 4.2.
Статистические данные
N (количество)
5
Среднее
943
SD (стандартное отклонение)
109
SEM (стандартная ошибка среднего)
49
Min (минимальное значение)
795
Медиана
1015
Max (максимальное значение)
1031
CV% (коэффициент вариации)
12
Среднее геометрическое
938
Среднее гармоническое
932
Пример 4. Сравнительное исследование с составом эприномектина для нанесения ограниченного объема препарата (Eprinex=EPRINEX)
Ветеринарную композицию эприномектина согласно настоящему изобретению (EPRINOJECT) получали, как показано в примере 1 выше в данном документе.
Лактирующих молочных коров (10 в общей сложности, по 5 в группе) разделили на 2 обрабатываемые группы. Группа 1 получала EPRINEX (Merial) с помощью нанесения ограниченного объема препарата при 500 мкг/кг массы тела, а группа 2 получала EPRINOJECT подкожно при 200 мкг/кг массы тела.
Образцы крови (10 мл) собирали путем пункции передней полой вены в гепаринизированные пробирки до обработки, а также через 6, 12, 24, 40, 48, 60 часов, 3, 5, 7, 11, 16, 21, 25, 35 и 43 суток после обработки. Пробы немедленно центрифугировали при 10000 об/мин в течение 10 мин.
Концентрации эприномектина в плазме крови определяли по валидированному способу ВЭЖХ после дериватизации и применения флуоресцентной детекции. (Danaher et al., ”Development and optimization of an improved derivatisation procedure for the determination of avermectins and mylbemycins in bovine liver”, The Analyst, 126, 576-580).
Результаты представлены в таблице 5 и на фигурах 1 и 2.
Таблица 5
Фармакокинетические параметры
Параметры
Единица
Среднее значение ± стандартное отклонение
Отношение
EPRINOJECT
EPRINEX
t<sub>max</sub>
(ч)
55±11
70±30
0,8
C<sub>макс</sub>
(нг/мл)
50,3±12,2
20,33±10,34
2,4
AUC<sub>0-t</sub>
(ч×нг/мл)
7799±1698
2538±1211
2,07
AUC<sub>0-∞</sub>
(ч×нг/мл)
8326±1772
2677±1177
3,1
Время пребывания
(ч)
299±72
299±85
-
Также время, пока концентрация превышала 1 нг/мл, для эприномектина, рассчитываемое после однократного подкожного введения коровам 200 мг/кг EPRINOJECT, композиции согласно настоящему изобретению, представлено в следующих таблицах 6.1 и 6.2.
Таблица 6.1
Отдельные значения
Животное
Время, пока концентрация превышала1 нг/мл (часы)
An_261
858
An_296
1015
An_4022
795
An_768
1016
An_9305
1031
Таблица 6.2
Статистические данные
N (количество)
5
Среднее
943
SD (стандартное отклонение)
109
SEM (стандартная ошибка среднего)
49
Min (минимальное значение)
795
Медиана
1015
Max (максимальное значение)
1031
CV% (коэффициент вариации)
12
Среднее геометрическое
938
Среднее гармоническое
932
Также время, пока концентрация превышала 1 нг/мл или 2 нг/мл, для эприномектина, рассчитываемое после местного применения единичной дозы 500 мг/кг эприномектина в виде EPRINEX для нанесения ограниченного объема препарата, представлено в следующих таблицах 7.1 и 7.2.
Таблица 7.1
Отдельные значения
Животное
Время, пока концентрация превышала 1 нг/мл (часы)
ID3337
333
ID4524
343
ID7176
502
ID8087
484
ID8138
479
Таблица 7.2
Статистические данные
N (количество)
5
Среднее
428
SD (стандартное отклонение)
83
SEM (стандартная ошибка среднего)
37
Min (минимальное значение)
333
Медиана
479
Max (максимальное значение)
502
CV% (коэффициент вариации)
19
Среднее геометрическое
421
Среднее гармоническое
414