УСТРОЙСТВО ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO И ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ

1. Устройство (10) для диагностики in vitro для детекции, по меньшей мере, одной реакции между антигеном эритроцитарного фенотипа и антителом, специфически направленным против этого антигена, в образце крови или одного из ее компонентов, характеризующееся тем, что оно содержит:
- подложку (12) и
- гидрофобную пористую мембрану (14) толщиной от 0,05 до 1,5 мм с диаметром пор от 2 до 30 мкм, причем указанная мембрана содержит, по меньшей мере, одну гидрофильную область реакции (16), предназначенную для получения указанного образца, и поверхность гидрофильной области реакции (16) меньше поверхности гидрофильной пористой мембраны (14).
2. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что гидрофильная область реакции (16) пористой мембраны (14) сделана гидрофильной с помощью детергента без модификации химических функций пористого субстрата предварительной физической или химической обработкой пористой мембраны.
3. Устройство (10) для диагностики по п. 2, характеризующееся тем, что детергент представляет собой неионное поверхностно-активное вещество.
4. Устройство (10) для диагностики по п. 2, характеризующееся тем, что детергент применяют в дозе от 0,01 до 2% (масс/об).
5. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что пористая мембрана (14) закреплена на подложке (12), и что подложка (12) содержит, по меньшей мере, одно отверстие (20), причем каждое отверстие (20) находится под прямым углом к соответствующей гидрофильной области реакции (16) пористой мембраны.
6. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что подложка (12) представляет собой твердую пластиковую подложку.
7. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что оно также содержит поглощающую мембрану (18), расположенную ниже пористой мембраны (14).
8. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что гидрофильная область реакции (16) пористой мембраны (14) содержит еще перехватывающие агенты.
9. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что перехватывающие агенты содержат антигены эритроцитарной группы / фенотипа.
10. Устройство (10) для диагностики по п. 9, характеризующееся тем, что перехватывающие агенты представляют собой красные кровяные клетки, лишенные гемоглобина.
11. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что перехватывающие агенты представляют собой антитела.
12. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что перехватывающие агенты представляют собой поликатионные полимеры.
13. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что область реакции (16) гидрофильна по всей толщине пористой мембраны.
14. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что область реакции (16) гидрофильна на поверхности указанной области реакции.
15. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что область реакции (16) содержит две гидрофильные области (16-1 и 16-2), причем степень гидрофилизации в центре (16-1) области реакции больше, чем на периферии (16-2).
16. Устройство (10) для диагностики по п. 1, характеризующееся тем, что область реакции (16) содержит две гидрофильные области с различной степенью гидрофилизации, одну на поверхности, а другую в глубине.
17. Устройство (10) для диагностики по п. 15, характеризующееся тем, что область реакции (16) делают гидрофильной с помощью двух различных детергентов без модификации химических функций пористого субстрата предварительной физической или химической обработкой пористой мембраны.
18. Способ производства устройства (10) по п. 1, характеризующееся тем, что включает следующие этапы:
- гидрофилизацию гидрофобной пористой мембраны (14) толщиной от 0,05 до 1,5 мм с диаметром пор от 2 до 30 мкм, по меньшей мере, в одной области (16) указанной мембраны, с помощью, по меньшей мере, одного детергента;
- необязательное депонирование раствора перехватывающего агента;
- сушку;
- сборку пористой мембраны (14) и, возможно, поглощающей мембраны (18), расположенной ниже пористой мембраны (14) на подложке (12).
19. Применение устройства по п. 1 для идентификации и определения групп крови по системе АВО, расширенного фенотипирования резуса, поиска иррегулярного агглютинина, поиска аутоантител, поиска холодового антиглобулина и/или перекрестной валидации, в образце крови или одного из его компонентов.
20. Способ фенотипирования эритроцитарных групп крови в образце эритроцитов для обнаружения двух различных популяций антигенов, характеризующийся следующими этапами:
- депонирование раствора для гидратации пористой мембраны (14) в центре области реакции устройства (10) по п. 1; причем указанная области реакции (16) содержит две гидрофильные области (16-1 и 16-2), где степень гидрофилизации в центре области 16-1 больше, чем на периферии 16-2, и в центре находятся перехватывающие агенты, содержащие антитела;
- разведение подлежащих фенотипированию красных клеток в буферном растворе;
- введение этого раствора, содержащего подлежащие фенотипированию красные клетки, в центр области реакции;
- инкубация;
- депонирование в область реакции промывающего раствора.
21. Способ фенотипирования эритроцитарных групп крови в образце эритроцитов, характеризующийся следующими этапами:
- депонирование раствора для гидратации пористой мембраны (14) на уровне области реакции (16) устройства (10) по п. 1; причем указанная область реакции (16) содержит одну гидрофильную область и перехватывающие агенты, содержащие антитела;
- возможное разведение подлежащих фенотипированию красных клеток в буферном растворе;
- введение этого раствора, содержащего подлежащие фенотипированию красные клетки, в центр области реакции;
- инкубация;
- депонирование в область реакции промывающего раствора.
22. Способ обнаружения присутствующих в крови мультивалентных антител в образце плазмы, сыворотки или цельной крови, включающий следующие этапы:
- депонирование исследуемого образца в область реакции (16) устройства (10) по п. 1, причем указанная область реакции (16) содержит перехватывающие агенты, включая антигены;
- введение красных кровяных клеток известного фенотипа, содержащих те же антигены, что и перехватывающие агенты;
- прохождение смеси через гидрофильную область;
- депонирование в промывающего раствора в область реакции.
23. Способ обнаружения анти-эритроцитарных антител в крови, перекрестной валидации или поиска аутоантител или холодового агглютинина в образце плазмы, сыворотки или цельной крови, характеризующийся следующими этапами:
- инкубация исследуемого образца с буфером, пробами красных кровяных клеток известного фенотипа;
- добавление к этой смеси агента, способного агрегировать клетки;
- депонирование смеси в область реакции (16) устройства (10) по п. 1;
- депонирование в область реакции раствора, содержащего агент, способный агрегировать красные клетки;
- депонирование в область реакции раствора Кумбса, человеческого антиглобулина или анти-комплемента; а также
- депонирование в область реакции промывочного раствора.