ПОЛУЧЕНИЕ ГЛИКОЛЕВОЙ КИСЛОТЫ ПУТЕМ ФЕРМЕНТАЦИИ ИЗ ВОЗОБНОВЛЯЕМЫХ РЕСУРСОВ

1. Способ ферментативного получения гликолевой кислоты, ее производных или предшественников путем культивирования микроорганизма в подходящей культуральной среде, содержащей источник углерода, и извлечения гликолевой кислоты из культуральной среды.
2. Способ по п.1, где микроорганизм модифицируют для уменьшения преобразования глиоксилата в продукты, отличные от гликолята.
3. Способ по п.2, при котором уменьшена экспрессия, по меньшей мере, одного гена, выбранного из следующих генов, вовлеченных в метаболизм глиоксилата:
ace
B, кодирующего малатсинтазу
glc
B, кодирующего вторую малатсинтазу
gcl
, кодирующего глиоксилаткарболигазу
eda
, кодирующего 2-кето-3-дезоксиглюконат-6-фосфатальдолазу.
4. Способ по пп.1-3, где микроорганизм содержит, по меньшей мере, один ген, кодирующий полипептид, катализирующий преобразование глиоксилата в гликолят.
5. Способ по п.4, где ген кодирует NADPH-зависимую глиоксилатредуктазу.
6. Способ по п.4, в котором ген, кодирующий полипептид с активностью NADPH-зависимой глиоксилатредуктазы, является эндогенным.
7. Способ по п.4, где экспрессия указанного гена увеличена.
ycd
yia
8. Способ по п.4, где ген, кодирующий полипептид с активностью NADPH-зависимой глиоксилатредуктазы, выбран из W и E.
9. Способ по любому из пп.1-3, где микроорганизм модифицируют таким образом, что он, по существу, не способен метаболизировать гликолят.
10. Способ по п.9, где уменьшают экспрессию, по меньшей мере, одного гена, выбранного из следующих генов, вовлеченных в метаболизм гликолята:
glc
DEF, кодирующего гликолятоксидазу
ald
A, кодирующего гликоальдегиддегидрогеназу.
11. Способ по любому из пп.1-3, где микроорганизм трансформируют для увеличения интенсивности потока глиоксилатного пути.
12. Способ по п.11, где уменьшают активность фермента изоцитратдегидрогеназы.
13. Способ по п.11, где уменьшают экспрессию, по меньшей мере, одного из следующих генов:
pta
, кодирующего фосфотрансацетилазу
ack
, кодирующего ацетаткиназу
pox
B, кодирующего пируватоксидазу.
ace
14. Способ по п.11, где интенсивность потока глиоксилатного пути увеличивают путем увеличения активности A.
ace
icl
fad
15. Способ по п.14, где экспрессию A увеличивают путем уменьшения экспрессии генов R или R.
ace
ace
16. Способ по п.14, где экспрессию A увеличивают путем введения искусственного промотора выше гена A.
17. Способ по п.1, где увеличивают доступность NADPH.
18. Способ по п.17, где уменьшают экспрессию, по меньшей мере, одного гена, выбранного из следующих:
pgi
, кодирующего глюкозо-6-фосфатизомеразу
udh
A, кодирующего растворимую трансгидрогеназу
edd
, кодирующего фосфоглюконатдегидратазу.
19. Способ по п.1, где источником углерода является, по меньшей мере, один из следующих: глюкоза, сахароза, моно- или олигосахариды, крахмал или его производные или глицерин.
20. Способ ферментативного получения гликолята по п.1, включающий следующие стадии:
a) Ферментация микроорганизма, продуцирующего гликолят
b) Накопление гликолята в бактериях или в среде и
c) Выделение гликолевой кислоты из культуральной среды и/или биомассы, необязательно остающейся в частях или в общем количестве (0-100%) в конечном продукте.
21. Способ по п.20, где гликолят выделяют посредством стадии полимеризации до, по меньшей мере, димеров гликолята.
22. Способ по п.21, где гликолят извлекают путем деполимеризации из димеров, олигомеров и/или полимеров гликолята.
23. Микроорганизм, как определено в любом из пп.1-22.
E. coli
C. glutamicum
S. cerevisiae
24. Микроорганизм по п.23, который выбран из группы, состоящий из , или .