Способ определения простых сахаров в тонком слое сорбента

f
Способ определения простых сахаров методом хроматографии в тонком слое сорбента характеризуется тем, что навеску исследуемого препарата растворяют в воде или навеску измельченного лекарственного растительного сырья экстрагируют водой с добавлением концентрированной кислоты соляной в соотношении вода-кислота 40:4 по объему при кипячении на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 часа с последующим хроматографированием с использованием силикагелевых пластинок марки «Sorbfil» с алюминиевой подложкой ПТСХ-АФ-А размером 10×15 см в системе растворителей (высота пробега не менее 13 см) - н-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:2) с последующим высушиванием на воздухе в течение 5-7 мин; хроматограмму равномерно обрабатывают раствором, содержащим 0,86 г сульфаниламида и 0,83 г о-фталевой кислоты в 50 мл 95% этилового спирта, из пульверизатора и высушивают в сушильном шкафу при температуре 103±2°C в течение 3-5 мин до проявления специфически окрашенных хроматографических зон (глюкоза - желто-коричневые зоны; ксилоза - розово-фиолетовые зоны, рамноза - вишнево-коричневые зоны); оптимальный объем пробы - 2,0 мкл водных растворов с содержанием простых сахаров 10 мг/мл; время насыщения камеры парами элюента - 10 мин, время элюирования - 7 часов; после проявления хроматографических зон, пластины сканируют с помощью планшетного сканера, а полученные изображения обрабатывают известной компьютерной программой «Sorbfil Videodensitometer», зоны моносахаридов идентифицируются по характерному значению величины R в сравнении с достоверными стандартными образцами, а количественное содержание (с, мкг) глюкозы в пробе, нанесенной на хроматограмму, в диапазоне концентраций 15-35 мкг/мкл рассчитывают по формуле:
содержание ксилозы (с, мкг) в пробе, нанесенной на хроматограмму, в диапазоне концентраций 15-30 мкг/мкл рассчитывают по формуле:
содержание рамнозы (с, мкг) в пробе, нанесенной на хроматограмму, в диапазоне концентраций 10-30 мкг/мкл рассчитывают по формуле:
где S - значение площади хроматографической зоны на хроматограмме, вычисленное с помощью компьютерной программы «Sorbfil Videodensitometer».