КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС, СОДЕРЖАЩАЯ БЕЛОК ХЕМОКИНОВОГО ЛИГАНДА 1, СОДЕРЖАЩЕГО С-Х-С МОТИВ (CXCLI)
COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING HAIR LOSS, COMPRISING PROTEIN OF CHEMOKINE LIGAND 1 CONTAINING C-X-C MOTIF (CXCLI)

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0001] В настоящем описании представлена композиция для предотвращения, лечения или снижения выпадения волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента, композиция для стимулирования образования волос или роста волос и способ, в котором применяются такие композиции.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0002] Выпадение волос означает отсутствие волос в области, где волосы обычно присутствуют, а также это означает, что в целом происходит выпадение отросших волос (жестких темных волос) с кожи головы. Отросшие волосы при выпадении создают косметическую проблему в отличие от мягких волос, которые не имеют цвета и являются тонкими. В случае уроженцев Азиатских стран с более низкой плотностью волос, чем у уроженцев западных стран, у них насчитывают от 50000 до 70000 волос, и обычно в день выпадает от 50 до 70 волос. Соответственно, если количество выпавших волос во время сна или ухода за волосами превышает 100, то это может свидетельствовать о выпадении волос.
[0003] Причины выпадения волос разнообразны, и в качестве важных факторов в развитии облысения рассматриваются генетические причины и мужской гормон андроген. Предполагается, что выпадение волос по женскому типу проявляется так же, как и выпадение волос по мужскому типу, однако существует разница в клиническом проявлении. Очаговая алопеция (alopecia areata) считается аутоиммунным заболеванием. Телогеновая алопеция (telogen effluvium) представляет собой временное выпадение волос, вызываемое серьезными физическими и умственными нагрузками, такими как эндокринные заболевания, недостаточность питания, употребление лекарственных средств, рождение ребенка, повышение температуры (лихорадка) и хирургические операции, и обуславливаемое частью волос, которые не проходят через цикл роста и впадают в состояние покоя.
[0004] Кроме того, среди указанных симптомов выпадения волос, волосы у мужчин становятся тонкими, и выпадение волос у мужчин прогрессирует у индивидуума, в истории семьи которого есть случаи облысения в возрасте от двадцати до тридцати лет. Граница роста волос между лбом и волосистой частью головы отодвигается назад и зона лба принимает М-образную форму по обеим сторонам головы, и выпадение волос постепенно переходит в теменную область головы. Выпадение волос у женщин характеризуется истончением волос по центру волоса и выпадением волос, в то время как линия роста волос по лбу остается неизменной по сравнению с выпадением волос у мужчин. Кроме того, выпадение волос у женщин до состояния полного облысения является редким, потому как степень выпадения волос небольшая, и волосы выпадают со лба по аналогии с выпадением волос по мужскому типу. Очаговая алопеция характеризуется появлением круговых или овальных участков без волос (англ. depilatory) различного размера (волосы выпадают и выглядят как точки). Очаговая алопеция происходит главным образом в области головы, и редко встречается в области бороды, бровей и ресниц, и при увеличении области с наблюдаемыми симптомами образуется обширный участок без волос. В случае сплошного выпадения волос такое выпадение классифицируется как выпадение всех волос (алопеция волос фронтальной области, all-hair alopecia), и как выпадение целиковых волос в случае, если волосы выпадают целиком (вместе с луковицей) (whole-hair alopecia). Кроме того, телогеновая алопеция обуславливается абсолютным уменьшением количества волос через 2-4 месяца после возникновения вызывающего алопецию фактора, и при устранении вызывающего алопецию фактора выпадение волос снижается, поскольку находящиеся в состоянии покоя волосы возвращаются к нормальному состоянию в течение нескольких месяцев.
[0005] С другой стороны, в случае выпадения волос у мужчин или женщин, в качестве способов лечения выпадения волос в соответствующей области техники применяют лекарственные средства для местного применения, такие как миноксидил и тому подобные, лекарственные средства для перорального применения, такие как финастерида и тому подобные, и трансплантацию волос. Кроме того, для лечения очаговой алопеции применяют топические стероиды или системные стероиды, иммунотерапию и тому подобные. При телогеновой алопеции важно идентифицировать и лечить причину, потому что волосы восстанавливаются в случае, когда причина устранена. Однако в случае лечения выпадения волос традиционным способом появляется проблема побочных эффектов, зависящих от медикаментозной терапии или стероидного препарата, и по причине того, что лечение проходит длительно, проблема возникает в долгосрочной перспективе. Кроме того, при лечении лекарственными средствами или при помощи трансплантации волос существует проблема значительного увеличения стоимости лечения. Миноксидил и финастерид являются примерами лекарственных средств, применяемых для стимулирования роста волос. Миноксидил от компании Upjohn Corporation в США при длительном применении может вызвать такие побочные эффекты, как отек, аритмия и гипертрихоз, а эффект от миноксидила наиболее выражен в период от 6 месяцев до 1 года после применения, и известно, что после этого эффект медленно уменьшается. Кроме того, известно, что финастерид, разработанный компанией Merck Corporation, представляет собой вещество, которое ингибирует активность 5-α-редуктазы в качестве фермента, который действует на метаболизм мужского гормона тестостерона в волосяных фолликулах, однако существуют свидетельства об увеличении сексуальной дисфункции, депрессии и суицидальных порывов при его применении. Кроме того, поскольку увеличивается возможность возникновения врожденных дефектов, его не применяют у женщин в период фертильности или у беременных женщин. Кроме того, известно, что при прекращении применения обоих лекарственных средств заново происходит выпадение волос. Кроме того, существует такой препарат, как вальпроевая кислота, но известно, что способность к когнитивному развитию у детей значительно снижается в случае ее применения во время беременности. Таким образом, при применении различных распространенных типов агентов для образования волос, в целом предпринимались попытки стимулирования роста волос с целью ускорения кровообращения и питания волосяных фолликулов, однако при этом остаются значительно выраженными токсичность и побочные эффекты, и действие таких агентов в настоящее время нельзя считать достаточно эффективным.
ОПИСАНИЕ
ЗАДАЧА ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0006] Следовательно, авторы настоящего изобретения приложили усилия для разработки веществ, не обладающих побочным действием, способных предотвращать выпадение волос и способствовать образованию волос, и, таким образом, показали, что белок CXCL1 обладает эффектом стимулирования роста волос, в результате чего было создано настоящее изобретение.
[0007] Настоящее изобретение было разработано с целью получения фармацевтической композиции для предотвращения или лечения выпадения волос, содержащей белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0008] Настоящее изобретение также было разработано с целью получения квазилекарственной композиции, косметической композиции и пищевой композиции для предотвращения или снижения выпадения волос, содержащей белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0009] Настоящее изобретение также было разработано с целью получения фармацевтической композиции, квазилекарственной композиции, косметической композиции и пищевой композиции для содействия или стимулирования образования волос или роста волос, содержащей белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0010] Настоящее изобретение также было разработано с целью обеспечения способа для предотвращения или лечения выпадения волос, включающего обеспечение субъекта белком CXCL1. Настоящее описание также было разработано с целью обеспечения способа для снижения выпадения волос, включающего обеспечение субъекта белком CXCL1.
[0011] Настоящее изобретение также было разработано с целью обеспечения способа для содействия или стимулирования образования волос или роста волос, включающего обеспечение субъекта белком CXCL1.
ТЕХНИЧЕСКОЕ РЕШЕНИЕ
[0012] Согласно иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для предотвращения или лечения выпадения волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0013] Кроме того, согласно другому иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена квазилекарственная композиция для предотвращения или снижения выпадения волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0014] Кроме того, согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена косметическая композиция для предотвращения или снижения выпадения волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0015] Кроме того согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена пищевая композиция для предотвращения или снижения выпадения волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0016] Кроме того, согласно еще одному иллюстративному варианту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для ускорения образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0017] Кроме того согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена квазилекарственная композиция для стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0018] Кроме того согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена косметическая композиция для стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0019] Кроме того согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложена пищевая композиция для стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0020] Кроме того согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложен способ для предотвращения или лечения выпадения волос, включающий обеспечение субъекта белком CXCL1.
[0021] Кроме того согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложен способ снижения выпадения волос, включающий обеспечение субъекта белком CXCL1.
[0022] Кроме того, согласно еще одному иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения предложен способ стимулирования образования волос или роста волос, включающий обеспечение субъекта белком CXCL1.
БЛАГОПРИЯТНЫЕ ЭФФЕКТЫ
[0023] Согласно иллюстративному варианту реализации настоящего изобретения белок CXCL1 согласно настоящему изобретению не имеет побочного действия при лечении выпадения волос и обладает превосходным эффектом образования волос даже за короткий период времени и, следовательно, может применяться в качестве фармацевтических продуктов, и является подходящим для применения в качестве квазилекарственных средств, косметических средств и функциональных оздоровительных пищевых продуктов.
[0024] Вышеприведенное краткое описание является только иллюстративным и не предназначено для ограничения изобретения каким-либо образом. В дополнение к иллюстративным аспектам, вариантам реализации и признакам, описанным выше, дополнительные аспекты, варианты реализации и признаки будут очевидны исходя из чертежей и последующего подробного описания.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[0025] На Фиг. 1 представлена диаграмма, иллюстрирующая результат измерения пролиферации клеток в течение 40 часов после обработки клеток дермального гребня (DPC) белком CXCL1.
[0026] На Фиг. 2 представлена диаграмма, иллюстрирующая фотографии спинки мыши через 15 дней после удаления волос со спинки мыши С3Н/HeN с применением агента для удаления волос и подкожного введения белка CXCL1.
[0027] На Фиг. 3 представлена диаграмма, иллюстрирующая результат измерения увеличенной массы волос (мг) указанной мыши через 15 дней после удаления волос со спинки мыши С3Н/HeN с применением агента для удаления волос и подкожного введения белка CXCL1.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0028] В нижеследующем подробном описании приведена ссылка на прилагаемые чертежи, который является частью настоящего документа. Подразумевается, что примеры вариантов реализации, описанные в подробном описании, чертежи и формула изобретения не являются ограничивающими. Можно использовать другие варианты реализации, и можно произвести другие изменения без отступления от сущности или объема представленного в настоящем документе объекта изобретения.
[0029] Настоящее изобретение подробно будет описано далее.
[0030] В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция для предотвращения или лечения выпадения волос и ускорения и/или стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0031] Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ предотвращения или лечения выпадения волос, снижения выпадения волос и ускорения или стимулирования образования волос или роста волос, включающий обеспечение субъекта белком CXCL1.
[0032] Хемокиновый лиганд 1, содержащий С-Х-С мотив (CXCL1), представляет собой тип хемокина, принадлежащего к СХС-семейству. Хемокин является основным гепаринсвязывающим низкомолекулярным белком для миграции и активации лейкоцитов. В молекуле хемокина присутствуют четыре остатка цистеина, и по первым двум остаткам цистеина в такой молекуле существующие типы хемокинов подразделяют на четыре подсемейства СХС (CXCL), СС (CCL), СХ3С (CX3CL) и С (XCL), и в настоящее время идентифицировано 40 или более видов цитокинов. Белок CXCL1 секретируется клетками меланомы человека и обладает способностью стимулировать митоз, и участвует в развитии меланомы. Белок CXCL1 экспрессируется в макрофагах, нейтрофилах и эпителиальных клетках и обладает функцией активации нейтрофилов. Белок CXCL1 проявляет действие посредством передачи сигнала через хемокиновый рецептор CXCR2 и участвует в воспалительном ответе, заживлении ран и опухолегенезе.
[0033] Конфигурация белка CXCL1 может определяться всеми или несколькими пептидами, обладающими эффектом предотвращения или лечения выпадения волос и стимулирования образования волос или роста волос, и в предпочтительном варианте его конфигурация определяется аминокислотной последовательностью SEQ ID №: 1, при этом включены функциональные эквиваленты и варианты такого белка.
[0034] Функциональный эквивалент указанного белка включает белки и полипептиды без полного изменения активности белковой молекулы, и в объем настоящего изобретения включены белки, обладающие одинаковым действием с функциональной точки зрения. Вариант означает, например, делецию, замену или добавление одной или нескольких аминокислот в указанную аминокислотную последовательность, и он обладает 95% или большей, предпочтительно 98% или большей и более предпочтительно 99% или большей идентичностью последовательности к указанной аминокислотной последовательности. В настоящем документе «идентичность» означает отношение (%) числа одинаковых аминокислотных остатков в одной аминокислотной последовательности ко всем аминокислотным остаткам другой аминокислотной последовательности, включая число разрывов (гэпов) в случае, когда гэп вводят в две аминокислотные последовательности, или в случае, когда две аминокислотные последовательности выравнены таким образом, что они обладают наивысшей степенью когерентности без введения указанного гэпа. Кроме того, «несколько» означает целое число от 2 до 10, например, от 2 до 7, от 2 до 5, от 2 до 4 и от 2 до 3. Конкретные примеры природных вариантов могут включать варианты, сплайс-варианты или им подобные варианты на основе полиморфизмов, таких как SNP (моноспецифичный полиморфизм). Замена в предпочтительном варианте представляет собой консервативную аминокислотную замену. Консервативная аминокислотная замена может иметь по существу одинаковую структуру или свойство с CXCL1 человека, содержащим аминокислотную последовательность. В качестве консервативной аминокислоты известны неполярные аминокислоты (глицин, аланин, фенилаланин, валин, лейцин, изолейцин, метионин, пролин и триптофан), полярные аминокислоты (аминокислоты, отличные от неполярных аминокислот), заряженные аминокислоты (кислотные аминокислоты (аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота) и основные аминокислоты (аргинин, гистидин и лизин), незаряженные аминокислоты (аминокислоты, отличные от заряженных аминокислот), ароматические аминокислоты (фенилаланин, триптофан и тирозин), разветвленные аминокислоты (лейцин, изолейцин и валин), алифатические аминокислоты (глицин, аланин, лейцин, изолейцин и валин) и тому подобные. Кроме того, известны белки с повышенной структурной устойчивостью к нагреванию, рН или им подобные белки или с повышенной белковой активностью в результате мутации или модификации аминокислотной последовательности.
[0035] Ген, кодирующий белок CXCL1, может быть образован последовательностью оснований SEQ ID №: 2, и варианты, которые с функциональной точки зрения могут обладать той же функцией, что и нуклеотид, включены в объем настоящего изобретения.
[0036] Варианты, которые с функциональной точки зрения могут обладать той же функцией, имеют по меньшей мере 70% или большую, предпочтительно 80% или большую, более предпочтительно 90% или большую и еще более предпочтительно 95% или большую гомологию последовательности к последовательности оснований, представленной SEQ ID №: 2 в результате добавления, замены или делеции в указанных основаниях, и означают последовательность оснований, которая может кодировать белок, обладающий по существу такой же физиологической активностью, что и белок, кодируемый указанной последовательностью оснований, представленной SEQ ID №: 2. Например, некоторые последовательности оснований модифицируют путем делеции, замены или вставки, но они включают варианты, которые с функциональной точки зрения могут обладать тем же действием, что и молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая белок CXCL1.
[0037] Термин «выпадение волос», применяемый в данном описании, может относиться к случаям, при которых число волос меньше общего числа, превышающего нормальный уровень волос без конкретного ограничения, и в предпочтительном варианте по меньшей мере любой один вид выпадения волос, выбранный из группы, состоящей из выпадения волос по мужскому типу, выпадения волос по женскому типу, кругового выпадения волос и выпадения волос, находящихся в состоянии покоя, может соответствовать виду выпадения волос, которое лечится или предотвращается при помощи композиции согласно настоящему изобретению. Кроме того, указанная композиция согласно настоящему изобретению обладает превосходным эффектом предотвращения выпадения волос до его начала.
[0038] Термин «образование волос», применяемый в данном описании, означает, что волосы образуются, а «рост волос» означает, что волосы растут. Эффект композиции согласно настоящему описанию также включает эффект стимулирования образования волос или роста волос.
[0039] Термин «предотвращение», применяемый в данном описании, означает все действия, которые подавляют или замедляют выпадение волос путем введения композиции согласно настоящему изобретению, а «улучшение» или «лечение» означает все действия, которые улучшают или в благоприятную сторону изменяют симптомы выпадения волос при помощи композиции согласно настоящему изобретению.
[0040] Термин «субъект», применяемый в данном описании, означает субъект, у которого прогрессирует или может наступить прогрессирование выпадения волос, и субъект, для которого требуется эффект образования волос и роста волос, и означает субъекта, у которого выпадение волос отсрочено, подавлено или снижено, или у которого образование волос или рост волос можно стимулировать при помощи обеспечения белком CXCL1 согласно настоящему изобретению. Указанный субъект может представлять собой млекопитающих, включая человека.
[0041] Термин «лечение», применяемый в данном описании, может включать все без ограничений действия для введения и приведения в контакт белка CXCL1 с указанным субъектом.
[0042] Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать носитель, вспомогательное вещество и разбавитель, которые надлежащим образом традиционно применяют для получения фармацевтической композиции. Кроме того, фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению может быть приготовлена и использована в виде лекарственной формы для перорального применения, такой как порошок, гранула, таблетка, капсула, суспензия, эмульсия, сироп и аэрозоль, препарата для наружного применения, суппозитория и стерильного раствора для инъекций согласно общепринятому способу. Предпочтительно, чтобы в подходящей лекарственной форме, известной в данной области техники, применялся состав, описанный в настоящем документе.
[0043] Указанные носитель, вспомогательное вещество и разбавитель, которые могут содержаться в фармацевтической композиции, могут включать лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, аравийскую камедь, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральное масло.
[0044] В том случае, когда фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению представлена в виде лекарственной формы, указанную лекарственную форму можно получить с использованием обычно применяемых разбавителя или вспомогательного вещества, таких как наполнитель, вещество для увеличения объема, связующее вещество, смачивающий агент, дезинтегрирующий агент и поверхностно-активное вещество. Твердая лекарственная форма для перорального введения включает таблетку, драже, порошок, гранулу, капсулу или им подобные, и твердую лекарственную форму можно получить путем смешивания по меньшей мере одного вспомогательного вещества, например, крахмала, карбоната кальция, сахарозы, лактозы, желатина и им подобных с активным ингредиентом. Кроме того, в дополнение к простым вспомогательным веществам можно применять смазывающие вещества (лубриканты), такие как стеарат магния и тальк. В качестве жидкой лекарственной формы для перорального введения может применяться суспензия, раствор, эмульсия, сироп и им подобные, и она может содержать различные вспомогательные вещества, например, смачивающий агент, подсластитель, ароматический агент, консервант и им подобные, в дополнение к воде и жидкому парафину, которые обычно применяют в качестве простых разбавителей. Лекарственная форма для парентерального введения включает стерильный водный раствор, неводный раствор, суспензию, эмульсию и лиофилизатор и суппозиторий. В качестве неводного раствора и суспензии можно применять пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, эфиры для инъекций, такие как этилолеат, и им подобные. В качестве материала для суппозитория можно применять витепсол, макрогол, tween 61, масло какао, лаурин, глицерожелатин и им подобные.
[0045] Композицию согласно настоящему изобретению можно вводить в фармацевтически эффективной дозе.
[0046] В настоящем описании термин «фармацевтически эффективная доза» означает количество, достаточное для лечения заболеваний при разумном соотношении эффективности и риска, применимом к терапевтическому лечению, и уровень эффективной дозы можно определить в зависимости от показателей, включающих вид заболевания пациента, тяжесть заболевания, возраст пациента, пол пациента, активность лекарственного средства, чувствительность к лекарственному средству, время введения, путь введения и скорость выделений, продолжительность лечения, и одновременно применяемых лекарственных средств и других показателей, хорошо известных в области медицины. Композицию согласно настоящему изобретению можно вводить в качестве индивидуального терапевтического агента или вводить в сочетании с другими терапевтическими агентами, и последовательно или одновременно вводить с терапевтическими агентами, известными из предшествующего уровня техники. Кроме того, композицию согласно настоящему изобретению можно вводить однократно или многократно. Важно вводить количество, способное обеспечить максимальный эффект при минимальном количестве без побочных эффектов с учетом указанных показателей, и это может легко определить специалист в данной области техники. Предпочтительную дозу композиции согласно настоящему описанию варьируют в зависимости от состояния и массы пациента, степени заболевания, типа лекарственного средства, пути и периода введения, и общее подходящее количество для ежедневного применения может определить врач с медицинской точки зрения, однако композицию можно вводить в количестве от 0,001 до 1000 мг/кг, в предпочтительном варианте от 0,05 до 200 мг/кг и в более предпочтительном варианте от 0,1 до 100 мг/кг от одного до нескольких раз в день. Выбор субъекта конкретно не ограничен в случае, если указанный субъект представляет собой субъект для предотвращения или лечения выпадения волос, и любой субъект является подходящим. Например, подходящим является любой субъект, как, например, животные, не являющиеся человеком, такие как обезьяна, собака, кошка, кролик, морская свинка, крыса, мышь, корова, овца, свинья и коза, и человек, и способ введения в том случае, если указанный способ представляет собой общепринятый способ в данной области техники, включен в настоящее изобретение без ограничений. Например, в указанном способе может использоваться способ подкожного введения посредством местного нанесения и т.п., не ограничиваясь указанным.
[0047] При этом указанный способ введения фармацевтической композиции согласно настоящему изобретернию конкретно не ограничен, и указанную фармацевтическую композицию можно вводить перорально или вводить путем нанесения на область выпадения волос или наносить на область, в которой прогнозируют развитие выпадения волос. Кроме того, способ введения конкретно не ограничен, и, таким образом, указанную фармацевтическую композицию можно непосредственно вводить в форме инъекций в область, в которой прогнозируют развитие выпадения волос. Кроме того, способ введения конкретно не ограничен, и, таким образом, указанную фармацевтическую композицию можно вводить посредством инъекции в артерию, вену и т.п..
[0048] Кроме того, для композиции выбранный уровень (объем) введения зависит от активности активного ингредиента, пути введения, тяжести выпадения волос, подлежащего лечению, состояния выпадения волос, подлежащего лечению, и предшествующей истории болезни. Тем не менее, начиная с количества активного ингредиента, меньшего, чем количество, необходимое для достижения желаемого терапевтического эффекта, медленное увеличение дозы до достижения желаемого эффекта находится в пределах знаний в данной области техники, и предпочтительную дозу можно определить в зависимости от возраста, пола, телосложения и массы. Композицию можно дополнительно обработать перед ее получением в виде фармацевтически приемлемого состава, и в предпочтительном варианте ее можно размолоть или полированием уменьшить в размере до более мелких частиц. Кроме того, композицию варьируют в зависимости от состояния пациента и пациента, подлежащего лечению.
[0049] Композиция согласно настоящему изобретению может представлять собой лекарственную форму, которую можно вводить способом непосредственного нанесения или распределения по коже, например, волосам или голове, например, лекарственную форму, такую как крем, лосьон, мазь, аэрозоль, шампунь, гель или маска. Способ для ингредиента для смешивания или агента, подходящих для каждой лекарственной формы, известен в данной области техники. В случае, когда такие агенты получает специалист в данной области техники, надлежащим образом можно выбрать и применить различные ингредиенты для смешивания, которые применяются для получения общепринятого препарата для наружного применения.
[0050] Волосы, на которые наносят композицию согласно настоящему изобретению, включают все области тела с корнями волос и волосяными фолликулами, такие как корни волос и волосяные фолликулы головы, ресниц и бровей, бороды, подмышек и лобковых волос.
[0051] Кроме того, в настоящем изобретении предложена квазилекарственная композиция для предотвращения или снижения выпадения волос и стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0052] Термин «квазилекарственный продукт» в настоящем описании означает изделие (article), за исключением устройства, машины или оборудования, которое применяют для целей диагностики, лечения, облегчения, управления течением или предотвращения заболевания у человека или животного, и продукт, за исключением устройства, машины или оборудования, который применяют для целей оказания фармакологического эффекта на структуру или функцию человека или животного, в качестве изделия, соответствующего одному из волокон, продуктов из резины или аналогичных им продуктов, применяемых для лечения, облегчения, управления течением или предотвращения заболеваний у человека или животных, изделия, за исключением устройств или машин и аналогичных продуктов, слабо воздействующих на организм человека или непосредственно не воздействующих на организм человека, и составов для стерилизации, для применения в качестве инсектицидов и аналогичных применений для предотвращения инфекции, и включает продукты для внешнего ухода за кожей и продукты личной гигиены.
[0053] В том случае, когда композиция согласно настоящему изобретению содержит квазилекарственое средство для предотвращения или снижения выпадения волос или стимулирования образования волос или роста волос, указанную композицию можно применять в исходном виде, или ее можно применять совместно с другими квазилекарственными ингредиентами, и ее можно надлежащим образом применять согласно общепринятым способам. Смешиваемое количество активных ингредиентов можно подходящим образом определить в зависимости от цели применения.
[0054] Квазилекарственное средство согласно настоящему описанию конкретно не ограничено, однако его можно получать и применять в форме, например, кремов, лосьонов, аэрозолей, шампуней, гелей или масок.
[0055] В случае кремов, лосьонов, аэрозолей, шампуней, гелей или масок, в них содержатся такие материалы, применяемые в качестве основы, как белый вазелин, желтый вазелин, ланолин, отбеленный пчелиный воск, цетанол, стеариловый спирт, стеариновая кислота, гидрогенизированное масло, гелеобразующий углеводород, полиэтиленгликоль, жидкий парафин и сквалан; такие растворители и агенты для растворения, как олеиновая кислота, изопропил миристиновой кислоты, глицерин триизооктановой кислоты, кротамитон, диэтилсебакат, диизопропиладипат, гексиллаурат, жирная кислота, сложный эфир жирной кислоты, алифатический спирт и растительное масло; такие антиоксиданты, как производные токоферола, L-аскорбиновая кислота, дибутилгидрокситолуол и бутилгидроксианизол; такие консерванты, как сложный эфир парагидроксибензойной кислоты; такие увлажнители, как глицерин, пропиленгликоль и гиалуронат натрия; такие поверхностно-активные вещества, как производные полиоксиэтилена, сложные эфиры глицерина и жирных кислот, сложные эфиры сахарозы и жирных кислот, сложные эфиры жирных кислот и сорбитана, сложные эфиры жирных кислот и пропиленгликоля и лецитин; такие загустители, как карбоксивиниловый полимер, ксантановая камедь, карбоксиметилцеллюлоза, натриевые соли карбоксиметилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза и им подобные.
[0056] В случае аэрозольного агента, в нем содержатся такие материалы, применяемые в качестве основы, как белый вазелин, желтый вазелин, ланолин, отбеленный пчелиный воск, цетанол, стеариловый спирт, стеариновая кислота, гидрогенизированное масло, гелеобразующий углеводород, полиэтиленгликоль, жидкий парафин и сквалан; такие растворители и агенты для растворения, как олеиновая кислота, изопропил миристиновой кислоты, диизопропиладипат, изопропилсебакат, глицерин триизооктановой кислоты, кротамитон, диэтилсебакат, гексиллаурат, жирная кислота, сложный эфир жирной кислоты, алифатический спирт и растительное масло; такие антиоксиданты, как производные токоферола, L-аскорбиновая кислота, дибутилгидрокситолуол и бутилгидроксианизол; такие консерванты, как сложный эфир парагидроксибензойной кислоты; такие увлажнители, как глицерин, пропиленгликоль и гиалуронат натрия; такие поверхностно-активные вещества, как производные полиоксиэтилена, сложные эфиры глицерина и жирных кислот, сложные эфиры сахарозы и жирных кислот, сложные эфиры жирных кислот и сорбитана, сложные эфиры жирных кислот и пропиленгликоля и лецитин; такие загустители, как карбоксивиниловый полимер, ксантановая камедь, карбоксиметилцеллюлоза, натриевые соли карбоксиметилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, которые применяют при получении мазей, кремов, гелей, суспензий, эмульсий, растворов и лосьонов; кроме того, могут быть смешаны различные стабилизаторы, буферы, матирующие агенты, суспензии, эмульгаторы, душистые вещества, консерванты, субсолюбилизаторы и другие подходящие добавки.
[0057] Кроме того, при необходимости могут быть добавлены стабилизаторы, консерванты, вещества, стимулирующие абсорбцию, регуляторы рН и другие подходящие добавки.
[0058] Кроме того, в настоящем описании предложена косметическая композиция для предотвращения или снижения выпадения волос и стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0059] Косметическая композиция может быть представлена в виде тонизирующего средства для волос, крема для волос, лосьона для волос, шампуня для волос, средства для ополаскивания волос, кондиционера для волос, спрея для волос, аэрозоля для волос, помады, геля в виде пудры, маски для волос, средства по уходу за волосами, агента для роста волос бровей, агента для роста ресниц и питательного средства для ресниц в виде квазилекарственного состава для кожи, но она не ограничена ими.
[0060] Кроме того, композицию для предотвращения или снижения выпадения волос и стимулирования образования волос или роста волос согласно настоящему изобретению можно применять для домашних животных путем изменения состава. Например, по аналогии с шампунями для домашних животных и средствами для ополаскивания для домашних животных, указанную композицию можно получить в виде различных форм, таких как раствор, золь-гель, эмульсия, масло, воск, аэрозоль, и получить путем добавления нейтрального детергента с меньшим раздражением для кожи домашнего животного и превосходным удержанием влаги.
[0061] Кроме того, косметическая композиция согласно настоящему изобретению может содержать традиционные приемлемые ингредиенты в дополнение к активному ингредиенту без ограничения и, например, может содержать обычные добавки, такие как антиоксиданты, стабилизаторы, солюбилизаторы, витамины, пигменты и ароматизаторы и носители.
[0062] В случае шампуня, в нем может содержаться по меньшей мере одно из синтетического поверхностно-активного вещества, которое представляет собой очищающий ингредиент, консерванта, загустителя, регулятора вязкости, регулятора рН, отдушки, красителя, агента для волос с кондиционирующим действием и воды. Синтетическое анионное поверхностно-активное вещество из синтетических поверхностно-активных веществ представляет собой алкил и алкилэфирсульфат, и в качестве типичного примера включает лаурилсульфат натрия, лаурилсульфат аммония, лаурилсульфат триэтаноламина, полиоксиэтилен-лаурилсульфат натрия, полиоксиэтилен-лаурилсульфат аммония и им подобные. Кроме того, синтетическое амфотерное поверхностно-активное вещество из синтетических поверхностно-активных веществ представляет собой алкилбетамин и алкиламидопропилбетаин, и в качестве типичного примера включает кокодиметилкарбоксиметилбетаин, лаурилдиметилкарбоксиметилбетаин, лаурилдиметил-альфа-карбоксиэтилбетаин, цетилдиметилкарбоксиметилбетаин, кокамидопропилбетаин или им подобные. Неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой алканоламид и оксид амина, и включает лаурилдиэтиламиноксид, алкилдиметиламиноксид кокосового масла, диэтаноламид лауриновой кислоты, диэтаноламид жирных кислот пальмового масла, моноэтаноламид жирных кислот пальмового масла и им подобные.
[0063] Любой ингредиент, применяемый в настоящем описании, широко известен специалисту в данной области техники в качестве любого обычного ингредиента для поддержания основного свойства и качества шампуня. В качестве любого ингредиента включены адъювант с перламутровым эффектом, консервант, загуститель и регулятор вязкости, регулятор рН, отдушку, краситель и агент для волос с кондиционирующим действием. Применяют, например, адъювант с перламутровым эффектом, такой как моностеарат этиленгликоля и дистеарат этиленгликоля; консервант, такой как метил-ρ-гидроксибензоат и смесь метилхлоризотиазолинона и метилизотиазолинона; загуститель и регулятор вязкости, такие как хлорид натрия, хлорид аммония и пропиленгликоль; регулятор рН, такой как лимонная кислота, фосфорная кислота, гидроксид натрия и гидроксид калия; применяют агенты для волос с кондиционирующим действием, такие как поликватерний-10, поликватерний-7, метилполисилоксаны, диметиконкополиол и гидролизованный животный белок, и краситель, такой как водорастворимая смола, и, кроме того, можно применять отдушку.
[0064] Кроме того, в настоящем изобретении предложена пищевая композиция для предотвращения или снижения выпадения волос и стимулирования образования волос или роста волос, содержащая белок CXCL1 в качестве активного ингредиента.
[0065] Пищевая композиция согласно настоящему изобретению может представлять собой функциональный оздоровительный пищевой продукт, и указанный «функциональный оздоровительный пищевой продукт» означает продукт, произведенный или обработанный с применением сырья или ингредиентов, обладающих полезными для организма человека функциями в соответствии с Законом №6727 о Функциональных Оздоровительных Пищевых Продуктах, и «функциональность» означает прием для регулирования питательных веществ по структуре и функции организма человека или получения подходящего оздоровительного эффекта, как, например, физиологического действия.
[0066] Пищевая композиция может дополнительно содержать пищевые добавки, и пригодность в качестве «пищевой добавки» определяют на основе шкалы и стандарта для соответствующего наименования согласно общим правилами и общими способам испытаний Кодекса пищевых добавок, одобренного Корейским управлением по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами, если не указано иное.
[0067] Наименования, описанные в «Кодексе пищевых добавок», могут включать, например, химические соединения, такие как кетоны, глицин, цитрат калия, никотиновая кислота и коричная кислота, природные добавки, такие как экстракт хурмы, экстракт солодки, кристаллические целлюлозы и гуаровые смолы, и агенты для смешивания, такие как L-глутамат натрия, щелочной агент для добавления в лапшу, консервант, окрашивающие смолы.
[0068] Пищевые продукты, содержащие активный ингредиент согласно настоящему изобретению, могут включать кондитерские изделия, такие как хлеб, рисовый торт, орехи, конфеты, шоколад, жевательная резинка и джем; продукты переработки мороженого, такие как мороженое, замороженные десерты и сухая смесь для мороженого; молочные продукты, такие как молоко, обезжиренное молоко, молоко с добавленной в него лактазой, переработанное молоко, козье молоко, сквашенное молоко, кефир, концентрированное молоко, молочный крем, масло сливочное, натуральный сыр, плавленый сыр, сухое молоко и молочные сыворотки; мясные продукты, такие как мясные продукты, продукты переработки яиц и гамбургеры; рыбные продукты, такие как продукты переработки рыбы, как, например, рыбная паста, ветчину, колбасу и бекон; лапшу, такую как лапша рамен, сушеная лапша, свежеприготовленная лапша, обжаренная лапша быстрого приготовления (instant fried noodles), лапша быстрого приготовления (instant dried noodles), улучшенная лапша, замороженная лапша и пасты; напитки, такие как фруктовые напитки, овощные напитки, газированные напитки, соевое молоко, молочные напитки, такие как йогурт, и напитки для смешивания; сезонные продукты, такие как соевый соус, мисо, кочуджанг (kochujang), чуньджанг (chunjang), чонггукджанг (chonggukjang), джанг (jang) для смешивания, уксус, соусы, томатный кетчуп, карри и заправку для салатов; маргарин, кулинарный жир и пиццу, но не ограничиваться ими.
[0069] Композиция согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать различные питательные вещества, витамины, электролиты, ароматизаторы, красители, пектиновую кислоту и ее соль, альгиновую кислоту и ее соль, органическую кислоту, защитный коллоидный загуститель, регулятор рН, стабилизатор, консервант, глицерин, спирт, угольную кислоту, применяемую в газированном напитке, или им подобные в дополнение к указанным ингредиентам. Кроме того, композиция согласно настоящему изобретению может содержать мякоть для получения натуральных фруктовых соков, напитков с содержанием фруктовых соков и овощных напитков. Указанные ингредиенты можно применять независимо или в сочетании. Хотя соотношение добавок не имеет значения, в целом такое соотношение выбирают в диапазоне от 0,01 до 0,1 частей по массе на 100 частей по массе композиции согласно настоящему описанию.
[0070] В составе напитка, содержащего активный ингредиент согласно настоящему изобретению, содержание других ингредиентов, за исключением белка, конкретным образом не ограничено, и, по аналогии с обычным напитком, в качестве дополнительного ингредиента могут содержаться различные ароматизаторы или природные углеводы или им подобные. Примеры природных углеводов включают обычные сахара, такие как моносахариды (например, глюкоза, фруктоза и им подобные); дисахариды (например, мальтоза, сахароза и им подобные); и полисахариды (например, декстрин, циклодекстрин и им подобные) и сахарные спирты, такие как ксилит, сорбит и эритрит. В качестве ароматизаторов, отличных от приведенных выше примеров, преимущественным образом можно применять природные ароматизаторы (тауматин, экстракт стевии (например, ребаудиозид А, глицирризин и т.п.) и синтетические ароматизаторы (сахарин, аспартам и им подобные).
[0071] Далее настоящее изобретение будет более подробно описано с помощью примеров и примеров исследований. Тем не менее, следующие примеры и примеры исследований приведены в качестве примеров для более доступного понимания настоящего изобретения, и содержание настоящего описания не ограничено примерами, и в этом случае применяемые технические термины и научные термины в целом понятны для специалистов в данной области техники, если другое определение отсутствует.
[0072] Пример 1. Получение CXCL1
[0073] Белок хемокинового лиганда 1, содержащего С-Х-С мотив (CXCL1), был приобретен у компании Peprotech. Результат анализа аминокислотной последовательности и последовательности оснований ДНК полученного белка CXCL1 представлен SEQ ID №: 1 и SEQ ID №: 2.
[0074] Пример 2. Подтверждение эффекта пролиферации клеток CXCL1
[0075] Проводили исследование на определение пролиферации клеток дермального гребня человека (DPC), которое представляло собой обычную клеточную тест-систему in vitro для измерения пролиферации волос.DPC обрабатывали 1 нг/мл или 5 нг/мл белка CXCL1 из Примера 1, измеряли пролиферацию в течение 40 часов, и результат представлен на Фиг. 1.
[0076] Как представлено на Фиг. 1, подтвердилось, что в случае, когда DPC обрабатывали белком CXCL1, пролиферация клеток увеличивалась по сравнению с клетками, которые не подвергались обработке белком CXCL1.
[0077] Результат подтвердил, что белок CXCL1 обладает превосходным эффектом пролиферации клеток, который можно применять для лечения выпадения волос или стимулирования роста волос.
[0078] Пример 3. Подтверждение эффекта образования волос CXCL1
[0079] Для исследования подтверждения эффекта образования волос, спинку мыши С3Н/HeN в возрасте 7 недель стабилизировали путем удаления волос с применением средства для удаления волос. Через один день 100 мкг/мл белка хемокинового лиганда 1 человека, содержащего С-Х-С мотив (CXCL1) (SEQ ID NO: 1), один раз подкожно инъецировали в спинку. В качестве контроля в том же объеме подкожно инъецировали фосфатно-буферный солевой раствор (ФСБ), содержащий 0,1% бычий сывороточный альбумин (BSA), лизированный белком CXCL1. После этого в течение 15 дней отслеживали и наблюдали за образованием волос на спинке у мыши с удаленными волосами. Фотография отслеживания и наблюдения за спинкой мыши с образованными волосами представлена на Фиг. 2.
[0080] Как представлено на Фиг. 2, было подтверждено, что наблюдалось превосходное образование волос в группе, получавшей лечение белком CXCL1, по сравнению с контролем.
[0081] Кроме того, через 15 дней волосы со спинки такой мыши со вновь образованными волосами удаляли с применением ножа, и результат измерения массы полученных волос представлен на Фиг. 3.
[0082] Как представлено на Фиг. 3, измеряемая масса волос в контроле составляла 40 мг, тогда как в группе, получавшей лечение белком CXCL1, она составляла 80 мг, и в результате было подтверждено, что в случае группы, получавшей лечение белком CXCL1, наблюдался превосходный эффект стимулирования образования волос.
[0083] Результат подтвердил, что ингредиент, представляющий собой белок CXCL1, обладал превосходным эффектом образования волос, и его применяли в качестве композиции для предотвращения или лечения выпадения волос.
[0084] Далее будут описаны Примеры получения фармацевтической композиции для предотвращения или лечения выпадения волос и косметической композиции и пищевой композиции для предотвращения или улучшения выпадения волос и содействия или стимулирования образования волос или роста волос, содержащих активный ингредиент согласно настоящему описанию, однако настоящее описание ими не ограничивается, но будет подробно описано.
[0085] Пример получения 1. Получение фармацевтического состава
[0086] 1. Получение порошка
Белок CXCL1 20 мг
Лактоза 100 мг
Тальк 10 мг
[0087] Ингредиенты смешивали и упаковывали в герметичный мешок для получения указанного порошка.
[0088] 2. Получение таблетки
Белок CXCL1 10 мг
Кукурузный крахмал 100 мг
Лактоза 100 мг
Стеарат магния 2 мг
[0089] Ингредиенты смешивали и придавали форму таблетки согласно общепринятому способу получения таблеток для получения указанной таблетки.
[0090] 3. Получение капсулы
Белок CXCL1 10 мг
Кристаллическая целлюлоза 3 мг
Лактоза 14,8 мг
Стеарат магния 0,2 мг
[0091] Ингредиенты смешивали и наполняли ими желатиновую капсулу согласно общепринятому способу получения капсул для получения указанной капсулы.
[0092] 4. Получение инъекции
Белок CXCL1 10 мг
Маннитол 180 мг
Стерильная дистиллированная вода для инъекций 2974 мг
2
4
2
NaHPO2HO 26 мг
[0093] Инъекцию получали с содержанием ингредиентов на ампулу (2 мл) согласно общепринятому способу получения инъекции.
[0094] 5. Получение жидкого раствора
Белок CXCL1 20 мг
Изомеризованная глюкоза 10 г
Маннит 5 г
Подходящее количество очищенной воды
[0095] Согласно общепринятому способу получения жидкого раствора соответствующие ингредиенты добавляли в очищенную воду и растворяли, добавляли подходящее количество ароматизатора «лимон» и смешивали, и затем добавляли очищенную воду, чтобы довести объем до полных 100 мл, и затем ею наполняли темную бутыль из желтого стекла и стерилизовали для получения указанного жидкого раствора.
[0096] Пример получения 2. Получение косметического состава
[0097] 1. Получение лосьона для волос
Белок CXCL1 0,6 масс. %
Глицерин 5,1 масс. %
Пропиленгликоль 4,2 масс. %
Токоферил ацетат 3,0 масс. %
Жидкий парафин 4,6 масс. %
Триэтаноламин 1,0 масс. %
Сквалан 3,1 масс. %
Масло ореха макадамии 2,5 масс. %
Полисорбат 60 1,6 масс. %
Сорбитана сесквиолеат 1,6 масс. %
Пропилпарабен 0,6 масс. %
Карбоксилвиниловый полимер 1,5 масс. %
Следовое количество душистого вещества
Следовое количество антисептического агента
Оставшееся количество очищенной воды
[0098] 2. Получение крема для волос
Белок CXCL1 1,0 масс. %
Глицерин 4,0 масс. %
Вазелин 3,5 масс. %
Триэтаноламин 2,1 масс. %
Жидкий парафин 53 масс. %
Сквалан 3,0 масс. %
Воск 2,6 масс. %
Токоферил ацетат 5,4 масс. %
Полисорбат 60 3,2 масс. %
Карбоксилвиниловый полимер 1,0 масс. %
Сорбитана сесквиолеат 3,1 масс. %
Следовое количество душистого вещества
Следовое количество антисептического агента
Оставшееся количество очищенной воды
[0099] 3. Получение шампуня для волос
Белок CXCL1 5,8 масс. %
Лаурилсульфат натрия 35 масс. %
Глицерин 1 масс. %
Лаурамид DEA 3,5 масс. %
Пропиленгликоль 1 масс. %
Кокамидопропилбетаин 1 масс. %
Цетиловый спирт 0,1 масс. %
Дистеарат гликоля 0,5 масс. %
Бутиленгликоль 8 масс. %
Метилпарабен 0,2 масс. %
Триэтаноламин 0,1 масс. %
Лимонная кислота 0,1 масс. %
Поликватерний-7 0,2 масс. %
Поликватерний-10 0,12 масс. %
Сложный эфир оливкового масла фиджи-7 0,2 масс. %
Следовое количество душистого вещества
Следовое количество антисептического агента
Оставшееся количество очищенной воды
[00100] Пример получения 3. Получение пищевого состава
[00101] 1. Получение оздоровительного пищевого продукта
Белок CXCL1 100 мг
Подходящее количество смеси витаминов
Витамина А-ацетат 70 г
Витамин Е 1,0 мг
Витамин В1 0,13 мг
Витамин В2 0,15 мг
Витамин В6 0,5 мг
Витамин В12 0,2 г
Витамин С 10 мг
Биотин 10 г
Никотинамид 1,7 мг
Фолиевая кислота 50 г
Пантотенат кальция 0,5 мг
Подходящее количество смеси минералов
Сульфат железа 1,75 мг
Оксид цинка 0,82 мг
Карбонат магния 25,3 мг
Однозамещенный фосфат калия 15 мг
Двузамещенный фосфат калия 55 мг
Цитрат калия 90 мг
Карбонат кальция 100 мг
Хлорид магния 24,8 мг
[00102] Соотношение в композиции смеси витаминов и минералов устанавливали путем смешивания относительно подходящих для оздоровительного пищевого продукта ингредиентов, но соотношение для смешивания можно произвольным образом модифицировать. Согласно общепринятому способу получения оздоровительных пищевых продуктов указанные ингредиенты смешивали для получения гранул, и их можно применять для получения оздоровительной пищевой композиции согласно общепринятому способу.
[00103] 2. Получение оздоровительного напитка
Белок CXCL1 100 мг
Витамин С 15 г
Витамин Е (порошок) 100 г
Лактат железа 19,75 г
Оксид цинка 3,5 г
Никотинамид 3,5 г
Витамин А 0,2 г
Витамин В1 0,25 г
Витамин В2 0,3 г
Вода в необходимом количестве
[00104] Согласно общепринятому способу получения оздоровительных напитков указанные ингредиенты смешивали, перемешивали и нагревали в течение примерно 1 часа' при 85°С, полученный раствор фильтровали с получением его в стерилизованной емкости объемом 2 л, стерилизовали после герметизации и охлаждали, и затем применяли для получения композиции оздоровительного напитка согласно настоящему описанию.
[00105] Соотношение компонентов в композиции устанавливали путем смешивания ингредиентов, относительно подходящих для предпочтительного напитка, но соотношение для смешивания можно произвольным образом модифицировать и реализовать на практике в зависимости от региональных и национальных предпочтений, как, например, спроса со стороны слоев населения, страны спроса и цели применения.
[00106] Из вышесказанного будет понятно, что в настоящем документе для целей иллюстрации были описаны различные варианты реализации настоящего описания, и что могут быть сделаны различные модификации без отклонения от объема и сущности настоящего описания. Соответственно, различные варианты реализации, описанные в настоящем документе, не предназначены для ограничения, при этом истинный объем и сущность указаны в следующей формуле изобретения.