Антибиотикорезистентность облигатно-анаэробных бактерий, ассоциированных с бактериемией

БЛАСТОЦИСТНАЯ ИНВАЗИЯ:

ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ СВЯЗЬ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ КОЖИ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Учитывая выявленную ассоциацию между заболеваниями кожи и бластоцистозом, представляется целесообразным и актуальным детальное изучение возможных причинно-следственных связей между эти-

ми состояниями в проспективных когортных исследованиях.

В то же время очевидно, что больные хроническими дерматозами могут рассматриваться как группа риска инвазирования патогенными бластоцистами и как потенциальный резервуар бластоцистной инвазии.

ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES:_____________________________________________________________________________________________________

1. Tan KS. New insights on classification, identification, and clinical relevance of Blastocystis spp. Clin Microbiol Rev. 2008; 21: 639-665.

2. Boorom KF, Smith H, Nimri L et al. Oh my aching gut: irritable bowel syndrome, Blastocystis, and asymptomatic infection. Parasit Vectors. 2008; 1: 40.

3. Zuel-Fakkar NM, Abdel Hameed DM, Hassanin OM. Study of Blastocystis hominis isolates in urticaria: a case-control study. Clin Exp Dermatol. 2011

Dec; 36(8): 908-910. doi: 10.1111/j.1365-2230.2011.04127.x. Epub 2011 Jul 25.

4. Hameed DM, Hassanin OM, Zuel-Fakkar NM. Association of Blastocystis hominis genetic subtypes with urticaria. Parasitol Res. 2011 Mar; 108(3): 553-560. doi: 10.1007/s00436-010-2097-2. Epub 2010 Oct 5.

5. Balint A, Doczi I, Bereczki L, Gyulai R, Szucs M, Farkas K, Urban E, Nagy F, Szepes Z, Wittmann T, Molnar T. Do not forget the stool examination!-cutaneous and gastrointestinal manifestations of Blastocystis sp. infection. Parasitol Res. 2014 Apr; 113(4): 1585-1590. doi: 10.1007/s00436-014-3805-0. Epub 2014 Feb 20.

6. Duda A, Kosik-Bogacka D, Lanocha-Arendarczyk N, Kobdziejczyk L, Lanocha A. The prevalence of Blastocystis hominis and other protozoan parasites in soldiers returning from peacekeeping missions. Am J Trop Med Hyg. 2015 Apr; 92(4): 805-806. doi: 10.4269/ajtmh.14-0344. Epub 2015 Mar 2.

7. Lee L, Chye T, Karmacharya B, Govind S. Blastocystis: waterborne zoonotic organism, a possibility? Parasit Vectors. 2012; 5: 130.

8. Parkar U, Traub R, Vitali S, Elliot A, Levecke B, Robertson I et al. Molecular characterization of Blastocystis isolates from zoo animals and their animal-keepers. Vet. Parasitol. 2010; 169: 8-17.

9. Leelayoova S, Siripattanapipong S, Thathaisong U, Naaglor T, Taamasri P, Piyaraj P et al. Drinking water: a possible source of Blastocystis spp. subtype 1 infection in schoolchildren of a rural community in central Thailand. Am J Trop Med Hyg. 2008; 79: 401-406.

10. Kurniawan A, Karyadi T, Dwintasari S, Sari I, Yunihastuti E, Djauzi S et al. Intestinal parasitic infections in HIV/AIDS patients presenting with diarrhoea in Jakarta, Indonesia. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2009; 103: 892-898.

11. Tan K. New insights on classification, identification, and clinical relevance of Blastocystis spp. Clin Microbiol Rev. 2008; 21: 639-665.

12. Tan K, Mirza H, Teo J, Wu B, Macary P. Current views on the clinical relevance of Blastocystis spp. Curr Infect Dis Rep. 2010: 12: 28-35.

13. Sciluna, Tawari and Clark: DNA barcoding of Blastocystis.Protist. 2006 Feb; 157(1): 77-85. Epub 2006 Jan 23.

14. Souppart L, Sanciu G, Cian A, Wawrzyniak I, Delbac F, Capron M, Dei-Cas E, Boorom K, Delhaes L, Viscogliosi E. Molecular epidemiology of human Blastocystis isolates in France. Parasitol Res. 2009 Aug; 105(2): 413-21.

15. Balint A, Doczi I, Bereczki L, Gyulai R, Szucs M, Farkas K, Urban E, Nagy F, Szepes Z, Wittmann T, Molnar T. Do not forget the stool examination!-cu-taneous and gastrointestinal manifestations of Blastocystis sp. infection. Parasitol Res. 2014 Apr; 113(4): 1585-1590. doi: 10.1007/s00436-014-3805-0.

16. Hameed DM, Hassanin OM, Zuel-Fakkar NM. Association of Blastocystis hominis genetic subtypes with urticarial. Epub 2014 Feb 20. Parasitol Res. 2011 Mar; 108(3): 553-560. doi: 10.1007/s00436-010-2097-2.

17. Potaturkina-Nesterova NI, Nesterov AS, Magomedov MA, Magomedova GM, Nemova IS, Lazorev AM, Kurzin AV. Intestinal inflammation effect on chronic dermatosis. Falk Symposium «Intestinal Disorders». Budapest (Hungary), 2-3 May 2008; 14: 26.

a

Статья поступила в редакцию 18.08.2015 г.

Сухина М.А., Жуховицкий В.Г., Селькова Е.П.

Государственный научный центр колопроктологии им. А.Н. Рыжих, Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф. Гамалеи, Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского,

г. Москва

АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕ.НТНЮСТБ облигатно-анаэробных БАКТЕРИЙ, ассоциированных С БАКТЕРИЕМИЕЙ

Предмет исследования. Облигатно анаэробные бактерии являются доминирующей микрофлорой человеческого тела. Достаточно часто они служат основной причиной возникновения заболевания или фактором, отягчающим его течение. Патология, вызванная анаэробными бактериями, нередко носит крайне тяжелый характер, сопровождаясь обширной гибелью тканей, токсикозом, органопатологией. Смешанный характер анаэробно-аэробной микрофлоры часто делает выбор антибактериальных препаратов трудной проблемой, при этом часто облигатно анаэробные бактерии устойчивы к действию многих антибактериальных препаратов.

48

T. 14 № 4 2015

Medicine

in Kuzbass

ОЛ&Эицина

в Кузбассе

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Цель исследования - изучение резистентности к антибактериальным препаратам облигатно анаэробных бактерий в крови при клиническом диагнозе «сепсис(?)».

Методы исследования. Было изучено 2626 проб крови от пациентов реанимационного, хирургического и гематологического стационаров многопрофильной больницы.

Основные результаты. Изолировано 1528 культур аэробных, факультативно-анаэробных и облигатно-анаэробных бактерий. Общая высеваемость составила 58,2 %. Из 1313 образцов крови, исследованных на анаэробную инфекцию, выделено 66 культур облигатно анаэробных микроорганизмов, высеваемость облигатных анаэробов составила 5 %. Оценка чувствительности изолированных облигатно анаэробных бактерий осуществлялась к 13 антибактериальным препаратам, наиболее часто применяемым в клинической практике для лечения анаэробной инфекции. Резистентными к антибактериальным препаратам, традиционно используемым в клинической практике для лечения анаэробной инфекции, оказались 32,6 % всех изолированных культур облигатно анаэробных бактерий. Резистентность к метронидазолу проявили 19,4 % штаммов облигатно анаэробных бактерий.

Область их применения. В 5 % случаев бактериемия, сопутствующая клиническому диагнозу «сепсис(?)», ассоциирована с облигатно анаэробными бактериями. Доминирующая роль принадлежит грамположительным облигатно анаэробным бактериям (79,6 %).

За последние несколько лет чувствительность облигатно анаэробных бактерий к антибактериальным препаратам существенно изменилась. Особое внимание заслуживает рост устойчивости анаэробов к наиболее часто используемым антибактериальным препаратам: метронидазолу, клиндамицину, имипенему, цефепиму.

Заключение. Высокие темпы роста резистентности облигатно анаэробных бактерий к обычно используемым антианаэробным препаратам определяют необходимость мониторинга резистентности анаэробов.

Ключевые слова: облигатно анаэробные бактерии; антибиотикорезистентность; антибактериальные препараты; бактериемия.

Sukhina M.A., Zhukhovitsky V.G., Selkova E.P.

State Research Center of Coloproctology names Ryzhikh A.N,

Moscow Research Institute of Epidemiology and Microbiology names Gabrichevskogo G.N,

Federal Research Centre for Epidemiology and Microbiology names Gamalei N.F, Moscow ANTIBIOTIC RESISTANCE OBLIGATELY ANAEROBIC BACTERIA ASSOCIATED WITH BACTEREMIA Objective - obligated anaerobic bacteria are the dominant microflora of the human body. Quite often, they are the primary cause of the disease or an aggravating factors. Pathology caused by anaerobic bacteria, often is very difficult behavior, followed by extensive destruction of tissue toxicity, organopathology. The mixed behavior of anaerobic-aerobic microflora often makes the choice of antimicrobials difficult problem, often obligated anaerobic bacteria is resistant to many antibiotics. Methods. The purpose of this study was to evaluate antimicrobial resistance obligated anaerobic bacteria in the blood in the clinical diagnosis of «sepsis(?)». 2626 has been studied of blood samples from patients intensive care, surgical and hospital hematology multifield hospital.

Results. 1528 isolated cultures of aerobic, facultative anaerobic and obligate anaerobic bacteria. Total sowing ability was 58,2 %. Of 1313 blood samples tested for anaerobic infections isolated 66 cultures obligated anaerobes whereas obligated anaerobes sowing ability was 5 %. Evaluation of the sensitivity of isolated obligated anaerobic bacteria was carried out to 13 antimicrobial agents most commonly used in clinical practice for the treatment of anaerobic infections resistant to antibiotics traditionally used in clinical practice for the treatment of anaerobic infections, were 32,6 % of isolated cultures of obligated anaerobic bacteria. Resistance to metronidazole have shown 19,4 % of the strains of obligated anaerobic bacteria. In 5 % of cases of bacteremia along with clinical diagnosis of «sepsis(?)» is associated with obligated anaerobic bacteria. The dominant role is played by Gram-positive obligated anaerobic bacteria (79,6 %).

In the last few years the sensitivity of obligated anaerobic bacteria to antibiotics has changed considerably. Special attention must be given to the growth of anaerobes resistance to commonly used antimicrobial agents: metronidazole, clindamycin, imi-penem, cefepime.

Conclusions. High growth rates of obligate anaerobic bacteria resistant to commonly used anti-anaerobic drugs determine the need for monitoring resistance of anaerobes.

Key words: obligate anaerobic bacteria; antibiotic resistance; antibacterial agents; bacteremia.

По данным разных авторов, на долю анаэробных бактериемий приходится от 0,3 % до 11 % случаев выделения из гемокультуры облигатно анаэробных микроорганизмов [1-3]. Обязательным компонентом терапии анаэробной инфекции является проведение направленной и адекватной антибиотикотерапии, а идеальным условием, повышающим его эффективность, считается знание свойств возбудителя и его чувствительности к антибактериальным средствам. Достижение вышеуказанных условий в

Корреспонденцию адресовать:

СУХИНА Марина Алексеевна,

123423, г. Москва, ул. Саляма Адиля, д. 2. Тел.: 8 (499) 199-84-44; +7-926-838-99-27. E-mail: marinamari272015@gmail.com

клинической практике зачастую не представляется возможным. Сложность выделения, идентификация и определение чувствительности к антибактериальным препаратам облигатно анаэробных бактерий является ведущим фактором, ограничивающим микробиологический мониторинг анаэробной инфекции.

В мировой литературе в последние годы приводятся данные о росте антибиотикорезистентности микроорганизмов к часто используемым антианаэробным препаратам. Резистентность к метронидазолу среди грампозитивных спорообразующих анаэробов рода Clostridium spp. достигает 36 %, среди грампозитив-ных анаэробных кокков рода Peptostreptococcus — 12 % [4-6]. Опираясь на мировой опыт, к сожалению, приходится констатировать, что в медицинских учреждениях даже микробиологи мало уделяют внима-

ОК{едицина

в Кузбассе

Medicine

in Kuzbass

T. 14 № 4 2015

1

49

АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОБЛИГАТНО-АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С БАКТЕРИЕМИЕЙ

ния изучению чувствительности облигатно анаэробных бактерий к антимикробным препаратам.

В клиниках России дело обстоит не лучше. Более того, если в США и Европе составлены и используются соответствующие распорядительные документы (стандарты), содержащие критерии чувствительности (устойчивости) некоторых облигатных анаэробов к антибиотикам, то в России до настоящего времени регламентирующие документы не приняты и, соответственно, не применяются. Такая ситуация вызывает озабоченность у медицинской общественности, так как облигатно анаэробные бактерии, являясь доминирующей микрофлорой человеческого тела, достаточно часто служат основной причиной возникновения заболевания или фактором, отягчающим его течение. Патологические состояния, обусловленные анаэробными бактериями, нередко носят крайне тяжелый характер, сопровождаясь обширной гибелью тканей, токсикозом, органопатологией. Смешанный характер анаэробно-аэробной микрофлоры преобладающий в последние годы среди возбудителей, затрудняет выбор антибактериальных препаратов. Кроме того, в последние годы проблема адекватной терапии таких состояний осложняется также тем, что анаэробные бактерии могут быть устойчивы к действию многих антибактериальных препаратов.

Цель работы — анализ резистентности к антибактериальным препаратам облигатно анаэробных бактерий в крови при клиническом диагнозе «сепсис(?)».

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследовано 2626 проб крови от пациентов реанимационного, хирургического и гематологического стационаров ГКБ им. С.П. Боткина г. Москва. Образцы венозной крови 1313 больных с клиническим диагнозом «сепсис(?)» инкубировались одновременно в аэробных и анаэробных условиях на средах BD Bactec Aerobic Plus/F и BD Bactec Anaerobic Plus/F, соответственно, в режиме бактериологического анализатора «Bactec 9120». Материал гемокультур высевался на кровяной агар (Blood Agar c 5 % эритроцитов баранов); агар для выделения анаэробов (Anaerobic agar), и культивировался в анаэробных условиях при 37°С в течение 48 часов. Идентификация и оценка чувствительности (резистентности) к антибиотикам выполнялись с помощью бактериологического анализатора miniAPI с использованием тест-систем «rapid ID 32A», «API 20A», «ATB ANA». Исследование чувствительности анаэробных бактерий проводилось в соответствии с рекомендациями NCCLS/CLSI с определением МПК методом разведений в агаре (Бру-

целла агар) с добавлением гемина (5 мкг/мл), витамина K1 (1 мкг/мл) и лизированной бараньей крови (итоговая концентрация — 5 %).

Все этапы исследования облигатно анаэробной микрофлоры осуществлялись в условиях анаэробной рабочей станции Bactron, позволяющей проводить все этапы исследования в условиях постоянного анаэробиоза — от первичного посева до идентификации и изучения антибиотикорезистентности, что исключает гибель анаэробных бактерий.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Из 2626 образцов крови выделено 1528 культур аэробных, факультативно-анаэробных и облигатноанаэробных бактерий. Общая высеваемость составляет 58,2 %. Из 1313 образцов крови исследованных на анаэробную инфекцию выделено 66 культур об-лигатно анаэробных микроорганизмов. Высеваемость облигатных анаэробов в нашем исследовании составила 5 %. Доступные методики фенотипической идентификации не позволили идентифицировать 17 культур ОАБ (25,7 % от общего их числа), материал 6-ти из которых (35,2 % от общего числа неидентифицированных культур) составляли грампозитивные палочки, 5-ти (29,4 %) — грампозитивные кокки, 5-ти (29,4 %) — грамнегативные палочки, одной (6 %) — грамнегативные кокки. Среди 49-ти идентифицированных культур ОАБ (74,3 %) ведущая роль (табл. 1) принадлежит грампозитивной облигатно анаэробной микрофлоре (79,6 %). На долю грамнегативных приходится 20,4 % (10). От общего числа ОАБ 21 культура (42,9 %) была отнесена к роду Clostridium и идентифицированы как C. perfringens (4 культуры), C. sphenoides (1), C. acetobutilicum (2), C. fallax (1), C. clostridioforme (1), C. histolyticum (3), C. tertium (2), C. parasputrificum (2), C. butiricum (3), C. nov-yi (1), C. sordellii (1). Прочие 18 культур грампози-тивных ОАБ были идентифицированы как Eggerthel-la lenta (1), Eubacterium lentum (2), E. sabureum (2), Actinomyces naeslundii (1), Bifidobacterium breve (1), Propionebacterium avidum (1), Propionibacterium ac-nes (5), Peptostreptococcus anaerobius (1), Anaerococ-cus prevotii (1), Peptococcus niger (2), P. sacharolyti-cus (1). У 10 культур грамнегативных ОАБ (20,4 %) были идентифицированы Bacteroides fragilis (3), B. ure-alyticus (4), Veilonella spp. (3).

В 1997 г. внесены изменения в стандартные методы по определению чувствительности анаэробных бактерий. Выявленные тенденции роста антибиотикорезистентности возбудителей анаэробных инфекций позволили выработать основные показания к определению их чувствительности для мониторинга ло-

Сведения об авторах:

СУХИНА Марина Алексеевна, канд. биол. наук, руководитель отдела микробиологических и иммунологических исследований, ФГБУ «ГНЦК им. А.Н. Рыжих» Минздрава России, г. Москва, Россия. E-mail: marinamari272015@gmail.com

ЖУХОВИЦКИЙ Владимир Григорьевич, канд. мед. наук, зав. лабораторией микробиологии латентных инфекций, ФГБУ «ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, г. Москва, Россия.

СЕЛЬКОВА Евгения Петровна, доктор мед. наук, зам. директора по клинико-эпидемиологической работе, ФБУН «МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, г. Москва, Россия.

50

T. 14 № 4 2015 MediciinnLass

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Таблица 1

Спектр облигатно анаэробных бактерий, ассоциированных с бактериемией Table 1

Spectrum obligate anaerobic bacteria associated with bacteremia

Микроорганизм % выделения

Грампозитивные облигатно анаэробные бактерии 79,6 %

Грампозитивные Clostridium tertium 20 %

спорообразующие Clostridium histoliticum 15

облигатно анаэробные бактерии 53,8% (21) Clostridium sordellii 10 %

Clostridium parasputrificum 10 %

Clostridium fallax 10

Clostridium acetobutylicum 10

Clostridium butyricum 5 %

Clostridium novyi 5 %

Clostridium clostridioforme 5

Clostridium perfringens 5 %

Грампозитивные Propionibacterium spp 35,3 %

неспорообразующие Eubacterium spp 23,5 %

облигатно анаэробные бактерии 46,2% (18) Peptococcus spp 11,7 %

Eggerthella lenta 5,9 %

Actinomyces naeslundii 5,5 %

Bifidobacterium spp 5,9 %

Anaerococcus spp 5,5 %

Peptostreptococcus spp 6,7 %

Грамнегативные облигатно анаэробные бактерии 20,4 %

Грамнегативные облигатно Bacteroides spp 70 %

анаэробные бактерии Veilonella spp 30 %

кальных и региональных тенденций резистентности. Это позволило более рационально проводить эмпирический выбор антибиотиков, выявлять резистентность к новым антибактериальным препаратам, а также оценивать возможность их использования в клинической практике.

Для оценки чувствительности изолированных об-лигатно анаэробных бактерий к антибактериальным препаратам в исследовании были использованы 13 антибактериальных препаратов, наиболее часто применяемых в клинической практике для лечения анаэробной инфекции. Спектр чувствительности изолированных облигатно анаэробных микроорганизмов к антибактериальным препаратам распределялся следующим образом (табл. 2).

Из общего числа всех изолированных облигатно анаэробных бактерий культур 32,6 % характеризовались как резистентные к традиционно используемым в клинической практике для лечения анаэробной инфекции. Большинство штаммов из этой группы мик-

роорганизмов (62,5 %) сохраняли чувствительность к указанным антибактериальным препаратам, 4,9 % культур расценивались как микроорганизмы с промежуточной чувствительностью.

По нашим данным установлено, что наиболее эффективными антибактериальными препаратами с выраженной антибактериальной активностью в отношении облигатно анаэробных микроорганизмов являются пиперациллин/тазобактам, тикарцил-лин/клавуланат и имипенем (75 %). 19,4 % штаммов облигатно анаэробных бактерий были резистентны к метронидазолу. В исследовании выявлен рост резистентности среди анаэробов к антибактериальным препаратам. Резистентные штаммы облигатно анаэробных бактерий, ассоциированные с бактериемией, встречались с разной частотой: более 50 % по отношению к азитромицину (54,5 %), более 40 % — к аммоксициллину (42 %). Выявлен высокий процент резистентных культур анаэробов по отношению к пенициллинам (38,9 %), пиперациллину (30 %), амоксоциллину/клавуланату (35,5 %), тикарцил-лину (36,8 %), цефалоспоринам с антианаэробной активностью — цефотаксим (32,3 %), цефепиму (38,7 %), 1/4 всех изолированных анаэробов резистентна к действию имипенема. Более 1/3 штаммов (35,5 %) облигатно анаэробных бактерий резистентны к клиндамицину, 19,4 % культур резистентны к действию метронидазола, позиционируемому как основной антианаэробный препарат. Последние десятилетия все чаще регистрируются штаммы с устойчивостью к нитроимидазолам.

Выявленная тенденция приводит к выводу, что необходимо применять препараты, считавшиеся ранее средствами, обладающими безусловной антибактериальной активностью, с обязательным проведением тестирования антибиотикорезистентности облигатно анаэробных микроорганизмов к антианаэробным препаратам.

Облигатно анаэробные бактерии резистентны к азитромицину (54,5 %), амоксициллину (42 %). Одинаковая частота встречаемости резистентных штаммов анаэробов наблюдалась к пенициллинам (38,9 %), тикарциллину (36,8 %), цефепиму (38,7 %), цефо-таксиму (32,3 %), реже в отношении к защищенным Р-лактамным антибактериальным препаратам: амок-сициллин/клавулановая кислота (35,5 %), тикар-циллин/клавулановая кислота (20 %), к пиперацил-лин/тазобактаму (10 %). К имипенему были резистентны 25 % выделенных из гемокультуры облигат-но анаэробных бактерий.

Обращает на себя внимание рост резистентных культур анаэробов к метронидазолу (19,4 %) и клин-дамицину (35,5 %). Резистентность анаэробных мик-

Information about authors:

SUKHINA Marina Alekseevna, candidate of biological sciences, head of department microbiological and immunological studies, State Research Center of Coloproctology names Ryzhikh A.N., Moscow, Russia. E-mail: marinamari272015@gmail.com

ZHUKHOVITSKY Vladimir Grigoryevich, candidate of medical sciences, head of the laboratory of microbiology of latent infections, Federal Research Centre for Epidemiology and Microbiology names Gamalei N.F., Moscow, Russia.

SELKOVA Evgenia Petrovna, doctor of medical sciences, deputy director for clinical and epidemiological work, Moscow Research Institute of Epidemiology and Microbiology of Gabrichevsky G.N., Moscow, Russia.

ОК{вдицина

в Кузбассе

Medicine

in Kuzbass

T. 14 № 4 2015

51

АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОБЛИГАТНО-АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С БАКТЕРИЕМИЕЙ

Таблица 2

Чувствительность к антибактериальным препаратам облигатно анаэробных бактерий, ассоциированных с бактериемией

Table 2

Sensitivity to antibiotics obligate anaerobic bacteria associated with bacteremia

Антибактериальные препараты

Пенициллин G 0,5-2 мг/мл 38,9 50,0 11,1

Амоксициллин 42,0 54,8 3,2

Амоксициллин/клавуланат 35,5 61,3 3,2

Пиперациллин 30,0 70,0 0

Пиперациллин + тазобактам 10,0 80,0 10,0

Тикарциллин/клавуланат 20,0 75,0 5,0

Имипенем 25,0 75,0 0

Клиндамицин 35,5 74,2 6,4

Метронидазол 19,4 74,2 6,4

Цефотаксим 32,3 61,3 0

Цефепим 38,7 63,2 0

Тикарциллин 36,8 63,2 0

Азитромицин 54,5 36,4 9,1

ИТОГО: 32,6 62,5 4,9

роорганизмов к нитроимидазолам — редкое явление. По данным исследований в США, не было зарегистрировано штаммов Bacteroides fragilis, резистентных к метронидазолу или орнидазолу (МПК > 16 мкг/мл). В Европе еще в 90-х годах прошлого столетия упоминалось о существовании единичных резистентных к метронидазолу штаммов грамнегативных облигатно анаэробных бактерий [6-8]. Известно, что устойчивость к метронидазолу более характерна для грампо-ложительных анаэробов, включая большинство штаммов Propionibacterium acnes, Actinomyces spp., а также некоторые штаммы лактобактерий и анаэробных стрептококков [6, 9]. Спектр чувствительности к ан-

тибактериальным препаратам грампозитивных спорообразующих облигатно анаэробных бактерий рода Clostridium представлен на рисунке.

Более 70 % исследованных штаммов спорообразующих грампозитивных облигатно анаэробных бактерий рода Clostridium чувствительны к пиперацил-лину (72,7 %), пиперациллину/тазобактаму (81,8 %), метронидазолу (80 %). Резистентными к метронидазолу оказались 20 % штаммов Clostridium spp. Выявлена низкая активность антибактериальных препаратов по отношению к представителям рода Clostridium, которая наблюдалась у пенициллинов (40 %), цефалоспоринов (цефепима — 42,9 %) и макроли-

Таблица 3

Спектр антибиотикочувствительности штаммов облигатно анаэробных неспорообразующих грампозитивных бактерий

Table 3

Spectrum antibiotic susceptibility strains obligate anaerobic gram-positive bacteria nonsporeforming

Антибактериальные препараты

Пенициллин G 0,5-2 мг/мл 0 75 25

Амоксициллин 0 75 25

Амоксициллин/клавуланат 75 25 0

Пиперациллин 75 25 0

Пиперациллин + тазобактам 62,5 37,5 0

Тикарциллин/клавуланат 33,3 66,7 0

Имипенем 100 0 0

Клиндамицин 100 0 0

Метронидазол 100 0 0

Цефотаксим 25 75 0

Цефепим 62,5 37,5 0

Тикарциллин 57,1 42,9 0

Азитромицин 62,5 37,5 0

ИТОГО: 33,3 66,7 0

52

T. 14 № 4 2015 MediciinnLass

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Рисунок

Спектр чувствительности к антибактериальным препаратам штаммов в популяции облигатно-анаэробных бактерий рода Clostridium spp.

Figure

Spectrum sensitivity to antibiotics strains in the population of obligate anaerobic bacteria of the genus Clostridium spp.

Азитромицин Тикарциллин Цефепим Цефотаксим Метронидазол Клиндамицин Имипенем Тикарциллин/ клавуланат Пиперациллин+ тазобактам Пиперациллин Амоксициллин/клавуланат Амоксициллин Пенициллин G 0,5-2 мг/мл

ЕЗ

Резистентные

Чувствительные

Промежуточная чувствительность

дов (азитромицина — 20 %). Более 50 % штаммов спорообразующих облигатно анаэробных бактерий резистентны к указанным антибактериальным препаратам.

Спектр антибиотикочувствительности неспорообразующих грампозитивных облигатных анаэробов представлен в таблице 3.

Все неспорообразующие грампозитивные облигатно анаэробные бактерии (Propionibacterium ssp., Eu-bacterium ssp., Bifidobacterium breve, Actinomyces na-eslundii), ассоциированные с бактериемией, резистентны к пиперациллин/тазобактаму, тикарциллину с клавулановой кислотой, имипенему. Большинство представителей грампозитивных облигатно анаэробных бактерий резистентны к метронидазолу (62,5 %), основная масса среди них — представители рода Pro-pionebacterium, имеющие природную резистентность к упомянутому препарату. Высокую устойчивость неспорообразующие грампозитивные облигатно анаэробные бактерии проявляли к цефалоспоринам (к це-

фепиму — 62,5 %). Природные пенициллины сохраняют активность в отношении неспорообразующих грампозитивных облигатно анаэробных бактерий (пенициллины — 75 % чувствительны).

Грамнегативные анаэробы сохраняли высокую чувствительность к антибактериальным препаратам (74,1 %), используемым в терапии анаэробной инфекции. Спектр чувствительности к антибактериальным препаратам представителей рода Bacteroides представлен в таблице 4.

Среди грамнегативных облигатно анаэробных бактерий, участвующих в развитии анаэробного сепсиса, не были выявлены культуры, резистентные к метро-нидазолу, 80 % из них чувствительны к упомянутому препарату, у 20 % штаммов Bacteroides spp. чувствительность к нитроимидазолам оценивалась как промежуточная. Среди Bacteroides fragilis доминировали штаммы, чувствительные к бензилпенициллину (81 %), ампициллину (92,1 %), цефотаксиму (60,5 %), тетрациклину (58 %).

ОК{вдицина

в Кузбассе

Medicine

in Kuzbass

T. 14 № 4 2015

53

АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОБЛИГАТНО-АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С БАКТЕРИЕМИЕЙ

Таблица 4

Спектр чувствительности штаммов в популяции облигатно анаэробных грамнегативных бактерий

Table 4

Spectrum sensitivity of strains in the population of obligate anaerobic gram-negative bacteria

Антибактериальные препараты

Пенициллин G 0,5-2 мг/мл 25 75 0

Амоксициллин 20 60 20

Амоксициллин/клавуланат 20 60 20

Пиперациллин 25 75 0

Пиперациллин + тазобактам 25 75 0

Тикарциллин/клавуланат 25 75 0

Имипенем 25 75 0

Клиндамицин 20 80 0

Метронидазол 0 80 20

Цефотаксим 20 80 0

Цефепим 20 80 0

Тикарциллин 25 75 0

Азитромицин 25 75 0

ИТОГО: 20,7 74,1 5,2

Изолированные из гемокультуры штаммы Fuso-bacterium nucleatum были резистентны к бензилпенициллину (71,4 %), ампициллину (76,2 %), эритромицину (85,7 %), но обладали чувствительностью к левомицетину (61,9 %), клиндамицину (57,1 %), азит-ромицину (52,4 %), тетрациклину (52,4 %), цефокси-тину (61,9 %). Среди культур Veillonella parvula наблюдалась резистентность к ампициллину (88,8 %), тетрациклину (77,8 %), левомицетину (66,6 %), эритромицину (55,6 %), чувствительность к бензилпенициллину (66,6 %), цефокситину (88,8 %), цефотакси-му (77,8 %), азитромицину (55,6

Изолированные культуры грамположительных анаэробных кокков характеризовались высокой резистентностью к бензилпенициллину, ампициллину, тетрациклину, эритромицину и чувствительностью к азит-ромицину, клиндамицину. Штаммы Peptococcus niger были чувствительны к цефокситину (69,2 %), це-фотаксиму (61,5 %). Штаммы Peptostreptococcus spp. были менее чувствительны к этим препаратам (38,5 % и 44,2 %, соответственно). Не было выделено штаммов Peptococcus niger, чувствительных к левомице-тину, а представители рода Peptostreptococcus в 65,4 % случаев были чувствительны к данному препарату.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

5 % случаев бактериемии, сопутствующей клиническому диагнозу «сепсис», ассоциированы с обли-гатно анаэробными бактериями. Ведущая микрофлора представлена грампозитивными облигатно анаэробными бактериями (79,6 %). Поскольку антианаэробная терапия чаще всего проводится эмпирически, актуально понимание тенденции формирования резистентности клинических изолятов к антимикробным препаратам. За последние несколько лет существенно изменилась чувствительность облигат-но анаэробных бактерий к антибактериальным препаратам. Обращает внимание рост устойчивости анаэробов к наиболее часто используемым антибактериальным препаратам: метронидазолу, клиндамицину, имипенему, цефепиму. Резистентностью к метронида-золу обладали 19,4 % культур, относящихся к родам Clostridium (20 %), Eubacterium spp (40 %), Propi-onebacterium spp. (100 %). Высокие темпы роста резистентности облигатно анаэробных бактерий к обычно используемым антианаэробным препаратам определяют необходимость мониторинга резистентности анаэробов.

ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES:__________________________________________________________________________________

1. Egorkin MA. Modern approaches to treatment of acute anaerobic paraproctitis. Russian journal of gastroenterologie, Hepatology and Coloproctology. 2011; (3): 74-79. Russian (Егоркин М.А. Современные подходы к лечению острого анаэробного парапроктита //Российский журнал гастроэн-теролигии, гепатологии и колопроктологии. 2011. № 3. P. 74-79.).

2. Kargaltseva NM, Kocherova VI, Ivanov AM. Polymicrobial ofblood cultures - current trends in etiology bloodstream infections. Practical medicine. 2012; 1(56): 56-61. Russian (Каргальцева Н.М., Кочеровец В.И., Иванов А.М. Полимикробность гемокультур - современная тенденция в этиологии инфекции кровотока //Практическая медицина. 2012. № 1(56). С. 56-61.).

3. Chestnova TV, Seregina NV, Deshko IV. Comparative analysis of the microbial landscape of the pathogens isolated from the blood of febrile patients. Vestnik of new medical technologies. 2012; 19(2): 63-65. Russian (Честнова Т.В., Серегина Н.В., Дешко И.В. Сравнительные анализ микробного пейзажа возбудителей, выделенных из крови лихорадящих больных. //Вестник новых медицинских технологий. 2012. Т. 19, № 2. С. 63-65.).

4. Vandijck DM, Blot SI, Decruyenaere JM, Vanholder RC et al. Costs and length of stay associated with antimicrobial resistance in acute kidney injury patients with bloodstream infection. Acta Clin. Belg. 2008 Jan-Feb; 63(1): 31-38.

54

T. 14 № 4 2015 Mediciinn^bass

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

5. WHO: Global strategy for containment of antimicrobial resistance. Geneva: WHO; 2001. World Health Organization.

6. Novak A, Rubic Z, Dogas V, Goic-Barisic I et al. Antimicrobial susceptibility of clinically isolated anaerobic bacteria in a University Hospital Centre Split, Croatia in 2013. Anaerobe. Elsevier. 2015; 31: 31-36.

7. Toprak Uger N., Sayin E., Dane F, Soyletir G. The first metronidazole-resistant Bacteroides species isolated at Marmara University Hospital: Bacteroides thetaiotaomicron. Mikrobiyol Bul. 2013; 47(4): 717-721.

8. Vasilevsky IV. Some solutions to the problem of antibiotic resistance at the present stage. Medicine (Minsk). 2008; 1: 92-97. Russian (Василевский И.В. Некоторые пути решения проблемы антибиотикорезистентности на современном этапе //Медицина (Минск). 2008. Т. 1. С. 92-97.).

9. Handal N., Jorgensen SB, Tunsjo HS, Johnsen BO, Leegaard TM. Anaerobic blood culture isolates in a Norwegian university hospital: identification by MALDI-TOF MS vs 16S rRNA sequencing and antimicrobial susceptibility profiles. APMIS. Denmark. 2015; 123(9): 749-758.

3?

Статья поступила в редакцию 20.10.2015 г.

Кутихин А.Г., Великанова Е.А., Глушкова Т.В., Ефимова О.С., Попова А.Н., Малышева В.Ю., Владимиров А.А., Созинов С.А., Руссаков Д.М., Гутаковский А.К., Живодков Ю.А., Демидов Е.А., Пельтек С.Е., Долганюк В.Ф., Бабич О.О., Фролов А.В., Мухамадияров Р.А., Долгов В.Ю., Григорьев Е.В., Брусина Е.Б., Барбараш О.Л.

НИИ комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний, Институт углехимии и химического материаловедения СО РАН, Кемеровский государственный университет, Кемеровский технологический институт пищевой промышленности, Кемеровская государственная медицинская академия,

г. Кемерово

Институт физики полупроводников им. А.В. Ржанова СО РАН, Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики СО РАН,

г. Новосибирск

ІХОДСГВО МИНЕРАЛО-ОРГАНИЧЕСКИХ наночастиц, ЩЕЛЕННЫХ ИЗ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ БЛЯШЕК,

г) I ВЫ

И ИСКУССТВЕННО СИНТЕЗИРОВАННЫХ МИНЕРАЛО-ОРГАНИЧЕСКИХ НАНОЧАСТИЦ

Предмет исследования. Минерало-органические наночастицы (МОНЧ), представляющие собой самореплицирующиеся кальций-фосфатные частицы < 500 нм в диаметре, состоящие из углерода, азота, кислорода, водорода, кальция и фосфора и содержащие некоторые белки.

Цель - показать сходство или различия между МОНЧ, выделенными из кальцифицированных тканей (естественные МОНЧ), и искусственно синтезированными МОНЧ.

Методы. Выделение МОНЧ из атеросклеротических бляшек, искусственный синтез МОНЧ, декальцификация МОНЧ, электронная и атомно-силовая микроскопия, энергодисперсионная рентгеновская спектроскопия, рентгеновская диф-рактометрия, инфракрасная спектроскопия с преобразованием Фурье, измерение распределения размерности МОНЧ методом динамического рассеяния света, электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия, окрашивание нитратом серебра, иммуноблоттинг, окраска на нуклеиновые кислоты, флюоресцентная микроскопия, выделение липидов, газовая хроматография-масс-спектрометрия, анализ факторов формирования МОНЧ, анализ саморепликации МОНЧ, статистический анализ.

Результаты. Как естественные, так и искусственные МОНЧ представляют собой сферические частицы губчатой структуры с диаметром 100-500 нм. Оба типа МОНЧ состоят из углерода, кислорода, водорода, кальция и фосфора, которые формируют гидроксиапатит, карбонат-гидроксиапатит и кальцит. Распределение размерности естественных и искусственных МОНЧ также сходно, с разбросом диаметров 100-500 нм и средним диаметром около 200 нм. Естественные и искусственные МОНЧ обладают сходным белковым и липидным профилем и могут адсорбировать нуклеиновые кислоты. Соли кальция и фосфора ускоряют формирование МОНЧ, в то время как сыворотка, альбумин и фетуин-А являются ингибиторами этого процесса.

Область применения. Патофизиология, кардиология.

Заключение. МОНЧ, выделенные из атеросклеротических бляшек, и искусственно синтезированные МОНЧ сходны по морфологии, минеральному и органическому профилю, и законы их формирования соответствуют таковым для каль-ций-фосфатных бионов (КФБ). Поскольку факторы риска развития атеросклероза и факторы, способствующие формированию КФБ в крови человека схожи, это вызывает вопрос о возможной патогенности этих частиц.

Ключевые слова: минерало-органические наночастицы; бионы; патогенность; атеросклероз; кальцификация.

ОК{едицина

в Кузбассе

Medicine

in Kuzbass

T. 14 № 4 2015

55