Диагностика рецидивов рака мочевого пузыря с помощью FISH-метода, осуществляемого на клетках осадка мочи

Диагностика рецидивов рака мочевого пузыря с помощью FISH-метода, осуществляемого на клетках осадка мочи

И.Е. Воробцова, З.Ж. Васильева, Е.Д. Коузова, Д.А. Тимофеев, М.И. Школьник, М.В. Одинцова, Г.М. Жаринов

ФГУ «РНЦ радиологии и хирургических технологий» МЗ РФ, Санкт-Петербург

Контакты: Ирина Евгеньевна Воробцова radgenetika@mail.ru

В выборке из 63 больных раком мочевого пузыря (РМП) оценивали информативность неинвазивного UroVysion-теста, проводившегося до цистоскопии на клетках осадка мочи, при диагностике рецидивов заболевания. У19 пациентов в разные сроки после лечения первичного РМП (1—36 мес) были выявлены рецидивы либо обоими методами (цистоскопия и FISH), либо одним из них. При этом методом цистоскопии выявлено 13 случаев рецидивов РМП, FISH-анализом — 17 и в более ранние сроки. Общая чувствительность FISH-метода составила 84,6 %. На выборке из 20 «FISH-положительных» первичных больных обнаружена прямая корреляция между стадией заболевания (рТ), степенью злокачественности (G) опухоли и количеством аномальных (в соответствии с UroVysion-тестом) клеток в осадке мочи.

Ключевые слова: рак мочевого пузыря, рецидивы, клетки осадка мочи, FISH-метод

Diagnosis of recurrent bladder cancer by fluorescence in situ hybridization assay on urine sediment cells

I.E. Vorobtsova, Z.Zh. Vasilyeva, E.D. Kouzova, D.A. Timofeyev, M.I. Shkolnik, M.V. Odintsova, G.M. Zharinov

Russian Research Center for Radiology and Surgical Technologies, Ministry of Health of the Russian Federation, Saint Petersburg

A sample of 63 patients with bladder cancer (BC) was used to estimate the informative value of a noninvasive UroVysion test carried out prior to cystoscopy on urine sediment cells when diagnosing BC recurrences. The latter were detected by either the two techniques (cystoscopy and fluorescence in situ hybridization (FISH) assay) or one of them in 19 patients in different periods after treatment for primary BC (1-36 months). Cystoscopy revealed 13 recurrent BC cases; FISH assay identified 17 cases and in earlier periods. The total sensitivity of the FISH assay was 84.6%. The sample of 20 FISH-positive primary patients showed a direct correlation between BC stage, grade, and the number of abnormal cells (as indicated the UroVysion test) in the urine sediment.

Key words: urinary bladder cancer, recurrences, urine sediment cells, fluorescence in situ hybridization assay

Ежегодно в мире диагностируется более 300 тыс. новых случаев рака мочевого пузыря (РМП). Наиболее распространенной (70 %) клинической формой заболевания является поверхностная, неинвазирующая в мышечный слой опухоль (рТа, рТ1), которая часто (70 %) рецидивирует. До 30 % таких опухолей в процессе рецидивирования превращается в инвазивную метастазирующую форму. При этом каждая следующая опухоль характеризуется большей инвазивностью, более низкой степенью диффе-ренцировки и худшим прогнозом [1]. От стадии заболевания и степени злокачественности опухоли зависит характер лечения: трансуретральная резекция (ТУР), внутрипузырная химио- и/или иммунотерапия. После любого вида лечения проводится периодическое цисто-скопическое обследование пациентов для выявления возможных рецидивов. Даже в случае полного удаления мочевого пузыря возможен рецидив, при котором опухоль локализуется в мочеточниках [2].

Обследование должно проводиться через каждые 3 мес в течение 2 лет после лечения, через каждые 6 мес — в следующие 2 года и далее — 1 раз в год [3]. При обнаружении рецидива протокол возобновляет-

ся. Болезненность и травматичность процедуры ци-стокопического исследования часто приводит к нежеланию больных следовать предписанной схеме наблюдения, что увеличивает вероятность неблагоприятного исхода болезни. В связи с этим продолжается поиск новых неинвазивных методов диагностики опухолей мочевого пузыря, пригодных для систематического мониторинга больных. Международная группа экспертов по вопросам маркеров РМП предложила для повышения эффективности диагностики рецидивов использовать одновременно несколько тестов: ММР22, ВТА^а!, 1шшипоСу!, игоУу8юп [4]. Последний представляет собой метод, позволяющий с помощью набора флуоресцентных ДНК-зондов к хромосомам 3, 7, 17, 9р21 на микроскопическом препарате слущенного уротелия осадка мочи определять опухолевые клетки по наличию в них генетических нарушений, характерных для пе-реходно-клеточных карцином мочевого пузыря [5]. Чувствительность игоУу8юп-теста достаточно высока [6, 7], и зачастую превышает чувствительность других неинвазивных методов.

В большинстве работ информативность FISH-ме-тода диагностики РМП оценивается лишь по качественному показателю (положительный или отрицательный результат анализа). В то же время данные немногочисленных исследований свидетельствуют о том, что и количественная оценка результатов FISH-метода немаловажна для прогнозирования динамики опухолевого процесса [8]. В предыдущей работе мы наблюдали хорошее соответствие данных цистоско-пического обследования и результатов UroVysion-теста при обследовании в основном больных c первичными опухолями мочевого пузыря [7]. Целями настоящего исследования являлись оценка информативности данного метода при диагностике рецидивов РМП, а также изучение связи между количеством генетически аномальных клеток в осадке мочи, стадией и степенью злокачественности опухоли у «FISH- положительных» пациентов.

Материалы и методы

Выборка состояла из 63 пациентов (57 мужчин и 6 женщин) в возрасте от 32 до 87 лет (средний возраст 65,5 ± 1,4 года), проходивших обследование в клинике ФГУ РНЦРХТ Минздравсоцразвития России на предмет выявления рецидивов РМП в интервале от 1 до 36 мес после проведенного лечения.

Пациентам перед цистоскопией проводилось микроскопическое исследование слущенных уротелиаль-ных клеток в осадке мочи FISH-методом. Методика приготовления, окрашивания препаратов c использованием набора флуоресцентных ДНК-зондов «UroVysion» (Abbott Molecular Inc. Des Plaines. IL, USA), специфичных к перицентромерным участкам хромосом 3, 7, 17 и к локусу 9р21, а также критерии оценки результатов микроскопического анализа были описаны ранее [7, 9].

FISH-обследование проходили неоднократно17 пациентов: 11 — как при первичном обращении (на стадии установления диагноза), так и в разные сроки после лечения, 6 — в разные сроки после лечения (при обследовании по поводу рецидива).

На выборке из 20 первичных «FISH-положитель-ных» пациентов, обследованных ранее [7], была изучена связь между стадией, степенью злокачественности опухоли и количеством генетически измененных клеток в образце мочи. Для этого на препарате осадка мочи каждого больного анализировали 100 последовательно встречавшихся уротелиальных клеток, среди которых определяли количество гиперплоидных клеток по хромосомам 3, 7 и 17, количество клеток c делецией 9р21 и суммарное число аномальных вариантов. При статистической обработке данных использовали статистический пакет Statistica, достоверность различий оценивали c помощью критерия х2 и t-критерия Стью-дента.

Результаты

В таблице 1 представлена характеристика выборки пациентов и индивидуальные результаты цистоскопи-ческого и FISH-обследований. По гистологическим типам первичной опухоли больные распределились следующим образом: TlLG — 17, TlНG — 9, T2LG —19, T2HG — 17 пациентов. В табл. 2 сопоставлены результаты цистоскопии и FISH-анализа, проведенных в разные сроки после лечения РМП.

В первые 6 мес после лечения контрольное обследование прошли 32 пациента, из них № 108 обследовался 3 раза, а № 119 — 2 раза. У 28 больных результаты обоих методов совпали (у 23 — оба результата были отрицательными, у 5 — положительными).

В период от 7 до 12 мес после лечения было обследовано 14 пациентов, у 12 — данные цистоскопии и FISH-анализа совпали (у 8 — оба результата были отрицательными, у 4 — положительными).

Из 16 больных, обследовавшихся через 13—36 мес после лечения, у 14 результаты цистоскопии и FISH-анализа совпали (12 — отрицательные и 2 — положительные). Таким образом, из 63 больных у 55 (87,3 %) обследованных в разные сроки после лечения, результаты цистоскопии и FISH-метода совпали: у 44 не было обнаружено рецидивов, у 11 были выявлены рецидивы. В 6 случаях тест игоУу8юп показал наличие рецидива при отрицательном результате визуального осмотра полости мочевого пузыря; у 2 — при положительном результате цистоскопии FISH-анализ не выявил опухолевых клеток. Всего из 63 пациентов, прошедших контрольное обследование, у 19 (30 %) были выявлены рецидивы либо обоими, либо одним из методов, при этом цистоскопически было выявлено только 13 случаев рецидива РМП, в то время как FISH-анализом — 17 случаев.

В табл. 3 отдельно представлены результаты повторных обследований одних и тех же больных. Из 11 пациентов, у которых первичная опухоль была выявлена нами цистоскопически, у 2 (№ 19 и № 78) результат FISH-анализа оказался отрицательным. У пациента № 2, при отрицательном результате цистоскопии, проведенной через 12 мес после лечения, тест игоУузюп показал наличие рецидива. Повторные обследования прошли еще 6 пациентов, первичная диагностика и лечение которых осуществлялись в других медицинских учреждениях, а обследование по поводу возможного рецидива — в клинике ФГУ РНЦРХТ У 4 больных по результатам обоих методов рецидивы не были обнаружены в интервале от 1 до 9 мес после лечения, у 1 (№ 108) рецидив был обнаружен обоими методами через 9 мес, при отрицательном результате — через 3 мес. У пациента № 45 в 3 обследованиях (через 24, 30 и 34 мес после лечения) при отрицательном результате цистоскопии результаты FISH-анализа были положительными. Таким образом, в группе больных, об-

Таблица 1. Характеристика выборки пациентов, обследованньа по поводу рецидива РМП и результаты цистоскопии и FISH-анализа

№ Код пациента Возраст, лет рТ первичной опухоли G Характер лечения Срок после лечения, мес Цистоскопия FISH

1 7б 82 р^ LG ТУР 9 - -

2 18б 67 р^ LG ТУР 3 - -

3 24б 64 р^ LG ТУР 13 - -

4 41 64 р^ LG ТУР, л/т 6 + +

5 42 68 р^ LG ТУР, х/т 18 - -

6 50 60 р^ HG х/т 48 - -

7 51 56 р^ LG ТУР, х/т 21 - -

8 53 75 р^ LG ТУР, х/т, л/т 12 + +

9 54б 76 р^ HG ТУР, х/т 3 - -

54в 18 - -

10 58 57 р^ HG ТУР 6 - +

11 62 70 рT1 HG ТУР 6 - -

12 64б 73 рT1 HG ТУР 3 - -

64в 9 + +

13 69 65 р^ LG ТУР 9 - -

14 71 63 рT1 LG ТУР 7 - -

15 74 73 рT1 LG ТУР, х/т 22 - -

16 79 63 рT1 LG ТУР, х/т 22 - -

17 96 45 рT1 HG ТУР 36 - -

18 97 32 р™ LG ТУР 5 - -

19 103 69 рT1 HG ТУР, л/т 7 - -

20 106 87 рT1 HG ТУР 12 - +

21 107 76 рТ1 LG ТУР, х/т 18 - -

108б 3 - -

22 108в 53 рТ1 LG ТУР 4 - -

108г 5 - -

23 109 61 рТ1 HG ТУР, х/т 3 - -

24 114 60 рТ1 LG ТУР, х/т 4 не делали -

25 118 63 рТ1 LG ТУР 6 - -

26 119б 74 рТ1 LG ТУР, л/т 2 - -

119в 3,5 - -

27 2б 44 рT2 LG ТУР, х/т 12 - +

28 11б 67 рT2 LG ТУР, л/т 9 + +

29 19б 61 рT2 НG ТУР, х/т 11 - -

30 25б 78 рT2 LG ТУР, л/т 12 - -

31 30б 64 рT2 HG ТУР 3 - -

32 34 65 рТ2 LG ТУР 3 + +

33 35 66 рT2 LG ТУР 6 - -

34 36 67 рT2 HG ТУР, л/т 1 - -

35 43 80 рT2 LG ТУР 24 + +

36 44 83 рT2 LG ТУР 6 - -

Таблица 1. Характеристика выборки пациентов, обследованных по поводу рецидива РМП и результаты цистоскопии и Т№И-анализа

№ Код пациента Возраст, лет рТ первичной опухоли G Характер лечения Срок после лечения Цистоскопия FISH

45б 24 - +

37 45в 57 рТ2 LG ТУР, л/т 30 - +

38 39 45г 46 49 66 61 рТ2 рТ2 LG LG ТУР ТУР, л/т 34 5 3 - +

— -

40 52 62 рТ2 HG ТУР 3 - -

41 55 50 рТ2 HG ТУР 3 + +

42 57 62 рТ4 LG ТУР, х/т 5 - -

43 60 51 рТ2 HG ТУР, х/т 4 - -

44 63 58 рТ2 HG ТУР, л/т 7 + +

45 65 67 рТ2 HG ТУР 6 + +

46 68 43 рТ2 HG ТУР, х/т 24 - -

47 72 77 рТ2 LG ТУР 1 - -

48 73 75 рТ2 HG ТУР, х/т, л/т 3 - +

49 77 55 рТ2 LG ТУР, х/т 36 - -

50 51 52 78б 83 84б 72 75 62 рТ2 рТ2 рТ2 LG LG HG ТУР ТУР, л/т ТУР, л/т 3 6 3 + + +

84в 9 - -

53 87 59 рТ2 HG ТУР, х/т 10 - -

54 89 76 рТ2 HG ТУР, л/т 4 не делали -

55 90 76 рТ2 HG ТУР, л/т 3 + -

56 57 91б 93 66 76 рТ2 рТ2 LG LG ТУР, л/т ТУР, л/т 6 18 + +

58 59 94 98 82 56 рТ2 рТ2 HG HG ТУР ТУР 5 20 - +

60 100 47 рТ2 HG ТУР 3 - -

61 62 63 111б 62 75 56 рТ2 рТ2 рТ2 LG LG НG ТУР, л/т, х/т ТУР ТУР, х/т 4 - -

111в 117 121 7 3 7 - -

- -

Примечание. «б» — пациенты, проходившие ПЗИ-обследование и на этапе первичной диагностики; «б», «в», «г» — пациенты, проходившие неоднократное ПЗИ-обследование по поводу рецидива; ТУР — трансуретральная резекция, л/т — лучевая терапия, х/т — химиотерапия.

следованных неоднократно (п = 17), результаты цистоскопии и игоУузюп-теста не совпали в 4 случаях: у пациентов № 19 и № 78 — при первичном обследовании и у пациентов № 2 и № 45 — при повторных.

В табл. 4 представлены предварительные результаты анализа связи между стадией (рТ), степенью ана-плазии и количеством аномальных клеток в осадке мочи у <^^Н-положительных» первичных больных. При стадии опухоли рТ2 и степени анапла-

зии HG доля генетически аномальных клеток оказалась достоверно выше, чем при стадии рТ1 и степени анаплазии LG.

Обсуждение

В многочисленных работах было показано, что не-инвазивный игоУу8юп-метод может с успехом применяться для диагностики первичных опухолей мочевого пузыря. В то же время работ с использованием FISH-

Таблица 2. Сопоставление результатов цистоскопии и РНИ-анализа у пациентов, обследованных по поводу рецидива в разные сроки после лечения

Срок после лечения, мес Число больных Цистоскопия

< 6 32 23 5 2 2

7-12 14 8 4 0 2

13-36 16 11 2 0 3

36 1 1 0 0 0

Всего 63 44 11 2 6

метода для диагностики рецидивов РМП относительно немного [10]. В настоящем исследовании метод игоУуа-оп был апробирован нами на выборке из 63 пациентов, проходивших обследование на предмет выявления рецидивов. Чувствительность FISH-метода, рассчитанная по результатам игоУузюп-теста у больных с цистоскопи-чески верифицированными рецидивами РМП составила 84,6 %, что соответствует данным литературы [11].

Для своевременной диагностики рецидивов РМП очень важным является соблюдение больными установленного протокола урологического мониторинга.

Однако, как показывает опыт различных клиник, этому протоколу следует не более 40 % пациентов [12]. В нашей выборке установленной схемы мониторинга практически не придерживался ни один из пациентов (19 пациентов было обследовано через 1—3 мес после лечения, 13 — через 4—6 мес, 10 — через 7—9 мес, 5 — через 10—12 мес, 12 — через 13—24 мес, 4 — через 25—36 мес и 1 — через 48 мес). Только 6 больных прошли повторное обследование в разные произвольные сроки после лечения. Несоблюдение больными общепринятого протокола наблюдения, как правило, связано

Таблица 3. Результаты обследования пациентов при первичном и повторных обращениях

№ Код Первичные опухоли Первичное обследование Повторное обследование, мес

Стадия (рТ) Степень (О) Цистоскопия РКН-анализ 1-3 4-6 7-9 10-12 >12

1 7 рТ1 LG + + -/-

2 19 рТ1 LG + - -/-

Первичные 3 24 рТ1 LG + + -/-

4 54 рТ1 ТО + + -/- -/-

5 2 рТ2 LG + + -/+

6 11 рТ2 LG + + +/+

7 18 рТ2 LG + + -/-

8 25 рТ2 LG + + -/-

9 30 рТ2 ТО + + -/-

10 91 рТ2 LG + + +/+

11 78 рТ2 LG + - -/-

12 64 рТ1 ТО -/- +/+

13 108 рТ1 LG -/- -/-

ы в и 14 119 рТ1 LG -/- -/-

ец Он 15 45 рТ2 LG 3-/3+

16 84 рТ2 ТО -/- -/-

17 111 рТ2 LG -/- -/-

Tаблица 4. Зависимость количества генетически аномальных клеток от стадии

* Различия достоверны,р > 0,05(критерийх2), Р < 0,05(икритерий Стьюдента). В скобках указано количество проанализированных клеток, п — число обследованных пациентов.

с субъективными причинами (нежелание пациентов подвергаться болезненной и травматичной процедуре). В то же время в ряде случаев существуют и объективные противопоказания к цистоскопии (инфекции мочевых путей, гематурия, сужение уретры, низкий порог болевой чувствительности и др.). В обоих случаях игоУузюп-тест является методом выбора для диагностики рецидивов, так как он неинвазивен и обладает значительно более высокой чувствительностью по сравнению с другими, в частности с обычным цитологическим исследованием мочи [13].

Иногда при отсутствии признаков рецидива по данным цистоскопии FISH-метод дает положительный результат [14]. Такие случаи квалифицируются как «предварительно положительные». В ряде случаев позже опухоль обнаруживается и при визуальном осмотре мочевого пузыря. В нашей выборке у 6 пациентов (см. табл. 2) при отрицательном результате цистоскопии FISH-анализ показал наличие опухолевых клеток в моче. У пациента № 45 цистоскопически рецидив был обнаружен лишь через 36 мес после лечения, в то время как игоУузюп-тест показал наличие опухоли на год раньше (через 24 мес). Поскольку генетическая трансформация в клетках уротелия предшествует анатомическим изменениям ткани, положительные» пациенты при отрицательном результате цистоскопии должны, по-видимому, рассматриваться как потенциальная группа риска и дополнительно обследоваться, в частности, с помощью флуоресцентной цистоскопии.

У некоторых больных при цистоскопически выявленной опухоли - первичной (№ 19 и № 78), или рецидива (№ 78 и № 90) - результаты игоУузюп-теста оказались отрицательными. В литературе описаны аналогичные случаи [14]. Известно, что при сканировании препарата одним из критериев отбора уротелиоци-тов для подсчета флуоресцентных сигналов является увеличенный размер ядра, обусловленный гиперплои-дией [15]. В то же время ядра некоторых опухолевых клеток (например, имеющие только делецию 9р21) могут не отличаться по размеру от нормальных и вследствие это-

го упускаться при сканирующем методе просмотра препарата. В этом случае результаты игоУузюп-теста могут оказаться ложноотрицательными.

Как показывают наши предварительные данные, существует положительная связь между стадией развития опухоли (рТ), степенью ее злокачественности

и количеством генетически аномальных клеток в осадке мочи. Аналогичные результаты были получены в работе [16] на большей, чем наша, группе больных. Авторы установили, что большое количество аномальных клеток (> 30 %) коррелирует с высоким риском рецидивирования опухоли и ее прогрессии в мышечно-инвазивную форму.

Эти результаты свидетельствуют о том, что, помимо качественной оценки препарата слущенных клеток мочи (+ или -), необходимо оценивать и количество аномальных клеток, так как это увеличивает информативную ценность FISH-метода. Количественный FISH-анализ может оказаться полезным при «предварительно положительных» результатах игоУузюп-теста. Предложено считать такие результаты истинно положительными при обнаружении аномальных клеток в осадке мочи в количестве > 5 % [16]. У 6 пациентов нашей выборки, имевших FISH-положительный результат (при отрицательном результате цистоскопии), количество аномальных клеток варьировало от 7 до 97 %. У пациента № 45 при отсутствии видимого рецидива количество аномальных клеток при каждом последующей анализе (через 24, 30 и 34 мес) прогрессивно увеличивалось с 27 до 79 %. Когда через 36 мес опухоль была обнаружена цистоскопически, больной был прооперирован. С учетом цитогенетических данных лечение следовало начать значительно раньше.

Количественный FISH-анализ может помочь врачу при отсутствии гистологической характеристики рецидивирующей опухоли, поскольку при повторных цистоско-пических осмотрах не всегда делается биопсия, что имело место и в нашей выборке больных. По проценту аномальных клеток в моче можно косвенно идентифицировать стадию (рТ) и степень злокачественности опухоли.

Полученные результаты свидетельствуют о высокой чувствительности игоУузюп-теста для диагностики рецидивов РМП, а также о необходимости не только качественного ответа FISH-анализа («положительный» против «отрицательного»), но и его количественной оценки (процент аномальных клеток). Это позволит улучшить диагностику рецидивов с точки зрения оценки вероятности их прогрессии в инвазивную форму, выделить группы с относительно высоким и низким рисками развития болезни с целью более персонифицированного подхода к назначению схем мониторинга, а также применить превентивную терапию при «предварительно положительном» FISH-результате, если при этом наблюдается увеличенное количество аномальных клеток в моче пациента.

Количество аномальных клеток, M ± SE %

Стадия (рТ) Степень злокачественности

Т1 Т2 LG HG

25,8+1,41 32,8+1,95* 25,1 + 1,04 50,6+2,9*

п = 8 п = 12 п = 17 п = 3

ЛИТЕРАТУРА

1. Parekh D.J., Bochner B.H., Dalbagni G. Superficial and muscle-invasive bladder cancer: principles of management for outcomes assessment. J Clin Oncol 2006;24:5519-27.

2. D.A. Levy. Surveillance for Recurrent Bladder Cancer. eMedicine 2008. http:// emedicine.medscape.com/article/458825-overview

3. Hall M.C., Chang S.S., Dalbagni G. et al. Guideline for the management of nonmuscle invasive bladder cancer (stages Ta, T1, and Tis). J Urol 2007;178(6):2314-30.

4. Halling K.C., King W., Sokolova I.A. et al. A comparison of BTA stat, hemoglobin dipstick, telomerase and Vysis UroVysion assays for the detection of urothelial carcinoma in urine. J Urol 2002;167(5):2001-6.

5. Sokolova I.A., Halling K.C., Jenkins R.B. et al. The development of a multitarget, multicolor fluorescence in situ hybridization assay for the detection of urothelial carcinoma in urine. J Mol Diagn 2000;(3):116-23.

6. Слозина Н.М., Никифоров А.М., Неронова Е.Г. и др. Молекулярно-цитоге-

нетическая диагностика рака мочевого пузыря. Онкология 2007;8:268-82.

7. Воробцова И.Е., Васильева З.Ж., Школьник М.И. и др. Применение метода флуоресцентной гибридизации in situ на клетках осадка мочи для диагностики рака мочевого пузыря и его рецидивов. Онко-урология 2011;1:73-8.

8. Kipp B.R., Karnes R.J., Brankley S.M. et al. Monitoring intravesical therapy for superficial bladder cancer using fluorescence in situ hybridization. J Urol 2005;173:401-4.

9. Воробцова И.Е., Васильева З.Ж. Способ диагностики переходно-клеточного рака мочевого пузыря. Патент РФ №2456607 от 20.07.2012.

10. Halling К.С., King W., Sokolova I.A. et al. A comparison of cytology and fluorescence in situ hybridization for the detection of urothelial carcinoma. J Urol 2000;164(5):1768-75.

11. Башкатов С.В., Севанькаев А.В., Каря-кин О.Б. и др. Флуоресцентная гибридизация in situ: практическое применение в онкоурологии. Онкоурология 2008;3:9-15.

12. Schräg D., Hsieh L.J., Rabbani F. et al. Adherence to surveillance among patients with superficial bladder cancer. J Natl Cancer Inst 2003;95(8):588—97.

13. Halling K.C. Vysys UroVysion for the detection of urothelial carcinoma. Expert Rev Mol Diagn 2003:3(4):507—19.

14. Yoder B.J., Skacel M., Hedgepeth R. et al. Reflex UroVysion testing of bladder cancer surveillance patients with equivocal or negative urine cytology: a prospective study with focus on the natural history of anticipatory positive findings. Am J Clin Pathol 2007;127:295-301.

15. Sokolova I.A., Halling K.C., Jenkins R.B. et al. The development of a multitarget, multicolor fluorescence in situ hybridization assay for the detection of urothelial carcinoma in urine. J Mol Diagn 2000;2(3):116-23.

16. Kipp B.R., Tanasescu M., Else T.A. et al. Quantitative fluorescence in situ hybridization and its ability to predict bladder cancer recurrence and progression to muscle-invasive bladder cancer. J Molec Diagn 2009;2;148-54.