Изучение антибактериальных и противогрибковых свойств препарата «Роксацин»

ЛИТЕРАТУРА: 1. Гулюкин М.И. Эффективность

вакцинопрофилактики бруцеллеза животных в России / М.И. Гулюкин, М.П. Альбертян, М.И. Искандаров, А.И. Федоров, В.Н. Боровой, С.В. Канальцев // Ветеринария. - 2008 -№9. - 7с. 2.Идрисов Г.З.

Иммуноморфологическое изучение органов и тканей крупного рогатого скота, привитого бруцеллезными вакцинами из штаммов 82 и 19 / Г.З. Идрисов, К.М. Салмаков // Ученые записки КВИ. - 1975 -Т.119. - С. 134142. З.Уразов Т.Н. Изучение иммуногенеза и иммуногенных свойств новых вакцинных штаммов бруцелл на морских свинках / Т.Н. Уразов, Т.Н. Сафина, А.М. Фомин, К.М. Салмаков // Ветеринарный врач. - 2006 - № 1. -С. 13-17.

ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ОТВЕТ МОРСКИХ СВИНОК НА ВВЕДЕНИЕ ЖИВОЙ ВАКЦИНЫ ИЗ ШТАММА B.abortus 82-Sr.

Авзалов Ф.З., Свинцов Р.А., Фомин А.М.

Резюме

Иммуноморфологическими и цитохимическими исследованиями на 52 морских свинках осуществлена оценка иммунобиологического ответа организма на введение живой противобруцеллёзной вакцины из штамма 82 - Sr.

IMMUNOBIOLOGICESKI ANSWER MARINE PIGS ON INTRODUCTION ALIVE VACCINE FROM STRAIN B.abortus 82-Sr

Avzalov F.Z., Svintsov R.A., Fomin A.M.

Summary

Immunomorfologi and by citochemical researches on 52 marine pigs is carried out the assessment of immunobiologi answer organism on introduction alive against brucellosis vaccine from strain 82 - Sr.

УДК 619:579+578.826.2:614.28

ИЗУЧЕНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ И ПРОТИВОГРИБКОВЫХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА «РОКСАЦИН»

Алимов А.М., Амирова Л.О., Амиров Д.Р.

Казанская государственная академия ветеринарной медицины

Ключевые слова: препарат «Роксацин», бактерицидные свойства, бактериостатические свойства, фунгистатические свойства.

Key words: preparation «Roksatsin», bactericidal, bacteriostatic

properties, fungistatic properties.

Дезинфекция является одной из важнейших частей общей программы профилактики и борьбы с инфекционными заболеваниями на животноводческих предприятиях агропромышленного комплекса. При этом её эффективность во многом зависит от создания и применения средств, направленных на подавление жизнеспособности микрофлоры, накапливающейся во внешней среде. Актуальной задачей ветеринарной науки является создание нетоксичных высокоэффективных, экологически чистых, не обладающим коррозионным действием на оборудование дезинфектантов.

Изучаемый препарат «Роксацин», любезно предоставленный нам Струниным Б.П. (г.Уфа), являет собой жидкость светло-жёлтого цвета, со слабым специфическим запахом моющего средства, которая хорошо растворяется в воде.

Целью данной работы было определение бактерицидной и фунгицидной активности нового препарата «Роксацин» в лабораторных условиях.

Материалы и методы. При изучении противомикробной активности препарата «Роксацин» в качестве тест-объектов использовали бактериальные культуры Staphylococcus aureus 209p, Bacillus cereus 8035, Escherichia coli F-50, Pseudоmonas aeruginosa 9027, культуры грибов: Aspergillus niger BKMF-1119 (фитопатогенный гриб), Trichophyton

mentagrophytes-1773 (дерматофит), Candida albicans (дрожжеподобный гриб).

Бактериостатические свойства препарата определяли методом двукратных разведений в жидких питательных средах (1, 2). В опыте использовали бульон Хоттингера, который разливали в пробирки по 3 мл.

В качестве исходного разведения использовали препарат в концентрациях от 4 до 0,2%, для этого «Роксацин» разводили в бульоне Хоттингера.

Разведения готовили непосредственно в пробирках подлежащих посеву исследуемых культур.

В каждом ряду имелись контрольные пробирки: со средой без препарата (контроль среды) и со средой без препарата с добавлением тест-штаммов бактерий (контроль культуры микроорганизма).

Одновременно с разведением вещества готовили бактериальные культуры для посева.

Для этого производили смыв с агаровых культур физиологическим раствором и разводили по оптическому стандарту до 109 микробных тел в 1 мл. Полученную взвесь разводили физиологическим раствором в 100 раз и по 0,1 мл вносили в каждую пробирку с 3 мл питательной среды.

Следовательно, посевная доза в опыте составляла 300000 микробных тел в мл. Затем посевы помещали в термостат при температуре 37оС.

Результаты опытов учитывали через 18-20 часов. Регистрировали наличие роста (помутнение) или задержку роста культуры в среде за счет бактериостатического действия препарата. За действующую дозу принимали ту наименьшую концентрацию препарата, которая в состоянии задержать рост бактериальных культур.

Бактерицидную активность определяли методом, описанным С.Н. Миловановой. Для этого приготовили растворы препарата в концентрациях от 0,01-1,0% и разлили по пробиркам по 1мл. В ряду содержалось несколько контрольных пробирок (без препарата). Одновременно готовили взвесь бактерий в физиологическом растворе с концентрацией 500000 микробных тел в мл и добавляли по 1 мл в пробирки с различными разведениями вещества. Через 4 часа делали высевы на чашки Петри с агаровой средой Хоттингера по 0,2мл. Чашки с посевами инкубировали 24 часа при температуре 37оС. При пересевах из контрольных пробирок через сутки наблюдался рост, соответствующей тест-культуры, так же быстро появлялся рост и при высевах из пробирок, содержащих небактерицидные концентрации исследуемого вещества. Если при посеве из пробирок роста не наблюдалось считали, что данные пробирки содержат бактерицидные концентрации по отношению к соответствующему микроорганизму.

Фунгистатические свойства препарата «Роксацин» изучали методом двукратных разведений в жидкой среде Сабуро, которую разливали по 3 мл в каждую пробирку(1, 2, 3).

Производили посев соответствующих культур грибов и инкубировали в термостате при 25оС 14 дней. В качестве исходного разведения выбрали концентрацию препарата 2%.

Чувствительность к испытуемому веществу определяли по его минимальной дозе, при которой рост грибов не наблюдался.

Инокулят для посева готовили по-разному в зависимости от культуры. Взвесь культуры дрожжеподобного гриба Candida albicans готовили также как в случае бактерий.

Для получения посевного материала грибов Aspergillus niger и Trichophyton mentagrophytes использовали смывы этих культур с агаровых косяков физиологическим раствором. Оптическую плотность взвеси гриба определяли по бактериальному стандарту, учитывая, что грибковые элементы примерно в 10 раз превышают величину бактерий. Готовили

9 8

1x10 культуру по стандарту мутности, что соответствует 10 грибковых тел в мл. Взвесь разводили в 10 раз и вносили по 0,1 мл в каждую пробирку. Посевная доза в опыте составляла 300000 грибковых тел в 1мл.

По окончании регистрации опыта по фунгистатическому действию препарата «Роксацин», провели проверку его фунгицидных свойств. Для этого жидкость из пробирок с посевами подвергали центрифугированию

при 3000об/мин в течение 20мин. Надосадочную жидкость удаляли и предполагаемый осадок ресуспензировали физиологическим раствором и вновь центрифугировали. Затем осадок разводили в 0,5мл стерильного физиологического раствора и пересеяли на чашки с агаризованной средой Сабуро. Наблюдения по методике вели в течение 1-1,5 месяцев. Отсутствие роста грибов свидетельствует о фунгицидных свойствах препарата.

Фунгицидные свойства Candida albicans определяли так же как у бактерий.

Результаты исследований. Данные по определению бактерицидной и бактериостатической активности приведены в таблице 1.

1. Результаты испытаний антибактериальной активности

«Роксацин»

Тест - культуры бактерий St. aureus 209-P B. cereus 8035 E. coli F-50 Ps. aeruginosa 9027

Бактериостатическая активность

Концентрация препарата «Роксацин» в % 0,2 0,6 0,4 0,8

Бактерицидная активность

Концентрация препарата «Роксацин» в % 0,2 1 0,4 0,8

Из этих данных видно, что препарат «Роксацин» обладает достаточно высокой бактериостатической активностью, которая проявляется в концентрациях от 0,8-0,2% в зависимости от тест-культуры бактерий. Наиболее чувствительным к испытуемому препарату оказался St. aureus 209-P (золотистый стафилококк), а относительно устойчивым Ps.aeruginosa 9027(синегнойная палочка). Активность по отношению к B. cereus 8035 и E. coli F- 50(кишечная палочка) также достаточно высокая 0,6 и 0,4 соответственно.

Бактерицидная активность исследуемого препарата проявлялось в концентрациях от 1-0,2%. В случае St. aureus 209-P и E. coli F-50 бактерицидная концентрация совпадала с бактериостатической. B. cereus 8035 и Ps.aeruginosa 9027 оказались более устойчивыми к данному препарату и для полной иноктивации их роста потребовались более высокие концентрации 1и 0,8% соответственно.

Из данных приведенных в таблице 2 видно, что наиболее чувствителен к испытуемому препарату дрожжеподобный гриб Candida albicans. Причём фунгистатическая и фунгицидная концентрации препарата совпадали и составляли 0,3%.

2. Результаты испытаний противогрибковой активности «Роксацина»

Тест - культуры грибов Aspergillus niger Trich. mentagr. Candida

Фунгистатическая активность

Концентрация препарата «Роксацин» в % 0,6 0,3 0,3

Фунгицидная активность

Концентрация препарата «Роксацин» в % 20 20 0,3

Фунгистатическая активность «Роксацина» по отношению к грибам Trichophyton mentagrophytes и Aspergillus niger составляла 0,3 и 0,6 % соответственно. Однако фунгицидных свойств данный препарат по отношению к этим грибам не проявлял даже в исходной концентрации 20%.

Заключение. На основании результатов проведенных нами испытаний, можно сделать вывод о том, что препарат «Роксацин» обладает высокой бактерицидной и бактериостатической активностью. Она проявлялась в концентрациях 0,2-0,8% и 0,2-1,0% соответственно. Кроме того, «Роксацин» обладает выраженной фунгистатической активностью, то есть ингибирует рост грибов в концентрации 0,3-0,6%. Однако, препарат не проявляет фунгицидную активность даже в 20% концентрации.

Таким образом, полученные данные позволяют отнести изучаемый препарат к потенциальным дезинфектантам.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Ведьмина Е.А., Фурер Н.М., Руководство по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней.- М.: Медицина, 1964, Т.1. - С. 670 - 675. 2. Милованова С.Н., Степанищева З.Г.// Методы экспериментальной химиотерапии.- 2-е изд.- М.: Медицина, 1971. -С. 318 - 321. 3. Милованова С.Н., Степанищева З.Г.// Методы экспериментальной химиотерапии.- 2-е изд.- М.: Медицина, 1971. - С.100 -106.

ИЗУЧЕНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ И ПРОТИВОГРИБКОВЫХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА «РОКСАЦИН»

Алимов А.М., Амирова Л.О., Амиров Д.Р.

Резюме

Изучены бактерио- и фунгистатические, бактери- и фунгицидные активности нового препарата «Роксацин». Установлено его выраженное бактерио- и фунгистатическое действие. Испытуемый препарат не обладал фунгицидной активностью.

STUDY ANTIBACTERIAL AND ANTIFUNGAL PROPERTIES OF THE PREPARATION "ROKSATSIN"

Alimov AM, Amirova LO, Amirov DR Summary

Bacteria and fungistatic, bacterial and fungicidal activity of a new drug "Roksatsin. Found its expression in bacterio-and fungistatic action. The test drug does not possess fungicidal activity.

УДК 619:616.9

НАБОР ДИАГНОСТИКУМОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ИНДИКАЦИИ АНТИТЕЛ ПРОТИВ ХЛАМИДИЙ У КРУПНОГО

РОГАТОГО СКОТА

Банзузи Б.А.С*., Равилов Р.Х*., Герасимов В.В**.

Казанская государственная академия ветеринарной медицины* Республиканский центр профилактики и борьбы со СПИД и ИЗ

Минздрава РТ* *

Ключевые слова: хламидиоз, ифа, тест-система, антитела, крупный рогатый скот.

Key words: Chlamydia, elisa, test system, antibodies, cattle.

Иммуноферментный анализ отличается высокой специфичностью, превышающую в несколько раз рутинные методы диагностики инфекционных болезней. Особенно это заметно при выявлении антител, в ИФА они определяются в первые 2-3 дня и отслеживаются в организме на протяжении 10-12 месяцев после взаимодействия с антигеном.

К преимуществам ИФА относят также: экспрессность, возможность исследовать антикомплементарные сыворотки, воспроизводимость, простота постановки реакции и учета ее результатов, стабильность регентов при хранении, автоматизация некоторых операций и т.д.

Хламидийные инфекции часто протекают в виде стертых, латентных, смешанных и вторичных инфекций, что в значительной степени затрудняет правильную оценку эпизоотической ситуации. В связи с этим при диагностике хламидиозов широко используют серологические методы, главным образом, РСК. В настоящее время применение иммуноферментного метода ветеринарными специалистами во многом сдерживается отсутствием в достаточном количестве необходимых компонентов (тест-систем и оборудования).