ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ РАСТВОРИМЫЕ ГЕТЕРОДИМЕРЫ МНС II КЛАССА СО СТАБИЛИЗИРУЮЩЕЙ ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ

1. Рекомбинантная молекула МНС II класса, включающая:
(i) весь или часть внеклеточного участка α-цепи МНС II класса;
(ii) весь или часть внеклеточного участка β-цепи МНС II класса;
при этом (i) и (ii) обеспечивают функциональный пептид-связующий домен, и (i) и (ii) соединены дисульфидной связью между остатками цистеина, расположенными на α2 домене указанной α-цепи и β2 домене указанной β-цепи, и при этом указанные остатки цистеина не присутствуют в нативных доменах α2 и β2 МНС II класса, а указанная рекомбинантная молекула не включает мотив лейциновой молнии.
α2
β2
α2
β2
α2
β2
2. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная дисульфидная связь расположена между остатками цистеина в положении Pro96-Ser119 (положение 1), Ser95-Ser121 (положение 2) или Arg94-Asn151(положение 3) мышиного изотипа I-Е или эквивалентных положениях в альтернативном изотипе МНС II класса.
α2
β2
3. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.2, отличающаяся тем, что указанная дисульфидная связь расположена между остатками цистеина в положении Ser95-Ser121 (положение 2) мышиного изотипа I-Е или эквивалентном положениии в альтернативном изотипе МНС II класса.
4. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что один или несколько остатков цистеина соответствует положениям 38, 42 или 106 эталонной последовательности Н-2ЕВ*01 (SEQ ID NO: 2) или один или несколько остатков цистеина в эквивалентных положениях альтернативного изотипа МНС II класса удалены.
5. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная рекомбинантная молекула экспрессируется на поверхности нитчатого бактериофага.
6. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.5, отличающаяся тем, что указанная рекомбинантная молекула экспрессируется в виде белка слияния с белком фаговой поверхности gpIII, gpVII, gpVIII или gpIX.
7. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.6, отличающаяся тем, что указанный белок на фаговой поверхности представлен gpIX.
8. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная молекула представлена растворимой молекулой.
9. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.8, отличающаяся тем, что (i) или (ii) указанной молекулы слиты с участком Fc иммуноглобулина.
10. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная молекула является полимерной.
11. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что (i) и (ii) указанной молекулы получены из молекул МНС II класса мыши или человека, преимущественно человека.
12. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная молекула получена из бактерии-хозяина.
13. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.12, отличающаяся тем, что указанная бактерия-хозяин представлена E. coli, преимущественно производным E. coli K12, более преимущественно, E. coli с фенотипом BL21 или его производным.
14. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная дисульфидная связь обеспечивает единственное средство стабилизации молекулы МНС II класса.
15. Рекомбинантная молекула МНС II класса по п.1, отличающаяся тем, что указанная молекула способна окрашивать T-клетки.
16. Рекомбинантная молекула МНС II класса по любому из пп.1-15, отличающаяся тем, что указанная молекула дополнительно включает пептид, связанный с указанным пептид-связующим доменом.
17. Рекомбинантная молекула МНС II класса, экспрессируемая с использованием прокариотического хозяина и включающая:
(i) весь или часть внеклеточного участка α-цепи МНС II класса;
(ii) весь или часть внеклеточного участка β-цепи МНС II класса;
при этом (i) и (ii) обеспечивают функциональный пептид-связующий домен, и (i) и (ii) соединены дисульфидной связью между остатками цистеина, расположенными на α2 домене указанной α-цепи и β2 домене указанной β-цепи, и при этом указанные остатки цистеина не присутствуют в нативных доменах α2 и β2 МНС II класса.
18. Способ получения рекомбинантной молекулы МНС II класса, включающей:
(i) весь или часть внеклеточного участка α-цепи МНС II класса;
(ii) весь или часть внеклеточного участка β-цепи МНС II класса;
при этом (i) и (ii) обеспечивают функциональный пептид-связующий домен, и (i) и (ii) соединены дисульфидной связью между остатками цистеина, расположенными на α2 домене указанной α-цепи и β2 домене указанной β-цепи, и при этом указанные остатки цистеина не присутствуют в нативных доменах α2 и β2 МНС II класса,
содержащий экспрессирование указанной рекомбинантной молекулы в прокариотическом хозяине.
19. Способ идентификации антигенных пептидных детерминант, распознаваемых T-клетками, включающий этапы контакта рекомбинантной молекулы МНС II класса по п.16 с рецептором T-клеток и определение связывания указанной рекомбинантной молекулы МНС II класса с указанными рецептором T-клеток.
20. Способ определения антиген-специфических T-клеток в образце, включающий этапы контакта рекомбинантной молекулы МНС II класса по п.16 с указанным образцом и определение связывания указанной рекомбинантной молекулы МНС II класса с указанными T-клетками.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что его используют для определения присутствия болезнь-специфических T-клеток в образце и для диагностики присутствия или отсутствия заболевания.