АНТИТЕЛА К ГЛЮКОКОРТИКОИД-ИНДУЦИРОВАННОМУ РЕЦЕПТОРУ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ (GITR) И СПОСОБЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

1. Выделенное гуманизированное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с человеческим глюкокортикоид-индуцированным рецептором фактора некроза опухоли (GITR), содержащее:
a. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
b. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8;
c. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12;
d. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16;
e. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20;
f. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24;
g. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28;
h. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32;
i. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36;
j. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40; или
k. вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44.
l, и вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48.
m, и вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 52.
2. Выделенное гуманизированное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, причем антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит:
(а) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 53, 54 или 55 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 56, 57 или 58;
(b) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 59, 60 или 61 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 62, 63 или 64;
(c) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 65, 66 или 67 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 68, 69 или 70;
(d) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 71, 72 или 73 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 74, 75 или 76;
(e) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 77, 78 или 79 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 80, 81 или 82;
(f) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 83, 84 или 85 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 86, 87 или 88;
(g) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 65, 72 или 89 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 90, 91 или 92;
(h) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 93, 94 или 95 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 96, 97 или 98;
(i) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 99, 100 или 101 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 102, 103 или 104;
(j) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 65, 72 или 105 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 106, 107 или 108;
(k) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 109, 72 или 110 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 111, 112 или 113;
(l) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 65, 72 или 114 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 115, 116 или 117; или
(m) вариабельный участок, определяющий комплементарность, тяжелой цепи (VH-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 101, 118 или 119 соответственно; и вариабельный участок, определяющий комплементарность, легкой цепи (VL-CDR) 1, 2 или 3, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 120, 121 или 122.
причем указанное антитело или связывающий фрагмент антитела связывают человеческий глюкокортикоид-индуцированный рецептор фактора некроза опухоли (GITR)
3. Антитело по п. 1, в котором указанное антитело является моновалентным или двухвалентным.
4. Антитело по п. 1, в котором указанное антитело представляет собой одноцепочечное антитело.
-5
-12
5. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанное антитело обладает аффинностью связывания в диапазоне от 10М до 10 М.
6. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанное антитело имеет константный участок тяжелой цепи IgG4.
7. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что участок Fc содержит мутации в аминокислотных положениях 234 и 235.
8. Антитело по п. 7, отличающееся тем, что мутации представляют собой L234A и L235A.
9. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой биспецифическое антитело, которое также связывается с ассоциированным с опухолью антигеном, цитокином или рецептором клеточной поверхности.
10. Антитело по любому из предыдущих пунктов, связанное с терапевтическим агентом.
11. Антитело по п. 10, отличающееся тем, что указанный терапевтический агент представляет собой токсин, радиоактивную метку, миРНК, малую молекулу или цитокин.
12. Клетка, продуцирующая антитело по любому из пп. 1-11.
13. Способ деплетирования регуляторных Т-клеток у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, содержащей антитело по любому из пп. 1-11.
14. Способ усиления иммунного ответа на антиген, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, содержащей антитело по любому из пп. 1-11.
15. Способ по п. 14, в котором указанный антиген представляет собой вирусный антиген, бактериальный антиген или ассоциированный с опухолью антиген.
16. Способ по п. 14, в котором указанное введение указанного антитела вызывает увеличение антиген-специфической Т-клеточной активности.
17. Способ по п. 14, в котором указанное введение указанного антитела вызывает увеличение цитотоксичности клеток НК.
18. Способ по п. 14, дополнительно включающий введение указанному субъекту ИЛ-15.
19. Способ лечения или облегчения симптома рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, содержащей антитело по любому из пп. 1-11.
20. Способ по п. 19, в котором указанный рак представляет собой рак, при котором GITR или его лиганд, GITR-L, сверхэкспрессируется.
21. Способ по п. 20, включающий дополнительное введение указанному субъекту цитокина или химиотерапевтического агента.
22. Способ по п. 21, в котором цитокин представляет собой ИЛ-15.
23. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты из SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51.
24. Нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид из SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52.
25. Полипептид, содержащий аминокислотную последовательность из SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52.
26. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 23 или 24.
27. Клетка, содержащая вектор по п. 26.