СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-ОРНИТИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ, СВЕРХЭКСПРЕССИРУЮЩИХ LYSE

1. Способ получения L-орнитина, отличающийся тем, что осуществляют следующие стадии, на которых:
а) осуществляют ферментацию бактерии, высвобождающей в среду L-орнитин, которая выбрана из группы, включающей бактерии p.p.Corynebacterium, Bacillus, Streptomyces, Arthrobacter и сем. Enterobacteriaceae, в которой происходит сверхэкспрессия полинуклеотида, кодирующего полипептид, который обладает активностью экспортера L-орнитина и аминокислотная последовательность которого идентична аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:2, или аминокислотная последовательность которого может быть получена из последовательности, представленной в SEQ ID NO:2, путем осуществления в общей сложности максимум 25 делеций, инсерций, замен или добавлений аминокислот на N- или соответственно на С-конце,
б) накапливают L-орнитин в среде, получая в результате ферментационный бульон, и
в) в котором для осуществления сверхэкспрессии не применяют плазмиду pEC71ysE, депонированную под регистрационным номером DSM23239,
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при применении Corynebacterium glutamicum в результате сверхэкспрессии повышают уровень активности в отношении экспорта L-орнитина по меньшей мере на 10% по сравнению с активностью штамма АТСС13032 или АТСС14067, или АТСС13869.
3. Способ по пп.1-2, отличающийся тем, что сверхэкспрессию обеспечивают с помощью одной или нескольких мер, выбранных из группы, включающей:
а) увеличение количества копий,
б) применение сильного промотора и
в) осуществление мутации промотора и
г) сверхэкспрессию белка-активатора.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что бактерия представляет собой бактерию p.Corynebacterium, предпочтительно Corynebacterium glutamicum.
5. Способ по п.2, отличающийся тем, что бактерия представляет собой бактерию p.Corynebacterium, предпочтительно Corynebacterium glutamicum.
6. Способ по п.3, отличающийся тем, что бактерия представляет собой бактерию p.Corynebacterium, предпочтительно Corynebacterium glutamicum.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что дополнительно ослабляют один или несколько генов, выбранных из группы, включающей:
а) ген odhA, кодирующий субъединицу Е1 альфа-кетоглутаратдегидрогеназы (КФ 1.2.4.2),
б) ген sucA, кодирующий дигидролипоамид-сукцинилтрансферазу (КФ 2.3.1.61),
в) ген dapA, кодирующий дигидродипиколинатсинтазу (DapA, КФ 4.2.1.52),
г) ген dapB, кодирующий дигидродипиколинатсинтазу (DapB, КФ 1.3.1.26),
д) ген ddh, кодирующий мезо-диаминопимелатдегидрогеназу (Ddh, КФ 1.4.1.16),
е) ген lysA, кодирующий диаминопимелатдекарбоксилазу (LysA, КФ 4.1.1.20),
ж) ген argR, кодирующий любой/конкретный репрессор (ArgR) биосинтеза L-аргинина,
з) ген argF, кодирующий орнитинкарбомоилтрансферазу (ArgF, КФ 2.1.3.3),
и) ген argG, кодирующий аргининсукцинатсинтазу (ArgG, КФ 6.3.4.5),
к) ген argH, кодирующий аргининсукцинатлиазу (ASAL) (ArgH, КФ 4.3.2.1),
л) ген lysC, кодирующий аспартаткиназу (LysC, КФ 2.7.2.4), и
м) ген asd, кодирующий аспартат-полуальдегид-дегидрогеназу (Asd, КФ 1.2.1.11).
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что дополнительно усиливают один или несколько генов, выбранных из группы, включающей:
а) глутаматдегидрогеназу (КФ 1.4.1.3), кодируемую геном gdh,
б) глутамат-N-ацетилтрансферазу (КФ 2.3.1.35 и КФ 2.3.1.1), кодируемую геном argJ,
в) ацетилглутаматкиназу (КФ 2.7.2.8), кодируемую геном argB,
г) N-ацетил-гамма-глутамил-фосфатредуктазу (КФ 1.2.1.38), кодируемую геном argC,
д) ацетилорнитинаминотрансферазу (КФ 2.6.1.11), кодируемую геном argD,
е) специфический в отношении глюкозы компонент EIIB (PtsG) (КФ 2.7.1.69) системы поглощения глюкозы, кодируемый геном ptsG,
ж) специфический в отношении сахарозы компонент EIIB (PtsS) (КФ 2.7.1.69) системы поглощения сахарозы, кодируемый геном ptsS,
з) глюкозо-6-фосфат-1-дегидрогеназу (КФ 1.1.1.49), кодируемую геном zwf,
и) глюкозо-6-фосфатизомеразу (КФ 5.3.1.9), кодируемую геном pgi,
к) фосфофруктокиназу (КФ 2.7.1.11), кодируемую геном pfkA,
л) фруктозобифосфатальдолазу (КФ 4.1.2.13), кодируемую геном fda,
м) глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу (КФ 1.2.1.59), кодируемую геном gap,
н) фосфоглицераткиназу (КФ 2.7.2.3), кодируемую геном pgk,
о) пируваткиназу (КФ 2.7.1.40), кодируемую геном pyk,
п) Е1-субъединицу пируватдегидрогеназы (КФ 1.2.4.1), кодируемую геном асеЕ,
р) фосфоенолпируваткарбоксилазу (КФ 4.1.1.31), кодируемую геном ррс,
с) пируваткарбоксилазу (КФ 6.4.1.1), кодируемую геном рус,
т) аконитазу (КФ 4.2.1.3), кодируемую геном acn, и
у) изоцитратдегидрогеназу (КФ 1.1.1.42), кодируемую геном icd.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что процесс ферментации выбирают из группы, включающей периодический процесс, периодический процесс с подпиткой, периодический процесс с повторной подпиткой и непрерывный процесс.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что выделяют L-орнитин или жидкий или твердый содержащий L-орнитин продукт из содержащего L-орнитин ферментационного бульона.