Антиатеросклеротическая и гиполипидемическая активность лекарственных средств растительного происхождения

нить необходимое оперативное вмешательство эндохирургическим путем.

Мы выполняли эндоскопическую пункцию тонкой кишки с целью опорожнения содержимого кишечника, что позволяло в дальнейшем выполнить операцию эндоскопически.

Данный способ применен нами у 8 пациентов (у 3 с перитонитом и у 5 с острой спаечной кишечной непроходимостью). Перистальтика восстановилась в 1-2-е сутки.

Осложнений не отмечено. Послеоперационное течение без особенностей. Катетер и гильзы удалены на 2-4-е сутки.

Сведения об авторах статьи:

Гумеров Аитбай Ахметович - зав. кафедрой детской хирургии БГМУ, д.м.н., профессор, заслуженный врач РФ (г. Уфа). Изосимов Александр Николаевич - руководитель департамента здравоохранения г. Тольятти, к.м.н. izosimov@zdravtlt.ru Плечев Владимир Вячеславаович - зав. кафедрой госпитальной хирургии БГМУ, д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ, член-корр. АН РБ (г. Уфа).

Мамлеев Игорь Айратович, кафедра детской хирургии БГМУ

Рисберг Роман Юрьевич - аспирант кафедры госпитальной хирургии БГМУ (г. Уфа).

ЛИТЕРАТУРА

1. Плечев В.В., Шабаев Р.Р., Нартайлаков М.А., Корнилаев П.Г. Применение клея «Сульфакрилат» в экстренной абдоминальной хирургии: тез. докл. регион. конф. «Медицинская наука - практике». - Уфа, 1989. - С.234-236.

2. Лапароскопия в диагностике и лечении острой спаечной кишечной непроходимости / А.Г.Хасанов, В.М.Сибаев, И.М.Уразбахтин [и др.]: тез. 3-й всероссийск. научно-практ. конф. “Новые технологии в хирургии”. -Уфа, 1998. - С. 103-105.

3. Диагностика и лечение больных с острой кишечной непроходимостью /Д.М.Красильников, Д.М.Миргасимова, М.М.Миннегалиев [и др.]: матер. Девятого всероссийск. съезда хирургов. - Волгоград, 2000. - С. 180-181.

4. Декомпрессия тонкой кишки при острой непроходимости кишечника /С.Н.Хунафин, И.Х.Гаттаров, М.С.Кунафин [и др.]: матер. Девятого всероссийск. съезда хирургов. - Волгоград, 2000. - С.224-225.

УДК 615.322:616. 13 - 004.6 © А.К. Бердгалеева, А.Г. Беккужин, 2012

А.К. Бердгалеева, А.Г. Беккужин АНТИАТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКАЯ И ГИПОЛИПИДЕМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Западно-Казахстанский государственный медицинский университет им. Марата Оспанова, г. Актобе

Целью работы явилось изучение влияния масляных экстрактов из корня солодки и масла льна на липидные спектры в гомогенатах жировой ткани и тканях печени при экспериментальном атеросклерозе у крыс. Экстракцию липидов из ткани печени и жировой ткани проводили методом Folch J. Фракционирование индивидуальных фосфолипидов осуществляли с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ). Содержание общего фосфора и фосфора фосфолипидных фракций по методу Фиска-Саббароу (М.И. Прохорова, 2003). Установлено, что изучаемые масла при экспериментальной гиперхолесте-ринемии оказывают нормализующее действие на липидные и фосфолипидные фракции в тканях крыс. Однонаправленное действие масел объясняется сходным жирнокислотным составом, разнонаправленное - различием химического состава.

Ключевые слова: масло солодки, масло льна, гиперхолестеринемия, экспериментальный атеросклероз, липидный спектр, фосфолипиды, жировая ткань, печень.

A.K. Berdgaleyeva, A.G. Bekkuzhin ANTIATHEROSCLEROTIC AND HYPOLIPID ACTIVITY OF PHYTOGENIC MEDICINAL PRODUCTS

The article relates to the study of oil extracts of Glycyrrhiza root and Linum usitatissimum (flax) oil and their influence on lipid spectra in adipose and liver tissue homogenate in experimental atherosclerosis rats. Extraction of lipids from liver and adipose tissues was performed by Folch J. method. Fracturization of individual phospholipids was carried out by means of thin layer chromatography (TLC) method, the content of total phosphorus and phospholipid fractions was determined by C.H. Fiske-Y. Subbarow method (M.I.Prokhorova, 2003). It was established that the oils under study have a normalizing effect on lipids and phospholipid fractions in experimental hypercholesterolemia rats. A unidirectional action of oils was found to be due to a similar lipid and acid structure, while a multidirectional effect was achieved with varying chemical composition.

Key words: Glycyrrhiza oil, Linum usitatissimum (flax) oil, hypercholesterolemia, experimental atherosclerosis, lipid spectrum, phospholipids, adipose tissue, liver.

Выводы

1. Декомпрессия кишечника может производиться пункционным способом.

2. Повышение ВКД более 5 мм рт. ст. приводит к выделению кишечного содержимого из просвета кишки через пункционные отверстия от игл диаметром 0,6 мм и более.

3. Ушивание пункционных отверстий в стенке тонкой кишки серозным кисетным или 2-образным швом препятствует просачиванию кишечного содержимого в брюшную полость даже при повышении ВКД более 20 мм рт.ст.

Заболевания, развивающиеся на основе актуальнейших нерешенных задач современ-

атеросклероза, остаются на сегодня одной из ной медицины. Прогрессирующие атероскле-

ротические сосудистые заболевания, по оценкам ВОЗ, занимают первое место среди причин смертности населения индустриально развитых стран [1-3]. В структуре сердечнососудистых заболеваний ведущее место занимает атеросклероз, который является проявлением нарушения обмена холестерина. По данным ВОЗ, не менее 10% населения Земли страдают дислипопротеинемией. Несмотря на значительные достижения медицины в России и большинстве западных стран, ишемическая болезнь сердца, которая чаще всего является следствием атеросклероза и инсульта атеросклеротической природы, является причиной большого количества смертных случаев [4,5]. В Республике Казахстан ИБС также является основной причиной смертности населения. Более половины смертностей от болезней системы кровообращения приходится на ИБС и артериальную гипертензию [6].

Атеросклероз - это патология организма, связанная с нарушением липидного обмена и поражением кровеносных сосудов, приводящая к гематологическим нарушениям [7,8,9,10]. Гематологические нарушения зависят от степени сужения сосудистого русла за счет атеросклеротических образований.

В фокусе постоянного внимания у исследователей и специалистов по превентивной медицине не только вопросы эпидемиологии сосудистой патологии, но и вопросы, связанные с эффективностью фармакотерапии. Лечение болезней сосудов длительное, а во многих случаях пожизненно [11,12,13,14].

Поэтому в настоящее время задачей фармакологов и химиков является поиск новых лекарственных средств, обладающих высокой гиполипидемической и антиатероскле-ротической активностью и низкой токсичностью. Таким требованиям отвечают препараты растительного происхождения.

Материал и методы

Эксперименты проводили на 60 белых нелинейных крысах весом 180-250г. Изучаемый масляный экстракт из корней солодки разработан на кафедре фармакологии Западно-Казахстанского государственного медицинского университета им. Марата Оспанова. Для установления гиполипидемической активности нового фитопрепарата у животных воспроизводили модель гиперлипидемии путем применения диеты, содержащей 2% холестерин, согласно методическим указаниям Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ [14]. Животные были разделены

на 6 экспериментальных групп: 1-я группа интактных животных - контрольная; 2-я

группа, в которой животные в течение 2 месяцев находились на холестериновой диете; 3-я группа животных, получавших масляный экстракт из корня солодки на фоне холестериновой диеты; 4-я группа животных, получавших масло льна как препарат сравнения на фоне холестериновой диеты; 5-я группа интактных животных, получавших подсолнечное масло (масляная основа изученного препарата) и 6-я группа животных, получавших подсолнечное масло на фоне холестериновой диеты. Изучаемые масляные экстракты вводили внутри-желудочно с помощью атравматического зонда в дозе 2,5 мл/кг соответственно массе тела. Через 8 часов после последнего введения животных забивали и в гомогенате жировой ткани и печени определяли липидные и фосфо-липидные спектры после предварительного выделения липидов. Экстракцию липидов из ткани печени и жировой ткани проводили методом БоісЬ Г [15,16]. Фракционирование индивидуальных фосфолипидов осуществляли на пластинках «Силуфол» (Чехия) в тонком слое селикагеля в системе растворителей хло-роформ-гексан-диэтиловый эфир (2:1:1).

Содержание общего фосфора и фосфора фосфолипидных фракций определяли по методу Фиска-Саббароу [15]. ТСХ позволяет разделить фосфолипиды на следующие фракции: лизофосфатидилхолин (ЛФХ), сфинго-миелин (СФМ), фосфатидилхолин (ФХ), фос-фатидилсерин (ФС), фосфатидилинозин (ФИ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидная кислота (ФК), кардилипины (КЛ), сульфати-ды, нейтральные липиды. Концентрацию липидов определяли по содержанию фосфора. Уровень отдельных фракций фосфолипидов выражали в процентах (по фосфору) от суммарных фосфолипидов. Количественную оценку содержания отдельных фракций липидов и фосфолипидов проводили с использованием компьютерной программы «Денситометр сорбфил».

Результаты и обсуждение

Жировая ткань, а точнее резервный жир, содержащийся в жировой ткани, служит главным источником жирных кислот, используемых в качестве энергетического топлива, и ее роль весьма важна в обмене липидов. Поэтому нами было изучено влияние экспериментального холестериноза, вызванного введением животным 2% холестерина на обмен липидов в жировой ткани. Результаты полученных исследований приведены в табл. 1.

Таблица 1

Изменение основных показателей липидного обмена в жировой ткани крыс при холестериновом атеросклерозе

Показатели, %

Группы животных ФОСФОЛИПИДЫ СВОБОДНЫЕ ЖИРНЫЕ ТРИГЛИЦЕРИДЫ ЭТЕРИФИЦИРОВАННЫИ

КОНТРОЛЬ 4,45±0,016 3,10±0,095 94,25±0,174 2,05±0,087

ХОЛЕСТЕРИНОВАЯ МОДЕЛЬ (ХМ) 2,12±0,111* 1,76±0,024* 98,7±0,084* 1,83±0,033*

ХМ+СОЛОДКИ МАСЛО 6,25±0,03*° 3,07±0,10° 95,05±0,48° 2,10±0,09

ХМ+ МАСЛО ЛЬНА 5,52±0,15*° 3,32±0,18° 94,22±0,97° 3,47±0,06*°

* Достоверное различие с контролем. ° Достоверное различие с моделью.

Установлено, что у животных, получавших подсолнечное масло, изучаемые показатели не отличались от контрольной группы, а показатели животных 6-й группы от показателей животных с моделью патологии. Это указывает на то, что масляная основа не оказывает фармакологического действия. Поэтому данные группы не включены в таблицы. Как видно из табл. 1, содержание животных на холестериновой диете в течение 2-х месяцев приводило к достоверному снижению в подкожном жире крыс фосфолипидов, свободных жирных кислот, эфиров холестерина в 2,1; в 1,76, в 1,12 раза соответственно и к достоверному увеличению триглицеридов в 1,05 раза по сравнению с контрольной группой. Повышение триглицеридов, по-видимому, происходит за счет включения метаболизма углеводов и белков.

Применение масляных экстрактов при экспериментальном холестеринозе вызывало изменение показателей липидов жировой ткани. Так, применение масляного экстракта солодки (МЭКС) на фоне экспериментального атеросклероза вызывало повышение фосфолипидов жировой ткани по сравнению с моделью патологии и контрольной группой - на 92,8% и 40,5% соответственно, а повышение СВЖК - на 42,4% до показателя контрольной группы. Масло солодки снижало уровень

триглицеридов до контрольных величин и не влияло на эстерификацию холестерина.

Введение масла льна вызывало повышение фосфолипидов жировой ткани по сравнению с моделью патологии и контрольной группой - на 76% и 24% соответственно. Масло льна на фоне экспериментального атеросклероза достоверно повышало уровень свободных жирных кислот на 50,5% , доводя до контрольных величин. Также достоверно повышался уровень эфиров холестерина по сравнению с моделью патологии и контрольной группой на 80% и 69% соответственно. При этом масло льна достоверно снижало содержание триглицеридов в жировой ткани крыс.

Таким образом, на стимуляцию и размножение клеток жировой ткани и пластическую функцию в целом эффективное влияние оказывают как масло льна, так и масло солодки. Глубина сдвигов изученных показателей объясняется, по-видимому, различным химическим составом данных масел, влияющих на регуляцию и выведение избытка холестерина.

Для изучения глубины механизма действия масляных экстрактов нами было изучено их влияние на фракции фосфолипидов ткани печени при холестериновой модели атеросклероза. Результаты полученных исследований приведены в табл. 2.

Таблица 2

Изменение фракций фосфолипидов в гомогенате печени крыс при холестериновом атеросклерозе

ГРУППЫ ЖИВОТНЫХ

ПОКАЗАТЕЛИ КОНТРОЛЬ ХОЛЕСТЕРИНОВАЯ МОДЕЛЬ (ХМ) ХМ + МАСЛО СОЛОДКИ ХМ + МАСЛО ЛЬНА

ЛИЗОФОСФАТИДИЛХОЛИН (ЛФХ) 0,98±0,22 5,83±0,09* 0,97±0,12° 1,20±0,15°

ФОСФАТИДИЛХОЛИН(ФХ) 38,2±0,11 15,13±0,39* 38,73±0,89° 39,37±1,78°

ФОСФОЭТАНОЛАМИН (ФЭА) 11,47±0,18 5,90±0,10* 12,5±0,43° 14,73±0,50*°

ФОСФОСЕРИН+СФИНГОМИЕЛИ-НЫ 30,37±0,43 26,53±0,42* 36,47±0,84*° 30,43±0,09°

ФОСФОИНОЗИН 3,6±0,11 2,13±0,14* 3,63±0,033° 3,5±0,25°

СУЛЬФАТИДЫ 0,70±0,06 0,27±0,03* 0,64±0,03° 0,60±0,06°

ФОСФАТИДНАЯ КИСЛОТА 1,2±0,06 0,3±0,06* 0,53±0,03*° 0,57±0,03*°

КАРДИЛИПИНЫ 0,17±0,03 0,20±0,06 0,47±0,09*" 0,43±0,03*°

ФХ / ФЭА 3,3 2,6 3,1 2,8

* Достоверное различие с контролем.° Достоверное различие с моделью.

Как видно из табл. 2, холестериновый атеросклероз, индуцированный введением животным 2% холестерина, вызывал изменения фракций фосфолипидов печени. Так, в гомогенате печени наблюдается достоверное

повышение ЛФХ и КЛ в 6 и 1,2 раза соответственно по сравнению с контрольной группой. Наряду с этим происходит достоверное снижение ФХ на 60%, ФЭА - на 48,6%, суммы ФС и СФ - на 13%, ФИ - на 41%, сульфа-

тидов - на 62% и фосфатидной кислоты - на 75% по сравнению с контролем.

Изучение фосфолипидных фракций ткани печени крыс, получавших холестерин, показало характерные метаболические нарушения, требующие включения компенсаторных механизмов. Результатом включения компенсаторных механизмов является накопление ЛФХ, который разрушает биологические мембраны клеток. Снижение фосфатид-ной кислоты свидетельствует о ее метаболическом недостатке для образования ФХ и других фосфолипидов.

Введение масляных экстрактов животным, получавшим холестерин, оказывало восстанавливающее действие на фракции фосфолипидов ткани печени. Так, из табл. 2 видно, что применение масла солодки животным, получавшим холестерин, приводило к снижению ЛФХ в 6 раз и повышению ФХ в 2,6 раза по сравнению с моделью патологии и доводило до показателя контрольной группы. Фракции ФЭА, ФИ и сульфатидов аналогично ФХ в этих же условиях повышались по сравнению с моделью патологии на 57,5%, 41,7% и 53,7% соответственно с доведением до контрольных величин. Сумма ФС и СФ и КЛ под влиянием масла солодки у животных с холестериновым атеросклерозом достоверно повышалась по сравнению с моделью патологии и контроль-

ной группой на 32,7% и 20%, 160% и 180% соответственно. При этом уровень фосфатид-ной кислоты повышался на 19%, по сравнению с моделью патологии, но не достигал контрольных значений.

Масло льна снижало ЛФХ в 5 раз до контрольных величин и достоверно повышало фракции ФХ, суммы ФС и СФ, ФИ, сульфа-тидов по сравнению с моделью патологии, что соответствовало контрольным значениям. Уровень фосфатидной кислоты под влиянием масла льна повышался относительно модели патологии на 22%, но не достигал контрольных значений. Масло льна повышало фракции ФЭА по сравнению с моделью патологии и контрольной группой на 107% и 28% соответственно. Фракции кардиолипинов масло льна повышало по сравнению моделью патологии и контрольной группой в 2,2 и 2,6 раза соответственно.

Таким образом, изучаемые масла оказывали нормализующее действие на ЛФХ, ФХ, ФИ, сульфатитиды. Нормализация суммы ФС и СФ наблюдалась только под влиянием масла льна, а ФЭА - под влиянием масла солодки.

Однотипное действие масел на изучаемые показатели объясняется одинаковым жирнокислотным составом масел, а разнонаправленное - отличием химического состава.

Сведения об авторах статьи:

Бердгалеева Айман Кажигалеевна - к.б.н., доцент, руководитель кафедры фармацевтических дисциплин, ЗападноКазахстанский ГМУ им. Марата Оспанова. Адрес: 030019, г. Актобе, ул. Маресьева, 68. E mail: bak0803@mail.ru.

Беккужин Анес Габбасович - к.б.н., доцент кафедры биохимии, Западно-Казахстанский государственный медицинский университет им. Марата Оспанова. Адрес: 030019, г. Актобе, ул. Маресьева, 68. Тел. 87132 -567830.

ЛИТЕРАТУРА

1. Беленков, Ю.Н. Современные принципы коронарной ангиографии / Ю.Н. Беленков, А.П. Савченко, Ю.Г. Матчин // Сердце. -2002. - №6. - С.265-268.

2. Манак, Н.А. Руководство по кардиологии. - Минск: Беларусь, 2003. - 185 с.

3. Goldberg R.J., Trends in community mortality due coronary heart disease / Goldberg R.J., Glarfelter K., Burbank-Schmidt E. et al. // Am Heart J. -2006. -V.151(2). - P.501-507.

4. Оруджаева, С.А. Оценка функциональных резервов сердечно-сосудистой системы у больных сахарным диабетом. Опасности анестезии и возможности анестезиологического обеспечения больных с гнойно-некротическими формами синдрома диабетической стопы / С.А. Оруджаева, А.А. Звягин // Новости анестезиологии и реаниматологии. - 2006. - №3. - С. 1 - 19.

5. Baigent C. Cholesterol Treatment Trialists (CTT) collaborators // C. Baigent// Lancet, 2005 - №366. - H. 1267 - 1278.

6. Джусипов А.К Здоровье населения Казахстана по сердечно-сосудистым заболеваниям и оценка работы кардиологической службы / А.К. Джусипов, Ж.Абылайулы, К.П. Ошакбаев [и др.] // Терапевтический вестник. - 2004. - №4. - С. 3 - 6.

7. Ройтберг, Г.Е. Внутренние болезни. Сердечно-сосудистая система / Г.Е.Ройтберг, А.В. Струтынский. - М.: Бином, 2003. - 856с.

8. Гуревич, В.С. Современные представления о патогенезе атеросклероза// Болезни сердца и сосудов. - 2006. - №4. - С. 4-7.

9. Ройтберг, Г.Е. Метаболический синдром / под ред. Г.Е. Ройтберга. - М.: МЕДпресс-информ, 2007. -224 с.

10. Галявич, А.С. Нарушение обмена жирных кислот при атеросклерозе и возможности его коррекции / А.С. Галявич, Л.Р. Салахо-ва // Кардиология, 2006г. - №12 - С. 36-39.

11. Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза: Российские рекомендации IV пересмотра. М., 2009.

12. Морозов, С.Ю. Применение симвастатина для лечения и профилактики ишемической болезни сердца / С.Ю. Морозов // РМЖ. -2009. - Т.17, №8. - С.606 - 609.

13. Вологожанин, Д. А. Иммунитет и питание / Д. А. Вологожанин, Н.М. Калинина, П.С. Князев // Иммунология. - 2006 -Т. 6. -С. 626 - 647.

14. Рыженков, В. Е. Методические указания по изучению гиполипидемического и антиатеросклеротического действия фармакологических веществ / В.Е. Рыженков, О.В.Романова, В.Г. Макаров // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.,2000. - С.224-227.

15. Прохорова, М.А. Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен) /под ред. М.И. Прохоровой. - Л.: Изд-во Ленинградского университета, 2003. - 327 с.

16. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии. - В 2 ч., / М. Шаршунова, В.Шварц,

Ч.Михалец. - М.: Изд-во Мир, 1980. - Ч. 2. - С. 536 - 550.