Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Противоопухолевая терапия: от эксперимента к клинике» (Москва, 20-21 марта 2014 года)

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 57

Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Противоопухолевая терапия: от эксперимента к клинике» Москва, 20-21 марта 2014 года

ТЕЗИСЫ

#

Е.В. Абакушина, Ю.В. Маризина, Г.С. Неприна, И.А. Пасова, Б.А. Бердов ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОТИПА ЛИМФОЦИТОВ

ПОСЛЕ ИММУНОТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЖЕЛУДКА И ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА

ФГБУ «Медицинскийрадиологический научный центр» Минздрава России, Обнинск, Калужская область

Задачи исследования. Оценить субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови у онкологических больных раком желудка и кишечника и маркеров активации лимфоцитов на этапах сопроводительной иммунотерапии с использованием активированных in vitro лимфоцитов.

Материалы и методы. В работе оценен фенотип В-, Т-, NKT-, NK-лимфоцитов периферической крови и маркеры активации (HLA-DR, CD38, CD69, CD314, CD25) у 13 пациентов с диссеминированными формами рака желудка и толстой кишки. Лимфоциты выделяли по стандартной методике и культивировали в полной питательной среде с ростовыми факторами (инсулин, трансферин) и цитокинами (IL-2 и IL-15) в С02 инкубаторе 7-10 дней. Фенотипирование флуоресцентно меченых лимфоцитов проводили на проточном цитофлуори-метре FACScan.

Результаты и выводы. Показано, что лимфоциты хорошо активируются и пролиферируют in vitro. До лечения у 5 (38 %) больных отмечалось снижение относительного числа В-лимфоцитов. У 46 % больных наблюдалось повышение абсолютного и у 78 % относительного содержания Treg-клеток (CD4 25 ). С другой стороны, более чем у половины пациентов (62 %) увеличено число NK-клеток. Число активированных лимфоцитов (HLA-DRall) у больных в среднем составило 17,87 %, CD25+ клеток - 9,79 %, CD38+ - 28,27%, a CD69+ - 22,92 %. Среднее содержание рецептора NKG2D (CD314+) на всех лимфоцитах составило 41,2 %, а на NK-клетках -17,13 %.

После иммунотерапии у всех больных сохранился исходно низкий уровень В-лимфоцитов (ср. 5%) и повышенное содержание Treg. Выявлено увеличение экспрессии маркеров CD25+, CD314+, CD38+, HLA-DRall на всех лимфоцитах и на Т-лимфоцитах (HLA-DR, CD38 ). Отмечено незначительное снижение в кровяном русле NK-клеток (на 7%) и активированных NK-клеток (CD314+, CD69+). Через несколько месяцев после иммунотерапии наблюдается положительная тенденция в увеличении экспрессии маркеров HLA-DRall, CD25 , CD314 на всех лимфоцитах и на HLA-DR Т-клетках.

Адоптивная иммунотерапия хорошо переносится, характеризуется отсутствием побочных эффектов и может рекомендоваться как сопроводительная к лучевой и химиотерапии при заболеваниях раком желудка и кишечника.

#

С.М. Адекенов , С.Н. Шин , B.C. Шнаукшта

ИССЛЕДОВАНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ ПРЕПАРАТА «АРГЛАБИН» ПРИ ПОВЫШЕННОЙ ДОЗЕ 1АО «Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия», Караганда, Казахстан 2 Испытательный Центр РГП на ПХВ «Национальный Центр экспертизы лекарственных средств, изделий медицинского назначения и медицинской техники» МЗ РК, Алматы, Казахстан

Актуальность. Препарат «Арглабин» разработан в Международном научно-производственном холдинге «Фитохимия» (г. Караганда, Республика Казахстан) на основе сесквитерпенового лактона, выделенного из эндемичного растения полыни гладкой и зарегистрирован в качестве противоопухолевого средства в Республике Казахстан (регистрационное свидетельство РК-ЛС-5-000725) и Российской Федерации (регистрационное удостоверение ЛС-001578).

Задачи исследования. Изучить воздействие лекарственного препарата «Арглабин», проявляющееся после однократного и многократного введения в различных дозах.

Материалы и методы. Экспериментальные животные: мыши весом 18-23 г; крысы - 165-200 г.

Результаты и выводы. На основании полученных экспериментальных данных при изучении острой токсичности на обоих видах лабораторных животных установлено, что препарат «Арглабин» относится 3-му классу токсичности, т.е. умеренно токсичные препараты. Видоспецифичностью действия изучаемый препарат не обладает. Препарат в дозе, эквивалентной 500 мг/м2 у человека, практически не влияет на периферическую кровь, что свидетельствует о его низкой токсичности по отношению к органам кроветворения. Также «Арглабин» не вызывает глубоких ультраструктурных изменений внутренних органов гематологии в дозах, ниже эквивалентной 500 мг/м2 для человека.

Таким образом, рекомендуемая клиническая доза для человека может быть увеличена до 450 мг/м2.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

58 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

А. В

ОСОБЕННОСТИ ОПЕРАТИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ У БОЛЬНЫХ МЕЛАНОМОЙ КОЖИ ТУЛОВИЩА

ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского МЗ России, Саратов

Актуальность. Меланома кожи - это злокачественная опухоль с вариабельным и непредсказуемым клиническим течением. Стойкое излечение после иссечения, на ранних стадиях развития, может быть у 80-90% больных. В настоящее время четко показано, что широкое иссечение опухоли не улучшает результатов лечения. Невозможность измерения толщины опухоли до операции диктует необходимость учета толщины кожи различных ее участков.

Задача исследования. Показать целесообразность учета толщины кожи на различных участках туловища при планировании объема операции при меланоме кожи туловища.

Материалы и методы. Материалом исследования послужили данные о 285 больных меланомой кожи туловища 1-Ш стадий, находившихся на лечении с 2001 по 2011гг. Наиболее частой локализацией опухоли была область спины (55,2 %). На коже живота меланома была у 22,4 %, на коже передней грудной стенки - у 17,2 %, ягодичной области - у 5,2 % пациентов. Выполнялось иссечение опухоли с окружающими тканями, с последующей пластикой дефекта свободным или перемещенным кожным лоскутом. Отступ от границ опухоли определялся в зависимости от полученных при микроморфометрическом исследовании толщины кожи.

Результаты. По результатам микроморфометрического исследования, средние величины общей толщины кожи составили 1906,0 мкм (в области грудной стенки) - 3883,6 мкм (в области живота). Больные с локализацией меланомы на животе и в ягодичной области отобраны в первую группу (104 человека). Вторую группу составили больные с локализацией опухоли на коже передней грудной стенки и спины (187 человек). Средний размер меланомы в двух группах существенно не отличался и составил: в первой группе - 1,4см, во второй группе - 1,6см. Больным из первой группы выполнено экономное иссечение опухоли с отступом от визуальных границ 2 см. Пациентам второй группы - широкое иссечение с отступом 3-4см. Проводили морфологический контроль абластичности операции. Во всех случаях по линии резекции опухолевого роста не было. При исследовании толщины опухоли (Вге81ош) в обеих группах существенно не отличалась, составив 2,6 мм и 2,4 мм, соответственно. Период наблюдения составил 5 лет. Местный рецидив в первой группе был у 11,5 %, во второй группе - у 10,7 % человек. Отдаленные метастазы, соответственно, у 5,7 % и 5,3 %.

Выводы. Знание толщины кожи на различных участках туловища у больных меланомой позволяет уменьшить объем оперативного вмешательства без риска ухудшения отдаленных результатов.

A.C. Алексеева', М.Р. Катаева2, О.Н. Щегловитова2, Е.В. Свирщевская1, Г.В. Пазынина , Н.В. Бовин1, Е.Л. Водовозова1 СПЕЦИФИЧЕСКОЕ СВЯЗЫВАНИЕ И НАКОПЛЕНИЕ В ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ ЛИПОСОМ С ЛИГАНДОМ СЕЛЕКТИНОВ СИАЛИЛ-ЛЬЮИС X

1Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва 2НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи РАМН, Москва

Актуальность. Нами показано на модели карциномы легких Льюис (LLC), что оснащение 100-нм-липосом, нагруженых липофильным пролекарством мелфалана, тетрасахаридным лигандом селектинов сиалил Льюис X (SiaLeX) обеспечивает их транспорт (после в/в введения) к эндотелию опухолевых сосудов и последующий антиваскулярный эффект [Kuznetsova et al. J. Drug Target., 2014]. Селектины (белки адгезии) экспрес-сируются на активированных лейкоцитах, тромбоцитах и эндотелиальных клетках.

Цель исследования. Сравнительное исследование взаимодействия SiaLeX-nnnocoM и безадресных липо-сом с эндотелиальными клетками in vitro на модели клеток эндотелия кровеносных сосудов, полученных из пупочной вены человека (HUVEC).

Материалы и методы. Липосомы состава фосфатидилхолин / фосфатидилинозит / диолеоилглицерид мелфалана BODIPY-меченый фосфатидилхолин / ± конъюгат SiaLeX, 8:1:1:0.05:0.2-1 (мол.), получали экструзией через мембранные фильтры с порами 100 нм. Использовали первичную культуру клеток HUVEC, прошедшую не более 2-х пассажей. Активацию клеток фактором некроза опухоли a (hr ФНОа) проводили 4 ч при 37°C.

Результаты. С помощью конфокальной микроскопии и проточной цитофлуориметрии подтвержден рост экспрессии Е-селектинов на поверхности клеток при увеличении концентрации ФНОа (0.1-50 нг/мл). Активированные клетки в 5 раз эффективнее связывали SiaLeX-nnnocoMbi (10% мол. SiaLeX); прединкубация с избытком антител к Е-селектину ингибировала связывание липосом на 70%, а аналогичная обработка IgG не влияла на связывание. Увеличение содержания SiaLeX (2-10% мол.) приводило к росту связывания липосом с HUVEC, причем только в случае активированных клеток. Спектрофлуориметрия клеточных лизатов выявила 50%-ное увеличение накопления SiaLeX-nnnocoM во внутриклеточной фракции активированных клеток, по сравнению с липосомами без адреса.

Выводы. Введение SiaLeX-кoнъюгaтa в состав цитотоксических липосом обеспечивает их специфическое связывание и увеличение накопления в активированных клетках HUVEC, что согласуется с антиваскуляр-ным эффектом этих липосом, показанным ранее in vivo на модели LLC.

Работа поддержана грантом РФФИ № 13-04-00069.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 59

Б. Альбассит1, М.Т. Зангиева, Н.В. Грищенко2, М.А. Барышникова2, Е.В. Игнатьева2, B.C. Косорукое2, В.П. Краснов3, А.Ю. Барышников12

липосомальный противоопухолевый препарат or-2011 из класса нитрозомочевины для лечения меланомы

1 Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва 2ФГБУ «РОНЦ um. Н.НБлохина» РАМН, Москва

3Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург

Цель исследования. Разработка нового липосомального противоопухолевого препарата OR-2011 из класса нитрозомочевины для лечения меланомы.

Материалы и методы. Фосфотидилхолин EPC, холестерин и PEG-2000-DSPE смешивали в колбе вместимостью 150 мл, добавляли хлороформ и выпаривали на роторном испарителе на водяной бане при температуре 30±2 °C под вакуумом в течение 40 минут до образования липидной пленки. Для получения липосом пленку смывали филологическим раствором с препаратом, а затем экструдировали через фильтры с диаметром пор 400 нм, 200 нм и 100 нм. Размер липосом измеряли с помощью наносайзера. Для определения включения препарата в липосмы его пропускали через хроматографическую колонку, заполненную сефадексом G-50, в качестве элюента использовали раствор натрия хлорида 0,15 М. На выходе из колонки получали 2 фракции: первая - липосомы с препаратом, вторая - не включившийся препарат, в которых с помощью спектрофотометра измеряли количество препарата. Липосомы лиофилизировали на сублимационной сушке Christ GAMMA 2-16 LSC, дозируя во флаконы по 2 мл, в качестве криопротектора использовали 4% раствор сахарозы. Методом МТТ на клеточных линиях меланомы человека исследовали цитотоксическую активность полученных липосом в сравнении с субстанцией

Результаты и выводы. Выбран оптимальный состав и отработана технология получения липосомаль-ной лекарственной формы 0R-2011. С целью повышения стабильности лекарственной формы проведена лио-филизация липосомальной дисперсии. Для количественного определения содержания 0R-2011 в липосомах предложен метод спектрофотометрии при длине волны 230 нм. Включение 0R-2011 в липосомы составило 43,2 %, размер частиц - 150 нм. Было показало, что липосомальная лекарственная форма 0R-2011 обладает более сильным цитотоксическим действием, чем субстанция.

-1-2-2-2-

И.И. Андреяшкина , Г.М. Евдокимов , C.B. Аверьянова , И.Н. Сидоров

ОСОБЕННОСТИ ОСЛОЖНЕНИЙ

У СТОМИРОВАННЫХ БОЛЬНЫХ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ХИМИОТЕРАПИИ

1ГУЗ ООД № 2, Саратов

2ГБОУВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского, Саратов

Актуальность.. Около 50% больных колоректальным раком химиотерапия проводится с наличием у них временного или постоянного наружного кишечного свища (стомой).

Цель исследования. Изучить осложнения, развившиеся у больных колоректальным раком со стомой при проведении химиотерапии (ХТ).

Материал и методы. Проведён анализ частоты и выраженности осложнений при проведении ХТ у 227 стомированных больных колоректальным раком при различных схемах химиотерапии.

Результаты. При проведении химиотерапии у стомированных больных распределение по применяемым схемам химиотерапии было следующим: Mayo 95(42%) больных; FOLFIRI - 52(23 %); FOLFOX - 52(23 %); Кселода - 28(12 %). Диарейный синдром диагностирован у 106 (47 %) больных. Степень выраженности была следующей: I—II ст. - у (73 %); III-IV ст. - у (27 %). Наиболее выраженный диарейный синдром - III-IV ст. отмечался у больных при применении схемы FOLFIRI. В данной кагорте больных имелись отличия выраженности диарейного синдрома в зависимости от локализации стомы, так при наличии илеостомы диарейный синдром - III-IV ст. встречался наиболее часто и составил 80 %. При этом, на ряду с выраженным диарейным синдромом у 24 больных с илеостомой наблюдались выраженные «изменения» слизистой кишки и кожи вокруг нее, что потребовало применения лечебных мероприятий. Отмечался один летальный случай, причиной которого были выраженные диарейный и интоксикационный синдромы. Задержка эвакуации кишечного содержимого наблюдалась у 32(14 %) пациентов. Наиболее часто данный вид осложнения отмечался при применении схемы Мейо - 42 %. При применении капецитабина (кселода) данный вид осложнения привел острой кишечной непроходимости, который купировался консервативным методом лечения.

Выводы. При проведении химиотерапии у больных колоректальным раком с наличием стомы наиболее часто возникают осложнения, связанные с нарушением пассажа кишечного содержимого: диарейный синдром -47 % и задержка эвакуации - 14 %. Данные осложнения требуют лечебных мероприятий, направленных на нормализацию «стула», уходом за слизистой кишки и кожи вокруг нее. При диарейном синдроме III-IV степени необходим комплексный подход в лечении, обуславливающий применение диетотерапии, коррекции водно-электролитного баланса и применении ферментных препаратов.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

60 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

H.O. Антонова , М.А. Лапшина , E.H. Кабачков , А.П. Веселое , В.Д. Сень , A.A. Терентъев ДИНАМИКА ПРОМИЕЛОЦИТАРНО-ЛЕИКЕМИЧЕСКИХ ЯДЕРНЫХ ТЕЛЕЦ В КЛЕТКАХ MCF7 ПРИ ДЕЙСТВИИ КОМПЛЕКСОВ ПЛАТИНЫ РАЗНОЙ СТРУКТУРЫ 1Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского, Нижний Новгород 2Институт проблем химической физики РАН, г. Черноголовка, Московская область Задачи исследования. Промиелоцитарно-лейкемические ядерные тельца (ПМЛ-ЯТ) - динамические субъядерные макромолекулярные белковые образования, большая часть которых связана с ядерным матриксом. С ПМЛ-ЯТ связывают функцию регуляции процессов транскрипции, апоптоза, клеточного старения, опухолевой супрессии. Их количество, размер и локализация зависят от физиологии и транскрипционной активности клетки. Целью работы было исследование влияния комплексов платины разной структуры на динамику и локализацию ПМЛ-ЯТ в опухолевых клетках. Материалы и методы. Исследования проводили на клетках MCF7 (аденокарцинома молочной железы человека). На клетки действовали комплексами платины разной структуры - цисплатином и аминонитроксиль-ным комплексом платины (IV) (ВС131) в дозе IC50 на протяжении 12 часов. Визуализацию ПМЛ-белков и ла-мина B проводили на фиксированных препаратах клеток и изолированного ядерного матрикса путем непрямого двойного иммунофлуоресцентного окрашивания. Результаты и выводы. По данным флуоресцентной микроскопии в контроле в ядрах клеток MCF7 присутствует диффузный ПМЛ-белок, а ПМЛ-тельца представлены небольшим количеством и распределены по ядру. В ядрах некоторых клеток наблюдается скопление ПМЛ-ЯТ на периферии ядра. В образцах ядерного матрикса, изолированного из контрольных клеток, отсутствует диффузная фракция ПМЛ-белка, но наблюдаются крупные белковые конгломераты по периферии скелетной структуры. При действии цисплатина наблюдается деградация ПМЛ-ЯТ, диффузное распределением ПМЛ-белка по всему ядру, значительная часть ПМЛ-белка локализована в цитозоле. При действии комплекса ВС131 наблюдается распад ПМЛ-ЯТ и концентрирование PML-белка вокруг ядрышек и на периферии ядра. На препаратах ядерного матрикса клеток, обработанных комплексами платины, ПМЛ-белок обнаружен не был, что может быть связано с распадом ПМЛ-ЯТ и утратой связи ПМЛ-белков с ядерным матриксом. Таким образом, в эквитоксических дозах платиновые комплексы разной структуры отличаются по влиянию на динамику и локализацию ПМЛ-ЯТ и ПМЛ-белков, что может свидетельствовать о разных механизмах их цитотоксичности.

Г.Н. Апрышко РЕСУРСЫ ИНТЕРНЕТ В ИНФОРМАЦИОННОМ ОБЕСПЕЧЕНИИ ИССЛЕДОВАНИИ ПО ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва Эффективное использование Интернет-доступных информационных ресурсов по химии, биологии и биологически активным веществам способно обеспечить интеграцию между коллективами специалистов разных профилей (химики, биологи, медики, ветеринары, фармацевты и др.), работающих в области экспериментальной химиотерапии опухолей и повысить эффективность исследований по поиску активных противоопухолевых веществ. Опыт показывает, что по разным причинам не все научные сотрудники полноценно используют ресурсы Интернет при поиске необходимой информации. В докладе описываются основные Интернет-ресурсы информационной среды экспериментальной химиотерапии опухолей и особенности их использования. Преимущественное внимание уделяется поиску информации в специализированных, но мало используемых научными сотрудниками, ресурсах Национального института США - фактографической базе данных по противоопухолевым веществам Open NCI Database и интегрированной химико-биологической справочной системе Developmental Therapeutics Program, а также созданной совсем недавно Британской базе знаний canSAR, в которой интегрированы биологические, химические, фармакологические и клинические данные, имеющие отношение к созданию лекарств и трансляционным исследованиям в химиотерапии опухолей. Описана также база данных широкого фармакологического профиля Integrity фирмы Thomson Reuters, США, содержащая данные по противоопухолевым препаратам, находящимся на разных стадиях исследований от первичного скрининга до внедрения в клиническую практику. Охарактеризованы такие ценные ресурсы, как поисковые платформы Pub-Chem и Chemical Structure Lookup Service, позволяющие вести поиск в разных близкопрофильных базах данных по единому запросу.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... Si

КО. Асланян1, М.Н. Холодцова2'3'4, И.А. Аполихина РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЕ АЛАСЕНСА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ФДТ ПРИ ВВК 1ФППОВ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва 2Институт Общей Физики, РАН, Москва 3Université de Lorraine, (CRAN), UMR 7Q39, Франция 4CNRS, CRAN UMR7Q39, Франция 5ФГБУ «НЦАГи П им. академика В.И. Кулакова» МЗРФ Актуальность. Урогенитальный кандидоз является широко распространенным заболеванием, может возникать у лиц обоего пола и наиболее часто наблюдается у женщин репродуктивного возраста. Внедрение современных технологий в клиническую микробиологию позволило расширить исследования и показать, что отрицательное воздействие факторов внешней среды на микрофлору макро организма различной локализации, в том числе влагалища, ведет к разнообразной патологии как воспалительного, так и невоспалительного генеза. Цель исследования. Оценка эффективности и безопасности проведения фотодинамической терапии (ФДТ) с препаратом Аласенс у женщин с хроническим вульвовагинальным кандидозом. Материалы и методы. В исследование были включены 60 пациенток: 20 с вульвовагинальным кандидозом, 25 - бактериальным вагинозом и 15 - с неспецифическим вагинитом. Перед каждым сеансом ФДТ и после были сняты спектры флуоресценции ФС во влагалище и вульве у пациенток. Всем пациенткам проводилось 4 сеанса ФДТ диодным лазером (длина волны 400 нм) с периодичность раз в 3 дня. Эффективность лечения оценивалась на основании микроскопии мазков по Грамму, ПЦР в режиме реального времени (фемофлор), результатов бактериологических посевов, и спектрального анализа данных, т.е. флуоресцентной диагностики. Результаты и выводы. Отмечается, что после 4 сеанса не было отличий накопления фотосенсибилизатора в слизистой влагалища больных хроническим вульвовагинальным кандидозом и здоровой ткани, таким образом, возможно сделать вывод о высокой эффективности проведенной терапии. Исходя из полученных данных, можно заключить, что именно 4 сеанса ФДТ, проводимые 1 раз в 3 дня, являются достаточными для достижения лечебного эффекта. Эффективность терапии составила 95% (р<0,01). Кроме того, при долговременном наблюдении пациенток в течение 1S месяцев было выявлено снижение рецидивов до 5 раз. Важно также отметить высокую эффективность ФДТ в лечении бактериального вагиноза и устойчивых к другим видам терапии неспецифических кольпитов.

Г.А. Атажанова, О.Г. Рязаниев, Р.И. Сейдахметова, С.М. Адекенов ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ И ИХ КОМПОНЕНТОВ АО «Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия», Караганда, Казахстан Актуальность. Анализ сведений о противоопухолевых свойствах эфирных масел и их основных компонентов свидетельствует об ингибирующей активности роста опухолевых штаммов у D-лимонена, периллового спирта, гераниола, карвеола, фарнезола, неролидола, линалоола, ß-цитронеллола и ментола. При этом, перилло-вый спирт является эффективным в качестве ингибитора фарнезил протеин трансферазы. Перилловый спирт в тесте на хомяках сократил рост опухоли поджелудочной железы, а также оказался эффективным в снижении роста опухоли печени и толстой кишки. Гераниол предотвратил рост культивируемых опухолевых клеток ме-ланомы у крыс. Задачи исследования. Скрининг 42 образцов эфирных масел и их компонентов на цитотоксическую активность. Материалы и методы. Эфирные масла, основные компоненты и их производные. Наличие цитотоксиче-ской активности определялось в отношении личинок морских рачков Artemia salina (Leach) в условиях культивирования in vitro. Результаты и выводы. Все исследованные на цитотоксическую активность образцы эфирных масел обладали биологическим действием в отношении личинок морских рачков Artemia salina. Сравнительно высокой цитотоксической активностью в ряду исследованных образцов обладают эфирные масла Eryngium planum L., Ptarmica salicifolia (Besser) Serg., Chaeophyllum prescotti DC, Cnidium dubium Schkuhr Thell, Thymus lavrenkoanus Klokov, Lophantus schrenkii Levin, Peucedanum morissonii Bess, Hyssopus cuspidatus Boiss, Thymus vulgaris L., Thymus dmitrievae L., Scutellaria subcaespitosa Pavlov, Tanacetum ulutavicum Tzvelev, Thymus crebrifolius Klokov. Среди индивидуальных компонентов эфирных масел сравнительно высокой цитотоксической активностью обладают сабинол и сабинилацетат. Из испытуемых образцов производных монотерпеноидов слабой цитотоксической активностью обладают оксим камфоры, бромид OKCHMa камфоры, тетрабромид лимонена. Таким образом, благодаря многообразию компонентного состава, эфирные масла являются потенциальным источником новых соединений с противоопухолевой активностью.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

62 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

С.Б. Ахметова1, С.М. Адекенов2 к вопросу изучения биологической активности арглабина и его производных 1 Карагандинский Государственный медицинский университет, Караганда, Казахстан 2Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия», Караганда, Казахстан Актуальность. Сесквитерпеновые лактоны являются перспективной группой растительных соединений в плане создания на их основе новых противоопухолевых препаратов, что связано, с их структурными особенностями и относительной доступностью данных природных соединений. Ранее авторами изучена антибактериальная, противогрибковая и противовирусная активности сесквитерпенового лактона арглабина и его производных (гидрохлорида диметиламиноарглабина, тетрабромкарбенпроизводного арглабина, метилйодида диме-тиламиноарглабина) по отношению к тест-культурам S.aureus, B.subtilis, E.coli, Ps.aeruginosa, выраженную способность подавлять рост в отношении грибов A. flavus, T.mentagrophytes, T. rubrum, M. canis. Задачи исследования. оценить способность сесквитерпенового лактона арглабина и его производных (гидрохлорида диметиламиноарглабина, тетрабромкарбен производного арглабина, метилйодида диметиламиноарглабина) проявлять антибактериофаговую активность к эшерихиозному фагу (медиус, санкт-петербург). Материалы и методы. Испытания проводили по общепринятой методике определения противофаговой активности, в эксперименте использовались эталонные штаммы E.coli и специфический для этой бактерии эше-рихиозный жидкий бактериофаг. Результаты и выводы. В результате исследований установлено, что изученные образцы: сесквитерпе-новый лактон арглабин и его производные (гидрохлорид диметиламиноарглабина, тетрабромкарбен производное арглабина, метилйодид диметиламиноарглабина) - проявляют антибактериофаговую активность к эшерихиозному т-четному бактериофагу, результаты экспериментального исследования коррелируют с данными антивирусной активности сесквитерпенового лактона арглабин и его производных (гидрохлорида диметиламиноарглабина, тетрабромкарбен производного арглабина, метилйодида диметиламиноарглабина). В результате, изучение биологических свойств арглабина и его производных показало, специфическая активность проявленная в экспериментальных системах in vitro в том числе и на модели эшерихиозного бактериофага доказывает, что активность арглабина и его производных зависит как от особенностей строения их молекулы.

H.A. Бабушкина сравнительный анализ эффективности различных методов противоопухолевой терапии на основе математического моделирования Институт проблем управления им. В. А. Трапезникова РАН На протяжении многих лет борьбы с онкологическими заболеваниями происходит совершенствование уже хорошо изученных методов лечения и активная разработка новых методов противоопухолевой терапии. Все методы лечения направлены на максимальное уничтожение опухолевых клеток. Для каждого метода характерны различные механизмы воздействия на опухолевые клетки, вызывающие их гибель. При сравнении эффективности различных методов противоопухолевой терапии, как в экспериментальных исследованиях, так и в клинической практике необходимо использовать единый количественный критерий оценки эффективности лечения. В данной работе представлен количественный критерий оценки эффективности лечебного воздействия на основе математических моделей, описывающих экспериментальные кинетические роста опухоли в контроле и после лечебного воздействия. Эффективность лечебного воздействия определяется длительностью задержки роста опухоли от начала введения препарата до момента, когда опухоль после частичной или длительной ремиссии снова достигает исходного размера в момент начала лечения. Длительность задержки роста опухоли легко определяется в эксперименте и согласуется с клиническим подходом к оценке эффективности лечения. В работе приведены результаты оценки эффективности противоопухолевой терапии по предложенному критерию, разработанному на основании математического описания механизмов гибели опухолевых клеток при вы-сокодозовой химиотерапии, химиотерапии на ферромагнитных частицах (ФМЧ) и при вакцинотерапии вирусом венесуэльского энцефаломиелита лошадей (ВЭЛ), который вызывает двухэтапную иммунную реакцию в организме. Получены зависимости «доза - эффект» и определены значения параметров этих функций, что является необходимой основой для последующих расчетов оптимальных режимов применения лечебных воздействий. Сравнительный анализ эффективности трех методов противоопухолевой терапии по данному критерию, полученный в результате расчетных экспериментов на математической модели показал, что метод вакцинотерапии вирусом ВЭЛ является наиболее эффективным по сравнению с высокодозовой химиотерапией и химиотерапией на ФМЧ. Использование математического моделирования для описания механизма гибели опухолевых клеток позволяет выявить влияние на эффективность лечебного воздействия множества сопутствующих параметров, которые отражают специфику метода противоопухолевой терапии. Проведение исследований с использованием математического моделирования для оценки эффективности различных доз и методов лечебных воздействий может являться необходимой составляющей экспериментальных исследований, как на этапе первичного скрининга препаратов, так и на последующих этапах изучения эффективных режимов противоопухолевой терапии. Расчетный эксперимент на математической модели позволяет сокращать время проведения исследований, рационально планировать проведение эксперимента и тем самым сокращать количество животных и препаратов, что является экономически целесообразным.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

А.Н. Балаев, В.Н. Осипов, В.Е. Федоров МЕТОД ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ ЦИКЛИЗАЦИИ И ОДНОВРЕМЕННОГО УДАЛЕНИЯ ЗАЩИТНОЙ АСМ-ГРУППЫ

ПРИ СИНТЕЗЕ СУБСТАНЦИИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА ОКТРЕОТИДА

ЗАО «Фарм-синтез», Москва

Задачи исследования. Разработка нового метода окислительной циклизации и снятия Аст защитной группы используемого на последней стадии синтеза противоопухолевого препарата Октреотида, исключающего применение токсичных и пожароопасных реагентов и растворителей.

Материалы и методы. Октреотид - синтетический циклический пептид, аналог природного гормона Соматостатина, обладающий большей избирательностью и продолжительностью действия. Октреотид применяют при лечении опухолей гастро-энтеро-панкреатической системы (в т.ч. карциноидные опухоли, глюкаго-номы, инсуломы, гастриномы). Известные в настоящее время методы основаны либо на 2-стадийном синтезе с применением высокотоксичных солей ртути, сероводорода и взрывоопасной перекиси водорода, либо на одностадийном процессе с использованием раствор йода в метиловом спирте, который также является токсичным и горючем растворителем. Поэтому разработка нового более безопасного метода синтеза, особенно при масштабируемом производстве, является актуальной задачей.

Результаты. Разработанный нами новый одностадийный метод окислительной циклизации и одновременного деблокирования с образованием -8-8- связи основан на использовании водного раствора трёхиодисто-го калия. Этот метод исключает токсичные и горючие реагенты, является технологически приемлемым и легко масштабируемым. Следует отметить, что метод является универсальным для водорастворимых пептидов и позволяет также получать другие аналоги гормона Соматостатина содержащие -8-8- связи.

Выводы. В результате проделанной работы разработан новый метод синтеза Октреотида (и др. аналогов Соматостатина), основанный на использовании водного раствора трёхиодистого калия для одновременной окислительной циклизации и снятия Аст защиты. Предложенный способ отличается простотой, более безопасный, является легко масштабируемым и технологически приемлемым.

A.A. Балакина, В.А. Мумятова, Ю.И. Кукушкина, В.Д. Сень, A.A. Терентьев ИЗМЕНЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ АНТИОКСИДАНТНОИ СИСТЕМЫ В КЛЕТКАХ ЛИНИИ MCF-7 ПРИ ДЕЙСТВИИ КОМПЛЕКСОВ ПЛАТИНЫ

Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка, Московская область

Актуальность. Известно, что активные формы кислорода (АФК) являются важными посредниками в путях клеточной гибели. Кроме того, АФК участвуют в пролиферации опухолевых клеток через активацию сигнальных путей митоза. Изучение роли АФК, анти- и прооксидантов в механизмах клеточной гибели позволит создавать новые препараты для таргетной терапии, основанные на изменении редокс-статуса клеток опухоли.

Цель исследования. Изучение функционирования антиоксидантной системы опухолевых клеток при действии комплексов платины(1"У) в норме и при подавлении белка р53.

Материалы и методы. В работе использовали линию опухолевых клеток MCF-7 (аденокарцинома молочной железа человека). Для определения уровня экспрессии генов sodl, sod2, cat, gpxl использовали метод ПЦР в реальном времени. Подбор пар праймеров проводили с помощью программы PrimerBLAST. Выделение РНК из клеток проводили с помощью GeneJET RNA Purification Kit (Fermentas). Обратную транскрипцию и ПЦР-РВ проводили с использованием готовых смесей (Евроген) по методике производителя. Сатраплатин и аминонитроксильные комплексы платины наносили в дозе IC50 с экспозицией 12 ч. Опыты проводили в трехкратной повторности.

Результаты и выводы. Определено, что все исследуемые соединения приводили к активации транскрипции генов sodl, sod2, cat и gpxl, что может являться доказательством важной роли АОС в механизмах клеточного ответа на действие комплексов платины(1"У). Было проведено исследование влияния комплексов пла-thhbi(IV) на экспрессию генов АОС при подавлении функций белка р53. Роль р53 в регуляции экспрессии генов АОС предполагала наличие изменений количества матричной РНК в присутствии пифитрина. Было выявлено, что подавление функций белка р53 приводит к существенному снижению экспрессии исследуемых генов, что говорит как о важной роли р53 в регуляции транкрипции генов АОС, так и о роли компонентов АОС в механизмах клеточного ответа на генотоксические воздействия.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

М.А. Барышникова, Н.В. Грищенко, А.П. Полозкова

ВЛИЯНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ АРАНОЗЫ НА ИНДУКЦИЮ АПОПТОЗА

ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Цель исследования. Изучение апоптоза, индуцированного действием двух лекарственных форм аранозы, на клеточных линиях меланомы человека, обладающих различным иммунологическим фенотипом.

Материалы и методы. Исследование проводили на клеточных линиях меланомы человека Mel Mtp, Mel Ibr и Mel Z, полученных в ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН [Михайлова И.Н. и др., 2005 ]. Клеточные линии культивировали в стандартных условиях. Для эксперимента клетки пересаживали в 6-луночных планшеты, через сутки в лунки с клетками добавляли лекарственные формы аранозы - лиофилизат для приготовления раствора для инъекций (араноза-лио) и липосомальную. Контролем служили интактыне клетки, которые инкубирвоали в тех же условиях, но без препарата. Через 24 ч проводили определение апоптоза методом двойного окрашивания аннексином V-FITC и пропидиумом йодидом (An/PI). Оценку проводили по следующим критериям: живые клетки - An-/PI-, ранние апоптотические клетки - An/PI-, поздние апоптотиче-ские или некротические клетки - An+/PI+.

Результаты. Под действием аранозы-лио через 24 ч инкубации количество клеток в раннем апоптозе (An+/PI-) на клеточных линиях Mel Mtp, Mel Ibr и Mel Z составляло 32%, 33% и 31% соответственно; количество клеток в позднем апоптозе (An+/PI+) составляло 10%, 11% и 9% соответственно. При инкубации с липосомальной аранозой через 24 ч количество клеток линии Mel Mtp в раннем апоптозе (An+/PI ) составляло 53%, линии Mel Ibr - 41% и линии Mel Z - 39%; количество клеток в позднем апоптозе (An+/PI+) составляло 13% для линии Mel Mtp, 16% для линии Mel Ibr и 18% для линии Mel Z.

Выводы. Показано, что обе лекарственные формы аранозы вызывают гибель клеток меланомы человека через 24 ч инкубации преимущественно по механизму раннего апоптоза. Однако липосомальная лекарственная форма аранозы вызывает более выраженную индукцию и раннего и позднего апоптоза, чем араноза-лио. Это может быть связано с тем, что липосомальная араноза попадает в клетку путем, отличным от аранозы-лио. Также показано, что Араноза-лио вызывает одинаковую индукцию апоптоза на всех исследованных клеточных линиях, в то время как липосомальная араноза больше всего индуцирует ранний апоптоз на клеточной линии Mel Mtp, у которой отсутствует CD95 рецептор, отвечающий за клеточную гибель по механизму внешнего апоптоза.

Ю.В. Береснева, Ф.А. Ибрагимов, Ю.Ю. Ассесорова

ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ 5-ФТОРУРАЦИЛА И СОЕВОГО БЕЛКА, БОГАТОГО ИЗОФЛАВОНАМИ, НА ПОЗДНИХ СРОКАХ РАЗВИТИЯ ОПУХОЛИ

Институт биоорганической химии АН РУз, Ташкент, Узбекистан

Актуальность. В Институте биоорганической химии АН РУз получена стандартизированная комбинация полипептидов из соевой муки с молекулярной массой 12,5-79,0 кДа, обогащенная изофлавонами (содержание дайдзеина на грамм белка составляет в среднем 1,50±0,3 мг, генистеина - 0,52±0,02 мг).

Задачи исследования. Сравнительная оценка противоопухолевого действия соевого белка, богатого изофлавонами, вводимого в монорежиме и в комплексной терапии с 5-фторурацилом на позднем этапе развития опухоли.

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на 60 беспородных мышах обоего пола, с первоначальной массой 16-21 г. Трансплантацию солидной опухоли Саркома 180 (С 180) производили гомогенатом опухолевой ткани в стерильном физиологическом растворе подкожно в область бедра по 0,2 мл. Противоопухолевая терапия проводилась при моновоздействии (I группа - соевый белок, II группа - 5-фторурацил) и комплексном воздействии (III группа - соевый белок совместно с 5-фторурацил) изучаемых веществ. Соевый белок растворяли в дистиллированной воде и вводили зондом в желудок мышам с саркомой 180 в дозе 75 мг/кг (I и III группы) на 10-й день после перевивки опухоли. Пероральное введение продолжали ежедневно в течение 10 дней. 5-фторурацил вводили животным внутрибрюшинно на 10-й, 12-й и 14-й день после перевивки опухоли, в дозе 228 мг/кг (II и III группы животных). Контрольная группа животных (IV группа) получала эквиобъемное количество дистиллированной воды в дни введения соевого белка. Забой проводился на 28-й день после перевивки опухоли.

Результаты. Настоящее исследование показало, что через 8 дней с момента окончания лечебного воздействия, соевый белок, вводимый в монорежиме, вызывает торможение роста опухоли до 71,3 % по массе и до 73,0 % по объему. При введении соевого белка совместно с 5-фторурацилом, значение ТРО по массе составило 91,9 %, а по объему - 92,6 %. Терапия, проводимая только 5-фторурацилом, вызывала торможение роста опухоли на 86,2 % по массе и на 85,6 % по объему.

Вывод. Дополнение цитостатической химиотерапии модификаторами природного происхождения, в данном случае соевым белком, богатым изофлавонами, усиливает противоопухолевое воздействие и улучшает результаты лечения в целом.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... | 65

-1-з-з-1-

Т.Н. Богатыренко , Л.М. Байдер , З.В. Куроптева , Н.П. Коновалова ,

И.В. Серков , Т.Е.Сашенкова , Д.В. Мищенко

ОПТИМИЗАЦИЯ ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ЦИТОСТАТИКОВ С ПОМОЩЬЮ ОРИГИНАЛЬНЫХ нпвс

1Институт Проблем Химической Физики РАН, Черноголовка, Московская область

2Институт физиологически активных веществ РАН, Черноголовка, Московская область 3Институт Биохимической физики РАН, Москва

Задача исследования. Исследовать возможность усиления цитотоксического действия циклофосфана с помощью модифицированного нестероидного противовоспалительного соединения (НСПВС)-1п^КО.

Материал и методы. Противоопухолевую активность изучали на лимфолейкозе мышей Р-388 линии ВБР^ Критерием эффективности лечения служило увеличение средней продолжительности жизни (СПЖ) и число излеченных животных. Исследуемые соединения вводили внутрибрюшинно 7-кратно в дозе 40 мг/кг. Циклофосфан (ЦФ) в субтерапевтической дозе 20 мг/кг вводили двукратно на первые и шестые сутки после перевивки опухоли.

Результаты. В рамках проводимого нами поиска эффективных хемосенсибилизаторов противоопухолевых соединений, обладающих полифункциональной активностью было исследовано влияние комбинации ЦФ с 1М-ЫО на мышей с лимфолейкозом Р-388. Пндометацин-ЫО (1М-ЫО) - оригинальное соединение, синтезированное в Институте физиологически активных веществ РАН. Содержит в своей структуре типичное нестероидное противовоспалительное вещество (НСПВС) индометацин, в боковую цепь которого введена группировка, содержащая нитратную функцию. За счет введения нитратной группировки 1п^ЫО является донором оксида азота. Механизм многофакторного действия НСПВС до конца не ясен. Известно, что большинство НСПВС являются ингибиторами циклооксигегазной активности (СОХ-1 или СОХ-2) - одного из ключевых ферментов метаболизма арахидоновой кислоты - простагландин-Н-синтазы. При лечении животных одним ЦФ в субтерапевтической дозе СПЖ увеличивалась в три раза по сравнению с нелеченным контролем. Выживших животных не было. Сам по себе 1пй-ЫО в исследуемой дозе не проявлял антилейкемической активности. Животные так же гибли одновременно с контролем. А вот комбинация ЦФ с 1п^ЫО увеличивала СПЖ на 40 % по сравнению с монотерапией ЦФ. В предыдущих работах при исследовании изменений метаболических парамагнитных центров в тканях печени и крови животных после введения доноров оксида азота нами было показано снижение сигнала ЭПР цитохрома Р-450 и образование функционально неактивного комплекса цитохрома Р-450-ЫО. Динамика измениния (ингибирования) сигнала цитохрома Р-450 в печени прослеживалась вплоть до 5-ти часов после введения препарата. Мы предполагаем, что пролонгация ингибирования цитохрома Р-450 является одной из возможных причин повышения химиотерапевтического действия ЦФ и уменьшение его токсичности.

Выводы. Таким образом, использование модифицированных НСПВС, обладающих разными типами активности для усиления действия цитостатика ЦФ даже в субтерапевтических дозах может приводить к интересным результатам - увеличивать среднюю продолжительность жизни животных на 40 %.

Т.А. Богуш, A.C. Шатурова, Е.А. Дудко, А.Б. Равчеева, A.B. Конухова, Б.Е. Полоцкий

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭКСПРЕССИИ ЭСТРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ БЕТА В ТКАНИ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ЛЁГКОГО И МЕТАСТАЗОВ В ЛЁГКОМ ОПУХОЛЕЙ ДРУГОЙ ПЕРВИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Задачи исследования. Открытие нового класса эстрогеновых рецепторов (ЭР) - 3Pß, создало предпосылки для развития новой стратегии лечения первичного и метастатического поражения лёгкого - антиэстроге-новой терапии. В настоящем исследовании проведена сравнительная количественная оценка экспрессии 3Pß в ткани немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), а также метастазов в легком опухолей другой первичной локализации. Главный вопрос, на который мы попытались ответить - какое число пациентов с указанной патологией лёгких являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии.

Материалы и методы. Проведена иммунофлуоресцентная количественная оценка уровня, интенсивности и частоты экспрессии 3Pß в ткани НМРЛ, а также метастазов в легком опухолей другой первичной локализации (суммарно 83 образца) с использованием проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Экспрессия 3Pß выявлена в подавляющем числе исследованных опухолей и метастазов в легком - у 92 и 86 % пациентов соответственно. Средний уровень экспрессии 3Pß в ткани НМРЛ составил 42,0 %, а в метастазах оказался ниже - 34,6 % (р=0,03), при этом различий между интенсивностью экспрессии 3Pß в группах сравнения не выявлено (р=0,06). Первичные опухоли с высоким уровнем экспрессии 3Pß (более чем в 50 % клеток) и суммарно с низким и умеренным показателем (в 10-29 % и 30-49 % клеток соответственно) выявлены в 35 и 65 % случаев, а метастазы с аналогичными показателями экспрессии 3Pß - у 14 и 86 % пациентов соответственно. Аналогично, у пациентов с НМРЛ опухоли с высокой интенсивностью экспрессии 3Pß выявлены в 1,5 раза чаще, чем при метастатическом поражении органа - в 60 и 40 % случаев соответственно.

Выводы. Экспрессия в опухоли 3Pß прогнозирует более благоприятное течение болезни, одной из причин этого может быть больший метастатический потенциал опухолевых клеток с низким уровнем экспрессии 3Pß. Около 70 % пациентов с НМРЛ и с метастатическим поражением органа являются потенциальными кандидатами на проведение антиэстрогеновой терапии в адъювантном режиме.

Исследование поддержано грантами РФФИ (№ 13-04-01004-a, 12-04-00028-a, 14-04-31734-мол-а) и стипендией Президента РФ (СП-376.2012.4).

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

66 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

Л.З. Болиева1, Ю.М. Букреев2, Н.К. Власенкова2, И.М. Лученко , В.В. Решетникова , Н.Ю. Соколов , A.B. Сергеев АНТИКАНЦЕРОГЕННАЯ И ИММУНОМОДУЛИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ НОВЫХ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

1 Северо-Осетинская государственная медицинская академия, Владикавказ 2ФГБУ «РОНЦим H.H. Блохина» РАМН, Москва

3ФГКУ «Главный военный клинический госпиталь им. акад. H.H. Бурденко» МО России, Москва

Актуальность. Многочисленные эпидемиологические исследования убедительно продемонстрировали наличие обратной зависимости между количеством потребляемых с продуктами питания аскорбиновой кислоты (АК), альфа-токоферола (ТФ), ликопина (ЛП), бета-каротина (БК) и риском развития рака различных локализаций. В РОНЦ им. H.H.Блохина РАМН разработана серия лечебно-профилактических препаратов на основе перечисленных биологически активных веществ: «Бетаск» (БТ), «Каскатол» (КАС), «Каскорутол» (КАР), «То-матол» (ТОЛ).

Цель исследования. Изучение антиканцерогенной и иммуномодулирующей активности разработанных препаратов.

Материалы и методы. Препараты БТ, КАС, КАР получены от фирмы ЗАО «Холдинг-«ЭДАС», ТОЛ получен от фирмы ООО «Инвест». Опухоли печени и пищевода индуцировали у крыс линии Вистар N-нитрозодиэтиламином, который добавляли к питьевой воде в концентрации 100 мг/л в течение 4 месяцев. Препараты давали крысам вместе с кормом ежедневно в дозе 0,4 г/ кг по БК в течение всего эксперимента. Продолжительность опыта составляла 38-46 недель. Иммуномодулирующую активность изучали по ранее описанным методикам.

Результаты. Все препараты при систематическом введении животным достоверно ингибировали на 2045% химический канцерогенез как при использовании их в фазе инициации и промоции, так и при применении только на стадии промоции. Антиканцерогенная активность препаратов проявлялась в снижении частоты, множественности и темпов роста опухолей, в удлинении латентного периода их появления, замедлении малигниза-ции неопластических изменений. Индекс множественности (число опухолей на одну крысу) при использовании БТ, КАС и КАР снижался в 1,8-2,5 раза по сравнению с контролем. Средний латентный период появления опухолей в контроле составлял 94,2±21,8 дней, а при использовании БТ и КАС 130±21,2 и 142±29,5 дней. Антиканцерогенная активность препаратов проявлялась в зависимости от гистогенеза и органной локализации опухолей. БТ, КАС и КАР повышали в 2-4 раза функциональную активность цитолитических Т-лимфоцитов, натуральных киллеров и перитонеальных макрофагов как у интактных мышей, так и в условиях вторичного иммунодефицита, индуцированного у животных противоопухолевым цитостатиком аранозой или циклофосфаном. Были проведены наблюдения по оценке возможности использования разработанных препаратов в группах онкологического риска («злостные» курильщики, женщины с мастопатиями и др.). При длительном систематическом применении КАС, КАР или ТОЛ отмечено повышение уровня БК в плазме крови, улучшение показателей антиоксидантной системы и коррекция показателей иммунологического статуса.

Выводы. Проведенные исследования позволяют рассматривать разработанные лечебно-профилактические препараты в качестве потенциальных средств химиопрофилактики рака.

Е.И. Борисенко, О.В. Кочеткова, И.В. Шапошникова, Ю.Н. Потапов СТАТУС HER2 РАКА ЖЕЛУДКА

Воронежское областное патологоанатомическое бюро Воронежский областной клинический онкологический диспансер

Актуальность. Повышение эффективности лекарственного лечения больных раком желудка возможно при использовании совместно с цитостатической терапией таргетных препаратов. В настоящее время трастузу-маб является единственным из этой группы лекарственных средств, одобренным для лечения распространенного рака желудка.

Задачи исследования. Изучить HER2-craTyc в злокачественных эпителиальных опухолях желудка.

Материалы и методы. Материалом послужили эпителиальные опухоли желудка, оперативно удаленные у 231 больного с I—III стадиями процесса. Мужчин - 131, женщин - 100. Моложе 40 лет - 8 пациентов, старше 40 - 223 человека. Средний возраст пациентов 63 года. После рутинного гистологического исследования и подтверждения диагноза карциномы желудка исследовали HER2 статус новообразования по стандартному алгоритму и методике. В опухолях с неопределенным HER2-craTycoM 2+ исследовали амплификацию гена HER2 методом гибридизации in situ (FISH).

Результаты. Аденокарциномы различной степени дифференцировки были у 191 из 231 больных. У 15 пациентов была недифференцированная карцинома, у 23 - перстневидноклеточная, нейроэндокринная карцинома - у 2 больных. Неопределенный HER2-craTyc (2+) выявлен в 11 аденокарциномах - у 8 мужчин и 3 женщин. Методом FISH амплификация гена HER2 обнаружена у 3 мужчин. Гиперэкспрессия белка HER2/neu (3+) имела место в 17 аденокарциномах - у 8 мужчин и 9 женщин. Таким образом, HER2-no3HTHBHbrä статус выявлен у 20 из 191 (10,47 %) больных с аденокарциномой желудка. Средний возраст пациентов с HER2 позитивным статусом составил 63 года. Высокодифференцированная аденокарцинома имелась у 5 больных (25 %), умеренно дифференцированная аденокарцинома - у 10 (50 %), низкодифференцированная - у 5 (25 %), I стадия у 4 человек (20 %), II стадия - у 11 человек (55 %), III стадия - у 5 человек (25 %).

Выводы. Большая часть раков желудка представлена аденокарциномами различной степени дифференцировки. Гиперэкспрессия HER2 имела место только в этой гистологической подгруппе у каждого 10 пациента. Не выявлено значимой зависимости между HER2-craTycoM рака и степенью дифференцировки опухоли, полом, возрастом пациентов.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 67

В.А. Борисов1, O.A. Гусева2, C.B. Хайдуков2

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ С ВТОРИЧНЫМИ ИММУНОДЕФИЦИТАМИ ОНКОГЕННОЙ И НЕОНКОГЕННОЙ ЭТИОЛОГИИ.

1 Центр Избирательной Хронотерапии, Москва, Россия;

2ФГБУ Федеральный Научно-Клинический Центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева, МЗ РФ, Москва

Цель исследования. Оценка основных и малых субпопуляций иммунокомпетентных клеток пои иммунологических нарушениях у больных с вторичными иммунодефицитами, вызванными заболеваниями онкоген-ной и неонкогенной этиологии.

Материалы и методы. Обследовано 8 человек со злокачественными солидными опухолями (группа 1) и 8 человек без злокачественных новообразований (группа 2). Идентификацию субпопуляций лимфоцитов венозной крови проводили методом проточной цитофлюориметрии. Клетки окрашивали мАТ производства компании Beckman Coulter (США) с последующей регистрацией на проточном цитофлюориметре Navios (Beckman Coulter, США).

Результаты. У больных группы 1 отмечено увеличение содержания Т-клеток за счет цитотоксических Т-лимфоцитов и незначительное снижение Th, относительно нормативных значений. Выявлено достоверное снижение Treg-KneTOK, а также повышение CD3+HLA-DR+ Т-лимфоцитов и Th-эффекторов. Среди B-клеток наблюдалось достоверное снижение количества В2-клеток и B-клеток памяти при одновременном увеличении доли В1-клеток. Отмечено выраженное снижение цитокинпродуцирующих NK-клеток. Напротив, у лиц группы 2 выявлено повышение количества Treg-KreTOK и цитокинпродуцирующих NK-клеток. Кроме того, наблюдалось снижение уровня наивных Th с одновременным увеличением доли Th-эффекторов. В обеих группах отмечалось повышение уровня CD8+ NK-клеток, а также NKT-лимфоцитов.

Выводы. Таким образом, выявлены достоверные различия в составе клеточного звена иммунитета пои Формировании вторичных иммунодефицитов, у пациентов с заболеваниями онкогенной и неонкогенной этиологии. Полученные данные могут служить отправной точкой в разработке тактики иммунореабилитационных мероприятий, направленных на компенсацию недостаточной иммунореактивности и адекватное восстановление клеточно-опосредованных иммунных реакций в организме. Предложенный алгоритм исследований позволяет проводить мониторинг состояния иммунной системы пациентов в процессе иммунореабилитационных мероприятий.

-1-1-2-2-1-

Л.М. Борисова , М.П. Киселева , В.П. Герасименя , С.В.Захаров , З.С.Смирнова

ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ ДЕЙСТВИЕ

ЭКСТРАКТА МИЦЕЛИЯ ВЕШЕНКИ «ОВОДОРИН» СИРОП НА ЛИМФОЛЕЙКОЗ Р388

1ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва 2ООО «Инбиофарм», Москва

Актуальность. В настоящее время внимание многих исследователей направлено на изучение способности экстрактов базидиальных грибов подавлять рост злокачественных опухолей. Среди таких грибов выделяется вешенка устричная, или обыкновенная (Pleurotus ostreatus), из экстракта мицелия которой в ООО «Инбиофарм» был получен препарат ОВОДОРИН сироп. Проведенные ранее исследования показали способность компонентов экстракта Pleurotus ostreatus 1137 блокировать пролиферацию и индуцировать апоптоз в различных культурах раковых клеток.

Цель исследования. Изучить противоопухолевую активность препарата ОВОДОРИН сироп в отношении лимфолейкоза Р388.

Материалы и методы. Исследование проводили на мышах-гибридах BDF1 (C57B1/6 х DBA/2) массой 18-20 гр. Р-388 перевивали подкожно по 106 опухолевых клеток в 0,2 мл среды 199. Критериями оценки служили: торможение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продолжительности жизни (УПЖ,%) опытных мышей по сравнению с контрольными животными. Препарат ОВОДОРИН сироп вводили внутрь в дозах 50 мг/кг, 60 мг/кг, 70 мг/кг, 80 мг/кг, 90 мг/кг, 100 мг/кг и 120 мг/кг при разных режимах.

Результаты. ОВОДОРИН сироп проявлял равный противоопухолевый эффект в дозах 80 мг/кг, 90 мг/кг и 100 мг/кг при ежедневном введении в течение 5 дней: ТРО = 62 %, 66 % и 60 % соответственно, непосредственно после окончания введения препарата и не оказывал влияния на УПЖ. Увеличение длительности введения препарата до 10 и 15 дней не вызывало увеличения противоопухолевого эффекта. Причем терапевтический эффект равный 60 % ТРО наблюдали только непосредственно после 5-кратного введения. Наибольшая эффективность получена при предварительном введении ОВОДОРИН сиропа в дозе 100 мг/кг в течение 3 дней до перевивки и 7 дней после перевивки опухоли, когда ТРО составило 66 %, и наблюдали тенденцию увеличения продолжительности жизни опытных мышей по сравнению с контрольными животными (УПЖ=13%). Выявлена также тенденция увеличения массы тела опытных мышей, получавших ОВОДОРИН сироп, по сравнению с контрольными животными в течение 12 дней опыта.

Выводы. Результаты по противоопухолевой активности ОВОДОРИН сиропа дают основание продолжить исследования препарата при комбинированной терапии опухолей с целью возможности рекомендовать его как препарат сопровождения при химиотерапии.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Ю.А. Борисова, И.Ж. Шубина, Г.Б. Смирнова, М.В. Киселевский, Е.М. Трещалина ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА

ПРОЭСТРОГЕННОГО ДЕЙСТВИЯ СЕКОИЗОЛАРИЦИРЕЗИНОЛА В СРАВНЕНИИ С ТАМОКСИФЕНОМ ПО ЭКСПРЕССИИ ЦИТОКЕРАТИНОВ CK19+ В ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ МЫШЕЙ IN VIVO

ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Одной из задач доклинического изучения нового антиэстрогена, функционального аналога тамоксифена (ТАМ), секоизоларицирезинола (СЕКО) было исключение характерного для лигнанов дозо-зависимого проэстрогенного действия, поддерживающего метастазирование, в т.ч. рака молочной железы. Исследование выполнено c одним из наиболее эффективно используемых молекулярных внутриклеточных маркеров цитокератином 19 (CK19), избирательно экспрессирующемся в неизмененной ткани молочной железы и опухолях и появляющимся в клетках крови и костном мозге только при микрометастазировании.

Задачи исследования. Оценить in vivo возможное проэстрогенное действие СЕКО в сравнении с ТАМ при дозовом диапазоне, ориентированном на применение в качестве антиэстрогена.

Материалы и методы. Использованы 4 группы мышей-самок BDF1: группы 1-3 (n=15, с Са755 РЭ+), группа 4 (n=3, без опухоли). Мышам группы 1 и 2 проведен 10-дневный курс лечения СЕКО в разовой дозе 250 мг/кг или ТАМ в разовой дозе 50 мг/кг соответственно. Эффективность ингибирования роста опухоли (n=10) оценена с помощью стандартного критерия ТРО% в сравнении с мышами без лечения (группа 3). Экспрессия СК19 определена через 24 ч после курса в периферической крови и костном мозге всех мышей (n=5) по величине средней геометрической интенсивности флюоресценции (ИФсртеом) с помощью флюоресцирующих FITC-меченых МКА методами проточной цитометрии и имуно-флюоресценции со световой и люминисцентной микроскопией. Данные представлены в виде гистограмм, обработаны статистически по методу Фишера и проанализированы с помощью программы WinMDI 2.8. Достоверными считали различия при p<0,05.

Результаты. Показано, что показатели экспрессии С19, рассчитанные по интенсивности флюоресценции, были практически идентичными у всех мышей с опухолью без лечения или получивших эффективное лечение препаратами с ТРО=59%, (p<0,05). В клетках крови ИФср.геом=32,48+3,75 против 30,14+2,33 и 39,07+2,30, в клетках костного мозга ИФсрте0м=31,94+5,02 против 28,87+13,70 и 28,02+9,50, соответственно. У здоровых мышей эти показатели равны «0».

Выводы. В результате проведенного исследования установлено, что у мышей с эстрогензависимой молочной железы Са755 РЭ+ в клетках костного мозга и периферической крови обнаружена практически одинаковая экспрессия эпителиального маркера СК19 независимо от лечения каким-либо препаратом. Таким образом, СЕКО или ТАМ в эффективных дозах и схемах лечения этой опухоли не изменяли количество СК19 клеток и, соответственно, не проявляли проэстрогенного действия.

A.A. Боровский, A.C. Федулов, Т.В. Трухачева, C.B. Шляхтин, И.И. Сакович, A.B. Борисов, С.А. Гузов, Д.П. Веевник, A.B. Шамкалович

РЕЗУЛЬТАТЫ ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ СО ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫМИ ОПУХОЛЯМИ ГОЛОВНОГО МОЗГА

С ПРИМЕНЕНИЕМ ИНТРАОПЕРАЦИОННОЙ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ

Белорусский государственный медицинский университет, Минск, Беларусь НФЦРУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь УЗ «ГКБСМП», Минск, Беларусь

Цель исследования. Изучить эффективность технологии лечения первичных опухолей головного мозга на основе интраоперационной лазерной фотодинамической терапии с использованием фотосенсибилизатора второго поколения Фотолон.

Материалы и методы. В основную группу включены 43 пациента, с глиомами III-IV степени по классификации ВОЗ, 1993 г. В контрольную группу включен 71 пациент с глиомами III-IV степени. Достоверных различий между группами по полу возрасту, общему состоянию пациентов не было. В качестве источника оптического излучения использовался лазер с длиной волны 670+30 нм. производства НПЦ «ЛЭМТ», с мощностью на выходе 0,6-2,5 Вт. Препарат применяли в диапазоне доз 1.8-2.5 мг/кг массы тела больного. Фотосенсибилизатор растворяли в 30-60 мл 0,9% раствора хлорида натрия и вводили внутривенно в течение 10 минут. Лазерное облучение проводили через 15-20 минут от начала введения ФОТОЛОНА в рассчитанном отрезке времени и мощности излучения до достижения общей поглощенной световой дозы 50-250 Дж/см2. Основные конечные точки: выживаемость. Суррогатные конечные точки: дермато/гемато/ликворологические осложнения.

Результаты. Кумулятивная доля выживших пациентов основной группы при 1-годичном наблюдении составила 76,8 %, медиана выживаемости - 77,3 недели. В контрольной группе, кумулятивная доля выживших при 1-годичном наблюдении составила 25,0 %, медиана выживаемости - 22,0 недели. Интра/периоперационной смертности в обеих группах не отмечено. Все больные выписаны после заживления операционных ран и улучшения общего состояния в среднем на 14,7 ±4,2 сутки после операции.

Выводы. Выживаемость пациентов основной группы оказалась достоверно выше, чем выживаемость пациентов контрольной (значение логарифмического критерия рангов z=-5,93; различия достоверны при уровне значимости p=0,01). Введение фотолона не сопровождалось значимыми сдвигами показателей системной гемодинамики, респирации, фототоксическими осложнениями.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 69

Е.В. Бочаров , A.B. Ревищин , Р.В. Карпова , Ю.Н. Соловьев , A.A. Вершинская1, C.B. Чулкова1, Г.В. Павлова2, O.A. Бочарова1 ЛЕЧЕБНЫЙ РЕЖИМ ВВЕДЕНИЯ КОМПЛЕКСНОГО ФИТОАДАПТОГЕНА СПОСОБСТВУЕТ ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ ИНФИЛЬТРАЦИИ ОПУХОЛЕЙ ПЕЧЕНИ У ВЫСОКОРАКОВЫХ МЫШЕЙ 1ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва 2ФГБУ Институт биологии гена РАН, Москва Задачи исследования. Изучить морфологические изменения в ткани печени высокораковых мышей СВА при лечебном воздействии комплексного фитоадаптогена. Материалы и методы. Комплексный фитоадаптоген фитомикс-40 - стандартизованный препарат, включающий компоненты 40 растительных экстрактов; обладает иммуномодулирующим, адгезиогенным, ин-терфероногенным, антимутагенным, антиоксидантным, радиопротекторным эффектами. В работе использовали 140 мышей: 1 группа (n=70) - контрольная; 2 группа (n=70) - опытная, мыши получали фитомикс-40 с водой курсами, начиная с 6-месячного возраста (периода возникновения первых опухолей) до естественной гибели животных. Исследование проводили на парафиновых срезах гепатокарцином мышей. Часть срезов окрашивали гематоксилин-эозином для морфологического исследования. На других срезах проводили иммуногистохимиче-ское выявление CD8, CD11a, CD11b антигенов на лимфоцитах, инфильтрирующих опухоль, с использованием антител, меченых пероксидазой. Результаты. В возрасте 4 месяцев у мышей обеих групп опухоли не были выявлены. В возрасте 8 месяцев у 10 % животных контрольной группы обнаружены трабекулярные гепатокарциномы умеренной диффе-ренцировки. В возрасте 22 месяцев у всех мышей контрольной группы и у 69,2 % мышей опытной группы выявлены умеренно и низкодифференцированные трабекулярные и трабекулярно-ацинарные гепатокарциномы. Вместе с тем в печени мышей опытной группы выявлена массовая лейкоцитарная инфильтрация опухолей и признаки деструкции. Фенотипирование мигрировавших лимфоцитов иммуногистохимическим методом определило наличие лейкоцитарных интегринов CD11a CD11b, а также CD8 антигена на их поверхности. В печени мышей контрольной группы инфильтрации лимфоцитами опухоли не наблюдали. Выводы. Лечебное воздействие комплексного фитоадаптогена способствует инфильтрации опухолевых узлов цитотоксическими CD8+ лимфоцитами, что обеспечивается адгезионными механизмами с участием CD11a и CD11b лейкоцитарных интегринов. Очевидно, это имеет значение для замедления опухолевого процесса, повышения выживаемости и улучшения соматического состояния животных.

Г.Е. Бриллъ , A.B. Егорова , А.Б. Правдин , Г.В. Пономарёв сравнительный анализ ИЗМЕНЕНИЯ СТРУКТУРООБРАЗОВАНИЯ РАСТВОРОВ ДИМЕГИНА И ФОТОДИТАЗИНА ПОД ВЛИЯНИЕМ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ 1 Государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского, Саратов 2Государственный университет им. Н.Г. Чернышевского, Саратов 3Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН, Москва Актуальность. Большинство используемых в настоящее время для проведения фотодинамической терапии фотосенсибилизаторов (ФС) содержат в своей структуре асимметричные атомные группировки. Последнее позволяет предполагать различие фотоотклика молекул ФС на разнополяризованный свет. Задача исследования. Провести сравнительный анализ влияния лазерного излучения с различным характером поляризации на процесс дегидратационной самоорганизации гидрофильных фотосенсибилизаторов димегина (Л) и Аотодитазина (ФД). Материалы и методы. ФС разводили в 0,9% растворе натрия хлорида (10 мг/мл). Процесс самоорганизации изучали методом клиновидной дегидратации. Растворы ФС предварительно облучали красным полупроводниковым лазером (X 660 нм, 1 Дж/см2) с насадкой, позволяющей получать линейно- и циркулярнополяризо-ванный свет. Анализировались качественные и количественные характеристики полученных фаций. Результаты и выводы. При облучении раствора Д циркулярно поляризованным светом с левым направлением вращения отмечалась деструктуризация центральной и промежуточной зон фации, изменение количества, среднего размера и структурной неоднородности объектов периферической зоны. В фациях ФД, облученных левополяризованным светом, отмечалось появление промежуточной зоны, а также изменение структуры центральной области. Достоверно различались площади периферических зон фаций, средний размер, число объектов и степень их структуризации в ободковой зоне. Наиболее существенные различия в структуре фаций Д и ФД наблюдались при сравнительном анализе образцов, полученных при облучении линейно- и левополяризованным светом. Различия были обнаружены и при анализе эффектов правополяризованного и линейнополяри-зованного света. Так, в фациях Д различия касались размеров ободковой зоны фации, среднего размера объектов периферической и центральной зон фации, а также показателя энтропии периферической, промежуточной и центральной зон. В фациях ФД достоверно изменялись размеры ободковой и центральной зон, средний размер и количество объектов, а также показатель изрезанности поверхности центральной области. Следовательно, структурные перестройки ФС при неизменной длине волны зависят от характера поляризации лазерного излучения.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

С.А. Будкевич, Т.М. Ермоленко, Т.В. Трухачева, К.А. Фроленков ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ПРЕПАРАТ КЛОФАРАБИН,

КОНЦЕНТРАТ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАСТВОРА ДЛЯ ИНФУЗИЙ 1 МГ/МЛ ВО ФЛАКОНАХ 20 МЛ ПРОИЗВОДСТВА РУП «БЕЛМЕДПРЕПАРАТЫ»

РУП «Белмедпрепараты», Минск

Задачи исследования. Разработать стабильный и эффективный противоопухолевый препарат на основе клофарабина для лечения детей с рефрактерными формами или рецидивами острого лейкоза.

Материалы и методы. Для разработки препарата использована субстанция 2-хлор-9-(2'-деокси-2'-фтор-Р-Б-арабинофуранозил)-9И-пурин-6-амин (>99,5 %), для контроля качества субстанции и лекарственного средства использовались методы ВЭЖХ, ГЖХ, УФ и ЯМР спектроскопии.

Результаты. Оригинальный препарат на основе клофарабина Clolar (Клолар) американской компании Genzyme Corp. используется в онкологической практике за рубежом, однако до настоящего времени не зарегистрирован в странах СНГ. РУП «Белмедпрепараты» разработан препарат Клофарабин, концентрат для приготовления раствора для инфузий 1 мг/мл во флаконах 20 мл. Разработанная технология получения препарата обеспечивает его исключительную стабильность.

При изучении стабильности лекарственного средства в условиях ускоренных (40±2 °С) испытаний в течение срока наблюдения 12 месяцев суммарное содержание примесей увеличилось с 0,15 % до 1 %. Долгосрочные (25±2 °С) испытания в течение срока наблюдения 24 месяца показали отсутствие нарастания примесей, неизменным оставалось и содержание действующего вещества. Оценка качества препарата проводилась с использованием высокочувствительных методов анализа на основе валидных методик. В настоящее время в Республиканском научно-практическом центре детской онкологии, гематологии и иммунологии (г. Минск) проводятся клинические испытания по оценке эффективности, переносимости и безопасности препарата «Клофарабин, концентрат для приготовления раствора для инфузий 1 мг/мл во флаконах 20 мл», производства РУП «Белмедпрепараты» у пациентов детского возраста с рецидивирующим или рефрактерным острым лейкозом I/II фаза.

Выводы. Разработана технология получения и современные аналитические методики оценки качества препарата Клофарабин, концентрат для инфузий. Препарат характеризуется высокой стабильностью. Инициированы клинические испытания по оценке эффективности и безопасности лекарственного средства.

-1-2-2-3-3-

П.М. Бычковский, Э.А. Жаврид , A.B. Ваккер , Ю.Г. Шанъко , А.Л. Танин ,

Е.А. Короткевич , А.Ф. Смеянович3, Т.Л. Юркштович4, Ф.Н. Капуцкий4, Д.А. Адамчик1, С.А. Беляев4 РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ

ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА «ЦИСПЛАЦЕЛ»

1УП « Унитехпром БГУ», Минск, Беларусь

2РНПЦОМР им. H.H. Александрова, Минск, Беларусь

3ГУ «РНПЦневрологии и нейрохирургии» МЗРБ, Минск, Беларусь

4НИИ ФХП БГУ, Минск, Беларусь

bYchkovsky@tut.bY

В Республике Беларусь разработано лекарственное средство пролонгированного действия «Цисплацел», представляющее собой цисплатин, иммобилизованный на биорассасывающемся полимерном носителе и предназначенное для локальной химиотерапии злокачественных опухолей головного мозга, головы и шеи.

Клинические испытания препарата «Цисплацел», проведенные в ГУ «РНПЦ ОМР им. H.H. Александрова» МЗ РБ на 65 пациентах с различными новообразованиями головы и шеи свидетельствуют о том, что в результате местного применения «Цисплацела» после не радикальных удалений первичных и рецидивных опухолей различной локализации на голове и шеи приводит к сокращению количества рецидивов в среднем на 2540% по сравнению с контрольной группой больных, что свидетельствует об эффективности местного применения препарата «Цисплацел». В результате проведенных клинических испытаний в ГУ «РНПЦ неврологии нейрохирургии» МЗ РБ было установлено, что эффективность препарата «Цисплацел» в качестве противоопухолевого средства послеоперационной локальной химиотерапии супратенториальных глиом головного мозга (Grade III-IV) в сочетании с лучевой терапией (95 пациентов) оценивается как положительная: наблюдалось достоверное увеличение продолжительности безрецидивного периода с 31,9±2,8 недель (контрольная группа) до 50,8±3,2 недель (опытная группа) (p<0,05) и продолжительности жизни больных более, чем в 2 раза с 211±21,4 до 427,5±28,4 дня. Кумулятивная выживаемость, рассчитанная по таблицам продолжительности жизни (Life table method) в основной группе, была выше, чем в контрольной, что также свидетельствует о большей эффективности полученного препарата, в сравнении с нативным цисплатином.

«Цисплацел» (производитель - УП «Унитехпром БГУ») рекомендован к применению в медицинской практике в качестве лекарственного средства для имплантации в ложе удаленной супратенториальной нейро-эпителиальной опухоли головного мозга, а также в мягкие ткани и полости в месте удаленной опухоли органов головы и шеи.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 71

М.И. Валуева1, Т. С. Хлыстова1, Н.Д. Олтаржевская1, М.А. Коровина1, В.П. Сокуренко2, Л.И. Корытова2, A.B. Мешечкин2 ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ЛЕЧЕБНЫХ ГИДРОГЕЛЕВЫХ МАТЕРИАЛОВ «КОЛЕГЕЛЬ» В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛУЧЕВЫХ РЕАКЦИЙ 1000 «Колетекс», Москва 2ФГБУ «РНЦРХТ», Санкт-Петербург Задачи исследования. Оценить эффективность использования гидрогелевого материала «Колегель-ДНК-Л-Ч» на основе альгината натрия с дезоксирибонуклеатом натрия, лидокаином и экстрактом черники в качестве средства для профилактики и лечения лучевых реакций и осложнений слизистых при проведении курса лучевой терапии. Материалы и методы. Пациентам по поводу злокачественных опухолей прямой кишки подводилась лучевая терапия области малого таза на аппарате SL 20 МэВ. Одновременно проводилась химиотерапия по схеме XELOX. «Колегель-ДНК-Л-Ч» вводили в объеме 20 мл в прямую кишку в виде микроклизмы с экспозицией до 6-8 часов 1 раз в сутки до стихания повреждений в течение 1 месяца. Результаты и выводы. Применение «Колегель-ДНК-Л-Ч», направленно подводящего лекарственные препараты непосредственно к очагу поражения, снимает болевые ощущения в области прямой кишки, купирует кровотечение в течение в среднем 3 суток (в контроле - 7 и 10 суток соответственно), способствует заживлению раневой поверхности на слизистой прямой кишки в течение 10-15 дней (в контроле - 17-25 дней). Химио-лучевое лечение проведено до запланированных суммарных доз у 80 % пациентов. Больные колоректальным раком переносили введение «Колегель-ДНК-Л-Ч» геля удовлетворительно без побочных явлений. Повторное введение геля в домашних условиях пациенты легко осуществляли самостоятельно. Исследование показало, что применение материала гидрогелевого во время проведения лучевой терапии дает возможность минимализиро-вать лучевые реакции слизистой прямой кишки. Лучевые реакции имели меньшую степень выраженности и развивались в более поздние сроки облучения, в основном к концу подведения запланированных суммарных доз, что позволило провести лучевое лечение без перерыва. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности использования рассматриваемого материала для профилактики и лечения лучевых реакций и повреждений, рекомендации его к использованию в практическом здравоохранении.

Д.П. Веевник , A.C. Федулов , A.C. Боровский , A.B. Шамкалович , С.А. Гузов , Т.Л. Юркштович3, С.А. Беляев3, В.В. Комар1, Н.К. Юркштович3, Т.В. Трухачева4, C.B. Шляхтин4 ИНТРАОПЕРАЦИОННАЯ ЛОКАЛЬНАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРЕПАРАТА «ТЕМОДЕКСА» (ОТ ЭКСПЕРИМЕНТА К КЛИНИКЕ) 1 Учреждение здравоохранения «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи», Минск, Беларусь 2Учреждение образования «Белорусский государственный медицинский университет», Минск 3Учебно-научно-производственное республиканское унитарное предприятие «Унитехпром Белорусского государственного университета», Минск, Беларусь 4Республиканское унитарное предприятие «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь Цель исследования. Изучить безопасность, переносимость и эффективность локальной химиотерапии в комплексном лечении злокачественных опухолей головного мозга с использованием противоопухолевого лекарственного средства «Темодекс». Материалы и методы. «Темодекс» - препарат, разработанный УНП РУП «Унитехпром БГУ» и РУП «Белмедпрепараты» для локальной химиотерапии, представляющий собой темозоломид, ассоциированный на биодеградирующей матрице на основе высокозамещенного фосфата декстрана. Дизайн исследования - открытое, ретропроспективное, когортное, контролируемое с параллельными группами. В исследование включено 41 пациент с глиальными опухолями головного мозга (Gr II- Gr IV), которым интраоперационно, в ложе удаленной опухоли имплантировали «Темодекс», с содержанием активного вещества (темозоломид) - 100,0 мг (основная группа). В качестве контроля - оценивались результаты лечения 95 пациентов с верифицированными глиальными опухолями, которые получали стандартную комбинированную терапию. Суррогатные конечные точки -выживаемость и длительность безрецедивного периода. Контрольная и основная группа были сопоставимы по клинико-демографическим характеристикам. Всем пациентам основной и контрольной группы проводилось МРТ/КТ исследование с контрастным усилением до проведения операции, на 2-3 день после операции, на 7-10 сутки, через 3 месяца, 6 месяцев, 12 месяцев. Результаты. Безопасность и переносимость препарата оценивали исходя из выраженности и динамики общемозговой и очаговой неврологической симптоматики, гематотоксичности, выраженности послеоперационного локального или диффузного отека головного мозга. У подавляющего большинства пациентов отмечен регресс очаговой неврологической симптоматики, наблюдавшейся до проведения операции. В раннем послеоперационном периоде умерло два пациента, причиной смерти которых была ТЭЛА. Заключение. Предварительный анализ результатов применения технологии интраоперационной локальной химиотерапии с применением противоопухолевого лекарственного средства «Темодекс», указывает на удовлетворительную безопасность и переносимость препарата.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

72 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

5.Д Волгин1, Е.Ф.Странадко2 Р.В. Кагояни3, М.А. Кабанова1, И.В. Булгакова4 ЛЕЧЕНИЕ БАЗАЛЬНО-КЛЕТОЧНОГО РАКА КОЖИ ГОЛОВЫ И ШЕИ МЕТОДОМ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ 1 Главный военный клинический госпиталь им. акад. H.H. Бурденко, Москва 2Государственный научно-исследовательский центр лазерной медицины Минздрава России, Москва 3Ставропольская государственная медицинская академия, Ставрополь 4Клиника «Столица», Москва Актуальность.Во всем мире отмечается постоянный рост заболеваемости базально-клеточным раком кожи (БКРК). Преимущественной локализацией БКРК является область головы и шеи (75,9-97,8 %), главным образом кожа лица. Возможности полной эрадикации опухолей значительно расширились с появлением фотодинамической терапии (ФДТ) как нового современного высокоэффективного метода лечения. Цель исследования. Оценка эффективности ФДТ при лечении первичного и рецидивного БКРК головы и шеи. Материалы и методы. За 10-летний период локализация на голове и шее составила 87 % среди всех БКРК (на голове - 83,4 %, на шее - 3,6 %). В том числе в области носа - 21,7 %, в периорбитальной области -19,7 %, на щеках - 15 %, в области ушной раковины и наружного слухового прохода - 15,4 %, на коже лба -13,7 %, на волосистой части головы - 11,7 %, на висках - 10,7 %, губах - 2,7 %, в носогубной складке - 1,7 %. ФДТ проведена 504 больным. Первичный БКРК был у 338 больных (67,3 %), рецидивный - у 165 (32,3 %). Использовали фотосенсибилизаторы (ФС) отечественного (фотогем, фотосенс, фотодитазин) и зарубежного производства (фоскан, Германия; фотолон, Беларусь). Лечение проводилось на лазерных установках: ИННОВА-200 («Когерент», США), МЕТАЛАЗ, ПОЛЮС-2, МИЛОН, ЛАТУС (Россия) КЕРАЛАЗ (Германия). Курс ФДТ включал однократное введение ФС и 1-2 сеанса облучения. Результаты и выводы. Полная резорбция опухолей (ПР) наступила у 89,1 % больных, в том числе при первичном БКРК - у 93,2%, при рецидивном - у 80,6 %. Эффективность ФДТ с фотодитазином составила 96,1 %, с фосканом - 89,2 %, с фотолоном - 88,9 %, с фотосенсом - 82,1 %, с фотогемом - 78,4 %. При диспансерном наблюдении от 6 месяцев до 8 лет частота рецидивов составила в среднем 13,7 %, при ФДТ с фотодитазином - 5,2 %, с фосканом - 6,9 %, с фотогемом - 24,3 %, с фотосенсом - 19,7 %, с фотолоном - 15,6 %. Наш опыт свидетельствует о высокой терапевтической эффективности метода ФТД при лечении первичного и рецидивного БКРК головы и шеи, в том числе с локализацией в областях, трудно доступных для традиционных методов лечения (ушная раковина, наружный слуховой проход, нос, угол глаза, веки). Резистентности к ФДТ не наблюдалось. В результате лечения достигнуты хорошие и отличные косметические результаты.

И.Г. Гатауллин, Р.К. Шакиров, М.Г. Гордеев КЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА МУТАЦИИ ГЕНА K-RAS У БОЛЬНЫХ КОЛОРЕКАЛЬНЫМ РАКОМ ГОУДПО КГМА Минздрава России, Казань ГАУЗ «РКОДМЗ Республики Татарстан», Казань Актуальность. Одной из важнейших соматических мутаций, обнаруженных в опухолях толстой кишки, является мутация в гене KRAS, выявленная в опухолях толстой кишки с частотой от 30% до 50%. Мутация в гене KRAS может стать новым фактором прогноза в рамках даже одной и той же стадии заболевания. Цель исследования. Выявление частоты мутации в гене KRAS у больных колоректальным раком в Республике Татарстан, и оценка влияния мутации на течение и прогноз заболевания. Материалы и методы. В исследование включены 120 больных колоректальным раком, получивших комбинированное лечение в ГАУЗ «РКОД МЗ Республики Татарстан». Пациентам был проведен генетический анализ на наличие мутации в гене KRAS на материале, полученном в результате оперативного вмешательства. Результаты. Из 120 пациентов у 35 выявлена мутация в гене KRAS, у 85 пациентов имелся «дикий» тип гена KRAS (частота мутаций составила 26,7 %). При этом 25 мутаций обнаружено в 12 и 13 кодонах, 7 мутаций в 61 кодоне и 3 - в 146 кодоне. Результаты исследования показали, что у русского населения мутантный тип гена KRAS выявляется чаще (в 38,9 %) чем у татарского населения (в 21,2 %). Данная зависимость является статистически значимой (р=0,045). Мутация в гене KRAS чаще встречалась у женщин, чем у мужчин (37,7% и 20,3% соответственно). Данные зависимости значимы (р=0,045). Опухоли толстой кишки с мутантным геном KRAS более склонны к лимфогенному метастазированию ( в 54,2 %), чем опухоли с «диким» типом (в 45,8 %), что косвенно свидетельствует о более агрессивном течении опухолевого процесса при мутантном типе гена (р=0,004). Больные с мутантным типом гена чаще имеют отдаленные синхронные метастазы (в 63,6%), чем больные с «диким» типом ( в 36,4 %) Данная зависимость является статистически значимой (р=0,0001). Таким образом, опухоль с мутантным типом гена обладает агрессивным течением и высоким потенциалом к метастазированию. Годичная выживаемость пациентов с «диким» типом гена KRAS составила 96,5%,с мутантным типом гена 88,6% (р=0,0012). Выводы. Мутация в гене K-RAS является независимым значимым прогностическим признаком. Генетические исследования необходимо включить в стандарт обследования больных колоректальным раком в качестве предиктивных маркеров для оценки течения и прогнозирования отдаленных результатов лечения.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Н.В. Голубцова, А.Е. Бармашов, О. С. Бурова, П.К. Иванов, К.А. Барышников, К.А. Парсункова, Г.З. Чкадуа, И.Н. Михайлова ИЗМЕНЕНИЕ СЫВОРОТОЧНОГО СОДЕРЖАНИЯ РАСТВОРИМОГО АНТИГЕНА CD 44 У БОЛЬНЫХ МЕЛАНОМОЙ

ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва. ГУП «МНКЦ «Интермедбиофизхим», Москва.

Задачи исследования. Изучение корреляции между содержанием сывороточного уровня растворимого антигена CD 44 и белка S-100, как маркера прогрессии опухоли, у больных диссеминированной меланомой кожи в процессе вакцинотерапии дендритными клетками для иммунологической оценки эффективности проводимой противоопухолевой терапии

Материалы и методы. Материалом для исследования служили образцы сывороток крови от 31 больного диссеминированной меланомой, получавших после удаления первичной опухоли вакцину на основе аутологич-ных дендритных клеток в течение года. В качестве контроля использовались образцы сывороток крови 15 здоровых доноров.

Растворимый антиген CD44 (sCD44std) определяли в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа с помощью диагностических тест-систем Bender MedSystems (Австрия). Учет результатов проводился спектрофотометрически при длине волны 450 нм. Результаты выражали в нг/мл.

Определение сывороточного уровня белка S-l0o (S-100 A1B и S-100 BB формы) проводили иммунофер-ментным методом с использованием диагностической тест-системы CanAg Diagnostics (Швеция). Учет результатов проводился спектрофотометрически при длине волны 405 нм. Результаты выражали в нг/л.

Результаты и выводы. При проведенном исследовании пациенты, в зависимости от исходного уровня CD44, делились на две группы: 1группа (n=16) с нормальными значениями CD44 и группа 2 (n=15) с повышенными значениями CD44 относительно значений данного маркера в группе здоровых доноров. Был проведен анализ содержания уровня S-100 в образцах сывороток крови в группах 1 и 2. Выявлено статистически достоверное повышение сывороточного уровня S-100 у больных группы 1 (p<0,05), а у больных группы 2 отмечено незначительное повышение уровня данного антигена (p>0,05). Таким образом, нормальный уровень CD44 указывает на неблагоприятное течение заболевания. Установлено, что в группе 1 (n=16) медиана времени до про-грессирования составила 14,0±7 месяцев, в группе 2 (n=15) медиана времени до прогрессирования составила 22,0±18,0 месяцев.

Е.В. Горанская, М.А. Каплан, В.Н. Капинус, Ю.А. Рагулин, Е.В. Ярославцева, И.С. Спиченкова, A.M. Шубина, О.В. Боргулъ, М.В. Таибова. ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРПИЯ В ЛЕЧЕНИИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, Обнинск

Актуальность. По данным отечественных авторов, при проведении ФДТ внутрикожных метастазов РМЖ полные регрессии (ПР) достигнуты в 39-51 %, частичные (ЧР) - в 36 %, стабилизация процесса - в 4 %,объективный положительный ответ - в 87-98 % случаев. По сведениям американских ученых объективный ответ был получен в 100 % наблюдений, ПР - в 65 %. Европейские исследователи также достигли полного ответа в 100 %, ПР - в 73 %, ЧР - в 18 % случаев.

Цель исследования. Изучить эффективность ФДТ при лечении кожных метастазов РМЖ.

Материалы и методы. Анализ проведен на основании результатов лечения 46 больных РМЖ с метастатическим поражением кожи, получавших ФДТ в период с 1998 по 2012 г. в клинике ФГБУ МРНЦ. В качестве ФС использовали фотолон, препарат вводили внутривенно капельно на физиологическом растворе в дозе 0,91,6 мг/кг.

Результаты. Средний возраст пациенток составил 59,8 года (от 39 до 72 лет). На момент лечения у 27 (59 %) больных были выявлены только внутрикожные метастазы, у 19 (41 %), помимо поражения кожи имелись метастазы в другие органы. Суммарно у пациенток, было проведено лечение 535 очагов. Размер полей облучения варьировал от 1 до 6 см, число полей - от 1 до 30, плотность мощности - от 0,11 до 0,56 Вт/см2, выходная мощность — от 0,3 до 2 Вт, плотность энергии - от 50 до 600 Дж/см2. Результаты лечения внутрикожных метастазов РМЖ оценивали через 1-2 месяца после окончания лечения: из 535 (100 %) очагов ПР была отмечена в 33,64 % (n = 180) случаев, ЧР - в 39,43 % (n = 211), стабилизация - в 22,61 % (n = 121), прогрессирование - в 4,29 % (n = 23). Объективный ответ получен в 73,07 % наблюдений, лечебный - в 95,68 %.

Выводы. ФДТ в 96 % случаев позволяет достичь лечебного эффекта. Метод может применяться при невозможности проведения хирургического вмешательства, ЛТ и XT. ФДТ выгодно отличается избирательностью поражения опухолевой ткани, отсутствием тяжелых местных и системных осложнений и возможностью повторения лечебной процедуры. Использование ФДТ в паллиативных целях позволяет уменьшать объем опухоли и улучшать качество жизни больных РМЖ с метастазами в кожу.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

О.В. Горюнова, И.В. Ярцева, H.A. Машалова, Н.К. Власенкова АМИНОКИСЛОТНЫЕ АНАЛОГИ N-ГЛИКОЗИДОВ ИНДОЛОКАРБАЗОЛОВ

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Задачи исследования. Синтезировать аминокислотные производные N-гликозидов индолопирролокар-базола и бисиндолилфурандиона в качестве потенциальных противоопухолевых соединений.

Материалы и методы. Последовательным взаимодействием ацетилированного рибопиранозилиндола или 2',3'-секорибопиранозилиндола с оксалилхлоридом, затем с 3-метилиндолилуксусной кислотой были получены бисиндолилфурандионы и превращены путём фотосинтеза в фуранокарбазолы. Нагревание в течение 2-3 часов при 130°С раствора в диметилформамиде ацетилрибопиранозида бисиндолилфурандиона или ацетилгли-копиранозидов фуранокарбазолов с метиловыми эфирами аминокислот в присутствии триэтиламина привело к получению производных аминокислот. Дезацетилирование углеводной части гликозидов проводили в безводных условиях действием поташа на раствор в метаноле соответствующих ацетилгликозидов. Полученные соединения были очищены хроматографией на силикагеле и охарактеризованы методами ЯМР- и УФ-спектроскопии.

Результаты. При взаимодействии метиловых эфиров глицина или аланина с фуранокарбазолами или би-синдолилфурандионами происходит трансформация фуранового цикла в пиррольный, причём а-аминогруппа аминокислоты встраивается в пятичленный цикл агликона. Производные глицина и аланина, полученные из N-ацетилгликозидов фуранокарбазола, образуются с выходами от 69 % до 89 %, стерически менее напряжённый бисиндолилфурандион вступает в реакцию в указанных условиях лишь частично, выход производного глицина составляет 38 %, а производного аланина 39 %. Дезацетилированные N-гликозиды были получены с выходом не менее 84 % при сохранении сложноэфирной группы аминокислотного остатка. Синтезированные таким образом аминокислотные аналоги противоопухолевого антибиотика ребеккамицина были изучены in vitro на клетках карциномы яичника CaOv и показали IC50>10 мкМ.

Выводы. N-Гликозиды индолопирролокарбазола и бисиндолилдиона, замещённые в пятичленном цикле остатками метиловых эфиров глицина или аланина, не обнаружили выраженной цитотоксической активности. Намечен синтез новых аминокислотных производных гликозидов индолокарбазола с открытой карбоксильной группой, что улучшит растворимость соединений и их цитотоксические свойства.

В. С. Горячева

РОЛЬ ТЕРМОГРАФИИ В ДИАГНОСТИКЕ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского МЗ РФ, Саратов

Актуальность. Рак молочной железы - одна из самых актуальных проблем современной клинической онкологии. Он по-прежнему занимает первое место в структуре заболеваемости злокачественных новообразований у женщин. Раннее выявление рака - важная стратегия для снижения смертности от этого заболевания и цель всех программ скрининга. В своевременной диагностике используют комплексное обследование, включающее сочетание клинического, инструментально-диагностического (маммография, УЗИ-диагностика), морфологического исследований. Еще одним методом диагностики рака молочной железы является термография. Это неинвазивный, бесконтактный метод, позволяющий регистрировать изображение распределения температуры.

Цель исследования. Выявление термографических признаков вовлечения молочной железы в патологический процесс.

Материалы и методы. В клинике факультетской хирургии и онкологии амбулаторно, за период с 2000 по 2003 гг. обследовано 90 женщин с непальпируемыми опухолями в молочной железе. Диаметр опухолей от 0,5 до 1,5 см. Используя результаты термографии, всех пациенток разделили на две группы. Первую группу (63 %) составили женщины, у которых не было очагов гипертермии на термограмме. Во вторую группу вошли пациентки с гипертермией на термограммах (37 %). Возраст больных - от 15 до 64 лет. Термографию выполняли на аппарате ЖКУЗ 4010.

Результаты. У пациенток первой группы в плане обследования выполнена тонкоигольная биопсия под контролем УЗИ с цитологическим исследованием. В дальнейшем больным произведена секторальная резекция и при плановом гистологическом исследовании у 3 % диагностирован рак. Термографическая картина при наличии очагов разогрева характеризовалась зонами повышения температуры с тяжистыми контурами, разность температур над которыми с контралатеральной точкой составила 2-2,5 градуса. После термографии и тонкоигольной биопсии под контролем УЗИ также выполнялась секторальная резекция и при гистологическом исследовании констатировано, что у 72 % пациенток этой группы был рак. В 28 % наблюдений диагностирована фиброзная мастопатия.

Выводы. Термографическое исследование является дополнительным методом диагностики опухолей молочной железы и может быть рекомендовано как скрининг-тест при непальпируемых опухолях молочной железы.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Е.В. Гребёнкина, C.B. Гамаюнов, Н.М. Шахова, С. С. Кузнецов ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ

ГБУЗ НО НООД, НГМА, ИПФ РАН, Нижний Новгород

Актуальность. Оптимальным методом профилактики рака шейки матки является адекватное лечение CIN, что в современных условиях требует органосохраняющих и патогенетически обоснованных подходов. Наиболее соответствующей этим требованиям является фотодинамическая терапия (ФДТ).

Цель исследования. Определение эффективности и безопасности проведения ФДТ у больных с CIN III, c-r colli uteri in situ. Задачи исследования: оценка терапевтического патоморфоза CIN III, c-r colli uteri in situ после проведения ФДТ; клиническая оценка эффективности ФДТ при CIN III, c-r colli uteri in situ; анализ побочных эффектов и осложнений.

Материалы и методы. Нами обследовано и пролечено 15 пациенток репродуктивного возраста (от 2б до 38 лет) с диагнозом CIN III and cervical cancer in situ. Комплексное клиническое обследование включало: ОКТ-кольпоскопию, бактериоскопию, ВПЧ-тестирование, цитологическое исследование, биопсию шейки матки. Использовались фотосенсибилизаторы (ФС) хлоринового ряда в дозе 1 мг/кг в/в капельно в течение 3G минут на 2GG мл физиологического раствора. Лазерное воздействие осуществлялось на длине волны бб2 нм. Лечение было двухэтапным: 1 этап - ФДТ шейки матки, 2 этап (через 6G дней после ФДТ) - конизация шейки матки с выскабливанием цервикального канала. Использовалась полипозиционная методика лазерного воздействия (цер-викальный канал и влагалищная порция шейки матки). Плотность энергии лазерного излучения составляла 15G Дж/см2, плотность мощности - 28G мВт/см2.

Результаты. При CIN инфицированность ВПЧ высокого онкогенного риска была выявлена у 13 пациенток, 2 женщины были вирус-негативными. После ФДТ завершение процессов эпителизации наступало к 4 неделе. В это время полная эрадикация ВПЧ выявлена у 1G пациенток из 13 ВПЧ положительных. При оценке патоморфоза ткани шейки матки после ФДТ с последующей конизацией и выскабливанием цервикального канала у б пациенток с CIN III данных за CIN не было, у 7 женщин (из них у 4 с c-r in situ, 3 с CIN III) были отмечены мелкие фокусы CIN I, у 2 больных с CIN III были выявлены фокусы CIN II. В краях резекции у всех пациенток CIN G. Сроки наблюдения составили 12 мес. ОКТ-кольпоскопия, цитологическое, вирусологическое, гистологическое исследование проводятся каждые 3 мес. За время наблюдения - 1 рецидив c-r in situ шейки матки, что потребовало повтора ФДТ.

Выводы. Таким образом, ФДТ шейки матки является альтернативным методом лечения CIN с сохранением анатомической и функциональной целостности органов. Показанный в работе в большинстве случаев выраженный патоморфоз говорит о противоопухолевой эффективности ФДТ, а также выраженном противовирусном эффекте ФДТ._

Е.Ю. Григорьева, Е.Ю. Колдаева, A.B. Смирнова, Ю.В. Стукалов ИССЛЕДОВАНИЕ

ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НАНОКОНСТРУКЦИЙ НА ОСНОВЕ ДЕНДРИМЕРОВ

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН

Задачи исследования. Изучение цитотоксической активности наноконструкции (НК) с RGD-пептидом и рением-188 на основе дендримеров.

Материалы и методы. Исследование цитотоксической активности созданной наноконструкции (HK -fleHflpHMep_RGD-1SSRe), проведено in vitro на культуре аденокарциномы легких LLC1. При приготовлении рабочих растворов исследуемых соединений для полного связывания 188Re брали не менее, чем 100-кратный избыток модифицированного дендримера. Клеточные линии культивировали в стандартной среде RPMI 1640 с 10% инактивированной телячьей эмбриональной сывороткой (FCS), 2 мМ глютамином, гентамицином. Определение пролиферативного индекса (ИП) проводили в 12-луночных планшетах (рассев по 400-500 тыс. клеток на лунку, объем среды 1мл). Определение % гибели клеток по связанной радиоактивной метке проводилось в96-луночных планшетах. Дозы радиоактивности 188Re для каждого из соединений (188Re - контроль и НК) составляли: 0,018 МБк; 0,037 МБк; 0,074 МБк на лунку. Культивирование клеток проводилось при 37 °С и 5% С02 в течение 60 минут. Количество погибших клеток оценивали через 1ч и 3 ч как сумму радиоактивностей среды и суммарной отмывки по отношению к внесенному количеству 188Re на колодезном счетчике фирмы Gamma (Венгрия). Индекс пролиферации определяли подсчетом количествавыросших клеток через 12, 38, 72 ч.

Результаты и выводы. Проведенные исследования на культуре клеток LLC1 по показателю связывания радиоактивной метки сисследуемыми носителями через 1 час инкубации показали, что при разных дозах рения процент гибели клеток максимален при дозе 0,074 МБк и составляет: 99,5 % для НК, 64,4 % для контроля. При дозе 0,037 МБк гибель составляет: 81,6 % для НК и 26,2% соотвественно. Доза 0,018 МБк приводила к гибели 47,8 % клеток для НК и 22,9 % для контроля. При определении ИП для культуры клеток LLC14epe3 12 ч, 38 ч и 72 ч культивирования клеток сисследуемыми носителями было показано: 1. Прямое действие 188Rern клетки приводит к 69-70 % их гибели и не обладает доза-зависимым эффектом в заданном дозовом диапазоне. 2. Для НК гибель клеток носит доза-зависимый характер и достигает 98,7 ± 2,4 % при дозе 0,074 МБк. Можно предположить, что НК встраивается в клеточные структуры, либо путем интернализации в клетки опухоли, либо контактируя с интегринами мембран опухолевых клеток.

№ 1/том 13/2G14 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

76 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

Е.Ю. Григорьева, Е.Ю. Колдаева, A.B. Смирнова, Ю.В. Стукалов ИЗУЧЕНИЕ БИОРАСПРЕДЕЛЕНИЯ И ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ НАНОКОНСТРУКЦИЙ НА ОСНОВЕ ДЕНДРИМЕРОВ ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва Задачи исследования. Изучение биораспределения и терапевтической эффективности наноконструкции (НК) с RGD-пептидом и рением-188 на основе дендримеров. Материалы и методы. При приготовлении рабочих растворов исследуемых соединений для полного связывания Re брали не менее, чем 100-кратный избыток модифицированного дендримера. В работе использовали мышей C57B1/6 с подкожно трансплантированной аденокарциномой легких Льюиса LLC1. Изучение биораспределения. На 10-й день после трансплантации опухоли животным вводили системно 0,2 мл соединений, содержащих, 1,85 МБк на 1 животное. Через 1, 3, 6, 9, 12 ч после инъекции животных дека-питировали. Для количественного определения НК (дендример RGD- Re) брали кровь, опухоль, печень, почки и легкие. Радиоактивность органов определяли по гамма - составляющей. Рассчитывали: количество радиоактивности образца на 1 г навески (СРМ/г); коэффициенты дифференциального накопления (КДН). Изучение терапевтической эффективности. Через два дня после трансплантации опухоли вводили одноразово системно 0,2 мл следующих соединений: 188Re связанный с НК и контроль - 188Re. Дозы радиоактивного 188Re составляли: 0,3 МБк, 1,85 МБк, 3,7 МБк на животное. Проводили измерение размеров опухоли. Результаты и выводы. Проведенные исследования биорасп^е^еления 18 Re (контроль), и НК показали: на всех сроках наблюдения НК дает преимущественное накопление Re в опухоли по сравнению с контролем. Содержание НК в интервале 1-6 ч выходит на плато. Можно отметить стабильное превышение концентраций 188Re в опухоли по отношению ко всем органам (тканям) мышей кроме крови с 1 до 12 ч после введения НК (градиент концентраций 188Re между опухолью и тканями мышей 1,3-3,9). Показано, что при введении НК доза 0,3 МБк по своему влиянию на рост опухоли не отличается от контрольных животных. Доза 1,85 МБк дает задержку роста опухоли 3-4 дня, доза 3,7 МБк обеспечивает задержку роста опухоли до 7-9 дней. ТРО максимально выражено для дозы 3,7 МБк. Носителем, обеспечивающим хороший терапевтический эффект, является НК при активности рения, равной 3,7 МБк на животное (Тзад = 7-9 дней, УПЖ >50 %, ТРО= 95,7 % до 7 суток и 91 % - до 14 суток). Таким образом, созданные наноконструкции могут рассматриваться в качестве базового элемента перспективных противоопухолевых препаратов.

Н.Я. Гридина, В.Д. Розуменко, В. В. Белошиикий, Н.Г. Драгунцова, О.Н.Величко, О.И. Веселова, А.П. Колисниченко ПРОВЕДЕНИЕ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГЛИОМ ГОЛОВНОГО МОЗГА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МОДУЛЯЦИИ КЕТАМИНОМ И ВЕРАПАМИЛОМ АКТИВНОСТИ ИОНОТРОПНЫХ NMDA - РЕЦЕПТОРОВ НА КЛЕТКАХ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ Государственное Учреждение "Институт нейрохирургии им. акад. А.П.Ромоданова АМН Украины", Киев, Украина, gridinanina@ukr.net Задачи исследования. При диагностике первичных глиом и их рецидивов актуальной задачей является дифференциальная диагностика между опухолевыми и локальными воспалительными процессами в головном мозге, между доброкачественными и злокачественными глиомами. Рост и прогрессия глиом во многом зависят от опухоль-ассоциированного воспаления, имеющего существенные отличия с воспалением неопухолевого ге-неза. Активатором воспалительного процесса является наличие некрозов в тканях организма. Механизм некротической гибели тканей головного мозга во многом зависит от активности ионотропных NMDA-рецепторов. Верапамил и кетамин влияют на активность ионотропных NMDA-рецепторов, изменяя при этом степень агрегации клеток крови. В экспериментах in vitro можно модулировать активность NMDA-рецепторов с помощью кетамина и верапамила таким образом, что она будет достоверно отличаться между воспалительными и опухолевыми процессами в головном мозге, а также между доброкачественными и злокачественными степенями ана-плазии глиом. Материалы и методы. Исследования агрегации клеток крови проводили у больных с глиомами головного мозга (110 чел.), с черепно-мозговыми травмами (27 чел.) и у доноров (35 чел.) с помощью плазмонно-резонансного спектрометра «Plasmon». Кетамин и верапамил добавляли в кровь в соотношении 1:10 перед исследованием на спектрометре в интервале разведений бидистиллятом от 10-1 до 10-5 степени. Результаты и выводы. При воздействии кетамина на агрегацию клеток крови в разведении 10-4 степени отмечены статистически достоверные отличия между показателями агрегации крови у больных с черепно-мозговыми травмами и глиомами IV стадии (p<0,01). Эти данные могут быть использованы при дифференциальной диагностике между воспалительными и опухолевыми процессами в тканях головного мозга в доопера-ционном периоде. При добавлении в кровь верапамила, разведенного в 10-4 степени, отмечены достоверные отличия (p<0,01) между показателями уровня агрегации клеток крови в группах больных с глиомами II стадии. По отношению к показателям в группах больных с глиомами IV стадии, что может лечь в основу разработки методов дифференциальной диагностики у больных с продолженным ростом глиом.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 77

М.А. Грин1, Р.И. Решетников1, Р.И. Якубовская2, Е.А. Плотникова2, ДЬ1. Морозова2,A.B. Феофанов , А.В.Ефременко , Д.Э.Ермакова ' , А.А.Цыганков , А.Ф. Миронов АМИНОАМИДЫ БАКТЕРИОХЛОРОФИЛЛА А, ОБЛАДАЮЩИЕ ВЫСОКОЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ 1 Московский государственный университет тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова, Москва 2Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П. А. Герцена Минздрава РФ, Москва 3Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва 4Институт фундаментальных проблем биологии РАН, г. Пущино, Россия Актуальность. Выбор природных пигментов для создания высокоэффективных фотосенсибилизаторов ФС) нового поколения обусловлен рядом причин, включая их распространенность в природе, интенсивное поглощение в длинноволновой области спектра, возможность химической модификации боковых заместителей, структурную близость к эндогенным порфиринам, что предполагает низкий уровень токсичности подобных соединений и быстрое выведение из организма. Цель исследования. Создание ФС бактериохлоринового ряда у которых отрицательный заряд на периферии хлоринового макроцикла заменен на положительный путем введения заместителя с терминальной аминогруппой. В связи с тем, что в опухолевых очагах кислотность среды повышена, протонирование аминогруппы и генерирование положительного заряда может способствовать изменению распределения ФС в организме и увеличению его тропности к опухолям. Результаты. В данной работе получены аминоамиды бактериохлорина путем взаимодействия метилового эфира бактериофеофорбида c диаминоалканами, имеющими различную длину углеродной цепи. Биологические испытания бактериоаминоамидов показали, что они обладают высокой фотоиндуцированной активностью в отношении клеток человека различного эпителиального происхождения при наномолярных концентрациях и обеспечивают высокую дозозависимую противоопухолевую эффективность у животных с опухолями различного генеза. При дозах ФС 2,5 и 5,0 мг/кг обнаружены 100 % торможение роста опухоли и 100 % излеченность животных в течение 120 суток наблюдения за счет селективного накопления в опухоли и быстрого выведения из организма. Выводы. Таким образом, данный модификационный ряд бактериохлоринов может рассматриваться как перспективная группа природных фотосенсибилизаторов нового поколения.

А.Н. Гришанина, Т.А. Богуш ИНГИБИРОВАНИЕ ФЕНОТИПА МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ЛЕГКОГО ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ГЕМЦИТАБИНА ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва Актуальность. Рак легкого - одна из самых распространенных форм злокачественных новообразований, которые часто обладают множественной лекарственной устойчивостью (MDR) к химиотерапии. Гемцитабин (Гем) - противоопухолевый препарат, который используют для лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) в сочетании с препаратами платины и таксанами. Из-за токсичности производных платины актуален вопрос об эффективности комбинаций гемцитабина с другими препаратами. Задачи исследования. Авторы попытались ответить на вопрос, может ли быть Гем модификатором MDR, подобно препаратам платины. Материалы и методы. Функционирование АВС-транспортеров Pgp и MRP, маркеров MDR, оценивали методом проточной цитофлуориметрии по накоплению MDR-препарата доксорубицина в клетках биопсийного материала опухолей. Эффект воздействия Гем на активность АВС-транспортеров сравнивали с эффектами их ингибиторов верапамила и генистеина. Результаты. Фенотип MDR был выявлен во всех исследованных опухолях: примерно в 30% случаев обнаружена экспрессия функции Pgp, и во всех случаях - MRP. Выявлено два типа реакции опухолевых клеток на воздействие ингибиторов АВС-транспортеров и Гем: увеличение накопления доксорубицина в цитоплазме или увеличение его накопления в ядре и связывание с ДНК. При всех использованных концентрациях Гем увеличение цитоплазматического накопления доксорубицина наблюдалось чаще по-сравнению с ядерным. Выводы. Накопление доксорубицина в клетках НМРЛ может увеличиваться при воздействии и циспла-тина, и Гем, однако эффект цисплатина выявляется практически всегда, а эффект Гем - приблизительно в половине случаев. Цисплатин в подавляющем большинстве случаев увеличивает поступление доксорубицина в ядро, а Гем значительно чаще увеличивает его накопление в цитоплазме. Из сказанного следует, что по силе модифицирующего эффекта Гем уступает цисплатину, но в силу его невысокой токсичности этот препарат может быть полезен, как модификатор, в комбинациях с MDR-препаратами при лечении НМРЛ. Поддержано РФФИ (гранты № 12-04-00028, № 13-04-01004).

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

78 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

ИД. Гулякин, E.B. Санарова, A.B. Ланцова, А.П. Полозкова, О.Л. Орлова, H.A. Оборотова, Т.Д. Миникер, Л.В. Эктова РАЗРАБОТКА НАНОСТРУКТУРИРОВАННОЙ МОДЕЛИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПРОИЗВОДНОГО ИНДОЛОКАРБАЗОЛА ЛХС-1208 ФГБУ «РОНЦИМ. Н.Н.БЛОХИНА» РАМН, МОСКВА Актуальность. В лаборатории химического синтеза НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» разработана субстанция производного индолокарбазола - ЛХС-1208. Особенностью механизма действия соединений этого класса является их способность взаимодействовать с несколькими мишенями и, следовательно, индуцировать различные пути гибели опухолевых клеток. Субстанция обладает сильной ингибирующей активностью в отношении киназ - циклинзависимой киназы (Cdkl), протеин-киназы С и тирозинкиназы и второй мишенью является двухцепочечная ДНК и комплекс ДНК с топоизмеразой. Задача исследования. Разработка состава и технологии получения модели липосомальной лекарственной формы с ЛХС-1208. Материалы и методы. В процессе определения оптимального состава липосомальной формы с ЛХС-1208 в качестве вспомогательных компонентов выбраны лецитин, холестерин и PEG-2000 DSPE, в молярном соотношении 100:6:4, которые растворяли в ацетоно-хлороформной смеси (4:1). Весовое соотношение препарат : липиды составляло 1:110. Липосомы получали по методу Бэнгхема, упариванием ацетоно - хлороформного раствора компонентов на роторном испарителе до образования полупрозрачной липидной пленки. Затем ее гидратировали водой для инъекций и получали липосомы, которые измельчали, последовательно пропуская через поликарбонатные мембранные фильтры (Nuclepore, Whatman, Великобритания) с уменьшающимся размером пор 0,45 и 0,22 мкм на экструдере LipexT Thermobarrel Extruder 10 мл (Канада). Количественное определение содержания препарата в липосомах проводили на спектрофотометре Cary 100 (Varian, Inc., Австралия) при длине волны 320 нм (±2 нм). Анализ среднего диаметра везикул измеряли на приборе Submicron Particle Sizer Nicomp-380. Результаты и выводы. Средний диаметр липосом с ЛХС-1208 составил после получения 202±10 нм. При хранении в холодильнике в течение 24 ч происходило расслоение липосом на две фракции, что говорило о том, что данный состав нестабилен, в связи с этим для увеличения срока годности целесообразным является применение метода лиофилизации. В настоящее время проводиться подбор криопротекторов, введение которых в состав липосом является необходимым в процессе сублимации для защиты липосомального бислоя от воздействия повреждающих факторов.

М.А. Гуреев1, В.Г. Трибулович1'2, A.B. Гарабаджиу1, Дж. Мелино1 ВЛИЯНИЕ ОПТИЧЕСКОИ ИЗОМЕРИИ НА ФАРМАКОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ МОДУЛЯТОРОВ АКТИВНОСТИ БЕЛКА Р53 1СП6ГТИ(ТУ), Санкт-Петербург 2ФГБУ НИИ Гриппа, Санкт-Петербург Задачи исследования. Разработка препаратов, модулирующих активность белка р53 - одного из главных онкосупрессоров, является одним из актуальных направлений в лечении рака. Основная мишень для данных препаратов - белок MDM2, участвующий в процессах регулирования активности р53 и его убиквитин-зависимой протеасомальной деградации. Материалы и методы. В ходе разработки новых классов ингибиторов MDM2, с целью повышения сродства к мишени и их мембранотропности, было предложено включить в их структуру аминокислоты с введёнными в них каркасными структурами. За основу был взят класс ингибиторов MDM2, разработанных Хардкаст-лом и соавт., на основе изоиндолинонового ядра. Также, в расчётах учитывается влияние энантиомерии аминокислот на активность соединений. Влияние оптической изомерии связано с различной пространственной ориентацией каркасного заместителя в L- и D- изомерах аминокислот, что в свою очередь может отразиться на фармакологической активности соединения. Потенциальная мишень-специфичность соединений оценивается с помощью молекулярного докинга в среде программ LeadFinder и LeadIT. Результаты и выводы. Для эксперимента были выбраны два соединения из серии изоиндолиноновых ингибиторов MDM2, содержащих в своей структуре два линкера (на основе 2,2-циклопропан-1,3-пропандиола и пропан-1,3-диола) через которые присоединены аминокислоты в L- и D- формах, включающие каркасные структуры (адамантан, борнан, хинуклидин). Докинг структур показал наличие существенных различий в сродстве ингибиторов к р53-связывающему участку MDM2 зависящих от стереоизомерии аминокислот. Так, например, расчётное значение константы связывания ингибитора с присоединённым через 2,2-циклопропан-1,3-пропандиоловый линкер, L-адамантилглицином, на 1 порядок меньше чем у D-изомера (Ki=2,87*10-8 против 3,12*10- ). Визуализация и анализ результатов молекулярного докинга, показали что L- изомер адамантилгли-цина эффективно заполняет полость сформированную участками Met62-Tyr67-Gln72 а аминогруппа формирует водородную связь с атомом кислорода в Gly58, что и приводит к повышению его активности. Остальная же часть молекулы (изоиндолиноновое ядро, хлорфенильная и нитробензильная группы) взаимодействуют идентично вне зависимости от оптической изомерии аминокислотного заместителя.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 79

ф

-1-2-1-

И. В. Гусев , H.A. Федоренко , Н.Д. Олтаржевская ,

Л.В. Демидова2, И.В. Дрошневс?, Е.А. Дунаева2, О.Б. Дубовецкая2, С. А. Кожевникова2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВЫСОКОСТРУКТУРИРОВАННЫХ АЛЬГИНАТНЫХ ДИСКОВ С 5-ФТОРУРАЦИЛОМ В ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ ШЕЙКИ МАТКИ И ПРЯМОЙ КИШКИ

1000 «Колетекс», Москва

2ФГБУ «МНИОИим. П.А. Герцена» Минздрава России, Москва

Задачи исследования. Определение эффективности использования высокоструктурированных дисков «Колегель-5-фтур-диск» на основе биополимера альгината натрия для местного подведения препарата 5-фторурацила с целью радиосенсибилизации при проведении лучевой терапии злокачественных опухолей шейки матки (РШМ) и прямой кишки (РПК). Высокоструктурированные мягкие, формоустойчивые диски на основе биодеградируемого полимера альгината натрия предназначены для направленной доставки введенного в них цитостатика и радиомодификатора 5-фторурацила ректально и вагинально, непосредственно к очагу поражения (опухоли шейки матки или прямой кишки).

Материалы и методы. Диски «Колегель-5-фтур-диск» при предоперационной химиолучевой терапии РШМ IIB-IIIB стадии (T1-2bN0-1M0) применяли до начала облучения в течение 5 дней в виде аппликаций. К опухоли шейки матки подводили «Колегель-5-фтур-диск», содержащий 0,3г 5-фторурацила. Суммарная доза 5-фторурацила на курс составляла 1,5 г. Далее проводили сочетанную лучевую терапию на область малого таза в СОД-40 Гр. Исследуемая группа составила 38 пациенток с плоскоклеточным РШМ. При химиолучевом лечении аденогенного РПК диски «Колегель-5-фтур-диск» вводились в прямую кишку на ночь накануне первого дня облучения и в течение всего курса лечения в дозе 5-фторурацила 0,1г на введение. Суммарная доза за курс лечения составила 2,0 г. Суммарная очаговая доза лучевой терапии составляла 48 Гр. Исследуемая группа - 24 пациента с верифицированным диагнозом рака прямой кишки.

Результаты. При предоперационной химиолучевой терапии с «Колегель-5-фтур-диск» проявлений общей токсичности не отмечено. Всем 38 пациенткам с РШМ удалось выполнить радикальное оперативное вмешательство. При анализе данных планового морфологического исследования у 63,3 % больных была зарегистрирована III-IV степень лечебного патоморфоза. При РПК в исследуемой группе степень резорбции опухоли оценивали субъективно. На первой неделе лечения у 2/3 пациенток улучшился пассаж по кишечнику, исчезли явления дискомфорта в прямой кишке. Лечение проведено всем запланированным больным в намеченные сроки и не увеличило число послеоперационных осложнений.

Выводы: использование высокоструктурированных дисков с 5-фторурацилом «Колегель-5-фтур-диск» в группе пациентов с РШМ и РПК при агрессивной предоперационной химиолучевой терапии обеспечило усиление степени резорбции опухоли при меньших суммарных дозах 5-фторурацила, снижение общей токсичности лечения, и возможность выполнения второго этапа лечения (операции) в запланированный срок.

Ф

Е.В. Давыдов

ОПЫТ КОМБИНИРОВАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ ФДТ И ХИМИОТЕРАПИИ

Ветеринарная клиника «Россолимо», Москва

Задачи исследования. Оценить возможность комбинированного применения фотодинамической терапии (ФДТ) и химиотерапии при терапии злокачественных опухолей, а именно: 1) применения доксорубицина в монорежиме, с последующей ФДТ; 2) применения доксорубицина и цисплатина, с последующей ФДТ; 3) применения циклофосфана в монорежиме, с последующей ФДТ.

Материалы и методы. ФДТ проводилась у мелких домашних животных (МДЖ) с наружными и внутренними опухолями различной этиологии и локализации (в том числе фибросаркома, остеосаркома и аденокар-цинома молочной железы). Хлорин Е6 применялся внутривенно в дозах 0,8 —1,0 мг/кг. Доксорубицин применялся в дозе 30 мг\м2 и 25 мг\м2. Циклофосфан применялся в дозе 300 мг\м2. Цисплатин применялся в дозе 70 мг\м2. Использовался диодный лазер мощностью 1,5 Вт, с длинной волны 662 нм. Активация ФС проводилась через 3 часа после введения. Плотность энергии составляла 300—500 Дж/см2.

Результаты. Результаты лечения оценивались по клиническим и патоморфологическим признакам. Клинически наблюдалась полная регрессия (ПР), частичная регрессия (ЧР) или стабилизация. При сравнении различных методов отмечено, что комбинированное применение химиотерапии и ФДТ (по сравнению со стандартной ФДТ) приводит к более выраженному эффекту, влияние на опухоль оказывалось комплексное: местное воздействие ФДТ и общее воздействие химиотерапевтических препаратов (которые воздействуют как на опухоль, так и на возможные метастазы).

Выводы. Показана возможность применения и эффективность комбинированного применения химиотерапии и ФДТ. Необходимы дальнейшие исследования комбинированного применения.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

О.Н. Дерябина, П.М. Канаев, H.A. Плотникова,

С.П. Кемайкин, C.B. Харитонов, Т.В. Харитонова, И.В. Каръгина

ВЛИЯНИЕ МЕЛАТОНИНА И МЕТФОРМИНА

НА ПРОЦЕССЫ АНГИОГЕНЕЗА ОПУХОЛЕЙ ШЕЙКИ МАТКИ У МЫШЕЙ

ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева», Саранск

Актуальность. Ангиогенез - неотъемлемая часть нормального эмбриогенеза и онтогенеза, высокорегу-лируемый многостадийный процесс формирования сети капилляров из эндотелиальных клеток, выстилающих мелкие венулы.

Задачи исследования. Изучить воздействие мелатонина и метформина на процессы ангиогенеза в ткани индуцированного рака шейки матки.

Материалы и методы. 120 мышей были разделены на 4 группы: 3 опытные группы по 30 животных, 30 животных составили контрольную группу по канцерогену. Животные 1-ой группы получали мелатонин. Животные 2-ой группы получали с питьевой водой в течение всего дня метформин. Животные 3-ей группы получали с питьевой водой в течение всего дня метформин и мелатонин. Животные 4-ой группы составили контрольную группу по канцерогену и получали питьевую воду без добавления мелатонина и метформина. Изучалась экспрессия ангиогенных факторов в ткани индуцированных опухолей, экспрессия VEGF и количество кровеносных сосудов, окрашенных антителами к CD31, с использованием коммерческих антител и проявочных тест-систем. Подсчитывали количество CD31+ микрососудов в опухоли в не менее 3 полях зрения при увеличении х20. Экспрессию VEGF определяли в интенсивности окрашивания опухолевых клеток, как 1+ при низкой интенсивности окрашивания, и как 2+ при средней интенсивности окрашивания.

Результаты. В группе контроля интенсивность окрашивания VEGF составила 2+. Под влиянием метформина и совместного использования мелатонина и метформина интенсивность окрашивания VEGF уменьшилась до 1+. В группе контроля количество CD31+ сосудов в поле зрения составляет 15+3. Под воздействием мелатонина данный показатель составил 10+5. Под влиянием метформина и совместного использования мелатонина и метформина количество CD31+ сосудов в поле зрения уменьшилось до 8+3.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение мелатонина и метформина способствует снижению активности ангиогенеза в ткани индуцированных неоплазий.

О.Н. Дерябина, H.A. Плотникова, С.П. Кемайкин, C.B. Харитонов, Т.В. Харитонова, И.В. Каръгина РЕГИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ РАКОМ ЯИЧНИКОВ ЗА ПЕРИОД С 2009 ПО 2013 ГГ.

ФГБОУ ВПО «Мордовский госуниверситет им. Н.П. Огарева», Саранск

Актуальность. Рак яичников занимает третье место в структуре злокачественных новообразований женских половых органов и первое место в структуре смертности от этих заболеваний.

Задача исследования. Выявить уровень заболеваемости раком яичников в Республике Мордовия за период с 2009 г по 2013 г.

Материалы и методы. При изучении заболеваемости раком яичников в Республике Мордовия проводился анализ статистики морфологической верификации диагнозов с учетом количественной характеристики стадийности процесса.

Результаты. Заболеваемость раком яичников в Республике Мордовия в 2009 г. составила 9,88 0/000 , в

2010 г. - 2,68 0/000, в 2011 г. - 7,5 6 0/000, в 2012 г. - 2,5 6 0/000, в 2013 г. - 8,4 1 0/000. За период 2009-2013 гг. в Республике Мордовия достоверно увеличилось количество случаев морфологической верификации диагноза рака яичников. За исследуемый период отмечается увеличение выявляемое™ рака яичников на ранних стадиях в

2011 и в 2013 гг. Так, в 2009 г. количество больных с I стадией рака яичников составило 11,11 %; в 2010 г. -9,09 %; в 2011 г. - 25,81 %; в 2012 г. - 14,29 %; в 2013 г. - 26,09 %. В 2009 г. количество больных с II стадией рака яичников составило 22,22 %; в 2010 г. - 4,55 %; в 2011 г. - 27,42 %; в 2012 г. - 9,52 %; в 2013 г. -11,59 %. В 2009 г. на III стадии было выявлено 38,27 %; в 2010 г. - 4,55 %; в 2011 г. - 37,1 %; в 2012 г. - 14,29 %; в 2013 г. - 37,68 %. Количество больных с IV стадией заболевания в 2009 г. -28, 4 %; в 2010 г. - 81,82 %; в 2011 г. - 9,68 %; в 2012 г. - 61,9 %; в 2013 г. - 24,64 % от общего числа больных с впервые установленным диагнозом.

Выводы. Пик заболеваемости раком яичников приходится на возраст 45-49 лет. В результате проведенного анализа эпидемиологии рака яичников в Республике Мордовия за исследуемый период можно сделать следующие выводы: за последние годы отмечается рост заболеваемости раком яичников в регионе; за период с 2009 по 2013 гг. отмечена низкая выявляемость заболеваний раком яичников на ранних стадиях.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 81

М.В. Дмитриева, А.П. Полозкова, Н.А. Оборотова качественный анализ липосомальнои лекарственной формы борхлорина ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» РАМН, Москва Актуальность. На сегодняшний день тонкослойная хроматография (TCX) является одним из основных методов в фармацевтических исследованиях, в том числе при установлении подлинности препаратов, так как обеспечивает простое и быстрое проведение разделений, хорошую воспроизводимость, обладает отличной селективностью и оптимален в ценовом отношении. В лаборатории разработки лекарственных форм ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН разработана лиофилизированная липосомальная лекарственная форма (ЛЛЛФ) отечественного фотосенсибилизатора хлоринового ряда борхлорина. Для идентификации действующего вещества в ЛЛЛФ преложен метод TCX. Задачи исследования. Обнаружение и идентификация борхлорина в ЛЛЛФ методом TCX. Материалы и методы. Анализ проводили с использованием пластинок «Sorbfil» в следующих системах растворителей: 1) Хлороформ/ метанол (9:1), 2) Хлороформ/ этанол (20:1), 3) Хлороформ/ этанол/ вода (65:25:4), 4) Хлороформ/ этанол/ ЛУК/ вода (40:10:7:3), 5) Хлороформ/ этанол/ пропанол-2/ ЛУК/ вода (6:3:3:2:1), 6) Хлороформ/ ацетон/ ЛУК/ вода (25:15:5:4), 7) Хлороформ/ пропанол-2/ ЛУК/ вода (6:3:2:1), 8) Хлороформ/ аммиак 25% (4:1), 9) Ацетон/ этилацетат/ ЛУК/ вода (15:10:3:5), 10) Этанол/ аммиак водный (7:3), 11) Пропанол-2/ ЛУК/ вода (12:3:1), 12) н-Бутанол/ ЛУК/ вода (6:3:2). ЛЛЛФ борхлорина регидратировали водой и добавляли этанол до получения раствора с концентрацией 0,1 мг/мл. Стандартный 0,1 мг/мл раствор борхлорина получали растворением субстанции в этаноле. На линию старта наносили по 5 мкл раствора препарата и стандарта. После подсушивания на воздухе пластинку помещали в камеру, предварительно насыщенную парами смеси растворителя, и хроматографировали до достижения фронтом растворителя линии финиша (длина пробега 12 см). Затем пластинку вынимали из камеры и подсушивали на воздухе. Обнаружение борхлорина проводили визуально (зеленые пятна). Результаты и выводы. В ходе исследования в образцах лекарственной формы (ЛФ) и стандарта (Ст) установлены следующие значения Rf : 1) ЛФ - 0,22, Ст - 0,13; 2) ЛФ - 0,06, Ст - 0,02; 3) ЛФ - 1,0, Ст - 1,0; 4) ЛФ - 1,0, Ст - 1,0; 5) ЛФ - 0,55, Ст - 0,60; 6) ЛФ - 0,56, Ст - 0,48; 7) ЛФ - 0,58, Ст - 0,52; 8) ЛФ - 0,08, Ст - 0,06; 9) ЛФ - 0,57, Ст - 0,59; 10) ЛФ - 0,55, Ст - 0,56; 11) ЛФ - 0,36, Ст - 0,13; 12) ЛФ - 0,50, Ст - 0,50. Таким образом, для обнаружения и идентификации борхлорина в ЛЛЛФ рекомендуется проводить TCX с использованием 12-й системы растворителей.

И.Н. Дружкова1, М.М. Кузнеиова1, М.В. Ширманова1, Л.Б. Снопова1, Н.Н. Проданец1, В.В. Белоусов2'1, С.А. Лукьянов2'1, Е.В. Загайнова1 РЕГИСТРАЦИЯ РН ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК С ПОМОЩЬЮ ГЕНЕТИЧЕСКИ-КОДИРУЕМОГО СЕНСОРА 1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 2Институт биоорганической химии РАН, Москва Актуальность. Внутриклеточный уровень рН является важным фактором и лежит в основе многих физиологических процессов в клетке. Установлено, что практически все патологические процессы сопровождаются изменением уровня рН. Известно, что более низкий уровень рН опухолевых клеток обеспечивает повышенную чувствительность к цитокинам и имеет существенное значение в формировании множественной лекарственной устойчивости. Поэтому информация о значении рН необходима для исследования биологии опухоли. Задача исследования. Разработка метода регистрации уровня рН с помощью генетически-кодируемого сенсора на основе желтого флуоресцентного белка cpYFP и флуоресцентного биоимиджинга. Материалы и методы. Работа выполнена на клетках HeLa Kyoto, экспрессирующих флуоресцентный белок, и на 3D модели опухоли (сфероидах), сформированных из тех же клеток. Оценку флуоресценции in vitro проводили на флуоресцентном микроскопе Nicon Eclipse Ti E. Результаты. Получена 3D-MOflenb опухоли, экспрессирующей флуоресцентный белок, в матригеле. Разработана методика рациометрической визуализации сигнала сенсора по данным флуоресцентной микроскопии. Значения сигнала откалиброваны с использованием клеточной культуры и набора буферов со значениями рН в диапазоне от 6,7 до 8,0. По результатам исследования in vitro показано, что уровень рН в 3D опухолевой модели неоднороден. В центре опухолевого узла наблюдается более щелочное значение внутриклеточного рН, чем на периферии. Выводы. Полученные результаты указывают на перспективность использования генетически-кодируемого сенсора на основе желтого флуоресцентного белка cpYFP для определения уровня внутриклеточного значения рН и проведения дальнейших исследований на опухолях животных. Работа выполнена при финансовой поддержке Минобрнауки (договор № 11.G34.31.0017).

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

82 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

E.A. Епифанова1, A.A. Бабаев1, O.A. Гамаюнова2, C.B. Гамаюнов2, B.B. Новиков1 сывороточный уровень растворимых молекул адгезии при заболеваниях лёгких 1ФГБОУ ВПО «Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», Нижний Новгород 2ГБОУ ВПО НижГМА Минздрава России, Нижний Новгород Актуальность. Растворимые формы мембранных молекул адгезии можно рассматривать в качестве эндогенных иммунорегуляторных молекул. В ходе исследований, проводимых различными лабораториями, показана несомненная прогностическая и мониторинговая значимость сывороточного уровня растворимых форм ряда мембранных молекул. Цель исследования. Изучение сывороточного уровня растворимых молекул адгезии при заболеваниях легких. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи: оценить сывороточное содержание растворимых молекул адгезии CD54, CD50, CD18, растворимых комплексов CD18-CD54 и CD18-CD50, олиго-мерных молекул olCD50 и olCD54 при заболеваниях легких. Материалы и методы. Материалом для исследований служили 100 образцов сыворотки крови больных различными заболеваниями лёгких (туберкулёз, рак лёгкого, пневмония), предоставленные Нижегородским областным противотуберкулезным диспансером. Основным методом исследования являлся твердофазный им-муноферментный анализ. Для проведения иммуноферментного анализа применяли мышиные моноклональные антитела серии ИКО (ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва), а также поликлональные антитела, направленные против поверхностных антигенов лимфоцитов периферической крови человека. Результаты. В ходе работы у больных было выявлено увеличение сывороточного содержания растворимых молекул адгезии CD54 в 1,5 раза, CD18 в 1,5 раза и olCD54 в 1,1 раза по сравнению с контрольной группой здоровых доноров. Также выявилось увеличение уровня растворимых комплексов CD18-CD54 в 1,6 раза и CD18-CD50 в 1,3 раза у людей с различными заболеваниями легких по сравнению с группой здоровых людей. Несмотря на это относительная концентрация растворимых молекул CD50 и их олигомерной формы olCD50 у людей с различными заболеваниями легких уменьшилась по сравнению с контрольной группой в 1,3 раза и в 1,5 раза соответственно. Выводы. Таким образом, при заболеваниях легких наблюдалось увеличение уровня растворимых молекул адгезии, что говорит об активации иммунологических реакций.

Н.П. Ермакова , А.П. Бонариев ' , О.И. Коняева , Н.Ю. Кулъбачевская , 1 3 3 3 2 1 А.А.Сергеев , АЛ. Зернов , С.Г. Яковлев , Г.А. Бонарцева , К.В. Шайтан , В.М. Бухман ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ БИОПОЛИМЕРНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПАКЛИТАКСЕЛА 1ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва 2МГУ им. М.В. Ломоносова, биологический факультет, Москва 3Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН, Москва Цель исследования. Изучение «острой» токсичности биополимерной лекарственной формы паклитак-села (БЛФП) для лечения опухолевых заболеваний. Материалы и методы. Исследования проведены на 180 мышах-самцах и самках гибридах B6D2F1, массой 20-23 г, 120 крысах-самцах и самках неинбредных, массой 150-160 г, полученных из разведения ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН. БЛФП представляет собой 5% суспензию биополимерных микрочастиц в физиологическим растворе хлористого натрия. Микрочастицы получены методом пьезоэлектрического распыления на биологическом факультете МГУ, содержание лекарственной субстанции паклитаксела (ПКЛ) в микрочастицах - 10±1%. БЛФП вводили внутрибрюшинно однократно мышам в ранже доз от 1000 до 6000 мг/кг, а крысам - от 500 до 2500 мг/кг. В качестве контроля использовали ПКЛ-Тева серии 11G29KD концентрат для приготовления раствора для инфузий 6 мг/мл. ПКЛ-Тева вводили однократно внутрибрюшинно в 5% концентрации мышам в дозе 1000 мг/кг, крысам в дозе 500 мг/кг. Результаты. Установлены расчетные токсические дозы БЛФП для мышей-самцов: ЛД10 -952(665-1239) мг/кг; ЛД50 - 1618(1387-1849) мг/кг, для мышей-самок: ЛД10 - 3714(3317-4111) мг/кг; ЛД50 -4372 (4121-4623) мг/кг, для крыс-самцов: ЛД10 - 591 (447-735) мг/кг; ЛД50 - 819 (725-913) мг/кг и для крыс-самок: ЛД10 - 462 (259-665) мг/кг; ЛД50 - 657 (555-759) мг/кг. Гибель животных наблюдалась с 3 по 30 сутки после введения БЛФП. Клиническая картина интоксикации на мышах и на крысах после введения в летальных дозах аналогична: уменьшение массы тела на 15-25 %, пилоэрекция, мидриаз, гиподинамия, диарея, анорексия. На аутопсии: препарат в брюшной полости находился свободно белыми кусками и частично осумкован и в виде белого налета на внутренних органах. В просвете кишечника сукровичное содержимое (4-8 сутки), или толстый кишечник растянут сухими каловыми массами (5-30сутки), печень светло-коричневая увеличена, селезенка уменьшена. У выживших животных, получивших сублетальную дозу БЛФП, на 30 сутки в брюшной полости геморрагический экссудат. После введения ПКЛ-Тева гибель животных происходила в течение 2 часов. Выводы. БЛФП при внутрибрюшинном введении мышам и крысам менее токсична в эквидозах чем ПКЛ-Тева. Выявлена половая зависимость при внутрибрюшинном применении БЛФП мышам гибридам B6D2F1 по величине расчетных токсических доз: самки примерно в 3 раза менее чувствительны, чем самцы.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Т.М. Ермоленко, А.Д. Мурашко, О.Г. Парахневич, Т.В. Трухачева, Н.П. Янюк ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ПРЕПАРАТ «ВИНОРЕЛБИН,

КОНЦЕНТРАТ ДЛЯ ИНФУЗИЙ 10 МГ/МЛ», ПРОИЗВОДСТВА РУП «БЕЛМЕДПРЕПАРАТЫ»

РУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь

Задачи исследования. Разработать технологию производства стабильного противоопухолевого препарата на основе производного винкаалкалоидов - винорелбин.

Материалы и методы. Для разработки препарата использована субстанция винорелбин тартрат производства Hubei HONCH Pharmaceutical Co., Ltd., для изучения стабильности при контроле качества препарата использовались методы ВЭЖХ, УФ-спектрофотометрии.

Результаты. РУП «Белмедпрепараты» разработана технология производства, позволяющая на выпуске получить препарат высокого качества и обеспечивающая стабильность лекарственной формы препарата в течение всего срока годности.

Основные примеси, которые могут образовываться в процессе производства и при хранении лекарственного средства - это продукт фотодинамического разложения (примесь А) и продукт деацетилирования - примесь В. Эффективность разработанной технологии подтверждает исключительная стабильность раствора препарата Винорелбин. В растворе, приготовленном для розлива, в течение 48 часов при температуре 25±2 °С отсутствует нарастание примесей, неизменным остается содержание действующего вещества. Это позволило установить в препарате на момент выпуска предельные нормы по содержанию сопутствующих примесей практически на уровне их значений в исходной субстанции: примесь А - до 0,4 %; примесь В - до 0,2 %, любая единичная примесь - до 0,2 %, суммарное содержание примесей - 1,0 %. Результаты проведенных исследований по изучению стабильности в условиях долгосрочных (2-8 °С) испытаний подтвердили стабильность разработанного препарата в течение 2 лет. В течение срока годности наблюдается медленный рост примеси А: содержание примеси А - не более 1,0 %, примеси В - не более 0,3 %, любой единичной примеси - не более 0,2 %. Для контроля качества препарата разработана и провалидирована высокоточная методика ВЭЖХ, позволяющая вести количественный контроль за содержанием примесей, что гарантирует высокое качество препарата Винорелбин, концентрат для инфузий 10 мг/мл, производства РУП «Белмедпрепараты».

Выводы. Разработана технология получения препарата Винорелбин, концентрат для инфузий 10 мг/мл, которая обеспечивает его качество и стабильность. Современные методики оценки качества позволяют обеспечить эффективный контроль физико-химических характеристик препарата в процессе производства и при хранении.

Н.В. Ефремова, Е.К. Кречина, H.A. Дмитриева, Л.Б. Ярыгина

ЭФФЕКТИВНОСТЬ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ ФДТ ПРИ ВОСПАЛЕНИИ ПАРОДОНТА

ФГБУ «Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии» МЗ РФ, Москва

Актуальность. По данным литературы имеются сведения, подтверждающие антимикробную эффективность метода фотодинамического воздействия на патогенную микрофлору инфекционного очага [Гельфонд Б.Р., 2001; Яшунский Д.В., 2002; Maisch T. et al., 2004]. Однако, в стоматологии сведения о применении ФДТ незначительны. В связи с чем, изучение антимикробного эффекта ФДТ при воздействии на пародонтальную флору актуально.

Цель исследования. Изучить эффективность ФДТ на аэробные микроорганизмы при воспалительных заболеваниях пародонта при воздействии различных фотосенсибилизаторов в зависимости от плотности энергии.

Материалы и методы. У 60 пациентов с диагнозом катаральный гингивит и генерализованный пародон-тит были выделены аэробные микроорганизмы из пародонтальных карманов и представлены в виде смешанной культуры стрептококка, C.albicans, E.faecalis и E.coli. В качестве фотосенсибилизаторов были использованы метилиновый синий (0,5-1,0 %), толлуидиновый голубой (0,5-1,0 %) и фотодитазин 0,5 %. Суточные культуры микроорганизмов (в разведении 1:1000) высевали на чашки Петри с селективными питательными средами. Затем посевы облучали лазерным излучением с длиной волны 661 нм и плотностью энергии 90 и 100 Дж/см2 с помощью прибора Латус-04 (ЗАО «Полупроводниковые приборы», Санкт-Петербург). Учет результатов проводили через 24 часа путем измерения зоны задержки роста в области лазерного воздействия.

Результаты. Анализ полученных результатов показал, что наибольшая активность лазерного излучения отмечена при плотности энергии 100 Дж/см . По отношению к смешанной культуре стрептококков наибольшая активность ФДТ была определена у всех фотосенсибилизаторов, несколько сниженное действие на S.faecalis отмечено при использовании 0,5% метиленового синего. При воздействии ФДТ на C.albicans лучшие результаты установлены при использовании 0,5% фотодитазина. При оценке лазерного воздействия на кишечную палочку (E.coli) наибольший антимикробный эффект отмечен при использовании фотосенсибилизаторов: 0,5% метиленого синего и 0,5% фотодитазина.

Выводы. Таким образом, эффективность ФДТ терапии зависит не только от длины волны лазерного излучения, но и от плотности энергии. Проведенные исследования выявили различия эффективности антимикробного действия ФДТ на изучаемые виды микроорганизмов.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

84 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

Л.Ф. Жандарова1, O.A. Калмыкова2, О.М. Конопацкова1, H.A. Волкова2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ДЛЯ ОЦЕНКИ ЛЕЧЕБНОГО ПАТОМОРФОЗА ПРИ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 1ГБОУВПО СаратовскийГМУим. В.И. Разумовского МЗ РФ, Саратов 2НУЗ Дорожная клиническая больница на станции Саратов II ОАО РЖД, Саратов Актуальность. В связи с широким применением в онкологии комбинированных методов лечения (лучевое, химиотерапевтическое и гормональное воздействие) особое значение приобретает морфологическая характеристика опухолевого процесса. неоценимые данные могут быть получены цитологическим методом. он позволяет провести сравнительное изучение опухоли до начала, в процессе и после операции (по соскобам с разреза тканей и органов, удаленных хирургическим путем). Задача исследования. Изучить результаты лекарственного патоморфоза при неоадъювантной полихимиотерапии больных раком молочной железы. Материалы и методы. В клинике онкологии более 20 лет назад разработан и внедрен в практику цитологический метод количественной оценки терапевтического патоморфоза при злокачественных новообразованиях. с этой целью подсчитывается процент дистрофически измененных клеток (пдик-1) рака в исходных препаратах и определяется пдик-2, являющийся суммарным показателем спонтанной дегенерации клеток и лечебного патоморфоза опухоли. разность этих показателей (дельта-пдик) отражает величину истинного лечебного патоморфоза. Результаты. Терапевтический патоморфоз после неоадъювантной полихимиотерапии по схеме ад с помощью цитологического метода изучен у 158 больных раком молочной железы iiia (t3n1m0) стадии. преобладали женщины старше 50 лет (69%). после трех курсов неоадъювантной полихимиотерапии всем больным выполнена мастэктомия маддена. целью неоадъювантного химиотерапевтического лечения является достижение полного морфологического регресса опухоли, что значительно улучшает результаты пятилетней выживаемости больных. выраженные проявления патоморфоза отмечены у 34 % больных, незначительный эффект - у 59 % пациенток. полная резорбция опухоли наблюдалась в 7 % наблюдений. Выводы. Разработанный нами метод определения лечебного патоморфоза цитологическим методом является простым и достоверным. Применение его возможно при различных вариантах лечения.

A.A. Журбина, Г.А. Блувштейн ПОВТОРНЫЕ ОПЕРАЦИИ У БОЛЬНЫХ С РЕЦИДИВОМ ЗОБА, ВОЗНИКШИМ В ТЕЧЕНИЕ ГОДА ПОСЛЕ ВМЕШАТЕЛЬСТВА ГУЗ «Областной онкологический диспансер №1», Саратов ГУЗ «Областная клиническая больница», Саратов Частота послеоперационного рецидивного зоба, по данным литературы, колеблется в широких пределах от 0,3 до 41%. Цель исследования. Определение групп риска рецидива заболевания, развивающегося в первый год после оперативного вмешательства. Материалы и методы. Использованы данные ООД №1 за период с 2001 по 2010 гг. Результаты. Проведен анализ лечения 95 пациентов с послеоперационным рецидивным зобом оперированных повторно в ООД №1 с 2001 по 2010 годы. Среди них 83 женщины (78,8 %) и 12 мужчин(11,2 %). Средний возраст составил 54±0,4 лет. Из всех пациентов в течение первого года после операции повторно оперированы 29 пациентов (31 %), из них 16 (55,2 %) были в возрасте 50 лет и старше. Женщин 22, мужчин 7. Первично им выполнялись 38 различных вмешательств на щитовидной железе. При анализе пациентов с рецидивами в течение первого года, выявлена группа в 6 человек, которые прооперированны дважды до поступления в клинику. Средний возраст 54±0,3 лет. Женщин 4, мужчин 2. Ранее им выполнено 14 оперативных вмешательств: резекция щитовидной железы - 3 (21,4 %), гемитиреиодэктомия - 3(21,4 %), субтотальная резекция щитовидной железы - 1 (7,2 %), тиреоидэктомия - 2 (14,2 %), ФФИКШ или лимфоаденэтомия - 3 (21,4 %), широкое иссечение метастаза -1 (7,2 %), стернотомия -1 (7,2 %). Морфологические заключения были следующие: фолликулярный рак -3 (21,4 %), папиллярный рак - 3 (21,4 %), фолликулярно-папиллярный рак -1 (7,2 %), медуллярный рак - 3 (21,4 %), доброкачественное поражение - 3 (21,4 %), в одном вмешательстве - неизвестно (7,2 %). Этой группе пациентов выполнено 6 различных вмешательств: гемитиреиодэктомия - 1 (16,7 %), субтотальная резекция - 1 (16,7 %), тиреоидэктомия - 2 (33,3 %), операция Крайла - 2 (33,3 %). При морфологическом заключении в 4 случаях (66,7 %) из 6 получен рак различной степени дифференцировки, в 2 (33,3 %) -доброкачественные изменения. Выводы. Рецидив в течение первого года чаще возникает у пациентов, ранее оперированных по поводу злокачественного поражения щитовидной железы, которым выполнены органосохраняющие операции в возрасте 50 лет и старше, что требует учёта этих факторов при первой операции и расширения объема операции при повторных вмешательствах.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 85

О.И. Задорожная1, Л.Р. Тилова1, К.И. Кирсанов1, М.Г. Якубовская1, И.В. Будунова2, Г.А. Белицкий1, Е.А. Лесовая1 ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ НОВОГО СЕЛЕКТИВНОГО АГОНИСТА ГЛЮКОКОР-ТИКОИДНОГО РЕЦЕПТОРА CPDA IN VIVO 1ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва 2Northwestern University, Chicago, USA Актуальность. Глюкокортикоиды широко используются при лечении гемобластозов. Их биологический эффект реализуется путем активации глюкокортикоидного рецептора, регулирующего экспрессию генов посредством запуска транс-активации, связанной с развитием осложнений, и транс-репрессии, обуславливающей терапевтическое действие. Перспективным направлением исследований является анализ эффектов селективных агонистов глюкокортикоидного рецептора - аналогов глюкокортикоидов со сниженными побочными эффектами. Ранее мы показали in vitro, что соединение этого класса, CpdA, обладает противоопухолевым эффектом на клетки гемобластозов. Однако на моделях гемобластозов in vivo эффекты CpdA изучены не были. Задачи исследования. Оценка влияния селективного агониста глюкокортикоидного рецептора CpdA на рост подкожных ксенографтов лимфомы у бестимусных мышей, изучение молекулярных механизмов биологического действия CpdA и глюкокортикоидов в ткани ксенографтов лимфомы. Материалы и методы. Иммунодефицитным мышам подкожно вводили 10 млн клеток лимфомы мантийной зоны селезенки линии Granta. На 7 день после перевивки животным было начато внутрибрюшинное введение дексаметазона, CpdA или физиологического раствора. На 32 день эксперимента опухолевую ткань извлекали и анализировали с помощью иммуногистохимии или ПЦР на специфические маркеры пролиферации, апоптоза и транс-активации/транс-репрессии. Результаты и выводы. Впервые было показано, что новый нестероидный лиганд глюкокортикоидного рецептора CpdA снижает рост ксенографтов лимфомы у иммунодефицитных мышей in vivo в 2,5 раза, причем его действие сравнимо с действием глюкокортикоидов. В образцах, полученных от животных, получавших CpdA, наблюдали значительно меньшее количество жизнеспособных клеток, чем в контроле. Также CpdA вызывал более активный запуск механизма транс-репрессии.

М.Т.Зангиева, М.А.Барышникова, Е.В.Игнатьева, В.С.Косорукое, А.А.Матюшин, А.Ю.Барышников РАЗРАБОТКА СОСТАВА ПРОСТРАНСТВЕННО СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ ИММУНОЛИПОСОМ, НАПРАВЛЕННЫХ ПРОТИВ HER2-РЕЦЕПТОРА ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва Актуальность. Новым этапом развития нанотехнологии стал метод присоединения лигандов к концу полиэтиленгликоля для создания иммунолипосом. Благодаря этой методике появилась возможность избирательно доставлять лекарственный препарат к опухолевой клетке. В качестве лигандов могут выступать моно-клональные антитела, F(ab), пептиды. Использование человеческих антител, в отличие от мышиных, позволяет исключить индукцию иммунного ответа, а также ослабить разрушение препарата в печени, и способствует протеканию таких иммунологических реакций как антитело-зависимая клеточная цитотоксичность и комплемент-зависимая цитотоксичность, что важно для поражения злокачественных клеток. В связи с этим гуманизированные антитела подходят для активной доставки препарата в опухолевую клетку. Цель исследования. Разработка состава иммунолипосом, загруженных доксорубицином, направленных против НЕЯ2-рецептора. Результаты. Инкапсулирование препарата в иммунолипосомы осуществляли по принципу активной загрузки с помощью ионного градиента сульфата аммония (NH4)2SO4, pH 5,5. Для чего пустые липосомы помещали во флакон вместимостью 10 мл и добавляли гуманизированные моноклональные антитела, исходя из мольного соотношения белок pNP-PEG3000-lipid 1:40. Смесь перемешивали и добавляли буфер, содержащий 10 мМ HEPES и 145мМ NaCL (pH 8,2-8,4) и раствор Доксорубицина с концентрацией 1 мг/мл. Далее доводили pH в дисперсии 3 М раствором NaOH до значения 8,5-8,6 и инкубировали в течение 12 ч при +4 °C и постоянном перемешивании. Весовое соотношение препарат : липиды составило 0,042:1. Измерение диаметра полученных везикул проводили на приборе Nicomp 380 Submicron Particle Sizer. Для очистки иммунолипосомальной дисперсии от не включившегося препарата и от не присоединившихся антител использовали метод гель-фильтрации на колонке С 16/40 (Amersham Biosciences, Швеция), предварительно заполненную сорбентом Sepharose CL-4B и уравновешенную 0,15 M NaCl. Содержание Доксорубицина в иммунолипосомах определяли методом спектрофотометрии при X 252±2 нм. Размер иммунолипосом составил 140±2 нм. Включение в везикулы Доксорубицина 80,2 %. Содержание цитостатика 1 мг/мл. Выводы. Получены иммунолипосомы с высокой степенью загрузки препарата, направленные против HER2-pe4enTopa.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Е.Н. Захарова, Т.Н. Заботина, Н.В. Голубцова, И.В. Чинарева, П.К. Иванов, Д.Ю. Блохин ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНТНЫЕ ЗОНДЫ НА ОСНОВЕ МКА СЕРИИ ICO И ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО КРАСИТЕЛЯ ALEXA-488

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Задачи исследования. Оптимизация условий получения флуоресцентных зондов на основе Alexa -488 и мышиных моноклональных антител (МКА) серии ICO для иммунофенотипирования лимфоцитов человека.

Материалы и методы. В работе использовали мышиные МКА (НПЦ МедБиоСпектр, Россия) к В-(CD20, клон ICO-180) и Т-клеточным (CD4, клон ICO-86; CD8, клон ICO-31) рецепторам лимфоцитов человека, сукцинимидный эфир красителя Alexa-488 (Invitrogen, США). Для получения конъюгатов МКА инкубировали с сукцинимидным эфиром флуорофора в молярном соотношении от 1:2 (М:М) до 1:100 (М:М) в карбонатном буфере (рН 8,3) при +18-25 °С в темноте в течение 90 минут. Условия инкубации подбирали экспериментально. Очистку конъюгатов от несвязавшегося флуорофора проводили гель-хроматографией на колонке Sephadex G-25, уравновешенной фосфатно-солевым буфером, рН 7,4. Далее рассчитывали плотность мечения. Полученные конъюгаты стабилизировали 1,0% раствором БСА с 0,1% азида натрия. Специфическую активность конъюгатов оценивали в прямой РИФ с последующим анализом на проточном цитофлуориметре FACCalibur (BD Biosciences, США) и регистрацией флуоресценции по каналу FL1. Для сравнительной характеристики доли антиген-позитивных клеток в популяции (%) и медианы интенсивности флуоресценции (MFI) применяли коммерческие МКА к тем же антигенам, конъюгированные с FITC и РЕ (BD Biosciences, США).

Результаты. Получены конъюгаты МКА и Alexa-488 с различной плотностью мечения. Показано, что оптимальным соотношением метки и иммуноглобулина для конъюгата CD20/Alexa-488 является диапазон 513,5:1 (моль : моль), для конъюгатов CD4/Alexa-488 и CD8/Alexa-488 - диапазон 4-9:1 и 4-10:1 (моль : моль) соответственно. Методом дробного титрования определили рабочие концентрации синтезированных конъюгатов в диапазоне исходных концентраций 0,5-100 мкг/мл: для конъюгатов CD4/Alexa-488 и CD8/Alexa-488 диапазон рабочих концентраций составил 2,5-10 мкг/мл, а для конъюгата CD20/Alexa-488 - 5-50 мкг/мл.

Выводы. Конъюгирование флуоресцентного красителя Alexa-488 с МКА в оптимальных соотношениях не оказывает влияния на иммунохимические свойства последних, что позволяет рекомендовать их к использованию для цитометрического анализа клеточных популяций с анализом по FL-1 каналу флуоресценции.

Ф.А. Ибрагимов, Ю.В. Береснева, Ю.Ю. Ассесорова

ОЦЕНКА ОРГАНОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ 5-ФТОРУРАЦИЛА

И СОЕВОГО БЕЛКА, БОГАТОГО ИЗОФЛАВОНАМИ

Институт биоорганической химии АН РУз, г. Ташкент

Актуальность. В Институте биоорганической химии АН РУз получена стандартизированная комбинация полипептидов из соевой муки с молекулярной массой 12,5-79,0 кДа, обогащенная изофлавонами. Соевый белок на позднем этапе развития опухоли, вводимый в монорежиме, вызывает торможение роста опухоли до 71,3 % по массе и до 73,0 % по объему. При введении соевого белка совместно с 5-фторурацилом, значения ТРО увеличиваются на 20 %.

Задача исследования. Изучить гепатотропное и спленотропное действие 5-фторурацила и соевого белка на позднем этапе развития опухоли.

Материалы и методы. Соевый белок вводили per os в дозе 75 мг/кг в течение 10 дней, 5-фторурацил 228 мг/кг внутрибрюшинно на 10-й, 12-й и 14-й день после перевивки опухоли. Исследовали гепатотропное и спленотропное действие проводимой терапии методом сравнительной оценки массы печени и селезенки (г) и визуально-тактильной оценки цвета, макроструктуры и консистенции данных органов у животных опытных и контрольной групп.

Результаты. Воздействие соевого белка (I группа), вводимого в монорежиме приводило к статистически значимым изменениям массы печени, которая на 25 % (<0,05) снижалась по сравнению с контролем (нелечен-ные животные-опухоленосители). При этом масса печени составила ~5,6 % от массы тела мышей, тогда как физиологическая норма находится в пределах 0,40-0,54 %. Во II группе, где соевый белок вводился совместно с 5-фторурацилом, а также в III группе, где терапия проводилась только 5-фторурацилом, снижение массы печени также имело место (соответственно ~6,5 % и ~7,2 % от общей массы животного). Макроскопический осмотр органа показал, что в контрольной группе печень нелеченных животных значительно варьировала по цвету и консистенции, тогда как у животных всех подопытных групп печень не имела существенных различий. Доля селезенки в контрольной группе нелеченных животных-опухоленосителей составила ~2,1 % от массы тела мышей, тогда как физиологическая норма составляет 0,38 %. В I, II и III группе доля селезенки от общей массы животных составила, соответственно, 1,6 %, 2,5 % и 2,4 %. Макроскопический осмотр селезенки не выявил каких-либо визуальных изменений цвета, формы и консистенции органа.

Вывод. Препарат из сои не оказывает токсического и гепатотропного действия.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 87

C.B. Иванников, A.B. Бородкин, Т.А. Жарова, В.И. Макаров, К.Г. Линьков, A.M. Тоненков, М.В. Лощеное ВИДЕОФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ АРТРОСКОПИЧЕСКАЯ НАВИГАЦИЯ ПРИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ПАТОЛОГИЙ КРУПНЫХ СУСТАВОВ Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва Институт общей физики им. A.M. Прохорова РАН, Москва Задачи исследования. В настоящей работе исследовалось накопление фотосенсибилизатора в крупных суставах человека до, в процессе и после сеанса фотодинамической терапии с применением новых методов и нового диагностического оборудования. Материалы и методы. Разработаны аппаратура и метод, позволяющие проводить флуоресцентную видеонавигацию в предварительно фотосенсибилизированных с применением препарата Фотодетазин воспаленных тканях плечевого и коленного суставов человека. Аппаратура уникальна своими режимами работы, система способна одновременно выводить на экран два изображения: цветное и флюоресцентное одновременно. Концентрация фотосенсибилизатора определяется в любой требуемой точке изображения в цифровом виде в режиме мониторига. Возбуждение флюоресценции производилось лазерным источником света длиной волны 635 нм. Контроль терапевтической дозы лазерного облучения отслеживался по фотобличингу в красном диапазоне длин волн, что позволило проводить диагностику даже при наличии тонких слоев крови на исследуемых тканях. Проверка показаний метода производилась с применением волоконно-оптического спектрометра. Результаты и выводы. Метод продемонстрировал чувствительность к контрасту интенсивности флуоресценции фотосенсибилизатора в нормальных и воспаленных тканях сустава, что свою очередь, позволяет делать вывод о контрасте накопления фотосенсибилизатора и возможности применения фотодинамической терапии. Также метод доказал свою применимость для контроля хода фотодинамической терапии по степени выгорания фотосенсибилизатора.

O.A. Ивашкевич , П.М. Бычковский , Т.Л. Юркштович , Д.А. Адамчик , А.К. Кононович , И.И. Тагилъ СОЗДАНИЕ МАЛОТОННАЖНОГО ПРОИЗВОДСТВА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СУБСТАНЦИИ И ГОТОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ НА УНП РУП «УНИТЕХПРОМ БГУ» 1 Белорусский государственный университет, Минск, Беларусь 2УП «УнитехпромБГУ», Минск, Беларусь 3НИИ ФХП БГУ, Минск, Беларусь Одним из приоритетных направлений развития Республики Беларусь и обеспечения ее национальной безопасности в сфере производства и обращения лекарственных средств является разработка и освоение выпуска фармацевтических субстанций, оригинальных и генерических лекарственных средств для лечения сердечнососудистых, онкологических и др. заболеваний УНП РУП «Унитехпром БГУ» реализует проект «Создание малотоннажного производства фармацевтических субстанций для получения противоопухолевых, кардиотропных и других лекарственных средств, соответствующих стандартам GMP на базе организаций Минобразования», в рамках которого предполагается модернизация имеющегося производства оригинального препарата «Цисплацел» (Патенты РБ №6420, №5748) для локальной химиотерапии злокачественных опухолей головного мозга и опухолей в области головы и шеи, создание производства дженерических фармацевтических субстанций темозоломида, проспидия хлорида для получения противоопухолевых препаратов и оригинальных фармацевтических субстанций темодекс (Патенты РБ №16085, №15961, №15136) и проспиделонг (Патенты РБ №14762, №15136, Патенты России №2455007, №2442586) и готовых лекарственных форм в соответствии с международными требованиями надлежащей производственной практики - GMP. Социальный эффект от реализации проекта: обеспечение независимости от импортных поставок субстанций эффективных противоопухолевых и кардиотропных препаратов, обеспечение фармацевтической промышленности Республики Беларусь высококачественными субстанциями темозоломида, темодекса, проспиде-лонга и нитаргала для производства их готовых лекарственных форм. Данная фармацевтическая продукция разработана и разрабатывается в НИИ ФХП БГУ в рамках Государственной научно-технической программы «Новые лекарственные средства» (2006-2010 годы) и «Фармацевтические субстанции и лекарственные средства» (2011-2015 годы).

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Е.В. Игнатьева, И.В. Ярцева, H.A. Дмитричева, Е.В. Санарова, З.С. Шпрах СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ СЕКОИЗОЛАРИЦИРЕЗИНОЛА ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Секоизоларицирезинол - отечественный препарат, предлагаемый для лечения эстрогено-зависимых опухолей. В ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН разработана лекарственная форма (ЛФ) секои-золарицирезинола, представляющая собой желатиновые капсулы, содержащие гранулят из смеси основного действующего вещества и вспомогательных веществ.

Цель исследования. Стандартизация лекарственной формы секоизоларицирезинола.

Материалы и методы. Исследования проводились на 5 сериях препарата по критериям: описание, подлинность, средняя масса капсулы, средняя масса и однородность по массе содержимого капсулы, рас-падаемость, растворение, посторонние примеси, потеря в массе при высушивании, количественное определение.

Результаты. Подлинность препарата подтверждали электронным спектром поглощения, где в области от 200 до 400 нм должны присутствовать максимумы поглощения при длинах волн 209+2 нм, 228+2 нм и 282+2 нм. Отклонение массы каждой капсулы не превышало ±10 % от средней массы. Средняя масса содержимого капсулы находилась в пределах от 115 мг до 140 мг. Образцы препарата при температуре 37±2 °С. полностью распадались в течение 10 мин. При проведении теста «Растворение» в качестве среды растворения использовали 0,2% раствор твин-80 в 0,1 М кислоте хлористоводородной. Количество действующего вещества, перешедшее в среду растворения, определяли спектрофотометрически. При температуре 37±2 °С в течение 2 часов в среду растворения переходило более 75 % действующего вещества. Определение посторонних примесей проводили методом ВЭЖХ. Содержание суммы посторонних примесей не превышало 1,5 %. Для определении потери в массе при высушивании содержимое капсулы высушивали при температуре 105 °С до постоянной массы. Потеря в массе не превышала 6,0 %. Для количественного определения секоизоларицирезинола использовали метод прямой спектрофотометрии. Содержание действующего вещества одной капсуле находилось в пределах от 92,5 г до 107,5 мг.

Выводы. Выбраны критерии качества и разработаны методики их определения для стандартизации лекарственной формы «Секоизоларицирезинол, капсулы 100 мг».

Авторы выражают благодарность ООО «Медресурс» (г. Москва) за финансовую поддержку исследований.

Е.В. Игнатьева, H.A. Дмитричева, И.В. Ярцева, М.А. Барышникова КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ OR-2011

В МОДЕЛЯХ ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ

ФГБУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, Москва

Актуальность. С целью создания стабильного в хранении и эффективного лекарственного средства на основе 0R-2011 - нового отечественного производного из класса нитрозоалкилмочевин - в ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН предложено несколько моделей его лиофилизированной лекарственной формы (ЛЛФ).

Цель исследования. Разработка наиболее точной и чувствительной методики количественного определения содержания 0R-2011 в технологическом концентрате и полученных моделях ЛЛФ.

Материалы и методы. Для разработки методики количественного определения содержания 0R-2011 был использован метод спектрофотометрии в видимой области.

Результаты. Содержание 0R-2011 в ЛЛФ определяли в интенсивном максимуме поглощения при длине волны 228±2 нм. Было установлено, что интенсивность поглощения водных растворов ЛЛФ препарата в данном максимуме подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в необходимом диапазоне концентраций от 0,01 мг/мл до 0,04 мг/мл в пересчете на 0R-2011. Рабочей концентрацией раствора 0R-2011 выбрана концентрация 0,02-0,03 мг/мл, т.к. при этом величина оптической плотности укладывается в интервал, рекомендуемый ГФ XI, а максимумы поглощения в растворах субстанции и лекарственной формы совпадают. При разработке методики необходимо учитывать влияние вспомогательных веществ, входящих в состав ЛФ на спектральные характеристики действующего вещества. На разных этапах разработки лекарственной формы в состав моделей были включены такие вспомогательные вещества как лимонная кислота, лактоза, маннит, коллидон. Растворы лактозы и манни-та не поглощают в области 240 нм - 200 нм. В то же время растворы лимонной кислоты и коллидона в этой области имеют незначительное собственное поглощение. Это обстоятельство следует учитывать при анализе, используя в качестве раствора сравнения растворы вспомогательных веществ с соответствующей концентрацией. Разработанная методика обладает достаточной точностью и воспроизводимостью. Относительная ошибка определения не превышает 2,0 %.

Выводы. Разработанная методика может быть использована для количественного определения 0R-2011 в технологическом концентрате и моделях ЛЛФ разного состава.

Работа выполнена в рамках Государственного контракта № 13411.1008799.13.163 «Доклинические исследования противоопухолевого лекарственного средства класса нитрозомочевин».

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

H.A. Кабилдина, В.Б. Сирота, И.М. Омарова, М.Д. Жумакаев ПРИМЕНЕНИЕ АРГЛАБИНА ПРИ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ МЕСТНОРАСПРОСТРАНЕННОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Карагандинский государственный медицинский университет, Караганда, Казахстан КГП«Областной онкологический диспансер», Караганда, Казахстан

Задачи исследования. Повышение степени доказательности клинической эффективности препарата «арглабин» путем проведения рандомизированного исследования.

Материалы и методы. В исследование включено 48 больных с местнораспространенным раком молочной железы (МРРМЖ) (T2Ni-2M0, T3N0-2M0) с гистологической и иммуногистохимической верификацией в возрасте от 28 до 75 лет. Из них 25 женщин имели II6 и 23 - III стадии рака. Все больные разделены на 3 группы -2 исследуемые, одна - контрольная. В контрольной группе больным проводили 4 курса неоадъювантной ХТ по схеме АС каждые 21 день, радикальную мастэктомию, 4 курса адъювантной ХТ (АС), лучевую терапию и гормонотерапию по показаниям. Исследуемая группа 1 получала лечение по аналогичной схеме, только режим ХТ (АС) сочетался с арглабином (арглабин 370 мг/м2 № 7 дней). Исследуемая группа 2 получала лечение по аналогичной схеме, но в неоадъювантном и адъювантном режиме применяли монотерапию арглабином. Эффективность комбинированного лечения оценивали по стандартным критериям ВОЗ (1978).

Результаты. Частичный ответ опухоли: в группе больных, получавших ПХТ по схеме АС - у 63,6±14,5 %, в группе больных, получавших АС с арглабином - у 80,0±17,9 % пациентов, в группе с монотерапией арглабином - у 25,0±21,7 % (p>0,05). Частичный ответ подмышечных лимфатических узлов: в группе больных, получавших ПХТ по схеме АС - у 30,0±14,5 %, в группе больных, получавших АС с арглабином - у 60,0±21,9 % пациентов, в группе с монотерапией арглабином - у 50,0±25,0 % (p>0,05). Степень регрессии опухоли составила после ХТ по схеме АС 81,7 %, после АС+арглабин - 57,4 %, после монотерапии арглабином - 21,4 %. Степень регрессии подмышечных лимфатических узлов у больных после неоадъювантной терапии по схеме АС составила 14,3 %, после АС+арглабин - 97,5 %, после монотерапии арглабином - 61,7 %. В контрольной группе третья часть больных имела лекарственный патоморфоз опухоли 3 и 4 степени, после неоадъювантной ХТ АС+арглабин - 50 %.

Выводы. Наблюдается общая положительная динамика регрессии опухоли и лимфатических узлов после неоадъювантной ПХТ АС при ее комбинации с арглабином у больных МРРМЖ.

АНАЛОГИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ НУКЛЕОЗИДОВ -СОВРЕМЕННЫЕ АНТИНЕОПЛАСТИЧЕСКИЕ СРЕДСТВА

Институт биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси, Минск

Основываясь на химических и химико-энзиматических методах синтеза, разработаны инновационные технологии получения большого ряда новых соединений, а также известных, но ранее малодоступных модифицированных нуклеозидов. Среди них препараты для лечения онкогематологических заболеваний: цитарабин, кладрибин, флударабин, клофарабин и ряд других.

Осуществлен синтез 5-азацитидина, децитабина и новых аналогов, содержащих атом фтора при С-2'/С-3'-положениях углеводного фрагмента; изучена их стабильность в водных растворах при различных значениях рН. Показано, что 2'-Р-ара-5-азацитидин гидролизуется значительно медленнее, чем изомерный 3'-фтордезоксианалог. Представлены результаты по изучению антилейкемической активности фтордезоксианало-гов 5-азацитидина на культурах четырех линий миелобластной лейкемии и трех линий клеток солидных опухолей человека. Установлено, что 2'-Р-ара-5-азацитидин проявляет более высокий цитотоксический эффект в культуре клеток острой моноцитарной лейкемии ТНР-1, острой промиелоцитарной лейкемии НЬ-60 и острой миелогенной лейкемии КО-1 по сравнению с 5-азацитидином.

Высокоэффективная технология получения фармсубстанции и лекарственного средства пеметрексед, являющегося структурным аналогом фолиевой кислоты, разработана в рамках программы «Импортозамещающая фармсубстанция».

Наиболее успешным примером применения таргетных препаратов и одной из самых значимых медицинских инноваций последнего десятилетия считают использование иматиниб мезилата (Гливек) для лечения ряда онкологических и онкогематологических заболеваний. Разработаны оригинальные химические методы синтеза иматиниб мезилата и бортезомиба. Бортезомиб является первым представителем нового класса препаратов, которые уничтожают раковые клетки, ингибируя активность протеасомы 268.

В Институте биоорганической химии НАН Беларуси создан научно-производственный центр «Хим-ФармСинтез», который обладает уникальными производственными мощностями, позволяющими осуществлять полную технологическую цепочку: от лабораторных разработок молекул до производства и коммерциализации готовых препаратов взамен дорогостоящих импортных аналогов.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

E.H. Калиниченко

90 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

A.B. Калугин1, C.B. Шумилова1, Е.Ю. Конторшикова2, Д.В. Новиков , A.A. Щербинина1, М.А. Шаров1, В.В. Новиков1

СРАВНЕНИЕ ЧАСТОТ ОБНАРУЖЕНИЯ МРНК РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНЫХ И ДИФФЕРЕНЦИРОВОЧНЫХ АНТИГЕНОВ В ОПУХОЛЕВЫХ ОЧАГАХ БОЛЬНЫХ РАКОМ ТЕЛА МАТКИ

1 Нижегородский госуниверситет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2Нижегородская областная клиническая больница им. H.A. Семашко, Нижний Новгород

Актуальность. Способность к неограниченному росту и миграции - это признаки злокачественной клетки. IL2Ra (CD25) и ICAM-1 (CD54) являются важными посредниками в пролиферации и адгезии клеток. Известно, что в реализации этих процессов могут участвовать раково-тестикулярные (CT) гены.

Задача исследования. Сравнить частоты встречаемости мРНК CT генов (MAGEA(1-6), SSX1,2,4, XAGE1, GAGE 1-8, MAGEC1, PAGE1, NY-ESO1), мРНК CD54 и мРНК CD25 в опухолевых очагах рака тела матки.

Материалы и методы. С помощью ОТ-ПЦР исследовали 15 образцов опухолевых очагов рака тела матки на присутствие мРНК раково-тестикулярных и дифференцировочных антигенов.

Результаты. Матричная РНК mCD54 была обнаружена в 4 образцах, мРНК sCD54 - в 2 образцах, мРНК fullCD25 - в 14 образцах, мРНК CD25Exo4Del - в 12 образцах, а мРНК CD25Exo4,5Del - в 8 образцах. Суммарная частота обнаружения мРНК MAGEA(1-6), MAGEC1, GAGE1-8, XAGE1, PAGE1, NY-ESO1 и SSX1,2,4 составила 73,3% (11 из 15 образцов). Матричная РНК MAGEA(1-6) детектировалась в 9 образцах опухолевых очагов, мРНК SSX1,2,4 - в 3 образцах, мРНК XAGE1 - в 2 образцах, мРНК MAGEC1 и GAGE1-8 - в 1 образце. Матричные РНК NY-ESO1 и PAGE1 обнаружены не были. Следует отметить, что один из двух sCD54-позитивных опухолевых очагов не содержал мРНК CT генов, а второй опухолевый очаг - содержал только мРНК MAGEA(1-6).

Выводы. Таким образом, в опухолевых очагах больных раком тела матки продемонстрирована гетерогенность экспрессии мРНК раково-тестикулярных и дифференцировочных антигенов.

Работа выполнена в рамках базовой части государственного задания №2014/134 Минобрнауки России (проект 2575).

-1-1-2-

О.Л. Канделинская , Е.Р. Грищенко , H.A. Шуканова ,

2 3 ' 3 4 4 5

М.М. Молчан , Т.В. Шман , Е.П. Вашкевич , H.A. Козловская , Е.В. Шаповал , В.И. Разлуцкий ВОДНЫЕ РАСТЕНИЯ: ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ОНКОЛОГИИ

1 Институт экспериментальной ботаники им. В.Ф. Купревича HAH Беларуси, Минск 2Институт биофизики и клеточной инженерии HAH Беларуси, Минск

3Республиканский научно-практический центр детской онкологии, гематологии и иммунологии, Минск 4РНПЦ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н.Александрова, Минск 5НПЦ HAH Беларуси по биоресурсам, Минск

Актуальность. Водные растения являются ценным источником физиологически активных веществ -эфирных масел, антоцианов, флавоноидов и др., среди которых лектины изучены менее других.

Задачи исследования. Идентификация в составе водных растений Беларуси фитолектинов (ФЛ), оказывающих иммуномодулирующее действие и регулирующих пролиферацию злокачественно трансформированных клеток.

Материалы и методы. Объектами исследования служили вегетативные органы водных растений 15 семейств. Выделение и идентификацию ФЛ проводили по общепринятым методам. Углеводную специфичность ФЛ определяли по ингибированию гаптенами реакции агглютинации эритроцитов кролика. Антипролифера-тивное действие ФЛ оценивали по их влиянию на активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) клеток рака молочной железы человека (РМЖ) в первичной культуре. Иммуномодулирующее действие ФЛ оценивали по индуцированной ими активации ЕК- и Т-клеток человека с использованием метода проточной цитофлуориметрии по экспрессии маркера CD69 на поверхности этих клеток.

Результаты. На примере маннозоспецифичного лектина из корневищ аира обыкновенного - Acorus calamus L. (ACA-Acorus calamus agglutinin) показано, что ACA оказывал ингибирующее действие разной степени на активность АХЭ в клетках РМЖ в зависимости от их молекулярно-генетического подтипа: в клетках лю-минального Б подтипа - на 80 %, Her+ подтипа - на 31 %, базальноподобного подтипа - на 64 %. Наблюдаемый эффект был сопоставим с действием применяемых в клинике цитостатиков. В отличие от последних, ACA вызывал умеренную активацию ЕК-клеток, и, в меньшей степени, Т-клеток человека.

Выводы. Обсуждается возможность использования ФЛ водных растений в качестве регуляторов клеточной пролиферации злокачественно трансформированных клеток и для идентификации особенностей строения их рецепторного аппарата.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... | 91

В.Н. Капинус, М.А. Каплан, Е.В. Ярославцева-Исаева, И. С. Спиченкова, Е.В. Горанская ИНТЕРСТИЦИАЛЬНАЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ ГОЛОВЫ И ШЕИ

ФГБУ Медицинский радиологический научный центр МЗ РФ, Обнинск

Актуальность. При использовании традиционных методов лечения опухолей кожи лица и шеи высок риск развития анатомо-функциональных нарушений в данной области, поэтому расширение возможностей ма-лоинвазивных методов с дополнительным внутритканевым воздействием позволит улучшить результаты лечения и реабилитации больных, особенно при наличии экзофитного компонента новообразования и при более выраженной опухолевой инфильтрации подлежащих тканей.

Цель исследования. Разработка методики и оценка эффективности интерстициальной фотодинамической терапии (ФДТ) с фотосенсибилизатором «Фотолон» у больных базальноклеточным раком кожи (БКРК) головы и шеи.

Материалы и методы. Лечение было проведено 55 больным БКРК в возрасте от 55 до 88 лет, имеющих так называемую «неудобную» локализацию рака кожи лицевой области (угол глаза, параорбитальная область, крыло носа, носогубные складки, ушная раковина), что представляет трудности не только для хирургического и/или лучевого лечения, но и для проведения ФДТ (формирование полей облучения, равномерное распределение лазерного излучения). Экзофитный тип роста отмечался у 25 (45,6 %) пациента, а инфильтрация подлежащих тканей - у 30 (54,6 %) больных. У 23 (41,8 %) пациентов был впервые диагностирован рак кожи, у 32 (58,2 %) пациентов имели место рецидивы заболевания. Для проведения ФДТ использовался ФС «Фотолон» в дозе 1,0-2,0 мг/кг, лазерный аппарат «Латус-2» (662 нм). На 1 этапе всем больным была проведена интерстициаль-ная ФДТ с использованием световодов с гибким цилиндрическим диффузором длиной 1,0 и 2,0 см (ООО «По-лироник», Москва) с диаметром световода 600 мкм, диаметр диффузора 900 мкм. Количество позиций диффузоров - 1-2, выходная мощность 200-400 мВт, время воздействия составляло от 15 до 25 минут. На 2 этапе проводилась ФДТ с дистанционным подведением лазерного света в дозах 50-300 Дж/см2 при плотности мощности 300-400 мВт/см2 по полипозиционной методике.

Результаты. Полная регрессия опухолевых очагов была зарегистрирована у 41 из 55 больных (74,5 %), частичная регрессия - у 14 (25,5 %) пациентов. На сроках наблюдения от 6 месяцев до 3 лет у 14 (25,5 %) из 55 пациентов были диагностированы рецидивы заболевания.

Выводы. Методика последовательного внутритканевого и дистанционного видов воздействия расширяет возможности оказания консервативного органосберегающего лечения БКРК, локализованного на коже областей со сложным анатомическим рельефом и наличием жизненно важных органов. После интерстициальной ФДТ новообразований параорбитальной области у пациентов не пострадала функция зрения (не изменились цветоощущение и острота зрения), сохранились веки, ресницы, размеры глазной щели и функции этих органов, после ФДТ рака носа, ушных раковин в некоторых случаях развивалась минимальная деформация хрящевых струк-

М.А. Каплан, В.Н. Капинус, Н.П. Ткаченко, И.А. Замулаева, С. А. Макаренко СИСТЕМНАЯ ВНУТРИВЕННАЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОМ «ФОТОДИТАЗИН»

У БОЛЬНЫХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ Ш-1У СТАДИИ

ФГБУ Медицинский радиологический научный центр МЗ РФ, Обнинск

Актуальность. Одним из возможных механизмов системной ФДТ является уменьшение количества циркулирующих в крови опухолевых клеток, что важно для предотвращения отдаленного метастазирования и улучшения прогноза заболевания.

Цель исследования. Разработка и изучение эффективности методики внутривенной системной ФДТ с ФС «Фотодитазин».

Материалы и методы. Клиническое исследование с использованием ФС «Фотодитазин» было проведено у 12 пациентов. В число больных вошли 3 (25,0 %) мужчин и 9 (75,0 %) женщин в возрасте от 37 до 72 лет. У 6 пациентов была диагностирована меланома кожи, у 2 пациенток рак молочной железы, у 3 - рак яичников и у 1 больной рак шейки матки. ФС «Фотодитазин» применяли в дозе 1,0-1,9 мг/кг, рассчитанную дозу растворяли в 200 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Сеанс внутривенной системной ФДТ выполняли следующим образом: в кубитальную вену пациента при помощи инфузии вводили раствор препарата «Фотодитазин». Одновременно с введением фотосенсибилизатора проводили лазерное облучение крови при помощи световода, вводимого в кубитальную вену другой руки. Сеанс ФДТ выполняли на аппарате «Латус 0,4» (662 нм), параметры облучения: мощность излучения - 20мВт, время облучения 60-90 минут. Количество сеансов ФДТ составляло 1-3 с интервалом 3-5 дней. Информативным показателем эффективности различных методов противоопухолевой терапии является количество циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК). Идентификацию ЦОК проводили с помощью проточной цитометрии по иммунофенотипу Ер-САМ(СБ326)+СБ45-. Апоптотическую гибель ЦОК выявляли по критерию целостности плазматической мембраны и транслокации фосфатидилсерина на внешнюю поверхность мембраны.

Результаты. Частота ЦОК определялась у всех пациентов до лечения и после сеанса ФДТ в динамике: через 6 часов, 1, 3, 7 суток. У 2/3 группы наблюдаемых пациентов в течение первых 3 суток после ФДТ отмечалось постепенное уменьшение частоты ЦОК в среднем на 30 % от исходной величины и сохранение этого показателя на стабильном уровне в течение всего периода наблюдения (7 суток).

Выводы. Полученные результаты позволяют сделать вывод о реализации эффектов системной ФДТ за счет уменьшения ЦОК. Применение внутривенной ФДТ позволит улучшить результаты лечения и качество жизни больных злокачественными новообразованиями, в том числе Ш-ГУ стадии.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Т.А. Карпенко, А.И. Бураковский, А.А Ястребова, М.Н. Тишкевич ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ ЭПИДЕРМАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА

ГНУ «Институт биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси», Минск

Актуальность. На сегодняшний день эпидермальный фактор роста (ЭФР) признан одним из перспективных прогностических и диагностических маркеров онкозаболеваний, ассоциированных с гиперэкспрессией ЭФР и его рецепторов. Ранняя диагностика и знание механизмов развития онкозаболеваний являются основополагающими факторами своевременной организации лечебно-профилактических мероприятий.

Цель исследования. Создание новых высокочувствительных и информативных методов количественной оценки уровня ЭФР.

Материалы и методы. Для этих целей нами был выбран формат непрямого твердофазного иммунофер-ментного анализа («сэндвич»-вариант), сочетающий в себе высокую чувствительность, специфичность, а так же доступность и простоту исполнения. Разработанный новый метод иммуноферментного анализа ЭФР обладает высоким уровнем чувствительности (7,7 пг/мл); широким диапазоном определяемых концентраций (0-500 пг/мл); время проведения анализа составляет 4,5 ч.

Результаты и выводы. Апробация разработанного лабораторного варианта иммуноферментного анализа ЭФР была проведена на модельных образцах (с известной концентрацией ЭФР) и на клиническом материале при онкопатологии различного генеза, что доказало возможность использования данного метода для выявления различных концентраций ЭФР в биологическом материале (сыворотке крови). Таким образом, в перспективе разработанный метод может использоваться для ранней диагностики онкологических заболеваний, ассоциированных с гиперэкспрессией ЭФР и его рецепторов, контроля эффективности проводимой терапии, динамического слежения за развитием патологического процесса и прогнозирования течения заболевания. Созданный метод иммуноферментного анализа определения ЭФР может служить основой для разработки аналогичных технологий по выявлению других опухолеассоциированных маркеров, биологически активных соединений, патологических субстанций и т.д.

A.B. Киселев, Г.А. Гордина, И.Ю. Кубасова, О.И. Тарасова, М.В. Гудкова, А.Е. Пастушенко ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНАЯ СОБСТВЕННОСТЬ

РОССИЙСКОГО ОНКОЛОГИЧЕСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА В 2013 ГОДУ

ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

В 2013 году в РОНЦ поддерживались 64 патента на изобретения: 10 патентов касались соединений и композиций, обладающих противоопухолевой активностью; 17 - клеточных линий меланомы человека, которые могут быть использованы для создания противоопухолевых вакцин; 14 - способов лечения злокачественных опухолей; 11 - способов ранней диагностики злокачественных опухолей; 4 - способов получения трахеоб-ронхиального биоимпланта и биоинженерной конструкции для замещения костных дефектов.

Из числа поддерживаемых патентов восемь изобретений были признаны перспективными и награждены дипломами Роспатента в номинации «100 лучших изобретений России».

Целесообразность поддержания патентов на изобретения определялась их тематикой и возможным использованием в коммерческих целях в перспективе. Научными сотрудниками патентно-лицензионного отделения совместно с авторами изобретений регулярно проводился анализ патентов для решения вопроса о целесообразности их поддержания.

В 2013 г. было подготовлено и подано в Роспатент девять заявок на объекты интеллектуальной собственности. Из их числа шесть заявок - на изобретения, одна - на полезную модель, одна - на базу данных противоопухолевых отечественных веществ, изученных в РОНЦ, одна - на программу для ЭВМ по прогнозированию клинического течения в раннем послеоперационном периоде у онкологических больных. За этот период получено семь патентов на изобретения и одно свидетельство на базу данных.

Из 144 научных тем признаны охраноспособными 49 (34 %). Из 47 тем диссертаций, запланированных в 2013 году, охраноспособные темы составили 36 %.

В целях стимулирования изобретательской деятельности администрация РОНЦ поощряла авторов изобретений выплатами вознаграждений.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 93

М.В. Князев1'2, В.А. Дуванский1'3 ЭНДОСКОПИЧЕСКАЯ АУТОФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ДИАГНОСТИКА КОЛОРЕКТАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ 1 Российский университет дружбы народов, Москва 2Поликлиника № 2 Минэкономразвития РФ, Москва 3ФГБУ «Государственный научный центр лазерной медицины ФМБА России», Москва Задачи исследования. Оценить эффективность эндоскопической аутофлуоресценции в диагностике ко-лоректальных неоплазий в зависимости от гистоморфологического строения. Материалы и методы. Проанализированы результаты аутофлуоресцентного исследования 269 неоплазий, выявленных при колоноскопии в тримодальном режиме у пациентов обоих полов, в возрасте 57±13,6 лет. Использовали эндоскопическую видеосистему Olympus Lucera CV-260, видеоэндоскопы с функциями высокого разрешения HD и оптического увеличения до 115 раз ZOOM, режимами узко спектрального анализа NBI и ау-тофлюоресценции AFI. Проводили биопсию для гистоморфологического исследования выявленных образований. Эпителиальные неоплазии были разделены на 4 группы, 1 группа - негативные по диспластическим изменениям, 2 группа неопределенная по дисплазии и включала аденоматозно-гиперпластические неоплазии, 3 группа неинвазивные, все типы аденом с дисплазией 1-3 степени, 4 группа включала инвазивные и неинвазив-ные карциномы. В каждой группе подсчитывались неоплазии окрашенные в пурпурный или зеленый цвет при аутофлуоресценции. Результаты. В 1 группе (n=50), пурпурная окраска наблюдалась в 19 случаях (относительная частота (ОЧС) 38 %, доверительный интервал (ДИ) 24-52% с вероятностью 95%); во 2 группе (n=39), ОЧС 59 %, ДИ 43-74 %; в 3 группе (n=135), ОЧС 89 %, ДИ 84-91 %; в 4 группе (n=26), ОЧС 89 %, ДИ 76-97 %. Оценена частота выявления пурпурного окрашивания неоплазий с помощью %2 критерия Пирсона между каждой группой. Статистически значимые различия наблюдали между 1-2 группами р<0,05; между группами 1-3 и 2-3 p<0,001; между группами 1-4 и 2-4 p<0,01. Различие между группами 3-4 статистически не значимы. Соотношение пурпурного и зеленого свечения в каждой группе составили: в 1 группе - 0,61; во 2 - 1,43; в 3 - 8,43, в 4 - 8,66. Выводы. Эндоскопическая аутофлуоресцентная диагностика эффективна в выявлении колоректальных неоплазий, и позволяет с вероятностью 95 % можно утверждать, что частота пурпурного аутофлуоресцентного окрашивания неоплазии зависит от гистоморфологической структуры и почти в 8,5 раз чаще наблюдается при неинвазивных аденомах и инвазивных и неинвазивных карциномах толстой кишки.

Ю.В. Коваленко, A.C. Толстокорое, Л.Ф. Жандарова СОЧЕТАНИЕ РАКА ЩИТОВИДНОИ ЖЕЛЕЗЫ С ЗОБОМ ХОШИМОТО ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России, Саратов Актуальность. Особые диагностические трудности возникают при сочетании рака щитовидной железы (РЩЖ) с зобом Хошимото, наблюдающимся по данным литературы в 1-38 % случаев. Цель исследования. Определить диагностический потенциал полипозиционной тонкоигольной пункци-онно-аспирационной биопсии (ТПАБ) в выявлении РЩЖ в сочетании с зобом Хошимото. Задачи исследования. Изучить частоту сочетания высокодифференцированного РЩЖ и зоба Хошимото. Определить диагностическую точность цитоморфологической диагностики данной патологии по данным ТПАБ. Материалы и методы. С 2009 по 2013 гг. по данным заключений ТПАБ были оперированы 332 (21,2 %) пациента. У 94 (6,0 %) пациентов выявлен РЩЖ в сочетании с зобом Хошимото и другой тиреоидной патологией. Результаты. При гистологическом исследовании дифференцированный РЩЖ выявлен у 94 (28,3 %) больных, где в 92 (97,9 %) случаях - папиллярная форма рака и в 2 (2,1%) - фолликулярная форма рака. Больные были разделены на 2 группы. У 27 больных первой группы результаты ТПАБ: подозрение на папиллярный РЩЖ на фоне тиреоидита - 11 (40,7 %); папиллярный РЩЖ - 2 (7,4 %); папиллярный РЩЖ с очаговой лимфо-идной инфильтрацией - 1 (3,7 %); очаг лимфоцитарного тиреоидита - 1 (3,7 %); узловой зоб на фоне тиреоидита - 1 (3,7 %). Полное соответствие результатов ТПАБ и окончательного гистологического диагноза, подтвердилось в 21 (77,8 %) случае. У 65 больных второй группы: папиллярный РЩЖ - 23 (35,4 %); подозрение на папиллярный РЩЖ - 21 (32,3 %); рак щитовидной железы - 11 (16,9 %); подозрение на папиллярный РЩЖ на фоне тиреоидита - 3 (4,6 %); папиллярный РЩЖ на фоне тиреоидита - 2 (3,1 %); узловой аденоматозный зоб -2 (3,1 %); трудно дифференцировать между аденомой и РЩЖ - 1 (1,5 %); подозрение на Гюртле клеточную неоплазию на фоне тиреоидита - 1 (1,5 %); узловой зоб - 1 (1,5 %). Диагностическая точность ТПАБ составила 92,6 % случаев. Выводы. Среди выявленного высокодифференцированного РЩЖ его сочетание с зобом Хошимото составило 21,2 % с преимущественным преобладанием папиллярной формы. Определена высокая диагностическая точность ТПАБ в отношении папиллярного рака как в сочетании с зобом Хошимото 92,6 % случаев. Соответствие цитологического и гистологического диагнозов при выявлении папиллярного рака щитовидной железы в сочетании с зобом Хошимото определено лишь в 77,8 % случаев.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

C.B. Козлов, О.И. Каганов, М.В. Ткачев, Д. С. Швец, A.M. Козлов РАДИОЧАСТОТНАЯ ТЕРМОАБЛАЦИЯ

ПРИ ЦИТОРЕДУКТИВНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ IV СТАДИЕЙ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА

ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет», Самара ГБУЗ «Самарский областной клинический онкологический диспансер», Самара

Цель исследования. Оценка результатов применения РЧА метастазов КРР печени при циторедукгивных операциях (ПО).

Материалы и методы. С целью проведения анализа результатов РЧА колоректальных метастазов печени при паллиативных операциях нами проведено исследование двух групп больных: 54 пациента с РЧА метастатических очагов составили основную группу, в контрольную группу вошел 61 больной с атипичной резекцией. Средний возраст в основной и контрольной группах составил 55,47*6,71 и 57,39*4,99 лет (t=l,71, р=0,089) соответственно. Общее число метастазов, удаленных при атипичной резекции составило - 177, РЧА -194. Количество метастатических новообразований в основной группе было от 2 до 6, среднее их число составило - 3,09*0,76, в контрольной - от 1 до 4, среднее число - 2,88*0,89 (р=0,24).

Результаты. Проведенный анализ годовых отчетов хирургических отделений ГБУЗ СОКОД с 2001 года по 2008 годы показал, что общее число ПО при КРР 4 стадии в данный период значимо не менялось и составило 54,37*7,71 операции в год. В основной группе послеоперационные осложнения наблюдались v 7 (13 %), в контрольной - v 18 (29,5 %) пациентов (р=0,04). Осложнения, связанные с операцией на печени после РЧА были диагностированы - v 2 (28,6 %), а после атипичной резекции - у 10 (55,5 %) пациентов. Пятилетняя бессобытийная выживаемость в основной группе была выше, чем в контрольной, их значения составили 13,1 % и 6,0 % соответственно, медианы бессобытийной выживаемости составили 24 и 15 месяцев соответственно (р=0,04). Показатели пятилетняя общей выживаемости в основной и контрольной группах составили 26,4 % и 12,7 % соответственно (р=0,07).

Выводы. Таким образом, применение РЧА в лечении единичных билобарных метастазов в печени позволило значимо увеличить число ПО R0, выполняемых при лечении КРР 4 стадии, снизить объем интраоперационной кровопотери и риск развития послеоперационных осложнений.

C.B. Козлов. О.И. Каганов. М.В. Ткачев, Д. С. Швец, A.M. Козлов ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ГНОЙНЫХ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У БОЛЬНЫХ КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ

ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет», Самара ГБУЗ « Самаюский областной клинический онкологический диспансеп». Самаюа

Цель исследования. Выявить значимые прогностические критерии развития гнойных послеоперационных осложнений (ГПО) v больных колоректальным раком (КРР).

Материалы и методы. В исследование были включены 278 больных КРР. которым был выполнены радикальные или циторедуктивные хирургические вмешательства. К первой группе были отнесены: пол. возраст. наличие тяжелой сопутствующей патологии. индекс массы тела. локализация опухоли. стадия основного заболевания. длительность догоспитального периода. характер ранее перенесенного специального лечения. наличие осложненного рака толстой кишки. наличие анемии. степень анестезиологического риска по ASA. Ко второй группе предикторов ГПО были отнесены: характер оперативного вмешательства. вариант восстановления кишечной непрерывности. стаж работы хирурга (<5 лет. >5 лет). длительность операции (<3 часов. >3часов). объем кровопотери (<1 литра. >1 литра). интраоперационная контаминация брюшной полости. В нашем исследовании мы предлагаем интегральный прогностический критерий. учитывающий субъективную интегральную опенку оперирующим хирургом предоперационных факторов риска (общее состояние больного. запущенность основного заболевания. тяжесть сопутствующей патологии. объем планируемой операции: 1 балл - хороший. 2 балла - удовлетворительный. 3 балла - плохой прогноз). а также таких интраоперационных критериев. как продолжительность операции (более 3 часов ± 1 балл) и интраоперационная контаминация раны + 1 балл.

Результаты. ГПО осложнения были диагностированы у 48 пациентов (17.2 %). Частота ГПО при локализации опухоли в прямой кишке составила 22.2 %. в правой половине ободочной кишки - 3 %. в левой половине - 11.1 % (р<0.05). Частота ГПО у пациентов с 3-4 (34 %) стадией КРР 24.2 %. аналогичный показатель у пациентов с 1-2 стадией заболевания составил 13.6 % (р<0.05). В случае. когда интегральный прогностический критерий (ИПК) составлял 1-2 балла. частота развития ГПО составила не более 10 %. В тех случаях. когда ИПК составлял 4-5 баллов. частота развития ГПО достигала 28-50 %.

Выводы. Локализация опухоли в прямой кишке. стадия заболевания являются значимыми прогностическими критериями развития ГПО. Предлагаемый интегральный прогностический критерий может быть использован для определения риска развития гнойных послеоперационных осложнений у больных КРР.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

C.B. Козлов. О.И. Каганов. М.В. Ткачев. Ц.С. Швец, A.M. Козлов ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫЙ ПЕРИОД

ПРИ ВЫПОЛНЕНИИ РАДИОЧАСТОТНОЙ ТЕРМОАБЛАЦИИ

ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет», Самара ГБУЗ «Самарский областной клинический онкологический диспансер». Самара

Цель исследования. Оценить результаты применения озонотерапии в послеоперационном периоде с целью профилактики и лечения «постаблационного» синдрома у больных с метастазами колоректального рака (КРР) в печени.

Материалы и методы. В 2005-2008 гг. на базе ГБУЗ Самарского областного клинического онкологического диспансера 98 больным было выполнено чрескожная радиочастотная термоаблация (РЧА) метастазов КРР в печени под контролем УЗИ. В послеоперационном периоде 58 пациентам, которые вошли в основную группу исследования, с целью профилактики и лечения «постаблационного» синдрома был применен метод озонотерапии. Пациентам контрольной группы (n=40) в послеоперационном периоде проводилась инфузионная, антибактериальная, обезболивающая терапия. Пациентам основной группы с первых суток после операции проводился метод озонотерапии крови в количестве 5 сеансов.

Результаты. «Постаблационный» синдром в основной группе возник у 8 (15 %), в контрольной - у 29 (73 %) больных (р=0,000). Было выявлено, что применение метода озонотерапии позволяет снизить абсолютный риск возникновения «постаблационного» синдрома на 57,4 % при отношении шансов 0,067. У пациентов контрольной группы в послеоперационном периоде на 2 сутки отмечалось повышение температуры до 37,96±0,52 °С, продолжающееся в течение 4-5 суток, в основной группе температура повышалась лишь до субФебрильных цифр 37,30±0,25 °С в течение двух первых дней после операции. Опенку интенсивности болевого синдрома проводили с помощью визуально-аналоговой шкалы (ВАШ). В контрольной группе максимальные болевые ощущения были на 1 сутки и достигли 7,20±1,13 баллов, данный синдром сохранялся на уровне 6 баллов со 2 по 4 сутки. В основной группе максимальные значения ВАШ отмечались также на 1 сутки и составили 7,3 7± 1,07 балла с прогрессивным снижением показателей в течение 5 дней. Сравнительный дисперсионный анализ с повторными измерениями в основной и контрольной группах показал значимую разницу значений ВАШ в контрольные сроки исследования (F=9,79 р=0,000).

Выводы. Таким образом, применение метода озонотерапии в послеоперационном периоде v больных с РЧА метастазов в печени позволило провести не только профилактику возникновения «постаблационного» синдрома, но и нормализовать у больных клиническую картину в более ранние сроки.

C.B. Козлов. О.И. Каганов, М.В. Ткачев, Д. С. Швец, A.M. Козлов

РЕЗУЛЬТАТЫ ПАЛЛИАТИВНЫХ ОПЕРАЦИЙ ПРИ КОЛОРЕКТАЛЬНОМ РАКЕ

ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет», Самара ГБУЗ «Самарский областной клинический онкологический диспансер», Самара

Актуальность. За последние десятилетия произошли качественные изменения в подходе к лечению больных колоректальным раком. Это стало возможным благодаря достижениям современной медицины -улучшению качества диагностики и внедрению современных методов лечения. Широкие возможности применения методов лучевой терапии, химиотерапии, а в последние годы появления лекарственных препаратов для таргетной терапии, обуславливают стремления онкологов к максимальному удалению опухолевой массы путем выполнения паллиативных операций.

Цель исследования. Изучение непосредственных результатов паллиативных операций у больных при ко-лоректальном раке.

Материалы и методы. С 2009 по 2012 гг. в отделении абдоминальной онкологии Самарского областного клинического онкологического диспансера выполнены 741 операции по поводу колоректального рака. Из них 43 носили паллиативный характер: гемиколэктомия справа - 20, гемиколэктомия слева - 17, резекция сигмовидной кишки - 4, передняя резекций прямой кишки - 2. У 2 больных дополнительно проводилась радиочастотная аблация метастазов печени, 2 больным выполнялись симультанные операции, дополненные с резекциями печени. Также имеется группа больных, которым резекции печени по поводу метастазов выполнялись отсрочено. Таким образом, за последние годы удельный вес паллиативных операций вырос с 1,6 % до 2,3 %.

Результаты. В послеоперационном периоде осложнения возникли у 5 больных (11,6 %): гнойные осложнения - 1, несостоятельность анастамоза - 1, тромбоэмболлия легочной артерии - 1, острое нарушение мозгового кровообращения - 1, перфорация язвы желудка - 1. Умерло 3 больных, причина смерти: тромбоэмболия легочной артерии - 1, перфорация хронической язвы желудка - 1, острое нарушение мозгового кровообращения - 1. послеоперационная летальность составила 4,6 %.

Выводы. Таким образом, низкий уровень послеоперационных осложнений и летальности после паллиативных операций свидетельствует о возможности и целесообразности их выполнения у больных с метастатическим колоректальным раком.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

C.B. Козлов, О.И. Каганов, М.В. Ткачев, Д. С. Швец, A.M. Козлов ПРОГНОЗИРОВАНИЕ РИСКА РАЗВИТИЯ ПРОГРЕССИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ ПОСЛЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАДИОЧАСТОТНОЙ ТЕРМОАБЛАЦИИ МЕТАСТАЗОВ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА

ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет», Самара ГБУЗ «Самарский областной клинический онкологический диспансер», Самара

Цель исследования. Внедрение в клиническую практику метода прогнозирования на дооперационном этапе риска развития прогрессии заболевания после выполнения радиочастотной термоаблации (РЧА) метастазов колоректального рака (КРР) в печени.

Материалы и методы. Проведено исследование результатов комбинированного лечения с применением чрескожной РЧА у 93 больных с единичными и множественными билобарными метастазами КРР в печени, выявленными в различные сроки диспансерного наблюдения после удаления первичной опухоли. Проводился многофакторный анализ, изучающий влияние различных предикторов на риск развития рецидива и появления новых метастазов после проведения РЧА.

Результаты. На основании проведенного исследования была создана математическая модель Р=1/1+2,71-z, где р - вероятность того, что произойдет интересующее событие; 2,71 - основание натуральных логарифмов; z - формула множественной линейной регрессии: Z= 4,68*Х1+0,02*Х2+0,03*Х3-4,68*х4-12,03, В настоящем исследовании математическую модель строили в модуле логистической регрессии по алгоритму Вальда, с пошаговым исключением в программе SPSS. При использовании этого метода первоначально брались в расчет все 11 предикторов, после чего они ранжировались и пошагово исключались в соответствии с их вкладом в модель. В результате была получена модель, включающая в себя 4 наиболее значимых предиктора (Х1-Х4): Х1 -число выявленных метастазов; Х2 - значение СЕА до операции в нг/мл; Х3 - значение СА19-9 до операции в Ед/мл; Х4 - число метастазов размером от 2 до 3 см. Далее приведена классификационная таблица, рассчитанная на основании вышеуказанной модели. Проведено сравнение результатов у 93 больных, полученных при выполнении КТ брюшной полости с целью выявления рецидива и прогрессии метастатического процесса (наблюдаемые результаты) и предсказанных результатов, полученных при помощи математической модели. Была просчитана чуствительность 95,5 %, специфичность 100 % и точность 96,8 % данной математической модели.

Выводы. Применение математической модели позволяет выбрать наиболее эффективный алгоритм обследования больных после выполнения малоинвазивного лечения, что позволяет своевременно выявлять дальнейшую прогрессию заболевания.

C.B. Козлов, О.И. Каганов, М.В. Ткачев, Д.С. Швец, A.M. Козлов ПРИМЕНЕНИЕ РАДИОЧАСТОТНОЙ ТЕРМОАБЛАЦИИ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ БИЛОБАРНЫХ МЕТАСТАЗОВ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА В ПЕЧЕНИ

ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет», Самара ГБУЗ «Самарский областной клинический онкологический диспансер», Самара

Цель исследования. Изучить результаты и обосновать применение радиочастотной термоаблации (РЧА) в комбинированном лечении больных с метастазами колоректального рака (КРР) в печени.

Материалы и методы. В программу исследования вошли 178 больных с билобарными единичными и множественными метастазами КРР в печени, выявленными после радикального хирургического лечения опухоли толстой кишки. В основную группу (n=93) вошли больные, которые получали комбинированное лечение: химиотерапия и РЧА. Больным контрольной группы (n=85) проводилась только химиотерапия без хирургического воздействия на метастатические очаги. Сравнительный анализ результатов лечения проводился: в основной (n=39) и контрольной (n=33) группах с единичными метастазами, а также в основной (n=54) и контрольных (n=52) группах с множественными метастазами.

Результаты. У больных в основной группе с единичными метастазами КРР в печени была достигнута трехлетняя безрецидивная выживаемость, которая составила 3,5 %, медиана безрецидивной выживаемости достигла 15 месяцев. В контрольной группе с единичными метастазами были получены только двухлетние показатели - 6,9 %, медиана выживаемости составила 9 месяцев. Общая пятилетняя выживаемость в основной группе с единичными метастазами - 4,3 %, медиана общей выживаемости достигла 28 месяцев, тогда как в контрольной группе была получена лишь трехлетняя выживаемость - 9,9 % с медианой выживаемости 15 месяцев. В основной группе больных с множественными билобарными метастазами КРР в печени проведение РЧА позволило достичь двухлетней безрецидивной выживаемости - 3,4 % с медианой безрецидивной выживаемости 9 месяцев, в то время как в контрольной группе с множественными метастазами аналогичный показатель равнялся нулю, медиана выживаемости достигла 6 месяцев. Применение РЧА в основной группе с множественными метастазами позволило достичь показателя общей четырехлетней выживаемости - 1,8 %, медиана выживаемости - 18 месяцев, тогда, как в контрольной группе была получена лишь трехлетняя выживаемость - 2,1 %, медиана выживаемости - 11 месяцев.

Вывод. Применение метода РЧА в комбинации с химиотерапией при лечении единичных и множественных билобарных метастазов КРР, позволяет значимо улучшить показатели безрецидивной и общей выживаемости.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 97

Н.В. Комлева, М.А. Лапшина, Г.В. Костюк, A.B. Иванов, И.И. Пархоменко, В.Д. Сень, A.A. Терентъев сравнительный анализ цитотоксичности и внутриклеточного накопления аминонитроксильных комплексов платины (IV) Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка, Московская область Актуальность. Использование комплексов платины в химиотерапии ограничено серьезными побочными эффектами, высокой токсичностью и быстрым развитием резистентности опухолей к препаратам. В связи с этим продолжается поиск новых комплексов платины с повышенной терапевтической эффективностью. Нами синтезирован и исследован ряд аминонитроксильных комплексов платины (IV) общей структуры Pt(IV)(NH3)(R^NH2)Cl2X2, где R«NH2 - нитроксильный радикал, а X - аксиальные лиганды (остатки алифатических карбоновых кислот - уксусной, масляной, валериановой, капроновой и каприловой). В качестве препаратов сравнения исследовались цисплатин и сатраплатин. Цель исследования. Изучить взаимосвязь физико-химических (липофильность, внутриклеточное накопление) и биологических (цитотоксичность) свойств комплексов платины (IV). Материалы и методы. Эксперименты проводились на клеточной культуре HeLa. Определение цитотоксичности комплексов платины и зависимости их цитотоксичности от времени экспозиции проводилось с помощью МТТ-теста. Липофильность соединений (logPow) определяли по распределению в системе 1-октанол-вода. Эффективность внутриклеточного накопления платины определяли атомно-абсорбционным анализом. Результаты и выводы. Обнаружено, что цитотоксичность комплексов платины (IV) снижается при внесении в их структуру нитроксильного радикала. Удлинение аксиальных лигандов приводит к значительному усилению цитотоксических свойств аминонитроксильных комплексов платины (IV). В ряду аминонитроксильных комплексов платины (IV) наблюдается корреляция между цитотоксичностью, липофильностью и эффективностью внутриклеточного накопления. При временной экспозиции скорость развития цитотоксичности для цисплатина выше, чем для комплексов платины (IV). Медленное развитие цитотоксичности комплексов платины (IV) определяется, вероятно, относительно медленной биотрансформацией до соответствующих комплексов платины (II) и, возможно, диффузией низкоактивных комплексов платины (IV) из клетки.

О.М. Конопаикова , И.Н. Павлова результаты иммунокоррекции больных меланомои кожи 1ГБОУВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского МЗ России, Саратов 2НУЗ ДКБ на ст. Саратов II ОАО РЖД, Саратов Задачи исследования. Изучить действие Галавита на иммунокомпетентные клетки различной функциональной активности в периферической крови больных меланомой. У всех больных до и после лечения контролировали состояние естественной защиты. Материалы и методы. Всего пролечен 41 пациент в возрасте от 32 до 56 лет. У всех диагноз верифицирован морфологически. Меланома чаще располагалась на туловище (51 %). К началу лечения метастатическая стадия констатирована у 8 % пациентов. Галавит вводили по 0,1 в/м № 10. Три инъекции ежедневно, через 72 часа остальные 7 введений. Результаты. При исследовании иммунологического статуса у 68 % больных было констатировано снижение CD3 -, CD4 -клеток. Какой-либо закономерности изменения показателей иммунитета, в зависимости от стадии и степени инвазии, не установлено. Стабильного повышения естественной защиты при введении Галавита не отмечено. Констатировано увеличение количества Т-лимфоцитов и снижение супрессорной активности клеток к концу первого года лечения (по сравнению с исходными данными). Через год лечения у 64% больных наблюдалось улучшение показателей естественной защиты. Изучение отдаленных результатов показало, что живые в течение пяти лет, без признаков прогрессирования 67 % больных. У них показатели CD3-k№tok были снижены на 15-20 % от нормы, с повышением CD8+-ktotok и незначительной депрессией CD20+-ktotok. К концу первого года лечения у всех больных констатирована тенденция к нормализации показателей. В различные сроки после операции метастазы в регионарные лимфоузлы выявлены у 24 % пациентов. В этой группе исходные показатели иммунитета были значительно снижены, затем улучшились на фоне иммуномодуляции, однако за 2-4 месяца до клинических проявлений значительно повысилось содержание CD8+-ktotok и изменилось содержание CD20-k№tok в сторону их увеличения. В срок от одного до трех лет умерли 9 % больных. У всех наблюдались нестабильные, разнонаправленные показатели. Выводы. Можно отметить, что выраженный иммуномодулирующий эффект от применения Галавита способствует длительному безрецидивному течению заболевания, а положительная динамика показателей клеточной защиты (повышение CD3 -,CD4 -клеток, и снижение CD8 -клеток) благоприятно влияет на исход лечения. Галавит целесообразно применять в качестве адъювантной терапии при лечении меланом кожи.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

98 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

O.M. Конопаикова1, Ю.П. Пугин2, Ю.И. Орлова2, А.Ю. Дугин2 РЕЗУЛЬТАТЫ ВНУТРИПУЗЫРНОИ ХИМИОТЕРАПИИ В ЛЕЧЕНИИ РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ 1ГБОУ ВПО Саратовский медицинский университет им. В.И. Разумовского МЗ РФ, Саратов 2НУЗ Дорожная клиническая больница на станции Саратов II ОАО РЖД, Саратов Актуальность.Заболеваемость раком мочевого пузыря (РМП) в Саратовской области составила в 2012 г. 13,4 на 100000 населения (по РФ - 9,7). Чаще рак встречается у мужчин (80,3 %) в возрасте 70-74 года. При обследовании установлено преобладание I—II стадий заболевания - 79,1 %. Лечение РМП в этих стадиях, при наличии неинвазивного рака, заключается в трансуретральной резекции пузыря (ТУР МП) и проведении внут-рипузырной химиотерапии (ВПХТ). Задача исследования. Оценка результатов лечения неинвазивного РМП с применением внутрипузырной химиотерапии после трансуретральной резекции мочевого пузыря. Материалы и методы. За период 2008—2010гг. по поводу РМП получили лечение 46 больных. Преобладали мужчины (76 %). Чаще рак встречался в возрасте 65—75 лет (69 %). Для установления диагноза использовали цистоскопию, УЗИ МП и паховых лимфоузлов, МРТ органов малого таза. Гистологически у всех больных был переходноклеточный рак. Степень дифференцировки: G1 у 31 %, G2 — 69 %. Распределение по стадиям: PT1N0M0 — 24 %, PT2aN0M0 — 76 % пациентов. В мочевом пузыре чаще процесс локализовался в нижней де-мисфере — 87 %. Всем пациентам выполнена ТУР МП. ВПХТ проводили адриамицином в дозе 50мг. Интервал — 1 раз в месяц. Общее число введений - 12. Результаты. Непосредственно в процессе введения все пациенты отмечали резь, болезненность; в течение 2—3 суток — макрогематурию. Все эти симптомы купировались после соответствующей терапии в течение недели. В дальнейшем больных обследовали каждые 3 месяца. Изучена трехлетняя выживаемость. Использованы стандартные методы обследования и иммуномониторинг. В результате наблюдения установлено, что местный рецидив возник у 26 % пациентов. С целью сравнения результатов лечения проведен анализ аналогичной группы пациентов, но без ВПХТ. У них рецидив констатирован в 58 %. Факт рецидива подтвержден гистологически. При анализе иммунограмм пациентов обследуемой группы у всех констатировано умеренное снижение показателей клеточного звена (особенно были снижены параметры CD3 и CD4 ) иммунитета. Поэтому между курсами проводилась коррекция свечами Галавита (0,1мг). Выводы. Применение ВПХТ при неинвазивном РМП позволяет улучшить результаты лечения и, тем самым, достичь оптимальных результатов.

О.И. Коняева, Н.Ю. Кулъбачевская, Н.П. Ермакова, И.Б. Меркулова, Т.В. Абрамова, В.А. Дерябина, A.A. Сергеев, К.А. Сережин, В.М. Бухман ПРЕДКЛИНИЧЕСКОЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЦИФЕТРЕЛИНА ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва Актуальность. Цифетрелин (ЦФ) — аналог гипоталамического гормона соматостатина, показал высокую противоопухолевую активность в эксперименте при рекомендованной эффективной терапевтической разовой дозе (ЭТД) для мышей — 10 мг/кг пятикратно (суммарная доза 50 мг/кг). Цель исследования. Предклиническое токсикологическое изучение ЦФ на мелких и крупных лабораторных животных. Результаты. В результате изучения «острой» токсичности на мышах и крысах ЦФ при введении в максимально возможной концентрации и максимально возможных объемах каких-либо проявлений токсичности не вызывал. Установлено, что превышение предполагаемой ЭТД препарата у мышей в 12 раз и у крыс в 10 раз не вызвало гибели животных. При изучении «острой» (отсутствие гибели) и «субхронической» токсичности при 15-кратном пероральном ежедневном введении крысам и собакам (отсутствие гибели животных при введении препарата в суммарных дозах - на крысах максимально введенная суммарная доза превышала суммарную эффективную дозу для мышей в 6 раз, для собак в 12 раз соответственно) установлено отсутствие кумулятивных свойств ЦФ. При ежедневном пероральном применении ЦФ крысам и собакам в течение 15 дней во всех исследованных дозах четкой дозовой зависимости не выявлено. Отмечено небольшое снижение количества лейкоцитов, колебания биомаркеров печени (белок, альбумин и АЛТ); очаговые дистрофические и деструктивные изменения в сердце, несильно выраженные очаговые дистрофические изменения в печени, очаговые дистрофические деструктивные и воспалительные изменения в почках, более выраженные у самок. С учетом функциональных и морфологических изменений во внутренних органах как крыс, так и собак изученные дозы ЦФ охарактеризованы как дозы, вызывающие слабые незначительные изменения — низкие токсические дозы (НТД). Лимитирующий вид токсичности не установлен, так как препарат вызывает незначительные морфофункциональные изменения различной степени обратимости практически во всех органах и системах организма крыс и собак. На основании полученных на экспериментальных животных данных о функциональных и морфологических изменениях в органах и тканях показано, что самки более чувствительны к препарату чем самцы. Выводы. На основании данных по предклиническому токсикологическому изучению ЦФ препарат может быть рекомендован для клинического изучения.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

О.И. Коняева, Н. Ю. Кулъбачевская, Н.П. Ермакова, В.А. Дерябина, A.A. Сергеев, К.А. Сережин, В.М. Бухман ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ СЕКОИЗОЛАРИЦЕРИЗИНОЛА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КЛИМАКТЕРИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ

И ЭСТРОГЕНЗАВИСИМЫХ ОПУХОЛЕЙ НА МЕЛКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

ФГБУ «РОНЦ ИМ. H.H. БЛОХИНА» РАМН, МОСКВА

Цель исследования. Изучение «острой» и «субхронической» токсичности лекарственного средства на основе секоизоларицеризинола (кнотолан) в модели лекарственной формы на мелких лабораторных животных с учетом установленной в эксперименте рекомендованной эффективной терапевтической разовой дозе (ЭТД) для мышей - 500 мг/кг десятикратно (суммарная доза 5000 мг/кг).

Материалы и методы. Работа проведена на 145 здоровых мышах гибридах (CBA х C57Bl/6j)F! самцах и самках и 317 здоровых неинбредных беспородных крысах самцах и самках. Препарат вводили однократно per os в дозах - мышам от 500 до 7500 мг/кг, крысам - от 1250 до 3750 мг/кг. В «субхронической» токсичности препарат вводили 30-кратно per os ежедневно в двух дозах в пересчете на крыс: разовая доза (суммарная ЭТД) -2500 мг/кг (суммарная 75 000 мг/кг) и разовая доза (1/2 суммарной ЭТД) - 1250 мг/кг (суммарная 37 500 мг/кг). Срок наблюдения за животными после введения - 30 суток.

Результаты. На основании анализа данных, полученных в опытах по «острой» (отсутствие гибели животных при максимально возможных концентрациях и максимально возможных объемах (превышение разовой оптимальной эффективной дозы для мышей - 250 мг/кг в 30 раз)) и «субхронической» токсичности при 30-кратном пероральном ежедневном введении кнотолана в модели лекарственной формы крысам (отсутствие гибели животных при введении препарата в суммарных дозах - на крысах максимально введенная суммарная доза превышала суммарную эффективную дозу для мышей (2500 мг/кг) в 30 раз) установлено отсутствие кумулятивных свойств кнотолана. При ежедневном пероральном применении кнотолана в модели лекарственной формы крысам в течение 30 дней установлена дозовая зависимость морфофункциональных изменений в органах и тканях животных. На основании данных по изучению «субхронической» токсичности лекарственного средства на основе секоизоларицеризинола (кнотолан) в модели лекарственной формы на крысах определены органы-мишени: сердечно-сосудистая система, почки и печень. Тем не менее, степень морфофункциональных изменений в указанных органах и системах не являлась дозолимитирующей токсичностью при 30-кратном ежедневном пероральном применении кнотолана в модели лекарственной формы.

Выводы. На основании результатов токсикологического изучения кнотолан рекомендуется для дальнейшего изучения.

Л.И. Короленкова

АНАЛИЗ ПРИЧИН ГИПОДИАГНОСТИКИ ПРЕДРАКА И РАННИХ ФОРМ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Главной целью цитологического скрининга является не рак шейки матки, а тяжелые цер-викальные интраэпителиальные неоплазии - CIN 2-3, включающие и рак in situ, когда возможно несложное недорогое органосохраняющее лечение. Однако часто заболевание обнаруживают не только на уровне инвазии, но и запущенным, несмотря на регулярные обследования в анамнезе.

Цель исследования. Раскрытие причин гиподиагностики при CIN 2-3 и микроинвазивном раке.

Материалы и методы. Проведен анализ несовпадений результатов кольпоскопии, цитологических и гистологических исследований 880 больных CIN и микроинвазивным раком шейки матки (МРШМ) и 187 больных с аномальными мазками, на основе базы данных кольпофотограмм в системе Leisecap, результатов тестирования на ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) методами ПЦР и гибридного захвата (НС2 тест, Di-gene/Qiagen) c определением вирусной нагрузки.

Результаты. Практически все случаи CIN2 и все - CIN3/CIS и МРШМ были ассоциированы с ВПЧ ВКР и имели положительный НС2 тест. При сопоставление данных видеокольпоскопии и морфологии показало, что: 1) часто степень повреждений в мазках ниже степени неоплазии в гистологическом материале; 2) более трети пациенток с тяжелыми CIN, преинвазивным и МРШМ, имеющие HSIL и более в мазках, взятых щетками из эндоцервикса, не имели аномалий в мазках с эктоцервикса, взятых шпателем Эйра; 3) в зависимости от типа зоны трансформации (ЗТ) от 12 до 42 % биопсий, взятых в эктоцервикса, недооценивают тяжесть эпителиальных повреждений и микроинвазию, обнаруженных затем в материале конизации. Выявлены три причины гиподиагностики степени неоплазии и снижения информативности мазков и ограниченных биопсий 1) тип и положение ЗТ: II и III типы с неполной ее видимостью и смещение ЗТ в цервикальный канал с сокрытием там части более «свежих и тяжелых» повреждений; 2) полиморфность неоплазий, отражающая появление в шейке новых, более агрессивных эпителиальных клонов; 3) присутствие неоплазий в эндоцервикальных криптах, иногда без повреждений эктоцервикса.

Выводы. Отрицательный НС2 тест (Digene/Qiagen) предсказывает отсутствие тяжелых CIN и МРШМ. Риск гиподиагностики по ограниченной биопсии возрастает в 1,92 раза при II типе ЗТ, в 5,34 раза при III типе по сравнению с I, достигая 42 %. С увеличением возраста и времени персистенции ВПЧ ВКР тяжесть неоплазий и вовлеченность крипт увеличиваются, а видимая в при кольпоскопии площадь их, также как и информативность мазков и биопсий, взятых с эктоцервикса, уменьшаются.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

100 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

Л. И. Короленкова РОЛЬ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕИ ТЕРАПИИ В ПРОФИЛАКТИКЕ И ЛЕЧЕНИИ ЦЕРВИКАЛЬНЫХ ИНТРАЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ (CIN) ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва Актуальность. Персистенция ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) является условием развития цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN), но возникает лишь у 10 % инфицированных, причем CIN 1 часто регрессирует. Лишь у единиц возникает CIN3, прогрессирующая в 12-50 % случаев до инвазивного рака. Прогрессия CIN всегда поддерживается ВПЧ ВКР со значимой вирусной нагрузкой (ВН). Элиминация, регрессия и торможение прогрессии до CIN следующей степени зависят от состояния местного иммунитета и сопровождаются снижением ВН в зоне трансформации шейки матки (ЗТ), являющейся основной мишенью для ВПЧ ВКР. В то же время при CIN3, неспособной к регрессии, вирусная нагрузка не снижается или прогрессивно растет. Мнения в отношении целесообразности применения иммуномодулирующей терапии у больных CIN расходятся, многие считают ее неоправданной. Иммуномодулятор в комбинированном лечении CIN в дополнение к эксцизии целесообразно применять для уменьшения количества реплицирующегося вируса лишь в случае, если при использовании препарата было зарегистрировано достоверное снижение вирусной нагрузки у большинства больных, которым не свойственно спонтанное снижение ВН. Цель исследования. Оценка эффективности предэксцизионного иммуномодулирующего лечения алло-фероном (аллокином-альфа) по изменению вирусной нагрузки в ЗТ у больных тяжелыми CIN2-3/CIS. Материалы и методы. В исследование вошли 79 больных CIN2-3/CIS с положительным НС2-тестом (Digene/Qiagen) и ВН более 20 RLU. Из них 51 получала перед эксцизией ЗТ (конизацией) аллокин-альфа (по 1 иг в 1 мл воды для инъекций п/к 1 раз в 48 часов - 6 инъекций), а 28 больных контрольной группы не получали лечения. Через 40-60 дней всем больным перед эксцизией ЗТ повторно определяли ВН. Результаты. После лечения аллокином-альфа отмечено снижение ВН у большинства больных (40 из 51 - 78,4 % больных), отрицательным тест стал у 9,8 % больных, медиана значений НС2-теста снизились в 5,2 раза (р=0,035). В группе без лечения ВН не снизилась ни у одной больной, у 26 из 28 отмечен ее рост (р<0,0001). Выводы. Лечение аллокином-альфа перед эксцизией приводит к снижению вирусной нагрузки у большинства больных CIN 2-3/CIS и может быть эффективно при CIN 1 и персистенции ВПЧ ВКР в отношении продуктивной ВПЧ-инфекции, поддерживающей прогрессию CIN. Динамика ВН может служить критерием эффективности лечения.

КС. Корчагина , C.B. Гамаюнов ' , В.А. Каров , P.P. Калугина , Е.В. Гребенкина2, Н.М. Шахова3, В.М. Терехов ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ПРИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ 'ГБОУ ВПО «НижГМА Минздравсоцразвития РФ », Н.Новгород, gamajnovs@mail.ru 2ГБУЗ Нижегородский областной онкологический диспансер, Н.Новгород 3Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород Задача исследования. Оценить влияние параметров флуоресценции на эффективность фотодинамической терапии. Материалы и методы. На базе Нижегородского областного онкологического диспансера при проведении фотодинамической терапия рака кожи проведено изучение накопления и выгорания фотосенсибилизатора в опухолевой ткани у 226 пациентов. Параметры флуоресценции оценивались с помощью флуоресцентной визуализирующей системы производства ООО «Аткус». Результаты. При анализе полученных данных не было получено различий в количестве полных ответов опухоли на лечение в зависимости от накопления препарата и его выгорания после процедуры. В то же время в группе больных с хорошим накоплением фотосенсибилизатора зарегистрировано 4,1 % рецидивов против 9,5 % в группе со слабым и отсутствием накопления препарата (р=0,044). Наметилась тенденция к увеличению количества рецидивов при отсутствии выгорания фотосенсибилизатора - 10,4 %, против 4,4 % при полном и частичном выгорании препарата (р=0,051). Сочетание хорошего накопления и полного выгорания препарата получено у 62 больных. Количество полных ответов опухоли в этой группе составило 94 %. Отмечено 2 рецидива при сроках наблюдения от 4 до 25 мес. Выводы. Оценка параметров флуоресценции при проведении фотодинамической терапии позволяет выявить категорию больных, у которых наиболее вероятен рецидив заболевания и которые подлежат интенсивному динамическому наблюдению. Дальнейшие разработки по подбору индивидуальных доз лазерного излучения в зависимости от параметров флуоресценции позволят добиться максимального количества полных ответов и снизить процент рецидивов заболевания.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

В.П. Красное1, Д.А. Груздев1, А.Ю. Второе1, Г.Л. Левит1,

И.Д. Константинова , Б.З. Елецкая2, И.В. Фатеев2, В.Н. Чарушин1

СИНТЕЗ НОВЫХ НУКЛЕОЗИДОВ С ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ

НА ОСНОВЕ КОНЪЮГАТОВ 2-АМИНОПУРИНА С АМИНОКИСЛОТАМИ

И ХИРАЛЬНЫМИ АМИНАМИ

1 Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург 2Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва

Актуальность. Гликозилированные производные 2-аминопуринов представляют интерес в качестве потенциальных противовирусных и противоопухолевых соединений. Известно, что трансгликозилирование под действием генно-инженерных пуриннуклеозидфосфорилаз протекает с высокой регио- и стереоселективностью, приводя к ß-D-гликозидам.

Задача исследования. Получение новых нуклеозидов рибо-, 2-дезоксирибо- и арабино- рядов на основе производных 2-аминопурина, несущих в положении 6 фрагменты аминокислот или хиральных гетероциклических аминов.

Материалы и методы. Исходя из 2-амино- и 2-ацетиламино- 6-хлорпуринов, синтезирован ряд конъю-гатов 2-аминопурина с аминокислотами (глицином, ^)-аланином, ^)-валином, ^)-фенилаланином, (S)-пролином, a-Cbz-(S)-nH3HHOM, е-аминокапроновой кислотой) и оптически чистыми аминами (производными 1,2,3,4-тетрагидрохинолина и 3,4-дигидробензоксазина). Реакции трансгликозилирования полученных конъю-гатов проводили под действием пуриннуклеозидфосфорилазы E. coli при использовании инозина, тимидина и а^-арабинозо-1-фосфата в качестве доноров Сахаров.

Результаты и выводы. Установлено, что замещенные по положению 6 производные 2-аминопурина являются хорошими акцепторами рибозы, 2-дезоксирибозы и арабинозы в реакции ферментативного трансгликозилирования. Конверсия модифицированных оснований в рибозиды и 2'-дезоксирибозиды составляла 70-100%; арабинозилирование протекало с меньшей конверсией (до 68%). Цитотоксичность синтезированных соединений исследована на линии клеток Jurkat -Т-лимфобластной лейкемии человека.

Впервые проведен химико-ферментативный синтез нуклеозидов на основе производных 2-аминопурина, включающих фрагменты природных аминокислот и хиральных аминов. Исследуется противоопухолевая активность синтезированных соединений.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант 13-03-00674), УрО РАН (проект 12-П-3-1030), а также в рамках Государственной программы поддержки ведущих научных школ (грант НШ 3656.2014.3)._

В.П. Краснов, Д.А. Груздев, А.Ю. Вигоров, A.A. Меньшикова, E.H. Чулаков, Г.Л. Левит, В.Н. Чарушин СИНТЕЗ КОНЪЮГАТОВ 2-АМИНОПУРИНА С ХИРАЛЬНЫМИ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИМИ АМИНАМИ

Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург

Актуальность. Модифицированные нуклеозиды пуринового ряда представляют интерес как потенциальные противоопухолевые агенты. Особый интерес представляет получение конъюгатов 2-аминопурина с хи-ральными аминами. Производные гетероциклических аминов проявляют широкий спектр биологической активности, в том числе противоопухолевую активность.

Задача исследования. Получение конъюгатов 2-аминопурина с хиральными гетероциклическими аминами: 3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2Д-[1,4]бензоксазином, 2-метил-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолином, и их нефторированными аналогами.

Материалы и методы. Исходные энантиомерно чистые амины были получены из рацематов с помощью разработанного нами метода кинетического разделения с использованием хлорангидридов оптически активных кислот. В качестве исходных пуринов использовали 2-амино- и 2-ацетиламино-6-хлорпурины. Исследовано два подхода к получению конъюгатов 2-аминопурина с гетероциклическими аминами: 1) «прямое» введение фрагментов хиральных гетероциклических аминов в молекулу 2-аминопурина; 2) использование линкерного фрагмента для получения конъюгатов. «Прямое» введение фрагментов гетероциклических аминов в положение 6 2-аминопурина удалось осуществить с низкими выходами при кипячении в трифторэтаноле в присутствии триф-торуксусной кислотой в качестве катализатора.

Подход, основанный на использовании остатка 6-аминокапроновой кислоты в качестве линкера, приводил к конъюгатам 2-аминопурина с более высокими выходами.

Во всех случаях синтез пурин-6-ил-замещенных производных хиральных гетероциклических аминов не сопровождался рацемизацией хирального центра в остатке амина. Оптическая чистота целевых конъюгатов подтверждена методом ВЭЖХ.

Результаты и выводы. Впервые получены энантиомерно чистые производные гетероциклических аминов, соединенные с остатком 2-аминопурина, - перспективные субстраты для получения на их основе нуклеозидов, потенциальных противоопухолевых и противовирусных соединений.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант 13-03-00674), УрО РАН (проект 12-П-3-1030), а также в рамках Государственной программы поддержки ведущих научных школ (грант НШ 3656.2014.3)._

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

102 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

Д.С. Кузнецова , M.B. Ширманова , В.А.Каменский , П.В Субочев , С.А. Лукьянов ' , Е.В. Загайнова 3Б-СФЕРОИДЫ КАК МОДЕЛЬ ДЛЯ ПОДБОРА РЕЖИМОВ ФОТОДИНАМИЧЕСКОИ ТЕРАПИИ С ГЕНЕТИЧЕСКИ КОДИРУЕМЫМИ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРАМИ 1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 2Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород 3Институт биоорганической химии РАН, Москва Актуальность. В исследовании противоопухолевых эффектов новых препаратов или методов терапии монослойная клеточная культура не может достаточно полно отражать свойства опухоли, а работа с опухолевыми моделями животных является более дорогостоящей и требует специальных профессиональных навыков. Сфероиды представляют собой клеточные агрегаты, имитирующие солидные опухоли до начала ангиогенеза. Цель исследования. Подбор режимов фотодинамической терапии (ФДТ) с генетически кодируемым фотосенсибилизатором KillerRed на опухолевых сфероидах при воздействии облучения непрерывного и импульсного лазера. Материалы и методы. Сфероиды получали из культуры клеток рака шейки матки человека HeLa Kyoto, трансфицированных геном флуоресцентного Фототоксичного белка KillerRed. Для Формирования сфероидов клетки высаживали в планшеты на матригель. На 5 день культивирования одна группа сфероидов подвергалась воздействию непрерывного, другая - импульсного лазера различной мощности и экспозиции. В процессе облучения флуоресценция клеток регистрировалась на микроскопе LSM Meta 510 или Leica DMIL для опенки выгорания белка KillerRed. Для анализа клеточной гибели сфероиды окрашивали аннексином V - FITC и пропидиум йодид через 24 ч после облучения. Результаты и выводы. Получены зависимости степени выгорания белка KillerRed от световой дозы при использовании плотности мощности 110, 140, 160 мВт/см2. Показано, что степень выгорания не зависит от режима воздействия (импульсный или непрерывный). Наибольшее снижение уровня флуоресценции (90 %) достигалось при воздействии плотностью мощностью 160 мВт/см2 в течение 20 мин. Впервые на модели сфероидов исследована возможность индукции Фототоксических повреждений с помощью белка KillerRed. В сфероидах, подвергавшихся лазерному облучению, выявлена активация апоптоза. Полученные данные позволяют сделать вывод, что 3D-cфepoиды являются перспективной моделью для подбора режимов в ФДТ перед исследованиями in vivo. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта правительства РФ № 11 .G34.31.0017.

Н.Ю. Кульбачевская, О.И. Коняева, Н.П. Ермакова, И.Б. Меркулова, Т.В. Абрамова, A.A. Сергеев, К.А. Сережин, В.А. Дерябина, В.М. Бухман СРАВНИТЕЛЬНОЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ОТЕЧЕСТВЕННОГО ВОСПРОИЗВЕДЕННОГО ОКСАЛИПЛАТИНА И ОКСАЛИПЛАТИНА ФИРМЫ ТЕВА ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва Цель исследования. Сравнительное изучение «острой» и «субхронической» токсичности нового воспроизведенного в лаборатории лекарственных форм НИН ЭДиТО ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН противоопухолевого препарата оксалиплатин (ОП-В) и оксалиплатина-Тева (ОП-Тева) (Фармацевтическое предприятие Лтд., Израиль). Материалы и методы. Исследования проведены на 70 мышах-самцах гибридах B6D2F1 и 250 неинбред-ных крысах-самцах, полученных из разведения ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН. ОП-В приготовлен в лаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН - раствор для внутривенного введения с концентрацией оксалиплатина 5 мг/мл, во флаконе по 10 мл, серии 010412. ОП-Тева - раствор для внутривенного введения 5 мг/мл, во флаконе по 10 мл, серии 10Н11КМ. В опытах по «острой» токсичности препараты вводили мышам однократно внутривенно в дозах от 10 до 30 мг/кг, крысам от 5 до 30 мг/кг. В опытах по «субхронической» токсичности препараты вводили внутривенно ежедневно 3-кратно в трёх суммарных дозах, рассчитанных, исходя из МПД, определённой в опытах по «острой» токсичности на крысах: 8 мг/кг (0,5МПД), 16 мг/кг (МПД), 24 мг/кг (1,5МПД). Результаты. На основании результатов, полученных при сравнительном изучении «острой» токсичности на мышах и крысах установлены расчетные токсические дозы ОП-В для мышей: ЛД10=17,2 мг/кг; ЛД50=18,5 (17,9^19,1) мг/кг; для крыс: ЛД10=16,1 мг/кг; ЛД50=19,7 (18,2^21,2) мг/кг и ОП-Тева для мышей: ЛД10=15,8 мг/кг; ЛД50=20,1 (19,0^21,2) мг/кг; для крыс: ЛД10=16,3 мг/кг; ЛД50=19,0 (17,9^20,2) мг/кг, которые практически не отличаются друг от друга. По результатам изучения «субхронической» токсичности установлено, что ОП-В и ОП-Тева проявляют практически одинаковую количественную и качественную токсичность. Так, ОП-Тева, введенный в суммарной дозе 24 мг/кг (2 МПД), вызвал гибель 5 из 5 крыс (100 %), а введенный в эквивалентной дозе ОП-В - 4 из 5 крыс (80 %). ОП-В и ОП-Тева по показателям количественной токсичности (летальность, биомаркеры токсичности, морфометрия органов) и патоморфологического изучения практически не отличаются друг от друга. Выводы. На основании результатов, полученных при сравнительном изучении «острой» и «субхронической» токсичности установлено, что ОП-В и ОП-Тева проявляют практически равную токсичность.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... | 103

Н.Ю. Кульбачевская, О.И. Коняева, Н.П. Ермакова, И.Б. Меркулова, Т.В. Абрамова, A.A. Сергеев, К.А. Сережин, В.А. Дерябина, В.М. Бухман ТОКСИЧНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ БИОСИНТЕТИЧЕСКОГО АКАДЕЗИНА - АКАВИДОНА

ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Цель исследования. Изучение «субхронической» токсичности Акавидона на крысах, изучение аллерги-зирующего действия на морских свинках, исследование пирогенных свойств и местнораздражающего действия на кроликах.

Материалы и методы. «Субхроническая» токсичность проведена на 40 здоровых неинбредных беспородных крысах самцах, полученных из разведения ФГБУ «РОНЦ им. H.H.Блохина» РАМН. Препарат вводили внутрибрюшинно ежедневно 15-кратно в трех дозах: 2300 мг/кг суммарная доза, равная 2 МПД при внутри-брюшинном введении крысам (разовая доза - 153 мг/кг); 1150 мг/кг суммарная доза, равная 1 МПД (разовая доза - 77 мг/кг); 750 мг/кг суммарная доза, равная 1/2 МПД (разовая доза - 50 мг/кг). Аллергизирующее действие - на 60 морских свинках-самках, массой 230-250 г, полученных из питомника ГУНЦ Биомедицинских технологий «Филиал Андреевка» РАМН. Исследование пирогенности и местнораздражающего действия — на 48 кроликах породы «Шиншилла», массой 2,5-3,0 кг, полученных из питомника лабораторных животных РАМН «Манихино».

Результаты. Установлено, что Акавидон после 15-кратного ежедневного внутрибрюшинного применения в трех исследованных дозах не вызывал гибели животных, не оказывал влияния на общее состояние животных, не вызывал внешних проявлений токсичности. На все сроки наблюдения не изменял поведенческие реакции животных, не вызывал изменений показателей периферической крови, морфо-функциональных изменений в печени и поджелудочной железе, морфо-функциональных изменений в состоянии сердечнососудистой системы животных. Акавидон не вызывал отклонений суточного диуреза и не влиял на содержание мочевины и креатинина в сыворотке крови крыс по сравнению с данными контрольных животных. Однако морфологически отмечены не дозозависимые необратимые несильно выраженные очаговые деструктивные воспалительные и дистрофические изменения в почках части крыс, получавших препарат в суммарной дозе 1150 мг/кг (МПД) как на ранние (1сутки), так и на поздние (30 сутки) сроки наблюдения. На основании анализа данных, полученных в опытах по «острой» (расчетные токсические дозы) и «субхронической» токсичности (отсутствие гибели животных при введении препарата в суммарных дозах 1/2 МПД, 1 МПД и 2 МПД установлено отсутствие кумулятивных свойств Акавидона. Препарат обладает дозозависимыми слабыми аллергизирующими свойствами. Акавидон в 2,5 %, 5 % и 10 % концентрациях вызывает слабое дозозависимое местнораздражаю-щее действие (несильно выраженные признаки воспаления сохраняются до 14 суток наблюдения). Установлена тест-доза Акавидона по пирогенности для проведения биологического контроля качества и стандартности препарата, равная 50 мг/кг (1,0 мл/кг 5% раствора).

Выводы. Полученные результаты по изучению токсичности Акавидона позволяют рекомендовать его для дальнейшего изучения.

Г.Д. Кутлиева, Д.К. Огай, Ш.М. Миралимова, Н.А. Элова, С.Н. Наврузов, Х.Д. Исламов ЭФФЕКТИВНОСТЬ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ КОРРЕКЦИИ МИКРОФЛОРЫ ТОЛСТОЙ КИШКИ У БОЛЬНЫХ КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ

Институт микробиологии АН РУз, Республиканский Онкологический Научный Центр МЗ РУз, Ташкент, Узбекистан

Актуальность. Любое противоопухолевое лечение снижает и без того низкий уровень иммунной защиты. Поэтому у ослабленных больных, особенно с нарушениями иммунитета, у онкологических больных самовосстановления микрофлоры кишечника не происходит, и часто у них появляются клинические симптомы дис-бактериоза. Распространенность и неуклонный рост онкозаболеваемости колоректальным раком, наличие отягощающего влияния массивной химио- и лучевой терапии на состояние микрофлоры толстой кишки послужили основанием для проведения исследований у больных с данной патологией.

Задачи исследования. Изучение микрофлоры кишечника больных колоректальным раком, проведение диагностики дисбиоза с последующей коррекцией отечественными пробиотическими препаратами.

Материалы и методы. Исследования проводятся на базе РОНЦ МЗ РУз в отделении онкоколопроктоло-гии. Объектом исследования послужили 20 больных с колоректальным раком в возрасте 40-75 лет.

Результаты. У всех обследованных был выявлен дисбиоз кишечника 3-4 степени. Из микрофлоры толстой кишки были выделены условно-патогенные микроорганизмы: Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus, Candida spp., Pseudomonas aeruginosa. У 6 больных из 20 наблюдается увеличение лактозанегативных кишечных палочек от 2 до10 раз. У всех больных отмечено отсутствие лактобактерий (100 %), в норме которые должны быть не менее 10 -108 КОЕ/г. Бифидобактерии отсутствовали или представляли очень низкий титр клеток 10:-102 КОЕ/г (в норме до 109 КОЕ/г). Коррекцию проводили индивидуально отечественными препаратами «Лактобактерин», «Бифидумбактерин», «Колибактерин» и «Бификол». Установлено, что у 80 % леченных больных наблюдается изменение микрофлоы в положительную сторону, связанное с восстановлением нормофлоры толстой кишки (титр клеток лакто-и бифидобактерий был восстановлен до 107-108 КОЕ/г). Количество условно-патогенных бактерий обнаружено в пределах допустимой нормы.

Выводы. Таким образом, результаты клинических испытаний показали эффективность отечественных пробиотических препаратов для коррекции дисбиотического состояния больных. Коррекция микрофлоры кишечника больных колоректальным раком способствует повышению эффективности лечения больных, профилактике осложнений после операций, а так же улучшению состояния больных.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

104 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

A.B. Ланцова, E.B. Санарова, А.П. Полозкова, О.Л. Орлова, И.Д. Гулякин, Т.Д. Миникер, Л.В. Эктова, H.A. Оборотова РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПРОИЗВОДНОГО ИНДОЛОКАРБАЗОЛА ЛХС-1208 ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина», Москва Актуальность. Отличительной особенностью механизма действия производных индолокарбазолов, обладающих противоопухолевой активностью, является их способность взаимодействовать с несколькими мишенями (топоизомеразы, ДНК и киназы) и, следовательно, индуцировать различные пути гибели опухолевых клеток. Объектом настоящего исследования является оригинальная отечественная субстанция производного индо-локарбозолов - ЛХС-1208 и его лекарственная форма (ЛФ), предназначенная для применения в терапии опухолей. Задача исследования. Разработка стабильной лекарственной формы ЛХС-1208 для лечения онкологических больных. Материалы и методы. Субстанция ЛХС-1208, синтезированная в лаборатории химического синтеза ФГБУ "РОНЦ им. H.H. Блохина" РАМН. Солюбилизаторы: Cremophor ELP, Kolliphor HS15, Kollidon 17 PF, Kollisolv-PEG 400 и Lutrol E-400 (BASF, Германия); растворитель - диметилсульфоксид, чда (Химмед, Россия.) Количественное определение ЛХС-1208 в лекарственной форме проводили на спектрофотометре Cary 100 (Varian, Inc., Австралия) при длине волны 320 нм. Результаты и выводы. В ходе исследования физико-химических свойств субстанции ЛХС-1208 оказалось, что данное соединение обладает гидрофобной природой и растворимо только в органических растворителях (ДМСО, ацетон и др.). В связи с этим в модельные составы при разработке ЛФ вводили различные солюбилизаторы (Cremophor ELP, Kolliphor HS15, Kollidon 17 PF, Kollisolv-PEG 400), однако это не повысило растворимость ЛХС-1208. Для увеличения растворимости разработана технология получения ЛФ, при которой растворение субстанции ЛХС-1208 проводят в минимально возможном количестве ДМСО, а затем добавляют водный раствор солюбилизатора Kollidon 17 PF. Полученная таким образом ЛФ оказалась стабильной по изученным параметрам (внешний вид, pH, концентрация действующего вещества) и передана на химико-фармацевтические и биологические исследования. Работа выполнена в рамках Государственного контракта 13411.1008799.13.120 от 24 июня 2013 г. «Доклинические исследования инновационного лекарственного средства на основе производного индолокарба-зола для лечения онкологических заболеваний».

Г.Б. Лапа , М.А. Барышникова , A.A. Вартанян , Д.В. Сергеев , Е.А. Чигорина СИНТЕЗ НОВЫХ Э-АМИНОИЗОХИНОЛИНОВ И ИХ ПЕРВИЧНЫЙ СКРИНИНГ НА ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ, ИНГИБИРОВАНИЕ МИГРАЦИИ КЛЕТОК И ВАСКУЛОГЕННОЙ МИМИКРИИ 1ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва 2ООО «Асинекс», Москва 3000 «Институт химического разнообразия», Химки, Московская область Цель исследования. Создание новых эффективных химиотерапевтических средств и исследование их противоопухолевой активности. Материалы и методы. На основе виртуального скрининга, с использованием PASS-online, было установлено, что ранее синтезированные производные 3-амино-изохинолинов могли бы обладать противоопухолевой активностью с вероятностью от 0.34 до 0.47, антиангиогенезной активностью с вероятностью от 0.30 до 0.54, а так же активностью ингибиторов протеинкиназ с вероятностью от 0.36 до 0.59. Была сгенерирована комбинаторная библиотека с использованием сервиса molinspiration-online, при этом 15 наиболее химически доступных соединений с индексами ингибиторов протеинкиназ от 0.1 до 0.18 были предложены для синтеза. Цио-токсичность синтезированных соединений исследовали с помощью МТТ-теста на клеточных линиях HCT-116 и А549. Ингибирование миграции клеток изучали на клеточной линии диссеминированной меланомы человека Mel Cher с помощью метода «заживление раны». Для исследования влияния соединений на образование сосудисто-подобных структур использовали метод формирования сосудисто-подобных структур на матригеле. Результаты и выводы. Были синтезированы 12 соединений, и первичный скрининг показал, что производные К-(3-изохинолинил)-4-хлоро-бензоиламида (LGB-032) и К-(3-изохинолинил)-4-(Ы-метил-пиперазинил-метил)-бензоиламида (LGB-017) обладают умеренной цитотоксической активностью на клеточных линиях HCT-116, А549, в концентрациях 50 цМ выживаемость клеток составила 45, 36 и 16, 29 % соответственно. Было найдено, что соединение LBG-017 способно на 25-30 % ингибировать миграцию клеток меланомы линии Mel Cher. При исследовании влияния соединений на образование сосудисто-подобных структур было обнаружено, что и LGB-017 является эффективным блокатором формирования васкулярных каналов клетками меланомы линии Mel Cher.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... | 105

В.А. Лапина, Т.А. Павич, A.B. Воробей РАЗРАБОТКА И СИНТЕЗ НАНОПЛАТФОРМЫ НА ОСНОВЕ АЛМАЗНЫХ НАНОЧАСТИЦ

ДЛЯ СЕЛЕКТИВНОЙ ДОСТАВКИ ФОТОДИНАМИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ В ОПУХОЛЕВЫЕ КЛЕТКИ

Институт физики HAH Беларуси, Минск, Беларусь

Актуальность. Поиск новых фотодинамически активных лекарственных противоопухолевых препаратов является актуальной задачей сегодняшнего дня. Объединение принципов двух современных высокотехнологичных направлений в биомедицине - нанотехнологий и фотодинамической терапии открыло широкие возможности для разработки лекарственных средств нового поколения, позволяющих резко повысить эффективность терапии онкологических заболеваний

Задача исследования. Разработать и синтезировать таргетируемую наноплатформу для селективной доставки лекарственных препаратов в положительные по фолатному рецептору клетки.

Материалы и методы. В качестве основы наноплатформы использовали функционализированные алмазные наночастицы (ФАН) детонационного синтеза. Благодаря особенностям химии поверхности ФАН (наличие функциональных групп различного рода: аминные, карбоксильные, карбонильные, гидроксильные, лактон-ные и др.) они могут быть нагружены разными типами химиотерапевтических препаратов. В наших исследованиях в качестве такого препарата использовали фотосенсибилизатор хлорин е6 (Хл), в качестве таргетирующе-го вектора - фолиевую кислоту (ФК).

Результаты и выводы. Синтезирована новая селективная наноплатформа НА-Хл-ФК. Установлено ее взаимодействие с экспрессирующими фолатный рецептор клетками HeLa. Полученная наноплатформа фотостабильна и проявляет в физиологических условиях выраженную фотодинамическую активность, что приводит к гибели связавших ее клеток при освещении. Изучены спектрально-люминесцентные свойства наноплатформы и показано, что они позволяют проводить визуализацию опухолевых клеток. В целом, синтезированная на основе алмазных наночастиц наноплатформа может быть использована для разработки новых эффективных методов тераностики онкологических заболеваний.

H.A. Лесная , В.И. Романенко , М.С.Калишъян , Е.М. Трещалина , А.Е. Щекотихин , М.Н. Преображенская ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ АНТРАФУРАНДИОНА ЛХТА-2034 НА МОДЕЛИ ЛИМФОЛЕЙКОЗА P388/DOX C МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ

1ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва 2ФГБУ «НИИНА им. Г.Ф. Гаузе» РАМН, Москва

Актуальность. Нами разрабатывается новый оригинальный отечественный ингибитор топоизомераз ан-трафурандиона ЛХТА-2034 с выраженной противолейкозной активностью. Одной из задач его доклинического изучения является оценка эффективности на опухолевой модели с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ), чему и посвящено настоящее исследование.

Цель исследования. Оценка эффективности антрафурандиона ЛХТА-2034 на лимфолейкозе, устойчивом к доксорубицину.

Материалы и методы. Исследование проведено на лимфолейкозе P388/DOX, в/б трансплантированном мышам-самкам линии DBA2. Для опытов использован прототип лекарственной формы антрафурандиона ЛХТА-2034 для парентерального применения с солюбилизатором циклодекстрином. Препарат вводили мышам (n=6-7) на 2-6 сутки после трансплантации лейкоза ежедневно в/б в эффективных разовых дозах 30 и 40 мг/кг, суммарно 150 и 200 мг/кг, соответственно. Контроль устойчивости штамма проведен в группе мышей (n=7), которым в/б вводили доксорубицин (DOX) в однократной дозе 7,5 мг/кг. Эффективность оценена с помощью стандартного критерия УПЖ %, рассчитанного по средней продолжительности жизни (СПЖ) мышей по сравнению с группой контроля без специфического лечения (n=7). Контроль накопления лейкозного асцита и развития узлов в брюшной полости проведен по результатам аутопсии павших мышей. О переносимости судили по поведению, состоянию, а также по средней массе тела и относительной массе селезенки мышей в сравниваемых группах. Достоверными считали различия при p<0,05.

Результаты. Показано, что на фоне развития P388/DOX без специфического лечения (СПЖ = 9,7 дн.), применение DOX было неэффективным (СПЖ = 9,8 дн.). Препарат ЛХТА-2034 в обеих суммарных дозах 150 и 200 мг/кг вызвал пограничный достоверный дозозависимый противоопухолевый эффект на уровне СПЖ = 12,1 и 13,2 дн., УПЖ = 25 и 36%, соответственно (p<0,05). При аутопсии брюшной полости мышей, леченных ЛХТА-2034, выявлено дозозависимое уменьшение накопления асцита вплоть до полного отсутствия с параллельным уменьшением числа лейкозных узлов. Переносимость лечения ЛХТА-2034 была удовлетворительной и зависела от величины примененной дозы. Под контролем отрицательной динамики массовых коэффициентов показано, что суммарная доза 200 мг/кг на этой модели близка к максимально переносимой.

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о достоверном, значимом и дозозависимом пролонгировании жизни мышей с внутрибрюшинно трансплантированным лимфолейкозом с множественной лекарственной устойчивостью P388/DOX под действием 5-дневного внутрибрюшинного введения антрафурандиона ЛХТА-2034 в суммарных дозах 150 и 200 мг/кг при удовлетворительной переносимости.

Работа выполнена в рамках гос. контракта Министерства промышленности и торговли РФ № 12411.1008799.13.007, шифр «2.1 Топоизомеразы 2012».

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

106 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

A.A. Липенгольи1'2'3, А.А Черепанов12'3, И.Н. Шейно1,

B.Н. Кулаков , В.Ф. Хохлов , В. А. Климанов3, Е.Ю Григорьево2 ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ГАДОПЕНТЕТАТА

В ДИСТАНЦИОННОЙ ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ

1 Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, Москва 2ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

3Национальный исследовательский ядерный университет «МИФИ», Москва

Задачи исследования. Исследование противоопухолевой эффективности дистанционного рентгеновского облучения с предварительным системным введения гадопентетата. Полученные результаты могут быть положены в основу разработки нового метода лучевой терапии и повышения эффективности существующей близкофокусной рентгенотерапии.

Материалы и методы. Исследование проводилось на мышах линии C57B1/6 весом 20-22 г с трансплантированной аденокарциномой Са755. Животные были поделены на три группы: группа №1 - животные с трансплантированными опухолями, с которые не подвергались никакому воздействию (необлученный контроль), группа №2 - животные с опухолью, которые были локально облучены рентгеновским излучением в дозе 10 Гр (облученный контроль) и группа №3 (опытная группа) - животные с опухолями, которым перед облучением рентгеновским излучением в той же дозе, что и группы №2, системно вводилось 0,3 мл водного раствора натриевой соли гадопентетата, содержащей 23 мг гадолиния. Облучение проводилось на рентгеновской установке с напряжением на трубке 200 кВ. Мощность дозы в позиции облучения составляла 1,3 Гр/мин.

Оценка противоопухолевого эффекта оценивалась по динамике роста опухоли и по продолжительности

жизни.

Результаты и выводы. В результате проведенных исследований было выявлено, что введение раствора гадопентетата перед облучением приводит к существенной задержке роста опухоли по сравнению с обеими контрольными группами ( 12 дней и 0 дней соответственно). Медиана продолжительности жизни для групп №1, №2 и №3 составили 22, 36 и 43 дня соответственно. У 25 % животных опытной группы наблюдалось полное излечение опухоли, тогда как в обеих контрольных группах рецидив наблюдался у 100% животных.

-1-2-3-

Е.В. Лихачева , Г. В. Пономарев , М.В. Муравьев

ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ РИНОСИНУСОПАТИЙ,

СОЧЕТАННЫХ С БРОНХОЛЕГОЧНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ

161 ГКБ, Москва

2ФГБУ «ИБМХ» РАМН, Москва

3000 "Панков-Медикл", Москва

Актуальность. Метод ФДТ более 12 лет входит в состав комплексного лечения неопухолевых ЛОР-патологий. В настоящее время появилась возможность широкого использования в диагностике КТ и МРТ, поэтому выявляются случаи хронических и затяжных синуситов и риносинусопатий, являющихся причиной острых и хронических бронхолегочных заболеваний. Часто патологии пазух носа бессимптомны или с минимальной симптоматикой (синдром постназального затекания), но требует лечения в связи с основным заболеванием (бронхиты, пневмонии и т.д.). В данной ситуации одним из вариантов лечения может быть проведение ФДТ.

Задача исследования. Оптимизация амбулаторного комплексного консервативного лечения синуситов и риносинусопатий при помощи ФДТ.

Материалы и методы. Проведено лечение методом ФДТ 17 пациентам, из них - 7 мужчин (41,1 %), 10 женщин (58,9 %), в возрасте от 15 до 70 лет, из них - 14 страдающих затяжным или хроническим этмоидитом, 3 - сфеноидитом, впервые выявленными. Все пациенты перенесли острый бронхит или пневмонию (5), обострение ХОБЛ или бронхиальной астмы (12). В работе использовали фотосенсибилизатор «Гелеофор» хлоринового ряда в виде геля, наносимого аппликационно на слизистую оболочку нижних и средних носовых раковин, а так же в нижний и средний носовой ход. В качестве источника излучения использовали аппарат светодидный матричный терапевтический «ACT» (per. № ФСР2008/02720) «Гармония-Спектр» с излучением в диапазоне 400410 нм и 660 нм с мощностью излучения 400-500 МВт на выходе. Облучали в сканирующем режиме слизистую оболочку, расчеты дозы проводили по формуле. Сеансы проводили 1-2 раза в 7-10 дней, всего на курс лечения 2-5 процедур.

Результаты. По данным КТ, лабораторным и общеклиническим: у 7 пациентов (41,1 %) - полная ремиссия после лечения, у 8 (47,1 %) - значительное улучшение (санация по реультатам посева отделяемого, уменьшение кашля), у 2 (11,8 %) без эффекта (у данных пациентов выражено искривление носовой перегородки и гипертофия задних отделов нижних носовых раковин, требующее оперативного лечения

Выводы. ФДТ как современный метод лечения может использоваться в терапии пациентов с сочетанной ЛОР+бронхолегочной патологией. Возможности ФДТ могут расширяться, учитывая эффективность, неинва-зивность и доступность в применении.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 107

A.И. Лобаков1, Е.Ф. Странадко2, В.А. Морохотов1,

B.Б. Румянцев1, Ю.И. Захаров1, Г.Л. Сачечелашвили1, Ю.К. Богомазов1 ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ РАКА ВНЕПЕЧЁНОЧНЫХ ЖЕЛЧНЫХ ПРОТОКОВ И БДС

1ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Москва

2ФБГУ «ГНЦЛазерной медицин ФМБА Российской федерации», Москва

Актуальность. К моменту установления диагноза подавляющее число пациентов опухолью внепечёноч-ных желчных протоков (ВЖП) являются неоперабельными. Специфическое противоопухолевое лечение малоэффективно, что вынуждает искать альтернативные способы борьбы со злокачественными опухолями ВЖП.

Задачи исследования. Оценить эффективность применения фотодинамической терапии (ФДТ) опухолей внепечёночных желчных протоков в зависимости от, используемого фотосенсибилизатора (ФС) и кратности выполнения сеансов ФДТ.

Материалы и методы. В исследование включены 28 пациентов: мужчин было 8 (32,1 %), женщин 19 (67,9 %). Средний возраст пациентов составил 68,5 лет. Во всех случаях выявлена аденокарцинома различной степени дифференцировки. Рак БДС наблюдался у 20 (71,4 %) больных, рак холедоха у 3 (10,7 %), рак ворот печени у 1 (3,6 %) и рак желчного пузыря у 4 (14,3 %) пациентов. В качестве ФС использовались препараты двух групп: производные хлорина Е6 (фотодитазин и радахлорин) 17 (60,7 %) и фотосенс 11 (39,3 %). Для оценки эффективности ФДТ в зависимости от кратности выполнения сеансов больные были распределены на 2 группы: первую группу составили пациенты, которым выполнялся один сеанс ФДТ в течение года, таких пациентов было 14 (48,1 %), вторую группу составили пациенты, которым выполнялось 2 и более сеансов ФДТ в течение года 13 (59,1 %). Результаты лечения оценивались путём определения медианы дожития по методу Ка-план-Меера.

Результаты. Медиана времени дожития при использовании производных хлорина Е6 составила 17 мес.17 (ДИ-95 %: 12; 21); в случае использования фотосенса - 18 мес. (ДИ-95 %: 16; 19). Летальных исходов не отмечено. Статистически значимых различий при анализе осложнений в двух группах больных не было, однако наиболее тяжёлые осложнения в виде развития фибринозно-язвенного дуоденита и стеноза ДПК отмечались при использовании препарата фотосенс. В группе пациентов, которым выполнялся один сеанс ФДТ в течение года, медиана дожития составила 12,5 мес. (95 %ДИ: 10; 15), в группе больных которым, выполнялось 2 и более сеансов, медиана дожития составила 23 мес. (95 %ДИ: 18; 28).

Выводы. Производные хлорина Е6 сопоставимы по эффективности с фотосенсом, однако с учётом анализа развившихся осложнений, более предпочтительно использовать препараты производные хлорина Е6. Увеличение кратности выполнения сеансов ФДТ позволяет увеличить продолжительность жизни пациентов с неоперабельными опухолями ВЖП.

М.В. Лощеное, A.B. Бородкин, Д.А. Голъбин, П.В. Зеленкое, A.M. Паршунина, КГ. Линьков, A.A. Потапов КОМБИНИРОВАННАЯ ВИДЕО-СПЕКТРОСКОПИЧЕСКАЯ МЕТОДИКА ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ В ФОТОСЕНСИБИЛИЗИРОВАННЫХ НЕРВНЫХ ТКАНЯХ

Институт общей физики им. A.M. Прохорова Российской академии наук, Москва Институт нейрохирургии имени академика H.H. Бурденко, Москва

Задачи исследования. В настоящей работе исследовалось накопление фотосенсибилизатора в опухолях нервных тканей человека и возможность проведения интраоперационной навигации с применением новых видеодиагностических инструментов.

Материалы и методы. В исследовании применялся препарат Аласенс. Аппаратура включает себя флуоресцентную видеосистему для эндоскопов, флуоресцентную видеосистему для операционных микроскопов и волоконно-оптический спектрометр. Флуоресцентные видеосистемы построены на основе двух источников света и двух чувствительных видеокамер. В качестве источников света использовались лазер 635 нм и светодиодный источник белого света. Лазер служит для возбуждения флуоресценции АЛА-индуцированного протопор-фирина 9, в то время как светодиодный источник служит для осуществления навигации в привычном белом свете. Видеосистема снабжена интегрирующей точкой в середине экрана, которая указывает интенсивность флуоресценции, а при должной нормировке, и концентрацию фотосенсибилизатора.

Результаты и выводы. Аппаратура и метод были апробированы на пациентах с менингиомой, проросшей в полость носа, и атипичной невриномой, исходящей из спинномозговых корешков на двух уровнях шейного отдела спинного мозга. В обоих случаях флуоресцентная видеосистема продемонстрировала высокую чувствительность, а показания интегрирующей точки в рамках погрешности совпадали с показаниями, снимаемыми с волоконно-оптического спектрометра. В силу того, что флуоресцентная видеосистема возбуждает флуоресценцию протопорфирина 9, используя длину волны 635нм, что близко к окну прозрачности биологической ткани, система позволила зондировать ткань с некоторым заглублением и работать в условиях умеренного кровотечения, что затруднительно при использовании стандартной видеофлуоресцентной аппаратуры, возбуждающей флуоресценцию в синем диапазоне длин волн.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

108 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

М.Е. Мамаева1, A.B. Алясова1, В.В. Новиков2

СЫВОРОТОЧНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАСТВОРИМЫХ МОЛЕКУЛ HLA-I КЛАССА И HLA-DR У БОЛЬНЫХ МИОМАМИ

1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 2Нижегородский государственный университет, Нижний Новгород

Цель исследования. Проанализировать содержание растворимых молекул HLA-I класса (sHLA-I) и HLA-DR (sHLA-DR) в сыворотки крови больных миомами.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 53 больных миомами в возрасте 31-79 лет. Контрольная группа была представлена 45 женщинами, не страдающими гинекологической патологией, сопоставимыми по возрасту с обследованными больными. Диагноз заболевания во всех случаях был подтвержден гистологически путем патологоанатомического исследования послеоперационного материала. Определение уровня растворимых дифференцировочных молекул в сыворотке крови проводили двухбайтовым иммуноферментным методом. Для обработки результатов исследования использовался пакет статистических программ STATISTICA 6.0.

Результаты. Концентрация растворимых молекул HLA-I класса в сыворотке крови здоровых женщин составила 1012±214 U/ml, молекул HLA-DR - 99,5±18,4 U/ml. У больных миомами матки содержание sHLA-I молекул в 1,7 (1751,6±148,3 U/ml) и sHLA-DR в 2,0 раза (196,0±14,4 U/ml) статистически значимо превышало уровень этих белков в контрольной группе. В случаях появления 1 миоматозного узла наблюдалось возрастание (р<0,05) концентрации данных белков в 2,2 и 3,1 раза по сравнению с контролем. У больных с наличием 2-3 узлов содержание молекул sHLA-I в 1,7 раза было выше, чем у здоровых женщин (р<0,05), а содержание sHLA-DR молекул в сыворотке крови не отличалось от показателя в контрольной группе. У больных с преимущественно субсерозной локализацией новообразований наблюдался наиболее низкий уровень в сыворотке крови и молекул sHLA-I класса, и молекул sHLA-DR по сравнению с соответствующими показателями у пациентов с иной локализацией миоматозных узлов.

Таким образом, развитие миомы сопровождается достоверным увеличением сывороточных концентраций растворимых молекул HLA-I класса и HLA-DR. Изменения уровней этих белков взаимосвязаны с количеством миоматозных узлов и их локализацией. По-видимому, выявленные отклонения уровня белков являются одним из факторов, определяющих своеобразие клинического течения того или иного варианта заболевания, поскольку они выступают в роли эндогенных иммуномодуляторов, принимая непосредственное участие в реализации иммунного ответа, отличающегося у больных с различным числом и локализацией миоматозных узлов.

-1-1-2-

М.Е. Мамаева , A.B. Алясова , В.В. Новиков

СОДЕРЖАНИЕ РАСТВОРИМОГО CD95 АНТИГЕНА

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ТЕЛА МАТКИ

1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 2Нижегородский государственный университет, Нижний Новгород

Цель исследования. Проанализировать содержание растворимого CD95 (sCD95) антигена в сыворотке крови больных раком тела матки.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 65 больных раком тела матки в возрасте 31-79 лет. Контрольная группа была представлена 45 женщинами, не страдающими гинекологической патологией, сопоставимыми по возрасту с обследованными больными. Диагноз заболевания во всех случаях был подтвержден гистологически путем патологоанатомического исследования послеоперационного материала. Определение уровня растворимых дифференцировочных молекул в сыворотке крови проводили двухбайтовым иммуноферментным методом. Для обработки результатов исследования использовался пакет статистических программ STATISTICA 6.0.

Результаты. В контроле содержание sCD95 антигена равнялось 374,3±23,8 U/ml. У больных злокачественными опухолями тела матки сывороточный уровень белка составил 395,39±53,74 U/ml и достоверно не отличался от нормы. У больных аденокарциномами значение суммарной фракции sCD95 антигена в 1,5 раза превышало норму (р<0,05). У больных саркомами матки содержание sCD95 антигена не отличалось статистически значимо от нормы, но было меньше (р<0,05) в 1,9 раза, чем в предыдущей группе. При железисто-плоскоклеточных опухолях уровень белка не отличался от уровня в контроле и у больных аденокарциномами, но достоверно превышал значения данного показателя у больных саркомами матки в 1,3 раза. В случаях высо-кодифференцированных аденокарцином (ВДА), имеющих более благоприятное течение, уровень sCD95 антигена достоверно превышал норму в 1,9 раза, у больных умереннодифференцированными аденокарциномами (УА) - достоверно не отличался от нормы, но в 1,8 раза был ниже (р<0,05), чем в предыдущей группе. В случаях аденокарцином низкой степени дифференцировки, имеющих плохой прогноз, содержание данного белка не отличалось от нормы и значений этого показателя в группе больных УДА, но было значимо ниже, в 2,4 раза, чем у больных ВДА.

Выводы. Таким образом, развитие рака тела матки не сопровождается значимыми изменениями уровня растворимого CD95 в сыворотке крови, что может свидетельствовать о глубокой дисфункции иммунной системы у этой группы больных. Однако изменения концентрации данного белка взаимосвязаны с особенностями гистологического строения опухоли и степенью дифференцировки аденокарциномы.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... | 109

Ю.В. Маризина, Г. С. Неприна, Д.В. Кудрявцев, Н.В. Селиванова, Е.В. Абакушина ФЕНОТИП ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ МЕЛАНОМОЙ ПОСЛЕ ИММУНОТЕРАПИИ

ФГБУ Медицинский Радиологический Научный Центр Минздрава России, Обнинск

Задача исследования. Оценить еубпопуляционный состав лимфоцитов и экспрессию маркеров активации у больных меланомой после иммунотерапии лимфокин активированными клетками (ЛАК-терапии).

Материалы и методы. Оценен фенотип лимфоцитов периферической крови и маркеры активации (HLA-DR, CD38, CD69, CD314, CD25) у 13 больных меланомой до проведения иммунотерапии и у 9 пациентов через 2-4 недели после. Лимфоциты выделяли из периферической крови по стандартной методике на градиенте плотности и культивировали в течение 7 дней в С02 инкубаторе в среде с 250 МЕ/мл ИЛ-2. Фенотипирование окрашенных лимфоцитов проводили с помощью проточного цитофлуориметра FACScan (Becton Dickinson, США).

Результаты. Было обследовано 13 человек, пятерым проведено по 2 курса ЛАК-терапии, остальным - по 1 курсу. Все больные меланомой хорошо переносили биотерапию. У данной группы больных выявлено повышение содержания регуляторных Т-лимфоцитов (среднее 7,24 %)и CD25+ клеток (среднее 9,37 %). Относительное содержание активированных лимфоцитов HLA-DRall+ в среднем составило 18,64 %, CD314 - 39,9 %, CD38+ - 34 %, CD69+ - 11,63 %. Через 2-4 недели после биотерапии у всех больных достоверно снизился уровень В-лимфоцитов (р<0,05) и стал ниже границы нормы. Сохранилось повышенное содержание Treg и CD25+ клеток. Количество CD38+ и CD38+CD3+ клеток достоверно уменьшилось в среднем на 13 % и 11 % соответственно (p<0,05). Наблюдалась тенденция к увеличению числа активированных лимфоцитов экспрессирующих HLA-DR до 22,58 %, что превышает верхнюю границу нормы и CD69 лимфоцитов с 11,63 % до 16,39 %. Также незначительное увеличение численности субпопуляций активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+) с 10,64 до 13,75 % и NK-клеток (CD69+CD16+) с 3,86 % до 5,16 %. Экспрессия маркера апоптоза Fas (CD95+) на всех клетках и на Т-лимфоцитах (CD95 3 ) имеет тенденцию к снижению после иммунотерапии.

Выводы. Показано, что у пациентов с меланомой повышено содержание регуляторных Т-клеток и CD25 лимфоцитов. Через 2-4 недели после иммунотерапии данные показатели не изменились, но достоверно снизилось содержание В-лимфоцитов и активированных Т-лимфоцитов CD38+CD3+, возможно за счет незначительного увеличения NK-клеток.

-1-1-1-2-2-2-

Д.В. Маринич , Н.В. Гончарова , Т.Н. Глинская , Т.В.Шевчук , О.В.Дьяченко , Я.И. Бурьянов

МЕТИЛИРОВАНИЕ ГЕНА МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА УВ-1 ПРИ ЛЕЙКОЗАХ

1 ГУ Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий, Минск, Беларусь 2Филиал института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова, Пущино.

Задача исследования. Изучение функциональной взаимосвязи метилирования регуляторно-промоторной области гена множественной лекарственной устойчивости (МБЯ1), иммунофенотипической экспрессии белка pgp-170 в сопоставлении с экспрессией УВ-1-гена у больных с разными видами лейкемий.

Материалы и методы. Использовались методы краткосрочных культур клеток, иммунофенотипирова-ния, метилзависимая полимеразных цепей реакция (МЗ-ПЦР), обратнотранскриптазная полимеразных цепей реакция (ОТ-ПЦР), электрофорез ДНК в агарозе с последующим сканированием геля. В качестве исходного материала для выделения ДНК были использованы лейкоциты периферической крови и ядросодержащие клетки костного мозга больных острым миелобластным лейкозом (ОМЛ), острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), хроническим миелолейкозом и хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ). В качестве контроля использовались образцы ДНК периферической крови 10 здоровых доноров. Во всех случаях диагноз подтверждался морфологическими, цитохимическими методами и методом иммунофенотипирования.

Результаты исследований свидетельствуют о наличии корреляции между экспрессией УВ-1 гена и статусом метилирования МБЯ-1 гена у больных, находящихся в стадии прогрессирования заболевания; высокие показатели транскрипционной активности УВ-1-гена в большинстве случаев соответствуют низкому уровню метилирования регуляторно-промоторной области гена МБЯ1.

Выводы. В исследовании проанализирован характер корреляции метилирования 5'-промоторной области гена МБЯ-1 в норме и при лейкозах и экспрессией нового маркера - гена УВ-1. Как известно, ген МБЯ-1 во многом определяет эффективность химиотерапии онкогематологических заболеваний, а деметилирование ДНК в его регуляторно-промоторной области, как правило, коррелирует с экспрессией гена. Фактором, потенцирующим транскрипционную активность МБЯ1 в ядре клетки, является У-бокс белок. Если такая связь действительно является устойчивой, то феномен УВ-1/МБЯ1-ассоциации станет еще одним шагом на пути создания эпигенетической панели маркеров прогрессирования течения лейкемической болезни, детекции минимальной остаточной болезни и рационализации терапии онкогематологических заболеваний.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

110 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

О.В. Матвеева1, Л.Ф. Жандарова2, С.П. Бажанов1, В.В. Островский1 ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ОПУХОЛЕЙ СПИННОГО МОЗГА 1ФГБУ «СарНИИТО травматологии и ортопедии» МЗ РФ, Саратов 2ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» МЗ РФ, Саратов Актуальность. Опухоли спинного мозга и позвоночника встречаются в 8-10 раз реже опухолей головного мозга. Они составляют 12-15 % всех новообразований центральной нервной системы. Частота встречаемости опухолей спинного мозга - 1-2 случая на 100 000 человек в год. У пациентов данной категории значительно страдает качество жизни из-за болевого синдрома, нестабильности в позвоночно-двигательных сегментах и возникающего неврологического дефицита. Цель исследования. Оценить возможности цитологического и гистологического методов исследований в диагностике опухолей спинного мозга. Материалы и методы. В отделении лабораторной диагностики «СарНИИТО» за период 2009-2013 гг. были изучены препараты у 38 (81 %) больных с первичными опухолями и 9 (19 %) пациентов с вторичными опухолями спинного мозга в возрасте от 25 до 79 лет. Среди больных преобладали женщины (83 %). Результаты. По локализации новообразования больные распределились следующим образом: на шейном уровне их выявлено - 24 %, на грудном - 45 % и пояснично-крестцовом - 31 %. Экстрамедуллярные опухоли спинного мозга локализовались на шейном уровне чаще на уровне С4, на грудном уровне - Th6-11 и по-яснично-крестцовом отделе чаще на уровне L2-5. Метастазы выявлены на пояснично-крестцовом уровне - 56 % пациентов, на грудном - 33 %, на шейном - 11 %. При гистологическом исследовании первичных опухолей спинного мозга неврилеммома верифицирована у 18 (47 %) больных, преобладал вариант с наличием телец Ве-рокаи; менингиома диагностирована у 15 (39 %) пациентов, преобладал псаммоматозный вариант; нейрофиб-рома у 3 (8 %), эпендимома - у 2 (5 %) человек. Среди больных с вторичными опухолями спинного мозга у женщин чаще диагностировали метастаз рака из молочной железы, у мужчин - метастаз рака из легкого. Во всех случаях применен интраоперационный цитологический метод исследования операционного материала. Расхождений между цитологическим и гистологическим исследованиями не выявлено. Выводы. Таким образом, морфологическое исследование является эффективным методом в диагностике опухолей спинного мозга и позвоночника. Проведенный анализ позволил установить особенности локализации и распространения опухолей спинного мозга и позвоночника соответственно.

И.Г. Меерович, Н.И. Казачкина, А.П. Савицкий ИЗУЧЕНИЕ ПРОЯВЛЕНИИ ФОТОИММУННОГО ОТКЛИКА ПРИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ФГБУНИнститут биохимии им.А.Н. Баха РАН, Москва Задачи исследования. Изучение влияния ФДТ на рост первичных и вторичных очагов мышиных опухолей и изучение экспрессии белка теплового шока HSP70 в результате ФДТ для оценки его влияния на развитие иммунного ответа. Материалы и методы. ФДТ проводили с использованием метилового эфира О-этилоксим-N-этоксибактериопурпуринимида в мицеллярной форме (МИТХТ им. М.В.Ломоносова) (внутривенное введение в дозе 1 мг/кг веса тела, облучение - 15 минут, плотность мощности 150 мВт/см2), и индоцианинового зеленого (ICG, «Cardiogreen», Sigma), (облучение - 15 минут, плотность мощности 500 мВт/см2. Для облучения использовался лазер MRL-III-800nm («Микрохоло», Россия). В качестве иммуноадьювантов использовались полный адьювант Фоейнда (ИАФ) и растворимое производное полимера на основе хитозана (Marine Polymer Technologies, США). В экспериментах использовались мыши линии C57BL/6 (ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН). Результаты и выводы. На модельных опухолях Льюиса показано, что при внутриопухолевом введении ICG в сочетании с производным хитозана (0,1 мл 0,5% раствора) с последующим через 75 мин облучением опухоли торможение роста опухоли (ТРО) для этой группы составило около 80 % на 6 день и 98-100 % с 9 по 20 день после ФДТ. В группе, где производное хитозана не вводили, ТРО после облучения увеличивалось до 9 дня и составило 71 %, а затем уменьшалось до 27 % к 20 дню после ФДТ. При внутривенном введении ICG (5 мг/кг веса тела), с последующим через 60 мин облучением, ТРО в обеих группах к 15 дню после облучения составляло 53 %, затем увеличивалось в группе, подвергавшейся сочетанному воздействию, и уменьшалось в группе, подвергавшейся только ФДТ. При локальном введении ICG после ФДТ содержание HSP70 достигало максимума через 4 часа после облучения, затем снижалось; содержание же HSP70 в печени возрастало к 24 часам после облучения. Сочетанное действие ФДТ с производным пурпуринимида и ИАФ более эффективно влияло на рост легочных метастазов мышиной меланомы B16, чем только ФДТ: количество легочных метастазов составляло соответственно 42 % и 64,5 % по сравнению с группой, не подвергавшейся никакому воздействию. Работа проводилась при поддержке программы Президиума РАН "Фундаментальные науки — медицине" и частично гранта РФФИ № 14-02-0934.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

И.Б. Меркулова, Т.В. Абрамова, Н.Ю. Кулъбачевская,

О.И. Коняева, Н.П. Ермакова, А.С.Кузнецова, В.М. Бухман

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ КРЫС

ПРИ 3-КРАТНОМ ВНУТРИВЕННОМ ПРИМЕНЕНИИ

ОТЕЧЕСТВЕННОГО ВОСПРОИЗВЕДЕННОГО ОКСАЛИПЛАТИНА

И ОКСАЛИПЛАТИНА ФИРМЫ ТЕВА

ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Цель исследования. Сравнительная патоморфологичеекая оценка внутренних органов крыс на 1 и 30 сутки после 3-кратного ежедневного внутривенного применения оксалиплатина воспроизведенного (ОП-В) и оксалиплатина фирмы Тева (ОП-Тева) на этапе доклинического изучения.

Материалы и методы. Использовано 70 неинбредных крыс-самцов, по 10 крыс в группе. ОП-В и ОП-Тева крысам вводили в разовых дозах 2,7; 5,4; 8,0 мг/кг, и, соответственно, в суммарных дозах - 8,0; 16,0 и 24,0 мг/кг. Крыс умерщвляли диэтиловым эфиром на 1 и 30 сутки после прекращения введений. На вскрытии были взяты участки внутренних органов, которые подвергали общепринятой гистологической обработке с окраской гематоксилином и эозином. Микропрепараты анализировали в световом микроскопе при увеличениях 100, 400,

Результаты и выводы. На 1 сутки после окончания внутривенного введения ОП-В и ОП-Тева отмечена четкая дозозависимая гипоплазия гемопоэтических клеток в костном мозге, гипоплазия лимфоцитов в тимусе, лимфатических узлах у большинства крыс, и в селезенке у отдельных крыс, причем обратимость гипоплазии к 30 суткам в этих органах была также дозозависимой. ОП-В и ОП-Тева в суммарных дозах 8, 16 и 24 мг/кг вызывали идентичные дозозависимые несильно выраженные деструктивные и дистрофические изменения в почках и семенниках крыс, деструктивно-воспалительные изменения в тонком кишечнике животных. Хотя оба изучаемых препарата показали сходный характер морфологических изменений и их обратимость во внутренних органах, имелись некоторые отличия в действии Оп-В и ОП-Тева на внутренние органы крыс. Так, на 1 сутки после применения ОП-Тева в дозе 24 мг/кг в отличие от ОП-В, у части крыс отмечены дистрофические изменения в печени, а на 30 сутки после применения ОП-В в почках некоторых крыс сохранялись несильно выраженные дистрофические и деструктивные изменения. На 30 сутки после применения ОП-В в суммарной дозе 16 мг/кг в отличие от ОП-Тева у животных были обнаружены дистрофические изменения в сердце (миокард) и сохранялись признаки гипоплазии в костном мозге у большинства крыс. Так несильно выраженные деструктивные и дистрофические изменения в почках к 30 суткам после применения ОП-Тева в дозе 8 мг/кг полностью исчезали, а у отдельных крыс после применения ОП-В в той же дозе еще сохранялись.

И.Б. Меркулова, Т.В. Абрамова, О.И. Коняева, Н.П. Ермакова, Н.Ю. Кулъбачевская, A.C. Кузнецова, В.М. Бухман

ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ КНОТОЛАНА В ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ НА ВНУТРЕННИЕ ОРГАНЫ КРЫС В ОПЫТЕ ПО ИЗУЧЕНИЮ «ХРОНИЧЕСКОЙ» ТОКСИЧНОСТИ

ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Цель исследования. Патоморфологичеекая оценка внутренних органов крыс на 3 и 30 сутки после 30-кратного перорального применения препарата кнотолан в лекарственной форме на этапе доклинического изучения безопасности его применения.

Задачи исследования. Макроскопическая и гистологическая оценка внутренних органов крыс на 3 и 30 сутки после 30-кратного ежедневного перорального применения кнотолана в лекарственной форме в суммарных дозах 37500 мг/кг и 75000 мг/кг.

Материалы и методы исследования. Для патоморфологического исследования использовано 30 неинбредных крыс-самцов, разделенных на 3 группы по 10 крыс в каждой. Крысы 1-й и 2-й групп в течение 30 дней ежедневно перорально получали кнотолан в лекарственной форме в виде 15% раствора в 1% крахмальном клейстере в разовых дозах 1250 и 2500 мг/кг и, соответственно, в суммарных дозах 37500 и 75000 мг/кг. В 3-й группе крысы получали 1% крахмальный клейстер тем же способом и в том же режиме по максимальному объему (контроль). Крыс (по 5 из группы) умерщвляли методом усыпления диэтиловым эфиром на 3 и 30 после окончания применения кнотолана. На вскрытии были взяты участки внутренних органов, которые подвергали общепринятой гистологической обработке с окраской гематоксилином и эозином. Микропрепараты анализировали в световом микроскопе при увеличениях 100, 400, 1000.

Результаты. Кнотолан в лекарственной форме при ежедневном пероральном применении в течение 30 дней в суммарной дозе 37500 мг/кг не вызывал макроскопические и гистологические изменения во внутренних органах крыс как на 3 так и на 30 сутки после окончания его применения. Кнотолан в суммарной дозе 75000 мг/кг вызывал воспалительные и дистрофические (ишемия) изменения в сердце (в миокарде) некоторых крыс как на 3, так и на 30 сутки после окончания его применения. Кнотолан в суммарной дозе 75000 мг/кг вызывал несильно выраженные очаговые дистрофические изменения в печени, почках и семенниках у отдельных крыс на 3 сутки после окончания его применения, которые были обратимы к 30 суткам. При применении кнотолана в лекарственной форме выявлена дозовая зависимость морфологических изменений.

Выводы. Кнотолан в лекарственной форме в суммарной дозе 75000 при 30-дневном пероральном применении может вызывать у некоторых крыс несильно выраженные обратимые изменения в печени, почках и семенниках, а у отдельных крыс может вызывать не полностью обратимые к 30 суткам изменения в сердце. Кнотолан в суммарной дозе 37500 мг/кг в том же режиме не влияет на внутренние органы крыс.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

1000

Ф

Ф

112 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

B.O. Мирончик1, Т.Л. Юркштович1, Н.К. Юркштович1, В.А. Алиновская1, Д.П. Веевник2, A.C. Федулов3, П.М. Бычковский1, Д.А. Адамчик1 ПОЛУЧЕНИЕ НОВОЙ ПРОЛОНГИРОВАННОЙ ФОРМЫ ТЕМОЗОЛОМИДА 1 Научно-исследовательский институт физико-химических проблем, Минск; Беларусь 2Городская клиническая больница скорой медицинской помощи, Минск, Беларусь 3Белорусский государственный медицинский университет, Минск, Беларусь Цель исследования. Разработка пролонгированной формы противоопухолевого вещества темозоломида, предназначенной комбинированного лечения первично-мозговых и метастатических опухолей головного мозга. Материалы и методы. Темозоломид - один из наиболее эффективных препаратов при лечении злокачественных новообразований головного мозга. Для создания системы адресной доставки цитостатика вместо локализации опухоли или ее остатков синтезирован препарат, представляющий собой темозоломид, иммобилизованный на биодеградируемые гелеобразующие фосфаты декстрана (ФД), которые биосовместимы с организмом, способны создавать эффект «перегрузки» лекарственным веществом и обладают собственной противоопухолевой активностью. Исследована сорбционная способность синтезированных путем этерификации декстрана со среднемассовой молекулярной массой 60 кДа в системе BU3PO4-H3PO4-P2O5 гидрогелей ФД с разной степенью сшивки по отношению к темозоломиду в зависимости от концентрации цитостатика в водных растворах, pH и времени сорбционного процесса. Проведено клиническое испытание на пациентах с первично-мозговыми опухолями головного мозга. Результаты. Послеоперационный период, при однократном введении препарата Темодекс интраопераци-онно после завершения основного этапа нейрохирургической операции, у всех включенных в испытание пациентов протекал удовлетворительно. На 10-й день после хирургической операции и имплантации Темодекса на МРТ головного мозга видно присутствие препарата в головном мозге. При этом никаких побочных эффектов или нежелательных проявлений в этот период не наблюдалось. Через 3 месяца после хирургической операции на МРТ головного мозга пациентов препарат не обнаруживается, что свидетельствует о его полном рассасывании. Выводы. Полученные данные свидетельствуют об удовлетворительной переносимости и безопасности применения препарата Темодекс в качестве средства локальной химиотерапии злокачественных опухолей головного мозга. Более того не выявлено прогрессирования злокачественного процесса у основной части пациентов.

В.А. Мисюрин , А.Е. Лукина , A.B. Мисюрин ' , Л.А. Кесаева ' , E.H. Мисюрина , Ю.П. Финашутина ' , И.Н. Солдатова ' , A.A. Крутое ' , В.В. Тихонова ' , А.Ю. Барышников . УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRAME - НОВЫЙ ПРОГНОСТИЧЕСКИЙ ФАКТОР ОСТРОГО ПРОМИЕЛОЦИТАРНОГО ЛЕЙКОЗА 1ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина», Москва 2ФГБУ Гематологический научный иентр МЗ РФ, Москва 3Медицинский центр ООО «ГеноТехнология», Москва Актуальность. Для острого промиелоцитарного лейкоза (ОПЛ) во многих случаях характерна экспрессия раково-тестикулярного гена (РТГ) PRAME в дебюте заболевания. Известно, что при многих онкологических заболеваниях, экспрессия этого гена указывает на неблагоприятный прогноз, однако в случае ОПЛ эти данные неполны. Задачи исследования. Оценить влияние ко-экспрессии РТГ PRAME и транскриптов гена PML/RARa bcrl и bcr3 в дебюте ОПЛ на время развития рецидива. Материалы и методы. Был определён уровень экспрессии РТГ PRAME и типов bcrl и bcr3 гена PML/RARa в клетках костного мозга 32 первичных больных ОПЛ в дебюте заболевания. Для определения уровня экспрессии использовался метод RQ-PCR. У каждого больного уровень экспрессии генов PRAME и PML/RARa рассчитывался относительно гена Abl. Уровень экспрессии РТГ PRAME относительно PML/RARa считался низким, если при делении показателя уровня экспрессии гена PRAME на показатель уровня экспрессии PML/RARa результат был меньше 0,05, и высоким, если этот результат превышал 0,05. Лечение всех больных производилось по протоколу AIDA. В течение 18 месяцев с момента постановки диагноза фиксировалось время развития рецидива. Результаты. У 53 % (17/32) больных наблюдался тип bcrl гена PML/RARa. Из этой группы у 4 больных наблюдался относительно низкий уровень экспрессии гена PRAME. У 13 больных, имеющих тип транскрипта bcrl PML/RARa, соотношение уровней экспрессии РТГ PRAME было высоким. Экспрессия гена PML/RARa (типа транскрипта bcr3) наблюдалось у 47% (15/32) больных в дебюте ОПЛ. Из них у 5 больных уровень экспрессии гена PRAME относительно PML/RARa был высоким, а у 8 больных - низким. За 18 месяцев наблюдения у 1 из 13 больных, экспрессирующих тип bcr1 и у 4 из 8 больных, экспрессирующих тип bcr3 гена PML/RARa развился гематологический рецидив ОПЛ. У всех больных с рецидивом (16% от общего числа) в дебюте ОПЛ наблюдался низкий уровень экспрессии гена PRAME. У всех остальных больных (84%) не отмечено ни гематологического, ни молекулярного рецидива заболевания. Выводы. Низкий уровень экспрессии гена PRAME при типе bcr3 гена PML/RARa в дебюте ОПЛ является неблагоприятным прогностическим фактором.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 113

Л.Ф. Морозова1, Н.М. Сураева1, A.B. Самойлов2, О. С. Бурова1,

В.А. Голубева , И.Н. Михайлова1, А.Ю. Барышников1

ПОЛУЧЕНИЕ МЕЛАНОМНОЙ СУБЛИНИИ ЧЕЛОВЕКА MEL IBR

КАК МОДЕЛИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ТЕРАПИИ

1ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

2ВНИИ консервной и овощесушилъной промышленности Росселъхозакадемии, Москва

Актуальность. Создание клеточных моделей для изучения резистентности опухолевых клеток, устойчивых к лекарственной терапии, имеет важное практическое значение. Было показано, что эмбриональные факторы могут индуцировать изменения эпигенетических, пролиферативных, фенотипических и туморогенных характеристик определенных популяций опухолевых клеток в культуре клеточных линий.

Задача исследования. Изучение морфологических и иммунологических характеристик субпопуляций клеток меланомной линии человека Mel Ibr, выделенных при воздействии куриного эмбрионального экстракта (ЭЭ).

Материалы и методы. Метод образования колоний был использован для выделения популяций мела-номных клеток человека после добавления куриного ЭЭ. Затем проведен отбор клонов меланомных клеток человека, их культивирование в среде RPMI-1640 с добавками в течение не менее 30 пассажей с последующим замораживанием. Оценка характеристик популяций клеток проводили с помощью морфологических и иммуно-химичеких методов исследования.

Результаты. Меланомная культура Mel Ibr представлена монослоем, состоящим преимущественно из клеток эпителиоподобного вида с небольшим количеством от 0,5 до 1 % веретеновидных клеток. Было показано, что в результате воздействия ЭЭ, наблюдалась почти 100 % гибель клеток эпителиоподобного вида и определялся только один тип колоний, состоящих из веретеновидных клеток. Выделенный субклон из веретеновидных клеток заметно отличался от исходной культуры Mel Ib интенсивностью роста и способностью к образованию сфероидов. В культуре веретеновидных клеток на 10-12 пассажах культивирования наблюдалось резкое уменьшение HLA-DR-положительных клеток, уменьшение процента CD-54-положительных клеток с молекулами адгезии и значительное увеличение CD-63-положительных клеток с меланоцитарным антигеном по сравнению с исходной линией.

Выводы. Субпопуляция клеток, образующая сфероиды, отличалась от исходной культуры Mel Ibr по морфологическим и иммунологическим параметрам. Полученная субпопуляция может быть использована в качестве модели для изучения воздействия экзогенных факторов на опухолевые клетки в сравнении с исходной линией Mel Ibr.

Н.Б. Морозова , Т.Н. Андреева , Т.А. Кармакова , H.A. Рубцова ,

12 2 2 3 3

Р.И. Якубовская , М.В. Гуляев , Н.В. Анисимов , Ю.А. Пирогов , Е.А. Лукъянец , Е.А. Макарова ОЦЕНКА ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ С ТОЗИЛЬНЫМ ПРОИЗВОДНЫМ БАКТЕРИОХЛОРИНА ТРАДИЦИОННЫМИ МЕТОДАМИ

И МЕТОДОМ МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ (МРТ) В СИСТЕМЕ IN VIVO

1ФГБУ «МНИОИим. П.А. Герцена» Минздрава РФ, Москва 2МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва 3ФГУПГНЦ «НИОПИК» Москва

Задача исследования. Оценка противоопухолевой и антиметастатической активности ФДТ с тозильным производным бактериохлорина - (3-PyMeOTs)4BC (^max=760 нм) у мышей с саркомой S37 традиционными методами и методом МРТ.

Материалы и методы. В работе использовали мышей гибридов BDF1 с привитой саркомой S37 в 100% метастазирующей в лимфатические узлы (ЛУ). (3-PyMeOTs)4BC вводили внутривенно в дозе 5,0 мг/кг на 7-ой день роста опухоли. Облучение проводили через 30 минут после введения светодиодным источником красного света с максимумом 759+18 нм (Ps=100 мВт/см2, Ws=l50 Дж/см2). МРТ-исследования проводили на биоспек-тротомографе BioSpec 70/30 USR фирмы Bruker (Германия) с постоянным магнитным полем 7 Тл. Состояние первичной опухоли, паховых, подмышечных и внутрибрюшинных ЛУ оценивали на 5, 12, 19 и 26 сутки роста опухоли. Т1-взвешенные изображения получали с использованием импульсной последовательности MSME (Multi Spin Multi Echo). Наличие или отсутствие метастатического поражения лимфоузлов подтверждали морфологически. Эффективность ФДТ оценивали, используя общепринятые в экспериментальной онкологии критерии и метод МРТ.

Результаты. Показано, что (3-PyMeOTs)4BC обладает высокой фотоиндуцированной противоопухолевой и антиметастатической активностью при оценке традиционными методами: ТРО - 90-100 %, УПЖ - 189%, КИ - 67%, 4M - 34%, HTM - 95%. Метод МРТ с морфологическим подтверждением поражения ЛУ дает полную картину развития опухолевого процесса у мышей с саркомой S37 после лечения методом ФДТ в динамике прижизненно. Анализ результатов позволяет зафиксировать для ФДТ с (3-PyMeOTs)4BC выраженную эффективность: первичная опухоль подвергается полной резорбции; регионарный ЛУ, в котором на 5 сутки выявлялись опухолевые клетки, постепенно уменьшается в размерах и на 26 сутки метастазы в нем уже не регистрируются. Остальные ЛУ остаются интактными. У контрольных животных развивается картина распространенного опухолевого процесса, включающая рост первичной опухоли, увеличение в размерах всех групп лимфоузлов и их поражение метастазами.

Выводы. Производное бактериохлорина (3-PyMeOTs)4BC обладает высокой фотоиндуцированной противоопухолевой и антиметастатической активностью. Метод МРТ позволяет наглядно прижизненно оценить динамику роста первичной опухоли и развитие метастатического поражения лимфоузлов в динамике и на минимальном количестве животных получить объективную картину проведенного лечения.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

114 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

И. И. Мусин, Т.Д. Ерошкина, Р. С. Муджаева, Э.А. Хачатурова

ВЛИЯНИЕ НЕОАДЬЮВАНТНОЙ ХИМИОЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ

НА СОСТОЯНИЕ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ

ФГБУ «ГНЦКолопроктологии» Минздрава России, Москва

Задачи исследования. Изучить изменения углеводного обмена у больных раком прямой кишки после неоадьювантной химиолучевой терапии до, и после операции для отработки методов коррекции.

Материалы и методы. Обследованы две группы больных, оперированных по поводу рака прямой кишки: 1 группа (27 чел.) после неоадьювантной химиолучевой терапии (НХЛТ) и 2 группа (23 чел), которые не были подвержены влиянию НХЛТ, так называемая контрольная группа. Определялись показатели глюкозы, панкреатической и альфы амилаз, гликозилированного гемоглобина, а так же уровень лактата в сыворотке крови до операции и в раннем послеоперационном периоде.

Результаты. До операции в обеих обследованных нами группах больных было выявлено увеличение лактата выше физиологической нормы (соответственно в 1-й группе 4,5±0,4 ммоль/л, р<0,01, а во 2-й гр. -3,1±0,2 ммоль/л, р<0,05 при норме до 2,2 ммоль/л). Гликозилированный гемоглобин превышал физиологическую норму до операции в группе с НХЛТ (7,0±0,6 %, р<0,05; норма до 6,0 %). Остальные изучаемые нами показатели (глюкоза, панкреатическая и альфа амилазы) практически не отличались от физиологической нормы. В раннем после операционном периоде в обеих группах больных в равной мере увеличилась концентрация глюкозы крови (в 2-2,5 раза), альфы амилазы (в 1,5 раза) гликозилированного гемоглобина (на 20 %) и лактата (на 25 %) по сравнению с исходным уровнем.

Выводы. Между группами с НХЛТ и без нее нами выявлены значительные различия изменений уровней лактата и гликозилированного гемоглобина уже до операции. После операции в ответ на операционную травму выявлены еще большие, чем до операции увеличения концентраций глюкозы, лактата и гликозилированного гемоглобина с наиболее выраженным эффектом у больных с неоадьювантной химиолучевой терапией. Выявленный высокий уровень лактата и повышенный уровень гликозилированного гемоглобина у больных с НХЛТ целесообразно учитывать при коррекции предоперационной подготовки онкологических больных после неоадьювантной химиолучевой терапии.

-1-1-2-

Л.Н. Николаевич , И.В. Залуцкий , С.М. Адекенов

ИЗУЧЕНИЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА «АРГЛАБИН» НА ГЛИАЛЬНЫЕ ОПУХОЛИ 1 Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси, Минск, Беларусь 2Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия», Караганда, Казахстан

Актуальность. Проблема онкологических заболеваний продолжает оставаться наиболее трудной областью медицины. Поиск эффективных методов и средств борьбы с онкологическими заболеваниями остается первоочередной задачей медицинской науки. Особенно, это касается опухолей головного мозга, которые составляют 50-55 % всех первичных опухолей. Наиболее эффективными в отношении глиом признаны цитоста-тики темозоломид, тиотеп, кармустин, гемцитабин. Актуальным является использование препаратов растительного происхождения, в частности, оригинального противоопухолевого препарата «Арглабин», разработанного на основе одноименного сесквитерпенового у-лактона из эндемичного вида растения - полынь гладкая (Artemisia glabella Kar. et Kir.).

Задачи исследования. Оценить эффекты воздействия препарата «Арглабин» на клеточные клоны гли-альных опухолей и провести скрининг доз данного препарата на модели гетерогенной популяции опухолевых глиальных клеток in vitro.

Материалы и методы. Работа выполнена на перевиваемой линии клеток глиомы крысы С6. Методом клонирования гетерогенная популяция глиальных клеток была разделена на две фракции клеток: клоногенные (образующие колонии, состоящие из дочерних клеток) и неклоногенные (не способные формировать колонии).

Результаты. При введении препарата «Арглабин» в дозах 140 мкг/мл и 300 мкг/мл в популяцию опухолевых клеток С6 достоверно подавляется пролиферация глиальных клеток (на 74 % и 55 % соответственно) по сравнению с контролем. Наблюдается достоверное увеличение доли погибших клеток после воздействия препарата «Арглабин» в дозах 140 мкг/мл (в 12 раз) и 300 мкг/мл (в 7 раз) и снижается число генераций клеток в популяции на 48 % и 96 % соответственно по сравнению с контролем. Подобран спектр доз препарата «Арглабин» (2,5 мкг/мл; 1 мкг/мл; 0, 25 мкг/мл; 0,2 мг/мл; 2мг/мл; 20 мг/мл), ингибирующих пролиферацию клоноген-ных клеток в клонах. Цитостатический эффект подавления пролиферации клоногенных клеток в клонах при воздействии арглабина в дозе 2,5 мкг/мл сохраняется при реклонировании этих клонов.

Выводы. Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что глиальные опухолевые клетки чувствительны к воздействию препарата «Арглабин».

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 115

-1-1-з-з-

Д. В. Новиков , C.B. Шумилова , A.B. Алясова , Е.Ю. Конторщикова ,

A.B. Калугин , А.Ю. Барышников2, В.В. Новиков1 ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ

ДИФФЕРЕНЦИРОВОЧНЫХ МОЛЕКУЛ В КЛЕТКАХ ОПУХОЛЕЙ

1 Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

3Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород

Задачи исследования. Иммунная система играет важную роль в развитии опухолей. Изменения первичной структуры и экспрессии сигнальных генов иммунной системы в опухолевой клетке может содействовать росту опухоли. Задачей настоящей работы явилось исследование нуклеотидной последовательности и особенностей экспрессии генов, опосредующих пролиферацию (IL-2Ra), адгезию (ICAM1), апоптоз (Fas) в клетках опухолей различной локализации.

Материалы и методы. Исследовали образцы опухолей и периферической крови больных раком толстой кишки (РТК), легких (РЛ), молочной железы (РМЖ) и эндометрия (РЭ). Выделение нуклеиновых кислот проводили с использованием смеси фенола с хлороформом. Генотипирование образцов проводили методом ПЦР. Детекцию мРНК - методом ОТ-ПЦР. Первичную структуру фрагментов ПЦР определяли по Сенгеру.

Результаты и выводы. В образцах опухолей толстой кишки и молочной железы регистрировались изменения первичной структуры гена ICAM1, вызванные потерей гетерозиготности. Обнаружены мутации гена Fas в образцах опухолей толстой кишки, приводящие к изменению аминокислотной последовательности белка. Генетические изменения детектировались преимущественно на поздних стадиях заболевания. При исследовании экспрессии генов установлено, что мРНК IL-2Ra детектировалась в 98% (48/49) образцов РТК, 82% (28/34) образцов РЛ, 73% (29/40) образцов РЭ. МРНК ICAM1 была выявлена в 84 % (41/49) образцов РТК, 53% (17/32) образцов РЛ и 86% (35/40) образцов РЭ. Экспрессия гена Fas выявлена в 100%, 73% и 100% образцов опухолей РТК, РЛ и РЭ, соответственно. Отсутствие исследуемых мРНК в части образцов опухолей, вероятно, связано с молчанием генов. В некоторых образцах опухолей легких и эндометрия были обнаружены только альтернативные мРНК Fas или IL-2Ra, без мРНК кодирующих полноценный белок. Альтернативные мРНК ICAM1 и IL-2Ra детектировались в опухолях преимущественно вместе с маркерами благоприятного прогноза, у больных РТК и РЛ. Полученные данные могут быть использованы в мониторинге РТК, РЛ и РЭ.

Работа выполнена в рамках базовой части государственного задания №2014/134 Минобрнауки России (проект 2575).

В.В. Носков, Е.А. Дудко, Р.Ю. Раманускайте, Н.О. Вихлянцева, К.К. Лактионов, Т.А. Богуш СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЭКСПРЕССИИ MRP2 В ТКАНИ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ЛЕГКОГО С ПРИМЕНЕНИЕ ДВУХ КЛОНОВ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Гиперэкспрессия транспортного белка MRP2 является одной из причин и маркёром резистентности к препаратам платины.

Цель исследования. Определение уровня и частоты экспрессии MRP2 в клетках НМРЛ, используя два различных клона антител, для выбора более информативного варианта анализа.

Материалы и методы. Исследованы суспензии клеток, полученные из хирургического биопсийного материала 47 пациентов, оперированных по поводу немелкоклеточного рака лёгкого (НМРЛ). Иммунофлуорес-центный анализ проводили методом проточной цитофлюориметрии с применением программы FlowJo и статического подхода Колмогорова-Смирнова. Использовали: моноклональные антитела к MRP2 - клон «1» и «2» (M2 II-12, ab24106 и M2 III-6, ab3373); изотипические антитела - IgG2a (Abcam) и вторичные антитела, меченные FITC, к мышиному IgG2a (Sigma).

Результаты. Частота экспрессии MRP2 (количество клеток, экспрессирующих MRP2 в исследуемой опухоли), варьировала у разных больных от 4 до 80 %. Средний показатель составил для клона «1» 19,7±10,2 %, для клона «2» - 30,9±17,2%. Интенсивность экспрессии MRP2 (превышение специфической флуоресценции клеток по сравнению с изотипическим контролем) варьировала в опухолях разных больных от 1,1 до 8,3 раз. Средний показатель превышения составил 1,6±0,4 для клона «1» и 3,3±2,1 для клона «2». При использовании клона «1» и «2» опухоли с низкой частотой экспрессии MRP2 (экспрессия маркёра менее чем в 30 % клеток) выявлены в 80,9 и 57,4% , с умеренной (в 30-50 % клеток) - у 19,1 и 31,9 % пациентов соответственно. Высокая частота экспрессии маркёра (более чем в 50 % клеток) отмечена в 10,6 % опухолей только при использовании клона «2». Опухоли с низкой интенсивностью экспрессии MRP2 (превышение специфической флуоресценции клеток по сравнению с изотипическим контролем менее чем в 2 раза) выявлены соответственно: в 83,0 и 38,3 %, а с высокой - в 17,0 и 61,7 % случаев.

Выводы. Для оценки экспрессии MRP2 в ткани НМРЛ предпочтительным следует признать использование специфических моноклональных антител M2 III-6, ab3373.

Исследование поддержано грантами РФФИ (№ 13-04-01004-a, 12-04-00028-a, 14-04-31734-мол-а) и стипендией Президента РФ (СП-376.2012.4).

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

116 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

M.B. Hvpeee1, T.A. Богуш2, A.A. Каменский1, Б.Е. Полоцкий2, С.А. Тюляндин2, М.И. Давыдов2 ЭКСПРЕССИЯ PGRMC1 (МЕМБРАННЫЙ КОМПОНЕНТ ПРОГЕСТЕРОНОВОГО РЕЦЕПТОРА 1) В ТКАНИ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ЛЕГКОГО КУРЯЩИХ ПАЦИЕНТОВ МУЖСКОГО ПОЛА 1МГУ имени М. В. Ломоносова, Москва 2ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва Задачи исследования. В химиотерапии немелкоклеточного рака лёгкого (НМРЛ) первостепенное значение занимают платиносодержащие препараты, но многие больные оказываются резистентными к терапии. Недавние исследования in vitro показали, что одной из причин этого может быть экспрессия PGRMC1. Чтобы оценить роль этого белка в реализации специфической активности препаратов платины при лечении НМРЛ, исследованы параметры экспрессии этого маркёра в ткани НМРЛ. Материалы и методы. Проведён иммунофлуоресцентный анализ с использованием проточной цитоф-луориметрии 60 образцов НМРЛ курящих мужчин (40 - аденокарцинома, 20 - плоскоклеточный рак). Первичные антитела к PGRMC1 (ab88381,Abcam), вторичные антитела к кроличьему IgG (FITC, ab6108,Abcam). Уровень экспрессии оценивали с помощью теста Колмогорова-Смирнова (программа FlowJo). Индексы экспрессии: высокий уровень - PGRMC1 отмечен в 20-50 % клеток, низкий - меньше чем в 20 % клеток. Результаты. Экспрессия PGRMC1 выявлена в 70 % исследованных образцов. Высокий уровень (29,9±8,1 %) отмечен в 36 % опухолей, 67 % из которых составили аденокарциномы. Низкий уровень экспрессии PGRMC1 (14,8±2,4 %) выявлен в 64 % опухолей, 81 % из которых - плоскоклеточный рак. В ткани плоскоклеточного рака средний уровень экспрессии PGRMC1 составил15 %, в аденокарциноме - в 1,7 раза выше (26 %, р=0,013 ). В ткани плоскоклеточного рака низкий уровень экспрессии PGRMC1 выявлен в 81 % случаев, высокий - только в 19 %. Напротив, в ткани аденокарциномы высокий маркёра обнаружено в 67 %, а низкий - только в 33 %. Вывод. PGRMC1 экспрессирован в ткани НМРЛ большинства курящих пациентов мужского пола, при этом уровень и частота экспрессии маркёра выше в ткани аденокарциномы, чем в плоскоклеточном раке легкого. Исследование поддержано грантами РФФИ (№ 13-04-01004-a, 12-04-00028-a).

Д.К. Огай, Г.Дж. Кутлиева, Ш.М. Миралимова, H.A. Элова, С.Н. Наврузов, З.М. Еникеева ИЗУЧЕНИЕ АНТИКАНЦЕРОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА PROPIONIBACTERIUM AVIDUM1 НА МЫШАХ BALB/ c Институт Микробиологии АНРУз, Республиканский Онкологический Научный Центр МЗ РУз, Ташкент, Узбекистан Актуальность. В последние годы среди иммуномодулирующих средств особый интерес вызывают препараты микробного происхождения. Цель исследования. Изучение антиканцерогенной активности местного штамма Propionibacterium avidum 1 при внутрибрюшинном введении мышам линии BALB/ c с привитой опухолью аденокарциномы толстой кишки. Результаты. В опытной группе животных, которым вводили препарат, состоящий из мертвых клеток Propionibacterium avidum 1 однократно за 6 дней до индукции опухоли в дозе 0,5мг, на 7-й день после перевивки у всех животных появились опухоли, но с отставанием в размерах (средний объем составил 0,86 см, что по отношению к контролю достигало 54,45 %). На 19 день (время забоя) торможение роста опухоли (TPO) составило 77,42 % (по массе) и 72,73 % (по объему). Поэтому индекс эффективности (ИЭ) по массе был равен 4,43, а по объему - 3,3, т.е. в среднем опухоли были в 2 раза меньше, чем в контроле. При введении препарата в дозе 1,0 мг однократно за 6 дней до индукции опухоли наблюдалось более заметное торможение опухолеобразова-ния : на 7 день после перевивки только у 2 мышей появились опухоли, объемы которых в среднем составляли 0,104 см, тогда как в контрольной группе, в которой опухолеобразование отмечено у 7 мышей, средний размер опухолей в тот период достигал 1,888 см, что дало TPO по объему на этот период 94,49 %. С увеличением времени эксперимента в опытной группе появились опухоли у других мышей, однако у 40 % мышей опухоль не перевилась. Таким образом, если рассчитывать эффект препарата по животным с появивщейся опухолью, то TPO равен 82,08 % (по массе) и 67,90 %(по объему). Противоопухолевое действие препарата подтверждается увеличением массы тела и селезенки, ростом экспрессии CD 16 рецепторов на естественных киллерных клетках (NK) более чем в 1,7 раза. Микробиологическое исследование гомогената печени показало обсеменение животных с индуцированной опухолью лактозонегативными кишечными палочками и клебсиеллами, в то время как после введения вакцинного штамма Propionibacterium avidum 1 наблюдалась элиминация указанных бактерий. Выводы. Таким образом, наибольшая степень регрессии аденокарциномы толстой кишки наблюдалась при введении 1,0 мг убитых клеток Propionibacterium avidum 1 на мышь за 6 дней до индукции опухолеобразо-вания.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 117

Н.Д. Олтаржевская, М.А. Коровина НОВЫЕ БИОПОЛИМЕРНЫЕ МАТЕРИАЛЫ «КОЛЕГЕЛЬ» И «КОЛЕТЕКС» ДЛЯ НАПРАВЛЕННОЙ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ В ХИМИО- И ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ ООО «Колетекс», Москва Задачи исследования. Создание систем для направленной доставки лекарственных препаратов (ЛП), позволяющих максимально приблизить подводимый ЛП к очагу поражения. Материалы и методы. Одним из вариантов создания систем для направленной доставки является использование гелевых полимерных композиций с импрегнированными в них ЛП или биологически активными веществами (БАВ). Компания ООО «Колетекс» разработала три разновидности полимерных материалов для пролонгированной направленной доставки ЛП: аппликации Колетекс, представляющие собой специальную объемную текстильную основу с нанесенным на поверхность слоем из гидрогелевого полимерного материала, содержащего ЛП; гидрогелевый материал Колегель (салфетка гидрогелевая Колетекс-гель) и высокоструктурированный гидрогелевый материал в форме диска - Колегель-диск. При их получении используются природные полимеры: соли альгиновой кислоты, хитозана, гиалуроновой кислоты и их смеси. Особенностью является технологическая возможность введения в полимерную композицию принципиально любых ЛП или их сочетаний, в т.ч. малорастворимых, в требуемых по медицинским показателям концентрациях. Результаты и выводы. Максимально приближая лечебную гидрогелевую композицию к очагу поражения, что достигается путем наложения увлажненной салфетки Колетекс на поврежденное место, введением гидрогеля или диска Колегель в полости орофаренгиально, ректально, вагинально (с помощью катетера, шприца, клизмы), удается за счет набухания и биодеградации полимера, из которого ЛП поступает во внешнюю среду, наличия градиента концентраций ЛП на границе полимерный материал - пораженный участок и сродства используемого ЛП в т.ч. к опухолевым тканям, достичь высокой концентрации ЛП в поврежденных тканях при минимальном его содержании в здоровых органах, что позволяет снизить токсичность лечения и повысить его результат. Меняя состав и вязкостные характеристики полимерной композиции, степень сшивки полимера, и, соответственно, кинетику высвобождения ЛП, удается создавать материалы с заранее заданными по медицинским показаниям свойствами. Применение этих материалов в онкологии позволяет повысить регрессию опухоли и эффективность лучевого лечения, предотвратить развитие лучевых реакций, снизить степень повреждения здоровых тканей, увеличить подводимую дозу и проводить облучение без перерыва.

И.Н. Павлова1, О.М. Конопаикова2 НУКЛЕИНАТ НАТРИЯ В ЛЕЧЕНИИ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ 1НУЗ ДКБ на ст. Саратов II ОАО РЖД, Саратов 2ГБОУ ВПО Саратовский ГМУим. В.И. Разумовского МЗ России, Саратов Цель исследования. Определить клинико-иммунологический эффект при применении нуклеината натрия в комплексном лечении больных раком молочной железы и меланомой Материалы и методы. За период с 2008 по 2012 гг. обследовано 198 больных раком молочной железы и 36 пациентов с меланомой. У всех была метастатическая стадия и проведено комплексное лечение (полихимиотерапия, операция и иммунокоррекция). Группу сравнения составили 80 пациенток (54 и 26, соответственно), которым лечение проведено без иммунокоррекции. Преобладали больные старше 50 лет (74 %). Иммунологическое обследование проводилось до начала лечения, после трех курсов химиотерапии, через месяц после окончания лечения. Химиотерапия при раке молочной железы проводилась по схеме АС, при меланоме - СУБ. Нуклеинат натрия назначали по 0,5мг 3 раза в день, в дни проведения химиотерапии. Результаты. У всех больных перед началом лечения имелись изменения в системе гематологических, биохимических и иммунологических показателей (р<0,05). Изменения в показателях иммунитета касались клеточного звена и затрагивали антителообразование. После проведения трех курсов химиотерапии снижение количества СБ3-клеток у больных, получавших иммунокоррекцию нуклеинатом натрия (54,1±9,2 в мкл), было не таким значительным, как у больных группы сравнения (50,4±3,2 в мкл). У всех было отмечено увеличение ЦИК. Через три месяца после проведенного лечения, во всех группах, где получали нуклеинат натрия, отмечалось достоверное повышение абсолютного числа СБ3-клеток (60,6±9,0 в мкл), тогда как у пациентов групп сравнения констатировано дальнейшее снижение уровня СБ3-клеток (45,2±2,1 в мкл). Тоже самое происходило и с относительными показателями уровня СБ3 -клеток. В группе сравнения через три месяца после лечения относительный уровень СБ3+ -клеток снизился на 5-6 %, а у больных получивших препарат, он достиг исходного уровня и имел тенденцию роста до 55,1±2,11 в мкл. Не отмечено зависимости показателей иммунитета от диагноза. Показатели качества жизни у больных, получавших нуклеинат натрия, не снижались. Выводы. Назначение нуклеината натрия в комплексном лечении рака молочной железы и меланомы способствует уменьшению иммунодефицита и снижению побочных эффектов полихимиотерапии.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

118 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

О.Г. Парахневич, Т.М. Ермоленко, Т.В. Трухачева ПРЕПАРАТ ДОЦЕТАКСЕЛ, КОНЦЕНТРАТ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАСТВОРА ДЛЯ ИНФУЗИЙ 20 МГ/МЛ, ПРОИЗВОДСТВА РУП «БЕЛМЕДПРЕПАРАТЫ» РУП «Белмедпрепараты», Минск, Беларусь Задача исследования. Оптимизация технологии производства препарата на основе доцетаксела с целью улучшения стабильности готового лекарственного средства. Материалы и методы. Препарат разработан на основе субстанции доцетаксела безводного, соответствующего по качеству требованиям Фармакопеи США, для контроля препарата использовались методы ВЭЖХ, ГЖХ, ТСХ, УФ-спектрофотометрии. Результаты. Препараты на основе доцетаксела выпускаются в виде концентрата для инфузий в комплекте с растворителем (13% раствор этанола), который необходим для приготовления промежуточного раствора перед приготовлением перфузионного раствора. РУП «Белмедпрепараты» разработан состав препарата и технология производства, обеспечивающие стабильность лекарственной формы доцетаксела в одном флаконе (20 мг/1 мл, 40 мг/2 мл, 80 мг/4 мл). Использование препарата в такой форме удобно для применения медицинским персоналом в клинической практике, исключается стадия предварительного разведения растворителем концентрата доцетаксела. Разработанная схема получения очень технологична, позволяет получать препарат в постоянном диапазоне pH 3,4 +0,2 при отсутствии стадии доведения pH.. Результаты проведенных исследований подтвердили исключительную стабильность разработанного препарата при хранении в температурных режимах 2-8 °С и 25±2 °С на протяжении срока наблюдения 2 года. Оценка качества препарата проводилась по основным показателям: идентификация (УФ-спектрофотометрия, ВЭЖХ, ТСХ), прозрачность, цветность, pH, вода, сопутствующие примеси и количественное определение (ВЭЖХ), стерильность, этанол (ГЖХ). Кроме того, были проведены исследования по изучению стабильности перфузионных растворов на основе разработанного препарата. Перфузионный раствор, приготовленный в 0,9% растворе натрия хлориде с концентрацией доцетаксела 0,74 мг/мл, оставался стабильным (начало образования осадка) в течение 8 час. Выводы. Оптимизирована технология получения и разработана стабильная форма препарата Доцетак-сел, концентрат для инфузий 20 мг/мл. Препарат выпускается в одном флаконе (1,2 и 4 мл) характеризуется улучшенным качеством и удобством применения в клинической практике.

С.Г. Пашкевич1, Л.Н. Николаевич1, A.A. Денисов1, И.В. Залуцкий1, С.М. Адекенов2 ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА «АРГЛАБИН» НА МЕЖНЕЙРОННЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В ГИППОКАМПЕ КРЫС 1 Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси, Минск, Беларусь 2Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия», Караганда, Казахстан Актуальность. Изменение функционального состояния клеточных популяций гиппокампа отражается на физиологических настройках гиппокамп-гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы. Известный механизм «программирования» в этой системе дает возможность фитохимически или фармацевтически корректировать различные заболевания [Rot M. et al., 2009]. Установленные противоопухолевые, иммуномодулирующие и радиосенсибилизирующие свойства препарата «Арглабин» позволили предположить возможность расширения спектра его применения для терапии онкологических заболеваний центральной нервной системы. Задача исследования. Оценить влияние перфузии противоопухолевого препарата «Арглабин» в дозах (0,2-0,002 мг/мл) на амплитудно-временные характеристики популяций нормальных нервных клеток гиппокампа крыс. Материалы и методы. Применяли электрофизиологический метод регистрации вызванных потенциалов переживающих срезов гиппокампа 3-4 недельных крысят. Результаты. Перфузия препарата «Арглабин» в концентрации 0,2 мг/мл приводила к синхронной блокаде вызванных ответов нейронов гиппокампа и синхронному их восстановлению в среднем через 40 мин. Снижение концентрации препарата «Арглабин» в перфузируемой жидкости до 0,02 мг/мл вызывало рассогласование амплитуд входящих и исходящих сигналов в популяции клеток гиппокампа, проявляющееся в увеличении амплитуды популяционных спайков при одновременном снижении амплитуды, возбуждающих постсинаптиче-ских потенциалов. В дозе 0,002 мг/мл препарат «Арглабин» оказывал преимущественное влияние на постси-наптический уровень формирования электрического сигнала, но не на пресинаптические механизмы. Выводы. Таким образом, установлено, что противоопухолевый препарат «Арглабин» - может влиять на процессы генерации электрической активности нейронами гиппокампа.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

H.A. Плужникова, А.Ю. Карпенко, М.В. Киселевский

ИССЛЕДОВАНИЕ КИСЛОРОДЗАВИСИМОГО КИЛЛИНГА ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ПАЦИЕНТОВ В ПЕРИОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. В условиях бактериемии (токсемии) эффекторы врожденного иммунитета обеспечивают естественную резистентность организма. В тоже время их чрезмерная активация приводит к развитию системной воспалительной реакции, лежащей в основе патогенеза сепсиса.

Цель исследования. Оценка функциональной активности фагоцитов крови онкологических больных с и без гнойно-септических осложнений в периоперационном периоде.

Материалы и методы. Исследовали образцы крови больных раком ЖКТ IIa—IIIb ст. Забор крови проводили до операции (1 этап), во время операции (вскрытие брюшной полости, рассечение стенок ЖКТ, наложение кожных швов - 2-4 этапы соответственно), а также на 1, 3 и 5 сутки после операции (5-7 этапы соответственно). Выделяли 2 группы больных: с гнойно-септическими осложнениями в послеоперационном периоде и без таковых. Оценку функциональной активности нейтрофилов проводили с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия (HCT) в двух вариантах: базальном и стимулированном. Для удобства представления полученных результатов использовали показатель разница (АНСТ)=НСТ (стимулированный) ИСТ (базаль-ный).

Результаты: исследование показателей АНСТ-тестов до операции в обеих группах пациентов не позволило выявить достоверных отличий (р=0,34). При изучении метаболического звена фагоцитоза нейтрофилов крови у пациентов без осложнений на начальном этапе операции выявлено незначительное увеличение разницы исследуемых параметров. К 5-м суткам после операции у данных пациентов отмечали нормализацию метаболической активности гранулоцитов (р>0,05), АНСТ-тестов находилась в пределах - 0,34-0,69 у.е. Анализ показателей НСТ-тестов у пациентов с осложнениями показал незначительное повышение данного показателя на всем протяжении хирургического вмешательства. Весь ранний послеоперационный период у данных больных характеризовался тенденцией снижения исследуемого показателя, достигая к 5-м суткам минимальных значений - 0,105 (0,07-0,35) у.е. (р=0,0047).

Выводы. У больных с гнойно-септическими осложнениями нейтрофилы изначально имеют повышенный уровень активности кислородзависимых механизмов фагоцитоза. Во время операции и в раннем послеоперационном периоде уровень базальной активности нейтрофилов возрастает, а показатель ДНСТ снижается, свидетельствуя об истощении запасов ферментативных систем у данной категории пациентов.

ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ НЕДИССЕМИНИРОВАННОЙ МЕЛАНОМЫ КОЖИ

Специализированная клиника лазерной и фотодинамической терапии, Краснодар

Цель исследования. В представленной работе обобщены данные длительного наблюдения за 307 больными недиссеминированной меланомой кожи Т1-Т4, получившими в качестве единственного лечения ФДТ по оригинальной методике. Все диагнозы были морфологически верифицированы.

Материалы и методы. Оценка результатов лечения проводилась путем сравнения с прогностически однородными группами пациентов получивших стандартное хирургическое или комбинированное лечение. Максимальные сроки наблюдения составили 10 лет, в среднем 5-6 лет.

Результаты. Полной резорбции первичной опухоли удалось добиться у всех пациентов. Заживление дефекта происходило под струпом с образованием мягкого рубца, даже на месте очень протяженных опухолей. Ни в одном случае не отмечено локального рецидива в области рубца, тогда как в группе сравнения локальные рецидивы наблюдались у 8 % пациентов. Пятилетняя выживаемость при толщине опухоли до 4 мм - 91,0 %, в группе сравнения 83,6 %, свыше 4 мм - 57 % и 47,6 % соответственно. Десятилетняя выживаемость при толщине опухоли до 2 мм в группе наблюдения составила 91,6 %, в группе сравнения 88,9 %, от 2 до 4мм - 66,3 % против 59,8 % в группе сравнения, более 4мм - 49,5 % против 37,1 % в группе сравнения.

Выводы. ФДТ при первичной недиссеминированной меланоме кожи является высокоэффективным методом лечения, предупреждающим развитие локальных рецидивов заболевания, даже у пациентов с неблагоприятными морфологическими характеристиками первичной опухоли, что улучшает отдаленные результаты лечения. Более высокая эффективность ФДТ в сравнении с хирургическим лечением, по-видимому, связана с иммунную ответом на антигены в опухолевом лизате. В отличие от широкого иссечения, ФДТ не требует сложных методик пластического закрытия дефектов, позволяет отказаться от ампутаций при акральной локализации меланом. Применение ФДТ при первичной меланоме кожи позволяет проводить лечение в амбулаторном режиме, что положительно сказывается на качестве жизни пациентов и значительно снижает затраты на лечение и реабилитацию.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

П.Б. Попов

120 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

И. Р. Просалкова, Ю.М. Букреев, Н.К. Власенкова, А. Б. Капитанов, С.А. Коростелев, В.В. Решетникова, А.В. Сергеев БИОДОСТУПНОСТЬ КАРОТИН-СОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Каротин-содержащие препараты (КСП) «Бетаск» (БТ), «Каскатол» (КАС), «Каскорутол» (КСР) разработаны нами совместно с фирмой ЗАО «Холдинг - «ЭДАС» и поступили в аптечную сеть. Каротин-токофероловый комплекс (КТК) плодов шиповника и препарат «Томатол» из томатов фирмы ООО «Инвест» получены по оригинальным методикам с помощью органических растворителей.

Цель исследования. Изучение биодоступности разработанных нами препаратов у различных видов лабораторных животных и у человека.

Материалы и методы. БТ содержит бета-каротин (БК) и аскорбиновую кислоту (АК), соответственно 2,5 и 12,5 мг в одном драже, КАС (БК, АК и витамин Е - 2,5, 12,5 и 25 мг), КСР (БК, АК, Е и рутин - 2,5, 25, 75 и 9,0 мг). КТК содержит БК, кантаксантин, ликопин (ЛП) и токоферол, соответственно 160, 27, 76 и 85 мг/%. ТОЛ содержит ЛП и БК - 250 и 40 мг/%. Определение каротиноидов в препаратах и в плазме крови животных и человека проводили, после экстракции гексаном с помощью ВЭЖХ, по ранее описанным методикам на хроматографах «Spectra Physics 8000» и «Perkin Elmer Nelson Mod. 1020».

Результаты. Однократное пероральное введение КТК в дозе 30 мг/кг мышам СВА приводило к повышению уровня БК в плазме крови через 30 и 60 мин до 15-25 мкг/100 мл с постепенным снижением концентрации в течение последующих 3 суток. Синтетический БК в аналогичной дозе не вызывал изменений в содержании провитамина в плазме крови. После введения КТК крысам в дозе 30 мг/кг максимальное содержание БК в плазме определялось через 1,5 ч и ровнялось 8-10 мкг /100 мл и сохранялось в отличие от синтетического БК в течение 72 часов. Величины площади под фармакокинетической кривой «концентрация-время», вычисленные для интервала 0-48 ч, оказались одинаковыми для КТК и синтетического БК (27,18 и 27,1 мкг/100мл). Курсовое введение мышам и крысам БТ, КТК, ТОЛ и КАС в различных дозах в течение 2 недель приводило через 4-6 дней к значительному повышению (до 25-55 мкг/100 мл) уровню БК и ЛП в плазме крови и в ткани печени. Курсовое пероральное введение собакам КТК, КАС и ТОЛ в дозе 100 мг/кг приводило к повышению уровня каротиноидов в плазме крови до 25-35 мкг/100 мл через 4-6 дней. Систематический прием БТ и КАС в дозах 30 и 60 мг в течение 10-14 дней пациентами с опухолями толстой кишки в предоперационном периоде приводил к повышению уровня БК в плазме крови. Длительный прием КАС и КСР добровольцами в группах онкологического риска («злостные» курильщики, женщины с мастопатиями и др.) приводил к значительному повышению уровня БК в плазме крови.

Выводы. Биодоступность разработанных нами препаратов БТ, КТК, КАС, КСР и ТОЛ практически не отличается от биодоступности кристаллических БК и ЛП и зависит от дозы и продолжительности приема лекарственных средств.

-1-2-1-

Р.Б. Пугачева , Л.В. Гончаренко , Г.Н. Апрышко

ПРИНЦИПЫ СТАНДАРТИЗАЦИИ СТРУКТУРНЫХ ФОРМУЛ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ В БАЗЕ ДАННЫХ ПО ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ ВЕЩЕСТВАМ

ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КОМПЬЮТЕРНЫХ АНАЛИТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ

1ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва 2ВИНИТИ РАН, Москва

Задачи исследования. Разработать принципы стандартизации представления пространственных структур соединений в Базе данных «Противоопухолевые отечественные вещества, изученные в РОНЦ им. H.H. Бло-хина РАМН» для их использования в исследованиях связи структура-активность и для компьютерного расчета ряда физико-химических показателей, имеющих значение для «лекарствоподобия».

Материалы и методы. 10 000 структурных формул индивидуальных химических соединений из Базы данных. Программные средства ISISBase, ISISDraw, ACDLab, PASS.

Результаты. Опыт по вводу, редактированию и использованию структурных формул из Базы данных позволил выработать ряд правил их нормализованного представления, максимально адекватного дальнейшей компьютерной обработке. Первая и достаточно простая процедура - удаление из поля химической структуры любых символов, не являющихся обозначениями атомов и химических связей, например, буквенных обозначений химических групп (Me, Et, Bz и т.д.) и пояснительных текстовых вставок (цис-, транс-, син-, анти-, трео-, эритро и т. д.), удаление противоионов и нейтральных компонентов в отдельное поле, нейтрализация зарядов на основных или кислотных группах с помощью возврата протона донорному компоненту. Более сложная задача - единообразное и правильное представление структурных формул координационных соединений металлов, поскольку используемый химический структурный редактор ISIS Draw не позволяет представить донорно-акцепторные (координационные) связи без искажения суммарной брутто-формулы. Испробовав несколько вариантов, мы остановились на способе представления донорно-акцепторной связи как ковалентной с одновременным формальным изменением валентности центрального атома (координационного центра).

Выводы. Выбранный способ нормализации структурных формул отображает все химические связи в молекуле, не приводит к искажению брутто-формулы и позволяет использовать такие структурные формулы для компьютерных расчетов.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ..

В. А. Пурихванидзе, О.Ю. Сафонова ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ПРЕДРАКОВЫХ И ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ И ВУЛЬВЫ

Медицинский центр высоких технологий «ЛазерВита», Москва

Актуальность. Рак шейки матки и вульвы занимают в структуре онкологической заболеваемости женщин третье и четвёртое место после рака молочной железы и рака матки. Рак шейки матки развивается чаще у женщин репродуктивного возраста в результате заражения высокоонкогенным вирусом папилломы человека, и страдающих предраковыми заболеваниями шейки матки. Рак вульвы, как правило, возникает у женщин в постменопаузе. Предраковыми заболеваниями являются крауроз и лейкоплакия вульвы, которые возникают на фоне дистрофических изменений кожи вульвы.

Задача исследования. Оценка эффективности фотодинамической терапии (ФДТ) предраковых и онкологических заболеваний шейки матки и вульвы.

Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилось 178 женщин в возрасте от 18 до 85 лет с предраковыми заболеваниями шейки матки и вульвы и начальными стадиями рака шейки матки и вульвы. Всем пациенткам проводилась фотодинамическая терапия с внутривенным введением фотодитазина и радахлорина из расчёта 0,6-0,8 мг/кг. Лекарственно-световой интервал составлял 3 часа. ФДТ проводилась в сочетании с флюо-ресцентоной диагностикой с использованием лазерного оборудования «Биоспек» и «Эломед». При ФДТ шейки матки использовался световоды с прямым торцом и с рассеивающим диффузором. Плотность мощности составляла от 150 до 300 Дж/см2 в зависимости от характера заболевания. При ФДТ вульвы использовался световод с прямым торцом. Плотность мощности составила от 100 до 300 Дж/см2 в зависимости от характера заболевания.

Результаты и выводы. ФДТ предраковых заболеваний и рака шейки матки и вульвы является высокоэффективным и органосохраняющим методом лечения. Характер лечения щадящий, без формирования рубца с сохранением анатомо-функциональной целостности шейки матки, архитектоники цервикального канала, что немаловажно для пациенток репродуктивного возраста.

Ю.А. Рагулин, М.А. Каплан, В.Н. Медведев, В.Н. Капинус, В.В. Петере ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ В ЛЕЧЕНИИ ЭНДОБРОНХИАЛЬНЫХ ОПУХОЛЕЙ

ФГБУ «Медицинскийрадиологический научный центр» Минздрава РФ, Обнинск

Задачи исследования. Оценить непосредственные и отдаленные клинические, эндоскопические и рентгенологические результаты фотодинамической терапии (ФДТ) у больных со злокачественными эндобронхиаль-ными опухолями.

Материалы и методы. В клинике МРНЦ проведена ФДТ 73 больным со злокачественными опухолями трахеи и бронхов. За 2 часа до процедуры больным внутривенно капельно вводился фотосенсибилизатор хло-ринового ряда (Фотолон, Фотодитазин).

Результаты. В качестве оценки проведенного лечения использовали данные бронхоскопии, спирометрии, рентгенологическую картину, а также динамику жалоб больных. При бронхоскопии через 5-7 дней у 18 (24,6 %) больных отмечался поверхностный некроз опухоли, у 52 (71 %) глубокий некроз опухоли, у 3 больных реакции со стороны опухолевой ткани не наблюдалось. При этом же исследовании, выполненном через месяц после ФДТ, у 45 (61,6 %) выявлена полная регрессия экзофитного компонента опухоли, у 25 (34,2 %) отмечалось уменьшение опухолевого очага, у 3 больных уменьшения опухоли не выявлено. Клинически реализация эффекта фотодинамической терапии проявлялась в полном прекращении кровохарканья у 72 % больных, уменьшение кашля отметило 55,3 % больных, уменьшение одышки - 44,7 % больных, имевших данные симптомы. При рентгенографии у 52 больных до ФДТ были выявлены выраженные вентиляционные нарушения в виде ателектаза или гиповентиляции, через 1-1,5 месяца после лечения положительная рентгенологическая динамика в виде разрешения ателектаза и уменьшения вентиляционных нарушений отмечалась у 75,2% пациентов. Медиана выживаемости больных III стадией при использовании ФДТ перед лучевой терапией составила 15,4 месяца, в то время как в группе ЛТ (без ФДТ) - 13,2 месяца. 1, 2 и 3-летняя выживаемость составила 42,3 % и 37 %, 15,4 % и 11,1 %, 7,7 % и 3,7 % соответственно.

Выводы. ФДТ с препаратами хлоринового ряда обладает высокой эффективностью в лечении эндоброн-хиальных опухолей, позволяя восстанавливать бронхиальную проходимость, уменьшить выраженность вентиляционных нарушений и симптомов заболевания. Использование ФДТ перед лучевой терапией у больных с опухолевым стенозом крупных бронхов позволяет улучшить результаты консервативного лечения, демонстрируя увеличение показателей выживаемости.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Э.Н. Рамазанов, А. С. Толстокорое, С. А. Дергунова, А. С. Волчков ОРГАНОСОХРАНЯЮЩИЕ ОПЕРАЦИИ В ЛЕЧЕНИИ РАКА ЛЕГКОГО

ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России, Саратов

Актуальность. Сложность хирургического лечения рака легкого у больных пожилого и старческого возраста обусловлена не только стадией заболевания, но и сопутствующими заболеваниями.

Задачи исследования. Улучшение непосредственных и отдаленных результатов хирургического лечения рака легкого путем применения новых оперативных методов.

Материалы и методы. Проведен анализ лечения 208 больных раком легкого в возрасте 60 лет и старше. Для оценки распространенности процесса выполняли рентгенологическое и КТ исследование органов груди, бронхоскопию с биопсией материала, УЗИ брюшной полости и забрюшинного пространства, МРТ головного мозга, спирографию, ЭКГ и ЭХО-КГ. Лёгочную гипертензию оценивали путем измерения давления в легочной артерии.

Результаты. Периферический рак диагностирован у 48 % больных, центральный - у 52 %. Выраженные нарушения вентиляционной функции легких были выявлены у 178 (85,5 %). Снизить объем операций при центральных опухолях возможно путём выполнения бронхопластических операций с сохранением функционально полноценной легочной ткани, при периферических опухолях - типичных сегментарных резекций легкого с тщательной лимфаденэктомией средостения и корня легкого. Эти операции выполняются с соблюдением брон-хо-, ангио- и лимфоархитектоники лёгкого, принципов зональности и футлярности. Бронхопластические операции на главных бронхах и трахеи должны проводиться по строгим показаниям. Максимальная ширина основания клина (наибольшее расстояние между проксимальным и дистальным краями резекции бронха) должна быть не более 3,5-4 см. При большем расстоянии наложение анастомоза нецелесообразно из-за натяжения швов. Бронхопластические операции выполнены у 22 больных с центральным раком. В результате пластики бронхов выполнили лоб- или билобэктомию вместо предполагаемой пневмонэктомии. При периферических опухолях небольших размеров выполнили 48 типичных сегментарных резекций. Послеоперационные осложнения отмечены у 19 % больных, что гораздо ниже, чем после стандартных операций. Летальных исходов не было.

Выводы. У больных с ограниченными функциональными резервами при благоприятных анатомических условиях возможно выполнение сегментарных резекций при периферическом раке и бронхопластических операций - при центральной бронхокарциноме.

Н.Я. Рапопорт

НАПРАВЛЕННЫЙ ТАРГЕТИНГ ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ В ПОЛИМЕРНЫХ МИЦЕЛЛАХ И НАНОЭМУЛЬСИЯХ: МИФЫ И РЕАЛЬНОСТЬ

Университет штата Юта, США

Среди наночастиц, используемых для направленной доставки лекарств, липосомы и полимерные мицеллы являются наиболее изученными. Липосомы вошли в клиническую практику, а мицеллы до настоящего времени в клинике не используются, хотя обладают комплексом полезных свойств: позволяют избежать использования токсических растворителей, могут в тысячи раз увеличить растворимость активных соединений, отвергнутых из-за низкой растворимости, теоретически могут обеспечить таргетинг в опухоль. Доклинические испытания некоторых мицеллярных формуляций на животных показали отличные результаты. Однако только две мицеллярных формуляции (одна с адриамицином, другая с паклитакселом) достигли клинических испытаний, которые дали разочаровывающие результаты: время циркуляции и биораспределение мицеллярно-инкапсулированных лекарственных средств мало отличались от таковых при введении лекарства в растворе, то есть таргетинг отсутствовал. Единственным серьёзным преимуществом мицеллярной доставки было отсутствие остротоксичных органических растворителей. В настоящем докладе будут обсуждены возможные причины отсутствия эффективного таргетинга при мицеллярной доставке и пути преодоления этой проблемы.

Прижизненный имаджинг с помощью специального флуоресцентного микроскопа был применён для изучения биораспределения флуоресцентно-меченного паклитаксела (Ф-ПКТ) путём визуализации его циркуляции и экстравазации в нормальные ткани и в опухоль поджелудочной железы мышей. Ф-ПКТ был инкапсулирован в мицеллах или приготовленных на их основе наноэмульсиях. Полученные путём имаджинга результаты коррелировали с гематотоксичностью паклитаксела, инкапсулированного в полимерных мицеллах или наноэмульсиях. Мицеллярно-инкапсулированный Ф-ПКТ полностью переходил из сосудов в окружающие ткани (нормальные ткани бедра или опухоль) в течение 20 минут. Ф-ПКТ в нанокаплях оставался в кровотоке длительное время (часы). Его экстравазация в опухоль была ускорена сфокусированным на опухоль ультразвуком.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 123

В.М. Ржезников , З.С. Смирнова , В.Н. Толкачев , К.А. Широких3, Е.В. Одинцова3, Т.А. Федотчева3, Н.Л. Шимановский3 ЦИТОСТАТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ НОВОГО АНТИЭСТРОГЕНЦИТОСТАТИКА ЦИТЕСТРОЛ АЦЕТАТА 1 Эндокринологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва 2ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва 3Российский Наиионалъный Исследовательский Медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития России, Москва Актуальность. Создание гормональных препаратов, обладающих противоопухолевой активностью, является приоритетной задачей отечественной фармакологии. Одним из препаратов выбора в лечении гормоноза-висимых опухолей женской половой сферы является Тамоксифен. Однако, ограничениями его эффективности являются отсутствие в 10-40% эстрогеновых рецепторов в опухоли и возникновение резистентности. В результате совместной РОНЦ им. Н.Н.Блохина и ЭНЦ РАМН разработки получен новый таргетный препарат - анти-эстрогенцитостатик Цитестрол ацетат (ЦА), в структуре которого антиэстрогенный компонент ассоциирован с бис-Р-хлорэтиламиновой группировкой. Присоединение антигормона к алкилирующей группе приводит к увеличению его накопления в опухоли за счет взаимодействия с гормональными рецепторами. Задачи исследования. Изучить действие ЦА на жизнеспособность опухолевых клеток HeLa, MCF-7/WT и MCF-7/R и его способность усиливать действие других цитостатиков. Материалы и методы. Жизнеспособность клеток оценивали методом МТТ (бромид 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-тетразолия), по четыре эксперимента на точку. IC50 определяли с помощью программы GraphPrism6. ЦА и Тамоксифен (ТАМ) (Sigma, США) разводили в 96% этаноле и диметилсульфоксиде в пропорции (1:1), Этопозид (ЭТОП) (Тева, Нидерланды) и Доксорубицин (ДОКС) (Тева, Нидерланды) - в среде DMEM. Результаты. В клетках HeLa, MCF-7/WT и MCF-7/R IC50 для ЦА составили 1,6*10-4М, 2,6*10-4М и 10-7М соответственно, тогда как для ТАМ - 0,5*10-4М, 2,2*10-4М и 4*10-6М. При исследовании совместного действия ЦА и цитостатиков ДОКС и ЭТОП была выявлено увеличение их цитостатического действия в отношении резистентных клеток. Так, в комбинации с ДОКС, ЦА усиливал его действие более чем в 3 раза. В клетках HeLa ЦА также усиливал цитостатическое действие ЭТОП в 2 раза, тогда как препарат сравнения ТАМ не влиял на цитостатический эффект ЭТОП. Выводы. В резистентных к ДОКС клетках (MCF-7/R), ЦА превосходит по цитостатическому эффекту ТАМ и значительно повышает эффективность ЭТОП и ДОКС.

Т.А. Розен, В.Г. Трибулович, A.B. Гарабаджиу МОДИФИКАЦИЯ СУЩЕСТВУЮЩИХ ИНГИБИТОРОВ MDM2 С ЦЕЛЬЮ ПОВЫШЕНИЯ ИХ СПОСОБНОСТИ ПРЕОДОЛЕВАТЬ ГЕМАТО-ЭНЦЕФАЛИЧЕСКИЙ БАРЬЕР НИЛ «Молекулярная фармакология», Санкт-Петербургский государственный технологический институт (Технический университет) Актуальность. Частым осложнением при развитии онкологических заболеваний различной локализации является метастазирование в мозг. В настоящее время для борьбы с метастазами наиболее широко применяют сочетание хирургического лечения и облучения. Химиотерапия метастазов обычно не имеет успеха, что связано, в том числе, с наличием гемато-энцефалического барьера, который предотвращает попадание лекарственного препарата в мозг. Задачи исследования. Химическая модификация класса изоиндолинонов с целью повысить их способность преодолевать гемато-энцефалический барьер. Эти соединения обладают сродством к р53-связывающему участку Е3-лигазы MDM2, за счет чего ингибируют взаимодействие p53-MDM2 и вызывают повышение в клетке уровня проапоптотического белка р53, что, в конечном итоге, приводит к гибели раковой клетки. Материалы и методы. Нами был проведен виртуальный скрининг ряда производных изоиндолинона схожего строения, в составе которых варьировался только один заместитель - в молекулу вводили группы, предположительно повышающие способность преодолевать гемато-энцефалический барьер. Оценивалась прочность связывания этих соединений с р53-связывающим участком MDM2. Соединения, наилучшим образом ингибировавшие взаимодействие белков, были синтезированы в нашей лаборатории, и подвергнуты высокоэффективному скринингу для подтверждения результатов, полученных in silico, кроме того, их способность преодолевать гемато-энцефалический барьер была оценена при помощи метода PAMPA, основанного на использовании искусственных липидных мембран заданного состава. Результаты и выводы. По результатам виртуального скрининга для последующей работы были отобраны десять соединений. В ходе высокоэффективного скрининга все эти вещества в той или иной мере способствовали апоптозу клеток по р53-зависимому механизму, кроме того, несколько веществ обладали значительно более высокой способностью преодолевать липидные мембраны, чем исходное вещество.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

124 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

Т.Г. Руденко , А.Б. Шехтер , Н.А.Аксенова , H.H. Глаголев , A.B. Иванов , А.Б. Соловьева особенности течения раневого процесса при фотодинамической терапии с комплексами фотодитазин - полимер 1 Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва, 2ФГБУН «Институт химической физики им. H.H. Семенова» РАН, Москва, ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» РАМН, Москва Актуальность. Развитие технологии ФДТ связывают с созданием новых лекарственных форм фотосенсибилизаторов (ФС), которые могли бы обеспечить их высокую биодоступность и уменьшить неспецифическую токсичность. В частности, для решения этой задачи предлагается применять для ФДТ комплексы ФС с амфифильными полимерами (АП) различной природы, которые хорошо зарекомендовали себя при лечении различной раневой патологии. Цель исследования. Экспериментально-морфологическое изучение особенностей ранней стадии раневого процесса при ФДТ с использованием ФС «Фотодитазин» и его комплексов с АП различной природы. Материалы и методы. В эксперименте на белых крысах-самцах воспроизводили стандартную модель полнослойной плоскостной раны кожи, 7 групп по 3 особи. На следующие сутки после создания дефектов кожи в дно ран животных экспериментальных групп инъекционно вводили одну из шести субстанций (изотонический раствор хлорида натрия, водный раствор «Фотодитазина», водные растворы АП - поливинилпирролидона (ПВП) или плюроника F127 (F127), либо комплексы «Фотодитазина» с ПВП или F127); у животных контрольной группы раны оставляли без лечения. Лазерное облучение раны (аппарат «Аткус-4», 661 нм) проводили через 15 минут после инъекции. На 3 сутки после нанесения раны процедуру повторяли. В течение 4 суток после создания ран проводили клинические наблюдения, а на 4 сутки животных усыпляли и направляли иссеченные фрагменты тканей ран на морфологическое исследование, при котором изучали строение раневого ложа и особенности воспалительных и репаративных реакций в разных группах; Гистологические характеристики ран оценивали полуколичественно, а результаты балльной оценки морфологических признаков анализировали статистически с использованием стандартного пакета программ SPSS for Windows 13.0. Результаты и выводы. Выявленные клинико-морфологические особенности течения ранней стадии раневого процесса позволяют сделать вывод о том, что комплексы «Фотодитазина» с АП способствуют ослаблению воспалительных и усилению репаративных процессов в ранах и могут быть рекомендованы для клинического изучения.

Т.А. Савельева , В.Б. Лощеное , С.А. Горяйнов , A.A. Потапов одновременный спектроскопический анализ содержания протопорфиринаix и гемоглобина в нервных тканях с целью повышения точности интраоперационной диагностики 1ФБГУНИнститут общей физики им. A.M. Прохорова РАН, Москва 2ФБГУ НИИ нейрохирургии имени академика H.H. Бурденко РАМН, Москва Актуальность. Инфильтративный рост глиальных опухолей обусловил широкий интерес к различным способам интраоперационной демаркации их границ. В связи с этим активно развивается такое направление интраоперационной диагностики, как оптическая биопсия. Задачи исследования. В данной работе предложен метод спектроскопического анализа биологических тканей с одновременным количественным определением таких маркеров опухолевых изменений, как кровенаполнение, уровень оксигенации гемоглобина, накопление Пп IX и изменение рассеивающих свойств. Материалы и методы. Метод основан на разделении видимого диапазона спектра на 3 канала - регистрации спектра диффузного отражения широкополосного и лазерного излучения и канал регистрации спектра флуоресценции. В работе приведены результаты верификации алгоритма на оптических фантомах и примеры интраоперационного анализа распределения исследуемых маркеров. Результаты. Метод показал повышение чувствительности по сравнению с методом видеофлуоресцентной визуализации с использованием микроскопа Zeiss OPMI Pentero с 78 % до 96 %, специфичности - с 60 % до 82 %.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 125

Е.В. Санарова1, A.B. Ланцова1, Л.Л. Николаева1, А.П. Полозкова1, О.Л. Орлова1, H.A. Оборотова1, В.В. Мусияк2, Г.Л. Левит2, В.П. Краснов2 ИЗУЧЕНИЕ РАСТВОРИМОСТИ НОВОГО СОЕДИНЕНИЯ ИЗ КЛАССА НИТРОЗОАЛКИЛМОЧЕВИНЫ С ЦЕЛЬЮ СОЗДАНИЯ ИНЪЕКЦИОННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ 1ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва 2Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург Актуальность. Характерным свойством противоопухолевых препаратов, производных нитрозоалкилмо-чевин (НАМ), является гидролитический распад в условиях организма с образованием алкилирующих и карба-моилирующих частиц, а также отсутствие перекрестной резистентности с типичными алкилирующими агентами. В связи с этим поиск новых активных соединений в ряду производных НАМ связан с попытками расширить спектр их противоопухолевого действия, снизить побочные и токсические эффекты, увеличить избирательность противоопухолевого действия. С этой целью в Институте органического синтеза им. И.Я. Постовского (г. Екатеринбург) синтезировано новое соединение из класса НАМ - OR-2011, которое проходит доклинические исследования в НИН ЭДиТО ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН. Задача исследования. Изучить растворимость субстанции OR-2011 в различных сорастворителях, разрешенных для инъекционного применения. Материалы и методы. Так как субстанция OR-2011 умеренно растворима в воде, для повышения растворимости использовали различные сорастворители, разрешенные для применения в инъекционных лекарственных формах, в следующих концентрациях - 5% раствор маннита (Химмед, Россия), 6% растворы Kollidon 17 PF и Kollidon 12 PF (BASF, Германия), 2% раствор декстрана 70000 (Sigma-Aldrich GmbH, Германия), 10% растворы ПЭГ-1500 (Химмед, Россия) и Kollisolv PEG-400 (BASF, Германия). Растворимость субстанции определяли визуально при температуре (20 ± 2 °С) и выражали в процентном соотношении (ГФ XII, ОФС 42-0049-07). Результаты и выводы. В результате проведенных исследований установили, что повышение растворимости субстанции 0R-2011 более чем в 1,5 раза обеспечивает добавление таких высокомолекулярных веществ как маннит, Kollidon 17 PF, декстран 70000. Применение многокомпонентных сорастворителей не обеспечивало значительного увеличения растворимости, так же как и повышение концентрации солюбилизаторов. Работа выполнена в рамках Государственного контракта № 13411.1008799.13.163 «Доклинические исследования противоопухолевого лекарственного средства класса нитрозомочевин».

Н.С. Сапрыкина , М.А. Барышникова , В.А.Краснов , Г.Л. Левит2, A.B. Ланцова1, Е.В. Санарова1, H.A. Оборотова1, А.Ю. Барышников1 ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ СОЕДИНЕНИЯ OR-2011 НА ПЕРЕВИВАЕМЫХ МЕЛАНОМАХ МЫШЕЙ 1ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва. 2Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург Задачи исследования. Оценить противоопухолевую активность нового оригинального соединения 0R-2011 на перевиваемых опухолях мышей. Материалы и методы. Исследование выполнено на мышах линии DBA/2 и гибридах BDF1 (C57Bl/6 х DBA/2). Животным подкожно прививались меланома B16, высокометастазирующая меланома B16-F 10 и мела-нома Клаудмана клон М3. Субстанцию 0R-2011, синтезированную в Институте органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН вводили животным с меланомой B16 однократно, внутрибрюшинно на 10 сутки опыта в дозах 150-225 мг/кг, мышам с меланомой М3 однократно, внутривенно на 2 сутки опыта в дозах 150-175 мг/кг. Лекарственная форма 0R-2011 в виде лиофилизата для приготовления раствора для инъекций разработана в лаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН. Лекарственную форму 0R-2011 вводили мышам с меланомой B16-F10 однократно, внутривенно на 2 сутки опыта в дозах 100-200 мг/кг. Терапевтический эффект оценивали по торможению роста опухоли (ТРО, %) и увеличению продолжительности жизни животных (УПЖ, %) по отношению к контролю. Результаты. Прививаемость опухоли мышам для всех меланом была 100%. В контрольной группе у мышей с М3 кинетика роста подкожных опухолевых узлов и продолжительность их жизни соответствовала таковым по данным других исследователей. Животные с М3, леченные 0R-2011, были свободны от опухоли. 0R-2011 значительно (ТРО 59-96 %) и продолжительно тормозил рост меланомы B16 и значимо увеличивал продолжительность жизни опухоленосителей (УПЖ 31-61 %). Лекарственная форма 0R-2011 вызывала у мышей с меланомой B16-F10 значительное удлинение латентного времени развития опухоли и продолжительное торможение роста опухоли (ТРО 55-100 %). Выводы. Выявлена высокая противоопухолевая активность 0R-2011 на перевиваемых меланомах с различной чувствительностью к препаратам. Это позволяет рекомендовать 0R-2011 для дальнейших исследований с целью создания нового антимеланомного препарата. Работа выполнена в рамках Государственного контракта 13411.1008799.13.163 «Доклинические исследования противоопухолевого лекарственного средства класса нитрозомочевин».

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

С.А. Сасов, В.В. Решетникова, H.H. Тотоева, В.Н. Толкачев МАКРОЦИКЛИЧЕСКИЕ ГИДРОЛИЗУЕМЫЕ ТАННИНЫ

CHAMAENERIONANGUSTIFOLIUM (L.) (ИВАН ЧАЙ): ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Изучению олигомерных макроциклических гидролизуемых таннинов в настоящее время уделяется большое внимание. Противоопухолевые свойства этих соединений исследованы как в культурах клеток, так и в экспериментах на животных. Экспериментально показано, что таннины кипрея узколистного (Chamaenerion angustifolium (L.)) обладают противоопухолевым действием на животных с перевиваемыми опухолями. На их основе разработан препарат ханерол, обладающий активностью против ряда солидных опухолей.

Материалы и методы. Димерный макроциклический гидролизуемый таннин хаменерин I (Oenothein B) и тримерный макроциклический таннин хаменерин II (Oenothein A) являются главными компонентами противоопухолевого препарата ханерол, выделяемого из цветков иван-чая (Chamaenerion angustifolium (L.)). Вышеуказанные гидролизуемые таннины были выделены из растения препаративными методами с использованием экстракции водным раствором диметилформамида, дробного осаждения свинцового комплекса таннинов, его разложения, обессоливания раствора на катионите и лиофилизацией раствора. Выделение индивидуальных соединений проводилось с использованием хроматографии на колонке с Сефадексом LH-20. Строение индивидуальных веществ установлено с помощью H1 и C13 ЯМР спектроскопии, химической деструкции, а также изучения продуктов гидролиза и их производных.

Результаты. В результате кислотного гидролиза ханерола, а также тримерного таннина (Oenothein A) нами ранее впервые была выделена и охарактеризована новая тетрафенолкарбоновая кислота, названная хаме-нериевой кислотой. Для расширения сырьевой базы получения димерных и тримерных таннинов, обладающих широким спектром биологического действия, мы разработали препаративные методы выделения этих таннинов из побегов иван чая узколистного. В отличие от цветков, побеги иван чая практически не содержат высших олигомерных гидролизуемых таннинов. Oenothein B и Oenothein A были также выделены нами из цветков и листьев Oenothera biennis (L.) в сопоставимых количествах.

Выводы. В связи с высокой биологической активностью выделенных соединений, описанных в мировой литературе, а также биологических данных, полученных в ФГБУ

«РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, они являются перспективными для дальнейших биологических исследований для создания противоопухолевого препарата.

В.М. Сафронова, С.А. Кузнецов, Л. Т. Мамедова, И.Ж. Шубина ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ В ЛИМФОУЗЛАХ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ

ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина», Москва

Задача исследования. Оценка субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток лимфоузлов (л/у), удаленных во время операции больных распространенным раком яичников (РЯ).

Материалы и методы. Визуально неизмененные л/у, удаленные во время операции у больных РЯ (п=10), дезагрегировали для получения клеточной суспензии, клетки отмывали центрифугированием, выделяли мононуклеарные клетки (МНК) на градиенте фиколла-урографина, полученную суспензию клеток инкубировали в полной культуральной среде ЯРМ1-1640 с 10% телячьей сыворотки при 37 0С, 5% С02 в течение 1-5 суток. Субпопуляционный клеточный состав лимфоцитов (МЛ) определяли при окрашивании моноклональными антителами (МКА) СБ45, СБ3,СБ8, СБ4, СБ25, СБ16, СБ56,СВ11с,СБ86 против соответствующих антигенов. Экспрессию маркеров определяли методом проточной цитофлуориметрии. Часть клеточной суспензии подвергали иммуномагнитной сепарации для определения опухолевых клеток, экспрессирующих эпителиальные маркеры - цитокератины (ЦК+) с последующим цитологическим исследованием при окрашивании препаратов гематоксилин-эозином.

Результаты. Культура клеток, полученная из л/у больных РЯ, хорошо пролиферировала. В результате проведения магнитной сепарации с использованием цитокератин-положительных (ЦК+) конъюгатов в клеточной суспензии обнаружены клетки, окруженные магнитными шариками в виде розеток. В 3 случаях при цитологическом анализе ЦК+ клетки были отмечены как опухолевые. Результаты оценки экспрессии поверхностных маркеров на МНК из л/у выявили субпопуляции зрелых лимфоцитов (СБ3+), цитотоксических лимфоцитов (СБ3+/СВ8+), натуральных киллеров (СБ16+, СБ56+), отсутствие Т-регуляторных клеток СБ4+/СБ25+, а также экспрессию костимулирующей молекулы СБ86+ и экспрессию маркера СБ11с+, характерных для дендритных клеток.

Выводы. Выделенные из л/у, удаленных во время операции МНК могут быть использованы для приготовления экстракорпорально активированных клеток-эффекторов, применяемых в иммунотерапии с целью продления безрецидивного периода жизни у больных раком яичников после комбинированного лечения. Использование метода иммуномагнитной сепарации для определения популяции ЦК+ клеток позволит удалить из культуры иммунокомпетентных клеток опухолевые клетки.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Ф

Ф

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

А.В. Сергеев, А.Б. Капитанов, С.А. Коростелев, И.М. Лученко, В.В. Решетникова ФАРМАКОКИНЕТИКА КАНТАКСАНТИНА, ЛИКОПИНА И БЕТА-КАРОТИНА

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Каротиноиды (КР) кантаксантин (КТ), ликопин (ЛП), бета-каротин (БК) широко распространены в растительном мире и обладают антиканцерогенными, антимутагенными, антитоксическими и другими свойствами. Изучение фармакокинетики (ФК) КР позволяет лучше понять механизм их антиканцерогенного действия и более рационально использовать в качестве потенциальных средств химиопрофилактики рака.

Цель исследования. Изучение фармакокинетики БК, КТ, и ЛИ в эксперименте на различных видах лабораторных животных и у человека.

Материалы и методы. Кристаллический БК, КТ и ЛИ получены из НПО «Витамины» и фирмы «Рош», Швейцария. Определение концентрации КР и ретиноидов в плазме крови и ткани печени проводили по ранее описанным методикам с помощью ВЭЖХ на хроматографах «Spectra Physics-8000» и «Perkin Elmer Nelson»,

Результаты. Однократное пероральное введение БК мышам СВА в дозах 30 и 100 мг/кг приводило к незначительному увеличению содержания КР в плазме крови через 60-90 мин и только доза 300 мг/кг сопровождалась появлением двух максимумов концентрации (33,6 и 52,2 мкг/100 мл), наблюдавшихся через 20 и 50 мин от начала введения. КТ и ЛП обладали несколько лучшей биодоступностью и дозы 30 и 100 мг/кг приводили к повышению концентрации КР до 35 и 70 мкг/100мл в течение 60 мин. Курсовое введение БК, КТ и ЛП в дозах 0,1-10 мг/кг в течение 2 недель вызывало существенное увеличение их концентрации в плазме крови и в ткани печени, начиная с 4-го дня введения. Кинетика БК в сыворотке крови собак и поросят, содержавшихся на витамин А-дефицитной диете, после введения препарата per os в дозе 1 и 10 мг/кг показала незначительное увеличение содержания КР до 6-10 мкг/100 мл в течение первых 60 мин. Однократное пероральное введение ЛП кроликам массой 3-4 кг в дозе 500 мг приводило через 8 часов к пику КР, при этом отмечен значительный индивидуальный разброс в содержании ЛП в плазме крови. Среднее время удерживания ЛП в организме составило 13,5+0,85 ч., а время полувыведения 6,2+0,9 ч. Однократный пероральный прием БК здоровыми добровольцами в дозе 100, 250 и 650 мг приводил к 1,5-3,5-кратному повышению уровня провитамина в плазме крови и не влиял на содержание ретинола и ретиноевой кислоты. При систематическом приеме БК в дозе 30 и 60 мг в сутки у здоровых людей и у больных раком толстой кишки обнаружено повышение концентрации КР в 1,5-3 раза.

Выводы. БК, КТ, и ЛП обладают неодинаковой биодоступностью у различных видов лабораторных животных. Хорошая биодоступность БК у человека позволяет быстро увеличить его уровень в плазме крови при систематическом применении.

И.Н. Сидоров, Е.И. Попова, Г.М. Евдокимов

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА РАКА ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У БОЛЬНЫХ С МНОГОУЗЛОВЫМ ЗОБОМ

ГБОУВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского, Саратов

Задачи исследования. Показать возможности цитологического метода в диагностике рака щитовидной железы.

Материалы и методы. Изучены результаты обследования и хирургического лечения 260 больных с многоузловым зобом. Большинство пациентов были в возрасте от 40 до 60 лет. Мужчин было 40, женщин 220. Для диагностики были использованы УЗИ щитовидной железы, тонкоигольная аспирационная пункционная биопсия с цитологическим исследованием, исследование гормонов щитовидной железы и ТТГ, МРТ, КТ (по показаниям). По длительности наблюдения у эндокринолога больные распределены следующим образом: подавляющее большинство больных 75% не состояли на учете, 6,3% наблюдались от 1 до 3 месяцев, 3,4 % от 3 до 6, 15,3 % более 6 месяцев. Необходимо отметить, что у 51,4 % больных диагностировано два образования в щитовидной железе, у 25 % от двух до трех , а у 23,6 % более трех узлов. В клинике используется трехэтапная морфологическая верификация патологического процесса щитовидной железы. Первый этап - дооперационное морфологическое исследование, второй этап - интраоперационное цитологическое и экстренное гистологическое исследование, третий этап - послеоперационное плановое гистологическое исследование.

Результаты. На первом этапе морфологической диагностики у 148 (57 %) больных диагностированы доброкачественные заболевания щитовидной железы, у 26 (10 %) подозрение и у 86 (33 %) рак щитовидной железы. На основании полученных данных оперировано 260 больных. Во время интраоперационного исследования (цитологического и гистологического) рак диагностирован еще у 7 больных (2,6 %). Окончательное гистологическое заключение позволило у 2 (0,7 %) больных диагностировать рак щитовидной железы. Общий процент злокачественной патологии составил 36,3 %.

Выводы. Таким образом, трехэтапная морфологическая диагностика рака щитовидной железы обладает высокой разрешающей способностью, что позволяет в большинстве случаев поставить правильный диагноз.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Model 1020.

Ф

Ф

128 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

В.Б. Сирота, Л.Е. Муравлева, O.A. Пономарева, H.A. Кабилдина, И.М. Омарова, М.Д. Жумакаев БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ

И ТЕЗИОГРАФИЧЕСКАЯ КАРТИНА ПЛАЗМЫ КРОВИ БОЛЬНЫХ МЕСТНОРАСПРОСТРАНЕННЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ АРГЛАБИНОМ

Карагандинский государственный медицинский университет, Караганда, Казахстан КГП «Областной онкологический диспансер», Караганда, Казахстан

Задачи исследования. Изучение биохимических показателей и тезиографической картины плазмы крови больных местнораспространенным раком молочной железы (МРРМЖ) при химиотерапии (ХТ) с арглаби-ном.

Материалы и методы. Объектом исследования являлась кровь 48 больных с МРРМЖ (T2Ni-2M0, T3N0-2M0) с гистологической и иммуногистохимической верификацией в возрасте от 28 до 75 лет. Из них 25 женщин имели II6 и 23 - III стадии рака. В группу контроля вошли 32 практически здоровых женщин. Все больные разделены на 3 группы - 2 исследуемые, одна - контрольная. В контрольной группе больным проводили 4 курса неоадъювантной ХТ по схеме АС каждые 21 день, радикальную мастэктомию, 4 курса адъювантной ХТ (АС), лучевую терапию и гормонотерапию по показаниям. Исследуемая группа 1 получала лечение по аналогичной схеме, только режим ХТ (АС) сочетался с арглабином (арглабин 370 мг/м2 № 7 дней). Исследуемая группа 2 получала лечение по аналогичной схеме, но в неоадъювантном и адъювантном режиме применяли монотерапию арглабином. Всем больным МРРМЖ проведены исследования метаболитов пуринового обмена, внеклеточных нуклеиновых кислот, растворимых фибрин-мономерных комплексов и тезиография плазмы крови.

Результаты. У больных МРРМЖ в плазме крови зафиксированы достоверное снижение уровня мочевой кислоты по сравнению с контролем в 1,94 раза, гипоксантина - на 17,5 %, аденина - на 18,7 %, ксантина - на 12 %, скорости реакции гипоксантин^ксантин - на 9 %, а общая активность ксантиноксидазы снижена на 19%. У больных, получивших курс АС, уровень мочевой кислоты достоверно остается ниже контрольного в 1,84 раза, уровень гуанина сравним с контролем, а скорость 1 реакции превращения гипоксантина в ксантин превосходит контроль на 11%. У больных, получавших АС+арглабин, отмечен рост всех изучаемых показателей пуринового обмена и содержание КРФ повысилось в 10,5 раз, уровень РНК в 1,35 раз, уровень ДНК - в 2,3 раза по сравнению с показателями до лечения.

Выводы. Неоадъювантный режим АС с арглабином у больных МРРМЖ определяет более интенсивный катаболизм пуринового обмена, что отражает интенсивность распада опухолевых клеток и активацию иммунного ответа.

-1-1-2-2-1-

М.А. Сироткина , В.В. Елагин , П.В. Субочев , В.А. Каменский , Е.В. Загайнова

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПЛАЗМОННО-РЕЗОНАНСНЫХ НАНОЧАСТИЦ

ДЛЯ СЕЛЕКТИВНОГО ЛАЗЕРНОГО НАГРЕВА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ОПУХОЛЕЙ

1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 2Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород

Цель исследования. Изучение селективности накопления и эффективности лазерного нагрева наноча-стиц для разработки методики лазерной гипертермии опухолей

Материалы и методы. Исследование выполнено на модели опухоли рак шейки матки мышей РШМ-5. Золотые наностержни (размер 60/15 нм, максимум экстинкции 775 нм) и бипирамиды (200 нм, пик экстинкции 850 нм) вводили внутривенно в дозе 235 мкг/кг. Время максимального накопления наночастиц в опухоли оценивали прижизненно неинвазивно методом оптической когерентной томографии (ОКТ). Лазерную гипертермию проводили локально в непрерывном режиме: опухоль нагревали лазером с длиной волны 810 нм до 44-45 °С в течение 20 мин. Изменение температуры опухоли контролировали на поверхности методом ИК-термографии и внутри новым методом пассивной акустической термографии. Эффективность лечения оценивали по торможению роста опухоли и данным патоморфологического анализа. Верификацию наночастиц в опухоли выполняли методом электронной микроскопии.

Результаты. Методом ОКТ показано, что бипирамиды селективно накапливаются в опухоли РШМ-5 при внутривенном введении. Установлено, что период максимального накопления составляет 4-5 часов, что подтверждено данными электронной микроскопии. Следовательно, это время является оптимальным для проведения лазерной гипертермии. Методом ИК-термографии получено, что наночастицы повышают эффективность гипертермии за счет обеспечения селективности нагрева. Новым методом пассивной акустической термометрии выявлено, что внутренняя температура опухоли с наночастицами на несколько градусов выше, что также указывает на эффективность наночастиц для гипертермии. Наибольший противоопухолевый эффект обнаружен при применении наностержней. Морфологический анализ опухолевой ткани выявил наиболее значимые структурные изменения на 3 сутки после гипертермии.

Выводы. Золотые наностержни повышают эффективность лазерной гипертермии, которая заключается в селективности нагрева и повышении внутренней температуры опухоли на несколько градусов, что приводит к высокому противоопухолевому эффекту.

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации договор № 14.B25.31.0015._

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... | 129

А.Ю. Скрябина1, Н.С. Рукк1' Г.Н. Апрышко2

КОМПЛЕКСЫ РЕДКОЗЕМЕЛЬНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ

КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ВЕЩЕСТВА

'ФГБОУВПО «МИТХим. М.В. Ломоносова», Москва 2ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

В связи с тем, что с каждым годом выявляется все больше случаев онкологических заболеваний, а смертность от рака стоит на втором месте после заболеваний органов кровообращения, открытие и разработка новых противораковых лекарственных препаратов приобретает жизненно важное значение. В последнее время в программу клинических испытаний включены, помимо проявляющих нейро-, гепато- и нефротоксичность производных платины, значительное количество соединений металлов других групп Периодической системы Д.И. Менделеева, в частности, комплексы редкоземельных элементов (РЗЭ). Соединения РЗЭ могут найти применение в медицине в качестве контрастных веществ (например, соединения гадолиния) при МРТ-исследованиях с контрастом, люминесцентных проб, антиоксидантов, лекарств, проявляющих цитотоксичность по отношению к различным видам раковых клеток, и т.д.

В обзорном докладе рассматриваются комплексные соединения РЗЭ с некоторыми биологически активными лигандами (например, производными кумарина, пиразолона, 5-фтороурацила, 8-оксихинолина и др.), обладающими цитотоксической, антипролиферативной, противоопухолевой и т.п. активностью. Показано, что в большинстве случаев противоопухолевая активность комплексов выше в сравнении с активностью лигандов и исходных солей РЗЭ и часто превышает активность цисплатина и других лекарственных препаратов. Описываются возможные механизмы фармакологического действия комплексов РЗЭ, обусловленные многозарядностью катионов, высокими значениями координационных чисел, вариативностью степеней окисления и координационных полиэдров и т.д. Отмечается важность наличия в молекуле комплексов РЗЭ фрагментов, имеющих плоское строение, для реализации интеркаляционного механизма воздействия на ДНК - основную внутриклеточную мишень для большинства металл-содержащих противоопухолевых лекарств. Немонотонность изменения ряда свойств соединений РЗЭ, в том числе их биологической активности, позволит тонко регулировать концентрационный диапазон их воздействия при проведении клинических испытаний. Имеющиеся данные о биологической активности комплексов РЗЭ позволяют сделать заключение о том, что поиск потенциальных противоопухолевых лекарств в этом химическом классе - перспективное направление экспериментальной химиотерапии опухолей.

З.С. Смирнова, Л.М. Борисова, М.П. Киселева, Т.Д. Миникер,

Л.В. Эктова, В.А. Еремина, Л.А. Медведева, Н.И. Тихонова,

A.B. Ланцова, Е.В. Санарова, О.Л. Орлова, А.П. Полозкова, З.С. Шпрах

ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДНОГО ИНДОЛОКАРБАЗОЛА ЛХС-1208 ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. В настоящее время за рубежом производные индолокарбазола: бекатекарин и эндотека-рин проходят клинические испытания. Установлено, что производные индолокарбазола могут действовать на одну или несколько мишеней, например, протеинкиназу С, топоизомеразы, киназы, ДНК. Поэтому противоопухолевая активность производных индолокарбазола может быть обусловлена их способностью взаимодействовать со многими мишенями и, следовательно, индуцировать разные пути клеточной гибели.

Цель исследования. Доклиническое изучение противоопухолевой активности производного индолокарбазола ЛХС-1208.

Материалы и методы. Противоопухолевую активность ЛХС-1208 изучали на перевиваемых опухолях мышей: лимфолейкозе Р-388 и эпидермоидной карциноме легкого Льюис (LLC). В опытах использовали мышей-гибридов ВДР]. Критериями эффективности служили: торможение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продолжительности жизни (УПЖ, %) опытных мышей по сравнению с контрольными животными. Лекарственную форму - лиофилизат для приготовления раствора для инъекций растворяли в воде и вводили внутривенно в течение 5 дней или однократно в широком диапазоне доз от 10 до 175 мг/кг.

Результаты. ЛХС-1208 при ежедневном внутривенном введении в течение 5 дней оказывает противоопухолевый эффект на Р-388 равный 26 % УПЖ в дозе 10 мг/кг, в дозе 25 мг/кг - 76 % УПЖ, а в дозе 35 мг/кг -80 % УПЖ и гибелью мышей в 25 % случаев. При однократном внутривенном введении в дозах от 75 мг/кг до 150 мг/кг терапевтический эффект статистически не различается и составляет 31-34 % УПЖ без гибели мышей от токсичности. На LLC в дозе 25 мг/кг при ежедневном внутривенном введении в течение 5 дней вызывает ТРО, которое составляет 96-75 % в течение 19 дней.

Выводы. Результаты по противоопухолевой активности соединения ЛХС-1208 дают основание продолжить его доклиническое изучение на других моделях опухолей мышей.

Работа выполнена в рамках Государственного контракта 13411.1008799.13.120 от 24 июня 2013 г. «Доклинические исследования инновационного лекарственного средства на основе производного индолокарбазола для лечения онкологических заболеваний»

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

130 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

З.С. Смирнова1, Л.М. Борисова1, М.П. Киселева1, Н.С. Сапрыкина1, 2 2 2 1 В.П.Краснов , Г.Л. Левит , Т.В. Матвеева , A.B. Ланцова ,

Е.В. Санарова1, О.Л. Орлова1, А.П. Полозкова1

ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНОГО НИТРОЗОМОЧЕВИНЫ OR-2011 НА ЛИМФОЛЕЙКОЗАХ МЫШЕЙ

1ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва

2Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург

Актуальность. Лекарственные средства из группы производных нитрозомочевины обладают широким спектром противоопухолевого действия, для них характерно отсутствие перекрестной резистентности с типичными алкилирующими агентами, отмечены существенные различия в механизмах действия представителей этой группы препаратов. Кроме того, отличительной особенностью является их способность проходить через ГЭБ, поэтому часто используются при опухолях головного и спинного мозга.

Цель исследования. Изучения противоопухолевой активности нового производного нитрозомочевины OR-2011 в отношении лимфолейкозов мышей.

Материалы и методы. Противоопухолевую активность OR-2011 изучали на перевиваемых лимфолейко-зах Р-388 и L-1210. В опытах использовали мышей-гибридов ВДБь Критериями противоопухолевой эффективности служили: увеличение продолжительности жизни (УПЖ, %) опытных мышей по сравнению с контрольными животными и излечение (% случаев). Лекарственную форму - лиофилизат для приготовления раствора для инъекций растворяли в 5% глюкозе и вводили внутривенно в широком диапазоне доз от 50 мг/кг до 175 мг/кг однократно.

Результаты. Выявлена дозовая зависимость противоопухолевого эффекта OR-2011 в отношении лимфолейкозов мышей. OR-2011 оказывает терапевтический эффект на Р-388 равный 90 % УПЖ в дозе 50 мг/кг, в дозе 135 мг/кг УПЖ составляет 181% с излечением мышей в 33,3 % случаев, а в дозе 175 мг/кг УПЖ составляет 206 % с излечением в 22,2 % случаев и токсичностью в 22,2 % случаев. Па L-1210 в дозе 50 мг/кг препарат имеет достаточно низкий противоопухолевый эффект - 70 % УПЖ. Наибольшая эффективность 0R-2011 выявлена в дозе 125 мг/кг, при введении которой УПЖ составляет 346 % и излечение мышей в 66,7 % случаев. При введении 0R-2011 в дозе 175 мг/кг наблюдается излечение мышей в 75 % случаев и гибель животных в 25 % случаев.

Выводы. Результаты по противоопухолевой активности нового производного нитрозомочевины OR-2011 дают основание продолжить изучение его эффективности на других моделях опухолей мышей.

Работа выполнена в рамках Государственного контракта № 13411.1008799.13.163 «Доклинические исследования противоопухолевого лекарственного средства класса нитрозомочевин».

Е.А. Соколова , Т.А. Здобнова ' , O.A. Стремовский , И.В. Балалаева , С.М. Деев

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ НОВОГО РЕКОМБИНАНТНОГО ИММУНОТОКСИНА

НА ОСНОВЕ ПСЕВДОМОНАДНОГО ЭКЗОТОКСИНА AIN VITRO И IN VIVO

1 Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва

Задачи исследования. Исследование эффективности нового рекомбинантного aHTH-HER2/neu иммуно-токсина на основе псевдомонадного экзотоксина А: оценка цитотоксичности in vitro и противоопухолевого эффекта in vivo.

Материалы и методы. Цитотоксичность aHTH-HER2/neu иммунотоксина оценивали методом МТТ-теста на клеточных культурах карциномы яичника человека SKOV3ip (гиперэкспрессия рецептора HER2/neu) и яичника китайского хомячка CHO (отсутствие HER2/neu). Исследование противоопухолевой эффективности иммунотоксина in vivo проводили на бестимусных мышах-самках линии nude с интраперитонеально привитой карциномой яичника человека, трансфицированной красным флуоресцентным белком Katushka (SKOV3ip-kat). Прижизненный неинвазивный мониторинг опухолевого процесса осуществляли на установке для поверхностного флуоресцентного имиджинга. Рост опухолевых узлов количественно оценивали по показателю интегральной интенсивности флуоресценции в брюшной полости.

Результаты и выводы. В экспериментах in vitro показана избирательная цитотоксичность нового рекомбинантного иммунотоксина на основе псевдомонадного экзотоксина А для клеток, гиперэкспрессирующих рецептор HER2/neu. В ходе прижизненного мониторинга роста опухоли с использованием интраперитонеаль-ной флуоресцентной модели карциномы яичника человека выявлен выраженный противоопухолевый эффект исследуемого иммунотоксина: в опытной группе наблюдалось значительное торможение опухолевого роста по сравнению с контролем. Полученные предварительные результаты свидетельствуют о противоопухолевой эффективности данного иммунотоксина и целесообразности дальнейшего исследования его свойств (в частности, фармакокинетики и токсичности), а также подбора оптимальных доз.

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (договор № I4.Z50.3I.0022) и РФФИ (проект № I3-04-40228-H)._

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 131

С. О. Соломевич1, П.М. Бычковский1, Т.Л. Юркштович1,

Н.В. Голуб , П.Ю. Мирчук1, В.А. Алиновская 1, Р.И. Костерова 1, А.А. Кладиев 2 КИНЕТИКА РЕЛИЗА ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ВЕЩЕСТВА ПРОСПИДИНА ИЗ ГИДРОГЕЛЕЙ НА ОСНОВЕ ФОСФАТОВ ДЕКСТРАНА

1 Учреждение Белорусского государственного университета «Научно-исследовательский институт физико-химических проблем», Минск, Беларусь 2ООО «Биотехнологическая компания ТНК», Москва

Актуальность. Для создания систем адресной доставки лекарственные веществ особый интерес в качестве полимеров-носителей представляют биодеградируемые гидрогели на основе модифицированных полисахаридов, которые биосовместимы, не имеют выраженных побочных эффектов и могут использоваться при продолжительном лечении.

Цель исследования. Получение системы адресной доставки проспидина в пораженный орган- мишень и оценка кинетики релиза противоопухолевого вещества из гидрогелей в модельных опытах in vitro и in vivo в зависимости от степени сшивки фосфатов декстрана, массового соотношения полимер/противоопухолевое вещество.

Материалы и методы. В настоящей работе фосфаты декстрана c содержанием фосфорнокислых групп 2,0-2,9 ммоль/г были получены путем этерификации ортофосфорной кислотой в расплаве мочевины. Приготовление противоопухолевого гелеобразующего препарата (доза проспидина 1000 мг/г) проводили путем смешения проспидина с фосфатом декстрана и последующей стерилизацией у-излучением в дозе 2,5 Мрад. Воду для инъекций добавляли за 15-20 мин до применения.

Результаты и выводы. Установлено, что в течение первых 60 минут из фазы носителя в фосфатный буферный раствор высвобождается от 45 до 70 % массы сорбированного проспидина. Максимальная доля высвобожденного проспидина зависит от степени сшивки гидрогелей и массового соотношения ФД/проспидин: чем ниже степень сшивки, и соответственно, выше степень набухания, тем выше количество высвобождающегося цитостатика. По мере дальнейшего роста времени инкубации в буферном растворе наблюдается потеря массы гелеобразующей лекарственной формы, что свидетельствует о высвобождении проспидина из гидрогеля в виде комплекса ФД-проспидин в результате осуществления перехода гель-золь. Приведены результаты изучения противоопухолевой активности пролонгированной формы проспидина в условиях in vitro и in vivo. В опытах in vitro установлено, что скорость высвобождения проспидина из гидрогелей замедляется по мере роста массового соотношения полимер- носитель/цитостатик. На модели гепатомы Зайдела установлено увеличение противоопухолевой активности пролонгированной формы проспидина по сравнению с субстанцией.

-1-2-1-

Е.Ф. Странадко , Т.И. Малова , A.C. Савчук

ЛЕЧЕНИЕ УПОРНО РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО БАЗАЛЬНОКЛЕТОЧНОГО РАКА КОЖИ

1ФГБУ «Государственный научный центр лазерной медицины ФМБА России», Москва 2ООО «ВЕТА-ГРАНД», Москва

Актуальность. Базальноклеточный рак кожи (БКРК) составляет 90 % всех злокачественных новообразований кожи. Наиболее эффективным методом лечения БКРК признана фотодинамическая терапия (ФДТ). Наряду с высокой степенью излечения БКРК, составляющей 95-96 %, ФДТ обеспечивает хорошие и отличные косметические результаты. Некоторые формы БКРК в 10-12 % случаев характеризуется упорно рецидивирующим течением (УРТ), при котором ни один из традиционных методов лечения не позволяет добиться излечения.

Задачи исследования. Оценить возможности ФДТ в лечении упорно рецидивирующего БКРК и разработать методические подходы к проведению ФДТ.

Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилась большая группа больных БКРК с УРТ, которые перенесли по 3-5 процедур различных видов лечения (близкофокусная рентгенотерапия, криодеструк-ция, электрокоагуляция, лазерная вапоризация и пр.). У 3 больных было более 10 лечебных вмешательств. Основная масса больных поступила с распространенными рецидивами, соответствующими символам Т3-Т4 международной классификации. Так как возможности традиционных методов лечения у этой категории больных были исчерпаны, мы применяли повторные курсы ФДТ с повышенными дозами фотосенсибилизаторов, плотности энергии светового воздействия и различными вариантами подведения света (фракционное поверхностное облучение, внутритканевое и внутриполостное подведение света). В процессе динамического наблюдения у больных с рецидивами размерами до 5 мм выполняли лазерную вапоризацию.

Результаты. ФДТ у всех больных сопровождалась терапевтическим эффектом, однако полной резорбции БКРК при УРТ удалось добиться лишь в половине случаев. Лечение иногда длилось годами. Необходимо отметить, что благодаря, прежде всего, сосудистому механизму действия ФДТ, длительность безрецидивных интервалов при УРТ составляла от 6 месяцев до 3-6 лет.

Выводы. Больные БКРК с УРТ не являются бесперспектиными в отношении возможности специального лечения. ФДТ при БКРК с УРТ оказалась эффективным методом лечения и в ряде случаев приводила к излечению с длительностью наблюдения более 5 лет. В зависимости от локализации и распространенности процесса при проведении ФДТ следует использовать все возможные методы подведения световой энергии.

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

132 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

К.Д. Творогова, C.B. Шумилова1, Д.В. Новиков1, Г.А. Кравченко1, В.В. Новиков1, А.Ю. Барышников2 ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА ICAM-1 ЧЕЛОВЕКА В КЛЕТКАХ ЛИМФОМ

1 Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2ФГБУ «РОНЦ им. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. ICAM-1 (CD54) является поверхностным клеточным гликопротеином, который представлен на клетках многих типов, включая Т- и B-лимфоциты. Процесс взаимодействия ICAM-1 с рецепторами вовлечен в формирование клеточных адгезивных контактов и играет ключевую роль в миграции и инвазии лейкоцитов в очаг воспаления, а также в метастазировании раковых клеток. В результате альтернативного сплайсинга ген ICAM-1 способен давать форму мРНК с делецией трансмембранного домена, которая транслируется в растворимый белок ICAM-1.

Цель исследования. Изучение профиля экспрессии гена ICAM-1 в клетках перевиваемых линий, полученных от больных Т-клеточной лимфомой кожи, лимфомой взрослых, лимфомой Беркитта.

Материалы и методы. Исследовали клетки перевиваемых линий HuT78, H9, Kit225K6, Ramos, имеющих происхождение от больных лимфомами. Анализ экспрессии гена ICAM-1 проводили с использованием ОТ-ПЦР. Нуклеотидные последовательности транскриптов гена ICAM-1 определяли путем секвенирования.

Результаты и выводы. В клетках линий HuT78, H9 (Т-клеточная лимфома кожи) и Ramos (лимфома Беркитта) обнаружена полноразмерная форма мРНК ICAM-1, что свидетельствует о том, что злокачественная трансформация клеток данных типов не сопровождается выключением гена ICAM-1. В линии Kit225K6, имеющей происхождение от раковых клеток больного лимфомой взрослых, данный вариант мРНК не детектировался. Альтернативная форма мРНК ICAM-1 не выявлена в клетках ни одной из тестированных линий. Потеря экспрессии гена ICAM-1 Т-лимфоцитами при лимфоме взрослых может являться отражением изменения механизмов адгезии, сопровождающего злокачественное перерождение клеток.

Работа выполнена в рамках базовой части государственного задания №2014/134 Минобрнауки России (проект 2575).

Л.Р. Тилова , О.И. Задорожная ,К.И. Кирсанов, A.M. Оглоблина , М.Г. Якубовская , И.В. Будунова , Г.А. Белицкий , Е.А. Лесовая ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СЕЛЕКТИВНЫХ АГОНИСТОВ ГЛЮКОКОРТИКОИДНОГО РЕЦЕПТОРА (SEGRA) В КОМБИНИРОВАННОЙ ХИМИОТЕРАПИИ ГЕМОБЛАСТОЗОВ 1ФГБУ «РОНЦ им. H.H.Блохина» РАМН, Москва 2Northwestern University, Chicago, USA

Актуальность. В настоящее время перспективным направлением исследований является анализ молекулярных механизмов действия комбинаций препаратов для терапии гемобластозов с использованием селективных агонистов глюкокортикоидного рецептора, которые вызывают меньше метаболических осложнений при длительных курсах приема, чем глюкокортикоиды. Ранее нами был продемонстрирован противоопухолевый эффект CpdA, нового соединения данного класса, in vitro. Более того, был показан синергизм действия CpdA и ингибитора протеасом бортезомиба.

Цель исследования. Изучение противоопухолевой активности CpdA в комбинациях с препаратами различного действия на клетки лимфом in vitro.

Задачи исследования. Определить суммарную противоопухолевую активность комбинаций CpdA с: ингибиторами белка DDIT4, играющего ключевую роль в сигнальном пути mTOR; ингибиторами протеасом; ингибиторами убиквитинирования; узкобороздочными лигандами. Изучить механизмы комбинированного действия указанных соединений.

Материалы и методы. Цитотоксический эффект ингибиторов DDIT4, ингибиторов протеасом, ингибиторов убиквитинирования и узкобороздочных лигандов; определяли путем прямого подсчета клеток. Уровень апоптоза и степень реактивации эпигенетически молчащих генов определяли с помощью проточной цитофлуо-риметрии. Разобщение межклеточных контактов определяли по степени проникновения люминесцентного красителя между слоями клеток.

Результаты и выводы. На клетках лейкозов in vitro был показан синергизм действия для комбинации CpdA с ингибиторами DDIT4, узкобороздочными лигандами, ингибиторами убиквитинирования. Антипроли-феративное действие этих соединений коррелировало с развитием апоптоза. Были получены данные о том, что CpdA, в отличие от дексаметазона, не снижает степень кооперации клеток, стабилизирует эпигенетическое молчание генов, а также не запускает процесс аутофагии в трансформированных лимфобластах, что способствует увеличению цитотоксического эффекта.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 133

A.C. Тихомиров12, А.Е. Щекотихин12, М.Н. Преображенская1 ИССЛЕДОВАНИЕ

ВЛИЯНИЯ СТРУКТУРЫ БОКОВОЙ ЦЕПИ АНТРА[2,3-Ь] ФУРАНКАРБОКСАМИДОВ НА ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

1ФГБУ «НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе» РАМН, Москва 2ФГБУВПО «РХТУим. Д.И.Менделеева»' Москва

Актуальность. Для углубленных доклинических исследований отобрано производное 4,11-дигидрокси-5,10-диоксоантра[2,3-Ъ]фуран-3-карбоксамида (препарат ЛХТА-2034), обладающее высокой противолейкозной активностью in vivo и in vitro (А.Е. Щекотихин и др., патент РФ №2412166). С целью выявления закономерностей связи структура-активность синтезирована серия новых аналогов ЛХТА-2034.

Цель исследования. Изучение роли карбоксамидной группы в антипролиферативных свойствах 4,11-дигидрокси-5,10-диоксоантра[2,3-Ъ]фуранкарбоксамидов.

Материалы и методы. Серия антра[2,3-Ъ]фуранкарбоксамидов синтезирована из соответствующих 4,11-дигидрокси-5,10-диоксоантра[2,3-Ъ]фуран-2- и 3- карбоновых кислот (A.C. Тихомиров и др., ХГС 2011, 10, 1464; ХГС 2013, 2, 264) и циклических диаминов. Цитотоксичность соединений определяли в МТТ-тесте на линиях клеток лейкоза мышей L1210.

Результаты. Новая серия амидов антра[2,3-Ъ]фуран-5,10-дион-3-карбоновой кислоты и циклических диаминов обладает высокой антипролиферативной активностью, ингибируя рост клеток лейкоза L1210 в микромолярных и субмикромолярных концентрациях. Наиболее активными в серии оказались производные, содержащие 3-аминопирролидин (IC50=0.67 мкМ) и 3-аминопиперидин (IC50=0.69 мкМ), значение 50%-й ростин-гибирующей концентрации которых близко к соединению-лидеру ЛХТА-2034 (IC50=0.60 мкМ). Изомерные аналоги 3-карбоксамидов - производные антра[2,3-Ъ]фуран-5,10-дион-2-карбоксамида оказались значительно менее активными (IC50=93-250 мкМ).

Выводы. Показано, что амиды 4,11-дигидрокси-5,10-диоксоантра[2,3-Ъ]фуран-3-карбоновой кислоты и циклических диаминов обладают высокой антипролиферативной активностью, в то время как изомерные производные антра[2,3-Ъ]фуран-2-карбоновой кислоты практически не влияют на рост опухолевых клеток. Полученные данные говорят о критической роли фармакофорной группы в положении 3 антра[2,3-Ъ]фуран-5,10-дионов.

Работа выполнена в рамках гос. контракта Министерства промышленности и торговли РФ № 12411.1008799.13.007' шифр «2.1 Топоизомеразы 2012»._

-1-2-1-

Е.Г. Толоконников , Ш.С. Калиева, С.М. Адекенов

ФАРМАКОЭКОНОМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА «АРГЛАБИН»

1 Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия», Караганда, Казахстан 2Карагандинский Государственный Медицинский Университет, Караганда, Казахстан

Актуальность. Рак молочной железы занимает первое место среди злокачественных новообразований у женщин и в настоящее время значительное внимание уделяется поиску и внедрению эффективных препаратов для лечения данной патологии, как с клинической, так и с экономической точки зрения. Многочисленные поиски препаратов с противораковой и иммуномодулирующей активностью привели к необходимости использования в комплексной терапии злокачественных новообразований лекарственных препаратов природного происхождения, одним из которых является отечественный препарат «Арглабин».

Задачи исследования. Изучить клинико-экономическую эффективность оригинального препарата «Арглабин» при местнораспространенном раке молочной железы в клинической практике на основе методов фарма-коэкономического анализа.

Материалы и методы. Применяли методы фармакоэкономического анализа "стоимость болезни" (прямые затраты), "затраты - эффективность".

Результаты. Проведенный фармакоэкономический анализ оригинального препарата «Арглабин» показал эффективность схемы с использованием арглабина, что подтверждается показателями выживаемости - трехлетняя безрецидивная выживаемость в группе больных, получавших арглабин на фоне лучевой терапии выше на 55,2 %, чем при использовании только лучевой терапии. По показателю «затраты-эффективность» схема арглабин+лучевая терапия дешевле, чем для стандартной лучевой терапии.

Выводы. Таким образом, с точки зрения фармакоэкономического анализа способ лечения больных ме-стнораспространенным раком молочной железы с назначением препарата «Арглабин» является эффективным, и что позволяет рекомендовать широкое использование его в клинической практике.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

134 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

A.C. Толстокорое, И.В. Федотов, С.А. Дергунова РОЛЬ HELICOBACTER PYLORI В РАЗВИТИИ РАКА ЖЕЛУДКА ГБОУВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России, Саратов Актуальность. Helicobacter pylori (HP) связан с широким спектром гастродуоденальных заболеваний -от бессимптомного гастрита до рака желудка. Его влияние на развитие рака желудка не столь бесспорно, однако, вызывает значительную заинтересованность гастроэнтерологов. В некоторых работах отмечается прямая патогенетическая связь между HP-инфекцией и развитием рака и лимфомы желудка. Прослеживается корреляция между уровнем антител к HP и риском развития рака желудка. При серологических исследованиях антитела IgG к HP чаще обнаруживались у больных раком желудка, чем у здоровых. В более молодом возрасте связь рака желудка и HP-инфекции прослеживается более чётко, и чем раньше произошло инфицирование HP, тем выше риск развития рака желудка. Положительная корреляция между HP-инфекцией и раком желудка касается некардиальной локализации поражения, в отличие от рака кардии, где связь с инфекцией не достоверна. Задачи исследования. Определение уровня контаминации HP в биоптатах у пациентов с раком желудка и выявление наиболее вирулентных штаммов. Материалы и методы. В последнее время всё большее применение в выявлении HP находит ПЦР (полимерная цепная реакция) - диагностика, которая даёт возможность идентифицировать видоспецифичный для HP фрагмент ДНК. Этот метод является высокоспецифичным, даёт возможность типировать и дифференцировать штаммы бактерий, что позволяет осуществить их эпидемиологические изучение: установить ответственность того или иного штамма за возникновение различной патологии, выявить наиболее вирулентные штаммы. Результаты. Важным этапом научного исследования было определение уровня контаминации HP у пациентов с раком желудка и установление частоты заболеваемости раком желудка от наличия хеликобактериоза. Морфологическая верификация биптатов со слизистой оболочки желудка осуществлялась у 41 пациента с раком желудка. Наличие HP в биоптатах выявилось в 51,2% случаев. Обсеменённость носила выраженный характер - более 50 микробных групп в исследуемом поле зрения. При морфологической верификации выявлено: аденокарцинома - 24 пациента (у 14 выявляли HP), недифференцированный рак - 15 (7), скирр - 2 случая без обсеменнёности. Выводы. У больных раком желудка контаминация HP возрастает до 80 %.

A.M. Торчинов , М.М. Умаханова , P.A. Дуванский , В.А. Дуванский ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ В ЛЕЧЕНИИ НЕОПУХОЛЕВЫХ И ПРЕДРАКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ 1 ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет», Москва 2ФГБУ «Государственный научный центр лазерной медицины ФМБА, Москва Задачи исследования. Оценить эффективность лазерной фотодинамической терапии (ФДТ) в лечении больных с неопухолевыми и предраковыми заболеваниями шейки матки. Материалы и методы. Пролечено 102 женщины с неопухолевыми заболеваниями шейки матки: эктопия у - 50 пациенток (49%), лейкоплакия у - 36 (35,3 %), эндометриоз у - 9 (8,8%), плоская кондилома шейки матки у - 7 (6,9%); и 57 пациенток с дисплазией шейки матки различной степени тяжести: легкая (CIN I) - у 18 (31,6%) больных, умеренная (CIN II) - 26 (45,6%) пациентки и тяжелая (CIN III) - 13 (22,8%) обследованных. Обследование больных включало в себя: клиническое обследование; кольпоскопическое, микробиологическое, цитологическое и гистологическое исследования, флуоресцентную диагностическую и оптическую когерентную томографию. 93 (58,5%) пациенткам, которым проводили ФДТ. В группе сравнения - 66 (41,5%) пациенток, использовали диатермохирургический (ДХ) метод лечения. ФДТ с ФС «Радахлорин» (гель для наружного применения, 0,1% - 25,0 г. при неопухолевых и раствор для в/в введения, 0,35% - 10,0 мл при предраковых заболеваниях) проводили с использованием лазерного аппарата МИЛОН ЛАХТА в непрерывном_режиме, длина волны 662 нм, мощность - 1 Вт, плотность - 80-200 Дж/см2 при неопухолевых, и 250-300 Дж/см при предраковых заболеваниях). ФДТ проводилась в I фазу менструального цикла, не требовала проведения анестезии. Результаты. При неопухолевых заболеваниях эффективность ДХ составила 71,1%, неполная эпителиза-ция отмечена у 13 (28,9%) пациенток, рецидив эктопии отмечен у 10 (22,2%) пациенток. Эффективность ФДТ -89,5%, частичная эпителизация отмечена у 6 (10,5%) пациенток, рецидив заболевания отмечен у 5 (8,8%) пациенток с эктопией. Эффективность лечения дисплазии шейки матки I-III степени тяжести методами ДХ - 95%, ФДТ - 94%, Число осложнений при ФДТ ниже (2,8%) против 9,5% при ДХ. Повторное возникновение дисплазии шейки матки при различных ее степенях нами отмечено 4,8% при диатермоэлектроконизации и в 8,3% наблюдений при ФДТ. Выводы. ФДТ с использованием фотосенсибилизатора «Радахлорин» является эффективным методом лечения больных с неопухолевыми заболеваниями шейки матки и успешно может применяться при лечении дисплазии, не сочетающейся с рубцовой деформацией ткани шейки матки.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 135

Н.Е. Устюжанина , H.A. Ушакова , М.И. Билан , А.И. Усов' , А.Ю. Анисимова3' Н.Э. Нифантъев , М.В. Киселевский3 ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ СТРУКТУРНО РАЗЛИЧНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ ФУКОИДАНОВ 1ФГБУ «Институт органической химии имени Н. Д. Зелинского» РАН, Москва 2ФГБУ «Институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича» РАМН, Москва 3ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва Задачи исследования. Изучить серию фракций полисахаридов фукоиданов из различных видов бурых водорослей in vitro, оценить их иммуностимулирующую, антиангиогенную и антиадгезионную активность. Материалы и методы. Фракции полисахаридов фукоиданов были выделены из бурых водорослей видов C. flageliformiS' F. evanescence, F. distichus, S. latissima и C. okamuranus методами экстракции, ионообменной хроматографии и гель-хроматографии. Была изучена способность образцов блокировать адгезию клеток рака молочной железы человека (MCF-7) на монослое тромбоцитов, ингибировать ангиогенез на матригеле, а также стимулировать натуральные киллеры (НК) по отношению к опухолевым клеткам К-562. Результаты. Показано, что все образцы не оказывают прямого цитоткосического действия на мононук-леарные лейкоциты в диапазоне концентраций 0,75-25 мг/мл и значимо повышают цитотоксическую активность натуральных киллеров по отношению к клеткам линии К-562. Исследуемые соединения блокируют адгезию опухолевых и тромбоцитов, и ингибирует процесс формирования капиллярных трубочек (начальный этап ангиогенеза) при испытании на линии эндотелиальных клеток (HUVEC). Исследовано взаимодействие divKono-лимеров с очищенными белками. В качестве белка-мишени был выбран тромбин, которыйиграет важную роль в процессе метастазирования. Было установлено образование комплекса белка с полисахаридом. Исследованные образцы существенно различаются по активности и наиболее перспективны полисахариды из водорослей S. latissima (SL) и C. flageliformis (CF), построенные из (1-3)-связанных альфа^-фукопиранозных остатков и несущие отрицательно заряженные группы в боковых заместителях. Выводы. Величина биологического эффекта существенно зависит от структурных характеристик полисахаридов фукоиданов. Обнаружены образцы фукоиданов, проявляющие иммуностимулирующую, антиангиогенную и антиадгезивную активности, перспективные для дальнейших исследований in vivo.

ИИ Файнголъд' А.Ю. Рыбкин. Г.В. Костюк A.A. Терентьев. P.A. Котелъникова. А.И.Котельников ФОТОДИНАМИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ КОНЪЮГАТОВ ПОЛИФУНКЦИО-НАЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ФУЛЛЕРЕНА И КРАСИТЕЛЕЙ НА ПЛАЗМИДНУЮ МОЛЕКУЛУ ДНК Институт проблем химической физики РАН' Черноголовка Актуальность. В основе фотодинамической терапии (ФДТ) лежит фотодинамический эффект повреждения биологических объектов световым излучением в присутствии некоторых красителей (фотосенсибилизаторов), которые повышают чувствительность объекта к свету при доступе кислорода. Впервые фотодинамический эффект был описан Raab в 1900 г., обнаруживший летальное действие акридинового оранжевого на парамеций при освещении их солнечным светом. Повреждение нуклеиновых кислот (ДНК, РНК) является важным этапом фотодинамической терапии. В зависимости от количества повреждений, полученных молекулой ДНК, может быть вызвана остановка клеточного цикла, запущен механизм апоптоза. Задачи исследования. Изучить способность конъюгатов полифункциональных производных фуллерена С60 (ППФ) и красителей вызывать повреждение молекулы плазмидной ДНК pET-21 при облучении светом в полосе поглощения красителя. Материалы и методы. В работе исследованы конъюгаты ППФ-Рубоксил и ППФ-Флуоресцеин. Фотодинамическое действие ППФ и красителей исследовали на плазмидной ДНК рЕТ-21, выделенной из Escherechia coli (плазмиды представляют собой двуцепочечные замкнутые кольцевые молекулы ДНК). Исследование проводили методом горизонтального электрофореза в 1% агарозном геле. Результаты и выводы. При облучении светом растворов (in vitro), содержащих плазмидную ДНК pET-21, NADH, ППФ-Рубоксил и плазмидную ДНК pET-21, NADH, ППФ-Флуоресцеин наблюдали изменение структуры ДНК рЕТ-21, исчезновение суперскрученной формы и переход ее в кольцевую форму. Такой переход возможен при одноцепочечном разрыве цепочки ДНК. Это доказывает эффективное фотодинамическое действие конъюгатов ППФ-Рубоксил и ППФ-Флуоресцеин на структуру ДНК. Эти исследования являются перспективными для применения ППФ в качестве фотосенсибилизирующих систем в фотодинамической терапии опухолевых процессов. Благодарности: П.А. Трошину и А.Б. Корневу за синтез конъюгатов полифункциональных производных фуллерена С60 и красителей. Работа выполнена при финансовой поддержке программы Президиума РАН № 24' программы 0ХНМ-09 и проекта РФФИ№14-04-31587 мол а.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

136 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

-1-1-1-2-2-2-

Е.В. Филоненко , _Т.Д Крылова , А.Н. Окушко , П.В.Грачев , КГ.Линьков , В.Б.Лощеное

ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ПОДКОЖНО РАСПОЛОЖЕННЫХ ПЕРВИЧНЫХ,

РЕЦИДИВНЫХ И МЕТАСТАТИЧЕСКИХ ОПУХОЛЕЙ

С ОХЛАЖДЕНИЕМ ПОВЕРХНОСТНЫХ СЛОЕВ КОЖИ

1ФГБУ «МНИОИим. П.А.Герцена» МЗ РФ, Москва 2Институт Общей Физики им. А.М.Прохорова РАН, Москва

Актуальность. Особую сложность при лечении больных со злокачественными опухолями кожи представляет группа пациентов с узловыми формами роста рака кожи и с внутрикожными метастазами рака молочной железы. Крупные размеры очагов, множественный характер поражения, невозможность или неэффективность традиционных методов лечения снижает психолого-эмоциональный статус больных, способствует появлению впоследствии болевого синдрома, отёка, изъязвления и кровотечения из опухолевых узлов, интоксикации, косметических дефектов, особенно при расположении опухолевых узлов на лице. Наряду с хирургическим, лучевым и лекарственным методами при лечении злокачественных опухолей кожи применяется метод фотодинамической терапии. Для повышения эффективности лечения, в МНИОИ им. П.А.Герцена разработан метод неинвазивной внутритканевой сочетанной фотодинамической терапии и лазерной гипертермии с низкотемпературной протекцией здоровых тканей.

Цель исследования. Оптимизация и повышение эффективности лечения больных раком кожи узловой формой роста и с внутрикожными метастазами рака молочной железы. Материалы и методы. МНИОИ им. П.А. Герцена располагает опытом использования сочетанной фотодинамической терапии с использованием фотосенса и лазерной гипертермии с низкотемпературной протекцией здоровых тканей у 39 больных данной группы, у которых проведение традиционных методов лечения сочтено нецелесообразным. Возраст больных колебался от 40 до 90 лет, средний возраст составил 69,2 года. Лечебному воздействию подвергались опухолевые узлы от 0,5 до 6,0см в диаметре, количество опухолевых узлов у одного больного варьировало от 1 до 6. При проведении сеанса внутритканевой сочетанной ФДТ+ЛГ в качестве источника света используют лазерные аппараты «ЛФТ-БИОСПЕК» (ООО «Биоспек», Россия) с длиной волны 675нм для ФДТ «Кристалл» или «Био-спек» с длиной волны 808 нм для ЛГ. Низкотемпературная протекция достигается благодаря оригинальному устройству, дистальный конец которого представлен сапфировой линзой, во время сеанса лечения устанавливается на поверхность кожи в проекции расположения опухолевого очага. При этом установка устройства производится под достаточным давлением для компрессии здоровых тканей. Плотность энергии лазерного излучения составила при ФДТ режиме - 764Дж/см2, мощность лазера в режиме гипертермии - 6 Вт. В зоне опухоли в режиме гипертермии нагревание тканей происходило от 42 до 55 °С. Курс лечения проводился в течение 4-10 сеансов в зависимости от размеров опухолевого узла. Во время проведения процедуры осложнений не отмечено.

Результаты: у 31 больного раком кожи (100,0 %) отмечена полная регрессия очагов опухоли после проведенного лечения, у 8 больных с 31 внутрикожными и подкожными метастазами рака молочной железы 8 очагов (25,8 %) подверглись полной регрессии, 9(29,0 %) - частичной регрессии, 14(45,2 %) - стабилизации.

Выводы. Накопленный нами опыт свидетельствует об улучшении результатов лечения больных с узловыми формами рака кожи и с внутрикожными метастазами рака молочной железы и может применяться как наряду, так и при невозможности проведения традиционных методов лечения.

-1-1-1-3-3-2-2-

Е.В. Филоненко , Г.П. Крылова , А.Г. Яникова , И.А. Шикунова , В.Н. Курлов , В.В. Волков , В.Б. Лощеное

ПРИМЕНЕНИЕ САПФИРОВЫХ КАПИЛЛЯРОВ ДЛЯ ДОСТАВКИ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ

К ОПУХОЛЯМ РАЗЛИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ

1ФГБУ «МНИОИим. П.А.Герцена» МЗ РФ, Москва 2Институт общей физики имени A.M. Прохорова РАН, Москва 3Институт физики твердого тела РАН, Москва

Актуальность. В последнее десятилетие активно развиваются оптические методы медицинской диагностики и терапии, основанные на достижениях современной науки в изучении взаимодействия света с живыми тканями, которые выводят на новый уровень лазерные методы терапии внутритканевых опухолей. В настоящее время для внутритканевых методов облучения в режиме гипертермии или фотодинамической терапии в качестве систем доставки лазерного излучения разработан новый класс контактных облучателей на основе кварцевых волокон, помещенных в сапфировые игловые капилляры, которые обладают высокой тепловодностью, стойкостью к термоудару, твердостью, прочностью, а также химической инертностью к крови и тканям человека в сочетании с высоким пропусканием в широком диапазоне длин волн излучения. Использование сапфировых облучателей позволяет более точно определять требуемые параметры облучения и стабилизировать динамику пространственного фототермического распределения в течение всей процедуры.

Цель исследования. Повышение эффективности лечения больных раком различной локализации с использованием сапфировых облучателей.

Материалы и методы. Мы располагаем опытом использования сапфирового иглового капилляра при ФДТ и ФДТ в сочетании с гипертермией опухолей различной локализации у 18 больных. Сапфировый игловой капилляр (внутренний диаметр 0.5-0.6 мм, внешний - 1.2 мм) диффузором 25мм вводят параллельно поверхности кожи на расстоянии около 3 мм. При проведении сеанса внутритканевого излучения с использованием сапфировых игловых капилляров в качестве источника света используют лазерные аппараты «ЛФТ-БИОСПЕК» (ООО «БИОСПЕК», Россия) с длиной волны 808нм и мощностью лазера 6 Вт. При этом биологическая ткань прогревается не более 39 С. В течение сеанса облучения распределение температуры фиксируется тепловой камерой. При использовании сапфировых облучателей в режиме ФДТ и гипертермии практически исключена вероятность образования очагов перегрева.

Результаты и выводы. Таким образом, использование сапфировых игловых капилляров позволяет более точно определять требуемые параметры облучения и стабилизировать динамику пространственного фототермического распределения в течение всей процедуры.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1Э7

A.A. Фильченков , М.П. Завелевич , Л.М. Куява , В.В. Семенов , М.Н. Семенова ИЗУЧЕНИЕ СОЧЕТАННОГО ДЕЙСТВИЯ ТРИАЗОЛЬНОГО АНАЛОГА КОМБРЕТАСТАТИНА A4 И ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ НА КЛЕТКИ JURKAT Т-КЛЕТОЧНОГО ОЛЛ 1ИЭПОР им. P.E. Кавецкого HAH Украины, Киев, Украина 2ИОХим. Н.Д. Зелинского РАН, Москва 3ИБР им. Н.К.Кольцова РАН, Москва Актуальность. В связи с широким использованием полихимиотерапии в онкологии актуальным является изучение комбинированного действия препаратов различных групп на опухолевые клетки. Комбретастатины (КС), как природные лиганды тубулина, ингибируют его полимеризацию и препятствуют формированию микротрубочек. Показано выраженное антимитотическое и цитотоксическое действие in vitro на опухолевые клетки пространственно стабилизированных аналогов КС A4, синтезированных в ИОХ (Demchuk D.V. et al., 2014). Эффекты триазольных аналогов КС A4 в комплексе с известными препаратами ранее не исследовались. Цель исследования. Изучение эффективности воздействия in vitro триазольного аналога КС A4 в сочетании с доксорубицином или цисплатином на лейкозные клетки человека линии Jurkat. Материалы и методы. Клетки Т-лимфобластного лейкоза человека линии Jurkat культивировали в суспензии. Использовали триазольный аналог КС A4 ^комбретатриазол-71 (синтезирован в ИОХ). Доксорубицин или цисплатин ("Ebewe", Австрия) вносили одновременно с №комбретатриазолом-71 либо за 24 ч до применения последнего. Цитотоксическую активность оценивали в МТТ-тесте. Результаты и выводы. При совместном действии цисплатина и №комбретатриазола-71 в клетках Jurkat отмечается лишь незначительное усиление эффекта по цитотоксичности и торможению роста в сравнении с таковым для каждого препаратов в отдельности, причем суммарные показатели ниже аддитивного эффекта. При совместном действии доксорубицина и №комбретатриазола-71 при разных схемах достоверного усиления антипролиферативных и цитотоксических свойств каждого из исследуемых препаратов не выявляется. Эффекты усиления цитотоксичности цисплатина или доксорубицина КС A4, обнаруженные на моделях солидных опухолей in vivo (Siemann D.W. et al., 2002; Nelkin B.D., Ball D.W., 2001), по-видимому, обусловлены мощным антиангиогенным действием КС A4. Исследования поддержаны грантами Государственного Фонда фундаментальных исследований Украины (№ Ф53.4/056) и Российского Фонда фундаментальных исследований (№13-03-90455).

A.A. Фильченков , М.П. Завелевич , Л.М. Куява , В.В. Семенов , М.Н. Семенова СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ТОКСИЧНОСТИ И АПОПТОТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЦИС-СТАБИЛИЗИРОВАННОГО ТРИАЗОЛЬНОГО АНАЛОГА КОМБРЕТАСТАТИНА A4 НА МОДЕЛЯХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА 1ИЭПОР им. P.E. Кавецкого HAH Украины, Киев, Украина 2ИОХ им. Н.Д. Зелинского РАН, Москва 3ИБР им. Н.К.Кольцова РАН, Москва Актуальность. Известно, что биологическая активность комбретастатинов (КС) реализуется лишь их цис-изомерами. Поэтому продолжаются активные поиски аналогов со стабилизированной пространственной конфигурацией. В ИОХ на основе природного растительного сырья была синтезирована серия триазольных и пиразольных аналогов КС A4. Среди синтезированных соединений в тесте на зародышах морских ежей был отобран 5-(4-метоксифенил)-1-(3,4,5-триметоксифенил)-1,2,3-триазол (Ы-комбретатриазол-71). Цель исследования. Сравнительное изучение цитотоксического и апоптотического действия 5-(4-метоксифенил)-1-(3,4,5-триметоксифенил)-1,2,3-триазол (Ы-комбретатриазол-71) на В- и Т-клеточных перевиваемых линиях злокачественных лимфоидных клеток человека. Материалы и методы. Использовали линии Т-клеточного лимфобластного лейкоза человека (MOLT-4, Jurkat) и лимфомы Беркитта (Namalwa). В качестве препарата сравнения применяли КС A4 фосфат ("OXiGENE", США). Уровень апоптоза и распределение клеток по фазам клеточного цикла определяли с помощью проточного цитометра FACSCalibur ("Becton Dickinson", США). Для выявления активной формы каспа-зы-3 использовали набор с моноклональными антителами ("BD Bioscience Pharmingen", США). Результаты и выводы. №комбретатриазол-71 проявляет цитотоксическое действие в отношении как Т-, так и B-клеточных линий злокачественных лимфоидных клеток человека. Токсичность №комбретатриазола-71 для клеток Namalwa гораздо ниже, чем для клеток Jurkat или MOLT-4. Вместе с тем, дозовая зависимость по индексу торможения пролиферации для клеток Namalwa практически совпадает с таковой для клеток Jurkat и MOLT-4. №комбретатриазол-71 в концентрациях, угнетающих пролиферацию клеток, блокирует прохождение цикла в фазе G2/M. ^комбретатриазол-71 является индуктором каспазо-зависимого апоптоза в исследуемых клетках и не уступает по своей эффективности КС A4. Исследования поддержаны грантами Государственного Фонда фундаментальных исследований Украины (№ Ф53.4/056) и Российского Фонда фундаментальных исследований (№13-03-90455).

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

138 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

И.Ю. Фшюшкина1, Н.В. Голубцова1, В.В.Новиков2, М.А. Барышникова1, 2 1 ' 2 1 1 1 А.И. Чкалина , З.А. Соколова , Е.В. Борисова , П.К. Иванов , И.К. Воротников , А.Ю. Барышников ДИНАМИКА СЫВОРОТОЧНЫХ УРОВНЕЙ РАСТВОРИМЫХ АНТИГЕНОВ HLAI, CD18, CD54 И РАСТВОРИМЫХ КОМЛЕКСОВ CD8-HLA I И CD18-54 У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 1ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН», Москва 2ННГУ им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород Задачи исследования. Исследовать содержание сывороточных уровней растворимых антигенов у больных раком молочной железы до хирургического удаления опухоли. Материалы и методы. Материалом для исследования служили образцы сывороток периферической крови 64 больных раком молочной железы (РМЖ) II стадии до хирургического удаления опухоли. Больные были разделены на 2 группы. Группу №1 (n=58) состояла из нелеченных пациенток, а группу №2 (n=6) составили больные, которые перед операцией получали неоадьювантную терапию. В качестве контроля использовались образцы сывороток крови 63 здоровых женщин. Определение сывороточных уровней растворимых антигенов проводилось иммуноферментным методом, разработанным в Нижегородском госуниверситете им. Н.И.Лобачевского (Новиков В.В. и др., 2008) с использованием моноклональных антител серии ИКО (Барышников А.Ю., 1997) против соответствующих антигенов, меченных пероксидазой хрена, и поликлональных антител против мононуклеарных клеток периферической крови человека. Учет результатов проводился спектрофо-тометрически при длине волны 492 нм. Результаты выражали в условных единицах (МЕ/мл). Статистический анализ данных проводился с помощью пакета программ EXCEL 2003, STATISTICA 10.0, SPSS 20.0. Результаты считались статистически достоверными при уровне значимости p < 0,05. Результаты и выводы. При проведенном исследовании выявлены различия в содержании растворимых форм антигенов HLAI, CD!8, CD54 и растворимых комплексов CD8-HLAI и CD18-54 в образцах сывороток крови больных РМЖ II стадии перед хирургическим удалением опухоли. У нелеченных больных сывороточный уровень исследуемых антигенов был сопоставим с показателями в контрольной группе доноров. Повышенное содержание сывороточных уровней данных маркеров обнаружено у больных, получавших неоадьювантную терапию (p < 0,05).

Д.С. Хачатрян , K.P. Матевосян , А.Л. Разинов СИНТЕЗ ПРОИЗВОДНЫХ 8-ТИОПУРИНА -ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ АНТИОПУХОЛЕВЫХ СУБСТАНЦИЙ 1ФГУП «ИРЕА», Москва 2РХТУ им. Д.И. Менделеева, Москва Актуальность. Общеизвестно значение химии пуринов в построении молекул биологически активных структур, особенно с противоопухолевым действием, например 6-тиопурин. В связи с этим любые новые попытки синтеза подобных структур или модификации методик их получения являются актуальной задачей. Задачи исследования. Разработка препаративных методов синтеза 8-тиопуринсодержащих строительных блоков посредством реакции изотиоцианатов с аминоцианацетамидами, через промежуточные 2-тио-5-аминоимидазол-4-карбоксамиды. Создание библиотеки потенциально антиопухолевых субстанций путем дальнейшей функционализации полученных строительных блоков различными алкилаторами. Материалы и методы. Исходя из коммерчески доступных изотиоцианатов методом тандемных превращений синтезированы 1-R(R=Alk, Ar, Не1)-2-тиоимидазоламинамиды. Кипячением последних с ортомуравьи-ными эфирами получены 9^-производные-8-тиопурина с «горячими» NH- и SH- функциями, которые служили строительными блоками в создании как виртуальной, так и реальной библиотеки потенциально биологически активных субстанций. Структура полученных соединений подтверждена на основе анализа ЯМР и масс-спектров. Результаты и выводы. Разработаны препаративные методы синтеза 8-тиопуринсодержащих строительных блоков. Создана комбинаторная библиотека тиопуринсодержащих субстанций с потенциальной антиопухолевой активностью путем алкилирования полученных 8-тиопуринсодержащих строительных блоков различными электрофилами. Исследуется противоопухолевая активность полученных субстанций в опытах in vitro.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 139

И.П. Шилов1, В.М. Маркушев2, А.И. Панас1, A.C. Рябов1, В.Д. Румянцева1, К.С. Щамхалов1, A.B. Иванов3 ФОТОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ СВОЙСТВА ИТТЕРБИЕВЫХ МЕТАЛЛОКОМПЛЕКСОВ 2, 4-ДИМЕТОКСИГЕМАТОПОРФИРИНАIX В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ ДМСО И ПЕРСПЕКТИВЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ОНКОЛОГИИ 1 Институт Радиотехники и Электроники им. В. А. Котелъникова РАН, Фрязинский филиал 2Институт Радиотехники и Электроники им. В. А. Котелъникова РАН, Москва 3ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва Цель исследования. Изучение фотолюминесцентных свойств и создание наноразмерных субстанций на основе иттербиевых комплексов 2,4-диметоксигематопорфирина IX (ИКДГ) в водных растворах диметилсуль-фоксида (ДМСО) для люминесцентной диагностики (ЛД) эндоскопически и визуально доступных форм рака. Материалы и методы. Изучение фотолюминесцентных свойств ИКДГ в водных растворах ДМСО осуществлялось на экспериментальном измерительном стробоскопическом стенде, разработанном в ИРЭ им. В. А. Котельникова РАН. Исследования люминесцентного диагностического контрастного индекса (ЛДКИ) осуществлялись на мышах-самках линии Bulb/c с привитой опухолью Льюиса при дозах препарата на уровне 0,05-1,0мг/кг веса с помощью макетного варианта лазерно-волоконного флуориметра (ЛВФ) разработки ФИРЭ им. В. А. Котельникова РАН. Результаты. В соответствии с целью исследований было установлено, что такие органические растворители как ДМСО существенно улучшают фотофизические характеристики ИКДГ. Так время жизни люминесценции ИКДГ в 100% растворе ДМСО составило 22мксек, что является рекордным результатом для ИМКП. В водно-органических растворах этот параметр испытывал существенное снижение и спад люминесценции имел при этом неэкспоненциальный характер, что обусловлено сильным тушением люминесценции колебаниями ОН групп из ближайшего окружения иона иттербия. В связи с чем оптимальной к применению в медицинской практике нам представляется субстанция на основе ИКДГ в 20-30% растворе ДМСО (такие концентрации разрешены в медицинской практике при внутривенном введении). Интенсивность люминесценции ИКДГ в 20% растворе ДМСО увеличивается более чем в 2 раза на длине волны 980нм по сравнению с чисто водным раствором ИКДГ, что делает такие компаунды перспективными для ЛД рака. Проведены исследования ЛДКИ опухоль/мышца с использованием ЛВФ и субстанции на основе водорастворимого комплекса ИКДГ в 20% растворе ДМСО на мышах-самках линии Bulb/c с привитой опухолью Льюиса в режиме ex vivo. Показано, что ЛДКИ увеличивался с 16,5 (чисто водный раствор ИКДГ) до значений ~19,0. Выводы. Синтезированы субстанции на основе ИКДГ в водных растворах ДМСО и исследованы их основные фотолюминесцентные свойства. Данные субстанции являются перспективными для использования в процедурах ЛД эндоскопически и визуально доступных форм рака. Работа выполнена при частичной финансовой поддержке гранта Президиума РАН «Фундаментальные науки - медицине» за 2013г.

Н.Ю. Шилягина1, А.Б. Воловецкий1, И.В. Балалаева1, 12 3 3 4 5 A.B. Масленникова ' , М.А. Грин , А.Ф. Миронов , A.B. Феофанов ' ИЗУЧЕНИЕ БИОРАСПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЪЮГАТОВ ПРОИЗВОДНЫХ ХЛОРИНА Е6 С НАНОЧАСТИЦАМИ БОРА ДЛЯ ЗАДАЧ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ И БОР-НЕЙТРОНЗАХВАТНОЙ ТЕРАПИИ 1 Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского, Нижний Новгород 2Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 3МХТИ им. М.В. Ломоносова, Москва 4Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва 5Биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва Задачи исследования. Оценка биологического распределения и степени накопления в опухоли нано-конъюгатов хлорина е6 с наночастицами бора, сочетающих в себе свойства фотосенсибилизатора и агента для БНЗТ. Материалы и методы. Анализ биораспределения наноконъюгата был выполнен на мышах линии Balb/c с перевитой опухолью Colo-26. Эксперимент проводился на 9-10 день, когда размер опухолевого узла достигал 5 мм. Животным в хвостовую вену вводили 10 мг/кг наноконъюгата в 5% растворе кремофора. Микроскопическое исследование органов ex vivo проводили на системе лазерной сканирующей микроскопии Axiovert 200M LSM510 META через 3 часа после введения препарата. Флуоресценцию возбуждали при 543 нм, регистрация спектров позволила идентифицировать сигнал, обусловленный накоплением в тканях конъюгата хлорина е6, на фоне сильной автофлуоресценции. Результаты и выводы. Введение наноконъюгата приводило к появлению сильного сигнала флуоресценции с максимумом в области 670 нм, соответствующему флуоресценции хлорина е6, в опухолевой ткани. В скелетных мышцах, а также в мышечных стенках полых органов и коже, характерного пика на 670 нм не наблюдалось. Через 3 часа после инъекции значительное количество препарата оставалось в кровеносном русле. Кроме опухолевой ткани, зарегистрировано накопление конъюгата в печени, почках и селезенке. Тем не менее, во всех перечисленных органах, по результатам микроскопического анализа, содержание исследуемого соединения не превышало такового в опухоли ткани, что можно рассматривать как весьма многообещающий результат. Работа выполнена при поддержке РФФИ (проекты № 13-04-00670 и 4-02-00715).

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

140 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

M.B. Ширманова1, А.И. Гаврина1, H.A. Аксенова2, А.Б. Соловьёва2, Е.В. Загайнова1 ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КОМПЛЕКСОВ ХЛОРИНА Е6 С АМФИФИЛЬНЫМИ ПОЛИМЕРАМИ НА ЖИВОТНЫХ С ОПУХОЛЕВОЙ МОДЕЛЬЮ РШМ-5 1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород, 2Институт химической физики РАН, Москва. Актуальность. Хлориновые фотосенсибилизаторы (ФС) признаны перспективными агентами для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии опухолей ввиду поглощения и флуоресценции в красной области спектра, высокой фототоксичности. Однако их низкая водорастворимость создает проблемы с внутривенным введением, а недостаточно высокое накопление в опухоли снижает эффективность лечения. Использование биосовместимых полимеров позволяет получить водные формы хлориновых ФС, повышает интенсивность флуоресценции и фотодинамическую активность, но биологические свойства таких комплексов ФС с полимером мало изучены. Задача исследования. Изучить влияния амфифильных полимеров на биораспределение хлорина еб и его накопление в опухоли животных. Материалы и методы. Работа выполнена на мышах линии CBA, самках, с подкожно привитой опухолью - рак шейки матки человека РШМ-5. Исследованы комплексы хлорина еб с поливинилпирролидоном, поливиниловым спиртом, плюрониками F1GS и F127. Кинетику накопления ФС в опухоли оценивали in vivo методом флуоресцентного имиджинга на установке IVIS-Spectrum. Абсолютное содержание в плазме крови, опухоли и органах животного определяли методом тканевой экстракции. Результаты. Анализ флуоресценции опухолей in vivo показал, что максимальное накопление препаратов в опухоли наблюдается в интервале от 2G мин до 4 ч после инъекции. Максимальное отношение опухоль/норма достигается к 3 ч после инъекции и мало менялось в течение суток. Определены абсолютные концентрации ФС в органах и тканях животных. Максимальные концентрации препаратов выявлены в кишечнике и фекалиях, а минимальные в мышцах, мозге, яичниках и сердце. Наибольшая избирательность накопления в опухоли РШМ-5 характерна для комплекса хлорина еб с поливиниловым спиртом: отношение опухоль/кожа составляет 1б (в контроле для чистого хлорина еб - 3). Выводы. Полученные результаты указывают на перспективность модификации хлорина еб поливиниловым спиртом для доставки в опухоль и необходимость дальнейшего изучения фотодинамической активности комплекса. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект 14-02-00738).

З.С. Шпрах , М.И. Кодесс , Г.Л. Левит , М.А. Ежикова , В.П. Красное , Л.И. Смирнова ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДЛИННОСТИ АНАЛОГА ГИПОТАЛАМИЧЕСКОГО ГОРМОНА МЕТОДОМ СПЕКТРОСКОПИИ ЯМР 1ФГБУ «РОНЦим. Н.Н.Блохина» РАМН, Москва 2ИОС. им. И.Я. Постовского УРО РАН, Екатеринбург Актуальность. Метод спектроскопии ядерного магнитного резонанса (ЯМР) - один из наиболее эффективных аналитических методов, отличающийся высокой специфичностью, чувствительностью и надежностью. ЯМР используется для испытания подлинности лекарственных веществ, которая может быть подтверждена либо по полному набору спектральных параметров, характеризующих структуру соединения, либо по наиболее характерным сигналам спектра. Задачи исследования. Разработать методику определения подлинности аналога гипоталамического гормона (АГГ) методом ЯМР. Материалы и методы. АГГ - пентапептид Boc-Cys(Thp)-Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-OMe, синтезированный в ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН. Метод исследования — мультиядерная ЯМР спектроскопия. Запись спектров проводили на ЯМР спектрометре Bruker AVANCE™ 5GG при температуре 35 °C по стандартным методикам 1 D и 2D экспериментов с использованием раствора АГГ в дейтерированном диметилсульфоксиде (ДМСО-d^. Структурную интерпретацию спектров 1H, 13C и 15N проводили на основе анализа данных двумерных корреляционных 2D экспериментов (1H-1H COSY, 1H-13C HSQC, 1H-13C HMBC, и 1H-15N HMQC). Результаты. В спектре ЯМР 1Н характеристичными являются сигналы NH- и a-CH- протонов аминокислотных остатков, которые наблюдаются в диапазонах 11.G - б.б и 4.7 - 4.G м.д. соответственно. В спектре 13С АГГ практически все химически неэквивалентные углероды дают отдельные сигналы, за исключением некоторых сигналов ароматических углеродов и двух a-углеродов аминокислотных остатков Phe и Trp, сигналы которых сливаются в одну уширенную линию 5с 53.3б м.д. Детальный анализ данных двумерного гетероядерного эксперимента 2D 1H- C HMBC позволил установить связи между соседними остатками вдоль пептидной цепи, и тем самым подтвердить последовательность аминокислот в пентапептиде. Отнесение сигналов 15N осуществляли с помощью двумерного эксперимента 2D 1H-15N HMQC по корреляциям между азотами и NH-протонами с известными химическими сдвигами. Выводы. Комбинация 1D и 2D ЯМР экспериментов на ядрах 1H, 13C и 15N подтверждает структуру и химическую индивидуальность исследованного пентапептида АГГ. Работа выполнена при финансовой поддержке Минпромторга РФ.

№ 1/том 13/2G14 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 141

В.И. Штин, А.И. Рябова, В.А. Новиков, Е.Ц. Чойнзонов, К.Ю. Меньшиков, О.В. Черемисина СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ЛЕЧЕНИЯ ОПУХОЛЕЙ ПОЛОСТИ НОСА И ПРИДАТОЧНЫХ ПАЗУХ НИИ онкологии СО РАМН, Томск Актуальность. Одним из перспективных методов интраоперационной визуализации опухоли и местной терапии является флюоресцентная диагностика и фотодинамическая терапия. В НИИ онкологии СО РАМН разработан лечебный комплекс, включающий в себя лучевую терапию, оперативное вмешательство с флуоресцентной диагностикой и фотодинамической терапией. Материалы и методы. Всем пациентам с опухолями полости носа и придаточных пазух T2-4N0-3M0 проводится предоперационный курс дистанционной гамма-терапии на установке «Рокус-М». Через 3-5 дней выполняется хирургическое вмешательство в объеме комбинированной электрорезекции верхней челюсти с флуоресцентной диагностикой радикальности операции и фотодинамической терапией. Для проведения флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии используется фотосенсибилизатор «Фотодитазин» (ООО Вета-Гранд, регистрационный номер ЛС-001246). Препарат вводится за 2 часа до операции внутривенно ка-пельно. После удаления опухоли выполняется контроль радикальности операции с использованием флуоресцентной диагностики и мазков-отпечатков со стенок послеоперационной полости. Затем проводится фотодинамическая терапия на ложе опухоли. Интраоперационная фотодинамическая терапия выполняется с применением полупроводникового лазера красного диапазона излучения «АЛОД-01», длина волны излучения — 662 нм, выходная мощность излучения на торце кварцевого моноволокна от 0,1 до 2 Вт. Доза излучения — от 150 до 350 Дж/см2. Результаты. Проведено комбинированное лечение 8 пациентов с распространенными опухолевыми процессами полости носа и околоносовых пазух. В 7 случаях выполнено удаление опухоли и проведена фотодинамическая терапия. В одном случае фотодинамическая терапия проведена непосредственно на рецидивную опухоль, локализовавшуюся в проекции основания средней черепной ямки. На сегодняшний день максимальный срок наблюдения составил 18 месяцев. Признаков рецидива опухоли нет у 6 пациентов. В двух случаях зафиксирован продолженный рост опухоли в сроки от 1 до 3 месяцев. Выводы. Таким образом комплексный подход к лечению пациентов с местно распространенными опухолями полости носа и придаточных пазух, с использованием фотодинамической терапии, позволяет повысить непосредственные о отдаленные результаты лечения, не оказывая влияния на качество жизни больных.

H.A. Шуканова , H.A. Козловская , М.А. Мартынова , Е.В. Шаповал , М.М. Молчан , И.М. Бушмакина ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПЕРВИЧНОИ КУЛЬТУРЫ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ДЛЯ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТОВ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ПОЛИХИМИОТЕРАПИИ 1 Институт биофизики и клеточной инженерии HAH Беларуси, Минск, Беларусь 2Республиканский научно-практический центр онкологии и медицинской радиологии им. Н. Н. Александрова, Минск, Беларусь Задачи исследования. Изучение возможности использования разработанной нами новой тест-системы оценки индивидуальной чувствительности к химиопрепаратам опухоли пациенток с диагнозом рак молочной железы (РМЖ) для прогнозирования эффектов неоадъювантной полихимиотерапии (НПХТ). Материалы и методы. Первичную культуру получали из трепан-биоптатов опухолей пациенток с диагнозом РМЖ. Гомогенат ткани в среде RPMI-1640 культивировали в С02-инкубаторе 48 - 64 ч. Лекарственные средства вносили в первичную культуру клеток РМЖ в концентрациях, соответствующих применяемым в клинической практике дозам. Активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) определяли стандартным методом с использованием реактива Эллмана. Концентрацию белка определяли по стандартному методу Лоури. Активность АХЭ клеток после культивирования в присутствии химиопрепаратов сравнивали с активностью АХЭ таких же клеток после культивирования без препаратов. Результаты. Ранее нами было показано, что степень ингибирования химиопрепаратами активности АХЭ клеток РМЖ наиболее агрессивного базальноподобного подтипа в условиях in vitro и посттерапевтические изменения опухолей пациенток после НПХТ совпадали на 85%. Далее был проведен сравнительный анализ исходной активности АХЭ клеток РМЖ, культивируемых без химиопрепаратов, и рецепторного статуса опухоли после НПХТ. Установлено, что активность АХЭ клеток базальноподобной опухоли до начала лечения составляла 10,7±3,7 отн.ед. в том случае, если после НПХТ в опухоли были обнаружены только клетки люминального Б подтипа; если же после НПХТ в опухоли были обнаружены клетки Нег2-позитивного подтипа, первоначальная активность АХЭ составляла 36,0±16,3. При этом активность АХЭ клеток опухоли, рецепторный статус которых оставался после НПХТ без изменения, была равна 79,0±20,4. Выводы. Таким образом, определяя величину активности АХЭ в первичной культуре ткани РМЖ наиболее агрессивного базальноподобного подтипа, можно с определенной степенью достоверности прогнозировать результаты терапии.

№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

142 ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ...

C.B. Шумилова1, Д.В. Новиков1, А.Ю. Барышников2, В.В. Новиков1 ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ СИСТЕМЫ «ИНТЕРЛЕЙКИН-2 - ЕГО РЕЦЕПТОР» В КЛЕТКАХ ЛИНИЙ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

1 Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород 2ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва

Актуальность. Экспрессия функционального рецептора интерлейкина-2 (IL-2R) была обнаружена на клетках линий, полученных из различных солидных опухолей человека. В некоторых случаях IL-2 ингибирует рост раковых клеток (рак головы и шеи, рак желудка, рак почки). Для других опухолей описаны эффекты усиления роста и прогрессии при воздействии IL-2 (рак легкого, глиома, фибросаркома, меланома). Кроме того, секреция биологически активного IL-2 обнаружена в клетках линий некоторых меланом и рака молочной железы.

Цель исследования. Анализ экспрессии генов IL-2 и трех цепей его рецептора (IL-2Ra, IL-2Rß, IL-2Ry) на транскрипционном уровне в клетках линий, полученных от больных раком молочной железы HS578, MCF-7, T-47D.

Материалы и методы. Исследовали лизаты клеток перевиваемых линий HS578, MCF-7, T-47D (рак молочной железы). Анализ экспрессии генов IL-2, IL-2Ra, IL-2Rß, IL-2Ry проводили с использованием ОТ-ПЦР. Нуклеотидные последовательности транскриптов определяли путем секвенирования.

Результаты и выводы. В клетках линий HS578, MCF-7, T-47D обнаружена экспрессия генов IL-2, бета-и гамма-цепей его рецептора в различных сочетаниях. мРНК интерлейкина-2 детектирована только в клетках MCF-7. Отсутствие экспрессии гена IL-2 в линиях HS578 и T-47D может являться свидетельством независимости пролиферации данных клеток от эндогенного IL-2. мРНК IL-2Rß обнаружена в клетках MCF-7, а мРНК IL-2Ry - в T-47D. Вероятным объяснением наличия мРНК лишь одной цепи рецептора из трех в линиях MCF-7 и T-47D является ее принадлежность к рецепторам других цитокинов (IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, IL-21). мРНК IL-2Ra не была детектирована ни в одной из исследованных линий. Предположительно, синтез мРНК IL-2Ra в тестированных изолированных культурах опухолевых клеток не происходит из-за отсутствия активатора, подобного активаторам синтеза IL-2Ra в клетках гемопоэтической системы (TGF-ß, CD28, IL-1 и др.). Возможно также, что индукция экспрессии гена IL-2Ra в линиях HS578, MCF-7, T-47D происходит только после воздействия экзогенного IL-2.

Работа выполнена в рамках базовой части государственного задания №2014/134 Минобрнауки России (проект 2575).

Д.В. Южакова , М.В. Ширманова , И.Н. Дружкова ,

Г.С. Перелъман1, А.П. Рюмина2, Е.А. Серебровская2, С.А. Лукьянов12, Е.В. Загайнова1 ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ

АКТИВАЦИИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ИММУННОГО ОТВЕТА МАЛЫМИ ДОЗАМИ ЦИКЛОФОСФАНА НА ОПУХОЛЯХ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БЕЛОК KILLERRED

1 Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород 2Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва

Актуальность. Известно, что опухоль способна уклоняться от иммунологического надзора посредством нескольких факторов, в том числе благодаря защите Т-регуляторными клетками (Sitkovsky, 2008). В ряде экспериментальных работ стимуляция иммунного ответа организма против опухоли осуществлялась посредством малых доз циклофосфана, ингибирующего данные клетки (Castaño, 2008; Levy, 2009). Но данный подход пока не нашёл широкого применения в лечении опухолей и требует изучения.

Цель исследования. Оценка иммуногенности фототоксичного флуоресцентного белка KillerRed и изучение возможности ингибирования роста опухоли, экспрессирующей KillerRed, малой дозой циклофосфана.

Материалы и методы. Работа проводилась на мышах линии Balb/c с подкожно привитой опухолью колорек-тальный рак мышей Colo26. Для оценки иммуногенности белка KillerRed оценивался рост опухолей, экспрессирую-щих KillerRed и без него, у животных с ранее удаленной опухолью, экспрессирующей KillerRed. В эксперименте по лечению опухолей циклофосфаном препарат вводили внутрибрюшинно в дозе 50 или 150 мг/кг на 5-й или 7-й день роста опухоли соотственно. Выполнялся анализ динамики роста и флуоресценции опухоли.

Результаты. Повторная прививаемость опухоли, экспрессирующей KillerRed, составляет 43 %, опухоли без белка - 78 %, в то время как первичная прививаемость данной опухоли составляла 80 %, что указывает на иммуногенность белка KillerRed. Установлено, что использование малой дозы циклофосфана вызвает значительное замедление роста опухолевого узла, сопоставимое с применением терапевтической дозы 150 мг/кг. Эффект малой дозы циклофосфана на опухоли Colo26 без KillerRed был менее выражен.

Выводы. Таким образом, применение малой дозы циклофосфана в комбинации с белком KillerRed оказало стимулирующее воздействие на иммунную систему и привело к существенному снижению скорости роста опухоли.

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (Договор № 11.G34.31.0017)._

№ 1/том 13/2G14 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ... 1 143

Т.Л. Юркштович1, Н.В. Голуб1, П.М. Бычковский1, С.О. Соломевич1, В.А. Алиновская1, Р.И. Костерова , Н.К. Юркштович1, В.А. Будевич1, Ю.П. Истомин2, E.H. Александрова2 МИКРОГЕЛИ ФОСФАТОВ ДЕКСТРАНА

В КАЧЕСТВЕ ПОЛИМЕРОВ-НОСИТЕЛЕЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВЕЩЕСТВ

1 Учреждение БГУ «НИИ физико-химических проблем», Минск, Беларусь 2РНПЦОМР им. H.H. Александрова, Минск, Беларусь

Цель исследования. Получение иммобилизованных форм противоопухолевых веществ основного (про-спидин) и цвиттерионного (а-2Ъ-интерферона) характера на основе микрочастиц фосфатов декстрана (ФД), оценка их противоопухолевой активности в модельных опытах in vitro.

Материалы и методы. К тестированию были представлены иммобилизованные формы проспидина и а-2Ъ-интерферона, а также ФД, полученные этерификацией ортофосфорной кислотой в расплаве мочевины с содержанием фосфорнокислых групп в интервале от 7,0% до 11,8 %. Эффективность противоопухолевого действия иммобилизованных форм противоопухолевых веществ в виде гидрогелей в условиях in vitro исследована на монослойной культуре опухолевых клеток HeLa (эпителиоидная карцинома шейки матки человека, клон М). Оценка роста культуры опухолевых клеток в опытных группах иммобилизованных форм проспидина и а-2Ъ-интерферона по отношению к контролю проведена на основании показателя эффективности противоопухолевого действия ИК50. Определение острой токсичности гидрогелей ФД проведено на крысах (каждая серия по 4 крысы весом 200-250 г).

Результаты. Установлено, что фосфаты полисахаридов относятся к классу малотоксичных веществ и LD50 составляет около 5000 мг/кг. Установлено, что цитостатическая активность исследованных иммобилизованных форм и ФД носит дозозависимый характер. Введение в состав микрогеля ФД проспидина приводит к уменьшению ИК50 в 2 раза, т.е. цитостатическая активность препарата в виде гидрогеля выше по сравнению с инъекционной формой нативного проспидина. Включение а-2Ъ-интерферона в состав микрочастиц ФД (массовое соотношение ФД : интерферон = 600 : 1) вызывает статистически достоверный цитотоксический эффект, который достигает 99 %. Изучена динамика высвобождения проспидина и а-2Ъ-интерферона из пространственной сетки ФД в условиях in vitro и установлен эффект пролонгированного действия.

Выводы. Модификация декстрана смесью ортофосфорной кислоты и мочевины приводит к образованию малотоксичных соединений, обладающих противоопухолевым действием и эффективных для использования в качестве полимеров-носителей противоопухолевых препаратов проспидина и а-2Ъ-интерферона.

Р.И. Якубовская1, Е.А. Плотникова1, Н.Б. Морозова1, А.Д. Плютинская1, Е.А. Лукъянец2

ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОР НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ

ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ: М£30-ТЕТРА(3-ПИРИДИЛ)БАКТЕРИОХЛОРИН

1ФГБУ «МНИОИ им. П. А. Герцена» Минздрава РФ, Москва 2ФГУПГНЦ «НИОПИК», Москва

Актуальность. Успешное применение метода ФДТ для лечения злокачественных новообразований стимулирует поиск новых фотосенсибилизаторов (ФС) с улучшенными свойствами.

Задачи исследования. Был синтезирован чисто синтетический ФС - .мезо-тетра(З-пиридил) бактерио-хлорин (H2Py4BC), имеющий поглощение в ближней ИК-области спектра (А^х = 747±2 нм), изучены его фотофизические свойства и специфическая активность в системах in vitro и in vivo.

Материалы и методы. ФС получали двухстадийным синтезом, исходя из пиррола и 3-пиридинальдегида. Для его солюбилизации в водных растворах использовали неионогенный ПАВ Cremophor EL (4%-ный раствор). Фотофизические свойства оценивали с помощью абсорбционного и флуоресцентного методов анализа. Фотоактивность изучали на опухолевых клетках человека HEp2 и EJ, варьируя концентрацию ФС (от 13 до 3200 нМ), время инкубации (от 30 минут до 6 часов) при плотности энергии 10 Дж/см2. Фотоин-дуцированную противоопухолевую активность и биораспределение H2Py4BC изучали на мышах BDF1 с опухолью S37, фармакокинетику - на интактных мышах. Облучение проводили светодиодным источником с длиной волны 754 ± 14 нм, биораспределение и фармакокинетику оценивали методом локальной флуоресцентной спектроскопии.

Результаты. Показано, что бактериохлорин стабилен в течение 6 месяцев в затемненных условиях и устойчив при облучении. ФС проявил высокую фотоиндуцированную активность при 4-х часов инкубации, величина ИК50 составляла 32+2 нМ и 35+3 нМ для клеток НЕр2 и EJ, соответственно. В опухолевой ткани нормированная флуоресценция ФС достигала максимального значения через 5 минут и сохранялась на высоком уровне в течение 1 часа. Выявлена высокая противоопухолевая эффективность при использовании ФС в дозах 1,0 и 2,5 мг/кг и облучении через 0,5 и 2 часа после введения: ТРО составляло 70-100%, КИ - 25-100% и УПЖ - 80131%. H2Py4BC полностью выводился из организма млекопитающих через 7 суток после введения, в коже регистрировался до 5 суток.

Выводы. Таким образом, .мезо-тетра(3-пиридил) бактериохлорин является высокоактивным фотосенсибилизатором нового поколения, поглощающий в ближней ИК-области спектра, стабилен при хранении и устойчив при облучении, проявляет высокую фотоиндуцированную противоопухолевую эффективность в системах in vitro и in vivo, за счет селективного накопления в опухоли и быстрого выведения из организма животных.

№ 1/том 13/2014 РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОИ...

Е.В. Ярославиева-Исаева, М.А. Каплан, В.Н. Капинус, И. С. Спиченкова, Е.В. Горанская ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ

ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ МЯГКИХ ТКАНЕЙ С ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРАМИ ХЛОРИНОВОГО РЯДА

ФГБУ МРНЦ Минздрав, Обнинск, Московская область

Актуальность. Почти все злокачественные опухоли мягких тканей относятся к саркомам. Это большая группа новообразований разнообразного генеза. Саркомы мягких тканей составляют по данным различных авторов 0,5-4 % всех злокачественных опухолей человека и до настоящего времени остаются одним из наименее изученных разделов клинической онкологии.

Цель исследования. Оценить эффективность фотодинамической терапии (ФДТ) больных злокачественными новообразованиями мягких тканей без поражения мышц и костей.

Материалы и методы. С 2000 по 2013 гг. проведены курсы ФДТ 12 больным злокачественными новообразованиями мягких тканей без поражения мышц и костей, среди которых 5 больных с саркомой Капоши (3 -н/конечности, 1- головка полового члена, 1 - ушные раковины), 3 больных с дерматофибросаркомой волосистой части головы, 2 больных с злокачественной фиброзной гистиоцитомой, 1 больной с ангиосаркомой волосистой части головы, 1 больная с нейрофибросаркомой левой щеки. У всех больных диагноз гистологически верифицирован и соответствовал Т1-2в К0М0

(1А-11А клинический стадии). Использовали ФС «Фотолон» в/в капельно в дозе 1,1-1,5 мг/кг, ФС «Фото-дитазин», 0,6-0,8 мг/кг. Облучение проводили дистанционно, у 2 больных контактно, 1 больной интерстици-ально на лазерных аппаратах «Латус», «Аткус» (662нм). Количество курсов 1-4, доза лазерного облучения от 150-400 Дж/см2.

Результаты. Непосредственно после лечения у всех больных наблюдали признаки геморрагического некроза, через 1-2 недели формировался струп. Через 3 месяца у 10 больных получена полная регрессия, у 2 с гистиоцитомой - частичная регрессия. На сроках наблюдения от 7 мес. до 3 лет выявлены рецидивы у 2 больных с саркомой Капоши (новые очаги), им проведены повторные курсы. Отдаленных и регионарных метастазов выявлено не было.

Выводы. Больным злокачественными новообразованиями мягких тканей без поражения мышц и костей, 1А-11А клинических стадий, возможно проведение фотодинамической терапии с фотосенсибилизаторами хло-ринового ряда в качестве альтернативы хирургическому лечению.

Ф

Ф

НАУЧНЫЕ ЖУРНАЛЫ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН

№ 1/том 13/2014

РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ