Применение лактоглобулина против условно-патогенных бактерий и сальмонелл для профилактики ОКЗ и сальмонеллеза

2012, Т. 2, № 1-2

Современное лабораторное обеспечение.

(р < 0,001). В контрольной группе мышей показатели спонтанной и индуцированной НСТ-реакции оставались относительно постоянными.

Обобщая полученные результаты, можно заключить:

1. спонтанная и индуцированная НСТ-активности ПМф при микст-инфекции достоверно ниже, чем при моно-инфекции, что должно учитываться при диагностике гнойно-воспалительных процессов в случае обнаружения микст-инфекции;

2. показатели спонтанной и индуцированной НСТ-активности ПМф характеризуют несостоятельность антиоксидантной системы фагоцитов при микст-инфекции, что может определить характер и течение инфекционных процессов, вызванных ассоциацией микроорганизмов.

АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ STREPTOCOCCUS PYOGENES В РОССИИ

О.В. Азовскова

ГБОУ ВПО Смоленская государственная медицинская академия, г. Смоленск

Нарастание антибиотикорезистентности выделенных штаммов S. pyogenes диктует необходимость проведения постоянного мониторинга резистентности с целью дальнейшей оптимизации и рационализации антибиотикотерапии стрептококковыхинфек-ций. Проведено исследование по изучению уровня, структуры и фенотипа резистентности штаммов S. pyogenes, выделенных при заболеваниях верхних дыхательных путей в 7 регионах России (Центральном, Приволжском, Уральском, Сибирском, Южном, Северо-Западном, Дальневосточном) с 1999 по 2009 гг. Согласно результатам этих исследований по-прежнему сохраняется 100% чувствительность гемолитических стрептококков группы А к пеницил-линам и другим бета-лактамам, однако отмечается тенденция к возрастанию МПК50 и МПК90 с 0,015 (в 1999 г.) до 0,03 мг/л (в 2007-2009 гг.), что говорит о нестабильности в популяции БГСА.

Доля резистентных к макролидам штаммов в России варьировала от 0,26% (для спирамицина) до 6,9% (для азитромицина). Отмечается тенденция к снижению встречаемости эритромицинрези-стентных штаммов с 5,2 до 2,6%. Незначительный уровень резистентности к клиндамицину и лин-козамидам позволяет по-прежнему использовать их в качестве подходящей альтернатив бета-лактамам и макролидам. В исследовании не было выявлено штаммов резистентных к респираторным фторхинолонам, что позволяет использовать эти препараты при терапии инфекций вызванных полирезистентными штаммами.

Чувствительность S. pyogenes к хлорамфениколу практически не изменилась (88%), и по-прежнему высокий уровень резистентности к этому препарату сохраняется в Южном регионе России. Уровень резистентности S. pyogenes к тетрациклинам в ряде регионов России (Приволжский, Южный) заметно снижался, в других (Сибирский, Уральский) — по-прежнему оставался на высоком уровне или, как в Центральном регионе, — варьировал. Штаммов, резистентных к ванкомицину, линезолиду, телитро-мицину в России выявлено не было.

Обосновывая проведенный анализ по резистентности S. pyogenes к антибиотикам следует подчер-

кнуть, что препаратами выбора для лечения стрептококковых инфекций являются бета-лактамы. В качестве альтернативной группы препаратов предлагаются макролиды, линкозамиды и, в некоторых случаях, респираторные фторхинолоны. Не рекомендуется применять тетрациклины и хло-рамфеникол.

Учитывая разницу в показателях по антибиоти-корезистентности в различных регионах и динамическое изменение популяций S. pyogenes, требуется проведение постоянного мониторинга резистентности выделенных штаммов этих бактерий.

ПРИМЕНЕНИЕ ЛАКТОГЛОБУЛИНА ПРОТИВ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ И САЛЬМОНЕЛЛ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ОКЗ И САЛЬМОНЕЛЛЕЗА

Н.В. Алексанина1, В.С. Гугуева1, М.Ю. Соловьев2, Е.В. Ковалев2

ФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» Роспотребнадзора, г. Ростов-на-Дону; 2Управление Роспотребнадзора по Ростовской области, г. Ростов-на-Дону

Высокая частота встречаемости среди возбудителей острых кишечных заболеваний (ОКЗ) у детей раннего возраста антибиотико- и фагорезистент-ных штаммов условно-патогенных энтеробактерий и сальмонелл, делает актуальным использование лактоглобулинов направленного действия для профилактики этих инфекций. Лактоглобулин против условно-патогенных бактерий и сальмонелл представляет собой стерильную лиофилизированную фракцию иммуноглобулинов молозива коров классов G, A, M (не менее 98%) и характеризуется высокой концентрацией антибактериальных антител к S. typhimurium, S. enteritidis, S. dublin, P. mirabilis, P. vulgaris, K. pneumoniae, P. auruginosa, блокирует рецепторы кишечника, обладает антиадгезивным действием, элиминирует из кишечника указанные выше микроорганизмы. Препарат устойчив к действию ферментов желудочно-кишечного тракта, не токсичен, совместим с антибиотиками, бактериофагами и препаратами нормофлоры, повышает их эффективность. Изучен профилактический эффект применения препарата у 407 детей различных групп риска. Для профилактики ОКЗ и коррекции микробиоценоза кишечника в течение 3-х лет в домах ребенка, неблагополучным по ОКИ и сальмонеллезу, ежегодно проводили по 2—3 курса вскармливания детей молочными продуктами, обогащенными лактоглобулином против условно-патогенных бактерий и сальмонелл Препарат давали совместно с бифидо- и/или лактосодержащими препаратами, а также всем вновь поступающим детям, находящимся в изоляторе. Обследование микрофлоры кишечника после приема лактоглобу-лина выявило значительное улучшение микробиоценоза. За весь период наблюдения вспышки ОКЗ не регистрировались.

Аналогичные результаты получены при применении лактоглобулина у 150 детей групп риска с периода новорожденности в течение первого года жизни. Применение препарата после выписки из роддома, а также в критические периоды позволило предупредить развитие диарейных заболеваний у детей и в 2,5 раза, по сравнению с контрольной группой, снизить заболеваемость ОРВИ.

Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.

Инфекция и иммунитет

Применение иммунного лактоглобулина для экстренной профилактики сальмонеллезной инфекции, вызванной антибиотико- и фагорезистентными штаммами 8. 1урЫтигшш в одной из групп детского сада и в родильном доме предотвратило инфекцию у 144 человек контактных с заболевшими. Таким образом, применение лактоглобулина против условно-патогенных бактерий и сальмонелл эффективно для профилактики ОКЗ у детей раннего возраста.

ПОИСК ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИХ ГРУПП ГЕНОВ ПОВЕРХНОСТНЫХ ПРОТЕИНОВ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ САПА И МЕЛИОИДОЗА IN SILICO

В.В. Алексеева1, О.Н. Гузенков2, Д.В. Викторов1, В.А. Антонов1

'ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора г. Волгоград; 2ГБОУ ВПО «ВолгГМУ Минздравсоцразвития России», г. Волгоград

Мелиоидоз и сап — особо опасные инфекционные заболевания человека и животных, экспресс-диагностика которых затруднена. Поэтому поиск высокоспецифичных мишеней (антигенов), пригодных для использования их в новых диагностических тест-системах остается актуальной проблемой. Целью настоящего исследования являлся сравнительный анализ известных последовательностей геномов патогенных видов Burkholderia in silico и выявление дифференцирующих групп кодирующих последовательностей поверхностных биополимеров специфичных для возбудителей ме-лиоидоза и сапа.

Для первоначального отбора кандидатных мишеней использовали интернет-ресурс Pathema (http:// pathema.jcvi.org/Pathema/). Всего было отобрано 11 поверхностных белков специфичных для возбудителя мелиоидоза и 1 белок для возбудителя сапа, общее число дифференцирующих нуклеотидных последовательностей составило 131 и 10, соответственно. Далее с использованием программы Vector NTI изучаемые сиквенсы транслировали в белковые молекулы и проверены на наличие гомологии с другими организмами в сетевом сервисе BLAST (http:// blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi), где была подтверждена их уникальность для изучаемых бактерий. После кластерного анализа в приложении Vector NTI AlignX были отобраны белки, сформировавшие наиболее гомогенные группы. Затем для каждого кластера белков в on-line программе BepiPred (http:// www.cbs.dtu.dk/services/BepiPred) изучали потенциальные антигенные свойства протеинов и выделяли линейные эпитопы. Далее в программе Vector NTI была сформирована библиотека выявленных эпито-пов и проведен их кластерный анализ. После анализа полученных результатов выявлено 8 кандидатных поверхностных протеинов возбудителя мелиоидоза, содержащих от 2 до 33 эпитопных сайтов. При этом больший интерес представляли белки OmpA и HrcV, содержащие эпитопы, порядок расположения и аминокислотная последовательность которых были идентичные. Поиск дифференцирующих групп генов для возбудителя сапа не дал положительного результата. Таким образом, обнаруженные группы протеинов могут являться главной мишенью для создания универсальной тест-системы для обнаружения возбудителя мелиоидоза.

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОГЕННЫХ СВОЙСТВ АНТИГЕНОВ Y. PESTIS EV11MP FSK3

Т.В. Аленкина, Е.Л. Воропаева, Г.В. Бочкарева, А.К. Никифоров, О.А. Волох

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Роспотребнадзора, г. Саратов

Фракция I — основной иммуногенн Y. pestis, который широко используется при разработке диагностических и вакцинных препаратов. Для получения поли-и моноклональных антител к фракции I, применяют корпускулярный антиген — цельные клетки чумного микроба, выращенные при 37°С, а также очищенный препарат фракции FI. Штаммом продуцентом, как правило, является вакцинный штамм Y. pestis EV линии НИИЭГ, который характеризуется повышенными питательными потребностями и невысокой скоростью роста при 37°С, хотя именно эта температура является оптимальной для синтеза антигена FI.

Методы генной инженерии позволяют создавать штаммы гиперпродуценты целевого антигена с одной стороны, авирулентные — с другой. Важную роль при этом играет стабильность штаммов в наследовании генетической информации. Авторский штамм Y. pestis EV11MpFSK3 получен из вакцинного штамма Y. pestis EV и депонирован в Государственной коллекции патогенных бактерий ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» (Анисимов А.П., 1995). Его генетической особенностью является расположение fra-оперона на плазми-де pPst в Scopl. Является суперпродуцентом фракции I, секретируя его в среду культивирования при 28°С (Никифоров А.К., 1995). Иммуногенные свойства антигенов авторского штамма до сих пор не изучались, что и определило цель настоящего исследования.

Изучение активности сывороток, полученных к корпускулярным антигенам, в объемной РА с культурами вакцинного и авторского штаммов показало отсутствие кросс-реагирования. Активность к гомологичному штамму находилась в пределах 1:3201:1280 для Y. pestis EV, 1:1280 для Y. pestis EV11MpFSK3. Активность сывороток к фракции I выявило высокую специфичность антифракционных сывороток Y. pestis EV, которые не взаимодействовали с клетками Y. pestis EV11MpFSK3, в то время как аналогичные сыворотки Y. pestis EV11MpFSK3 агглютинировали культуру вакцинного штамма в начальных разведениях (1:20—1:40). Сыворотки к фракции I авторского штамма были в 2 раза активнее антифракционных сывороток Y. pestis EV — 1:640-1:1280 и 1:320-1:640 соответственно.

Заключение. Изучение иммуногенных свойств фракции I и корпускулярных антигенов штаммов Y. pestis EV11MpFSK3 и Y. pestis EV линии НИИЭГ на данном этапе выявило преимущество авторского штамма для получения высокоактивных сывороток к фракции I.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА К РИФАМПИЦИНУ В МОКРОТЕ У БОЛЬНЫХ С НАЛИЧИЕМ ИЛИ ОТСУТСТВИЕМ КОИНФЕКЦИИ ВИЧ

М.В. Альварес Фигероа12, Е.А. Долгова12, М.А. Гордукова12, Г.П. Лобашева2

ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва; 2ГУ Туберкулезная клиническая больница № 7 Департамента здравоохранения г. Москвы

На фоне высокого распространения резистентного к антибиотикам туберкулеза (ТБ), а также уве-