Накопление L-аргинина в хвое ели европейской при регуляции азотного и борного обеспечения

Труды Карельского научного центра РАН

№ 3. 2013. С. 159-165

УДК 582.475:630*160.22:630*181.34

НАКОПЛЕНИЕ ЬАРГИНИНА В ХВОЕ ЕЛИ ЕВРОПЕЙСКОЙ ПРИ РЕГУЛЯЦИИ АЗОТНОГО И БОРНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ

Н. П. Чернобровкина, Е. В. Робонен, А. К. Морозов, Т. Н. Макарова

Институт леса Карельского научного центра РАН

Изучены показатели роста, содержания азота, бора и свободных аминокислот в хвое 5-летней ели европейской (Picea abies L.) в связи с различным обеспечением растений азотом и бором в условиях оптимума других элементов минерального питания. Оптимальным для роста растений было содержание в хвое азота 1,8 % и бора 280 мкгг-1 сухого вещества. Содержание L-аргинина в хвое увеличивалось в десятки раз при внесении десятикратной, по сравнению с оптимальной, дозы азота. Установлено многократное повышение количества этой аминокислоты в хвое при использовании высокой дозы бора и низкой - азота.

Ключевые слова: Picea abies (L.), азот, бор, аминокислоты, L-аргинин.

N. P. Chernobrovkina, E. V. Robonen, A. K. Morozov, T. N. Makarova. ACCUMULATION OF L-ARGININE IN NEEDLES OF NORWAY SPRUCE WITH REGULATED NITROGEN AND BORON AVAILABILITY

The parameters of growth, nitrogen, boron and free amino acid content in the needles of 5-year-old Norway spruce (Picea abies L.) were studied in relation with nitrogen and boron availability to the plants, the supply of other nutrients being optimal. Growth of the plants was optimized by a nitrogen content of 1.8 % and a boron content of 280 |jg-g-1 dry weight in the needles. L-arginine content in the needles increased tens of times upon application of a ten-fold, compared with the optimum, nitrogen dose. The amount of this amino acid in the needles multiplied when the plants were treated with a high dose of boron combined with a low dose of nitrogen.

Key words: Picea abies (L.), nitrogen, boron, amino acids, L-arginine.

Введение

Древесная зелень является источником большого числа органических соединений, до 30 % их составляют водорастворимые фракции, включающие свободные аминокислоты, которые применяются для лечения многих заболеваний человека и животных. Повышение в растительном сырье уровня доступных для усвоения аминокислот, обладающих высокой биологической активностью, и изменение их количественного соотношения в соответствии с кон-

кретными задачами можно осуществлять путем регуляции минерального питания растений. Разбалансированность минерального питания хвойных растений приводит к изменению состава свободных аминокислот в их тканях [Nasholm, Ericsson, 1990; Gezelius, Nasholm, 1993; Huhn, Schulz, 1996; Engvild, 2005]. При избытке азота, а также при дефиците фосфора у хвойных происходит накопление аминокислот с высоким содержанием азота - аргинина, лизина и орнитина. Влияние микроэлементов, в частности бора, на метаболизм растений интенсивно

исследуется [Ferrol, Donaire, 1992; Cakmak et al., 1995; Kobayashi et al., 1996; Camacho-Cristobal et al., 2008]. Ранее нами было показано стимулирующее влияние бора на накопление L-аргинина у сосны обыкновенной на фоне высокого обеспечения азотом и дефицита других элементов питания [Чернобровкина и др., 2010]. Разработка технологии повышения уровня L-аргинина у хвойных растений открывает возможности использовать хвою в фармацевтической промышленности в качестве сырья для получения этой аминокислоты и в ветеринарии в качестве кормовых добавок животным. Следует отметить, что данная аминокислота имеет большое значение для функциональной активности органов и тканей человека и животных [Запад-нюк и др., 1982; Дахно, 2000; Ульянов и др., 2010; Cengiz, Kucukersan, 2010]. Установлено значение L-аргинина как гипогликемического и антитромботического средства [Ульянов и др., 2010]. L-аргинин используется как иммуностимулятор при лечении фасциолеза коров, инфекционных заболеваний бройлеров [Дахно, 2000; Cengiz, Kucukersan, 2010]. Получение L-аргинина, как и других аминокислот, осуществляют несколькими путями: с использованием биотехнологических процессов, путем химического синтеза, гидролизом природного белкового сырья [Волова, 1999]. Для производства лекарственных средств и пищевых добавок L-аргинин получают культивированием бактерии рода Escherichia [Рыбак и др., 2005]. Химический синтез дает рацемат - продукт, содержащий как L-, так и D-формы аминокислот, однако D-изомеры обладают токсичностью, что ограничивает возможности применения аминокислот, полученных таким способом. Производство оптически активных L-изомеров аминокислот из гидролизатов природных материалов растительного и животного происхождения связано с многоступенчатой и дорогостоящей очисткой [Волова, 1999]. Метод экстрагирования водорастворимых свободных аминокислот из растительного материала несложен и экологически безопасен.

Целью работы было исследование влияния азота и бора на накопление L-аргинина в хвое ели европейской.

Материалы и методы

Объектом исследования была 5-летняя ель европейская (Picea abies L.), произрастающая в условиях южной части Карелии. Супесчаные почвы характеризовались оптимальной для роста хвойных растений кислотностью (pH водн. 5,1), недостаточностью азота (0,14 % от сухой почвы) и бора (0,001 %). Сбалансированное содержа-

ние остальных элементов минерального питания (ЭМП) обеспечивали путем внесения комплексного удобрения, составленного без включения азота и бора.

В мае 2009 г. было заложено 35 вариантов опыта, которые различались обеспеченностью растений азотом и бором. В первой половине вегетационного периода трижды вносили в почву аммиачную селитру в дозах 0; 3; 10; 30; 100 г-м-2 д. в. (N0-N100) и борную кислоту в дозах 0; 0,1; 0,3; 1; 3; 10; 30 г-м-2 (B0-B30). За контроль был принят вариант (N0B0), в котором азот и бор в почву не вносили. По окончании вегетационного периода, в октябре, определяли воздушно-сухую массу хвои и всего растения, включая корни, проводили анализ содержания азота, бора и аминокислот в хвое в расчете на абсолютно-сухой вес. Анализ свободных аминокислот в хвое проводили во всех вариантах азотного (N0-N100) при трех уровнях борного (B0, B1, B10) обеспечения. Фиксировали растительный материал методом лиофилизации. В работе использовано оборудование Института леса КарНЦ РАН. Химические элементы растений и почвы определяли на спектрофо-токолориметре КФК-3 (Загорский оптикомеханический завод, Россия) и на атомноабсорбционном спектрофотометре АА-6800 (Shimadzu, Япония). Извлечение свободных аминокислот из тканей осуществляли по методу Калинкиной и соавторов [1990], анализ содержания аминокислот в хвое проводили на автоматическом аминокислотном анализаторе ААА-339, L-аргинина - методом Сака-гучи [Jesse, 1961].

Результаты и обсуждение

Внесение борной кислоты в почву в дозе 1 г-м-2 максимально стимулировало рост растений 5-летней ели европейской при дозах азота в 10 и 30 г-м-2 на фоне оптимального уровня других ЭМП (рис. 1: а, б). Максимум роста растений сохранялся также при дозе азота в 10 г-м-2 и дозах борной кислоты в 3 и 10 г-м-2, однако в этих вариантах отмечались признаки избытка бора в растениях. Максимальное увеличение сухой массы всего растения и хвои по сравнению с контролем (без внесения азота и бора) было соответственно в 3,8 и 4,0 раза. Увеличение сухой массы растений и хвои за счет оптимального внесения борной кислоты в варианте оптимума азота (N10B1) составило соответственно 44 % и 50 %. Более высокие дозы борной кислоты при всех уровнях азота оказались равнозначными или менее эффективными по сравнению с дозой в 1 г-м-2, а доза в 30 г-м-2

ингибировала рост растений по сравнению с контролем при соответствующих уровнях азотного питания. Первые признаки избытка бора у растений - пожелтение кончиков хвои - отмечались при дозе борной кислоты в 3 гм-2, при более высоких дозах хвоя приобретала желто-бурую окраску. Данные показали, что ель европейская испытывала дефицит в борном обеспечении, и эффект от внесения борной кислоты под растения зависел от обеспеченности их азотом.

Содержание азота в хвое ели было низким в контроле (Ы0В0) - 0,6 % от сухой массы (рис. 2: а). Внесение аммиачной селитры при всех дозах борной кислоты увеличивало накопление азота в хвое, максимально до 3,5 % от сухой массы (N100В1). При оптимизации борного питания ели отмечалось повышение ^0В1, N3B1) или тенденция к повышению (N100В1) содержания азота в хвое в % от сухой массы, за исключением вариантов с дозами азота в 10 и 30 г-м-2, что можно объяснить эффектом разбавления в результате значительного увеличения массы растений, поскольку в расчете на целое растение содержание азота в хвое увеличивалось и в этих двух вариантах (с 20 мг в контроле до 220 и 290 мг в вариантах N10В1 и N30B1 соответственно).

а

-.-о-.-М о —О—N 3 —Д—N 10 —О... N 30 О-'-И 100

При содержании азота в хвое, равном 1,8 % от сухой массы, отмечался максимум роста ели (N10В1). Ранее было показано стимулирующее влияние бора на накопление азота и у сосны обыкновенной [Чернобровкина, 2001].

Содержание бора в хвое ели в контроле составляло 110 мкг-ґ1 сухого вещества ^0В0) (рис. 2: б). Уровень бора в хвое повышался с увеличением дозы внесения в почву борной кислоты при соответствующих уровнях обеспеченности растений азотом, максимально до 875 мкг-ґ1 сухого вещества ^0В10). Исключением была доза борной кислоты в 1 г-м-2 в условиях токсичного влияния азота в дозе 100 г-м-2 - при ее внесении не отмечалось повышения уровня бора в хвое. При повышении доз аммиачной селитры содержание бора в хвое в расчете на сухую массу преимущественно понижалось или имело тенденцию к снижению - минимально до 44 мкг-г-1 в варианте Ж00В0. Внесение в почву азота и других мак-ро- и микроэлементов под сосну обыкновенную также способствовало снижению поступ-

-Ы 0—0—N З —Л— N10 —N 30 —О—N 100

О

О

Доза борной кислоты, гм'

Доза борной кислоты, г-м-2

Рис. 1. Влияние обеспечения азотом и бором 5-летней ели европейской на сухую массу дерева

Доза азота, гм-

Рис. 2. Влияние обеспечения азотом и бором 5-летней ели европейской на содержание азота (а) и бора (б) в сухой хвое

В 0

В 1

В 10

ления бора в хвою [Чернобровкина и др., 2007]. В литературе отмечается, что в обеспечении бором древесных растений большое значение имеют почвенные условия - повышенное содержание в почве ионов NH4+, Fe3+, Al3+ и повышение pH почвы при известковании способствуют закреплению бора почвенными частицами [Wikner, 1983]. По нашим данным, для молодых растений ели европейской содержание бора в хвое на уровне 280 мкг-г-1 сухого вещества (N10B1) оказалось оптимальным для их роста в условиях достаточного обеспечения другими ЭМП. При содержании бора в хвое свыше 500 мкг-г-1 сухой массы отмечались признаки токсичности бора - желтобурое окрашивание хвои.

В контроле в хвое ели европейской в осенний период содержалось 16 свободных аминокислот. Их сумма составила 1,5 мг-г-1 абсолютно сухой хвои. 57 % их массы составлял L-аргинин, который является подвижной формой азота, позволяющей регулировать содержание его минеральных форм, выполняет запасную функцию азота в хвойных растениях [Новицкая, Чикина, 1980; Gezelius, Nasholm, 1993; Huhn, Schulz, 1996]. Запасание L-аргинина в органах хвойных растений обеспечивает азотом процессы их раннего весеннего роста и сезонного развития.

Повышение доз внесения азота на всех фонах борного питания вызывало увеличение суммы свободных аминокислот в хвое, максимально в 26 раз - от 5,5 мг-г-1 сухой массы в контроле (N0B0) до 38,6 мг-г-1 сухой массы в варианте с самой высокой дозой азота и оптимальной дозой бора (N100B1) (рис. 3: а). При дозе бора, максимально стимулирующей рост ели, сумма аминокислот в хвое снижалась в 4 раза на оптимальном фоне азотного питания (N10B1). Снижение уровня свободных аминокислот в хвое происходило, предположительно, как за счет «эффекта разбавления», так и в результате включения их в состав белковых соединений.

При внесении высоких доз азота влияние бора на накопление суммы аминокислот в хвое практически не наблюдалось (N30B0; N30B1; N30B10) или было слабо отрицательным (N100B0; N100B1; N100B10). В контрольном по азоту варианте накопления аминокислот, естественно, не происходило независимо от обеспеченности бором. Интересная ситуация сложилась в варианте с первой, небольшой, дозой азота (N3B10), где сумма аминокислот в хвое под воздействием максимальной дозы бора возросла в 5 раз. Даже небольшое дополнительное обеспечение азотом ели способствовало накоплению в хвое свободных аминокис-

лот, которые не использовались в метаболических процессах, поскольку избыток бора ингибировал рост растения.

б

Доза азота, гм-2

Рис. 3. Влияние обеспечения азотом и бором 5-летней ели европейской на содержание суммы аминокислот (а) и 1_-аргинина (б) в сухой хвое

1_-аргинин составлял основную массу от суммы свободных аминокислот хвои ели не только в контроле, как было отмечено выше, но и во всех вариантах азотного и борного питания (рис. 3: б). Изменение содержания этой аминокислоты в хвое под воздействием азотного и борного обеспечения ели обусловливало динамику суммы аминокислот в различных вариантах. Максимально (в 33 раза по сравнению с контролем) уровень 1_-аргинина в хвое повышался в вариантах с самой высокой дозой азота без внесения бора и с дозой борной кислоты в 1 г-м-2 (Ы100В0 и N100В1). При избыточной дозе борной кислоты и первой дозе азота ^3В10) содержание 1_-аргини-на повысилось в 7 раз. Под воздействием оптимальной дозы борной кислоты в условиях оптимального для роста ели уровня азота (Ж0В1) содержание аминокислоты в единице сухой массы хвои снижалось в 5 раз.

Данные показали, что максимальное накопление свободных аминокислот в хвое, включая L-аргинин, произошло под воздействием самой высокой дозы азота. Оптимизация борного питания ели не вызывала накопления L-аргинина в хвое в условиях достаточного обеспечения ЭМП. Как было показано нами ранее, в условиях высокого уровня азотного питания на низком фоне других ЭМП оптимизация борного обеспечения сосны обыкновенной в 20 раз повышала содержание L-аргинина в хвое [Чер-нобровкина и др., 2010].

Распределение азота между растворимыми фракциями в значительной степени зависит от обеспеченности растений азотом, фосфором и другими ЭМП. Рибулозо-1,5-бисфосфат-кар-боксилаза/оксигеназа (Рубиско), аминокислоты и аммоний могут рассматриваться как соединения, в которых преимущественно накапливается азот, но аккумулируются они в органах и тканях при различных условиях [Warren, Adams, 2002]. С увеличением обеспеченности растений фосфором содержание Рубиско увеличивается, а при высоких дозах азота и низкой обеспеченности фосфором избыточный азот накапливается в форме азота аминокислот и аммония. При дефиците фосфора у сосны обыкновенной повышалось содержание L-аргинина в хвое [Nasholm, Ericsson, 1990]. В случае незначительного или краткосрочного воздействия азотом растения реагируют увеличением интенсивности синтеза белка, если другие элементы питания доступны в достаточном количестве [Huhn, Schulz, 1996]. Высокие дозы азота или долгосрочные воздействия азотом в сосновых древостоях приводят к изменениям в механизме детоксификации избытка азотных соединений. Чтобы избежать накопления токсичного аммиака в растительных клетках, ассимилируемые соединения азота детоксифицируются путем включения в состав свободных аминокислот, преимущественно в состав L-аргинина, имеющего наиболее низкое по сравнению с другими аминокислотами отношение C/N (1,5) [Huhn, Schulz, 1996]. В литературе показано, что сеянцы сосны обыкновенной накапливали и запасали до 80 % азота в форме L-аргинина в случае, если синтез белка был ограничен факторами, отличными от доступности азота [Gezelius, Nasholm, 1993]. Увеличение содержания L-аргинина и глутамина в хвое сосны обыкновенной в 25-летнем, а также 60-80-летнем древостоях указывало на поступление избыточного количества азота в хвойное растение [Huhn, Schulz, 1996]. Уровень этих аминокислот рассматривается как биохимический индикатор загрязнения азотом сосновых древостоев. Необходимо учитывать, однако, что состав и содер-

жание свободных аминокислот в хвое может варьировать в пределах кроны, имеет сезонную, суточную динамику, зависит от внешних воздействий [Новицкая, Чикина, 1980; Nasholm, Ericsson, 1990; Gezelius, Nasholm, 1993; Черно-бровкина, 2001]. При внесении в течение 17 лет избыточного количества азота под деревья сосны обыкновенной в условиях Северной Швеции отмечалось значительное повышение уровня L-аргинина в хвое [Nasholm, Ericsson, 1990]. Максимальное количество аминокислоты в хвое в сезонной динамике было отмечено в феврале. При выращивании ели норвежской (Picea abies L.) в течение двух сезонов в вегетационных сосудах в условиях фона азотного питания, повышенного в 4 раза по сравнению с оптимальным, содержание свободного L-аргинина в хвое увеличивалось и составляло до 2 % сырого веса [Engvild, 2005]. Отмечалось увеличение содержания и других аминокислот с высоким содержанием азота - орнитина и лизина.

Наши и литературные данные позволяют заключить, что высокий уровень L-аргинина и других аминокислот в органах хвойных растений можно рассматривать как чувствительный биохимический индикатор разбалансирован-ности их минерального питания. При высоком по сравнению с другими ЭМП поступлении азота в хвойное растение часть его органы и ткани не способны использовать для синтеза белков и запасают в форме аминокислот с высоким содержанием азота, прежде всего в форме L-аргинина. Дополнительное оптимальное обеспечение бором хвойного растения ускоряет процессы роста и вместе с тем усиливает дефицит других ЭМП, что приводит к повышению накопления в хвое L-аргинина. В условиях оптимального фона минерального питания многократное накопление аминокислоты в хвое происходит при избыточной дозе борной кислоты и невысокой дозе азота. Последнее обстоятельство представляет интерес с экономической точки зрения - при небольших затратах на азотные удобрения можно достигать значительного повышения уровня L-аргинина в хвое. Древесная зелень используется для производства биологически активных препаратов лечебно-профилактического и кормового назначения [Ягодин, 1981; Левин, Репях, 1984]. Повышение содержания L-аргинина в древесной зелени путем регуляции минерального питания хвойных растений открывает новые возможности использования ее в фармакологии. Предлагается испытание хвои, обогащенной L-аргинином, в качестве сырья для получения этой аминокислоты, а также в качестве иммуностимулятора для ветеринарии.

В заключение следует отметить, что содержание азота и бора в хвое, равное соответственно 1,8 % и 280 мкг-г-1 сухого вещества, обеспечивает оптимальный рост 5-летней ели европейской в условиях оптимального фона других ЭМП. Уровень бора в хвое свыше 500 мкг-г-1 сухой массы является избыточным для ели и вызывает желто-бурое окрашивание хвои. Оптимизация борного питания ели способствует накоплению азота в хвое при его невысоком уровне - менее 1 % от сухой массы. При внесении азотных удобрений под растения ели отмечается преимущественно снижение уровня бора в хвое. Содержание L-аргинина в хвое ели увеличивалось максимально в 33 раза в условиях десятикратной по сравнению с оптимальной дозой азота. Установлено многократное повышение количества этой аминокислоты в хвое в варианте с использованием высокой дозы борной кислоты и низкой - азота.

Работа выполнена при финансовой поддержке Программы ФИ ОБН РАН «Биологические ресурсы России: динамика в условиях глобальных климатических и антропогенных воздействий» в рамках проекта № 01201257867.

Литература

Волова Т. Г. Биотехнология. Новосибирск: Изд-во СО РАН, 1999. 252 с.

Дахно И. С. Влияние иммуностимуляторов L-аргинина и РНК на иммунный статус коров при фас-циолезе // Вісник Полтавського державного сільського сподарського інституту. 2000. № 5.

С.32-34.

Западнюк В. И., Купраш Л. П., Заика М. И. и др. Аминокислоты в медицине. Киев: Здоровье, 1982. 200 с.

Калинкина Л. Х., Назаренко Л. В., Гордеева Е. Е. Модифицированный метод выделения свободных аминокислот для определения на аминокислотном анализаторе // Физиология растений. 1990. Т. 37. Вып. 3. С. 617-621.

Левин Э. Д., Репях С. М. Переработка древесной зелени. М: Лесн. пром-сть, 1984. 120 с.

Новицкая Ю. Е., Чикина П. Ф. Азотный обмен у сосны на Севере. Л.: Наука, 1980. 166 с.

Рыбак К. В., Сливинская Е. А., Саврасова Е. А. и др. Способ получения L-аминокислот с использованием бактерий, принадлежащих к роду Escherichia. Патент на изобретение № 2304615, РФ. 2005.

Ульянов А. М., Оберган Т. Ю., Шубина Т. А. и др. Исследование протектирующего действия комплекса аргинина с гепарином при экспериментальном развитии инсулинзависимого диабета // Известия РАН. Сер. биол. 2010. № 1. С. 109-114.

Чернобровкина Н. П. Экофизиологическая характеристика использования азота сосной обыкновенной. СПб.: Наука, 2001. 175 с.

Чернобровкина Н. П., Робонен Е. В., Иготти С. А., Дорофеева О. С., Шенгелиа И. Д. Влияние обеспеченности бором на рост сеянцев сосны обыкновенной // Лесоведение. 2007. № 5. С. 69-76.

Чернобровкина Н. П., Робонен Е. В., Зайцева М. И. Накопление L-аргинина в хвое сосны обыкновенной при регуляции азотного и борного обеспечения // Химия растительного сырья. 2010. № 3. С. 71-75.

Ягодин В. И. Основы химии и технологии переработки древесной зелени. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1981.224 с.

Cakmak I., Kurz H., Marschner H. Short-term effects of boron, germanium and high light intensity on membrane permeability in boron deficient leaves of sunflower // Physiol. Plant. 1995. Vol. 95. P. 11-18.

Camacho-CristFbal J. J., Rexach J., Gonznlez-Fontes A. Boron in Plants: Deficiency and Toxicity // Journal of Integrative Plant Biology. 2008. Vol. 50. N 10. P. 1247-1255.

Cengiz ., Kucukersan S. Effects of graded contents of arginin supplementation on growth performance, haematological parameters and immune system in broilers // Revue Med. Vet., 2010. Vol. 161. P.409-417.

Engvild K. C. The «Red» Decline of Norway Spruce or «R0de R0dgraner» - Is it Ammonium Overload or Top-Dying? // Ris0 National Laboratory. April, 2005. 16 p.

Ferrol N., Donaire J. P. Effect of boron on plasma membrane proton extrusion and redox activity in sunflower cells // Plant Sci. 1992. Vol. 86. P. 41-47.

Gezelius K., Nasholm T. Free amino acids and protein in Scots pine seedlings cultivated at different nutrient availabilities // Tree Physiology. 1993. Vol. 13, N 1. P. 71-86.

Huhn B.G., Schulz H. Contents of free amino acids in Scots pine needles from field sites with different levels of nitrogen deposition // New Phytol. 1996. Vol. 134. P. 95-101.

Jesse P. Greenstein and Milton Winitz. Chemistry of Amino Acids. New York. London. John Veley and Sons, IV. 1961. P. 1847-1848.

Kobayashi M., Matoh T., Junichi A. Two chains of ramnogalacturonan-2 are cross - linked by borate - diol ester bonds in higher plant cell wall // Plant Physiol. 1996. Vol. 110. P. 1017-1020.

Nasholm T., Ericsson A. Seasonal changes in amino acids, protein and total nitrogen in needles of fertilized Scots pine trees // Tree Physiology. 1990. Vol. 6. P.267-281.

Warren C. R., Adams M. A. Phosphorus affects growth and partitioning of nitrogen to Rubisco in Pinus pinaster // Tree Physiology. 2002. Vol. 22. P. 11-19.

Wikner B. Distribution and mobility of boron in forest ecosystems // Communications Institution Forestalis Fenniae. 1983. N 116. P. 131-141.

Чернобровкина Надежда Петровна

ведущий научный сотрудник, д. б. н.

Институт леса Карельского научного центра РАН ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск,

Республика Карелия, Россия, 185910 эл. почта: chernobr@krc.karelia.ru тел: (8142) 768160

Робонен Елена Вильямовна

ведущий физик

Институт леса Карельского научного центра РАН ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск,

Республика Карелия, Россия, 185910 эл. почта: er51@bk.ru тел.: (8142) 768160

Морозов Александр Константинович

зав. аналитической лабораторией

Институт леса Карельского научного центра РАН

ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск,

Республика Карелия, Россия, 185910 эл. почта: атогоЕОУ@ krc.karelia.ru тел.: (8142) 768160

Макарова Тамара Николаевна

ведущий химик

Институт леса Карельского научного центра РАН ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск,

Республика Карелия, Россия, 185910 эл. почта: chernobr@krc.karelia.ru тел.: (8142) 768160

Chernobrovkina, Nadezhda

Forest Research Institute, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences 11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk,

Karelia, Russia

e-mail: chernobr@krc.karelia.ru tel.: (8142) 768160

Robonen, Elena

Forest Research Institute, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences 11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk,

Karelia, Russia e-mail: er51@bk.ru tel.: (8142) 768160

Morozov, Alexandr

Forest Research Institute, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences 11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk,

Karelia, Russia

e-mail: amorozov@ krc.karelia.ru tel.: (8142) 768160

Makarova, Tamara

Forest Research Institute, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences 11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk,

Karelia, Russia

e-mail: chernobr@krc.karelia.ru tel.: (8142) 768160