СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПОРАЖЕНИЯ ПЧЕЛ НОЗЕМАТОЗОМ
METHOD FOR DIAGNOSING BEE INFECTION WITH NOSEMATOSIS

Изобретение относится к сельскому хозяйству и, в частности, к пчеловодству.
Нозематоз - один из наиболее опасных протозоозов, приводящих к массовой гибели или ослаблению пчелиных семей. Это инвазионное заболевание взрослых пчел и маток вызывает одноклеточный микроорганизм Nozema apis Zander. Нозема поражает эпителиальные клетки слизистой оболочки средней кишки.
Для диагностики заражения пчел нозематозом у них ампутируют брюшные отделы и вычленяют желудки, в качестве которых у пчел используется средняя кишка. Ампутированные желудки с небольшим количеством песка и воды помещают в фарфоровую ступку. Содержимое ступки тщательно растирают и полученную каплю гомогенна, помещают на предметное стекло и исследуют в затемненном поле микроскопа под 400-600-кратным увеличением. Заражение пчел нозематозом оценивается по наличию овальных спор ноземы. Они обнаруживаются по преломлению света (Методические указания, 1985; Гробов, Лихотн, 1989).
Недостаток способа заключается в больших затратах труда и времени и особенно то, что этим способом невозможности определить реальное поражение эпителиальных клеток желудка пчел, зараженных нозематозом.
Целью настоящего изобретения является обеспечение надежной диагностики поражения пчел нозематозом.
Поставленная цель достигается средствами гистологического анализа на вычленяемой средней кишке пчелы.
Повреждение средней кишки пчел, болеющих нозематозом, устанавливается по следующим гистологическим изменениям стенки средней кишки:
1. Увеличению объема эпителиоцитов.
2. Наличию в светлой цитоплазме спор паразита - Nozema apis.
3. Исчезновению пищеварительных вакуолей из цитоплазмы эпителиоцитов.
4. Утрате перитрофической мембраны.
5. Появлению гипохромности и пикнотичности ядер клеток.
6. Утрате камбиальных клеток.
7. Нарушению гистологической структуры слизистой оболочки в виде неравномерности длинны пищеварительных желез за счет десквамации. Технический результат выражается в снижении затрат труда и времени на реализацию способа, обеспечивающего высокую надежность выявления поражения пчел нозематозом.
Пример. Исследование выполнено на рабочих особях (Apis mellifera L.). У них ампутируют среднюю кишку. Ее фиксируют в 10%-ном нейтральном формалине, а затем промывали в дистиллированной воде, пропитывают парафином в автоматическом гистологическом процессоре Tissue-TekVip 6. Парафиновый блок изготавливляют в модульной системе Tissue-TekTEC 5. Парафиновые срезы толщиной 4 мкм изготавливают ручным роторным микротомом. Для окрашивания срезов применяется гематоксилин-эозином. Изучение гистопрепаратов и оценку структурных изменений средней кишки проводят с помощью светооптического микроскопа. Таким же способом изучали состояние кишечника пчел контрольной группы (Меркулов, 1961). Гистограммы изображены на рис. 1 и 2.
Источники информации
Методические указания по диагностике нозематоза медоносных пчел (утв. Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 25 апреля 1985 г. №115-6А).
Гробов О.Ф., Лихотин А.К. Болезни и вредители пчел. Москва: ВО «Агро-промиздат», 1989, 239 с.