ЖИВОЙ АТТЕНУИРОВАННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ЖЕЛТОЙ ЛИХОРАДКИ, АДАПТИРОВАННЫЙ К РОСТУ В КЛЕТКАХ VERO, И ВАКЦИННАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО

50
1. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки, адаптированный к росту в клетках Vero, полученный из исходного субштамма вируса желтой лихорадки 17D, который не адаптирован к росту в клетках Vero, для защиты пациентов от инфекции вируса желтой лихорадки, где указанный живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки является менее нейровирулентным, чем указанный исходный субштамм 17D вируса желтой лихорадки, и где указанный живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки является менее нейровирулентным, чем исходный субштамм вируса желтой лихорадки 17D, согласно тесту с определением дозы, летальной для 50% мышей (MLD).
2. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по п.1, где исходный штамм вируса желтой лихорадки представляет собой живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки, адаптированный к росту в яйцах.
3. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по п.1 или 2, где исходный штамм вируса желтой лихорадки представляет собой субштамм вируса желтой лихорадки 17D-204.
4. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-3, где исходный субштамм вируса желтой лихорадки 17D содержит последовательность РНК под SEQ ID NO. 2.
5. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-4, где указанный штамм был получен путем пассирования указанного исходного субштамма 17D вируса желтой лихорадки на клетках Vero.
10
50
50
6. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-5, где указанный штамм достигает logMLD/мл ниже или равного 4, ниже или равного 3,5, ниже или равного 3 или ниже или равного 2,5 в тесте на летальную дозу 50 для мышей (MLD).
7. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-6, где указанный штамм является по меньшей мере таким же аттенуированным по висцеротропизму, как и исходный субштамм 17D вируса желтой лихорадки.
8. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-7, где указанный штамм является по меньшей мере таким же иммуногенным для индукции иммунного ответа против вируса желтой лихорадки, как и исходный субштамм 17D вируса желтой лихорадки.
9. Иммуногенная композиция для индукции иммунного ответа против вируса желтой лихорадки, содержащая живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-8 и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Способ получения живого аттенуированного штамма вируса желтой лихорадки, адаптированного к росту в клетках Vero, для защиты пациентов от инфекции вируса желтой лихорадки, включающий стадии:
а) очистки вирусной геномной РНК исходного живого аттенуированного штамма вируса желтой лихорадки, который не адаптирован к росту в клетках Vero и который необязательно адаптирован к росту в яйцах;
b) трансфекции клеток Vero вирусной геномной РНК, очищенной на стадии а), в результате чего получают трансфицированные клетки Vero;
c) выращивания трансфицированных клеток Vero, полученных на стадии b), в культуральной среде, в результате чего получают, а затем выделяют первую популяцию вируса желтой лихорадки;
d) амплификации выделенной первой популяции вируса желтой лихорадки, полученной в конце стадии c), в 2 раза или больше в свежих клетках Vero, в результате чего получают вторую популяцию вируса желтой лихорадки;
e) клонирования второй популяции вируса желтой лихорадки, полученной на стадии d), посредством двух или больше последовательных клонирований методом бляшкообразования с использованием клеток Vero, в результате чего получают множество клонов вируса желтой лихорадки;
f) амплификации отдельно каждого из выделенных клонов вируса желтой лихорадки, полученных в конце стадии e), в 2 раза или больше в свежих клетках Vero, в результате чего получают множество штаммов вируса желтой лихорадки; и
50
g) отбора из указанного множества штаммов вируса желтой лихорадки, выделенных на стадии f), одного или нескольких живых аттенуированных штаммов вируса желтой лихорадки, которые являются менее нейровирулентными, чем исходный живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки, согласно тесту с определением дозы, летальной для 50% мышей (MLD).
11. Способ по п.10, где указанная культуральная среда является бессывороточной и необязательно не содержит какого-либо вещества человеческого или животного происхождения.
12. Живой аттенуированный штамм вируса желтой лихорадки, который может быть получен способом по любому из пп. 10 или 11.
13. Применение живого аттенуированного штамма вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-8 или 12 для получения вакцины против вируса желтой лихорадки.
14. Применение живого аттенуированного штамма вируса желтой лихорадки по любому из пп. 1-8 или 12, для получения вакцины для применения в профилактике инфекции, вызываемой вирусом желтой лихорадки.