СПОСОБ РЕПЛИКАЦИИ ВИРУСА ГРИППА В КУЛЬТУРЕ

1. Способ выбора человеческого вируса гриппа для выращивания на клетках культуры ткани клонированием методом серийных разведений, где способ включает:
серийное разведение штамма вируса гриппа и
контакт каждого разведения с культивированными клетками;
выращивание клеток в течение времени, достаточного для получения цитопатического эффекта (ЦПЭ);
сбор вируса и наибольшего разведения, которое вызывает ЦПЭ; и
повторение процесса с собранным вирусом.
2. Способ по п.1, также включающий смешивание штамма вируса гриппа с эффективным количеством трипсина до контакта с культивированными клетками.
3. Способ по п.2, где трипсином является трипсин IX типа.
4. Способ по п.2, где стадию контакта адаптированного к культуре ткани изолята с клетками культуры ткани проводят при МЗ менее около 0,01.
5. Способ по п.1, где клетками культуры ткани являются клетки почек эмбриона млекопитающих.
6. Способ по п.5, где клетками почек эмбриона млекопитающих являются клетки мезонефроса человека.
7. Способ по п.1, где вирусом гриппа является вирус гриппа А, В или С.
8. Способ по п.7, где вирусом гриппа А является штамм H5N1.
9. Способ по п.1, где штамм вируса гриппа сначала выращивают в оплодотворенных яйцах с получением большого инокулята для адаптации к культуре ткани.
10. Способ по п.9, где штамм вируса гриппа сначала выращивают на амниотической оболочке.
11. Способ получения вакцины человеческого вируса гриппа, включающий очистку собранного вируса по п.1.
12. Способ по п.11, где стадию очистки проводят с применением гель-хроматографии.
13. Способ по п.11, также включающий обработку вируса количеством бинарного этиленимина (БЭИ), эффективным для инактивации вируса.
14. Иммуногенная композиция, содержащая БЭИ-инактивированный человеческий вирус гриппа и адъювант.
15. Вакцина, содержащая человеческий вирус гриппа, составляющий, по крайней мере, менее 4 мкг НА человеческого гриппа на дозу, где, по крайней мере, 70% НА имеет одинаковую последовательность аминокислот.
16. Вакцина по п.15, где человеческий вирус гриппа инактивирован БЭИ.
17. Вакцина по п.15, где вакцина также содержит ISCOM.
18. Вакцина по п.15, где, по крайней мере, 90% НА имеет одинаковую последовательность аминокислот.
19. Способ выбора вируса гриппа собаки (ВГС) H3N8 для выращивания на клетках культуры ткани клонированием методом серийных разведений, где способ включает:
серийное разведение штамма вируса гриппа и
контакт каждого разведения с культивированными клетками;
выращивание клеток в течение времени, достаточного для получения цитопатического эффекта (ЦПЭ);
сбор вируса и наибольшего разведения, которое вызывает ЦПЭ; и
повторение процесса с собранным вирусом.
20. Способ по п.19, также включающий смешивание штамма вируса гриппа с эффективным количеством трипсина до контакта с культивированными клетками.
21. Способ по п.19, где трипсином является трипсин IX типа.
22. Способ по п.19, где клетками культуры ткани являются клетки почек эмбриона млекопитающих.
23. Способ по п.5, где клетками почек эмбриона млекопитающих являются клетки почек быка Мадин-Дарби (MDBK).
24. Иммуногенная композиция, содержащая инактивированный вирус гриппа собак (ВГС) H3N8 и адъювант.
25. Иммуногенная композиция по п.24, где адъювантом является эмульсия - масло и вода.
26. Иммуногенная композиция по п.24, где адъювантом является гидроксид алюминия.
27. Иммуногенная композиция по п.24, где инактивированным ВГС H3N8 является инактивированный бинарным этиленимином ВГС H3N8.
28. Вакцина, содержащая иммуногенную композицию по п.24.
29. Вакцина по п.28, также содержащая иммунологически эффективное количество одного или более дополнительных инактивированных серотипов ВГС.
30. Вакцина по п.28, также содержащая дополнительный патоген, где дополнительный патоген выбирают из группы, включающей вирус чумки собак; аденовирус собак; парвовирус собак; вирус парагриппа собак; коронавирус собак, серовары Leptospira, организмы Leishmania, виды Borrelia (spp.); Bordetella bronchiseptica, виды Mycoplasma, вирус бешенства, Ehrlichia canis и их комбинации.
31. Вакцина по п.28, где ВГС H3N8 составлен при 500 ЕГА/дозу, и где, по крайней мере, 70% НА имеет одинаковую последовательность аминокислот.
32. Вакцина по п.31, где адъювантом является гидроксид алюминия.
33. Вакцина по п.31, где, по крайней мере, 90% НА имеет одинаковую последовательность аминокислот.
34. Способ иммунизации собак от ВГС, включающий введение собаке вакцины по п.28.
35. Сыворотка, содержащая антитела, которые связываются с ВГС H3N8, полученная у собак, иммунизированных способом по п.34.