ПЕРЕКРЕСТНО-РЕАКТИВНЫЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ STAPHYLOCOCCUS AUREUS

1. Перекрестно-нейтрализующее антитело, содержащее, по меньшей мере, один сайт полиспецифического связывания, который связывается с альфа-токсином (Н1а) и, по меньшей мере, одним из бикомпонентных токсинов Staphylococcus aureus.
2. Антитело по п. 1, при этом указанный бикомпонентный токсин выбирают из группы, состоящей из родственных и неродственных пар F- и S-компонентов гамма-гемолизинов, токсинов PVL и PVL-подобных токсинов, предпочтительно, любых из HIgAB, HIgCB, LukSF, LukED, LukGH, LukS-HIgB, LukSD, HIgA-LukD, HIgA-LukF, LukG-HIgA, LukEF, LukE-HIgB, HIgC-LukD или HIgC-LukF.
3. Антитело по п. 1, при этом указанный сайт связывания связывается с, по меньшей мере, двумя или, по меньшей мере, тремя бикомпонентными токсинами, предпочтительно, по меньшей мере, с любыми двумя или тремя из HIgAB, HIgCB, LukSF и LukED, предпочтительно, HIgAB, HIgCB, LukSF и LukED.
4. Антитело по п. 2, при этом указанный сайт связывания связывается с, по меньшей мере, двумя или, по меньшей мере, тремя бикомпонентными токсинами, предпочтительно, по меньшей мере, с любыми двумя или тремя из HIgAB, HIgCB, LukSF и LukED, предпочтительно, HIgAB, HIgCB, LukSF и LukED.
5. Антитело по любому из п.п. 1-4, при этом указанный сайт связывания представляет собой сайт связывания CDR, предпочтительно, содержащий последовательности CDR сайта связывания VH и/или VL.
-8
-9
6. Антитело по любому из п.п. 1-4, которое представляет собой полоноразмерное моноклональное антитело или фрагмент такого антитела, содержащий, по меньшей мере, один домен антитела, содержащий сайт связывания, предпочтительно, антитело, которое имеет аффинность для связывания с каждым из токсинов с Kd менее 10 М, предпочтительно, менее 10 М.
-8
-9
7. Антитело по п. 5, которое представляет собой полоноразмерное моноклональное антитело или фрагмент такого антитела, содержащий, по меньшей мере, один домен антитела, содержащий сайт связывания, предпочтительно, антитело, которое имеет аффинность для связывания с каждым из токсинов с Kd менее 10 М, предпочтительно, менее 10 М.
8. Антитело по любому из п.п. 1-4, при этом антитело связывает тот же эпитоп, что и антитело, обозначенное #АВ-24, предпочтительно, которое включает такой же сайт связывания, что и антитело, обозначенное #АВ-24.
9. Антитело по п. 5, при этом антитело связывает тот же эпитоп, что и антитело, обозначенное #АВ-24, предпочтительно, которое включает такой же сайт связывания, что и антитело, обозначенное #АВ-24.
10. Антитело по п. 6, при этом антитело связывает тот же эпитоп, что и антитело, обозначенное #АВ-24, предпочтительно, которое включает такой же сайт связывания, что и антитело, обозначенное #АВ-24.
11. Антитело по любому из п.п. 1-4, при этом антитело получают из антитела, продуцированного клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747 и/или DSM 26748, или его функционально активного варианта, предпочтительно, при этом
(a) легкая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26748; и/или
(b) тяжелая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747;
(c) или используют функционально активный вариант (а) и/или (b).
12. Антитело по п. 5, при этом антитело получают из антитела, продуцированного клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747 и/или DSM 26748, или его функционально активного варианта, предпочтительно, при этом
(a) легкая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26748; и/или
(b) тяжелая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747;
(c) или используют функционально активный вариант (а) и/или (b).
13. Антитело по п. 6, при этом антитело получают из антитела, продуцированного клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747 и/или DSM 26748, или его функционально активного варианта, предпочтительно, при этом
(a) легкая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26748; и/или
(b) тяжелая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747;
(c) или используют функционально активный вариант (а) и/или (b).
14. Антитело по п. 8, при этом антитело получают из антитела, продуцированного клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747 и/или DSM 26748, или его функционально активного варианта, предпочтительно, при этом
(а) легкая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26748; и/или
(b) тяжелая цепь антитела продуцирована клеткой-хозяином, депонированной как DSM 26747;
(c) или используют функционально активный вариант (а) и/или (b).
15. Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность
- кодирующую легкую цепь антитела, обозначенную #AB-24-LC, включенную в клетку-хозяина, депонированную как DSM 26748; и/или
- кодирующую тяжелую цепь антитела, обозначенную #АВ-24-НС, включенную в клетку-хозяина, депонированную как DSM 26747.
16. Экспрессирующая кассета, содержащая кодирующую последовательность для экспрессии легкой цепи и/или тяжелой цепи антитела по любому из п.п. 1-14, где такую экспрессирующую кассету или кодирующую последовательность получают из плазмиды по п. 15.
17. Клетка-хозяин, содержащая плазмиду по п. 15 или экспрессирующую кассету по п. 16.
18. Способ получения антитела по любому из п.п. 1-14, где клетку-хозяина по п. 17 культивируют или поддерживают в условиях для получения указанного антитела.
19. Способ идентификации потенциальных защитных антител, включающий
(a) предоставление образца, содержащего антитело или клетку, продуцирующую антитело; и
(b) оценку связывания антитела из образца или полученного с помощью образца с эпитопом, узнаваемым антителом, обозначенным #АВ-24, при этом положительная реакция между антителом и эпитопом идентифицирует антитело как потенциально защитное антитело.
20. Способ идентификации потенциальных защитных антителах, включающий
(a) предоставление образца, содержащего антитело или клетку, продуцирующую антитело; и
(b) оценку связывания антитела из образца или полученного с помощью образца с альфа-токсином и, по меньшей мере, одним бикомпонентным токсином Staphylococcus aureus, при этом положительная реакция между антителом и токсинами идентифицирует антитело как потенциально защитное антитело.
21. Способ получения антитела по любому из п.п. 1-14, включающий
(a) предоставление потенциально защитного антитела, идентифицированного по п. 19 или 20; и
(b) получение моноклонального антитела или гуманизированной или человеческой формы антитела из потенциально защитного антитела, или его производного с такой же специфичностью связывания эпитопа, что и у потенциально защитного антитела.
22. Применение антитела по любому из п.п. 1-14 при лечении субъекта в с риском возникновения или страдающего от инфекции S. aureus, включающем введение субъекту эффективного количества антител для ограничения инфекции у субъекта, облегчения болезненного состояния, возникшего в результате указанной инфекции или ингибирования патогенеза пневмонии S. aureus.
23. Фармацевтический препарат антител по любому из п.п. 1-14, предпочтительно содержащий парентеральную или мукозальную композицию, необязательно содержащий фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
24. Применение антитела по любому из п.п. 1-14 в диагностике для обнаружения инфекций S. aureus, включая инфекции MRSA с высоким продуцированием токсинов, таких как некротическая пневмония, и продуцирование токсинов при фурункулезе и карбункулезе.
25. Диагностический препарат антител по любому из п.п. 1-14, необязательно содержащий антитела с меткой и/или дополнительный диагностический реагент с меткой.
26. Изолированный конформационный эпитоп, узнаваемый антителом, обозначенным #АВ-24.
27. Иммуноген, содержащий
(a) эпитоп по п. 26;
(b) необязательно, дополнительные эпитопы, по природе неассоциированные с эпитопом, указанным в (а); и
(c) носитель.
28. Иммуноген по п. 27 для применения при лечении субъекта путем введения эффективного количества указанного иммуногена для защиты субъекта от инфекции S. aureus, для предупреждения болезненного состояния, возникшего в результате указанной инфекции или для ингибирования патогенеза пневмонии S. aureus.
29. Изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из п.п. 1-14 или эпитоп по п. 26.