Риск развития иммунной тромбоцитопении новорожденного

«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ИММУНОГЕНЕТИКИ И ТКАНЕВОГО ТИПИРОВАНИЯ»

Санкт-Петербург 24-25 июня 2015 г.

на относительную малочисленность Регистра, в 2002 г. в клиническом отделении гемобласто-зов, депрессий кроветворения и трансплантации костного мозга института была проведена первая в России трансплантация костного мозга от донора из собственного Регистра — жителя Санкт-Петербурга. В настоящее время общее число трансплантаций, выполненных в клиниках России благодаря донациям стволовых клеток российских доноров, составляет около 20.

Сотрудниками РЦИТТ и лаборатории имму-ногематологии института ежегодно проводятся обучающие семинары для заведующих Зональными лабораториями иммунологического типи-рования тканей. В течение последних пяти лет при участии ведущих ученых Европейской федерации иммуногенетики организуются обучающие конференции для специалистов тканевого типирования России и стран ближнего зарубежья. Мы выражаем глубокую признательность

ведущим европейским специалистам, регулярно принимающим участие в наших конференциях.

Таким образом, созданные более 20 лет назад в нашей стране иммуногенетические лаборатории сыграли важную роль в развитии трансплантологии в России, благодаря их работе стали возможными успешные пересадки почек и других органов, эффективные трансфузии тромбоцитов. Однако одна из важнейших задач, ради которой создавались эти структуры, осталась невыполненной: формирование полноценного Национального регистра доноров ГСК, дающего возможность осуществлять подбор доноров для гематологических больных в основном в пределах нашей страны. Эту задачу необходимо решить в течение ближайших лет, и реальные шаги в этом направлении в последние 2 года сделаны Федеральным медико-биологическим агентством России.

Бутина Е.В, Зайцева Г. А.

ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России», Киров

РИСК РАЗВИТИЯ ИММУННОЙ ТРОМБОЦИТОПЕНИИ НОВОРОЖДЕННОГО

Введение. Тромбоцитопения (уровень тромбоцитов в периферической крови менее 150х109 /л) встречается у 1-5 % новорожденных. В патогенезе иммунной тромбоцитопении лежит реакция взаимодействия антител (иммуноглобулинов класса G) с антигенами поверхности тромбоцитов, приводящая к разрушению клеток в ретикуло-эндотелиальной системе. Кроме прямой деструкции тромбоцитов, происходит также снижение их продукции мегакариоцитами. Во внутриутробном периоде и периоде новорож-денности могут наблюдаться следующие варианты иммунной тромбоцитопении:

1. аллоиммунная тромбоцитопения (АТПН), возникающая при несовместимости матери и плода по специфическим антигенам тромбоцитов системы НРА (Human Platelet Antigens) и сенсибилизации матери к данным антигенам;

2. трансиммунная тромбоцитопения, при которой разрушение тромбоцитов ребенка происходит под действием аутоантител матери, страдающей иммунной тромбоци-топенией или системными заболеваниями, сопровождающимися аутосенсибилизаци-ей;

3. аутоиммунная тромбоцитопения, развивающаяся вследствие срыва иммунологической толерантности и выработки антител к собственным тромбоцитам у ребенка.

Частота случаев возникновения аллоиммун-ной тромбоцитопении составляет от 1:800 до 1:1000 новорожденных. Наиболее опасными осложнениями АТПН являются внутричерепные кровоизлияния во внутриутробном или раннем постнатальном периодах. Тяжелые нарушения, приводящие к инвалидности, регистрируются в 20 % случаев АТПН, смертность составляет 15 %. Установлено, что в 75 % случаев АТПН возникает при несовместимости по гену НРА-1а (генотип матери — НРА-1ЪЪ, ребенка — НРА-1аЬ). Причиной АТПН в 15,5 % случаев являются антитела к антигену НРА-5Ъ (генотип матери — НРА-5аа, ребенка — НРА-5аЪ) и 4 % случаев — анти-15Ъ антитела (генотип матери — НРА-15аа, ребенка — НРА-15аЪ). Сочетание антител указанных специфичностей выявляется в 5,5 % случаев АТПН.

Цель. Определение риска развития АТПН на основании анализа распределения генов НРА локусов НРА-1,—5, 15 у типированных доноров крови и ее компонентов.

ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XI, № 2, 2015

Материалы и методы. Проведено исследование а- и Ь-форм генов локусов НРА-1,—5,—15 методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуориметрической регистрацией продуктов в ходе процесса (ПЦР в реальном времени) с помощью наборов реагентов ТромбоГенТест (Россия). Гены локуса НРА-1 определены у 1419 человек, локуса НРА-5 и НРА-15 — у 185 доноров крови и/или ее компонентов, проживающих на территории Кировской области.

Результаты. Установлена частота встречаемости генетических сочетаний, выявление которых у женщин является критерием риска развития АТПН. Генотип НРА-1ЬЬ определен у 1,3 % обследованных, генотип НРА-5аа — 84,5 %, генотип НРА-15аа — 24,7 % человек. Для выявления риска развития АТПН проведен расчет

вероятности несовместимости матери и ребенка по НРА-генотипам по формуле: г=а (Ь + с), где г — генетический риск развития АТПН; а — частота встречаемости «генотипа риска»; Ь, с — другие сочетания генов в данном локусе. Соответственно, риск развития АИТН составляет по локусам НРА-1 — 1,28 %, НРА-5 — 13,1 %, НРА-15-18,5 %.

Заключение. Анализ совместимости НРА-генотипов матери и ребенка является одним из критериев дифференциальной диагностики причин тромбоцитопении у новорожденных. Для постановки диагноза АТПН, наряду с генетическими показателями, необходимо исследовать наличие у матери антител к собственным тромбоцитам и тромбоцитам ребенка.

Головкина Л. Л., Стремоухова А. Г., Пушкина Т.Д., Атрощенко Г. В., Каландаров Р. С., Паровичникова Е. Н.

ФГБУ Гематологический Научный Центр Минздрава России, Москва

ЧАСТОТА ТИПОВ АНТИГЕНА DWEAK СИСТЕМЫ РЕЗУС У РОССИЯН

Введение. Антигены системы Резус имеют большое значение в трансфузиологии ввиду их высокой иммуногенности. В настоящее время установлен широкий полиморфизм генов, кодирующих синтез белковых молекул антигена RhD. Классический антиген D состоит из 36 составных частей (эпитопов). Среди множества его вариантов принято выделять три основных: слабый антиген D — Dweak (его количество на эритроците снижено), парциальный антиген D, у которого отсутствует какой-либо из эпитопов (лица с таким антигеном D могут вырабатывать антитела к отсутствующим у них эпитопам) и DEL. Выявление Dweak представляет большое значение как у доноров, так и у реципиентов для профилактики анти-D аллоиммунизации. Серологические методы определения резус-принадлежности людей, применяемые в обычной практике иммуногематологов, не позволяют идентифицировать тип слабого варианта антигена Dweak. Это можно сделать только с помощью молекулярных методов. Выявление слабых типов антигена D у доноров важно для предупреждения аллоиммунизации D-отрицательных пациентов. Для пациентов это имеет значение в контексте тактики переливания эритроцит-содержащих сред: в практике американских трансфузиологов рекомендовано переливание

реципиентам с Dweak type 1, 2, 3 эритроцитов от D-положительных доноров для экономии резус-отрицательных эритроцитов. Беременным женщинам с теми же типами слабого антигена D не рекомендовано введение антирезусного иммуноглобулина.

Цель работы: выявить частоту типов антигена Dweak и фенотипов антигенов системы Резус у Dweak-положительных лиц среди россиян.

Методы исследования: фенотипирование эритроцитов по системе Резус выполняли в реакции агглютинации на плоскости Цоликлона-ми IgM класса со специфичностями анти-D,— С,— с,— Е. — е. Определение антигена Dweak проводили в реакции солевой агглютинации в планшетах с полными моноклональными антителами анти-D (ЭритротестТМ-Цоликлон анти-D Супер, ООО «Гематолог», Москва) двух серий, непрямой антиглобулиновый тест с неполными моноклональными антителами анти-D двух серий (ЭритротестТМ-Цоликлон анти-D, ООО «Гематолог», Москва) в пробирках и в геле (фирма BioRad, США). Антиглобулиновую сыворотку трех серий применяли для выявления фиксирования неполных анти-D антител после проведенной инкубации на исследуемых и контрольных эритроцитах. Метод полимеразной цепной реакции выполняли с праймерами для выявления ге-