СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ МАЛЫХ ИНТЕРФЕРИРУЮЩИХ PHK (SIRNA) ДЛЯ БОРЬБЫ С НЕМАТОДАМИ У РАСТЕНИЙ

1. Двунитевая молекула РНК, содержащая антисмысловую нить и смысловую нить, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити является комплементарной по отношению к части нуклеотидной последовательности гена Hg-rps-23 соевой цистообразующей нематоды, при этом часть состоит главным образом из от приблизительно 18 до приблизительно 25 последовательных нуклеотидов SEQ ID NO:931; где двунитевая молекула РНК ингибирует экспрессию гена Hg-rps-23.
1. Молекула РНК по п.1, где часть нуклеотидной последовательности гена Hg-rps-23 состоит главным образом из любой нуклеотидной последовательности из SEQ ID NO:1-463 (таблица 1).
3. Молекула РНК по п.1, где часть нуклеотидной последовательности гена Hg-rps-23 состоит главным образом из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:64.
4. Молекула РНК по п.1, где часть нуклеотидной последовательности гена Hg-rps-23 состоит главным образом из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:258.
5. Молекула РНК по п.1, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити состоит главным образом из любой нуклеотидной последовательности из SEQ ID NO:464-926 (таблица 2).
6. Молекула РНК по п.1, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити состоит главным образом из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:863.
7. Молекула РНК по п.1, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити состоит главным образом из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:669.
8. Молекула РНК по п.1, где нуклеотидная последовательность смысловой нити является в значительной степени комплементарной по отношению к нуклеотидной последовательности антисмысловой нити.
9. Молекула РНК по п.1, где нуклеотидная последовательность смысловой нити является полностью комплементарной по отношению к нуклеотидной последовательности антисмысловой нити.
10. Молекула РНК по п.1, где двунитевая молекула РНК представляет собой молекулу короткой РНК, образующей шпильки (shRNA).
11. Конструкт нуклеиновой кислоты, содержащий молекулу РНК по любому из пп.1-10.
12. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая молекулу РНК по любому из пп.1-10.
13. Конструкт нуклеиновой кислоты, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.12.
14. Молекула химерной нуклеиновой кислоты, содержащая антисмысловую нить, имеющую любую нуклеотидную последовательность из SEQ ID NO:464-926, функционально связанную с молекулой-предшественником растительной микроРНК.
15. Молекула химерной нуклеиновой кислоты по п.14, где молекула-предшественник растительной микроРНК является предшественником соевой микроРНК.
16. Молекула химерной нуклеиновой кислоты по п.15, где молекулой-предшественником растительной микроРНК является gma-MIR164.
17. Конструкт нуклеиновой кислоты, содержащий молекулу химерной нуклеиновой кислоты по любому из пп.14-16.
18. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая молекулу химерной нуклеиновой кислоты по любому из пп.14-16.
19. Конструкт нуклеиновой кислоты, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.18.
20. Молекула-предшественник искусственной растительной микроРНК, содержащая антисмысловую нить, имеющую любую нуклеотидную последовательность из SEQ ID NO:464-926.
21. Молекула-предшественник искусственной растительной микроРНК по п.20, где молекула-предшественник микроРНК является молекулой-предшественником соевой микроРНК.
22. Молекула-предшественник искусственной растительной микроРНК по п.21, где молекулой-предшественником микроРНК является gma-MIR164.
23. Конструкт нуклеиновой кислоты, содержащий молекулу-предшественника искусственной растительной микроРНК по любому из пп.20-22.
24. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая искусственную растительную микроРНК по любому из пп.20-22.
25. Конструкт нуклеиновой кислоты, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.24.
26. Конструкт нуклеиновой кислоты по любому из пп.11, 13, 17, 19, 23 или 25, где конструкт нуклеиновой кислоты является вектором экспрессии.
27. Композиция, содержащая две или более молекулы РНК по любому из пп.1, 2, 5, 8, 9 или 10, где каждая из двух или более молекул РНК содержит различную антисмысловую нить.
28. Композиция по п.27, где две или более молекулы РНК присутствуют в одном и том же конструкте нуклеиновой кислоты, в различных конструктах нуклеиновых кислот или в любых их комбинациях.
29. Композиция по любому из пп.27 или 28, содержащая молекулу РНК, содержащую антисмысловую нить, состоящую главным образом из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:863, и молекулу РНК, содержащую антисмысловую нить, состоящую главным образом из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:669.
30. Композиция, содержащая два или более конструкта нуклеиновых кислот по любому из пп.11, 17 или 23, где каждый из двух или более конструктов нуклеиновых кислот содержит различную антисмысловую нить.
31. Композиция, содержащая две или более молекулы нуклеиновых кислот по любому из пп.12, 18 или 24, где каждая из двух или более молекул нуклеиновых кислот кодирует различную антисмысловую нить.
32. Композиция, содержащая два или более конструкта нуклеиновых кислот по пп.13, 19 или 25, где каждый из двух или более конструктов нуклеиновых кислот содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую различную антисмысловую нить.
33. Композиция, содержащая две или более молекулы химерных нуклеиновых кислот по пп.14-16, где каждая из двух или более молекул химерных нуклеиновых кислот содержит различную антисмысловую нить.
34. Композиция, содержащая две или более молекулы-предшественника искусственных растительных микроРНК по любому из пп.20-22, где каждая из двух или более молекул-предшественников искусственных растительных микроРНК содержит различную антисмысловую нить.
35. Трансформированная растительная клетка, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты, конструкт нуклеиновой кислоты, молекулу химерной нуклеиновой кислоты, молекулу-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композицию по любому из соответствующих предыдущих пунктов, где трансформированная растительная клетка имеет повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой соевой цистообразующей нематодой, по сравнению с контрольной растительной клеткой.
36. Растительная клетка по п.35, где растительная клетка является клеткой бобового растения.
37. Растительная клетка по п.36, где растительная клетка является клеткой растения сои.
38. Трансгенное растение, содержащее молекулу нуклеиновой кислоты, конструкт нуклеиновой кислоты, молекулу химерной нуклеиновой кислоты, молекулу-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композицию по любому из соответствующих предыдущих пунктов, где трансгенное растение имеет повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой соевой цистообразующей нематодой, по сравнению с контрольным растением.
39. Трансгенное растение по п.38, где трансгенное растение является бобовым растением.
40. Трансгенное растение по п.39, где трансгенное растение является растением сои.
41. Способ повышения устойчивости растительной клетки к инфекции, вызываемой нематодами, включающий введение в растительную клетку молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов для повышения, таким образом, устойчивости растительной клетки к инфекции, вызываемой нематодами.
42. Способ борьбы с инфекцией растительной клетки, вызываемой нематодами, включающий приведение нематоды, инфицирующей растительную клетку, в контакт с молекулой нуклеиновой кислоты, конструктом нуклеиновой кислоты, молекулой химерной нуклеиновой кислоты, молекулой-предшественником искусственной растительной микроРНК и/или композицией по любому из соответствующих предыдущих пунктов для борьбы, таким образом, с инфекцией растительной клетки, вызываемой нематодами.
43. Способ повышения устойчивости растения к инфекции, вызываемой нематодами, включающий введение в клетки растения молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов для повышения, таким образом, устойчивости растения к инфекции, вызываемой нематодами.
44. Способ борьбы с инфекцией растения, вызываемой нематодами, включающий приведение нематоды, инфицирующей растение, в контакт с молекулой нуклеиновой кислоты, конструктом нуклеиновой кислоты, молекулой химерной нуклеиновой кислоты, молекулой-предшественником искусственной растительной микроРНК и/или композицией по любому из соответствующих предыдущих пунктов для борьбы, таким образом, с инфекцией растения, вызываемой нематодами.
45. Способ ослабления развития нематодных цист на корнях растения, инфицированного нематодами, включающий введение в клетки растения молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов для ослабления, таким образом, развития нематодных цист на корнях растения.
46. Способ получения трансформированной растительной клетки, имеющей повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, включающий введение в растительную клетку молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов с получением, таким образом, трансформированной растительной клетки, имеющей повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, по отношению к контрольной растительной клетке.
47. Трансформированная растительная клетка, полученная с помощью способа по п.46.
48. Способ получения трансгенного растения, имеющего повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, включающий трансформацию клеток растения с помощью молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов с получением, таким образом, трансгенного растения, имеющего повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, по отношению к контрольному растению.
49. Трансгенное растение, полученное с помощью способа по п.48.
50. Способ создания трансгенного растения, имеющего повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, включающий:
a) трансформацию растительной клетки с помощью молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов с получением трансформированной растительной клетки; и
b) выращивание трансгенного растения из трансформированной растительной клетки, в силу чего трансгенное растение имеет повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, по отношению к контрольному растению.
51. Трансгенное растение, полученное с помощью способа по п.50.
52. Растение-потомок трансгенного растения по п.49 или п.51, где растение-потомок является трансгенным растением.
53. Семя трансгенного растения по любому из пп.49, 51 или 52, где семя является трансгенным семенем.
54. Способ по любому из пп.41, 42, 46 или 48, где растительная клетка является клеткой бобового растения.
55. Способ по п.54, где растительная клетка является клеткой растения сои.
56. Способ по любому из пп.43, 44, 48 или 50, где растение является бобовым растением.
57. Способ по п.56, где растение является растением сои.
58. Способ по любому из пп.41-46, 48, 50, 55, 57, где нематода является соевой цистообразующей нематодой.
59. Сельскохозяйственная культура, включающая множество трансгенных растений по любому из соответствующих предыдущих пунктов, высаживаемых вместе на сельскохозяйственном поле.
60. Способ повышения урожайности, включающий:
а) введение молекулы нуклеиновой кислоты, конструкта нуклеиновой кислоты, молекулы химерной нуклеиновой кислоты, молекулы-предшественника искусственной растительной микроРНК и/или композиции по любому из соответствующих предыдущих пунктов в клетки растения; и
b) культивирование множества растений согласно (а) в качестве сельскохозяйственной культуры, что дает в результате множество растений, имеющих повышенную устойчивость к инфекции, вызываемой нематодами, с повышением, таким образом, урожайности.
61. Сельскохозяйственная культура по п.59 или способ по п.60, где растение является бобовым растением.
62. Сельскохозяйственная культура по п.59 или способ по п.60, где растение является растением сои.