СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МАСТИТА У ЖИВОТНЫХ
METHOD OF TREATING MASTITIS IN ANIMALS

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к средствам для лечения мастита у животных.
Известен препарат для профилактики мастита у коров «Средство для профилактики мастита у коров в сухостойный период», патент №(11) 2342123, дата публикации 27.12.2008. Данное средство относится к ветеринарии, обладает лечебными и профилактическими свойствами для лечения мастита у коров после перевода их в сухостой. Средство в своем составе содержит йодвисмутсульфамид и биополимер. Биополимер получают путем взаимодействия мочевины, формалина, глицерина с последующим внесением раствора поливинилпирролидона. Целевой продукт совмещает свойства антисептика и пленочного покрытия. Средство в своем составе имеет мочевину и формалин - эти небезопасные вещества могут оказывать раздражающее действие. В качестве гелеобразователя используется поливинилпирролидон - это синтетическое соединение также может оказывать неблагоприятные воздействия.
Еще одним средством, используемым в ветеринарии и фармакологии, является «Препарат «Биогель-10 » для лечения коров, больных маститами и эндометритами», патент №(11) 2102074, дата публикации 20.01.1998. Препарат "Биогель-10" для лечения коров, больных маститами и эндометритами, содержит 20%-ный спиртовый экстракт прополиса, натрий карбоксиметилцеллюлозу и воду дистиллированную. Недостатком данного средства является то, что спиртовая настойка экстракта может сушить кожу. Нет отпугивающего действия против насекомых.
Наиболее близким (прототипом) к заявленному средству является «Антибактериальная композиция для лечения животных», заявка на изобретение №(11) 2002122440, дата публикации заявки 20.03.2004. Антибактериальная композиция для лечения животных на основе тилозина и его производных. В качестве желирующего компонента содержит фталоилжелатину. Средство имеет гелеобразную консистенцию. Данное средство обладает лечебными свойствами, но срок годности очень мал, так как желатин и его производные являются продуктами животного происхождения и соответственно подвергаются обсеменению бактериями и быстро разрушаются. Также препарат не обладает репеллентными свойствами.
Задачей изобретения является создание гелеобразного средства для лечения мастита у животных, обладающего одновременно выраженным терапевтическим и репеллентным воздействием и пролонгированным сроком хранения.
Техническим результатом является усиление регенерирующего, противовоспалительного, антисептического и репеллентного свойств. В качестве антисептика используется антибиотик для животных тилозин и сок маклейи, полученный путем прессования из растения маклейи мелкоплодной. В качестве связующего компонента используется карбопол. В качестве вспомогательного компонента средство содержит эфирное масло пихты сибирской, которое обладает способностью отпугивать насекомых, в частности мух.
2
2
2
Данное техническое решение достигается за счет того, что средство для лечения мастита у животных, содержащее антибиотик в виде тилозина, гелеобразующий компонент, воду, отличающееся тем, что в качестве гелеобразующего компонента содержит карбопол и триэтаноламин, дополнительно содержит эфирное масло пихты сибирской и глицерин, в качестве дополнительного антисептического компонента содержит сок маклейи мелкоплодной, полученный путем прессования вегетативной части растения, убранного в период цветения, на механическом прессе с применением ступенчатой нагрузки в виде нагружения с первым усилием сжатия 25-30 кН/см, и выдержкой 5 минут; вторым усилием сжатия 55-60 кН/см, выдержкой 2,5 минуты; третьим усилием сжатия 80 кН/см, выдержкой 1 минута, при следующем соотношении компонентов в смеси, %:
Тилозин
0,05-1,0
Сок маклейи
0,05-1,0
Глицерин
5,0-10,0
Карбопол
0,15-0,20
Триэтаноламин
0,02-0,03
Эфирное масло пихты
0,1-0,3
Вода
до 100
Карбопол - гелеобразователь обеспечивает вязкость и создание поверхностных пленок. Карбопол является полимером акриловой кислоты, особенностью его является наличие перекрестных «сшивок» мономера. В качестве сшивающего агента может быть использован многоатомный спирт. Все гелеобразные средства и препараты, в которых содержится карбопол, обладают пролонгированным сроком хранения в отличие от натуральных гелеобразующих компонентов средств.
Триэтаноламин обеспечивает гелеобразную структуру, поддерживает нейтральную среду в растворе.
Глицерин обладает смягчающим действием, повышает эластичность кожи, хороший влагоудерживающий агент.
Эфирное масло пихты кроме выраженного местного противовоспалительного действия оказывает противовоспалительное, иммуномодулирующее, радиопротекторное и адаптогенное действие на организм, также обладает способностью отпугивать насекомых.
Активным веществом препарата является тилозин. Он является бактериостатическим действующим антибиотиком, разработанным специально для применения животным. Тилозин действует на грамположительные и некоторые грамотрицательные бактерии, в том числе: Е. coli, Bacillus anthracis, Pasteurella spp., Haemophilus spp., Leptospira spp., Stapylococcus spp., Streptococcus spp., Erysipelothrix spp., Corynebacterium spp., Mycoplasma spp., Chlamydia spp., Treponema spp. (Brachispira) и др. По степени воздействия на организм относится к малоопасным.
2
2
2
Вспомогательным веществом является сок маклейи мелкоплодной. Сок обладает хорошими антисептическими свойствами, является натуральным продуктом, выделенным из надземной части растения - маклейи мелкоплодной. Растение богато алкалоидами - сангвинарином и хелиритрином, которые и оказывают выраженное антисептическое действие. Сок маклейи мелкоплодной, полученный путем прессования вегетативной части растения, убранного в период цветения, на механическом прессе с применением ступенчатой нагрузки в виде нагружения с первым усилием сжатия 25-30 кН/см, и выдержкой 5 минут; вторым усилием сжатия 55-60 кН/см, выдержкой 2,5 минуты; третьим усилием сжатия 80 кН/см, выдержкой 1 минута, что увеличивает степень извлечения биологически активных веществ из растения.
Технология приготовления заявленного средства против мастита у животных в виде гелеобразной жидкости состоит в следующем: необходимое количество карбопола и расчетное количество воды смешивают и оставляют набухать при комнатной температуре в течение 40 минут до получения гомогенного состояния. Далее добавляют глицерин и полученную гелеобразную смесь воды, карбопола и глицерина нагревают до 40-45ºC при перемешивании (50-60 об/мин), затем добавляют заданное количество тилозина, триэтаноламина и сока маклейи. Перемешивание осуществляют еще в течение 5-10 минут. Убирают нагрев, затем вносят эфирное масло пихты сибирской. После этого массу охлаждают в бане с холодной водой.
Средство обладает противовоспалительным, смягчающим, антисептическим свойствами. Имеет способность отпугивать насекомых. Для подтверждения заявленных свойств нами были поставлены эксперименты, которые приведены в таблице 1.
Таблица 1
Примеры рецептур разрабатываемого средства и прототипа
Компоненты рецептуры
Массовая доля компонентов, в %
Заявленное средство
Прототип
Опыт №1
Опыт №2
Опыт №3
Опыт №4
Опыт №5
тилозин
0,05
0,53
1,0
5,0
10,0
сок маклейи
0,05
0,53
1,0
-
-
глицерин
5,0
7,50
10,0
-
-
карбопол
0,15
0,18
0,20
-
-
триэтаноламин
0,02
0,025
0,03
-
-
эфирное масло пихты
0,1
0,2
0,3
-
-
фталоилжелатин
-
-
-
1,0
2,0
вода
до 100
до 100
до 100
до 100
до 100
Приготовление 100 г разрабатываемого средства и прототипа
3
3
3
3
3
Опыт №1: 0,15 мг карбопола и 94,68 см воды смешивают и оставляют набухать при комнатной температуре в течение 40 минут до получения гомогенного состояния. Далее добавляют 5,0 см глицерина и полученную гелеобразную смесь воды, карбопола и глицерина нагревают до 40-45ºC при перемешивании (50-60 об/мин), затем добавляют 0,05 мг тилозина, 0,02 см триэтаноламина, 0,05 см сока маклейи мелкоплодной. Перемешивание осуществляют еще в течение 5-10 минут. Убирают нагрев, затем вносят 0,1 см эфирного масла пихты сибирской. После этого массу охлаждают в бане с холодной водой.
3
3
3
3
3
Опыт №2: 0,18 мг карбопола и 91,57 см воды смешивают и оставляют набухать при комнатной температуре в течение 40 минут до получения гомогенного состояния. Далее добавляют 7,50 см глицерина и полученную гелеобразную смесь воды, карбопола и глицерина нагревают до 40-45ºC при перемешивании (50-60 об/мин), затем добавляют 0,53 мг тилозина, 0,025 см триэтаноламина, 0,53 см сока маклейи мелкоплодной. Перемешивание осуществляют еще в течение 5-10 минут. Убирают нагрев, затем вносят 0,2 см эфирного масла пихты сибирской. После этого массу охлаждают в бане с холодной водой.
3
3
3
3
3
Опыт №3: 0,20 мг карбопола и 88,47 см воды смешивают и оставляют набухать при комнатной температуре в течение 40 минут до получения гомогенного состояния. Далее добавляют 10,0 см глицерина и полученную гелеобразную смесь воды, карбопола и глицерина нагревают до 40-45ºC при перемешивании (50-60 об/мин), затем добавляют 1,0 мг тилозина, 0,03 см триэтаноламина, 1,0 см сока маклейи мелкоплодной. Перемешивание осуществляют еще в течение 5-10 минут. Убирают нагрев, затем вносят 0,3 см эфирного масла пихты сибирской. После этого массу охлаждают в бане с холодной водой.
Технология приготовление образца прототипа похожа на технологию приготовления изобретения, только как желирующий агент используется фталоилжелатин.
3
Опыт №4:1,0 мг фталоилжелатина смешивается с 94,00 см воды, затем добавляется 5,0 мг тилозина.
3
Опыт №5: 2,0 мг фталоилжелатина смешивается с 88,00 см воды, затем добавляется 10,0 мг тилозина.
Были проведены лабораторные исследования на определение противовоспалительного действия и влияние на регенеративные процессы, была проанализирована антимикробная активность, определены репелентные свойства препарата.
Определение противовоспалительного действия и влияние препарата на регенеративные процессы
Определение противовоспалительного действия средств проводили на морских свинках живой массой 400-500 г. Было сформировано четыре группы по три морские свинки в каждой группе, из них две опытные и две контрольные группы.
Животным опытной и контрольной групп на участок кожи, после депиляции, в области спины, наносили три капли ксилола, который стеклянной палочкой в течение двух минут втирали в кожу, чтобы вызвать дерматит. Спустя один час, а затем ежедневно 1 раз в день на обожженный ксилолом участок кожи диаметром 10 мм наносили 0,1 мл испытуемого препарата.
В течение первых суток после термического воздействия и дальнейшей обработке средством обнаруживали гиперемию кожи, незначительную отечность в зоне поражения. К концу вторых суток признаки воспаления исчезали, на 3-5 день признаков дерматита выявлено не было.
У животных контрольной группы, в которой применяли прототип, в течение первых суток на местах химического воздействия выявляли гиперемию и отечность, наиболее выраженную через 6-10 часов после раздражающего действия химического агента. На второй день отмечались более выраженные признаки воспаления в зоне поражения (гиперемия, отечность, болезненность); на третий день - зуд, к 4-5 дню заживление происходило на 8-10 сутки.
Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что препарат обладает выраженным противовоспалительным действием.
Изучение влияния средства на течение регенеративных процессов осуществляли в сравнительном аспекте модели экспериментально воспроизведенных инфицированных кожно-мышечных ран у 20 молодых белых крыс массой 80-100 г, взятых из одних пометов и распределенных в опытную и контрольную группы. Им наносили кожно-мышечные раны без соблюдения правил асептики. На спине всех животных тщательно выстригали участок 2×2 см. Затем трафаретом (острыми краями пробочного пробойника) намечали контуры раны диаметром 1 см и вырезали глазными ножницами лоскут кожи и мышц.
Десяти опытным крысам на раневую поверхность наносили препарат, а 10 контрольным - средство прототип.
После этого раны покрывали марлевой салфеткой, поверх которой накладывали лоскут марли, и ее края приклеивали к шерсти животного густым коллодием. Для более надежной фиксации повязки ее укрепляли бинтом. Перевязки проводили каждый день.
О ходе заживления экспериментальных ран судили по следующим показателям: время проявления грануляций в ране, закрытие дна раны грануляциями, качество грануляций, ход эпителизации, состояние тканей вокруг раны. Как показали наблюдения, у животных опытной группы заживление ран (выполнение их грануляцией, исчезновение гиперемии, отечности и боли, эпителизация с образованием рубца) проходило в среднем на шесть дней раньше, чем у животных контрольной группы.
Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что препарат благотворно влияет на регенеративные процессы, стимулируя их.
Антимикробная активность препарата
Антимикробные свойства препарата проверяли методом диффузии в агар с использованием лунок.
В качестве тест-культур использовали суточные полевые очищенные изоляты микроорганизмов. Результаты проведенных исследований отражены в таблице 2.
Анализируя полученные результаты исследований по определению чувствительности условно-патогенной микрофлоры к препаратам, устанавливаем, что наиболее активно препятствуют росту микрофлоры опытный препарат.
Таблица 2
Определение чувствительности микроорганизмов к тестируемым препаратам
Препараты
Зона задержки роста в мм
St. aureus
Str. pyogenes
E.coli
Shigella boudi
Препарат с тилозином и маклейей
29,5
31,5
15
38
Препарат с тилозином
35,7
20,3
11,2
15,6
Прототип
5,3
7,5
-
-
Была проанализирована активность воздействия препарата с тилозином и маклейей на микроорганизмы. Результаты лабораторных исследований представлены в таблице 3.
Таблица 3
Влияние препарата с тилозином и маклейей на активность роста микроорганизмов
Название микроорганизмов
Зона задержки роста микроорганизмов, мм
I. enterocolitica
30,5
Р. mirabilis
-
Ps. aeroginosa
15,5
St. aureus
29,5
K.L pneumoniae
задержка
St. warreri
49,5
St. huicus
43,5
St. epidermidis
33
St. hominis
29
Sh.boudi
38
Sh. desenteria
30
Репеллентные свойства препарата
В опыте использовалось 10 коров, которые были распределены на 2 группы по 5 животных в каждой. Коровам первой группы (опытная) наносили опытный препарат, животным второй группы (контрольная) - прототип. Тестируемые препараты наносили на соски вымени сразу после доения путем опускания соска вымени в специальный стакан для обработки сосков.
В результате наблюдения за животными было установлено, что препарат обладает репеллентным свойством в течение 3-3,5 часов, в то время как контрольное средство (прототип) подобным действием не обладает.
Результаты всех проведенных экспериментов представлены в таблице 4.
Таблица 4
Результаты экспериментов
Компоненты рецептуры
Примеры предела средства на 100 г
Прототип
Опыт №1
Опыт №2
Опыт №3
Опыт №4
Опыт №5
Противовоспалительное действие Заживление на:
+
+
+
+
+
3-5 день
3-5 день
3-5 день
8-10 сутки
8-10 сутки
Влияние на регенеративные процессы
+
+
+
на 6 дней
на 6 дней
на 6 дней
+
+
раньше
раньше
раньше
Антимикробная активность
+
+
+
±
±
Срок хранения
1,5 года
1,5 года
1,5 года
1 год
1 год
Репелентные свойства
+
+
+
-
-
+ - свойства обнаружены; - - свойства не обнаружены
По полученным лабораторным экспериментальным данным можно судить о результатах данного изобретения. Техническим результатом изобретения явилось то, что противомаститное средство на основе тилозина и маклейи для лечения мастита у животных, в качестве гелеобразующего вещества в котором содержится карбопол, благотворно влияет на регенеративные процессы, стимулируя их, активно борется с микроорганизмами, по сравнению с другими препаратами. После применения средства повышается эластичность кожи, средство обладает отпугивающим свойством против мух, ранозаживляет, смягчает кожу. На основании всего вышеизложенного технические цели были достигнуты.