СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ГЕМОФИЛИИ A

1. Способ лечения гемофилии A у субъекта-человека, нуждающегося в этом, предусматривающий введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) полипептидный фактор VIII (FVIII) и (ii) фрагмент фактора фон Виллебранда (VWF), содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней.
2. Способ по п. 1, где полипептид FVIII связан с фрагментом VWF с помощью ковалентной связи.
3. Способ по п. 1 или 2, где ковалентная связь представляет собой пептидную связь или дисульфидную связь.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где полипептид FVIII содержит первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни.
5. Способ по п. 4, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом или N-концом полипептида FVIII.
6. Способ по п. 4, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в полипептид FVIII.
7. Способ по п. 5 или 6, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в домен В полипептида FVIII.
8. Способ по п. 7, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в полипептид FVIII непосредственно ниже аминокислоты, соответствующей аминокислотному остатку 745 в SEQ ID NO: 65.
9. Способ по любому из пп. 4-8, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с полипептидом FVIII с помощью линкера.
10. Способ по любому из пп. 4-9, где фрагмент VWF содержит второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни.
11. Способ по п. 10, где второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом или N-концом фрагмента VWF.
12. Способ по п. 10, где второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен во фрагмент VWF.
13. Способ по п. 10 или 11, где второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом фрагмента VWF.
14. Способ по любому из пп. 10-13, где второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с фрагментом VWF с помощью линкера.
15. Способ по любому из пп. 4-14, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, или они оба выбраны из группы, состоящей из альбумина, Fc-области иммуноглобулина, последовательности XTEN, C-концевого пептида (CTP) β-субъединицы хорионического гонадотропина человека, последовательности PAS, последовательности HAP, трансферрина, альбуминсвязывающих компонентов или любых их фрагментов, производных, вариантов и любой их комбинации.
16. Способ по любому из пп. 4-15, где первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, содержит первый XTEN.
17. Способ по п. 16, где первый XTEN вставлен в полипептид FVIII непосредственно ниже аминокислоты, соответствующей аминокислотному остатку 745 в SEQ ID NO: 65.
18. Способ по любому из пп. 10-17, где второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, содержит второй XTEN.
19. Способ по п. 18, где второй XTEN слит с С-концом фрагмента VWF.
20. Способ по любому из пп. 1-19, где полипептид FVIII содержит первую константную область иммуноглобулина (Ig) или ее часть.
21. Способ по п. 20, где первая константная область Ig или ее часть слита с С-концом или N-концом полипептида FVIII.
22. Способ по п. 20, где первая константная область Ig или ее часть вставлена в полипептид FVIII.
23. Способ по п. 20 или 21, где первая константная область Ig или ее часть слита с С-концом полипептида FVIII.
24. Способ по любому из пп. 20-23, где первая константная область Ig или ее часть слита с полипептидом FVIII с помощью линкера.
25. Способ по любому из пп. 20-24, где первая константная область Ig или ее часть содержит первый Fc-домен или его часть.
26. Способ по любому из пп. 1-25, где фрагмент VWF содержит вторую константную область Ig или ее часть.
27. Способ по п. 26, где вторая константная область Ig или ее часть слита с С-концом или N-концом фрагмента VWF.
28. Способ по п. 26, где вторая константная область Ig или ее часть вставлена во фрагмент VWF.
29. Способ по п. 26 или 27, где вторая константная область Ig или ее часть слита с С-концом фрагмента VWF.
30. Способ по любому из пп. 26-29, где вторая константная область Ig или ее часть слита с фрагментом VWF с помощью линкера.
31. Способ по п. 30, где линкер представляет собой расщепляемый линкер.
32. Способ по любому из пп. 26-31, где вторая константная область Ig или ее часть содержит второй Fc-домен или его часть.
33. Способ по п. 32, где белок FVIII и фрагмент VWF связаны друг с другом посредством ковалентной связи между первым Fc-доменом и вторым Fc-доменом.
34. Способ по п. 33, где белок FVIII и фрагмент VWF дополнительно связаны друг с другом посредством нековалентного взаимодействия между белком FVIII и фрагментом VWF.
35. Способ лечения гемофилии А у субъекта-человека, предусматривающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, нескольких доз химерного полипептида с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид содержит:
белок FVIII, содержащий:
первый фрагмент полипептида FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 215;
первую последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8 (AE288);
второй фрагмент полипептида FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 216; и
первую Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217;
(ii) белок VWF, содержащий:
домен D' VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 210;
домен D3 VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 214;
вторую последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 58 (AE144_5A);
линкер а2, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88; и
вторую Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217;
где первая Fc-область ковалентно соединена со второй Fc-областью с помощью дисульфидной связи.
36. Способ по п. 35, где белок FVIII дополнительно содержит сигнальный пептид FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 64.
37. Способ по п. 35, где белок VWF дополнительно содержит сигнальный пептид VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 208.
38. Способ по п. 35, где белок VWF дополнительно содержит домен D1D2 VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 209.
39. Способ лечения гемофилии А у субъекта-человека, предусматривающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, нескольких доз химерного полипептида с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид содержит:
белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 203 или SEQ ID NO: 207; и
белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 202 или SEQ ID NO: 205.
40. Способ лечения гемофилии А у субъекта-человека, предусматривающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, нескольких доз химерного полипептида с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид содержит:
белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 203; и
белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 205.
41. Способ лечения гемофилии А у субъекта-человека, предусматривающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, нескольких доз химерного полипептида с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид содержит:
белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную последовательности, выбранной из FVIII-161 (SEQ ID NO: 69), FVIII-169 (SEQ ID NO: 70), FVIII-170 (SEQ ID NO: 71), FVIII-173 (SEQ ID NO: 72); FVIII-195 (SEQ ID NO: 73); FVIII-196 (SEQ ID NO: 74), FVIII199 (SEQ ID NO: 75), FVIII-201 (SEQ ID NO: 76); FVIII-203 (SEQ ID NO: 77), FVIII-204 (SEQ ID NO: 78), FVIII-205 (SEQ ID NO: 79), FVIII-266 (SEQ ID NO: 80), FVIII-267 (SEQ ID NO: 81), FVIII-268 (SEQ ID NO: 82), FVIII-269 (SEQ ID NO: 83), FVIII-271 (SEQ ID NO: 84), FVIII-272 (SEQ ID NO: 85), FVIII-312 (SEQ ID NO: 173) или FVIII-312A (SEQ ID NO: 203); и
белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную последовательности, выбранной из VWF031 (SEQ ID NO: 86), VWF034 (SEQ ID NO: 87), VWF059 (SEQ ID NO: 197), VWF059A (SEQ ID NO: 202) или VWF036.
42. Способ по любому из пп. 39-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней.
43. Способ по любому из пп. 39-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг или приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней или приблизительно 7 дней.
44. Способ по любому из пп. 1-41, где несколько доз предусматривают по меньшей мере две дозы, по меньшей мере три дозы, по меньшей мере четыре дозы, по меньшей мере пять доз, по меньшей мере шесть доз, по меньшей мере семь доз, по меньшей мере восемь доз, по меньшей мере девять доз, по меньшей мере десять доз, по меньшей мере одиннадцать доз, по меньшей мере двенадцать доз, по меньшей мере тринадцать доз, по меньшей мере четырнадцать доз, по меньшей мере пятнадцать доз, по меньшей мере шестнадцать доз, по меньшей мере семнадцать доз, по меньшей мере восемнадцать доз, по меньшей мере девятнадцать доз, по меньшей мере двадцать доз или больше.
45. Способ по любому из пп. 1-41, где лечение гемофилии А предусматривает контроль или уменьшение встречаемости или частоты эпизодов кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом.
46. Способ по любому из пп. 1-41, где лечение гемофилии А предусматривает предупреждение или лечение эпизода кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом.
47. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 95 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 90 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 85 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 60 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 55 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 50 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 45 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 40 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 35 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 30 МЕ/кг или от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 25 МЕ/кг.
48. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 30 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 35 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 40 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 45 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 55 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 70 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 75 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 80 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 85 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг или от приблизительно 90 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг.
49. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 30 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг, от приблизительно 35 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, от приблизительно 40 МЕ/кг до приблизительно 60 МЕ/кг или от приблизительно 45 МЕ/кг до приблизительно 55 МЕ/кг.
50. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг.
51. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 20 МЕ/кг, приблизительно 25 МЕ/кг, приблизительно 30 МЕ/кг, приблизительно 35 МЕ/кг, приблизительно 40 МЕ/кг, приблизительно 45 МЕ/кг, приблизительно 50 МЕ/кг, приблизительно 55 МЕ/кг, приблизительно 60 МЕ/кг, приблизительно 65 МЕ/кг, приблизительно 70 МЕ/кг, приблизительно 75 МЕ/кг, приблизительно 80 МЕ/кг, приблизительно 85 МЕ/кг, приблизительно 90 МЕ/кг, приблизительно 95 МЕ/кг или приблизительно 100 МЕ/кг.
52. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг.
53. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг.
54. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг.
55. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней, по меньшей мере приблизительно 8 дней, по меньшей мере приблизительно 9 дней, по меньшей мере приблизительно 10 дней, по меньшей мере приблизительно 11 дней, по меньшей мере приблизительно 12 дней, по меньшей мере приблизительно 13 дней, по меньшей мере приблизительно 14 дней, по меньшей мере приблизительно 15 дней, по меньшей мере приблизительно 16 дней, по меньшей мере приблизительно 17 дней, по меньшей мере приблизительно 18 дней, по меньшей мере приблизительно 19 дней, по меньшей мере приблизительно 20 дней, по меньшей мере приблизительно 21 день, по меньшей мере приблизительно 22 дня, по меньшей мере приблизительно 23 дня, по меньшей мере приблизительно 24 дня, по меньшей мере приблизительно 25 дней, по меньшей мере приблизительно 26 дней, по меньшей мере приблизительно 27 дней, по меньшей мере приблизительно 28 дней, по меньшей мере приблизительно 29 дней, по меньшей мере приблизительно 30 дней или по меньшей мере приблизительно 31 день.
56. Способ по любому из пп. 1-41, где частота введения доз составляет по меньшей мере один раз в неделю, по меньшей мере один раз в 2 недели, по меньшей мере один раз в 3 недели или по меньшей мере один раз в 4 недели.
57. Способ по любому из пп. 1-41, где частота введения доз составляет по меньшей мере один раз в неделю.
58. Способ по любому из пп. 1-41, где частота введения доз составляет по меньшей мере один раз в две недели.
59. Способ по любому из пп. 1-41, где химерный полипептид вводят для профилактического лечения.
60. Способ по любому из пп. 1-41, где химерный полипептид вводят посредством пути, выбранного из группы, состоящей из внутривенной инъекции, внутривенной инфузии, подкожного введения, внутримышечного введения, перорального введения, назального введения и легочного введения.
61. Способ по любому из пп. 1-41, где химерный полипептид после введения приводит к уровню активности FVIII в плазме крови, составляющему по меньшей мере приблизительно 1%, по меньшей мере приблизительно 2%, по меньшей мере приблизительно 3%, по меньшей мере приблизительно 4%, по меньшей мере приблизительно 5%, по меньшей мере приблизительно 6%, по меньшей мере приблизительно 7%, по меньшей мере приблизительно 8%, по меньшей мере приблизительно 9% или по меньшей мере приблизительно 10%.
62. Способ по п. 61, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3%.
63. Способ по п. 61, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5%.
64. Способ по любому из пп. 1-41, где химерный полипептид после введения приводит к уровню активности FVIII в плазме крови, составляющему по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 2 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 4 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 6 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 7 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 8 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 9 МЕ/дл или по меньшей мере приблизительно 10 МЕ/дл.
65. Способ по п. 64, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл.
66. Способ по п. 64, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл.
67. Способ по любому из пп. 1-41, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 10 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 5 дней после введения химерного полипептида.
68. Способ по любому из пп. 1-41, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 7 дней после введения химерного полипептида.
69. Способ по любому из пп. 1-41, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 8 дней после введения химерного полипептида.
70. Способ по любому из пп. 1-41, где уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 10 дней после введения химерного полипептида.
71. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг.
72. Способ по любому из пп. 1-41, где несколько доз составляют приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет приблизительно 7 дней.
73. Способ по любому из пп. 1-41, где введение химерного полипептида не приводит к индукции образования ингибитора FVIII после приблизительно 7 дней, приблизительно 10 дней, приблизительно 11 дней, приблизительно 12 дней, приблизительно 13 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 15 дней, приблизительно 20 дней, приблизительно 24 дней, приблизительно 25 дней, приблизительно 28 дней, приблизительно 30 дней или приблизительно 35 дней введения.
74. Способ по любому из пп. 1-41, где введение химерного полипептида не приводит к индукции образования ингибитора FVIII после приблизительно 28 дней введения.
75. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг.
76. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг.
77. Способ по любому из пп. 1-41, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг.
78. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней.
79. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет от приблизительно 7 дней до приблизительно 14 дней.
80. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней.
81. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет от приблизительно 10 дней до приблизительно 21 дня.
82. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет от приблизительно 14 дней до приблизительно 21 дня.
83. Способ по любому из пп. 1-41, где интервал между введениями доз составляет приблизительно 14 дней.
84. Способ по любому из пп. 1-41, где субъект-человек является женщиной.
85. Способ по любому из пп. 1-41, где субъект-человек является ребенком.
86. Способ по п. 85, где субъект-человек является ребенком в возрасте, равном приблизительно 12 лет или меньше, в возрасте менее чем приблизительно 11 лет, в возрасте менее чем приблизительно 10 лет, в возрасте менее чем приблизительно 9 лет, в возрасте менее чем приблизительно 8 лет, в возрасте менее чем приблизительно 7 лет, в возрасте менее чем приблизительно 6 лет, в возрасте менее чем приблизительно 5 лет, в возрасте менее чем приблизительно 4 года, в возрасте менее чем приблизительно 3 года, в возрасте менее чем приблизительно 2 года или в возрасте менее чем приблизительно 1 год.
87. Способ по любому из пп. 1-41, где введение приводит к индукции иммунной толерантности к FVIII у субъекта-человека.
88. Способ по любому из пп. 1-41, где введение приводит к ослаблению ингибирующего иммунного ответа на FVIII у субъекта-человека.
89. Способ по п. 88, где ингибирующий иммунный ответ на FVIII предусматривает высокий титр антител к FVIII у субъекта-человека.