Биологически активная добавка к пище капсулированной формы
BIOLOGICALLY ACTIVE FOOD SUPPLEMENT OF ENCAPSULATED FORM

Группа изобретений относится к медицине, фармацевтике, фитотерапии и пищевой промышленности. Главным образом изобретение относится к комплексу биологически активных веществ (БАВ), содержащему сухой экстракт следующего состава: корни заманихи, трава хвоща полевого, плоды кизилы, плоды череды трехраздельной, корни и корневища девясила, побеги черники обыкновенной, трава галеги, листья шелковицы, листья земляники при следующем соотношении частей 1,5:1,5:1:1:1:1:1:1:1. Также описана готовая форма биологически активной добавки (БАД), представляющая собой капсулированную форму, включающей в свой состав вышеназванный комплекс БАВ и комплекс вспомогательных веществ. Кроме того, описана технология получения комплекса БАВ и готовой формы БАД. Дополнительно предложен режим дозирования БАД в капсулированной форме с учетом потребности организма человека в флавоноидах и дубильных веществах. Группа изобретений позволяет получить БАД в капсулированной форме, которая при заявленном способе получения, количественном и качественном соотношении ингредиентов состава обеспечивает потребность организма человека в необходимом количестве флавоноидов и дубильных веществ без выраженных аллергических и нежелательных реакций, и которая обладает очищающим, антиоксидантным, восстанавливающим, противоотечным, кардиопротекторным, сосудорасширяющим, венотонизирующим, антиканцерогенным, противовоспалительным действием. В особенности заявленный состав БАД в капсулированной форме будет оказывать существенное положительное влияние на ЖКТ, почки, печень, и, в особенности, на поджелудочную железу.
В настоящее время существует довольно широкая потребность в поддержке питательными веществами организма как в целом, так и определенных органов и систем человека, из вне. На этом фоне в последние десятилетия пристальное внимание исследователей привлекают такие продукты, которые способны оказывать профилактическое и терапевтическое действие на организм человека, и в то же время сводить к минимуму аллергические и нежелательные реакции. К таким, например, относится продукт вторичного метаболизма растений - флавоноиды, в связи с широким спектром действия.
Флавоноиды - это растительные фенольные соединения, структурную основу которых составляют 2 бензильных кольца (А и В), соединенных друг с другом гетероциклическим пираном или пироном (кольцо С). Экспериментальные и клинические исследования выявили их антиоксидантные, цитопротекторные, гепатозащитные, антигипоксические и многие другие эффекты. Не меньший интерес направлен на исследование дубильных веществ (ДВ). ДВ или танины предоставляют собой соединения полифенольной структуры, подразделяющиеся на гидролизуемые и конденсированные. Для конденсированных характерны гастропротекоторная, антиоксидантная, антимутагенная, противоопухолевая, антибактериальная, противовирусная активность. Гидролизуемые танины оказывают противокандидозное, антифиброзное действия, ингибируют ВИЧ-индуцированный цитопатический эффект. ДВ проявляют активность в отношении метициллин-резистентного золотистого стафилококка и вируса Эпштейна-Барра.
Флавоноиды, дубильные вещества и их аналоги являются эссенциальными для человека, т.е. требующими постоянного поступления в организм с пищей или в виде лекарств и пищевых добавок.
При неконтролируемом или чрезмерном потреблении продуктов или пищевых добавок, являющихся источниками ДВ и/или флавоноидов, могут возникать нежелательные эффекты, такие как аллергические реакции, замедление перистальтики кишечника, запоры, ухудшение усвоения витаминов. При нарушении режима дозирования в большинстве случаев не достигаются профилактический и терапевтический эффекты.
Довольно распространенным явлением становится низкий уровень медицинского комплаенса при выполнении оздоровительных и профилактических процедур. В первую очередь этому способствует форма и подача источника питательных и оздоровительных веществ. К таким формам относятся настойки, бальзамы, чаи, когда речь идет о пищевой добавке или диеты, содержащие определенный перечень продуктов, насыщенных необходимыми питательными и/или оздоровительными веществами.
Некоторые из готовых форм, например настойки, часто вызывают привыкание, особенно седативные - человек без успокоительного начинает чувствовать повышенную тревожность. Кроме того, настойки и бальзамы содержат в составе спирт, а это значит, что они противопоказаны детям, беременным, при грудном вскармливании и при алкоголизме. Они также противопоказаны людям тех профессий, где требуется высокая концентрация внимания и при употреблении некоторых лекарственных препаратов. Нельзя забывать и про аллергические реакции.
Эффективность использования композиций из сборов сухих трав не всегда максимальна ввиду неполного извлечения экстрактивных веществ или потери активности этих веществ при приготовлении чаев в домашних условиях. Кроме того, такие композиции слабо защищены от воздействий окружающей среды при хранении, транспортировке, эксплуатации. Композиции, требующие заваривания часто используются с нарушением режима приема или дозирования: перезавариваются, используют несоответствующие тары и режимы приготовления и т.д.
Таким образом, задачей изобретения является разработка готовой формы БАД, являющейся источником флавоноидов и ДВ с таким количественным и качественным составом, который бы оказывал максимально полезное действие на указанные органы и системы жизнедеятельности, в частности проявлял высокую эффективность в отношении ЖКТ, печени, почек и поджелудочной железы, и одновременно практически не имел бы аллергических и нежелательных реакций. Кроме того, ещё одной задачей изобретения является разработка такой готовой формы, которая бы способствовала повышению медицинского комплаенса при выполнении оздоровительных и профилактических процедур. Дополнительной задачей изобретения является способ получения готовой формы, при котором было бы задействовано оптимальное качественное и количественное соотношение ингредиентов БАВ и вспомогательных веществ.
Поставленная задача решается путем создания БАД капсулированной формы, содержащей комплекс биологически активных веществ (БАВ) в форме сухого экстракта в качестве активного компонента, включающего в себя корни заманихи высокой, траву хвоща полевого, плоды кизила, плоды череды трехраздельной, корни и корневища девясила, побеги черники обыкновенной, траву галеги, листья шелковицы и листья земляники в соотношении 1,5:1,5:1:1:1:1:1:1:1 и где сумма флавоноидов в пересчете на рутин составляет 1,75 - 2,03 мг, а сумма дубильных веществ в пересчете на танин 11,13 - 13,4 - мг на капсулу, и комплекс вспомогательных веществ, включающий в себя наполнитель, связующее, дезинтегрант, противоприлипающее, скользящее. Дополнительно, поставленная задача решается путем получения БАД капсулированной формы, где в предпочтительном варианте изобретения в качестве наполнителя выступает микрокристаллическая целлюлоза 101 (МКЦ 101), в качестве связующего и дезинтегранта выступает α-поливинилпирролидон (α-ПВП К25), а качестве скользящего - кремния диоксид коллоидный (аэросил) и/или стеарат магния, а в качестве противоприлепающего выбран кремния диоксид коллоидный (аэросил). Дополнительно поставленная задача решается путем оптимального подбора дозы, которая способствует достижению наилучшего эффекта с практически полным отсутствием аллергических и нежелательных явлений и составляет при заявленном качественном и количественном составе комплекса БАВ в форме сухого экстракта 2 капсулы 2 раза в день. Кроме того, поставленная задача решается тем, что экспериментальным путем разработан способ получения капсулированной формы, решающей поставленные задачи.
Техническим результатом заявленной группы изобретений является получение БАД, которая при заявленном способе получения, количественном и качественном соотношении ингредиентов состава обеспечивает организму необходимое количество дубильных веществ и флавоноидов для профилактического и терапевтического воздействия на органы и системы жизнедеятельности человека, в частности в отношении ЖКТ, почек, печени и поджелудочной железы. Заявленные состав и способ позволяют получить такую композицию БАД, которая обладает выраженным синергетическим эффектом, а заявленные форма и режим дозирования позволяют добиться удобства приема пищевой добавки и поддержания высокого уровня медицинского комплаенса. Благодаря подобранному составу БАВ в форме сухого экстракта, выступающему в качестве активного компонента, комплексу вспомогательных веществ и готовой форме БАД обладает улучшенной стабильностью, биодоступность и пролонгированным действием.
Существует состав (RU2458701, 31.01.2011), который включает в себя сухие экстракты растений галеги лекарственной, гарсинии камбоджийской, семян льна обыкновенного, кожуры фасоли, джимнемы сильвестра, солянки холмовой, корневища пырея, а также в качестве микроэлементов магния оксид и ванадия сульфат.
Состав направлен на узкий спектр применения - профилактики и лечения инсулин-независимого сахарного диабета. Тем не менее состав не заменяет традиционную терапию подобного типа диабета - инсулинотерапия и строгая диета.
Существует ещё одна композиция, обладающая антидиабетическим действием (RU 2430735, 30.12.2009), включающую в себя: траву козлятника лекарственного (галеги) и створки плодов фасоли обыкновенной, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит листья ореха грецкого, листья шелковицы белой, траву горца птичьего (спорыша), репешка аптечного, листья брусники, барвинка малого, корни одуванчика лекарственного и девясила высокого, цветки липы сердцевидной и соцветия коровяка скипетровидного.
Другая, известная из уровня техники, композиция, обладающая антидиабетическим действием (RU 2611353, 21.02.2017) представлена следующим составом: трава козлятника лекарственного (галеги), корни одуванчика лекарственного, цветки липы сердцевидной, листья шелковицы белой, корни девясила высокого, листья брусники обыкновенной, створки плодов фасоли обыкновенной, листья лавра благородного, трава череды поникшей.
Все они обладают узконаправленным спектром действия, содержат выраженные аллергены или элементы, которые могут способствовать проявлению нежелательных реакций. Например, листья грецкого ореха противопоказаны определенных патологиях, таких как высокая свертываемость крови, острых кишечных заболеваниях, панкреатите, нейродермите, тромбофлебите. Кроме, того ненормированный прием подобных веществ, особенно в отварах, может привести к сильным аллергическим реакциям и даже спазмам в сосудах головного мозга. Другим примером является цветок липы сердцевидной, который довольно часто используется в отварах и настоях. Чрезмерное употребление и трудность контролирования дозировки может привести к сильным аллергическим реакциям, кроме того, при каждодневном употреблении настоев и отваров, содержащих цветки липы, отмечается дополнительная нагрузка на сердце.
В качестве ближайшего аналога выбран состав, описанный в патенте RU 2611353.
Таким образом, существует необходимость в создании такой БАД, которая будет обладать широким практическим и терапевтическим профилем, в частных случаях, оказывать благотворное влияние на ЖКТ, печень, почки и поджелудочную железу, будет являться оптимальным источником флавоноидов и ДВ, и при приеме не проявлять выраженных аллергических и нежелательных реакций.
Согласно поставленной задаче заявителем предложена БАД капсулированной формы. При разработке состава БАД с высокими показателями качества, обладающей терапевтическим эффектом, были использованы те же технологические подходы и требования, как и при разработке лекарственных средств.
При разработке заявитель ориентировался на оптимальные для профилактики и оздоровления суммы флавоноидов и дубильных веществ, которые человек может получать при приеме БАД, чтобы одновременно достигался максимальный положительный эффект без проявления нежелательных реакций.
Было установлено, что оптимальной суммой флавоноидов в пересчете на рутин и дубильных веществ в пересчете на танин для выбранной формы должно присутствовать в количествах 3,5-4,26 мг и 22,26-26,8 мг соответственно. Такой объем бы соответствовал 1 фильтр-пакету массой 1,5 г. В результате разработки БАД капсулированной формы было установлено, что БАВ в 1 фильтр-пакете массой 1,5 г соответствует количеству БАВ в 2 капсулах, таким образом при рекомендуемом приеме 2 фильтр-пакета в сутки оптимальный режим приема капсул составляет 2 капсулы 2 раза в день. При этом на каждую капсулу приходится 1,75-2,13 мг флавоноидов в пересчете на рутин и 11,13-13,4 мг дубильных веществ в пересчете на танин.
Для достижения синергетического эффекта и максимальной ликвидации нежелательных реакций или доведение последних до статуса минимально возможных, экспериментальным путем был подобран качественный и количественный состав, включающий корни заманихи высокой, траву хвоща полевого, плоды кизила, плоды череды трехраздельной, корни и корневища девясила, побеги черники обыкновенной, траву галеги, листья шелковицы и листья земляники в соотношении 1,5:1,5:1:1:1:1:1:1:1.
Все структурные и физико-химические характеристики БАВ и вспомогательных веществ были изучены, полученная информация использовалась для разработки состава и технологии получения БАД.
Корень и корневище девясила содержат инулин (до 44%) и другие полисахариды, алантолактон, эфирное масло (до 4,5 %), сапонины, горькие вещества, алкалоиды (небольшое количество), слизь, камедь, пектины, витамин E, аскорбиновая кислота.
Растительное сырье обладает противовоспалительным действием, улучшает аппетит, регулирует моторику кишечника, уменьшает его секреторную активность, стимулирует процесс желчеобразования, секрецию желчного пузыря.
Современная медицина рекомендует плоды кизила в качестве витаминного средства при диетическом питании как в сушеном, так и в свежем виде.
Плоды кизила представляют собой костянки, богатые следующими витаминами и минералами: органическими кислотами - 100%, витамином C - 50%, калием - 14,5%, железом - 22,8%. Плоды содержат дубильные вещества, с характерным желчегонным, противовоспалительным и мочегонным действием; флавоноиды, отвечающие за укрепление сосудистой стенки.
В листьях земляники содержатся дубильные вещества, аскорбиновая кислота, флавоноиды, следы алкалоидов. Экстракты, полученные из листьев земляники, обладают общеукрепляющим и желчегонным свойствами.
Трава полевого хвоща богата содержанием минеральных солей, особенно кремниевой кислоты в форме растворимых соединений. Также содержит флавоноиды, дубильные вещества, щавелевую и яблочную кислоты, следы алкалоидов, смолистые и горькие вещества, каротин, аскорбиновую кислоту.
Экстракты, полученные из сырья хвоща полевого, оказывают кровоостанавливающее, противовоспалительное и особенно диуретическое свойства.
Трава галеги (козлятник) содержит углеводы, сапонины, алкалоид галегин, вазицинон, пеганин, гликозид галютеолин, дубильные вещества, танин, фенолкарбоновые кислоты, каротин, аскорбиновую кислоту, горечи. Козлятник лекарственный обладает мочегонным и желчегонным свойствами.
Листья шелковицы белой содержат альдегиды, флавоноиды (рутин, кверцитрин, изокверцитрин, кверцетин, кемпферол), дубильные вещества, стерины (β-ситостерин, капестерин), органические кислоты (яблочную, лимонную, янтарную, виннокаменную), кумарины, смолы, эфирное масло, каротин, витамин C. Экстракт из листьев в медицине применяют в качестве противовоспалительного, обезболивающего, гипогликемического средства.
В корневищах заманихи высокой содержится эфирное масло, алкалоид аралин, тритерпеновые гликозиды, фенольные соединения, минеральные вещества. Экстракты, полученные из сырья заманихи высокой, оказывают мочегонное и желчегонное действие, усиливают секрецию поджелудочной железы.
Листья черники содержат дубильные вещества, флавоноиды (астралгин, рутин, кемпферол, кверцетин, изокверцетин, мератин), олеаноловую кислоту, каротиноиды, фенол и его производные, алкалоид муртин, эфирное масло, антоцианы, катехины, аскорбиновую кислоту, органические кислоты, микроэлементы.
Плоды черники содержат углеводы (глюкозу, сахарозу, фруктозу), органические кислоты (лимонную, яблочную, молочную, янтарную, щавелевую), витамины С, РР, B2, B3, каротин, эфирное масло, флавоноиды, дубильные вещества.
Экстракты из черники обладают вяжущим, противовоспалительным, гипогликемическим, болеутоляющим свойствами.
Трава череды трёхраздельной содержит флавоноиды, дубильные вещества и горечи, эфирное масло, каротин, кумарины, красный флобафен, аскорбиновую кислоту, микроэлементы.
Экстракты из растительного сырья обладают потогонным, мочегонным и желчегонным свойствами.
За счет подобранного комплекса БАВ растительное сырье неожиданно приобретает ярко выраженное противовоспалительное и желчегонное действие, а также является ценным источником витаминов.
Экспериментально подобранный состав в заданных пропорциях показал, что комплекс БАВ представляет высокую практическую ценностью для ЖКТ, почек, печени и особенно для поджелудочной железы.
При подборе оптимального состава для капсулированной формы БАД, являющегося полноценным источником флавоноидов и дубильных веществ неожиданно было установлено, что все вышеперечисленные ингредиенты в указанном количественном соотношении обладают синергетическим эффектом.
Указанный качественный и количественный состав может считаться готовым к применению в случае изготовления из него сухого экстракта переноса экстракта в любую из известных из уровня техники готовых форм. Предпочтительной готовой формой для заявленного состава сухого экстракта считается травяной сбор рассыпной, травяной сбор в фильтр-пакете, настойка, бальзам, гранулированная, таблетированная, капсульная формы. Наиболее предпочтительной является капсульная форма, установленная для указанного состава экспериментальным путем.
Были оценены и рассчитаны показатели качества растительного сырья на соответствие показателям, необходимым для решения поставленной задачи, которые отражены в таблице №1.
Таблица 1 – Показатели качества растительного сырья
Показатели качества
Требования
Результаты испытаний
Внешние признаки
Смесь неоднородных частиц растительного сырья коричневато-зеленого цвета с коричневыми, серовато-белыми вкраплениями
Соответствует
Вкус водного настоя
Пряный, слегка вяжущий
Соответствует
Запах водного настоя
Слабый, свойственный пропаренным растениям
Соответствует
Наличие посторонних примесей
Не допускается
Не обнаружено
Массовая доля влаги, % не более
13,00
8,50
Массовая доля экстрактивных веществ, извлекаемых водой, % не менее
32,50
34,00
Дубильные вещества в пересчете на танин, %, не менее
4,00
4,60
Флавоноиды в пересчете на рутин, %, не менее
0,80
0,95
Частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, %, не более
10,00
4,60
Частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм, %, не более
15,00
5,2
Микробиологическая чистота
В соответствии с требованиями
Соответствует
Масса содержимого упаковки, кг
15,00± 5%
15,05
В настоящее время наиболее распространенной лекарственной формой для БАД является таблетированная. Технология таблетированных БАД широко используется производителями. Однако следует учитывать ее особенности, которые заявитель относит к недостаткам: многостадийность, большое количество технологических вспомогательных веществ в рецептурах, воздействие на БАВ стрессовых технологических условий, таких как увлажнение, высокие температуры, прессование, способных привести к их разрушению, что негативно отразится на стабильности и эффективности БАВ.
В соответствии с поставленной задачей заявитель установил, что именно капсулы позволяют обеспечить высокую точность дозирования, при производстве самих капсул БАВ не подвергается агрессивному технологическому воздействию, что положительно сказывается на стабильности и эффективности БАД и позволяет сохранить синергетический эффект. Дополнительно стоит отметить привлекательный внешний вид, маскировку неприятного вкуса и запаха БАВ.
Биофармацевтические возможности модификации высвобождения БАВ из капсул позволяют варьировать его в широком диапазоне - от быстрого до фазного и пролонгированного.
Для заявленной капсульной формы справедливы все виды капсул известные из уровня техники. Тем не менее определить наиболее предпочтительный специалисту среднего уровня без предварительных апробаций будет невозможно. Предпочтительным вариантом капсульной формы в настоящем изобретении являются капсулы из желатина - натурального продукта гидролиза коллаген содержащего сырья, являющегося отходами предприятий пищевой промышленности.
Желатин представляет собой полипептид, молекула которого состоит из аминокислот, в числе которых имеются: глицин (около 30%), пролин, оксипролин, аланин, глутаминовую и аспарагиновые кислоты. Аминокислоты желатина обладают действием на организм: улучшают обмен веществ, повышают умственную работоспособность и укрепляют сердечную мышцу, благоприятно воздействуют на ткани опорно-двигательного аппарата, слизистую желудочно-кишечного тракта при эрозиях и язвенной болезни и являются одним из основных источников энергии центральной нервной системы, мышц и головного мозга. Выбранный вид капсулы легко усваивается и не дает побочных реакций, кроме того, выбранный состав капсулы усиливает синергетический эффект комплекса БАВ в форме сухого экстракта.
Дополнительно следует отметить, что желатин являясь природным продуктом, легко усваивается организмом, быстро растворяется в кислой среде желудка (чему способствует наличие желудочной протеазы пепсина) и высвобождает содержимое капсул, способствуя тем самым быстрому поступлению БАВ в форме сухого экстракта в организм.
Капсулы из гипромеллозы получают синтетической модификацией целлюлозы и считают безопасной для потребления человеком. Она практически не растворима в горячей воде, в ацетоне, в безводном этиловом спирте и в хлороформе, но растворяется в холодной воде с образованием коллоидного раствора, и демонстрирует обратимое температурное гелирование.
Модификация молекулы ГПМЦ метокси- и гидрокси- пропокси- группами позволяет получить продукты с вариациями многих свойств, например, температуры гелирования, вязкости, эластичности, гидратации.
Это дает возможность создания продуктов с модифицированным высвобождением и с повышенной устойчивостью к условиям хранения и механической обработки.
ГПМЦ хорошо совместима с известными вспомогательными веществами и имеет подобные желатину свойства. ГПМЦ соответствует диетическим и культурным потребностям всех пациентов. Отвечает запросам производства - капсулы могут быть произведены и заполнены на существующем оборудовании. Характеризуется доказанными сведениями о безопасности и разрешена к фармацевтическому применению. Кроме того, обеспечивает улучшение характеристик капсул, их прочности, защиты от влажности от микробной контаминации, высокую совместимость с продуктами.
Гипромеллозные капсулы более стабильны к влаге, по сравнению с желатиновыми. Влажность самих капсул составляет 6-7 %, что ниже влажности желатиновых капсул, которая составляет 12-13 %. Это крайне важно для гигроскопических БАВ и для условий наполнения, транспортировки, хранения как пустых капсул.
Тем не менее существует задержка времени распадаемости гипромеллозной капсулы примерно на 5 минуте в смоделированной желудочной среде и на 10 минуте в смоделированной кишечной жидкости. Вследствие этого желатиновые капсулы остаются лидирующими при выборе капсулированной формы для не лимитированного и не модифицированного высвобождения БАВ.
Ввиду отсутствия необходимости в модифицировании высвобождения БАД, для дальнейшей фармацевтической разработки были выбраны капсулы из желатина, вследствие физико-химических свойств, а также предполагаемых параметров высвобождения, растворения и всасывания БАВ. Тем не менее, основываясь на описанных ваше видах и свойствах капсул, справедливы различные варианты компоновки БАВ в форме сухого экстракта, включающие варианты, касающиеся модифицированного и/или пролонгированного действия, которые возможно воспроизвести методами известными из уровня техники для специалиста среднего уровня.
Заявитель рассматривал все виды экстрактов, тем не менее для поставленной задачи наиболее предпочтительным является сухой экстракт из растительного сырья.
Сухие экстракты - это концентрированные извлечения из растительного сырья, представляющие собой сыпучие массы с содержанием влаги не более 5%. Сухие экстракты получают высушиванием густых экстрактов или непосредственно из очищенной вытяжки методами, обеспечивающими максимальное сохранение БАВ: методом конвекционной или лиофильной сушки.
Наиболее предпочтительным вариантом формы действующего вещества, помещаемого в твердые капсулы, является вещество, выполненное в форме гранул или порошка. В случае малой дозировки действующего вещества, для обеспечения точности дозирования капсулонаполняющим автоматом в рецептуры вводят наполнители (разбавители): маннитол, лактозу, микрокристаллическую целлюлозу, кукурузный крахмал и др. традиционные ВВ, одобренные для фармацевтического применения.
Выбор вспомогательных веществ тесно связан с технологией подготовки капсулируемой смеси к наполнению, соответственно для выбора и обоснования технологии подготовки были изучены технологические свойства БАВ.
Пример 1. Определение сыпучести БАВ для последующего производства капсулированной формы.
Порошкообразное содержимое должно в первую очередь обладать хорошей сыпучестью. Сыпучесть, в свою очередь, зависит от многих характеристик порошка: от фракционного состава, аморфности и влажности субстанции. Поскольку сыпучесть - сложная характеристика, ее принято определять двумя способами: по скорости истечения из стандартной воронки и по величине угла естественного откоса. Угол естественного откоса - угол между образующей конуса из сыпучего материала и горизонтальной плоскостью. Угол откоса характеризует влияние трения между частицами и влияние гравитации на порошковую массу, дает оценку влияния размера частиц, формы и электростатического взаимодействия между частицами во время высыпания порошка из бункера капсулонаполняющей машины. Величина угла естественного откоса зависит от формы, размеров и когезионных свойств частиц, она варьирует в широких пределах: от 25° до 30° для хорошо сыпучих, от 60° до 70° для плохо сыпучих материалов.
Как и другие характеристики сыпучих масс, насыпная плотность - комплексный показатель, который зависит от многих других: гранулометрического состава, влажности, плотности укладки в слое. Важно, что это - не постоянная величина, она может меняться под влиянием вибрации и даже при хранении на складе. Поэтому различают минимальную насыпную плотность свободно насыпанного порошка и максимальную - насыпную плотность после уплотнения - для порошка, свободно насыпанного, но подвергшегося уплотнению путем встряхивания. Насыпная плотность тесно связана с объемом капсулы, номер которой подбирается в зависимости от массы содержимого капсулы.
Методики проведения представлены в Государственной фармакопее Российской Федерации (ГФ РФ). Качественную оценку сыпучести порошка определяют по величинам индексов Карра и Хауснера, которые рассчитываются по шкале, приведенной в USP 31 (таблица 2).
Таблица 2 - Оценка индексов Хауснера и Карра
Индекс Карра
Оценка прессуемости
Индекс Хауснера
10
очень хорошая
1,00-1,11
11-15
хорошая
1,12-1,18
16-20
средняя
1,19-1,25
21-25
удовлетворительная
1,26-1,34
26-31
плохая
1,35-1,45
32-37
очень плохая
1,46-1,59
Больше 38
очень, очень плохая
Больше 1,60
Определение фракционного состава проводили в соответствии с ОФС.1.1.0015.15 «Ситовой анализ» на любом подходящем для этого электромагнитном ситовом анализаторе. Точную навеску материала разделяли на фракции путем просеивания через набор последовательно собранных сит с размерами отверстий: 2 мм, 1,25 мм, 710 мкм и 315 мкм.
Навеску помещали на верхнее самое крупное сито и весь комплект встряхивали вручную в течение 5 минут. Затем сита снимали одно за другим, материал, оставшийся на каждом сите, раздельно взвешивали. Затем находили процентное содержание каждой фракции от общей массы навески. Просеивание окончено, если при дополнительном встряхивании количество материала, проходящего сквозь сито в течение 1 минуты, составит по массе менее 1% материала, оставшегося на сите.
Определение насыпной плотности проводили в соответствии с ОФС.1.4.2.0016.15 «Степень сыпучести порошков» на любом подходящем для этого тестере для определения насыпной плотности. При проведении анализа взвешивали навеску материала с точностью 0,001 г и засыпали ее в стеклянный мерный цилиндр вместимостью 50 мл. Устанавливали амплитуду колебаний 3 мм и частоту 150 колебаний в минуту. Через 5 минут прибор выключали.
Насыпную плотность рассчитывали по формуле: ρ = m / v
3
где ρ - насыпная плотность до или после утряски (уплотнения), г/ см;
m - масса материала, г;
3
v - объем порошка в цилиндре до или после утряски (уплотнения), см.
Определение угла естественного откоса осуществляли в соответствии с ОФС.1.4.2.0016.15 «Степень сыпучести порошков» на любом подходящем для этого тестере сыпучести. Точную навеску порошка, около 100 г, насыпали в воронку прибора, диаметр сопла 10 мм. Угол естественного откоса устанавливается в приборе с помощью лазерного сенсора.
Индексы Хауснера и Карра
На основании значений насыпной плотности рассчитывают индекс Хауснера и индекс Карра, по величинам которых оценивают сыпучесть и сжимаемость.
Формулы расчета индексов:
y
индекс Хауснера (Н) H= P / ρ;
y
y
индекс Карра (J) J =100⋅( P − ρ) / P;
y
где P - насыпная плотность после уплотнения;
ρ - насыпная плотность.
Результаты, полученные после измерений 6 образцов, приведены в таблице 3.
Таблица 3
Показатель, ед. изм.
Величина
1
2
3
4
5
6
Среднее
Размеры частиц
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
Насыпная плотность до уплотнения, г/мл
0,37
0,38
0,39
0,38
0,38
0,37
0,37±0,03
Насыпная плотность после уплотнения, г/мл
0,57
0,58
0,57
0,58
0,57
0,57
0,57±0,02
Угол естественного откоса, град
31
30
29
30
30
32
30±3
Влажность, %
0,20
0,22
0,25
0,25
0,21
0,19
0,23±0,3
Индекс Карра
11,80
12,20
12,50
13,90
12,10
12,50
12,50±1,3
Индекс Хауснера
1,12
1,14
1,15
1,15
1,14
1,12
1,15±0,2
Угол естественного откоса соответствует 30-32 градусам, порошок не пылил и свободно высыпался из воронки. Насыпная плотность до уплотнения составляет 0,37, а после уплотнения – 0,57, что подтверждает использование экстракта в виде капсулированной формы. На основании рассчитанных величин индексов Карра и Хауснера сыпучесть экстракта оценена как «хорошая».
Неожиданно было обнаружено, что при добавлении вспомогательных веществ, учитывая дозировку БАВ, кроме улучшения технологических характеристик, увеличивались биодоступность самого активного ингредиента.
Пример 2. Разработка состава капсулированной формы биологически активной добавки.
Экспериментальным путем был подобран оптимальный состав БАД капсулированной формы, содержащей в качестве БАВ в форме сухого экстракта ранее указанный состав, включающий корни заманихи высокой, траву хвоща полевого, плоды кизила, плоды череды трехраздельной, корни и корневища девясила, побеги черники обыкновенной, траву галеги, листья шелковицы и листья земляники в соотношении 1,5:1,5:1:1:1:1:1:1:1 (таблица 4).
Таблица 4 – Наименование наиболее предпочтительных вспомогательных веществ и их назначение.
Наименование вспомогательных веществ
Назначение
Микрокристаллическая целлюлоза 101 (МКЦ 101)
Наполнитель
α-поливинилпирролидон К25 (α-ПВП К25)ПВП К25
Связующее, дезинтегрант
Кремния диоксид коллоидный (аэросил)
Противоприлипающее, скользящее
Стеарат магния
Скользящее
Желатин
Материал капсул
Титана диоксид (Е171)
краситель
Триацетин
пластификатор
Полисорбат 80
пластификатор
Микрокристаллическая целлюлоза 101 (МКЦ 101) получаемая модификацией хлопковой целлюлозы, используется как структурирующий агент, загуститель, эмульгатор и стабилизатор. Они лучше растворяются и быстрее усваиваются организмом. При этом использование МКЦ позволяет высвобождать БАВ постепенно, с контролируемой скоростью, в течение длительного времени. Сама же микрокристаллическая целлюлоза не переваривается и не усваивается в организме.
α-поливинилпирролидон К25 (α-ПВП К25) - представляет собой полимер N-винилпирролидона, легко сыпучий порошок со сферической морфологией частиц. При использовании достигается оптимальный баланс между силой адгезии и простотой применения за счет низкой вязкости. Обладают стабильным значением pH.
Кремния диоксид коллоидный (Аэросил). Используется как глидант, для увеличения скольжение частиц. Мелкий размер его частиц и большая удельная площадь поверхности обеспечивают необходимые свойства, улучшающие реологические свойства во время прессования, предотвращает слеживаемость порошкообразных материалов, способствует перераспределению влаги в капсуле.
Кремния диоксид коллоидный (Аэросил), представляющий собой легкий белый высокодисперсный микронизированный, с большой удельной поверхностью порошок, обладающий выраженными адсорбционными свойствами. В воде аэросил в концентрации 1-4% образует студнеобразные системы с глицерином, маслом вазелиновым.
Кремния диоксид коллоидный (Аэросил) широко применяется в качестве скользящего вспомогательных веществ для повышения сыпучести порошковой смеси, улучшает процессы покрытия таблеток оболочкой, обеспечивает распадаемость и скорость растворения таблеток и хороший внешний вид. Аэросил используют для стабилизации суспензий, сухих экстрактов и пилюль. Он обеспечивает равномерное распределение БАВ.
Стеарат магния - тонко измельченный белый порошок, слегка мыльный на ощупь. Представляет собой магниевую соль стеариновой кислоты или смесь солей стеариновой кислоты и синтетических жирных кислот. Растворяется в теплом спирте, размешивается в маслах, практически не растворяется в воде. Стеарат магния плавится при температуре около 88° С. Плотность: 1,02 г/см³.
Капсулы желатиновые. Капсулы №1 выбраны как наиболее подходящие по объему для наполнения массой сухого экстракта, обеспечивающей дозировку БАВ.
Для определения и разработки качественного и количественного состава капсул были использованы результаты количественного содержания БАВ в сухой смеси растительного сырья, которые приведены в таблице 5. Необходимое количество БАВ при употреблении в рекомендованных дозах представлено в таблице 6.
Таблица 5
Показатели
Содержание согласно НД
Содержание в образце
Флавоноиды в пересчете на рутин, %
Не менее 0,80
0,93±0,09
Дубильные вещества в пересчете на танин, %
Не менее 4,00
4,45±0,45
Таблица 6
Показатель
мг
Адекватный уровень потребления*Верхний допустимый уровень потребления**, мг
%от адекватного уровня потребления в сутки
Флавоноиды в пересчете на рутин
7,36
30*-100**
24,50
Дубильные вещества в пересчете на танин
49,00
300*-900**
16,30
,
* ** согласно «Единым санитарно-эпидемиологическим и гигиеническим требованиям к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю)» Глава II, раздел 1, приложение № 5.
В качестве основных БАВ растительное сырье содержит различные группы флавоноидов в пересчете на рутин и дубильные вещества в пересчете на танин.
Флавоноиды - группа БАВ с фиксированной температурой плавления, горького вкуса, бесцветные или окрашенные в желтый, красный или синий цвет с зависимости от рН среды. Они хорошо растворимы в полярных растворителях, в метаноле, бутаноле и растворах щелочей.
Флавоноидные гликозиды растворимы в воде, но агликоны в воде растворяются плохо. Большинство агликонов флавоноидов растворимы в ацетоне, этилацетате, хлороформе и других гидрофобных растворителях.
Наличие фенольных гидроксильных групп обусловливает кислые свойства флавоноидов и их способность к образованию фенолятов в щелочной среде. Благодаря наличию фенольных гидроксилов флавоноиды легко окисляются. Легкая окисляемость флавоноидов способствует восстановлению других веществ в реакционной смеси или препятствует их окислению. Такое свойство флавоноидов называется антиокислительным или антиоксидантным. В процессе экспериментального подбора вспомогательных веществ, было обнаружено, что флавоноидные антиоксиданты способны даже в незначительных количествах сильно угнетать процессы окисления, что оказывает существенное влияние на стабильность капсульной формы.
Рутин, является биоактивным полифенолом группы витаминов Р, широко применяется в медицине благодаря ангиопротекторному, гастропротекторному, диуретическому, спазмолитическому, антисклеротическому, противовоспалительному, противовирусному действиям.
Крайне низкая растворимость рутина в водных средах и жидкостях организма создает определенные трудности при создании препаратов и проведения процесса экстракции, так как именно растворимость является одной из основных биофармацевтических характеристик, во многом определяющей биодоступность БАВ.
Экспериментальным путем было установлено, что растворимость рутина существенно возрастает в водных растворах поливинилпирролидона с молекулярной массой 8000 и более, сывороточного альбумина человека и мицеллярных средах катионных поверхностно-активных веществ (ПАВ) за счет образования супрамолекулярных комплексов.
ПАВ находят широкое применение в фармацевтической технологии как солюбилизаторы, эмульгаторы и стабилизаторы. Поливинилпирролидон является катионным ПАВ, благодаря сочетанию его поверхностно-активных и бактерицидных свойств это позволило повысить стабильность и высвобождение БАВ в составе капсульной формы в процессе поиска оптимального состава. Для повышения биодоступности рутина и стабильности БАД в качестве вспомогательного вещества был выбран Альфа ПВП К25 в виде связующего компонента, который позволил улучшить растворимость и всасываемость флавоноидов.
Дубильными веществами называются высокомолекулярные, генетически связанные между собой природные фенольные соединения, обладающие дубящими свойствами. Они являются производными пирогаллола, пирокатехина, флороглюцина и имеют молекулярную массу от 1000 до 20 000.
Дубильные вещества аморфные амфолиты; многие хорошо растворяются в воде и спирте, имеют вяжущий вкус. В растворе дают нейтральную/слабокислую реакцию среды. В кристаллическом состоянии известны только катехины, они плохо растворимы в холодной воде, лучше в горячей. Большинство таннидов сильно гигроскопичны. В лекарственных смесях их нельзя смешивать с солями тяжелых металлов, белковыми веществами и алкалоидами, так как образуются осадки. Вызывая частичное свертывание белков, они образуют на слизистых оболочках и раневых поверхностях защитную пленку. При соприкосновении с воздухом дубильные вещества легко окисляются, превращаясь во флобафены, которые обусловливают темно-бурую окраску экстрактов.
В результате экспериментального подбора качественного и количественного соотношения БАВ и вспомогательных веществ для БАД, содержащей ранее указанный комплекс БАВ в форме сухого экстракта, был установлен оптимальный диапазон и соотношение БАВ и вспомогательных веществ, учитывающий все заявленные требования авторами при решении поставленных задач и выраженный в мас.%: комплекс БАВ в форме сухого экстракта 30-40%, наполнитель 50-60%, связующее, дезинтегрант 4-6%, противоприлипающее 0.8-2,2%, скользящее 1,2-3,8%.
При этом в процессе установки предпочтительного состава было зафиксировано, что при выходе за диапазон в меньшую сторону БАВ в форме сухого экстракта и увеличении диапазона для вспомогательных веществ, наблюдались уменьшение биодоступности и снижение пролонгированности, а также падение качества капсулированной формы. Аналогичная ситуация наблюдалась и при обратном выходе за пределы диапазонов. Таким образом, не соблюдение соответствующих диапазонов не позволяло достичь заявленных технических результатов. Состав, указанный в таблице 7, следует считать наиболее предпочтительным вариантом изобретения.
Таблица 7
Рецептура
Спецификация
Содержание
на капсулу, мг
%
Содержимое капсулы
Биологически активные вещества
Комплекс БАВ в форме сухого экстракта
80,00
36,36
Вспомогательные вещества
МКЦ 101
120,00
54,55
Альфа-ПВП К25
11,00
5,00
Аэросил
3,25
1,48
Магния стеарат
5,75
2,61
Итоги
220,00
100,00
Капсулы CAPSUGEL, США
Масса наполненной капсулы
290,00-300,00
Для выбора размера капсулы были определены технологические характеристики смеси для инкапсулирования, содержащей экстракт, полученный из растительного сырья, которые представлены в таблице 8.
Таблица 8
Показатель, ед. изм.
Величина
1
2
3
4
5
6
Среднее
Размеры частиц
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
≥100 мкм
Насыпная плотность до уплотнения, г/мл
0,34
0,32
0,31
0,30
0,30
0,31
0,33±0,02
Насыпная плотность после уплотнения, г/мл
0,57
0,58
0,57
0,58
0,57
0,57
0,57±0,02
Угол естественного откоса, град
31
30
29
30
30
32
30±3
Влажность, %
0,20
0,22
0,25
0,25
0,21
0,19
0,23±0,3
Индекс Карра
10,02
9,20
10,50
9,90
10,10
9,95
10,50±0,3
Индекс Хауснера
1,05
1,08
1,09
1,08
1,07
1,110
1,08±0,2
Угол естественного откоса соответствует 30-32 градусам, порошок не пылил и свободно высыпался из воронки. Насыпная плотность до уплотнения составляет 0,33, а после уплотнения - 0,57. На основании рассчитанных величин индексов Карра и Хауснера сыпучесть экстракта оценена как «очень хорошая».
Таким образом, полученные показатели качества позволяют сделать вывод о повышении показателей «сыпучести» смеси для инкапсулирования в результате смешивания сухого экстракта с выбранными вспомогательными веществами. Наиболее предпочтительным размером капсул выбран размер 1.
Пример 3. Разработка технологии получения сухого экстракта.
Для получения БАВ в форме сухого экстракта была проведена водная экстракция растительного сырья путем получения жидкого экстракта, с последующим фильтрованием, выпариванием, водно-спиртовой очисткой и сушкой.
Описание технологического процесса.
1. Получение жидкого экстракта.
На лабораторных весах отвешивают 700,0 г растительного сырья, помещают в ультразвуковой экстрактор, предпочтительно НО-538 и заливают 7500 мл экстрагента, предпочтительно это вода очищенная 70–80 °С, время экстракции приблизительно 30 мин. Температура водного контура около 60-70 °С. После окончания процесса экстракции сырье отжимают, жидкий экстракт фильтруют через сито с диаметром ячеек предпочтительно 355 мкм, а затем предпочтительно 250 мкм. Коэффициент водопоглощения растительного сырья был рассчитан экспериментально и составил 3,2. Объем полученного жидкого экстракта составил приблизительно - 6100 мл.
2. Выпаривание жидкого экстракта.
Колбу на 1000 мл заполняют экстрактом на 2/3 объёма и упаривают на любом ротационном испарителе, предпочтительно, BUCHI R-300 при температуре водяной бани 60°С. Скорость вращения колбы составляет 80 оборотов/мин. Начальный вакуум составляет 180 мбар, с постепенным уменьшением, с шагом в 5 мбар, до 30 мбар в течение 20 минут, избегая точки кипения. Общая продолжительность процесса отгонки экстрагента составляет 45 мин. Полученные объемы густых экстрактов объединяют. Общий объем густого экстракта составляет 1000 мл.
3. Очистка
Полученный объем густого экстракта переносят в колбу объемом на 2000 мл. К густому экстракту добавляют спирт этиловый 96% в объеме 200 мл и перемешивают. Затем фильтруют, предпочтительно проводить фильтрование в колбе Бунзена через шестислойный марлевый фильтр. Объем очищенного густого экстракта составляет 1100 мл.
4. Получение сухого экстракта
Очищенный густой экстракт разливают по поддонам для сушки по 550 мл и сушат в сушильном шкафу при температуре 70°С в течение 26 часов. По истечении 26 часов проверяют остаточную влажность сухого экстракта, ее значение должно составлять менее 5%. При значении остаточной влажности более 5%, экстракт досушивают приблизительно в течение 4 часов при температуре 70°С. Полученный сухой экстракт измельчают при помощи мельницы для сухого перемалывания твердых и хрупких веществ в течение, примерно, 30-40 секунд, скорость вращения 6000 оборотов/мин до размеров частиц, проходящих сквозь сито с диаметром ячеек 250 мкм. Масса сухого экстракта составляет 150,00 г.
Пример 4. Инкапсуляция БАВ в форме сухого экстракта.
Для получения смеси для инкапсулирования на аналитических весах отвешивают точные навески компонентов капсулы (таблица 7). Смесь перемешивают, предпочтительный вариант перемешивания будет в стеклянном стакане с помощью верхнеприводной мешалки в течение 10 минут.
Наполнение капсул проводят с помощью любой подходящей для этой процедуры капсулонаполняющей машины, предпочтительно ручной капсулонаполняющей машины Optima Aluminum (Farmalabor Tech, Italy), а наиболее предпочтительным вариантом капсул являются твердые желатиновые капсулы №1, производства Сapsugel.
Дозирование в капсулы осуществляют с помощью любого известного из уровня техники устройства, подходящего для этой операции, однако предпочтительным вариантом является ручная капсулонаполняющая машина, более предпочтительным Optima Aluminum. С помощью неё осуществляют дозирование в четыре последовательных стадии: установка пустых капсул, разделение, наполнение и повторная сборка.
Предварительно отвешенная на весах с точностью до 0,0001 г в количестве 220,00 мг смесь дозируют в каждую капсулу, затем проводят установку крышечек и фиксацию запирающего устройства.
Пример 5. Определение показателей качества биологически активной добавки.
Тонкослойная хроматография. Определение подлинности флавоноидов.
Норма: На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией желто-оранжевого цвета примерно на уровне зоны адсорбции СО (стандартного образца) рутина, зона адсорбции с флуоресценцией ярко-желтого цвета ниже зоны адсорбции СО рутина; допускается обнаружение дополнительных 3-4 зон адсорбции, в том числе зоны адсорбции с желтой флуоресценцией выше зоны адсорбции СО рутина.
Качественная реакция на дубильные вещества.
К 1,00 г образца прибавляют 10 мл спирта (30%) и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин. Охлаждают и фильтруют. К 1 мл фильтрата прибавляют 2 мл 10 % раствора ванилина в кислоте хлористоводородной. Появляется красное окрашивание.
Однородность массы капсул определяли в соответствии с ОФС 1.4.2.0009.15 «Однородность массы дозированных лекарственных форм» с использованием электронных весов. Определяли среднюю массу взвешиванием 20 единиц дозированной лекарственной формы (невскрытых капсул). Взвешивали каждую единицу в отдельности c точностью до 0,001 г и рассчитывали среднюю массу.
- Вскрывали капсулы и удаляли как можно полнее ее содержимое. Взвешивали оболочку. Массу содержимого каждой капсулы рассчитывали, как разность между взвешиваниями. Повторяли определение на 19 оставшихся капсулах.
Норма: Не более 2 индивидуальных масс могут отклоняться от средней массы не более 10,0% - для капсул с содержимым, массой менее 290 мг.
Распадаемость капсул. (ОФС.1.4.1.0005.15 «Капсулы»). Терапевтический эффект БАД зависит не только от дозировки действующего вещества, но и от скорости и полноты их высвобождения из капсулы. В жидкой среде капсулы сначала распадаются на отдельные фрагменты, из которых затем начинается высвобождение действующего вещества. В соответствии современными требованиями, капсулы должны сочетать достаточную механическую прочность, необходимую для автоматического наполнения, упаковки и транспортировки, и распадаемость в водной среде, удовлетворяющую требованиям ГФ РФ.
Определение распадаемости проводили на приборе типа «качающаяся корзинка» ED-2 SAPOx фирмы Electrolab, Индия. Объем среды - 800 мл. Использовали три среды: 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты с рН 1,2; ацетатный буфер с рН 4.5; и фосфатный буфер с рН 6,8. Температура среды (37±0,5) °С, объем - 800 мл, опыт проводили без использования крышечек.
Среды растворения готовили в соответствии ОФС.1.3.0003.15 «Буферные растворы».
Для приготовления 1 литра 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты с рН 1,2 использовали стандарт-титр (ЗАО «Уралхиминвест»). Содержимое фиксанала доводили водой очищенной до объема 1000 мл, при перемешивании на магнитной мешалке (RO5, IKA, Германия) в течение часа при нагревании до температуры 40 °С.
Для приготовления 1 литра ацетатного буфера с рН 4.5 63,0 г натрия ацетата безводного растворяют в воде, добавляют 90 мл уксусной кислоты разведенной (30%), доводят значение рН до 4,5 потенциометрически уксусной кислотой 30%, доводят объем водой очищенной до 1000 мл. Затем при перемешивании на магнитной мешалке (RO5, IKA, Германия) в течение часа при нагревании до температуры 40 °С.
Для приготовления 1 л калий-фосфатного буфера с рН 6,8 51,0 мл 27,2 г/л раствора калия дигидрофосфата смешивают с 49,0 мл 71,6 г/л раствора динатрия гидрофосфата. Если необходимо, доводят рН до 6,8 потенциометрически исходным раствором калия дигидрофосфата или динатрия гидрофосфата. Затем при перемешивании на магнитной мешалке (RO5, IKA, Германия) в течение часа при нагревании до температуры 40°С.
Норма: если не указано иначе в фармакопейной статье или нормативной документации, капсулы должны распадаться в воде не более, чем за 30 мин.
Тест Растворение. Тест «Растворение» проводили по ОФС.1.4.2.0014.15, ГФ XIV на аппарате типа «Лопастная мешалка» (EDT-08Lx, Electrolab, Индия) при скорости вращения мешалки 50 об/мин, непосредственно в каждый из шести сосудов со средой растворения до начала вращения мешалки помещали по одной капсуле.
В соответствии с современными требованиями изучение сравнительной кинетики растворения проводили в трех средах: с рН 1,2 (0,1 М раствор хлористоводородной кислоты); с рН 4,5 (ацетатный буфер) и с рН 6,8 (фосфатный буфер). Объем среды растворения 500 мл (рН = 1,2) и 800 мл (рН = 4,5 и рН = 6,8), температура среды растворения (37±0,5)°С. Среды растворения готовили в соответствии ОФС.1.3.0003.15 «Буферные растворы», по методике, описанной выше в разделе «Распадаемость капсул».
Профили растворения должны состоять не менее чем из трех точек, исключая нулевую, поэтому пробы отбирали через 5, 10, 15, 30 и 45 минут порциями по 10 мл. Такой же объем соответствующего буферного раствора добавлялся в среду растворения для сохранения объема. Отбор проб осуществляли из зоны сосуда для растворения, находящейся между поверхностью среды растворения и верхней частью лопасти мешалки и на расстоянии не менее 1 см от стенок сосуда для растворения.
Требования: если не указано иначе в нормативной документации, количество действующих веществ, высвободившегося в среду растворения, в течение 45 минут должно составлять не менее 75 % (Q) от заявленного содержания.
Определение БАВ
Определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин. В основе количественного определения флавоноидов лежит спектрофотометрический метод при длине волны 415 нм продуктов их взаимодействия с раствором хлорида алюминия и спектрофотометрия при длине волны 495 нм продуктов их взаимодействия с 2,4-динитрофенилгидразином.
Принцип колориметрического метода, основанного на взаимодействии с алюминий хлоридом, заключается в том, что реагент образует кислотоустойчивые комплексы с С-4 кето-группой и с С-3 или С-5 гидроксильной группой флавонов и флавонолов, имеющие максимумы поглощения в диапазоне длин волн 415-440 нм.
Принцип взаимодействия с 2,4-динитрофенилгидразином основан на его реакции с кетонами и альдегидами с образованием 2,4-динитрофенилгидразонов. Следовательно, флавоны, флавонолы и изофлавоны с С2-С3 двойной связью не способны реагировать с 2,4-динитрофенилгидразином в то время, как гидразоны и флавононы образуют соединения, имеющие максимум поглощения при 495 нм. Результаты проведенного анализа представлены в таблице 9.
Таблица 9
Образец
Содержание, мг/г
Флавонолы и их гликозиды
Флавоны и их гликозиды
Халконы и их гликозиды
Флаваноны иих гликозиды
Сумма флавоноидов
1
18,72
4,40
-
-
23,12
2
18,57
4,33
-
-
22,90
3
17,02
4,28
-
-
21,30
4
17,77
4,34
-
-
22,11
5
18,58
4,31
-
-
22,89
6
20,57
3,29
-
-
23,86
Определение суммы дубильных веществ в пересчете на танин.
В основе количественного определения дубильных веществ лежит метод титрования раствором перманганата до золотисто-желтого окрашивания. Результаты проведенного анализа представлены в таблице 10.
Таблица 10
Образец
1
2
3
4
5
6
Содержание дубильныхвеществ, мг/г
310,20
305,05
309,12
307,63
308,80
309,99
Микробиологическая чистота. По микробиологическим показателям БАД должна соответствовать требованиям п. 10.10 Главы II раздела 1 «Единых санитарно-эпидемиологических и гигиенических требований к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю)».
Результаты определения показателей по качеству биологически активной добавки приведены в таблице 11.
Таблица 11
Показатели
Результаты
1
2
3
4
5
6
Описание
соотв.
соотв.
соотв.
соотв.
соотв.
соотв.
Подлинность
соотв.
соотв.
соотв.
соотв.
соотв.
соотв.
Количественное определение, мг
2,05±0,18; 12,51±1,20
2,00±0,18;13,52±1,20
1,95±0,18; 13,20±1,20
1,95±0,18; 12,91±1,20
1,82±0,18; 11,84±1,20
1,84±0,18; 11,95±1,20
Однородность массы, мг
295,10
293,00
291,15
291,10
292,20
290,10
В результате, разработанный БАД капсулированной формы соответствует всем вышеперечисленным показателям. В ходе разработки с учетом дозировки каждой капсулы было определено, что рекомендуемый режим дозирования составляет 2 капсулы 2 раза в день. Капсульная форма и режим дозирования позволяют поддерживать высокий медицинский комплаенс и получать оптимальное количество флавоноидов и дубильных веществ, а также оказывать терапевтическое и профилактическое действие на ЖКТ, печень, почки и, в особенности, поджелудочную железу.