НОВЫЙ АТТЕНУИРОВАННЫЙ ПОЛИОВИРУС: PV-1 MONO-CRE-X

1. Геном аттенуированного полиовируса, содержащий:
один активный cis-действующий элемент репликации (cre), причем указанный элемент cre локализован в спейсерной области 5′-НТО между клеверным листом и участком внутренней посадки рибосомы (IRES), и
последовательность, кодирующую белок полиовируса, с меньшим отклонением в частоте использования пар кодонов, чем отклонение в частоте использования пар кодонов исходной последовательности, кодирующей данный белок полиовируса, из которой ее получают.
2. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, который содержит один активный элемент cre, встроенный около нуклеотида 102/103.
3. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что элемент cre располагается как в SEQ ID NO: 1.
4. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что в последовательности, кодирующей белок, отклонение в частоте использования пар кодонов по меньшей мере примерно на 0,05 меньше, предпочтительно по меньшей мере примерно на 0,1 меньше, более предпочтительно по меньшей мере примерно на 0,2 меньше, чем отклонение в частоте использования пар кодонов в исходной последовательности, кодирующей данный белок.
5. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что в последовательности, кодирующей белок, отклонение в частоте использования пар кодонов составляет примерно -0,05 или меньше, предпочтительно примерно -0,1 или меньше, более предпочтительно примерно -0,2 или меньше, более предпочтительно примерно -0,3 или меньше, более предпочтительно примерно -0,4 или меньше.
6. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что последовательность, кодирующая белок, меньше, чем на 90% идентична, предпочтительно меньше чем на 80% идентична последовательности, кодирующей данный белок исходного вируса.
7. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что последовательность, кодирующая белок, и исходная последовательность, кодирующая данный белок, кодируют одинаковый белок.
8. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что исходная последовательность, кодирующая белок, кодирует природный изолят данного белка.
9. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что исходная последовательность, кодирующая белок, представляет собой последовательность штамма Mahoney.
10. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что последовательность, кодирующая белок, кодирует белок, который отличается от природного изолята примерно на 10 аминокислот или меньше, предпочтительно примерно на 20 аминокислот или меньше.
11. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, отличающийся тем, что последовательность, кодирующая модифицированный белок, содержит последовательность PV-Min (SEQ ID NO: 2) от нуклеотида 755 до нуклеотида 1514.
12. Геном аттенуированного полиовируса по п. 1, который содержит SEQ ID NO: 3.
13. Аттенуированный полиовирус, содержащий геном полиовируса по любому из пп. 1-12.
14. Способ получения генома аттенуированного полиовируса, который включает:
получение последовательности нуклеиновой кислоты, которая содержит
cis-действующий элемент репликации (cre), локализованный в спейсерной области 5′-НТО между клеверным листом и участком внутренней посадки рибосомы (IRES), и
последовательность, кодирующую белок полиовируса с меньшим отклонением в частоте использования пар кодонов, чем отклонение в частоте использования пар кодонов исходной последовательности, кодирующей данный белок полиовируса, из которой ее получают.
15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что последовательность генома аттенуированного полиовируса, кодирующую белок полиовируса, составляют путем реаранжировки кодонов исходной нуклеотидной последовательности полиовируса для получения мутированной нуклеотидной последовательности, которая кодирует такую же аминокислотную последовательность, как и исходная нуклеотидная последовательность полиовируса.
16. Способ по любому из пп. 14 или 15, который дополнительно включает введение полиовируса в соответствующую клетку-хозяина и культивирование клетки-хозяина для получения полиовируса.