СПОСОБ ОЧИСТКИ ПЕГИЛИРОВАННОГО ЭРИТРОПОЭТИНА

1. Способ получения белка, который содержит эритропоэтин и один остаток полиэтиленгликоля, включающий следующие стадии:
a) нанесение раствора, содержащего смесь свободного эритропоэтина и конъюгатов эритропоэтина и полиэтиленгликоля, содержащих один или более остатков полиэтиленгликоля на молекулу эритропоэтина, на колонку, содержащую хроматографический материал SP Sephacryl S 500 HR, уравновешенный раствором с электропроводностью около 21 мСм/см,
b) промывка колонки раствором с электропроводностью около 21 мСм/см и, таким образом, удаление свободного полиэтиленгликоля и белков, содержащих два или более остатков полиэтиленгликоля,
c) промывка колонки раствором с линейно возрастающей электропроводностью до конечного значения около 62,5 мСм/см и, таким образом, раздельное высвобождение с колонки белка, содержащего эритропоэтин и один остаток полиэтиленгликоля, и эритропоэтина, при этом белок, содержащий эритропоэтин и один остаток полиэтиленгликоля, высвобождается первым.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что раствор с электропроводностью около 21 мСм/см представляет собой раствор с рН, значение которого составляет 2,5-3,5.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что раствор с электропроводностью около 21 мСм/см представляет собой фосфатный буферный раствор с рН, значение которого составляет 2,5-3,5.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что электропроводность раствора, содержащего смесь эритропоэтина и конъюгатов эритропоэтина и полиэтиленгликоля, содержащих один или более остатков полиэтиленгликоля на молекулу эритропоэтина, не доводят до значения около 21 мСм/см.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что раствором с линейно возрастающей электропроводностью является раствор с линейно возрастающей концентрацией хлорида натрия.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что раствор с линейно возрастающей электропроводностью имеет рН, значение которого составляет 2,3-3,5.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что эритропоэтин представляет собой эритропоэтин человека.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что эритропоэтин человека имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:01 или SEQ ID NO:02.
9. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что один остаток полиэтиленгликоля имеет молекулярную массу в диапазоне от 20 кДа до 40 кДа.