Цитокины матери и плода в зависимости от пути инфицирования плодного яйца

ЦИТОКИНЫ МАТЕРИ И ПЛОДА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ПУТИ ИНФИЦИРОВАНИЯ ПЛОДНОГО ЯЙЦА

О.Н. Новикова

Кафедра акушерства и гинекологии № 1 ГОУ ВПО

Кемеровская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России Россия, 650099, Кемерово, ул. Н. Островского, д. 22

Для оценки уровня медиаторов иммунного ответа у беременных у новорожденных при различных путях инфицирования плодного яйца проведено ретроспективное исследование случай-контроль, в которое включено 452 беременные и их новорожденные. Основную группу составили 321 пациентка и их новорожденные с инфицированным плодным яйцом (177 - с гематогенным инфицированием, 78 - с восходящим инфицированием, 66 - с лимфогенным распространением инфекции при пиелонефрите), группу сравнения составили 131 женщина с неинфи-цированным плодным яйцом и их новорожденные. В сыворотке крови беременной за 2-7 дней до предстоящих родов и в сыворотке пуповинной крови изучен уровень интерлейкинов-1в, 6, 8, 10 и а-частицы фактора некроза опухоли. Выявлено, что уровень медиаторов в сыворотке крови беременных достоверно отличается от уровня медиаторов в сыворотке пуповинной крови. У беременных и их новорожденных с различными путями инфицирования плодного яйца уровень медиаторов иммунного ответа имеет разнонаправленные изменения, свидетельствующие о продолжительном антигенном воздействии на организм матери и плода. Уровень медиаторов иммунного ответа у матери и новорожденного позволяет судить об активности воспалительного процесса, степени угнетения иммунитета и продолжительности антигенной стимуляции.

Ключевые слова: интерлейкины, фактор некроза опухоли.

Значительное распространение вирусно-бактериальных инфекций у женщин во время беременности приводит к росту частоты внутриутробного инфицирования плода, которое обусловливает развитие перинатальных осложнений [3, 4, 7]. Реализация внутриутробной инфекции у новорожденного во многом зависит от его иммунитета [1, 5, 6, 7], который определяется состоянием здоровья матери. Гомеостаз в системе «мать-послед-плод» обеспечивается плацентой, синтезирующей и депонирующей широкий спектр гормонов и биологически активных сигнальных молекул. При различных заболеваниях матери, в том числе при инфекционной патологии, нарушается баланс между определенными биологически активными веществами в плаценте, крови плода и матери. Это обстоятельство позволяет использовать плацентарные пептиды, цитокины и др. в качестве маркеров патологических состояний беременности [2].

Цель исследования - изучение уровня медиаторов иммунного ответа у беременных и новорожденных при различных путях инфицирования плодного яйца.

Материал и методы исследования. Для оценки уровня медиаторов иммунного ответа у беременных и новорожденных при различных путях инфицирования плодного яйца проведено ретроспективное исследование случай-контроль, в которое включены 452 беременные, родоразрешенные в родильном доме № 1 МБУЗ ГКБ №3 им. М.А. Подгорбунского г. Кемерово за период 20092011 гг., и их новорожденные. Проведен анализ особенностей анамнеза, тече-

ния беременности и родов у матерей, клиническое и иммунологическое обследование беременных и новорожденных. Все беременные/новорожденные были разделены на 2 группы. В I группу (основную) была включена 321 беременная с инфицированным плодным яйцом: 1а группу составили 177 беременных с инфекциями TORCH- комплекса, Ib группу - 78 беременных с нарушением влагалищного биоценоза во время беременности, 1с группу - 66 беременных с пиелонефритом во время беременности. Во II группу (сравнения) включена 131 беременная с неинфицированным плодным яйцом. Аналогичным образом были разделены новорожденные. Критерии включения в 1а группу: наличие клинически и лабораторно подтвержденных у женщины во время беременности инфекций TORCH-комплекса, морфологическое подтверждение гематогенного воспалительного поражения последа. Критерии включения в Ib группу: наличие клинически и лабораторно подтвержденного у женщины во время беременности нарушения влагалищного биоценоза, морфологическое подтверждение восходящего инфекционного поражения последа. Критерии включения в 1с группу: наличие клинически и лабораторно подтвержденного у женщины во время беременности инфекционного процесса в почках, воспалительных изменений в последе при морфологическом исследовании. Критерии включения во II группу: отсутствие клинических и лабораторных проявлений у женщины и новорожденного инфекций TORCH-комплекса, нарушения влагалищного биоценоза во время беременности, отсутствие инфекционно-воспалительных заболеваний какой-либо локализации во время беременности, отсутствие воспалительных изменений в последе при морфологическом исследовании. Критерии исключения из исследования: наличие у матери тяжелой соматической патологии, пре-эклампсия во время настоящей беременности, изосерологическая несовместимость крови матери и плода по группе или резус-фактору, курение, отсутствие информированного согласия матери на участие в исследовании.

Уровень интерлейкина-1 (ИЛ-1), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-8 (ИЛ-8), интерлейкина-10 (ИЛ-10), а-частицы фактора некроза опухоли (ФНО-а) изучался в сыворотке крови беременной за 2-7 дней до предстоящих родов и в сыворотке пуповинной крови. Исследование концентраций цитокинов (пкг/мл) проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа в системе бидетерминантного определения антигена (ELISA) с применением пероксидазы в качестве индикаторного фермента в культурах клеток крови беременных. Исследование проведено на базе клинико-биохимической лаборатории ОКБ № 1 г. Кемерово (зав. лабораторией - к.м.н. Вавин Г.В.).

Статистический анализ данных проводился с использованием пакета прикладных программ StatSoft Statistica 6.1. (лицензия № BXXR006BO92218FAN11). Для представления данных использовали как абсолютные, так и относительные показатели (доли,%), методы описательной статистики: среднее (М), стандартное отклонение (у). Достоверность различий показателей сравниваемых групп оценивалась с помощью параметрического критерия Стьюдента (t-тест). Статистически значимыми считали различия при p 0,05.

Результаты и их обсуждение. Уровень медиаторов иммунного ответа у беременных и новорожденных представлен в табл. 1.

Таблица 1

Уровень медиаторов иммунного ответа у беременных и их новорожденных в зависимости от пути инфицирования плодного яйца

Группы, п Показатели цитокинов, пкг/мл М±у

ИЛ-1в ИЛ-6 ИЛ-8 ИЛ-10 ФНО-а

1а бер, п=40 614,28±55,19* р=0,000 24,79±6,03* р=0,000 9,16±2,66* р=0,435 3,41±1,55* р=0,000 1,04±0,42* р=0,151

1а нов, п=40 2130,24±270,72 р1<0,001 73,57±30,57 р1=0,001 49,84±23,36 р1<0,001 11,95±4,46 р1<0,001 3,89±0,54 р1=0,479

1Ь бер, п=40 1114,54±231,15* р=0,000 18,23±5,23* р=0,962 11,63±3,44* р=0,125 2,34±0,22* р=0,000 1,39±0,31* р=0,000

1Ь нов, N=40 1373,56±260,29 р=0,865 12,69±1,69 р1=0,000 5,09±1,48 р1=0,000 3,31±2,04 р1=0,000 2,21±0,12 р1=0,000

1с бер, п=40 800,98±115,55* р=0,009 10,59±3,65* р=0,000 2,45±0,55* р=0,000 2,93±1,02 р=0,000 1,24±0,74* р=0,000

1с нов, п=40 1558,25±195,41 р=0,0008 9,2±1,17 р1=0,000 2,96±0,31 р1=0,000 2,93±1,02 р1=0,000 3,0±0,49 р1=0,211

II бер, п=40 901,78±205,92* 18,17±5,97* 9,96±5,87* 0,1±2,02* 0,91±0,38*

II нов, п=40 1362,92±294,57 47,9±35,16 20,51±9,77 1,32±0,72 3,13±0,43

Примечание: р - достоверность различий между группой инфицированных и группой неинфициро-ванных матерей; р1 - достоверность различий между группой инфицированных и группой неинфици-рованных новорожденных; * - достоверность различий между уровнем цитокина у матери и у плода

У беременных с гематогенным инфицированием плодного яйца, а также при лимфогенном распространении воспалительного процесса при пиелонефрите во время беременности уровень ИЛ-1в был достоверно ниже, чем в группе неинфицированных пациенток (614,28±55,19 и 901,78±205,92, р=0,000; 800,98±115,55 и 901,78±205,92, р=0,009 соответственно). У беременных с восходящим инфицированием плодного яйца уровень провоспалительного цитокина ИЛ-1в был выше, чем беременных с неинфицированным плодным яйцом (1114,54±231,15 и 901,78±205,92, р=0,000).

У новорожденных от матерей с гематогенным инфицированием плодного яйца, а также при лимфогенном распространении инфекционного агента уровень провоспалительного цитокина ИЛ-1в был выше, чем у новорожденных группы сравнения (соответственно 2130,24±270,72 и 1362,92±294,57, р<0,001 и 1558,25±195,41, р=0,0008), у новорожденных от матерей с восходящим инфицированием уровень этого медиатора достоверно не отличался от уровня у неинфицированных новорожденных (1373,56±260,29 и 1362,92±294,57, р=0,865).

У беременных с гематогенным инфицированием плодного яйца уровень ИЛ-6 превышал значения у неинфицированных беременных (24,79±6,03 и 18,17±5,97, р=0,000). В группе беременных с восходящим инфицированием плодного яйца уровень ИЛ-6 не отличался от уровня у неинфицированных беременных (18,23±5,23 и 18,17±5,97, р=0,962). У пациенток с пиелонефритом во время беременности уровень ИЛ-6 был достоверно ниже (10,59±3,65 и 18,17±5,97), что могло свидетельствовать о снижении адаптационных возмож-

ностей иммунной системы в результате непрерывно рецидивирующего воспалительного процесса.

У новорожденных от матерей с гематогенным инфицированием плодного яйца уровень ИЛ-6 превышал значения у новорожденных неинфицированных матерей (73,57±30,57 и 47,9±35,16, р=0,001). В группах новорожденных с восходящим инфицированием и пиелонефритом у матери уровень этого медиатора был достоверно ниже (12,69±1,69 и 9,2±1,17 соответственно), что могло свидетельствовать о снижении адаптационных возможностей иммунной системы.

У беременных с гематогенным и восходящим инфицированием плодного яйца уровень ИЛ-8 не имел достоверных отличий от пациенток с неинфициро-ванным плодным яйцом (9,16±2,66 и 9,96±5,87, р=0,435; 11,63±3,44 и 9,96±5,87, р=0,125 соответственно). В группе беременных с пиелонефритом уровень ИЛ-8 был более чем в 4 раза ниже показателя при неинфицированном плодном яйце (2,45±0,55 и 9,96±5,87, р=0,000).

У новорожденных в группе пациенток с гематогенным инфицированием плодного яйца уровень ИЛ-8 более чем в 2 раза превышал уровень у неинфицированных новорожденных (49,84±23,36 и 20,51±9,77, р<0,001). В группах новорожденных с восходящим инфицированием и пиелонефритом у матери уровень этого медиатора также был достоверно ниже, чем у неинфицированных новорожденных (5,09±1,48 и 2,96±0,31 соответственно).

У беременных во всех группах уровень ИЛ-10 в несколько раз превышал уровень у неинфицированных беременных (при гематогенном инфицировании -34 раза (3,41±1,55 и 0,1±2,02, р=0,000), при восходящем - в 23 раза (2,34±0,22 и 0,1±2,02, р=0,000), при пиелонефрите - в 29 раз (2,93±1,02 и 0,1±2,02, р=0,000)).

У новорожденных в группе пациенток с гематогенным инфицированием плодного яйца уровень ИЛ-10 в 9 раз превышал уровень у неинфицированных новорожденных (11,95±4,46 и 1,32±0,72, р<0,001), в группах новорожденных с восходящим инфицированием и пиелонефритом у матери также отмечалось кратное увеличение уровня этого медиатора (3,31±2,04 и 2,93±1,02 соответственно).

У беременных с гематогенным инфицированием плодного яйца уровень ФНО-а не имел достоверных отличий от уровня у неинфицированных беременных (1,04±0,42 и 0,91±0,38, р=0,151), а при восходящем инфицировании плодного яйца и пиелонефрите во время беременности был достоверно выше, чем у неинфицированных беременных (1,39±0,31 и 0,91±0,38, р=0,000 и 1,24±0,34 и 0,91±0,38, р=0,000 соответственно).

У новорожденных в группе пациенток с гематогенным инфицированием плодного яйца и при пиелонефрите у матери уровень ФНО-а не имел достоверных отличий от уровня у неинфицированных новорожденных (3,89±0,54 и 3,13±0,43, р=0,479 и 3,0±0,49 и 3,13±0,43, р=0,211), а при восходящем инфицировании - был достоверно ниже, чем у неинфицированных новорожденных (2,21±0,12 и 3,13±0,43, р=0,000).

Уровень медиаторов иммунного ответа в сыворотке крови беременных достоверно отличался от уровня медиаторов в пуповинной крови.

Заключение. Таким образом, у беременных с гематогенным инфицированием плодного яйца уровень противовоспалительного медиатора ИЛ-10 в десятки раз превышает аналогичные показатели неинфицированных беременных, а уровень ИЛ-1в снижен, что в совокупности может свидетельствовать о напряжении иммунной системы матери вследствие длительной антигенной стимуляции. Причем повышение цитокинов, относящихся к разным фазам динамики патологического процесса (I фаза - ИЛ-6; III фаза - ИЛ-10), позволяет говорить о продолжительном антигенном воздействии на организм матери. Уровень провоспалительных и противовоспалительных медиаторов воспаления у новорожденных от матерей с гематогенным инфицированием плодного яйца достоверно превышает аналогичные показатели неинфицированных новорожденных. Причем повышение цитокинов, относящихся к разным фазам динамики патологического процесса (I фаза - ИЛ-1в, ИЛ-6, ИЛ-8; III фаза - ИЛ-10), позволяет судить о длительности антигенной стимуляции организма плода еще в утробе матери и говорит не только о внутриутробном инфицировании, но и о течении внутриутробной инфекции.

При восходящем инфицировании плодного яйца отмечается высокий уровень медиаторов как первой (ИЛ-1в), так и второй (ФНО-а) и третьей (ИЛ-10) фазы иммунного ответа, что свидетельствует о длительности процесса и может говорить об активном инфекционном процессе. При восходящем инфицировании плодного яйца отмечается более низкий уровень медиаторов первой фазы иммунного ответа и повышение медиаторов II и III фазы, что свидетельствует о длительности процесса и может говорить о перенесенном инфекционном процессе еще внутриутробно и, возможно, о некотором угнетении иммунной системы плода.

При пиелонефрите беременных отмечается повышение медиаторов второй и третьей фазы иммунного ответа, уровень медиаторов первой фазы значительно снижен, что может говорить о длительности воспалительного процесса в почках и, возможно, некотором угнетении иммунного ответа матери. При пиелонефрите у матери во время беременности у новорожденных отмечается повышение только медиаторов III фазы иммунного ответа, что может говорить о перенесенном внутриутробно воспалительном процессе и, возможно, формировании очага хронической инфекции у новорожденного ребенка.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Акушерство: Национальное руководство / Под ред. Э.К. Айламазяна, В.И. Кулакова, В.Е. Радзинского, Г.М. Савельевой. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.

[2] Князькин И.В., Кветной И.М., Зезюлин П.Н., Филиппов С.В. Нейроиммуноэндокрино-логия мужской половой системы, плаценты и эндометрия. - СПб.: Изд-во общества «Знание» Санкт-Петербурга и Ленинградской области, 2007. - 192 с.

[3] Перинатальные инфекции: Практическое пособие / Под ред. А.Я. Сенчука, З.М. Ду-боссарской. - М.: МИА, 2005. - 318 с.

[4] Радзинский В.Е., Оразмурадов А.А. Ранние сроки беременности // Status praesens. -2009. - С. 136-151.

[5] Радзинский В.Е., Ордиянц И.М., Оразмурадов А.А. Женская консультация. - 3-е изд. -М.: ГЭОТАР-МЕДИА, 2009.

[6] Радзинский В.Е. Рук-во к практическим занятиям по акушерству. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.

[7] Репродуктивное здоровье: Учеб. пособ. / Под ред. В.Е. Радзинского. - М.: РУДН, 2011.

MOTHER AND FETUS CYTOKINES DEPENDING ON THE OVUM INFECTION WAY

O.N. Novikova

Ob/Gyn department № 1 Kemerovo State Medical Academy, Russia 22, str. of N. Ostrovsky, Kemerovo, 650099, Russia

A retrospective case-control study was proposed to assess the level of immune response mediators in pregnant women and babies with different ways of infection of the ovum. Four hundred and fifty-two pregnant women and their newborns were included into study.

The main group included 321 female patients and their newborns with infected fetal ovum (177 -with hematogenous infection, 78 - with ascending infection, 66 - with lymphogenous spread of infection with pyelonephritis). The comparable group included 131 women with uninfected ovum and their babies.

During the period of 2-7 days before the upcoming birth, levels of interleukin -1b, 6, 8, 10 and a-particle tumor necrosis factor in the blood serum of a pregnant woman and the umbilical blood serum were studied.

It was revealed that the level of mediators in blood serum of pregnant women differs authentically from level of mediators in serum of umbilical blood.

In pregnant women and their newborns with various ways of ovum infection a mediator's level of the immune response has different changes testifying to the long antigene influence on an organism of mother and fetus.

Level of the immune response mediators of mother and the newborn allows judging the activity of inflammatory process, extent of immunity oppression and duration of anti-gene stimulation.

Key words: interleukin, tumor necrosis factor.