ХИМЕРЫ ВИТРОНЕКТИН: ФАКТОР РОСТА КЕРАТИНОЦИТОВ

1. Выделенный белковый комплекс в форме синтетического химерного белка, включающего аминокислотную последовательность:
(i) фактора роста кератиноцитов (KGF), или по крайней мере домена KGF, который способен к связыванию с рецептором фактора роста кератиноцитов, и
(ii) одного или более доменов витронектина (VN), включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN.
2. Выделенный белковый комплекс по п. 1, в котором один или более доменов VN, включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN, не включают С-концевой гепарин-связывающий домен (HBD).
3. Выделенный белковый комплекс по п. 2, включающий аминокислоты 1-346 последовательности зрелого VN (SEQ ID NO: 2).
v
4. Выделенный белковый комплекс по любому из пп. 1-3, в котором интегрин-связывающий домен представляет собой связывающий интегрин α домен.
v
3
v
5
5. Выделенный белковый комплекс по п. 4, в котором интегрин-связывающий домен представляет собой связывающий интегрин αβ домен или связывающий интегрин αβдомен.
6. Выделенный белковый комплекс по п. 1, в котором один или более доменов VN, включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN, включают аминокислоты 1-311 последовательности зрелого VN (SEQ ID NO: 2).
7. Выделенный белковый комплекс по п. 1, в котором один или более доменов VN, включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN, включают аминокислоты 1-125 последовательности зрелого VN (SEQ ID NO: 2).
8. Выделенный белковый комплекс по п. 1, в котором один или более доменов VN, включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN, включает аминокислоты 1-64 последовательности зрелого VN (SEQ ID NO: 2).
9. Выделенный белковый комплекс по п. 1, в котором один или более доменов VN, включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN, включает аминокислоты 1-52 последовательности зрелого VN (SEQ ID NO: 2).
10. Выделенный белковый комплекс по п. 9, в котором один или более доменов VN, включающих по крайней мере интегрин-связывающий домен VN, не включает полианионную аминокислотную последовательность, соответствующую остаткам 53-64 зрелого белка VN (SEQ ID NO: 2).
11. Выделенный белковый комплекс по п. 1, включающий, кроме того, дополнительный фрагмент VN.
12. Выделенный белковый комплекс по п. 1, дополнительно включающий по крайней мере одну последовательность линкера.
13. Выделенный белковый комплекс по п. 12, в котором последовательность линкера включает сайт расщепления протеазой.
14. Выделенный белковый комплекс по п. 12, в котором последовательность линкера выбирают из группы, состоящей из
4
(i) Gly Ser (SEQ ID NO: 4);
4
3
(ii) Gly Ser (SEQ ID NO: 5);
4
3
(iii) (Gly Ser) (SEQ ID NO: 6);
4
4
(iv) (Gly Ser) (SEQ ID NO: 7);
(v) Leu Ile Lys Met Lys Pro (SEQ ID NO: 8) и
(vi) Gln Pro Gln Gly Leu Ala Lys (SEQ ID NO: 9).
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
15. Выделенный белковый комплекс по п. 1, в случае которого указанный синтетический химерный белок включает аминокислотную последовательность 1-459 VN:(GlySer):1-163 KGF:GlySer Gly:6 His (SEQ ID NO: 10); 1-311 VN:(GlySer):1-163 KGF:GlySer Gly:6 His (SEQ ID NO: 11); 1-125 VN:(GlySer):1-163 KGF:GlySer Gly:6 His (SEQ ID NO: 12); 1-64 VN:(GlySer):1-163 KGF:GlySer Gly:6 His (SEQ ID NO: 13) или 1-64 VN:(GlySer):343-376 VN:(GlySer):1-163 KGF:GlySer Gly:6 His (SEQ ID NO: 14).
16. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая выделенный белковый комплекс по любому из пп. 1-15.
17. Генетическая конструкция, включающая выделенную нуклеиновую кислоту по п. 16, функционально связанную с одной или более регуляторных нуклеотидных последовательностей в векторе.
18. Генетическая конструкция по п. 17, представляющая собой конструкцию для экспрессии, в которой выделенная нуклеиновая кислота функционально связана с промотором.
19. Клетка-хозяин, включающая генетическую конструкцию по п. 17.
20. Фармацевтическая композиция, включающая выделенный белковый комплекс по любому из пп. 1-15 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
21. Используемые в хирургии имплантат, каркас или протез, которые пропитаны, покрыты выделенным белковым комплексом по любому из п.п. 1-15 или иным способом включают его.
22. Повязка на рану или ожог, включающая выделенный белковый комплекс по любому из пп. 1-15.
23. Способ активирования миграции и/или пролиферации клетки, включающий стадию использования выделенного белкового комплекса по любому из п.п. 1-15 для связывания как с рецептором фактора роста кератиноцитов, так и с интегриновым рецептором, экспрессируемыми клеткой, для индукции, усиления и/или иным способом способствования миграции и/или пролиферации указанной клетки.
24. Способ по п. 23, в котором выделенный белковый комплекс вводят животному для активирования миграции и/или пролиферации клетки in situ.
25. Способ по п. 23 для индукции, усиления и/или иным способом способствования с профилактической или терапевтической целью миграции и/или пролиферации эпителиальных клеток для содействия тем самым заживлению ран in situ.
26. Способ по п. 24, в котором животным является человек.
27. Способ по п. 23, в котором выделенный белковый комплекс вводят в одну или более клеток или тканей in vitro.