КОНЪЮГАТЫ ОЛИГОНУКЛЕОТИДОВ, СОДЕРЖАЩИЕ НУКЛЕОЗИДЫ С 7'-5'-АЛЬФА-АНОМЕРНЫМИ-БИЦИКЛИЧЕСКИМИ САХАРАМИ

1. Конъюгат олигонуклеотид-липидная группа, в котором олигонуклеотид содержит по меньшей мере два остатка альфа-аномерной бицикло-ДНК (abc-ДНК), связанных фосфодиэфирной связью, и при этом указанная липидная группа ковалентно присоединена к олигонуклеотиду.
2. Конъюгат олигонуклеотида по п. 1, отличающийся тем, что указанная липидная группа ковалентно присоединена к олигонуклеотиду через линкер.
3. Конъюгат олигонуклеотида по п. 1 или 2, отличающийся тем, что олигонуклеотид содержит от 12 до 24 остатков.
4. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что указанный олигонуклеотид содержит от 14 до 19 остатков.
5. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что указанный остаток abc-ДНК имеет формулу (V)
3
4
где независимо для каждого из по меньшей мере двух остатков abc-ДНК формулы (IV) один из T или T представляет собой нуклеозидную линкерную группу;
3
4
1
2
другой из T и T представляет собой OR, OR, 5'-концевую группу, 7'-концевую группу или нуклеозидную линкерную группу, причем:
1
R представляет собой H или защитную группу для гидроксила; и
2
R представляет собой фосфорсодержащий фрагмент; и
Bx представляет собой азотистое основание.
6. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что все остатки представляют собой остатки abc-ДНК.
7. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что указанные по меньшей мере два остатка abc-ДНК связаны с соседними остатками фосфодиэфирными связями.
8. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что все остатки представляют собой остатки abc-ДНК и связаны фосфодиэфирными связями.
9. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что указанная липидная группа ковалентно присоединена к концевому остатку олигонуклеотида.
10. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что олигонуклеотид содержит остатки, связанные через фосфорсодержащую н уклеозидную линкерную группу, выбранную из группы, состоящей из: фосфодиэфирной линкерной группы, фосфотриэфирной линкерной группы, тиофосфатной линкерной группы, дитиофосфатной линкерной группы, фосфонатной линкерной группы, тиофосфонатной линкерной группы, фосфинатной линкерной группы, тиофосфорамидатной линкерной группы и фосфорамидатной линкерной группы.
11. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 2-10, отличающийся тем, что линкер представляет собой углеводородный линкер или полиэтиленгликолевый (ПЭГ) линкер.
12. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 2-11, отличающийся тем, что линкер выбран из группы, состоящей из амино-алкил-тиофосфатного линкера, амино-ПЭГ-тиофосфатного линкера, альфа-карбоксилат-аминоалкил-тиофосфатного линкера и альфа-карбоксилат-амино-ПЭГ-тиофосфатного линкера.
13. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 2-12, отличающийся тем, что линкер содержит расщепляемую группу.
14. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что липидная группа представляет собой группу, полученную из жирной кислоты.
15. Конъюгат олигонуклеотида по п. 14, отличающийся тем, что жирная кислота является насыщенной или ненасыщенной.
16. Конъюгат олигонуклеотида по п. 14 или п. 15, отличающийся тем, что жирная кислота имеет от 4 до 28 атомов углерода в длину.
17. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 14-16, отличающийся тем, что группа, полученная из жирной кислоты, содержит группу карбоновой кислоты.
18. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 14-17, отличающийся тем, что жирная кислота выбрана из жирных кислот, представленных в таблице 1 или в таблице 2.
19. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 14-18, отличающийся тем, что жирная кислота представляет собой гексадекановую кислоту.
20. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-19, отличающийся тем, что липидная группа присоединена к олигонуклеотиду через тиофосфатную группу.
21. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-20, отличающийся тем, что указанный конъюгат олигонуклеотида связывается с пре-мРНК, соответствующей части 51 экзона гена мышечной дистрофии Дюшенна (DMD).
22. Конъюгат олигонуклеотида по п. 21, отличающийся тем, что указанный конъюгат олигонуклеотида содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, 5, 22 - 24, 36 - 39, 51 - 55, 404 и 414 - 425.
23. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-22, отличающийся тем, что олигонуклеотид содержит любую из последовательностей, представленных в таблице 3.
24. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-23, отличающийся тем, что указанный конъюгат олигонуклеотида связывается с пре-мРНК, соответствующей части 53 экзона гена DMD.
25. Конъюгат олигонуклеотида по п. 24, отличающийся тем, что указанный конъюгат олигонуклеотида содержит любую из последовательностей, представленных в таблице 4.
26. Конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-25, отличающийся тем, что указанный конъюгат олигонуклеотида связывается с пре-мРНК, соответствующей части 45 экзона гена DMD.
27. Конъюгат олигонуклеотида по п. 26, отличающийся тем, что указанный конъюгат олигонуклеотида содержит любую из последовательностей, представленных в таблице 5.
28. Фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат олигонуклеотид-липидную группу по любому из пп. 1-27 в комбинации с пригодным носителем.
29. Способ изменения экспрессии гена посредством обеспечения возможности гибридизации конъюгата олигонуклеотида по любому из пп. 1-27 с РНК, экспрессируемой из указанного гена, причем указанный олигонуклеотид содержит последовательность, комплементарную части указанной РНК.
30.Способ инициации пропуска 51 экзона пре-мРНК человеческого дистрофина у субъекта с мышечной дистрофией Дюшенна (DMD) или с мышечной дистрофией Беккера (BMD) или в клетке, полученной от указанного субъекта, включающий обеспечение конъюгата олигонуклеотида по любому из пп. 1-23, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, 5, 22 - 24, 36 - 39, 51 - 55, 404 и 414 - 425, причем указанный олигонуклеотидный конъюгат инициирует пропуск указанного экзона у субъекта или в клетке, и при этом мРНК, образованная в результате пропуска экзона 51 пре-мРНК дистрофина, кодирует функциональный белок дистрофин или белок дистрофин у субъекта с синдромом Беккера.
31. Способ лечения мышечной дистрофии Дюшенна (DMD) или с мышечной дистрофии Беккера (BMD) у субъекта или в клетке, полученной от указанного субъекта, посредством инициации пропуска 51 экзона в пре-мРНК человеческого дистрофина, включающий обеспечение у субъекта или в клетке композиции, содержащей конъюгат олигонуклеотида по любому из пп. 1-23, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, 5, 22 - 24, 36 - 39, 51 - 55, 404 и 414 - 425, причем указанный олигонуклеотидный конъюгат инициирует пропуск указанного экзона у субъекта или в клетке, и при этом мРНК, образованная в результате пропуска экзона 51 пре-мРНК дистрофина, кодирует функциональный белок дистрофин или белок дистрофин у субъекта с синдромом Беккера.