СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
METHOD OF COMPLEX ASSESSMENT OF PRODUCT CONTENT OF OXIDATIVE MODIFICATION OF PROTEINS IN TISSUES AND BIOLOGICAL FLUIDS

Изобретение относится к медицине, в частности, к биологической химии, и предназначено для более полной оценки окислительной модификации белков (ОМБ) и анализа соотношения альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) основного и нейтрального характера в плазме и клетках крови, а также в тканях животных с целью определения степени выраженности и стадии окислительного стресса.
На сегодняшний день окислительная модификация белков признана одним из наиболее ранних показателей поражения различных тканей организма при свободнорадикальной патологии [1, 4]. Следует отметить, что окислительная деструкция белков рассматривается как один из ранних и стабильных признаков окислительного стресса (ОС). В ранних стадиях окислительного стресса преобладают альдегид-динитрофенилгидразоны (АДНФГ), в поздних стадиях - кетон-динитрофенилгидразоны (КДНФГ) [6].
Определение окисленных групп белков как маркеров ОС имеет ряд преимуществ. Так, карбонильные группы являются химически стабильными соединениями и циркулируют в крови более продолжительный промежуток времени, чем конечные продукты свободнорадикального окисления липидов, например малоновый диальдегид. Окисленные белки подвергаются разрушению в течение часов и дней, в то время как продукты окисления липидов нейтрализуются за считанные минуты [7, 8].
Одним из перспективных направлений в науке стало практическое исследование ОМБ в биологическом материале при патологических состояниях. Результатом окислительной деструкции белков является нарушение нативной структуры белков [4]. Под действием АФК могут происходить два процесса - фрагментация белков, маркерами которой являются АДНФГ, и агрегация белков, маркерами которой являются КДНФГ [5, 6].
Для определения продуктов ОМБ обычно используется метод R.L.Levine в модификации Е.Е.Дубининой, основанный на регистрации 2,4-динитрофенилгидразонов основного и нейтрального характера. Содержание окисленных белков определяют не только в плазме и клетках крови, но и в тканях.
Из данных литературы известно, что для алифатических альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера спектр поглощения зарегистрирован в диапазоне 230-558 нм, основного характера - в диапазоне 258-264 и 428-520 нм. Для алифатических кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера спектр поглощения 363-367 нм, основного характера - 430-434 и 524-535 нм [3].
Анализ ОМБ производится путем сравнения отдельных значений на соответствующих длинах волн. В результате такой оценки накапливается большой фактический материал, демонстрирующий изменение карбонильных производных. Однако полученный материал перегружен числовыми значениями, что затрудняет оценку и анализ полученного материала. Известно, что одним из способов комплексной оценки может быть подсчет площади под кривой, так например, Малаховой М.Я. оценивались результаты содержания в плазме и эритроцитах крови веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ) [2].
Из всего вышеперечисленного следует, что для корректной интерпретации полученных результатов ОМБ требуется разработка метода, позволяющего комплексно оценить и проанализировать значения ОМБ, учитывая стадию окислительного стресса и нарушения конформации белков.
Сущность изобретения заключается в том, что график спектра ОМБ делится на УФ-спектр (100-400 нм) и область видимого света (380-790 нм). В свою очередь, в УФ-спектре регистрируются АДНФГ и КДНФГ нейтрального характера. Следовательно, длины волн 230, 254, 270, 280, 356 нм характеризуют АДНФГ нейтрального характера, а λ=363 нм и λ=370 нм характеризуют КДНФГ также нейтрального характера. Немаловажно отметить, что в области видимого света регистрируются АДНФГ (428 и 430 нм) и КДНФГ (430, 434 нм и 524, 535 нм) основного характера («Характеристика регистрации динитрофенилгидразонов в световом спектре», рис.1).
Поставленная цель достигается тем, что график спектра ОМБ разделяется на сегменты, одни из которых характеризуют первичные маркеры ОС - АДНФГ, а другие характеризуют вторичные маркеры ОС - КДНФГ.
Результат, который может быть получен при осуществлении изобретения, состоит в более полном анализе фактического материала, используя комплексную оценку содержания окисленных продуктов белка.
Это достигается тем, что оценка осуществляется при подсчете площади под кривой спектра окислительной модификации белков.
2
1
λ1
λ2
Учитывая, что «шаг» между длинами волн является величиной непостоянной, то вычислить площадь плоской фигуры с помощью определенного интеграла не представляется возможным. В результате этого возникает необходимость разбить площадь под кривой на отдельные фигуры, которые представляют собой прямоугольные трапеции (рис 1), высота которых будет равна разнице между длинами волн (h=λ-λ), а основания равны значениям экстинкции на определенной длине волны, например Ext и Ext, выраженные в единицах оптической плотности. Далее полученное значение можно выразить в е.о.п. на мл плазмы, ед.опт.пл. на грамм ткани, ед.опт.пл. на грамм белка для плазмы и тканей органов.
Таким образом, площадь под кривой спектра окислительной модификации белков, которая складывается из площадей под кривой АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, определяется формулой:
<mrow><mi>S</mi><mi>о</mi><mi>б</mi><mi>м</mi><mo>=</mo><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>+</mo><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>+</mo><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>+</mo><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub></mrow>
где
<mtable columnalign="left"><mtr><mtd><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>230</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>254</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>24</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>254</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>270</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>16</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>270</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>280</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>10</mn><mo>+</mo></mtd></mtr><mtr><mtd><mo>+</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>280</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>356</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>76</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>356</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>363</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>7</mn></mtd></mtr></mtable>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>428</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>520</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>92</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>363</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>370</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>7</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>370</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>428</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>58</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>430</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>434</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>4</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>520</mn></mrow></msub><mo>+</mo><mi>E</mi><mi>x</mi><msub><mi>t</mi><mrow><mn>535</mn></mrow></msub></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>15</mn></mrow>
Таким образом, предложенный метод позволяет не только оценить общее значение ОМБ, определить количество АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, но и сопоставить первичные и вторичные маркеры ОМБ и в результате этого выявить путь нарушения нативной конформации белков.
Пример 1
Исследование проводилось на крысе линии Wistar массой 350 г. Животному в течение 10 дней перорально вводили L-аргинин в дозе 500 мг/кг. Содержание и выведение животных из эксперимента осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ Минздрава СССР №755 от 12.08.1977 г.). После выведения животного из эксперимента из навески ткани почки готовили гомогенат лизосомальной и внелизосомальной фракции. Окислительную модификацию белков определяли во внелизосомальной фракции по методу R.L.Levine в модификации Е.Е.Дубининой.
По полученным значениям экстинкции строится график («Спектр ОМБ под действием L-аргинина в почке крыс», рис.2), далее рассчитывается площадь под полученной кривой.
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0</mn><mo>+</mo><mn>0</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>24</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0</mn><mo>+</mo><mn>0</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>24</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0</mn><mo>+</mo><mn>0</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>16</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0</mn><mo>+</mo><mn>0,015</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>76</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,015</mn><mo>+</mo><mn>0,02</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>7</mn><mo>=</mo><mn>0,6925</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0,005</mn><mo>+</mo><mn>0,002</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>92</mn><mo>=</mo><mn>0,322</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0,02</mn><mo>+</mo><mn>0,02</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>7</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,02</mn><mo>+</mo><mn>0,005</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>58</mn><mo>=</mo><mn>0,865</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0,01</mn><mo>+</mo><mn>0,015</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>4</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,006</mn><mo>+</mo><mn>0,01</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>15</mn><mo>=</mo><mn>0,125</mn></mrow>
омб
S=0,6925+0,322+0,865+0,125=2,0045
Полученное значение площади под кривой делится на содержание белка (3,7044 г/л) и окончательное значение выражается в е.о.п./грамм белка.
нейтр.
осн
нейтр
осн
Общая площадь под кривой ОМБ почки составила 2,0045/3,7044=0,541 е.о.п./грамм белка, из них площадь АДНФГ=0,187, АДНФГ=0,087, КДНФГ=0,234, КДНФГ=0,034 е.о.п./грамм белка.
неитр
осн
нейтр
осн
Содержание первичных маркеров окислительного стресса составило 50,3%, из них на долю АДНФГ приходится 68%, а на долю АДНФГ - 32%. Из общего количества ОМБ содержание вторичных маркеров составило 49,7%, из них на долю КДНФГ приходится 86%, а на долю КДНФГ - 14%.
Таким образом, под действием L-аргинина в дозе 500 мг/кг содержание вторичных и первичных маркеров окислительного стресса почти равны.
Пример 2.
Пациентке С.Т.И., 64 года, поставлен диагноз тромбофлебит вен нижних конечностей. Забор крови у пациентки производился утром из локтевой вены натощак в количестве 10 мл. В качестве антикоагулянта использовали ЭДТА. Кровь центрифугировали, плазму снимали и использовали для проведения определения ОМБ по методике Levine R. в модификации Дубининой Е.Е. По полученным значениям экстинкции строится график («Спектр ОМБ в плазме пациента с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей», рис.3), далее рассчитывается площадь под полученной кривой.
<mtable columnalign="left"><mtr><mtd><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0</mn><mo>+</mo><mn>0,025</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>24</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,025</mn><mo>+</mo><mn>0,035</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>16</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,035</mn><mo>+</mo><mn>0,17</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>10</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,17</mn><mo>+</mo><mn>0,4</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>76</mn><mo>+</mo></mtd></mtr><mtr><mtd><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,4</mn><mo>+</mo><mn>0,53</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>7</mn><mo>=</mo><mn>26,71</mn></mtd></mtr></mtable>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0,2</mn><mo>+</mo><mn>0,27</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>92</mn><mo>=</mo><mn>21,62</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0,53</mn><mo>+</mo><mn>0,195</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>7</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,195</mn><mo>+</mo><mn>0,2</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>58</mn><mo>=</mo><mn>13,9925</mn></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><mn>0,26</mn><mo>+</mo><mn>0,20</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>4</mn><mo>+</mo><mfrac><mrow><mn>0,25</mn><mo>+</mo><mn>0,28</mn></mrow><mn>2</mn></mfrac><mo>×</mo><mn>15</mn><mo>=</mo><mn>3,975</mn></mrow>
омб
S=26,71+21,62+13,9925+3,975=66,2975
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mn>267,1</mn><mo>;</mo></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>А</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mn>216,2</mn><mo>;</mo></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>н</mi><mi>е</mi><mi>й</mi><mi>т</mi><mi>р</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mn>139,925</mn><mo>;</mo></mrow>
<mrow><msub><mi>S</mi><mrow><munder><mrow><mi>К</mi><mi>Д</mi><mi>Н</mi><mi>Ф</mi><mi>Г</mi></mrow><mrow><mi>о</mi><mi>с</mi><mi>н</mi><mo>.</mo></mrow></munder></mrow></msub><mo>=</mo><mn>39,75</mn><mtext> е</mtext><mtext>.о</mtext><mtext>.п</mtext><mtext>./мл плазмы</mtext><mtext>.</mtext></mrow>
Полученное значение площади под кривой ОМБ рассчитано на 0,1 мл плазмы, соответственно на 1 мл плазмы составит 662,975 е.о.п./мл плазмы, из них
нейтр
осн
нейтр
осн
Содержание первичных маркеров окислительного стресса плазмы пациентки с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей составило 73%, из них на долю АДНФГ приходится 55%, а на долю АДНФГ - 45%. Из общего количества ОМБ содержание вторичных маркеров составило 27%, из них на долю КДНФГ приходится 78%, а на долю КДНФГ - 22%.
Таким образом, в плазме пациентки с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей значительно преобладают первичные маркеры окислительного стресса, что свидетельствует о фрагментации белковых молекул.
Источники информации
1. Зенков Н.К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К.Зенков, В.З.Ланкин, Е.Б.Меньшикова. - М.: МАИК, 2001. - 343 с.
2. Малахова М.Я. Эндогенная интоксикация. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации / М.Я.Малахова // Эфферентная терапия. - Т. 1, №1. - 1995. - С.61-64
3. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека. Метод ее определения / Е.Е.Дубинина [и др.] // Вопросы мед. химии, т.41, №1. - 1995. - с.24-26.
4. Окислительная модификация белков: проблемы и перспективы исследования / Л.Е.Муравлева [и др.] // Фундаментальные исследования - 2010. - №1. - С.74-78.
5. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях / Ю.И.Губский [и др.] // Современные проблемы токсикологии, т.8, №3. - 2005. - с.20-27.
6. Толочко З.С. Окислительная модификация белков в крови крыс при повреждении капсаицин-чувствительных нервов и изменении уровня оксида азота / 3.С.Толочко, В.К.Спиридонов // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - Т.96, №1. - 2010. - с.77-84.
7. Protein carbonyl groups as biomarkers of oxidative stress / I. Dalle - Donne [et al.] // Pubmed - 2003. - URL:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12589963.
8. Stadtman E.R. Protein oxidation / E.R.Stadtman, R.L.Levine // Annals of N.Y.Academy of Sciences. - Vol.899. - 2000. - P.191-208.