КОМБИНИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ КОКЛЮША, ДИФТЕРИИ, СТОЛБНЯКА
COMBINED VACCINE FOR PREVENTING PERTUSSIS, DIPHTHERIA, TETANUS

Изобретение относится к медицине, а именно к комбинированным бустерным вакцинам и может применяться для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка у детей с 6-летнего возраста, подростков и взрослых.
За прототип принято описание вакцины коклюшно-дифтерийно-столбнячной адсорбированной (АКДС-вакцина) (инструкция по применению АКДС-вакцины, https://health.mail.ru/drug/vaktsina_koklyushnodifteriynostolbnyachnaya/).
Вакцина АКДС представляет собой смесь убитых формальдегидом коклюшных микробов 1 фазы (цельноклеточный коклюшный компонент) и сорбированных на алюминия гидроксиде дифтерийного и столбнячного анатоксинов. Лекарственная форма АКДС-вакцины представляет собой суспензию для внутримышечного введения.
Состав
Одна доза вакцины (0,5 мл) содержит:
Активные вещества:
Дифтерийный анатоксин
15 Lf
Столбнячный анатоксин
5 Lf
Коклюшные микробные клетки
10 млрд
Вспомогательные вещества:
Алюминия гидроксид (Al<sup>3+</sup>)
не более 0,55 мг
Формальдегид
не более 50 мкг
Консервант-мертиолят
от 42,5 до 57,5 мкг
Признаки прототипа, совпадающие с признаками заявленного изобретения, заключаются в наличии в составе комбинированного препарата коклюшного компонента, очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, адсорбированных на гидроксиде алюминия.
Причины, препятствующие получению технического результата в прототипе, который обеспечивается изобретением, заключаются в наличии в составе комбинированной вакцины цельноклеточного коклюшного компонента и высоком содержании дифтерийного анатоксина, что препятствует использованию вакцины для бустерной иммунизации.
Прививки АКДС-вакциной, содержащей коклюшный цельноклеточный компонент, проводят детям в возрасте от 3 месяцев до достижения возраста 3 года 11 месяцев 29 дней. В последующем для профилактики дифтерии, столбняка у детей, начиная с 6-летнего возраста, подростков и взрослых в соответствии с Национальным календарем прививок используется только анатоксин дифтерийно-столбнячный очищенный адсорбированный с уменьшенным содержанием антигенов жидкий (АДС-М - анатоксин). Длительность иммунитета к коклюшной инфекции у детей, вакцинированных АКДС вакциной, составляет 5-7 лет. Известно, что в эпидемический процесс вовлекаются не только дети, но подростки и взрослые, среди которых заболевание коклюшем протекает тяжело, нередко приводя к формированию осложнений (пневмонии, стойкие неврологические нарушения) и летальным исходам, что обуславливает необходимость иммунизации против коклюша разных возрастных групп. АКДС-вакцина, содержащая цельноклеточный коклюшный компонент, является наиболее реактогенным препаратом Национального календаря прививок и не может использоваться для иммунизации детей старше 6 лет, подростков и взрослых.
Задача, решаемая изобретением, состоит в повышении качества вакцины и расширении сферы ее применения для разных возрастных групп населения.
Технический результат, обеспечивающий решение указанной задачи, состоит в снижении реактогенности комбинированной вакцины и расширении сферы ее применения для разных возрастных групп.
Указанный технический результат достигается тем, что в комбинированной вакцине для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, содержащей коклюшный компонент, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на алюминия гидроксиде, согласно изобретению, в качестве коклюшного компонента используется вакцина коклюшная бесклеточная очищенная, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл):
Вакцина коклюшная бесклеточная очищенная
30-45 мкг
Дифтерийный анатоксин
2,5-5 Lf
Столбнячный анатоксин
2,5-5 Lf
Алюминия гидроксид (в пересчете на алюминий Al<sup>3+</sup>)
от 0,3 до 0,55 мг
При этом совокупность отличительных признаков обеспечивает снижение реактогенности вакцины и расширение сферы применения. Использование бесклеточного коклюшного компонента и уменьшение содержания дифтерийного анатоксина обеспечивают снижение реактогенности и расширяют ее сферу применения в отличие от прототипа - АКДС-вакцины, применяемой для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка у детей до достижения возраста 3 года 11 месяцев 29 дней, вакцину аАКДС-М (где, индекс «а» обозначает бесклеточный коклюшный компонент) можно использовать для бустерной вакцинации детей с 6-летнего возраста, подростков и взрослых.
Новые признаки изобретения заключаются в использовании в составе комбинированного препарата в качестве коклюшного компонента вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл):
Вакцина коклюшная бесклеточная очищенная
30-45 мкг
Дифтерийный анатоксин
2,5-5 Lf
Столбнячный анатоксин
2,5-5 Lf
Алюминия гидроксид (в пересчете на алюминий Al<sup>3+</sup>)
от 0,3 до 0,55 мг
Лекарственная форма вакцины аАКДС-М представляет собой суспензию для внутримышечного введения.
Вакцину аАКДС-М получают следующим способом:
Последовательно добавляют к гелю гидроксида алюминия коклюшный, дифтерийный, столбнячный анатоксины.
Коклюшный компонент представляет собой антигенную фракцию Bordetella pertussis, очищенную без разделения компонентов, полученную по технологии (патент №2504399), включающей следующие основные операции:
1) выращивают культуры трех штаммов разных серовариантов Bordetella pertussis на плотной питательной среде (казеиново-угольный агар);
2) смывают полученную биомассу с поверхности питательной среды;
3) проводят экстракцию комплекса антигенов раствором дезоксихолата натрия;
4) центрифугируют для отделения полученного экстракта, содержащего комплекс антигенов, от микробной биомассы;
5) проводят очистку экстракта ультрадиафильтрацией, с последующим удалением эндотоксинов хроматографией;
6) проводят обезвреживание формальдегидом и теплом.
Полученная субстанция вакцины коклюшной бесклеточной содержит в одном мл:
- антигенную фракцию Bordetella pertussis, очищенную без разделения компонентов - не менее 1 мг белка;
- формальдегид - не более 200 мкг;
- сукцинатно-боратный буферный раствор 0,005 М до 1 мл.
Для приготовления вакцины аАКДС-М используют дифтерийный, столбнячный анатоксины, соответствующие по показателям качества требованиям нормативных документов.
Перед соединением указанных компонентов проводят расчет, исходя из того, что в одной прививочной дозе (0,5 мл) вакцины должно содержаться 30-45 мкг вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, 2,5-5 Lf очищенного дифтерийного анатоксина, 2,5-5 Lf очищенного столбнячного анатоксина и не более 0,55 мг алюминия гидроксида (в пересчете на алюминий).
Расчет проводят по формуле: , где
Vi - требуемый объем антигенного ингредиента в мл;
V - объем вакцины аАКДС-М, мл;
1
Т - титр антигенного ингредиента в вакцине аАКДС-М (показатель специфической активности) или концентрация по белку в мкг/мл;
2
Т - титр исходного антигенного полуфабриката (показатель специфической активности) или концентрация по белку в мкг/мл.
Пример: Требуется приготовить 80 л вакцины аАКДС-М с содержанием в одной прививочной дозе: 2,5 Lf дифтерийного анатоксина, 2,5 Lf столбнячного анатоксина, 30 мкг вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, 0,45 мг алюминия гидроксида (в 1 мл соответственно: 5 Lf дифтерийного анатоксина, 5 Lf столбнячного анатоксина, 60 мкг вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, 0,9 мг алюминия гидроксида).
Потребуется:
1
а) дифтерийного анатоксина (V) с титром 500 Lf/мл:
2
б) столбнячного анатоксина (V) с титром 500 Lf/мл:
3
в) бесклеточной коклюшной вакцины (V) с содержанием белка 1000 мкг/мл:
4
г) суспензии алюминия гидроксида (V) с содержанием алюминия 6,0 мг/мл:
5
е) 0,9% раствора натрия хлорида (V):
После выполнения расчетов проводят сорбцию компонентов вакцины: последовательно добавляют антигены в расчетных количествах к гелю гидроксида алюминия и тщательно перемешивают смесь в течение 20 минут после добавления каждого компонента. После соединения всех компонентов с гелем гидроксида алюминия добавляют стерильный апирогенный 0,9% раствор натрия хлорида до необходимого объема и доводят рН до 6,4-7,4.
Разработанный алгоритм приготовления аАКДС-М обеспечивает полноту сорбции на геле гидроксида алюминия всех компонентов на уровне не ниже 99%.
Препарат обладает высокой иммуногенной активностью: обеспечивает 100% резистентность иммунизированных морских свинок к 100 Dlm (минимальных летальных доз) дифтерийного тест-токсина; 80-100% резистентность иммунизированных белых мышей к 50 Dlm столбнячного тест-токсина; индуцирует образование коклюшных антител у 90-100% иммунизированных белых мышей.
Применение вакцинных препаратов может приводить к развитию сенсибилизации и аллергических реакций немедленного типа (ГНТ). Установлено, что сенсибилизирующий эффект бустерной вакцины аАКДС-М значимо меньше в сравнении с прототипом (АКДС-вакцина).
Кроме того, по содержанию бактериальных эндотоксинов, в основном определяющих реактогенность препаратов с цельноклеточным компонентом, предлагаемый состав вакцины аАКДС-М в отличие от прототипа содержит более чем в десять раз меньшее количество эндотоксических единиц в дозе и по данному показателю соответствует требованиям Европейской Фармакопеи (табл. 2).
Результаты проведенных испытаний показали, что комбинированная вакцина аАКДС-М по эффективности, безопасности, специфической активности полностью соответствует требованиям, предъявляемым Всемирной Организацией Здравоохранения к препаратам такого класса.