СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ВОЗНИКНОВЕНИЯ РАКА ЛЕГКОГО У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЛЕГКИХ
METHOD FOR PREDICTION OF ONSET OF LUNG CANCER IN PATIENTS WITH CHRONIC OBSTRUCTIVE PULMONARY DISEASE

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для прогнозирования развития рака легкого у больных хронической обструктивной болезнью легких во всех лечебных учреждениях пульмонологического профиля, в пульмонологических отделениях больниц, диспансеров и госпиталей, а также может использоваться при проведении массовых медицинских осмотров и диспансеризации больных.
Актуальность проблемы определяется тем, что в настоящее время количество больных раком легкого и число бронхолегочных заболеваний, особенно сопровождаемых обструкцией дыхательных путей, прогрессивно увеличивается.
В настоящее время известен ряд способов прогнозирования течения бронхолегочных заболеваний и рака легкого.
Известен способ прогнозирования течения хронических неспецифических воспалительных заболеваний бронхов путем подсчета аномальных клеток в биоптате слизистой оболочки бронхов (авторское свидетельство СССР № 1409944, 1988).
Известен способ прогнозирования течения неспецифических заболеваний легких, в котором исследуют бронхиальный секрет и/или мокроту с помощью микробиологических методов. Определяют количество условно патогенных бактерий, патогенных бактерий и грибов рода Candida, оценивая каждый показатель в баллах (патент РФ №2121675, 1998).
Прототипом данного изобретения является способ прогнозирования течения бронхолегочных заболеваний и рака легкого (патент РФ №2280868, 2006), включающий исследование конденсата влаги выдыхаемого воздуха, а согласно изобретению в конденсате влаги выдыхаемого воздуха определяют содержание натрия, калия, кальция и водородный показатель, и при сочетании уровней концентрации натрия 9,550±0,350 ммоль/л, калия 0,275±0,025 ммоль/л, кальция 0,221±0,012 ммоль/л и водородного показателя 7,078±0,172 единиц прогнозируют стадию ремиссии бронхолегочных заболеваний и исключают рак легкого, а при концентрации натрия 10,831±0,930 ммоль/л, калия 0,353±0,052 ммоль/л, кальция 0,175±0,033 ммоль/л и водородного показателя 6,384±0,521 единиц, если хотя бы один из определяемых показателей или любое их сочетание находятся в указанных пределах, прогнозируют стадию обострения бронхолегочных заболеваний или наличие рака легкого. Однако данный способ не позволяет диагностировать рак легкого у больных хронической обструктивной болезнью легких.
Задачей изобретения является разработка объективного и высокоинформативного способа прогнозирования развития рака легкого у больных хронической обструктивной болезнью (ХОБЛ).
Технический результат - повышение точности прогноза развития рака легкого у больных ХОБЛ.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом: в сыворотке крови больных хронической обструктивной болезнью легких, взятой натощак из вены, определяют содержание антител (иммуноглобулинов) острого периода к вирусам семейства Herpesviridae: класса М (IgM) к вирусу простого герпеса (ВПГ) типа 1 и 2; IgM - к цитомегаловирусу (ЦМВ); иммуноглобулинов классов G и М (IgG и IgM) к предраннему белку (IEA) цитомегаловируса, IgM к капсидному белку вируса Эпштейн-Барра (ВЭБ) и IgG к раннему антигену (ЕА) вируса Эпштейн-Барра методом ИФА. При выявлении антител острого периода к двум и более вирусам одновременно (наличии ассоциированности герпесвирусной инфекции) прогнозируют развитие рака легкого у больных хронической обструктивной болезнью легких.
Наборы реагентов, необходимых для исследования:
Тест-системы: «ВектоЦМВ-IgM» - к цитомегаловирусу;
«ВектоВПГ-IgM» - к вирусу простого герпеса типа 1 и 2;
«ВектоЦМВ-1ЕА-антитела» - IgG и IgM предраннему белку цитомегаловируса;
«ВектоВЭБ-VCA-IgM» - IgM к капсидному белку вируса Эпштейн-Барра;
«ВектоВЭБ-ЕА-IgG» - IgG к раннему антигену вируса Эпштейн-Барра.
Метод определения основан на твердофазном иммуноферментном анализе с применением моноклональных антител. На первой стадии анализа исследуемые и контрольные образцы, разведенные в 100 раз в объеме 100 мкл инкубируют в лунках планшета с иммобилизованными антигенами в течение 30 минут при температуре 37°С и происходит образование комплекса «антиген-антитело».
Не связавшийся материал удаляют отмывкой. Связавшиеся антитела выявляют при инкубировании в течение 30 минут при температуре 37°С с конъюгатом антител к IgM или IgG человека с пероксидазой хрена в объеме 100 мкл. После второй отмывки количество связавшегося конъюгата определяют цветной реакцией с использованием субстрата пероксидазы - перекиси водорода и хромогена - тетраметилбензидина (добавляют 100 мкл и инкубируют 25 минут при комнатной температуре в темноте). Реакцию останавливают добавлением 100 мкл стоп-реагента и через 2-3 минуты после остановки реакции измеряют оптическую плотность растворов в лунках на спектрофотометре вертикального сканирования в двухволновом режиме: при длине волны 450 нм, референс-волне в диапазоне 620-650 нм. Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна количеству содержащихся в исследуемом образце антител к определяемому виду вирусов в анализируемых пробах. После измерения оптической плотности раствора в лунках, на основании рассчитанного значения ОПкрит., анализируемые образцы оцениваются как положительные или отрицательные.
Рассчитают среднее арифметическое значение оптической плотности в лунках с отрицательным контрольным образцом (ОПсрК-).
На основании полученных данных вычисляют критическое значение оптической плотности (ОПкрит).
При наличии ассоциированности герпесвирусной инфекции - выявление антител острого периода к вирусам семейства Herpesviridae к двум и более вирусам одновременно прогнозируют развитие рака легкого у больных ХОБЛ.
Было произведено исследование, в котором в сыворотке крови практически здоровых лиц (группа контроля n=21), больных с ХОБЛ (n=30) и больных раком легкого, возникшего на фоне ХОБЛ (n=30), взятой натощак из вены, определяли содержание антител острого периода к вирусам семейства Herpesviridae: IgM к ВПГ типа 1 и 2; IgM - к ЦМВ; IgG и IgM к предраннему белку ЦМВ, IgM к капсидному белку ВЭБ и IgG к раннему антигену ВЭБ.
2
Оценка данных ассоциированности герпесвирусной инфекции (выявлены антитела к двум и более вирусам одновременно) показала достоверное увеличение показателя в группе больных ХОБЛ с раком легкого (23,3%) при соответствующем показателе в группе контроля 0% (соответственно χ=3,65 при р=0,05 OR=63,6). Сопоставление с данными при изолированном течении заболевания (9,1%) не выявил статистически значимую разницу. Таким образом, выявление антител к двум и более вирусам семейства Herpesviridae одновременно свидетельствует о том, что риск развития рака легкого увеличивается у больных ХОБЛ в 64 раза.
Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1.
В онкодиспансер поступил больной А., 50 лет (история болезни №1219), с жалобами на сухой кашель, одышку при физической нагрузке, чувство стеснения в грудной клетке, возникающее при физической нагрузке, отеки голеностопных суставов.
Считает себя больным в течение 2 лет, в течение которых отмечает постоянный кашель с небольшим количеством вязкой мокроты, одышку при физической нагрузке, месяц назад усилился кашель, кашель стал сухим, надсадным, усилилась одышка, появилось чувство стеснения в грудной клетке, отеки.
При осмотре наблюдается цианотическое окрашивание слизистых оболочек. Набухание вен шеи. Грудная клетка бочкообразной формы, горизонтальное направление ребер.
Число дыхательных движений в покое 18 в минуту.
При пальпации и перкуссии изменений не выявлено.
При аускультации выявлено ослабление дыхательных шумов, сухие хрипы во время спокойного дыхания.
Тоны сердца приглушены, акцент 2 тона на аорте, систолический шум у основания грудины. ЧСС 90 в минуту.
Органы желудочно-кишечного тракта: при пальпации печень выступает из-под края реберной дуги на 1 см, безболезненна.
Лабораторные данные: Выявлены антитела острого периода к ЦМВ, к ВЭБ. Обнаружена ассоциированность активации двух вирусов (ЦМВ, ВЭБ).
Рентгенография ОГК: R - признаки центрального рака с гиповентиляцией S3 левого легкого. Эмфизема легких.
Спирография: значительные нарушения бронхиальной проходимости. Значительное снижение ЖЕЛ. Значительное нарушение в состоянии аппарата вентиляции.
Пример 2. В терапевтическое отделение поступил больной М., 50 лет (история болезни №1130), с диагнозом: хроническая обструктивная болезнь легких.
Жалобы на постоянный кашель с небольшим количеством мокроты, усилившуюся одышку, возникающую при незначительной физической нагрузке, повышение температуры тела.
Объективно: кожные покровы и видимые слизистые цианотичные.
Набухание шейных вен. Грудная клетка бочкообразной формы.
При пальпации и перкуссии грудной клетки изменений не выявлено.
При аускультации: ослабление дыхательных шумов, сухие хрипы.
Сердечно-сосудистая система: тоны сердца приглушены.
Лабораторные данные: Обнаружены антитела к ЦМВ.
Рентгенография ОГК: Хронический обструктивный процесс. Эмфизема. Единичные бронхоэктазы.
Спирография: Значительное снижение ЖЕЛ. Умеренная обструкция дистальных бронхов. ОФВ1 - 55,44%, ЖЕЛ - 45%, ФЖЕЛ - 61. Значительное нарушение в состоянии аппарата вентиляции.
ФБС: Субатрофический эндобронхит.
Предлагаемый способ современен и позволяет прогнозировать развитие рака легкого у больных хронической обструктивной болезнью легких - выявление антител острого периода одновременно к нескольким вирусам семейства Herpesviridae повышает риск развития рака легкого у больных ХОБЛ в 64 раза.