КУЛЬТИВИРОВАННЫЕ МЕЛАНОЦИТЫ НА БИОПОЛИМЕРАХ

1. Композиция трансплантата, способная к стимулированию пигментации в коже, которая содержит клетки-меланоциты, полученные из аутологичного эпидермиса, и биополимерную мембрану, в которой по меньшей мере 75% клеток остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 72 ч в условиях транспортировки при температуре от 5 до 37°C.
2. Композиция по п.1, в которой по меньшей мере 80% клеток остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 96 ч в условиях транспортировки при температуре от 5 до 37°C.
3. Композиция по п.1, в которой композиция дополнительно содержит клетки-кератиноциты.
4. Композиция по п.3, при этом в композиции клеток меланоцитов и кератиноцитов они присутствуют на биополимерной мембране в соотношении от 0,8:2 до 1:1.
5. Композиция по п.1, в которой клетки присутствуют в виде монослоя на биополимерной мембране.
6. Композиция по п.5, в которой указанный монослой представляет собой субконфлуэнтный монослой.
7. Композиция по п.1, в которой клетки-меланоциты способны к дополнительной пролиферации.
8. Композиция по п.1, в которой по меньшей мере 90% клеток являются активно пролиферирующими меланоцитами.
9. Композиция по п.1, в которой биополимерную мембрану выбирают из группы, состоящей из полимолочной кислоты (ПМК), полигликолевой кислоты (ПГК) и сополимера полимолочной-полигликолевой кислоты (ПМГК), имеющих молекулярную массу по меньшей мере 50000 Да.
10. Композиция по п.1, в которой биополимерная мембрана представляет собой полимолочную кислоту (ПМК).
11. Композиция по п.1, в которой жизнеспособные клетки-меланоциты присутствуют в достаточном количестве, чтобы получаемая композиция обладала терапевтическим эффектом против гипопигментационого заболевания кожи.
12. Способ изготовления композиции по п.1, содержащий этапы:
а) выделение клеток-меланоцитов из аутологичного эпидермиса;
b) изготовление суспензии клеток, содержащей выделенные клетки-меланоциты;
c) рост клеток-меланоцитов;
d) необязательно, криоконсервирование клеток-меланоцитов;
e) необязательно, оттаивание клеток-меланоцитов;
f) посев клеток-меланоцитов клетки на биополимерную мембрану;
g) рост клеток в субконфлуэнтном монослое на биополимерной мембране; и
h) транспортировка биополимерной мембраны с использованием транспортировочного устройства, содержащего транспортировочную среду;
в котором по меньшей мере 75% клеток остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 72 ч в условиях транспортировки.
4
5
2
13. Способ по п.12, в котором биополимерная мембрана содержит полимолочную кислоту (ПМК), и клетки-меланоциты высевают на биополимерную мембрану при концентрации клеток от 1·10 до 1·10 клеток/см.
14. Способ по п.12, в котором транспортировочное устройство содержит поликарбонат.
15. Способ по п.12, в котором транспортировочная среда содержит среду, обогащенную углекислым газом.
16. Способ по п.12, в которой транспортировочной средой является среда KSFN.
17. Способ лечения субъекта, нуждающегося в пигментации кожи, содержащий применение композиции по п.1 у человека, при котором указанная композиция увеличивает скорость эпидермальной регенерации в коже человека.
18. Способ по п.17, в котором субъект является человеком.
19. Способ по п.17, в котором субъект, нуждающийся в пигментации кожи, страдает витилиго.
20. Композиция, содержащая субконфлуэнтный монослой клеток-меланоцитов и биополимерную мембрану, в которой по меньшей мере 75% клеток остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 72 ч в условиях транспортировки при температуре от 5 до 37°C.
21. Композиция, содержащая субконфлуэнтный монослой меланоцитов, культивируемых совместно с кератиноцитами, и биополимерную мембрану, в которой по меньшей мере 75% клеток-меланоцитов остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 72 ч в условиях транспортировки при температуре от 5 до 37°C.
22. Композиция по п.21, в которой меланоциты сокультивируют с кератиноцитами в соотношении 1:1.
23. Композиция, содержащая (1) субконфлуэнтный монослой клеток-кератиноцитов, содержащий недифференцированные клетки, и (2) биополимерную мембрану, в которой по меньшей мере 75% клеток остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 72 ч в условиях транспортировки при температуре от 5 до 37°C.
24. Способ лечения гипопигментации у субъекта, предусматривающий использование биополимерной мембраны в качестве системы доставки, и доставка на кожу субконфлуэнтного монослоя меланоцитов.
25. Способ лечения гиперпигментации у субъекта, предусматривающий использование биополимерной мембраны в качестве системы доставки, и доставка на кожу субконфлуэнтного монослоя меланоцитов.
26. Набор для лечения витилиго, при этом набор содержит (1) композицию, содержащую (a) субконфлуэнтный монослой клеток-меланоцитов и (b) биополимерную мембрану, в которой монослой находится на биополимерной мембране; и (2) транспортировочное устройство, в котором по меньшей мере 75% клеток-меланоцитов остаются жизнеспособными в композиции в течение по меньшей мере 72 ч в условиях транспортировки при температуре от 5 до 37°C.
27. Композиция трансплантата, способная стимулировать пигментацию в коже, содержащая клетки-меланоциты, полученные из аутологичного эпидермиса, и биополимерную мембрану, ее способы и набор согласно предшествующим пунктам, описанные, по существу, в настоящем изобретении, и иллюстрированные, по существу, в настоящем изобретении с помощью примеров и числовых данных.