Роль гипергомоцистеинемии в риске возникновения артериальной гипертонии и осложнений у лиц казахской национальности

А. У. Джолдасбекова

РОЛЬ ГИПЕРГОМОЦИСТЕИНЕМИИ В РИСКЕ ВОЗНИКНОВЕНИЯ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ И ОСЛОЖНЕНИЙ У ЛИЦ КАЗАХСКОЙ НАЦИОНАЛЬНОСТИ

НИИ кардиологии и внутренних болезней МЗ РК

Исследование кандидатных генов при изучении заболеваний, имеющих мультифакториаль-ную природу, в том числе артериальной гипертонии (АГ), является актуальным направлением геномной медицины [6]. Одним из генетических маркеров сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) является ген 5, 10 - метилен-тетрагидрофолат-редуктазы (MTHFR). Установлена связь наследственного дефицита MTHFR с нарушением обмена гомоцистеина [4], но результаты работ, посвященных оценке связи полиморфизма гена с развитием ССЗ, неоднозначны и противоречивы [4, 10, 13]. Поэтому значительный интерес представляет изучение полиморфизма С677Т гена MTHFR у здоровых и больных артериальной гипертонией, проживающих в Казахстане, сопоставление с уровнем гомоцистеина плазмы крови и маркеров повреждения эндотелия сосудов у больных АГ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Обследовано 120 лиц казахской национальности, поступивших в кардиологическое отделение ННМЦ г.Астаны с диагнозом артериальной гипертонии 2-3 степени, риск 2-4, без сопутствующих заболеваний и не состоящих в родстве. Средний возраст больных - 47,0±0,7 г. В исследование не включались пациенты с клиническими проявлениями ИБС, симптоматической АГ, сахарным диабетом, а также с признаками острых или обострение хронических воспалительных или инфекционных заболеваний.

В контрольную группу были включены 80 практически здоровых лиц без клинических проявлений сердечно-сосудистых заболеваний, без отягощенной наследственности по вышеуказанному заболеванию, с нормальными показателями ЭхоКг, ЭКГ и нагрузочных проб, средний возраст - 42,5±0,9 г.

В исследуемых группах был произведен забор крови из локтевой вены в объеме 5-10 мл в стерильные пластиковые пробирки, содержащие 100 мкл 0.5М ЭДТА рН 8.0 в качестве антикоагулянта. Собранная таким образом кровь замораживалась и хранилась при -20°С.

ДНК выделяли из лейкоцитов крови стандартным фенол хлороформным методом [2]. Для амплификации необходимого фрагмента гена MTHFR использовали два праймера (9): 5'-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3' 5'-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3' Определение концентрации гомоцистеина (ГЦ) в плазме крови проводилось методом

иммуноферментного анализа на аппарате «Anthos -2020», а исследование параметров сис-темы гемостаза - в лаборатории генетики с биохимической и иммунологической диагностикой НИИ кардиологии и внутренних болезней МЗ РК. Измерение показателей плазменного гемостаза (уровень фибриногена (ФГ), фактора Виллебранда (ФВБ), ингибитора активатора плазминогена - 1 (ИАП-1)) определялось на автоматическом анализаторе Behring Coagulation Timer (ВСТ) с использованием реактивов, калибраторов, стандартных и контрольных материалов фирмы Behring, Германия. Количественное определение СРБ проходило на биохимическом анализаторе «Hitachi - 902» реактивами фирмы «Roche». Определение ИЛ-6 и ИЛ-10 проводилось методом иммуноферментного анализа. Определение концентрации молекул клеточной адгезии (Е-селек-тина, ICAM-1) проведены методом иммуноферментного анализа на аппарате «Anthos-2020».

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета статистических программ SPSS 11.0. Наблюдаемое распределение генотипов проверяли на соответствие равновесия Харди-Вайнберга. Достоверность анализа частотного распределения аллелей и генотипов полиморфизма гена FGB оценивали с помощью критерия с2. Достоверность различий сравниваемых величин оценивали критериями Стьюдента и достоверными считали различия при Р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В табл. 1 отражены данные сравнительного анализа распределения частоты аллелей и генотипов гена MTHFR у больных и здоровых жителей Казахстана. Достоверность анализа частотного распределения аллелей и генотипов полиморфизма С677Т гена MTHFR оценивали с помощью критерия с2. Как и ожидалось, большинство обследованных являлись носителями СС генотипа, у оставшихся определены СТ и ТТ генотипы. Лица с генотипом ТТ встречались редко, у всех обследованных превалировал С аллель. У казахов, больных АГ, частота генотипа СС встречалась в 2,3 раза чаще, чем частота генотипа СТ, и в 9,7 раз чаще, чем частота генотипа ТТ (65%, 28,3% и 6,7%, соответственно). Аллель С (79,2%) встречался в 3,8 раза чаще, чем аллель Т (20,8%).

Среди практически здоровых казахов прослеживается аналогичное частотное распределение генотипов: СС почти в 1,8 раз чаще встречался СТ и в 8 раз чаще ТТ (60%, 32,5% и 7,5%, соответственно). Аллель С (76,3%) обнаружен в 3,2 раза чаще, чем аллель Т (23,7%). Сравнения частотного распределения генотипов и аллелей гена MTHFR у больных АГ и практически здоровых казахов представлено в табл. 1. Различия статистически не значимые (с2=0,09, P=0,77 и с2=0,07, P=0,79, соответственно).

Изучение полиморфизма С677Т гена MTHFR у лиц казахской национальности установило отсутствие взаимосвязи данного гена с раз-

Таблица 1.

Генотипы и аллели гена MTHFR у больных АГ и здоровых лиц казахской национальности

Генотип Больные АГ Здоровые Р

п=120 частота п=80 частота

СС 78 65% 48 60% С2=0,09 P=0,77

СТ 34 28,3% 26 32,5%

ТТ 8 6,7% 6 7,5%

Аллели

С 190 79,2% 122 76,3% С2=0,07 P=0,79

Т 50 20,8% 38 23,7%

витием заболевания. Так, в работе Rodrigues-Esparragon F. с соавт., генотип изучался у 223 здоровых доноров и 235 пациентов с артериальной гипертонией [14]. Обнаружена достоверная связь ТТ-генотипа с Аг у мужчин (р=0,022). В то же время в австралийском исследовании Heux S с соавт., где генотип изучали у 250 больных АГ и у 250 пациентов контрольной группы, более часто выявлен мутантный аллель Т при АГ (40%), чем в контрольной группе (34%), однако данные различия недостоверны (р=0,07) [13]. Генотип Тт в данном исследовании так же чаще отмечался при АГ, чем в контроле (14% и 10%, соответственно), однако различия недостоверны (р=0,17). Обнаружено, что С677Т мутация MTHFR обеспечивает умеренное повышение риска АГ на фоне ожирения (р=0,03). В китайской популяции при обследовании 127 больных АГ и 170 пациентов контрольной группы связи генотипа с АГ не обнаружено [9].

Таким образом, полученные нами данные согласуются с теми данными литературы, где указывается на недостоверную связь мутации С677Т гена MTHFR с артериальной гипертензией.

Механизмы влияния гомоцистеина на процесс развития сердечно-сосудистых заболеваний осуществляются по нескольким биохимическим каналам и в значительной степени связаны с эндотелиальной дисфункцией [3]. В связи с этим мы провели анализ средних значений показателей эндотелиального повреждения с различными генотипами (СС, СТ, ТТ) гена MTHFR у лиц казахской национальности (табл. 2).

Анализ маркеров воспаления и эндотели-ального повреждения у больных АГ казахов по генотипам в группах (СС, СТ, ТТ) гена MTHFR (табл. 2) показало, что уровень гомоцистеина с высокой достоверностью различался в сравниваемых группах, причем наибольшим был при генотипе ТТ, что почти в 2 раза выше, чем при гено-

Таблица 2.

Связь генотипа гена MTHFR с маркерами воспаления и эндотелиального повреждения среди больных АГ

Показатель СС п=78 (1) СТ п=34 (2) ТТ п=8 (3) Р1-2 Р2-3 Р1-3

Гомоцистеин, мкмоль/л 12,8+0,55 19,9+0,9 27,8+2,2 <0,001 <0,001 <0,001

ИАПГ-1, ммоль/л 5,12+0,41 7,30+0,62 8,15+0,95 <0,05 >0,05 <0,05

ФВБ, % 145,5+4,5 165,4+9,3 194,4+6,7 <0,05 >0,05 <0,05

1САМ, нг/мл 350,8+4,8 368,8+11,2 383,4+5,7 <0,05 >0,05 <0,05

Е-селектин, нг/мл 57,5+3,4 63,2+4,29 71,2+8,8 >0,05 >0,05 <0,05

ИЛ-6, пг/мл 51,8+2,5 65,3+6,7 67,6+10,2 <0,05 >0,05 <0,05

ИЛ-10, пг/мл 100,5+5,9 53,6+7,8 41,4+5,9 <0,05 >0,05 <0,001

вчСРБ, мг/дл 13,2+1,6 15,7+1,5 14,2+1,1 >0,05 >0,05 >0,05

Фибриноген, г/л 3,40+0,16 4,05+0,19 5,23+0,14 <0,05 <0,05 <0,001

Р1-2 - достоверность различий маркеров воспаления и эндотелиального повреждения у больных с генотипами СС и СТ, Р2-3 - достоверность различий маркеров воспаления и эндотелиального повреждения у больных с генотипами СТ и ТТ, Р1-3 - достоверность различий маркеров воспаления и эндотелиального повреждения у больных с генотипами СС и ТТ.

типе СС, и 1,5 раза выше гетерозиготного генотипа СТ (14,8±0,55мкмоль/л, 19,9±0,9 мкмоль/л и 27,8±2,2 мкмоль/л, соответственно, Р<0,001). У больных с генотипом, содержащих Т аллель (СТ и ТТ), уровни ИАПГ-1,ФВБ, 1САМ были значительно выше в сравнении с пациентами с генотипом СС и данное различие статистически значимое (Р<0,05). Показатели Е-селектина при генотипе ТТ значительно больше в сравнении с генотипами СС и СТ (57,5 ±3,4 нг/мл, 63,2±4,29 нг/мл, и 71,2±8,8 нг/мл соответственно, Р<0,05).

При сопоставлении маркеров воспаления больных АГ в зависимости от полиморфизма гена MTHFR установлено, что у казахов с генотипом ТТ показатели ИЛ-6 были достоверно повышены по сравнению с гомозиготами СС (51,8±2,5 пг/ мл) и гетерозиготами СТ (65,3±6,7 пг/мл) и составляли (67,6±10,2 пг/мл, Р<0,05). Аналогичная закономерность обнаружена и для фибриногена: наибольшие показатели обнаружены при генотипе ТТ (5,23±0,14 г/л), наименьшие - СС (3,40±0,16 г/л) и средние - СТ генотипах (4,05±0,19 г/л). Уровень противовоспалительного маркера ИЛ-10 был наибольшим при гомозиготном генотипе по С аллели (СС - 100,5±5,9 пг/ мл), средним - СТ генотипе (53,6±7,8 пг/мл) и наименьшим при ТТ генотипе (41,4±5,9 пг/мл, Р<0,001). В отношении уровней вчСРБ у казахов генотипы, содержащие Т аллели (СТ, тТ), имели тенденцию к более высоким уровням в сравнении с гомозиготами по С аллели (СС) , но различия статистически незначимые.

В исследовании наибольшие значения го-моцистеина наблюдались у больных с ТТ генотипом гена MTHFR, наименьший уровень гомоци-стеина, находившийся в пределах нормы, был определен у лиц с генотипом СС, гетерозиготы (СТ) занимали промежуточное положение. Такая взаимосвязь между генотипом гена MTHFR и уровнем гомоцистеина объясняется снижением активности фермента при мутации - замене ци-тозина и тимина в положении 677 приводит к нарушению термолабильности фермента, нарушению метаболизма гомоцистеина, в результате чего он накапливается в плазме [4]. Данная закономерность проявляется в различных европей-

ских популяциях [7]. Взаимосвязь между повышением уровня гомоцистеина и гена MTHFR с АГ изучено в ряде исследованиях [5, 9, 10, 14]. Группой ученых из Японии было показано, что у пациентов из японской популяции с повторными инфарктами миокарда частота мутантного аллеля Т (0,56) была значительно связана с заболеванием и генотип ТТ коррелировал с повышенным уровнем гомоцистеина в плазме [4, 12]. Нами был проведен однофакторный анализ связи гена MTHFR с перенесенным в анамнезе ишемическим инсультом (табл. 3).

У пациентов с отсутствием связи с ОНМК чаще встречается генотип СС и аллель С677. Мутантный генотип ТТ встречается исключительно у пациентов с перенесенным ОНМК, и соответственно мутантная аллель 677Т в 2,5 раза чаще встречается в данной группе, различия статистически значимые (с2=7,01, Р=0,03 и с2=8,8, Р=0,003 соответственно).

У больных АГ казахской национальности носительство мутантной аллели 677Т и генотипа ТТ ведет к риску развития инсульта. Аналогичные данные получены О. В. Сироткиной (2003). У мужчин русской популяции развитие ишемичес-кого инсульта возрастает при носительстве аллели 677Т гена MTHFR [1]. У жителей Китая получены данные о взаимосвязи С677Т гена MTHFR с риском инсульта [9]. А вот и. Nowak-Gottl с соавт. отмечают высокую частоту ТТ генотипа гена MTHFR в случае спонтанного ишемиче-ского инсульта у детей [11].

Мы показали статистически значимое накопление частоты Т677 аллеля гена MTHFR у больных АГ, перенесших инсульт, по сравнению с лицами без инсульта. Л. С. ^етЬеге с соавт. (2000) показали, что даже небольшое увеличение гомоцистеина, в пределах нормальных физиологических колебаний, индуцирует дисфункцию эндотелия сосудов [8]. В артериальном тромбозе роль пускового фактора играет повреждение эндотелия. Одним из агентов, индуцирующих повреждение стенки сосуда, является гомоцистеин [9, 10, 12]. Л. Н. Yoo et а1. показали, что умеренная гипергомоцистеинемия является независимым фактором риска развития церебрального инфарк-

Генотипы Нет связи с ОНМК Есть связь с ОНМК

п % п %

СС 40 54,1 34 45,9

СТ 12 35,3 22 64,7

ТТ 0 0 8 100

Аллели

С 92 88,5 90 70,3

Т 12 11,5 38 29,7

С2, Р

С2=7,01 Р=0,03

С2=8,8

Р=0,003

Таблица 3.

Однофакторный анализ связи гена MTHFR с перенесенным в анамнезе ОНМК

та и церебрального атеросклероза [15].

У больных АГ казахской национальности носительство мутантной аллели Т677 и гомозиготного генотипа ТТ гена MTHFR ассоциирует с высокими показателями гомоцистеина в плазме крови. Гипергомоцистеинемия приводит к изменению синтеза окиси азота, повышению атеро-генных липидов, нарушению вазоконстрикции и повреждению эндотелия, которая сопровождается повышением маркеров повреждения эндотелия сосудов, повышению факторов воспаления и снижению противовоспалительных факторов. ВЫВОДЫ

1. Распределение генотипов и аллелей полиморфного маркера С (-677)Т гена MTHFR достоверно не отличаются у больных артериальной гипертонией и практически здоровых лиц казахской национальности и совпадают с таковыми в популяции.

2. Мутация С (-677)Т гена MTHFR у больных АГ казахов не увеличивает риск развития артериальной гипертонии, но ассоциирует с гипергомоцистеинемией и повреждением эндотелия сосудов.

3. Полиморфизм С (-677)Т гена MTHFR у больных АГ является генетическим маркером развития ишемического инсульта у лиц с отягощенной наследственностью в данной этнической группе.

ЛИТЕРАТУРА

1. Генетические нарушения коагуляционного каскада и обмена гомоцистеина в генезе церебрального тромбоза /О. В. Сироткина, Ю. В. Черкас, А. В. Меркулова и др. //Мед. академ. журн. -2004. - Т. 4, №4. - С. 23 - 27.

2. Маниатис Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. - Мир, 1084. - С. 480.

3. Спиридонов М. Г. О роли полиморфных вариантов гена 5,10-етилентетрагидрофолатредук-тазы (MTHFR) в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний /М. Г. Спиридонов, В. А. Степанов,

B. П. Пузырев //Клин. медицина. - 2001. - №2. -

C. 10 - 16.

4. A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylenetetra-hydrofolate reductase /P. Frosst, H. J. Blom, R. Milos et al. //Nat. Genet. - 1995. - V. 10. - P. 111 -113.

5. A case-control study on the relationship between abnormal homocysteine metabolism and essential hypertension /S. Zhan, Y. Gao, X. Yin et al. //Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. - 2000. - V. 21, №3. - P. 194 - 197.

6. Beaudet A. Making genomic medicine a reality. -Am. J. Hum.Genet. - 1999. - V. 64. - P. 1 - 13.

7. C677T (thermo labile alanine/valine) polymorphism in methylentetrahydrofolate reductase (MTHFR): its frequency and impact on plasma homocysteine concentration in different European populations /V. Gudnason, D. Stansbie, J. Scott et al. // Atherosclerosis. - 1998. - V. 136. - P. 347 - 354.

8. Chambers J. C. Physiological increments in plasma homocysteine induce vascular endothelial dysfunction in normal human subjects /J. C. Chambers, O. A. Obeid, J. S. Kooner //Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2000. - V. 20. - P. 185 - 188.

9. Elevated Plasma Homocysteine Was Associated With Hemorrhagic and Ischemic Stroke, but Methylene tetrahydrofolate Reductase Gene C677T Polymorphism Was a Risk Factor for Thrombotic Stroke. A Multicenter Case-Control Study in China /Z. Li, L. Sun, H. Zhang et al. //Stroke. - 2003.

- V. 34. - P. 2085.

10. Effect of C677Tmethylen tetrahydrofolate reductase gene polymorphism on plasma homo-cysteine cysteine levels in ethnic groups /J. Gas-parovic, K. Raslova, Z. Basistova et al. //Physiol. Res. - 2004. - V. 53, №2. - P. 215 - 218.

11. Lipoprotein (a) and genetic polymorphisms of clotting factor V, protrombin, and methylentetrahy-drofolate reductase are risk factor of spontaneous ischemic stroke in childhood /U. Nowak-Gottl, R. Strater, A. Heinecke et al. //Blood. - 1999. - V. 94.

- P. 3678 - 3682.

12. Methylenetetrahydrofolate reductase gene polymorphism and ischemic stroke in Japanese. /H. Morita, H. Kurihara, S. Tsubaki et al. // Arterioscleros. Thrombos. Vase. Biol. - 1998. - V. 18. - Р. 1465 - 1469.

13. The methylentetrahydrofolate reduc-tase gene variant (C677T) as a risk factor for essential hypertension in Caucasians /S. Heux, F. Morin, R. A. Lea et al. //Hyper. Res. - 2004. - V. 27, №9.

- P. 663 - 667.

14. The effect of methylenetetrahydrofolate reductase C677T common variant on hypertensive risk is not solely explained by increased plasma ho-mocysteine values /P. Rodriguez-Esparragon, O. Hernandez-Perem, J. C. Rodriguez-Perez et al. // Clin. Exp. Hyper. - 2003. - V. 25, №4. - P. 209 -220.

15. Yoo J. Relation of plasma homocysteine to cerebral infarction and cerebral atherosclerosis /J. Yoo C. S. Chang, S. S. Kang //Stroke. - 1998. - V. 29. -P. 2478 - 2483.

Поступила 05.05.08

A. U. Joldasbekova

THE ROLE OF С677Т POLYMORPHISM MTHFR GENE IN DEVELOPMENT OF ESSENTIAL HYPERTENSION IN KAZAKH SUBJECTS

The aim of our investigation was to study the association between MTHFR gene C677T polymorphism and development of essential hypertension diseases in Kazakh subjects. 200 subjects of Kazakh nationality were examined, 120 of them suffered essential hypertension, and 80 subjects are healthy, normotensive men. The frequency of 677TT genotype and 677T allele gene MTHFR in patient was significantly associated with the cerebral infarction and the higher level of blood homocystein induced vascular endothelial dysfunction in comparance with normotensive group.

d. 6. Жолдасбекова

КАЗАК ¥ЛТЫНЬЩ ЕР АДАМДАРЫНДА ЦАН КЫСЫМЫ АУРУЫНЬЩ ДАМУЫНДАРЫ С677Т MTHFR ГЕН1НЩ ПОЛИМОРФИЗМ1

Жумыстык максаты: С677Т MTHFR геншщ полиморфизм^щ казак ултынык ер адамдарындары кан кысымы ауруынык дамуымен байланысын зерттеу. Зерттеуге 200 казак ултынык ер адамдары алынды. Олардык 120-i кан кысымы ауруы. Сау адамдар тобы 80 казак ултты ер адамдары. Барлык зерттелген адамдарда С677Т MTHFR генiнiк генотипi аныкталды. Зерттеу нэтижесiнде жалпы зерттелген топ арасында С677Т MTHFR генiнiк полиморфизмшщ кан кысымы ауруы дамуымен байланысы аныкталран жок. Бiрак 677Т аллель жэне 677ТТ генотиптерi ауру адамдар тобында плазмадары гомоцистеин жэне эндотелия бу-зылыс маркерлар жорары корсетюшке тенейдi. Бул казак ултынык адамдарынык арасында С677Т MTHFR генi мутация 677Т аллелшщ кан кысымы ауруына жэне ишемиялык инсультке экелетiн рол^ аныктайды.

М. Ю. Любченко, М. А. Сисембина

ОСОБЕННОСТИ ДЕПРЕССИВНЫХ СИНДРОМОВ В СТРУКТУРЕ ШИЗОФРЕНИИ

Карагандинская государственная медицинская академия, психоневрологический диспансер

Общественное психическое здоровье является индикатором интеллектуального и нравственного состояния общества, его духовного потенциала.

Среди психических заболеваний шизофрения и расстройства шизофренического спектра имеют особую значимость и актуальность, обусловленную тем, что расстройства, свойственные шизофрении, поражают фундаментальные функции, которые в норме придают человеку чувство своей индивидуальности, неповторимости и целенаправленности [6].

Наряду с психопатологическими симптомами, характеризующими расстройства восприятия, мышления, двигательно-волевой сферы, сознания при шизофрении широко представлены и аффективные нарушения. Депрессивные расстройства могут иметь место практически при любом типе и при любой форме течения заболевания. Проблема взаимосвязи депрессии и шизофрении издавна была предметом оживленной дискуссии в психиатрии [7, 9]. При этом исследования проводились в двух направлениях: при сочетании депрессии с продуктивной симптоматикой и при сочетании депрессии с дефицитар-ной симптоматикой. Развитие депрессивной симптоматики при шизофрении может повышать частоту обострений болезни, увеличивать продолжительность приступов и повышать риск суи-

цидального поведения [8, 10]. Механизм возникновения депрессии при шизофрении остается не до конца выясненным. Предполагается, что антипсихотическая терапия, редуцируя продуктивную симптоматику, как бы «отфильтровывает» лежащую под ней эндогенную депрессию. Сами нейролептики могут играть важную роль в ее развитии (известны так называемые аминазино-вые депрессии, характеризующиеся значительной глубиной и суицидальным риском). Кроме того, в развитии депрессии могут участвовать и реактивно-личностные механизмы (реакция на наличие тяжелого хронического заболевания). При шизофрении депрессия может носить и вторичный характер и быть вызвана различными соматическими заболеваниями, органическими и медикаментозными факторами, употреблением алкоголя. К этому следует добавить возможность развития психогенных депрессий вследствие явлений длительной госпитализации [2, 3, 4] (табл. 1).

Основной проблемой при этом является дифференциация депрессий с негативными процессуальными расстройствами, которые включают в себя такие феноменологически сходные состояния, как недостаточность инициативы, падение энергетического потенциала, апатоабу-лические нарушения, эмоциональное уплощение, бедность ассоциативного мышления и речевой продукции, аутизм.

Специально разработанные диагностические школы (SANS, PANSS, PSE) способны дифференцировать эти феномены и отличить их от нейролептической экстрапирамидной акинетической симптоматики. Негативные феномены больше коррелируют с такими депрессивными чертами, как моторная заторможенность, чем с когнитивными чертами, такими как пониженное