СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ CAR-T-КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ

1. Способ лечения злокачественной опухоли, включающий
i) введение пациенту первой дозы соединения или его фармацевтически приемлемой соли, где соединение содержит низкомолекулярный лиганд, связанный с нацеливающей группой посредством линкера;
ii) введение пациенту композиции CAR-T-клетки, где CAR-T-клетка содержит CAR, направленный на нацеливающую группу;
ii) введение пациенту второй дозы соединения или его фармацевтически приемлемой соли, где вторая доза отличается от первой дозы; и
iv) лечение пациента для облегчения состояния при злокачественной опухоли.
2. Способ по п. 1, где лиганд выбран из фолата, DUPA, лиганда CAIX, лиганда NK-1R, лиганда гамма-глутамилтранспептидазы и лиганда CCK2R.
3. Способ по п. 1, где лиганд представляет собой фолат.
4. Способ по п. 1, где лиганд представляет собой лиганд NK-1R.
5. Способ по п. 1, где лиганд представляет собой DUPA.
6. Способ по п. 1, где лиганд представляет собой лиганд CCK2R.
7. Способ по п. 1, где лиганд представляет собой лиганд гамма-глутамилтранспептидазы.
8. Способ по п. 1, где нацеливающая группа выбрана из 2,4-динитрофенола (DNP), 2,4,6-тринитрофенола (TNP), биотина, дигоксигенина, флуоресцеина, изотиоцианата флуоресцеина (FITC), NHS-флуоресцеина, пентафторфенильного сложного эфира (PFP), тетрафторфенильного сложного эфира (TFP), ноттина, центирина и дарпина.
9. Способ по п. 1, где нацеливающая группа представляет собой FITC.
10. Способ по п. 1, где нацеливающая группа представляет собой DNP.
11. Способ по п. 1, где нацеливающая группа представляет собой TNP.
12. Способ по любому из пп. 1-11, где линкер содержит полиэтиленгликоль (PEG), полипролин, гидрофильную аминокислоту, сахар, неприродный пептидогликан, поливинилпирролидон и/или плюроник F-127.
13. Способ по п. 12, где линкер содержит PEG.
14. Способ по п. 1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль, первый конъюгат или его фармацевтически приемлемая соль, или второй конъюгат или его фармацевтически приемлемая соль имеет формулу
где В представляет собой низкомолекулярный лиганд, L представляет собой линкер, и Т представляет собой нацеливающую группу, и где L содержит структуру, имеющую формулу
где n представляет собой целое число от 0 до 200.
15. Способ по п. 14, где n представляет собой целое число от 0 до 150.
16. Способ по п. 14, где n представляет собой целое число от 0 до 110.
17. Способ по п. 14, где n представляет собой целое число от 0 до 20.
18. Способ по п. 14, где n представляет собой целое число от от 15 до 20.
19. Способ по п. 14, где n представляет собой целое число от от 15 до 110.
20. Способ по п. 1, где линкер содержит PEG, и нацеливающая группа представляет собой FITC или его фармацевтически приемлемую соль.
21. Способ по любому из пп. 1-20, где доза соединения или его фармацевтически приемлемой соли составляет от приблизительно 10 нмоль/кг до приблизительно 3000 нмоль/кг массы тела пациента.
22. Способ по любому из пп. 1-20, где доза соединения или его фармацевтически приемлемой соли составляет от приблизительно 50 нмоль/кг до приблизительно 2000 нмоль/кг массы тела пациента.
23. Способ по любому из пп. 1-20, где доза соединения или его фармацевтически приемлемой соли составляет от приблизительно 100 нмоль/кг до приблизительно 1000 нмоль/кг массы тела пациента.
24. Способ по любому из пп. 1-20, где доза соединения или его фармацевтически приемлемой соли, первого конъюгата или его фармацевтически приемлемой соли, или второго конъюгата или его фармацевтически приемлемой соли составляет от приблизительно 100 нмоль/кг до приблизительно 600 нмоль/кг массы тела пациента.
25. Способ по любому из пп. 1-20, где доза соединения или его фармацевтически приемлемой соли составляет от приблизительно 200 нмоль/кг до приблизительно 500 нмоль/кг массы тела пациента.
26. Способ по любому из пп. 1-20, где доза соединения или его фармацевтически приемлемой соли, первого конъюгата или его фармацевтически приемлемой соли, или второго конъюгата или его фармацевтически приемлемой соли составляет от приблизительно 250 нмоль/кг до приблизительно 500 нмоль/кг массы тела пациента.
27. Способ по любому из пп. 1-20, где злокачественная опухоль выбрана из рака легкого, рака кости, рака поджелудочной железы, рака кожи, рака головы, рака шеи, меланомы кожи, внутриглазной меланомы, рака тела матки, рака яичника, рака эндометрия, рака прямой кишки, рака желудка, рака толстого кишечника, рака молочной железы, трижды отрицательного рака молочной железы, карциномы фаллопиевых труб, карциномы эндометрия, карциномы шейки матки, карциномы влагалища, карциномы вульвы, болезни Ходжкина, рака пищевода, рака тонкого кишечника, злокачественной опухоли эндокринной системы, злокачественной опухоли щитовидной железы, злокачественной опухоли паращитовидной железы, немелкоклеточного рака легкого, злокачественной опухоли надпочечника, саркомы мягких тканей, злокачественной опухоли мочеиспускательного канала, рака предстательной железы, хронического лейкоза, острого лейкоза, лимфоцитарной лимфомы, мезотелиомы плевры, рака мочевого пузыря, лимфомы Беркитта, злокачественной опухоли мочеточника, рака почки, почечноклеточного рака, карциномы почечной лоханки, неоплазий центральной нервной системы (ЦНС), первичной лимфомы ЦНС, опухолей спинного мозга, глиомы ствола головного мозга, аденомы гипофиза и аденокарциномы желудочно-пищеводного соединения.
28. Способ по п. 27, где злокачественная опухоль представляет собой рак эндометрия.
29. Способ по п. 27, где злокачественная опухоль представляет собой немелкоклеточный рак легкого.
30. Способ по п. 27, где злокачественная опухоль представляет собой рак яичника.
31. Способ по п. 27, где злокачественная опухоль представляет собой трижды отрицательный рак молочной железы.
32. Способ по любому из пп. 1-20, где CAR имеет узнающую область, и узнающая область представляет собой одноцепочечный фрагмент вариабельной области (scFv) антитела.
33. Способ по любому из пп. 1-9 или 12-20, где CAR имеет узнающую область, и узнающая область CAR представляет собой одноцепочечный фрагмент вариабельной области (scFv) антитела против FITC.
34. Способ по любому из пп. 1-20, где CAR имеет костимулирующий домен, и костимулирующий домен выбран из CD28, CD137 (4-1ВВ), CD134 (ОХ40) и CD278 (ICOS).
35. Способ по любому из пп. 1-20, где CAR имеет передающий сигналы активации домен, и передающий сигналы активации домен представляет собой цепь CD3ζ, Т-клетки или рецептор Fc γ.
36. Способ по любому из пп. 1-9 или 12-20, где CAR имеет узнающую область, и узнающая область представляет собой одноцепочечный фрагмент вариабельной области (scFv) антитела против FITC, где CAR имеет костимулирующий домен, и костимулирующий домен представляет собой CD137 (4-1ВВ), и где CAR имеет передающий сигналы активации домен, и передающий сигналы активации домен представляет собой цепь CD3ζ, Т-клетки.
37. Способ по любому из пп. 1-20, где вводят множество доз соединения или его фармацевтически приемлемой соли и композиции CAR-T-клетки.
38. Способ по любому из пп. 1-20, где пациента подвергают визуализации перед введением соединения или его фармацевтически приемлемой соли или перед введением композиции CAR-T-клетки.
39. Способ по любому из пп. 1-20, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль не является антителом и не содержит фрагмент антитела.
40. Способ по любому из пп. 1-20, где нацеливающая группа не представляет собой пептидный эпитоп.
41. Способ по любому из пп. 1-20, где высвобождения цитокинов, приводящего к «нецелевой» токсичности у пациента, не возникает, и где возникает токсичность CAR-T-клетки по отношению к злокачественной опухоли.
42. Способ по любому из пп. 1-20, где «нецелевой» токсичности для тканей не возникает у пациента, и где возникает токсичность CAR-T-клетки по отношению к злокачественной опухоли.
43. Способ по любому из пп. 1-20, где злокачественная опухоль содержит опухоль, где размер опухоли уменьшают у пациента, и где «нецелевой» токсичности не возникает.
44. CAR-T-клетка, содержащая нуклеиновую кислоту, содержащую SEQ ID NO: 1.
45. CAR-T-клетка, содержащая полипептид, содержащий SEQ ID NO: 2.
46. Выделенная нуклеиновая кислота, содержащая SEQ ID NO: 1 и кодирующая химерный рецептор антигена.
47. Полипептид химерного рецептора антигена, содержащий SEQ ID NO: 2.
48. Вектор, содержащий SEQ ID NO: 1.
49. Вектор по п. 48, где вектор представляет собой лентивирусный вектор.
50. Способ, CAR-T-клетка, выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая химерный рецептор антигена (CAR), или полипептид химерного рецептора антигена по любому из пп. 1-20 или 44-47, где CAR содержит человеческие аминокислотные последовательности.
51. Способ, CAR-T-клетка, выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая химерный рецептор антигена (CAR), или полипептид химерного рецептора антигена по любому из пп. 1-20 или 44-47, где CAR состоит из человеческих аминокислотных последовательностей.
52. Набор, содержащий по меньшей мере два различных типа мостиков, содержащих низкомолекулярный лиганд, связанный с нацеливающей группой, где лиганды по меньшей мере в двух различных типах мостиков являются различными, и где лиганд выбран из фолата, DUPA, лиганда CAIX, лиганда NK-1R, лиганда гамма-глутамилтранспептидазы и лиганда CCK2R.
53. Набор по п. 52, где лиганд по меньшей мере в одном из мостиков представляет собой лиганд NK-1R.
54. Набор по п. 52, где лиганд по меньшей мере в одном из мостиков представляет собой лиганд гамма-глутамилтранспептидазы.
55. Набор по п. 52, где лиганд по меньшей мере в одном из мостиков представляет собой фолат.
56. Способ по любому из пп. 1-20, или набор по п. 52, где лиганд представляет собой лиганд CAIX.
57. Конъюгат формулы