СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЭГИЛИРОВАННЫХ ОЛИГОНУКЛЕОТИДОВ

1. Способ получения терапевтического пэгилированного олигонуклеотида, включающий:
(a) синтез непэгилированного олигонуклеотида на твердом носителе,
(b) отщепление непэгилированного олигонуклеотида от твердого носителя и снятие защитных групп с олигонуклеотида,
(c) обессоливание непэгилированного олигонуклеотида с использованием ультрафильтрации,
(d) пэгилирование непэгилированного олигонуклеотида для получения пэгилированного олигонуклеотида,
(e) очистку пэгилированного олигонуклеотида с использованием анионообменной ВЭЖХ, и
(f) обессоливание и дополнительную очистку пэгилированного олигонуклеотида с использованием ультрафильтрации, где ионообменную очистку непэгилированного олигонуклеотида не осуществляют между стадиями (b) и (c).
2. Способ по п.1, который дополнительно включает стадию (g) лиофилизации конечного продукта.
3. Способ по п.1, где непэгилированный олигонуклеотид содержит вторичную структуру.
4. Способ по п.3, где вторичная структура содержит стебель и петлю.
5. Способ по п.1, где непэгилированный олигонуклеотид содержит модифицированный нуклеотид.
6. Способ по п.5, где непэгилированный олигонуклеотид содержит модифицированный 2'-O-метилом нуклеотид.
7. Способ по п.5, где непэгилированный олигонуклеотид содержит модифицированный 2'-фтором нуклеотид.
8. Способ по п.1, где непэгилированный олигонуклеотид подвергают сочетанию с линкером перед стадией d.
9. Способ по п.1, где непэгилированный олигонуклеотид содержит RB005.
10. Способ по п.1, где пэгилированный олигонуклеотид содержит RB006.
11. Способ по п.1, где стадия (f) содержит использование ультрафильтрующей мембраны, которая имеет порог молекулярной массы приблизительно от 10 кДа приблизительно до 20 кДа или приблизительно от 20 кДа приблизительно до 30 кДа.