Влияние эфирного масла бархатцев мелкоцветковых (Tagetes Patu la l) на некоторые биохимические процессы при токсическом гепатите

MEDICAL SCIENCES

Холикова О., Азонов Д. А., Ганиев Х.А.

Центральный научно-исследовательский лаборатория Таджикского государственного медицинского Университета им. Абуали ибн Сино

DOI: 10.24411/2520-6990-2019-10309 ВЛИЯНИЕ ЭФИРНОГО МАСЛА БАРХАТЦЕВ МЕЛКОЦВЕТКОВЫХ

НА НЕКОТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ

Kholikova O., Azonov D.A, Ganiev Kh.A.

Central Research Laboratory - Tajik State Medical University. Abuali Ibn Sino

INFLUENCE OF THE ESSENTIAL OIL OF VELVETS OF THE FINE TREATMENT (TAGETES PATULA L) ON SOME BIOCHEMICAL PROCESSES IN TOXIC HEPATITIS

Резюме.

В данной статье рассматриваются гепатозащитные свойства эфирного масла бархатцев мелько-цветковых(Tagetes patula L.) культивируе- мых на территории Республики Таджикистан. Установлено, что эфирное масло бархатцев в дозах 0,01,0,02,0,04 г/кг массы на фоне тетрахлорметанового токсического гепатита достоверно снижают активность маркеров цитолитического синдрома и холестаза. Наряду с этим улучшает показатели билирубина и гликогена нарушенные под воздействием СС14. Полученные результаты свидетельствуют о выраженном гепатопротекторном эффекте испытуемого средства.

Abstract.

This article discusses the hepatoprotective properties of essential oil of marigolds of small-flowered(Tagetes patula L.) cultivated on the territory of the Republic of Tajikistan. It is established that the essential oil of marigold in doses 0,01,0,02,0,04 g/kg on the background of tetrachloro -stanovogo toxic hepatitis significantly reduce the activity of markers of cytolysis and cholestasis, along with this improves the bilirubin and glycogen broken by impact СС14. The obtained results indicate a pronounced hepatoprotective effect of the tested agent.

Ключевые слова; токсический гепатит, гепатозащитный, тетрахлорметан, гепатозащитный, хо-лестаз, эфирное масло, гепатоциты, карсил.

Key words: toxic, hepatoprotective, carbon tetrachloride, hepatoprotective, cholestasis, essential oil, hepato-cytes, Carsil.

Актуальность. Проблема изучения эфирных масел за последние 30-50 лет стала достаточно актуальной, Примером тому регулярные международные конгрессы, конференции совещания и симпозиумы. Данной проблемой занимаются биологи, микробиологи фармакологи, биохимики, пульмонологи, иммунологи и др. специалисты. [1,3,6, 10,].

Установлено, что эфирные масла обладают широким спектором биологической активности и многие из них (розовое, лавандовое, гераниевое, гвоздичное, фенхеловое, лавровое и др.) не только применяются в парфюмерно-косметической промышленности для производства духов, одеколонов, туалетных вод, зубных паст, мыл и кремов, но и обладают гепатозащитными, противовоспалительными, спазмолитическими, мембраностабилизиру-ющими, антиоксидантными, противомикробными, бактерио- и фунгидсидными свойствами. [ 2,3, 13,14,17]

С этой точки зрения большой интерес представляют эфиромасличное растения- бархатцы, содержащие в своем составе. наряду с флаваоноидами и другими биоактивными веществами, эфирные масла.

Согласно литературным данным, цветки бархатцев в народной медицине в виде водного настоя применяются как мочегонное при мочекаменной болезни, потогонное, противоглистное средство, а эфирное масло- при неврозах, циститах, уретрите, задержке мочеиспускания и глистных инвазиях. [7] Установлено, что биоактивные вещества состава бархатцев снижают проницаемость капилляров, обладают гипотензивными, диуретическими свойствами и проявляют Р-витаминную активность. [ 12,15]

Наряду с этим обладают антибактериальной активностью. Согласно О.И. Папаяни и со-авт.(2012), сухой экстракт бархатцев распростертых оказывает выраженное бактерицидное действие, на коковую флору и спорообразующую Salmonella gallinarum и Pseudomonas aeruginosa, а также оказывет бактериостатическое коррекци в отношении Escherichia coli. Полученный антибактериальный эффект авторы связывают с наличием фенолкарбоновых кислот, в том числе галловой, что считается природным антибиотиком. [11,18,19] На модели острого токсического поражения печени СС14 установлено, что препараты бархатцев снижали активность маркеров цитолитического

синдрома (АЛТ,АСТ) и маркера холестаза ЩФ. Кроме того они улучшали показатели липидного обмена в крови и печени. Согласно гистоморфоло-гическим показателям, препятствовали развитию очагов некроза в печеночных клетках, улучшая микроциркуляцию печени. [4,16]

В связи, с этим нам было интересно выяснить гепатозащитные свойства эфирного масла бархатцев мелкоцветкового, культивируемого на территории Республики Таджикистан

Целью настоящего исследования явилось изучение гепатозащитных свойств эфирного масла бархатцев мелкоцветковых при токсическом тет-рахлорметановом гепатите.

Материалы и методы исследования Исследования были проведены на 36 беспородных белых крысах массой 210-230 гг. Экспериментальный гепатит вызывали подкожным введением 50%-ного масляного раствора СС14 в дозе 2 мл/кг через день в течение 1 -го месяца. Животные были распределены на 6 групп: 1- интактныеб 2 -контрольные ( животные которым подкожно вводили только СС14), 3,4,5 -животные, которым на фоне СС14, внутрижелудочно вводили эфирное масло бархатцев мелкоцветковых в дозах 0,01, 0,02 и 0,04 г/кг массы, 6-животные ,которым на фоне

Однако в сериях, леченных испытуемыми средствами в дозе 0,01,0,02 и 0,04 г/кг массы в течение 1 месяца наблюдался прирост массы тела на 15,2, 12,5 и 13,9% соответственно.

С целью выяснения механизма гепатозащит-ного действия эфирного масла бархатца мелько-цветкового при подостром отравлении СС14 нами было изучено влияние различных ее доз на активность маркеров цитолитического синдрома АЛТ,АСТ и холестаза ЩФ. При подострой интоксикации крыс гепатотоксином (рис 1) наблюдалось

токсического гепатита вводили препарат сравнения карсил в дозе 0,1 г/кг массы в течение 1 мес. Активность маркеров цитолитического синдрома ( АЛТ, АСТ) и маркера холестаза (ЩФ) определяли при помощи био-латестов на биохимическом анализаторе -FAX-3300.

Концентрацию гликогена в печени определяли антроновым методом ( М. Прохорова и соавт., 1985) Полученные цифровые данные обрабатывались общепринятыми статистическими методами при помощи персонального компьютера с использованием программы SPSS с пакетом анализа для Windows 10.

Результаты исследования. Месячное подкожное введение гепатотоксина оказало выраженное гепатотоксическое воздействие на экспериментальных животных, что проявилос уменьшением массы тела крыс , повышением активности маркеров цитолитического синдрома (АСТ,АЛТ) и холе-стаза (ЩФ), а также нарушением гликогенобразую-щей и антитоксической функции печени

Согласно полученным результатам исследований, приведенные в (табл.1) пророст массы контрольных животных под влиянием гепатоток- си на по отношению к исходным на 15 сутки составлял 2%, а через месяц 3,5%.

достоверное (Р< 0,001) повышение активности вышеуказанных ферментов в сыворотке крови контрольных животных. В результате месячного лечения крыс эфирным маслом бархатца мелькоцветкового в указанных дозах активность АЛТ по сравнению с контрольными животными снижается на 46,4, 52,56, 51%, АСТ на 36,47,45,8% соответственно. Препарат сравнения карсил также оказал хороший гепатозащитный эффект, но по эффективности несколько уступал испытуемому средству в дозах 0,02 и 0,04 мг/кг массы.

Таблица 1

Влияние испытуемых средств на прирост массы тела животных при токсическом гепатите

Серия опытов и дозы в г/кг Интактные Показатели массы животных в граммах через в %

Исходные-100% 15-суток 1 мес.

210,2±11,8 239,7±10,2 259,7±12,5

14,03 23,5

CC14 212,8±34 217,1±36 221,0±31

2 3,85

ЭМБ-0,01 г/кг 210,2±9,9 237,6±13,1 241,8±12,9

13 15

ЭМБ-0,02г/кг 222,7±10,4 247,5±12,8 250,5±9,9

11,1 12,5

ЭМБ-0,04г/кг 219,2±8,9 239,6±11,1 249,7±12,5

9,3 13,9

Карсил 0.08 г/кг 222,0±13,8 238,8±8,5 247,5±10,7

7,56 11,5

Рис1. Влияние Эфирного масла бархатцев (ЭМБ) на активность маркеров цитолитического синдрома при токсическом гепатите

Установлено, что при токсических поражениях печени нарушается процесс конюгации билирубина с глюкуроновой кислотой, что сопровождается обратной регургитацией желчи в синусоиды. Данный процесс связан с некрозом печеночных клеток и закупоркой внутрипеченочных желчных канальцев и с загустевший желчью в результате деструкции, воспаления и повышения проницаемости на фоне воздействия гепатотоксических средств. [ 5,9]

Связи с этим нами было изучено влияние испытуемых средств на пигментообразующую функцию печени на фоне токсического поражении печени СС14.

Проведенными нами исследованиями установлено, что в результате месячной интоксикации гепатотоксином у контрольных животных наблюдалось достоверное

Таблица 2

Влияние различных доз ЭМБ на показатели билирубина при подостром токсическом гепатите

Серия опытов и дозы в г/кг Билирубин состава крови в мкмоль/л

массы. Интактные

Общий

12,0±0,3

Прямой 0,89±0,001

Непрямой 11,2±0,67

СС14 2 мл/кг массы через день 1 мес.

Контрольные 34,3± 0,66 1,8±02 32,5±1,2

р<0,001 р<0,001 р<0,001

ЭМБ- 0,01 23,09±0,45 1,09±0,001 22,4±0,98

р<0,05 р<0,001 р<0,05

ЭМБ-0,02 20,6±0,7 0,9±0,001 19,8±0,9

р<0,001 р<0,001 р<0,001

ЭМБ-0,04 21,7±0,34 1,02±0,001 20,9±0,68

р<0,05 р<0,001 р<0,001

Карсил-0,1 24,0±0,71 1,1±0,001 24,1±0,95

р<0,05 р<0,001 р<0,05

Примечание; Значение Р для контрольных дано по отношению к интактным, а для леченных по отношению к контрольным.

При месячном внутрижелудочном введении эфирного масла в указанных дозах концентрация общего билирубина по сравнению с контрольными животными снижалось на- 32,7%,40,36%,73,30% соответственно, прямой билирубин - на 39,4%,50%,43,39% соответственно и связанный билирубин на 36,4, 43,75, 40,6 и 32% соответственно.

Таким образом, полученные результаты свидетельствует о том, что эфирное мало бархатцев в указанных дозах защищая печеночные клетки от

токсического воздействия СС14, тем самым улучшает нарушенную под влиянием гепатотоксина пигменто- образующую функцию печени. Согласно полученным результатам при сравнении эффективности испытуемых доз эфирного масла установлено, что наиболее эффективной дозой является 0,02 г/кг массы, что по всем параметрам превосходит аналогичные действие не только остальных доз, но и препарата сравнения карсила.

1000

900 800 700 600 500 400 300 200 100 0

жазатели ЩФ в ЕД/л+ Гликогена в мг%

1, 2 3, 4, 5, 6

Рис Влияние ЭМБ на показатели маркера холестаза и концентрации гликогена в сыворотке крови при токсическом гепатите т (1,2-Интактные и контрольные. 2-3-4 ЭМБ в дозе 0,01,0,02 и 0,04 г/кг. 6. Карсил 0,1 г/кг

Установлено, что при токсическом гепатите в результате повреждения и некроза печеночных клеток и желчевыводящих протоков, приводящих к уменьшении оттока желчи в двенадцатиперстную кишку, способствует повышению концентрации ЩФ или синдрома холестаза. [8].

В результате месячного лечения крыс с подо-стром токсическим гепатитом установлено, что под влиянием эфирного масла бархатцев активность щелочной фосфатазы в дозе 0,01 г/кг по сравнению с контрольными снижалась на -30%,0,02 г/кг на 35,5%, 0,04 г/кг на 34,85%,а в сериях, получавших карсил на 30,3%. Таким образом испытуемые средства в дозах о,о2 и 0,04 г/кг массы оказались незначительно эффективнее препарата сравнения.

При токсических поражениях печени также нарушается гликоген- образующая функция печени. Согласно нашим исследованиям концентрация гликогена в гомогенатах из ткани печени контрольных животных по сравнению с интактными снижалась на 39%, а в сериях, леченных различными дозами испытуемого эфирного масла, наблюдалось восстановление гликогенобразующий функции печени. Концентрация гликогена по сравнению с контрольными сериями, повышалась на-51,53,9,52,8% соответственно. Показатели препарата сравнения карсила также были идентичны по отношению к испытуемым средствам.

Таким образом, введение различных доз эфирного масла бархатцев мелкоцветковых при токсическом гепатите вызванном введением СС14, снижая активность маркеров цитолитического синдрома, холестаза, улучшая антитоксическую функцию печени и синтез гликогена, оказывает значительный гепатопротективный эффект, что по всей вероятности связано со смягчающим действием эфирных масел, которые таким образом смягчая воздействие гепатотоксина на печеночные клетки и тем самым защищают их от гибели.

Литература.

1.Азонов Д.А. Фармакология геранола. Д.А. Азонов//-Автореф. канд.мед. наук.- Ленинград. -1987.-16 с.

2.Азонов Д.А. Лечебные свойства фенхелового и лавандового эфирных масел/ Д.А Азонов// - Изд-во»Эджот».-2006.-132 с.

3.Азонов Д.А Лечебные свойства геранорети-нола и эфирных масел/ Д.А. Азонов., А.К.Холов., Г.В. Разыкова// Душанбе, «Матбуот».-2011.- 126с.

4.Василенко, Ю.К. Гепатозащитные свойства препаратов из бархатцев распростертых/ Ю.К. Василенко // Хим.-фармац. журн. 1990. Т.24, №1. С. 53-56.

5.Лысенко А.С. Показатели пигментообразую-щий функции печени при токсическом гепатите/

A.С. Лысенко, В.В. Осадчий,А.А. Виноградов // Научные ведомости.-серия Медицина, фармация. -2013.-.-№25 (168).-Вып-24/1.-с. 166-168.

6.Малеев А. Стоянов С. Нешев Г. Розанол.- Со-фия.-1973.-35-49.

7.Малинина И.В. Разработка сухого и маслян-ного экстрактов цветков бархатцев и перспективы их использования.-Автореф. канд. биол. наук. -Пятигорск.-2011.- 24 с.

8.Маширова С.Ю. Изучение гепатозащитной и желчегонной активности фитосубстанций чернушки даммаской// Современные проблемы науки и образования. - 2013.-№2.:URL: http://www.science-education. ru/ru/ article /view? id=8588 (дата обращения: 11.05.2019).

9.Михайлов В.В. Основы патологической физиологии. Руководство для врачей/ В.В. Михайлов// Москва.: Медицина,2001.- С.-704 с.

10.Николаевский В.В. ЕременкоА.Е., Иванов И.К. Биологическая активность эфирных масел/

B.В. Николаевский, А.Е. Еременко, И.К. Иванов//. -М. :Медицина. -1987.-141 с.

11.Папаяни О.И. Изучения химического состава и антимикробной активности сухого экс-

тракта из цветков бархатцев распростертых( Tagetes Patula L.)/ О.И. И.В. Папаяни, Е.О. Духанина, Е.О. Сергеева // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2012, том 14.-№5(3).- С 742-744

12.Подгорная Ж.В Исследование цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L) с целью получения биологически активных веществ.- Автореферат канд. Биол. Наук.-Пятигорск.-2008 .- 23 с.

13. Прохорова М.Н. Большой практикум по углеводному обмену/ М.Н. Прохорова, З.Н. Тупи-кова// .- Л.: Медицина ,1985.-С.34-35.

14.Разыкова Г.В., Холов А.К., Азонов Д.А., Молохова Е.И. Гепатозащитные свойства липови-тола и лимонеола при остром и хроническом токсическом гепатите./ Г.В. Разыкова, А.К.Холов , Д.А. Азонов Д.А. и др// Вестник Таджикского национального Университета. -2011.-№10. -С 134-137.

15..Терехова А.Ю. Влияние фловоноидного комплекса из цветков бархатцев распростертых на перекисное окисление липидов и активности ферментов антиоксидантной системы при хроническом поражении печени СС14/ А.Ю. Терехова, Е.Г.Дор-

кина,Е.П. Парфентьева,Е.В. Кабузхина// Актуальные проблемы создания новых ЛП природного происхождения.- 2004.-С.173-176.

16. Терехов А.Ю. Изучение защитного действия биологически активных веществ из цветков бархатцев распростертых (Tagets patula L.) при экспериментальных токсических поражениях печени. -Автореферат канд. фарм. наук .- Пятигорск.-2006

17. Холов А.К.,Азонов Д.А. Эфиромасличные растения и эфирные масла источники биологически активных веществ (обзор литературы)/ А.К. Хо-лов,Д.А. Азонов// Вестник ТНУ.-2014.-№1/3 (134).-С. 153-160.

18.Romagnoli, C. Chemical characterization and antifungal activity of essential oil of capitula from wild Indian Tagetes patula L. / C. Romagnoli, R.Bruni, E. Andreotti, M.K. Rai, C.B. Vicentini, D. Mares // Protoplasma. - 2005. Vol. 225. - № 1-2. - P. 57-65. 9.

19.Rondon, M. Chemical composition and antibacterial activity of the essential oil of Tagetes patula L. (Asteraceae) collected from the Venezuela Andes / M. Rondon, J. Velasco, J. Hernandez, M. Pecheneda, J. Rojas, A. Morales, J. Carmona, T. Diaz // Rev. Latino-amer. Quнm. - 2006. - Vol. 34. - № 1-3. - P. 32- 34.