ИНДОЛИЛ ИЛИ ИНДОЛИНИЛГИДРОКСАМАТНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, ИХ СОДЕРЖАЩАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ (ВАРИАНТЫ) И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РАКА (ВАРИАНТЫ) С ИХ ПОМОЩЬЮ
INDOLYL OR INDOLINYL HYDROXAMATE COMPOUNDS, PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING SAME (VERSIONS) AND METHOD OF TREATING CANCER (VERSIONS) USING SAME

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области медицины и фармакологии, а именно, к новым индолил или индолинилгидроксаматным соединениям, проявляющим ингибирующую активность в отношении гистондеацетилазы (ГДАЦ), к фармацевтическим композициям их содержащим и к способам лечения рака с помощью указанных соединений.
Уровень техники
Деацетилазы гистонов (ГДАЦ) представляют собой класс ферментов, которые регулируют ацетилирование гистонов и, тем самым, регулируют экспрессию генов. Известно, что ингибиторы ГДАЦ вызывают прекращение роста клеток, дифференцировку и апоптоз в опухолевых клетках. Поэтому они привлекают огромное внимание в качестве сильнодействующих противораковых веществ. См., например, Lu et al., J. Med. Chem. 2005, 48, 5530-5535; Kulp et al., Clin. Cancer Res. 2006, 12, 5199-5206; и Ryan et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23, 3912-3922.
Раскрытие изобретения
Данное изобретение основано на неожиданном открытие того, что некоторые индолил- или индолинилгидроксаматные соединения являются ингибиторами ГДАЦ и обладают сильной противораковой активностью. Таким образом, данное изобретение относится к индолил- или индолинилгидроксаматным соединениям и использованию их при лечении рака.
В одном аспекте отличительной особенностью данного изобретения является индолил- или индолинилгидроксамтное соединения с формулой (I):
1
a
2
a
a
2
3
4
5
6
b
b
b
b
c
d
b
c
d
2
c
d
b
b
b
c
d
c
d
b
c
d
c
b
c
d
1
2
a
2
3
5
6
c
d
b
c
d
4
b
c
d
b
c
d
1
4
c
В данной формуле  - представляет собой одинарная или двойная связь; n равно 0, 1 или 2; R - представляет собой Н, алкил, необязательно замещенный арильной или гетероарильной группой, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, C(O)R или SOR, в котором R - представляет собой Н, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил; а каждая из групп R, R, R, R и R независимо друг от друга представляет собой Н, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, галоген, цианогруппу, нитрогруппу, OR, SR, S(O)R, CH=CH-C(O)R, CH=CH-C(O)NRR, NHC(O)-CH=CH-C(O)R, NHC(O)-CH=CH-C(O)NRR, SONRR, ОС(O)R, С(O)R, С(O)OR, C(O)NRR, NRR, NHC(O)R, NHC(O)NRR или NHC(S)R, в котором каждая из групп R, R и R независимо друг от друга представляют собой Н, гидроксигруппу, алкоксигруппу, арилоксигруппу, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил; а когда R представляет собой SOR, то, по меньшей мере, одна из групп R, R, R и R - это CH=CH-C(O)NRR, NHC(O)-СН=СН-С(O)R или NHC(O)-СН=СН-C(O)NRR или R - это СН=СН-С(O)R, CH=CH-C(O)NRR, NHC(O)-CH=CH-C(O)R или NHC(O)-CH=CH-C(O)NRR, а когда R представляет собой арил, то R - это CH=CH-C(O)NHR.
4
b
c
d
b
c
d
4
1
2
a
a
2
3
5
6
c
d
b
c
d
Один подкласс вышеописанных индолил- или индолинилгидроксаматных соединений включает соединения, в которых R - это СН=СН-С(O)R, СН=СН-C(O)NRR, NHC(O)-CH=CH-C(O)R или NHC(O)-CH=CH-C(O)NRR. В этих соединениях R может представлять собой С(O)NHOH, СН=СН-С(O)ОН, CH=CH-C(O)NHOH, NHC(O)-CH=CH-C(O)OH или NHC(O)-CH=CH-C(O)NHOH; R может представлять собой SOR, при этом R - это арил или гетероарил (например, фенил, необязательнозамещенный галогенидной, гидроксильной, алкоксильной, амино, циано или нитрогруппой); или, по меньшей мере, одна из групп R, R, R, R может представлять собой СН=СН-С(O)NRR, NHC(O)-СН=СН-С(O)R или NHC(O)-СН=СН-С(O)NRR (например, СН=СН-С(O)NHOH, NHC(O)-CH=CH-C(O)OH или NHC(O)-СН=СН-С(O)NHOH).
2
3
5
6
c
d
b
c
d
2
3
5
6
1
2
a
a
Другой подкласс вышеописанных индолил- или индолинилгидроксаматных соединений включает соединения, в которых, по меньшей мере, одна из групп R, R, R, R - может представлять собой CH=CH-C(O)NRR, NHC(O)-СН-СН-С(O)R или NHC(O)-СН=СН-С(O)NRR. В этих соединениях, по меньшей мере, одна из групп R, R, R, R - может представлять собой CH=CH-C(O)NHOH, NHC(O)-CH=CH-C(O)OH, или NHC(O)-CH=CH-C(O)NHOH. R может представлять собой SOR, при этом R - представляет собой арил или гетероарил (например, фенил, необязательно замещенный галогенидной, гидроксильной, алкоксильной, амино, циано или нитрогруппой).
1
2
a
a
a
Еще один подкласс вышеописанных индолил или индолинилгидроксаматных соединений включает соединения, в которых R - это SOR, a R - это арил или гетероарил. R может представлять собой фенильную группу, необязательно, с галогенидным, гидроксильным, алкоксильным, амино, циано или нитро заместителем.
1
10
2
10
2
10
2
Термин "алкил" относится к неразветвленным или разветвленным одновалентным углеводородам, содержащим, если не указано иное, 1-20 атомов углерода (например, С-С). К примерам алкильных групп относятся, помимо прочего, метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил и трет-бутил. Термин "алкенил" относится к неразветвленным или разветвленным одновалентным углеводородам, содержащим 2-20 атомов углерода (например, C-C) и одну или несколько двойных связей. К примерам алкенильных групп относятя, помимо прочего, этенил, пропенил, аллил и 1,4-бутадиенил. Термин "алкинил" относится к неразветвленным или разветвленным одновалентным углеводородам, содержащим 2-20 атомов углерода (например, С-С) и одну или несколько тройных связей. К примерам алкинильных групп относятся, помимо прочего, этинил, 1-пропинил, 1- или 2-бутинил и 1-метил-2-бутинил. Термин "алкокси" относится к -O-алкильному радикалу. К примерам "алкокси-групп" относятся, помимо прочего, метокси-, этокси-, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изо-пропокси, втор-бутокси и трет-бутокси группы. Термин "амино" относится к NH, алкиламино или ариламиногруппе. Термин "алкиламино" относится к -N(R)-алкильному радикалу, в котором R может представлять собой Н, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил или гетероарил.
3
12
3
20
Термин "циклоалкил" относится к одновалентной насыщенной углеводородной циклической системе с 3-30 атомами углерода (например, С-С). К примерам циклоалкильных групп относятя, помимо прочего, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, 1,4-циклогексилен, циклогептил, циклооктил и адамантил. Термин "циклоалкенил" относится к одновалентной неароматической углеводородной циклической системе с 3-30 атомам углерода (например, С-С), содержащей одну или несколько двойных связей. К примерах таких систем относятся циклопентенил, циклогексенил и циклогептенил. Термин "гетероциклоалкил" относится к одновалентной неароматической 5-8-членной моноциклической, 8-12-членной бициклической или 11-14-членной трициклической системе с одним или несколькими гетероатомами (такими как О, N, S или Se). К примерам гетероциклоалкильных групп относятся, помимо прочего, пиперазинил, пирролидинил, диоксанил, морфолинил и тетрагидрофуранил. Термин "гетероциклоалкенил" относится к одновалентной неароматической 5-8-членной моноциклической, 8-12-членной бициклической или 11-14-членной трициклической системе с одним или несколькими гетероатомами (такими как О, N, S или Se), содержащей одну или несколько двойных связей.
Термин "арил" относится к одновалентной 6-углеродной моноциклической, 10-углеродной бициклической, 14-углеродной трициклической системе ароматических колец. К примерам арильных групп относятся, помимо прочего, фенил, нафтил и антраценил. Термин "гетероарил" относится к одновалентной ароматической 5-8-членной моноциклической, 8-12-членной бициклической или 11-14-членной трициклической системе с одним или несколькими гетероатомами (такими как О, N, S или Se). К примерам гетероарильных групп относятся пиридил, фурил, имидазолил, бензимидазолил, пиримидинил, тиенил, хинолинил, индолил, тетразолил и тиазолил.
1
10
2
10
2
10
3
20
3
20
1
20
1
20
1
10
1
10
1
10
1
10
2
1
10
Вышеупомянутые алкильная, алкенильная, алкинильная, циклоалкильная, гетероциклоалкильная, циклоалкенильная, гетероциклоалкенильная, амино, арильная и гетероарильные группы включают как замещенные, так и незамещенные компоненты. К возможным заместителями при амино, циклоалкильной, гетероциклоалкильной, циклоалкенильной, гетероциклоалкенильной, арильной и гетероарильной группе относятся, помимо прочего, С-С-алкильная, С-С-алкенильная, C-С-алкинильная, С-С-циклоалкильная, С-С-циклоалкенильная, C-C-гетероциклоалкильная, С-С-гетероциклоалкенильная, С-С-алкокси, арильная, арилокси, гетероарильная, гетероарилокси, амино, С-С-алкиламино, ариламино, гидрокси, галогенидная, оксо (O=), тиоксо (S=), тио, силильная, С-С-алкилтио, арилтио, С-С-алкилсульфонильная, арилсульфонильная, ациламино, аминоацильная, аминотиоацильная, аминидино, амидо, тиоуреидо, тиоацинатная, сульфонамидо, гуанидиновая, уреидо, циано, нитро, ацильная, тиоацильная, ацилокси, карбамидо, карбамильная (-С(О)NH), карбоксильная (-СООН) и сложноэфирная группы. С другой стороны к возможным заместителям при алкильной, алкенильной или алкинильной группах относятся все вышеперечисленные заместители, кроме С-С-алкила.
Циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил и гетероарил могут быть соединены друг с другом.
Описанные в этом документе индолил- или индолинилгидроксаматные соединения включают как соединения сами по себе, так и их соли, сольваты и пролекарственные формы, если такое возможно. Соль, к примеру, может быть образована между анионом и положительно заряженной группой (например, аминогруппой) на индолил- или индолинилгидроксаматном соединении. К подходящим анионам относятся хлорид, бромид, йодид, сульфат, гидросульфат, сульфамат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, глютамат, глюкуронат, глутарат, соль яблочной кислоты, малеат, сукцинат, фумарат, тартрат, тозилат, салицилат, лактат, нафталинсульфонат и ацетат.Подобным же образом, соль может быть образована между катионом и отрицательно заряженной группой (например, карбоксилатной) на индолил- или индолинилгидроксаматном соединении. К подходящим катионам относятся ион натрия, ион калия, ион магния, ион кальция, и ион аммония, например, ион тетраметиламмония. Индолил или индолинилгидроксаматные соединения также включают соединения, содержащие четвертичные атомы азота. К примерам пролекарств относятся сложные эфиры и другие фармацевтически приемлемые производные, которые при введении больному способны обеспечивать активные индолил-или индолинилгидроксаматные соединения.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу подавления активности ГДАЦ посредством контактирования клетки с эффективным количеством индолил- или индолинигидроксаматного соединения, описанного выше.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака путем введения больному, нуждающемуся в лечении,
эффективного количества индолил- или индолинигидроксаматного соединения, описанного выше.
В пределах объема настоящего изобретения также находятся фармацевтическая композиция, содержащий одно или несколько вышеописанных индолил- или индолинилгидроксаматных соединений, для использования при лечении рака, а также данное терапевтическое применение и использование этих соединений для изготовления лекарственного средства для лечения рака.
Подробности одного или нескольких вариантов осуществления данного изобретения изложены ниже в описании. Другие особенности, объекты и преимущества изобретения очевидны из описания и формулы настоящего изобретения.
Осуществление изобретения
Ниже показаны примерные соединения, описанные в данному документе.
Индолил или индолилгидроксаматные соединения, описанные сданном документе, могут быть получены традиционными химическими превращениями (включая способы с использованием защитных групп), например, по способам, описанным в R.Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W.Greene и P.G.M.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999); LFieser и М.Fieser, Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L.Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) и последующих ее изданиях.
Индолил- или индолинилгидроксаматное соединение, синтезированное таким образом, может быть дополнительно очищено методом флэш-хроматографии на колонке, высокоэффективной жидкостной хроматографии, кристаллизацией или другими подходящими способами.
Упомянутые в данном документе индолил- или индолинилгидроксаматные соединения могут содержать неароматическую двойную связь или один или несколько асимметрических центров. Таким образом, они могут существовать в виде рацематов и рацемических смесей, отдельных энантиомеров, индивидуальных диастереомеров, диастереомерных смесей и в виде цис- или транс-изомеров. Предполагаются все изомерные формы.
Также в пределах объема настоящего изобретения находятся (1) фармацевтическая композиция, которая содержит эффективное количество, по меньшей мере, одно из индолил- или индолинилгидроксаматных соединений данного изобретения и фармацевтически приемлемый носитель и (2) способ лечения рака путем введения больному, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества такого индолил- или индолинилгидроксаматного соединения.
Используемый в данном документе термин "лечение" относится к введению индолил- или индолинилгидроксаматного соединения больному, страдающему от рака или имеющему симптомы рака или предрасположенность к данному заболеванию, с целью излечения, заживления, смягечения, ослабления, изменения, вылечивания, улучшения, оздрововления, воздействия или снижения риска расстройства, симптомов или предрасположенности к раку. Термин "эффективное количество" относится к количеству активного вещества, которое необходимо для обеспечения предполагаемого терапевтического эффекта у больного. Эффективные количества могут варьироваться, что понятно для специалистов в данной области техники, в зависимости от способа введения, использования вспомогательных веществ и возможности совместного использования вместе с другими веществами.
Раковые заболевания, которые могут быть излечены по способам изобретения, включают как солидные опухоли, таки и опухоли кроветворной системы различных органов. К примерам солидных опухолей относятся рак поджелудочной железы, рак мочевого пузыря, рак ободочной и прямой кишки, рак молочной железы, в том числе, метастатический рак молочной железы, рак предстательной железы, в том числе, андроген-зависимый и андроген-независимый рак предстательной железы, рак почек, в том числе, например, метастатический почечноклеточный рак, печеночно-клеточный рак, раклегких, в том числе, например, немелкоклеточный раклегкого (NSCLC), альвеолярно-клеточная опухоль (ВАС) и аденокарцинома легкого, рак яичников, в том числе, например, прогрессирующий эпителиальный рак или рак идиопатического перитонита, рак шейки матки, рак желудочно-кишечного тракта, рак пищевода, рак головы и шеи, в том числе, например, плоскоклеточный рак головы и шеи, меланома, нейроэндрокринный рак, в том числе, метастатические нейроэндрокринныеопули, опухоли головного мозга, в том числе, глиома, анапластическая олигодендроглиома, мультиформная глиобластома взрослого и атипическая астроцитома взрослого, рак костей и саркома мягких тканей. К примерам злокачественных опухолей кроветворной системы относятся острый миелолейкоз (ОМЛ), хронический миелолейкоз (ХМЛ), в том числе прогрессирующий ХМЛ и ХМЛ на недифференцируемой стадии (ХМЛ-НС), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), хронический лимфобластный лейкоз (ХЛЛ), болезнь Ходжкина (БХ), не-ходжкинская лимфома (НХЛ), в том числе фоликуллярная лимфома и лимфома из клеток мантийной зоны, В-клеточная лимфома, Т-клеточная лимфома, множественная миелома (ММ), макроглобулинемия Вальденстрема, миелодиспластический синдромы (МДС), в том числе рефракторная анемия (РА), рефракторная анемия с кольцевидными сидеробластами (РАКС), рефракторная анемия с избытком бластов (РАИБ) и рефракторная анемия с избытком бластов на стадии трансформации (РАИБ-Т) и миелопролиферативные синдромы.
Для воплощения способа данного изобретения на практике вышеописанный фармацевтическая композиция может быть введена путем приема внутрь, парентерально, с использованием ингаляционного спрея, местно, через прямую кишку, нос, трансбуккальным, вагинальным способом или через имплантированный резервуар. Используемый в данном документе термин "парентеральный" включает подкожный, внутрикожный, внутривенный, внутримышечный, внутрисуставной, внутриартериальный, надчревной, интратекальный способы, способ введения внутрь пораженных тканей, внутричерепной способы инъекции или инфузии.
Стерильная инъецируемая композиция, например, стерильная водная или маслянистая суспензия для инъекции, может быть составлена по способам, известным в данной области техники, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих веществ (таких как Твин 80) и суспендирующих веществ. Стерильный инъецируемый препарат может также представлять собой стерильный инъецируемый раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавители или растворители, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых сред и растворителей, которые пригодны для использования, находятся маннит, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные жирные масла (например, синтетические моно- или диглицериды). Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, используют при приготовлении инъецируемых препаратов, в виде природных фармацевтически приемлемых масел, таких как оливковое или касторовое масло, в особенности, в их полиоксиэтилированных вариантах. Данные масляные растворы или суспензии могут также содержать разбавитель или диспергатор на основе длиноцепочечного спирта, либо карбоксиметилцеллюлозу или схожие дисперигующие вещества. Для приготовления композиции могут также использоваться другие обычно используемые поверхностно-активные вещества, такие как твины или спаны, или другие схожие эмульгаторы или усилители биодоступности, которые обычно используют при приготовлении фармацевтически приемлемых твердых, жидких или других лекарственных форм.
Композиция для приема внутрь может также представлять собой перорально приемлемую лекарственную форму, включая, помимо прочего, капсулы, таблетки, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. В случае таблеток для приема внутрь к обычно используемым носителям относятся лактоза и кукурузный крахмал. Как правило, добавляют также смазывающие вещества, такие как стеарат магния. При приеме внутрь в виде капсулы к пригодным разбавителям относятся лактоза и высушенный кукурузный крахмал. При приеме внутрь водных суспензий или эмульсий активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в масляной фазе в сочетании с эмульгирующим или суспендирующими веществами. При желании можно добавить определенные подсластители, вкусовые вещества или окрашивающие вещества. Назальные аэрозоль или ингаляционный состав могут быть приготовлены по способам, хорошо известным в области приготовления фармацевтических составов (композиций). Композиции (составы), содержащие индолил- или индолинилгидроксаматные соединения, могут быть также введены в форме суппозиториев для ректального введения.
Носитель в фармацевтическом составе должен быть приемлемым в плане совместимости с активным ингредиентом состава (и, предпочтительно, обладать способностью стабилизации его) и не оказывать неблагоприятного воздействия на больного, подвергающегося лечению. В качестве фармацевтического носителя для доставки активных соединений можно использовать одно или несколько солюбилизирующих веществ (например, циклодекстрины), которые образуют более растворимые комплексы с активными индолил- или индолинилгидроксаматными соединениями. К примерам носителей относятся коллоидный диоксид кремния, стеарат магния, лаурилсульфат натрия и D&C желтый №10 (2-(2-Хинолил)-1,3-индандиондисульфоновая кислота, динатриевая соль).
Для предварительной оценки эффективности противораковыхэффектов индолил- или индолинилгидроксаматных соединений, например, подавления роста опухолевых клеток, можно использовать подходящие in vitro способы анализа. Соединения могут быть, кроме того, оценены на эффективность при лечении рака. Например, соединение может быть введено животному (например, в экспериментальную модель на мыше) с раковым заболеванием, а затем проводится оценка его терапевтической эффективности. На основе полученных результатов может быть определен подходящий диапазон доз и способ введения.
Без проведения дополнительных исследований полагают, что вышеприведенное описание адекватно обеспечивает возможность осуществления настоящего изобретения. Поэтому следующие примеры следует тольковать лишь как иллюстрацию, а не ограничение оставшейся части раскрытия каким бы то ни было образом. Все публикации, цитированные в данном документе, включены в данной документ по сссылке во всей своей полноте.
Пример 1. Синтез гидроксиамида 1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-
карбоновой кислоты (соединение 1)
Схема 1
2
2
3
Соединение 1 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 1 (реагенты и условия: а) хлористый бензил или бензолсульфонилхлорид, t-BuOK, KI, ДМФА; b) 1M LiOH (водн-), диоксан; с) (i) NHОТГП (NHO тетрагидропиран), PyBOP (бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфоний гексафторфосфат), NEt, ДМФА (диметилформамид), комн. темп.; (ii) ТФК(трифторуксусная кислота), МеОН, комн. темп.).
2
2
2
2
4
Метиловый эфир 1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (2): После перемешивания в течение 20 мин суспензии метилиндол-5-карбоксилата (1) (0,30 г, 1,71 ммоль), гидросульфата тетрабутиламмония (ТБАГС) (0,19 г, 0,26 ммоль) и КОН (0,19 г, 3,42 ммоль) в CHCl (15 мл) добавляют бензолсульфонилхлорид (0,32 мл, 2,57 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре, затем гасят водой и экстрагируют CHCl (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, получая желтый остаток.
1-Бензолсульфонил-1Н-индол-5-карбоновая кислота (3): 1М водный раствор LiOH (3,87 мл, 3,87 ммоль) добавляют к раствору сырого продукта 2 в диоксане (15 мл). Смесь перемешивают при 40°C на протяжении ночи, а затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде. Затем к раствору добавляют концентрированную HCl до тех пор, пока рН не станет меньше 7, что приводит к выпадению осадка, который высушивают под вакуумом, получая соединение 3 (0,38 г) в виде белого твердого вещества с выходом 74%.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,83 (д, J = 3,70 Гц, 1Н), 7,51-7,54 (м, 2Н), 7,60-7,63 (м, 1Н), 7,75 (д, J = 3,72 Гц, 1Н), 7,95 (д, J = 7,63 Гц, 2Н), 7,97 (дд, J = 8,83, 1,49 Гц, 1Н), 8,03 (д, J = 8,86 Гц, 1Н), 8,25 (д, J = 0,82 Гц, 1Н).
Гидроксиамид 1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-карбоновойкислоты (1):
2
4
2
2
3
3(водн)
3
3
NHОТГП (0,08 г, 0,72 ммоль) добавляют к раствору 3 (0,18 г, 0,60 ммоль), PyBOP (0,33 г, 0,63 ммоль) и триэтиламина (0,20 мл, 1,43 ммоль) в ДМФА (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем гасят водой и экстрагируют EtOAc (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на колонке с силикагелем (элюент - CHCl:СНОН=30:1:1% NH), получая после упаривания белое твердое вещество, которое обрабатывают ТФК (1,70 мл, 22,89 ммоль) в присутствии СНОН (31 мл). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре, а затем концентрируют при пониженном давлении, получая белый остаток. Остаток перекристаллизовывают из СНОН, получая соединение 1 (0,10 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,80 (д, J = 3,65 Гц, 1Н), 7,49-7,52 (м, 2Н), 7,59-7,62 (м, 1Н), 7,68 (д, J = 8,53 Гц, 1Н), 7,75 (д, J = 3,72 Гц, 1Н), 7,93 (д, J = 7,52 Гц, 2Н), 7,94-7,97 (м, 1Н), 8,04 (д, J = 8,53 Гц, 1Н).
15
12
2
4
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (M): вычислено, 316,0518; найдено, 316,0518.
Пример 2. Синтез гидроксиамида 1-бензил-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (соединение 2)
Соединение 2 получают по способу, схожему для описанного в Примере 1.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 5,40 (с, 2Н), 6,60 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 7,11 (д, J = 7,2 Гц, 2Н), 7,21-7,28 (м, 3H), 7,36-7,38 (м, 2Н), 7,50 (дд, J = 8,5, 1,7 Гц, 1Н), 8,02 (д, J = 1,1 Гц, 1Н).
16
14
2
2
+
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 266. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNO (M): вычислено, 266,1055; найдено, 266,1057.
Пример 3. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-Н-гидрокси-акриламида (соединение 3)
Схема 2
2
3
3
3
2
2
2
3
4
2
Соединение 3 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 2 (реагенты и условия: а) хлористый бензил или бензоилхлорид, 4-метокссибензолсульфонилхлорид, 4-фторбензолсульфонилхлорид или 4-нитробензолсульфонилхлорид,1-BuOK, KI, ДМФА; b)4-йодбензол, KCO, CuO, ДМФА; с) PhP=СН-СООСН, CHCl; d) 1M LiOH (водн.), диоксан; е) (i) NHОТГП, PyBOP, NEt, ДМФА; (ii) ТФК, МеОН; f) Fe, NHCl, изопропанол, НО).
2
2
2
2
4
1-Бензолсульфонил-1 Н-индол-5-карбальдегид (5): После перемешивания в течение 20 мин суспензии метилиндол-5-карбоксилата (4) (1,00 г, 6,89 ммоль), гидросульфата тетрабутиламмония (0,35 г, 1,03 ммоль) и KOH (0,77 г, 13,78 ммоль) в CHCl (30 мл) добавляют бензолсульфонилхлорид (1,32 мл, 10,33 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре, затем гасят водой и экстрагируют CHCl (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, получая желтый остаток, который очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc (этилацетат): н-гексан = 1:2). После упаривания получают продукт 5 (1,79 г) в виде белого твердого вещества.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 6,78 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,45-7,48 (м, 2Н), 7,55-7,58 (м, 1Н), 7,67 (д, J = 3,7 Гц, 1Н), 7,85-7,87 (м, 1Н), 7,89 (д, J = 7,6 Гц, 2Н), 8,06 (с, 1Н), 8,11 (д, J = 8,6 Гц, 1Н), 10,03 (с, 1Н).
2
2
2
2
4
Метиловый эфир 3-(1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-акриловой кислоты (7): Ацетат метил(трифенилфосфоранилидена) (2,52 г, 7,53 ммоль) добавляют к раствору 5 (1,79 г, 6,27 ммоль) в CHCl (25 мл). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре, затем гасят водой и экстрагируют CHCl (25 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc: н-гексан = 1:3), получая после упаривания продукт 7 (2,08 г) в виде белого твердого вещества.
3-(1-Бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-акриловая кислота (8): 1М водный раствор LiOH (11,72 мл, 11,72 ммоль) добавляют к раствору 7 (2,00 г, 5,86 ммоль) в диоксане (20 мл). Реакционную месь перемешивают при 40°C на протяжении ночи, а затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде. Затем к раствору прибавляют концентрированную HCl до тех пор, пока рН не станет кислым, что приводит к выпадению осадка, который высушивают под вакуумом, получая 8 (1,72 г) в виде белого твердого вещества.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 6,39 (д, J = 16,1 Гц, 1Н), 6,71 (д, J = 3,6 Гц, 1 Н), 7,45-7,48 (м, 2Н), 7,52 (дд, J = 8,7, 1,4 Гц, 1Н), 7,55-7,58 (м, 1Н),7,61 (д, J = 3,7 Гц, 1Н), 7,67-7,72 (м, 2Н), 7,89 (д, J = 8,9 Гц, 2Н), 7,96 (д, J = 8,7 Гц, 1Н).
2
4
2
2
3
3(водн)
3
3
3-(1-Бензолсульфонил-1H-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламид (соединение 3): NHОТГП (0,43 г, 3,67 ммоль) добавляют к раствору 8 (1,00 г, 3,05 ммоль), PyBOP (1,69 г, 3,24 ммоль) и триэтиламина (1,02 мл, 7,33 ммоль) в ДМФА (1,5 мл). Реакционную смесь перемешиваютпри комнатной температуре в течение 3 ч, а затем гасят водой и экстрагируют EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на колонке с силикагелем (элюент - CHCl : СНОН = 30:1:1% NH), получая после упаривания белое твердое вещество, которое обрабатывают ТФК (6,90 мл, 92,90 ммоль) в присутствии СНОН (140 мл). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Затем смесь концентрируют при пониженном давлении, полученный белый остаток перекристаллизовывают из СНОН, получая соединение 3 (0,85 г) в виде красного твердого вещества.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 6,42 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 6,75 (д, J = 3,5 Гц, 1Н), 7,49-7,54 (м, 3H), 7,59-7,62 (м, 1Н), 7,61 (д, J = 15,5 Гц, 1Н), 7,68 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,72 (с, 1Н), 7,93 (д, J = 7,7 Гц, 2Н), 7,98 (д, J = 8,6 Гц, 1Н).
+
+
17
14
2
4
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 327 (100%), 342 (M, 3%). Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 342,0674; найдено, 342,0673.
Пример 4. Синтез Н-гидрокси-3-(1-(4-метоксибензолсульфонил)-1Н-индол-5-ил)-акриламида (соединение 4)
Соединение 4 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
+
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 3,79 (с 3H), 6,43 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 6,73 (д, J = 3,5 Гц, 1Н), 6,99 (д, J = 9,1 Гц, 2Н), 7,52 (д, J = 8,7 Гц, 1Н), 7,62 (д, J = 15,7 Гц, 1Н), 7,65 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,71 (с, 1Н), 7,86 (д, J = 8,9 Гц, 2Н), 7,97 (д, J = 8,6 Гц, 1Н). ЖХ-МС, m/z: 373 (М).
18
16
2
5
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNO (М): вычислено, 372,0780; найдено, 372,0779.
Пример 5. Синтез 3-(1-(4-фторбензолсульфонил)-1Н-индол-5-ил)-Н-гидрокси-акриламида (соединение 5)
Соединение 5 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
+
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,45 (д, J = 15,9 Гц, 1Н), 6,77 (д, J = 3,5 Гц, 1Н), 7,54 (д, J = 8,6 Гц, 2Н), 7,61 (д, J = 15,4 Гц, 1Н), 7,67 (д, J = 3,7 Гц, 1Н), 7,73 (с, 1Н), 7,98-8,02 (м, 3H). ЖХ-МС, m/z: 361 (М).
17
13
2
4
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHFNOS (M): вычислено, 360,0580; найдено, 360,0580.
Пример 6. Синтез N-гидрокси-3-(1-(4-нитробензолсульфонил)-1H-индол-5-ил)-акриламида (соединение 6)
Соединение 6 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,44 (д, J = 15,7 Гц, 1Н), 6,81 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 7,56 (д, J = 8,6 Гц, 1Н), 7,61 (д, J = 15,7 Гц, 1Н), 7,72 (д, J = 3,5 Гц, 1Н), 7,74 (с, 1Н), 8,01 (д, J = 8,5 Гц, 1Н), 8,18 (д, J = 8,6 Гц, 2Н), 8,33 (д, J = 8,6 Гц, 2Н).
17
13
3
6
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 387,0525; найдено, 387,0523.
Пример 7. Синтез 3-(1-(4-амино-бензолсульфонил)-1Н-индол-5-ил)-Н-гидрокси-акриламида (соединение 7)
Соединение 7 синтезируют по способу, представленному на схеме 2 в Примере 3.
2
2
4
2
2
3
3(водн)
Суспенизию соединения 6 (0,10 г, 0,26 ммоль), порошка железа (0,05 г, 0,77 ммоль) и хлорида аммония (0,03 г, 0,52 ммоль) в смеси изопропилового спирта (5 мл) и воды (1 мл) кипятят в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, затем гасят водой и экстрагируют CHCl. Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Реакционную смесь очищают хроматографией на колонке с силикагелем (CHCl : CHOH = 10:1:1% NH), получая соединение 7 (0,06 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,57 (д, J = 8,9 Гц, 2Н), 6,60 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 6,69 (д, J = 3,5 Гц, 1Н), 7,53 (дд, J = 8,5, 1,4 Гц, 1Н), 7,58 (д, J = 9,0 Гц, 2Н), 7,60 (д, J = 8,3 Гц, 1 H), 7,62 (д, J = 3,8 Гц, 1 Н), 7,73 (с, 1 Н), 7,94 (д, J = 8,6 Гц, 1Н).
17
15
3
4
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 357,0783; найдено, 357,0785.
Пример 8. Синтез 3-(1-(3,4-диметоксибензолсульфонил)-1Н-индол-5-ил)-Н-гидрокси-акриламида (соединение 8)
Соединение 8 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 3,78 (с, 3H), 3,81 (с, 3H), 6,42 (д, J = 15,78 Гц, 1 Н), 6,73 (д, J = 3,57 Гц, 1Н), 7,00 (д, J = 8,61 Гц, 1Н), 7,33 (д, J = 1,99 Гц, 1Н), 7,52-7,56 (м, 2Н), 7,60 (д, J = 15,75 Гц, 1Н), 7,68 (д, J = 3,65 Гц, 1Н), 7,72 (с, 1Н), 7,99 (д, J = 8,66 Гц, 1Н).
Пример 9. Синтез 3-(1-бензил-1Н-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 9)
Соединение 9 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
+
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 5,32 (с, 2Н), 6,57 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 7,10 (д, J = 7,1 Гц, 2Н), 7,14 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 7,25-7,32 (м, 5Н), 7,37 (д, J = 8,3 Гц, 1Н), 7,80 (с, 1Н) 7,85 (д, J = 15,4 Гц, 1Н). ЖХ-МС, m/z: 293 (M).
18
16
2
2
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNO (M): вычислено, 292,1212; найдено, 292,1213.
Пример 10. Синтез 3-(1-бензоил-1Н-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 10)
Соединение 10 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
ЯМР H (500 МГц, ДМСО), δ, м.д.: 6,48 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 6,78 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,42 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,54-7,61 (м, 4Н), 7,67-7,70 (м, 1Н), 7,75 (д, J = 7,3 Гц, 2Н), 7,86 (с, 1Н), 8,24 (д, J = 8,6 Гц, 1Н), 9,00 (с, 1Н), 10,73 (с, 1Н).
18
14
2
3
+
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 306. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNO (М): вычислено, 306,1004; найдено, 306,1006.
Пример 11. Синтез N-гидрокси-3-(1-фенил-1Н-индол-5-ил)-акриламида (соединение 11)
2
3
4
3
1
1-Фенил-1Н-индол-5-карбальдегид (6): Суспензию метилиндол-5-карбоксилата (4) (0,70 г, 4,82 ммоль), 4-йодбензола (0,65 мл, 5,79 ммоль), KCO (0,93 г, 6,75 ммоль), CuO (0,04 г, 0,48 ммоль) в ДМФА (2 мл) кипятят в течение 2 дней. Реакционную смесь гасят водой и экстрагируют EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:4), получая после упаривания 6 (0,30 г). ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,83 (д, J = 3,2 Гц, 1Н), 7,431-7,44 (м, 1Н),7,42 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 7,49-7,51 (м, 2Н), 7,54-7,60 (м, 3H), 7,77 (дд, J = 8,7, 1,1 Гц, 1Н), 10,06 (с, 1Н).
Соединение 11 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3, с использованием соединения 6 вместо 5.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 7,18 (д, J = 15,7 Гц, 1Н), 7,49 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 8,15-8,20 (м, 1Н), 8,30-8,38 (м, 8Н), 8,59 (с, 1Н). Масс-спектр (ЭУ), m/z: 278.
17
14
2
2
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNO (M) вычислено, 278,1055; найдено, 278,1055.
Пример 12. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 12)
Схема 3
3
4
2
2
3
3
2
2
2
3
4
2
Соединение 12 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 3 (реагенты и условия: (а) NaBHCN, AcOH; (b) бензолсульфонилхлорид, 4-метоксибензолульфонилхлорид, 3,4-диметоксибензолсульфонилхлорид, 4-фторбензолсульфонилхлорид, 4-фторбензолсульфонилхлорид или 4-нитробензолсульфонилхлорид, пиридин; (с) LiAlH, ТГФ; (d) PDC (пиридиния дихромат), MS (молекулярные сита), CHCl;(f) PhP = СН-COOCH, CHCl; (g) 1М LiOH (водн.), диоксан; (h) (i) NHОТГП, PyBOP, NEt, ДМФА; (ii) ТФК, MeOH; (i) Fe, NHCl, изопропанол, HO).
2
2
4
Метиловый эфир 2,3-дигидро-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (10): Цианборгидрид натрия (0,16 г, 2,57 ммоль) добавляют к раствору метилиндол-5-карбоксилата (9) (0,30 г, 1,71 ммоль) в AcOH (2 мл) при 0°C. Реакционную смесь отогревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч, а затем гасят водой 0°C. Доводят рН до 10 прибавлением концентрированного раствора NaOH. Водный слой фазу экстрагируют CHCl (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:2), получая после упаривания 10 (0,28 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 3,06 (т, J = 8,5 Гц, 2Н), 3,65 (т, J = 8,5 Гц, 2Н), 3,84 (с, 3Н), 6,53-6,55 (м, 1Н), 7,75-7,76 (м, 2Н).
Метиловый эфир 1-бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (11): К раствору 10 (0,28 г, 1,58 ммолей) в пиридине (2 мл) добавляют бензолсульфонилхлорид (0,40 мл, 3,16 ммоль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником на протяжении ночи. Смесь очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc : н-гексан = 1:3), получая соединение 11 (0,40 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 2,99 (т, J = 8,6 Гц, 2Н), 3,87 (с, 3Н), 3,97 (т, J = 8,6 Гц, 2Н), 7,45-7,48 (м, 2Н), 7,56-7,59 (м, 1Н), 7,66 (д, J = 8,5 Гц, 1Н), 7,75 (с, 1Н), 7,82 (д, J = 7,7 Гц, 2Н), 7,90 (д, J = 7,9 Гц, 1Н).
4
2
2
4
(1-Бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-метанол (12): LiAlH (0,10 г, 2,52 ммоль) добавляют к раствору 11 (0,40 г, 1,26 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°C. Реакционную смесь отогревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч, а затем гасят водой и экстрагируют CHCl (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Реакционную смесь очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc: н-гексан = 1:1), получая соединение 12 (0,24 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 2,83 (т, J = 8,4 Гц, 2Н), 3,92 (т, J = 8,5 Гц, 2Н), 4,49 (с, 2Н), 7,09 (с, 1Н), 7,16 (д, J = 8,2 Гц, 1Н), 7,46-7,49 (м, 2Н), 7,53 (д, J = 8,2 Гц, 1Н), 7,60 (т, J = 7,5 Гц, 1Н), 7,76 (д, J = 7,7 Гц, 2Н).
2
2
1-Бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-карбальдегид (13): к раствору 12 (0,24 г, 0,83 ммоль) в CHCl (10 мл) и PDC (0,63 г, 1,66 ммоль) добавляют молекулярные сита (0,63 г). Смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре, а затем отфильтровывают через целит. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, а затем очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc : н-гексан 1:2), получая соединение 13 (0,19 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDCl), δ, м.д.: 3,05 (т, J = 8,6 Гц, 2Н), 4,01 (т, J = 8,7 Гц, 2Н), 7,46-7,49 (м, 2Н), 7,58-7,62 (м, 2Н), 7,71 (д, J = 8,3 Гц, 1 Н), 7,75 (д, J = 8,3 Гц, 1Н), 7,84 (д, J = 7,8 Гц, 2Н), 9,85 (с, 1Н).
2
2
2
2
4
Метиловый эфир 3-(1-бензолсульфонил-2,3-дигидро-1H-индол-5-ил)-акриловой кислоты (14): Ацетат метил(трифенилфосфоранилидена) (0,27 г, 0,79 ммоль) добавляют к раствору 13 (0,19 г, 0,66 ммоль) в CHCl (10 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасят водой и экстрагируют CHCl (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:3), получая после упаривания 14(0,20 г).
3-(1-Бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-акриловаякислота (15): 1М водный раствор LiOH (1,16 мл, 1,16 ммоль) добавляют к раствору 14 (0,20 г, 0,58 ммоль) в диоксане (15 мл). Реакционную смесь перемешивают при 40°C на протяжении ночи, а затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и прибавляют концентрированную HCl до тех пор, пока рН не станет кислым, что приводит к выпадению осадка, который высушивают под вакуумом, получая соединение 15 (0,16 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,92 (т, J = 8,5 Гц, 2Н), 3,96 (т, J = 8,5 Гц, 2Н), 6,33 (д, J = 15,9 Гц, 1Н), 7,38 (с, 1Н), 7,41 (д, J = 8,5 Гц, 1Н), 7,50-7,53 (м, 2Н), 7,55 (д, J = 16,1 Гц, 1Н), 7,58-7,64 (м, 2Н), 7,82 (д, J = 7,6 Гц, 2Н).
2
4
2
2
3
3(водн)
3
3
3-(1-Бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламид (соединение 12): NHОТГП (0,05 г, 0,44 ммоль) добавляют к раствору 15 (0,12 г, 0,37 ммоль), PyBOP (0,20 г, 0,39 ммоль) и триэтиламина (0,12 мл, 0,88 ммоль) в ДМФА (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем гасят водой и экстрагируют EtOAc (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на колонке с силикагелем (элюент - CHCl : СНОН = 30:1:1% NH), получая после упаривания белое твердое вещество, которое обрабатывают ТФК (1,13 мл, 15,21 ммоль) в присутствии СНОН (25 мл) и перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, полученный белый остаток перекристаллизовывают из СНОН, получая соединение 12 (0,12 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,91 (т, J = 8,5 Гц, 2Н), 3,96 (т, J = 8,4 Гц, 2Н), 6,32 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,32 (с, 1Н), 7,37-7,39 (м, 1Н), 7,46 (д, J = 15,7 Гц, 1Н), 7,50-7,53 (м, 2Н), 7,58-7,64 (м, 2Н), 7,82 (д, J = 7,8 Гц, 2Н).
+
+
17
16
2
4
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 170 (100%), 344 (M 3,21%). Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 344,0831; найдено, 344,0829.
Пример 13. Синтез N-гидрокси-3-(1-(4-метоксибензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-акриламида (соединение 13)
Соединение 13 получают по способу, схожему для описанного в Примере 12.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,91 (т, J = 8,46 Гц, 2Н), 3,81 (с, 3Н), 3,92 (т, J = 8,49 Гц, 2Н), 6,31 (д, J = 15,78 Гц, 1Н), 7,00 (д, J = 8,85 Гц, 2Н), 7,32 (с, 1Н), 7,37 (д, J = 8,77 Гц, 1Н), 7,46 (д, J = 15,78 Гц, 1Н), 7,56 (д, J = 8,36 Гц, 1 Н), 7,74 (д, J = 8,80 Гц, 2Н).
Пример 14. Синтез 3-(1-(4-фторбензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 14)
Соединение 14 получают по способу, схожему для описанного в Примере 12.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,93 (т, J = 8,41 Гц, 2Н), 3,95 (т, J = 8,42 Гц, 2Н), 6,80 (д, J = 15,40 Гц, 1Н), 7,25 (д, J = 8,67 Гц, 2Н), 7,33 (с, 1Н), 7,37-7,43 (м, 2Н), 7,56 (д, J = 8,17 Гц, 1Н), 7,86-7,89 (м, 2Н).
Пример 15. Синтез N-гидрокси-3-(1-(4-нитробензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-акриламида (соединение 15)
Соединение 15 получают по способу, схожему для описанного в Примере 12.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,96 (т, J = 8,38 Гц, 2Н), 4,02 (т, J = 8,47 Гц, 2Н), 6,32 (д, J = 15,78 Гц, 1Н), 7,34 (с, 1Н), 7,40 (д, J = 8,29 Гц, 1Н), 7,45 (д, J = 15,71 Гц, 1Н), 7,59 (д, J = 8,34 Гц, 1Н), 8,06 (д, J = 8,73 Гц, 2Н), 8,34 (д, J = 8,82 Гц, 2Н).
Пример 16. Синтез 3-(1-(4-аминобензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-Н-гидрокси-акриламида (соединение 16)
Соединение 16 получают по способу, схожему для описанного в Примере 7, исходя из соединения 15.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,91 (т, J = 8,41 Гц, 2Н), 3,87 (т, J = 8,52 Гц, 2Н), 6,48 (д, J = 15,75 Гц, 1Н), 6,58 (д, J = 8,80 Гц, 2Н), 7,34 (с, 1Н), 7,37 (д, J = 8,21 Гц, 1Н), 7,44 (д, J = 15,78 Гц, 1Н), 7,45 (д, J = 8,85 Гц, 2Н), 7,53 (д, J = 8,37 Гц, 1Н).
Пример 17. Синтез 3-[1-(3,4-диметоксибензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-5-ил]-N-гидрокси-акриламида (соединение 17)
Соединение 17 получают по способу, схожему для описанного в Примере 12.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,90 (т, J = 8,39 Гц, 2Н), 3,72 (с, 3Н), 3,85 (с, 3Н), 3,93 (т, J = 8,45 Гц, 2Н), 6,33 (д, J = 15,73 Гц, 1Н), 7,06 (д, J = 8,54 Гц, 1Н), 7,19 (д, J = 1,82 Гц, 1Н), 7,36 (с, 1Н), 7,41-7,50 (м, 3Н), 7,61 (д, J = 8,37 Гц, 1Н).
Пример 18. Синтез гидроксиамида 1-бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (соединение 18)
Соединение 18 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 3 в Примере 12.
1-Бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-карбоновая кислота (16): 1М водный раствор LiOH (2,4 мл, 2,40 ммоль) добавляют к раствору 11 (0,38 г, 1,20 ммоль) в диоксане (15 мл). Реакционную месь перемешивают при 40°C на протяжении ночи, а затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и прибавляют концентрированную HCl до тех пор, пока рН не станет кислым, что приводит к выпадению осадка, который высушивают под вакуумом, получая соединение 16 (0,34 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,97 (т, J = 8,6 Гц, 2Н), 3,99 (т, J = 8,6 Гц, 2Н), 7,51-7,54 (м, 2Н), 7,61-7,64 (м, 2Н), 7,74 (с, 1Н), 7,84-7,88 (м, 3Н).
2
4
2
2
3
3(водн)
3
3
Гидроксиамид 1-бензолсульфонил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (18): NHОТГП (0,12 г, 0,99 ммоль) добавляют к раствору 16 (0,25 г, 0,82 ммоль), PyBOP (0,46 г, 0,87 ммоль) и триэтиламина (0,28 мл, 1,98 ммоль) в ДМФА (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч, а затем гасят водой и экстрагируют EtOAc (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на колонке с силикагелем (элюент - CHCl : CHOH = 30:1:1% NH), получая после упаривания белое твердое вещество, которое обрабатывают ТФК (2,7 мл, 36,35 ммоль) в присутствии CHOH (52 мл) и перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, полученный белый остаток перекристаллизовывают из СНОН, получая соединение 18 (0,25 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 2,95 (д, J = 8,49 Гц, 2Н), 3,97 (д, J = 8,52 Гц, 2Н), 7,48-7,52 (м, 3Н), 7,57-7,63 (м, 3Н), 7,82 (д, J = 7,71 Гц, 2Н).
15
14
2
4
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 318,0674; найдено, 318,0672.
Пример 19. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-1Н-индол-3-ил)-Н-гидрокси-акриламида (соединение 19)
Схема 4
2
3
2
2
Соединение 19 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 4 (реагенты и условия: а) NHОТГП, PyBOP, NEt, ДМФА; b) бензолсульфонилхлорид, KOH, гидросульфат тетра-н-бутиламмония, CHCl; с) ТФК, MeOH).
2
4
3(водн)
3-(1Н-индол-3-ил)-N-(тетрагидропиран-2-илокси)-акриламид (соединение 18): NHОТГП (0,38 г, 3,21 ммоль) добавляют к раствору трасн-3-индолакриловой кислоты (17) (0,50 г, 2,67 ммоль), PyBOP (1,47 г, 2,83 ммоль) и триэтиламина (0,74 мл, 6,41 ммоль) в ТГФ (25 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в EtOAc, а затем гасят водой и экстрагируют EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc : н-гексан = 1,5:1:1% NH). получая соединение 18.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 1,58-1,70 (м, 3Н), 1,79-1,90 (м, 3Н), 3,63-3,65 (м, 1Н), 4,03-4,08 (м, 1Н), 4,97-4,98 (м, 1Н), 6,47 (д, J = 14,9 Гц, 1Н), 7,15-7,21 (м, 2Н), 7,41 (д, J = 7,8 Гц, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,84-7,87 (м, 2Н).
2
2
2
2
4
3-(1-Бензолсульфонил-1Н-индол-3-ил)-N-(тетрагидропиран-2-илокси)-акриламид (19): Суспензию 18 (0,52 г, 1,82 ммоль), гидросульфата тетрабутиламмония (0,09 г, 0,27 ммоль) и КОН (0,20 г, 3,63 ммоль) в CHCl (15 мл) перемешивают в течение 20 мин, а затем добавляют бензолсульфонилхлорид (0,32 мл, 2,72 ммоль) и оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Реакционную смесь гасят водой и экстрагируют CHCl (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:2), получая после упаривания 19 (0,42 г).
3
3-(1-Бензолсульфонил-1Н-индол-3-ил)-N-гидрокси-акриламид (соединение 19): Раствор сырого продукта 19 в метаноле (50 мл) обрабатывают ТФК (2,2 мл, 29,8 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Затем концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток перекристаллизовывают из CHOH, получая соединение 19 (0,1 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,61 (д, J = 16,0 Гц, 1Н), 7,35-7,43 (м, 2Н), 7,55-7,58 (м, 2Н), 7,65-7,68 (м, 1Н), 6,69 (д, J = 16,0 Гц, 1Н), 7,85 (д, J = 7,8 Гц, 1Н), 8,00-8,05 (м, 3Н), 8,27 (с, 1Н).
17
14
2
4
+
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (M) вычислено, 342,0674; найдено, 342,0673.
Пример 20. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-1Н-индол-6-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 20)
Соединение 20 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,50 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 6,74 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,43 (д, J = 8,1 Гц, 1Н), 7,50-7,54 (м, 3Н), 7,59 (т, J = 7,4 Гц, 1Н), 8,65 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,71 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,93 (д, J = 1,1 Гц, 1Н), 7,94 (с, 1Н), 8,13 (с, 1Н).
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342.
Пример 21. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-1H-индол-4-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 21)
Соединение 21 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,54 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,03 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,33 (т, J = 7,9 Гц, 1Н), 7,49 (д, J = 8,1 Гц, 2Н), 7,55 (с, 1Н), 7,60 (т, J = 7,5 Гц, 1Н), 7,78 (д, J = 3,8 Гц, 1Н), 7,88 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,92 (д, J = 7,7 Гц, 2Н), 8,01 (д, J = 8,4 Гц, 1Н).
17
14
2
4
+
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (M): вычислено, 342,0674; найдено, 342,0674.
Пример 22. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-1Н-индол-7-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 22)
Соединение 22 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 5,87 (д, J = 15,1 Гц, 1Н), 6,62 (д, J = 3,7 Гц, 1Н), 7,07-7,10 (м, 1Н), 7,15-7,16 (м, 1Н), 7,26-7,30 (м, 2Н), 7,39-7,43 (м, 2Н), 7,61 (д, J = 7,9 Гц, 2Н), 7,70 (д, J = 3,7 Гц, 1Н), 8,34 (д, J = 15,2 Гц, 1Н).
17
14
2
4
+
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 342,0674; найдено, 342,0672.
Пример 23. Синтез Н-гидрокси-3-(1Н-индол-4-ил)-акриламида (соединение 23)
Соединение 23 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
+
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,67 (д, J = 15,6 Гц, 1Н), 6,77 (д, J = 2,9 Гц, 1Н), 7,11-7,14 (м, 1Н), 7,27 (д, J = 7,3 Гц, 1Н), 7,35 (д, J = 3,1 Гц, 1Н), 7,43 (д, J = 8,0 Гц, 1Н), 8,0 (д, J = 15,8 Гц, 1Н). ЖХ-МС, m/z: 203 (M + 1).
11
10
2
2
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNO (M): вычислено, 202,0742; найдено, 202,0742.
Пример 24. Синтез 3-(3-бензолсульфонил-1Н-индол-6-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 24)
Схема 5
2
3
2
2
2
2
2
2
3
Соединение 24 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 5 (реагенты и условия: (a) Ph3P=CH-COCH, CHCl; (b) NaH, Ph-S-S-Ph, ДМФА; (с) МХПБК, CHCl; (d) LiOH, MeOH, HO; (e) (i) NHОТГП, PyBOP, NEt, ДМФА; (ii) ТФК, MeOH).
2
2
2
2
4
3
1
Метиловый эфир 3-(1Н-индол-6-ил)-акриловой кислоты (21): Ацетат метил(трифенилфосфоранилидена) (1,38 г, 4,13 ммоль) добавляют к раствору 20 (0,5 г, 3,44 ммоль) в CHCl (15 мл). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре, затем гасят водой и экстрагируют CHCl (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:4), получая после упаривания 21 (0,63 г). ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 3,81 (с, 3Н), 6,43 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 6,57 (м, 1Н), 7,30 (т, J = 2,7 Гц, 1Н), 7,35 (дд, J = 8,2, 1,0 Гц, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,62 (д, J = 8,3 Гц, 1Н), 7,80 (д, J = 15,9 Гц, 1Н), 8,30 (с, 1Н).
4
3
1
Метиловый эфир 3-(3-фенилсульфанил-1Н-индол-6-ил)-акриловой кислоты (22): К суспензии NaH (0,11 г, 4,70 ммолей) в ДМФА (6 мл) добавляют соединение 21 при 0°C. Затем реакционную смесь отогревают до комнатной температуры. После перемешивания в течение 2 ч добавляют фенилдисульфид (0,75 г, 3,44 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь, а затем гасят водой при 0°C и экстрагируют EtOAc (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:3), получая после упаривания 22 (0,61 г). ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 3,81 (с, 3Н), 6,44 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,03-7,18 (м, 5Н), 7,37-7,39 (м, 1Н), 7,56-7,60 (м, 3Н), 7,80 (д, J = 15,9 Гц, 1Н), 8,53 (с, 1Н).
2
2
3
2
2
4
3
4
1
Метиловый эфир 3-(3-бензолсульфонил-1Н-индол-6-ил)-акриловой кислоты (23): К раствору 22 (0,61 г, 1,97 ммолей) в CHCl (40 мл) добавляют 3-хлорпербензойную кислоту (0,77 мл, 4,44 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь отогревают до комнатной температуры и оставляют перемешиваться на ночь. Затем гасят ее насыщенным водным раствором NaHCO при 0°C и экстрагируют CHCl (25 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный зеленый остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOc : н-гексан = 1:1), получая после упаривания 23 (0,36 г). ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 3,81 (с, 3Н), 6,43 (д, J = 16,0 Гц, 1Н), 7,03-7,18 (м, 5Н), 7,73 (д, J = 16,0 Гц, 1Н), 7,56-7,60 (м, 4Н), 8,85 (с, 1Н). 3-(3-бензолсульфонил-1Н-индол-6-ил)-акриловая кислота (24): К раствору 23 (0,36 г, 1,05 ммолей) в смеси MeOH (10 мл) и воды (2 мл) добавляют гидроксид лития (0,05 г, 2,11 ммоль). Реакционную смесь кипятят в течение 6 ч, а затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в воде. Прибавляют 3Н HCl до тех пор, пока рН не станет кислым, а затем экстрагируют смесь EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, получая коричневый остаток, который перекристаллизовывают из EtOH, получая 24 (0,2 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,46 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,62-7,69 (м, 4Н), 7,81 (с, 1Н), 7,81 (д, J = 16,0 Гц, 1Н), 7,95 (д, J = 8,4 Гц, 1Н), 8,12 (д, J = 7,3 Гц, 2Н), 8,21 (с, 1Н).
2
4
2
2
3
3(водн)
3
3
3
17
14
2
4
1
+
3-(3-Бензолсульфонил-1Н-индол-6-ил)-N-гидрокси-акриламид (соединение 24): NHОТГП (0,04 г, 0,37 ммоль) добавляют к раствору 24 (0,10 г, 0,31 ммоль), PyBOP (0,17 г, 0,33 ммоль) и триэтиламина (0,1 мл, 0,74 ммоль) в ДМФА (1 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем гасят водой и экстрагируют EtOAc (15 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на колонке с силикагелем (элюент - CHCl : CHOH = 30:1:1% NH), получая после упаривания белое твердое вещество, которое обрабатывают ТФК (0,70 мл, 9,44 ммоль) в присутствии СНОН (15 мл) и перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, полученный белый остаток перекристаллизовывают из СНОН, получая соединение 24 (0,08 г). ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.; 6,45 (д, J = 15,8 Гц, 1Н), 7,45 (д, J = 8,4 Гц, 1Н), 7,50-7,65 (м, 5Н), 7,81 (д, J = 8,4 Гц, 1Н), 7,98-8,00 (м, 2Н), 8,04 (с, 1Н). Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (M): вычислено, 342,0674; найдено, 342,0674.
Пример 25. Синтез 3-(3-бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 25)
Соединение 25 получают по способу, схожему для описанного в Примере 24.
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,48 (д, J = 16,2 Гц, 1Н), 7,52 (с, 2Н), 7,56 (д, J = 7,7 Гц, 2Н), 7,55-7,59 (м, 1 Н), 7,67 (д, J = 15,9 Гц, 1 Н), 8,01 (с, 1 Н), 8,03 (д, J = 6,9 Гц, 2Н), 8,07 (с, 1Н).
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342.
Пример 26. Синтез 3-(3-бензолсульфонил-1Н-индол-7-ил)-N-гидрокси-акриламида (соединение 26)
Соединение 26 получают по способу, схожему для описанного в Примере 24.
1
ЯМР H (500 МГц, ДМСО), δ, м.д.: 6,58 (д, J = 15,5 Hz, 1Н), 7,26 (т, J = 7,7 Hz, 1Н), 7,52-7,58 (м, 4Н), 7,86 (д, J = 7,9 Hz, 1Н), 8,01-8,07 (м, 4Н).
17
14
2
4
+
Масс-спектр (ЭУ), m/z: 342. Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (M): вычислено, 342,0674; найдено, 342,0673.
Пример 27. Синтез (1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-амида N-гидроксиамида бут-2-ендиовой кислоты (соединение 27)
Схема 6
2
2
4
2
2
3(водн)
Соединение 27 синтезируют по способу, представленному выше на схеме 6 (реагенты и условия: а) бензолсульфонил хлорид, KOH, ТБАГС, CHCl; (b) Fe, NNHCl, изопропанол, HO; (с) (i) фумарилхлорид, ТГФ (ii) NHOH-HCl, нас. NaHCO, ТГФ).
2
2
2
2
4
1-Бензолсульфонил-5-нитро-1Н-индол (26): Суспензию 5-нитроиндола (25) (1,00 г, 6,17 ммоль), гидросульфата тетрабутиламмония (0,32 г, 0,93 ммоль) и KOH (0,69 г, 12,33 ммоль) в CHCl (20 мл) перемешивают в течение 30 мин, а затем добавляют бензолсульфонилхлорид (1,18 мл, 9,25 ммоль) и оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Реакционную смесь гасят водой и экстрагируют CHCl (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остатокочищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:4), получая после упаривания 26 (1,72 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 6,81 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,48-7,51 (м, 2Н), 7,58-7,61 (м, 1Н), 7,73 (д, J = 3,69 Гц, 1Н), 7,90 (д, J = 7,64 Гц, 2Н), 8,09 (д, J = 9,0 Гц, 1Н), 8,21 (дц, J = 9,0, 2,0 Гц, 1Н), 8,47 (д, J = 2,0 Гц, 1Н).
2
2
2
2
4
3(водн)
1-Бензолсульфонил-1Н-индол-5-иламин (27): К суспензии 2 (1,16 г, 3,84 ммолей) в смеси изопропанола (38 мл) и воды (9 мл) добавляют железо (0,64 г, 11,51 ммоль) и хлорид аммония (0,41 г, 7,67 ммоль) и оставляют кипятиться с обратным холодильником на ночь. После чего профильтровывают реакционную смесь через целит, растворитель отгоняют при пониженном давлении, полученный коричневый остаток растворяют в CHCl, а затем гасят водой и экстрагируют CHCl (20 мл × 3). Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, оставшееся коричневое твердое вещество очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - EtOAc : н-гексан = 1:2:1% NH), получая 27 (0,86 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 3,60 (с, 2Н), 6,48 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 6,69 (дд, J = 8,7, 2,1 Гц, 1Н), 6,76 (д, J = 1,8 Гц, 1Н), 7,39-7,42 (м, 2Н), 7,44 (д, J = 3,5 Гц, 1 Н), 7,49-7,51 (м, 1 Н), 7,77 (д, J = 8,7 Гц, 1 Н), 7,82 (д, J = 7,9 Гц, 2Н).
3
4
2
2
3
(1-Бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-амид N-гидроксиамид бут-2-ендиовой кислоты (соединение 27): Раствор 27 (0,20 г, 0,73 ммоль) в ТГФ (2 мл) добавляют по каплям к растворму фумарилхлорида (0,08 мл, 0,73 ммоль) в ТГФ (1 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 ч, а затем высушивают под вакуумом до образования остатка. Полученный остаток растворяют в ТГФ (мл). В другом сосуде к суспензии гидрохлорида гидроксиламина (0,26 г, 3,77 ммоль) в ТГФ (4 мл) добавляют насыщенный раствор NaHCO (3 мл) и перемешивают реакционную смесь при комнатной температуре в течение 10 мин. Содержимое обоих сосудов объединяют и перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь разделяют на части путем экстракции EtOAc (15 мл × 3) и водой. Объединенные органические вытяжки сушат над безводным MgSO и концентрируют при пониженном давлении, полученный желтый остатокочищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюент - CHCl : СНОН = 10:1:1% АсОН), получая соединение 27 (0,12 г).
1
3
ЯМР H (500 МГц, CDOD), δ, м.д.: 7,70 (д, J = 3,3 Гц, 1Н), 6,86 (д, J = 15,0 Гц, 1Н), 7,10 (д, J = 15,0 Гц, 1Н), 7,46-7,51 (м, 3Н), 7,58-7,61 (м, 1Н), 7,65 (д, J = 3,4 Гц, 1Н), 7,90-7,97 (м, 4Н).
18
15
3
5
+
Масс-спектр высокого разрешения (ЭУ) для CHNOS (М): вычислено, 385,0732; найдено, 385,0732.
Пример 28. Синтез Н-гидрокси-3-(1-(4-метоксибензолсульфонил)-1Н-индол-7-ил)-акриламида (соединение 28)
Соединение 28 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
Пример 29. Синтез 3-(1-бензолсульфонил-1Н-индол-5-ил)-акриловой кислоты (соединение 29)
Соединение 29 получают по способу, схожему для описанного в Примере 3.
1
ЯМР H(500 МГц, CDCl3), δ, м.д.: 6,39 (д, J = 16,1 Гц, 1Н), 6,71 (д, J = 3,6 Гц, 1Н), 7,45-7,48 (м, 2Н), 7,52 (дд, J = 8,7, 1,4 Гц, 1Н), 7,55-7,58 (м, 1Н), 7,61 (д, J = 3,7 Гц, 1Н), 7,67-7,72 (м, 2Н), 7,89 (д, J = 8,9 Гц, 2Н), 7,96 (д, J = 8,7 Гц, 1Н).
Пример 30. Анализ жизнеспособности клеток
i) Анализ на основе 3-{4,5-диметилтиазол-2-ил}-2,5-дифенилтетразолий бромида (МТТ)
4
50
50
50
50
Человеческие лейкозные клеточные линии К562(несущиетранслокацию BCR/ABL), NB4 (экспрессирующие PML/RaRальфа гибридный белок), MV4-11 (несущие мутацию FLT3/ITD), HL60 (несущие р53 нуль-мутацию), Kasumi-1 (перемещение хромосомы 8; 21; экспрессия гена c-kit) и U937 (макрофагоподобные клетки) являются общеиспользуемыми моделями при изучении человеческих лейкозных клеток. Клетки суспендируют в RPMI 1640 (Life Technologies), содержащем 10% FBS (Бычья эмбриональная сыворотка). На 96-луночных культуральных планшетах высеивают клетки в количестве 10 клеток на лунку вместе с или без одного из тестируемых соединений. Оценивают различные концентрации тестируемого соединения. Определяют жизнеспособность клеток при различных концентрациях соединения через 48 ч или 72 ч после обработки по методу анализа с использованием бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия (МТТ) (Sigma, рабочая конц. 0,5 мг/мл). МТТ анализ представляет собой хорошо разработанный способ анализа цитотоксической активности, в котором количественно определяется активность бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия (МТТ) в отношении снижения клеточного митохондрия по образованию темно-синего формазанового соединения. Соответствующим образом определяют значения LC и GI для каждого тестируемого соединения. GI - это концентрация соединения, вызывающая 50% подавление чистого клеточного роста в контрольных клетках. Ингибирование роста на 50% определяется как [(Ti-Tz)/(C-Tz)]×100=50, где Tz представляет содержание клеток в начальный момент (в момент, когда не происходило увеличения числа клеток), С - это содержание клеток в контрольной группе (к которой не добавляли тестируемое соединение), a Ti - это содержание клеток в группе, обработанной тестируемым соединением при концентрации GI.
50
Концентрация лекарственного вещества, приводящая к полному подавлению роста (TGI) определяется как концентрация, при которой Ti=Tz. LC - это концентрация соединения, вызывающая 50% потерю клеток в конечный момент медикаментозного лечения в сравнении с их количеством в начальный момент. Чистая потеря клеток после обработки определяется как [(Ti-Tz)/Tz]×100=-50.
2
Клетки высеивают на 96-луночной планшете с плоским дном (2500-3000 клеток на ячейку). Затем клетки обрабатывают тестируемым соединением (соединением 3, соединением 12, цитарабином и субероиланилидом гидроксамовой кислоты (SAHA)) при различных концентрациях (т.е. 0, 5, 10, 15 и 20 мкМ) в среде RPMI 1640 с добавкой 10% ФБС при 37°C с подачей 5% CO в течение 48 или 72 ч. Культуральную среду затем извлекают из каждой лунки и добавляют 150 мкл 0,5 мг/мл раствора МТТ в среде RPMI 1640. После выдерживания при 37°C в течение 2 ч удаляют надосадочную жидкость и добавляют ДМСО в количестве 200 мкл/лунку для растворения оставшегося МТТ красителя. Определяют поглощение при 570 нм для каждой лунки с помощью планшет-ридера. Каждую концентрацию соединения испытывают по 6 раз. Полученные результаты МТТ анализа приведены в Таблице 1 ниже.
Таблица 1.
Сравнительная оценка терапевтической эффективности настоящих соединений и коммерческих противораковых лекарств в отношении лейкозных клеток
NB4
Соединение 3
Соединение 12
Цитарабин
САГК
GI<sub>50</sub> (нМ)
223,1
31,5
448,3
303,3
TGI (нМ)
500,9
61,2
2324,0
615,8
LC<sub>50</sub> (нМ)
778,7
91,0
7324,0
928,3
HL60
Соединение 3
Соединение 12
Цитарабин
САГК
GI<sub>50</sub> (нМ)
241,6
32,9
445,4
454,7
TGI (нМ)
535,8
65,3
4344,3
811,9
Le<sub>50</sub> (нМ)
829,9
97,8
11487,1
5866,7
U937
Соединение 3
Соединение 12
Цитарабин
САГК
GI<sub>50</sub> (нМ)
162,2
54,7
46,6
589,6
TGI (нМ)
440,0
8330,0
109,7
2006,9
LC<sub>50</sub> (нМ)
717,8
>10000
665,2
5853,1
К562
Соединение 3
Соединение 12
Цитарабин
САГК
GI<sub>50</sub> (нМ)
9020
148,7
>10000
>10000
TGI (нМ)
>10000
982,0
>10000
>10000
LC<sub>50</sub> (нМ)
>10000
>10000
>10000
>10000
Kasumi-1
Соединение 3
Цитарабин
САГК
GI<sub>50</sub> (нМ)
96,6
>10000
292,25
TGI (нМ)
393,0
>10000
604,75
LC<sub>50</sub> (нМ)
694,2
>10000
917,25
MV4-11
Соединение 12
GI<sub>50</sub> (нМ)
13,1
TGI (нМ)
50,2
LC<sub>50</sub> (нМ)
87,2
ii) Анализ с использованием сульфородамина В (SRB)
0
0
0
0
50
Человеческие раковые клетки А549 (немелкоклеточный рак легкого), MDA-MB-231 (эстроген-независимый рак молочной железы), Нер 3В (гепатома) и НА22Т (гепатома) клетки высеивают на 96-луночмых планшетах в среде с 5% ФБС. Через 24 ч клетки фиксируют 10% трихлоруксусной кислотой (ТХК) для представления клеточной популяции в момент добавления соединения (Т). После дополнительного выдерживания ДМСО или тестируемого соединения в течение 48 ч клетки фиксируют 10% ТХК и добавляют сульфородамин В в концентрации 0,4% (по отношению массы к объему) в 1% уксусной кислоте для окрашивания клеток. Несвязанный сульфородамин В промывают 1% уксусной кислотой, а клетки, связанные с сульфородамином В, солюбилизируют 10 мМ основанием Trizma (2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиол). Считывают поглощение при длине волны 515 нм. С использованием измерений поглощения в начальный момент (Т), контрольной группы (С) и для роста клеток в присутствии соединения (Ti), рассчитывают рост в процентах для каждой концентрации соединения. Подавление роста на 50% определяют как [(Ti-Т)/(С-Т)]×100=50, а GI определяется как концентрация соединения, вызывающая 50% подавление чистого увеличения белка (что измеряется по окрашиванию сульфородамином В) в контрольной группе во время выдерживания соединения. Результаты представлены в Таблице 2 ниже.
Таблица 2
Клеточная линия
А549
MDA-MB-231
Нер-3B
НА22Т
легкие
молочная железа
печень
печень
Название соединение
GI<sub>50</sub> (мкМ)
GI<sub>50</sub> (мкМ)
GI<sub>50</sub>(мкМ)
GI<sub>50</sub> (мкМ)
Соединение 13
0,32
0,16
0,14
0,54
Соединение 14
0,60
0,37
0,25
1,20
Соединение 16
>10
>10
>10
>10
Соединение 15
0,80
0,45
0,28
0,74
Соединение 8
0,93
0,37
0,36
0,93
Соединение 17
0,32
0,19
0,16
0,62
Соединение 4
1,31
0,75
0,55
1,56
Соединение 5
1,59
0,66
0,64
2,30
Соединение 6
2,12
0,75
0,56
1,98
Соединение 7
>10
>10
>10
>10
Соединение 3
0,96
0,48
0,41
1,15
Соединение 12
0,7
0,25
0,21
0,62
Клеточная линия
А549
MDA-MB-231
Нер-3B
НА22Т
САГК
2,37
0,97
0,69
2,24
Пример 31. Вестерн-блоттинг
PC-3 клетки обрабатывают тестируемым соединением в концентрации 1, 2,5 и 5 мкМ в среде RPMI 1640 с добавкой 10% ФБС в течение 48 часов. Клетки собирают и подвергают ультразвуковому воздействию. Определяют концентрации белков в полученных лизатах с использованием набора для анализа белков по методу Брэдфорда (Bio-Rad, Hercules, CA). Белковые лизаты, содержащие одинаковое количество белков подвергают электрофорезу в полиакриламидном геле (10%) в присутствии 10% додецилсульфата натрия. Почле чего белки на геле переносят на нитроцеллюлозную мембрану Immobilon (Millipore, Bellerica, MA) в полусухой камере для переноса. Трансблоттированную мембрану промывают два раза трис-буферный физиологическим раствором, содержащим 0,1% Твин 20 (ТБСТ). После блокирования посредством ТБСТ, содержащим 5% обезжиренное молоко, в течение 40 мин, мембрану выдерживают с первым антителом, специфичным к ацетил-H3 (антитело, полученное от Upstate Biotechnology, Inc., Lake Placid, NY), H3 (Upstate Biotechnology), ацетил-α-тубулину (Sigma-Aldrich, St. Louis, МО), фосфопротеинкиназе В (серин 473) (Cell Signaling Technologies, Danvers, MA), протеинкиназе В (Cell Signaling Technologies), ацетил p53 (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), p53 (Santa Cruz Biotechnology), p21 (Santa Cruz Biotechnology), или α-тубулину (Sigma-Aldrich, St. Louis, МО) (разбавлене 1:3000), в ТБСТ с 1% обезжиренным молоком при 4°C на протяжении ночи. Мембрану промывают три раза ТБСТ в общей сложности 15 мин, а затем выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч с козлиным противокроличьим или противомышиным IgG антителом, конъюгированным с хреном (разбавление 1:3000). После промывания, как минимум, три раза посредством ТБСТ, определяют интенсивности сигнала для каждого белка.
Тестируют субероиланилид гидроксамовой кислоты (САГК), соединения 3 и 12. Из результатов видно, что подобно САГК соединения 3 и 12 ингибируют диацетилирование гистонов, повышающе регулируют экспрессию H3 и ацетилирование тубулина.
Другие варианты осуществления
Все особенности, раскрытые в данном описании, могут быть объединены в любой комбинации. Каждая особенность, раскрытая в данном описании, может быть замещена альтернативной особенностью, выполняющей ту же самую, эквивалентную или схожую цель. Таким образом, если иное прямо не указано, каждый раскрытый отличительный признак является лишь примером обобщенного ряда эквивалентных или схожих отличительных признаков.
Из вышеприведенного описания специалист в данной области техники выявляет существенные характеристики настоящего изобретения и, не отклоняясь от его сути и объема, может проводить различные изменения и модификации изобретения для адаптирования его под различные способы использования и условия. Таким образом, другие варианты осуществления также находятся в пределах объема следующей формулы изобретения.