Способ диагностики состояния микрофлоры влагалища и кишечника у женщин с осложненной беременностью
METHOD FOR DIAGNOSING STATE OF VAGINAL MICROFLORA AND INTESTINES IN WOMEN WITH COMPLICATED PREGNANCY

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, гинекологии, гастроэнтерологии и функциональной диагностике, и может применяться в диагностике осложненной беременности.
Известны способы диагностики влагалищной флоры для выявления патогенной среды при осложненной беременности путем анализа данных микроскопического исследования нативного препарата и микроскопии окрашенных препаратов [Е.В. Рыбин // Современные методы оценки микробиоценоза влагалища // Журнал акушерства и женских болезней, 2015, ТОМ LXIV ВЫПУСК 1, С. 53-65; Рухляда Н.Н., Горбакова Л.Ш. и др. // Инфицированные аборты I триместра беременности - Современная тактика ведения// Журнал скорая медицинская помощь, 2016 Том 17 выпуск 2, С. 57-61].
Недостатками этих способов являются как временная, так и аппаратная трудоемкость в определении влагалищной флоры, необходимость сложного и дорогостоящего оборудования. Кроме того, точность результатов в этих способах зависит от квалификации специалистов.
Ближайшим к заявляемому является способ определения патогенной флоры во влагалище при осложненной беременности с помощью бактериального посева [Ю.Э. Доброхотова, Ж.А. Мандрыкина и др. // Несостоявшийся выкидыш. Причины и возможности реабилитации //, Российский вестник акушера-гинеколога. 2016; 16(4): 85-90].
Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является то, что он трудоемкий и затратный, требует большого количества питательных средств.
Задачей настоящего изобретения является повышение эффективности диагностики.
4
7
4
4
4
4
4
4
4
7
7
4
7
7
4
4
4
4
7
7
4
4
4
Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе диагностики состояния микрофлоры влагалища и кишечника у женщин с осложненной беременностью, заключающемся в исследовании микрофлоры влагалища, одновременно исследуют состояние кишечной микрофлоры и при выявлении в микрофлоре влагалища Lactobacillus spp. более 80% и числе анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. меньше 10%, Candida spp. не более 10, а также присутствии Escherichia coli и/или Lactobacillus spp. больше 10, наличии патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus не более 10, Citrobacter spp.не более 10, Candida spp. не более 10 и отсутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii меньше 100 в кишечной микрофлоре, диагностируют нормоциноз влагалища и кишечника, при выявлении увеличенного числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. больше 10%, Candida spp. более 10 во влагалище и снижении Lactobacillus spp. менее 80% и наличии патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, не более 10, Citrobacter spp. не более 10, Candida spp. более 10, а также присутствии Escherichia coli больше 10 и/или Lactobacillus spp. больше 10 и отсутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii меньше 100 в кишечнике, диагностируют дисбиоз влагалища и нормоциноз кишечника, при выявлении в микрофлоре влагалища Lactobacillus spp. более 80% и числе анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. меньше 10%, Candida spp. не более 10, a в кишечной микрофлоре Escherichia coli меньше 10 и/или Lactobacillus spp. меньше 10, определение патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, более 10, Citrobacter spp. более 10, Candida spp.более 10 и присутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 диагностируют нормоциноз влагалища и дисбиоз кишечника, при наличии патогенной среды во влагалищной и кишечной флоре, а также снижении во влагалище Lactobacillus spp. менее 80%, увеличении числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. больше 10%, Candida spp. более 10, а в кишечнике снижении Escherichia coli меньше 10 и/или Lactobacillus spp. меньше 10, определении патогенных микроорганизмов Staphylococcus aureus, более 10, Citrobacter spp. более 10, Candida spp. более 10 и присутствии анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 диагностируют дисбиоз влагалища и кишечника.
Физиологическое течение беременности обеспечивается за счет нормального микробиоценоза различных биотопов организма, обеспечивающих формирование колонизационной резистентности слизистой оболочки. Микробиоценоз влагалища и кишечника имеет существенные различия, что обусловлено анатомическими и функциональными особенностями. Вместе с тем, они тесно связаны между собой в единую экосистему, благодаря способности синтезировать секреторные иммуноглобулины, выполняющие защитные функции. Нарушение микрофлоры кишечника является первичным триггером разнообразных химических, физических, биологических и других факторов, оказывающих значительное влияние на характер течения и исход беременности.
7
Во влагалищной и в кишечной микрофлоре одновременно присутствует основной представитель двух биоценозов Lactobacillus spp. Показатель нормального его содержания во влагалище больше 80%, а в кишечнике больше 10. Два микробиоценоза находятся в состоянии равновесия между собой и при изменении состава во одной из флор влагалища или кишечника, также происходят изменения в другой. Все это способно привести к развитию инфекции беременности, т.к. уменьшение содержания Lactobacillus spp. снижается продукция ферментов, удерживающих рост патогенных микроорганизмов.
4
При этом происходит интенсивный рост таких патогенных микроорганизмов как Staphylococcus aureus, Citrobacter spp. и Candida spp., показатель нормы их содержания не более 10, которые могут одновременно встречаться, как и в кишечнике, так и во влагалище. Они способны мигрировать из флоры влагалища, в флору кишечника, или наоборот.
Также важно во влагалище определять содержание Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vagina, показатель нормы не более 10%, так как они могут препятствовать росту основного представителя влагалищной флоры Lactobacillus spp. и тем самым способствовать прогрессированию дисбиоза во влагалища и в последующем изменять состав кишечной микрофлоры.
7
8
В кишечнике еще важно исследовать содержание Escherichia coli, показатель нормы 10-10, помимо определения Lactobacillus spp. Т.к. часто происходит снижение содержания Escherichia coli без снижения Lactobacillus spp., в результате развивается дисбиоз кишечнике и это приводит к росту патогенных микроорганизмов, которые в последующем перемещаются во влагалище. Также наличие анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii, в норме меньше 100, показывает нарушение местного иммунного ответа, который косвенный признак дисбиоза кишечника.
Одновременное исследование микрофлоры влагалища и кишечника повышает точность диагностики состояния флоры влагалища и кишечника, при наличии патогенной среды диагностировать дисбиоз влагалища и/или кишечника, который приводит к последующему инфицированию беременности и способствует развитию осложненной беременности.
4
7
7
4
4
4
Способ осуществляется следующим образом. Исследование флоры влагалища проводят с помощью «Фемофлора-16», а кишечной «Колонофлором-16». Исследование влагалищной и кишечной микробиоты с помощью ПЦР РВ позволяет выполнить качественный и количественный анализ состава флоры, путем сравнения содержания конкретных представителей нормо- и условно-патогенной биоты с общей бактериальной массой (ОБМ). Полученные данные сопоставляют с показателями нормы. Если при исследовании влагалища выявляют снижение Lactobacillus spp. меньше 80%, увеличение числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов больше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. и присутствие Candida spp. более 10. А в кишечной микрофлоре обнаруживают уменьшение Escherichia coli меньше 10 и/или Lactobacillus spp. меньше 10, помимо этого, присутствуют патогенные микроорганизмы в большом количестве Staphylococcus aureus, более 10, Citrobacter spp. более 10, Candida spp. более 10, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 признак аэробного дисбаланса. Выставляют диагнозы: Дисбиоз влагалища. Дисбиоз кишечника.
4
7
4
4
4
Если обнаруживают во влагалищной микрофлоре Lactobacillus spp.меньше 80% и рост числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов больше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. и наличие Candida spp. более 10. В кишечнике не выявляют уменьшения числа основных представителей флоры Escherichia coli и Lactobacillus spp. больше 10, а также наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus, не более 10, Citrobacter spp. не более 10, Candida spp.не более 10, признак аэробного дисбаланса меньше 100 Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii. Ставят диагнозы: Дисбиоз влагалища. Нормоциноз кишечника.
4
7
7
4
4
4
Во влагалищной флоре определяют Lactobacillus spp. больше 80%, а число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp. и Candida spp. не более 10. При исследовании кишечного микробиоценоза определяют сдвиг главных представителей (уменьшение Escherichia coli меньше 10 и/или Lactobacillus spp. меньше 10, а также находятся патогенные микроорганизмы за границами нормы (taphylococcus aureus, более 10, Citrobacter spp. более 10, Candida spp. более 10, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii больше 100 признак аэробного дисбаланса. В этом случае выставляют диагнозы: Нормоциноз влагалища. Дисбиоз кишечника.
4
7
4
4
4
Если определяют во влагалище Lactobacillus spp. больше 80%, а число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp., Atobium vaginae, Staphylococcus spp., Candida spp. не более 10 и в кишечной микрофлоре не выявляют изменения показателей количества основных представителей флоры Escherichia coli и Lactobacillus spp. больше 10, а также выявляют наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus, не более 10, Citrobacter spp. не более 10, Candida spp. не более 10, признак аэробного дисбаланса меньше 100 Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii, ставят диагнозы: Нормоциноз влагалища. Нормоциноз кишечника.
3.0
6.9
7.3
6.7
6.7
4
5
7
5
7
Пример 1. Больная К., 34 г. поступила 02.02.2020 в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе поставлен диагноз погибшее плодное яйцо на сроке 9/10 нед. Выполнена диагностика заявляемым способом. При исследовании влагалища с помощью ПЦР РВ Lactobacillus spp. 10 меньше 80%, увеличение числа анаэробных микроорганизмов больше 10% Eubacterium spp. 10, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp.10, Atobium vaginae 10, Candida spp. 10. При анализе кишечника обнаружено снижение Escherichia coli 2*10 и Lactobacillus spp. 4*10, определение патогенных микроорганизмов за предалах допустимых значений Staphylococcus aureus. 5*10, Citrobacter spp. 3*10, Candida spp. 3*10 и присутствие анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 345. Установлен диагноз: Погибшее плодное яйцо на сроке 9/10 нед. Дисбиоз влагалища. Дисбиоз кишечника. При сравнении полученных результатов флоры влагалища и кишечника диагностировали инфекцию беременности. Пациентка выписана.
4.0
7.6
6.1
7.9
6.6
5.4
8
7
2
4
4
Пример 2. Пациентка Б., 34 г. поступила НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 10.02.2020. При обследовании у больной диагностировано неполный инфицированный выкидыш на сроке 6/7 нед. Выполнена диагностика заявляемым способом. Исследование влагалища с помощью ПЦР РВ обнаружило Lactobacillus spp. 10 меньше 80%, увеличение числа анаэробных или/и аэробных микроорганизмов больше 10% Staphylococcus spp. 10 Eubacterium spp. 10, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 10, Atobium vaginae 10 и Candida spp. 10. При исследовании кишечной микрофлоры, используя ПЦР РВ выявили: Lactobacillus spp. 8*10, Escherichia coli 6*10, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 90 и наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus. 3*10, Citrobacter spp. 10, Candida spp. 2*10. При анализе кишечника изменений не выявлено. По результатам исследования диагноз: Неполный инфицированный выкидыш на сроке 6/7 нед. Дисбиоз влагалища. Нормоциноз кишечника. Пациентка переведена на дневной стационар для дальнейшего лечения.
8.0
1.9
2.3
0.6
2.6
3.0
5
5
10
4
7
Пример 3. Больная Я., 24 г. При обследовании в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 13.02.2020 поставлен диагноз погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Кровотечение. Выполнена диагностика заявляемым способом. При исследовании флоры влагалища с помощью ПЦР РВ выявило Lactobacillus spp. 10 больше 80%, а число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp. 10, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 10, Atobium vaginae 10, Staphylococcus spp. 10, Candida spp. 10. При анализе кишечника обнаружено Escherichia coli 5*10 и Lactobacillus spp. 2*10, определение патогенных микроорганизмов за предалах допустимых значений Staphylococcus aureus. 6*10, Citrobacter spp. 6*10, Candida spp. 3*10 и присутствие анаэробного дисбаланса Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 156. Диагноз: Погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Кровотечение. Нормоциноз влагалища. Дисбиоз кишечника. При сравнении полученных результатов флоры влагалища и кишечника инфекция беременности не выявлена. Пациентка выписана.
8.0
3.5
3.0
1.7
3.1
2.1
8
7
3
4
2
Пример 4. Больная С., 21 г. При обследовании в НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 04.02.2020 поставлен диагноз погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Выполнена диагностика заявляемым способом. При исследовании флоры влагалища с помощью ПЦР РВ в Lactobacillus spp. 10 больше 80%, число анаэробных и аэробных микроорганизмов меньше 10% Eubacterium spp. 10, Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. 10, Atobium vaginae 10, Staphylococcus spp. 10, Candida spp. 10. При анализе кишечника Lactobacillus spp. 6*10, Escherichia coli 2*10, Bacteroides fragilis/ Faecalibacterium prausnitzii 75 и наличие патогенных микроорганизмов в пределах допустимых значений Staphylococcus aureus. 2*10, Citrobacter spp. 10, Candida spp. 2*10. Диагноз: Погибшее плодное яйцо на сроке 6/7 нед. Нормоциноз влагалища. Нормоциноз кишечника. При сравнении полученных результатов флоры влагалища и кишечника инфекция беременности не выявлена.
Заявляемый способ позволяет эффективно диагностировать состояние влагалищной и кишечной микрофлоры, при наличии патогенной среды диагностировать дисбиоз влагалища и/или кишечника, который в свою очередь, приводит к инфицированию беременности и способствует развитию осложненной беременности. Способ доступен врачам любой специальности, не требует дорогостоящего оборудования и проведения большого количества лабораторных и инструментальных исследований. Заявляемый способ является простым, неинвазивным, информативным, высоко скоростным и высоко воспроизводимым в определении состава микробиоты влагалища и кишечника.
Выполнение заявляемого способа дает возможность не только диагностировать инфекцию беременности, но и провести коррекцию лечения с учетом флоры влагалища и кишечника для последующей предотвращения развития данной патологии.