ГЕННАЯ ТЕРАПИЯ ГЕМОФИЛИИ А С ПРИМЕНЕНИЕМ ВИРУСНЫХ ВЕКТОРОВ, КОДИРУЮЩИХ РЕКОМБИНАНТНЫЕ ВАРИАНТЫ FVIII С ПОВЫШЕННОЙ ЭКСПРЕССИЕЙ

12
1. Способ лечения гемофилии А, включающий внутривенную инфузию субъекту-человеку, у которого диагностирована гемофилия А, дозы 2×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела субъекта-человека, причем частицы ААВ включают полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA).
12
2. Способ лечения гемофилии А, включающий внутривенную инфузию субъекту-человеку, у которого диагностирована гемофилия А, дозы 6×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела субъекта-человека, причем частицы ААВ включают полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA).
3. Способ по п. 1 или 2, дополнительно включающий введение субъекту-человеку, у которого диагностирована гемофилия А, курса преднизолона или преднизона.
4. Способ по п. 3, в котором указанный курс преднизолона или преднизона вводят после инфузии частиц ААВ.
5. Способ по п. 3 или 4, в котором курс преднизолона или преднизона включает:
введение пациенту-человеку 60 мг преднизолона или преднизона в день в течение первой недели сразу после инфузии частиц ААВ;
введение пациенту-человеку 40 мг преднизолона или преднизона в день в течение второй недели сразу после инфузии частиц ААВ; и
введение пациенту-человеку 30 мг преднизолона или преднизона в день в течение третьей недели сразу после инфузии частиц ААВ.
6. Способ по п. 5, дополнительно включающий введение постепенно снижающейся дозы преднизолона или преднизона после третьей недели сразу после инфузии частиц ААВ.
7. Способ по п. 6, в котором введение постепенно снижающейся дозы преднизолона или преднизона включает:
введение субъекту-человеку 20 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после завершения начального курса преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 15 мг преднизолона или преднизона в день в течение 3 дней подряд сразу после 5 дней, в которые субъекту-человеку вводили 20 мг преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 10 мг преднизолона или преднизона в день в течение 3 дней подряд сразу после 3 дней, в которые субъекту-человеку вводили 15 мг преднизолона или преднизона; и
введение субъекту-человеку 5 мг преднизолона или преднизона в день в течение 3 дней подряд сразу после 3 дней, в которые субъекту-человеку вводили 10 мг преднизолона или преднизона.
8. Способ по п. 6, в котором введение постепенно снижающейся дозы преднизолона или преднизона включает:
введение субъекту-человеку 30 мг преднизолона или преднизона в день в течение 7 дней подряд сразу после завершения начального курса преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 20 мг преднизолона или преднизона в день в течение 7 дней подряд сразу после 7 дней, в которые субъекту-человеку вводили 30 мг преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 15 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после 7 дней, в которые субъекту-человеку вводили 20 мг преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 10 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после 5 дней, в которые субъекту-человеку вводили 15 мг преднизолона или преднизона; и
введение субъекту-человеку 5 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после 5 дней, в которые субъекту-человеку вводили 10 мг преднизолона или преднизона.
9. Способ, включающий:
определение первого уровня активности фактора VIII в образце крови, взятом у субъекта-человека, у которого диагностирована гемофилия A, после введения субъекту-человеку частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), содержащих полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII, и в то время как человек проходит начальный курс лечения глюкокортикостероидами;
определение второго уровня активности фактора VIII в образце крови, взятом у субъекта-человека, после завершения начального курса лечения глюкокортикостероидами;
сравнение второго уровня активности фактора VIII с первым уровнем активности фактора VIII; и
введение постепенно снижающейся дозы глюкокортикостероида, при этом:
когда второй уровень активности фактора VIII не меньше, чем первый уровень активности фактора VIII, первую постепенно снижающуюся дозу глюкокортикостероида вводят в течение периода времени не более трех недель; и,
когда второй уровень активности фактора VIII меньше, чем первый уровень активности фактора VIII, вторую постепенно снижающуюся дозу глюкокортикостероида вводят в течение периода времени, превышающего три недели.
10. Способ, включающий:
определение первого уровня активности ферментов печени в образце крови, взятом у субъекта-человека, у которого диагностирована гемофилия A, до введения субъекту-человеку частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), содержащих полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII;
определение второго уровня активности ферментов печени в образце крови, взятом у субъекта-человека, после введения человеку частиц ААВ, содержащих полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII, и после завершения начального курса лечения глюкокортикостероидами;
сравнение второго уровня активности ферментов печени с первым уровнем активности ферментов печени; и
введение постепенно снижающейся дозы глюкокортикостероида, при этом:
когда второй уровень активности ферментов печени не выше, чем первый уровень активности ферментов печени первую постепенно снижающуюся дозу глюкокортикостероида вводят в течение периода времени не более трех недель; и,
когда второй уровень активности ферментов печени выше, чем первый уровень активности фактора VIII, вторую постепенно снижающуюся дозу глюкокортикостероида вводят в течение периода времени, превышающего три недели.
11. Способ по п. 9 или 10, в котором введение первой постепенно снижающейся дозы глюкокортикостероида включает:
введение субъекту-человеку 20 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после завершения начального курса лечения глюкокортикостероидами;
введение субъекту-человеку 15 мг преднизолона или преднизона в день в течение 3 дней подряд сразу после 5 дней, в которые субъекту-человеку вводили 20 мг преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 10 мг преднизолона или преднизона в день в течение 3 дней подряд сразу после 3 дней, в которые субъекту-человеку вводили 15 мг преднизолона или преднизона; и
введение субъекту-человеку 5 мг преднизолона или преднизона в день в течение 3 дней подряд сразу после 3 дней, в которые субъекту-человеку вводили 10 мг преднизолона или преднизона.
12. Способ по любому из пп. 9-11, в котором введение второй постепенно снижающейся дозы глюкокортикостероида включает:
введение субъекту-человеку 30 мг преднизолона или преднизона в день в течение 7 дней подряд сразу после завершения начального курса лечения глюкокортикостероидами;
введение субъекту-человеку 20 мг преднизолона или преднизона в день в течение 7 дней подряд сразу после 7 дней, в которые субъекту-человеку вводили 30 мг преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 15 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после 7 дней, в которые субъекту-человеку вводили 20 мг преднизолона или преднизона;
введение субъекту-человеку 10 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после 5 дней, в которые субъекту-человеку вводили 15 мг преднизолона или преднизона; и
введение субъекту-человеку 5 мг преднизолона или преднизона в день в течение 5 дней подряд сразу после 5 дней, в которые субъекту-человеку вводили 10 мг преднизолона или преднизона.
13. Способ мониторинга эффективности генной терапии фактора VIII гемофилии A с применением частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), содержащих полинуклеотид, кодирующий полипептид фактора VIII, включающий:
определение того, присутствуют ли ингибирующие антитела к фактору VIII в образце крови, взятом у субъекта-человека после введения частиц ААВ субъекту-человеку; и
после обнаружения присутствия в крови субъекта-человека ингибитора к фактору VIII субъекту-человеку вводят альтернативный агент для лечения гемофилии А.
14. Способ по п. 13, в котором альтернативный агент включает химически модифицированный белок фактора VIII человека.
15. Способ по п. 13, в котором альтернативный агент включает белок фактора VIII свиньи.
16. Способ по п. 13, в котором альтернативный агент представляет собой терапевтический агент обходного пути фактора VIII, содержащий фактор II, фактор IX и фактор X.
17. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 2×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня SEQ ID NO: 1 или ее фрагмента в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
18. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 6×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня SEQ ID NO: 1 или ее фрагмента в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
19. Способ, включающий:
a) введение пациенту с гемофилией A дозы частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), причем частицы ААВ содержат полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII в первый момент времени; и
b) измерение уровня полинуклеотида, кодирующего белок фактора VIII, или его фрагмента в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
20. Способ по любому из пп. 17-19, в котором указанный более поздний момент времени составляет 7 дней.
21. Способ по любому из пп. 17-19, в котором указанный более поздний момент времени составляет 14 дней.
22. Способ по любому из пп. 17-19, в котором указанный более поздний момент времени составляет 21 день.
23. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 2×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат капсидный белок и полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня указанного капсидного белка в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
24. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 6×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат капсидный белок и полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня указанного капсидного белка в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
25. Способ, включающий:
a) введение пациенту с гемофилией A дозы частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), причем частицы ААВ содержат капсидный белок и полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII в первый момент времени; и
b) измерение уровня указанного капсидного белка в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
26. Способ по любому из пп. 23-25, в котором указанный более поздний момент времени составляет 7 дней.
27. Способ по любому из пп. 23-25, в котором указанный более поздний момент времени составляет 14 дней.
28. Способ по любому из пп. 23-25, в котором указанный более поздний момент времени составляет 21 день.
29. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 2×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня антител к фактору VIII в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
30. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 6×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня антител к фактору VIII в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
31. Способ, включающий:
a) введение пациенту с гемофилией A дозы частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), причем частицы ААВ содержат полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII в первый момент времени; и
b) измерение уровня антител к фактору VIII в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
32. Способ по любому из пп. 29-31, в котором указанный более поздний момент времени составляет 7 дней.
33. Способ по любому из пп. 29-31, в котором указанный более поздний момент времени составляет 14 дней.
34. Способ по любому из пп. 29-31, в котором указанный более поздний момент времени составляет 21 день.
35. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 2×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат капсидный белок и полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня антител к капсидному белку в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
36. Способ, включающий:
12
а) введение пациенту с гемофилией A дозы 6×10 частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) на килограмм массы тела указанного пациента, причем частицы ААВ содержат капсидный белок и полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1 (CS04-FL-NA) в первый момент времени; и
b) измерение уровня антител к капсидному белку в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
37. Способ, включающий:
a) введение пациенту с гемофилией A дозы частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), причем частицы ААВ содержат капсидный белок и полинуклеотид, кодирующий белок фактора VIII в первый момент времени; и
b) измерение уровня антител к капсидному белку в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени, где указанный более поздний момент времени составляет 7 дней или дольше.
38. Способ по любому из пп. 35-37, дополнительно включающий:
c) измерение исходного уровня антител к капсидному белку в кровотоке указанного пациента перед введением дозы частиц аденоассоциированного вируса (ААВ) указанному пациенту; и
d) необязательно, сравнение измеренного уровня антител к капсидному белку в кровотоке указанного пациента в более поздний момент времени с исходным уровнем антител к капсидному белку в кровотоке указанного пациента.
39. Способ по любому из пп. 35-38, в котором указанный более поздний момент времени составляет 7 дней.
40. Способ по любому из пп. 35-38, в котором указанный более поздний момент времени составляет 14 дней.
41. Способ по любому из пп. 35-38, в котором указанный более поздний момент времени составляет 21 день.