СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ ЗАВИСИМОСТИ
AGENT FOR PREVENTION AND TREATMENT OF ALCOHOLIC DEPENDENCE

Изобретение относится к области медицины, а именно к средствам для профилактики и лечения алкоголизма.
Для России злоупотребление алкоголем с давних пор является общенациональной проблемой. По официальным данным, в России на душу населения в 2001 году потреблялось 10,7 литров чистого алкоголя в год (World Health Organization. Global Alcohol Database. 2006), что является одним из самых высоких в мире (Немцов А.В. Алкогольный урон регионов России. M.:"NALEX", 2003).
В 2005 году специализированными учреждениями Росздрава зарегистрировано 3 млн 445 тысяч больных наркологическими расстройствами, или 2,4% общей численности населения. 84,2% от общего числа зарегистрированных - это больные алкогольной зависимостью (Халтурина Д.А., Коротаев А.В. Русский крест. Факторы, механизмы и пути преодоления демографического кризиса в России. М.: УРСС, 2006; Немцов А.В. Алкогольная смертность в России 1980-90-е гг. М.: "NALEX", 2001; Немцов А.В. 2006. География связанной с алкоголем смертности в России. Доклад на всероссийской конференции "Концепция алкогольной политики России", Москва, 18 мая 2006).
Основной проблемой при лечении алкоголизма является профилактика рецидивов и формирование и максимальное продление терапевтических ремиссий, то есть периодов полного воздержания пациентов от употребления алкоголя. Однако, несмотря на разнообразие психотерапевтических методов и социальных программ, направленных на стабилизацию ремиссий у больных алкоголизмом, эффективность терапии этого заболевания продолжает оставаться недостаточной. У 75% пациентов происходит срыв в первый год, а у 50% в первые три месяца лечения (Крупицкий Е.М., Звартау Э.Э. Ученые записки Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова. СПб., 2003. Т.X. №2. С.12-23; Ерышев О.Ф., Рыбакова Т.Г., Шабанов П.Д. Алкогольная зависимость: формирование, течение, противорецидивная терапия. - СПб.: Издательство «ЭЛБИ-СПб», 2002. - 192 с.)
В настоящее время широко используются при лечении алкоголизма такие препараты, как дисульфирам, цианамид и налтрексон (Крупицкий Е.М., Звартау Э.Э. Ученые записки Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова. СПб., 2003. Т.X. №2. С.12-23).
Дисульфирам является аверсивным препаратом, использующимся в наркологической практике с середины XX века. Дисульфирам ингибирует альдегиддегидрогеназу, катализирующую окисление ацетальдегида, продукта окисления этанола, оказывающего токсическое действие. Таким образом, употребление алкогольных напитков на фоне действия дисульфирама приводит к ацетальдегидной интоксикации и аверсивным эффектам. В рандомизированных контролируемых клинических испытаниях, выполненных в 80-е годы в США, было показано, что в отсутствие непосредственного контроля за приемом препарата дисульфирам не отличается значимо по клинической эффективности от плацебо, что, возможно, обусловлено в первую очередь низким комплайенсом с проводимой терапией (Fuller RK, et al. JAMA, 1986; 256(11): 1449-1455). В качестве альтернативы подобным методам улучшения комплайенса было предложено использовать пролонгированную форму дисульфирама в виде импланта (препарат «Эспераль»). Однако ни в одном из проведенных исследований эффективность пролонгированных форм дисульфирама не была продемонстрирована, возможно, в силу того, что имплант не обеспечивал стабильную и высокую концентрацию дисульфирама в крови, достаточную для развития дисульфирам-алкогольной реакции. Кроме того, при пероральном лечении дисульфирамом выявлен ряд недостатков: 1) его действие проявляется очень медленно; 2) возможны труднопрогнозируемые, чрезмерно сильные реакции «дисульфирам-алкоголь»; 4) толерантное количество алкоголя трудно определить; 5) в случае превышения дозы возможно возникновение дисульфирамовых психозов (Johnsen J, Morland J. Disulfiram implant: a double-blind placebo controlled follow-up on treatment outcome. Alcohol Clin Exp Res, 1991; 15(3): 532-536; Wilson A, et al. Disulfiram implantation: a dose response trial. J Clin Psychiatry, 1984; 45(6): 242-247).
Важно отметить, что создание пролонгированных форм лекарственных препаратов на основе дисульфирама технологически затруднительно, поскольку при формировании длительно действующего депо необходимо использовать большое количество (десятки и сотни грамм, в зависимости от срока действия) лекарственной субстанции. Также остается высокий риск возникновения дисульфирамовых психозов при неравномерном высвобождении препарата.
Цианамид (Temposil, Dipsan, Abstem, Colme) обладает надежным и быстрым, в сравнении с дисульфирамом, антиалкогольным эффектом. Прием алкоголя на фоне лечения этим препаратом вызывает аверсивную реакцию (приливы крови к лицу, тошноту, тахикардию, одышку и т.п.). Цианамид безопасен и вызывает меньше вредных побочных эффектов, чем дисульфирам (Mokasa. H. The Journal of the Kurume Medical Association. 22, 1632. 1959; Mokasa. H. Psychiatr. Neurol. Jap., 64, 469. 1962; Lancet (Apr. 24, 1976): 911-912).
Сравнительное исследование клинической эффективности цианамида и дисульфирама вывило: более быстрое формирование сенсибилизации к алкоголю, мягкую, но достаточную выраженность аверсивной реакции, отсутствие грубых побочных расстройств, подавление влечения к алкоголю (Иванец Н.Н. Отчет о результатах сравнительного открытого клинико-катамнестического исследования препарата КОЛМЕ в комплексном лечении больных с зависимостью от алкоголя. Национальный научный центр. 2006, с.26).
Сенсибилизационное воздействие цианамида на алкоголь проявляется примерно через 45-60 минут и длится около 12 часов. Недостатками препарата является необходимость ежедневного приема, а также термолабильность активного начала, которое легко разрушается горячей пищей. Длительно действующих зарегистрированных лекарственных форм цианамида в настоящее время в мире не существует. При лечении наркомании цианамид применяется в рамках комплексной терапии.

Более перспективным является использование антагонистов опиатного рецептора, таких как налоксон, налтрексон, дипренофин, этазоцин левалофан метазоцин, налофин, или их солей (US 5086058, US 4882335). Наибольшее распространение из них получили налоксон и налтрексон. Налоксон используется, как правило, в виде инъекций в дозе 0,4-10,0 мг в день, налтрексон - перорально в дозе от 50 до 200 мг перед приемом алкоголя. Эффективность налтрексона, антагониста опиатных рецепторов, в лечении алкоголизма изучалась в многочисленных двойных слепых рандомизированных плацебо-контролируемых исследованиях. Выявлена большая эффективность налтрексона по сравнению с плацебо по таким показателям, как период времени до рецидива алкоголизма и процент трезвых дней. Есть исследования, указывающие на то, что налтрексон эффективнее, чем плацебо, стабилизирует ремиссию и предотвращает наступление развернутого рецидива алкоголизма вслед за срывом (единичным эпизодом употребления алкоголя). В 2006 в США зарегистрирован длительно действующий препарат Vivitrol компании Alkermes, на основе налтрексона, как средство лечения алкоголизма.
Многоцентровые исследования показывают, что в зависимости от дозы препарата и пола пациентов на 20-35% снижается количество случаев тяжелого пьянства, 30% больных, получавших Vivitrol в течение 3 месяцев, оставались в ремиссии (J.С. Garbutt et al., JAMA, April 6, 2005. - Vol. 293, no.13, 1617-1625). Однако мультицентровое двойное слепое рандомизированное исследование, проведенное в США учеными Йельского университета на больных с хронической тяжелой алкогольной зависимостью, не выявило у налтрексона преимуществ по сравнению с плацебо (Volpicelli JR, et al. Arch Gen Psychiatry, 1992; 49(11): 876-880; Volpicelli JR, et al. Arch Gen Psychiatry, 1997; 54: 737-742).
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту к заявляемому изобретению является препарат S-(N,N-диэтилкарбомоил)-глутатион, далее ДЭКТ (пат. США №7250401, 2005), обладающий нейропротективным действием, который может использоваться для профилактики и лечения алкоголизма в виде растворов, капсул, взвесей, суспензий и т.д. Конкретная технология применения и достигаемые результаты по лечению алкоголизма с его использованием в просмотренной научно-технической литературе отсутствуют. Как показали проведенные эксперименты, недостатком применения ДЭКТ в этом направлении является относительная непродолжительность его действия. Уже через 24 часа после введения в организм его содержание в плазме крови становится незначительным.
Задачей заявляемого изобретения является разработка препарата на основе ДЭКТ для лечения алкогольной зависимости, обладающего пролонгированным действием, т.е. обеспечивающего поддержание дозированной терапевтической концентрации лекарственного средства в биологических жидкостях пациента на требуемом уровне в течение всего периода лечения (30-45 суток и более).
Технический результат достигался созданием лекарственного средства в форме микрогранул, представляющего собой суспензию в растительном масле наночастиц с размерами 20-500 нм, состоящего из смеси ДЭКТ и полиглюкина в массовом соотношении от 1:4 до 3:7.
Использование наночастиц меньшего размера затруднено по технологическим причинам, использование более крупных частиц снижает эффективность воздействия и длительность хранения суспензии. Проведенные эксперименты (табл.2) показали, что повышение или понижение содержания ДЭКТ возможно, однако понижает длительность действия лекарственного средства.
Наиболее удобна в применении суспензия, содержащая 20-25 мас.% наночастиц, которая отличается стабильностью в течение нескольких месяцев. Применение более высоких концентраций наночастиц снижает время хранения препарата. Менее концентрированные суспензии требуют введения больших количеств используемого средства.
В качестве растительного масла суспензия содержит фармацевтически приемлемое растительное масло, например оливковое, кунжутное или кокосовое масло.
Заявляемое средство готовят путем смешения ингредиентов, измельчения в баллистической мельнице ДЭКТ до образования частиц размером 20-500 нм, с последующим суспендированием наночастиц в растворе полиглюкина, лиофильной сушкой полученного раствора, его повторным помолом в баллистической мельнице и суспендированием в масле.
Сущность заявляемого изобретения и его промышленная применимость иллюстрируются следующими примерами.
Пример 1. ДЭКТ измельчали в баллистической мельнице до образования наночастиц размером 20-500 нм. Навеску массой 2 г ДЭКТ суспендировали в 100 мл  6%  водного раствора полиглюкина. Затем полученную суспензию подвергали замораживанию при -70°С и подвергали лиофильной сушке. Полученную субстанцию дополнительно подвергали измельчению на баллистической мельнице до получения фракции 20-250 нм, содержащей 25% ДЭКТ. 1 г полученной сухой смеси диспергировали в 4 г кокосового масла, получив суспензию, содержащую 20% наночастиц (5 мас.% ДЭКТ).
Пример 2. Опыты были проведены на крысах-самцах линии Вистар массой 190-240 грамм. Животных получали из селекционной станции Рапполово (Санкт-Петербург). Крыс размещали по 6 особей в стандартных клетках. Животные привыкали к условиям лаборатории в течение минимум 1 недели при неограниченном доступе к пище (гранулированный корм) и воде в виварии с регулируемым световым режимом (12 ч свет - с 8 часов утра/12 ч темнота), температурой воздуха 22±1°С и влажностью 60%.
Каждая экспериментальная группа состояла из 6 животных. Всего было 5 групп животных: контрольная группа 1 (растворитель с изотоническим раствором NaCl), группа 2 (однократное внутримышечное введение физраствора с порошком ДЭКТ со средним размером частиц 0,1 мм в дозе ДЭКТ 20 мг/кг), группа 3 (однократное внутримышечное введение физраствора с порошком смеси ДЭКТ с полиглюкином в соотношении 20:80 со средним размером частиц 0,1 мм в дозе ДЭКТ 20 мг/кг), группа 4 (однократное внутримышечное введение физраствора с наночастицами ДЭКТ (после первого помола) в дозе ДЭКТ 20 мг/кг), группа 5 (однократное внутримышечное введение физраствора с препаратом 1 в дозе ДЭКТ 20 мг/кг) и группа 6 (однократное внутримышечное введение препарата 1 в виде суспензии в кокосовом масле в дозе ДЭКТ 20 мг/кг).
Эффект от введения препарата оценивали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Обработку полученных результатов проводили с использованием прикладной программы "INSTAT". Результаты экспериментов анализировали с использованием дисперсионного анализа (Repeated Measures Analysis of Variance) с последующим выявлением достоверных отличий между группами (Post hoc анализ с помощью Tukey-Kramer Multiple Comparisons test). Результаты по группам животных усредняли. Полученные результаты приведены в таблице 1 в виде процентов от исходного введенного вещества.
Таблица 1
Данные по влиянию ингредиентов на пролонгированное действие заявляемого средства
Группа животных
Содержание ДЭКТ в плазме в процентах от исходного вещества
4 часов
3 суток
14 суток
21 сутки
45 суток
1 (контроль)
нет
нет
нет
нет
нет
2 (ДЭКТ-частицы 0,1 мм)
100
3,2
<2
нет
нет
3 (ДЭКТ + полиглюкин - частицы 0,1 мм)
100
8,2
3,7
нет
нет
4 (ДЭКТ - наночастицы)
100
12
<2
нет
нет
5 (ДЭКТ + полиглюкин обр.1)
100
49,1
14,2
4,8
<2
6 (суспензия в масле обр.1)
100
39,2
20,1
15,2
5,2
Полученные результаты свидетельствуют, что введение заявляемого средства обеспечивает пролонгацию действия ДЭКТ до 45 суток.
Пример 3. В условиях примера 1, изменяя соотношение ингредиентов, были получены образцы с различным соотношением полиглюкина и ДЭКТ, которые были диспергированы в растительном масле с концентрацией 25% наночастиц. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Таблица 2
Влияние соотношения ДЭКТ : полиглюкин (ПЛГА) на пролонгированный эффект при введении суспензии на основе наночастиц
Состав композиции
15% ДЭКТ + 85% ПЛГА*
20% ДЭКТ + 80% ПЛГА**
25% ДЭКТ + 75% ПЛГА*
28% ДЭКТ + 72% ПЛГА***
30% ДЭКТ + 70% ПЛГА*
34% ДЭКТ + 66% ПЛГА**
Содержание ДЭКТ в плазме через 1 час после введения
56,7
56,7
56,7
56,7
56,7
56,7
Содержание ДЭКТ в плазме через 4 часа после введения
100
100
100
100
100
100
Содержание ДЭКТ в плазме через 24 часа после введения
33,1
45,3
57,6
64,9
79,7
84,7
Содержание ДЭКТ в плазме через 3 сут после введения
18,7
26,6
38,8
43,6
41,9
63,7
Содержание ДЭКТ в плазме через 7 сут после введения
3,9
17,2
24,6
26,3
21,2
31,7
Содержание ДЭКТ в плазме через 14 сут после введения
2,4
14,8
18,5
21,9
17,3
12,7
Содержание ДЭКТ в плазме через 21 сут после введения
<2
11,6
13,4
14,7
10,2
6,7
Содержание ДЭКТ в плазме через 30 сут после введения
<2
8,3
10,4
9,7
8,1
<2
Содержание ДЭКТ в плазме через 45 сут после введения
<2
6,9
5,8
4,5
3,7
<2
Содержание ДЭКТ в плазме через 60 сут после введения
<2
4,9
3,7
2,7
2,0
<2
Содержание ДЭКТ в плазме через 75 сут после введения
<2
3,4
2,7
<2
<2
<2
* суспензия в оливковом масле; ** суспензия в кокосовом масле;
*** суспензия в кунжутном масле;
Полученные результаты свидетельствуют, что наибольшее пролонгирующее действие имеет средство, содержащее 20-25 мас.% ДЭКТ.
Пример 4. Группе из 5 кроликов вводили внутримышечно суспензию образца 1 в кокосовом масле в дозе 10 мг/кг. Концентрацию ДЭКТ в кровотоке кроликов определяли методом ВЭЖХ. Полученные результаты приведены в таблице 3.
Таблица 3
Зависимость концентрации ДЭКТ в кровотоке кроликов от времени при внутримышечном введении пролонгированной формы
№№
Время циркуляции
Концентрация ДЭКТ по данным ВЭЖХ, нанограмм/мл
1
24 часа
126
2
2 суток
83
3
3 суток
64
4
4 суток
53
5
5 суток
51
6
6 суток
47
7
7 суток
46
8
2 недели
44
9
3 недели
41
10
4 недели
37
11
5 недель
35
12
6 недель
32
13
7 недель
26
14
8 недель
23
15
9 недель
21
Полученные результаты исследования подтвердили эффективность предлагаемого препарата и наличие значительного эффекта задержки и медленного высвобождения действующего начала при введении заявляемой формы заявляемого средства.