ПРОИЗВОДНЫЕ ОКСАЗОЛИЛМЕТИЛОВОГО ЭФИРА В КАЧЕСТВЕ АГОНИСТОВ РЕЦЕПТОРА ALX
OXAZOLYL-METHYLETHER DERIVATIVES AS ALX RECEPTOR AGONISTS

Настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира формулы (I) и их применению в качестве лекарственных средств. Настоящее изобретение также относится к родственным вопросам, включая способы получения соединений, фармацевтические композиции, содержащие одно или большее количество соединении формулы (I), и в особенности, к их применению в качестве агонистов рецептора ALX.
LAI
ALXR (также называющийся рецептором липоксина А4, FPRL1, FPR2; раскрытый в WO 2003/082314, как нуклеотидная последовательность SEQ ID NO:1 и аминокислотная последовательность SEQ ID NO:2) является представителем семейства рецепторов, связанных с белком G. Установлено, что ALXR опосредует мобилизацию кальция в ответ на высокую концентрацию формилметионин-лейцилфенилаланинового пептида. Кроме того, установлено, что метаболит липида, липоксин А4 (LXA4), и его аналоги с высоким сродством связывают ALXR и усиливают выработку арахидоновой кислоты и активацию белка G в трансфицированных посредством ALXR клетках (Chiang et al., Pharmacol. Rev., 2006, 58, 463-487). Влияние LXA4 исследовано с помощью множества моделей заболеваний на животных и установлено, что LXA4 обладает высокой противовоспалительной и способствующей разрешению заболеваний активностью. Моделями заболеваний, в которых LXA4 или производные или стабильные аналоги проявляют активность in vivo, являются, например, воспаление кожи, дорсального воздушного кармана, ишемию/реперфузионное поражение, перитонит, колит, мезангиопролиферативный нефрит, плеврит, астма, муковисцидоз, сепсис, повреждение роговицы, ангиогенез, периодонтит, вызванную каррагенаном гипералгезию и реакцию трансплантат против хозяина (GvHD) (Schwab and Serhan, Current Opinion in Pharmacology, 2006, 414-420). ALXR также идентифицировали как функциональный рецептор различных пептидов, включая фрагмент прионного белка, пептид, полученный из штамма gp120 вируса иммунодефицита человека (ВИЧ)-1 и амилоида-бета 1-42 (Ab42) (обзор, см. Le et al., Protein Pept Lett., 2007, 14, 846-853), и было предположено, что он участвует в патогенезе болезни Альцгеймера (AD) в некоторых решающих путях (Yazawa et al., FASEB J., 2001, 15, 2454-2462). Активация ALXR в макрофагах и микроглиальных клетках инициирует опосредуемый белком G каскад сигналов, который усиливает направленную миграцию клеток, фагоцитоз и высвобождение медиатора. Эти явления могут обеспечивать рекрутмент мононуклеарных клеток вблизи от старческих бляшек в областях поражения головного мозга с помощью БА, где чрезмерно продуцируется и накапливается Ab42. Хотя накопление лейкоцитов на участках поражения ткани можно считать врожденным ответом хозяина, направленным на устранение токсичных агентов, активированные мононуклеарные фагоциты также выделяют различные вещества, такие как супероксидные анионы, которые могут быть токсичными для нейронов. Таким образом, ALXR может опосредовать провоспалительные ответы, вызванные Ab42 в пораженном БА головном мозге, и обострять прогрессирование заболевания. Также сообщали, что гуманин (HN), пептид, способный оказывать нейропротективное воздействие, воздействует совместно с ALXR человека и с Ab42 на мононуклеарные фагоциты и линии нервных клеток и было предположено, что нейропротективная активность HN может быть объяснена конкуренцией с занятостью посредством ALXR (Ying et al., J. Immunol., 2004, 172, 7078-7085).
Биологические характеристики агонистов ALXR включают, но не ограничиваются только ими, миграцию/активацию моноцитов/макрофагов/микроглиальных клеток/дендритных клеток, миграцию/активацию нейтрофилов, регуляцию активации, пролиферации и дифференциации лимфоцитов, регуляцию воспаления, регуляцию продуцирования и/или высвобождения цитокинов, регуляцию продуцирования и/или высвобождения провоспалительного медиатора, регуляцию иммунной реакции.
Настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, которые являются непептидными агонистами рецептора ALX человека. Соединения применимы для предупреждения или лечения заболеваний, которые отвечают на модулирование рецептора ALX, таких как воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей, аллергические патологические состояния, опосредуемые с помощью ВИЧ ретровирусные инфекции, сердечно-сосудистые нарушения, нейровоспаление, неврологические нарушения, боль, опосредуемые прионом заболевания и опосредуемые амилоидом нарушения (предпочтительно болезнь Альцгеймера); кроме того, они применимы для предупреждения или лечения аутоиммунных заболеваний и для модулирования иммунных ответов (предпочтительно вызванных вакцинацией).
Другие производные аминотриазола, которые также являются агонистами рецептора ALX, раскрыты в WO 2009/077990 и WO 2010/143116. Другие агонисты рецептора ALX раскрыты в WO 2009/077954 и WO 2010/143158.
По сравнению с соединениями, раскрытыми в WO 2009/077990, тип гетероарильной группы, присоединенной к фрагменту простого алкоксиалкилового эфира, обладает неожиданно сильным влиянием на агонистическую активность соединений, заявленных в настоящем изобретении. Кроме того, по данным исследования стабильности в плазме соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, являются более стабильными, что может привести к более слабому ковалентному связыванию в присутствии плазмы.
Ниже описаны различные варианты осуществления настоящего изобретения.
1) Настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира формулы (I),
в которой
1
1
4
1
4
1
2
1
2
R обозначает фенил, который является незамещенным или монозамещенным галогеном, (C-C)алкилом, (C-C)алкоксигруппой, (C-С)фторалкилом или (С-С)фторалкоксигруппой;
2
R обозначает водород, метил или циклопропил (и предпочтительно водород или метил);
3
4
R и R являются одинаковыми и обозначают водород или метил; и
5
1
2
R обозначает (С-С)алкил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
Соединения формулы (I), соответствующие варианту осуществления (1), могут содержать один или большее количество стереогенных или асимметрических центров, таких как один или большее количество асимметрических атомов углерода. Заместители у двойной связи могут находиться в (Z)- или (Е)-конфигурации, если не указано иное. Таким образом, соединения формулы (I) могут находиться в виде смесей стереоизомеров или предпочтительно в виде чистых стереоизомеров. Смеси стереоизомеров можно разделить по методикам, известным специалисту в данной области техники.
В следующих абзацах приведены определения различных химических фрагментов соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, и они применимы во всем описании и формуле изобретения, если в других определениях не приведены более широкие или более узкие определения.
x
y
1
4
Термин "алкил" при использовании по отдельности или в комбинации означает обладающую линейной или разветвленной цепью алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода. Термин "(C-C)алкил" (x и y являются целыми числами) означает алкильную группу, определенную выше, содержащую от x до y атомов углерода. Например, (С-С)алкильная группа содержит от 1 до 4 атомов углерода. Типичные примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил.
1
4
1
4
1
4
В случае, если (C-C)алкильная группа является заместителем фенильной группы, термин "(С-С)алкил" означает (С-С)алкильные группы, определенные выше. Примерами указанных групп являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил. Предпочтительным является метил.
5
1
2
1
2
В случае если "R" обозначает "(С-С)алкил", термин означает (C-С)алкильные группы, определенные выше. Примерами указанных групп являются метил и этил. Предпочтительным является метил.
x
y
1
4
Термин "алкоксигруппа" при использовании по отдельности или в комбинации означает группу алкил-O-, где алкильная группа является такой, как определено выше. Термин "(C-C)алкоксигруппа" (x и y являются целыми числами) означает алкоксигруппу, определенную выше, содержащую от x до y атомов углерода. Например, (С-С)алкоксигруппа содержит от 1 до 4 атомов углерода. Типичные примеры алкоксигрупп включают метоксигруппу, этоксигруппу, н-пропоксигруппу, изопропоксигруппу, н-бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу и трет-бутоксигруппу. Предпочтительной является метоксигруппа.
x
y
1
2
1
Термин "фторалкил" означает алкильную группу, определенную выше, содержащую 1 или 2 атома углерода, в которой 1 или 2 (и, возможно, все) атомы водорода заменены фтором. Термин "(C-C)фторалкил" (x и y являются целыми числами) означает алкильную группу, определенную выше, содержащую от х до у атомов углерода. Например, (C-C)фторалкильная группа содержит 1 или 2 атома углерода, и в ней от 1 до 5 атомов водорода заменены фтором. Типичные примеры фторалкильных групп включают дифторметил, трифторметил и 2,2,2-трифторэтил. Предпочтительным является (С)фторалкил, такой как трифторметил и дифторметил. Наиболее предпочтительным является трифторметил.
x
y
1
2
1
Термин "фторалкоксигруппа" означает алкоксигруппу, определенную выше, содержащую 1 или 2 атома углерода, в которой один или большее количество (и, возможно, все) атомов водорода заменены фтором. Термин "(C-C)фторалкоксигруппа" (x и y являются целыми числами) означает фторалкоксигруппу, определенную выше, содержащую от x до y атомов углерода. Например, (С-С)фторалкоксигруппа содержит 1 или 2 атома углерода, и в ней от 1 до 5 атомов водорода заменены фтором. Типичные примеры фторалкоксигрупп включают трифторметоксигруппу, дифторметоксигруппу и 2,2,2-трифторэтоксигруппу. Предпочтительными являются (С)фторалкоксигруппы, такие как трифторметоксигруппа и дифторметоксигруппа. Наиболее предпочтительной является трифторметоксигруппа.
Термин галоген означает фтор, хлор, бром или йод, предпочтительно фтор, хлор или бром, и наиболее предпочтительно фтор или хлор.
2) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим варианту осуществления (1), в которых
1
1
4
1
4
1
2
1
2
R обозначает фенил, который является незамещенным или монозамещенным галогеном, (С-С)алкилом, (С-С)алкоксигруппой, (C-С)фторалкилом или (С-С)фторалкоксигруппой;
2
R обозначает водород, метил или циклопропил (и предпочтительно водород или метил;
3
4
R и R являются одинаковыми и обозначают водород или метил; и
5
R обозначает метил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
3) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим варианту осуществления (1), в которых
1
R обозначает фенил, который является незамещенным или монозамещенным фтором, хлором, метилом, метоксигруппой, трифторметилом или трифторметоксигруппой (и предпочтительно является незамещенным или монозамещен фтором, хлором, метилом или трифторметилом);
2
R обозначает водород или метил (и предпочтительно метил);
3
4
R и R являются одинаковыми и обозначают водород или метил; и
5
R обозначает метил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
4) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(3), в которых
1
R обозначает фенил, который является незамещенным или монозамещен фтором, хлором, метилом, метоксигруппой, трифторметилом или трифторметоксигруппой;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
5) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(3), в которых
1
4
R обозначает фенил, который является незамещенным или монозамещенным галогеном или (C-C)алкилом (и предпочтительно является незамещенным или монозамещен фтором, хлором или метилом);
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
6) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(3), в которых
1
1
4
R обозначает фенил, который является незамещенным или монозамещенным (C-C)алкилом (и предпочтительно монозамещен метилом);
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
7) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(6), в которых
1
в случае если R обозначает монозамещенную фенильную группу, то указанная фенильная группа замещена в мета-положении;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
8) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(7), в которых
2
R обозначает водород или метил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
9) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(7), в которых
2
R обозначает водород;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
10) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(7), в которых
2
R обозначает метил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
11) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(10), в которых
3
4
R и R оба обозначают водород;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
12) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(10), в которых
3
4
R и R оба обозначают метил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
13) В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к производным оксазолилметилового эфира, соответствующим любому из вариантов осуществления (1)-(12), в которых
5
R обозначает метил;
и к солям (предпочтительно фармацевтически приемлемым солям) таких соединений.
14) Предпочтительные соединения формулы (I), определенные в варианте осуществления (1), выбраны из группы, включающей:
N-(2-((4-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-фенилоксазол-4-карбоксамид;
5-(3-хлорфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(3-(трифторметил)фенил)оксазол-4-карбоксамид;
5-(3-хлорфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)оксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(3-метоксифенил)оксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(3-метоксифенил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид;
5-(3-фторфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид;
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2H-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(3-(трифторметокси)фенил)оксазол-4-карбоксамид;
2-циклопропил-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид; и
N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид;
или соли (предпочтительно фармацевтически приемлемые соли) таких соединений.
15) Другие предпочтительные соединения формулы (I), определенные в варианте осуществления (1), выбраны из группы, включающей:
N-(2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид; и
N-(2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид;
или соли (предпочтительно фармацевтически приемлемые соли) таких соединений.
2
2
2
В объем настоящего изобретения также входят изотопно-меченые, предпочтительно меченые с помощью Н (дейтерий) соединения формулы (I), эти соединения идентичны соединениям формулы (I) с тем отличием, что один или большее количество атомов заменены атомами, обладающими таким же атомным номером, но атомной массой или массовым числом, отличающимся от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Изотопно-меченые, предпочтительно меченые с помощью Н (дейтерий) соединения формулы (I) и их соли входят в объем настоящего изобретения. Замещение водорода более тяжелым изотопом Н (дейтерий) может привести к большей метаболической стабильности, приводящей, например, к увеличенному периоду полувыведения in vivo или возможности использования меньших доз, или может привести к уменьшению ингибирования ферментов цитохромов Р450, что приводит, например, к улучшенному профилю безопасности. В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединения формулы (I) не являются изотопно-мечеными или они мечены только одним или большим количеством атомов дейтерия. В одном подварианте осуществления соединения формулы (I) совсем не являются изотопно-мечеными. Изотопно-меченые соединения формулы (I) можно получить по методикам, аналогичным описанным ниже в настоящем изобретении, но с использованием соответствующих изтопозамещенных вариантов подходящих реагентов или исходных веществ.
Термин "фармацевтически приемлемые соли" означает нетоксичные соли присоединения с неорганической или органической кислотой и/или основанием, см. например, "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1986), 33, 201-217.
Если для соединений, солей, фармацевтических композиций, заболеваний и т.п. используется форма множественного числа, это также означает одно соединение, соль и т.п.
Соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для применения в качестве лекарственных средств. В частности, соединения формулы (I) модулируют рецептор ALX, т.е. они выступают в качестве агонистов рецептора ALX, и применимы для предупреждения или лечения заболеваний, которые отвечают на активацию рецептора ALX, таких как воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей, аллергические патологические состояния, ретровирусные инфекции опосредуемые ВИЧ, сердечно-сосудистые нарушения, нейровоспаление, неврологические нарушения, боль, опосредуемые прионом заболевания и опосредуемые амилоидом нарушения (предпочтительно болезнь Альцгеймера); кроме того, они применимы для модулирования иммунных ответов (предпочтительно вызванных вакцинацией). Соединения формулы (I) являются особенно подходящими для предупреждения или лечения заболеваний, таких как воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей, аллергические патологические состояния, сердечно-сосудистые нарушения, нейровоспаление, неврологические нарушения, боль, опосредуемые прионом заболевания и опосредуемые амилоидом нарушения (предпочтительно болезнь Альцгеймера).
В частности, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения заболеваний, выбранных из группы, включающей воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния.
Воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния включают, но не ограничиваются только ими, одну, несколько или все указанные ниже группы заболеваний и нарушений:
1) Острое поражение легких (ALI); острый респираторный дистресс-синдром взрослых (ARDS); хроническое обструктивное заболевание легких, дыхательных путей или легочное заболевание (COPD, COAD или COLD), включая хронический бронхит или связанную с ним одышку; эмфизему; а также обострение гиперреактивности дыхательных путей вследствие другой лекарственной терапии, в частности терапии другим вдыхаемым лекарственным средством. Воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния предпочтительно включают COPD, COAD и COLD.
2) Другие воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния включают бронхит любого типа или генеза.
3) Другие воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния включают бронхоэктаз и пневмокониоз любого типа или генеза.
4) Другие воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния включают астму любого типа или генеза, включая наследственную астму (неаллергическую) и приобретенную (аллергическую) астму, контролируемую астму, неконтролируемую астму, слабую астму, астму средней тяжести, тяжелую астму, бронхиальную астму, астму напряжения, профессиональную астму и астму, вызванную бактериальной инфекцией.
5) В другом варианте осуществления соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются особенно подходящими для предупреждения или лечения воспалительных заболеваний. Воспалительные заболевания включают одну, несколько или все указанные ниже группы заболеваний и нарушений:
5а) В частности, воспалительные заболевания означают связанные с нейтрофилами нарушения, предпочтительно связанные с нейтрофилами нарушения дыхательных путей, включая гипернейтрофилию, поскольку она влияет на дыхательные пути и/или легкие. Другие связанные с нейтрофилами нарушения также включают периодонтит, гломерулонефрит и муковисцидоз.
5b) Другие воспалительные заболевания включают заболевания кожи, такие как псориаз, контактный дерматит, атопический дерматит, герпетиформный дерматит, склеродермию, аллергические васкулиты, уртикарию, красную волчанку и эпидермолиз.
5с) Другие воспалительные заболевания также означают заболевания или патологические состояния, содержащие воспалительный компонент. Заболевания или патологические состояния, содержащие воспалительный компонент, включают, но не ограничиваются только ими, заболевания и патологические состояния, влияющие на глаза, такие как увеит (передний, промежуточный и задний), увеит при синдроме Бехчета, конъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит при синдроме Шегрена, и весенний конъюнктивит (и предпочтительно конъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит и весенний конъюнктивит); заболевания, влияющие на нос, включая ринит и аллергический ринит (и предпочтительно аллергический ринит); и воспалительные заболевания, в которых участвуют аутоиммунные реакции или которые обладают аутоиммунным компонентом или этиологией, такие как системная красная волчанка, анкилозирующий спондилит, синдром Бехчета, синдром Шегрена, полихондрия, склеродермия, гранулематоз Вегенера, дерматомиозит, хронический активный гепатит, злокачественная миастения, синдром Стивенса-Джонсона, идиопатический спру, аутоиммунная воспалительная болезнь кишечника (например, язвенный колит и болезнь Крона), эндокринная офтальмопатия, хронический гиперчувствительный пневмонит, первичный биллиарный цирроз, сухой кератоконъюнктивит и весенний кератоконъюнктивит, интерстициальный фиброз легких, псориатический артрит и гломерулонефрит (и предпочтительно системная красная волчанка, полихондрия, склеродермия, гранулематоз Вегенера, дерматомиозит, хронический активный гепатит, злокачественная миастения, синдром Стивенса-Джонсона, идиопатический спру, аутоиммунная воспалительная болезнь кишечника (например, язвенный колит и болезнь Крона), эндокринная офтальмопатия, хронический гиперчувствительный пневмонит, первичный биллиарный цирроз, сухой кератоконъюнктивит и весенний кератоконъюнктивит, интерстициальный фиброз легких, псориатический артрит и гломерулонефрит).
5d) Другие воспалительные заболевания, в которых участвуют аутоиммунные реакции или которые обладают аутоиммунным компонентом или этиологией включают ревматоидный артрит, тиреоидит Хашимото и диабет типа I или II.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения отторжения трансплантата органа или ткани, например, для лечения реципиентов трансплантата сердца, легких, объединенного сердца-легких, печени, почек, поджелудочной железы, кожи или роговицы и предупреждения реакции "трансплантат против хозяина", такой как иногда возникающая после трансплантации костного мозга, в особенности для лечения острого или хронического отторжения алло- и ксеротрансплантата или при трансплантации клеток, продуцирующих инсулин, например, клеток панкреатических островков.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения ретровирусных инфекций опосредуемых ВИЧ.
Опосредуемые ВИЧ ретровирусные инфекции включают, но не ограничиваются только ими, одну, несколько или все группы заболеваний и нарушений, вызванных штаммами ВИЧ-1 и ВИЧ-2, такими как GUN-4v, GUN-7wt, AG204, AG206, AG208, НСМ305, НСМ308, НСМ342, mSTD104 и НСМ309.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения сердечно-сосудистых нарушений.
Сердечно-сосудистые нарушения означают одно или большее количество патологических состояний сердечно-сосудистой системы (включая сердце) и заболевания зависимых органов. Патологические состояния сердечнососудистой системы и заболевания зависимых органов включают, но не ограничиваются только ими, нарушения сердечной мышцы (кардиомиопатия или миокардит), такие как идиопатическая кардиомиопатия, метаболическая кардиомиопатия, которая включает диабетическую кардиомиопатию, алкогольную кардиомиопатию, вызванную лекарственным средством кардиомиопатию, ишемическую кардиомиопатию и гипертензивную кардиомиопатию; атероматозные нарушения основных кровеносных сосудов (макрососудистое заболевание), таких как аорта, коронарные артерии, сонные артерии, цереброваскулярные артерии, почечные артерии, подвздошные артерии, бедренные артерии и подколенные артерии; токсические, вызванные лекарственным средством и метаболические (включая гипертензивные и/или диабетические) нарушения небольших кровеносных сосудов (микрососудистое заболевание), таких как сетчаточные артериолы, гломерулярные артериолы, нервные сосуды, артериолы сердца и связанные с ними капиллярные русла глаз, почек, сердца и центральной и периферической нервных систем; и разрыв бляшек атероматозных поражений главных кровеносных сосудов, таких как аорта, коронарные артерии, сонные артерии, цереброваскулярные артерии, почечные артерии, подвздошные артерии, бедренные артерии и подколенные артерии.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения нейровоспаления. Нейровоспаление означает выработку в клетке сигнальных молекул, активацию глии или активацию путей и ответов глии, провоспалитальных цитокинов или хемокинов, активацию астроцитов или активацию путей и ответов астроцитов, активацию микроглии или активацию путей и ответов микроглии, окислительных связанных со стрессом ответов, таких как выработку синтазы оксида азота и накопление оксида азота, белков острой фазы, утрату синаптопсина и белка постсинаптического уплотнения-95 (PSD-95), компонентов комплементарного каскада, утрату или ослабление синаптической функции, активности протеинкиназы (например, смерть, связанная с активностью протеинкиназы), поведенческие дефицита, поражение клеток (например, поражение нейронных клеток), гибель клеток (например, гибель нейронных клеток) и/или осаждение амилоида β в амилоидных бляшках.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения неврологических нарушений.
В частности, неврологические нарушения включают, но не ограничиваются только ими, эпилепсию, удар, ишемию головного мозга, паралич головного мозга, рецидивирующий-ремиссирующий рассеянный склероз, прогрессирующий рассеянный склероз, зрительный миелоневрит, клинически изолированный синдром, синдром Альперса, боковой амиотрофический склероз (ALS), старческое слабоумие, слабоумие с тельцами Леви, синдром Ретта, травму спинного мозга, травматическое повреждение головного мозга, невралгию тройничного нерва, хроническую воспалительную демиелинизирующую полиневропатию, синдром Гийена-Барре, глоссофарингеальную невралгию, паралич Белла, злокачественную миастению, мышечную дистрофию, прогрессирующую мышечную атрофию, прогрессирующую врожденную бульбарную мышечную атрофию, синдромы грыжи, перелома или выпадения межпозвоночного диска, шейный спондилез, нарушения сплетения, компрессионный синдром разрушения верхней апертуры грудной клетки, периферические невропатии, слабое ухудшение познавательной способности, ухудшение познавательной способности, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, хорею Гентингтона, атрофию мышц позвоночника, заболевания, связанные с полиглутамином (такие как спинобульбарная мышечная атрофия (болезнь Кеннеди), спинально-церебеллярная атаксия типа 1, 2, 3 (болезнь Мачадо-Джозефа), 6, 7, 17) и мозговую малярию (и предпочтительно эпилепсию, удар, ишемию головного мозга, паралич головного мозга, рецидивирующий-ремиссирующий рассеянный склероз, прогрессирующий рассеянный склероз, синдром Альперса, боковой амиотрофический склероз (ALS), старческое слабоумие, слабоумие с тельцами Леви, синдром Ретта, травму спинного мозга, травматическое повреждение головного мозга, невралгию тройничного нерва, глоссофарингеальную невралгию, паралич Белла, злокачественную миастению, мышечную дистрофию, прогрессирующую мышечную атрофию, прогрессирующую врожденную бульбарную мышечную атрофию, синдромы грыжи, перелома или выпадения межпозвоночного диска, шейный спондилез, нарушения сплетения, компрессионный синдром разрушения верхней апертуры грудной клетки, периферические невропатии, слабое ухудшение познавательной способности, ухудшение познавательной способности, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и хорею Гентингтона).
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения боли. Боль включает, но не ограничивается только ими, невропатическую боль, примерами которой являются такие патологические состояния, как диабетическая невропатия, постгерпетическая невралгия, невралгия тройничного нерва, болезненная диабетическая полиневропатия, боль после удара, боль после ампутации, миелопатическая или радикулопатическая боль, атипическая лицевая боль и синдромы типа каузалгии.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения опосредуемых прионом заболеваний. Опосредуемые прионом заболевания, также известные под названием трансмиссивные губчатые энцефалопатии (TSE), включают, но не ограничиваются только ими, куру, синдром Герстманна-Стройсслера-Шейнкера (GSS), летальную семейную инсомнию (FFI) и болезнь Крейтцфельда-Якоба (CJD).
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для лечения опосредуемых амилоидом нарушений. Опосредуемые амилоидом нарушения определяются, как заболевания и нарушения, которые вызваны амилоидными или амилоидноподобными белками или связаны с ними. Заболевания и нарушения, вызванные амилоидными или амилоидноподобными белками или связанными с ними включают, но не ограничиваются только ими, болезнь Альцгеймера (AD), включая заболевания или патологические состояния, характеризующиеся уменьшением объема памяти познавательной способности, такие как, например, слабое ухудшение познавательной способности (MCI); слабоумие с тельцами Леви; синдром Дауна; внутримозговое кровоизлияние с амилоидозом. В другом варианте осуществления заболевания и нарушения, вызванные амилоидными или амилоидноподобными белками или связанными с ними включают прогрессирующий супрануклеарный паралич, амилоидный амилоидоз легких цепей, семейные амилоидные невропатии, рассеянный склероз, болезнь Крейтцфельда-Якоба, болезнь Паркинсона, мультиинфарктное слабоумие, связанное с ВИЧ слабоумие, боковой амиотрофический склероз (ALS), миозит с включенными тельцами (IBM), возникновение диабета у взрослых и старческий амилоидоз сердца (и предпочтительно прогрессирующий супрануклеарный паралич, рассеянный склероз, болезнь Крейтцфельда-Якоба, болезнь Паркинсона, связанное с ВИЧ слабоумие, боковой амиотрофический склероз (ALS), миозит с включенными тельцами (IBM), возникновение диабета у взрослых и старческий амилоидоз сердца).
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для модулирования иммунных ответов.
Модулирование иммунных ответов включает, но не ограничивается только ими, способы, основанные на введении субъекту композиции по меньшей мере одного антигена и по меньшей мере одного соединения формулы (I), соответствующего любому из вариантов осуществления (1)-(15), или его фармацевтически приемлемых солей. В некоторых случаях содержащую антиген композицию вводят первой, затем вводят композицию по меньшей мере одного соединения формулы (I), соответствующего любому из вариантов осуществления (1)-(15), или его фармацевтически приемлемых солей. В других случаях содержащую антиген композицию вводят последней. Различные композиции можно вводить одновременно, вскоре одну после другой или раздельно во времени. Эти способы и композиции предназначены для терапевтический или профилактической иммунизации (т.е. преднамеренной провокации, усиления, интенсификации или модулирования адаптационного и/или врожденного иммунного ответа). Особые преимущества могут включать одно или большее количество из следующих:
1) Ускоренный и иммунный ответ после введения по меньшей мере одного соединения формулы (I), соответствующего любому из вариантов осуществления (1)-(15), или его фармацевтически приемлемых солей и антигена, по сравнению с введением только антигена;
2) Более высокая чувствительность к небольшим количествам антигена (например, токсина или патогена) или антигенов, которые обычно не вызывают сильные иммунные ответы; и
3) Более эффективное противоопухолевое лечение.
Кроме того, соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются подходящими для предупреждения или лечения муковисцидоза, фиброза легких, легочной гипертензии, заживления ран, диабетической нефропатии, уменьшения воспаления трансплантированной ткани, или воспалительных заболеваний, вызванных патогенными организмами.
Соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), или их фармацевтически приемлемые соли являются особенно подходящими для предупреждения или лечения заболеваний, выбранных из одной, нескольких или всех указанных ниже групп заболеваний и нарушений:
1) Воспалительные заболевания, обструктивные заболевания дыхательных путей и аллергические патологические состояния, такие как острое поражение легких (ALI); острый респираторный дистресс-синдром взрослых (ARDS); хроническое обструктивное заболевание легких, дыхательных путей или легочное заболевание (COPD, COAD или COLD), включая хронический бронхит или связанную с ним одышку; и астму любого типа или генеза, включая наследственную астму (неаллергическую) и приобретенную (аллергическую) астму, контролируемую астму, неконтролируемую астму, слабую астму, астму средней тяжести, тяжелую астму, бронхиальную астму, астму напряжения, профессиональную астму и астму, вызванную бактериальной инфекцией (и предпочтительно острое поражение легких (ALI); острый респираторный дистресс-синдром взрослых (ARDS); и астму любого типа или генеза, включая наследственную астму (неаллергическую) и приобретенную (аллергическую) астму, контролируемую астму, неконтролируемую астму, слабую астму, астму средней тяжести, тяжелую астму, бронхиальную астму, астму напряжения, профессиональную астму и астму, вызванную бактериальной инфекцией);
2) Воспалительные заболевания, такие как связанные с нейтрофилами нарушения, предпочтительно связанные с нейтрофилами нарушения дыхательных путей, включая гипернейтрофилию, поскольку она влияет на дыхательные пути и/или легкие; периодонтит; гломерулонефрит; муковисцидоз; и заболевания кожи, такие как псориаз, контактный дерматит, атопический дерматит, герпетиформный дерматит, склеродермию, аллергические васкулиты, уртикарию, красную волчанку и эпидермолиз;
3) Заболевания, содержащие воспалительный компонент, такие как заболевания и патологические состояния, влияющие на глаза, такие как конъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит и весенний конъюнктивит; воспалительное заболевание, в котором участвует аутоиммунные реакции или которое обладает аутоиммунным компонентом или этиологией; и аутоиммунная воспалительная болезнь кишечника (например, язвенный колит и болезнь Крона);
4) Опосредуемые ВИЧ ретровирусные инфекции, такие как заболевания и нарушения, вызванные штаммами ВИЧ-1 и ВИЧ-2, такими как GUN-4v, GUN-7wt, AG204, AG206, AG208, НСМ305, НСМ308, НСМ342, mSTD104 и НСМ309;
5) Нейровоспаление, которое означает выработку в клетке сигнальных молекул, активацию глии или активацию путей и ответов глии, провоспалитальных цитокинов или хемокинов, активацию астроцитов или активацию путей и ответов астроцитов, активацию микроглии или активацию путей и ответов микроглии, окислительных связанных со стрессом ответов, таких как осаждение амилоида β в амилоидных бляшках.
6) Неврологические нарушения, такие как удар, ишемия головного мозга, болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона;
7) Опосредуемые прионом заболевания, также известные под названием трансмиссивные губчатые энцефалопатии (TSE), такие как куру, синдром Герстманна-Стройсслера-Шейнкера (GSS), летальная семейная инсомния (FFI) и болезнь Крейтцфельда-Якоба (CJD);
8) Опосредуемые амилоидом нарушения;
9) Муковисцидоз, заживление ран и воспалительные заболевания, вызванные патогенными организмами.
Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I), соответствующего любому из вариантов осуществления (1)-(15), для приготовления фармацевтических композиций, предназначенных для лечения и/или профилактики указанных выше заболеваний.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям и к фармацевтическим композициям и препаратам соединений формулы (I), соответствующих любому из вариантов осуществления (1)-(15).
Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, содержит по меньшей мере одно соединение формулы (I), соответствующее любому из вариантов осуществления (1)-(15) (или его фармацевтически приемлемую соль) в качестве активного средства и необязательно носители и/или разбавители, и/или вспомогательные вещества.
Соединения формулы (I), соответствующие любому из вариантов осуществления (1)-(15), и их фармацевтически приемлемые соли можно использовать в качестве лекарственных средств, например, в форме фармацевтических композиций для энтерального (предпочтительно такого, как пероральное) или парентерального введения (включая местное введение или ингаляционное введение).
Приготовление фармацевтических композиций можно провести по методикам, которые должны быть известны любому специалисту в данной области техники (см. например. Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition (2005), Part 5, "Pharmaceutical Manufacturing" [published by Lippincott Williams & Wilkins]), путем внесения описанных соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей, необязательно в комбинации с другим терапевтически полезными веществами в галенову вводимую форму вместе с подходящими нетоксичными инертными терапевтически совместимыми твердыми или жидкими носителями и при необходимости с обычными фармацевтическими вспомогательными веществами.
Настоящее изобретение также относится к способу предупреждения или лечения заболевания или нарушения, указанному в настоящем изобретении, включающему введение субъекту соединения формулы (I), соответствующего любому из вариантов осуществления (1)-(15), или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтически активном количестве.
Любое указание на соединение формулы (I) в этом тексте следует понимать, как указание и на соли (и предпочтительно фармацевтически приемлемые соли) таких соединений, если это является подходящим или целесообразным. Разумеется, предпочтения, указанные для соединений формулы (I), с соответствующими изменениями применимы к солям и фармацевтически приемлемым солям соединений формулы (I). Это относится и к этим соединениям в качестве лекарственных средств, к фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения в качестве активных действующих средств, или применению этих соединений для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения заболеваний, указанных в настоящем изобретении.
Кроме использования применительно к температурам, термин "примерно" (или, альтернативно, "около"), расположенный перед числовым значением "X" в настоящей заявке означает интервал, составляющий от Х -10% от Х до Х +10% от X, и предпочтительно интервал, составляющий от Х -5% от Х до Х +5% от X. В частном случае температур термин "примерно" (или, альтернативно, "около"), расположенный перед значением температуры "Y" в настоящей заявке означает интервал, составляющий от температуры Y -10°C до Y +10°C, и предпочтительно интервал, составляющий от Y -5°C до Y +5°C. Кроме того, термин "комнатная температура" (КТ) при использовании в настоящем изобретении означает температуру, равную примерно 25°C.
Когда выражение "от … до" используется для описания числового диапазона, следует понимать, что крайние точки указанного диапазона явно включены в этот диапазон. Например: если описан диапазон температур, составляющий от 40 до 80°C, это означает, что крайние точки 40 и 80°C входят в этот диапазон, или если переменная определена, как целое число, равное от 1 до 4, это означает, что эта переменная является целым числом, равном 1, 2, 3, или 4.
Соединения формулы (I) можно получить по методикам, приведенным ниже, по методикам, приведенным в примерах или по аналогичным методикам. Оптимальные условия проведения реакции могут меняться в зависимости от конкретных использующихся реагентов или растворителей, но такие условия специалист в данной области техники может определить с помощью стандартных процедур оптимизации.
1
2
3
4
5
Если не указано иное, то типичные группы R, R, R, R и R являются такими, как определено для формулы (I). Другие использующиеся аббревиатуры определены в экспериментальном разделе.
Реакции спиртов с метансульфонилхлоридом (Ms-Cl) могут привести к образованию соответствующего хлоридного или соответствующего мезилатного производного в зависимости от использующихся условий проведения реакции; в данной области техники хорошо известно, что даже небольшие изменения таких условий проведения реакции могут повлиять на выход указанных реакций; следует понимать, что обычно оба реагента, хлорид и мезилат, можно использовать в качестве электрофильных реагентов в рассмотренных ниже реакциях.
А. Синтез конечных продуктов
2
2
3
А.а) Соединения формулы (I) можно получить из аминов структуры 1 по реакции с соответствующим хлорангидридом карбоновой кислоты при температуре, равной примерно КТ, в подходящем растворителе, таком как CHCl, в присутствии основания, такого как EtN или ДИПЭА.
3
2
2
2
2
Соответствующий хлорангидрид карбоновой кислоты можно получить при температуре, равной примерно КТ, из соответствующей карбоновой кислоты структуры 5 по реакции с таким реагентом, как оксалилхлорид, в присутствии ДМФ в подходящем растворителе, таком как толуол. Альтернативно, амины структуры 1 можно ввести в реакцию сочетания с соответствующей карбоновой кислотой структуры 5 с использованием стандартных условий сочетания с получением амида, таких как использование ЭДХ/HOBt/ДМАП или TBTU, или HBTU, или РуВОР в присутствии основания, такого как ДИПЭА или EtM, при температуре, равной примерно КТ, в подходящем растворителе, таком как CHCl (или смесь CHCl и ДМФ) и получить соединения формулы (I).
В. Синтез промежуточных продуктов
2
2
Соединения структуры 1 можно получить из соединений структуры 2 восстановлением нитрогруппы путем гидрирования в присутствии содержащего металл катализатора, такого как Pd/C, Pt/C или PtO, при температуре, равной примерно КТ, в подходящем растворителе, таком как МеОН или EtOH, или восстановлением металлом, таким как железо, в смеси растворителей, такой как НО/EtOH, в присутствии хлорида аммония при температуре в диапазоне от КТ до примерно 95°C.
2
3
2
3
Соединения структуры 2 можно получить по реакции соединений структуры 3 с 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазолом (Т.Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman, J. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) в присутствии основания, такого как KCO или CsCO, в растворителе, таком как ацетон или AcCN, при температуре, равной примерно КТ или 80°C (с добавлением или без добавления тетрабутиламмонийбромида). Альтернативно, реакцию можно провести в присутствии основания, такого как ДИПЭА, в растворителе, таком как ДМФ, ацетон, или в смеси этих двух растворителей, при температуре, равной примерно КТ или 50°C.
2
2
2
Соединения структуры 3 можно получить алкилированием спирта структуры 4 с алкилйодидом в присутствии оксида серебра(1) (AgO) в растворителе, таком как CHCl.
3
4
2
2
Соединения структуры 4, в которой R и R обозначают метил, можно получить путем добавления метилсодержащего реагента Гриньяра к метил-2-(хлорметил)оксазол-4-карбоксилату (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) при температуре, равной ниже КТ (предпочтительно примерно при -78°C), в растворителе, таком как ТГФ, или, альтернативно, путем добавления триметилалюминиевого реагента при температуре, равной примерно 0°C, в растворителе, таком как CHCl.
3
4
4
Соединения структуры 4, в которой R и R обозначают водород, можно получить восстановлением метил-2-(хлорметил)оксазол-4-карбоксилата с использованием диизобутилалюминийгидрида или LiAlH при температуре, равной примерно 0°C, в растворителе, таком как ТГФ.
Кислоты структуры 5 имеются в продаже, хорошо известны в данной области техники или их получают в соответствии с методиками, описанными в WO 2009/077990 (стр.112-116), или аналогичным образом.
Экспериментальная часть
Аббревиатуры (при использовании в настоящем изобретении и приведенном выше описании)
Ас
ацетил
AcCN
ацетонитрил
AlMe<sub>3</sub>
триметилалюминий
COAD
хроническое обструктивное заболевание дыхательных путей
COLD
хроническое обструктивное заболевание легких
COPD
хроническое обструктивное легочное заболевание
ДДМ
детектор с диодной матрицей
ДЦК
N,N′-дициклогексилкарбодиимид
распадов/мин
количество распадов в минуту
ДИПЭА
диизопропилэтиламин
DiBAL-H
диизобутилалюминийгидрид
ДМАП
4-N,N-диметиламинопиридин
МДСИ
модифицированная по методике Дульбекко среда Игла
ДМФ
диметилформамид
ДМСО
диметилсульфоксид
ЭА
этилацетат
ЕС<sub>50</sub>
концентрация, равная половине максимальной эффективной
ЭДХ
N-(3-диметиламинопропил)-N′-этилкарбодиимидгидрохлорид
ИДСР
испарительное детектирование с помощью светорассеяния
экв.
эквивалент(ы)
Et
этил
Эфир или Et<sub>2</sub>O
диэтиловый эфир
Et<sub>3</sub>N
триэтиламин
EtOH
этанол
ФХ
колоночная флэш-хроматография на силикагеле
ФВСУП
флуоресцентное визуализующее устройство для считывания планшетов
FPRL1
формилпептидный рецептор типа 1
GSH
глутатион
ч
час(ы)
HBTU
O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N′,N′-тетраметилуронийгексафторфосфат
ССР (Хенкса)
сбалансированный солевой раствор (Хенкса)
ВИЧ
вирус иммунодефицита человека
МПЧ
микросомы печени человека
HOBt
гидроксибензотриазол
HPLC
высокоэффективная жидкостная хроматография
ME
международные единицы
ЖХ-МС
жидкостная хроматография - масс-спектрометрия
lem
длина волны испускания
lex
длина волны возбуждения
Me
метил
MeOH
метанол
мин
минута (минуты)
мМ
концентрация в милимолях
мкМ
концентрация в микромолях
MC
масс-спектрометрия
Ms
метансульфонил
NADPH
никотинамидадениндинуклеотидфосфат
нм
нанометр
нМ
концентрация в наномолях
ЯМР
ядерный магнитный резонанс
n
пара
PG
защитная группа
ПТФЭ
политетрафторэтилен
РуВОР
бензотриазол-1-илокситрипирролидинофосфонийгексафторфосфат
Соль Рошеле
тартрат калия-натрия
РХЧ
радиохимическая чистота
rf
коэффициент удерживания
об/мин
оборотов в минуту
КТ
комнатная температура
ДСН
додецилсульфат натрия
ТБАФ
тетра-н-бутиламмонийфторид
ТБДМС
трет-бутилдиметилсилил
TBTU
O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N′,N′-тетраметилуронийтетрафторборат
ТФК
трифторуксусная кислота
ТГФ
тетрагидрофуран
TCX
тонкослойная хроматография
t<sub>R</sub>
время удерживания
УФ
ультрафиолетовое излучение
Вид. излучение в видимой области спектра
I. Химические данные
Общие положения. Все температуры указаны в градусах Цельсия (°C). Если не указано иное, то реакции протекают при КТ.
254
254
4
2
3
2
Аналитическую тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводили с использованием пластин 0,2 мм: Merck, Силикагель 60 F. Препаративную тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводили с использованием пластин 0,2 или 0,5 мм: Merck, Силикагель 60 F. Детектирование проводили с помощью УФ-излучения или с использованием раствора KMnO (3 г), KCO (20 г), 5% NaOH (3 мл) и HO (300 мл) с последующим нагреванием.
2
2
3
4
Колоночную флэш-хроматографию (ФХ) и фильтрование проводили с использованием силикагеля 60 Merck (0,063-0,200 мм) или силикагеля Macherey-Nagel (0,063-0,200 мм): для элюирования использовали ЭА, гептан, гексан, CHCl, CHCl, МеОН, NHOH или их смеси.
2
4
R
Условия проведения ЖХ-МС 10 (если не указано иное): Аналитическая: насос для подачи двух компонентов Dionex HPG-3000, MC: Thermo MSQ, ДДМ: Dionex PDA 3000, ИДСР: PolymerLab ELS 2100. Колонка: Ascentis Express С18 2,7 мкм, 2,1×30 мм ВД (внутренний диаметр), выпускающаяся фирмой Sigma-Aldrich, термостатируемая в камере Dionex ТСС-3200. Элюенты: А: HO+0,05% NHOH+2% AcCN; В: AcCN. Методика: Градиентный режим: 5% В→95% В за 2,00 мин. Скорость потока: 1,8 мл/мин. Детектирование: УФ/вид, и/или ИДСР, и MC, t приведены в минутах.
2
R
Условия проведения ЖХ-МС 02 (если не указано иное): Аналитическая: MC: Thermo Finnigan MSQ Plus с насосом для подачи двух компонентов Agilent 1100 и ДДМ. Колонка: Zorbax SB-AQ 5 мкм, 4,6×50 мм ВД, выпускающаяся фирмой Agilent Technologies. Элюенты: А: HO + 0,04% ТФК; В: AcCN; Градиентный режим: 5% В→95% В за 1 мин. Скорость потока: 4,50 мл/мин. Детектирование: УФ/Вид, и/или ИДСР, и MC, t приведены в минутах.
3
3
R
Условия проведения ЖХ-МС 04 (если не указано иное): Аналитическая: Dionex P680, MC: Thermo MSQ Plus, ДДМ: Agilent G1315A, ИДСР: Sedere Sedex 85. Колонка: Waters XBridge C18 5 мкм, 4,6×50 мм. Элюенты: А: вода/NH ([NH]=13 ммолей); В: AcCN. Методика: Градиентный режим: 5% В→95% В за 0,75 мин. Скорость потока: 4,5 мл/мин. Детектирование: уф/вид, и/или ИДСР, и МС, t приведены в минутах.
2
R
Условия проведения ЖХ-МС 06 (если не указано иное): Аналитическая: Насос: Dionex HPG-3200RS, МС: Thermo MSQ Plus, ДДМ: Dionex DAD-3000RS, ИДСР: Sedere Sedex 85. Колонка: Atlantis T3 5 мкм, 4,6×30 мм ВД, выпускающаяся фирмой Waters, термостатируемая (40°C) в камере Dionex TCC-3200. Элюенты: А: HO+0,04% ТФК; В: AcCN. Методика: Градиентный режим: 5% В→95% В за 1,00 мин. Скорость потока: 4,5 мл/мин. Детектирование: Уф/Вид, и/или ИДСР, и МС, t приведены в минутах.
2
R
Условия проведения ЖХ-МС 07 (если не указано иное): Аналитическая. Насос: Dionex HPG-3200RS, МС: Thermo MSQ Plus, ДДМ: Dionex DAD-3000RS, ИДСР: Sedere Sedex 85. Колонка: Zorbax SB-AQ 3,5 мкм, 4,6×50 мм ВД, выпускающаяся фирмой Agilent Technologies, термостатируемая (40°C) в камере Dionex ТСС-3200. Элюенты: А: HO + 0,04% ТФК; В: AcCN. Градиентный режим: 5% В→95% В за 1 мин. Скорость потока: 4,50 мл/мин. Детектирование: Уф/Вид, и/или ИДСР, и МС, t приведены в минутах.
2
4
R
Препаративная ВЭЖХ: X-Bridge С18 5 мкм, 50×19 мм ВД, выпускающаяся фирмой Waters. Элюенты: А: HO + 0,5% NHOH; В: AcCN; Градиентный режим: 10% В→90% В за 5 мин. Скорость потока: 40,0 мл/мин. Детектирование: УФ/Вид, и/или ИДСР, и МС, t приведены в минутах.
ЯМР: Bruker Avance 400 (400 МГц); Varian Mercury 300 (300 МГц); химические сдвиги приведены в част./млн относительно использующегося растворителя; мультиплетности: s = синглет, d = дублет, t = триплет, q = квадруплет, р = пентиплет, hex = секстет, hept = гептет, m = мультиплет, br = широкий, константы спин-спинового взаимодействия приведены в герцах.
Приведенные ниже примеры иллюстрируют настоящее изобретение, но не ограничивают его объем.
Общие методики
Общая методика 1 (GP1): Сочетание с образованием амида
2
2
2
2
2
2
2
2
2
В сосуде, снабженном стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) необходимую кислоту (1,5 экв.) последовательно обрабатывали а) 2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амином (0,1 ммоля, 1,0 экв.), 0,4М раствор в смеси CHCl/ДМФ состава 4:1 (0,25 мл), b) смесью НОВТ (2,0 экв.), ДМАП (0,25 экв.) и ДИПЭА (2,0 экв.) в CHCl (0,25 мл) и с) с помощью ЭДХ (1,5 экв.) в CHCl (0,5 мл). Затем реакционную смесь перемешивали при КТ до завершения реакции. Полученный раствор помещали в шприц, содержащий диатомитовую землю, выпускающуюся фирмой International Sorbent Technology (isolute HM-N)(800 мг), кондиционированную водой (0,6 мл), и шприц промывали с помощью CHCl (5×1 мл). Растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка с помощью препаративной ВЭЖХ давала искомое вещество.
Синтез ссылочных соединений
Ссылочное соединение 1: N-(2-((2-(метоксиметил)тиазол-5-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (70,0 мг, 0,32 ммоля) в CHCl (1,5 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (9,8 мг, 0,08 ммоля), HOBt (52 мг, 0,39 ммоля), ЭДХ (154 мг, 0,81 ммоля) и ДИПЭА (0,22 мл, 1,3 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 2-((2-(метоксиметил)тиазол-5-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (73 мг, 0,32 ммоля) в CHCl (1,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (5,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (5,0 мл) сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,29. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,94 мин, [M+H]=425,09.
Ссылочное соединение 2: N-(2-((5-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (61,0 мг, 0,28 ммоля) в CHCl (1,5 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (8,5 мг, 0,07 ммоля), HOBt (45,6 мг, 0,34 ммоля), ЭДХ (135 мг, 0,70 ммоля) и ДИПЭА (0,19 мл, 1,12 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 2-((5-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (63 мг, 0,28 ммоля) в CHCl (1,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (5,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (5,0 мл) сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,29. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,92 мин, [M+H]=425,09.
Ссылочное соединение 3: N-(2-((5-(метоксиметил)фуран-2-ил)метил)-2Н-1.2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (52 мг, 0,26 ммоля) в CHCl (3,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (8,1 мг, 0,07 ммоля), HOBt (42,8 мг, 0,32 ммоля), ЭДХ (127 мг, 0,66 ммоля) и ДИПЭА (0,2 мл, 1,17 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 2-((5-(метоксиметил)фуран-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (55 мг, 0,26 ммоля) в CHCl (3,0 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (10,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (10,0 мл), затем рассолом (10,0 мл) и сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (6:4 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (6:4 гептан-ЭА)=0,23. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,87 мин, [M+H]=380,26.
Ссылочное соединение 4: N-(2-((5-(метоксиметил)тиофен-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (120 мг, 0,62 ммоля) в CHCl (4,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (19 мг, 0,15 ммоля), HOBt (103 мг, 0,74 ммоля), ЭДХ (301 мг, 1,54 ммоля) и ДИПЭА (0,5 мл, 2,77 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 15 мин. Затем добавляли раствор 2-((5-(метоксиметил)тиофен-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (131 мг, 0,61 ммоля) в CHCl (8,0 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (15,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали 1 н. раствором HCl (15,0 мл), водой (15,0 мл), затем рассолом (15,0 мл) и сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (градиентный режим: от 85:15 гептан-ЭА до 70:30 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде белого твердого вещества. ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,2. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,90 мин, [М+Н]=396,03.
Ссылочное соединение 5: N-(2-((4-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (64 мг, 0,33 ммоля) в CHCl (3,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (10 мг, 0,08 ммоля), HOBt (55 мг, 0,39 ммоля), ЭДХ (157 мг, 0,82 ммоля) и ДИПЭА (0,25 мл, 1,48 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 15 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (74 мг, 0,33 ммоля) в CHCl (3,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (15,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали 1 н. раствором HCl (15,0 мл), водой (10,0 мл), затем рассолом (10,0 мл) и сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (градиентный режим: от 90:10 гептан-ЭА до 60:40 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде белого твердого вещества. ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,15. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,83 мин, [М+Н]=397,21.
Ссылочное соединение 6: N-(2-((2-(метоксиметил)тиазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (42 мг, 0,21 ммоля) в CHCl (3,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (6,6 мг, 0,05 ммоля), HOBt (36 мг, 0,26 ммоля), ЭДХ (102 мг, 0,53 ммоля) и ДИПЭА (0,16 мл, 0,96 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((2-(метоксиметил)тиазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (48 мг, 0,21 ммоля) в CHCl (3,0 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (15,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали 1 н. раствором HCl (10,0 мл), водой (5,0 мл), затем рассолом (10,0 мл) и сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (60:40 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде белого твердого вещества. ТСХ: П(7:3 гептан-ЭА)=0,15. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,83 мин, [М+Н]=397,23.
Ссылочное соединение 7: Н-(2-((2-(метоксиметил)тиазол-5-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (30,0 мг, 0,16 ммоля) в CHCl (1,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (4,8 мг, 0,04 ммоля), HOBt (26 мг, 0,19 ммоля), ЭДХ (76 мг, 0,40 ммоля) и ДИПЭА (0,11 мл, 0,63 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 2-((2-(метоксиметил)тиазол-5-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (36 мг, 0,16 ммоля) в CHCl (0,6 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ВЭЖХ давала искомое соединение в виде бежевого твердого вещества. ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,30. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,87 мин, [М+Н]=397,39.
Ссылочное соединение 8: N-(2-((5-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (30 мг, 0,16 ммоля) в CHCl (1,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (4,8 мг, 0,04 ммоля), HOBt (26 мг, 0,19 ммоля), ЭДХ (76 мг, 0,40 ммоля) и ДИПЭА (0,11 мл, 0,63 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 2-((5-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (36 мг, 0,16 ммоля) в CHCl (0,6 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью препаративной ВЭЖХ давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,31. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,85 мин, [М+Н]=397,40.
Ссылочное соединение 9: N-(2-((2-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (18 мг, 0,10 ммоля) в CHCl (1,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (3,0 мг, 0,02 ммоля), HOBt (15,7 мг, 0,12 ммоля), ЭДХ (46,5 мг, 0,24 ммоля) и ДИПЭА (0,07 мл, 0,39 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((2-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (23,0 мг, 0,10 ммоля) в CHCl (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (10,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (5,0 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (50:50 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (50:50 гептан-ЭА)=0,27. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,86 мин, [М+Н]=408,89.
Ссылочное соединение 10: Н-(2-((2-(метоксиметил)оксазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
2
4
R
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (14 мг, 0,06 ммоля) в CHCl (0,3 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (2 мг, 0,02 ммоля), HOBt (10 мг, 0,08 ммоля), ЭДХ (31 мг, 0,16 ммоля) и ДИПЭА (0,04 мл, 0,26 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((2-(метоксиметил)оксазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (13 мг, 0,06 ммоля) в CHCl (0,3 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (5 мл), органическую фазу промывали водой (5 мл), сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:2 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: t (1:2 гептан-ЭА)=0,36. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,88 мин, [М+Н]=408,69.
Ссылочное соединение 11: N-(2-((4-ацетилоксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2.3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (590 мг, 2,72 ммоля) в CHCl (20 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (82 мг, 0,68 ммоля), HOBt (441 мг, 3,62 ммоля), ЭДХ (1,3 г, 6,79 ммоля) и ДИПЭА (1,8 мл, 10,86 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Затем добавляли раствор 1-(2-((4-амино-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазол-4-ил)этанона (WO 2009/077990, стр.105) (562 мг, 2,72 ммоля) в CHCl (7,0 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (50 мл), органическую фазу промывали водой (50 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде белого твердого вещества: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,35. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,88 мин, [М+Н]=407,05.
Синтез промежуточных продуктов
2-((5-(Метоксиметил)фуран-2-ил)метил)-4-нитро-2Н-1,2,3-триазол
2
2
2
2
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (5-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)фуран-2-ил)метанола (WO 2009077990 A1) (186 мг, 0,83 ммоля) в CHCl (3,0 мл) добавляли к суспензии AgO (288 мг, 1,24 ммоля) и MeI (0,06 мл, 0,99 ммоля). Полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (7:3 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,27. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,74 мин.
2-((5-(Метоксиметил)фуран-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
4
2
4
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 2-((5-(метоксиметил)фуран-2-ил)метил)-4-нитро-2Н-1,2,3-триазола (97 мг, 0,35 ммоля), порошкообразного железа (59 мг, 1,04 ммоля) и NHCl (94 мг, 1,74 ммоля) в смеси EtOH (1,6 мл) и воды (0,8 мл) перемешивали при 90°C в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (20 мл), затем 1 н. раствор NaOH (10 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHSO (10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (95:5 CHCl-MeOH) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (95:5 CHCl-MeOH)=0,39. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,51 мин, [M+H]=209,34.
2-(Метоксиметил)тиофен
2
2
2
2
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющегося в продаже тиофен-2-илметанола (1,46 г, 12,8 ммоля) в CHCl (7,5 мл) обрабатывали с помощью MeI (3,0 мл, 48,2 ммоля), затем с помощью AgO (4,44 г, 19,1 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (95:5 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,67.
5-(Метоксиметил)тиофен-2-карбальдегид
2
4
4
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-(метоксиметил)тиофена (1,23 г, 9,58 ммоля) в ТГФ (50,0 мл) при -75°C по каплям обрабатывали N,N,N′,N′-тетраметилэтилендиамином (2,69 мл, 17,7 ммоля), затем с помощью n-BuLi (6,5 мл 2,7 М раствора в гептане, 17,7 ммоля). Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 90 мин. Затем добавляли ДМФ (4,03 мл, 52,1 ммоля) и полученной смеси давали постепенно нагреться до КТ. Затем смесь выливали в насыщенный водный раствор NHCl (40 мл) и органический слой экстрагировали с помощью ЭА (3×20 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (градиентный режим: от 95:5 гептан-ЭА до 85:15 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде оранжевого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,62 мин.
(5-(Метоксиметил)тиофен-2-ил)метанол
2
4
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 5-(метоксиметил)тиофен-2-карбальдегида (782 мг, 5,01 ммоля) в ЕЮН (10 мл) при 0°C обрабатывали с помощью NaBFLt (379 мг, 10,0 ммоля) и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 5 мин и затем давали нагреться до КТ. Добавляли воду (5 мл) и ЭА (5 мл). Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×15 мл) и объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,51 мин.
2-((5-(Метоксиметил)тиофен-2-ил)метил)-4-нитро-2Н-1,2,3-триазол
2
2
2
3
2
2
4
R
4
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (5-(метоксиметил)тиофен-2-ил)метанола (900 мг, 5,69 ммоля) в сухом CHCl (20,0 мл) при 0°C обрабатывали с помощью EtN (1,19 мл, 8,53 ммоля), затем с помощью ДМАП (70 мг, 0,57 ммоля) и Ms-Cl (0,57 мл, 7,39 ммоля). После перемешивания при 0°C в течение 1 ч реакцию останавливали водой (5 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (2×10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали 1,38 г неочищенного (5-(метоксиметил)тиофен-2-ил)метилметансульфоната в виде оранжевого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,51 мин. Раствор этого неочищенного вещества в ДМФ (10,0 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (7,05 г 9,6% раствора в ДМФ, 5,93 ммоля) в ДМФ (15,0 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (1,96 мл, 11,9 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Добавляли воду (10 мл), затем ЭА (10 мл). Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×15 мл) и объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (градиентный режим: от 95:5 гептан-ЭА до 80:20 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (8:2 гептан-ЭА)=0,36. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,80 мин.
2-((5-(Метоксиметил)тиофен-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 2-((5-(метоксиметил)тиофен-2-ил)метил)-4-нитро-2Н-1,2,3-триазола (169 мг, 0,67 ммоля), порошкообразного железа (131 мг, 2,33 ммоля) и NHCl (215 мг, 3,99 ммоля) в смеси EtOH (4,6 мл) и воды (2,4 мл) перемешивали при 50°C в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (20 мл), затем 3 н. раствор NaOH (5 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (3×15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,58 мин, [M+H]=225,18.
Метил-2-((4-нитро-2Н-1.2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-4-карбоксилат
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-(хлорметил)тиазол-4-карбоксилата (S.A. Hermitage et al. Organic Process Research & Development, 5, 37-44, 2001) (2,05 г, 10,7 ммоля) в ДМФ (20,0 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (Т. Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman J. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) (11,53 г 8% раствора в ДМФ, 9,70 ммоля) в ДМФ (20,0 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (3,21 мл, 19,4 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Добавляли воду (50 мл), затем ЭА (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×50 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (градиентный режим: от 60:40 гептан-ЭА до 50:50 гептан-ЭА)) давала искомое соединение в виде желтого твердого вещества. ТСХ: rf (6:4 гептан-ЭА)=0,31. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,67 мин, [М+Н]=270,21.
(2-((4-Нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-4-ил)метанол
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-4-карбоксилата (1,10 г, 4,08 ммоля) в ТГФ (30 мл) при 0°C по каплям обрабатывали с помощью DiBAL-H (14,3 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 14,3 ммоля) и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли раствор соли Рошеле (100 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×40 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,53 мин; [М+Н] 241,95.
4-(Метоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-4-ил)метанола (672 мг, 2,79 ммоля) в CHCl (15,0 мл) добавляли к суспензии AgsO (968 мг, 4,18 ммоля) и MeI (0,52 мл, 8,36 ммоля). Полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (6:4 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,66 мин, [M+H]=226,27.
2-((4-(Метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
4
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N3) смесь 4-(метоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазола (85 мг, 0,31 ммоля), порошкообразного железа (66 мг, 1,17 ммоля) и NHCl (108 мг, 2,0 ммоля) в смеси EtOH (2,0 мл) и воды (1,0 мл) перемешивали при 75°C в течение 25 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (15 мл), затем 1 н. раствор NaOH (10 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (3×10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,47 мин, [M+H]=226,30.
Этил 4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-2-карбоксилат
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор этил-4-(хлорметил)тиазол-2-карбоксилата (WO 2009077990 А1) (2,16 г, 10,5 ммоля) в ДМФ (15,0 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (Т.Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 1 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman J. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) (8,0 г 10% раствора в ДМФ, 7,01 ммоля) в ДМФ (15,0 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (1,82 мл, 2,33 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Добавляли воду (50 мл), затем ЭА (50 мл). Слои разделяли и водный слой промывали водой (50 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (60:40 гептан-ЭА)) давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,36. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,76 мин, [М+Н]=284,28.
(4-((4-Нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-2-ил)метанол
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор этил-4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-2-карбоксилата (845 мг, 2,98 ммоля) в ТГФ (30 мл) при 0°C по каплям обрабатывали с помощью DiBAL-H (11,3 мл 1,0 М раствора в толуоле, 11,3 ммоля) и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли раствор соли Рошеле (100 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×40 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (40:60 гептан-ЭА)) давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,25. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,54 мин, [М+Н]=241,95.
2-(Метоксиметил)-4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил')метил)тиазол
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол-2-ил)метанола (419 мг, 1,74 ммоля) в CHCl (15,0 мл) добавляли к суспензии AgO (604 мг, 2,61 ммоля) и MeI (0,33 мл, 5,21 ммоля). Полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,36. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,68 мин, [М+Н]=256,27.
2-((2-(Метоксиметил)тиазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 2-(метоксиметил)-4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазола (200 мг, 0,78 ммоля), порошкообразного железа (133 мг, 2,35 ммоля) и NHCl (212 мг, 3,92 ммоля) в смеси EtOH (10,0 мл) и воды (5,0 мл) перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (40 мл), затем 1 н. раствор NaOH (20 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (2×10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение, которое очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, и получали бесцветное масло. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,47 мин, [М+Н]=226,30.
(Е)-(2-Стирилоксазол-4-ил)метанол
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (Е)-этил-2-стирилоксазол-4-карбоксилата (WO 2009077990 А1) (8,5 г, 34,9 ммоля) в ТГФ (28,3 мл) при 0°C по каплям обрабатывали с помощью DiBAL-H (85,0 мл 1,0 М раствора в толуоле, 85,0 ммоля) и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1,5 ч. Добавляли раствор соли Рошеле, затем ЭА и смесь перемешивали при КТ в течение 24 ч. Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (3×40 мл) и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде оранжевого масла. ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,20. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,71 мин, [М+Н]=202,15.
(Е)-4-(Т(трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-стирилоксазол
2
2
2
2
4
R
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (Е)-(2-стирилоксазол-4-ил)метанола (5,40 г, 26,8 ммоля) в CHCl (56,0 мл) при КТ обрабатывали трет-бутилхлордиметилсиланом (8,52 г, 53,67 ммоля), затем имидазолом (3,69 г, 53,67 ммоля) и полученную суспензию перемешивали при КТ в течение 1 ч. Добавляли воду. Водный слой экстрагировали и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (градиентный режим: от гептана до 9:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (9:1 гептан-ЭА)=0,35. Условия проведения ЖХ-МС t: t=1,08 мин, [М+Н]=316,13.
4-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-карбальдегид
2
4
2
2
2
2
3
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор NaIO (726 мг, 3,33 ммоля) в воде (6,6) мл при энергичном перемешивании медленно добавляли к суспензии силикагеля (4,46 г) в ацетоне (13,2 мл). Затем смесь концентрировали при пониженном давлении и комкообразное твердое вещество суспендировали в CHCl и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (16,5 мл) и реакционную смесь при КТ обрабатывали (Е)-4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-стирилоксазолом (350 мг, 1,1 ммоля) и гидратом RuCl (7,8 мг, 0,03 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в темноте при КТ в течение ночи, фильтровали через силикагель и концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде красного масла. ТСХ: rf (1:3 ЭА-гептан)=0,51. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,64 мин.
1-(4-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-ил)этанол
2
2
2
4
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-карбальдегида (268 мг, 1,11 ммоля) в CHCl (9,2 мл) при 0°C по каплям обрабатывали триметилалюминием (1,11 мл 2,0 М раствора в толуоле, 2,22 ммоля) и полученный желтый раствор перемешивали при 0°C в течение 45 мин. К реакционной смеси добавляли NHCl и ее экстрагировали с помощью CHCl (3×25 мл) и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,40. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,85 мин, [М]=257,81.
1-(4-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-ил)этанон
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 1-(4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-ил)этанола (260 мг, 1,01 ммоля) в AcCN (7,1 мл) при КТ обрабатывали с помощью MnO (1488 мг, 5,05 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. ТСХ: rf (2:l гептан-ЭА)=0,55. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,96 мин, [М]=255,89.
2-(4-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-ил)пропан-2-ол
2
2
2
4
2
2
2
4
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 1-(4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-ил)этанона (171 мг, 0,67 ммоля) в CHCl (5,6 мл) при 0°C по каплям обрабатывали триметилалюминием (0,56 мл 2,0 М раствора в толуоле, 1,12 ммоля) и полученный желтый раствор перемешивали при 0°C в течение 90 мин. К реакционной смеси добавляли NHCl и ее экстрагировали с помощью CHCl (3×25 мл) и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: tp=0,88 мин, [М+Н]=272,20.
4-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-(4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)оксазол-2-ил)пропан-2-ола (153 мг, 0,56 ммоля) в CHCl (0,4 мл) обрабатывали с помощью MeI (0,08 мл, 1,35 ммоля), затем с помощью AgO (196 мг, 0,85 ммоля). Полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (7:3 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде оранжевого масла. ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,40. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,99 мин, [М+Н]=286,20.
(2-(2-Метоксипропан-2-ил)оксазол-4-ил)метанол
2
4
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(2-метоксипропан-2-ил)оксазола (110 мг, 0,39 ммоля) в ТГФ (1,8 мл) при 0°C обрабатывали с помощью ТБАФ (0,39 мл 1М раствора в ТГФ, 0,39 ммоля) и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 45 мин. Реакционную смесь разбавляли с помощью ЭА (10 мл), промывали насыщенным водным раствором NHCl (5 мл) и рассолом, сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (3:7 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (3:7 гептан-ЭА)=0,20. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,44 мин, [M+H]=172,01.
2-(2-Метоксипропан-2-ил)-4-((4-нитро-2Н-1,2.3-триазол-2-ил)метил)оксазол
2
2
2
3
2
4
R
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-4-ил)метанола (31 мг, 0,18 ммоля) в сухом CHCl (1,4 мл) при 0°C обрабатывали с помощью EtN (0,03 мл, 0,23 ммоля), затем с помощью ДМАП (2,2 мг, 0,02 ммоля) и Ms-Cl (0,02 мл, 0,23 ммоля). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин реакцию останавливали водой (10 мл). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали 44 мг неочищенного (2-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-4-ил)метилметансульфоната в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,62 мин, [М+Н]=250,00. Раствор этого неочищенного вещества (44 мг) в ДМФ (0,4 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (Т.Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 1 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman J. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) (203 мг 9,6% раствора в ДМФ, 0,17 ммоля) в ДМФ (0,4 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (0,06 мл, 0,34 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 24 ч. Добавляли воду (5 мл), затем ЭА (5 мл). Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (10 мл) и объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,43. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,72 мин, [М]=267,96.
2-((2-(2-Метоксипропан-2-ил)оксазол-4-ил)метил)-2Н-1.2.3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 2-(2-метоксипропан-2-ил)-4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазола (33 мг, 0,12 ммоля), порошкообразного железа (21 мг, 0,37 ммоля) и NHCl (33 мг, 0,62 ммоля) в смеси EtOH (0,4 мл) и воды (0,2 мл) перемешивали при 85°C в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (5 мл), затем 1 н. раствор NaOH (5 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (5×5 мл). Объединенные органические экстракты сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде оранжевого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,51 мин; [М]=237,17.
2-Бром-5-(метоксиметил)тиазол
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-бромтиазол-5-ил)метанола (WO 2009/077990, стр.92) (1,19 г, 6,11 ммоля) в CHCl (4,0 мл) обрабатывали с помощью MeI (0,46 мл, 7,33 ммоля), затем с помощью AgO (2,12 г, 9,16 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (7:3 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,66 мин, [М+Н]=209,93.
(5-(Метоксиметил)тиазол-2-ил)метанол
2
2
4
4
4
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-бром-5-(метоксиметил)тиазола (944 мг, 4,54 ммоля) в EtO (10,0 мл) при -70°C по каплям обрабатывали с помощью n-BuLi (2,98 мл 1,6М раствора в гексане, 4,76 ммоля). Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 30 мин. Затем добавляли ДМФ (0,56 мл, 7,26 ммоля) и полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 20 мин. Добавляли насыщенный водный раствор NHCl, органический слой экстрагировали с помощью ЭА (3×20 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали 543 мг 5-(метоксиметил)тиазол-2-карбальдегида в виде желтого масла: ТСХ: rf (9:1 гептан-ЭА)=0,32. Раствор этого вещества в МеОН (10 мл) при 0°C обрабатывали с помощью NaBH (169 мг, 4,29 ммоля). После выдерживания при 0°C в течение 15 мин добавляли воду, затем ЭА. Органический слой экстрагировали с помощью ЭА (3×20 мл) и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:2 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:2 гептан-ЭА)=0,25. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,42 мин, [М+Н]=160,17.
5-(Метоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол
2
2
2
3
2
4
R
4
R
+
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (5-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метанола (201 мг, 1,26 ммоля) в сухом CHCl (10,0 мл) при 0°C обрабатывали с помощью EtN (0,23 мл, 1,63 ммоля), затем с помощью ДМАП (15,6 мг, 0,13 ммоля) и Ms-Cl (0,13 мл, 1,59 ммоля). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин реакцию останавливали водой (10 мл). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали 300 мг неочищенного (5-(метоксиметил)тиазол-2-ил)метилметансульфоната в виде оранжевого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,59 мин, [М+Н]=238,07. Раствор этого неочищенного вещества (300 мг) в ДМФ (3,0 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (1,50 г 9,6% раствора в ДМФ, 1,26 ммоля) в ДМФ (3,0 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (0,43 мл, 2,53 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 24 ч. Добавляли воду (10 мл), затем ЭА (10 мл). Органический слой экстрагировали с помощью ЭА (10 мл) и объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: П(1:1 гептан-ЭА)=0,29. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,70 мин, [M+H]=255,85.
2-((5-(Метоксиметил)тиазол-2-ил)метил)-2Н-1.2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 5-(метоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазола (80 мг, 0,31 ммоля), порошкообразного железа (53 мг, 0,93 ммоля) и NHCl (84 мг, 1,56 ммоля) в смеси EtOH (1,0 мл) и воды (0,5 мл) перемешивали при 85°C в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (5 мл), затем 1 н. раствор NaOH (5 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (2×5 мл). Объединенные органические экстракты сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,49 мин; [М+Н]=226,17.
(5-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)тиазол-2-ил)метанол
2
2
4
4
R
4
2
4
R
+
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-бром-5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)тиазола (WO 2009/077990, стр.92) (2,0 г, 6,49 ммоля) в EtO (14,0 мл) при -70°C по каплям обрабатывали с помощью n-BuLi (4,25 мл 1,6М раствора в гексане, 6,81 ммоля). Полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 30 мин. Затем добавляли ДМФ (0,80 мл, 10,38 ммоля) и полученную смесь перемешивали при -70°C в течение 20 мин. Добавляли насыщенный водный раствор NHCl, органический слой экстрагировали с помощью ЭА (3×20 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали 1,50 г 5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)тиазол-2-карбальдегида в виде желтого масла: ТСХ: rf (9:1 гептан-ЭА)=0,31. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=1,00 мин, [М+Н]=257,93. Раствор этого вещества в МеОН (10 мл) при 0°C обрабатывали с помощью NaBH (286 мг, 7,25 ммоля). После выдерживания при 0°C в течение 30 мин добавляли воду, затем ЭА. Органический слой экстрагировали с помощью ЭА (3×20 мл) и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,87 мин, [М+Н]=260,06.
5-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(метоксиметил)тиазол
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)тиазол-2-ил)метанола (1,21 г, 4,65 ммоля) в CHCl (3,0 мл) обрабатывали с помощью MeI (0,35 мл, 5,57 ммоля), затем с помощью AgO (1,61 г, 6,97 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (4:1 гептан-ЭА)=0,27. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,99 мин, [М+Н]=273,95.
(2-(Метоксиметил)тиазол-5-ил)метанол
2
4
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(метоксиметил)тиазола (721 мг, 2,64 ммоля) в ТГФ (20 мл) при 0°C обрабатывали с помощью ТБАФ (5,30 мл 1М раствора в ТГФ, 5,30 ммоля) и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 45 мин. Реакционную смесь разбавляли с помощью ЭА, промывали насыщенным водным раствором NHCl и рассолом, сушили над NaSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:9 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (1:9 гептан-ЭА)=0,27. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,41 мин, [М+Н]=160,01.
2-(Метоксиметил)-5-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазол
2
2
2
3
2
4
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-(метоксиметил)-тиазол-5-ил)метанола (319 мг, 2,00 ммоля) в сухом CHCl (15,0 мл) при 0°C обрабатывали с помощью EtN (0,36 мл, 2,59 ммоля), затем с помощью ДМАП (25 мг, 0,20 ммоля) и Ms-Cl (0,20 мл, 2,53 ммоля). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин реакцию останавливали водой (10 мл). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали 469 мг (количественный выход) неочищенного (2-(метоксиметил)тиазол-5-ил)метилметансульфоната в виде желтого масла: ТСХ: П(1:4 гептан-ЭА)=0,39. Раствор этого неочищенного вещества (469 мг) в ДМФ (4,5 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (2,35 г 9,6% раствора в ДМФ, 1,98 ммоля) в ДМФ (4,5 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (0,68 мл, 3,96 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 4 дней. Добавляли воду (10 мл), затем ЭА (10 мл). Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (10 мл) и объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,72 мин, [М+Н]=255,95.
2-((2-(Метоксиметил)тиазол-5-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 2-(метоксиметил)-5-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)тиазола (109 мг, 0,43 ммоля), порошкообразного железа (72 мг, 1,28 ммоля) и Nl-HCl (115 мг, 2,14 ммоля) в смеси EtOH (2,0 мл) и воды (1,0 мл) перемешивали при 85°C в течение 15 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (5 мл), затем 1 н. раствор NaOH (5 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (2×5 мл). Объединенные органические экстракты сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,50 мин; [M+H]=225,93.
2-(2-(Хлорметил)оксазол-4-ил)пропан-2-ол
2
4
4
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-(хлорметил)оксазол-4-карбоксилата (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) (13,00 г, 74,04 ммоля) в ТГФ (433 мл) при 0°C по каплям обрабатывали метилмагнийхлоридом (51,8 мл 3,0 М раствора в ТГФ, 155,49 ммоля) и полученный оранжевый раствор перемешивали при 0°C в течение 1,5 ч. Реакционную смесь осторожно выливали в охлажденный льдом насыщенный водный раствор NHCl (300 мл). Смесь экстрагировали с помощью ЭА (3×200 мл) и объединенные органические слои промывали рассолом (300 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (6:4 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (6:4 гептан-ЭА)=0,24. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,49 мин.
2-(Хлорметил)-4-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-(2-(хлорметил)оксазол-4-ил)пропан-2-ола (200 мг, 1,14 ммоля) в MeI (3,5 мл) обрабатывали с помощью AgO (396 мг, 1,71 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение 26 ч. Реакционную смесь фильтровали и MeI удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (7:3 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,64 мин, [М+Н]=190,17.
4-(2-Метоксипропан-2-ил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазол
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-(хлорметил)-4-(2-метоксипропан-2-ил)оксазола (134 мг, 0,71 ммоля) в ДМФ (2,0 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (Т.Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman J. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) (1,01 г 8% раствора в ДМФ, 0,71 ммоля) в ДМФ (2,0 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (0,24 мл, 1,41 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Добавляли воду (16 мл), затем ЭА (16 мл). Слои разделяли и органический слой промывали водой (3×6 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,69 мин, [М+Н]=268,13.
2-((4-(2-Метоксипропан-2-ил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 4-(2-метоксипропан-2-ил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазола (56 мг, 0,21 ммоля), порошкообразного железа (35 мг, 0,63 ммоля) и NHCl (57 мг, 1,05 ммоля) в смеси EtOH (1,0 мл) и воды (0,5 мл) перемешивали при 85°C в течение 15 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (2 мл), затем 1 н. раствор NaOH (2 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (2 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,46 мин; [M+H]=238,09.
(2-(Хлорметил)оксазол-4-ил)метанол
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-(хлорметил)оксазол-4-карбоксилата (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) (12,50 г, 71,20 ммоля) в ТГФ (400 мл) при 0°C по каплям обрабатывали с помощью DiBAL-H (242 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 242,0 ммоля) и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 1 ч и затем ему давали нагреться до КТ. Реакционную смесь осторожно выливали в раствор соли Рошеле (600 мл) и добавляли ЭА (250 мл). Смесь перемешивали в течение 1,5 ч. Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×250 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:4 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:4 гептан-ЭА)=0,28. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,39 мин; [М+Н]=147,98.
2-(Хлорметил)-4-(метоксиметил)оксазол
2
2
2
2
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-(хлорметил)оксазол-4-ил)метанола (8,00 г, 54,22 ммоля) в CHCl (32,0 мл) обрабатывали с помощью MeI (4,05 мл, 65,06 ммоля), затем с помощью AgO (18,85 г, 81,32 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (6:4 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (6:4 гептан-ЭА)=0,31. Условия проведения ЖХ-МС 07: ir=0,54 мин, [М+Н]=162,00.
4-(Метоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1.2,3-триазол-2-ил)метил)оксазол
2
4
R
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-(хлорметил)-4-(метоксиметил)оксазола (1,38 г, 8,55 ммоля) в ДМФ (24,0 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (Т.Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 1 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman J. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) (10,16 г 9,6% раствора в ДМФ, 8,55 ммоля) в ДМФ (24,0 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (2,93 мл, 17,10 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Добавляли воду (200 мл), затем ЭА (200 мл). Слои разделяли и органический слой промывали водой (3×70 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,38. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,63 мин.
2-((4-(Метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 4-(метоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазола (1,46 г, 6,10 ммоля), порошкообразного железа (1,03 г, 18,31 ммоля) и NHCl (1,65 г, 30,52 ммоля) в смеси EtOH (30,0 мл) и воды (15,0 мл) перемешивали при 85°C в течение 15 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (55 мл), затем 1 н. раствор NaOH (33 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (5×50 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,42 мин; [M+H]=210,09.
Метил-2-(ацетоксиметил)оксазол-4-карбоксилат
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-(хлорметил)оксазол-4-карбоксилата (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) (20,00 г, 113,91 ммоля) в уксусной кислоте (80 мл) обрабатывали уксусным ангидридом (8,0 мл), затем ацетатом натрия (39,72 г, 484,14 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 3 ч. При КТ добавляли ЭА (400 мл) и суспензию нейтрализовывали насыщенным водным раствором карбонат натрия. Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью ЭА (2×400 мл). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,48 мин, [М+Н]=200,41.
Метил-2-(гидроксиметил)оксазол-4-карбоксилат
2
4
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) натрий (1,32 г, 57,42 ммоля) порциями добавляли к МеОН (145 мл). Затем добавляли метил-2-(ацетоксиметил)оксазол-4-карбоксилат (23,30 г, 116,99 ммоля) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Затем добавляли насыщенный водный раствор NHCl (760 мл) и смесь экстрагировали с помощью ЭА (2×760 мл). Объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества: ТСХ: rf (1:9 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,31 мин, [М+Н]=158,15.
Метил-2-(метоксиметил)оксазол-4-карбоксилат
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-(гидроксиметил)оксазол-4-карбоксилата (231 мг, 1,47 ммоля) в CHCl (0,9 мл) обрабатывали с помощью MeI (0,11 мл, 1,76 ммоля), затем с помощью AgO (511 мг, 2,21 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,33. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,49 мин, [М+Н]=172,20.
(2-(Метоксиметил)оксазол-4-ил)метанол
2
4
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор метил-2-(метоксиметил)оксазол-4-карбоксилата (192 мг, 1,12 ммоля) в ТГФ (11 мл) при 0°C по каплям обрабатывали с помощью LiAlH (1,35 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 1,35 ммоля) и полученный раствор перемешивали при 0°C в течение 20 мин. Реакционную смесь осторожно обрабатывали водой (1,0 мл), 1 н. раствором NaOH (1,0 мл), затем водой (1,0 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Полученную суспензию фильтровали, экстрагировали с помощью ЭА и объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде коричневого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,33 мин; [М+Н] 144,08.
2-(Метоксиметил)-4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазол
2
2
2
3
2
4
R
4
R
+
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-(метоксиметил)оксазол-4-ил)метанола (76 мг, 0,53 ммоля) в сухом CHCl (5 мл) при 0°C обрабатывали с помощью EtN (0,10 мл, 0,69 ммоля), затем с помощью ДМАП (6,6 мг, 0,05 ммоля) и Ms-Cl (0,05 мл, 0,67 ммоля). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин реакцию останавливали водой (5 мл). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали 118 мг неочищенного (2-(метоксиметил)оксазол-4-ил)метилметансульфоната в виде коричневого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,51 мин, [М+Н]=222,02. Раствор этого неочищенного вещества (118 мг) в ДМФ (1,3 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (635 мг 9,6% раствора в ДМФ, 0,53 ммоля) в ДМФ (1,3 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (0,18 мл, 1,07 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 24 ч. Добавляли воду (10 мл), затем ЭА (10 мл). Водный слой экстрагировали с помощью ЭА (10 мл) и объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,31. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,62 мин, [М+Н]=240,10.
2-((2-(Метоксиметил)оксазол-4-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
4
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 2-(метоксиметил)-4-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазола (21 мг, 0,09 ммоля), порошкообразного железа (15 мг, 0,26 ммоля) и NHCl (24 мг, 0,44 ммоля) в смеси EtOH (1,0 мл) и воды (0,5 мл) перемешивали при 85°C в течение 15 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли СНзС^ (5 мл), затем 1 н. раствор NaOH (5 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (2×5 мл). Объединенные органические экстракты сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,41 мин; [M+H]=210,22.
2-(Хлорметил)-4-(этоксиметил)оксазол
2
2
2
2
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор (2-(хлорметил)оксазол-4-ил)метанола (500 мг, 3,39 ммоля) в CHCl (2,0 мл) обрабатывали с помощью EtI (0,28 мл, 3,39 ммоля), затем с помощью AgO (1,18 г, 5,08 ммоля) и полученную смесь (защищенную от света) перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (7:3 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,29. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,62 мин, [М+Н]=176,26.
4-(Этоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазол
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-(хлорметил)-4-(этоксиметил)оксазола (260 мг, 1,48 ммоля) в ДМФ (4,2 мл) добавляли к раствору 4-нитро-2Н-[1,2,3]триазола (Т.Е. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P.N. Neuman.7. Heterocycl. Chem. 8, 51-56, 1971) (1,76 г 9,6% раствора в ДМФ, 1,48 ммоля) в ДМФ (4,2 мл), предварительно обработанному в течение 30 мин с помощью ДИПЭА (0,51 мл, 2,96 ммоля), и реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Добавляли воду (20 мл), затем ЭА (20 мл). Слои разделяли и органический слой промывали водой (3×10 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (1:1 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (1:1 гептан-ЭА)=0,40. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,69 мин, [М+Н]=254,06.
2-((4-(Этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) смесь 4-(этоксиметил)-2-((4-нитро-2Н-1,2,3-триазол-2-ил)метил)оксазола (115 мг, 0,45 ммоля), порошкообразного железа (77 мг, 1,36 ммоля) и NI-LtCl (123 мг, 2,27 ммоля) в смеси ЕЮН (2,4 мл) и воды (1,2 мл) перемешивали при 85°C в течение 15 мин. Реакционную смесь фильтровали в горячем виде и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли CHCl (25 мл), затем 1 н. раствор NaOH (25 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали с помощью CHCl (5×25 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде желтого масла. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,48 мин; [М+Н]=224,09.
Получение соединений по примерам
Пример 1: N-(2-((4-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (40,0 мг, 0,18 ммоля) в CHCl (1,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (5,6 мг, 0,05 ммоля), HOBt (29,9 мг, 0,22 ммоля), ЭДХ (88,3 мг, 0,46 ммоля) и ДИПЭА (0,13 мл, 0,74 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (43,7 мг, 0,18 ммоля) в CHCl (0,8 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (2,0 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (2,0 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,35. Условия проведения ЖХ-МС 06: t=0,94 мин, [М+Н]=437,34.
Пример 2: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (1,14 г, 5,26 ммоля) в CHCl (30 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (160 мг, 1,31 ммоля), HOBt (854 мг, 6,32 ммоля), ЭДХ (2,52 г, 13,15 ммоля) и ДИПЭА (3,60 мл, 21,03 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (1,10 г, 5,26 ммоля) в CHCl (22 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (45 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (45 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,20. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,88 мин, [М+Н]=409,11.
Пример 3: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.113) (955 мг, 4,70 ммоля) в CHCl (27 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (143 мг, 1,17 ммоля), HOBt (763 мг, 5,65 ммоля), ЭДХ (2,25 г, 11,75 ммоля) и ДИПЭА (3,22 мл, 18,80 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амин (983 мг, 4,70 ммоля) в CHCl (20 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (40 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (40 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью кристаллизации из ЭА давала искомое соединение в виде белого твердого вещества: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,14. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,84 мин, [М+Н]=395,44.
Пример 4: 5-(3-хлорфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 5-(3-хлорфенил)-2-метилоксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.113). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,14 мин, [М+Н]=429,05.
Пример 5: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(3-(трифторметил)фенил)оксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 2-метил-5-(3-(трифторметил)фенил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.113). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,18 мин, [М+Н]=463,03.
Пример 6: 5-(3-хлорфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)оксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 5-(3-хлорфенил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.114). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,03 мин, [М+Н]=415,02.
Пример 7: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(3-метоксифенил)оксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 5-(3-метоксифенил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.114). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=0,92 мин, [М+Н]=411,09.
Пример 8: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(3-метоксифенил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 5-(3-метоксифенил)-2-метилоксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,02 мин, [М+Н]=425,08.
Пример 9: 5-(3-фторфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 5-(3-фторфенил)-2-метилоксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,04 мин, [М+Н]=413,07.
Пример 10: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.114). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,00 мин, [M+H]=395,12.
Пример 11: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(3-(трифторметокси)фенил)оксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 2-метил-5-(3-(трифторметокси)фенил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.113). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,22 мин, [М+Н]=479,05.
Пример 12: 2-циклопропил-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
R
+
Синтезировали в соответствии с GP1 с использованием 2-циклопропил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (получали по методике получения 2-циклопропил-5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты, описанной в WO 2009/077990, стр.114, но с использованием в качестве исходного вещества этил-3-оксо-3-(м-толил)пропаноата). Условия проведения ЖХ-МС 10: t=1,25 мин, [M+H]=435,09.
Пример 13: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (50 мг, 0,26 ммоля) в CHCl (1,3 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (8 мг, 0,07 ммоля), HOBt (43 мг, 0,32 ммоля), ЭДХ (127 мг, 0,67 ммоля) и ДИПЭА (0,18 мл, 1,06 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (55 мг, 0,26 ммоля) в CHCl (1,3 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (5 мл), слои разделяли и органическую фазу промывали водой (5 мл), сушили над NaSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (4:6 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде белого твердого вещества: ТСХ: rf (4:6 гептан-ЭА)=0,13. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,81 мин, [M+H]=381,14.
Пример 14: N-(2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор 2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоновой кислоты (WO 2009/077990, стр.112) (42 мг, 0,20 ммоля) в CHCl (1,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (5,8 мг, 0,05 ммоля), HOBt (31 мг, 0,23 ммоля), ЭДХ (91 мг, 0,48 ммоля) и ДИПЭА (0,13 мл, 0,76 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (43 мг, 0,19 ммоля) в CHCl (0,9 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (10 мл) и органическую фазу промывали водой (10 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (3:7 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,34. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,91 мин, [М+Н]=423,14.
Пример 15: N-(2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
2
2
4
R
+
В высушенной пламенем круглодонной колбе, снабженной стержнем для магнитной мешалки, и в инертной атмосфере (N) раствор имеющейся в продаже 5-фенилоксазол-4-карбоновой кислоты (36 мг, 0,19 ммоля) в CHCl (1,0 мл) при КТ обрабатывали с помощью ДМАП (5,8 мг, 0,05 ммоля), HOBt (31 мг, 0,23 ммоля), ЭДХ (91 мг, 0,48 ммоля) и ДИПЭА (0,13 мл, 0,76 ммоля) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин. Затем добавляли раствор 2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-амина (43 мг, 0,19 ммоля) в CHCl (0,9 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью CHCl (10 мл) и органическую фазу промывали водой (10 мл), сушили над MgSO, фильтровали и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка остатка с помощью ФХ (3:7 гептан-ЭА) давала искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ: rf (7:3 гептан-ЭА)=0,34. Условия проведения ЖХ-МС 07: t=0,84 мин, [М+Н]=395,08.
II. Биологические исследования
Исследование in vitro
Агонистическую активность соединений формулы (I) по отношению к рецептору ALX определяют по описанной ниже экспериментальной методике.
Экспериментальная методика: Определение содержания внутриклеточного кальция
2
Клетки, экспрессирующие рекомбинантный рецептор ALX человека и G белок Gα16 (HEK293-hALXR-Gα16), выращивали до слияния 80% в среде для выращивания (СВ). Клетки отделяли от культуральных матрацев с помощью буфера для отделения клеток (Invitrogen, 13151-014) и собирали центрифугированием при 1000 об/мин при КТ в течение 5 мин в буфере для анализа (AD) (равные части сбалансированного солевого раствора Хенкса (Gibco, 14065-049) и МДСИ без добавления фенолового красного (Gibco, 11880-028)). После инкубирования в течение 60 мин при 37°C и 5% СО в БА, к которому добавляли 1 мкМ Fluo-4 (AM) (Invitrogen, F 14202) и 20 мМ HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N-2-этансульфоновая кислота) (Gibco, 15630-056), клетки промывали и повторно суспендировали в БА. Затем их высевали в 384-луночные планшеты для анализа ФВСУП (Greiner, 781091) по 50000 клеток в 70 мкл на лунку и осаждали центрифугированием при 1000 об/мин в течение 1 мин. Исходные растворы исследуемых соединений готовили при концентрации, равной 10 мМ, в ДМСО и серийно разводили в БА до концентраций, необходимых для получения зависимостей доза - ответ.WKYMVm (Phoenix Peptides) использовали в качестве агониста сравнения. ФВСУП Tetra instruments (Molecular Devices) использовали в соответствии со стандартными инструкциями изготовителя, добавляя 4 мкл исследуемого соединения, растворенного в 10 мМ в ДМСО, и до проведения эксперимента разводили в буфере для анализа и получали необходимые конечные концентрации. Изменения интенсивности флуоресценции определяли до и после добавления исследуемых соединений при lex=488 нм и lem=540 нм. Интенсивности пиков испускания относительно базового уровня после добавления соединений использовали после вычитания значения для базовой линии. Значения нормировали на значение для контроля с высокой активностью (соединение WKYMVm, конечная концентрация 10 нМ) после вычитания значения для базовой линии (добавление БА).
50
Агонистическая активность приведенных в качестве примеров соединений по отношению к рецептору ALX (значения ЕС) представлена в таблице 1.
Таблица 1
Соединение
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
Пример 1: N-(2-((4-(2-метоксипропан-2-ил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-гриазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
6,6
Тример 2: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
1,7
Пример 3: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
4,3
Пример 4: 5-(3-хлорфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид
2,1
Пример 5: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(3-(трифторметил)фенил)оксазол-4-карбоксамид
5,6
Пример 6: 5-(3-хлорфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)оксазол-4-карбоксамид
4,0
Пример 7: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(3-метоксифенил)оксазол-4-карбоксамид
17,5
Пример 8: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(3-метоксифенил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид
8,8
Пример 9: 5-(3-фторфенил)-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-,2,3-триазол-4-ил)-2-метилоксазол-4-карбоксамид
3,7
Пример 10: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
4,6
Пример 11: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(3-(трифторметокси)фенил)оксазол-4-карбоксамид
7,4
Пример 12: 2-циклопропил-N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-гриазол-4-ил)-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
11,6
Пример 13: N-(2-((4-(метоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
5,0
Пример 14: N-(2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-метил-5-(м-толил)оксазол-4-карбоксамид
6,7
Пример 15: N-(2-((4-(этоксиметил)оксазол-2-ил)метил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5-фенилоксазол-4-карбоксамид
8,6
Результаты сравнительного исследования
В отличие от соединений, раскрытых в WO 2009/077990, тип гетероарильной группы, присоединенной к фрагменту простого алкоксиалкилового эфира, обладает неожиданно сильным влиянием на агонистическую активность соединений, предлагаемых в настоящем изобретении. Высокой агонистической активностью обладают только соединения, в которых гетероарильные группы содержат атом азота, находящийся между двумя замещенными атомами углерода, и в особенности содержащие оксазол-2,4-диильные группы, которые замещены в положении 4 алкоксиалкильным фрагментом. Результаты, представленные в таблице 2, получены с использованием описанного выше исследования по определению содержания внутриклеточного кальция.
Таблица 2
Ссылочные соединения
Соединение, подпадающее под формулу I WO 2009/077990
EC<sub>50</sub> [нМ]
Ссылочные соединения
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
<img file="00000007.tif" he="51" wi="49" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,7
<img file="00000008.tif" he="47" wi="55" img-content="undefined" img-format="tif" />
5,0
<img file="00000009.tif" he="50" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />
73
<img file="00000010.tif" he="41" wi="60" img-content="undefined" img-format="tif" />
4810
<img file="00000011.tif" he="50" wi="49" img-content="undefined" img-format="tif" />
88
<img file="00000012.tif" he="42" wi="63" img-content="undefined" img-format="tif" />
2540
<img file="00000013.tif" he="50" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,8
<img file="00000014.tif" he="47" wi="60" img-content="undefined" img-format="tif" />
498
Соединение, подпадающее под формулу I WO 2009/077990
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
Ссылочные соединения
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
<img file="00000015.tif" he="52" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />
2,8
<img file="00000016.tif" he="40" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />
2300
<img file="00000017.tif" he="50" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />
8,1
<img file="00000018.tif" he="41" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />
48
<img file="00000019.tif" he="50" wi="49" img-content="undefined" img-format="tif" />
93
<img file="00000020.tif" he="42" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />
146
<img file="00000021.tif" he="51" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />
73
<img file="00000022.tif" he="41" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />
8130
Соединение, подпадающее под формулу I WO 2009/077990
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
Ссылочные соединения
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
<img file="00000023.tif" he="50" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />
88
<img file="00000024.tif" he="46" wi="57" img-content="undefined" img-format="tif" />
5950
<img file="00000025.tif" he="45" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,5
<img file="00000026.tif" he="50" wi="57" img-content="undefined" img-format="tif" />
685
<img file="00000027.tif" he="30" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,9
<img file="00000028.tif" he="36" wi="64" img-content="undefined" img-format="tif" />
8,1
Исследование ковалентного связывания реакционноспособных метаболитов и белков с использованием микросом печени человека
Задачей описанного исследования ковалентного связывания является определение количества ковалентно связанных реакционноспособных метаболитов с белками микросом печени человека (МПЧ) за 1 ч после инкубирования в присутствии системы регенерации NADPH. Измеренную степень ковалентного связывания выражают в пмоль-экв. связанного лекарственного средства/мг белка/ч. Хорошо известно, что предпочтительно, если соединения обладают небольшой склонностью к ковалентному связыванию с белками.
3
14
2
Инкубирование: содержащие радиоактивную метку (Н или С) соединения при концентрации, равной 10 мкМ, инкубировали в одном 96-луночном планшете, содержащем 1,0 мг/мл микросом печени человека в 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4). Для этого 2,5 мкл 1 мМ исходного раствора, приготовленного в соответствующем растворителе (этанол), добавляли до конечного объема, равного 250 мкл. Инкубирования проводили при отсутствии или в присутствии системы регенерации NADPH с добавлением глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (20 МЕ/мл дегидрогеназы, 25 мкл с добавлением 11 мМ натриевой соли NADP, 100 мМ динатриевой соли глюкозо-6-фосфата, 100 мМ MgCl в 0,1 М буфере Tris, рН 7,4 (Tris=трис(гидроксиметиламинометан))) и дополнительно при отсутствии или в присутствии 5 мМ GSH для захвата реакционноспособных промежуточных продуктов. Для определения неспецифического быстрого связывания также исследовали холостые образцы без добавления NADPH и без проведения инкубирования. Реакции инициировали путем добавления 25 мкл системы регенерации NADPH и через 1 ч их останавливали путем добавления 200 мкл инкубирующей смеси в многоситовый гидрофобный фильтрующий 96-луночный планшет из ПТФЭ с глубокими лунками Solvinert (Millipore, Zug, Switzerland), содержащий 260 мкл охлажденного льдом ацетонитрила. Осаждение микросомных белков завершали путем встряхивания планшета при 600 об/мин при температуре, равной 15°C, в течение 15 мин. В заключение осадившиеся инкубированные образцы на 15 мин помещали в холодильник при 4°C.
Белки и фильтраты разделяли центрифугированием при 1800 g при 10°C в течение 20 мин. Для устранения неспецифического связывания таблетку белка промывали смесью 800 мкл метанола/0,1% серной кислоты (об./об.) при центрифугировании при 1500 g, 10°C и в течение 2 мин. Стадию промывки повторяли 6 раз. Промытую таблетку белка повторно растворяли путем добавления 500 мкл смеси 0,1% (мас./об.) водный раствора NaOH/1% (мас./об.) ДСН. Фильтрующий планшет встряхивали при 400 об/мин при 60°C в течение 45 мин и центрифугировали при 2000 g при 35°C в течение 20 мин. Эту стадию повторяли один раз и растворы белка объединяли.
113
Для определения полной радиоактивности аликвоту (400 мкл) раствора белка смешивали с 4 мл жидкой сцинтилляционной смеси (Irga Safe plus, Perkin Elmer, Zurich, Switzerland) и анализировали с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика Tricarb 2300 TR (Perkin Elmer) с поправкой на люминесценцию и поправкой на тушение в реальном масштабе времени с помощью внешнего стандарта (Ва). Для определения полного содержания белка аликвоту (20 мкл) раствора белка анализировали с использованием набора для анализа содержания белка ВСА (Perbio Science Switzerland SA, Lausanne, Switzerland). Количество лекарственного средства, ковалентно связанного с микросомными белками, рассчитывали следующим образом: отношение количества эквивалентов связанного лекарственного средства в присутствии NADPH (вычитали фоновое значение, количество эквивалентов связанного лекарственного средства при отсутствии NADPH) к рассчитанному количеству белка в повторно растворенной промытой таблетке белка в каждой лунке дает количество эквивалентов связанного лекарственного средства в пмоль/мг белка за 1 ч.
Исследование стабильности в плазме
2
last
Плазму крыс или человека, в которой молочной кислотой или гидроксидом аммония обеспечивали значение рН, равное 7,4, приводили в равновесие при 37°C на орбитальном устройстве для встряхивания в инкубаторе, содержащем 5% СО. Реакцию инициировали путем добавления 1 мкМ соединений (1 мкл 1 мМ исходного раствора в ДМСО в 999 мкл плазмы). Через 0,01 ч, 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч и 24 ч аликвоты (30 мкл) переносили в 96-луночный планшет, содержащий 90 мкл МеОН, который помещали на лед для остановки реакции. После вихревого перемешивания в термомиксере Eppendorf при 1400 об/мин в течение 20 мин планшеты центрифугировали при 3220 g при 4°C в течение 20 мин и надосадочные жидкости анализировали с помощью ЖХ-МС. Для проведения количественного анализа готовили калибровочные образцы в плазме, содержащей 0,1% дихлорвоса, и их анализировали одновременно с инкубированными образцами. Затем рассчитывали время полужизни в часах. Кроме того определяли отношение остаточной концентрации соответствующего соединения в момент времени T исходной концентрации (таблица 3).
Таблица 3
Стабильность в плазме
Соединение
Количество повторов
Вид
Т<sub>1/2</sub> [ч]
T<sub>last</sub> [ч]
Остаточная концентрация при T<sub>last</sub> [%]
Пример 2
3
человек
>24
24
101
Пример 2
3
крыса
>24
24
88
Ссылочное соединение 11
3
человек
2,4
6
18
Ссылочное соединение 11
3
крыса
4,7
6
42
Данные показывают, что соединение примера 2 значительно более стабильно в плазме, чем Ссылочное соединение 11.
Исследование стабильности тритированных соединений в плазме
3
Плазму крыс или человека, в которой молочной кислотой обеспечивали значение рН, равное 7,4, приводили в равновесие при 37°C на орбитальном устройстве для встряхивания. Реакцию инициировали путем добавления 10 мкМ тритированного соединения (7,5 мкл 1 мМ исходного раствора в ДМСО в 742,5 мкл плазмы). В начале и через 4 ч, 6 ч и 24 ч аликвоты (100 мкл) переносили в пробирку, содержащую 400 мкл МеОН, которую помещали на лед для остановки реакции. После вихревого перемешивания в термомиксере Eppendorf при 1400 об/мин в течение 20 мин планшеты центрифугировали при 3220 g при 4°C в течение 20 мин и аликвоты надосадочных жидкостей анализировали с помощью жидкостного хроматографа, соединенного с детектором радиоактивности H. Оставшуюся таблетку дополнительно экстрагировали с помощью AcCN, проводя 3 дополнительных цикла повторного суспендирования, перемешивание в термомиксере Eppendorf при 2000 об/мин в течение 20 мин и центрифугирование (при 3220 g при 4°C в течение 20 мин). Определяли полную радиоактивность собранных надосадочных жидкостей. Затем конечную таблетку растворяли в 1 н. растворе NaOH и определяли полную радиоактивность (таблица 4).
Таблица 4
Стабильность ссылочного соединения 11 в плазме
Номинальное время инкубации [ч]
0,01
4,0
6,4
24,4
Полная радиоактивность [распадов/мин]
плазма крыс в виде надосадочной жидкости
173116
94798
45228
4816
плазма крыс в виде таблетки
419
124853
153683
180032
плазма человека в виде надосадочной жидкости
158854
38918
10532
3134
плазма человека в виде таблетки
918
170136
185420
227567
По данным анализа с помощью ВЭЖХ в разные моменты времени в надосадочных растворах, полученных после первого цикла экстракции, обнаружено только Ссылочное соединение 11. Ссылочное соединение 11 исчезало из надосадочной жидкости, в то время как собранные таблетки обладали радиоактивностью, что указывает на сильное взаимодействие лекарственного вещества с белками плазмы.