Биологические свойства фитоэстрогена генистеина (обзор литературы)

Р.А. Тарумов1, A.H. Гребенюк1, B.A. Башарин1, В.Ю. Ковтун2

Биологические свойства фитоэстрогена генистеина

1 Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, г. Санкт-Петербург; 2 Научно-производственный центр «Фармзащита» ФМБА России, г. Химки Московской обл.

R.A. Tarumov1, A.N. Grebenyuk1, V.A. Basharin1, V.Yu. Kovtun2

Biological properties of phytoestrogen genistein

1 Military Medical Academy named after S.M.Kirov (MMA), Russia, St. Petersburg; 2 Research and Production Center «Pharmzaschita» of Federal Medical and Biological Agency,

Khimki Moscow region

Ключевые слова: генистеин, 4,5,7-тригидрокси-изофлавоноид, фитоэстроген, антиоксидант, биологические свойства, применение.

В обзоре представлены результаты исследований отечественных и зарубежных авторов, посвященных изучению биологических свойств фитоэстрогена генистеина. Рассмотрены вопросы токсичности, фармакодинамики, фармакокинетики и механизмы действия генистеина, а также сферы его возможного применения в различных областях клинической медицины. В отдельном разделе обзора дана подробная характеристика генисте-ина как средства профилактики и терапии патологических состояний, вызванных воздействием ионизирующего излучения на организм.

Keywords: genistein, 4,5,7-trihydroxyisoflavone, phytoestrogen, antioxidant, biological properties, application.

The review presents the results of phytoestrogen genistein biological properties studies conducted by national (Russian) and foreign authors. This review focused on toxicity, pharmacodynamics, pharmacokinetics and mechanisms of action of genistein and the potential application in clinical medicine. A separate section of the review provides detailed data on genistein application as a preventive medication in pathological conditions caused by ionizing radiation.

В течение многих лет после открытия генистеин не привлекал большого внимания научного сообщества, поскольку предполагали, что его значение ограничено эффектами фитоэстрогена. Однако со временем отношение к соединению решительно менялось, и в конце XX — начале XXI в. произошел взрыв интереса к генистеину, что подтверждается стремительным ростом количества публикаций. Многочисленные исследования были сосредоточены на изучении механизмов фармакологической активности генистеина, его положительного и неблагоприятного воздействия на здоровье животных и человека.

В настоящем обзоре проанализированы основные биологические свойства генистеина, позволяющие широко применять его в клинической практике в качестве эффек-

тивного средства профилактики и терапии ряда заболеваний. Авторы не претендуют на исчерпывающую характеристику всех проведенных в нашей стране и за рубежом исследований по изучению биологических эффектов природного генистеина, поскольку работа в этой сфере продолжается.

Генистеин: от открытия до применения

Генистеин (4,5,7 -тригидроксиизофла-воноид, генистерин, прунетол, софорикол) — органическое вещество растительного происхождения из класса изофлавоноидов. Получен в 1899 г. из растения дрок красильный, или дрок кровожадный (Gennsta tinctoria), — вид растений рода дрок (Genista) семейства бобовых (Fabaceae), произрастающих

в Евразии. Молекулярная формула соединения была установлена в 1926 г., а его химический синтез впервые осуществлен в 1928 г. [81]. Сегодня генистеин — один из самых известных изофлавоноидов. Номер по CAS — 446-72-0.

Интерес к генистеину был связан с открытием у изофлавоноидов эстрогенной активности (фитоэстрогены). В 1931 г. E. Waltz установил, что генистеин является основным фитоэстрогеном сои [82]. В 1981 г. K. Asahi et al. изолировали от фильтрата культуры стрептомицетов новое вещество, которое вызывало дифференцирование клеток мышей с лейкемией и было малотоксично; впоследствии это соединение было идентифицировано как генистеин [8]. Еще больший интерес к препарату был вызван открытием в 1987 г. факта, что генистеин является специфическим ингибитором тирозинкиназы белка [6], а следовательно, способен регулировать механизмы внутриклеточной сигнализации, в том числе пролиферацию клетки.

Относительно высоко содержание ге-нистеина в бобовых культурах, особенно в сое [30]. К другим растениям, которые используются в пищу и содержат генистеин, относятся: ячмень, семена подсолнечника, клевер, семена тмина, арахис, фасоль, нут, горох, чечевица, брокколи, цветная капуста, кофе и др. [41]. Несмотря на то что природный генистеин не зарегистрирован как лекарственный препарат, многие компании выпускают это соединение в качестве пищевой или биологически активной добавки для ежедневного употребления.

По своим физическим свойствам генистеин представляет собой субстанцию светло-желтого цвета [25]. Лучше всего это соединение растворяется в 80% этаноле и метаноле при нагревании, а также в горячем ацетоне и пиридине. Растворяется в смеси хлороформа и метанола, образуя прозрачный раствор желтого цвета [38]. В концентрации не более 100 мМ/л хорошо растворим в диме-тилсульфоксиде и практически не растворим в воде [76].

Генистеин существует в формах как гликозидных конъюгатов, содержащих молекулу глюкозы, так и в виде агликонов (рис. 1). Наличие гетероциклического коль-

ца в молекуле генистеина делает это соединение гидрофобным. Конъюгация генистеина с группами глюкозы увеличивает его водорас-творимость.

Данные токсикокинетики в организме человека и экспериментальных животных показывают, что генистеин достаточно хорошо всасывается в системный кровоток детей и взрослых при пероральном поступлении [18]. После всасывания генистеин в виде гликозида или в небольшом количестве в виде агликона распространяется по органам и системам. Максимальная концентрация его свободной фракции определяется через 1—6 ч после приема препарата [14; 69]. Проходя через кишечно-печеночный цикл, генистеин может быть деконъюгиро-ван кишечными бактериями, что в конечном итоге приводит к образованию 6-гидрокси-О-деметилданголензина [73]. Большая часть генистеина выводится с мочой в течение суток. У человека средний объем распределения для свободного генистеина составляет около 71—441 л/кг, а для общего генистеина — 1—6 л/кг. Предполагают, что свободный генистеин легче проникает в ткани и может накапливаться в них [14].

И. МсС1ат е! а1. сообщили о серии исследований по изучению токсичности генистеина [56]. Оценка токсичности изо-флавоноида проводилась на крысах Вистар обоего пола и включала изучение острой, подострой (4 и 13 недель) и хронической (52 недели) токсичности по критериям выживаемости животных, морфологии и массы их внутренних органов, а также по гематологическим и биохимическим показателям периферической крови. На основании полученных данных авторы пришли к выводу о малой токсичности генистеина [56]. Кроме

Рис. 1. Структура генистеина и его гликозидов [65]

того, показано, что внутрибрюшннное введение синтетического генистеина в диапазоне доз от 2000 до 6000 мг/кг не сопровождалось изменением массы тела и не приводило к макроскопическим нарушениям морфологии внутренних органов у экспериментальных животных. При этом величина расчетной среднесмертельной дозы для синтетического генистеина при внутрибрюшин-ном введении составила 8292 мг/кг, что позволяет отнести это соединение к малотоксичным веществам [4].

Механизм действия генистеина

Многочисленными экспериментальными исследованиями выявлено, что природный генистеин обладает выраженными противоопухолевыми свойствами [28; 34—36, 48]. Так, в некоторых сообщениях указывается, что генистеин в опытах in vivo и in vitro способствует задержке роста опухолей [28; 48]. Другие авторы установили, что комбинация генистеина с противоопухолевыми препаратами обеспечивает большую задержку роста опухоли путем ингиби-рования ангиогенеза по сравнению с эффектом от изолированного использования этих средств [62].

В механизме цитостатического и противоопухолевого эффектов изофлавоноидов первостепенную роль играют ингибирование активности тирозинкиназы, топоизомера-зы II, снижение концентрации полиаминов, участвующих в канцерогенезе [74].

В опытах in vitro было показано, что антиканцерогенные эффекты генистеина реализуются через плейотропные молекулярные механизмы регулировки клеточного цикла, апоптоза, ангиогенеза и метастазирова-ния [16; 51; 52]. Эти эффекты могут быть в первую очередь обусловлены регуляцией ге-нистеином различных сигнальных каскадов через процессы активации или ингибирова-ния p21WAF1, p27KTP1, NF-кВ, ММР и Bax/ Bcl-2 и др.

В таблице представлена характеристика основных молекулярных мишеней природного генистеина в опухолевой клетке.

Как известно, контроль клеточного цикла осуществляется посредством различных циклинов, циклинзависимых киназ (CDK) и циклинзависимых ингибиторов киназ (CDKI) в определенных фазах клеточного цикла [16]. Раковые клетки, обработанные различными концентрациями генистеина, показали дозозависимое снижение экспрессии циклина В, который играет важную роль в регулировании активности CDK и необходим для формирования комплекса циклин B/CDK в фазе цикла G2/M. Предполагается, что генистеин индуцирует остановку клеточного цикла в раковых клетках, в том числе путем снижения экспрессии циклина В [16]. Не исключается, что подобный эффект может наблюдаться и в стволовых кроветворных клетках. Это имеет большое значение для повышения их радиорезистентности. Эффекты комплексов CDK-

«Мишени» для природного генистеина в опухолевой клетке [9]

Апоптоз Транскрипционные факторы Клеточный цикл Другие

t Bax J NF-kB J Cyclin B1 J Akt

1 Bcl-2 t Nrf 1 J Cyclin D1 J AR

1 Bcl-xL t Nrf 2 t p21WAF1 J PSA

1 PARP J STAT-3 t P27 KTP1 J COX-2

J Survivin J STAT-5 t p16 INK4a J MMP-9

1 IAP J IGF-1R t Myt-l J MMP-2

1 XIAP J Ape-l/Ref J Wee-1 J p38 МАРК

t BAD J Wnt J CDK-1 J ERK-1/2

t Active caspases J Notch-2 t GPx

t ER stress regulators J AP-1 t kangai-1

J CREB t Endoglin

t GADD 153 J RANK/RANK-L

J HIF-1a J PTEN

Примечание: t — активирующий эффект; J, — ингибирующий эффект.

циклин на продвижение клетки по митоти-ческому циклу регулируются ингибиторами CDK, включая p21WAF1, p27KiP1 и p16INK4a. Обнаружено дозозависимое повышение экспрессии p21WAF1 в обработанных генистеином раковых клетках линии MDA-MB-231, MDA-MB-435 и MCF-7 молочной железы, линиях опухолевых клеток PC3 и LNCaP простаты, а также в клетках линий H460 и H322 немел-коклеточного рака легких [50].

L. Touny и P. Banerjee сообщили об участии киназ Myt-1 и Wee-1 в подавлении транскрипции циклина В1 и активации p21WAF1 в клетках рака простаты [78]. Авторы обнаружили, что обработка клеток генистеином активирует киназу Myt-1 и снижает фосфорилирование циклина B1. Это наблюдение позволяет лучше понять возможный механизм действия генистеина в отношении остановки продвижения клетки по митотическому циклу в фазе G2/M. Сделано заключение, что генистеин может ингибиро-вать рост раковых клеток путем модуляции экспрессии генов, которые участвуют в регуляции роста клеток и клеточного цикла [78].

Трансформирующий ростовой фактор бета-1 (TGFß1) является основным фактором, который регулирует пролиферацию эу-кариотической клетки путем ослабления ее прохода через сверочные точки клеточного цикла [71]. TGFß1 связывается с рецепторами на плазматической мембране, которые затем фосфорилируют внутриклеточные белковые субстраты по остаткам серина и треонина. При этом TGFß1 останавливает клеточный цикл преимущественно в фазе G1/S посредством регуляции транскрипции отдельных белков [71]. Показано, что инкубация клеток в среде с генистеином приводила к пятикратному увеличению содержания TGFß1 по сравнению с контролем [43]. Воздействие природного генистеина было обусловлено либо синтезом, либо секрецией TGFß1 со стороны клеток линии HME.

Наряду со способностью генистеина останавливать клеточный цикл в его определенной фазе другим важным эффектом изо-флавоноида является индукция запрограммированной смерти клеток, известной как апоптоз [52]. Это событие реализуется при участии различных групп белковых фрагмен-

тов в клетках, а именно белков семейства Bcl-2, а также каскада протеолитической активации семейства цистеинил-аспартат-специфических протеаз, или каспаз, что приводит к денатурации структурных белков, деградации ДНК и, наконец, фагоцитозу [67]. Белки семейства Bcl-2 являются одними из наиболее изученных факторов апоптоза и могут быть разделены на две основные группы в соответствии с их функциональными свойствами: антиапоптотические белки, например Bcl-xl и Bcl-2, и проапоптотические белки, такие как Bax, Bak и Bad [19]. Показано, что количество апоптотических клеток увеличивалось на 43—57% при инкубации клеток в среде, содержащей генистеин в физиологических концентрациях, по сравнению с контролем [57]. Сообщается также, что соевый изофлавоноид генистеин может индуцировать апоптоз в различных раковых клетках человека путем активации каспазы-3 и снижения активности Bcl-2, Bcl-xl и HER-2/neu [40; 77].

Известно, что опухолевые гены-супрессоры р53 и p21WAF1 вовлечены в процессы апоптоза [68]. Обнаружено, что природный генистеин способен вызывать остановку клеточного цикла и апоптоз в раковых клетках линии MDA-MB-231, содержащих мутантный ген p53 [60]. При этом регистрировалась повышенная экспрессия гена p21WAF1, что указывает на индукцию апоптоза генистеином по р53-независимому пути. A. Kaziet et al. показали, что генистеин регулирует апоптоз путем снижения активности протеосом и индукцией промоторов апоптоза р27кР1, ^Ba и Вах [42].

Выявлено также, что генистеин индуцирует апоптоз клеток гепатоцеллюлярной карциномы путем активации стресс-регуляторов эндоплазматической сети (ER-stress), которые включают транскрипционный фактор — GADD153, m-кальпаин, GRP78 и каспазу-12 [88]. Кроме того, существуют данные, свидетельствующие о том, что многие из этих каскадов могут прямо или косвенно регулироваться посредством ядерного фактора кВ (NF-кВ), на который также способен оказывать влияние генистеин [63]. Таким образом, активация ER-stress и каспаз, ингибиро-вание протеосом, а также снижение актив-

ности Bcl-2, Bcl-xl и HER-2/neu могут представлять собой молекулярный механизм индукции генистеином апоптоза.

Было показано, что природный генистеин вовлечен в регуляцию экспрессии генов, по всей видимости, путем модуляции эпигенетических процессов, таких как метилирование ДНК и/или ацетилирование гистонов непосредственно или через связывание с эстрогеновыми рецепторами [28]. Генистеин способен активировать экспрессию мРНК гена BRCA1 в опухолевых клетках молочной железы, которая часто инак-тивируется при раке молочной железы [15]. Кроме того, были установлены плейотроп-ные эффекты генистеина при ингибирова-нии канцерогенеза и роста раковых клеток. В частности, было показано, что генисте-ин подавляет ангиогенез и метастазирова-ние опухоли [45].

Имеются интересные данные, свидетельствующие, что природный генистеин вызывает арест клеточного цикла не только в опухолевых клетках, но и в нормальных. Так, при обработке эпителиальных клеток линии MCF10A молочной железы генистеином регистрировалась остановка мито-тического цикла клетки в фазе G2/M [79]. Однако эффекты генистеина в злокачественных клетках по сравнению с нормальными оказались более выражены, что, вероятно, может объясняться высокой митотической активностью опухолевых клеток.

Кроме того, подобно флавоноидам других классов, изофлавоноиды, в частности природный генистеин, оказывают ингибиру-ющее действие на многочисленные энзимные системы, а через них — на ряд клеточных биохимических процессов. Показано, что ге-нистеин ингибирует тирозинкиназу, топоизо-меразу II, фосфатидилинозитол киназу, ABC-транспортеры — важные факторы пролиферации, дифференцировки, метаболизма и генной экспрессии [63]. Предположительно механизм ингибирования такой широкой группы ферментов обусловлен влиянием генистеина на область связывания АТФ, что приводит к конкурентному ингибированию по отношению к этой молекуле, хотя никакой структурной взаимосвязи между АТФ и генистеином нет [6].

Кроме того, как уже было отмечено, структурные особенности природного генистеина определяют его антиоксидантную, незначительную эстрогенную и антиэстроген -ную активность (из-за структурного сходства с эстрогенами) [26; 66], что также является весьма важным обстоятельством при рассмотрении его фармакологических свойств.

Действительно, генистеин способствовал повышению активности супероксиддис-мутазы в культуре клеток H9C2 на 28%, а также снижению интенсивности образования радикала 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил в модельной системе [61]. Показано, что гени-стеин способен реагировать с окислителями гипохлоритом и пероксинитритом, нейтрализуя их окислительный потенциал. Это также свидетельствует о его антиоксидантной активности [12].

I. Kruk et al. выявили, что природный генистеин снижал хемилюминесцент-ную реакцию свечения в супероксид-анион-генерирующей системе [44]. Генистеин также реагировал с гидроксильным радикалом, при этом активность изофлавоноида была в два раза сильнее, чем у тролокса, который, как правило, является эталоном в подобных исследованиях. Кроме того, генистеин в дозе 0,5 ммоль/л ингибировал НО-зависимую деградацию дезоксирибозы на 20% по сравнению с контролем [44].

В исследовании Y. Zhang et al. [89] было зарегистрировано, что генистеин стимулировал увеличение активности ферментов антиоксидантной защиты, таких как су-пероксиддисмутаза, глутатион-пероксидаза (ГП), каталаза и глутатион-редуктаза (ГР). Кроме того, генистеин регулировал экспрессию генов антиоксидантной защиты, воздействуя на рецепторы эстрогена, киназу ERK 1/2 и транскрипционный фактор NF^ [13].

У генистеина также обнаружены ан-тиоксидантные свойства — они реализовались посредством активации изофлавоно-идом транскрипционных факторов Nrf1 и Nrf2, которые вовлечены в регуляцию генов, участвующих в ответе на интенсификацию окислительного стресса [33]. Эти транскрипционные факторы участвуют и в регуляции белков II фазы метаболизма ксенобиотиков.

В то же время Nrf2 и Nrfl являются факторами, которые могут связываться с AREs и экс-прессировать гены ГП и ГР [33]. Известно также, что окислительный стресс активирует фактор №кВ [27], который играет отрицательную роль в развитии онкологической патологии. Генистеин в свою очередь ингибиру-ет активацию NF^, проявляя при этом ан-тиоксидантные свойства [21].

В хемилюминесцентной реакции in vitro с участием рибофлавина и перекиси водорода синтетический генистеин также обладал анти-оксидантной активностью, сопоставимой с активностью аскорбиновой кислоты, но выраженной слабее, чем у кверцетина [2]. Кроме того, в исследованиях in vivo выявлено, что в эритроцитах периферической крови крыс через 4 часа после введения животным синтетического генистеина концентрация восстановленного глутатиона повышалась на 73,8%, а спустя 1 сутки значение этого показателя превосходило контрольные величины на 85%. В эти же сроки обнаружено увеличение активности ГР: в 1,6 раза через 4 часа после введения синтетического генистеина и в 2 раза — через 24 часа после введения препарата [2].

Однако имеются и другие концепции, объясняющие причины, почему изофлавоно-ид генистеин модулирует разнообразные биохимические процессы в клетке. В частности, это структурное и функциональное подобие с эстрогенами, которые, как известно, играют важную роль в жизни клеток.

На рис. 2 отражена структурная схожесть молекулы природного изофлавоноида генистеина и эстрадиола. Это обстоятельство и определяет возможность взаимодействия природного генистеина как фитоэстрогена с рецепторами эстрогена [37] (рис. 3).

Однако вопрос, действует ли это соединение как эстроген или является эстрогенным агонистом-антагонистом, остается окончательно не решенным, так как имеются противоречивые данные литературы по этому поводу [55; 83]. Тем не менее большинство авторов все-таки предполагают наличие эстро-генной активности у природного генистеина. Это подтверждено обнаружением связи изо-флавоноида с рецептором эстрогена, хотя его сродство с рецептором было приблизительно в 100—1000 ниже, чем для эстрадиола [58].

Рис. 2. Структурная формула молекулы эстрадиола

Рис. 3. Сродство фитоэстрогена с эстрогеновым рецептором

Кроме того, генистеин оказывает модулирующее влияние на эти рецепторы, что приводит к увеличению экспрессии генов под влиянием эстрогенов [37]. Эффекты генистеина могут быть устранены при действии классического антиэстрогена тамоксифена, что является доказательством эстрогенного механизма действия препарата [86]. Однако имеются и данные, свидетельствующие об антиэстрогенном действии генистеина. Было показано, что совместное применение изофлавоноида и эстра-диола приводит к меньшей активации рецепторов, чем изолированное применение препаратов [80]. Установлено также, что эстроген-ной активностью в структуре генистеина обладает только агликон [72].

В работе Ь. Уе е! а1. [87] была исследована способность генистеина регулировать активность ароматазы в печеночных клетках линии Нер02. Показано, что при инкубации клеток генистеином в концентрации 10 мМ в течение 24 часов активность фермента увеличивается на 50% по сравнению с контролем. Кроме того, обнаружено повышение активности протеинкиназ РКСа, Р38 и ЕИК-1/2. Они в свою очередь активировали транскрипционный фактор СИЕВ, который связывался с участком СИЕ молекулы ДНК и регулировал транскрипцию гена СУР19. Известно, что ген СУР19 ответствен

за экспрессию фермента ароматазы, которая катализирует превращение андрогенов в эстрогены [87].

В последнее время возникло несколько теорий, объясняющих механизм влияния фитоэстрогенов на уровень половых гормонов. Предполагается, что изофлавоноиды могут изменять уровень циркуляции эстрогена и тестостерона, воздействуя на глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ), — особый белок плазмы крови, участвующий в связывании и транспорте половых гормонов и ограничивающий свободную концентрацию гормонов, доступных для захвата клетками, а следовательно, и выполнение биологического эффекта [5; 17]. Согласно одной из теорий, изофлавоноиды могут ингибировать связывание эстрогенов или андрогенов с ГСПГ, увеличивая тем самым уровень свободно циркулирующих гормонов [84]. По другой теории, изофлавоноиды могут увеличивать синтез ГСПГ, что приводит к снижению уровня свободно циркулирующих гормонов [65]. Результаты исследований, посвященных связыванию фитоэстрогенов с ГСПГ, также носят противоречивый характер. Исследования in vitro демонстрируют, что генистеин в концентрации 135 мг/л увеличивает синтез ГСПГ [5]. В то же время результаты воздействия изофлавоноидов на синтез ГСПГ, полученные в различных исследованиях на людях, принимавших фитоэстрогены, не всегда совпадают с результатами исследований in vitro [32; 84].

Генистеин как средство профилактики и терапии различных заболеваний

По результатам экспериментальных и клинических исследований установлено, что генистеин оказывает положительный эффект при профилактике и терапии ряда сердечнососудистых заболеваний и остеопороза у женщин в период менопаузы [20], гормон-зависимого рака груди и простаты [45; 85], а также других злокачественных новообразований [49].

В экспериментах на мышах показан гипохолестеролемический эффект изофлаво-ноидов за счет усиленного превращения хо-лестерола в желчные кислоты и нарушения их кишечно-печеночной рециркуляции [64].

В антидиабетическом действии изофлавоно-идов существенную роль играет снижение концентрации сывороточного холестерола (на 45%), триглицеридов (на 70%) и леп-тина (на 58%) с одновременным снижением секреции инсулина (на 70%) и SREBR-1c [29].

Показано, что длительное (2—5 лет) потребление женщинами в постменопаузе соевых продуктов (заместительная гормонотерапия) уменьшает такие проявления менопаузы, как потливость, сухость влагалища, приливы, инфекции мочевого тракта, риск переломов и колоректального рака [39]. Однако длительная гормонозаместительная терапия дает и побочные эффекты: увеличение частоты сердечно-сосудистой патологии (на 29%), рака молочной железы (на 26%), инсультов (на 41%), а также гиперплазии и рака эндометрия [53].

Одно из следствий дефицита эстрогенов в постменопаузе — ускорение потери минералов костями. Изофлавоноиды, взаимодействуя с рецепторами эстрогенов, угнетают резорбцию костей, экскрецию биомаркера резорбции дезоксипиридинолина, стимулируют активность остеобластов [53].

G. Hillman et al. показали, что комбинированное применение генистеина совместно с лучевой терапией рака простаты и рака почки привело к замедлению роста опухоли и распространения метастазов в лимфатические узлы по сравнению с проведением радиотерапии без использования генистеина [34; 35]. Кроме того, применение соевых изофлавоноидов повышало эффективность лучевой терапии рака легких, а также смягчало повреждение сосудов, воспаление и фиброз легких, вызванные радиационным поражением нормальной легочной ткани [36].

Таким образом, генистеин является малотоксичным соединением, обладающим широким спектром биологических свойств, в том числе способностью замедлять деление клеток, антиоксидантными свойствами и эстрогенной активностью. Это обстоятельство позволяет рассматривать его в качестве перспективного средства, способного обеспечить модификацию повреждений, образующихся при действии ионизирующего излучения на организм.

Радиозащитная эффективность генистеина

Особое внимание в работах последних лет уделено изучению противолучевых свойств препаратов из группы изофлавоно-идов [47]. Одним из таких препаратов является генистеин. У него выявлена радиозащитная способность, которая, как полагают, в значительной степени определяется анти-оксидантной и эстрогенной активностью этого соединения [59]. По данным литературы, изофлавоноид генистеин обладает умеренной радиозащитной эффективностью, при этом эффект от его применения зависит от времени введения и дозы препарата.

В исследовании A. Bhatia et al. [11] белым мышам линии Swiss подкожно вводили различные дозы генистеина (100, 200, 300, 400 мг/кг) за 24 часа перед острым у-облучением в дозе 8 Гр (60Со, мощность дозы 1,02 Гр/мин). Установлено, что при дозе 200 мг/кг выживаемость животных была существенно выше по сравнению с эффектом от применения препарата в других дозах. На следующем этапе исследования авторы предварительно вводили генистеин в различные сроки — за 24 часа или за 1 час перед облучением. Показано, что применение генистеина за 24 часа до облучения увеличивало выживаемость животных на 20% к 30-м суткам эксперимента по сравнению с контролем. Введение генистеина за 1 час до лучевой нагрузки позволило достигнуть аналогичного эффекта к 22-м суткам исследования, но в дальнейшем отмечалось снижение выживаемости, и к концу срока наблюдения все животные погибали.

В исследовании T. Davis et al. [23] показано, что однократное подкожное введение генистеина в дозе 200 мг/кг за 24 часа перед у-облучением в дозе 8,75 Гр обеспечивало выживаемость мышей линии CD2F1 на уровне 97% при 100%-ной гибели в контроле. Кроме того, у животных, получавших генистеин, на 15-е сутки эксперимента отмечалось достоверное увеличение числа нейтро-филов на 8,7% по сравнению с контролем, а также числа 11-суточных селезеночных коло-ниеобразующих единиц, значения которых в 13 раз превосходили аналогичные показатели в контроле.

В другом эксперименте [22] мышам-самкам C57B1/6J за 24 часа до у-облучения 60Co в дозе 7,75 Гр подкожно вводили генистеин в дозе 200 мг/кг. Показано, что введение генистеина защищало от миелотоксиче-ского действия облучения посредством остановки клеточного цикла LSK( + )-клеток. Это приводило к созданию резерва стволовых гемопоэтических клеток и клеток-предшественников, находящихся в состоянии покоя, в объеме, достаточном для пострадиационного восстановления гемопоэза.

М. Landauer et al. при изучении радиозащитного действия генистеина выявили, что пероральное введение генистеина мышам линии CD2F1 за 24 часа до острого внешнего у-облучения оказывало выраженное защитное действие, проявляющееся в снижении смертности облученных животных [46]. Если же препарат вводили за 1 час до радиационного воздействия, то эффективность генистеина снижалась, повышение выживаемости облученных животных по сравнению с контролем было статистически незначимым

[46].

Y. Zhou et al. изучили радиозащитный эффект генистеина, который перораль-но вводили мышам-самцам линии BALB/с в течение 7 дней до облучения с периодичностью 1 раз в сутки в дозе 160 мг/кг [90]. Однократное острое у-облучение 60Со в дозе 6 Гр проводили через 7 суток после окончания курса. Показано, что генистеин обладает противолучевым действием, обеспечивая выживаемость облученных мышей на уровне 60% при 20%-ной гибели в контроле. Установлено также, что на 2-е сутки эксперимента наблюдалось достоверное увеличение абсолютного числа лейкоцитов и лимфоцитов в крови, а также общей клеточно-сти костного мозга. Кроме того, в течение 14 суток эксперимента отмечалось достоверное увеличение ГМ-КСФ у животных, получавших генистеин.

В работе C. Ha et al. [31] оценивали радиозащитную эффективность генисте-ина в суспензии наночастиц по показателям выживаемости на фоне общего однократного у-облучения мышей линии CD2F1 в дозе 9,25 Гр. Влияние препарата на показатели гемопоэза облученных животных из-

учали при радиационном воздействии в дозе 7 Гр. Показано, что введение препарата мышам в дозе 150 мг/кг за 24 часа до облучения способствовало увеличению выживаемости животных на 70% по сравнению с контролем. Кроме того, спустя 7 суток после облучения популяция стволовых клеток-предшественников гемопоэза линии HSPC, Lineage ( — ) / cKit ( + ) увеличилась на 33% по сравнению с контролем.

В исследовании J. Mahmood et al. [54] авторы изучали радиозащитную эффективность терапевтического применения природного генистеина. Препарат в дозе 50 мг/кг подкожно вводили 7-недельным крысам линии Fisher сразу после облучения и спустя 2 недели после лучевого воздействия курсом 1 раз в сутки в течение 26 недель. Животные подвергались острому местному ( область грудной клетки) облучению в дозе 12 Гр. Оценивали уровень провоспалительных ци-токинов, секретируемых активированными макрофагами, показатели оксидантного стресса и фиброза в течение 48 недель после облучения. Выявлено, что генистеин снижал показатели окислительного повреждения на 50%, уменьшал активность транскрипционного фактора TGFp1 на 75% и выраженность фиброза на 60—80% по сравнению с контролем.

В исследовании M. Aksenov et al. [7] авторы изучали влияние природного генисте-ина на апоптоз и пролиферацию нормальных клеток у мышей с опухолью толстой кишки на фоне сеанса лучевой терапии. Раковые клетки СТ26 толстой кишки мыши подкожно вводили мышам-реципиентам линии BALB/с. В дальнейшем животных облучали фотонами высокой энергии в дозе 5 или 10 Гр в целях моделирования лучевой терапии рака толстой кишки. Животным профилактически вводили генистеин в дозе 200 мг/ кг за 24 часа до радиационного воздействия. Через 12 часов после облучения в дозе 5 Гр генистеин значительно снижал апоптотический индекс клеток крипт тощей кишки по сравнению с облученным контролем. Кроме того, у защищенных генистеином облученных животных наблюдалось увеличение Ki-67-положительных про-лиферирующих клеток в криптах кишки по сравнению с контролем, а средний вес опухо-

ли СТ26 у мышей, получавших генистеин до облучения, был меньше.

В работе V. Singh et al. [70] показано, что генистеин в условиях облучения является индуктором гемопоэтических цитокинов. Так, подкожное введение мышам генистеина в дозе 200 мг/кг за 24 часа до острого облучения сопровождалось повышением уровня сывороточного ГМ-КСФ и ИЛ-6 уже через 4 часа после радиационного воздействия по сравнению с контролем. По мнению авторов, это обстоятельство может быть объяснением более раннего восстановления функционального пула системы кроветворения у животных, которые получали генистеин в условиях воздействия радиации.

Показано также, что радиозащитной активностью обладает и синтетический генистеин [3]. Так, внутрибрюшинное введение препарата в дозе 200 мг/кг за 1 час до острого воздействия рентгеновского из луче -ния в дозах СД50-90/30 приводило к увеличению выживаемости и средней продолжительности жизни облученных белых беспородных мышей. Значение ФИД для генистеина при данной схеме применения препарата составило 1,23 [3].

Заключение

Биологические эффекты природного генистеина свидетельствуют об актуальности исследований, направленных на изучение возможности использования изофла-воноида при различных патологических процессах. Показано, что генистеин являет -ся малотоксичным соединением, а вопросы его фармакодинамики до конца не изучены. Определенная часть публикаций посвящена оценке противолучевой эффективности гени-стеина, из которых видно, что этот изофла-воноид обладает радиозащитными свойствами. Их выраженность зависит от сроков и схемы введения препарата. Эти исследования в настоящее время не закончены и активно продолжаются.

Литература

1. Барабой В.А. Изофлавоноиды сои: биологическая активность и применение // Биотехнология. 2009. Т. 2. № 3. С. 44-54.

2. Гребенюк А.Н., Башарин В.А., Тарумов Р.А. и др. Оценка антиоксидантных свойств отечественного синтетического ге-нистеина на моделях in vitro и in vivo // Вестник Российской Военно-медицинской академии. 2013. Т. 42. № 2. С. 83-87.

3. Гребенюк А.Н., Башарин В.А., Тару-мов Р.А. и др. Экспериментальная оценка радиозащитной эффективности генистеина по показателям выживаемости и костномозгового кроветворения мышей, подвергнутых рентгеновскому облучению // Радиационная биология. Радиоэкология. 2013. Т. 53. № 5. С. 468-474.

4. Гребенюк А.Н., Башарин В.А., Тару-мов Р.А. и др. Экспериментальное исследование острой токсичности генистеина в опытах на мелких лабораторных животных / / Токсикологический вестник. 2012. № 6 (116). С. 25-29.

5. Шепельская Н.Р., Проданчук М.Г. Фито-эстрогены сои и их антиандрогенное действие (обзор литературы) // Проблеми харчувания. 2010. № 3-4. С. 36-31.

6. Akiyama T., Ishida J., Nakagawa S. et al. Genistein, a specific inhibitor of tyrosine-specific proteinkinases // Journal of Biological Chemistry. 1987. Vol. 262. № 12. P. 5592-5595.

7. Aksenov M.Y., Aksenova M.V., Mactu-tus C.F., Booze R.M. Attenuated neurotoxicity of the transactivation-defective HIV-1 Tat protein in hippocampal cell cultures // Experimental Neurology. 2009. Vol. 219. P. 586-590.

8. Asahi K.I. et al. Studies on differentiation inducing substances of animal cells. A differentiation inducing substance against mouse leukemia cells // The Journal of Antibiotics. 1981. Vol. 34. P. 919-922.

9. Banerjee S., Li Y., Wang Z., Sarkar F.H. Multi-targeted therapy of cancer by genistein // Cancer Letters. 2008. Vol. 269. P. 226-242.

10. Barnes S., Peterson G. Biochemical targets of the isoflavone genistein in tumor cell lines // Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. 1995. Vol. 208. № 1. P. 103-108.

11. Bhatia A., Gaur A., Sharma A. Radiation protection by an isoflavone, genis t ein: a study on the survivability of mice // Nuclear Technology & Radiation Protection. 2007. Vol. 22. № 1. P. 34-39.

12. Boersma B.J., Patel R.P., Kirk M. et al. Chlorination and nitration of soy isoflavones // Archives of Biochemistry and Biophysics. 2000. Vol. 368. P. 265-275.

13. Borras C. et al. Genistein, a soy isoflavone, up-regulates expression of antioxidant genes: involvement of estrogen receptors, ERK1/2, and NFkB // The FASEB Journal: Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 2006. Vol. 20. № 12. P. 2136-2138. °

14. Busby M.G., Jeffcoat A.R., Bloedon L.T. et al. Clinical characteristics and pharmacokinetics of purified soy isoflavones: singledose administration to healthy men // The American Journal of Clinical Nutrition. 2002. Vol. 75. P. 126-136.

15. Cabanes A., Wang M., Olivo S. et al. Pre-pubertal estradiol and genistein exposures up-regulate BRCA1 mRNA and reduce mammary tumorigenesis // Carcinogenesis. 2004. Vol. 25. P. 741-748.

16. Casagrande F., Darbon J. p21CIP1 is dispensable for the G2 arrest caused by genistein in human melanoma cells // Experimental Cell Research. 2000. Vol. 258. P. 101-108.

17. Castelo-Branco C., Soveral I. Phytoestrogens and bone health at different reproductive stages // Gynecological Endocrinology. 2013. Vol. 29. № 8. P. 735-743.

18. Chang Y., Choue R. Plasma pharmacokinetics and urinary excretion of isoflavones after ingestion of soy products with different aglycone/glucoside ratios in South Korean women // Nutrition Research and Practice. 2013. Vol. 7. № 5. P. 393-399.

19. Chowdhury I., Tharakan B., Bhat G. Current concepts in apoptosis: the physiological suicide program revisited // Cellular & Molecular Biology Letters. 2006. Vol. 11. № 4. P. 506-525.

20. Cotter A., Cashman K. Genistein appears to prevent early postmenopausal bone

loss as effective as hormone replacement therapy // Nutrition Reviews. 2003. Vol. 61. P. 346-351.

21. Davis J., Kucuk O., Djuric Z., Sarkar F. Soy isoflavone supplementation in healthy men prevents NF kappaB activation by TNF-alpha in blood lymphocytes // Free Radical Biology & Medicine. 2001. Vol. 30. P. 1293-1302.

22. Davis T., Mungunsukh O., Zins S. et al. Genistein induces radioprotection by hematopoietic stem cell quiescence // International Journal of Radiation Biology. 2008. Vol. 84. № 9. P. 713-726.

23. Davis T.A., Clarke T.K., Mog S.R., Landauer M.R. Subcutaneous administration of genistein prior to lethal irradiation supports multilineage, hematopoietic progenitor cell recovery and survival // International Journal of Radiation Biology. 2007. Vol. 83. № 3. P. 141-151.

24. Demonthy J., Lamarche B., Jones P. Role of isoflavones in hypocholesterolemic effect or soy // Nutrition Reviews. 2003. Vol. 61. P. 189-203.

25. Dixona R., Ferreira D. Genistein // Phytochemistry. 2002. Vol. 60. № 3. P. 205-211. "

26. Djuric Z., Chen G., Doerge D. et al. Effect of soy isoflavone supplementation on oxidative stress in men and women // Cancer Letters. 2001. Vol. 172. P. 1-6.

27. Dudek E., Shang F., Taylor A. H2O2-mediated oxidative stress activates NF-kappa B in lens epithelial cells // Free Radical Biology & Medicine. 2001. Vol. 31. P. 651-658.

28. Fang M., Chen D., Sun Y. et al. Reversal of hypermethylation and reactivation of p16INK4a, RARbeta, and MGMT genes by genistein and other isoflavones from soy // Clinical Cancer Research: Official Journal of the American Association for Cancer Research. 2005. Vol. 11. P. 7033-7041.

29. Fu Z., Gilbert E., Pfeiffer L. et al. Genistein ameliorates hyperglycemia in a mouse model of nongenetic type 2 diabetes // Applied Physiology, Nutrition, and Metabolism. 2012. Vol. 37. № 3. P. 480-488.

30. Fukutake M., Takahashi M., Ishida K et al. Quantification of genistein and genistin in soybeans and soybean products // Food and Chemical Toxicology. 1996. Vol. 34. № 5. P. 457-461.

31. Ha C.T. et al. Genistein nanoparticles protect mouse hematopoietic system and prevent proinflammatory factors after gamma irradiation // Radiation Research. 2013. Vol. 180. № 3. Р. 316-325.

32. Habito R.S., Ball M.J. Effects of replacing meat with soyabean in the diet on sex hormone concentrations in healthy adult males // The British Journal of Nutrition. 2000. Vol. 84. № 4. P. 557-563.

33. Hernandez-Montes E., Pollard S.E., Vauzour D. et al. Activation of glutathione peroxidase via Nrf1 mediates genistein's protection against oxidative endothelial cell injury // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2006. Vol. 346. P. 851-859.

34. Hillman G.G., Wang Y., Kucuk O. et al. Genistein potentiates inhibition of tumor growth by radiation in a prostate cancer orthotopic model // Molecular Cancer Therapeutics. 2004. Vol. 3. № 10. P. 1271-1279.

35. Hillman G.G., Wang Y., Che M et al. Progression of renal cell carcinoma is inhibited by genistein and radiation in an orthotopic model // BMC Cancer. 2007. Vol. 13. P. 4-8.

36. Hillman G.G. et al. Soy isoflavones radio-sensitize lung cancer while mitigating normal tissue injury // Radiotherapy and Oncology. 2011. Vol. 13. № 2. P. 329-336.

37. Hsieh C.Y. et al. Estrogenic effects of genistein on the growth of estrogen receptor-positive human breast cancer (MCF-7) cells in vitro and in vivo // Cancer Research. 1998. Vol. 58. № 17. P. 3833-3838.

38. Huang J. Genistein inhibits protein histidine kinase // The Journal of Biological Chemistry. 1992. Vol. 267. № 22. P. 15511-15515.

39. Irace C. et al. Genistein and endothelial function in postmenopausal women with

metabolic syndrome // European Journal of Clinical Investigation. 2013. Vol. 43. № 10. P. 1025-1031.

40. Katdare M., Osborne M., Telang N.T. Soy isoflavone genistein modulates cell cycle progression and induces apoptosis in HER-2/neu oncogene expressing human breast epithelial cells // International Journal of Oncology. 2002. Vol. 21. P. 809-815.

41. Kaufman P.B. et al. A comparative survey of leguminous plants as sources of the isoflavones, genistein and daidzein: implications for human nutrition and health // Journal of Alternative and Complementary Medicine. 1997. Vol. 3. № 1. P. 7-12.

42. Kazi A. et al. Inhibition of the proteasome activity, a novel mechanism associated with the tumor cell apoptosis-inducing ability of genistein // Biochemical Pharmacology. 2003. Vol. 66. P. 965-976.

43. Kim H., Peterson T., Barnes S. Mechanisms of action of the soy isoflavone genistein: emerging role for its effects via transforming growth factor beta signaling pathways // The American Journal of Clinical Nutrition. 1998. Vol. 68. № 6. P. 1418-1425.

44. Kruk I. et al. Scavenging of reactive oxygen species by the plant phenols genistein and oleuropein // Luminescence. 2005. Vol. 20. P. 81-89.

45. Lamartiniere C.A. Protection against breast cancer with genistein: a component of soy // The American Journal of Clinical Nutrition. 2000. Vol. 71. № 6. P. 1705-1707.

46. Landauer M.R. et al. Phytoestrogenic isoflavone compositions, their preparation and use thereof for protection against and treatment of radiation injury: пат. № 7655694 USA, 2010.

47. Landauer M.R. et al. Protection against lethal irradiation by genistein // International Journal of Toxicology. 2000. Vol. 19. P. 37-43.

48. Li M., Zhang Z., Hill D. et al. Genistein, a dietary isoflavone, down-regulates the MDM2 oncogene at both transcriptional and posttranslational levels // Cancer Research. 2005. Vol. 65. № 18. P. 8200-8208.

49. Li Q.S. et al. Genistein and its synthetic analogs as anticancer agents // Anticancer Agents in Medicinal Chemistry. 2012. Vol. 12. № 3. P. 271-281.

50. Li Y., Upadhyay S., Bhuiyan M., Sarkar F. Induction of apoptosis in breast cancer cells MDA-MB-231 by genistein // Oncogene. 2000. Vol. 18. P. 3166-3172.

51. Li Z. et al. Genistein induces G2/M cell cycle arrest via stable activation of ERK1/2 pathway in MDA-MB-231 breast cancer cells // Cell Biology and Toxicology. 2008. Vol. 24. № 5. P. 401-409.

52. Lian F., Bhuiyan M., Li Y. et al. Genis-tein-induced G2/M arrest, p21WAF1 upregulation, and apoptosis in a non-small-cell lung cancer cell line // Nutrition and Cancer. 1998. Vol. 31. P. 184-191.

53. Mahadi G.B. Soy isoflavones cause endometrial hyperplasia? // Nutrition Reviews.

2005. Vol. 63. P. 392-397.

54. Mahmood J. et al. Mitigation of radiation-induced lung injury with EUK-207 and genistein: effects in adolescent rats // Radiation Research. 2013. Vol. 179. № 2. P. 125-134.

55. Marik R. et al. Potent genistein derivatives as inhibitors of estrogen receptor alphapositive breast cancer // Cancer Biology & Therapy. 2011. Vol. 11. № 10. P. 883892.

56. McClain R.M. et al. Acute, subchronic and chronic safety studies with genistein in rats // Food and Chemical Toxicology.

2006. Vol. 44. P. 56-80.

57. Moiseeva E.P., Almeida G.M., Jones G.D., Manson M.M. Extended treatment with physiologic concentrations of dietary phyto-chemicals results in altered gene expression, reduced growth, and apoptosis of cancer cells // Molecular Cancer Therapeutics.

2007. Vol. 6. P. 3071-3079.

58. Moran J. et al. 17ß-Estradiol and genistein acute treatments improve some cerebral cortex homeostasis aspects deteriorated by aging in female rats // Experimental Gerontology. 2013. Vol. 48. № 4. P. 414-421.

59. Mortensen A. et al. Analytical and compositional aspects of isoflavones in food

and their biological effects // Molecular Nutrition & Food Research. 2009. Vol. 53. P. 266-309.

60. Pan H. et al. Genistein inhibits MDA-MB-231 triple-negative breast cancer cell growth by inhibiting NF-kB activity via the Notch-1 pathway // International Journal of Molecular Medicine. 2012. Vol. 30. № 2. P. 337-343.

61. Patel R.P. et al. Antioxidant mechanisms of isoflavones in lipid systems: paradoxical effects of peroxyl radical scavenging // Free Radical Biology & Medicine. 2001. Vol. 31. P. 1570-1581.

62. Pietras R.J., Weinberg O.K. Antiangiogenic steroids in human cancer therapy // Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. 2005. Vol. 13. № 1. P. 49-57.

63. Polkowski K., Mazurek A. Biological properties of genistein. A review of in vitro and in vivo data // Acta Poloniae Pharmaceutica. 2000. Vol. 57. № 2. Р. 135-155.

64. Ross-Viola J. et al. Effects of low and high isoflavone soy protein-based diets on cholesterol metabolism and entero-hepatic bile recirculation in mice // The FASEB Journal: Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 2006. Vol. 20. Abstr. 11.525.3.

65. Rozman K.K. et al. NTP-CERHR Expert Panel Report on the reproductive and developmental toxicity of soy formula // Birth Defects Research. Part B. Developmental and Reproductive Toxicology. 2006. Vol. 77. P. 280-397.

66. Ruiz-Larrea M.B. et al. Antioxidant activity of phytoestrogenic isoflavons // Free Radical Research. 2007. Vol. 26. P. 67-70.

67. Schultz D.R., Harrington Jr. W.J. Apop-tosis: programmed cell death at a mole-cul ar level // Seminars in Arthritis and Rheumatism. 2003. Vol. 32. № 6.

Р. 345-369.

68. Sen N., Satija Y., Das S. p53 and metabolism: old player in a new game //

Transcription. 2012. Vol. 3. № 3. Р. 119123.

69. Sepehr E. et al. Effect of glycosidation of isoflavones on their bioavailability and pharmacokinetics in aged male rats // Molecular Nutrition & Food Research. 2009. Vol. 1. P. 16-26.

70. Singh V.K. et al. Effects of genistein administration on cytokine induction in whole-body gamma irradiated mice // International Immunopharmacology. 2009. Vol. 9. № 12. Р. 1401-1410.

71. Sriram S. et al. Triple combination of siRNAs targeting TGFß1, TGFßR2 and CTGF enhances reduction of collagen I and smooth muscle actin in corneal fibroblasts // Investigative Ophthalmology & Visual Science. 2013. Vol. 54. № 13. P. 456-467.

72. Steensma A. et al. Bioavailability of genistein and its glycoside genistin as measured in the portal vein of freely moving unanesthetized rats // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2006. Vol. 54. Р. 8006-8012.

73. Steer T.E. et al. Metabolism of the soybean isoflavone glycoside genistin in vitro by human gut bacteria and the effect of prebiotics // The British Journal of Nutrition. 2003. Vol. 90. № 3. Р. 635-642.

74. Switalska M. et al. Novel genistein derivatives induce cell death and cell cycle arrest through different mechanisms // Nutrition and Cancer. 2013. Vol. 65. № 6. Р. 874-884.

75. Taylor C.K. et al. The effect of genistein aglycone on cancer and cancer risk: a review of in vitro, preclinical, and clinical studies // Nutrition Reviews. 2009. Vol. 67. № 7. Р. 398-415.

76. The Merck Index. 11th ed. 1989. P. 4221.

77. Tophkhane C. et al. Bcl-2 overexpression sensitizes MCF-7 cells to genistein by multiple mechanisms // International Journal of Oncology. 2007. Vol. 31. P. 867-874.

78. Touny L.H., Banerjee P.P. Identification of both Myt-1 and Wee-1 as necessary mediators of the p21-independent inactivation of the cdc-2/cyclin B1 complex and growth inhibition of TRAMP cancer

cells by genistein // Prostate. 2006. Vol. 66. P. 1542-1555.

79. Upadhyay S. et al. Differential sensitivity of normal and malignant breast epithelial cells to genistein is partly mediated by p21(WAF1) // Clinical Cancer Research. 2001. Vol. 7. P. 1782-1789.

80. Vitale D.C. et al. Isoflavones: estrogenic activity, biological effect and bio-availability // European Journal of Drug Metabolism and Pharmacokinetics. 2013. Vol. 38. № 1. P. 15-25.

81. Walter E.D. Genistin (an isoflavone glucoside) and its aglucone, genistein, from soybeans // Journal of the American Chemical Society. 1941. Vol. 62. № 12. P. 3273-3276.

82. Walz E. Isoflavon- und saponin-glucoside in Soja hispida // Justus Liebigs Annalen der Chemie. 1931. Vol. 489. P. 118-155.

83. Wang S.F. et al. Genistein derivatives as selective estrogen receptor modulators: sonochemical synthesis and in vivo anti-osteoporotic action // Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2005. Vol. 13. № 16. P. 4880-4890.

84. Whitten P.L., Patisaul H.B. Cross-species and interassay comparisons of phytoestrogen action // Environmental Health Perspectives. 2001. Vol. 109. № 1. P. 5-20.

85. Wiseman H. The therapeutic potential of phytoestrogens // Expert Opinion on

Investigational Drugs. 2000. Vol. 9. № 8. P. 1829-1840.

86. Yamaguchi M., Gao Y. Inhibitory effect of genistein on bone resorption in tissue culture // Biochemical Pharmacology. 1998. Vol. 55. № 1. P. 71-76.

87. Ye L. et al. The soy isoflavone genistein induces estrogen synthesis in an extragonadal pathway // Molecular and Cellular Endocrinology. 2009. Vol. 302. P. 73-80.

88. Yeh T.C. et al. Genistein induces apoptosis in human hepatocellular carcinomas via interaction of endoplasmic reticulum stress and mitochondrial insult // Biochemical Pharmacology. 2007. Vol. 73. P. 782-792.

89. Zhang Y.C. et al. Isoflavone profile and biological activity of soya bread // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2003. Vol. 51. P. 7611-7616.

90. Zhou Y., Mi M. Genistein stimulates hema-topoiesis and increases survival in irradiated mice // Journal of Radiation Research. 2005. Vol. 46. P. 425-433.

Контакты:

Тарумов Роман Алексеевич,

аспирант кафедры военной токсикологии

и медицинской защиты Военно-медицинской

академии им. С.М. Кирова.

Тел. раб.: 8-812-966-32-83.

E-mail: tarumov_ra@mail.ru.