Влияние пористого титана на остеогенный потенциал клеток костного мозга in vitro

Н.В. Шацкая, А.В. Еременко // Русская цивилизация : наука, образование, общество. -2011. - № 7. - С. 36-38.

19. Шурна, А.А. Секреторная активность нейтро-фильных лейкоцитов при воспалительных патологиях пародонта / А.А. Шурна, Ю.В. Са-калаускене, А.А. Глейзнис // Физиология человека. - 2006. - № 6. - С. 95-102.

ВЛИЯНИЕ КОМПОЗИЦИИ ФИТОЛИЗИН-ДИОКСИДИНОВАЯ МАЗЬ НА ЦИТОХИМИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТНЫХ СИСТЕМ ПОЛИМОРФНОЯДЕРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПАРОДОНТИТА

В. Е. БИЧЕГКУЕВА, К. Г. КАРАКОВ,

Ю. Н. МАЙБОРОДА, М. П. ПОРФИРИАДИС

Клинико-цитохимическими методами исследования пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести в стадии обострения прослежена эффективность применения композиции фитолизин-диоксидиновая мазь в динамике комплексного лечения. Установлено, что данная композиция способствовала усилению противовоспалительной и антимикробной реакции, о чем свидетельствовало восстановление активности ферментных систем гранулоцитарного аппарата в ближайшие и отдаленные сроки после лечения. Эффект лечения и ремиссия оказались в среднем на 32 % выше, чем при традиционной терапии.

Ключевые слова: пародонтит, антибактериальная терапия, ферментные системы нейтрофильных грану-лоцитов

20. Ягода, А.В. Клиническая цитохимия / А.В. Ягода, Н.А. Локтев, Ю.Н. Майборода. - Ставрополь, 2005. - 484 с.

21. Oates, T.W. Clinical radiographic and biochemical assessment of IL-1 TNF-a antagonist inhibition of bone loss in experimental periodontitis / T.W. Oates, D.Z. Cochan, D.T. Graves // О. Clin. Periodontal. -2002. - Vol. 29, № 2. - P 137-139.

THE EFFECT

OF PHYTOLYSINE-DIOXIDINE OINTMENT

COMPOSITION

ON CYTOCHEMICAL ACTIVITY OF ENZYMES

OF POLYMORPHONUCLEAR LEUKOCYTES

IN THE TREATMENT OF PERIODONTITIS

BICHEGKUYEVA V. E., KARAKOV K. G.,

MAYBORODA YU. N., PORFIRIADIS M. P.

By means of clinical and cytochemical methods of study of the patients with chronic generalized periodontitis of moderate severity in acute condition of the disease the efficacy of phytolysine-dioxidine ointment composition in the dynamics of treatment was traced. It was found that the composition promoted increasing anti-inflammatory and antimicrobial response, as was evidenced by the restoration of the activity of enzyme systems of granulocyte apparatus in the immediate and long-term period after treatment. The effect of treatment and remission were on average by 32 % higher than in traditional therapy.

Key words: periodontal disease, antibiotic therapy, enzyme systems of neutrophil granulocytes

© Коллектив авторов, 2012

УДК 615.465:546.824.015.4:612.419.014.2.085.2

ВЛИЯНИЕ ПОРИСТОГО ТИТАНА НА ОСТЕОГЕННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА IN VITRO

С. В. Сирак, А. А. Слетов, И. М. Ибрагимов, Б. А. Кодзоков Ставропольская государственная медицинская академия

Сирак Сергей Владимирович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой стоматологии ИПДО Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: (8652)917869, (8652)350551; e-mail: sergejsirak@yandex.ru.

Слетов Александр Анатольевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии

Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: (8652)465986, (8652)355536; e-mail: ddt111@yandex.ru.

Ибрагимов Инал Мавлатович, клинический ординатор кафедры терапевтической стоматологии

Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: 89287368194, (8652)742201; e-mail: inal5@mail.ru.

Кодзоков Беслан Абдулович, клинический ординатор кафедры стоматологии ИПДО

Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: 89286937749, (8652)742201; e-mail: zir21@mail.ru.

В настоящее время дентальная имплантация заняла одно из ведущихмест вкомплексе методов лечения различных стоматологических заболеваний. Все шире в амбулаторной практике применяются реконструктивно-восстановительные операции на челюстях. Растет количество устанавливаемых дентальных имплантатов, расширяются показания к дентальной имплантации. Дальнейшее развитие стоматологической имплантологии базируется на детальном изучении сложных закономерностей взаимодействия имплантатов с окружающей тканью, что стимулирует поиск новых биосовместимых металлов и сплавов, а также способов имплантации и методов стимуляции остеогенеза вокруг имплантата [1-3].

В имплантационной хирургии особенно перспективными являются 3 вида материалов: сплавы

на основе хрома и кобальта, нержавеющие стали и титан [1, 3, 4]. К новинкам последних лет можно отнести пористый титан, который наиболее толеран-тен к окружающим тканям и все чаще используется в стоматологической практике как при изготовлении имплантатов, так и в качестве остеоинтегра-ционного материала [5]. Однако до настоящего времени недостаточно изучен вопрос о влиянии пористого титана на костномозговые остеогенные клетки-предшественники фибробластов и их пролиферативную активность, которая, как правило, резко возрастает при эксплантации и трансплантации.

Цель исследования - изучение влияния пористого титана Natix на пролиферативный и остеогенный потенциал клеток костного мозга экспериментальных животных, культивируемых in vitro.

Материал и методы. У полугодовалых баранов массой 20-25 кг под тиопенталовым наркозом из костномозгового канала бедренной кости методом кюретажа аспирировали костный мозг, обрабатывали его консервантом «Gemgel» и помещали в питательную среду. Клетки костного мозга трижды промывали раствором Хенкса с гентамицином (500 ЕД/мл), дезагрегировали многократным пропусканием через пастеровскую пипетку и полученную суспензию фильтровали через двухслойный капроновый фильтр. Для культивирования костномозговые клетки в концентрации 1,5х106-2,5х106 на 1 мл высевали в чашки Петри и флаконы Карреля с питательной средой следующего состава: 80 % среды № 199, 10 % сыворотки крупного рогатого скота и 10 % телячьей эмбриональной сыворотки («Flow», Англия). На дно чашек и флаконов перед посевом клеточной суспензии помещали гранулы пористого титана Natix. Контролем служила интактная культура клеток костного мозга. Питательную среду меняли через сутки после посева, а затем каждые 4 дня. Клеточную культуру изучали в динамике через 1, 5, 9 и 15 суток после начала эксперимента. Клетки трижды отмывали от инкубационной среды раство-

ром Хенкса, обрабатывали 1-2 минуты фиксатором Мая - Грюнвальда, окрашивали гематоксилином и эозином. Препараты изучали методом электронной микроскопии.

Результаты исследования. Через сутки после посева в чашках Петри и флаконах Карреля как с пористым титаном, так и без него наблюдалось большое количество прикрепленных к стеклу клеток овальной и округлой формы. При этом отмечалось неравномерное распределение клеток в поле зрения: наибольшее количество концентрировалось в области более пористых участков гранул титана. Изредка встречались единичные слегка вытянутые клетки. Вместе с тем в культуральной среде наблюдалось небольшое количество клеточных элементов, не прикрепленных к субстрату (эритроциты, сегментоядерные лейкоциты, мертвые и сильно поврежденные клетки). На 5-й день после эксплантации количество клеток круглой и овальной формы, в том числе лейкоцитов, уменьшалось. При этом появлялись клетки с короткими ветвящимися отростками и небольшим ядром (гистиоциты), хорошо окрашивавшиеся азуром и эозином. В то же время на препаратах уже отмечались округлые вытянутые, иногда распластанные клетки с бледно-окрашенной цитоплазмой, длинными отростками и большим овальным ядром (рис. 1-А). При большом увеличении в ядрах некоторых из этих фибро-бластоподобных клеток отчетливо видно несколько плотно окрашенных ядрышек. В этот период не наблюдалось различий между ростом клеток в чашках и флаконах с пористым титаном и без него (рис. 1-Б). К 9-м суткам культивирования появлялись отдельные скопления по 10-20 типичных вытянутых фибробластоподобных клеток. Одновременно в культурах полностью исчезали лейкоциты и значительно уменьшалось количество гистиоцитов. Фи-бробластоподобные клетки, контактируя своими отростками, образовывали подобие функционального синцития. При этом увеличивалась концентрация клеток вокруг титановых гранул.

А

Б

Рис. 1. Культура клеток костного мозга на 5-е сутки после посева:

А - интактные фибробластоподобные клетки;

Б - рост клеток в присутствии гранул пористого титана. Окраска гематоксилином и эозином. 06.10, ок.16

На 15-е сутки фибробластоподобные клетки полностью вытесняли другие клеточные элементы костного мозга (рис. 2-А). Фокусы роста увеличивались и образовывали большие очаги, ограниченные друг от друга. На препаратах были видны отдельные колонии по 90-120 клеток, занимающие все поле зрения. Местами ранее четко ограниченные клеточные очаги постепенно сливались. Отчетливо заметно перераспределение клеток в чашках и флаконах с пористым титаном в сторону увеличения концентрации клеточных элементов вокруг и внутри титановых гранул (рис. 2-Б). К 15-му дню наблюдались большие очаги и мелкие фокусы фибро-бластов, которые разрастались и сливались между

собой, образуя сплошной пласт. К этому времени в культуре практически не оставалось гистиоцитов и других клеточных элементов костного мозга. В культуре без титана наблюдалась аналогичная картина с интенсивным ростом фибробластов. Результаты настоящих опытов in vitro, а также предварительные исследования in vivo в эксперименте и клинике по вживлению пористых титановых гранул Natix в искусственно образованные дефекты челюсти позволяют предположить, что применение этого биоинертного материала может быть успешно использовано для ускорения процесса остеоинтеграции при дентальной имплантации.

Рис. 2. Культура клеток костного мозга на 9-е сутки после посева:

А - колония интактных фибробластоподобных клеток;

Б - рост клеток в присутствии гранул пористого титана. Окраска гематоксилином и эозином. 0б.10, ок.16

Выводы

1. Пористый титан Natix является биотолерант-ным металлом, не влияет на пролиферацию и дифференцировку остеогенных детерминированных клеток-предшественников из костномозговой ткани.

2. Установлено преимущественное расположение фибробластоподобных клеток вокруг гранул пористого титана с 5-х суток от начала исследования.

Литература

1. Амхадова, М.А. Хирургическая тактика при использовании метода имплантации у пациентов с дефектами зубных рядов и значительной атрофией челюстей : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Амхадова М.А. - М., 2005. -34 с.

2. Бахтинов, А.А. Клинико-рентгенологическая и биохимическая характеристика результатов аутотрансплантации костного мозга в сочета-

нии с препаратами гидроксиапатита для замещения дефектов и костных полостей в челюстных костях : автореф. дис. ... канд. мед. наук / Бахтинов А.А. - М., 2005. - 24 с.

3. Иванов, С.Ю. Новое поколение биокомпози-ционных материалов для замещения дефектов костной ткани / С.Ю. Иванов, Л.И. Гиллер, А.Ф. Бизяев [и др.] // Новое в стоматологии. -1999. - № 5. - С. 47-50.

4. Кулаков, О.Б. Применение различных материалов для костной пластики дефектов альвеолярного отростка челюстных костей в сочетании с дентальными имплантатами / О.Б. Кулаков, В.В. Матюнин, А.А. Докторов, А.Г. Малый // Институт стоматологии. - 2004. -№ 3(24). - С. 58-61.

5. Кулаков, О.Б. Остеоинтеграция имплантатов из циркония и титана в эксперименте / О.Б. Кулаков, А.А. Докторов, С.В. Дьякова, Ю.И. Денисов-Никольский, К.А. Грётц // Морфология. - 2005. - № 1(127). - С. 52-55.

ВЛИЯНИЕ ПОРИСТОГО ТИТАНА НА ОСТЕОГЕННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА IN VITRO

С. В. СИРАК, А. А. СЛЕТОВ,

И. М. ИБРАГИМОВ, Б. А. КОДЗОКОВ

Представлены результаты опытов in vitro по изучению влияния пористого титана на пролиферацию и дифференцировку остеогенных детерминированных клеток-предшественников из костномозговой ткани. Установлено, что пористый титан биоинер-тен и может быть успешно использован для ускорения процесса остеоинтеграции при дентальной имплантации.

Ключевые слова: костный мозг, пористый титан

EFFECT OF POROUS TITANIUM

ON BONE MARROW

CELLS OSTEOGENIC POTENTIAL IN VITRO

SIRAK S. V., SLETOV A. A.,

IBRAGIMOV I. M., KODZOKOV B. A.

The results of in vitro study of porous titanium effects on the proliferation and differentiation of osteogenic determined precursor bone marrow cells are presented. The porous titanium has demonstrated its’ biological inactivity, so it can be successfully used for acceleration of osteointegration in dental implants.

Key words: bone marrow, porous titanium

© Коллектив авторов, 2012

УДК 615.37.003.13:616-08-039.73:616.311.2-002

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ИММУНОМОДУЛЯТОРА «ГАЛАВИТ» ПРИ ЛЕЧЕНИИ ОБОСТРИВШЕГОСЯ КАТАРАЛЬНОГО ГИНГИВИТА

Ю. Н. Майборода, Т. В. Маркина, Э. В. Урясьева Ставропольская государственная медицинская академия

Необходимость воздействия на иммунную систему при заболеваниях пародонта различной степени тяжести обусловлена выраженными её изменениями со стороны последней, заключающимися в трансформации клеточного звена иммунитета у лиц различного возраста [2, 4, 5]. Арсенал фармакологических препаратов, обладающих иммуномодулирующими и иммуностимулирующими свойствами, достаточно широк. Среди них выделяют иммуномодуляторы естественного и искусственного происхождения.

Спектр действия иммуномодулятора «Галавит» определяется как провоспалительным, так и противовоспалительным эффектом [8]. Изучение морфогенеза и регуляции воспалительных процессов в пародонте на фоне лечения препаратом «Галавит» находится пока ещё на начальных этапах [10, 11]. Требуется дальнейшее изучение влияния препарата на накопление в поражённых тканях полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ), которым придаётся важное значение в патогенезе воспалительно-деструктивных расстройств при заболеваниях пародонта. Наличие локальной активации ПМЯЛ может быть верифици-

Майборода Юрий Николаевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры ортопедической стоматологии Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: (8652)713469.

Маркина Татьяна Валерьевна, врач-стоматолог стоматологической поликлиники

Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: 89283036429; e-mail: mtvsta@narod.ru.

Урясьева Эльвира Валерьевна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры стоматологии общей практики Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: 89054973057.

ровано по накоплению в крови на фоне гингивита и пародонтита продуктов их секреции, прежде всего ферментов, являющихся общепризнанными маркерами аккумуляции и локальной дегрануляции ПМЯЛ [9, 12, 14].

Целью исследования было проведение сравнительного анализа применения препарата «Галавит» в лечении воспалительных процессов в пародонте. В статье отражен фрагмент исследования по применению иммуномодулятора на фоне катарального гингивита в стадии обострения.

Материал и методы. Под наблюдением находились 46 пациентов с катаральным гингивитом, которые были разделены на 2 группы. Первая группа (21 пациент) и вторая группа - основная (25 больных). У пациентов первой группы использовали для обработки десны антимикробный препарат - гель «Метрогил-Дента». Пациентам второй группы наряду с применением геля «Метрогил-Дента» проводили курс инъекций иммуномодулятора «Галавит», который вводили в переходную складку (10 инъекций) 1 раз через день в течение 20 дней. В контрольную группу (40 пациентов) были включены лица с интакт-ным пародонтом на предмет выявления фоновой активности гранулоцитов.

Обследование пациентов проводили по стандартной схеме, включающей клинико-рентгенологические и лабораторные методы. Для регистрации состояния тканей пародонта использовали индексы PMA и ПИ. Гигиеническое состояние полости рта оценивали с помощью индекса Грина - Вермиллиона (OHI-S), степени кровоточивости (SBI), измеряли глубину па-родонтальных карманов.

В нейтрофилах периферической крови определяли содержание катионных белков (КБ) по методике Писаревского, а также активность щелочной