КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ-КОМПАНЬОНОВ, ВКЛЮЧАЮЩИЕ ЛИПОЕВУЮ КИСЛОТУ, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
COMPOSITIONS FOR COMPANION ANIMALS INCLUDING LIPOIC ACID AND COMPOSITIONS APPLICATION METHOD

Перекрестные ссылки на родственные заявки
Настоящая заявка является частичным продолжением предварительной заявки № 11/154210, поданной 16 июня 2005 года, которая является продолжением заявки № 09/978132, поданной 16 октября 2001 года, на которую выдан патент США 6914071, которая является частичным продолжением заявки № 09/922660, поданной 6 августа 2001 года, с приоритетом по предварительной заявке № 60/253448, поданной 28 ноября 2000 года, и предварительной заявке № 60/244504, поданной 31 октября 2000 года, описание каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
Область техники
Настоящее изобретение относится к композициям и способам для лечения или профилактики нарушений у животных-компаньонов, где композиции и способы включают скармливание животному-компаньону композиции, включающей липоевую кислоту или ее соль.
Предшествующий уровень техники
Считается, что животные-компаньоны, такие как собаки и кошки, страдают от возрастных проблем. О некоторых из них сложены поговорки. Одной из них является «Старую собаку не научишь новым трюкам». Эта поговорка вытекает из наблюдения, что, как считается, с возрастом у собак ухудшаются умственные способности наряду с физическими возможностями. Умственные способности, ассоциируемые с процессом мышления, обучения и памятью, по наблюдениям, ослабевают (Cummings, B. J., Head, E., Ruehl, W., Milgram, N. W. & Cotman, C. W. (1996): The canine as an animal model of aging and dementia. Neurobiology of Aging 17:259-268). Кроме того, изменения в поведении могут проявляться у стареющих животных в связи с изменением умственных способностей. Снижение способностей вызвано множеством причин.
Такая потеря способностей, как правило, наблюдается у пожилых собак и кошек. Считается, что собаки и кошки семи лет или старше могут испытывать такие проблемы.
Важным индикатором здоровья животного является состав тканей тела животного. Нездоровый рацион и/или нездоровый образ жизни может привести к тому, что у животного будет нездоровая пропорция жира в теле, в частности в отношении мышечной массы в теле. Считается, что превышение жировой массой тела на 30% по массе указывает на то, что животное нездорово, в частности, если жировая масса превышает 35% по массе.
Настоящее изобретение относится к пищевым композициям для животных-компаньонов с усиленной терапевтической и профилактической эффективностью по сравнению с представленными в настоящее время на рынке пищевыми композициями.
Раскрытие изобретения
Авторы настоящего изобретения разработали пищевые композиции и способы применения композиций для лечения или профилактики нарушений у животных.
Настоящее изобретение относится к рациону для животного-компаньона, отвечающему потребностям в питательных веществах взрослого животного-компаньона и дополнительно включающему эффективное количество антиоксиданта или их смеси для подавления снижения умственных способностей указанного животного-компаньона в пожилом возрасте.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к пищевой композиции для животных-компаньонов, включающей липоевую кислоту или ее соли.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу подавления ухудшения умственных способностей пожилого животного-компаньона, включающему скармливание указанному домашнему животному во взрослом возрасте антиоксиданта или их смесей в количестве, достаточном для указанного подавления.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к рациону для животного-компаньона, отвечающему потребностям в питательных веществах взрослого животного-компаньона и дополнительно включающему антиоксидант, выбранный из группы, состоящей из витамина E, витамина C, альфа-липоевой кислоты, L-карнитина и любой их смеси в количестве, эффективном для подавления снижения умственных способностей указанного животного-компаньона в пожилом возрасте.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу повышения умственных способностей пожилого животного-компаньона, включающему скармливание указанному домашнему животному во взрослом возрасте антиоксиданта или их смесей в количестве, достаточном для повышения умственных способностей.
В другом варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу повышения умственных способностей взрослого животного-компаньона, включающему скармливание указанному домашнему животному антиоксиданта или их смесей в количестве, достаточном для повышения умственных способностей у указанного домашнего животного.
Во всех этих способах желательно вводить в рацион животного антиоксидант или их смеси.
Детальное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к пищевым композициям, включающим липоевую кислоту или ее соль.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество составляет по меньшей мере 50 частей на миллион.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество составляет по меньшей мере приблизительно 100 частей на миллион.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество составляет в пределах от приблизительно 100 частей на миллион до приблизительно 600 частей на миллион.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество составляет в пределах от приблизительно 100 частей на миллион до приблизительно 200 частей на миллион.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения животное-компаньон является собакой.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения животное-компаньон является кошкой.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для профилактики дегенеративного состояния суставов у животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения дегенеративным состоянием суставов является остеоартрит.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения дегенеративным состоянием суставов является повреждение хряща.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для профилактики или лечения нарушений, связанных с почками у животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для усиления вкусовой привлекательности для животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для поддержания или содействия здоровому составу тканей тела животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для индуцирования потери веса у животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для индуцирования потери телесного жира у животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения эффективное количество является эффективным количеством для повышения процента сухой мышечной массы у животного-компаньона.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция дополнительно включает белки, жиры, углеводы, пищевые волокна и их комбинации.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция является кормовым продуктом для собак.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция является кормовым продуктом для кошек.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция является кормовым продуктом, питательным рационом, кормовой добавкой, лакомством или игрушкой для животного.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция представляет влажный кормовой продукт.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция представляет сухой кормовой продукт.
Используемый здесь термин «животное-компаньон» относится к любому животному, не являющемуся человеком, подходящему для содержания в качестве домашнего животного, и включает собак, кошек и грызунов. Композиции по настоящему изобретению в конкретных вариантах воплощения предназначены для лечения кошек и/или собак.
Используемый здесь термин «собака» включает тех собак, которые являются животными-компаньонами, такими как Canis familiaris, рабочих собак и тому подобное. Термин «собака» является синонимом термина собачьи.
Используемый здесь термин «кошка» включает тех кошек, которые являются животными-компаньонами, известными как домашние кошки или кошки, содержащиеся дома.
Используемый здесь термин «грызун» без ограничения включает хомяков, мышей, крыс, морских свинок, песчанок, кроликов, ежей, хорьков, шиншилл и тому подобное.
Если ясно не указанно иное, все проценты приведены по массе композиции по сухому веществу.
Композиции по настоящему изобретению
В одном варианте воплощения настоящее изобретение относится к композициям для животных-компаньонов, включающим количество липоевой кислоты или ее соли, эффективное для профилактики или лечения дегенеративного состояния суставов у животного-компаньона.
Используемые здесь термины «липоевая кислота или ее соль» включает без ограничения, например, альфа-липоевую кислоту, рацемическую смесь липоевых кислот, соль липоат, эфир, амид или ее производное, например, как описано в патенте США № 5621117. В различных вариантах воплощения настоящего изобретения липоевая кислота может быть введена в композицию, включающую композицию влажного или сухого кормового продукта, которая может быть в форме влажного кормового продукта, сухого кормового продукта, кормовой добавки или лакомства.
Липоевая кислота может быть введена в или на поверхность любой пищевой композиции таким способом, как распыление или осаждение на нем, или может быть добавлена в рацион, как снэк, кормовая добавка, лакомство, или в жидкую часть рациона, такую как вода или другая жидкость. Липоевая кислота может быть введена в виде порошка, твердого вещества или как жидкость, включая гель. Важным аспектом является то, что животному обеспечено эффективное количество липоевой кислоты для обеспечения положительного воздействия. Как правило, источник липоевой кислоты присутствует в композиции в количестве вплоть до количества, остающегося не токсичным для животного.
Количество альфа-липоевой кислоты может варьировать по меньшей мере от приблизительно 25 частей на миллион, приблизительно 50 частей на миллион, приблизительно 100 частей на миллион, приблизительно 200 частей на миллион, приблизительно 300 частей на миллион, приблизительно 500 частей на миллион, приблизительно 700 частей на миллион, приблизительно 900 частей на миллион, приблизительно 1100 частей на миллион, приблизительно 1200 частей на миллион, приблизительно 1400 частей на миллион, приблизительно 1600 частей на миллион, приблизительно 1800 частей на миллион, приблизительно 2000 частей на миллион, приблизительно 2200 частей на миллион, приблизительно 2400 частей на миллион, приблизительно 2600 частей на миллион, приблизительно 2800 частей на миллион, приблизительно 3000 частей на миллион или приблизительно 3500 частей на миллион. В различных вариантах воплощения настоящего изобретения предельные значения липоевой кислоты, которые могут быть введены собакам, составляют от приблизительно 150 частей на миллион до приблизительно 4500 частей на миллион. В различных вариантах воплощения настоящего изобретения предельные значения липоевой кислоты, которые могут быть введены кошкам, составляют от приблизительно 65 частей на миллион до приблизительно 2600 частей на миллион. В конкретных приведенных в качестве иллюстрации вариантах воплощения настоящего изобретения количества могут варьировать в пределах от приблизительно 100 частей на миллион до количества, которое остается не токсичным для домашнего животного. В других вариантах воплощения настоящего изобретения пределы составляют от приблизительно 100 частей на миллион до приблизительно 200 частей на миллион.
В различных вариантах воплощения настоящего изобретения пищевая композиция, включающая липоевую кислоту, обеспечивает по существу полнорационный кормовой продукт для потребляющего его животного. Используемый здесь термин «полнорационный кормовой продукт» относится к рациону, включающему достаточно нутриентов для поддержания нормального состояния здоровья животного, находящегося на этом рационе.
Композиции по настоящему изобретению включают липоевую кислоту или ее соль в количестве, эффективном для лечения или профилактики дегенеративного состояния суставов.
Липоевая кислота или ее соль присутствует в концентрации, не оказывающей негативного воздействия на здоровье животного. Следовательно, липоевая кислота или ее соль присутствует в концентрации, не вызывающей нежелательного или токсического воздействия.
Настоящее изобретение основывается на новом открытии, что добавление липоевой кислоты или ее соли в композицию, потребляемую животным-компаньоном, усиливает вкусовую привлекательность композиции и увеличивает вероятность того, что животное будет потреблять композицию. Добавление липоевой кислоты или ее соли в потребляемую композицию также повышает частоту потребления композиции.
Композиция может представлять жидкий или твердый кормовой продукт. В случае когда композиция жидкая, липоевая кислота или ее соль может быть смешена с другими компонентами. В случае когда композиция твердая, липоевая кислота может быть нанесена в виде покрытия на композицию, введена в композицию или и то, и другое.
В различных вариантах воплощения настоящего изобретения липоевая кислота или ее соль может быть добавлена в кормовой продукт для животного. В различных вариантах воплощения настоящего изобретения липоевая кислота или ее соль может быть добавлена в кормовой продукт для животного составителем смесей или производителем на месте или владельцем животного перед его кормлением. В различных вариантах воплощения настоящего изобретения липоевая кислота или ее соль может быть добавлена в кормовой продукт для животного во время процесса получения кормового продукта для животных, такого как во время и/или после смешивания других компонентов композиции, которую затем расфасовывают и делают доступной для потребителей. Такой процесс получения может включать экструзию, консервирование, выпекание и тому подобное или другой способ или процесс для получения кормового продукта для домашнего животного, известный из предшествующего уровня техники. В различных вариантах воплощения настоящего изобретения липоевая кислота или ее соль может быть получена за счет натурального источника, такого как животный или растительный компонент, или липоевая кислота или ее соль может быть получена за счет синтетически полученного источника, или липоевая кислота или ее соль может быть получена за счет смеси натуральных и синтетических источников.
Композиции дополнительно к липоевой кислоте или ее соли включают по меньшей мере один компонент, подходящий для потребления животным-компаньоном, включая, без ограничения, жиры, углеводы, белки, пищевые волокна, агенты, балансирующие питательную ценность, такие как витамины, минеральные вещества и микроэлементы и их смеси. Специалист в области техники, к которой относится настоящее изобретение, может выбрать количество и тип ингредиентов кормового продукта для традиционного кормового продукта на основе пищевых потребностей животного, например вида животного, возраста, размера, массы, состояния здоровья и функции.
Часть ингредиента кормового продукта пищевой композиции может включать вплоть до приблизительно 100% любого конкретного ингредиента кормового продукта или может включать смесь ингредиентов кормового продукта в различных пропорциях. В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения пищевая композиция включает комбинацию ингредиентов кормового продукта в пределах от приблизительно 0 масс.% до приблизительно 50 масс.% жира, в пределах от приблизительно 0 масс.% до приблизительно 75 масс.% углеводов, в пределах от приблизительно 0 масс.% до приблизительно 95 масс.% белка, в пределах от приблизительно 0 масс.% до приблизительно 40 масс.% пищевых волокон и в пределах от приблизительно 0 масс.% до приблизительно 15 масс.% одного или более агента, балансирующего питательную ценность.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения жировые и углеводные ингредиенты кормового продукта получают из различных источников, таких как животный жир, рыбий жир, растительное масло, мясо, мясные субпродукты, зерно или другие животные или растительные источники и их смеси. Зерно включает пшеницу, кукурузу, ячмень и рис.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения белковый ингредиент кормового продукта получают из различных источников, таких как растения, животные или и то, и другое. Животный белок включает мясо, мясные субпродукты, молочные продукты и яйца. Мясо включает мясо птицы, рыбу и мясо животных, таких как крупный рогатый скот, свиньи, овцы, козы и тому подобное. Мясные субпродукты включают легкие, почки, мозги, печень, желудки и кишки. Белковым ингредиентом кормового продукта также могут быть свободные аминокислоты и/или пептиды. В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения белковый ингредиент кормового продукта включает мясо, мясные субпродукты, молочные продукты или яйца.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения волокнистый ингредиент кормового продукта получают из разных источников, таких как растительные волокна, например, целлюлоза, свекловичный жом, арахисовая шелуха и волокна сои.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения агенты, балансирующие питательную ценность, получают из различных источников, известных специалисту в области техники, к которой относится настоящее изобретение, например витаминные и минеральные пищевые добавки и ингредиенты кормовых продуктов. Витамины и минеральные вещества могут быть включены в количествах, требуемых для восполнения дефицита и поддержания здоровья в норме. Эти количества являются известными из предшествующего уровня техники. Национальный научно-исследовательский совет (NRC) дает рекомендации количеств таких ингредиентов для сельскохозяйственных животных. См., например, Nutrient requirements of swine (Пищевые потребности свиней) (10th Rev. Ed., Nat'1 Academy Press, Wash D.C.,1998), Nutrient requirements of Poultry (Пищевые потребности птицы) (9th Rev. Ed., Nat'1Academy Press, Wash D.C., 1994), Nutrient requirements of Horses (Пищевые потребности лошадей) (5th Rev. Ed., Nat'1 Academy Press, Wash D.C., 1989) и т.д. Ассоциация американских официальных контролеров по качеству кормов (AAFCO) дает рекомендации количеств таких ингредиентов для собак и кошек. См., American Feed Control Officials, Inc., Official publication, стр.127-137 (2004). Как правило, витамины, используемые в качестве кормовых добавок, включают витамин А, витамин В1, витамин В2, витамин В6, витамин В12, витамин D, биотин, витамин К, фолиевую кислоту, инозитол, ниацин и пантотеновую кислоту. Как правило, минеральные вещества и микроэлементы, используемые в качестве кормовых добавок, включают кальций, фосфор, натрий, калий, магний, медь, цинк, хлор, железо, селен, йод и железо.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения пищевые композиции могут содержать дополнительные ингредиенты, такие как витамины, минеральные вещества, наполнители, усилители вкусовой привлекательности, связывающие агенты, ароматизаторы, стабилизаторы, эмульгаторы, подсластители, красители, забуферивающие агенты, соли, покрывающие агенты и тому подобное, известные специалистам в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Стабилизаторы включают вещества, увеличивающие лежкоспособность композиции, такие как консерванты, синергисты и секвестранты, упаковочные газы, стабилизаторы, эмульгаторы, загустители, желирующие агенты и удерживающие влагу вещества. Примеры эмульгаторов и/или загущающих агентов включают желатин, эфиры целлюлозы, крахмал, эфиры крахмала, сложные эфиры крахмала и модифицированные крахмалы. Конкретные подходящие количества каждого компонента в композиции, ингредиента кормового продукта и других ингредиентов будут зависеть от различных факторов, таких как конкретные компоненты и ингредиенты, входящие в состав композиции; вид животного; возраст животного, масса, общее состояние здоровья, пол и рацион животного; интенсивности потребления животным; заболевания или состояния, которые подлежат лечению, и тому подобного. Следовательно, количества компонента или ингредиента могут широко варьировать и даже могут отклоняться от предпочтительных указанных здесь пропорций.
В одном варианте воплощения настоящего изобретения, приведенном в качестве иллюстрации, композиция, в которую, например, может быть добавлена липоевая кислота или ее соль, также включает по меньшей мере одно из следующего:
(a) в пределах от приблизительно 0% до приблизительно 75% углеводов,
(b) в пределах от приблизительно 2% до приблизительно 50% жира,
(c) в пределах от приблизительно 0% до приблизительно 40% пищевых волокон и
(d) в пределах от приблизительно 0% до приблизительно 15% одного или более балансирующего питательную ценность агента.
Рацион, скармливаемый взрослому животному-компаньону, например собаке и кошке, является стандартным нормальным рационом, скармливаемым животному в этом возрасте. Ниже приведен стандартный рацион для собак в возрасте от 1 года до 6 лет.
Таблица 1Приведенная в качестве иллюстрации пищевая композиция для животного-компаньона
Ингредиент
Количество
Белок (% по сухому веществу)
23
Жир (% по сухому веществу)
15
Фосфор (% по сухому веществу)
0,6
Натрий (% по сухому веществу)
0,3
Композиции могут содержать дополнительные ингредиенты для поддержания или улучшения состояния здоровья животного, например добавки, медикаменты, травы, холистические лекарственные средства и композиции и тому подобное.
Композиция по настоящему изобретению может включать один (или более) дополнительный ингредиент для профилактики или лечения одного (или более) состояния или заболевания.
Компонент в рационе, дополняющий его, является антиоксидантом или их смесью. Антиоксидант относится к веществу, блокирующему свободные радикалы. Примеры включают без ограничения такие материалы, как гингко билоба, цитрусовая пульпа, виноградные выжимки, выжимки томатов, морковь и шпинат, предпочтительно все в сухом виде, наряду с другими материалами, такими как бета-каротин, селен, коэнзим Q10 (убихинон), лютеин, токотриенолы, изофлавоны сои, S-аденозилметионин, глютатион, таурин, N-ацетилцистеин, витамин E, витамин C, альфа-липоевую кислоту, L-карнитин и тому подобное. Витамин E может быть введен в виде токоферола или смеси токоферолов и его различных производных, таких как эфиры ацетата витамина E, сукцинат, пальмитат и тому подобное. Предпочтительны альфа-формы, но также могут быть использованы бета-, гамма- и дельта-формы. Предпочтительна d-форма, но также могут быть использованы рацемические смеси. Формы и производные будут функционировать с витамин E подобной активностью после поглощения домашним животным. Витамин C может быть введен в рацион в виде аскорбиновой кислоты и ее различных производных, таких как соли фосфата кальция, соль холестерина, 2-монофосфат и тому подобное, которые будут функционировать с витамин C подобной активностью после поглощения домашним животным. Они могут быть в любой форме, такой как жидкая, полутвердая и твердая, и стабильная к нагреванию форма. Альфа-липоевая кислота может быть введена в рацион в виде альфа-липоевой кислоты или в виде производного липоата, как описано в патенте США № 5621117, рацемических смесей, их солей, эфиров или амидов. В рацион может быть введен L-карнитин и различные производные карнитина, такие как соли, такие как гидрохлорид, фумарат и сукцинат, наряду с ацетилированным карнитином и тому подобное.
Количества, вводимые в рацион, все выраженные как масс.% (по сухому веществу) рациона, рассчитывают как активный материал сам по себе, который измеряют как свободный материал. Максимальные количества не должны быть токсичными. Может быть использовано по меньшей мере приблизительно 100 частей на миллион или по меньшей мере приблизительно 150 частей на миллион витамина E. В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения могут быть применены пределы от приблизительно 500 до приблизительно 1000 частей на миллион. Хотя в этом нет необходимости, максимум может составлять в пределах приблизительно 2000 частей на миллион или приблизительно 1500 частей на миллион, что, как правило, не является избыточным. Может быть использовано по меньшей мере 50 частей на миллион витамина C, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 75 частей на миллион и более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 100 частей на миллион. Может быть применен нетоксичный максимум. Количество альфа-липоевой кислоты может варьировать по меньшей мере от приблизительно 25 частей на миллион, по меньшей мере приблизительно 50 частей на миллион или по меньшей мере приблизительно 100 частей на миллион. В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения максимальные количества могут варьировать в пределах от приблизительно 100 частей на миллион до количества, остающегося не токсичным для домашнего животного. Предпочтительные пределы составляют от приблизительно 100 частей на миллион до приблизительно 200 частей на миллион. Минимум L-карнитина, используемый для собак, составляет приблизительно 50 частей на миллион, предпочтительно приблизительно 200 частей на миллион, более предпочтительно приблизительно 300 частей на миллион. Для кошек используемый минимум L-карнитина немного больше, приблизительно 100 частей на миллион, 200 частей на миллион и 500 частей на миллион. Может быть использовано нетоксичное максимальное количество, например менее чем приблизительно 5000 частей на миллион. Для кошек могут быть использованы более низкие количества, например менее чем приблизительно 5000 частей на миллион. Для собак предпочтительные пределы составляют от приблизительно 200 частей на миллион до приблизительно 400 частей на миллион. Для кошек предпочтительные пределы составляют от приблизительно 400 частей на миллион до приблизительно 600 частей на миллион. Бета-каротин может быть использован в пределах 1-15 частей на миллион. Селен может быть использован в пределах от приблизительно 0,1 вплоть до приблизительно 5 частей на миллион. Лютеин может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 5 частей на миллион. Токоферолы могут быть использованы в количестве по меньшей мере приблизительно 25 частей на миллион. Коэнзим Q10 может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 25 частей на миллион. S-аденозилметионин может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 50 частей на миллион. Таурин может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 1000 частей на миллион. Изофлавоны сои могут быть использованы в количестве по меньшей мере приблизительно 25 частей на миллион. N-ацетилцистеин может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 50 частей на миллион. Глютатион может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 50 частей на миллион. Экстракт гингко билоба может быть использован в количестве по меньшей мере приблизительно 50 частей на миллион.
Следующие сырьевые ингредиенты имеют высокое содержание ORAC (способность абсорбировать кислородные радикалы): выжимки шпината, выжимки томатов, цитрусовая пульпа, виноградные выжимки, гранулы моркови, брокколи, зеленый чай, гингко билоба и глютеновая кукурузная мука.
При добавлении в рацион 1% включений (для общего 5% замещения для ингредиента с низким ORAC, такого как кукуруза) они повышают содержание ORAC в рационе и повышают содержание ORAC в плазме животных, рацион которых содержит эти компоненты. Предпочтительно любой ингредиент с содержанием ORAC>25 мкмоль эквивалентов Trolox на грамм по сухому веществу может быть использован при добавлении 1%-ной комбинации с четырьмя другими 1%-ными ингредиентами для общего добавления в рацион 5%. В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиции дополнительно включают эффективное количество по меньшей мере одного вещества, выбранного из группы, состоящей из глюкозамина, хондроитина, сульфата хондроитина, метилсульфонилметана («MSM»), креатинов, антиоксидантов, Perna canaliculata, омега-3 жирных кислот, омега-6 жирных кислот и их смесей.
В различных вариантах воплощения настоящего изобретения добавка включает эффективное количество липоевой кислоты или ее соли дополнительно к эффективному количеству по меньшей мере одного вещества, включая аспирин, противовоспалительные средства, такие как ибупрофен, ингибиторы COX-2 и другие лекарственные и фармацевтические композиции и их комбинации. Кормовые добавки, используемые в настоящем изобретении, включают корм, используемый с другим кормом для улучшения питательного баланса или общей продуктивности. Кормовые добавки включают композиции, которые скармливают неразведенными, как кормовую добавку к другим кормам, что позволяет свободно выбирать другие части, входящие в рацион животного, доступные по отдельности или разведенные и смешанные с обычным кормовым продуктом для животного с получением полнорационного кормового продукта. AAFCO приводит пояснение в отношении кормовых добавок в American Feed Control Officials, Inc., Official publication, стр.220 (2003). Кормовые добавки могут быть в различной форме, включая, например, порошки, жидкости, сиропы, гранулы и инкапсулированные композиции.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиции могут представлять лакомства. Лакомства включают композиции, даваемые животному с целью приманить его к еде, когда животное не ест, например косточки для собак. Лакомства могут быть питательными, если композиция включает один (или более) нутриент, и могут иметь композицию, подобную кормовому продукту. Непитательные лакомства включают любые другие нетоксичные лакомства. Композицию или компоненты наносят в виде покрытия на лакомство или вводят в лакомство или и то, и другое. Лакомства по настоящему изобретению могут быть получены экструзией или выпеканием аналогично таковым, используемым для сухих кормовых продуктов. Для нанесения композиции в виде покрытия на поверхность существующих форм лакомств или введения композиции в существующие формы лакомств также могут быть использованы другие процессы.
В конкретных вариантах воплощения настоящего изобретения композиция может представлять игрушку. Игрушки включают жевательные игрушки, такие как искусственные кости. Липоевая кислота или ее соль может быть нанесена на поверхность игрушки или на поверхность компонента игрушки с образованием покрытия, может быть введена частично или полностью в игрушку или и то, и другое. В одном варианте воплощения настоящего изобретения липоевую кислоту или ее соль вводят пероральным способом, доступным пользователю. Широкий список подходящих игрушек, представленных в настоящее время на рынке, приведен, например, в патенте США № 5339771, в патенте США № 5419283, включенных в данный документ посредством ссылок. Настоящее изобретение относится как к частично съедобным игрушкам, например игрушки, включающие пластиковые компоненты, так и к полностью съедобным игрушкам, например полоски кожи для собак и различные искусственные косточки. Предпочтительно настоящее изобретение относится к игрушкам для собак или кошек.
Получение композиций по настоящему изобретению
Композиции по настоящему изобретению могут быть получены в консервированной или влажной форме с использованием традиционных способов получения пищи, известных специалисту в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Как правило, измельченные белоксодержащие ткани животных смешивают с другими ингредиентами, таким как рыбий жир, зерно злаков, ингредиенты, приводящие к балансу питательной ценности, целевые добавки (например, витамины и смеси минеральных веществ, неорганические соли, целлюлоза и свекольный жом, агенты-наполнители и тому подобное) и вода, в количествах, достаточных для производства. Эти ингредиенты смешивают в емкости, подходящей для нагревания, с одновременным перемешиванием компонентов. Нагревание смеси может быть проведено с использованием любого подходящего способа, такого как инжекция острого пара или использование емкости, оборудованной теплообменником. После введения последнего ингредиента смесь нагревают до температуры в пределах от приблизительно 50°F (10°C) до приблизительно 212°F (100°C). Температуры вне этих пределов приемлемы, но они могут быть непрактичными с коммерческой точки зрения без использования других вспомогательных технологических добавок. Как правило, материал, нагретый до подходящей температуры, имеет форму вязкой жидкости. Вязкую жидкость заполняют в консервные банки. Накладывают крышки и герметично укупоривают емкость. Затем укупоренные банки могут быть помещены в традиционные устройства для проведения стерилизации содержимого. Стерилизацию, как правило, проводят нагреванием до температур выше, чем приблизительно 230°F (110°C) в течение подходящего периода времени, который зависит от используемой температуры, композиции и аналогичных факторов. Композиции по настоящему изобретению могут быть добавлены в пищевые композиции перед, во время или после получения.
Композиции по настоящему изобретению могут быть получены в сухой форме с использованием традиционных способов, известных специалисту в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Как правило, сухие ингредиенты, такие как источник животного белка, источник растительного белка, зерно и тому подобное, измельчают и смешивают вместе. Затем в сухую смесь вводят и смешивают с влажными или жидкими ингредиентами, включая жиры, масла, источник животного белка, воду и тому подобное. Затем смесь обрабатывают с получением крупных гранул или аналогичных им сухих кусочков. Часто крупные гранулы получают экструзией, в процессе которой смесь сухих или влажных ингредиентов подвергают механической обработке при высоком давлении и температуре, с усилием проталкивают через маленькие отверстия и нарезают на крупные гранулы ротационным ножом. Затем влажные крупные гранулы сушат и необязательно покрывают одним или более наружным покрытием, которое может включать ароматизаторы, жиры, масла, порошки и тому подобное. Крупные гранулы также могут быть получены из теста выпеканием вместо экструзии, при этом тесто помещают в формы перед проведением тепловой обработки. Пищевые композиции могут быть получены в форме лакомства при использовании экструзии или выпекания аналогично таковому, описанному в патентах США № 5339771 и 5419283. Композиции по настоящему изобретению могут быть добавлены в пищевые композиции перед, во время или после получения.
Способы лечения или профилактики заболеваний композициями по настоящему изобретению
Настоящее изобретение также относится к способам лечения или профилактики определенных нарушений введением композиции, включающей терапевтически или профилактически эффективное количество липоевой кислоты или ее соли, в пищевую композицию для животного, нуждающегося в нем.
Добавление антиоксидантов или их смесей, например липоевой кислоты, в рацион домашнего животного-компаньона может поддерживать или содействовать здоровому составу тканей тела, например, потеря массы или телесного жира и повышение процента мышечной массы у животного-компаньона, например взрослого животного. Используемый здесь термин «взрослое» относится, как правило, к собаке в возрасте по меньшей мере от 1 года до 6 лет и кошке в возрасте по меньшей мере от 1 года до 6 лет. Пожилая собака или кошка - это собака или кошка в возрасте 7 лет или более.
Потеря умственных способностей у собак и кошек наблюдается со временем. Эта потеря умственных способностей проявляется во многих отношениях. У собак, например, она может проявляться как дезориентация, хождение в туалет по всему дому, изменение режима сна-бодрствования, снижение или изменение взаимодействия с людьми и другими домашними животными и неспособность к обучению и концентрации. Эти состояния также могут проявляться у кошек. Болезнь Альцгеймера, проявляющаяся у людей, у кошек и собак не выявлена.
Существует множество теорий в отношении потери умственных способностей. На сегодняшний день авторы настоящего изобретения не знают ни одного диетического способа воздействия, подавляющего потерю умственных способностей или способного фактически привести к положительным изменениям в умственных способностях, измеряемых при использовании объективных параметров у собак и кошек.
Авторам настоящего изобретения удалось отсрочить начало этого ухудшения. При использовании рациона по настоящему изобретению у взрослого животного-компаньона видно, что умственные способности животных в пожилом возрасте могут проявляться в течение более длительного периода времени. По существу ухудшение умственных способностей может быть остановлено или отсрочено. Способность к запоминанию и обучению может быть улучшена. В целом может быть улучшена умственная активность. Может быть замедлено снижение когнитивной функции, связанное с возрастом. Может быть замедлено прогрессирование ухудшения когнитивной дисфункции у собак в пожилом возрасте, и клинические признаки, связанные с этим синдромом, могут контролироваться. Целевой группой являются домашние животные, нуждающиеся в этих компонентах, которым подходит и необходима профилактика.
Настоящее изобретение не ограничивается конкретными способами, методами и реагентами, описанными здесь, поскольку они могут варьировать. Кроме того, использованная здесь технология приведена только в качестве описания конкретных вариантов воплощения настоящего изобретения и не ограничивает объем притязаний по настоящему изобретению. Используемые здесь термины «включать», «включает» и «включающий» следует понимать в открытом, а не в закрытом значении. Если не указано иное, все использованные здесь технические и научные термины и аббревиатуры используются в общепринятом смысле, понятном для специалиста в данной области техники, в которой заявлено данное изобретение. Хотя для осуществления настоящего изобретения могут быть использованы любые композиции, способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным здесь, предпочтительными являются способы, устройства и материалы, приведенные ниже.
Все приведенные здесь патенты, патентные заявки и публикации приведены ссылкой в объеме, позволенном законом, для раскрытия в описании соединений, процессов, технологий, процедур, изделий и других композиций и способов, описанных здесь методов, которые могут быть использованы в настоящем изобретении. Однако это не делает изобретение частью предшествующего уровня техники.
ПРИМЕРЫ
Настоящее изобретение может быть дополнительно иллюстрировано следующими неограничивающими примерами предпочтительных вариантов воплощения настоящего изобретения, и они не ограничивают цели, сущность и объем изобретения, если не указано другое.
Пример 1
Семнадцать взрослых собак породы бигль в возрасте 2-4 лет (контроль n=8, обогащенный атиоксидантом n=9) случайным образом распределяют в контрольную группу и группу с обогащенным рационом. Контрольный рацион содержит 59 частей на миллион витамина E и <32 частей на миллион витамина C. Тестируемый рацион содержит 900 частей на миллион витамина E и 121 часть на миллион витамина C, 260 частей на миллион L-карнитина и 135 частей на миллион альфа-липоевой кислоты. Приблизительно через месяц после начала приема рациона первое задание, данное собакам, тест на обучение распознаванию ориентиров, который является тестом на пространственное внимание (Milgram et al., 1999 Milgram, N. W., Adams, B., Callahan, H., Head, E., Mackay, B., Thirlwell, C, & Cotman (1999), C. W. Landmark Discrimination Learning in the Dog. Learning & Memory, 6:54-61).
Обучение распознаванию ориентира требует от субъектов выбора конкретного объекта, основываясь на близости к объекту. Начальное обучение, однако, основывается на способности собаки обучиться распознаванию объекта. Ранее авторы настоящего изобретения обнаружили, что влияние возраста на обучение распознаванию зависит от степени трудности задания.
Взрослые собаки, получающие обогащенный рацион, делают меньше ошибок по сравнению с взрослыми собаками, получающими контрольный кормовой продукт, при обучении в тесте с 0 ориентиров (среднее значение - контроль = 31,1, среднее значение - обогащенный = 15,1). Взрослые собаки следуют за тестовым ориентиром 1 и 2, где ориентир передвигают дальше от исходного места. Взрослые собаки, получающие обогащенный рацион, выучили ориентир 0-2 с меньшим количеством ошибок по сравнению с получающими контрольный рацион (среднее количество ошибок при обучении ориентирам 0+1+2 контроль = 132,9; среднее количество ошибок при обучении ориентирам собак с обогащенным рационом 0+1+2=87,1).
Пример 2
В исследовании участвуют тридцать (30) взрослых выбранных случайным образом собак. Возраст собак по меньшей мере 10 месяцев, они не беременны, не кормят, имеют нормальную массу тела на начало исследования. Животных случайным образом разделяют на 5 групп для пищевого исследования по 3 самки и 3 самца на группу.
Всем собакам скармливают контрольный кормовой продукт (добавлено 0 частей на миллион dl-альфа-липоевой кислоты), отвечающий или превосходящий все рекомендации по нутриентам Ассоциации Американских Официальных Контролеров по Качеству Кормов (AAFCO 2000), в течение 2 недельного периода, предшествующего скармливанию (таблица 2). После периода, предшествующего скармливанию, собак случайным образом разделяют на 5 групп для исследования одного из следующих добавленных количеств dl-альфа-липоевой кислоты (по сухому веществу): 0 частей на миллион, 150 частей на миллион, 1500 частей на миллион, 3000 частей на миллион, 4500 частей на миллион. Во все рационы, контрольные и с альфа-липоевой кислотой, добавляют витамин E в пределах 600-1000 международных единиц и витамин C в пределах 100-200 частей на миллион.
Тестируемые кормовые продукты являются единственным источником нутриентов за исключением воды. Свежая вода обеспечивается без ограничений. Всех собак разделяют и определяют начальную массу тела, дозировку кормового продукта рассчитывают для каждой собаки на основе предполагаемой МЭ кормового продукта. Расчеты начальной дозировки кормового продукта основываются на потребности животного в энергии (MER) с поправкой для собаки на коэффициент для нормальной активности, рассчитанной по следующей формуле:
MER(ккал/день)=1,6 × RER(потребность в энергии в состоянии покоя)
где: RER (ккал/день)=70 × массу тела (кг) 0,75.
Собак взвешивают каждую неделю и при необходимости регулируют дозировку кормового продукта для поддержания оптимальной массы тела. Оптимальная масса тела находится между показателями 3 и 5 по шкале. В случае когда масса тела собаки не сохраняется в пределах -10% начальной массы тела, после регулирования дозировки кормового продукта ее выводят из исследования. Все измерения массы тела и потребление кормового продукта записывают.
2
4
3
4
Образцы измельчают и 0,100±0,001 г образца экстрагируют дважды в 5,0 мл фосфатного буфера (10 мМ NaHPO, 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), 0,9% NaCl, pH 7,4). 250 мкл экстракта помещают в 5 мл стеклянную центрифужную пробирку с покрытой тефлоном крышкой. 15 мкл раствора ЭДТА (100 мМ ЭДТА регулируют до pH 7,8 при добавдении 1 М NaOH) и 50 мкл свежеприготовленного 5 мМ дитиоэритрита (DTE). Растворы перемешивают на вортексе и инкубируют при комнатной температуре в течение 5 минут. Затем добавляют 10 мкл 1М HPO и 2,0 мл эфира диэтила. Пробирки укупоривают, перемешивают на вортексе и центрифугируют при 1500×g в течение 3 минут при комнатной температуре. Слой эфира помещают в отдельную 5 мл стеклянную центрифужную пробирку, в то же время водный слой экстрагируют еще дважды с 1,5 мл эфира. Все экстракты одного и того же образца комбинируют. Затем экстракты сушат в испарителе жидкого азота на водяной бане при комнатной температуре. Затем образцы укупоривают и замораживают в течение ночи.
4
4
3
Затем высушенные экстракты оттаивают и восстанавливают 70 мкл раствора SDS/ЭДТА (0,11% натрия додецилсульфата (SDS), 15 мМ ЭДТА, 0,9% NaCl) и 5 мкл свежеприготовленного 1 мМ DTE. Затем в каждую пробирку добавляют 50 мкл свежеприготовленного NaBH. Затем пробирки перемешивают на вортексе и инкубируют при комнатной температуре в течение 10 минут. Через 10 минут образцы замораживают при температуре -70°C. Перед оттаиванием в растворы добавляют 20 мкл 2М HCl. После оттаивания в растворы добавляют 800 мкл 100 мМ NHHCO. Растворы перемешивают на вортексе и добавляют 5 мкл 100 мМ монобромдиамина в растворе ацетонитрила (mBBr). Затем растворы инкубируют в темноте в течение 90 минут при комнатной температуре.
4
Из образцов после инкубации удаляют избыток mBBr и производное DTE экстракцией 1,5 мл дихлорметана. Водный слой помещают в ВЭЖХ. Липоевую кислоту разделяют с использованием мобильной фазы, состоящей из 30% ацетонитрила, 1% уксусной кислоты, отрегулированной до pH 3,95, при использовании приблизительно 2М NHOH прокачивают при скорости потока 1,0 мл/минуту с изократическим элюированием в течение 15 минут для инжекции. Этот препарат показывает, что плотность экструдированного кормового продукта равна 1 г/мл.
Образцы крови собирают асептически для клинического анализа крови и биохимического анализа крови за 2 недели до начала и повторно на 0, 28, 56, 84, 112, 140 и 168 дни исследования. Дополнительно 15 мл цельной крови собирают для выделения лимфоцитов на 0, 28 и 84 дни применения рациона.
Гепаризированную цельную кровь расслаивают в 50 мл Accuspin конической центрифужной пробирке (Sigma Chemical) и добавляют равный объем физиологического раствора с фосфатным буфером (PBS). Образцы центрифугируют при 700×g в течение 30 минут без фиксатора. Собирают слой моноцитов и помещают его в 15-мл коническую центрифужную пробирку, ресуспендируют в 1-3 мл PB и центрифугируют, как ранее (первая промывка). Вторую промывку проводят, как первую промывку. Наконец, клетки собирают и суспендируют в перхлорной кислоте (10% масса/объем) и замораживают при температуре -70°C до момента проведения анализа.
Образцы перемещают из морозильной камеры при температуре -70°C в охлаждающую камеру с сухим льдом. Пробирки центрифугируют при 12000 об/мин в течение 5 минут в охлаждаемой центрифуге. Аликвоту супернатанта для анализа глютатиона (GSH) помещают в коническую пробирку для тестирования.
Дереватизацию экстрактов, растворимых в кислоте, проводят способом Reed и другие (Fariss et al), модифицированным Jones (Jones et al).
3
Кратко, 150 мкл экстракта и внешние стандарты добавляют в 1,5 мл пробирку Эппендорфа с последующим добавлением 20 мк γ-Glu-Glu внутреннего стандарта и 50 мкл IAA с последующим смешиванием. Раствор регулируют до pH приблизительно 10 (пурпурный цвет) при использовании рабочего раствора KOH-KHCO. Растворы инкубируют 1 час при комнатной температуре в темноте. Добавляют реагент Sanger в том же объеме, что и общий объем, и раствор инкубируют в течение ночи (20 часов) в темноте при комнатной температуре.
После инкубации раствор центрифугируют при 12000 об/мин в течение 5 минут, супернатант помещают в другую пробирку - 1,5 мл пробирку Эппиндорфа. 200 мкл супернатанта добавляют в пробирки темного стекла, которые имеют 300 мкл впускное отверстие, фиксируют в верхней части при использовании кримпера для ВЭЖХ.
Растворители и условия отделения описаны (Fariss, Jones). Уровни GSH и GSSG количественно определяют относительно аутентичных стандартов. В качестве внутреннего стандарта для оценки эффективности дериватизации используют гамма-глютамил-глютамат.
Анализируют сравнения показателей клинической биохимии, гематологии и массы тела относительно базовых уровней при использовании парного t-критерия на SAS для windows при значении, установленном на уровне P<0,05. Средние показатели при измерении в каждой временной точке отделяют при использовании одностороннего ANOVA при значении, установленном на уровне P<0,05. Анализируют различия GSH:GSSG между 84 днем и базовым уровнем между группами при использовании SAS для windows при использовании одностороннего ANOVA при значении, установленном на уровне P<0,05.
Результаты
Концентрации липоевой кислоты (частей на миллион) в кормовом продукте, как определено при проведении 7 последовательных анализов (на 0, 28, 56, 84, 112, 140, 168 дни), находятся в пределах ожидаемой чувствительности анализа, и параметры получения, как правило, фиксируются на нашем испытательном приборе (таблица 2).
Данные по потреблению кормового продукта ничем не выделяются. Большинство животных во всех группах потребили больше кормового продукта за 6 месяцев в среднем по сравнению с началом исследования. Данные по массе тела ничем не выделяются за исключением того, что наблюдалась некоторая потеря массы тела, произошедшая первоначально в группе с включением 4500 частей на миллион, но в течение 6 месяцев появилась обратная тенденция. На оценку состояния организма животного эта ничтожная потеря массы не оказала значительного воздействия.
Рутинные физические обследования не выявили каких-либо нарушений, связанных с потреблением или токсичностью dl-альфа-липоевой кислоты. Все принимавшие участие в исследовании животные сохранили нормальную форму на протяжении всего исследования. На протяжении исследования у некоторых животных наблюдались случаи рвоты; однако не наблюдалось общей тенденции, которая позволила бы заключить, что рвота вызвана липоевой кислотой. Одно животное в группе с наивысшим включением было выведено из исследования на 21 день из-за потери массы тела и лейкоцитоза. Лейкоцитоз у этого животного не прошел к окончанию исследования, он предположительно вызван каким-либо другим патологическим процессом.
Показатели биохимии сыворотки 28, 56, 84, 112, 140 и 168 дней сравнивают с начальными показателями для одной и той же группы собак, наблюдается несколько статистический различий, однако ни одно из них не считается биологически значимым, поскольку эти показатели близки к лабораторному контролю и не наблюдается постоянной тенденции в течение нескольких месяцев. Сравнения между контролем и группами исследования в каждый из определенных моментов времени также выявили некоторые статистические отличия, однако они не являются биологически значимыми, поскольку эти показатели очень близки к клиническим лабораторным контролям и не наблюдается тенденции.
Показатели гематологии 28, 56, 84, 112, 140 и 168 дней сравнивают с начальными показателями для одной и той же группы собак, наблюдается несколько статистических различий, однако ни одно из них не считается биологически значимым, поскольку эти показатели близки к лабораторному контролю и не наблюдается тенденции. Сравнения между контролем и группами исследования в каждый из определенных моментов времени также выявили некоторые статистические отличия, однако они не являются биологически значимыми, поскольку эти показатели очень близки к клиническим лабораторным контролям и не наблюдается тенденции.
Соотношение GSH:GSSG
Изменения в соотношении GSH:GSSG через 84 дня скармливания отражают значительное воздействие рациона (P=0,024), во всех группах с обогащенным кормовым продуктом наблюдается увеличение соотношения (таблица 3). ANOVA показал значительные различия по сравнению с базовым кормовым продуктом и продуктом с самым низким и самым высоким уровнем включений, однако самое большое числовое увеличение наблюдается у продукта с самым низким уровнем включений. То есть изменения в соотношениях GSH:GSSG для наивысшего и самого низкого включения значительно отличаются от изменений, наблюдаемых в тот же период времени в базовом кормовом продукте. Соотношение по 4 точкам не может быть определено на 84 день, поскольку GSSG в этих образцах неопределим (1 контроль, 3 группы исследования). Поскольку показатели групп с обогащенными кормовыми продуктами демонстрируют даже более высокие соотношения GSH:GSSG, если анализ достаточно чувствителен для определения низких уровней GSSG на 84 день.
Таблица 2
Уровень включенийСтандартный показатель (частей на миллион)
Среднее
Стандартное отклонение
Кол-во
0 частей на миллион
24 части на миллион
17
н/о
150 частей на миллион
151 часть на миллион
13
101
1500 частей на миллион
1471 частей на миллион
113
98
3000 частей на миллион
2869 частей на миллион
250
96
4500 частей на миллион
4176 частей на миллион
642
93
Таблица 3
Изменение в среднем соотношении GSH:GSSG у собак с дня 0 до дня 84
Потребление DL-альфа-липоевой кислоты в экструдированном кормовом продукте
Включение
Различия в соотношении GSH:GSSG с дня 0 до дня 84Включения по сравнению с базовым кормовым продуктом
N
Показатель P
0 частей на миллион
-9,2±26
5∗
Не определено
150 частей на миллион
70±20
6
0,003
1500 частей на миллион
24±7
6
0,16
3000 частей на миллион
10±4
4∗
0,46
4500 частей на миллион
50±36
4∗
0,03
∗1 собака в контроле и группа 4500 частей на миллион не имеют определимого GSSG на 84 день, при этом 2 собаки в группе 3000 частей на миллион не имеют определяемого GSSG на 84 день.
Возможны дополнительные исследования в отношении альфа-липоевой кислоты. Постоянное скармливание рациона с альфа-липоевой кислотой безопасно и эффективно. Оно усиливает снижение соотношения глютатиона (GSH) к окисленному глютатиону (GSSG). Постоянное введение альфа-липоевой кислоты в рацион может осуществляться в течение одного, двух, трех, четырех, пяти или шести месяцев минимум, в течение одного, двух, трех, четырех, пяти лет или даже более, в течение жизни животного. Функции альфа-липоевой кислоты сохраняются в рационе без какой-либо специальной защиты, такой как инкапсулирование, она не должна присутствовать в рационе в дозированной лекарственной форме, такой как используют в фармацевтике, например таблетки, гранулы, капсулы и тому подобное. Липоевую кислоту обеспечивают в рационе на минимальном уровне приблизительно 25, 50, 75 или 100 частей на миллион рациона. Высшие пределы находятся ниже токсичности до приблизительно 400, 300 или 200 частей на миллион рациона. Как правило, не выходят за пределы приблизительно 6 или 7 мг/кг массы тела животного в день, более предпочтительно не более приблизительно 5. Альфа-липоевая кислота улучшает антиоксидантный защитный потенциал наряду с улучшением способности животного противостоять окислительному повреждению. Все это делается с соответствующим количеством других антиоксидантов, присутствующих в виде таких, как витамин E и витамин C. Это демонстрирует, что действие альфа-липоевой кислоты выходит за пределы витамина C и/или витамина E.
Пример 3
Материалы и способы
Для определения воздействия липоевой кислоты по сравнению с контрольным кормовым продуктом AAFCO или по меньшей мере кормовым продуктом, содержащим рыбий жир, в исследовании принимают участие тридцать (30) собак.
Исследуют различающиеся профили экспрессии генов между контрольным продуктом AAFCO, кормовым продуктом, содержащим рыбий жир, и кормовым продуктом, содержащим липоевую кислоту. Минимальное изменение в 1,3 раза, при сравнении с контрольным AAFCO был создан список из 1212 генов и при сравнении с кормовым продуктом, содержащим рыбий жир, был создан список из 1896 генов на 30 день.
Выделение РНК: Из образцов цельной крови выделяют РНК при использовании набора PAXgene для выделения РНК. Все измерения проводят при участии 2 собак с использованием генных чипов Affymetrix. Для статистического анализа все измерения стандартизируют с использованием RMA. Все анализы проводят с использованием Partek. t-Тест ANOVA проводят для генов с отличающейся экспрессией для контрольных и тестируемых кормовых продуктов, выбранных на основе p-показателя с кратностью изменения 0,1> ± 1,3.
Экспрессия генов: Было установлено, что экспрессия 1212 генов изменилась у собак, потреблявших кормовой продукт, содержащий 150 частей на миллион липоевой кислоты по сравнению с собаками, потреблявшими контрольный кормовой продукт AAFCO. Дополнительно было установлено, что экспрессия 1896 генов изменилась у собак, потреблявших кормовой продукт, содержащий липоевую кислоту по сравнению с тестируемым кормовым продуктом, содержащим рыбий жир. В таблице 7 приведены гены, сгруппированные по функции и направлению экспрессии относительно таковых при потреблении контрольного кормового продукта или кормового продукта, содержащего рыбий жир.
Метаболомика: Анализируют и сравнивают метаболиты плазмы на кратность изменения по сравнению с собаками, потреблявшими контрольный кормовой продукт.
Измерения биомаркера: Сывороточные маркеры метаболизма хрящевой ткани определяют при использовании ELISA на основе набора для определения концентраций маркеров метаболизма хрящевой ткани. 0 день используют как независимую переменную в анализе для регулирования показателей базовых уровней.
Результаты: Добавление липоевой кислоты в кормовой продукт в результате приводит к большему снижению C-пропептида коллагена II типа и фрагмента карбокси-концевого перекрестно сшитого телопептида коллагена II типа по сравнению с аналогичным кормовым продуктом без липоевой кислоты. Известно, что повышение этих двух маркеров указывает на остеоартрит. Дополнительно, собаки, получавшие кормовой продукт, содержащий липоевую кислоту, теряли жир, предполагается, что это происходит за счет повышения утилизации жира для получения энергии (окисление жира) и снижения продуцирования глюкозы, что приводит к поддержанию более здоровой массы. Другими словами, собаки, получающие липоевую кислоту, утилизируют доступную глюкозу более эффективно, и их метаболизм смещается в сторону мобилизации жира для получения энергии. Дополнительно, в плазме крови понижено содержание метаболита гидроксипролина, что, как предполагается, указывает на снижение разрушения хрящевой ткани, поскольку метаболит почти всегда происходит исключительно из хрящевой ткани. Дополнительно, изменения в экспрессии генов, как определено по лейкоцитам сыворотки, поддерживает доказательство усиленной защиты хрящевой ткани за счет повышенного синтеза компонентов хрящевой ткани и снижения разрушения хрящевой ткани. Наконец, изменение экспрессии генов подтверждается повышенной утилизацией жира за счет повышения PDK4, ингибирующего образование пирувата из глюкозы и смещающего метаболизм к возврату ацетил-CoA для получения энергии и повышения экспрессии переносчиков глюкозы. Собаки, получавшие липоевую кислоту, также продемонстрировали на генетическом уровне меньше телесного жира по сравнению с собаками, получавшими контрольный кормовой продукт.
В таблице приведены различия по жиру и массе наряду с маркерами метаболизма хрящевой ткани при приеме липоевой кислоты.
В таблице 4 приведены изменения в составе тканей тела собак, получающих контрольный рацион, и собак, получающих контрольный рацион плюс рыбий жир и контрольный рацион плюс липоевая кислота. Как видно из таблицы 4, собаки, получающие контрольный рацион плюс липоевая кислота, демонстрируют самые значительные изменения в массе в течение 90 дней периода исследования.
В Таблице 5 приведены изменения уровней пируватов в крови собак, получающих контрольный рацион по сравнению с собаками, получающими контроль плюс рыбий жир и контроль плюс липоевая кислота. Как видно из Таблицы 5, собаки, получающие контроль плюс липоевая кислота, демонстрируют самые значительные изменения в уровнях пируватов в крови через 30 дней исследования.
Таблица 5Кратность изменения измеренных в крови собак пируватов на 30 день потребления трех кормовых продуктов<sup>а</sup>
Вероятность, P<
Метаболит
Контроль
Липоевая кислота по сравнению с контролем
Липоевая кислота по сравнению с рыбьим жиром
+ липоевая кислота по сравнению с контролем
+липоевая кислота по сравнению с обновлением
Пируват
1,000
0,5379
0,6274
0,01
0,03
<sup>a</sup>0 день используют как независимую переменную в анализе
В таблице 6 приведен процент собак, классифицированных как собаки, имеющих на генетическом уровне меньше телесного жира, потреблявшие контрольный рацион по сравнению с собаками, потреблявшими контроль плюс рыбий жир и контроль плюс липоевая кислота в течение 30 дней. Как видно из таблицы 6, собаки, получавшие контроль плюс липоевую кислоту, на генетическом уровне отличаются от физически толстых собак через 30 дней исследования.
Таблица 6Процент животных, определенных как толстые на генетическом уровне
Вероятность, P<
Измерение %
Контроль
Рыбий жир
Липоевая кислота
Липоевая кислота по сравнению с контролем
Липоевая кислота по сравнению с рыбьим жиром
Процент животных на 30 день, классифицированных по телесному жиру с использованием геномных маркеров
30
10
0
0,08
0,33
В таблице 7 приведены изменения в крови уровней маркеров артрита у собак, потребляющих контрольный рацион, по сравнению с собаками, потребляющими контроль плюс рыбий жир и контроль плюс липоевая кислота в течение 30 дней и повторно измеренный на 90 день. Как видно из таблицы 7, собаки, получающие контроль плюс липоевую кислоту, демонстрируют снижение маркеров артрита (то есть CPII и CTXII) через 30 дней приема и еще большее снижение уровней маркеров артрита через 90 дней потребления контроль плюс липоевая кислота.
Таблица 7Уровень маркеров артрита в крови собак, потребляющих три различных кормовых продукта<sup>ab</sup>
Вероятность, P<
Метаболит
Контроль
Рыбий жир
Липоевая кислота
SE
Исследование
Рыбий жир по сравнениюс контролем
Рыбий жир по сравнению с липоевой кислотой
Липоевая кислота по сравнению с контролем
30 день
CPII, нг/мл
1076,9
997,61
986,28
29,254
0,004
0,01
0,70
0,01
Изменение CPII
17,00
-30,50
-95,10
33,863
0,01
0,17
0,07
0,01
Изменение CTXII
-2,33
-0,03
-5,60
2,662
0,12
0,39
0,04
0,22
90 день
CPII, нг/мл
941,1
897,8
848,0
33,56
0,02
0,18
0,15
0,01
Изменение CPII
-118,70
-131,00
-232,70
36,546
0,01
0,74
0,01
0,01
Изменение CTXII
-3,24
-1,23
-0,59
6,119
0,90
0,75
0,92
0,67
<sup>a</sup>Индивидуальные маркеры анализируют, используя день 0 как независимую переменную в анализе.
<sup>b</sup>Изменения индивидуальных маркеров и соотношений, проанализированные без независимой переменной.
В таблице 8 приведено направление изменения (активация или ослабление) генов, связанных с метаболизмом хряща у собак, потребляющих контрольный рацион, по сравнению с собаками, потребляющими контроль плюс рыбий жир и контроль плюс липоевая кислота в течение 90 дней в остеоцитах собак. Как видно из таблицы 8, собаки, получающие контроль плюс липоевую кислоту, демонстрируют угнетение регуляции гена MMP-3, отвечающего за разрушение коллагенового компонента хряща, усиление регуляции TIMP2, отвечающего за ингибирование MMP, и усиление регуляции пролил 4-гидроксилазы, отвечающей за стадию, контролирующую скорость синтеза коллагена типа II (то есть продуцирует гидроксипролин для введения в коллагеновый эпитоп).
Таблица 8Гены, связанные с метаболизмом хрящевой ткани, измененные липоевой кислотой в остеоцитах собак
Название гена
Проба
Направление изменения
Функция
MMP3
1582602_at
Угнетение регуляции
Разрушение коллагенового компонента хряща
TIMP2
1582708_at
Усиление регуляции
Ингибирование MMP
Пролил-4-гидроксилаза
1600479_at
Усиление регуляции
Стадия контроля скорости синтеза коллагена типа II, продуцирует гидроксипролин для введения в коллагеновый эпитоп
В Таблице 9 приведены изменения в генах, связанных с метаболизмом хрящевой ткани и метаболизмом энергии у собак, получающих контрольный рацион по сравнению с собаками, получающими контроль плюс рыбий жир и контроль плюс липоевая кислота в течение 90 дней.
В таблице 10 приведены ингредиенты приведенной в качестве иллюстрации пищевой композиции для домашних животных по настоящему изобретению.
Таблица 10Ингредиенты, используемые для получения композиции
Ингредиент
1
Пшеница
2
Мило
3
Кукуруза
4
Измельченная курица
5
Кукурузная глютеновая мука
6
Мясо птицы
7
Соевое масло
8
Льняное масло
9
Рисовая крупка
10
Соевая мука, 49%
11
Усилитель вкусовой привлекательности 1
12
Свекольный жом
13
Цитрат калия
14
Рыбий жир
15
DL-метионин
16
L-лизин HCl
17
Соль
18
Карбонат кальция
19
Липоевая кислота
20
Хлорид холина
21
Витаминный премикс
22
L-треонин
23
Витамин E
24
L-триптофан
25
Липоевая кислота
26
Минеральный премикс
27
Консервант
В таблице 11 приведены уровни маркеров иммунного статуса в образцах крови собак, потребляющих контрольный рацион, по сравнению с собаками, потребляющими контроль плюс липоевая кислота в течение 90 дней. Как видно из таблицы 11, собаки, получающие контроль плюс липоевую кислоту, демонстрируют повышенный уровень маркеров иммунного статуса через 90 дней.
В таблице 12 приведены уровни маркеров артрита, измеренные в образцах крови собак, потребляющих контрольный рацион, по сравнению с собаками, потребляющими кормовой продукт для домашних животных с липоевой кислотой в течение 90 дней. Как видно из таблицы 12, собаки, получающие контроль плюс липоевую кислоту, демонстрируют снижение маркеров иммунного статуса через 90 дней.
В таблице 13 приведены уровни маркеров кожного и шерстного покрова, измеренные в образцах крови собак, потребляющих контрольный рацион, по сравнению с собаками, потребляющими кормовой продукт для домашних животных с липоевой кислотой в течение 90 дней. Как видно из таблицы 13, собаки, получающие контроль плюс липоевую кислоту, демонстрируют повышение маркеров кожного и шерстного покрова через 90 дней.
В таблице 14 приведены измеренные в образцах крови уровни почечных маркеров у собак, потребляющих контрольный рацион, по сравнению с собаками, потребляющими кормовой продукт для домашних животных с липоевой кислотой в течение 90 дней. Как видно из таблицы 14, собаки, получающие контроль плюс липоевую кислоту, демонстрируют снижение почечных маркеров через 90 дней.
В таблице 15 приведены данные измерений двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA) собак, потреблявших контрольный рацион по сравнению с собаками, потреблявшими контроль плюс липоевая кислота, в течение 90 дней. Измерение телесного жира при использовании DEXA более точное по сравнению с оценкой состояния здоровья по массе тела. Собака может иметь большую мышечную массу, но считаться имеющей «лишний вес» по многим таблицам рост/масса тела. Также может иметь место обратное, собака может иметь много жира и мало мышечной массы и иметь «лишний телесный жир», но не иметь лишнего веса.
В таблице 16 приведены уровни маркеров иммунного статуса и антиоксидантных маркеров, измеренные в образцах крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов в течение 180 дней.
Таблица 16Уровни маркеров иммунного статуса и антиоксидантных маркеров, измеренные в крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов* на 180 день
Вероятность, P<
Метаболит
# 1
# 2
# 3
# 4
# 5
SE
по сравнению с # 1
по сравнению с # 2
по сравнению с # 4
по сравнению с # 5
Глютатионин пероксидаза, мкг/10<sup>6</sup>
5,44
5,96
5,74
5,65
5,35
0,401
н/о
н/о
н/о
н/о
Витамин Е, мкг/мл
28,65
37,03
29,5
41,24
23,35
2,377
н/о
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
Витами Е: Холестерин
0,15
0,20
0,15
0,20
0,13
0,009
н/о
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
Витамин Е: Триглицерид
0,27
0,29
0,31
0,37
0,19
0,62
н/о
н/о
н/о
н/о
*0 день показатели используют как независимую переменную.- Контроль относится к стандартному кормовому продукту AAFCO.- Обновленный относится к кормовому продукту для домашнего животного с низким содержанием жира, пониженной калорийностью, с высоким содержанием пищевых волокон.
В таблице 17 приведены уровни маркеров артрита, измеренные в образцах крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов в течение 180 дней.
Таблица 17Уровни маркеров артрита, измеренные в крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов*, на 180 день
Вероятность, P<
Метаболит
# 1
# 2
# 3
# 4
# 5
SE
по сравнению с # 1
по сравнению с # 2
по сравнению с # 4
по сравнению с # 5
Остеокальцин, нг/мл
6,81
8,64
9,53с
8,29
6,71
0,883
<b>0,05</b>
н/о
н/о
<b>0,05</b>
Олигомерный матриксный белок хряща ед./л
3,17
3,30
3,23
3,19
3,38
0,204
н/о
н/о
н/о
н/о
Аминоконцевой перекрестно сшитый телопептид, нM, ВСЕ
21,42
25,53
24,89
24,02
23,63
2,707
н/о
н/о
н/о
н/о
Эйкозапентаеновая кислота, мг/дл
1,88b
0,49а
8,07с
1,79b
0,47
0,388
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
*0 день показатели используют как независимую переменную.
В таблице 18 приведены уровни маркеров кожного и шерстного покрова, измеренные в образцах крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов в течение 180 дней.
Таблица 18Уровни маркеров кожного и шерстного покрова, измеренные в крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов, на 180 день
Вероятность, P<
Метаболит
# 1
# 2
# 3
# 4
# 5
SE
по сравнению с с # 1
по сравнению с # 2
по сравнению с # 4
по сравнению с # 5
Витамин Е, мкг/мл
28,65
37,03
29,5
41,24
23,35
2,377
н/о
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
Витами Е: Холестерин
0,15
0,20
0,15
0,20
0,13
0,009
н/о
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
Витамин Е: Триглицерид
0,27
0,29
0,31
0,37
0,19
0,62
н/о
н/о
н/о
н/о
Липоевая кислота, мг/дк
51,67
53,84
62,23
50,13
51,98
2,966
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
Эйкозапентаеновая кислота, мг/дл
1,88
0,49
8,07
1,79
0,47
0,388
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
Докозагексаеновая кислота, мг/дл
10,36
2,68
13,43
11,86
2,01
0,646
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
<b>0,05</b>
В таблице 19 приведены уровни почечных маркеров, измеренные в образцах крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов в течение 180 дней.
Таблица 19Уровни почечных маркеров, измеренные в крови собак, потребляющих пять различных кормовых продуктов, на 180 день
Вероятность, P<
Метаболит
# 1
# 2
# 3
# 4
# 5
SE
по сравнению с # 1
по сравнению с # 2
по сравнению с # 4
по сравнению с # 5
Удельный вес мочи
1,032
1,028
1,032
1,032
1,032
0,0047
н/о
н/о
н/о
н/о
ERD (здоровые (0) по сравнению с нездоровыми (1,2,3)
0
1
0
2
0
-
н/о
н/о
н/о
н/о
Азот мочевины крови:Креатинин
18,78
19,50
19,86
21,12
19,38
1,070
н/о
н/о
н/о
н/о
Азот мочевины крови, мг/дл
14,03
14,64
14,27
16,22
13,54
0,831
н/о
н/о
<b>0,05</b>
н/о
Креатинин, мг/дл
0,75
0,75
0,72
0,78
0,70
0,034
н/о
н/о
н/о
н/о
*0 день показатели используют как независимую переменную.
В таблице 20 приведен состав тканей тела на 180 день для определения при независимой переменной воздействия приема у собак, получавших пять различных кормовых продуктов для домашних животных в течение 180 дней.
Таблица 20Воздействие приема на состав тканей тела взрослой собаки на 180 день при независимой переменной
Прием
Вероятность, P<
# 1
# 2
# 3
# 4
# 5
SE
по сравнению с # 1
по сравнению с # 2
по сравнению с # 4
по сравнению с # 5
BMC, г
419,78
395,51
400,1
442,07
393,07
24,95
0,05
н/о
н/о
<b>0,05</b>
BMD, г
0,601
0,584
0,587
0,623
0,577
0,0185
н/о
н/о
н/о
<b>0,05</b>
Мышечная масса
7929
7631
7758
7982
7380
479,6
н/о
н/о
н/о
н/о
% жира
24,2
25,50
26,5
28,8
27,20
2,480
н/о
н/о
н/о
н/о
Общий жир
2726
2843
3012
3361
2945
365,6
н/о
н/о
н/о
н/о
Общая масса, кг
11,1
10,9
11,2
11,8
10,7
681,3
н/о
н/о
н/о
н/о
Соотношение мышечная масса: жир
3,28
3,01
2,86
2,57
2,95
0,405
н/о
н/о
н/о
н/о
BMC, %
3,85
3,73
3,67
3,78
3,74
0,101
н/о
н/о
н/о
н/о
Мышечная масса, %
72,9
72,3
71,1
68,0
70,6
2,60
н/о
н/о
н/о
н/о
В таблице 21 приведены уровни цитокинов в крови на 180 день для определения при независимой переменной воздействия приема у собак, получавших пять различных кормовых продуктов для домашних животных в течение 180 дней.
Таблица 21Уровни цитокинов в крови у собаки на 180 день при независимой переменной d0
Вероятность, P<
Параметр
# 1
# 2
# 3
# 4
# 5
SE
по сравнению с # 1
по сравнению с # 2
по сравнению с # 4
по сравнению с # 5
IL-2 (пг/мл)
635,2
251,60
263,9
371,00
257,10
394,21
0,20
0,97
0,98
0,77
IL-6 (пг/мл)
103,7
66,8
45,9
41,7
66,50
48,606
0,11
0,55
0,55
0,93
IL-7 (пг/мл)
369,0
235,9
215,7
661,6
210,4
200,49
0,30
0,89
0,97
0,02
IL-8 (пг/мл)
989,9
885,0
1024,3
1261,1
833,3
227,10
0,82
0,37
0,21
0,24
IL-15 (пг/мл)
477,8
390,8
280,5
476,0
374,7
247,07
0,28
0,53
0,59
0,39
IL-18 (пг/мл)
458,7
200,6
172,4
297,5
262,5
238,53
0,10
0,87
0,60
0,57
КС (пг/мл)
803,6
643,6
653,9
592,6
589,0
105,65
0,05
0,89
0,38
0,54
МРС-1 (пг/мл)
349,2
216,8
215,4
223,7
256,2
108,13
0,09
0,99
0,60
0,93
IP-10 (пг/мл)
6,05
7,93
3,98
7,76
2,89
3,572
0,41
0,12
0,68
0,25
IFN-гамма (пг/мл)
31,88
29,61
15,07
9,03
19,79
25,207
0,36
0,42
0,79
0,80
GM-CSF (пг/мл)
620,9
217,2
223,7
351,8
284,2
301,51
0,08
0,98
0,78
0,65
Общие провоспали-тельные цитокины
5351,1
2394,10
2832,2
4535,5
3284,1
1482,30
0,02
0,70
0,68
0,22
В таблице 22 приведены данные изменения метаболитов, измеренных в образцах крови собак, получавших контрольный рацион, по сравнению с собаками, получавшими кормовой продукт для домашних животных, включающий липоевую кислоту, в течение 30 дней. Как видно из таблицы 22, собаки, получавшие контроль плюс липоевая кислота, демонстрируют снижение содержания почечных маркеров через 30 дней.
Объем притязаний настоящего изобретения не ограничивается конкретными вариантами его воплощения, приведенными в качестве примеров, приведенных только для иллюстрации некоторых аспектов настоящего изобретения, и любые варианты воплощения настоящего изобретения и их функциональные эквиваленты входят в объем настоящего изобретения. Для специалиста в области техники, к которой относится настоящее изобретение, очевидно, что дополнительно к указанным выше вариантам воплощения настоящего изобретения могут быть сделаны многие модификации и варианты настоящего изобретения, которые входят в объем притязаний, изложенный в приложенной формуле изобретения.
Все приведенные здесь ссылки включены в данный документ посредством ссылки в полном объеме.