ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДИАРЕИ У ТЕЛЯТ
PREPARATION FOR PREVENTION AND TREATMENT OF DIARRHOEA IN CALVES

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к комплексному биологическому препарату, который может быть использован для профилактики и лечения телят при диарее вирусно-бактериальной этиологии.
Известен препарат для профилактики и лечения диареи у телят, включающий раствор гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л и гипериммунную поливалентную сыворотку крови против диареи с титром антител 1:300-1:600 при соотношении ингредиентов, мас. %: раствор гипохлорита натрия - 30-40, гипериммунная поливалентная сыворотка остальное (60-70). Гипериммунную поливалентную сыворотку готовили согласно требованиям получения активных лечебно-профилактических и диагностических иммунных сывороток (Ветеринарные препараты. Справочник под ред. Д.Ф. Осидзе. - М.: Колос, 1981. - С. 49-60).
Забор крови (без стабилизатора) от животных-доноров осуществляют на 7-10 дни (после 3-кратно, 4-, 5- и 6-кратных) гипериммунизаций продуцентов (доноров) при максимальных уровнях выработки специфических антител (от 1: 300 до 1: 1200 и выше) в зависимости от вида инфекции. Количество забираемой крови от крупного рогатого скота - 2,5-3 л, от лошадей - в количестве 5 л от одного продуцента.
Полученную кровь с соблюдением асептики и антисептики отслаивают на водяной (37-38°C) в течение 30-40 мин или при комнатной температуре, в темном месте в течение 12-15 ч. С момента образования сгустка и начала ретракции образцы крови переносят в рефрижератор (холодильник) при 4-5°C, где они находятся до наступления максимальной ретракции.
Отстоявшуюся сыворотку из емкостей объединяют методом отсоса (слива), отделяя от сгустков в одну стерильную емкость.
Для отжатия оставшихся сгустков крови используют раствор гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л из расчета 300 мл на 1 л (кг) сгустка крови, оставляют на сутки в темном прохладном помещении, после чего сливают и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 30 мин.
Далее с целью активизации препарата проводят его облучение ультрафиолетовыми лучами в режиме «холодного свечения» с основным диапазоном излучения 254 нм.
Объединение всех порций сыворотки, которые были получены методом отсоса (слива) - основная партия и отжатая из сгустка крови с добавлением гипохлорита натрия, осуществляют после центрифугирования и консервируют карболовой кислотой (0,25-0,30% раствором фенола) из расчета 50 мл 5% раствора на каждый литр сыворотки (при этом конечная концентрация фенола 0,25%) (См. патент RU 21196591, МКИ А61K 33/14, А61K 35/16, А61K 39/395 - прототип).
Данный препарат обладает высокой лечебно-профилактической эффективностью при использовании его для лечения телят при диарее вирусно-бактериальной этиологии. Однако используемый в качестве консерванта препарата фенол (карболовая кислота) является достаточно токсичным и дорогим препаратом. Фенол обладает сильным антимикробным противопаразитарным и инсектицидным действием, в основе которого лежат дегидротация и денатурация белка бактериальных клеток. Фенол хорошо всасывается слизистыми оболочками и даже неповрежденной кожей, вызывая раздражающее и прижигающее действие, и может вызвать отравление, а в чистом виде, попадая на кожу и слизистые, вызывает некроз (Червяков Д.К, Евдокимов П.Д., Вишкер А.С. Лекарственные средства в ветеринарии. Москва. Колос. 1977. стр. 381-382. Фармакология. Мозгов И.Е. Изд. 8, дополненное и переработанное. Москва. Колос. 1985. С. 322-325).
Таким образом, использование фенола в качестве консерванта может вызывать ряд побочных негативных эффектов в силу своей токсичности, а также может представлять опасность с физиологической и экологической точки зрения в отношении животных и обслуживающего персонала.
Необходима разработка препарата для лечения диареи у телят при вирусно-бактериальной этиологии, исключающая использование в качестве консерванта токсичного фенола при сохранении высокой эффективности и отсутствии побочных негативных явлений в процессе лечения при более низкой себестоимости препарата и повышенной экологической безопасности его использования.
Указанный технический результат достигается тем, что в препарате для профилактики и лечения диареи у телят, включающем гипериммунную поливалентную сыворотку крови (далее ГПС) против диареи с титром антител 1:300-1:600 в эффективном количестве, раствор гипохлорита натрия (далее ГП) в концентрации 300-350 мг/л при соотношении ингредиентов, мас. %: сыворотка:гипохлорит натрия 70:30-60:40, консервант, согласно заявленному изобретению, в качестве консерванта используют раствор гипохлорита натрия в концентрации 700-750 мг/л в объеме 10-11% от количества препарата.
Для определения оптимального соотношения количества препарата и консерванта (ГН с активностью 700-750 мг/л) при заявленных в прототипе соотношениях ингредиентов: ГПС:ГН в концентрации 300-350 мг/л - 70:30 и 60:40 были проведены производственные опыты, отраженные в таблице 1.
Как показали исследования, в опытах с 1 по 5, на каждые 10 мл препарата (при соотношении ГПС:ГН концентрацией 300-350 мг/л 70:30) воздействовали консервантом (ГН концентрацией 730 мг/л), при этом рост микроорганизмов наблюдался с первого по третий опыт при количестве консерванта 0,5, 0,75,1,0 мл на каждые 10 мл препарата. В шестом опыте при количестве консерванта 1,13 (среднее значение граничных показателей 1,0 и 1,25, при которых наблюдался переход наличия положительных проб в их отсутствие) было найдено более точное значение количества консерванта на каждые 10 мл препарата. В опытах с 7 по 12 на каждые 10 мл препарата (при соотношении ГПС:ГН концентрацией 300-350 мг/л, 60:40) воздействовали консервантом в тех же пропорциях, что и в шести первых опытах. Отсутствие роста микроорганизмов наблюдалось уже при соотношении количество препарата:количество консерванта 10:1, вероятно, из-за более высокого содержания в препарате ГН концентрацией 300-350 мг/л (40% в отличие от 30% при соотношении 70:30). Таким образом, согласно исследованиям, оптимальным соотношением: препарат:количество консерванта следует считать соотношение 10:1,13-10:1,25, что при некотором округлении данных составляет 10-11% консерванта в составе препарата.
Аналогичные результаты были получены при исследовании в опытах консерванта в концентрации менее 700 и 750 мг/л. Так, при концентрации консерванта менее 700 мг/л (675 мг/л) рост микроорганизмов наблюдался уже при дозе консерванта в 1,0 мл, при большем количестве положительных проб концентрация в 750 мг/л обеспечивала оптимальный результат, но ее увеличение нецелесообразно.
Сравнительные исследования морфо-биохимических показателей телят при использовании заявленного препарата и препарата по прототипу, свидетельствующие о повышении защитных и иммунобиологических свойств у подопытных животных, представлены в таблице 2. В процессе проведения опыта телятам вводили лечебные дозы препаратов из расчета 3 мл на 10 кг живой массы тела животного дважды с интервалом 48 часов.
Как показали исследования, содержание общего количества эритроцитов в крови телят опытной группы-2 на 10,9%, гемоглобина на 1,8% выше чем в первой опытной группе. Количество метгемоглобина в первой опытной группе увеличилось в 2,4 раза, по сравнению с исходным состоянием, тогда как во второй опытной группе этот показатель снизился на 22,8%. Следует особо отметить, что снижение метгемоглобина во второй группе происходит вероятно за счет достаточного количества детоксифицирующего компонента (ГН) входящего в состав препарата, а в первой опытной группе этот показатель не только не уменьшился, а даже вырос более чем в 2 раза, возможно, за счет фенола, который способен вызывать метгемоглобинемию. Образование в крови метгемоглобина вызывается такими веществами, как нитраты, нитриты, бертолетова соль, аминофенолы и их производные и др. Метгемоглобин не способен осуществлять дыхательную функцию крови. При превращении 20-40% гемоглобина в метгемоглобин наступает кислородное голодание.
Как видно из таблицы 3, в отличие от препарата по прототипу использование заявленного лекарственного средства при лечении диареи у телят позволило исключить ряд побочных и негативных эффектов.
Опыт по выявлению профилактической эффективности заявленного препарата и препарата по прототипу на телятах крупного рогатого скота представлен в таблице 4.
Использование в качестве консерванта гипохлорита натрия в концентрации 700-750 мг/л позволило снизить себестоимость одного литра препарата на 10 рублей 80 копеек, по сравнению с прототипом (при стоимости килограмма фенола 2183 рубля и килограмма натрия хлорида 60 рублей).
Заявленный препарат готовят по аналогии с препаратом по прототипу и после объединения порции сывороток, полученных путем сливания цельной сыворотки и сыворотки, полученной после экстракции сгустка, с частью раствора гипохлорита натрия в концентрации 350-300 мг/л из расчета 300 мл на 1 л (кг) сгустка крови, осуществляют центрифугирование при 1500 об/мин в течение 30 мин и консервируют активным раствором гипохлорита натрия, содержащего не менее 700-750 мг/л активного хлора из расчета 10-11% концентрата в составе препарата (на 100 мл препарата 11,3-12,5 мл консерванта).
Готовый препарат - гипериммунную поливалентную сыворотку разливают по стерильным флаконам емкостью 50, 100, 250, 500 мл. срок хранения в условиях холодильника до 2-х лет. Контроль за качеством препарата осуществляется на всех стадиях его приготовления. Каждая серия проверяется на ее физические свойства (цвет, консистенция, осадок), стерильность, безвредность, специфическую активность после 20-дневной выдержки при (37±1)°C.
Таким образом, заявленный препарат является высокоэффективным средством для лечения диареи у телят, превосходя по этому показателю препарат по прототипу.
Использование гипохлорита натрия с активностью 700-750 мг/л в качестве консерванта позволило сократить себестоимость заявленного препарата, сделать его более безопасным с физиологической и экологической точки зрения как в отношении животных, на которых он используется, так и для обслуживающего персонала в связи со снижением токсичности, а остатки, попадающие в окружающую среду, не наносят вреда, так как гипохлорит натрия разлагается до своих составляющих: поваренная соль и вода, не нанося при этом вреда окружающим объектам, как внутри животноводческих помещений, так и за их пределами.