Иммунологические детерминанты аденомиоза с позиции доказательной медицины

ГИНЕКОЛОГИЯ

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ДЕТЕРМИНАНТЫ АДЕНОМИОЗА С ПОЗИЦИИ ДОКАЗАТЕЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ

В.Е. Радзинский, А.В. Сорокина

Кафедра акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Российский университет дружбы народов ул. Миклухо-Маклая, 8, Медицинский факультет, Москва, Россия, 117198

Н.В. Жилина, С.Г. Морозов

Городская клиническая больница № 29 Госпитальная площадь, 2, Москва, Россия, 111020

С использованием иммуноферментного анализа (ИФА) были изучены особенности продукции цитокинов (ИЛ-6, ИЛ-10) и факторов роста (EGF, VEGF) у пациенток с аденомиозом. Показано, что при аденомиозе концентрации ИЛ-6 и ИЛ-10 повышены у 81,6 и 53,3%, EGF и VEGF у 86,2 и 91,4% больных аденомиозом соответственно, причем для клинически активного аденомиоза характерно более выраженное повышение уровня ИЛ-6, ИЛ-10, EGF и VEGF, а соответственно и уровня пролиферации, неоан-гиогенеза и иммуносупрессии.

Ключевые слова: цитокины, ИФА, ИЛ-6, ИЛ-10, EGF, VEGF, аденомиоз.

Несмотря на значительное число исследований, посвященных диагностике и терапии аденомиоза, не менее чем у 78% больных, получивших медикаментозную терапию, отмечается рецидив и дальнейшее прогрессирова-ние заболевания. По данным последних лет, эффективность лечения адено-миоза определяется степенью его активности, диагностика которой, особенно на дооперационном этапе, представляет большие трудности [1; 3].

Изучение иммунологических аспектов аденомиоза с позиций доказательной медицины позволит проводить прогнозирование, раннюю диагностику и оценивать эффективность проводимого лечения. Это послужит,

кроме того, основанием для расширения представлений о патогенезе аденомиоза и возможностях его лечения.

К настоящему времени можно считать доказанной роль многих цитоки-нов и факторов роста в патогенезе эндометриоза [2; 6]. В то же время лишь очень небольшое число исследований касалось аденомиоза.

Цитокины вовлечены фактически в каждое звено иммунитета, включая дифференцировку предшественников клеток иммунной системы, представление антигена, клеточную активацию и пролиферацию, экспрессию молекул адгезии и острофазового ответа [2].

В настоящий момент диагностическая значимость оценки уровня концентрации цитокинов заключается в констатации самого факта ее повышения или понижения у данного больного с конкретным заболеванием, причем для оценки тяжести и прогноза течения заболевания целесообразно определять концентрацию как про- (интерлейкин-6 - ИЛ-6), так и противовоспалительных (интерлейкин-10 - ИЛ-10) цитокинов в динамике. Можно предположить, что изменение соотношения про- и противовоспалительных цито-кинов создает благоприятные условия для инвазии и последующего роста жизнеспособных фрагментов эндометрия.

Повышение содержания таких факторов роста, как сосудисто-эндотели-альный (VEGF) и эпидермальный (EFG), создает благоприятные условия для инвазии и последующего роста жизнеспособных фрагментов эндометрия [5; 7].

Таким образом, целью данного исследования явилось выявление в сыворотке крови пациенток потенциальных маркеров, которые можно будет использовать для диагностики, определения степени тяжести и прогноза аденомиоза.

Контингент, материалы и методы. Нами было обследовано 120 больных аденомиозом (средний возраст составил 41,2 ± 8,3) и 30 практически здоровых женщин составили контрольную группу (средний возраст составил 40,1 ± 4,5). Диагноз «аденомиоз» был установлен на основании данных гистероскопии и результатов морфологического исследования.

Распределение больных по стадиям и данным анамнеза представлено в табл. 1.

Содержание ИЛ-6 и ИЛ-10 в сыворотке крови определяли твердофазным иммуноферментным методом с использованием диагностических тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Россия); для изучения факторов роста VEGF и EGF использовали тест-системы BioSource International.

Результаты и их обсуждение. Анализ клинического течения аденомио-за не обнаружил у больных достаточных различий в возрасте, времени наступления менархе и количестве родов в зависимости от степени инвазии эндометриоза в миометрий. Не все исследователи соглашаются с такой точкой зрения, считая позднее наступление менархе провоцирующим фактором развития аденомиоза.

Таблица 1

Клиническая характеристика больных в зависимости от степени инвазии и формы аденомиоза

Показатель Степень и форма аденомиоза

1-я 2-я 3-я узловая

Возраст(лет) 38,2 ± 1,8 41,2 ± 1,4 41,7 ± 1,3 43,2 ± 1,5

Менархе (лет) 14,3 ± 0,2 13,3 ± 0,3 14,2 ± 0,4 14,1 ± 0,2

Продолжительность менструаций (сутки) 4,15 ± 0,3 5,38 ± 0,2 5,87 ± 0,1 6,18 ± 0,1

Число родов 1,95 ± 0,2 1,35 ± 0,1 1,65 ± 0,5 1,87 ± 0,1

Число абортов 3,56 ± 0,7 3,98 ± 0,6 4,25 ± 0,8 4,34 ± 1,1

Число диагностических выскабливаний 1,12 ± 0,3 2,06 ± 0,6 1,35 ± 0,2 1,87 ± 0,5

Размеры матки (недель) 4,35 ± 0,5 5,98 ± 0,3 6,54 ± 0,1 6, 23 ± 0,1

На наш взгляд, скорее раннее становление менструального цикла с укороченным циклом, длительными и обильными менструациями и, следовательно, большей экспозицией полости матки является фактором риска.

В связи с выявленными различиями и особенностями в клиническом течении и молекулярно-биологических процессах в работе мы использовали термины «активный» и «неактивный» аденомиоз, отражающие степень клинической и морфологической активности эндометриоидного процесса [4].

В зависимости от степени выраженности основных клинических проявлений, характерных для аденомиоза, все исследованные пациенты (n = 120) условно были разделены на 2 клинические группы: I группу составили 76 пациенток с клинически активным аденомиозом; II группу - 44 пациентки с клинически неактивным аденомиозом.

Для определения форм клинической активности произвели оценку наиболее распространенных клинических проявлений аденомиоза - болевого синдрома и гиперполименореи.

Определение степени болевого синдрома осуществляли с помощью предложенной C.M. Mac Laverty, P.W. Shaw (1995) системы для оценки выраженности болей и дисменореи, согласно которой интенсивность боли определялась в баллах: 1-3 балла - слабая боль; 4-6 - умеренная боль; 7-9 -сильная [1].

Общеизвестно, что наличие аденомиоза часто сопровождается маточными кровотечениями, зачастую вызывающими анемизацию больных, в связи с чем гипер- и полименорею различали без анемии и с анемией. По степени тяжести различали легкую (Hb 90-110 г/л), среднюю (Hb 70-90 г/л) и тяжелую (Hb - ниже 70г/л) анемию.

Пациенток с умеренной и сильной болью и пациенток с гиперполиме-нореей в сочетании с анемией средней и тяжелой степени относили к I группе больных с клинически активным проявлением заболевания. Больных со слабой болью, отсутствием анемии или гиперполименореей в сочетании с анемией легкой степени относили ко II группе пациенток, с клинически неактивным аденомиозом.

Анализ длительности заболевания аденомиозом в зависимости от момента начальных клинических проявлений до первой госпитализации позволил выявить, что при активном аденомиозе продолжительность данного периода в более чем 50% случаев составила 1-5 лет, а при неактивном адено-миозе - 6-10 лет, т.е. для активного аденомиоза характерна меньшая длительность заболевания с момента первых симптомов до госпитализации и соответственно быстрое прогрессирование процесса.

В I группе гиперпластические процессы эндометрия (81,5%) и миома матки (75,6%) выявлены чаще, чем во II группе (60,2 и 31,5%). Эндометрио-идные кисты яичников наблюдались у 25,2% больных с активным аденомиозом и всего лишь у 3,5% пациенток из II группы.

Следующим этапом исследования явилось выявление молекулярно-биологических особенностей аденомиоза в зависимости от его клинической активности (п = 60).

Проведенный твердофазный иммуноферментный анализ ИЛ-6, ИЛ-10, УЕОБ и БОБ позволил выявить взаимосвязь между степенью активности аденомиоза и концентрацией данных белков в сыворотке крови.

При анализе значений концентраций ИЛ-6, ИЛ-10, полученных методом ИФА, были получены следующие данные (рис. 1).

600 п

400 200 0

£71

И

к_

Активный аденомиоз

Неактивный аденомиоз

Контроль

ИЛ -6

ИЛ-10

Рис. 1. Уровень цитокинов в сыворотке крови у больных аденомиозом

Присутствие в сыворотке крови ИЛ-6 обнаружено у 49 (81,6%) больных аденомиозом; из них 34 (69,4%) пациенток I группы - средняя концентрация 435,5 пг/мл и 15 (30,6%) пациенток II группы - средняя концентрация

223,6 пг/мл. В контрольной группе ИЛ-6 в сыворотке крови обнаружено не было.

Присутствие в сыворотке крови ИЛ-10 обнаружено у 32 (53,3%) больных аденомиозом; из них 22 (68,7%) пациенток I группы - средняя концентрация 324,5 пг/мл и 10 (31,3%) пациенток II группы - средняя концентрация 164,1 пг/мл. В контрольной группе ИЛ-10 обнаружен у 3 (10%) пациенток - средняя концентрация 145,2 пг/мл.

Степень участия цитокинов в патогенезе аденомиоза находится в прямой зависимости от стадии иммунного ответа, степени вовлеченности в него различных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, тяжести и распространенности патологического процесса. Изменение иммунореактивности обследованных пациенток аденомиозом сопровождалось активацией продукции провоспалительных цитокинов (ИЛ-6) и в меньшей степени противовоспалительных цитокинов (ИЛ-10).

При анализе значений концентраций ББО и УЕОБ, полученных методом ИФА, были получены следующие данные (рис. 2).

800 700 600 500 400 300 200 100 0

1

1

1

:1

1

14 , г

Активный аденомиоз

Неактивный аденомиоз

Контроль

БРО

УБОР

Рис. 2. Уровень факторов роста в сыворотке крови у больных аденомиозом

Средняя концентрация в сыворотке крови ЕБО в I группе составила 647,4 пг/мл, во II группе - 334,5 пг/мл, в контрольной группе - 45,9 пг/мл.

Средняя концентрация в сыворотке крови УЕБО в I группе составила 725,3 пг/мл, во II группе - 250,6 пг/мл, в контрольной группе - 38,3 пг/мл.

По нашим данным, содержание в сыворотке крови таких цитокинов, как ИЛ-6 и ИЛ-10, а также факторов роста - УЕОБ и ЕОБ повышено в сравнении с контрольной группой, что согласуется с данными литературы, касающимися наружного эндометриоза [7].

Заключение. Привлекательность использования сыворотки крови для диагностики различных заболеваний обусловлена главным образом тем об-

стоятельством, что она наиболее полно представляет фенотип человека, его состояние в конкретный момент времени [3]. Еще одно немаловажное достоинство сыворотки крови - ее доступность, поскольку она является наиболее распространенным в медицинской практике первичным клиническим образцом.

Результаты исследования свидетельствуют о том, что клиническая активность аденомиоза обусловлена нарушениями молекулярно-биологиче-ских процессов. Для клинически активного аденомиоза характерно более выраженное повышение уровня ИЛ-6, ИЛ-10, VEGF и EGF, т.е. пролиферации, неоангиогенеза и иммуносупрессии.

Таким образом, определение концентрации цитокинов ИЛ-6, ИЛ-10, а также факторов роста VEGF и EGF позволяет определить степень активности заболевания, а значит прогноз и необходимость терапии в настоящий момент.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Адамян Л.В., Кулаков В.И., Андреева Е.Н. Эндометриозы. - 2-е изд. - М.: Медицина, 2006.

[2] Адамян Л.В., Гусаева Х.З.,Василенко И.А. и др. Цитокины в перитонеальной жидкости и периферической крови больных с сочетанными доброкачественными заболеваниями матки // Проблемы репродукции. - 2008. - № 6. - С. 16-19.

[3] Ищенко А.А., Кудрина Е.А. Эндометриоз: современные аспекты. - М.: Медицинское информационное агентство, 2008. - С. 3-11.

[4] Сидорова И.С, Унанян А.Л., Коган Е.А. Клинико-патогенетические варианты развития аденомиоза - перспективы таргетной терапии // Эффективная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии. - 2007. - № 36. - С. 38-41.

[5] Сидорова И.С., Унанян А.Л., Коган Е.А. и др. Неоангиогенез и экспрессия факторов роста в различных по клинической активности формах аденомиоза // Тезисы Первого международного конгресса по репродуктивной медицине. - М., 2006. -С. 86-87.

[6] Berkkanoglu M., Arici A. Immunology and endometriosis // AGRI. - 2003. - № 50. -Р. 48-59.

[7] Jorissen R.N., Walker F., Pouliot N., Garrett T.P., Ward C.W., Burgess A.W. Epidermal growth factor receptor: mechanisms of activation and signaling // Exp. Cell. Res. - 2003. -№ 284. - Р. 31-53.

[8] Koumantakis E., Matalliotakis I., Neonaki M., Froudarakis G., Georgoulias V. Soluble serum interleukin-2 receptor, interleukin-6 and interleukin-1a in patients with endometriosis and in controls // Arch. Gynecol Obstet. - 1994. - № 255. - Р. 107-12.

IMMUNOLOGICAL DETERMINANTS OF ADENOMYOSIS FROM POSITIONS OF EVIDENTIAL MEDICINE

V.E. Radzinsky, A.V. Sorokina

Department of Obstetrics and Gynecology with the course of Perinathology Peoples' Friendship University of Russia Mikluho-Maklaya Str., 8, Medical Faculty, Moscow, Russia, 117198

N.V. Gilina, S.G. Morozov

Clinical Hospital № 29 Gospitalnaya sq., 2, Moscow, Russia, 111020

The purpose of reseach: to discover the production of cytokines (IL-6, IL-10) and growth factors by an enzyme-linked immunosorbent assay from women with adenomiosis. The results of reseach: IL-6 and IL-10 are present in serum of women with adenomiosis (81,6 and 53,3% currently), as well as growth factors EGF and VEGF (86,2 and 91,4%).We also observed that IL-6, IL-10, EGF, VEGF levels are correlated with the severity of the disease.

Key words: cytokines, IL-6, IL-10, growth factors, EGF, VEGF, adenomiosis.