СПОСОБ КОНТРОЛЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКИХ МИКОБАКТЕРИОЗОВ
METHOD OF MONITORING EFFECTIVENESS OF TREATING CHRONIC MYCOBACTERIOSIS

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования, и может быть, в частности, использовано для контроля эффективности лечения хронических микобактериозов.
Хронические микобактериозы - это инфекционные болезни (лепра, туберкулез и др.), вызываемые патогенными или условно-патогенными микобактериями и характеризующиеся тяжелым затяжным течением заболевания.
Лечение хронических микобактериозов, несмотря на достигнутые успехи, связанные с внедрением современных антибактериальных средств, комбинированной терапии, остается очень длительным. При этом на основании клинических показателей и существующих лабораторных методов исследования не всегда удается своевременно оценить эффективность проводимого лечения, что может привести к развитию лекарственной резистентности, инвалидизирующих осложнений, увеличению риска прогрессирования процесса и возникновению рецидивов заболевания (Хоменко А.Г, 1996, Капков Л.П, 2001, Dooley S.W. et al., 1992, Chaulet P. et al., 1995, Weyer K. et al., 1995, Niemann S. et al., 2000, Rossetti M.L. et al., 2002, Kim S.J, 2005). Поэтому разработка новых методов оценки эффективности лечения хронических микобактериозов является актуальной и имеет важное практическое значение.
В настоящее время известен способ контроля эффективности лечения хронических микобактериозов, основанный на бактериоскопическом исследовании биологического материала, полученного от больного, - микроскопия мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену (Саин Д.О., Цымбаларь Г.Г., Писаренко С.В., Наливайко Н.Н., Рывняк Л.П., Цымбаларь В.Г. Эффективность альтернативных схем краткосрочного лечения туберкулеза. //Туберкулез сегодня: проблемы и перспективы. // Науч. труды и материалы конф., посвященной памяти М.М.Авербаха (к 75-летию со дня рождения). М., 2000. - С.160-162; Абдиров Ч.А., Ющенко А.А., Вдовина Н.А, Руководство по борьбе с лепрой. - Нукус: Каракалпакстан, 1987. - 170 с.).
Недостатком этого способа является:
- отсутствие возможности учитывать особенности течения патологического процесса у каждого конкретного больного;
- высокая зависимость результата бактериоскопического исследования от правильности забора биологического материала, техники приготовления мазка и качества используемых красителей;
- необходимость достаточного практического опыта у лаборанта для просмотра мазков и выявления возбудителя (из-за разнообразия кислото- и спиртоустойчивых микроорганизмов).
Перечисленные недостатки не дают возможности получить конкретный технический результат - повышение чувствительности способа контроля эффективности лечения хронических микобактериозов.
Известен также способ контроля эффективности лечения хронических микобактериозов, основанный на определении уровня специфических антител в сыворотке крови к возбудителям заболеваний (М. leprae, М. tuberculosis и др.) с помощью иммуноферментного анализа (Torres М., Mendez S.A. Comparison of the immune response against Mycobacterium tuberculosis antigens between a group of patients with active pulmonary tuberculosis and healthy household. // Clin. exp. immunol. - 1994. - Vol.96. - P.75-78; Roche, P.W., Britton, W.J., Failbus, S.S., Williams, D., Pradhan, H.M., Theuvenet, W.J. Operational value of serological measurements in multibacillary leprosy patients: clinical and bacteriological correlates of antibody responses. // Int. J. Leprosy, 1990. - Vol.58. - P.480-490).
Недостатками данного способа являются
- отсутствие возможности оценить тяжесть осложнений, связанных с длительным приемом лекарственных препаратов;
- сложность и длительность технического исполнения;
- вероятность возникновения ложноотрицательных результатов.
Перечисленные недостатки не дают возможности получить конкретный технический результат - повышение чувствительности способа контроля эффективности лечения хронических микобактериозов.
Наиболее близким к заявляемому способу контроля эффективности лечения является метод клиновидной дегидратации сыворотки крови, позволяющий на основе анализа морфологической картины исследуемой биологической жидкости установить характер патологии, оценить тяжесть специфического процесса и возможных осложнений (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей. - М.: Хризостом, 2001. - 304 с.; Аюпова А.К., Ющенко А.А., Шатохина С.Н., Урляпова Н.Г. Диагностическое значение структур твердой фазы сыворотки крови при хронических заболеваниях. // Морфология биологических жидкостей в диагностике и контроле эффективности лечения: Сб. науч. трудов. 2-й Всерос. науч.-практ. конф. - М., 2001. - С.14-16).
Однако недостатками данного способа являются:
- низкая чувствительность при скрытых формах патологического взаимодействия элементов исследуемой жидкости;
- высокая зависимость от внешних условий дегидратации, влияющих на скорость испарения биологической жидкости (температуры, влажности, движения воздуха).
Сходство предлагаемого способа с известным состоит в том, что они оба относятся к лабораторным методам исследования и основаны на микроскопическом исследовании структур сыворотки крови.
Предлагаемое изобретение решает основную задачу - повышение чувствительности способа контроля эффективности лечения хронических микобактериозов. Сущность изобретения выражена совокупностью существенных признаков, достаточных для обеспечиваемого изобретением технического результата.
Решение поставленной задачи заключается в том, что по сходству или отличию параметров морфологической картины высушенных образцов нативной и подвергшейся воздействию электромагнитного поля сыворотки крови судят об эффективности или неэффективности лечения.
Известно, что внешние волновые воздействия на сыворотку крови способны подавлять внутренние физиологические ритмы ее компонентов. При этом патологические межмолекулярные связи элементов биологической жидкости носят более выраженный характер.
Электромагнитное поле, особая форма материи, представляет собой физическую систему с бесконечно большим числом степеней свободы, посредством которой между макрообъектами и микрочастицами передаются различные виды волнового и квантового взаимодействия. Оно обладает тепловым и информационным эффектами воздействия на биологические объекты, а также может служить «провоцирующим» фактором для выявления скрытых патологических ритмов элементов жидких сред организма. Использование эффекта «провокации» электромагнитного поля при создании нового способа оценки эффективности лечения хронических микобактериозов позволяет достичь положительного результата - повышение чувствительности предлагаемого способа эффективности лечения хронических микобактериозов.
Способ осуществляют следующим образом.
Сыворотку крови больного хроническим микобактериозом, получающего лечение, в количестве 0,5 мл, подвергают воздействию электромагнитного поля в течение 5 минут, после чего 0,01 мл нативной сыворотки крови (контрольный образец) и 0,01 мл сыворотки крови, подвергшейся воздействию электромагнитного поля (опытный образец), в форме капли наносят на поверхность стандартного предметного стекла и высушивают в условиях рабочей комнаты. Полученные образцы микроскопируют и проводят сравнительный анализ их морфологической картины.
При сходстве параметров морфологической картины контрольного и опытного образцов сыворотки крови судят об эффективности проводимого лечения.
Наличие существенных отличий в морфологической картине опытного образца сыворотки крови (появление или увеличение количества аномальных структур, более выраженные нарушения на системном уровне) от таковой контрольного образца свидетельствует о неэффективности проводимого лечения.
Изложенная сущность изобретения поясняется чертежами, где:
Фиг.1 демонстрирует фрагменты морфологической картины образцов сыворотки крови больного хроническим микобактериозом (туберкулезом) при эффективном лечении: а - отсутствие патологических элементов в контрольном образце нативной сыворотки; б - отсутствие патологических элементов в опытном образце сыворотки крови после воздействия электромагнитного поля.
Фиг.2 демонстрирует фрагменты морфологической картины образцов сыворотки крови больного хроническим микобактериозом (туберкулезом) при неэффективном лечении: а - единичные токсические бляшки (+) в контрольном образце нативной сыворотки; б - увеличение количества токсических бляшек (+++) в опытном образце сыворотки крови после воздействия электромагнитного поля.
Предлагаемый способ был успешно апробирован в противотуберкулезных стационарах (ОПТД, ГТБ №1) и ФГУ «ПИИ по изучению лепры Росздрава» г.Астрахани в 2003-2006 гг. Ниже приводятся результаты апробации.
1
2
Пример №1. Больная А. (и/б 335), 40 лет, находилась на лечении в легочном отделении ОПТД с диагнозом: Очаговый туберкулез С-C верхней доли правого легкого в фазе инфильтрации; МБТ -.
При поступлении: температура тела 36,8°С, состояние удовлетворительное. При аускультации в проекции верхней доли правого легкого дыхание ослабленное, хрипы не выслушиваются. Перкуторно - притупление легочного звука в подключичном пространстве справа.
Результаты рентгенологического исследования.
1
2
Очаговый туберкулез C-C верхней доли правого легкого, фаза инфильтрации.
Результаты бактериоскопического исследования мокроты методом простой микроскопии.
Микобактерии туберкулеза не обнаружены (-).
Результаты морфологического анализа сыворотки крови до начала лечения.
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - радиальный тип фации с высоким уровнем структурообразования. Присутствуют единичные токсические бляшки (+).
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - тип фации потерял радиальную упорядоченность основных структурных элементов. Отмечается увеличение количества токсических бляшек (++) и появление складок белковой зоны (+), отсутствующих в контрольном образце.
Заключение: результаты морфологического анализа свидетельствуют о снижении компенсаторно-адаптационных возможностей организма. После воздействия электромагнитного поля количество структурных признаков интоксикации увеличивается.
Назначен I режим стандартной химиотерапии и патогенетическое лечение (0,25% р-р хлористого кальция, 30% тиосульфат натрия, аутогемоновокаиновая терапия, витамины, ингаляции с диоксидином).
Через 2 месяца лечения состояние больной улучшилось, отмечалась нормализация физикальных данных: аускультативно - дыхание везикулярное, перкуторно - легочный звук.
Результаты рентгенологического исследования
Рассасывание инфильтрации, уменьшение размеров и уплотнение очаговых теней.
Результаты морфологического анализа сыворотки крови через 2 месяца лечения.
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - радиальный тип структуропостроения. Патологические образования не наблюдаются.
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - тип фации сходен с таковым контрольного образца и является радиальным. Патологические элементы отсутствуют.
Таким образом, результаты сравнительного анализа морфологической картины контрольного и опытного образцов сыворотки крови свидетельствуют об эффективности проводимого лечения.
Пример №2. Больной Г. (и/б 108), 33 года, находился на лечении в легочном отделении ОПТД с диагнозом: Диссеминированный туберкулез в фазе инфильтрации и распада. МБТ +.
Осложнение: Экссудативный плеврит туберкулезной этиологии справа. ДН I ст. Туберкулезная интоксикация.
При поступлении: температура тела 38,8°С, состояние неудовлетворительное. При аускультации в верхних отделах обоих легких дыхание ослабленное, выслушиваются единичные мелкопузырчатые хрипы, справа ниже 5 ребра дыхание не выслушивается. Перкуторно - укорочение легочного звука в верхних отделах обоих легких, справа - от 5-го межреберья и ниже.
Результаты рентгенологического исследования:
Диссеминированный туберкулез легких, распад. Экссудативный плеврит справа.
Результаты бактериоскопического исследования мокроты методом простой микроскопии:
Обнаружены микобактерии туберкулеза (++)
Результаты морфологического анализа сыворотки крови до начала лечения
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - частично радиальный тип фации с большим количеством основных структурных элементов. Из патологических образований наблюдаются мелкие единичные токсические бляшки (+) и языковые микроструктуры (+).
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - иррадиальный тип фации, увеличение количества патологических элементов: крупные бляшки занимают всю поверхность образца (+++), языковые микроструктуры носят сливной характер (++). Регистрируются аномальные структуры, не наблюдавшиеся в контрольном образце - складки белковой зоны (++) и двойная фация.
Заключение: Низкий уровень компенсаторно-адаптационных возможностей организма; выраженные структурные признаки интоксикации, воспалительной реакции и глубоких метаболических нарушений.
Б
Назначен II режим стандартной химиотерапии и патогенетическое лечение (0,25% р-р хлористого кальция, 30% тиосульфат натрия, аутогемоновокаиновая терапия, витамины, преднизолон 30 мг, ингаляции с диоксидином).
Через 3 месяца лечения состояние больного несколько улучшилось. Однако сохранялись кашель с мокротой, в легких - мелкопузырчатые хрипы и ослабленное дыхание.
Результаты рентгенологического исследования:
Незначительное рассасывание инфильтрации и очаговых теней. Распад сохраняется.
Результаты бактериоскопического исследования мокроты методом простой микроскопии:
Обнаружены микобактерии туберкулеза (+)
Результаты морфологического анализа сыворотки крови через 3 месяца лечения:
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - частично радиальный тип, присутствуют единичные токсические бляшки (+).
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - иррадиальный тип фации с низким уровнем структуропостроения. Из патологических элементов наблюдаются бляшки в большом количестве (+++), единичные языковые (+) и листовидные структуры (+).
Заключение. Низкий уровень компенсаторных возможностей организма. Присутствуют структурные маркеры интоксикации, воспаления, а также процессов склерозирования и фиброзирования, протекающих в легочной ткани.
Таким образом, результаты сравнительного анализа морфологической картины контрольного и опытного (после воздействия электромагнитного поля) образцов сыворотки крови свидетельствуют о неэффективности проводимого лечения, требующего его коррекции (перевод на IV режим стандартной химиотерапии и проведение дополнительных дезинтоксикационных мероприятий).
Пример №3. Больной Е. (и/б 3850) находится на амбулаторном лечении в ФГУ «НИИ по изучению лепры Росздрава» с диагнозом: Лепра, лепроматозный тип. Стадия регресса.
Специфическое противолепрозное лечение получает в течение 10 лет.
При осмотре: состояние удовлетворительное. Лепрозный процесс на кожном покрове полностью регрессировал.
Результаты бактериоскопического исследования скарификатов кожи и соскобов со слизистой носа:
Микобактерии лепры (-) не обнаружены.
Результаты иммуноферментного анализа:
Уровень антител к микобактериям лепры составил 0,16 опт. ед. (при норме <0,2).
Результаты морфологического анализа сыворотки крови:
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - частично радиальный тип фации. Наблюдаются листовидные структуры.
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - тип фации сходен с таковым контрольного образца и является частично радиальным. Количество и выраженность листовидных структур не изменяется.
Заключение. Основные параметры фаций сыворотки крови соответствуют возрастной норме. Присутствуют структурные маркеры процессов склерозирования. Результаты сравнительного анализа морфологической картины контрольного и опытного образцов сыворотки крови свидетельствуют об эффективности проводимого лечения.
Пример №4. Больная К. (и/б 3511) находится на лечении в клинике ФГУ «НИИ по изучению лепры Росздрава» с диагнозом: Лепра, погранично-лепроматозная форма (рецидив). Активная стадия.
Осложнения: Хроническая специфическая полиневропатия с чувствительными, двигательными, трофическими нарушениями.
При поступлении: состояние удовлетворительное. Лепрозный процесс на кожном покрове носит распространенный характер. На лице (в области лба, щек, подбородка), шеи, спине, ягодицах и бедрах имеются очаговые инфильтраты с нарушением чувствительности. Локтевые нервы умеренно утолщены. Амиотрофия кистей с обеих сторон. Сгибательная контрактура IV-V пальцев левой кисти.
Результаты бактериоскопического исследования скарификатов кожи и соскобов со слизистой носа:
Обнаружены микобактерии лепры (++).
Результаты иммуноферментного анализа:
Уровень антител к микобактериям лепры составил 0,78 опт. ед. (при норме <0,2).
Результаты морфологического анализа сыворотки крови:
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - частично радиальный тип фации. Наблюдаются языковые структуры (+).
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - иррадиальный тип фации с низким уровнем структуропостроения. Наблюдается большое количество языковых структур (+++).
Заключение: результаты морфологического анализа свидетельствуют о снижении компенсаторно-адаптационных возможностей организма. После воздействия электромагнитного поля количество структурных маркеров воспалительной реакции значительно увеличилось.
Назначена комбинированная терапия, состоящая из трех препаратов (рифампицин, лампрен, дапсон) по схеме ВОЗ, и патогенетическое лечение.
Через 4 месяца лечения состояние больной удовлетворительное. Лепрозный процесс на кожном покрове медленно регрессирует. Проявления специфической полиневропатии сохраняются.
Результаты бактериоскопического исследования скарификатов кожи и соскобов со слизистой носа:
Микобактерии лепры не обнаружены (-).
Результаты иммуноферментного анализа:
Уровень антител к микобактериям лепры составил 0,74 опт. ед. (при норме <0,2).
Результаты морфологического анализа сыворотки крови:
Контрольный образец нативной сыворотки крови (метод клиновидной дегидратации) - частично радиальный тип фации. Языковые структуры отсутствуют.
Опытный образец (после воздействия электромагнитного поля) - иррадиальный тип фации с высоким уровнем структуропостроения. Наблюдается большое количество языковых структур (+++) и единичные токсические бляшки (+).
Заключение: Высокое напряжение систем адаптации. После воздействия электромагнитного поля количество структурных маркеров воспалительной реакции нарастает, появляются признаки интоксикации.
Спустя несколько дней течение лепрозного процесса у больной К. осложнилось развитием реактивного состояния.
Таким образом, результаты сравнительного анализа морфологической картины контрольного и опытного образцов сыворотки крови свидетельствуют о неэффективности проводимого лечения, требующего его коррекции (назначение дополнительных противовоспалительных мероприятий и десенсибилизирующей терапии).
Полученные результаты исследований подтвердили высокую информативность разработанного способа контроля эффективности лечения хронических микобактериозов. Данный способ обладает высокой чувствительностью при скрытых формах патологического взаимодействия элементов исследуемой жидкости, возникающих в процессе лечения.
Разработанный способ позволяет выделить основные составляющие повреждающего действия, учитывать особенности течения патологического процесса у каждого конкретного больного, а также определить тяжесть осложнений, связанных с длительным приемом лекарственных препаратов. Способ не требует специальных окрасок и дает возможность оперативно в короткие сроки на малых объемах сыворотки крови оценить адекватность терапевтических мероприятий, способствуя тем самым повышению эффективности лечения больных хроническими микобактериозами.
Разработанный способ контроля эффективности лечения хронических микобактериозов может быть использован в противотуберкулезных, пульмонологических, противолепрозных и дерматовенерологических учреждениях.