ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА К LIV-1 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА

1. Гуманизированное антитело, содержащее зрелый вариабельный участок тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную SEQ ID NO: 53, при условии, что положение Н27 занято L, положение Н29 занято I, Н30 - Е и Н94 - V, и зрелый вариабельный участок легкой цепи, по меньшей мере на 90% идентичный SEQ ID NO: 60, при условии, что положение L36 занято Y и положение L46 - Р.
2. Гуманизированное антитело по п. 1, содержащее три гипервариабельных участка CDR из SEQ ID NO: 53 и три CDR из SEQ ID NO: 60.
3. Гуманизированное антитело по п. 1 или 2 при дополнительном условии, что положение Н76 занято N.
4. Гуманизированное антитело по п. 1, содержащее зрелый вариабельный участок тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную SEQ ID NO: 53, и зрелый вариабельный участок легкой цепи, по меньшей мере на 95% идентичный SEQ ID NO: 60.
5. Гуманизированное антитело по п. 1, где зрелый вариабельный участок тяжелой цепи слит с константным участком тяжелой цепи, и зрелый вариабельный участок легкой цепи слит с константным участком легкой цепи.
6. Гуманизированное антитело по п. 1, где константный участок тяжелой цепи представляет собой мутантную форму природного константного участка человека, который имеет пониженное связывание с рецептором Fc-гамма по сравнению с природным константным участком человека.
7. Гуманизированное антитело по п. 1, где константный участок тяжелой цепи относится к изотипу IgG1.
8. Гуманизированное антитело по любому из пп. 1 или 7, где константный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 44, и константный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 42.
9. Гуманизированное антитело по п. 1, где константный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 46 (S239C), и константный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 42.
10. Гуманизированное антитело по п. 1 при условии, что любые отличия в CDR зрелого вариабельного участка тяжелой цепи и зрелого вариабельного участка легкой цепи от SEQ ID NO 52 и 60, соответственно, находятся в положениях Н60-Н65.
11. Гуманизированное антитело по п. 1, где зрелый вариабельный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 52 или 53, и зрелый вариабельный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 59 или 60.
12. Гуманизированное антитело по п. 1, где зрелый вариабельный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 53, и зрелый вариабельный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 60.
13. Гуманизированное антитело по п. 1, где антитело конъюгировано с цитотоксическим или цитостатическим агентом.
9
-1
14. Гуманизированное антитело по п. 1, имеющее константу ассоциации в отношении LIV-1 человека или яванского макака от 0,5 до 2×10 М.
15. Гуманизированное антитело, содержащее зрелый вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий три CDR согласно Kabat из SEQ ID NO: 52, где положение Н27 занято L, положение Н29 занято I, Н30 - Е, Н76 - N и Н94 - V, и зрелый вариабельный участок легкой цепи, содержащий три CDR согласно Kabat из SEQ ID NO: 60, при условии, что положение L36 занято Y, и положение L46 - Р.
16. Нуклеиновая кислота, кодирующая зрелый вариабельный участок тяжелой цепи и/или зрелый вариабельный участок легкой цепи, как определено по любому из пп. 1-15.
17. Способ лечения пациента, имеющего рак или подверженного риску рака, включающий введение пациенту эффективного режима гуманизированного антитела по любому из пп. 1-15.
18. Способ по п. 17, где рак является раком молочной железы, раком предстательной железы, раком шейки матки или меланомой.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая гуманизированное антитело по любому из пп. 1-5.
20. Гуманизированное антитело, содержащее зрелый вариабельный участок тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную НВ (SEQ ID NO: 10), и зрелый вариабельный участок легкой цепи, по меньшей мере на 90% идентичный LB (SEQ ID NO: 5).
21. Гуманизированное антитело по п. 20, содержащее зрелый вариабельный участок тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную НВ, и зрелый вариабельный участок, по меньшей мере на 95% идентичный LB.
22. Гуманизированное антитело по п. 20 или 21, при условии, что положения Н29, Н30 и Н76 заняты I, Е и N, и L36 занято Y.
23. Гуманизированное антитело по п. 20, при условии, что любое различие в каркасах вариабельных участков зрелого вариабельного участка тяжелой цепи и SEQ ID NO: 10 выбрано из группы, состоящей из Н27, занятого F, H28, занятого N, H48, занятого I, H66, занятого К, Н67, занятого А, Н71, занятого А, Н76, занятого N, H93, занятого N, H94, занятого V, L37, занятого L, L39, занятого К, L45, занятого К, и L46, занятого L.
24. Гуманизированное антитело по п. 20, где три CDR зрелого вариабельного участка тяжелой цепи представляют собой CDR из SEQ ID NO. 10, и три CDR зрелого вариабельного участка легкой цепи представляют собой CDR из SEQ ID NO: 15.
25. Гуманизированное антитело по п. 20, где зрелый вариабельный участок тяжелой цепи слит с константным участком тяжелой цепи, и зрелый константный участок легкой цепи слит с константным участком легкой цепи.
26. Гуманизированное антитело по п. 20, где константный участок тяжелой цепи представляет собой мутантную форму природного константного участка человека, который имеет пониженное связывание с рецептором Fc-гамма по сравнению с природным константным участком человека.
27. Гуманизированное антитело по п. 26, где константный участок тяжелой цепи относится к изотипу IgG1.
28. Гуманизированное антитело по п. 25 или 27, где константный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 6, и константный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 4.
29. Гуманизированное антитело по п. 26, где константный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 8 (S239C), и константный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 4.
30. Гуманизированное антитело по п. 20, при условии, что любые отличия в CDR зрелого вариабельного участка тяжелой цепи и зрелого вариабельного участка легкой от SEQ ID NO 10 и 15, соответственно, находятся в положениях Н60-Н65.
31. Гуманизированное антитело по п. 20, где зрелый вариабельный участок тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 10, и зрелый вариабельный участок легкой цепи имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 15.
32. Гуманизированное антитело по п. 20, где антитело конъюгировано с цитотоксическим или цитостатическим агентом.
33. Гуманизированное антитело, содержащее зрелый вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий 3 CDR из SEQ ID NO: 10, и где положения Н29, Н30 и Н76 заняты I, E и N соответственно, и зрелый вариабельный участок легкой цепи, содержащий три CDR из SEQ ID NO: 15, и где положение L36 занято Y.
34. Гуманизированное антитело по п. 20, имеющее большую аффинность к LIV-1, чем антитело BR2-14a.
9
-1
35. Гуманизированное антитело по п. 20, имеющее константу ассоциации в отношении LIV-1 человека или яванского макака от 0,5 до 2×10 М.
36. Нуклеиновая кислота, кодирующая зрелый вариабельный участок тяжелой цепи и/или зрелый вариабельный участок легкой цепи, как определено по любому из пп. 20-35.
37. Способ лечения пациента, имеющего рак или подверженного риску рака, включающий введение пациенту эффективного режима гуманизированного антитела по любому из пп. 20-35.
38. Способ по п. 37, где рак представляет собой рак молочной железы, рак предстательной железы, рак шейки матки или меланому.
39. Фармацевтическая композиция, содержащая гуманизированное антитело по любому из пп. 1-15, 20-35.
40. Способ лечения пациента, имеющего или подверженного риску тройного негативного рака молочной железы, включающий введение пациенту эффективного режима антитела, которое специфично связывается с LIV-1.
41. Способ по п. 40, где антитело конъюгировано с цитотоксическим или цитостатическим агентом.
42. Выделенный полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 85, при условии, что остатки 1-28 могут быть опущены, или нуклеиновая кислота, кодирующая то же самое.