Новые соединения пиридопиримидинона для модулирования каталитической активности гистонлизиндеметилаз (KDMS)
NOVEL PYRIDOPYRIMIDINONE COMPOUNDS FOR MODULATION OF CATALYTIC ACTIVITY OF HISTONE LYSINE DEMETHYLASES (KDMS)

Область техники
В настоящем изобретении предложены соединения, которые способны модулировать активность гистонлизиндеметилазы (KDM), их фармацевтические композиции, способы получения указанных соединений и применение таких соединений в качестве лекарственного средства.
Предшествующий уровень техники
Нуклеосома представляет собой основную единицу, из которой организована чрезвычайно сложная структура хроматина внутри клеток эукариот. В нуклеосоме геномная ДНК обернута вокруг гистонового октамера, который состоит из двух копий четырех различных ядерных гистоновых субъединиц: Н2А, Н2В, Н3 и Н4. Мутации в геномной последовательности ДНК могут вызывать аномальные экспрессии важнейших белков, которые требуются для поддержания гомеостаза жизни, приводя к серьезным заболеваниям, таким как врожденные дефекты, диабет, неврологические расстройства и рак. Однако, в течение нескольких последних десятилетий было показано, что даже без изменений последовательности выработка и биологические функции белков также могут быть нарушены тем, что согласно новой терминологии называется "эпигенетическими" изменениями в геномной ДНК и гистонах. Метилирование ДНК и пост-трансляционные модификации гистонов являются двумя основными эпигенетическими событиями, которые наиболее часто встречаются в большинстве живых организмов. У людей примерно 70% цитозинов в динуклеотидах CpG обычно метилируются, и N-терминальные хвосты гистонов подвергаются нескольким ковалентным модификациям, включая метилирование, ацетилирование, фосфорилирование, убиквитинилирование и сумоилирование (Shilatifard, A. Annu. Rev. Biochem. (2006) 75, 243-269). В некоторых конкретных лизиновых остатках гистонов одна, две или три метильные группы могут быть добавлены или удалены двумя различными классами ферментов: гистонметилтрансферазами (HMTs) и гистондеметилазами (KDMs), соответственно. Эти состояния метилирования играют важнейшую роль в регуляции экспрессии генов зависимым от контекста образом. Например, ди/три-метилирование лизина 4, 36 или 79 гистона Н3 обычно соответствует активной метке для экспрессии генов. Напротив, ди/три-метилирование лизина 9, 27 на Н3 обычно связано с закрытой конформацией хроматина (гетерохроматин), что приводит к подавлению экспрессии генов (Martin, С. & Zhang, Y. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. (2005) 6, 838-849).
У млекопитающих было обнаружено более чем 30 KDMs, и KDMs могут быть подразделены на два семейства по лежащему в основе механизму, посредством которого они удаляют метильные группы из хвостов гистона: LSD1 (лизинспецифичная деметилаза 1) и JmjC-содержащие KDMs. LSD1, первая гистондеметилаза, обнаруженная в 2004 году, удаляет моно- и диметильные метки на Н3K4 и Н3K9 с использованием флавина в качестве кофактора. Так как протонированный амин в субстрате требуется для пути его деметилирования, LSD1 не может действовать на триметилированные лизины. Таким образом, было предсказано существование другого класса KDMs, которые могут удалять триметильную метку, и они были определены позже в качестве каталитических белков, содержащих домен JmjC. По сравнению с LSD1 эти белки включают намного более разнообразные подсемейства, включая KDM2, KDM3, KDM4, KDM5, KDM6 и PHF2/8, все из которых используют Fe(II) и α-кетоглутарат (αKG) в качестве кофакторов (Spannhoff, А. et al. ChemMedChem (2009) 4, 1568-1582).
Многие исследования показали, что KDMs вовлечены в этиологию рака, одного из наиболее губительных заболеваний человека (Cloos, P. A. et al. Genes Dev. (2008) 22, 1115-1140). LSD1 сверхэкспрессируется в различных типах раковых клеток, включая рак простаты, легкого и молочной железы, при котором LSD1 может усиливать онкогенные свойства клеток путем модулирования экспрессии способствующих выживанию генов и генов-супрессоров опухоли, таких как р53 (Scoumanne, А. & Chen X.J. Biol. Chem. (2007) 282, 15471-15475).
Опосредованное короткой шпилечной РНК (shRNA) истощение KDM2B (также известной как FBXL10) ослабляло рост клеточной линии острого миелоидного лейкоза (AML), в которой KDM2B сверхэкспрессируется (Не, J. et al. Blood (2011) 117, 3869-3880). Изменения в экспрессии целевых генов Polycomb могут отвечать за этот противоопухолевый эффект на основании недавнего обнаружения того, что KDM2B регулирует экспрессию (Tzatsos, A. et al. J. Clin. Invest. (2013) 123, 727-739).
Исходно идентифицированный как предположительный онкоген GASC1 (ген, амплифицированный при плоскоклеточной карциноме 1), KDM4C, который удаляет ди- и триметильные метки из Н3K9, а также Н3K36, геномно амплифицируется при карциноме молочной железы и карциноме простаты и требуется для роста этих злокачественных клеток (Liu, G. et al. Oncogene (2009) 28, 4491-4500; Wissmann, M. et al. NatureCell Biol. (2007) 9, 347-353).
Семейство KDM5/JARID1 (Jumonji AT-rich interactive domain 1, AT-обогащенный взаимодействующий Джумонджи 1) у человека включает четыре члена: KDM5A/RBP2, KDM5B/PLU-1, KDM5C/SMCX и KDM5D/SMCY, которые имеют общие высококонсервативные структурные мотивы, включающие домен JmjN, каталитический домен JmjC, ДНК-связывающий домен ARID, цинковый палец и от двух до трех пальцев PHD (растительный гомеодомен). Как было показано, члены этого подсемейства вовлечены в патогенез рака.
Аномально высокая экспрессия KDM5A часто обнаруживается при раковых заболеваниях желудка и шейки матки (Zeng, J. et al. Gastroenterology (2010), 138, 981-992; Hidalgo, A. et al. BMC Cancer (2005) 5, 77), и регуляция KDM5B также повышена при различных злокачественных заболеваниях, таких как раковые заболевания молочной железы, простаты, легкого и меланома (Lu, P.J. et al. J. Biol. Chem. (1999) 274, 15633-15645; Xiang, Y. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2007) 104, 19226-19231; Hayami, S. et al. Mol. Cancer (2010) 9, 59; zur Hausen, H. Virilogy (2009) 384, 260-265). Приобретенную лекарственную устойчивость при раке часто связывают с присутствием раковых стволовых клеток, которые способны реформировать клетки опухоли. Недавние исследования показали, что в лекарственно устойчивых клетках рака легкого и клетках меланомы нарушение ферментативной функции KDM5A или KDM5B путем РНК-интерференции снижало свойства, подобные раковым стволовым клеткам, и увеличивало лекарственную чувствительность, что таким образом оказывало на эти клетки противоопухолевый эффект (Sharma, S. et al. Cell (2010) 141, 69-80; Roesch, A. et al. Cancer Cell (2013) 23, 811-825).
KDM5C по-видимому связан с задержкой умственного развития и некоторыми формами рака. Анализ экспрессии генов для светлоклеточной почечноклеточной карциномы (ccRCC) показал, что мутация с усечением KDM5C была обнаружена в 3% опухолей ccRCC, и  часть мутаций возникала одновременно с мутациями VHL (онкосупрессора фон Гиппеля-Линдау) (Dalgliesh, G.L. et al. Nature (2010) 463, 360-363).
Хотя прямую связь между KDM5D и раком еще предстоит установить, в одном из исследований показано, что 52% протестированных случаев рака простаты содержат делецию гена KDM5D, что предполагает связь KDM5D с заболеванием (Perinchery, G. et al. J. Urol. (2000) 163, 1339-1342).
Сходным образом с KDM5A и KDM5B, KDM7B (также известная как PHF8), ферментативно активная в отношении H3K9me1/2 и H4K20me1, как обнаружено, управляет ответом на противораковое лекарственное средство (ретиноевую кислоту) при остром промиелоцитарном лейкозе (Arteaga, М.F. et al. Cancer Cell (2013) 23, 376-389).
В целом, дерегуляция KDM вовлечена в инициирование, поддержание, прогрессирование и другой патогенез рака, подтверждая что KDM представляет собой чрезвычайно многообещающий терапевтический агент для борьбы с этим заболеванием. Настоящее изобретение направлено на соединения, ингибирующие KDM, с выраженной эффективностью, что таким образом имеет значительный потенциал для фармацевтического вмешательства при раке и любых других заболеваниях, связанных с дисрегуляцией KDM.
Несколько ингибирующих киназы соединений, содержащих аминопиридиновый остов, были ранее описаны в публикации US 2008/7361662 В2, но они имеют на данном остове группировки, отличные от настоящего изобретения. До настоящего времени ни одно из соединений этого класса не было одобрено для противораковой терапии у человека. Несколько соединений, ингибирующих KDM, были ранее описаны в публикациях WO 2014/055634, US 2014/0371214, WO 2014/053491, WO 2014/139326, WO 2014/151106, WO 2014/164708 и WO 2015/035062, но они химически и структурно отличаются от соединений по настоящему изобретению.
Раскрытие
Техническая задача
Задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить соединение, способное модулировать активность гистонлизиндеметилазы (KDM).
Другая задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить фармацевтическую композицию, содержащую указанное соединение.
Еще одна задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить применение таких соединений в качестве лекарственного средства.
Техническое решение
Соответственно, первый аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I):
где
1
2
1
2
3
X выбран из группы, состоящей из водорода, циклоалкила, гетероциклила, арила, гетероарила, -CH(R)NH-R и -CH(R)О-R, где циклоалкил, гетероциклил, арил и гетероарил возможно могут быть замещены одним или более R;
2
Y отсутствует или представляет собой -CHNH-A-Z-;
1-8
2-8
2-8
3-10
3
4
А выбран из группы, состоящей из простой связи, Салкилена, Салкенилена, Салкинилена, Сциклоалкилена, гетероциклилена, -С(=O)- и -CH(R)C(=O)-, где алкилен, алкенилен, алкинилен, циклоалкилен и гетероциклилен возможно могут быть замещены одним или более R;
4
5
3
1-8
2-8
2-8
3-10
Z выбран из группы, состоящей из водорода, -N(R)(R), Салкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, гетероциклила, арила, арилалкила и гетероарила, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклил, арил, арилалкил и гетероарил возможно могут быть замещены одним или более R;
1
1-8
1-4
1-4
1-4
2-8
2-8
3-10
1-8
R выбран из группы, состоящей из водорода, Салкила, Cаминоалкила, Сфторалкила, Сгидроксиалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, арилалкила, гетероциклила и гетероарилалкила, где гетероциклил возможно может быть замещен одним или более заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и Салкила;
2
4
4
5
4
4
4
4
5
4
4
4
4
4
5
1-8
2-8
2-8
3-10
3
2
3
3
2
1-8
1-8
1-8
1-8
1-8
R выбран из группы, состоящей из арила, арилалкила и гетероарила, где арил, арилалкил и гетероарил возможно могут быть замещены одним или более заместителями, выбранными из водорода, галогена, Салкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, -CF, -CN, -NO, -C(=O)-O(R), -C(=O)-N(R)(R), -O(R), -OCF, -S(R), -SO, -SO(R), -N(R)(R), СалкоксиСалкила, -Caлкил-C(=O)R, -C(=O)R, -Салкил-R, -NH-C(=O)R и -Салкил-NRR;
3
4
4
5
4
4
4
4
5
4
1-8
1-4
1-4
2-8
2-8
3-10
2
R выбран из группы, состоящей из водорода, Салкила, Саминоалкила, Сгидроксиалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, оксо, C(=O)-O(R), -C(=O)-N(R)(R), -O(R), -S(R), -SO(R) и -N(R)(R); или, альтернативно, два соседних заместителя образуют арильное или гетероарильное кольцо, которое замещено одним или более R;
4
5
1
4
5
1
1-6
1-4
1-4
1-4
2-6
2-6
3-10
R или R независимо выбран из группы, состоящей из водорода, Cалкила, Саминоалкила, Сфторалкила, Сгидроксиалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, циклоалкилалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, гетероарилалкила и арилалкила, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклил, гетероарил, арил, циклоалкилалкил, гетероциклилалкил, гетероарилалкил и арилалкил возможно могут быть замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из R; или, альтернативно, соседние R и R образуют N-содержащий гетероциклил, который замещен одним или более R. Термин 'галоген', как использовано здесь, относится к фтору, хлору, брому или йоду.
1-8
Термин 'алкил', как использовано здесь, относится к прямоцепочечному или разветвленному углеводородному остатку, если не указано иное. Примеры Салкила включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил, гексил, гептил, октил и тому подобное.
1-8
Термин 'алкокси', как использовано здесь, включает алкил-кислородный радикал, имеющий алкил, как определено выше, если не указано иное. Примеры Салкокси включают метокси, этокси, пропокси, бутокси, пентокси и тому подобное.
Термин 'гетероцикл' или 'гетероциклический', как использовано здесь, относится к 4-13-членному неароматическому соединению, включающему 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, если не указано иное.
Термин 'гетероарил', как использовано здесь, относится к 4-13-членному гетероароматическому соединению, включающему 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, если не указано иное.
6-12
Термин 'арил', как использовано здесь, относится к Сароматическому соединению, если не указано иное.
3-8
1
2
1
2
3
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения X выбран из водорода, Сциклоалкила, 4-10-членного гетероциклила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, фенила, 4-10-членного гетероарила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, -CH(R)NH-R и CH(R)O-R, где гетероциклил возможно может быть замещен R.
1-8
2-8
2-8
3-10
3
4
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения А выбран из группы, состоящей из простой связи, Салкилена, Салкенилена, Салкинилена, Сциклоалкилена, гетероциклилена, -С(=O)- и -CH(R)C(=O)-, где алкилен, алкенилен, алкинилен, циклоалкилен и гетероциклилен возможно могут быть замещены одним или более R.
4
5
3
1-6
2-6
2-6
3-8
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения Z выбран из группы, состоящей из водорода, -N(R)(R), Cалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, арила, арилалкила, фенила, 4-10-членного гетероциклила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, и 4-10-членного гетероарила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклил, гетероарил и арил возможно могут быть независимо замещены одним или более R.
1
1-6
1-3
1-3
1-3
2-6
2-6
3-8
1-6
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения R выбран из группы, состоящей из водорода, Салкила, Cаминоалкила, Cфторалкила, Cгидроксиалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, бензила, 4-10-членного гетероарилалкила и 4-10-членного гетероциклила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, где гетероарилалкил и гетероциклил возможно могут быть замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена и Cалкила.
2
4
4
5
4
4
4
4
5
4
4
4
4
4
5
1-6
2-6
2-6
3-8
3
2
3
3
2
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения R выбран из группы, состоящей из фенила, бензила или 4-10-членного гетероарила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О или S, где фенил, бензил и гетероарил возможно могут быть замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из водорода, галогена, Cалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, -CF, -CN, -NO, -C(=O)-O(R), -C(=O)-N(R)(R), -O(R), -OCF, -S(R), -SO, -SO(R), -N(R)(R), СалкоксиСалкила, -Салкил-С(=O)R, -C(=O)R, -Салкил-R, -NH-C(=O)R и -Салкил-NRR.
3
4
4
5
4
4
4
4
5
4
1-6
1-4
1-4
2-6
2-6
3-8
2
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения R выбран из группы, состоящей из водорода, Салкила, Саминоалкила, Сгидроксиалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, оксо, С(=O)-O(R), -C(=O)-N(R)(R), -O(R), -S(R), -SO(R) и -N(R)(R); или, альтернативно, два соседних заместителя образуют фенил или 4-10-членное гетероарильное кольцо, которое замещено одним или более R.
4
5
1
4
5
1
1-6
1-4
1-4
1-4
2-6
2-6
3-8
3-8
1-4
1-4
1-4
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения R или R независимо выбран из группы, состоящей из водорода, Салкила, Саминоалкила, Сфторалкила, Сгидроксиалкила, Салкенила, Салкинила, Сциклоалкила, СциклоалкилСалкила, 4-10-членного гетероциклила, имеющего 1-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, 4-10-членного гетероциклилСалкила, имеющего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, 4-10-членного гетероарилалкилСалкила, имеющего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, и бензила, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклил, гетероарил, арил, циклоалкилалкил, гетероциклилалкил, гетероарилалкил и арилалкил возможно могут быть замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из R; или, альтернативно, соседние R и R образуют 4-10-членный N-содержащий гетероциклил, который замещен одним или более R.
1
2
1
2
В более предпочтительном воплощении настоящего изобретения X представляет собой водород, циклопентил, тетрагидрофуран, бензофуран, дигидробензофуран, хроман, дигидроинден, тетрагидронафталин, -CH(R)NH-R или CH(R)O-R, где бензофуран возможно может быть замещен пиперидинэтиламинокарбонилом или метоксикарбонилом.
2
3
В более предпочтительном воплощении настоящего изобретения А представляет собой простую связь, метилен, этилен, пропилен, бутилен, -С(=O)- или -СНС(=O)-, где метилен, этилен, пропилен и бутилен возможно могут быть замещены СН.
3
3
2
В более предпочтительном воплощении настоящего изобретения Z представляет собой водород, амино, бензил, пиридин, циклогексил, диэтиламино, азетидин, пирролидин, фуран, тиофен, оксазол, изоксазол, пиразол, имидазол, пиперидин, пиперазин, пиримидин, пиразин, морфолин, тетрагидрофуран, тетрагидропиран, дигидропирролопиридин или пиперидинилметил, который замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из оксо, Cl, СН, этила, изопропила, бутила, гидроксиэтила, метоксиэтила, циклопропила, бензила, метилпиперидина, -C(=O)-N(CH), диэтиламино, диметиламино, метиламино, метилпирролидинилметила, пиперидина, бензилпирролидина и пирролидинилтетрагидрофурана или диметиламиноэтила.
1
В более предпочтительном воплощении настоящего изобретения R представляет собой водород или метил.
2
3
2
2
3
3
В более предпочтительном воплощении настоящего изобретения R представляет собой фенил, который возможно может быть замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из фтора, хлора, циано, нитро, метила, этила, бутила, трифторметила, метокси, циклопентила, циклогексила, метоксиэтила, -C(=O)-CH, -(СН)-С(=O)-СН, -NH-С(=O)-СН, пиридина, фенокси, бензоила, фенила, пропоксипиперидинилметила, метоксикарбонила, бензила, возможно замещенного метилом, пропоксипиперидинметила, аминометила, возможно замещенного тетрагидропиранилом, бензилом, тетрагидропиранметилом или морфолиноэтилом, аминокарбонила, возможно замещенного пиперидиноэтилом, гидроксиэтилпиперидинметилом, метоксиэтилпиперидинметилом, метилпиперидинметилом, бензилпиперидинметилом, морфолиноэтилом, бензилом, циклогексилметилом, пиридинометилом, диметиламинопропилом, циклопентилом, ацетилпиперидинметилом, пиперидинметилом, аминоциклогексилом, тетрагидропиранометилом или пиперидинэтилом, пирролидинокарбонила, где пиперидинкарбонил возможно замещен бензилом или пропокси, пиперазинокарбонилом, морфолинокарбонилом, морфолиноэтиламинокарбонилом, фенокси, бензилокси, возможно замещенным метокси, бензоилом или фенилом; пиперидина, возможно замещенного метилом или бензилом; пиридина, возможно замещенного фтором, бромом или метилом; пиразина, возможно замещенного бромом; индена; бензила, возможно замещенного хлором.
В еще более предпочтительном воплощении настоящего изобретения соединение, представленное описанной выше формулой (I), может быть выбрано из группы, состоящей из соединений, показанных в Таблице 1 ниже.
В то же время, соединение, представленное формулой (I), может иметь асимметрический центр углерода, и при наличии асимметрического центра углерода может существовать в виде оптического изомера, диастереомера или рацемата, и все формы изомеров, включая эти, также могут попадать в объем соединения согласно одному из воплощений настоящего изобретения.
Кроме того, фармацевтически приемлемая соль соединения, представленная формулой (I), или фармацевтически приемлемая соль изомеров соединения, представленного формулой (I), также может находиться в объеме соединения вышеописанного одного из воплощений. Например, неограничивающие примеры фармацевтически приемлемой соли соединения, представленного формулой (I), или его изомера, могут включать соль с неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота или серная кислота; соль с органической карбоновой кислотой, такой как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, лимонная кислота, малеиновая кислота, щавелевая кислота, янтарная кислота, бензойная кислота, винная кислота, фумаровая кислота, миндальная кислота, аскорбиновая кислота или яблочная кислота, или соль с сульфоновой кислотой, такой как метансульфоновая кислота или пара-толуолсульфоновая кислота; соль со щелочным металлом, таким как натрий, калий или литий; соль с различными кислотами, про которые известно, что они способны образовывать фармацевтически приемлемые соли, или тому подобное.
Соединение в объеме соединения вышеуказанной формулы (I) может оказывать превосходные эффекты в отношении модулирования каталитической активности гистонлизиндеметилазы (KDMs), и таким образом обладает значительным потенциалом для фармацевтического вмешательства при различных раковых заболеваниях и любых других заболеваниях, связанных с дисрегуляцией KDM.
Кроме того, в другом воплощении настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, включающая указанное выше соединение, его изомер или их фармацевтически приемлемую соль в качестве эффективного ингредиента. Более предпочтительно, фармацевтическая композиция может быть предназначена для лечения или предупреждения различных раковых заболеваний и заболеваний, связанных с дисрегуляцией KDM. В определенных воплощениях заболевание представляет собой гиперпролиферативное заболевание, рак, инсульт, диабет, гепатомегалию, сердечно-сосудистое заболевание, рассеянный склероз, болезнь Альцгеймера, муковисцидоз, вирусное заболевание, аутоиммунные заболевания, атеросклероз, рестеноз, псориаз, ревматоидный артрит, воспалительное заболевание кишечника, астму, аллергические расстройства, воспаление, неврологические расстройства, заболевание, связанное с гормонами, состояния, связанные с трансплантацией органов, иммунодефицитные расстройства, деструктивные расстройства костей, инфекционное заболевание, патологические иммунные состояния, включающие активацию Т-клеток, расстройства ЦНС (центральной нервной системы) или миелопролиферативное расстройство. Более предпочтительно, рак может быть выбран из группы, состоящей из эмбриональной карциномы, тератомы, семиномы, эмбрионально-клеточных опухолей, рака простаты, рака молочной железы, рака желудка, рака желудочно-кишечного тракта, нейробластомы, хориокарциномы, опухолей желточного мешка, рака яичников, эндометриального рака, рака шейки матки, ретинобластомы, рака почки, рака печени, рака желудка, рака мозга, медуллобластомы, медуллоэпителиомы, глиомы, глиобластомы, множественной миеломы, рака легкого, рака бронхов, мезотелиомы, рака кожи, рака толстой и прямой кишки, рака мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака губы и полости рта, рака гортани и глотки, меланомы, рака гипофиза, рака полового члена, рака околощитовидной железы, рака щитовидной железы, феохромоцитомы и параганглиомы, тимомы и карциномы вилочковой железы, лейкоза, лимфомы, плазмаклеточных опухолей, миелопролиферативных расстройств, опухоли островков поджелудочной железы, рака тонкого кишечника, переходноклеточного рака, плевролегочной бластомы, гестационного трофобластического рака, рака пищевода, рака центральной нервной системы, рака головы и шеи, эндокринного рака, сердечно-сосудистого рака, рабдомиосаркомы, карциномы мягких тканей, карциномы костной, хрящевой, жировой, сосудистой, нервной и кроветворной тканей и раковых заболеваний, связанных со СПИД.
Фармацевтическая композиция, содержащая соединение, представленное формулой (I), его изомер или их фармацевтически применяемую соль в качестве эффективного компонента, может быть использована в форме общего медицинского препарата. Медицинский препарат может быть введен в виде различных препаратов, таких как пероральный и парентеральный препарат, и препарат может быть определен различным образом в зависимости от применения.
Если композиция изготовлена в виде различных пероральных и парентеральных препаратов, она может быть получена с использованием обычно используемого эксципиента, такого как наполнитель, разбавитель, объемообразующий агент, связующее вещество, смачивающий агент, разрыхлитель, поверхностно-активное вещество.
Твердый препарат для перорального введения может включать таблетки, пилюли, порошки, гранулы, капсулы и тому подобное, и твердый препарат может быть получен путем смешивания соединения, представленного формулой (I), его изомера или их фармацевтически приемлемой соли с по меньшей мере одним эксципиентом, например крахмалом, карбонатом кальция, сахарозой или лактозой, желатином и тому подобным. Также, помимо простого эксципиента может быть использован смазывающий агент, такой как стеарат магния и тальк.
Также, жидкий препарат для перорального введения может представлять собой суспензии, пероральные жидкости, эмульсии, сиропы и тому подобное, и включать различные эксципиенты, например увлажняющий агент, подсластитель, ароматический агент, консервант и тому подобное, в дополнение к воде и жидкому парафину, которые представляют собой простой часто используемый разбавитель.
Препарат для парентерального введения включает стерильный водный раствор, неводный растворитель, суспензию, эмульсию, лиофильно высушенный препарат, суппозиторий и тому подобное. В качестве неводного растворителя и суспендирующего растворителя может быть использован пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительное масло, такое как оливковое масло, инъецируемый сложный эфир, такой как этилолеат и тому подобное. В качестве основы для суппозитория может быть использован витепсол, макрогол, твин 61, масло какао, лауриновое масло, глицерожелатин и тому подобное.
Кроме того, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению, содержащая соединение, представленное формулой (I), его изомер или их фармацевтически приемлемую соль в качестве эффективного компонента, может иметь эффективное количество в диапазоне дозировок от примерно 0,1 до примерно 1000 мг. Дозировка или доза может быть введена в различных дозировках и способах, например, в разделенных дозах от одного до нескольких раз в сутки в зависимости от массы, возраста, пола, состояния здоровья, диеты пациента, времени введения, способа введения, скорости экскреции и тяжести заболевания.
В предпочтительном воплощении соединение формулы (I) может быть получено различными способами, проиллюстрированными на Схемах 1-16 (Способы А-Р). Схемы 1-16 показаны в Примерах.
Полезные эффекты
Соединение указанной выше формулы (I) по настоящему изобретению может оказывать превосходные эффекты в отношении модулирования каталитической активности гистонлизиндеметилазы (KDMs), и таким образом обладает значительным потенциалом для фармацевтического вмешательства при различных раковых заболеваниях или любых других заболеваниях, связанных с дисрегуляцией KDM.
Описание графических материалов
На Фиг. 1 показана микрофотография, демонстрирующая результаты исследования настоящих соединений на заживление ран. На Фиг. 1 ссылка относится к 8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-ону.
На Фиг. 2 показаны результаты исследования клоногенности настоящих соединений. На Фиг. 2 Никотиновая кислота означает 2-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)изоникотиновую кислоту.
Способ осуществления изобретения
ПРИМЕРЫ
Далее настоящее изобретение объяснено более подробно со ссылкой на следующие примеры. Однако, эти примеры не должны быть интерпретированы как ограничивающие объем настоящего раскрытия каким-либо образом.
1. Химический синтез
Схема 1 (Способ А)
Общий синтез соединения А-3 проиллюстрирован на Схеме 1. 3-Аминоизоникотинамид приводят во взаимодействие с хлорацетилхлоридом с получением амидного промежуточного соединения 2. За этим следует реакция с фенольным реагентом, что приводит к пиридопиримидиноновому соединению А-3.
Пример 1
Стадия 1
3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамид
К раствору 3-аминоизоникотинамида в THF (тетрагидрофуран) добавляли хлорацетилхлорид при комнатной температуре. Смесь оставляли перемешиваться в течение 2 суток при комнатной температуре и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество кристаллизовали с EtOAc (этилацетат) и фильтровали с получением 3-(2-хлорацетамидо)-изоникотинамида.
+
MS (ESI+) m/z 214 (М+Н).
Стадия 2
2-((пара-толилокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он
3
2
3
4
К раствору 3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамида в CHCN добавляли CsCO и пара-крезол при комнатной температуре. Смесь нагревали при температуре флегмообразования в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Концентрированный остаток очищали посредством препаративной HPLC (высокоэффективной жидкостной хроматографии).
+
MS (ESI+) m/z 268 (М+Н).
Пример 2
2-((4-бутилфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3Н)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-бутилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 504 (М+Н).
Пример 3
2-((4-(трет-бутил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-трет-бутилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.81 (br s, 1Н), 9.02 (s, 1Н), 8.65 (d: J=5,09 Гц, 1H), 7.93 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.30 (d, J=8,61 Гц, 2H): 6.95 (d, J=8,61 Гц, 2H), 4.98 (s. 2Н), 1.21 (s, 9Н).
+
MS (ESI+) (масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением в режиме положительно заряженных ионов) (m/z 310 (М+Н).
Пример 4
2-((4-(втор-бутил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-изобутилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.80 (br s, 1Н), 9.02 (s, 1Н), 8.65 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.93 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=8,61 Гц, 2Н), 6.95 (d, J=8,61 Гц, 2Н), 4.98 (S, 2Н), 2.50 (m, 1Н), 1.46 (m, 2Н), 1.12 (d, J=7,04 Гц, 3Н), 0.72 (t, J=7,24 Гц, 3Н).
+
MS (ESI+) m/z 310 (М+Н).
Пример 5
2-((4-циклопентилфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-циклопентилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.85 (br s, 1Н), 9.01 (s, 1H), 8.63 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.92 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.14 (d, J=8,61 Гц, 2H), 6.93 (d, J=8,61 Гц, 2H), 4.97 (s, 2H), 2.68 (m, 1H), 1.93 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.58 (m, 2H), 1.43 (m, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 322 (M+H).
Пример 6
2-((4-циклогексилфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-циклогексилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.97 (s, 1Н), 8.61 (d, 1Н), 7.91 (d, 1Н), 7.16 (d, 1Н), 7.09 (m, 1Н), 6.98 (d, 1Н), 6.90 (m, 1Н), 5.01 (s, 2Н), 3.24 (m, 1Н), 1.73 (m, 5Н), 1.32 (m, 3H), 1.20 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 336 (М+Н).
Пример 7
2-((4-(2-метоксиэтил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(2-метоксиэтил)фенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.00 (s, 1Н), 8.62 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.15 (t, J=7,83, 1Н), 6.80 (m, 3H), 4.97 (s, 2Н), 3.31 (m, 2Н), 2.46 (m, 2Н), 2.24 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 312 (M+H).
Пример 8
2-((4-ацетилфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4'-гидроксиацетофенона, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.94 (s, 1Н), 8.56 (d, 1Н), 7.90 (m, 3H), 7.13 (d, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 2.48 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 296 (M+H).
Пример 9
2-((4-(3-оксобутил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(4-гидроксифенил)-2-бутанона, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 324 (М+Н).
Пример 10
N-(4-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)фенил)-ацетамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-ацетамидофенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 311 (М+Н).
Пример 11
2-(((2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)окси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 5-инданола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 294 (М+Н).
Пример 12
2-(((5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)окси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 5,6,7,8-тетрагидро-2-нафтола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 308 (М+Н).
Пример 13
2-((4-(морфолин-4-карбонил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(морфолин-4-карбонил)фенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 367 (M+H).
Пример 14
2-((3-(пиперидин-1-карбонил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-(4-морфолинилкарбонил)фенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 365 (М+Н).
Пример 15
2-((4-бензилфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-бензилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.81 (br, 1Н), 9.04 (s, 1Н), 8.67 (d, 1Н), 7.94 (s, 1Н), 7.24 (m, 2Н), 7.18 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.00 (s, 2Н), 3.87 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 344 (M+H).
Пример 16
2-((4-(1-фенилэтил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(1-фенилэтил)фенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 358 (М+Н).
Пример 17
2-((4-(2-фенилпропан-2-ил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-кумилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.15 (br s, 1Н), 9.01 (s, 1Н), 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.17 (m. 5Н), 6.92 (m, 3H), 6.91 (d, J=8,61 Гц, 1Н), 4.97 (s, 2Н), 1.57 (s, 3H), 1.54 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 372 (М+Н).
Пример 18
2-((4-феноксифенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-феноксифенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.83 (br s, 1Н), 9.02 (s, 1Н), 8.65 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.93 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.31 (t, J=8,02, 2Н), 7.03 (m, 5Н), 6.89 (m, 2Н), 5.01 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 346 (М+Н).
Пример 19
2-((4-(бензилокси)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-бензилоксифенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.79 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.93 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.34 (m, 5H), 6.96 (m, 4H), 5.00 (s, 2H), 4.94 (s, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 360 (M+H).
Пример 20
2-((3-(бензилокси)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-бензилоксифенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.39 (br s, 1Н), 9.00 (s, 1Н), 8.63 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.38 (m, 5Н), 7.17 (t, J=8,02 Гц, 1Н), 6.69 (s, 1Н), 6.61 (d, J=8,22 Гц, 2Н), 5.05 (s, 2Н), 4.99 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 360 (М+Н).
Пример 21
2-((4-бензоилфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-бензоилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.96 (s, 1Н), 8.55 (d, 1Н), 7.87 (d, 1Н), 7.71 (d, 2Н), 7.63 (d, 3H), 7.50 (t, 2Н), 7.16 (d, 2Н), 5.10 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 358 (М+Н).
Пример 22
2-(([1,1'-бифенил]-3-илокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-фенилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 330 (М+Н).
Пример 23
2-((4-фторфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-фторфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 1.41 (br s, 1Н), 9.01 (s, 1Н), 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.92 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.12 (m, 2Н), 7.06 (m, 2Н), 4.99 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 272 (M+H).
Пример 24
2-((3,4-дифторфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3,4-дифторфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 290 (М+Н).
Пример 25
2-((4-хлорфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-хлорфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.77 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.91 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.33 (d, J=9,0 Гц, 2H), 7.06 (d, J=9,0 Гц, 2H), 5.02 (s, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 288 (M+H).
Пример 26
2-((3-хлорфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-хлорфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 288 (М+Н).
Пример 27
2-((2-хлорфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-хлорфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 288 (М+Н).
Пример 28
2-((3,4-дихлорфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3,4-дихлорфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 323 (М+Н).
Пример 29
2-((3,5-дихлорфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3,5-дихлорфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.01 (s, 1Н), 8.66 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 8.08 (s 1Н), 7.94 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.19 (s, 2Н), 5.09 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 323 (М+Н).
Пример 30
4-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензонитрил
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-гидроксибензонитрила, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 279 (М+Н).
Пример 31
3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензонитрил
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-гидроксибензонитрила, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.00 (s, 1Н), 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.93 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.55 (s, 1Н), 7.49 (d, 1Н), 7.41 (m, 1Н), 5.10 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 279 (М+Н).
Пример 32
2-((4-нитрофенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-нитрофенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.99 (s, 1Н), 8.65 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 8.21 (d, J=9,39 Гц, 2Н), 7.93 (d, J=5,48 Гц, 1Н), 7.25 (d, 2Н), 5.19 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 299 (М+Н).
Пример 33
2-((4-метоксифенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-метоксилфенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 284 (М+Н).
Пример 34
2-((пиридин-4-илокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-пиридинола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 255 (М+Н).
Пример 35
2-((пиридин-3-илокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-пиридинола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.00 (s, 1Н), 8.65 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 8.39 (d, 1Н), 8.19 (d, 1Н), 7.93 (d, 1Н), 7.49 (m, 1Н), 7.35 (m, 1Н), 5.11 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 255 (М+Н).
Пример 36
2-(((6-фторпиридин-3-ил)окси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-фтор-5-гидроксипиридина, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 273 (М+Н).
Пример 37
2-(((6-бромпиридин-3-ил)окси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-бром-5-гидроксипиридина, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.84 (br s, 1Н), 8.99 (s, 1Н), 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1H), 8.22 (d, J=3,13 Гц, 1H), 7.93 (d, J=5,38 Гц, 1H), 7.57 (d, 1Н), 7.49 (d, 1Н), 5.12 (s, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 334 (M+H).
Пример 38
2-(((6-метилпиридин-3-ил)окси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-гидрокси-6-метилпиридина, как описано на Схеме 1 (Способ А).
+
MS (ESI+) m/z 269 (М+Н).
Пример 39
2-((3,4,5-триметоксифенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3,4,5-триметоксифенола, как описано на Схеме 1 (Способ А).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDCl) δ 9.19 (m, 2Н), 8.74 (m, 2Н), 8.47 (m, 1Н), 5.17 (s, 2Н), 3.96 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.86 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 344 (М+Н).
Схема 2 (Способ В)
Общий синтез соединения В-3 проиллюстрирован на Схеме 2. 3-(2-Хлорацетамидо)изоникотинамид приводят во взаимодействие с метил-3-гидроксибензоатом с получением метил-3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензоата. Метиловый сложный эфир гидролизуют NaOH. Последующее амидное сочетание 3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензойной кислоты с амином также дает соединение В-3.
Пример 40
Стадия 1
3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамид
К раствору 3-аминопиридин-4-карбоксамида (137 мг, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (0,53 мл, 3 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям добавляли хлорацетилхлорид (160 мкл, 2 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин и концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом 4 раза. Объединенный органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали посредством combi-flash с получением 3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамида (140 мг, 0,657 ммоль).
Стадия 2
3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамид
К раствору 3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамида (140 мг, 0,657 ммоль) и метил-3-гидроксибензоата (150 мг, 0,986 ммоль) в ацетонитриле (6 мл) добавляли карбонат цезия (642 мг, 1,97 ммоль). Смесь нагревали до температуры флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Ее разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением метил-3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензоата в виде неочищенного продукта. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 3
3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензоат
К раствору 3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензоата в метаноле (3 мл) добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (3 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов при температуре окружающей среды и подкисляли 2 н. водным раствором хлористоводородной кислоты до рН 4. Смесь экстрагировали этилацетатом, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме с получением 3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензойной кислоты в виде неочищенного продукта (80 мг). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 4
N-(2-морфолиноэтил)-3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
К раствору 3-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-метокси)бензоата (1,0 экв.) и амина (1,1 экв.) в N,N-диметилформамиде добавляли N,N-диизопропилэтиламин (2,0 экв.) и HATU (1,2 экв.). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин. Ее разбавляли рассолом и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический экстракт дважды промывали рассолом и сушили над сульфатом магния (или экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX). Его концентрировали и очищали посредством combi-flash или препаративной HPLC.
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.03 (s, 1Н), 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.59 (m, 1Н), 7.49 (m, 1Н), 7.44 (m, 1Н), 7.32 (m, 1Н), 5.16 (s, 2Н), 4.07 (m, 2Н), 3.76 (t, J=6,0 Гц, 2Н), 3.74 (m, 2Н), 3.65 (m, 2Н), 3.38 (t, J=6,0 Гц, 2Н); 3.19 (m, 2Н)
+
MS (ESI+) m/z 410 (М+Н).
Схема 3 (Способ С)
2
3
3
Общий синтез соединения С-9 проиллюстрирован на Схеме 3. 2-(3-Формилфенокси)ацетилхлорид синтезируют с помощью 2 последовательных реакций, которые представляют собой замещение уксусной кислотой и хлорирование. 3-Аминоизоникотиновую кислоту приводят во взаимодействие с 2,4-диметоксибензиламином с использованием HATU с получением амидного промежуточного соединения С-5. Амидное промежуточное соединение подвергают сочетанию с промежуточным соединением С-3 с получением амидного промежуточного соединения 6. Последующая циклизация с помощью CsCO и восстановительное аминирование с помощью NaBH(OAc) приводят к промежуточному соединению 8. За этим следует реакция с TFA, которая приводит к соединению С-9 со снятой защитой.
Пример 41
Стадия 1
2-(3-формилфенокси)уксусная кислота
К смеси хлоруксусной кислоты (598 мкл, 10 ммоль) и 3-гидроксибензальдегида (1,47 г, 12 ммоль) добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (25 мл). Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. Ее подкисляли концентрированной хлористоводородной кислотой и осадок отфильтровывали. Твердое вещество промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением 2-(3-формилфенокси)уксусной кислоты (952 мг, 5,3 ммоль).
Стадия 2
2-(3-формилфенокси)ацетил хлорид
К раствору 2-(3-формилфенокси)уксусной кислоты (1,0 экв.) в дихлорметане добавляли оксалилхлорид (1,5 экв.) и несколько капель N,N-диметилформамида. Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Ее концентрировали в вакууме и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 3
N-(2,4-диметоксибензил)-3-(2-(3-формилфенокси)ацетамидо)-изоникотинамид
К раствору 2-(3-формилфенокси)ацетилхлорида (1,0 экв.) в тетрагидрофуране добавляли ацилхлорид (1,5 экв.). Смесь оставляли перемешиваться в течение ночи и затем концентрировали. Остаток кристаллизовали с подходящим растворителем или использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 4
3-((3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензальдегид
К суспензии N-(2,4-диметоксибензил)-3-(2-(3-формилфенокси)ацетамидо)-изоникотинамида (450 мг, 1,0 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) добавляли карбонат цезия (1,63 г, 5,0 ммоль). Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение 3 суток. Ее разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали посредством combi-flash с получением 3-((3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензальдегида (56 мг, 0,13 ммоль).
Стадия 5
3-(2,4-диметоксибензил)-2-((3-((((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)-метил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
К раствору 3-((3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензальдегида (1,0 экв.) и амина (1,3 экв.) в дихлорметане добавляли триацетоксиборгидрид натрия (2,0 экв.). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин. Ее экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX и экстракт концентрировали. Полученный остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением аминного продукта.
Стадия 6
2-((3-((((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)метил)фенокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
3-(2,4-диметоксибензил)-2-((3-((((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)-метил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он растворяли в трифторуксусной кислоте (и дихлорметане). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа при температуре окружающей среды и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением конечного продукта.
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.05 (s, 1Н), 8.66 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.12 (dd, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 7.41 (m, 1Н), 7.17 (m, 3H), 5.15 (s, 2Н), 4.19 (s, 2Н), 3.92 (dd, J=3,2, 10,8 Гц, 2Н), 3.39 (t, J=12,0 Гц, 2Н), 2.91 (d, 6,8 Гц, 2Н), 1.96 (m, 1Н), 1.65 (d, J=13,2 Гц, 2Н), 1.30 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 381 (М+Н).
Пример 42
2-((3-((бензиламино)метил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием бензиламина, как описано на Схеме 3 (Способ С).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.03 (s, 1Н), 8.64 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.09 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.42 (m, 6Н), 7.19 (m, 2Н), 7.12 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 5.14 (s, 2Н), 4.21 (s, 2Н), 4.20 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 373 (М+Н).
Пример 43
2-((3-((4-пропоксипиперидин-1-ил)метил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-пропоксипиперидина, как описано на Схеме 3 (Способ С).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.04 (s, 1Н), 8.65 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.10 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.44 (m, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 1Н), 5.16 (s, 2Н), 4.28 (s, 2Н), 3.42 (m, 3H), 3.22 (m, 3H), 3.00 (m, 1Н), 2.18 (m, 1Н), 2.02 (m, 1Н), 1.84 (m, 1Н), 1.57 (m, 3H), 0.90 (t, J=7,2 Гц, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 409 (М+Н).
Пример 44
2-((3-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)амино)метил)фенокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием тетрагидро-2Н-пиран-4-амина, как описано на Схеме 3 (Способ С).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.05 (s, 1Н), 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.42 (m, 1Н), 7.20 (m, 2Н), 7.14 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 5.21 (s, 2Н), 4.22 (s, 2Н), 4.01 (dd, J=4,4, 11,6 Гц, 2Н), 3.39 (m, 3H), 2.06 (dd, J=2,4, 12,4 Гц, 2Н), 1.67 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 367 (М+Н).
Пример 45
2-((3-(((2-морфолиноэтил)амино)метил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-морфолиноэтан-1-амина, как описано на Схеме 3 (Способ С).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.05 (s, 1Н), 8.66 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.12 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.41 (m, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.20 (m, 1Н), 7.14 (d, J=7,2 Гц, 1Н), 5.14 (s, 2Н), 4.26 (s, 2Н), 3.90 (m, 4Н), 3.52 (t, J=6,4 Гц, 2Н), 3.41 (t, J=1,2 Гц, 2Н), 3.25 (m, 4Н).
+
MS (ESI+) m/z 367 (М+Н).
Схема 4 (Способ D)
2
3
Общий синтез соединения D-9 проиллюстрирован на Схеме 4. Группу карбоновой кислоты промежуточного соединения D-1 превращают в этиловый сложный эфир. Затем следуют реакции замещения трет-бутилацетатом с помощью KСО и гидролиза трет-бутилового сложного эфира с помощью TFA с получением уксуснокислого промежуточного соединения D-4. Промежуточное соединение D-4 хлорируют оксалилхлоридом и DMF и подвергают сочетанию с 3-аминоизоникотинамидом с получением амидного промежуточного соединения D-6. Последующая циклизация с помощью NaOtBu и гидролиз с помощью NaOH приводят к промежуточному соединению D-8. За этим следует реакция амидного сочетания с помощью HATU, которая приводит к амидному соединению D-9.
Пример 46
Стадия 1
Этил-2-хлор-5-гидроксибензоат
К раствору 2-хлор-5-гидроксибензойной кислоты (5 г, 28,98 ммоль) в этаноле (20 мл) по каплям добавляли концентрированную серную кислоту (0,5 мл). Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. Ее гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением метил-2-хлор-5-гидроксибензоата в виде неочищенного продукта (колич.). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 2
Этил-5-(2-(трет-бутокси)-2-оксоэтокси)-2-хлорбензоат
К раствору этил-2-хлор-5-гидроксибензоата (неочищенный, 34,78 ммоль) и трет-бутилбромацетата (5,1 мл, 34,78 ммоль) в N,N-диметилформамиде (20 мл) добавляли карбонат калия (10,6 г, 76,52 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Ее разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический экстракт дважды промывали рассолом и сушили над сульфатом магния. Его концентрировали с получением этил-5-(2-(трет-бутокси)-2-оксоэтокси)-2-хлорбензоата в виде неочищенного продукта (колич.). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 3
2-(4-хлор-3-(этоксикарбонил)фенокси)уксусная кислота
К раствору этил-5-(2-(трет-бутокси)-2-оксоэтокси)-2-хлорбензоата в дихлорметане (30 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (15 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и концентрировали в вакууме. Остаток кристаллизовали с н-гексаном. Осадок отфильтровывали и промывали н-гексаном. Твердое вещество собирали и сушили при 50°С с получением 2-(4-хлор-3-(этоксикарбонил)фенокси)уксусной кислоты (7,47 г, 28,88 ммоль) в виде белого твердого вещества.
Стадия 4
Этил-2-хлор-5-(2-хлор-2-оксоэтокси)бензоат
К раствору карбоновой кислоты в дихлорметане добавляли оксалилхлорид (1,5 экв.) и несколько капель N,N-диметилформамида. Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Ее концентрировали в вакууме и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 5
Этил-5-(2-((4-карбамоилпиридин-3-ил)амино)-2-оксоэтокси)-2-хлорбензоат
К суспензии 3-амино-2-карбоксамида (1,70 г, 12,4 ммоль) и этил-2-хлор-5-(2-хлор-2-оксоэтокси)бензоата (неочищенный, 18,6 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) по каплям добавляли N,N-диизопропилэтиламин (6,5 мл, 37,2 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и концентрировали в вакууме с получением этил-5-(2-((4-карбамоилпиридин-3-ил)амино)-2-оксоэтокси)-2-хлорбензоата в виде неочищенного продукта. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 6
Этил-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-бензоат
К суспензии этил-5-(2-((4-карбамоилпиридин-3-ил)амино)-2-оксоэтокси)-2-хлорбензоата (неочищенный, 12,4 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) добавляли трет-бутоксид натрия (3,57 г, 37,2 ммоль). Смесь нагревали до температуры флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение 4 часов. Ее нейтрализовывали 2 н. водной хлористоводородной кислотой и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток кристаллизовали с изопропиловым спиртом. Твердое вещество собирали и сушили при пониженном давлении с получением этил-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензоата (2,6 г, 7,23 ммоль) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
Стадия 7
2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-бензойная кислота
К раствору этил-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензоата (2,6 г, 7,23 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (10 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и нейтрализовали 2 н. водным раствором хлористоводородной кислоты. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Твердое вещество собирали и сушили при пониженном давлении с получением 2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензойной кислоты (2,2 г, 6,64 ммоль) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
Стадия 8
трет-Бутил-4-(2-(2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамидо)этил)пиперидин-1-карбоксилат
К раствору исходного вещества (1,0 экв.) и амина (1,1 экв.) в N,N-диметилформамиде добавляли N,N-диизопропилэтиламин (2,0 экв.) и HATU (1,2 экв.). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин. Ее разбавляли рассолом и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический экстракт дважды промывали рассолом и сушили над сульфатом магния (или экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX). Его концентрировали и очищали посредством combi-flash или препаративной HPLC.
Стадия 9
2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-N-(2-(пиперидин-4-ил)этил)бензамид
Исходное вещество растворяли в трифторуксусной кислоте (и дихлорметане). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа при температуре окружающей среды и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением конечного продукта.
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.04 (s, 1Н), 8.66 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.41 (d, 9,0 Гц, 1Н), 7.18 (m, 2Н), 5.14 (s, 2Н), 3.42 (m, 2Н), 3.39 (m, 2Н), 2.96 (m, 2Н), 2.04 (m, 2Н), 1.75 (m, 1Н), 1.60 (m, 2Н), 1.41 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 442 (М+Н).
Пример 47
2-хлор-N-((1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)метил)-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-(4-(аминометил)пиперидин-1-ил)этан-1-ола, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 472 (M+H).
Пример 48
2-хлор-N-((1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)метил)-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 486 (М+Н).
Пример 49
2-хлор-N-((1-метилпиперидин-4-ил)метил)-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 442 (М+Н).
Пример 50
N-((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (1-бензилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 518 (М+Н).
Пример 51
2-хлор-N-(2-морфолиноэтил)-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-морфолиноэтан-1-амина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 444 (М+Н).
Пример 52
N-бензил-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием бензиламина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 421 (M+H).
Пример 53
2-((3-(4-бензилпиперидин-1-карбонил)-4-хлорфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-бензилпиперидина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 489 (М+Н).
Пример 54
2-((4-хлор-3-(4-пропоксипиперидин-1-карбонил)фенокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-пропоксипиперидина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 457 (М+Н).
Пример 55
2-хлор-N-(циклогексилметил)-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием циклогексилметанамина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 427 (М+Н).
Пример 56
2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-N-(пиридин-4-ил метил)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(аминометил)пиридина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.05 (s, 1Н), 8.83 (d, J=7,2 Гц), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1H), 8.11 (d, J=5,4 Гц, 1H), 8.10 (d, J=6,6 Гц, 2H), 7.46 (d, J=9,0 Гц, 1H), 7.31 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7.24 (dd, J=3,0, 9,0 Гц, 1H), 5.17 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 422 (M+H).
Пример 57
2-хлор-N-(3-(диметиламино)пропил)-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием N,N-диметил-1,3-пропандиамина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.04 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.10 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.43 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.21 (m, 2Н), 5.15 (s, 2Н), 3.47 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 3.23 (m, 2Н), 2.92 (s, 6Н), 2.03 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 416 (М+Н).
Пример 58
2-хлор-N-циклопентил-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием циклопентиламина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.03 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.37 (d, J=7,2 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.38 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.10 (m, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 4.14 (m, 1Н), 1.83 (m, 2Н), 1.62 (m, 2Н), 1.48 (m, 4Н)
+
MS (ESI+) m/z 399 (М+Н).
Пример 59
2-((4-хлор-3-(пирролидин-1-карбонил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-OH
Указанное в заголовке соединение получали с использованием пирролидина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.07 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.13 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.43 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.17 (dd, J=3,0, 9,0 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 5.14 (s. 2Н), 3.59 (t, J=7,2 Гц, 2Н), 3.21 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 1.98 (m, 2Н), 1.89 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 385 (М+Н).
Пример 60
2-((4-хлор-3-(пиперидин-1-карбонил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием пиперидина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.05 (s, 1Н), 8.66 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.42 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.16 (dd, J=3,0, 9,0 Гц, 1Н), 7.07 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 5.14 (s. 2Н), 3.76 и 3.65 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 1.66 (m, 4Н), 1.52 и 1.42 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 399 (М+Н).
Пример 61
N-((1-ацетилпиперидин-4-ил)метил)-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-(4-(аминометил)пиперидин-1-ил)этан-1-она, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.15 (s, 1Н), 8.71 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.26 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.41 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.17 (m, 2Н), 5.16 (s, 2Н), 4.53 (m, 1Н), 3.95 (m, 1Н), 3.26 и 3.22 (m, 2Н), 3.11 (m, 1Н), 2.63 (m, 2Н), 1.92 (m, 1Н), 1.84 (m, 2Н), 1.27 и 1.17 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 62
2-((4-хлор-3-(пиперазин-1-карбонил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-Вос-пиперазина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.06 (s, 1Н), 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.13 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.47 (d, J=9,6 Гц, 1Н), 7.23 (dd, J=3,0, 9,6 Гц, 1Н), 7.17 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 5.15 (m, 2Н), 4.01 (m, 2Н), 3.54 (m, 2Н), 3.34 (m, 2Н), 3.22 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 400 (М+Н).
Пример 63
N-(транс-1,4-аминоциклогексил)-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием транс-N-Вос-1,4-циклогександиамина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.05 (s, 1Н), 8.66 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.10 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.40 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7.16 (m, 2Н), 5.14 (s, 2Н), 3.83 (m, 1Н), 3.09 (m, 1Н), 2.11 (m, 4Н), 1.54 (m, 2Н), 1.42 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 64
2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-N-(пиперидин-4-илметил)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.06 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.13 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.41 (m, 1Н), 7.18 (m, 2Н), 5.15 (s, 2Н), 3.42 (m, 2Н), 3.32 (m, 2Н), 3.00 (m, 2Н), 2.01 (m, 2Н), 1.96 (m, 1Н), 1.48 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 65
2-((4-хлор-3-(морфолин-4-карбонил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием морфолина, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.02 (s, 1Н), 8.67 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.44 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7.12 (m, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 3.61 (m, 4Н), 3.46 (m, 2Н), 3.09 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 401 (М+Н).
Пример 66
2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-N-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (4-аминометил)тетрагидропирана, как описано на Схеме 4 (Способ D).
+
MS (ESI+) m/z 429 (М+Н).
Пример 67
2-метил-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-N-(2-(пиперидин-4-ил)этил)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 5-гидрокси-2-метилбензойной кислоты, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.07 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.13 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.20 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.08 (m, 1Н), 7.06 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 5.12 (s, 2Н), 3.41 (m, 4Н), 2.97 (m, 2Н), 2.31 (s, 3H), 2.02 (m, 2Н), 1.72 (m, 1Н), 1.59 (m, 2Н), 1.44 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 422 (М+Н).
Пример 68
2-бром-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)-N-(2-(пиперидин-4-ил)этил)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-бром-5-гидроксибензойной кислоты, как описано на Схеме 4 (Способ D).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.07 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.14 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.56 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 7.15 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=3,0, 9,0 Гц, 1Н), 5.14 (s, 2Н), 3.42 (m, 2Н), 3.39 (m, 2Н), 2.96 (m, 2Н), 2.03 (m, 2Н), 1.78 (m, 1Н), 1.61 (m, 2Н), 1.41 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 422 (М+Н).
Схема 5 (Способ Е)
2
4
Общий синтез соединения Е-1 проиллюстрирован на Схеме 5. Указанная выше реакция этерификации с МеОН и с помощью конц. HSO приводит к метиловому сложноэфирному соединению Е-1.
Пример 69
Метил-2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-метокси)бензоат
К суспензии 2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-метокси)бензойной кислоты (20 мг) в метаноле (1 мл) добавляли несколько капель концентрированной серной кислоты. Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. Ее гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением 2-хлор-5-((4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-метокси)бензоата.
1
6
Н-ЯМР (600 МГц, DMSO-d) δ 9.03 (s, 1Н), 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.50 (m, 2Н), 7.28 (dd, J=3,0, 9,0 Гц, 1Н), 5.11 (s, 2Н), 3.84 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 346 (М+Н).
Схема 6 (Способ F)
2
3
Общий синтез соединения F-3 проиллюстрирован на Схеме 6. Промежуточное соединение 1 синтезируют путем 2-стадийной реакции с хлорацетилхлоридом и CsCO. Последующее перекрестное сочетание Сузуки с бороновой кислотой давало промежуточное соединение F-2, с которого затем снимают защиту с помощью TFA с получением целевого соединения F-3.
Пример 70
Стадия 1
2-((2-бромфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
К суспензии 3-(2-хлорацетамидо)-N-(2,4-диметоксибензил)-изоникотинамида (728 мг, 2 ммоль) и 2-бромфенола (320 мкл, 3 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли карбонат цезия (1,95 г, 6 ммоль). Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение 3 суток. Ее разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали посредством combi-flash с получением 2-((2-бромфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она (116 мг, 0,24 ммоль).
Стадия 2
3-(2,4-диметоксибензил)-2-((2-(пиридин-4-ил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
К раствору 2-((2-бромфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она (24 мг, 0,05 ммоль), пиридин-4-илбороновой кислоты (12 мг, 0,1 ммоль) и 2М водного раствора фосфата калия (50 мкл, 0,1 ммоль) добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (6 мг, 0,005 ммоль) в атмосфере азота. Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. Ее экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX. Экстракт концентрировали и очищали посредством препаративной HPLC с получением 3-(2,4-диметоксибензил)-2-((2-(пиридин-4-ил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она.
Стадия 3
2-((2-(пиридин-4-ил)фенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Исходное вещество растворяли в трифторуксусной кислоте (и дихлорметане). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа при температуре окружающей среды и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением конечного продукта.
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 9.03 (s, 1Н), 8.83 (d, J=6,6 Гц, 2Н), 8.66 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.44 (d, J=6,6 Гц, 2H), 8.09 (d, J=5,4 Гц, 1H), 7.67 (dd, J=1,8, 7,8 Гц, 1H), 7.60 (m, 1Н), 7.36 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.27 (t, J=7,8 Гц, 1H), 5.24 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 331 (M+H).
Схема 7 (Способ G)
Общий синтез соединения G-10 проиллюстрирован на Схеме 7. Промежуточное соединение G-2 синтезируют с помощью 2-стадийной реакции хлорирования и этерификации. Затем следует реакция замещения трет-бутилацетатом с помощью NaOtBu и циклизация с получением бензофуранового промежуточного соединения G-3. Последующий гидролиз трет-бутилового сложного эфира с помощью TFA и хлорирование с помощью оксалилхлорида приводят к промежуточному соединению G-5. За этим следует амидное сочетание с помощью HATU и циклизация с помощью NaOtBu, которая приводит к пиридопиримидиноновому промежуточному соединению G-7. Метиловую сложноэфирную группу промежуточного соединения G-7 превращают в карбоновокислотное промежуточное соединение G-8. Последующее амидное сочетание промежуточного соединения G-8 с помощью HATU и снятие защиты с помощью TFA дают соединение G-10.
Пример 71
Стадия 1
Метил-3-формил-2-гидроксибензоат
К суспензии 3-формил-2-гидроксибензойной кислоты (831 мг, 5 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли оксалилхлорид (1,3 мл, 15 ммоль) и несколько капель N,N-диметилформамида. Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин. Добавляли метанол (избыток) и смесь концентрировали в вакууме с получением метил-3-формил-2-гидроксибензоата в виде желтого твердого вещества. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 2
2-(трет-бутил)-7-метилбензофуран-2,7-дикарбоксилат
К раствору метил-3-формил-2-гидроксибензоата (неочищенный, 5 ммоль) и трет-бутилбромацетата (0,74 мл, 5 ммоль) в диметилсульфоксиде (10 мл) добавляли mpem-бутоксид натрия (1,44 г, 15 ммоль). Смесь нагревали при 100°С и оставляли перемешиваться в течение 3 суток. Ее разбавляли водой и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический экстракт промывали рассолом, сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали посредством combi-flash с получением 2-(трет-бутил)-7-метилбензофуран-2,7-дикарбоксилата (261 мг, 0,945 ммоль).
Стадия 3
7-(метоксикарбонил)бензофуран-2-карбоновая кислота
Исходное вещество растворяли в трифторуксусной кислоте (и дихлорметане). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа при температуре окружающей среды и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением 7-(метоксикарбонил)бензофуран-2-карбоновой кислоты.
Стадия 4
Метил-2-(хлоркарбонил)бензофуран-7-карбоксилат
К раствору 7-(метоксикарбонил)бензофуран-2-карбоновой кислоты в дихлорметане добавляли оксалилхлорид (1,5 экв.) и несколько капель N,N-диметилформамида. Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Ее концентрировали в вакууме и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки
Стадия 5
Метил-2-((4-карбамоилпиридин-3-ил)карбамоил)бензофуран-7-карбоксилат
К суспензии 3-амино-2-карбоксамида (1,0 экв.) и метил-2-(хлоркарбонил)-бензофуран-7-карбоксилата (1,5 экв.) в тетрагидрофуране по каплям добавляли N,N-диизопропилэтиламин (3,0 экв.). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и концентрировали в вакууме с получением метил-2-((4-карбамоилпиридин-3-ил)карбамоил)бензофуран-7-карбоксилата в виде неочищенного продукта. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 6
Метил-2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)бензофуран-7-карбоксилат
К суспензии метил-2-((4-карбамоилпиридин-3-ил)карбамоил)бензофуран-7-карбоксилата (1,0 экв.) в ацетонитриле добавляли трет-бутоксид натрия (3,0 экв.). Смесь нагревали до температуры флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение 4 часов. Ее нейтрализовали 2 н. водной хлористоводородной кислотой и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток кристаллизовали с изопропиловым спиртом. Твердое вещество собирали и сушили при пониженном давлении с получением метил-2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)бензофуран-7-карбоксилата.
Стадия 7
2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)бензофуран-7-карбоновая кислота
К раствору метил-2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-бензофуран-7-карбоксилата (7,0 ммоль) в метаноле добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (10 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и нейтрализовали 2 н. водным раствором хлористоводородной кислоты. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Твердое вещество собирали и сушили при пониженном давлении с получением 2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)бензофуран-7-карбоновой кислоты (6,64 ммоль).
Стадия 8
трет-Бутил-4-(2-(2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-бензофуран-7-карбоксамидо)этил)пиперидин-1-карбоксилат
К раствору 2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-бензофуран-7-карбоновой кислоты (1,0 экв.) и трет-бутилового сложного эфира 4-(2-амино-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты (1,1 экв.) в N,N-диметилформамиде добавляли N,N-диизопропилэтиламин (2,0 экв.) и HATU (1,2 экв.). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин. Ее разбавляли рассолом и дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический экстракт дважды промывали рассолом и сушили над сульфатом магния (или экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX). Его концентрировали и очищали посредством combi-flash или препаративной HPLC.
Стадия 9
2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-N-(2-(пиперидин-4-ил)этил)бензофуран-7-карбоксамид
трет-Бутил-4-(2-(2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-бензофуран-7-карбоксамидо)этил)пиперидин-1-карбоксилат растворяли в трифторуксусной кислоте (1 мл) и дихлорметане (4 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа при температуре окружающей среды и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением 2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-N-(2-(пиперидин-4-ил)этил)бензофуран-7-карбоксамида.
1
:
3
Н-ЯМР (600 МГЦ CDOD) δ 9.14 (s, 1Н), 8.70 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.55 (m, 1Н), 8.11 (s, 1Н), 8.01 (m, 1Н), 7.93 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.48 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 3.48 (m, 2Н), 3.24 (m, 2Н), 2.84 (m, 2Н), 1.94 (m, 2Н), 1.70 (m, 1Н), 1.60 (m, 2Н), 1.31 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 418 (М+Н).
Схема 8 (Способ Н)
2
4
Общий синтез соединения Н-1 проиллюстрирован на Схеме 8. Вышеуказанная реакция этерификации с МеОН и с помощью конц. HSO приводит к метиловому сложноэфирному соединению Н-1.
Пример 72
Метил-2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)бензофуран-7-карбоксилат
К суспензии 2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)-бензофуран-7-карбоновой кислоты (20 мг) в метаноле (1 мл) добавляли несколько капель концентрированной серной кислоты. Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. Ее гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением 2-(4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)бензофуран-7-карбоксилата.
1
6
Н-ЯМР (600 МГц, DMSO-d) δ 9.16 (s, 1Н), 8.70 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.20 (s 1Н), 8.14 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 8.00 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.49 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 3.98 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 322 (M+H).
Схема 9 (Способ I)
2
3
Общий синтез соединения 1-2 проиллюстрирован на Схеме 9. 3-(2-Хлорацетамидо)изоникотинамид циклизуют с помощью KCO с получением промежуточного соединения I-1. За этим следует замещение амином, которое приводит к соединению I-2.
Пример 73
Стадия 1
3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамид
К раствору 3-аминоизоникотинамида в THF добавляли хлорацетилхлорид при комнатной температуре. Смесь оставляли перемешиваться в течение 2 суток при комнатной температуре и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество кристаллизовали с EtOAc и фильтровали с получением 3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамида.
+
MS (ESI+) m/z 214 (М+Н).
Стадия 2
2-(хлорметил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
2
2
3
К раствору 3-(2-хлорацетамидо)изоникотинамида (1,0 ммоль) в HO добавляли KCO (1,0 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали до 80°С в течение 1 ч. в микроволновой печи. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали в вакууме с получением 2-(хлорметил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она (0,5 ммоль).
Стадия 3
2-(((4-(втор-бутил)фенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
4
К раствору 2-(хлорметил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она (0,5 ммоль) в EtOH добавляли 4-втор-бутиланилин (0,5 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали при температуре флегмообразования в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Концентрированный остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением 2-(((4-(втор-бутил)фенил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она (0,3 ммоль).
+
MS (ESI+) m/z 309 (М+Н).
Пример 74
2-(((4-циклогексилфенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-циклогексиланилина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
+
MS (ESI+) m/z 335 (М+Н).
Пример 75
2-(((4-феноксифенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-феноксианилина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.01 (s, 1Н), 8.62 (d, J=5,48 Гц, 1Н), 7.91 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.25 (t, J=8,02 Гц, 2Н), 7.06 (d, J=8,61 Гц, 2Н), 6.98 (m, 2Н), 6.81 (dd, J=8,41, 5,67 Гц, 2Н), 6.67 (d, J=8,61 Гц, 1Н), 4.24 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 345 (М+Н).
Пример 76
2-(((4-(бензилокси)фенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-бензилоксиланилина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
+
MS (ESI+) m/z 359 (М+Н).
Пример 77
2-(((4-((4-метоксибензил)окси)фенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-OH
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-(4-метоксибензилокси)-фениламина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
+
MS (ESI+) m/z 389 (М+Н).
Пример 78
2-(((3-(бензилокси)фенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-бензилоксианилина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
+
MS (ESI+) m/z 359 (M+H).
Пример 79
2-(([1,1'-бифенил]-3-иламино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-аминобифенила, как описано на Схеме 9 (Способ I).
+
MS (ESI+) m/z 329 (М+Н).
Пример 80
2-(((3,4-дифторфенил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3,4-дифторанилина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.59 (br s, 1Н), 8.98 (s, 1Н), 8.61 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.90 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.09 (m, 1Н), 6.62 (m, 1Н), 6.37 (m, 2Н), 4.23 (d, J=6,26 Гц, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 289 (М+Н).
Пример 81
2-(((1-метилпиперидин-4-ил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-метил-4-пиперидинамина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
+
MS (ESI+) m/z 274 (М+Н).
Пример 82
2-(((1-бензилпиперидин-4-ил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-амино-1-бензилпиперидина, как описано на Схеме 9 (Способ I).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.00 (s, 1Н), 8.6 (d, 1Н), 7.8 (d, 1Н), 7.24 (m, 5Н), 3.42 (s, 2Н), 2.73 (m, 2Н), 2.63 (m, 1Н), 2.46 (s, 2Н), 1.93 (m, 2Н), 1.66 (m, 2Н), 1.32 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 350 (М+Н).
Схема 10 (Способ J)
2
3
Общий синтез соединения J-5 проиллюстрирован на Схеме 10. 3-Амино-2-хлор-N-(2,4-диметоксибензил)изоникотинамид приводят во взаимодействие с триэтилортоформиатом с получением пиридопиримидинонового промежуточного соединения J-1. Перекрестное сочетание Сузуки с использованием триметилбороксина и окисление с использованием SeO приводят к альдегидному промежуточному соединению J-3. Последующее восстановительное аминирование с использованием NaBHCN и снятие защиты с помощью TFA приводит к соединению J-5.
Пример 83
Стадия 1
8-хлор-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Промежуточное соединение 3-5 (322 мг, 1,0 ммоль) растворяли в триэтилортоформиате (4 мл). Смесь нагревали при 150°С и оставляли перемешиваться в течение 4 суток. Растворитель концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения 1 (колич.) в виде белого твердого вещества.
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.61 (s, 1Н), 8.41 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.19 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 6.53 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 6.44 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1Н), 5.00 (s, 2Н), 3.77 (s, 3H), 3.70 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 332 (М+Н).
Стадия 2
3-(2,4-диметоксибензил)-8-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
2
3
3
4
4
К раствору промежуточного соединения 1 (396 мг, 1,02 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли KCO (282 мг, 2,04 ммоль), триметилбороксин (213 мкл, 1,53 ммоль) и Pd(PPh) (59 мг, 0,05 ммоль) в атмосфере азота. Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 ч. при 100°С. После охлаждения до комнатной температуры смесь экстрагировали EtOAc и промывали рассолом. Отделенный органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Концентрированный остаток очищали посредством флэш-колоночной хроматографии с получением промежуточного соединения 2 (301 мг, 0,815 мг) в виде бледно-желтого масла.
Стадия 3
3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-карбальдегид
К раствору промежуточного соединения 2 (312 мг, 1,0 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли диоксид селена (222 мг, 2,0 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100°С и оставляли перемешиваться в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали через набивку целита. Фильтрат концентрировали в вакууме.
+
MS (ESI+) m/z 384 (М+Н).
Стадия 4
8-((бензиламино)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
3
4
Промежуточное соединение 3 и (1-бензилпиперидин-4-ил)метанамин смешивали в МеОН при комнатной температуре. Смесь нагревали при температуре флегмообразования в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь обрабатывали NaBHCN, оставляли перемешиваться в течение 1 ч. при комнатной температуре, гасили 1 М NaOH и экстрагировали EtOAc. Отделенный органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Концентрированный остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением 8-((бензиламино)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-она.
+
MS (ESI+) m/z 514 (М+Н).
Стадия 6
8-((бензиламино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
8-((Бензиламино)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он растворяли в TFA (2 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 ч. при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали в вакууме. Концентрированный остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения.
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12.87 (br s, 1Н), 8.66 (d, J=5,09 Гц, 1H), 8.28 (s, 1Н), 7.97 (d, J=5,09 Гц, 1H), 7.53 (m, 2Н), 7.41 (m, 3H), 4.68 (s, 2Н), 4.33 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 267 (M+H).
Пример 84
8-((((2,6-дихлорпиридин-4-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-OH
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2,6-дихлорпиридин-4-метиламина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 337 (М+Н).
Пример 85
8-(((циклогексилметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием циклогексанметиламина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.64 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 8.29 (s, 1Н), 7.97 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 4.63 (s, 2Н), 2.51 (d, 2Н), 1.77-1.60 (m, 5Н), 1.26-0.76 (m, 6Н).
+
MS (ESI+) m/z 273 (М+Н).
Пример 86
8-(((4-(диэтиламино)бутил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием N,N-диэтил-1,4-бутандиамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 304 (М+Н).
Пример 87
8-(((5-(диэтиламино)пентан-2-ил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-амино-5-диэтиламинопентана, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 318 (М+Н).
Пример 88
8-(((3-(2-оксопирролидин-1-ил)пропил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием N-(3-аминопропил)-2-пирролидинона, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 302 (М+Н).
Пример 89
8-(((азетидин-3-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-b]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-Вос-3-(аминометил)азетидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 246 (М+Н).
Пример 90
8-(((пирролидин-3-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-Вос-3-(аминометил)пирролидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 260 (М+Н).
Пример 91
(S)-8-(((пирролидин-2-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (S)-3-(аминометил)-1-Вос-пирролидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 260 (М+Н).
Пример 92
8-((((1-метил пиррол идин-3-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-(1-метилпирролидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 21А (М+Н).
Пример 93
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-Вос-4-(аминометил)пиперидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, 1Н), 8.19 (s, 1Н), 8.04 (d, 1Н), 4.85 (s, 2Н), 3.45 (d, 2Н), 3.28 (s, 2Н), 3.04 (t, 2Н), 2.23 (bs, 1Н), 2.10 (d, 2Н), 1.56 (q, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 274 (М+Н).
Пример 94
8-(((1-(пиперидин-4-ил)этил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием трет-бутил-4-(1-аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 288 (М+Н).
Пример 95
8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (1-метил-4-пиперидинил)метанамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8.65 (d, J=5,48 Гц, 1Н), 8.31 (s, 1Н), 7.99 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 4.74 (s, 2Н), 3.06 (m, 2Н), 2.96 (m, 1Н), 2.73 (m, 2Н), 2.5 (s, 3H), 2.49 (s, 2Н), 1.99 (m, 2Н), 1.39 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 288 (М+Н).
Пример 96
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-OH
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-(1-бензилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 364 (М+Н).
Пример 97
8-((((1'-метил-[1,4'-бипиперидин]-4-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-(1'-метил-1,4'-бипиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 371 (М+Н).
Пример 98
(R)-8-(((пиперидин-3-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (S)-1-Boc-3-(аминометил)пиперидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 274 (М+Н).
Пример 99
(S)-8-(((пиперидин-3-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (R)-1-Boc-3-(аминометил)пиперидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 274 (М+Н).
Пример 100
8-((((1-метилпиперидин-3-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 3-(аминометил)-1-метилпиперидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 288 (М+Н).
Пример 101
8-((((1-бензилпиперидин-3-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием (1-бензилпиперидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 364 (М+Н).
Пример 102
8-((((1-бензилпиперидин-2-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 2-аминометил-1-бензилпиперидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 364 (М+Н).
Пример 103
8-(((1-бензилпиперидин-4-ил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 4-амино-1-бензилпиперидина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
1
6
Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9.72 (br s, 1Н), 8.63 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 8.35 (br s, 1Н), 8.30 (s, 1Н), 7.97 (d, J=5,09 Гц, 1Н), 7.42 (m, 5Н), 4.76 (s, 2Н), 4.25 (s, 2Н), 3.36 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.33 (m, 2Н), 2.09 (m, 2Н), 1.95 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 350 (М+Н).
Пример 104
8-((((1s,4s)-4-аминоциклогексил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием 1-N-Boc-цис-1,4-циклогексилдиамина, как описано на Схеме 10 (Способ J).
+
MS (ESI+) m/z 274 (М+Н).
Схема 11 (Способ K)
t
2
3
4
3
Общий синтез соединения К-10 проиллюстрирован на Схеме 11. 3-Амино-2-хлоризоникотиновую кислоту приводят во взаимодействие с 2,4-диметоксибензиламином с использованием HATU с получением амидного промежуточного соединения С-5. За этим следует 2-стадийная реакция с использованием метилхлороксоацетата и NaOBu с получением промежуточного соединения К-2. Перекрестное сочетание Сузуки с использованием триметилбороксина и окисление с использованием SeO приводят к альдегидному промежуточному соединению К-4. Последующая реакция восстановительного аминирования с использованием NaBHCN и защита Boc дают промежуточное соединение К-6. Метиловый сложный эфир восстанавливают NaBH и повторно окисляют DDQ с получением спиртового промежуточного соединения K-8. Реакцию Мицунобу осуществляют с использованием DIAD и PPh с образованием простой эфирной связи и 2,4-диметоксибензильную защитную группу снимают с помощью TFA с получением конечного продукта.
Пример 105
Стадия 1
Метил-8-хлор-3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-карбоксилат
3
3
3
4
t
К раствору промежуточного соединения С-5 (322 мг, 1,0 ммоль) и EtN (418 мкл, 3,0 ммоль) в диоксане (5 мл) и CHCN (5 мл) по каплям добавляли метилхлороксоацетат (276 мкл, 3,0 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до температуры окружающей среды, оставляли перемешиваться в течение 1 часа и концентрировали в вакууме. К концентрированному остатку добавляли CHCN (10 мл) и NaOBu (192 мг, 2,0 ммоль). Смесь нагревали при 90°С и оставляли перемешиваться в течение 2 суток. После охлаждения до температуры окружающей среды в смесь вливали воду (30 мл). Полученную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения K-2 (265 мг, 0,68 ммоль) в виде бледно-желтого масла.
1
6
Н-ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 8.50 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.98 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.08 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 6.49 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 6.42 (dd, J=2,4 Гц, 8,4 Гц, 1Н), 5.19 (s, 2Н), 3.85 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.66 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 390 (М+Н).
Стадия 2
Метил-3-(2,4-диметоксибензил)-8-метил-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-карбоксилат
2
3
3
4
4
К раствору промежуточного соединения К-2 (396 мг, 1,02 ммоль) в безводном диоксане (5 мл) добавляли KCO (282 мг, 2,04 ммоль), триметилбороксин (213 мкл, 1,53 ммоль) и Pd(PPh) (59 мг, 0,05 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали при 100°С и оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Затем смесь разбавляли EtOAc (30 мл) и промывали водой (30 мл) и рассолом (30 мл). Органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения К-3 (301 мг, 0,815 ммоль) в виде бледно-желтого масла.
1
6
Н-ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 8.58 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.86 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.05 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6.48 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 6.42 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 5.20 (s, 2Н), 3.84 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.72 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 370 (М+Н).
Стадия 3~5
Метил-8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)(трет-бутоксикарбонил)-амино)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-карбоксилат
2
К раствору промежуточного соединения К-3 (312 мг, 1,0 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли SeO (222 мг, 2,0 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С и оставляли перемешиваться в течение 3 часов. После охлаждения смесь фильтровали через набивку целита. Фильтрат концентрировали в вакууме.
+
MS (ESI+) m/z 384 (М+Н).
3
4
К раствору концентрированного остатка в МеОН (10 мл) добавляли (1-бензилпиперидин-4-ил)метанамин (225 мг, 1,1 ммоль) и NaBHCN (126 мг, 2,0 ммоль). После того как реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 15 мин, ее гасили водой (30 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме.
+
MS (ESI+) m/z 572 (М+Н).
2
3
К раствору концентрированного остатка в DCM (20 мл) добавляли BocO (327 мг, 1,5 ммоль) и EtN (279 мкл, 2,0 ммоль). После того как реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 30 мин, ее концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения К-6 (268 мг, 0,40 ммоль) в виде бледно-желтого масла.
1
6
Н-ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 8.74 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.45 (m, 5Н), 7.08 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 6.50 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 6.44 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1Н), 5.22 (s, 2Н), 4.73 (m, 2Н), 4.26 (m, 2Н), 3.84 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.36 (m, 2Н), 3.01 (m, 2Н), 2.91 (m, 2Н), 2.46 (s, 9Н), 1.97 (m, 2Н), 1.82 (m, 1Н), 1.38 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 672 (М+Н).
Стадия 6~7
трет-Бутил-((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)((3-(2,4-диметоксибензил)-2-(гидроксиметил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)-карбамат
4
4
К раствору промежуточного соединения К-6 (200 мг, 0,298 ммоль) в МеОН (10 мл) порциями добавляли NaBH (105 мг, 2,98 ммоль). После того как смесь оставили перемешиваться в течение 3 часов, ее гасили водой (30 мл) и затем экстрагировали EtOAc (30 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме.
+
MS (ESI+) m/z 646 (М+Н).
3
4
К раствору концентрированного остатка в CHCl (10 мл) добавляли DDQ (135 мг, 0,596 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и затем разбавляли DCM (30 мл). Органический слой промывали 1 н. водным NaOH (30 мл), сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения К-8 в виде неочищенного масла (158 мг), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.54 (m, 1Н), 7.94 (m, 1Н), 7.31 (m, 5Н), 6.81 (m, 1Н), 6.39 (m, 1Н), 5.27 (m, 2Н), 5.04 (m, 2Н), 4.63 (m, 2Н), 3.82 (s, 3H), 3.74 (m, 3H), 3.62 (m, 2Н), 3.25 (m, 2Н), 2.95 (m, 2Н), 2.12 (m, 2Н), 1.68 (m, 3H), 1.45 и 1.19 (m, 9Н).
+
MS (ESI+) m/z 644 (М+Н).
Стадия 8
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-((2-хлорфенокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
3
К раствору промежуточного соединения К-8 (13 мг, 0,02 ммоль) в безводном THF (1,5 мл) добавляли 2-хлорфенол (0,2М в диоксане, 0,2 мл), PPh (52 мг, 0,2 ммоль) и DIAD (39 мкл, 0,2 ммоль). Смесь нагревали до 50°С и оставляли перемешиваться в течение 3 часов и затем экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX. Экстракт концентрировали и остаток растворяли в TFA (1 мл). Полученный раствор нагревали до 50°С и оставляли перемешиваться в течение 2 часов. Раствор концентрировали и остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения (2,5 мг).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.49 (m, 5Н), 7,41 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7:26 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.00 (t, J=7,6 Гц, 1Н), 5.14 (s, 2Н), 4.31 (s, 2Н), 3.56 (m, 2Н), 3.14 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.17 (m, 2Н), 1.59 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 504 (М+Н).
Пример 106
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-((3-хлорфенокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,3 мг) получали с использованием 3-хлорфенола, как описано на Схеме 11 (Способ К).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.49 (m, 5Н), 7.28 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 7,13 (m, 1Н), 7.01 (m, 2Н), 5.14 (s, 2Н), 4.31 (s, 2Н), 3.53 (m, 2Н), 3.14 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.17 (m, 1Н), 2.13 (m, 2Н), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 504 (М+Н).
Пример 107
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-((4-хлорфенокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,4 мг) получали с использованием 4-хлорфенола, как описано на Схеме 11 (Способ К).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.49 (m, 5Н), 7.29 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 7.05 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 4.31 (s, 2Н), 3.55 (m, 2Н), 3.22 (m, 2Н), 3.11 (m, 2Н), 2.17 (m, 1Н), 2.13 (m, 2Н), 1.58 (m, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 504 (M+H).
Пример 108
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-((4-бромфенокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,1 мг) получали с использованием 4-бромфенола, как описано на Схеме 11 (Способ K).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.49 (m, 5Н), 7.43 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 7.00 (d, J=9,2 Гц, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 4.32 (s, 2Н), 3.55 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.17 (m, 1Н), 2.13 (m, 2Н), 1.57 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 548 (М+Н).
Пример 109
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-((пиридин-3-илокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,2 мг) получали с использованием 3-гидроксипиридина, как описано на Схеме 11 (Способ К).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.47 (m, 1Н), 8.27 (m, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.52 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.49 (m, 5Н), 5.23 (s, 2Н), 4.33 (s, 2Н), 3.57 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.06 (m, 2Н), 2.17 (m, 1Н), 2.14 (m, 2Н), 1.58 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 471 (М+Н).
Пример 110
8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-((пиридин-4-илокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,2 мг) получали с использованием 4-гидроксипиридина, как описано на Схеме 11 (Способ К).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.70 (d, J=7,6 Гц, 2Н), 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.66 (d, J=7,2 Гц, 2Н), 7.49 (m, 5Н), 5.46 (s, 2Н), 4.32 (s, 2Н), 3.54 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.06 (m, 2Н), 2.17 (m, 1Н), 2.13 (m, 2Н), 1.60 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 471 (М+Н).
Пример 111
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((1-бензилпиперидин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,3 мг) получали с использованием 4-бензилфенола, как описано на Схеме 11 (Способ К).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.49 (m, 5Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.05 (s, 2Н), 4.30 (s, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.55 (m, 2Н), 3.14 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.16 (m, 1Н), 2.13 (m, 2Н), 1.58 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 560 (М+Н).
Схема 12 (Способ L)
4
4
3
Общий синтез соединений L-6 проиллюстрирован на Схеме 12. Альдегидную группу вводят путем перекрестного сочетания Сузуки с использованием винилтрифторбората калия и окислительного отщепления с использованием OSO и NaIO. Последующее восстановительное аминирование с использованием NaBHCN и защита Вое приводят к промежуточному соединению L-4. За этим следует 2-стадийная реакция с хлорацетилхлоридом и карбонатным основанием с получением промежуточного соединения L-5. Защиту 2,4-диметоксибензильной группой снимают с помощью TFA с получением конечного продукта.
Пример 112
Стадия 1
3-амино-N-(2,4-диметоксибензил)-2-винилизоникотинамид
2
3
4
К раствору промежуточного соединения С-5 (644 мг, 2,0 ммоль) в безводном EtOH (20 мл) добавляли винилтрифторборат калия (402 мг, 3,0 ммоль), Pd(dppf)Cl (дихлорметановый аддукт, 49 мг, 0,06 ммоль) и EtN (1,4 мл, 10 ммоль). Продували азотом. После того как реакционную смесь нагрели до 80°С и оставили перемешиваться в течение 1 часа, ее разбавляли водой (40 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения L-1 (472 мг, 1,51 ммоль).
1
3
:
Н-ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 7.99 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7.55 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.46 (br t, J=5,6 Гц, 1Н), 7.20 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6.75 (dd, J=12,0, 17,6 Гц, 1Н), 6.44 (m, 2Н), 6.32 (d, J=17,6 Гц, 1Н), 6.18 (br s, 2Н), 5.98 (d, J=12,0 Гц, 1Н), 4.50 (d, J=5,6 Гц, 2Н), 3.82 (s, 3H) 3.77 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 314 (М+Н).
Стадия 2
3-амино-N-(2,4-диметоксибензил)-2-формилизоникотинамид
4
4
3
4
К раствору промежуточного соединения L-1 (251 мг, 0,8 ммоль) в THF (5 мл) и воде (5 мл) добавляли OsO (4% в воде, 0,62 мл, 0,08 ммоль). После короткого перемешивания в течение 5 мин добавляли NaIO (513 мг, 2,25 ммоль) и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов. Смесь гасили насыщенным водным раствором NaHCO (30 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения L-2 в виде неочищенного масла. Неочищенное масло (колич.) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 316 (М+Н).
Стадия 3~4
трет-Бутил-4-((((3-амино-4-((2,4-диметоксибензил)карбамоил)пиридин-2-ил)метил)(трет-бутоксикарбонил)амино)метил)пиперидин-1-карбоксилат
3
4
К раствору промежуточного соединения L-2 (250 мг в виде неочищенного вещества, 0,8 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилат (214 мг, 1,0 ммоль) и NaBHCN (100 мг, 1,6 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин, гасили водой (30 мл) и затем экстрагировали DCM (30 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали.
+
MS (ESI+) m/z 514 (М+Н).
2
3
Полученный остаток разбавляли DCM (10 мл), затем добавляли BocO (230 мкл, 1,0 ммоль) и EtN (223 мкл, 1,6 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения L-4 (138 мг, 0,225 ммоль).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 7.73 (m, 1Н), 7.30 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.15 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 6.52 (m, 1Н), 6.46 (m, 1Н), 4.54 (br s, 2Н), 4.44 (s, 2Н), 3.98 (m, 2Н), 3.82 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.09 (m, 2Н), 2.58 (m, 2Н), 1.60 (m, 3H), 1.43 (m, 18Н), 0.94 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 614 (М+Н).
Стадия 5~6
2-((2-хлор-5-(трифторметил)фенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
2
3
К раствору промежуточного соединения L-4 (13,8 мг, 0,023 ммоль) в THF (1 мл) добавляли хлорацетилхлорид (5,5 мкл, 0,069 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли МЕK (1,5 мл). Добавляли 2-хлор-5-трифторметилфенол (0,2 М в диоксане, 0,3 мл) и KCO (9,5 мг, 0,069 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°С и оставляли перемешиваться в течение ночи. После того как смесь экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX, экстракт концентрировали и очищали посредством препаративной HPLC. Очищенный остаток растворяли в TFA (1 мл), нагревали до 50°С и оставляли перемешиваться в течение 2 часов. Его концентрировали в вакууме и очищали посредством препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения (2,1 мг).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.69 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.09 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.64 (m, 1Н), 7.55 (m, 1Н), 7.34 (m, 1Н), 5.24 (s, 2Н), 4.81 (m, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 482 (М+Н).
Пример 113
2-((2,3-дихлорфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,7 мг) получали с использованием 2,3-дихлорфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 3H), 5.18 (s, 2Н), 4.78 (m, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.14 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.18 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 448 (М+Н).
Пример 114
2-((2,4-дихлорфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,4 мг) получали с использованием 2,4-дихлорфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,6 Гц, 1H), 8.08 (d, J=5,2 Гц, 1H), 7.49 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.29 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 7.20 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5.16 (s, 2Н), 4.77 (m, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.13 (m, 2H), 3.03 (m, 2H), 2.17 (m, 1H), 2.10 (m, 2H), 1.52 (m, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 448 (M+H).
Пример 115
2-((2,5-дихлорфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,6 мг) получали с использованием 2,5-дихлорфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.69 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.09 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.41 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.33 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7.05 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1Н), 5.17 (s, 2Н), 4.80 (m, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 448 (М+Н).
Пример 116
2-((2-фторфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,7 мг) получали с использованием 2-фторфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.13 (m, 4Н), 5.14 (s, 2Н), 4.81 (m, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 398 (M+H).
Пример 117
2-((2-бромфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,2 мг) получали с использованием 2-бромфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.68 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.09 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.59 (dd, J=1,2, 8,0 Гц, 1Н), 7.33 (t, J=8,6 Гц, 1Н), 7.17 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6.95 (t, J=8,4 Гц, 1Н), 5.15 (s. 2Н), 4.81 (m, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 458 (М+Н).
Пример 118
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-2-((орто-толилокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,3 мг) получали с использованием орто-крезола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.14 (m, 2Н), 6.97 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=7,6 Гц, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.28 (m, 3H), 2.20 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 394 (М+Н).
Пример 119
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-2-((мета-толилокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,2 мг) получали с использованием мета-крезола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.17 (t, J=8,0 Гц, 2Н), 6.89 (m, 1Н), 6.83 (m, 1Н), 5.07 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.31 (s, 3H), 2.20 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 394 (М+Н).
Пример 120
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-2-((пара-толилокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,5 мг) получали с использованием пара-крезола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8,07 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.10 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 6.94 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 5.05 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.25 (s, 3H), 2.20 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 394 (М+Н).
Пример 121
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,5 мг) получали с использованием 4-бензилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 122
2-((2-хлорфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,9 мг) получали с использованием 2-хлорфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.42 (m, 1Н), 7.28 (m, 1Н), 7.20 (m, 1Н), 7.01 (m, 1Н), 5.15 (s, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 414 (М+Н).
Пример 123
2-(феноксиметил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,7 мг) получали с использованием фенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.31 (m, 2Н), 7.06 (m, 2Н), 7.00 (t, J=7,6 Гц, 1Н), 5.10 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 380 (М+Н).
Пример 124
2-((2,4-дифторфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,4 мг) получали с использованием 2,4-дифторфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.05 (m, 1Н), 6.92 (m, 1Н), 5.12 (s, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 416 (М+Н).
Пример 125
2-((3,5-дифторфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,5 мг) получали с использованием 3,5-дифторфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1H), 8.07 (d, J=5,6 Гц, 1H), 6.74 (m, 2Н), 6.61 (m, 1Н), 5.12 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.17 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.21 (m, 1H), 2.11 (m, 2H), 1.54 (m, 2H).
+
MS (ESI+) m/z 416 (M+H).
Пример 126
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,9 мг) получали с использованием 3-хлор-4-фторфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.19 (t, J=9,2 Гц, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 432 (М+Н).
Пример 127
2-((4-хлор-3-фторфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,0 мг) получали с использованием 4-хлор-3-фторфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.39 (t, J=9,2 Гц, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 6.92 (m, 1Н), 5.11 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 432 (М+Н).
Пример 128
2-((4-оксо-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензонитрил
Указанное в заголовке соединение (0,3 мг) получали с использованием 2-цианофенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.70 (m, 1Н), 7.65 (m, 1Н), 7.29 (m, 1Н), 7.16 (m, 1Н), 5.25 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 405 (М+Н).
Пример 129
4-((4-оксо-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензонитрил
Указанное в заголовке соединение (2,1 мг) получали с использованием 2-цианофенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 7.23 (d, J=9.2 Гц, 2Н), 5.20 (s, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.55 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 405 (М+Н).
Пример 130
2-((2-хлор-5-метилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,5 мг) получали с использованием 2-хлор-5-метилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.68 (d, 7=5,2 Гц, 1Н), 8.09 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.27 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 6.84 (m, 1Н), 5.12 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.32 (s, 3H), 2.19 (m, 1Н), 2.10 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 131
2-(((5-бромпиразин-2-ил)окси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,4 мг) получали с использованием 5-бром-2-гидроксипиразина, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.26 (s, 2Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.27 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 5.39 (s, 2Н), 4.73 (s, 2Н), 3.47 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.06 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 460 (М+Н).
Пример 132
2-((3-хлорфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,6 мг) получали с использованием 3-хлорфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.29 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 7.14 (m, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 5.11 (s, 1Н), 4.83 (m, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 414 (М+Н).
Пример 133
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-2-((пиридин-2-илокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,6 мг) получали с использованием 2-гидроксипиридина, как описано на Схеме 12 (Способ L).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.62 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.77 (m, 1Н), 7.64 (m, 1Н), 6.60 (d, J=10,0 Гц, 1Н), 6.49 (m, 1Н), 5.19 (s, 1Н), 4.82 (m, 2Н), 4.51 (s, 1Н), 3.44 (m, 2Н), 3.32 (m, 2Н), 3.02 (m, 2Н), 2.12 (m, 1Н), 2.04 (m, 2Н), 1.51 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 381 (М+Н).
Пример 134
2-((4-хлор-3-метилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,9 мг) получали с использованием 4-этилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 135
2-((4-этилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,6 мг) получали с использованием 4-этилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 408 (М+Н).
Пример 136
2-((3,4-диметилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,9 мг) получали с использованием 3,4-диметилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 408 (М+Н).
Пример 137
2-((4-хлор-2-метилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,5 мг) получали с использованием 4-хлор-2-метилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 138
3-((4-оксо-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-2-ил)метокси)бензонитрил
Указанное в заголовке соединение (1,9 мг) получали с использованием 3-цианофенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 405 (М+Н).
Пример 139
2-(((2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)окси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,9 мг) получали с использованием 2,3-дигидро-1Н-инден-5-ола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 420 (М+Н).
Пример 140
2-((4-циклопентилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,2 мг) получали с использованием 4-циклопентилфенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 448 (М+Н).
Пример 141
2-((4-(1-фенилэтил)фенокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,3 мг) получали с использованием 4-(1-фенилэтил)фенола, как описано на Схеме 12 (Способ L).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Схема 13 (Способ М)
2
3
4
4
Общий синтез соединения М-5 проиллюстрирован на Схеме 13. Промежуточное соединение М-2 синтезируют с помощью 2-стадийной реакции с хлорацетилхлоридом и KCO. Последующее перекрестное сочетание Сузуки с винилтрифторборатом калия и окислительное отщепление с помощью OsO/NaIO вводит альдегидную группу. Реакция восстановительного аминирования и снятие 2,4-диметоксибензильной защитной группы с помощью TFA дают конечный продукт.
Пример 142
Стадия 1
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-хлор-3-(2,4-диметоксибензил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
3
3
4
К раствору Промежуточного соединения С-5 (644 мг, 2,0 ммоль) в THF (20 мл) по каплям добавляли хлорацетилхлорид (477 мкл, 6,0 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли МЕК (40 мл). К суспензии добавляли 4-бензилфенол (442 мг, 2,4 ммоль) и КСО (828 мг, 6,0 ммоль). Смесь нагревали до температуры флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. После того как смесь охладили до температуры окружающей среды, ее разбавляли EtOAc (50 мл). Органический слой промывали водой (50 мл) и рассолом (25 мл), сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения М-1 (517 мг, 0,98 ммоль).
1
3
Н-ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 8.42 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.00 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.26 (m, 2Н), 7.15 (m, 3H), 7.10 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 6.98 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 6.88 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 6.37 (m, 2Н), 5.43 (s, 2Н), 5.16 (s, 2Н), 3.91 (m, 2Н), 3.74 (s, 3H), 3.58 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 528 (М+Н).
Стадия 2
2-((4-бензилфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)-8-винилпиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-OH
2
3
4
К раствору промежуточного соединения М-1 (600 мг, 1,14 ммоль) в безводном EtOH (20 мл) добавляли винилтрифторборат калия (229 мг, 1,71 ммоль), Pd(dppf)Cl (дихлорметановый аддукт, 28 мг, 0,034 ммоль) и EtN (794 мкл, 5,70 ммоль). Продували азотом. Реакционную смесь нагревали до 80°С и оставляли перемешиваться в течение 1 часа. После того как смесь разбавили водой (30 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл), органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с получением промежуточного соединения М-2 (440 мг, 0,847 ммоль).
1
3
Н-ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 8.64 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.96 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.81 (dd, J=10,8, 17,6 Гц, 1Н), 7.26 (m, 2Н), 7.15 (m, 3H), 7.09 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 6.94 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 6.86 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 6.59 (dd, J=2,0, 17,2 Гц, 1Н), 6.36 (m, 2Н), 5.64 (dd, J=2,0, 10,8 Гц, 1Н), 5.42 (s, 2Н), 5.10 (s, 2Н), 3.91 (m, 2Н), 3.74 (s, 3H), 3.58 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 520 (М+Н).
Стадия 3
2-((4-бензилфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-карбальдегид
4
4
3
4
К раствору промежуточного соединения М-2 (390 мг, 0,75 ммоль) в THF (10 мл) и воды (10 мл) по каплям добавляли OsO (4% в воде, 0,59 мл, 0,075 ммоль). После того как смесь оставили перемешиваться в течение 5 мин, добавляли NaIO (481 мг, 2,25 ммоль) и оставляли перемешиваться в течение 2 часов. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NaHCO (30 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл). Органический экстракт сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения М-3 (колич.) в виде неочищенного масла. Неочищенное масло использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 522 (М+Н).
Стадия 4~5
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((1-этилпирролидин-3-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
3
К раствору промежуточного соединения М-3 (39 мг в виде неочищенного масла, 0,075 ммоль) в DCM (1,5 мл) добавляли (1-этилпирролидин-3-ил)-метанамин (0,2М в диоксане, 0,5 мл) и АсОН (каталитическое количество). После добавления NaBH(OAc) (32 мг, 0,15 ммоль) реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов и затем экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX. Экстракт концентрировали в вакууме и остаток очищали посредством препаративной HPLC. Очищенный остаток растворяли в TFA (1,5 мл). После того как раствор нагрели до 50°С и оставили перемешиваться в течение 3 часов, его концентрировали в вакууме и полученный остаток очищали посредством препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения (4,9 мг).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (m, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.73 (m, 1Н), 3.58 (m, 1Н), 3.35 (m, 2Н), 3.25 (m, 2Н), 2.90 (m, 1Н), 2.39 (m, 2Н), 2.02 (m, 1Н), 1.94 (m, 1Н), 1.85 (m, 1Н), 1.62 (m, 1Н), 1.33 (m, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Пример 143
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((4-(пирролидин-1-ил)бутил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,5 мг) получали с использованием 4-(пирролидин-1-ил)бутан-1-амина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.67 (m, 1Н), 8.08 (m, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (m, 2Н), 4.82 (m, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.64 (m, 2Н), 3.56 (m, 1Н), 3.22 (m, 3H), 3.05 (m, 2Н), 2.12 (m, 2Н), 2.00 (m, 1Н), 1.86 (m, 3H), 1.77 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 498 (М+Н).
Пример 144
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((1-метилпирролидин-3-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,7 мг) получали с использованием (1-метилпирролидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.71 (m, 1Н), 3.58 (m, 1Н), 3.35 (m, 2Н), 2.95 (s, 3H), 2.92 (m, 1Н), 2.43 (m, 2Н), 2.04 (m, 1Н), 1.91 (m, 2Н), 1.64 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 145
(R)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((1-этилпирролидин-2-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,2 мг) получали с использованием (R)-(1-зтилпирролидин-2-ил)метанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.83 (m, 1Н), 3.71 (m, 1Н), 3.63 (m, 1Н), 3.47 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 2.45 (m, 1Н), 2.17 (m, 2Н), 2.12 (m, 1Н), 1.36 (m, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Пример 146
(S)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((1-этилпирролидин-2-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (4,3 мг) получали с использованием (S)-(1-этилпирролидин-2-ил)метанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.06 (m, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.76 (m, 1Н), 3.70 (m, 2Н), 3.52 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 2.47 (m, 1Н), 2.16 (m, 2Н), 2.05 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Пример 147
8-(((азетидин-3-илметил)амино)метил)-2-((4-бензилфенокси)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,6 мг) получали с использованием трет-бутил-3-(аминометил)азетидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1H), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1H), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (m, 2Н), 4.83 (m, 2Н), 4.22 (m, 2Н), 4.04 (m, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.53 (m, 2Н), 3.42 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 442 (M+H).
Пример 148
(R)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((тетрагидрофуран-2-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,2 мг) получали с использованием (R)-(тетрагидрофуран-2-ил)метанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.07 (m, 2Н), 4.81 (m, 1Н), 4.25 (m, 2Н), 3.92 (m, 1Н), 3.89 (s, 2Н), 3.82 (m, 1Н), 3.33 (m, 1Н), 3.12 (m, 1Н), 2.13 (m, 1Н), 1.96 (m, 2Н), 1.62 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 457 (М+Н).
Пример 149
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (4,0 мг) получали с использованием (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.07 (s, 2Н), 4.80 (m, 2Н), 3.96 (m, 2Н), 3.89 (m, 2Н), 3.43 (m, 2Н), 3.07 (m, 2Н), 1.83 (m, 1Н), 1.73 (m, 2Н), 1.40 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 471 (М+Н).
Пример 150
(S)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((пирролидин-3-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,4 мг) получали с использованием трет-бутил-(R)-3-(аминометил)пирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.86 (s, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.61 (m, 1Н), 3.44 (m, 1Н), 3.35 (m, 2Н), 3.08 (m, 1Н), 2.85 (m, 1Н), 2.37 (m, 1Н), 1.86 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 456 (М+Н).
Пример 151
(R)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((пирролидин-3-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (8,2 мг) получали с использованием трет-бутил-(S)-3-(аминометил)пирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.86 (s, 2Н), 3.88 (s, 2Н), 3.61 (m, 1Н), 3.45 (m, 1Н), 3.35 (m, 2Н), 3.08 (m, 1Н), 2.85 (m, 1Н), 2.37 (m, 1Н), 1.86 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 456 (М+Н).
Пример 152
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,2 мг) получали с использованием (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.57 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.02 (m, 2Н), 2.86 (s, 3H), 2.20 (m, 1Н), 2.14 (m, 2Н), 1.59 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Пример 153
(S)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-3-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (10,6 мг) получали с использованием трет-бутил-(R)-3-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 3.88 (s, 2Н), 3.54 (m, 1Н), 3.38 (m, 1Н), 3.18 (m, 2Н), 2.93 (m, 1Н), 2.83 (m, 1Н), 2.36 (m, 1Н), 2.07 (m, 1Н), 1.99 (m, 1Н), 1.79 (m, 1Н), 1.41 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 154
(R)-2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((пиперидин-3-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,0 мг) получали с использованием трет-бутил-(S)-3-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 3.88 (s, 2Н), 3.54 (m, 1Н), 3.38 (m, 1Н), 3.18 (m, 2Н), 2.93 (m, 1Н), 2.83 (m, 1Н), 2.36 (m, 1Н), 2.07 (m, 1Н), 2.00 (m, 1Н), 1.79 (m, 1Н), 1.42 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 155
8-((((1r,4r)-4-аминоциклогексил)амино)метил)-2-((4-бензилфенокси)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,2 мг) получали с использованием N-Вос-транс-1,4-циклогександиамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.65 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.98 (m, 2Н), 5.07 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.89 (s, 2Н), 3.31 (m, 1Н), 3.15 (m, 1Н), 2.35 (m, 2Н), 2.18 (m, 2Н), 1.65 (m, 2Н), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 156
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((пиридин-3-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (7,3 мг) получали с использованием пиридин-3-илметанамина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.76 (m, 1Н), 8.67 (m, 1Н), 8.15 (m, 1Н), 8.05 (m, 1Н), 7.63 (m, 1Н), 7.23 (m, 2Н), 7.14 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.86 (s, 2Н), 4.48 (s, 2Н), 3.88 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 464 (М+Н).
Пример 157
2-((4-бензилфенокси)метил)-8-(((2-морфолиноэтил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (12,9 мг) получали с использованием 2-морфолиноэтан-1-амина, как описано на Схеме 13 (Способ М).
1
3
Н-ЯМР (CDOD, 400 МГц) δ 8.63 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.21 (m, 2Н), 7.13 (m, 5Н), 6.97 (m, 2Н), 5.06 (s, 2Н), 4.89 (s, 2Н), 3.85 (m, 4Н), 3.57 (m, 2Н), 3.32 (m, 2Н), 3.07 (m, 4Н).
+
MS (ESI+) m/z 486 (М+Н).
Схема 14 (Способ N)
2
Общий синтез соединений N-4 проиллюстрирован на Схеме 14. Карбоновую кислоту превращают в хлорангидрид промежуточного соединения N-2 с помощью (COCl). Последующая 2-стадийная реакция приводит к промежуточному соединению N-3, которое приводят во взаимодействие таким же образом, как описано в Способе М (Стадия 2~5), с получением конечного соединения.
Пример 158
Стадия 1
трет-бутил-2-(3-хлор-4-фторфенокси)ацетат
2
3
4
К раствору трет-бутил-бромацетата (30,9 мл, 209,5 ммоль, 1,0 экв.) и 3-хлор-4-фторфенола (30,7 г, 209,5 ммоль, 1,0 экв.) в DMF (300 мл) добавляли КСО (63,6 г, 461 ммоль, 2,2 экв.). Смесь перемешивали в течение 2 часов. Ее разбавляли ЕА и органический слой промывали рассолом 3 раза. Органический экстракт сушили над MgSO и концентрировали с получением трет-бутил-2-(3-хлор-4-фторфенокси)ацетата (колич.). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 261 (М+Н).
Стадия 2
2-(3-хлор-4-фторфенокси)уксусная кислота
К раствору трет-бутил-2-(3-хлор-4-фторфенокси)ацетата в DCM (300 мл) добавляли TFA (150 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов и концентрировали в вакууме. Остаток кристаллизовали с н-гексаном с получением промежуточного соединения N-1 (41,3 г, 96%-ный выход) в виде белого твердого вещества.
+
MS (ESI+) m/z 205 (М+Н).
Стадия 3
2-(3-хлор-4-фторфенокси)ацетилхлорид
2
К суспензии промежуточного соединения N-1 (43,5 г, 213 ммоль) в DCM добавляли (COCl) (27,4 мл, 319 ммоль) и DMF (1 мл) при 0°С. Смесь оставляли перемешиваться в течение 3 часов и концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения N-2 (колич.). Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 219 (М+Н).
(Ацилхлорид превращается в метиловый сложный эфир в образце LC-MS из-за МеОН в качестве растворителя для образца)
Стадия 4
8-хлор-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
2
3
К промежуточному соединению N-2 (213 ммоль, неочищенный) в THF (500 мл) добавляли 3-амино-2-хлор-N-(2,4-диметоксибензил)изоникотинамид (42,9 г, 133 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов. Осадок отфильтровывали и промывали THF. К суспензии собранного твердого вещества в МЕК (500 мл) добавляли KCO (18,4 г, 399 ммоль). Смесь нагревали при температуре флегмообразования и оставляли перемешиваться в течение ночи. После того как реакционную смесь охладили до комнатной температуры, вливали воду (400 мл). Смесь оставляли интенсивно перемешиваться в течение 30 мин на ледяной бане. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Твердое вещество собирали и сушили при пониженном давлении с получением промежуточного соединения N-3 (54,5 г, 82%-ный выход).
Стадия 5~8 (такая же методика, как описано в Способе М)
(S)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((пирролидин-3-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,4 мг) получали с использованием трет-бутил-(R)-3-(аминометил)пирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 3.46 (m, 1Н), 3.36 (m. 2Н), 3.29 (m.1Н), 3.09 (m, 1Н), 2.86 (m, 1Н), 2.38 (m, 1Н), 1.87 (m, 1Н).
+
MS (ESI+): m/z 418 (М+Н).
Пример 159
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((1-метилпирролидин-3-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,1 мг) получали с использованием (1-метилпирролидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD,) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 3.46 (m, 1Н), 3.42 (m. 1Н), 3.36 (m. 2Н), 2.96 (s, 3H), 2.45 (m, 2Н), 2.04 (m, 1Н), 1.95 (m, 1Н), 1.64 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 432 (М+Н).
Пример 160
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (6,2 мг) получали с использованием (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 мгц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 3.58 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.21 (m, 1Н), 2.15 (m, 2Н), 1.62 (m, 2Н)
+
MS (ESI+) m/z 446 (М+Н).
Пример 161
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (4,4 мг) получали с использованием (тетрагидропиран-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.10 (s, 2Н), 4.80 (s, 2Н), 3.97 (m, 2Н), 3.44 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.09 (m, 2Н), 2.09 (m, 1Н), 1.75 (m, 2Н), 1.39 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 433 (М+Н).
ПРИМЕР 162
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,7 мг) получали с использованием (тетрагидропиран-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.25 (гл, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.10 (s, 2Н), 4.79 (s, 2Н), 3.94 (m, 1Н), 3.81 (m, 1Н), 3.49 (m, 1Н), 3.31 (m, 1Н), 3.10 (m, 2Н), 2.10 (m, 1Н), 1.98 (m, 1Н), 1.65 (m, 2Н), 1.46 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 433 (М+Н).
Пример 163
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((тетрагидрофуран-3-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (4,7 мг) получали с использованием (тетрагидрофуран-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
:
:
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.10 (s, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 3.91 (m, 2Н), 3.77 (m, 1Н), 3.60 (m, 1Н), 3.23 (m, 2Н), 2.70 (m, 1Н), 2.21 (m, 1Н), 1.75 (m 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 419 (М+Н).
Пример 164
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-морфолиноэтил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,3 мг) получали с использованием 2-морфолиноэтан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.88 (s, 2Н), 3.86 (m, 4Н), 3.59 (m, 2Н), 3.31 (m, 2Н), 3.08 (m, 4Н).
+
MS (ESI+) m/z 448 (М+Н).
Пример 165
8-(((3-(1Н-имидазол-1-ил)пропил)амино)метил)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (14,3 мг) получали с использованием 3-(1Н-имидазол-1-ил)пропан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 9.00 (s, 1Н), 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.70 (s, 1Н), 7.60 (s, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.08 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.43 (m, 2Н), 3.29 (m, 2Н), 2.43 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 443 (М+Н).
Пример 166
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((5-метилпиразин-2-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (8,4 мг) получали с использованием (5-метилпиразин-2-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.58 (m, 1Н), 8.53 (m, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.91 (s, 2Н), 4.59 (s, 2Н), 2.58 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 441 (M+H).
Пример 167
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((морфолин-2-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (10,7 мг) получали с использованием морфолин-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.25 (m, 1Н), 4.17 (m, 1Н), 3.89 (m, 1Н), 3.43 (m, 1Н), 3.37 (m, 1Н), 3.18 (m, 2Н), 3.01 (m, 1Н), 1.29 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 434 (М+Н).
Пример 168
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((1-изопропилпиперидин-4-ил)-метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (20,0 мг) получали с использованием (1-изопропилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 3.52 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.07 (m, 2Н), 2.20 (m, 3H), 1.65 (m, 2Н), 1.35 (m, 2Н), 1.35 (d, J=6,4 Гц,6Н).
+
MS (ESI+) m/z 474 (М+Н).
Пример 169
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((1-циклопентилпиперидин-4-ил)-метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (30,0 мг) получали с использованием (1-циклопентилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 3.67 (m, 2Н), 3.49 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.01 (m, 2Н), 2.17 (m, 5Н), 1.69 (m, 8Н).
+
MS (ESI+) m/z 501 (М+Н).
Пример 170
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((пиридин-2-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,7 мг) получали с использованием пиридин-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.69 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.63 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.86 (m, 1Н), 7.44 (m, 2Н), 7.22 (dd, J=2,4, 5,6 Гц, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.88 (s, 2Н), 4.55 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 426 (М+Н).
Пример 171
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((фуран-2-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,5 мг) получали с использованием фуран-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.61 (d, J=1,2 Гц, 1Н), 7.23 (dd, J=3,2, 5,6 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 6.63 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 6.48 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.75 (s, 2Н), 4.45 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 415 (М+Н).
Пример 172
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((пиридин-3-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,4 мг) получали с использованием пиридин-3-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.72 (s, 1Н), 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.64 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 8.06 (m, 2Н), 7.56 (m, 1Н), 7.23 (dd, J=3,2, 5,6 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.48 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 426 (М+Н).
Пример 173
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((пиридин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,6 мг) получали с использованием пиридин-4-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (m, 3H), 8.08 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.63 (d, J=6,0 Гц, 2Н), 7.22 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 5.08 (s, 2Н), 4.86 (s, 2Н), 4.49 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 426 (М+Н).
Пример 174
5-((((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)метил)-N,N-диметилфуран-2-карбоксамид
Указанное в заголовке соединение (1,0 мг) получали с использованием 5-(аминометил)-N,N-диметилфуран-2-карбоксамида, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (dd, J=3,2, 6,0 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.02 (m, 2Н), 6.74 (d, J=3,6 Гц, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.90 (s, 2Н), 4.52 (s, 2Н), 3.29 (s, 6Н).
+
MS (ESI+) m/z 486 (М+Н).
Пример 175
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(2-метил-1Н-имидазол-1-ил)зтил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,2 мг) получали с использованием 2-(2-метил-1Н-имидазол-1-ил)этан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.82 (m, 1Н), 8.06 (m, 1Н), 7.25 (m, 1Н), 7.20 (m, 2Н), 7.05 (m, 2Н), 5.10 (s, 2Н), 4.89 (s, 2Н), 3.20 (m, 2Н), 2.67 (m, 2Н), 2.15 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 443 (М+Н).
Пример 176
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(тиофен-2-ил)этил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,9 мг) получали с использованием 2-(тиофен-2-ил)этан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.30 (dd, J=1,2, 4,8 Гц, 1Н), 7.24 (dd, J=2,8, 6,0 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.00 (m, 3H), 5.08 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.47 (m, 2Н), 3.33 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 445 (М+Н).
Пример 177
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((3-метилизоксазол-5-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,2 мг) получали с использованием (3-метилизоксазол-5-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,6 Гц, 1H), 7.23 (dd, J=3,2, 6,0 Гц, 1H), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 6.51 (s, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 4.59 (s, 2Н), 2.30 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 430 (M+H).
Пример 178
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((4-метилморфолин-2-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,8 мг) получали с использованием (4-метилморфолин-2-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 4.30 (m, 1Н), 4.21 (m, 1Н), 3.91 (m, 1Н), 3.50 (m, 3H), 3.33 (m, 1Н), 3.15 (m, 1Н), 2.97 (m, 1Н), 2.97 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 448 (М+Н).
Пример 179
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((оксазол-2-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,2 мг) получали с использованием оксазол-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.02 (s, 1Н), 7.21 (m, 3H), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.95 (s, 2Н), 4.64 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z416 (М+Н).
Пример 180
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((пиримидин-2-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (14,3 мг) получали с использованием пиримидин-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.85 (d, J=5,2 Гц, 2Н), 8.69 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.49 (m, 1Н), 7.23 (dd, J=2,8, 5,6 Гц, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.98 (s, 2Н), 4.69 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 427 (М+Н).
Пример 181
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((тиофен-2-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,3 мг) получали с использованием тиофен-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.56 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.31 (d, J=3,6 Гц, 1Н), 7.22 (dd, J=2,8, 5,6 Гц, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.10 (m, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 5.08 (s, 2Н), 4.78 (s, 2Н), 4.63 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 431 (М+Н).
Пример 182
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((2-хлорпиридин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (8,8 мг) получали с использованием (2-хлорпиридин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.45 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.64 (s, 1Н), 7.51 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (dd, J=2,4, 5,6 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.86 (s, 2Н), 4.46 (s, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 460 (М+Н).
Пример 183
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(3,5-диметил-1Н-пиразол-1-ил)-зтил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (11,5 мг) получали с использованием 2-(3,5-диметил-1Н-пиразол-1-ил)этан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.22 (dd, J=2,8, 5,6 Гц, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 5.89 (s, 1Н), 5.08 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 4.38 (t, J=5,6 Гц, 2Н), 3.62 (t, J=5,6 Гц, 2Н), 2.27 (s, 3H), 2.15 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 457 (М+Н).
Пример 184
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(6-метилпиридин-2-ил)этил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (19,0 мг) получали с использованием 2-(6-метилпиридин-2-ил)этан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.15 (m, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.59 (m, 2Н), 7.22 (dd, J=2,8, 6,0 Гц, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.89 (s, 2Н), 3.68 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.47 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 2.69 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 454 (М+Н).
Пример 185
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((3-(5-оксо-5,7-дигидро-6Н-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил)пропил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (4,6 мг) получали с использованием 6-(3-аминопропил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,4-Ь]пиридин-5-она, как описано на Схеме 14 (Способ N).
+
MS (ESI+) m/z 509 (М+Н).
Пример 186
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(пиридин-2-ил)зтил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,9 мг) получали с использованием 2-(пиридин-2-ил)зтан-1-амина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.57 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 7.95 (m, 1Н), 7.51 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.44 (m, 1Н), 7.23 (dd, J=2,4, 5,6 Гц, 1Н), 7.17 (m, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.87 (s, 2Н), 3.63 (t, J=7,2 Гц, 2Н), 3.35 (t, J=6,8 Гц, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 440 (М+Н).
Пример 187
(R)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((морфолин-2-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (11,1 мг) получали с использованием (R)-морфолин-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.25 (m, 1Н), 4.17 (m, 1Н), 3.89 (m, 1Н), 3.43 (m, 1Н), 3.37 (m, 1Н), 3.18 (m, 2Н), 3.01 (m, 1Н), 1.29 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 434 (М+Н).
Пример 188
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((1-(2-гидроксизтил)пиперидин-4-ил)метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,8 мг) получали с использованием 2-(4-(аминометил)пиперидин-1-ил)этан-1-ола, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 3.87 (m, 2Н), 3.71 (m, 2Н), 3.24 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.07 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.16 (m, 2Н), 1.67 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 476 (М+Н).
Пример 189
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-((((1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (11,6 мг) получали с использованием (1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 3.70 (m, 2Н), 3.67 (m, 2Н), 3.39 (s, 3H), 3.33 (m, 2Н), 3.17 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.15 (m, 2Н), 1.66 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 490 (М+Н).
Пример 190
(S)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((морфолин-2-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (22,8 мг) получали с использованием (S)-морфолин-2-илметанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.25 (m, 1Н), 4.17 (m, 1Н), 3.89 (m, 1Н), 3.43 (m, 1Н), 3.37 (m, 1Н), 3.18 (m, 2Н), 3.01 (m, 1Н), 1.29 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 434 (М+Н).
Пример 191
2-циклопентил-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,2 мг) получали с использованием циклопентанкарбонилхлорида и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.59 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.01 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 3.44 (m, 2Н), 3.20 (m, 2Н), 3.10 (m, 1Н), 3.05 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.12 (m, 2Н), 2.04 (m, 4Н), 1.85 (m, 2Н), 1.72 (m, 2Н), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 342 (М+Н).
Пример 192
2-циклопентил-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,6 мг) получали с использованием циклопентанкарбонилхлорида и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.58 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.02 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 3.58 (m, 2Н), 3.20 (m, 2Н), 3.10 (m, 1Н), 3.04 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.16 (m, 3H), 2.03 (m, 4Н), 1.84 (m, 2Н), 1.73 (m, 2Н), 1.61 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 356 (М+Н).
Пример 193
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-2-(тетрагидрофуран-2-ил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,0 мг) получали с использованием тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.62 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 4.89 (m, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 4.12 (m, 1Н), 3.96 (m, 1Н), 3.46 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.40 (m, 1Н), 2.23 (m, 2Н), 2.11 (m, 2Н), 2.02 (m, 2Н), 1.57 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 344 (М+Н).
Пример 194
8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-(тетрагидрофуран-2-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (9,4 мг) получали с использованием тетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
;
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.62 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d J=5,2 Гц, 1Н), 4.87 (m, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 4.12 (m, 1Н), 3.96 (m, 1Н), 3.58 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.41 (m, 1Н), 2.23 (m, 2Н), 2.15 (m, 2Н), 2.02 (m, 2Н), 1.61 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 358 (М+Н).
Пример 195
8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-2-(тетрагидрофуран-3-ил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (8,4 мг) получали с использованием тетрагидрофуран-3-карбоновой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)-пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.61 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.01 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 4.17 (m, 1Н), 4.05 (m, 2Н), 3.88 (m, 1Н), 3.50 (m, 1Н), 3.45 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.39 (m, 2Н), 2.22 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 344 (М+Н).
Пример 196
8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-2-(тетрагидрофуран-3-ил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение получали с использованием тетрагидрофуран-3-карбоновой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.61 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.01 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 4.17 (m, 1Н), 4.05 (m, 2Н), 3.88 (m, 1Н), 3.57 (m, 1Н), 3.49 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.37 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.14 (m, 2Н), 1.63 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 358 (М+Н).
Пример 197
2-(2,3-дигидробензофуран-2-ил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (11,8 мг) получали с использованием 2,3-дигидробензофуран-2-карбоновой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)-пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.14 (m, 1Н), 6.89 (m, 2Н), 5.70 (m, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 3.84 (m, 1Н), 3.64 (m, 1Н), 3.44 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.55 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 392 (М+Н).
Пример 198
2-(2,3-дигидробензофуран-2-ил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (8,9 мг) получали с использованием 2,3-дигидробензофуран-2-карбоновой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)-метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.14 (m, 1Н), 6.90 (m, 2Н), 5.70 (m, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 3.84 (m, 1Н), 3.64 (m, 1Н), 3.57 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.02 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.18 (m, 1Н), 2.13 (m, 2Н), 1.60 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 406 (М+Н).
Пример 199
2-(хроман-2-ил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (18,0 мг) получали с использованием хроман-2-карбоновой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.10 (m, 2Н), 6.91 (m, 2Н), 5.10 (m, 1Н), 4.82 (m, 2Н), 3.44 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.94 (m, 2Н), 2.47 (m, 1Н), 2.30 (m, 1Н), 2.20 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.55 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 406 (М+Н).
Пример 200
2-(хроман-2-ил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,0 мг) получали с использованием хроман-2-карбоновой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.08 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.11 (m, 2Н), 6.91 (m, 2Н), 5.09 (m, 1Н), 4.82 (m, 2Н), 3.59 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.94 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.45 (m, 1Н), 2.30 (m, 1Н), 2.16 (m, 3H), 1.58 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 420 (М+Н).
Пример 201
2-(2,3-дигидро-1Н-инден-2-ил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,2 мг) получали с использованием 2,3-дигидро-1Н-инден-2-карбоновой кислоты и (1-метил пиперидин-4-ил)-метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
+
MS (ESI+) m/z 404 (М+Н).
Пример 202
2-((бензилокси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,5 мг) получали с использованием 2-(бензилокси)уксусной кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5.2 Гц, 1Н), 7.40 (m, 2Н), 7.33 (m, 2Н), 7.29 (m, 1Н), 4.82 (s, 2Н), 4.70 (s, 2Н), 4.53 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 394 (М+Н).
Пример 203
2-((бензилокси)метил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,8 мг) получали с использованием 2-(бензилокси)уксусной кислоты и (1-метил пиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.40 (m, 2Н), 7.33 (m, 2Н), 7.29 (m, 1Н), 4.82 (s, 2Н), 4.70 (s, 2Н), 4.53 (s, 2Н), 3.57 (m, 2Н), 3.15 (m, 2Н), 3.02 (m, 2Н), 2.86 (s, 3H), 2.18 (m, 1Н), 2.14 (m, 2Н), 1.58 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 408 (М+Н).
Пример 204
(S)-2-((бензилокси)метил)-8-(((пирролидин-3-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (3,9 мг) получали с использованием 2-(бензилокси)уксусной кислоты и трет-бутил-(R)-3-(аминометил)пирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.40 (m, 2Н), 7.33 (m, 2Н), 7.29 (m, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 4.70 (s, 2Н), 4.53 (s, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 3.44 (m, 1Н), 3.34 (m, 2Н), 3.29 (m, 1Н), 3.08 (m, 1Н), 2.84 (m, 1Н), 2.37 (m, 1Н), 1.86 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 380 (М+Н).
Пример 205
2-((бензилокси)метил)-8-((((1-метилпирролидин-3-ил)метил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,8 мг) получали с использованием 2-(бензилокси)уксусной кислоты и (1-метилпирролидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.40 (m, 2Н), 7.34 (m, 2Н), 7.29 (m, 1Н), 4.84 (s, 2Н), 4.70 (s, 2Н), 4.53 (s, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 3.46 (m, 1Н), 3.42 (m, 1Н), 3.36 (m, 2Н), 2.95 (s, 3H), 2.45 (m, 2Н), 2.04 (m, 1Н), 1.95 (m, 1Н), 1.64 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 394 (М+Н).
Пример 206
Стадия 1
2-((3-хлорбензил)окси)уксусная кислота
4
К раствору 3-хлорбензилового спирта (713 мг, 5,0 ммоль) в безводном THF (10 мл) по каплям добавляли NaH (60%-ную дисперсию в минеральном масле, 200 мг, 5,0 ммоль) в безводном THF (10 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин при температуре окружающей среды. К этой смеси по каплям добавляли бромуксусную кислоту (144 мкл, 2,0 ммоль) в безводном THF (2 мл) и затем оставляли перемешиваться в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и разбавляли 2 н. водным раствором NaOH, водой и EtOAc. Органический слой отбрасывали, а водный слой подкисляли 2 н. водным раствором HCl. Подкисленный водный слой экстрагировали ЕА и сушили над MgSO. Экстракт концентрировали в вакууме с получением 2-((3-хлорбензил)окси)уксусной кислоты в виде неочищенного продукта и остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 201 (М+Н).
Стадия 2~7 (Та же методика, как описано в Способе М)
2-(((3-хлорбензил)окси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (6,4 мг) получали с использованием 2-((3-хлорбензил)окси)уксусной кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.45 (m, 1Н), 7.33 (m, 2Н), 7.29 (m, 1Н), 4.83 (s, 2Н), 4.69 (s, 2Н), 4.55 (s, 2Н), 3.44 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.20 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.55 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 207
2-(((3-хлорбензил)окси)метил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,3 мг) получали с использованием 2-((3-хлорбензил)окси)уксусной кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.45 (m, 1Н), 7.33 (m, 2Н), 7.28 (m, 1Н), 4.83 (s, 2Н), 4.69 (s, 2Н), 4.55 (s, 2Н), 3.57 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.15 (m, 3H), 1.55 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 442 (М+Н).
Пример 208
(S)-2-(((3-хлорбензил)окси)метил)-8-(((пирролидин-3-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,7 мг) получали с использованием 2-((3-хлорбензил)окси)уксусной кислоты и трет-бутил-(R)-3-(аминометил)-пирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.65 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.44 (m, 1Н), 7.32 (m, 2Н), 7.28 (m, 1Н), 4.85 (s, 2Н), 4.69 (s, 2Н), 4.55 (s, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 3.44 (m, 1Н), 3.35 (m, 2Н), 3.31 (m, 1Н), 3.09 (m, 1Н), 2.85 (m, 1Н), 2.38 (m, 1Н), 1.86 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 414 (М+Н).
Пример 209
Стадия 1
2-((2-хлорбензил)окси)уксусная кислота
Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием 2-хлорбензилового спирта по такой же методике, как для 2-((2-хлорбензил)-окси)уксусной кислоты.
+
MS (ESI+) m/z 201 (М+Н).
Стадия 2~7 (Такая же методика, как описано в Способе М)
2-(((2-хлорбензил)окси)метил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (7,8 мг) получали с использованием 2-((2-хлорбензил)окси)уксусной кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.57 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 7.38 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 7.30 (m, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 4.61 (s, 2Н), 3.45 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.54 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 428 (М+Н).
Пример 210
2-(((2-хлорбензил)окси)метил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (7,1 мг) получали с использованием 2-((2-хлорбензил)окси)уксусной кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.04 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.57 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 7.38 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 7.29 (m, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 4.61 (s, 2Н), 3.57 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н), 2.86 (s, 3H), 2.15 (m, 3H), 1.61 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 442 (М+Н).
Пример 211
Стадия 1
Метил-2-(4-бензилфенокси)пропаноат
3
К раствору метиллактата (287 мкл, 3 ммоль), 4-бензилфенола (774 мг, 4,2 ммоль) и PPh (866 мг, 3,3 ммоль) в безводном THF (10 мл) по каплям добавляли DIAD (650 мкл, 3,3 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение ночи и концентрировали в вакууме. Концентрированный остаток очищали посредством combi-flash с получением метил-2-(4-бензилфенокси)-пропаноата (колич.) в виде бледно-желтого масла.
+
MS (ESI+) m/z 271 (М+Н).
Стадия 2
2-(4-бензилфенокси)пропановая кислота
4
К раствору метил-2-(4-бензилфенокси)пропаноата в МеОН (10 мл) добавляли 2 н. водный раствор NaOH (3,0 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов при температуре окружающей среды. 2 н. водный раствор HCl (6,0 мл) добавляли для остановки реакции. Смесь концентрировали, экстрагировали ЕА и сушили над MgSO. Экстракт концентрировали в вакууме с получением 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты в виде неочищенного соединения. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 257 (М+Н).
Стадия 3~9 (Такая же методика, как описано в Способе М)
2-(1-(4-бензилфенокси)этил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,6 мг) получали с использованием 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.63 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.02 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.19 (m, 2Н), 7.08 (m, 5Н), 6.92 (m, 2Н), 5.28 (m, 1Н), 4.92 (s, 2Н), 3.84 (s, 2Н), 3.59 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.88 (s, 3H), 2.20 (m, 1Н), 2.16 (m, 2Н), 1.71 (m, 2Н), 1.57 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 498 (М+Н).
Пример 212
2-(1-(4-бензилфенокси)этил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,9 мг) получали с использованием 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)-пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.62 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.20 (m, 2Н), 7.08 (m, 5Н), 6.92 (m, 2Н), 5.28 (m, 1Н), 4.93 (s, 2Н), 3.84 (s, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.16 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.19 (m, 1Н), 2.11 (m, 2Н), 1.71 (m, 3H), 1.53 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Пример 213
2-(1-(4-бензилфенокси)этил)-8-(((((S)-пирролидин-3-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (12,0 мг) получали с использованием 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты и трет-бутил-(R)-3-(аминометил)-пирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
:
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.62 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.01 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.19 (m, 2Н), 7.09 (m, 5Н), 6.92 (m, 2Н), 5.29 (m, 1Н), 4.89 (s, 2Н), 3.84 (s, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 3.44 (m, 1Н), 3.37 (m, 2Н), 3.31 (m, 1Н), 3.09 (m, 1Н), 2.87 (m 1Н), 2.36 (m, 1Н), 1.89 (m, 1Н), 1.71 (m, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 470 (М+Н).
Пример 214
2-(1-(4-бензилфенокси)этил)-8-((((1-метилпирролидин-3-ил)метил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (5,4 мг) получали с использованием 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты и (1-метилпирролидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.63 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.02 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.19 (m, 2Н), 7.08 (m, 5Н), 6.92 (m, 2Н), 5.29 (m, 1Н), 4.86 (s, 2Н), 3.84 (s, 2Н), 3.59 (m, 1Н), 3.47 (m, 1Н), 3.43 (m, 1Н), 3.39 (m, 2Н), 2.96 (s, 3H), 2.44 (m, 2Н), 2.04 (m, 1Н), 1.94 (m, 1Н), 1.71 (m, 3H), 1.64 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
ПРИМЕР 215
Стадия 1~2
(R)-2-(4-бензилфенокси)пропановая кислота
Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием метил-D-лактата по такой же методике, как описано для 2-(4-бензилфенокси)-пропановой кислоты.
+
MS (ESI+) m/z 257 (М+Н).
Стадия 3~9. (Такая же методика, как описано в Способе М)
(R)-2-(1-(4-бензилфенокси)этил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)метил)-пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (2,0 мг) получали с использованием (R)-2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты и тре/бутил-4-(аминометил)-пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.63 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.02 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.19 (m, 2Н), 7.08 (m, 5Н), 6.92 (m, 2Н), 5.28 (m, 1Н), 4.87 (s, 2Н), 3.84 (s, 2Н), 3.44 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 2.21 (m, 1Н), 2.09 (m, 2Н), 1.71 (m, 3H), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 484 (М+Н).
Пример 216
(R)-2-(1-(4-бензилфенокси)этил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)метил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,3 мг) получали с использованием (R)-2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)-метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.63 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.02 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.19 (m, 2Н), 7.08 (m, 5Н), 6.92 (m, 2Н), 5.30 (m, 1Н), 4.87 (s, 2Н), 3.84 (s, 2Н), 3.59 (m, 2Н), 3.18 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.17 (m, 3H), 1.71 (m, 3H), 1.61 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 498 (М+Н).
Пример 217
Стадия 1-2
(R)-2-(3-хлор-4-фторфенокси)пропановая кислота
Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием метил-D-лактата и 3-хлор-4-фторфенола с использованием такой же методики, как описано для 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты.
+
MS (ESI+) m/z 219 (М+Н).
Стадия 3-9
(R)-2-(1-(3-хлор-4-фторфенокси)этил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,0 мг) получали с использованием (R)-2-(3-хлор-4-фторфенокси)пропановой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.12 (m, 1Н), 6.98 (m, 1Н), 5.32 (q, J=6,8 Гц, 1Н), 4.87 (s, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.23 (m, 1Н), 2.12 (m, 2Н), 1.73 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 446 (М+Н).
Пример 218
(R)-2-(1-(3-хлор-4-фторфенокси)этил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)-метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (10,3 мг) получали с использованием (R)-2-(3-хлор-4-фторфенокси)пропановой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)-метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.12 (m, 1Н), 6.98 (m, 1Н), 5.32 (q, J=6,8 Гц, 1Н), 4.87 (s, 2Н), 3.58 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.17 (m, 3H), 1.73 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1.62 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 460 (М+Н).
Пример 219
Стадия 1~2
(S)-2-(3-хлор-4-фторфенокси)пропановая кислота
Указанное в заголовке соединение синтезировали с использованием метил-L-лактата и 3-хлор-4-фторфенола с использованием той же методики, как описано для 2-(4-бензилфенокси)пропановой кислоты.
+
MS (ESI+) m/z 219 (М+Н).
Стадия 3~9 (Такая же методика, как описано в Способе М)
(S)-2-(1-(3-хлор-4-фторфенокси)этил)-8-(((пиперидин-4-илметил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (19,1 мг) получали с использованием (S)-2-(3-хлор-4-фторфенокси)пропановой кислоты и трет-бутил-4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.12 (m, 1Н), 6.98 (m, 1Н), 5.32 (q, J=6,8 Гц, 1Н), 4.87 (s, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.23 (m, 1Н), 2.12 (m, 2Н), 1.73 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1.56 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 446 (M+H).
Пример 220
(S)-2-(1-(3-хлор-4-фторфенокси)этил)-8-((((1-метилпиперидин-4-ил)-метил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (18,6 мг) получали с использованием (S)-2-(3-хлор-4-фторфенокси)пропановой кислоты и (1-метилпиперидин-4-ил)-метанамина, как описано на Схеме 14 (Способ N).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.64 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.03 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.12 (m, 1Н), 6.98 (m, 1Н), 5.32 (q, J=6,8 Гц, 1Н), 4.87 (s, 2Н), 3.58 (m, 2Н), 3.19 (m, 2Н), 3.05 (m, 2Н), 2.87 (s, 3H), 2.17 (m, 3H), 1.73 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1.62 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 460 (М+Н).
Схема 15 (Способ О)
Общий синтез соединений O-6 проиллюстрирован на Схеме 15. Восстановительное аминирование альдегидного промежуточного соединения O-1 трет-бутилглицинатом приводит к промежуточному соединению O-2. Снятие защитных групп с помощью TFA и защиту с помощью Boc осуществляют с получением промежуточного соединения карбоновой кислоты O-4. Последующее амидное сочетание с использованием HATU и снятие защиты Воc с помощью TFA дают конечный продукт. (O-1 получают по такой же методике, как описано в Способе М, с использованием 3-хлор-4-фторфенола).
Пример 221
Стадия 1
трет-Бутил-((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)глицинат
3
4
К раствору промежуточного соединения O-1 (2 ммоль, неочищенный продукт) и трет-бутилглицината (410 мкл, 0,3 ммоль) в DCM порциями добавляли NaBH(OAc) (850 мг, 0,4 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин и гасили водой. Ее экстрагировали ЕА и сушили над MgSO. Органический экстракт концентрировали с получением промежуточного соединения O-2 (колич.) в виде неочищенного продукта. Неочищенное вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+)m/z 599 (М+Н).
Стадия 2
((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)глицин
Промежуточное соединение O-2 разбавляли TFA (10 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 2 часов и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли МеОН и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения О-3 (колич.) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS (ESI+) m/z 393 (М+Н).
Стадия 3
N-(трет-Бутоксикарбонил)-N-((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)глицин
3
2
К раствору промежуточного соединения O-3 (785 мг, 2 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли EtN (1,4 мл, 10 ммоль) и BocO (1,4 мл, 6 ммоль). После того, как смесь оставили перемешиваться в течение 1 часа, ее концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc и экстрагировали 2 н. водным раствором NaOH и водой. Органический слой отбрасывали и водный слой нейтрализовывали 2 н. водным раствором HCl. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Собранное твердое вещество сушили при 50°С с получением промежуточного соединения O-4 (790 мг, 1,6 ммоль) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
+
MS (ESI+) m/z 493 (М+Н).
Стадия 4
трет-Бутил-((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)(2-((2-(диметиламино)этил)(этил)-амино)-2-оксоэтил)карбамат
1
2
2
К раствору промежуточного соединения O-4 (2 мг, 0,004 ммоль) и N-этил-N,N-диметилэтан-1,2-диамина (0,2 М в диоксане, 30 мкл, 0,006 ммоль) в DMF добавляли DIPEA (0,2 М в DMF, 40 мкл, 0,008 ммоль) и HATU (0,2 М в DMF, 30 мул, 0,006 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин и экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX. Экстракт концентрировали в вакууме и очищали посредством препаративной HPLC с получением промежуточного соединения О-5 (1 мг).
+
MS (ESI+) m/z 591 (М+Н).
Стадия 5
К раствору промежуточного соединения О-5 в DCM (1 мл) добавляли TFA (0,5 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (1,0 мг).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.87 (s, 2Н), 4.32 (s, 2Н), 3.80 (m, 2Н), 3.38 (m, 4Н), 2.97 (s, 6Н), 1.24 (m, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 491 (М+Н).
Пример 222
N-бутил-2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-N-этилацетамид
Указанное в заголовке соединение (0,2 мг) получали с использованием N-этилбутан-1-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
+
MS (ESI+) m/z 476 (М+Н).
Пример 223
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-оксо-2-(пирролидин-1-ил)этил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (1,5 мг) получали с использованием пирролидина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 мгц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.15 (s, 2Н), 3.49 (m, 2Н), 3.43 (m, 2Н), 2.01 (m, 2Н), 1.91 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 446 (М+Н).
Пример 224
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-оксо-2-(пиперидин-1-ил)этил)-амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,6 мг) получали с использованием пиперидина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.83 (s, 2Н), 4.24 (s, 2Н), 3.58 (m, 2Н), 3.36 (m, 2Н), 1.68 (m, 2Н), 1.60 (m, 4Н).
+
MS (ESI+) m/z 460 (М+Н).
Пример 225
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-морфолино-2-оксоэтил)амино)-метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (0,5 мг) получали с использованием морфолина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m. 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.84 (s, 2Н), 4.26 (s, 2Н), 3.68 (m, 4Н), 3.62 (m, 2Н), 3.43 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 462 (М+Н).
Пример 226
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (10,7 мг) получали с использованием 1-метилпиперазина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.86 (s, 2Н), 4.36 (s, 2Н), 3.75 (m, 4Н), 3.34 (m, 4Н), 2.93 (s, 3H).
+
MS (ESI+) m/z 475 (М+Н).
Пример 227
2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-N-((1-метилпирролидин-3-ил)метил)ацетамид
Указанное в заголовке соединение (8,7 мг) получали с использованием (1-метилпирролидин-3-ил)метанамина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.02 (s, 2Н), 3.68 (m, 2Н), 3.41 (m, 1Н), 3.37 (m, 2Н), 3.13 (m, 1Н), 2.70 (m, 1Н), 2.25 (m, 1Н), 1.85 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 489 (М+Н).
Пример 228
(R)-8-(((2-(3-аминопирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)метил)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,9 мг) получали с использованием (R)-пирролидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.87 (s, 2Н), 4.22 (s, 2Н), 4.02 и 3.95 (m, 1Н), 3.82 (m, 1Н), 3.6 (m, 3H), 2.45 и 2.35 (m, 1Н), 2.19 и 2,07 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 461 (М+Н).
Пример 229
(S)-8-(((2-(3-аминопирролидин-1-ил)-2-оксозтил)амино)метил)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (13,4 мг) получали с использованием (S)-пирролидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.23 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.87 (s, 2Н), 4.22 (s, 2Н), 4.02 и 3.95 (m, 1Н), 3.82 (m, 1Н), 3.6 (m, 3H), 2.45 и 2.35 (m, 1Н), 2.19 и 2,07 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 461 (М+Н).
Пример 230
(R)-2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-N-(пиперидин-3-ил)ацетамид
Указанное в заголовке соединение (13,0 мг) получали с использованием (R)-пиперидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.09 (m, 1Н), 4.02 (s, 2Н), 3.44 (m, 1Н), 3.26 (m, 1Н), 2.94 (m, 2Н), 2.02 (m, 2Н), 1.80 (m, 1Н), 1.62 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 475 (М+Н).
Пример 231
(S)-2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-N-(пиперидин-3-ил)ацетамид
Указанное в заголовке соединение (17,6 мг) получали с использованием (S)-пиперидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.09 (m, 1Н), 4.02 (s, 2Н), 3.44 (m, 1Н), 3.26 (m, 1Н), 2.94 (m, 2Н), 2.02 (m, 2Н), 1.80 (m, 1Н), 1.62 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 475 (М+Н).
Пример 232
N-(1-бензилпирролидин-3-ил)-2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)ацетамид
Указанное в заголовке соединение (23,4 мг) получали с использованием 1-бензилпирролидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.66 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.05 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.52 (m, 2Н), 7.47 (m, 3H), 7.25 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.19 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7,04 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.10 (s, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.58 (m, 1Н), 4.46 (m, 2Н), 4.37 (m, 1Н), 4.02 (m, 2Н), 3.71 (m, 1Н), 3.54 (m, 1Н), 3.44 (m, 1Н), 2.58 (m, 1Н), 2.10 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 551 (М+Н).
Пример 233
2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-N-(транс-5-(пирролидин-1-ил)тетрагидрофуран-2-ил)ацетамид
Указанное в заголовке соединение (18,0 мг) получали с использованием транс-4-(1-пирролидинил)тетрагидро-3-фуранамина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.25 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.20 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7.05 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.11 (s, 2Н), 4.70 (m, 2Н), 4.25 (m, 1Н), 4.09 (m, 4Н), 4.07 (s, 2Н), 3.88 (m, 1Н), 3.74 (m, 1Н), 3.65 (m, 1Н), 3.42 (m, 1Н), 3.19 (m, 1Н), 2.09 (m, 4Н).
+
MS (ESI+) m/z 531 (М+Н).
Пример 234
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-оксо-2-(4-(пирролидин-1-ил)-пиперидин-1-ил)этил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (22,0 мг) получали с использованием 4-(пирролидин-1-ил)пиперидина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.25 (m, 1Н), 7.19 (m, 1Н), 7.05 (m, 1Н), 5.11 (s, 2Н), 4.87 (s, 2Н), 4.68 (m, 1Н), 4.35 (m, 2Н), 3.88 (m, 1Н), 3.67 (m, 2Н), 3.42 (m, 1Н), 3.17 (m, 3H), 2.79 (m, 1Н), 2.25 (m, 2Н), 2.15 (m, 2Н), 2.02 (m, 2Н), 1.76 (m, 1Н), 1.64 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 530 (М+Н).
Пример 235
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(3-морфолинопирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (20,4 мг) получали с использованием 4-(пирролидин-3-ил)морфолина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
:
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.25 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.20 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7.05 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.10 (m, 2Н), 4.88 (m, 2Н), 4.24 (m, 2Н), 3.93-4.12 (m, 2Н), 3.95 (m, 4Н), 3.69-3.85 (m, 2Н), 3.58 и 3.51 (m, 1Н), 3.36 (m, 4Н), 2.58 и 2.50 (m, 1Н), 2.36 и 2.23 (m 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 531 (М+Н).
Пример 236
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(3-(диэтиламино)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (19,2 мг) получали с использованием N,N-диэтилпирролидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.25 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.20 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7.05 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.11 (s, 2Н), 4.88 (s, 2Н), 4.25 (m, 2Н), 4.02-4.28 (m, 4Н), 3.77-3.90 (m, 2Н), 3.47-3.72 (m, 3H), 2.56 и 2.49 (m, 1Н), 2.30 и 2.16 (m, 1Н), 1.35 (m, 6Н).
+
MS (ESI+) m/z 517 (М+Н)
Пример 237
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(3-(диметиламино)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (16,8 мг) получали с использованием N,N-диметилпирролидин-3-амина, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.24 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.19 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7.05 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.10 (s, 2Н), 4.88 (s, 2Н), 4.20 (m, 2Н), 4.00 (m, 2Н), 3.75 (m, 2Н), 3.60 (m, 1Н), 2.96 (s, 6Н), 2.55 и 2.49 (m, 1Н), 2.33 и 2.20 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 489 (М+Н).
Пример 238
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-8-(((2-(3-(метиламино)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Указанное в заголовке соединение (25,6 мг) получали с использованием трет-бутил-метил(пирролидин-3-ил)карбамата, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.68 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.24 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.19 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7.05 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.10 (s, 2Н), 4.89 (m, 2Н), 4.25 (m, 2Н), 3.95 и 3.89 (m, 2Н), 3.74 (m, 2Н), 3.64 (m, 1Н), 2.78 (s, 3H), 2.50 и 2.40 (m, 1Н), 2.30 и 2.18 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 475 (М+Н).
Пример 239
(R)-2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-N-(пирролидин-3-ил)ацетамид
Указанное в заголовке соединение (17,5 мг) получали с использованием трет-бутил-(R)-3-аминопирролидин-1-карбоксилата, как описано на Схеме 15 (Способ О).
1
3
Н-ЯМР (600 МГц, CDOD) δ 8.67 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 7.25 (dd, J=3,0, 6,0 Гц, 1Н), 7.20 (t, J=9,0 Гц, 1Н), 7.05 (dt, J=3,0, 9,0 Гц), 5.11 (s, 2Н), 4.88 (s, 2Н), 4.51 (m, 1Н), 4.04 (m, 2Н), 3.55 (m, 1Н), 3.48 (m, 1Н), 3.36 (m, 2Н), 2.35 (m, 1Н), 2.07 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 461 (М+Н).
Схема 16 (Способ Р)
Общий синтез соединения Р-4 проиллюстрирован на Схеме 16. Альдегидную группу превращают в первичный амин путем двухстадийной реакции восстановительного аминирования 2,4-диметоксибензиламином и снятия защитной 2,4-диметоксибензильной группы с помощью TFA. Первичный амин промежуточного соединения Р-2 превращают в амид путем реакции сочетания с использованием HATU с получением промежуточного соединения Р-3, у которого защитную группу Воc снимают с помощью TFA (при необходимости) с получением конечных продуктов.
Пример 240
Стадия 1
2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-3-(2,4-диметоксибензил)-8-(((2,4-диметоксибензил)амино)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
3
4
К раствору промежуточного соединения 0-1 (75 мг, 0,15 ммоль) и 2,4-диметоксибензиламина (30 мкл, 0,2 ммоль) в DCM (5 мл) порциями добавляли NaBH(ОАс) (64 мг, 0,3 ммоль). После того как смесь оставили перемешиваться в течение 1 часа, ее гасили водой. Ее экстрагировали DCM, сушили над MgSO и концентрировали. Остаток очищали посредством combi-flash с получением промежуточного соединения Р-1 (64 мг, 0,10 ммоль, 67%-ный выход).
+
MS (ESI+) m/z 635 (М+Н).
Стадия 2
8-(аминометил)-2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)пиридо[3,4-d]пиримидин-4(3H)-он
Промежуточное соединение Р-1 (64 мг, 0,10 ммоль) растворяли в TFA (2 мл) и DCM (2 мл). После того как смесь оставили перемешиваться в течение ночи при 50°С, ее концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения Р-2 (колич.) в виде неочищенного продукта.
+
MS (ESI+) m/z 335 (M+H).
Стадия 3
трет-Бутил-4-(2-(((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)амино)-2-оксоэтил)пиперидин-1-карбоксилат
3
К раствору промежуточного соединения Р-2 (0,03 ммоль, 10 мг, неочищенный) и 2-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-ил)уксусной кислоты (0,03 ммоль, 7 мг) в DMF (1 мл) добавляли EtN (0,2 М в DMF, 300 мкл, 0,06 ммоль) и HATU (0,2М в DMF, 200 мкл, 0,04 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 1 часа. Ее экстрагировали с помощью картриджа UCT SPE CUBCX и очищали посредством препаративной HPLC с получением промежуточного соединения Р-3 (2 мг).
+
MS (ESI+) m/z 560 (М+Н).
Стадия 4
N-((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)-2-(пиперидин-4-ил)ацетамид
К раствору промежуточного соединения Р-3 (2 мг) в DCM (1 мл) добавляли TFA (0,3 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 30 мин и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (1,6 мг).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.56 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.27 (m, 1Н), 7.16 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.95 (s, 2Н), 3.35 (m, 2Н), 2.98 (m, 2Н), 2.30 (m, 2Н), 2.10 (m, 1Н), 2.00 (m, 2Н), 1.47 (m, 2Н).
+
MS (ESI+) m/z 460 (М+Н).
Пример 241
N-((2-((3-хлор-4-фторфенокси)метил)-4-оксо-3,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-8-ил)метил)пиперидин-3-карбоксамид
Указанное в заголовке соединение (1,6 мг) получали с использованием 1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-карбоновой кислоты, как описано на Схеме 16 (Способ Р).
1
3
Н-ЯМР (400 МГц, CDOD) δ 8.56 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=5,2 Гц, 1Н), 7.25 (m, 1Н), 7.18 (m, 1Н), 7.04 (m, 1Н), 5.09 (s, 2Н), 4.96 (s, 2Н), 3.33 (m, 1Н), 3.19 (m, 2Н), 3.11 (m, 1Н), 2.88 (m, 1Н), 2.04 (m, 1Н), 1.91 (m, 2Н), 1.78 (m, 1Н).
+
MS (ESI+) m/z 446 (М+Н).
Как использовано здесь, термин "Ас" относится к ацетильной группе.
Как использовано здесь, термин "Bn" относится к бензильной группе.
Как использовано здесь, термин "Boc" относится к трет-бутилоксикарбонилу.
Как использовано здесь, термин "DCM" относится к дихлорметану.
Как использовано здесь, термин "DDQ" относится к 2,3-дихлор-5,6-дицианобензохинону.
Как использовано здесь, термин "DIPEA" относится к N,N-диизопропилэтиламину.
Как использовано здесь, термин "DMF" относится к N,N-диметилформамиду.
Как использовано здесь, термин "dppf относится к 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцену.
Как использовано здесь, термин "EtOAc" относится к этилацетату.
Как использовано здесь, термин "Et" относится к этильной группе.
Как использовано здесь, термин "ESI" относится к ионизации электрораспылением.
Как использовано здесь, термин "HATU" относится к гексафторфосфату 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида.
Как использовано здесь, термин "HPLC" относится к высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Как использовано здесь, термин "Me" относится к метильной группе.
Как использовано здесь, термин "МЕК" относится к 2-бутанону.
Как использовано здесь, термин "MS" относится к масс-спектроскопии.
Как использовано здесь, термин "ОМе" относится к группе метокси.
Как использовано здесь, термин "Ph" относится к фенильной группе.
Как использовано здесь, термин "SPE" относится к твердофазной экстракции.
t
Как использовано здесь, термин "Bu" относится к трет-бутильной группе.
Как использовано здесь, термин "TFA" относится к трифторуксусной кислоте.
Как использовано здесь, термин "THF" относится к тетрагидрофурану.
2. Биохимическое тестирование
FLAG-меченый белок JARID1B (также известный как KDM5B) подвергали скринингу в отношении более чем 170 соединений. Для этого скрининга соединений применяли исследование резонансного переноса энергии флуоресценции с временным разрешением (TR-FRET) LANCE Ultra с использованием меченого европием (Eu) антитела, которое может специфически распознавать моно- или диметилированные пептиды (H3K4me2/1), и ULight-стрептавидина (ULight-SA), низкомолекулярного флуоресцентного красителя. При облучении при 340 нм энергия от донора Ей переносится на акцептор краситель ULight, который, в свою очередь, излучает в основном при 665 нм. Соотношение между интенсивностью первичного излучения при 665 нм и интенсивностью вторичного излучения при 590 нм использовали для количественного определения уровня метилирования лизина. Так как JARID1B удаляет больше метильных группировок из триметилированных субстратных пептидов (H3K4me3), соотношение увеличивается до тех пор, пока ферментативная реакция не завершена. Следовательно, в случае, когда соединения полностью нарушают ферментативную активность, соотношение становится равным фоновому значению.
Рекомбинантный человеческий JARID1B/KDM5B (номер доступа NP 006609) молекулярной массы 179,9 кДа экспрессировался в клетках насекомых Sf9 и содержит N-концевую метку FLAG. Фермент получали от Active Motif (номер в каталоге 31432). Триметилированный гистоновый субстратный пептид с чистотой более 95% представлял собой синтетический пептид, в котором первая 21 аминокислота соответствует последовательности человеческого гистона Н3 с тремя дополнительными аминокислотами и биотиновым мотивом (GGK-биотин), связанным с С-концом [последовательность: ART-K(Me3)-QTARKSTGGKAPRKQLA-GGK-биотин-OH], (AnaSpec, Fremont, СА, номер в каталоге ANA-1413). Референсное ингибирующее соединение транилципромин (или гидрохлорид транс-2-фенилциклопропиламина, также известный как 2-РСРА) приобретали в Sigma (St. Louis, МО. Cat. no.P8511). ULight-меченый стрептавидин (ULight-SA, номер в каталоге TRF0102), Eu-W1024-меченое антитело анти-метил-Гистон Н3 лизин 4 (H3K4me1-2) (номер в каталоге TRF0402) и буфер для детектирования LANCE 10х (номер в каталоге CR97-100) получали от PerkinElmer (Montreal, Quebec, Canada). Эксперименты TR-FRET осуществляли в белых 384-луночных планшетах малого объема, которые приобретали в PerkinElmer (ProxiPlate-384 Plus, номер в каталоге 6008280).
Сигнал TR-FRET измеряли в присутствии и пептида bio-H3K4me3, и FLAG-JARID1B путем детектирования любого количества пептида H3K4me2/1, полученного в тестовой системе. Тесты с использованием только пептида bio-H3K4me2 служили в качестве положительного контроля. Активное ферментативное развитие наблюдали при использовании JARID1B в концентрациях в диапазоне от 10 до 30 нМ. В типичном эксперименте TR-FRET JARID1B предварительно инкубировали с или без 20 мкМ, 1 мкМ или 0,1 мкМ тестовых соединений (содержащих конечную концентрацию 1% DMSO) в течение 5 мин. Ферментативные реакции инициировали путем добавления 500 нМ биотинилированного пептидного субстрата H3K4me3 плюс 500 мкМ 2-OG, 25 мкМ Fe(II) и 2 мМ аскорбата. Реакционный буфер также содержал 50 мМ Hepes (рН 7,5), 0,01% (об./об.) Tween 20 и 50 мМ NaCl. Реакционную смесь инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре перед считыванием на планшет-ридере EnVision (PerkinElmer, Waltham, MA). Результаты показаны в Талице 2.
Обозначения: +++: % ингибирования>50; ++: 50>% ингибирования>20; +: 20>% ингибирования, Н.Д.: не доступно
Как использовано здесь, термин "2,4-PDCA" относится к моногидрату 2,4-пиридиндикарбоновой кислоты.
Как использовано здесь, термин "DMSO" относится к ди метил сульфоксиду.
Как использовано здесь, термин "bio" относится к биотину или биотинилированному.
Как использовано здесь, термин "H3K4me2" относится к диметилированному лизину 4 в гистоне Н3.
Как использовано здесь, термин "H3K4me3" относится к триметилированному лизину 4 в гистоне Н3.
Как использовано здесь, термин "KDM5" относится к лизиндеметилазе 5.
Как использовано здесь, термин "a-KG" относится к альфа-кетоглутарату или его соли или сольвату.
50
Как использовано здесь, термин "IC" относится к полумаксимальной ингибирующей концентрации.
3. Клеточное тестирование
Для тестирования клеточной ингибирующей активности соединений оценивали уровень общего триметилирования на лизине 4 в гистоне Н3 посредством иммуноблот-анализа в клеточной линии человеческой остеосаркомы U2-OS, стабильно сверхэкспрессирующей KDM5B.
5
2
Клетки U2-OS высевали в 6-луночные планшеты при плотности 2,5×10 клеток/лунка в 3 мл среды Мак-Коя 5А, содержащей 10%-ную термически инактивированную фетальную бычью сыворотку и 100 ед/мл пенициллина/стрептомицина (Invitrogen Gibco, USA) и инкубировали в течение ночи. КРМбВ-экспрессирующую плазмиду, меченую Мус-DDK (Origene, USA), трансфицировали в клетки с использованием Lipofectamine 2000 (Invitrogen, USA) согласно инструкциям производителя. Через сорок восемь часов после трансфицирования клетки разбавляли до 1:100 для пассирования и неомицин-резистентные клоны отбирали в присутствии 600 мкг/мл G418 (Gibco BRL, USA) в течение 2 недель. Положительные клоны собирали и индивидуально выращивали в течение 2 недель. Экспрессию KDM5B в каждом клоне подтверждали посредством иммуноблот-анализа, и затем клоны, сверхэкспрессирующие KDM5B, поддерживали в среде Мак-Коя 5А с добавлением 300 мкг/мл G418 при 37°С в атмосфере 5% CO.
5
Для тестирования соединений клетки U2-OS, стабильно сверхэкспрессирующие KDM5B, высевали в 12-луночные планшеты с плотностью 1,0×10 клеток/лунка в 1 мл среды Мак-Коя 5А без G418. Клетки инкубировали в течение 24 часов, после чего добавляли соединения. Соединения разбавляли в среде Мак-Коя 5А, и общий объем среды в каждой лунке составлял 2 мл с конечной концентрацией DMSO 0,3%.
Через двадцать четыре часа после обработки соединениями клетки дважды промывали забуфуренным фосфатом физиологическим раствором Дюльбекко и общие клеточные белки экстрагировали буфером RIPA (Simga, USA), содержащим ингибитор протеазы (таблетки с полной смесью ингибиторов протеазы; Roche Applied Science, Switzerland). Экстракт центрифугировали при 14,000×g в течение 10 минут и собирали надосадочные жидкости. Концентрацию белков количественно определяли с использованием ВСА анализа на белок (Pierce, USA) и программного обеспечения SoftMax pro версии 5.2 (Molecular Device, USA). После денатурирования при 95°С в течение 10 минут общие белки (20 мкг белка/полоса) разделяли посредством SDS-PAGE на 4~12% градиентных гелях (Invitrogen, USA). Разделенные белки переносили на 0,45 мкм нитроцеллюлозную мембрану путем влажного электроблоттинга в течение 1 часа, и затем мембрану смачивали в физиологическом растворе, забуференном Tris, содержащем 5% нежирного сухого молока и 0,05% Tween-20 (TBS-T), в течение 1 часа при комнатной температуре. Мембрану инкубировали с 1:2000 антителами H3K4me3 (ab8580; Abeam) и 1:10000 антителами Н3 (ab1791; Abeam) в течение ночи при 4°С. Мембрану трижды промывали TBS-T в течение 30 мин и затем инкубировали с 1:5000 или 1:20000 антикроличьими вторичными антителами в течение 1 часа при комнатной температуре. Интересующие полосы белков визуализировали посредством хемилюминесценции (Amersham ECL prime Western Blotting Detection Реагентэ; GE Healthcare Lifesciences, USA). Изображение каждой полосы белка получали с помощью системы молекулярной визуализации ChemiDoc XRS (Bio-Rad, USA) и количественно определяли с использованием программного обеспечения Quantity One (ver4.6.7). Нормализованный уровень триметилирования определяли путем деления интенсивности полосы H3K4me3 на соответствующую интенсивность полосы Н3, и полумаксимальную ингибирующую концентрацию (IC50) рассчитывали с использованием Sigma Plot. Результаты приведены в Таблице 3.
50
50
50
50
++++: IC<1, +++: 1≤IC<10, ++: 10≤IC<30, +: IC≥30
4. Исследование ингибирования роста клеток
2
Клетки MCF-7 высевали в количестве 2000 клеток/лунка в 100 мкл полной среды в 96-луночные планшеты. Клетки инкубировали в течение 24 часов, после чего добавляли соединение. Соединения разбавляли в полной среде (100 мкл/лунка) и добавляли в планшеты в двух параллельных анализах. Общий объем среды в лунках составлял 200 мкл, и конечная концентрация DMSO составляла 1%. Полная среда представляла собой DMEM с 4 мМ L-глутамина, содержащего 10%-ную инактивированную теплом фетальную бычью сыворотку и 100 ед/мл пенициллин/стрептомицин (Invitrogen Gibco, USA), и клетки инкубировали при 37°С в атмосфере 5% CO.
Через 120 часов 100 мкл среды отбрасывали и в каждую лунку добавляли 10 мкл реагента Cell Counting Kit-8 (Dojindo, Japan) и инкубировали при 37°С в течение 4 ч. Количество живых клеток оценивали путем измерения абсорбции при 450 нм с использованием SpectraMax Plus384 (Molecular Devices, USA). Значения полумаксимальных концентраций ингибирования роста (GI50) рассчитывали с использованием программного обеспечения Sigma Plot или Prism6.
5. Исследования заживления ран
2
Клетки рака молочной железы (MDA-MD-231) высевали в 12-луночные планшеты (2500 клеток/лунка), на дно которых были помещены культуральные вставки. Клетки выращивали до субконфлюэнтности в среде RPMI1640, дополненной 0,5% FBS и 100 мкг/мл пенициллина/стрептомицина, и затем истощали в не содержащих сыворотки средах в течение одних суток при 37°С и 5% СО. Вставки удаляли с получением двух пластов клеток, отделенных друг от друга "раневыми областями" по 0,9 мм. Затем культуры обрабатывали тестовыми соединениями в течение 24 ч. Результаты тестов на залечивание ран в указанное время фотографировали под микроскопом с 40-кратным увеличением после образования раневых областей. Соединение №144 подавляло миграцию клеток MDA-MB-231 по сравнению с DMSO и соединением №87, неактивным соединением (см. Фиг. 1). Сходные результаты получили в трех независимых образцах. Раковые клетки окрашивали 0,1% кристаллическим фиолетовым через каждые 24 часа.
6. Исследование инвазивности клеток
5
Способность клеток рака молочной железы MDA-MB-231 инвазировать в базальную мембрану через слой ВМЕ (экстракта базальной мембраны) определяли с использованием вставок трансвелл в 24-луночном планшете. Размер пор мембраны составлял 0,5 мкм. Базальную мембрану восстанавливали путем помещения холодного ВМЕ сверху на поликарбонатный фильтр вставок планшета трансвелл. После желирования матригеля при 37°С клетки MDA-MB-231 высевали на вставки (1×10 клеток/0,3 мл/лунка) и в нижние лунки добавляли полную среду (0,5 мл/лунка). Для анализа влияния 10 мкМ соединений №87, 167, в клеточных суспензиях присутствовала изоникотиновая кислота или SAHA. После инкубирования в течение 24 ч неинвазивные клетки оставались внутри вставок, в то время как клетки, которые проникали через ВМЕ и поликарбонатный фильтр, присоединялись к нижней поверхности фильтра. Затем проникшие клетки окрашивали 0,1% кристаллическим фиолетовым. Как показано на Фиг. 2, Соединение №167 снижало инвазивный потенциал клеток рака молочной железы MDA-MB-231, так же как и SAHA.