NANOBODIEC TM ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ОПОСРЕДОВАННЫХ АГРЕГАЦИЕЙ

1. Белок или полипептид, который содержит два идентичных нанотела, где, указанное нанотело направлено против фактора фон Виллебранда (vWF) и указанное нанотело состоит из 4 каркасных областей (FR1-FR4, соответственно) и 3 определяющих комплементарность районов (CDR1-CDR3, соответственно), в которых:
i) CDR1 состоит, по существу, из:
аминокислотной последовательности YNPMG [SEQ ID NO:22]; или
аминокислотной последовательности, которая имеет 2 различия или 1 различие в аминокислотах с аминокислотной последовательностью YNPMG [SEQ ID NO:22];
и в которых:
ii) CDR2 состоит, по существу, из:
аминокислотной последовательности AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32]; или
аминокислотной последовательности, которая имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32]; или
аминокислотной последовательности, которая имеет 2 различия или 1 различие в аминокислотах с аминокислотной последовательностью AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32];
и в которых
(iii) CDR3 состоит, по существу, из:
аминокислотной последовательности AGVRAEDGRVRTLPSEYTF [SEQ ID NO:42]; или
аминокислотной последовательности, которая имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью AGVRAEDGRVRTLPSEYTF [SEQ ID NO:42]; или
аминокислотной последовательности, которая имеет 1 различие в аминокислотах с последовательностью AGVRAEDGRVRTLPSEYTF [SEQ ID NO:42].
2. Белок или полипептид по п.1, в котором:
а) CDR1 состоит, по существу, из:
аминокислотной последовательности YNPMG [SEQ ID NO:22];
и
b) CDR2 состоит, по существу, из:
аминокислотной последовательности AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32]; или
аминокислотной последовательностью, которая имеет 2 различия или 1 различие в аминокислотах с аминокислотной последовательностью AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32]; и
c) CDR3 состоит, по существу, из:
аминокислотной последовательности AGVRAEDGRVRTLPSEYTF [SEQ ID NO:42].
3. Полипептид по п.2, в котором CDR2 состоит, по существу, из аминокислотной последовательности AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32] или AISRTGGSTYYARSVEG [SEQ ID NO:31].
4. Полипептид по п.2, в котором CDR2 состоит, по существу, из аминокислотной последовательности AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32].
5. Полипептид по любому из пп.1 или 2, в котором
любая замена аминокислоты в указанном CDR является консервативной заменой аминокислоты; и
указанная аминокислотная последовательность содержит только замены аминокислот, а не делеции или инсерции аминокислот, в сравнении с вышеуказанной аминокислотной последовательностью (аминокислотными последовательностями).
6. Полипептид по п.1, в котором
любая замена аминокислоты в указанных нанотелах является консервативной заменой аминокислоты; и
указанная аминокислотная последовательность содержит только замены аминокислот, в не делеции или инсерции аминокислот, в сравнении с вышеуказанной аминокислотной последовательностью (аминокислотными последовательностями).
7. Полипептид по п.1, в котором CDR1 является аминокислотной последовательностью YNPMG [SEQ ID NO:22]; CDR2 является аминокислотной последовательностью AISRTGGSTYYPDSVEG [SEQ ID NO:32], и CDR3 является аминокислотной последовательностью AGVRAEDGRVRTLPSEYTF [SEQ ID NO:42].
8. Полипептид по п.1, где указанное нанотело является нанотелом класса KERE нанотел.
9. Полипептид по п.1, где указанное нанотело является гуманизированным вариантом указанного нанотела.
10. Белок или полипептид, который содержит два идентичных нанотела, где указанное нанотело направлено против фактора фон Виллебранда (vWF) и указанное нанотело имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности по меньшей мере с одним из нанотел, выбранных из группы, состоящей из: 12В6 (SEQ ID NO:62); 12А2 (SEQ ID NO:71); 12F2 (SEQ ID NO:72); 14H10 (SEQ ID NO:73); 12B6H1 (SEQ ID NO:86); 12B6H2 (SEQ ID NO:87); 12B6H3 (SEQ ID NO:88); 12B6H4 (SEQ ID NO:89); 12A2H1 (SEQ ID NO:90); 12A2H3 (SEQ ID NO:91); 12A2H4 (SEQ ID NO:92); 12A2H11 (SEQ ID NO:93 и 12A2H13 (SEQ ID NO:94).
11. Полипептид по п.10, где указанное нанотело имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности по меньшей мере с одним из нанотел, выбранных из группы, состоящей из: 12А2 (SEQ ID NO:71; 12A2H1 (SEQ ID NO:90); 12A2H3 (SEQ ID NO:91); 12A2H4 (SEQ ID NO:92); 12A2H11 (SEQ ID NO:93) и 12А2Н13 (SEQ ID NO:94).
12. Полипептид по п.10, где указанное нанотело имеет 80% идентичность последовательности с нанотелом 12A2H1 (SEQ ID NO:90).
13. Белок или полипептид по п.10, где указанные два нанотела связаны непосредственно друг с другом или связаны друг с другом через линкер.
14. Белок или полипептид по п.13, в котором линкером является аминокислотная последовательность.
15. Белок или полипептид по п.13, в котором этот линкер содержит 1-40 аминокислотных остатков.
16. Белок или полипептид по п.13, в котором этот линкер, по существу, состоит из остатков глицина и серина.
17. Белок или полипептид по п.13, в котором этот линкер включает в себя линкер GS9 (SEQ ID NO:84).
18. Белок или полипептид по п.13, в котором этот линкер содержит остатки аланина или, по существу, состоит из остатков аланина.
19. Белок или полипептид по п.13, в котором этот линкер содержит 1-10 остатков аланина или, по существу, состоит из 1-10 остатков аланина.
20. Белок или полипептид по п.13, в котором этот линкер содержит 3 остатка аланина или, по существу, состоит из 3 остатков аланина.
21. Белок или полипептид, который имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности по меньшей мере с одним из полипептидов из группы, состоящей из SEQ ID NO:74-76, SEQ ID NO:80-82 и SEQ ID NO:98-106.
22. Белок или полипептид по п.21, который имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности по меньшей мере с одним из полипептидов из группы, состоящей из SEQ ID NO:74-76 и SEQ ID NO:98-106.
23. Белок или полипептид по п.21, который имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности по меньшей мере с одним из полипептидов из группы, состоящей из SEQ ID NO:98-106.
24. Белок или полипептид по п.21, который имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности с полипептидом SEQ ID NO:98.
25. Белок или полипептид, который имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:98.
26. Нуклеотидная последовательность или нуклеиновая кислота, кодирующая белок или полипептид по любому из пп.1, 10, 21 или 25.
27. Клетка-хозяин, содержащая нуклеотидную последовательность или нуклеиновую кислоту по п.26 или экспрессирующая или способная экспрессировать белок или полипептид по любому из пп.1, 10, 21 или 25.
28. Способ получения белка или полипептида по любому из пп.1, 10, 21 или 25, который предусматривает культивирование или поддержание клетки-хозяина по п.27 в условиях, в которых указанная клетка-хозяин продуцирует или экспрессирует белок или полипептид по любому из пп.1, 10, 21 или 25; или который необязательно дополнительно предусматривает выделение белка или полипептида по любому из пп.1, 10, 21 или 25.
29. Фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере один белок или полипептид по любому из пп.1, 10, 21 или 25 и необязательно по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
30. Применение белка или полипептида по любому из пп.1, 10, 21 или 25 для приготовления лекарственного средства для предотвращения или лечения заболевания или нарушения, связанного с опосредованной тромбоцитами агрегацией.
31. Белок или полипептид по любому из пп.1, 10, 21 или 25 для применения в предотвращении или лечении заболевания или нарушения, связанного с опосредованной тромбоцитами агрегацией.
32. Применение белка или полипептида по любому из пп.1, 10, 21 или 25 для приготовления лекарственного средства для предотвращения или лечения заболевания или нарушения, связанного с опосредованной тромбоцитами агрегацией, выбранного из неокклюзивного тромба, образования окклюзивного тромба, образования артериального тромба, острой коронарной окклюзии, окклюзивного заболевания периферических артерий, рестеноза и нарушений, возникающих вследствие шунтирования коронарных артерий, замены клапана коронарной артерии и коронарных вмешательств, таких как ангиопластика, стентирование или, атерэктомия, гиперплазия после ангиопластики, атерэктомия или артериальное стентирование, окклюзивного синдрома в сосудистой системе или отсутствия раскрытого состояния больных артерий, тромбоцитопенической тромбогемолитической пурпуры (ТТР), преходящего ишемического нарушения мозгового кровообращения, нестабильной или стабильной стенокардии, синдрома HELLP, эндартерэктомии сонной артерии, стеноза сонной артерии, критической ишемии конечностей, кардиоэмболии, заболевания периферических сосудов, рестеноза и инфаркта миокарда.
33. Белок или пептид по любому из пп.1, 10, 21 или 25 для применения в предотвращении или лечении заболевания или нарушения, связанного с опосредованной тромбоцитами агрегацией, выбранного из неокклюзивного тромба, образования окклюзивного тромба, образования артериального тромба, острой коронарной окклюзии, окклюзивного заболевания периферических артерий, рестеноза и нарушений, возникающих вследствие шунтирования коронарных артерий, замены клапана коронарной артерии и коронарных вмешательств, таких как ангиопластика, стентирование или, атерэктомия, гиперплазия после ангиопластики, атерэктомия или артериальное стентирование, окклюзивного синдрома в сосудистой системе или отсутствия раскрытого состояния больных артерий, тромбоцитопенической тромбогемолитической пурпуры (ТТР), преходящего ишемического нарушения мозгового кровообращения, нестабильной или стабильной стенокардии, синдрома HELLP, эндартерэктомии сонной артерии, стеноза сонной артерии, критической ишемии конечностей, кардиоэмболии, заболевания периферических сосудов, рестеноза и инфаркта миокарда.