ФЕРМЕНТАТИВНОЕ ТРАНСФОСФОРИЛИРОВАНИЕ САХАРНЫХ СУБСТРАТОВ

1. Способ получения одного или более фосфатов сахаров посредством ферментативного трансфосфорилирования, включающий следующие стадии:
(i) обеспечение одного или более сахарных субстратов, выбранных из группы, состоящей из альдоз и кетоз.
(ii) обеспечение одного или более субстратов - доноров фосфата, выбранных из группы фосфорилированных углеводов
(iii) обеспечение альфа-глюкозо-1-фосфатазы или фермента, обладающего активностью альфа-глюкозо-1-фосфатазы,
(iv) инкубирование одного или более сахарных субстратов, обеспеченных на стадии (i), и одного или более субстратов - доноров фосфата, обеспеченных на стадии (ii), с альфа-глюкозо-1-фосфатазой или, соответственно, ферментом, обладающим активностью альфа-глюкозо-1-фосфатазы, обеспеченными на стадии (iii), в условиях, которые позволяют трансфосфорилирование,
(v) необязательно, очистку одного или более фосфатов сахаров, полученных на стадии (iv).
2. Способ по п. 1, в котором сахарный субстрат (субстраты) выбирают из группы, состоящей из глюкозы, глюкозамина, N-ацетилглюкозамина, фруктозы, галактозы, фукозы, маннозы, сорбозы, ксилозы, арабинозы, ксилита, арабитола, рамнозы и N-ацетилнейраминовой кислоты.
3. Способ по п. 1, в котором один или более субстратов - доноров фосфата выбирают из группы, состоящей из альфа-глюкозо-1-фосфата, глюкозо-6-фосфата, фруктозо-6-фосфата и фруктозо-1-фосфата.
4. Способ по п. 1, в котором субстрат - донор фосфата или один из субстратов - доноров фосфата, обеспеченных на стадии (ii), представляет собой альфа-глюкозо-1-фосфат.
5. Способ по п. 4, в котором стадия (ii) включает ферментативное превращение сахарозы в D-фруктозу и альфа-D-глюкозо-1-фосфат с помощью сахарозофосфорилазы или фермента, обладающего активностью сахарозофосфорилазы, в присутствии фосфата или одного или более источников фосфата.
6. Способ по п. 5, в котором стадию (ii) и стадию (iv) и необязательно стадию (iii) проводят одновременно.
7. Применение биокатализатора, обладающего сахарозофосфорилазной активностью и альфа-глюкозо-1-фосфатазной активностью и/или содержащего или состоящего из сахарозофосфорилазы и альфа-глюкозо-1-фосфатазы в способе по п. 5 или 6.
8. Способ по любому из пп. 1-6, в котором стадия (iii) включает экспрессию альфа-глюкозо-1-фосфатазы или фермента, обладающего активностью альфа-глюкозо-1-фосфатазы, клеткой-хозяином.
9. Способ по п. 8, в котором альфа-глюкозо-1-фосфатазу или фермент, обладающий активностью альфа-глюкозо-1-фосфатазы, соответственно, экспрессируется в виде рекомбинантного слитого белка, содержащего метку, подходящую для выделения альфа-глюкозо-1-фосфатазы или фермента, обладающего активностью альфа-глюкозо-1-фосфатазы.