ПАКЕТИРОВАННОЕ СОБЫТИЕ 8264.44.06.1 СУСТОЙЧИВОСТЬЮ К ГЕРБИЦИДАМ, СВЯЗАННЫЕ ТРАНСГЕННЫЕ ЛИНИИ СОИ И ИХ ДЕТЕКТИРОВАНИЕ

1. Трансгенная растительная клетка сои, содержащая геном, содержащий первый полинуклеотидный участок, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO: 14, и второй полинуклеотидный участок, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO: 15.
2. Семя сои, содержащее геном, содержащий событие pDAB8264.44.06.1, такое как содержащееся в типовых семенах, хранящихся в Американской коллекции типовых культур (ATCC) под номером доступа No. PTA-11336.
3. Семя сои, содержащее клетку по п.1.
4. Растение сои, полученное в результате выращивания семени по п.2, где указанное растение содержит указанное событие.
5. Растение-потомок растения сои по п.4, где указанное растение-потомок содержит событие pDAB8264.44.06.1.
6. Трансгенное растение сои, содержащее множество клеток по п.1.
7. Растение по п.6, где указанные клетки дополнительно содержат ген резистентности к насекомым.
8. Растение по п.6, где растение является резистентным, по меньшей мере, к одному гербициду, выбранному из группы, состоящей из гербицидов на основе феноксиуксусной кислоты, гербицидов на основе феноксибутановой кислоты, гербицидов на основе пиридилоксиалкановой кислоты, гербицидов на основе глифосата и гербицидов на основе глуфосинатов, где указанное растение содержит трансгенную геномную вставку, содержащую остатки 2026-9222 SEQ ID NO:13.
9. Часть растения по п.4, где указанная часть выбрана из группы, состоящей из пыльцы, семязачатков, цветов, побегов, корней и листьев, где указанная часть содержит SEQ ID NO:14 и SEQ ID NO:15.
10. Растительная клетка, содержащая геном, содержащий событие pDAB8264.44.06.1, такое как содержащееся в типовых семенах, хранящихся в Американской коллекции типовых культур (ATCC) под номером доступа No. PTA-11336.
11. Изолированный полинуклеотид, где указанный полинуклеотид содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID No:3-28.
12. Способ скрещивания растения сои, где указанный способ включает скрещивание первого растения сои, содержащего SEQ ID NO:14 и SEQ ID NO:15, со вторым растением сои с получением третьего растения сои, содержащего геном, и анализ указанного третьего растения сои на наличие SEQ ID NO:14 и/или SEQ ID NO:15 в указанном геноме.
13. Способ по п.12, где указанный способ используют для переноса признака устойчивости к гербицидам в растение сои.
14. Способ контроля сорняков, где указанный способ включает нанесение, по меньшей мере, одного из гербицида из группы, включающей гербициды на основе феноксиуксусной кислоты, феноксибутановой кислоты, пиридилоксиалкановой кислоты, глифосата, биалафоса, фосфинотрицина или глуфосината, на область применения, где указанная область применения включает растение по п.6, где указанное растение содержит трансгенную геномную вставку, содержащую остатки 2026-9222 SEQ ID NO:13.
15. Способ по п.14, где указанный способ включает одновременное применение, по меньшей мере, двух из указанных гербицидов.
16. Способ по п.14, где указанный способ включает последовательное нанесение, по меньшей мере, двух из указанных гербицидов.
17. Способ по п.14, где указанный гербицид на основе арилоксиалканоата выбран из группы, состоящей из 2,4-D; 2,4-DB; MCPA; и MCPB; и указанный гербицид на основе пиридилоксиалкановой кислоты выбран из группы, состоящей из триклопира и флуроксипира.
18. Способ по п.14, где указанный способ включает нанесение, по меньшей мере, одного дополнительного гербицида на указанную область применения.
19. Способ по п.18, где указанный, по меньшей мере, один дополнительный гербицид представляет собой дикамбу.
20. Способ контроля сорняков в области применения, где указанный способ включает нанесение гербицида на основе феноксиуксусной кислоты, феноксибутановой кислоты, пиридилоксиалкановой кислоты, глифосата и/или глуфосината в области применения и высаживание семени по п.3, где указанная трансгенная вставка содержит остатки 2026-9222 SEQ ID NO:13, на область применения в течение 14 суток после применения гербицида(ов).
21. Способ по п.20, где указанный этап применения проводят перед указанным этапом посадки.
22. Способ по п.14, где указанный, по меньшей мере, один гербицид наносят на верхушку указанного растения.
23. Растение по п.6, где указанное растение дополнительно содержит полинуклеотид, по меньшей мере, на 95% идентичный молекуле нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO:27.
Glycine max
24. Растение по п.23, где растение относится к .
25. Пищевой продукт или маслопродукт, полученный посредством выращивания растения по п.6.
26. Растительная клетка, содержащая экспрессирующую кассету, трансгенно встроенную в единственный хромосомный локус генома растительной клетки, содержащую:
a. первую единицу транскрипции растения, которая экспрессирует ген устойчивости к гербицидам на основе глифосата;
b. вторую единицу транскрипции растения, которая экспрессирует ген устойчивости к гербицидам на основе феноксиуксусной кислоты, ген устойчивости к гербицидам на основе феноксибутановой кислоты и/или ген устойчивости к гербицидам на основе пиридилоксиалкановой кислоты; и
c. третью единицу транскрипции растения, которая экспрессирует ген устойчивости к гербицидам на основе глуфосината.
27. Способ идентификации события pDAB8264.44.06.1 в образце, где указанный способ включает детектирование соединяющей последовательности pDAB8264.44.06.1, такой как содержащаяся в семенах, хранящихся под номером доступа ATCC PTA-11336, с применением зонда или, по меньшей мере, одного праймера, которые специфически связываются с или амплифицируют указанную соединяющую последовательность, где указанная соединяющая последовательность содержит остатки 570-571 SEQ ID NO:14 или остатки 220-221 SEQ ID NO:15.
28. Способ по п.27, где указанный способ дополнительно включает амплификацию фрагмента ДНК из нуклеиновой кислоты, содержащейся в указанном образце, посредством полимеразной цепной реакции с применением, по меньшей мере, двух праймеров, где указанный первый праймер специфически связывается со встроенной последовательностью в SEQ ID NO:13 или комплементарной ей последовательностью, а второй праймер специфически связывается с последовательностью во фланкирующей последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:1 и SEQ ID NO:2.
29. Способ определения зиготности события растения сои, содержащего событие сои pDAB-8264.44.06.1, такое как содержащееся в семенах, хранящихся под номером доступа ATCC PTA-11336, где указанное событие содержит трансгенную конструкцию, где указанная трансгенная конструкция фланкирована 5'-фланкирующей геномной ДНК сои и 3'-фланкирующей геномной ДНК сои, где указанный способ включает:
получение образца ДНК геномной ДНК указанного растения сои;
получение обработанного образца посредством взаимодействия указанного образца ДНК с
a. первым праймером к событию и вторым праймером к событию, где указанный первый праймер к событию специфически связывается с указанной трансгенной конструкцией, а указанный второй праймер к событию специфически связывается с указанной 5'-фланкирующей геномной ДНК сои или указанной 3'-фланкирующей геномной ДНК сои, и где указанный первый праймер к событию и указанный второй праймер к событию позволяют получать ампликон при воздействии условиями TaqMan ПЦР
b. референсным прямым праймером и референсным обратным праймером, которые позволяют получать референсный ампликон на основе эндогенного референсного гена сои при воздействии условиями TaqMan ПЦР
c. флуоресцентным зондом к событию, который гибридизуется с указанным ампликоном события
d. флуоресцентным референсным зондом, который гибридизуется с указанным референсным ампликоном;
воздействие на указанный обработанный образец условиями основанной на флуоресценции TaqMan ПЦР по конечной точке; количественная оценка указанного флуоресцентного зонда к событию, который гибридизуется с указанным ампликоном события;
количественную оценку указанного флуоресцентного референсного зонда, который гибридизуется с указанным референсным ампликоном;
сравнение количества гибридизованного флуоресцентного зонда к событию и гибридизованного флуоресцентного референсного зонда; и
определение зиготности pDAB8264.44.06.1 посредством сравнения уровней флуоресценции гибридизованного флуоресцентного зонда к событию и гибридизованного флуоресцентного референсного зонда.
30. Способ по п.29, где указанные ампликоны состоят из 50-150 остатков.
31. Способ по п.29, где указанная 5'-фланкирующая ДНК содержит SEQ ID NO:1, а указанная 3'-фланкирующая ДНК содержит SEQ ID NO:2.
32. Способ по п.29, где указанный референсный ген представляет собой эндогенный ген сои GMFL01-25-J19.
33. Способ по п.29, где указанный первый праймер к событию связывается с SEQ ID NO:13, а второй праймер к событию связывается с SEQ ID NO:l или SEQ ID NO:2, или комплементарными им последовательностями.
34. Способ по п.29, где указанный способ используют для интрогрессии события в другую линию сои посредством скрещивания.
35. Способ по п.34, где указанная другая линия сои не содержит указанное событие.
36. Способ по п.29, где указанный референсный ген содержит или гибридизуется с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26.
37. Способ по п.29, где указанный референсный праймер содержит SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:24, а указанный референсный зонд содержит SEQ ID NO:26.
38. Способ по п.29, где указанные зонды помечены флуоресцентным красителем и гасителем.
39. Способ по п.38, где указанный зонд к событию содержит FAM в качестве указанного флуоресцентного красителя на 5'-конце указанного зонда к событию и гаситель MGB на 3'-конце указанного зонда к событию.
40. Способ по п.38, где указанный референсный зонд помечен HEX на 5'-конце указанного референсного зонда и гасителем Black Hole Quencher 1 (BHQl) на 3'-конце указанного референсного зонда.
41. Способ по п.29, где указанный зонд к событию содержит SEQ ID NO:20.
42. Способ по п.29, где указанные праймеры к событию выбраны из группы, состоящей из SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:21 и SEQ ID NO:22.
43. Способ по п.29, где результаты указанного способа анализируют напрямую на планшетном спектрофотометре.
44. Способ по п.29, где указанный образец ДНК получают из растения сои из области применения.
45. Набор для осуществления способа по п.29, где указанный набор содержит указанный первый праймер к событию, указанный второй праймер к событию, указанный референсный прямой праймер, указанный референсный обратный праймер, указанный зонд к событию и указанный референсный зонд.
46. Набор по п.45, где указанные праймеры к событию состоят из SEQ ID NO:18 и SEQ ID NO:19, указанные референсные праймеры состоят из SEQ ID NO:24 и SEQ ID NO:25, указанный зонд к событию состоит из SEQ ID NO:20 и указанный референсный зонд состоит из SEQ ID NO:26.
47. Набор для осуществления способа по п.27, где указанный набор содержит указанный зонд или указанный, по меньшей мере, один праймер.
48. Способ по п.28, где указанный амплифицированный фрагмент ДНК содержит приблизительно 7196 оснований.
49. Зонд, который, по меньшей мере, на 95% идентичен последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:l, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, и комплементарным им последовательностям.
50. Изолированная молекула полинуклеотида, где указанная молекула содержит, по меньшей мере, 15 нуклеотидов и обеспечивает гибридизацию в жестких условиях с последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:l и SEQ ID NO:2.
51. Трансгенное растение сои, содержащее геном и трансгенную вставку в участок ДНК указанного генома, где указанный участок ДНК содержит 5'-конец, содержащий SEQ ID NO:l, и 3'-конец, содержащий SEQ ID NO:2.
52. Способ встраивания трансгенной вставки в участок ДНК генома сои, где указанный участок ДНК содержит 5'-конец, содержащий SEQ ID NO:l, и 3'-конец, содержащий SEQ ID NO:2.
53. Способ получения трансгенного растения сои, где указанное растение содержит геном, где указанный способ включает встраивание трансгенной вставки в участок ДНК указанного генома, где указанный участок ДНК содержит 5'-конец, содержащий SEQ ID NO:l, и 3'-конец, содержащий нуклеотидные остатки SEQ ID NO:2.
54. Способ по п.52, где указанная вставка содержит SEQ ID NO:27.
55. Способ по п.53, где указанная вставка содержит SEQ ID NO:27.
56. Семя по п.2, дополнительно содержащее событие с резистентностью к насекомым, такое как содержащееся в семенах, хранящихся под номером доступа ATCC, выбранным из группы, состоящей из PTA-11602 и PTA-12006.
57. Семя по п.3, дополнительно содержащее SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:28, или вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:29.
58. Растение, выращенное из семени по п.56 и содержащее указанное событие и указанное событие резистентности к насекомым.
59. Растение по п.6, дополнительно содержащее полинуклеотидный участок с резистентностью к насекомым, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:28 и/или SEQ ID NO:29.
60. Растительная клетка по п.10, дополнительно содержащая событие с резистентностью к насекомым, такое как содержащееся в семенах, хранящихся под номером доступа ATCC, выбранным из группы, состоящей из PTA-11602 и PTA-12006.
61. Растительная клетка по п.1, содержащая SEQ ID NO:27 или ее вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:27.
62. Растительная клетка по п.61, дополнительно содержащая SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:28, или вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:29.
63. Семя по п.3, где указанная клетка содержит SEQ ID NO:27 или ее вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:27.
64. Семя по п.63, дополнительно содержащее SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:29, вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:28, или вариант, по меньшей мере, на 95% идентичный SEQ ID NO:29.
65. Семя, содержащее событие pDAB8264.44.06.1 и событие 9582.812.9.1, такие как содержащиеся в семенах сои, 18 ноября 2011 года помещенные в ATCC с обозначением:pDAB9582.812.9.1::событие pDAB8264.44.06.1.
66. Растение, содержащее событие pDAB8264.44.06.1 и событие 9582.812.9.1, такие как содержащиеся в семенах сои, 18 ноября 2011 года помещенные в ATCC с обозначением: pDAB9582.812.9.1::событие pDAB8264.44.06.1.
67. Растительная клетка, содержащая событие pDAB8264.44.06.1 и событие 9582.812.9.1, такие как содержащиеся в семенах сои, 18 ноября 2011 года помещенные в ATCC с обозначением:pDAB9582.812.9.1:: событие pDAB8264.44.06.1.
68. Растение, растительная клетка или семя, содержащие SEQ ID NO:28.
69. Растение, растительная клетка или семя, содержащие событие 9582.812.9.1, такое как содержащееся в семенах сои, хранящиеся в ATCC под номером доступа PTA-11602.