ФЕРМЕНТАТИВНОЕ ПОЛУЧЕНИЕ ГЕКСОЗ

1. Усовершенствованный способ ферментативного получения гексозы из крахмала или производного крахмала, причем улучшение включает по меньшей мере одно из:
a) этапа преобразования глюкозо-1-фосфата (G1P) в глюкозо-6-фосфат (G6P), катализируемого фосфоглюкомутазой (PGM), причем PGM содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с любой из SEQ ID NO: 2-8;
b) этапа преобразования производного крахмала в G1P, катализируемого альфа-глюканфосфорилазой (αGP), причем αGP содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с любой из SEQ ID NO: 10-13;
c) этапа трансгликозилирования производного крахмала, катализируемого 4-альфа-глюкантрансферазой (4GT), причем 4GT содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с любой из SEQ ID NO: 15-17.
2. Усовершенствованный способ ферментативного получения гексозы из целлюлозы или производного целлюлозы, причем улучшение включает этап преобразования G1P в глюкозо-6-фосфат (G6P), катализируемого фосфоглюкомутазой (PGM), причем PGM содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с любой из SEQ ID NO: 2-8.
3. Усовершенствованный способ ферментативного получения гексозы из сахарозы, причем улучшение включает по меньшей мере одно из:
a) этапа преобразования глюкозо-1-фосфата (G1P) в глюкозо-6-фосфат (G6P), катализируемого фосфоглюкомутазой (PGM), причем PGM содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с любой из SEQ ID NO: 2-8;
b) этапа преобразования сахарозы в глюкозо-1-фосфат (G1P) с использованием сахарозофосфорилазы, причем сахарозофосфорилаза содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с любой из SEQ ID NO: 19-25.
4. Усовершенствованный способ по любому из пп. 1-3, в котором гексозу выбирают из группы, состоящей из аллозы, маннозы, галактозы, фруктозы, альтрозы, талозы, сорбозы, гулозы, идозы, аллулозы, инозитола и тагатозы.
5. Усовершенствованный способ по п. 1, в котором производное крахмала выбирают из группы, состоящей из амилозы, амилопектина, растворимого крахмала, амилодекстрина, мальтотриозы, мальтозы и мальтодекстрина.
6. Усовершенствованный способ по любому из пп. 1-4, дополнительно включающий этап дефосфорилирования гексозофосфата с использованием гексозофосфат-фосфатазы.
7. Усовершенствованный способ по п. 6, в котором этапы способа проводят в одном реакционном сосуде.
8. Усовершенствованный способ по п. 7, в котором этапы способа проводят без ATP, без NAD(P)(H), с концентрацией фосфата от приблизительно 0,1 мМ до приблизительно 150 мМ, фосфат используют повторно, и/или этап дефосфорилирования гексозофосфата включает энергетически выгодную химическую реакцию.
9. Усовершенствованный способ по любому из пп. 1-8, в котором этапы способа проводят по меньшей мере при одном из следующих технологических условий:
при температуре с разбросом от приблизительно 37°C до приблизительно 85°C,
с pH с разбросом от приблизительно 5,0 до приблизительно 8,0 или
в течение от приблизительно 0,5 часа до приблизительно 48 часов или в виде непрерывной реакции.
10. Усовершенствованный способ по п. 4, дополнительно включающий этап восстановления гексозы до ее сахарного спирта.
11. Усовершенствованный способ по п. 4, в котором PGM имеет по меньшей мере на 10% более высокую активность по сравнению с активностью PGM из Thermococcus kodakaraensis (Uniprot ID Q68BJ6).
12. Усовершенствованный способ по п. 1, в котором αGP имеет по меньшей мере на 10% более высокую активность по сравнению с активностью αGP из Thermotoga maritima (Uniprot ID G4FEH8).
13. Усовершенствованный способ по п. 1, в котором 4GT имеет по меньшей мере на 10% более высокую активность по сравнению с активностью 4GT из Thermococcus litoralis (Uniprot ID O32462).
14. Усовершенствованный способ по п. 3, в котором SP имеет по меньшей мере на 10% более высокую активность по сравнению с активностью SP из Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum (Uniprot ID D9TT09).
15. Усовершенствованный способ по п. 3, в котором SP имеет по меньшей мере на 10% более высокий достижимый выход по сравнению с выходом SP из Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum (Uniprot ID D9TT09).