МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ К FGF23 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Выделенная молекула антитела, способная связываться с FGF23, содержащая:
(a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 48, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 67, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 67, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 49, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 67, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 57; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 67, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 50, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 54; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 67, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 69, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 89;
(g) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 49, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 55; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 69, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(h) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 59, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 70, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 73;
(i) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 59, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 68, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 73;
(j) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 59, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 69, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 73;
(k) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 59, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 70, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 74;
(l) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 70, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 73; или
(m) VH, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность HCDR2 SEQ ID NO: 46, и аминокислотную последовательность HCDR3 SEQ ID NO: 53; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 59, аминокислотную последовательность LCDR2 SEQ ID NO: 70, и аминокислотную последовательность LCDR3 SEQ ID NO: 73.
2. Выделенная молекула антитела, способная связываться с FGF23, содержащая вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), причем VH содержит аминокислотную последовательность HCDR1 любой из SEQ ID NO: 39-43 или 110; аминокислотную последовательность HCDR2 любой из SEQ ID NO: 44-52; и аминокислотную последовательность HCDR3 любой из SEQ ID NO: 53-57; а VL содержит аминокислотную последовательность LCDR1 любой из SEQ ID NO: 58-63 или 109, аминокислотную последовательность LCDR2 любой из SEQ ID NO: 64-72, и аминокислотную последовательность LCDR3 любой из SEQ ID NO: 73-89.
3. Молекула антитела по п. 1 или 2, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90% или 95% идентичную любой из SEQ ID NO: 1-13, 90 или 91.
4. Молекула антитела по п. 3, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 1-13, 90 или 91.
5. Молекула антитела по любому из пп. 1-4, которая содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90% или 95% идентичную любой из SEQ ID NO: 14-38 или 92-96.
6. Молекула антитела по п. 5, которая содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 14-38 или 92-96.
7. Молекула антитела по п. 1, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90% или 95% идентичную любой из SEQ ID NO: 1-13, 90 или 91, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85%, 90% или 95% идентичную любой из SEQ ID NO: 14-38 или 92-96.
8. Молекула антитела по п. 7, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 1-13, 90 или 91, и VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 14-38 или 92-96.
9. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19.
10. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
11. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19.
12. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19.
13. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
14. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28.
15. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25.
16. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37.
17. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.
18. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36.
19. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 94.
20. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 95.
21. Молекула антитела по любому из пп. 1-8, которая содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96.
22. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая содержит антигенсвязывающий фрагмент.
23. Молекула антитела по п. 22, отличающаяся тем, что антигенсвязывающий фрагмент включает Fab, F(ab')2, Fv, scFv или sc(Fv)2.
24. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая содержит константную область легкой цепи, выбранную из константных областей легкой цепи каппа или лямбда.
25. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая содержит константную область тяжелой цепи, выбранную из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, или химеру из двух или более изотипов (например, IgG2 и IgG4), и константную область легкой цепи, выбранную из константных областей легкой цепи каппа или лямбда.
26. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая содержит константную область тяжелой цепи, выбранную из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG4, или химеру IgG2 и IgG4 (например, «IgG2/4»), и, необязательно, константная область тяжелой цепи содержит одну или более аминокислотных модификаций в шарнирной, CH2- и/или CH3-области (например, IgG1-YTE, IgG4-YTE или IgG2/4-YTE).
27. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая содержит Fc-область.
28. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанная молекула антитела представляет собой молекулу гуманизированного антитела.
29. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанная молекула антитела представляет собой молекулу моноклонального антитела.
30. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанная молекула антитела представляет собой молекулу синтетического антитела.
31. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанная молекула антитела представляет собой молекулу моноспецифического антитела.
32. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что FGF23 представляет собой FGF23 человека.
50
33. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая связывается с FGF23 человека при EC менее 0,04 мкг/мл (например, менее чем около 0,04, 0,03, 0,029, 0,028, 0,027, 0,026, 0,025, 0,024, 0,023, 0,022 или 0,021 мкг/мл), например, по определению методом ИФА.
50
34. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая связывается с FGF23 человека при EC от 0,01 мкг/мл до 0,04 мкг/мл (например, от 0,02 мкг/мл до 0,04 мкг/мл, от 0,02 мкг/мл до 0,03 мкг/мл, от 0,02 мкг/мл до 0,025 мкг/мл или от 0,025 мкг/мл до 0,03 мкг/мл), например, по определению методом ИФА.
50
35. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая ингибирует клеточную пролиферацию при ICменее чем 10 мкг/мл (например, менее чем около 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2,8, 2,5, 2, 1,7, 1,6, 1,5, 1,4, 1,3, 1, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2 или 0,1 мкг/мл), например, по определению методом клеточного анализа, например, как описано в примере 2.
50
36. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая ингибирует клеточную пролиферацию при IC от 0,1 мкг/мл до 3 мкг/мл (например, от 0,1 мкг/мл до 0,3 мкг/мл, от 0,3 мкг/мл до 0,6 мкг/мл, от 0,6 мкг/мл до 1 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 2 мкг/мл или от 2 мкг/мл до 3 мкг/мл) по определению методом клеточного анализа, например, как описано в примере 2.
37. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая связывается с FGF23 человека, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 82.
38. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1 и HCDR2 относятся к каноническим классам CDR по Chothia 2, 1, 3, 1 и 3, соответственно.
39. Молекула антитела, которая конкурирует за связывание с FGF23 с молекулой антитела по любому из предшествующих пунктов.
40. Молекула антитела, которая связывается с тем же или перекрывающимся эпитопом, что и эпитоп, распознаваемый молекулой антитела по любому из предшествующих пунктов.
41. Фармацевтическая композиция, содержащая выделенную молекулу антитела по любому из предшествующих пунктов и фармацевтически приемлемый носитель, эксципиент или стабилизатор.
42. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая VH, VL, или их обе, молекулы антитела по любому из пп. 1-40.
43. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 42, отличающаяся тем, что нуклеиновая кислота содержит:
(a) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 111 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 112;
(b) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 97 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 98;
(c) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 99 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 100;
(d) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 101 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 102;
(e) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 103 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 104;
(f) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 105 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 106;
(g) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 107 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 108;
(h) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 113 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 114;
(i) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 115 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 116;
(j) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 117 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 118;
(k) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 119 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 120;
(l) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 121 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 122; или
(m) последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 123 и/или последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 124.
44. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 42 или 43.
45. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 42 или 43 или вектор по п. 44.
46. Способ получения молекулы антитела, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 45 в условиях, подходящих для генной экспрессии.
47. Способ ингибирования FGF23, включающий приведение FGF23 в контакт с молекулой антитела по любому из пп. 1-40 или фармацевтической композицией по п. 41.
in vitro
ex vivo
in vivo
48. Способ по п. 47, отличающийся тем, что этап приведения в контакт происходит ,  или .
49. Способ лечения нарушения, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту молекулы антитела по любому из пп. 1-40 или фармацевтической композиции по п. 41 в количестве, эффективном для лечения нарушения.
50. Способ по п. 49, отличающийся тем, что нарушение представляет собой связанное с FGF23 нарушение, необязательно при этом связанное с FGF23 нарушение выбрано из X-сцепленного гипофосфатемического рахита (XLH), аутосомно-рецессивного гипофосфатемического рахита (ARHR) (например, ARHR 1 или ARHR2), аутосомно-доминантного гипофосфатемического рахита (ADHR), остеоглофоновой дисплазии, метафизарной хондродисплазии типа Янсена, гипофосфатемии с аномалией зубов и эктопической кальцификацией, синдрома МакКьюна - Олбрайта, синдрома эпидермального невуса (ENS) или опухоль-индуцированного размягчения костей (TIO).
51. Способ по п. 49 или 50, отличающийся тем, что молекулу антитела вводят субъекту в дозе от 0,1 мг/кг до 50 мг/кг.
52. Способ по любому из пп. 49-51, дополнительно включающий применение второго терапевтического агента или метода.
53. Способ по п. 52, отличающийся тем, что второй терапевтический агент или метод применяют до, во время или после применения молекулы антитела.
54. Способ предотвращения нарушения, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту молекулы антитела по любому из пп. 1-40 или фармацевтической композиции по п. 41 в количестве, эффективном для лечения нарушения.
55. Способ по п. 54, отличающийся тем, что нарушение представляет собой связанное с FGF23 нарушение, необязательно при этом связанное с FGF23 нарушение выбрано из X-сцепленного гипофосфатемического рахита (XLH), аутосомно-рецессивного гипофосфатемического рахита (ARHR) (например, ARHR 1 или ARHR2), аутосомно-доминантного гипофосфатемического рахита (ADHR), остеоглофоновой дисплазии, метафизарной хондродисплазии типа Янсена, гипофосфатемии с аномалией зубов и эктопической кальцификацией, синдрома МакКьюна - Олбрайта, синдрома эпидермального невуса (ENS) или опухоль-индуцированного размягчения костей (TIO).
56. Способ выявления FGF23, включающий (i) приведение образца или субъекта в контакт с молекулой антитела по любому из пп. 1-40 в условиях, в которых возможно взаимодействие молекулы антитела и FGF23, и (ii) выявление образования комплекса между молекулой антитела и образцом или субъектом.
57. Способ по п. 56, дополнительно включающий приведение референсного образца или субъекта в контакт с молекулой антитела по любому из пп. 1-40 в условиях, в которых возможно взаимодействие молекулы антитела и FGF23, и (ii) выявление образования комплекса между молекулой антитела и образцом или субъектом.
58. Молекула антитела по любому из пп. 1-40 или фармацевтическая композиция по п. 41 для применения в лечении нарушения у субъекта.
59. Молекула антитела или фармацевтическая композиция для применения по п. 58, отличающаяся тем, что нарушение представляет собой связанное с FGF23 нарушение, необязательно при этом связанное с FGF23 нарушение выбрано из X-сцепленного гипофосфатемического рахита (XLH), аутосомно-рецессивного гипофосфатемического рахита (ARHR) (например, ARHR 1 или ARHR2), аутосомно-доминантного гипофосфатемического рахита (ADHR), остеоглофоновой дисплазии, метафизарной хондродисплазии типа Янсена, гипофосфатемии с аномалией зубов и эктопической кальцификацией, синдрома МакКьюна - Олбрайта, синдрома эпидермального невуса (ENS) или опухоль-индуцированного размягчения костей (TIO).
60. Применение молекулы антитела по любому из пп. 1-40 или фармацевтической композиции по п. 41 в изготовлении лекарственного средства для лечения нарушения у субъекта.
61. Применение по п. 60, отличающееся тем, что нарушение представляет собой связанное с FGF23 нарушение, необязательно при этом связанное с FGF23 нарушение выбрано из X-сцепленного гипофосфатемического рахита (XLH), аутосомно-рецессивного гипофосфатемического рахита (ARHR) (например, ARHR 1 или ARHR2), аутосомно-доминантного гипофосфатемического рахита (ADHR), остеоглофоновой дисплазии, метафизарной хондродисплазии типа Янсена, гипофосфатемии с аномалией зубов и эктопической кальцификацией, синдрома МакКьюна - Олбрайта, синдрома эпидермального невуса (ENS) или опухоль-индуцированного размягчения костей (TIO).