Доклиническое изучение радиоконъюгата на основе модульного нанотранспортера, содержащего лиганд - эпидермальный фактор роста

20 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

локарбазолов ЛХС-1269. Применяли следующие методы: 2D- и ЗО-культивирование клеток, фенотипирование клеток в реакции прямой иммунофлуоресценции, детекцию апоптотических клеток с помощью двойного окрашивания Annexin-V-FITS/PI и определение активной каспазы-3 проточной цитометрией.

Результаты. Методом искусственной стимуляции апоп-тоза противоопухолевым препаратом из группы производных нитрозомочевины аранозой создана резистентная модельная клеточная линия меланомы mel Il. Исследование фенотипа резистентных к аранозе клеток меланомы mel Il выявило снижение в 3 раза экспрессии CD63, в 86 раз CD54 и в 460 раз CD117, что указывало на переход клеток в фазу агрессивного роста. Клетки mel Il оказались резистентны также к другим противоопухолевым препаратам — стрепто-зотоцину и ЦП. В отличие от клеток mel Il дикого типа, резистентные клетки mel Il формировали на матригеле сосу-дистоподобные структуры, что является in vitro тестом ВМ. Соединение ЛХС-1269 блокировало ВМ на резистентных клетках mel Il. При исследовании индукции апоптотической гибели соединением ЛХС-1269 в комбинации с противоопухолевыми препаратами аранозой или ЦП показано, что на резистентной линии mel Il соединение ЛХС-1269 восстанавливало чувствительность клеток к аранозе и ЦП.

Заключение. В работе впервые обсуждается роль блокирования ВМ как движущей силы восстановления чувствительности резистентных клеток меланомы к ДНК-по-вреждающим агентам. Полученные нами результаты позволяют поднять вопрос о существовании нового терапевтического подхода в лечении меланомы.

Д. П. Веевник1, А. С. Федулов2, Т. Л. Юркштович3, Н.К. Юркштович3

КОМПЛЕКСНОЕ ЛЕЧЕНИЕ НЕЙРОЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ ОПУХОЛЕЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА GRADE II-IV С ПРИМЕНЕНИЕМ ИНТРАОПЕРАЦИОННОЙ ЛОКАЛЬНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ ТЕМОДЕКСОМ

1УЗ «ГКБ скорой медицинской помощи», Минск,

Республика Беларусь;

2УО БГМУ, Минск, Республика Беларусь;

3УНПРУП«Унитехпром БГУ», Минск, Республика Беларусь

Введение. Несмотря на постоянное совершенствование хирургии удаления опухолей головного мозга, при использовании хирургического этапа — максимально возможного удаления объемного образования с минимальным повреждением окружающей ткани мозга и с последующим химио/радиотерапевтическим воздействием на резидуаль-ную часть опухоли, сохраняются низкая выживаемость, высокая смертность и инвалидизация пациентов, особенно при опухолях высокой степени злокачественности, в том числе среди социально активной популяции. Сказанное делает очевидным необходимость совершенствования существующих и разработки новых технологий лечения пациентов данной группы.

Цель исследования — повысить эффективность комбинированного лечения пациентов с нейроэпителиальными опухолями головного мозга супратенториальной локализации путем применения интраоперационной локальной химиотерапии (ХТ).

Материалы и методы. Открытое, контролируемое, сравнительное, проспективное, рандомизированное исследование с параллельными группами. Отследить конечные точки исследования удалось у 128 пациентов с внутримоз-говыми опухолями: у 39 в основной и у 89 в контрольной группе. Для локальной ХТ использовали препарат темодекс.

Результаты. Медиана выживаемости пациентов с опухолями Grade III—IV супратенториальной локализации на фоне интраоперационной химиолучевой терапии увеличилась при радикальном удалении опухоли с 44,6 (11,15 мес) до 78,6 нед (19,65 мес) (WW = 12,6; р = 0,0001). У пациентов с высокозлокачественными опухолями Grade III—IV при применении химиолучевой терапии безрецидивный период составил 59,0 нед (14,75 мес), тогда как в контроле он был 34,0 нед (8,5 мес) (WW = 26,0; p = 0,0001). При этом медиана выживаемости без прогрессирования у пациентов основной группы с наиболее злокачественными опухолями Grade IV достигала 56,0 нед (14.0 мес), а в контрольной — 31,5 (14,0-100,0) нед (7,875 мес) (WW = 26,2; p = 0,0001). Одногодичная кумулятивная доля выживших пациентов с опухолями Grade III-IV в основной группе составила 72,7 %, в контрольной - 20,8 % (WW = 20,6; р = 0,0001).

Заключение. Проведенное исследование противоопухолевой активности препарата темодекс в качестве средства для локальной ХТ опухолей Grade II-IV в комбинации с адъ-ювантной химиолучевой терапией указывают на достижение при этом вполне сопоставимых с препаратами глиадел и ци-сплацел результатов в части повышения общей выживаемости и продолжительности безрецидивного периода.

М.С. Воронцова1, Н.Б. Морозова1, Т.А. Кармакова1,

A.А. Панкратов1, Т.Н. Андреева1, Е.А. Плотникова1, Р. И. Якубовская1, О.А. Сморызанова2, В.М. Петриев2,

B. Г. Скворцов2, А.А. Розенкранц3,4, Т.А. Сластникова3, Т.Н. Лупанова3, А.С. Соболев3, 4

ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ РАДИОКОНЪЮГАТА НА ОСНОВЕ МОДУЛЬНОГО НАНОТРАНСПОРТЕРА, СОДЕРЖАЩЕГО ЛИГАНД - ЭПИДЕРМАЛЬНЫЙ ФАКТОР РОСТА

1МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУНМИРЦ

Минздрава России, Москва;

2МРНЦ им. А. Ф. Цыба - филиал ФГБУ НМИРЦ

Минздрава России, Обнинск;

3ИБГ РАН, Москва;

4Биологический факультет ФГАОУВО

«МГУ им. М.В. Ломоносова», Москва

Введение. Модульный нанотранспортер (МНТ) — рекомбинантный белок, состоящий из различных модулей, которые обеспечивают возможность присоединения радионуклида, связывание конструкции с поверхностными рецепторами клеток и доставку радиоконъюгата в ядро клетки. Функциональная активность МНТ позволяет сосредоточить повреждающее действие радиации в ткани-мишени.

Цель исследования — медико-биологическое изучение МНТ, содержащего в качестве лигандного модуля эпидер-мального фактора роста (ЭФР) человека, а в качестве терапевтического радионуклида — эмиттер электронов Оже, индий-111 (1UIn).

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

21

Материалы и методы. Исследование общей токсичности выполнено на мышах и крысах, оценка аллергизирующего действия — на морских свинках, согласно существующим методическим рекомендациям. Противоопухолевая эффективность МНТ-ЭФР-Ш1п (в дозах 63, 125 и 250 мкКи) исследована на модели ЭФР-положительного подкожного ксенографта рака мочевого пузыря человека (культура клеток EJ) у мышей nude. Фармакокинетика и биораспределение МНТ-ЭФР-1111п изучены у интактных животных и у мышей-опухоленосителей ex vivo методом радиометрического анализа.

Результаты. Субстанция МНТ-ЭФР-In (природный изотоп) в эквитерапевтической дозе (ЭТД) и 10ЭТД при внутрибрюшинном (в/б) и конъюнктивальном введении не вызывает аллергических реакций. По результатам изучения хронической токсичности в дозах 5ЭТД и 10ЭТД МНТ-ЭФР и МНТ-ЭФР-In являются малотоксичными. Мыши удовлетворительно переносят однократное в/б введение МНТ-ЭФР-1111п в дозах 25—250 мкКи на мышь. При подкожном введении интактным животным, а также при интратуморальном (и/т) введении мышам nude с опухолью EJ МНТ-ЭФР-1111п характеризуется низкой системной абсорбцией и удерживается в месте введения (80—45 % от введенной дозы в интервале 5 мин — 2 сут), преимущественно элиминируется из организма выделительной системой почек. Отношение концентрации радиоактивности в опухоли к данному показателю в органах/тканях мышей на 2-е сутки после и/т введения МНТ-ЭФР-1111п составляет 34 (почка), 170 (печень), 460 (кость, селезенка), > 1000 (кровь и другие органы). При однократном и/т введении МНТ-ЭФР-1111п в дозе 250 мкКи торможение роста ксено-графта опухоли EJ по сравнению с ЭДТА-1111п составляет 70—80 % на протяжении 16—33 сут после начала лечения.

Заключение. МНТ-ЭФР-1111п может служить основой для разработки радиофармпрепарата, предназначенного для местного лечения ЭФР-положительных злокачественных опухолей человека.

Ю. С. Гаврилова, Н.П. Бгатова, А. П. Лыков, А. О. Соловьева, Ю.И. Бородин, В. И. Коненков ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ЭФФЕКТЫ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМ ЛИТИЯ

НИИКЭЛ, Новосибирск

Введение. Одной из актуальных проблем современной биологии и медицины является проблема подавления опухолевого роста и метастазирования. Для ее решения разрабатываются различные подходы и медицинские технологии, в частности с использованием наноразмерных структур. Известно, что соединения лития могут оказывать влияние на сигнальные пути канцерогенеза и регуляцию клеточного цикла. В последнее время появляются работы, показывающие эффективность использования лития для подавления опухолевого роста.

Цель исследования — выявление противоопухолевых эффектов различных форм солей лития.

Материалы и методы. Эксперименты проводили in vitro на культуре клеток гепатокарциномы-29 (ГК-29) и in vivo при инокуляции клеток ГК-29 в область бедра экспериментальным животным — мышам-самцам линии CBA. В каче-

стве агентов, запускающих гибель опухолевых клеток, использовали цитрат и карбонат лития и их наноразмерные формы (10 нм). Определяли жизнеспособность клеток ГК-29 (МТТ-тест) при их культивировании с различными дозами и формами лития, распределение клеток ГК-29 по фазам клеточного цикла (проточная цитофлуориметрия). Проводили фенотипирование клеток ГК-29 на основании морфологических критериев (световая, электронная микроскопия) для выявления клеток-мишеней различных форм лития, а также определяли формы клеточной гибели ГК-29. В эксперименте in vivo определяли продолжительность жизни экспериментальных животных, размер опухоли при введении различных форм солей лития и цитостатика, проводили иммуногистохимическое выявление молекулярных маркеров пролиферации, апоптоза, сосудистого русла опухоли.

Результаты. Выявлено дозозависимое снижение жизнеспособности клеток ГК-29 при культивировании с исходными и наноразмерными формами карбоната и цитрата лития. На основании морфологических критериев 5 стадий дифференцировки клеток ГК-29 были определены клетки-мишени солей лития. Показано, что клетками-мишенями цитрата лития исходной и наноразмерной форм являются пролиферирующие клетки I и II стадий дифференцировки, а карбоната лития наноразмерной формы — дифференцированные клетки IV и V стадий дифференцировки. Отмечено увеличение продолжительности жизни животных — носителей опухоли при введении различных форм лития, некроз и апоптоз опухолевых клеток, увеличение численности нейтрофилов и макрофагов в опухоли, достоверное уменьшение объемной плотности сосудистой сети.

Заключение. Наноразмерные формы солей лития оказывают более выраженные противоопухолевые эффекты в меньших концентрациях, чем их исходные формы, что дает возможность более эффективного использования низких доз препаратов.

Д. Р. Гафурова1, И. В. Гусев1, М.А. Щедрина2, Е.А. Маслюкова3, Е.М. Егорова4, М.А. Коровина1, Н.Д. Олтаржевская1, Г.Е. Кричевский1 ДЕПО-МАТЕРИАЛЫ НА ОСНОВЕ АЛЬГИНАТА НАТРИЯ С НАНОЧАСТИЦАМИ СЕРЕБРА ДЛЯ ТЕРАПИИ СОПРОВОЖДЕНИЯ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ООО «КОЛЕТЕКС», Москва;

2ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, Москва;

3ФГБУРНЦРХТМинздрава России, Санкт-Петербург; ФГБНУ «НИИобщей патологии и патофизиологии», Москва

Введение. Для наиболее эффективного лечения различных форм рака молочной железы (РМЖ) необходимо соблюдать оптимальный временной интервал между курсами лучевой терапии (ЛТ). В связи с тем, что в 35—40 % случаев встречаются нежелательные осложнения, в том числе послеоперационные (покраснения, отек, боль, серома, гематома, язвы и болевой синдром), необходимо разработать программу сопроводительной терапии для нормализации мягких тканей, при этом предусматривая минимальную системную медикаментозную нагрузку у указанного