THIENOPYRIDONE CARBOXAMIDES AND THEIR MEDICAL USE
ТИЕНОПИРИДОН КАРБОКСАМИДЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В МЕДИЦИНЕ

Область техники, к которой относится изобретения
Настоящее изобретение относится к замещенным производным тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида, к способам их приготовления, к композициям, включающим их, и к способам и применению для клинического лечения заболеваний, причиной которых является возникновение аутоиммунного ответа и патологическое воспаление, а также злокачественных опухолей. Примерами таких аутоиммунных заболеваний являются рассеянный склероз (MS), инсулинзависимый сахарный диабет (LDDM), системная красная волчанка (SLE), ревматоидный артрит (RA), воспалительная болезнь кишечника (IBD) и псориаз. Другими заболеваниями, где воспаление играет основную роль, являются такие заболевания как астма, атеросклероз, инсульт и болезнь Альцгеймера. Кроме того, соединения настоящего изобретения особенно хорошо подавляют развитие твердых опухолей, включая, например, рак груди, рак толстой кишки, саркому Капоши, рак легких, рак яичника, рак простаты и рак кожи. Более конкретно, настоящее изобретение относится к производным тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида.
Уровень техники
Аутоиммунные заболевания, например, MS, LDDM, SLE, RA, IBD и псориаз представляют собой атаки иммунной системы организма, которые могут быть по природе системными или направленными на индивидуальные органы организма. Они, по-видимому, являются заболеваниями, при которых иммунная система делает ошибки, и вместо обеспечения защитных функций, становится агрессором (1).
MS представляет собой наиболее распространенное приобретенное нейрологическое заболевание среди молодых взрослых людей Западной Европы и Северной Америки. Он является причиной большего количества случаев, приводящих к нетрудоспособности и финансовым потерям (как за счет недополученных доходов, так и затрат в области медицинского обеспечения), чем любое другое нейрологическое заболевание этой возрастной группы. Общее количество случаев MS составляет примерно 1000000 в Соединенных Штатах и Европе.
Хотя причина возникновения MS неизвестна, успехи в визуализации мозга, иммунологии и молекулярной биологии улучшили понимание исследователями этой болезни. В настоящее время для лечения MS применяется несколько видов терапии, однако ни один из них не обеспечивает значительной эффективности лечения. Современные способы лечения MS попадают в три категории: лечение обострения, модуляция прогресса заболевания и терапия специфических симптомов.
MS влияет на центральную нервную систему и приводит к процессу димиелинизации, то есть к потере миелиновых оболочек нейрона, в то время как аксоны сохраняются. Миелин является изолирующим материалом нейрона, который делает возможным быстрое проведение нервного импульса. Очевидно, что при демиелинизации это свойство теряется. Хотя патогенные механизмы, ответственные за MS, остаются неясными, несколько линий доказательств свидетельствуют, что демиелинизация имеет иммунопатологическую основу. Патологические повреждения, пятна, характеризуются инфильтрацией иммунологически активных клеток, таких как макрофаги и активированные Т-клетки (2).
В патенте США 5219864 некоторые производные тиено[2,3-b]пиридина и таено[3,2-b]пиридина, представленные формулой (А)
где Z представлен пиридилом, заявляются как иммунорегуляторы и средства для профилактики и лечения остеопороза.
В WO 94/29295 раскрываются соединения общей формулы (В)
где Y среди других представляет
то есть производные тиено[3,2-b]пиридина, а N представляет собой бициклическую гетероциклическую группу, включающую, по меньшей мере, один атом азота, R5 представляет собой низший алкил и R6 - гидрокси, и которые обладают иммуномодулирующей активностью, противовоспалительной активностью и противораковой активностью.
Раскрытие изобретения
Первичная цель настоящего изобретения - обеспечить новые производные тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида, которые благодаря преимуществам их фармакологического профиля, высокой эффективности действия на экспериментальных моделях и низкого уровня побочных эффектов рассматриваются как ценные в лечении заболеваний, возникающих вследствие аутоиммунного ответа и патологического воспаления, а также злокачественных опухолей. Настоящее изобретение относится к новым замещенным производным тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида, к способам их получения, к композициям, включающим их, и к способам и применению для клинического лечения заболеваний, возникающих вследствие аутоиммунного ответа и патологического воспаления, а также злокачественных опухолей. Примерами таких аутоиммунных заболеваний является MS, IDDM, SLE, RA, IBD и псориаз, а также другие заболевания, где воспаление играет основную роль: астма, атеросклероз, инсульт и болезнь Альцгеймера.
Типы твердых опухолей, которые особенно хорошо подавляются соединениями настоящего изобретения, включают, например, рак груди, рак толстой кишки, саркому Капоши, рак легких, рак яичника, рак простаты и рак кожи. Подходом, который выбрали авторы изобретения, является ингибирование индуцированного опухолью ангиогенеза и стимуляция иммунной системы хозяина для индукции/усиления противоопухолевого ответа.
Более конкретно, настоящее изобретение относится к новым производным тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида.
Термин «лечение», как он применяется здесь, включает профилактику, облегчение симптомов заболевания, а также исцеление от заболевания.
Неожиданно было обнаружено, что соединения общей формулы (I)
где
R выбран из метила, этила, н-пропила, изо-пропила, н-бутила и аллила;
1
4
1
3
1
3
x
y
R' выбран из водорода, неразветвленного, разветвленного или циклического C-Cалкила, предпочтительно неразветвленного, разветвленного или циклического C-Салкила; неразветвленного, разветвленного или циклического C-Салкокси; фтора, хлора, брома, трифторометила и OCHF,
где х=0, 1, 2,
y=1, 2, 3 при условии, что
х+y=3;
R'' выбран из водорода, фтора и хлора, при условии, что R'' выбран из фтора и хлора, только когда R' выбран из фтора и хлора;
3
1
5
1
4
R выбран из водорода и неразветвленного, разветвленного или циклического C-Cалкила, более предпочтительно из неразветвленного, разветвленного или циклического C-Cалкила;
2
3
3
R4 выбран из водорода, CHOCOC(СН), фармацевтически приемлемых неорганических катионов, таких как литий, натрий, калий, магний, кальций, медь (II), цинк, алюминий
4
4
1
5
и железо (III); органических катионов, таких как моноэтаноламин и диэтаноламин; и COR', где R' выбран из неразветвленного или разветвленного C-Cалкила, фенила, бензила, фенэтила и подобного;
7
R выбран из метила и этила;
2
один из А и В - это сера, а другой - это C-R;
2
2
если А - является S, R выбран из водорода и метила, при условии что R представляет собой только метил,
3
если R не является водородом; и
2
когда В представляет собой S, R - не является водородом;
и их любой таутомер,
являются неожиданно эффективными в лечении индивидуумов, страдающих от аутоиммунных и воспалительных заболеваний и злокачественных опухолей.
В приведенной выше формуле (I), если А представляет собой серу, кольцо
имеет следующий вид
то есть соединение является производным тиено[2,3-b]пиридина; а если В означает серу, кольцо
имеет следующий вид
2
(R - это водород), то есть соединение является производным 2-тиа-4-аза-индена.
Соединения общей формулы (I) могут существовать в различных таутомерных формах, и все эти формы включены в изобретение.
В предпочтительном воплощении изобретения
А означает серу,
R выбран из метила и этила,
R' выбран из пара-метокси, пара-фтор, пора-хлор, пара-трифторметил и пара-трифторметокси, когда R'' означает водород,
R'' - это opтo-фтор, при условии что R' означает пара- или мета'-фтор,
2
R означает водород,
3
R выбран из метила, этила и изо-пропила, и
7
R означает метил.
В другом предпочтительном воплощении изобретения
В означает сера,
R выбран из метила и этила,
R' выбран из пара-метокси, пара-фтор, пара-хлор, пара-трифторметила и пара-трифторметокси, когда R'' означает водород,
R'' означает орто-фтор при условии, что R' означает пара- или мета'-фтор,
3
R выбран из метила, этила и изо-пропила, и
7
R означает метил.
Предпочтительными воплощениями изобретения являются соединения, представленные формулой (1а) в таблице 1.
Таблица 1.
Соединение
R<sub>2</sub>
R<sub>3</sub>
R<sub>7</sub>
R
R'
R''
№1
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
Н
Н
№2
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
C<sub>2</sub>H<sub>5</sub>
Н
Н
№3
Н
С<sub>2</sub>Н<sub>5</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
Н
Н
№4
Н
изо-С<sub>3</sub>Н<sub>7</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
Н
Н
№5
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
пара-СН<sub>3</sub>
Н
№6
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
пара-ОСН<sub>3</sub>
Н
№7
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
пара-Cl
Н
№8
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
пара-F
o-F
№9
Н
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
СН<sub>3</sub>
пара-OCF<sub>3</sub>
Н
Другим предпочтительным воплощением изобретения является соединение (Ib)
3
7
где R и R - это метил, R - это метил или этил, и R' и R'' - это водород. В предпочтительном соединении (соединение №10), R является метилом.
Для нескольких спонтанно возникающих аутоиммунных заболеваний человека имеются экспериментальные модели, которые спонтанно возникают у определенных линий лабораторных животных или могут быть вызваны у лабораторных животных путем иммунизации специфическим(и) антигеном(ами) из органа-мишени.
Экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (ЕАЕ) как модель аутоиммунных воспалительных заболеваний центральной нервной системы (CNS) был наиболее широко распространенной моделью заболевания человека MS.
Аутоиммунный ответ по отношению к коллагену типа II может быть вызван экспериментально у определенных линий мышей или крыс и может привести к развитию полиартрита. Индуцированный коллагеном артрит имеет несколько общих особенностей с заболеванием человека RA.
Соединения общей формулы (I), а также соединения из уровня техники/соединения сравнения были исследованы на ингибирование острого ЕАЕ у мышей. При сравнении контрольных производных тиено [3,2-b]пиридин-6-карбоксамида с соответствующими производными тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида настоящего изобретения были получены удивительные и неожиданные результаты. Производные тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида изобретения совершенно ясно являются лучшими. В отличие от соединений изобретения, например, 6,7-дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-N-фенил-6-оксо-тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 4,5-дигидро-N,4-диметид-7-гидрокси-N-фенил-5-оксо-2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида, соединение сравнения 4,5-дигидро-N,4-диметил-7-гидрокси-N-фенил-5-оксо-тиено[3,2-b]пиридин-6-карбоксамид является неактивным в модели острого ЕАЕ. Подобным образом замена N-фенильной группы на N-пиридильную в карбоксамидной части приводит к лучшей активности. Отсюда, соединение сравнения 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-(3-пиридил)-N,3,7-триметил-6-оксо-тиено [2,3-b] пиридин-5-карбоксамид проявляет меньшую активность в сравнении с соединением изобретения 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксо-тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамидом. Соединение 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-(3-пиридил)-6-оксо-тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, раскрытое в патенте США 5219864, является неактивным.
Все воплощения изобретения, как раскрыто в формуле изобретения, включены, таким образом, в описание.
Соединения общей формулы (I) могут быть получены способами, описанными в литературе, а также следующими способами:
Способ А:
A
Соединения общей формулы (I) могут быть приготовлены известными способами, и, например, как показано выше, реакцией производного эфира карбоновой кислоты (II; R - алкильная группа из 1-4 атомов углерода) с анилином в подходящем растворителе, например, в алифатическом углеводороде, таком как гептан, октан и подобное, или в ароматическом углеводороде, таком как толуол, ксилол и подобное. Основные способы приготовления производных эфира карбоновой кислоты формулы (II) описаны ниже, начиная с 2-аминотиофен-3-карбоксилата или 4-аминотиофен-3-карбоксилата. Аминотиофен-3-карбоксилаты доступны коммерчески или известны из литературы (3, 4, 5, 6, 7). N-алкилированные анилины формулы (III) доступны коммерчески или известны из литературы (8). Новые аминотиофен-3-карбоксилаты и N-алкилированные анилины формулы (III) могут быть приготовлены способами, которые в основном аналогичны тем, что приведены в литературе. Способ В:
Соединения формулы (I) также могут быть получены реакцией соединения формулы (IV) с анилином формулы (III). Могут быть применены различные сопрягающие реагенты, известные специалистам, например, карбодиимиды, известные из патента США 4547511. В одном из подходящих способов сопряжения применяется тионилхлорид в присутствии триэтиламина и приемлемый растворитель, такой как дихлорометан. Этот способ может быть применен в отдельных случаях, когда прямое сопряжение между эфиром и анилином не дает результатов, например, когда анилин включает электроноакцепторные заместители. Производные карбоновой кислоты формулы (IV) могут быть получены из соответствующих эфиров формулы (II) за счет кислотного расщепления, как описано ниже.
Следующие примеры предназначены для иллюстрации изобретения без ограничения его рамок.
Пример 1.
Этиловый эфир 6,7-Дигидро-3,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты (Интермедиат)
Этил-2-амино-4-метилтиофен-3-карбоксилат (27,0 ммоль, 5,0 г) нагревали в диэтилмалонате (25 мл) при 180°С в течение 3 ч и образовавшемуся этанолу позволяли перегоняться. Температура масляной бани была понижена, и диэтилмалонат был дистиллирован при пониженном давлении с получением промежуточного продукта, малонового амида, сложного этилового эфира 2-(2-этоксикарбонилацетиламино)-4-метилтиофен-3-карбоновой кислоты в виде масла, которое медленно кристаллизовалось при стоянии (7,7 г, 95%). Малоновый амид растворяли в N,N-диметилацетамиде (DMA, 40 мл), после чего был добавлен гидрид натрия (NaH 80%, 2,0 экв., 54 ммоль, 1,62 г). Смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч. После охлаждения и добавления воды (300 мл) продукт был осажден добавлением концентрированной соляной кислоты (HCl) до рН 1,5. Осадок собирали фильтрацией и перекристаллизовали из метилизобутилкетона, получая сложный этиловый эфир 6,7-дигидро-4-гидрокси-3-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты (3,8 г, 56%). Этиловый эфир карбоновой кислоты (11,9 ммоль, 3,02 г) растворяли в DMA (40 мл) и добавляли NaH (2,1 экв., 25 ммоль, 750 мг). Смесь нагревали до 40°С в течение 10 мин. После этого ее охлаждали до 10°С и добавляли диметилсульфат (1,2 экв., 14,3 ммоль, 1,37 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем охлаждали на ледяной бане. Затем добавляли воду (200 мл), и смесь подкисляли 5 М HCl до рН 1,5. Собирали осадок и перекристаллизовали его из смеси толуол/гептан, получая соединение, указанное в заголовке (2,4 г, 75%).
1
3
H ЯМР (CDCl): σ 1,45 (3H, t), 2,48 (3H, d), 3,55 (3H, s), 4,45 (2H, q), 6,46 (1H, q, уш.), 14,22 (1H, s).
По сути тем же способом были получены следующие соединения из соответствующих исходных материалов:
метиловый эфир 6,7-дигидро-4-гидрокси-2,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-3-этил-4-гидрокси-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-4-гидрокси-3-изопропил-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-4-гидрокси-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-2,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
этиловый эфир 6,7-дигидро-3-(4-фторофенил)-4-гирокси-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты; и
метиловый эфир 4,5-дигидро-7-гидрокси-4-метил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоновой кислоты.
Пример 2.
Этиловый эфир 4,5-дигидро-1,4-диметил-7-гидрокси-5-оксо-2-тиа-4-аза-инден-6-карбоновой кислоты (Интермедиат).
Этил-4-амино-2-метилтиофен-3-карбоксилат (12,8 ммоль, 2,37 г) растворяли в 1,4-диоксане (20 мл), после чего добавляли этилмалонил хлорид (90%) (19,2 ммоль, 2,73 мл). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 1 ч, затем ей позволяли остыть до температуры окружающей среды. Реакционную смесь помещали в лед (60 г), и продукт получали путем фильтрации, промывали водой и сушили (3,32 г, 87%). Малоновый амид растворяли в N,N-диметилацетамиде (DMA, 35 мл) и добавляли гидрид натрия (NaH 60%, 2,0 экв., 22,1 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч. После охлаждения и добавления воды (50 мл) продукт осаждали добавлением 1 М соляной кислоты (HCl, водн.) (30 мл). Осадок собирали фильтрованием и перекристаллизовали из этанола, получая этиловый эфир 4,5-дигидро-7-гидрокси-1-метил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоновой кислоты (1,46 г, 52%). Этиловый эфир карбоновой кислоты растворяли в диметилформамиде (DMA, 40 мл) и NaH (3,0 экв., 17,3 ммоль, 692 мг). Реакционную смесь нагревали до 40°С в течение 15 мин, а затем охлаждали до 10°С. Добавляли иодометан (1,3 экв., 7,49 ммоль, 0,47 мл), затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и выливали в 0,5 М HCl (водн.) (50 мл). Осадок собирали фильтрацией и перекристаллизовали из этанола, а затем вновь из метилизобутилкетона, получая соединение, указанное в заголовке (524 мг, 89%).
1
2
Н ЯМР (NaOD/DO): σ 1,28 (3H, t), 2,79 (3H, s), 3,82 (3H, s), 4,30 (2H, q), 6,81 (1H, s).
По сути тем же способом были получены следующие соединения из соответствующих начальных материалов:
метиловый эфир 6,7-дигидро-3-этил-4-гидрокси-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-4-гидрокси-7-метил-3-трет-бутил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-4-гидрокси-3-изобутил-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-3-(2,2-диметилпропил)-4-гидрокси-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 6,7-дигидро-3-(1-этилпропил)-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты;
метиловый эфир 3-циклогексил-6,7-дигидро-4-гирокси-7-метил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты; и
метиловый эфир 4,5-дигидро-3,4-диметил-7-гидрокси-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоновой кислоты.
Пример 3.
Этиловый эфир 4,5-дигидро-7-гидрокси-4-метил-5-оксо-тиено[2,3-b]пиридино-5-карбоновой кислоты (Не в соответствии с изобретением)
2
Смесь метил-3-аминотиофен-2-карбоксилата (63 ммоль, 10,0 г) и этилхлороформиата (50 мл) была подвергнута дефлегмации в течение 2 ч и затем выпарена до полного высушивания. Осадок растворяли в этаноле (130 мл), после чего добавляли водный раствор гидроксида натрия (NaOH, 65 ммоль, 3,84 г). После перемешивания при комнатной температуре в течение 48 ч смесь подкисляли 1 М HCl и разводили водой. Осадок собирали, промывали водой, высушивали под вакуумом и перекристаллизовали из смеси толуол/гептан с получением 3-этоксикарбониламинотиофен-2-карбоновой кислоты (10,2 г, 73%). Эту кислоту (23,2 ммоль, 5,0 г) и трибромид фосфора (12 ммоль, 1,14 мл) растворяли в 1,4-диоксане (50 мл). Смесь перемешивали при 100°С в течение 2 ч и затем охлаждали до того, как концентрировали на роторном испарителе. Осадок, образованный при добавлении толуола, был отделен фильтрованием с получением 1Н-тиено-[3,2-b][1,3]оксазин-2,4-диона (3,96 г, 100%). Этот интермедиат (20,6 ммоль, 3,5 г) растворяли в DMA (40 мл) и охлаждали на ледяной бане. Затем добавляли NaH (22,7 ммоль, 780 мг) с последующим добавлением метилиодида (25 ммоль, 1,6 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем добавляли диэтилмалонат (25 ммоль, 3,85 мл) и NaH (22,7 ммоль, 780 мг). После добавления смесь нагревали при 85°С в течение 2 ч и затем охлаждали. Добавляли воду, смесь закисляли 1 н HCl и экстрагировали хлороформом. Экстракт высушивали, концентрировали и хроматографировали (SiO, хлороформ/метанол/уксусная кислота; 40/1/0,1) с получением соединения, указанного в заголовке примера (1,4 г, 26%).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,45 (3H, t), 3,61 (3H, s), 4,45 (2H, q), 7,00 (3H, d), 7,76 (1H, d), 13,92 (1Н, s, уш.).
Пример 4.
6,7-Дигидро-3,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновая кислота (Интермедиат)
Этиловый эфир 6,7-дигидро-3,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоты (5,72 ммоль, 1, 45 г) нагревали до 55°С в 33% смеси бромисто-водородной кислоты/уксусной кислоты (35 ммоль HBr, 6,0 мл). Через 2 ч смесь охлаждали и добавляли 2-пропанол (30 мл). Осадок собирали фильтрацией и сушили в вакууме с получением требуемого соединения (1,28 г, 93%).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,53 (3H, d), 3,67 (3H, s), 6,63 (1H, q уш.), 14,48 (1H, s), 15,29 (1H, s).
По сути тем же способом были получены следующие соединения из соответствующих исходных материалов:
6,7-дигидро-2,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновая кислота;
6,7-дигидро-4-гидрокси-2,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновая кислота;
6,7-дигидро-2,7-диметил-3-этил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновая кислота;
4,5-дигидро-7-гидрокси-4-метил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоновая кислота; и
4,5-дигидро-7-гидрокси-4-метил-5-оксотиено[3,2-b]пиридин-6-карбоновая кислота.
Пример 5.
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-(4-метоксифенил)-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (Метод А)
Этиловый эфир 6,7-Дигидро-3,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридино-5-карбоновой кислоты (3,74 ммоль, 1,0 г), N-метил-пара-анизидин (3 экв., 11,2 ммоль, 1,57 г) и н-октан (60 мл) нагревали до точки кипения под азотом на масляной бане. Летучим веществам (примерно 40 мл) было позволено дистиллироваться в течение 6 ч, и оставшийся н-октан удаляли на роторном испарителе. Остаток растворяли в хлороформе и промывали холодной 1 М серной кислотой. Органическую фазу экстрагировали 0,5 М NaOH, и рН в водной фазе был доведен приблизительно до 6,5. Мутный раствор фильтровали через силит. Далее добавляли метанол (соответственно до 10% от объема), и затем прозрачный раствор был подкислен 1 М HCl до рН 1,5. Полученный осадок был оставлен на ночь, собран фильтрованием и высушен под вакуумом с получением требуемого соединения (1,06 г, 79%).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,51 (3H, d), 3,29 (3Н, s, уш.), 3,43 (3H, s), 3,78 (3H, s), 6,45 (1H, q уш.), 6,79 (2H, d уш.), 7,12 (2H, d уш.), 12,60 (1Н, s уш.).
По существу тем же способом были получены следующие соединения из соответствующих исходных материалов.
6,7-Дигидро-Н,7-диметил-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 53%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 3,27 (3H, s уш.), 3,48 (3H, s), 6,88 (1H, d), 7,15-7,22 (3H, m), 7,27 (2Н, t уш.), 7,32 (2H, d), 12,50 (1H, s уш.).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-3-этил-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 86%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,31 (3H, t), 2,98 (2H, q), 3,26 (3H, s уш.), 3,48 (3H, s), 6,48 (1H, s), 7,14-7,30 (5H, m), 12,78 (1H, s).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-3-изо-пропил-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 66%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,28 (6Н, d), 3,24 (3Н, s уш.), 3,47 (3H, s), 3,57-3,68 (1H, m), 6,52 (1H, s), 7,12-7,20 (3H, m), 7,23-7,29 (2Н, m), 12,94 (1H s уш.).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-3-изо-бутил-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 76%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 0,97 (6H, d), 2,04 (1Н, m), 2,77 (2H, d), 3,28 (3H, s уш.), 3,50 (3H, s), 6,47 (1H, s), 7,17-7,32 (5H, m), 12,85 (1H, s).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-N-фенил-3-трет-бутил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 83%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,47 (9H, s), 3,28 (3H, s), 3,49 (3H, s), 6,61 (1H, s), 7,15-7,32 (5H, m), 13,60 (1H, s).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-3-(1-этилпропил)-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход: 23%.
1
3
Н NMR (CDCl): σ 0,89 (6H, t), 1,69 (4H, m), 3,27 (3H, bs), 3,44 (1H, bs), 3,48 (3H, s), 6,48 (1H, s), 7,18 (3H, m), 7,28 (2H, m), 12,97 (1H, bs).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-3-(2,2-диметил-пропил)-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 63%; не включено в формулу изобретения.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 0.98 (9Hs), 2,96 (2Hs), 3,29 (3Hs уш.), 3,51 (3H, s), 6,48 (1H, s), 7,17-7,33 (5H, m), 12,85 (1H, s).
3-Циклогексил-6,7-дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 60%; не включено в формулу изобретения.
1
3
2
Н ЯМР (CDCl): σ 1,22-2,18 (10Н, m, циклогескил-СН), 3,30 (4Н, широкий сигнал, N-Me и циклогексил-СН), 3,50 (3H, s), 6,52 (1H, s), 7,17-7,32 (5H, m), 12,95 (1H, s).
6,7-Дигидро-3,7-диметил-N-этил-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 87%.
1
6
Н ЯМР (DMSO-d): σ 1,01 (3H, t), 2,31 (3H, s), 3,29 (3H, s), 3,74 (2H, q уш.), 6,72 (1H, s уш.), 7,10-7,31 (5Н, m), 11,0 (1H, s уш.).
N,3-Диэтил-6,7-дигидро-4-гидрокси-7-метил-N-фенил-6-оксотиено [2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 76%.
1
3
Н ЯМР (CDCl) σ 1,20 (3H, t), 1,30 (3H, t), 2,97 (2H, q), 3,19 (3H, s), 3,97 (2H, q), 6,47 (1H, s), 7,15 (3H, t), 7,24 (2H, t), 12,83 (1H, bs).
6,7-Дигидро-N-этил-4-гидрокси-3-изо-пропил-7-метил-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 67%.
1
3
H ЯМР (CDCl) σ 1,21 (3H, t), 1,30 (6H, d), 3,19 (3H, s), 3,64 (1H, m), 3,97 (2H, q), 6,51 (1H, s), 7,15 (3H, t), 7,24 (2H, m), 12,98 (1H, bs).
6,7-Дигидро-3,7-диметил-4-гидрокси-N-фенил-N-пропил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 58%.
1
3
Н ЯМР (CDCl) σ 0,92 (3H3t), 1,63 (2H, m), 2,52 (3H, d), 3,17 (3H, s), 3,87 (2H, t), 6,43 (1H, d), 7,14 (3H, t), 7,23 (2H, t), 12,62 (1Н, уш.).
Пирролидиновая соль 6,7-дигидро-N,3-диметил-7-этил-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 75%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,08 (3Н, широкий сигнал), 1,79 (4H, m), 2,45 (3H, s), 2,98 (4H, m), 3,35 (3H, s), 3,85 (2H, широкий сигнал), 6,25 (1H,s уш.), 7,08-7,36 (5H, m).
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-(4-метилфенил)-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 81%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,29 (3H, s), 2,50 (3H, d), 3,26 (3H, s уш.). 3,43 (3H, s), 6,43 (1H, q уш.), 7,06 (4H, s), 12,70 (1H, s уш.).
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-(4-изо-пропил)-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 85%.
1
3
H ЯМР (CDCl): σ 1,22 (6H, d), 2,53 (3H, s), 2,88 (1H, m), 3,25 (3H, s уш.), 3,46 (3H, s), 6,45 (1H, s уш.), 7,07-7,17 (4H, m), 12,8 (1H, s).
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-(4-трифторометоксифенил)-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 76%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,52 (3H, s), 3,23 (3H, s), 3,47 (3H, s), 6,47 (1H, s уш.), 7,12 (2H, d), 7,22 (2H, d), 12,70 (1H, s).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-3-этил-N-(4-метоксифенил)-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 67%.
1
3
Н NMR (CDCl) σ 1,29 (3H, t), 2,96 (2H, dq), 3,29 (3H, bs), 3,43 (3H, s), 3,77 (3H, s), 6,48 (1H, s), 6,79 (2H, d), 7,11 (2H, d), 12,69 (1H, bs).
N-(4-Хлорфенил)-6,7-дигидро-3,7-диметил-N-этил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 54%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,19 (3H, t), 2,51 (3H, d), 3,23 (3H, s), 3,93 (2H, q), 6,45 (1H, d), 7,09 (2H, d), 7,21 (2H, d), 12,73 (1H, bs).
N-(4-Хлорфенил)-6,7-дигидро-N,7-диметил-3-этил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 57%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,29 (3H, t), 2,96 (2H, q), 3,28 (3H, s), 3,45 (3H, s), 6,50 (1H, s), 7,13 (2H, d), 7,23 (2H, d), 12,79 (1H, bs).
N-(2,4-Дифторфенил)-6,7-дигидро-N,7-диметил-3-этил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 44%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,29 (3H, t), 2,96 (2H, q), 3,25 (3H, bs), 3,38 (3H, s), 6,49 (1H, s), 6,69 (1H, bs), 6,86 (1H, bt), 7,05 (1H, bs), 12,72 (1H, bs).
N-(2,4-Дифторфенил)-1,6-дигидрокси-4-гидрокси-3-изо-пропил-N,7-диметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 37%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,29 (6H, d), 3,25 (3H, bs), 3,38 (3H, s), 3,62 (1H, m), 6,54 (1H, s), 6,71 (1H, bs), 6,87 (1H, bs), 7,05 (1H, bs), 12,85 (1H, bs).
6,7-Дигидро-N,7-диметил-3-(4-фторофенил)-4-гидрокси-N-фенил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 92%, не включено в формулу изобретения.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 3,30 (3H, s уш.), 3,44 (3H, s), 6,68 (1H, s), 7,04-7,11 (2H, m), 7,14-7,20 (3H, m), 7,23-7,30 (1H, m), 7,42-7,49 (1H, m), 12,67 (1H, s уш.).
4,5-Дигидро-7-гидрокси-N-фенил-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 87%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,86 (3H, s), 3,21 (3H, s, уш.), 3,48 (3H, s), 6,17 (1H, s), 7,13-7,32 (5H, m), 12,89 (1H, s уш.).
4,5-Дигидро-1,4-диметил-N-этил-7-гидрокси-N-фенил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 76%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,20 (3H, t), 2,86 (3H, s), 3,04 (3H, s), 3,97 (1H, q), 6,14 (1H, s), 7,15 (3H, m), 7,24 (2H, m), 12,93 (1H, bs).
4,5-Дигидро-7-гидрокси-N-(4-метилфенил)-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 68%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,30 (3H, s), 2,85 (3H, s), 3,13 (3H, bs), 3,44 (3H, s), 6,18 (1H, s), 7,07 (4H, bs), 12,88 (1H, bs).
4,5-Дигидро-7-гидрокси-N-(4-метоксифенил)-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 55%.
1
3
H ЯМР (CDCl): σ 2,85 (3H, s), 3,14 (3H, bs), 3,78 (3H, s), 6,18 (1H, s), 6,80 (2H, bd), 7,11 (2H, bd), 12,79 (1H, bs).
N-(4-Хлорфенил)-4,5-дигидро-7-гидрокси-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 50%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,86 (3H, bs), 3,14 (3H, s), 3,44 (3H, s), 6,20 (1H, s), 7,12 (2H, d), 7,23 (2H, d), 12,87 (1H, bs).
N-(2,4-Дифторфенил)-4,5-дигидро-7-гидрокси-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 14%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,85 (3H, s), 3,09 (3H, bs), 3,37 (3H, s), 6,18 (1H, bs), 6,70 (1H, bs), 6,86 (1H, bt), 7,05 (1H, bs), 12,83 (1H, bs).
N-(2,5-Дифторфенил)-4,5-дигидро-7-гидрокси-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 48%.
1
3
H ЯМР (CDCl): σ 2,86 (3H, s), 3,15 (3H, bs), 3,39 (3H, s), 6,19 (1H, s), 6,88 (2H, m), 7,06 (1H, dt), 12,89 (1H, bs).
4,5-Дигидро-7-гидрокси-N-(4-трифторометилфенил)-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 36%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,87 (3H, s), 3,08 (3H, s), 3,50 (3H, s), 6,21 (1H, s), 7,30 (2H, d), 7,52 (2H, d), 12,98 (1H, bs).
4,5-Дигидро-7-гидрокси-N-(4-трифторометоксифенил)-N,1,4-триметил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 52%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,86 (3H, s), 3,09 (3H, s), 3,46 (3H, s), 6,19 (1H, s), 7,11 (2H, d), 7,21 (2H, d), 12,87 (1H, bs).
Пример 6.
N-(2,5-Дифторфенил)-6,7-дигидро-4-гидрокси-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (Метод В).
К 6,7-дигидро-3,7-диметил-4-гидрокси-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоновой кислоте (4,18 ммоль, 1,0 г) в дихлорметане (10 мл) добавляли триэтиламин (4 экв., 16,7 ммоль, 2.4 мл) и N-метил-2,5-дифторанилин (1,2 экв., 5,0 ммоль, 720 мг). К смеси, перемешиваемой под азотом и охлажденной до 0°С, в течение 30 мин был добавлен раствор тионилхлорида (1,3 экв., 5,4 ммоль, 0,4 мл) в дихлорметане (5 мл). Перемешивание продолжали при 0°С в течение 1 ч и затем при комнатной температуре в течение еще 20 мин. Реакционную смесь разводили хлороформом и быстро промывали холодной 1 М серной кислотой. Органическую фазу сразу же экстрагировали 0,5 М NaOH. Оставшиеся следовые количества хлорированных органических растворителей удаляли на роторном испарителе. рН был доведен чуть выше точки, в которой начинает осаждаться желаемый продукт (приблизительно рН 6,5), и раствор фильтровали через силит. Продукт осаждали доведением рН 1М HCl до значений приблизительно 1-2, и смесь оставляли на 2 ч. Полученный осадок собирали фильтрацией, промывали водой и высушивали под пониженным давлением с получением требуемого соединения (1,26 г, 83%).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,53 (3H, d), 3,31 (3H, s уш.), 3,42 (3H, s), 6,49 (1H, q уш.), 6,84-6,95 (2H, m), 7,05-7,12 (1H, m), 12,73 (1H, s уш.).
По существу тем же способом были получены следующие соединения из соответствующих исходных материалов.
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 81%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,50 (3H, d), 3,23 (3H, s уш.), 3,46 (3H, s), 6,42 (1H, q), 7,12-7,19 (3H, m), 7,21-7,27 (2H, m), 12,65 (1H, s уш.).
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,2,3,7-тетраметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 75%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,32 (3H, s), 2,40 (3H, s), 3,21 (3H, s уш.), 3,47 (3H, s), 7,14-7,29 (3H, m), 7,26 (2H, t уш.), 12,60 (1H, s уш.).
6,7-Дигидро-3-этил-4-гидрокси-N-фенил-N,2,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 87%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,19 (3H, t), 2,34 (3H, s), 2,86 (2H, q), 3,22 (3H, s), 3,47 (3H, s), 7,14-7,22 (3H, m), 7,27 (2H, t уш.), 12,75 (1H, s уш.).
N-(4-Хлорфенил)-6,7-дигидро-4-гидрокси-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 90%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,50 (3H, d), 3,26 (3H, s), 3,43 (3H, s), 6,45 (1H, q уш.), 7,11 (2H, d), 7,21 (2H, d), 12,66 (1H, S уш.).
N-(2,4-Дифторфенил)-6,7-дигидро-4-гидрокси-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 92%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,51 (3H, d), 3,25 (3H, s уш.), 3,38 (3H, s), 6,45 (1H, s), 6,70 (1H, s уш.), 6,87 (1H, t уш.), 7,04 (1H, s уш.), 12,62 (1H, s уш.).
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-(4-трифторометилфенил)-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 76%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,52 (3H, d), 3,23 (3H, s), 3,50 (3H, s), 6,48 (1H, q уш.), 7,31 (2H, d), 7,53 (2H, d) 12,76 (1H, s уш.).
6,7-Дигидро-3,7-диметил-N-этил-4-гидрокси-N-(4-трифторометилфенил)-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 68%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 1,21 (3H, t), 2,52 (3H, s), 3,18 (3H, s), 3,99 (2H, q), 6,46 (1H, q уш.), 7,27 (2H, d), 7,50 (2H, d), 12, 86 (1H, s уш.).
Триэтиламиновая соль 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-(3-пиридил)-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамимида, выход 94%; (контрольное соединение, не в соответствии с изобретением).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 0,86 (9H, t), 2,24 (3Н, d уш.), 2,37 (6H, q), 3,10 (3H, s), 3,29 (3H, s), 6,18 (1H, q уш.), 7,10 (1H, dd), 7,67 (1H, dt), 8,00 (1H, dd), 8,34 (1H, d).
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,2,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид, выход 80%; не включено в формулу.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 2,45 (3H, d), 3,22 (3H, s уш.), 3,47 (3H, s), 6,95 (1H, q уш.), 7,14-7,28 (5H, m), 12,10 (1H, s уш.).
4,5-Дигидро-N,4-диметил-7-гидрокси-N-фенил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 33%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 3,15 (3Н, s уш.), 3,49 (3H, s), 6,49 (1H, d), 7,15-7,21 (3H, m), 7,24-7,30 (2H, m), 7,98 (1H, d), 12,36 (1H, s уш.).
4,5-Дигидро-N-этил-7-гидрокси-4-метил-N-фенил-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 30%.
1
3
Н ЯМР (CDCl+TFA): σ 1,22 (3H, t), 3,45 (3H, s), 3,97 (2H, q), 6,85 (1H, d), 7,21-7,25 (3H, m), 7,28-7,32 (2H, m), 8,10 (1H, d).
N-(2,5-Дифторфенил)-4,5-дигидро-N,4-диметил-7-гидрокси-5-оксо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид, выход 46%.
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 3,22 (3H, s уш.), 3,41 (3H, s), 6,55 (1H, d), 6,82-6,96 (2H, m), 7,02-7,11 (1Hm), 8,03 (1H, d), 12,41 (1H s уш.).
N-(2,4-Дифторфенил)-4,5-дигидро-N,4-диметил-7-гидрокси-5-оксотиено[3,2-6]пиридин-6-карбоксамид; выход 57%; (контрольное соединение, не в соответствии с изобретением).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 3,32 (3H, s уш.), 3,38 (3H, s), 6,69 (1H, s уш.), 6,87 (1H, t уш.), 6,94 (1H, s уш.), 7,04 (1H, s уш.), 7,70 (1H, d), 12,46 (1H, s уш.).
Пример 7.
4,5-Дигидро-N,4-диметил-7-гидрокси-N-фенил-5-оксотиено[3,2-6]пиридин-6-карбоксамид (контрольное соединение, не в соответствии с изобретением) (Способ В).
4,5-Дигидро-7-гидрокси-4-метил-5-оксотиено[3,2-6]пиридин-6-карбоновая кислота (1,27 ммоль, 288 мг), N-метиланилин (1,92 ммоль, 0,211 мл,) и дициклогексилкарбодиимид (1,92 ммоль, 0,41 г) нагревали в толуоле (3 мл) при 70°С в течение 4 ч. Смесь охлаждали, добавляли 0,5 М серной кислоты (20 мл) и затем смесь экстрагировали хлороформом. Органическую фазу экстрагировали 1 М NaOH, pH доводили примерно до 6 и отфильтровывали осадок дициклогексилмочевины. Затем осадок, образованный при закислении водным раствором HCl, собирали и высушивали под вакуумом с получением требуемого соединения (225 мг, 56%).
1
3
Н ЯМР (CDCl): σ 3,30 (3H, s уш.), 3,47 (3H, s), 6,92 (1H, d), 7,13-7,21 (3H, m).
Пример 8.
Кальциевая соль 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида.
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,304 ммоль, 100 мг) растворяли в смеси 1 М NaOH (0,304 ммоль, 0,304 мл) и этанола (1 мл). Смесь нагревали до 50°С и по каплям при перемешивании добавляли водный 1 М раствор моногидрата ацетата кальция (1,05 экв., 0,16 ммоль, 0,16 мл). После перемешивания при 50°С в течение 30 мин осадок отфильтровывали, промывали смесью этанол/вода и высушивали под вакуумом с получением титульного соединения (101 мг, 96%).
34
30
4
6
2
Расчет для CHCaNOS; С 58,77%, Н 4,35%, N 8,06%, найдено С 58,8, Н 4,73, N 7,86. EDTA - титрометрическое определение Са дало 5,64% (теоретическое - 5,77%).
Пример 9.
Диэтаноламиновая соль 6.7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида.
1
2
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b)]пиридин-5-карбоксамид (0,304 ммоль, 100 мг), метанол (3 мл) и диэтаноламин (0,33 ммоль, 0,032 мл) смешивали и позволяли удалиться летучим веществам. Осадок кристаллизовали из этилацетата (2 мл) и гептана (5 мл) с получением требуемого соединения (101 мг, 76%). Н-ЯМР в DO выявил две изомерных формы в соотношении 4/1. Сообщается только о сигналах от основной формы.
1
2
Н-ЯМР (DO) (основной ротамер) σ 2,37 (3H, s), 3,21 (4H, t), 3,26 (3H, s), 3,37 (3H, s), 3,85 (4H, t), 6,38 (1H, s), 7,10 (1H, t), 7,19 (2H, t), 7,33 (2H, d).
21
27
3
5
Расчет для CHNOS; С 58,18%, Н 6,28%, N 9,69%, найдено С 57,58, Н 6,40, N 9,51.
Пример 10.
Литиевая соль 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида.
1
2
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,304 ммоль, 100 мг) и этанол (0.48 мл) перемешивали, после чего по каплям добавляли раствор гидрата гидроксида лития (1,04 экв., 13,2 мг) в воде (0,26 мл). После перемешивания в течение 5 мин смесь концентрировали и добавляли этилацетата (5 мл). Осадок собирали и высушивали с получением требуемого соединения (79 мг, 77%). H-ЯМР в DO выявил две изомерных формы в соотношении 4/1. Сообщается только о сигналах от основной формы.
1
2
H-NMR (DO) (основной ротамер) σ 2,37 (3H, s), 3,25 (3H, s), 3,37 (3H, s), 6,37 (1H, s), 7,09 (1H, t), 7,19 (2H, t), 7,33 (2H, d).
Пример 11.
Натриевая соль 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида.
1
2
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,304 ммоль, 100 мг) и 2-пропанол (0,40 мл) перемешивали и добавляли раствор метоксида натрия в метаноле (0,5 М, 0,305 ммоль, 0,609 мл). Смесь концентрировали, добавляли диэтиловый эфир (2 мл) и обрабатывали ультразвуком в течение 15 мин в бане для ультразвука. Полученный кристаллический осадок собирали фильтрованием и высушивали с получением требуемого соединения (49 мг, 46%). H-ЯМР в DO выявил две изомерных формы в соотношении 4/1. Сообщается только о сигнале от основной формы.
1
2
Н-ЯМР (DO) (основной ротамер) σ 2,37 (3H, s), 3,25 (3H, s), 3,37 (3H, s), 6,37 (1H, s), 7,09 (1H, t), 7,19 (2H, t), 7,33 (2H, d).
Пример 12.
Медная (II) соль 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида
3
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,304 ммоль, 100 мг), воду (1,0 мл), и 1М NaOH (0,304 ммоль, 0,304 мл) перемешивали и к полученному прозрачному раствору добавляли раствор пентагидрата сульфата меди (II) (0,152 ммоль, 38,0 мг) в воде (0,2 мл). Получали густой бледно-зеленый осадок. Добавляли хлороформ (2,0 мл), что приводило к получению прозрачной бесцветной водной фазы и прозрачной зеленоватой органической фазы. Органическую фазу собирали, высушивали и выпаривали. При обработке остатка метанолом (2,0 мл) получали зеленый кристаллический осадок, который отделяли фильтрованием и высушивали с получением требуемого продукта. ЯМР в CDCI давал очень широкие сигналы, что вероятно обусловлено парамагнитыми особенностями меди (II).
Пример 13.
Соль железа (III) 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-оксотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,304 ммоль, 100 мг), воду (1,0 мл) и 1 М NaOH (0,304 ммоль, 0,304 мл) перемешивали и к полученному прозрачному раствору добавляли раствор пентагидрата сульфата железа (III) (0,051 ммоль, 0,102 ммоль Fe (III), 25,0 мг) в воде (0,1 мл). Получали густой красный осадок. Добавляли хлороформ (2,0 мл), что приводило к получению прозрачной бесцветной водной фазы и окрашенной в темно-красный цвет органической фазы. Органическую фазу собирали, высушивали и испаряли. При обработке оставшейся части диэтиловым эфиром (2,0 мл) получали красный кристаллический осадок, который отделяли фильтрацией с получением требуемого соединения (25,3 мг, 25%).
Пример 14.
Эфир уксусной кислоты и 6,7-дигидро-3,7-диметил-5-(метилфенилкарбамоил)-6-охотиено[2,3-6]-пиридин-4-ила.
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,76 ммоль, 250 мг) растворяли в пиридине (3 мл) и добавляли уксусный ангидрид (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего добавляли 1 М HCl (водн.) (20 мл). Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали с получением требуемого соединения (209 мг, 74%).
1
3
Н-ЯМР (CDCl) (основной ротамер) σ 2,27 (3H, d), 2,38 (3H, s), 3,45 (3H, s), 3,46 (3H, s), 6,51 (1H, d), 7,14-7,42 (5H, m); (второй ротамер) σ 2,37 (3H, s), 2,38 (3H, s), 3,34 (3H, s), 3,71 (3H, s), 6,63 (1H, d), 7,14-7,42 (5H, m).
Пример 15.
Эфир 2,2-диметил-пропионовой кислоты и 6,7-дигидро-3,7-диметил-5-(метилфенилкарбамоил)-6-охотиено[2,3-b]пиридин-4-ила.
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,76 ммоль, 250 мг) растворяли в пиридине (3 мл) и добавляли пивалоил хлорид (0,12 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего добавляли 1 М HCl (водн.) (20 мл). Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали с получением требуемого соединения (116 мг, 37%).
1
3
Н-ЯМР (CDCl) (основной ротамер) σ 1,44 (9H, s), 2,25 (3H, d), 3,42 (3H, s), 3,46 (3H, s), 6,49 (1Hd), 7,17-7,41 (5H, m); (второй ротамер) σ 1,36 (9H, s), 2,37 (3H, d), 3,33 (3H, s), 3,72 (3H, s), 6,62 (1H, d), 7,17-7,41 (5H, m).
Пример 16.
Эфир 2,2-диметил-пропионовой кислоты и 6,7-дигидро-3,7-диметил-5-(метилфенилкарбамоил)-6-охотиено[2,3-b]пиридин-4-илоксиметила.
6,7-Дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (0,76 ммоль, 250 мг) растворяли в DMF (3 мл). Добавляли хлорметил пивалот (1,14 ммоль, 0,171 мл), 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундек-7-ен (DBU, 1,14 ммоль, 0,175 мл) и иодид калия (10 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч, после чего добавляли 1 М HCl (водн.) (20 мл). Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали с получением требуемого соединения (172 мг, 51%).
1
3
Н-ЯМР (CDCl) (основной ротамер) σ 1.25 (9H, s), 2,29 (3H, d), 3,50 (3H, s), 3,51 (3H, s), 5,85 (1Hd), 6,11 (1Hd), 6,43 (1Hd), 7,15-7,48 (5H, m); (второй ротамер) σ 1,25 (9H, s), 2,43 (3H, d), 3,47 (3H, s), 3,68 (3H, s), 5,86 (1Hd), 6,13 (1Hd), 6,56 (1H, d), 7,15-7,48 (5H, m).
Фармацевтические композиции
Пример 17.
Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением в форме капсул приготавливаются следующим образом: натриевая соль соединения №1 растворяется в избытке водного раствора карбоната натрия и гранулируется во влажном виде с маннитолом и дополнительно вводимым карбонатом натрия. Капсула наполняется всеми требуемыми эксципиентами за исключением смазывающего вещества, которое присутствует на стадии грануляции. Полученный гранулят высушивается традиционным способом и пропускается через решето с отверстиями подходящего размера. Высушенные гранулы хорошо смешиваются со стеарилфумаратом натрия, полученной смесью заполняются капсулы. Капсулы содержат надлежащие количества активного ингредиента.
Пример 18.
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением в форме капсул приготавливается следующим образом: приготавливается предварительная смесь кальциевой соли соединения №1, маннитола и микрокристаллической целлюлозы. Предварительная смесь гранулируется во влажном виде с раствором водного ацетата кальция. Все эксципиенты, необходимые для заполнения капсулы, присутствуют на стадии грануляции. Полученный гранулят высушивается традиционным способом и пропускается через сито с отверстиями подходящего размера. Сухие гранулы помещаются в капсулы. Капсулы включают надлежащие количества активного ингредиента.
Фармакологические методы
Острый экспериментальный ЕАЕ.
В экспериментах использовали мышей-самок линии SJL/N в возрасте 8 недель. Получали гомогенат спинного мозга (MSCH) самок мышей С57В 1/6 в возрасте 8-12 недель. Ткань гомогенизировали на льду и разводили холодным PBS. Неполный адъювант Фрейнда, содержащий 1 мг/мл М.tuberculosis hominis H37Ra был эмульгирован равным объемом MSCH с получением конечной концентрации MSCH 10 мг/мл. Инокуляционный объем 0,1 мл инъецировали внутрикожно в основание хвоста. Внутриперитонеально инъецировали коклюшный токсин в 0 и 3 дни после иммунизации. Лекарство давали per os ежедневно на 3-7 и 10-12 дни. Контрольные животные получали солевой раствор. Животных, восемь на группу для каждой дозы, оценивали по клиническим признакам паралитического заболевания по шкале от 0 до 5 следующим образом: 0 - норма; 1 - мягкий хвост; 2 - парез задних конечностей; 3 - паралич задних конечностей и хромота передних лап; 4 - двусторонний паралич передних и задних конечностей; 5 - смерть. Клиническую оценку проводили на 7 день и ежедневно, начиная с 9 дня до конца эксперимента на 14 день. Эффект лечения рассчитывали как процент ингибирования клинической оценки по сравнению с контролем, получавшим солевой раствор.
Индуцированный коллагеном артрит.
Для экспериментов использовались мыши самцы линии DBA/I в возрасте между 8-10 неделями. На 0 день мышей иммунизировали внутрикожно у основания хвоста бычьим коллагеном типа II (100 мкг/мышь) в полном адъюванте Фрейнда. Лечение давали per os ежедневно на 3-7, 10-14, 17-21, 24-28 и 31-35 дни. Через пятнадцать дней после иммунизации мышей проверяли на наличие признаков артрита. Животных инспектировали три раза в неделю. Каждый второй или третий день лапы отдельного индивидуума животных с артритом оценивали по шкале 0-4 (0 - нет артрита, 1 - артрит в одном из межфаланговых суставов, плюснефаланговых или внутризапястных суставов, 2 - два артритных сустава, 3 - три артритных сустава, 4 - как в пункте 3, но с более серьезной краснотой и опухолью лапы). Давалась оценка каждой лапы для получения максимально возможной оценки в 16 баллов для каждой мыши.
R-3327 АТ-1 рак простаты крысы
Dunning R-3327 AT-1 представляет собой рак простаты крысы и служит экспериментальной животной моделью заболевания человека. Опухоль AT-1 серийно переносится подкожно (sc) на сингенных крыс линии Copenhagen. Небольшие кусочки опухоли трансплантировали крысам реципиентам sc и лечение крыс с опухолями начинали, когда опухоли легко определялись, примерно на 10 день после трансплантации. Дозировки соединения давали либо орально, либо парентерально 5 дней в неделю в течение четырех недель. Во время эксперимента регистрировали рост опухоли и увеличение веса тела.
Производные тиено[2,3-b]пиридина и 2-тиа-4-аза-индена тестировали на их способность ингибировать острый ЕАЕ у мышей после их лечения различными дозировками. Таблица 2 суммирует данные скринирования лечения острого ЕАЕ. Среди предпочтительных соединений представлены 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-фенил-N,3,7-триметил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (соединение №1), 6,7-дигидро-3,7-диметил-N-этил-4-гидрокси-N-фенил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (соединение №2), 6,7-дигидро-N,7-диметил-3-этил-4-гидрокси-N-фенил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (соединение №3), 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-(4-метоксифенил)-N,3,7-триметил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (соединение №6) and 4,5-дигидро-7-гидрокси-N-фенил-N,1,4-триметил-5-охо-2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамид (соединение №10). Дополнительно для иллюстрации стадии изобретения включены соединения изобретения 6,7-дигидро-N,7-диметил-4-гидрокси-N-фенил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (соединение №11) и соединения сравнения (не соответствующее изобретению) 4,5-дигидро-N,4-диметил-7-гидрокси-N-фенил-5-охотиено[3,2-6]пиридин-6-карбоксамид (соединение №12) и 6,7-дигидро-4-гидрокси-N-(3-пиридил)-N,3,7-триметил-6-охотиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамид (соединение №13).
Таблица 2.Подавление острого ЕАЕ.
Соединение
Подавление острого ЕАЕ (%)
Дозировка (мг/кг р/о)
0,2
1,0
5,0
№1 (изобретение)
85
99
№2 (изобретение)
66
84
№3 (изобретение)
84
100
№6 (изобретение)
92
№10 (изобретение)
78
95
№11 (контроль)
53
№12 (контроль)
неактивно*
№13 (контроль)
46
Неактивно определяется как обеспечивающее ингибирование <35%.
Эффективные количества соединений формулы (I) предпочтительно вводятся пациенту при необходимости такого лечения в соответствии с обычными способами введения и обеспечиваются обычные фармацевтические композиции, включающие эффективное количество активного ингредиента и подходящие фармацевтически приемлемые нетоксические эксципиенты и носители. Такие композиции могут приниматься в различных формах, например в виде растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, капсул и порошков, приготовленных для орального введения, аэрозолей для ингаляций, стерильных растворов для парентерального введения, суппозиториев для ректального введения или подходящих композиций для локального применения. Концентрация соединений, описанных здесь, в терапевтической композиции будет варьировать в зависимости от ряда факторов, включая дозировку лекарства, которое должно быть введено, химические характеристики используемого соединения и способ введения. Традиционные процедуры для выбора и приготовления подходящих фармацевтических композиций описаны, например, в "Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Design", M.B.Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
Композиции могут быть введены традиционно в единичной форме дозировки. Предпочтительная дозировка вводимого соединения вероятно зависит от таких переменных, как тип и степень прогрессии заболевания или расстройства, общего статуса здоровья определенного пациента, эксципиента, относительной биологической эффективности выбранного соединения и композиции соединения и эксципиентов, а также способа введения. Подходящая ежедневная дозировка для применения в лечении вышеупомянутых заболеваний рассматривается как варьирующая между 0,0005 мг/кг до примерно 10 мг/кг веса тела, в частности между 0,005 мг/кг до 1 мг/кг веса тела в зависимости от специфических расстройств, которые лечатся, возраста и веса определенного пациента, а также специфического ответа пациента на лечение. Точная индивидуальная дозировка, а также ежедневная дозировка будут определяться в соответствии со стандартными медицинскими принципами по назначению врача. Рассматриваются различные добавки для усиления стабильности или более легкого введения лекарства. Фармацевтическая композиция может также включать дополнительные фармацевтически полезные субстанции, иные чем соединение формулы (I).
Некоторые производные тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида и 2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамида восприимчивы к химической деградации в твердых фармацевтических композициях. В одном воплощении настоящего изобретения, как проиллюстрировано здесь выше в Примерах 17 и 18, эта проблема решается за счет обеспечения способа приготовления стабильной твердой фармацевтической композиции, которая включает производные соли тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида или 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида формулы (I) с моновалентными или мультивалентными катионами. Способ включает формирование капсулы или таблетки, включающей соль производных тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида или 2-тиа-4-аза-инден-6-карбоксамида и равномерно распределенный щелочно-реакционный компонент, такой как карбонат натрия, способный нейтрализовать любую диссоциацию протонов из эксципиентов, удерживая, таким образом, производные тиено[2,3-b]пиридин-5-карбоксамида или 2-тиа-4-азаинден-6-карбоксамида в форме соли.
Источники информации
1. Talal, N.: Autoimmune diseases. In: Roitt, I.M. and Delves, P J. (eds.) Encyclopedia of Immunology, pp.195-198. Academic Press, 1992.
2. Prineas, J.W.: The neuropathology of multiple sclerosis. In: Koetsier, J.C. (ed.) Handbook of Clinical Neurology, pp.213-257. Elsevier Science Publ., Amsterdam, 1985.
3. Gutschow, M. et at, J. Med. Chem. 1999, 42, 5437-5447.
4. Gewald, К. et at, Chem. Ber. 1966, 99, 94-100.
5. Shinkwin, A.E. et al., Bioorg. Med. Chem. 1999, 7, 297-308.
6. Buchstaller, H.-P. et al, Monatsh. Chemie 2001, 132, 279-293.
7. Liu, H.-.T. et al., Can. J. Chem., 1982, 60, 437-439.
8. Johnstone, R.A.W. et al., J. Chem. Soc. 1969, 2223-2224.