Экспериментальное обоснование эффективности экстракорпоральной антибиотикотерапии в лечении острого гнойного пиелонефрита у животных

зубов применяла «Фторлак».

3 группа (15 чел.) - для устранения гиперчувствительности зубов применяла «Гипостез - фтор».

Повторные осмотры, включающие оценку ТЭР-теста и биопсию эмали, проводились сразу после завершения манипуляции отбеливания, на следующий день, через неделю и через месяц.

Результаты и их обсуждение. Клинический результат после проведения отбеливания во всех трех группах составлял б-8 тонов, что явилось демонстрацией эффективности самой отбеливающей системы «Радогель - ОК». Однако, после проведения манипуляции, практически все пациенты предъявляли жалобы на повышенную чувствительность зубов. Данный процесс нельзя расценивать как патологию, это естественная реакция, так как под воздействием элементов отбеливающей системы, происходит выход микроэлементов из твердых тканей зуба, дегидратация и разрушение органического матрикса эмали. В результате появляется чувствительность к термическим и химическим раздражителям.

При применении зубной пасты «Aqua-fresh», не содержащей десенситайзеры, пациенты отмечали нормализацию чувствительности эмали через 39±2 часов. При использовании «Фторла-ка» полное исчезновение повышенной чувствительности происходило через 22±3 часа. При применении «Гипостез - фтор» у обследованных гиперестезия купировалась уже через 10±4 часов. За время исследования наблюдалась общая тенденция к снижению показателей ТЭР-теста, что свидетельствует о повышении резистентности эмали под действием всех препаратов. По данным клинических исследований до проведения процедуры отбеливания ТЭР-тест составлял 15,8±0,03% во всех группах, сразу после отбеливания 94,0±0,03%, через сутки 72,3±0,08, через б-8 дней, после проведения процедуры, этот показатель составлял 1б,0±0,0б, т.е. резистентность эмали восстанавливается через одну неделю (табл. 1) (р<0,05).

Таблица І

Динамика изменения кислотоустойчивости эмали в группах пациентов на этапах исследования по результатам ТЭР — теста

Данные кислотной биопсии эмали отбеленных зубов показывают, что изначальный выход кальция и фосфора (36,3±0,01/ 21,4±0,03 мкмоль/мин) в первые часы после проведения отбеливания резко увеличивался до 51,0±0,21 /31,8±0,02 мкмоль/мин. На следующий день в группах, где профессионально применяли препараты с фтором, соотношение изменялось до 40,8±0,8/ 24,4±0,02 мкмоль/мин, а в контрольной группе составляло 44,3±0,18/28,2±0,04 мкмоль/мин. Через 6-8 дней эти данные во всех группах практически достигали первоначального соотношения (табл.2) (р<0,05).

Таблица 2

Результаты, полученные при проведении кислотной биопсии эмали, на этапах исследования

группы до проведения отбеливания сразу после отбеливания на следующий день после отбеливания через б-8 дней после отбеливания через 24-30 дней после отбеливания

1 группа Са 3б,3±0,01 51,0±0,21 44,3±0,18 39,б±0,19 37,5±0,12

Р 21,4±0,03 31,8±0,07 28,2±0,04 23,б±0,02 22,1±0,03

2 группа Са 37,1±0,03 52,1±0,15 41,7±0,19 37,9±0,11 37,3±0,19

Р 23,2±0,05 32,9±0,03 25,7±0,0б 22,8±0,01 22,б±0,04

3 группа Са 38,2±0,07 51,9±0,11 40,8±0,8 38,5±0,17 37,2±0,04

Р 23,3±0,04 32,7±0,05 24,4±0,02 23,8±0,03 22,4±0,03

Выводы. Результаты проведенных исследований показали, что рациональный выбор препарата, восстанавливающего резистентность эмали играет важнейшую роль для устранения гиперестезии после процедуры отбеливания.

При проведении клинических исследований нами было отмечено, что препараты фтора, примененные в условиях стоматологического кабинета, сразу после процедуры отбеливания устраняют гиперчувствительность зубов уже в первые сутки, в то

время как отсутствие такой профессиональной обработки, повышенная чувствительность сохраняется до 2 суток.

На основании данных кислотной биопсии эмали, проведенных на следующий день после отбеливания, отмечено, что при применении обычной зубной пасты, соотношение выхода кальция и фосфора достигает 1,57±0,10, в то время как изначальное соотношение составляло 1,73±0,05.Профессиональные препараты фтора действуют более эффективно, и соотношение кальция и фосфора уже на следующий день составляет 1,б1±0,09, что говорит о необходимости их включения в реабилитационные схемы после процедур профессионального отбеливания (р<0,05).

Препарат «Гипостез-фтор» рекомендуется применять для быстрого купирования гиперестезии и нормализации обменных процессов в эмали зубов после проведения отбеливания и профессиональной гигиены.

Литература

1. Гринволл, Л. Методики отбеливания / Л. Гринволл.- М., 2003.- 304 с.

2. Гудкова, Е.К. Влияние внутрикоронкового отбеливания с использованием отбеливающего геля фирмы ''Радуга-Р'' на обменные процессы в твердых тканях зубов / Е. К. Гудкова, П.С. Кравчук //Вестник института стоматологии.- 2010.- № 1.-С. 12-15.

3. Крихели, НИ. Опыт применения профессиональной системы отбеливания зубов / Н.И. Крихели //Актуальные вопросы стоматологии детского возраста: сб. науч. тр.- Уфа, 2001.- С.30-34.

4. Кузьмина, Э.М. Повышенная чувствительность зубов / Э.М. Кузьмина- М.: МГМСУ.- 2003.- 40 с.

5. Кузьмина, Э. М. Влияние профилактических средств на состояние твёрдых тканей зубов при отбеливании /

Э. М. Кузьмина, Т.А. Смирнова. Н. И. Крихели // Новое в стоматологии.- 2001.- № 2.- С.82-84.

6. Максимовский, Ю.М. Наш опыт лечения гиперчувствительности твердых тканей зуба / Ю.М. Максимовский, Р.Р. Тур-сунова, В.В. Садовский // Маэстро стоматологии.- 2002.- №2(7).-С. 80-81.

7. Улитовский, С.Б. Зубные пасты / С.Б. Улитовский.-СПб.: Человек, 2001.- 272 с.

8. Шмидседер, Дж. Эстетическая стоматология 2-е изд./ Дж. Шмидседер.- М.- С. 48-б8.

ASSESSUNG THE EFFICIENCY OF VARIOUS PREPARATIONS CONTANING FLUORINE FOR RESTORING THE RESISTANCE OF ENAMEL AFTER PROFESSIONAL TEETH BLEACHING

YE.V. ANDREEVA, I.A. BELENOVA, D.S. GLAZYEVA, YE.K. GUDKOVA

Voronezh State Medical Academy after N.N. Burdenko

Recent decades among stomatological services bleaching of teeth rank one of leading places. At the same time recent years more and more information on unfavourable influence of peroxide connections in bleaching systems on the organs and oral cavity appear.. In most cases during and after carrying out such stomatological manipulations at patients’ dental hyperesthesia appears proving their negative influence on exchange processes in firm fabrics of teeth. The article presents comparative results of clinic and laboratory researches of applying preparations with fluorine after the procedure of professional bleaching.

Key words: bleaching systems, hyperesthesia, preparations containing fluorine, acid biopsy of enamel.

УДК: б1б.б1-002.3-03б.11.001.б:б15.33

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ АНТИБИОТИКОТЕРАПИИ В ЛЕЧЕНИИ ОСТРОГО ГНОЙНОГО ПИЕЛОНЕФРИТА У ЖИВОТНЫХ

В.В. КУЗЬМЕНКО, О.В. ЗОЛОТУХИН, Ю.А. АНОСОВА,

М.В. КОЧЕТОВ, Ю.Ю. МАДЫКИН *

В статье приводятся результаты лечения моделированного острого гнойного пиелонефрита методом направленного транспорта антибиотиков, представлены исследования концентрации антибиотика в плазме крови и ткани почки при различных методах введения антибиотиков. Ключевые слова: острый гнойный пиелонефрит, направленный

* ГБОУ ВПО Воронежская государственная медицинская академия им.

Н.Н. Бурденко, 394036, Воронежская обл., г. Воронеж, ул. Студенческая д. 1

группы до проведения отбеливания сразу после отбеливания на следующий день после отбеливания через 3-4 дня после отбеливания через б-8 дней после отбеливания

1 группа 1б,3 ±0,04 93,1±0,01 72,0±0,0б 27,3±0,08 17,1±0,08

2 группа 15,1±0,07 94,0±0,07 72,2±0,09 22,3±0,01 15,4±0,09

3 группа 1б,2±0,08 95,2±0,02 73,2±0,10 21,5±0,03 15,0±0,01

транспорт антибиотиков, цефотаксим, концентрация.

Неэффективность антибактериальной терапии пиелонефрита (даже при восстановленном пассаже мочи) объясняется вирулентностью микрофлоры, иммунологическими реакциями, как в очаге воспаления, так и в макроорганизме, общим состоянием последнего, а также развитием полиантибиотикорезистентности, наличием Ь-форм бактерий или реинфекцией новым возбудителем [3,4]. В результате нарушений в системе гомеостаза снижается возможность доставки препарата в очаг воспаления и достижения необходимой концентрации в нём [5]. Антибиотикотера-пия становится эффективной при условии создания высоких, длительно сохраняющихся концентраций лекарственного вещества в очаге микробного воспаления. При внутримышечном и внутривенном введении лекарственных препаратов не всегда удается достичь необходимой концентрации в ткани почки [5]. Одним из возможных решений является поиск и изучение новых перспективных методов лечения, каким и является методика направленного транспорта антибиотиков [1], что по эффективности и минимальной токсичности можно сравнить с «точечным бомбовым ударом» [6].

Цель исследования — экспериментальное обоснование эффективности направленного транспорта антибиотиков при остром гнойном пиелонефрите у животных.

Материалы и методы исследования. В ходе работы был использован антибиотик цефотаксим группы цефалоспоринов. Цефотаксим в своем составе имеет несколько ионогенных групп, поэтому можно предположить о фиксации цефотаксима на мембране эритроцитов за счет слабых взаимодействий с компонентами мембраны. Кроме того, не исключено проникновение цефо-таксима внутрь эритроцита и его взаимодействие с внутриклеточным содержимым. В инкубационные системы поочередно были внесены разные модификаторы. Были выбраны:

- АТФ (за счет энергии гидролиза АТФ происходит активный транспорт ионов через клеточную мембрану, изменяется микровязкость клеточных мембран);

- М§804 (связываясь с клеточными мембранами, ионы М§++ регулируют их проницаемость для прочих ионов. Сорбируясь на мембране, ионы М§++, меняют ее проницаемость для воды и ионов, а также механические свойства мембраны. Особое значение ионы М§++ имеют в поддержании трансмембранного потенциала. Активируя М§++-зависимую Ка+-К+-АТФ-азу, они определяют работу К+/Ыа+ насоса);

- глюкоза (при облегченной диффузии глюкозы белки-переносчики при контакте с транспортируемым веществом изменяют свою конформацию, в результате в мембране открываются своеобразные каналы, через которые другие ионы могут проникать в клетку. Эти изменения происходят за счет энергии, высвобождающейся при связывании транспортируемого вещества с белком. Возможен также перенос эстафетного типа. В этом случае сам переносчик остается неподвижным, а ионы мигрируют вдоль него от одной гидрофильной связи к другой);

- КС1 (ионы К+ снижают устойчивость мембран клеток, ионы К+ могут влиять на степень ионизации антибиотков, а также на заряд мембраны).

В ходе исследования форменные элементы крови после инкубации с антибиотиком были отделены от плазмы крови центрифугированием. Далее форменные элементы крови были гемолизи-рованы путем добавления дистиллированной воды и в полученной взвеси определяли концентрацию цефотаксима. Все спектрофотометрические методы исследования проведены в 30 повторах. С целью определения объема крови, необходимого для проведения направленного транспорта 1,0 г цефотаксима, были созданы инкубационные системы с равными количествами в них цефотаксима и различными объемами крови. Во всех опытах был добавлен КС1 в одинаковой конечной концентрации в клеточной взвеси, равной

0,25 мг/мл (оптимальная концентрация). Полученные данные были применены далее в лечении моделированного пиелонефрита у собак. Экспериментальное исследование проводилось в двух группах на 30 беспородных собаках. Для опыта отбирались внешне здоровые животные без видимых дефектов на коже и признаков общей патологии массой тела 14-18 кг.

Группы экспериментальных животных отличались методом введения антибиотика цефотаксима:

- первая группа (контрольная) включала 15 собак, которым проводилась антибактериальная терапия путем традиционных

внутривенных инъекций цефотаксима;

- вторая группа (опытная) состояла из 15 собак, которым цефотаксим вводился методом направленного транспорта.

Методика направленного транспорта антибиотиков предусматривает забор венозной крови, добавление гепарина и полиглю-кина, удаление плазмы после осаждения форменных элементов, экстракорпоральную инкубацию клеточной массы с цефотаксимом, последующее добавление 0,9% раствора NaCl и внутривенное введение полученной взвеси. Для того, чтобы максимально приблизить условия проводимой терапии в группах сравнения, в контрольной группе также выполнялась эксфузия венозной крови, добавление полиглюкина и гепарина в соответствующих дозировках и замещение плазмы 0,9% раствором NaCl.

Ежедневно оценивалось общее состояние животных, отмечалось наличие гипертермии, тахикардии, тахипноэ, сниженного аппетита и массы тела. В начале эксперимента все животные подвергались оперативному вмешательству с целью моделирования острого гнойного пиелонефрита путем создания обратимой обструкции верхних мочевых путей и введения взвеси Escherichia coli, 105 КОЭ в 1 мл в почечную лоханку.

На третьи сутки у всех экспериментальных животных в разной степени выраженности отмечались повышение температуры тела, тахипноэ, тахикардия, снижение аппетита. Наблюдалось общее угнетение животного, утомляемость, исхудание. Производилась биопсия почки с целью гистологического исследования (гистологическое подтверждение развития гнойного пиелонефрита). У всех животных был произведен общий анализ крови с лейкоцитарной формулой. На третьи сутки уродинамика на стороне поражения была восстановлена путем снятия П-образного шва с устья мочеточника. После восстановления пассажа мочи начиналась антибактериальная терапия. Антибактериальную терапию проводили препаратом цефотаксим. На шестые сутки всем животным производилась ревизия, декапсуляция почки, при выявлении карбункулов - крестообразное вскрытие. После этого производилась биопсия почки (с целью гистологического и хроматографического исследований) и общий анализ крови.

В послеоперационном периоде продолжалась проводимая антибактериальная терапия. На девятые сутки проводилась нефрэкто-мия, взятие материала для гистологического и хроматографического исследований и общий анализ крови.

Предложенный способ направленного транспорта антибиотиков заключается в следующем. В шприц набирают из вены кровь, при этом добавляют гепарин и полиглюкин в расчете: на 30 мл крови 0,5 мл (2500 ЕД) гепарина и 1 мл полиглюкина. Взвесь отстаивается, плазма удаляется. Разовую среднетерапевтическую дозу цефотаксима растворяют в 0,9% растворе NaCl и растворе KCl (концентрация KCl 0,25 мг/мл) и добавляют в шприц с клеточной массой. Создают однородную гомогенную массу взвеси клеток крови с антибиотиком, которую затем инкубируют в термостате при температуре 370С в течение 30 минут. После этого, доводят объем крови в шприце стерильным 0,9% раствором NaCl до исходного объема и вводят внутривенно.

Для обработки данных изучаемых показателей был использован компьютерный пакет прикладных программ STATISTICA (StatSoft, версия б). Статистическая нулевая гипотеза о соответствии данных нормальному закону проверялась с помощью критерия Шапиро-Уилка. В качестве порогового уровня статистической значимости р (вероятности ошибочно отклонить нулевую гипотезу) было принято значение 0,05. Для проверки различий средних изучаемых признаков в исследуемых группах использовали t-критерий Стьюдента для независимых групп, который заключается в проверке нулевой гипотезы о том, что средние значения в группах не различаются. При значениях p < 0,05 принималась альтернативная гипотеза о существовании различий средних значений. Анализ качественных данных включал подсчет абсолютных и относительных частот для каждого признака. По результатам подсчета проводилось сравнение контрольной и основной групп путем проверки нулевой гипотезы о равенстве относительных частот с помощью «Вероятностного калькулятора» пакета прикладных программ STATISTICA с использованием двустороннего критерия статистической значимости, когда неизвестно какая из групп преобладает по частоте. В качестве порогового уровня статистической значимости было принято значение 0,05 [2].

Результаты и их обсуждение. Оказалось, что при увеличении концентрации цефотаксима, вносимого в инкубационную среду, увеличивается его концентрация в клетках крови, но при этом

увеличивается его концентрация и в супернатанте. Соотношение данного антибиотика в форменных элементах и супернатанте увеличилось незначительно, при этом оставаясь выше во внеклеточном пространстве в 1,6-2,0 раза. Оказалось, что при условиях инкубации клеточной взвеси с антибиотиком в присутствии АТФ концентрация в супернатанте цефотаксима в 1,82-2 раза выше, чем в клеточной массе. При инкубации в присутствии 25% раствора М§804 концентрация в супернатанте цефотаксима остается в 1,732,0 раза выше, чем в клеточной массе. При инкубации в присутствии 10% раствора глюкозы концентрация цефотаксима в супернатанте остается в 1,67-2,1 раза выше, чем в клеточной массе.

При внесении в инкубационную систему 5% раствора КС1 концентрация цефотаксима в клетках крови становится выше, чем в супернатанте в 0,8-0,9 раз. Таким образом, комплексирование цефотаксима с компонентами мембраны эритроцитов и их проникновение внутрь клеток не зависит от присутствия в среде АТФ, глюкозы и ионов М§++. Добавление раствора КС1 в среду инкубации улучшает проникновение цефотаксима внутрь клеток крови. При этом оптимальная концентрация КС1 в клеточной взвеси составляет 0,25 мг/мл. Ионы К+ снижают устойчивость мембран клеток. Возможно, при снижении устойчивости в мембране образуются каналы, через которые цефотаксим может проникать внутрь клеток. С другой стороны, инкубация К+ с антибиотиками и взвесью форменных элементов крови может влиять на степень ионизации цефотаксима, а также на заряд мембраны. В этих условиях, по-видимому, улучшается связывание антибиотиков с компонентами мембран клеток в основном за счет электростатических взаимодействий. В ходе эксперимента выявлено, что исходный объем венозной крови для проведения направленного транспорта 1,0 г цефо-таксима составляет 30 мл при условии присутствия в среде инкубации 5% раствора КС1 в концентрации 0,25 мг/мл.

Полученные данные были применены далее в лечении моделированного пиелонефрита у собак. В ходе эксперимента было выявлено, что с первых по третьи сутки эксперимента (развитие острого пиелонефрита) симптоматика в обеих группах животных достоверно не отличалась. Наиболее тяжелое состояние животных было отмечено на третьи сутки эксперимента. В ходе эксперимента было выявлено, что гипертермия, тахикардия и тахипноэ отмечались до конца эксперимента в контрольной группе и до седьмых суток включительно в опытной группе. В контрольной группе снижение аппетита и массы тела отмечались до восьмого дня эксперимента включительно. В опытной группе уже к седьмым суткам у всех собак восстановился аппетит, снижения массы тела зафиксировано не было. В контрольной группе аналогичные данные получены на девятые сутки эксперимента. Таким образом, при проведении антибактериальной терапии методом направленного транспорта состояние экспериментальных животных нормализуется быстрее, чем при введении антибиотика традиционным внутривенным путем. Всем экспериментальным животным производился общий анализ крови перед началом эксперимента (исходный уровень), на третьи, шестые и девятые сутки эксперимента. При изучении показателей периферической крови собак на третьи сутки эксперимента в обеих группах было отмечено повышение процентного содержания палочкоядерных и сегментоядерных нейтро-филов, моноцитов, снижение процентного содержания лимфоцитов при повышенном уровне лейкоцитов и ускорение СОЭ по сравнению данными забора крови перед началом эксперимента. Полученные данные отражают наличие воспалительного процесса у собак. В контрольной группе на третьи сутки лейкоциты периферической крови составили 24,3±1,02х109/л (исходный уровень 14,2±0,53х109/л), лимфоциты 10,2±0,42% (исходный уровень 25,2±1,22%), СОЭ - 32,8±1,54мм/ч (исходный уровень

6,4±0,18мм/ч). Повысилось процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов до 11,3±0,37% (исходный уровень 2,1±0,07%), сегментоядерных нейтрофилов до 89,3±3,6% (исходный уровень 67,8±2,91), эозинофилов до 7,1±0,31% (исходный уровень

5,7±0,15%) и моноцитов до 12,9 ±0,47% (исходный уровень 6,9 ±0,25%). В опытной группе на третьи сутки лейкоциты периферической крови составили 24,5±1,03х109/л (исходный уровень 14,4±0,54х109/л), лимфоциты 11,1±0,44% (исходный уровень

24,9±1,20%), СОЭ - 30,5± 1,51 мм/ч (исходный уровень

6,4±0,18мм/ч). Повысилось процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов до 11,6±0,39% (исходный уровень 2,3±0,08%), сегментоядерных нейтрофилов до 91,2±3,8% (исходный уровень 70,1±2,95), эозинофилов до 7,0±0,30% (исходный уровень

5,9±0,16%) и моноцитов до 12,3±0,44% (исходный уровень

6,8±0,25%). В контрольной группе к шестым суткам эксперимента на фоне проводимой антибактериальной терапии и устранении обструкции мочевых путей в анализах периферической крови оставался достоверно повышенный лейкоцитоз по сравнению исходными данными - 19,1±0,82х109/л, (исходный уровень

14,2±0,53х109/л), повышение процентного содержания палочкоядерных нейтрофилов 6,2±0,18% (исходный уровень 2,1±0,07%), сегментоядерных нейтрофилов 80,3±3,4% (исходный уровень 67,8±2,91), эозинофилов 6,7±0,24% (исходный уровень 5,7±0,15%) и моноцитов 11,2±0,44% (исходный уровень 6,9 ±0,25%), повышение процентного содержания лимфоцитов 15,1±0,64%, (исходный уровень 25,2±1,22%) и ускорение СОЭ - 31,8±1,53 мм/ч (исходный уровень 6,4±0,18 мм/ч). На шестые сутки эксперимента в контрольной группе показатели не вошли в диапазон исходного уровня. В опытной группе на шестые сутки эксперимента была отмечена нормализация большинства показателей периферической крови. Количество лейкоцитов составило 15,4±0,67 (исходный уровень 14,4±0,54х109/л), лимфоцитов 23±0,98% (исходный уровень

24,9±1,20%), СОЭ - 15,3±0,6 мм/ч (исходный уровень

6,4±0,18мм/ч). Процентное содержание палочкоядерных нейтро-филов составило 2,4±0,05% (исходный уровень 2,3±0,08%), сегментоядерных нейтрофилов 71,2±3,01% (исходный уровень

70,1±2,95), эозинофилов 6,2 ±0,18% (исходный уровень 5,9±0,16%) и моноцитов 7,1 ±0,31% (исходный уровень 6,8±0,25%). В опытной группе животных на шестые сутки эксперимента была отмечена нормализация 6 из 7 показателей периферической крови. В контрольной группе при лабораторном исследовании показателей периферической крови на девятые сутки наблюдалась нормализация большинства показателей. Лейкоциты составили 16,1±0,72х109/л (исходный уровень 14,2±0,53х109/л), лимфоциты 24,9±0,98% (исходный уровень 25,2±1,22%), СОЭ - 14,8±0,56мм/ч (исходный уровень 6,4±0,18мм/ч), палочкоядерные нейтрофилы 3,2±0,09% (исходный уровень 2,1±0,07%), сегментоядерные ней-трофилы 76,3 ±3,2% (исходный уровень 67,8±2,91), эозинофилы 6,1±0,17% (исходный уровень 5,7±0,15%) и моноциты 7,4±0,35% (исходный уровень 6,9 ±0,25%). В опытной группе на девятые сутки эксперимента было отмечено дальнейшее снижение СОЭ, остальные показатели периферической крови нормализовались уже на 6 сутки эксперимента. Количество лейкоцитов составило 14,4±0,54 (исходный уровень 14,4±0,54х109/л), лимфоцитов

26,1±1,12% (исходный уровень 24,9±1,20%), СОЭ - 6,9±0,25мм/ч (исходный уровень 6,4±0,18мм/ч). Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов составило 2,1±0,07% (исходный уровень 2,3±0,08%), сегментоядерных нейтрофилов 65,2±2,96% (исходный уровень 70,1±2,95%), эозинофилов 5,5±0,15% (исходный уровень 5,9±0,16%) и моноцитов 7,0±0,21% (исходный уровень 6,8±0,25%). Таким образом, при проведении антибактериальной терапии методом направленного транспорта, показатели периферической крови нормализуются быстрее, чем при введении антибиотиков традиционным внутривенным путем.

При изучении полученных морфологических данных из разных контрольной и опытной групп был выявлен ряд морфологических особенностей. В препаратах почек собак на 3 сутки эксперимента в обеих группах исследования отмечаются следующие изменения. Морфологические изменения в корковом слое: эпителий проксимальных канальцев в состоянии гиалиново-капельной дистрофии. В просвете некоторых канальцев белковые цилиндры. Выраженное полнокровие сосудов. Интерсти-ций с отеком. Патологические изменения в мозговом слое: эпителий дистальных канальцев с явлениями выраженной гидропи-ческой дистрофии, в просвете встречаются белковые цилиндры. Встречаются многочисленные очаговые некрозы. Местами канальцы разрушены, на их месте очаговые скопления лейкоцитов

- микроабсцессы. Отек и лейкоцитарная инфильтрация интер-стиция, полнокровие сосудов, очаговые кровоизлияния. На 6 сутки эксперимента в препаратах из контрольной группы животных выявлены следующие изменения. В корковом слое почки наблюдалась гидропическая дистрофия эпителия клубочков. В капиллярах клубочков стаз эритроцитов. Эпителий проксимальных канальцев в состоянии гиалиново-капельной и гидропиче-ской дистрофии, в просвете канальцев белковые массы. В мозговом слое наблюдалась выраженная гидропическая дистрофия эпителия дистальных канальцев, в просвете некоторых белковые цилиндры. Интерстиций с явлениями отека, полнокровия сосудов, очаговыми кровоизлияниями. Встречаются очаговые инфильтраты из лимфоцитов, плазмацитов. Количество нейтрофи-

лов уменьшено, лейкоцитарные инфильтраты небольшие, встречаются редко. На 9 сутки в контрольной группе преобладают пролиферативные изменения. В корковом слое отмечалось полнокровие капилляров клубочков. Проксимальные канальцы с явлениями гиалиново-капельной дистрофии, в просвете некоторых канальцев белковые массы. В интерстиции встречаются участки периваскулярного фиброза. В мозговом слое отмечалось уплощение эпителия дистальных канальцев. В интерстиции встречались множественные прослойки соединительной ткани, очаговые инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов и плазмаци-тов. В опытной группе течение воспалительного процесса изменяется. Так, на 6 сутки морфологические изменения соответствуют фазе пролиферации воспалительного процесса. В корковом слое гиалиново-капельная дистрофия проксимальных канальцев, полнокровие сосудов. Очаги периваскулярного фиброза в интерстиции. Эпителий дистальных канальцев уплощен. В интерстиции очаговые инфильтраты из лимфоцитов и плазмацитов, очаговый фиброз. На 9 сутки в опытной группе патологические изменения минимальны. Сохраняется очаговая гиалиновокапельная дистрофия проксимальных канальцев. Дистальные канальцы обычного гистологического строения, просвет некоторых заполнен массами белка. В интерстиции полнокровие и очаги фиброза. Редко встречаются мелкие очаги лимфоцитарной инфильтрации. Таким образом, полученные морфологические данные свидетельствуют об ускорении темпов воспалительного процесса в опытной группе по сравнению с контрольной.

Для успеха проводимой антибактериальной терапии направленным транспортом антибиотик должен не только проникать в клетки крови или связываться с компонентами мембран этих клеток. Необходимо также высвобождение антибиотика из кровяных клеток и создание высоких концентраций в очаге воспаления. При воспалении в ткани всегда повышается осмотическое давление, возникает ацидоз, увеличивается содержание воды. Кроме того, при воспалении нарушается местное крово- и лимфообращение, прежде всего микроциркуляция. При этом возникает спазм артериол, который носит рефлекторный характер и скоро проходит. Вслед за этим возникает артериальная гиперемия. Кроме того, расширение приводящих сосудов возникает в результате паралича вазоконстрикторов, сдвига рН среды в сторону ацидоза, понижения эластичности окружающей сосуды соединительной ткани. Вследствие нарушения тканевого окисления и накопления в тканях недоокисленных продуктов развивается ацидоз. Сначала он компенсируется буферными механизмами, а затем становится декомпенсированным, в результате чего рН экссудата снижается. Концентрация ионов водорода тем выше, чем интенсивнее выражено воспаление. Исходя из вышесказанного, в случае гнойного пиелонефрита рН почечной ткани, вовлеченной в патологический процесс, будет сдвинуто в сторону ацидоза. Кроме того, если в ходе патологического процесса изменяется кислотность плазмы, то одновременно изменяется и соотношение ионизированной и неионизированной форм молекул, циркулирующих в крови, и, следовательно, характер их распределения в организме. По-видимому, при ацидозе происходит изменение заряда на поверхности мембраны форменных элементов крови, что приводит к десорбции антибиотика с поверхности мембраны и появлению его в ткани почек. Для подтверждения вышесказанного нами проведено исследование концентрации цефотак-сима в ткани почек собак с острым гнойным пиелонефритом при традиционном внутривенном введении и применении методики направленного транспорта. В ткани почек животных концентрация цефотаксима на шестые и девятые сутки эксперимента в контрольной группе составила 8,6±0,39 мкг/г и 9,2±0,43 мкг/г соответственно, в опытной группе 21,5±0,98 мкг/г и 25,7±1,07 мкг/г. Из полученных данных следует, что при традиционном внутривенном введении цефотаксима повысить его концентрацию в ткани почки возможно только при увеличении дозы вводимого препарата. При введении цефотаксима методом направленного транспорта повышается его концентрация в ткани почки без увеличения дозы вводимого препарата. Таким образом, при направленном транспорте цефотаксим проникает в клетки крови или связывается с компонентами мембран этих клеток. После этого антибиотик постепенно высвобождается из кровяных клеток и создает высокие концентрации в очаге воспаления, что повышает эффективность проводимой антибактериальной терапии при остром гнойном пиелонефрите.

Таким образом, добавление раствора калия хлорида в кон-

центрации 0,25 мг/мл в среду инкубации улучшает комплексиро-вание цефотаксима с компонентами мембраны форменных элементов крови и проникновение антибиотика внутрь клетки. Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта в лечении острого гнойного пиелонефрита способствует более ранней нормализации показателей периферической крови и состояния экспериментальных животных, ускорению темпов воспалительного процесса.

Литература

1. Абу Идда, А.Ш. Лечение больных с гнойновоспалительными заболеваниями почек. Путем применения направленного транспорта антибактериальных препаратов в аутологичных лейкоцитах / А.Ш. Абу Идда, С. И. Горелов, О.Ф. Каган // Медицинский научный и учебно-методический журнал.- 2006.-№31.- С.116-124.

2. Гринхалъх, Т. Основы доказательной медицины: Пер. с англ. / Т. Гринхальх.- М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004.- 240 с.

3. Летальность при остром гнойном пиелонефрите в общей структуре причин смертность у урологических больных / П.В. Глыбочко [и др.] // Современные принципы диагностики, профилактики и лечения инфекционно-воспалительных заболеваний почек, мочевыводящих путей и половых органов.- 2007.-

С.32-33.

4. Неймарк, А.И. Комплексное лечение больных острым пиелонефритом / А.И. Неймарк, А.В. Симашкевич // Современные принципы диагностики, профилактики и лечения инфекционно-воспалительных заболеваний почек, мочевыводящих путей и половых органов.- 2007.- С.88-91.

5. Рациональная фармакотерапия в урологии: рук. для практикующих врачей / под ред. Н.А. Лопаткина, Т.С. Перепановой.-М.: Литера.- 2006.- 824 с.

6. Эритроциты - носители лекарственных препаратов. / В.И. Сарбаш [и др.] // Российский химический журн.- 2007.-Том 51.- №1.- С.143-152.

EXPERIMENTAL SUBSTANTIATION OF EXTRACORPORAL ANTIBACTERIAL THERAPY IN TREATING ACUTE PURULENT PYELONEPHRITIS AT ANIMALS

V.V. KUZMENKO, O.V ZOLOTUKHIN., Y.A. ANOSOVA,

Y.Y. MADYKIN, M.V.KOCHETOV

Voronezh State Medical Academy after N.N. Burdenko

The article presents the results of treating acute purulent pyelonephritis by means of directed transport antibiotics. The studies of antibiotic concentration in the plasma of blood and kidney tissue at various methods of antibiotic introduction article are presented.

Key words: acute purulent pyelonephritis, directed transport of antibiotics, cefotaxim, concentration.

УДК 591.8

ПУТИ ПРОГРАММИРУЕМОЙ КЛЕТОЧНОЙ ГИБЕЛИ И УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ГЕПАТОЦИТОВ АМФИБИЙ ВИДА RANA TERRESTRIS В СИСТЕМЕ IN VITRO

Е.И. АНТОНОВА, Д.И. БЕКОВА, Л.Е. ХАМИТОВА, О.Ю. ШПАК *

Целесообразно в процессе культивирования гепатоцитов холоднокровных животных использовать модифицированный метод выделения гепатоцитов. Ультраструктурная организация культур ин-тактных гепатоцитов характеризуется незначительным развитием мембранных структур, наличием мелких единичных митохондрий, липидов. Отмечаются морфологические признаки активации синтеза белка. Основной путь программируемой клеточной гибели является некроз. После перегревания наблюдается мозаичный характер деструктивных изменений ультраструктуры гепатоцитов. Снижается активность синтетических процессов. Проявляются морфологические признаки реализации программы гибели гепатоцитов по пути аутофа-гии. Увеличивается количество погибших гепатоцитов - хехст-позитивных и пропидиумиодид-позитивных, но в большей мере увеличивается количество гепатоцитов с некротическим фенотипом. Ключевые слова: программируемая клеточная гибель, амфибии, клеточные культуры, апоптоз, некроз, гипертермия, индекс пролиферации, гепатоциты.

*

Омский государственный педагогический университет, 644099, Омск, набережная Тухачевского,14