КАНОЛА HO/LL С УСТОЙЧИВОСТЬЮ К ЗАБОЛЕВАНИЮ КИЛОЙ КРЕСТОЦВЕТНЫХ

1. Способ идентификации растения, включающего мутацию гена fad2, вносящего вклад в фенотип высокого содержания олеиновой кислоты у Brassica napus, причем способ включает:
выделение геномной ДНК из растения; и
скрининг выделенной геномной ДНК на молекулярный маркер нуклеиновой кислоты в группе сцепления N5 или N1 B. napus, где присутствие молекулярного маркера нуклеиновой кислоты является показателем мутации гена fad2, вносящего вклад в фенотип высокого содержания олеиновой кислоты у Brassica napus.
2. Способ по п.1, где мутация представляет собой полиморфизм одиночного нуклеотида, который приводит к укороченному продукту экспрессии fad2.
3. Способ по п.1, где молекулярный маркер представляет собой полиморфизм одиночного нуклеотида в положении, соответствующем положению 411 гена fad2 B. napus.
4. Способ по п.3, где молекулярный маркер представляет собой нуклеотид тимидин в положении, соответствующем положению 411 гена fad2 B. napus.
5. Способ по п.4, где скрининг выделенной геномной ДНК на молекулярный маркер нуклеиновой кислоты включает определение присутствия в выделенной геномной ДНК молекулы нуклеиновой кислоты, которая способна специфически гибридизоваться с комплементарной SEQ ID NO:7.
6. Растение, идентифицированное способом по п.1.
7. Способ идентификации растения, включающего мутацию гена fad3, вносящего вклад в фенотип низкого содержания линоленовой кислоты у Brassica napus, причем способ включает:
выделение геномной ДНК из растения; и
скрининг выделенной геномной ДНК на молекулярный маркер нуклеиновой кислоты в группе сцепления N4 или N14 B. napus, где присутствие молекулярного маркера нуклеиновой кислоты является показателем мутации гена fad3, вносящего вклад в фенотип низкого содержания линоленовой кислоты у Brassica napus.
8. Способ по п.7, где мутация представляет собой полиморфизм одиночного нуклеотида, который приводит к аномальному сплайсингу продукта экспрессии fad3.
9. Способ по п.7, где молекулярный маркер представляет собой полиморфизм одиночного нуклеотида в положении, соответствующем первому основанию 5′-сайта сплайсинга третьего интрона гена fad32 B. napus.
10. Способ по п.9, где молекулярный маркер представляет собой нуклеотид аденин в положении, соответствующем первому основанию 5′-сайта сплайсинга третьего интрона гена fad32 B. napus.
11. Способ по п.10, где скрининг выделенной геномной ДНК на молекулярный маркер нуклеиновой кислоты включает определение присутствия в выделенной геномной ДНК молекулы нуклеиновой кислоты, которая способна специфически гибридизоваться с комплементарной SEQ ID NO:12.
12. Растение, идентифицированное способом по п.7.
13. Способ идентификации растения, включающего последовательность ДНК, вносящую вклад в устойчивость к заболеванию килой крестоцветных у Brassica napus, причем способ включает:
выделение геномной ДНК из растения; и
скрининг выделенной геномной ДНК на молекулярный маркер нуклеиновой кислоты, представляющий собой повтор короткой последовательности (SSR) у B. napus, где присутствие молекулярного маркера нуклеиновой кислоты SSR является показателем наличия последовательности ДНК, вносящей вклад в устойчивость к заболеванию килой крестоцветных у Brassica napus.
14. Способ по п.13, где молекулярный маркер представляет собой маркер BN1810 SSR.
15. Способ по п.1, где скрининг выделенной геномной ДНК на молекулярный маркер нуклеиновой кислоты включает определение присутствия в выделенной геномной ДНК последовательности нуклеиновой кислоты из приблизительно 300 пар оснований в длину, которая амплифицируется праймерами SEQ ID NO:16-17 при полимеразной цепной реакции.
16. Растение, идентифицированное способом по п.13.
17. Способ введения фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты в растение Brassica, причем способ включает:
1
скрещивание первого растения Brassica, включающего мутацию одиночного нуклеотида в гене fad2, что приводит к укороченному продукту экспрессии fad2, со вторым растением Brassica с получением поколения Fрастений Brassica;
1
применение селекции с использованием маркеров для идентификации растения F Brassica, включающего молекулярный маркер нуклеиновой кислоты в группе сцепления N5 или N1 B. napus, где присутствие молекулярного маркера нуклеиновой кислоты является показателем мутации гена fad2, вносящей вклад в фенотип высокого содержания олеиновой кислоты у Brassica napus; и
1
размножение идентифицированного растения F Brassica, вводя тем самым фенотип высокого содержания олеиновой кислоты в растение Brassica.
1
1
18. Способ по п.17, где идентификация растения F Brassica включает определение присутствия в растении F Brassica молекулы нуклеиновой кислоты, которая способна специфически гибридизоваться с комплементарной SEQ ID NO:7, где молекула нуклеиновой кислоты не способна специфически гибридизоваться с комплементарной SEQ ID NO:9.
19. Способ введения фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты в растение Brassica, причем способ включает введение в растение Brassica мутантного гена fad2, кодирующего полипептид, включающий SEQ ID NO:8.
20. Способ по п.19, где мутантный ген fad2 включает SEQ ID NO:7.
21. Способ по п.19, где мутантный ген fad2 вводят в растение Brassica путем скрещивания с растением Brassica, включающим мутантный ген fad2.
22. Способ введения фенотипа низкого содержания линоленовой кислоты в растение Brassica, причем способ включает:
1
скрещивание первого растения Brassica, включающего мутацию одиночного нуклеотида в гене fad3, что приводит к аномальному сплайсингу продукта экспрессии fad3, со вторым растением Brassica с получением поколения Fрастений Brassica;
1
применение селекции с использованием маркеров для идентификации растения F Brassica, включающего молекулярный маркер нуклеиновой кислоты в группе сцепления N4 или N14 B. napus, где присутствие молекулярного маркера нуклеиновой кислоты является показателем мутации гена fad3, вносящей вклад в фенотип низкого содержания линоленовой кислоты у Brassica napus; и
1
размножение идентифицированного растения F Brassica, вводя тем самым фенотип низкого содержания линоленовой кислоты в растение Brassica.
1
1
23. Способ по п.22, где идентификация растения F Brassica включает определение присутствия в растении F Brassica молекулы нуклеиновой кислоты, которая способна специфически гибридизоваться с комплементарной SEQ ID NO:12, где молекула нуклеиновой кислоты не способна специфически гибридизоваться с комплементарной SEQ ID NO:13.
24. Способ введения фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты в растение Brassica, причем способ включает введение в растение Brassica мутантного гена fad3, включающего SEQ ID NO:12.
25. Способ по п.23, где мутантный ген fad3 вводят в растение Brassica путем скрещивания с растением Brassica, включающим мутантный ген fad3.
26. Способ введения устойчивости к заболеванию килой крестоцветных в растение Brassica, причем способ включает:
1
скрещивание первого растения Brassica, включающего молекулярный маркер нуклеиновой кислоты, представляющий собой повтор короткой последовательности (SSR) в B. napus, где присутствие молекулярного маркера нуклеиновой кислоты SSR является показателем наличия последовательности ДНК, вносящей вклад в устойчивость к заболеванию килой крестоцветных у Brassica napus, со вторым растением Brassica с получением поколения Fрастений Brassica;
1
применение селекции с использованием маркеров для идентификации растения F Brassica, включающего молекулярный маркер нуклеиновой кислоты SSR или его эквивалент; и
1
размножение идентифицированного растения F Brassica, вводя тем самым устойчивость к заболеванию килой крестоцветных в растение Brassica.
27. Способ по п.26, где молекулярный маркер нуклеиновой кислоты представляет собой маркер BN1810 SSR.
28. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид, включающий SEQ ID NO:8.
29. Молекула нуклеиновой кислоты по п.28, включающая SEQ ID NO:7.
30. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая SEQ ID NO:12.
31. Выделенный образец молекул нуклеиновой кислоты, включающий:
молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, включающий SEQ ID NO:8; и
молекулу нуклеиновой кислоты, включающую SEQ ID NO:12.
32. Способ получения генно-инженерного организма, включающий введение молекулы нуклеиновой кислоты по п.28 в организм.
33. Способ получения генно-инженерного организма, включающий введение молекулы нуклеиновой кислоты по п.30 в организм.
34. Растение Brassica, включающее молекулу нуклеиновой кислоты по п.28 и SEQ ID NO:12, где растение более устойчиво к заболеванию килой крестоцветных, чем растение дикого типа того же вида.
35. Растение Brassica по п.34, где растение дикого типа представляет собой B. napus сорта Quantum.
36. Растение Brassica по п.34, где растение более устойчиво или толерантно чем растение дикого типа того же вида к гербициду, выбранному из группы, состоящей из глифосатного и имидазолинонового гербицида.
37. Растение Brassica по п.36, где растение дикого типа представляет собой B. napus сорта Quantum.
38. Растение Brassica по п.34, где растение включает признак восстановления цитоплазматической мужской стерильности.
39. Растение Brassica по п.34, где растение включает:
устойчивость или толерантность по сравнению с растением дикого типа того же вида к гербициду, выбранному из группы, состоящей из глифосатного и имидазолинонового гербицида; и
признак восстановления цитоплазматической мужской стерильности.
40. Растение Brassica по п.34, где масло семян, полученное из растения, включает профиль жирных кислот, включающий, по меньшей мере, приблизительно 63% олеиновой кислоты и не более приблизительно 6% линоленовой кислоты.
41. Способ введения фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты в растение Brassica, причем способ включает:
1
скрещивание первого растения Brassica со вторым растением Brassica, включающим средство для введения фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты в растение рода Brassica, с получением поколения F растений Brassica;
1
идентификацию растения FBrassica, включающего средство для введения фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты в растение рода Brassica; и
1
размножение идентифицированного растения FBrassica, в результате чего вводится фенотип высокого содержания олеиновой кислоты в растение Brassica.
42. Способ идентификации растения Brassica, включающего фенотип высокого содержания олеиновой кислоты, причем способ включает:
выделение молекул нуклеиновой кислоты из растения Brassica; и
введение в контакт молекул выделенной нуклеиновой кислоты со средством для идентификации растения, несущего ген, вносящий вклад в фенотип высокого содержания олеиновой кислоты у растения рода Brassica, с получением поддающегося определению сигнала, который является показателем присутствия фенотипа высокого содержания олеиновой кислоты у растения Brassica.
43. Способ введения фенотипа низкого содержания линоленовой кислоты в растение Brassica, причем способ включает:
1
скрещивание первого растения Brassica со вторым растением Brassica, включающим средство для введения фенотипа низкого содержания линоленовой кислоты в растение рода Brassica, с получением поколения F растений Brassica;
1
идентификацию растения FBrassica, включающего средство для введения фенотипа низкого содержания линоленовой кислоты в растение рода Brassica; и
1
размножение идентифицированного растения FBrassica, в результате чего вводится фенотип низкого содержания линоленовой кислоты в растение Brassica.
44. Способ идентификации растения Brassica, включающего фенотип низкого содержания линоленовой кислоты, причем способ включает:
выделение молекул нуклеиновой кислоты из растения Brassica; и
введение в контакт молекул выделенной нуклеиновой кислоты со средством для идентификации растения, несущего ген, вносящий вклад в фенотип низкого содержания линоленовой кислоты у растения рода Brassica, с получением поддающегося определению сигнала, который является показателем присутствия фенотипа низкого содержания линоленовой кислоты у растения Brassica.
45. Способ введения устойчивости к заболеванию килой крестоцветных в растение Brassica, причем способ включает:
1
скрещивание первого растения Brassica со вторым растением Brassica, включающим средство для введения устойчивости к заболеванию килой крестоцветных в растение Brassica spp., с получением поколения F растений Brassica;
1
идентификацию растения FBrassica, включающего средство для введения устойчивости к заболеванию килой крестоцветных в растение Brassica spp.; и
1
размножение идентифицированного растения FBrassica, в результате чего вводится устойчивость к заболеванию килой крестоцветных в растение Brassica.
46. Способ идентификации растения Brassica, включающего устойчивость к заболеванию килой крестоцветных, причем способ включает:
выделение молекул нуклеиновой кислоты из растения Brassica; и
введение в контакт молекул выделенной нуклеиновой кислоты со средством для идентификации растения, несущего ген, вносящий вклад в устойчивость к заболеванию килой крестоцветных, с получением поддающегося определению сигнала, который является показателем присутствия устойчивости к заболеванию килой крестоцветных у растения Brassica.