ВОДОРАСТВОРИМЫЙ КОМПЛЕКС ЦИС-ДИАМИНОДИХЛОРПЛАТИНЫ (2+) С ИЗОНИАЗИДОМ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
WATER-SOLUBLE COMPLEX OF CIS-DIAMINODICHLOROPLATINUM (2+) WITH ISONIASIDE AND METHOD OF PREPARING SAID COMPLEX

Изобретение относится к физиологически активным соединениям и может быть использовано в медицинской практике для лечения онкологических заболеваний как в качестве самостоятельного лекарственного средства, так и в композиции с известными препаратами.
Известно, что цисплатин (Цис-Диаминдихлорплатина (2+)) (коммерческие синонимы: Платидиам, Platidiam, Platinol) широко используется на практике для химиотерапии онкологических больных. Цисплатин представляет собой кристаллический порошок от желтого до желто-оранжевого цвета, который медленно и очень мало растворим в воде и изотоническом растворе хлорида натрия (Машковский М.Д. Лекарственные средства, изд. 12-е. - М.: Медицина, 1992, стр.523-524).
Несмотря на плохую растворимость соединения в воде и водных растворах, основной способ применения цисплатина при терапии - внутривенно. Для этого препарат растворяют из расчета 10 мг сухого вещества на 10 мл стерильной воды для инъекций, и этот раствор разводят в 1 л изотонического раствора натрия хлорида или 5% раствора глюкозы. Для увеличения растворимости цисплатина перед введением раствор рекомендуется предварительно подогреть до температуры 30-36 градусов Цельсия. Раствор вводят струйно (медленно) или в виде длительных инфузий (в течение 6-48 ч).
Известен способ получения цис-диаминдихлордигидроксоплатины (4+) из цис-диаминдихлорплатины (2+) путем обработки суспензии цисплатина 30%-ной перекисью водорода при 60-80°С с последующим отделением твердого остатка (SU 1137698 А1, Желиговская Н.Н. и др., 17.10.1983). Показано, что при проведении химических превращений встраиваемые гидроксигруппы не затрагивают стерического размещения хлор- и аминогрупп.
Также известны производные цисплатина, где один из лигандов замещен на другой биогенный лиганд с целью понижения общей токсичности цисплатина (US6548541, Shaw, 15.04.2003; US7160908, Shaw, 09.01.2007) и создания его растворимой формы (RU2151740 С1, Желиговская Н.Н. и др., 27.06.2000).
Задачей настоящего изобретения является разработка ранее неизвестного комплексного соединения цисплатина (двухвалентной платины), а именно комплекса цис-диаминдихлорплатины (2+) с гидразидом изоникотиновой кислоты (изониазид), отличающегося более высокой растворимостью и пониженной токсичностью, что позволяет отказаться от стадии лиофилизации в процессе получения лекарственной формы и облегчает ее использование, и способа его получения.
3
2
2
Новое комплексное соединение является производным цисплатина (цис-диаминдихлорплатина) формулы: Pt(NH)Cl·2L, где L=INH (изониазид, гидразид изоникотиновой кислоты).
Для получения соединения (1) одну часть цисплатина смешивают с 2 частями изониазида, находящегося в растворе, при температуре раствора в диапазоне 50-80°С при постоянном перемешивании в течение 48 часов до образования гомогенного раствора. Полученное соединение фильтруют через стандартный микробиологический фильтр с размерами пор 0.22 мкм для очистки от нерастворимых фракций.
Патентуемое комплексное соединение является новым, в литературе не описано, не известен и способ его получения.
Ниже приводится детальное описание способа получения патентуемого соединения - комплексного соединения цис-диаминдихлорплатины (2+) с гидразидом изоникотиновой кислоты.
Приготовили раствор 0.274 г (0.002 моль) гидразида изоникотиновой кислоты в 5 мл воды. Полученный раствор нагревали до температуры 50°С и добавили к нему 0.300 г (0.001 моль) цис-диаминдихлороплатины (2+). После смешения реагентов реакционную смесь перемешивали 48 часов при 50°С. Полученный раствор фильтровали через стандартный микробиологический фильтр с размерами пор 0.22 мкм (фирмы Миллипоре). Полученный фильтрат концентрировали в вакууме. Получено 0.563 г (98%) вещества в виде стеклообразной пленки светло-желтого цвета. Комплекс растворим в воде, что значительно упрощает работу с ним на биообъектах, и это является техническим результатом группы изобретений.
Строение и состав полученного комплексного соединения были доказаны методами УФ- и ЯМР-спектроскопии и элементного анализа, а полученные спектры приведены на фиг.1-6:
1
на фиг.1 представлен спектр ЯМР Н исходного изониазида;
1
на фиг.2 - спектр ЯМР Н смеси изониазид + комплекс;
1
на фиг.3 - спектр ЯМР Н смеси изониазид + комплекс (через год);
1
на фиг.4 - спектр ЯМР Н смеси изониазид + комплекс (80°С);
1
2
2
на фиг.5 - спектр ЯМР Н смеси изониазид + комплекс (после пропускания через SiO, элюент - МеОН:НO 3:1);
-2
-2
-2
на фиг.6 - спектры поглощения раствора 10 М изониазида в воде (кривая 1), растворов комплекса в воде с концентрацией 5·10 М (кривая 2) и ≈10 М (кривая 3) (оптический путь 0,1 см).
1
Видно, что в спектре ЯМР Н полученного комплекса по сравнению со спектром исходного изониазида наблюдается смещение сигналов ароматических протонов в более слабое поле, что указывает на образование нового соединения. Величина константы спин-спинового взаимодействия составляет 6.3 Гц, что на 1 Гц больше, чем у исходного лиганда.
2
3
2
Стабильность комплекса была подтверждена сохранением ЯМР-спектра после выдерживания раствора комплекса в течение года, нагревания раствора с комплексом до 80°С и после пропускания раствора комплекса через колонку с селикагелем (SiO), элюент - СНOН:НO=3:1. Последнее показывает возможность дополнительной очистки получаемого комплекса.
Элементный анализ.
12
20
2
8
2
CHClNOPt
Найдено 1(%): С 25.48; Н 3.96; Сl 16.13; N 12.80; Pt 32.29;.
Найдено 2(%): С 25.18; Н 3.70; Сl 14.00; N 14.86; Pt 33.01;.
Вычислено (%): С 25.09; Н 3.48; Сl 12.37; N 19.51; Pt 33.97.
Таким образом, предлагаемый способ получения соединения формулы (1) позволяет достичь цели изобретения и получить ранее неизвестное водорастворимое комплексное соединение цисплатина, а именно комплекс цис-диаминдихлорплатины (2+) с гидразидом изоникотиновой кислоты. Полученное соединение может быть использовано в медицинской практике как в качестве самостоятельного противоопухолевого и антиметастатического лекарственного средства, так и в композиции с уже известными препаратами.
Испытания на острую токсичность проводили путем внутрибрюшинного введения раствора препарата мышам линии BDFi. В качестве препарата сравнения использовался исходный цисплатин. Испытания показали, что заявляемый комплекс при расчете на количество введенной платины обладает в несколько раз меньшей токсичностью по сравнению с исходным цисплатином, при этом активность в отношении всех видов испытанных опухолей, на которые действует цисплатин, сохраняется такой же или возрастает.
Эти данные доказывают, что физиологическая активность цисплатина, связанного в комплекс, в отношении опухолевых процессов практически не изменилась, острая токсичность снизилась, а удобство использования при терапии значительно возросло.