ПЕПТИДНЫЕ АНТАГОНИСТЫ ПЕПТИДНЫХ ГОРМОНОВ ИЗ СЕМЕЙСТВА КАЛЬЦИТОНИНА (CGRP) И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Антагонист на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида, причем указанный антагонист имеет структуру согласно формуле I:
1
где X является модифицированным N-концевым фрагментом связанного с геном кальцитонина пептида или другого члена семейства пептидов CT/CGRP, содержащим от пяти до семи остатков аминокислот, где два остатка аминокислот указанного N-концевого фрагмента являются цистеином (Cys), С-концевой остаток является Cys, а остаток, расположенный непосредственно перед С-концевым остатком Cys указанного фрагмента, является заменой остатка треонина (Thr) на не треонин;
1
Y является центральной структурой, причем по меньшей мере одна аминокислота указанной центральной структуры является аргинином (Arg) или лизином (Lys), и указанная центральная структура содержит α-спираль; и
1
Z является модифицированным С-концевым фрагментом связанного с геном кальцитонина пептида или другого члена семейства пептидов CT/CGRP, содержащим от пяти до семи остатков аминокислот с С-концевым амидом, причем по меньшей мере один остаток аминокислот указанного С-концевого фрагмента является фенилаланином (Phe), тирозином (Tyr), пролином (Pro) или гидроксипролином (Hyp);
или его фармацевтически приемлемая соль.
1
2. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что Y является центральной структурой из 15-22 остатков.
3. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что N-концевой фрагмент содержит:
11
12
13
14
15
1б
17
Х-Х-Х-Х-Х-Х-Х (SEQ ID №: 16),
11
где X выбран из группы, состоящей из аланина (Ala), цистеина (Cys), глицина (Gly), изолейцина (Ile), лейцина (Leu), метионина (Met), фенилаланина (Phe), пролина (Pro), триптофана (Trp) и валина (Val);
12
X выбран из группы, состоящей из цистеина (Cys), серина (Ser) и тирозина (Tyr);
13
X выбран из группы, состоящей из аргинина (Arg), аспарагина (Asn), аспарагиновой кислоты (Asp), цистеина (Cys), глутаминовой кислоты (Glu), глутамина (Gln), гистидина (His), лизина (Lys), серина (Ser), треонина (Thr), тирозина (Tyr) и валина (Val);
14
X выбран из группы, состоящей из аргинина (Arg), аспарагина (Asn), аспарагиновой кислоты (Asp), глутаминовой кислоты (Glu), глутамина (Gln), гистидина (His), лейцина (Leu), лизина (Lys), фенилаланина (Phe), серина (Ser), треонина (Thr), тирозина (Tyr) и валина (Val);
15
X выбран из группы, состоящей из аланина (Ala), глицина (Gly), изолейцина (Ile), лейцина (Leu), метионина (Met), фенилаланина (Phe), серина (Ser), триптофана (Тур) и валина (Val);
16
X выбран из группы, состоящей из аланина (Ala), глицина (Gly), изолейцина (Ile), лейцина (Leu), метионина (Met), фенилаланина (Phe), серина (Ser), триптофана (Тур) и валина (Val); и
17
X представляет собой цистеин (Cys).
11
4. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что X выбран из группы, состоящей из Ala, Cys и Gly.
12
5. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что X выбран из группы, состоящей из Cys и Ser.
13
6. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что X выбран из группы, состоящей из Arg, Asn, Asp и Val.
14
7. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что X выбран из группы, состоящей из Leu, Phe и Thr.
15
8. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что X выбран из группы, состоящей из Ala, Gly и Ser.
16
9. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что X выбран из группы, состоящей из Ala, Ile, Leu, Ser и Val.
11
12
13
14
15
16
17
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
10. Антагонист по п. 3, отличающийся тем, что Х-Х-Х-Х-Х-Х-Х выбран из группы, состоящей из NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-(SEQ ID №: 17), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-(SEQ ID №: 18), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys-(SEQ ID №: 19), NH-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-(SEQ ID №: 20), NH-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-(SEQ ID №: 21), NH-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys-(SEQ ID №: 22), NH-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Ala-Cys-(SEQ ID №: 23), NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-(SEQ ID №: 24), NH-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-(SEQ ID №: 25), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-(SEQ ID №: 26), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-(SEQ ID №: 27), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-(SEQ ID №: 28), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-(SEQ ID №: 29), NH-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys-(SEQ ID №: 30), NH-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys-(SEQ ID №: 31), NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-(SEQ ID №: 32) и NH-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys-(SEQ ID №: 33).
11. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что центральная структура спирали содержит фрагмент из кальцитонина человека или лососевых рыб.
1
12. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что Y содержит от 18 до 20 аминокислот.
13. Антагонист по п. 12, отличающийся тем, что указанный фрагмент кальцитонина содержит от 19 до 20 аминокислот.
1
14. Антагонист по п. 13, отличающийся тем, что Y представляет собой -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-(SEQ ID №: 34) или -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-(SEQ ID №: 35).
1
15. Антагонист по n. 13, отличающийся тем, что Y на 95% идентичен последовательности -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-(SEQ ID №: 34) или -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-(SEQ ID №: 35).
1
16. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что Z содержит:
11
12
13
14
15
16
Z-Z-Z-Z-Z-Z(SEQ ID №: 45),
11
где Z выбран из группы, состоящей из Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp и Val;
12
Z выбран из группы, состоящей из Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp и Val;
13
Z выбран из группы, состоящей из Ser и Tyr;
14
Z выбран из группы, состоящей из Arg, Asn, Asp, Glu, Gln, His, Lys, Ser, Thr и Tyr;
15
Z выбран из группы, состоящей из Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp и Val; и
16
Z выбран из группы, состоящей из Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp и Val.
11
17. Антагонист по n. 16, отличающийся тем, что Z является Val.
18. Антагонист по п. 16, отличающийся тем, что Z является Gly.
13
19. Антагонист по п. 16, отличающийся тем, что Z является Ser.
14
20. Антагонист по п. 16, отличающийся тем, что Z является Lys.
15
21. Антагонист по п. 16, отличающийся тем, что Z является Ala.
16
22. Антагонист по п. 16, отличающийся тем, что Z является Phe.
11
12
13
14
I5
16
2
23. Антагонист по п. 16, отличающийся тем, что Z-Z-Z-Z-Z-Z является -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH.
24. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что
1
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
X выбран из группы, состоящей из NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-(SEQ ID №: 17), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-(SEQ ID №: 18), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys-(SEQ ID №: 19), NH-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-(SEQ ID №: 20), NH-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-(SEQ ID №:21), NH-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys-(SEQ ID №: 22), NH-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Ala-Cys-(SEQ ID №: 23), NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-(SEQ ID №: 24), Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-(SEQ ID №: 25), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-(SEQ ID №: 26), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-(SEQ ID №: 27), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-(SEQ ID №: 28), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-(SEQ ID №: 29), NH-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys-(SEQ ID №: 30), NH-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys-(SEQ ID №: 31), NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID №: 32) и NH-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys-(SEQ ID №: 33);
1
Y представляет собой -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-(SEQ ID №: 34) или -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-(SEQ ID №: 35); и
1
2
Z представляет собой -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 46).
25. Антагонист по п. 1, содержащий от 28 до 35 остатков аминокислот.
26. Антагонист по п. 1, содержащий от 31 до 33 остатков аминокислот.
27. Антагонист по п. 1, содержащий 32 остатка аминокислот.
16
16
28. Антагонист по п. 1, содержащий мотив -Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-X-Cys-(SEQ ID №: 16), отличающийся тем, что X является остатком аминокислоты, отличным от Thr.
29. Антагонист по п. 1, содержащий первый пептидный фрагмент, содержащий семь или менее остатков аминокислот, отличающийся тем, что указанный первый пептидный фрагмент имеет в составе последовательность из связанного с геном кальцитонина пептида.
30. Антагонист по п. 29, содержащий второй пептидный фрагмент, содержащий семь или менее остатков аминокислот, отличающийся тем, что указанные первый и второй пептидные фрагменты не идут подряд, и каждый из них независимо имеет последовательность из связанного с геном кальцитонина пептида.
31. Антагонист по п. 1, содержащий третий пептидный фрагмент, содержащий 20 или менее остатков аминокислот, отличающийся тем, что указанный третий пептидный фрагмент имеет последовательность из кальцитонина лососевых рыб.
32. Антагонист по п. 31, отличающийся тем, что указанный второй пептидный фрагмент и указанный третий пептидный фрагмент являются смежными.
33. Антагонист по п. 1, имеющий структуру:
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 1), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 2), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 3), NH-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 4), NH-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 5), NH-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 6), NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 7), NH-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 8), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-AIa-Phe-NH (SEQ ID №: 9), NH-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-GIn-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 10), NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 11), NH-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 12), или NH-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH (SEQ ID №: 13), Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH (SEQ ID №: 14), или Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH (SEQ ID №: 15), или его фармацевтически приемлемая соль.
34. Антагонист по п. 1, отличающийся тем, что
1
Y включает -Ala-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Ala-(SEQ ID №: 50), -Ala-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu-Ala-(SEQ ID №: 51), -Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala-(SEQ ID №: 52) или -Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-(SEQ ID №: 53).
35. Антагонист на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида, содержащий последовательность аминокислот, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности аминокислот, представленной в SEQ ID №: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15, причем указанный пептид сохраняет антагонистическую активность.
36. Антагонист на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида по п. 35, отличающийся тем, что указанный пептид содержит последовательность аминокислот, по меньшей мере на 90% идентичную последовательности аминокислот, представленной в SEQ ID №: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10,11, 12, 13, 14 или 15.
37. Антагонист на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида по п. 35, отличающийся тем, что указанный пептид содержит последовательность аминокислот, по меньшей мере на 95% идентичную последовательности аминокислот, представленной в SEQ ID №: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15.
38. Антагонист на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида по п. 35, отличающийся тем, что указанный пептид содержит последовательность аминокислот, по меньшей мере на 97% идентичную последовательности аминокислот, представленной в SEQ ID №: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15.
39. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество и антагонист на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида по п. 1.
40. Способ лечения головной боли у субъекта, включающий введение указанному субъекту эффективного количества антагониста на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида по п. 1.
41. Способ по п. 40, отличающийся тем, что указанная головная боль представляет собой мигрень.
42. Способ по п. 40, дополнительно включающий идентификацию субъекта, страдающего головной болью.
43. Способ по п. 42, отличающийся тем, что указанная головная боль представляет собой мигрень.
44. Способ лечения состояния, связанного с аномальным уровнем CGRP, включающий введение субъекту антагониста на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида по любому из пп. 1-38, причем указанный способ включает введение указанному субъекту эффективного количества антагониста на основе модифицированного связанного с геном кальцитонина пептида.
45. Способ по п. 44, отличающийся тем, что указанное состояние представляет собой мигрень.