Интенсивность свободно-радикальных процессов и уровень тестостерона и эстрадиола в семенной жидкости мужчин с различными типами патоспермии, персонифицированный подход

ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ

И УРОВЕНЬ ТЕСТОСТЕРОНА И ЭСТРАДИОЛА В СЕМЕННОЙ ЖИДКОСТИ МУЖЧИН С РАЗЛИЧНЫМИ ТИПАМИ ПАТОСПЕРМИИ, ПЕРСОНИФИЦИРОВАННЫЙ ПОДХОД

К. Г. Савикина, С. В. Ломтева, А. Н. Шестель, К. Ю. Сагамонова, В. Н. Прокофьев, Т. А. Шерчкова, А. А. Александрова, М. А. Амелина, Т. П. Шкурат

Аннотация. Исследована интенсивность свободно-радикальных процессов и уровень тестостерона и эстрадиола в семенной жидкости мужчин с нормоспермией, астенозоо-спермией, олигозооспермией, олигоастенозооспермией, те-ратозооспермией. Выявлена повышенная способность к генерации активных форм кислорода в семенной жидкости при олигозооспермии. Увеличение уровня тестостерона и эстра-диола в семенной жидкости отмечено при патоспермиях, связанных с уменьшением подвижности сперматозоидов. По-

ложительная корреляция выявлена между интенсивностью свободно-радикальных процессов и увеличением уровня тестостерона при олигозооспермии; при этой патоспермии отмечен высокий уровень корреляции между уровнем тестостерона и эстрадиола в семенной жидкости.

Ключевые слова: активные формы кислорода (АФК), люминол-зависимая хемилюминесценция (ХЛ), семенная жидкость, эстрадиол, тестостерон, окислительный стресс, сперматогенез.

THE INTENSITY OF FREE-RADICAL PROCESSES AND THE LEVEL OF TESTOSTERONE AND ESTRADIOL IN SEMINAL FLUID OF MEN WITH DIFFERENT TYPES OF PATOSPERMIA,

PERSONALIZED APPROACH

K. Savikina, S. Lomteva, A. Shestel, K. Sagamonova, V. Prokofiev, T. Sherchkova, A. Aleksandrova, M. Amelina, T. Shkurat

Annotation. We studied the intensity of free-radical processes and the level of testosterone and estradiol in the semen of men with normospermia, asthenozoospermia, oligozoospermia, oligoasthenozoospermia, teratozoospermia. An increased ability to generate reactive oxygen species in seminal fluid when oligozoospermia is spotted. The levels of testosterone and estradiol

ВВЕДЕНИЕ

В последние годы многочисленные исследования посвящались изучению влияния окислительного стресса, активных форм кислорода (АФК) и антиоксидантов на мужскую репродуктивную систему [4, 20, 23]. Умеренные количества АФК необходимы для физиологической регуляции функций сперматозоидов, гиперактивации и акросомальной реакции [2, 11]. В физиологических условиях сперма производит небольшое количество АФК, которые необходимы для оплодотворения, акросомаль-ной реакции и капацитации. Увеличение интенсивности свободно-радикальных процессов рассматривается некоторыми авторами как ведущая экзогенная причина нарушения процессов сперматогенеза [19].

Молекулярный кислород является естественным субстратом и метаболитом аэробных форм жизни, являясь главным источником энергии, и поэтому не обладает мутагенной активностью в концентрации, не превышающей 20%, в отличие от его интермедиаторов — активных форм кислорода [5, 10, 17, 21]. Повышенная концентрация кислорода и АФК способны индуцировать мутации в сперматогониях и сперматозоидах [16, 22].

Показано, что окислительный стресс может снижать подвижность сперматозоидов, а также препятствовать проникновению сперматозоидов в ооцит [1]. Окислительный стресс, вызванный повышением АФК или снижением уровня антиоксидантов, в семенной плазме играет

in semen noted in pathospermia associated with reduced sperm motility are increased. A positive correlation was found between the intensity of free-radical processes and the increase in testosterone levels when oligozoospermia. High correlation between the level of testosterone and estradiol in the seminal fluid is marked at this pathospermia.

Keywords: reactive oxygen species (ROS), luminol-dependent chemiluminescence (CL), semen, estradiol, testosterone, oxidative stress, spermatogenesis.

важную роль в возникновении нарушений параметров спермы [6]. Также известно, что более 25% бесплодных мужчин имеют повышенный уровень АФК в семенной жидкости [13].

Стандартные методы диагностики мужской фертиль-ности, такие как изучение параметров эякулята, куда входят макроскопические, микроскопические, биохимические и функциональные показатели, не всегда позволяют судить о таких причинах мужского бесплодия, как повышенная продукция АФК сперматозоидами.

Целью данной работы является проведение сравнительного анализа интенсивности окислительных процессов и уровня выработанных гормонов в семенной жидкости в норме и при патоспермии.

МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ

Обследованы 88 соматически здоровых мужчин в возрасте от 20 до 50 лет, обратившихся в 2014 году в Центр репродукции человека и ЭКО г. Ростова-на-Дону с проблемой бесплодия в браке и патоспермией в анамнезе. Из этого числа были исключены пациенты с азооспермией, генетическими заболеваниями, наличием воспалительных процессов различных этиологий, а также пациенты из пар с недоказанным женским бесплодием. Контрольная группа включала 22 здоровых мужчины с нормозооспермией и с доказанной фертильностью.

Было сформировано пять исследуемых групп: пациенты с нормозооспермией (контроль, n=22),

№2 (54) • 2017

www.akvarel2002.ru

АНДРОЛОГИЯ

астенозооспермией (n=28), олигозооспермией (n=26), те-ратозооспермией (n=20), олигоастенозооспермией (n=14).

Анализ эякулята проводили в соответствии с рекомендациями ВОЗ (WHO, 2010). Спермоплазму получали центрифугированием эякулята при 2800 об./мин. в течение 10 минут. В спермальной плазме определяли интенсивность свободно-радикальных процессов и уровень тестостерона и эстрадиола. Для оценки окислительного статуса плазмы спермы нами был использован метод индуцированной хемилюминесценции (ХЛ) в системе Н2О2-люминол (5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндион). Последний относят к химическим активаторам ХЛ, он реагирует со свободными радикалами с образованием возбужденных молекул. Люминол, не обладая побочными цитотоксическим действием и фотоэффектами, дает при окислении высокий квантовый выход [9] и образует широкий спектр активных форм кислорода. Исследования проведены на автоматическом хемилюминесцент-ном анализаторе Berthold Autolumat Plus LB 953 (Berthold Technologies, GmbH).

Методом иммуноферментного анализа определяли уровень тестостерона и эстрадиола на автоматическом иммуноферментном анализаторе ALISEI QS (Италия) ЦКП «Высокие технологии» ЮФУ.

Статистический анализ результатов проводили с использованием программного пакета Excel и Statistica v.6.0. Сравнение различных данных проведено с использованием критерия Стьюдента и Пирсона (с2). Различия признаков считались достоверными при 95% уровне значимости (p<0,05). Для определения взаимосвязи явлений применялся корреляционный анализ по Спирмену с вычислением коэффициента корреляции (r).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ

По результатам анализа спермограмм и на основании руководства ВОЗ (WHO, 2010 [18]) нами были сформированы следующие группы:

1) нормозооспермия (контроль) — показатели спермо-граммы соответствуют нормативным значениям;

2) олигоастенозооспермия — концентрация сперматозоидов менее 15 млн/мл, подвижность А+B менее 40%;

3) астенозооспермия — концентрация сперматозоидов в норме, подвижность сперматозоидов А+B менее 40%, морфология по строгим критериям Крюгера более 4%;

4) олигозооспермия — концентрация сперматозоидов менее 15 млн/мл, подвижность сперматозоидов А+B более 40%;

5) тератозооспермия — концентрация сперматозоидов в норме, подвижность сперматозоидов А+B более 40%, морфология по Крюгеру менее 4%.

В таблице 1 представлены результаты средних показателей концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов в исследуемых группах. Из таблицы видно, что группы достоверно различались по параметрам подвижности и количеству сперматозоидов. Увеличение количества клеток сперматогенеза в группе оли-гозооспермии свидетельствует о том, что созревание половых клеток в данной группе имеет незавершенный характер.

ИЗУЧЕНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В СПЕРМЕ У БЕСПЛОДНЫХ МУЖЧИН С РАЗЛИЧНЫМИ ПАТОСПЕРМИЯМИ

Окислительный стресс сопровождает и/или является одним из ключевых патогенетических звеньев в развитии многих видов репродуктивной патологии. Как известно, продукция свободных радикалов и перекисное окисление липидов играют важную роль в регуляции физиологических функций семенника. Многочисленные исследования последних лет показали, что окислительный стресс различной этиологии является основной причиной тестикулярной дисфункции [2, 8, 14, 15]. Окислительный стресс оказывает непосредственное влияние на процессы пролиферации и дифференцировки сперматогенных клеток, индуцирует их апоптоз, нарушает стероидогенез в клетках Лейдига, вызывает гибель эндокриноцитов путем апоптоза [3, 7, 12].

Динамику метаболических изменений плазмы спермы оценивали по высоте быстрой вспышки и светосумме. При этом амплитуда

Таблица 1

Показатели концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов в исследуемых группах

Показатели спермограмм

Исследуемые группы Концен- Подвижность, % Морфология по Лейко- Клетки

млн/мл А В С D Крюгеру (N) циты сперматогенеза

Нормозооспермия (контроль) 39,5±6,8 35,1±5,8 16,1±3,1 7,6±2,5 40,8±8,7 6,0±1,1 0,6±0,3 0,6±0,2

Олигоастенозооспермия 7,0±4,1*** 13,3±3,9** 13,2±5,3 11,1±4,6 62,3±9,9* 5,2±1,2 0,6±0,2 0,3±0,1

Астенозооспермия 49,1±8,8 15,1±5,1** 17,4±7,4 10,0±2,3 57,3±7,8* 4,8±0,8 0,7±0,3 0,7±0,3

Олигозооспермия 10,5±2,1** 29,8±3,4 15,2±4,5 9,0±3,5 46,1±5,5 4,2±0,2 0,5±0,2 1,2±0,6*

Тератозооспермия 31,7±7,5 31,6±3,4 17,2±4,4 8,7±4,1 41,3±7,1 2,6±0,7** 0,6±0,1 0,7±0,3

Примечание: звездочками обозначена степень достоверности.

www.akvarel2002.ru а

Таблица 2

Интенсивность свободнорадикальных процессов в сперме у бесплодных мужчин с различными формами

патоспермии

Показатели хемилюминесценции эякулята

Исследуемые группы Высота светосуммы быстрой вспышки Н2О2-индуцированной люминолзависимой ХЛ Достоверность по отношению к контролю

Нормозооспермия (контроль) 11,78±0,92 30,05±2,36

Олигоастенозооспермия 19,82±2,86 <0,02 45,6±2,66 <0,02

Астенозооспермия 17,25±1,89 <0,02 42,37±2,68 <0,02

Олигозооспермия 24,44±3,06 <0,02 57,01±2,29 <0,02

Тератозооспермия 16,72±2,43 >0,05 38,89±2,82 >0,05

отражает скорость расходования свободных радикалов липидной природы вследствие их взаимодействия с ан-тиоксидантами и обусловлена, в первую очередь, уровнем прооксидантов в системе, а влияние антиоксидант-ных компонентов носит вторичный характер.

В таблице 2 представлены результаты исследования люминолзависимой хемилюминесценции семенной жидкости пациентов сформированных групп. Как видно из представленных результатов, у всех мужчин с пато-спермией, независимо от ее проявления (олигоастено-зооспермия, астенозооспермия, олигозооспермия, тера-тозооспермия), наблюдается достоверное повышение интенсивности свободно-радикальных процессов. При этом в семенной плазме мужчин с олигоастенозооспер-мией и олигозооспермией высота быстрой вспышки практически в два раза выше по сравнению с нормозооспер-мией и равна 19,82±2,86 и 24,44±3,06 мм соответственно. При астенозооспермии высота быстрой вспышки была достоверно увеличена на 46%, а при тератозооспер-мии — на 42% по сравнению с контролем (рис. 1).

Как видно из полученных данных, если при нормо-спермии индивидуальные различия в величине импульса светосуммы быстрой вспышки варьировали в пределах

120

7,4—18,8 (отн. ед. хемилюминесценции), то при астенозоо-спермии у отдельных пациентов значения этого показателя достигали 36,9 (отн. ед. хемилюминесценции), при тератозооспермии — до 41,3, при олигоастенозооспер-мии — до 52,1, при олигозооспермии — до 56,4 (отн. ед. хемилюминесценции). Значительный индивидуальный размах наблюдали и при оценке светосуммы индуцированной хемилюминесценции за 10 секунд (Sm10 ф при различных типах патоспермии. Так, если при нормоспер-мии максимальные значения Sm10 c не превышали уровня 59,4 (отн. ед. хемилюминесценции), то при патоспермии у отдельных пациентов этот уровень был существенно увеличен: при тератоспермии — до 87,5, при олигоастено-зооспермии — до 102,9, при олигозооспермии — до 118,2, при астенозооспермии — до 380,1 (отн. ед. хемилюминесценции). Механизм Н2О2-индуцированной хемилюми-несценции образцов тканей основан на взаимодействии Н2О2 с прооксидантными компонентами, в первую очередь, с железосодержащими компонентами, что приводит к образованию активных форм кислорода, таких как гидроксид-радикал, синглетный кислород и суперок-сиданион-радикал. Это может вызвать активацию сво-боднорадикальных процессов, ведущих к образованию

100

80 -

60

40 68 52 107 90 49

46 42 -

20

0% 41

I II III IV

Рис. 1. Интенсивность изменений хемилюминесценции в плазме спермы при различных видах патоспермии (% к нормоспермии): I — олигоастенозооспермия; II — астенозооспермия; III — олигозооспермия; IV — тератозооспермия.

YRGZEN

Heal Force

Компания БИОДМ предлагает широкий спектр медицинского и лабораторного оборудования от компаний Arctikо, Gyrozen, Healforce и других производителей на выгодных условиях!

Arctikо

Производитель холодильно-морозильного оборудования из Дании

Страна изготовления - Дания Оборудование из нержавеющей стали Соответствует стандарту ISO 13485:2003 Имеет РУ Минздрава РФ Высочайшая стабильность температуры Объем от 7 до 1381 литров Диапазон температуры от -150° до +15°

Gyrozen

Высокоточное оборудование для центрифугирования и лабораторные шейкеры

• Высокое удобство использования

• Интуитивно понятное управление

• Центрифуги и роторы под любые задачи

• Возможность производства по спецзаказу

• Широкий выбор стандартных комплектующих

• Защита паролем для сохранности образцов

• Приятный внешний вид

Healforce

Лабораторное и медицинское оборудование от производителя с мировым именем

• Более 20 лет опыта работы на рынке

• Сильная научно-исследовательская база

• Поставляется более чем в 120 стран мира

• Возможность работы с частными проектами

• Высокое качество и долговечность

• Собственные инженерные решения

• Возможность быстрой доставки

Оставляйте свои запросы по телефону: +7 (495) 649-06-51 или обращайтесь на e-mail: info@biodm.ru сайт: www.biodm.ru

Традиции качества с 1935 года Ведущий разработчик и производитель медтехники в России

ОАО «Загорскийюп.тико=механияескиивавод»;

• Сертифицированная система менеджмента качества

• Развитая производственная база

• Собственное конструкторское бюро

• Комплексное проведение НИОКР

• Сотрудничество с ведущими медицинскими НИИ

• География продаж: Россия, СНГ, страны ЕС

Офтальмологические приборы:

- Щелевые лампы SL-P-00, SL-P-04

- Офтальмоскопы налобные бинокулярные НБО-3-01

- Офтальмоскопы ручные универсальные ОР-ЗБ

- Монобиноскопы МБС-02

- Анализаторы поля зрения АППЗ-01

- Диоптриметры ДО-3

Лабораторные приборы:

- Фотометры КФК-3-01-«ЗОМЗ»

- Фотометры пламенные ФПА-2-01

- Колориметры фотоэлектрические КФК-5М

- Поляриметры круговые СМ-3

Приборы разрешены Росздравнадзором к применению на территории РФ 141300 г. Сергиев Посад, Московская область, пр. Красной Армии, 212 В Тел.: ( 195) 797-93-66, (496) 546-93-35. E-mail: info@zomz.ru, product@zomz.ru, www.zomz.ru

Медицинская компания «Медгарант» осуществляет поставку оборудования для медицинских, лечебно-профилактических учреждений на территории Северо-Кавказского федерального округа.

Предлагаем широкий спектр лечебно-диагностического оборудования и медтехники для лаборатории, физиотерапии, водолечения, эстетической косметологии, а также для отделений гинекологии и перинатальных центров от ведущих отечественных и зарубежных производителей.

Всё оборудование сертифицировано и зарегистрировано в Минздраве России.

Основные направления продукции, предлагаемой компанией «Медгарант»:

♦ Диагностическое оборудование

♦ Оториноларингология

♦ Офтальмология

♦ УЗИ-сканеры

♦ Лаборатория

♦ Физиотерапия и реабилитация

♦ Бальнеологическое оборудование

♦ Эстетическая медицина и косметология

♦ Акушерство/гинекология

♦ Аптечное и больничное оборудование

♦ Оборудование для учебных учреждений

♦ Дезинфицирующие средства

♦ Эндоскопия

г. Пятигорск, ул. Железнодорожная 125, офис 21 <

с

Тел./факс: 8 (8793) 98-16-64. E-mail: med-garant@mail.ru, www.medgarant-kmv.ru |

АНДРОЛОГИЯ

перекисных радикалов, рекомбинация которых сопровождается высвечиванием кванта света. При этом амплитуда (высота) вспышки ХЛ (Н), индуцированной Н2О2, характеризует резистентность плазмы спермы к перекисному окислению. Величина ее прямо пропорциональна окис-ляемости липидов и концентрации металлов переменной валентности и обратно пропорциональна содержанию природных антиоксидантов в исследуемом биосубстрате. Светосумма ^т) хемилюминесценции за 10 секунд отражает скорость расходования свободных радикалов липидной природы вследствие их взаимодействия с ан-тиоксидантами и обусловлена, в первую очередь, уровнем прооксидантов в системе; влияние антиоксидантных компонентов носит вторичный характер.

Интенсивность свободнорадикальных процессов, состояние антиоксидантной системы в первую очередь зависят от характера метаболических процессов в различных тканях. Большое значение имеют не только абсолютные величины активности про- и антиок-сидантных систем, но и их соотношение между собой, а также буферная емкость антиоксидантной защиты. Агрессивные оксиданты повреждают не только ДНК/ РНК соматических клеток тела, но и генетический материал гамет. Хронический окислительный стресс приводит к гипоплазии клеток Лейдига [25], являющихся главным источником выработки тестостерона. Поэтому следующим этапом нашей работы было изучение

уровня тестостерона и эстрадиола в семенной жидкости у мужчин с различными типами патоспермии. В таблице 3 приведены результаты исследований уровня тестостерона (нМ/л) и эстрадиола (пг/мл) в семенной жидкости у бесплодных мужчин с различными типами патоспермии.

Как видно из представленных результатов, при асте-нозооспермии в семенной жидкости отмечено достоверное увеличение уровня тестостерона и эстрадио-ла, уровень эстрадиола имел тенденцию к увеличению и при олигоастенозооспермии, связанной с нарушением подвижности сперматозоидов. Увеличения уровня гормонов в семенной жидкости при других типах патоспер-мии не было отмечено, однако индивидуальный уровень у некоторых пациентов был значительно выше или ниже средних значений при нормоспермии.

Эстрогены традиционно рассматриваются в основном как ключевые половые гормоны, выполняющие важнейшие функции в женском организме, однако их роль в мужском организме оказывается не менее значимой, хотя и остается недостаточно изученной. До 80% эстрогенов в организме мужчины образуются в результате ароматизации из тестостерона. Таким образом, нарушения синтеза и метаболизма тестостерона у мужчин закономерно приводят к нарушениям синтеза и метаболизма эстрогенов. Эстрогены и тестостерон обычно работают совместно, при этом их функция иногда усиливается еще

Таблица 3

Уровень тестостерона (нM/л) и эстрадиола (пг/мл) в семенной жидкости у бесплодных мужчин

с различными типами патоспермии

Исследуемые группы Количество тестостерона и эстрадиола в семенной жидкости

Тестостерон

Нормозооспермия (контроль) 13,83±2,18 51,68±4,82

Олигоастенозооспермия 15,27±3,73 >0,05 63,13±8,20 <0,02

Астенозооспермия 20,03±1,93 <0,01 68,40±8,41 <0,02

Олигозооспермия 12,90±1,95 >0,05 53,85±4,64 >0,05

Тератозооспермия 14,82±3,26 >0,05 50,57±5,97 >0,05

Таблица 4

Коэффициенты корреляции (г) между исследуемыми параметрами при разных типах патоспермии

Исследуемые группы Сравниваемые параметры

HSm/Sm HSm/ Тестостерон Sm/ Тестостерон HSm/ Эстрадиол Sm/Эстрадиол Tестостерон/ Эстрадиол

Нормоспермия (контроль) 0,93 -0,02 -0,04 0,02 0,02 0,6

Олигоастенозооспермия 0,98 0,03 -0,06 0,26 0,2 0,57

Астенозооспермия 0,31 -0,3 -0,09 -0,14 0,24 0,35

Олигозооспермия 0,96 0,7 0,62 0,5 0,4 0,8

Тератозооспермия 0,91 -0,07 -0,2 -0,1 -0,1 0,48

и эффектами 5а-дигидротестостерона. Эстрогены поддерживают обратную связь тестикул с гипофизом и способны понижать уровень тестостерона, но без эстрогенов тестостерон оказывает лишь ограниченное влияние на половое поведение [26].

Для оценки персонифицированной сопряженности свободнорадикальных процессов в семенной жидкости с уровнем выработки половых гормонов проведен корреляционный анализ, результаты которого представлены в таблице 4.

Во всех исследуемых типах патоспермии, за исключением астенозооспермии, получен высокий коэффициент корреляции (г=0,91 и выше) между показателями индуцированной хемилюминесценции в семенной жидкости, суммарной светосуммы свечения и высотой быстрой вспышки (^т^т), что показывает высокую емкость

антиоксидантых систем при нормоспермии, олигоасте-нозооспермии, олигозооспермии и даже тератозооспер-мии. Отсутствие корреляции параметров ^т^т при астенозооспермии, вероятно, обусловлено различными причинами, приводящими к нарушению двигательной активности сперматозоидов. У одних индивидуумов это может быть связано с возрастанием продукции АФК, которое увеличивается в состоянии полного покоя за счет разобщения дыхательной цепи митохондрий [24], у других снижение подвижности может быть не связано с нарушением синтеза АТФ, а вызвано целым рядом других причин. Таким образом, при астенозооспермии происходит нарушение сопряженности прооксидантных и анти-оксидантных процессов, что отражается в отсутствии корреляции всех исследуемых параметров в семенной жидкости.

ЛИТЕРАТУРА

1. Agarwal A., Virk G., Ong C., du Plessis S. Effect of oxidative stress on male reproduction // The world journal of men's health. — 2014. — 32 (1). — P. 1 — 17.

2. Aitken R. J., Roman S. D. Antioxidant systems and oxidative stress in the testes // Oxidative Medicine and Cellular Longevity. — 2008. — №1. — Р. 115—124.

3. Aktas C., Kanter M., Erboga M. et al. Anti-apoptotic effects of curcumin on cadmium-induced apoptosis in rat testis // Toxicology and Industrial Health. — 2011. — Vol. 28. — №2. — Р. 122—130.

4. Amaral S., Ramalho-Santos J. Free Radical Biology and Reproductive Health in Diabetes // Systems Biology of Free Radicals and Antioxidants. — 2014. — P. 2789—2813.

5. Ames B. N., Cathcart R., Schwiers E., Hochstein P. L. Uric acid provides an antioxidant defense in humans against oxidant and radical-caused aging and cancer: a hypothesis // Proceedings of the National Academy of Sciences. — 1981. — 78 (11). — P. 6858—6862.

6. Appasamy M., Muttukrishna S., Pizzey A. R. et al. Relationship between male reproductive hormones, sperm DNA damage and markers of oxidative stress in infertility // Reproductive biomedicine online. — 2007. — 14 (2). — P. 159—165.

7. Cheng C., Wang Q., Wang F. F. et al. Stress induces glucocorticoid-mediated apoptosis of rat Leydig cells in vivo // Stress. — 2012. — Vol. 15. — №1. — P. 74—78.

8. El-Shahat A. E., Gabr A. R., Meki E. S. Mehana Altered testicular morphology and oxidative stress induced by cadmium in experimental rats and protective effect of simultaneous green tea extract // International Journal of Morphology. — 2009. — Vol. 27. — №3. — P. 757—764.

9. Fritzsche R., De Weck A. L. Chemiluminescence microscopy reveals functional heterogeneity in single neutrophils undergoing oxygen burst // Eur. J. Immunol. — 1988. — Vol. 18. — P. 817—820.

10. Halliwell B. Antioxidants in human health and disease // Annual review of nutrition. — 1996. — 16 (1). — P. 33—50.

11. Lombardo F., Sansone A., Romanelli F. et al. The role of antioxidant therapy in the treatment of male infertility: an overview // Asian. J. Androl. — 2011. — Vol. 13. — №5. — P. 690—697.

12. Murugesan P., Muthusami T., Balasubramanian K. et al. Studies of the protective role of vitamin C and E against polychlorinated biphenyl (Aroclor 1254)-induced oxidative damage in Leydig cells // Free Radical Research. — 2005. — Vol. 39. — №11. — P. 1259—1272.

13. Nadjarzadeh A., Mehrsai A., Mostafavi E. et al. The association between dietary antioxidant intake and semen quality in infertile men // Med. J. Islam. Repub. Iran. — 2013. — 27 (4). — P. 204—209.

14. Rezvanfar M., Sadrkhanlou A., Ahmadi A. et al. Protection of cyclophosphamide-induced toxicity in reproductive tract histology, sperm characteristics, and DNA damage by an herbal source; evidence for role of free-radical toxic stress // Human & Experimental Toxicology. — 2008. — Vol. 27. — №12. — P. 901—910.

15. Turner T. T., Lysiak J. J. Oxidative stress: a common factor in testicular dysfunction // Journal of Andrology. — 2008. — Vol. 29. — №5. — P. 488—498.

16. Venkatesh S., Kumar R., Shamsi M. et al. Reactive oxygen species and sperm mitochondrial DNA mutations in infertile patients // Journal of Andrology. — 2011. — №70. — P. 70.

17. Wang C. Y., Liu L. N., Zhao Z. B. The role of ROS toxicity in spontaneous aneuploidy in cultured cells // Tissue cell. — 2013. — 45 (1). — P. 47—53.

18. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. — 5th ed. WHO (Geneva), 2010. — 270 p.

19. Божедомов В. А., Липатова Н. А., Спориш Е. А. и др. Роль структурных нарушений хроматина и ДНК сперматозоидов в развитии бесплодия // Андрология и генитальная хирургия. — 2012. — №3. — С. 83—91.

20. Громенко Д. С., Фархутдинов Р. Р., Галимов Ш. Н. Генерация активных форм кислорода сперматозоидами в патогенезе мужского бесплодия // Эфферентная терапия. — 2006. — Т. 12. — №1. — С. 28—32.

21. Гуськов Е. П., Шкурат Т. П. Цитогенетические последствия гипербарической оксигенации в ряду клеточных циклов лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. — 1985. — №21. — С. 8.

22. Гуськов Е. П., Шкурат Т. П., Шиманская Е. И., Гуськова С. С. Влияние гипербарической оксигенации на соматические и генеративные клетки крыс // Цитология и генетика. — 1990. — №24. — С. 2.

23. Ломтева С. В., Савикина К. Г., Шестель А. Н. и др. Окислительный стресс и мужская репродуктивная система // Валеология. — 2015. — №1. — С. 59—67.

24. Скулачев В. П. Энергетические механизмы внутриклеточного дыхания. — М.: Наука, 1971. — С. 24.

25. Целуйко С. С. Влияние низкомолекулярной ДНК из молок лососевых рыб на семенники крыс при стрессе, вызванном низкими температурами // Дальневосточный медицинский журнал. — 2008. — №1.

26. Цицман М. Эстрогены у мужчин. Пленарная лекция / VII Международный конгресс ISSAM. — М., 2013.

АВТОРСКАЯ СПРАВКА

ФГАОУ ВО «Южный федеральный университет», г. Ростов-на-Дону, e-mail: tshkurat@sfedu.ru Прокофьев Виктор Николаевич — кандидат биологических наук Шерчкова Татьяна Александровна

Александрова Анжела Аслановна — кандидат биологических наук, доцент Амелина Мария Александровна — кандидат медицинских наук Шкурат Татьяна Павловна — доктор биологических наук, профессор

ООО «Центр репродукции человека и ЭКО», г. Ростов-на-Дону, e-mail: vrt-rostov@aaanet.ru Ломтева Светлана Витальевна — кандидат биологических наук Савикина Ксения Геннадьевна Шестель А. Н.

Сагамонова Карина Юрьевна — доктор медицинских наук, профессор

№2 (54) • 2017

www.akvarel2002.ru