Морфология центральных органов иммунной системы цыплят-бройлеров при введении в их рацион пробиотика и ферментного препарата на основе вас. Subtilis

Корнеев Г.И. ,Сипайлова О.Ю.‘, Мартыненко С.С.', Иванов Ю.Б.**, Мирошникова Е.П.‘

Оренбургская государственная медицинская академия, 'Институт биоэлементологии Оренбургского государственного университета, ***Институт клеточного и внутриклеточного

симбиоза УрО РАН

МОРФОЛОГИЯ ЦЕНТРАЛЬНЫХ ОРГАНОВ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ ВВЕДЕНИИ В ИХ РАЦИОН ПРОБИОТИКА И ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ВАС. SUBTILIS

Экспериментальные исследования показали, что дополнительное введение споробактерина и авизи-ма 1200 в рацион цыплят-бройлеров способствует существенному изменению морфофункциональных характеристик центральных органов иммуногенеза птицы, замедляя в них процессы инволюции.

Одним из перспективных направлений им-муннокоррекции в птицеводстве является применение пробиотиков, практическое использование которых обусловлено их способностью регулировать микробиологические процессы в пищеварительном тракте, а также стимулировать рост и развитие молодняка (Бессарабов Б. и др. 1996; Тараканов Б.В. 2000; Маннапова Р.Т., 2001; Башкиров О.Г., 2002, 2003).

В этой связи действие пробиотиков на микробиологический статус кишечного содержимого способно оказывать существенное влияние и на формирование естественной резистентности и иммунологической реактивности организма (Манухина А.И., 1999; Пикина А.П., 1999), причем наиболее выраженным данное воздействие может быть в молодом возрасте.

Особенностью иммунной системы цыплят-бройлеров является то, что она находится в стадии формирования и развития, что и определяет своеобразие ее реагирования на антигенную стимуляцию. Поэтому при внедрении в практику выращивания бройлеров пробиотиков необходимо изучение их влияния на органы иммунногенеза. При этом нормальный рост и развитие фабрициевой бурсы и тимуса, их функциональная активность могут служить критерием оценки обмена веществ организма птицы (Riddell C., 1982).

Целью нашего исследования явилось сравнительное изучение реакции центральных органов иммуногенеза - тимуса и фабрициевой бурсы цыплят- бройлеров при добавлении в рацион пробиотика споробактерина и ферментного препарата авизима 1200 в течение 7 недель опыта.

Материалы и методы

В качестве пробиотика был использован споробактерин, представляющий собой взвесь

3-7-суточной культуры Bac. Subtilis 534 в 1-7%

растворе NaCI после смыва с плотных питательных сред, с содержанием в 1 мл взвеси 109 микробных тел (споры и палочки). В качестве ферментного препарата использован авизим 1200-мультиэнзимная композиция, выделенная из культуры Bac. Subtilis. Для проведения опыта было отобрано 180 голов суточного молодняка, из которых по принципу аналогов было сформировано 3 группы (n=60) - контрольная и две опытных. Бройлеры всех групп получали один и тот же по составу рацион. Цыплята I опытной группы, в отличие от контрольной и II опытной, в дополнение к основному рациону получали споробактерин из расчета 10 мл на 1 кг корма. Птица II опытной группы получала дополнительно ферментный препарат авизим 1200 - 0,1% от массы корма.

При убое птицы в возрасте 2, 4 и 7 недель жизни для гистологического исследования были взяты тимус и фабрициева сумка. Указанный материал фиксировался в 10% растворе нейтрального формалина. Приготавливались серийные парафиновые срезы, которые окрашивались гематоксилин-эозином, пикрофукси-ном, Шифф-реактивом и альциановым синим. С помощью стандартной морфометрической сетки на фиксированной площади проводилось определение площадей коркового и мозгового вещества тимуса. Подсчитывалось число тимо-цитов в указанных слоях тимуса, количество лимфоидных образований, межэпителиальных лимфоцитов и клеток в фолликулах фабрицие-вой сумки. Основные данные обработаны методом вариационной статистики по Г.Ф. Лаки-ну (1991).

Результаты и обсуждения

Как следует из полученных данных, в опытных группах отмечался наибольший прирост площади корковой зоны тимуса. Данный процесс был наиболее интенсивен у 2-х и 4 недель-

ных цыплят, получавших авизим. При этом в 2-недельном возрасте площадь корковой зоны тимуса у птицы II опытной группы превысила аналогичные показатели в контрольной и I опытной группах на 14 и 7%, соответственно. В

4-недельном возрасте данная разница увеличилась до 19,6% - с контрольной и до 13% - с I опытной группами. К концу эксперимента к 7недельному возрасту показатель площади коркового слоя снизился во всех трех группах, оставаясь наивысшим также во II опытной группе - 70%, что превысило данные показатели в контрольной и I опытной группах на 14,4 и 9,3%, соответственно.

Добавление в корм оцениваемых препаратов сопровождалось значительным увеличением концентрации тимоцитов в обеих зонах, особенно к 4-недельному возрасту птиц. В этот период наибольшее число тимоцитов отмечалось нами во II опытной группе - 51079 и 32992 клетки на 1 мм2, соответственно в корковой и мозговой зонах, что превышало уровень контрольной и I опытной групп на 24,3 (Р<0,05), 41% (Р<0,01) и на 7,3 и 12,4%, соответственно (табл. 1).

К 7 неделям жизни цыплят темпы прироста и число тимоцитов в корковой зоне было больше при добавлении в корм споробактери-на, превысив на 3,9 и 24% (Р<0,05) аналогичные показатели во II опытной и контрольной группах, соответственно. При этом в мозговой зоне темпы прироста были равноценны при применении обеих добавок.

Определенные гистологические различия выявлены нами и в строении фабрициевой сумки. Одним из них явилась значительная количественная разница в содержании межэпителиаль-ных лимфоцитов в слизистой оболочке сумки цыплят контрольной и экспериментальных групп. Так, в 2-недельном возрасте в условиях применения споробактерина их количество составило 37,5 в расчете на 100 эпителиоцитов, что на 10,3% было выше, чем во II опытной группе, и более чем в два раза превысило значение данного показателя в контрольной группе.

У 4-недельных цыплят гистологическая структура фабрициевой сумки отличалась от таковой цыплят 2-недельного возраста. При этом у птиц опытных групп состояние морфофункциональной активности бурсы было значительно выше, чем в контрольной группе. Корковая и мозговая зоны фолликулов железы этих цыплят были плотно заселены различными иммунокомпетентными клетками с преоб-

ладанием лимфоцитов, макрофагов при наличии плазматических клеток. Эпителиальные кисты встречались редко и были мелкие.

В отличие от контрольной группы у месячных цыплят, получавших изучаемые добавки, сохранялась и высокая активность межэпите-лиальных лимфоцитов. При этом в условиях применения споробактерина их насчитывалось 45,5±8,72 в расчете на 100 эпителиоцитов, что превысило их количество в контроле и при применении авизима.

Что касается количественного содержания иммунокомпетентных клеток по зонам, то в этом возрасте в корковой зоне оно было преобладающим в железе птиц II опытной группы, превысив на 16 и 37,9% (Р<0,05) содержание клеток в I опытной и контрольной группах, соответственно. В мозговой зоне наблюдалась обратная ситуация, и концентрация клеток была выше у птицы I опытной группы.

К 7 неделям жизни у цыплят опытных групп отмечалось некоторое снижение функциональной активности фабрициевой бурсы, по сравнению с 4 недельным возрастом, что выражалось в снижении количественного содержания клеток, как в зонах фолликулов, так и в слизистой бурсы. При этом в корковой зоне фолликулов максимальной концентрация клеточного инфильтрата была у птицы II опытной, а в мозговой - у птицы I опытной групп (табл. 2).

У контрольных особей к концу опыта в тимусе и фабрициевой сумке четко прослеживались инволюционные изменения. Эти процессы у птиц являются установленным фактом. С

5-60 дня жизни у большинства из них происходят инволюционные процессы в фабрициевой сумке, которые приводят к полной атрофии данного органа к 8-месячному возрасту. Подчеркивается, что эти изменения в бурсе протекают синхронно с подобными изменениями в тимусе (Вакуленко А.В., 1974).

В этом наши данные нашли подтверждение с исследованими Р.Т. Маннаповой и др. (2001), изучавшими влияние бифидумбактерина на морфологические показатели центральных органов иммунной системы, а также соответствуют результатам, полученным Е.В. Берсеневой (2004), в которых показано, что введение в рацион пробиотика биоспорин предотвращает процессы ранней инволюции тимуса и фабри-циевой бурсы.

В опытных группах морфофункциональная активность данных органов хотя и снижа-

Таблица!. Количество тимоцитов в корковом и мозговом слоях тимуса, на площади 1 мм2

Группа Возраст, недель

Г- «N

Зона тимуса

корковая мозговая корковая мозговая корковая мозговая

Контрольная 31054±2299 21330±1397 41085±3497 23376±1414 40829±2281 23028±314

I опытная 39657±3239 24266±1575 47589±5861 26729±1970 50588±3350* 29801±2536*

II опытная 40721±3455,2* 24113±1955 51079±3052,9* 32993±2474** 48693±2650* 35044±3345**

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01.

Таблица 2. Количество иммуннокомпетентных клеток в фолликулах фабрициевой сумки, на площади 1 мм2

Возраст, недель

Группа 4

зона фабрициевой сумки

корковая мозговая корковая мозговая корковая мозговая

Контрольная 25052±1350 17220±980 29055±1420 20320±1370 28672±1615 20829±910

I опытная 29200±1505** 25325±2490* 34551±2020* 28050±2708* 32691±2425 25048±2450

II опытная 34567±2030** 22935±2615 40058±3615* 22050±2530 38121±2349** 23056±1995

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01.

ется, однако остается на достаточно высоком уровне, превышая показатели контрольной птицы.

Таким образом, введение в рацион цыплят-бройлеров споробактерина и авизима 1200 приводит к существенному изменению морфофункциональных характеристик центральных ор-

ганов иммунной системы, замедляя в них и процессы инволюции. При этом дополнительное скармливание ферментного препарата преимущественно способствует активизации тимуса, тогда как наибольшая возрастающая активность фабрициевой сумки наблюдается при применении пробиотика.

Список использованной литературы:

1. Бессарабов Б., Крыканов А., Мельникова И., Донкор Джозеф. Влияние пробиотиков на рост и сохранность цыплят // Птицеводство, 1996. - №1. - С.25.

2. Башкиров О.Г. Биоплюс 2Б в современном высокоэффективном производстве //Био. - 2002. -№11. - С. 6-8.

3. Башкиров О.Г., Марченко А/ Увеличение продуктивности бройлеров и кур- несушек с помощью пробиотического препарата «Биоплюс 2Б» в современном высокоэффективном производстве// Био. -2003. -№8. -С. 9- 12.

4. Берсенева Е.В. Морфофункциональные изменения в организме цыплят- бройлеров при применении пробиотика «биоспо-рин» // Автореф. ... канд. вет. наук. - Екатеринбург, 2004. - 26 с

5. Вакуленко А.В. Влияние бурсоэктомии на рост и оплату корма цыпля там- бройлерам// Сб. тр. Ставроп. СХИ. - 1974. - Т. 37. - 27 с.

6. Манухина А.И., Тараканов Б.В., Николичесва Т.А. Морфофункциональная характеристика органов иммунной системы кроликов при длительном использовании стрептофагина // Сбор. науч. тр. «Современные проблемы биотехнологии и биологии продуктивных животных»- Боровск - 1999. - 22с.

7. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Изд-во Высшая школа, 1991. - 352 с.

8. Маннапова Р.Т., Панин А.Н., Маннапова А.Г., Гусев А.А. Иммунный статус, естественный микробиоценоз птиц и методы их оценки. - М.: Изд- во Башкирского ГАУ и ВгНКИ, 2001. - 339 с.

9. Пикина А.П., Смеянов В.В. и др. Первичный скрининг штаммов бифидобактерий и лактобактерий с целью разработки на их основе эффективных препаратов - пробиотиков // Микробиология, эпидемиология и иммунобиология - 1999. - №6. - С. 34.

10. Тараканов Б.В. Механизм действия пробиотиков на микрофлору пищеварительного тракта и организм животных // Ветеринария. - 2000. - №1. - С.42-54.

11. Riddell C. Avian histopathology Published by American Association of Avian Pathologists/ - Western college of veterinary medicine university of Saskatchewan Saskatoon, Canada S 7 NOWO, 1982.-15 p.