НАНОСТРУКТУРИРОВАННЫЕ ЛИПИДНЫЕ НОСИТЕЛИ И СТАБИЛЬНЫЕ ЭМУЛЬСИИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Композиция, содержащая частицы наноструктурированного липидного носителя (НЛН) для доставки биоактивного агента в клетку, причем частицы НЛН содержат:
(a) масляную сердцевину, содержащую смесь жидкофазного липида и твердофазного липида,
(b) катионный компонент,
(c) гидрофобное поверхностно-активное вещество, и
(d) гидрофильное поверхностно-активное вещество.
2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что биоактивный агент связан с частицами НЛН.
3. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанная композиция доставляет биоактивный агент в клетку.
4. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сложный эфир сорбитана, присутствующий в количестве, достаточном для повышения способности композиции доставлять биоактивный агент в клетку по сравнению с сопоставимой композицией без сложного эфира сорбитана.
5. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что биоактивный агент представляет собой белок, биоактивный агент кодирует белок, биоактивный агент представляет собой белковый антиген, или биоактивный агент кодирует белковый антиген.
6. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что клетка находится в организме субъекта, причем указанный бореактивный агент представляет собой антиген, и при этом указанная композиция вызывает иммунный ответ у субъекта против указанного антигена.
7. Композиция по п.6, отличающаяся тем, что гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сложный эфир сорбитана, причем указанный биоактивный агент представляет собой белковый антиген, и при этом указанный сложный эфир сорбитана присутствует в количестве, достаточном для повышения способности композиции вызывать иммунный ответ к белковому антигену по сравнению с сопоставимой композицией без сложного эфира сорбитана.
8. Композиция по п. 7, отличающаяся тем, что гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сложный эфир сорбитана, причем указанный биоактивный агент представляет собой белковый антиген и при введении в эффективном количестве субъекту указанная композиция вызывает образование титров антител к белковому антигену на более высоком уровне, чем титры антител, полученные в случае, когда сопоставимую композицию, не содержащую сложный эфир сорбитана, вводят субъекту.
9. Композиция по п. 7, отличающаяся тем, что гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сложный эфир сорбитана, и композиция вызывает образование титров нейтрализующих антител у субъекта на более высоком уровне, чем титры нейтрализующих антител, вызванные у субъекта сопоставимой композицией, не содержащей сложного эфира сорбитана.
10. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что биоактивный агент представляет собой РНК, мРНК, онколитическую вирусную РНК или ДНК.
11. Композиция по п. 10, отличающаяся тем, что РНК кодирует антиген или антитело.
12. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что жидкофазный липид содержит растительное масло, подсолнечное масло, соевое масло, оливковое масло, виноградное масло, животное масло, полученное синтетическим путем масло, каприновый/каприловый триглицерид, витамин E, лауроилполиоксилглицерид, моноацилглицерин, соевый лецитин, сквален или сквалан, встречающийся в природе или синтетический терпеноид.
13. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что твердофазный липид содержит глицеролипид, микрокристаллический триглицерид или тримиристин.
14. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что катионный компонент представляет собой катионный липид, выбранный из: 1,2-диолеоилокси-3-(триметиламмонио)пропана (ДОТАП), 3β-[N-(N',N'-диметиламиноэтан)-карбамоил]холестерина (ДК-холестерина), диметилдиоктадециламмония (ДДА), 1,2-димиристоил-3-триметиламмоний-пропана (ДМТАП), дипальмитоил(C16:0)-триметиламмоний-пропана (ДПТАП), дистеароилтриметиламмоний-пропана (ДСТАП), N-[1-(2,3-диолеилокси)пропил]-N,N,N-триметиламмония хлорида (ДОТМА), N,N-диолеоил-N,N-диметиламмония хлорида (ДОДАХ), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (ДОЭФХ), 1,2-диолеоил-3-диметиламмоний-пропана (ДОДАП) и 1,2-дилинолеилокси-3-диметиламинопропана (ДЛинДМА), полиэтиленгликоля, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и их комбинаций,.
15. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что гидрофильное поверхностно-активное вещество представляет собой полиэтиленгликоль, сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана, полисорбат или полисорбат 80.
16. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что средний коэффициент полидисперсности частиц НЛН составляет от 0,1 до приблизительно 0,5.
17. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сложный эфир сорбитана, имеющий значение гидрофильно-липофильного баланса (ГЛБ), равное от 1 до 5.
18. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сложный эфир сорбитана, и указанный сложный эфир сорбитана представляет собой сложный моноэфир сорбитана, сложный триэфир сорбитана, сорбитана моностеарат, сорбитана моноолеат или сорбитала триолеат.
19. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что Z-средний диаметр частиц НЛН составляет от приблизительно 40 нм до приблизительно 80 нм.
20. Композиция по любому из пп. 1-19, отличающаяся тем, что Z-средний диаметр частиц НЛН составляет от приблизительно 40 нм до приблизительно 60 нм.
21. Композиция по п. 1, имеющая молярное отношение масла к поверхностно-активному веществу от приблизительно 0,5 до приблизительно 12.
22. Композиция по п. 1, имеющая соотношение гидрофильного поверхностно-активного вещества к катионному компоненту от приблизительно 0,2 до приблизительно 1,5.
23. Композиция по п. 1, содержащая от приблизительно 0,2% до приблизительно 40% (масса/объем) жидкофазного липида, от приблизительно 0,1% до приблизительно 10% (масса/объем) твердофазного липида, от приблизительно 0,2% до приблизительно 10% (масса/объем) катионного компонента, представляющего собой катионный липид, от приблизительно 0,25% до приблизительно 15% (масса/объем) гидрофобного поверхностно-активного вещества, представляющего собой сложный эфир сорбитана и от приблизительно 0,2% до приблизительно 15% (масса/объем) поверхностно-активного вещества, представляющего собой гидрофильное поверхностно-активное вещество.
24. Композиция по п. 1, где масляная сердцевина содержит встречающийся в природе или синтетический сквален и глицеролипид, где катионный компонент представляет собой ДОТАП, где гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сорбитана моностеарат, или сорбитана моноолеат, или сорбитана триолеат, и где гидрофильное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
25. Композиция по п. 1, где масляная сердцевина содержит сквален и тримиристин, где катионный компонент представляет собой ДОТАП, где указанное гидрофобное поверхностно-активное вещество представляет собой сорбитана моностеарат, или сорбитана моноолеат, или сорбитана триолеат, и где гидрофильное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80.
26. Способ выработки иммунного ответа у субъекта, включающий (a) введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества онколитического вируса, кодирующего белковый антиген, и (b) введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества частиц наноструктурированного липидного носителя (НЛН) содержат: масляную сердцевину, содержащую смесь жидкофазного липида и твердофазного липида, катионный компонент, гидрофобное поверхностно-активное вещество и гидрофильное поверхностно-активное вещество , причем биоактивный агент представляет собой белковый антиген или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белковый антиген.
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что введение (a) и введение (b) осуществляют с интервалом между введениями, составляющим по меньшей мере 1 неделю, по меньшей мере 2 недели, по меньшей мере 3 недели, по меньшей мере 1 месяц, по меньшей мере 6 недель, по меньшей мере два месяца, по меньшей мере три месяца, по меньшей мере 6 месяцев или по меньшей мере 1 год.
28. Способ доставки биоактивного агента в клетку, включающий приведение клетки в контакт с композицией по п. 1.
29. Способ оптимизации доставки биоактивного агента в клетку, включающий выбор молярного отношения биоактивного агента к наноструктурированному липидному носителю (НЛН), которое оптимизирует титры антител, продуцируемые у субъекта, содержащего указанную клетку.
30. Способ по п. 29, отличающийся тем, что НЛН представляет собой частицу НЛН по п. 1.
31. Способ получения композиции по п. 1, включающий:
(a) смешивание твердофазного липида, жидкофазного липида, катионного компонента и гидрофобного поверхностно-активного вещества с получением смеси масляной фазы;
(b) смешивание гидрофильного поверхностно-активного вещества и воды с получением смеси водной фазы; и
(c) смешивание смеси масляной фазы со смесью водной фазы с получением частиц НЛН.
32. Композиция по п.13, отличающаяся тем, что биоактивный агент представляет собой РНК, и при этом РНК кодирует один или более антигенов TB.
33. Способ по п. 26, отличающийся тем, что биоактивный агент представляет собой РНК, и при этом РНК кодирует один или более антигенов TB.
34. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что биоактивный агент представляет собой адъювант.
35. Композиция по п. 34, отличающаяся тем, что адъювант выбирают из агониста TLR, агониста Rig-I, сапонина, углевода, углеводного полимера, конъюгированного углевода, целой вирусной частицы, подобной вирусу частицы, фрагментов вирусов и фрагментов клеток.
36. Композиция по п. 34, отличающаяся тем, что биоактивный агент выбирают из двухцепочечной РНК, riboxxol, поли(I:C) и поли-ICLC.
37. Композиция, содержащая адъювант в стабильной эмульсии, в которой адъювант выбран из агониста TLR3 и агониста Rig-I, и в которой стабильная эмульсия представляет собой эмульсию типа масло в воде.
38. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что указанная эмульсия содержит от 2 до 10% масла, или от 2 до 15% масла, или от 5 до 15% масла, или от 5 до 10% масла.
39. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что масло представляет собой сквален.
40. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что эмульсия типа масло в воде содержит от 0,01 до 0,1% альфа-токоферола.
41. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что эмульсия типа масло в воде содержит от 0,3 до 3% поверхностно-активного вещества.
42. Композиция по п. 41, отличающаяся тем, что поверхностно-активное вещество представляет собой полиоксиэтиленсорбитана моноолеат или полоксамер 188 (сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена).
43. Способ выработки или усиления иммунного ответа, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества композиции по п. 37.
44. Композиция, содержащая (a) адъювант и (b) эмульсию типа масло в воде или частицы наноструктурированного липидного носителя (НЛН), в которой эмульсия типа масло в воде или частицы НЛН содержат сквален.
45. Композиция по п. 44, отличающаяся тем, что адъювант выбирают из агониста TLR, агониста Rig-I, сапонина, углевода, углеводного полимера, конъюгированного углевода, целой вирусной частицы, подобной вирусу частицы, фрагментов вирусов и фрагментов клеток.
46. Композиция по п. 44, дополнительно содержащая биоактивный агент, выбранный из группы, содержащей двухцепочечную РНК, riboxxol, поли(I:C) и поли-ICLC.
47. Способ выработки или усиления иммунного ответа, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества композиции по п. 44.
48. Способ по п.31, дополнительно включающий
(d) объединение биоактивного агента с частицами НЛН таким образом, что биоактивный агент связывается с поверхностью частиц НЛН посредством нековалентных взаимодействий или посредством обратимых ковалентных взаимодействий.