ЛИОФИЛИЗИРОВАННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАСТВОРА ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ОПОРНО-ДВИГАТЕЛЬНОГО АППАРАТА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ
LYOPHILISED PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR PREPARING SOLUTION FOR INJECTIONS FOR TREATING DEGENERATE-DYSTROPHIC LOCOMOTOR DISEASES AND METHOD FOR PREPARING IT

Изобретение относится к области фармакологии и медицины, конкретно к препаратам на основе хондроитинсульфата для профилактики и лечения различных форм патологий и заболеваний суставной и костной систем.
Заболевания опорно-двигательного аппарата, к которым относится остеоартрит и остеоартроз, имеют значение для здравоохранения любой страны. Вследствие высокой распространенности, инвалидизации больных, особенно всех возрастных групп, и сопровождающая эти заболевания потеря трудоспособности, ведет к выраженному снижению качества жизни пациентов [Насонова В.А., Фоломеева О.М. Медико-социальное значение XIII класса болезней для населения России // Научно-практическая ревматология. - 2001. - №1. - С.7-11. Badley E.M., Ibanez D. Socioeconomic risk factors and musculoskeletal disability // J.Rheumatol. - 1994. - Vol.21. - P.515-522].
Болезни суставов имеют примерно 70% населения старше 45 лет. Как правило, эти патологии сопровождаются в виде болей в суставе, усиливающихся при движении, ощущении скованности, миалгией и миастений. Воспалительные процессы сопровождаются отечностью, припухлостью, изменением формы и очертаний суставов.
Установлено, что при заболеваниях суставов затрагивается хрящ, покрывающий суставные поверхности, а также костная ткань и внутренняя поверхность суставной сумки.
Хондропротекторы разделяются на три подгруппы: препараты - мукополисахариды, как разновидность заместительной терапии; стимуляторы синтеза протеогликанов и прочие, включая комбинированные средства.
К мукополисахаридным препаратам относятся хондроитин сульфат или его смеси и мукополисахарид моносульфат (который, на данный момент не выпускается). Хондроитин сульфат широко используется для лечения различных видов остеоартроза и остеохондрозов позвоночника. Его источником являются хрящевая ткань крупного рогатого скота, свиней, а также куриный и акулий хрящи.
Уровень техники
На территории Российской Федерации зарегистрировано около 65 наименований препаратов на основе хондроитин сульфата. Монографии на хондроитинсульфат включены в ведущие зарубежные фармакопеи (с 2002 г. в USP и с 2006 г. в Eur. Ph., Br. Ph.).
Известны фармацевтические составы на основе хондроитин сульфата в различных лекарственных формах: растворы для инъекций, гранулированные порошки, капсулы, таблетки для перорального применения, для местного применения.
Притом известно, что инъекционные растворы имеют преимущественные медицинские показания, т.к. не проходят значительную трансформацию, как это происходит в желудочно-кишечном тракте. Также инъекционный способ введения показаны при выраженных нарушениях и для устранения синдромов, требующих скорейшего достижения терапевтического результата. Таким образом, данная лекарственная форма представляет значительный интерес для специалистов.
Имеется патент №2282437, где предлагаемое средство содержит сахарид - хондроитинсульфат (0,5-20,0 мас.%), консервант (0,1-2,0 мас.%), неионогенное поверхностно-активное вещество, в частности, моноэфир олеиновой кислоты и полиоксиэтилированного сорбината (1,0-5,0 мас.%) и воду (остальное). Данное средство имеет высокую биологическую доступность. Однако введение поверхностно-активных веществ может вызывать аллергические реакции.
Имеется патент №2021812, сущность изобретения заключается в том, что предложенное средство содержит смесь хондроитин сульфатов А и С в соотношении 3:2-1:1, консервант - бензиловый спирт, апирогенную воду, причем компоненты содержатся в определенных количествах. Отмечается стабильность в течение 3 лет.
Наиболее близким к данному изобретению является патент №2080857. Данный патент касается инъекционной формы, содержащей в качестве действующего вещества натриевую соль хондроитин сульфатов А и С. Инъекционную форму препарата получают путем растворения субстанции хондроитин сульфата в дистиллированной воде, стерилизации раствора, розлива в ампулы и лиофильного высушивания, при котором кассеты с ампулами помещают в сублимационную камеру, где раствор хондроитин сульфата замораживают до минус 40-45°С со скоростью 10-13°С/ч в течение 5-6 ч, выдерживают при этой температуре 5-6 ч, затем подвергают его высушиванию методом сублимации путем подогревания ампул со скоростью 5-6°С/ч в течение 13-16 ч до температуры 34-36°С и выдерживают при этой температуре 7-10 ч. Полученный по данному способу препарат не содержит консерванта и сохраняет свои свойства в течение длительного срока хранения (не менее 3-х лет). Хотя известные формы сохраняют свои биологические свойства, они могут быть подвержены изменениям цвета.
Недостатком известной формы является то, что субстанция хондроитина сульфата в силу химический процессов меняет цвет, т.е. вещество желтеет, что может отражаться на сроках хранения.
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента стабильных фармацевтических композиций для инъекций для лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний опорно-двигательного аппарата, содержащих хондроитина сульфат.
Поставленная задача решается лиофилизированной фармацевтической композицией для приготовления раствора для инъекций для лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний опорно-двигательного аппарата, содержащей хондроитина сульфат, натрия метабисульфита при следующем соотношении компонентов, мг
Хондроитина сульфат
50,0-160,0
Натрия метабисульфит
0,05-1,25
и способом ее получения.
Способ получения лиофилизированной фармацевтической композиции заключается в том, что растворяют хондроитин сульфат в воде для инъекций, добавляют и растворяют при перемешивании метабисульфит натрия, устанавливают рН 5,5-6,5, полученный раствор насыщают азотом в течение 10 мин при расходе азота 0,048 атм/мин, проводят стерилизующую фильтрацию, заполняют раствором ампулы, раствор подвергают замораживанию в течение 12-15 ч, включая выдержку препарата при температуре минус (40-45)°С не менее 8 ч и затем сушат методом сублимации, при начальной величине остаточного давления около 17,0 Па, при этом повышают температуру с 1-го по 8-й час сушки с минус (45÷40)°С до (5÷7)°С, оставляют на этом уровне до 28 ч, затем к 34-му часу поднимают ее до (20±2)°С и оставляют на этом уровне до конца сушки, ампулы с лиофилизированным раствором запаивают с использованием защиты сухим фильтрованным азотом.
Технический результат: введение в фармацевтический состав на основе хондроитина сульфат стабилизатора - натрия метабисульфита, и предложенные соотношения компонентов позволяют сохранять стабильность и цветность лиофилизированной субстанции в течение всего срока хранения и более, без влияния на терапевтический эффект, что улучшает качество данной лекарственной формы хондроитина сульфата.
Натрия метабисульфит широко используется в химической промышленности, как химический реагент, например, в частности, окислителей, как хлор и озон, для очистки хромсодержащих сточных вод. Применяется также в рыбной и пищевой промышленности в качестве консерванта, в сельском хозяйстве для консервации кормовых смесей, при обработке цветных фотоматериалов. Использование его в качестве стабилизатора лекарственных средств избирательно. Так, например, известно его использование в составе инъекционных растворов но-шпы (справочник Видаль 2008 года, стр.Б-886) и в растворе 2-этил-6-метил-3-оксипиридин сукцината, компании «Сотекс».
Хондроитин сульфат - это высокомолекулярный полисахарид, который относится к группе гликозаминогликанов (или протеогликанов), обладает тропностью к хрящевой ткани, инициирует процесс фиксации серы в процессе синтеза хондроитин-серной кислоты, что в свою очередь способствует отложению кальция в костях. Хондроитин сульфат способствует активной регенерации хряща. Он является хондропротективным средством. Хондроитин сульфата обладает способностью угнетать действие специфических ферментов, разрушающих соединительную ткань, в том числе лизосомальных ферментов, высвобождающихся в результате разрушения хондроцитов (эластаза, пептидаза, катепсин, интерлейкин-1 и др.). Хондроитин сульфат оказывает противовоспалительное и анальгезирующее действие, уменьшает боли в суставах. Хондроитин сульфат необходим также при любых патологических процессах соединительной ткани, не только хряща, но и сухожилий, связок и кожи.
Основными областями применения заявляемой композиции, таким образом, являются дегенеративно-дистрофические заболевания суставов и позвоночника: первичный артроз, межпозвонковый остеохондроз, остеоартроз, остеопороз, пародонтопатия, переломы костей (для ускорения образования костной мозоли).
Осуществление изобретения может быть продемонстрировано ниже представленными примерами.
Пример 1.
Получение лиофилизированной композиции состава:
Хондроитина сульфат
50,0 мг
Натрия метабисульфит
0,05 мг
Приготовление раствора Хондроитин сульфата
В реактор наливают воду для инъекций из сборника с помощью насоса. Воду кипятят в течение 60 мин и охлаждают до комнатной температуры - (20±2)°С и сливают в стерильные бутыли.
Навеску хондроитин сульфата (прошедшего входной контроль в ОКК) порционно полностью растворяют в бутылях, содержащих воду для инъекций из реактора, а затем раствор переносят в реактор. Емкость, в которой находился растворенный хондроитин сульфат, дважды промывают водой для инъекций и ее содержимое переносят в тот же реактор. Когда концентрированный раствор хондроитин сульфата будет внесен в реактор полностью, содержимое реактора перемешивают в течение 30 мин. Затем вносят при перемешивании натрия метабисульфит. Затем мешалку останавливают, отбирают пробу раствора препарата из реактора и контролируют рН. Величина рН должна быть 5,6. При необходимости рН подводят с помощью 0,2 N раствора натрия гидроокиси. Насыщают раствор хондроитин сульфата в реакторе азотом в течение 10 мин (расход азота 0,048 атм/мин) и передают на стадию фильтрации.
Далее происходит этап фильтрации, который одновременно и является и стерилизующим этапом.
По окончании процесса фильтрации трубки подачи и выхода раствора зажимают зажимами и отсоединяют с соблюдением правил асептики от реактора. На бутыль наклеивают этикетку с указанием наименования препарата, номера серии, объема раствора, даты фильтрации.
Сборник с раствором препарата перемещают в помещение наполнения ампул класса чистоты 100/М3.5(В) - к машине розлива, установленной в этом же помещении в зоне ламинарного потока стерильного воздуха 100/М3.5, А класса чистоты.
Удаляют воздух из насосов и шлангов, прокачивают стерильно отфильтрованный раствор хондроитин сульфата через всю разливочную систему (всасывающие шланги насосов-дозаторные, насосы-соединительные шланги-иглы) до полного вытеснения воздуха из них.
Открывают вентили подачи азота, природного газа (пропана) и кислорода. Включают вытяжной вентилятор, поджигают пьезозажигалкой газовые горелки, при этом кнопка включения вентилятора блокирует самопроизвольное погасание пламени. С помощью ротаметров регулируют пламя горелок. Ампулы не запаивают!
Стерильный отфильтрованный раствор хондроитин сульфата из сборника передавливается с помощью сжатого азота в стеклянные бутыли-приемники и далее подается на дозаторы автоматической машины.
Стерильные ампулы через входной шнек подают на технологическое колесо. Скорость подачи ампул регулируют таким образом, чтобы они подавались к входному шнеку без пробелов. Далее ампулы попадают под балку с иглами, с помощью которых ампулы заполняются раствором препарата. Заполненные ампулы с помощью устройства поперечного выталкивания собирают в кассеты.
Через каждый час работы контролируют дозу наполнения объемным методом с помощью калиброванного шприца. Объем наполнения должен составлять 1,15 мл при номинальном объеме наполнения - не менее 2,0 мл.
Ампулы с раствором препарата передают на следующую стадию технологического процесса - лиофилизация раствора препарата.
Замораживание препарата
Замораживание раствора «Хондроитин сульфат» производят на полках сублимационных установок, и в морозильных камерах. Перед загрузкой препарата производят санитарную обработку внутренних поверхностей и полок сублимационных установок и морозильных камер.
Датчиком лагометра-регулятора устанавливают температуру полок сублимационной камеры минус 40-45°С и включают холодильную машину. Загрузку в сублиматор кассет с раствором Хондроитин сульфата в ампулах производят при температуре полок не ниже минус 15°С. Перед началом загрузки в сублимационную камеру с кассет с ампулами снимают крышки. В ампулы двух кассет на второй и четвертой полках устанавливают термодатчики и подключают их к регистрирующему устройству. Длительность процесса замораживания раствора препарата составляет 12 ч, включая выдержку препарата при температуре минус 40°С не менее 8 ч.
Сублимационное высушивание препарата
За (3,0±0,5) ч до начала высушивания включают охлаждение конденсатора установки. При температуре конденсатора не менее минус 50°С и температуре препарата около минус 40°С и ниже включают вакуумный насос. При стабилизации остаточного давления (около 17,0 Па) начинают процесс сублимационного высушивания. Данная операция считается нулевым часом сушки. Подогрев полок ведут по следующему режиму: задатчиком лагометра-регулятора температуру полок повышают с 1-го по 8-й час сушки с минус 40°С до 5°С и оставляют на этом уровне до 28 ч, затем к 34-му ч поднимают ее до (20±2)°С. При температуре (20±2)°С полки установки выдерживаются до конца высушивания.
Температура продукта при этом изменяется следующим образом: с 1-го по 36-й ч она поднимается от минус (38±5)°С до 0°С, к 40-му ч сушки поднимается до (20±1)°С и сохраняется на этом уровне в течение (5±1) ч до конца лиофилизации. Остаточное давление (вакуум) в процессе сушки не превышает 17,0 Па. Общая длительность процесса составляет около 50 ч.
Все температурные параметры и величины остаточного давления в сублиматоре записываются на ленте шести-точечного самописца и ежечасно регистрируют в технологическом журнале.
По окончании процесса высушивания вакуум в камере «гасится» через стерилизующий фильтр фильтрованным азотом.
Запайка ампул с препаратом
Кассеты с ампулами с высушенным Хондроитин сульфатом, закрытые стерильными салфетками из безворсовой ткани, по возможности быстро закрывают металлическими крышками, вынимают из сублимационной установки, и передают в бокс запайки. До запайки возможно хранение ампул с препаратом непосредственно в сублиматоре или эксикаторе при остаточном давлении не более 150 Па и абсолютной влажности воздуха не более 20% не более 24 ч.
Запайку ампул с сухим препаратом производят на автомате с защитой сухим фильтрованным азотом.
Автомат для запайки подготавливают к работе, согласно инструкции по эксплуатации, обрабатывают все поверхности автомата салфеткой, смоченной 76% раствором спирта этилового, включают в сеть, регулируют пламя газо-кислородной горелки. В приемный бункер вставляют кассету с ампулами и приступают к запайке, постоянно следят за ее качеством. Не допускается образования «усиков», вздутия или провала запаянного конца ампул.
В процессе запайки оператор обрабатывает резиновые перчатки 76% раствором спирта этилового каждые 30 мин, не совершает лишних манипуляций над не запаянными ампулами, пользуется пинцетом для прикосновения к ампулам. При поступлении запаянных ампул в приемный бункер разбитые ампулы отбирают в отдельную кассету. Качественно запаянные ампулы устанавливают в кассеты и передают для проверки на герметичность.
Пример 2
Получение лиофилизированной композиции состава:
Хондроитина сульфат
160,0
Натрия метабисульфит
1,25
Композицию готовят согласно способу по примеру 1 с использованием соответствующих количеств компонентов при максимальных значениях параметров, заявленных в формуле изобретения.
Пример 3
Изучение восстанавливающей активности композиции, полученной по примеру 1.
Главными химическими компонентами матрикса соединительной ткани являются белок и мукополисахариды (глюкозаминогликаны), которые включают уроновые кислоты. При изменениях в хрящевой ткани меняется состав матрикса.
Крысам вводили папаин внутривенно в дозе 10 мг/кг с интервалом 3-4 дня, что приводило к снижению содержания уроновой кислоты в реберном хряще на 18,5% (при норме 14,25 мг/г).
Композицию, полученную по примеру 1, вводили ежедневно внутримышечно в виде раствора на дистиллированной воде для инъекций по 0,5 мл после последней инъекции папаина. Через месяц содержание уроновой кислоты повысилось до 16,8 мг/г.
Таким образом, подтверждается восстанавливающее действие нового состава и его сберегающее влияние на содержание гликозаминогликанов, входящих в состав матрикса соединительной ткани.
В другой серии опытов было изучено противовоспалительное действие композиции, полученной по примеру 2.
У кроликов вызывали хроническое воспаление коленного сустава путем 4-х кратного введения калликреина по 24 ЕД в 0,3 мл физиологического раствора с интервалом 5 дней. Животным опытной группы вводили внутримышечно композицию, полученную по примеру 1 в виде раствора по 1 мл через день в течение 2 месяцев. Животным контрольной группы вводили физиологический раствор в том же объеме и режиме.
У животных контрольной группы окружность сустава к концу 1 месяца опыта увеличилась в среднем на 8 мм, к концу 2-го месяца - в среднем на 11 мм, а у кроликов, получавших заявляемую композицию - соответственно на 3,1 и 5,2 мм. При вскрытии у контрольных кроликов в полости сустава обнаружено скопление жидкости серозного характера. Синовиальная оболочка была несколько гипертрофированной, рыхлой, отмечалось набухание суставного хряща.
В опытной группе изменений структуры суставов не обнаружено ни в одном случае.
Новая композиция практически не токсична. ЛД 50 для мышей при внутрибрюшинном введении составляла соответственно 15,7 г/кг.
Пример 4
Изучение «цветности» растворов, полученных из заявленной лиофилизированной композиции.
Окраску жидкостей определяли визуально методом, в соответствии с требованиями ГФ 12 издания.
Испытания проводили в одинаковых пробирках из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с внутренним диаметром около 12 мм, используя равные объемы - 2,0 мл испытуемой жидкости и воды. Сравнивали окраску в дневном отраженном свете, горизонтально (перпендикулярно оси пробирок) на матово-белом фоне (эталоны 1-3).
Не наблюдалось отклонений при сравнении в течение всего срока хранения препарата (3,5 года).