ЭКСПРЕССИОННЫЕ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ РАСТЕНИЙ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Способ осуществления экспрессии представляющей интерес молекулы в растении, включающий приведение корней растения в контакт с раствором, содержащим по меньшей мере одну экспрессионную конструкцию на основе геминивируса так, чтобы обеспечить поглощение указанными корнями по меньшей мере одной указанной экспрессионной конструкции на основе геминивируса, где указанная экспрессионная конструкция содержит полинуклеотид, кодирующий представляющую интерес молекулу, и кроме того, указанная экспрессионная конструкция способна к системному бессимптомному распространению в растении-хозяине, посредством этого осуществляя экспрессию представляющей интерес молекулы в растении.
2. Способ по п.1, где указанная экспрессионная конструкция на основе геминивируса лишена полинуклеотидной последовательности, кодирующей С2 и С3 кодирующую последовательность.
3. Способ по п.1, где указанная экспрессионная конструкция на основе геминивируса содержит полинуклеотидную последовательность, кодирующую представляющую интерес молекулу, причем указанная полинуклеотидная последовательность фланкирована несмежной последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей репликазу геминивируса.
4. Способ осуществления экспрессии представляющей интерес молекулы в растении, включающий прививку сегмента первого растения, инфицированного по меньшей мере одной экспрессионной конструкцией на основе геминивируса, на сегмент второго растения, причем указанная экспрессионная конструкция содержит полинуклеотидную последовательность, которая кодирует представляющую интерес молекулу, и кроме того, указанная экспрессионная конструкция на основе геминивируса способна к системному бессимптомному распространению в растении-хозяине, посредством этого осуществляя экспрессию представляющей интерес молекулы в растении.
5. Способ по п.4, где указанная экспрессионная конструкция на основе геминивируса лишена полинуклеотидной последовательности, кодирующей С2 и С3 кодирующую последовательность.
6. Способ по п.4, где указанная экспрессионная конструкция на основе геминивируса содержит полинуклеотидную последовательность, кодирующую представляющую интерес молекулу, причем указанная полинуклеотидная последовательность фланкирована несмежной последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей репликазу геминивируса.
7. Экспрессионная конструкция на основе геминивируса, способная к системному бессимптомному распространению в растении-хозяине, лишенная полинуклеотидной последовательности, кодирующей С2 и С3 кодирующую последовательность.
8. Экспрессионная конструкция по п.7, содержащая:
(1) полинуклеотидную последовательность, кодирующую межгенную область геминивируса (IR);
(2) полинуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный белок оболочки геминивируса (СР); и
(3) полинуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный белок предоболочки геминивируса (V2).
9. Экспрессионная конструкция по п.8, дополнительно содержащая полинуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный белок репликазы (С1).
10. Экспрессионная конструкция по п.9, где указанный модифицированный белок репликазы является таким, как представлено в SEQ ID NO: 36.
11. Экспрессионная конструкция по п.8, дополнительно содержащая полинуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный С4.
12. Экспрессионная конструкция по п.7, способная к репликации в прокариотической клетке.
13. Экспрессионная конструкция по п.7, неспособная к переносу от растения к растению посредством вектора насекомого.
14. Экспрессионная конструкция по п.7, дополнительно содержащая гетерологичную полинуклеотидную последовательность.
15. Экспрессионная конструкция по п.14, где указанный гетерологичный полинуклеотид больше, чем 1 т.п.н. (тысяча пар нуклеотидов).
16. Экспрессионная конструкция по п.14, где указанный гетерологичный полинуклеотид больше, чем 5 т.п.н.
17. Экспрессионная конструкция по п.14, где указанный гетерологичный полинуклеотид содержит оперон.
18. Экспрессионная конструкция по п.14, где указанный гетерологичный полинукпеотид адаптирован для сайленсинга генов.
19. Экспрессионная конструкция по п.7, дополнительно содержащая бактериальную полинуклеотидную последовательность.
20. Экспрессионная конструкция по п.8, где указанный модифицированный белок V2 геминивируса является таким, как представлено в SEQ ID NO: 6.
21. Экспрессионная конструкция по п.8, где указанный модифицированный белок оболочки геминивируса содержит аминокислотную последовательность, как представлено в SEQ ID NO: 3.
22. Экспрессионная конструкция по п.8, где указанный модифицированный белок оболочки геминивируса содержит мутацию или делецию в нуклеотидах, кодирующих N-концевые 100 аминокислот.
23. Экспрессионная конструкция по п.8, содержащая полинуклеотидную последовательность, как представлено в SEQ ID NO: 10 или 11.
24. Экспрессионная конструкция по п.14, где указанный гетерологичный полинуклеотид кодирует полипептид, выбранный из группы, состоящей из репортерной молекулы, противовирусной молекулы, вирусной группировки, противогрибковой молекулы, антибактериальной молекулы, молекулы устойчивости к насекомым, молекулы устойчивости к гербицидам, молекулы устойчивости к биотическому или абиотическому стрессу, фармацевтической молекулы, молекулы, индуцирующей рост, и молекулы, ингибирующей рост.
25. Экспрессионная конструкция по п.7, где геминивирус представляет собой бегомовирус.
26. Экспрессионная конструкция по п.7, где геминивирус представляет собой вирус желтой курчавости листьев томата (TYLCV).
27. Экспрессионная конструкция по п.7, которая адаптирована для экспрессии в растении-хозяине, выбранном из группы, состоящей из Solanaceae, Cucurbitaceae, Umbelliferae, Liliacae, Gramineae (Poaceae), Rosaceae, Musaceae, Vitacea и Cruciferae.
28. Способ осуществления экспрессии представляющей интерес молекулы в растительной клетке, включающий введение в растительную ткань нуклеиновокислотной конструкции по п.14, где представляющая интерес молекула представляет собой указанный гетерологичный полипептид, посредством этого осуществляя экспрессию представляющей интерес молекулы в растительной клетке.
29. Способ по п.28, где представляющая интерес молекула выбрана из группы, состоящей из репортерной молекулы, противовирусной молекулы, вирусной группировки, противогрибковой молекулы, антибактериальной молекулы, молекулы устойчивости к насекомым, молекулы устойчивости к гербицидам, молекулы устойчивости к биотическому или абиотическому стрессу, фармацевтической молекулы, молекулы, индуцирующей рост, продукта генов в метаболическом пути и молекулы, ингибирующей рост.
30. Способ по п.29, где данные гены в метаболическом пути кодируются опероном.
31. Способ по п.28, где растение выбрано из группы, состоящей из Solanaceae, Cucurbitaceae, Umbelliferae, Liliacae, Gramineae (Poaceae), Rosaceae, Musaceae, Vitacea и Cruciferae.