СПОСОБ ПРОМЫШЛЕННОГО ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА АЛЬФА-ФЕТОПРОТЕИНА

1. Способ получения инъекционного препарата альфа-фетопротеина из плацентарной и(или) абортной крови человека, путем отделения балластных белков из крови центрифугированием, фильтрацией, проведением хроматографических очисток, отличающийся тем, что перед центрифугированием в кровь добавляют вспомогательные вещества - хлорид натрия, тритон Х-100, хлороформ и апротинин в следующей концентрации:
Хлорид натрия
0,1÷0,5 моль/л
Тритон Х-100
0,01÷0,02% (масс/об)
Хлороформ
0,005÷0,01% (масс/об)
Апротинин
0,05÷0,1% (масс/об),
проводят перемешивание и экспозицию, а после центрифугирования и фильтрации в сыворотку крови добавляют подготовленный иммуносорбент с антителами, поликлональными к альфа-фетопротеину, перемешивают и затем отмывают иммуносорбент от сыворотки крови буферным раствором, проводят элюцию белка с иммуносорбента, ультрафильтрацию с заменой буферного раствора, а в конце очистку с помощью сорбента Sepharose CNBr-4B с антителами к IgG человека емкостью 2-10 мг/мл, стерилизующую фильтрацию через стерильный мембранный фильтр, розлив во флаконы, охлаждение, заморозку, сублимацию, десорбцию, герметичное укупоривание.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве аффинного сорбента используют иммуносорбент на основе Sepharose FF с антителами, поликлональными к альфа-фетопротеину емкостью 20-25 мг/мл.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора используют декстраны с молекулярной массой 35-45 кДа.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что готовый препарат содержит (0,025±0,005) мг или (0,05±0,01) мг или (0,075±0,015) мг альфа-фетопротеина и (5±1) мг декстрана.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что расфасованный продукт подвергают охлаждению и замораживанию, причем полупродукт загружают в камеру сублиматора, температура которого поддерживается на уровне 0°C, при этом до (-12±2)°C продукт доводят со скоростью менее 1°C в мин, дальнейшее замораживание осуществляют со скоростью от 1,5°C в мин в течение не менее 8 ч при конечной температуре не выше -45°C.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что процесс сублимации осуществляют при температуре полок от -20 до -25°C и вакууме не более 20 Па в течение 10 ч, затем производят равномерный подогрев полок со скоростью (5-10)°C/ч до конечной температуры (32±2)°C, при этом после достижения препаратом указанной температуры осуществляют его досушивание (десорбцию) в течение не менее 12 ч до остаточного содержания влаги в препарате на уровне 1-3%.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что после окончания лиофильной сушки препарата альфа-фетопротеина остаточный вакуум понижают стерильным аргоном или стерильным воздухом до 1000 кПа, после чего, не нарушая герметичности сублимационной камеры, за счет укупуривающего устройства сублиматора проводят процедуру укупорки флаконов специальной резиновой пробкой.