Способ получения жировой эмульсии с регенераторным эффектом
METHOD OF PRODUCING FAT EMULSION WITH REGENERATIVE EFFECT

Изобретение относится к области медицины, а именно регенеративной медицине и хирургии, и может быть использовано для получения аутотрансплантата жировой ткани (липографта) в виде жировой эмульсии с регенераторным эффектом за счет высокого содержания регенераторных (фибробластоподобных) клеток, который может быть использован для коррекции дефектов мягких тканей, рубцов и т.д.
Регенераторный эффект при аутотрансплантации жировой ткани достигается высоким содержанием в нем клеток регенераторного ряда, в том числе, мезенхимальных стромальных клеток, имеющих морфологическую структуру фибробластоподобных клеток. Тип липографта в виде жировой эмульсии позволяет вводить его не только в подкожный, но и во внутрикожный слой.
Известен способ получения жировой эмульсии с регенераторным эффектом, при котором производится поочередная фильтрация липографта через анаэробные клеточные фильтры с помощью 30 пассажей (Tonnard P. et al. Nanofat Grafting: Basic Research and Clinical Applications. Plastic and Reconstructive Surgery. October 2013. DOI: 10.1097/PRS.0b013e31829fe1b0).
Недостатки способа: длительность и трудоемкость проведения.
Технический результат: сокращение времени выполнения, упрощение способа при сохранении его высокой эффективности; способ позволяет снизить количество пассажей через каждый клеточный фильтр, при этом получив липографт в виде жировой эмульсии с максимальным количеством неповрежденных фибробластоподобных клеток (клеток регенераторного ряда)
Указанный результат достигается тем, что фильтрацию липоаспирата производят сначала через анаэробный клеточный фильтр с одним отверстием диаметром 1,2 мм с помощью 20 пассажей, затем через анаэробный эмульсифицирующий «нано» фильтр с внутренним диаметром ячеек сетки от 0,15 до 0,5 мм с помощью 20 пассажей.
Способ осуществляют следующим образом. Пациенту производят аспирацию подкожного жира методом липосакции [Heymans О., Castus Р., Grandjean F.X., Zele, D. Liposuction: Review of the Techniques, Innovations and Applications. Acta chirurgica Belgica. 106. 647-53. 2006. 10.1080/00015458. 2006.11679973]. Полученный липоаспират содержит адипоциты, клетки регенераторного ряда, клетки крови и факторы роста, находящиеся в изотоническом растворе. Для подготовки липоаспирата к аутотрансплантации производят его фильтрацию с помощью анаэробного клеточного фильтра с одним отверстием диаметром 1,2 мм (например, Tulip Medical Systems, San Diego, CA, USA), герметично закрепленного между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. При этом липоаспират перегоняют из одного шприца в другой через фильтр и обратно с помощью 20 пассажей. За счет данной манипуляции достигается уменьшение размеров жировых глобул в липоаспирате более чем в 2 раза, по сравнению с исходным, а также снижение числа эритроцитов и клеток крови. После этого производят фильтрацию липоаспирата через анаэробный клеточный эмульсифицирующий «нано» фильтр, имеющий вид сетки с внутренним диаметром ячеек от 0,15 до 0,5 мм (например, РАКТ medical products), герметично закрепленный между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл с помощью 20 пассажей туда и обратно. За счет фильтрации липоаспирата через «нано» фильтр липоаспират приобретает вид жировой эмульсии, при этом волокна соединительной ткани осаждаются на сетке фильтра и не попадают в реципиентную зону, а клетки регенераторного ряда сохраняются в липографте.
Примеры конкретного выполнения
Пример 1. Пациентка К., 64 года, выполнена липоаспирация. Последняя производилась под местной анестезией шприцевым методом в одной анатомической зоне - области живота. Липоаспират объемом 20 мл был профильтрован с помощью анаэробного клеточного фильтра с одним отверстием диаметром 1,2 мм (Tulip Medical Systems, San Diego, CA, USA), герметично закрепленного между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. При этом липоаспират перегонялся из одного шприца в другой через фильтр и обратно с помощью 20 пассажей. Полученный липографт имел хорошие реологические свойства и был пригоден для дальнейшей эмульсификации. Далее производили фильтрацию липоаспирата через эмульсифицирующий «нано» фильтр с диаметром ячеек сетки 0,5 мм, герметично закрепленный между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. Липоаспират перегонялся из одного шприца в другой через фильтр туда и обратно 20 раз. Полученный липографт имел вид жировой эмульсии с 11% морфологически неповрежденных фибробластоподобных клеток и 3% морфологически неповрежденных адипоцитов, а также отсутствием эритроцитов и минимальным содержанием элементов соединительной ткани. Липографт использовали с регенераторной целью, вводили его под трофические язвы голеней с помощью щприца, далее продолжали местное лечение. В результате проведенной процедуры у пациентки с длительным анамнезом незаживающих трофических язв получен положительный результат - размеры язв уменьшились на 5-10 мм.
Пример 2. Пациент Н., 62 года, выполнена липоаспирация. Последняя производилась под местной анестезией шприцевым методом в одной анатомической зоне - области живота. Липоаспират объемом 20 мл был профильтрован с помощью анаэробного клеточного фильтра с одним отверстием диаметром 1,2 мм (Tulip Medical Systems, San Diego, CA, USA), герметично закрепленного между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. При этом липоаспират перегонялся из одного шприца в другой через фильтр и обратно с помощью 20 пассажей. Полученный липографт имел хорошие реологические свойства и был пригоден для дальнейшей эмульсификации. Далее производили фильтрацию липоаспирата через эмульсифицирующий «нано» фильтр с диаметром ячеек сетки 0,5 мм, герметично закрепленный между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. Липоаспират перегонялся из одного шприца в другой через фильтр туда и обратно 20 раз. Полученный липографт имел вид жировой эмульсии с 15% морфологически неповрежденных фибробластоподобных клеток и 3% морфологически неповрежденных адипоцитов, а также отсутствием эритроцитов и минимальным содержанием элементов соединительной ткани. Липографт использовали с регенераторной целью, вводили его под трофическую язву нижней трети голени с помощью щприца, далее продолжали местное лечение. В результате выполненной процедуры у пациента с длительным анамнезом незаживающей трофической язвы размер ее уменьшился на 10 мм.
Пример 3. Пациент А., 45 лет, выполнена липоаспирация. Последняя производилась под местной анестезией шприцевым методом в одной анатомической зоне - области живота. Липоаспират объемом 20 мл был профильтрован с помощью анаэробного клеточного фильтра с одним отверстием диаметром 1,2 мм (Tulip Medical Systems, San Diego, CA, USA), герметично закрепленного между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. При этом липоаспират перегонялся из одного шприца в другой через фильтр и обратно с помощью 20 пассажей. Полученный липографт имел хорошие реологические свойства и был пригоден для дальнейшей эмульсификации. Далее производили фильтрацию липоаспирата через эмульсифицирующий «нано» фильтр с диаметром ячеек сетки 0,5 мм, герметично закрепленный между двумя шприцами типа Luer-Lok объемом 20 мл. Липоаспират перегонялся из одного шприца в другой через фильтр туда и обратно 20 раз. Полученный липографт имел вид жировой эмульсии с 15% морфологически неповрежденных фибробластоподобных клеток и 3% морфологически неповрежденных адипоцитов, а также отсутствием эритроцитов и минимальным содержанием элементов соединительной ткани. Липографт использовали с регенераторной целью, вводили его под трофические язвы средней и нижней третей обеих голеней с помощью щприца, далее продолжали местное лечение. В результате у пациента с длительным анамнезом незаживающих трофических язв размер их начал уменьшаться сразу после операции, а через 6 месяцев уменьшился в среднем с 5 см до 2 см.
Таким образом, предлагаемый способ получения жировой эмульсии с регенераторным эффектом является применимым в области практического здравоохранения, так как может быть воспроизведен неоднократно, не требует сложной аппаратуры и реактивов, помогает снизить количество пассажей через клеточный фильтр с 90 до 40, сократить время манипуляции, по сравнению с прототипом, а также получить жировую эмульсию с прогнозируемо высоким количеством неповрежденных фибробластоподобных клеток.