ХАРАКТЕРИСТИКА УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ (TNFб, IL-6, IL-10) И ИХ РАСТВОРИМЫХ РЕЦЕПТОРОВ (SRp55 TNFб, SRp75 TNFб, SR IL-6) У БОЛЬНЫХ ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ, ВИЧ-АССОЦИИРОВАННЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ И ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

Медицинская Иммунология 2008, Т. 10, № 6, стр. 519-526 © 2008, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

характеристика уровня цитокинов (TNFa, il-6, il-10) и их растворимых рецепторов

у больных вич-инфекцией, вич-ассоциированным туберкулезом и туберкулезом легких

Маркелова Е.В.1, Сотниченко С.А.2, Скляр Л.Ф.1, Сафронов А.Е.1

1 ГОУВПО Владивостокский государственный медицинский университет, г. Владивосток

2 ГУ Краевой клинический центр по профилактике СПИД и инфекционных заболеваний, г. Владивосток

Резюме. Были обследованы пациенты с ВИЧ-инфекцией (1 группа), с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом (2 группа) и с туберкулезом легких (3 группа). Содержание цитокинов (TNFa, IL-6, IL-10) и их растворимых рецепторов (SRp55 TNFa, SRp75 TNFa, SR IL-6) определяли в сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа. Больные до начала и на момент исследования не получали противовирусной терапии. Выявлены особенности, отражающие вектор и степень выраженности изменений иммунореактивности обследуемых. У больных туберкулезом на фоне умеренного повышения TNFa зарегистрировано увеличение IL-10 и IL-6, значительное нарастание SR IL-6, относительно более низкие показатели SRp75 TNFa и дефицит SRp55 TNFa. В группах больных ВИЧ-инфекцией и ВИЧ-ассоциированным туберкулезом в целом, за исключением IL-10, направленность изменений была однотипной: гиперпродукция TNFa и его растворимых рецепторов I и II типа, увеличение уровня IL-6 на фоне недостатка его растворимого рецептора. Корреляционный анализ показал наличие сильной прямой зависимости между TNFa и уровнем вирусной нагрузки у больных IVB и V стадиями ВИЧ-инфекции и ВИЧ-ассоциированного туберкулеза, что подтверждает важную роль TNFa в патогенезе ВИЧ-инфекции и ее прогрессировании. Выявлена разнонаправленная динамика уровня исследуемых цитокинов и их растворимых рецепторов по мере прогрессирования ВИЧ-инфекции в 1 и 2 группах больных, что позволило разработать дополнительные дифференциально-диагностические критерии ВИЧ-ассоциированного туберкулеза.

Ключевые слова: цитокины, растворимые рецепторы цитокинов, ВИЧ-инфекция, ВИЧ-ассоциированный туберкулез.

MarkelovaE.V., Sotnichenko S.A., SklyarL.F., SafronovA.E.

CHARACTERISTICS OF CYTOKINE PROFILE LEVEL (TNF, IL-6, IL-10) AND THEIR SOLUBLE RECEPTORS (sRp55 TNFa, sRp75 TNFa, sR IL-6) In The RATIENTs wITH HIv, HIv-AssoCIATED Tuberculosis AND PULMONARY TUBERCULOsIs

________________________________________________ Abstract. Three groups of patients were investigated

Адрес Для переписки: as follows: 1st group, HIV-infected patients, 2nd group,

Маркелова Елена Владимировна patients with HIV-associated tuberculosis, the 3rd group,

690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 2. persons with pulmonary tuberculosis. The amounts

Тел./факс: (4232) 45-07-00. of cytokines (TNFa, IL-6, IL-10) and their soluble

E-mail: patphis-vl@mail.ru receptors (SRp55 TNFa, SRp75 TNFa, SR IL-6) were

519

Маркелова Е.В. и др.

Медицинская Иммунология

evaluated in blood serum by solid-phase immuno-enzyme technique. The patients did not receive antiviral therapy before, or during the investigations. Some features are revealed reflecting a direction and significance of changes in immune reactivity of the patients. In the patients with tuberculosis, IL-10 and IL-6 levels were increased, along with pronounced rise of srIL-6, relatively low index of SRp75 TNFa and deficiency of SRp55 TNFa, associated with moderate increase in TNFa. In the patients with HIV and HIV-associated tuberculosis, the direction of alterations were found to be similar, except of IL-10, i.e., a hyper-production of TNFa and its soluble type I and II receptors, increased IL-6 level in combination with lack of its soluble receptor. Correlation analysis showed a strict dependence between TNFa and viral load in the patients with IYB and V stage of HIV, and HIV-associated tuberculosis that argues for significance of TNFa in pathogenesis of HIV-infection and its progression. We have found differential trends in dynamics of cytokines under study and their soluble receptors in the course of HIV-infection progression in the groups I and II of patients, that allowing us of elaborating additional diagnostic criteria of HIV-associated tuberculosis.

Введение

ВИЧ-инфекция и туберкулез — это две взаимосвязанные эпидемии, являющиеся ведущими инфекционными причинами смертности во всем мире [2, 4, 5, 6].

ВИЧ-индуцированная иммунодепрессия значительно повышает риск развития туберкулеза как вследствие реактивации латентной микобактериальной инфекции, так и свежего экзогенного заражения, особенно в ситуации широкого распространения туберкулезной инфекции в Российской Федерации. По мере прогрессирования ВИЧ-инфекции отмечается уменьшение числа и ослабление функции CD4-лимфoцитoв, вследствие чего иммунная система теряет способность предупреждать рост и локализовать распространение микобактерий туберкулеза. Именно поэтому при ВИЧ-инфекции наиболее часто встречаются диссеминированные, остро прогрессирующие формы туберкулезного процесса в легких, довольно высока частота его внелегочных форм, а также сочетание легочных и внелегочных поражений [1].

Данные исследований в этой области свидетельствуют, что эпидемия ВИЧ-инфекции влияет на эпидемию туберкулеза: во-первых, ВИЧ-инфекция увеличивает вероятность инфицирования Mycobacterium tuberculosis [10]. Во всем мире 7,65% из 8,6 миллиона ежегодно новых случаев туберкулеза регистрируется среди ВИЧ-инфицированных. Во-вторых, ВИЧ-инфекция способствует развитию активной формы туберкулеза у лиц ранее инфицированных М. tuberculosis. Также доказано, что ВИЧ-инфекция повышает риск рецидива туберкулеза, который, в свою очередь, является одной из ведущих причин смерти среди лиц, больных ВИЧ-инфекцией [1]. Причем как суперинфекция туберкулез развивается на ранних фазах ВИЧ-инфекции при относительно высоких показателях CD4+ клеток [10].

Сложный процесс взаимодействия возбудителей с организмом хозяина складывается из многих компонентов, основными из кото-

рых являются патогенные свойства возбудителя и способность иммунной системы адекватно реагировать на внедрение чужеродного агента.

ВИЧ-индуцированное подавление и потеря CD4+, вероятно, объясняют увеличенный риск активации микобактерий туберкулеза, а развитие коинфекции зависит от баланса между состоятельностью микробной агрессии и компетентностью иммунной системы у ВИЧ-инфицированных пациентов.

В настоящее время известно, что цитокины играют одну из важных ролей в иммунопатогенезе ВИЧ-инфекции [3, 8]. Они действуют в двух направлениях: как положительный и отрицательный фактор. В первом случае — сдерживание, а во втором — репликация вируса и нарушение регуляции иммунитета. Исследования цитокиновой регуляции механизмов развития туберкулезной инфекции у ВИЧ-инфицированных немногочисленны и нередко противоречивы [7, 9].

Целью настоящего исследования было охарактеризовать особенности цитокинового профиля больных ВИЧ-инфекцией, ВИЧ-ассоциирован-ным туберкулезом и туберкулезом легких.

Материалы и методы

Было обследовано 117 пациентов с ВИЧ-инфекцией (1 группа), 90 Больных с ВИЧ-ассоци-ированным туберкулезом (2 группа) и 32 человека с туберкулезом легких (3 группа). Диагноз ВИЧ-инфекции устанавливался на основании эпидемиологических, клинических и лабораторных данных. В соответствии с классификацией В.И. Покровского (2001) III стадия ВИЧ-инфекции была диагностирована у 23 больных (19,7%); IVA - у 21 (17,9%) Больных; IVb - у 33 чел. (28,2%); IVB - у 29 чел. (24,8%); V стадия - у 11 (9,4%) больных.

Диагноз туберкулеза устанавливался на основании комплексного клинико-рентгенологического, бактериоскопического и бактериологического исследований. У больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом III стадия

520

2008, Т. 10, № 6

Характеристика уровня цитокинов при ВИЧ-ассоциированном туберкулезе

ВИЧ-инфекции диагностирована у 14 чел. (15,6%); IVA стадия — у 22 чел. (24,4%); ГУБ стадия — у 24 чел. (26,7%); ГУВ стадия — у 20 чел. (22,2%); V стадия — у 10 чел. (11,1%). В структуре заболеваемости туберкулезом у Больных ВИЧ-инфекцией легочные формы диагностированы у 83 (92,2%) пациентов, внелегочные — у 7 (7,8%) Больных, при этом в 5 случаях отмечалось сочетание легочного и внелегочного процессов. Среди легочных форм ВИЧ-ассоциированного туберкулеза преобладали инфильтративный — 37 пациентов (44,6%) и диссеминированный — 28 (33,7%). Очаговый туберкулез обнаружен у 11 Больных (13,3%), фиброзно-кавернозный у 9 (10,8%) и милиарный туберкулез — у 5 (6%). У 2 Больных с изолированным внелегочным процессом наблюдался туберкулез периферических лимфатических узлов. При сочетанном легочном и внелегочном туберкулезе в 5 случаях определялся милиарный процесс. Все больные милиарным (5), а также 3 Больных с диссеминированным и 2 с инфильтративным туберкулезом легких были больны СПИДом (V стадией ВИЧ-инфекции).

Содержание цитокинов (TNFa, IL-6, IL-10) и их растворимых рецепторов (SRp55 TNFa, SRp75 TNF, SR IL-6) определяли в сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием реактивов «R&D Diagnostics 1пс.» (США). Расчеты количества цитокинов и их растворимых рецепторов проводили путем построения калибровочной кривой с помощью компьютерной программы и выражали в пг/мл.

Больные до начала и на момент исследования не получали противовирусной терапии. Контрольную группу составили 50 практически здоровых лиц того же возраста и пола. Результаты исследования обрабатывались с использованием программы «Биостат». Проверку нормальности выборок проводили с помощью оценок коэффициентов ассиметрии и эксцесса, а также критериев

и Колмогорова-Смирнова. При нормальном распределении переменных проверку гипотезы о равенстве выборочных средних выполняли с использованием t-критерия Стьюдента для зависимых и независимых выборок. Для оценки различий между зависимыми выборками применяли непараметрический критерий Вилкоксона. Различия считали достоверными при р < 0,05. Степень зависимости между различными параметрами внутри исследуемых групп оценивали с помощью ранговой корреляции Спирмена.

Результаты и обсуждение

В результате проведенных исследований выявлены значительные отличия цитокинового профиля у Больных анализируемых групп от показателей контроля. Установлена гиперпродукция как раннего (TNFa), так и позднего (IL-6) провоспалительных цитокинов, тогда как уровень противовоспалительного медиатора IL-10 статистически значимо не изменялся (табл. 1). Можно лишь отметить более высокие значения IL-10 в группе Больных туберкулезом (64,10±21,87 пг/мл против 14,43±1,25 пг/мл; p > 0,05) и существенный разброс индивидуальных

ТАБЛИЦА 1. УРОВЕНЬ ЦИТОКИНОВ И ИХ РАСТВОРИМЫХ РЕЦЕПТОРОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ РАЗНЫХ

ГРУПП и здоровых людей

Исследованные показатели M±m пг/мл Группы обследованных

Здоровые люди (n = 50) Обследованные больные

Туберкулезом

1 2 3

TNFa 0,95±0,32 10,52±5,96*** р1-2 < 0,001 108,58±18,62*** Р2-3 < 0,01 44,22±10,32*** Р1-3 < 0,01

SRp55 TNFa 390,11±38,04 167,50±43,33*** р1-2 < 0,001 770,12±20,02*** р2-3 > 0,05 766,57±10,32*** р1-3 < 0,001

SRp75 TNFa 2673,36±58,00 4902,16±565,89*** р1-2 < 0,001 8421,23±971,02*** р2-3 > 0,05 10887,45±851,32*** р1-3 < 0,001

IL-6 1,99±0,53 54,51±24,15* р1-2 > 0,05 18,46±7,35* р2-3 > 0,05 30,57±8,66** р1-3 > 0,05

SR IL-6 3120,00±18,00 4332,00±31,75*** р1-2 < 0,001 2812,00±30,66*** р2-3 < 0,001 2010,80±39,44*** р1-3 < 0,001

IL-10 14,43±1,25 64,10±21,87* р1-2 < 0,05 18,84±2,60 р2-3 > 0,05 26,39±3,11*** р1-3 > 0,05

Примечание. Статистическая достоверность различий с группой контроля: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001; р12,3 -сравниваемые группы.

521

Маркелова Е.В. и др.

Медицинская Иммунология

значений (от 0,12 пг/мл до 648,3 пг/мл), что отражает гетерогенность типов иммунного реагирования у этой категории больных. При этом среди больных анализируемых групп степень изменения цитокиновогопрофилябыларазличной. Наиболее высокий уровень TNFa регистрировался у больных с ВИЧ-инфекцией (108,58±18,62 пг/мл), он в 50-100 раз превышал показатели контрольной группы, в 10 раз — у больных туберкулезом и 2-3 раза — у больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом (р < 0,001-0,01). Полученные данные подтверждают мнение большинства авторов [8, 11, 18], что TNFa играет особую роль в патогенезе ВИЧ-инфекции, вызывая репликацию вируса иммунодефицита человека и горизонтальное распространение инфекции. Как уже отмечалось, содержание IL-6 в сыворотке крови больных было в 5-30 раз выше, чем в контрольной группе. Однако не выявлено статистически значимых отличий содержания IL-6 в сыворотке крови больных разных групп (табл. 1). В то же время уровень IL-10 был максимальным в группе больных туберкулезом и наиболее низким у пациентов с ВИЧ-инфекцией. Для суждения о состоянии баланса раннего и позднего провоспалительных цитоки-

Q Здоровые люди Щ Больные туберкулезом Q Больные ВИЧ-инфекцией Q Больные ВИЧ-ассоциированным туберкулезом

Рисунок 1. Соотношение про- и противовоспалительных цитокинов в крови больных разных групп

нов к противовоспалительному медиатору нами проведен расчет коэффициентов TNFa/IL-10 и IL-6/IL-10. Как видно на рисунке 1, у больных с ВИЧ-инфекцией преобладает продукция TNFa, у больных туберкулезом, напротив, позднего провоспалительного цитокина (IL-6), тогда как у пациентов с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом регистрируется одновременное, практически равнозначное повышение обоих коэффициентов. Как было показано ранее, все эти цитокины способны активировать процессы транскрипции генов ВИЧ-1 и экспрессию вирусных белков [15]. Это согласуется с мнением авторов, что изменение цитокинового профиля может быть значительно более сложным, чем первоначально предполагаемое простое перераспределение от Thl- к ТИ2-су6популяциям [13]. Полученные данные важны как для понимания особенностей патогенеза изучаемых инфекций, так и для практического здравоохранения в качестве критериев диагностики.

Как известно, реализация функциональной активности цитокинов происходит в результате их взаимодействия с соответствующими рецепторами на клетках-мишенях. Рецепторы цитокинов могут отделяться от клетки путем органического протеолиза (шеддинга) с появлением их в биологических жидкостях. Имеется два типа рецептора для TNFa. Рецептор 1-го типа (CD 120а) имеет молекулярную массу около 55 kDa (SRр55 TNFa), рецептор 2-го типа (CD 120в) - около 75 kDa ^р75 TNFa). Цитоплазматические домены этих рецепторов лишены сходства, что указывает на их различные сигнальные функции. Рецепторы TNFRI и TNFRII индуцируют в клетках разный ответ. Через рецептор 75 kDa TNFa стимулирует пролиферацию Т-клеток, через рецептор 55 kDa — индуцирует гибель клетки путем апоптоза. Растворимые рецепторы связывают TNF и действуют как ингибиторы его биологической активности [4].

В наших исследованиях установлено повышение количества растворимого рецептора TNFa II типа (SRр75) в сыворотке крови больных всех групп по сравнению с их уровнем в контроле (табл. 1). Наиболее высокие его значения зафиксированы при ВИЧ-ассоциированном туберкулезе (10887,45±851,32 пг/мл). Изменения показателей растворимых рецепторов TNFa I типа (SRр55) и SR IL-6 было не столь однозначным. У больных ВИЧ-инфекцией и ВИЧ-ассоциированным туберкулезом выявлено повышение уровня SRр55 TNFa и снижение количества SR IL-6 (р < 0,001). Тогда как у больных туберкулезом, напротив, зарегистрировано двухкратное, по сравнению с контрольной группой и в 3-5 раз по отношению к больным

522

2008, Т. 10, № 6

Характеристика уровня цитокинов при ВИЧ-ассоциированном туберкулезе

ВИЧ-инфекцией и ВИЧ-ассоциированным туберкулезом снижение SR TNFa I типа и статистически значимое увеличение SR IL-6. Выявленная разнонаправленная динамика уровня растворимых рецепторов позволила разработать дополнительные дифференциально-диагностические критерии туберкулеза и ВИЧ-инфекции.

Учитывая, что клинические проявления и показатели клеточного иммунитета зависят от стадии ВИЧ-инфекции, нами проведен анализ уровня цитокинов и их растворимых рецепторов в группах с разной стадией ВИЧ-инфекции. Результаты позволили констатировать, что как у больных ВИЧ-инфекцией, так и у пациентов с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом гипер-цитокинемия коррериловала с тяжестью перси-стирующей инфекцией (табл. 2-5). Показано, что TNFa способствует вирусной репликации и, следовательно, гибели CD4+ иммуноцитов. Кроме того, TNFa подает сигнал смерти через рецептор TNFa I типа (р55) и Fas-антиген (Аро-1, CD95+), инициируя каскад реакций, приводящих к апоптозу CD4+ клеток [17]. Большое значение имеют характеристики возбудителя, в частности существование штаммов с разной патогенностью, с менее выраженной способностью к репродукции и низкой вирусной нагрузкой [6]. Проведенный корреляционный анализ между уровнем цитокинов и величиной вирусной нагрузки (ВН) показал наличие сильной прямой зависимости между уровнем TNFa и ВН у больных IVB и V стадиями ВИЧ-инфекции (г = 0,73; р < 0,05 и г = 0,81; р < 0,05) и ВИЧ-ассоциированного туберкулеза (г = 0,78; р < 0,05; г = 0,83; р < 0,05 соответственно). Известно, что TNFa оказывает наиболее сильное воздействие на ВИЧ-экспрессию в хронически инфицированных клетках в постинтегративной фазе жизненного цикла вируса [3]. Полученные нами результаты подтверждают важную роль TNFa в патогенезе ВИЧ-инфекции и ее прогрессировании. Высокий уровень IL-6 у больных ВИЧ-инфекцией IVA-V стадий, а у больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом с IVE-V стадиями свидетельствует о выраженности острофазного ответа и об ослаблении у них функциональной активности Т-хелперов I типа, что способствует прогрессии ВИЧ-инфекции [16]. Существует гипотеза, согласно которой при ВИЧ-инфекции постоянно циркулирует IL-6. Этот провоспалительный цитокин опосредованно (через активацию моноцитов и Т-хелперов) используется вирусом для усиления своей репликации и играет ключевую роль в обеспечении В-клеточной активации при ВИЧ-инфекции [15].

По мере прогрессирования заболевания в двух анализируемых группах отмечен разнонаправленный характер изменений уровня рас-

творимых рецепторов TNFa II типа и SR IL-6. У больных с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом уже в бессимптомной стадии (III ст.) уровень SR TNFa II типа в 1,5 раза превышал значения в крови больных ВИЧ-инфекцией (8223,33± 347,80 пг/мл против 5940,84±346,80 пг/мл, р < 0,05) с последующей аналогичной динамикой в IVA-IVE стадиях. Тогда как в V стадии ВИЧ-инфекции зафиксирована противоположная закономерность: у больных терминальной стадией ВИЧ содержание SRp75 TNFa возрастало (р > 0,05), в то время как у больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом, напротив, вдвое снижалось (11047,82± 486,00 пг/мл против 6426,54±424,52 пг/мл соответственно, р < 0,01). Полученные данные согласуются с результатами о раннем (уже в бессимптомной стадии) увеличении растворимого рецептора TNFa II типа и нарастании его содержания при прогрессировании ВИЧ-инфекции [11, 12]. B терминальной стадии ВИЧ-ассоциированного туберкулеза, вероятно, происходит истощение его продукции, что может свидетельствовать о глубоких нарушениях функции Т-клеток.

Уровень растворимого рецептора IL-6 в сыворотке крови больных ВИЧ-инфекцией был максимально высоким в бессимптомную стадию, снижаясь в 3 раза в IVE и IVB стадии, с последующим увеличением в стадию СПИДа (табл. 2, 3). B то время как у больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом в III стадии определялся дефицит SR IL-6 с нарастанием уровня в IVE и IVB стадиях и значительным (в 2 раза) снижением в V стадию ВИЧ-инфекции (табл. 4, 5).

При анализе уровня IL-10 в сыворотке крови больных с разными стадиями ВИЧ-инфекции выявлено статистически значимое (р < 0,001) снижение его содержания в III и IVA стадиях, тенденция к увеличению в IVB стадии и достоверно увеличение IL-10 в стадии СПИДа (V стадии). Тогда как у больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом содержание IL-10 в сыворотке крови было повышенным на всех стадиях ВИЧ-инфекции с наиболее высокими значениями в IVE и IVB стадиях (табл. 4). Полученные данные подтверждают мнение авторов, показавших, что доля клеток, продуцирующих IL-10, наиболее высока у пациентов с клиническими проявлениями ВИЧ-инфекции [8, 15].

Проведенное исследование позволило выявить целый ряд особенностей, отражающих вектор изменений иммунореактивности обследуемых. У больных туберкулезом на фоне умеренного повышения TNFa зарегистрировано увеличение IL-10 и IL-6, значительное нарастание SR IL-6, относительно более низкие показатели SRp75 TNFa и дефицит SRp55 TNFa.

523

ТАБЛИЦА 2. УРОВЕНЬ ЦИТОКИНОВ И ИХ РАСТВОРИМЫХ РЕЦЕПТОРОВ У БОЛЬНЫХ С РАЗНЫМИ СТАДИЯМИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Исследованные показатели М±т пг/мл Исследуемые группы

Больные ВИЧ-инфекцией, n = 117

III СТ. IVA ct. IVB ct. IVB ct. V ct.

TNFa 160,20±34,23*** 79,01±26,08** 48,00±7,43*** 58,97±7,09*** 104,09±3,63***

SRp55TNFa 800,00±0,50*** 748,77±37,08*** 770,46±57,37*** 703,40±37,84*** 673,30±58,66***

SRp75TNFa 5940,84±346,80*** 5045,00±689,36*** 6475,90± 1420,00** 9862,26±246,62*** 11047,82±486,00***

IL-6 2,55± 1,27 6,70±1,82*** 9,34±2,80*** 31,13±10,99** 19,66±4,10***

SR IL-6 5530,00±60,00*** 2975,50±24,65** 1232,60±356,80*** 1471,80±565,10** 2848,50±176,00

IL-10 5,62±0,80*** 4,91 ±0,01 *** 11,57±5,25 41,33±15,56 46,11 ±10,50***

Примечание. Статистическая достоверность различий с группой контроля: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001.

ТАБЛИЦА 3. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ДОСТОВЕРНОСТЬ РАЗЛИЧИЙ УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ И ИХ РАСТВОРИМЫХ РЕЦЕПТОРОВ У БОЛЬНЫХ С РАЗНЫМИ СТАДИЯМИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Исследованные показатели Статистическая достоверность различий между группами

Р1-Р2 Pl-Рз Р1-Р4 Р1-Р5 Рг-Рз Р2-Р4 Р2-Р5 РЗ-Р4 Рз-Рз Р4-Р5

TNFa > 0,05 < 0,01 < 0,01 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,001 < 0,001

SRp55TNFa > 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05

SRp75TNFa > 0,05 > 0,05 < 0,001 < 0,001 > 0,05 < 0,001 < 0,001 < 0,05 < 0,01 > 0,05

IL-6 > 0,05 < 0,05 < 0,01 < 0,001 > 0,05 < 0,05 < 0,001 > 0,05 < 0,05 > 0,05

SR IL-6 < 0,001 < 0,001 < 0,01 < 0,001 < 0,001 < 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,01 < 0,05

IL-10 > 0,05 > 0,05 < 0,05 < 0,01 > 0,05 < 0,001 < 0,001 > 0,05 < 0,01 > 0,05

Примечание. р15 - стадии ВИЧ-инфекции, где р, - III, р2 - IVA, р3 - IV5, р4 - IVB, р5 - Vстадия.

ТАБЛИЦА 4. УРОВЕНЬ ЦИТОКИНОВ И ИХ РАСТВОРИМЫХ РЕЦЕПТОРОВ У БОЛЬНЫХ С РАЗНЫМИ СТАДИЯМИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ

Исследованные показатели М±т, пг/мл Исследуемые группы

Больные ВИЧ-ассоциированным туберкулезом, п = 90

III ст. IVA ст. IVB ст. IVB ст. V ст.

TNFa 9,05±4,38 5,69±2,05* 37,31 ±20,64 59,70±27,25* 88,38± 12,58***

SRp55TNFa 750,30±49,67*** 800,00±10,00*** 677,30±34,03*** 772,80±24,73*** 712,10±56,08***

SRp75TNFa 8223,33±347,80*** 8667,35±964,80*** 10052,41±1242,31*** 11863,22±624,55*** 6426,54±424,52***

IL-6 3,18± 1,08 3,03±1,78 25,25±8,59** 33,23±12,84* 45,34±11,26**

SR IL-6 1492,00±45,31 *** 2515,40±245,20** 4589,50±281,80*** 4583,40±349,10*** 2178,30±127,90***

IL-10 20,00± 1,15** 18,64±4,82 29,57±4,59** 33,12±5,06** 19,22±1,99*

Примечание. Статистическая достоверность различий с группой контроля: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001.

Маркелова Е.В. и др. Медицинская Иммунология

2008, Т. 10, № 6

Характеристика уровня цитокинов при ВИЧ-ассоциированном туберкулезе

к

5

I—

_о

х

со

<

Q.

О

X

_о

х

_а

О

LQ

>

ш

о

Q.

О

Q.

X

_о

о.

О

ш

к

<

Q.

X

ш

о

о

СЕ

СО

О X g- S

сц о

S3 «

С ш Q- с

о

LQ

m О О >S I— О О I О I =1 < пт 0Q < О 55 а. о s ш s з- 3"

Е °

I— О О о

Е <

« 3-

If) ^

ZL ш

S е

ш з-

< S I- 0Q

Статистическая достоверность различий между группами GL 1 Tf О. Ю o o' Л ю о о~ Л о о о~ Л LO О о" Л о о" V LO о о~ Л

CL i О. LO о о" Л LO о о" Л LO о о" V ю о о~ Л о о о~ V LO о о" Л

Tf Q. i Q. Ю о о" Л LO о о~ V о о о" V LO о о" Л LO о о" Л LO о о" Л

cl i 6 о о о~ V LO о о" Л ю о о~ V о о~ V LO о о" Л ю о о~ Л

Tt Q. i 6 LO о о" Л LO о о" Л о о" V LO о о" V о о~ V LO о о" V

Q. i 6 LO о о" Л о о~ V LO о о~ Л о о" V о о о" V LO о о~ Л

cl i d о о о~ V LO о о" Л LO о о" V LO о о~ V о о" V LO о о" Л

Tt Q. i d LO о о" Л LO о о~ Л о о о" V LO о о" V о о о~ V LO о о" V

Q. i d LO о о~ Л LO о о" Л ю о о~ Л о о" V о о о" V ю о о~ V

6 i d LO о о" Л LO о о" Л LO о о" Л ю о о~ Л о о о~ V LO о о" Л

Исследованные показатели а LL ~z. н а LL ~z. н ю ю О. а. ю а LL ~z. н ю в- Q. а. ю со со С0 о

ч

сб

>

I

СО

>

I

О.

LD

>

g

I

qI

I

d

а>

s

z

а

г

а>

2

s

а

В группах больных ВИЧ-инфекцией и ВИЧ-ассоциированным туберкулезом в целом, за исключением IL-10, направленность изменений была однотипной: гиперпродукция TNFa и его растворимых рецепторов I и II типа, увеличение уровня IL-6 на фоне недостатка его растворимого рецептора, тогда как содержание IL-10 было повышенным только у больных с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом. Следует отметить также и различия в степени выраженности указанных изменений. В бессимптомной стадии ВИЧ-ассоциированного туберкулеза в крови выявлено значительное повышение растворимого рецептора II типа TNFa, дефицит растворимого рецептора IL-6 и увеличение IL-10. Уровень TNFa < 20 пг/мл, SR IL-6 < 2000 пг/мл и SR II TNFa > 7000 пг/мл являются дополнительными дифференциально-диагностическими признаками бессимптомной стадии ВИЧ-ассоциированного туберкулеза, тогда как у больных ВИЧ-инфекцией в бессимптомную стадию зарегистрирована гиперпродукция TNFa, дефицит IL-10, резкое увеличение растворимого рецептора IL-6 и относительно меньшее нарастание SR II TNFa.

По мере прогрессирования ВИЧ-инфекции нарастал уровень TNFa, SR II типа TNFa, IL-6 и снижался (в ГУБ и ГУВ стадиях) SR IL-6, количество IL-10 возрастало только в терминальную стадию. У больных ВИЧ-ассоциированным туберкулезом при прогрессировании инфекции до ГУВ стадии возрастало содержание TNFa, его растворимого рецептора II типа, IL-6, IL-10 и SR IL-6. Тогда как в терминальной стадии ВИЧ-ассоциированного туберкулеза зарегистрировано относительное снижение растворимого рецептора TNFa II типа, IL-10 и растворимого рецептора IL-6 по сравнению с больными ВИЧ-инфекцией аналогичной стадии.

Выявленные различия иммунной реактивности больных разных групп позволяют разработать дополнительные критерии дифференциальной диагностики на разных стадиях ВИЧ-инфекции, ВИЧ-ассоциированного туберкулеза и прогноза течения болезни.

Список литературы

1. Бородулин Б.Е., Бородулина Е.А., Куликова И.И., Курбатова Е.В. Марченко Г.Р., Калин-кин А.В. Туберкулез у ВИЧ-инфицированных в крупном промышленном центре // Пульмонология. - 2007. - № 2. - С. 56-58.

2. Ермак Т.Н., Кравченко А.В., Груздев Б.М. Вторичные заболевания у больных ВИЧ-инфекцией — 15-летнее наблюдение // Тер. архив. — 2004. — № 4. — С. 18-20.

525

Маркелова Е.В. и др.

Медицинская Иммунология

3. Козлов В.К., Егорова В.Н. Патогенез ВИЧ-инфекции. Возможности иммунотерапии цитокинами. — СПб., 2001. — 32 с.

4. Назаров П.Г. Реактанты острой фазы. — СПб.: Наука, 2001. - 423 с.

5. Покровский В.В., Ладная Н.Н., Соколова Е.В., Юрин О.Г. Эпидемиология ВИЧ-инфекции в Российских регионах в 2004 г. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2005. — № 10. — С. 3-13.

6. Рахманова А.Г. ВИЧ-инфекция. Клиника и лечение. — СПб.: ССЗ, 2000. — 370 с.

7. Соколова Ю.В., Сизякина Л.П. Особенности секреции цитокинов и их рецепции в динамике ВИЧ-инфекции // Иммунология. — 2007. — № 7. — С. 324-327.

8. Смольникова М.В., Прокофьев В.Ф., Сизякина Л.П. Аллельные варианты генов IL-4, IL-10 и TNFa при ВИЧ-инфекции // Цитокины и воспаление. — 2002. — Т 1, № 1. — С. 29-32.

9. Хонина Л.Б., Никонов С.Д., Шпилевский С.В. Особенности иммунитета у больных различными формами туберкулеза легких // Проблемы туберкулеза. — 2000. — № 1. — С. 30-32.

10. Aliyu М.Н., Salihu Н.М. Tuberculosis and HIV coinfection — a symbiotic relationship // Eur. J. Med. — 2004. — Vol. 115. — P 685-697.

11. Aziz N., Nishanian P., Taylor J.M., Hallahan G., Chang N.K. Stability of plasma levels of cytokines and soluble activation markers in patients with human immunodeficiency virus infection. // J. Infect. Dis. — 1999. — Vol. 179, N 4. — P 843-848.

12. Fahry J.L., Taylor J.M., Manna B. Prognostic significance of plasma markers og immune activation, HIV viral load and CD4 T-cell measurements // AIDS. — 1998. — Vol. 12, N 13. — P 1581-1590.

13. Fakoya A., Matear P.M., Filley E. HIV infection alters the production of both type 1 and 2 cytokines but does not induce a polarized type 1 or 2 state // AIDS. — 1997. — Vol. 11, N 12. — P 1445-1452.

14. Ferbas J. Perspectives on the role of CD8+cell suppressor factors and cytotoxic T-lymphocytes during HIV infection // AIDS Res. Hum. Retrovir. — 1998. — Vol. 14, suppl. 2. — P 153-160.

15. Klein S.A., Dobmeyer J.M. Demonstration of the Thl to Th2 cytokine shift during the course of HIV-I infection using cytoplasmic cytokine detection on single cell level by flow cytometry // AIDS. —

1997. — Vol. 11, N 9. — P 1111-1118.

16. Lafeuillade A., Poizot-Martin I., Quilichini R. Increased IL-6 production is associated with disease progression on HIV infection // AIDS. — 1991. — Vol. 5, N 9. — P 1139-1140.

17. Saile Mih B., Ramodori FJ. Apoptosis // Mediana Viral Join. — 2003. — Vol. 69, N 1. — P 50-58.

18. Shearer G.M, Clerici M. Cytokine profiles in HIV type 1 desease and protection // AIDS Res. Human Retrovir. — 1998. — ЛЫ. 14, suppl. 2. — P 149-152.

поступила в редакцию 08.07.2008 отправлена на доработку 15.08.2008 принята к печати 05.10.2008

526