ПРОИЗВОДНЫЕ БЕНЗО[1,3]ДИОКСИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ LPAR5 АНТАГОНИСТОВ
BENZO[1,3]DIOXIN DERIVATIVES AND THEIR USE AS LPAR5 ANTAGONISTS

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I,
1
5
1
2
где остатки A, R-R, Z и Z принимают значения, определенные ниже. Соединения формулы I являются ценными фармакологически активными соединениями для применения в лечении различных нарушений. Соединения формулы I проявляют сильное противоагрегатное действие на тромбоциты и, таким образом, антитромботическое воздействие, и подходят, например, для лечения и профилактики сердечно-сосудистых нарушений, таких как тромбоэмболические заболевания или рестенозы. Кроме того, соединения формулы I ингибируют LPA-опосредуемую активацию тучных клеток и микроглиоцитов. Соединения по настоящему изобретению являются антагонистами LPA рецептора LPAR5 (GPR92) тромбоцитов и, как правило, могут применяться при состояниях, в которых имеет место нежелательная активация LPA рецептора LPAR5 тромбоцитов, LPA рецептора LPAR5 тучных клеток или LPA рецептора LPAR5 микроглиоцитов, или для лечения или предотвращения которых желательно ингибирование LPA рецептора LPAR5 тромбоцитов, тучных клеток или микроглиоцитов. Кроме того, изобретение относится к способам получения соединений формулы I, их применению, в частности, в качестве активных ингредиентов в лекарственных средствах, и к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения.
В промышленно развитых странах тромботические осложнения являются одной из основных причин смерти. Примеры состояний, связанных с патологическим образованием тромба, включают тромбоз глубоких вен, венозную и артериальную тромбоэмболию, тромбофлебит, коронарный и церебральный артериальный тромбоз, эмболию сосудов головного мозга, почечную эмболию, легочную эмболию, дессименированное внутрисосудистое свертывание, преходящие ишемические нарушения мозгового кровообращения, инсульты, острый инфаркт миокарда, заболевание периферических сосудов, преэклампсию/эклампсию и тромбоцитопеническую пурпуру. Также во время или после инвазивных процедур, включая введение эндоваскулярных устройств и протезов, каротидной эндартерэктомии, ангиопластики, хирургической операции CABG (аортокоронарного шунтирования), хирургической пересадки сосудов и размещений стента, могут возникать тромботические осложнения и рестенозные осложнения.
Агрегация тромбоцитов играет важную роль в этих внутрисосудистых тромботических явлениях. Тромбоциты могут активироваться с помощью медиаторов, высвобождаемых из циркулирующих клеток и поврежденных эндотелиальных клеток, выстилающих сосуд, или поврежденных молекул субэндотелиальной матрицы, таких как коллаген, лизофосфатидиловая кислота или тромбин, который образуется в каскаде коагуляции. После активации, тромбоциты, которые обычно свободно циркулируют в сосудистой сети, и другие клети накапливаются в месте повреждения сосуда с образованием тромба и вовлекают больше тромбоцитов в образующийся тромб. Во время этого процесса тромбы могут расти до размера, достаточного для частичного или полного блокирования артериальных кровеносных сосудов. В венах в областях застоя или медленного кровотока также могут образовываться тромбы. Эти венозные тромбы могут образовывать эмболы, которые перемещаются по кровеносной системе, поскольку от них легко отделяются их части. Такие «странствующие» эмболы могут блокировать другие сосуды, такие как легочные или коронарные артерии, что может привести к указанным выше патологическим последствиям, таким как легочная или коронарная эмболия. Таким образом, при венозных тромбах возникновение заболевания и смертность являются результатом, прежде всего, эмболизации или удаленной закупорки сосудов, в то время как артериальные тромбы вызывают серьезные патологические состояния посредством локальной закупорки.
2
2
-/-
+/-
Лизофосфатидиловая кислота (LPA) является важным биологически активным фосфолипидом с широким диапазоном клеточных функций. Уровни содержания LPA тонко регулируются с помощью ее синтеза, контролируемого двумя различными путями. Первый включает активность фосфолипазы D (PLD) и фосфолипазы А2 (PLA), второй включает активности PLA и лизофосфолипазы D (lysoPLD). Наиболее часто используемой в лабораторной практике LPA является 18:1 LPA (1-ацил-2-гидрокси-sn-глицеро-3-фосфат). Тем не менее, в организме существуют многие другие формы LPA с различной длиной цепи жирных кислот, различными степенями насыщения и связывающие цепь жирной кислоты с цепью глицерина, т.е. сочетанием через сложноэфирную связь или связь простого эфира (Choi et al., Ann Rev Pharmacol Toxicol (2010), 50, 157-186). Ключевым ферментом для синтеза LPA является аутотаксин (ATX), Enpp2 у мышей. Было показано, что ATX обладает lysoPLD активностью и что Εnpp2 мыши погибают внутриутробно на 9,5 день. Εnpp2 мыши показывают пониженные уровни LPA в плазме (van Meeteren et al., Mol Cell Biol (2006), 26, 5015-5022). LPA проявляет свои внеклеточные биологические эффекты посредством связывания с G-белок-связанными рецепторами. До настоящего времени было идентифицировано пять различных рецепторов LPA: LPAR1 (EDG2), LPAR2 (EDG4), LPAR3 (EDG7), LPAR4 (GPR23) и LPAR5 (GPR92). Все описанные рецепторы LPA относятся к классу А (родопсин-подобный класс) G-белок связанных рецепторов (GPCR).
-/-
q
S
LPAR5 был идентифицирован в ганглиях заднего корешка спинного мозга мыши и человека, и у LPAR5 мышей было выявлено снижение восприятия боли (Oh et al., J. Biol. Chem. (2008), 283, 21054-21064; Kinloch et al., Expert Opin. Ther. Targets (2005), 9, 685-698). Связывание LPAR c различными субъединицами G-белка в клетках различных типов во взаимодействии с дифференциальной экспрессией различных LPA рецепторов на той же клетке является основной причиной большого разнообразия биологических эффектов LPA. Влияние LPA на активацию тромбоцитов человека было описано в начале 1980-х годов. Было установлено, что 1-O-алкил-sn-глицеро-3-фосфат (алкил-LPA) является более мощным активатором тромбоцитов по сравнению с олеоил-LPA (Simon et al., Biochem Biophys Res Commun (1982), 108, 1743-1750). Дальнейшие исследования показали, что так называемый рецептор алкил-LPA не является рецептором LPA ни EDG-типа, ни GPR23 (Tokumura et al., Biochem. J. (2002), 365, 617-628; Noguchi et al., J. Biol. Chem. (2003), 278, 25600-25606; Khandoga et al., J. Thromb. Haemost. (2007), 5 Supplement 2: P-M-246 (ISTH 2007)). В клеточной линии гепатомы крысы RH7777 при временной экспрессии LPAR5 может активироваться более сильно с помощью алкил-LPA, чем ацил-LPA (Williams et al., J. Biol. Chem. (2009), 284, 14558-14571). Эти данные соответствовали LPA-опосредуемой активации, наблюдаемой для тромбоцитов человека, при которой функциональное действие алкил-LPA с точки зрения агрегации тромбоцитов является более выраженным, чем действие ацил-LPA. Кроме того, LPA-рецепторы LPAR4 и LPAR5 являются высоко экспрессированными тромбоцитами человека (Amisten et al., Thromb. Res. (2008), 122, 47-57). В отличие от LPAR5, который связывается с G, LPAR4 связывается с G и, следовательно, может исключаться из участия в LPA-опосредуемой активации тромбоцитов человека. Поэтому, как обсуждалось, LPAR5 является основным LPA-рецептором, ответственным за LPA-опосредованную активацию в тромбоцитах человека (Khandoga et al., Platelets (2008), 19, 415-427). Высокая экспрессия LPAR5 в линиях тучных клеток человека была показана, например, Lundequist (Lundequist, J. Allergy Clin. Immunol. (2008), 121, Suppl. 1, Abstr. 518) и последующими исследованиями.
Тучные клетки являются частью иммунной системы и генерируются в качестве клеток-предшественников в костном мозге, дифференциирующихся до зрелых тучных клеток в хоминг-ткани. Тучные клетки участвуют в различных патофизиологических процессах от антимикробной защиты до анафилаксии и воспалительного артрита и, поэтому, как обсуждалось, связаны с аллергическими реакциями. При активации тучные клетки подвергаются дегрануляции и высвобождают множество медиаторов (цитокинов, таких как TNFa, MCP-1, Rantes) в интерстиций. Это указывает на прямой вклад тучных клеток в невропатическую боль посредством высвобождения алгогенных медиаторов после дегрануляции.
Помимо рассмотренной выше роли тучных клеток широкий спектр функций тучных клеток объясняет, почему тучные клетки кроме аллергических реакций вовлечены в различные патологии, связанные с патологиями с воспалительным компонентом. Эти заболевания включают, среди прочих, гипералгезию, астму, рассеянный склероз и ангиогенез (Zuo et al., Pain (2003), 105, 467-479; Toews et al., Biochim. Biophys. Acta (2002), 1582, 240-250; Norby, APMIS (2002), 110, 355-371). Лечение тучных клеток человека линии LAD2 короткой шпилечной РНК, нацеленной на LPAR5, снижает экспрессию LPAR5 и ослабляет ΜΙΡ-1β после активации LPA (Lundequist, J. Allergy Clin. Immunol. (2008), 121, Suppl. 1, Abstr. 518).
Анализы профиля LPA рецептора в микроглиоцитах мыши линии BV-2 подтвердили высокую экспрессию LPAR5 в микроглиоцитах, которые подобны тучным клеткам клеточной популяции воспалительного системы. Выявление того, что LPAR5 экспрессируется с высоким уровнем не только в тучных клетках, но и в микроглиоцитах, подчеркивает важную роль LPAR5 в развитии и прогрессировании воспалительных расстройств, таких как гипералгезия, астма, рассеянный склероз, ангиогенез и другие.
Дальнейшие эксперименты подтвердили, что в тромбоцитах человека, тучных клетках человека и микроглиоцитах LPAR5 является ключевым LPA-рецептором, ответственным за LPA-опосредуемую активацию. Ввиду важности LPAR5 для различных болезненных состояний существует потребность в соединениях, которые эффективно ингибируют LPAR5 и, как следствие, ингибируют, например, активацию тучных клеток или активацию тромбоцитов в патологических условиях, обеспечивая новые терапевтические возможности лечения расстройств. Таким образом, задачей настоящего изобретения является предоставление LPAR5 антагонистов, которые являются антагонистами действия эндогенной LPA на ее LPAR5 рецептор и обладают дополнительными полезными свойствами, например стабильностью в плазме и печени и селективностью по сравнению с другими рецепторами, агонизм или антагонизм к которым нежелателен. Эта задача достигается, согласно настоящему изобретению, предоставлением производных бензо[1,3]диоксина формулы I, которые обладают превосходной антагонистической активностью в отношении LPAR5, являются благоприятными агентами с высокой биодоступностью и могут применяться для ингибирования агрегации тромбоцитов и лечения, например, тромбоэмболических заболеваний.
1
2
1
2
1
2
1
3
1
3
В GB 2022579 и в публикации D. Humbert et al., Eur. J. Med. Chem. (1983), 18, 67-78 описаны некоторые 4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновые кислоты и их алкиловые эфиры, в которых одна из групп, соответствующих группам Z и Z в соединениях формулы I, может представлять собой водород, алкил, содержащий до шести атомов углерода, или циклогексил, и другая может представлять собой водород, алкил, содержащий до шести атомов углерода, циклогексил или фенил, где фенильная группа, а также бензольный фрагмент в бензо[1,3]диоксиновой кольцевой системе, независимо друг от друга, являются незамещенными или замещены одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из галогена, трифторметила, циклогексила, (C-С)алкил-O-, (C-C)алкила и пара-хлорфенокси. Конкретными соединениями, в которых одна из групп, соответствующих Z и Z, представляет собой циклогексил, являются 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота и ее метиловый эфир, и 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота. Для некоторых соединений, описанных в GB 2022579 и в указанной публикации Д. Гумберта с соавторами, в которых группы, соответствующие Z и Z, не являются циклогексилом, представлены данные, которые показывают их гипотриглицеридемическую и гипохолестенемическую активность, и благодаря которым соединения рассматриваются как полезные при лечении гиперлипемии. Активность соединений в отношении агрегации тромбоцитов не раскрыта и не предполагается ни в GB 2022579, ни в публикации Д. Гумберта с соавторами. Другие 4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновые кислоты и их производные описаны, например, в публикации J.A. Turner et al., J. Agric. Food Chem. (2002), 50, 4554-4566 и представляют собой гербицидные ингибиторы ацетил-кофермента А карбоксилазы, или в патенте США 4056540 и представляют собой соединения, обладающие противосудорожной и противоаритмической активностью.
Объектом настоящего изобретения являются соединения формулы I в любой из их стереоизомерных форм или смесь их стереоизомерных форм в любом соотношении и их фармацевтически приемлемые соли:
где
11
12
13
1
А выбран из группы, состоящей из R-O-C(O)-, R-N(R)-C(O)- и Het;
1
2
3
4
2
14
15
3
11
12
3
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
n
n
2
2
1
4
1
4
1
4
R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, (C-C)алкила, Ar-(C-C)алкила-, Ar, Het, (C-C)алкил-С(O)-, Ar-С(O)-, циано, R-N(R)-C(O)-, Het-C(O)-, гидроксигруппы, (C-C)алкил-O-, Ar-О-, Ar-(C-C)алкил-O-, (C-C)алкил-S(O)-, Ar-S(O)-, R-N(R)-S(O)-, Het-S(O)-, (C-C)алкил-NH-, ди((C-C)алкил)N-, Ar-NH- и Ar-N((C-C )алкил)-,
1
2
2
3
3
4
1
4
1
4
1
4
n
1
4
и или R и R, или R и R, или R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, могут образовывать карбоциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из бензола и 5-7-членного циклоалкана, где бензольное кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, циано, (C-C)алкил-O- и (C-C)алкил-S(O)-, и циклоалкановое кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
5
1
4
R выбран из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
11
12
13
14
15
1
4
R, R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
1
2
3
8
1
8
3
8
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
n
одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из водорода, (C-С)алкила, (С-С)циклоалкила и фенила, где все циклоалкильные группы, независимо друг от друга, являются незамещенными или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора, (C-C)алкила и (C-C)алкил-O-, и фенильная группа является незамещенной или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, циано, (C-C)алкил-O- и (C-C)алкил-S(O)-;
1
4
1
4
1
4
n
Ar представляет собой фенил или ароматический 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, и все указанные группы являются незамещенными или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, циано, (C-C)алкил-O- и (C-C)алкил-S(O)-;
1
1
4
Het представляет собой частично ненасыщенный или ароматический 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один-четыре одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, который присоединен через атом углерода кольца и является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из (C-C)алкила, гидроксигруппы и оксогруппы;
2
1
4
Het представляет собой насыщенный 4-7-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, который присоединен через атом углерода кольца или атом азота кольца и является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
3
3
1
4
Het представляет собой насыщенный 4-7-членный моноциклический гетероцикл, содержащий в кольце атом азота, через который Het присоединяется, и не содержит или содержит в кольце один дополнительный гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атомов N, О и S, и указанный гетероцикл является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
n выбран из целых чисел 0, 1 и 2;
где все алкильные группы являются незамещенными или замещены одним или несколькими фторсодержащими заместителями;
при условии, что соединение формулы I не является 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислотой, метиловым эфиром 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты или 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислотой.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы I, где
11
12
13
1
А выбран из группы, состоящей из R-O-C(O)-, R-N(R)-C(O)- и Het;
1
2
3
4
2
14
15
3
11
12
3
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
n
n
2
2
1
4
1
4
R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, (C-C)алкила, Ar-(C-C)алкила-, Ar, Het, (C-C)алкил-С(O)-, Ar-С(O)-, R-N(R)-C(O)-, Het-(O)-, (C-C)алкил-O-, Ar-О-, Ar-(C-C)алкил-O-, (C-C)алкил-S(O)-, Ar-S(O)-, R-N(R)-S(O)-, Het-S(O)-, (C-C)алкил-NH- и ди((C-C)алкил)N-,
1
2
2
3
3
4
1
4
1
4
и или R и R, или R и R, или R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, могут образовывать карбоциклическое кольцо, которое выбрано из группы, состоящей из бензола и 5-членного или 6-членного циклоалкана, где бензольное кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила, и циклоалкановое кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
5
1
4
R выбран из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
11
12
13
14
15
1
4
R, R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
1
2
3
8
1
8
3
8
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
n
одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из водорода, (C-С)алкила, (С-С)циклоалкила и фенила, где все циклоалкильные группы, независимо друг от друга, являются незамещенными или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора, (C-C)алкила и (C-C)алкил-O-, и фенильная группа является незамещенной или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, циано, (C-C)алкил-O- и (C-C)алкил-S(O)-;
1
4
1
4
1
4
n
Ar представляет собой фенил или ароматический 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, и все указанные группы являются незамещенными или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, циано, (C-C)алкил-O- и (C-C)алкил-S(O)-;
1
1
4
Het представляет собой частично ненасыщенный или ароматический 5-членный моноциклический гетероцикл, который содержит один-четыре одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, который присоединен через атом углерода кольца и является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из (C-C)алкила, гидроксигруппы и оксогруппы;
2
1
4
Het представляет собой насыщенный 4-7-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, который присоединен через атом углерода кольца или атом азота кольца и является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
3
3
1
4
Het представляет собой насыщенный 4-7-членный моноциклический гетероцикл, содержащий в кольце атом азота, через который Het присоединяется, и не содержит или содержит в кольце один дополнительный гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атомов N, О и S, и указанный гетероцикл является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
n выбран из целых чисел 0, 1 и 2;
где все алкильные группы являются незамещенными или замещены одним или несколькими фторсодержащими заместителями;
и ко всем их стереоизомерным формам и смесям стереоизомерных форм в любом соотношении, и к их фармацевтически приемлемым солям.
В еще одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы I, где
11
1
А выбран из R-O-C(O)- или Het;
1
2
3
4
2
14
15
3
11
12
3
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
2
2
1
4
1
4
R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, (C-C)алкила, Ar-(C-C)алкила-, Ar, Het, (C-C)алкил-С(O)-, Ar-С(O)-, R-N(R)-C(O)-, Het-C(O)-, (C-C)алкил-O-, Ar-О-, Ar-(C-C)алкил-O-, R-N(R)-S(O)-, Het-S(O)-, (C-C)алкил-NH- и ди((C-C)алкил)N-,
1
2
2
3
3
4
1
4
1
4
и или R и R, или R и R, или R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, могут образовывать карбоциклическое кольцо, выбранное из группы, состоящей из бензола и 5-членного или 6-членного циклоалкана, где бензольное кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила, и циклоалкановое кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
5
1
4
R выбран из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
11
12
14
15
1
4
R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
1
2
3
8
1
4
3
8
1
4
1
4
одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из водорода, (C-C)алкила, (С-С)циклоалкила и фенила, где все циклоалкильные группы, независимо друг от друга, являются незамещенными или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила, и фенильная группа является незамещенной или замещена одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила;
1
4
1
4
Ar представляет собой фенил или ароматический 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, и все указанные группы являются незамещенными или замещены одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила и (C-C)алкил-O-;
1
Het выбран из группы, состоящей из
10
1
4
где R выбран из группы, состоящей из водорода и (C-C)алкила;
2
1
4
Het представляет собой насыщенный 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, который присоединен через атом углерода кольца или атом азота кольца и является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
3
3
1
4
Het представляет собой насыщенный 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, содержащий в кольце атом азота, через который Het присоединяется, и не содержит или содержит в кольце один дополнительный гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атомов N, О и S, и указанный гетероцикл является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
где все алкильные группы являются незамещенными или замещены одним или несколькими фторсодержащими заместителями;
и ко всем их стереоизомерным формам и смесям стереоизомерных форм в любом соотношении, и к их фармацевтически приемлемым солям.
В еще одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы I, где
11
А выбран из группы, состоящей из R-OC(O)-,
1
2
3
4
1
4
1
4
1
4
1
4
2
1
4
1
4
1
4
R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, (C-C)алкила, (C-C)перфторалкила, (C-C)алкил-O-, (C-C)перфторалкил-О-, фенила, пирролила, пиридинила, пиридинил-O-, пирролидинил-S(O)-, морфолинила, Ar-С(O)-, Ar-О-, ди((C-C)алкил)-N-, Ar(C-C)алкила- и Ar-(C-C)алкил-О-,
1
2
2
3
3
4
1
4
1
4
и или R и R, или R и R, или R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, могут образовывать бензольное кольцо или циклогексановое кольцо, где бензольное кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила, и циклогексановое кольцо является незамещенным или замещено одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила;
5
R представляет собой водород или метил;
1
2
1
2
3
8
3
8
Z и Z являются одинаковыми и представляют собой (С-С)циклоалкил, или один из остатков Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другой представляет собой водород или фенил;
1
4
Ar представляет собой фенил, который является незамещенным или замещен одним или двумя одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкил-O-;
и ко всем их стереоизомерным формам и смесям стереоизомерных форм в любом соотношении, и к их фармацевтически приемлемым солям.
11
1
11
1
В еще одном из вариантов осуществления изобретения соединения формулы I представляют собой соединения, определенные выше, и А представляет собой остаток, выбранный из группы, состоящей из R-O-C(O)- и Het, в другом варианте осуществления изобретения А представляет собой R-O-C(O)-, в еще одном варианте осуществления А представляет собой HO-C(O)-. В одном из вариантов осуществления изобретения группа Het, представляющая А, представляет собой любую одну или несколько из групп
1
где в формулах указанных групп, а также в формулах других конкретных групп Het, представляющих А, линия, отмеченная звездочкой, обозначает свободную связь, через которую группа присоединяется к атому углерода кольца, несущему группу А.
1
2
3
4
В одном из вариантов осуществления изобретения соединения формулы I представляют собой соединения, определенные выше, и R, R, R и R являются одинаковыми или различными и, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из одной или нескольких следующих групп:
водорода;
галогена;
1
4
1
4
(C-C)алкила, где в одном из вариантов осуществления (C-C)алкил выбран из любой одной или нескольких групп, представляющих собой метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил;
1
4
1
4
(C-C)алкил-O-, где в одном из вариантов осуществления (C-C)алкил-О- выбран из любой одной или нескольких групп, представляющих собой метил-O-, этил-O-, пропил-О и бутил-O-;
Ar, где в одном из вариантов осуществления Ar выбран из любой одной или нескольких групп, представляющих собой фенил, пирролил и пиридинил;
Ar-С(O)-, где в одном из вариантов осуществления Ar-C(O)- представляет собой фенил-C(O)-, в другом варианте осуществления является незамещенным или замещенным, в еще одном варианте осуществления замещен, например, одним или двумя галогенсодержащими заместителями, например хлорсодержащими заместителями, в еще одном варианте осуществления Ar-C(O)- представляет собой хлор-замещенную бензоильную группу, например Cl-фенил-C(O)-;
Ar-O-, где в одном из вариантов осуществления Ar-О- выбран из любой одной или нескольких групп, представляющих собой пиридинил-O- и фенил-О-, и в одном из вариантов является незамещенным или замещенным, в другом варианте осуществления замещен, например, одним или двумя галогенсодержащими заместителями, например хлорсодержащими заместителями, в еще одном варианте Ar-О- выбран из любой одной или нескольких групп, представляющих собой пиридинил-O- и Cl-фенил-О-;
1
4
1
4
2
2
ди((C-C)алкил)-N-, где в одном из вариантов осуществления ди((C-C)алкил)-N- выбран из любой одной или нескольких групп, представляющих собой (метил)N- и (этил)N-;
1
4
1
4
1
4
Ar-(C-C)алкил-, где в одном из вариантов осуществления Ar в группе Ar-(C-C)алкил- представляет собой фенил, в другом варианте осуществления Ar-(C-C)алкил- представляет собой бензил, в еще одном варианте Ar является незамещенным или замещенным, в еще одном варианте осуществления замещен, например, одним или двумя галогенсодержащими заместителями, например хлорсодержащими заместителями;
3
3
2
2
2
Het-S(O), где в одном из вариантов осуществления Het-S(O)- представляет собой пирролидин-SO-;
2
2
Het, где в одном из вариантов осуществления Het представляет собой морфолинил;
1
4
1
4
1
4
3
(C-C)алкила, который замещен одним или несколькими фторсодержащими заместителями, где в одном из вариантов осуществления такой фтор-замещенный (C-C)алкил представляет собой (C-C)перфторалкил, и в другом варианте осуществления представляет собой трифторметил, т.е. FC-;
1
4
1
4
1
4
3
(C-C)алкил-O-, который замещен одним или несколькими фторсодержащими заместителями, где в одном из вариантов осуществления такой фтор-замещенный (C-C)алкил-O- представляет собой (C-C)перфторалкил-O-, и в другом варианте осуществления представляет собой трифторметокси, т.е. FCO-;
1
2
2
3
3
4
1
2
3
4
1
2
3
4
1
2
3
4
1
4
1
4
и или R и R, или R и R, или R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, могут образовывать бензольное кольцо или 5-7-членное циклоалкановое кольцо, где в одном из вариантов осуществления такое кольцо представляет собой бензольное кольцо, циклопентановое кольцо или циклогексановое кольцо, и в другом варианте осуществления представляет собой бензольное кольцо или циклогексановое кольцо, и в одном из вариантов осуществления бензольное кольцо, образованное двумя группами из R, R, R и R, является незамещенным или замещено одним или несколькими, например одним или двумя, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила, и циклоалкановое кольцо, образованное двумя группами из R, R, R и R, является незамещенным или замещено одним или несколькими, например одним или двумя, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила, и в другом варианте осуществления кольцо, образованное двумя группами из R, R, R и R, является незамещенным.
1
2
2
3
3
4
1
2
3
4
1
2
3
4
1
2
3
4
1
2
3
4
Как правило, карбоциклическое кольцо, которое может быть образовано группами R и R, группами R и R или группами R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, в одном из вариантов осуществления изобретения выбрано из группы, состоящей из бензола, циклопентана и циклогексана, в другом варианте осуществления выбрано из группы, состоящей из бензола и циклогексана. Поскольку в случае циклоалканового кольца, образованного двумя группами, выбранными из R, R, R и R, двойная связь между двумя атомами углерода, которые являются общими для обоих конденсированных колец, может рассматриваться как принадлежащая обоим кольцам, такое циклоалкановое кольцо также может рассматриваться как циклоалкеновое кольцо. В одном из вариантов осуществления карбоциклическое кольцо, образованное двумя группами, выбранными из R, R, R и R, является незамещенным или замещено одним или двумя одинаковыми или различными заместителями, в другом варианте осуществления оно является незамещенным. В одном из вариантов осуществления R, R, R и R принимают любое из определенных выше значений за исключением тех, при которых две группы из R, R, R и R, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, не образуют карбоцикл.
1
2
3
4
1
2
3
4
В одном из вариантов осуществления изобретения одна из групп R, R, R и R представляет собой водород, и остальные принимают любое из определенных для них значений, в другом варианте осуществления две группы из R, R, R и R представляют собой водород, и другие принимают любое из определенных для них значений.
5
5
В одном из вариантов осуществления изобретения соединения формулы I представляют собой соединения, определенные выше, и R выбран из группы, состоящей из водорода и метила, и в другом варианте осуществления R представляет собой водород.
11
12
13
14
15
В одном из вариантов осуществления изобретения соединения формулы I представляют собой соединения, определенные выше, и R, R, R, R и R, независимо друг от друга, выбраны из группы, состоящей из водорода, метила и этила, в другом варианте осуществления выбраны из группы, состоящей из водорода и метила, и в еще одном варианте осуществления представляют собой водород.
3
8
4
8
4
8
5
7
6
7
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
В одном из вариантов осуществления изобретения (С-С)циклоалкильная группа, представляющая Z или Z, представляет собой (С-C)циклоалкильную группу, в другом варианте осуществления (С-C)циклоалкильную группу, в еще одном варианте осуществления (С-С)циклоалкильную группу, в еще одном варианте осуществления (С-С)циклоалкильную группу, в еще одном варианте циклогексильную группу, причем все указанные группы являются незамещенными или замещены, как это указано выше. В одном из вариантов осуществления число заместителей в замещенной циклоалкильной и замещенной фенильной группе, представляющей Z или Z, независимо друг от друга, равно одному, двум, трем или четырем, в другом варианте оно равно одному, двум или трем, в еще одном варианте осуществления оно равно одному или двум, в еще одном варианте осуществления равно одному, в еще одном варианте осуществления равно нулю. В одном из вариантов осуществления циклоалкильная группа, представляющая Z или Z, является незамещенной. В еще одном из вариантов осуществления заместители в замещенной циклоалкильной группе, представляющей Z или Z, выбраны из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила, в другом варианте осуществления выбраны из группы, состоящей из (C-C)алкила и (C-C)алкил-O-, и в еще одном другом варианте осуществления они представляют собой (C-C)алкильные заместители. В одном из вариантов осуществления заместители в замещенной фенильной группе, представляющей Z или Z, выбраны из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила и (C-C)алкил-O-, в другом варианте осуществления выбраны из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила.
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
3
8
1
8
3
8
3
8
3
8
3
8
3
8
3
8
3
8
3
8
3
8
В одном из вариантов осуществления изобретения соединения формулы I представляют собой соединения, определенные выше, и одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из водорода, (С-C)алкила и (С-С)циклоалкила, в другом варианте осуществления одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из водорода, (С-С)циклоалкила и фенила, в еще одном варианте осуществления одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из водорода и (С-С)циклоалкила, в еще одном варианте осуществления одна из групп Z и Z представляет собой (С-С)циклоалкил, и другая выбрана из группы, состоящей из (С-С)циклоалкила и фенила, в еще одном варианте осуществления группы Z и Z являются одинаковыми или различными (С-С)циклоалкильными группами, и в еще одном варианте осуществления группы Z и Z представляют собой одинаковые (С-С)циклоалкильные группы, где все группы являются незамещенными или замещены, как определено выше.
1
2
3
1
4
1
4
1
4
В одном из вариантов осуществления изобретения количество заместителей в замещенной группе Ar, в замещенной группе Het, замещенной группе Het или замещенной группе Het независимо равно одному, двум или трем, в другом варианте осуществления равно одному или двум, в еще одном варианте осуществления равно одному, в еще одном варианте осуществления равно нулю. В одном из вариантов осуществления Ar представляет собой фенил или ароматический 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атомов N, О и S, в другом варианте осуществления Ar выбран из группы, состоящей из фенила, пиридинила и тиенила, в еще одном варианте осуществления выбран из группы, состоящей из фенила и пиридинила, и в еще одном варианте осуществления Ar представляет собой фенил, где все указанные группы являются незамещенными или замещены, как определено выше. В одном из вариантов осуществления изобретения заместители в замещенной группе Ar выбраны из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила и (C-C)алкил-O-, в другом варианте осуществления выбраны из группы, состоящей из галогена и (C-C)алкила.
2
2
2
2
В одном из вариантов осуществления изобретения Het представляет собой насыщенный 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который содержит в кольце один или два одинаковых или различных гетероатома, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, в другом варианте осуществления выбраны из группы, состоящей из атомов N и О, в еще одном варианте осуществления Het выбран из группы, состоящей из пирролидинила, тетрагидропиранила, пиперидинила и морфолинила, и в еще одном варианте осуществления Het представляет собой морфолинил. В одном из вариантов осуществления Het присоединен через атом углерода кольца, в другом варианте осуществления через атом азота кольца.
3
3
3
2
В одном из вариантов осуществления изобретения Het представляет собой насыщенный 5-членный или 6-членный моноциклический гетероцикл, который, помимо атома азота, через который Het присоединяется, и не содержит или содержит в кольце один дополнительный гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атомов N, O и S, в другом варианте осуществления не содержит в кольце дополнительных гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов N, О и S, в другом варианте осуществления содержит в кольце один дополнительный гетероатом, выбранный из группы, состоящей из атомов N, O и S, в еще одном варианте осуществления Het выбран из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила и морфолинила, и в еще одном варианте осуществления Het представляет пирролидинил.
В одном из вариантов осуществления изобретения n выбран из 0 и 2, в другом варианте осуществления n равен 2.
В одном из вариантов осуществления изобретения соединение формулы I выбрано из группы, состоящей из
4,4-дициклогексил-7-пиррол-1-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-7-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-7-диметиламино-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-5,7-диметокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-4Н-нафто[2,3-d][1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-7-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-5-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
7-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-8-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-8-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-трет-бутил-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-йод-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-трифторметил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-2-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-трифторметокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-7-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-8-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-5-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-(4-хлорфенокси)-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-пиридин-4-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-(3-метоксифенокси)-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-(3-хлорфенокси)-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-(4-хлорбензоил)-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-(пиридин-3-илокси)-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-8-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-5-этокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
7-бутокси-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6,8-дихлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
1,1-дициклогексил-1Н-нафто[2,1-d][1,3]диоксин-3-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-фенил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-7-метокси-5-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
7-бензилокси-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-7-метокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-6-(пирролидин-1-сульфонил)-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-7-морфолин-4-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-4Н-нафто[1,2-d][1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-8-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогексил-7-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-5,7-дифтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
1,1-дициклогексил-7,8,9,10-тетрагидро-1Н-нафто[2,1-d][1,3]диоксин-3-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-8-трифторметокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
8-трет-бутил-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
10-бензил-4,4-дициклогексил-4Н-нафто[2,3-d][1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогексил-7-диэтиламино-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-бром-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклопентил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4-циклопентил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-бром-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогептил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклооктил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-хлор-4,4-дициклогептил-7-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
4,4-дициклогептил-6-трифторметокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
6-бром-4,4-дициклогептил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты,
5-(6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-1Н-тетразола,
3-(6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-4Н- [1,2,4]оксадиазол-5-она,
метилового эфира 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты и
5-(6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-3Н-[1,3,4]оксадиазол-2-она,
и всех их стереоизомерных форм и смеси стереоизомерных форм в любом соотношении, и их фармацевтически приемлемых солей.
Модель замещения в соединениях формулы I, которые могут быть названы, например, как 4Н-бензо[1,3]диоксины или бензо[1,3]диоксаны, и в данном описании также называются бензодиоксанами, пронумерована в соответствии с правилами IUPAC и представлена в приведенной ниже формуле.
Если структурные элементы, такие как группы, заместители или численные значения, например алкильная, циклоалкильная или Ar группы или число n, могут встречаться несколько раз в соединениях формулы I, то все они являются независимыми друг от друга, в каждом случае могут принимать любое из указанных значений и в каждом случае могут быть одинаковыми или отличаться от любого другого такого элемента.
1
4
Термин «алкил» следует понимать, как означающий остаток насыщенного ациклического углеводорода, который может быть линейным, т.е. с прямой цепью, или разветвленным. Если не определено иное, алкил содержит от 1 до 4 атомов углерода. Примерами (C-C)алкила являются алкильные остатки, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, включая метил, этил, пропил, бутил, н-изомеры указанных остатков, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил. Это применимо также, если алкильная группа является замещенной или является заместителем в другом остатке, например в алкил-О-остатке (алкилокси-остаток, алкокси-остаток), алкил-OC(O)-остаток (алкилоксикарбонильный остаток) или арилалкильном остатке.
3
8
3
8
Термин «(С-С)циклоалкил» следует понимать, как означающий остаток насыщенного углеводородного цикла, содержащего в моноциклическом кольце от 3 до 8 атомов углерода. Примерами (С-С)циклоалкила являются циклоалкильные остатки, содержащие в кольце 3, 4, 5, 6, 7 или 8 атомов углерода, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил.
Термин «5-7-членный циклоалкан» следует понимать, как означающий циклопентан, циклогексан или циклогептан.
1
4
1
4
1
4
n
Термин «Ar» следует понимать, как означающий фенил или остаток ароматического 5-членного или 6-членного моноциклического углеводородного кольца, где в указанном углеводородном кольце один или два атома углерода заменены одинаковыми или различными гетероатомами, выбранными из группы, состоящей из атомов N, О и S, например фуранил, пиридинил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, имидазолил, пиразинил, пиридазинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил и тиенил, которые являются незамещенными или замещены одним или несколькими, например одним, двумя или тремя, или одним или двумя, или одним, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, циано, (C-C)алкил-О- и (C-C)алкил-S(О)-.
1
1
4
Термин «Het» следует понимать, как означающий остаток частично ненасыщенного или ароматического 5-членного или 6-членного моноциклического углеводородного кольца, в котором один-четыре атомов углерода заменены одинаковыми или различными гетероатомами, выбранными из группы, состоящей из атомов N, О и S, например фуранил, пиридинил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, имидазолил, пиразинил, пиридазинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил, тиенила, 1,2,4,5-тетразинил, 1,2,3,4-тетразинил, 1,2,3-триазинил, 1,2,4-триазинил, 1,3,5-триазинил, тетразолил, тиадиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, пиранил, 1,2-оксазинил, 1,3-оксазинил, 1,4-оксазинил, 1,2-тиазин, 1,3-тиазин, 1,4-тиазин, пирролинил, тиадиазинил и тиазолинил, которые могут быть замещены одним или несколькими, например одним, двумя или тремя, одним или двумя, или одним, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из (C-C)алкила, гидроксигруппы и оксогруппы, и указанный остаток присоединен через атом углерода кольца.
2
1
4
Термин «Het» следует понимать, как означающий остаток насыщенного 4-членного, 5-членного, 6-членного или 7-членного моноциклического углеводородного кольца, в котором один или два атома углерода заменены одинаковыми или различными гетероатомами, выбранными из группы, состоящей из атомов N, О и S, например оксетанил, азетидинил, тиетанил, диоксетанил, морфолинил, тиоморфолинил, пиперазинил, пиперидинил, пирролидинил, оксазолидинил, тиазолидинил, 1,2-оксатиоланил, 1,3-оксатиоланил, тетрагидрофуранил и тетрагидропиранил, который может присоединяться через атом углерода кольца или атом азота кольца, и который является незамещенным или замещен одним или несколькими, например одним, двумя или тремя, или одним или двум, или одним, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила.
3
3
1
4
Термин «Het» следует понимать, как означающий остаток насыщенного 4-членного, 5-членного, 6-членного или 7-членного моноциклического углеводородного кольца, который содержит в кольце атом азота, через который Het присоединяется, и не содержит в кольце дополнительного гетероатома или где один атом углерода заменен гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из атомов N, О и S, например азетидинил, морфолинил, тиоморфолинил, пиперазинил, пиперидинил, пирролидинил, тиазолидинил и оксазолидинил, и который является незамещенным или замещен одним или несколькими, например одним, двумя или тремя, или одним или двумя, или одним, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и (C-C)алкила.
3
2
2
2
3
3
2
3
Алкильные группы могут, как правило, независимо от любых других заместителей, которые несут алкильные группы, быть незамещенными или замещены одним или несколькими фторсодержащими заместителями, например одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью фторсодержащими заместителями, или одним, двумя или тремя фторсодержащими заместителями. Такие фтор-замещенные алкильные группы также могут представлять собой перфторалкильные группы, т.е. алкильные группы, в которых все атомы водорода заменены атомами фтора. Примерами фтор-замещенных алкильных групп являются -CF, -CHF, -CHF и -CF-CF, из которых -CF и -CF-CF представляют собой примеры перфторалкильных групп. В одном из вариантов осуществления изобретения алкильная группа, в любом случае, независимо от других случаев и независимо от любых других заместителей, которые несут алкильные группы, не замещена фтором.
Термин «галоген» означает фтор, хлор, бром или йод. В одном из вариантов осуществления изобретения атом галогена, как правило, независимо от других случаев, выбран из группы, состоящей из фтора, хлора, брома, в другом варианте осуществления из группы, состоящей из фтора и хлора.
Оптически активные атомы углерода, присутствующие в соединениях формулы I, могут, независимо друг от друга, иметь R конфигурацию или S конфигурацию. Соединения формулы I могут быть представлены в форме чистых энантиомеров или чистых диастереомеров, или в форме смесей энантиомеров и/или диастереомеров в любом соотношении, например в виде рацематов. Таким образом, настоящее изобретение относится к чистым энантиомерам и смесям энантиомеров, а также к чистым диастереомерам и смесям диастереомеров. Изобретение включает смеси двух или нескольких стереоизомеров формулы I и включает все соотношения стереоизомеров в смесях. В случае, когда соединения формулы I могут быть представлены в виде Е-изомеров или Z-изомеров (или цис-изомеров или транс-изомеров), изобретение относится как к чистым Е-изомерам и чистым Z-изомерам, так и к E/Z (или цис/транс) смесям во всех соотношениях. Изобретение также включает все таутомерные формы соединений формулы I.
Диастереомеры, в том числе E/Z-изомеры, могут разделяться на индивидуальные изомеры, например хроматографией. Рацематы могут разделяться на два энантиомера обычными способами, например хроматографией на хиральных фазах, или разделением, например кристаллизацией диастереомерных солей, полученных с оптически активными кислотами или основаниями. Стереохимически однородные соединения формулы I также могут быть получены при использовании стереохимически однородных исходных веществ или с использованием стереоселективных реакций.
Термин «фармацевтически приемлемые соли» соединений формулы I следует понимать, как означающий нетоксичные соли, которые являются физиологически приемлемыми, в частности фармацевтически применимые соли. Такими солями соединений формулы I, содержащими кислотные группы, например карбоксильную группу СООН, являются, например, соли щелочных металлов или соли щелочноземельных металлов, такие как соли натрия, соли калия, соли магния и соли кальция, а также соли фармацевтически приемлемых четвертичных аммониевых ионов, таких как тетраметиламмоний или тетраэтиламмоний, а также кислотно-аддитивные соли аммиака и фармацевтически приемлемых органических аминов, таких как метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, триэтиламин, этаноламин или трис(2-гидроксиэтил)амин. Основные группы, содержащиеся в соединениях формулы I, например аминогруппы, образуют кислотно-аддитивные соли, например с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота или фосфорная кислота, или с органическими карбоновыми кислотами и сульфоновыми кислотами, такими как муравьиная кислота, уксусная кислота, щавелевая кислота, лимонная кислота, молочная кислота, яблочная кислота, янтарная кислота, малоновая кислота, бензойная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, метансульфоновая кислота или п-толуолсульфокислота. Соединения формулы I, которые одновременно содержат основную группу и кислотную группу, например аминогруппу и карбоксильную группу, также могут быть представлены в виде цвиттерионов (бетаинов), которые также включены в настоящее изобретение.
Соли соединений формулы I могут быть получены обычными способами, известными специалистам данной области техники, например, посредством объединения соединения формулы I с неорганической или органической кислотой или основанием в растворителе или дисперсионной среде, или из других солей посредством катионного обмена или анионного обмена. Настоящее изобретение также включает все соли соединений формулы I, которые вследствие низкой физиологической переносимости не подходят для непосредственного применения в фармацевтических препаратах, но которые пригодны, например, в качестве промежуточных соединений для проведения дальнейших химических модификаций соединений формулы I или в качестве исходных соединений для получения фармацевтически приемлемых солей.
Изобретение также включает сольваты, производные и модификации соединений формулы I, например пролекарства, защищенные формы и другие фармацевтически приемлемые производные. В частности, изобретение относится к пролекарствам и защищенным формам соединений формулы I, которые могут быть преобразованы в соединения формулы I в физиологических условиях. Подходящие пролекарства соединений формулы I, т.е. химически модифицированные производные соединений формулы I, обладающие свойствами, которые улучшены желаемым образом, например, в отношении растворимости, биодоступности или продолжительности действия, известны специалистам в данной области техники. Более подробную информацию, относящуюся к пролекарствам, можно найти в известной научной литературе, например в публикациях Design of Prodrugs, H. Bundgaard (ed.), Elsevier, 1985; Fleisher et al., Advanced Drug Delivery Reviews 19 (1996) 115-130; H. Bundgaard, Drugs of the Future 16 (1991) 443; Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, B. Testa, J.M. Mayer, Wiley-VCH, 2003.
1
6
1
4
3
8
3
8
1
4
6
14
6
14
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
6
14
P1
P2
P1
1
2
1
2
3
p2
p1
Подходящими пролекарствами соединений формулы I являются, в частности, ацильные пролекарства и карбаматные пролекарства ацилируемых азотсодержащих групп, таких как аминогруппы, а также сложноэфирные пролекарства и амидные пролекарства групп карбоновых кислот, которые могут присутствовать в соединениях формулы I. В ацильных пролекарствах и карбаматных пролекарствах атом водорода на атоме азота в таких группах заменен ацильной группой или сложноэфирной группой, например (C-C)алкил-О-С(O)- группой. Подходящими ацильными группами и сложноэфирными группами для ацильных пролекарств и карбаматных пролекарств являются, например, группы R-CO- и RO-CO-, где R может представлять собой водород, (C-C)алкил, (С-С)циклоалкил, (С-С)циклоалкил-(C-C)алкил-, Ar, (С-С)арил, Het, Het, (С-С)арил-(C-C)алкил-, Ar-(C-C)алкил-, Het-(C-C)алкил-, Het(C-C)алкил- или Het-(C-C)алкил-, и где R принимает значения, указанные для R, за исключением водорода. Термин «(C-С)арил» следует понимать, как означающий остаток моноциклического, бициклического или трициклического ароматического углеводорода, содержащего в кольце от 6 до 14 атомов углерода, например, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1, 12, 13 или 14 атомов углерода. Примерами являются фенил, нафтил, например 1-нафтил и 2-нафтил, или бифенилил.
Кроме того, в отношении всех вариантов осуществления изобретения, определенных в настоящем изобретении, применимо, что соединения формулы I включены в изобретение во всех стереоизомерных формах и смесях стереоизомерных форм в любом соотношении, в форме фармацевтически приемлемых солей, а также в форме их пролекарств.
Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений формулы I, с помощью которых могут быть получены соединения и которые являются другим объектом настоящего изобретения.
Соединения формулы I могут быть получены с использованием методик и способов, которые сами по себе хорошо известны специалистам данной области техники и принимаются ими во внимание. Исходные вещества или структурные блоки для применения в общих методах синтеза, которые могут применяться при получении соединений формулы I, доступны любому специалисту в данной области техники. Во многих случаях, они являются коммерчески доступными или описаны в литературе. В иных случаях, они могут быть получены из доступных соединений-предшественников в соответствии с методиками, аналогично описанным в литературе, или в соответствии с методиками или по аналогии с методиками, описанными в данном изобретении.
Обычно соединения формулы I могут быть получены, например, в ходе конвергентного синтеза путем связывания двух или нескольких фрагментов, которые могут быть получены обратным синтезом из формулы I. В частности, при получении бензодиоксановых соединений формулы I в качестве исходных составляющих блоков используют соответствующим образом замещенные производные 2-гидроксиметилфенола, которые подвергают взаимодействию с соответствующим образом замещенными алкановыми кислотами или производными алкановых кислот. Например, производные 2-гидроксиметилфенола формулы II могут быть подвергнуты взаимодействию с алкановыми кислотами или производными алкановых кислот формулы III, которые содержат две одновалентных удаляемых группы или двухвалентную оксогруппу в положении 2, например с 2,2-дихлоралкановой кислотой или ее производным, таким как 2,2-дихлоруксусная кислота, когда группа А' представляет собой водород, с получением соединения формулы I, которое уже может представлять собой конечное соединение формулы I или дальнейшая модификация которого может приводить к получению конечного соединения формулы I.
1
5
1
2
Группы A', R-R, Z и Z в соединениях формулы II, III и I' принимают значения, как определено для соединений I, и дополнительные функциональные группы могут присутствовать в защищенной форме или в форме групп-предшественников, которые впоследствии подвергают преобразованию в группы, присутствующие в соединении формулы I. Группы Х в соединениях формулы III представляют собой подходящие удаляемые одновалентные группы, например галоген, такой как хлор, или вместе представляют собой атом кислорода, т.е. образуют, например, двухвалентную оксогруппу.
Если исходные производные 2-гидроксиметилфенола, используемые в синтезе соединений формулы I, не являются коммерчески доступными, они должны быть получены в соответствии с хорошо известными стандартными методиками получения 2-гидроксиметилфенольных систем. Подбором подходящих молекул-предшественников эти способы синтеза 2-гидроксиметилфенолов дают возможность вводить различные заместители в различные положения 2-гидроксиметилфенольной системы, которая может подвергаться химической модификации для получения в соединении формулы I заданной картины замещения.
Если исходные 2-гидроксиметилфенольные производные не являются коммерчески доступными и должны быть синтезированы, синтез может осуществляться с помощью различных хорошо известных способов. Далее, в качестве примеров, будут кратко описаны некоторые методики, представляющие интерес для синтеза соединений по настоящему изобретению, со ссылками на публикации. Они иллюстрируют некоторые из возможных способов получения подходящих производных 2-гидроксиметилфенола.
1. Humbert et al., Eur. J. Med. Chem. 1983, 18, 67-78.
2. Blechert et al., Tetrahedron 1995, 51, 1167-1176.
3. J. Talley et al., J. Org. Chem. 1984, 49, 5267-5269.
4. Hoppe et al., Synthesis 2006, 1578-1589.
Далее, в качестве примеров, кратко описаны некоторые методики получения производных бензодиоксанов формулы I из подходящего 2-гидроксиметилфенольного производного последовательной стадией циклизации, с получением бензодиоксановых производных, которые представляют интерес для получения соединения по настоящему изобретению, и представлены ссылки на публикации.
5. Wang et al., Org. Lett. 2007, 9, 1533-1535.
6. Humbert et al., Eur. J. Med. Chem. 1983, 18, 67-78.
7. Yus et al., Tetrahedron 1997, 53, 17373-17382.
8. Njarddarson et al., Synlett 2009, 23-27.
1
2
3
4
5
1
2
Эти способы являются стандартными методиками, подробно описанными в научной литературе и хорошо известными специалистам данной области техники. Специалист данной области техники может заменить конкретные примеры соединений или реагентов, показанные на схемах, соответствующими альтернативными соединениями и реагентами либо опустить или добавить при необходимости другие стадии синтеза. Хотя и не всегда показано явно, в процессе синтеза с использованием указанных реакций в некоторых случаях будут встречаться изомеры положения. Такие смеси позиционных изомеров могут разделяться современными способами разделения, такими как, например, препаративная ВЭЖХ. Остатки в формулах, приведенных выше, уже могут содержать нужные конечные группы, т.е. группы R, R, R, R, R, Z, Z и А', значения которых определены для формулы I, или, необязательно, эти остатки могут подвергаться преобразованию в конечные группы, с получением желаемого соединения формулы I. Остатки формул, приведенных выше, также могут присутствовать в виде групп, которые в дальнейшем могут подвергаться преобразованию в конечные группы, и, например, функциональные группы могут присутствовать в форме групп-предшественников, производных или в защищенной форме.
Кроме того, для получения нужных заместителей в бензодиоксановой кольцевой системе формулы I функциональные группы, введенные в циклическую систему в процессе синтеза бензодиоксанов, могут подвергаться химической модификации. В частности, заместители, присутствующие на бензодиоксановой кольцевой системе, могут быть модифицированы с помощью различных реакций и, таким образом, могут быть получены нужные остатки. Например, бензодиоксан, несущий атом водорода в некотором положении, также может быть получен омылением с последующим декарбоксилированием бензодиоксана, содержащего сложноэфирную группу в этом положении. Атомы галогена могут вводиться, например, в соответствии с хорошо известными методиками, описанными в литературе. Фторирование ароматических субструктур соединений формулы I может осуществляться с использованием различных реагентов, включая, например, трифлат N-фтор-2,4,6-триметилпиридиния. Хлорирование, бромирование или йодирование может проводиться путем взаимодействия с элементарными галогенами или с использованием N-галогенсукцинимидов, таких как NCS, NBS или NIS, и многих других реагентов, хорошо известных специалистам данной области техники. В зависимости от условий реакции, реагента, стехиометрии и модели замещения, галоген вводится в определенные положения. Селективным обменом «галоген/металл» в полученных соединениях, таким как металлирование путем селективного обмена «водород/металл» с последующим взаимодействием с широким диапазоном электрофилов различные заместители могут вводиться в циклические ядра с использованием методик, хорошо известных специалистам данной области техники.
3
2
5
Галогены, гидроксигруппы (через трифлат или нонафлат) или первичные амины (с помощью соли диазония) или после взаимного преобразования соответствующие винилстаннаны или бороновые кислоты, присутствующие в бензодиоксановой структуре, могут быть подвергнуты преобразованию в различные другие функциональные группы, такие как, например, -CN, -CF, -CF, простые эфирные, кислотные, амидные, аминные, алкильные или арильные группы, при использовании катализаторов переходных металлов, таких как палладиевые или никелевые катализаторы, или солей меди и реагентов, например, приведенных ниже (F. Diederich, P. Stang, Metal-catalyzed Cross-coupling Reactions, Wiley-VCH, 1998; M. Beller, C. Bolm, Transition Metals for Organic Synthesis, Wiley-VCH, 1998; J. Tsuji, Palladium Reagents and Catalysts, Wiley, 1996; J. Hartwig, Angew. Chem. 1998, 110, 2154; B. Yang, S. Buchwald, J. Organomet. Chem. 1999, 576, 125; T. Sakamoto, K. Ohsawa, J. Chem. Soc. Perkin Trans I, 1999, 2323; D. Nichols, S. Frescas, D. Marona-Lewicka, X. Huang, B. Roth, G. Gudelsky, J. Nash, J. Med. Chem., 1994, 37, 4347; P. Lam, C. Clark, S. Saubern, J. Adams, M. Winters, D. Chan, A. Combs, Tetrahedron Lett., 1998, 39, 2941; D. Chan, K. Monaco, R. Wang, M. Winters, Tetrahedron Lett. 1998, 39, 2933; V. Farina, V. Krishnamurthy, W. Scott, The Stille Reaction, Wiley, 1994; F. Qing et al. J. Chem. Soc. Perkin Trans. I 1997, 3053; S. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 7727; S. Kang et al. Synlett 2002, 3, 427; S. Buchwald et al., Organic Lett. 2002, 4, 581; T. Fuchikami et al. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 91; Q. Chen et al. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 7689; M.R. Netherton, G.C. Fu, Topics in Organometallic Chemistry 2005, 14, 85-108; A.F. Littke, G.F. Fu, Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 4176-4211; A.R. Muci, S.L. Buchwald, Topics in Current Chemistry 2002, 219, 131-209).
Например, нитрогруппы могут быть подвергнуты восстановлению до аминогрупп с помощью различных восстановителей, таких как сульфиды, дитиониты, комплексные гидриды, или каталитическим гидрированием. Восстановление нитрогруппы может осуществляться на различных стадиях синтеза соединения формулы I, и восстановление нитрогруппы до аминогруппы также может выполняться одновременно с реакцией, проводимой по другой функциональной группе, например при взаимодействии группы, такой как цианогруппа, с сероводородом или при гидрировании указанной группы. Для введения этих остатков аминогруппы затем быть подвергнуты модификации в соответствии со стандартными методами алкилирования, например взаимодействием с (замещенными) алкилгалогенидами или восстановительным аминированием карбонильных соединений в соответствии со стандартными методами ацилирования, например взаимодействием активированных производных карбоновых кислот, таких как хлорангидриды кислот, ангидриды кислот, активированные сложные эфиры или др., взаимодействием с карбоновыми кислотами в присутствии активирующего агента или в соответствии со стандартными методами сульфонилирования, например взаимодействием с сульфонилхлоридами.
Сложноэфирные группы, присутствующие в бензодиоксановых ядрах, могут быть подвергнуты гидролизу до соответствующих карбоновых кислот, которые после активации могут быть подвергнуты взаимодействию с аминами или спиртами в стандартных условиях. Кроме того, эти сложноэфирные или кислотные группы могут быть подвергнуты восстановлению до соответствующих спиртов в соответствии с множеством стандартных методик. Простые эфирные группы, например бензилоксигруппы, или другие легко расщепляемые группы простых эфиров, могут быть подвергнуты расщеплению, с получением гидроксигрупп, которые затем могут быть подвергнуты взаимодействию с различными реагентами, например агентами получения простых эфиров или активирующими агентами, позволяющими проводить замещение гидроксильных групп другими группами. Серосодержащие группы могут быть подвергнуты аналогичному взаимодействию.
2
3
2
3
nd
Группы в бензодиоксанах формулы I, которые также могут присутствовать в защищенной форме или в форме группы-предшественника, которая еще не была введена во время предыдущей стадии, например при синтезе бензодиоксанового ядра, могут вводиться, например, в положении 7 бензодиоксановой системы, например с помощью стандартных методов алкилирования, хорошо известных специалистам данной области техники. Исходное бензодиоксановое производное, которое должно использоваться при проведении такой реакции, содержит, например, атом кислорода, азота или серы в положении 7. Алкилирование вышеуказанного атома может, например, проводиться в стандартных условиях, предпочтительно в присутствии основания, такого как KCO, CsCO, NaH или KOtBu, с использованием алкилирующего реагента, содержащего удаляемую группу, такую как галоген, например хлор, бром или йод, или сульфонилоксигруппу, такую как тозилокси, мезилокси или трифторметилсульфонилокси. Эти стандартные методики описаны, например, в следующих публикациях: M. Smith, J. March, March's Advanced Organic Chemistry, Wiley-VCH, 2001; Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie (Methods of Organic Chemistry), Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Germany; Organic Reactions, John Wiley&Sons, New York; R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH, 2 ed., 1999; B. Trost, I. Fleming (eds.), Comprehensive Organic Synthesis, Pergamon, 1991. Удаляемая группа может, например, представлять собой гидроксигруппу, которая для проведения реакции алкилирования активируется в соответствии с хорошо известными условиями метода Мицунобу (O. Mitsunobu, Synthesis 1981, 1) или в соответствии с методами дальнейшей модификации (A. Tunoori, D. Dutta, G. Gunda, Tetrahedron Lett. 39 (1998) 8751; J. Pelletier, S. Kincaid, Tetrahedron Lett. 41 (2000) 797; D.L. Hughes, R.A. Reamer, J.J. Bergan, E.J.J. Grabowski, J. Am.Chem. Soc. 110 (1998) 6487; D.J. Camp, I.D. Jenkins, J. Org. Chem. 54 (1989) 3045; D. Crich, H. Dyker, R.J. Harris, J. Org. Chem. 54 (1989) 257).
nd
Приведенные выше реакции преобразования функциональных групп, в общем, также подробно описаны в учебниках по органической химии, таких как M. Smith, J. March, March's Advanced Organic Chemistry, Wiley-VCH, 2001, и в монографиях, таких как Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie (Methods of Organic Chemistry), Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Germany; Organic Reactions, John Wiley&Sons, New York; R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH, 2 ed., 1999; B. Trost, I. Fleming (eds.), Comprehensive Organic Synthesis, Pergamon, 1991; A. Katritzky, C. Rees, E. Scriven, Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Elsevier Science, 1996, где подробно описаны реакции и можно найти литературные первоисточники. Благодаря тому факту, что в данном случае функциональные группы присоединены к бензодиоксановому кольцу, в некоторых случаях возникает необходимость в специфическом подборе условий реакции или в подборе специфических реагентов из различных реагентов, которые, в принципе, могут применяться в реакции преобразования, или в применении иных конкретных манипуляций для достижения желаемой конверсии, например в применении методик защиты функциональных групп. Однако поиск подходящих вариантов реакции и условий реакции в таких случаях не представляет трудности для специалиста данной области техники.
Структурные элементы, присутствующие в остатках в положении 4, положении 5, положении 6, положении 7 и положении 8 бензодиоксанового кольца в соединениях формулы I, также могут вводиться, например, в 2-гидроксиметилфенольный предшественник или бензодиоксан с применением способов, описанных в данном описании, посредством последовательных стадий реакции с применением методов параллельного синтеза и методик, которые сами по себе хорошо известны специалистам в данной области техники.
В ходе получения соединений формулы I, как правило, может быть полезно или необходимо ввести функциональные группы, которые уменьшают или предотвращают нежелательные или побочные реакции на соответствующих стадиях синтеза, в форме групп-предшественников, которые позднее преобразовываются в нужные функциональные группы, или временно блокировать функциональные группы стратегией применения защитных групп, подходящей для синтеза. Такие стратегии хорошо известны специалистам данной области техники (см., например, Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, 1991; или P. Kocienski, Protective Groups, Thieme, 1994). Примерами групп-предшественников являются цианогруппы и нитрогруппы. Цианогруппа может быть на более поздней стадии подвергнута преобразованию в производные карбоновых кислот или восстановлению в аминометильные группы. Нитрогруппы могут быть подвергнуты преобразованию восстановлением, например каталитическим гидрированием, в аминогруппы. Защитные группы могут также иметь значение твердой фазы, и отщепление от твердой фазы означает удаление защитной группы. Применение таких методов известно специалистам данной области техники (Burgess K. (ed.) Solid Phase Organic Synthesis, New York, Wiley, 2000). Например, фенольная гидроксигруппа может быть присоединена к тритилполистирольной смоле, которая служит в качестве защитной группы, и молекула отщепляется от данной смолы при обработке трифторуксусной кислотой (ТФУК) или другими кислотами на более поздней стадии синтеза.
Соединения формулы I являются эффективными антагонистами LPAR5, которые противодействуют эффекту эндогенной LPA на ее LPAR5 рецепторе. В частности, соединения формулы I являются эффективными антагонистами LPA рецепторов LPAR5 тромбоцитов, тучных клеток и микроглиоцитов. Соединения по настоящему изобретению противодействуют эффекту агрегации тромбоцитов активации тромбоцитного LPA рецептора LPAR5, LPA-опосредуемой активации тучных клеток человека и LPA-опосредуемой активации микроглиоцитов. Кроме того, соединения формулы I по изобретению также обладают дополнительными полезными свойствами, например стабильностью в плазме и печени и селективностью по сравнению с другими рецепторами, антагонизм к которым не является желательным. Такая хорошая селективность, например, позволяет снизить потенциальные побочные эффекты, имеющие место у молекул, обладающих недостаточной селективностью.
Объектом настоящего изобретения также являются соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, и/или пролекарства для применения в качестве лекарственного средства или в виде фармацевтического средства, и фармацевтические композиции, которые содержат эффективное количество, по меньшей мере, одного соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли, и/или пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель, то есть одно или несколько фармацевтически приемлемых веществ-носителей или эксципиентов и/или вспомогательных веществ или добавок, и могут применяться в медицине, ветеринарии или фитозащите.
Активность соединений формулы I может быть определена, например, в анализах, описанных ниже, или в других анализах in vitro или in vivo, известных специалистам данной области техники. Способность соединений ингибировать LPA-индуцированную агрегацию тромбоцитов может количественно определяться с помощью методов, аналогично описанным в литературе (например, Holub and Waston in Platelets: A Practical Approach, pp 236-239, Oxford University Press 1996), и с помощью методов, описанных ниже. Результаты этих анализов четко показывают, что соединения по изобретению являются функциональными антагонистами LPA рецептора LPAR5 тромбоцитов и, следовательно, могут применяться для ингибирования агрегации тромбоцитов и тромбообразования. Способность соединений ингибировать LPA-индуцированную активацию тучных клеток или микроглиоцитов также может количественно определяться с помощью FLIPR системы.
В качестве антагонистов LPA рецептора LPAR5 соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, и/или их пролекарства, как правило, подходят для лечения, включая терапию и профилактику, состояний, при которых активность LPAR5 рецептора играет роль или обладает определенным нежелательным влиянием или на которые можно благоприятно влиять посредством ингибирования LPAR5 рецепторов или снижения их активности, или для предотвращения, облегчения или лечения которых для врача необходимо ингибирование LPA рецепторного LPAR5 или снижение его активности.
Таким образом, объектом настоящего изобретения также являются соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, и/или пролекарства для применения в лечении, включая терапию и профилактику, заболевания или болезненного состояния, чувствительного к ингибированию LPA рецептора LPAR5 и/или снижению или ингибированию агрегации тромбоцитов или тромбообразования, и/или снижению или ингибированию активации тучных клеток, и/или снижению или ингибированию активации клеток микроглиоцитов.
Объектом настоящего изобретения также является применение соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей, и/или пролекарств для производства лекарственного средства для лечения, включая терапию и профилактику, заболевания или болезненного состояние, чувствительного к ингибированию LPA рецептора LPAR5 и/или снижению или ингибированию агрегации тромбоцитов или тромбообразования, и/или снижению или ингибированию активации тучных клеток, и/или снижению или ингибированию активации микроглиоцитов.
Объектом настоящего изобретения также являются конкретные соединения формулы I, кроме соединений, которые исключены из соединений, являющихся объектом настоящего изобретения, то есть 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислот, 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислот и метиловый эфир 6-хлор-4,4-дициклогексил-4H бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты, и их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства для применения в лечении, включая терапию и профилактику, заболевания или болезненного состояния, чувствительного к ингибированию LPA рецептора LPAR5 и/или снижению или ингибированию агрегации тромбоцитов или тромбообразования, и/или снижению или ингибированию активации тучных клеток, и/или снижению или ингибированию активации микроглиоцитов, и всех других заболеваний, приведенных выше или ниже в настоящем описании. Объектом настоящего изобретения является также применение соединений формулы I, которые исключены из соединений, являющихся объектом настоящего изобретения в качестве соединений как таковых, то есть 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота, 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота и метиловый эфир 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты, и их фармацевтически приемлемых солей и пролекарств для производства лекарственного средства для лечения, включая терапию и профилактику, заболевания или болезненного состояния, чувствительного к ингибированию LPA рецепторного LPAR5 и/или снижению или ингибированию агрегации тромбоцитов или тромбообразования, и/или снижению или ингибированию активации тучных клеток, и/или снижению или ингибированию активации микроглиоцитов и всех других заболеваний, приведенных выше или ниже в настоящем описании.
Поскольку ингибирование LPA рецептора LPAR5 влияет на активацию тромбоцитов и агрегацию тромбоцитов, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, и/или их пролекарства в целом подходят для снижения тромбообраования в крови или для лечения, включая терапию и профилактику, состояний и заболеваний, при которых активность агрегации тромбоцитов играет важную роль или имеет нежелательное влияние, или на которые может благоприятно влиять снижение тромбообразования, или для предупреждения, облегчения или лечения которых для врача необходимо снижение активности системы агрегации тромбоцитов. Таким образом, конкретным объектом настоящего изобретения является снижение или ингибирование нежелательного тромбообразования, в частности у человека, путем введения эффективного количества соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли, и/или его пролекарства, а также фармацевтических композиций.
Поскольку ингибирование LPA рецептора LPAR5 влияет на активацию тучных клеток, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, и/или их пролекарства в целом подходят для снижения активации тучных клеток или для лечения, в включая терапию и профилактику, состояний, при которых активность тучных клеток играет важную роль или имеет нежелательное влияние, или которые могут благоприятно влиять на снижение активации тучных клеток, или для предотвращения, облегчения или лечения которых для врача необходимо снижение активности системы тучных клеток. Таким образом, конкретным объектом настоящего изобретения является снижение или ингибирование нежелательного активации тучных клеток, в частности у человека, посредством введения эффективного количества соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли и/или пролекарства, а также фармацевтических композиций.
Поскольку ингибирование LPA рецепторного LPAR5 влияет на активацию микроглиоцитов, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, и/или их пролекарства в целом подходят для снижения активации микрогоцитов или для лечения, в включая терапию и профилактику, состояний, при которых активность клеток микроглии играет важную роль или имеет нежелательное влияние, или на которые может благоприятно влиять снижение активации микрогоцитов, или для предотвращения, облегчения или лечения которых для врача необходимо снижение активности системы микроглиоцитной системы. Таким образом, конкретным объектом настоящего изобретения является снижение или ингибирование нежелательной активации микроглиоцитов, в частности у человека, посредством введения эффективного количества соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли и/или его пролекарства, а также фармацевтических композиций.
Настоящее изобретение также относится к соединениям формулы I и/или их фармацевтически приемлемым солям, и/или их пролекарствам для применения в лечении, включая терапию и профилактику, тромбоэмболических заболеваний, таких как тромбоз глубоких вен, венозная и артериальная тромбоэмболия, тромбофлебит, коронарный и церебральный артериальный тромбоз, эмболия сосудов головного мозга, почечная эмболия, легочная эмболия, диссеминированное внутрисосудистое свертывание, сердечно-сосудистых заболеваний, таких как преходящие нарушения мозгового кровообращения, инсульты, острый инфаркт миокарда, заболевания периферических сосудов, преэклампсия/эклампсия и тромбоцитопеническая пурпура, и развития и прогрессирования воспалительных заболеваний, таких как гипералгезия, астма, рассеянный склероз, воспалительная боль, ангиогенез или аллергических реакций или рестенозов.
Настоящее изобретение также относится к применению соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей, и/или их пролекарств для производства фармацевтических композиций или лекарственных средств для ингибирования LPA рецептора LPAR5 или для воздействия на активацию тромбоцитов, агрегацию тромбоцитов и дегрануляцию тромбоцитов и способствования дезагрегации тромбоцитов, воспалительную реакцию и/или для лечения, включая терапию и профилактику, заболеваний, указанных выше или ниже, например, для получения лекарственных средств для лечения и профилактики сердечно-сосудистых расстройств, тромбоэмболических заболеваний, рестеноза, тромбоза глубоких вен, венозных и артериальных тромбоэмболических осложнений, тромбофлебита, коронарного и церебрального артериального тромбоза, эмболии сосудов головного мозга, почечной эмболии, легочной эмболии, дессименированного внутрисосудистого свертывания, преходящих ишемических нарушений мозгового кровообращения, инсультов, острого инфаркта миокарда, заболеваний периферических сосудов, преэклампсии/эклампсии и тромбоцитопенической пурпуры и развития и прогрессирования воспалительных заболеваний, таких как гипералгезия, астма, рассеянный склероз, ангиогенез, аллергические реакций и др.
Изобретение также относится к соединениям формулы I и/или их фармацевтически приемлемым солям, и/или их пролекарствам для применения в лечении, включая терапию и профилактику, заболеваний, указанных выше или ниже, например, для применения в лечении и профилактике сердечно-сосудистых нарушений, тромбоэмболических заболеваний или рестенозов, и к способам лечения, мишенью которых являются указанные цели, включая способы указанных терапии и профилактики.
Благодаря важной роли LPA рецептора LPAR5 тромбоцитов в LPA-опосредуемой активации тромбоцитов, изобретение также относится к соединениям формулы I и/или их фармацевтически приемлемым солям для применения в лечении, включая терапию и профилактику, болезненных состояний, таких как аномальное тромбообразование, острый инфаркт миокарда, тромбоэмболия, острое закрытие сосуда, связанное с тромболитической терапией или чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластикой (ЧТКА), преходящие нарушения мозгового кровообращения, инсульты, перемежающаяся хромота, шунтирование коронарных или периферических артерий, люминальное сужение сосудов, рестеноз после коронарной или венозной ангиопластики, поддержание раскрытого доступного состояния сосудов у пациентов периодического гемодиализа, патологическое тромбообразование, происходящее в венах нижних конечностей после хирургической операции на брюшной полости, колене или бедре, риск тромбоэмболии легочной артерии или диссимерирующая системная внутрисосудистая коагулопатия, имеющая место в сосудистых системах при септическом шоке, некоторых вирусных инфекциях или раке. Изобретение также относится к применению соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей для производства лекарственного средства для лечения, включая терапию и профилактику, указанных болезненных состояний.
Благодаря важной роли LPA рецептора LPAR5 в LPA-опосредуемой активации тучных клеток и/или микроглиоцитов, изобретение также относится к соединениям формулы I и/или их фармацевтически приемлемым солям для применения в лечении, включая терапию и профилактику, болезненных состояний, таких как воспалительная боль, астма, ангиогенез, демилинизирующие заболевания (а) центральной нервной системы, такие как рассеянный склероз, поперечный миелит, неврит зрительного нерва, болезнь Девика, и (b) периферической нервной системы, таких как синдром Гийена-Барре или хроническая воспалительная демиелинизирующая полинейропатия, а также к применению соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей для производства лекарственного средства для лечения, включая терапию и профилактику, указанных болезненных состояний.
Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства могут вводиться животным, предпочтительно млекопитающим, в частности человеку, в качестве лекарственных средств для лечения или профилактики. Они могут быть вводиться отдельно или в виде смесей друг с другом, или в виде фармацевтических композиций, которые позволяют вводить их энтерально или парентерально.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут вводиться перорально, например, в форме пилюль, таблеток, лакированных таблеток, таблеток с покрытием, гранул, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, сиропов, эмульсий, суспензий или аэрозольных смесей. Введение также может осуществляться ректально, например, в форме суппозиториев, или парентерально, например, внутривенно, внутримышечно или подкожно в виде растворов для инъекций или растворов для вливания, микрокапсул, имплантатов или стержней, чрескожно или местно, например, в виде мазей, растворов или настоек, или другими способами, например в форме аэрозолей или назальных спреев.
Фармацевтические композиции по изобретению получают способом, известным и знакомым специалисту данной области техники, когда фармацевтически приемлемые инертные неорганические и/или органические вещества-носители и/или вспомогательные вещества используются в дополнение к одному или нескольким соединениям формулы I и/или их фармацевтически приемлемым солям, и/или их пролекарствам. Для получения пилюль, таблеток, таблеток с покрытием и твердых желатиновых капсул может использоваться, например, лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновая кислота или ее соли и т.д. Веществами-носителями для мягких желатиновых капсул и суппозиториев являются, например, жиры, воски, полутвердые и жидкие многоатомные спирты, природные или отвержденные масла и т.д. Подходящими веществами-носителями для получения растворов, например, растворов для инъекций, или эмульсий или сиропов, являются, например, вода, физиологический раствор, спирты, глицерин, многоатомные спирты, сахароза, инвертный сахар, глюкоза, растительные масла и т.д. Подходящими веществами-носителями для микрокапсул, имплантатов или стержней являются, например, сополимеры гликолевой кислоты и молочной кислоты. Фармацевтические композиции обычно содержат примерно от 0,5% до примерно 90% по массе соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей, и/или пролекарств. Количество активного ингредиента формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей и/или пролекарств в фармацевтических композициях обычно составляет примерно от 0,5 мг до примерно 1000 мг, предпочтительно примерно от 1 мг до примерно 500 мг.
Помимо активных ингредиентов формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей и/или пролекарств и веществ-носителей или эксципиентов, фармацевтические композиции могут содержать вспомогательные вещества или добавки, такие как, например, наполнители, дезинтегранты, связующие вещества, лубриканты, смачивающие агенты, стабилизаторы, эмульгаторы, консерванты, подсластители, красители, вкусовые добавки, ароматизаторы, загустители, разбавители, буферные вещества, растворители, солюбилизаторы, агенты для достижения эффекта депо, соли для регулирования осмотического давления, вещества для покрытия или антиоксиданты. Они также могут содержать два или более соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых соли, и/или их пролекарств. В случае если фармацевтическая композиция содержит два или более соединений формулы I, выбор отдельных соединений может определяться специфическим общим фармакологическим профилем фармацевтической композиции. Например, сильнодействующее соединение с меньшей продолжительностью действия может быть объединено с длительно действующим соединением с более низкой активностью. Гибкость, допустимая при выборе заместителей в соединениях формулы I, дает возможность в значительной степени контролировать биологические и физико-химические свойства соединений и, таким образом, позволяет подобрать желательные соединения. Кроме того, помимо, по меньшей мере, одного соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли, и/или его пролекарства, фармацевтические композиции могут также содержать один или несколько других фармацевтически, терапевтически и/или профилактически активных ингредиентов.
При применении соединений формулы I доза может изменяться в широких пределах и, обычно, как известно врачу, должна подбираться по индивидуальным состояниям в каждом отдельном случае. Она зависит, например, от конкретного используемого соединения, от природы и тяжести заболевания, которое лечат, от способа и режима введения или от того, острое или хроническое заболевание подлежит лечению или проводится профилактика. Соответствующую дозировку можно установить с использованием клинических подходов, хорошо известных в области медицины. Обычно суточная доза для достижения желаемых результатов у взрослого человека с массой тела примерно 75 кг составляет от 0,01 мг/кг до 100 мг/кг, предпочтительно от 0,1 мг/кг до 50 мг/кг, в частности от 0,1 мг/кг до 10 мг/кг (в каждом случае в мг на кг массы тела). Суточная доза может разделяться, в частности в случае введения относительно больших количеств, на несколько, например на 2, 3 или 4 введения. Как правило, в зависимости от индивидуальной реакции, доза может быть выше или ниже указанной суточной дозы.
Соединения по настоящему изобретению также могут применяться в качестве стандартных или эталонных соединений, например в качестве стандарта качества или контрольного соединения в тестах или анализах, включающих ингибирование LPA рецептора LPAR5. Такие соединения могут быть представлены в коммерческом наборе, например для применения в фармацевтических исследованиях с участием LPA рецептора LPAR5. Например, соединение по настоящему изобретению может применяться в качестве эталона в анализе для сравнения его известной активности с активностью соединения, которая не известна. Это должно гарантировать экспериментатору, что анализ выполнен должным образом, и предоставить основу для сравнения, в особенности, если тестируемое соединение являлось производным эталонного соединения. При разработке новых анализов или методов исследования соединения согласно настоящему изобретению могут применяться для испытания их эффективности.
Соединение формулы I также может полезно применяться в качестве внешнего антиагреганта для человека. Например, эффективное количество соединения по настоящему изобретению может быть подвергнуто контакту со свежеотобранным образцом крови для предотвращения агрегации образца крови. Кроме того, соединение формулы I или его соли могут применяться для диагностических целей, например для диагностики in vitro, а также в качестве вспомогательного средства в биохимических исследованиях. Например, соединение формулы I может применяться в анализе для идентификации присутствия LPA рецептора LPAR5 или выделения LPA рецептора LPAR5, содержащего ткань по существу в очищенной форме. Соединение по настоящему изобретению может быть помечено, например, радиоактивным изотопом, и меченое соединение, связанное с LPA рецептором LPAR5, затем детектируется с помощью обычного метода, применяемого для обнаружения конкретной метки. Таким образом, соединение формулы I или его соль может применяться в качестве зонда для обнаружения местоположения или количества LPAR5 активности в условиях in vivo, in vitro или ex vivo.
Кроме того, соединения формулы I могут применяться в качестве промежуточных продуктов синтеза для получения других соединений, в частности других фармацевтически активных ингредиентов, которые могут быть получены из соединений формулы I, например введением заместителей или модификацией функциональных групп.
Общие последовательности синтеза соединений, применимых в настоящем изобретении, подробно изложены в приведенных ниже примерах, которые предназначены только для иллюстрации настоящего изобретения и не ограничивают его объема или сущности. Специалистам данной области техники будет понятно, что известные вариации условий и способов, описанных в примерах, могут применяться для синтеза соединений по настоящему изобретению.
Примеры
Когда на конечной стадии синтеза соединения использовали кислоту, такую как трифторуксусная кислота или уксусная кислота, например, когда трифторуксусная кислота использовалась в качестве кислотно-лабильной защитной группы (например, tBu-группы) или когда соединение очищали хроматографией с использованием элюента, который содержал такую кислоту, в некоторых случаях, в зависимости от метода обработки, например условий сушки вымораживанием, соединение получали частично или полностью в форме соли используемой кислоты, например, в виде соли уксусной кислоты, соли муравьиной кислоты, соли трифторуксусной кислоты или соли хлористоводородной кислоты. Аналогично, исходные вещества или промежуточные продукты, содержащие основный центр, такой как, например, основный азот, получали и использовали в виде свободного основания или в форме соли, такой как, например, соль трифторуксусной кислоты, соль бромистоводородной кислоты, соль серной кислоты или соль хлористоводородной кислоты. Комнатная температура означает температуру примерно от 20°С до 25°С.
Аббревиатуры
Ацетонитрил
MeCN
трет-Бутил
t-Bu
Этилацетат
EtOAc
Тетрагидрофуран
ТГФ
Трифторуксусная кислота
ТФУК
Пример 1: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота (иллюстративный пример)
(i) 4-Хлор-2-(дициклогексилгидроксиметил)фенол
4
4
К раствору 7,0 г 5-хлор-2-гидроксибензойной кислоты в 38 мл ТГФ при комнатной температуре медленно добавляют 115,5 мл раствора хлорида циклогексилмагния в ТГФ (2М). Затем реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 часов. После охлаждения до комнатной температуры, смесь гидролизуют льдом. К смеси добавляют насыщенный водный раствор NHCl до полного растворения белого осадка. Водную фазу экстрагируют эфиром. Объединенные органические слои сушат над MgSO, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт перекристаллизовывают из н-гептана, с получением ярко-желтого продукта. Выход: 5,2 г.
(ii) 6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
4
К суспензии 1,6 г NaH (60% дисперсия в минеральном масле) и 131 мг 18-краун-6-эфира в 60 мл безводного диоксана при комнатной температуре медленно добавляют 16,4 мл раствора дихлоруксусной кислоты (1М) в безводном диоксане. Реакционную смесь нагревают до 60°С, к смеси добавляют раствор 3,2 г 4-хлор-2-(дициклогексилгидроксиметил)фенола в 42 мл безводного диоксана и полученную смесь перемешивают при 90°С в течение 6 часов. После охлаждения до 0°C реакционную смесь гасят 8 мл изопропанола и выливают на лед. Водную фазу экстрагируют эфиром, затем подкисляют HCl (2М, до рН 1) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над MgSO, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт перекристаллизовывают из н-гептана, с получением ярко-желтого продукта. Выход: 2,5 г.
МС (ES-): m/e=377.
Пример 2: 4,4-Дициклогексил-7-пиррол-1-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
(i) 2-(Дициклогексилгидроксиметил)-5-пиррол-1-илфенол
4
4
К раствору 217 мг 2-гидрокси-4-пиррол-1-илбензойной кислоты в 4 мл ТГФ при комнатной температуре медленно добавляют 2 мл раствора циклогексилмагнийхлорида в ТГФ (2 М). Полученную реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, смесь гидролизуют льдом. К смеси добавляют насыщенный водный раствор NHCl до растворения белого осадка. Водную фазу экстрагируют эфиром. Объединенные органические слои сушат над MgSO, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 504 мг.
(ii) 4,4-Дициклогексил-7-пиррол-1-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
4
К суспензии 228 мг гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле) и 18 мг 18-краун-6-эфира в 8 мл безводного диоксана при комнатной температуре медленно добавляют раствор 2,3 мл дихлоруксусной кислоты (1М) в безводном диоксане. Реакционную смесь нагревают до 60°С, к смеси добавляют раствор 504 мг 2-(дициклогексилгидроксиметил)-5-пиррол-1-илфенола в 6 мл безводного диоксана и полученную смесь перемешивают при 95°С в течение 6 часов. После охлаждения до 0°C, реакционную смесь гасят 2 мл изопропанола и выливают в лед. Водную фазу экстрагируют эфиром, затем подкисляют HCl (2М, до рН 1) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над MgSO, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (колонка С18, обращенная фаза, элюирование с градиентом: вода/MeCN градиент с 0,1% ТФУК). Фракции, содержащие продукт, упаривают и лиофилизируют, с получением продукта в виде белого твердого вещества. Выход: 1 18 мг.
МС (ES-): m/e=408.
Пример 3: 4,4-Дициклогексилкарбодиимид-6-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=357.
Пример 4: 4,4-Дициклогексил-7-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=373.
Пример 5: 4,4-Дициклогексил-6-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=362.
Пример 6: 4,4-Дициклогексил-7-диметиламино-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES+): m/e=388.
Пример 7: 4,4-Дициклогексил-5,7-диметокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=403.
Пример 8: 4,4-Дициклогексил-4Н-нафто[2,3-d][1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=393.
Пример 9: 4,4-Дициклогексил-7-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=357.
Пример 10: 4,4-Дициклогексил-5-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=357.
Пример 11: 7-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
MC (ES-): m/e=377.
Пример 12: 4,4-Дициклогексил-8-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=357.
Пример 13: 4,4-Дициклогексил-8-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=361.
Пример 14: 6-трет-Бутил-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=399.
Пример 15: 4,4-Дициклогексил-6-йод-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=469.
Пример 16: 4,4-Дициклогексил-6-трифторметил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=411.
Пример 17: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-2-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=391.
Пример 18: 4,4-Дициклогексил-6-трифторметокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=427.
Пример 19: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-7-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=395.
Пример 20: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-8-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=395.
Пример 21: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-5-фтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=395.
Пример 22: 6-(4-Хлорфенокси)-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=469.
Пример 23: 4,4-Дициклогексил-6-пиридин-4-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES+): m/e=422.
Пример 24: 4,4-Дициклогексил-6-(3-метокси-фенокси)-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=465.
Пример 25: 6-(3-Хлорфенокси)-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=469.
Пример 26: 6-(4-Хлорбензоил)-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=483.
Пример 27: 4,4-Дициклогексил-6-(пиридин-3-илокси)-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES+): m/e=438.
Пример 28: 4,4-Дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=348.
Пример 29: 4,4-Дициклогексил-8-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=373.
Пример 30: 4,4-Дициклогексил-5-этокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=387.
Пример 31: 7-Бутокси-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=415.
Пример 32: 6,8-Дихлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=411.
Пример 33: 1,1-Дициклогексил-1Н-нафто[2,1-d][1,3]диоксин-3-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=393.
Пример 34: 4,4-Дициклогексил-6-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=373.
Пример 35: 4,4-Дициклогексил-6-фенил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=419.
Пример 36: 4,4-Дициклогексил-7-метокси-5-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=387.
Пример 37: 7-Бензилокси-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=449.
Пример 38: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-7-метокси-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=407.
Пример 39: 4,4-Дициклогексил-6-(пирролидин-1-сульфонил)-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES+): m/e=478.
Пример 40: 4,4-Дициклогексил-7-морфолин-4-ил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES+): m/e=430.
Пример 41: 4,4-Дициклогексил-4Н-нафто[1,2-d][1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=393.
Пример 42: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-8-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=391.
Пример 43: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-7-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=391.
Пример 44: 4,4-Дициклогексил-5,7-дифтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=379.
Пример 45: 1,1-Дициклогексил-7,8,9,10-тетрагидро-1Н-нафто[2,1-d][1,3]диоксин-3-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=397.
Пример 46: 4,4-Дициклогексил-8-трифторметокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=427.
Пример 47: 8-трет-Бутил-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=399.
Пример 48: 10-Бензил-4,4-дициклогексил-4Н-нафто [2,3-D] [1, 3] диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=483.
Пример 49: 4,4-Дициклогексил-7-диэтиламино-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES+): m/e=416.
Пример 50: 6-Бром-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=421.
Пример 51: 6-Хлор-4,4-дициклопентил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=349.
Пример 52: 6-Хлор-4-циклогептил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1, с использованием 5-хлор-2-гидроксибензальдегида и хлорида циклогептилмагния вместо 5-хлор-2-гидроксибензойной кислоты и циклогексилмагнийхлорида на стадии (i).
МС (ES-): m/e=309.
Пример 53: 6-хлор-4-циклогексил-4-фенил-4H-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота (иллюстративный пример)
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=371.
Пример 54: 6-Бром-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=421.
Пример 55: 6-Хлор-4,4-дициклогептил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=405.
Пример 56: 6-Хлор-4,4-дициклооктил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=433.
Пример 57: 6-Хлор-4,4-дициклогептил-7-метил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=419.
Пример 58: 4,4-Дициклогептил-6-трифторметокси-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=455.
Пример 59: 6-Бром-4,4-дициклогептил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
Указанное в заголовке соединение получают по аналогичной методике, как описано в примере 1.
МС (ES-): m/e=449.
Пример 60: 5-(6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-1Н-тетразол
i) Амид 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты
4
2
5
Раствор 4,8 г 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты и 2,44 г 1,1'-карбонилдиимидазола в 122 мл ТГФ перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Затем к смеси добавляют 122 мл 25% водного раствора NHOH и реакционную смесь перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Осадок собирают фильтрованием, промывают холодной водой и сушат над PO. После перекристаллизации из этилацетата, получают указанное в заголовке соединение. Выход: 3,55 г.
(ii) 6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбонитрил
2
5
4,19 мл трифторуксусного ангидрида по каплям добавляют к раствору 3,25 г амида 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты и 1,7 мл пиридина в 29 мл диоксана при 0°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут при 0°С и затем в течение 4 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в смесь воды со льдом и перемешивают в течение 30 минут. Осадок собирают фильтрованием, промывают водой и сушат над PO в вакууме. Выход: 2,95 г.
(iii) 5-(6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-1Н-тетразол
500 мг 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбонитрила и 572 мг азида триметилолова растворяют в 23 мл ксилола. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. Затем растворитель удаляют в вакууме и неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ (колонка С18 с обращенной фазой, элюирование с градиентом: смесь вода/MeCN, градиент 0,1% ТФУК). Фракции, содержащие продукт, упаривают и лиофилизируют, с получением твердого вещества, которое промывают три раза гептанами для удаления следов оловосодержащего побочного продукта. Выход: 238 мг.
+
МС (ES+): m/e=444 (М+Н+MeCN).
Пример 61: 3-(6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-4Н-[1,2,4]оксадиазол-5-он
(i) N-гидрокси-6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоксамидин
4
Раствор 500 мг 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбонитрила, 204 мг гидрохлорида гидроксиламина и 0,41 мл триэтиламина в 7 мл метанола кипятят с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в EtOAc и промывают водой. Водную фазу экстрагируют EtOAc, объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором соли и сушат над MgSO. После удаления растворителя, неочищенный продукт используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 540 мг.
(ii) 3-(6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-4Н-[1,2,4]оксадиазол-5-он
4
К раствору 500 мг N-гидрокси-6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоксамидина в 3,7 мл этанола добавляют 0,7 мл раствора метоксида натрия (30% в метаноле) и затем 0,617 мл диэтилкарбоната. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов. После охлаждения смеси до комнатной температуры, растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в 3,4 мл воды и добавляют 1М водный раствор HCl до достижения рН 7. Полученный осадок собирают фильтрованием, промывают водой, растворяют в EtOAc и сушат над MgSO. Затем растворитель удаляют в вакууме и неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ (колонка С18 с обращенной фазой, элюирование с градиентом: смесь вода/MeCN с градиентом 0,1% ТФУК). Фракции, содержащие продукт упаривают и лиофилизируют, с получением продукта в виде твердого вещества. Выход: 257 мг.
МС (ESI-): m/e=417.
Пример 62: 6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновая кислота
2
4
Раствор 2 г 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты и 73 мг пара-толуолсульфоновой кислоты в 4 мл метанола кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, к смеси добавляют 50 мг бикарбоната натрия и растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в 10 мл EtOAc, промывают водой и сушат над NaSO. Растворитель удаляют в вакууме. Выход 1,3 г.
1
6
Н-ЯМР (500 МГц, D-диметилсульфоксид): δ (м.д.) 7,30 (1H, д×д, J=8,5 Гц, 2,5 Гц), 7,25 (1H, д, J=2,5 Гц), 7,04 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,26 (1H, с), 3,80 (3H, с), 2,22-2,14 (1H, м), 1,87-1,61 (8H, м), 1,58-1,48 (2H, м), 1,45-1,39 (1H, м), 1,37-1,04 (7H, м), 0,87-0,71 (2H, м), 0,03-0,07 м.д. (1H, м).
Пример 63: 5-(6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-3Н-[1,3,4] оксадиазол-2-он
(i) Гидразид 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты
Раствор 2,47 г метилового эфира 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]оксина-2-карбоновой кислоты в 9 мл этанола добавляют к раствору 0,61 мл моногидрата гидразина в 9 мл этанола. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляют в вакууме. Неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ (колонка С18 с обращенной фазой, элюирование: смесь вода/ТФУК с градиентом 0,1% ТФУК). Фракции, содержащие продукт, упаривают и лиофилизируют, с получением твердого вещества. Выход: 1,1 г.
(ii) 5-(6-Хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-ил)-3Н-[1,3,4]оксадиазол-2-он
4
К раствору 300 мг гидразида 6-хлор-4,4-дициклогексил-4Н-бензо[1,3]диоксин-2-карбоновой кислоты в 4,3 мл толуола добавляют 4 мл 1,9M раствора фосгена в толуоле. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют EtOAc, промывают водой и насыщенным раствором соли и сушат над MgSO. Затем растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ (колонка С18 с обращенной фазой, элюирование: смесь вода/MeCN с градиентом 0,1% ТФУК). Фракции, содержащие продукт, упаривают и лиофилизируют, с получением продукта в виде твердого вещества. Выход: 180 мг.
МС (ES+): m/e=419.
Фармакологическое тестирование
Способность соединений формулы I ингибировать или связывать LPA рецептор LPAR5 может быть оценен путем определения их влияния на клеточную функцию. Эту способность указанных соединений оценивают в анализе агрегации тромбоцитов, таком как метод Борна (Born) с использованием одиночных кювет, и в анализе тучных клеток и микроглиоцитов с использованием планшет-ридера для визуализации флуоресценции (FLIPR) от Molecular Devices Inc.
А) Анализ агрегации отмытых кровяных пластинок крови человека (тромбоцитов)
2
2
2
5
Цельную кровь собирают от здоровых добровольцев с использованием 3×20 мл шприцов, каждый из которых содержит 1/10 объема буферного цитрата. Антикоагулированную цельную кровь переносят в конические пробирки из полипропилена объемом 50 мл (30 мл на пробирку). Пробирки центрифугируют в течение 10 минут при 150×g при комнатной температуре без применения тормоза центрифуги. Такая методика приводит к получению нижней фазы клеточных компонентов и супернатанта (верхняя фаза), обогащенного тромбоцитами плазмы (PRP). PRP фазу собирают из каждой пробирки и объединяют для каждого донора. Для предотвращения переноса клеточных компонентов после первого центрифугирования примерно 5 мл PRP оставляют в пробирке. Концентрацию тромбоцитов определяют, используя счетчик ABX Micros 60. PRP фазу переносят в новую пробирку объемом 50 мл. Пробирку оставляют на 10 минут при комнатной температуре, после чего добавляют 1 мкл PGI (1 мМ в Tris-HCl/рН 8,8) и 180 мкл ACD/А на мл PRP. Затем PRP переносят в новую пробирку объемом 10 мл и центрифугируют в течение 10 минут при 500×g. После центрифугирования клеточный осадок виден на дне пробирки. Супернатант осторожно декантируют, и клеточный осадок, состоящий из тромбоцитов человека, затем растворяют в 10 мл буфера Т (состав Т буфера: 145 мм NaCl, 5 мМ KCl, 0,1 мМ MgCl×6НО, 15 мМ HEPES, 5,5 глюкозы, рН 7,4). Определяют концентрацию тромбоцитов в растворе и добавляют Т буфер, с получением конечной концентрации 3,5×10 тромбоцитов на миллилитр.
2
2
2
50
макс
50
50
5

Раствор выдерживают в течение 10 минут при комнатной температуре, затем добавляют 1 мкл PGI на мл раствора тромбоцитов и полученный раствор распределяют в новые пробирки объемом 10 мл. После стадии центрифугирования (10 минут при 500×g) супернатант декантируют и тромбоциты снова суспендируют в Т буфере до конечной концентрации 3,5×10 тромбоцитов на мл Т буфера. Перед применением буфер, содержащий тромбоциты, уравновешивают в течение 30 минут при комнатной температуре. Анализ определения агрегации тромбоцитов проводят в кюветах разового использования с помощью Platelet Aggregation Profiler (PAP-4 или -8E, BIO/DATA Corporation). Для единственного эксперимента 320 мкл раствора тромбоцитов переносят в аналитическую кювету и добавляют 20 мкл раствора цитрата кальция (10 мМ в HO) и 20 мкл раствора фибриногена (20 мг/мл HO). Анализ агрегации проводят в аналитической кювете при 37°С и перемешивании со скоростью 1200 оборотов в минуту. Для определения EC восемь аналитических кювет загружают, как описано выше, различными концентрациями LPA. Количественное определение агрегации проводят в течение 6 минут при 37°С и перемешивании со скоростью 1200 об./мин. (оборотов в минуту). Результаты анализа выражают в % активации, которую рассчитывают с использованием максимума агрегации (Т) или площади под кривой (AUC) зависимости оптической плотности от времени в течение 6 минут. Ингибирующее действие (IC) тестируемых соединений определяют как снижение максимальной агрегации. Тестируемое соединение добавляют перед началом эксперимента и инкубируют смесь с тестируемым соединением в течение 5 минут при 37°С и перемешивании со скоростью 1200 оборотов в минуту. Данные IC, полученные в описанном выше анализе на агрегацию тромбоцитов с использованием отмытых тромбоцитов для иллюстративных соединений по настоящему изобретению, представлены в таблице 1.
Таблица 1
Пример
IC<sub>50</sub> (мкМ)
Пример
IC<sub>50</sub> (мкМ)
1
1,1
37
11,3
30
5,9
46
5,4
36
2,4
49
2,7
2+
B) Применение теста с использованием флуорометрического визуализирующего планшет-ридера (FLIPR) для определения высвобождения внутриклеточного Ca в тучных клетках человека линии HMC-1 и мышиных микроглиоцитах клеточной линии BV-2
2+
6
Способность соединений формулы I ингибировать или связывать LPA рецептор LPAR5 может быть оценено с помощью количественного определения высвобождения внутриклеточного Са в клетках человека или в клетках животных. Для анализа активирующего потенциала LPA и ингибирующего действия соединений формулы I используют две клеточные линии с высокой экспрессией LPAR5: тучные клетки человека линии HMC-1 и мышиные микроглиоциты линии BV-2 (фиг.1 и 2). Для FLIPR-анализа с использованием тучных клеток человека в формате 96-луночного микропланшета собирают суспензию клеток линии HMC-1 из бокаловидной культуры, снова суспендируют и подсчитывают количество клеток. 14×10 клеток линии HMC-1 переносят в новую пробирку объемом 50 мл и центрифугируют суспензию в течение 3 минут при 540×g. Полученный на дне пробирки клеточный пеллет снова суспендируют в 15 мл загрузочного буфера (загрузочный буфер содержит HBSS буфер (рН 7,4), 0,1% BSA, 2 мкΜ Fluo-4 красителя; HBSS буфер (рН 7,4), содержащий 1×HBSS, 20 мМ HEPES, 0,01% Pluronic F-127, 2,5 мМ пробеницида).
50
max
50
50
50
Клетки в загрузочном буфере инкубируют в течение 45-60 минут при температуре 37°С. После инкубации, клетки центрифугируют в течение 3 минут при 540×g и снова суспендируют в 21 мл HBSS буфера (рН 7,4). В каждую лунку 96-луночного микропланшета с поли-D-лизиновым покрытием загружают 150 мкл клеточного раствора, эквивалентных 100000 клеток/лунка. 96-луночный микропланшет центрифугируют в течение 2 минут при 100×g (без тормоза) перед периодом восстановления в течение 30 минут при 37°С. После этой процедуры, клетки стимулируют с помощью LPA (в HBSS, рН 7,4, и 0,1% BSA) для определения EC LPA в HMC-1 клетках. Для определения ингибирующего действия соединений формулы I тестируемые соединения добавляют к клеткам в 96-луночные планшеты за 10 минут до добавления LPA. Результаты анализа выражают в % активации и рассчитывают с использованием максимального пика активации (A). Данные IC, полученные в описанном выше FLIPR анализе с использованием тучных клеток человека линии HMC-1 для конкретных соединений по настоящему изобретению, представлены в таблице 2. Прилипающие BV-2 клетки высевают на 96-лучноный микропланшет с поли-D-лизиновым покрытием (100000 клеток/лунка) за день до проведения FLIPR анализа. Плотность клеток в 96-луночном микропланшете в день проведения FLIPR-анализа должна составлять 90%. После аспирации культуральной среды, BV-2 клетки инкубируют в течение 30 минут при 37°С с загрузочным буфером и восстанавливают в 150 мкл HBSS буфера в течение 30 минут при 37°С. После этой процедуры, клетки стимулируют с помощью LPA (в HBSS, рН 7,4, и 0,1% BSA) для определения EC LPA в BV-2 клетках. Для определения ингибирующего действия соединений формулы I, тестируемые соединения добавляют к клеткам в 96-луночнном микропланшете за 10 минут до добавления LPA. Данные IC, полученные в описанном выше FLIPR-анализе с использованием микроглиоцитов мыши линии BV-2 для конкретных соединений по настоящему изобретению, представлены в таблице 3.
Таблица 2
Пример
IC<sub>50</sub> (мкМ)
Пример
IC<sub>50</sub> (мкМ)
1
3,2
37
3,6
2
3,4
43
3,3
7
4,4
45
3,1
18
1,5
46
3,2
22
2,6
49
3,6
26
3,4
50
2,5
31
5,2
55
2,4
32
3,5
60
3,6
33
3,3
61
3,2
35
3,8
63
7,7
Таблица 3
Пример
IC<sub>50</sub> (мкМ)
1
4,1
12
8,0
18
1,5