Изучение терапевтической активности нового противотуберкулезного препарата - Линарола

ПРОФИЛАКТИКИ ЭЙМЕРИОЗА ИНДЕЕК

Лутфуллин М.Х., Лутфуллина Н.А., Гиззатуллин Р.Р.

Резюме

В данной статье приводятся результаты экспериментальных исследовании по изучению профилактической эффективности препарата депрот-эрин при эймериозе индеек, а также влияние этого препарата на сохранность, привесы птиц, вес тушки и процент выхода мяса. Установлено, что препарат в дозе 30 мг на кг предотвращает развитие эймерий. Сохранность индюшат за период выращивания (98 суток) при подкожном введении препарата депрот-эрин составила 100%, при алиментарном - 83,4%, у контрольных - 71,4%. Разница в весе между опытными и контрольным группами за период выращивания составила 253 г при подкожном и 73 г при алиментарном введении. Выход мяса у индюшат убитых на 98 сутки после подкожного введения был больше на 5,9%, при алиментарном - на 2,1% по сравнению с контрольными птицами.

PREVENTION OF EIMERIOSIS INDICES

Lutfullin M.H., Lutfullin N.A., Gizzatullin R.R.

Summary

In this article, we present the results of an experimental study on the prophylactic efficacy of the drug deprot-erin in turkey eimeriosis, as well as the effect of this drug on safety, the weight gain of birds, the weight of the carcass and the percentage of meat yield. It is established that the drug in a dose of 30 mg per kg prevents the development of the emeres. Preservation of turkeys during the growing period (98 days) with subcutaneous administration of the drug deprot-erin was 100%, with alimentary - 83.4%, in control - 71.4%. The difference in weight between the experimental and control groups over the growing period was 253 g with subcutaneous and 73 g with alimentary administration. The yield of meat from turkeys killed on the 98th day after subcutaneous injection was more by 5.9%, with alimentary - by 2.1% compared to control birds.

УДК 619:615.3:579.873.21

ИЗУЧЕНИЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВОГО ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОГО ПРЕПАРАТА - ЛИНАРОЛА

Мингалеев Д.Н. - к.в.н., доцент Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

Ключевые слова: туберкулез, белые мыши, противотуберкулезная активность, Линарол.

Key words: tuberculosis, white mice, antituberculosis activity, Linarol.

Эпидемическая и эпизоотическая ситуация по туберкулезу продолжают оставаться напряженными. Туберкулез крупного рогатого скота занимает особое место среди других инфекционных болезней животных, его своеобразие в том, что болезнь долгие годы может протекать без проявления клинических признаков. В неблагополучных стадах достаточно остаться не выявленным одному больному животному, чтобы на долгие годы продлить проведение оздоровительных мероприятий [2,

4].

Низкая эффективность используемых в настоящее время противотуберкулезных препаратов объясняется не их слабыми бактери-

цидными и бактериостатическими свойствами, а длительным - более полувека их использованием и постоянным ростом количества больных с множественной лекарственной устойчивостью, вызванным появлением лекарственно-резистентных штаммов микобак-терий. Большинство лекарственных препаратов действуют неселективно, поэтому возникает необходимость ввода избыточного количества лекарственного вещества, что приводит к возникновению серьезных побочных проявлений в виде нарушения функций печени, почек, гемопоэза и т.д. [3].

Новые противотуберкулезные препараты в последние 40 лет не появлялись. Поэтому

поиск, создание новых фармацевтических препаратов, обладающих антимикобактери-альными свойствами и позволяющих повысить эффект химиопрофилактики и химиотерапии туберкулеза остается весьма актуальной задачей [1].

В связи с вышеизложенным, в Казанском институте органической и физической химии им. А.Е. Арбузова синтезирован новый противотуберкулёзный препарат -Линарол, который относится к химии азотсодержащих гетероциклидов и может быть использован в ветеринарной для профилактики туберкулеза у молодняка сельскохозяйственных животных.

Исходя из вышеизложенного, целью наших исследований являлось изучение специфической противотуберкулезной активности синтезированного препарата Линарол, в отношении M. tubercuiosis штамма H37Rv (МБТ), на модели острого эксудативно-некротического туберкулеза мышей. Для выполнения поставленной цели определена задача - изучить микробиологическим методом in vivo противотуберкулезную активность нового синтезированного препарата Амикол.

Материал и методы. Определение противотуберкулезной активности Линарола в системе in vivo проводили на 16 самцах ин-бредных мышей линии I/St, полученных из вивария ФГБУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза» РАМН. Мышей содержали в условиях, согласно ветеринарно-санитарным требованиям (Приказ МЗ и СР РФ от 23 августа 2010 года за №708н). Вес мышей - 22 -23 грамма. Всех животных заражали внутривенным введением M. tuberculosis штамма H37Rv из коллекции института Пастера (Франция) в латеральную хвостовую вену в летальной дозе 5 х 106 КОЕ/мышь. Все экспериментальные животные были разделены на три группы:

1. Зараженные мыши без лечения (контроль) - 5 шт.;

2. Зараженные мыши, получающие внутрижелудочно препарат изониазид, в дозе 50 мг/кг массы тела - 5 шт.;

3. Зараженные мыши, получающие внутрижелудочно препарат Линарол, в дозе 50 мг/кг массы тела - 6 шт.

Испытуемые препараты вводили через неделю после заражения, ежедневно, внутри-желудочно, с помощью металлического зонда с оливой, в течение 5 суток, предварительно

растворив их в дистиллированной воде. Объем вводимых препаратов составлял 0,5 мл/мышь.

Через 14 суток после инфицирования животных опытных и контрольной групп выводили из эксперимента методом цервикаль-ной дислокации для определения количества колониеобразующих единиц (КОЕ) M. tuberculosis в легких и селезенке мышей.

Для определения количества микобак-терий (КОЕ МБТ) в органах зараженных мышей легкое и селезенку каждой мыши гомогенизировали в 2 мл физиологического раствора, готовили серию 10 кратных разведений исходной суспензии в физиологическом растворе и 50 мкл каждого разведения помещали на чашку Петри, покрытую агаром Дюбо. Чашки Петри с нанесенными суспензиями клеток легкого и селезенки инкубировали в термостате, в течение 21 суток, при температуре 370С, после чего подсчитывали число колоний на чашке и определяли количество КОЕ микобактерий в исследуемых органах мышей.

Для статистической обработки данных использовали программу «Биостатистика», достоверность определяли с помощью критерия Манна-Уитни.

Результаты исследования. Основными показателями эффективности специфической антимикобактериальной терапии экспериментальных животных являются - средний срок жизни животных после инфицирования, количество КОЕ МБТ в органах инфицированных животных, тропных к туберкулезу и степень патологических изменений внутренних органов.

На момент убоя, все экспериментальные мыши были живы и выглядели клинически здоровыми. Количество КОЕ МБТ, высеянных из органов животных, представлено в таблице 1.

Представленные в таблице 1 данные показывают, что по сравнению с контрольной группой, количество КОЕ микобактерий туберкулеза в легком мышей, получавших Линарол, уменьшилось примерно в 3,5 раза. В селезенке этой группы мышей, количество КОЕ микобактерий по сравнению с контрольной группой, сократилось в 10 раз. В группе мышей, получавших изониазид, КОЕ МБТ в легком сократилось более чем в 100 раз, а в селезенке более чем в 10 раз.

Таблица 1 - Количество КОЕ МБТ в легком и селезенке мышей через 14 суток после инфицирования в дозе 5 х 106 КОЕ/мышь

Группы животных КОЕ МБТ

Линарол (50 мг/кг) (2,3 ± 0,46)х107* (3,73 ± 0,23)х107*

Изониазид (50 мг/кг) (2,7 ± 1,5)х105* (1,075 ± 0,25)х 107*

Контрольная (6,99 ± 0,9)х107 (3,99 ± 0,29)х108

Примечание: * - Р < 0,06.

Таким образом, в результате проведенного исследования установлено, что препарат Линарол при внутрижелудочном введении в дозе 50 мг/кг массы тела, в течение 5 дней достоверно снижал количество КОЕ микобак-терий туберкулеза в легких и селезенке экспериментальных мышей в сравнении с мышами контрольной группы. Изониазид, в аналогичной дозе и сроках введения, снижал количество КОЕ МБТ на 2 порядка больше в легких, чем Линарол. Однако, показатели КОЕ в селезенке в группах мышей, получавших изони-азид и Линарол, были практически одинаковыми.

Заключение. На основании полученных данных можно утверждать, что препарат Линарол обладает противотуберкулезной активностью, в отношении M. tuberculosis штамма H37Rv, которая в исследуемой дозе при краткосрочном введении была в 100 раз ниже в легком экспериментальных животных, чем препарата стандарта изониазид в аналогичной дозе и сроках введения. В селезенке противотуберкулезная активность Линарола и препарата стандарта изониазид была практически одинаковой.

Учитывая низкую токсичность препара-

та Линарол (максимально вводимая доза белым мышам и крысам - 4000 мг/кг массы тела, для сравнения LD50 изониазида - 213 мг/кг массы тела), оптимально было бы изучить противотуберкулезную активность Линарола в высоких дозах и при длительном сроке лечения.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Визель, А.А. Лечение туберкулеза органов дыхания / А.А. Визель // КГМУ МЗ РФ ГП ВЭО «Саламат», 1998. - 121 с.

2. Овдиенко, Н.П. Туберкулез как международная и национальная медико-ветеринарная проблема в современных условиях / Н.П. Овдиенко, Н.Г. Толстенко, Н.А. Яременко, П.П. Рахманин // Ветеринарный врач. - 2009. - №2. - С. 14 - 17.

3. Скакун, С.П. К вопросу о гепатоток-сичности изониазида / Н.П. Скакун, В.В. Шманько // Проблемы туберкулеза. - 1985. -№4. - С. 51 - 55.

4. Смолянинов, Ю.И. Специфическая профилактика туберкулеза у молодняка крупного рогатого скота / Ю.И. Смолянинов, Н.Н. Кощеев // Инфекционная патология животных. - 2001.- С. 168-170.

ИЗУЧЕНИЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВОГО ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОГО

ПРЕПАРАТА - ЛИНАРОЛА

Мингалеев Д.Н.

Резюме

Целью данной работы, было изучение специфической противотуберкулезной активности препарата Линарол, в отношении M. tubercuюsis штамма Н37Rv (МБТ), на модели острого эксуда-тивно-некротического туберкулеза мышей. Установлено, что что препарат Линарол при внутри-желудочном введении в дозе 50 мг/кг массы тела, в течение 5 дней достоверно снижал количество КОЕ микобактерий туберкулеза в легких и селезенке экспериментальных мышей в сравнении с мышами контрольной группы. Изониазид, в аналогичной дозе и сроках введения, снижал количество КОЕ МБТ на 2 порядка больше в легких, чем Линарол. Однако, показатели КОЕ в селезенке в группах мышей, получавших изониазид и Линарол, были практически одинаковыми.

STUDY OF THERAPEUTIC ACTIVITY OF NEW ANTITUBERCULOSIS - LINAROL

Mingaleev D.N.

Summary

The aim of this work was to study the specific antitubercular activity of Linarol against M. tubercu-iosis strain H37Rv (MBT) on the model of acute exudative necrotic tuberculosis of mice. It was found that the Linarol preparation, when administered intragastrically at a dose of 50 mg / kg body weight, significantly reduced the number of CFU mycobacterium tuberculosis in the lungs and spleen of experimental mice in comparison with the control group mice for 5 days. Isoniazid, in a similar dose and timing of administration, reduced the amount of CFU MBT by 2 orders of magnitude more in the lungs than Linarol. However, the CFU indices in the spleen in the groups of mice receiving isoniazid and Linarol were almost identical.

УДК 619:5A3:636.2

СПОСОБЫ ХРАНЕНИЯ КУЛЬТУР CLOSTRIDIUM BOTULINUM

Мустафина Э.Н. - к.в.н., в.н.с.; Мустафин Т.Р. - к.б.н., с.н.с.; Садыков Н.С. - д.в.н.; профессор;

*Юсупов С.А. - аспирант Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности *Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

Ключевые слова: ботулизм, лиофилизация, хранение. Key words: botulism, lyophilisation, storage.

Необходимость стабилизации материалов биологического происхождения, связана с их чрезвычайной нестойкостью, возникла на заре развития биологической науки. Известно, что в обычных условиях продолжительность сохранения большинства биологических препаратов исчисляется несколькими днями. В связи с этим разрабатывались различные способы консервирования биологических препаратов, которые можно разделить в настоящее время на 1) консервирование при положительных температурах; 2) консервирование при низких температурах (замораживание); 3) консервирование высушиванием. Все эти способы используют как в научных исследованиях, так и в производстве биологических препаратов. Высушивание стало неотъемлемым этапом технологии производства ряда вакцин против бактерийных и вирусных инфекций, а также самым надежным способом сохранения коллекционных культур микроорганизмов.

Для обеспечения долгосрочного хранения с сохранением исходных биологических свойств уникальных коллекционных образцов возбудителя Cl. botulinum нами проводились исследования по детальному изучению влияния способов и сроков их длительного хранения. Ботулизм (от латинского слова - колбаса) известен с начала XIX века, когда в 1822 году

предположили, что виновницей заболевания является «жирная кислота» колбас. Впервые возбудитель ботулизма Clostridium botulinum (синоним Bacillus botulinus) был описан E.Van Ermengem (1896). В 1897 году Van Ermengem установил связь ботулизма с бактериальным токсином. Возбудители Cl. botulinum классифицируются как один вид, однако это неоднородная группа бактерий.

Ботулизм - острое токсико-инфекционное заболевание, связанное с употреблением в пищу продуктов, содержащих токсин Clostridium botulinum и самих возбудителей, характеризующаяся преимущественным поражением центральной и вегетативной нервной системы. Возбудитель подвижная грамположительная, строго анаэробная спо-рообразующая бактерия. В мазках имеет вид палочек с закругленными концами, располагающихся беспорядочными скоплениями или небольшими цепочками. В неблагоприятных условиях образует субтерминальные и терминальные споры, в виде которых и сохраняются в окружающей среде. В высушенном состоянии споры могут сохранять жизнеспособность десятилетиями. Известно 8 типов возбудителя ботулизма (А, В, Са, Cß, D, E, F, G), которые отличаются между собой по антигенным свойствам вырабатываемых ими токсинов и некоторыми другими признаками.