СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ, ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ У ЖИВОТНЫХ
METHOD FOR MAKING COMPLEX PREPARATION FOR RESISTANCE IMPROVEMENT, PREVENTION AND TREATMENT OF INFLAMMATORY PROCESSES IN ANIMALS

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, а именно к способам получения препаратов для профилактики и лечения воспалительных процессов и повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных.
Известен способ получения биологически активного препарата из дрожжей (SU 1808331 A1, А61K 35/72, 15.04.93) в виде очищенного полисахаридного комплекса, обладающий иммуностимулирующей активностью. Иммобилизация полисахаридов дрожжевых клеток в агаровом геле (ТУ 10.07.236-91 на производство препарата «Достим») или в 10-14% водно-солевом растворе поливинилпирролидона (RU 2137480 C1, А61К 31/79, 35/72, 20.09.99) повышает иммуностимулирующую активность препаратов.
Наиболее близким аналогом (прототипом) по решаемой задаче является способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных (ПС-2), включающий смешивание 0,2-0,3% суспензии агара и концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазол гидрохлорид и формалин, объем доводят до 100 мас.ч. Препарат обладает иммуностимулирующей активностью (RU 2332214 C1, А61К 31/429, 31/115, А61К 36/06, А61К 36/02, А61Р 37/04, 27.08.2008).
К недостаткам препарата можно отнести отсутствие бактерицидной активности к возбудителям воспалительных процессов, которыми являются условно-патогенные и патогенные микроорганизмы, активизирующие свои воздействия на почве снижения неспецифической резистентности и специфического иммунитета. Учитывая причины воспалительных процессов, профилактика и лечение их должно основываться на применении средств, повышающих неспецифическую резистентность и специфически действующих на возбудителя.
Изобретение направлено на получение комплексного препарата, расширяющего ассортимент средств как для повышения активности клеточных и гуморальных звеньев неспецифической резистентности, так и улучшения бактерицидной активности против возбудителей воспалительных процессов у животных.
Технический результат заключается в смешивании 90 мас.ч. 0,2-0,3%) суспензии агара и 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 7,2 млн ЕД антибиотика экстенциллина и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводят до 100 мас.ч. Полученный препарат используют для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, лечения и профилактики болезней животных.
Отличие заявляемого решения от известного заключается в том, что при введении антибиотика экстенциллина совместно с полисахаридным комплексом и (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлоридом усиливается их действие как на факторы неспецифической резистентности и иммуногенеза, активируется фагоцитоз, так и усиливается бактерицидная активность против возбудителей воспалительных процессов.
Препарат ПС-2 (прототип) используется при воспалительных процессах респираторного и желудочно-кишечного тракта животных в качестве лечебно-профилактического средства для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза.
Экстенциллин (бензатин бензилпенициллин) - антибиотик широкого спектра действия, применяется как антибактериальное, противомикробное средство при воспалительных процессах различной этиологии, бактериальных инфекциях не уточненной локализации.
Для осуществления способа использовали следующие вещества:
1. Агар микробиологический ГОСТ 17206.
2. Концентрат очищенного полисахаридного комплекса дрожжей (SU 1808331).
3. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2.1-b]-тиазола гидрохлорид (ТУ 9333-024).
4. Экстенциллин антибиотик П №013932/01, 2006-02-10.
5. Формалин ГОСТ 1625.
6. Вода дистиллированная ГОСТ 6709.
Способ осуществляется следующим образом:
Пример 1. 90 мас.ч. 0,2% суспензии агара смешивали 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 7,2 млн ЕД антибиотика экстенциллина и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводили до 100 мас.ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения воспалительных процессов у животных.
Пример 2. 90 мас.ч. 0,3% суспензии агара смешивали 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 7,2 млн. ЕД антибиотика экстенциллина и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводили до 100 мас.ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения воспалительных процессов у животных.
Эффективность действия препарата, полученного заявленным способом, определялась в хозяйстве, неблагополучном по острым диарейным воспалительным процессам у поросят, обусловленных условно-патогенной и патогенной микрофлорой.
Пример 3. Испытание препарата, полученного заявленным способом для изучения влияния на показатели неспецифической резистентности и иммуногенез, проводили на поросятах, подобранных по принципу пар-аналогов, в возрасте 1-3 суток. Были созданы четыре группы животных по 10 голов в каждой. Первой группе поросят вводили препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы (опытные варианты). Четвертая группа поросят была контрольной, которым для профилактики болезней не использовали предлагаемый препарат, а лечение проводили использованием традиционных способов (применение антибиотика биомицина, сульфаниламидных препаратов, вяжущих средств). Через 14 суток после введения препаратов проводили определение показателей неспецифической резистентности и иммуногенеза организма общепринятыми методами исследований. Данные приведены в таблице 1.
Установлено, что предлагаемый препарат улучшает клеточные факторы иммунитета, о чем свидетельствует повышение содержания лейкоцитов на 11,2-12,9%, Т-лимфоцитов - на 6,7-9,4, CD3 - на 5,4-5,9, CD4 - на 8,2-9,6, CD8 - на 6,9-13,4%. Отмечено улучшение показателей неспецифической резистентности: фагоцитарной активности лейкоцитов на 3,7-5,2%, лизоцимной активности сыворотки крови на 13,1-13,6, бактерицидной активности сыворотки крови на 6,1-10,3%, а также уровня гаммаглобулинов на 11,0-11,5%. Отмечено, что показатели неспецифической резистентности и специфического иммунитета были выше в сравнении с прототипом.
Пример 4. Испытание препарата для изучения профилактической и лечебной эффективности проводили на поросятах, подобранных по принципу пар-аналогов в возрасте 1-3 суток. Были созданы четыре группы животных по 10 голов в каждой. Первой группе поросят вводили препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы (опытные варианты). Четвертая группа поросят была контрольной, которых лечили традиционными методами, принятыми в хозяйстве. Изучали заболеваемость и сохранность поросят в течение 60 суток. Данные приведены в таблице 2. Отмечено, что в контрольной группе заболело 6 поросят или 60%, из них три поросенка пали и три выздоровели. Вначале у поросят регистрировались признаки острого воспаления кишечного тракта (диарея), проявляющаяся поносом, переходящая в токсическую диспепсию с признаками обезвоживания и эшерихиоза. Продолжительность их болезни составила 8,42±1,74 суток. При лабораторных исследованиях патматериала от павших поросят были выделены эшерхии, а также стрептококки, протей. Осложнения в течение болезни у поросят происходят в результате снижения защитных свойств организма, при котором усиливается активность условно патогенной микрофлоры (эшерихий, стрептококков, протея) и болезнь переходит в токсическую форму с признаками обезвоживания и эшерихиоза.
Заболеваемость поросят в 1 опытной группе составила 30%, во второй - 10, в третьей - 20%, что в 2, 6 и 3 раза меньше, чем в контрольной группе. Болезнь у них протекала с признаками угнетения, незначительными расстройствами пищеварения и при лечении предложенными способами поросята выздоравливали в течение 3-6 суток. Сохранность поросят в этих группах составила 100%. Дополнительное включение экстенциллина в состав комплексного препарата обезвреживает возможных возбудителей воспалительных процессов, что проявляется повышением профилактической и лечебной эффективности предлагаемого способа.
Таким образом, на основании клинических, гематологических, биохимических и иммунологических исследований установлено, что применение предлагаемого препарата способствует повышению параметров неспецифической резистентности и специфического иммунитета организма животных и обладает профилактической и лечебной эффективностью.
Таблица 1
Показатели неспецифической резистентности и специфического иммунитета у свиней
Показатель
1 группа (прототип)
Опытная группа
Контрольная группа
препарат по примеру 1
препарат по примеру 2
Эритроциты, 10<sup>12</sup> /л
5,20±0,07
5,72±0,06
5,30±0,07
5,04±0,09
Гемоглобин, г/л
106,8±0,37
109,4±1,17
111,8±1,02
105,8±0,37
Лейкоциты, 10<sup>9</sup>/л
14,35±0,22
15,53±0,38
15,77±0,32
13,97±0,14
в т.ч. гранулоциты, %
44,8±0,49
44,2±1,02
40,80±0,86
45,2±0,86
лимфоциты, %
51,0±0,71
51,0±0,84
53,8±1,02
50,8±0,66
моноциты, %
4,20±0,37
4,80±0,37
5,40±0,24
4,00±0,32
Общий белок, г/л
60,99±0,57
62,35±0,36
62,47±0,43
59,12±0,42
в т.ч. альбумины, %
35,2±0,92
35,80±0,73
32,00±0,45
35,00±0,71
γ-глобулины, %
41,00±0,32
44,20±0,58
44,40±0,60
39,80±0,58
ФА, %
43,41±,68
44,20±0,66
44,80±0,58
42,60±0,66
ЛА, %
49,40±2,29
51,60±1,60
51,80±1,16
45,60±0,87
БА, %
23,00±0,84
23,93±0,38
23,03±0,22
21,70±0,23
Ig А, мкмоль/л
22,36±0,38
23,93±0,38
24,03±0,22
21,70±0,23
Ig М, мкмоль/л
10,57±0,22
11,27±0,57
12,34±0,22
10,25±0,24
Ig G, мкмоль/л
139,5±0,58
139,8±3,31
140,5±2,39
133,7±1,56
Т-лимфоциты, %
57,85±0,36
59,45±0,67
60,96±0,46
55,73±1,00
В-лимфоциты, %
20,37±0,43
19,42±0,87
19,09±0,24
20,38±0,83
CD-3, %
64,99±0,61
66,53±0,75
66,20±0,43
62,79±1,03
CD-4, %
49,56±0,32
50,16±0,51
49,51±0,28
45,75±1,01
CD-8, %
19,34±0,22
19,94±0,16
18,79±0,25
17,58±0,30
CD-16, %
12,94±0,30
14,04±0,21
11,65±0,42
8,90±0,24
Таблица 2
Показатели заболеваемости и сохранности поросят
Показатель
1 группа (прототип)
Опытная группа
Контрольная группа
препарат по примеру 1
препарат по примеру 2
Количество поросят
10
10
10
10
Заболели
3
1
2
6
Диагноз болезни
диарея
диарея
диарея
эшерихиоз
Выздоровели
3
1
2
3
Пали
-
-
-
3
Продолжительность болезни, суток
6,72±1,6
3,00±0,00
5,55±1,05
8,42±1,74
Заболеваемость, %
30
10
20
60
Сохранность, %
100
100
100
70