ПОЛУЧЕНИЕ IN VIVO N-ДЕГЛИКОЗИЛИРОВАННЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ ПОСРЕДСТВОМ СОВМЕСТНОЙ ЭКСПРЕССИИ С ENDO H

1. Способ получения дегликозилированного полипептида в клетке растения, включающий
введение в контакт цитозоля указанной клетки растения с первой нуклеиновой кислотой, включающей первую последовательность для контроля экспрессии и первую экспрессируемую последовательность нуклеиновой кислоты, функционально связанную с указанной первой последовательностью для контроля экспрессии, при этом указанная первая экспрессируемая нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты, приведенную в SEQ ID NO: 1;
введение в контакт указанного цитозоля указанной клетки растения со второй нуклеиновой кислотой, включающей вторую последовательность для контроля экспрессии и вторую экспрессируемую последовательность нуклеиновой кислоты, функционально связанную с указанной первой последовательностью для контроля экспрессии, при этом указанная вторая экспрессируемая последовательность нуклеиновой кислоты кодирует иммуноактивный полипептид;
совместную экспрессию указанной первой нуклеиновой кислоты и указанной второй нуклеиновой кислоты в клетке растения для получения указанного дегликозилированного полипептида,
при этом указанной клеткой растения является клетка Nicotiana benthamiana.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный полипептид является иммуноактивным в людях.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная вторая последовательность нуклеиновой кислоты кодирует последовательность пептида, который при получении в его нативных видах не является гликозилированным.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный полипептид выбран из Pfs48/45, РА83, и фактора XIII человека.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанным полипептидом является РА83, при этом указанный полипептид имеет повышенную стабильность по сравнению с гликозилированным пептидом РА83.
6. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанным полипептидом является РА83, при этом указанный полипептид имеет повышенную стабильность по сравнению с пептидом РА83, дегликозилированным посредством PNGазы.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что введение в контакт цитозоля указанной клетки растения дополнительно включает трансформирование указанной клетки растения с использованием Agrobacterium.
8. Вакцина, включающая иммуноактивный дегликозилированный полипептид, при этом указанный иммуноактивный дегликозилированный полипептид получен способом, включающим
введение в контакт цитозоля клетки растения с первой нуклеиновой кислотой, включающей первую последовательность для контроля экспрессии и первую экспрессируемую последовательность нуклеиновой кислоты, функционально связанную с указанной первой последовательностью для контроля экспрессии, при этом указанная первая экспрессируемая нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты, приведенную в SEQ ID NO: 1;
введение в контакт указанного цитозоля клетки растения со второй нуклеиновой кислотой, включающей вторую последовательность для контроля экспрессии и вторую экспрессируемую последовательность нуклеиновой кислоты, функционально связанную с указанной второй последовательностью для контроля экспрессии, при этом указанная вторая экспрессируемая последовательность нуклеиновой кислоты кодирует иммуноактивный полипептид;
совместную экспрессию указанной первой нуклеиновой кислоты и указанной второй нуклеиновой кислоты в клетке растения для получения указанного дегликозилированного полипептида,
при этом указанной клеткой растения является клетка Nicotiana benthamiana.
9. Вакцина по п. 8, отличающаяся тем, что указанным полипептидом является РА83, при этом указанный полипептид имеет повышенную стабильность по сравнению с гликозилированным пептидом РА83.
10. Вакцина по п. 8, отличающаяся тем, что указанным полипептидом является РА83, при этом указанный полипептид имеет повышенную стабильность по сравнению с пептидом РА83, дегликозилированным посредством PNGазы.
11. Вакцина по п. 8, отличающаяся тем, что указанным полипептидом является Pfs48/45, при указанный полипептид имеет повышенную стабильность по сравнению с гликозилированным пептидом Pfs48/45.
12. Вакцина по п. 8, отличающаяся тем, что указанным полипептидом является Pfs48/45, при этом указанный полипептид имеет повышенную стабильность по сравнению с пептидом Р Pfs48/45, дегликозилированным посредством PNGазы.
13. Дегликозилированный полипептид, полученный способом, включающим: введение в контакт цитозоля клетки растения с первой нуклеиновой кислотой,
включающей первую последовательность для контроля экспрессии и первую экспрессируемую последовательность нуклеиновой кислоты, функционально связанную с указанной первой последовательностью для контроля экспрессии, при этом указанная первая экспрессируемая нуклеиновая кислота содержит последовательность нуклеиновой кислоты, приведенную в SEQ ID NO: 1;
введение в контакт указанного цитозоля указанной клетки растения со второй нуклеиновой кислотой, включающей вторую последовательность для контроля экспрессии и вторую экспрессируемую последовательности нуклеиновой кислоты, функционально связанную с указанной второй последовательностью для контроля экспрессии, при этом указанная вторая экспрессируемая последовательность нуклеиновой кислоты кодирует полипептид;
совместную экспрессию указанной первой нуклеиновой кислоты и указанной второй нуклеиновой кислоты в клетке растения для получения указанного дегликозилированного полипептида,
при этом указанной клеткой растения является клетка Nicotiana benthamiana.
14. Дегликозилированный полипептид по п. 13, отличающийся тем, что указанный дегликозилированный полипептид является антигенным.
15. Дегликозилированный полипептид по п. 13, отличающийся тем, что указанный дегликозилированный полипептид выбран из Pfs48/45, РА83 и фактора XIII человека.