АЛЬФА-ПЕПТИД β-ГАЛАКТОЗИДАЗЫ В КАЧЕСТВЕ НЕ ОТНОСЯЩЕГОСЯ К АНТИБИОТИКАМ СЕЛЕКТИВНОГО МАРКЕРА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

1. Способ применения конструкции нуклеиновой кислоты в качестве селективного маркера, причем способ включает стадии, на которых:
a. приводят клетку-хозяина, содержащую делецию в опероне lac, в контакт с конструкцией нуклеиновой кислоты, причем конструкция нуклеиновой кислоты содержит выделенную экспрессионную кассету β-галактозидазы, содержащую нуклеотидную последовательность, кодирующую аминоконцевой фрагмент β-галактозидазы, функционально связанный с промотором; и
b. выращивают клетку-хозяина в условиях, в которых конструкция нуклеиновой кислоты сохраняется в клетке-хозяине.
2. Способ по п. 1, в котором аминоконцевой фрагмент β-галактозидазы содержит аминокислотную последовательность с по меньшей мере 75%-ной идентичностью с SEQ ID NO: 1.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором аминоконцевой фрагмент β-галактозидазы содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.
4. Способ по любому из пп. 1-3, в котором нуклеотидная последовательность дополнительно содержит точку начала репликации.
5. Способ по п. 4, в котором точка начала репликации является точкой начала репликации мультикопийной плазмиды.
6. Способ по п. 5, в котором точка начала репликации мультикопийной плазмиды является точкой начала репликации pUC57.
7. Способ по п. 6, в котором точка начала репликации pUC57 содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 19.
8. Способ по любому из пп. 1-7, в котором выделенная экспрессионная кассета β-галактозидазы дополнительно содержит элемент расщепления димера.
9. Способ по п. 8, в котором элемент расщепления димера содержит нуклеотидную последовательность, содержащую сайт распознавания сайт-специфической рекомбиназы.
10. Способ по п. 8 или 9, в котором элемент расщепления димера дополнительно содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую сайт-специфическую рекомбиназу.
11. Способ по п. 8 или 9, в котором клетка-хозяин содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую сайт-специфическую рекомбиназу.
12. Способ по любому из пп. 8-11, в котором элемент расщепления димера является элементом расщепления димера ColE1.
13. Способ по п. 12, в котором элемент расщепления димера ColE1 содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 20.
14. Способ по любому из пп. 1-13, в котором клетка-хозяин содержит делецию LacZΔ15.
15. Способ по любому из пп. 1-14, в котором выделенный вектор содержит выделенную экспрессионную кассету β-галактозидазы.
16. Способ по п. 15, в котором выделенный вектор имеет размер менее около 1,5 килобазы.
17. Способ по п. 15 или 16, в котором выделенный вектор содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9-13, 17 и 18.
18. Способ получения выделенного вектора по пп. 15-17, причем способ включает стадии, на которых:
а. приводят клетку-хозяина в контакт с выделенным вектором;
b. выращивают клетку-хозяина в условиях продуцирования вектора;
c. выделяют вектор из клетки-хозяина.
19. Способ по п. 18, в котором клетка-хозяин выращена на минимальной среде.
20. Способ по п. 19, в котором минимальная среда содержит лактозу в качестве единственного источника углерода.
21. Способ по п. 20, в котором минимальная среда содержит от около 1% до около 4% массовой доли на объем (мас./об.) лактозы.
22. Способ по п. 21, в котором минимальная среда содержит около 2% мас./об. лактозы.
23. Набор, содержащий:
а. выделенную экспрессионную кассету β-галактозидазы по любому из пп. 1-13; и
b. клетку-хозяина, содержащую делецию в опероне lac.
24. Набор по п. 23, дополнительно содержащий минимальную среду, содержащую лактозу в качестве единственного источника углерода.
25. Набор по п. 23 или 24, в котором вектор содержит выделенную экспрессионную кассету β-галактозидазы.
26. Набор по любому из пп. 23-25, в котором клетка-хозяин содержит делецию LacZΔ15.
27. Набор по п. 26, в котором клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки-хозяина E. coli и дрожжевой клетки-хозяина.