Морфологическая картина течения раневого процесса в передней брюшной стенке при экспериментальном повреждении

длинностных и обхватных характеристик в различные возрастные периоды постнатального онтогенеза. Эта разница в интенсивности роста особенно заметно в период после 3-х лет у девочек и после 4-х лет у мальчиков, т.е. после второго периода активного роста.

2. В возрасте 6 месяцев отмечается первое расхождение в равномерности роста у девочек и мальчиков. С этого возраста отмечается прямая зависимость в изменении антропометрических характеристик: роста и длинностных антропометрических характеристик у мальчиков, и роста и обхватных характеристик у девочек.

3. Установленная гетерохронность роста отдельных частей тела в различные возрастные периоды отражает общебиологическую закономерность.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М.: Практика, 1999. - 460 с.

2 Кондрашев А.В. Региональные особенности соматотипа детей 8-15 лет - жителей юга России / А.В. Кондрашев, Е.В. Чаплыгина, Д.П. Осипов, Т.М. Сикоренко, О.В. Полисмак // Новые исследования. -2012. - № 1-2. - С. 212.

3 Пежемский Д.В. Изменчивость продольных размеров трубчатых костей человека и возможности реконструкции телосложения : автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.03.02 / Пежемский Денис Валерьевич. - М., 2011. - 21 с.

4 Шапаренко П.Ф. Масса тела величина интегрирующая с развитием разнонаправленных признаков, характеризующих тело человека / П.Ф. Шапаренко // Морфология. - 1999. - Т. 116. - № 4. - С. 64-67.

5 Martinovic, D. Quantitative differences in anthropometric characteristics of preschool boys ang girls / D. Martinov-ic, V. Pelemis, D. Brancovic // Journal Plus Education / Educatia Plus. - 2012. - Vol. 8. - Issue 2. - P. 99.

6 Spahiu T., Shehi E. and Piperi E. Anthropometric Studies: Advanced 3D Method for Taking Anthropometric Data in Albania // International Journal of Innovative Research in Science, Engineering and Technology. - Vol. 4. - Issue 4. - April. - 2015. - P. 2137-2142.

Рукопись получена: 18 ноября 2016 г. Принята к публикации: 23 ноября 2016 г.

УДК 616-001.4

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ КАРТИНА ТЕЧЕНИЯ РАНЕВОГО ПРОЦЕССА В ПЕРЕДНЕЙ БРЮШНОЙ СТЕНКЕ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПОВРЕЖДЕНИИ

© 2016 А.А. Супильников1, Ю.В. Григорьева2, А.А. Девяткин3, О.Н. Павлова1, С.Д. Литвинов1

1 Частное учреждение образовательная организация высшего образования «Медицинский университет «Реавиз»

2 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

^Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Самарская городская клиническая больница № 1

им. Н.И. Пирогова»

Проведенное сравнительное морфологическое исследование течения раневого процесса в лапаротомной ране с созданием различных условий при регенерации, а именно ушивании краев раны «край в край», путем наложение дубликатуры с использованием аллогенного материала позволило установить, что раневой процесс протекает по общим законам воспаления, с последовательной сменой фаз альтерации, экссудации и пролиферации. Однако вмешательство в ход течения приводит его к изменениям во времени и морфологической картине.

У крыс экспериментальной группы с созданием натяжения брюшной стенки преобладает экссудативная фаза воспаления, а в экспериментальной группе при применении материала «ЛитАр» - пролиферативная фаза воспаления. Во всех трех группах опыта к 21 суткам формируется соединительнотканный рубец, но в контрольной группе, ране ушитой «край в край» специализированной мышечной ткани наблюдается наименьшее количество. Она замещается на волокнистую соединительную и жировую ткань, при этом жировая ткань не несет опорной функции, что патогномонически может свидетельствовать о несостоятельности рубца. При создании натяжения брюшной стенки мышечная ткань сохраняется, присутствует небольшое количество жировой ткани, а погибшие мышечные волокна замещаются волокнистой соединительной тканью, что на наш взгляд можно расценить как положительную динамику исхода раневого процесса. При применении препарата «ЛитАр» в зоне лапаратомной раны течение раневого процесса протекает с преобладанием пролиферативной фазы воспаления, а именно с развитием гранулематозного воспаления и появлением гигантоклеточных гранулем вокруг препарата «ЛитАр». К 21 суткам течения репаративного процесса воспаления не заканчиваются, что не позволяет судить об его исходе.

Ключевые слова: раневой процесс, дубликатура, крысы, материал «ЛитАр».

Введение. Раневой процесс - совокупность общепатологических процессов, протекающих при повреждении тканей в ране, имеющих фазность течения, которые направлены на удаление погибших тканей и восстановление утраченных структур.

В настоящее время выделено несколько классификаций раневого процесса, отличающихся положенными в их основу критериями (морфологические изменения в ране, биохимические изменения, изменения силы натяжения раны и т.д.) [1, 3, 4]. Такой спектр разнообразных классификаций указывает на то, что ни одна из существующих классификаций, на данный момент, не раскрывает всей полноты процессов, сопровождающих заживление раны.

По современным данным, течение раневого процесса условно подразделяют на 3 основные фазы: 1 фаза - воспаления; 2 фаза - регенерации; 3 фаза - организации рубца и эпители-зации. Наиболее изучен и широко распространен взгляд на воспалительную фазу как на три связанных между собой и одновременно протекающих явлений: тканевую дистрофию (альтерацию), расстройство кровообращения (экссудацию и эмиграцию) и размножение клеточных элементов (пролиферацию) [3, 4].

При этом закономерным является лишь последовательность смены фаз раневого процесса, которые характеризуются морфофункциональными изменениями в тканях раны, длительность фаз раневого процесса определить невозможно (Leaper, 2004; Nichols, 2001).

Для лучшего понимания патоморфоза раневого процесса, и с целью разработки методов управления течением раневого процесса, немаловажно подробно изучить все морфологические процессы, происходящее в ране. Поэтому в основе такого подхода должны лежать экспериментальные исследования с моделированием повреждений [2, 5, 6, 7, 8].

Учитывая вышесказанное, целью исследования явилось изучение морфологической картины различных фаз раневого процесса в передней брюшной стенке у животных при ее экспериментальном повреждении и с моделированием различных условий его течения.

Для достижения поставленной цели был определен ряд задач:

1. Смоделировать раневой процесс в тканях передней брюшной стенки у крыс с преобладанием различных фаз воспаления.

2. Выяснить морфологические отличия в ходе раневого процесса в лапаротомной ране передней брюшной стенки с различными условиями его течения с целью возможного прогнозирования его исхода.

Материал и методы исследования. Эксперименты проведены на 54 белых беспородных крысах-самцах массой 190-210 г. Было поставлено 3 группы опытов в трех повтор-

ностях. Динамику раневого процесса изучали на 1, 3, 5, 7, 14 и 21 сутки эксперимента. Экспериментальные исследования на животных проводили в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных».

В первую группу эксперимента вошли животные, которым под эфирным наркозом по средней линии живота рассекали кожу, подкожную клетчатку и апоневроз белой линии живота. После чего апоневроз, клетчатку и кожу ушивали край в край узловыми швами нитью Prolen 3/0. Эта группа служила контролем для изучения течения раневого процесса, без каких либо дополнительных вмешательств.

Вторая группа животных использовалась для создания модели натяжения тканей передней брюшной стенки. Для этого у экспериментальных животных была применена следующая методика. Под эфирным наркозом по средней линии живота разрезом длиной 4 см рассекали кожу, подкожную клетчатку и апоневроз белой линии живота. После отделения кожи от апоневроза его края сшивали продольно путем создания дубликатуры на ширину, равную 10 мм. Апоневроз фиксировали двумя рядами швов нитями Prolen 3.0 (первый П-образный, второй -простой узловой).

В третьей группе животных мы создавали модель изменения течения раневого процесса с помощью аллогенного трансплантата. В этой группе животным под эфирным наркозом также была выполнена лапаротомия, но ушивая апоневроз «край в край» узловыми швами нитью Prolen 3/0, на область раны помещали пластинку стерильного нанокомпозитного материала «ЛитАр» размерами 10*5 мм, толщиной 1 мм.

Ткани передней брюшной стенки с лапаротомной раной фиксировали в забуференном формалине, проводку осуществляли в гистологическом процессоре замкнутого типа с вакуумом Leica ASP 300. Заливали материал в парафин «Histomix» фирмы Bio Optica. Фронтальные, сагиттальные и поперечные срезы готовили на роторном микротоме толщиной 4 мкм. Готовые срезы окрашивали гематоксилином и эозином, для визуализации соединительной и мышечной тканей по Ван Гизону.

В результате исследования установлено, что передняя брюшная стенка у крыс представляет собой многотканевую систему, основа которой образована косопереплетающимися пучками поперечнополосатых мышечных волокон от трех пар боковых мышц живота и прямой мышцы живота и сухожильных волокон.

Во всех экспериментальных группах раневой процесс протекал со сменой фаз воспаления, но при этом с морфологическими и временными вариациями.

После повреждения, на месте травмы происходит гибель всех компонентов тканей, образующих брюшную стенку на уровне белой линии. Тем ни менее, при гистологическом исследовании выявляется участок альтерации, который можно разделить на три зоны: центральная зона повреждения, прираневая зона и зона структурной целостности. Центральная зона соответствует краям сведения раны в первой и третьей группах эксперимента. Во второй группе центральная зона представлена участком дубликатуры брюшной стенки.

В первые сутки эксперимента во всех группах заметны проявления дистрофии и некроза клеток эпидермиса, а также подлежащих соединительной и мышечной тканей. Нарастают изменения со стороны системы кровообращения, повышается их проницаемость, развивается отек. К 3-м суткам формируется воспалительный выпот, представленный преимущественно нейтрофилами и макрофагами. В прираневых зонах первой и третьей группы эксперимента заметна отсроченность альтернативных процессов особенно со стороны скелетных мышечных волокон.

У животных 3-й группы эксперимента с имплантированным материалом «Лит Ар» в рану передней брюшной стенки, в срезах обнаруживаются фрагменты внесенного аллогенного материала (рис. 1). Проявления воспаления здесь выражены в виде густой лейкоцитарной инфильтрации как в ценральной, так и прираневой зонах.

Рис. 1. Передняя брюшная стенка экспериментальных животных на 3 сутки эксперимента при использовании материала «ЛитАр» в зоне апоневроза передней брюшной стенки. Выраженная нейтрофильная инфильтрация между волокнами мышечной ткани. Частицы «ЛитАра» на поверхности раны и между волокнами соединительной ткани. Окрашивание гематоксилином и эозином. Увел. 200Х

В экспериментальной группе, с формированием дупликатуры передней брюшной стенки, прираневая зона остается относительно интактной. Однако сформированное натяжение краев лапаротомной раны приводит к дополнительным повреждениям ткани от шовного материала (рис. 2).

Рис. 2. Участок передней брюшной стенки с лапаратомной раной, ушитой путем наложения дубликатуры на 5 сутки регенерации. Имеется след от локализации шовного материала с воспалительной инфильтрацией и пролиферацией соединительной ткани. Сохраняются отдельные пучки мышечных волокон и интерстициальный отек. Окраска Гематоксилином и эозином. Увел. 10Х

На 5-7 сутки эксперимента заметно снижение активности нейтрофилов, лейкоцитарный инфильтрат заменяется преимущественно на лимфоциты и макрофаги, особенно в третьей экспериментальной группе. В центральной зоне активно идут процессы пролиферации соединительной ткани. Отличия заметны в экспериментальной группе с включенным в раневой процесс аллогенным материалом. Здесь заметно появление многоядерных гигантских макрофагов.

Уже с 7-14 суток эксперимента в центральной зоне увеличивается количество волокнистой соединительной ткани, в толще встречаются и фрагменты сохранившихся мышечных волокон, появляются очаги жировой ткани. Согласно полученным данным, объемная плотность мышечной ткани в центральной зоне у животных всех трех экспериментальных групп на протяжении всего эксперимента была примерно на одном уровне. При этом объемная плотность соединительной ткани в центральной зоне у животных с натяжением брюшной стенки на протяжении всего эксперимента была меньше, чем в контроле, но достоверные отличия наблюдались только на 3 и 5 сутки опыта (меньше на 19,4 % и 13,79 % соответственно). Объемная плотность соединительной ткани в центральной зоне у животных с применением материала «ЛитАр» на протяжении всего опыта была достоверно больше, чем в контроле: на 1 сутки больше на 28,18 %, на 3 сутки - на 15,31 %, на 5 сутки - на 20,57 %, на 7 сутки - на 9,08 %, на 14 сутки - на 10,96 % и на 21 сутки больше на 11,17 %.

Объемная плотность жировой ткани в центральной зоне у животных экспериментальных групп была меньше, чем в контроле: у животных с натяжением брюшной стенки на 1 сутки опыта меньше на 47,80 %, на 3 сутки - меньше на 52,78 %, на 5 сутки - на 46,34 %, на 7 сутки - на 40,43 %, на 14 сутки - на 33,33 % и на 21 сутки - меньше на 33,87 %; у животных при применении материала «ЛитАр» объемная плотность жировой ткани была достоверно меньше, чем в контроле на 1, 3 и 5 сутки опыта на 26,09 %, 19,44 % и 9,76 % соответственно.

Однако даже через 3 недели после повреждения брюшной стенки в 3-й экспериментальной группе частицы «ЛитАра» сохранены, находятся в лакуне. Особенностью является увеличение клеток макрофагальной системы, которые вплотную подходят к лакуне с материалом «ЛитАр» (рис. 3). При применении препарата «ЛитАра», в зоне лапаратомной раны течение раневого процесса протекает с преобладанием пролиферативной фазы воспаления, а именно с развитием грану-лематозного воспаления и появлением гигантоклеточных гранулем вокруг материала «ЛитАр».

Рис. 3. Центральная зона передней брюшной стенки крыс на 21 сутки опыта. Гранулематозное воспаление с включением многоядерных клеток инородных тел вокруг остатков материала «ЛитАр» Окраска:

гематоксилином и эозином. Увел. 400Х

В остальных экспериментальных группах подобных изменений не наблюдается. Отмечается формирование соединительнотканного рубца, нарастает количество сосудов и их ветвлений. Заметными становятся проявления компенсаторно-приспособительных изменений в тканях, в виде гипертрофии и атрофии отдельных мышечных волокон.

Таким образом, независимо от создания различных условий течения раневого процесса, он протекает по общим законам процесса - воспаления, с последовательной сменой фаз альтерации, экссудации и пролиферации. Однако вмешательство в его ход приводит к изменениям во времени и морфологической картине основных фаз.

Полученные данные позволяют нам сделать вывод, что у животных контрольной группы и у крыс с натяжением брюшной стенки преобладает экссудативная фаза воспаления, а при применении материала «ЛитАр» - пролиферативная фаза воспаления. Однако во всех трех вариантах опыта к 21 суткам формируется соединительнотканный рубец, но в контрольной группе специализированной мышечной ткани наблюдается наименьшее количество, так как она замещается на соединительную и жировую ткань, при этом жировая ткань не несет опорную функцию, что патогномонически может свидетельствовать о несостоятельности рубца. При натяжении брюшной стенки мышечная ткань сохраняется в большем количестве, присутствует небольшое количество жировой ткани, а погибшие мышечные волокна замещаются волокнистой соединительной тканью, что, на наш взгляд, можно расценить как положительную динамику исхода раневого процесса. При применении аллогенного трансплантата в лапаратомной ране к 21 суткам течения раневого процесса воспаления не заканчиваются, что не позволяет судить об его исходе.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Данилов Р.К., Гололобов В.Г., Григорян Б.А. и др. Гистогенетические основы раневого процесса // Морфология. - 2009. - Т. 136. - № 4. - С. 47-48.

2 Иванов И.С., Иванов С.В., Должиков А. А. и др. Влияние эмбриональных фибробластов на динамику раневого процесса при эндопротезировании брюшной стенки (экспериментальное исследование) / Человек и его здоровье. - 2009. - № 4. - С. 61-68.

3 Малышев В.В., Буланкина И.А., Лебединский В.Ю. и др. Биомеханические и морфофункциональные изменения структур кожи в патогенезе раневого процесса // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2000. - № 2. - С. 21-23.

4 Миронов В.И., Гилёва И.И. Раневой процесс: современные аспекты патогенеза // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2009. - Т. 89. - № 6. - С. 20-25.

5 Пушкин С.Ю. Оценка течения раневого процесса при грыжесечениях с использованием синтетических эн-допротезов // Аспирантский вестник Поволжья. - 2010. - № 3-4. - С. 114-115.

6 Фетисов В.А., Кривокорытов А.Л., Костяев А.А. и др. Актуальные вопросы управления раневым процессом при его патологии // Вятский медицинский вестник. - 2001. - № 1. - С. 26-27.

7 Харитонов С.В., Кузнецов Н.А., Немов И.Д. и др. Закономерности неосложненного раневого процесса у больных со срединной вентральной грыжей после различных видов пластики передней брюшной стенки // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. - 2013. - № 1. - С. 47-52.

8 Морфология внутренних органов и брюшной стенки крыс при синдроме абдоминального компартмента в эксперименте / Т. А. Федорина, В.И. Белоконев, А.А. Супильников, Л.Б. Гинзбург // Морфологические ведомости. -2008. - Т. 1. - № 3-4. - С. 82-83.

Рукопись получена: 2 декабря 2016 г. Принята к публикации: 7 декабря 2016 г.