МЕФЛОХИН И ЕГО КОМБИНАЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
MEFLOQUINE AND COMBINATIONS THEREOF FOR TREATING AND PREVENTING A CORONAVIRUS INFECTION

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и предназначено для лечения инфекции, вызванной вирусом из семейства коронавирусов. Настоящее изобретение раскрывает лекарственное средство и способ лечения и профилактики коронавирусной инфекции с применением мефлохина и его комбинаций с другими активными веществами, в частности, с антибиотиками.
Предшествующий уровень техники
В настоящее время всеобщее внимание привлекает вирусное заболевания, вызванное вирусом SARS-CoV-32 (corona virus disease 2019), относящимся к коронавирусам, в связи с тяжестью течения, отсутствием средств этиотропной терапии и молниеносным распространением. Коронавирусы (лат. Coronaviridae) — семейство, включающее на январь 2020 года 40 видов РНК-содержащих вирусов, которые поражают человека и животных. Название связано со строением вируса, шиповидные отростки которого напоминают солнечную корону.
За последние 20 лет наблюдали как минимум 3 вспышки коронавирусных инфекций (2002-2003 гг., 2015 г., 2019-2020 гг.). К коронавирусам, поражающим человека, в частности, относятся: вирус HCoV-229E, вирус HCoV-NL63, вирус HCoV-OC43, вирус HCoV-HKU1, вирус SARS-CoV (возбудитель SARS - атипичной пневмонии или тяжелого острого респираторного синдрома, вспышка зарегистрирована в 2002 году), вирус MERS-CoV (возбудитель MERS - ближневосточного респираторного синдрома, вспышка произошла в 2015 году), вирус SARS-CoV-2 (COVID-19, 2019-nCoV). Последний является причиной пандемии, которую ВОЗ объявила в марте 2020 г. Вспышка данной инфекции началась в китайском городе Ухань в декабре 2019 г., после чего за 2 месяца данная инфекция распространилась практически по всему миру. По состоянию на 13.04.2020 г., всего в мире заражено более 1,6 млн человек, при этом скончалось от коронавирусной инфекции более 100 тыс. человек.
SARS-CoV-2 характеризуется высокой вирулентностью, продолжительным инкубационным периодом и инициацией мощного патологического провоспалительного ответа – «цитокинового взрыва». Вызываемое им заболевание – COVID-19, которое в большинстве случаев протекает как острая респираторная вирусная инфекция (ОРВИ), связывают с частым развитием тяжелых респираторных осложнений (вирусная пневмония, дыхательная недостаточность, острый респираторный дистресс-синдром взрослых - ОРДС) и отсроченных поражений легких. Чаще всего тяжелое течение данной инфекции наблюдают у людей старше 65 лет, а также на фоне хронических заболеваний (бронхиальная астма, сахарный диабет, сердечно-сосудистые заболевания и др.).
В настоящее время эффективные схемы лечения и профилактики новой коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2, не разработаны, а терапия зачастую носит симптоматический и поддерживающий характер. Ингибиторы нейраминидазы, эффективные в отношении вирусов гриппа, при коронавирусной инфекции не продемонстрировали выраженной активности. Иммуномодуляторы, традиционно назначаемые при развитии ОРВИ, при COVID-19 могут приводить к усугублению состояния пациента, особенно при назначении на поздних стадиях заболевания. Антибиотики могут рассматриваться только как средство профилактики и лечения сопутствующих бактериальных осложнений, поскольку не оказывают влияния на вирус.
Предпринимаются попытки применения для лечения и профилактики COVID-19 препаратов, направленных против ВИЧ-инфекции, в частности, ингибиторов ВИЧ-протеаз (лопинавир, дарунавир). Ранее в экспериментах in vitro (на культуре клеток) и in vivo (на лабораторных животных) у этой группы препаратов была выявлена противовирусная активность в отношении SARS-CoV и MERS-CoV, генетический материал которых на 80 % совпадает с SARS-CoV-2. Однако результаты клинического применения лопинавира/ритонавира не позволили доказать его эффективность [Cao B., 2020]. Были разработаны схемы, включающие лопинавир/ритонавир в комбинации с интерфероном бета-1b или интерфероном альфа и рибавирином [Bhatnagar T., 2020], однако целесообразность их применения является спорной [Jin Y.H., 2020].
Клиническое исследование лопинавира/ритонавира, проведенное в Китае с участием 199 пациентов, позволило сделать следующие выводы [Cao B., 2020]:
- отсутствие влияния на показатель смертности через 28 сут;
- отсутствие влияния на частоту выявления вирусной РНК у пациентов в различные сроки после начала терапии;
- среднее время достижения клинического улучшения у пациентов не превышало 1-х суток.
При введении лопинавира/ритонавира пациентам с тяжелой формой COVID-19 не было выявлено никаких преимуществ по сравнению со стандартным лечением (стандартный уход без применения специфических противовирусных препаратов) [Jin Y.H., 2020]. Отмечена низкая доказательность эффективности применения данной комбинации при COVID-19. При этом следует отметить, что в 14-30 % случаев пациенты с коронавирусной инфекцией прекращали прием лопинавира в связи с выраженными побочными эффектами [Cao B., 2020; Liu F., 2020].
Были изучены и другие препараты, показавшие свою эффективность для лечения коронавирусной инфекции, вызванной SARS и MERS. Наибольшая активность в отношении SARS-CoV-2 в экспериментах in vitro была выявлена у ремдизивира (ингибитор РНК-зависимой РНК-полимеразы), хлорохина и гидроксихлорохина (противомалярийные препараты)
90
Ремдезивир рассматривается как одно из наиболее перспективных средств химиотерапии COVID-19. Минимальная подавляющая концентрация препарата в культуре клеток составляет 0,77 мкМ, а EC (концентрация препарата, вызывающая снижение копий вируса на 90 %) составляет 1,76 мкМ. Однако в настоящее время известен только один случай успешного клинического применения препарата у пациента с коронавирусной инфекцией.
Другой группой препаратов, у которых отмечена противовирусная активность в отношении SARS-CoV2, являются производные 4-аминохинолина – хлорохин и гидроксихлорохин. В исследованиях in vitro хлорохин показал себя как разносторонний противовирусный агент, проявивший активность как в отношении РНК- (вирус бешенства; вирус полиомиелита; HIV; вирусы гепатитов А и С; вирусы гриппа А и В в частности, вирус гриппа H5N1; вирусы лихорадки Чикунгунья, Денге, Зика, Ласса, Эбола; вирус Конго-крымской геморрагической лихорадки), так и в отношении ДНК-содержащих вирусов (вирус гепатита В; вирус простого герпеса) [Devaux CA., 2020]. В ряде случаев противовирусные свойства хлорохина были подтверждены в исследованиях на инфицированных пациентах. Как альтернатива хлорохину рассматривается гидроксихлорохин, который является производным хлорохина, характеризуется меньшей токсичностью и применяется для лечения аутоиммунных заболеваний.
50
50
3
Была продемонстрирована способность хлорохина и гидроксихлорохина подавлять цитопатическое действие SARS-CoV в исследованиях на культуре клеток [Biot C., 2006], при этом активность хлорохина была примерно в пять раз выше, чем активность гидроксихлорохина (EC в культуре клеток составила 6,5±3,2 мкМ и 34±5 мкМ, а индекс селективности - >15 и >3, соответственно). Еще большая противовирусная активность хлорохина установлена в отношении штамма HCoV-OC43 (возбудитель атипичной пневмонии). EC хлорохина по подавлению репликации вируса в культуре клеток составила 0.306 ± 0.091 мкM, а индекс селективности – 1369. В экспериментах на мышах установлено, что препарат в дозе 15 мг/кг (около 80 мг в пересчете на человека) обеспечивал выживаемость мышей при заражении HCoV-OC43 в дозе 10 копий [Keyaerts E., 2009]. Блокирующее действие хлорохина на репликацию вируса MERS проявлялось при концентрациях препарата 3-8 мкМ [de Wilde AH., 2014].
50
В сравнительном исследовании противовирусной активности хлорохина и гидроксихлорохина in vitro [Liu J., 2020] было показано, что в диапазоне MOI от 0,01 до 0,8 (MOI - multiplicities of infection, отношение количества вирусных частиц к количеству клеток в культуре) ED через 48 ч после заражения для хлорохина составила 2,71-7,36 мкМ, а для гидроксихлорохина – 4,51-12,96 мкМ. При этом цитотоксическая доза для обоих препаратов более чем в 100 раз превышала среднеэффективную.
50
В другом исследовании [Yao X., 2020] при использовании MOI=0,01 и внесении гидроксихлорохина в среду переживания через 2 ч после начала инкубации культуры клеток с вирусными частицами EC через 24 ч составило 6,14 мкМ (2060 мкг/л), а через 48 ч – 0,72 мкМ (258 мкг/л).
В предварительных клинических исследованиях, проведенных в Китае с участием 100 пациентов, инфицированных SARS-CoV-2, было отмечено, что на фоне применения хлорохина более быстро проходит лихорадка, улучшается состояние легких по результатам компьютерной томографии и в более ранние сроки наступает выздоровление по сравнению с группой контроля [Agrawal S., 2020]. В пилотном клиническом исследовании, проведенном во Франции с участием 20 пациентов, было показано, что применение гидроксихлорохина при COVID-19 позволяет снизить вирусную нагрузку и ускорить выздоровление [Gautret P, 2020]. Ускорение элиминации вирусной РНК, регистрируемое по результатам ПЦР-анализа, может достигаться при комбинированном введении гидроксихлорохина с азитромицином. Вместе с тем, исследования, которые позволят сделать окончательный вывод о противовирусной активности производных 4-аминохинолина при их применении для лечения COVID-19, в настоящее время не завершены.
Наряду с тем, что в настоящее время активность хлорохина и гидроксихлорохина в отношении коронавируса SARS-CoV-2 отмечена только в пилотных исследованиях, данные препараты характеризуются выраженным побочным действием. Наиболее серьезные негативные эффекты отмечены со стороны органа зрения (помутнение роговицы, поражение сетчатки глаза, нарушение зрения), центральной нервной системы (головокружение, потеря сознания, нарушение сна, галлюцинации, психические нарушения, полиневропатия) и сердечно-сосудистой системы (нарушения ритма, повышение артериального давления). К частым побочным эффектам относятся рвота, диарея, боли в животе, повышение активности трансаминаз.
Таким образом, в настоящее время не зарегистрировано препаратов, предназначенных для этиотропной терапии COVID-19, хотя потребность в средствах эффективного лечения и профилактики инфекции, вызванной вирусом из семейства коронавирусов, постоянно увеличивается на фоне развития пандемии.
Настоящее изобретение предлагает эффективную схему лечения и профилактики COVID-19 со следующими преимуществами:
- эффективность при лечебном применении в виде монотерапии и в комбинации с антибиотиками, при этом наблюдается:
а) ускорение элиминации вирусной РНК при ПЦР-анализе;
б) сокращение сроков лечения (продолжительность лихорадки, скорость снижения концентрации C-реактивного белка и другие);
в) снижение числа осложнений (развитие пневмонии у пациентов с легкой формой заболевания; развитие дыхательной недостаточности и ОРДС).
- эффективность при профилактическом применении лицами, контактировавшими с заболевшим, как одно-, так и многократно, при этом наблюдается:
а) снижение частоты заболевания COVID-19;
б) снижение частоты развития осложнений при заболевании COVID-19.
Описание изобретения
Настоящее изобретение предлагает применение мефлохина в качестве лекарственного средства для профилактики и лечения инфекции, вызванной вирусом из семейства коронавирусов. При этом возбудителем вирусной инфекции может быть вирус вида SARS-CoV-2 (Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2).
Согласно изобретению, предложено применение мефлохина для лечения инфекции в дозе от 250 мг до 1500 мг в сутки. Мефлохин может быть принят перорально или введен пациенту гастроэнтерально, единовременно или дробно, например, разделив суточную дозу на 2- 3 раза по 250 мг – 750 мг. Курс лечения инфекции, вызванной вирусом из семейства коронавирусов, составляет от 3-х до 14-ти дней. В течение курса лечения мефлохин может вводиться в комбинации с дополнительным лекарственным средством. Это дополнительное лекарственное средство может представлять собой средство, выбранное из группы, включающей антибиотики, противовирусные средства, препараты интерферона, антитела. Например, в качестве антибиотиков может применяться кларитромицин, азитромицин, амоксициллин, клавуновая кислота. Согласно изобретению, при применении для лечения коронавирусной инфекции мефлохин вводят в комбинации с кларитромицином, доза которого составляет от 500 до 1000 мг в сутки, возможно, дробно 2 раза в день. Введение может быть осуществлено перорально или внутривенно капельно. Также в качестве дополнительного средства может быть применен азитромицин, а также амоксициллин с клавулановой кислотой. Азитромицин в комбинации с мефлохином может вводиться в количестве от 500 мг до 1000 мг азитромицина в сутки, внутрь по 500-1000 мг 1 раз в день, или внутривенно капельно по 500 мг 1 раз в день.
Противовирусные препараты могут включать препараты против ВИЧ-инфекции, например, лопинавир, ритонавир и их комбинации, дарунавир, ремдезивир, пенцикловир, фавипиравир. Препараты интерферона включают интерферон альфа и бета группы, например, интеферон бета-1b, интерферон альфа и другие. Антитела могут включать антитела к белкам коронавируса, вызвавшего развитие инфекции, а также другие антитела, например, антитела к интерлейкину-6 – тоцилизумаб, сарилумаб.
Кроме того, согласно настоящему изобретению, предлолжено применение мефлохина для профилактики инфекции, вызванной вирусом из группы семейства коронавирусов, в частности, для профилактики инфекции, вызванной SARS-CoV, SARS-CoV-2. Для профилактики инфекции мефлохин вводят в дозе от 250 до 750 мг в сутки. Мефлохин можно вводить перорально, в 1-3 приема, например, 1-3 раза в сутки, разделив общее количество на соответствующее количество приемов. Курс профилактики может составлять до 3-х дней, при приеме 1-2 раза в сутки. Далее, согласно изобретению, возможно снижение общего количества мефлохина, принимаемого для профилактики, до приема 1 раз в неделю в количестве от 250 до 500 мг, при этом курс еженедельного приема может составлять от 2 до 8 недель.
Подробное описание изобретения
Мефлохин представляет собой производное 4-метанзинолина,(R*,S*)-(±)-альфа-2-Пиперидинил-2,8-бис-(трифторметил)-4-хинолин-метанол, следующей формулы
.
Мефлохин (в России известен по торговым наименованием «Мефлохин», за рубежом – под торговым наименованием «Лариам»), известен как противомалярийное, противопротозойное лекарственное средство. Он обладает высокой гематошизонтоцидной активностью в отношении Plasmodium falciparum и P. vivax, не эффективен в отношении гамонтов P. falciparum и печеночных гистошизонтов P. vivax, может действовать на циркулирующих шизонтов P. ovale и P. malariae.
Согласно настоящему изобретению, мефлохин в количестве от 200 до 1500 мг мефлохина в сутки можно вводить для лечения или профилактики инфекции, вызванной вирусом из семейства короновирусов. К коронавирусам относят, в частности, следующие типы вирусов: HCoV-229E, вирус HCoV-NL63, вирус HCoV-OC43, вирус HCoV-HKU1, вирус SARS-CoV (возбудитель атипичной пневмонии или тяжелого отсрого респираторного синдрома), вирус MERS-CoV (возбудитель ближневосточного респираторного синдрома), вирус SARS-CoV-2 (COVID-19, 2019-nCoV). В частности, согласно настоящему изобретению мефлохин применяют в качестве лекарственного средства против вирусов SARS-CoV, MERS-CoV, SARS-CoV-2 (COVID-19, 2019-nCoV), особенно предпочтительно – против вируса SARS-CoV-2 (COVID-19, 2019-nCoV). Данный вирус характеризуется высокой вирулентностью и инкубационным периодом до 14 дней. При протекании в легкой форме обладает сходством симптомов с острой респираторной вирусной инфекцией, которая развивается под действием вируса гриппа. При протекании в среднетяжелой форме заболевание характеризуется развитием вирусной пневмонии и высокой частотой осложнений (тяжелое течение), к числу которых относится острая дыхательная недостаточность, ОРДС, сепсис. Диагноз подтверждается при выявлении РНК вируса при проведении ПЦР или выявлении антител к белкам вируса методом ИФА.
Таким образом, диагноз коронавирусной инфекции может быть поставлен только после проведения ряда тестов, например, взяв мазок из горла или носа или кровь на анализ, и определив наличие нуклеиновой кислоты вируса, или последовательностей нуклеотидов, характерных для вируса, или антител против вируса по результатам постановки ПЦР или выполнения ИФА.
Согласно изобретению, для лечения мефлохин вводят в разовой дозе от 250 до 750 мг. Общая суммарная суточная доза может составлять от 250 до 1500 мг. При этом, общая суммарная доза мефлохина может быть разделена на 2-3 приема в течение суток, в количестве от 250 до 750 мг. Мефлохин может быть введен пациенту перорально, например, в виде таблетки, капсулы, суспензии, раствора, сиропа, с добавлением вспомогательных веществ, необходимых для получения стабильной дозированной формы, или гастроэнтерально, например, назогастрально, через зонд, в виде суспензии. Предпочтительно мефлохин вводят в виде таблеток, по 250 мг каждые 8 часов, 2-3 раза в день. Дополнительно, прием мефлохина должен сопровождаться приемом большого количества воды или осуществляться после еды.
Лечение мефлохином проводят курсом, в течение 3-14 дней. Суммарная доза при введении пациенту может варьироваться, в зависимости от дня лечения, тяжести заболевания, и других параметров, определяемых лечащим врачом. В частности, мефлохин можно принимать по следующей схеме:
1-й день: 750 мг мефлохина в сутки, внутрь, в таблетках по 250 мг 3 раза в день – по 1 таблетке каждые 8 часов.
2-й день: 500 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 2 раза в день – по 1 таблетка каждые 12 ч.
3-й – 7-й день: по 250 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 1 раз в день в одно и то же время.
Мефлохин может быть использован в комбинации с дополнительными лекарственными средствами, например, антибиотиками, другими противовирусными средствами, препаратами интерферона, антителами. Например, мефлохин можно вводить в комбинации с кларитромицином, азитромицином, амоксициллином и клавулановой кислотой. Дозы кларитромицина, азитромицина могут варьироваться в зависимости от тяжести заболевания, массы пациента, сопутствующих заболеваний и иных параметров, влияющих, по мнению лечащего врача, на ход лечения и количество применяемого лекарственного средства. Например, для лечения COVID-19 мефлохин могут вводить пациенту в комбинации с кларитромицином, доза которого составляет от 500 до 1000 мг в сутки, возможно, дробно 2 раза в день. Введение может быть осуществлено перорально или внутривенно капельно. Также мефлохин может быть введен в комбинации с азитромицином, при этом азитромицин может вводиться в дозе от 500 мг до 1000 мг азитромицина в сутки, внутрь по 500-1000 мг 1 раз в день, или внутривенно капельно по 500 мг 1 раз в день.
Комбинации мефлохина и кларитромицина, или мефлохина и азитромицина, могут представлять собой единую дозированную форму, содержащую мефлохин и кларитромицин или мефлохин и азитромицин, или набор с отдельными дозированными формами мефлохина и кларитромицина или мефлохина и азитромицина.
Настоящее изобретение при введении мефлохина в указанных количествах в комбинации с антибиотиками позволяет повысить эффективность мефлохина при его введении в виде монотерапии. При этом наблюдается ускорение элиминации вирусной РНК при ПЦР-анализе, сокращение сроков лечения инфекции, и снижение частоты осложнений.
Также, согласно изобретению, мефлохин может применяться при экстренной или плановой профилактике инфицирования вирусами из семейства коронавирусов, в частности, типами SARS-nCoV, SARS-CoV-2. Данная профилактика особенно значима у лиц, однократно или многократно контактирующих с инфицированными пациентами, например: у медицинского персонала; у лиц, ведущих осмотр на входе в учреждение; у лиц, занятых на особо важной работе. Для профилактики инфекции мефлохин вводят в дозе от 250 до 750 мг в сутки. Мефлохин можно вводить перорально, в 1-3 приема, например, 1-3 раза в сутки, разделив общее количество на соответствующее количество приемов. Курс профилактики может составлять до 3-х дней, при приеме 1-2 раза в сутки. Далее, согласно изобретению, возможно снижение общего количества мефлохина, принимаемого для профилактики, до приема 1 раз в неделю в количестве от 250 до 500 мг, при этом курс еженедельного приема может составлять от 2 до 8 недель. При этом, желательно, чтобы еженедельные дозы препарата вводили в один и тот же день недели, предпочтительно запивая большим количеством воды или после еды. Мефлохин может быть введен перорально, например, в виде таблеток, капсул, суспензии, раствора или сиропа, с добавлением вспомогательных веществ, необходимых для получения стабильной дозированной формы, или гастроэнтерально.
При профилактике мефлохином отмечена эффективность в виде снижения количества заболевших, а также частота осложнений при COVID-19 (развитие пневмонии, развитие дыхательной недостатoчности и ОРДС) (острой респираторной дыхательной недостаточности)).
Далее изобретение будет проиллюстрировано примерами, которые не предназначены для ограничения объема изобретения.
Примеры
Пример 1
Оценка эффективности мефлохина в отношении коронавируса
SARS-CoV-2 на культуре клеток
Изучение противовирусной активности мефлохина проводили в системах in vitro на культурах клеток почки зеленой мартышки линии Vero E6. При изучении противовирусной активности использовали штамм вируса SARS типа SARS-CoV-2, выделенный от пациентов с диагнозом COVID-19 и клиническими признаками заболевания, у которых диагноз был подтвержден при выявлении РНК вируса в мазках из носоглотки методом ПЦР.
Для определения противовирусной эффективности мефлохина оценивали показатель снижения уровня накопления вируса под действием препарата, а также рассчитывали коэффициент ингибирования. Исследуемый препарат вносили через 2 ч после инфицирования, инфицирующая доза составляла 0,01 ЦПД/клетку. Отмечали концентрацию мефлохина, которая полностью предотвращала цитотоксическую активность вируса в отношении культур.
В серии предварительных экспериментов оценивали цитотоксическое действие мефлохина в отношении клеточной линии Vero E6. Было показано, что в концентрациях от 0,5 мкМ до 18,0 мкМ мефлохин не вызывал визуально наблюдаемых изменений клеток. Более высокие концентрации препарата оказались цитотоксичными.
При изучении влияния мефлохина на цитотоксическую активность вируса было установлено, что препарат в концентрации 4,7 мкМ полностью подавлял способность вируса SARS-CoV-2 вызывать цитопатический эффект в монослое культур клеток через 48 ч после инфицирования, а в концентрации 3,0 мкМ подавляющая способность составила около 60%.
50
При изучении подавления репродукции вируса SARS-CoV-2 в культуре клеток Vero E6 под действием мефлохина было показано, что препарат эффективно предотвращал репликацию вируса через 72 ч после инфицирования в концентрациях более 3,0 мкМ. Уровень подавления накопления вируса при данной концентрации составил 1,4±0,2 lg ЦПД/мл при этом коэффициент ингибирования составил более 92,5 %. Учитывая результаты изучения цитотоксичности и противовирусной эффективности мефлохина, величина химиотерапевтического индекса для данного препарата составила 6,0.
Таким образом, мефлохин полностью предотвращал цитопатическое действие вируса SARS-CoV-2 в культуре клеток в концентрации 4,7 мкМ, что составляет 2,0 мкг/мл.
Пример 2
Определение концентрации мефлохина в плазме крови после однократного перорального приема в дозах 750-1500 мг
В исследовании, проводившемся с участием здоровых добровольцев мужского пола в возрасте 18-45 лет, проводили сравнительное исследование фармакокинетических параметров мефлохина после однократного перорального введения в дозах 750 мг и 1500 мг. Количество добровольцев в каждой группе составило 6 человек. Кроме того, оценивали динамику концентрации мефлохина в плазме крови на 2-й и на 3-й день после курсового приема препарата по следующей схеме: 1-й день – 750 мг, 2-й день – 500 мг, 3-й день 250 мг. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1. – Концентрация мефлохина в плазме крови здоровых добровольцев после введения в дозах 750 мг и 1500 мг.
Показатель
Значение
1-й день (750 мг)
2-й день (+500 мг)
3-й день (+250 мг)
1500 мг однократно
С<sub>max, </sub>мкг/мл
0,65(0,4-1,5)
1,28(0,9-3,4)
2,2(1,4-3,8)
1,3(0,7-2,8)
Время достижения максимальной концентрации мефлохина в плазме крови после приема препарата в дозе 750 мг составило 15,4 ч, а период полувыведения - 17,6±3,4 сут. Учитывая длительный период полувыведения, повторное введение мефлохина на 2-й и 3-й дни сопровождалось нелинейным увеличением концентрации препарата в плазме крови в 1,97 раз и 1,71 раз, соответственно. Этот эффект мог быть связан с замедлением метаболизма мефлохина в печени или перераспределением его связанной и свободной фракции.
Таким образом, при курсовом введении мефлохина по схеме, описанной выше, концентрация препарата, обеспечивающая его противовирусное действие (~2 мкг/мл), достигается на 2-е – 3-е сутки.
Пример 3
Влияние кларитромицина на концентрацию мефлохина в плазме крови после однократного введения
В сравнительном исследовании, проводившемся с участием здоровых добровольцев мужского пола в возрасте 18-45 лет, оценивали влияние кларитромицина на фармакокинетические параметры мефлохина после однократного перорального введения.
Добровольцы группы 1 (6 человек) принимали мефлохин в дозе 750 мг.
Добровольцы группы 2 принимали мефлохин в дозе 750 мг в комбинации с кларитромицином в дозе 500 мг.
Сравнение основных фармакокинетических показателей показало, что максимальная концентрация мефлохина в плазме крови составила 0,65±0,21 мкг/мл и 0,89±0,29 мкг/мл у добровольцев группы 1 и группы 2, соответственно (различия между группами достоверны при р<0,05), при этом время достижения максимальной концентрации мефлохина в плазме крови на фоне приема кларитромицина увеличилось с 15,4 ч до 16,8 ч. Показатель AUC (показатель AUC «площадь под кривой «концентрация-время») после введения мефлохина составил 18,2±5,3 мкг/мл*сут, а после введения мефлохина в комбинации с кларитромицином увеличился до 21,9±9,6 мкг/мл*сут. Период период полувыведения мефлохина составил 17,6±3,4 сут и 15,0±3,5 сут, а кажущийся объем распределения - 19,6±2,9 л/кг и 14,7±5,9 л/кг в группах 1 и 2, соответственно (для обоих показателей различия между группами достоверны при р<0,05).
Таким образом, комбинированное введение мефлохина с кларитромицином позволяет достичь более высокой концентрации мефлохина в плазме крови, что способствует более быстрому достижению концентрации, препятствующей распространению и репликации вируса. При этом сокращается кажущийся объем распределения препарата и ускоряется его выведение из организма, что может способствовать снижению частоты развития побочных эффектов.
Пример 4
Применение мефлохина для лечения пациентов с инфекцией, вызванной вирусом из семейства коронавирусов.
Отбирали пациентов, которым на основании клинических и лабораторных данных был поставлен диагноз: «Новая коронавирусная инфекция CОVID-19 (подтвержденная), легкая форма». Критериями постановки диагноза в соответствии с методическими рекомендациями Министерства здравоохранения Российской Федерации «Временные методические рекомендации. Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19)», Версия 5 (02.04.2020 г.) являлись:
- положительный результат анализа мазка из носоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР;
- симптомы ОРВИ (сухой кашель, боль в горле, слабость, симптомы интоксикации);
- температура тела менее 38,5 °С;
- ЧД ≤ 22/мин, SpO2≥93 %;
- концентрация С-реактивного белка в плазме крови ≤10 мг/л;
- отсутствие признаков пневмонии по результатам компьютерной томографии органов грудной клетки.
В зависимости от проводимой терапии, пациенты были разделены на две группы:
1) Группа 1: пациенты, которым проводили симптоматическое лечение (без назначения препаратов, обладающих противовирусной активностью).
2) Группа 2 - пациенты, которые принимали мефлохин по следующей схеме:
• 1-й день: 750 мг мефлохина в сутки, внутрь, в таблетках по 250 мг 3 раза в сутки – по 1 таблетке каждые 8 часов.
• 2-й день: 500 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 2 раза в сутки – по 1 таблетка каждые 12 ч.
• 3-й – 7-й день: по 250 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 1 раз в сутки в одно и то же время.
Препарат принимали, запивая большим количеством воды, по возможности – после еды.
Результаты ПЦР-анализа через 5 суток и 11 суток после начала лечения представлены в таблице 2.
Группа
Частота выявления РНК SARS-CoV-2при ПЦР-анализе
на 5 сут
на 11 сут
n
%
Уровень значимости
n
%
Уровень значимости
Симптоматическая терапия (n=20)
3/20
15
0,031
4/20
20
0,023
Мефлохин (n=20)
12/18
66,7
15/18
83,3
Через 5 суток после начала лечения у 66,7 % пациентов, которые принимали мефлохин, ПЦР-анализ не выявил вирусной РНК в мазках из носоглотки, в то время как у пациентов с симптоматической терапией отсутствие вирусной РНК по результатам ПЦР-анализа наблюдали только у 15 % пациентов, различия между группами были достоверны при р<0,05. Через 11 суток после начала лечения у 83,3 % пациентов, которые принимали мефлохин, ПЦР-анализ не выявил вирусной РНК в мазках из носоглотки, в то время как у пациентов с симптоматической терапией отсутствие вирусной РНК по результатам ПЦР-анализа наблюдали у 20 % пациентов, различия между группами не достоверны.
Таким образом, мефлохин способствовал более быстрой элиминации вирусной РНК у пациентов, инфицированных SARS-CoV-2.
Пример 5
Применение мефлохина в комбинации с азитромицином и кларитромицином для лечения пациентов с инфекцией, вызванной вирусом из семейства коронавирусов
Отбирали пациентов, которым на основании клинических и лабораторных данных был поставлен диагноз «Новая коронавирусная инфекция CОVID-19 (подтвержденная), легкая форма» или «Новая коронавирусная инфекция CОVID-19 (подтвержденная), тяжелая форма, внебольничная двусторонняя пневмония. Критерии диагностики легкой формы заболевания представлены в Примере 4. Критериями диагностики среднетяжелой формы в соответствии с методическими рекомендациями Министерства здравоохранения Российской Федерации «Временные методические рекомендации. Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19)», Версия 5 (08.04.2020 г.) являлись:
- положительный результат анализа мазка из носоглотки на наличие РНК SARS-CoV-2 методом ПЦР;
- признаки пневмонии по результатам выполнения компьютерной томографии органов грудной клетки;
- температура тела более 38,5 °С;
- сухой кашель, выраженные признаки интоксикации (жалобы на недомогание, слабость и быструю утомляемость; головную боль, мышечные боли), чувство заложенности в грудной клетке;
- одышка, ЧД > 22/мин, SpO2<93 %, концентрация С-реактивного белка в плазме крови >10 мг/л.
- отсутствие показаний к ИВЛ, отсутствие ОРДС, сепсиса, полиорганной недостаточности.
Выделяли три группы пациентов:
- группа 1: пациенты с COVID-19 легкого течения (n=20), которым проводили симптоматическое лечение без назначения препаратов, обладающих противовирусной активностью. В данную группу не были включены пациенты с среднетяжелой формой заболевания, поскольку таким пациентам обязательно назначалась противовирусная терапия;
- группа 2 – пациенты с COVID-19 среднетяжелого течения, которым назначали мефлохин и азитромицин по следующей схеме:
• 1-й день: 750 мг мефлохина в сутки, внутрь, в таблетках по 250 мг 3 раза в день – по 1 таблетке каждые 8 часов.
2-й день: 500 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 2 раза в день – по 1 таблетка каждые 12 ч.
3-й – 7-й день: по 250 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 1 раз в день в одно и то же время.
Препарат принимали, запивая большим количеством воды, по возможности – после еды. У части пациентов, которым невозможно было ввести препарат перорально, его вводили через назогастральный зонд, предварительно приготовив суспензию, мелко растерев мефлохин и добавив к нему дистиллированную воду из расчета 10 мл воды на 1 таблетку 250 мг.
• 500 мг азитромицина в сутки, внутрь по 500 мг 1 раз в день, на протяжении всего периода приема мефлохина.
- группа 3 – пациенты с COVID-19 среднетяжелого течения, которым назначали мефлохин и кларитромицин по следующей схеме:
• 1-й день: 750 мг мефлохина в сутки, внутрь, в таблетках по 250 мг 3 раза в день – по 1 таблетке каждые 8 часов.
2-й день: 500 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 2 раза в день – по 1 таблетка каждые 12 ч.
3-й – 7-й день: по 250 мг мефлохина, внутрь, в таблетках по 250 мг 1 раз в день в одно и то же время.
Препарат принимали, запивая большим количеством воды, по возможности – после еды. У части пациентов, которым невозможно было ввести препарат перорально, его вводили через назогастральный зонд, предварительно приготовив суспензию, мелко растерев мефлохин и добавив к нему дистиллированную воду из расчета 10 мл воды на 1 таблетку 250 мг.
• 1000 мг кларитромицина в сутки, внутрь по 500 мг 2 раз в день, на протяжении всего периода приема мефлохина.
Результаты ПЦР-анализа через 5 суток и 11 суток после начала лечения представлены в таблице 3.
Группа
Частота выявления РНК SARS-CoV-2при ПЦР-анализе
на 5 сут
на 11 сут
n
%
Уровень значимости
n
%
Уровень значимости
Группа 1(симптоматическая терапия, n=20)
3/20
15
-
4/20
35
-
Группа 2Мефлохин + азитромицин (n=10)
9/10
90
0,015
9/10
90
0,03
Группа 3Мефлохин + азитромицин (n=16)
14/16
87,5
0,014
16/16
100
0,01
При назначении пациентам со среднетяжелым течением COVID-19 мефлохина в комбинации с азитромицином или мефлохина в комбинации с кларитромицином в большинстве случаев (в 80-90 %) отмечали элиминацию вирусной РНК уже на 5-й день после начала лечения. Через 11 суток отрицательный ПЦР-анализ на вирусную РНК фиксировали у всех пациентов, принимавших мефлохин и кларитромицин, и у 90 % пациентов, принимавших мефлохин и азитромицин.
Таким образом, и азитромицин, и кларитромицин усиливали эффект мефлохина в отношении SARS-CoV-2. Препараты обеспечивали более быструю элиминацию вирусной РНК по результатам ПЦР-анализа мазков из носоглотки, полученных от пациентов с COVID-19.
Пример 6
Применение мефлохина для профилактики коронавирусной инфекции у людей, контактировавших с лицами, у которых по результатам ПЦР была диагносцирована новая коронавирусная инфекция CОVID-19
Устанавливали «контактный» медицинский персонал с повышенным риском заражения SARS-CoV-2 – врачей и медсестер, непосредственно работавших в «заразной зоне с пациентами, у которых по результатам ПЦР-анализа был поставлен диагноз «Новая коронавирусная инфекция (COVID-19)».
Их разделили на 2 группы по 40 человек:
1) группа 1 – медперсонал принимал мефлохин по следующей схеме:
1-й и 2-й дни: в дозе 500 мг в сутки, внутрь, в таблетках по 250 мг 2 раза в день – по 1 таблетке каждые 12 часов.
3-й день: мефлохин в дозе 250 мг в сутки, внутрь, в таблетках по 250 мг 1 раз в день.
Далее мефлохин принимается по 250 мг (1 таблетка) 1 раз в неделю в течение 6-ти недель. Препарат принимали в один и тот же день недели в одно и то же время, запивая большим количеством воды.
2) группа 2 – медперсонал принимал плацебо в аналогичной дозе и по аналогичной схеме.
Через 7-8 недель после начала приема мефлохина или плацебо определяли, у какого количества людей с повышенным риском инфицирования COVID-19 развились признаки заболевания, подтвержденные по результатам ПЦР.
Было установлено, что на фоне приема плацебо COVID-19 развилось в 35 % случаев, в то время как на фоне приема мефлохина заболевание развилось только в 10 % случаев (различия между группами статистически достоверны при р<0,05).
Таким образом, согласно настоящему изобретению, мефлохин может успешно применяться для лечения и профилактики новой коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2.