СПОСОБЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПОДСЛАСТИТЕЛЕЙ ВЫСОКОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ

1. Способ получения Соединения 1, имеющего структуру:
(1),
способ, включающий:
контакт могрозида IIIE с первым ферментом, способным катализировать образование Соединения 1 из могрозида IIIE.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что контакт могрозида IIIE с первым ферментом включает контакт могрозида IIIE с рекомбинантной клеткой-хозяином, которая содержит первый ген, кодирующий первый фермент.
3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что первый фермент представляет собой одну или несколько из числа УДФ-гликозилтрансфераз, цикломальтодекстрин-глюканотрансфераз (ЦГТ), гликотрансфераз, декстрансукраз, целлюлаз, β-глюкозидаз, амилаз, трансглюкозидаз, декстраназ и пектиназ.
4. Способ по любому из пп. 1-3, включающий контакт могрозида IIA со вторым ферментом, способным катализировать образование могрозида IIIE из могрозида IIA.
5. Способ по любому из пп. 1-4, включающий контакт могрола с одним или несколькими ферментами, способными катализировать образование могрозида IIIE из могрола.
6. Способ по пп. 2-5, отличающийся тем, что приведение могрола в контакт с одним или несколькими ферментами, способными катализировать продуцирование могрозида IIE и/или IIIE из могрола, включает контакт могрола с рекомбинантной клеткой-хозяином для получения могрозида IIE и/или IIIE, где рекомбинантная клетка-хозяин содержит один или несколько генов, кодирующих один или несколько ферментов, способных катализировать продуцирование могрозида IIE и/или IIIE из могрола.
7. Способ по любому из пп. 1-6, включающий контакт соединения могрозида с одним или несколькими ферментами, способными катализировать продуцирование могрозида IIIE из соединения могрозида с образованием могрозида IIIE, где соединение могрозида представляет собой одно или несколько соединений из числа могрозида IA1, могрозида IE1, могрозида IIA1, могрозида IIE, могрозида IIA, могрозида IIIA1, могрозида IIIA2, могрозида III, могрозида IV, могрозида IVA, могрозида V и сиаменозида.
8. Способ по любому из пп. 2-7, включающий контакт могрозида IA1 с рекомбинантной клеткой-хозяином, где рекомбинантная клетка-хозяин содержит ген, кодирующий фермент UGT98 или UGT SK98.
9. Способ по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что способ включает контакт 3, 24, 25-тригидрокси-кукурбитадиенола с рекомбинантной клеткой-хозяином, где рекомбинантная клетка-хозяин содержит пятый ген, кодирующий цитохром P450.
10. Способ по любому из пп. 1-9, включающий приведение в контакт первого могрозида с одной или несколькими гидролазами для получения могрозида IIIE перед контактом могрозида IIIE с первым ферментом.
11. Клеточный лизат, содержащий Соединение 1, имеющее структуру:
(1).
12. Рекомбинантная клетка, содержащая: Соединение 1, имеющее структуру:
(1),
и ген, кодирующий фермент, способный катализировать продуцирование Соединения 1 из могрозида IIIE.
13. Рекомбинантная клетка, содержащая первый ген, кодирующий первый фермент, способный катализировать продуцирование Соединения 1, имеющего структуру:
(1)
из могрозида IIIE.
14. Способ получения Соединения 1, имеющего структуру:
(1), причем способ включает:
контакт первого могрозида с одной или несколькими гидролазами с получением могрозида IIIE; и
контакт могрозида IIIE с ферментом, способным катализировать образование соединения 1 из могрозида IIIE.
15. Гибридный полипептид, обладающий активностью кукурбитадиенолсинтазы, отличающийся тем, что гибридный полипептид включает гибридный домен, слитый с кукурбитадиенолсинтазой.