Связь между полиморфизмом гена фактора роста эндотелия сосудов и привычным невынашиванием беременности: систематический обзор и метаанализ

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ОБЗОРЫ

Связь между полиморфизмом гена фактора роста эндотелия сосудов и привычным невынашиванием беременности: систематический обзор и метаанализ

Ялинг Сун, Первая больница Цзинчжоу, Университет Янцзы, Хубэй, Китай

Мин Чен,

Беню Мао,

Хианглин Ченг,

Хианпинг Жанг,

Чуанхин Ху

Цель. В некоторых исследованиях сообщалось, что генетические полиморфизмы фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) связаны с привычным невынашиванием беременности (ПНБ), но полученные результаты остаются спорными. Данное исследование направлено на количественную оценку состоятельности этой ассоциации.

Методы. Был проведен систематический обзор опубликованной литературы из баз данных MEDLINE, Springer и China National Knowledge Infra (CNKI), в ходе которого исследователи отобрали исследования генетических полиморфизмов VEGF при ПНБ. Авторы оценили обобщенные отношения шансов (OR) для оценки данной возможной ассоциации.

Результаты. В данный метаанализ были включены 15 исследований «случай-контроль»: 2702 случая и 2667 контролей. В них проводили исследование 5 генетических полиморфизмов (rs3025039, rs833061, rs15703060, rs2010963 и rs699947). Общий анализ показал, что только 2 генетических полиморфизма (rs1570360, rs3025039) были связаны с повышенным риском ПНБ. Статистически значимый рост риска между полиморфизмом rs1570360 VEGF и ПНБ был обнаружен только в доминантной модели у представителей белой европеоидной расы [0R=1,70; 95% доверительный интервал (ДИ) 1,02-2,82; р=0,04]. В свою очередь авторы обнаружили, что полиморфизм rs3025039 VEGF статистически значимо ассоциировался с ПНБ как в доминантной, так и в рецессивной модели у представителей восточноазиатской расы, а их суммарные отношения шансов и 95% ДИ составляли 1,26; 1,04-1,53; р=0,02 и 2,94; 1,80-4,83; р=0 соответственно.

Заключение. Метаанализ показал, что только полиморфизмы rs1570360 (особенно у представителей европеоидной расы) и rs3025039 (особенно у представителей восточноазиатской расы) могут быть факторами риска ПНБ.

Ключевые слова:

метаанализ, VEGF, привычное невынашивание беременности, полиморфизм

Association between vascular endothelial growth factor polymorphism and recurrent pregnancy

loss: a systematic review and meta-analysis

Yaling Sun, Min Chen, Benyu Mao, The First Hospital of Jing Zhou, Yangtze University, Hubei, China

Xianglin Cheng, Xianping Zhang,

Chuanxin Xu

Purpose. Some studies have reported that vascular endothelial growth factor (VEGF) genetic polymorphisms are associated with recurrent pregnancy loss (RPL), but the results are controversial. This study is aimed to quantify the strength of this association.

Methods. A systematic review of the published literature from MEDLINE, Springer, and China National Knowledge Infra structure (CNKI) databases was conducted and investigations of VEGF genetic polymorphisms in RPL were selected. We estimated the pooled odds ratio (OR) to assess this possible association.

Results. 15 case-control studies comprising 2702 cases and 2667 controls and including 5 genetic polymorphisms (rs3025039, rs833061, rs15703060, rs2010963 and rs699947) were eligible for this meta-analysis. The overall analysis suggested that only 2 genetic polymorphisms (rs1570360, rs3025039) were associated with increased risk of RPL. A significant increased risk between VEGF rs1570360 polymorphism and RPL was only found under the dominant model in Caucasians (0R=1.70, 95% CI 1.02-2.82, p=0.04). Whereas, we found that VEGF rs3025039 polymorphism was significantly associated with RPL both under the dominant and recessive model in East Asians, and their summary odd ratios and 95% CIs were 1.26, 1.04-1.53, p=0.02 and 2.94, 1.80-4.83, p=0, respectively.

Conclusions. This meta-analysis showed that only rs1570360 (especially in Caucasians) and rs3025039 (especially in East Asians) may be risk factors for RPL.

Keywords:

meta-analysis, VEGF, habitual miscarriage, polymorphism

Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2017; 211: 169-76. http://dx.doi.org/10.1016/j.ejogrb.2017.03.003

Привычное невынашивание беременности (ПНБ), в большинстве случаев определяемое как выкидыш на сроках до 24 нед беременности и регистрируемый >2-3 раз, выявляется у 1-5% женщин репродуктивного возраста [1]. С невынашиванием беременности связаны такие факторы, как родительская принадлежность хромосомных аномалий, тромбофилия, нарушения обмена веществ, аномалии развития матки, иммунные факторы, материнские инфекции и особенности образа жизни [2]. Однако в 50% случаев ПНБ фактор риска установить трудно либо невозможно [3]. У пациентов с ПНБ предположительными факторами риска выкидыша также являются специфические полиморфизмы генов [4].

Семейство факторов роста эндотелия сосудов (VEGF) состоит из VEGF, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D и фактора роста плаценты. VEGF является основным фактором ангиогенеза и основным регулятором пролиферации эндотелиальных клеток [5, 6]. В различных тканях при физиологических и патологических состояниях наблюдалась повышенная экспрессия VEGF, которая, как полагают, может быть причиной развития различных заболеваний, включая аномалии развития эмбрионов, злокачественные новообразования и цереброваскулярные или сердечно-сосудистые патологии. На ранней стадии беременности VEGF необходим для созревания ооцитов, пролиферации трофобластов, имплантации

и развития эмбриона, ангиогенеза плаценты и роста кровеносных сосудов матки, связывающих материнский кровоток и растущий новый организм [7]. Согласно данным исследований, некоторые полиморфизмы VEGF: VEGFA 2578C/A (rs699947), 460T/C (rs833061), 1154G/A (rs15703060), 634G/C (rs2010963), 398G/A (rs833068), 497G/A (rs833070), 583T/C (rs3025020) и 936C/T (rs3025039), - влияют на активность и экспрессию VEGF. Однако генетическая связь неубедительна.

Учитывая важность VEGF для развития беременности у человека, авторы исследовали роль генетических полиморфизмов VEGF при ПНБ. Более чем в 6 исследованиях были представлены 5 генетических полиморфизмов (rs1570360, rs699947, rs2010963, rs3025039 и rs833061). Поэтому авторы выбрали их для формирования систематического обзора, посвященного их связи с ПНБ.

Материал и методы

Стратегия поиска

Обширный поиск литературных публикаций бы проведен в базах данных MEDLINE, Springer и China National Knowledge Infrastructure (CNKI) до сентября 2015 г. без языковых ограничений. Ключевые слова поиска: VEGF или фактор роста эндотелия сосудов и выкидыш привычный, привычный аборт

или привычное невынашивание беременности. Отбор исследований проводили 2 рецензента, решение по включению в анализ спорных исследований проводил третий рецензент. Результаты поиска ограничивались исследованиями, проведенными среди людей.

Критерии выбора

Исследования, включенные в данный метаанализ, отвечали следующим требованиям: исследования типа «случай-контроль»; ПНБ, определяемая как >2 выкидышей в первые два триместра беременности; исключение из анализа ПНБ с известными причинами; генотипы, определенные в ходе проведения анализа ДНК; была предоставлена информация о частоте генотипа. В исследованиях с пересекающимися клиническими случаями или контролями в метаанализ было включено последнее или самое большое исследование с поддающимися извлечению данными.

Получение данных

2 рецензента независимо использовали стандартизованную форму с критериями включения для извлечения данных. Если они расходились во мнении, спорные вопросы разрешались путем обсуждения или с помощью третьего рецензента. В извлекаемую информацию включали имя первого автора, год публикации, страну рождения, количество клинических случаев и контролей, средний возраст (если было возможно) и распределение генотипов.

Оценка качества

Для оценки качества исследований типа «случай-контроль» использовали шкалу Ньюкасл-Оттава (NOS), с помощью которой проводили оценку исследований по трем широким перспективам: выбор, сопоставимость и клиническое воздействие. Баллы варьировали от 0 до 9. Исследования с баллом >7 считали качественными [8].

Статистический анализ

Для проверки на соответствие закону Харди-Вейнберга (HWE) для генетического полиморфизма VEGF в контрольной группе применяли анализ с использованием критерия х2 с точным уровнем значимости, а p<0,05 считалось репрезентативным для отклонения от HWE. Авторы провели оценку 5 генетических полиморфизмов (rs1570360, rs699947, rs2010963, rs3025039 и rs833061). Анализ подгрупп проводили на основе расовой принадлежности (представители восточноазиатской и европеоидной расы и не только). Отношение шансов (OR) отражает величину эффекта, а 95% ДИ оценивали для получения интервальных оценок. Гетерогенность проверяли с использованием статистики I2 и Q-критерия Кохрена для количественной оценки доли, которую составляет полная вариация. Соответствующие p-значения Q-статистики <0,05 или I2>50% считались признаками статистически значимой гетерогенности. При наличии гетерогенности модель со случайными эффектами вводили для объединения данных, в противном случае использовали модель с фиксированными эффектами. Анализ чувствительности проводили путем исключения каждого отдельного исследования, а также предполагалась избыточная

чувствительно отдельного исследования, если точечная оценка анализа с его пропуском находилась вне 95% ДИ факторного анализа. Возможную систематическую ошибку, связанную с предпочтительной публикацией положительных результатов исследования, рассчитывали путем визуального изучения воронкообразного графика Бегга, для представления доказательств использовали тест Эггера. Для оценки возможной географической изменчивости авторы выполнили анализ данных подгрупп, стратифицированных по географическому положению. Весь статистический анализ был выполнен с использованием программы STATA версии 12.0 (Stata Corp, College Station, TX, США). Все р-значения были двусторонними.

Результаты

15 исследований [9-23], включающие данные о 2702 клинических случаях и 2667 контрольных пациентках, соответствовали критериям включения в метаанализ связи генетического полиморфизма VEGF с риском ПНБ. Все они были типа «случай-контроль» и проводились в 8 странах:

5 в Китае, по 2 в США и Бахрейне, по 1 в других 6 странах (табл. 1). Все исследования, отвечающие критериям включения, были переведены на английский язык, за исключением трех на китайском [16, 19, 21]. Было выявлено

6 исследований связи с полиморфизмом rs833061 [17-22], 12 исследований с rs3025039 [9, 10, 12, 13, 15, 17-23], 9 исследований с rs2010963 [9, 10, 12, 13, 17, 18, 21-23], 14 исследований с rs1570360 [9, 11-23] и 11 исследований с rs699947 [9, 10, 12, 13, 15, 17-22]. Число клинических случаев варьировало от 38 до 339, а число контролей -от 30 до 371. ПНБ определялась как >2 выкидышей в 8 исследованиях и >3 выкидыша в оставшихся 7 исследованиях. В 7 исследованиях в анализ были включены случаи выкидыша на сроках до 20 нед, еще в 8 исследованиях срок беременности на момент выкидыша не описан. В группу контроля были отобраны: в 9 исследованиях -случаи с рождением, по крайней мере, 1 живого ребенка и отсутствием выкидыша в анамнезе; в 6 исследованиях ->2 случаев с рождением живого ребенка без выкидыша в анамнезе. Все включенные исследования объединяло то, что известные факторы риска ПНБ в анамнезе отсутствовали. Общие характеристики опубликованных исследований, включенных в данный метаанализ, перечислены в табл. 1, 2. В табл. 3 представлены результаты данного метаанализа.

Полиморфизм rs1570360 и привычная невынашиваемость беременности

Наиболее часто изучаемым аллельным вариантом в VEGF был полиморфизм rs1570360. 14 исследований, соответствовавших критериям включения, содержали описание в общей сложности 1855 случаев и 2014 контролей. В рецессивной генетической модели (AA против GG + GA) наблюдалась статистически значимая гетерогенность исследования (Q-критерий Кохрена: х2=28,40, p=0,008, статистика Хиггинса: I2=54,2%), поэтому использовалась модель со случайными эффектами. Суммарное ОШ и 95% ДИ для модели

Таблица 1. Характеристики исследований ассоциации между генетическими полиморфизмами VEGF и привычной невынаши-ваемостью беременности

Автор, год Страна Клинический случай Контроль Балл

(расовая принадлежность) n средний число срок бере- n средний число по

возраст, выки- менности возраст, родов шкале

лет дышей лет NOS

Papazolou, 2005 Греция (европеоидная раса) 52 33 3 <20 нед 82 НД 2 8

Lee, 2010 Корея (восточноазиатская раса) 215 32,8 2 НД 113 31,1 1 7

Xing, 2011 Китай (восточноазиатская раса) 339 29,7 3 НД 291 30,8 1 8

Eller, 2011 США (европеоидная раса) 93 30 3 <20 нед 178 28 1 8

Magdoud, 2012 Бахрейн (другая) 304 32,4 3 НД 371 31,9 2 8

Coulam, 2008 США (европеоидная раса) 152 НД 2 НД 65 НД 1 7

Aggarwal, 2011 Индия (другая) 200 28 3 <20 нед 200 31,9 2 8

Li, 2010 Китай (восточноазиатская раса) 271 29 2 <20 нед 250 30 1 8

Su, 2011 Тайвань (восточноазиатская раса) 115 31 2 НД 170 29,8 1 7

Almawi, 2013 Бахрейн (другая) 52 31,6 3 НД 82 31,6 2 8

Zhu, 2014 Китай (восточноазиатская раса) 203 27,6 2 <20 нед 190 27,3 1 7

Samli, 2012 Турция (другая) 38 30,1 2 <20 нед 25 36,8 1 7

Huang, 2013 Китай (восточноазиатская раса) 120 29,9 2 <20 нед 110 28,8 1 7

Luo, 2013 Китай (восточноазиатская раса) 227 30,6 3 НД 232 30,8 2 7

Traina, 2011 Бразилия (другая) 77 30,4 3 НД 85 33,2 2 8

Примечание. НД - нет данных; NOS - Шкала оценки качества исследований Ньюкасл-Оттава.

с фиксированным эффектом показали статистически значимую связь между полиморфизмом гб1570360 и ПНБ, оба наблюдались только у представителей европеоидной расы ^=1,70, 95% ДИ 1,02-2,82) (рис. 1). В доминантной генетической модели не отмечено статистически значимых различий по гетерогенности среди исследований (О-критерий Кохрена: х2=13,68, р=0,39, статистика Хиггинса: 12=5%).

Связи между полиморфизмом гб1570360 и ПНБ не отмечено ни в одной расовой принадлежности (табл. 3). Систематическая ошибка, связанная с предпочтительной публикацией положительных результатов, не выявлена среди исследований, включенных в анализ (р-значение Эггера = 0,88). Ни одно исследование не оказывает чрезмерного влияния на общие результаты (данные не показаны).

Полиморфизм ^699947 и привычная невынашиваемость беременности

В 11 исследованиях, в которых приняли участие в общей сложности 1866 женщин с ПНБ и 1980 здоровых женщин из группы контроля, изучалась связь между полиморфизмом гб699947 и ПНБ. Гетерогенность в каждом исследовании не была статистически значимой как в доминантной (АА + СА против СС), так и в рецессивной модели (АА против СА + СС) (О-критерий Кохрена: х2=6,06, р=0,21, статистика Хиггинса: 12=0, модель с фиксированными эффектами в рецессивной модели). Метаанализ не выявил статистически значимой связи между полиморфизмом гб699947 VEGF и ПНБ при любой расовой принадлежности (табл. 3). Анализы на систематическую ошибку, связанную с предпочтительной публикацией положительных результатов, не выявили статистически значимых ошибок случайной выборки (р-значение Эггера = 0,26). Авторы обнаружили, что ни одно исследование не оказывает чрезмерного влияния на общие результаты (данные не показаны).

Полиморфизм ^2010963 и привычная невынашиваемость беременности

В метаанализ были включены 9 исследований: 1502 клинических случая и 1647 контролей. Статистически значимой гетерогенности среди отобранных исследований как в доминантной (СС + CG против GG), так и в рецессивной модели (СС против GG + CG) не выявлено (О-критерий Кохрена: х2=3,97, р=0,86, статистика Хиггинса: 12=0, модель с фиксированными эффектами в рецессивной модели). Метаанализ не выявил статистически значимой связи между полиморфизмом гб2010963 и ПНБ в любой генетической модели. Систематическая ошибка, связанная с предпочтительной публикацией положительных результатов исследования, во включенных исследованиях не обнаружена (р-значение Эггера = 0,85). Ни одно исследование не оказывает чрезмерного влияния на общие результаты (данные не показаны).

Полиморфизм ^833061 и привычная невынашиваемость беременности

6 исследований, без исключения из HWE, включали данные о 999 пациентах и 1037 контролей для анализа. Гетерогенность в каждом исследовании была статистически значима в рецессивной модели (СС против СТ + ТТ) (О-критерий Кохрена: х2=16,92, р=0,01, статистика Хиггинса: 12=70,4, модель со случайными эффектами в рецессивной модели). Метаанализ не выявил статистически значимой связи между полиморфизмом гб833061 VEGF и ПНБ ни при какой расовой принадлежности (табл. 3). Тесты на систематическую ошибку, связанную с предпочтительной публикацией положительных результатов, не выявили статистически значимой ошибки (р-значение Эггера = 0,89). В 2 исследованиях (А1шаш1, 2013; Zhu, 2014) выявлено чрезмерное влияние на результат в целом. После исключения 2 статей метаанализ

to О)

Таблица 2. Распределение VEGF генотипа и аллельных генов среди клинических случаев и контролей в 5 однонуклеотидных полиморфизмах

S

о

I

OI

>

>

>

X

га z:

"О

m о г

m т

о

гс >

s с s

X

п

А

о

о

0

01 "U 01 ш

Ш

си I

s

ш "о

ÛJ

та

s

Автор, год rsl570360 GG:GA:AA Pa rs699947 CC:CA:AA Pa rs2010963 GG:GC:CC Pa rs833061 TT:TC:CC Pa rs3025039 CC:CT:TT Pa

Papazolou, 2005 С 18:19:15 0 42:28:12 0,06 с 15:21:16 ci 27:34:21 0,13 С 14:22:16 d 29:35:18 0,24 - - с 35:16:1 d 64:17:1 0,91

Lee, 2010 с 130:80:5 d 81:23:9 0,01 с 107:94:14 ci 60:45:8 0,91 с 67:114:34 d 38:54:21 0,81 - - с 149:63:3 d 82:29:2 0,76

Xing, 2011 с 245:89:5 d 200:81:10 0,61 - - - - - - - -

El 1er, 2011 с 55:27:11 d 86:74:18 0,72 с 38:43:15 d 44:96:37 0,25 с 36:45:15 d 88:73:18 0,62 - 1 - 1 с 67:29:1 d 127:45:6 0,42

Magdouci, 2012 с 155:118:31 d 230:126:15 0,66 с 104:152:48 d 122:182:67 0,95 с 131:130:43 d 154:166:51 0,56 - - с 207:87:10 d 299:66:6 0,29

Coulam, 2008 с 21:101:25 d 10:51:4 0,01 - - - - - - - -

Aggarwal, 2011 с 120:48:32 d 135:47:18 0,01 с 103:74:23 d 116:67:17 0,11 - - - - с 142:52:6 d 164:35:1 0,55

Li, 2010 с 149:107:15 d 168:75:7 0,69 - - - - - - - s

Su, 2011 с 74:37:4 d 124:39:7 0,09 с 64:46:5 d 107:55:8 0,78 С 76:32:7 d 101:61:8 0,75 С 61:49:5 d 99:64:7 0,40 с 75:33:7 d 130:36:4 0,43

Almawi, 2013 с 162:93:41 d 153:119:33 0Д8 с 126:117:53 d 116:135:54 0,18 с 96:137:63 d 127:127:51 0,05 с 112:116:68 d 142:127:36 0,36 с 232:59:5 d 232:65:8 0,19

Zhu, 2014 с 111:88:4 d 89:92:9 0,02 с 120:79:4 d 101:81:8 0,10 - - с 135:64:5 d 68:101:21 0,07 с 94:79:30 d 117:70:3 0,04

Samli, 2012 С 16:13:9 d 12:12:1 0,34 с 20:10:8 d 16:10:4 0,26 - - С 37:0:1 d 29:1:0 0,93 о 27:7:4 d 23:5:2 0,06

Huang, 2013 с 68:46:6 d 72:33:5 0,63 с 49:63:8 d 58:46:6 0,42 с 50:61:9 d 30:70:10 0,01 с 50:62:8 d 59:46:5 0,28 с 94:21:5 d 77:30:3 0,97

Luo, 2013 с 126:85:16 d 145:77:10 0,96 с 127:86:14 d 146:78:8 0,54 с 72:121:34 d 73:126:33 0,07 с 139:79:9 d 148:75:9 0,90 с 128:78:21 d 159:63:10 0,25

Traîna, 2011 - - - - с 23:37:17 d 27:47:11 0,18 - с 59:20:1 d 101:27:1 0,58

> >

s.

s m

О

in

«

о

Примечание, с - число случаев; d - количество контролей; Ра - р-значен не для закона Харди-Вейнберга (HWE) в контрольной группе.

Таблица 3. Результаты метаанализа

Все включенные статьи После исключения ОНУУЕ

Генотип Генетическая модель Общее суммарное ОШ (95% ДИ) га 0. Восточноазиатская раса Суммарное ОШ (95% ДИ) СП 0. Европеоидная раса Суммарное ОШ (95% ДИ) га 0- Другая раса Суммарное ОШ (95% ДИ) га 0. Общее суммарное ОШ (95% ДИ) га о. Восточноазиатская раса Суммарное ОШ (95% ДИ) га 0. Европеоидная раса Суммарное ОШ (95% ДИ) га 0. Другая раса Суммарное ОШ (95% ДИ) га 0.

о со СП о Доминантная (АА + Ай против йй) 1,10 (0,99-1,22) 0,07 1,12 (0,97-1,30) 0,11 0,97 (0,74-1.28) 0,84 1,12 (0,94-1,32) 0,21 1,11 (0,99-1,25) 0,08 1,16 (0,99-1,38) 0,07 0,97 (0,68-1,38) 1X1 00 О 1,09 (0,90-1,32) 0,39

ю н сл Рецессивная (АА против йй + СА) 1,31 (0,93-1,83) 0,12 0,81 (0,46-1,45) 0,48 1,70 (1,02-2,82) 0,04 1,77 (1,28-2,43) О 1,49 (1,16-1,92) 0,002 1.17 (0,76-1,81) 0,48 1,50 (0,85-2,64) 0,16 1,76 (1,21-2,56) о

0) 0) от со й Доминантная (АА + АС против СС) 1,02 (0,91-1,13) 0,81 0,75 1,09 (0,91-1,30) см го о 0,88 (0,64-1,22) 0,45 0,99 (0,86-1,16) 0,98 0,93 1,02 (0,91-1,13) 0,75 1,09 (0,91-1,30) 0,32 0,88 (0,64-1,22) ю О (0 и ОТ т-Г О) 1 о 0,93

Рецессивная (АА против АС + СС) 1,00 (0,82-1,23) 1,05 (0,67-1,64) 0,84 0,91 (0,56-1,48) 0,72 1,01 (0,79-1,31) 1,00 (0,82-1,23) 0,81 1,05 (0,67-1,64) 0,84 0,91 (0,56-1,48) 0,72 1,01 (0,79-1,31) 0,98

сз СО от о Доминантная (СС + се против Сй) 1,02 (0,91-1,15) 0,72 0,94 (0,78-1,12) 0,50 1,19 (0,86-1,65) 0,29 1,06 (0,89-1,25) 0,53 1,04 (0,92-1,18) 0,49 0,97 (0,80-1,19) 0,80 1,19 (0,86-1,65) 0,29 1,06 (0,89-1,25) 0,53

о см [Л Рецессивная (СС против СС + Сй) 1,15 (0,95-1,41) 0,16 0,97 (0,69-1,36) 0,87 1,48 (0,87-2,50) 0,14 1,21 (0,92-1,59) 0,18 1,17 (0,96-1,44) 0,13 1,00 (0,69-1,43) 0,98 1,48 (0,87-2,50) 0,14 1,21 (0,92-1,59) 0,18

*Н со о т со со й Доминантная (СС + СТ против ТТ) 0,98 (0,73-1,32) 0,96 0,89 0,94 (0,63-1,40) 0,75  1 1,16 (0,89-1,51) 0,002 0,27 см со со ,4 ОТ I о" со о 0,89 0,94 (0,63-1,40) 0,75 1 1,16 (0,89-1,51) 0,27

Рецессивная (СС против СТ + ТТ) 0,98 (0,45-2,13) 0,73 (0,29-1,85) 0,50 1 1,95 (1,27-3,01) 0,98 (0,45-2,13) 0,96 0,73 (0,29-1,85) 0,50 1 1 1,95 (1,27-3,01) 0,002

от го о ю Доминантная (ТТ + СТ против СС) 1,27 (1,12-1,46) о 1,26 (1,04-1,53) 0,02 1,20 (0,78-1,83) 0,41 1,31 (1,07-1,61) 0,01 1,26 (1,09-1,45) 0,002 1,21 (0,96-1,52) 0,10 1,20 (0,78-1,83) 0,41 1,31 (1,07-1,61) 0,01

см о т (Л Рецессивная (ТТ против СТ + СС) 2,11 (1,47-3,03) 0,02 2,94 (1,80-4,83) о 0,50 (0,10-2,48) 0,39 1,55 (0,84-2,86) 0Д6 1,59 (1,07-2,36) 0,02 1,92 (1,09-3,39) 0,02 0,50 (0,10-2,48) 0,39 1,55 (0,84-2,86) 0,16

Примечание. 95% ДИ - 95% доверительный интервал; Ра - р-значение для 95% ДИ: ОН№Е - отклонение от закона Харди-Вейнберга в контрольной группе.

Рис. 1. Связь между полиморфизмом ге1570360 и риском привычной невынашиваемостью беременности в рецессивной генетической модели

ID исследования Отношение шансов (95% доверительный интервал) Вес, %

Европеоидная раса (Papazoglou, 2005) Eller, 2011 Coulam, 2008 Промежуточный итог (I2=0,0%, p=0,439) Восточноазиатская раса Xing 2011 , Lee, 2010 Su 2011 , Huang 2013 Luo, 2013 lee 2010 c , 7hu 2014 , Промежуточный итог (I2=51,4%, p=0,055) - Другая раса Magdoud, 2012 Almawi, 2013 Samli, 2012 Aggarwal, 2011 Промежуточный итог (I2=27,6%, p=0,247) Общее значение (I2=49,1%, p=0,020) Вес рассчитывали в ходе проведения анализа случайных эффектов , 1 97 (0 87- 4 48) 8 04 1 17 (0 54- 2 54) 8 47 , 2 67 (0 93- 7 63) 5 93 1,70 (1,02- 2,82) 22,44 0,43 (0,15- 1,21) 5,99 , 1 98 (0 81- 4 79) 7 3? 0 84 (0 26- 2 77) 4 97 1 10 (0 35- 3 49) 5 17 , 1,64 (0,74- 3,61) 8,27 М 0,29 (0,10- 0,85) 5,78 0,42 (0,13- 1,30) 5,29 0,81 (0,46- 1,45) 42,80 , 2 52 (1 35- 4 72) 10 17 1,28 (0,79- 2,07) 11,97 , ^ 5 92 (0 89- ) 2 16 , 1 78 (0 97- 3 25) 10 46 <-~;;;:> 1,80 (1,20- 2,69) 34,76 1,31 (0,93- 1,83) 100,00

I 0,1 1 9,97

выявил более сильную связь между генетическим полиморфизмом гб833061 и ПНБ, но эта связь не была статистически значимой (ОШ=1,18, рецессивная модель).

Полиморфизм ^3025039 и привычная невынашиваемость беременности

В данный метаанализ было отобрано 12 исследований, из них одно исключено из HWE 2014). Они включали данные о 1947 пациентах с ПНБ и 2110 контролях. Суммарный результат показал статистически значимую связь между полиморфизмом гб3025039 и ПНБ как в доминантной (ТТ + ТС против СС), так и в рецессивной генетических моделях (ТТ против ТС + СС). Статистически значимой гетерогенности среди этих включенных исследований не наблюдалось (О-критерий Кохрена: х2=18,64, р=0,07, статистика Хиггинса: 12=41%, модель с фиксированными эффектами в рецессивной модели). Анализ данных подгрупп показал, что связь между полиморфизмом гб3025039 и ПНБ выявлялась только у представителей восточноазиатской расы. В доминантной и рецессивной моделях суммарное ОШ и 95% ДИ составляли 1,27; 1,12-1,46; р=0 (1,26; 1,04-1,53; р=0,02, у представителей восточноазиатской расы) и 2,11; 1,47-3,03; р=0,02 (2,94; 1,80-4,83; р=0, у представителей восточноазиатской расы) (рис. 2). Систематическая ошибка, связанная с предпочтительной публикацией положительных результатов, не выявлена во включенных исследованиях

(р-значение Эггера = 0,40). Ни одно исследование не оказывает чрезмерного влияния на общие результаты (данные не показаны).

Обсуждение

Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) играет важную роль в неадекватном образовании сосудов и созревании ооцитов, васкуляризации децидуализированного эндометрия и имплантации эмбриона. На ранних сроках беременности васкуляризация хорионических ворсинок близко к эмбриональному развитию, и при привычном аборте описано понижение уровня плацентарного трофобластного VEGF в децидуальном эндотелии [24]. Во многих исследованиях сообщалось о связи между генетическими полиморфизмами VEGF и ПНБ, но результаты были противоречивы, поэтому для количественной оценки данной связи был проведен этот метаанализ.

Авторы провели систематический обзор исследований связи 5 генетических полиморфизмов VEGF (гб1570360, гб699947, гб2010963, гб3025039 и гб833061) и риска ПНБ. Метаанализ включал данные о 2702 клинических случаях и 2667 контролях из 15 независимых исследований типа «случай-контроль». В данный метаанализ было включено более 6 исследований, посвященных каждому генетическому полиморфизму. Полученные результаты показали,

ID исследования

Отношение шансов

Вес, %

Европеоидная раса Papazoglou, 2005 Eller, 2011

Промежуточный итог

Восточноазиатская раса Lee, 2010 Su, 2011

Huang, 2013 _

Luo, 2013 Zhu, 2014

Промежуточный итог

Другая раса Magdoud, 2012 Aggarwal, 2011 Almawi, 2013

Samli, 2012 _

Traina, 2011

Промежуточный итог

О

1,49

1,12

1.39

1.40

1,64

2,84 7,13 9,97

8,04

6,46

7,03

13,47

13,22

48,21

13,30

7,47

15,01

1,59

4,45

41,82

1,27 (1,12; 1,46) 100,00

1 0,287 1 ' 1 3,49

ID исследования

Отношение шансов

Вес, %

Европеоидная раса

Papazoglou, 2005 ^_

Eller, 2011

Промежуточный итог

Восточноазиатская раса

Lee, 2010

Su, 2011

Huang, 2013

Luo, 2013

Zhu, 2014

Промежуточный итог

Другая раса Magdoud, 2012 Aggarwal, 2011 Almawi, 2013 Samli, 2012

Traina, 2011 ^_

♦

О

Промежуточный итог

I

1.0e-08

0

I

Ф

1,58

0,79

1,80 9,71 11,51

6,07

7,31

7,11

21,79

6,72

49,01

2,03 (0,76 5,45) 12,42

6,00 (0,94 ,) 2,31

0,64 (0,22 1,89) 18,14

1,58 (0,31 ,) 4,83

1,61 (0,00 ,) 1,78

1,55 (0,84 2,86) 39,48

2,11 (1,47; 3,03) 100,00

I

1.0e+08

А

Б

Рис. 2. Ассоциация между полиморфизмом гб3025039 и риском привычной невынашиваемости беременности в рамках доминантной и рецессивной генетической модели: А - доминантная модель; Б - рецессивная модель

что гб1570360 и гб3025039 статистически значимо связаны с ПНБ. По результатам метаанализа, обобщенные ОШ для гб699947, гб2010963 и гб833061 не показали статистической значимости при ПНБ. Однако при анализе подгрупп (представители восточноазиатской, европеоидной и другой расы) по расовой принадлежности полученные результаты показали, что статистически значимая связь между гб1570360 и риском ПНБ наблюдалась у представителей европеоидной расы. У представителей восточноазиатской расы данная статистически значимая связь наблюдалась между гб3025039 и риском ПНБ.

В настоящем метаанализе предпринимались попытки избежать таких частых ограничений, как систематическая ошибка отбора и систематическая ошибка, связанная с предпочтительной публикацией положительных результатов, которые могут присутствовать в оригинальных документах. Наиболее очевидным отличием, пожалуй, было определение ПНБ. В 3 исследованиях [9, 12, 15] у пациентов с ПНБ было зарегистрировано >3 выкидышей на сроке до 20 нед беременности в анамнезе. Многие выбранные для анализа группы включали данные женщин с двумя последовательными выкидышами, без регистрации точных сроков беременности на момент выкидыша. Объединение перечисленных данных может указывать на то, что генотип АА полиморфизма гб1570360 и генотип ТТ полиморфизма гб3025039 при 2 выкидышах может быть важным фактором риска ПНБ.

Другим потенциальным различием мог быть срок беременности на момент выкидыша. Только в 7 исследованиях указан срок беременности на момент выкидыша (все на сроке до 20 нед), в оставшихся 8 исследованиях срок беременности на момент выкидыша неизвестен. Другие потенциальные, но менее явные систематические ошибки могут включать материнский возраст. Средний возраст варьировал от 27,6 до 32,8 года в клинических случаях и 27,3-36,8 года в контроле (табл. 1). В некоторых исследованиях информация об этом факторе не предоставлена, поэтому авторы не смогли интегрировать эту переменную в метаанализ. Хотя аллель/генотип схожи в разных исследованиях при одной и той же расовой принадлежности, разные расы различаются по частотам 5 аллелей/генотипов генетических полиморфизмов. Это еще один фактор, влияющий на результаты. Кроме того, данное исследование включало только статьи,

опубликованные на английском и китайском языках из трех выбранных баз данных, а количество исследований и объемы выборки были относительно небольшими для анализа каждого полиморфизма генов, поэтому статистическая мощность недостаточна для оценки ассоциации между генетическим полиморфизмом VEGF и риском ПНБ.

Авторы выполнили анализ чувствительности, чтобы изучить потенциально важные причины гетерогенности между исследованиями. Результаты показали, что статистически значимая гетерогенность между исследованиями наблюдалась в отношении только одного генетического полиморфизма (rs833061). После исключения 2статей выявлено снижение гетерогенности (I2=0, предыдущее значение I2=70,4%) в модели аллелей (C против T). Метаанализ показал более крепкую связь между генетическим полиморфизмом rs833061 и ПНБ, однако полученные результаты не были статистически значимыми (ОШ=1,18, рецессивная модель). Более того, в настоящем метаанализе авторы не выявили статистически значимую систематическую ошибку, связанную с предпочтительной публикацией положительных результатов, в любой модели наследования с использованием воронкообразного граффика Бегга и теста Эггера (данные не указаны).

Заключение

Только для 2 выбранных генетических полиморфизмов VEGF (rs1570360 и rs3025039) была выявлена статистически значимая связь с возникновением ПНБ. Поскольку авторы не смогли полностью исключить потенциальное смещение выборки и вмешивающиеся факторы в ходе проведения данного метаанализа, необходимы дополнительные исследования с большим количеством выборок и стандартизованными методами генотипирования, не подверженными систематической ошибке, для подтверждения полученных данных.

Финансирование. Отсутствовало.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности. Благодарим Wen Zhang за помощь в написании статьи.

АВТОР ДЛЯ ДЛЯ КОРРЕСПОНДЕНЦИИ

Chuanxin Xu (Чуанxин Ху) - Первая больница Цзинчжоу, Университет Янцзы (Хубэй, Китай) Е-шаШ mcl220@126.com

ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES

1. Vaiman D. Genetic regulation of recurrent spontaneous abortion in humans. Biomed J. 2015; 38: 11-24. doi: http://dx.doi.org/10.4103/ 2319-4170.133777.

2. Horne A.W, Alexander C. Recurrent miscarriage. J Fam Plann Reprod Health Care. 2005; 31: 103-7.

3. Clifford K., Rai R., Watson H., Regan L. An informative protocol for the investigation of recurrent miscarriage: preliminary experience of 500 consecutive cases. Hum Reprod. 1994; 9: 1328-32.

4. Su M.T., Lin S.H., Chen Y.C. Genetic association studies of angio-genesis-and vasoconstriction-related genes in women with recurrent preg-

nancy loss: a systematic review and meta-analysis. Hum Reprod Update 2011; 17: 803-12. doi: http://dx.doi.org/10.1093/humupd/dmr027.

5. Iruela-Arispe M.L., Dvorak H.F. Angiogenesis: a dynamic balance of stimulators and inhibitors. Thromb Haemost. 1997; 78: 672-7.

6. Senger D.R., Van deWater L., Brown L.F., Nagy J.A., et al. Vascular permeability factor (VPF, VEGF) in tumor biology. Cancer Metastasis Rev. 1993; 12: 303-24.

7. Jelkmann W. Pitfalls in the measurement of circulating vascular endothelial growth factor. Clin Chem. 2001; 47: 617-23.

8. Chen H., Zhang L., He Z., Zhong X., et al. Vitamin D binding protein gene polymorphisms and chronic obstructive pulmonary disease: a metaanalysis. J Thorac Dis. 2015; 7: 1423-40. doi: http://dx.doi.org/10.3978/ j. issn.2072-1439.2015.08.16.

9. Papazoglou D., Galazios G., Papatheodorou K., Liberis V., et al. Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms and idiopathic recurrent pregnancy loss. Fertil Steril. 2005; 83: 959-63. doi: http://dx.doi. org/ 10.1016/j.fertnstert.2004.12.017.

10. Lee H.H., Hong S.H., Shin S.J., Ko J.J., et al. Association study of vascular endothelial growth factor polymorphisms with the risk of recurrent spontaneous abortion. Fertil Steril. 2010; 93: 1244-7. doi: http:// dx.doi.org/ 10.1016/j.fertnstert.2008.11.017.

11. Xing X., Yan J., Zhao Y., You L., et al. Association of vascular endothelial growth factor gene polymorphisms with recurrent spontaneous abortion in Chinese Han women. Am J Reprod Immunol. 2011; 65: 521-5.

12. ELLer A.G., Branch D.W., Nelson L., Porter T.F., et al. Vascular endothelial growth factor-A gene polymorphisms in women with recurrent pregnancy Loss. J Reprod Immunol. 2011; 88: 48-52. doi: http://dx.doi. org/10.1016/j. jri.2010.06.159.

13. Magdoud K., Dendana M., Herbepin V., Hizem S., et al. Identification of specific vascular endothelial growth factor susceptible and protective haplotypes associated with recurrent spontaneous miscarriages. Hum Reprod. 2012; 27: 1536-41. doi: http://dx.doi.org/10.1093/humrep/ des033.

14. Coulam C.B., Jeyendran S. Vascular endothelial growth factor gene polymor-phisms and recurrent pregnancy loss. Am J Reprod Immunol. 2008; 59: 301-5. doi: http://dx.doi.org/10.1111/j.1600-0897.2007.00515.x.

15. Aggarwal S., Parveen F., Faridi R.M., Phadke S., et al. Vascular endothelial growth factor gene polymor- phisms in North Indian patientswith recurrent miscarriages. Reprod Biomed Online. 2011; 22: 59-64. doi: http://dx. doi.org/10.1016/j.rbmo.2010.08.005.

16. Li Z., You Z., Su X., Zhang X., et al. Association of vascular endothelial growth factor genepolymorphism with recurrent spontaneous abortion in south Chinese women. Xinyixue. 2010; 9: 578-81.

17. Su M.T., Lin S.H., Lee I.W., Chen Y.C., et al. Association of polymorphisms/ haplotypes of the genes encoding vascular endothelial growth factor and its KDR receptor with recurrent pregnancy loss. Hum Reprod. 2011; 4: 758-64. doi: http://dx.doi.org/10.1093/humrep/deq401.

18. Almawi W.Y., Saldanha F.L., Mahmood N.A., Al-Zaman Sater M.S., et al. Relationship between VEGFA polymorphisms and serum VEGF protein levels and recurrent spontaneous miscarriage. Hum Reprod. 2013; 10: 2628-35. doi: http://dx.doi.org/10.1093/humrep/det308.

19. Zhu H., Qu L., Yu B., Lu H., et al. The association between gene polymorphism of vascular endothelial growth factor and recurrent spontaneous abortion. Ningxiayikedaxuexuebao. 2014; 36: 604-7.

20. Samli H., Demir B.C., Ozgoz A., Atalay M.A., et al. Vascular endothelial growth factorgene 1154 G/A, 2578C/A, 460C/T, 936C/T polymorphisms and association with recurrent pregnancy losses. Genet Mol Res. 2012; 11: 4739-45. doi: http:// dx.doi.org/10.4238/2012.December.17.6.

21. Huang R., Pang L., Wei Z., Li O., et al. Association of VEGF single nucleotide polymorphisms and patients with recurrent spontaneous abortion in guangxi zhuang women. Reprod Contracept. 2013; 33: 652-7.

22. Luo L., Li D., Wei S., Zhang H., et al. Polymorphisms in the vascular endothelial growth factor geneassociated with recurrent spontaneous miscarriage. J Matern Fetal Neonatal Med. 2013; 26: 686-90. doi: http://dx. doi.org/10.3109/14767058.2012.746305.

23. Traina E., Daher S., Moron A.F., Sun S.Y., et al. Polymorphisms in VEGF, progesterone receptor and IL-1 receptor genes in women with recurrent spontaneous abortion. J Reprod Immunol. 2011; 88: 53-7. doi: http://dx.doi.org/ 10.1016/j.jri.2010.07.006.

24. Vuorela P., Carpen O., Tulppala M., Halmesmaki E. VEGF, its receptors and the tie receptors in recurrent miscarriage. Mol Hum Reprod. 2000; 6: 276-82. doi: http://dx.doi.org/10.1093/molehr/6.3.276.