ГЕН БИОСИНТЕЗА ПИРИПИРОПЕНА А

1. Выделенный полинуклеотид, который представляет собой
(a) полинуклеотид, обладающий нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 266,
(b) полинуклеотид, обладающий нуклеотидной последовательностью, которая способна гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 266 в жестких условиях,
(c) полинуклеотид, обладающий полинуклеотидной последовательностью, кодирующей, по меньшей мере, одну аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 267-274, или по существу эквивалентную им аминокислотную последовательность, или
(d) полинуклеотид, обладающий, по меньшей мере, одной нуклеотидной последовательностью, выбранной из нуклеотидной последовательности в любом из пунктов (1) или (2) ниже:
(1) нуклеотидной последовательностью в любом из пунктов от (a) до (h) ниже:
(a) нуклеотидной последовательностью от 3342 до 5158 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(b) нуклеотидной последовательностью от 5382 до 12777 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(c) нуклеотидной последовательностью от 13266 до 15144 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(d) нуклеотидной последовательностью от 16220 до 18018 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(e) нуклеотидной последовательностью от 18506 до 19296 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(f) нуклеотидной последовательностью от 19779 до 21389 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(g) нуклеотидной последовательностью от 21793 до 22877 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266,
(h) нуклеотидной последовательностью от 23205 до 24773 в нуклеотидной последовательности, представленной SEQ ID NO: 266;
(2) нуклеотидной последовательностью, которая способна гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью из (1) в жестких условиях.
2. Полинуклеотид по п.1, кодирующий, по меньшей мере, один полипептид, вовлеченный в биосинтез пирипиропена А.
3. Полинуклеотид по п.1, кодирующий полипептид, обладающий какой-либо одной или более из активностей - активностью поликетидсинтазы, активностью пренилтрансферазы, активностью гидроксилазы, активностью ацетилтрансферазы или активностью аденилатсинтетазы.
4. Полинуклеотид по п.1, который происходит из штамма PF1169 Penicillium coprobium.
5. Полинуклеотид по п.1, кодирующий полипептид, обладающий активностью в отношении гидроксилирования положения 7 и/или положения 13 пирипиропена E или пирипиропена O.
6. Полинуклеотид по п.1, кодирующий полипептид, обладающий активностью в отношении гидроксилирования положения 11 пирипиропена E.
7. Рекомбинантный вектор, включающий какой-либо один или более из указанных полинуклеотидов по п.1.
8. Рекомбинантный вектор по п.7, включающий полинуклеотид, кодирующий полипептид, обладающий активностью в отношении гидроксилирования положения 7 и/или положения 13 пирипиропена E или пирипиропена O.
9. Рекомбинантный вектор по п.7, включающий полинуклеотид, кодирующий полипептид, обладающий активностью в отношении гидроксилирования положения 11 пирипиропена E.
10. Рекомбинантный вектор по п.7, где указанный рекомбинантный вектор представляет собой плазмиду pCC1-PP1.
11. Рекомбинантный вектор по п.7, где указанный рекомбинантный вектор представляет собой плазмиду pPP2.
12. Рекомбинантный вектор по п.7, где указанный рекомбинантный вектор представляет собой плазмиду pPP3.
13. Трансформант, включающий какой-либо один или более из указанных полинуклеотидов по п.1.
14. Трансформант по п.13, где указанный трансформант представляет собой Escherichia coli, включающую плазмиду pCC1-PP1.
15. Трансформант по п.13, где указанный трансформант представляет собой Aspergillus oryzae, включающий плазмиду pPP2.
16. Трансформант по п.13, где указанный трансформант представляет собой Aspergillus oryzae, включающий плазмиду pPP3.
17. Способ получения предшественника пирипиропена А, который включает культивирование микроорганизма, включающего указанные векторы по п.7, и выделение предшественника пирипиропена А из пирипиропена E.
18. Способ по п.17, который включает культивирование указанного трансформанта по п.15 и указанного трансформанта по п.16 одновременно или раздельно и выделение предшественника пирипиропена А из пирипиропена E.
19. Способ по п.17, где указанный предшественник пирипиропена А представлен формулой (I) ниже:
Формула (I)
20. Способ получения предшественника пирипиропена А, который включает культивирование микроорганизма, включающего указанные векторы по п.7, и выделение предшественника пирипиропена А из пирипиропена O.
21. Способ по п.20, который включает культивирование указанного трансформанта по п.16 и выделение предшественника пирипиропена А из пирипиропена O.
22. Способ по п.20, где указанный предшественник пирипиропена А представлен формулой (II) ниже:
Формула (II)