Оксид азота и эмоксипин при лечении ожоговой ишемии коньюнктивы (экспериментальные исследования)

Биорадикалы и Антиоксиданты 2016 Том 3, №3

204

О.И. Кваша, Н.Б. Чеснокова

ОКСИД АЗОТА И ЭМОКСИПИН ПРИ ЛЕЧЕНИИ ОЖОГОВОЙ ИШЕМИИ КОНЬЮНКТИВЫ

ФГБУ «МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава России, Москва, Россия

МГМСУ им. А.И.Евдокимова, Москва, Россия

Цель: провести сравнительное исследование влияния оксида азота в газовом потоке и эмоксипина, а также их совместного действия на клинические проявления и биохимические процессы в слёзной жидкости при лечении ожоговой ишемии коньюнктивы. У 22 кроликов (44 глаза) моделировали щелочной ожог III степени. В качестве источника NO-содержащего газового потока (NO-СГП) использовали медицинский воздушно-плазменный аппарат «Плазон». Биохимическое исследование слезной жидкости. При сопоставлении полученных результатов антиокислительной активности слезной жидкости с данными клинических исследований, можно говорить о преимуществах лечения NO и сочетанного лечения NO + эмоксипин. Одновременное применение оксида азота в газовом потоке с экспозицией 15 сек. и эмоксипина способствует более быстрому купированию воспаления, уменьшению отёка, более быстрому восстановлению коньюнктивы в зоне ожога и краевой петлистой сети, восстановлению прозрачности роговицы и меньшей васкуляризации.

Ключевые слова: оксид азота, эмоксипин, конъюктива, ожог

The purpose: to carry out comparative research of influence of Nitric oxide in gas flow (NO-GF) and emoxipine, and also their joint action on clinical displays and biochemical processes in a plaintive liquid at treatment of burn's ishemy of conjunctiva. At 22 rabbits (44 eyes) simulated an alkaline burn III. The medical air-plasma device "Plason" was used as a source of a NO-containing gas flow (NO-GF). Biochemical research of a tear's liquid were performed. By comparison of the received results of antioxidizing activity of a plaintive liquid to the data of clinical researches, it is possible to speak about advantages of NO - treatment and combined treatment (NO + emoxipine). Simultaneous application of Nitric oxide in gas flow (NO-GF) with an exposition 15 seconds and emoxipine promotes faster reduction of an inflammation, reduction of edema, faster conjunctiva restoration in a zone of a burn and regional of limbal vessels, restoration of a transparency of a cornea and smaller vascularization.

Key words: nitric oxide, emoxipin, conjunctiva, burns

В последнее время в регуляции сосудистого тонуса и гемостаза большую роль отводят биорегулятору оксиду азота. Известно, что механизмы ускорения регенерации под воздействием NO, заключаются в нормализации микроциркуляторных нарушений, улучшении сосудистой и нервной трофики, усилении фагоцитоза, ингибиции свободных кислородных радикалов, продукции активированными макрофагами цитокинов, усиливающих рост фибробластов, синтез коллагена и ангиогенез Так как оксид азота является свободным радикалом и может влиять на свободнорадикальные процессы в тканях, необходимо при его применении контролировать состояние местного антиокислительного статуса [ 1, 4].

Известно, что эмоксипин замедляет инвазию фибробластических элементов в роговицу, эффективно ингибирует свободнорадикальное окисление липидов, стабилизирует мембранные структуры, ингибирует агрегацию тромбоцитов. Особенностью воздействия эмоксипина на обожженную роговицу является предупреждение образования грубого помутнения роговицы в исходе ожога [2].

Учитывая вышесказанное, целью нашей работы явилось проведение сравнительного исследования влияния NO- содержащего газового потока и эмоксипина, а также их совместного действия на клинические проявления и биохимические процессы в слёзной жидкости при лечении ожоговой ишемии конъюнктивы.

Материал и методы. Исследование проведено на 22 кроликах. Для общей анестезии подкожно вводили 5% раствор кетамина (1 мл/кг). Одновременно проводили местную анестезию путем инстилляции на роговицу 1% раствора дикаина (Тетракаина).

Биорадикалы и Aнтиоксиданты 2016 Том 3, №3

205

На оба глаза наносили тяжелый дозированный щелочной ожог % конъюнктивы и 1/4 области роговицы в верхне-внутреннем квадранте глазного яблока. После ожога глаза животных 1-ой опытной группы (5 кроликов) подвергали воздействию NO-содержащего газового потока с концентрацией 300 ppm, экспозицией 15сек., лечение 2-ой опытной группы (5 кроликов) проводили препаратом эмоксипин 1% в виде инстилляций 3 раза в день в течение 21 дня. Для определения взаимодействия NO-СГП и препарата эмоксипин в 3-ей опытной группе (5 кроликов) лечение проводилось одновременно двумя методиками. Животные были разделены на пять групп (одна из них контрольная -4 кролика, в которой после ожога лечение не проводилось и 3 кролика интактных для исследования слезы).

Воздействие NO-СГП в 1 и 3 группах проводили с помощью воздушно-плазменного аппарата «Плазон» с расстояния 200 мм экспозицией 15 сек.3 раза в течение заживления -через сутки после ожога конъюнктивы, через 2-е и 3-е суток. Лечение препаратом эмоксипин проводили во 2 и 3 группе начиная с первых суток после ожога 3 раза в день в виде инстилляций в течение 21 дня).

Состояние глаз экспериментальных животных оценивали с помощью клинико-экспериментальных и биохимических методов.

Клиническую оценку состояния глаз экспериментальных животных проводили в условных баллах на 1, 2, 3, 4, 7, 10, 14, 21 сутки по 10 критериям: гиперемия конъюнктивы (воспалительная реакция глаза), отделяемое, отёк конъюнктивы, площадь ищемии, восстановление цвета конъюнктивы в зоне ишемии, густота сосудов в зоне ишемии и краевой петлистой сети в зоне лимба, интенсивность помутнения роговицы, васкуляризация роговицы, симблефарон, изъязвление роговицы,

Биохимические исследования проведены в 98 образцах слезной жидкости.

Слезную жидкость забирали у интактных животных до начала эксперимента и на 1, 3, 7, 14, 21 и 28 сутки после ожога роговицы.

Для определения AOA (антиокислительной активности) слезной жидкости измеряли латентный период опытной пробы, содержащей биологический материал,- t^ и контрольной пробы, содержащей аликвоту буфера - t0. Для расчетов использовали отношение разности латентных периодов пробы и контроля к контролю (t^-fe)/ t0. AOA слезы определяли с помощью калибровочной кривой и выражали через эквивалентную концентрацию тролокса (тролокс-эквивалент) [3].

Результаты и их обсуждение. Экспериментальное исследование показало, что одновременное применение оксида азота в газовом потоке с экспозицией 15 сек. и эмоксипина способствует более быстрому купированию воспаления, уменьшению отёка, более быстрому восстановлению конъюнктивы в зоне ожога и краевой петлистой сети. Способствует меньшей васкуляризации и восстановлению прозрачности роговицы. Для подтверждения полученных данных нами исследована антиокислительная активность (AOA) слёзной жидкости при комбинированном лечении ожоговой ишемии конъюнктивы NO-СГП + эмоксипин.

Установлено, что AOA слезной жидкости кроликов варьирует в пределах от 100 до 300 мкмоль тролокса; отмечены сезонные колебания AOA слезы, влияние на нее характера питания и температурного режима. Наилучшие результаты отмечаются в группах, получающих NO и NO + эмоксипин. При сопоставлении полученных результатов с данными клинических исследований, можно говорить о преимуществах сочетанного лечения NO и NO + эмоксипин.

Заключение. Одновременное применение оксида азота в газовом потоке с экспозицией 15 сек. и эмоксипина способствует более быстрому купированию воспаления, уменьшению отёка, более быстрому восстановлению конъюнктивы в зоне ожога и краевой петлистой сети, восстановлению прозрачности роговицы и меньшей васкуляризации.

Список литературы:

1. Кваша О.И. Терапия оксидом азота в газовом потоке в офтальмотравматологии (экспериментально-клиническое исследование): дис ... докт. мед. наук. - Москва, 2007. - 245 с.

2. Марковска Э.К. Применение антиоксиданта эмоксипина для лечения заболеваний роговицы: Aвтореф. дис. ... канд. мед.наук.- 1991 .- 21 с.

3. Биохимические методы исследования в клинике / Ред. A.A. Покровский. М., 1969. 206-210.

4. Berman M., Leary R., Gage J. Evidence for a role of the plasminogen activator-plasmin system in corneal ulceration // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1980; 19 (10): 1204-1221.