Участие генов белков теплового шока (HSP70-2, HSP70-HOM) в развитии ревматоидного артрита и болезни Рейтера

- Краткие сообщения

© 2001, СПб РО РААКИ

УЧАСТИЕ ГЕНОВ БЕЛКОВ ТЕПЛОВОГО ШОКА (HSP70-2, HSPTO-HOM) В РАЗВИТИИ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА И БОЛЕЗНИ РЕЙТЕРА

Шевченко А.В., Зонова Е.В., Королев М.А., Коненкова Л.П., Коненков В.И.

Институт Клинической Иммунологии СО РАМН, г. Новосибирск

Резюме. Наибольший риск развития патологии суставов связывают с HLA DRB1*01 , HLA DRB1*04 специфичностями. Однако только ограниченный процент HLA DRBl*01/*04 позитивных страдают суставными заболеваниями. Способствовать патологическим процессам могут специфические взаимодействия между hsp70 и HLA DRB1 за счет функционирования белков hsp70 семейства как шаперонов и участия их в процессинге и презентации антигенных пептидов. Мы рассмотрели роль полиморфизма кодирующих регионов HSP70-2 и HSPTO-HOM генов у пациентов с болезнью Рейтера и с ревматоидным артритом и связь их аллельных вариантов с HLA DRB1 специфичностями. Увеличение риска развития РА было выявлено у носителей фенотипа HSP70-2*B/B/ HSP70-HOM*A/A и HSP70-2*B/B/ HSP7C)-HOM*B/B. Риск развития РА в группе HLA-DRB1 *01/*04 позитивных усиливался у носителей HSP70-2*B/B/HSP70-HOM*A/A фенотипа. Полученные данные свидетельствуют о том, что наряду с аллельными вариантами генов презентации, набор аллельных вариантов генов процессинга может определять эффективность развития иммунного ответа и определенным образом влиять на развитие аутоиммунных процессов.

Ключевые слова: HSP70-2, HSP70-HOM, HLA DRB1, ревматоидный артрит

Shevchenko А. V., Zonova E.V., Korolev М.A., Konenkova L.P., Konenkov V.I.

HEAT SHOCK PROTEIN GENES (HSP70-2, HSP70-HOM) PARTICIPATION

IN THE DEVELOPMENT OF RHEUMATOID ARTHRITIS AND REITER’S DISEASE

Abstract. The greatest risk of the development of joints pathology is connected with HLA DRB 1*01, HLA DRB1*04. However, not all HLA DRB 1*01, HLA DRB 1*04 positive individuals suffer this pathology. The specific interactions between hsp70 and HLA DRB1 can promote the pathological process, because hsp70 can function as molecular chaperone and participate in processing and presentation of antigenic peptides. We have considered an influence of HSP70-2 and HSP70-HOM genes polymorphism in the coding regions and their association with HLA DRB1 in patients with rheumatoid arthritis. An increased risk of RA development was observed in patients with HSP70-2*B/B/ HSP70-HOM*A/A and HSP70-2 *B/B/ HSP70-HOM* В/В/ phenotypes. The risk of RA development in HLA-DRBl*01/*04 positive groups increased in patients with HSP70-2* В/В/ HSP70-HOM*A/A phenotype. The obtained data reveal that gene allelic variants of processing, along with gene allelic variants of presentation, may indicate the efficiency of the immune response and, probably, influence the development of autoimmune processes.

Введение ные типы HLA DRB1 молекул. Наибольший риск

Большинство пациентов с ревматоидным артри- развития патологии связывают с HLA DRB1 01, том, болезнью Рейтера, или другими хроническими HLA DRB1 04 и HLA DRB1 10 специфичностями, воспалениями суставов экспрессируют определен- Молекулярные основы этих ассоциаций объясняют-

------------------------------------------ ся определенными аминокислотными мотивами (31

Адрес для переписки: цепи в третьем гипервариабельном (HV3) регионе

630099, Новосибирск 099, HLA DRB1 молекулы [4, 5]. Однако только ограни-

ул. Ядринцевская 14, Шевченко Алла Владимировна ченный процент населения, позитивный по HLA Тел.:(383 2)28-50-84 DRB1*01 и HLA DRB1*04, страдает суставными

Факс:(383 2)22-70-28 заболеваниями. Детальный анализ роли специфи-

Е-тай: konen@online.nsk.su ческих мотивов HLA DRB1 молекулы позволил

выявить, что они являются связывающими для семейства белков теплового шока 70 кБ (Ьзр70). Показано, что специфические взаимодействия между Ьзр70 и НЬА 011В1*04 могут способствовать развитию РА [6, 7, 25] за счет того, что белки Ьзр70 семейства функционируют как шепероны [15, 17-19], регулируя сборку и разрушение белковых комплексов и участвуют в процессинге и презентации антигенных пептидов [13]. Гены, кодирующие Ьэр, расположены на коротком плече 6 хромосомы в регионе III класса МНС комплекса в 280 кЬ к центромере от гена 'ШР-ос. В этом семействе различают три гена: ШР70-1, НБР70-2, и ШР70-НОМ [10,12,

14, 20, 22, 26].

Расположение НБР в НЬА регионе, для большинства генов которого доказана ассоциация со многими заболеваниями, участие Ьэр в процессинге и презентации антигенных пептидов, полиморфизм Н5Р генов в кодирующих и некодирующих регионах говорят о возможном влиянии полиморфизма этих генов на характер течения того или иного заболевания.

С другой стороны, высокий уровень межвидовой гомологии первичных структур НБР внутриклеточных инфекций и собственных белков теплового шока человека [21, 23, 24] может способствовать перекрестному реагированию при иммунном ответе и являться одним из механизмов индукции аутоиммунных процессов [9, 16].

Мы рассмотрели роль полиморфизма кодирующих регионов гена НБР70-2 в позиции 1267 (замена в—>А в Рэ1 I рестрикционном сайте) и НОРТОНОМ в позиции 2437 (замена Т—>С в Ысо1 рестрикционном сайте) у пациентов, страдающих ревматоидным артритом.

Материалы и методы

Пациенты и контроль

Нами были обследованы 46 пациентов (29 женщин и 17 мужчин в возрасте от 21 до 62 лет) с диагнозом ревматоидный артрит. У 78,8 % наблюдалось медленно процессирующее, у 21,2% - быстро процес-сирующее заболевание. В группе преобладали пациенты со второй степенью активности болезни (60,6%) и с выраженными системными проявлениями (66,7%). Все пациенты соответствовали критериям Американской ассоциации ревматологов для РА [3] . Контрольная группа составила 58 человек (37 женщин и 21 мужчина в возрасте от 22 до 67 лет) без каких-либо патологий суставов.

НБР70-2 и (дао-ном ЯР!-Р-анализ.

Полиморфные участки НБР70-2 и Н5Р70-НОМ генов были амплифицированы с использованием

сиквенс-специфичных праймеров OL 19 и OL14 для HSP70-2 гена и OL8 и OLIO для HSP70-HOM гена [20]. Праймеры были синтезированы в НПО “Вектор”, Новосибирск, Кольцово. PCR реакционная смесь содержала 500ng геномной DNA, 200цм каждого dNTP, 1цм каждого праймера, 1 единицу Tag DNA полимеразы (“Сибэнзим”, Новосибирск), 1х PCR буфер с 1,5 mM MgCl2 PCR продукты были гидролизованы PstI рестриктазой для HSP70-2 и Ncol рестриктазой для HSP70-HOM (“Сибэнзим”, Новосибирск) и визуализированы в ультрафиолетовом свете после разгонки в 1,5% агарозном геле.

HLA-типирование

HLA-DRB1 генотипирование было проведено всем пациентам и контрольной группе с использованием тест-систем для ДНК-типирования гена DRB1 (НПО “ДНК-технология”, Москва). ДНК выделялась стандартным фенол-хлороформным методом из периферической крови пациентов.

Статистический анализ

Анализ различий частот исследуемых признаков и относительного риска заболевания проводился точным методом Фишера с корректирующей поправкой Йетса для величин меньше пяти, неравновесное сцепление аллелей определяли по критерию X2 с использованием авторских программ для генетико-статистического анализа [1].

Результаты

Распределение частот аллельных вариантов HSP70 генов в группах с патологиями суставов

RFLP анализ полиморфных кодирующих регионов HSP70 генов выявлял фрагмент 2075-пн при отсутствии PstI сайта (HSP70-2*B аллель) и фрагменты 1139 и 936 пн в присутствии PstI сайта (HSP70-2*A аллель) для HSP70-2 гена, Ncol гидролиз выявлял фрагмент 2060 пн при отсутствии Ncol сайта (HSP70-HOM*B аллель) и фрагменты 1510 и 550 пн в присутствии Ncol сайта (HSP70-HOM*A аллель). Частоты PstI и Ncol генотипов и фенотипов обследуемых указаны в табл. 1. Были найдены достоверные различия в частотах аллельных вариантов HSP70-2 гена при сравнении группы пациентов с РА и контрольной группой. Частота HSP70-2* В/В увеличивалась, частота гетерозиготного варианта, напротив, снижалась в группе с патологией суставов. При анализе частот HSP70-HOM гена не было найдено каких-либо достоверных различий пациентов с РА со здоровыми.

Анализ частот HSP70-2/HSP70-HOM, проведенный в группе с патологией суставов и в контрольной

Табл.1. АССОЦИИРОВАННОСТЬ ЧАСТОТ НЭР70-2 И Н5Р70-НОМ ГЕНОВ С РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ (РА).

Контроль N=58 РА N=46 №

НБР70-2

А/А 18,9% 15,2% -1,30

А/В 58,6% 43,5% -1,84*

В/В 22,4% 41,3% 2,43*

А 48,3% 36,9% -1,59*

В 51,7% 63,1% 1,59*

НБР70-Н0м

А/А 54,5% 60,8% 1,30

А/В 32,7% 19,6% -2,00

В/В 12,7% 19,6% 1,67

А 70,9% 70,7% -1,01

В 29,1% 29,3% 1,01

Примечание: *Р<0,05.

Табл.2. АССОЦИИРОВАННОСТЬ ФЕНОТИПОВ Н5Р70-2/Н8Р70-НОМ С РАЗВИТИЕМ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА (РА).

Фенотипы НБР70-2/ НЭР70-НОМ Контроль N=58 РА N=46

АА/АА 11,11 % 6,52 % -1,67

АА/АВ 5,55 % 6,52 % 1,27

АА/ВВ 3,70 % 2,17 % -1,62

АВ/АА 33,33 % 19,50 % -1,89

АВ/АВ 16,61% 10,80 % -1,52

АВ/ВВ 9,25% 8,69 % 1,01

ВВ/АА 9,25% 28,26 % 4,25*

ВВ/АВ 11,11% 2,17 % -5,25

ВВ/ВВ 0 % 8,69 % 12,42*

Примечание: *Р<0,05.

группе, представлен в табл. 2. Достоверно значимо увеличены частоты гомозигот Н8Р70-2*В/В / Н8Р70-НОМ*А/А и Н8Р70-2*В/В/Н8Р70-НОМ*В/ в группе больных с РА относительно контроля.

Ассоциированность аллельных вариантов НБР70 генов с ША 0ЯВ1

Проведенный нами анализ частот Н8Р70-2 и НБР70-Н0м совместно с НЬА 011В1 представлен в табл. 3. У позитивных по НЬА БЫВ 1*01 и НЬА ВКВ1*04, ассоциация которых с патологиями суставов показана ранее [6, 7], достоверно увеличены частоты НЬА 1ЖВ1*04/Н8Р70-2*В/В и достоверно уменьшены частоты НЬА БКВ1*04/Н8Р70-2*А/ В в группе больных с РА по сравнению с контрольной группой. Кроме того выявлено достоверное увеличение частот НЬА Б11В1*01/Н8Р70-2*В/

В/ШР70-НОМ*А/А и НЬА ОЫВ1*04/ ШР70-2*В/ В/Н8Р70-НОМ*А/А в данной группе относительно здоровых лиц. В распределении аллельных вариантов Н8Р70-2 и Н8Р70-НОМ генов в обеих группах, негативных по НЬА БКЫ *01 /*04 значимых различий не показано.

Обсуждение

Полиморфизм кодирующих регионов Н8Р70 генов в развитии аутоиммунных патологий исследовался многими авторами. Особое значение Ьэр белков в механизмах патогенеза общепринято [5, 6, 7,

17, 25], однако роль полиморфизма данных генов в развитии заболеваний вызывает дискуссии. Получены результаты как подтверждающие значение определенных аллельных вариантов в патологии [10,

12, 22, 24], так и опровергающие наличие каких-либо аллельных ассоциаций [11, 26] .

Табл. 3. ЧАСТОТЫ РЭИ И N001 ФЕНОТИПОВ У Н1МЖВГ01,*04 ПОЗИТИВНЫХ И Н1А-ОВВГ01 ,*04 НЕГАТИВНЫХ ПАЦИЕНТОВ С РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ (РА).

Фенотип Н1А-ОР!В1*01 Н1_А-ОВВ1*01/*04 негативные

Контроль N=14% РА N=18% Контроль N=16 % РА N=14% Контроль N=28% РА N=14%

Н5Р70-2

А/А 35,7 17,6 6,3 0 17,9 26,67

А/В 50,0 47,0 75,0 35,7 Р!В=-5,4‘ 53,57 46,67

В/В 14,3 35,3 18,7 64,3 7,8' 28,57 26,68

Н5Р70-НОМ

Д/А 50,0 77,8 57,1 69,2 55,56 33,34

А/В 28,6 11,1 28,6 7,7 37,04 40,00

В/В 21,4 11,1 14,3 23,0 7,41 26,67

Н5Р70-2/Н5Р70-НОМ

АА/АА 14,3 12,5 0 0 16,67 7,14

АА/АВ 14,3 0 6,3 0 0 21,43

АА/ВВ 7,1 6,3 0 0 4,17 0

АВ/АА 28,8 25,0 37,5 7,7 33,33 21,43

АВ/АВ 7,1 12,5 31,3 7,7 12,50 14,28

АВ/ВВ 14,3 6,25 12,5 7,6 4,17 14,28

ВВ/АА 7,1 37,5 1^=7,8* 6,3 38,5 т=и,5‘ 12,50 0

ВВ/АВ 7,1 0 6,2 0 16,67 7,14

ВВ/ВВ 0 0 0 15,4 0 14,28

Примечание: *Р<0,05.

В данной работе был исследован аллельный полиморфизм кодирующих регионов Н8Р70-2 и Н8Р70-НОМ генов у пациентов с ревматоидным артритом. Нами показана достоверная ассоциация Н8Р70-2*В/В с риском развития РА (р=0,02) и устойчивость Н8Р70-2*А аллельного варианта к развитию данной патологии. Аналогичная зависимость была ранее получена при обследовании пациентов с болезнью Бехтерева [12]. Аллельный полиморфизм кодирующего региона Н8Р70-НОМ гена в исследуемой области не был достоверно ассоциирован с развитием РА, что также совпадает с ранее проведенными исследованиями НБР70-НОМ полиморфизма в группах с болезнью Бехтерева и реактивным артритом в Финской популяции [26]. Анализ НБР70 фенотипов в группах больных и здоровых показал увеличение относительного риска развития РА у носителей Н8Р70-2*В/В/Н8Р70-НОМ*А/А (Р=0,006) и НБР70-2 *В/В/ Н8Р70-НОМ*В/В ( Р=0,03).

Проведенное нами ДНК-типирование гена НЬА-Б11В1 по 18 специфичностям и анализ частот аллельных вариантов генов БКВ1 и НБР70-2/ НБР70-НОМ выявило определенные различия в обследуе-

мых группах. Учитывая, что патологии суставов ассоциированы с определенным НЬА-ВИШ фенотипом [2, 6, 7], мы рассмотрели влияние Н8Р70 полиморфизма у носителей НЬА-БКВ1*01 и НЬА-ВИВ1*04 (табл. 3). Риск развития РА в группе у носителей Н8Р70-2*В/В/ Н8Р70-НОМ*А/А был достоверно выражен у НЬА-Б11В1*01 позитивных (Р=0,05) и у НЬА-ВЯВ1*04 позитивных (Р=0,006). У пациентов, не имеющих в геноме НЬА-В11В1*01/ *04 специфичностей, каких-либо значимых ассоциаций с аллельный вариантами Н8Р70-2/Н8Р70-НОМ генов не наблюдалось, что могло бы говорить

о сцеплении между аллельными вариантами Н8Р70 генов и НЬА-Б11В1*01/*04. Однако анализ неравновесного сцепления показал, что аллели Н8Р70-2/Н8Р70-НОМ и НЬА-БКВ1*01/*04 участвуют в формировании риска развития РА независимо друг от друга (х2<1 для всех вариантов табл. 3). Скорее это свидетельствует в пользу предположения о вто-ричности значения аллельного полиморфизма НБР70 генов в патологии суставов в сравнении с НЬА-Б11В1. Взаимосвязь НЬА-ОЯВ1*01/*04 и определенных аллельных вариантов НБР70-2/Н8Р70-НОМ может иметь особое значение в развитии РА

за счет особенностей их специфических взаимодействий. Во-первых, презентация определенных вариантов собственных hsp70 молекулам HLA-DRB1*01/ *04 может индуцировать Т-клеточный ответ, допускающий кросс-реактивность с некоторыми сходными антигенными детерминантами [6,16]. Во-вторых, презентация пептидов через hsp70 может приводить к развитию аутоиммунного ответа к собственным вариантам hsp70 за счет их высокой межвидовой гомологии [5, 7, 16]. Кроме того, свой отпечаток на эффективность иммунного ответа накладывают взаимодействия HLA-DRB1 и hsp70 как шеперонов.

Полученные данные свидетельствуют о том, что наряду с аллельными вариантами генов презентации HLA-DRB1, набор аллельных вариантов генов процессинга, таких как HSP70, может во многом определять эффективность развития иммунного ответа и определенным образом влиять на развитие аутоиммунных процессов. Анализ неравновесного сцепления аллельных вариантов генов белков процессинга и презентации поможет глубже понять некоторые механизмы иммуногенетической предрасположенности и резистентности человека к заболеваниям, а также механизмы запуска аутоиммунных процессов.

Благодарности

Авторы благодарят сотрудника Института Клинической Иммунологии Прокофьева В.Ф. за предоставление генетико-статистических программ для статистической обработки материала.

Список литературы

1. Прокофьев В.Ф., Воронова И.А., Котова Л.А., Ширинский B.C., Вольский Н.Н. Иммунологические методы раннего диагноза и прогноза в клинике аутоиммунных заболеваний. //Клиническая иммунология и иммуногенетика.- Новосибирск, 1998.-С.126-134.

2. Ahmed S.,Ayoub E.,Scornik J.,Wang C.-Y.,She J.-X. Poststreptococcal Reactive Arthritis. Clinical characteristics and association with HLA-DR alleles./ / Arthritis and Rheumatism, -1998.-Vol. 41.-P.1096-1102.

3. Arnett FS., Edworthy SM., Bloch DA., et all.The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of Rheumatoid Arthritis. // Arthritis Rheum.- 1998.-Vol 31.-P315-324.

4. Auger I., EscolaJM., Gorvel JP„ Roudier J. HLA-DR4 and HLA DR-10 motifs that carry susceptibility to rheumatoid arthritis bind 70-kd heat shock proteins. // Nature Medicine,- 1996.-Vol.2.-P.306-310.

5. Auger I., Roudier J. A function for the QKRAA amino acid motif: mediating binding of DnaJ to DnaK. Implications for the association of rheumatoid arthritis

with HLA DR4. // J Clin Invest, -1997.-Vol.99,-P. 1818-1822.

6. Auger I„ Toussirot E., Roudier J. Molecular mechanisms involved in the association of HLA-DR4 and rheumatoid arthritis. // Immunol Res - 1997.-Vol.l6.-P.121-126.

7. Auger I., Toussirot E„ Roudier J. HLA DRB1 motifs and heat shock proteins in rheumatoid arthritis. // Int Rev Immunol. - 1998,- Vol.17.- P.263-271.

8. Barron KS., Reveille JD„ Carrington M, Mann DL., Robinson MA. Susceptibility to Reiter's syndrome is associated with alleles of TAP genes.// Arthritis Rheumatology .- 1995.-Vol.38.-P.684-687.

9. Corzo D.,Yunis J.,Yunis E.,Howard A.,Lieberman J. HSP70-2 9.0 kb variants is in linkage disequilibrium with HLA-B and DRB1* alleles associated with Clozapine-Induced Agranulocytosis.// J Clin Psychiatry.- 1994.-Vol.55.-P. 149-152.

10. Corzo D., Yunis J.,Salazar M„ Lieberman J., Howard A.,Awdeh Z.,Alper C., Yunis E. The major histocompatibility complex region marked by HSP70-

1 and HSP70-2 variants is associated with Clozapine-Induced Agranulocytosis in two different etnic groups./ / Blood.- 1995.-Vol.86.-P.3835-3840.

11. Favatier F., Bornman L., Hightower LE., Gunther E., Polla BS. Variation in hsp gene expression and Hsp polymorphism: susceptibility and stress tolerance? // Cell Stress & Chaperones 1997.-Vol 2-P.141-155. ’

12. Fraile A., Nieto A., Mataran L., MartinJ. HSP70 gene polymorphisms in ankylosing spondylits. //Tissue Antigens.- 1998.-Vol.51 .-P.382-385.

13. Ginsberg H. Lipoprotein physiology. // Endocrinology and Metabolism Clinics.- 1998.-Vol.27.-P.503-519.

14. Gutsmann-Conrad A., Heydari A., You S., Richardson A. The expression of Heat Shock Protein 70 decreases with cellular senescence in vitro and in cells derived from young and old human subjects.// Experemental Cell Research .- 1998.-Vol.241.-P.404-413.

15. Horwich A., Weber-Ban E., Finley D. Chaperone rings in protein folding and degradation.// PNAS -1999,-Vol.96.-P.l 1033-1140.

16. Karlsen AE., Dyrberg T. Molecular mimicry between non-self , modified self and self in autoimmunity. //Immunology.- 1998.-Vol.l0.-P.25-34.

17. Kurzik-Dumke U., Schick C., Rzepka R., Melchers I. Overexpression of human homologs of the bacterial Dnajchaperone in the sinovial tissue of patients with Rheumatoid Arthritis.//Arthritis and Rheumatism.- 1999,- Vol.42.-P.210-220.

18. Manara G., Sansoni P., Badiali-De Giorgi L., Gallinella G., Ferrari C., Brianti V., Fagnoni F., Ruegg C., De Panfilis G., Pasquinelli G. Newinsights suggesting a possible role of a heat shock protein 70-kD family-related protein in antigen processing/

presentation phenomen in humans.// Blood.- 1993.-Vol.82.-P.2865-2871.

19. Milner C., Campbell D. Structure and expression of the three MHC-linked HSP-70 genes. // Immunogenetics.- I990.-Vol.32.-P242-251.

20. Milner C., Campbel D. Polymorphic analysis of the three MHS-linked HSP70 genes.// Immunogenetics.- 1992. -Vol.36.-P.357362.

21. Mustafa A., Lundin K., Meloen R., Shinnick T„ Coulson A., Oftung F. HLA-DR4-restricted T-cell epitopes from the mycobacterial 60 000 MW heat shock protein (hsp60) do not map to the sequence homology regions with the human hsp60. // Immunology .- 1996.-Vol.87.-P.421-427.

22. Pociot F., Ronningen K., Nerup J. Polymorphic analysis of the human MHC-Linked Heat Shock Protein 70 (HSP70-2) and HSP70-HOM genes in Insulin-Dependent Diabetes Mellitus (IDDM). // Scand.J.Immunology.- 1993.-Vol.38.-P.491-495.

23. Quayle A., Wilson K., Li S., Kjeldsen-Kragh J., Oftung F., Shinick T., Sioud M., Forre O., Capra

J., Natvig J. Peptid recognition, Tcell receptor usage and HLA restriction elements of human heat-shock protein (hsp) 60 and mycobacterial 65-kDa hsp-reactive T cell clones from rheumatoid synovial fluid. //Eur.J.Immunology.- 1992.-Vol.22.-P.1315-1322.

24. Schroeder S., Reck М., Hoeft A., Stuber F. Analysis of two human leukocyte antigen-linked polymorphic heat shock protein 70 genes in patients with severe sepsis. //Crit Care Med.- 1999,-Vol 27.-P.1265-1270.

25. Vinasco J., Beraun Y., Nieto A., Fraile A., Pareja E., Mataran L., Martin J. Heat Shock Proteins 70 gene polymorphisms in rheumatoid arthritis. // Tissue Antigenes. -1997,- Vol 50,- P.71-73.

26. Westman P., Partanen J., Leirisalo-Repo М., Koskimies S. HSP70-HOM Ncol polymorphism and HLA-associations in the Finnish population and in patients with Ankylosing Spondylitis or Reactive Arthritis.// Scan Journal of Immunogenetics .- 1994.-Vol.21.-P81-90.

поступила в редакцию 21.04.2001 принята к печати 05.07.2001