Роль нейтрофильных гранулоцитов в генезе опухолевых заболеваний

медико-биологические науки

medical and life sciences

DOI: 10.12731/WSD-2016-5-3 УДК 616.017.1

РОЛЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ В ГЕНЕЗЕ ОПУХОЛЕВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Смирнова О.В., Агилова Ю.Н., Перепечай Я.И., Бахарева О.П.

Целью исследования было изучение особенностей противоопухолевой хемилюминесцентной активности нейтрофилов крови больных множественной миеломой-G варианта в зависимости от стадии развития заболевания. Были обследованы 101 больной множественной миеломой G-иммунохимического варианта, в возрасте от 40 до 76 лет и 125 практически здоровых добровольцев. Больные были разделены на стадии согласно классификации Durie, Salmon (1975 г.) Исследование проводилось методом хемилюминесцентного анализа спонтанной и индуцированной продукции активных форм кислорода нейтрофилами. У больных на II стадии статистически значимо повышались показатели хемилюминесцентной активности нейтрофилов, как при спонтанной, так и при индуцированной хемилюминесценции: интенсивность хемилюминесцентной активности нейтрофилов, площадь под кривой, а также индекс активации по сравнению с контрольной группой. На III стадии заболевания интенсивность спонтанной хемилюминесценции превышала таковую на II стадии заболевания, а интенсивность индуцированной хемилюминесценции была снижена по сравнению со II стадией. Таким образом, на III стадии множественной миеломы возникают модификационные преобразования нейтрофилов ведущие к быстрому прогрессированию заболевания.

Ключевые слова: нейтрофильные гранулоциты; хемилюминесценция; множественная миелома.

THE ROLE OF NEUTROPHILS IN THE GENESIS OF TUMOR DISEASES

Smirnova O.V., Agilova Y.N., Perepechai Y.I., Bahareva O.P.

The goal was to study the characteristics of anti-tumor activity of blood neutrophils chemiluminescence in patients with multiple myeloma-G variants depending on the stage of the disease. We examined 101 patients with multiple myeloma G-immunochemical variant, between the ages of 40 to 76 years and 125 healthy volunteers. Patients were divided into stages according to classification Durie, Salmon (1975). The study was conducted by chemiluminescence analysis of spontaneous and induced production of reactive oxygen by neutrophils. Patients at stage II had significantly raised the chemiluminescent indicators of the neutrophils activity, both in spontaneous and induced chemiluminescence: the intensity of the chemiluminescent activity of neutrophils, area under the curve, and the index of activation compared to the control group. In stage III disease spontaneous chemiluminescence intensity was higher than that at the II stage of the disease and the intensity of induced chemilumines-cence was reduced in comparison with stage II disease. Thus, the modification transformation of neutrophils leading to the rapid progression of the disease was occurred at stage III of multiple myeloma.

Keywords: neutrophilic granulocytes; chemiluminescence; muitiple myeloma.

Введение

Нейтрофильные гранулоциты (НГ), неспецифические фагоциты являются преобладающей гранулоцитарной субпопуляцией лейкоцитов. В крови здорового человека содержится 2,0-7,5*109 /л нейтрофилов, что составляет 50-70% от общего числа лейкоцитов крови. Нейтрофильные гранулоциты традиционно рассматривались в контексте их антибактери-

альной функции, однако становится ясным, что ассоциированные с опухолью нейтрофилы и их миелоидные предшественники в селезенке, костном мозге и крови играют важную роль в биологии рака [1, с. 281-285]. Нейтрофильные гранулоциты активно вовлекаются в реализацию противоопухолевого ответа - участвуют в уничтожении мутировавших клеток и первыми из клеток иммунной системы мигрируют к опухоли на ранних стадиях ее формирования [1, с. 281-285]. Нейтрофильные гранулоциты способны осуществлять как непосредственную цитотоксичность, которая проявляется при активации секретной дегрануляции, респираторного взрыва, антителозависимой клеточной цитотоксичности, так и опосредованную с помощью привлечения других клеток иммунной системы.

Важную роль в регрессии опухоли отводят активным формам кислорода, активным формам азота и цитокинам, продуцируемым нейтрофила-ми [2, с. 467-474]. При активации НГ происходит «кислородный взрыв» и образование АФК, которые включают высокореактивные свободные радикалы, ионы кислорода и кислородсодержащие химические группы. Образование АФК происходит в мембране фаголизосом за счет инициации фермента NADPН-оксидазы.

В то же время злокачественная опухоль неоднозначно влияет на функцию НГ, уменьшает их хемотаксическую активность, подавляя адаптивный иммунитет [3, с. 1404-1412; 4, с. 183-194]. Обусловленная опухолью среда богата такими факторами как №N-7, Ш1-В, Ш-6, Ш-8, GM-CSF, G-CSF, [5, с. 2273-2284; 6, с. 5466-5480]. Вероятно, эти провоспа-

лительные факторы задерживают апоптоз нейтрофилов [6, с. 5466-5480]. ГЬ-8, секретируемый опухолью, играет важную роль в привлечении ней-трофилов в микроокружающую среду опухоли, в клеточной культуре, способствует выживанию нейтрофилов [6, с. 5466-5480; 7, с. 2411-2416].

Привлеченные опухолью нейтрофилы синтезируют ряд веществ, которые стимулируют ангиогенез и лимфангиогегенез, поощряют инвазию и метастазирование, ремоделируют внеклеточный матрикс, инициируют повреждения ДНК [8, с. 949-955; 9, с. Е98259; 10, с. 225-36; 11, с. 14551470; 12, с. 94-112; 13, с. 411-429].

Проопухолевое действие нейтрофилов проявляется чаще всего на более поздних сроках роста опухоли, что соответствует Ш-ГУ стадии онкологического процесса [2 , с. 467-474]. Ассоциированные с опухолью нейтрофилы на ранней стадии опухолевого процесса обладали цитоста-тическими свойствами по отношению к опухолевым клеткам и производили более высокие уровни Т№-а и Н2О2 по сравнению с нейтрофилами на поздних стадиях опухолевого процесса [14, с. 1745-1756].

Иммуносупрессорный цитокин TGF-P очень выражен в окружении опухоли и играет существенную роль в блокировании иммунных реакций и прогрессии опухоли. TGF-P подавляет функции Т-клеток, запрещает дегрануляцию нейтрофилов [4, с. 183-194; 15, с. 155-161]. После блокады TGF-P нейтрофилы приобретают фенотип N1 и имеют потенциал для киллинга опухолевых клеток [1, с. 281-285; 4, с. 183-194; 16, с. 173-174].

Особенности функциональной активности нейтрофильных грану-лоцитов влияют на иммунологическую защиту организма в целом. При острых и хронических гемобластозах наблюдаются нарушения в системе клеточно-гуморального иммунитета [17, с. 185-159; 18, с. 403-408; 19, с. 280-286; 20, с. 48-52].

Множественная миелома (ММ) - злокачественный В-лимфопроли-феративный гемобластоз, характеризующейся увеличением в костном мозге плазматических клеток более 10%, накоплением парапротеина и поражением различных внутренних органов. При данном заболевании выявляются разнообразные нарушения иммунной системы, страдают неспецифический и адаптивный иммунитет. Учитывая неоднозначность нейтрофильных гранулоцитов в генезе опухолевых заболеваний, задачей нашего исследования явилось изучение особенностей противоопухолевой хемилюминесцентной активности НГ крови больных ММ^ варианта в зависимости от стадии развития заболевания.

Материалы и методы исследования

Обследован 101 больной множественной миеломой G-иммунохими-ческого варианта, в возрасте от 40 до 76 лет. Пациенты поступили в от-

деление впервые. Диагноз верифицировался по результатам клинического и лабораторного исследования. Контрольная группа состояла из 125 практически здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту с группой обследованных больных. Группа контроля была отобрана при профилактических осмотрах в ЛПУ города Красноярска. Обследование больных и практически здоровых людей проводилось с разрешения этического ФГБНУ «НИИ медицинских проблем Севера», каждый участник подписал форму информированного согласия на обследование.

Объектом исследования служила венозная кровь, которую брали у пациентов из локтевой вены в пробирки Vacutainer с гепарином утром натощак до назначения патогенетической терапии. На протяжении всего периода пребывания в стационаре за пациентами осуществлялось динамическое наблюдение.

Все больные, согласно классификации Durie, Salmon (1975 г.), были разделены на стадии. Больные ММ на II стадии при поступлении в стационар характеризовались уровнем гемоглобина (Hb) 85-100 г/л, IgG -50-70 г/л., с измененной массой миеломных клеток от 0,6 кг/м3, уровнем кальция в сыворотке менее 12 мг/100 м, у них наблюдался остеолиз или солитарный костный очаг. Для больных на III стадии с максимально высокой опухолевой массой (1,2 кг/м3) гемоглобин ниже 85 г/л, уровень кальция в сыворотке более 12 мг/100 мл, выраженный остеодеструктив-ный процесс, высокий уровень М-компонента (IgG менее 70 г/л, IgA менее 50 г/гл, BJ в моче менее 12 г/сут).

Средний возраст обследованных больных множественной миеломой составил 60,53 ± 6,78 лет. Среди пациентов ММ мужчин было 39%, а женщин 61%. У 93 человек (93,93%) имелись очаги деструкции в костях. На II стадии заболевания находились 65,65% исследуемых больных, а на III стадии 35,35%.

В качестве метода изучения противоопухолевой активности нейтро-фильных гранулоцитов использовался хемилюминесцентный анализ спонтанной и индуцированной продукции АФК НГ больных ММ в зависимости от стадии заболевания (De sole p.et al.; 1983). Оценку спон-

таннои и индуцированнои хемилюминесценции осуществляли в течение 90 минут на 36-канальном хемилюминесцентном анализаторе "CL 3606" (Россия). Регистрация результатов и управление анализатором осуществлялись через персональный компьютер. Определялись следующие характеристики: время выхода кривой на максимум интенсивности хемилюминесценции (Tmax), максимальное значение интенсивности хемилюминесценции (Imax), площадь под кривой хемилюминесценции (S). В качестве усилителя хемилюминесценции использовали люминол. Индуктором респираторного взрыва служил опсонизированный зимозан. Усиление хемилюминесценции, индуцированной опсонизированным зи-мозаном, оценивали по соотношению площади индуцированной ^инд) к площади спонтанной ^спонт) хемилюминесценции и обозначали индексом активации [21, с. 579-584; 22, с. 313-315; 23, с. 515; 24, с. 24].

Статистическая обработка данных проводилась с помощью пакетов прикладных программ Statistica 8.0 (StatSoft Inc., США, 2008). Для всех данных определяли медиану (Me) и персинтили (С25-С75). Статистическую значимость различий определяли с использованием рангового критерия Манна-Уитни.

Результаты исследования и их обсуждение

Анализ хемилюминесцентной активности нейтрофильных грануло-цитов показал достоверное увеличение активности спонтанной хемилюминесценции на всех стадиях заболевания. На II стадии миеломной болезни спонтанная хемилюминесцентная активность НГ была выше в 2,60 раз (p<0,001), а на III стадии в 3,65 раз (p<0,001) по сравнению с контрольной группой. При этом хемилюминесцентная активность НГ на III стадии ММ была достоверно выше в 1,4 раза относительно II стадии заболевания (p<0,001).

Площадь под кривой спонтанной хемилюминесцентной активности НГ у больных ММ на II стадии ММ увеличивалась в 14,59 раз (p<0,001), а на III стадии в 10,64 раза (p<0,001) относительно группы здоровых людей.

Время выхода кривой спонтанной хемилюминесценции НГ на максимум не имело статистически достоверных различий между группами. Особенности спонтанной хемилюминесцентной активности НГ при ММ, вероятно, обусловлены наличием злокачественного онкологического заболевания и инфекционными осложнениями, которые регистрировались у больных (табл. 1).

Таблица 1.

Показатели спонтанной хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных множественной миеломой в зависимости от стадии заболевания

Показатели Контроль, N=125 1 Стадия II, N=65 2 Стадия III, N=35 3

Ме С25-С75 Ме С25-С,5 Ме С25-С,5

Ттах спонтанная (сек.) 975,00 211,001510,00 943,00 564,001603,00 790,00 502,001374,00

!тах спонтанная (у. е.) 7720,00 3000,0019000,00 20135,00 10088,0052555,00 28213,00 18715,0051385,00

p1<0,001 p1<0,001 ; p2<0,001

Squr спонтанная (*106) 0,22 0,15-0,54 3,21 1,15-6,19 2,34 0,14-2,71

p1<0,001 p1<0,001

Примечание: р1 - статистически достоверные различия с показателями контрольной группы; р2 - с показателями больных на II стадии.

После индукции хемилюминесцентного ответа опсонизированным зимозаном у больных ММ отмечалось статистически значимое увеличение интенсивности индуцированной хемилюминесцентной активности НГ на II стадии заболевания в 2,73 раза (р<0,001) относительно контроля. У пациентов на III стадии ММ активность индуцированной хемилюминесценции превышала таковую у здоровых людей в 1,85 раз (р<0,001), но была снижена по сравнению с пациентами на II стадии ММ в 1,47 раз (р<0,001). При этом в сравнении со спонтанной хемилюминесценцией регистрировалось усиление «свечения» в 2,34 раза на II стадии заболевания и в 1,13 раз на III стадии заболевания (р<0,001).

Площадь под кривой индуцированной хемилюминесценции у больных ММ на II стадии статистически значимо увеличивалась в 18,01 раза, а на III стадии заболевания в 12,50 раз относительно контрольной группы (p<0,001).

Таблица 2.

Показатели индуцированной хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных множественной миеломой в зависимости от стадии заболевания

Показатели Контроль, N=125 1 Стадия II, N=65 2 Стадия III, N=35 3

Ме С25-С75 Ме С25-С,5 Ме С25-С,5

Tmax индуцированная (сек.) 1102,50 872,001800,00 1164,00 765,001851,00 1023,00 866,001355,00

Imax индуцированная (у. е.) 17270,00 8000,0042840,00 47203,00 31200,0099928,00 31999,00 16542,00102201,00

p1<0,001 p<0,001; p2<0,001

Squr индуцированная (*106) 0,40 0,15-0,95 7,24 1,39-10,6 5,01 0,11-8,09

p1<0,001 p1<0,001

Индекс активации 1,30 0,90-2,00 1,90 1,00-3,00 1,72 1,20-2,00

p1<0,001 p1<0,001

Примечание: р1 - статистически достоверные различия с показателями контрольной группы; р2 - с показателями больных на II стадии.

При этом в сравнении с площадью кривой спонтанной хемилюминес-центной активности НГ площадь кривой индуцированной хемилюминес-центной активности НГ увеличивалась в 2,25 раз на II стадии заболевания и в 2,18 раза на III стадии заболевания.

Хемилюминесцентный анализ функциональной активности НГ, характеризующий уровень продукции первичных и вторичных АФК у больных ММ, не показал достоверного изменения времени выхода на максимум индуцированной хемилюминесцентной активности НГ на II и III стадии заболевания относительно контроля.

Индекс активации у больных ММ на II стадии заболевания статистически значимо увеличивался в 1,47 раза и в 1,32 раза на III стадии отно-

сительно контрольной группы (р<0,001), что свидетельствует о несбалансированной работе НГ.

Таким образом, происходят следующие молекулярно-клеточные механизмы в активности НГ. На II стадии ММ статистически значимо повышались показатели хемилюминесцентной активности НГ как при спонтанной, так и при индуцированной хемилюминесценции: интенсивность хемилюминесцентной активности НГ, площадь под кривой, а также индекс активации по сравнению с контрольной группой.

На III стадии заболевания изменения хемилюминесцентной активности НГ были аналогичны. Статистически значимо повышались показатели как при спонтанной, так и при индуцированной хемилю-минесценции: интенсивность хемилюминесценции, площадь кривой, а также индекс активации по сравнению с контрольной группой, при этом показатели на данной стадии были ниже, чем на II стадии заболевания.

Заключение

Развитие миеломной болезни сопровождается изменением функциональных свойств периферических НГ, зависящее от стадии заболевания. На II стадии заболевания имеется однонаправленное увеличение интенсивности спонтанной и индуцированной хемилюминесцентной активности НГ относительно контрольной группы. Увеличенная индуцированная хемилюминесцентная активность НГ обусловлена активным участием фагоцитов в противоопухолевой защите организма, и, следовательно, высокой противоопухолевой активностью.

На III стадии заболевания интенсивность спонтанной хемилюминесценции превышала таковую на II стадии заболевания, что свидетельствовало о возросшей продукции активных форм кислорода в ответ на опухолевую прогрессию и антигенную нагрузку. Индуцированная хемилюминесцентная активность у больных ММ на III стадии заболевания была снижена по сравнению со II стадией, что может свидетельствовать об истощении резервных возможностей НГ,

и возможном, преобразовании НГ, когда клетки, наряду с противоопухолевой функцией сами способствуют распространению опухоли. По нашим данным, только на III стадии множественной миеломы возникают модификационные преобразования НГ, отсюда быстрое прогрес-сирование заболевания, возникновение осложнений и неблагоприятный исход.

Список литературы

1. Двойственная роль нейтрофильных гранулоцитов в реализации противоопухолевой защиты / Нестерова И.В., Ковалева С.В, Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В., Евглевский А.А. // Иммунология. 2012. № 5. С. 281-285.

2. Мальцева В.Н., Сафронова В.Г. Неоднозначность роли нейтрофила в ге-незе опухоли // Цитология. 2009. Т. 51, № 6. С. 467-474.

3. Tumor associated macrophages neutrophils in tumor progression / Galdiero M.R., Garlanda C., Jaillon S., Montovani. A. // J Cell Physiol. 2013. vol. 228, no. 7, pp. 1404-1412.

4. Fridlender Z.G., Sun J., Kim S. Polarization of Tumor-Associated Neutrophil (TAN) Penotype by TGF-fl : «N1» versus «N2» TAN. Cancer cell. 2009. vol. 16, no. 3, pp. 183-194.

5. Lechner M.G., Liebertz D.J., Epstein A.L. Characterization of cytokine-in-duced myeloid-derived suppressor cells from normal human peripheral blood mononuclear cells. J. Immunol. 2010. no. 185, pp. 2273-2284.

6. Eruslanov E.B., Bhojnagarwara P.S., Quatromoni J.G. Tumor-associated neu-trophils stimulate T cell responses in early-stage human lung cancer. The Journal of clinical investigation. 2014. vol. 124, no. 12, pp. 5466-5480.

7. Gregory A.D., Houghton A.M. Tumor-Associated Neutrophils: New Targets for Cancer Therapy. Cancer research. 2011. vol. 71, no.7, pp. 2411-2416.

8. Fridlender Z.G., Albelda S.M. Tumor-associated neutrophils: frend or foe? Carcinogenesis. 2012. vol.33, no. 5, pp. 949-955.

9. Shen M., Hu P., Donskov F., Wang G. Tumor-Associated Neutrophils as a New Prognostic Factor in Cancer: A Systematic Rewiewand Meta-Analysis. Plos one. 2014. vol. 9, issue 6, e98259. doi: 10.1371/journal.pone.0098259

10. Neutrophils and respiratory tract DNA damage and mutagenesis: a review / Knaapen A.M., Gungor N., Schins R.P., Borm P. J., Van Schooten F.J. // Mutagenesis. 2006. vol. 21, pp. 225-36.

11. Tumor-Recruited Neutrophils and Neutropil TIMP-free MMP-9 Regulate Co-ordinately the Levels of Tumor Angiogenesis and Efficiency of Malignant cell Intravasation / Bekes E.M., Schweighoter B., Kupriyanova T.A., Zajac E., Ardi V.C., Quigley J.P., Deryugina E.I. // The American Journal of Pathology. 2011. vol.179, no. 3, pp. 1455-1470.

12. Deryugina E.L., Quigley J.P. Tumor angiogenesis: MMP-mediated induction of intravasation and metastasia-sustaing neovasculature. Matrix Biol. 2015. vol. 44-46, pp. 94-112.

13. Smith H.A., Kang Y. The metastasis-promoting roles of tumor-associated immune cells. J. Mol. Med. (Berl.). 2013. vol. 91, no. 4, pp. 411-429.

14. Tumor-associated neutrophils (TAN) develop pro-tumorigenic properties during tumor progression / Mishalian I., Bayuh R., Levy L., Zolotarov L., Michaeli J., Fridlender Z.G. // Cancer Immunol Immunother. 2013. vol. 62, no.11, pp. 1745-1756.

15. Inhibition of human neutrophil degranulation by transforming growth factor-beta / Shen L., Smith J.M., Shen Z., Eriksson M., Sentman C., Wira C.R. // Clinical and Experimental Immunology. 2007. no. 149, pp. 155-161.

16. Montovani. A. The Yin-Yang of Tumor-Associated Neutrophils. Cancer Cell. 2009. vol. 16, no. 3, pp. 173-174.

17. Смирнова О.В. Хронический миелолейкоз - клинические и иммунологические особенности у взрослых больных // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. 2012. № 3-2. С. 185-189.

18. Манчук В.Т., Смирнова О.В. Особенности прогнозирования возникновения инфекционных осложнений после проведения химиотерапии у больных острыми лейкозами // Медицинская иммунология. 2012. Т. 14, № 4-5. С. 403-408.

19. Smirnova O.V., Manchouk V.T., Savchenko A.A. Immune status & enzymes activity in blood lymphocytes in adult patients at different stages of acute lymphoblastic leukaemia // Indian Journal of Medical Research. 2011. vol. 133, no. 3, pp. 280-286.

20. Смирнова О.В., Манчук В.Т., Агилова Ю.Н. Роль клеточного иммунитета в прогрессировании миеломной болезни // Клиническая медицина. 2014. №11. С. 48-52.

21. Смирнова О.В., Манчук В.Т., Агилова Ю.Н. Особенности хемилюминес-центной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных миеломной болезнью G-формы в зависимости от стадии заболевания // Медицинская иммунология. 2015. T.17, №6. C. 579-584.

22. Смирнова O.B., Титова Н.М., Елманова Н.Г. Особенности хемилюминис-центной активности нейтрофильных гранулоцитов больных механической желтухой доброкачественного генеза // Российский иммунологический журнал. 2015. T. 2(1) (18). C. 313-315.

23. Смирнова О.В., Манчук В.Т., Агилова Ю.Н. Роль неспецифического иммунитета при прогрессировании миеломной болезни // Современные проблемы науки и образования. 2014. №2. С. 515.

24. Синусовые брадиаритмии в остром периоде инфаркта миокарда (дифференциальная диагностика, прогноз) / Шульман В.А., Матюшин Г.В., Смирнова О.В., Назаров Б.В., Радионов В.В., Безрук А.П. // Кардиология. 2000. Т. 40. № 2. С. 24.

References

1. Nesterova I.V., Kovaleva S.V., Chudilova G.A., Lomtatidze L.V., Evglevs-kiy A.A. Dvoystvennaya rol' neytrofil'nykh granulotsitov v realizatsii pro-tivoopukholevoy zashchity [The dual role of neutrophils in the antitumor protection]. Immunologiya [Immunology], 2012, no. 5, pp. 281-285.

2. Mal'tseva V.N., Safronova V.G. Neodnoznachnost' roli neytrofila v geneze opukholi [Ambiguity role of neutrophils in oncogenesis ]. Tsitologiya [Cytology], 2009, vol. 51, no. 6, pp. 467-474.

3. Galdiero M.R., Garlanda C., Jaillon S., Montovani. A. Tumor associated macrophages neutrophils in tumor progression. J Cell Physiol, 2013, vol. 228, no. 7, pp. 1404-1412.

4. Fridlender Z.G., Sun J., Kim S. Polarization of Tumor-Associated Neutrophil (TAN) Penotype by TGF-fl : «N1» versus «N2» TAN. Cancer cell, 2009, vol.16, no. 3, pp. 183-194.

5. Lechner M.G., Liebertz D.J., Epstein A.L. Characterization of cytokine-in-duced myeloid-derived suppressor cells from normal human peripheral blood mononuclear cells. J. Immunol., 2010, no. 185, pp. 2273-2284.

6. Eruslanov E.B., Bhojnagarwara P.S., Quatromoni J.G. Tumor-associated neu-trophils stimulate T cell responses in early-stage human lung cancer. The Journal of clinical investigation, 2014, vol. 124, no.12, pp. 5466-5480.

7. Gregory A.D., Houghton A.M. Tumor-Associated Neutrophils: New Targets for Cancer Therapy. Cancer research, 2011, vol.71, no.7, pp. 2411-2416.

8. Fridlender Z.G., Albelda S.M. Tumor-associated neutrophils: frend or foe? Carcinogenesis, 2012, vol. 33, no. 5, pp. 949-955.

9. Shen M., Hu P., Donskov F., Wang G. Tumor-Associated Neutrophils as a New Prognostic Factor in Cancer: A Systematic Rewiewand Meta-Analysis. Plos one, 2014, vol. 9, issue 6, e98259. doi: 10.1371/journal.pone.0098259

10. Knaapen A.M., Gungor N., Schins R.P., Borm P. J., Van Schooten F. J. Neutro-phils and respiratory tract DNA damage and mutagenesis: a review. Mutagen-esis, 2006, vol. 21, pp. 225-36.

11. Bekes E.M., Schweighoter B., Kupriyanova T.A., Zajac E., Ardi V.C., Quig-ley J.P., Deryugina E.I. Tumor-Recruited Neutrophils and Neutropil TIMP-free MMP-9 Regulate Coordinately the Levels of Tumor Angiogenesis and Efficiency of Malignant cell Intravasation. The American Journal of Pathology, 2011. vol.179, no. 3, pp. 1455-1470.

12. Deryugina E.L., Quigley J.P. Tumor angiogenesis: MMP-mediated induction of intravasation and metastasia-sustaing neovasculature. Matrix Biol., 2015, vol. 44-46, pp. 94-112.

13. Smith H.A., Kang Y. The metastasis-promoting roles of tumor-associated immune cells. J. Mol. Med. (Berl.), 2013, vol. 91, no. 4, pp. 411-429.

14. Mishalian I., Bayuh R., Levy L., Zolotarov L., Michaeli J., Fridlender Z.G. Tumor-associated neutrophils (TAN) develop pro-tumorigenic properties during tumor progression. Cancer ImmunolImmunother, 2013, vol. 62, no. 11, pp. 1745-1756.

15. Shen L., Smith J.M., Shen Z., Eriksson M., Sentman C., Wira C.R. Inhibition of human neutrophil degranulation by transforming growth factor-beta. Clinical and Experimental Immunology, 2007. no. 149, pp. 155-161.

16. Montovani. A. The Yin-Yang of Tumor-Associated Neutrophils. Cancer Cell, 2009, vol. 16, no. 3, pp. 173-174.

17. Smirnova O.V. Khronicheskiy mieloleykoz - klinicheskie i immunologiches-kie osobennosti u vzroslykh bol'nykh [Chronic myeloid leukemia - clinical and immunological peculiarities in adult patients]. Byulleten ' Vostochno-Sibir-skogo nauchnogo tsentra SO RAMN. [Bulletin of the East Siberian Scientific Center of the Academy of Medical Sciences]. 2012. no. 3-2, pp. 185-189.

18. Manchuk V.T., Smirnova O.V. Osobennosti prognozirovaniya vozniknoveniya infektsionnykh oslozhneniy posle provedeniya khimioterapii u bol'nykh ostry-mi leykozami [Features prediction of occurrence of infectious complications after chemotherapyin patient swith acute leukemia]. Meditsinskaya immu-nologiya. 2012. vol.14, № 4-5, pp. 403-408.

19. Smirnova O.V., Manchouk V.T., Savchenko A.A. Immune status & enzymes activity in blood lymphocytes in adult patients at different stages of acute lym-phoblastic leukaemia. Indian Journal of Medical Research. 2011. vol.133, no. 3, pp. 280-286.

20. Smirnova O.V., Manchouk V.T., Agilova Y.N. Rol' kletochnogo immuniteta v progressirovanii mielomnoy bolezni [The role of cell-mediated immunity in progression of myeloma disease]. Klinicheskaya meditsina 2014. №11, pp. 48-52.

21. Smirnova O.V., Manchouk V.T., Agilova Y.N. Osobennosti khemilyumin-estsentnoy aktivnosti neytrofil'nykh granulotsitov u bol'nykh mielomnoy bolezn'yu G-formy v zavisimosti ot stadii zabolevaniya [Characteristic of neu-trophil chemiluminescence in patients with type multiple myeloma at different stages of the disease]. Meditsinskaya immunologiya. 2015. vol. 17, no. 6. pp. 579-584.

22. Smirnova O.V., Titova N.M., Elmanova N.G. osobennosti khemilyuminists-entnoy aktivnosti neytrofil'nykh granulotsitov bol'nykh mekhanicheskoy zhel-tukhoy dobrokachestvennogo geneza [Features chemiluminescent activity of neutrophilic granulocytes of patients with obstructive jaundice of benign origin]. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal [Russian Journal of Immunology] 2015. vol. 2(1) (18), pp. 313-315.

23. Smirnova O.V., Manchouk V.T., Agilova Y.N. Rol' nespetsificheskogo immu-niteta pri progressirovanii mielomnoy bolezni [Role nonspecific immunity in the progression of myeloma disease]. Sovremennye problemy nauki i obrazo-vaniya. 2014. no.2, pp. 515.

24. Shul'man V.A., Matyushin G.V., Smirnova O.V., Nazarov B.V., Radionov V. V., Bezruk A.P. Sinusovye bradiaritmii v ostrom periode infarkta miokarda (dif-ferentsial'naya diagnostika, prognoz) [Sinus bradycardia in acute myocardial infarction (differential diagnosis, prognosis)]. Kardiologiya. 2000. vol. 40. no. 2. Р. 24.

ДАННЫЕ ОБ АВТОРАХ Смирнова Ольга Валентиновна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией клинической патофизиологии

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера» ул. Партизана Железняка, 3г, г. Красноярск, 660022, Российская Федерация

ovsmirnova71@mail.ru

Агилова Юлия Николаевна, кандидат биологических наук

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера» ул. Партизана Железняка, 3г, г. Красноярск, 660022, Российская Федерация

Перепечай Ярослава Игоревна, младший научный сотрудник лаборатории клинической патофизиологии

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера» ул. Партизана Железняка, 3г, г. Красноярск, 660022, Российская Федерация peyaig@yandex.ru

Бахарева Оксана Петровна, кандидат сельскохозяйственных наук, магистрант

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера» ул. Партизана Железняка, 3г, г. Красноярск, 660022, Российская Федерация

DATA ABOUT THE AUTHORS Smirnova Olga Valentinovna, MD, Professor, Head of the Laboratory of Clinical Pathophysiology

Scientific Research Institute of Medical Problems of the North 3d, Partizan Zheleznyaka Str., Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation

ovsmirnova71 @mail. ru

Agilova Yulia Nikolaevna, Candidate of Biological Sciences

Scientific Research Institute of Medical Problems of the North 3d, Partizan Zheleznyaka Str., Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation

Perepechai Yaroslava Igorevna, Junior researcher of the Laboratory of Clinical Pathophysiology

Scientific Research Institute of Medical Problems of the North 3d, Partizan Zheleznyaka Str., Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation

peyaig@yandex. ru

Bahareva Oksana Petrovna, Candidate of Agricultural Sciences (PhD), master student

Scientific Research Institute of Medical Problems of the North 3d, Partizan Zheleznyaka Str., Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation