Роль канонического р-катенин/шпт-сигналинга в постнатальном развитии мозгового вещества надпочечников и его нарушениях, обусловленных воздействием эндокринного дисраптора дихлордифенилтрихлорэтана

DOI: 10.23868/201906019

роль канонического р-кАТЕнин^ПТ-сигнАлингА в постнатальном развитии мозгового вещества надпочечников и его нарушениях, обусловленных воздействием эндокринного дисраптора дихлордифенилтрихлорэтана

Д.А. Цомартова, Н.В. Яглова, С.В. Назимова, С.С. Обернихин, В.В. Яглов

Научно-исследовательский институт морфологии человека, Москва, Россия

iMPAcT of canonical P-cATENiN/wNT sIGNALING IN NoRMAL AND iMPAiRED BY ENDocRiNE DisRuPToR dichlordiphenyltrichloroethane postnatal development of the adrenal medulla

D.A. Tsomartova, N.V. Yaglova, S.V. Nazimova, S.S. Obernikhin, V.V. Yaglov

Institute of Human Morphology, Moscow, Russia

e-mail: Yaglova@mail.ru

Воздействие эндокринных дисрапторов на развивающийся организм является глобальной проблемой, важность которой обусловлена не только уже известной способностью дисрапторов нарушать регуляцию метаболических процессов, но и потенциальной возможностью влиять на транскрипционную регуляцию процессов развития. Дихлордифенилтрихлорэтан (ДДТ) считается одним из наиболее распространенных эндокринных дис-рапторов, воздействию фоновых доз которого повсеместно подвергается население планеты. Целью настоящего исследования было изучение роли канонического p-катенин/Wnt-сигналинга в постнатальном развитии мозгового вещества надпочечников крыс в норме и при воздействии эндокринного дисраптора ДДТ в пренатальном и постнатальном этапах онтогенеза. Объектом исследования были самцы крыс Вистар, подвергавшиеся воздействию низких доз ДДт с первого дня пренатального и с первого дня постнатального развития, до достижения пубертатного (42 сут.) и постпубертатного (70 сут.) возраста. Гистологическое исследование препаратов надпочечников показало увеличение объема мозгового вещества с равномерным развитием хромаф-финной ткани и сосудистого русла с 42 до 70 сут. постнаталь-ного онтогенеза у интактных крыс и замедление развития мозгового вещества у крыс, подвергавшихся воздействию низких доз ДДТ в периоды пренатального и постнатального развития. Выявлены возрастные особенности активации канонического Wnt-сигналинга в хромаффинных клетках в постнатальном развитии у интактных животных, изменения Wnt-сигналинга и нарушения постнатального морфогенеза мозгового вещества надпочечников у крыс, подвергавшихся воздействию эндокринного дисраптора. Полученные данные свидетельствуют о том, что воздействие ДДТ, начавшееся в пренатальном периоде, в отличие от воздействия в постнатальном периоде, обусловливает более выраженное снижение активации канонического Wnt-сигналинга в хромаффинных клетках, сопровождающееся нарушением морфогенеза паренхимы мозгового вещества.

ключевые слова: надпочечник, хромаффинные клетки, р-катенин, канонический Wnt-сигналинг, морфогенез, эндокринный дисраптор, ДДТ.

Exposure of developing organism to endocrine disrupting chemicals is an emerging scientific problem of wide concern. Dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) is considered to be one of the most wide-spread endocrine disruptors. Exposure of humans to low doses of DDT occurs around the globe. The present study was undertaken to elucidate the role of canonical Wnt-signaling in postnatal morphogenesis of the adrenal medulla in intact and de-velopmentally exposed to DDT rats. The research was performed on male Wistar rats in pubertal (42nd day) and postpubertal (70th day) periods which were exposed to dDt during both prenatal and postnatal and only postnatal development. Adrenal histology showed enlargement of the adrenal medulla due to equal development of chromaffine cells and blood vessels from 42nd to 70th day in the intact rats and slower development of the adrenal medulla in the prenatally and postnatally exposed rats. Age-dependent changes in activation of canonical Wnt-signaling in the intact rats and altered Wnt-signaling along with impaired postnatal morphogenesis of the adrenal medulla in the DDT-exposed rats were found. The data obtained shows that prenatal exposure to DDT unlike postnatal exposure causes more profound decrease in activation of canonical Wnt-signaling in adrenal chromaffine cells and impairs development of adrenal medulla parenchyma.

Keywords: adrenal, chromaffine cells, ß-catenin, canonical Wnt-signaling, morphogenesis, endocrine disrupter, DDT.

Введение

Воздействие на организм эндокринных дисрапторов — веществ, способных нарушать любые этапы секреции гормонов и их взаимодействия с клетками-мишенями, является глобальной проблемой [1]. Особую опасность представляет действие эндокринных дисрап-торов на развивающийся организм, так как, проникая через плацентарный барьер, они способны изменять программы развития органов [2, 3]. Одним из наиболее распространенных дисрапторов на планете является дихлордифенилтрихлорэтан (ДДТ) [4]. Его повсеместная персистенция обусловлена комплексом факторов, таких как массивное использование в ХХ веке [1], возобновившееся активное применение в качестве средства для

борьбы с трансмиссивными заболеваниями в 21 веке [5], а также длительный период распада в окружающей среде [6]. Способность к депонированию в организме [7, 8] и биоаккумуляция ДДТ в пищевой цепи [9] делает человека наиболее уязвимым звеном биосферы. Все перечисленные факторы привели к тому, что воздействие низких фоновых доз ДДТ на организм, при которых он проявляет свойство именно эндокринного дисраптора, а не нейро-токсичного вещества, происходит повсеместно.

Дисрапторное действие ДДТ на развитие желез внутренней секреции мало изучено. В наших предыдущих работах мы показали обусловленные ДДТ изменения морфогенетических процессов в щитовидной железе и корковом веществе надпочечников [10, 11]. Мозговое

вещество надпочечников имеет гистогенетические отличия от коркового вещества, но в то же время развивается и функционирует в тесной связи с последним, а также непосредственно регулируется им [12]. Молекулярно-генетические исследования выявили ряд сигнальных путей и транскрипционных факторов, активация которых играет важную роль в пренатальном и постнатальном развитии надпочечников Одним из ведущих сигнальных путей, регулирующих пролиферацию, рост и диффе-ренцировку клеток, является канонический р-катенин/ Wnt-сигналинг [13]. На сегодняшний день данных о роли Wnt-сигналинга в развитии хромаффинных клеток в пренатальном и постнатальном периодах мало и их трудно обобщить [14]. Известно, что Wnt-сигналинг участвует в инициации и поддержании клеток нервного гребня в процессе нейруляции [15], а также миграции клеток нервного гребня в вентральные части зародыша [16, 17]. Прекращение Wnt-сигналинга в клетках нервного гребня приводит к отсутствию развития среднего и частично заднего мозга, уменьшению числа чувствительных нейронов и меланоцитов, утрате шван-новских клеток, а, следовательно, и предшественников хромаффиноцитов мозгового вещества [18-20]. Роль канонического Wnt пути в постнатальном развитии хро-маффинных клеток в норме не изучена, что значительно затрудняет исследования проявлений и механизмов действия эндокринных дисрапторов.

Целью настоящего исследования было изучение роли канонического p-катенин/Wnt-сигналинга в постнаталь-ном развитии мозгового вещества надпочечников крыс в норме и при воздействии эндокринного дисраптора ДДТ в пренатальном и постнатальном развитии.

Материал и методы

Дизайн эксперимента

Половозрелые самки и самцы крыс Вистар были получены из питомника ФГБУН НЦБМТ ФМБА России (филиал «Столбовая»]. Уход за животными, содержавшимися в виварии, осуществлялся по нормам и правилам обращения с лабораторными животными, в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985], правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003] и законом «О защите животных от жестокого обращения», глава V, ст. 10, 4679-ГД от 01.12.1999.

Для изучения воздействия ДДТ на постнатальное развитие мозгового вещества надпочечников крыс самки были разделены на 3 группы: группу самок, потреблявшую с момента ссаживания с самцами водный раствор о,п-ДДТ (Sigma, США] в концентрации 20 мкг/л ежедневно в течение всей беременности и периода молочного вскармливания потомства (21 сут.); группу самок, которым водопроводную воду заменили на раствор о,л-ДДТ с момента рождения потомства и группу интактных самок, потреблявшую в течение беременности и молочного вскармливания водопроводную воду. Объектом исследования было потомство мужского пола, подвергавшееся воздействию эндокринного дисраптора с первого дня пренатального и с первого дня постна-тального развития до достижения пубертатного (42 сут.] и постпубертатного (70 сут.) возраста, и потомство интактных самок, потреблявшее водопроводную воду.

Из родившихся крысят были сформированы три группы: контрольная (n=24); группа крысят, подвергавшихся воздействию низких доз ДДт в пренатальном и постнатальном развитии (n=24];

группа крысят, подвергавшихся воздействию низких доз ДДТ только в постнатальном развитии [п=24]. Самостоятельное потребление ДДТ потомством составило 2,90±0,12 и 3,71±0,15 мкг/кг/сут., соответственно. Расчет дозы ДДТ выполняли согласно требованиям к определению низких доз [21] и максимально допустимому уровню содержания в продуктах питания по Техническому регламенту Таможенного Союза [22] с учетом различий в метаболизме ДДТ в организмах крысы и человека [23]. Отсутствие в воде и корме ДДТ, его метаболитов и родственных хлорорганических соединений было подтверждено методом газожидкостной хроматографии. Половину животных из каждой группы выводили из эксперимента передозировкой золетила в пубертатном периоде на 42 сут. (контрольная группа обозначена как Р42, группа крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ в период пре- и постнатального развития — ДДТ Е0-Р42, группа крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ только в период постнатального развития — ДДТ Р0-Р42], оставшихся — после достижения половой зрелости в возрасте 70 сут., когда надпочечник крысы достигает своего максимального развития [24] (группы Р70, ДДТ Е0-Р70 и ДДТ Р0-Р70, соответственно].

Гистологические исследования

Надпочечники фиксировали в растворе Буэна, после стандартной гистологической проводки заливали в парафин, изготавливали экваториальные срезы, окрашивали их гематоксилином и эозином (Биовитрум, Россия] и исследовали в световом микроскопе Leica DM2500 (Leica Microsystems, Германия]. Для оценки развития мозгового вещества проводили компьютерную морфоме-трию препаратов надпочечников с помощью программы ImageScope (Leica Microsystems, Германия]. Определяли площадь мозгового вещества и долю площади, занимаемой хромаффинными клетками в мозговом веществе.

Иммуногистохимическое исследование

Выявление ß-катенина в хромаффинных клетках мозгового вещества проводили методом иммуногистохимии с помощью моноклональных антител (Cell Marque, США] согласно протоколу производителя. Гистологические срезы докрашивали гематоксилином Майера. Активацию канонического ß-катенин/Wnt-сигналинга определяли по его транслокации в ядро [25, 26], для чего подсчитывали количество клеток с локализацией ß-катенина в плазмолемме, в цитоплазме и в ядре и выражали в виде процентов к общему числу хромаффинных клеток.

Статистический анализ

Статистическую обработку осуществляли с помощью пакета программ Statistica 7.0 (Statsoft Inc., США]. Для определения типа распределения признаков использовали критерии Лиллиефорса и Шапиро-Уилка. Центральные тенденции и меры рассеяния признаков с нормальным распределением представляли в виде среднего и ошибки среднего (M±m]. Сравнение независимых групп проводили с помощью t-критерия Стьюдента и х2. Различия считали статистически значимыми при р<0,01.

Результаты

Морфологическая характеристика мозгового вещества надпочечников крыс в различные периоды постнатального развития Светооптическое исследование гистологических препаратов показало, что мозговое вещество надпочечников крыс контрольной группы пубертатного возраста было образовано скоплениями хро-маффинных клеток, разделенными тонкими прослойками

Рис. 1. Площадь мозгового вещества (А) и площадь, занимаемая хромаффинными клетками в мозговом веществе [Б] надпочечников крыс контрольной группы (в пубертатном возрасте — P42, и постпубертатном возрасте — P70); и крыс аналогичного возраста, подвергавшихся воздействию эндокринного дисраптора ДДТ в пренатальном и постнатальном периодах (ДДТ Е0-Р42 и дДт Е0-Р70] и только в постнатальном периодах развития (ДДТ Р0-Р42 и ДДТ Р0-Р70] (M±m) р<0,01 при сравнении: * — с контрольными группами Р42 и Р70, # — с предыдущим сроком исследования, — группы крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ в постнатальный период развития с группой крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ в пренатальный и постнатальный периоды развития

соединительной ткани. Клетки контактировали с капиллярами, просвет которых был очень мал, а также с венозными синусоидами, просвет которых в основном был свободным. Хромаффинные клетки имели круглые и овальные светлые ядра и цитоплазму с тинкториальными свойствами от слабо до сильно выраженной базофилии.

У крыс группы ДДТ Е0-Р42 были выявлены незначительные изменения структуры мозгового вещества. Площадь, занимаемая мозговым веществом, и относительная площадь хромаффинных клеток в экваториальных срезах были меньше контрольных значений, но эти различия не достигали статистической значимости (рис. 1А, Б). У большинства животных в мозговом веществе встречались в небольшом количестве хромаффинные клетки с пикнозом ядер. Соединительнотканные перегородки в мозговом веществе были более крупными по сравнению с таковыми у контрольных животных. В просветах синусоидов обнаруживались небольшие скопления эритроцитов и фибрин.

Мозговое вещество в надпочечниках крыс группы ДДТ Р0-Р42 было хорошо выражено. Площадь, занимаемая мозговым веществом в экваториальных срезах, а также доля площади, занимаемой хромаффинными клетками в мозговом веществе, не отличались от значений контрольной группы и группы ДДТ Е0-Р42 (см. рис. 1А, Б). Как и в предыдущих группах, хромаффинные клетки составляли три четверти площади мозгового вещества. Их тяжи разделялись соединительнотканными перегородками. сосудистое русло было хорошо развито, просветы синусоидов были заполнены плазмой и свободны от форменных элементов. Большая часть клеток характеризовалась умеренной базофилией цитоплазмы. У четверти крыс в мозговом веществе встречались единичные клетки с пикнозом и гиперхромазией ядер.

После наступления половой зрелости к 70 сут. у крыс контрольной группы площадь мозгового вещества и хромаффинных клеток в нем равномерно увеличились по сравнению с предыдущим сроком исследования, соответственно, паренхиматозно-стромальное соотношение в мозговом веществе не изменилось (см. рис. 1А, Б).

У крыс группы ДДТ Е0-Р70 мозговое вещество надпочечника было развито в значительно меньшей степени, чем у крыс контрольной группы (см. рис. 1А). Площадь, занимаемая хромаффинными клетками в мозговом

веществе, уменьшилась (см. рис. 1Б). Цитоплазма хро-маффинных клеток была просветлена или имела сла-бобазофильные тинкториальные свойства. Венозные синусоиды, как правило, имели свободный просвет.

Мозговое вещество надпочечников крыс группы ДДТ р0-р70 имело структуру аналогичную таковой у крыс контрольной группы. Площадь мозгового вещества и доля площади хромаффинных клеток в срезе мозгового вещества соответствовали значениям контрольной группы и были статистически значимо большими, чем у крыс группы ДДТ Е0-Р70 (рис. 1А, Б). Изменения в микроциркуляторном русле не наблюдались.

Экспрессия р-катенина хромаффинными клетками

в различные периоды постнатального онтогенеза

В хромаффинных клетках крыс контрольной группы пубертатного возраста на 42 сут. экспрессия р-катенина была очень низкой. Встречались клетки как с мембранной, так и цитоплазматической и ядерной локализацией р-катенина (рис. 2А). Наибольший процент составляли клетки с мембранной локализацией, а наименьший — с накоплением р-катенина в цитоплазме (рис. 2В).

В мозговом веществе надпочечников крыс группы ДДТ Е0-р42 по сравнению с контролем хромаффинные клетки отличались пониженной экспрессией р-катенина за счет уменьшения числа клеток с мембранной и ядерной локализацией белка (см. рис. 2Б, В). В отличие от контрольной группы клетки с транслоцированным в ядро р-катенином встречались в таком же количестве, как и клетки с его мембранной локализацией (см. рис. 2В).

В мозговом веществе надпочечников крыс группы ДДТ р0-р42 по сравнению с контролем хромаффинные клетки также характеризовались пониженной экспрессией р-катенина (см. рис. 2В). Это было обусловлено уменьшением только числа клеток с его мембранной локализацией, а процент клеток с ядерной и цитоплаз-матической локализацией р-катенина не отличался от контрольных значений. Но эти показатели были статистически значимо больше, чем в группе ДДТ Е0-Р42.

У крыс контрольной группы после наступления половой зрелости в мозговом веществе надпочечников было выявлено двукратное уменьшение доли р-катенин-позитивных хромаффинных клеток с локализацией р-катенина в плазмолемме. Доля клеток с накоплением

В Р42 Р70 ДДТ Е0-Р42 ДДТ Е0-Р70 ДДТ Р0-Р42 ДДТ Р0-Р70

рис. 2. ß-катенин в хромаффинных клетках мозгового вещества надпочечников крыс: А — контрольная группа (пубертатный период, Р42); Б — группа крыс, подвергавшихся воздействию эндокринного дисраптора ДДТ в пренатальном и постнатальном периодах развития (пубертатный возраст, ДДТ Е0-Р42); В — возрастные изменения экспрессии ß-катенина хромаффинными клетками мозгового вещества надпочечников крыс контрольной группы (Р42 и Р70) и крыс, подвергавшихся воздействию эндокринного дисраптора ДДТ в пренатальном и постнатальном (ДДТ Е0-Р42 и ДДТ Е0-Р70) и только в постнатальном (ДДТ Р0-Р42 и ДДТ Р0-Р70) периодах развития (M±m): р<0,01 при сравнении: * — с контрольной группой, # — с предыдущим сроком исследования, — группы крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ в постнатальный период развития, с группой крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ в пренатальный и постнатальный периоды развития. А, Б — иммуногистохимические реакции, стрелками указаны клетки с транслокацией ß-катенина в ядро. Докраска: гематоксилин Майера. Ув. х640

ß-катенина в цитоплазме не изменялась, а с локализацией в ядре увеличилась почти в три раза, вследствие чего общее количество ß-катенин-позитивных клеток не уменьшалось по сравнению с предыдущим сроком исследования (см. рис. 2В).

У крыс, подвергавшихся воздействию низких доз ДДТ в пренатальном и постнатальном периодах онтогенеза

(ДДТ Е0-Р70), общая численность ß-катенин-позитивных хромаффинных клеток увеличилась вдвое по сравнению с предыдущим сроком исследования за счет усиления транслокации ß-катенина в ядро. При сравнении с контрольной группой процент клеток с мембранной, цито-плазматической и ядерной локализацией ß-катенина был статистически значимо меньшим (см. рис. 2В).

У крыс, подвергавшихся воздействию низких доз ДДТ в постнатальном периоде онтогенеза (ДДТ Р0-Р70) в мозговом веществе надпочечника общая численность ß-катенин-позитивных хромаффиноцитов снизилась по сравнению с предыдущим сроком исследования за счет уменьшения клеток с мембранной и цитоплазма-тической локализацией белка. Процент клеток с транслокацией ß-катенина в ядро не изменялся по сравнению с предыдущим сроком исследования. Таким образом, почти 90% ß-катенин-позитивных клеток составляли клетки с ядерной локализацией. По сравнению с контрольной группой и группой ДДТ Е0-Р70 экспрессия ß-катенина хромаффинными клетками была значительно уменьшена (рис. 2В).

обсуждение

Морфологический анализ препаратов надпочечников крыс контрольной группы выявил увеличение площади мозгового вещества к 70 сут. постнатального развития. Сопоставление долей паренхимы и стромы в пубертатном и постпубертатном периодах показывает, что увеличение мозгового вещества происходило за счет равномерного развития как хромаффинной ткани, так и сосудистого русла. У крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ в пренатальном и постнатальном периодах развития, снижение доли хромаффиноци-тов в мозговом веществе свидетельствует о менее выраженном развитии паренхимы по сравнению со стромальными компонентами. Это указывает на менее активное течение пролиферативных процессов в хромаффинных клетках в предшествующих исследованию сроках. Известно, что пролифератив-ная активность хромаффиноцитов надпочечников в постнатальном развитии у мышей и крыс снижается перед началом полового созревания, но сохраняет достаточный потенциал для дальнейшего развития хромаффинной ткани [27], и только после 7-месячного возраста паренхиматозно-стромальное соотношение изменяется за счет увеличения доли кровеносных сосудов [28]. Следовательно, снижение доли хромаф-финных клеток в мозговом веществе крыс в возрасте 70 сут. в группе ДДТ Е0-р70 можно расценивать, как изменение программы постнатального морфогенеза. Наличие хромаффиноцитов с пикнотизированными гиперхромными ядрами свидетельствует об их гибели, однако численность таких клеток была слишком мала, чтобы вносить существенный вклад в замедление развития мозгового вещества. Полученные данные демонстрируют способность хромаффинных клеток надпочечников в норме синтезировать ß-катенин в постнатальном развитии, при этом общее количество ß-катенин-позитивных клеток не изменяется, а число клеток с транслокацией ß-катенина в ядро после наступления половой зрелости увеличивается на фоне уменьшения содержания ß-катенина в плазмо-лемме. Известно, что ß-катенин вместе с а-катенином и Е-кадгерином участвует в формировании плотных межклеточных контактов [29]. Именно эти надмолекулярные комплексы являются мишенью для канонического Wnt-сигналинга, то есть для переключения с адгезивной функции ß-катенина на транскрипционную

ЛИТЕРАТУРА:

1. World Health Organization. State of the Science of Endocrine-Disrupting Chemicals. International Programme on Chemical Safety. Geneva; 2012.

2. Skakkebaek N.E., Toppari J., Soder O. et al. The exposure of fetuses and children to endocrine-disrupting chemicals: a European Society for Paediatric Endocrinology (ESPE) and Pediatric Endocrine Society (PES) call to action statement. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2011; 96: 3056-8.

и активации пролиферации клеток [30]. Таким образом, в контрольной группе после наступления половой зрелости наблюдалось усиление активации канонического Wnt-сигналинга в хромаффинных клетках и увеличение площади мозгового вещества, что указывает на важную роль этого пути в поддержании численности популяции хромаффинных клеток. В нашем предыдущем исследовании мы установили, что активное развитие коркового вещества надпочечников у крыс контрольной группы сопровождалось снижением содержания р-катенина в мембранах кортикостероцитов без изменения его транслокации в ядро [31]. То есть, развитие мозгового вещества в постнатальном периоде в большей степени зависит от активации канонического Wnt-сигналинга, чем развитие коркового вещества.

У животных, которые подвергались воздействию эндокринного дисраптора в пренатальном и постна-тальном периодах развитии, возрастная динамика экспрессии р-катенина была аналогичной таковой в контрольной группе, но синтез этого транскрипционного фактора и активация канонического Wnt-сигналинга в хромаффинных клетках были существенно снижены, как и размеры мозгового вещества. В пубертатном периоде у крыс, подвергавшихся воздействию ДДТ с первого дня постнатального развития, отмечалось аналогичное контролю развитие мозгового вещества и отсутствие отличий в транслокации р-катенина в ядро. После наступления половой зрелости отсутствие возрастной динамики активации канонического Wnt-сигналинга сочеталось с тенденцией к замедлению развития мозгового вещества. сравнение изменений экспрессии р-катенина хромаффинными клетками и его транслокации в ядро у крыс, подвергавшихся воздействию эндокринного дисраптора, показало, что ДДТ вероятно оказывает ингибирующее воздействие на эти процессы еще в пренатальном периоде, что и обусловливает пониженный уровень синтеза этого белка и в пубертатном и в постпубертатном периодах, в то время как воздействие дисраптора в постнатальном периоде приводило к менее выраженному подавлению синтеза р-катенина, а снижение активации Wnt-сигналинга появилось только после наступления половой зрелости.

Выводы

развитие мозгового вещества надпочечников крыс при переходе от пубертатного периода к половой зрелости в норме сопровождается активацией канонического Wnt-сигналинга в хромаффинных клетках.

Воздействие эндокринного дисраптора ДДТ, начавшееся в пренатальном периоде онтогенеза, в отличие от воздействия с начала постнатального периода обусловливает более выраженное снижение активации канонического Wnt-сигналинга в хромаффинных клетках, что приводит к нарушению развития паренхимы мозгового вещества, и может рассматриваться как один из механизмов дисрапторного действия низких доз ДДТ на морфогенетические процессы в надпочечнике.

Благодарности

Исследование выполнено в рамках госзадания (№ госрегистрации АААА-А17-117013050048-6).

3. Gore A., Chapell V., Fenton S. et al. EDC-2: The Endocrine Society's Second Scientific Statement on Endocrine Disrupting Chemicals. Endocr. Rev. 2015; 36(6): E1-E150.

4. Eskenazi B., Chevrier J., Rosas L.G. et al. The Pine River statement: human health consequences of DDT use. Environ. Health Perspect. 2009; 117: 1359-67.

5. World Health Organization. The use of DDT In malaria vector control. Geneva; 2011.

6. Bachman M.J., Keller J.M., West K.L. et al. Persistent organic pollutant concentrations in blubber of 16 species of cetaceans stranded in the Pacific Islands from 1997 through 2011. Sci. Total Environ. 2014; 9: 115-23.

7. Jaga K., Dharmani S. Global surveillance of DDT and DDE levels in human tissues. IJOMECH 2003; 16(1): 7-20.

8. Longnecker M.P. Invited Commentary: Why DDT matters now. Am. J. Epidemiol. 2005; 162: 726-8.

9. Международная организация труда и ВОЗ. ДДТ и его производные. Экологические аспекты. Женева: мвмест. изд. Прогр. ООН по окружающей среде. Пер. с англ.; 1991. (DDT and its derivatives: environmental aspects published under the joint sponsorship of the United Nations Environment Programme, the International Labour Organisation, and the World Health Organization; 1989).

10. Яглов В.В., Яглова Н.В. Морфологические и функциональные изменения щитовидной железы крыс при длительном воздействии низких доз эндокринного дисраптора дихлордифенилтрихлорэтана. Современные технологии в медицине 2014; 6(4): 55-61. (Yaglov V.V., Yaglova N.V. Alterations of thyroid morphology and function after long-term exposure to low doses of endocrine disruptor dichlorodiphenyltrichloroeth ane. Modern Technologies in Medicine 2014; 6(4): 55-61).

11. Яглова Н.В., Цомартова Д.А., Обернихин С.С. и др. Морфофунк-циональные изменения коркового вещества надпочечников крыс пубертатного возраста, потреблявших низкие дозы эндокринного дисраптора дихлордифенилтрихлорэтана с первого дня постнатального онтогенеза. Вопросы питания 2017; 86(4): 70-6. (Yaglova N.V., Tsomartova D.A., Obernikhin S.S. et al. Alteration of rat adrenal cortex after low-dose exposure to endocrine disrupting chemical dichlorodlphenyltrichloroethane since the first day of postnatal development. Nutrition questions 2017; 86(4): 70-6.).

12. Ehrhart-Bornstein M., Hinson J.P., Bornstein S.R. et al. Intraadrenal interactions in the regulation of adrenocortical steroidogenesis. Endocr. Rev. 1998; 19: 101-43.

13. Val P., Swain A. Gene dosage effects and transcriptional regulation of early mammalian adrenal cortex development. Mol. Cell. Endocrinol. 2010; 323(1): 105-14.

14. Becker J., Wilting Y. WNT signaling, the development of the sympathoadrenal-paraganglionic system and neuroblastoma. Cell. Mol. Life Sci. 2018; 75: 1057-70.

15. Stuhlmiller T.J., Garcia-Castro M.I. Current perspectives of the signaling pathways directing neural crest induction. Cell. Mol. Life Sci. 2012; 69(22): 3715-37.

16. Harris M.L., Erickson C.A. Lineage specification in neural crest cell pathfinding. Dev. Dyn. 2007; 236(1): 1-19.

17. Wakamatsu Y., Maynard T.M., Weston J.A. Fate determination of neural crest cells by NOTCH-mediated lateral inhibition and asymmetrical cell division during gangliogenesis. Dev. 2000; 127(13): 2811-21.

18. Brault V., Moore R., Kutsch S. et al. Inactivation of the ß-catenin gene by Wnt1-Cre-mediated deletion results in dramatic brain malformation and failure of craniofacial development. Dev. 2001; 128: 1253-64.

19. Hari L., Brault V., Kleber M. et al. Lineage-specific requirements of ß-catenin in neural crest development. J. Cell Biol. 2002; 159: 867-80.

20. Lee H.Y., Kleber M., Hari L. et al. Instructive role of Wnt/ß-catenin in sensory fate specification in neural crest stem cells. Science 2004; 303: 1020-3.

21. Vandenberg L.N., Colborn T., Hayes T.B. et al. Hormones and endocrine-disrupting chemicals: low-dose effects and nonmonotonic dose responses. Endocr. Rev. 2012; 33: 378-455.

22. Технический регламент Таможенного союза ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции»; 2011. (Custom Union's Technical Regulations on Food Safety Requirements 021/2011; 2011).

23. Yamazaki H., Takano R., Shimizu M. et al. Human blood concentrations of dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) extrapolated from metabolism in rats and humans and physiologically based pharmacokinetic modeling. J. Health Sci. 2010; 56(5): 566-75.

24. Pignatelli D., Xiao F., Gouvtia A. et al. Adrenarche in the rat. J. Endocrinol. 2006; 191(1): 301-8.

25. Berthon A., Martinez A., Bertherat J. et al. Wnt/b-catenin signalling in adrenal physiology and tumour development. Mol. Cell. Endocrinol. 2012; 351: 87-95.

26. Kim W., Kim M., Jho E.H. Wnt/ß-catenin signaling: from membrane to nucleus. Biochem. J. 2013; 450: 9-21.

27. Chan W., Anderson C., Gonsalvez D. From proliferation to target innervation: signaling molecules that direct sympathetic nervous system development. Cell Tissue Res. 2018; 372(2): 171-93.

28. Кемоклидзе К.Г. Постнатальный рост мозгового вещества надпочечника крысы. Морфология 1998; 113

29. Baum B., Georgiou M. Dynamics of adherens junctions in epithelial establishment, maintenance, and remodeling. J. Cell Biol. 2011; 192: 907-17.

30. Brembeck F., Rosario M., Birchmeier W. Balancing cell adhesion and Wnt signaling, the key role of ß-catenin. Curr. Opin. Genet. Dev. 2006; 16: 51-9.

31. Цомартова Д.А., Яглова Н.В., Яглов В.В. Изменения активации канонического ß-катенин/Wnt-сигналинга в корковом веществе надпочечников крыс, подвергавшихся воздействию эндокринного дисраптора дихлордифенилтрихлорэтана (ДДТ) в пренатальном и постнатальном периоде онтогенеза. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2017; 164: 495-9. (Tsomartova D.A., Yaglova N.V., Yaglov V.V. Changes in canonical ß-catenin/Wnt signaling activation in the adrenal cortex of rats exposed to endocrine disruptor dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) during prenatal and postnatal ontogeny. Bulletin of Experimental Biology and Medicine 2018; 164: 493-6).

Поступила: 06022019