ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЕРДЦА

1. Фармацевтическая композиция, содержащая клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель, в которой указанный по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель представляет собой раствор консерванта.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, получают в соответствии с принятыми международными стандартами изготовления лекарственных препаратов.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанный раствор консерванта выбран из группы, включающей раствор консервантов, которые позволяют осуществлять криоконсервацию при температурах от -196°С до 0°С, и растворы консервантов, которые позволяют осуществлять криоконсервацию при температурах от 0°С до 40°С.
4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанный раствор консерванта представляет собой раствор консерванта, который может содержать ионы, рН-буферные растворы, непроникающие агенты, коллоидные растворы и метаболиты, диметилсульфоксид (DMSO), глицерин; сахарозу, сывороточный альбумин, трегалозу или их сочетание.
+
+
2+
2+
-
5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой указанные ионы выбраны из группы, состоящей из Na, K, Ca, Mg, Cl и сочетаний указанных ионов.
6. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой указанные рН-буферные растворы выбраны из группы, состоящей из , , (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновой кислоты) (HEPES) и их смесей.
7. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой указанные непроникающие агенты выбраны из группы, состоящей из лактобионата, сахарозы, маннита, глюкозы и их сочетаний.
8. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой указанный коллоидный раствор представляет собой Декстран-40.
9. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой указанные метаболиты выбраны из группы, состоящей из аденозина, глутатиона и их сочетаний.
10. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанный по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель включает по меньшей мере один компонент, выбранный из группы, состоящей из факторов роста, цитокинов, белков, участвующих в сигналинге при органогенезе, лекарственные средства, лизата тромбоцитов, сыворотки, изотопов, средств для прослеживания клеток in vivo, разбавителей, любрикантов, трехмерных материалов или матриксов и их сочетаний.
11. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанные клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, представляют собой стволовые клетки.
12. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанные клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, получают из стволовых клеток.
13. Фармацевтическая композиция по п.11 или 12, в которой указанные стволовые клетки выбраны из группы, состоящей из взрослых стволовых клеток, эмбриональных стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (IPS), индуцируемых к дифференцировке в различных направлениях взрослых клеток костного мозга (MIAMI), местных стволовых клеток сердца, вегетативных стволовых клеток или их любого сочетания.
14. Фармацевтическая композиция по п.13, в которой указанные стволовые клетки представляют собой мезенхимные стволовые клетки, полученные из соответствующей ткани, выбранной из группы, состоящей из костного мозга, жировой ткани, пуповинной крови, амниотической жидкости, менструальной крови, крови.
15. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанные клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, представляют собой клетки млекопитающего.
16. Фармацевтическая композиция по п.15, в которой указанные клетки млекопитающего выбраны из группы, состоящей из клеток человека, кошек, собак, свиней, лошадей, мышей, крыс, хомячков и других млекопитающих.
17. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанные клетки представляют собой аутологичные клетки, аллогенные клетки, ксеногенные клетки или любое их сочетание.
18. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанные клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, представляют собой кардиопоэтические клетки, которые могут быть получены из взрослых мезенхимных стволовых клеток человека, эмбриональных клеток человека (при условии, что их получение не требует разрушения эмбрионов человека), эмбрионально-подобных стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, местных стволовых клеток сердца или другого подходящего источника или их сочетания.
19. Фармацевтическая композиция по п.18, отличающаяся тем, что указанная композиция не содержит кардиопоэтические клетки в определяемом количестве, включая, но не ограничиваясь ими, кардиомиоциты, гемопоэтические клетки, клетки предшественники эндотелия, адипобласты, адипоциты, хондробласты, хондроциты, остеобласты, остеоциты, нейробласты и нейроциты.
20. Фармацевтическая композиция по п.19, в которой содержание всех не кардиопоэтических клеток составляет от 0% до 50% от общего количества клеток, предпочтительно от 0% до 15% от общего количества клеток.
21. Фармацевтическая композиция по п.19, в которой содержание каждого типа не кардиопоэтических клеток составляет от 0% до 50% от общего количества клеток, предпочтительно от 0% до 15% от общего количества клеток.
22. Фармацевтическая композиция по п.1 для применения при лечении ишемической кардиомиопатии, острого инфаркта миокарда, хронического инфаркта миокарда, сердечной недостаточности не ишемического характера, сердечной недостаточности ишемического характера, врожденной кардиомиопатии или их сочетания.
23. Способ изготовления фармацевтической композиции по любому из предыдущих пунктов, включающий следующие этапы:
- получение клеток, из которых можно получить клетки, коммитированные на формирование ткани сердца;
- культивирование указанных клеток в условиях, которые позволяют получать клетки, коммитированные на формирование ткани сердца;
- сбор указанных коммитированных клеток;
- добавление к указанным коммитированным клеткам по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого наполнителя, причем указанный по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель представляет собой раствор консерванта.
24. Способ по п.23, согласно которому осуществляют контакт указанных клеток, из которых можно получить клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, с кардиогенным коктейлем, состоящим из кардиогенных веществ, выбранных из следующих веществ: по меньшей мере одно вещество выбрано из группы, состоящей из активина А, α-тромбина, ангиопоэтина, белков морфогенеза костной ткани (BMP), таких как ВМР-1, ВМР-2, ВМР-4, ВМР-5, ВМР-6, кардиотрофина 1, кардиогенола С, эпидермального фактора роста (EGF), эритропоэтина (ЕРО), факторов роста фибробластов (FGF), таких как FGF-1, FGF-2, FGF-4, FGF-5, FGF-12, FGF-13, FGF-15, FGF-20, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF), гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF), фактора роста-дифференциации 9 (GDF-9), фактора роста гепатоцитов (HGF), инсулиноподобных факторов роста (IGF), таких как IGF-1, IGF-2, миостатина (GDF-8), нейротрофинов, таких как NT-3, NT-4, NT-1, и фактора роста нервов (NGF), тромбоцитарного фактора роста (PDGF), такого как PDGF-бета, PDGF-AA, PDGF-BB, тромбопоэтина (ТРО), TGF-α (трансформирующий фактор роста альфа), трансформирующих факторов роста β (TGF-β), таких как TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3, VEGF (фактор роста эндотелия сосудов), такой как VEGF-A, VEGF-C, TNF-α, фактора подавления лейкемии (LIF), интерлейкина 6 (IL-6), ретиноевой кислоты, С SDF-1 (фактора стромальных клеток-1), BDNF (нейротрофического фактора роста мозга), периостина, ангиотензина II, лиганда Flt3, нейротрофического фактора глии, связывающего белка -3 инсулиноподобного фактора роста, связывающего белка -5 инсулиноподобного фактора роста, интерлейкина-3, интерлейкина-8, мидкина, прогестерона, путресцина, фактора стволовой клетки, TGF-альфа, Wntl, Wnt3a, Wnt5a, каспазы-4, лиганда хемокина 1, лиганда хемокина 2, лиганда хемокина 5, лиганда хемокина 7, лиганда хемокина 11, лиганда хемокина 20, гаптоглобина, лектина, холестерин 25-гидроксилазы, синтаксина-8, синтаксина-11, церулоплазмина, компонента комплемента 1, компонента комплемента 3, интергрина альфа 6, лизосомальной кислой липазы 1, β-2 микроглобулина, убиквитина, фактора подавления миграции макрофагов, кофилина, циклофилина A, FKBP12, NDPK, профилина 1, цистатина С, кальциклина, станниокальцина-1, PGE-2, mpCCL2, IDO, iNOS, HLA-G5, M-CSF,, PIGF, MCP-1, молекул внеклеточного матрикса, CCL2 (МСР-1), CCL3 (MIP-1α), CCL4 (MIP-1β), CCL5 (RANTES), CCL7 (МСР-3), CCL20 (MIP-3α), CCL26 (эотаксина-3), CX3CL1 (фракталкина), CXCL5 (ENA-78), CXCL11 (i-TAC), CXCL1 (GROα), CXCL2 (GROβ), CXCL8 (IL-8), CCL10 (IP-100 и их сочетаний.
25. Способ по п.24, согласно которому указанный кардиогенный коктейль разбавляют в среде, содержащей вещества, выбранные из группы, состоящей из телячьей эмбриональной сыворотки, сыворотки крови человека, лизата тромбоцитов, фактора роста тромбоцитов и их смесей, и вещества, выбранные из группы, состоящей из (коктейль 1): TGFβ-1, ВМР-4, α-тромбина, вещества, выбранного из группы, состоящей из кардиотрофина 1 и IL-6, и вещества, выбранные из группы, состоящей из кардиогенола С и ретиневой кислоты; (коктейль 2): TGFβ-1, ВМР-4, α-тромбина, кардиотрофина 1, IL-6, ретиноевой кислоты и кардиогенола С; (коктейль 3): активина-А, FGF-2, IL-6, IGF-1 и ретиноевой кислоты; (коктейль 4): TGF-β1, TGF-β2, TNF-α, ВМР-1, ВМР-2, ВМР-4, ВМР-6, FGF-2, FGF-4, FGF-5, FGF-12, FGF-13, FGF-15, FGF-20, фактора подавления лейкемии, VEGF-A, VEGF-C, инсулиноподобного фактора роста 1, интерлейкина 6 (IL-6), активинаА, α-тромбина, ретиноевой кислоты, кардиотрофина 1, кардиогенола С и их сочетаний.
26. Способ по п.23, который осуществляют в соответствии с признанными международными стандартами изготовления лекарственных средств, который включает отбор образцов на любом этапе указанного способа для осуществления контроля качества.
27. Способ по п.23, осуществляемый в соответствии с признанными международными стандартами изготовления лекарственных средств, который включает отбор образцов на последнем этапе культивирования клеток для осуществления контроля качества активного вещества.
28. Способ по п.23, согласно которому критерии контроля активного вещества включают по меньшей мере один анализ, выбранный из группы, состоящей из анализа на идентичность, анализа на гомогенность, анализа на содержание примесей и их сочетания.
29. Способ по любому из пп.23-28, согласно которому в случае, когда клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, представляют собой кардиопоэтические клетки, идентичность указанных кардиопоэтических клеток соответствует наблюдаемому повышению уровня экспрессии по меньшей мере одного гена из группы, состоящей из Nkx2.5, Tbx5, MEF2C, GATA4, GATA6, Mesp1, FOG1, FOG2, Flk1 и их гомологов.
30. Способ по п.29, согласно которому экспрессия указанного гена повышена минимум в два раза, при определении методом количественной ПЦР, по сравнению с контролем.
31. Способ по п.28, согласно которому, в случае, когда клетки, коммитированные на формирование ткани сердца, представляют собой кардиопоэтические клетки, их идентичность в качестве кардиопоэтических клеток считают установленной при наблюдаемом присутствии по меньшей мере одного типа полипептида, выбранного из группы, состоящей из Nkx2.5, Tbx5, MEF2C, GATA4, GATA6, Mesp1, FOG1, FOG2, Flk1 и их гомологов при сравнении с контролем, и дополнительно по тому, что Nkx2.5 и/или MEF2C переносятся в ядра указанных кардиопоэтических клеток.
32. Способ по п.31, согласно которому о наблюдаемом присутствии свидетельствует иммунное окрашивание по меньшей мере одним антителом из группы, состоящей из антитела к Nkx2.5, антитела к Tbx5, антитела к MEF2C, антитела к GATA4, антитела к GATA6, антитела к Mesp1, антитела к FOG 1, антитела к FOG2, антитела к Flk1 и их гомологам.
33. Способ по п.28, согласно которому гомогенность достигается, если по меньшей мере 50% в данном образце составляют кардиопоэтические клетки.
34. Способ по п.33, согласно которому гомогенность достигается, когда по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 85% в данном образце составляют кардиопоэтические клетки.
35. Способ по п.28, согласно которому о присутствии среди полученных клеток мезенхимных стволовых клеток свидетельствует положительное окрашивание антителами, направленными против поверхностного маркера, выбранного из группы, состоящей из CD105, CD90, CD133, CD105, CD166, CD29 и CD44, и отрицательное окрашивание антителом, направленным против поверхностного маркера, выбранного из группы, состоящей из CD14, CD34 и CD45.
36. Способ по п.28, согласно которому указанную чистоту считают не достигнутой при повышенной экспрессии генов CD34, FABP4, остеокальцина, нестина, Sox9 и MYH7 и их гомологов в два раза или более по сравнению с контролем.
37. Способ по п.36, согласно которому указанное повышение экспрессии генов по сравнению с контролем определяют методом количественной ПЦР.
38. Способ по любому из пп.30, 36 или 37, согласно которому указанный контроль состоит из не кардиопоэтических клеток.
39. Способ по п.38, согласно которому указанный контроль состоит из клеток, культивированных в отсутствии кардиогенных веществ.
40. Способ по п.23, согласно которому условия культивирования включают использование биореактора, который включает иммобилизацию или инкапсуляцию указанных клеток на частицах или матрице и пропускание питательной среды через слой частиц или матрицу.
41. Способ лечения заболевания сердца, или предрасположенности к такому заболеванию, согласно которому фармацевтическую композицию согласно любому из пп.1-21 вводят пациенту в эффективном количестве.
42. Способ по п.41, согласно которому у указанного пациента наблюдается недостаточность сердечно-сосудистой системы.
43. Способ по п.42, согласно которому указанный пациент страдает от ишемической кардиомиопатии, инфаркта миокарда, сердечной недостаточности ишемического характера или сердечной недостаточности не ишемического характера, врожденной кардиомиопатии или их сочетания.
44. Способ по любому из пп.41-43, согласно которому указанную фармацевтическую композицию вводят с использованием способа введения, выбранного из группы, состоящей из введения внутрь миокарда, внутрь сердца, внутрикоронарного введения, внутримышечного введения, подкожного введения, интраперитонеального введения, внутриматочного введения, парентерального или системного введения.
45. Способ по п.44, согласно которому указанную фармацевтическую композицию вводят внутрь миокарда с использованием катетера, шприца или их сочетания.
46. Набор для введения фармацевтической композиции по любому из пп.1-21, который включает контейнер, содержащий указанную фармацевтическую композицию.
47. Набор по п.46, в котором указанный контейнер представляет собой биологически совместимый контейнер, который способствует выживанию клеток и транспортировке в мировом масштабе, удобен для использования сотрудником лечебного учреждения или медицинским персоналом для введения пациенту.
48. Набор по любому из пп.46 или 47, в котором указанный контейнер герметично закрыт.
49. Набор по п.46, в котором указанный контейнер совместим с наполнителем и условиями хранения.
50. Набор по п.46, в котором указанный контейнер представляет собой закрытый стеклянный контейнер.
51. Набор по п.46, котором указанный контейнер имеет крышку с прокалываемой диафрагмой.
52. Набор по п.51, в котором указанная крышка с прокалываемой диафрагмой позволяет удалять жидкость из контейнера через адаптер для флакона, который включает клапан типа Луэр.
53. Набор по п.52, в котором указанную крышку с прокалываемой диафрагмой можно проколоть с помощью иглы.
54. Набор по п.46, в котором указанная фармацевтическая композиция хранится в герметично закрытом контейнере, подходящем для криоконсервации.
55. Набор по п.46, в котором срок хранения фармацевтической композиции в указанном контейнере составляет по меньшей мере 48 ч.
56. Набор по п.46, в котором срок хранения фармацевтической композиции в указанном контейнере составляет по меньшей мере 72 ч.
57. Набор по п.46, который дополнительно включает по меньшей мере один катетер.
58. Набор по п.46, который дополнительно включает по меньшей мере один шприц.
59. Применение клеток, коммитированных на формирование ткани сердца, при изготовлении фармацевтической композиции по любому из пп.1-21 для лечения ишемической кардиомиопатии, острого инфаркта миокарда, хронического инфаркта миокарда, сердечной недостаточности не ишемического характера, сердечной недостаточности ишемического характера, врожденной кардиомиопатии или их сочетания.