Контейнер для длительного инкубирования подвижных мелких организмов

Предлагаемая полезная модель относится к размножению и выращиванию мух дрозофил.
При длительном инкубировании мух дрозофил необходима периодическая смена питательного субстрата, обеспечение непрерывной подачи свежего воздуха и удаление погибших особей из контейнера. При этом должна исключаться возможность покидания мухами дрозофилами объема контейнера. Наиболее высокая вероятность покидания объема контейнера возникает при манипуляциях с заменой питательного субстрата и удаления погибших особей.
Известно устройство для инкубирования мелких мух Drosophila [1], представляющее собой стеклянную (многоразовую) или полистирольную (одноразовую) пробирку. Размеры используемых пробирок 20 мм диаметр и 100 мм высотой. Нужное количество мух отсаживают в пробирку с кормом и затыкают ее пробкой из натуральной ваты, которая не дает мухам улететь, обеспечивает доступ кислорода и сохраняет влажность среды. Затем мух пересаживают в новые пробирки со свежим кормом с периодичностью раз в несколько дней (1-3 раза в неделю в зависимости от количества мух в пробирке и того, одного ли пола мухи в пробирке или разнополые). Важно создать одинаковые условия содержания для мух во всех пробирках.
2
При пересаживании на свежую среду мух необходимо обездвижить (обычно холод, СО или эфир), а затем перенести на новый субстрат. При этом есть несколько трудностей: муха может улететь, влипнуть в корм, или ее можно повредить при вытряхивании из пробирки. Поэтому особое внимание уделяется качеству корма: он не должен быть липким, жидким, холодным, а так же условиям пересаживания.
Целью предполагаемого изобретения является создание массового, дешевого, удобного в работе контейнера, позволяющего выполнять длительное инкубирование мух дрозофил.
Поставленная цель достигается тем, что контейнер выполняется из двух пробирок, соединенных стыковочным узлом с затвором.
Конструкция контейнера представлена на фиг. 1. Контейнер представляет собой две стандартные прозрачные пластиковые пробирки (1 и 2) типа Falkon (объем 50 мл, с коническим дном и резьбовой крышкой), соединенные стыковочным узлом.
Стыковочный узел представляет собой два симметричных комплекта деталей (3-6), зажимающих стандартные крышки (7 и 8) пробирок. Крышка 7 вставляется между деталями 3 и 4, а крышка 8 - между деталями 5 и 6, и данная конструкция соединяется склеиванием. В крышках 7 и 8 выполняются отверстия с диаметром, равном внутреннему диаметру пробирки. На стороне детали 4, объединенной с деталью 5, выполняется паз шириной, превышающей диаметр отверстия в детали 4, и глубиной, соответствующей толщине тонкой задвижки (9). В качестве затвора может использоваться полоска писчей бумаги. Детали 4 и 5 также объединяются склеиванием. Для повышения механической прочности детали 3-6 могут стягиваться винтами. Пробирки 1 и 2 вкручиваются соответственно в крышки 7 и 8.
Возможна реализация стыковочного узла из двух монолитных деталей (11 и 12), в которых нарезана резьба для ввинчивания пробирок (Фиг. 2).
Устройство работает следующим образом. В пробирку 2 помещается питательный субстрат и пробирка вкручивается в крышку 8. Мухи дрозофилы помещаются в пробирку 1, которая вкручивается в крышку 7. Контейнер помещается в инкубатор.
При необходимости замены питательного субстрата биологические объекты перемещаются в пробирку 1. В паз 10, расположенный в стыковочном узле, вставляется затвор (лист писчей бумаги). Пробирка 8 выкручивается из крышки 7. На ее место устанавливается аналогичная пробирка со свежим питательным субстратом. Затвор 9 удаляется из паза. Контейнер помещается в инкубатор.
Преимуществом конструкции контейнера является специальный элемент подачи свежего воздуха. Газообмен объема контейнера с окружающей средой осуществляется через паз 10. Толщина зазора, значительно меньшая, чем размеры инкубируемых мух дрозофил, препятствует покиданию биологическими объектами объема инкубатора. Подобное устройство газообмена упрощает конструкцию контейнера.
Для перемещения мух дрозофил используются их естественные рефлексы. В случае легкого механического воздействия (легкая встряска) мухи дрозофилы стремятся взлететь вверх и собираются в верхней пробирке. В дальнейшем верхняя пробирка отсекается затвором, что позволяет заменить нижнюю пробирку, гарантированно исключая условие покидания контейнера мухами дрозофилами. Удаление погибших объектов производится одновременно с заменой нижней пробирки. При этом не требуется использование дополнительных инструментов.
Исключается воздействие на объект химических и физических факторов для обездвиживания при пересадке, что позволяет упростить процесс инкубирования и исключить использование дополнительных устройств и реагентов.
В качестве затвора возможно использование тонкой пленки или бумаги. Возможно использование одного затвора на весь комплект контейнеров. Для изготовления контейнера используются стандартные полипропиленовые пробирки с резьбовой крышкой.
Источники использованной информации
1. LABORATORY MANUAL of DROSOPHILA. Evolutionary Biology Research Department of Ecology & Evolutionary Biology. University of California, Irvine, 26 May 1999.