Влияние вилона на лимфоцитарнотромбоцитарную адгезию в эксперименте

10. Кушнаренко Н.Н. Патогенетическое значение изменений процессов перекисного окисления липидов и вариабельности артериального давления у больных гипертонической болезнью: Автореф. дис.... канд. мед. наук. Чита, 2002. 23 с.

11. Мюллер Х.П. Пародонтология / Пер. с нем. Львов: ГалДент, 2004. 256 с.

12. Промыслов М.Ш. // Вопросы мед. химии. 1990. №4. С. 90-92.

13. Рабухина Н.А., Аржанцев А.П. Рентгенодиаг-

ностика в стоматологии. М., 2003. С. 188-204.

14. Голубкина Н.А., Скальный А.В., Соколов Я.А. и др. Селен в медицине и экологии. М., 2002. 139 с.

15. Улащик B.C. Введение в теоретические основы физической терапии. Минск: Наука и техника, 1981. 238 с.

16. Musik I., Starostawska Е., Pasternak К. // Bull. Vet. Inst. Pulawy. 2003. Vol. 47, №2. P. 567-573.

17. Zuolo M.L., Toledo M.S., Nogueira H.E. et all. // J. Endod. 2001. №2. P. 107-109.

УДК 616.097 + 616 - 092 + 615.2 В.А. Щербак, Ю.А. Витковский

ВЛИЯНИЕ ВИЛОНА НА ЛИМФОЦИТАРНО-ТРОМБОЦИТАРНУЮ АДГЕЗИЮ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

ГОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия", г. Чита

Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА) заключается в спонтанном или стимулированном цитокинами присоединении кровяных пластинок к лимфоцитам. Из всего пула лимфоцитов способны образовывать коагрегаты с тромбоцитами только клетки, несущие поверхностные маркеры CD4+ (Т-хелперы) и CD 16+ (натуральные киллеры) [ 1 ]. Лигандом ЛТА выступают молекулы межклеточной адгезии-1 (ICAM-1) [9]. Адгезивную способность лимфоцитов с кровяными пластинками стимулируют IL-1 и IL-2, а ингибируют IL-4, IL-10 и IFN-a [2, 12-14]. ЛТА отражает состояние иммунитета и гемостаза. Стресс сопровождается гиперкоагуляцией и иммунодефицитом [6, 8].

Дипептид вилон (Lys-Glu) получен путем направленного химического синтеза на основании аминокислотного анализа комплексного препарата тимуса ти-малина [5]. Вилон ликвидирует нарушения иммунитета и гемостаза при различных патологических состояниях [4, 7,10,11], поэтому целью настоящего исследования явилось изучение действия тимомимети-ка вилона на лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию у стрессированных крыс.

Материалы и методы

Эксперименты in vivo проведены на 55 белых беспородных крысах, которых содержали в обычных условиях вивария. С целью создания у крыс эрозивного процесса в желудке использовали острый иммобили-зационный стресс (ОИС) по методу О.Н. Забродина

Резюме

Цель исследования состояла в изучении влияния вилона на лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию у стрессированных крыс. Внутримышечное введение тимомиме-тика вилона крысам в дозе 10 мкг внутримышечно после острого иммобилизационного стресса увеличивает лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию и уменьшает образование эрозий слизистой оболочки желудка. Введение вилона до стресса оказывает протекторное действие.

V.A. Shcherbak, Yu.A. Vitkovsky

EFFECT OF VILON ON LYMPHOCYTE-PLATELET ADHESION IN EXPERIMENT

State medical academy, Chita Summary

The aim of the study was to investigate the influence of vilon on lymphocyte-platelet adhesion in rats. Intramuscular injection of thymomimetic vilon in the dose of 10 mg increases lymphocyte-platelet adhesion and decreases formation of stomach mucosa erosions. Administration of vilon before stress has a protective action.

[3]. После ОИС животные были разделены на две группы: 1 группа получала физраствор по 1,0 мл; 2 группа — вилон в дозе 10 мкг. Все препараты вводились внутримышечно 1 раз в сут в течение 10 дн. Материал для

Таблица 1

Количество острых эрозий слизистой оболочки желудка у крыс в различные сроки после ОИС

Исследуемые животные Дни исследования Протек- торное действие

2 9 21

Крысы, получавшие физраствор

Крысы, получавшие вилон (2 группа) 7,40+0,24 (п-5) р>0,05 1,60+0,67 (п=6) р<0,05 0+0 (п-5) р<0,05 1,16+0,40 (п-6) р<0,001

Примтание. р — уровень значимости различий по сравнению с крысами, получавшими физраствор.

исследования забирался на 2,9 и 21 сут эксперимента. За 10 и 5 дн. до создания ОИС крыс иммунизировали внутрибрюшинным введением эритроцитов барана.

Для изучения протекторных свойств вилон вводили 1 раз в сут в течение трех дней, предшествующих эксперименту, и во время ОИС через каждые б ч по 10 мкг внутримышечно. Забор материала осуществляли непосредственно после 24-часового ОИС.

Для исследования ЛТА свежую гепаринизирован-ную кровь в количестве 1,0 мл наслаивали в пробирку на фиколл-урографин (градиент плотности 1077) и центрифугировали при 1500 об./мин в течение 40 мин. После центрифугирования интерфазное кольцо, содержащее лимфоциты и тромбоциты, забирали пастеровской пипеткой. Полученную клеточную взвесь отмывали средой 199 и микроскопировали в камере Горяева. Определяли процент розеток лимфоцитов с тромбоцитами. За розетку принимали лимфоцит, присоединивший не менее 3 тромбоцитов [1].

Результаты и обсуждение

В первые сутки после ОИС у крыс наблюдалась общая реакция в виде заторможенности, снижения аппетита, жажды, у некоторых животных отмечалось затруднение движений вследствие синюшности и отека дистальных отделов конечностей.

При макроскопическом исследовании желудка выявлены общие и местные изменения слизистой оболочки. Общие изменения наблюдались в виде отека, гиперемии, полнокровия. Перфораций не зарегистрировано. Местные изменения отмечены в виде эрозий линейной или округлой формы длиной от 1 до 12 мм, шириной 0,5-2 мм, располагающихся на вершинах складок. Эрозии заполнены геморрагическим содержимым черного цвета, не смывающимся потоком воды. У каждого животного наблюдалось от 7 до 10 эрозий слизистой оболочки желудка (СОЖ). При заживлении отмечено уменьшение их размера и меньшая интенсивность окраски. Рубцевания в процессе регенерации не установлено.

На 2 сут ОИС эрозии выявлены у всех экспериментальных животных. В процессе лечения на 9 день эрозивные изменения слизистой зарегистрированы у 80% крыс 1 группы и 60% — 2 группы. На 21 день эрозии отмечены у 67% крыс, получавших физраствор, а у леченных вилоном их не было. Число эрозивных поражений было примерно одинаковым и составляло в среднем на одно животное: в 1 группе — 8,80±0,37, во 2 группе — 7,40+0,24 (табл. 1.).

Таблица 2

Влияние вилона на ЛТА у крыс

Условия опыта ЛТР

Нестрессированные животные

Интактные крысы (контроль 1), (п=6) 14,50±0,76

Иммунизированные крысы (контроль 2), (п-4) 10,50±0,50 р<0,05

Стрессированные животные

2 день эксперимента Крысы, получавшие физраствор (п=5) 3,80±0,37 р<0,001; р,<0,01

Крысы, получавшие вилон (п=5) 6,80±1,01; р<0,05; р,<0,05; р2<0,05

9 день эксперимента Крысы, получавшие физраствор (п-5) 8,80±1,15 р<0,01; р,>0,05

Крысы, получавшие вилон (п=6) 19,50+1,17; р<0,05; р <0,001; р2<0,01

21 день эксперимента Крысы, получавшие физраствор (п-6) 13,50+0,43 р>0,05; р,<0,01

Крысы, получавшие вилон (п-6) 14,50+0,65; р>0,05; р,<0,01; р2>0,05

Протекторное дейстие вилона

Крысы, получавшие физраствор (п-6) 6,67±0,67 р<0,001; р,<0,01

Крысы, получавшие вилон (п-6) 13,66+0,42; р>0,05; р,<0,01; р2<0,01

Примечания, р — достоверность различий по сравнению с контролем 1; р, — достоверность различий по сравнению с контролем 2; р2 — достоверность различий между группами животных, получавших вилон и физраствор.

Положительным результатом действия вилона явилась наименьшая поражаемость СОЖ, ибо эрозии в этой группе регистрировались в 82,3% случаев, тогда как в первой — в 90,7%.

Среднее число эрозий было меньше у животных, получавших тимомиметик во все дни эксперимента. На 21 день у животных, леченных вилоном, эрозивных поражений желудка не отмечено, а в 1 группе они сохранялись в 8,7% случаев в виде единичных эрозий размером 1-3 мм, в стадии заживления.

ЛТА в 1 контрольной группе составила 14,00+1,04%, после иммунизации адгезия несколько уменьшалась (табл. 2). После стрессирования число розеткообразующих лимфоцитов снижалось в 3,8 раза, по сравнению с интактными крысами, и в 2,7 раза по отношению к иммунизированным животным. Введение дипептида вилона несколько замедляло этот процесс.

На 9 день после ОИС у крыс, получавших физраствор, количество лимфоцитарно-пластиночных ко-агрегатов не отличалось от контроля. Вилон значительно стимулировал ЛТА, и этот показатель был почти в 2 раза выше, чем у нелеченых животных.

На 21 день эксперимента адгезия в обеих группах не отличалась как от интактных крыс, так и между группами. Однако если в 1 группе она возрастала, то во 2 группе снижалась. По-видимому, действие вилона на феномен ЛТА нестойкое, поскольку на 21 день (т.е. через 10 дн. после отмены препарата) статистически значимых изменений не зарегистрировано.

На следующем этапе мы проанализировали влияние вилона при введении его до и во время стресса. Результаты этой серии опытов свидетельствовали о

том, что вилон обладает выраженным протекторным действием, ибо его предварительное введение резко снижало поражаемость СОЖ крыс после ОИС. Эрозии в опытной группе зарегистрированы в 61,7% случаев, а в контрольной группе — в 86,6%. Кроме того, у экспериментальных животных реже формировались крупные эрозии. Отмечено также меньшее количество эрозий в среднем на одно животное: в экспериментальной группе оно составило 1,5±0,9, а в контрольной — 9,7±0,4. У крыс, получавших вилон с протекторной целью, число ЛТА составило 13,66+0,42%, тогда как при введении физраствора было существенно меньше. Следовательно, вилон предохраняет снижение адгезии у стрессированных животных.

Выводы

1. Острый иммобилизационный стресс приводит к уменьшению лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии.

2. Тимомиметик вилон увеличивает адгезию тромбоцитов к лимфоцитам во все дни эксперимента и оказывает протекторное действие при введении его до стресса.

Литература

1. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. // Иммунология. 1999. №4. С. 35-37.

2. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Еделев Д.А. и др. // Иммунология. 2001. №1. С. 43-45.

3. Забродин О.Н. Роль адренергических механизмов в развитии и заживлении экспериментальных

нейрогенных повреждений слизистой желудка (фармакологический анализ): Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. Л., 1982. 42 с.

4. Лиханов И.Д., Кузник Б.И., Абдулаев Х.Р. // Intern. J. Immunorehab. 2002. №4. P. 135.

5. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. Пептидные тимомиметики. СПб.: Наука, 2000.

6. Обыденко В.И., Джулай М.А. // Медицинская иммунология. 2002. Т.4. №2. С. 357-358.

7. Кузник Б.И., Хавинсон В.Х., Витковский Ю.А. и др. Применение пептидных биорегуляторов в хирургии и онкологии. Чита, 2001.

8. Пшенникова М.Г. // Патолог, физиология. 2001. №2. С. 26-30.

9. Солпов А.В. // Тромбоз, гемостаз и реология. 2002. №1. С. 126-129.

10. Чиркунов А.В. Влияние тималина, тимогена и вилона на некоторые показатели иммунитета и гемостаза: Автореф. дис.... канд. мед. наук. Чита, 2000.19 с.

11. Цыбенова Б.Ц., Гаймоленко И.Н. // Проблемы биорегулирующей терапии в эксперименте и клинике. Чита, 2002. С. 74-75.

12. Solpov A., Vitkovsky Yu., Kuznik В. // Thrombosis and Haemostasis. 1999. Suppl, P. 439.

13. Vitkovsky Yu., Kuznik B, Solpov A. // Platelets 2000 Symposium. 18-22 May 2000. Ma'ale Hachamisha, Israel. 2000. P. 32.

14. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. // Thrombosis and Haemostasis. 2001. Suppl, P. 2711.

УДК 615.322:577.112.38:582.683.2].07 Т.В. Орловская

ИЗУЧЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА СЕМЯН КЛОПОВНИКА ПОСЕВНОГО

ГОУ ВПО "Пятигорская ГФА Росздрава", г. Пятигорск

Изучен состав свободных аминокислот семян клоповника посевного. Идентифицировано 15 аминокислот (в том числе 7 незаменимых). Установлено, что суммарное содержание свободных аминокислот в семенах клоповника посевного составляет 13,77%. Основным по содержанию являются аспарагиновая и глутаминовая кислоты, валин, лейцин, аргинин, изолейцин, фенилаланин.

Современная наука о питании рассматривает пишу не только как источник пластического материала и энергии,

но и как комплекс биологически активных веществ (БАВ), регулирующих отдельные функции организма [3].

Дефицит макро- и микроэлементов, витаминов, аминокислот и других БАВ в питании современного человека представляет серьезную проблему.

Один из путей решения этой важной проблемы ведет к необходимости разработки технологий получения комплексов БАВ из естественных источников для введения их непосредственно в пищу или в виде отдельных концентратов в процесс питания.