АНТИТЕЛА, СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С ВНЕКЛЕТОЧНЫМ ДОМЕНОМ ТИРОЗИНКИНАЗНОГО РЕЦЕПТОРА (ALK)

1. Антитело, связывающее белок ALK человека, включающее CDR3 вариабельного района тяжелой цепи с последовательностью, проявляющей, по меньшей мере, 50% идентичности, предпочтительно, по меньшей мере, 60, 70, 75, 85%, более предпочтительно, по меньшей мере, 90% идентичности последовательности SEQ. ID. NO:2.
2. Антитело по п.1, включающее CDR3 вариабельного района тяжелой цепи с последовательностью SEQ. ID. NO:2.
3. Антитело по п.1, где связывание белка ALK человека является специфическим.
4. Антитело по п.1, являющееся фрагментом антитела, scFv антителом или Fab фрагментом.
5. Антитело по п.1, являющееся scFv антителом.
H
L
6. Антитело по п.1, включающее Н3 V домен и λ1 V домен.
H
L
7. Антитело по п.1, в котором каркасные районы V и V являются стабильными и растворимыми, так чтобы сохранять функциональность в восстановительном окружении внутри клетки.
8. Антитело по п.1, включающее каркасный район 4.4.
9. Антитело по п.1, которое связывается с пептидом эпитопа ALK, состоящим из 16 аминокислотных остатков с последовательностью, проявляющей, по меньшей мере, 75% идентичности последовательности SEQ. ID. NO:1.
10. Антитело по п.9, отличающееся тем, что пептид эпитопа ALK имеет последовательность SEQ. ID. NO:1.
D
11. Антитело по п.9 или 10, у которого его сродство к пептиду эпитопа ALK характеризуется K 30 нМ или ниже, предпочтительно 10 нМ или ниже, наиболее предпочтительно ниже 3 нМ.
12. Антитело по п.1, включающее CDR3 вариабельного района легкой цепи с последовательностью, проявляющей, по меньшей мере, 50% идентичности, предпочтительно, по меньшей мере, 60, 70, 75, 85%, более предпочтительно, по меньшей мере, 90% идентичности последовательности SEQ. ID. NO:3.
13. Антитело по п.1, включающее CDR3 вариабельного района легкой цепи с последовательностью SEQ. ID. NO:3.
H
L
14. Антитело по п.1, содержащее V последовательности SEQ. ID. NO:4 и V последовательности SEQ. ID. NO:5.
D
15. Антитело по п.14, включающее, по меньшей мере, одну мутацию, по меньшей мере, в одном из CDR, приводящую к более высокому сродству, характеризуемому K менее приблизительно 3 нМ.
H
L
16. Антитело по п.15, отличающееся тем, что упомянутая мутация или упомянутые мутации находятся в CDR1 или CDR2 V и/или V.
H
17. Антитело по п.15, отличающееся тем, что упомянутая мутация находится в CDR2 V.
18. Антитело по п.1, включающее CDR2 вариабельного района тяжелой цепи, включающий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ. ID. NO:7, SEQ. ID. NO:8, SEQ. ID. NO:9, SEQ. ID. NO:10, SEQ. ID. NO:11, SEQ-ID. NO:12 или SEQ. ID. NO:13.
19. Антитело по п.18, где упомянутым определенным последовательностям CDR2 предшествуют аминокислотные остатки AI и за которыми следуют последовательности SEQ. ID. NO:17.
H
L
20. Антитело по п.1, содержащее V последовательность SEQ. ID. NO:14 и V последовательность SEQ. ID. NO:15.
2
L
H
2
H
L
21. Антитело по п.5, содержащее структуру NH-V-линкер-V-COOH или NH-V-линкер-V-СООН, где линкер имеет последовательность SEQ. ID. NO:16.
22. Антитело по п.1, которое помечено с помощью радиоактивной метки и с помощью токсина.
23. Антитело по п.1, применяемое в качестве лекарства или диагностического инструмента.
24. Применение антитела по любому из предшествующих пунктов для производства лекарственного средства для лечения рака или опухолей.
25. Применение по п.24, при котором лекарственное средство необходимо для ингибирования связывания МК и/или PTN с ALK или опосредованной ALK передачи сигнала.
26. Применение по пп.24 или 25, при котором лекарственное средство является комбинированным, пригодным для введения упомянутого антитела в комбинации с противораковым агентом, например метотрексатом.
27. Применение по п.24, при котором лечение является лечением нейробластомы, глиобластомы, рабдомиосаркомы, карциномы груди, меланомы, рака поджелудочной железы, неходжкинской лимфомы В-клеток, карциномы щитовидной железы, мелкоклеточной карциномы легких, ретинобластомы, саркомы Эвига, рака простаты, рака кишечника, липомы, липосаркомы, фибросаркомы, в частности глиобластомы, нейробластомы и рабдомиосаркомы.
28. Последовательность ДНК, кодирующая антитело по любому из пп.1-21.
29. Экспрессионный вектор, включающий последовательность ДНК по п.28.
30. Клетка хозяина, трансформированная экспрессионным вектором по п.29, в частности клетка E.coli.
31. Способ получения антитела, включающий культивирование клеток хозяина по п.30 в условиях, позволяющих синтез упомянутого антитела и извлечение его из упомянутой культуры.
32. ALK вакцина, включающая выделенный белок ALK или его фрагмент, или нуклеиновую кислоту, кодирующую эпитоп ALK.
33. Вакцина по п.32, которая включает остатки 391-406 выделенного белка ALK.
34. Вакцина по пп.32 или 33, которая состоит из остатков 391-406 выделенного белка ALK, включенного в композицию вместе с носителем, вспомогательным веществом и/или гаптеном для усиления иммунного ответа на белок ALK или его фрагмент.
35. Антитело или его связывающий антиген фрагмент, способный специфически связываться с аминокислотными остатками района, охватывающего аминокислотные остатки 391±3 и 406±3 (SEQ. ID. NO:91), наиболее предпочтительно аминокислоты 391-406 (SEQ. ID. NO:1) выделенного белка ALK или его фрагмента.
36. Антитело по п.35, которое является одноцепочечным антителом (scFv), Fab фрагментом, IgG или IgM.
37. Эпитоп ALK, подходящий для идентификации, скрининга или выработки антител против ALK или его фрагментов, где эпитоп ALK является его фрагментом, включающим или состоящим, в основном, из района, охватывающего аминокислотные остатки 391±3 и 406±3 (SEQ. ID. NO:91), наиболее предпочтительно аминокислотные остатки 391-406 (SEQ. ID. NO:1).
38. Антитело по любому из пп.1-8, которое связывается с эпитопом, являющимся фрагментом, включающим или, в основном, состоящим из района, охватывающего аминокислотные остатки 391±3 и 406±3 (SEQ. ID. NO:91), наиболее предпочтительно аминокислотные остатки 391-406 (SEQ. ID. NO:1).