КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ДЛЯ САЙЛЕНСИНГА АЛЬДЕГИД-ДЕГИДРОГЕНАЗЫ

1. Композиция, содержащая интерферирующую РНК, которая подавляет экспрессию гена альдегид-дегидрогеназы (ALDH), где интерферирующая РНК содержит смысловую цепь и комплементарную антисмысловую цепь, и где интерферирующая РНК содержит двухцепочечный участок длиной от около 15 до около 60 нуклеотидов.
2. Композиция по п. 1, где интерферирующая РНК представляет собой двухцепочечную РНК (дцРНК), выбранную из группы, состоящей из миРНК, дцРНК, являющуюся субстратом для Дайсера, кшРНК, аиРНК, пре-микроРНК, и их комбинации.
3. Композиция по п. 1, где интерферирующая РНК содержит двухцепочечный участок длиной от около 19 до около 25 нуклеотидов.
4. Композиция по п. 1, где интерферирующая РНК химически синтезирована.
5. Композиция по п. 1, где интерферирующая РНК содержит 3′-выступающий конец в одной или в обеих цепях интерферирующей РНК.
6. Композиция по п. 1, где интерферирующая РНК содержит, по меньшей мере, один модифицированный нуклеотид в двухцепочечном участке.
7. Композиция по п. 6, где менее чем около 30% нуклеотидов в двухцепочечном участке составляют модифицированные нуклеотиды.
8. Композиция по п. 6, где модифицированный нуклеотид представляет собой 2′-O-метил (2′ОМе) нуклеотид.
9. Композиция по п. 8, где 2′ОМе нуклеотид содержит 2′ОМе-гуанозин-нуклеотид, 2′ОМе-уридин-нуклеотид или их смесь.
10. Композиция по п. 1, дополнительно включающая фармацевтически приемлемый носитель.
11. Композиция по любому из пп. 1-10, где интерферирующая РНК подавляет экспрессию гена альдегиддегидрогеназы 2 (ALDH2).
12. Частица нуклеиновая кислота-липид, содержащая: (а) интерферирующую РНК по п. 1; (b) катионный липид; и (с) некатионный липид.
13. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 11, где катионный липид включает 1,2-дилинолеилокси-N,N-диметиламинопропан (DLinDMA), 1,2-дилинолеилокси-N,N-диметиламинопропан (DLenDMA), 1,2-ди-γ-линолеилокси-N,N-диметиламинопропан (γ-DLenDMA), их соль или их смесь.
14. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где катионный липид включает 2,2-дилинолеил-4-(2-диметиламиноэтил)-[1,3]-диоксолан (DLin-K-C2-DMA), 2,2-дилинолеил-4-диметиламинометил-[1,3]-диоксолан (DLin-K-DMA), их соль или их смесь.
15. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где катионный липид включает (6Z,9Z,28Z,31Z)-гептатриаконта-6,9,28,31-тетраен-19-ил 4-(диметиламино) бутаноат (DLin-M-C3- DMA), дилинолеилметил-3-диметиламинопропионат (DLin-M-C2-DMA), их соли или их смесь.
16. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где некатионный липид представляет собой фосфолипид.
17. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где некатионный липид представляет собой холестерин или его производное.
18. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где некатионный липид представляет собой холестерин или его производное.
19. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 16 или 18, где фосфолипид включает дипалмитоилфосфатидилхолин (DPPC), дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), или их смесь.
20. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где некатионный липид представляет собой смесь DPPC и холестерина.
21. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, дополнительно включающая конъюгированный липид, который ингибирует агрегацию частиц.
22. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где конъюгированный липид, который ингибирует агрегацию частиц, представляет собой конъюгат полиэтиленгликоль (РЕО)-липид.
23. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 22, где конъюгат PEG-липид выбран из группы, состоящей из конъюгата PEG-диацилглицерин (PEG-DAG), конъюгата PEG-диалкилоксипропил (PEG-DAA), конъюгата PEG-фосфолипид, конъюгата PEG-церамид (PEG-Cer) и их смеси.
24. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 22, где не катионный конъюгат PEG-липид представляет собой конъюгат PEG-DAA.
10
12
14
16
18
25. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 24, где конъюгат PEG-DAA выбран из группы, состоящей из конъюгата PEG-дидецилоксипропил (С), конъюгата PEG-дилаурилоксипропил (С), конъюгата PEG-димиристилоксипропил (С), конъюгата ПЭГ-дипалмитилоксипропил (C), конъюгата PEG-дистеарилоксипропил (C), и их смеси.
26. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 21, где конъюгированный липид, который ингибирует агрегацию частиц, представляет собой конъюгат полиоксазолин (POZ)-липид.
27. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 26, где некатионный конъюгат POZ- липид представляет собой конъюгат POZ-DAA.
28. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где интерферирующая РНК полностью инкапсулирована в частице.
29. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где частица имеет массовое соотношение липид:интерферирующая РНК от около 5:1 до около 15:1.
30. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где частица имеет средний диаметр от около 30 нм до около 150 нм.
31. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где катионный липид составляет от около 50 мол.% до около 65 мол.% от общего липида, присутствующего в частице.
32. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 12, где некатионный липид включает смесь фосфолипида и холестерина или его производного, где фосфолипид составляет от около 4 мол.% до около 10 мол.% общего липида, присутствующего в частице, и холестерин или его производное составляет от около 30 мол.% до около 40 мол.% общего липида, присутствующего в частице.
33. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 32, где фосфолипид составляет от около 5 мол.% до около 9 мол.% общего липида, присутствующего в частице, и холестерин или его производное составляет от около 32 мол.% до около 37 мол.% общего липида, присутствующего в частице.
34. Частица нуклеиновая кислота-липид по п. 21, где конъюгированный липид, который ингибирует агрегацию частиц, составляет от около 0,5 мольных % до около 2 мольных % от общего липида, присутствующего в частице.
35. Фармацевтическая композиция, включающая частицу нуклеиновая кислота-липид по п. 12 и фармацевтически приемлемый носитель.
36. Способ введения интерферирующей РНК, которая подавляет экспрессию гена ALDH в клетке, причем способ включает контакт клетки с частицей нуклеиновая кислота-липид по п. 12.
37. Способ по п. 36, где клетка является клеткой млекопитающего.
38. Способ по п. 36, где контакт с клеткой осуществляется при введении частицы млекопитающему системным путем.
39. Способ по п. 36, где млекопитающее является человеком.
40. Способ по п. 36, где у млекопитающего диагностировали алкоголизм.
41. Способ по п. 36, где интерферирующая РНК подавляет экспрессию гена ALDH2 в клетке.
42. Способ сайленсинга экспрессии гена ALDH у нуждающегося в этом млекопитающего, причем способ включает введение млекопитающему частицы нуклеиновая кислота-липид по п. 12.
43. Способ по п. 42, где частицу вводят системно.
44. Способ по п. 42, где животное является человеком.
45. Способ по п. 44, где человек страдает алкоголизмом.
46. Способ по п. 42, где введение частицы уменьшает уровень РНК ALDH у млекопитающего, по меньшей мере, на примерно 50% по отношению к уровню РНК ALDH при отсутствии частицы.
47. Способ по п. 42, где частица нуклеиновая кислота-липид выключает экспрессию гена ALDH2.
48. Способ лечения и/или улучшения при одном или нескольких симптомах, ассоциированных с алкоголизмом у человека, причем способ включает введение человеку терапевтически эффективного количества частицы нуклеиновая кислота-липид по п. 12.
49. Способ по п. 48, где частицу вводят системно.
50. Способ по п. 48, где человек страдает алкоголизмом.
51. Способ по п. 48, где интерферирующая РНК частицы нуклеиновая кислота-липид ингибирует экспрессию гена ALDH2 у человека.
52. Способ ингибирования экспрессии ALDH у млекопитающего, нуждающегося в этом, причем способ включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества частицы нуклеиновая кислота-липид по п. 12.
53. Способ по п. 52, где частицу вводят системно.
54. Способ по п. 52, где млекопитающее является человеком.
55. Способ по п. 54, где человек страдает алкоголизмом.
56. Способ по п. 52, где введение частицы уменьшает экспрессию гена ALDH у млекопитающего, по меньшей мере, на примерно 50% по отношению к экспрессии гена ALDH при отсутствии частицы.
57. Способ по п. 52, где экспрессия ALDH2 ингибируется у млекопитающего.
58. Способ предотвращения и/или лечения алкоголизма у человека, причем способ включает введение человеку терапевтически эффективного количества частицы нуклеиновая кислота-липид по п. 12.
59. Способ по п. 58, где частицу вводят системно.
60. Способ по п. 58, где человек страдает алкоголизмом.
61. Способ по п. 58, где интерферирующая РНК частицы нуклеиновая кислота-липид ингибирует экспрессию гена ALDH2 у человека.
62. Молекула двухцепочечной миРНК, выбранная из группы, состоящей из Идентификатора 1, Идентификатора 2, Идентификатора 3, Идентификатора 4, Идентификатора 5 и Идентификатора 6, как представлено в Таблице А Примера 4 данного документа.
63. Молекула одноцепочечной РНК, выбранная из молекул одноцепочечных смысловых цепей, представленных в Таблице А Примера 4 данного документа.
64. Молекула одноцепочечной РНК, выбранная из молекул одноцепочечных антисмысловых цепей, представленных в Таблице А Примера 4 данного документа.
65. Применение молекулы миРНК по настоящему изобретению для ингибирования экспрессии гена ALDH в живой клетке.
66. Применение фармацевтической композиции по настоящему изобретению для ингибирования экспрессии гена ALDH в живой клетке.