Изучение острой токсичности средства из растительных компонентов на белых крысах

УДК:619:615.9

ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ СРЕДСТВА ИЗ РАСТИТЕЛЬНЫХ КОМПОНЕНТОВ НА БЕЛЫХ КРЫСАХ

Муравьёва К.В. - аспирант; Хадеев Д.П. - аспирант; Медетханов Ф.А. - д.б.н., доцент, зав. кафедрой Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

Ключевые слова: острая токсичность, белые крысы, оральное введение. Key words: sharptoxic, whiterats, oralintroduction.

Учитывая интенсивное развитие фундаментальных наук, регулярно возникает необходимость создания новых фармакологических веществ, способных в будущем заявить себя как лекарственный препарат. Но, прежде чем внедрить какое либо лекарственное средство, необходимо полное доклиническое изучение его фармакологических свойств, с детальным выявлением специфической активности и безопасности на каждом этапе экспериментального исследования.

Первым этапом доклинического исследования лекарственного средства, является определение острой токсичности.

Целью изучения острой токсичности является определение переносимых, токсических и летальных доз фармакологического вещества и причин наступления гибели животных.

Целью нашего исследования было определение параметров острой токсичности, разработанного нами с использованием растительного сырья средства под лабораторным шифром «КВ».

Для достижения цели была определена следующая задача:

- определить острую токсичность средства «КВ» при интрагастральном способе введения.

Материалы и методы исследования.

Опыты проведены на клинически здоровых самцах и самках белых крыс половозрелого возраста, с исходной массой тела 220-270 г, [3] которых содержали предварительно, в течение 14 суток в помещении вивария для карантинных животных. В эксперименте использовано 20 крыс, из которых были сформированы две группы подопытных животных по принципу пар аналогов, по 10 исследуемых в каждой. Разработанное нами средство «КВ» вводили в желудок однократно оральным методом в дозе 6,0 мл на одно животное, используя желудочный зонд. Указанная доза является максимально допустимой для крыс при данной массе тела [3,6]. Контрольной

группе белых крыс вводили - раствор натрия хлорида 0,9 % (изотонический), в аналогичной дозе. Предварительно, на ночь животных лишали корма, оставляя при этом доступ к питьевой воде. По истечению периода голодания животных взвешивали и вводили тестируемое вещество. После введения средства «КВ» животные также были лишены корма, на 3-4 часа.

За каждым животным наблюдение проводили отдельно, в течение первых 24 часов непрерывно. Особое внимание уделяли первым 5 часам. Начиная со второго дня, на протяжении 14 суток, продолжали вести наблюдения за животными в утренние и вечерние часы с учетом картины интоксикации, проводимой визуально, посредством оценки клинического состояния затравленных крыс. Следили за состоянием кожи и кожного покрова, глаз и слизистых оболочек.

Оценку общего состояния животных после введении средства «КВ» проводили с учетом изменения поведенческих реакций (двигательная активность, груминг, акт приема корма, воды, акт дефекации). Наравне с этим, для оценки общего состояния, учитывали нервно-мышечную возбудимость, некоторые вегетативные функции. По завершении наблюдений измеряли массу тела. Все наблюдения фиксировали систематически, для каждого животного вели отдельные записи.

Эксперименты проводили при строгом соблюдении требований Европейской конвенции «О защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных или иных научных целей» [4,5].

Результаты исследования. Нами установлено, что средство «КВ» в максимально допустимой дозе, при введении внутрь, не вызывает гибели крыс. Однако, в течение первых шести часов после введения средства отмечалось общее угнетенное состояние животных.

У некоторых подопытных крыс наблюдалось диспноэ. У части животных отмечали

брюшной тип дыхания, у некоторых - диа-фрагмальное дыхание. Отмечали снижение двигательной активности, животные забивались в угол, прекращали груминг.

При подсчете количества дыхательных движений установлено резкое урежение их числа, в особенности в группе которым использовали средство «КВ» (таблица 1). В частности, на третий час после затравки животных испытуемым средством, дыхание достоверно понизилось, по отношению к исходным значениям, у самок на 50,4% и самцов на 50,7%, тогда как у контрольных аналогов данные значения у самок были ниже на 5,7% и самцов на 12,6% при р>0,05 соответствен-

но. Такие изменения со стороны органов дыхания у контрольных животных, в первые часы после введения изотонического раствора хлорида натрия, мы склонны связать с большим количеством введенного средства и как следствие, возникновение стресса.

Все вышеперечисленные симптомы прекращались по истечении 6-12 часов, и полное восстановление функций происходило по истечении суток. Животные внешне выглядели вполне здоровыми, активно совершали груминг, функционирование органов дыхания становилось полноценным, и количество дыхательных движений укладывалось в пределы физиологической нормы.

Таблица 1 - Динамика дыхательных движений белых крыс при использовании средства «КВ» в

максимально допустимой дозе

§ Й Количество дыхательных движений

Пол и группа н 3 о В о С Г О ив ^ к £ * После введения, час

До введения 3 6 12 24

самки 10 121,1+0,96 60,1+0,72** 90+1,26** 116,1+1,37 122,6+1,87

самцы 10 130,1+0,82 64,1+1,04** 96,8+1,93** 123,6+3,28 130,6+1,12

самки 10 121,5+1,19 114,6+1,83 115,5+2,15 130,5+1,76 122,6+1,87

самцы 10 138,6+2,85 121,1+2,96 133,5+1,57 140,5+1,19 141,0+1,13

Примечание: *,** - уровни достоверности различия, соответственно р<0,01; <0,001 Таблица 2 - Масса тела белых крыс при использовании средства «КВ» в максимально допустимой

дозе

Пол и группа Количество Масса тела, г Разница от первоначальной массы

животного животных На начало опыта В конце опыта

опытная 10 249,8+0,52 261,0+0,49 + 11,1 +4,4

контрольная 10 251,3+1,46 259,0+2,08 +7,7 +3,06

опытная 10 224,5+1,62 236,5+1,69 +12 +5,3

контрольная 10 226,0+1,88 236,3+1,62 +10,3 +4,5

Примечание: уровни достоверности ра

Изучая особенности токсического действия средства «КВ» на массу тела, при использовании per os установлено, что животные обеих групп прибавили в приросте живой массы, хотя у опытных крыс данный показатель был несколько выше, чем у кон-

:, соответственно р>0,05.

трольных аналогов (таблица 2). В частности, разница от первоначальной массы у самцов опытной группы составила 4,4%, тогда как в контроле эти значения находились на уровне 3,06 , что ниже на 1,34%. А в группе самок эта разница была не существенной и соста-

вила менее 1,0%.

В период исследования гибели животных не наблюдали. Ввиду этого среднесмер-тельную дозу ЛД50 определить не удалось.

Заключение. Таким образом, анализируя полученные данные можно заключить, что использование средства «КВ» внутрь в максимально допустимой дозе не сопровождается гибелью затравленных животных. Исходя из этого, руководствуясь классификацией Л.И. Медведь, Ю.С. Кагана, Е.И. Спыну (1968), [2] принятой в настоящее время ВОЗ, про исследованное нами средство на данном этапе можно отнести к группе малотоксичных веществ, и, в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 - по степени токсичности к 4 классу опасности - вещества малоопасные.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Медведь, Л.И. Пестициды и проблема здравоохранения / Л.И. Медведь, Ю.С.Каган, Е.И. Спыну // Журнал Всесоюз-

ного химического общества. - 1968. - Т.8 -№3. - С.263-271.

2. Миронов, А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М., -2012. - 944 с.

3. Страсбург, 1986 г. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: www.msu.ru/bioetika/ doc/konv.doc.

4. Федерального закона Российской Федерации «О защите животных от жестокого обращения» от 01.01.1997 г. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http: //www .consultant .ru/ document/.

5. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Р.У. Хабриева. - 2 изд., пе-рераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832 с.

ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ СРЕДСТВА ИЗ РАСТИТЕЛЬНЫХ КОМПОНЕНТОВ

НА БЕЛЫ1Х КРЫСАХ

Муравьёва К.В., Хадеев Д.П., Медетханов Ф.А.

Резюме

Статья посвящена выявлению специфической активности и безопасности средства разработанного на основе растительных компонентов. Изучены параметры острой токсичности средства «КВ» на основе растительных компонентов, при однократном пероральном введении в максимально допустимой дозе. По результатам исследования испытуемое средство отнесено к веществам малоопасным (4 класс опасности).

STUDY OF ACUTE TOXICITY OF MEANS FROM VEGETABLE COMPONENTS ON

WHITE RATS

Muravyova K.V., Khadeev D.P., Medetkhanov F.A.

Summary

The article is devoted to the identification of specific activity and safety of the agent developed on the basis of plant components. Parameters of acute toxicity of the "KV" agent on the basis of plant components were studied, with a single oral administration at the maximum permissible dose. According to the results of the study, the test substance is classified as a low-hazard substance (hazard class 4).