Противоопухолевая активность некоторых производных алкалоида - анабазина

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

11

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

ВЛИЯНИЕ АРГЛАБИНА НА ДНК И НУКЛЕОТИДЫ

С.М. Адекенов1, Н.С. Жангабылов1, Л.Ю. Дедерер2, Л.Б. Горбачева2, А.Е. Гуляев1 Институт фитохимии МОН РК, Караганда 2Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва

Задачи исследования. В данной работе изучено взаимодействие гидрохлорида диметиламиноарглаби-на (АГ) (субстанция препарата Арглабин, разработанного на основе одноименного сесквитерпенового у-лактона, выделенного из эндемичного растения полыни гладкой Artemisia glabella Kar. et Kir.) с ДНК и азотистыми основаниями в условиях in -vitro.

Материалы и методы. Объектом исследования являлся АГ. Для определения взаимодействия АГ с ДНК и азотистыми основаниями использовали следующие соединения (Serva): деградированная ДНК спермы лосося, нуклеотиды ДНК (дезоксиаденозинмоно-фосфат (dAMP), дезоксигуанозинмонофосфат (dGMP), дезоксицитидинмонофосфат (dCMP), дезокситимидин-монофосфат (dTMP)).

При изучении взаимодействия АГ с деградированной ДНК спермы лосося использован сравнительный анализ электронных спектров поглощения (ЭСП) продуктов реакции ДНК с АГ и исходной ДНК. Регистрировали ЭСП продуктов реакции на спектрофотометре «Specord М40». Полученные спектры сравнивали со спектрами ДНК, концентрация которой была равна концентрации в реакционной смеси с АГ после раз-

бавления. Точность измерения D составляла ~0,003 опт. ед., ошибка эксперимента составляла 1,1 %.

Для изучения взаимодействия АГ с азотистыми основаниями также использован сравнительный анализ ЭСП продуктов реакции этих оснований с АГ и исходных оснований. Регистрировали ЭСП продуктов реакции на спектрофотометре. Полученные спектры сравнивали со спектрами соответствующих де-зоксинуклеотидов, концентрация которых была равна их концентрации в реакционной смеси с АГ после разбавления.

Результаты. Установлено, что АГ реагирует в условиях in vitro с деградированной ДНК при инкубации при 4 °С на протяжении 2 сут. Выявлено, что в условиях данных экспериментов наблюдается взаимодействие АГ с пуриновыми и пиримидиновыми основаниями, причем в большей степени с dAMP и dGMP, чем с dTMP и dCMP.

Выводы. Таким образом, на основании полученных данных можно предположить, что противоопухолевая активность препарата Арглабин частично зависит от взаимодействия гидрохлорида диметиламино-арглабина с ДНК и азотистыми основаниями ДНК.

ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ПРОИЗВОДНЫХ АЛКАЛОИДА - АНАБАЗИНА

О.А. Аймаков1, Т.Н. Луговицкая1, В.К. Красноштанов2, КА. Тойбаева2 !Кокшетауский государственный университет им. Ш. Уалиханова, Казахстан 2КазНИИ онкологии и радиологии Минздрава РК, Алматы, Казахстан

В данной работе сообщается о биологической активности солей дитиокислот фосфора на основе алкалоида - анабазина. Исследования специфической активности и токсичности тиосолей анабазина в лаборатории экспериментальной терапии опухолей КазНИИ онкологии и радиологии показали, что препараты об-

ладали различной активностью по отношению к экспериментальным опухолям животных.

Исследования противоопухолевой активности препаратов - Анабазиний 0,0-диэтил-, 0,0-дибутил (дитиофосфаты) и Анабазиний N-пиперидил-О-изоп-ропилдитиофосфат проводили in vivo на мышах с

№2/томЗ/2004

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

12

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

прививаемым лимфоцитарным лейкозом Р-388. Лечение начинали через 24 ч после трансплантации опухоли: препараты в дозах 1 мг/кг; 10 мг/кг; 20 мг/кг; 50 мг/кг; 100 мг/кг вводили в течение 5 дней внутрибрюшинно.

Результаты исследований показали, что представленные препараты малотоксичны и обладают выраженной противоопухолевой активностью в пределах 56-94 %, особенно Анабазиний ЪТ-пиперидил -0-изоп-ропилдитиофосфат. Наибольший терапевтический эффект на опухоли Эрлиха оказывала доза 10мг/кг, вызывая торможение роста опухоли до 88-94 %, не проявляя при этом высокой токсичности. Таким же эффектом обладает Анабазиний 0,0-диэтилдитиофосфат.

Для испытания химиопрепаратов использовалась прививаемая асцитная опухоль Эрлиха, прививаемая опухоль яичника крыс и лекарственно-устойчивый вариант. Опухоли прививались путем внутрибрюшин-

ных инъекций 5 млн. клеток в растворе Хенкса. Препараты вводили внутрибрюшинно через 48 ч после трансплантации опухоли ежедневно в течении 5 дней (5-кратно). Торможение роста опухоли (ТРО) оценивали по формуле:

ТРО = N. - N /Кх 100%,

кок 5

где - среднее количество клеток в опухолях контрольной группы в млн.;

Ио - среднее количество клеток в опытной группе в млн.

В результате клинических исследований химиопрепаратов наибольший терапевтический эффект проявили дозы 10 мг/кг и 20 мг/кг, вызывая торможение роста опухоли до 88-94 % и без высокой токсичности.

Необходим дальнейший поиск соединений среди анабазиниевых солей дитиокислот фосфора и разработка новых химиопрепаратов с гетероциклическими радикалами в области эфиров дитиокислот фосфора.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ПОДХОДЫ К КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СОНОДИНАМИЧЕСКОГО УЛЬТРАЗВУКОВОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ

Н.В. Андронова1, А.Л. Николаев2, Е.М. Трещалина1, Г. К. Герасимова1, А.В. Гопин2, Д.В. Филоненко1, О.Л. Калия3, Г.Н. Ворожцов3

Введение. Локальное ультразвуковое воздействие (УЗ) мощностью 2-3 Вт/см2 с использованием соносенсибилизирующих (ССБ) противоопухолевых препаратов позволяет существенно повысить избирательность повреждения опухоли. На мышах и крысах с в/м привитыми опухолями было выявлено ССБ-дейсгвиетераф-тала (ТФ), каталитической системы ТФ+аскорбиновая кислота (АК), цисплатина (ЦП) и карбоплатина (КП). Показано аддитивное усиление ССБ-эффекта ТФ+АК в комбинации с ЦП с усилением нефротоксичности. В настоящем исследовании изучено ССБ-действие доксо-рубицина, метотрексата, фторурацила и сарколизина в сравнении с цисплатином и карбоплатином и ТФ+АК.

Материал и методы. На мышах с развившимися в/м Са-755 и меланомой В-16 (Уср=0,8-1,5 см3), а также на беспородных крысах с развившимся в/м РС-1 (Уср=4,0-10,0 см3) изучали эффективность комбинированной терапии (КТ) с использованием локального ультразвукового облучения (УЗ) и системной химиотерапией (ХТ) (сонодинамическое воздействие). УЗ проводили в течение 10 мин на оригинальной установке УСДТ в водной среде одновременно с 2 полей с частотами 0,88 и 2,64 МГц общей мощностью до 4 Вт/см2. Комбинированная терапия (КТ) проведена с цисплатином, карбоплатином, доксорубици-

’ГУРОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва 2МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва 3ФГУП «ГНЦ «НИОПИК», Москва

ном, метотрексатом, фторурацилом, сарколизином, ТФ+АК, которые вводили парентерально в диапазоне доз от У а до максимально переносимой (МПД). Об эффективности КТ судили в серии опытов по времени удвоения объема опухоли т в сравнении с группой без лечения (контроль) и с группой, получавшей только УЗ. Эксперименты выполнены под контролем патоморфоза в опухоли: гистологическое, электронно-микроскопическое и иммуногистохимичес-кое исследования.

Результаты. Установлено, что эффективность ци-тостатиков или ТФ+АК при сочетании с УЗ повышается в 2-3 раза. Показано, что добавление АК не влияет на сонодинамические свойства ТФ. Лучшие результаты получены при комбинированном применении УЗ с ТФ, сарколизином, Д>5. Сонодинамическое воздействие приводит к усилению апоптоза в опухоли, способствует нарушению мембран клеток митохондрий и ядер опухолевых клеток и усиливает антиангио-генный эффект УЗ.

Заключение. КТ опухолей с использованием локального УЗ и цитостатиков приводит к выраженной задержке роста, связанной с повреждением клеточных мембран, усилением гибели клеток через апоптоз и снижением ангиогенеза в опухоли.

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

№2/томЗ/2004