НОВЫЕ АЛКИЛИРУЮЩИЕ СРЕДСТВА
NEW ALKYLATING AGENTS

Настоящее изобретение относится к новому классу алкилирующих средств, включающих тиено-индольный фрагмент, связанный с ДНК-связывающим фрагментом, способам их получения, фармацевтической композиции, их содержащей, и к их применению в лечении определенных опухолей у млекопитающих.
В настоящее время доступным является широкий диапазон химических веществ для лечения различных видов рака. Несмотря на попытки проведения направленных против рака исследований, рак остается грозной и трудноуловимой целью, поэтому потребность в новых противораковых средствах все еще сохраняется.
Алкилирующими средствами являются цитотоксические средства, которые были использованы для лечения рака в течение свыше шести десятков лет, при этом их спектр продолжает расти. Указанные средства действуют в течение всех фаз клеточного цикла прямо на ДНК, вызывая разрыв нитей ДНК, приводящий к аномальному спариванию оснований, ингибированию клеточного деления, и в конечном счете, к клеточной гибели.
Настоящее изобретение предоставляет новый класс алкилирующих средств, содержащих тиено-индольный фрагмент, связанный с ДНК-связывающим фрагментом.
Тиено-индольные производные описаны в патенте GB2344818; некоторые конкретные соединения указанных выше патентных заявок исключены из общей формулы настоящего изобретения.
Таким образом, первым объектом настоящего изобретения является предоставление соединения формулы (I) или (II):
где R1 и R2, взятые вместе, образуют группу (D) или (G):
1
4
1
4
1
4
где R5 означает водород, линейный или разветвленный C-C алкил, линейный или разветвленный C-C гидроксиалкил или линейный или разветвленный C-C аминоалкил;
1
4
1
4
R3 и R4 означают, каждый независимо, водород или группу, выбранную из необязательно замещенного линейного или разветвленного C-C алкила и линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила;
R6 означает уходящую группу;
T отсутствует или означает N;
BM является ДНК-связывающим фрагментом формулы (V):
где:
1
4
2
4
2
4
X отсутствует, означает линейный или разветвленный C-C алкил, линейный или разветвленный C-C алкенил или линейный или разветвленный C-C алкинил;
Y и Y' означают независимо необязательно замещенный арил или гетероарил;
U является фрагментом формулы (VI) или (VII):
где R3 является таким, как определено выше;
q является целым числом, равным от 0 до 4;
L1 означает водород или L, где L отсутствует или означает расщепляемый при определенных условиях фрагмент;
W1 отсутствует или означает саморасщепляющуюся систему, содержащую одну или более саморасщепляющуюся группу;
Z1 отсутствует или означает пептидный, непептидный линкер или гибрид пептидного и непептидного линкера;
при условии, что соединение формулы (I) или соединение формулы (II), где L1 означает водород
исключается, когда
1) оба T и X отсутствуют, q равно 0 и
Y' означает гетероциклильный фрагмент формулы (VIII), (VIII)' или (VIII)'':
или
2) оба T и X отсутствуют, q равно 1, U означает группу формулы (VII),
Y является гетероциклильным фрагментом формулы (IX):
и
Y' означает гетероциклильный фрагмент формулы (VIII)''':
2
5
2
2
где Q является N или O, и R21 означает водород или группу, выбранную из -N(CH) и -C(NH)NH;
и
и его фармацевтически приемлемых солей.
Цитотоксические лекарственные средства действуют на быстро пролиферирующие клетки посредством различных механизмов, обычно препятствуя прямо или косвенно репликации ДНК. Хотя эта терапия представляется эффективной для различных типов опухолей, она может иметь некоторые ограничения: препятствуя клеточной пролиферации, она также воздействует и на нормальные клетки, которые часто пролиферируют, такие как клетки костного мозга, клетки желудочно-кишечного тракта и на фолликулы волос. Концентрации лекарственных средств, которые должны полностью уничтожить опухоль, не могут быть достигнуты из-за дозолимитирующих побочных воздействий на эти ткани, приводящих к иммуносупрессии, токсичности для желудочно-кишечного тракта и потере волос.
Кроме того, цитотоксические лекарственные средства проявляют в некоторых случаях неоптимальные физико-химические свойства, и у них могут отсутствовать подходящие фармакокинетические характеристики, что ограничивает их использование для больных.
Конъюгирование цитотоксических лекарственных средств с молекулами, способными переносить лекарственное средство и, таким образом, улучшающими таргетирование опухоли или способными модифицировать их фармакокинетические характеристики, является одной из стратегий, которые были предприняты для решения описанных выше проблем. Различные примеры конъюгирования цитотоксических лекарственных средств с белками, пептидами или аптамером, полимерами или наночастицами, способствующими лучшей доставке к мишени, улучшающими растворимость и, в некоторых случаях, другие фармакокинетические характеристики, такие как увеличение времени полужизни или локальной концентрации лекарственного средства и улучшение практических характеристик лекарственного средства, были описаны. Действительно, полученные конъюгаты улучшали характеристики на примере растворимости, проницаемости в клетку, терапевтического окна in vivo, контролируемого высвобождения, способности достигать мишени согласно природе конкретной молекулы, конъюгированной с цитотоксическим средством.
По этой причине, повышается потребность в развитии функционализированных цитотоксических средств, подходящих для конъюгирования с различными типами молекул.
Настоящее изобретение предоставляет также функционализированные алкилирующие средства, которые, кроме обладания цитотоксической активностью, также являются подходящими для конъюгирования с различными типами нуклеофилов.
Исходя из этого, второй целью настоящего изобретения является предоставление соединения формулы (III) или (IV):
,
где
BM означает ДНК-связывающий фрагмент формулы (V)':
где:
X, Y, U, Y' и q являются такими, как определено выше;
A является атомом, выбранным из -O-, -NH-, -CO-;
A' отсутствует или означает А, где A является таким, как определено выше;
L отсутствует или означает расщепляемый в определенных условиях фрагмент;
W отсутствует или означает саморасщепляющуюся систему, содержащую одну или более саморасщепляющуюся группу;
Z отсутствует или означает пептидный, непептидный линкер или гибрид пептидного и непептидного линкера;
RM отсутствует или означает реакционноспособный фрагмент, соединенный с одним или более из A, L, W или Z;
RM1 отсутствует или означает реакционноспособный фрагмент, соединенный с одним или более из L1, W1 или Z1;
и R1, R2, R3, R4, R6, T, BM, L1, W1 и Z1 являются такими, как определено выше;
при условии, что
1) соединение формулы (IV) исключается, когда A' отсутствует, и RM1 отсутствует;
2) соединение формулы (III) или (IV) отсутствует, когда
a) оба T и X отсутствуют, q равно 0, и
IV
Y' является гетероциклильным фрагментом формулы (VIII):
где
1
4
1
4
Q означает -O-, -S-, -NR14, где R14 означает водород, C-Cалкил или C-C гидроксиалкил;
Q1 означает -CH= или -N=;
1
4
2
R7 и R8 означают независимо водород, галоген, гидрокси, C-C алкокси, циано, -NCOOR3, -C(NH)-NH или -NR3R4, где R3 и R4 являются такими, как определено выше;
или
b) оба T и X отсутствуют, q равно 1 или 2, U означает группу формулы (VII),
Y означает гетероциклильный фрагмент формулы (IX)':
IV
и Y' означает гетероциклильный фрагмент формулы (VIII):
где Q, Q1, R7 и R8 являются такими, как определено выше;
и его фармацевтически приемлемых солей.
Следует отметить, что когда L1 означает водород или расщепляемый в определенных условиях фрагмент, и связь O-L1 расщепляется с образованием ОН-функции, тогда соединения формулы (II) или (IV) могут быть превращены в соединения формулы (I) или (III), соответственно, посредством хорошо описанного в литературе механизма реакции (см., например, Baiard, R; et al., J. Am. Chem. Soc. 1963, 85, 567-578; Zhao, R.Y. et al. J. Med. Chem. 2012, 55, 766-782.)
Кроме того, следует отметить, что соединение формулы (III) имеет одну функциональную группу:
в то время как соединение формулы (IV) может иметь одну или две функциональные группы.
Конкретнее, соединение формулы (IV) имеет функциональную группу, когда:
A' означает A, и L1 означает водород, как в соединении формулы (IV)':
или
A' отсутствует, и L1 не является водородом, как в соединении формулы (IV)''':
поскольку L, W, Z и/или RM не могут быть прямо связаны с BM.
Соединение формулы (IV) имеет две функциональные группы, когда
A' означает A, и L1 означает L, как в соединении формулы (IV)'':
Настоящее изобретение также предоставляет способы синтеза соединений формулы (I), (II), (III) и (IV), полученных способом, состоящим из стандартных синтетических превращений и включающим изомеры, таутомеры, гидраты, сольваты, комплексы, метаболиты, пролекарства, носители, N-оксиды.
Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения рака, который включает введение млекопитающему, при необходимости, эффективного количества соединения формулы (I), (II), (III) или (IV), как определено выше. Млекопитающим, нуждающимся в лечении, может быть, например, человек.
Настоящее изобретение также предоставляет соединение формулы (I), (II), (III) или (IV), как определено выше, для применения в способе лечения рака, нарушений клеточной пролиферации и вирусных инфекций.
Предпочтительно, соединение формулы (I), (II), (III) или (IV), как определено выше, предназначается для применения в способе лечения конкретных типов рака, включающих, но не ограниченных ими: карциному, такую как карцинома мочевого пузыря, молочной железы, толстой кишки, почки, печени, легкого, включая мелкоклеточный рак легкого, пищевода, желчного пузыря, яичника, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, предстательной железы и кожи, включая плоскоклеточную карциному; гематобластозы лимфоидного ряда, включая лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточный лейкоз и лимфому Беркитта; гематобластозы миелоидного ряда, включающие острые и хронические миелобластные лейкозы, миелодиспластический синдром и промиелоцитарный лейкоз; опухоли мезенхимального происхождения, включающие фибросаркому и рабдомиосаркому; опухоли центральной и периферической нервной системы, включающие астроцитому, нейробластому, глиому и шванномы; другие опухоли, включающие меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродерму, кератоксантому, фолликулярный рак щитовидной железы, саркому Капоши и мезотелиому.
Кроме того, соединение формулы (I), (II), (III) или (IV), как определено выше, предназначается для применения в способе лечения конкретных нарушений клеточной пролиферации, таких как, например, доброкачественная гиперплазия предстательной железы, семейный аденоматоз толстой кишки (FAP), нейрофиброматоз, псориаз, пролиферация гладкомышечных клеток сосудов, связанная с атеросклерозом, фиброз легких, артрит, гломерулонефрит и послеоперационный стеноз и рестеноз.
Кроме того, соединение формулы (I), (II), (III) или (IV), как определено выше, предназначается для применения в способе ингибирования ангиогенеза и метастазирования опухоли, а также в способе лечения отторжения трансплантата органа и реакции “трансплантат против хозяина”.
Настоящее изобретение также предоставляет фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединений формулы (I), (II), (III) или (IV) или их фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель и/или разбавитель.
Настоящее изобретение также предоставляет фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы (I), (II), (III) или (IV) и одно или более химиотерапевтическое средство.
Настоящее изобретение также предоставляет фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы (I), (II), (III) или (IV), в сочетании с известными противораковыми терапиями, такими как лучевая терапия или химиотерапия в комбинации с цитостатическими или цитотоксическими средствами, средствами типа антибиотиков, алкилирующими средствами, антиметаболитами, гормональными средствами, иммунологическими средствами, средствами типа интерферона, ингибиторами циклооксигеназы (например, ингибиторы COX-2), ингибиторами матриксных металлопротеиназ, ингибиторами теломеразы, ингибиторами тирозинкиназы, средствами, направленными против рецептора фактора роста, анти-HER2 средствами, анти-EGFR средствами, средствами, направленными против ангиогенеза (например, ингибиторы ангиогенеза), ингибиторами фарнезилтрансферазы, ингибиторами сигнальной трансдукции ras-raf, ингибиторами клеточного цикла, другими ингибиторами cdks, тубулинсвязывающими средствами, ингибиторами топоизомеразы и тому подобное.
Кроме того, изобретение предоставляет продукт, содержащий соединение формулы (I), (II), (III) или (IV), или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, и одно или более химиотерапевтическое средство, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в противораковой терапии.
В еще одном аспекте изобретение предоставляет соединение формулы (I), (II), (III) или (IV) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, для применения в качестве лекарственного средства.
Кроме того, изобретение относится к применению соединения формулы (I), (II), (III) или (IV) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, в получении лекарственного средства с противораковой активностью.
В конечном итоге, изобретение относится к применению соединения формулы (I), (II), (III) или (IV) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, в получении конъюгатов.
Если не указано иное, следующие термины и фразы, которые используются в данном документе, имеют следующие значения.
1
4
Под термином “линейный или разветвленный C-C алкил”, авторы изобретения подразумевают любую из групп, такую как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил.
1
4
Под термином “линейный или разветвленный C-C гидроксиалкил”, авторы изобретения подразумевают любую из групп, такую как, например, 2-гидроксиэтил, 3-гидроксипропил, 2-гидроксипропил, 4-гидроксибутил, 3-гидроксибутил, 2-гидроксибутил.
1
4
Под термином “линейный или разветвленный C-C алкокси”, авторы изобретения подразумевают любую из групп, такую как, например, метокси, этокси, пропокси, и т.д.
Под термином “галоген”, авторы изобретения подразумевают фтор, хлор, бром или йод.
1
4
Под термином “линейный или разветвленный C-C аминоалкил”, авторы изобретения подразумевают любую из групп, такую как, например, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 4-аминобутил, 3-аминобутил, и т.д.
3
8
Термин “C-C циклоалкил”, используемый в данном документе, относится к насыщенному или ненасыщенному неароматическому цельноуглеродному моноциклическому кольцу, которое может состоять из одного кольца или двух или более колец, конденсированных вместе. Примеры включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклопентадиенил, циклогексил, циклогексенил, 1,3-циклогексадиенил, декалинил и 1,4-циклогексадиенил.
4
8
Термин “гетероциклил”, используемый в данном документе, относится к насыщенному или ненасыщенному неароматическому C-C карбоциклическому кольцу, которое может состоять из одного кольца или двух или более колец, конденсированных вместе, где от 1 до 4 атомов углерода заменены на гетероатомы, такие как азот, кислород, сера, где указанные выше гетероатомы могут быть прямо соединены друг с другом; азот и сера могут необязательно быть окисленными, и азот может необязательно быть кватернизованным. Неограничивающими примерами гетероциклильных групп являются, например, тетрагидрофуранил, пирролидинил, пиперидинил, 1,4-диоксанил, декагидрохинолинил, пиперазинил, оксазолидинил и морфолинил.
Термин “арил”, используемый в данном документе, относится к моно-, би- или поликарбоциклическому углеводороду из 1-4 кольцевых систем, необязательно дополнительно конденсированных или связанных друг с другом простыми связями, где по меньшей мере одно из карбоциклических колец является ароматическим, где термин “ароматический” относится к полностью конъюгированной π-электронной системе. Неограничивающими примерами таких арильных групп являются фенильные, α- или β-нафтильные или антраценильные группы.
1
Термин “гетероарил”, используемый в данном документе, относится к ароматическим гетероциклическим кольцам, обычно 4-7-членным гетероциклам, с 1-4 гетероатомами, выбранными среди кислорода, азота и серы, где азот и сера могут необязательно быть окисленными, и азот может необязательно быть кватернизированным; указанное выше гетероарильное кольцо может быть необязательно дополнительно конденсированным или связанным с одним или двумя или более кольцами, конденсированными вместе, ароматическими и неароматическими карбоциклическими и гетероциклическими кольцами. Гетероатомы могут быть связанными друг с другом напрямую. Примеры гетероарильных групп включают, но не ограничиваются ими, пиридинил, пиримидинил, фуранил, пирролил, триазолил, пиразолил, пиразинил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, имидазолил, тиенил, индолил, бензофуранил, бензимидазолил, бензотиазолил, пуринил, индазолил, бензотриазолил, бензизоксазолил, хиноксалинил, изохинолил и хинолил. В одном варианте осуществления изобретения гетероарильная групп содержит 1-4 гетероатома. Следует отметить, что “C гетероарильная группа” означает, что только один углерод присутствует в кольцевой системе гетероароматической группы (атомы углерода в необязательных заместителях, таким образом, не считаются). Примером такой гетероароматической группы является тетразолильная группа.
1
6
7
12
Термин “уходящая группа” относится к группе, которая может быть замещена другой группой в реакции замещения. Подобные уходящие группы являются хорошо известными в данной области техники, и их примеры включают, но не ограничиваются ими, галогенид (фторид, хлорид, бромид и йодид), азид, сульфонат (например, необязательно замещенный C-Cалкансульфонат, такой как метансульфонат и трифторметансульфонат, или необязательно замещенный C-Cалкилбензолсульфонат, такой как п-толуолсульфонат), сукцинимид-N-оксид, п-нитрофеноксид, пентафторфеноксид, тетрафторфеноксид, карбоксилат, аминокарбоксилат (карбамат) и алкоксикарбоксилат (карбонат). Что касается замещений у насыщенного углерода, галогениды и сульфонаты являются предпочтительными уходящими группами. Что касается замещений у карбонильного углерода, галогенид, сукцинимид-N-оксид, п-нитрофеноксид, пентафторфеноксид, тетрафторфеноксид, карбоксилат или алкоксикарбоксилат (карбонат) могут, например, быть использованы в качестве уходящей группы. Термин “уходящая группа” также относится к группе, которая удаляется в результате реакции элиминирования, например, электронного каскада реакций или реакции спироциклизации. В этом примере, галогенид, сульфонат, азид, аминокарбоксилат (карбамат) или алкоксикарбоксилат (карбонат) могут, например, быть использованы в качестве уходящей группы.
Термин “активированный сложный эфир” относится к функциональной группе, в которой алкоксигруппа сложноэфирного фрагмента является хорошей уходящей группой. Примеры таких алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, сукцинимид-N-оксид, п-нитрофеноксид, пентафторфеноксид, тетрафторфеноксид, 1-гидроксибензотриазол и 1-гидрокси-7-азабензотриазол и группы со сравнимой способностью для уходящей группы. Незамещенные, основанные на алкиле алкоксигруппы, такие как метокси, этокси, изопропокси и трет-бутокси, не квалифицируются как хорошие уходящие группы, и поэтому метиловые, этиловые, изопропиловые и трет-бутиловые сложные эфиры не предполагаются быть активированными эфирами.
Термин “нуклеофилы” относится к молекулам, которые несут нуклеофильную группу. Термин “нуклеофильная группа” относится к молекуле, которая отдает пару электронов электрофильной группе с образованием химической связи в химической реакции. Примеры таких нуклеофильных групп включают, но не ограничиваются ими, галогены, амины, нитраты, азиды, спирты, алкоксидные анионы, карбоксилатные анионы, тиолы, тиолаты и т.д.
Термин “электрофильная группа” относится к молекуле, которая принимает пару электронов от нуклеофильной группы с образованием химической связи в химической реакции.
Примеры таких электрофильных групп включают, но не ограничиваются ими, сложные эфиры, альдегиды, амиды, кетоны и т.д.
Термин “алкилирующий фрагмент" относится к структуре, которая остается после разрыва одной или более расщепляемых связей и которая может или не может ковалентно связываться с полинуклеотидной нитью.
Термин “неприродная аминокислота” относится к D-стереоизомеру природной аминокислоты.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I), (II), (III) или (IV) включают соли присоединения кислоты с неорганическими или органическими кислотами, например, азотной, хлористоводородной, бромистоводородной, серной, хлорной, фосфорной, уксусной, трифторуксусной, пропионовой, гликолевой, фумаровой, молочной, щавелевой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансульфоновой, изетионовой и салициловой кислотой.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I), (II), (III) или (IV) также включают соли с неорганическими или органическими основаниями, например, щелочными или щелочноземельными металлами, особенно гидроксидами натрия, калия, кальция, аммония или магния, карбонатами или бикарбонатами, ациклическими или циклическими аминами.
Если стереогенный центр или другая форма изомерного центра присутствует в соединении согласно настоящему изобретению, все формы такого изомера или изомеров, включая энантиомеры и диастереомеры, предназначены быть охваченными изобретением. Соединения, содержащие стереогенный центр, могут быть использованы в виде рацемической смеси, обогащенной энантиомером смеси, или рацемическая смесь может быть разделена с использованием хорошо известных методик, и может быть использован только индивидуальный энантиомер. В случаях, когда соединения имеют ненасыщенные углерод-углеродные двойные связи, оба цис (Z) и транс (E) изомеры входят в объем данного изобретения.
В случаях, когда соединения могут существовать в таутомерных формах, каждая форма рассматривается как включенная в данное изобретение, существующая в равновесии или предпочтительно в одной форме.
ДНК-связывающий фрагмент BM
BM-фрагмент представляет собой связывающий фрагмент, который связывает или ассоциирует соединение формулы (I), (II), (III) или (IV) с двухцепочечной ДНК. Связывающий фрагмент может улучшать аффинные свойства производных по отношению к ДНК или улучшать способность алкилирующего средства алкилировать или таргетировать различные последовательности ДНК с тем, чтобы модулировать специфичность соединений как мишеней.
Предпочтительно, у соединения формулы (I) или (II) BМ- фрагмент представляет собой группу формулы (V), как определено выше,
где
2
4
X отсутствует или означает C-C алкенил формулы (XIV):
где R3, независимо одинаковый или различный, является таким, как определено выше;
U и q являются такими, как определено выше;
Y, если присутствует, означает группу, выбранную из:
и
Y’ означает группу, выбранную из:
2
1
6
1
6
2
где R3 является таким, как определено выше, и R15, R16 и R20 означают независимо водород, галоген, гидрокси, NO, необязательно замещенный линейный или разветвленный C-C алкил или C-C алкокси, циано, -COOH, -CONH-R3, -N-C(O)O-R3, -C(NH)-NH или -NR3R4, в котором R3 и R4 являются такими, как определено выше.
1
4
Согласно настоящему изобретению и если не предусмотрено иное, указанные выше группы R3, R15, R16 и R20 могут быть необязательно замещенными, в любом из свободных положений, одной или более группами, например, 1-3 группами, независимо выбранными из: алкокси, гидрокси, амино, линейной или разветвленной C-C алкиламиногруппы, диалкиламиногруппы, аминокарбонила, гетероциклила и гетероциклилалкила. В свою очередь, по возможности, каждый из описанных выше заместителей может быть дополнительно замещен одной или более указанными выше группами.
Более предпочтительно, у соединения формулы (I) или (II) BM-фрагмент представляет собой группу формулы (V), определенную выше, где X и U являются такими, как определено выше, q является целым числом от 0 до 2;
Y, если присутствует, является группой, выбранной из:
где R3 является таким, как определено выше;
и
Y’ означает группу, выбранную из:
где R3 является таким, как определено выше, и R15, R16 и R20 означают независимо водород или метокси.
Предпочтительно, у соединения формулы (III) или (IV), BM-фрагмент означает группу формулы (V)’, как определено выше, где
2
4
X отсутствует или означает C-C алкенил формулы (XIV), как определено выше;
U и q являются такими, как определено выше;
и
Y, если присутствует, и Y' независимо выбраны из:
где R3, R15, R16 и R20 являются такими, как определено выше.
Более предпочтительно, у соединения формулы (III) или (IV), BM-фрагмент означает группу формулы (V)', как определено выше, где X и U являются такими, как определено выше, q является целым числом от 0 до 2;
Y, если присутствует, выбран из:
где R3 является таким, как определено выше; и
Y' означает группу, выбранную из:
где R3 является таким, как определено выше, и R15, R16 и R20 означают независимо водород или метокси.
Расщепляемый при определенных условиях фрагмент L или L1
L- или L1-фрагмент, если присутствует, является расщепляемой при определенных условиях группой, которая может быть расщеплена химическим, фотохимическим, физическим, биологическим или ферментативным способом, будучи выполненным в или при определенных условиях. Одним из указанных условий может быть, например, внесение соединения согласно изобретению в водную среду, что приводит к гидролизу L и/или L1, или внесение соединения согласно изобретению в среду, которая содержит фермент, распознающий и расщепляющий L и/или L1, или внесение соединения согласно изобретению в условия восстановления, что приводит к восстановлению и/или удалению L и/или L1, или внесение соединения согласно изобретению в условия окисления, что приводит к окислению и удалению L и/или L1, или приведение соединения согласно изобретению в контакт с излучением, например, УФ-излучением, что приводит к расщеплению, или приведение соединения согласно изобретению в контакт с теплом, что приводит к расщеплению L и/или L1. Это условие может быть обеспечено прямо после введения соединения согласно данному изобретению животному, например, млекопитающему, например, человеку, из-за присутствия широко распространенных в кровообращении ферментов. Альтернативно, указанное условие может быть достигнуто, когда соединение локализуется в конкретном органе, ткани, клетке, субклеточной мишени или бактериальной, вирусной или микробной мишени, например, при присутствии внутренних факторов (например, мишень-специфические ферменты или гипоксия), или при применении внешних факторов (например, излучение, магнитные поля).
Расщепление L или L1 означает, что связь между A и L в молекуле соединения формулы (III) или (IV), или между кислородом и L1 в молекуле соединения формулы (II) или (IV) разрывается:
Следует отметить, что в молекуле соединения формулы (IV) могут присутствовать две расщепляемые в определенных условиях группы. В этом случае, два фрагмента могут или не могут быть одинаковыми и могут или не могут требовать одних и тех же условий для расщепления.
В одном варианте осуществления изобретения L и/или L1 могут быть фрагментами, которые расщепляются посредством ферментов или условий гидролиза, присутствующих около или внутри клеток-мишеней по сравнению с другими частями организма, или посредством фермента или условий гидролиза, присутствующих только около или внутри клеток-мишеней. Важно распознать, что если специфичность сайта-мишени достигается только на основании избирательной трансформации и/или расщепления указанного фрагмента L у сайта-мишени, вызывающее расщепление условие должно предпочтительно по меньшей мере до определенной степени, быть специфическим по отношению к сайту-мишени. В одном варианте осуществления изобретения расщепление L происходит внутри клетки.
В другом варианте осуществления изобретения расщепление L происходит вне клетки.
В другом варианте осуществления изобретения расщепление L и/или L1 может осуществляться широко распространенным внутриклеточным ферментом.
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения L и/или L1 может представлять собой фрагмент, который может расщепляться широко распространенными ферментами, например, эстеразами, присутствующими в кровотоке, или внутриклеточными ферментами, такими как, например, протеазы и фосфатазы, или путем рН-контролируемого гидролиза. Поэтому, L и/или L1 могут образовывать, необязательно вместе с соединяющим атомом(-ами) A или кислородом, карбонат, карбамат, мочевину, сложный эфир, амид, имин, дисульфит, простой эфир, ацеталь, кеталь или фосфатную группу, которые могут расщепляться in vivo.
В более предпочтительном варианте осуществления изобретения A означает -O-, и L и L1 независимо отсутствуют или означают группу, выбранную из:
-NHCO-R9(Xa); -NHCONH-R9(Xb); -NHCOO-R9(Xc); -NH-R9 (Xd);
где:
1
4
1
4
1
4
1
4
R9 и R10, каждый независимо, отсутствуют или означают водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-Cалкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила;
n является целым числом от 0 до 2; и
n1 является целым числом от 0 до 4.
1
4
1
4
1
4
1
4
3
8
Согласно настоящему изобретению и если не предусмотрено иное, указанные выше группы R9 и R10 могут быть необязательно замещены, в любом из свободных положений в группе, одной или более группами, например, 1-3 группами, независимо выбранными из: галогена, линейного или разветвленного C-C алкила, полифторированного алкила, линейной или разветвленной C-C алкоксигруппы, полифторированной алкоксигруппы, гидроксигруппы, аминогруппы, линейной или разветвленной C-C алкиламиногруппы, диалкиламиногруппы, C-C алкилкарбонила, C-C циклоалкила, циклоалкилалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила.
В другом более предпочтительном варианте осуществления изобретения A означает -N-, и L и L1 независимо отсутствуют или независимо означают группу, выбранную из:
где:
R9 и n1 являются такими, как определено выше.
В другом более предпочтительном варианте осуществления изобретения A означает -CO-, и L и L1 независимо отсутствуют или независимо означают группу, выбранную из:
где:
R9, R10, и n1 являются такими, как определено выше.
Саморасщепляющаяся система W или W1
Группа W или W1, если присутствует, является саморасщепляющейся системой, которая в соединении формулы (III) и (IV) присоединяется с образованием стабильной связи от одного конца фрагмента L или A (если L отсутствует), к фрагменту Z или RM (если Z отсутствует); в соединении формулы (II) стабильно присоединяется от одного конца фрагмента L1 или кислорода (если L1 отсутствует), к Z1 или дополнительно к RM1 (если Z1 отсутствует) в соединении формулы (IV). Связь L-W, A-W, L1-W1 или O-W1 может стать лабильной при активации в результате химического, фотохимического, физического, биологического или ферментативного процесса, осуществляемого в или при определенном условии, как описано выше, приводящего необязательно к высвобождению соответствующих фрагментов:
Следует отметить, что в молекуле соединения формулы (IV), могут присутствовать две саморасщепляющиеся системы. В этом случае, две системы могут или не могут быть одинаковыми или могут или не могут требовать одних и тех же условий для расщепления.
Саморасщепляющаяся система может быть введена в соединение формулы (II), (III) или (IV), например, для улучшения растворимости или для оптимизирования расстояния между алкилирующим фрагментом и реакционноспособным фрагментом; кроме того, указанная саморасщепляющаяся система может модулировать реакционную способность RM или RM1 в отношении нуклеофилов.
Саморасщепляющиеся системы известны специалистам в данной области техники, см., например, системы, описанные в Международных публикациях WO 2002/083180 и WO 2004/043493; или системы, описанные в публикации Tranoy-Opalinsi, A. et al,. Anticancer Agents in Medicinal Chemistry, 2008, 8, 618-637. Другие примеры саморасщепляющихся систем включают, но не ограничиваются ими, необязательно замещенные амиды 4-аминомасляной кислоты, соответственно замещенные бицикло[2.2.1] и бицикло[2.2.2] кольцевые системы или амиды 2-аминофенилпропионовой кислоты [см., WO 2005/079398, WO 2005/105154 и WO 2006/012527; Greenwald, R.B., et al,. Adv. Drug Delivery Rev. 2003, 55, 217-250; Kingsbury, W.D.; et al,. J. Med. Chem. 1984, 27, 1447-1451].
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения W или W1 могут образовывать вместе с соединяющим атомом(-ами) L, L1, A, Z, Z1, RM, RM1 или кислородом, карбонатную, карбаматную, мочевинную, сложноэфирную, амидную, из простого эфира или тиоамидную связующую группу, которая может быть необязательно расщеплена при активации.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения W и W1 независимо отсутствуют или означают саморасщепляющуюся систему, содержащую одну или более саморасщепляющуюся группу, независимо выбранную из:
где
один из R9 и R10 отсутствует, и другой является таким, как определено выше;
1
4
R11 и R12 означают, каждый независимо, водород, галоген, метил, этил или линейный или разветвленный C-Cгидроксиметил;
m является целым числом от 0 до 3; и
1
2
2
A означает CH, CHN-R12 или N-R12, где R12 является таким, как определено выше.
В другом более предпочтительном варианте осуществления изобретения W и W1 независимо отсутствуют или означают группу, выбранную из:
где один из R9 и R10 отсутствует, и другой является таким, как определено выше; и
R11 определен выше.
Линкер Z или Z1
a
b
c
Линкер Z или Z1, если присутствует, может быть пептидным (Z), непептидным (Z) или гибридным, где указанный гибридный линкер является пептидным и непептидным (Z); в соединении формулы (II), (III) или (IV) указанный линкер Z или Z1 может быть отщеплен от W или W1, соответственно, в результате химического, фотохимического, физического, биологического или ферментативного процесса, будучи осуществленного в или при определенных условиях, как описано выше:
Линкер Z или Z1 может быть линейным или разветвленным.
Связь между Z или Z1 и левосторонним фрагментом или между Z или Z1 и, необязательно, RM или RM1, может быть амидной, карбонатной, дисульфидной или карбаматной связью.
В одном варианте осуществления изобретения оба линкера Z и Z1 отсутствуют; в другом варианте осуществления изобретения один из линкеров Z или Z1 отсутствует.
a
В другом варианте осуществления изобретения Z, Z1 является пептидным линкером Z, который может быть расщеплен протеолитическим ферментом, плазмином, катепсином, β-глюкуронидазой, галактозидазой, специфическим антигеном простаты (PSA), плазминогеновым активатором урокиназного типа (u-PA) или членом семейства матриксных металлопротеиназ.
b
В другом варианте осуществления изобретения Z, Z1 является непептидным линкером Z, который может содержать один или более непептидных водорастворимых фрагментов. В этом случае, линкер способствует растворимости в воде соединения формулы (II), (III) или (IV).
b
В другом варианте осуществления изобретения Z является непептидным линкером, который может содержать один или более непептидных фрагментов, снижающих агрегацию соединения формулы (II), (III) или (IV), которые могут или не могут быть фрагментом/фрагментами, которые также повышают растворимость в воде соединения формулы (II), (III) или (IV).
b
Например, непептидные водорастворимые линкеры Zмогут содержать олигоэтиленгликолевый или полиэтиленгликолевый фрагмент или его производное.
c
В другом варианте осуществления изобретения Z, Z1 является гибридным линкером Z, который может содержать как пептидные, так и непептидные остатки общей формулы
a
b
Z-Z
a
b
где Z и Z означают независимо пептидный линкер или непептидный линкер. Гибридные линкеры могут способствовать растворимости соединения формулы (II), (III) или (IV) и/или быть субстратом, который может расщепляться протеолитическим ферментом, например, членом семейства матриксных металлопротеиназ.
a
В предпочтительном варианте осуществления изобретения Z является единственной аминокислотой, дипептидным, трипептидным, тетрапептидным или олигопептидным фрагментом, содержащим природные L-аминокислоты, неприродные D-аминокислоты, синтетические аминокислоты или любую их комбинацию, где один из C-концевого или N-концевого аминокислотного остатка связан с W, L или A или с W1, L1, или кислородом и, другая концевая аминокислота заканчивается COOH- или NH2-группой или необязательно связана с RM или RM1.
a
В более предпочтительном варианте осуществления изобретения Z является дипептидом или трипептидом, связанным через его C-конец с W или W1, или с L, когда W отсутствует, или с L1, когда W1 отсутствует, или с A, когда оба W и L отсутствуют, или с 0, когда оба W1 и L1 отсутствуют.
В другом более предпочтительном варианте осуществления изобретения C-концевой аминокислотный остаток дипептида или трипептида выбирают из глицина, аргинина и цитруллина; и N-концевой аминокислотный остаток выбирают из любой природной или неприродной аминокислоты; предпочтительно, в случае трипептида, промежуточный аминокислотный остаток выбирают из аланина, валина, лейцина, изолейцина, метионина, фенилаланина и пролина.
a
В другом более предпочтительном варианте осуществления изобретения Z включает пентапептид, где C-концевую аминокислоту выбирают из любой природной или неприродной аминокислоты, и N-концевым аминокислотным остатком является 6-аминогексановая кислота.
b
В предпочтительном варианте осуществления изобретения Z может содержать олигоэтиленгликолевый или полиэтиленгликолевый фрагмент или его производное.
b
В более предпочтительном варианте осуществления изобретения Z означает группу, выбранную из:
где
один из R9 и R10 отсутствует, и другой является таким, как определено выше; и
p является целым числом от 1 до 20;
c
В предпочтительном варианте осуществления изобретения Z является гибридным фрагментом, содержащим:
a
a
пептидный фрагмент Z, где Z представляет собой единственную аминокислоту, трипептид или тетрапептид, содержащий природные L-аминокислоты и неприродные D-аминокислоты; и
b
непептидный фрагмент Z, содержащий олигоэтиленгликолевый или полиэтиленгликолевый фрагмент или его производное.
Реакционноспособный фрагмент RM или RM1
Фрагмент RM или RM1, если присутствует, представляет собой электрофильную группу, которая может взаимодействовать с нуклеофилами, т.е., молекулами, несущими нуклеофильную группу, при относительно мягких условиях и без необходимости осуществлять предварительную функционализацию реакционноспособного фрагмента, причем для указанной реакции между реакционноспособным фрагментом и указанным нуклеофилом потребуется только использование некоторого тепла, давления, катализатора, кислоты и/или основания.
Поэтому, когда один из фрагментов RM или RM1 присутствует, соединение формулы (III) или (IV) конъюгируется с различными типами нуклеофилов.
Когда оба фрагмента RM и RM1 отсутствуют, соединение формулы (III) или (IV) конъюгируется с различными типами электрофилов, т.е. молекулами, несущими электрофильную группу, при посредничестве одной или более нуклеофильных групп, которые присутствуют во фрагменте(-ах) A, L, L1, W, W1, Z и Z1.
В соединении формулы (III) RM-фрагмент может связываться с одной или более из групп A, L, W или Z; в соединении формулы (IV), RM может связываться либо с одной или более из групп A, L, W или Z, и/или с одной или более из групп L1, W1, Z1, или с атомом кислорода:
.
Примеры реакционноспособных фрагментов включают, но не ограничиваются ими, карбамоилгалогенид, ацилгалогенид, активированный сложный эфир, ангидрид, α-галогенацетил, α-галогенацетамид, малеимид, изоцианат, изотиоцианат, дисульфид, тиол, гидразин, гидразид, сульфонилхлорид, альдегид, метилкетон, винилсульфон, галогенметил и метилсульфонат.
2
В одном предпочтительно варианте осуществления изобретения, когда нуклеофильной группой нуклеофила является NH, NH или OH, RM и RM1 независимо отсутствуют или означают группу, выбранную из:
1
3
2
где R13 означает C-C алкил или электроноакцепторную группу, содержащую NO- и CN-группу;
r является целым числом от 0 до 7; и
R11 и R12являются такими, как определено выше.
В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения, когда нуклеофильной группой нуклеофила является COOH, RM и RM1 независимо отсутствуют или означают группу, выбранную из:
В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения, когда нуклеофильной группой нуклеофила является SH, RM и RM1 независимо отсутствуют или означают группу, выбранную из:
где R13 является таким, как определено выше.
В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения по меньшей мере один из RM и RM1 присутствует.
Предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I) или (II), как определено выше, отличающиеся тем, что
1
4
R1 и R2, взятые вместе, образуют группу (D), где R5 является линейным или разветвленным C-C алкилом.
Более предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (II), как определено выше, отличающиеся тем, что R6 означает галогенид, и
L1 означает водород или расщепляемый при определенных условиях фрагмент формулы (Xj):
1
4
1
4
1
4
1
4
где R9 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-Cалкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила.
Предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (III) или (IV), как определено выше, отличающиеся тем, что
1
4
R1 и R2, взятые вместе, образуют группу (D), где R5 означает линейный или разветвленный C-C алкил.
Более предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (IV), как определено выше, отличающиеся тем, что R6 означает галогенид; и
A' отсутствует, и L1 означает L, где L является таким, как определено выше.
Более предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (III) или (IV), как определено выше, отличающиеся тем, что L и L1 независимо отсутствуют или означают расщепляемый при определенных условиях фрагмент, выбранный из
NHCO-R9(Xa); -NHCONH-R9(Xb); -NHCOO-R9(Xc); -NH-R9 (Xd);
где:
1
4
1
4
1
4
1
4
R9 и R10, каждый независимо, отсутствуют или означают водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-Cалкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила;
n является целым числом от 0 до 2; и
n1 является целым числом от 0 до 4.
Более предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (III) или (IV), как определено выше, отличающиеся тем, что W и W1 означают независимо саморасщепляющуюся систему, содержащую одну или более саморасщепляющихся групп, независимо выбранных из:
где
один из R9 и R10 отсутствует, и другой является таким, как определено выше;
1
4
R11 и R12 означают, каждый независимо, водород, галоген, метил, этил или линейный или разветвленный C-Cгидроксиметил;
m является целым числом от 0 до 3; и
1
2
2
A означает CH, CHN-R12 или N-R12, где R12 является таким, как определено выше.
Более предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (III) или (IV), как определено выше, отличающиеся тем, что Z и Z1 означают независимо пептидный линкер, предпочтительно дипептидный или трипептидный линкер, или означают непептидный линкер, содержащий олигоэтиленгликолевый или полиэтиленгликолевый фрагмент или его производное, выбранное из:
где
один из R9 и R10 отсутствует, и другой является таким, как определено выше; и
p является целым числом от 1 до 20.
Более предпочтительно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (III) или (IV), как определено выше, отличающиеся тем, что RM и RM1 означают независимо реакционноспособный фрагмент, выбранный из:
1
3
2
где R13 означает C-C алкил или электроноакцепторную группу, содержащую NO- и CN-группу;
r является целым числом от 0 до 7; и
группы R11 и R12являются такими, как определено выше.
Конкретные, неограничивающие, предпочтительные соединения (соед.) согласно настоящему изобретению, необязательно в виде их фармацевтически приемлемой соли, представляют собой следующие соединения:
1) N-(6-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-3-ил)-1H-индол-6-карбоксамид,
2) N-(5-{[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-1-метил-4-{[(1-метил-4-нитро-1H-пиррол-2-ил)карбонил]амино}-1H-пиррол-2-карбоксамид,
3) (2E)-1-[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-ен-1-он,
4) (2E)-1-[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-ен-1-он,
5) N-(6-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-3-ил)-1H-индол-6-карбоксамид,
6) 1-метил-N-(1-метил-5-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-пиррол-3-ил)-4-{[(1-метил-4-нитро-1H-пиррол-2-ил)карбонил]амино}-1H-пиррол-2-карбоксамид,
7) (3bS,4aR)-3-метил-6-[(2E)-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-еноил]-4,4a,5,6-тетрагидро-8H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-8-он,
8) (3bR,4aS)-3-метил-6-[(2E)-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-еноил]-4,4a,5,6-тетрагидро-8H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-8-он,
9) (3bS,4aR)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-карбоксамид,
10) (8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-карбоксамид,
11) (8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-карбоксамид,
12) (3bR,4aS)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-карбоксамид,
13) N-(3-{(1E)-3-[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
14) N-(3-{(1E)-3-[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
15) N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
16) N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
17) N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-карбоксамид,
18) трет-бутил-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамат,
19) 5-амино-N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-5a,7,8,8a-тетрагидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
20) трет-бутил-{2-[(2-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамат,
21) 5-амино-N-(2-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
22) (8S)-6-({5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,
23) (8S)-6-[(5-{[(5-амино-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата гидрохлорид,
24) (8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-пиперазин-1-карбоксилат,
25) трет-бутил-{2-[(2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамат,
26) 5-амино-N-(2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
27) (8R)-6-({5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,
28) (8R)-6-[(5-{[(5-амино-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата гидрохлорид,
29) N-(2-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-нитро-1H-индол-2-карбоксамид,
30) N-(2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-нитро-1H-индол-2-карбоксамид,
31) (8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(5-{[(5-нитро-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,
32) (8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(5-{[(5-нитро-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,
33) (8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-гидрокси-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,
34) (8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-гидрокси-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат,
5
35) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид,
5
36) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид,
37) [(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}метанон,
38) [(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}метанон,
5
39) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид,
5
40) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид,
5
41) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[(3-{[({(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(2E)-3-{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}проп-2-еноил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил}окси)карбонил](метил)амино}-2,2-диметилпропил)(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид,
5
42) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[(3-{[({(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(2E)-3-{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}проп-2-еноил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил}окси)карбонил](метил)амино}-2,2-диметилпропил)(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид,
43) (2E)-1-[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-(1H-индол-3-ил)проп-2-ен-1-он,
44) N-(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1-метил-1H-индол-5-ил)-1-метил-1H-индол-2-карбоксамид,
45) 1-метил-N-(1-метил-2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид,
46) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]глицинамид,
47) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]глицинамид,
48) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]глицинамид,
49) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}-метил)фенил]глицинамид,
5
50) L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид,
5
51) L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид,
5
52) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}-метил)фенил]-L-орнитинамид,
5
53) N-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид и
5
54) N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид.
Относительно ссылки на любое конкретное соединение формулы (I), (II), (III) или (IV) согласно изобретению, необязательно в виде фармацевтически приемлемой соли, см. экспериментальную часть и формулу изобретения.
Настоящее изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы (I), (II), (III) или (IV), как определено выше, путем использования процедур и схем синтеза, описанных ниже, применяя способы, доступные в данной области техники, и легко доступные исходные материалы. Получение некоторых вариантов согласно настоящему изобретению описано в последующих примерах, но специалисты в данной области примут во внимание, что описанные способы получения могут быть легко приспособлены к получению других вариантов согласно настоящему изобретению. Например, синтез не представленных в качестве примера соединений согласно изобретению может быть осуществлен путем модификаций, очевидных специалисту в данной области техники, например при соответствующей защите препятствующих реакции групп, путем замены на другие подходящие реагенты, известные в данной области техники, или путем осуществления определенных модификаций условий реакции. Альтернативно, другие реакции, указанные в данном документе или известные в данной области техники, будут признаны в качестве способных к применению для получения других соединений согласно изобретению.
Все специалисты в данной области техники оценят, что для любой трансформации, осуществляемой согласно указанным выше способам, может потребоваться выполнение стандартных модификаций, таких как, например, защита групп, препятствующих реакции, замена на другие подходящие реагенты, известные в данной области, или осуществление стандартных изменений условий реакции.
Настоящее изобретение предоставляет способ получения соединения формулы (I) или (III), как определено выше, отличающийся тем, что способ включает следующую стадию:
a) превращение соединения формулы (II) или (IV):
где
1
L означает водород, W1, Z1 и RM1 отсутствуют, и
R1, R2, R3, R4, R6, T, BM, A', L, W, Z и RM являются такими, как определено выше,
с получением соединения формулы (I) или (III), соответственно, как определено выше, и его фармацевтически приемлемых солей.
Соответственно, получение соединения формулы (I) или (III) представлено на схеме 1 ниже:
Схема 1
3
В соответствии со стадией a), реакцию осуществляют путем хорошо известных процедур, описанных в данной области (см., например, Boger, D.L.; J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 2301-2302). Примером, который не стремится ограничить способ, является использование основных условий, таких как, например, использование TEA, NaHCO или DBU. Реакцию осуществляют в DCM или ДМФА или в их смеси, при температуре, колеблющейся от 20°C до температуры кипения с обратным холодильником, и в течение времени, колеблющемся от 30 минут до 24 часов.
Настоящее изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы (II), определенной выше, т.е. соединения формулы (II)', где L1 означает водород, и соединения формулы (II)ʺ, где L1 не является водородом, отличающийся тем, что способ включает следующие стадии:
b) взаимодействие соединения формулы (XVI):
где R17 означает галоген, OH или активирующий фрагмент карбоксильной группы, например, активированные сложные эфиры, T является таким, как определено выше, и BM является связывающим фрагментом формулы (V), определенной выше,
с соединением формулы (XVII):
где R18означает водород или защитную группу, и R1, R2, R3, R4 и R6 являются такими, как определено выше;
необязательно
c) удаление защитной группы, если присутствует, и взаимодействие полученного соединения формулы (II)':
где R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше, с соединением формулы (XVIII)
где R19 отсутствует, означает водород, активирующий фрагмент NH-группы, предпочтительно тозил, или R17, где R17 является таким, как определено выше, и
L1, W1 и Z1 являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует,
с получением соединения формулы (II)'':
где L1 является таким, как определено выше, за исключением водорода, по меньшей мере один из L1, W1 и Z1 присутствует,
и R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше,
и его фармацевтически приемлемых солей.
Соответственно, получение соединения формулы (II) представлено на схеме 2 ниже:
Схема 2
Настоящее изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы (IV), как определено выше, т.е. соединения формулы (IV)', где A' означает A, и L1 означает водород, и соединения формулы (IV)'', где A' означает A, и L1 не является водородом, отличающийся тем, что способ включает следующие стадии:
d) взаимодействие соединения формулы (XIX):
где A' означает A, где A является таким, как определено выше,
T является таким, как определено выше, и
BM является связывающим фрагментом формулы (V)', определенной выше,
с соединением формулы (XX):
где R19 является таким, как определено выше, и
L, W, Z и RM являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует;
e) взаимодействие полученного соединения формулы (XXI):
где A' означает A, где A является таким, как определено выше, и
T, BM, L, W, Z и RM являются такими, как определено выше,
с соединением формулы (XVII):
как определено выше;
необязательно
f) взаимодействие полученного соединения формулы (IV)':
где A' означает A, где A является таким, как определено выше,
L, W, Z и RM являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует,
и R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше,
с соединением формулы (XX)':
где R19 является таким, как определено выше, L1 является таким, как определено выше, за исключением водорода, и W1, Z1 и RM1 являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует, с получением соединения формулы (IV)ʺ:
где L1 является таким, как определено выше, за исключением водорода,
W1, Z1 и RM1 являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует,
A' означает A, где A является таким, как определено выше,
L, W, Z и RM являются такими, как определено выше, и
R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше,
и его фармацевтически приемлемых солей.
2
Настоящее изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы (IV), как определено выше, т.е. соединения формулы (IV)', определенной выше, и соединения формулы (IVa)'', где A' означает A, где A означает насыщенную группу, выбранную из OH, NH и COOH, и L1 не является водородом, отличающийся тем, что способ включает следующие стадии:
d') взаимодействие соединения формулы (XIX) с соединением формулы (XVII), определенной выше;
e') взаимодействие полученного соединения формулы (XV):
2
где A' означает A, где A означает насыщенную группу, выбранную из OH, NH и COOH;
и
R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше,
с соединением формулы (XX), определенной выше;
необязательно
f') взаимодействие полученного соединения формулы (IV)':
где A' означает A, где A является таким, как определено выше,
и
R1, R2, R3, R4, R6, T, BM, L, W, Z и RM являются такими, как определено выше,
с соединением формулы (XX)', определенной выше, с тем, чтобы получить соединение формулы (IV)'', определенной выше, и его фармацевтически приемлемые соли
или
e'') взаимодействие соединения формулы (XV), определенной выше, с соединением формулы (XX)', определенной выше;
необязательно
f'') взаимодействие полученного соединения формулы (IVa)'':
где L1 является таким, как определено выше, за исключением водорода, L1, W1, Z1 и RM1 являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует,
2
A' означает A, где A означает насыщенную группу, выбранную из OH, NH и COOH, и R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше,
с соединением формулы (XX), определенной выше, с получением соединения формулы (IV)'', определенной выше, и его фармацевтически приемлемых солей.
Соответственно, получение соединения формулы (IV), т.е. соединения формулы (IV)', (IV)'' или (IVa)'', определенной выше, представлено на схеме 3 ниже:
Схема 3
Согласно стадии c), d), f), e'), f'), e'') и f''), реакцию сочетания проводят в органическом растворителе, предпочтительно ДМФА, в присутствии конденсирующего средства, такого как, например, DCC, EDC (относительно общих связующих реагентов см., например, Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry: Building Blocks, Catalysis and Coupling Chemistry, Volume 3; Andrew B. Hughes, Ayman El-Faham, Fernando Albericio). См. также конкретные химические условия, описанные в экспериментальной части ниже.
Согласно стадии b), e), d'), реакцию сочетания предпочтительно осуществляют при температуре, колеблющейся от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником, в присутствии, необязательно, основания и в течение времени, колеблющемся от 30 минут до 24 часов.
Соединения формулы (XVII) и (XIX) являются известными или могут быть получены способами, известными специалисту в данной области техники или описанными в публикации GB2344818, приведенной выше, или J. Med.Chem. 2003, (46) стр. 634-637.
Соединения формулы (XVI), (XVIII), (XX) и (XX)' являются известными или могут быть получены способами, известными специалисту в данной области техники или описанными в публикации Anticancer Agents in Med Chem 2008, (8) стр. 618-637 или в WO 2010/009124.
Настоящее изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы (IV), определенной выше, т.е. соединения формулы (IV)''', где A' отсутствует, и L1 не является водородом, отличающийся тем, что способ включает следующую стадию:
e''') взаимодействие соединения формулы (II)':
где A' отсутствует,
1
2
3
4
6
R, R, R, R, R и T являются такими, как определено выше, и
BM является связующим фрагментом формулы (V), определенной выше,
с соединением формулы (XX)':
где L1 является таким, как определено выше, но не водородом, и
R19, W1, Z1 и RM1 являются такими, как определено выше, с получением соединения формулы (IV)''':
где A’ отсутствует,
L1 является таким, как определено выше, за исключением водорода,
R1, R2, R3, R4, R6, T и BM являются такими, как определено выше, и
W1, Z1 и RM1 являются такими, как определено выше, и по меньшей мере один из них присутствует,
и его фармацевтически приемлемых солей.
Соответственно, получение соединения формулы (IV), где A' отсутствует, представлено на схеме 4 ниже:
Схема 4
Согласно стадии e'''), реакцию сочетания осуществляют, как описано в пункте e'') выше.
Исходя из описанного выше, специалисту в данной области будет понятно, что при получении соединения формулы (I), (II), (III) и (IV), согласно любому одному из представленных выше вариантов способа, необязательные функциональные группы в исходных материалах или их промежуточных соединениях, которые могут приводить к возникновению нежелательных побочных реакций, необходимо защитить согласно обычным методикам. Аналогично, превращение этих последних групп в свободные незащищенные соединения можно осуществлять по известным методикам.
Поскольку легко оценить, что если соединения формулы (I), (II), (III) и (IV), полученные согласно описанному выше способу, получают в виде смеси изомеров, их разделение при использовании обычных способов на единичные изомеры формулы (I), (II), (III) и (IV) входит в объем настоящего изобретения.
Предпочтительно, соединение формулы (II), где L1 является таким, как определено выше, за исключением водорода, или
соединение формулы (IV), где RM и/или RM1 присутствует, и
R1, R2, R3, R4, R6, T, BM, A', L, W, Z, L1, W1 и Z1 являются такими, как определено выше, взаимодействует,
g) с соединением формулы (XXII):
R17-RM (XXII)
где R17 является таким, как определено выше, и RM является таким, как определено выше, и присутствует, с получением соответствующего соединения формулы (IV), где RM является таким, как определено выше, и присутствует,
затем необязательно
h) с соединением формулы (XXII)':
R17-RM1 (XXII)'
где R17 является таким, как определено выше, и RM1 является таким, как определено выше, и присутствует, с получением соответствующего соединения формулы (IV), где RM1 является таким, как определено выше, и присутствует.
Важно подчеркнуть, что стадии, описанные в пунктах g) и h), могут необязательно выполняться в обратном порядке, т.е. стадия h) вначале и затем стадия g).
Согласно стадии g) и h), реакцию сочетания осуществляют, как описано в пункте b) выше.
Соединения формулы (XXII) и (XXII)' являются коммерчески доступными или являются известными соединениями или могут быть получены способами, известными специалисту в данной области техники или описанными в публикации Anticancer Agents in Med Chem 2008, (8) стр. 618-637 или в WO 2010/009124.
Предпочтительно, соединение формулы (XIX), где A’ является -OH, и T и BM являются такими, как определено выше, взаимодействует:
i) с соединением формулы (XX):
где R19 отсутствует,
L является группой формулы (Xf') или (Xg'):
1
4
1
4
1
4
1
4
где R9 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-Cалкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-Cаминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
R9 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
с получением соединения формулы (XХI):
где A' означает -O-, L является группой формулы (Xf) или (Xg), T, W, Z и RM являются такими, как определено выше, и BM является группой формулы (V)';
или
j) с соединением формулы (XX)Ж
где R19 отсутствует,
L является группой формула (Xh') или (Xi')
1
4
1
4
1
4
1
4
где R9 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-Cалкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
R9 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -O-, L является группой формулы (Xh) или (Xi), и T, BM, L, W, Z и RM являются такими, как определено выше;
или
k) с соединением формулы (XX):
где R19 означает NH-активирующую группу, предпочтительно тозил,
9
9
9
9
L означает группу формулы -NHCOR(Xa), -NHCONH-R(Xb), -NHCOO-R(Xc) или -NH-R (Xd);
1
4
1
4
1
4
1
4
где R9 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-C алкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
R9 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -O-, L является группой формулы от (Xa) до (Xd), и T, BM, W, Z и RM являются такими, как определено выше;
или
l) с соединением формулы (XX):
где R19 означает R17, где R17 является -OH,
L означает группу формулы (Xe):
где
1
4
1
4
1
4
1
4
R9 и R10 означают, каждый независимо, водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-C алкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
один из R9 или R10 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -O-, L является группой формулы (Xe), и T, BM, W, Z и RM являются такими, как определено выше.
Согласно стадии i) и j), реакцию осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM или ДМФА, в присутствии PTSA, при температуре, колеблющейся от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником, в течение времени, колеблющемся от 30 минут до приблизительно 24 часов. Удаление защитной группы осуществляют с использованием известной процедуры, описанной в литературе (см., например, Protective Groups in Organic Synthesis; Theodora W. Greeen, Peter G. M. Wuts).
Согласно стадии k), реакцию осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно простом эфире, диоксане или их смеси с LiHMDS, при температуре, колеблющейся от -10°С до 50°С, и в течение времени, колеблющемся от 30 минут до приблизительно 24 часов. Удаление защитной группы осуществляют с использованием известной процедуры, описанной в литературе (см., например, Protective Groups in Organic Synthesis; Theodora W. Greeen, Peter G.M. Wuts).
3
4
Согласно стадии l), реакцию осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM, ТГФ, CHCN или CCl, необязательно в присутствии основания, предпочтительно DIPEA, при температуре, колеблющейся от -10°С до 50°С, и в течение времени, колеблющемся от 30 минут до приблизительно 24 часов.
2
Предпочтительно, соединение формулы (XIX), где A' означает -OH или -NH, и Tи BM являются такими, как определено выше, взаимодействует
m) с соединением формулы (XX):
где R19 означает R17, где R17 является фрагментом, активирующим карбоксильную группу, предпочтительно пирролидин-2,5-дион-1-илом,
L является группой формулы (Xj) или (Xk):
или
1
4
1
4
1
4
1
4
где R9 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-C алкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
R9 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -O- или -NH, L является группой формулы (Xj) или (Xk), и T, BM, W, Z и RM являются такими, как определено выше.
Согласно стадии m), реакцию сочетания осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM, в основных условиях, например TEA, DMAP. Реакцию осуществляют при температуре, колеблющейся от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение времени, колеблющемся от 30 минут до приблизительно 24 часов.
Предпочтительно, соединение формулы (XIX), где A' означает -COOH, и T и BM являются такими, как определено выше, взаимодействует
n) с соединением формулы (XX):
где R19 означает водород,
L является группой формулы (Xm) или (Xn):
где
1
4
1
4
1
4
1
4
R9 и R10 означают, каждый независимо, водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-C алкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
один из R9 или R10 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -CO-, L является группой формулы (Xm) или (Xn), и T, BM, W, Z и RM являются такими, как определено выше;
или
o) с соединением формулы (XX):
где L отсутствует,
W является группой формулы от (XIa) до (XIe), от (XIh) до (XIj)
где R9 означает водород,
1
4
1
4
1
4
1
4
R10 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-C алкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
R10 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
R11 и R12 являются такими, как определено выше,
1
2
2
A означает -CH-, -CHN(R12)- или -NR12-, где R12 является таким, как определено выше,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -CO-, L отсутствует, W является группой формулы от (XIa) до (XIe), (XIh) и (XIj), T, BM, W, Z и RM являются такими, как определено выше.
Согласно стадии n), реакцию осуществляют в органическом растворителе, предпочтительно DCM, в основных условиях, например, TEA, и необязательно в присутствии конденсирующего агента, такого как, например, DCC, EDC, при температуре, колеблющейся от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, и в течение времени, колеблющемся от 30 минут до приблизительно 24 часов.
Согласно стадии o), реакцию сочетания осуществляют, используя условия, хорошо известные из литературы (см., например, Scott, C.J. et al. J. Med. Chem. 2005, 48, 1344-1358; Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry: Building Blocks, Catalysis and Coupling Chemistry, Volume 3; Andrew B. Hughes, Ayman El-Faham, Fernando Albericio).
2
Предпочтительно, соединение формулы (XIX), где A' означает -OH или -NH, и T и BM являются такими, как определено выше, взаимодействует
p) с соединением формулы (XX):
где R19 отсутствует,
L отсутствует,
W означает группу формулы от (XIa) до (XIj):
где R10 означает -OH,
1
4
1
4
1
4
1
4
R9 означает водород, гидрокси или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного C-C алкила, линейного или разветвленного C-C гидроксиалкила, линейного или разветвленного C-C сульфгидрилалкила и линейного или разветвленного C-C аминоалкила, и
W, Z и RM отсутствуют,
или
R9 отсутствует, и
по меньшей мере один из W, Z или RM присутствует,
1
R11, R12, m и A являются такими, как определено выше,
с получением соединения формулы (XXI):
где A' означает -O- или -NH-, L отсутствует, W означает группу формулы от (XIa) до (XIi), T, BM, W, Z и RM являются такими, как определено выше.
Согласно стадии p), реакцию сочетания осуществляют, как описано в пункте o) выше.
Стадии от i) до m) и p) также могут быть использованы для превращения соединений формулы (IV)' в соединения формулы (IV)'' путем реакции с соединениями формулы (XX)' (стадия f), или для превращения соединений формулы (XV) в соединения формулы (IV)''' путем реакции с соединениями формулы (XX)' (стадия e''), или для превращения соединений формулы (II)' в соединения формулы (II)'' путем реакции с соединениями формулы (XVIII) (стадия c), или для превращения соединений формулы (XV) в соединения формулы (IV)' посредством реакции с соединениями формулы (XX) (стадия e'), или для превращения соединений формулы (IV)''' в соединения формулы (IV)'' посредством реакции с соединениями формулы (XX) (стадия f'').
ФАРМАКОЛОГИЯ
Соединения согласно настоящему изобретению являются пригодными в качестве противораковых средств.
Млекопитающего, например, человека или животное, можно лечить способом, включающим введение млекопитающему фармацевтически эффективного количества соединения формулы (I), (II), (III) или (IV).
Состояние человека или животного можно облегчить или улучшить таким способом лечения.
Оценку цитотоксичности соединения формулы (I), (II), (III) или (IV) осуществляли, как описано ниже.
Исследование клеточной пролиферации in vitro
2
Раковые клетки яичника A2780 и молочной железы MCF7 человека (1250 клеток/лунку) высевали в белые 384-луночные планшеты в полную среду (RPMI1640 или EMEM плюс 10% фетальная телячья сыворотка) и обрабатывали соединениями, растворенными в 0,1% ДМСО, 24 ч после высевания. Клетки инкубировали при 37°C и 5% CO, и после 72 ч планшеты подвергали обработке, используя анализ CellTiter-Glo (Promega), следуя инструкции производителя.
Анализ CellTiter-Glo представляет собой гомогенный метод, основанный на количественном определении присутствующего ATP, индикатора метаболически активных клеток. ATP определяют количественно, используя систему, основанную на люциферазе и D-люциферине, активность которой приводит к генерации света. Люминесцентный сигнал пропорционален числу клеток, присутствующих в культуре.
Вкратце, 25 мкл/лунку раствора реагента добавляли к каждой лунке, и после 5 минут встряхивания микропланшеты считывали посредством люминометра. Люминесцентный сигнал был пропорционален числу клеток, присутствующих в культуре.
Характерные соединения согласно изобретению формулы (I) или (II) испытывали в специфичном анализе in vitro клеточной пролиферации, описанном выше.
50
Все испытуемые соединения имели величину IC<0,5 мкМ (<500 нМ) относительно раковых клеток А2780 яичника человека.
50
50
50
В частности, соединения 7, 9, 23, 6, 1 и 5 имели величину IC<50 нМ; соединения 22, 17 и 20 имели величину IC<0,1 нМ; соединения 18, 8 и 37 имели величину IC<0,01 нМ.
Специалист может признать, что все эти характерные соединения являются, таким образом, особенно благоприятными в противораковой терапии.
Кроме того, функционализированные соединения формулы (III) или (IV) согласно настоящему изобретению являются подходящими для конъюгации.
Способность функционализированных производных формулы (III) или (IV) к конъюгированию оценивали путем конъюгации их с нуклеофильной группой, такой как SH-группа аминокислоты цистеина.
Получение конъюгата
2 нмоль цистеина (молекулярная масса 121 Да) подвергали взаимодействию с 2 нмоль функционализированного соединения формулы (IV), т.е. соединения 54 (молекулярная масса 1221 Да).
Реакционную смесь инкубировали в течение 1 ч при 21°C в присутствии 50 мМ боратного буфера, pH 8, DTPA 2 мМ, NaCl 50 мМ, затем полученный конъюгат A1 (m/z=1343 (MH+)) анализировали посредством ВЭЖХ ESI-МС, используя метод ВЭЖХ с обращенной фазой (PLRP-S колонка 1000A 8 мкМ 150×2,1 мм) на приборе ВЭЖХ 1100 Agilent, соединенном с одноквадрупольным масс-спектрометрическим детектором серии Agilent 1946 с ортогональным источником ионов ESI.
На фигуре 1 представлен масс-спектр конъюгата A1 и приведена молекулярная масса (m/z) на x-оси, в то время как интенсивность, выраженная как число импульсов в секунду (имп/с), представлена на y-оси.
На фигуре 2 представлен профиль ВЭЖХ конъюгата A1 и приведено время (мин) на x-оси, в то время как уровень поглощения в УФ-области (mAU) (миллиединица оптической плотности) изображен на y-оси.
Высвобождение фрагмента лекарственного средства из конъюгата
В качестве примера, который не предназначен для ограничения объема изобретения, высвобождение соединения формулы (II) из конъюгата осуществляли в присутствии катепсина, как описано ниже.
Конъюгат A1 инкубировали с 0,2 единицы катепсина B в натрий-ацетатном буфере, pH 5,5 и 1 мМ Cys в течение 2 часов при 40°C.
Исчезновение конъюгата и высвобождение соответствующего соединения формулы (II), т.е. соединения 37, а также его предшественника A3, подтверждает расщепление Z пептидного линкера конъюгата.
Полное высвобождение соединения формулы (II) из конъюгата наблюдали посредством анализа ВЭЖХ ESI-МС.
На фигуре 3 представлен профиль ВЭЖХ после 2-часовой обработки конъюгата A1 катепсином, и время (мин) отложено на оси х, в то время как поглощение в УФ-области (mAU) отложено на оси y.
На фигуре 4а представлен масс-спектр высвобожденного соединения 37 и отложена молекулярная масса (m/z) на оси x, в то время как интенсивность, выраженная в импульсах в секунду (имп/с), отложена на оси y.
На фигуре 4b представлен масс-спектр высвобожденного соединения А3, предшественника 37, и молекулярная масса (m/z) отложена на оси x, в то время как интенсивность, выраженная в импульсах в секунду (имп/с), отложена на оси y.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть введены в виде единичного средства, либо, альтернативно, в комбинации с известными противораковыми терапиями, такими как радиационная терапия или химиотерапия, в комбинации с цитостатическими или цитотоксическими средствами, алкилирующими средствами, средствами типа антибиотиков, антиметаболитами, гормональными средствами, иммунологическими средствами, средствами типа интерферона, ингибиторами циклооксигеназы (например, ингибиторы COX-2), ингибиторами матриксных металлопротеиназ, ингибиторами теломеразы, ингибиторами тирозинкиназы, средствами против рецептора фактора роста, анти-HER средствами, анти-EGFR средствами, средствами против ангиогенеза (например, ингибиторы ангиогенеза), ингибиторами фарнезилтрансферазы, ингибиторами пути сигнальной трансдукции ras-raf, ингибиторами клеточного цикла, другими ингибиторами cdks, тубулинсвязывающими средствами, ингибиторами топоизомеразы I, ингибиторами топоизомеразы II и тому подобное.
В таких комбинированных продуктах, если они составлены в виде фиксированной дозы, используются соединения согласно изобретению в диапазоне доз, описанном ниже, и другой фармацевтически активный агент в одобренном диапазоне доз.
Соединения формулы (I), (II), (III) или (IV) могут быть использованы последовательно с известными противораковыми средствами, когда комбинированный препарат является неподходящим.
Соединения формулы (I), (II), (III) или (IV) согласно настоящему изобретению, подходящие для введения млекопитающим, например, людям, могут быть введены обычными способами, и уровень дозировки зависит от возраста, массы тела, состояний больного и способа введения.
Например, подходящая дозировка, предназначенная для перорального введения соединения формулы (I), может варьироваться от приблизительно 1 до приблизительно 300 мг на дозу, от 1 до 5 раз в сутки. Соединения согласно изобретению могут быть введены в различных дозированных формах, например, перорально, в виде таблеток, капсул, покрытых сахаром или пленкой таблеток, жидких растворов или суспензий; ректально в виде суппозиториев; парентерально, например, подкожно, внутримышечно или посредством внутривенной и/или интратекальной и/или интраспинальной инъекции или инфузии.
Настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в сочетании с фармацевтически приемлемым эксципиентом, который может быть носителем или разбавителем.
Фармацевтические композиции, содержащие соединения согласно изобретению, обычно получают следующими общепринятыми способами и вводятся в подходящей фармацевтической форме. Например, твердые пероральные формы могут содержать, вместе с активным соединением, разбавители, например, лактозу, декстрозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазывающие средства, например, двуокись кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связующие средства, например, крахмалы, аравийскую камедь, желатин, метицеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон; дезинтегрирующие средства, например, крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты или натрия крахмал гликолят; шипящие смеси; красители; подсластители; увлажняющие средства, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и, как правило, нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических составах. Указанные фармацевтические препараты могут быть произведены известным способом, например, посредством смешивания, гранулирования, таблетирования, способами с покрытием сахаром или пленкой.
Жидкие дисперсии для перорального введения могут быть, например, представлены сиропами, эмульсиями и суспензиями. В качестве примера, сиропы могут содержать в виде носителя сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннит и сорбит.
Суспензии и эмульсии могут содержать, в качестве примеров носителей, природную камедь, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать, вместе с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например, стерилизованную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например, пропиленгликоль и, если требуется, подходящее количество гидрохлорида лидокаина. Растворы для внутривенных инъекций или инфузий могут содержать, в качестве носителя, стерилизованную воду, или предпочтительно они могут быть в виде стерильных, водных, изотоничных, физиологических растворов, или они могут содержать пропиленгликоль в качестве носителя. Суппозитории могут содержать, вместе с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например, масло какао, полиэтиленгликоль, поверхностно-активный сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты или лецитин.
С целью лучшей иллюстрации настоящего изобретения, однако без какого-либо ограничения изобретения, далее представлены следующие примеры.
ПРИМЕРЫ
1
Синтез некоторых соединений формулы (I) согласно изобретению описан в следующих примерах. Соединения согласно настоящему изобретению, полученные согласно следующим примерам, были также охарактеризованы посредством H ЯМР и/или точных массовых данных ESI(+).
1
1
13
15
1
13
15
1
13
15
Спектры H ЯМР регистрировали при постоянной температуре 25°C на спектрометре Varian INOVA 500 (работающий при 499,8 МГц для H, 125,8 МГц для C и 50,6 МГц для N) и снабженном низкотемпературным датчиком косвенного обнаружения H{C,N} диаметром 5 мм с PFG (градиентом импульсного поля) по оси z или альтернативно датчиком тройного резонанса H{C-N} диаметром 5 мм с PFG по оси z.
Химические сдвиги рассматривали с учетом сигналов остаточного растворителя. Данные описывали следующим образом: химический сдвиг (δ), мультиплетность (с = синглет, д = дублет, т = триплет, кв = квартет, уш. с = уширенный синглет, тд = триплет дублета, дд = дублет дублетов, ддд = дублет дублетов дублетов, м = мультиплет), константа взаимодействия (Hz) и число протонов.
Точные массовые данные ESI(+) были получены на масс-спектрометре Waters Q-Tof Ultima, непосредственно соединенным с системой микро-ВЭЖХ с хроматографом Agilent 1100, как ранее описано (M. Colombo, F. Riccardi-Sirtori, V. Rizzo, Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004, 18, 511-517).
В представленных ниже примерах, а также по всей заявке, следующие сокращения имеют следующие значения. Если не указано иное, термины имеют их общепринятые значения.
СОКРАЩЕНИЯ
DCC
N,N'-дициклогексилкарбодиимид
DBU
диазабициклоундецен
DCM
дихлорметан
DIPEA
N,N-диизопропилэтиламин
DMAP
N,N-диметиламинопиридин
ДМФА
N,N-диметилформамид
ДМСО
диметилсульфоксид
EDCI
N-этил-N',N'-диизопропилкарбодиимида гидрохлорид
EDC
1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид
Et<sub>2</sub>O
Диэтиловый эфир
EtOAc
этилацетат
EtOH
этанол
HCl
Хлористоводородная кислота
HOBt
1H-бензотриазол-1-ол
LiHMDS
лития бис(триметилсилил)амид
MeOH
метанол
Na<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>
Натрия сульфат
NaHCO<sub>3</sub>
Натрия бикарбонат
NaOH
Натрия гидроксид
TEA
триэтиламин
TFA
Трифторуксусная кислота
TГФ
тетрагидрофуран
Пример 1
Стадия b, стадия a
N-(6-{[(8S)-8-(Хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-3-ил)-1H-индол-6-карбоксамид [(II)] (соединение 1)
Стадия b
2
3
2
4
Раствор (8S)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ола (XVII), приготовленный, как описано в GB2344818 (14,2 мг, 0,0563 ммоль), растворяли в сухом ДМФА (1,5 мл) и обрабатывали EDCI (43 мг, 4 экв.) и 3-[(1H-индол-6-илкарбонил)амино]-1H-индол-6-карбоновой кислотой (XVI) (27 мг, 1,5 экв.) Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, и затем реакцию гасили добавлением насыщенного водного раствора NaCl. Выделение продукта осуществляли путем экстракции EtOAc (×4) и последующей промывки объединенных органических слоев водным раствором 2M HCl (×3), насыщенным водным раствором NaCO (×3) и насыщенным водным раствором NaCl (×3). Органический слой сушили (NaSO), концентрировали в вакууме. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (гексан-ацетон 6:4) с получением указанного в заголовке соединения (18,7 мг, 60%).
ESI МС: m/z 555 (MH+).
Аналогично, путем использования соответствующих карбоновых кислот, были получены следующие соединения:
N-(5-{[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-1-метил-4-{[(1-метил-4-нитро-1H-пиррол-2-ил)карбонил]амино}-1H-пиррол-2-карбоксамид [(II)] (соединение 2)
ESI МС: m/z 650 (MH+),
(2E)-1-[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-ен-1-он [(II)] (соединение 3)
ESI МС: m/z 424 (MH+),
(2E)-1-[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-ен-1-он [(II)] (соединение 4)
ESI МС: m/z 424 (MH+),
N-(3-{(1E)-3-[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(II)] (соединение 13)
ESI МС: m/z 582 (MH+),
N-(3-{(1E)-3-[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(II)] (соединение 14)
ESI МС: m/z 582 (MH+),
(2E)-1-[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]-3-(1H-индол-3-ил)проп-2-ен-1-он [(II)] (соединение 43)
ESI МС: m/z 423 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 2,60 (д, J=1,0 Гц, 3H), 3,58 (м, 1H), 3,88 (м, J=11,2, 1,9 Гц, 1H), 4,2 (м, 1H), 4,46 (т, J=9,5 Гц, 1H), 4,63 (д, J=10,6 Гц, 1H), 7,07 (д, J=15,4 Гц, 1H), 7,24 (м, 2H), 7,32 (м, 1H), 7,53 (м, 1H), 7,91 (м, 1H), 8,02 (м, 2H), 8,13 (уш. с, 1H), 9,26 (уш. с, 1H), 10,81 (уш. с, 1H),
N-(2-{[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1-метил-1H-индол-5-ил)-1-метил-1H-индол-2-карбоксамид [(II)] (соединение 44)
ESI МС: m/z 583 (MH+).
Стадия a
N-(6-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-3-ил)-1H-индол-6-карбоксамид [(I)] (соединение 5)
3
3
2
4
Соединение 1 (25 мг, 0,045 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл), и обрабатывали раствором NaHCO в воде (1 мл, 15 мг NaHCO/мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, EtOAc добавляли, и образовавшийся органический слой промывали насыщенным раствором соли (×4), сушили (NaSO) и концентрировали в вакууме. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (гексан-ацетон 6:4) с получением соединения 5 (19 мг, 82%).
ESI МС: m/z 519 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,75 (т, J=4,8 Гц, 1H), 2,27 (с, 3H), 2,32 (дд, J=7,6, 4,6 Гц, 1H), 3,40 (дт, J=7,5, 4,9 Гц, 1H), 4,13 (д, J=11,3 Гц, 1H), 4,30 (дд, J=11,1, 4,7 Гц, 1H), 5,78 (с, 1H), 6,57 (уш. с, 1H), 7,32 (дд, J=8,4, 0,7 Гц, 1H), 7,44 (с, 1H), 7,52 (т, J=2,7 Гц, 1H), 7,67 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,79 (м, 2H), 8,00 (д, J=8,2 Гц, 1H), 8,22 (д, J=2,7 Гц, 2H), 9,51 (с, 1H), 10,45 (уш. с, 1H), 10,61 (уш. с, 1H).
Аналогично, путем использования соответствующих карбоновых кислот были получены следующие соединения:
1-метил-N-(1-метил-5-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-пиррол-3-ил)-4-{[(1-метил-4-нитро-1H-пиррол-2-ил)карбонил]амино}-1H-пиррол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 6)
ESI МС: m/z 614 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 1,52 (т, J=4,9 Гц, 1H), 2,21 (с, 3H), 2,28 (дд, J=7,6, 4,3 Гц, 1H), 3,43 (дт, J=7,8, 5,2 Гц, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,86 (с, 3H), 3,96 (с, 3H), 4,16 (д, J=10,7 Гц, 1H), 4,29 (дд, J=10,6, 4,8 Гц, 1H), 6,30 (с, 1H), 6,77 (д, J=1,7 Гц, 1H), 7,08 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,25 (д, J=1,7 Гц, 1H), 7,48 (д, J=1,7 Гц, 1H), 7,58 (т, J=1,9 Гц, 2H), 8,19 (д, J=1,8 Гц, 1H), 10,00 (с, 1H) 10,30 (с, 1H),
(3bS,4aR)-3-метил-6-[(2E)-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-еноил]-4,4a,5,6-тетрагидро-8H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-8-он [(I)] (соединение 7)
ESI МС: m/z 388 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,45 (т, J=4,8 Гц, 1H), 2,19 (дд, J=7,6, 4,5 Гц, 1H), 2,26 (д, J=0,7 Гц, 3H), 3,44 (дт, J=7,7, 4,8 Гц, 1H), 4,40 (дд, J=10,4, 4,8 Гц, 1H), 4,51 (д, J=10,3 Гц, 1H), 6,98 (д, J=15,4 Гц, 1H), 7,08 (уш. с, 1H), 7,24 (дд, J=7,9, 4,7 Гц, 1H), 7,44 (с, 1H), 7,98 (д, J=15,4 Гц, 1H), 8,09 (с, 1H), 8,34 (дд, J=4,8, 1,5 Гц, 1H), 8,41 (дд, J=7,8, 1,3 Гц, 1H), 11,30 (с, 1H),
(3bR,4aS)-3-метил-6-[(2E)-3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)проп-2-еноил]-4,4a,5,6-тетрагидро-8H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-8-он [(I)] (соединение 8)
ESI МС: m/z 388 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,45 (т, J=4,9 Гц, 1H), 2,16-2,21 (м, 1H), 2,26 (с, 3H), 3,44 (дт, J=7,7, 4,9 Гц, 1H), 4,40 (дд, J=10,4, 5,1 Гц, 1H), 4,51 (д, J=10,4 Гц, 1H), 6,98 (д, J=15,4 Гц, 1H), 7,08 (уш. с, 1H), 7,24 (дд, J=7,8, 4,5 Гц, 1H), 7,44 (с, 1H), 7,98 (д, J=15,4 Гц, 1H), 8,09 (с, 1H), 8,34 (дд, J=4,7, 1,1 Гц, 1H), 8,41 (д, J=7,8 Гц, 1H), 11,29 (уш. с, 1H),
N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 15)
ESI МС: m/z 546 (MH+),
N-(3-{(1E)-3-[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]-3-оксопроп-1-ен-1-ил}-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 16)
ESI МС: m/z 546 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,58 (м, 1H), 2,24 (м, 1H), 2,27 (с, 3H), 3,47 (дт, J=7,6, 4,9 Гц, 1H), 4,39 (дд, J=10,2, 4,9 Гц, 1H), 4,48 (м, 1H), 6,96 (д, J=15,1 Гц, 1H), 7,01 (с, 1H), 7,12 (м, 2H), 7,28 (м, 1H), 7,40 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,61 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,70 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,98 (м, 1H), 8,09 (д, J=2,8 Гц, 1H), 8,76 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,87 (д, J=2,0 Гц, 1H), 9,76 (уш. с, 1H), 10,97 (уш. с, 1H), 11,32 (уш. с, 1H),
1-метил-N-(1-метил-2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 45)
ESI МС: m/z 547 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,65 (т, J=4,9 Гц, 1H), 2,27 (д, J=12,4 Гц, 1H), 2,27 (д, J=0,7 Гц, 3H), 3,43 (дт, J=7,6, 4,89 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 4,12 (с, 3H), 4,38 (д, J=11,1 Гц, 1H), 4,51 (дд, J=10,8, 4,8 Гц, 1H), 6,52 (с, 1H), 7,08 (с, 1H), 7,13 (м, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,32 (тд, J=7,7, 1,0 Гц, 1H), 7,47 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,54 (м, 2H), 7,66 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,71 (дд, J=9,1, 2,0 Гц, 1H), 8,29 (д, J=2,0 Гц, 1H), 9,54 (с, 1H).
Пример 2
трет-Бутил-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамат [(II)] (соединение 18)
Стадия b, удаление защитной группы, стадия a
Стадия b
2
3
2
4
Раствор (8S)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ола ((XVII), 11,4 мг, 0,045 ммоль), полученный, как описано в GB2344818, растворяли в сухом ДМФА (1 мл), и обрабатывали EDCI (35 мг, 4 экв.) и 5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-карбоновой кислотой (XVI) (29 мг, 1,5 экв.). Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, и затем реакцию гасили добавлением насыщенного водного раствора NaCl. Выделение продукта осуществляли путем экстракции EtOAc (×4) и последующей промывки объединенных органических слоев водным 2M HCl (×3), насыщенным водным раствором NaCO (×3) и насыщенным водным раствором NaCl (×3). Органический слой сушили (NaSO), концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения 18, которое затем очищали флэш-хроматографией (гексан-ацетон 1:1).
+
ESI МС: m/z 670(MH),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,50 (с, 9Н), 1,79 (дт, J=6,4, 3,3 Гц, 1H), 2,61 (с, 2H), 3,53-3,66 (м, 1H), 3,89 (дд, J=11,4, 2,8 Гц, 1H), 4,25 (м, 1H), 4,73 (м, 1H), 4,84 (д, J=10,6 Гц, 1H), 7,21 (с, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,34 (м, 2H), 7,49 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,56 (м, 1H), 7,61 (м, 1H), 7,96 (уш. с, 2H), 8,21 (уш. с, 1H), 8,34 (с, 1H), 9,28 (с, 1H), 9,52 (с, 1H), 10,73 (уш. с, 1H), 10,80 (уш. с, 1H).
После удаления защитной группы были получены следующие соединения:
5-амино-N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-5a,7,8,8a-тетрагидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(II)] (соединение 19)
Раствор соединения 18 (18 мг, 0,0268 ммоль) в 3,5 M HCl-EtOAc (5 мл) перемешивали в течение 30 минут до удаления растворителя в стационарном потоке азота и получали хлористоводородное производное соединения 2 (15 мг, 89%).
+
ESI МС: m/z 570 (MH).
Стадия a
трет-Бутил-{2-[(2-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамат [(I)] (соединение 20)
3
3
2
4
Соединение 18 (30 мг, 0,045 ммоль) растворяли в ДМФА (1 мл), и обрабатывали водным раствором NaHCO (0,5 мл, 15 мг NaHCO/мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, EtOAc добавляли, и образовавшийся органический слой промывали насыщенным раствором соли (×4), сушили (NaSO) и концентрировали в вакууме. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (гексан-ацетон 6:4) с получением конечного соединения 20 (9 мг, 31%).
+
ESI МС: m/z 634 (MH),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,41 (с, 9Н), 1,56 (т, J=4,8 Гц, 1H), 2,22 (м, 1H), 2,29 (д, J=0,9 Гц, 3H), 3,52 (м, 1H), 4,69 (м, 2H), 7,06 (с, 1H), 7,26 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,28 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,36 (дд, J=8,8, 1,8 Гц, 1H), 7,48 (м, 1H), 7,49 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,58 (м, 1H), 7,63 (м, 1H), 7,96 (уш. с, 1H), 8,26 (уш. с, 1H), 8,35 (с, 1H), 9,55 (с, 1H), 10,77 (уш. с, 1H), 10,95 (уш. с, 1H).
После удаления защитной группы были получены следующие соединения:
5-амино-N-(2-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 21)
+
ESI МС: m/z 534 (MH).
Аналогичной процедурой и при использовании подходящего исходного материала были получены следующие соединения:
трет-бутил-{2-[(2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамат [(I)] (соединение 25)
+
ESI МС: m/z 634 (MH),
5-амино-N-(2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 26)
+
ESI МС: m/z 534 (MH),
N-(2-{[(3bR,4aS)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-нитро-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 29)
+
ESI МС: m/z 564 (MH),
N-(2-{[(3bS,4aR)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-нитро-1H-индол-2-карбоксамид [(I)] (соединение 30)
+
ESI МС: m/z 564 (MH).
Пример 3
Стадия b, удаление защитной группы, стадия a
Стадия b
Промежуточное соединение (8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-4-(бензилокси)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-карбоксамид
3
Раствор 4-амино-N-[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]-1-метил-1H-пиррол-2-карбоксамида, полученный, как описано в публикации J.Med. Chem. 2004, 47, 2611-2623, (155 мг, 0,341 ммоль), триэтиламина (0,048 мл, 0,341 ммоль) и CDI (300 мг, 1,71 ммоль) в сухом ДМФА (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После упаривания растворителя, остаток обрабатывали ТГФ и перемешивали в течение ночи. Осадок (соединение XVI) фильтровали и сушили в вакууме при 50°C и обрабатывали (8R)-4-(бензилокси)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индолом (соединение (XVII) (15,5 мг, 0,045 ммоль, полученным, как описано в GB2344818) в сухом ДМФА (2 мл) в присутствии NaHCO (4 мг, 0,047 ммоль) и перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 16 ч. После упаривания растворителя, остаток очищали флэш-хроматографией (DCM-MeOH 95:5) с получением промежуточного соединения (30 мг, 80%).
ESI МС: m/z 824 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 2,31 (т, J=7,2 Гц, 2H), 2,53 (с, 3H), 3,53 (т, J=10,4 Гц, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,85 (с, 3H), 3,87 (с, 3H), 4,12 (м, 1H), 4,18 (м, 1H), 4,32 (д, J=10,4 Гц, 1H), 5,27 (с, 2H), 6,83 (д, J=1,7 Гц, 1H), 6,84 (м, 1H), 7,05 (м, 2H), 7,13 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,20 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,25 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,36 (м, 2H), 7,41 (с, 1H), 7,43 (м, 2H), 7,50 (д, J=7,3 Гц, 2H), 7,99 (м, 2H), 8,77 (с, 1H), 9,91 (с, 1H), 9,93 (с, 1H).
Аналогично, при использовании соответствующего ацильного производного соединения были получены следующие соединения:
(8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-4-(бензилокси)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-карбоксамид
ESI МС: m/z 824 (MH+),
N-(2-{[(8S)-4-(бензилокси)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-карбоксамид
ESI МС: m/z 758 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,74 (м, 4H), 2,59 (м, 4H), 2,63 (д, J=1,0 Гц, 3H), 2,86 (м, 2H), 3,65 (дд, J=11,4, 9,6 Гц, 1H), 3,93 (дд, J=11,4, 2,4 Гц, 1H), 4,12 (т, J=6,1 Гц, 2H), 4,29 (м, 1H), 4,77 (м, 1H), 4,87 (м, 1H), 5,36 (м, 2H), 6,94 (дд, J=8,8, 2,3 Гц, 1H), 7,15 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,25 (м, 2H), 7,35 (м, 1H), 7,38 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,43 (м, 2H), 7,49 (д, J=9,1 Гц, 1H), 7,58 (м, 3H), 7,63 (м, 1H), 8,18 (уш. с, 1H), 8,37 (д, J=1,3 Гц, 1H), 9,52 (с, 1H), 10,77 (уш. с, 1H), 10,87 (уш. с, 1H),
[(8S)-4-(бензилокси)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}метанона гидрохлорид
ESI МС: m/z 600 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 2,06 (м, 4H), 2,62 (д, J=1,0 Гц, 3H), 3,02-3,32 (м, 2H), 3,56 (уш. с, 2H), 3,63 (дд, J=11,4, 9,6 Гц, 1H), 3,91 (дд, J=11,4, 2,4 Гц, 1H), 4,27 (м, 1H), 4,57 (уш. с, 2H), 4,73 (дд, J=10,2, 8,2 Гц, 1H), 4,84 (м, 1H), 5,35 (м, 2H), 7,05 (дд, J=8,8, 2,3 Гц, 1H), 7,16 (д, J=1,7 Гц, 1H), 7,31 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,35 (м, 1H), 7,38 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,43 (м, 2H), 7,52 (д, J=9,1 Гц, 1H), 7,57 (д, J=7,6 Гц, 2H), 8,16 (уш. с, 1H), 10,80 (уш. с, 1H), 13,38 (уш. с, 1H).
Удаление защитной группы
(8R)-N-(5-{[5-({5-[(3-Амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-карбоксамид [(II)] (соединение 10)
2
4
Раствор промежуточного соединения (15 мг, 0,0182 ммоль), 25% водного раствора HCONH (0,15 мл) и 10% Pd-C (15 мг) в ТГФ (3 мл) перемешивали в течение 3 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь фильтровали через целит и концентрировали после очистки хроматографией (DCM-MeOH 10:1) с получением соединения 10 (6,7 мг, 50%).
ESI МС: m/z 734 (MH+).
Аналогично были получены следующие соединения:
(8S)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-карбоксамид [(II)] (соединение 11)
ESI МС: m/z 734 (MH+),
N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-карбоксамид [(II)] (соединение 17)
ESI МС: m/z 668 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 2,19-2,25 (м, 4H), 2,60 (с, 3H), 3,39 (уш. с, 2H), 3,81 (м, 2H), 3,88 (дд, J=11,1, 2,5 Гц, 1H), 3,91-3,96 (уш. с, 2H), 4,24 (м, 1H), 4,51 (м, 1H), 4,72 (дд, J=10,8, 7,8 Гц, 1H), 4,80-4,82 (д, J=10,8, 1H), 7,01 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H), 7,26 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,28 (с, 1H), 7,33 (с, 1H), 7,49 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,55 (м, 1H), 7,60 (м, 1H), 7,90 (уш. с, 1H), 8,29 (д, J=1,8 Гц, 1H),
[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}метанона гидрохлорид [(II)] (соединение 37)
ESI МС: m/z 510 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 2,10-2,29 (м, 4H) 2,58 (д, J=1,3 Гц, 3H) 3,33 (м, 2H) 3,54 (дд, J=11,4, 10,1 Гц, 1H) 3,80 (м, 2H) 3,89 (м, 3H) 4,20 (м, 1H) 4,51 (м, 2H) 4,68 (дд, J=10,2, 8,2 Гц, 1H) 4,77 (м, 1H) 7,04 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H) 7,12 (с, 1H) 7,29 (д, J=2,3 Гц, 1H) 7,31 (д, J=0,5 Гц, 1H) 7,49 (д, J=8,9 Гц, 1H) 7,87 (уш. с, 1H),
[(8R)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}метанона гидрохлорид [(II)] (соединение 38)
ESI МС: m/z 510 (MH+).
Стадия a
3
3
2
4
Раствор соединения 10 (5 мг, 0,0068 ммоль) в ДМФА (5 мл) обрабатывали раствором NaHCO в воде (3 мл, 15 мг NaHCO/мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч, EtOAc добавляли, и образовавшийся органический слой промывали насыщенным раствором соли (×4), сушили (NaSO) и концентрировали в вакууме. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (DCM-MeOH 10:1) с получением соединения 9 (3,9 мг, 82%).
(3bS,4aR)-N-(5-{[5-({5-[(3-Амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-карбоксамид [(I)] (соединение 9)
ESI МС: m/z 698 (MH+),
1
2
H ЯМР (500 МГц, дихлорметан-d) δ м.д. 1,37 (м, 1H), 2,12 (дд, J=7,6, 4,6 Гц, 1H), 2,18 (д, J=0,9 Гц, 3H), 2,47 (т, J=6,6 Гц, 2H), 3,26 (дт, J=7,6, 5,0 Гц, 1H), 3,53 (т, J=6,6 Гц, 2H), 3,85 (с, 3H), 3,88 (с, 6Н), 4,05 (д, J=10,4 Гц, 1H), 4,14 (м, 1H), 6,64 (д, J=2,1 Гц, 1H), 6,73 (с, 1H), 6,82 (м, 2H), 6,99 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,17 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,20 (д, J=1,8 Гц, 1H) 7,29 (д, J=0,9 Гц, 1H).
Аналогично были получены следующие соединения:
(3bR,4aS)-N-(5-{[5-({5-[(3-амино-3-оксопропил)карбамоил]-1-метил-1H-пиррол-3-ил}карбамоил)-1-метил-1H-пиррол-3-ил]карбамоил}-1-метил-1H-пиррол-3-ил)-3-метил-8-оксо-4a,5-дигидро-4H-циклопропа[c]тиено[3,2-e]индол-6(8H)-карбоксамид [(I)] (соединение 12)
ESI МС: m/z 698 (MH+).
Пример 4
Стадия c, удаление защитной группы
Стадия c
(8S)-6-({5-[({5-[(трет-Бутоксикарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 22)
2
4
К раствору трет-бутил-{2-[(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)карбамоил]-1H-индол-5-ил}карбамата (соединение 18) (42 мг, 0,064 ммоль) в сухом DCM (6 мл) добавляли 4-метилпиперазин-1-карбонилхлорида гидрохлорид (XIII) (39 мг, 0,193 ммоль) и N,N-диметиламинопиридин (27 мг, 0,212 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. Растворитель упаривали, и остаток растворяли в EtOAc, образовавшийся органический слой промывали насыщенным раствором соли (×3), сушили (NaSO) и концентрировали в вакууме. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (DCM-MeOH 95:5) с получением соединения 22 (30 мг, 59%).
+
ESI МС: m/z 796 (MH),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 2,22 (с, 3H), 2,65 (д, J=0,9 Гц, 3H), 2,39–2,91 (м, 4H), 3,72 (дд, J=11,6, 9,5 Гц, 1H), 3,96 (дд, J=11,6, 3,1 Гц, 1H), 3,49-4,14 (м, 4H), 4,37 (м, 1H), 4,79-4,85 (м, 1H), 4,87-4,93 (м, 1H), 7,27 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,28 (с, 1H), 7,34-7,38 (м, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,50 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,56 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,62-7,65 (м, 1H), 7,96 (уш. с, 1H), 8,38 (с, 1H), 9,60 (с, 1H), 10,86 (уш. с, 1H), 10,90 (уш. с, 1H).
Аналогичной процедурой были получены следующие продукты:
(8R)-6-({5-[({5-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 27)
+
ESI МС: m/z 796 (MH),
(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(5-{[(5-нитро-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 31)
+
ESI МС: m/z 726 (MH),
(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(5-{[(5-нитро-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 32)
+
ESI МС: m/z 726 (MH).
Удаление защитной группы
(8S)-6-[(5-{[(5-Амино-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата гидрохлорид [(II)] (соединение 23)
Раствор соединения 22 (22 мг, 0,0276 ммоль) в 3,5 M HCl-EtOAc (5 мл) перемешивали в течение 30 минут до удаления растворителя в стационарном потоке азота, и получали целевой продукт в виде хлористоводородной соли (18 мг, 89%).
+
ESI МС: m/z 696 (MH),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 2,59 (с, 3H), 2,76 (уш. с, 3H), 3,05–3,42 (м, 4H), 3,75 (дд, J=10,8, 7,9 Гц, 1H), 3,95-4,01 (м, 1H), 3,58–4,08 (м, 4H), 4,32-4,40 (м, 1H), 4,67 (д, J=11,1 Гц, 1H), 4,75-4,83 (м, 1H), 6,92 (уш. с, 1H), 7,21 (уш. с, 1H), 7,23 (с, 1H), 7,30 (уш. с, 1H), 7,37 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,49-7,52 (м, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,57-7,60 (м, 1H), 8,16 (с, 1H), 8,24 (с, 1H), 10,15 (уш. с, 1H), 11,67 (уш. с, 1H), 11,70 (с, 1H).
Аналогичной процедурой были получены следующие продукты:
(8R)-6-[(5-{[(5-амино-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-8-(хлорметил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилата гидрохлорид [(II)] (соединение 28)
+
ESI МС: m/z 696 (MH),
(8S)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-гидрокси-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 33)
+
ESI МС: m/z 697 (MH),
(8R)-8-(хлорметил)-6-[(5-{[(5-гидрокси-1H-индол-2-ил)карбонил]амино}-1H-индол-2-ил)карбонил]-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил-4-метилпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 34)
+
ESI МС: m/z 697 (MH).
Пример 5
Стадия c, удаление защитной группы
Стадия c
Получение трет-бутил-(8S)-8-(хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-илпиперазин-1,4-дикарбоксилата [(II)]
2
4
N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-1H-индол-2-карбоксамид (111 мг, 0,2 ммоль), полученный, как описано в GB2344818, растворяли в сухом DCM (15 мл), и к этому раствору добавляли раствор трет-бутил-4-(хлоркарбонил)пиперазин-1-карбоксилата (100 мг, 0,4 ммоль) и N,N-диметиламинопиридина (55 мг, 0,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. Растворитель упаривали, и остаток растворяли в EtOAc, образовавшийся органический слой промывали насыщенным раствором соли (×4), сушили (NaSO) и концентрировали в вакууме. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (гексан-ацетон 7:3) с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, 19%).
+
ESI МС: m/z 767 (MH),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ацетон-d) δ м.д. 1,48 (с, 9Н), 2,65 (д, J=1,01 Гц, 3H), 3,55 (уш. с, 4H), 3,60 (уш. с, 2H), 3,73 (дд, J=11,36, 9,59 Гц, 1H), 3,79 (уш. с, 2H), 3,97 (дд, J=11,36, 2,78 Гц, 1H), 4,33-4,42 (м, 1H), 4,80-4,86 (м, 1H), 4,89-4,94 (м, 1H), 7,10 (т, J=7,19 Гц, 1H), 7,23-7,27 (м, 1H), 7,28 (с, 1H), 7,34 (д, J=1,51 Гц, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,53-7,57 (м, 1H), 7,60 (д, J=8,08 Гц, 1H), 7,61-7,65 (м, 1H), 7,67 (д, J=8,08 Гц, 1H), 8,29 (с, 1H), 8,38 (д, J=1,26 Гц, 1H), 9,56 (с, 1H), 10,89 (уш. с, 2H).
Удаление защитной группы
(8S)-8-(Хлорметил)-6-({5-[(1H-индол-2-илкарбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-илпиперазин-1-карбоксилат [(II)] (соединение 24)
Раствор промежуточного соединения (25 мг, 0,0326 ммоль) в 3,5 M HCl-EtOAc (5 мл) перемешивали в течение 2 ч. После упаривания растворителя в стационарном потоке азота, остаток сушили в вакууме с получением соединения 9 (11 мг, 48%).
+
ESI МС: m/z 667 (MH).
Пример 6
Стадия e'''
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 35)
Стадия e'''
К раствору N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-карбоксамида (соединение 17) (5 мг, 0,0071 ммоль) в DCM (1 мл) и TГФ (0,5 мл) добавляли 4-нитрофенилхлорформиат (3,1 мг, 0,0156 ммоль) и триэтиламин (2,2 мл, 0,0156 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов.
5
3
Добавляли N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-{4-[({[2,2-диметил-3-(метиламино)пропил](метил)карбамоил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид (XX)' (16 мг, 0,018 ммоль) и триэтиламин (3 мл, 0,021 ммоль). Полученную таким образом смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли DCM и промывали насыщенным водным раствором NaHCO. Сырой остаток очищали флэш-хроматографией (DCM-MeOH 100:15) с получением указанного в заголовке соединения (2 мг, 20%).
ESI МС: m/z 1422 (MH+),
1
3
H ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ м.д. 0,82-1,45 (м, 29H), 2,68 (с, 3H), 2,90-3,61 (м, 20H), 3,84-4,34 (м, 8H), 4,49 (м, 1H), 5,04-5,14 (м, 2H), 6,70-6,77 (м, 2H), 7,01 (дд, J=9,0,2,4, 1H), 7,18-7,71 (м, 11H) 8,11 (уш. с, 2H).
Аналогично были получены следующие соединения:
5
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 36)
ESI МС: m/z 1422 (MH+),
5
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 39)
ESI МС: m/z 1264 (MH+),
5
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{3-[({[(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 40)
ESI МС: m/z 1264 (MH+),
5
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[(3-{[({(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(2E)-3-{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}проп-2-еноил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил}окси)карбонил](метил)амино}-2,2-диметилпропил)(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 41)
ESI МС: m/z 1290 (MH+),
5
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[(3-{[({(8R)-8-(хлорметил)-1-метил-6-[(2E)-3-{5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}проп-2-еноил]-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил}окси)карбонил](метил)амино}-2,2-диметилпропил)(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 42)
ESI МС: m/z 1290 (MH+),
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]глицинамид [(IV)] (соединение 46)
ESI МС: m/z 1483 (MH+),
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{3-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]-2,2-диметилпропил}(метил)карбамоил]окси}метил)фенил]глицинамид [(IV)] (соединение 47)
ESI МС: m/z 1325 (MH+),
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]глицинамид [(IV)] (соединение 48)
ESI МС: m/z 1441 (MH+),
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-фенилаланил-L-лейцил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]глицинамид [(IV)] (соединение 49)
ESI МС: m/z 1283 (MH+).
Пример 7
Стадия c, удаление защитной группы, стадия g
Стадия c
5
N-[(9H-Флуорен-9-илметокси)карбонил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид [(II)]
5
К раствору N-(2-{[(8S)-8-(хлорметил)-4-гидрокси-1-метил-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-6-ил]карбонил}-1H-индол-5-ил)-5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-карбоксамида гидрохлорида (13 мг, 0,02 ммоль) в смеси ТГФ/DCM 1:1 (2 мл) при 0°C в атмосфере азота, добавляли 4-нитрофенилхлорформиат (20 мг, 0,1 ммоль) и триэтиламин (20 мл, 0,14 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов, растворитель упаривали, и остаток выделяли фильтрованием после обработки диэтиловым эфиром. Полученное твердое вещество разбавляли 1 мл DCM (10% ДМФА), и N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-L-валил-N-карбамоил-N-{4-[({метил-[2-(метиламино)этил]карбамоил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамида гидрохлорид (38 мг, 0,05 ммоль) и триэтиламин (7 мл, 0,05 ммоль) добавляли. Смесь перемешивали в течение ночи, растворители упаривали, и указанное в заголовке соединение (12 мг, выход 42%) выделяли путем очистки колоночной хроматографией (DCM/MeOH 8:2).
ESI МС: m/z 1409 (MH+),
1
4
H ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ м.д. 2,07 (уш. с, 4H), 2,58 (с, 3H), 2,93-3,09 (м, 6Н), 3,40-3,69 (м, 8Н), 4,11-4,40 (м, 3H), 4,43-4,81 (м, 3H), 4,99-5,17 (м, 2H), 6,92-7,44 (м, 14H), 7,46-7,64 (м, 4H), 7,75 (уш. с, 3H), 8,01-8,22 (м, 2H), 8,01-8,06 (м, 1H).
Аналогично были получены следующие соединения:
5
N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид
ESI МС: m/z 1251 (MH+),
1
4
H ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ м.д. 0,94-1,01 (м, 6Н), 1,51-1,95 (м, 4H), 2,12 (уш. с, 5H), 2,48-2,62 (м, 3H), 2,89-3,05 (м, 4H), 3,40-3,54 (м, 4H), 3,46-3,65 (м, 4H), 3,58-3,74 (м, 2H), 3,75-4,05 (м, 1H), 4,08-4,42 (м, 3H), 4,50 (м,1H), 4,55-4,81 (м, 4H), 4,96-5,20 (м, 2H), 6,92-7,81 (м, 17Н), 8,04 (уш. с, 1H).
Удаление защитной группы
5
L-Валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид [(II)] (соединение 50)
5
К раствору N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамида (11 мг, 0,0078 ммоль) в ДМФА (1 мл) добавляли пиперидин (4 мл, 0,039 ммоль). Смесь перемешивали 1 час при комнатной температуре, растворитель упаривали, и полученное указанное в заголовке соединение использовали без дальнейшей очистки.
Аналогично были получены следующие соединения:
5
L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид [(II)] (соединение 51)
Стадия g
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 52)
5
К раствору L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамида (4,6 мг, 0,0039 ммоль) в 1 мл DCM (10% ДМФА), добавляли 1-{6-[(2,5-диоксопирролидин-1-ил)окси]-6-оксогексил}-1H-пиррол-2,5-дион (3,6 мг, 0,0117 ммоль) и триэтиламин (2,2 мл, 0,0156 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, растворители упаривали, и указанное в заголовке соединение (2,2 мг, выход 41%) выделяли путем очистки колоночной хроматографией (DCM/MeOH 8:2).
ESI МС: m/z 1380 (MH+),
1
4
H ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ м.д. 1,98 (уш. с, 4H), 2,60-2,63 (м, 3H), 2,89-3,11 (м, 6Н), 3,39-3,72 (м,10H), 4,07-4,75 (м,7H), 4,98-5,17 (м,2H), 6,74 (уш. с, 2H), 7,00 (м, 2H), 7,07-7,45 (м, 8Н), 7,52 (уш. с, 3H), 8,07-8,11 (м, 1H).
Аналогично были получены следующие соединения:
5
N-[19-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-17-оксо-4,7,10,13-тетраокса-16-азанонадекан-1-оил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)амино]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 53)
ESI МС: m/z 1585 (MH+),
5
N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-[4-({[{2-[({[(8S)-8-(хлорметил)-1-метил-6-({5-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-индол-2-ил}карбонил)-7,8-дигидро-6H-тиено[3,2-e]индол-4-ил]окси}карбонил)(метил)амино]этил}(метил)карбамоил]окси}метил)-фенил]-L-орнитинамид [(IV)] (соединение 54)
ESI МС: m/z 1222 (MH+),
1
7
H ЯМР (400 МГц, dmf-d) δ м.д. 0,95 (т, J=7,8 Гц, 6Н), 2,16 (м, 1H), 2,66 (уш. с, 3H), 2,99-3,09 (м, 3H), 3,09-3,29 (м, 3H), 3,59 (уш. с, 2H), 3,69 (уш. с, 2H), 3,81 (уш. с, 2H), 4,04 (д, J=10,7 Гц, 1H), 4,31-4,47 (м, 2H), 4,61 (уш. с, 1H), 4,83 (уш. с, 2H), 5,11 (д, J=15,7 Гц, 2H), 5,60 (с, 2H), 6,29 (уш. с, 1H), 7,00 (м, 3H), 7,30 (м, 2H), 7,53 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,88 (д, J=8,2 Гц, 1H), 8,13 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,27 (с, 1H), 10,1 (м, 1H), 11,61 (уш. с, 1H).
Получение промежуточного соединения
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-{4-[({[2,2-диметил-3-(метиламино)пропил](метил)карбамоил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид (XX)'
Стадия 1
N,N'-(2,2-Диметилпропан-1,3-диил)диформамид
2
2
В круглодонной колбе коммерчески доступный 2,2-диметилпропан-1,3-диамин (851 мг, 8,32 ммоль) подвергали взаимодействию с этилформиатом (4,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов до тех пор, пока исходный материал не переставал обнаруживаться (ТСХ-анализ, MeOH:CHCl = 2:8). Затем, реакционную смесь упаривали в вакууме с получением сырого продукта (1,4 г, масло).
ESI МС: m/z 159 (MH+),
1
6
H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 0,79 (с, 6Н), 2,92 (д, J=6,41 Гц, 4H), 7,94 (уш. с, 2H), 8,05-8,09 (м, 2H).
Стадия 2
N,N',2,2-Тетраметилпропан-1,3-диамин
В высушенную круглодонную колбу, содержащую N,N'-(2,2-диметилпропан-1,3-диил)диформамид (1,4 г, 8,85 ммоль), охлажденный при 0°C в атмосфере аргона, добавляли раствор (24 мл) литийалюминийгидрида в тетрагидрофуране (1M). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 28 часов. После охлаждения при 0°C, добавляли раствор воды в тетрагидрофуране, и полученную смесь фильтровали через слой целита. Фильтрат сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, и полученный таким образом продукт в виде раствора в тетрагидрофуране использовали без дальнейшей очистки на следующей стадии.
Стадия 3
2-(Бифенил-4-ил)пропан-2-ил[2,2-диметил-3-(метиламино)пропил]метилкарбамат
2
2
Коммерческий метил 4-[({[2-(бифенил-4-ил)пропан-2-ил]окси}карбонил)окси]бензоат (5,54 ммоль, 2,16 г) добавляли к раствору N,N',2,2-тетраметилпропан-1,3-диамина в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем растворитель упаривали в вакууме, и остаток очищали флэш-хроматографией (MeOH:CHCl = 1:9) с получением целевого продукта (848 мг).
MС (ESI): 369 (MH+),
1
6
H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 0,73-0,83 (м, 5H), 0,91 (уш. с, 3H), 1,65-1,77 (м, 6Н), 2,78 (уш. с, 1H), 7,32-7,38 (м, 1H), 7,41 (д, J=8,43 Гц, 2H), 7,46 (т, J=7,69 Гц, 2H), 7,58-7,69 (м, 4H).
Аналогично были получены следующие соединения:
2-(бифенил-4-ил)пропан-2-ил метил-[2-(метиламино)этил]карбамат
MС (ESI): 327 (MH+),
1
6
H ЯМР (401 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 1,70-1,75 (м, 6Н), 2,23-2,39 (м, 3H), 7,30-7,39 (м, 1H), 7,40-7,49 (м, 4H), 7,58-7,63 (м, 2H), 7,63-7,68 (м, 2H).
Стадия 4
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-{4-[11-(бифенил-4-ил)-4,6,6,8,11-пентаметил-3,9-диоксо-2,10-диокса-4,8-диазадодец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамид
К раствору N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N5-карбамоил-N-[4-({[(4-нитрофенокси)карбонил]окси}метил)фенил]-L-орнитинамида (0,492 ммоль, 363 мг) в безводном диметилсульфоксиде (1,0 мл) добавляли раствор 2-(бифенил-4-ил)пропан-2-ил[2,2-диметил-3-(метиламино)пропил]метилкарбамата (0,393 ммоль, 145 мг) в безводном диметилсульфоксиде (0,9 мл) и триэтиламине (1,5 ммоль, 150 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока исходный материал не переставал обнаруживаться, затем обрабатывали н-гексаном (3×6 мл), и сырой остаток использовали без дальнейшей очистки на следующей стадии.
MС (ESI): 967 (MH+).
Аналогично были получены следующие соединения:
5
N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-L-валил-N-{4-[10-(бифенил-4-ил)-4,7,10-триметил-3,8-диоксо-2,9-диокса-4,7-диазаундец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамид
MС (ESI): 954 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 0,86 (дд, J=13,34, 6,79 Гц, 6Н), 1,69 (уш. с, 6Н), 1,86-2,05 (м, 1H), 2,76 (м, J=9,30 Гц, 2H), 2,92 (д, J=14,95 Гц, 3H), 3,01 (м, J=6,10 Гц, 1H), 3,15-3,15 (м, 0H), 3,38-3,53 (м, 2H), 3,93 (т, J=7,63 Гц, 1H), 4,18-4,26 (м, 2H), 4,26-4,34 (м, 1H), 4,42 (уш. с, 1H), 4,92-5,06 (м, 2H), 5,39 (с, 2H), 5,96 (т, J=6,02 Гц, 1H), 7,18-7,48 (м, 12H), 7,52-7,66 (м, 6Н), 7,70-7,77 (м, 2H), 7,88 (д, J=7,47 Гц, 2H), 8,11 (уш. с, 1H), 10,06 (уш. с, 1H)
Стадия 5
Указанное в заголовке промежуточное соединение
5
2
2
Сырой продукт N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-{4-[11-(бифенил-4-ил)-4,6,6,8,11-пентаметил-3,9-диоксо-2,10-диокса-4,8-диазадодец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамид обрабатывали дихлоруксусной кислотой (7,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока исходный материал не переставал обнаруживаться, затем очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (EtOH:CHCl=1,5:8,5) с получением целевого продукта (44,0 мг, белое твердое вещество).
MС (ESI): 729 (MH+),
1
4
H ЯМР (500 МГц, МЕТАНОЛ-d) δ м.д. 0,97 (д, J=4,42 Гц, 3H), 0,98 (д, J=4,27 Гц, 3H), 1,04 (с, 6Н), 1,23-1,35 (м, 4H), 1,50-1,68 (м, 7Н), 1,76 (дтд, J=13,90, 9,26, 9,26, 5,11 Гц, 1H), 1,86-1,95 (м, 1H), 2,07 (д кв., J=13,90, 6,86 Гц, 1H), 2,26-2,31 (м, 2H), 2,57 (с, 3H), 2,67 (с, 2H), 3,04 (с, 3H), 3,11 (дт, J=13,50, 6,67 Гц, 1H), 3,16-3,22 (м, 1H), 3,23 (уш. с, 2H), 3,48 (т, J=7,09 Гц, 2H), 4,14 (д, J=7,47 Гц, 1H), 4,49 (дд, J=9,07, 5,11 Гц, 1H), 5,13 (с, 2H), 5,94 (с, 3H), 6,75-6,82 (м, 1H), 7,36 (д, J=8,54 Гц, 2H), 7,60 (д, J=8,69 Гц, 2H).
Получение промежуточного соединения
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-карбамоил-N-{4-[({метил[2-(метиламино)этил]карбамоил}окси)метил]фенил}-L-орнитинамид
Стадия 6
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-{4-[11-(бифенил-4-ил)-4,6,6,8,11-пентаметил-3,9-диоксо-2,10-диокса-4,8-диазадодец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамид
5
К раствору продукта N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-L-валил-N-{4-[10-(бифенил-4-ил)-4,7,10-триметил-3,8-диоксо-2,9-диокса-4,7-диазаундец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамида [полученного, как описано выше на стадии 4] (0,063 ммоль, 60 мг) в безводном диметилформамиде (0,8 мл) добавляли пиперидин (0,32 ммоль, 27,2 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока исходный материал не переставал обнаруживаться. Растворитель упаривали в вакууме, и полученный таким образом сырой продукт использовали без дальнейшей очистки на следующей стадии.
MС (ESI): 732 (MH+).
Стадия 7
5
N-[6-(2,5-Диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-{4-[10-(бифенил-4-ил)-4,7,10-триметил-3,8-диоксо-2,9-диокса-4,7-диазаундец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамид
5
2
2
К раствору сырого продукта N-[6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноил]-L-валил-N-{4-[11-(бифенил-4-ил)-4,6,6,8,11-пентаметил-3,9-диоксо-2,10-диокса-4,8-диазадодец-1-ил]фенил}-N-карбамоил-L-орнитинамида (0,0629 ммоль) в безводном диметилформамиде (1,5 мл) добавляли 1-{6-[(2,5-диоксопирролидин-1-ил)окси]-6-оксогексил}-1H-пиррол-2,5-дион (0,189 ммоль, 58,3 мг) и триэтиламин (0,252 ммоль, 25,5 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока исходный материал не переставал обнаруживаться. Растворитель упаривали в вакууме, и сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (элюент EtOH:CHCl=1:9) на силикагеле (230-400 меш) с получением целевого продукта (34 мг, воск белого цвета).
MС (ESI): 925 (MH+),
1
6
H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 0,83 (дд, J=15,79, 6,79 Гц, 6Н), 1,31-1,40 (м, 1H), 1,60 (уш. с, 1H), 1,69 (с, 6Н), 1,90-2,02 (м, 1H), 2,05-2,23 (м, 2H), 2,89-2,96 (м, 3H), 3,01 (уш. с, 1H), 3,34-3,38 (м, 2H), 3,46 (м, J=8,24 Гц, 2H), 4,19 (т, J=7,40 Гц, 1H), 4,38 (уш. с, 1H), 4,95-5,05 (м, 2H), 5,40 (с, 2H), 5,97 (д, J=12,20 Гц, 1H), 6,98-7,02 (м, 2H), 7,30 (д, J=8,85 Гц, 2H), 7,37 (дд, J=15,40, 7,93 Гц, 3H), 7,45 (м, J=7,17 Гц, 2H), 7,52-7,67 (м, 6Н), 7,80 (д, J=8,24 Гц, 1H), 8,08 (д, J=6,71 Гц, 1H), 9,76-10,18 (м, 1H).
Стадия 8
Указанное в заголовке промежуточное соединение
Путем проведения реакции промежуточного соединения, полученного на стадии 6, в условиях реакции, описанных выше на стадии 5, было получено указанное в заголовке соединение в виде порошка белого цвета.
MС (ESI): 687(MH+).