Исследование влияния процесса автофлокуляции клеток микроводоросли Chlorella sorokiniana в аквакультуре на получение комплекса пигментов

УДК 608.2

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРОЦЕССА АВТОФЛОКУЛЯЦИИ КЛЕТОК МИКРОВОДОРОСЛИ CHLORELLA SOROKINIANA В АКВАКУЛЬТУРЕ НА ПОЛУЧЕНИЕ КОМПЛЕКСА ПИГМЕНТОВ

Т. А. Кузнецова, Ю. Г. Базарнова, А. С. Боргоякова

THE EFFECT OF AUTOFLOCCULATION OF CHLORELLA SOROKINIANA MICROAlGAE CELLS IN AQUACULTURE ON OBTAINING THE PIGMENT

COMPLEX

T. A. Kuznetsova, Yu. G. Bazarnova, A. S. Borgoyakova

Культивирование микроводорослей Сhlorella для получения продуктов с высокой добавленной стоимостью является перспективным направлением аква-биотехнологии ввиду высокой скорости роста биомассы. Биомасса вида С. sorokiniana - перспективный сырьевой источник для производства кормов, а также получения эссенциальных липидов, пигментов, белков, растительных волокон. До сих пор не найдено дешевого и эффективного способа концентрирования биомассы, позволяющего снизить общую себестоимость продуктов из С. sorokiniana и при этом максимально эффективно извлечь ценные компоненты. Цель работы - исследовать процесс автофлокуляции микроводорослей С. sorokiniana и установить влияния рН на динамику и эффективность процесса, а также на выход комплекса пигментов. Установлено, что эффективность автофло-куляции при рН 11 составляет 95,4 % при минимальном времени седиментации 30 мин. Увеличение рН более 11 приводит к частичной гибели клеток популяции. Показано, что продолжительность седиментации флокулятов зависит от фазы роста популяции и увеличивается в фазе интенсивного роста. Выход суммы пигментов из биомассы, седиментированной путем автофлокуляции, составил 32,58 мг/г сухой биомассы. В пигментный комплекс входит хлорофилл а и b (12,93 и 9,51 мг/г соответственно). Выход каротиноидов в экстракты составил 6,49 мг/г сухой биомассы. Данные показатели сопоставимы с выходом пигментов из биомассы, осажденной традиционными механическими способами: центрифугированием и фильтрацией.

Сhlorella sorokiniana, автофлокуляция, клеточная суспензия, седиментация, экстракция, пигментный комплекс, хлорофилл, каротиноиды

Cultivation of Chlorella sorokiniana microalgae in order to obtain products with high added value is a promising direction of aqua-biotechnology due to the high rate of biomass growth. The biomass of C. sorokiniana is a promising source of raw materials for feed production, as well as for obtaining essential lipids, pigments, proteins, and plant fibers. Until now, there has not been discovered a cheap and effective method of concentrating biomass, allowing to reduce the total cost of products from C. sorokin-iana and, at the same time, to extract valuable components as efficiently as possible.

The aim of the work is to study the process of autofloculation of С. Sorokiniana micro-algae and the effect of the pH of the suspension on the dynamics and efficiency of the process, as well as on the output of the complex of pigments. It has been established that the efficiency of autofloculation at pH 11 is 95.4% with a minimum sedimentation time of 30 minutes. An increase in pH of more than 11 leads to a partial death of the population cells. It is shown that the duration of the sedimentation of the flocules depends on the phase of population growth and increases in the phase of intensive growth. Determination of the amount and components of the pigment complex in ethanol extracts has been performed spectrophotometrically. The output of the amount of pigments from the biomass of the precipitated autofloculation was 32.58 mg / g of dry biomass. The pigment complex includes chlorophyll a and b (12.93 and 9.51 mg / g, respectively). The output of carotenoids in the extracts was 6.49 mg / g of dry biomass. These figures are comparable with the output of pigments from biomass deposited by traditional energy-intensive mechanical methods: centrifugation and filtration.

Chlorella sorokiniana, autoflocculation, cell suspension, sedimentation, pigment complex, spectrophotometry, chlorophyll, carotenoids

ВВЕДЕНИЕ

Культивирование микроводорослей Сhlorella sorokiniana для получения продуктов с высокой добавленной стоимостью является перспективным направлением аквабиотехнологии ввиду высокой скорости роста биомассы [1, 2], содержащей значительное количество ценных компонентов [3], а также низких затрат на культивирование [4].

Биомасса микроводорослей С. sorokiniana является перспективным сырьевым источником для производства кормов, а также получения эссенциальных липидов, пигментов, белков, растительных волокон [5].

Незначительная масса клеток водорослей С. sorokiniana и отрицательный заряд на их поверхности создают проблемы концентрирования биомассы и ее отделения от культуральной среды [6].

Сбор биомассы микроводорослей в аквакультуре чаще всего проводят методом центрифугирования, который является весьма энергозатратным, что увеличивает общую себестоимость продуктов из микроводорослей на 30 % [7].

Таким образом, разработка эффективного способа концентрирования биомассы является весьма актуальной для снижения затрат и более успешной коммерциализации продуктов переработки микроводорослей.

Флокуляция рассматривается как перспективный способ концентрирования биомассы микроводорослей, позволяющий заметно сократить затраты. Увеличение размера частиц путем образования флоков позволяет повысить скорость осаждения биомассы за счет гравитационных сил (рис. 1) [8].

Рис. 1. Схема флокуляции отрицательно заряженных клеток одноклеточных водорослей при нейтрализации их заряда с помощью катионных флокулянтов [9] Fig. 1. Scheme of flocculation of negatively charged cells of unicellular algae while neutralizing their charge with the help of cationic flocculants [9]

На сегодняшний день изучено несколько методов флокуляции одноклеточных водорослей, в том числе химические, физические, биологические, автофлоку-ляция и флокуляция, вызываемая генетической модификацией [8]. Известен опыт использования коагулянтов, таких как сульфат магния, хлорид железа [10], алюминиевые квасцы [9], а также флокулянтов - хитозана, полиакриламида [11].

Стоит отметить ряд недостатков использования химических коагулянтов и флокулянтов. В их числе загрязнение биомассы катионами металлов, оказываю -щее негативное влияние на обменные процессы в клетках, отсутствие возможности рециклинга питательных сред, а также риск попадания токсичных примесей в питательную среду. В качестве флокулянтов предпочтительны природные биополимеры, однако в этом случае определяющими факторами являются кислотность среды и присутствие посторонних электролитов, оказывающих влияние на целостность клеток. Избыточная кислотность растворов хитозана, используемых в технологиях очистки сточных вод от нефтяных и других органических загрязнений, приводит к стрессу клеток и деградации ценных фитохимических веществ [8].

Биофлокуляция является альтернативным способом концентрирования биомассы микроводорослей за счет сочетанного использования симбиотических микроорганизмов или полярных по заряду микроводорослей, который пока не изучен полностью и требует дополнительных затрат на культивирование микро-организмов-флокулянтов [7, 12].

Одним из новых способов концентирования биомассы является электро-флокуляция. Она не предполагает использования дополнительных флокулянтов, поэтому может быть перспективной [13].

Известно, что в биомассе микроводорослей при повышении рН более 9 может спонтанно возникать автофлокуляция [14], что связано с образованием осадка гидроксидов кальция или магния, частицы которых обладают поверхностным зарядом и могут выполнять роль коагулянтов [8].

Цель настоящей работы - исследование процесса автофлокуляции микроводорослей С. sorokiniana и влияния рН и концентрации клеток в суспензии на его динамику и эффективность.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

В качестве прекультуры С. sorokiniana использовали штамм 211-8k из коллекции водорослей университета Гёттингена (Германия), который культивировали в лабораторных условиях [2] в пилотном фотобиореакторе.

Для освещения клеточной суспензии использовали светодиодные светильники со световым потоком 700 лм, коррелированной цветовой температурой (К) 2900^3200 (теплый дневной свет). Температура культивирования составляла (23±1)°С; интенсивность аэрации смеси - 1,5 л/мин. Культуральную среду, сбалансированную по содержанию макро- и микроэлементов, готовили в соответствии с рекомендациями авторов [15]. Продолжительность культивирования до достижения максимальной концентрации клеток в суспензии в лабораторных условиях составляла 9-10 сут.

Для изучения процесса автофлокуляции суспензию помещали в стеклянные циллиндры объемом 100 мл, в каждом из которых варьировали рН в диапазоне от 7 до 12 путем внесения 0,1 н растворов NaOH или НС1 при постоянном перемешивании. Контроль рН осуществляли на приборе Mini PH Meter (АКВА-ЛАБ, Россия).

Эффективность флокуляции определяли по оптической плотности клеточной суспензии при длине волны 750 нм на спектрофотометре UVmini-1240 (SHIMADZU), по отношению к раствору культуральной среды.

Эффективность флокуляции ЭФ (%) рассчитывали по формуле:

эф

OD

где 0D750(t0) - оптическая плотность суспензии в момент времени т0; 0D750(t) - оптическая плотность осветленного слоя суспензии в момент времени Т (Т > Т0).

Микроскопирование прижизненных препаратов суспензии микроводорослей, окрашенных метиленовым синим для выявления мертвых клеток, проводили с помощью микроскопа МИКМЕД-6 с системой визуализации (АО «ЛОМО», Санкт-Петербург). Для обработки микрофотографий использовали программу Микроанализ FOTO (АО «ЛОМО», Санкт-Петербург) и Levenguk (производитель «Levenhuk LabZZ»).

Для количественного анализа пигментов (хлорофиллов и каротиноидов) в экстрактах биомассы использовали полосы поглощения пигментов в области 440, 649 и 664 нм и методику авторов [16, 17]. Характеристики состава пигментного комплекса в полученных экстрактах определяли по сумме пигментов и содержанию хлорофиллов и каротиноидов, а также соотношению хлорофиллов а и b.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Кривая роста биомассы С. sorokiniana описывается S-образной кривой (рис. 2, а), на которой можно выделить участки, соответствующие лаг-фазе, фазе экспоненциального роста и стационарной фазе (фазе истощения). Максимальная концентрация клеток биомассы 41*106 клеток/мл достигалась на девятые сутки культивирования, удельная скорость линейной фазы роста биомассы составляла ц = 0,26 сут-1.

Нарастание щелочности в процессе культивирования микроводорослей происходит за счет истощения культуральной среды, что является вполне естественным (рис. 2, б). Увеличение значения рН связано с потреблением клетками анионов солей питательной среды [18].

0 7 ¿г

____jj § @  @

ч

© .О

Q* f

рН

7,6 7,4 7,2

0 2 4 6 8 10 1 0123456789 10 Время, сут В ремя культивирования, сут

а б

Рис. 2. Характеристика роста биомассы микроводорослей С. sorokiniana: а - кривая роста биомассы микроводорослей; б - динамика рН в процессе

культивирования

Fig. 2. Characteristics of the growth of the biomass of C. sorokiniana microalgae: a - growth curve of the microalgae biomass; b - pH dynamics during cultivation

По мере истощения среды, примерно на шестые-седьмые сутки, когда рН достигает значений около 8-9, происходит автофлокуляция. Эффект ее несколько снижен за счет аэрации суспензии. В процессе культивирования рН может достигать 11 [19], однако оптимальное для синтеза биомассы значение рН, согласно литературным данным, находится в пределах 6-8 [18].

+2 +2

Увеличение рН приводит к осаждению ионов Mg и Са из культуральной среды в виде гидроксидов на поверхности клеток, что нейтрализует поверхностный заряд последних [20].

Влияние рН на процесс автофлокуляции микроводорослей и эффективность этого процесса иллюстрирует рис. 3. Установлено, что в интервале рН от 7 до 10 происходит скрытая флокуляция, соответствующая стадии, при которой каких-либо внешних изменений не отмечается. В области рН 11 наблюдается порог перехода от скрытой флокуляции к явной, соответствующий концентрации электролитов, снижающих ^-потенциал поверхности клеток до критической величины. Дальнейшее увеличение концентрации электролитов выше порога коагуляции

приводит к резкому повышению скорости флокуляции клеток, что в нашем случае соответствует рН 12.

а б

Рис. 3. Влияние рН: а) на процесс автофлокуляции микроводорослей С. sorokiniana (цифры на фотографии соответствуют значению рН); б) на эффективность автофлокуляции Fig. 3. The influence of pH: a) on the process of autoflocculation of C. sorokiniana microalgae (the numbers in the photo correspond to pH value); b) on the effectiveness

of autoflocculation

Интенсивность автофлокуляции зависит от нескольких факторов, в том числе от концентрации клеток в суспензии: при небольшой концентрации клеток (до 10 млн.кл./мл) автофлокуляция проходит менее интенсивно, что связано с большим расстоянием между клетками. Установлено, что процесс автофлокуляции популяции С. sorokiniana в фазе истощения происходит интенсивнее и заканчивается в течение 30 мин, в то время как в фазе интенсивного роста он протекает от 1,5 до 3,0 ч.

При достижении рН 12 снижение эффективности автофлокуляции от 96 до 90 % связано с началом гибели клеток, вызванной нарушением целостности клеточной оболочки и выходом окрашенных компонентов клетки в раствор, что подтверждают результаты микроскопирования прижизненных препаратов (рис. 4).

Микроскопирование биомассы микроводоросли позволило выявить образование единичных флоков при рН 10 (рис. 4). Количество флоков и их размер увеличивается при достижении рН 11. Дальнейшее увеличение щелочности (рН 12) приводит к уплотнению флоков, однако сопровождается появлением мертвых клеток.

рН 11 рН 12

Рис. 4. Микроскопическая картина прижизненных препаратов С. sorokiniana при разных значениях рН суспензии: 1 - флоки; 2 - мертвые клетки, окраска

метиленовым синим Fig. 4. Microscopic picture of C. sorokiniana intravital preparations at different pH values of the suspension: 1 - flocks; 2 - dead cells, stained with methylene blue

В таблице приведены сводные данные по влиянию способов концентрирования клеточной суспензии на выход пигментов из биомассы С. sorokiniana.

Установлено, что используемые способы концентрирования клеточной суспензии позволили выделить суммарное количество пигментов от 29,58 до 35,4 мг из 1 г сухой биомассы.

Таблица. Влияние способов концентрирования клеточной суспензии на выход пигментов из биомассы С. sorokiniana

Table. The effect of methods for concentration cell suspension on the output of pigments from C. sorokiniana biomass_

Способ концентрирования Z пигментов, мг/г сухой биомассы Chlorophyll, мг/г сухой биомассы Carotenoids

Cha Chb Cha/Chb мг/г сухой биомассы % от ? пигментов

Центрифугирование 29,58±1,48 10,01±0,50 10,11±0,51 0,99±0,27 5,49±0,27 21,45±1,07

Фильтрация через мембранный фильтр 35,44±1,52 15,95±0,79 12,93±0,65 1,64±0,08 5,99±0,31 18,93±1,02

Авто флокуляция 32,58±1,73 12,93±0,65 9,51±0,48 1,36±0,07 6,48±0,32 22,41±1,12

Наибольшее количество суммы пигментов соответствует способу концентрирования - фильтрация через мембранный фильтр, так как этот способ не предполагает повышения температуры и использования различных коагулянтов, а хло-рофиллы и каротиноиды достаточно чувствительны к влиянию повышения температур, изменению рН [21, 22]. При центрифугировании наблюдается снижение содержания пигментов в экстрактах в среднем на 8,5 %, что связано с повышением температуры в процессе отделения жидкой фазы.

Отделение биомассы методом автофлокуляции позволяет удешевить технологию получения пигментов: снижение их содержания относительно показателя, соответствующего фильтрации биомассы, составляло 8,0 %. Содержание каро-тиноидов в исследуемых образцах варьировалось от 5,49 (центрифугирование) до 6,48 мг/г сухой биомассы (автофлокуляция).

ВЫВОДЫ

Автофлокуляция является эффективным способом концентрирования биомассы С. sorokiniana. Показано, что эффективность процесса флокуляции при рН 11 составляет 95,4 %. Установлено, что минимальная продолжительность седиментации флокулятов при рН 11 соответствует фазе стабилизации роста, когда концентрация клеток достигает максимума (41*106 клеток/мл). Увеличение рН до 12 приводит к гибели культуры вследствие разрушения клеточной оболочки.

При сравнении механических методов концентрирования биомассы микроводорослей и автофлокуляции по показателю выхода суммы пигментов в этанольные экстракты результат оказался сопоставимым. Выход суммы пигментов из биомассы, осажденной автофлокуляцией, составлял 32,58 мг/г сухой биомассы. Пигментный комплекс включает хлорофилл а и b (12,93 и 9,51 мг/г соответственно). Выход каротиноидов в экстракты составил 6,49 мг/г сухой биомассы.

Таким образом, автофлокуляцию можно использовать для промышленного концентрирования биомассы микроводорослей С. Sorokiniana из клеточной суспензии с целью получения пигментного комплекса.

БЛАГОДАРНОСТИ

Исследования проводились в рамках реализации федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014-2020 годы» по теме проекта: «Разработка и внедрение инновационных биотехнологий переработки микроводорослей Chlorella sorokiniana и ряски Lemna minor» (Соглашение № 14.587.21.0038). Уникальный идентификатор проекта RFMEFI58717X0038.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Franco, M. C. Batch cultivation of microalgae in the Labfors 5 Lux Photobio-reactor with LED Flat Panel Option / М. С. Franco [Электронный ресурс]. - URL: http://www.inforsht.com/images/downloads/application_notes_photosynthesis_biofuel/ Batch_cultivation_of_microalgea_in_the_Labfors_5_Lux_photobioreactor_

2. Politaeva, N. Impact of various physical exposures on Chlorella Sorokiniana microalgae cultivation / N. Politaeva, T. Kuznetsova, et al. // International Journal of Applied Engineering Research. - 2017. - Volume 12. - Number 21. - Pp. 1148811492.

3. Дворецкий, Д. С. Технология получения липидов из микроводорослей: монография / Д. С. Дворецкий, С. И. Дворецкий. - Тамбов: Изд-во ФГБОУ ВПО «ТГТУ», 2015. - 103 с.

4. Xu, Yanan Algal biomass and diesel emulsions: An alternative approach for utilizing / Yanan Xu, Paul Hellier, et al. // Applied Energy. - 2016. - №172. - Pp. 80-95.

5. Kari, Skja BioCO2 - A multidisciplinary, biological approach using solar energy to capture CO2 while producing H2 and high value products / Kari Skja, Peter Lindblad, et al. // Biomolecular Engineering. - 2007. - №24. - Рр. 405-413.

6. Amrit, Lal Das Biomass production and identification of suitable harvesting technique for Chlorella sp. MJ 11/11 and Synechocystis PCC 6803 / Lal Amrit // Biotech. - 2016. - №6. - Р. 41.

7. Salim, Sina Harvesting of microalgae by bio-flocculation / Sina Salim, Rouke Bosma, et al. // J Appl Phycol. - 2011. - № 23. - Рр. 849-855.

8. Vandamme, D. Flocculation based harvesting processes for microalgae biomass production Dissertation presented in partial fulfillment of the requirements for the degree of Doctor in Bioscience Engineering / D.Vandamme. - Arenberg Doctoral School. - May 2013. - 123 p.

9. Rastogia, R. P. Algal Green Energy - R & D and technological perspectives for biodiesel production / R. P. Rastogia, Pandey A., et al. // Renewable and Sustainable Energy Reviews. Article in Renewable and Sustainable Energy Reviews November. -2017. - Pp. 1-24.

10. Wyatt, N. B. Critical Conditions for High Efficiency Flocculation of Freshwater Algae with Ferric Chloride / N. B. Wyatt, L. M. Gloe, et al. // Biotechnology and Bioengineering. - 2011. [Электронный ресурс]. - URL: https://www.osti.gov/servlets/purl/1106656

11. Pradana, Y. S. Chitosan Flocculation-sedimentation for Harvesting Selected Microalgae Species Grown in Monoculture and Mixed Cultures / Y. S. Pradana, Y. Kusumastutia, et al. // Chemical engineering transactions. - 2017. -Vol. 56. -Pр. 1549-1554.

12. Watanabe, K. Composition of the sheath produced by the green alga Chlorella sorokiniana / K. Watanabe, M. Imase, et al. // Journal compilation. The Society for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology. - 2006. - № 42. -Pр. 538-543.

13. Matos, К. Т. Microalgae biomass harvesting by electrocoagulation / К. Т. Matos, M. Santos, et al. // Energy for Sustainability 2013 Sustainable Cities: Designing for People and the Planet. (8 to 10 September). - Coimbra, 2013. - Pp. 1-6.

14. Spilling, K. Inducing autoflocculation in the diatom Phaeodactylum tricor-nutum through CO2 regulation / K. Spilling, J. Seppälä, and T. Tamminen // Journal of Applied Phycology. - 2011. - 23(6). - Pp. 959-966.

15. Crofcheck, C. Influence of media composition on the growth rate of Chlorella vulgaris and Scenedesmus acutus utilized for CO2 mitigation / C. Crofcheck, A. Shea, et al. // J Biochem Tech. - 2012. - 4(2). - Pp. 589-594.

16. Selen, Hande Efect of heat treatment on chlorophyll degradation and color loss in green peas / Hande Selen, Feryal Karadenz, Nuray Koca, Yeflim Soer // Research Article (Araflt>rma Makalesi). - 2008. - 33 (5). - Pp. 225-233.

17. Sumanta, Nayek Spectrophotometry Analysis of Chlorophylls and Carote-noids from Commonly Grown Fern Species by Using Various Extracting Solvents / Nayek Sumanta // Research Journal of Chemical Sciences. - 2014. - Vol. 4(9). -Pp. 63-69.

18. Yao, L. Mixed Wastewater Coupled with CO2 for Microalgae Culturing and Nutrient Removal / L. Yao L., J. Shi, et al. // Plose one. - September 29 2015. -Pp. 1-16.

19. Andrade, C. J., Andrade L. M. An overview on the application of genus Chlorella in biotechnological processes / C. J. Andrade, L. M. Andrade // Journal of Advanced Research in Biotechnology. 2017. [Электронный ресурс]. - URL: www.symbiosisonlinepublishing.com

20. Morales, V. Flocculation of Microalgae via pH Change in a Turbulent Medium and Subsequent Filtration / V. Morales, R. Ramírez, et al // Int. J. Environ. Res. -2016. - 10(4). - Pp. 593-600.

21. Родригес, С. Инновационные технологии переработки плодоовощной продукции / С. Родригес, Ф. А. Фернандес: пер. с англ. / под ред. Ю. Г. Базарно-вой. - Санкт-Петербург: Профессия, 2014. - 456 с. [Rodrigues S., Fernandes F.A.N. (Eds.) Advances in Fruit Processing Technologies, CRC Press, Taylor & Francis Group, 2012. - 439 p.]

22. Бриттон, Г. Биохимия природных пигментов / Г. Бриттон: пер. с англ. / под ред. М. Н. Запрометова. - Москва: Мир, 1986. - 422 с. [Britton G. The biochemistry of natural Pegments, 1983. - 244 p.].

REFERENCES

1. Franco M. C. Batch cultivation of microalgae in the Labfors 5 Lux Photobi-oreactor with LED Flat Panel Option, available at: http://www.inforsht.com/images/downloads/application_notes_photosynthesis_biofuel/ Batch_cultivation_of_microalgea_in_the_Labfors_5_Lux_photobioreactor_(en).pdf (Accessed 20 February 2017).

2. Politaeva N., Kuznetsova T. Impact of various physical exposures on Chlorella Sorokiniana microalgae cultivation. International Journal of Applied Engineering Research, 2017, vol. 12, no. 21, pp. 11488-11492.

3. Dvoreckij D. S., Dvoreckij S. I. Tekhnologiya polucheniya lipidov iz mikrovodoroslej [Technology for obtaining lipids from microalgae]. Tambov, Iz-datel'stvo FGBOU VPO «TGTU», 2015, 103 p.

4. Xu Y., Hellier P. Algal biomass and diesel emulsions: An alternative approach for utilizing. Applied Energy, 2016, no. 172, pp. 80-95.

5. Skja K. Lindblad P. Bio CO2 - a multidisciplinary, biological approach using solar energy to capture CO2 while producing H2 and high value products. Bio-molecular Engineering, 2007, no. 24, pр. 405-413.

6. Amrit L. Das Biomass production and identification of suitable harvesting technique for Chlorella sp. MJ 11/11 and Synechocystis PCC 6803. Biotech, 2016, no. 6, p. 41.

Haynnbiu wypnan «H3eecmuH KfTY», № 51, 2018 г.

7. Salim S., Bosma R. Harvesting of microalgae by bio-flocculation. J. Appl Phycol, 2011, no. 23, pp. 849-855.

8. Vandamme D. Flocculation based harvesting processes for microalgae biomass production Dissertation presented in partial fulfillment of the requirements for the degree of Doctor in Bioscience Engineering. Arenberg, 2013, 123 p.

9. Rastogia R. P., Pandey A. Algal Green Energy - R & D and technological perspectives for biodiesel production. Renewable and Sustainable Energy Reviews. Article in Renewable and Sustainable Energy Reviews November, 2017, pp. 1-24.

10. Wyatt N. B., Gloe L. M. Critical Conditions for High Efficiency Flocculation of Freshwater Algae with Ferric Chloride. Biotechnology and Bioengineering, 2011, available at: https://www.osti.gov/servlets/purl/1106656 (Accessed 08 April 2017).

11. Pradana Y. S., Kusumastutia Y. Chitosan Flocculation-sedimentation for Harvesting Selected Microalgae Species Grown in Monoculture and Mixed Cultures. Chemical engineering transactions, 2017, vol. 56, pp. 1549-1554.

12. Watanabe K., Imase M. Composition of the sheath produced by the green alga Chlorella sorokiniana. Journal compilation. The Society for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology, 2006, no. 42, pp. 538-543.

13. Matos K. T., Santos M. Microalgae biomass harvesting by electrocoagulation. Energy for Sustainability 2013 Sustainable Cities: Designing for People and the Planet. (8 to 10 September). Coimbra, 2013, pp. 1-6.

14. Spilling K., Seppala J., Tamminen T. Inducing autoflocculation in the diatom Phaeodactylum tricornutum through CO2 regulation. Journal of Applied Phycology, 2011, iss. 23(6), pp. 959-966.

15. Crofcheck C., Shea A. Influence of media composition on the growth rate of Chlorella vulgaris and Scenedesmus acutus utilized for CO2 mitigation. J. Biochem Tech., 2012, iss. 4(2), pp. 589-594.

16. Selen H., Karadenz F., Koca N., Soer Y. Efect of heat treatment on chlorophyll degradation and color loss in green peas. Research Article (Araflt>rma Makalesi), 2008, iss. 33 (5), pp. 225-233.

17. Nayek S. Spectrophotometry Analysis of Chlorophylls and Carotenoids from Commonly Grown Fern Species by Using Various Extracting Solvents. Research Journal of Chemical Sciences, 2014, vol. 4(9), pp. 63-69.

18. Yao L., Shi J. Mixed Wastewater Coupled with CO2 for Microalgae Cultur-ing and Nutrient Removal. Plose one. September 29, 2015, pp. 1-16.

19. Andrade C. J., Andrade L. M. An overview on the application of genus Chlorella in biotechnological processes. Journal of Advanced Research in Biotechnology, 2017, available at: www.symbiosisonlinepublishing.com (Accessed 27 April 2017).

20. Morales V., Ramirez R. Flocculation of Microalgae via pH Change in a Turbulent Medium and Subsequent Filtration. Int. J. Environ. Res., 2016, no. 10(4), pp. 593-600.

21. Rodriguez S., Fernandez F.A. Innovative technologies for fruit and vegetable processing, 2012, 439 p. (Russ. Ed.: Rodriguez S., Fernandez F.A. Innovative technologies for fruit and vegetable processing. SPb, Professiya, 2014, 456 p.).

22. Britton G. The biochemistry of natural Pegments, 1983. 244 p. (Russ. Ed.: Britton, G. Biohimiya prirodnyh pigmentov. Moscow, Mir, 1986, 422 p.).

ИНФОРМАЦИЯ ОБ АВТОРАХ

Кузнецова Татьяна Алексеевна - Санкт-Петербургский университет Петра Великого, Высшая школа биотехнологии и пищевых технологий; кандидат биологических наук, доцент; E-mail: kuznetsova.ta1@spbstu.ru

Kuznetsova Tatyana Alekseevna - Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University; Graduate School of Biotechnology and Food Science; Ph.D. in Biology; Associate Professor; E-mail: kuznetsova.ta1@spbstu.ru

Базарнова Юлия Генриховна - Санкт-Петербургский университет Петра Великого, Высшая школа биотехнологии и пищевых технологий; профессор; доктор технических наук; E-mail: jbazarnova@spbstu.ru

Bazarnova Yulia Genrikhovna - Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University; Graduate School of Biotechnology and Food Science Professor; Doctor of Technical Sciences; E-mail: jbazarnova@spbstu.ru

Боргоякова Анастасия Сергеевна - Санкт-Петербургский университет Петра Великого, Высшая школа биотехнологии и пищевых технологий; магистрант; E-mail: a_borgoyakova@mail.ru

Borgoyakova Anastasia Sergeevnа - Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University; Graduate School of Biotechnology and Food Science; Master's Degree Student; E-mail: a_borgoyakova@mail.ru