СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ХОЛЕРНЫХ ФАГОВ, ИЗОЛИРОВАННЫХ ИЗ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ, И ЛИЗОГЕННЫХ ШТАММОВ ВИБРИОНОВ ЭЛЬ-ТОР

доемов Ладожского бассейна позволили установить основные закономерности распространения загрязнений, выявить региональные особенности санитарного режима с учетом антропогенных факторов, оценить эффективность водоохранных мероприятий, наметить пути оптимизации условий водопользования и профилактики инфекционных заболеваний у населения бассейна Ладожского озера.

Литература

1. Грушко Я. М., Кожова О. М. Сточные воды сульфат-целлюлозных предприятий и охрана от загрязнения.— М., 1978; 1987.

2. Красовский Г. Н„ Михайловский Н. ЯМарченко 10. Г. и др.//Гиг и сан.—1985. —№ 10. —С. 33—35.

3. Красовский Г. Н., Егорова Н. А. //Там же.— 1987.— № 3. — С. 8—10.

4. Левин А. И., Новиков 10. В., Плитман С. И. и др. // Там же. — 1984. — № 10. — С. 16—19.

5. Новиков Ю. В., Акаок А. Ф., Пархомчук Т. К. // Современные вопросы водопользования населения и санитарной охраны водоемов. — М,. 1976.— С. 84—91.

6. Расплетина Г. Ф., Ульянова Р. 3., Шерман Э. Ж. Гидрохимия и гидрооптика Ладожского озера. — Л., 1967.

7. Руководство по контролю качества питьевой воды. — Т. 1. Рекомендации. — Женева, 1986.

8. Селюжицкий Г. В., Воробьева Л. В., Чернова Г. И., Ермолаева-Маковская А. П.// Гигиенические и эпидемиологические проблемы охраны окружающей среды и укрепления здоровья населения Смоленской области. — Смоленск, 1987. — С. 7—8.

9. Соловьева Н. Ф. Гидрохимия и гидрология Ладожского озера. — Л., 1967.

10. Kringsted К. P.,' Lindstrom К.// Environ. Sci. Technol.— 1984. — Vol. 18. — P. 236—248.

11. Poole N. JWildish, D. J., Kristmanson D. D. // Critical Reviews in Environmental Control.— 1978.— P. 81 — 195.

Поступила 07.07.88

Summary. Results of the investigation of the sanitary state of water objects of the North-Western Region made it possible to identify zones of increased antropogenic stress, to evaluate the efficacy of water protection activities, to determine regional peculiarities of self-purification processes and of water use in the basin of Lake Ladoga, as well as to draft a complex of activities aimed at their optimization.

) ,

Гигиена воды, санитарная

охрана водоемов и почвы

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1990 УДК 614.445:579.68:579.843.11-078

Т. А. Кудрякова, Л. Д. Македонова, Л. Р. Черкасова, Б. М. Дегтярев

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ХОЛЕРНЫХ ФАГОВ, ИЗОЛИРОВАННЫХ ИЗ ВОДЫ ОТКРЫТЫХ ВОДОЕМОВ, И ЛИЗОГЕННЫХ ШТАММОВ ВИБРИОНОВ ЭЛЬ-ТОР

Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт

Обнаружение холерных фагов в объектах окружающей среды свидетельствует о наличии на данной территории невыявленных источников инфекции и косвенно указывает на санитарное неблагополучие местности. Об одновременном выделении холерных фагов и вибрионов из проб воды в весенне-летний, зимний периоды имеется ряд сообщений [2, 3].

Целью настоящей работы явилось исследование на наличие вибриофагов сточных вод и воды открытых водоемов для установления периода синхронного выделения возбудителя холеры и фагов из анализируемых проб. В задачи экспериментов входили сравнительное изучение свойств фагов и идентификация изолятов из воды и лизогенных штаммов вибрионов Эль-Тор.

0 Материалы и методы. Индикаторная система включала холерные вибрионы двух биотипов.

V. с1ао1егае 145, 154 С. еНог 75, Р-131169. На на^ личие фагов проверяли надосадочные жидкости из проб пептонной воды, в которую вводили исследуемую воду. Титры обнаруженных фагов проверяли по Грациа. Для проверки на лизоге-нию были взяты штаммы V. еНог Р-13167, Р-13169, Р-13183, Р-13019. В исследовании осу^ ществляли идентифицирование фагов по классическим методикам. Морфологию частиц изучали в электронном микроскопе ^М-100, биологические свойства фагов характеризовали по Адамсу [1]. Диапазон действия и специфичность определяли нанесением фагов (108 частиц в 1 мл) на газон гомо- и гетерологичных культур с последующим выращиванием посевов при 37 °С в течение суток. УФ-облучение фагов, разведенных в бульоне в 100 раз, проводили на чашках Петри лампой ПРК-2 на расстоянии

50 см с экспозицией 30, 60, 120, 180 и 210 с. При выполнении работы были исследованы 83 штамма холерных вибрионов, 133 культуры нехолерных вибрионов, энтеропатогенных и сапрофитных бактерий. В качестве питательных сред брали бульон и агар Мартена (рН 7,6—7,8). Посевы выращивали при 37 °С, результаты учитывали через 20 ч.

Результаты и их обсуждение. 91 проба воды поверхностных водоемов и сточных вод исследована на наличие холерных фагов с марта по октябрь. Выделены 9 холерных фагов. В период накопления холерных фагов (июнь) получены положительные результаты бактериологического контроля проб воды.

При исследовании на лизогению V. eltor Р-

13167, Р-13168, Р-13169, Р-13183, Р-13019 установлено, что штаммы Р-13167 и Р-13019 являются носителями фагов (Р-13183 и Р-13019). Фаг 36-3 лизирует штаммы V. eltor Р-13169 и Р-131183, выделенные в тот же летний период. Обнаружить его фагопродукцию на других индикаторных штаммах не удалось. Холерные фаги формировали на газоне чувствительной культуры негативные колонии диаметром 1—2 мм с плотным и полупрозрачным центром, окруженные зоной неполного лизиса. Корпускулы всех изученных фагов были V морфологической группы [4]. После 5 пассажей по Грациа концентрация частиц составляла 108 БОЕ/мл.

Серологические свойства всех фагов были изучены в реакции нейтрализации с антифаговыми сыворотками к холерным фагам I—X серотипов. Определена принадлежность исследуемых фагов к II серологическому типу холерных фагов.

Для сравнительного изучения биологических свойств были отобраны 2 фага, один из которых (29) был выделен из речной воды, а второй (36-3) — из одноименной лизогенной культуры.

Активность 2 фагов проверена в одиночном цикле развития. Полученные экспериментальные данные показывают, что фаги имели неодинаковую продолжительность минимального латентного периода. У фага 29 он равнялся 33— 35 мин, а у фага 36-3—110—120 мин. В одиночном цикле размножения фаг 36-3 отличался большей урожайностью, чем фаг 29. Фаги не различались по способности паразитировать на 2 биотипах холеры. Продолжительность периода внутриклеточного развития изучали на разных штаммах-хозяевах (Эль-Тор 75 и 37-1), этим может быть объяснена различная скорость размножения фагов в жидкой среде. Специфичность фагов была доказана на 133 штаммах различных представителей семейства Vibrionaceae, из которых ни один не лизировался холерными фагами. Фаги обладали узким спектром литической активности, лизируя 12,1—15,1 % V. cholerae и 6—8 % V. eltor.

Различий в диапазоне активности между фагами, выделенными из лизогенного штамма и во-

Влияние различных факторов на выживаемость холерных

фагов

Фактор воздействия Фаг 29 Фаг 36-3

контроль О п ыт контроль опыт

Цитрат натрия, % 0,5 3,3- 107 3,5- 107 4,9. 107 5,0- 107-

1 3,3- 107 3,8. 107 4,9 107 7,0- 10?

3 3,3- 107 3,4- 107 4,9 ю7 4,5- ю7

Мочевина, % 5 1,3. 107 1,1- 107 5,1 107 4,9- ю7

15 1,3. 107 3,1. 10G 5,1 107 2,0- 10?

30 1,3. 107 6,1- 104 5,1 107 7,5- 105

УФ-облучение, с 120 1,5- 109 2- 103 1,4 10° 9,0- 105

180 1,5- 109 1,2- 103 1,4 ю9 1,9- 105

210 1,5- 109 3,0- 102 1,4 109 1,3- 10*

240 1,5- Ю9 0 1,4 109 0

Прогревание, °С 56 2,2. 107 1,9- 10s 1,4 106 2,0- Ю5

50 2,8- 10е 1,5- 104 2,4 10е 3,0- 102

65 2,8- 106 0 2,4 106 0 1 1

ды, не выявлено. Оптимальная множественность инфекции составляла 0,01—0,001. Время репродукции 3,5 ч. Фаги инактивировались при одинаковой температуре прогревания (65°С) спустя час после воздействия. Различные концентрации цитрата натрия не оказывали влияния на выживаемость изученных фагов (см. таблицу) и ли-тическую активность.

При воздействии на фаги концентрированных (15%) растворов мочевины в течение суток количество жизнеспособных фаговых корпускул составляло 22,5—39,2 %, в то же время в 30% растворе гибель фагов возрастала до 98,5— 99,5%. УФ-облучение холерных фагов не выявило существенных различий в характере инактивации фага, выделенного из воды и лизогенного штамма. Жизнеспособность фагов сохранялась до 210 с облучения УФ-лучами. Полная инактивация отмечалась через 240 с.

Таким образом, фаг, выделенный из воды открытого водоема, имеет сходство с фагом, продуцируемым лизогенным штаммом вибрионов Эль-Тор, по морфологии фаговых корпускул, негативных колоний, серологическому типу, диапазону и специфичности действия, устойчивости к физическим и химическим агентам.

Анализ бактериологических находок холерных вибрионов позволил отметить время выделения возбудителя холеры и холерных фагов. Присутствие в культурах вибрионов Эль-Тор фагов, идентичных по биологическим свойствам фагам сточных вод, может свидетельствовать о циркуляции лизогенной разновидности возбудителя холеры в данной местности. Необходимо подчеркнуть, что исследование воды на присутствие холерных фагов не заменяет бактериологического контроля.

Ранее было показано, что вибрионы отличаются меньшей, чем фаги, устойчивостью к воздействию факторов окружающей среды, а следовательно, и к процессам очистки сточных вод. Вследствие этого холерные фаги также могут

содержаться в воде с малым числом признаков бактериального загрязнения, В связи с быстротой и простотой постановки тестов на бактериофаги возможность использования фагов холерных вибрионов в качестве возможного индикатора присутствия холерных вибрионов следует считать перспективным.

Выводы. 1. Фаги, продуцируемые лизоген-ными штаммами холерных вибрионов Эль-Тор, по биологическим свойствам идентичны фагам, изолированным из водоемов, исследовавшихся на вибрифлору.

2. Быстрота и простота постановки тестов на холерные бактериофаги позволяет рекомендовать этот метод в качестве дополнительного те-

ста при исследовании воды на возможную контаминацию специфическим возбудителем.

Литература

1. Адаме М. Бактериофаги. — М., 1961.

2. Бичулъ К. Г., Киселева В. ИСомова А. Г. // Проблемы ООН. — 1969.—№ 6. —С. 188—192.

3. Либинзон А. Е., Попов Ю. М., Кулов Г. И. // Проблемы ООН.— 1970. —№ 2. —С. 37—41.

4. Тихоненко А. С. Ультраструктура вирусов бактерий.— М., 1968.

Поступила 18.10.88

Summary. A comparative study of biochemical properties of cholera phages isolated from the water of open-air reservoirs and lysogenic strains of vibrios Al-Tor was carried out, and their identity was determined.

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990 УДК 614.777:628.191 ]:678.744.72

И. И. Даценко, С. Л. Долошицкий, Л. А. Дычок, Л. Д. Вышемирская,

Я. Н. Федор ив, Ю. Е. Кит, Р. В. Романив, Т. В. Ковальчук,

3. В. Бандурко

О ГИГИЕНИЧЕСКОЙ РЕГЛАМЕНТАЦИИ ПОЛИВИНИЛОВОГО СПИРТА 18/11 В ВОДЕ ВОДОЕМОВ

Львовский медицинский институт

В последние годы для изготовления фотополимерных печатных форм в полиграфической промышленности используется поливиниловый спирт марки 18/11 (ПВС). Он же применяется как пропиточный материал при изготовлении полупрозрачной бумаги, в производстве волокна, поливинилацетата, как эмульгатор при полимеризации. При этом ПВС со сточными водами предприятий может попадать в открытые водоемы и нарушать условия водопользования. Вышесказанное послужило основанием для проведения исследований по обоснованию ПДК для ПВС в воде водоемов.

ПВС представляет собой белый порошок с молекулярной массой в пределах 10 000—50 000. Плотность 1,34 г/см3, температура стеклования 57 °С, разложения 220—235 °С. Максимальная

растворимость в 100 г дистиллированной воды 17,62 г. Нерастворим в органических растворителях, растворяется в метиловом и этиловом спиртах, концентрированных растворах многоатомных спиртов; муравьиной, уксусной, фосфорной кислотах.

Исследования показали, что ПВС придает воде запах и привкус машинного масла К Лимитирующим показателем по влиянию ПВС на ор-ганолептические свойства воды является привкус, порог восприятия которого в «закрытом»

1 Исследования проведены в Украинском НИИ полиграфической промышленности.

опыте установлен при концентрации 67,6 мг/дм3. Подогревание воды до 60 °С и хлорирование ее обычными дозами хлора существенно не влияли на величины пороговых концентраций.

При оценке влияния ПВС на санитарный режим водоемов в воде испытывали концентрации 0,007, 0,07, 0,13, 0,7, 1,35, 6,8, 33,8 и 67,6 мг/дм3.

Пороговой по влиянию на санитарный режим водоемов является концентрация ПВС в воде 0,07 мг/дм3, при которой отмечается стимуляция процессов биохимического окисления. Максимально недействующей из испытанных концентраций оказалась концентрация ПВС 0,007 мг/дм3.

С целью оценки действия ПВС на организм животных (белых крыс, мышей и морских свинок) применена обычная методика токсикологических исследований [3].

Клиническая картина отравления различных видов животных была сходной. Спустя 3—4 сут после однократного введения вещества в желудок наблюдались нарушение деятельности желудочно-кишечного тракта в виде поноса, потеря аппетита, вялость, ослабление реакции на внешние раздражители. Животные становились неопрятными, шерсть — взъерошенной. Гибель наступала при постепенном угасании жизненных функций.

При вскрытии погибших животных выявлены растяжение стенки желудка, выраженная гиперемия печени, слизистой желудка и тонкого кишечника.