ПЕСТИЦИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ И ОТНОСЯЩИЕСЯ К НИМ СПОСОБЫ

1. Синтетический слитый белок активатора транскрипции, содержащий:
ДНК-связывающий полипептид; и
полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-58.
2. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где ДНК-связывающий полипептид выбран из группы, состоящей из ДНК-связывающего домена с цинковыми пальцами; консенсусной связывающей последовательности из индуцируемого AVRBS3 гена или синтетической связывающей последовательности, модифицированной способами инженерии из нее; GAL4; TAL; LexA; репрессора Tet; LacR и рецептора стероидных гормонов.
3. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где слитый белок содержит по меньшей мере один дополнительный ДНК-связывающий полипептид.
4. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где слитый белок активатора транскрипции содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:2-8 и SEQ ID NO:100-120.
5. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
6. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации
выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:47 и SEQ ID NO:53.
7. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:48 и SEQ ID NO:54.
8. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:49 и SEQ ID NO:55.
9. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:50 и SEQ ID NO:56.
10. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:51 и SEQ ID NO:57.
11. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 1, где слитый белок содержит по меньшей мере один дополнительный мотив взаимодействия полипептида домена трансактивации.
12. Синтетический слитый белок активатора транскрипции, который увеличивает экспрессию представляющей интерес нуклеотидной последовательности, когда представляющая интерес нуклеотидная последовательность функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, причем слитый белок содержит:
ДНК-связывающий полипептид, который специфично связывается со второй нуклеотидной последовательностью; и
полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации белка, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
13. Синтетический слитый белок активатора транскрипции, содержащий:
ДНК-связывающий полипептид; и
полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации, обладающий по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
14. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 13, где полипептид трансактивирующего домена взаимодействия обладает по меньшей мере 85% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
15. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 13, где полипептид трансактивирующего домена взаимодействия
обладает по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
16. Синтетический слитый белок активатора транскрипции по п. 13, где полипептид трансактивирующего домена взаимодействия обладает по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
17. Нуклеиновая кислота, кодирующая синтетический слитый белок активатора транскрипции, причем нуклеиновая кислота содержит:
первую полинуклеотидную последовательность, кодирующую ДНК-связывающий полипептид; и
вторую полинуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-58,
где первая и вторая полинуклеотидные последовательности экспрессируются с нуклеиновой кислоты в рамке считывания и в едином транскрипте.
18. Нуклеиновая кислота по п. 17, где нуклеиновая кислота содержит по меньшей мере одну дополнительную полинуклеотидную последовательность, кодирующую ДНК-связывающий полипептид.
19. Нуклеиновая кислота по п. 17, где нуклеиновая кислота содержит по меньшей мере одну дополнительную полинуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид трансактивирующего
домена взаимодействия, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:10-58.
20. Нуклеиновая кислота по п. 17, где первая и вторая полинуклеотидные последовательности функционально связаны с регуляторным элементом гена.
21. Нуклеиновая кислота по п. 17, где первая и вторая полинуклеотидные последовательности разделены третьей полинуклеотидной последовательностью.
22. Нуклеиновая кислота по п. 17, где нуклеиновая кислота встроена в геном клетки-хозяина.
23. Нуклеиновая кислота по п. 22, где клетка-хозяин представляет собой клетку растения.
24. Нуклеиновая кислота по п. 17, где ДНК-связывающий полипептид выбран из группы, состоящей из ДНК-связывающего домена с цинковыми пальцами; консенсусной связывающей последовательности из индуцируемого AVRBS3 гена или синтетической связывающей последовательности, модифицированной способами инженерии из нее; GAL4; TAL; LexA; репрессора Tet; LacR и рецептора стероидных гормонов.
25. Нуклеиновая кислота по п. 24, где ДНК-связывающий полипептид специфично связывается с последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:68 и SEQ ID NO:99.
26. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 17.
27. Вектор по п. 26, где вектор содержит селективный маркер или поддающийся скринингу маркер.
28. Вектор по п. 26, где вектор представляет собой
экспрессирующий вектор растений.
29. Нуклеиновая кислота, кодирующая синтетический слитый белок активатора транскрипции, причем нуклеиновая кислота содержит:
первую полинуклеотидную последовательность, кодирующую ДНК-связывающий полипептид; и
вторую полинуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации, обладающий по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:2-8, SEQ ID NO:10-16, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:58 и SEQ ID NO:100-120,
где первая и вторая полинуклеотидные последовательности экспрессируются с нуклеиновой кислоты в рамке считывания и в едином транскрипте.
30. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, обладающую по меньшей мере 80% идентичностью с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
31. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, обладающую по меньшей мере 85% идентичностью с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
32. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, обладающую по меньшей мере 90% идентичностью с нуклеотидной последовательностью,
выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
33. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, обладающую по меньшей мере 95% идентичностью с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
34. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, обладающую по меньшей мере 97% идентичностью с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
35. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, обладающую по меньшей мере 98% идентичностью с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
36. Нуклеиновая кислота по п. 29, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:80-93.
37. Нуклеиновая кислота по п. 29, где ДНК-связывающий полипептид выбран из группы, состоящей из ДНК-связывающего домена с цинковыми пальцами; консенсусной связывающей последовательности из индуцируемого AVRBS3 гена или синтетической связывающей последовательности, модифицированной способами инженерии из нее; GAL4; TAL; LexA; репрессора Tet; LacR и рецептора стероидных гормонов.
38. Нуклеиновая кислота, кодирующая синтетический слитый белок активатора транскрипции, причем нуклеиновая кислота содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:
SEQ ID NO:80-93;
нуклеотидной последовательности, которая по существу идентична одной из SEQ ID NO:80-93;
последовательности, комплементарной полинуклеотиду, который способен специфически гибридизоваться по меньшей мере с одной из SEQ ID NO:80-93; и
последовательности, обратно комплементарной полинуклеотиду, который способен специфически гибридизоваться по меньшей мере с одной из SEQ ID NO:80-93.
39. Клетка, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 17.
40. Клетка по п. 39, где клетка представляет собой клетку растений или клетку дрожжей.
41. Клетка, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 29.
42. Клетка по п. 41, где клетка представляет собой клетку растений или клетку дрожжей.
43. Ткань растения, часть растения, товарный продукт растения или целое растение, содержащие клетку по п. 39.
44. Ткань растения, часть растения, товарный продукт растения или целое растение, содержащие клетку по п. 41.
45. Способ повышения экспрессии представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине, причем способ включает:
введение нуклеиновой кислоты по п. 17 в клетку-хозяина, содержащую представляющую интерес нуклеотидную последовательность, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, которая специфично связывается с ДНК-
связывающим полипептидом,
тем самым повышая экспрессию представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине.
46. Способ по п. 45, где введение нуклеиновой кислоты в клетку-хозяина включает введение вектора, содержащего нуклеиновую кислоту, в клетку-хозяина.
47. Способ по п. 45, где нуклеиновая кислота стабильно встраивается в геном клетки-хозяина.
48. Способ по п. 45, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность представляет собой экзогенную нуклеотидную последовательность.
49. Способ по п. 45, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность представляет собой эндогенную нуклеотидную последовательность.
50. Способ по п. 45, где введение нуклеиновой кислоты в клетку-хозяина включает скрещивание растения, содержащего нуклеиновую кислоту, с растением, содержащим клетку-хозяина.
51. Способ повышения экспрессии представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине, причем способ включает:
введение в клетку-хозяина, содержащую нуклеиновую кислоту по п. 17, представляющей интерес нуклеотидной последовательности, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, которая специфически связывается с ДНК-связывающим полипептидом,
тем самым, увеличивая экспрессию представляющей интерес
нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине.
52. Способ по п. 51, где введение представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетку-хозяина включает введение вектора, содержащего представляющую интерес нуклеотидную последовательность, в клетку-хозяина.
53. Способ по п. 51, где нуклеиновая кислота стабильно встраивается в геном клетки-хозяина.
54. Способ по п. 51, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность, функционально связанная со второй нуклеотидной последовательностью, стабильно встроена в геном клетки-хозяина.
55. Способ по п. 51, где введение представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетку-хозяина включает скрещивание растения, содержащего представляющую интерес нуклеотидную последовательность, с растением, содержащим клетку-хозяина.
56. Способ повышения экспрессии представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине, причем способ включает:
введение нуклеиновой кислоты по п. 17 в клетку-хозяина, содержащую представляющую интерес нуклеотидную последовательность, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, которая специфично связывается с ДНК-связывающим полипептидом,
тем самым повышая экспрессию представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине.
57. Нуклеиновая кислота, кодирующая синтетический слитый белок активатора транскрипции, причем нуклеиновая кислота содержит:
первую полинуклеотидную последовательность, кодирующую ДНК-связывающий полипептид; и
вторую полинуклеотидную последовательность, кодирующую средство для трансактивации экспрессии генов растений,
где первая и вторая полинуклеотидные последовательности экспрессируются с нуклеиновой кислоты в рамке считывания и в едином транскрипте.
58. Способ повышения экспрессии представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине, причем способ включает:
введение нуклеиновой кислоты по п. 57 в клетку-хозяина, содержащую представляющую интерес нуклеотидную последовательность, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, которая специфично связывается с ДНК-связывающим полипептидом,
тем самым повышая экспрессию представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине.
59. Способ повышения экспрессии представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине, причем способ включает:
введение в клетку-хозяина, содержащую нуклеиновую кислоту по п. 57, представляющей интерес нуклеотидной последовательности, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность
функционально связана со второй нуклеотидной последовательностью, которая специфично связывается с ДНК-связывающим полипептидом,
тем самым, повышая экспрессию представляющей интерес нуклеотидной последовательности в клетке-хозяине.
60. Нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:121-127.
61. Последовательность, комплементарную нуклеиновой кислоте, которая способна специфически гибридизоваться с нуклеиновой кислотой по п. 60.
62. Последовательность, обратно комплементарная нуклеиновой кислоте, которая способна специфически гибридизоваться с нуклеиновой кислотой по п. 60.
63. Нуклеиновая кислота по п. 60, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:22; SEQ ID NO:28; SEQ ID NO:34; SEQ ID NO:40; SEQ ID NO:46; SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.
64. Полипептид, содержащий полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:121-127.
65. Полипептид по п. 64, где полипептид мотива взаимодействия домена трансактивации выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO:22; SEQ ID NO:28; SEQ ID NO:34; SEQ ID NO:40; SEQ ID NO:46; SEQ ID NO:52 и SEQ ID NO:58.