СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДИФИЦИРОВАННОЙ ФОРМУЛЫ ТРИПТОФАНИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗЫ

1. Способ получения модифицированной формы триптофанил-тРНК-синтетазы, включающий измельчение тканей поджелудочной железы животных (КРС и свиней), экстрагирование, отделение экстракта от жмыха, осаждение и удаление примесных нуклеиновых кислот с помощью стрептомицин сульфата, повторное осаждение примесей из супернатанта высаливанием сульфатом аммония и постадийное фракционирование экстракта, отличающийся тем, что для получения модифицированной формы на стадии получения экстракта не использовались ингибиторы протеаз, экстракт фракционируют методом хроматографии с использованием анионнообменных смол, проводят ступенчатую элюцию буферным раствором, содержащим стабилизатор модифицированной формы ТРСазы в виде комплекса субстратов - L-триптофана и АТФ-Mg, концентрируют собранные фракции методом переосаждения сульфатом аммония, с последующей второй стадией ионообменной хроматографии и использованием линейного градиента при элюции ионообменной колонки с ДЕАЕ-целлюлозой ДЕ-52, отобранные пики с модифицированной формой собирают и концентрируют целевой продукт высаливанием сульфатом аммония, растворяют его в буферном растворе, содержащем буфер, субстраты и другие стабилизаторы и замораживают на -70°С в аликвотах или при -20°С в глицерине.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве ингибитора протеаз используется ДФФ до конечной концентрации 5 мМ.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что в качестве источника препарата используется нативная исходная ТРСазы, а для стимуляции перехода нативная ТРСаза - модифицированная ТРСаза используется активированный уголь.
4. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что переход нативная ТРСаза - модифицированная ТРСаза осуществляется путем ограниченного протеолиза эластазой.
5. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что добавление ингибитора протеаз ФМСФ осуществляли перед первой ионообменной колонкой с ДЕ-52.
6. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что в качестве ускорителя перехода нативной ТРСазы в модифицированную используется препарат исходной ТРСазы, обработка активированным углем и ограниченный протеолиз в присутствии субстратов L-триптофана и АТФ.