Цитокиновый статус при спондилоартропатиях

ВЕСТНИК ВГМУ, 2009, Том 8, №4

ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС ПРИ СПОНДИЛОАРТРОПАТИЯХ ХОТЕТОВСКАЯ Ж.В., КУНДЕР Е.В.

УО «Витебский государственный ордена дружбы народов медицинский

университет»

Резюме. Выявлены статистически незначимые различия между сывороточными концентрациями фактора некроза опухоли альфа у пациентов с псориатическим артритом, анкилозирующим спондилитом и здоровых лиц. Установлено снижение сывороточных концентраций фактора некроза опухоли альфа у пациентов с реактивным артритом, интерлейкина 1 бета у пациентов со спондилоартропатиями и реактивным артритом, а также сывороточных концентраций интерферона гамма у пациентов с реактивным артритом и анкилозирующим спондилитом по сравнению со здоровыми лицами.

Выявлены широкие вариации сывороточных концентраций указанных цитокинов при спондилоартропатиях. Не установлено влияния проводимого базисного лечения на содержание фактора некроза опухоли альфа, интерлейкина 1 бета и интерферона гамма при спондилоартропатиях. Выявлены взаимосвязи между сывороточными концентрациями изученных цитокинов и некоторыми клиническими и лабораторными данными.

Ключевые слова: спондилоартропатии, сывороткакрови, цитокины.

Abstract. There was no difference between serum concentrations of tumor necrosis factor in patients with spondyloarthropathies (psoriatic arthritis, reactive arthritis and ankylosing spondylitis) and control group. The serum concentrations of interleukin 1 beta in patients with spondyloarthropathies and reactive arthritis and serum concentrations of interferon gamma in patients with reactive arthritis and ankylosing spondylitis were significantly lower in comparison with donors. We detected the great variation of serum tumor necrosis factor, interleukin 1 beta and interferon gamma concentrations in patients with spondyloarthropathies.

We do not revealed significant differences of serum proinflammatory cytokines concentrations in patients witch are treated with and without disease-modifying anti-inflammatory drugs. We revealed the relationships between serum cytokine concentrations and some clinical and laboratory data.

Key words: spondyloarthropathies, blood serum, cytokines.

Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь, 210023, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, УО «Витебский государственный ордена дружбы народов медицинский университет».

- Кундер Е.В.

Вводная часть. Результаты современных исследований, касающихся продукции и роли ключевых провоспалительных цитокинов (фактора некроза опухоли альфа (ФНО-а), интерлейкина 1 бета (ИЛ-1Р) и интерферона гамма (ИФН-у) при спондилоартропатиях (СпА) во многом противоречивы. Несмотря на то, что большинство авторов указывают на преобладание уровня данных цитокинов при псориатическом артрите (ПА), реактивном артрите (РеА) и анкилозирующем спондилите (АС) [5], высказывается мнение об относительной антивоспалительной поляризации цитокинового спектра при СпА с преобладанием, в первую очередь, ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-10

[4,8]. Некоторые исследователи показали, что уровень цитокинов Th1 у больных СпА ниже, чем у здоровых лиц [8].

Данные разногласия связаны как со значительными сложностями в оценке изменений цитокинового статуса при различных заболеваниях вследствие флюктуации уровней цитокинов в сыворотке крови и коротким периодом их жизни, так и с гетерогенным распределением в организме. Известно, что высокое содержание провоспалительных цитокинов в очагах локального воспаления (синовиальной ткани, энтезах, коже и др.) не всегда сопровождается повышением их уровней в сыворотке крови.

Нами проведен анализ сывороточных концентраций ФНО-а, ИЛ-10 и ИФН-у при СпА с целью уточнения их патогенетической роли и диагностической значимости при данной патологии.

Методы

Всего в исследовании приняло участие 335 человек, из них 266 пациентов со СпА (95 больных ПА, 120 - РеА и 51 - АС. Контрольную группу составили 69 практически здоровых лиц - доноров Витебской областной станции переливания крови. Принадлежность заболеваний к СпА устанавливалась в соответствии с критериями ESSG (European Spondyloarthropathy Study Group) [10] и классификационными критериями спондилоартропатий Amor B. et al. [1]. Диагноз ПА выставлялся согласно критериям CASPAR [3]. Диагноз АС выставлялся в соответствии с модифицированными Нью-Йоркскими критериями [11].

Характеристика пациентов со СпА и здоровых лиц по полу и возрасту представлена в таблице 1.

Таблица 1

Характеристика пациентов со СпА и здоровых лиц по полу и возрасту

СпА ПА РеА АС Здоровые лица

Количество мужчин 16S

Количество женщин 9S

Средний возраст 40,37±S, S5

Средний возраст мужчин 39,56±S, 97

Средний возраст женщин 41,74±S, 50

Характеристика пациентов с ПА представлена в таблице 2.

Характеристика пациентов с ПА

Признаки Все пациенты сПА Пациенты сПА мужского пола Пациенты сПА женского пола Пациенты сПА, получавшие базисную терапию Пациенты с ПА, не получавшие базисную терапию

Характеристика кожного синдрома

Распространенный псориаз 55

Ограниченный псориаз 40

Обыковенный

Обыкновенный и интертригинозный псориаз 14

Эритродермический псориаз 9

Экссудативный псориаз 3

Стационарная стадия 73

Регрессирующая стадия 8

Стационарно-регрессирующая стадия 14

Непрерывно рецидивирующее течение 59

Торпидное течение 12

Характеристика синдрома ониходистрофии

Поражение ногтей 86

Характеристика суставного синдрома

Полиартрит 84

Олигоартрит 11

Дактилит 27

Сакроилеит 37

Спондилит 46

Активность 1 степени 36

Активность2 степени 38

АктивностьЗ степени 21

Рентгенологическая 2 стадия 59

Рентгенологическая 3 стадия 25

Рентгенологическая 4 стадия 11

Функциональная недостаточность 1 степени 65

Функциональная недостаточность 2 степени 25

Функциональная недостаточность 3 степени 5

Лечебные мероприятия

Терапия НПВП 95 100%) 44

Базисная терапия метотрексатом

Характеристика пациентов с РеА представлена в таблице 3.

Характеристика пациентов с РеА

Признаки Все пациенты Пациенты с РеА Пациенты с

с РеА мужского пола пола

Характеристика суставного синдрома

Полиартрит 34

Олигоартрит 45

Сакроилеит 39

Спондилит 22

Ахиллобурсит 73

Артрит суставов кистей 34

Артрит суставов стоп 77

Гонартрит 43

Коксартрит 7

Энтезопатии 86

Активность 1 степени 49

Активность 2 степени 32

Активность 3 степени 39

Рентгенологическая 1 стадия 50

Рентгенологическая 2 стадия 66

Рентгенологическая 3 стадия 3

Функциональная недостаточность 1 степени 117

Функциональная недостаточность 2 степени 3

Характеристика экстраартикулярных проявлений

Конъюнктивит 11

Увеит 2

Иридоциклит 3

Кератодермия 1

Лихорадка 10

Характеристика урогенитальной патологии

Анамнестическая связь с урогенитальной патологией 107

Клинически выраженный уретрит 73

Хронический простатит 24

Орхит 3

Цирцинарный баланит 1

Цервицит 42

Эрозия шейки матки 22

Изолированная хламидийная урогенитальная инфекция 98

Хламидийная инфекция и трихомониаз 12

Хламидийная, уреаплазменная инфекция и трихомониаз 10

Лечебные мероприятия

Терапия НПВП 120

Характеристика пациентов с АС представлена в таблице 4.

Характеристика пациентов с АС

Признаки Все пациенты с АС Пациенты с АС, получавшие базисную терапию Пациенты с АС, не получавшие базисную терапию

Характеристика АС

Центральная форма 36

Ризомелическая форма 7

Периферическая форма 8

Сакроилеит, 1 стадия 4

Сакроилеит, 2 стадия 12

Сакроилеит, 3 стадия 14

Сакроилеит, 4 стадия 18

Спондилит, 1 стадия 4

Спондилит, 2 стадия 10

Спондилит, 3 стадия 19

Спондилит, 4 стадия 18

Энтезопатии 43

Активность 1 степени 10

Активность 2 степени 24

Активность 3 степени 17

Рентгенологическая 1 стадия 4

Рентгенологическая 2 стадия 10

Рентгенологическая 3 стадия 19

Рентгенологическая 4 стадия 18

Функциональная недостаточность 1 степени 14

Функциональная недостаточность 2 степени 34

Функциональная недостаточность 3 степени 3

Лечебные мероприятия

Терапия НПВП 51

Базисная терапия сульфасалазином

Определение сывороточных концентраций ФНО-а, ИЛ 1-0 и ИФН-у проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов ООО «Цитокин» (Россия).

Результаты

Установлены статистически незначимые различия между сывороточными концентрациями ФНО-а у здоровых лиц и у пациентов со СпА (р=0,17), ПА (р=0,46) и АС (р=0,96). Сывороточная концентрация ФНО-а у пациентов с РеА оказалась ниже, чем у здоровых лиц (р=0,031). Выявлены статистически

незначимые различия между сывороточными концентрациями ФНО-а у пациентов с ПА и РеА (р=0,11), ПА и АС (р=0,44).

Сывороточные концентрации ФНО-а у обследованных лиц представлены в таблице 5.

Таблица 5

Сывороточные концентрации ФНО-а у обследованных лиц

Сывороточные концентрации ФНО-а, пг/мл

Группы обследованных лиц Медиана Размах (шт- тах) 95%ДИ для медианы 25-75 перцентили Число наблюдений

СпА 0,00 0,00-183,94 0,00-0,00 0,00-0,00 266

ПА 0,00 0,00-64,17 0,00-0,00 0,00-0,00 95

РеА 0,00 0,00-46,80 0,00-0,00 0,00-0,00 120

АС 0,00 0,00-183,94 0,00-0,00 0,00-3,024 51

Здоровые лица 0,00 0,00-84,00 0,00-0,00 0,00-7,05 69

Сывороточные концентрации ФНО-а у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию, представлены в таблице 6.

Таблица 6

Сывороточные концентрации ФНО-а у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию

Сывороточные концентрации ФНО-а

Группы обследованных лиц Медиана Размах (тт- тах) 95%ДИ для медианы 25-75 перцентили Число наблюдений

ПА (базисное лечение+) 0,00 0,00-29,44 0,00-0,00 0,00-2,10 42

ПА (базисное лечение-) 0,00 0,00-64,17 0,00-0,00 0,00-0,00 53

АС (базисное лечение+) 0,00 0,00-183,94 0,00-8,29 0,00-5,85 15

АС (базисное лечение-) 0,00 0,00-49,80 0,00-1,71 0,00-2,65 36

Не выявлены статистически значимые различия между сывороточными концентрациями ФНО-а у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию с ПА (р=0,78) и АС (р=0,64).

Выявлены взаимосвязи между сывороточными концентрациями ФНО-а и величиной индекса активности и тяжести псориаза (РАБ1) при ПА (г=-0,49,

р<0,05), числом Т-супрессоров (г=-0,32, р<0,05) и иммунорегуляторным индексом ПА (г=0,34, р<0,05) при РеА, величиной индекса активности АС ВАББМ (г=0,31, р<0,05).

Сывороточные концентрации ИЛ-10 у обследованных лиц представлены в таблице 7.

Таблица 7

Сывороточные концентрации ИЛ-1Р у обследованных лиц

Сывороточные концентрации ИЛ-13

Группы обследованных лиц Медиана Размах (тт- тах) 95%ДИ для медианы 25-75 перцентили Число наблюдений

СпА 17,12 0,00-1768,63 10,96-26,87 0,00-83,16 266

ПА 24,02 0,00-1305,48 9,99-38,13 0,00-88,39 95

РеА 10,85 0,00-1164,10 4,00-26,04 0,00-98,85 120

АС 19,08 0,00-1768,63 10,59-39,95 1,25-69,43 51

Здоровые лица 57,12 0,00-697,38 17,31-98,16 14,38-140,60 69

Установлены статистически значимые различия между сывороточными концентрациями ИЛ-10 у пациентов со СпА и у здоровых лиц и (р=0,036), а также у пациентов с РеА и контрольной группы (р=0,024).

Выявлены статистически незначимые различия между сывороточными концентрациями ИЛ-10 у пациентов с ПА и здоровых лиц (р=0,095), пациентами с АС и здоровых лиц (р=0,079), а также пациентами с ПА и РеА (р=0,37), ПА и АС (р=0,98), РеА и АС (р=0,40).

Не установлено статистически значимых различий между сывороточными концентрациями ИЛ-10 у больных мужского и женского пола со СпА (р=0,082), с ПА (р=0,085), с РеА (р=0,23), а также у здоровых мужчин и женщин (р=0,15).

Сывороточные концентрации ИЛ-10 у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию, представлены в таблице 8.

Таблица 8

Сывороточные концентрации ИЛ-1 у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию

Сывороточные концентрации ИЛ-1 Ь

Группы обследованных лиц Медиана Размах (тт-шах) 95%ДИ для медианы 25-75 перцентили Число наблюдений

ПА (базисное лечение+) 39,97 0,00-1305,48 28,81-142,79 3,80-248,59 42

ПА (базисное лечение-) 10,35 0,00-817,55 0,00-23,98 0,00-41,85 53

АС (базисное лечение+) 16,74 0,00-53,52 0,00-948,23 0,00-38,53 15

АС (базисное лечение-) 26,58 0,00-1768,63 10,16-60,27 5,64-97,10 36

Различия между сывороточными концентрациями ИЛ-10 у пациентов с ПА, получавшими и не получавшими базисную терапию, оказались статистически высокозначимыми (р=0,0034). Между сывороточными концентрациями ИЛ-10 у пациентов с АС, получавшими и не получавшими базисную терапию, не выявлено статистически значимых различий (р=0,32).

Установлены взаимосвязи между сывороточными концентрациями ИЛ-10 и наличием дактилита (г=0,32, р<0,05), сакроилеита (г=0,35, р<0,05), а также сывороточной концентрацией ИФН-у (г=0,47, р<0,05).

Сывороточные концентрации ИФН-у у обследованных лиц представлены в таблице 9.

Таблица 9

Сывороточные концентрации ИФН-у у обследованных лиц

Сывороточные концентрации ИФН- у

Группы обследованных лиц Медиана Размах (тт-тах) 95%ДИ для медианы 25-75 перцентили Число наблюдений

СпА 57,00 0,00-6230,00 42,11-78,80 0,00-181,52 266

ПА 106,75 0,00-6230,00 73,87-166,14 44,21-325,19 95

РеА 34,24 0,00-3604,44 6,95-52,13 0,00-136,90 120

АС 31,09 0,00-1396,00 0,00-58,49 0,00-84,99 51

Здоровые лица 71,36 1,86-1030,20 32,92-94,94 32,62-110,05 69

Установлены статистически незначимые различия между сывороточными концентрациями ИФН-у у пациентов со СпА и у здоровых лиц и (р=0,38), а также у пациентов с ПА и у контрольной группы (р=0,14).

Сывороточные концентрации ИФН-у у пациентов с РеА (р=0,031) и АС (р=0,011) оказались ниже, чем у здоровых лиц. Выявлены статистически высокозначимые различия между сывороточными концентрациями ИФН-у у пациентов с ПА и РеА (р=0,000016), а также у пациентов с ПА и АС (р=0,000021). Различия между сывороточными концентрациями ИФН-у у пациентов с РеА и АС оказались статистически незначимыми (р=0,65).

Сывороточные концентрации ИФН-у у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию, представлены в таблице 10.

Таблица 10

Сывороточные концентрации ИФН-у у пациентов, получавших и не получавших базисную терапию

Сывороточные концент рации ИЛ-1Р

Группы обследованных лиц Медиана Размах (тт-шах) 95%ДИ для медианы 25-75 перцентили Число наблюдений

ПА (базисное лечение+) 156,12 0,00-6230,90 73,94-366,33 53,68-568,10 42

ПА (базисное лечение-) 82,37 0,00-3089,00 53,87-172,12 39,73-235,96 53

АС (базисное лечение+) 55,00 0,00-1396,00 0,00-145,47 2,70-121,98 15

АС (базисное лечение-) 6,63 0,00-302,90 0,00-58,80 0,00-87,84 36

Различия между сывороточными концентрациями ИФН-у у пациентов с ПА, получавшими и не получавшими базисную терапию, оказались статистически незначимыми (р=0,14). Между сывороточными концентрациями ИФН-у у пациентов с АС, получавшими и не получавшими базисную терапию, не выявлено статистически значимых различий (р=0,19).

Выявлены взаимосвязи между сывороточными концентрациями ИФН-у и количеством лейкоцитов (г=-0,38, р<0,05), сывороточной концентрацией ИЛ-10 (г=0,47, р<0,05 ) при ПА, а также числом Т-супрессоров (г=-0,33, р<0,05) при РеА.

Обсуждение

Большинство литературных источников указывает на наличие повышенных сывороточных концентраций ФНО-а при спондилоартропатиях

[2,6,8]. Однако в некоторых исследованиях обнаружено значительное

уменьшение содержания С04+ и С08+ клеток, экспрессирующих внутриклеточный ФНО-а как у больных СпА, в частности, АС, так и у НЬА-В27 позитивных здоровых лиц по сравнению с НЬА-В27 негативной контрольной группой [7]. Обнаруженные нами низкие сывороточные концентрации ФНО-а у пациентов со СпА не исключают локальной роли данного цитокина в развитии артрита, сакроилеита, спондилита, энтезопатий и других проявлений заболеваний.

Вероятно, определение сывороточных концентраций ФНО-а при СпА необходимо проводить для отбора пациентов, нуждающихся в агрессивном лечении, прежде всего, анти ФНО-а препаратами. Выявленные взаимосвязи между сывороточной концентрацией ФНО-а и индексом активности и тяжести псориаза (РАБ1) при ПА, числом Т-супрессоров и величиной иммунорегуляторного индекса при РеА, индексом активности ВАБВА1 при АС указывают на патогенетическую роль данного цитокина при СпА. Установлено, что базисная терапия не влияет на сывороточную концентрацию ФНО-а.

Не установлено значимых различий между содержанием ИЛ-10 в сыворотке крови у пациентов с ПА, АС и здоровых лиц, а при СпА в целом и РеА данные величины оказались ниже, чем у доноров. Кроме того, выявлена значительная вариация концентраций ИЛ-10 внутри групп. Полученные результаты согласуются с данными других исследований сывороточных концентраций ИЛ-10 у больных со спондилоартропатиями [4 9]. У пациентов с ПА, получавшими базисную терапию, сывороточные концентрации ИЛ-10 оказались выше, чем у пациентов без базисного лечения. Установлены взаимосвязи между содержанием ИЛ-10 в сыворотке крови и наличием дактилита и сакроилеита, а также сывороточной концентрацией ИФН-у при ПА, что свидетельствует об участии ИЛ-10 в патогенезе СпА.

При исследовании сывороточных концентраций ИФН-у при СпА не обнаружены различия между данными величинами у пациентов со СпА в целом и ПА по сравнению с донорами, а содержание ИФН-у в сыворотке

крови при РеА и АС оказалось ниже, чем у здоровых лиц. Выявлена значительная вариация концентраций ИФН-у внутри групп. Выявлены взаимосвязи между сывороточной концентрацией ИФН-у и уровнем лейкоцитов, а также сывороточной концентрацией ИЛ-10 при ПА, числом Т-супрессоров при РеА. Полученные результаты согласуются с литературными данными, свидетельствующими о низкой информативности определения сывороточной концентрации ИФН-у при СпА.

Заключение

Сывороточные концентрации ФНО-а, ИЛ-10 и ИФН-у у пациентов со СпА сопоставимы или оказываются ниже, чем у здоровых лиц.

Существуют значительные вариации сывороточных концентраций ФНО-

а, ИЛ-10 и ИФН-у внутри групп пациентов.Проводимая пациентам со СпА базисная терапия не оказывает влияния на содержание ФНО-а, ИЛ-10 и ИФН-у в сыворотке крови.

Имеется взаимосвязь между сывороточными концентрациями ФНО-а, ИЛ-10 и ИФН-у с клиническими (величина PASI, наличие дактилита, сакроилеита, индекс BASDAI), и лабораторными (число Т-супрессоров, уровень лейкоцитов) данными при СпА.

Литература

1. Amor, B. Criteria of classification of spondyloarthropathies / B. Amor, M. Dougados, M. Mijiyama // Rev. Rheum. Mal. Osteoartic. - 1990. - Vol. 7, N 2.

- P. 85-89.

2. Ankylosing spondylitis--the current situation and new therapeutic options / D. Zlnay fet al l // Vnitr. Lek. - 2006. - Vol. 52. - P. 730-735.

3. CASPAR Study Group. Classification criteria for psoriatic arthritis: development of new criteria from a large international study / W. Taylor [et al.] // Ann. Rheum. Dis. - 2006. - Vol. 54. - P. 2665-2673.

4. 161Cytokine production from peripheral blood mononuclear cells in patients with ankylosing spondylitis and their first-degree relatives / C. T. Chou [et al.] // Arch. Med. Res. - 2007. - Vol. 38, N 1. - P. 190-195.

5. Different cytokine profiles in patients with chronic and acute reactive arthritis / I. Butrimiene [et al.] // Rheumatology (Oxford). - 2004. - Vol. 43, N 10.

- P. 1300-1304.

6. Drug insight: anti-tumor-necrosis-factor therapy for ankylosing spondylitis / C. Henderson [et al.] // Nat. Clin. Pract. Rheumatol. - 2006. - Vol. 2. - P. 44-49.

7. Et all CD27+ memory and CD 27- effector CD8+ T cells are responsible for a decreased production of proinflammatory cytokines in HLA B27-positive subjects / S. Kohler [et al.] // Clin. Exp. Rheumatol. - 2005. - Vol. 23. - P. 840846.

8. Keller, C. Cytokines in seronegative spondyloarthropathies and their modification by TNF blockade: a brief report and literature review / C. Keller, A. Webb, J. Davis // Ann. Rheum. Dis. - 2003. - Vol. 62. - P. 1128-1132.

9. Serum levels of IL-1 0, TNF-a, IL-8, and acute phase proteins in seronegative spondyloarthropathies / B. Sonel [et al.] // Joint. Bone. Spine. - 2002.

- Vol. 69. - P. 463-467.

10.The European Spondyloarthropathy Study Group preliminary criteria for classification of spondyloarthropathy / M. Dougados [et al.] // Arthritis Rheum. -1991. - Vol. 34. - P. 1218-1227.

11.Van der Linder, S. Evaluation of diagnostic criteria for ankylosing spondylitis: a proposal for modification of the New York criteria / S. Van der Linder, H. A. Valkenburg, A. Cats // Arthritis Rheum. - 1984. - Vol. 27. - P. 361368.