Влияние гидрохлорида бета-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутама) на иммунную систему и психоэмоциональное состояние животных

cystic kidney disease type 2, familial juvenile hyperuricemic nephropathy, and autosomal dominant glomerulocystic kidney disease. Am. J. Kidney Dis. 2005; 46: 52-7.

11. Sejdiu I., Torffvit O. Decreased urinary concentration of Tamm-Horsfall protein is associated with development of renal failure and cardiovascular death within 20 years in type 1 but not in type 2 diabetic patients. Scand. J. Urol. Nephrol. 2008; 42: 168-74.

12. Tamm I., Horsfall F.L., Jr. A mucoprotein derived from human urine which reacts with influenza, mumps, and Newcastle disease viruses. J. Exp. Med. 1952; 95: 71-97.

13. Gefter M. L., Margulies D.H., Scharff M.D. A simple method for polyethylene glycol-promoted hybridization of mouse myeloma cells. Somat/Cell Genet. 1977; 3: 231-6.

14. Samoylovich M.P., Krutetskaya I.Yu., Klimovich V.B., Shmidt E.N., Pashkova S.F., Kotova T.S. Monoclonal antibodies against human IgG subclasses. Receiving and determining specificity. Immunologiya. 1998; 3: 27-30.

15. Kobayashi K., Fukuoka S. Conditions for solubilization of Tamm-Horsfall protein/uromodulin in human urine and establishment of a sensitive and accurate enzyme-linked immunosorbent Assay (ELISA) method. Arch. Biochem. Biophys. 2001; 388 (1): 113-20.

16. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase labeled antibody. A new method of conjugation. J. Histochem. Cytochem. 1974; 22: 1084-91.

17. Viswanathan P., Rimer J.D., KolbachA.M., Ward M.D., Kleinman J.G., Wesson J.A. Calcium oxalate monohydrate aggregation induced by aggregation of desialylated Tamm-Horsfall protein. Urol. Res. 2011; 39 (4): 269-82.

18. Lau Wai-Hoe, Leong Wing-Seng, Ismail Zhari, Gam Lay-Harn. Qualification and application of an ELISA for the determination of Tamm-Horsfall protein (THP) in human urine and its use for screening of kidney stone disease. Int. J. Biol. Sci. 2008; 4 (4): 215-22.

Received 19.11.13

© коллектив авторов, 2014 удк 615.31:547.466.6].015.46.076.9

Тюренков И.Н.1, Гумилевский Б.Ю.2, Филина И.С.1, Самотруева М.А.3, Бакулин ДА.1

влияние гидрохлорида бета-фенилглутаминовой кислоты (ргпу-135, нейроглутам) на иммунную систему и психоэмоциональное состояние животных

1Кафедра фармакологии и биофармации ФУВ ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, 400131, г Волгоград, Российская Федерация; 2кафедра клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, 400131, г. Волгоград, Российская Федерация; 3ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, 414000, г. Астрахань, Российская Федерация

На мышах линии BALB/c изучено влияние нейроглутама на психоэмоциональное состояние животных в условиях развития иммунного ответа при иммунизации корпускулярным антигеном - эритроцитами барана. Анализ изменения психоэмоционального статуса у животных под влиянием нейроглутама проводили в тестах «Открытое поле» и «Черно-белая камера». Исследовано влияние нейроглутама на формирование антигенспецифического иммунитета (оценка гуморального и Т-клеточного звена иммунного ответа) и неспецифическую (оценка фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови) резистентность организма. Полученные результаты свидетельствуют о способности нейроглутама устранять тревожность животных, возникшую после иммунизации антигеном. Показано, что исследуемое соединение РГПУ-135 в дозах 26 и 78 мг/кг оказывает стимулирующее влияние на специфический иммунный ответ, а в дозах 78 и 234 мг/кг повышает фагоцитарную активность нейтрофилов.

Ключевые слова: нейрогяутам; иммунная система; психоэмоциональный статус; BALB/c мыши. Tiurenkov I.N.1, Gumilevskiy B.Yu.2, Filina I.S.1, Samotrueva M.A.3, Bakulin D.A.1

THE INFLUENCE OF BETA-PHENYLGLUTAMIC ACID HYDROCHLORIDE (RGPU-135, NEUROGLUTAM) ON IMMUNE SYSTEM AND PSYCHOEMOTIONAL STATE OF ANIMALS.

'Volgograd state medical university, Department of Pharmacology and Biopharmacy, 400131, Volgograd, Russian Federation; 2Volgograd state medical university, Department of Clinical Laboratory Diagnosis, 400131, Volgograd, Russian Federation; 3Astrakhan state medical academy, 414000, Astrakhan, Russian Federation

The main purpose of this article is to evaluate the influence of neuroglutam (RGPU-135) on psychoemotional state during the development of the immune response in Balb/c mice. The "open field" test and "light/dark box" test were used to the evaluation of psychoemotional state of mice. Analysis of formation of antigen specific (humoral and T cells part of immunity) and non-specific (the phagocytic activity of neutrophils) immune resistance was used to the evaluation of development of the immune response in mice. We observed the neuroglutam ability to decrease animal anxiety after antigen immunization. Neuroglutam showed stimulating effect on specific immune response in dose 26 and 78 mg/kg; and increased the phagocytic activity of neutrophils in dose 78 и 234 mg/kg.

Keywords: neuroglutam; immune system; psychoemotional state; BALB/c mouse.

Введение. Нервная и иммунная системы, играющие важную роль в процессах поддержания гомеостаза, характеризуются тесным и сложным двухсторонним взаимодействием посредством гормонов, нейромедиаторов и цитокинов воспаления [1, 2]. Подтверждением наличия тесных интегратив-

ных нейроиммунных взаимосвязей является доказанная роль центральных нейромедиаторных систем, таких как ГАМКер-гическая, глутаматергическая, серотонинергическая, допа-минергическая, в регуляции функционирования иммунной системы [3, 4].

В последние годы проводится интенсивное изучение роли нейроактивных аминокислот в иммунологических процессах [5, 6]. Получен ряд данных, доказывающих влияние производных ГАМК, глутаминовой кислоты на реактивность иммунной системы в условиях нормы и экспериментальной патологии [7-9]. В связи с подтверждением участия иммунных механизмов в развитии ряда психосоматических заболеваний (эпилепсия, болезнь Альцгеймера, синдром хронической усталости, ишемия головного мозга и др.) и широким использованием нейротропных лекарственных средств в неврологии и психиатрии является актуальным поиск лекарственных средств из группы аналогов нейромедиаторов, способных наряду с положительным влиянием на психоэмоциональный статус корректировать также нарушения в иммунной системе [10, 11]. В настоящее время завершается доклиническое изучение нейроглутама - вещества с антиде-прессантным, анксиолитическим, нейропротекторным и иммуностимулирующим действием [12, 13].

С учетом вышесказанного целью настоящего исследования стало изучение иммунотропного действия нового производного нейроактивной глутаминовой кислоты нейроглутама и его влияния на поведение животных в условиях развития иммунного ответа на антигенный стимул.

Материал и методы. Исследование выполнено на 140 мышах-самцах линии ВАЬВ/с массой 18-24 г, разделенных на группы по 10 особей в каждой, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Эксперименты проводили в соответствии с приказом Минздравсоцразвития РФ от 23.08.10 № 708н "Об утверждении правил лабораторной практики", ГОСТ Р-53434-2009 "Принципы надлежащей лабораторной практики". Данное исследование было одобрено региональным независимым этическим комитетом ГУ Волгоградского медицинского научного центра (протокол № 132-2012).

400 350 300 250 200 150 100 50 0

Титр антиэритроцитарных антител

\ Титр

Контроль

151

26 мг/кг

341

78 мг/кг

302

234 мг/кг

90

Индекс воспаления

25 и

20-

15-

10-

5-

и Контроль 26 мг/кг 78 мг/кг 234 мг/кг

Щ Индекс 12,4 17,6 20,9 11,6

Рис. 1. Влияние гидрохлорида Р-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутам) на гуморальное в РПГА (а) и Т-клеточное в РГЗТ (б) звенья иммунного ответа на антигенный стимул. Здесь и на рис. 2-4: * - значимые различия по сравнению с показателями в контрольной группе животных при р < 0,05 (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса).

Субстанцию гидрохлорида р-фенилглутаминовой кислоты РГПУ-135 (получена на кафедре органической химии ФГБОУ ВПО "РГПУ им. А.И. Герцена") в дозах 26, 78 и 234 мг/кг вводили однократно внутрибрюшинно за 1 ч до иммунизации животных корпускулярным антигеном - эритроцитами барана (ЭБ; ЗАО "ЭКОлаб", Россия) (I и II серии) и за 24 ч до постановки реакции фагоцитоза (III серия). Лабораторных животных разделили на группы следующим образом:

1-я группа (интактная) получала физиологический раствор;

2-я группа (контроль) подвергалась иммунизации антигеном ЭБ (в I и II сериях) и получала физиологический раствор; 3, 4, 5-я (опытные) подвергались иммунизации ЭБ (в I и II сериях) и получали соединение РГПУ-135 в дозах 26, 78 и 234 мг/кг соответственно.

Исследование состояло из трех экспериментальных серий: в I серии изучали влияние нейроглутама на гуморальное звено первичного иммунного ответа и поведение животных в тестах "Открытое поле" (ОП) и "Черно-белая камера" (ЧБК); во II серии определяли влияние соединения РГПУ-135 на активность Т-клеточного звена иммунной системы при антигенной стимуляции; в III серии изучали влияние нейроглутама на активность фагоцитов. Результаты исследования статистически обрабатывали с использованием рангового однофакторного анализа Крускала-Уоллиса, критерия Ньюмена-Кейлса, критерия Данна.

Влияние РГПУ-135 на формирование гуморального иммунного ответа при антигенной стимуляции ЭБ осуществляли на основе реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Иммунизацию животных ЭБ осуществляли однократно вну-трибрюшинно в дозе 5 • 107 клеток в 250 мкл физиологического раствора. Уровень антителообразования определяли на 7-е сутки после иммунизации по среднегеометрическому значению титра антител в каждой исследуемой группе [14].

Изучали поведение животных при развитии гуморального иммунного ответа на антигенный стимул. Психоэмоцио-

Фагоцитарный показатель

чР О^ 80 -|

3 70 -

с

-В- 60 -

о о. 50 -

>5 0) 40 -

I <0 30 -

л I 20 -

т

1? 10 -

< 0 -

Ш фп

Контроль

33,8

26 мг/кг

45,0

78 мг/кг

67,2

234 мг/кг

67,8

ё!

т

4,0 3,5 3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0

Фагоцитарное число

I ФЧ

Контроль

2,7

26 мг/кг

3,3

78 мг/кг

3,3

234 мг/кг

3,1

Рис. 2. Влияние гидрохлорида Р-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутам) на показатели фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови при совместной инкубации с частицами латекса.

Двигательная активность

Интакт

Контроль

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 РГПУ-135

мг/кг

25-,

к к

Е ь

со о со о.

15-

<а 5

ё со £ г

о

1 юн

5-

Ориентировочно-исследовательская активность

Интакт Контроль

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 мг/кг РГПУ-135

Число актов кратковременного груминга

Интакт

Контроль

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 РГПУ-135

мг/кг

3,5-, 3,02,52,0 -1,51,00,50,0-

Количество фекальных болюсов ##

#;

Интакт

Контроль

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 мг/кг РГПУ-135

До иммунизации

После иммунизации

Рис. 3. Влияние гидрохлорида Р-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутам) на тревожность животных в тесте ОП.

- значимые различия по сравнению с показателями в контрольной группе животных при р < 0,01;

группе животных до иммунизации антигеном при р < 0,05, p < 0,01 соответственно; при p < 0,05 (ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Данна).

по сравнению с показателями в этой же

по сравнению с показателями в интактной группе животных

# ##

Латентный период захода в темный отсек

Интакт

Контроль

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 мг/кг РГПУ-135

Количество переходов между отсеками

Интакт

л,##

Контроль

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 мг/кг РГПУ-135

У///\ До иммунизации

к г аз а. Ш

160 140 120 ° 100 80 60 40 20 0

6 -, 5 -4

3 -2 -1 -0

Время, проведенное в светлом отсеке

Интакт

\##

Контроль

ш:

26 мг/кг I 78 мг/кг I 234 мг/кг РГПУ-135

Количество исследовательских отсеков

Интакт

Интакт

26 мг/кг | 78 мг/кг | 234 мг/кг РГПУ-135

После иммунизации

Рис. 4. Влияние гидрохлорида Р-фенилглутаминовой кислоты (РГПУ-135, нейроглутам) на тревожность животных в тесте ЧБК.

Л, лл - значимые различия по сравнению с показателями в интактной группе животных при p < 0,01 (ранговый однофакторный анализ Крускала-

Уоллиса, критерий Данна).

нальный статус животных оценивали с помощью тестов ОП и ЧБК. Показатели снимали в динамике: 1) поведение животных после введения исследуемого вещества, т. е. до иммунизации (вещество вводили за 40 мин до проведения теста); 2) поведение животных через 48 ч (на 3-и сутки) после иммунизации.

Влияние нейроглутама на Т-клеточное звено иммунной системы изучали на модели реакции гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ) при введении разрешающей дозы антигена. В этом случае иммунизацию мышей проводили однократно подкожно 2 • 108 клеток в объеме 100 мкл физиологического раствора. Разрешающую дозу (1 • 108 клеток в объеме 20 мкл) вводили на 5-е сутки после сенсибилизации под апонев-ротическую пластинку одной из задних конечностей (опытная лапа), физиологический раствор - в контралатеральную (контрольная лапа). Через 24 ч оценивали интенсивность местной реакции и подсчитывали индекс воспаления РГЗТ [14].

Влияние нейроглутама на активность фагоцитов, а именно фагоцитарный показатель - процент клеток, вступивших в фагоцитоз (процент активных нейтрофилов); фагоцитарное число - среднее число поглощенных частиц латекса активными нейтрофилами, исследовали в тесте постановки реакции фагоцитоза полиморфно-ядерных (нейтрофильных) лейкоцитов периферической крови с 1% суспензией частиц латекса размером 1,5 мкм («Диаэм», Россия). При этом через 24 ч после введения нейроглутама в исследуемых дозах животных выводили из эксперимента и производили забор венозной крови. 50 мкл гепаринизированной крови смешивали с 50 мкл 1% суспензии латекса в 96-луночном крутодонном планшете и инкубировали 2 ч при температуре 37oC, периодически встряхивая пробы. Далее изготавливали гематологические мазки, которые фиксировали в растворе Мая-Грюнвальда 2-3 мин, окрашивали краской Романовского 30-40 мин и просматривали под иммерсионной системой в микроскопе под увеличением 10 • 100 oil с подсчетом показателей фагоцитоза.

результаты и обсуждение. Однократное внутрибрюшин-ное введение гидрохлорида р-фенилглутаминовой кислоты (нейроглутам) стимулировало гуморальный иммунный ответ на корпускулярный антиген - ЭБ. Введение соединения в дозах 26 и 78 мг/кг приводило к возрастанию титра гемагглюти-нинов на 59,5 и 40,5% соответственно относительно такового в группе животных, получавших физиологический раствор (контроль) (p < 0,05) (рис. 1, а). Нейроглутам оказал также стимулирующее влияние на уровень Т-клеточного иммунного ответа. Так, индекс воспаления РГЗТ при введении соединения в дозах 26 и 78 мг/кг возрос соответственно на 42,1 и 68,7% относительно аналогичного показателя в контрольной группе (p < 0,05) (рис. 1, б). Дальнейшее увеличение дозы нейроглутама до 234 мг/кг снижало активность гуморального и Т-клеточного иммунного ответа относительно фоновых значений в контрольной группе (см. рис. 1, а, б).

Результаты оценки влияния РГПУ-135 на фагоцитарную активность нейтрофильных гранулоцитов периферической крови показали, что данное соединение в дозах 78 и 234 мг/кг достоверно увеличивало процент клеток, вступивших в фагоцитоз, практически в 2 раза по сравнению с таковым в контрольной группе (p < 0,05) (рис. 2, а) и не оказывало значимого влияния во всех исследуемых дозах на среднее число поглощенных частиц латекса активными нейтрофилами (рис. 2, б).

У животных контрольной группы после введения антигена отметили изменения психоэмоционального статуса. Так, в тесте ОП достоверно уменьшились показатели двигательной и ориентировочно-исследовательской активности, количество заходов в центральную зону и увеличилось количество актов "тревожного" груминга (рис. 3). В тесте ЧБК уменьшались время до захода в темный отсек (латентный период) и суммарное время, проведенное в светлом отсеке, а также количество исследовательских стоек и количество переходов между светлым и темным отсеками (рис. 4). Что указывает на наличие тревожного состояния у животных на фоне развития иммунного ответа.

Нейроглутам достоверно нивелировал признаки тревожности, развивающиеся у животных на 3-и сутки после

однократной иммунизации антигеном. Так, в тесте ОП введение соединения РГПУ-135 в дозах 26 и 78 мг/кг лабораторным животным приводило к увеличению локомоторной и ориентировочно-исследовательской активности и к снижению актов "тревожного" груминга и количества фекальных болюсов относительно такового в контрольной группе (p < 0,05) (см. рис. 3).

В тесте ЧБК у животных опытных групп, получавших РГПУ-135 в диапазоне доз 26-234 мг/кг, отметили увеличение латентного периода (время до захода в темный отсек), суммарного времени, проведенного в светлом отсеке, также возрастали количество переходов между темным и светлым отсеками и количество исследовательских стоек (см. рис. 4).

Полученные данные свидетельствуют о наличии у данного соединения анксиолитической активности.

выводы 1. Соединение РГПУ-135 (нейроглутам) оказывает дозозависимое иммуностимулирующее действие на гуморальный, Т-клеточный иммунный ответ и процент клеток, вступивших в фагоцитоз.

2. Нейроглутам оказывает анксиолитическое действие, снижая признаки тревожности у животных, возникающие на фоне развития иммунного ответа, тогда как у животных контрольной группы данные признаки сохраняются.

3. В терапевтической дозе 26 мг/кг нейроглутам оказывает умеренное влияние на гуморальное и Т-клеточное звенья иммунной системы и проявляет наиболее выраженное анк-сиолитическое действие у иммунизированных животных.

литература

1. Фрейдлин И.С. Современные направления в развитии иммуно-фармакологии. Медицинский академический журнал. 2004; 1: 88-100.

2. Черешнев В.А., Юшков Б.Г., Климин В.Г., Лебедева Е.В. Имму-нофизиология. Екатеринбург: УрО РАН; 2002.

3. Магаева С.В., Морозов С.Г. Нейроиммунофизиология. М.: Издательство ГУ НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН; 2005.

4. Пальцев М.А., Кветной И.М. Руководство по нейроиммуноэндо-кринологии. М.: Медицина; 2006.

5. Корнева Е.А. МедицинаXXI век: научно-практический журнал. 2007; 5: 16-23.

6. Irwin M.R. Human psychoneuroimmunology: 20 years of discovery. BrainBehav. Immunol. 2008; 22 (2): 129-39.

7. Самотруева М.А., Теплый Д.Л., Тюренков И.Н., Лужнова С.А. Изменения психоэмоционального состояния в условиях подавления иммуногенеза у мышей и крыс. Коррекция нарушений ГАМК-позитивными препаратами. Российский физиологический журнал. 2010; 2: 115-220.

8. Гражданцева Н.Н., Самотруева М.А., Тюренков И.Н., Хлебцова Е.Б., Берестовицкая В.М., Васильева О.С. Иммунотропная активность фенотропила и его композиции с глутаминовой кислотой. Фармация. 2010; 8: 38-40.

9. Давыдова О.Н., Болдырев А.А. Глутаматные рецепторы в клетках нервной и иммунной систем. Анналы клинической и экспериментальной неврологии. 2007; 1 (4): 28-34.

10. Крыжановский Г.Н., Магаева С.В., Макаров С.В., Сепиашви-ли Р.И. Нейроиммунопатология. Руководство. М.: Медицина; 2003.

11. Самотруева М.А. Иммунные нарушения при некоторых нервно-психических заболеваниях. Астраханский медицинский журнал. 2008; 3: 14-24.

12. Петров В.И., Тюренков И.Н., Багметова В.В., Самотруева М.А., Берестовицкая В.М., Васильева О.С. и др. Средство, обладающее антидепрессантным, анксиолитическим, нейропротек-торным и иммуностимулирующим действием. Патент РФ № 2429834, 2011.

13. Волотова Е.В., Мазина Н.В., Куркин Д.В., Тюренков И.Н. Ней-ропротективное действие гидрохлорида ß-фенилг-лутаминовой кислоты (РГПУ-135) при недостаточности мозгового кровообращения у крыс. Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. 2013; 1: 40-2.

14. Хабриев Р.У, ред. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ОАО «Издательство «Медицина»; 2005.

Поступила 15.12.13

references

1. Freydlin I.S. Modern trends in the development of Immunopharma-cology. Meditsinskiy akademicheskiy zhurnal. 2004; 1: 88-100.

2. Chereshnev V.A., Yushkov B.G., Klimin V.G., Lebedeva E.V. Im-munophysiology. Ekaterinburg: UrO RAN; 2002.

3. Magaeva S.V., Morozov S.G. Neuroimmunophysiology. Moscow: Izdatelstvo GU NII biomeditsinskoy himii im. V.N. Orekhovicha RAMN; 2005.

4. Pal'tsev M.A., Kvetnoy I.M. Guidelines for Neuroimmunoendocri-nology. Moscow: Meditsina; 2006.

5. Korneva E.A. Meditsina XXI vek: nauchno-prakticheskiy zhurnal. 2007; 5: 16-23.

6. Irwin M.R. Human psychoneuroimmunology: 20 years of discovery. Brain Behav. Immunol. 2008; 22 (2): 129-39.

7. Samotrueva M.A., Teplyy D.L., Tyurenkov I.N., Luzhnova S.A. Changes in emotional state under conditions of suppression of immunogenesis in mice and rats. Correction of disorders by the GABA-positive drugs. Rossiyskiy fiziologicheskiy zhurnal. 2010; 2: 115-220.

8. Grazhdantseva N.N., Samotrueva M.A., Tyurenkov I.N., Khlebtsova E.B., Berestovitskaya V.M., Vasileva O.S. Immunotropic activity

of Phenotropil and its composition with glutamic acid. Farmatsiya. 2010; 8: 38-40.

10. Kryzhanovskiy G.N., Magaeva S.V., Makarov S.V., Sepiashvili R.I. Neuroimmunopathology: Rukovodstvo. Moscow: Meditsina; 2003.

11. Samotrueva M.A. Immune disorders in certain neuropsychiatric disorders. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal. 2008; 3: 14-24.

12. Petrov V.I., Tiurenkov I.N., Bagmetova V.V., Samotrueva M.A., Berestovitskaya V.M., Vasil'eva O.S. et al. Substance with Antidepressant, Anxiolytic, Neuroprotective and Immunostimulatory Effects. Patent RF № 2429834, 2011.

13. Volotova E.V., Mazina N.V., Kurkin D.V., Tyurenkov I.N. The neuroprotective effect of beta-phenylglutamic acid hydrochloride

14. Khabriev R.U., red. Guidelines for Experimental

Received 15.12.13

ЦИТОКИНЫ

© коллектив авторов, 2014 удк 615.281.8.015.46.076.9

горская Ю.Ф., Семенова Е.Н., грабко В.и., Суслов А.П., Нестеренко В.г.

противовирусный препарат "кагоцел" оказывает модулирующее действие на цитокиновый профиль сыворотки крови мышей линии сва, формирующийся под действием комплекса антигенов s. typhimurium in vivo

ФГБУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России, 123098, г. Москва

Известно, что вирусная инфекция нередко сопровождается бактериальной инфекцией. В данной работе изучено действие противовирусного препарата "Кагоцел" на цитокиновый профиль (концентрация интерлейкина (ИЛ)-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-12, GM-CSF, интерферона-Y (IFNy), фактора некроза опухоли a (TNFa)) сыворотки крови мышей линии СВА, формирующийся под действием комплекса антигенов S. typhimurium in vivo. Введение кагоцела в использованной дозе (внутрибрюшинно, 30 мкг на мышь) через 1 ч вызывало умеренный (в 1,3-1,6 раза) подъем концентрации ИЛ-2, ИЛ-10, IFNy, ИЛ-12, ИЛ-4 и TNFa в сыворотке крови мышей, а через 3, 7 и 23 ч практически не влияло на их уровень, что соответствует ранее полученным данным. Введение мышам антигенов S. typhimurium через 2 и 4 ч вызывало в сыворотке их крови повышение концентрации ИЛ-2 (соответственно в 1,8 и 3,3 раза), ИЛ-10 (в 4,7 и 2,9 раза), ИЛ-12 (в 2,4 и 3,7 раза), TNFa (в 1,3 и 1,6 раза), ИЛ-4 (в 1,3 раза через 4 ч), GM-CSF (в 2 раза через 4 ч), IFNy (в 5,9 раз через 4 ч). Таким образом, через 4 ч после введения антигенов S. typhimurium по сравнению с 2 ч спектр цитокинов с повышенной концентрацией расширялся, их уровень существенно повышался и достигал высоких значений. Через 20 ч после введения антигенов S. typhimurium уровень цитокинов сыворотки крови либо примерно соответствовал уровню контроля (ИЛ-2, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-4), либо становился ниже его в 1,4-1,9 раза для остальных цитокинов (IFNy, ИЛ-12, TNFa).

Предварительное введение кагоцела перед введением антигенов S. typhimurium модулировало вышеуказанные изменения цитокинового профиля следующим образом: для одной группы цитокинов - ИЛ-10, ИЛ-4, GM-CSF и TNFa - снижало высокую (2 и 4 ч после введения антигенов S. typhimurium) концентрацию цитокинов и поднимало низкую концентрацию TNFa (имеющую место через 20 ч после введения антигенов S. typhimurium), в результате поддерживая их на уровне нормы или (ИЛ-10) выше уровня нормы; для другой группы цитокинов - ИЛ-2, IFNy и ИЛ-12 - практически не влияло на высокий уровень (через 2 и 4 ч) после введения антигенов S. typhimurium и обеспечивало повышение сниженного через 20 ч после введения антигенов S. typhimurium содержания этих цитокинов до уровня, превышающего нормальный в 1,4-1,8 раза. Таким образом, кагоцел оказывал разнонаправленное модулирующее действие на цитокиновый профиль сыворотки крови, формирующийся под действием бактериальных антигенов. Это может вносить вклад в его лечебный и профилактический эффект наряду с ранее показанной способностью стимулировать синтез IFNa и IFNp в течение нескольких дней.

Ключевые слова: кагоцел; цитокины сыворотки крови; иммуномодулирующее действие.