СИНТЕЗ ЛИКСИСЕНАТИДА С КЭППИРОВАНИЕМ

1. Способ твердофазного синтеза полипептида, содержащего предварительно определенную аминокислотную последовательность, при этом способ включает циклы связывания аминокислотных структурных блоков с аминокислотной цепью,
где указанные аминокислотные структурные блоки содержат незащищенную C-концевую карбоксильную группу и защищенную N-концевую аминогруппу,
и где указанная аминокислотная цепь содержит незащищенную N-концевую аминогруппу,
при этом по меньшей мере один цикл связывания включает следующие стадии:
связывание С-конца аминокислотного структурного блока с незащищенной N-концевой аминогруппой аминокислотной цепи, так чтобы между аминокислотной цепью и аминокислотным структурным блоком образовалась амидная связь,
приведение продукта, полученного на стадии (а), в контакт с кэппирующим реагентом, содержащим кэппирующее соединение, при этом кэппирующее соединение связывается с незащищенной N-концевой аминогруппой аминокислотной цепи, с которой на стадии (а) не был связан ни один структурный блок, и
удаление защитной группы с N-концевой аминогруппы аминокислотного структурного блока,
где кэппирующий реагент содержит 0,5-5% об./об. уксусного ангидрида и 0,2-2% об./об. диизопропилэтиламина.
N
трет
N
трет
2. Способ по п. 1, где кэппирующее соединение выбрано из группы, состоящей из уксусного ангидрида (CAS 108-24-7), гомологов уксусного ангидрида, бензоилхлорида (CAS 98-88-4), -(бензилоксикарбонилокси)сукцинимида (CAS 13139-17-8), бензилхлорформиата (CAS 501-53-1), сложных эфиров хлормуравьиной кислоты, 1-ацетилимидазола (CAS 2466-76-4), ди--бутилдикарбоната (CAS 24424-99-5) и -(-бутоксикарбонилокси)сукцинимида (CAS 13139-12-3).
3. Способ по п. 1 или 2, где кэппирующий реагент содержит 1-3% об./об. уксусного ангидрида, предпочтительно 2% об./об. уксусного ангидрида.
4. Способ по любому из предыдущих пунктов, где кэппирующий реагент содержит 0,5-2% об./об. диизопропилэтиламина, предпочтительно 1% об./об. диизопропилэтиламина.
5. Способ по любому из предыдущих пунктов, где кэппирующий реагент содержит 1% об./об. диизопропилэтиламина и 2% об./об. уксусного ангидрида.
6. Способ по любому из предыдущих пунктов, где кэппирующий реагент содержит DMF.
7. Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадию (b) проводят при температуре 15-25°C.
8. Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадию (b) проводят в течение 5-15 мин.
9. Способ по любому из предыдущих пунктов, где аминокислотный структурный блок содержит α-аминокислоту.
10. Способ по любому из предыдущих пунктов, где аминокислотный структурный блок выбран из Arg, Glu, Gln, Leu и Gly.
11. Способ по любому из предыдущих пунктов, где полипептид выбран из GLP-1, его аналогов и производных, эксендина-3, его аналогов и производных и эксендина-4, его аналогов и производных.
12. Способ по любому из предыдущих пунктов, где полипептид выбран из эксендина-4, ликсисенатида, албиглутида, дулаглутида и семаглутида.
13. Применение композиции для ацетилирования незащищенной аминогруппы в ходе твердофазного синтеза полипептида, при этом указанная композиция содержит 0,5-5% об./об. уксусного ангидрида и 0,2-2% об./об. диизопропилэтиламина в DMF.
14. Применение по п. 13, где композиция содержит 1% об./об. диизопропилэтиламина и 2% об./об. уксусного ангидрида в DMF.