СПОСОБ ОТБОРА СЕЛЕКЦИОННЫХ ОБРАЗЦОВ РАСТЕНИЙ ГРЕЧИХИ

1. Способ отбора селекционных образцов растений гречихи, включающий: выращивание селектируемой и контрольной популяций при нормальных условиях с последующим помещением части образцов каждой популяции в стрессовые условия; сбор образцов ткани растений селектируемой и контрольной популяции подвергнутых и не подвергнутых стрессовому воздействию; определение в собранных образцах уровней экспрессии предварительно выявленных генов, маркирующих уровень ответа на анализируемый тип стресса; сравнение уровня экспрессии генов в образцах, помещенных в стрессовые условия и образцов, выращенных при нормальных условиях; отбор тех образцов, у которых наблюдается максимальное изменение уровня экспрессии генов, маркирующих уровень ответа на анализируемый тип стресса по сравнению с контрольной популяцией.
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что выявление генов, маркирующих уровень ответа на анализируемый тип стресса, включает: выращивание образцов сорта гречихи при нормальных условиях с последующим помещением части образцов в различные стрессовые условия; сбор образцов ткани растений подвергнутых и не подвергнутых стрессовым воздействиям; анализ уровня экспрессии всех генов в подвергнутых и не подвергнутых стрессовому воздействия образцах; сравнение уровней экспрессии генов в образцах, подвергнутых разным типам стрессов; выявление генов специфически изменяющих уровень экспрессии в ответ на анализируемый тип стресса.
3. Способ по п.1, характеризующийся тем, что отбирают селектируемые образцы, характеризующиеся максимальным изменением уровня экспрессии генов, маркирующих уровень ответа на анализируемый тип стресса, в направлении, в котором оно происходит у контрольного образца.
4. Способ по п.1, характеризующийся тем, что сбор образцов ткани проводят в одно и то же время светового цикла.
5. Способ по п.1, характеризующийся тем, что уровень экспрессии генов определяют методом полимеразной цепной реакции продуктов обратной транскрипции с детекцией результатов в режиме реального времени с использованием референсных генов.
6. Способ по п.5, характеризующийся тем, что в качестве референсных генов используют не менее 2 генов, имеющих последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленной в SEQ ID NO:33-37, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:33-37.
7. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют кратковременное воздействие высокой температурой, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:1-4, или последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную последовательности, представленной в SEQ ID NO:1-4.
8. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют долговременное воздействие высокой температурой, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:5-8, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:5-8.
9. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют кратковременное воздействие низкой температурой, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:9-12, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:9-12.
10. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют долговременное воздействие низкой температурой, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:13-16, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:13-16.
11. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют долговременное воздействие избыточным освещением, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:17-20, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:17-20.
12. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют долговременное воздействие недостаточным освещением, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:21-24, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:21-24.
13. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют раневое воздействие, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:25-28, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:25-28; при этом определение уровня экспрессии генов проводят через час после воздействия.
14. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве стрессового воздействия используют раневое воздействие, а в качестве гена(ов), маркирующего(их) уровень ответа на анализируемый тип стресса, используют один или несколько генов, имеющих нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, включающей: последовательность, представленную в SEQ ID NO:29-32, последовательность, по крайней мере, на 95% гомологичную гомологичной последовательности, представленной в SEQ ID NO:29-32; при этом определение уровня экспрессии генов проводят через 23-25 часов после воздействия.
15. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве селектируемых образцов используют межвидовые гибриды, а в качестве контрольных образцов дикие формы, устойчивые к анализируемым стрессовым воздействиям.
16. Способ по п.1 характеризующийся тем, что в качестве селектируемых образцов используют материал, полученный при проведении мутагенеза, а в качестве контрольных образцов используют растения исходной линии.