Эндофитные актинобактерии рода Cellulomonas в искусственно созданной ассоциации с меристемным картофелем

References

1. Novoselov S.N. Filosofiya ideotipa sel'skokhozyajstvennykh kul'tur. I metodologiya i metodika. [Philosophy of ideatype of agricultural crops. I. Methodology and principles]. Nauchnyj zhurnalKubGAU. [Scientific journal of Kuban State Agrarian University] 2006. no. 24 (8). pp. 1-20.

2. Kovtun V.I. Modeli sortov ozimoj pshe-nicy raznoj intensivnosti dlya zasushlivykh uslovij yuga Rossii. [Models of winter wheat varieties of different intensity for drought conditions of Russian South]. Izvestiya OGA U [News of Orel State Agrarian Iniversity]. 2010. V.4. no. 28. pp. 31-33.

3. Tikhonov V.E., Dolgalev K.M., Dolgalev M.P. Parametry modeli sorta yarovoj tverdoj pshenicy dlya uslovij stepi Orenburgskogo Pre-dural'ya. [Parameters of variety model of spring hard wheat for conditions of steppe of Orenburg PredUral]. Vestnik OGU [Herald of Orenburg State University]. 2005. no.5. pp. 125-127.

4. Mukhitov L.A., Samuilov F.D. Modeli sortov yarovoj myagkoj pshenicy, adaptirovan-nykh k usloviyam lesostepnoj zony Orenburgskogo Predural'ya. [Models of spring soft wheat varieties adapted for conditions of forest-steppe zone of Orenburg PredUral]. Vestnik Kazanskogo GAU [Herald of Kazan State Agrarian University]. 2013. no. 3 (29). pp. 106-112.

5. Vavilov N.I. Genetika na sluzhbe socia-listicheskogo zemledeliya [Genetics for socialist agriculture]. Teoreticheskie osnovy selekcii. [The-

oretical basis of breeding]. Moscow: Nauka, 1987. pp. 142-167.

6. Dragavcev V.A., Udovenko G.V., Batygin N.F. Fiziologicheskie osnovy selekcii rastenij. [Physiological basis of plant breeding]. S-Pb.: izd-vo VIR, 1995. V.2. 622 p.

7. Dragavcev V.A. Ekologo-geneticheskaya model' organizacii kolichestvennykh priznakov rastenij. [Ecological-and genetic model of organization of plant quantity traits]. Sel'skokho-zyajstvennaya biologiya [Agricultural biology]. 2008. no. 5. pp. 22-27.

8. Dragavcev V.A. K probleme geneti-cheskogo analiza poligennykh kolichestvennykh priznakov rastenij. [About problem of genetic analysis of polygenic quantitative traits in plants]. S-Pb, 2003.35 p.

9. Komarov N.M., Druzhinina E.V. O modul'noj strukture geneticheskoj organizacii koli-chestvennykh priznakov u yarovoj myagkoj pshe-nicy v usloviyakh zony neustojchivogo uvlazhne-niya central'nogo Predkavkaz'ya. [About module structure of genetic organization of quantitative traits in spring soft wheat under conditions of unstable moistening of Central Caucasus]. Sel'sko-khozyajstvennaya biologiya [Agricultural biology]. 2008. no. 5. pp. 22-27.

10. Bajer Ya, Cherny V., Ferik M. Formi-rovanie urozhaya osnovnykh sel'skokhozyajstvennykh kul'tur. [Forming of yield of main agricultural crops]. Moscow: Kolos, 1984. 367 p.

УДК 579.871.3:633.491:57.085.23

Эндофитные актинобактерии рода Cellulomonas в искусственно созданной ассоциации с меристемным картофелем

Рябова Ольга Вениаминовна, кандидат биол. наук, научный сотрудник ФГБНУ «НИИСХ Северо-Востока», г. Киров, Россия

E-mail: olga06.03@mail.ru

В статье изложены результаты исследования способности продуцирующего ауксины штамма 7 Cellulomonas sp., выделенного из внутренних тканей корней озимой ржи (Secale cereale L.) на дерново-подзолистой почве и проявлявшего в отношении растения-хозяина ростстимулирующую активность, вступать во взаимодействие с другой сельскохозяйственной культурой - картофелем (Solanum tuberosum L.), размножаемым в условиях in vitro. Исследование проводили на двух сортах картофеля -Рождественский и Дарик. Создание микробно-растительной ассоциации in vitro осуществляли путем нанесения на поверхность эксплантов суспензии клеток изучаемого изолята. В результате инокуляции Cellulomonas sp. 7 активно колонизировал поверхность и внутренние ткани побегов (0,5*109 и 4,2*10 КОЕ/г соответственно; на 30 сутки с момента обработки) и корней (3,4*10 и 9,4*10* КОЕ/г) растений сорта Рождественский. Плотность заселения целлюломонадами филлопланы (2,6*109 КОЕ/г) и ризопланы (0,7*107 КОЕ/г) картофеля Дарик была на том же уровне, что и картофеля Рождественский, однако, во внутренних тканях побегов этого сорта бактерии обнаруживались в меньшем, чем у сорта Рождественский, количестве (2,1*10 КОЕ/г), а в поверхностно стерилизованных корнях не об-

наруживались совсем. Наблюдение на протяжении трех пассажей за колонизацией целлюломонадами растений меристемного картофеля позволило установить, что их численность в фитосфере сорта Рождественский сохранялась на достаточно высоком уровне в течение всего эксперимента. Стабильная колонизация изучаемым изолятом фитосферы картофеля Дарик наблюдалась на протяжении только двух пассажей, в третьем пассаже бактерии на растениях выявить не удалось. Полученные результаты свидетельствуют о способности Cellulomonas sp. 7 вступать во взаимодействие с мери-стемным картофелем. При этом плотность заселения целлюломонадами растительных тканей, а также стабильность созданной ассоциации в значительной степени зависит от сортовой принадлежности растений: обнаружена более тесная связь изучаемого изолята с сортом Рождественский, нежели сортом Дарик. Показана возможность регуляции актинобактериями рода Cellulomonas роста меристемного картофеля в условиях in vitro. Обработка эксплантов Cellulomonas sp. 7 способствовала увеличению высоты побегов, массы и коэффициента размножения растений. Существенный фито-стимулирующий эффект от инокуляции достигается путем подбора оптимальной концентрации инокулюма.

Ключевые слова: актинобактерии, культура ткани, картофель, колонизация, эндофиты, фитогормоны

Возможность использования эндофит-ных микроорганизмов для регуляции роста и развития растений, выращиваемых в культуре ткани, привлекает все более пристальное внимание исследователей [1, 2, 3]. Это обусловлено широкой распространенностью среди них представителей, продуцирующих метаболиты с фиторегуляторной активностью [1, 4, 5], а также более тесной связью эндофитов, по сравнению с почвенной и ри-зосферной микрофлорой, с растениями.

В последнее время в зарубежной научной литературе все чаще появляются сообщения [6, 7] о выделении из внутренних тканей растений, произрастающих в естественных условиях, актинобактерий рода Cellulomonas. Их присутствие отмечено также в тканях растительных эксплантов, культивируемых в асептических условиях in vitro [8]. Рядом авторов [6, 9] показана способность представителей рода Cellulomonas успешно колонизировать поверхность и внутренние ткани растений при их искусственной интродукции в фитосферу. Имеются данные о синтезе целлюломонадами фито-гормонов [9, 10]. Все это обусловливает привлекательность представителей рода Cellulomonas для использования в фитобио-технологии. Тем не менее, в доступной нам литературе до настоящего времени сообщения о создании ассоциаций растений, выращиваемых в культуре ткани, с целлюломо-надами не встречались.

Ранее из внутренних тканей корней озимой ржи Вятка 2 нами был выделен штамм Cellulomonas sp. 7, проявивший способность к продукции ауксинов [11]. В эксперименте с проростками озимой ржи, ино-

кулированными Cellubmonas sp. 7, продемонстрирована способность данного изолята заселять поверхность и внутренние ткани корней, а также оказывать стимулирующее воздействие на рост растений [11]. На следующем этапе представляло интерес изучение эффектов совместного культивирования Cellulomonas sp. 7 с растениями, размножаемыми в культуре ткани.

Цель исследований - оценить возможность создания и использования ассоциации Cellulomonas sp. 7 с микроклонально размножаемыми растениями картофеля для направленной регуляции роста последних в условиях in vitro.

Материал и методы. В качестве микробного объекта исследования выбран выделенный нами ранее эндофитный штамм Cellulomonas sp. 7, продуцирующий ауксины (до 43 мкг/мл среды за 2-е суток культивирования). Растительные объекты - предварительно размноженные в асептических условиях меристемные растения картофеля сортов Дарик и Рождественский.

Получение бактериальной суспензии для создания микробно-растительной ассоциации осуществляли путем культивирования Cellulomonas sp.7 в жидкой питательной среде RHM [12] с добавлением 200 мкг/мл триптофана и заменой сульфата аммония на эквивалентное (по азоту) количество нитрата калия [11]. Выращивание проводили при 270С на качалке (180 об/мин) в течение 48 часов. Полученной бактериальной суспензией инокулировали микрочеренки картофеля, осторожно нанося на лист экспланта каплю объемом 5 мкл. Растения культивировали в условиях искусственного освещения

(8 тыс. люкс) при температуре 25/180С (день/ночь) и фотопериоде 16 ч на среде Мурасиге-Скуга (MS) [13] с добавлением 0,5 мг/л гибберелловой (ГК) и 0,1 мг/л индо-лил-3-уксусной (ИУК) кислот.

В эксперименте проводили оценку способности Cellulomonas sp. 7 заселять поверхность и внутренние ткани меристемного картофеля, а также сохраняться на растениях в течение трех пассажей (длительность 1-го пассажа - 1 месяц). Для анализа отбирали по 5 инокулированных растений. В некоторых случаях корень отделяли от побега. Целые растения, корни или побеги растирали в ступке со 100 мл стерильного физраствора, после чего готовили ряд последовательных разведений и осуществляли высев по 0,1 мл на плотную питательную среду RHM. Чашки с посевами инкубировали в термостате при 280С в течение 3-5 дней. Для выделения бактерий из внутренних тканей перед приготовлением суспензии растительных образцов использовали дополнительный прием - поверхностную стерилизацию растений [6] смесью этилового спирта и перекиси водорода (1:1) в течение 15 минут.

Фиторегуляторную активность изолята изучали при культивировании растений на среде МS в трех вариациях: А - с полным набором солей, витаминов и фитогормонов; Б - без ИУК; В - без витаминов и фитогор-монов. Инокуляция растений осуществлялась нативной суспензией Cellulomonas sp.7 (106 КОЕ/эксплант). В отдельном эксперименте на среде с исключением ауксина оценивали влияние на рост растений сорта Рождественский доз вносимого инокулюма Cellulomonas sp. 7: 1 - 106 КОЕ/эксплант (нативная суспензия), 2 - 105 КОЕ/эксплант, 3 - 104 КОЕ/эксплант. По окончании экспериментов учитывали биометрические параметры растений и коэффициент размножения в контрольном (без инокуляции) и опытных (инокуляция Cellulomonas sp. 7) вариантах.

Статистическую обработку полученных данных осуществляли стандартными методами дисперсионного анализа [14].

Результаты и их обсуждение. Создание микробно-растительной ассоциации можно считать успешным только в том случае, если инокуляция растений сопровожда-

ется колонизацией их тканей внесенными микроорганизмами, а также сохранением последних в фитосфере на протяжении достаточно длительного временного промежутка. При этом предполагается, что вступившие в ассоциацию микроорганизмы будут оказывать на растение определенное воздействие [3].

В нашей работе инокуляция меристем-ного картофеля штаммом 7 Cellulomonas sp. сопровождалась размножением бактерий на его поверхности и во внутренних тканях. Так, численность целлюломонад на поверхности побегов 30-суточных растений достигала у разных сортов (0,5-2,6)х 109 КОЕ/г (рис. 1). В поверхностно стерилизованных тканях побегов количество клеток Cellulomonas sp. 7 варьировало в пределах от 2,1х103 до 4,2х106 КОЕ/г у сортов Дарик и Рождественский соответственно. Корни мик-роклональных растений были заселены цел-люломонадами менее плотно, чем побеги: численность внесенного изолята в ризоплане не превышала (0,7-3,4)х 107 КОЕ/г у разных сортов. Во внутренних тканях корней Cellulomonas sp. 7 обнаруживался только у сорта Рождественский в количестве 9,4*103 КОЕ/г. Полученные данные свидетельствуют о том, что при искусственной интродукции в фитосферу картофеля, выращиваемого in vitro, изучаемый изолят способен вступать с ним в ассоциацию. При этом выявлена большая приуроченность Cellulomonas sp. 7 к надземной части растений, нежели к их корням. Однако результаты данного исследования не дают информации о том, насколько стабильной является полученная микробно-растительная ассоциация. Поэтому представляло интерес определение способности Cellulomonas sp. 7 сохраняться в фитосфере при черенковании инокулирован-ных растений и последующем культивировании вновь полученных эксплантов на свежей питательной среде.

Наблюдение на протяжении трех пассажей за колонизацией целлюломонадами фитосферы меристемного картофеля позволило установить, что их численность на поверхности растений сорта Рождественский сохранялась на достаточно высоком уровне -

(0,3-1,5)х108 КОЕ/г в зависимости от пассажа - в течение всего эксперимента (рис. 2). Стабильная колонизация на уровне численности (4,1-8,6)х 107 КОЕ/г изучаемым изоля-том фитосферы картофеля Дарик наблюдалась на протяжении только двух пассажей,

тогда как в третьем пассаже бактерии не обнаруживались. Полученные результаты свидетельствуют о более тесной связи Cellulomonas sp. 7 с сортом Рождественский по сравнению с сортом Дарик.

10

Рождественский

~ 4

10

Дарик

— 2

I эпифиты эндофиты

Рис. 1. Численность

8

8

6

6

4

2

0

0

1

2

1

2

Рождественский  Дарик

10

I' I I

12 3

пассаж

Рис.2. Численность (N) Cellulomonas sp. 7 в фитосфере инокулированных растений картофеля при трехкратном пассировании в условиях in vitro

Изучение фиторегуляторной активности Cellulomonas sp. 7 позволило выявить тенденцию увеличения высоты побега инокулированных растений по сравнению с контрольными у обоих сортов картофеля независимо от используемой среды культивирования (табл. 1). Превышение этого показателя над контролем в опытном варианте составляло 3-32% в зависимости от сорта и состава среды. Стимуляция роста побега под влиянием инокуляции в некоторых случаях приводила к увеличению коэффициента размножения от 8 до 55%.

Таблица 1

Изменение морфометрических показателей меристемного картофеля на средах различного состава в результате инокуляции CeUulomonas «р.7

Сорт Среда

А Б В

Высота побега

Дарик 120 116 132

Рождественский 113 115 103

Коэффициент размножения

Дарик 155 98 124

Рождественский 108 121 87

Длина корня

Дарик 70* 94 68

Рождественский 76 110 64

Масса растения

Дарик 110 107 101

Рождественский 134 144* 80

Примечание: * вариант достоверно отличается от контроля при Р = 0,95; n = 15

При этом обработанные бактериальной суспензией растения, как правило, имели более короткую корневую систему. У сорта Рождественский под влиянием инокуляции отмечена заметная прибавка сухой массы на

средах полного состава и с исключением ИУК, причем в последнем случае прибавка (44%) получена статистически достоверной. По всей видимости, увеличение массы ино-кулированных растений сорта Рождественский по сравнению с неинокулированными на среде без ИУК связано с поставкой недостающего в среде компонента ассоциированными с картофелем целлюломонадами. Менее выраженный фитостимулирующий эффект от инокуляции на среде полного состава обусловлен, очевидно, тем, что ауксины в данной среде присутствовали в достаточной для роста картофеля Рождественский концентрации.

Таблица 2

Изменение морфометрических показателей меристемного картофеля Рождественский на среде с исключением ИУК в зависимости от инокуляционной дозы Cellulomonas 8р.7

Доза инокулюма, Высота Длина Масса (сухая) Коэффициент

КОЕ/эксплант побега корня побег корень растение размножения

106 115 110 117 193* 144* 121

105 127 86 126* 197* 162* 107

104 147* 88 152* 140* 136* 137*

Уточнение дозы инокулюма, необходимой для получения наибольшего стимулирующего эффекта на среде без ИУК, позволило установить, что нанесение на экс-плант 104 КОЕ Cellulomonas sp. 7 приводило к достоверному увеличению всех оцениваемых показателей, за исключением длины корня, по сравнению с таковыми в контроле (табл. 2). Дозы инокулюма 10 и 106 КОЕ/эксп-лант также являлись достаточно эффективными, однако, прибавки от инокуляции высоты побега и коэффициента размножения в данных вариантах опыта не были статистически достоверны.

* Вариант достоверно отличается от контроля при Р = 0,95; n = 15

Выводы. Установлена способность Cellulomonas sp. 7 вступать в ассоциацию с микроклонально размножаемыми растениями картофеля. При этом уровень колонизации поверхности и внутренних тканей растений целлюломонадами, а также стабильность созданной ассоциации в значительной степени зависит от сортовой принадлежности растительного объекта: обнаружена более тесная связь изучаемого изолята с сортом Рождественский, нежели сортом Дарик.

Показана возможность регуляции ак-тинобактериями рода Cellulomonas роста меристемного картофеля в условиях in vitro. Обработка эксплантов Cellulomonas sp. 7 способствовала увеличению высоты побегов, массы и коэффициента размножения растений. Отмеченная под влиянием бактеризации стимуляция роста картофеля на среде без ИУК позволяет предположить, что вступившие с ним в ассоциацию целлюло-монады обеспечивали поставку недостающего компонента. Существенный фитости-

мулирующий эффект от инокуляции достигается путем подбора оптимальной концентрации инокулюма.

Таким образом, полученные результаты расширяют наши представления о микроорганизмах, способных вступать в ассоциацию с важнейшими сельскохозяйственными культурами, в т.ч. размножаемыми in vitro. С практической точки зрения возможность создания ассоциации между ауксин-продуцирующими целлюломонадами и мик-роклонально размножаемыми растениями представляет интерес для разработки новых технологических приемов, повышающих эффективность как непосредственно процесса размножения в лабораторных условиях, так и последующей адаптации инокули-рованных растений при высадке в грунт.

Список литературы

1. Иванова Е.Г. Ассоциация аэробных метилотрофных бактерий с растениями: Дис. ... канд. биол. наук. Пущино, 2006. 164 с.

2. Mattilla nee Pirttilä A.M. Endophytes in the buds of Scots pine (Pinus sylvestris L.). Dissertation. Departments of Biology and Biochemistry, University of Oulu, Finland. 2001. 52 p.

3. Shailendra Vyas, Rakhi Nagori, Sunil Dutta Purohit. Root Colonozation and Growth Enhancement of Micropropagated Feronia limonia (L.) Swingle by Piriformospora indica -A Cultivable Root Endophyte // International Journal of Plant Developmental Biology. 2008. V.2 №2. P. 128-132.

4. Subhash J Bhore, Ravichantar Nithya, Chye Ying Loh. Screening of endophytic bacteria isolated from leaves of Sambung Nyawa [Gynura procumbens (Lour.) Merr.] for cytokinin-like compounds // Bioinformation. 2010. V. 5. №5. P. 191-197

5. Dhanya N. Nair, Padmavathy S. Impact of Endophytic Microorganisms on Plants, Environment and Humans// The Scientific World Journal. 2014 Volume (2014). Article ID 250693. 11 p. http://dx.doi.org/10.1155/2014/250693

6. Denise K. Zinniel, Pat Lambrecht, N. Beth Harris, Zhengyu Feng, Daniel Kuczmarski, Phyllis Higley, Carol A. Ishimaru, Alahari Arunakumari, Raúl G. Barletta, Anne K. Vidaver. Isolation and Characterization of Endophytic Colonizing Bacteria from Agronomic Crops and Prairie Plants // Applied and Environmental Mycrobiology. 2002. V. 68. №. 5. P. 2198-2208.

7. Marquez-Santacruz H.A., Hernandez-Leon R., Velazquez-Sepulveda I., Santoyo G. Di-

versity of bacterial endophytes in roots of Mexican husk tomato plants (Physalis ixocarpa) and their detection in the rhizosphere // Genet. Mol. Res. 2010. V.9. №4. P. 2372-2380.

8. Ummey Habiba, Sharmin Reza, Mihir Lal Saha, Khan M. R., Syed Hadiuzzaman. Endogenous Bacterial Contamination During In vitro Culture of Table Banana: Identification and Prevention // Plant Tissue Cult. 2002. V.12. №2. P. 117-124.

9. Egamberdiyeva D., Höflich G. Root colonization and growth promotion of winter wheat and pea by Cellulomonas spp. at different temperatures // Plant Growth Reg. 2002.V.38. P. 219-224.

10. Egamberdiyeva D. Plant Growth Promoting Properties of Rhizobacteria Isolated from Wheat and Pea Grown in Loamy Sand Soil // Turk. J. Biol. 2008. V.32. P. 9-15.

11. Мерзаева О.В., Широких И.Г. Образование ауксинов эндофитными актинобакте-риями озимой ржи // Прикладная биохимия и микробиология. 2010. Т.46. №1. С. 51-57.

12. Belimov A.A., Dietz K.-J. Effect of associative bacteria on element composition of barley seedlings grown in solution culture at toxic cadmium concentrations // Microbiol. Res. 2000. V. 155. P. 113-121.

13. Murashige T., Skoog F. Revised Medium for Growth and Bioassay with Tobacco Tissue Cultures // Physiol. Plant. 1962. V.15. P. 473-497.

14. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа. 1990. 352 с.

Endophytic actinobacteria genus Cellulomonas in an artificially created association with potato meristem Ryabova O.V., PhD, researcher

North-East Agricultural Research Institute, Kirov, Russia

The article presents the results of the study of ability of the auxins producing strain Cellulomonas sp. 7, isolated from the inner tissues of roots of winter rye (Secale cereale L.) on sod-podzolic soil and manifests growth-stimulating activity in the host plant, to interact with other crop - potato (Solanum tuberosum L.), propagated in conditions in vitro. The study was conducted on two varieties of potato -Rozhdestvensky and Darik. Creating of microbe-plant association in vitro was carried out by coating of cell suspension of studied isolates on the surface of the explant. As a result of inoculation Cellulomonas sp. 7 actively colonizes the surface and internal tissues of the shoots (0.5x109 and 4.2x106 CFU/g, respectively on 30th day after treatment) and roots (3.4x107 and 9.4x103 CFU/g) of plant of Rozhdestvensky variety. Population density of colonization of the phylloplane (2.6x109 CFU/g) and rhizoplane (0.7x107 CFU/g) of potato Darik by cellulomanades was on the same level as potato Rozhdestvensky; however in the internal tissues of the shoots of this variety bacteria were found in smaller number (2.1x103 CFU/g) than that of the Rozhdestvensky variety and in surface-sterilized roots did not show up at all. Observation for three passages for colonization of potato meristem plants revealed that their numbers in phytosphere of variety Rozhdestvensky remained at a high level throughout the experiment. Stable colonization by studied isolate of phytosphere of potato Darik observed for only two passages; in the third passage the bacteria could not be identified on the plants. The obtained results demonstrate the ability of Cellulomonas sp. 7 to interact with potato meristem. The density of the

population of bacteria in plant tissues, as well as the stability of the association is largely dependent on the variety of plant accessories: a closer connection of the studied isolates was with the variety Rozhdestvensky than Darik. The possibility of regulation of potato meristem growth by actinobacteria of genus Cellulomonas in conditions in vitro is shown. Treatment of explants Cellulomonas sp. 7 promotes an increase in shoots height, the mass and the coefficient of plant propagation. Significant growth-promoting effect of the inoculation of plants is achieved by selection of the optimal concentration of inoculum.

Key words: actinobacteria, tissue culture, potato, colonization, endophytes, plant hormones

References

1. Ivanova E.G. Associaciya ae'robnykh metilotrofnykh bakterij s rasteniyami. [The Association of aerobic methylotrophic bacteria with plants]. PhD Thesis. Pushchino. 164 p.

2. Mattilla nee Pirttilä A.M. Endophytes in the buds of Scots pine (Pinus sylvestris L.). Dissertation. Departments of Biology and Biochemistry, University of Oulu, Finland. 2001. 52 p.

3. Shailendra Vyas, Rakhi Nagori, Sunil Dutta Purohit. Root Colonozation and Growth Enhancement of Micropropagated Feronia limo-nia (L.) Swingle by Piriformospora indica - A Cultivable Root Endophyte. International Journal of Plant Developmental Biology. 2008. V.2 no.2. pp.128-132.

4. Subhash J Bhore, Ravichantar Nithya, Chye Ying Loh. Screening of endophytic bacteria isolated from leaves of Sambung Nyawa [Gynura procumbens (Lour.) Merr.] for cytokinin-like compounds. Bioinformation. 2010. V. 5. no.5. pp. 191-197

5. Dhanya N. Nair, Padmavathy S. Impact of Endophytic Microorganisms on Plants, Environment and Humans. The Scientific World Journal. 2014 Volume (2014). Article ID 250693. 11 p.http://dx.doi.org/10.1155/2014/250693

6. Denise K. Zinniel, Pat Lambrecht, N. Beth Harris, Zhengyu Feng, Daniel Kuczmarski, Phyllis Higley, Carol A. Ishimaru, Alahari Arunakumari, Raúl G. Barletta, Anne K. Vidaver. Isolation and Characterization of Endophytic Colonizing Bacteria from Agronomic Crops and Prairie Plants. Applied and Environmental Mycrobiology. 2002. V. 68. no.5. pp. 2198-2208.

7. Marquez-Santacruz H.A., Hernandez-Leon R., Velazquez-Sepulveda I., Santoyo G. Diversity of bacterial endophytes in roots of Mexican husk tomato plants (Physalis ixocarpa) and their detection in the rhizosphere. Genet. Mol. Res. 2010. V.9. no.4. pp. 2372-2380.

8. Ummey Habiba, Sharmin Reza, Mihir Lal Saha, Khan M. R., Syed Hadiuzzaman. Endogenous Bacterial Contamination During In vitro Culture of Table Banana: Identification and Prevention. Plant Tissue Cult. 2002. V.12. no.2. pp. 117-124.

9. Egamberdiyeva, D., Höflich G. Root colonization and growth promotion of winter wheat and pea by Cellulomonas spp. at different temperatures. Plant Growth Reg. 2002.V.38. pp. 219-224.

10. Egamberdiyeva, D. Plant Growth Promoting Properties of Rhizobacteria Isolated from Wheat and Pea Grown in Loamy Sand Soil. Turk. J. Biol. 2008. V.32. pp. 9-15.

11. Merzaeva O.V., Shirokikh I.G. Obrazo-vanie auksinov endofitnymi aktinobak-teriyami ozimoj rzhi. [The formation of auxins by winter rye's endophytic actinobacteria]. Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya [Applied biochemistry and microbiology]. 2010. V.46. no.1. pp. 51-57.

12. Belimov A.A., Dietz K.-J. Effect of associative bacteria on element composition of barley seedlings grown in solution culture at toxic cadmium concentrations. Microbiol. Res., 2000. V. 155. pp.113-121.

13. Murashige T., Skoog F. Revised Medium for Growth and Bioassay with Tobacco Tissue Cultures. Physiol. Plant. 1962. V.15. pp. 473-497.

14. Lakin G.F. Biometriya. [Biometrics]. Moscow: Higher school, 1990. 352 p.