СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТЫ

1. Способ получения L-аминокислоты, предусматривающий культивирование бактерии, которая принадлежит семейству Enterobacteriaceae и обладает способностью продуцировать L-аминокислоту в среде для получения и накопления L-аминокислоты в среде, и сбор L-аминокислоты из среды, в котором:
бактерия была модифицирована таким образом, чтобы увеличить экспрессию гена gltP и/или гена gltS, и L-аминокислоту выбирают из группы, состоящей из L-лизина, L-треонина, L-аспарагина, L-аспарагиновой кислоты, L-метионина, L-аланина, L-изолейцина и L-гомосерина.
2. Способ по п.1, в котором ген gltP кодирует белок, показанный в следующих (А) или (В):
(A) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 12 и обладающий активностью L-глутаматного транспортера,
(B) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 12, включающий в себя замены, делеции, вставки, добавления или инверсии одного или нескольких аминокислотных остатков, и обладающий активностью L-глутаматного транспортера.
3. Способ по п.2, в котором ген gltP кодирует белок, показанный в следующих (А1) или (В1):
(А1) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 2,
(B1) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 2, включающий в себя замены, делеции, вставки, добавления или инверсии одного или нескольких аминокислотных остатков, и обладающий активностью L-глутаматного транспортера.
4. Способ по п.1, в котором ген gltP представляет собой ДНК, показанную в следующих пп. (а) или (b):
(a) ДНК с нуклеотидной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 1,
(b) ДНК, способная к гибридизации с последовательностью, которая комплиментарна нуклеотидной последовательности, показанной в SEQ ID No: 1, или зондом, который можно изготовить из нуклеотидной последовательности при жестких условиях, и которая кодирует белок, обладающий активностью L-глутаматного транспортера.
5. Способ по п.1, в котором ген glt3 кодирует белок, показанный в следующих (С) или (D):
(C) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 13 и обладающий активностью L-глутаматного транспортера,
(D) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 13, включающий в себя замены, делеции, вставки, добавления или инверсии одного или нескольких аминокислотных остатков, и обладающий активностью L-глутаматного транспортера.
6. Способ по п.5, в котором ген gltS кодирует белок, показанный в следующих (С1) или (D1):
(С1) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 4,
(D1) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 4, включающий в себя замены, делеции, вставки, добавления или инверсии одного или нескольких аминокислотных остатков, и обладающий активностью L-глутаматного транспортера.
7. Способ по п.1, в котором ген glt3 представляет собой ДНК, показанную в следующих (с) или (d):
(c) ДНК с нуклеотидной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 3,
(d) ДНК, способная к гибридизации с последовательностью, которая комплиментарна нуклеотидной последовательности, показанной в SEQ ID No: 3, или зондом, который можно изготовить из нуклеотидной последовательности при жестких условиях, и которая кодирует белок, обладающий активностью L-глутаматного транспортера.
8. Способ по п.1, в котором повышена экспрессия гена путем увеличения числа копий гена, или модификации экспрессии контрольной последовательности гена.
9. Способ по п.1, в котором L-аминокислота представляет собой L-лизин, и у бактерии повышена экспрессия гена ybjE.
10. Способ по п.9, в котором ген ybjE кодирует белок, показанный в следующих (Е) или (F):
(Е) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 6, или аминокислотной последовательностью аминокислот от №№17 до 315 в SEQ ID No: 6,
(F) белок с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 6, или аминокислотной последовательностью аминокислот от №№17 до 315 в SEQ ID No: 6, которая включает в себя замены, делеции, вставки, добавления или инверсии одного или нескольких аминокислотных остатков, где белок обладает активностью экскреции L-лизина.
11. Способ по п.9, в котором ген ybjE представляет собой ДНК, показанную в следующих (е) или (f):
(e) ДНК с нуклеотидной последовательностью, показанной в SEQ ID No: 5, или нуклеотидной последовательностью нуклеотидов от №№49 до 948 в SEQ ID No: 5,
(f) ДНК, способная к гибридизации с последовательностью, которая комплиментарна нуклеотидной последовательности, показанной в SEQ ID No: 5, или нуклеотидной последовательностью нуклеотидов от №№49 до 948 в SEQ ID No: 5, или зондом, который можно изготовить из указанных нуклеотидных последовательностей при жестких условиях, и которая кодирует белок, обладающий активностью экскреции L-лизина.
12. Способ по п.1, в котором L-аминокислотой является L-лизин, уровень рН среды регулируют таким образом, чтобы он составлял от 6,0 до 9,0 во время культивирования для продуцирования, и от 7,2 до 9,0 в конце культивирования, для обеспечения периода культивирования, когда в среде присутствуют ионы бикарбоната и/или ионы карбоната в количестве 20 мМ или больше, с тем, чтобы ионы бикарбоната и/или ионы карбоната служили противоионами основной аминокислоты.
13. Способ по любому из пп.1-12, в котором бактерия представляет собой бактерию Escherichia.