ФИЛЬТРАЦИЯ В ПЕРЕМЕННОМ ТАНГЕНЦИАЛЬНОМ ПОТОКЕ

1. Способ концентрирования раствора иммуноглобулина с помощью фильтрации в тангенциальном слое, отличающийся тем, что трансмембранное давление и поперечный поток варьируются в следующих пределах:
1) трансмембранное давление от 1,4 бар до 1,6 бар и поперечный поток от 75 мл/мин до 90 мл/мин в диапазоне концентраций до 30 мг иммуноглобулина на миллилитр концентрируемого раствора,
2) трансмембранное давление от 0,8 бар до 0,9 бар и поперечный поток от 140 мл/мин до 160 мл/мин в диапазоне концентраций от 15 мг/мл до 55 мг/мл,
3) трансмембранное давление от 0,8 бар до 0,9 бар и поперечный поток от 120 мл/мин до 140 мл/мин в диапазоне концентраций свыше 45 мг/мл.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что диапазон концентраций на стадии в) составляет от 45 мг/мл до 130 мг/мл.
3. Способ по любому из пп.1 или 2, отличающийся тем, что трансмембранное давление и величина поперечного потока составляют
1,5 бар и 80 мл/мин на стадии а),
0,85 бар и 150 мл/мин на стадии б) и/или
0,85 бар и 130 мл/мин на стадии в).
4. Способ получения гетерологичного иммуноглобулина, включающий следующие стадии:
а) получение рекомбинантной клетки млекопитающего, содержащей одну или несколько нуклеиновых кислот, кодирующих гетерологичный иммуноглобулин,
б) культивирование таковой клетки в условиях, подходящих для экспрессии гетерологичного иммуноглобулина,
в) выделение гетерологичного иммуноглобулина из рекомбинантной клетки млекопитающего или из культуральной среды,
г) концентрирование получаемого забуференного водного раствора, содержащего гетерологичный иммуноглобулин, с помощью фильтрации в тангенциальном потоке с переменными трансмембранным давлением и величиной поперечного потока.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что стадия г) включает концентрирование получаемого забуференного водного раствора с помощью фильтрации в тангенциальном потоке с переменными трансмембранным давлением и величиной поперечного потока, составляющими
1) трансмембранное давление от 1,4 бар до 1,6 бар и поперечный поток от 75 мл/мин до 90 мл/мин в диапазоне концентраций до 30 мг иммуноглобулина на миллилитр концентрируемого раствора,
2) трансмембранное давление от 0,8 бар до 0,9 бар и поперечный поток от 140 мл/мин до 160 мл/мин в диапазоне концентраций от 15 мг/мл до 55 мг/мл,
3) трансмембранное давление от 0,8 бар до 0,9 бар и поперечный поток от 120 мл/мин до 140 мл/мин в диапазоне концентраций свыше 45 мг/мл.
6. Способ по любому из пп.4 или 5, отличающийся тем, что он включает до или после стадии г) следующую стадию:
д) очистку забуференного водного раствора, содержащего гетерологичный иммуноглобулин.
7. Способ по любому из пп.1, или 2, или 4, или 5, отличающийся тем, что гетерологичный иммуноглобулин является целым иммуноглобулином, или фрагментом иммуноглобулина, или конъюгатом иммуноглобулина.
8. Способ по любому из пп.4 или 5, отличающийся тем, что клетка млекопитающего является клеткой СНО, клеткой ВНK, клеткой НЕK, клеткой Sp2/0 или клеткой линии PER.C6.
9. Способ по любому из пп.1, или 2, или 4, или 5, отличающийся тем, что в упомянутой фильтрации в тангенциальном потоке задействована мембрана с величиной верхнего порога молекулярной массы 20 до 50 кДа.
10. Способ по любому из пп.1, или 2, или 4, или 5, отличающийся тем, что упомянутый раствор иммуноглобулина характеризуется величиной рН от рН 3,0 до рН 10,0.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что упомянутая величина рН находится в пределах от рН 3,0 до рН 7,0.
12. Способ по любому из пп.1, или 2, или 4, или 5, отличающийся тем, что таковой способ является способом фильтрации в тангенциальном потоке с переменными параметрами, в котором текущая концентрация иммуноглобулина в подвергаемом концентрированию растворе определяет прикладываемое трансмембранное давление и величину поперечного потока.
13. Способ по любому из пп.1, или 2, или 4, или 5, отличающийся тем, что трансмембранное давление и величина поперечного потока могут быть изменены при любом значении концентрации, принадлежащем пересечениям диапазонов концентраций.
14. Способ по любому из пп.1 или 5, отличающийся тем, что диапазон концентраций составляет от 5 до 25 мг/мл на стадии а), от 25 до 50 мг/мл на стадии б) и от 50 до 140 мг/мл на стадии в).