СОСТАВЫ ДЛЯ РАДИОТЕРАПИИ И ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ВИЗУАЛИЗАЦИИ
COMPOSITIONS FOR RADIOTHERAPY AND DIAGNOSTIC IMAGING

Настоящее изобретение относится к составам радиоактивно меченых соединений, которые могут быть использованы для радиотерапии и диагностической визуализации.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
in vivo
Радиоактивно мечение соединения, или лиганды, могут быть использованы в качестве радиофармацевтических средств в таких вариантах применения, как радиотерапия или диагностическая визуализация. Особенно полезными являются радиоактивно меченые соединения, которые обладают свойствами избирательного нацеливания на конкретный участок  (например, конкретный рецептор), с последующей доставкой радиоизотопа в нужную зону его действия. Для этого необходимо, чтобы лиганд представлял собой компонент, образующий комплекс с радиоизотопом, и, кроме того, компонент, нацеленный на нужный участок.
Одной из известных проблем, связанных с таким лигандом, является преждевременная диссоциация радиоизотопа до достижения комплексом лиганд-радиоизотоп зоны действия. Это не только снижает эффективность комплекса, но, кроме того, попадание радиоизотопа в области, не предназначенные для радиотерапевтического воздействия, может приводить к неблагоприятным последствиям.
in vivo
Диссоциация радиоизотопа от лиганда может происходить в результате трансхелатирования, когда радиоизотоп переносится на другой биологический лиганд . Опять-таки, это приводит к снижению терапевтического эффекта, а также доставке радиоизотопа в области, где лечение не требуется.
Лиганд, который подлежит радиоактивному мечению, и радиоизотоп, как правило, хранят и транспортируют к пациенту в раздельных контейнерах для сведения к минимуму вышеуказанных проблем, связанных с диссоциацией до введения. Лиганд можно транспортировать в виде лиофилизированного порошка при пониженных температурах для продления стабильности соединения. Затем радиоизотоп может быть объединен с лигандом, с образованием радиофармацевтического средства, непосредственно перед введением, что может способствовать минимизации диссоциации радиоизотопа до достижения комплексом области его действия.
Другая проблема, связанная с радиоактивно мечеными соединениями, заключается в том, что использование радиоизотопа может приводить к радиолизу, или разрушению, лиганда. Поскольку радиоизотоп подвергается спонтанному распаду, с последующим испусканием радиации, этой энергии может быть достаточно для индукции расщепления связей и вызывания последующего разрушения лиганда. Помимо снижения эффективности радиофармацевтического средства также происходит высвобождение радиоизотопа, что приводит к доставке радиации в нежелательные области.
Поскольку многие радиофармацевтические средства предназначены для парентерального введения, то есть, не пероральным путем и, как правило, в виде раствора, сам лиганд должен быть растворим в фармацевтически приемлемом растворителе или носителе. Как известно в данной области, растворимость конкретного соединения в любом конкретном растворителе может быть непредсказуемой. Хотя растворимость конкретного соединения в конкретном растворителе может быть известна, растворимость аналога соединения в другой системе растворителя может быть совершенно иной. Это может создавать трудности при разработке состава соединения, и особенно фармацевтически приемлемого инъекционного состава.
Фармацевтические составы, как правило, содержат один или более эксципиентов, которые определенным образом влияют на соединение, например, увеличивают растворимость соединения или увеличивают стабильность находящегося в растворе соединения. Альтернативно, могут быть использованы дополнительные эксципиенты для придания других свойств составу, например, консерванты, буферы и тому подобное.
Хотя известны многие тысячи составов комплексов лиганд-радиоизотоп, трудно ожидать, что эксципиенты, используемые в таких составах, обеспечат необходимую стабильность и биодоступность нового образовавшегося комплекса. Кроме того, нельзя ожидать, что конкретное сочетание эксципиентов позволит также предотвратить или свести к минимуму диссоциацию радиоизотопа, или свести к минимуму вероятность радиолиза.
Соответственно, необходимо, чтобы составы комплексов лиганд-радиоизотоп были специально приспособлены для проявления необходимой стабильности в отношении радиолиза и диссоциации радиоизотопа, оставаясь при этом фармацевтически приемлемыми. Настоящее изобретение направлено на решение этих проблем для конкретного лигандного комплекса.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В одном аспекте настоящее изобретение относится к водному составу для парентерального введения, содержащему соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu:
Формула (I),
дополнительно содержащему:
от примерно 7 до примерно 13% (об/об) этанола;
от примерно 0,3 до примерно 1,2% (масс/об) хлорида натрия;
от примерно 0,02 до примерно 0,1% (масс/об) гентизиновой кислоты или ее соли;
при этом состав имеет значение pH от примерно 4 до примерно 8.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к водному составу для парентерального введения, содержащему соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu:
Формула (I),
дополнительно содержащему:
от примерно 7 до примерно 13% (об/об) этанола;
от примерно 0,3 до примерно 1,2% (масс/об) хлорида натрия;
от примерно 0,02 до примерно 0,1% (масс/об) гентизиновой кислоты или ее соли; и
от примерно 1,0 до примерно 4,0 мг/мл L-метионина или его соли;
при этом состав имеет значение pH от примерно 4 до примерно 8.
В одном из вариантов осуществления, и в связи с вышеуказанными двумя аспектами, соединение формулы (I) предоставлено в виде ацетатной соли.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу получения водного состава , содержащего соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu, включающему стадии:
i) приготовления буферного раствора ацетатной соли, при этом буферный раствор дополнительно содержит этанол и гентизиновую кислоту или ее соль;
ii) растворения соединения формулы (I), или его соли, в буферном растворе, полученном на стадии i);
iii) добавления раствора иона Cu к раствору, полученному на стадии ii);
iv) фильтрования раствора, полученного на стадии iii), на стационарной фазе; и
v) промывания стационарной фазы со стадии iv) этанолом и солевым раствором;
с получением водного состава, содержащего соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу получения водного состава, содержащего соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu, включающему стадии:
i) приготовления буферного раствора ацетатной соли, при этом буферный раствор дополнительно содержит этанол и гентизиновую кислоту или ее соль;
ii) растворения соединения формулы (I), или его соли, в буферном растворе, полученном на стадии i);
iii) добавления раствора иона Cu к раствору, полученному на стадии ii);
iv) фильтрования раствора, полученного на стадии iii), на стационарной фазе; и
v) промывания стационарной фазы со стадии iv) этанолом и солевым раствором во флакон, содержащий раствор L-метионина или его соли;
с получением водного состава, содержащего соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к водному составу, полученному способом, указанным в вышеприведенном аспекте.
Водный состав по настоящему изобретению также может быть получен путем предоставления определенных компонентов состава в виде набора частей, включающего по меньшей мере соединение формулы (I), или его соль, и ион Cu, который должен образовать комплекс с соединением формулы (I), при этом соединение формулы (I), или его соль, и ион Cu предоставлены отдельно в наборе и могут быть объединены для образования вышеуказанного комплекса перед введением.
Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для получения водного состава для парентерального введения, содержащего соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, включающему:
контейнер, содержащий лиофилизированное соединение формулы (I)
Формула (I)
или его соль;
контейнер, содержащий раствор иона Cu; и
инструкции по получению водного состава, указанного в вышеприведенном аспекте, включающие добавление буферного раствора этанола, хлорида натрия и гентизиновой кислоты или ее соли.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для получения водного состава для парентерального введения, содержащего соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, включающему:
контейнер, содержащий лиофилизированное соединение формулы (I)
Формула (I)
или его соль;
контейнер, содержащий раствор иона Cu; и
инструкции по получению водного состава, указанного в вышеприведенном аспекте, включающие добавление буферного раствора этанола, хлорида натрия и гентизиновой кислоты или ее соли и L-метионина или его соли.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к набору для получения водного состава для парентерального введения, указанного в вышеприведенном аспекте, включающему:
контейнер, содержащий лиофилизированное соединение формулы (I) или его соль;
Формула (I)
контейнер, содержащий раствор иона Cu;
контейнер, содержащий буферный раствор этанола, хлорида натрия и гентизиновой кислоты или ее соли; и
инструкции по получению водного состава, указанного в вышеприведенном аспекте.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к набору для получения вышеуказанного водного состава для парентерального введения, включающему:
контейнер, содержащий лиофилизированное соединение формулы (I) или его соль;
Формула (I)
контейнер, содержащий раствор иона Cu;
контейнер, содержащий буферный раствор этанола, хлорида натрия, гентизиновой кислоты или ее соли и L-метионина или его соли; и
инструкции по получению водного состава, указанного в вышеприведенном аспекте.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лучевой визуализации, диагностирования или лечения рака, включающему введение субъекту, который нуждается в этом, водного состава, указанного в вышеприведенном аспекте.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
Фигура 1:
64
64
64
Определение площади, в процентах, с использованием гамма-сцинтилляционного детектора - Анализ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) низкодозного состава Cu-SARTATE из Примера 1 непосредственно после приготовления (радиохимический выход=606 МБк), показывающий, что 97,3% обнаруженного Cu присутствует в виде Cu-SARTATE.
Фигура 2
64
64
: График, представляющий результаты периодических анализов методом ВЭЖХ низкодозного состава Cu-SARTATE из Примера 1 в течение 24 часов, с использованием гамма-сцинтилляционного детектора, показывающий, что радиохимическая чистота Cu-SARTATE остается стабильной (>90%) с течением времени.
Фигура 3
64
64
64
: Определение площади, в процентах, с использованием гамма-сцинтилляционного детектора - Анализ методом ВЭЖХ высокодозного состава Cu-SARTATE из Примера 2 непосредственно после приготовления (радиохимический выход=3500 МБк), показывающий, что 98,2% обнаруженного Cu присутствует в виде Cu-SARTATE.
Фигура 4
64
64
: График, представляющий результаты периодических анализов методом ВЭЖХ высокодозного состава Cu-SARTATE из Примера 2 в течение 45 часов, с использованием гамма-сцинтилляционного детектора, показывающий, что радиохимическая чистота Cu-SARTATE остается стабильной (>90%) с течением времени.
Фигура 5:
67
67
67
Определение площади, в процентах, с использованием гамма-сцинтилляционного детектора - Анализ методом ВЭЖХ состава Cu-SARTATE из Примера 3 непосредственно после приготовления (радиохимический выход=3922 МБк), показывающий, что 98,6% обнаруженного Cu присутствует в виде Cu-SARTATE.
Фигура 6
67
67
: График, представляющий результаты периодических анализов методом ВЭЖХ состава Cu-SARTATE из Примера 3 в течение 11 часов, с использованием гамма-сцинтилляционного детектора, показывающий, что радиохимическая чистотаCu-SARTATE остается стабильной (>90%) с течением времени.
Фигура 7:
64
График, представляющий результаты периодических анализов методом ВЭЖХ состава Cu-SARTATE из Примера 2 в течение 43 часов после инкубации в свежей человеческой сыворотке.
Фигура 8
In vitro
64
3
:  интернализация Cu-SARTATE в избыточно экспрессирующих SSTR2 клетках линии A427-7 (заштрихованные символы) и с избытком Tyr-октреотата (незаштрихованные символы), в течение возрастающих периодов инкубации.
Фигура 9
64
3
: Связывание на клеточной поверхности Cu-SARTATE в избыточно экспрессирующих SSTR2 клетках линии A427-7 (заштрихованные символы) и с избытком Tyr-октреотата (незаштрихованные символы), в течение возрастающих периодов инкубации.
Фигура 10:
64
Сравнение нормированного поглощения Cu-SARTATE в клетках линии A427-7 и родительской линии A427 в течение 2 часов (p <0,0001).
Фигура 11:
In vivo
64
64
3
биораспределение Cu-SARTATE в выбранных тканях мышей Balb/c, несущих опухоль A427-7, через 2 и 24 ч. Проводили исследования с блокированием для подтверждения специфичности Cu-SARTATE в отношении SSTR2 через 2 часа путем совместного введения инъекцией избытка Tyr-октреотата.
Фигура 12:
In vivo
64
64
3
визуализация методом ПЭТ Cu-SARTATE с использованием полученных на установке ПЭТ для мелких животных проекционных изображений максимальной интенсивности несущих опухоль A427-7 мышей Balb/c через 2 часа и 24 часа после инъекции Cu-SARTATE, с совместным введением, или без введения, инъекцией избытка Tyr-октреотата.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к стабильным составам конкретного радиоизотоп-лигандного комплекса. Авторы настоящего изобретения установили, что составы комплекса, раскрытые в настоящем документе, сводят к минимуму диссоциацию радиоизотопа от лиганда и/или сводят к минимуму радиолиз лиганда, причиной которого является радиоизотоп.
Составы радиоизотоп-лигандного комплекса, описанные в настоящем документе, стабильны в растворе и в физиологических условиях в течение некоторого времени. Стабильность состава означает стабильность комплекса в случае, когда радиоизотоп может диссоциировать или комплекс может подвергнуться радиолизу. Стабильность комплекса может быть измерена на основании радиохимической чистоты состава. Радиохимическую чистоту определяют как количество радиоизотопа, находящегося в комплексе с лигандом-саркофагином, выраженное в виде процентной доли от общего количества радиоизотопа, присутствующего в составе. Радиоизотоп может присутствовать в составе в виде комплекса с лигандом-саркофагином, в виде свободного радиоизотопа или в виде части продукта радиолиза.
Ранее было установлено, что октреотат-содержащие лиганды нацелены на соматостатиновые рецепторы, а именно, рецепторы 2 типа (SSTR2) и 5 типа (SSTR5). Примером лиганда, содержащего октреотат, является MeCOSar-октреотат, или MeCOSar-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH, где MeCOSar представляет собой макроциклический лиганд-саркофагин 5-[[8-амино-3,6,10,13,19-гексаазабицикло[6.6.6]эйко-1-ил)амино]-5-оксопентанил и октреотат представляет собой D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH. Специалист в данной области понимает, что октреотат представляет собой циклический октапептид и получен из соответствующего линейного пептида путем образования дисульфидной связи Cys-Cys. Специалист в данной области также понимает, что саркофагин («sar») представляет собой азотсодержащий гексадентатный макроциклический лиганд, который способен к образованию комплекса с донорными атомами, такими как ионы переходных металлов, и в контексте настоящего изобретения ионы Cu.
MeCOSar-октреотат (в настоящем документе также называемый «SARTATE») также представлен Формулой (I):
Формула (I).
Dalton Trans.
Соединение формулы (I) может быть получено путем реакции сочетания между лигандом-саркофагином и циклическим пептидом октреотатом, при этом макроциклический саркофагин и фрагменты октреотата синтезируют отдельно до проведения реакции сочетания. Саркофагин формулы (I) получают из макроцилического лиганда с блокированными аминогруппами, связанного с алифатической карбоксилатной группой. Путь синтеза для получения соединения формулы (I), а также компонент саркофагин и фрагменты октреотата, ранее были описаны в публикации , 2015, 43, 1386.
Настоящее изобретение также относится к применению фармацевтически приемлемых солей соединения формулы (I) в качестве составляющей заявленных составов. Примеры фармацевтически приемлемых солей соединений формулы (I) могут включать соответствующую ацетатную соль, натриевую соль, гидрохлоридную соль, калиевую соль, магниевую соль, кальциевую соль или аммониевую соль. В одном из вариантов осуществления соединение формулы (I) предоставлено в виде ацетатной соли.
2+
Dalton Trans.
Подходящие для введения составы по настоящему изобретению содержат комплекс соединения формулы (I), или его соли, и радиоизотопа. Радиоизотоп, который также можно называть радионуклидом, может представлять собой металл или ион металла. Лиганд по настоящему изобретению, как было установлено, особенно эффективно образует комплекс с ионами меди, в частности, ионами Cu. Комплекс соединения формулы (I), содержащий радиоизотоп ион меди, ранее описан в , 2015, 43, 1386. Специалист в данной области также понимает, что комплекс соединения формулы (I) и радиоизотопа можно получать путем создания контакта соединения формулы (I), или его соли, с радиоизотопом, который должен входить в комплекс, в результате чего соединение формулы (I), или его соль, образует комплекс с радиоизотопом. Это может включать смешивание соединения формулы (I), или его соли, и радиоизотопа в подходящей системе растворителя (такой, как та, которая конкретно описана в настоящем документе).
60
61
64
67
64
67
В одном из вариантов осуществления лиганд находится в комплексе с ионом Cu. Ион меди может быть радиоактивным и, следовательно, радионуклидом, или радиоизотопом, меди. В одном из вариантов осуществления лиганд находится в комплексе с Cu. В другом варианте осуществления лиганд находится в комплексе с Cu. В другом варианте осуществления лиганд находится в комплексе с Cu. В другом варианте осуществления лиганд находится в комплексе с Cu. В предпочтительном варианте осуществления лиганд находится в комплексе с Cu. В другом предпочтительном варианте осуществления лиганд находится в комплексе с Cu.
Составы по настоящему изобретению содержат этанол в качестве компонента. Этанол, используемый в составе, может представлять собой безводный этанол. Альтернативно, этанол, используемый в составе, может не быть подвергнут процессу осушения и может быть гидратированным. Этанол предпочтительно представляет собой этанол фармацевтической категории. Этанол, присутствующий в составе, может дополнительно способствовать предотвращению радиолиза радиоактивно меченого комплекса соединения формулы (I).
В одном из вариантов осуществления этанол присутствует в составе в количестве от примерно 7% до примерно 13% (об/об). В одном из вариантов осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 7% (об/об). В другом варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 8% (об/об). В другом варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 9% (об/об). В другом варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 10% (об/об). В другом варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 11% (об/об). В другом варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 12% (об/об). В другом варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 13% (об/об). В предпочтительном варианте осуществления этанол присутствует в составе в количестве примерно 10% (об/об). В других вариантах осуществления настоящего изобретения также предусмотрено содержание этанола в диапазоне вышеуказанных количеств.
Составы по настоящему изобретению также содержат хлорид натрия в качестве компонента. В составы по настоящему изобретению хлорид натрия может быть введен в виде солевого раствора. Солевой раствор представляет собой водный раствор хлорида натрия. Например, нормальный солевой раствор представляет собой водный раствор хлорида натрия в концентрации 0,9% (масс/об). В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения в состав вводят хлорид натрия в виде солевого раствора.
В одном из вариантов осуществления хлорид натрия присутствует в составе в количестве примерно от 0,6% до 1,2% (масс/об). В одном из вариантов осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 0,6% (масс/об). В другом варианте осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 0,7% (масс/об). В другом варианте осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 0,8% (масс/об). В другом варианте осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 0,9% (масс/об). В другом варианте осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 1,0% (масс/об). В другом варианте осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 1,1% (масс/об). В другом варианте осуществления хлорид натрия присутствует в количестве примерно 1,2% (масс/об). В предпочтительном варианте осуществления хлорид натрия присутствует в составе в количестве примерно 0,9% (масс/об). В других вариантах осуществления настоящего изобретения также предусмотрено содержание хлорида натрия в диапазоне вышеуказанных количеств.
Составы по настоящему изобретению содержат гентизиновую кислоту, или ее фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты, в качестве компонента. Гентизиновая кислота также известна как 2,5-дигидроксибензойная кислота, 5-гидроксисалициловая кислота или гидрохинонкарбоновая кислота. Соли гентизиновой кислоты могут включать натриевую соль и гидрат натриевой соли. Любая ссылка на гентизиновую кислоту может включать ссылку на ее соли, где это уместно. Авторами настоящего изобретения было установлено, что гентизиновая кислота, или ее соль, в настоящих составах способствует предотвращению или минимизации радиолиза радиоактивно меченого комплекса соединения формулы (I).
В одном из вариантов осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве от примерно 0,02% до примерно 0,1% (масс/об). В одном из вариантов осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,02% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,025% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,03% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,035% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,04% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,045% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,05% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,055% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,6% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,065% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,07% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,075% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,08% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,085% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,09% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,095% (масс/об). В другом варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве примерно 0,1% (масс/об). В других вариантах осуществления настоящего изобретения также предусмотрено содержание гентизиновой кислоты, или ее соли, в диапазоне вышеуказанных количеств. В предпочтительном варианте осуществления гентизиновая кислота, или ее соль, присутствует в составе в количестве не более 0,056% (масс/об).
Составы по настоящему изобретению имеют значение pH от примерно 4 до примерно 8. Специалист в данной области понимает, что значение pH состава является неотъемлемой характеристикой состава, обусловленной сочетанием соединения формулы (I), или его комплекса, и остальных эксципиентов состава. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что данный диапазон значений pH обеспечивает оптимальную эффективность радиоактивного мечения.
В одном из вариантов осуществления значение pH состава составляет от примерно 4 до примерно 8. В одном из вариантов осуществления значение pH состава составляет примерно 4. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 4,5. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 5,0. В одном из вариантов осуществления значение pH состава составляет примерно 5,5. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 5,6. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 5,7. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 5,8. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 5,9. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,0. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,1. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,2. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,3. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,4. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,5. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 7,0. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 7,5. В другом варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 8,0. В предпочтительном варианте осуществления значение pH состава составляет примерно 6,0.
В предпочтительном варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. Специалист в данной области понимает, что количество комплекса «соединение формулы (I)-ион Cu», присутствующего в водном составе, может быть изменено для разных целей.
64
64
64
В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
67
67
67
В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
64
64
64
В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
67
67
67
В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия и не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
Водный состав по настоящему изобретению также может содержать ацетатную соль в качестве буферной соли. Ацетатная соль может представлять собой ацетат аммония или ацетат натрия.
Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что состав может быть дополнительно стабилизирован путем добавления L-метионина или его соли. Добавление L-метионина в состав, содержащий соединение формулы (I), этанол, хлорид натрия и гентизиновую кислоту или ее соль, приводит к дополнительному повышению стабильности состава за счет предотвращения или минимизации радиолиза радиоактивно меченого комплекса соединения формулы (I). Авторы настоящего изобретения также установили, что добавление L-метионина в состав, содержащий соединение формулы (I) и ион Cu, позволяет получать состав с более высокой начальной радиоактивностью, в котором ион Cu представляет собой радиоизотоп Cu.
Соответственно, настоящее изобретение также относится к водному составу для парентерального введения, содержащему соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu:
Формула (I),
дополнительно содержащему:
от примерно 7 до примерно 13% (об/об) этанола;
от примерно 0,3 до примерно 1,2% (масс/об) хлорида натрия;
от примерно 0,02 до примерно 0,1% (масс/об) гентизиновой кислоты или ее соли; и
от примерно 1 до примерно 4 мг/мл L-метионина или его соли;
при этом состав имеет значение pH от примерно 4 до примерно 8.
В одном из вариантов осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве от примерно 1 мг/мл до примерно 4 мг/мл. В одном из вариантов осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 1,0 мг/мл. В другом варианте осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 1,5 мг/мл. В другом варианте осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 2,0 мг/мл. В другом варианте осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 2,5 мг/мл. В другом варианте осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 3,0 мг/мл. В другом варианте осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 3,5 мг/мл. В другом варианте осуществления L-метионин, или его соль, присутствует в составе в количестве примерно 4,0 мг/мл.
В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. Специалист в данной области понимает, что количество комплекса «соединение формулы (I)-ион Cu», присутствующего в водном составе, может быть изменено для разных целей.
64
64
64
В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, не более 0,9% (масс/об) хлорида натрия, не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
67
67
67
67
В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В одном из вариантов осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, не более 0,9% (масс/об) хлорида натрия, не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
64
64
64
В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
67
67
67
В следующем варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,06% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% (об/об) этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, примерно 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0. В другом варианте осуществления водный состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) в виде ацетатной соли, в комплексе с ионом Cu, примерно 10% этанола, примерно 0,9% (масс/об) хлорида натрия, не более 0,056% гентизиновой кислоты, или ее соли, и примерно 2,5 мг/мл L-метионина, или его соли, при этом состав имеет значение pH примерно 6,0.
64
64
64
64
64
В соответствии с настоящим изобретением, состав комплекса Cu и соединения формулы (I) может иметь радиохимическую чистоту по меньшей мере примерно 90% в течение по меньшей мере 45 часов. Это означает, что по меньшей мере примерно 90% радиоизотопа Cu, присутствующего в составе, находится в комплексе с соединением формулы (I), или его солью, в течение по меньшей мере 45 часов после изготовления состава. Если радиоизотоп Cu, присутствующий в составе, не находится в комплексе с соединением формулы (I), или его солью, радиоизотоп Cu может присутствовать в виде свободного иона Cu или в виде части продукта радиолиза.
64
64
64
В одном из вариантов осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 90% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 91% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 92% через примерно 45 часов после изготовления состава.
64
64
64
64
64
64
64
В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 93% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 94% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 95% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 96% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 97% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 98% через примерно 45 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 45 часов после изготовления состава.
64
64
64
64
64
64
64
64
64
64
В одном из вариантов осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% сразу после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 1 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 3 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 6 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 9 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 12 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 15 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 18 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 21 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 24 ч после изготовления состава.
67
67
67
67
67
В соответствии с настоящим изобретением, состав комплекса Cu и соединения формулы (I) также может иметь радиохимическую чистоту по меньшей мере 90% в течение по меньшей мере 11 часов. Это означает, что по меньшей мере примерно 90% радиоизотопа Cu, присутствующего в составе, находится в комплексе с соединением формулы (I), или его солью, в течение по меньшей мере 11 часов после изготовления состава. Если радиоизотоп Cu, присутствующий в составе, не находится в комплексе с соединением формулы (I), или его солью, радиоизотоп Cu может присутствовать в виде свободного иона Cu или в виде части продукта радиолиза.
67
67
67
67
67
67
67
67
67
67
В одном из вариантов осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 90% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 91% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 92% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 93% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 94% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 95% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 96% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 97% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 98% через примерно 11 часов после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 11 часов после изготовления состава.
67
67
67
67
67
67
67
67
67
67
В одном из вариантов осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% сразу после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 1 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 3 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 6 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 9 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 12 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 15 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 18 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 21 ч после изготовления состава. В другом варианте осуществления радиохимическая чистота состава по настоящему изобретению, содержащего комплекс Cu и соединения формулы (I), или его соли, составляет примерно 99% через примерно 24 ч после изготовления состава.
Получение водного состава по настоящему изобретению
Соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu может быть получено путем смешивания соединения формулы (I), или его соли, с раствором иона Cu в присутствии буферного раствора. Затем раствор можно фильтровать, с последующим промыванием, получая состав, содержащий соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu. Соответственно, настоящее изобретение относится к способу получения водного состава, содержащего соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu, включающему стадии:
i) приготовления буферного раствора ацетатной соли, при этом буферный раствор дополнительно содержит этанол и гентизиновую кислоту или ее соль;
ii) растворения соединения формулы (I), или его соли, в буферном растворе, полученном на стадии i);
iii) добавления раствора иона Cu к раствору, полученному на стадии ii);
iv) фильтрования раствора, полученного на стадии iii), на стационарной фазе; и
v) промывания стационарной фазы со стадии iv) этанолом и солевым раствором;
с получением водного состава, содержащего соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu.
Буферный раствор может представлять собой раствор ацетата аммония. Альтернативно, буферный раствор может представлять собой раствор ацетата натрия. Буферный раствор, содержащий ацетатную соль, используют для поддержания pH в диапазоне, допускающем максимальное и быстрое образование комплекса соединения формулы (I), или его соли, с ионом Cu. Буферный раствор может содержать водный раствор ацетата аммония в концентрации от примерно 0,08 до примерно 0,12 моль/л. В одном из вариантов осуществления буферный раствор содержит водный раствор ацетата аммония в концентрации примерно 0,08 моль/л. В другом варианте осуществления буферный раствор содержит водный раствор ацетата аммония в концентрации примерно 0,09 моль/л. В другом варианте осуществления буферный раствор содержит водный раствор ацетата аммония в концентрации примерно 0,1 моль/л. В другом варианте осуществления буферный раствор содержит водный раствор ацетата аммония в концентрации примерно 0,11 моль/л. В другом варианте осуществления буферный раствор содержит водный раствор ацетата аммония в концентрации примерно 0,12 моль/л. В предпочтительном варианте осуществления буферный раствор содержит водный раствор ацетата аммония в концентрации 0,1 моль/л.
Буферный раствор также содержит этанол в качестве компонента. Как описано ранее, этанол может быть безводным или предварительно подвергнутым процедурам осушения, известным в данной области. Буферный раствор может содержать этанол в концентрации от примерно 3 до примерно 11% (об/об). В одном из вариантов осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 3% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 3,5% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 4% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 4,5% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 5% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 6% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 7% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 8% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 9% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 10% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 10% (об/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 11% (об/об). В предпочтительном варианте осуществления буферный раствор содержит этанол в концентрации примерно 10% (об/об).
Буферный раствор также содержит гентизиновую кислоту, или ее соль, в качестве компонента. Как описано ранее, соли гентизиновой кислоты могут включать натриевую соль или гидрат натриевой соли. Другие соли гентизиновой кислоты также предусмотрены. Буферный раствор может содержать гентизат натрия в концентрации от примерно 0,1 до примерно 0,55% (масс/об). В одном из вариантов осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,1% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,15% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,2% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,25% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,3% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,35% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,4% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,45% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,5% (масс/об). В другом варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,55% (масс/об). В предпочтительном варианте осуществления буферный раствор содержит гентизат натрия в концентрации примерно 0,228% (масс/об).
В одном варианте осуществления настоящего изобретения буферный раствор может быть приготовлен путем смешивания этанола и гентизиновой кислоты, или ее соли, с водным раствором ацетата аммония. Буферный раствор может быть приготовлен путем последовательного добавления этанола и гентизиновой кислоты, или ее соли, к водному раствору ацетата аммония или, альтернативно, этанол и гентизиновая кислота, или ее соль, вместе могут быть добавлены к раствору ацетата аммония. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения буферный раствор содержит ацетат аммония в концентрации примерно 0,1 M, с этанолом в концентрации примерно 4-11% (об/об) и гентизиновой кислотой, или ее солью, в концентрации примерно 0,5% (масс/об).
В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение формулы (I), или его соль, смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. Соединение формулы (I), или его соль, может быть получено в виде твердого вещества. В одном из вариантов осуществления соединение формулы (I), или его соль, получают в виде лиофилизированного порошка. В одном из вариантов осуществления соединение формулы (I), или его соль, полученное в виде лиофилизированного порошка, смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В одном из вариантов осуществления от примерно 15 мкг до примерно 65 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 15 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 20 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 25 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 30 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 35 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 40 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 45 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 50 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 55 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 60 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль. В другом варианте осуществления примерно 65 мкг соединения формулы (I), или его соли, в виде лиофилизированного порошка смешивают с буферным раствором водного ацетата аммония, содержащим этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль.
Раствор иона Cu добавляют к смеси соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль, и оставляют стоять в течение некоторого времени.
60
61
64
67
61
64
67
61
64
67
2
2
2
В одном из вариантов осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор соли Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли, содержащей медь. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор соли хлорида меди (II). В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор соли меди, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли радиоактивной меди (II). В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли меди (II), при этом медь представляет собой изотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли меди (II), при этом медь представляет собой изотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор хлоридной соли меди (II), при этом медь представляет собой изотоп Cu. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор [Cu]CuCl. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор [Cu]CuCl. В другом варианте осуществления раствор иона Cu представляет собой раствор [Cu]CuCl.
64
67
2
2
Раствор иона Cu используют в виде водного раствора. Ион Cu может быть предоставлен в водном растворе соляной кислоты. В одном из вариантов осуществления ион Cu предоставляют в растворе соляной кислоты с концентрацией от примерно 0,01 до примерно 0,1 моль/л. В одном из вариантов осуществления ион Cu предоставляют в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,01 моль/л. В другом варианте осуществления ион Cu предоставляют в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,02 моль/л. В другом варианте осуществления ион Cu предоставляют в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,05 моль/л. В другом варианте осуществления ион Cu предоставляют в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,075 моль/л. В другом варианте осуществления ион Cu предоставляют в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,1 моль/л. В предпочтительном варианте осуществления ион Cu используют в виде [Cu]CuCl в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,05 моль/л. В другом предпочтительном варианте осуществления ион Cu используют в виде [Cu]CuCl в растворе соляной кислоты с концентрацией примерно 0,05 моль/л.
64
64
64
64
64
64
64
64
64
64
64
64
64
Раствор радиоизотопа Cu используют в виде водного раствора с радиоактивностью от примерно 750 до примерно 3500 МБк. В одном из вариантов осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 750 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 1000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 1250 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 1500 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 1750 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 2000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 2250 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 2500 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 2750 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 3000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 3250 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность раствора радиоизотопа Cu составляет примерно 3500 МБк.
67
67
67
67
67
67
67
67
67
67
Раствор радиоизотопа Cu используют в виде водного раствора с радиоактивностью от примерно 1000 до примерно 5000 МБк. В одном из вариантов осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 1000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 1500 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 2000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 2500 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 3000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 3500 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 4000 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 4500 МБк. В другом варианте осуществления радиоактивность радиоизотопа Cu составляет примерно 5000 МБк.
64
Смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль, можно оставлять стоять при комнатной температуре. Смесь можно оставлять стоять с перемешиванием, альтернативно, смесь оставляют стоять без перемешивания. Смесь можно оставлять стоять в течение периода времени от примерно 5 до примерно 25 минут. В одном из вариантов осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 5 минут. В другом варианте осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 10 минут. В другом варианте осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 15 минут. В другом варианте осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 20 минут. В другом варианте осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 25 минут. В предпочтительном варианте осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 15 минут. В другом предпочтительном варианте осуществления смесь радиоизотопа Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, оставляют стоять без перемешивания в течение примерно 20 минут.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения смесь иона Cu, соединения формулы (I), или его соли, и буферного раствора водного ацетата аммония, содержащего этанол и гентизиновую кислоту, или ее соль, фильтруют. Смесь можно фильтровать для удаления ацетатной соли, которая может оставаться в растворе. Смесь можно фильтровать методом твердофазной экстракции. Смесь можно фильтровать методом твердофазной экстракции, при этом стационарная фаза картриджа для твердофазной экстракции удерживает соединение формулы (I), или его соль, в комплексе с ионом Cu, любое соединение формулы (I), или его соль, которое не находится в комплексе, и некоторое присутствующее количество гентизиновой кислоты в форме соли, такой как гентизат натрия. Используемый в настоящем документе термин «стационарная фаза» означает смолоподобный материал, который находится в картридже для твердофазной экстракции и позволяет разделять соединения на основе их полярности.
В методе твердофазной экстракции, описанном в настоящем документе, можно использовать обращенно-фазовую стационарную фазу. Используемый в настоящем документе термин «обращенно-фазовая» применительно к стационарной фазе означает стационарную фазу, которая является гидрофобной по природе, вследствие чего стационарная фаза обладает сродством к гидрофобным или незаряженным молекулам. Примеры обращенно-фазовой стационарной фазы могут включать полимерную обращенную фазу Phenomenex Strata-X 33u, Waters tC18 или Waters C18. Можно использовать и другие аналогичные стационарные фазы. Поскольку в методе твердофазной экстракции используют обращенно-фазовую стационарную фазу, ацетат аммония из буферного раствора, любые свободные ионы Cu и большая часть оставшейся гентизиновой кислоты, или ее соли, не удерживаются стационарной фазой, и эти компоненты отбрасывают.
64
64
67
67
В одном из вариантов осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I) и буферного раствора водного ацетата аммония фильтруют через картридж для твердофазной экстракции. В одном из вариантов осуществления смесь иона Cu, соединения формулы (I) и буферного раствора водного ацетата аммония фильтруют через картридж для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой. В одном из вариантов осуществления ацетат аммония и гентизиновую кислоту из буферного раствора удаляют при помощи картриджа для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой. В одном из вариантов осуществления соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu удерживается в картридже для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой. В предпочтительном варианте осуществления смесь радиоизотопа Cu, соединения формулы (I) и буферного раствора водного ацетата аммония фильтруют через картридж для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой. В предпочтительном варианте осуществления соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu удерживается в картридже для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой. В другом предпочтительном варианте осуществления смесь радиоизотопа Cu, соединения формулы (I) и буферного раствора водного ацетата аммония фильтруют через картридж для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой. В другом предпочтительном варианте осуществления соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu удерживается в картридже для твердофазной экстракции с обращенно-фазовой стационарной фазой.
Соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu элюируют с картриджа для твердофазной экстракции, содержащего стационарную фазу, путем промывания растворителем. Поскольку картридж для твердофазной экстракции содержит обращенно-фазовую стационарную фазу, для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu необходимо промывание стационарной фазы этанолом, солевым раствором и/или другим растворителем. В одном из вариантов осуществления картридж для твердофазной экстракции промывают этанолом для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu. В другом варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции промывают солевым раствором для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu. В другом варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции промывают этанолом и солевым раствором для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu. В предпочтительном варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции последовательно промывают этанолом и солевым раствором для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu. В предпочтительном варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции последовательно промывают этанолом и солевым раствором, получая состав по настоящему изобретению. В предпочтительном варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции последовательно промывают этанолом и солевым раствором для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu и любых оставшихся компонентов, таких как, гентизиновая кислота, или ее соль.
Как описано выше, авторы настоящего изобретения обнаружили, что составы соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu, дополнительно содержащие L-метионин, демонстрируют еще большую устойчивость к радиолизу. В другом предпочтительном варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции последовательно промывают этанолом и солевым раствором для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu и гентизиновой кислоты, или ее соли, в раствор L-метионина в солевом растворе. В другом предпочтительном варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции последовательно промывают этанолом и солевым раствором для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu, ацетата аммония и гентизиновой кислоты, или ее соли, в раствор L-метионина в солевом растворе. В другом предпочтительном варианте осуществления концентрация L-метионина в солевом растворе, в который промывают картридж для твердофазной экстракции, составляет примерно 2,5 мг/мл. В другом предпочтительном варианте осуществления картридж для твердофазной экстракции последовательно промывают этанолом и солевым раствором, получая состав по настоящему изобретению.
Специалист в данной области понимает, что эксципиенты состава включают растворитель, который используют для элюирования соединения формулы (I) в комплексе с ионом Cu со стационарной фазы, и что количество каждого используемого растворителя связано с количеством каждого эксципиента в составах по настоящему изобретению.
Специалист в данной области понимает, что в настоящем документе предложен ручной способ получения состава по настоящему изобретению. Специалист в данной области понимает, что стадии, описанные в настоящем документе, могут быть автоматизированы, с использованием соответствующего автоматизированного модуля для радиационного синтеза, для получения состава по настоящему изобретению.
64
67
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что составы, раскрытые в настоящем документе, обладают большей стабильностью и отличаются пониженным радиолизом, с учетом более высокой исходной радиоактивности. Эта повышенная стабильность может быть связана с более высокой радиохимической чистотой состава при данном уровне радиоактивности. Стабильность составов по настоящему изобретению можно наблюдать в течение периодов времени вплоть до 45 часов после производства в случае состава Cu-SARTATE и вплоть до 11 часов после производства в случае состава Cu-SARTATE. Если составы по настоящему изобретению используют с целью лечения или терапии, то повышенная стабильность может означать, что дозы для множества пациентов во многих удаленных пунктах могут быть изготовлены в одно и то же время в одном производственном центре. Это может означать, что ресурсы для производства нужны в одном производственном центре, а не во многих производственных центрах, и может быть достигнута большая эффективность в производстве составов. Если составы по настоящему изобретению используют для целей визуализации, могут иметь место дополнительные преимущества, поскольку клинические центры визуализации могут получать лекарственную форму, готовую для инъекции. Это может быть особенно выгодным для клинических центров, в которых отсутствуют специальные производственные мощности для изготовления радиофармацевтического средства.
Составы по настоящему изобретению содержат комплекс лиганд-радиоизотоп, где лиганд представляет собой соединение формулы (I), или его соль. Соединение формулы (I), или его соль, и радиоизотоп могут быть предоставлены в отдельных контейнерах. Альтернативно, соединение формулы (I), или его соль, и радиоизотоп могут быть предоставлены совместно, в виде комплекса лиганд-радиоизотоп.
В контейнере, содержащем соединение формулы (I), или его соль, соединение формулы (I), или его соль, может находиться в виде лиофилизированного порошка. Контейнер может находиться при температуре от -20°C до 20°C.
64
Составы могут быть предоставлены в виде набора, включающего контейнер с радиоизотопом и отдельный контейнер с лигандом, а также инструкции по получению водного состава по настоящему изобретению. В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер, содержащий раствор радиоизотопа Cu, и отдельный контейнер, содержащий соединение формулы (I), или его соль. Контейнер, содержащий радиоизотоп, может содержать раствор соли металла, при этом металл представляет собой радионуклид.
64
64
64
64
64
2
В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором радиоизотопа Cu. В следующем варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором соли меди, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором хлоридной соли, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором хлоридной соли радиоактивной меди (II). В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором хлоридной соли меди (II), при этом ион меди представляет собой изотоп Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl.
67
67
67
67
67
2
В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором радиоизотопа Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором соли меди, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором хлоридной соли, содержащей радиоизотоп Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором хлоридной соли радиоактивной меди (II). В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором хлоридной соли меди (II), при этом ион меди представляет собой изотоп Cu. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl.
Раствор радиоизотопа, как правило, используют в виде водного раствора. В одном из вариантов осуществления в набор по настоящему изобретению входит радиоизотоп в виде водного раствора. В следующем варианте осуществления в набор по настоящему изобретению входит радиоизотоп в виде кислотного водного раствора. В другом варианте осуществления в набор по настоящему изобретению входит радиоизотоп в виде раствора в соляной кислоте. Радиоизотоп может быть использован в виде раствора в соляной кислоте с концентрацией от примерно 0,01 до примерно 0,1 моль/л.
64
64
64
64
2
2
2
2
В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте. В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте, при этом соляная кислота имеет концентрацию примерно 0,02 моль/л. В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте, при этом соляная кислота имеет концентрацию примерно 0,05 моль/л. В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте, при этом соляная кислота имеет концентрацию примерно 0,1 моль/л.
67
67
67
67
2
2
2
2
В одном из вариантов осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте, при этом соляная кислота имеет концентрацию примерно 0,02 моль/л. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте, при этом соляная кислота имеет концентрацию примерно 0,05 моль/л. В другом варианте осуществления набор по настоящему изобретению включает контейнер с раствором [Cu]CuCl в соляной кислоте, при этом соляная кислота имеет концентрацию примерно 0,1 моль/л.
Набор может дополнительно включать контейнер, содержащий этанол, хлорид натрия и гентизиновую кислоту в буферном растворе. Этот контейнер может содержать этанол, хлорид натрия и гентизиновую кислоту в водном растворе или, альтернативно, контейнер может содержать только этанол, хлорид натрия и гентизиновую кислоту. В одном из вариантов осуществления набор включает контейнер, содержащий этанол, хлорид натрия и гентизиновую кислоту, или ее соль, в буферном растворе ацетата аммония.
Набор также может включать контейнер, содержащий этанол, хлорид натрия, гентизиновую кислоту, или ее соль, и L-метионин, или его соль, в буферном растворе. Контейнер в наборе может содержать этанол, хлорид натрия, гентизиновую кислоту, или ее соль, и L-метионин, или его соль, в водном растворе или, альтернативно, контейнер может содержать только этанол, хлорид натрия, гентизиновую кислоту, или ее соль, и L-метионин, или его соль. В одном из вариантов осуществления набор включает контейнер, содержащий этанол, хлорид натрия, гентизиновую кислоту, или ее соль, и L-метионин, или его соль. В одном из вариантов осуществления набор включает контейнер, содержащий этанол, хлорид натрия, гентизиновую кислоту, или ее соль, и L-метионин, или его соль, в буферном растворе ацетата аммония.
Варианты применения состава по настоящему изобретению
in vivo
Составы по настоящему изобретению могут быть особенно полезны в области медицины для диагностики и лечения. Комплексы с лигандом, несущие соответствующий нацеливающий фрагмент, можно использовать для направления на ткани конкретных типов. Чтобы такие комплексы считались подходящими для использования в  диагностике и лечении, комплекс должен демонстрировать определенные показатели кинетики, стабильности и клиренса в физиологических условиях, помимо необходимых свойств растворимости и стабильности комплекса в растворе. Используемый в настоящем документе термин «комплекс» может относиться к комплексу лиганд-ион металла, при этом ион металла представляет собой радиоактивный изотоп или, альтернативно, ион металла представляет собой нерадиоактивный изотоп.
Соответственно, настоящее изобретение относится к способу лучевой визуализации, способу диагностирования заболевания у субъекта или способу лечения заболевания у субъекта, включающему введение субъекту эффективного количества состава, описанного в настоящем документе. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что составы по настоящему изобретению могут быть использованы в способе лучевой визуализации, способе диагностирования или способе лечения рака.
Используемый в настоящем документе термин «рак» в широком смысле охватывает класс неопластических заболеваний, характеризующихся аномальным ростом клеток, которые потенциально могут проникать, или распространяться, в другие части тела. Эти заболевания следует отличать от доброкачественных опухолей, которые не распространяются в другие части тела, и, следовательно, используемое в настоящем документе определение включает все злокачественные (раковые) болезненные состояния. Таким образом, термин относится к лечению опухолей.
Соответственно, термин «опухоль» используют, в целом, для обозначения любого злокачественного ракового или предракового роста клеток, и он может включать лейкозы, однако преимущественно относится к солидным опухолям или карциномам, таким как меланомы, рак толстой кишки, легкого, яичника, кожи, молочной железы, поджелудочной железы, глотки, головного мозга, предстательной железы, ЦНС и почки (а также другие формы рака).
Соматостатиновые рецепторы, в частности, SSTR2, в высокой степени экспрессируются на плазматической мембране некоторых опухолей и злокачественных новообразований, включая опухоли поджелудочной железы, нейроэндокринные опухоли (НЭО) желудочно-кишечного тракта и легких, аденомы гипофиза, карциномы молочной железы, менингиомы, нейробластомы, медуллобластомы, феохромоцитомы и параганглиомы. Наличие соматостатиновых рецепторов на таких опухолях привело к разработке и клиническому применению стабильных лигандов соматостатиновых рецепторов, например, соединений, имеющих октреотатный фрагмент. Авторы настоящего изобретения установили, что комплекс соединения формулы (I) и иона Cu в составах по настоящему изобретению проявляет конкретное свойство связывания с соматостатиновыми рецепторами и, в частности, соматостатиновыми рецепторами подтипа 2 и подтипа 5. В конкретных вариантах осуществления состав может быть использован для лучевой визуализации, диагностирования или лечения рака, на клетках которого экспрессирован или в высокой степени экспрессирован соматостатиновый рецептор.
Составы по настоящему изобретению содержат соединение формулы (I), содержащее октреотатный фрагмент, аналогичный октреотиду, используемому в клинической практике аналогу соматостатина. Соматостатин секретируется нейроэндокринными клетками желудочно-кишечного тракта и действует через соматостатиновые рецепторы 5 подтипов (SSTR 1-5). Учитывая аналогичную природу октреотатного фрагмента и октреотида, соединения формулы (I) могут нацеливаться и связываться с конкретными участками в организме, где присутствуют соматостатиновые рецепторы. Аналогично, соединение формулы (I) в комплексе с ионом Cu также может нацеливаться и связываться с такими участками.
64
64
64
64
61
61
61
67
67
67
67
Радиоизотоп-лигандный комплекс по настоящему изобретению может содержать такой радиоизотоп, как Cu. Изотоп Cu имеет период полураспада примерно 12,7 часов и распадается по механизму как позитронной эмиссии, так и бета-распада, что делает Cu-меченый комплекс подходящим для использования в различных вариантах лучевой визуализации. В частности, характеристики распада и период полураспада Cu делают этот радиоизотоп подходящим для использования в методе позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ) и однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (ОФЭКТ). Радиоизотоп-лигандный комплекс по настоящему изобретению может содержать такой радиоизотоп, как Cu. Изотоп Cu имеет период полураспада примерно 3 часа и распадается по механизму позитронной эмиссии, что делает Cu-меченый комплекс подходящим для использования в различных вариантах лучевой визуализации. Радиоизотоп-лигандный комплекс по настоящему изобретению также может содержать такой радиоизотоп, как Cu. Изотоп Cu имеет период полураспада примерно 61,8 часов и распадается по механизму бета-эмиссии, что делает Cu-меченый комплекс подходящим для использования в визуализации методом ОФЭКТ. Cu-меченый комплекс также может быть подходящим для использования в радиотерапевтическом лечении.
60
61
64
67
64
67
Введение эффективного количества состава, содержащего соединение формулы (I) и радиоизотоп Cu, такой как Cu, Cu, Cu или Cu, может приводить к связыванию комплекса соединения формулы (I) и радиоизотопа Cu с соматостатиновыми рецепторами. Если соматостатиновые рецепторы экспрессированы на поверхности опухоли, комплекс соединения формулы (I) и иона Cu может связываться с соматостатиновыми рецепторами. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу лучевой визуализации, включающему введение субъекту состава, содержащего соединение формулы (I) и ион Cu. В одном из вариантов осуществления состав, содержащий соединение формулы (I) и ион Cu или Cu, может быть использован в способе лучевой визуализации. Мониторинг субъекта, которому был введен состав, содержащий соединение формулы (I) и радиоизотоп Cu, методом ПЭТ или ОФЭКТ, например, позволяет проводить визуализацию и последующее обнаружение опухолевых зон. Изображение, полученное методом лучевой визуализации, может предоставить информацию, относящуюся к локализации любых таких опухолевых зон. Мониторинг субъекта, которому был введен радиоактивно меченый комплекс, методом ОФЭКТ, например, позволяет проводить визуализацию и последующее обнаружение опухолевых зон. Это позволяет получать информацию, относящуюся к локализации опухолей, при их наличии. Повторная визуализация в более поздние моменты времени позволяет контролировать клиренс радиоизотоп-лигандного комплекса, что позволяет производить дозиметрические оценки. Специалист в данной области понимает, что количество, вводимое для проведения лучевой визуализации, может варьироваться и будет зависеть от характеристик субъекта и запланированной зоны визуализации.
64
Для того, чтобы комплекс мог быть использовать для целей лучевой визуализации, радиоизотоп-лигандный комплекс должен обладать достаточной метаболической стабильностью, то есть, оставаться интактным, с радиоизотопом, связанным с лигандом, в течение необходимого времени. Настоящее изобретение относится к комплексу соединения формулы (I) и Cu, который остается интактным в течение вплоть до 45 часов, о чем свидетельствует отсутствие потери радиоизотопа и метаболического распада.
Составы по настоящему изобретению можно вводить субъекту с целью лучевой визуализации, диагностирования или терапии. Введение осуществляют парентеральным путем введения, предпочтительно внутривенной инъекцией. Альтернативно, составы по настоящему изобретению можно вводить внутриартериальным или другими путями введения для доставки в систему кровообращения. Субъекта, которому вводят состав, затем помещают в ПЭТ-сканер и получают изображения, демонстрирующие локализацию радиоизотоп-лигандного комплекса и, как следствие, локализацию любых опухолей. Это позволяет диагностировать и обнаруживать опухоли. Альтернативно, образец (например, образец крови или ткани), который был подвергнут воздействию состава по настоящему изобретению, можно анализировать методом гамма-спектроскопии, с помощью гамма-счетчика, жидкостного сцинтилляционного счетчика, ауторадиографии или бета-зонда для получения радиоизображений.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к применению состава, содержащего соединение формулы (I), в способе лучевой визуализации опухоли или рака. Специалист в данной области понимает, что информацию, полученную методом лучевой визуализации субъекта, можно использовать в диагностировании опухоли или рака у субъекта. В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к способу диагностирования опухоли или рака. В следующем варианте осуществления опухоль или рак могут представлять собой опухоль или рак с клетками, экспрессирующими соматостатиновый рецептор. В одном из вариантов осуществления опухоль или рак представляет собой нейроэндокринную опухоль. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой аденому гипофиза. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой нейробластому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой менингиому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой медуллобластому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой карциному молочной железы. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой феохромоцитому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой параганглиому. В другом варианте осуществления опухоль представляет собой опухоль поджелудочной железы. В другом варианте осуществления опухоль представляет собой опухоль желудочно-кишечного тракта.
Поскольку состав по настоящему изобретению содержит соединение формулы (I) и радиоизотоп Cu, введение состава может способствовать лечению опухоли или рака. Как описано выше, соединение формулы (I) может связываться с соматостатиновыми рецепторами на поверхности клеток опухоли или рака, и в результате связывания соединения с участками, имеющими соматостатиновые рецепторы, радиоизотоп Cu также доставляется к этим участкам. Поскольку радиоизотоп Cu подвергается радиоактивному распаду по механизму распада, зависящему от конкретного выбранного радиоизотопа, продукты распада могут быть полезны для лечения опухоли или рака за счет близости опухоли или рака к соединению формулы (I) и радиоизотопу Cu.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение относится к применению состава, содержащего соединение формулы (I) и радиоизотоп Cu, в способе лечения опухоли или рака. В одном из вариантов осуществления опухоль или рак представляет собой нейроэндокринную опухоль. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой аденому гипофиза. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой нейробластому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой менингиому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой медуллобластому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой карциному молочной железы. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой феохромоцитому. В другом варианте осуществления опухоль или рак представляет собой параганглиому. В другом варианте осуществления опухоль представляет собой опухоль поджелудочной железы. В другом варианте осуществления опухоль представляет собой опухоль желудочно-кишечного тракта.
В настоящей спецификации ссылка на любую более раннюю публикацию (или информацию, полученную из нее) или на любой факт, который известен, не является, и не должна восприниматься как подтверждение или признание, или любая форма предположения, что эта более ранняя публикация (или информация, полученная из нее) или известный факт является частью общих знаний в области, к которой относится настоящее изобретение.
В тексте настоящей спецификации и прилагаемой формулы изобретения, если из контекста явно не следует иное, термин «включать» и его вариации, такие как «включает» и «включая», следует понимать, как подразумевающий включение указанного целого числа или стадии, либо группы целых чисел или стадий, но не исключение любых других целых чисел или стадий, либо группы целых чисел или стадий.
ПРИМЕРЫ
Пример 1 - Получение низкодозного состава
Cu-SARTATE, содержащего этанол и гентизат натрия в качестве эксципиентов для уменьшения радиолиза
64
Готовят буферный раствор 0,1 M ацетата аммония, также содержащий этанол в концентрации 4-10% (об/об). Буферный раствор также содержит гентизат натрия, при этом 5-мл объем буферного раствора содержит 38 мг гентизата натрия.
Соединение формулы (I) получают в виде лиофилизированного порошка. 20 мкг соединения формулы (I) в лиофилизированном состоянии растворяют в 5 мл приготовленного буферного раствора.
64
64
64
2
2
Готовят раствор [Cu]CuCl в 0,05 M соляной кислоте, при этом 300-мкл объем данного раствора содержит 1500 МБк [Cu]. 300 мкл этого раствора [Cu]CuCl добавляют к раствору, содержащему соединение формулы (I) и гентизат натрия в аммоний-ацетатном буфере. Этот объединенный раствор оставляют стоять с перемешиванием при комнатной температуре на 15 минут.
64
Затем раствор фильтруют через картридж для твердофазной экстракции. Картридж элюируют 1,0 мл этанола, а затем 9,0 мл солевого раствора в стерильный флакон для состава, получая Cu-SARTATE в объеме 10 мл этанол/солевого раствора. Результаты анализа методом ВЭЖХ полученного раствора приведены на Фигуре 1, они показывают радиохимическую чистоту 97%. Результаты дополнительного ВЭЖХ-анализа того же раствора состава, полученные в разные моменты времени, приведены на Фигуре 2, они показывают, что радиохимическая чистота остается >90% в течение более 11 часов.
Пример 2 - Получение высокодозного состава
Cu-SARTATE, содержащего этанол, гентизат натрия и L-метионин в качестве эксципиентов для уменьшения радиолиза
64
Готовят буферный раствор 0,1 M ацетата аммония, также содержащий этанол в концентрации 4-10% (об/об). Буферный раствор также содержит гентизат натрия, при этом 5-мл объем буферного раствора содержит 114 мг гентизата натрия.
Соединение формулы (I) получают в виде лиофилизированного порошка. 20 мкг соединения формулы (I) в лиофилизированном состоянии растворяют в 5 мл приготовленного буферного раствора.
64
64
64
2
2
Готовят раствор [Cu]CuCl в 0,05 M соляной кислоте, при этом 300-мкл объем данного раствора содержит 4650 МБк [Cu]. 300 мкл этого раствора [Cu]CuCl добавляют к раствору, содержащему соединение формулы (I) и гентизат натрия в аммоний-ацетатном буфере. Этот объединенный раствор оставляют стоять с перемешиванием при комнатной температуре на 15 минут.
64
Затем раствор фильтруют через картридж для твердофазной экстракции. Картридж элюируют 1,0 мл этанола, а затем 16,0 мл солевого раствора, получая Cu-SARTATE в объеме 20 мл этанол/солевого раствора. Результаты анализа методом ВЭЖХ полученного раствора приведены на Фигуре 3, они показывают радиохимическую чистоту более 98%. Результаты дополнительного ВЭЖХ-анализа того же раствора состава, полученные в разные моменты времени, приведены на Фигуре 4, они показывают, что радиохимическая чистота остается >90% в течение более 45 часов.
Пример 3 - Получение состава
Cu-SARTATE, содержащего этанол, гентизат натрия и L-метионин в качестве эксципиентов для уменьшения радиолиза
67
Готовят буферный раствор 0,1 M ацетата аммония, также содержащий этанол в концентрации 4-10% (об/об). Буферный раствор также содержит гентизат натрия, при этом 5-мл объем буферного раствора содержит 114 мг гентизата натрия.
Соединение формулы (I) получают в виде лиофилизированного порошка. 60 мкг соединения формулы (I) в лиофилизированном состоянии растворяют в 5 мл приготовленного буферного раствора.
67
64
67
2
2
Готовят раствор [Cu]CuCl в 0,05 M соляной кислоте, при этом 300-мкл объем данного раствора содержит 4650 МБк [Cu]. 300 мкл этого раствора [Cu]CuCl добавляют к раствору, содержащему соединение формулы (I) и гентизат натрия в аммоний-ацетатном буфере. Этот объединенный раствор оставляют стоять с перемешиванием при комнатной температуре на 15 минут.
67
Затем раствор фильтруют через картридж для твердофазной экстракции. Картридж элюируют 1,0 мл этанола, а затем 16,0 мл солевого раствора в стерильный флакон для состава, содержащий раствор L-метионина (50 мг в 3 мл солевого раствора), получая Cu-SARTATE в объеме 20 мл этанол/солевого раствора. Результаты анализа методом ВЭЖХ полученного раствора приведены на Фигуре 5, они показывают радиохимическую чистоту более 98%. Результаты дополнительного ВЭЖХ-анализа того же раствора состава, полученные в разные моменты времени, приведены на Фигуре 6, они показывают, что радиохимическая чистота остается >90% в течение более 11 часов.
Пример 4 -
In vitro
стабильность
Cu-SARTATE в сыворотке
64
64
64
Инкубация Cu-SARTATE (радиохимическая чистота >99%) со свежей человеческой сывороткой продемонстрировала высокую метаболическую стабильность. Результаты анализа методом ВЭЖХ сыворотки, инкубированной с полученным Cu-SARTATE, приведены на Фигуре 7, они показывают, что >90% радиоактивности в небелковой фракции через 3 часа, 20 часов, 23 часа, 26 часов и 34 часа все-еще оставались связанными с хелатором, что свидетельствовало об интактности радиоактивного пептида и указывало на отсутствие потери меди или заметного метаболического распада в течение вплоть до 43 часов.
Пример 5 -
In vitro
интернализация и связывание на клеточной поверхности
Cu-SARTATE
64
64
64
3
Исследования интернализации и связывания на клеточной поверхности Cu-SARTATE проводили с использованием клеток A427-7, несущих соматостатиновый рецептор 2. Процентная доля от общей добавленной радиоактивности на мг белка (% ДР/мг белка), которая была интернализована, возрастала со временем, достигая 23,9 ± 0,7 через 120 мин (Фигура 8). Через 30 мин 40,2 ± 0,7% ДР/мг белка было связано с клеточной поверхностью (Фигура 9). Это значение снижалось до 31,2 ± 1,2 через 60 мин и 35,2 ± 1,3 через 120 мин. Как опосредованная рецептором интернализация, так и связывание на клеточной поверхности, частично ингибировались при добавлении холодного Tyr-октреотата в среду. Нормированное поглощение Cu-SARTATE в родительских клетках A427 было заметно меньше, чем в экспрессирующих SSTR2 клетках A427-7, что указывало на важность специфического связанного с рецептором накопления (Фигура 10).
Пример 6 -
In vivo
биораспределение
Cu-SARTATE
64
64
64
64
64
64
64
64
3
3
64
Биораспределение Cu-SARTATE изучали с использованием Cu-SARTATE у несущих опухоль A427-7 «голых» мышей Balb/c (Фигура 11). Для Cu-SARTATE наблюдали эффективный клиренс из крови через 2 часа (0,4 ± 0,2% ИД/г, где % ИД/г представляет собой процентную долю инъецированной дозы на грамм ткани), с дальнейшим клиренсом через 24 часа (0,1 ± 0,02% ИД/г). Поглощение Cu-SARTATE печенью (3,1 ± 1,3% ИД/г) и почками (35,2 ± 5,4% ИД/г) было максимальным через 2 часа после дозирования. Через 24 часа после дозирования поглощение почками Cu-SARTATE снижалось на 71% до 10,1 ± 3,5% ИД/г, что свидетельствовало об эффективном клиренсе Cu-SARTATE в почках. Через 24 часа после дозирования поглощение Cu-SARTATE в легких и селезенке (то есть, нецелевых органах) составляло 0,6 ± 0,3% ИД/г и 0,8 ± 0,2% ИД/г, соответственно, при этом накопление в мышцах составляло 0,1 ± 0,01% ИД/г через 24 часа. Поглощение опухолью Cu-SARTATE через 2 часа после введения было высоким, на уровне 31,2 ± 13,1% ИД/г и оставалось высоким через 24 часа, на уровне 31,4 ± 14,0% ИД/г. Совместное введение избытка Tyr-октреотата (избытка Y-TATE) для блокирования рецепторов приводило к значительному уменьшению поглощения опухолью Cu-SARTATE через 2 часа, на 81% до уровня 5,9 ± 0,3% ИД/г, при этом увеличивалось поглощение нецелевыми тканями, о чем свидетельствовало возрастание на 135% в почках до уровня 47,7 ± 6,3% ИД/г.
Пример 7 -
In vivo
визуализация
Cu-SARTATE методом ПЭТ
64
3
64
3
64
Изображения несущих опухоль A427-7 мышей Balb/c, полученные на установке ПЭТ для мелких животных через 2 и 24 часа, с блокированием и без блокирования избытком Tyr-октреотата представлены на Фигуре 12. Опухоль отчетливо видна через 2 часа после инъекции Cu-SARTATE, со средним отношением опухоль/фон, составляющим 48. Отношение опухоль/фон через 24 часа оставалось постоянным на уровне 45, что указывает на высокую степень специфичности связывания и стабильности комплекса. Совместное введение избытка Tyr-октреотата приводило к эффективному блокированию поглощения опухолью, с отношением опухоль/фон, составляющим 3,1 через 2 часа и ниже предела количественного определения через 24 ч. Результаты эксперимента с блокированием дополнительно свидетельствуют в пользу специфичности в отношении SSTR2 и низкого уровня неспецифического связывания Cu-SARTATE. Значительное поглощение в почках и мочевом пузыре имело место у всех животных, указывая на то, что клиренс через почки являлся основным путем экскреции соединения. Отношение опухоль/почки через 2 часа составляло 1,6 и возрастало до 2,8 через 24 часа.
Пример 8 -
In vivo
токсикологические исследования SARTATE
Проводили доклиническое токсикологическое исследование с введением одной дозы крысам Sprague Dawley для оценки потенциальной токсичности SARTATE при введении внутривенной инъекцией. Проводили тестирование растворов комплекса SARTATE-медь (SCC) и немеченого лиганда SARTATE (SL) в соотношении 1:1. Исследование проводили в соответствии с принципами OECD GLP.
Тестируемый состав вводили один раз шести группам по 10 крыс (5 животных каждого пола) в трех дозах 50, 250 и 1000 мкг/кг в растворителе, с объемом введения 3 мл/кг. Двум контрольным группам по 10 крыс (5 животных каждого пола) вводили только растворитель (10% этанола в 0,9% растворе хлорида натрия и 0,056% гентизиновой кислоты) в том же объеме дозы.
Четыре группы крыс (одна группа введения растворителя и три группы введения тестируемого состава в дозе 50, 250 и 1000 мкг/кг) из основного исследования умерщвляли в день 2. Оставшиеся четыре группы по 10 крыс (одна группа введения растворителя и три группы введения тестируемого состава в дозе 50, 250 и 1000 мкг/кг) из исследования восстановления наблюдали в течение 14-дневного периода без лечения и умерщвляли в день 15 для оценки обратимости любой токсичности.
Оценивали следующие параметры: смертность, результаты ежедневного клинического осмотра, результаты еженедельного взвешивания, результаты еженедельного поглощения пищи, показатели гематологии, биохимии, результаты анализа мочи, взвешивания органов, а также вскрытия и макроскопического исследования в день эвтаназии. Масштабное гистопатологическое исследование проводили для всех животных.
Случаи гибели животных, связанные с лечением, отсутствовали как в группе введения растворителя, так и в экспериментальных группах, как в период лечения, так и в период восстановления. Тестируемый состав не вызывал никакие клинические аномалии, связанные с лечением, ни у одного из животных в течение 2-дневного и 15-дневного экспериментальных периодов. В группах лечения и контрольных группах введения растворителя наблюдали сопоставимое прибавление массы тела в течение 2-дневного и 15-дневного экспериментальных периодов. Поглощение пищи было аналогичным в контрольных и экспериментальных группах в течение 2-дневного и 15-дневного экспериментальных периодов. Показатели гематологии, биохимии крови и анализа мочи свидетельствовали об отсутствии связанных с составом отклонений. При вскрытии не были обнаружены никакие макроскопические аномалии ни у одного из животных. Отсутствовали признаки какого-либо связанного с тестируемым составом эффекта на массу органов и все ткани, для которых был проведен гистопатологический анализ в данном исследовании.
В условиях исследования у тестируемого состава, введенного внутривенно в дозе 50, 250 и 1000 мкг/кг крысам Sprague Dawley, токсический эффект отсутствовал. Таким образом, доза, не вызывающая обнаруживаемых нежелательных эффектов (NOAEL), составляет 1000 мкг/кг (1 мг/кг).
64
NOAEL 1 мг/кг у крыс соответствует эквивалентной дозе для человека (HED) 0,16 мг/кг, или общей дозе 11,2 мг для пациента с массой тела 70 кг. Максимально допустимая общая доза в данном клиническом испытании составит 0,02 мг (20 микрограмм) на пациента. Таким образом, NOAEL представляет границу безопасной дозы, в 50-раз превышающую максимальную дозу SARTATE для человека. Поскольку доза Cu-SARTATE, вводимая пациентам, определяется активностью (200 МБк), ожидается, что, скорее всего, фактическая вводимая доза SARTATE будет составлять часть от общей допустимой дозы, что существенно расширяет границы безопасности.
Пример 9 -
In vitro
генотоксичность SARTATE
Для оценки мутагенного потенциала SARTATE проводили тест Эймса, в соответствии с принципами GLP, для растворов комплекса SARTATE-медь (SCC) и немеченого лиганда SARTATE (SL) в соотношении 1:1. Раствор SL:SCC не вызывал соответствующего кратного увеличения среднего числа ревертантов на чашку относительно среднего числа ревертантов на чашку с соответствующим контрольным растворителем. Раствор SL:SCC не оказывал никакого цитотоксического действия при уровнях доз, используемых с любым из 5 тестируемых штаммов. Состав был признан не мутагенным.