Способ повышения антибактериальной активности наночастиц серебра в отношении St. aureus
METHOD FOR INCREASING THE ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF SILVER NANOPARTICLES AGAINST ST. AUREUS

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано в лабораторной работе при изучении антибиотикочувствительности микроорганизмов, а также в лечебно-профилактических мероприятиях, при терапии животных.
В последние время во всем мире отмечается значительное количество случаев выделения антибиотико-резистентных штаммов возбудителей инфекционных болезней у сельскохозяйственных животных.
Неоправданно широкое бесконтрольное применение антибактериальных препаратов в сельском хозяйстве, как для профилактики, так и для лечения инфекционных заболеваний, привело к развитию резистентных штаммов микроорганизмов с последующей потерей терапевтического эффекта антибиотиков как противомикробного препарата. Приспосабливаемость микрофлоры к антибактериальным средствам настолько высока, что внедрение новых антибактериальных препаратов едва поспевает за нуждами медицины и ветеринарии. В большинстве случаев устойчивость обусловлена наличием у микроорганизмов особых генетических детерминант-R-плазмид, способных передаваться между таксономически далекими бактериями, придавая им резистентность к отдельным антибиотикам и их комбинациям.
В соответствии с распоряжением Правительства РФ №2604-р от 30.03.2019 г. утверждена «Стратегия предупреждения распространения антимикробной резистентности», где был обозначен комплекс мер, направленных на ограничение распространения феномена антибиотикорезистентности (Распоряжение Правительства РФ от 30 марта 2019 года №604-р).
Наиболее близким решением, принятым за прототип, является документ Д1 (Шкиль Н.Н., Нефедова Е.В. Влияние наночастиц серебра и диметилсульфоксида в комбинации с антибиотиком на изменение антибактериальной чувствительности St. Aureus ATCC 29737// Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. – 2020. - №1. – С. 55-57), в котором раскрывается способ повышения антибактериальной чувствительности St. аureus ATCC 29737 и антибиотика в комбинации с наночастицами серебра и диметилсульфоксида. Способ включает использования препарата арговит и диметилсульфоксида. Способ включает использования препарата арговит с содержание действующего вещества 12-14 мг/мл, диметилсульфоксида (ДМСО) и антибиотика цефтимаг. Отличием заявленного решения от прототипа, является то, что в заявленном способе для повышения антибактериальной активности наночастиц серебра в отношении St. аureus ATCC 29737 используют ДМСО без антибиотика.
Задачей заявленного изобретения является расширение способа повышения бактерицидной активности наночастиц серебра в отношении St. aureus.
6
Поставленная задача достигается тем, что к 0,2 мл раствора препарата арговит с содержанием действующего вещества 13-15 мг/мл вносят равный объем - 0,2 мл диметилсульфоксида (ДМСО) с содержанием действующего вещества 1000 мг/мл используя метод последовательных серийных разведений в мясопептонный бульон 1,6 мл с последующем внесением 0,2 мл 1,5⋅10 КОЕ/мл референтного штамма St. aureus АТСС 29737 и изолята St. aureus выделенного от крупного рогатого скота с клиническим проявлением инфекционного заболевания, с последующем инкубированием в течении 24 ч. при Т=37,5±0,5°С.
Результат повышения бактерицидной активности препарата арговит в отношении St. aureus определяется методом последовательных серийных разведений в МПБ (Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н. и др. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. - 2-е изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 1984. - 256 с). Использование данного способа позволяет оценить повышение бактерицидной активности препарата Арговит в комбинации с диметилсульфоксидом.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Препарат Арговит представляет собой комплекс высокодисперсных частиц кластерного серебра, поливинилпирролидона и водного раствора, полученного электронно-лучевой обработкой водного раствора. Препарат обладает широким спектром антимикробного действия в отношении грамположительных и грамотрицательных, аэробных и анаэробных, спорообразующих и аспорогенных бактерий в виде монокультур и микробных ассоциаций (ООО НПЦ «Вектор-Вита»).
Димексид (ДМСО) - это раствор действующего вещества диметилсульфоксида, который обладает выраженными противовоспалительными, анальгезирующими и антисептическими свойствами.
Пример 1
При определении минимальной бактерицидной концентрации (МБЦК) референтного штамма St.aureus АТСС 29737 и его изолята, выделенного от крупного рогатого скота с клиническим проявлением инфекционного заболевания к различным препаратам Арговит и ДМСО и их комбинациям, установлено, что комбинация Арговит + ДМСО значительно снижает их МБцК (таблица 1).
Пример 2
Промышленная применимость иллюстрируется при лечении мастита коров, где главным действующим этиологическим агентом являлся St.aureus. Применили комбинацию препаратов Арговит + ДМСО с концентрацией действующих веществ 0,214 мкг/мл + 0,3 мкг/мл соответственно.
При изучении сравнительной эффективности лечения субклинического, серозного, катарального маститов коров было сформировано три группы животных: первой группе (п=30) вводили интрацистернально препарат лактобай в дозе 10 мл на одно введение, трижды с интервалом 12 часов. Второй группе (n=30) вводили интрацистернально комплексный препарат арговит + ДМСО в дозе 10 мл 1 раз в день (таблица 2).
Вывод:
На основании полученных результатов исследования установлено, что разработанный способ повышения антибактериальной активности наночастиц серебра препаратами арговит и ДМСО в отношении St. aureus позволяет сократить терапию субклинического мастита коров в 2,5 раза.