Проблемы контроля качества продукции клеточных технологий

A.B. Жукоцкий, A.B. Мелерзанов Проблемы контроля качества продукции клеточных технологий

Федеральный Научно-клинический центр Детской гематологии, онкологии и иммунологии Росздрава,

Москва, Россия m83071@gmail.com

A.V. Zhukotskyi, A.V. Melerzanov Problems of quality assurance for Cellular Technologies Products

Отрасль клеточных технологий является одним из наиболее перспективных направлений в биомедицине. Однако отсутствие четкого законодательства, регулирующего деятельность данной отрасли, тормозит ее развитие.

Организационные проблемы существуют на всех этапах от создания клеточной технологии до применения продукции клеточных технологий в клинических испытаниях. Для лаборатории, создающей продукцию клеточных технологий, основной проблемой является контроль качества выпускаемой продукции, так как качество продукции прямо связано с обеспечением безопасности субъекта клинических испытаний. В связи с отсутствием нормативно-правовых актов, регулирующих контроль качества продукции клеточных технологий, отсутствует стандарт для так называемого клеточного паспорта или сертификата продукции клеточных технологий, в котором должны быть отражены все необходимые параметры продукта.

Сегодня контроль качества продукции, выпускаемой лабораториями клеточных технологий, заключается, как правило, в контроле донора по основным наиболее часто встречающимся инфекциям, передающимся с кровью, в бактериальном контроле исходного материала, поступающего в лабораторию и фенотипировании конечного продукта. В некоторых лабораториях продукция также подвергается микроскопическому анализу перед передачей учреждению, проводящему соответствующие клинические исследования. При этом недавно открытые нанобактерии, которые оказывают существенное влияние на функционирование клетки, сегодня чаще всего не определяются даже при трансплантации аллогенных клеток.

Быстрое развитие отрасли приводит к появлению новых клеточных технологий, связанных с генной инженерией, воздействием на геном вирусов, плазмид, наночастиц и других носителей участков ДНК, приводящих к изменению генома и в ряде случаев к изменению функций клетки качественно или количественно (например, увеличение продукции белков при воздействии наночастицами серебра размером 40 нм). Изменение генома значительно увеличивает риск возникновения нежелательных мутаций, потенциально опасных для реципиента. Это приводит к необходимости гораздо более тщательного многопараметрического контроля продукции клеточных технологий, в том числе, карио-типировании и оценки стабильности генома.

Стабильность генома имеет большое значение с точки зрения биологической безопасности продукции клеточных технологий. При этом являясь категорией биофизической, нередко недооценивается врачами и биологами, работающими в сфере клеточных технологий.

Таким образом, так как продукция клеточных технологий является сравнительно дорогостоящей, то в отсутствии соответствующего законодательства веро-

ятность полноценной оценки клеточного материала маловероятна, тем более по нанопараметрам (стабильность генома и наличие нанобактерий). Решение проблемы биобезопасности продукции клеточных технологий на наноуровне — это создание экономически оправданного высокоточного метода многоуровневой визуализации. В этом может помочь применение новой технологии — морфоденситометрии, которая позволяет осуществить одномоментный многоуровневый морфо-функциональный анализ клеточных структур. Аппаратно-програмный комплекс, работающий на основе технологии морфоденситометрии, сочетает в себе высокую точность, простоту применения и низкую стоимость как самого комплекса (по сравнению с системами сходных функций и разрешения), так и анализов, проведенных с его помощью.

Внедрение данного аппаратно-програмного комплекса в лаборатории клеточных технологий позволит проводить полноценный контроль качества без значительного роста себестоимости продукции.

В дальнейшем, когда широкая практика применения аппаратно-программного комплекса покажет эффективность морфоденситометрии, в том числе экономическую, технологию можно будет рекомендовать для стандартного оснащения лабораторий клеточных технологий.

Б.В. Засорин, О.М. Курмангалиев, A.A. Белышев Эффективность применения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга при токсических формах нарушения сперматогенеза

Западно-Казахстанский государственный медицинский университет им. М. Оспанова, Актюбинск, Казахстан

B.V. Zasorin, Ü.M. Kurmangaliev, A.A. Belyshev The efficacy of using multipatent mesenchymal stromal cells derived from bone marrow in toxic impairment of spermatogenesis

На сегодняшний день достоверно установлено, что около 40% бесплодных браков обусловлено нарушениями в мужской половой сфере. Среди причин, приводящих к указанным нарушениям, одно из ведущих мест занимает токсическое поражение гонад. В связи с этим, актуален поиск новых подходов в реабилитации данной группы пациентов. Одним из таких подходов является клеточная терапия. Наш эксперимент проведен на 70 крысах-самцах линии Вистар, разделённых на три группы: интактные, негативный контроль и опытная группа. В качестве модели токсического поражения гонад использовали хроническую алкогольную интоксикацию (ежедневное внутрибрюшинное введение 20% этилового спирта из расчёта 0,52 гр/кг в течение 6 мес.). Воздействию подвергались животные опытной группы и негативного контроля.

Аллогенные мультипотентные мезинхимальные стромальные клетки (ММСК) были выделены из бедренных костей двадцати семидневных крысят, культивированы in vitro до третьего пассажа, иммунофеноти-пированы и использованы в эксперименте. Введение ММСК животным опытной группы осуществляли внут-рибрюшинно на 14 сут. после прекращения введения алкоголя. Учёт результатов осуществляли на седьмые, четырнадцатые и двадцать первые сутки после введения клеток. Для оценки функционального состояния семенников определяли плотность и формы спермиев (активно-подвижные, аномальные), полученных из

Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том V, 1У< 3, 2010