КОНЪЮГАТ миРНК И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

1. Конъюгат миРНК и полимерного соединения, имеющий следующую структуру:
A-X-R-Y-B,
где A и B независимо представляют собой гидрофильное полимерное или гидрофобное полимерное соединение; X и Y независимо представляют собой простую ковалентную связь или ковалентную связь через промежуточный линкер; и R представляет собой миРНК.
2. Конъюгат миРНК и полимерного соединения, имеющий следующую структуру:
A-X-R,
где A представляет собой гидрофобное полимерное соединение; X представляет собой простую ковалентную связь или ковалентную связь через промежуточный линкер; и R представляет собой миРНК.
3. Конъюгат по п.1 или 2, в котором одинарная цепь миРНК (R) включает от 19 до 31 нуклеотида.
4. Конъюгат по п.1 или 2, в котором гидрофобное полимерное соединение (A) имеет молекулярную массу от 250 до 1000.
16
50
5. Конъюгат по п.4, в котором гидрофобное полимерное соединение (A) представляет собой углеводород C-C или холестерин.
6. Конъюгат по п.1 или 2, в котором ковалентная связь (X, Y) представляет собой нерасщепляемую связь или расщепляемую связь.
7. Конъюгат по п.6, в котором нерасщепляемая связь представляет собой амидную связь или фосфатную связь.
8. Конъюгат по п.6, в котором расщепляемая связь выбрана из дисульфидной связи, расщепляемой кислотой связи, сложноэфирной связи, ангидридной связи, биорасщепляемой связи и расщепляемой ферментом связи.
9. Конъюгат по п.1, в котором гидрофильное полимерное соединение (A или B) представляет собой неионное полимерное соединение, имеющее молекулярную массу от 1000 до 10000.
10. Конъюгат по п.9, в котором гидрофильное полимерное соединение выбрано из группы, в которую входят полиэтиленгликоль (ПЭГ), поливинилпирролидон и полиоксазолин.
11. Связанная с полиэтиленгликолем твердая подложка, имеющая следующую структуру:
где R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил, арилалкил, гетероалкил или гетероарил; m представляет собой целое число от 2 до 18; n представляет собой целое число от 5 до 120; и X представляет собой атом водорода, 4-монометокситритил, 4,4'-диметокситритил или 4,4',4"-триметокситритил.
12. Связанная с полиэтиленгликолем твердая подложка по п.11, где твердая подложка представляет собой стекло с контролируемым размером пор (СКП).
13. Связанная с полиэтиленгликолем твердая подложка по п.12, в которой СКП имеет диаметр от 40 до 180 мкм и размер пор от 500 до 3000 Å.
14. Связанная с полиэтиленгликолем твердая подложка по любому из пп.11-13, в которой связанная с полиэтиленгликолем твердая подложка представляет собой соединение 3'-ПЭГ(полиэтиленгликоль)-СКП, имеющее следующую структурную формулу IV:
[Структурная формула IV]
15. Способ получения соединения 3'-ПЭГ-СКП, имеющего следующую структурную формулу IV, который предусматривает:
1) реакцию СКП с 3-аминопропилтриэтоксисиланом, в которой образуется соединение длинноцепного алкиламина и стекла с контролируемым размером пор (ДЦАА-СКП);
2) реакцию полиэтиленгликоля с 4,4'-диметокситритилхлоридом, в которой образуется 2-[бис-(4-диметокситритил)полиэтиленгликоль];
3) реакцию соединения, полученного на стадии (2), с соединением, имеющим следующую химическую формулу 1, в которой образуется соединение, имеющее следующую структурную формулу I;
4) реакцию полученного соединения, имеющего следующую структурную формулу I, с 4-нитрофенилхлорформиатом, в которой образуется соединение, имеющее следующую структурную формулу II;
5) реакцию соединения, имеющего следующую структурную формулу I и полученного на стадии (3), с N-сукцинимидилтрифторуксусной кислотой, в которой образуется соединение, имеющее следующую структурную формулу III; и
6) реакцию соединения ДЦАА-СКП, полученного на стадии (1), с соединениями, имеющими следующие структурные формулы I, II и III, соответственно, и полученными на стадиях (3)-(5), соответственно.
[Формула 1]
[Структурная формула I]
[Структурная формула II]
[Структурная формула III]
[Структурная формула IV]
где R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил, арилалкил, гетероалкил или гетероарил; и n представляет собой целое число, составляющее не менее чем 5 и не более чем 120.
16. Способ получения конъюгата миРНК по п.1 или 2, который предусматривает:
1) получение миРНК против гена-мишени с использованием связанной с полиэтиленгликолем твердой подложки по п.11; и
2) соединение концевой группы миРНК и полиэтиленгликоля ковалентной связью.
17. Наночастица, состоящая из конъюгатов миРНК по п.1 или 2.
18. Способ генной терапии, который предусматривает:
1) получение наночастиц по п.17; и
2) введение наночастиц в организм животного.
19. Способ по п.18, в котором наночастицы вводят в организм путем перорального приема или внутривенной инъекции.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически эффективное количество конъюгатов миРНК по п.1 или 2.
21. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически эффективное количество наночастиц по п.17.