Новое тетерагидропиримидиновое соединение или его соль
NEW TETRAHYDROPYRIMIDINE CONNECTION OR ITS SALT

Область техники
[0001]
Настоящее изобретение касается нового тетрагидропиридопиримидинового соединения, которое применимо в качестве фармацевтического агента, в частности антиандрогенного агента, и его соли и содержащей их фармацевтической композиции.
Уровень техники
[0002]
Рак предстательной железы является раковым заболеванием, наиболее часто встречающимся у мужчин в западных странах, и второй главной причиной смерти от рака. В Японии в соответствии с европеизацией пищевых предпочтений и старением населения также год от года возрастает число пациентов с раком предстательной железы. Вообще, пролиферация раковых клеток предстательной железы стимулируется андрогеном. По существу, для лечения неоперабельного прогрессирующего рака предстательной железы пациентов подвергают хирургической или химической кастрации и/или вводят антиандрогенный агент, так называемая антиандрогенная терапия. В результате хирургической или химической кастрации снижают уровень андрогена, циркулирующего в организме человека, так что снижается активность андрогенного рецептора (здесь ниже он может быть обозначен AR). Когда вводят антиандрогенный агент, ингибируют связывание андрогена с AR, получая в результате меньшую активность AR. Такие методы лечения очень эффективны для лечения большинства пациентов на ранней стадии болезни. Однако в течение нескольких лет случается рецидив рака. Такой рецидивный рак предстательной железы называют кастрационно-резистентным раком предстательной железы (CRPC).
[0003]
Подтверждено и сообщается (непатентные публикации 1 и 2), что причиной кастрационно-резистентного рака предстательной железы является усиление и сверхэкспрессия гена AR. В результате сверхэкспрессии AR кастрационно-резистентный рак предстательной железы демонстрирует высокую чувствительность к андрогену даже при ультранизкой концентрации, которая является результатом кастрационной обработки. То есть в результате сверхэкспрессии AR он активируется, вызывая пролиферацию раковых клеток. Подтверждено и сообщается (непатентные публикации с 3 по 5), что причиной кастрационно-резистентного рака предстательной железы также является мутация AR. В соответствии с мутацией в AR эстроген или сам антиандрогенный агент, который применяют в настоящее время, может функционировать как агонист AR в дополнение к андрогену.
[0004]
Бикалутамид представляет собой наиболее часто используемый антиандрогенный агент и демонстрирует ингибирующее действие при гормон-чувствительном раке предстательной железы как антагонист AR. Однако антиандрогенный агент, включающий бикалутамид, который применяют для антиандрогенной терапии, не является эффективным против кастрационно-резистентного рака предстательной железы. Основная причина состоит в следующем: так как AR сверхэкспрессирован при кастрационно-резистентном раке предстательной железы, AR-антагонистическая активность не полностью выражена и проявляется AR-агонистическая активность (непатентные публикации 6 и 7). Таким образом, для ингибирования сверхэкспрессированного AR при кастрационно-резистентном раке предстательной железы требуется антиандрогенный агент, обладающий более сильной AR-антагонистической активностью, чем антиандрогенный агент, применяемый в настоящее время и не обладающий AR-агонистической активностью. Кроме того, так как антиандрогенный агент также оказывает действие по снижению AR экспрессии, он может представлять собой более эффективный терапевтический агент для лечения кастрационно-резистентного рака предстательной железы.
[0005]
В прототипах описан 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин как ингибитор ванилоидного рецептора 1 (VR1) (патентные публикации с 1 по 3). В патентной публикации 1 раскрыто бициклогетероариламинное соединение, применимое для лечения боли, воспалительной гиперальгезии, гиперактивного мочевого пузыря и недержания мочи на основании ингибирования рецептора VR1. Кроме того, в патентных публикациях 2 и 3 раскрыто бициклогетероариламинное соединение, применимое, например, для лечения воспалительной боли, и описаны экспериментальные данные для термической гипералгезии. Однако соединение, имеющее цианобензол в 7 положении 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидина, не описано ни в одной из этих патентных публикаций с 1 по 3. Кроме того, отсутствуют описания, касающиеся данных по противоопухолевому эффекту, и вообще не описана AR-антагонистическая активность или активность по снижению AR экспрессии.
Список цитирования
Патентная литература
[0006]
Патентная публикация 1: WO 2006/062981
Патентная публикация 2: WO 2005/066171
Патентная публикация 3: WO 2006/118598
Непатентная литература
[0007]
Непатентная публикация 1: Koivisto P и др. «Androgen receptor gene amplification: a possible molecular mechanism for androgen deprivation therapy failure in prostate cancer», Cancer Res 57: 314-319, 1997.
Непатентная публикация 2: Gregory CW и др. «Androgen receptor stabilization in recurrent prostate cancer is associated with hypersensitivity to low androgen», Cancer Res 61: 2892-2898, 2001.
Непатентная публикация 3: Taplin ME и др. «Mutation of the androgen-receptor gene in metastatic androgen-independent prostate cancer», N Engl J Med 332: 1393-1398, 1995.
Непатентная публикация 4: Zhao XY и др. «Glucocorticoids can promote androgen-independent growth of prostate cancer cells through a mutated androgen receptor», Nat Med 6: 703-706, 2000.
Непатентная публикация 5: Tan J и др. «Dehydroepiandrosterone activates mutant androgen receptors expressed in the androgen-dependent human prostate cancer xenograft CWR22 and LNCaP cells», моль Endocrinol 11: 450-459, 1997.
Непатентная публикация 6: Charlie D Chen и др. «Molecular determinants of resistance to antiandrogen therapy», Nature Medicine 10:33-39, 2004.
Непатентная публикация 7: Takahito Hara и др. «Novel Mutations of Androgen Receptor: A Possible Mechanism of Bicalutamide Withdrawal Syndrome», Cancer Res 63: 149-153, 2003.
Сущность изобретения
Проблемы, подлежащие решению посредством данного изобретения.
[0008]
Настоящее изобретение касается нового тетрагидропиридопиримидинового соединения, которое обладает более сильной антагонистической активностью относительно AR, сверхэкспрессированных при кастрационно-резистентном раке предстательной железы, чем принятый в настоящее время антиандрогенный агент, такой как бикалутамид, не демонстрирует агонистической активности относительно AR и обладает активностью по снижению степени экспрессии AR, или его фармацевтически приемлемой соли.
Средства решения проблем.
[0009]
В результате интенсивных исследований заявители настоящего изобретения обнаружили новую группу соединений, имеющих 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин в качестве базовой структуры, группу, представленную -NHR, в положении 4 и цианобензол в положении 7. Соединения данной группы обладают антагонистической активностью, но не обладают агонистической активностью относительно AR и в дополнение к эффективности в отношении клеток, в которых экспрессируется AR, они оказывают сильное действие по ингибированию пролиферации клеток, в которых сверхэкспрессирован AR. Кроме того, соединения данной группы в дополнение к антагонистической активности относительно AR обладают активностью по снижению экспрессии AR и демонстрируют противоопухолевый эффект на модели мышей, несущих раковую опухоль при кастрационно-резистентном раке предстательной железы. Таким образом, заявители настоящего изобретения обнаружили, что соединения данной группы эффективны в качестве фармацевтического агента для лечения рака, и, следовательно, настоящее изобретение выполнено.
[0010]
Таким образом, настоящее изобретение касается следующих пунктов с [1] по [22].
[0011]
[1] Тетрагидропиридопиримидиновое соединение, представленное следующей формулой (I):
(I)
[в формуле
1-3
X обозначает атом водорода или галоген-C алкильную группу;
6-14
1
2
1
2
R обозначает C арильную группу, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R, или 5- или 6-членную гетероарильную группу, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R;
1
1-6
3-7
1-6
3-7
1-3
1-3
1-6
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, C циклоалкиламиносульфонильную группу, (3-7)-членную моноциклическую гетероциклоалкилсульфонильную группу, галоген-C алкоксикарбониламиногруппу, галоген-C алкилкарбониламиногруппу, (3-7)-членную моноциклическую гетероциклоалканкарбонильную группу, замещенную гидрокси-C алкильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу;
1-6
1-6
Ra обозначает C алкилпиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу или C алкилсульфонилпиперазинильную группу;
1-3
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
Rf обозначает галоген-C алкильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa;
1-6
1-3
1-3
Rfa обозначает C алкилпиразолильную группу, галоген-C алкилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу или галоген-C алкилоксадиазолильную группу; и
n равно целому числу от 0 до 3]
или его фармацевтически приемлемая соль.
[0012]
[2] Соединение по пункту [1] или его фармацевтически приемлемая соль, где X обозначает атом хлора, атом брома или трифторметильную группу.
[0013]
[3] Соединение по пункту [1] или [2] или его фармацевтически приемлемая соль, где n равно 0 или 1.
[0014]
[4] Соединение по любому из пунктов с [1] по [3] или его фармацевтически приемлемая соль, где R выбран из группы, включающей следующие радикалы:
[0015]
[5] Соединение по любому из пунктов с [1] по [4] или его фармацевтически приемлемая соль, где
1
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидроксиэтильную группу, гидроксиизопропильную группу, гидроксициклопропильную группу, гидроксициклобутильную группу, метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, циклопропиламиносульфонильную группу, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу, 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу, пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой или -(CH)-C(=O)-NHRf;
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, гидроксициклогексильную группу, гидроксициклопропилметильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную метилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой или этильную группу, замещенную трифторметилоксазолильной группой; и
n равно 0 или 1.
[0016]
[6] Соединение по любому из пунктов с [1] по [5] или его фармацевтически приемлемая соль, где R выбран из группы, включающей следующие радикалы:
1
(в формуле R обозначает атом водорода);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает метильную группу, замещенную Rfa, или этильную группу, замещенную Rfa,
Rfa обозначает метилпиразолильную группу или оксадиазолильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
R обозначает фенильную группу, гидроксиэтильную группу, гидроксиизопропильную группу, метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой или н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой);
(в формуле
1
2
n
R обозначает гидроксиизопропильную группу, гидроксициклопропильную группу, гидроксициклобутильную группу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, циклопропиламиносульфонильную группу, 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
R обозначает атом водорода, атом фтора или атом хлора,
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, метильную группу, замещенную Rfa, или этильную группу, замещенную Rfa;
Rfa обозначает трифторметилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу, или трифторметилоксадиазолильную группу, и
n равно 0 или 1);
(в формуле
1
2
n
R обозначает гидроксиизопропильную группу, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
R обозначает атом водорода или трифторметильную группу,
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу или этильную группу, замещенную Rfa,
Rfa обозначает оксадиазолильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает гидроксиизопропильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, гидроксициклогексильную группу, гидроксициклопропилметильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rfa обозначает гидрокси-2-метилпропильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rfa обозначает гидрокси-2-метилпропильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
R обозначает пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой; и
(в формуле
1
R обозначает пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой).
[0017]
[7] Соединение по любому из пунктов с [1] по [5] или его фармацевтически приемлемая соль, где
X обозначает атом хлора, атом брома или трифторметильную группу; и
R выбран из группы, включающей следующие радикалы:
1
1-4
3-5
1-4
3-5
1-3
1-3
1-4
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, C циклоалкиламиносульфонильную группу, 7-членную моноциклическую гетероциклоалкилсульфонильную группу, фтор-C алкоксикарбониламиногруппу, фтор-C алкилкарбониламиногруппу, 6-членную моноциклическую гетероциклоалканкарбонильную группу, замещенную гидрокси-C алкильной группой или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
R обозначает атом водорода, атом фтора, атом хлора или трифторметильную группу;
1-4
1-4
Ra обозначает C алкилпиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу или C алкилсульфонилпиперазинильную группу;
1-3
1-4
3-5
3-5
1-4
1-4
Rf обозначает фтор-C алкильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa;
1-4
1-3
1-3
Rfa обозначает C алкилпиразолильную группу, фтор-C алкилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу или фтор-C алкилоксадиазолильную группу; и
n равно 0 или 1.
[0018]
[8] Соединение по пункту [7] или его фармацевтически приемлемая соль, где
X обозначает атом хлора, атом брома или трифторметильную группу; и
R выбран из группы, включающей следующие радикалы:
1
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидроксиэтильную группу, гидроксиизопропильную группу, гидроксициклопропильную группу, гидроксициклобутильную группу, метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, циклопропиламиносульфонильную группу, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу, 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу, пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
R обозначает атом водорода, атом фтора, атом хлора или трифторметильную группу;
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, гидроксициклогексильную группу, гидроксициклопропилметильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную метилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную трифторметильной группой; и
n равно 0 или 1.
[0019]
[9] Соединение по пункту [8] или его фармацевтически приемлемая соль, где
X обозначает атом хлора или трифторметильную группу; и
R выбран из группы, включающей следующие радикалы:
1
2
n
R обозначает атом водорода, гидроксиизопропильную группу, изопропоксигруппу, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу, пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
R обозначает атом водорода или атом фтора;
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную трифторметилоксадиазолильной группой; и
n равно 0.
[0020]
[10] Соединение по пункту [1] или его фармацевтически приемлемая соль, которая выбрана из группы, включающей следующие соединения с (1) по (19):
(1) 4-(4-((1,2,4-тиадиазол-5-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(2) 4-(4-((4-изопропоксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(3) 4-(4-((6-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(4) 2-хлор-4-(4-((6-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридазин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил;
(5) 4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(6) 2-хлор-4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил;
(7) 4-(4-((6-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридазин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(8) 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид;
(9) 4-(4-((6-изопропоксипиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(10) 4-(4-((6-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(11) 4-(4-((5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(12) 4-(4-((4-(3-(4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил)пропокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(13) 4-(4-((5-((1,4-оксазепан-4-ил)сульфонил)тиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
(14) 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиридазин-3-карбоксамид;
(15) 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиримидин-5-карбоксамид;
(16) 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-((4-(трифторметил)тиазол-2-ил)метил)никотинамид;
(17) (R)-N-(1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотинамид;
(18) (R)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)никотинамид и
(19) 4-(4-((5-(4-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)оксазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил.
[0021]
[11] Антиандрогенный агент, содержащий в качестве активного ингредиента тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемую соль.
[0022]
[12] Противоопухолевый агент, содержащий в качестве активного ингредиента тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемую соль.
[0023]
[13] Фармацевтический агент, содержащий в качестве активного ингредиента тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемую соль.
[0024]
[14] Фармацевтическая композиция, содержащая тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
[0025]
[15] Применение тетрагидропиридопиримидинового соединения по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемой соли для получения антиандрогенного агента.
[0026]
[16] Применение тетрагидропиридопиримидинового соединения по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого агента.
[0027]
[17] Применение тетрагидропиридопиримидинового соединения по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемой соли для получения фармацевтического агента.
[0028]
[18] Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемая соль для применения с целью ингибирования андрогенной активности.
[0029]
[19] Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемая соль для применения с целью лечения опухоли.
[0030]
[20] Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве фармацевтического агента.
[0031]
[21] Способ ингибирования андрогенной активности, включающий введение эффективного количества тетрагидропиридопиримидинового соединения по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту.
[0032]
[22] Способ лечения опухоли, включающий введение эффективного количества тетрагидропиридопиримидинового соединения по любому из пунктов с [1] по [10] или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту.
Эффекты изобретения
[0033]
Новое тетрагидропиридопиримидиновое соединение по настоящему изобретению или его соль демонстрирует антагонистическую активность относительно андрогенного рецептора (AR) и является эффективным для лечения нарушения, связанного с активацией AR. Примеры нарушений, связанных с активацией AR, включают опухоль, метастатическое заболевание костей, простатическую гиперплазию, вульгарные угри, себорею, гипертрихоз, андрогенную алопецию, преждевременное половое созревание и синдром вирилизации. Примеры опухолей включают рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак мочевого пузыря, рак матки, рак поджелудочной железы и гепатоцеллюлярный рак.
Описание вариантов осуществления
[0034]
Как здесь описано, примеры «атома галогена» включают атом фтора, атом хлора, атом брома и атом йода.
[0035]
1-6
1-4
1-3
1-6
Как здесь описано, термин «C алкильная группа» определяет линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, и и их примеры включают метильную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, 2-метилпропильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, н-пентильную группу, изопропенильную группу, трет-пентильную группу, неопентильную группу, н-гексильную группу и тексильную группу. Кроме того, как здесь описано, термины «C алкильная группа» и «C алкильная группа» каждый обозначает среди вышеупомянутых «C алкильных групп» алкильную группу, имеющую от 1 до 4 атомов углерода или от 1 до 3 атомов углерода.
[0036]
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
Как здесь описано, термин «галоген-C алкильная группа» обозначает упоминаемую выше C алкильную группу, которая замещена 1-7 атомами галогена, которые описаны выше. Примеры «галоген-C алкильной группы» включают фтор-C алкильную группу и хлор-C алкильную группу, например, фторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу, трихлорметильную группу, 2-фторэтильную группу, 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, 2,2,2-трихлорэтильную группу, монофтор-н-пропильную группу, перфтор-н-пропильную группу и перфторизопропильную группу.
[0037]
6-14
Как здесь описано, термин «C арильная группа» обозначает арильную группу, имеющую от 6 до 14 атомов углерода, и их примеры включают фенильную группу, нафтильную группу, антраценильную группу, фенантрильную группу и флуоренильную группу.
[0038]
Как здесь описано, термин «гетероарильная группа» обозначает моноциклическую или полициклическую группу, имеющую ароматичность с 1-4 гетероатомами, выбранными из группы, включающей атомы кислорода, азота и серы. Примеры гетероарильной группы включают фурильную группу, тиенильную группу, пирролильную группу, имидазолильную группу, пиразолильную группу, диазолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу, оксазолильную группу, оксадиазолильную группу, триазинильную группу, тиазолильную группу, тиадиазолилную группу, изоксазолильную группу, изотиазолильную группу, пиридинильную группу, пиразинильную группу, пиримидинильную группу, пиридазинильную группу, индолильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, бензо[b]тиенильную группу, бензимидазолильную группу, бензотиазолильную группу и бензоксазолильную группу.
[0039]
1-6
1-6
1-6
Как здесь описано, термин «гидрокси-C алкильная группа» обозначает упоминаемую выше C алкильную группу, которая замещена 1-3 гидроксильными группами. Примеры «гидрокси-C алкильной группы» включают гидроксиметильную группу, 1-гидроксиэтильную группу, 1,2-дигидроксиэтильную группу, 1-гидроксипропильную группу, 1,2-дигидроксипропильную группу, 1,2,3-тригидроксипропильную группу, 1-гидроксибутильную группу, 2-гидроксипропан-2-ильную группу и 2-гидрокси-2-метилпропильную группу.
[0040]
3-7
Как здесь описано, термин «C циклоалкильная группа» обозначает циклическую алкильную группу, имеющую от 3 до 7 атомов углерода, и ее примеры включают циклопропильную группу, циклобутильную группу, циклопентильную группу, циклогексильную группу и циклогептильную группу.
[0041]
3-7
3-7
3-7
Как здесь описано, термин «гидрокси-C циклоалкильная группа» обозначает упоминаемую выше C циклоалкильную группу, которая замещена 1-3 гидроксильными группами. Примеры «гидрокси-C циклоалкильной группы» включают 1-гидроксициклопропильную группу, 2-гидроксициклопропильную группу, 1,2-дигидроксициклопропильную группу, 1,2,3-тригидроксициклопропильную группу, 1-гидроксициклобутильную группу, 1-гидроксициклопентильную группу, 1-гидроксициклогексильную группу и 4-гидроксициклогексильную группу.
[0042]
1-6
1-4
1-3
1-6
Как здесь описано, термин «C алкоксигруппа» обозначает линейную или разветвленную алкоксигруппу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, и ее примеры включают метоксигруппу, этоксигруппу, н-пропоксигруппу, изопропоксигруппу, н-бутоксигруппу, 2-метилпропоксигруппу (изобутоксигруппу), втор-бутоксигруппу, трет-бутоксигруппу, н-пентилоксигруппу, изопентилоксигруппу, трет-пентилоксигруппу, неопентилоксигруппу, н-гексилоксигруппу и тексилоксигруппу. Кроме того, как здесь описано, термины «C алкоксигруппа» и «C алкоксигруппа» каждый обозначает среди вышеупомянутых «C алкоксигрупп» алкоксигруппу, имеющую от 1 до 4 атомов углерода или от 1 до 3 атомов углерода.
[0043]
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
Как здесь описано, термин «галоген-C алкоксигруппа» обозначает упоминаемую выше C алкоксигруппу, которая замещена 1-7 атомами галогенов, которые описаны выше. Примеры «галоген-C алкоксигруппы» включают фтор-C алкоксигруппу и хлор-C алкоксигруппу, например, фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу, трифторметоксигруппу, трихлорметоксигруппу, 2-фторэтоксигруппу, 2,2-дифторэтоксигруппу, 2,2,2-трифторэтоксигруппу, 2,2,2-трихлорэтоксигруппу, монофтор-н-пропоксигруппу, перфтор-н-пропоксигруппу и перфторизопропоксигруппу.
[0044]
3-7
3-7
3-7
Как здесь описано, термин «C циклоалкиламиносульфонильная группа» обозначает сульфонильную группу, имеющую аминогруппу, замещенную одной C циклоалкильной группой, описанной выше. Примеры «C циклоалкиламиносульфонильной группы» включают циклопропиламиносульфонильную группу, циклобутиламиносульфонильную группу и циклопентиламиносульфонильную группу.
[0045]
Как здесь описано, термин «гетероциклоалкильная группа» обозначает (3-7)-членную моноциклическую алкильную группу, которая вместо атомов углерода имеет от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей атом кислорода, азота и серы. Примеры такой группы включают азиридинильную группу, азетидинильную группу, пирролидинильную группу, оксазолидинильную группу, тиазолидинильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидротиофенильную группу, пиперидинильную группу, пиперазинильную группу, морфолиногруппу, тиоморфолиногруппу, оксазиналильную группу, тиазиналильную группу, азепанильную группу, диазепанильную группу и оксазепанильную группу.
[0046]
Как здесь описано, термин «гетероциклоалкилсульфонильная группа» обозначает сульфонильную группу, замещенную упоминаемой выше гетероциклоалкильной группой. Примеры «гетероциклоалкилсульфонильной группы» включают пиперидин-1-илсульфонильную группу, морфолиносульфонильную группу, 1,4-тиазепам-4-илсульфонильную группу и 1,4-оксазепанилсульфонильную группу.
[0047]
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
Как здесь описано, термин «галоген-C алкоксикарбониламиногруппа» обозначает аминогруппу, которая замещена одной галоген-C алкоксикарбонильной группой, и термин «галоген-C алкоксикарбонильная группа» обозначает карбонильную группу, которая замещена упоминаемой выше галоген-C алкоксигруппой. Примеры «галоген-C алкоксикарбониламиногруппы» включают трифторметоксикарбониламиногруппу, трихлорметоксикарбониламиногруппу, 2-фторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2-дифторэтоксикарбониламиногруппу и 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу.
[0048]
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
Как здесь описано, термин «галоген-C алкилкарбониламиногруппа» обозначает аминогруппу, которая замещена одной галоген-C алкилкарбонильной группой, и термин «галоген-C алкилкарбонильная группа» обозначает карбонильную группу, которая замещена упоминаемой выше галоген-C алкильной группой. Примеры «галоген-C алкилкарбониламиногруппы» включают трифторметилкарбониламиногруппу, трихлорметилкарбониламиногруппу, 2-фторэтилкарбониламиногруппу, 2,2-дифторэтилкарбониламиногруппу и 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу.
[0049]
Как здесь описано, термин «гетероциклоалканкарбонильная группа» обозначает карбонильную группу, которая замещена упоминаемой выше гетероциклоалкильной группой, и ее примеры включают 4-пиперидин-1-карбонильную группу, 4-пиперазин-1-карбонильную группу, азиридин-1-карбонильную группу и морфолин-4-карбонильнгую группу.
[0050]
1-6
1-6
1-6
Как здесь описано, термин «C алкилпиразолильная группа» обозначает пиразолильную группу, которая замещена одной C алкильной группой, описанной выше, и примеры «C алкилпиразолильной группы» включают 1-метил-1H-пиразол-5-ильную группу, 1-этил-1H-пиразол-5-ильную группу, 1-пропил-1H-пиразол-5-ильную группу, 1-метил-1H-пиразол-3-ильную группу и 1-метил-1H-пиразол-4-ильную группу.
[0051]
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
Как здесь описано, термин «C алкилсульфонилпиперазинильная группа» обозначает пиперазинильную группу, которая замещена одной C алкилсульфонильной группой, и термин «C алкилсульфонильная группа» обозначает сульфонильную группу, замещенную упоминаемой выше C алкильной группой. Примеры «C алкилсульфонилпиперазинильной группы» включают 4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ильную группу, 4-(этилсульфонил)пиперазин-1-ильную группу, 4-(пропилсульфонил)пиперазин-1-ильную группу, 4-(изопропилсульфонил)пиперазин-1-ильную группу, 4-(метилсульфонил)пиперазин-2-ильную группу и 4-(метилсульфонил)пиперазин-3-ильную группу.
[0052]
3-7
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
Как здесь описано, термин «гидрокси-C циклоалкил-C алкильная группа» обозначает упоминаемую выше C алкильную группу, которая замещена одной гидрокси-C циклоалкильной группой, описанной выше, и примеры «гидрокси-C циклоалкил-C алкильной группы» включают (1-гидроксициклопропил)метильную группу, (1-гидроксициклобутил)метильную группу, 2-(1-гидроксициклопропил)этильную группу, (1,2-дигидроксициклопропил)метильную группу и (1,2,3-тригидроксициклопропил)метильную группу.
[0053]
1-3
1-3
Как здесь описано, термин «галоген-C алкилтиазолильная группа» обозначает тиазолильную группу, которая замещена одной галоген-C алкильной группой, описанной выше, и их примеры включают 4-(трифторметил)тиазол-2-ильную группу, 5-(трифторметил)тиазол-2-ильную группу, 4-(трихлорметил)тиазол-2-ильную группу и 4-(2,2,2-трифторэтил)тиазол-2-ильную группу.
[0054]
1-3
1-3
Как здесь описано, термин «галоген-C алкилоксадиазолильная группа» обозначает оксадиазолильную группу, которая замещена одной галоген-C алкильной группой, описанной выше, и ее примеры включают 5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ильную группу, 5-(2,2,2-трифторэтил)-1,3,4-оксадиазол-2-ильную группу, 5-(2-фторэтил)-1,3,4-оксадиазол-2-ильную группу и 4-(трифторметил)-1,2,3-оксазол-5-ильную группу.
[0055]
Как здесь описано, термин «фармацевтически приемлемая соль» может обозначать любое соединение в виде фармацевтически приемлемой соли, и ее примеры включают минеральную соль, такую как соль соляной кислоты, соль бромистоводородной кислоты, соль серной кислоты, соль азотной кислоты и соль фосфорной кислоты, и соль органической кислоты, например, соль уксусной кислоты, соль пропионовой кислоты, соль винной кислоты, соль фумаровой кислоты, соль малеиновой кислоты, соль янтарной кислоты, соль яблочной кислоты, соль лимонной кислоты, соль метансульфоновой кислоты, соль пара-толуолсульфоновой кислоты и соль трифторуксусной кислоты.
[0056]
Как здесь описано, выражение «группа может быть замещена» замещающей группой означает состояние, в котором группа является замещенной замещающей группой или группа является незамещенной.
[0057]
Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по настоящему изобретению или его соль характеризуется тем, что оно имеет 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидиновый каркас, в положении 4 каркаса присутствует группа, представленная формулой -NHR (R определен ниже), и в положении 7 присутствует цианобензол. В положении 4 присутствует цианогруппа, и в положении 3 цианобензола присутствует специфическая группа X (X определен ниже). Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по настоящему изобретению или его соль обладает антагонистической активностью относительно андрогенного рецептора (AR) и демонстрирует противоопухолевый эффект. Между тем, соединение, имеющее вместо 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидинового каркаса, 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-d]пиримидиновый или 5,6,7,8-тетрагидро[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразиновый каркас, не демонстрирует ни AR-антагонистической активности, ни противоопухолевого эффекта. Кроме того, соединение, имеющее вместо цианобензола, в котором присутствует цианогруппа в положении 4 и замещающая группа X присутствует в положении 3, другой цианобензол, не демонстрирует указанных выше эффектов.
[0058]
В упоминаемых выше патентных публикациях с 1 по 3 раскрыто соединение, имеющее 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидиновый каркас. Однако ни в одной из патентных публикаций с 1 по 3 не раскрыто соединение, имеющее по положению 4 группу, представленную формулой -NHR (R определен ниже), и цианобензол по положению 7 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидина. Кроме того, в патентных публикациях с 1 по 3 вообще не раскрывается применимость 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидинового соединения в качестве противоопухолевого агента и не предполагается эффект соединения в отношении AR.
[0059]
Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по настоящему изобретению представлено следующей общей формулой (I).
[0060]
[0061]
1-3
1-3
1-3
В общей формуле (I) X обозначает атом водорода или галоген-C алкильную группу. Примеры «атома галогена», обозначенного X, включают упоминаемый выше атом галогена и предпочтительно представляют собой атом хлора или атом брома. Примеры «галоген-C алкильной группы, обозначенной X, включают упоминаемую выше галоген-C алкильную группу и предпочтительно трифторметильную группу. В общей формуле (I) X предпочтительно представляет собой атом хлора, атом брома или трифторметильную группу и более предпочтительно атом хлора или трифторметильную группу.
[0062]
6-14
1
2
1
2
В общей формуле (I) R обозначает C арильную группу, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R, или 5- или 6-членную гетероарильную группу, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R.
[0063]
6-14
6-14
6-14
6-14
1
2
1
2
Что касается R, C арильная группа в «C арильной группе, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R» обозначает упоминаемую выше C арильную группу и предпочтительно представляет собой фенильную группу. Количество заместителей R на «C арильной группе» составляет 1, и количество R равно 0 или 1.
[0064]
1
2
1
2
Что касается R, гетероарильная группа в «5- или 6-членной гетероарильной группе, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R», обозначает упоминаемую выше арильную группу. Предпочтительно «5- или 6-членная гетероарильная группа» представляет собой пиридинильную группу, пиразинильную группу, пиримидинильную группу, пиридазинильную группу, триазинильную группу, тиазолильную группу, тиадиазолильную группу, оксазолильную группу или оксадиазолильную группу. Более предпочтительны пиридинильная группа, пиримидинильная группа, пиридазинильная группа, тиазолильная группа, оксазолильная группа или тиадиазолильная группа. Еще более предпочтительны пиридинильная группа или пиридазинильная группа. Количество заместителей R на «5- или 6-членной гетероарильной группе» составляет 1, и количество R равно 0 или 1.
[0065]
В общей формуле (I) R предпочтительно представляет собой радикал, выбранный из группы, включающей следующие радикалы.
[0066]
Более предпочтительно, если R представляет собой группу, выбранную из группы, включающей следующие радикалы.
[0067]
Еще более предпочтительно, если R представляет собой радикал, выбранный из группы, включающей следующие радикалы.
[0068]
1
1-6
3-7
1-6
3-7
1-3
1-3
1-6
2
n
Что касается R в общей формуле (I), R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, C циклоалкиламиносульфонильную группу, (3-7)-членную моноциклическую гетероциклоалкилсульфонильную группу, галоген-C алкоксикарбониламиногруппу, галоген-C алкилкарбониламиногруппу, (3-7)-членную моноциклическую гетероциклоалканкарбонильную группу, замещенную гидрокси-C алкильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf.
[0069]
1-6
1-6
1-4
1-4
1-6
1
«Гидрокси-C алкильная группа», обозначенная R, представляет собой упоминаемую выше гидрокси-C алкильную группу, предпочтительно упоминаемую выше C алкильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-C алкильную группу), и более предпочтительно этильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидроксиэтильную группу), или изопропильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-изопропильную группу). Число гидроксильных групп предпочтительно равно 1. Более предпочтительно, если «гидрокси-C алкильная группа» представляет собой 1-гидроксиэтильную группу или 2-гидроксипропан-2-ильную группу.
[0070]
3-7
3-7
3-5
3-7
1
«Гидрокси-C циклоалкильная группа», обозначенная R, представляет собой упоминаемую выше гидрокси-C циклоалкильную группу, предпочтительно циклическую алкильную группу с 3-5 атомами углерода, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-C циклоалкильную группу), более предпочтительно циклопропильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидроксициклопропильную группу), или циклобутильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидроксициклобутильную группу). Число гидроксильных групп предпочтительно равно 1. Более предпочтительно, если «гидрокси-C циклоалкильная группа» представляет собой 1-гидроксициклопропильную группу или 1-гидроксициклобутильную группу.
[0071]
1-6
1-4
1
«C алкоксигруппа, которая может быть замещенной Ra», обозначенная R, представляет собой упоминаемую выше C1-6 алкоксигруппу, которая замещена 0-3 радикалами Ra, и предпочтительно представляет собой упоминаемую выше C алкоксигруппу, которая замещена 0-3 радикалами Ra. Количество Ra предпочтительно равно 0 или 1.
[0072]
1-6
1-6
1-6
1-6
1-4
1-4
1-6
1-6
1-4
1-4
Ra обозначает C алкилпиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу или C алкилсульфонилпиперазинильную группу. «C алкилпиразолильная группа», обозначенная Ra, представляет собой пиразолильную группу, которая замещена одной C алкильной группой, описанной выше, предпочтительно пиразолильную группу, которая замещена одной C алкильной группой, описанной выше (C алкилпиразолильную группу), более предпочтительно пиразолильную группу, которая замещена одной метильной группой (метилпиразолильную группу), и еще предпочтительнее 1-метил-1H-пиразол-5-ильную группу. «C алкилсульфонилпиперазинильная группа», обозначенная Ra, представляет собой пиперазинильную группу, которая замещена одной сульфонильной группой, замещенной описанной выше C алкильной группой, предпочтительно пиперазинильную группу, которая замещена одной сульфонильной группой, замещенной описаной выше C алкильной группой (C алкилсульфонилпиперазинильную группу), и более предпочтительно пиперазинильную группу, которая замещена одной сульфонильной группой, замещенной метильной группой (метилсульфонилпиперазинильную группу).
[0073]
1-6
«C алкоксигруппа, которая может быть замещенной Ra», предпочтительно представляет собой метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, или н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, и более предпочтительно изопропоксигруппу, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, или н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой.
[0074]
3-7
3-7
3-5
1
«C циклоалкиламиносульфонильная группа», обозначенная R, представляет собой упоминаемую выше C циклоалкиламиносульфонильную группу и предпочтительно представляет собой сульфонильную группу, которая замещена аминогруппой, замещенной одной циклической алкильной группой с 3-5 атомами углерода (C циклоалкиламиносульфонильную группу), и более предпочтительно циклопропиламиносульфонильную группу.
[0075]
1
«3-7-членная моноциклическая гетероциклоалкилсульфонильная группа», обозначенная R, представляет собой сульфонильную группу, замещенную упоминаемой выше гетероциклоалкильной группой, и предпочтительно представляет собой сульфонильную группу, замещенную 7-членной моноциклической гетероциклоалкильной группой, и более предпочтительно 1,4-оксазепанилсульфонильную группу.
[0076]
1-3
1-3
1-3
1-3
1
«Галоген-C алкоксикарбониламиногруппа», обозначенная R, представляет собой упоминаемую выше галоген-C алкоксикарбониламиногруппу и предпочтительно представляет собой аминогруппу, которая замещена одной карбонильной группой, замещеной упоминаемой выше фтор-C алкоксигруппой (фтор-C алкоксикарбониламиногруппу), и более предпочтительно 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу.
[0077]
1-3
1-3
1-3
1-3
1
«Галоген-C алкилкарбониламиногруппа», обозначенная R, представляет собой упоминаемую выше галоген-C алкилкарбониламиногруппу и предпочтительно представляет собой аминогруппу, которая замещена одной карбонильной группой, замещеной упоминаемой выше фтор-C алкильной группой (фтор-C алкилкарбониламиногруппу), и более предпочтительно 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу.
[0078]
1-6
1-6
1-4
1
«(3-7)-членная моноциклическая гетероциклоалканкарбонильная группа, замещенная гидрокси-C алкильной группой», обозначенная R, представляет собой карбонильную группу, которая замещена (3-7)-членным моноциклическим гетероциклоалканом, замещенным одной описанной выше гидрокси-C алкильной группой, и предпочтительно представляет собой 6-членную моноциклическую гетероциклоалканкарбонильную группу, замещенную одной описанной выше гидрокси-C алкильной группой, более предпочтительно пиперидинкарбонильную группу, замещенную одной описанной выше гидрокси-изопропильной группой, и еще предпочтительнее 4-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидинкарбонильную группу.
[0079]
1
2
n
1-3
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
Что касается R, в группе, обозначенной «-(CH)-C(=O)-NHRf», Rf представляет собой галоген-C алкильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa. n равно целому числу от 0 до 3, предпочтительно 0 или 1 и более предпочтительно 0.
[0080]
1-3
1-3
1-3
«Галоген-C алкильная группа», обозначенная Rf, представляет собой упоминаемую выше галоген-C алкильную группу и предпочтительно представляет собой упоминаемую выше фтор-C алкильную группу, более предпочтительно 2,2,2-трифторэтильную группу или 2,2-дифторэтильную группу и еще предпочтительнее 2,2,2-трифторэтильную группу.
[0081]
1-6
1-6
1-4
1-4
«Гидрокси-C алкильная группа», обозначенная Rf, представляет собой упоминаемую выше гидрокси-C алкильную группу и предпочтительно представляет собой C алкильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-C алкильную группу), более предпочтительно 2-метилпропильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-2-метилпропильную группу), и еще предпочтительнее 2-гидрокси-2-метилпропильную группу.
[0082]
3-7
3-7
5-7
«Гидрокси-C циклоалкильная группа», обозначенная Rf, представляет собой упоминаемую выше гидрокси-C циклоалкильную группу и предпочтительно представляет собой циклическую алкильную группу, имеющую от 5 до 7 атомов углерода, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-C циклоалкильную группу), более предпочтительно циклогексильную группу, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидроксициклогексильную группу), и еще предпочтительнее 4-гидроксициклогексильную группу.
[0083]
3-7
1-6
3-7
1-6
1-4
3-5
3-5
1-4
«Гидрокси-C циклоалкил-C алкильная группа», обозначенная Rf, представляет собой упоминаемую выше гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу и предпочтительно упоминаемую выше C алкильную группу, которая замещена одной циклической алкильной группой, имеющей от 3 до 5 атомов углерода, замещенную 1-3 гидроксильными группами (гидрокси-C циклоалкильную группу (гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу)), более предпочтительно метильную группу, которая замещена одной циклопропильной группой, замещенной 1-3 гидроксильными группами (гидроксициклопропильную группу (гидроксициклопропилметильную группу)), и более предпочтительно (1-гидроксициклопропил)метильную группу.
[0084]
1-6
1-6
1-4
«C алкильная группа, представленная Rfa», обозначенная Rf, представляет собой упоминаемую выше C алкильную группу, замещенную 1-3 радикалами Rfa, и предпочтительно упоминаемую выше C алкильную группу, которая замещена 1-3 радикалами Rfa. Количество Rfa предпочтительно равно 1.
[0085]
1-6
1-3
1-3
1-6
1-6
1-4
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
1-3
Rfa обозначает C алкилпиразолильную группу, галоген-C алкилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу или галоген-C алкилоксадиазолильную группу. «C алкилпиразолильная группа», обозначенная Rfa, представляет собой упоминаемую выше C алкилпиразолильную группу и предпочтительно представляет собой C алкилпиразолильную группу, более предпочтительно метилпиразолильную группу и еще предпочтительнее 1-метил-1H-пиразол-5-ильную группу. «Галоген-C алкилтиазолильная группа», обозначенная Rfa, представляет собой упоминаемую выше галоген-C алкилтиазолильную группу и предпочтительно представляет собой тиазолильную группу, замещенную одной описанной выше фтор-C алкильной группой (фтор-C алкилтиазолильную группу), более предпочтительно тиазолильную группу, замещенную одной трифторметильной группой (трифторметилтиазолильную группу), и еще предпочтительнее 4-(трифторметил)тиазол-2-ильную группу. «Галоген-C алкилоксазолильная группа», обозначенная Rfa, представляет собой упоминаемую выше галоген-C алкилоксазолильную группу и предпочтительно представляет собой оксадиазолильную группу, замещенную одной описанной выше фтор-C алкильной группой (фтор-C алкилоксазолильную группу), более предпочтительно оксадиазолильную группу, замещенную одной трифторметильной группой (трифторметилоксазолильную группу) и еще предпочтительнее 5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ильную группу.
[0086]
1-6
1-4
1-4
1-3
1-3
«C алкильная группа, замещенная Rfa», предпочтительно представляет собой упоминаемую выше C алкильную группу, которая замещена любой одной из следующих групп: описанной выше C алкилпиразолильной группой, описанной выше фтор-C алкилтиазолильной группой, оксадиазолильной группой и описанной выше фтор-C алкилоксадиазолильной группой. Более предпочтительно, если она представляет собой метильную группу, замещенную одной описанной выше трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную одной описанной выше метилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную одной описанной выше оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную одной описанной выше трифторметилоксадиазолильной группой. Еще более предпочтительно, если она представляет собой 2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этильную группу, (4-(трифторметил)тиазол-2-ил)метильную группу, 1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этильную группу или 1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этильную группу. Наиболее предпочтительно, если она представляет собой (4-(трифторметил)тиазол-2-ил)метильную группу.
[0087]
Что касается общей формулы (I), предпочтительны варианты, в которых:
1
1-4
3-5
1-4
3-5
1-3
1-3
1-4
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, C циклоалкиламиносульфонильную группу, 7-членную моноциклическую гетероциклоалкилсульфонильную группу, фтор-C алкоксикарбониламиногруппу, фтор-C алкилкарбониламиногруппу, 6-членную моноциклическую гетероциклоалканкарбонильную группу, замещенную гидрокси-C алкильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
1-4
1-4
Ra обозначает C алкилпиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу или C алкилсульфонилпиперазинильную группу;
1-3
1-4
5-7
3-5
1-4
1-4
Rf обозначает галоген-C алкильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa;
1-4
1-3
1-3
Rfa обозначает C алкилпиразолильную группу, фтор-C алкилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу или фтор-C алкилоксадиазолильную группу; и
n равно 0 или 1.
[0088]
Что касается общей формулы (I), более предпочтительны варианты в которых:
1
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидроксиэтильную группу, гидроксиизопропильную группу, гидроксициклопропильную группу, гидроксициклобутильную группу, метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, циклопропиламиносульфонильную группу, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу, 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу, пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, гидроксициклогексильную группу, гидроксициклопропилметильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную метилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную трифторметилоксазолильной группой; и
n равно 0 или 1.
[0089]
2
2
2
1-3
1-3
1-3
В общей формуле (I) R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу. Примеры «атома галогена» включают упоминаемые выше атомы галогенов и предпочтительно представляют собой атом фтора или атом хлора. Примеры «галоген-C алкильной группы» включают упоминаемую выше галоген-C алкильную группу и предпочтительно трифторметильную группу. R предпочтительно представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора или трифторметильную группу. Более предпочтительно, если R обозначает атом водорода или атом фтора.
[0090]
6-14
1
2
1
2
В общей формуле (I) примеры C арильной группы, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R, и 5- или 6-членной гетероарильной группы, которая является замещенной R и одновременно может быть замещенной R, включают следующие группы:
1
(в формуле R обозначает атом водорода);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
1-6
Rf обозначает C алкильную группу, замещенную Rfa,
1-6
Rfa обозначает C алкилпиразолильную группу или оксадиазолильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
1-4
3-7
1-6
R обозначает фенильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу или C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу, и
1-6
1-6
Ra обозначает C алкилпиразолильную группу или C алкилсульфонилпиперазинильную группу);
(в формуле
1
1-6
3-7
1-6
3-7
1-3
1-3
2
n
R обозначает упоминаемую выше гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, C циклоалкиламиносульфонильную группу, галоген-C алкоксикарбониламиногруппу, галоген-C алкилкарбониламиногруппу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
R обозначает атом водорода или атом галогена,
Ra обозначает триазолильную группу или тетразолильную группу,
1-3
1-6
Rf обозначает галоген-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa,
1-3
1-3
Rfa обозначает галоген-C алкилтиадиазолильную группу, оксадиазолильную группу или галоген-C алкилоксадиазолильную группу, и
n равно 0 или 1);
(в формуле
1
1-6
2
n
R обозначает упоминаемую выше гидрокси-C алкильную группу, (3-7)-членную моноциклическую гетероциклоалкилсульфонильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу,
1-3
1-6
Rf обозначает галоген-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa,
Rfa обозначает оксадиазолильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
1-6
2
n
R обозначает упоминаемую выше гидрокси-C алкильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу,
1-3
1-6
3-7
3-7
1-6
Rf обозначает галоген-C алкильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу или гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает упоминаемую выше группу -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу,
1-6
Rfa обозначает гидрокси-C алкильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает упоминаемый выше -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу,
1-6
Rfa обозначает гидрокси-C алкильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает упоминаемую выше группу -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу,
1-3
Rf обозначает галоген-C алкильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
1-6
R обозначает (3-7)-членную моноциклическую циклогетероалканкарбонильную группу, которая замещена упоминаемой выше гидрокси-C алкильной группой,
2
1-3
R обозначает атом водорода, атом галогена или галоген-C алкильную группу); и
1
1-6
(в формуле R обозначает (3-7)-членную моноциклическую циклогетероалканкарбонильную группу, которая замещена упоминаемой выше гидрокси-C алкильной группой).
[0091]
1
2
Что касается общей формулы (I), ниже описана более предпочтительная комбинация R, Rи R:
1
(в формуле R обозначает атом водорода);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает метильную группу, замещенную Rfa, или этильную группу, замещенную Rfa,
Rfa обозначает метилпиразолильную группу или оксадиазолильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
R обозначает фенильную группу, гидроксиэтильную группу, гидроксиизопропильную группу, метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой, или н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой);
(в формуле
1
2
n
R обозначает гидроксиизопропильную группу, гидроксициклопропильную группу, гидроксициклобутильную группу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, циклопропиламиносульфонильную группу, 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
R обозначает атом водорода, атом фтора или атом хлора,
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, метильную группу, замещенную Rfa, или этильную группу, замещенную Rfa;
Rfa обозначает трифторметилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу или трифторметилоксадиазолильную группу, и
n равно 0 или 1);
(в формуле
1
2
n
R обозначает гидроксиизопропильную группу, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
R обозначает атом водорода или трифторметильную группу,
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу или этильную группу, замещенную Rfa,
Rfa обозначает оксадиазолильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает гидроксиизопропильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, гидроксициклогексильную группу или гидроксициклопропилметильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rfa обозначает гидрокси-2-метилпропильную группу и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rfa обозначает гидрокси-2-метилпропильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
R обозначает пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой); или
(в формуле
1
R обозначает пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой).
[0092]
1
2
Что касается общей формулы (I), ниже описана еще более предпочтительная комбинация R, R и R:
1
(в формуле R обозначает атом водорода);
1
(в формуле R обозначает изопропоксигруппу или н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой);
(в формуле
1
2
n
R обозначает упоминаемую выше гидрокси-изопропильную группу, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой или -(CH)-C(=O)-NHRf,
2
R обозначает атом водорода или атом фтора,
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную трифторметилоксадиазолильной группой, и
n равно 0);
1
(в формуле R обозначает изопропоксигруппу или 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой);
1
(в формуле R обозначает 1,4-оксазепанилсульфонильную группу);
(в формуле
1
2
n
R обозначает упоминаемую выше гидрокси-изопропильную группу или -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rf обозначает упоминаемую выше гидрокси-2-метилпропильную группу, и
n равно 0);
(в формуле
1
2
n
R обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf,
Rfa обозначает гидрокси-2-метилпропильную группу, и
n равно 0); или
1
(в формуле R обозначает пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой).
[0093]
Согласно предпочтительному варианту осуществления в общей формуле (I)
X обозначает атом хлора, атом брома или трифторметильную группу;
R обозначает радикал, выбранный из группы, включающей следующие радикалы:
1
1-4
3-5
1-4
3-5
1-3
1-3
1-4
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, C циклоалкиламиносульфонильную группу, 7-членную моноциклическую гетероциклоалкилсульфонильную группу, фтор-C алкоксикарбониламиногруппу, фтор-C алкилкарбониламиногруппу, 6-членную моноциклическую гетероциклоалканкарбонильную группу, замещенную гидрокси-C алкильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
R обозначает атом водорода, атом фтора, атом хлора или трифторметильную группу;
1-4
1-4
Ra обозначает C алкилпиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу или C алкилсульфонилпиперазинильную группу;
1-3
1-4
3-5
3-5
1-4
1-4
Rf обозначает фтор-C алкильную группу, гидрокси-C алкильную группу, гидрокси-C циклоалкильную группу, гидрокси-C циклоалкил-C алкильную группу или C алкильную группу, замещенную Rfa;
1-4
1-3
1-3
Rfa обозначает C алкилпиразолильную группу, фтор-C алкилтиазолильную группу, оксадиазолильную группу или фтор-C алкилоксадиазолильную группу; и
n равно 0 или 1.
[0094]
Согласно более предпочтительному варианту осуществления в общей формуле (I)
X обозначает атом хлора, атом брома или трифторметильную группу;
R обозначает радикал, выбранный из группы, включающей следующие радикалы:
1
2
n
R обозначает атом водорода, фенильную группу, гидроксиэтильную группу, гидроксиизопропильную группу, гидроксициклопропильную группу, гидроксициклобутильную группу, метоксигруппу, изопропоксигруппу, этоксигруппу, замещенную метилпиразолильной группой, этоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную триазолильной группой, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, циклопропиламиносульфонильную группу, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу, 2,2,2-трифторэтоксикарбониламиногруппу, 2,2,2-трифторэтилкарбониламиногруппу, пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
R обозначает атом водорода, атом фтора, атом хлора или трифторметильную группу;
Rf обозначает 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, гидроксициклогексильную группу, гидроксициклопропилметильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную метилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную трифторметильной группой; и
n равно 0 или 1.
[0095]
Согласно еще более предпочтительному варианту осуществления в общей формуле (I)
X обозначает атом хлора или трифторметильную группу;
R обозначает радикал, выбранный из группы, включающей следующие радикалы:
1
2
n
R обозначает атом водорода, гидроксиизопропильную группу, изопропоксигруппу, 2-метилпропоксигруппу, замещенную тетразолильной группой, н-пропоксигруппу, замещенную метилсульфонилпиперазинильной группой, 1,4-оксазепанилсульфонильную группу, пиперидинкарбонильную группу, замещенную гидроксиизопропильной группой, или -(CH)-C(=O)-NHRf;
2
R обозначает атом водорода или атом фтора;
Rf обозначает 2,2,2-трифторэтильную группу, гидрокси-2-метилпропильную группу, метильную группу, замещенную трифторметилтиазолильной группой, этильную группу, замещенную оксадиазолильной группой, или этильную группу, замещенную трифторметилоксадиазолильной группой; и
n равно 0.
[0096]
Конкретные примеры тетрагидропиридопиримидинового соединения, которые являются предпочтительными в настоящем изобретении, включают соединения, описанные в следующих пунктах с (1) по (19):
(1) 4-(4-((1,2,4-тиадиазол-5-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 1);
(2) 4-(4-((4-изопропоксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 2);
(3) 4-(4-((6-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 5);
(4) 2-хлор-4-(4-((6-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридазин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил (пример 6);
(5) 4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 7);
(6) 2-хлор-4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил (пример 9);
(7) 4-(4-((6-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридазин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 10);
(8) 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид (пример 11);
(9) 4-(4-((6-изопропоксипиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 13);
(10) 4-(4-((6-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 16);
(11) 4-(4-((5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 17);
(12) 4-(4-((4-(3-(4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил)пропокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 18);
(13) 4-(4-((5-((1,4-оксазепан-4-ил)сульфонил)тиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 20);
(14) 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиридазин-3-карбоксамид (пример 32);
(15) 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиримидин-5-карбоксамид (пример 34);
(16) 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-((4-(трифторметил)тиазол-2-ил)метил)никотинамид (пример 36);
(17) (R)-N-(1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотинамид (пример 38);
(18) (R)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)никотинамид (пример 40);
(19) 4-(4-((5-(4-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)оксазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил (пример 42).
[0097]
1
2,
Тетрагидропиридопиримидиновое соединение по настоящему изобретению или его соль можно получить различными способами. Соединение, представленное общей формулой (I), можно получить широко известным способом. Соединение, представленное общей формулой (I), можно получить, например, по приведенным далее реакционным схемам с 1 по 6. На реакционных схемах с 1 по 6 X, R, R, RRf и Ra являются такими, как определено выше.
[0098]
Реакционная схема 1
[0099]
Настоящая реакционная схема представляет собой реакционную схему для синтеза соединения общей формулы (I) из соединения формулы (II).
[0100]
(Стадия 1)
Эта стадия представляет собой взаимодействие с целью удаления защитной группы P с соединения формулы (II), показанного выше на реакционной схеме 1. Что касается способа удаления защиты, его можно осуществить широко известным способом, например, способом, описанным в работе Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, John Wiley & Sons (1981), или способом, аналогичным этому. Примеры защитной группы включают Boc группу, бензилоксикарбонильную группу и бензильную группу. Если в качестве защитной группы используют бензильную группу, примеры катализатора гидрогенолиза включают гидроксид палладия, палладий на угле, платину, никель Ренея, оксид платины и родий-алюминийоксид. Предпочтителен палладий на угле. Используемое количество реагента относительно 1 экв. соединения формулы (II) составляет от 0,001 до 10 экв. и предпочтительно от 0,05 до 2 экв. Температура для реакции по удалению защиты составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от 40 до 80°C. Соединение формулы (III), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией, или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0101]
(Стадия 2)
1
1
Эта стадия представляет собой стадию получения соединения, обозначенного формулой (V), по реакции нуклеофильного замещения между амином, представленным формулой (III), и ароматическим циклом, замещенным уходящей группой L, представленной формулой (IV). Примеры уходящей группы L включают в дополнение к атому галогена, такому как атом фтора и хлора, метансульфонилоксигруппу, пара-толуолсульфонилоксигруппу и трифторметилсульфонилоксигруппу. Растворитель, используемый на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают толуол, ацетонитрил, бензол, диоксан, ТГФ, ДМСО, ДМФА, пиридин и их смесь. Предпочтителен ДМСО. Количество ароматического цикла, представленного формулой (IV), который используют для этого взаимодействия, имеет избыток 0,1 моль и предпочтительно от 0,5 до 3 моль относительно 1 моля амина, представленного формулой (III). Для этого взаимодействия можно использовать основание или не использовать. Если используют основание, примеры основания включают пиридин, DBU, карбонат калия, карбонат цезия и третичный амин. Предпочтителен триэтиламин. Температура для реакции нуклеофильного замещения составляет от 0 до 200°C и предпочтительно от 0 до 50°C. Соединение формулы (V), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией, или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0102]
(Стадия 3)
2
2
1
Эта стадия представляет собой стадию преобразования свободной гидроксильной группы соединения формулы (V) в уходящую группу L. Примеры уходящей группы L включают те же группы, что и для L, и предпочтительным является атом галогена. Реакцию преобразования выполняют без растворителя или в присутствии растворителя. Примеры растворителя, который можно использовать для этой стадии не имеют особых ограничений, пока не вызывают каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ДМФА, NMP, DMA, толуол, дихлоэтан и ацетонитрил. Примеры основания, используемого для взаимодействия, включают триэтиламин, диизопропилэтиламин, N,N-диметиланилин и гидрокарбонат натрия. Количество используемого для взаимодействия агента галогенирования (например, оксихлорида фосфора, пентахлорида фосфора и трибромида фосфора) относительно 1 моля соединения формулы (V) составляет от 0,5 до 20 моль и предпочтительно от 5 до 15 моль. Время реакции преобразования составляет от 0,1 до 48 час. и предпочтительно от 0,5 до 24 час. Температура взаимодействия составляет от 0 до 200°C и предпочтительно от 50 до 120°C. Соединение формулы (VI), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0103]
(Стадия 4)
Эта стадия представляет собой стадию получения соединения общей формулы (I) посредством связывания соединения формулы (VI) с соединением формулы (VII). Взаимодействие на этой стадии выполняют, используя металлический катализатор и фосфиновый лиганд в подходящем растворителе в присутствии различных оснований. В качестве металлического катализатора можно использовать комплекс металла с различными лигандами, и его примеры включают тетракистрифенилфосфинпалладий(0), хлорбис(трифенилфосфин)палладий(II), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) и ацетат палладия(II). Примеры фосфинового лиганда включают dppf, Xantphos и XPhos. Примеры основания, используемого для взаимодействия на этой стадии, включают карбонат калия, карбонат цезия и трет-бутилат натрия. Растворитель, который можно использовать для этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают диоксан, этилацетат и толуол. Используемое для взаимодействия количество металлического катализатора относительно 1 моля соединения формулы (VI) составляет от 0,005 до 10 моль и предпочтительно от 0,01 до 1 моль. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 48 час. и предпочтительно от 0,5 до 24 час. Температура взаимодействия составляет от 0 до 200°C и предпочтительно от 50 до 120°C. Соединение формулы (I), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0104]
Согласно другому способу для этой стадии, соединение, представленное общей формулой (I), можно получить, используя только основание и не используя металлический катализатор и фосфиновый лиганд. Примеры основания включают карбонат калия. Количество основания относительно 1 моля соединения формулы (VI) составляет от 0,005 до 10 моль и предпочтительно от 1,0 до 5,0 моль. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ацетонитрил и диоксан. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 48 час. и предпочтительно от 0,5 до 24 час. Температура взаимодействия составляет от 0 до 200°C и предпочтительно от 50 до 120°C. Соединение общей формулы (I), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0105]
В качестве другого способа для этой стадии можно проводить связывание соединения формулы (VI) и соединения формулы (VII) при СВЧ-облучении. В этом случае упоминаемое выше основание можно использовать в качестве основания для этой стадии; однако можно не использовать основания. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывают каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ацетонитрил. Время взаимодействия составляет от 0,01 до 10 час. и предпочтительно от 0,1 до 1 час. Температура взаимодействия составляет от 0 до 200°C и предпочтительно от 100 до 200°C. Соединение общей формулы (I), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0106]
В качестве другого способа для этой стадии можно выполнять связывание соединения формулы (VI) с соединением формулы (VII), используя кислоту вместо металлического катализатора и фосфинового лиганда. Количество соединения формулы (VII) относительно 1 моля соединения формулы (VI) имеет избыток 0,1 моль и предпочтительно от 1 до 10 моль. Примеры используемой кислоты включают паратолуолсульфоновую кислоту, камфорсульфоновую кислоту и соляную кислоту. Количество кислоты относительно 1 моля соединения формулы (VI) имеет избыток 0,005 моль и предпочтительно от 0,1 до 10 моль. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают трет-бутанол, 2-пропанол, ТГФ и диоксан. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 48 час. и предпочтительно от 0,1 до 24 час. Температура взаимодействия составляет от 0 до 200°C и предпочтительно от 50 до 180°C. Соединение общей формулы (I), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0107]
Реакционная схема 2
[0108]
1
2
n
1-6
Настоящую реакционную схему можно применять, если заместитель R на R общей формулы (I) обозначает -(CH)-C(=O)-NHRf или (3-7)-членную моноциклическую азотсодержащую гетероциклоалкильную группу, замещенную гидрокси-C алкильную группу.
[0109]
(Стадия 5)
6-14
2
Эта стадия представляет собой стадию получения соединения, обозначенного формулой (VIII), гидролизом сложноэфирной группы соединения, представленного формулой (I'), общеизвестным способом. В формуле (I') Ar обозначает C арильную группу или 5- или 6-членную гетероарильную группу, n равно целому числу от 0 до 3 и R такой, как определено выше. Соединение формулы (I') можно получить согласно способу по упоминаемой выше реакционной схеме 1. Что касается способа удаления защитной группы P', его можно осуществить широко известным способом, например, способом, описанным в работе Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, John Wiley & Sons (1981), или способом, аналогичным этому. Примеры защитной группы P' включают метильную группу и этильную группу. В этом случае предпочтительным является удаление защиты в основных условиях, и примеры основания включают неорганическое основание, такое как гидроксид натрия и гидроксид калия. Количество, используемого основания относительно 1 моля соединения формулы (I') составляет от 1 до 100 моль. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают воду, метанол, этанол, диэтиловый эфир и ТГФ. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 100 час. и предпочтительно от 0,5 до 24 час. Температура взаимодействия составляет от 0 до 120°C и предпочтительно от 0 до 90°C. Соединение формулы (VIII), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, сушкой при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением, экстракцией растворителем и хроматографией, или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0110]
(Стадия 6)
1
2
1-6
Эта стадия представляет собой стадию синтеза соединения, обозначенного общей формулой (X), конденсацией соединения, представленного формулой (VIII), с амином, представленным формулой (IX). Группа, обозначенная -N(Rf)(Rf) в формуле (IX), представляет собой -NHRf или (3-7)-членную моноциклическую азотсодержащую гетероциклоалкильную группу, замещенную гидрокси-C алкильной группой. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ДМФА, толуол, дихлорметан, ацетонитрил, ТГФ и ДМСО. Предпочтителен ДМФА или метанол. Примеры конденсирующего агента включают DCC, WSC/1-гидроксибензотриазол (здесь ниже HOBt), DMT-MM и HATU. Предпочтительным конденсирующим агентом является WSC/HOBt, DMT-MM или HATU. Количество эквивалентов конденсирующего агента относительно 1 экв. соединения формулы (VIII) составляет от 0,2 до 5,0 экв. и предпочтительно от 1,0 до 1,5 экв. Кроме того, если необходимо, можно использовать основание, например, DIPEA. Температура взаимодействия составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от 10 до 40°C. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 24 час. и предпочтительно от 0,5 до 16 час. Соединение формулы (X), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, сушкой при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением, экстракцией растворителем и хроматографией.
[0111]
Реакционная схема 3
[0112]
1
1-3
Настоящую реакционную схему можно применять, если заместитель R на R общей формулы (I) обозначает галоген-C алкилкарбониламиногруппу.
[0113]
(Стадия 7)
Эта стадия представляет реакцию получения соединения, обозначенного формулой (XI), общеизвестным контактным восстановлением нитрогруппы соединения, представленного формулой (Iʹʹ). Соединение формулы (Iʹʹ) можно получить способом по указанной выше реакционной схеме 1. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, трет-бутиловый спирт, диметоксиэтан, диметиловй эфир диэтиленгликоля, диизопропиловый эфир, диэтиловый эфир, ТГФ, диоксан, этилацетат и бутилацетат. Предпочтителен метанол или этанол. Примеры катализатора, используемого на этой стадии, включают палладий на угле, гидроксид палладия на угле, платину, никель Ренея, оксид платины и родий-алюминийоксид. Предпочтителен палладий на угле. Количество эквивалентов катализатора относительно 1 экв. соединения формулы (Iʹʹ) составляет от 0,001 до 10 экв. и предпочтительно от 0,01 до 5,0 экв. Температура реакции восстановления составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от 20 до 60°C. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 72 час. и предпочтительно от 6 до 72 час. Соединение формулы (XI), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией, или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0114]
(Стадия 8)
2
1-3
Эта стадия представляет собой амидирование соединения, обозначенного общей формулой (XI), с использованием карбоновой кислоты, представленной формулой (XII). Ree обозначает галоген-C алкильную группу. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ДМФА, толуол, дихлорметан, ацетонитрил, ТГФ и ДМСО. Предпочтителен ДМФА или метанол. Примеры конденсирующего агента, который используют на этой стадии, включают DCC, WSC/HOBt, DMT-MM и HATU. Предпочтительным конденсирующим агентом является WSC/HOBt, DMT-MM или HATU. Количество эквивалентов конденсирующего агента относительно 1 экв. соединения формулы (XI) составляет от 0,2 до 5,0 экв. и предпочтительно от 1,0 до 1,5 экв. Кроме того, если необходимо, можно использовать основание, например, DIPEA. Температура реакции амидирования составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от 10 до 40°C. Время взаимодействия составляет от 0,1 до 24 час. и предпочтительно от 0,5 до 16 час. Соединение формулы (XIII), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0115]
Реакционная схема 4
[0116]
1
2
2
1-3
Настоящую реакционную схему можно применять, если заместитель R на R общей формулы (I) обозначает галоген-C алкоксикарбониламиногруппу. Ree имеет такое же значение, как упоминаемый выше Ree.
[0117]
(Стадия 9)
Эта стадия представляет собой стадию получения соединения, обозначенного формулой (XV), из соединения, представленного формулой (VIII'). Эта стадия представляет собой реакцию преобразования Курциуса между соединением, представленным формулой (VIII'), и спиртом, представленным формулой (XIV). Примеры основания, которое используют для этой стадии, включают триэтиламин и N,N-диизопропиламин. Используемое количество основания относительно 1 экв. соединения формулы (VIII') составляет, например, от 1 до 10 экв. Примеры реагента азидирования включают азид натрия и DPPA. Используемое количество реагента азидирования относительно 1 экв. соединения формулы (VIII') составляет от 1 до 5 экв. Используемое количество спирта, представленного формулой (XIV) относительно 1 экв. соединения формулы (VIII') обычно составляет от 1 до 10 экв. и предпочтительно от 2 до 5 экв. Примеры растворителя, используемого на этой стадии, включают дихлорметан, хлороформ, ТГФ, толуол и диоксан. Температура взаимодействия составляет от 0°C до 200°C. Время взаимодействия составляет от 0 до 24 час. Если необходимо, взаимодействие можно проводить при СВЧ-облучении. Соединение формулы (XV), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0118]
Реакционная схема 5
[0119]
1
3
1-6
1-6
Настоящую реакционную схему можно применять, если заместитель R на R общей формулы (I) обозначает C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra. -OR обозначает C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra.
[0120]
(Стадия 10)
Эта стадия представляет собой взаимодействие с целью удаления защитной группы Pʹʹ формулы (Iʹʹʹ). Соединение формулы (Iʹʹʹ) можно получить согласно способу по упоминаемой выше реакционной схеме 1. Что касается способа удаления защиты, его можно осуществить широко известным способом, например, способом, описанным в работе Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, John Wiley & Sons (1981), или способом, аналогичным этому. Примеры защитной группы Pʹʹ включают бензилоксиметильную группу (BOM), метоксиэтоксиметильную группу (MEM), трет-бутильную группу и бензильную группу. Если в качестве защитной группы Pʹʹ используют бензильную группу, примеры катализатора гидрогенолиза включают гидроксид палладия, палладий на угле, платину, никель Ренея, оксид платины и родий-алюминийоксид. Предпочтительным катализатором является палладий на угле. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, трет-бутиловый спирт, диметоксиэтан, диметиловй эфир диэтиленгликоля, диизопропиловый эфир, диэтиловый эфир, ТГФ, диоксан, этилацетат и бутилацетат. Предпочтителен метанол или этанол. Используемое количество катализатора относительно 1 экв. соединения формулы (Iʹʹʹ) составляет от 0,001 до 10 экв. и предпочтительно от 0,05 до 2 экв. Температура взаимодействия составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от 40 до 80°C. Соединение формулы (XVI), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, переосаждением, кристаллизацией и хроматографией, или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0121]
(Стадия 11)
Эта стадия касается способа получения соединения формулы (XVIII) из соединения формулы (XVI). Эту стадию можно выполнять известным способом, то есть так называемой реакцией Мицунобу (Synthesis, 1981, 1-28). Количество соединения, представленного формулой (XVII), которое используют на этой стадии, относительно 1 экв. соединения формулы (XVI) составляет от 0,5 до 5 экв. и предпочтительно от 1 до 3 экв. Примеры азосоединения, используемого в этой реакции, включают диэтилазодикарбоксилат, диизопропилазодикарбоксилат и 1,1'-азобис(N,N-диметилформамид). Количество используемого азосоединения относительно 1 экв. соединения формулы (XVI) составляет от 1 до 5 экв. и предпочтительно от 1,1 до 3 экв. Примеры используемого фосфинового соединения включают трифенилфосфин и трибутилфосфин. Количество фосфинового соединения, которое используют, относительно 1 экв. соединения формулы (XVI) составляет от 1 до 5 экв. и предпочтительно от 1,1 до 3 экв. Растворитель, который можно использовать на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ТГФ, диоксан, диэтиловый эфир, хлороформ, дихлорметан, толуол, ДМФА и диметилсульфоксид. Эти растворители можно использовать в виде смеси, где они смешаны при подходящем соотношении. Температура взаимодействия имеет значение от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником. Время взаимодействия составляет от 1 до 4 час. Соединение формулы (XVIII), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, кристаллизацией, переосаждением и хроматографией.
[0122]
Кроме того, взаимодействие на этой стадии можно проводить, используя такой реагент как (цианометилен)триметилфосфоран и (цианометилен)трибутилфосфоран (реагент Цунода). Количество реагента, который используют, относительно 1 экв. соединения формулы (XVI) составляет от 1 до 5 экв. и предпочтительно от 1,1 до 3 экв. Примеры растворителя, который используют для взаимодействия, включают упоминаемый выше растворитель для этой стадии. Температура взаимодействия имеет значение от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником. Время взаимодействия составляет от 1 до 48 час. Соединение формулы (XVIII), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, переосаждением, экстракцией растворителем, кристаллизацией и хроматографией.
[0123]
Реакционная схема 6
[0124]
1
7
1-6
1-6
1-6
1-6
Настоящую реакционную схему можно применять, если заместитель R на R общей формулы (I) представляет собой C алкоксигруппу, которая может быть замещенной Ra, где Ra обозначает C алкилсульфонилпиперазинильную группу. Здесь н-пропильная группа является примером C алкоксигруппы. R обозначает C алкильную группу.
[0125]
(Стадия 12)
Эта стадия представляет собой взаимодействие с целью удаления защитной группы Pʹʹʹ с соединения формулы (XVIII'). Что касается способа удаления защиты, его можно осуществить широко известным способом, например, способом, описанным в работе Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, John Wiley & Sons (1981), или способом, аналогичным этому. Примеры защитной группы Pʹʹʹ включают трет-бутоксикарбонильную группу, пара-метоксикарбобензоксигруппу и тритильную группу. Предпочтительна трет-бутоксикарбонильная группа.
[0126]
Если защитная группа Pʹʹʹ представляет собой трет-бутоксикарбонильную группу, удаление защиты можно осуществить, используя кислоту. Растворитель, используемый для взаимодействия на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают хлороформ, дихлорметан, диоксан, ТГФ, этилацетат, метанол и воду. Кроме того, примеры используемой на этой стадии кислоты включают минеральную кислоту, например, соляную кислоту и серную кислоту, и органическую кислоту, например, трифторуксусную кислоту и паратолуолсульфоновую кислоту. Температура взаимодействия составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от комнатной температуры до 60°C. Время взаимодействия составляет от 1 до 48 час., предпочтительно от 1 до 6 час. Соединение формулы (XIX), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, переосаждением, экстракцией растворителем, кристаллизацией и хроматографией, или можно отправить его на следующую стадию без выделения и очистки.
[0127]
(Стадия 13)
Эта стадия касается способа получения соединения, представленного формулой (XXI), с использованием соединения, представленного формулой (XIX). Взаимодействие на этой стадии можно проводить, используя сульфонилхлорид, представленный формулой (XX), в апротонном растворителе в присутствии основания. Количество соединения, представленного формулой (XX), которое используют, относительно 1 экв. соединения формулы (XIX) составляет от 0,5 до 5 экв. и предпочтительно от 1 до 3 экв. Примеры основания включают триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин, DMAP и DBU. Предпочтительным основанием является триэтиламин. Растворитель, который можно использовать на этой стадии, не имеет особых ограничений, пока не вызывает каких-либо проблем при взаимодействии. Примеры растворителя включают ТГФ, диоксан, диэтиловый эфир, хлороформ, дихлорметан, толуол и ДМФА. Предпочтителен дихлорметан. Температура взаимодействия составляет от 0 до 100°C и предпочтительно от 0 до 50°C. Время взаимодействия составляет от 0,5 до 48 час. и предпочтительно от 1 до 6 час. Соединение формулы (XXI), полученное на этой стадии, можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, концентрированием при пониженном давлении, переосаждением, экстракцией растворителем, кристаллизацией и хроматографией.
[0128]
Тетрагидропиридопиримидиновое соединение, представленное общей формулой (I) (здесь ниже, оно также может быть обозначено как «соединение формулы (I) по настоящему изобретению»), которое получают описанным выше способом, может иметь оптический изомер или геометрический изомер в зависимости от типа замещающей группы, и любой из них также включен в соединение формулы (I) по настоящему изобретению. Изомеры можно разделять или использовать в виде смеси изомеров. Кроме того, для тетрагидропиридопиримидинового соединения, представленного общей формулой (I), присутствуют таутомеры, показанные ниже, и любой из этих таутомеров также включен в соединение формулы (I) по настоящему изобретению.
[0129]
Кроме того, соединение формулы (I) по настоящему изобретению также включает сольват, представленный гидратом, некристаллический (аморфный) или кристаллический полиморф.
[0130]
Соединение формулы (I) по настоящему изобретению может образовывать соль при использовании общеизвестного способа. Что касается типа соли соединения формулы (I) по настоящему изобретению, допустимой является любая из упоминаемых выше фармацевтически приемлемых солей.
[0131]
Соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его соль можно выделить и очистить известными способами разделения и очистки, например, концентрированием, экстракцией растворителем, фильтрованием, перекристаллизацией или различными хроматографическими методами.
[0132]
Если соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль используют в качестве фармацевтического агента, то можно устанавливать различные формы приема в зависимости от цели профилактики или лечения. Примеры форм введения включают формы для перорального и парентерального введения, например, пероральный препарат, препарат для инъекций, суппозиторий, препарат для наружного применения и пластырь. Предпочтительно используют пероральный препарат. Каждую из этих форм можно получить способом приготовления, который общеизвестен специалистам в данной области.
[0133]
Фармацевтический агент может представлять собой фармацевтическую композицию, содержащую эффективное количество соединения формулы (I) по настоящему изобретению или фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель. Что касается фармацевтически приемлемого носителя, используют различные органические или неорганическое вещества-носители, которые обычно применяются в качестве материала для приготовления препарата, например, для твердого препарата, можно упомянуть носитель, лубрикант, связующее и разрыхлитель, а для жидкого препарата можно упомянуть растворитель, агент, способствующий растворению, суспендирующий агент, агент, обеспечивающий изотоничность, буферный агент, стабилизатор, агент для регулировки pH, ПАВ, смачивающий агент, консервант и болеутоляющий агент. Кроме того, если необходимо, фармацевтический агент может содержать добавки к препаратам, такие как консервант, антиоксидант, краситель, подсластитель и вкусовой агент.
[0134]
Фармацевтически приемлемый носитель или добавки к препаратам могут быть такими, которые обычно применяются в соответствующей области. Примеры носителя включают лактозу, белый сахар, хлорид натрия, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу и кремниевую кислоту; примеры связующего включают воду, этанол, пропанол, сладкий сироп, раствор глюкозы, раствор крахмала, раствор желатина, раствор карбоксиметилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилкрахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция и поливинилпирролидон; примеры разрыхлителя включают сухой крахмал, альгинат натрия, агаровый порошок, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, моноглицерид стеариновой кислоты и лактозу; примеры лубриканта включают очищенный тальк, соль стеариновой кислоты, буру и полиэтиленгликоль; примеры красителя включают оксид титана и оксид железа; и примеры вкусового агента включают белый сахар, апельсиновую корку, лимонную кислоту и винную кислоту.
[0135]
Для получения твердого препарата для перорального приема к соединению формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли добавляют носитель и, если необходимо, связующее, разрыхлитель, лубрикант, каситель, вкусовой агент или подобное и готовят в виде таблетки, Таблетки с покрытием, гранулы, порошка или капсулы, например, согласно обычно применяемому способу.
[0136]
Для получения жидкого препарата для перорального приема к соединению формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли добавляют вкусовой агент, буферный агент, стабилизатор, корригирующее вещество или подобное и готовят, например, в виде жидкого препарата для внутреннего применения, сиропа или эликсира. В этом случае вкусовой агент может быть таким же, как описанный выше; примеры буферного агента включают цитрат натрия; и примеры стабилизатора включают трагакант, гуммиарабик и желатин.
[0137]
Для получения препарата для инъекций к соединению формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли добавляют агент для регулировки pH, буферный агент, стабилизатор, агент, обеспечивающий изотоничность, местный анестетик или подобное и готовят в виде препарата для внутримышечных или внутривенных инъекций согласно обычно применяемому способу. В этом случае примеры агента для регулировки pH и буферного агента включают цитрат натрия, ацетат натрия и фосфат натрия; примеры стабилизатора включают пиросульфит натрия, EDTA, тиогликолевую кислоту и тиомолочную кислоту; примеры местного анестетика включают прокаингидрохлорид и лидокаингидрохлорид; и примеры агента, обеспечивающего изотоничность, включают хлорид натрия и глюкозу.
[0138]
Для получения суппозиториев, к соединению формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли добавляют известный носитель для препаратов, например, полиэтиленгликоль, ланолин, масло какао и триглицерид жирной кислоты и, если необходимо, ПАВ, например, Tween (зарегистрированная торговая марка) и получают препарат обычным способом.
[0139]
Для получения препарата для наружного применения, такого как мазь, крем, гель или паста, к соединению формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли добавляют, если необходимо, обычно применяемое основание, стабилизатор, смачивающий агент или консервант и выполняют смешивание и приготовление препарата обычным способом. Примеры основания включают жидкий парафин, белый вазелин, белый пчелиный воск, октилдодециловый спирт и парафин. Примеры консерванта включают метилпараоксибензоат, этилпараоксибензоат и пропилпараоксибензоат.
[0140]
Для получения пластыря наносят, например, мазь, крем, гель или пасту на обычную подложку обычным способом. Примеры подложки включают тканый или нетканый материал, состоящий из хлопка, штапельного волокна или химического волокна, или пленку, или вспененный лист мягкого винилхлорида, полиэтилена и полиуретана.
[0141]
Количество соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которое требуется смешать в каждой стандартной форме для введения, описанной выше, варьируется в зависимости от симптома, массы, возраста или пола субъекта или, например, типа препарата. Что касается количества соединения формулы (I) по настоящему изобретению, оно предпочтительно составляет от 0,05 до 1000 мг для перорального препарата, от 0,01 до 500 мг для препарата для инъекций и от 1 до 1000 мг для суппозитория. Кроме того, дневная доза указанной выше формы введения варьируется в зависимости от вида, симптома, массы, возраста или пола субъекта. Что касается количества соединения формулы (I) по настоящему изобретению, оно предпочтительно составляет от 0,05 до 5000 мг и предпочтительно от 0,1 до 1000 мг в день для взрослого, и предпочтительно его вводят один раз в день или примерно 2-4 раза в день поделенными дозами. Что касается соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, можно использовать любой тип соединения или соли отдельно или можно использовать множество типов в комбинации.
[0142]
Как здесь описано, термин «антиандрогенная активность» обозначает активность по подавлению андрогенной активности, и соединение, композицию или фармацевтический агент, обладающий антиандрогенной активностью, обозначают как антиандрогенный агент. Соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль действует как антагонист относительно андрогенного рецептора (AR) и подавляет реакцию AR на андроген, демонстрируя, таким образом, антиандрогенную активность. Кроме того, так как соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его соль также обладает активностью по снижению экспрессии AR, то оно может проявлять основанную на этом антиандрогенную активность. Обладая антиандрогенной активностью, соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль демонстрирует эффект подавления инцидента или прогрессирования различных нарушений, образования опухоли, прогрессирования или рецидива прогрессирующей или возвратной опухоли.
[0143]
Таким образом, согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение касается антиандрогенного агента, который содержит в качестве активного ингредиента соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль. Также настоящее изобретение касается применения соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для получения антиандрогенного агента. Также настоящее изобретение касается применения соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в качестве антиандрогенного агента. Также настоящее изобретение касается соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве антиандрогенного агента.
[0144]
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение касается фармацевтического агента, который содержит в качестве активного ингредиента соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль. Также настоящее изобретение касается применения соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для получения фармацевтического агента. Также настоящее изобретение касается применения соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в качестве фармацевтического агента. Также настоящее изобретение касается соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве фармацевтического агента.
[0145]
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение касается фармацевтической композиции, которая содержит соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
[0146]
Согласно предпочтительному варианту осуществления, фармацевтический агент или фармацевтическую композицию применяют в качестве антиандрогенного агента. Кроме того, согласно предпочтительному варианту осуществления, фармацевтический агент или фармацевтическая композиция представляет собой терапевтический агент для лечения нарушения, связанного с активацией AR. Кроме того, согласно предпочтительному варианту осуществления, фармацевтический агент или фармацевтическая композиция представляет собой противоопухолевый агент.
[0147]
Между тем, согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение касается способа подавления андрогенной активности, включающего введение субъекту эффективного количества соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Также настоящее изобретение касается способа лечения нарушения, связанного с активацией AR, включающего введение субъекту эффективного количества соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Также настоящее изобретение касается способа лечения опухоли, включающего введение субъекту эффективного количества соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли.
[0148]
Что касается способа подавления андрогенной активности, способа лечения нарушения, связанного с активацией AR, и способа лечения опухоли по настоящему изобретению, примеры субъекта включают нуждающегося в данном способе человека или животное, отличное от человека. Примеры животного, отличного от человека, включают приматов, таких как обезьяна и шимпанзе, и млекопитающих, таких как мышь, крыса, хомяк, морская свинка, собака, кошка, корова, лошадь, овца, коза и свинья; однако список ими не ограничен.
[0149]
Эффективное количество или схему введения соединения формулы (I) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, вводимой указанному выше субъекту, может соответствующим образом определить специалист в данной области в зависимости, например, от вида, симптомов, массы, возраста и пола субъекта. Например, если субъект является взрослым человеком, то обычно вводят от 0,05 до 5000 мг и предпочтительно от 0,1 до 1000 мг в день в переводе на количество соединения формулы (I) по настоящему изобретению и предпочтительно вводят один раз в день или примерно 2-4 раза в день поделенными дозами.
[0150]
Примеры нарушения, связанного с активацией AR, включают опухоль, метастатическое заболевание костей, простатическую гиперплазию, вульгарные угри, себорею, гипертрихоз, андрогенную алопецию, преждевременное половое созревание и синдром вирилизации. Примеры опухоли включают рак предстательной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак мочевого пузыря, рак матки, рак поджелудочной железы и гепатоцеллюлярный рак. Предпочтительным является рак предстательной железы. При этом опухоль также включает резистентную, возвратную или метастатическую опухоль. Таким образом, конкретные примеры рака предстательной железы включают в дополнение к обыкновенному раку предстательной железы, кастрационно-резистентный рак предстательной железы (CRPC), гормонорезистентный рак предстательной железы (HRPC), PSA рецидивный рак предстательной железы, таксан-резистентный рак предстательной железы и радиационно-резистентный рак предстательной железы. Предпочтительным является кастрационно-резистентный рак предстательной железы.
[0151]
Примеры общепринятого антиандрогенного агента включают бикалутамид. Однако так как они обладают агонистической активностью относительно AR, эффект не сохраняется в течение длительного периода времени, и через 2-5 лет после реакции наблюдают возвратный рак. Кроме того, считают, что при CRPC причиной рецидива является сверхэкспрессия AR. Соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его соль обладает сильной антагонистической активностью в отношении AR, но вследствие этого не обладает агонистической активностью и демонстрирует сильную AR-антагонистическую активность в отношении клеток, в которых сверхэкспрессирован AR. Кроме того, обладая активностью по снижению AR-экспрессии в дополнение к антагонистической активности относительно AR, соединение формулы (I) по настоящему изобретению или его соль является эффективным в отношении рака, имеющего сверхэкспрессированный AR, такого как CRPC.
Примеры
[0152]
Здесь ниже, настоящее изобретение описано конкретно при помощи примеров и примеров тестирования. Однако они описаны исключительно ради иллюстрации, область настоящего изобретения не ограничена ими.
[0153]
<Пример получения>
Для следующих ниже примеров различные используемые реагенты являются коммерчески доступными продуктами, пока конкретно не указано иное. Для колоночной хроматографии на силикагеле используют колонку Purif-Pack (зарегистрированная торговая марка) SI производства MORITEX Corporation, предварительно набитую силикагелем, KP-Sil (зарегистрированная торговая марка) производства Biotage или колонку HP-Sil (зарегистрированная торговая марка) производства Biotage, предварительно набитую силикагелем. Для основной колоночной хроматографии на силикагеле используют колонку Purif-Pack (зарегистрированная торговая марка) NH производства MORITEX Corporation или колонку KP-NH (зарегистрированная торговая марка) производства Biotage, предварительно набитую силикагелем.
[0154]
Препаративную ВЭЖХ хроматографию на колонке с обращенной фазой выполняют при следующих условиях.
Колонка: YMC-Actus Triart C18 производства YMC, 30×50 мм, 5 мкм.
УФ детектирование: 254 нм.
Скорость потока в колонке: 40 мл/мин.
Подвижная фаза: вода/ацетонитрил (0,1% муравьиная кислота).
Вводимый объем: 1,0 мл.
Градиент вода/ацетонитрил 10%→60% (7 мин.)
[0155]
1
1
Для H-ЯМР спектральных измерений используют спектрометр AL400 (400 МГц; JEOL Ltd. (JEOL)), Mercury 400 (400 МГц; Agilent Technologies, Inc.) или спектрометр Inova 400 (400 МГц; Agilent Technologies, Inc.), оснащенный датчиком OMNMR (Protasis). Для получения H-ЯМР спектра выполняют измерения с использованием ТМС (тетраметилсилана) в качестве внутреннего стандарта и химический сдвиг представляют в виде значения δ (м.д.). Относящееся к химическому сдвигу число протонов, картину поглощения и константы взаимодействия (J значение) описаны в круглых скобках. Что касается картины поглощения, используют следующие обозначения: с=синглет, д=дублет, т=триплет, кв=квартет, септ=септет, дд=дублет дублетов, дт=дублет триплетов, дкв=дублет квартетов, м=мультиплет, ш.с=широкий синглет.
[0156]
Для получения масс-спектра используют масс-спектрометр низкого разрешения (МС низкого разрешения) и выполняют измерения методом ионизации с электрораспылением (здесь ниже ESI).
[0157]
Что касается структурной формулы соединений, используют следующие обозначения: Me=метил, Et=этил, tBu=трет-бутил, Ph=фенил, Bn=бензил, Ac=ацетил, Boc=трет-бутоксикарбонил, TFA=трифторуксусная кислота, MsOH=метансульфоновая кислота.
[0158]
Что касается растворителя и реагента, можно использовать следующие сокращения:
ДМСО=диметилсульфоксид;
ДМФА=N,N-диметилформамид;
ТГФ=тетрагидрофуран;
Dba=дибензилиденацетон;
Dppf=1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен;
XantPhos=4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен;
2
BocO=ди-трет-бутилдикарбонат;
DMAP=4-диметиламинопиридин;
TFA=трифторуксусная кислота;
DIPEA=диизопропилэтиламин;
DMT-MM=4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолинийхлорид;
HATU=O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфат;
HOBt=1-гидроксибензотриазол;
WSC=EDCI=1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид;
DBU=1,8-диазабицикло[5,4,0]ундецен;
NMP=N-метил-2-пирролидон;
DMA=диметилацетамид;
DCC=N,N'-дициклогексилкарбодиимид;
DPPA=дифенилфосфорилазид;
LDA=литийдиизопропиламид.
[0159]
(Пример сравнения 1-1)
4-(4-Гидрокси-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Коммерчески доступный 7-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ол (12,6 г), 10% палладий на угле (2 г) и формиат аммония (16,5 г) суспендируют в метаноле (200 мл) с последующим перемешиванием в течение ночи при 60°C. Реакционный раствор фильтруют через целит, концентрируют и затем используют для следующего взаимодействия без очистки. Реакционную смесь суспендируют с 4-фтор-2-(трифторметил)бензонитрилом (10 г) в ДМСО (150 мл) и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют к реакционному раствору воду (200 мл) и твердое вещество отделяют фильтрованием. Далее его суспендируют и промывают 100 мл этилацетата, затем сушат при нагревании, получая целевое соединение (7,1 г).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 12,35 (1H, ш.с), 8,09 (1H, с), 7,85 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,39 (1H, с), 7,32 (1H, д, J=8,0 Гц), 4,34 (2H, с), 3,71 (2H, т, J=4,0), 2,56 (2H, т, J=4,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 321 [M+H].
[0160]
(Пример сравнения 1-2)
4-(4-Хлор-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Твердое вещество (12,3 г), полученное из примера сравнения 1-1, суспендируют в дихлоэтане (60 мл) и добавляют оксихлорид фосфора (36 мл) и триэтиламин (12 мл) с последующим перемешиванием в течение 30 мин. при 90°C. Реакционный раствор добавляют к воде (300 мл) и экстрагируют хлороформом (3×300 мл), pH которого отрегулирован до значения 7 с использованием карбоната натрия. После сушки над сульфатом магния его концентрируют, суспендируют и промывают этилацетатом, получая 9,4 г (72%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,89 (1H, с), 7,89 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,47 (1H, с), 7,40 (1H, д, J=8,0 Гц), 4,73 (2H, с), 3,90 (2H, т, J=4,0), 2,94 (2H, т, J=4,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 339 [M+H].
[0161]
(Пример сравнения 1-3)
2-Хлор-4-(4-хлор-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Коммерчески доступный 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ол гидрохлорид (10,0 г), 2-хлор-4-фторбензонитрил (8,1 г) и триэтиламин (22 мл) добавляют к ДМСО (183 мл) и перемешивают в течение 2 дней при комнатной температуре. После добавления воды (400 мл) доводят pH реакционного раствора до 4-6, используя концентрированную соляную кислоту, и осажденное твердое вещество собирают фильтрованием. Полученное твердое вещество суспендируют и промывают этилацетатом, затем сушат. Его используют для следующего взаимодействия без очистки. Полученное твердое вещество (6,4 г) кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин. в оксихлориде фосфора (15 мл). После концентрирования при пониженном давлении к нему добавляют воду (400 мл) и доводят pH водного слоя до 8, используя карбонат натрия. Осажденное твердое вещество собирают фильтрованием, затем сушат. Его суспендируют и промывают толуолом, получая 5,8 г (выход второй стадии 47%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,87 (1H, с), 7,70 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,32 (1H, д, J=2,3 Гц), 7,12 (1H, дд, J=8,9, 2,3 Гц), 4,66 (2H, с), 3,83 (2H, т, J=5,8 Гц), 2,90 (2H, т, J=5,8 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 306 [M+H].
[0162]
(Пример сравнения 2-1)
Метил 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотинат
2
Соединение (10,0 г), полученное из примера сравнения 1-2, метил 6-аминоникотинат (4,49 г), Pd(dba) (1,70 г), dppf (1,64 г) и карбонат цезия (24,1 г) суспендируют в диоксане (120 мл) и перемешивают в течение ночи при 80°C в атмосфере азота. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и твердое вещество, полученное при добавлении воды, собирают фильтрованием и очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 9,42 г (70%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,63 (1H, с), 8,82 (1H, с), 8,65 (1H, с), 8,27-8,21 (2H, м), 7,85 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,42 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,35 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 4,57 (2H, с), 3,85-3,80 (5H, м), 2,91 (2H, т, 5,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 455 [M+H].
[0163]
(Пример сравнения 2-2)
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотиновая кислота
Соединение (9,21 г), полученное из примера сравнения 2-1, суспендируют в метаноле (100 мл) и добавляют 5,0 моль/л водный раствор гидроксида натрия (11 мл) с последующим перемешиванием в течение ночи при 40°C. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры, и доводят pH до значения примерно 3, используя 5,0 моль/л соляную кислоту. Осажденное твердое вещество собирают фильтрованием и после промывания дистиллированной водой и сушки на воздухе получают 8,24 г (92%) целевого соединения. Соединение непосредстивенно используют на следующей стадии, не проводя очистки.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,59 (1H, с), 8,83 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,67 (1H, с), 8,27-8,23 (2H, м), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,38 (1H, дд, J=2,4, 8,8 Гц), 4,60 (2H, с), 3,86 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,93 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 441 [M+H].
[0164]
(Пример сравнения 3)
2-(6-Аминопиридин-3-ил)пропан-2-ол
Метил 6-аминоникотинат (5,0 г) суспендируют в ТГФ (500 мл) и добавляют метиллитий при -78°C с последующим перемешиванием в течение 15 час., пока температура естественным образом повышается. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония на бане со льдом и производят экстракцию 3 раза смесью хлороформ/метанол=5/1. Органические слои объединяют и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, а и фильтрат концентрируют и сушат. Полученное твердое вещество очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 2,2 г (44%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,97 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,43 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 6,36 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,66 (2H, ш.с), 4,82 (1H, с), 1,36 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 153 [M+H].
[0165]
Пример получения A
2-(6-Аминопиридазин-3-ил)пропан-2-ол
(Стадия 1)
Синтез этил 6-аминопиридазин-3-карбоксилата
К этанолу (800 мл) медленно добавляют натрий (7,2 г) и перемешивают в течение 2 час. при комнатной температуре. После подтверждения, что весь натрий растворился, добавляют коммерчески доступный метил 6-аминопиридазин-3-карбоксилат (40,0 г) и далее перемешивают при комнатной температуре в течение 1 час. К реакционному раствору добавляют по капле хлористый водород (4,0 моль/л этилацетатный раствор, примерно 80 мл) для регулирования pH до значения примерно 5. Полученный реакционный раствор концентрируют, сушат и после суспендирования и промывания дистиллированной водой с последующим сбором фильтрованием и сушки на воздухе получают 39,9 г (99%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,73 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,14 (2H, ш.с), 6,77 (1H, д, J=9,2 Гц), 4,29 (2H, кв, J=7,2 Гц), 1,29 (3H, т, J=7,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 168 [M+H].
[0166]
(Стадия 2)
Синтез 2-(6-аминопиридазин-3-ил)пропан-2-ола
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 3, и используя соединение (4,00 г), полученное на стадии 1, вместо метил 6-аминоникотината, получают 1,21 г (33%) целевого соединения в виде маслянистого продукта.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,45 (1H, д, J=9,2 Гц), 6,73 (1H, д, J=9,2 Гц), 6,14 (2H, ш.с), 5,12 (1H, с), 1,41 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 154 [M+H].
[0167]
Пример получения B
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридазин-3-карбоновая кислота
(Стадия 1)
Синтез метил 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридазин-3-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя коммерчески доступный метил 6-аминопиридазин-3-карбоксилат (100 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают 38 мг (28%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,39 (1H, с), 8,65 (1H, с), 8,48 (1H, д, J=9,6 Гц), 8,16 (1H, д, J=9,6 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, д, J=2,8 Гц), 7,37 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 4,60 (2H, с), 3,91 (3H, с), 3,85 (2H, т, J=6,0 Гц), 2,97 (2H, т, 5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 456 [M+H].
[0168]
(Стадия 2)
Синтез 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридазин-3-карбоновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-2, и используя соединение (2,30 г), полученное на стадии 1, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-1, получают 2,04 г (91%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,32 (1H, с), 8,64 (1H, с), 8,45 (1H, д, J=9,6 Гц), 8,13 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,37 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 4,60 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,97 (2H, т, 6,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 442 [M+H].
[0169]
Пример получения C.
5-((7-4-Циано-3-(трифторметил)фенил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиразин-2-карбоновая кислота
(Стадия 1)
Синтез метилового эфира 5-((7-4-циано-3-(трифторметил)фенил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиразин-2-карбоновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (700 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и метиловый эфир 5-аминопиразин-2-карбоновой кислоты (320 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают 360 мг (38%) целевого соединения (выход 66%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 9,99 (1H, с), 8,99 (1H, с), 8,79 (1H, с), 7,70 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,56 (1H, с), 7,09 (1H, дд, J=2,6 Гц, 8,9 Гц), 4,57 (2H, с), 4,03 (3H, с), 3,90 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,94 (2H, т, 5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 456 [M+H].
[0170]
(Стадия 2)
Синтез 5-((7-4-циано-3-(трифторметил)фенил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиразин-2-карбоновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-2, для соединения (360 мг), полученного на стадии 1, получают 310 мг целевого соединения (выход 89%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,06 (1H, ш.с), 9,39 (1H, с), 8,92 (1H, с), 8,70 (1H, с), 7,89 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,47 (1H, д, J=2,2 Гц,), 7,40 (1H, дд, J=2,7 Гц, 9,0 Гц), 4,63 (2H, с), 3,87 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,94 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 442 [M+H].
[0171]
Пример получения D
2-((7-4-Циано-3-(трифторметил)фенил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиримидин-5-карбоновая кислота
(Стадия 1)
Синтез метилового эфира 2-аминопиримидин-5-карбоновой кислоты
Натриевую соль 3,3-диметокси-2-метоксикарбонилпропен-1-ола (3,0 г), которая синтезирована согласно способу, описанному в работе Synthesis, 2002, 6, 720, и гуанидингидрохлорид растворяют в ДМФА (24 мл) и перемешивают при 100°C в течение 1 час. После охлаждения до комнатной температуры добавляют воду для осаждения твердого вещества, которое затем собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении, получая 720 мг (30%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,69 (2H, с), 7,57 (2H, с), 3,78 (3H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 154 [M+H].
[0172]
(Стадия 2)
Синтез метил 2-((7-4-циано-3-(трифторметил)фенил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиримидин-5-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (300 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и метиловый эфир 5-2-аминопиримидин-5-карбоновой кислоты (164 мг), полученный на стадии 1, вместо метил 6-аминоникотината, получают 128 мг целевого соединения (выход 32%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 9,11 (2H, с), 8,94 (1H, с), 8,01 (1H, с), 7,71 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,23 (1H, с), 7,07 (1H, д, J=8,8 Гц), 4,63 (2H, с), 3,97 (3H, с), 3,78 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,92 (2H, т, 5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 456 [M+H].
[0173]
(Стадия 3)
Синтез 2-((7-4-циано-3-(трифторметил)фенил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиримидин-5-карбоновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-2, для соединения (120 мг), полученного на стадии 2, получают 114 мг целевого соединения (выход 99%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,65 (1H, с), 8,94 (2H, м), 8,82 (1H, с), 7,88 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 7,36 (1H, д, J=9,0 Гц), 4,69 (2H, с), 3,78 (2H, т, J=5,5 Гц), 2,77 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 442 [M+H].
[0174]
Пример получения E
5-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-1,3,4-тиадиазол-2-карбоновая кислота
Выполняя такую же операцию, как в примерах сравнения 2-1 и 2-2, и используя этил 5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-карбоксилат (92 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают 141 мг целевого соединения (выход второй стадии 72%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,80 (1H, с), 7,88 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,46 (1H, ш.с), 7,39 (1H, д, J=8,4 Гц), 4,62 (2H, с), 3,88 (2H, т, J=5,2 Гц), 2,97 (2H, т, J=5,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 448 [M+H].
[0175]
Пример 1
4-(4-((1,2,4-Тиадиазол-5-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
2
3
2
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (100 мг), полученное из примера сравнения 1-2, 5-амино-1,2,4-тиадиазол (45 мг) вместо метил 6-аминоникотината, Pd(dba) (30 мг) вместо Pd(dba) и Xantphos (17 мг) вместо dppf, получают 10 мг целевого соединения (выход 8%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,88 (1H, с), 8,31 (1H, с), 7,71 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,26 (1H, с), 7,10 (1H, д, J=8,8 Гц), 4,59 (2H, с), 3,89 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,96 (2H, т, J=5,9 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 404 [M+H].
[0176]
Пример 2
4-(4-((4-Изопропоксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Соединение (19 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и 4-изопропоксианилин (10 мг) растворяют в ацетонитриле (1,5 мл) и проводят взаимодействие в течение 10 мин. при 180°C и СВЧ-облучении. После концентрирования растворителя, продукт очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (17 мг, 60%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,55 (1H, с), 7,69 (1H, д, J=8,7 Гц), 7,45-7,36 (2H, м), 7,24 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,06 (1H, дд, J=8,7, 2,4 Гц), 6,96-6,88 (2H, м), 6,31 (1H, с), 4,53 (1H, септ, J=6,1 Гц), 4,48 (2H, с), 3,87 (2H, т, J=6,1 Гц), 2,75 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,35 (6H, д, J=6,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 454 [M+H].
[0177]
Пример 3
4-(4-((4-Метоксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Твердое вещество (600 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и пара-анизидин (262 мг) суспендируют в ацетонитриле (12 мл) и перемешивают в течение 20 мин. при 180°C и СВЧ-облучении. Полученный реакционный раствор концентрируют и сушат с последующей очисткой методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (555 мг).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,89 (1H, ш.с), 8,68 (1H, с), 7,96 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,48-7,42 (3H, м), 7,37 (1H, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 6,99 (1H, д, J=20,0 Гц), 4,68 (2H, с), 3,93 (2H, т, J=4,0 Гц), 3,17 (3H, с), 2,83 (2H, т, 4,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 426 [M+H].
[0178]
Пример 4
4-(4-((1,1'-Бифенил)-3-иламино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Твердое вещество (100 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и 3-аминобифенил (125 мг) суспендируют в ацетонитриле (2,0 мл) и добавляют карбонат калия (182 мг) с последующим перемешиванием в течение 8 час. при 80°C. Полученный реакционный раствор концентрируют и сушат с последующей очисткой методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (15 мг).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,63 (1H, с), 8,46 (1H, с), 7,95 (1H, т, J=2,0 Гц), 7,87 (1H, д, J=9,3 Гц), 7,75 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,67-7,62 (2H, м), 7,51-7,33 (7H, м), 4,53 (2H, с), 3,91 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,84 (2H, т, 5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 472 [M+H].
[0179]
Пример 5
4-(4-((6-Фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 5-бром-6-фторпиридин-2-амина
6-Фторпиридин-2-амин (2,40 г) растворяют в ацетонитриле (45 мл) в условиях без доступа света, добавляют N-бромсукцинимид (3,81 г) при охлаждении на льду с последующим перемешиванием в течение 3 дней и ночей при комнатной температуре в условиях без доступа света. Полученный реакционный раствор концентрируют и сушат с последующей очисткой методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 3,22 г (79%) целевого соединения.
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 7,61 (1H, t), 6,27 (1H, дд, J=8,4, 0,8 Гц), 4,63 (2H, ш.с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 191 [M+H].
[0180]
(Стадия 2)
Синтез метил 6-амино-2-фторникотината
Твердое вещество (500 мг), полученное на стадии 1, ацетат палладия (II) (118 мг), dppf (290 мг) и триэтиламин (1,1 мл) суспендируют в метаноле (10 мл) и N,N-диметилформамиде (30 мл) в атмосфере монооксида углерода (0,4 МПа), перемешивают в течение 18 час. при 75°C. Реакционный раствор фильтруют через целит и концентрируют при пониженном давлении. Полученный маслянистый продукт растворяют в этилацетате и промывают дистиллированной водой и насыщенным солевым раствором, затем сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием и фильтрат концентрируют и сушат. Полученное твердое вещество очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 133 мг (30%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,91 (1H, дд, J=10,0, 8,4 Гц), 7,22 (2H, ш.с), 6,34 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 3,73 (3H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 171 [M+H].
[0181]
(Стадия 3)
Синтез 2-(6-амино-2-фторпиридин-3-ил)пропан-2-ола
+
Твердое вещество (200 мг), полученное на стадии 2, растворяют в тетрагидрофуране (4 мл) и добавляют метилмагнийбромид (3,0 моль/л раствор в тетрагидрофуране, 1,96 мл) при охлаждении на льду и с последующим перемешиванием в течение 5 час. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают дистиллированной водой и насыщенным солевым раствором, затем сушат над безводным сульфатом магния. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный маслянистый продукт очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 32 мг (16%) целевого соединения в виде маслянистого продукта. Соединение используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. МС низкого разрешения (ESI) m/z 171 [M+H].
[0182]
(Стадия 4)
Синтез 4-(4-((6-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя маслянистый продукт, полученный на стадии 3, вместо метил 6-аминоникотината, получают 25 мг (30%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,25 (1H, с), 8,56 (1H, с), 8,04-7,97 (2H, м), 7,83 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,41 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,34 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 5,32 (1H, с), 4,53 (2H, с), 3,82 (2H, т, J=5,2 Гц), 2,84 (2H, т, 5,6 Гц), 1,44 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 473 [M+H].
[0183]
Пример 6
2-Хлор-4-(4-((6-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридазин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя твердое вещество (1,85 г), полученное из примера сравнения 1-3, вместо соединения, полученного из примера сравнения 1-2, и маслянистый продукт (975 мг), полученный из примера получения A, вместо метил 6-аминоникотината, получают 650 мг (выход 25%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,74 (1H, с), 8,52 (1H, с), 8,19 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,84 (1H, д, J=9,6 Гц), 7,67 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,30 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,11 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 5,41 (1H, с), 4,50 (2H, с), 3,80 (2H, т, J=5,2 Гц), 2,89 (2H, т, J=5,2 Гц), 1,51 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 422 [M+H].
[0184]
Пример 7
4-(4-((5-(2-Гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя твердое вещество (50 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и твердое вещество (25 мг), полученное из примера сравнения 3, вместо метил 6-аминоникотината, получают 17 мг (26%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,04 (1H, с), 8,53 (1H, с), 8,41 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,02 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,82 (1H, дд, J=8,5, 2,4 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,37 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 5,14 (1H, с), 4,54 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,86 (2H, т, 5,4 Гц), 1,45 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 455 [M+H].
[0185]
Пример 8
4-(4-((5-(2-Гидроксипропан-2-ил)-4-(трифторметил)тиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез этилового эфира 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоновой кислоты
2
Этиловый эфир 2-амино-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоновой кислоты (1,0 г) растворяют в ТГФ и добавляют BocO (1,0 г) и DMAP (25 мг), далее перемешивают при 60°C в течение 1 час. Реакционный раствор концентрируют, сушат и затем очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (1,14 г, 80%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,63 (1H, ш.с), 4,36 (2H, кв, J=7,1 Гц), 1,55 (9H, с), 1,36 (3H, т, J=7,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 285 [M-трет-бутил+H].
[0186]
(Стадия 2)
Синтез трет-бутил (5-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(трифторметил)тиазол-2-ил)карбамата
Соединение (450 мг), полученное на стадии 1, растворяют в ТГФ и добавляют к нему по капле метиллитий (3,0 моль/л раствор в диэтоксиметане; 1,76 мл) при -78°C в атмосфере аргона с последующим перемешиванием в течение 40 мин. К реакционному раствору добавляют по капле насыщенный водный раствор хлорида аммония, экстрагируют этилацетатом и промывают насыщенным солевым раствором. Экстракт сушат над сульфатом натрия, концентрируют и затем очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (410 мг, 95%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,05 (1H, ш.с), 2,36 (1H, с), 1,71 (6H, с), 1,51 (9H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 271 [M-трет-бутил+H].
[0187]
(Стадия 3)
Синтез 2-(2-амино-4-(трифторметил)тиазол-5-ил)пропан-2-ола
Соединение (250 мг), полученное на стадии 2, растворяют в метиленхлориде (5 мл) и добавляют TFA (1 мл) с последующим перемешиванием при 0°C в течение 60 час. и при комнатной температуре в течение 7 час. Добавляют туда по капле насыщенный водный раствор бикарбоната натрия с последующей экстракцией этилацетатом. После сушки над сульфатом натрия и концентрированием раствор очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (50 мг, 29%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: δ4,89 (2H, ш.с), 2,31 (1H, с), 1,68 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 227 [M+H].
[0188]
(Стадия 4)
Синтез 4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)-4-(трифторметил)тиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (37 мг), полученное на стадии 3, вместо метил 6-аминоникотината и проводя взаимодействие при 150°C и СВЧ-облучении в течение 25 мин. вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (48 мг, 62%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 11,29 (1H, с), 8,73 (1H, с), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,46 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,38 (1H, дд, J=2,4, 8,8 Гц), 6,14 (1H, с), 4,59 (2H, с), 3,86 (2H, т, J=5,2 Гц), 2,92 (2H, т, J=5,2 Гц), 1,58 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 529 [M+H].
[0189]
Пример 9
2-Хлор-4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (3,0 г), полученное из примера сравнения 1-3, вместо соединения, полученного из примера сравнения 1-2, и соединение (1,59 г), полученное из примера сравнения 3, вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение (1,0 г, 23%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,04 (1H, с), 8,53 (1H, с), 8,42 (1H, д, J=2,6 Гц), 8,03 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,83 (1H, дд, J=2,6, 8,8 Гц), 7,69 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,31 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,11 (1H, дд, J=2,6, 8,8 Гц), 5,14 (1H, с), 4,48 (2H, с), 3,80 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,85 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,46 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 421 [M+H].
[0190]
Пример 10
4-(4-((6-(2-Гидроксипропан-2-ил)пиридазин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (30 мг), полученное из примера получения A, вместо метил 6-аминоникотината и проводя взаимодействие при 150°C и СВЧ-облучении в течение 25 мин. вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (30 мг, 36%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,74 (1H, с), 8,52 (1H, с), 8,19 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,88-7,81 (1H, м), 7,43 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,37 (1H, дд, J=2,2, 8,8 Гц), 5,40 (1H, с), 4,56 (2H, с), 3,87 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,91 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,51 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 456 [M+H].
[0191]
Пример 11
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид
Соединение (8,24 г), полученное из примера сравнения 2-2, и DMT-MM (10,36 г) суспендируют в метаноле (20 мл) и N,N-диметилформамиде (40 мл) и добавляют 2,2,2-трифторэтиламин (3,71 г) с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют дистиллированную воду и экстрагируют этилацетатом три раза. Органические слои собирают, промывают дистиллированной водой и насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, а фильтрат концентрируют и сушат. Полученное твердое вещество очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 6,80 г (70%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,53 (1H, с), 9,13 (1H, т, J=6,2 Гц), 8,84-8,81 (1H, м), 8,64 (1H, с), 8,27-8,20 (1H, м), 7,85 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,36 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,57 (2H, с), 4,15-4,04 (2H, м), 3,84 (2H, т, J=6,0 Гц), 2,91 (2H, т, 5,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 522 [M+H].
[0192]
Пример 12
4-(4-((5-(1-Гидроксициклопропил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 1-(6-хлорпиридин-3-ил)циклопропанола
Метил 6-хлорникотинамид (1 г) суспендируют в диэтиловом эфире (20 мл) и добавляют тетраизопропилат титана (1,76 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота с последующим перемешиванием в течение 30 мин. Реакционный раствор охлаждают до -78°C и добавляют этилмагнийбромид (3 M, 6,8 мл) с последующим перемешиванием в течение 4 час. при -78°C. После дополнительного перемешивания в течение ночи при комнатной температуре добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют хлороформом три раза. После сушки над сульфатом натрия с последующим концентрированием и очисткой методом колоночной хроматографии на силикагеле получают целевое соединение в виде маслянистого продукта (283 мг, 29%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 9,33 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,69 (1H, дд, J=8,1,2,6 Гц), 7,28 (1H, д, J=8,1 Гц), 0,95 (4H, т, J=7,3 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 170 [M+H].
[0193]
(Стадия 2)
Синтез 1-(6-аминопиридин-3-ил)циклопропанола
2
3
Соединение (283 мг), полученное на стадии 1, бензфенонимин (363 мг), Pd(dba) (76 мг), XantPhos (145 мг) и карбонат цезия (761 мг) растворяют в ТГФ (10 мл) и перемешивают в течение 3 дней при 60°C. После фильтрования реакционного раствора остаток промывают этилацетатом и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток суспендируют в ТГФ (5 мл) и добавляют 2N соляную кислоту с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 час. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и экстрагируют хлороформом три раза. После сушки над сульфатом натрия и концентрированием полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (98 мг, 39%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,71 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,03 (1H, дд, J=8,6, 2,3 Гц), 6,50 (1H, д, J=8,6 Гц), 1,22 (4H, т, J=7,3 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 151 [M+H].
[0194]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((5-(1-гидроксициклопропил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
При взаимодействии соединения (50 мг), полученного из примера сравнения 1-2, и соединения (27 мг), полученного на стадии 2, согласно примеру сравнения 2-1 получают целевое соединение (9,0 мг, 13%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,61 (1H, с), 8,89 (1H, д, J=1,9 Гц), 8,65 (1H, с), 8,27 (1H, дд, J=8,8, 1,9 Гц), 8,22 (1H, д, J=9,1 Гц), 7,86 (1H, д, J=9,1 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,3 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 2,3 Гц), 4,58 (2H, с), 3,84 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,91 (2H, т, J=5,6 Гц), 1,07 (4H, т, J=7,3 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 453 [M+H].
[0195]
Пример 13
4-(4-((6-Изопропоксипиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя 6-изопропоксипиридин-3-амин (54 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают 43 мг (32%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,64 (1H, с), 8,35 (1H, с), 8,28 (1H, д, J=2,9 Гц), 7,85 (2H, м), 7,43 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 6,72 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,18 (1H, quin, J=6,1 Гц), 4,49 (2H, с), 3,88 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,76 (2H, т, 5,5 Гц), 1,26 (6H, д, J=6,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 455 [M+H].
[0196]
Пример 14
4-(4-((4-(2-(1-Метил-1H-пиразол-5-ил)этокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этанола
1-Метил-1H-пиразол (3,57 г) растворяют в ТГФ (50 мл) и добавляют трет-бутиллитий (30,5 мл, 1,6 моль/л раствор в пентане) при -78°C с последующим перемешиванием в атмосфере азота при -60°C в течение 30 мин. и при -10°C в течение 40 мин. К реакционному раствору добавляют по капле ТГФ-раствор (50 мл) оксирана (2,42 г) при -10°C. Реакционный раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония с последующей экстракцией три раза хлороформом. Органический слой сушат над сульфатом натрия с последующим концентрированием и очисткой методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (2,42 г, 45%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,24 (1H, д, J=1,8 Гц), 6,02 (1H, д, J=1,8 Гц), 4,76 (1H, т, J=5,3 Гц), 3,71 (3H, с), 3,60 (2H, тд, J=6,9, 5,3 Гц), 2,74 (2H, т, J=6,9 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 127 [M+H].
[0197]
(Стадия 2)
Синтез 4-(4-((4-(бензилокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя 4-(бензилокси)анилин (706 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение (1,39 г, 94%).
1
+
4
H-ЯМР (MeOH-d) δ: 8,30 (1H, с), 7,76 (1H, д, J=9,0 Гц), 7,47-7,24 (9H, м), 7,02-6,97 (2H, м), 5,09 (2H, с), 4,45 (2H, с), 3,89 (2H, т, J=5,8 Гц), 2,80 (2H, т, J=5,8 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 502 [M+H].
[0198]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((4-гидроксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (1,39 г), полученное на стадии 2, 10% палладий на угле (содержащий 50% воды, 300 мг) и формиат аммония (872 мг) суспендируют в метаноле (30 мл) и перемешивают в течение ночи при 60°C. Реакционный раствор фильтруют и остатки промывают смесью хлороформ-метанол. Добавляют к ним воду и далее экстрагируют четыре раза смесью хлороформ-метанол (3:1). После сушки над сульфатом натрия с последующим концентрированием получают целевое соединение (971 мг, 85%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,25 (1H, ш.с), 8,43 (1H, с), 8,33 (1H, с), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,46-7,30 (4H, м), 6,73 (1H, д, J=8,3 Гц), 4,48 (2H, с), 3,88 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,75 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 412 [M+H].
[0199]
(Стадия 4)
Синтез 4-(4-((4-(2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (802 мг), полученное на стадии 3, цианометилентрибутилфосфоран (реагент Цунода, 565 мг) и 2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этанол (246 мг), полученный на стадии 1, растворяют в смеси толуол (10 мл)/тетрагидрофуран (8 мл) и перемешивают в течение ночи при 95°C. Растворитель выпаривают и выполняют очистку методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (724 мг, 71%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,55 (1H, с), 7,69 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,47-7,39 (3H, м), 7,24 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,06 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 6,96-6,90 (2H, м), 6,32 (1H, ш.с), 6,14 (1H, д, J=1,5 Гц), 4,49 (2H, с), 4,22 (2H, т, J=6,6 Гц), 3,89 (3H, с), 3,87 (2H, т, J=5,6 Гц), 3,13 (2H, т, J=6,6 Гц), 2,76 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 520 [M+H].
[0200]
Пример 15
4-(4-((6-(2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 2-(2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этокси)-5-нитропиридина
2-Хлор-5-нитропиридин (300 мг) растворяют в ТГФ и добавляют гидрид натрия (151 мг, 60%) при 0°C с последующим перемешиванием в течение 10 мин. После добавления 2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этанола раствор перемешивают в течение 2 час. при 0°C. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют этилацетатом три раза. Органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором, затем сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (376 мг, 90%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,05 (1H, д, J=2,9 Гц), 8,47 (1H, дд, J=9,2,2,9 Гц), 8,20 (1H, с), 7,73 (1H, с), 7,07 (1H, д, J=9,2 Гц), 4,87-4,78 (4H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 236 [M+H].
[0201]
(Стадия 2)
Синтез 6-(2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этокси)пиридин-3-амина
Соединение (270 мг), полученное на стадии 1, растворяют в метаноле (8 мл) и добавляют 10% палладий на угле (содержащий 50% воды, 135 мг). В атмосфере водорода смесь перемешивают в течение ночи при атмосферном давлении. Реакционный раствор фильтруют через Hyflo Super-Cel и выпаривают растворитель, получая целевое соединение в виде бесцветного маслянистого продукта (200 мг).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,11 (1H, д, J=1,0 Гц), 7,70 (1H, д, J=1,0 Гц), 7,46 (1H, д, J=2,9 Гц), 6,97 (1H, дд, J=8,4, 2,9 Гц), 6,49 (1H, д, J=8,4 Гц), 4,77 (2H, с), 4,70 (2H, т, J=5,3 Гц), 4,48 (2H, т, J=5,3 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 206 [M+H].
[0202]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((6-(2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
При взаимодействии соединения (50 мг), полученного из примера сравнения 1-2, и соединения (36 мг), полученного на стадии 2, согласно примеру сравнения 2-1, получают целевое соединение (28 мг, 37%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,69 (1H, с), 8,38 (1H, с), 8,33 (1H, д, J=2,6 Гц), 8,19 (1H, с), 7,92 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,73 (1H, с), 7,44 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,38 (1H, дд, J=8,8, 2,2 Гц), 6,79 (1H, д, J=8,8 Гц), 4,79 (2H, т, J=5,2 Гц), 4,65 (2H, т, J=5,2 Гц), 4,51 (2H, с), 3,89 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,78 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 508 [M+H].
[0203]
Пример 16
4-(4-((6-(2-Метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропан-1-ола
2-Амино-2-метилпропан-1-ол (30 г), триэтилортоформиат (64,8 г) и азид натрия (26,3 г) суспендируют в уксусной кислоте (150 мл) и перемешивают в течение ночи в условиях кипячения с обратным холодильником. К реакционному раствору добавляют концентрированную соляную кислоту (40 мл) и полученные нерастворимые вещества удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении для удаления растворителя и полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая твердое вещество. Полученное твердое вещество суспендируют в толуоле и после фильтрования и промывания толуолом сушат при пониженном давлении, получая целевое соединение (28,5 г, 60%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,39 (1H, с), 5,24 (1H, т, J=5,6 Гц), 3,59 (2H, д, J=5,6 Гц), 1,56 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 143 [M+H].
[0204]
(Стадия 2)
Синтез 6-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-амина
Выполняя такую же операцию, как на стадии 1 и стадии 2 примера 15, и используя 2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропан-1-ол (2,82 г), полученный на стадии 1, вместо 2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этанола, получают целевое соединение (3,84 г, выход второй стадии 86%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,54 (1H, с), 7,42 (1H, д, J=2,9 Гц), 6,96 (1H, дд, J=8,8, 2,9 Гц), 6,46 (1H, д, J=8,8 Гц), 4,79 (2H, ш.с), 4,40 (2H, с), 1,72 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 235 [M+H].
[0205]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((6-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
При взаимодействии соединения (2,0 г), полученного из примера сравнения 1-2, и соединения (1,52 г), полученного на стадии 2, согласно примеру сравнения 2-1, получают целевое соединение (1,49 г, 47%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,60 (1H, с), 8,68 (1H, с), 8,39 (1H, с), 8,27 (1H, д, J=2,7 Гц), 7,92 (1H, дд, J=8,8, 2,7 Гц), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, д, J=2,5 Гц), 7,38 (1H, дд, J=9,1,2,5 Гц), 6,75 (1H, д, J=9,1 Гц)), 4,57 (2H, с), 4,50 (2H, ш.с)3,89 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,77 (2H, т, J=5,6 Гц), 1,76 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 537 [M+H].
[0206]
Пример 17
4-(4-((5-(2-Метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 2-бром-5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридина
2-Метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропан-1-ол (3,27 г), полученный на стадии 1 примера 16, 6-бромпиридин-3-ол (4,00 г) и цианометилентрибутилфосфоран (реагент Цунода, 9,99 г) растворяют в толуоле (100 мл) и перемешивают в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Растворитель выпаривают и выполняют очистку методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (5,08 г, 74%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,60 (1H, с), 8,08 (1H, д, J=3,3 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 3,3 Гц), 4,39 (2H, с), 1,76 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 298 [M+H].
[0207]
(Стадия 2)
Синтез трет-бутил (5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-ил)карбамата
2
3
Соединение (4 г), полученное на стадии 1, трет-бутилкарбамат (4,72 г), Pd(dba) (1,23 г), XantPhos (2,33 г) и трет-бутилат натрия (2,58 г) растворяют в диоксане (100 мл) и перемешивают в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют хлороформом три раза. После сушки над сульфатом натрия и концентрирования, полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (3,36 г, 74%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,59 (1H, с), 9,58 (1H, ш.с), 7,89 (1H, д, J=3,0 Гц), 7,66 (1H, д, J=9,1 Гц), 7,33 (1H, дд, J=9,1,3,0 Гц), 4,32 (2H, с), 1,75 (6H, с), 1,44 (9H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 335 [M+H].
[0208]
(Стадия 3)
Синтез 5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-амина
Соединение (185 мг), полученное на стадии 2, растворяют в 4N диоксановом растворе соляной кислоты (3 мл) и перемешивают в течение ночи при кипении с обратным холодильником. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и экстрагируют хлороформом три раза. После сушки над сульфатом натрия и концентрирования получают целевое соединение в виде желтого маслянистого продукта (130 мг, 100%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,60 (1H, с), 7,56 (1H, д, J=3,0 Гц), 7,01 (1H, дд, J=8,9, 3,0 Гц), 6,36 (1H, д, J=8,9 Гц), 5,52 (2H, ш.с), 4,18 (2H, с), 1,76 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 235 [M+H].
[0209]
(Стадия 4)
Синтез 4-(4-((5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
При взаимодействии соединения (1,6 г), полученного из примера сравнения 1-2, и соединения (1,14 г), полученного на стадии 3, согласно примеру сравнения 2-1, получают целевое соединение (0,80 г, 32%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,62 (1H, с), 9,02 (1H, с), 8,49 (1H, с), 8,01 (1H, д, J=3,1 Гц), 7,99 (1H, д, J=9,1 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,46-7,34 (3H, м), 4,53 (2H, ш.с), 4,37 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,84 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,77 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 537 [M+H].
[0210]
Пример 18
4-(4-((4-(3-(4-(Метилсульфонил)пиперазин-1-ил)пропокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез трет-бутил 4-(3-(4-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)фенокси)пропил)пиперазин-1-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере 14 (стадия 4), и используя трет-бутил 4-(3-гидроксипропил)пиперазин-1-карбоксилат (65 мг) вместо 2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этанола, получают целевое соединение (140 мг, 92%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,61 (1H, с), 7,69 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,34-7,31 (1H, м), 7,29-7,22 (2H, м), 7,06 (2H, дд, J=8,8, 2,7 Гц), 6,70 (1H, д, J=8,3, 2,2 Гц), 6,50 (1H, с), 4,49 (2H, с), 4,05 (2H, т, J=6,2 Гц), 3,87 (2H, т, J=5,6 Гц), 3,48-3,38 (4H, м), 2,79 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,54 (2H, т, J=7,2 Гц), 2,46-2,35 (4H, м), 2,04-1,92 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 638 [M+H].
[0211]
(Стадия 2)
Синтез 4-(4-((4-(3-(4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил)пропокси)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
К соединению (140 мг), полученному на стадии 1, добавляют 10% метанольный раствор соляной кислоты с последующим перемешиванием в течение 3 час. при 50°C. Растворитель выпаривают, получая de-Boc-продукт (132 мг). Часть (30 мг) полученного твердого вещества суспендируют в дихлорметане и добавляют последовательно триэтиламин (22 мкл) и метансульфонилхлорид (5 мкл) с последующим перемешиванием в течение 2 час. при комнатной температуре. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют хлороформом три раза. После сушки над сульфатом натрия и концентрирования, выполняют очистку методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (6,7 мг, 21%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,54 (1H, с), 7,68 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45-7,36 (2H, м), 7,23 (1H, д, J=2,7 Гц), 7,06 (1H, дд, J=8,8, 2,7 Гц), 6,95-6,89 (2H, м), 6,32 (1H, с), 4,48 (2H, с), 4,03 (2H, т, J=6,1 Гц), 3,87 (2H, т, J=5,7 Гц), 3,72 (1H, кв, J=7,0 Гц), 3,30-3,23 (4H, м), 2,83-2,73 (2H, м), 2,78 (3H, с), 2,63-2,55 (5H, м)2,02-1,93 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 616 [M+H].
[0212]
Пример 19
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-циклопропилпиридин-3-сульфонамид
(Стадия 1)
Синтез 6-хлор-N-циклопропилпиридин-3-сульфонамида
6-Хлорпиридин-3-сульфонилхлорид (300 мг) и триэтиламин (0,59 мл) растворяют в дихлорметане (6 мл) и добавляют циклопропиламин (121 мг) и диметиламинопиридин (5 мг) с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют хлороформом три раза. После сушки над сульфатом натрия и концентрирования, получают целевое соединение (442 мг).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,78 (1H, д, J=2,6 Гц), 8,24 (1H, ш.с), 8,20 (1H, дд, J=8,4, 2,6 Гц), 7,81 (1, д, J=8,4 Гц), 2,25-2,17 (1H, м), 0,56-0,49 (2H, м), 0,40-0,36 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 233 [M+H].
[0213]
(Стадия 2)
Синтез 6-амино-N-циклопропилпиридин-3-сульфонамида
Соединение (200 мг), полученное на стадии 1, растворяют в этаноле (2 мл) и добавляют 28% аммиачную воду (2 мл) с последующим перемешиванием в течение 1 час. при 140°C и СВЧ-облучении. После концентрирования реакционного раствора полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (90 мг, выход второй стадии 66%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,27 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,65 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,60 (1H, д, J=2,6 Гц), 6,87 (2H, с), 6,52 (1H, д, J=8,8 Гц), 2,13-2,05 (1H, м), 0,52-0,45 (2H, м), 0,39-0,33 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 214 [M+H].
[0214]
(Стадия 3)
Синтез 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-циклопропилпиридин-3-сульфонамида
При взаимодействии соединения (50 мг), полученного из примера сравнения 1-2, и соединения (38 мг), полученного на стадии 2, согласно примеру сравнения 2-1, получают целевое соединение (21 мг, 28%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,74 (1H, с), 8,68 (1H, с), 8,67 (1H, дд, J=2,6, 0,8 Гц), 8,33 (1H, дд, J=8,8, 0,8 Гц), 8,12 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,95 (1H, д, J=2,8 Гц), 7,88 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,39 (1H, дд, J=8,8, 2,8 Гц), 4,61 (2H, с), 3,86 (2H, т, J=5,8 Гц), 2,94 (2H, т, J=5,8 Гц), 2,24-2,15 (1H, м), 0,57-0,49 (2H, м), 0,43-0,36 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 516 [M+H].
[0215]
Пример 20
4-(4-((5-((1,4-Оксазепан-4-ил)сульфонил)тиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез N-(5-((1,4-оксазепан-4-ил)сульфонил)тиазол-2-ил)ацетамида
2-(Ацетиламино)-1,3-тиазол-5-сульфонилхлорид (200 мг) растворяют в ДМФА (5 мл) и добавляют 1,4-оксазепангидрохлорид (170 мг) и DIPEA (424 мкл) с последующим перемешиванием в течение 6 час. при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют водный раствор хлорида аммония и осадок собирают фильтрованием, получая целевое соединение (200 мг, 79%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 13,03 (1H, ш.с), 8,31 (1H, с), 3,99-3,95 (4H, м), 3,71-3,58 (4H, м), 2,52 (3H, с), 2,16-2,10 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 306 [M+H].
[0216]
(Стадия 2)
Синтез 5-((1,4-оксазепан-4-ил)сульфонил)тиазол-2-амина
Соединение (183 мг), полученное на стадии 1, растворяют в этаноле (4 мл) и добавляют 4,0 моль/л соляную кислоту (диоксановый раствор, 1,2 мл) с последующим перемешиванием в течение 4,5 час. при 70°C. После концентрирования реакционного раствора добавляют аммиачную воду при охлаждении на льду и осадок собирают фильтрованием, получая целевое соединение (110 мг, 70%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,88 (2H, ш.с), 7,45 (1H, с), 3,67-3,64 (4H, м), 3,39-3,27 (4H, м), 1,84-1,78 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 264 [M+H].
[0217]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((5-((1,4-оксазепан-4-ил)сульфонил)тиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, используя соединение (47 мг), полученное на стадии 2, вместо метил 6-аминоникотината и проводя взаимодействие в течение 30 мин. при 150°C и СВЧ-облучении вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (10 мг, 12%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 11,97 (1H, ш.с), 8,81 (1H, с), 8,03 (1H, с), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, д, 2,0 Гц), 7,38 (1H, дд, J=2,0, 8,8 Гц), 4,61 (2H, с), 3,86 (2H, т, 5,6 Гц), 3,69-3,63 (4H, м), 3,42-3,30 (4H, м), 2,94 (2H, т, 5,6 Гц), 1,84-1,78 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 566 [M+H].
[0218]
Пример 21
2,2,2-Трифторэтил (6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)карбамат
Соединение (100 мг), полученное из примера сравнения 2-2, дифенилфосфорилазид (188 мг), 2,2,2-трифторэтанол (68 мг) и N,N-диизопропилэтиламин (88 мг) суспендируют в диоксане (2,5 мл) и перемешивают в течение 2 час. при 125°C и СВЧ-облучении. Полученный реакционный раствор концентрируют, сушат и выполняют очистку методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение 5,8 мг (2,4%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,24 (1H, с), 9,08 (1H, с), 8,51 (1H, с), 8,42 (1H, с), 8,07 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,89-7,82 (2H, м), 7,43 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,79 (2H, кв, J=9,2 Гц), 4,53 (2H, с), 3,84 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,85 (2H, т, 5,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 538 [M+H].
[0219]
Пример 22
2-(6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)-N-(2,2,2-трифторэтил)ацетамид
(Стадия 1)
Синтез 2-(6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)уксусной кислоты
Выполняя такую же операцию, как в сравнительных примерах 2-1 и 2-2, и используя этил 2-(6-аминопиридин-3-ил)ацетат (175 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение (94 мг, выход второй стадии 26%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,73 (1H, ш.с), 8,64 (1H, с), 8,27 (1H, д, J=1,1 Гц), 8,03 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,89 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,84 (1H, дд, J=8,8, 1,1 Гц), 7,45 (1H, д, J=2,1 Гц), 7,39 (1H, дд, J=8,8, 2,1 Гц), 4,60 (2H, с), 3,88 (2H, т, J=5,2 Гц), 3,66 (2H, с), 2,91 (2H, т, J=5,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 455 [M+H].
[0220]
(Стадия 2)
Синтез 2-(6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)-N-(2,2,2-трифторэтил)ацетамида
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (30 мг), полученное на стадии 1, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, получают целевое соединение (29 мг, 83%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,10 (1H, ш.с), 8,79 (1H, т, J=6,2 Гц), 8,54 (1H, с), 8,20 (1H, д, J=2,2 Гц), 8,07 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (1H, дд, J=8,4, 2,4 Гц), 7,44 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,37 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 4,55 (2H, с), 3,98-3,82 (4H, м), 3,52 (2H, с), 2,88 (2H, т, J=5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 536 [M+H].
[0221]
Пример 23
N-(6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)-3,3,3-трифторпропанамид
(Стадия 1)
4-(4-((5-Нитропиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя 5-нитропиридин-2-амин (986 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение (810 мг, 31%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,11 (1H, с), 9,14 (1H, д, J=2,9 Гц), 8,71 (1H, с), 8,54 (1H, дд, J=9,3, 2,7 Гц), 8,27 (1H, д, J=9,5 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,37 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,61 (2H, с), 3,84 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,94 (2H, т, 5,7 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 442 [M+H].
[0222]
(Стадия 2)
4-(4-((5-Аминопиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Соединение (100 мг), полученное на стадии 1, и 10% палладий на угле (10 мг) суспендируют в метаноле (2,0 мл) и перемешивают в течение 2 дней при комнатной температуре в атмосфере водорода. Полученную суспензию фильтруют через целит и фильтрат концентрируют и сушат, получая 12 мг (13%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,67 (1H, с), 8,40 (1H, с), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,72 (1H, д, J=2,9 Гц), 7,67 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,00 (1H, дд, J=8,6, 2,7 Гц), 5,12 (2H, с), 4,49 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,78 (2H, т, 5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 412 [M+H].
[0223]
(Стадия 3)
N-(6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)-3,3,3-трифторпропанамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя 3,3,3-трифторпропановую кислоту(7,0 мг) вместо 6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотиновой кислоты и соединение (15 мг), полученное на стадии 2, вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают 2,8 мг (15%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,51 (1H, с), 9,14 (1H, с), 8,57 (1H, д, J=2,6 Гц), 8,53 (1H, с), 8,12 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,91 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,37 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,54 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,8 Гц), 3,53 (2H, кв, J=11,2 Гц), 2,86 (2H, т, 5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 522 [M+H].
[0224]
Пример 24
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)пиридазин-3-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (5,0 мг), полученное из примера получения B, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, и HATU (8,6 мг) и DIPEA (8,1 мкл) вместо DMT-MM, получают целевое соединение (1,22 мг) (выход 21%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,53 (1H, т, J=6,5 Гц), 8,62 (1H, с), 8,49-8,42 (2H, м), 8,15 (1H, д, J=9,6 Гц), 7,85 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,45 (1H, с), 7,36 (1H, д, J=8,9 Гц), 4,59 (2H, с), 4,09 (2H, м), 3,85 (2H, т, J=5,5 Гц), 2,96 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 523 [M+H].
[0225]
Пример 25
3-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)-1,2,4-триазин-6-карбоксамид
(Стадия 1)
Синтез 6-бром-1,2,4-триазин-3-амина
1,2,4-Триазин-3-амин (5,00 г) растворяют в ацетонитриле (45 мл) и дистиллированной воде (75 мл) в условиях без доступа света, добавляют N-бромсукцинимид (10,0 г) при охлаждении на льду с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре в условиях без доступа света. К полученному реакционному раствору добавляют дистиллированную воду (100 мл) и экстрагируют этилацетатом три раза (150 мл). Полученные органические слои объединяют и после промывания насыщенным солевым раствором сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют и сушат, получая 2,64 г (выход 29%) целевого соединения.
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,38 (1H, с), 7,45 (2H, ш.с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 175 [M+H].
[0226]
(Стадия 2)
Синтез метил 3-амино-1,2,4-триазин-6-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере 5, и используя соединение (1,0 г), полученное на стадии 1 этого примера, вместо соединения, полученного на стадии 1 примера 5, получают 728 мг целевого соединения (выход 83%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,64 (1H, с), 3,85 (3H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 155 [M+H].
[0227]
(Стадия 3)
Синтез 3-амино-N-(2,2,2-трифторэтил)-1,2,4-триазин-6-карбоксамида.
Соединение (100 мг), полученное на стадии 2, растворяют в метаноле (6,5 мл) и добавляют 2N водный раствор гидроксида натрия (4 мл) с последующим перемешиванием в течение 3 час. Доводят pH реакционного раствора до 4, используя 2N соляную кислоту, и затем концентрируют и сушат при пониженном давлении. Полученный остаток и 2,2,2-трифторэтиламин (102 мкл) растворяют в смешанном растворителе ДМФА (3 мл)/метанол (3 мл), добавляют DMT-MM с последующим перемешиванием в течение ночи. К реакционному раствору добавляют дистиллированную воду и экстрагируют этилацетатом три раза. Органические слои объединяют, промывают дистиллированной водой и насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют и сушат. Затем выполняют очистку методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (56 мг) (выход 39%).
+
МС низкого разрешения (ESI) m/z 222 [M+H].
[0228]
(Стадия 4)
Синтез 3-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)-1,2,4-триазин-6-карбоксамида
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение (30 мг), полученное из примера сравнения 1-2, и соединение (23 мг), полученное на стадии 3, вместо метил 6-аминоникотината и проводя перемешивание в течение 30 мин. при 140°C и СВЧ-облучении вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают 32 мг целевого соединения (выход 70%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,62 (1H, т, J=6,4 Гц), 8,99 (1H, с), 8,79 (1H, с), 8,28 (1H, с), 7,85 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,41 (1H, с), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,68 (2H, с), 4,14 (2H, м), 3,79 (2H, м), 2,81 (2H, т, J=5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 524 [M+H].
[0229]
Пример 26
2-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоксамид
(Стадия 1)
Синтез этил 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, используя этил 2-амино-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоксилат (341 мг) вместо метил 6-аминоникотината и проводя взаимодействие в течение 30 мин. при 150°C и СВЧ-облучении вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (670 мг, 100%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,59 (1H, с), 7,79 (1H, д, 8,8 Гц), 7,40 (1H, д, 2,4 Гц), 7,33 (1H, дд, J=2,4, 8,8 Гц), 4,43 (2H, с), 4,19 (2H, кв, 7,0 Гц), 3,79 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,80 (2H, т, J=5,9 Гц), 1,25 (3H, т, J=7,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 543 [M+H].
[0230]
(Стадия 2)
Синтез 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоновой кислоты
Соединение (670 мг), полученное на стадии 1, суспендируют в этаноле (10 мл) и добавляют 2,0 моль/л водный раствор гидроксида натрия (4,8 мл) с последующим перемешиванием в течение 6 час. при 60°C. Реакционный раствор концентрируют, разбавляют дистиллированной водой и доводят pH примерно до 5, используя 2,0 моль/л соляную кислоту. Осадок собирают фильтрованием, получая целевое соединение (275 мг, 45%).
+
МС низкого разрешения (ESI) m/z 515 [M+H].
[0231]
(Стадия 3)
Синтез 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоксамида
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (40 мг), полученное на стадии 2, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, и HOBt (13 мг) и WSC (16 мг) вместо DMT-MM, получают целевое соединение (11 мг, 24%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 12,02 (1H, с), 9,43 (1H, т, J=6,2 Гц), 8,83 (1H, с), 7,88 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,48 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,40 (1H, дд, J=2,4, 8,8 Гц), 4,63 (2H, с), 4,11-4,01 (2H, м), 3,88 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,96 (2H, т, J=5,7 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 596 [M+H].
[0232]
Пример 27
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2-дифторэтил)никотинамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя 2,2-дифторэтиламин вместо 2,2,2-трифторэтиламина и HATU и DIPEA вместо DMT-MM, получают целевое соединение (выход 58%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,48 (1H, с), 8,90 (1H, т, J=5,8 Гц), 8,80 (1H, с), 8,62 (1H, с), 8,25-8,16 (2H, м), 7,84 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,42 (1H, с), 7,35 (1H, д, J=8,9 Гц), 6,10 (1H, т, J=56 Гц), 4,56 (2H, с), 3,83 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,66 (2H, м), 2,90 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 504 [M+H].
[0233]
Пример 28
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2-дифторэтил)пиридазин-3-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (5,0 мг), полученное из примера получения B, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, 2,2-дифторэтиламин вместо 2,2,2-трифторэтиламина и HATU (8,6 мг) и DIPEA (8,1 мкл) вместо DMT-MM, получают целевое соединение (3,52 мг) (выход 62%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,22 (1H, ш.с), 9,26 (1H, т, J=6,2 Гц), 8,62 (1H, с), 8,44 (1H, д, J=9,6 Гц), 8,14 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,85 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,43 (1H, с), 7,36 (1H, д, J=8,9 Гц), 6,14 (1H, т, J=56 Гц), 4,59 (2H, с), 3,85 (2H, м), 3,73 (2H, м), 2,96 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 505 [M+H].
[0234]
Пример 29
6-((7-(3-Хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-((1r,4r)-4-гидроксициклогексил)пиридазин-3-карбоксамид
(Стадия 1)
Синтез метил 6-((7-бензил -5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридазин-3-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя метил 6-аминопиридазин-3-карбоксилат (353 мг) вместо метил 6-аминоникотината и коммерчески доступный 7-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин (500 мг) вместо соединения, полученного из примера сравнения 1-2, получают целевое соединение (267 мг, 37%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,56 (1H, с), 8,52 (1H, д, J=9,5 Гц), 8,17 (1H, д, J=9,5 Гц), 7,37 (1H, с), 7,59-7,32 (5H, м), 3,93 (3H, с), 3,68 (2H, с), 3,50 (2H, с), 2,83 (2H, т, J=5,5 Гц), 2,74 (2H, т, J=5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 377 [M+H].
[0235]
(Стадия 2)
Синтез метил 6-((7-(3-хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридазин-3-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 1-1, для соединения (260 мг), полученного на стадии 1, и используя 2-хлор-4-фторбензонитрил (322 мг) вместо 4-фтор-2-(трифторметил)бензонитрила, получают целевое соединение (34 мг, 12%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 9,01 (1H, д, J=8,8 Гц), 8,70 (1H, с), 8,24 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,56 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,40 (1H, с), 7,07 (1H, д, J=2,4 Гц), 6,94 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 4,52 (2H, с), 4,06 (3H, с), 3,87 (2H, т, J=5,2 Гц), 3,04 (2H, т, J=5,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 422 [M+H].
[0236]
(Стадия 3)
Синтез 6-((7-(3-хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридазин-3-карбоновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-2, и используя соединение (34 мг), полученное на стадии 2, получают целевое соединение (27 мг, 82%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,33 (1H, ш.с), 8,65 (1H, с), 8,47 (1H, д, J=9,3 Гц), 8,16 (1H, д, J=9,3 Гц), 7,70 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,33 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,13 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 4,55 (2H, с), 3,82 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,97 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 408 [M+H].
[0237]
(Стадия 4)
Синтез 6-((7-(3-хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-((1r,4r)-4-гидроксициклогексил)пиридазин-3-карбоксамида
При взаимодействии соединения, полученного на стадии 3, и транс-4-аминоциклогексанола, согласно примеру 11, получают целевое соединение (5,6 мг, 50%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,14 (1H, ш.с), 8,67 (1H, д, J=8,7 Гц), 8,63 (1H, с), 8,41 (1H, д, J=9,5 Гц), 8,12 (1H, д, J=9,5 Гц), 7,70 (1H, д, J=8,7 Гц), 7,33 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,13 (1H, дд, J=8,7, 2,2 Гц), 4,60-4,52 (3H, м), 3,84-3,74 (3H, м), 2,95 (2H, т, J=5,3 Гц), 1,90-1,75 (4H, м), 1,56-1,45 (2H, м), 1,33-1,18 (3H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 505 [M+H].
[0238]
Пример 30
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-((1-гидроксициклопропил)метил)пиридазин-3-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (20 мг), полученное из примера получения B, и 1-(аминометил)циклопропанол (34 мг), получают целевое соединение (3,6 мг, 16%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 9,00 (1H, д, J=9,2 Гц), 8,74 (1H, с), 8,38 (1H, т, J=5,8 Гц), 8,31 (1H, д, J=9,2 Гц), 8,25-8,08 (1H, м), 7,72 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,27 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,10 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,8, 2,3 Гц), 4,57 (2H, с), 3,92 (2H, т, J=5,6 Гц), 3,69 (2H, д, J=5,8 Гц), 3,00 (2H, т, J=5,6 Гц), 0,95-0,89 (2H, м), 0,77-0,70 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 511 [M+H].
[0239]
Пример 31
2-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)изоникотинамид
(Стадия 1)
Синтез 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)изоникотиновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примерах сравнения 2-1 и 2-2, и используя этил 2-аминоизоникотинат (135 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение (147 мг, выход второй стадии 45%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,35 (1H, с)8,62 (2H, с), 8,48 (1H, д, J=5,0 Гц), 7,86 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,47 (1H, дд, J=5,0, 1,1 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,36 (1H, дд, J=8,9, 2,0 Гц), 4,57 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,4 Гц), 2,90 (2H, т, J=5,4 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 441 [M+H].
[0240]
(Стадия 2)
Синтез 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)изоникотинамида
Соединение (25 мг), полученное на стадии 1, и 2,2,2-трифторэтиламин (11 мг) растворяют в ДМФА (1 мл) и добавляют HATU (43 мг) и диизопропилэтиламин (40 мкл) с последующим перемешиванием в течение 3 час. при комнатной температуре. Добавляют к реакционному раствору воду и выполняют экстракцию этилацетатом три раза. Органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (22 мг, 73%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,90 (1H, с), 8,74 (1H, с), 8,43 (1H, д, J=5,1 Гц), 7,70 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, с), 7,40 (1H, дд, J=5,1,1,5 Гц), 7,25 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,08 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 6,71 (1H, т, J=5,9 Гц), 4,53 (2H, с), 4,18 (2H, м), 3,89 (2H, т, J=5,8 Гц), 2,89 (2H, т, J=5,8 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 522 [M+H].
[0241]
Пример 32
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиридазин-3-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (20 мг), полученное из примера получения B, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, 1-амино-2-метилпропан-2-ол (4 мг) вместо 2,2,2-трифторэтиламина и HATU (26 мг) и DIPEA (15 мкл) вместо DMT-MM, получают целевое соединение (4,2 мг, 18%).
1
+
3
H-ЯМР (CDOD) δ: 8,81 (1H, д, J=9,2 Гц), 8,65 (1H, с), 8,22 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,79 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,41 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,32 (1H, дд, J=2,6, 8,8 Гц), 4,64-4,54 (3H, м), 3,93 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,47 (2H, с), 3,02 (2H, т, J=5,5 Гц), 1,26 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 513 [M+H].
[0242]
Пример 33
5-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиразин-2-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (10 мг), полученное из примера получения C, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, и 1-амино-2-метилпропан-2-ол (8 мг) вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают целевое соединение (6,4 мг, 55%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,04 (1H, ш.с), 9,35 (1H, с), 8,92 (1H, с), 8,67 (1H, с), 8,29 (1H, т, J=6,2 Гц), 7,88 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,46 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,39 (1H, дд, J=2,2, 8,9 Гц), 4,72 (1H, с), 4,62 (2H, с), 3,87 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,34-3,30 (2H, м), 2,94 (2H, т, J=5,5 Гц), 1,12 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 513 [M+H].
[0243]
Пример 34
2-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиримидин-5-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (5 мг), полученное из примера получения D, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, и 1-амино-2-метилпропан-2-ол (4 мг) вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают целевое соединение (3,2 мг, 53%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,42 (1H, ш.с), 8,95 (2H, с), 8,77 (1H, с), 8,42 (1H, т, J=6,2 Гц), 7,88 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,1 Гц), 7,36 (1H, дд, J=2,1,8,9 Гц), 4,67 (2H, с), 4,56 (1H, с), 3,79 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,24 (2H, д, J=6,2 Гц), 2,77 (2H, т, J=5,5 Гц), 1,11 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 513 [M+H].
[0244]
Пример 35
5-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этил)-1,3,4-тиадиазол-2-карбоксамид
(Стадия 1)
Синтез 2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этил метансульфоната
2-(1-Метил-1H-пиразол-5-ил)этанол (537 мг), полученный на стадии 1 примера 14, и триэтиламин (0,89 мл) растворяют в хлороформе (10 мл) и добавляют к ним по капле метансульфонилхлорид (0,4 мл) при 0°C. Реакционный раствор перемешивают в течение 6 час. при комнатной температуре. После добавления воды к реакционному раствору и экстракции три раза хлороформом, его сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение в виде бесцветного маслянистый продукта (930 мг).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 7,42 (1H, д, J=1,7 Гц), 6,14 (1H, д, J=1,7 Гц), 4,44 (2H, т, J=6,7 Гц), 3,85 (3H, с), 3,11 (2H, т, J=6,7 Гц), 2,95 (3H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 205 [M+H].
[0245]
(Стадия 2)
Синтез 2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этанамина
Соединение (443 мг), полученное на стадии 1, растворяют в ДМФА и добавляют азид натрия (705 мг) с последующим перемешиванием при 60°C в течение 3 час. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют этилацетатом три раза. Органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и затем концентрируют. Полученный остаток растворяют в метаноле (8 мл) и добавляют 10% палладий на угле (50 мг, содержащий 50% воды) с последующим перемешиванием в течение ночи при атмосферном давлении в атмосфере водорода. Реакционный раствор фильтруют через Hyflo Super-Cel и растворитель выпаривают, получая целевое соединение (180 мг, 76%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 7,42 (1H, J=1,7 Гц), 6,10 (1H, д, J=1,7 Гц), 3,84 (3H, с), 3,57 (2H, т, J=7,1 Гц), 2,90 (2H, т, J=7,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 126 [M+H].
[0246]
(Стадия 3)
Синтез 5-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2-(1-метил-1H-пиразол-5-ил)этил)-1,3,4-тиадиазол-2-карбоксамида
Соединение (17 мг), полученное на стадии 2, и соединение (30 мг), полученное из примера получения E, растворяют в ДМФА и добавляют EDC·HCl (25 мг) и 1-гидроксибензотриазол (18 мг) с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют этилацетатом три раза. Органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и затем концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (17 мг, 46%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,32 (1H, с), 7,70 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,49 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,39 (1H, д, J=1,8 Гц), 7,24 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,09 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 6,11 (1H, д, J=1,8 Гц), 4,59 (2H, с), 3,91-3,71 (4H, м), 3,83 (3H, с), 3,07-2,94 (4H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 555 [M+H].
[0247]
Пример 36
6-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-((4-(трифторметил)тиазол-2-ил)метил)никотинамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (30 мг), полученное из примера сравнения 2-2, и 4-(трифторметил)тиазол-2-ил)метанамингидрохлорид (16 мг) вместо 2,2,2-трифторэтиламина и добавляя HATU (39 мг) и DIPEA (18 мг) вместо DMT-MM, получают 20 мг целевого соединения (выход 48%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,53 (1H, м), 8,84 (1H, с), 8,64 (1H, с), 8,41 (1H, с), 8,24 (2H, м), 8,11 (1H, с), 7,86 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,37 (1H, д, J=8,8 Гц), 4,78 (2H, д, J=6,2 Гц), 4,58 (2H, с), 3,84 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,92 (2H, т, 5,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 605 [M+H].
[0248]
Пример 37
(R)-N-(1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)-2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоксамид
(Стадия 1)
Синтез (R)-трет-бутил (1-гидразинил-1-оксопропан-2-ил)карбамата
Метиловый эфир Boc-D-аланина (2,0 г) растворяют в этаноле (50 мл) и добавляют гидразин моногидрат (0,6 мл) с последующим перемешиванием в течение ночи. По завершении взаимодействия добавляют этилацетат и воду для фракционирования. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют и сушат и полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 500 мг целевого соединения (выход 25%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,96 (1H, ш.с), 6,83 (1H, д, J=7,7 Гц), 4,16 (2H, ш.с), 3,91 (1H, т, 7,2 Гц), 1,36 (9H, с), 1,13 (3H, д, J=7,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 204 [M+H].
[0249]
(Стадия 2)
Синтез (R)-трет-бутил (1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)карбамата
Соединение, полученное на стадии 1, растворяют в триэтилортоформиате (11 мл) и перемешивают в течение ночи при 150°C. После взаимодействия его очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (960 мг) (выход 82%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,15 (1H, с), 7,62 (1H, м), 4,87 (1H, м), 1,45 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,38 (9H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 157 [M-трет-бутил+H].
[0250]
(Стадия 3)
Синтез (R)-1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этанамина
Соединение (200 мг), полученное на стадии 2, растворяют в 1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропаноле (4,7 мл) и перемешивают в течение 1 час. при 150°C и СВЧ-облучении. После охлаждения раствор концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение в виде маслянистого продукта (96 мг) (выход 91%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,13 (1H, с), 4,18 (1H, м), 2,12 (2H, ш.с), 1,38 (3H, д, J=6,8 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 114 [M+H].
[0251]
(Стадия 4)
Синтез (R)-N-(1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)-2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-4-(трифторметил)тиазол-5-карбоксамида
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (45 мг), полученное из примера 26 (стадия 2), вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, и (R)-1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этанамин (17 мг), полученный на стадии 3, вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают 29 мг целевого соединения (выход 55%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,38 (1H, д, J=6,8 Гц), 9,19 (1H, с), 8,74 (1H, с), 8,11 (1H, с), 7,84 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,43 (1H, с), 7,36 (1H, д, J=8,9 Гц), 5,33 (1H, т, J=7,2 Гц), 4,56 (2H, с), 3,84 (2H, т, J=5,5 Гц), 2,90 (2H, м), 1,55 (3H, д, J=7,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 610 [M+H].
[0252]
Пример 38
(R)-N-(1-(1,3,4-Оксадиазол-2-ил)этил)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотинамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (30 мг), полученное из примера сравнения 2-2, и соединение (15 мг), полученное на стадии 3 примера 37, вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают 12 мг целевого соединения (выход 33%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,50 (1H, с), 9,18-9,11 (2H, м), 8,80 (1H, с), 8,62 (1H, с), 8,24-8,17 (2H, м), 7,84 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,42 (1H, с), 7,35 (1H, д, J=8,9 Гц), 5,42 (1H, м), 4,56 (2H, с), 3,83 (2H, т, J=5,5 Гц), 2,90 (2H, м), 1,60 (3H, д, J=6,8 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 536 [M+H].
[0253]
Пример 39
(R)-N-(1-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)-5-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-1,3,4-тиадиазол-2-карбоксамид
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение, полученное из примера получения E, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, и соединение, полученное на стадии 3 примера 37, вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают целевое соединение (выход 44%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,74 (1H, д, J=7,5 Гц), 9,15 (1H, с), 8,77 (1H, с), 8,10 (1H, с), 7,84 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,43 (1H, с), 7,36 (1H, д, J=8,9 Гц), 5,41 (1H, м), 4,59 (2H, с), 3,85 (2H, т, J=5,5 Гц), 2,94 (2H, м), 1,62 (3H, д, J=7,5 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 543 [M+H].
[0254]
Пример 40
(R)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)никотинамид
(Стадия 1)
Синтез (R)-трет-бутил (1-оксо-1-(2-(2,2,2-трифторацетил)гидразинил)пропан-2-ил)карбамата
Соединение (400 мг), полученное на стадии 1 примера 37, растворяют в ацетонитриле (10 мл) и затем добавляют DIPEA (0,77 мл). В атмосфере азота смесь охлаждают до -45°C и добавляют трифторуксусный ангидрид (0,56 мл). Температуру смешанного раствора постепенно повышают и перемешивают в течение 30 мин. при комнатной температуре. Растворитель удаляют выпариванием при пониженном давлении и добавляют этилацетат и воду для фракционирования. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют и сушат и полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 236 мг целевого соединения (выход 40%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 4,90 (1H, м), 4,28 (1H, м), 1,46 (9H, с), 1,42 (3H, д, J=7,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 243 [M-трет-бутил+H].
[0255]
(Стадия 2)
Синтез (R)-трет-бутил (1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)карбамата
К ацетонитрильной суспензии (7,7 мл) соединения (230 мг), полученного на стадии 1, добавляют DIPEA (780 мкл) и трифенилфосфин (830 мг) с последующим перемешиванием в течение 5 мин. при комнатной температуре. После добавления гексахлорэтана (420 мг) смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель отгоняют при пониженном давлении и к остатку добавляют этилацетат и воду для фракционирования. После экстракции смесь промывают насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют и сушат и полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 142 мг целевого соединения (выход 65%).
1
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 5,18-5,11 (2H, м), 1,80-1,60 (3H, м), 1,45 (9H, с).
[0256]
(Стадия 3)
Синтез (R)-1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этанамина
Соединение (140 мг), полученное на стадии 2, растворяют в 1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропаноле (2,5 мл) и перемешивают в течение 1 час. при 150°C и СВЧ-облучении. После охлаждения выполняют концентрирование при пониженном давлении, получая целевое соединение в виде маслянистого продукта (99 мг, выход 99%).
1
3
H-ЯМР (CDCl) δ4,47-4,36 (3H, м), 1,63 (3H, д, J=7,0 Гц)
[0257]
(Стадия 4)
Синтез (R)-6-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(1-(5-(трифторметил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)этил)никотинамида
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение, полученное на стадии 3, вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают целевое соединение (41%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,53 (1H, ш.с), 9,22 (1H, д, J=7,3 Гц), 8,82 (1H, с), 8,64 (1H, с), 8,25-8,15 (2H, м), 7,86 (1H, д, J=9,0 Гц), 7,44 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,36 (1H, дд, J=9,0 Гц, 2,4 Гц), 5,50 (1H, д.кв, J=7,3 Гц, 7,1 Гц), 4,58 (2H, с), 3,85 (2H, м), 2,92 (2H, м), 1,66 (3H, д, J=7,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 604 [M+H]
[0258]
Пример 41
4-(4-((4-(4-(2-Гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)оксазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез этил 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)оксазол-4-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, используя этиловый эфир 2-аминооксазол-4-карбоновой кислоты (387 мг) вместо метил 6-аминоникотината и проводя взаимодействие в течение 20 мин. при 160°C и СВЧ-облучении вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (570 мг, 60%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,30 (1H, с), 7,95 (1H, с), 7,69 (1H, д, 8,9 Гц), 7,23 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,07 (1H, дд, J=2,4, 8,9 Гц), 4,47-4,34 (4H, м), 3,74 (2H, т, 5,5 Гц), 2,96 (2H, т, J=5,5 Гц), 1,39 (3H, т, J=7,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 459 [M+H].
[0259]
(Стадия 2)
Синтез 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)оксазол-4-карбоновой кислоты
Соединение (550 мг), полученное на стадии 1, суспендируют в этаноле (10 мл) и добавляют 2,0 моль/л водный раствор гидроксида натрия (4,8 мл) с последующим перемешиванием в течение 6 час. при 60°C. Реакционный раствор концентрируют и разбавляют дистиллированной водой. Используя 2,0 моль/л соляную кислоту, доводят pH до значения примерно 5. Осажденное твердое вещество собирают фильтрованием, получая целевое соединение (495 мг, 96%).
+
МС низкого разрешения (ESI) m/z 431 [M+H].
[0260]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((4-(4-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)оксазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (15 мг), полученное на стадии 2, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, 2-(пиперидин-4-ил)пропан-2-ол (6 мг) вместо 2,2,2-трифторэтиламина и HATU (20 мг) и DIPEA (12 мкл) вместо DMT-MM, получают целевое соединение (4,8 мг, 25%).
1
+
3
H-ЯМР (CDOD) δ: 8,40 (1H, с), 7,99 (1H, ш.с), 7,95-7,85 (1H, м), 7,77 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,38 (1H, д, J=2,3 Гц), 7,29 (1H, дд, J=2,3, 8,8 Гц), 4,75-4,60 (2H, м), 4,48 (2H, ш.с), 3,84-3,80 (2H, м), 3,32-3,24 (2H, м), 2,90-2,65 (3H, м), 1,95-1,80 (2H, м), 1,66-1,58 (1H, м), 1,41-1,25 (2H, м), 1,17 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 556 [M+H].
[0261]
Пример 42
4-(4-((5-(4-(2-Гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)оксазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез этил 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)оксазол-5-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, используя этиловый эфир 2-аминооксазолe-5-карбоновой кислоты (276 мг) вместо метил 6-аминоникотината, и проводя взаимодействие в течение 25 мин. при 160°C и СВЧ-облучении вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (180 мг, 27%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,28 (1H, с), 7,68-7,77 (3H, с), 7,23 (1H, д, 2,6 Гц), 7,08 (1H, дд, J=2,6, 8,8 Гц), 4,45-4,36 (4H, м), 3,75 (2H, т, 5,7 Гц), 2,98 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,39 (3H, т, J=7,2 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 459 [M+H].
[0262]
(Стадия 2)
Синтез 2-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)оксазол-5-карбоновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как на стадии 2 примера 41, и используя соединение (180 мг), полученное на стадии 1 этого примера вместо соединения, полученного на стадии 1 примера 41, получают целевое соединение (137 мг, 81%).
+
МС низкого разрешения (ESI) m/z 431 [M+H].
[0263]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((5-(4-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)оксазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (25 мг), полученное на стадии 2, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, 2-(пиперидин-4-ил)пропан-2-ол (10 мг) вместо 2,2,2-трифторэтиламина и HOBt (10 мг) и WSC (13 мг) вместо DMT-MM, получают целевое соединение (8,6 мг, 27%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,26 (1H, с), 7,69 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,60 (1H, с), 7,29-7,21 (1H, м), 7,07 (1H, дд, J=2,2, 8,8 Гц), 4,75-4,60 (2H, м), 4,42 (2H, с), 3,75 (2H, т, J=5,7 Гц), 3,06-2,92 (2H, м), 1,94-1,86 (2H, м), 1,61 (2H, дт, J=2,9, 12,1 Гц), 1,39-1,16 (9H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 556 [M+H].
[0264]
Пример 43
4-(4-((5-(4-(2-Гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез этил 5-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-1,3,4-оксадиазол-2-карбоксилата
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, используя этиловый эфир 5-амино-1,3,4-оксадиазол-2-карбоновой кислоты (418 мг) вместо метил 6-аминоникотината и проводя взаимодействие в течение 30 мин. при 150°C и СВЧ-облучении вместо перемешивания в течение ночи при 80°C, получают целевое соединение (120 мг, 15%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,59 (1H, с), 7,88 (1H, д, 8,8 Гц), 7,46 (1H, д, 2,6 Гц), 7,38 (1H, дд, J=2,6, 8,8 Гц), 4,55 (2H, с), 4,40 (2H, кв, 7,0 Гц), 3,83 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,80 (2H, т, J=5,9 Гц), 1,34 (3H, т, J=7,0 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 460 [M+H].
[0265]
(Стадия 2)
Синтез 4-(4-((5-(4-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-1-карбонил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (30 мг), полученное на стадии 1, растворяют в этаноле (2 мл) и ТГФ (2 мл) и добавляют 1,0 моль/л водный раствор гидроксида натрия (130 мкл) с последующим перемешиванием в течение 5 мин. при комнатной температуре. Реакционный раствор охлаждают на льдуи доводят pH примерно до 5, используя 1,0 моль/л соляную кислоту, с последующим концентрированием и сушкой. Полученное твердое вещество растворяют в метаноле (1 мл) и ДМФА (1 мл) и добавляют 2-(пиперидин-4-ил)пропан-2-ол (11 мг) и DMT-MM (21 мг) с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют 2-(пиперидин-4-ил)пропан-2-ол (10 мг) и DMT-MM (88 мг) и далее перемешивают при комнатной температуре в течение 6 час. Добавляют к реакционному раствору воду и осадок собирают фильтрованием. Полученное твердое вещество очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (5,0 мг, 14%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,56 (1H, ш.с), 7,87 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,46 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,38 (1H, дд, J=2,2, 8,8 Гц), 4,69-4,43 (4H, м), 4,20 (1H, с), 3,81 (2H, т, J=5,7 Гц)3,17-3,04 (1H, м), 2,85-2,61 (3H, м), 1,80 (2H, т, J=12,8 Гц), 1,57-1,45 (1H, м), 1,31-1,12 (2H, м), 1,03 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 557 [M+H].
[0266]
Пример 44
2-Бром-4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез метил 6-((7-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотината
2
Согласно примеру сравнения 2-1, коммерчески доступный 7-бензил-4-хлор-5,6,7,8-тетрагидропиродопиридо[3,4-d]пиримидин (5,37 г), метил 6-аминоникотинат (3,45 г), Pd(dba) (1,19 г), dppf (1,15 г) и карбонат калия (5,70 г) суспендируют в 1,2-диметоксиэтане (100 мл) и перемешивают в течение 1 час. при 83°C в атмосфере азота. После охлаждения реакционного раствора до комнатной температуры к нему добавляют воду (400 мл). Полученное твердое вещество собирают фильтрованием, суспендируют и промывают смесью метанол/вода (3/1, 60 мл) с последующим суспендированием и промыванием толуолом (60 мл). После сушки при нагревании получают целевое соединение (5,18 г, выход 67%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,39 (1H, с), 8,84 (1H, с), 8,57 (1H, с), 8,32 (1H, д, J=8,0 Гц), 8,26 (1H, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,40-7,20 (5H, м), 3,86 (3H, с), 3,69 (2H, с), 3,48 (2H, с), 2,80-2,70 (4H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 376 [M+H].
[0267]
(Стадия 2)
Синтез 2-(6-((7-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)пропан-2-ола
В атмосфере азота, соединение (5,0 г), полученное на стадии 1, суспендируют в ТГФ (16 мл) при охлаждении на льду, добавляют туда по капле ТГФ-раствор (47 мл) 1 моль/л метилмагнийбромида за 5 мин. По завершении капельного добавления повышают температуру до комнатной и перемешивают реакционный раствор при той же температуре в течение 3,5 час. Реакционный раствор снова охлаждают на льду и добавляют 2 моль/л соляную кислоту (24 мл) при температуре 20°C или менее. Нерастворимые вещества удаляют фильтрованием через целит, полученный масляный слой сушат над сульфатом магния и отгоняют растворитель при пониженном давлении. К полученному маслянистому продукту добавляют мета-ксилол (25 мл) и перемешивают при охлаждении на льду для осаждения твердого вещества. Осадившийся продукт собирают фильтрованием, затем сушат при нагревании, получая целевое соединение (2,44 г, выход 49%).
1
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,78 (1H, с), 8,44 (1H, с), 8,40 (1H, д, J=4,0 Гц), 8,07 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,82 (1H, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,40-7,25 (5H, м), 5,14 (1H, с), 3,68 (2H, с), 3,43 (2H, с), 2,80-2,65 (4H, м), 1,45 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 376 [M+H]+
[0268]
(Стадия 3)
Синтез 2-(6-((5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)пропан-2-ола
Соединение (1,0 г), полученное на стадии 2, растворяют в этаноле (10 мл), и добавляют 10% палладий на угле (продукт 50% влажности, 600 мг), с последующим перемешиванием при 60°C в течение 7 час. в атмосфере водорода. Нерастворимые вещества удаляют фильтрованием через целит и фильтрат концентрируют. К полученному маслянистому продукту добавляют метилизобутилкетон (12 мл) и получают осадок при охлаждении. Твердое вещество собирают фильтрованием, сушат и нагревают при пониженном давлении, получая осадок, который собирают фильтрованием, получая целевое соединение (576 мг, выход 76%).
[0269]
(Стадия 4)
Синтез 2-бром-4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрила
Соединение (20 мг), полученное на стадии 3, 2-бром-4-фторбензонитрил (21 мг) и карбонат калия (15 мг) растворяют в ДМСО (0,2 мл) и перемешивают при 125°C в течение 25 мин. и СВЧ-облучении. Реакционную смесь очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой и полученную фракцию концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение в виде белого аморфного продукта (15 мг, 46%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,67 (1H, с), 8,47 (1H, д, J=8,8 Гц), 8,42 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,87 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 7,51 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,36 (1H, ш.с), 7,17 (1H, д, J=2,6 Гц), 6,89 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,45 (2H, с), 3,81 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,83 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,62 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 465 [M+H].
[0270]
Пример 45
2-Хлор-4-(4-((4-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 4-фтор-5-йодпиридин-2-амина
4-Фторпиридин-2-амин (1,20 г) растворяют в ацетонитриле (24 мл) и добавляют N-йодсукцинимид (2,41 г) при охлаждении на льду и в условиях без доступа света с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. Полученный реакционный раствор концентрируют и очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 132 мг (5%) целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.
[0271]
(Стадия 2)
Синтез этил 6-амино-4-фторпиридин-3-карбоксилата
Соединение (132 мг), полученное на стадии 1, ацетат палладия (II) (31 мг), dppf (77 мг) и триэтиламин (0,23 мл) суспендируют в этаноле (26 мл) и перемешивают при 60°C в течение двух дней и ночей в атмосфере монооксида углерода (0,5 МПа). Реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении и добавляют этилацетат (20 мл) и дистиллированную воду (20 мл) с последующим фильтрованием через целит. Органический слой промывают дистиллированной водой и насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, а фильтрат концентрируют и сушат. Полученное твердое вещество очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 67 мг (66%) целевого соединения грязно-белого твердого вещества.
[0272]
(Стадия 3)
Синтез этил 6-((7-(3-хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-4-фторникотината
2
3
Соединение (139 мг), полученное из примера сравнения 1-3, соединение (60 мг), полученное на стадии 2, Pd(dba) (30 мг), XantPhos (38 мг) и карбонат цезия (318 мг) суспендируют в диоксане (1,2 мл) и перемешивают в течение 4 час. при 80°C в атмосфере азота. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через целит. Фильтрат концентрируют и полученное твердое вещество очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая 14 мг (9%) целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.
[0273]
(Стадия 4)
Синтез 2-хлор-4-(4-((4-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрила
Соединение (14 мг), полученное на стадии 3, растворяют в ТГФ (1,4 мл) и добавляют метилмагнийбромид (3 моль/л раствор в диэтиловом эфире, 0,11 мл) на бане со льдом с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 час. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (3 мл) с последующей экстракцией хлороформом три раза. Органический слой объединяют, сушат над сульфатом магния, нерастворимые вещества отделяют фильтрованием и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой, получая 2,1 мг (16%) целевого соединения в виде желтого твердого вещества.
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,70 (1H, с), 8,47 (1H, д, J=11,0 Гц), 8,37 (1H, д, J=14,3 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, ш.с), 6,99 (1H, д, J=2,6 Гц), 6,85 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,47 (2H, с), 3,81 (2H, т, J=5,9 Гц), 2,83 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,67 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 439 [M+H].
[0274]
Пример 46
2-Хлор-4-(4-((6-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез этил 6-амино-2-фторникотината
Выполняя такую же операцию, как на стадии 2 примера 5, и используя этанол вместо метанола, получают целевое соединение.
[0275]
(Стадия 2)
Этил 6-((7-(3-хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-2-фторникотинат
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя соединение, полученное из примера сравнения 1-2, и соединение, полученное на стадии 1, получают целевое соединение.
[0276]
(Стадия 3)
2-Хлор-4-(4-((6-фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как на стадии 4 примера 45, и используя соединение (30 мг), полученное на стадии 3, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества (4,2 мг, 14%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,70 (1H, с), 8,39 (1H, дд, J=8,4, 1,8 Гц), 8,06 (1H, дд, J=10,6, 8,4 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,00 (1H, д, J=2,6 Гц), 6,85 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,47 (2H, с), 3,81 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,80 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,65 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 439 [M+H].
[0277]
Пример 47
4-(4-((4-Фтор-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере 46, и используя этил 6-амино-4-фторникотинат, который синтезирован в на стадии 2 примера 5, используя 4-фторпиридин-2-амин вместо 6-фторпиридин-2-амина и используя соединение, полученное из примера сравнения 1-2, вместо соединения, полученного из примера сравнения 1-3, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества (21,3 мг, 20%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,70 (1H, с), 8,47 (1H, д, J=11,0 Гц), 8,37 (1H, д, J=14,3 Гц), 7,70 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,45 (1H, ш.с), 7,25 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,08 (1H, дд, J=8,6, 2,6 Гц), 4,47 (2H, с), 3,80 (2H, т, J=6,0 Гц), 2,83 (2H, т, J=5,8 Гц), 1,67 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 473 [M+H].
[0278]
Пример 48
5-((7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2-дифторэтил)пиколинамид
(Стадия 1)
Синтез 5-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)пиридин-3-ил)пиколиновой кислоты
Выполняя такую же операцию, как в примерах сравнения 2-1 и 2-2, и используя метил 5-аминопиколинат (540 мг) вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение (496 мг, выход второй стадии 38%).
[0279]
(Стадия 2)
Синтез 5-((7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2-дифторэтил)пиридин-3-ил)пиколинамида
Выполняя такую же операцию, как в примере 11, и используя соединение (40 мг), полученное на стадии 1, вместо соединения, полученного из примера сравнения 2-2, HATU (69 мг) и DIPEA (63 uL) вместо DMT-MM и 2,2-дифторэтиламин вместо 2,2,2-трифторэтиламина, получают целевое соединение (24 мг) (выход 52%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,13 (ш.с, 1H), 8,97 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,94 (т, J=6,2 Гц, 1H), 8,55 (с, 1H), 8,41 (дд, J=8,6, 2,4 Гц, 1H), 8,02 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,88 (д, J=9,1 Гц, 1H), 7,45 (ш.д, J=2,2 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=9,1,2,2 Гц, 1H), 5,94-6,33 (м, 1H), 4,57 (с, 2H), 3,90 (ш.т, J=5,5 Гц, 2H), 3,63-3,74 (м, 2H), 3,25 (ш.с, 1H), 2,87 (т, J=5,5 Гц, 2H); МС низкого разрешения (ESI) m/z 504 [M+H].
[0280]
Пример 49
6-((7-(3-Хлор-4-цианофенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)пиридазин-3-карбоксамид
При взаимодействии соединения (9,0 мг), полученного на стадии 3 примера 29, с 2,2,2-трифторэтиламином (4,4 мг) согласно примеру 29 получают целевое соединение (7,0 мг, 65%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 10,27 (ш.с, 1H), 9,58 (т, J=6,6 Гц, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,47 (д, J=9,5 Гц, 1H), 8,18 (д, J=9,5 Гц, 1H), 7,70 (д, J=9,0 Гц, 1H), 7,33 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,13 (дд, J=9,0, 2,4 Гц, 1H), 4,56 (с, 2H), 4,06-4,17 (м, 2H), 3,82 (т, J=5,6 Гц, 2H), 2,97 (ш.т, J=5,6 Гц, 2H); МС низкого разрешения (ESI) m/z 489 [M+H].
[0281]
Пример 50
4-(4-((5-Фтор-6-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере 15, и используя 2-хлор-3-фтор-5-нитропиридин (100 мг) вместо 2-хлор-5-нитропиридина и 2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропан-1-ол (97 мг), полученный на стадии 1 примера 16, вместо 2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этанола, получают целевое соединение (40 мг, 49%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,59 (с, 1H), 8,82 (ш.с, 1H), 8,43 (с, 1H), 8,14 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,05 (дд, J=12,1,2,2 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,44 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=8,8, 2,6 Гц, 1H), 4,67 (с, 2H), 4,52 (с, 2H), 3,88 (т, J=5,7 Гц, 2H), 2,78 (ш.т, J=5,5 Гц, 2H), 1,77 (с, 6H); МС низкого разрешения (ESI) m/z 555 [M+H].
[0282]
Пример 51
4-(4-((5-Фтор-6-(2-метил-2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез этил 2-метил-2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)пропанoата
Этил 2-азид-2-метилпропанoат (3,1 г) растворяют в толуоле (190 мл) и добавляют этинилтриметилсилан (13 мл) с последующим перемешиванием при 130°C в течение 36 час. Реакционный раствор концентрируют, сушат и очищают полученный остаток методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая сырой маслянистый продукт (2,16 г). Полученный маслянистый продукт растворяют в ТГФ (20 мл) и добавляют ТГФ-раствор (9,8 мл) 1,0 моль/л фторида тетрабутиламмония с последующим перемешиванием в течение 15 час. при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют ТГФ-раствор (3,0 мл) 1,0 моль/л фторида тетрабутиламмония с последующим перемешиванием в течение 7 час. при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония, экстрагируют этилацетатом и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, а фильтрат концентрируют и сушат. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевой продукт (500 мг, 42%).
[0283]
(Стадия 2)
Синтез 2-метил-2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)пропан-1-ола
Соединение (420 мг), полученное на стадии 1, растворяют в ТГФ (10 мл) и затем добавляют ТГФ-раствор (10 мл) литийалюминийгидроксида (130 мг) при охлаждении на льду. После перемешивания в течение 2 час. при охлаждении на льду добавляют по капле воду (132 мкл), 1,0 моль/л водный раствор гидроксида натрия (132 мкл) и воду (400 мкл). Реакционный раствор фильтруют через целит и промывают этилацетатом. Фильтрат концентрируют, сушат и полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевой продукт (240 мг, 74%).
[0284]
(Стадия 3)
Синтез 4-(4-((5-фтор-6-(2-метил-2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере 15, и используя 2-хлор-3-фтор-5-нитропиридин (100 мг) вместо 2-хлор-5-нитропиридина и 2-метил-2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)пропан-1-ол (80 мг), полученный на стадии 2, вместо 2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этанола, получают целевое соединение (54 мг, 66%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,82 (ш.с, 1H), 8,43 (с, 1H), 8,26 (с, 1H), 8,17 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,05 (дд, J=12,3, 2,1 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,44 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 4,66 (с, 2H), 4,52 (ш.с, 2H), 3,89 (т, J=5,6 Гц, 2H), 2,78 (ш.т, J=5,6 Гц, 2H), 1,73 (с, 6H); МС низкого разрешения (ESI) m/z 554 [M+H].
[0285]
Пример 52
4-(4-((5-Хлор-6-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-3-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как в примере 15, и используя 2,3-дихлор-5-нитропиридин (100 мг) вместо 2-хлор-5-нитропиридина и 2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропан-1-ол (88 мг), полученный на стадии 1 примера 16, вместо 2-(1H-1,2,3-триазол-1-ил)этанола, получают целевое соединение (33 мг, 39%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,58 (с, 1H), 8,79 (с, 1H), 8,44 (с, 1H), 8,30 (д, J=2,5 Гц, 1H), 8,22 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,44 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 4,64 (с, 2H), 4,52 (ш.с, 2H), 3,89 (т, J=5,6 Гц, 2H), 2,78 (ш.т, J=5,6 Гц, 2H), 1,79 (с, 6H); МС низкого разрешения (ESI) m/z 571 [M+H].
[0286]
Пример 53
2-Хлор-4-(4-((5-(2-метил-2-(1H-тетразол-1-ил)пропокси)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Выполняя такую же операцию, как на стадии 4 примера 17, и используя соединение (42 мг), полученное на стадии 3 примера 17, и соединение (50 мг), полученное из примера сравнения 1-3, вместо соединения, полученного из примера сравнения 1-2, получают целевое соединение (27 мг, 33%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,61 (с, 1H), 8,97 (ш.с, 1H), 8,47 (с, 1H), 7,97-8,02 (м, 2H), 7,67 (д, J=9,2 Гц, 1H), 7,40 (дд, J=9,0, 3,1 Гц, 1H), 7,29 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,09 (дд, J=9,2,2,2 Гц, 1H), 4,45 (ш.с, 2H), 4,36 (с, 2H), 3,78 (т, J=5,6 Гц, 2H), 2,80 (ш.т, J=5,6 Гц, 2H), 1,77 (с, 6H); МС низкого разрешения (ESI) m/z 503 [M+H].
[0287]
Пример 54
2-Хлор-4-(4-((4-метоксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Твердое вещество (5,0 мг), полученное из примера сравнения 1-3, 4-метоксианилин (11 г) и (+)-10-камфорсульфоновую кислоту (3,8 мг) суспендируют в 2-пропаноле (1 мл) при СВЧ-облучении, перемешивают в течение 1 час. при 120°C. Реакционный раствор концентрируют и сушат в токе азота, остатки очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой и полученную фракцию концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение (1,7 мг, 26%).
1
+
3
H-ЯМР (400МГц, CDCl) δ: 8,54 (1H, с), 7,52 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,41 (2H, ш.д, J=8,8 Гц), 6,99 (1H, с), 6,93 (2H, д, J=8,8 Гц), 6,84 (1H, ш.д, J=9,2 Гц), 6,34 (1H, ш.с), 4,45 (2H, с), 3,82 (3H, с), 3,78-3,84 (2H, м), 2,73 (2H, ш.с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 392 [M+H].
[0288]
Пример 55
2-Хлор-4-(4-((3-метоксифенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Твердое вещество (12 мг), полученное из примера сравнения 1-3, 3-метоксианилин (15 мг) и (+)-10-камфорсульфоновую кислоту (5,3 мг) суспендируют в трет-бутаноле (1 мл) при СВЧ-облучении и перемешивают в течение 45 мин. при 115°C. Реакционный раствор концентрируют и сушат в токе азота, остатки очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой и полученную фракцию концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение (5,5 мг, 36%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,80 (1H, с), 7,52 (1H, д, J=9,2 Гц), 7,45-7,58 (2H, м), 7,07 (1H, ш.д, J=9,2 Гц), 6,99 (1H, с), 6,85 (1H, д, J=7,1 Гц), 6,72 (1H, д, J=7,2 Гц), 6,48 (1H, ш.с), 4,45 (2H, с), 3,84 (3H, с), 3,78-3,84 (2H, м), 2,67-2,84 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 392 [M+H].
[0289]
Пример 56
2-Хлор-4-(4-((6-фтор-5-(1-гидроксициклобутил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 1-(6-хлор-2-фтор-3-пиридил)циклобутанола
ТГФ-раствор (15 мл) 2-хлор-6-фторпиридина (910 мг) охлаждают до -78°C и затем добавляют к нему по капле LDA (2 моль/л ТГФ-раствор, 5,2 мл). Реакционный раствор перемешивают при -78°C в течение 45 мин. и добавляют к нему по капле циклобутанон (480 мг) с последующим перемешиванием при -78°C в течение 90 мин. К реакционному раствору добавляют этилацетат и воду, органический слой промывают последовательно насыщенным водным раствором хлорида аммония и насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом натрия. Нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют и сушат. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение в виде бесцветного маслянистого продукта (1,5 г).
[0290]
(Стадия 2)
Синтез 1-(6-амино-2-фтор-3-пиридил)циклобутанола
Соединение (200 мг), полученное на стадии 1, и оксид меди(I) (30 мг) суспендируют в смешанном растворителе NMP (2 мл)/28% аммиачная вода и перемешивают в течение 2 час. при 110°C и СВЧ-облучении. Растворитель отгоняют при пониженном давлении и остатки очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (8,4 мг, 4,6%).
[0291]
(Стадия 3)
Синтез 2-хлор-4-(4-((6-фтор-5-(1-гидроксициклобутил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрила
Выполняя такую же операцию, как в примере сравнения 2-1, и используя твердое вещество (7,2 мг), полученное из примера сравнения 1-3, вместо соединения, полученного из примера сравнения 1-2, и соединение (4,2 мг), полученное на стадии 2, вместо метил 6-аминоникотината, получают целевое соединение в виде желтого аморфного продукта (2,0 мг, 19%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,71 (1H, с), 8,40 (1H, дд, J=8,8, 2,2 Гц), 7,86 (1H, дд, J=11,0, 8,1 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,1 Гц), 7,00 (1H, д, J=2,2 Гц), 6,85 (1H, дд, J=8,8, 2,2 Гц), 4,48 (2H, с), 3,75-3,86 (2H, м), 2,76-2,86 (2H, м), 2,56-2,72 (2H, м), 2,33-2,48 (2H, м), 2,07-2,22 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 451 [M+H].
[0292]
Пример 57
4-(4-((2-Гидроксипропан-2-ил)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 4-(4-((4-ацетилфенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (8,2 мг), полученное из примера сравнения 1-2, 1-(4-аминофенил)этанон (8,3 мг) и (+)-10-камфорсульфоновую кислоту (2,9 мг) суспендируют в трет-бутаноле (1 мл) при СВЧ-облучении и перемешивают в течение 90 мин. при 135°C. Реакционный раствор концентрируют и сушат в токе азота, остатки очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой и полученную фракцию концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение (7,9 мг, 75%).
[0293]
(Стадия 2)
Синтез 4-(4-((2-гидроксипропан-2-ил)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
К ТГФ-раствору (0,5 мл) соединения (2,5 мг), полученного на стадии 1, добавляют метилмагнийбромид (2M ТГФ-раствор, 0,1 мл) при комнатной температуре и реакционный раствор перемешивают в течение 15 мин. при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и сушат в токе азота, остатки очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой и полученную фракцию концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение в виде белого твердого вещества (1,8 мг, 69%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,60 (1H, с), 7,70 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (4H, с), 7,24 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,07 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 6,42 (1H, с), 4,51 (2H, с), 3,89 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,78 (2H, т, J=5,6 Гц), 1,61 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 454 [M+H].
[0294]
Пример 58
4-(4-((1-Гидроксиэтил)фенил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
К метанольному раствору (0,5 мл) соединения (1,7 мг), полученного из примера 57 (стадия 1), добавляют тетрагидроборат натрия (3 мг) при комнатной температуре и перемешивают реакционный раствор в течение 15 мин. при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и сушат в токе азота, остатки очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой и полученную фракцию концентрируют при пониженном давлении, получая целевое соединение в виде белого твердого вещества (1,6 мг, 94%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,60 (1H, с), 7,70 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,53-7,60 (2H, м), 7,38-7,46 (2H, м), 7,20-7,30 (1H, м), 7,03-7,13 (1H, м), 6,42 (1H, д, 9,2 Гц), 4,88-4,98 (1H, м), 4,51 (2H, с), 3,85-3,93 (2H, м), 2,75-2,85 (2H, м), 1,49-1,56 (3H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 440 [M+H].
[0295]
Сравнительный пример 1
N-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-3-((4-фторфенил)сульфонил)-2-гидрокси-2-метилпропанамид (бикалутамид)
Синтез выполняют согласно способу, описанному в J. Org. Chem., 2003, 68 (26): 10181-2.
[0296]
Сравнительный пример 2
4-(4-((4-Изопропоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[4,3-d]пиримидин-6(5H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 6-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-d]пиримидин-4-ола
К этил 1-бензил-4-оксопиперидин-3-карбоксилатгидрохлориду (5,31 г) добавляют формамидингидрохлорид (1,67 г) и метилат натрия (30 мл, 28% метанольный раствор) и перемешивают в течение ночи при 85°C. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют 5 раз хлороформом, сушат над сульфатом натрия и концентрируют, получая целевое соединение (3,16 г, 77%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 7,81 (1H, с), 7,32-7,23 (5H, м), 3,58 (2H, с), 3,09 (2H, с), 2,58 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,43 (2H, т, J=5,7 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 242 [M+H].
[0297]
(Стадия 2)
Синтез (4-(4-гидрокси-7,8-дигидропиридо[4,3-d]пиримидин-6(5H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (3,16 г), полученное на стадии 1, растворяют в метаноле (8 мл) и добавляют 10% палладий на угле (содержащий 50% воды, 600 мг) и формиат аммония (4,13 г) с последующим перемешиванием в течение 2 дней при 60°C. Реакционный раствор фильтруют через Hyflo Super-Cel, остатки промывают метанолом и ДМСО и метанол отгоняют из фильтрата при пониженном давлении. К полученному раствору добавляют 4-фтор-2-(трифторметил)бензонитрил (2,70 г) и перемешивают в течение 2 дней при 40°C. Добавляют к реакционному раствору воду, экстрагируют этилацетатом три раза и органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором. Полученный раствор сушат над сульфатом натрия с последующим концентрированием при пониженном давлении, получая целевое соединение (4,03 г, 44%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,07 (1H, с), 7,85 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,34 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,28 (1H, дд, J=8,9, 2,2 Гц), 4,20 (2H, с), 3,75 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,72 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 321 [M+H].
[0298]
(Стадия 3)
Синтез (4-(4-хлор-7,8-дигидропиридо[4,3-d]пиримидин-6(5H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
+
Соединение (1,82 г), полученное на стадии 2, растворяют в 1,2-дихлоэтане (10 мл) и добавляют оксихлорид фосфора (5,3 мл) и триэтиламин (1,73 мл) с последующим перемешиванием в течение 2 час. при 90°C. Реакционный раствор выливают в воду со льдом и проводят нейтрализацию, осторожно добавляя твердый карбонат калия. Полученный раствор экстрагируют хлороформом три раза, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (1,09 г, 57%). МС низкого разрешения (ESI) m/z 339 [M+H].
[0299]
(Стадия 4)
Синтез 4-(4-((4-изопропоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[4,3-d]пиримидин-6(5H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (60 мг), полученное на стадии 3, растворяют в ацетонитриле (1,5 мл) и добавляют 4-изопропоксианилин (40 мг) с последующим перемешиванием в течение 30 мин. при 180°C и СВЧ-облучении. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, экстрагируют хлороформом три раза и органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (82 мг, 100%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,57 (1H, с), 7,69 (1H, д, J=8,8 Гц)7,41-7,37 (2H, м), 7,23 (1H, д, J=2,6 Гц), 7,10 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 6,95-6,90 (2H, м), 6,30 (1H, ш.с), 4,55 (1H, септ, J=6,1 Гц), 4,30 (2H, с), 3,82 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,06 (2H, т, J=5,9 Гц), 1,36 (6H, д, J=6,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 454 [M+H].
[0300]
Сравнительный пример 3
4-(3-((4-Изопропоксифенил)амино)-5,6-дигидро[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил
(Стадия 1)
Синтез 2-хлор-3-гидразинилпиразина
2,3-Дихлорпиразин (25 г) растворяют в этаноле (500 мл) и добавляют гидразинмоногидрат (16,7 мл) с последующим перемешиванием в течение 1,5 час. при кипении с обратным холодильником. Добавляют к реакционному раствору воду, осажденное твердое вещество собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении. Перекристаллизацией полученного твердого вещества из этанола получают целевое соединение (18,12 г, 74%).
[0301]
(Стадия 2)
Синтез 8-хлор-[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразина
Смесь соединения (8 г), полученного на стадии 1, и триэтилортоформиата (32 мл) перемешивают в течение 4 час. при кипении с обратным холодильником. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и осажденное твердое вещество фильтруют, промывают этанолом и сушат при пониженном давлении, получая целевое соединение (8,10 г, 95%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,53 (1H, с), 8,62 (1H, д, J=4,6 Гц), 7,76 (1H, д, J=4,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 155 [M+H].
[0302]
(Стадия 3)
Синтез трет-бутил 5,6-дигидро-[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразин-7(8H)-карбоксилата
Соединение (8,10 г), полученное на стадии 2, оксид платины (IV) и 10% палладий на угле (2 г, содержащий 50% воды) растворяют в метаноле (8 мл) и перемешивают в течение 34 час. в атмосфере водорода при 345 кПа (аппарат Парра). Реакционный раствор фильтруют через Hyflo Super-Cel. Маслянистый продукт, полученный при выпаривании растворителя, растворяют в дихлорметане (200 мл) и добавляют N,N-диизопропилэтиламин (10 мл) и ди-трет-бутилбикарбонат (11,4 г) с последующим перемешиванием в течение 3 час. при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и экстрагируют хлороформом три раза. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (2,55 г, 22%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 8,15 (1H, с), 4,84 (2H, с), 4,09 (1H, т, J=5,5 Гц), 3,88 (1H, т, J=5,5 Гц), 1,50 (9H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 225 [M+H].
[0303]
(Стадия 4)
Синтез трет-бутил 3-бром-5,6-дигидро-[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразин-7(8H)-карбоксилата
Соединение (1 г), полученное на стадии 3, растворяют в хлороформе (20 мл) и добавляют гидрокарбонат натрия (688 мг) и N-бромсукцинимид (873 мг) при 0°C с последующим перемешиванием в течение 2,5 час. при комнатной температуре. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют хлороформом три раза. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (693 мг, 51%).
+
МС низкого разрешения (ESI) m/z 303 [M+H].
[0304]
(Стадия 5)
Синтез 4-(3-бром-5,6-дигидро-[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (53 мг), полученное на стадии 4, растворяют в хлороформе (2 мл) и добавляют трифторуксусную кислоту (0,2 мл) с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. Маслянистый продукт, полученный концентрированием реакционного раствора при пониженном давлении, растворяют в N,N-диметилформамиде (1,5 мл), добавляют карбонат цезия (111 мг) и 4-фтор-2-(трифторметил)бензонитрил (64 мг) с последующим перемешиванием при 200°C в течение 2 час. Добавляют к реакционному раствору воду и экстрагируют этилацетатом три раза. Органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (19 мг, 30%).
+
МС низкого разрешения (ESI) m/z 372 [M+H].
[0305]
(Стадия 6)
Синтез 4-(3-((4-изопропоксифенил)амино)-5,6-дигидро[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила
Соединение (19 мг), полученное на стадии 5, растворяют в диоксане (1 мл) и добавляют 4-изопропоксианилин (12 мг) и 4N соляную кислоту в диоксане (64 мкл) с последующим перемешиванием в течение 20 мин. при 180°C и СВЧ-облучении. К реакционному раствору добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и экстрагируют хлороформом три раза. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный остаток очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, получая целевое соединение (13 мг, 57%).
1
+
3
H-ЯМР (CDCl) δ: 7,71 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,29 (1H, с), 7,18-7,12 (3H, м), 7,03 (1H, дд, J=8,8, 2,7 Гц), 6,88-6,79 (2H, м), 4,66 (2H, с), 4,45 (1H, септ, J=6,1 Гц), 3,83 (4H, ш.с), 1,31 (6H, д, J=6,1 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 443 [M+H].
[0306]
Сравнительный пример 4
7-(3-Хлорпиридин-2-ил)-N-(4-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-амин
Синтез выполняют согласно способу, описанному в патентных публикациях 1 или 3.
[0307]
Сравнительный пример 5
3-Хлор-4-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Соединение (74 мг), полученное на стадии 3 примера 44, 3-хлор-4-фторбензонитрил (40 мг) и карбонат натрия (82 мг) добавляют к ДМСО (2 мл) и проводят взаимодействие в течение 3 час. при 120°C. Нерастворимые вещества отфильтровывают и получают целевое соединение методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой (26 мг, 24%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 8,92 (1H, с), 8,52 (1H, с), 8,42 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,07 (1H, д, J=8,8 Гц), 8,01 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,84 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 7,79 (1H, дд, J=8,4, 2,0 Гц), 7,36 (1H, д, J=8,4 Гц), 5,14 (1H, с), 4,26 (2H, с), 3,53 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,90 (2H, т, J=5,6 Гц), 1,46 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 421 [M+H]
[0308]
Сравнительный пример 6
3-Хлор-5-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Соединение (74 мг), полученное на стадии 3 примера 44, 3-хлор-5-фторбензонитрил (40 мг) и карбонат натрия (82 мг) добавляют к ДМСО (2 мл) и проводят взаимодействие в течение 15 час. при 120°C. Нерастворимые вещества отфильтровывают и получают целевое соединение методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой (17 мг, выход 15%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 8,99 (1H, с), 8,53 (1H, с), 8,42 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,04 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,83 (1H, дд, J=8,8, 2,8 Гц), 7,51 (1H, с), 7,43 (1H, т, J=2,4 Гц), 7,26 (1H, с), 5,13 (1H, с), 4,40 (2H, с), 3,73 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,85 (2H, т, J=5,6 Гц), 1,46 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 421 [M+H].
[0309]
Сравнительный пример 7
2-Хлор-6-(4-((5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Соединение (74 мг), полученное на стадии 3 примера 44, 2-хлор-6-фторбензонитрил (40 мг) и карбонат натрия (82 мг) добавляют к ДМСО (2 мл) и проводят взаимодействие в течение 3 час. при 120°C. Нерастворимые вещества отфильтровывают и получают целевое соединение методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой (18 мг, выход 16%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 9,01 (1H, с), 8,52 (1H, с), 8,43 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,04 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,84 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 7,62 (1H, т, J=8,4 Гц), 7,27 (2H, т, J=8,4 Гц), 5,14 (1H, с), 4,31 (2H, с), 3,66 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,94 (2H, т, J=5,6 Гц), 1,46 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 421 [M+H]
[0310]
Сравнительный пример 8
6-((7-(2-Циано-4-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид
(Стадия 1)
Синтез 6-((7-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)никотиновой кислоты
Соединение (150 мг), полученное на стадии 1 примера 44, суспендируют в метаноле (1 мл) и 6 моль/л водном растворе гидроксида натрия (0,2 мл) при СВЧ-облучении, проводят взаимодействие в течение 10 мин. при 120°C. Впоследствии твердое вещество, образованное при добавлении 5N-HCl (0,24 мл), собирают фильтрованием и сушат, получая целевой продукт бледно-коричневого цвета (120 мг, 83%). Его используют для следующего взаимодействия без очистки.
[0311]
(Стадия 2)
Синтез 6-((7-бензил-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамида
Соединение (120 мг), полученное на стадии 1, добавляют к ДМФА (3 мл) и добавляют к смеси DIPEA (N,N-диизопропилэтиламин, 76 мкл) и HATU (162 мг). Затем добавляют туда 2,2,2-трифторэтанамин (43 мг) и смесь перемешивают в течение 2 час. при комнатной температуре. Далее добавляют воду (3 мл) при охлаждении на льду с последующим перемешиванием в течение 1 час. Осажденное твердое вещество собирают фильтрованием и сушат, получая целевое соединение (70 мг, выход 92%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 9,28 (1H, с), 9,14 (1H, т, J=6,4 Гц), 8,23 (1H, с), 8,54 (1H, с), 8,29 (1H, д, J=8,8 Гц), 8,22 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,40-7,30 (5H, м), 4,13-4,09 (2H, м), 3,68 (2H, с), 3,46 (2H, с), 2,76-2,72 (4H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 443 [M+H]
[0312]
(Стадия 3)
Синтез 6-((5,6,7,8-тетрагидроpyrodoпиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамида
Соединение (640 мг), полученное на стадии 2, растворяют в этаноле (30 мл) и добавляют 10% палладий на угле (продукт 50% влажности, 300 мг) с последующим перемешиванием при 70°C в течение 5 час. в атмосфере водорода. Нерастворимые вещества удаляют фильтрованием через целит и фильтрат концентрируют. К полученному сырому продукту добавляют метилизобутилкетон (1 мл) и гексан (1 мл) для осаждения твердого вещества. Твердое вещество собирают фильтрованием и сушат, получая целевое соединение (440 мг, выход 86%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 9,16-9,10 (2H, м), 8,80 (1H, с), 8,52 (1H, с), 8,24 (1H, д, J=8,8 Гц), 8,20 (1H, д, J=8,8 Гц), 4,13-4,04 (2H, м), 3,71 (2H, с), 2,94 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,62-2,60 (2H, м); МС низкого разрешения (ESI) m/z 353 [M+H].
[0313]
(Стадия 4)
Синтез 6-((7-(2-циано-4-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамида.
Соединение (74 мг), полученное на стадии 3, 2-фтор-5-(трифторметил)бензонитрил (50 мг) и карбонат натрия (82 мг) добавляют к ДМСО (2 мл) и проводят взаимодействие в течение 3 час. при 120°C. Нерастворимые вещества отфильтровывают и получают целевое соединение методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой (31 мг, 28%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 9,56 (1H, с), 9,12 (1H, т, J=6,4 Гц), 8,84 (1H, т, J=5,6 Гц), 8,67 (1H, с), 8,30-8,20 (3H, м), 7,61 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,48 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 6,23 (2H, с), 4,23 (2H, т, J=6,4 Гц), 4,20-4,05 (2H, м), 3,23 (2H, т, J=6,4 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 522 [M+H].
[0314]
Сравнительный пример 9
6-((7-(2-Циано-5-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид
Соединение (74 мг), полученное на стадии 3 сравнительного примера 8, 2-фтор-4-(трифторметил)бензонитрил (50 мг) и карбонат натрия (82 мг) добавляют к ДМСО (2 мл) и проводят взаимодействие в течение 3 час. при 120°C. Нерастворимые вещества отфильтровывают и получают целевое соединение методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой (32 мг, выход 29%).
1
+
H-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 9,57 (1H, с), 9,13 (1H, т, J=6,4 Гц), 8,85 (1H, с), 8,69 (1H, с), 8,24 (2H,с), 7,94 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,87 (1H, с), 7,22 (1H, д, J=8,8 Гц), 6,12 (2H, с), 4,26 (2H, т, J=6,4 Гц), 4,18-4,06 (2H, м), 3,24 (2H, т, J=6,4 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 522 [M+H].
[0315]
Сравнительный пример 10
6-((7-(3-Циано-2-(трифторметил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидин-4-ил)амино)-N-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид
Соединение (148 мг), полученное на стадии 3 сравнительного примера 8, 3-фтор-2-(трифторметил)бензонитрил (100 мг) и карбонат натрия (164 мг) добавляют к ДМСО (2 мл) и проводят взаимодействие в течение 15 час. при 120°C. Нерастворимые вещества отфильтровывают и получают целевое соединение методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой (18 мг, выход 17%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 9,41 (1H, с), 9,14 (1H, т, J=6,4 Гц), 8,86 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,62 (1H, с), 8,31 (1H, д, J=8,4 Гц), 8,25 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 8,05-8,00 (1H, м), 7,95-7,85 (2H, м), 4,18-4,06 (4H, м), 3,29 (2H, т, J=5,6 Гц), 2,92 (2H, т, J=5,6 Гц); МС низкого разрешения (ESI) m/z 522 [M+H].
[0316]
Сравнительный пример 11
4-(4-((5-(2-Гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)амино)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)-ил)бензонитрил
Соединение (20 мг), полученное на стадии 3 примера 44, 4-фторбензонитрил (11 мг) и карбонат калия (15 мг) растворяют в ДМСО (0,2 мл) и перемешивают в течение 25 мин. при 125°C и СВЧ-облучении. Реакционную смесь очищают методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке с обращенной фазой, получая целевое соединение (4,4 мг, 16%).
1
+
6
H-ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,67 (1H, с), 8,47 (1H, д, J=8,4 Гц), 8,42 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,86 (1H, дд, J=8,8, 2,2 Гц), 7,56 (2H, д, J=9,2 Гц), 6,97 (2H, д, J=9,2 Гц), 4,46 (2H, с), 3,82 (2H, т, J=5,7 Гц), 2,82 (2H, т, J=5,7 Гц), 1,62 (6H, с); МС низкого разрешения (ESI) m/z 387 [M+H].
[0317]
<Биологический тест>
Пример тестирования 1: антагонистическая активность относительно AR.
4
TM
50
Антагонистическую активность относительно AR оценивают следующим способом. Клетки COS-7 (ATCC) трансфицируют вектором pMMTV-luc (репортерная плазмида, имеющая в качестве элемента отклика на андрогены длинный концевой повтор крысиного-мышиного вируса рака молочной железы) и вектором pEX-hAR (вектор экспрессии человеческого андрогенного рецептора, который экспрессирует человеческий AR ген под контролем CMV промотора), используя набор Nucleofector (зарегистрированная торговая марка) Kit R (Lonza) в качестве реагента для трансфекции и Amaxa (Lonza). Клетки COS-7, полученные после трансфекции, высевают в 96-луночный микропланшет с прозрачным дном (BD) при плотности 1,5×10 на ячейку со средой RPMI1640, не содержащей фенолового красного и содержащей обработанную древесным углем 10% фетальную телячью сыворотку (здесь ниже, DCC-FBS) (здесь ниже среда обозначена как оценочная среда), и затем культивируют в течение ночи. К культуре добавляют оценочную среду, содержащую дигидротестостерон (DHT) (конечная концентрация DHT: 1 нмоль/л) или оценочную среду, содержащую соединение из примеров или соединение из сравнительных примеров (конечная концентрация соединения из примеров или соединения из сравнительных примеров: 5, 14, 41, 123, 370, 1111, 3333 или 10000 нмоль/л) с последующим культивированием в течение 24 час. Затем определяют величину транскрипционной активности. Транскрипционную активность определяют, используя люциферазную систему исследования Bright-GloLuciferase Assay System (Promega). Из измеренной транскрипционной активности рассчитывают концентрацию 50% ингибирования транскрипционной активности (значение IC) посредством логистической регрессии, когда значение транскрипционной активности, полученное с использованием 1 нмоль/л DHT составляет 100% и значение транскрипционной активности, полученные с использованием только оценочной среды, составляет 0%.
[0318]
Результаты показаны в таблице 1. Даже при сравнении с бикалутамидом (сравнительный пример 1) соединения по настоящему изобретению демонстрируют антагонистическую активность относительно AR, равную или более высокую, чем активность бикалутамида. Между тем, соединение из сравнительного примера 4, описанное в патентных публикациях 1 и 3, демонстрирует отсутствие антагонистической активности относительно AR, которую наблюдают для соединений примеров по настоящему изобретению. Кроме того, в отличие от соединений примеров, имеющих 5,6,7,8-тетрагидропиридо[3,4-d]пиримидиновый каркас, соединение, имеющее 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3-d]пиримидиновый каркас, из сравнительного примера 2, соединение, имеющее 5,6,7,8-тетрагидро[1,2,4]триазолo[4,3-a]пиразиновый каркас, из сравнительного примера 3 и соединение из сравнительного примера 4, описанное в патентных публикациях 2 и 3, демонстрируют отсутствие антагонистической активности относительно AR. Кроме того, соединения, описанные в сравнительных примерах с 5 по 10 и содержащие цианобензол, который имеет замещающую группу X, но отличающиеся от соединений по настоящему изобретению, также не проявляют антагонистической активности относительно AR. Кроме того, соединение, описанное в сравнительном примере 11 и не имеющее замещающей группы X, также не демонстрирует антагонистической активности относительно AR.
[0319]
[Таблица 1-1]
Таблица 1
Пример
X
-R
Значение IC<sub>50</sub> (мкМ)
1
CF<sub>3</sub>
<img file="00000245.jpg" he="12" wi="14" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,08
2
CF<sub>3</sub>
<img file="00000246.jpg" he="12" wi="28" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,37
3
CF<sub>3</sub>
<img file="00000247.jpg" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,53
4
CF<sub>3</sub>
<img file="00000248.jpg" he="17" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,62
5
CF<sub>3</sub>
<img file="00000249.jpg" he="14" wi="23" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,19
6
Cl
<img file="00000250.jpg" he="14" wi="23" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,07
7
CF<sub>3</sub>
<img file="00000251.jpg" he="15" wi="23" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,16
8
CF<sub>3</sub>
<img file="00000252.jpg" he="18" wi="20" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,25
[0320]
[Таблица 1-2]
Таблица 1 (продолжение)
Пример
X
-R
Значение IC<sub>50</sub> (мкМ)
9
Cl
<img file="00000253.jpg" he="14" wi="22" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,25
10
CF<sub>3</sub>
<img file="00000254.jpg" he="13" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,09
11
CF<sub>3</sub>
<img file="00000255.jpg" he="14" wi="31" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,03
12
CF<sub>3</sub>
<img file="00000256.jpg" he="14" wi="21" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,17
13
CF<sub>3</sub>
<img file="00000257.jpg" he="12" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,11
14
CF<sub>3</sub>
<img file="00000258.jpg" he="14" wi="35" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,30
15
CF<sub>3</sub>
<img file="00000259.jpg" he="13" wi="38" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,13
16
CF<sub>3</sub>
<img file="00000260.jpg" he="14" wi="35" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,21
17
CF<sub>3</sub>
<img file="00000261.jpg" he="13" wi="32" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,17
18
CF<sub>3</sub>
<img file="00000262.jpg" he="19" wi="37" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,36
[0321]
[Таблица 1-3]
Таблица 1 (продолжение)
Пример
X
-R
Значение IC<sub>50</sub> (мкМ)
19
CF<sub>3</sub>
<img file="00000263.jpg" he="15" wi="31" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,13
20
CF<sub>3</sub>
<img file="00000264.jpg" he="18" wi="22" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,10
21
CF<sub>3</sub>
<img file="00000265.jpg" he="14" wi="34" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,38
22
CF<sub>3</sub>
<img file="00000266.jpg" he="14" wi="34" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,37
23
CF<sub>3</sub>
<img file="00000267.jpg" he="13" wi="29" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,80
24
CF<sub>3</sub>
<img file="00000268.jpg" he="16" wi="33" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,07
25
CF<sub>3</sub>
<img file="00000269.jpg" he="15" wi="33" img-content="undefined" img-format="jpg" />
3,32
26
CF<sub>3</sub>
<img file="00000270.jpg" he="17" wi="27" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,06
27
CF<sub>3</sub>
<img file="00000271.jpg" he="14" wi="32" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,09
28
CF<sub>3</sub>
<img file="00000272.jpg" he="16" wi="32" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,02
[0322]
[0323]
[0324]
[Таблица 1-6]
Таблица 1 (продолжение)
Пример
X
-R
Значение IC<sub>50</sub> (мкМ)
48
CF<sub>3</sub>
<img file="00000275.jpg" he="36" wi="80" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,49
49
Cl
<img file="00000276.jpg" he="16" wi="33" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,002
50
CF<sub>3</sub>
<img file="00000277.jpg" he="17" wi="40" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,32
51
CF<sub>3</sub>
<img file="00000278.jpg" he="17" wi="41" img-content="undefined" img-format="jpg" />
1,1
52
CF<sub>3</sub>
<img file="00000279.jpg" he="18" wi="43" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,15
53
Cl
<img file="00000280.jpg" he="18" wi="47" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,055
54
Cl
<img file="00000281.jpg" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="jpg" />
не тестирован
55
Cl
<img file="00000282.jpg" he="18" wi="13" img-content="undefined" img-format="jpg" />
не тестирован
56
Cl
<img file="00000283.jpg" he="19" wi="26" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,84
[0325]
[0326]
[0327]
Пример тестирования 2: андроген-зависимая ингибиторная активность по пролиферации раковых клеток предстательной железы.
3
50
Раковые клетки предстательной железы человека LNCaP (непатентная публикация 5), имеющие амплифицированный ген андрогенного рецептора, высевают в 96-луночный микропланшет с прозрачным дном (BD) при плотности 4,0×10 на ячейку с RPMI1640, не содержащей фенолового красного и содержащей 5% DCC-FBS (здесь ниже среда обозначена как оценочная среда), и затем культивируют в течение ночи. К культуре добавляют оценочную среду, содержащую DHT (конечная концентрация DHT: 10 нмоль/л) или оценочную среду, содержащую соединение из примеров или соединение из сравнительных примеров (конечная концентрация соединения из примеров или соединения из сравнительных примеров: 10, 30, 100, 300, 1000, 3000, 10000 или 30000 нмоль/л), с последующим культивированием в течение 72 час. Затем подсчитывают количество жизнеспособных клеток. Определяют количество жизнеспособных клеток, используя набор для подсчета клеток Cell Counting Kit-8 (DOJINDO LABORATORIES). Из определенного числа жизнеспособных клеток рассчитывают концентрацию 50% ингибирования пролиферации (значение GI) посредством логистической регрессии, когда активность пролиферации клеток, полученная с использованием 10 нмоль/л DHT, составляет 100%, и активность пролиферации клеток, полученная с использованием только оценочной среды, составляет 0%.
[0328]
Результаты показаны в таблице 2. При сравнении с бикалутамидом (сравнительный пример 1) соединения по настоящему изобретению демонстрируют андроген-зависимую активность по ингибированию пролиферации раковых клеток предстательной железы, равную или более высокую, чем активность бикалутамида.
[0329]
[Таблица 2]
Таблица 2
Пример
Значение GI<sub>50</sub> (мкМ)
Пример
Значение GI<sub>50</sub> (мкМ)
1
3,0
24
3,5
2
1,0
27
2,8
5
0,6
28
3,2
6
0,4
29
0,2
7
0,5
30
3,2
9
0,5
32
3,1
10
0,8
33
2,1
11
0,38
34
3,8
13
0,6
35
1,6
14
1,4
36
0,3
16
0,7
38
1,1
17
0,7
40
0,4
18
1,9
41
2,4
19
3,0
42
1,1
20
2,5
Сравнительный пример 1
3,5
23
1,5
[0330]
Пример тестирования 3: агонистическая активностью относительно AR.
4
TM
AR-позитивные раковые клетки предстательной железы человека VCaP (in Vivo 15:163-168, 2001) высевают в 96-луночный микропланшет с прозрачным дном (BD) при плотности 1,5×10 на ячейку с RPMI1640, не содержащей фенолового красного и содержащей 5% DCC-FBS (здесь ниже, среда обозначена как оценочная среда), и затем культивируют в течение ночи. К культуре добавляют оценочную среду, содержащую соединение из примеров или соединение из сравнительных примеров (конечная концентрация соединения из примеров или соединения из сравнительных примеров: 2, 5, 14, 41, 123, 370, 1111, 3333 или 10000 нмоль/л), с последующим культивированием в течение 72 час. Затем подсчитывают количество жизнеспособных клеток (тестовая группа). В качестве контроля культивируют клетки после добавления только оценочной среды и подсчитывают количество жизнеспособных клеток (контрольная группа). Количество жизнеспособных клеток определяют, применяя люминисцентное исследование жизнеспособности клеток CellTiter-Glo (Promega). Из определенного числа жизнеспособных клеток рассчитывают скорость пролиферации клеток относительно соединения из примеров или соединения из сравнительных примеров на основании числа жизнеспособных клеток, определенного в случае использования только оценочной среды.
Скорость пролиферации клеток (%)=(количество жизнеспособных клеток в тестовой группе - число жизнеспособных клеток в контрольной группе)/(количество жизнеспособных клеток в контрольной группе)×100.
Учитывая ошибку в количестве жизнеспособных клеток, определяемых в случае использования только оценочной среды, когда скорость пролиферации клеток составляет более 10% при любой концентрации из 9 концентраций, которые оцениваются, определяли наличие агонистической активности относительно AR.
[0331]
Результаты показаны в таблице 3. В отличие от бикалутамида (сравнительный пример 1) для соединений по настоящему изобретению не наблюдают агонистической активности относительно AR.
[0332]
[Таблица 3]
Таблица 3
Пример
Скорость пролиферации клеток (%)
Пример
Скорость пролиферации клеток (%)
1
8,7
34
6,4
2
3,8
35
0,1
3
1,0
36
-1,9
5
-5,5
37
0,9
6
-0,7
38
-2,7
7
4,9
39
5,5
9
-0,7
40
0,0
10
2,8
42
-17,2
11
2,9
44
5,2
13
2,8
46
1,0
15
0,3
47
1,9
16
-1,5
48
-2,6
17
0,6
50
-3,7
18
-4,6
51
-5,4
20
0,0
52
-3,4
21
-0,6
54
3,4
23
5,1
55
1,0
25
6,3
56
8,0
26
5,7
57
5,0
27
-0,2
58
2,0
32
-2,2
Сравнительный пример 1
39,7
33
4,4
[0333]
Пример тестирования 4: оценка активности по снижению уровня экспрессии андрогенового рецептора.
5
AR положительные раковые клетки предстательной железы человека LNCaP высевают в 6-луночный микропланшет с прозрачным дном (BD) при плотности 3,5×10 на ячейку с RPMI1640, не содержащей фенолового красного и содержащей 5% FBS (здесь ниже, среда обозначена как оценочная среда) и затем культивируют в течение ночи. К культуре добавляют оценочную среду, содержащую соединение из примеров или соединение из сравнительных примеров, так что конечная концентрация соединения из примеров или соединения из сравнительных примеров составляет 10000 нмоль/л, с последующим культивированием в течение 48 час. После культивирования в течение 48 час. среду удаляют и клетки промывают PBS и добавляют 0,1 мл буфера для лизиса (M-PER с добавлением протеазного ингибиторного коктейля) с последующим хранением при 4°C в течение 20 мин. После лизиса клеток раствор клеток центрифугируют для выделения супернатанта в виде клеточного лизата. Клеточные лизаты регулируют так, чтобы они имели такую же концентрацию белка, и подвергают электрофорезу в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (SDS-PAGE) и вестерн-блоттингу, используя анти-AR антитело (Santa Cruz Biotechnology, N-20). Зону взаимодействия с антителом (анти-AR рецептор) определяют количественно посредством LAS-3000 (FUJIFILM), используя Super Signal West Pico Substrate (Thermo Scientific) в качестве реагента детектирования. Что касается количественного анализа, если AR-экспрессия в LNCaP снижается на 50% или более по сравнению с контрольной оценочной средой, то определяют наличие активности по ингибированию экспрессии AR.
[0334]
Результаты показаны в таблице 4. Если активность по снижению экспрессии AR составляет 50% или более, то ее описывают как «пониженную». Для сравнительных примеров с 1 по 4, активность по снижению экспрессии AR составляет менее 10% при 10 мкМ и, таким образом, активность вообще не наблюдается. В отличие от этого, подтверждено, что соединения по настоящему изобретению обладают активностью по снижению экспрессии AR на 50% или более при 10 мкМ.
[0335]
[Таблица 4]
Таблица 4
Пример
10 мкМАктивностьпо снижению экспрессии AR
Пример
10 мкМАктивностьпо снижению экспрессии AR
1
понижена
32
понижена
2
понижена
34
понижена
3
понижена
36
понижена
4
понижена
37
понижена
5
понижена
38
понижена
6
понижена
39
понижена
7
понижена
40
понижена
8
понижена
41
понижена
9
понижена
42
понижена
10
понижена
44
понижена
11
понижена
46
понижена
12
понижена
47
понижена
13
понижена
49
понижена
14
понижена
50
понижена
16
понижена
51
понижена
17
понижена
52
понижена
18
понижена
57
понижена
20
понижена
Сравнительный пример 1
<10%
24
понижена
Сравнительный пример 2
<10%
26
понижена
Сравнительный пример 3
<10%
28
понижена
Сравнительный пример 4
<10%
30
понижена
[0336]
Пример тестирования 5: оценка противоопухолевой активности на in vivo модели кастрационно-резистентного рака предстательной железы.
3
Из AR-позитивных раковых клеток предстательной железы человека LNCaP приняты и используются для in vivo теста клетки кастрационно-резистентного рака предстательной железы и клетки LNCaP-Xeno-IL-6 на основании научной работы (Clin Cancer Res, 2001 7:2941-8) (в этой работе клетки указаны как клетки LNCaP-IL-6+). Клетки LNCaP-Xeno-IL-6 имплантируют подкожно самцам голых мышей и производят кастрацию, когда объем опухоли достигает примерно 200 мм. После кастрации вводят мышам носитель (0,5% HPMC) или соединение из примеров, суспендированное в носителе, перорально каждый день в течение 2 недель. Соединения из примеров вводят так, чтобы между соединениями не было различия в воздействующем количестве. После введения в течение 2 недель регистрируют объем опухоли у каждой мыши и рассчитывают средний объем опухоли по группе, в которой животным вводят оцениваемое соединение, относительно среднего объема опухоли по группе, в которой животным вводят только носитель, то есть T/C (%) по следующей формуле.
T/C(%)=(средний объем опухоли по группе с оцениваемым соединением)/(средний объем опухоли по группе с введением носителя).
[0337]
Результаты показаны в таблице 5. Соединения по настоящему изобретению демонстрируют противоопухолевый эффект на in vivo модели кастрационно-резистентного рака предстательной железы.
[0338]
[Таблица 5]
Таблица 5
Пример
Дневная доза(мг/кг/день)
T/C (%)
6
100
29
7
30
49
9
15
40
11
200
47