Морфология тромбоцитов новорожденных (обзор литературы)

4 2013 ESC guidelines on the management of stable coronary artery disease. The Task Force on the management of stable coronary artery disease of the European Society of Cardiology // Eur. Heart J. - 2013. - Vol. 34. - P. 2949-3003.

5 Диагностика и лечение больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST электрокардиограммы. Российские рекомендации / М.Я. Руда, С.П. Голицын, Н.А. Грацианский и др. - М., 2007. - 146 с.

6 2015 ESC guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. Task Force for the Management of Acute Coronary Syndromes in Patients Presenting without Persistent ST-Segment Elevation of the European Society of Cardiology (ESC) / Eur. Heart J. - 2016. - Vol. 37, № 3. - P. 267-315.

7 Диагностика и лечение больных острым инфарктом миокарда с подъёмом сегмента ST электрокардиограммы: Клинические рекомендации / М.Я. Руда, О.В. Аверков, С.П. Голицын и др. // Кардиологический вестник. - 2014. - № 4. - С. 3-59.

8 Синицын В.Е. Мультиспиральная и электронно-лучевая томография сердца // Кардиология: национальное руководство/ под ред. Е. В. Шляхто. - 2-е изд. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2015. -С. 139-148.

9 Agatston A.S. Quantification of coronary artery calcium using ultrafast computed tomography / A.S.Agatston, W.R. Janowitz, F.J. Hildner et al. // J.Am.Coll.Cardiol. - 1990. - Vol. 15, № 4. - P. 827-832.

10 Georgiou D. Screening patients with chest pain in the emergency department using electron beam tomography: a follow-up study / D. Georgiou, M.J. Budoff, E. Kaufer et al. // J.Am.Coll. Cardiol. - 2001. - Vol. 38, № 1. -P. 105-110.

11 Youssef G. Coronary Calcium: New Insights, Recent Data, and Clinical Role / G. Youssef, N. Kalia, S. Darabian, M.J. Budoff // Curr. Cardiol. Rep. - 2013. - Vol. 15, № 1. - P. 325.

12 Yamamoto H. Clinical implications of the coronary artery calcium score in Japanese patients / H. Yamamoto, T. Kitagawa, Y. Kihara // J. Atheroscler. Thromb. - 2014. - Vol. 21, № 11. - P. 1101-1108.

13 Lee D.H. Coronary artery calcium score plays an important role for cardiovascular risk stratification in the statin benefit groups of asymptomatic individuals / D.H. Lee, H.J. Youn, H.O. Jung et al. // Lipids Health Dis. - 2017. -Vol. 16, № 1. - P. 172.

Рукопись получена: 17 октября 2017 г. Принята к публикации: 22 октября 2017 г.

УДК 616-018

МОРФОЛОГИЯ ТРОМБОЦИТОВ НОВОРОЖДЕННЫХ

© 2017 М.А. Леонтьев, Е.Б. Родзаевская, В.В. Масляков

Филиал частного учреждения образовательной организации высшего образования «Медицинский университет «Реавиз» в г. Саратове, Саратов

Тромбоциты как взрослых людей, так и новорожденных, в последние десятилетия являются предметом активного изучения. Крайне небольшой размер этих форменных элементов, которые способны изменять морфологию в зависимости от условий внешней среды, обусловливает трудности их изучения, рождая многочисленные споры и противоречия. В статье дается обзор литературных данных по морфологии тромбоцитов и способам их изучения у новорожденных детей.

Ключевые слова: тромбоциты, морфология, новорожденные.

Первое упоминание о тромбоцитах относится к первой половине XIX века и связано с исследованиями А. Donne (1842), Simon (1842) и Zimmermann (1847), которые впервые их обнаружили. Участие тромбоцитов в гемостазе установлено исследованиями M. Schultze

(1865), Hayem (1878). Однако они не понимали происхождения и функции тромбоцитов, считая их предшественниками, либо продуктами распада эритроцитов или лейкоцитов. Первыми, предположившими независимое происхождение тромбоцитов, определившими их диско-видную форму и отсутствие ядра были итальянец G. Bizzozero (1882) и немцы K.J. Eberth и K. Schimmelbusch (1885-1888 гг). G. Bizzozero принадлежит термин «кровяная пластинка» (blood platelet) [5].

Тромбоциты обнаруживаются в крови плода при сроке гестации пять недель, куда они попадают, отделяясь от мегакариоцитов, расположенных в печени; начиная с 5 месяца эм-рионального развития, тромбоцитопоэз протекает в красном костном мозге, который к тому времени колонизируется стволовыми клетками.

Образование тромбоцитов начинается с продукции мегакариоцитов, самых крупных полиплоидных клеток костного мозга. Они берут свое начало от гемопоэтических стволовых клеток - общих предшественников всех форменных элементов. На первой стадии дифферен-цировки из них образуются клетки - предшественники лимфоидного и миелоидного ростка. Миелоидная клетка - предшественник на пути дифференцировки вначале проходит стадию общего предшественника мегакариоцитов и эритроцитов, а уже из этой клетки образуются коммитированные мегакариоцитарные предшественники, среди которых выделяют мегака-риобласт и промегакариоцит [5].

Согласно современным представлениям, тромбоциты образуются не напрямую из мега-кариоцитов, а из структур, которые формируются в результате отделения частей цитоплазмы, называемых протромбоцитами [8]. Отщепление тромбоцитов происходит с концевых участков протромбоцитов, где предварительно накапливаются тромбоцитарные органеллы. На конечных этапах мегакариоцит исчезает, превращаясь в многочисленные отдельные про-тромбоциты и тромбоциты, а от тела мегакариоцитов остается лишь оголенное ядро, окруженное тонким слоем цитоплазмы, которое подвергается деструкции.

Наиболее сильным стимулятором образования тромбоцитов считается тромбопоэтин (ТПО), который образуется в гепатоцитах, ретикулярных клетках стромы красной пульпы селезенки, мезангиоцитах почек, однако определенную роль могут играть интерлейкин-3, интер-лейкин-6, интерлейкин-11 и гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор [16]. Скорость образования тромбоцитов, в основном, зависит от количества свободного ТПО в кровотоке, избыток тромбопоэтина устраняется связыванием его с рецептором на мембране тромбоцита. Таким образом, по принципу обратной связи, снижение количества тромбоцитов приводит к увеличению свободного ТПО и интенсификации тромбоцитопоэза.

Один мегакариоцит выпускает 1500-2000 тромбоцитов в кровоток, где они циркулируют в течение 7-10 дней, а затем поглощаются клетками ретикулоэндотелиальной системы селезенки.

В результате исследования тромбоцитопоэза у новорожденных, установлен ряд особенностей, отличающих этот процесс от такового у взрослых людей: мегакариоциты новорожденных меньше по размеру и обладают меньшей плоидностью, чем аналогичные клетки взрослых, и из этого сделан вывод, что нормальный уровень тромбоцитов у новорожденных поддерживается за счет повышенной скорости пролиферации их клеток - предшественников. У недоношенных новорожденных обнаруживается значительно меньшее число крупных, наиболее активных тромбоцитов, что может быть вызвано более низкой плоидностью мега-кариоцитов, потому что крупные мегакариоциты с более высокой плоидностью производят большие тромбоциты. Клетки - предшественники мегакариоцитов у новорожденных при-

сутствуют как в костном мозге, так и в периферической крови, в отличие от взрослых людей, у которых они находятся исключительно в костном мозге.

Тромбоциты представляют собой безъядерные фрагменты цитоплазмы мегакариоцитов и являются самыми мелкими из форменных элементов крови. В условиях неповрежденного эндотелия, тромбоциты, циркулирующие в кровотоке, имеют дисковидную форму и средний диаметр 2-5 микрометров (мкм) [14].

Объем тромбоцитов новорожденных в настоящее время представляется не до конца изученным и требует уточнения. По разным данным он колеблется в пределах 4,5-11,7-10-15 л или фемтолитров (фл) [12].

Эталонный диапазон для количества тромбоцитов у доношенных и недоношенных новорожденных является предметом дискуссий. Установлено, что к 21 неделе гестации уровень тромбоцитов составляет 150-109 /л, а к 24 неделе поднимается до 250-109 /л. За нормальный диапазон значений большинством исследователей принят уровень равный 150-300-109 /л. Также отмечено, что у недоношенных новорожденных уровень тромбоцитов снижается пропорционально гестационному возрасту [20].

При световой микроскопии мазков крови, тромбоциты выглядят как пластинки многоугольной формы, в которых различают периферическую часть - гиаломер, имеющий базо-фильную окраску и центрально-расположенную - грануломер, которая содержит гранулы и окрашивается оксифильно.

Цитолемма тромбоцитов состоит из двух слоев фосфолипидов, между которыми расположены белки. Наиболее многочисленные белки плазматической мембраны, число которых составляет до 80 000 копий на 1 тромбоцит - гликопротеиновые рецепторы (!!!) ПЬ-Ша, 1Ь-У-1Х, IV, молекула клеточной адгезии тромбоцитов и эндотелия (РЕСАМ) [6].

В результате инвагинации поверхностной мембраны в структуре тромбоцита образуется сложная сеть, именуемая открытой системой канальцев (ОСК), которая открывается на поверхности тромбоцита. В состав мембран ОСК входят многие рецепторные белки и молекулы адгезии. При активации тромбоцита наблюдается диффузия рецепторов тромбина и рецепторов ГП ПЬ-Ша из внутренних мембран в сторону цитоплазматической мембраны, а различных мембранных компонентов, таких как ГП 1Ь в обратном направлении, таким образом, ОСК осуществляет перераспределение мембранных компонентов внутри тромбоцита [6].

Плотная тубулярная система (ПТС) является производным гладкого эндоплазматическо-го ретикулума. Она равномерно распределена по цитоплазме тромбоцита, не имея контакта ни с мембранами цитолеммы, ни с мембранами ОСК. В мембранах ПТС находятся кальциевые насосы, транспортирующие кальций во внутреннее пространство тубулярной системы, поддерживая в цитоплазме неактивированных тромбоцитов низкие концентрации этого иона, внутри кальций секвестрируется кальретикулином. При активации тромбоцита происходит открытие канала для кальция с последующим выходом его в цитоплазму.

Цитоплазма тромбоцитов содержит три основных типа гранул: а-гранулы, Р-гранулы (плотные), и у-гранулы, содержащие кислые гидролазы.

а-гранулы являются наиболее распространенными секреторными гранулами в тромбоцитах, содержащие факторы свертывания крови, фибриноген, фактор Виллебранда, фактор 4 тромбоцитов, ростовые факторы, а также различные гликопротеины, в том числе фибронек-тин и тромбоспондин [13]. Размер этих гранул составляет 300-500 нм.

Плотные Р-гранулы происходят из эндосомальных предшественников и содержат адено-зинтрифосфат, аденозиндифосфат, аденозинмонофосфат, циклический аденозинмонофосфат,

серотонин, гистамин, кальций, пирофосфат и полифосфат, их размер 250-350 нм. Эти гранулы по своей природе являются кислотными и накапливают ацидофильные красители, такие как акридиновый оранжевый и мепакрин.

Самые маленькие у-гранулы содержат кислую фосфатазу, р-глюкуронидазу, катепсин и другие лизосомальные ферменты. Размер гарнул составляет 200-250 нм. Их роль недостаточно хорошо изучена, предполагается, что секреция из этих гранул может иметь определенное значение в процессах фибринолиза, деградации экстрацеллюлярного матрикса и ремоде-лирования сосудов [15].

В последнее время идентифицирован новый тип секреторных гранул, названный Т-гранулами за счет их трубчатого строения, однако их функциональное значение не до конца понятно.

Установлено, что дефекты гранул или полное отсутствие их сопряжены с развитием ряда тромбоцитопатий, которые чаще всего носят наследственный характер и обусловливают нарушения гемостаза [18]. Вместе с тем показано, что популяция тромбоцитов без гранул встречается и у здоровых людей [4].

При активации тромбоцитов, под действием силы сокращения актин-миозинового комплекса, мембраны гранул сливаются либо непосредственно с плазматической мембраной, либо с мембраной, соединенной с поверхностью ОКС, что приводит к секреции их содержимого в окружающую среду, делая активацию тромбоцитов необратимой. Точный механизм, с помощью которого реорганизация цитоскелета влияет на слияние гранул, остается плохо изученным.

Кроме вышеописанных гранул, тромбоциты содержат немногочисленные митохондрии, которые являются «энергетической станцией», пероксисомы, содержащие каталазу, и включения гликогена.

В тромбоцитах идентифицируется более 300 белков, которые могут влиять на функцию сосудистой стенки и циркулирующие иммунные клетки. Согласно литературным данным, большая часть белков, содержащихся в тромбоцитах, синтезируется на стадии тромбоцито-поэза.

Важная роль в поддержании дисковидной формы тромбоцита и обеспечении его целостности принадлежит мембранному цитоскелету и сети микротрубочек. Непосредственно под цитолеммой расположена плотная сеть тонких волокон, называемая мембранным цитоске-летом, которая состоит из белка спектрина. Наряду с мембранным цитоскелетом различают так называемый тубулиновый цитоскелет, состоящий из одной единственной микротрубочки, скрученной в спираль и прилегающей к цитолемме по периметру тромбоцита. В покоящихся тромбоцитах трехмерная сеть актиновых волокон формирует актиновый цитоскелет, который разделяет мембранные каналы и клеточные органеллы. Сигналом, инициирующим перестройку актинового скелета при активации, служит увеличение концентрации внутриклеточного кальция [6].

При активации тромбоциты меняют дисковидную форму на сферическую с образованием многочисленных выростов (филоподий), благодаря чему значительно увеличивается площадь поверхности. Молекулярной основой образования филоподий является полимеризация актиновых микротрубочек (микрофиламентов) из растворимого белка актина. К ним присоединяется белок миозин и другие молекулы, образуя актин-миозиновые тяжи. В результате филоподии могут сокращаться и прикрепляться к различным поверхностям [7].

Однако активацию тромбоцитов не следует рассматривать по принципу «все или ничего»; так, в ряде работ было показано существование форм тромбоцитов, находящихся на разных стадиях активации. Согласно современным представлениям, большая часть тромбоцитов представлена так называемыми клетками «покоя» или I типа, имеющими дисковидную форму. Крупные тромбоциты округлой формы со складчатой поверхностью относят ко II типу (большой округлый тромбоцит). Считается, что эти тромбоциты находятся на ранней стадии активации и могут обратимо менять свою форму, становясь дискоцитами. К III типу относятся тромбоциты, которые имеют выраженные отростки и при этом не содержат гранул (большой отросчатый тромбоцит), такие клетки считаются активированными. К IV типу относят дегенеративные тромбоциты для которых характерны увеличенная площадь поверхности, неправильная форма и наличие вакуолей в цитоплазме [6].

Согласно формуле, предложенной Кенигсон Т.В. в 1948 году, фиксированные тромбоциты в мазках крови, окрашенных по Романовскому, можно разделить на юные, зрелые, старые, дегенеративные формы, некоторые исследователи выделяют также формы раздражения [3]. В юных большую часть цитоплазмы занимает гиаломер, грануломер выражен слабо. В зрелых клетках указанные структуры выявляются одинаково четко, а в старых тромбоцитах грануломер занимает практически весь объем клетки. Дегенеративные тромбоциты являются форменными элементами произвольной формы, в которых выявляется нарушение структуры как гиаломера, так и грануломера. Формы раздражения представлены гиганскими клетками размером до 15 мкм, имеющими отростки. При патологии в ряде случаев выявляют так называемые вакуолизированные тромбоциты - крупные оксифильные клетки, содержащие две и более вакуолей. Считается, что подавляющее большинство тромбоцитов здоровых людей составляют зрелые формы (80-85 %), меньшая часть (15-20 %) приходится на юные и старые тромбоциты в независимости от возраста человека [2].

В 1967 г. Тоцкая А. А. предложила классифицировать популяцию тромбоцитов, взяв за основу размер тромбоцитов [3]. Но несмотря на очевидную простоту данных методов, они не нашли широкого применения в неонатальной практике, об этом свидетельствует отсутствие упоминания о них в современной литературе.

Академик Гаврилов О.К. в 1985 году представил расширенную и дополненную классификацию форм тромбоцитов, выделяя тромбоциты дискоидной и недискоидной форм. В зависимости от характера цитолеммы, среди тромбоцитов дискоидной формы он выделял гладкие дискоциты (55 %), цитолемма которых имеет гладкий контур, встречаются небольшие неровности или вдавления, соответствующие местам выхода ОКС. У рифленых дискоцитов (20 %) поверхность имеет складчатую форму. Гладкие и рифленые тромбоциты относят к тромбоцитам покоя. Дискоциты с короткими отростками (11,24 %) имеют округлую форму, неровную поверхность и немногочисленные короткие (менее 4 мкм) тонкие псевдоподии (1-3). К тромбоцитам недискоидной формы оносятся следующие подклассы: тромбоциты с длинными отростками (7,36 %), представленные клетками полиагональной формы с разнообразными отростками, в длину превышающими 4 мкм. Тромбоциты с пальцеобразными выростами (3,36 %) представляют собой клетки округлой или полусферической формы, мембрана которых имеет широкие закругленные на концах короткие пальцевидные выросты. Сфероцитарные тромбоциты (2,83 %) представляют собой немногочисленную популяцию клеток, имеющих гладкую поверхность мембраны или отростки различной формы и величины. Дегенеративно измененные тромбоциты встречаются очень редко (0,31 %), форма неправильная, поверхность бугристая, по внешнему виду, напоминающая цветную капусту [цит. по 1].

По мере развития технологий появляются новые подходы к оценке морфологии тромбоцитов, однако отсутствие общепринятых критериев не позволяет выделить «приоритетные» параметры для морфометрии фиксированных тромбоцитов. Различными авторами предлагается использовать линейные размеры, в том числе площадь и периметр, другие исследователи предлагают определять цвето-яркостные характеристики, учитывая удельные оптические плотности по трем спектральным диапазонам [6].

Тромбоциты являются высокореактивными форменными элементами, и их разнородность в окрашенном мазке может быть обусловлена действием внешних факторов, связанных не с функциональным состоянием тромбоцита, а со способом получения препарата [17]. Поэтому необходимо придерживаться определенного алгоритма, чтобы свести вероятность технических ошибок к минимуму.

У новорожденных детей для исследования морфологии тромбоцитов рекомендуется использовать капиллярную кровь, полученную путем прокола скарификатором кожи пятки или пальца, при этом первую каплю крови, содержащую активированные тромбоциты, удаляют. Мазок допускается готовить как непосредственно нанося кровь из места пункции на предметное стекло, так и после предварительного смешивания с антикоагулянтом. Антикоагу-лянтном, рекомендованным международным комитетом по стандартизации в гематологии (ICSH), является калиевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА К3) в концентрации 1,5-2,2 мг/мл [17]. Мазок наносится вручную или при помощи специальных устройств, после чего просушивается на воздухе. Для окраски наиболее часто применяется фиксатор эозин - метиленовый синий по Май - Грюнвальду, с последующей окраской по Романовскому, однако известны другие варианты красителей, созданные исследователями для наилучшей визуализации тромбоцитов [3]. Для получения наименьшего количества артефактов рекомендуется сократить до минимума время между взятием крови и приготовлением мазка, так как удлинение этого промежутка существенно сказывается на морфологии тромбоцитов.

Производные параметры тромбоцитов, полученные в качестве части автоматического общего анализа крови, называются тромбоцитарными показателями. Наиболее распространены: средний объем тромбоцитов, ширина распределения тромбоцитов по объему, тром-бокрит, и, в ряде случаев, коэффициент больших тромбоцитов.

Средний объем тромбоцитов (MPV - mean platelet volume) - величина, связанная с формой и линейными размерами, выражается в фемтолитрах (фл). Молодые тромбоциты более активны и имеют больший объем, поэтому при интенсификации тромбоцитопоэза MPV возрастает. Кроме того, увеличение площади поверхности при активации тромбоцита, связанное с переходом к сферической форме и образованием псевдоподий, приводит к увеличению показателя MPV, позволяя рассматривать его в качестве одного из маркеров активации тромбоцитов [10].

В исследовании Wasiluk A. et al., MPV у доношенных новорожденных был достоверно ниже, чем у недоношенных (7,84 против 8,25 фл) [19].

Ширина распределения тромбоцитов по объему (PDW - platelet distribution width) измеряется в процентах и отражает гетерогенность в морфологии тромбоцитов по размерам (степень анизоцитоза), нормальное значение 10-20 %. Этот показатель, также как и MPV, является маркером активации тромбоцитов, а по мнению некоторых исследователей, может служить более точным критерием, чем MPV. Однако наиболее целесообразным признается совместное использование этих показателей, но и это не является специфичным маркером ак-

тивации, так как форма и объем тромбоцитов являются довольно вариабельными даже у здоровых людей [9].

Тромбокрит (PCT - platelet crit) является параметром, который отражает долю объема цельной крови, занимаемую тромбоцитами. Он аналогичен гематокриту и выражается в процентах, рассчитываясь по формуле PLT*MPV/10000. У здоровых субъектов PCT поддерживается на относительно постоянном уровне путем баланса между регенерацией и разрушением тромбоцитов, в то время как MPV обратно пропорционален количеству тромбоцитов.

Наименее распространенные показатели, такие как коэффициент больших тромбоцитов (P-LCR), ширина распределения компонентов тромбоцитов (PCDW) и средняя масса тромбоцитов (MPM) являются новыми параметрами активации тромбоцитов и доступны не на всех моделях гематологических анализаторов.

Нельзя не упомянуть еще об одном показателе - незрелая фракция тромбоцитов (IPF) -показывает процент незрелых тромбоцитов от общей массы тромбоцитов. Процент IPF увеличивается по мере увеличения производства тромбоцитов, а низкие значения указывают на подавленный тромбоцитопоэз [11].

Несмотря на очевидную важность вышеописанных доступных показателей и простоту их измерения, в клинической практике они зачастую игнорируются, или им не придается должного значения. Отчасти это обусловлено отсутствием референтного интервала этих показателей для здоровых новорожденных, что не позволяет сравнивать и анализировать их при различной перинатальной патологии, требуя уточнения.

Более детальный анализ ультраструктуры тромбоцитов можно получить с помощью электронной и атомно-силовой микроскопии (АСМ). Они позволяют выявлять маркеры активации тромбоцитов, изучать процессы адгезии, агрегации и дегрануляции. Метод АСМ позволяет визуализировать две разные актиновые структуры - филоподии и ламеллаподии, образующиеся при прилипании тромбоцитов к чужеродной поверхности. На начальной стадии адгезии к той самой чужеродной поверхности тромбоциты приобретают сферическую форму с образованием длинных и коротких филоподий. Дальнейшая адгезия приводит к расширению филоподий и превращению их в ламеллаподии. Однако ввиду высокой стоимости оборудования, сложной предварительной подготовки мазков, данные исследования носят единичный характер и пока недоступны для широкого круга пользователей.

Таким образом, можно сказать, что морфология тромбоцитов новорожденных детей представляет собой одну из наименее изученных проблем современной цитологии и только начинает развиваться. Теоретические исследования в этом направлении несомненно должны явиться фундаментом для разработки адекватных методических подходов при оценке гематологических показателей в практической медицине. Появление за последние десятилетия в структуре автоматического общего анализа крови производных параметров тромбоцитов, которые обязаны помочь клиницистам, явное тому подтверждение. Однако отсутствие данных о «морфологической норме» тромбоцитов новорожденных, определяет необходимость в проведении подобного рода исследований с широкой перспективой их применения.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Алексеев Н. А. Гематология и иммунология детского возраста. - СПб.: Гиппократ, 2009. - С. 155-156.

2 Колосова Е. Н., Василенко И. А., Ковалева Л. Г. Оценка морфофункционального состояния тромбоцитов у больных идиопатической тромбоцитопеничской пурпурой методом витальной компьютерной морфометрии // Сибирский научный медицинский журнал. - 2011. - Т. 31. - № 2. - C. 58-63.

3 Коробова Ф. В. и др. Сравнительное исследование тромбоцитов здоровых лиц с использованием световой микроскопии и проточного счетчика Cobas Micros 18 ОТ // Клин. лаб. диагн. - 2000. - № 12. - С. 21-24.

4 Льюис С. М., Бейн Б., Бейтс И. Практическая и лабораторная гематология. - М.: Гэотар-медиа, 2009. - 672 с.

5 Мазуров А. В. Физиология и патология тромбоцитов. - М.: Литтерра, 2011. - C. 15-482.

6 Макаров М.С. Особенности морфофункционального статуса тромбоцитов человека в норме и при патологии: дис. ... канд. биол. наук. - М., 2013. - C. 14-20.

7 Asian J. E., McCarty O. J. T. Rho GTPases in platelet function // Journal of Thrombosis and Haemostasis. - 2013. -Vol. 11. - № 1. - P. 35-46.

8 Avanzi M. P. et al. Actin inhibition increases megakaryocyte proplatelet formation through an apoptosis-dependent mechanism // PloS one. - 2015. - Vol. 10. - № 4. - Р. e0125057.

9 Beyan C., Kaptan K., Ifran A. Platelet count, mean platelet volume, platelet distribution width, and plateletcrit do not correlate with optical platelet aggegation responses in healthy volunteers // Journal of thrombosis and thrombolysis. - 2006. - Vol. 22. - № 3. - P. 161-164.

10 Bilici S. et al. Mean Platelet volume in diagnosis of acute appendicitis in children // African Health Sciences. -Vol. 11. - № 3. - P. 427-432.

11 Briggs C. et al. Assessment of an immature platelet fraction (IPF) in peripheral thrombocytopenia // British journal of haematology. - 2004. - V. 126. - № 1. - Р. 93-99.

12 Demirin H. et al. Normal range of mean platelet volume in healthy subjects: Insight from a large epidemiologic study //Thrombosis research. - 2011. - V. 128. - № 4. - P. 358-360.

13 Flaumenhaft R. a-granules: a story in the making // Blood. - 2012. - V. 120. - № 25. - P. 4908-4909.

14 Ghoshal K., Bhattacharyya M. Overview of platelet physiology: its hemostatic and nonhemostatic role in disease pathogenesis // TheScientificWorldJournal. - 2013. - Vol. 2014. - С. 781857-781857.

15 Heijnen H., Sluijs P. Platelet secretory behaviour: as diverse as the granules. or not? // Journal of Thrombosis and Haemostasis. - 2015. - V. 13. - № 12. - P. 2141-2151.

16 Kaushansky K. Thrombopoietin and its receptor in normal and neoplastic hematopoiesis // Thrombosis journal. -2016. - V. 14. - № 1. - P. 40.

17 Palmer L. et al. ICSH recommendations for the standardization of nomenclature and grading of peripheral blood cell morphological features //International journal of laboratory hematology. - 2015. - V. 37. - № 3. - P. 287-303.

18 Urban D. et al. Decreased numbers of dense granules in fetal and neonatal platelets // Haematologica. - 2017. -Vol. 102. - № 2. - P. 36-38.

19 Wasiluk A. et al. Platelet indices in SGA newborns // Advances in medical sciences. - 2011. - V. 56. - № 2. - P. 361-365.

20 Wiedmeier S. E. et al. Platelet reference ranges for neonates, defined using data from over 47 000 patients in a multihospital healthcare system // Journal of perinatology. - 2009. - Vol. 29. - № 2. - P. 130-136.

Рукопись получена: 15 октября 2017 г. Принята к публикации: 22 октября 2017 г.