ДЛИННЫЕ ЖЕСТКИЕ СПЕЙСЕРЫ ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ КИНЕТИКИ СВЯЗЫВАНИЯ В ИММУНОАНАЛИЗАХ

1. Устройство для детектирования молекулы-мишени в образце, содержащее:
(a) контейнер для образцов для количественного определения молекулы-мишени в образце,
(b) первую частицу, где указанная первая частица функционализирована первой связывающей молекулой, способной к специфическому связыванию с указанной молекулой-мишенью, и
(c) поверхностную структуру, содержащую вторую связывающую молекулу, где указанная поверхностная структура покрывает плоский сенсор или присутствует на второй частице,
где указанная первая частица способна к связыванию указанной второй связывающей молекулы поверхностной структуры напрямую или ненапрямую; где указанная первая и/или вторая связывающая молекула присоединена к поверхности частицы указанной первой и/или второй частицы и/или поверхности плоского сенсора посредством длинной и жесткой линкерной молекулы; где длина и консистенция указанной линкерной молекулы выбраны так, чтобы в результате была получена средняя протяженность удлинения указанного линкера более 60 нм; и где количество кластеров частиц или связанных частиц прямо или обратно пропорционально соотносится с количеством молекул-мишеней, представленных в образце.
2. Устройство по п. 1, где диаметр указанной первой и/или второй частицы составляет по меньшей мере приблизительно 100 нм и где указанная средняя протяженность удлинения составляет по меньшей мере 10% диаметра.
3. Устройство по п. 1, где жесткая линкерная молекула имеет среднюю протяженность удлинения по меньшей мере 20% от контурной длины указанной линкерной молекулы.
4. Устройство по п. 1, где диаметр указанной первой и/или второй частицы составляет по меньшей мере приблизительно 100 нм и где жесткая линкерная молекула имеет среднюю протяженность удлинения по меньшей мере 20% от контурной длины указанной линкерной молекулы.
5. Устройство по любому из пп. 1-4, где указанная первая связывающая молекула представляет собой антитело или его фрагмент, аптамер, лиганд или комплементарную нуклеиновую кислоту.
6. Устройство по любому из пп. 1-4, где указанная линкерная молекула представляет собой или содержит молекулу нуклеиновой кислоты или небиологический полимер, при этом предпочтительно указанная линкерная молекула представляет собой или содержит молекулу, выбранную из группы, состоящей из двухцепочечной молекулы нуклеиновой кислоты, такой как молекула дцДНК, ПНК, дуплекс ПНК-ДНК и дуплекс РНК-ДНК.
7. Устройство по любому из пп. 1-4, где указанная первая частица дополнительно содержит отталкивающую поверхностную структуру, которая непосредственно присоединена к поверхности указанной частицы, где указанная отталкивающая поверхностная структура покрывает поверхность частицы так, чтобы в результате были получены специфический результирующий заряд и/или стерическое отталкивание частицы, и где указанная отталкивающая поверхностная структура переносит отталкивающий эффект на указанные частицы к указанной сенсорной поверхности, где предпочтительно указанная линкерная молекула длиннее указанной отталкивающей поверхностной структуры.
8. Устройство по п. 7, где указанная отталкивающая поверхностная структура представляет собой заряженную структуру, предпочтительно содержащую молекулу, выбранную из группы, состоящей из молекулы нуклеиновой кислоты, такой как дцДНК, ПНК, дуплекс ПНК-ДНК, дуплекс РНК-ДНК, гидрогеля и полимера; или стерическое покрытие.
9. Устройство по п. 7, где указанная линкерная молекула и/или указанная отталкивающая поверхностная структура не расщепляются ДНКазой и/или рестрикционным ферментом, способным к разрезанию двухцепочечной молекулы нуклеиновой кислоты.
10. Устройство по п. 8, где указанная линкерная молекула и/или указанная отталкивающая поверхностная структура не расщепляются ДНКазой и/или рестрикционным ферментом, способным к разрезанию двухцепочечной молекулы нуклеиновой кислоты.
11. Устройство по любому из пп. 1-4, где указанная линкерная молекула дополнительно содержит по меньшей мере один короткий гибкий спейсер, предпочтительно короткий гибкий спейсер, содержащий одноцепочечную нуклеиновую кислоту.
12. Устройство по п. 5, где указанная линкерная молекула дополнительно содержит по меньшей мере один короткий гибкий спейсер, предпочтительно короткий гибкий спейсер, содержащий одноцепочечную нуклеиновую кислоту.
13. Устройство по п. 6, где указанная линкерная молекула дополнительно содержит по меньшей мере один короткий гибкий спейсер, предпочтительно короткий гибкий спейсер, содержащий одноцепочечную нуклеиновую кислоту.
14. Устройство по п. 7, где указанная линкерная молекула дополнительно содержит по меньшей мере один короткий гибкий спейсер, предпочтительно короткий гибкий спейсер, содержащий одноцепочечную нуклеиновую кислоту.
15. Устройство по п. 8, где указанная линкерная молекула дополнительно содержит по меньшей мере один короткий гибкий спейсер, предпочтительно короткий гибкий спейсер, содержащий одноцепочечную нуклеиновую кислоту.
16. Устройство по п. 9, где указанная линкерная молекула дополнительно содержит по меньшей мере один короткий гибкий спейсер, предпочтительно короткий гибкий спейсер, содержащий одноцепочечную нуклеиновую кислоту.
17. Устройство по любому из пп. 1-4, где указанная первая и/или вторая частица представляет собой магнитную частицу.
18. Устройство по п. 5, где указанная первая и/или вторая частица представляет собой магнитную частицу.
19. Устройство по п. 6, где указанная первая и/или вторая частица представляет собой магнитную частицу.
20. Устройство по п. 7, где указанная первая и/или вторая частица представляет собой магнитную частицу.
21. Устройство по любому из пп. 1-4, где указанная молекула-мишень представляет собой сердечный тропонин I (cTnI).
22. Способ детектирования наличия или количества молекулы-мишени в образце, содержащий стадии:
(a) приведения образца в контакт с первой связывающей молекулой, присоединенной к первой частице в устройстве по любому из пп. 1-4, и
(b) приведения образца в контакт с
i) второй связывающей молекулой, способной к присоединению к плоской поверхности или ко второй частице, где указанная первая связывающая молекула и/или указанная вторая связывающая молекула способны к специфическому связыванию с указанной молекулой-мишенью, и необязательно
ii) аналогом молекулы-мишени, присоединенным к плоской поверхности или ко второй частице; где указанная молекула-мишень способна препятствовать связыванию первой связывающей молекулы с указанным аналогом молекулы-мишени; и
(c) детектирования количества первой частицы, связанной с указанной плоской поверхностью или указанной второй частицей,
где количество кластеров частиц или связанных частиц прямо или обратно пропорционально соотносится с количеством молекул-мишеней, представленных в образце.
23. Способ по п. 22, где сила магнитного поля применяется для приведения частиц в непосредственную близость с указанной твердой подложкой или друг с другом, для того чтобы облегчить кластеризацию частиц.
24. Способ по п. 22, где присоединение указанной второй связывающей молекулы к плоской поверхности или второй частице происходит до или после связывания указанной второй связывающей молекулы с молекулой-мишенью.