МЕТОД КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРИДОКСИНА
PYRIDOXIN QUALITATIVE AND QUANTITATIVE DETERMINATION METHOD

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для качественного и количественного определения пиридоксина, в условиях контрольно-аналитических лабораторий.
6
Известен вольтамперометрический метод определения форм витамина В в биологически активных добавках (БАД) и фармацевтических препаратах при помощи электрода, модифицированного фталоцианинами металлов [1].
Недостатком метода является сложность осуществления самого анализа, трудности оценки специфичности полученных результатов и высокая стоимость.
Известен метод капиллярного электрофореза для определения содержания водорастворимых витаминов [2].
Недостатком метода является то, что определение витаминов идет комплексно.
Среди наиболее популярным и надежным методом определения пиридоксина является высокоэффективная жидкостная хроматография [3].
Недостатком метода является применение дорогостоящего оборудования.
Наиболее близким к изобретению по техническому решению является спектрофотометрическое определение пиридоксина, основанного на реакции по фенольному гидроксилу, - при добавлении к раствору препарата раствора хлорида железа (III) появляется красное окрашивание, исчезающее при подкислении раствора.
Недостатком метода является влияние кислой среды на протекание реакции идентификации (исчезновение окраски).
Предложен метод качественного и количественного определения пиридоксина, заключающийся в создании тест-системы, основанный на сорбционном концентрировании. Твердофазной матрицей для сорбционного концентрирования является кремнийсодержащий материал, обладающий такими преимуществами, как ненабухаемость, жесткий каркас, развитая поверхность, термическая и гидролитическая стабильность, устойчивость к действию органических растворителей.
6
Целью изобретения является создание высокочувствительного экспресс метода оценки содержания витамина В в водных объектах.
6
Метод основан на формировании координационных соединений между витамином В, железом (II) и бромфенолым синим (БФС). В связи с тем, что методика количественного определения пиридоксина гидрохлорида в субстанции - неводное титрование - требует использования дорогостоящих реактивов и высокотоксичных растворителей [4]. Поэтому актуальным является совершенствование метода количественного определения пиридоксина гидрохлорида с использованием тест-систем.
Изобретение включает стадии: а) изучение оптимальных условий комплексообразования в системе железо (II) - пиридоксин - БФС; б) сорбция пиридоксин модифицированным цеолитным сорбентом; в) формирование на сорбенте окрашенного соединения при участии железа (II), пиридоксина и БФС.
Первая стадия. Спектрофотометрическим методом изучены условия комплексообразования в системе железо (II) - пиридоксин - БФС. Максимум поглощения бромфенолового синего 590 нм; комплекса железо (II) - бромфеноловый синий - 590 нм; трехкомпонентной системы железо (II) - пиридоксин - БФС - 440 нм. Изучение оптимальных условий комплексообразования показало, что максимальный выход комплекса наблюдается в нейтральной среде рН=7.
2+
6
Метод изомолярных серий основан на определении стехиометрического соотношения реагирующих веществ, отвечающего максимальному выходу образующегося комплексного соединения для определения стехиометрического соотношения компонентов в разнолигандном комплексе (Fe:БФС:В=1:1:1).
2+
3
6
Рассчитанная методом Комаря величина молярного коэффициента светопоглощения разнолигандного комплекса Fe - БФС - В - ε=4,6⋅10 указывает на высокую чувствительность данной фотометрической реакции.
Полученная трехкомпонентная система легла в основу экспресс-метода определения пиридоксина.
Вторая стадия. Сорбция пиридоксина. Для сорбционного концентрирования пиридоксина использовали модифицированные цеолиты. Сорбцию проводили при постоянном перемешивании в течение 20 мин при ~25°C.
3
-3
3
3
-3
3
-3
Третья стадия. Формирование на сорбенте окрашенного трехкомпонентного соединения. К сорбенту после промывания добавляют 0,1 см 10 М раствора пиридоксина, доводят до 10 см дистиллированной водой, после 10 минут перемешивания центрифугируют, осадок дважды промывают дистиллированной водой. К осадку приливают 5 см 1⋅10 моль/л раствора соли Мора. Навеску соли брали с учетом содержания в ней кристаллизационной воды и ионов аммония. И добавляют 5 см бромфеноловой синей с концентрацией 1⋅10 моль/л. Через 10 минут определяют концентрацию пиридоксина в пробе по тест-шкале.
3
-2
3
3
-3
3
-3
3
Колористическая тест-шкала. В 10 центрифужных пробирок вносят 0; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8 см 10 М раствора пиридоксина и доводят до 10 см дистиллированной водой. В растворы вносят по 0,1 г сорбента, содержимое пробирок перемешивают 20 мин и центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. Центрифугат отбрасывают, а к осадкам добавляют по 0,1 см 10 М соли Мора, центрифугируют, центрифугат отбрасывают. К промытым осадкам приливают по 0,1 см 10 М бромфенолового синего, перемешивают 10 мин, доводят объемы до 10 см все тщательно перемешивают и через 20 мин оценивают окраску сорбента, которая меняется от фиолетового до желтого (фиг. 1). Окраска устойчива длительное время.
3
Фиг. 1 - Колористическая тест-шкала (Зависимость окрашенных систем от концентрации пиридоксина (с⋅10 моль/л).
Результаты определения пиридоксина в различных лекарственных препаратах представлены в таблице 1.
2+
6
Следует отметить, что тест-шкала с образованием окрашенного трехкомпонентного соединения Fe - БФС - В на поверхности модифицированного цеолита позволяет быстро оценить содержание пиридоксина в воде. В случае, если содержание пиридоксина не укладывается в шкалу, можно построить другую для большего или меньшего интервала концентраций.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
6
1. Боев А.С. Вольтамперометрическое определение форм витамина В с помощью химически модифицированного фталоцианином кобальта электрода. 02.00.02 - аналитическая химия. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук.
1
2
3
5
6
с
2. ГОСТ 31483-2012. Определение содержания витаминов: В (тиаминхлорида), В (рибофлавина), В (пантотеновой кислоты), В (никотиновой кислоты и никотинамида), В (пиридоксина), В (фолиевой кислоты), С (аскорбиновой кислоты) методом капиллярного электрофореза.
3. ГОСТ 32903-2014. Продукция соковая. Определение водорастворимых витаминов: тиамина (В1), рибофлавина (В2), пиридоксина (В6) и никотинамида (РР) методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.
4. Крыльский Д.В., Сливкин А.И. «Гетероциклические лекарственные вещества (лекарственные вещества с гетероциклической структурой)» / Учебное пособие по фармацевтической химии, Воронеж, 2007.