СИСТЕМА ПОЛИЦИСТРОННОЙ ЭКСПРЕССИИ ДЛЯ БАКТЕРИЙ

1. Молочнокислая бактерия, содержащая единицу полицистронной экспрессии, при этом указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3':
(i) промотор эндогенный по отношению к указанной молочнокислой бактерии, выбранный из группы, состоящей из промотора eno (Peno), промотора usp45 (Pusp45) и промотора gapB (PgapB);
(ii) ген, эндогенный по отношению к указанной молочнокислой бактерии (эндогенный ген); и
(iii) один или несколько генов, экзогенных по отношению к указанной молочнокислой бактерии (экзогенные гены) расположенные 3' по отношению к указанному эндогенному гену;
при этом указанные эндогенный ген и один или несколько экзогенных генов являются транскрипционно связанными.
2. Молочнокислая бактерия по п. 1, при этом молочнокислая бактерия выбрана из группы, состоящей из Lactococcus, Lactobacillus и Enterосоccus.
3. Молочнокислая бактерия по п. 1, при этом молочнокислая бактерия представляет собой Lactococcus lactis.
4. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 1-3, в которой указанный промотор и указанный эндогенный ген расположены в своем естественном локусе на хромосоме у молочнокислой бактерии, и при этом указанный эндогенный ген транскрипционно связан с одним или несколькими экзогенными генами посредством встраивания в хромосому одного или нескольких экзогенных генов в указанный локус, предпочтительно посредством встраивания в хромосому одного или нескольких экзогенных генов 3' от указанного локуса.
5. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 1-4, в которой указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов транскрипционно связаны с по меньшей мере одним межгенным участком, активным у грамположительной бактерии.
6. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 1-5, в которой указанный межгенный участок выбран из группы, состоящей из межгенных участков, предшествующих rplW, rplP, rpmD, rplB, rpsG, rpsE, rplN, rplM, rplE и rplF.
7. Молочнокислая бактерия по п. 6, в которой указанный межгенный участок представляет собой межгенный участок, предшествующий rpmD.
8. Молочнокислая бактерия по п. 6 или 7, в которой указанный межгенный участок содержит последовательность SEQ ID NO: 3.
9. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 1-8, в которой указанный один или несколько экзогенных генов кодируют один или несколько полипептидов.
10. Молочнокислая бактерия по п. 9, в которой указанный один или несколько экзогенных генов трансляционно связаны с нуклеиновой кислотой, кодирующей определяющий секрецию сигнальный пептид.
11. Молочнокислая бактерия по п. 10, в которой указанный определяющий секрецию сигнальный пептид представляет собой кодирующий определяющий секрецию сигнал Usp45 Lactococcus.
12. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 9-11, в которой указанный один или несколько полипептидов имеют терапевтический или профилактический эффект на субъект.
13. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 9-12, в которой указанный один или несколько полипептидов выбраны из группы, состоящей из:
(i) интерлейкина-10 (IL-10);
(и) фактора "трилистника"-1 (TFF1);
(iii) проинсулина (ins);
(iv) интерлейкина-27 (IL-27).
14. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 1-13, в которой указанная единица полицистронной экспрессии выбрана из группы, состоящей из:
(i) gapB, слитый с SS:: TFF1 через rpmD;
(ii) usp45, слитый с SS::ins через rpmD; и
(iii) enoА, слитый с SS::ins через rpmD;
при этом SS:: представляет собой трансляционно слитый определяющий секрецию сигнал.
15. Молочнокислая бактерия по п. 14, в которой указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3' PgapB, gapB, rpmD и SS::TFF1.
16. Молочнокислая бактерия по п. 14, в которой указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3' Pusp45, usp45, rpmD и SS::ins.
17. Молочнокислая бактерия по п. 14, в которой указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3' PenoA, enoA, rpmD и SS::ins.
18. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 14-17, в которой указанная единица полицистронной экспрессии расположена в эндогенном локусе промотора.
19. Молочнокислая бактерия по любому из пп. 1-18 для применения при введении или доставке указанного одного или нескольких полипептидов субъекту.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая молочнокислую бактерию по любому из пп. 1-19 и фрамацевтически приемлемый носитель.
21. Фармацевтическая композиция для применения при введении или доставке указанного одного или нескольких полипептидов субъекту, содержащая терапевтически эффективное количество молочнокислой бактерии по любому из пп. 1-19 и фрамацевтически приемлемый носитель.
22. Рекомбинантная нуклеиновая кислота, содержащая единицу полицистронной экспрессии, причем указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3':
(i) промотор эндогенный по отношению к указанной молочнокислой бактерии, выбранный из группы, состоящей из промотора eno (Peno), промотора usp45 (Pusp45) и промотора gapB (PgapB);
(ii) ген, эндогенный по отношению к указанной молочнокислой бактерии (эндогенный ген); и
(iii) один или несколько генов, экзогенных по отношению к указанной молочнокислой бактерии (экзогенные гены) расположенные 3' к указанному эндогенному гену;
при этом указанные эндогенный ген и один или несколько экзогенных генов являются транскрипционно связанными.
23. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 22, при этом молочнокислая бактерия выбрана из группы, состоящей из Lactococcus, Lactobacillus и Enterococcus.
24. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 22 или 23, при этом молочнокислая бактерия представляет собой Lactococcus lactis.
25. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 22-24, в которой указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов находятся под транскрипционным контролем нативного промотора указанного эндогенного гена.
26. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 22-24, в которой указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов транскрипционно связаны по меньшей мере с одним межгенным участком, активным у грамположительной бактерии.
27. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 22-26, в которой указанный межгенный участок выбран из группы, состоящей из межгенных участков, предшествующих rplW, rplP, rpmD, rplB, rpsG, rpsE, rplN, rplM, rplE и rplF.
28. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 27, в которой указанный межгенный участок представляет собой межгенный участок, предшествующий гену rpmD.
29. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 27 или 28, в которой указанный межгенный участок содержит последовательность SEQ ID NO: 3.
30. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 22-29, в которой указанный один или несколько экзогенных генов кодируют один или несколько полипептидов.
31. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 30, в которой указанный один или несколько экзогенных генов трансляционно связаны с нуклеиновой кислотой, кодирующей определяющий секрецию сигнальный пептид.
32. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 31, в которой указанный определяющий секрецию сигнальный пептид представляет собой кодирующий определяющий секрецию сигнал Usp45 Lactococcus.
33. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 30-32, в которой указанный один или несколько полипептидов имеют терапевтический или профилактический эффект на субъект.
34. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 30-32, в которой указанный один или несколько полипептидов выбраны из группы, состоящей из:
(i) интерлейкина-10 (IL-10);
(ii) фактора "трилистника"-1 (TFF1);
(iii) проинсулина (ins);
(iv) интерлейкина-27 (IL-27).
35. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по любому из пп. 22-34, в которой указанная единица полицистронной экспрессии выбрана из группы, состоящей из:
(i) gapB, слитый с SS:: TFF1 через rpmD;
(ii) usp45, слитый с SS::ins через rpmD; и
(iii) enoА, слитый с SS::ins через rpmD;
при этом SS:: представляет собой трансляционно слитый определяющий секрецию сигнал.
36. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 35, в которой указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3' PgapB, gapB, rpmD и SS::TFF1.
37. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 35, в которой указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3' Pusp45, usp45, rpmD и SS::ins.
38. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 35, в которой указанная единица полицистронной экспрессии содержит в направлении от 5' к 3' PenoA, enoА, rpmD и SS::ins.
39. Вектор для экспрессии одного или нескольких экзогенных генов, содержащий рекомбинантную нуклеиновую кислоту по любому из пп. 22-38.
40. Молочнокислая бактерия для экспрессии одного или нескольких экзогенных генов, содержащая рекомбинантную нуклеиновую кислоту по любому из пп. 22-38 или вектор по п. 39.