ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МУТАЦИЙ ГЕНОВ BRCA1 И BRCA2 ПРИ СЕРОЗНОМ РАКЕ ЯИЧНИКОВ

Особенности определения мутаций

генов BRCA1 и BRCA2

при серозном раке яичников

И.А.Демидоваи

ГАУЗ «Московская городская онкологическая больница №62» Департамента здравоохранения г. Москвы. 143423, Россия, пос.

Истра, д. 27

кУета-80@уап(^ех.ги

Мутации в генах ВЙ0Л1/ВЙ0Л2 встречаются в 15-20% случаев рака яичников (РЯ) и ассоциируются с высокой чувствительностью к терапии препаратами платины и новыми таргетными препаратами, ингибирующими протеины семейства РДЯР. Появление новой терапевтической опции в лечении пациенток с РЯ, ассоциированном с мутациями генов ВЙ0Л1/ВЙ0Л2, привело к существенным изменениям в международных и национальных клинических рекомендациях и разработке новых подходов к определению мутаций в Российской Федерации. Первые результаты Программы Российского общества клинической онкологии, направленной на совершенствование молекулярно-генетической диагностики в РФ с целью повышения эффективности противоопухолевого лечения (www.cancergenome.ru) показали релевантность нового двухэтапного алгоритма тестирования, включающего секвенирование следующего поколения для определенных групп больных. Были исследованы образцы 1385 пациенток с платиночувствительным рецидивом РЯ. Мутации ВЙ0Л1/ВЙ0Л2 обнаружены у 22% больных. В 92,5% случаев выявлялись мутации в гене ВЯСД1, в 6,5% случаев - в гене ВЙ0Л2. Метод секвенирования нового поколения позволил дополнительно выявить 47 мутаций, встречавшихся с частотой 0,03-2,3%. Мутации достоверно чаще встречались у больных с классическими признаками семейного рака и у пациенток до 50 лет. Продолжение работы Программы позволит полностью охарактеризовать группу пациенток с мутациями ВЙ0Л1/ВЙ0Л2, как кандидатов для получения нового высокоэффективного вида терапии.

Ключевые слова: рак яичников, мутации ВЙ0Л1/ВЙ0Л2, ингибиторы РДЯР, секвенирование следующего поколения. Для цитирования: Демидова И.А. Особенности определения мутаций генов БЯСА1 и БКСА2 при серозном раке яичников. Современная Онкология. 2017; 19 (1): 30-33.

Original article

The characteristics of determination of BRCA1 and BRCA2 mutations in serous ovarian cancer

IADemidova

The Moscow city cancer hospital No. 62 of the Department of health of Moscow. 143423, Russian Federation, pos. Istra, d. 27 Hdema-80@yandex.ru

Abstract

Mutations of the BRCA1/BRCA2 genes occur in 15-20% cases of ovarian cancer (OC) and are associated with increased sensitivity to platinum drugs and new target drugs that inhibit proteins of poly(ADP-ribose) polymerase family. The discovery of new therapeutic options in the treatment of patients with OC associated with mutations of the BRCA1/BRCA2 genes is resulted in significant changes in national and international clinical guidelines and in the development of new approaches for identification of mutations in the Russian Federation. The first results of the project of Russian Society of Clinical Oncology aimed at improvement of molecular genetic testing in the Russian Federation and associated with enhancing the effectiveness of antitumor treatment (www.cancergenome.ru), have showed the relevance of new two-stage testing algorithm including next-generation sequencing in special groups of patients. 1385 patients with platinum-sensitive relapsed OC were examined. BRCA1 and BRCA2 mutations were found in 22% of patients. BRCA1 gene mutations were found in 92.5% of cases and in 6.5% of cases - BRCA2 mutations. Next-generation sequencing helped to identify another 47 mutations and to determine mutations frequency - 0.03-2.3%. Statistically significant mutations were determined in patients with classical signs of familial cancer and in patients under 50 years of age. Continuation of this project would fully describe the characteristics of group of patients with mutations of the BRCA1/BRCA2 genes as the candidates for new and highly efficient therapy. Key words: ovarian cancer, BRCA1/BRCA2 mutations, PARP inhibitors, next-generation sequencing.

For citation: Demidova I.A.The characteristics of determination of BRCA1 and BRCA2 mutations in serous ovarian cancer. Journal of Modern Oncology. 2017; 19 (1): 30-33.

Вступление

Опухолевые супрессоры БКСА1 и БЯСА2 играют ключевую роль в поддержании генетической стабильности клетки, являясь основными участниками механизма наиболее точного восстановления разрывов двухцепочечной ДНК -так называемой репарации путем гомологичной рекомбинации [1, 2]. Краткая схема, иллюстрирующая работу этого механизма, представлена на рис. 1. Потеря функции БКСА1/БКСА2 может возникнуть как в результате наследственно обусловленных (герминальных) мутаций, так и при возникновении соматических аберраций или эпигенетиче-

ской блокады нормальной регуляции генов непосредственно в опухоли. В этом случае восстановление поврежденной ДНК происходит с участием менее точных механизмов, что ведет к нарастанию генетической нестабильности и злокачественной трансформации клеток. Носительство наследственных мутаций ведет к значительному росту риска развития рака яичников (РЯ) - так, терминальные мутации в гене БЯСА1 повышают риск до 40-50% в течение жизни, в гене БЯСА2 - до 20-25% [3]. По результатам наиболее значительных зарубежных исследований наследственные мутации встречаются примерно в 14% немуцинозного РЯ, в том чис-

!.Д.ОЕМЮОУД/ иОУВМДЬ ОР МОРЕВМ ОМООЬОСУ. 2017; 19 (1): 30-33.

Рис. 1. Репаративный механизм, участниками которого являются БЯОА1 и BRCA2 (по A.Meindl, 2011).

Ультрафиолетовое излучение Ошибки репликации Гидрокси мочевина

ЯРА

70КЭ 34 КО Конечные точки синтеза ДНК

Задержка Б-фазы клеточного цикла

Гомологичная рекомбинация Инициация синтеза ДНК

Рис. 2. PARP-ингибирование и синтетическая летальность (по J.Lee и соавт., 2014).

Повреждения ДНК

Невосстановленные однонитевые разрывы_

Двунитевыо разрывы ДНК

Однонитевые разрывы ДНК

ВЯСА1Л \RCA2mut

Негомологичное соединение концов

Эксдияонмая сепарация тугем

удаления повреадеинь« кнсеании

Эвдцизиожея репарация нукпезтидоа

Исправление сшибо« юмглемечтарк^х

ТрЯНСПЯ1|И1>Я«Й синтез ДНК

Разрушение ДНК

+ РАНР-ингибитор

Рис. 3. Влияние сочетания факторов риска (семейный анамнез, личный анамнез, национальность) на процент потерь в выявлении возможных носительниц терминальных мутаций при РЯ (по D.Eccles и соавт., 2016).

Частичное пересечение факторов

Пересечение факторов 0% 26,3%

Пересечение факторов 100% .''Семейный

43,7%

ле в 17 РЯ высокой степени злокачественности. Около 6% пациенток имеют соматические мутации ЕЯСА1/ЕЯСА2, определяющиеся только в опухоли [4, 5]. Следует особо отметить, что, по данным приведенных исследований, 44% носительниц терминальных мутаций не имели прослеженного наследственного анамнеза.

Определения мутаций генов БнСА1/БЯСА2 у больных РЯ

Необходимость определения мутаций генов ЕКСА1/ ЕЯСА2 у больных РЯ диктуется в первую очередь биологическими особенностями подобных опухолей, отличающихся

крайне высокой чувствительностью к препаратам платины и существенно лучшим прогнозом по сравнению с РЯ. Эта чувствительность обусловлена упомянутыми выше дефектами репарации ДНК после воздействия производных платины [6]. Кроме того, появление новых препаратов, блокирующих другие пути репарации, таких как ингибиторы поли(АДФ-рибоза)-полимеразы (РАИР), и показавших особую эффективность именно в лечении больных РЯ с мутациями генов ЕКСА1/ЕКСА2, дало новое клиническое значение определению этих мутаций в рутинной практике. Протеины семейства РАИР участвуют в процессе восстановления одноцепочечных разрывов ДНК - механизме, который становится ведущим при нарушении репарации двухцепочечных разрывов, причиной чего чаще всего являются мутации генов ЕКСА1/ЕКСА2. Поэтому ингибиро-вание протеинов РАИР в клетках, несущих эти мутации, приводит к феномену так называемой синтетической летальности, приводящему к необратимому повреждению ДНК (рис. 2) [7].

В проведенных рандомизированных исследованиях было продемонстрировано статистически значимое увеличение выживаемости без прогрессирования (ВБП) для пациенток с платиночувствительным рецидивом РЯ и мутациями ЕЯСА1/ЕЯСА2, получавших РАИР-ингибитор олапариб в качестве поддерживающей терапии после полного или частичного ответа на химиотерапию платиносодержащими режимами. Так, у больных, получавших олапариб в качестве поддерживающей терапии в исследовании II фазы (Исследование 19), ВБП увеличилась до 11,2 мес по сравнению с 4,3 мес у пациенток, получавших плацебо, риск прогрессирования снизился на 82% [8].

Современные рекомендации по определению мутаций БЯСА1/2 у больных РЯ - мировой опыт и отечественные разработки

Еще недавно считалось, что в российской популяции практически исключительно встречаются так называемые фаун-дерные мутации ЕКСА1, или «мутации основателя». Сущность эффекта основателя заключается в том, что внутри популяции циркулирует ограниченное количество генетических нарушений, передающихся по наследству, причиной чему является определенная закрытость этноса и относительная редкость смешанных браков. Так, в России, как и в большинстве стран с преимущественно славянским населением, наиболее распространена герминальная мутация ЕКСА1 5382тзС, встречающаяся приблизительно у 0,1% жителей и выявляющаяся почти в 70% случаев наследственного рака молочной железы (РМЖ) и РЯ [10]. Однако последние отечественные исследования выявили не только значимые различия в структуре мутаций между РМЖ и РЯ, но и подтвердили существенно меньшее значение наследственного анамнеза для последней группы пациенток [11]. Более того, значительное этническое разнообразие российского населения сделало необходимым пересмотр традиционных для нашей страны подходов в определении мутаций ЕЯСА1 /2 у больных РЯ.

Следует отметить, что до 2013 г. практически все международные рекомендации по тестированию мутаций ЕКСА1/ЕКСА2 у больных РЯ предусматривали проведение исследования лишь у пациентов с какими-либо признаками наследственной предрасположенности к заболеванию [12-14]. Как правило, рекомендовалось определение мутаций у пациенток с семейным или личным анамнезом, предполагающим наличие РМЖ или РЯ у ближайших родственников, синхронный/метахронный РМЖ у самой пациентки, ранний возраст манифестации заболевания или принадлежность к этнической популяции с известной высокой частотой герминальных «мутаций основателя» (например, к евреям-ашкеназам или коренному населению Исландии). Однако исследования последних лет показали дефекты подобного подхода к больным серозным РЯ. Оказалось, что сужение тестируемой группы приводит к значительному снижению частоты определения носительниц мутаций ЕКСА1/ЕКСА2. Так, по данным Э.Есскэ и соавт., только 56,3% носительниц имели прослеженный наследственный анам-

СОВРЕМЕННАЯ ОНКОЛОГИЯ 2017 I ТОМ 19 I №1

ЛОиВЫЛ1_ ОР МОРЕНЫ ОЫСОШвУ 2017 I УО1_. 19 I N0. 1 31

нез, 27,8% - личный анамнез предшествующего РМЖ и лишь у 28,6% пациенток РЯ был диагностирован до 60 лет [15]. Похожие результаты были получены Е.Суспицыным и соавт. при поиске фаундерных мутаций у 354 больных РЯ из двух регионов России. Мутации были обнаружены у 33 пациенток из 266 без семейного анамнеза (12,4% случаев) [11]. Более того, часто используемое сочетание факторов риска приводит к тому, что более 40% случаев носительства может быть пропущено [15] (рис. 3).

В связи с этим в последние годы начался пересмотр клинических рекомендаций. Так, последние рекомендации Национальной сети многопрофильных онкологических учреждений США, рекомендации Американского общества онкогинекологии, Шотландские междисциплинарные рекомендации были изменены - тестирование рекомендовано во всех случаях немуцинозного инвазивного РЯ, первичного рака брюшины и маточных труб [16-18]. Такие же изменения были внесены в рекомендации Российского общества клинической онкологии в 2016 г. - генетическое консультирование и определение мутаций BRCA1/BRCA2 предполагается всем больным с серозными и эндометриоидны-ми карциномами высокой степени злокачественности [19].

Особенности тестирования смешанной российской популяции больных РЯ и первые результаты программы Cancergenome.ru

Принципиально методы тестирования мутаций BRCA1 и BRCA2 могут быть разделены на две группы. Первая представляет собой секвенирование определенных зон интереса (задействованных экзонов при «эффекте основателя», характерном в том числе для славянских и близких к ним этносов), либо аллель-специфическую полимеразную цепную реакцию (ПЦР) на наиболее распространенные мутации. Эти методы способны выявлять короткие делеции/инсер-ции (indels) и однонуклеотидные замены, представляющие собой практически весь известный спектр мутаций в славянской популяции Российской Федерации. Метод аллель-специфической ПЦР относительно прост, дешев и может выполняться практически в любой лаборатории, персонал которой имеет навыки ее проведения. Ко второй группе можно отнести методы, позволяющие изучить всю кодирующую последовательность обоих генов и обнаружить редкие и уникальные мутации, которые не могут быть выявлены с помощью ПЦР. Конечно, эти методы существенно сложнее, дороже и требуют привлечения серьезных материальных ресурсов и высококвалифицированного персонала. К ним относятся классическое секвенирование по Сэнгеру и метод секвенирования следующего поколения.

Метод секвенирования следующего поколения, показавший свою исключительную эффективность в изучении полного спектра возможных генетических аберраций, в настоящее время проходит клиническую валидацию. Учитывая преимущества этого метода и постоянно снижающиеся цены на расходные материалы, следует ожидать его широкого внедрения в практику в ближайшее время. Применение его становится весьма актуальным с учетом высокой частоты носительства мутаций BRCA1/BRCA2 у больных РЯ, особенно принимая во внимание тот факт, что существенная часть этих мутаций может быть уникальной и недоступной для исследования методами, направленными на изучение фаундерных мутаций. Конечно, не последнюю роль в рациональности такого подхода имеет появление дополнительной эффективной терапевтической опции для этих пациенток - возможности терапии ингибиторами PARP. Определенную сложность в трактовке полученных результатов представляют так называемые варианты неясного клинического значения - генетические события, не ведущие к безусловной потере функции протеина или недостаточно охарактеризованные в существующих базах данных ввиду их редкости.

Кроме того, существует еще один особый тип мутаций BRCA1/BRCA2 - так называемые длинные делеции, затрагивающие один или несколько экзонов этих генов, не определяемые ни одним из методов, основанных на секвенирова-

нии или аллель-специфической ПЦР. Для выявления мутаций такого типа требуется применение метода мультиплексной лигаза-зависимой амплификации зонда (MPLA), однако для российской популяции частота этих мутаций к настоящему моменту не описана.

Все больший интерес вызывают так называемые соматические мутации BRCA1/BRCA2, т.е. те, которые определяются исключительно в опухолевых клетках и возникают de novo в процессе онкогенеза. Их значение идентично значению герминальных мутаций, хотя частота встречаемости существенно ниже. Так, в исследовании K.Pennington и соавт. частота соматических мутаций составила 6,8%, а A.Mafficini и соавт. - около 6,2% [7, 20]. По данным, опубликованным группой The Cancer Genome Atlas Research Network (TCGA), соматические мутации выявлялись в 20,4% случаев из всех обнаруженных мутаций BRCA1/BRCA2 или в 4,2% от всей изученной популяции пациенток с РЯ, причем в трех случаях обнаруживалось сочетание герминальных и соматических мутаций [21]. Эти данные убедительно свидетельствуют в пользу исследования образцов опухоли, что позволяет определить наличие не только наследственных генетических нарушений, но и приобретенных в результате неопластической трансформации.

В связи с этим эффективно работающая в РФ Программа Российского общества клинической онкологии, направленная на совершенствование молекулярно-генетической диагностики в РФ с целью повышения эффективности противоопухолевого лечения (www.cancergenome.ru), включила в число необходимых генетических исследований определение мутаций генов BRCA1/BRCA2 при платиночувствитель-ном рецидиве РЯ [22].

В настоящее время в Программе по тестированию BRCA1/ BRCA2 участвуют 19 лабораторий в различных городах РФ. Программа предусматривает направление на исследование материала больных РЯ, маточных труб и первичным раком брюшины высокой степени злокачественности с платино-чувствительным рецидивом заболевания, возникшим не ранее чем через 6 мес после окончания платиносодержащей терапии. На I этапе проводится определение методом ПЦР восьми герминальных мутаций, встречающихся в российской славянской популяции больных РЯ с частотой более 1%. Для выявления мутаций в генах BRCA1/BRCA2 в лабораторию может быть направлен любой материал - как кровь пациентки, взятая с учетом правил, оговоренных на сайте программы, так и парафиновые блоки удаленной опухоли или биопсированного метастаза. Оптимально одномоментно отправлять образец нормальной ткани (кровь/блок) и образец опухолевой ткани (блок). Следующий этап предусматривает проведение секвенирования следующего поколения для тех пациенток, у которых мутации не были обнаружены, несмотря на наличие семейного или личного анамнеза (РМЖ/РЯ у близких родственников по одной линии или синхронный/метахронный РМЖ и РЯ у самой больной). Кроме того, секвенирование следующего поколения обязательно проводится пациенткам, не принадлежащим к славянской этнической группе. Секвенирование следующего поколения позволяет также выявить соматические мутации в образцах опухолевой ткани.

С мая 2016 по январь 2017 г. было исследовано 1385 образцов пациенток с платиночувствительным рецидивом РЯ из всех субъектов РФ. В 787 случаях для анализа присылалась кровь больных, в 598 случаях исследовались парафиновые блоки. Большинство пациенток (1049) принадлежали к славянской этнической группе, 330 больных идентифицировали себя как относящихся к 32 минорным этническим популяциям.

После I этапа тестирования (ПЦР) терминальные фаун-дерные мутации были обнаружены у 16,6% пациенток из славянской группы и у 11,8% - из других этнических групп. При этом самая частая славянская мутация 5382insC обнаруживалась у 11,4% славянок и у 6% больных других национальностей. К сожалению, каждая неславянская этническая группа оказалась слишком мала, чтобы полученные результаты могли быть экстраполированы на весь этнос в целом, кроме того, самоидентификация пациенток и сбор инфор-

I.A.DEMIDOVA/ JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY. 2017; 19 (1): 30-33.

мации о национальной принадлежности в первом поколении может не совсем верно отражать истинную родословную больных. Возможно, после накопления большего объема информации удастся достоверно определить частоту «мутаций основателя» в каждой из национальных групп.

На II этапе проводилось исследование образцов пациенток с наследственным/личным анамнезом и пациенток из неславянских этнических групп, в которых не были обнаружены мутации при первичном обследовании, с помощью метода секвенирования следующего поколения. Дополнительно было выявлено 47 мутаций с частотой от 0,03% до 2,3%. Наиболее интересные результаты были получены у 148 славянских пациенток с семейным и личным анамнезом. В этой группе количество «мутаций основателя» приближалось к 20% (19,5%), а редкие мутации были выявлены у 17,5% больных. Таким образом, с помощью проведения II этапа тестирования мутации ЕЯСА1/ЕЯСА2 были обнаружены в целом у 37% пациенток, т.е. число больных, несущих мутации, практически удвоилось. Полученные данные убедительно свидетельствуют о том, что проведение полного исследования кодирующей последовательности обоих генов является абсолютно необходимым по крайней мере пациенткам с классическими признаками наследственного рака. К сожалению, пока невозможно сделать какие-либо выводы по двухэтапному анализу материала больных из неславянских этнических групп, поскольку лишь незначительному числу из них к моменту проведения анализа были выполнены оба этапа обследования. Возможно, дальнейшее накопление данных позволит определить соотношение частых и уникальных мутаций, выявляемых только с помощью секвени-рования, и в этой группе пациенток.

Суммируя итоги проведенной работы в целом, несмотря на то, что не всем пациенткам пока выполнены оба этапа обследования, можно выделить следующие основные результаты:

• Патогенные мутации генов ЕЯСА1/ЕЯСА2 были обнаружены у 22% обследованных пациентов (без учета наследственных и этнических факторов). В 78,9% случаев мутации не выявлялись (в 2,4% обнаруживались генетические варианты неясного значения). В 92,5% случаев выявлялись мутации в гене ЕЯСА1, в 6,5% случаев - в генеЕЯСА2.

• Мутации достоверно чаще определялись у больных с семейным анамнезом (28% уэ 15%, р<0,001) и у больных с личным анамнезом (27% уэ 18%, р=0,02).

• Мутации генов ЕЯСА1/ЕЯСА2 значительно чаще выявлялись у пациенток до 50 лет (31% уэ 21%, р<0,01), что соответствует ранее полученным данным.

• Частота выявления мутаций у больных без семейного и личного анамнеза, а также у пациенток старше 50 лет подтверждает необходимость тестирования всех больных РЯ вне зависимости от приведенных выше факторов.

• Результаты гистологического исследования показали, что образцы опухоли больных с мутациями ЕЯСА1/ЕЯСА2 отличались более высокой степенью злокачественности по сравнению с образцами больных без мутаций (29,5% уэ 19,5%, р=0,01).

Таким образом, первые результаты работы программы по определению мутаций генов ЕЯСА1/ЕЯСА2 у пациенток с платиночувствительным рецидивом РЯ подтвердили высокую частоту их встречаемости при данной патологии. Использование метода секвенирования следующего поколения позволило практически удвоить число носительниц в группе больных с классическими признаками наследственного РМЖ/РЯ и доказало релевантность используемого подхода. Проведение всех этапов тестирования на большей выборке позволит получить новую информацию о частоте встречаемости исследуемых мутаций в разных группах больных и разработать новый алгоритм обследования, который, возможно, позволит улучшить результаты лекарственного лечения у этих пациенток.

Литература/References

1. Ashworth A. A synthetic lethal therapeutic approach: poly(ADP) ribose polymerase inhibitors for the treatment of cancers def^ient in DNA doublestrand break repair. J Clin Oncol2008; 26:3785 -90.

2. Lee JM, Ledermann JA, Kohn EC. PARP Inhibitors for BRCA1/2 mutation-associated andBRCA-like malignancies. Ann Oncol2014; 25:32-400.

3. JazaeriAA. Molecularprofхles of hereditary epithelial ovarian cancers and their implications for the biology of this disease. Mol Oncol 2009; 3:151 -6.

4. Cancer Genome Atlas Research Network. Integrated genomic analyses of ovarian carcinoma. Nature 2011; 474: 609-15.

5. Alsop K, Fereday S, Meldrum C et al BRCA mutation frequency and patterns of treatment response in BRCA mutation-positive women with ovarian cancer: a report from the Australian Ovarian Cancer Study Group. J Clin Oncol 2012; 30:2654-63.

6. Lord CJ, Ashworth A. PARP inhibitors: synthetic lethality in the clinic. Science 2017; 355:1152-8.

7. Pennington KP, Walsh T, Barrett MI et al. Germline and somatic mutations in homologous recombination genes predict platinum response and survival in ovarian, fallopian tube, and peritoneal carcinomas. Clin Cancer Res

2014;20: 764-75.

8. Ledermann J, Barter P, Gourley C et al. Olaparib maintenance therapy in patients with platinum- sensitive relapsed serous ovarian cancer: a preplanned retrospective analysis of outcomes by BRCA status in a randomised phase 2 trial. Lancet Oncol2015; 16 (4): e158.

9. Oza AM, Cibula D, Benzaquen AO et al. Olaparib combined with chemotherapy for recurrent platinum-sensitive ovarian cancer: a randomised phase 2 trial. Lancet Oncol2015; 16 (1): 87-97.

10. Любченко ЛН. Наследственный рак молочной железы и/или яичников: ДНК-диагностика, индивидуальный прогноз, лечение и профилактика. Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. М., 2009. / Liubchenko LN. Na-sledstvennyi rak molochnoi zhelezy i/ili iaichnikov: DNK-diagnostika, in-dividualnyiprognoz, lechenie iprofilaktika. Avtoref. dis. ... d-ra med. nauk. M. 2009. [in Russian]

11. Suspitsin EN, Sherina NY, Ponomariova DN et al. High frequency of BRCA1, but not CBEK2 or NBS1 (NBN), founder mutations in Russian ovarian cancer patients. Bered Cancer Clin Pract2009; 7 (1): 5.

12. European Institute of Oncology. Newly diagnosed and relapsed epithelial ovarian carcinoma: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and ^follow-up. Ann Oncol 2013; 24 (6): 24-32.

13. U.S. Preventive Services Task Force (USPSTF). Risk assessment, genetic counseling, and genetic testing for BRCA-related cancer in women: U.S. Pre-ventice Services Task Force recommendation statement. Ann Intern Med 2014; 160 (4):271-81.

14. Gadzicki D, Evans DG, Harris H et al. Genetic testing for familial/hereditary breast cancer-comparison of guidelines and recommendations from the UK, France, the Netherlands and Germany J Community Genet 2011; 2 (22): 53-69.

15. Eccles D, Balmana J, Clune J et al. Selecting Patients with Ovarian Cancer for Germline BRCA Mutation Testing: Findings from Guidelines and a Systematic Literature Review. Adv Ther 2016; 33 (2): 129-50.

16. National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Genetic/familial high-risk assessment: breast and ovarian - clinical practice guidelines in oncology: National Comprehensive Cancer Network (NCCN), 2014.

1 J. Genetic testing for breast and ovarian cancer susceptibility: evaluating di-rect-to-consumer marketing - Atlanta, Denver, Raleigh-Durham, and Seattle, 2003.

18. Scottish Intercollegiate Guidelines Network (SIGN). Management of epithelial ovarian cancer (SIGN 135), 2014.

19. Тюляндин СА, Деньгина НВ., Коломиец ЛА. и др. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака яичников/первичного рака брюшины/маточных труб. DOI: 10.1802 "7/2224-5057-2016-4s2-123-134 / Tiuliandin SA, Dengina N.V., Kolomiets LA. i dr. Praktich-eskie rekomendatsii po lekarstvennomu lecheniiu raka iaichnikov/per-vichnogo raka briushiny/matochnykh trub. DOI: 10.18027/2224-5057-2016-4s2-123-134 [in Russian]

20. Mafficini A, Simbolo M, Parisi A et al. BRCA somatic and germline mutation detection in paraffin embedded ovarian cancers by next-generation sequencing, Oncotarget2017; 7 (2): 1076-83.

21. Cancer Genome Atlas Research Network. Integrated genomic analyses of ovarian carcinoma.Nature 2011; 474 (7353): 609-15.

22. Информационный портал молекулярно-генетической диагностики онкологических заболеваний www.cancergenome.ru / Informatsion-nyi portal molekuliarno-geneticheskoi diagnostiki onkologicheskikh zdbolevanii www.cancergenome.ru [in Russian]

Сведения об авторах

Демидова Ирина Анатольевна - канд. мед. наук, зав. молекулярно-биологической лаб. ГАУЗ МГОБ №62. E-mail: dema-80@yandex.ru

СОВРЕМЕННАЯ ОНКОЛОГИЯ 2017 I ТОМ 19 I №1

JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY 2017 I VOL. 19 I NO. 1 33