СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ РЕЗИДЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК СЕРДЦА ИЗ ОБРАЗЦОВ МИОКАРАДА

1. Способ получения резидентных стволовых клеток сердца млекопитающего, экспрессирующих поверхностные маркеры c-kit, и/или sca-1 и/или MDR1, в ходе которого выделяют образцы ткани миокарда, измельчают образцы, осуществляют их ферментативную обработку коллагеназой и трипсином и проводят культивирование на культуральной чашке с покрытием из фибронектина и дальнейшую иммуномагнитную селекцию, отличающийся тем, что культивирование на культуральной чашке с покрытием из фибронектина осуществляют методом эксплантной культуры измельченных образцов, полученных после их ферментативной обработки, которую используют для частичного расщепления ткани образца и адгезии эксплантов к поверхности культуральной чашки.
3
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что измельчение образцов миокарда проводят до получения кусочков размером 1-3 мм.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что для обработки образцов миокарда используют протеолитические ферменты.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что обработку ферментами образцов миокарда проводят в растворе, содержащем 0-0,5% коллагеназы А и 0-0,2% трипсина, в течение 1-30 мин при 37°С.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что фибронектин для покрытия культуральных чашек используют в концентрации от 1 до 1000 мкг/мл.
2
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что культивирование образцов миокарда (эксплантов) проводят в среде IMDM, содержащей 1-20% фетальной сыворотки теленка, 100 ед/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 2 мМ Л-глутамина в течение 7-40 дней при 37°С в атмосфере 5% СО, со сменой среды каждые 1-5 дней.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что иммуномагнитную селекцию клеток эксплантной культуры для получения резидентных стволовых клеток проводят с поверхностными маркерами c-kit и/или sca-1 и/или MDR1.
8. Способ по п.9, отличающийся тем, что иммуномагнитную селекцию клеток эксплантной культуры из одного образца миокарда проводят от 1 до 5 последовательных этапов с интервалами 5-21 день.