АНТИТЕЛО ПРОТИВ ЛИГАНДА 1 ЗАПРОГРАММИРОВАННОЙ ГИБЕЛИ КЛЕТОК (PD-L1), ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ И ИХ МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Антитело против лиганда 1 запрограммированной гибели клеток (PD-L1) или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие любую из последовательностей определяющего комплементарность участка (CDR), выбранную из следующих последовательностей или их мутантной последовательности:
последовательности HCDR вариабельного участка тяжелой цепи, представленной как: SEQ ID NO 10, 11, 12, SEQ ID NO 16, 17, 18; и последовательности LCDR вариабельного участка легкой цепи, представленной как: SEQ ID NO 13, 14, 15, SEQ ID NO 19, 20, 21;
в частности, из следующих:
1
HCDR1, выбранной из NDYWX (SEQ ID NO 10) или SYWMH (SEQ ID NO 16);
4
5
HCDR2, выбранной из YISYTGSTYYNPSLKS (SEQ ID NO 11) или RI XPNSG XTSYNEKFKN (SEQ ID NO 17);
HCDR3, выбранной из SGGWLAPFDY (SEQ ID NO 12) или GGSSYDYFDY (SEQ ID NO 18);
2
3
LCDR1, выбранной из KSSQSLFYXSNQKXSLA(SEQ ID NO 13) или RASESVSIHGTHLMH (SEQ ID NO 19);
LCDR2, выбранной из GASTRES (SEQ ID NO 14) или AASNLES (SEQ ID NO 20);
LCDR3, выбранной из QQYYGYPYT (SEQ ID NO 15) или QQSFEDPLT (SEQ ID NO 21);
1
2
3
4
5
где X выбран из N или T, Х выбран из R или Н, Х выбран из N или Н, Х выбран из Н или G, Х выбран из G или F.
2. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, содержащие последовательность HCDR вариабельного участка тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO 10, SEQ ID NO 11, SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 16, SEQ ID NO 17 и SEQ ID NO 18 или их мутантной последовательности.
3. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 1, содержащие последовательность LCDR вариабельного участка легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO 13, SEQ ID NO 14, SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 19, SEQ ID NO 20 и SEQ ID NO 21 или их мутантной последовательности.
4. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-3, где вариабельный участок легкой цепи антитела дополнительно содержит каркасный участок (FR) легкой цепи, полученный из мышиной κ -цепи, или его вариант, или FR-участок легкой цепи, полученный из мышиной λ-цепи, или его вариант; где вариабельный участок тяжелой цепи антитела дополнительно содержит FR-участок тяжелой цепи, полученный из мышиного IgG1, или его вариант, или FR-участок тяжелой цепи, полученный из мышиного IgG2, или его вариант, или FR-участок тяжелой цепи, полученный из мышиного IgG3, или его вариант.
5. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 4, где вариабельный участок тяжелой цепи антитела, содержащий FR-участок мышиного происхождения, выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO 6, 8 или их мутантной последовательности, где вариабельный участок легкой цепи антитела, содержащий FR-участок мышиного происхождения, выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO 7, 9 или их мутантной последовательности.
6. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 4, где легкая цепь антитела дополнительно содержит константный участок легкой цепи, полученный из мышиной κ -цепи, или его вариант, или константный участок легкой цепи, полученный из мышиной λ -цепи, или его вариант; где тяжелая цепь антитела дополнительно содержит константный участок тяжелой цепи, полученный из мышиного IgG1, или его вариант, или константный участок тяжелой цепи, полученный из мышиного IgG2, или его вариант, или константный участок тяжелой цепи, полученный из мышиного IgG3, или его вариант.
7. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-5, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляют собой химерное антитело.
8. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-3, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляют собой гуманизированное антитело или его фрагмент.
9. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 8, где гуманизированное антитело представляет собой гуманизированное антитело 9-2 или гуманизированное антитело 24D5, где последовательность FR тяжелой цепи на вариабельном участке тяжелой цепи гуманизированного антитела получена из тяжелой цепи зародышевой линии человека, где:
последовательность FR тяжелой цепи на вариабельном участке тяжелой цепи гуманизированного антитела 9-2 получена из комбинированной последовательности IGHV4-30-4*01 тяжелой цепи зародышевой линии человека и hjh2 и содержит FR1, FR2 и FR3 из IGHV4-30-4*01 тяжелой цепи зародышевой линии человека и FR4 из hjh2; или
последовательность FR тяжелой цепи на вариабельном участке тяжелой цепи гуманизированного антитела 24D5 получена из комбинированной последовательности IGHV1-46*01 тяжелой цепи зародышевой линии человека и hjh6.1 и содержит FR1, FR2 и FR3 из IGHV1-46*01 тяжелой цепи зародышевой линии человека и FR4 из hjh6.1.
10. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 9, где последовательность FR тяжелой цепи гуманизированного антитела 9-2 содержит от 0 до 10 аминокислотных обратных мутаций, предпочтительно, содержит одну или более аминокислотную обратную мутацию, выбранную из группы, состоящей из W47Y, V71R, G27Y, I48M, V67L, F78Y, S30T и Q39K, более предпочтительно, содержит аминокислотные обратные мутации W47Y и V71R; где последовательность FR тяжелой цепи гуманизированного антитела 24D5 содержит от 0 до 10 аминокислотных обратных мутаций, предпочтительно, содержит одну или более аминокислотную обратную мутацию, выбранную из группы, состоящей из Т74K, R72V, M48I, M70L, R38Q, L83F, V68A и V79A.
11. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 9, где последовательность вариабельного участка тяжелой цепи гуманизированного антитела представлена следующим образом:
последовательность вариабельного участка тяжелой цепи гуманизированного антитела 9-2 представлена как SEQ ID NO 22 или ее вариантом; или последовательность вариабельного участка тяжелой цепи гуманизированного антитела 24D5 представлена как SEQ ID NO 24 или ее вариантом.
12. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 8, где гуманизированное антитело представляет собой гуманизированное антитело 9-2 или гуманизированное антитело 24D5, где последовательность FR легкой цепи на вариабельном участке легкой цепи гуманизированного антитела получена из легкой цепи зародышевой линии человека, где:
последовательность FR легкой цепи на вариабельном участке легкой цепи гуманизированного антитела 9-2 получена из комбинированной последовательности IGKV4-1*01 легкой цепи зародышевой линии человека и hjk.4.1 и содержит FR1, FR2 и FR3 из IGKV4-1*01 легкой цепи зародышевой линии человека и FR4 из hjk4.1, последовательность FR легкой цепи вариабельного участка легкой цепи гуманизированного антитела 24D5 получена из комбинированной последовательности IGKV7-3*01 легкой цепи зародышевой линии человека и hjh2.1 и содержит FR1, FR2 и FR3 из IGKV7-3*01 и FR4 из hjk2.1.
13. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 12, где последовательность FR легкой цепи гуманизированного антитела 9-2 содержит от 0 до 10 аминокислотных обратных мутаций, предпочтительно содержит аминокислотную обратную мутацию P49S; где последовательность FR легкой цепи гуманизированного антитела 24D5 содержит от 0 до 10 аминокислотных обратных мутаций, предпочтительно, содержит одну или более аминокислотную обратную мутацию, выбранную из группы, состоящей из Y91F, T22S и G72E или введение мутации дегликозилирования N85E.
14. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 12, где последовательность вариабельного участка легкой цепи гуманизированного антитела представлена следующим образом:
последовательность вариабельного участка легкой цепи гуманизированного антитела 9-2 представлена как SEQ ID NO 23 или ее вариантом; или последовательность вариабельного участка легкой цепи гуманизированного антитела 24D5 представлена как SEQ ID NO 25 или ее вариантом.
15. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 8-14, где гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент подвергают дизайну созревания аффинности.
2
3
4
5
16. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 15, где представляет собой Т, Х представляет собой Н, Х представляет собой Н, Хпредставляет собой G, Х представляет собой F.
17. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по пп. 15 или 16, где гуманизированное антитело представляет собой гуманизированное антитело 9-2 или гуманизированное антитело 24D5, где последовательность вариабельного участка гуманизированного антитела представлена следующим образом:
последовательность вариабельного участка тяжелой цепи гуманизированного антитела 9-2 представлена как SEQ ID NO 26; последовательность вариабельного участка легкой цепи гуманизированного антитела 9-2 представлена как SEQ ID NO 27;
последовательность вариабельного участка тяжелой цепи гуманизированного антитела 24D5 представлена как SEQ ID NO 28; последовательность вариабельного участка легкой цепи гуманизированного антитела 24D5 представлена как SEQ ID NO 29.
18. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 17, где тяжелая цепь гуманизированного антитела дополнительно содержит константный участок тяжелой цепи, полученный из человеческого IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, или его вариант, предпочтительно, содержит константный участок тяжелой цепи, полученный из человеческого IgG2 или IgG4, более предпочтительно, содержит константный участок тяжелой цепи IgG4 с мутациями F234A и L235A; где легкая цепь гуманизированного антитела дополнительно содержит константный участок, полученный из человеческой κ -цепи, человеческой λ -цепи, или его вариант.
19. Антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 17, где гуманизированное антитело 9-2 содержит последовательность антитела, состоящего из тяжелых цепей, представленную как SEQ ID NO 30, и последовательность антитела, состоящего из легких цепей, представленную как SEQ ID NO 32; где гуманизированное антитело 24D5 содержит последовательность антитела, состоящего из тяжелых цепей, представленную как SEQ ID NO 34 и последовательность антитела, состоящего из легких цепей, представленную как SEQ ID NO 36.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество антитела против PD-L1 или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 1-19, и один или более фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.
21. Молекула ДНК, кодирующая антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-19.
22. Экспрессионный вектор, содержащий молекулу ДНК по п. 21.
23. Клетка-хозяин, трансформированная экспрессионным вектором по п. 22, где клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из бактерий, дрожжей и клеток млекопитающих; предпочтительно, из клеток млекопитающих.
24. Применение антитела против PD-L1 или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 1-19 или фармацевтической композиции по п. 20 для приготовления лекарственного средства для лечения PD-L1-опосредуемого заболевания или расстройства, где PD-LI-опосредоуемое заболевание или расстройство предпочтительно представляет собой рак; более предпочтительно, рак, экспрессирующий PD-L1; наиболее предпочтительно, выбрано из группы, состоящей из рака молочной железы, рака легких, рака желудка, рака желудочно-кишечного тракта, рака почки, меланомы и немелкоклеточного рака легкого; еще более предпочтительно выбрано из группы, состоящей из немелкоклеточного рака легкого, меланомы, рака мочевого пузыря и рака почки.
25. Способ лечения или профилактики PD-L1- опосредуемого заболевания или расстройства у человеческого субъекта, нуждающегося в этом, причем способ содержит введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела против PD-L1 или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 1-19 или введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 20, где заболевание или расстройство предпочтительно представляет собой рак, более предпочтительно, рак, экспрессирующий PD-L1; рак предпочтительно выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака легких, рака желудка, рака желудочно-кишечного тракта, рака почки, меланомы, немелкоклеточного рака легкого и рака мочевого пузыря; и, наиболее предпочтительно, выбирают из группы, состоящей из немелкоклеточного рака легкого, меланомы, рака мочевого пузыря и рака почки.