Разработка и валидация методики количественного определения таблеток 11-дезоксимизопростола

NK

МЕДИЦИНСКИЙ

АЛЬМАНАХ

27. Fortunate I.M., Avato P., Ruta C. Glandular hairs and essential oils in micropropagated plants of Origanum vulgare L. Acta horticulturae 723. 2006. P. 295-298.

28. Jovanovic A.A., Dordevic V.B., Zdunic G.M., Pljevljakusic D.S., Savikin K.P., Godevac D.M., Bugarski B.M. Optimization of the extraction process of polyphenols from Thymus serpyllum L. herb using maceration, heat- and ultrasound-assisted techniques. Separation and Purification Technology. 2017. 51 p. (doi:http://dx.doi. org/10.1016/j.seppur.2017.01.055).

29. Han F., Ma G.-Q., Yang M., Yan L., Xiong W., Shu J.-C., Zhao Z.-D., Xu H.-L. Chemical composition and antioxidant activities of essential oils from different parts of the oregano. Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology). 2017. Vol. 18. № 1. P. 79-84.

30. Nikoli'c M., Glamo'clija J., Ferreira I.C.F., Calhelha R.C., Fernandes A. et al. Chemical composition, antimicrobial, antioxidant and antitumoractivity of Thymus

serpyllum L., Thymus algeriensis Boiss. and Reut and Thymus vulgaris L. essential oils. Industrial Crops and Products. 2014. Vol. 52. P. 183-190.

31. Tohidi B., Rahimmalek M., Arzani A. Essential oil composition, total phenolic, flavonoid contents, and antioxidant activity of Thymus species collected from different regions of Iran. Food Chemistry. 2017. Vol. 220. P. 153-161.

32. Hallahan D.L. Monoterpenoid biosynthesis in glandular trichomes of Labiatae plants. Advances in Botanical Research. 2000. Vol. 31. P. 77-120.

33. Saeb K., Gholamrezaee S. Variation of essential oil composition of Melissa officinalis L. leaves during different stages of plant growth. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2012. Vol. 2. Iss. 2. P. 54 7-549.

34. Farhat M.B., Jordan M.J., Chaouch-Hamada R., Landoulsi A., Sotomayor J. A. Phenophase effects on sage (Salvia officinalis L.) yield and composition of essential oil. Journal of Applied Research on Medicinal and Aromatic Plants. 2016. Vol. 3. Iss. 3. P. 87-93.

E3

УДК: 615.24:615.453.6 Код специальности ВАК: 14.04.01, 14.04.02

РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАБЛЕТОК 11-ДЕЗОКСИМИЗОПРОСТОЛА

А.Г. Ялкаев, Ф.Х. Кильдияров, В.А. Катаев, Р.А. Халиков, А.А. Федотова,

ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет»

Ялкаев Александр Георгиевич - e-mail: alexander-platz@mail.ru

Дата поступления 104.03.2017

11-дезоксимизопростол — это новое оригинальное производное простагландина E,, созданное для прерывания беременности медикаментозным способом. Для таблеток 11-дезоксимизопростола разработана методика количественного определения методом ВЭЖХ с УФ-детекцией. Анализ выполнялся на жидкостном хроматографе Shimadzu LC-20 Prominence с матричным фотодиодным детектором SPD-M20A. Разделение осуществлялось на колонке Discovery C18 (5 мкм; 150 х 4,6 мм). В качестве подвижной фазы была подобрана смесь ацетонитрил-вода (50:50). Методика валидирована в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи XIII издания.

Ключевые слова: таблетки, 11-дезоксимизопростол, количественное

определение, валидация, ВЭЖХ.

11-desoxymizoprostol is a new original derivative of prostaglandin E, what was designed for medical abortion. It was developed a quantitative chromatographic analysis by UV detection for 11-desoxymizoprostol tablets. The analysis was performed on the liquid chromatograph «Shimadzu LC-20 Prominence» with photodiode array detector. Separation was carried out on a column of Discovery C18 (5 |jm; 150 x 4,6 mm). The mixture of acetonitrile/water (50:50, v/v) was selected as the mobile phase. The test method was validated in accordance with the requirements of the 13th edition of State Pharmacopeia of Russia.

Key words: tablets, 11-desoxymisoprostol, quantitative assay, validation, HPLC.

Введение

Создание лекарственных средств нового поколения актуально для обеспечения потребности отечественного здравоохранения в стратегически важных лекарственных препаратах с целью не только импортозамещения, но и обеспечения национальной безопасности в сфере лекарственной политики.

Внедрение перспективных научных разработок позволит обеспечить устойчивое производство эффективных лекарственных препаратов и инициировать создание инновационной фармацевтической продукции мирового уровня, способной конкурировать с иностранными производителями как на отечественном, так и на зарубежных рынках.

Одной из острых медико-социальных проблем во всем мире является проблема репродуктивного здоровья

женщин. Так, существенно уменьшить отдаленные отрицательные последствия, материнскую смертность при абортах, акушерских кровотечениях позволяет применение мизопростола. Мизопростол используется для индукции родов, предотвращения гипотонического маточного кровотечения в послеродовом периоде, медикаментозного прерывания беременности по медицинским показаниям. Комбинация мифепристона и мизопростола рекомендована ВОЗ для прерывания беременности [1], включена в клинический протокол прерывания беременности в РФ [2, 3].

В РФ активно ведутся исследования по разработке перспективного аналога мизопростола. Так, в Уфе, в лаборатории синтеза низкомолекулярных биорегуляторов Уфимского института химии РАН (УфИХ РАН), под руководством д. х. н. М.С. Мифтахова осуществлен синтез

Al

SSM

нового аналога простагландина Е-, — 11-дезоксимизопро-стола [4] - в контексте Федеральной целевой программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу» (Госконтракт 14.N08.12.0013), а в Башкирском государственном медицинском университете (БГМУ) получена таблетированная лекарственная форма на основе экспериментальной субстанции и ведутся доклинические исследования [5, 6]. 11-дезоксимизо-простол (ДМП) индуцирует сокращение гладких мышечных волокон миометрия и расширение шейки матки, что обеспечивает удаление плодного яйца. ДМП по сравнению с мизопростолом имеет более высокие утеротониче-ские свойства [7], широта его терапевтического действия больше в 2 раза [8], токсичность в 2 раза меньше, при этом он стабильнее и имеет более доступный путь химического синтеза [9, 10].

Работа соответствует задачам программы «Фарма 2020» в части формирования инновационного потенциала фармацевтической и медицинской промышленности, развития производства инновационных лекарственных средств и медицинских изделий.

Цель исследования: разработка методики количественного определения таблеток 11-дезоксимизопростола и валидация разработанной методики.

Материал и методы

В качестве объектов исследования использовали: стандарт ДМП, синтезированный в УфИХ РАН, таблетки ДМП по 0,2 г. Для приготовления подвижной фазы использовали ацетонитрил марки supergradient производства Panreac, для подготовки воды аналитического качества для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) свежую очищенную воду фильтровали через нейлоновый фильтр Supelco с порами 0,45 мкм под вакуумом.

Количественное определение ДМП осуществляли на хроматографе фирмы Shimadzu марки Prominence LC-20, снабженном матричным фотодиодным детектором SPD-M20A. Результаты исследований обработаны статистически в программе Microsoft Excel с использованием t-критерия Стьюдента в соответствии с требованиями ГФ XIII, 0ФС.1.1.0013.15 «Статистическая обработка результатов химического эксперимента». Валидацию разработанной методики проводили по требованиям Государственной фармакопеи (ГФ) XIII издания, 0ФС.1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик» [11].

Результаты и их обсуждение

Объектом настоящего исследования является таблети-рованная лекарственная форма ДМП. ДМП представляет собой бесцветную прозрачную маслянистую жидкость без запаха, практически нерастворимую в воде, хорошо растворимую в 95% спирте этиловом, хлороформе. Субстанция синтезирована в УфИХ РАН, лекарственная форма разработана в БГМУ (Уфа). По химической структуре является синтетическим производным простагландина Ev Для приготовления таблеток ДМП был использован метод влажного гранулирования с последующим прессованием [12]. Исследуемые таблетки имеют среднюю массу 0,2 г и содержат200 мкг ДМП. Вспомогательные вещества: гидроксипропилметилцеллюлоза, микрокри-

сталлическая целлюлоза, натрия гликолят, аэросил, магния стеарат.

Методика количественного определения ДМП в растворе — ВЭЖХ с УФ-детекцией. Выбран обращенно-фазный вариант хроматографии в изократическом режиме. В качестве элюентов для ВЭЖХ-анализа простаглан-динов по литературным данным часто используют смесь ацетонитрил-вода в соотношениях 80:20, 75:25, 55:45, смесь пропанол-2-гексан в соотношениях 0,8:99,2, 5:95, 7:93 и др. [13]. Максимум поглощения ДМП равен 192-193 нм, ацетонитрил в этой области не мешает определению. После ряда экспериментов по подбору элюента (варьировали системы растворителей, температуру, скорость потока) была выбрана смесь ацетонитрил-вода (50:50), длина волны измерения — 195 нм.

Разработана и предложена следующая методика количественного определения. Около 1000 мг (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу объемом 25 мл, добавляют 20 мл 75% раствора ацетонитрила, интенсивно встряхивают на протяжении 30 мин, объём смеси доводят до метки этим же растворителем, перемешивают и фильтруют, используя шпри-цевую насадку из политетрафторэтилена (ПТФЭ) с диаметром пор 0,45 мкм, первую порцию фильтрата в 10 мл отбрасывают (испытуемый раствор).

По 20 мкл исследуемого раствора и раствора Б рабочего стандартного образца (РСО) ДМП последовательно хроматографируют на приборе для ВЭЖХ с УФ-детектором.

Содержание ДМП в одной таблетке в миллиграммах (Х) вычисляют по формуле:

5j *= аа * 25 * b * Р 5г * аа* b * Р

, где

Sa * а± > 25 * 25 * 100 * а± * 25 * 100' м

St - площадь пика ДМП на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 - площадь пика ДМП на хроматограмме раствора Б РСО;

- навеска порошка растертых таблеток в мг;

а0 - навеска РСО ДМП в мг;

Р - содержание ДМП в РСО в процентах;

b - средняя масса таблетки в мг.

Содержание ДМП (С22Н37О4) должно находиться в пределах от 0,17 до 0,23 мг в пересчете на среднюю массу одной таблетки.

Условия хроматографирования:

- колонка из нержавеющей стали, заполненная с обра-щенно-фазовым сорбентом с октадецилсилильными группами Discovery C18 (5 мкм; 150 х 4,6 мм) и предколон-кой, заполненной обращенно-фазовым сорбентом с октадецилсилильными группами (5мкм, 20мм х 4 мм). Время удерживания ДМП - 15 мин. Время проведения анализа - 20 мин;

- подвижная фаза: смесь вода-ацетонитрил (50:50);

- скорость потока подвижной фазы - 1,5 мл/мин;

- детекция при длине волны 195 нм;

- температура колонки - 35±0,1°С.

Приготовление рабочего стандартного образца

ДМП. Около 25 мг (точная навеска) ДМП помещают в мерную колбу объёмом 25 мл, добавляют 20 мл ацетонитрила,

МЕДИЦИНСКИЙ

АЛЬМАНАХ

РИС. 1.

Хроматограмма раствора таблеток ДМП.

РИС. 2.

Хроматограмма раствора РСО ДМП.

?Ао ?1о ?¿0 7*0 7^0 7*0 ?Ао тйо ¡¿V з)о

РИС. 3.

УФ-спектры действующего вещества в испытуемом растворе (а) и РСО ДМП (б).

РИС. 4.

Хроматограмма раствора таблеток без действующего вещества.

РИС. 5.

Линейная зависимость площади пика от концентрации 11-дезоксимизопростола.

растворяют перемешиванием, объём раствора доводят до метки ацетонитрилом и перемешивают (раствор А). 1 мл раствора А переносят в мерную колбу объёмом 25 мл, доводят объём 75% раствором ацетонитрила до метки (раствор Б). Концентрация раствора Б РСО ДМП равна 40,0 мкг/мл. Срок годности раствора А при температуре не выше 5°С составляет двое суток.

Результаты анализа принимаются за достоверные при соблюдении требований теста «Проверка пригодности хроматографической системы»:

1) количество теоретических тарелок N для пика ДМП, рассчитанное по пяти хроматограммам раствора Б РСО ДМП, должно быть больше 8000;

2) относительное стандартное отклонение площади пика ДМП, рассчитанное по пяти последовательным хро-матограммам раствора Б РСО ДМП, не должно превышать 2,0%;

3) разрешение основного пика ДМП для раствора не менее 1,5.

В молекуле ДМП есть 3 ассиметрических атома углерода, поэтому вещество представляет собой смесь изомеров и дает при данных условиях хроматографирования три пика (времена удерживания 14, 14,5 и 15 мин соответственно), из которых больший пик является преобладающим в смеси и именно по нему ведется расчет количественного определения (рис. 2). Если повысить концентрацию элюента до 80%, то на хроматограмме будет только один пик, представляющий собой смесь изомеров, но точность расчетов снизится, т. к. из-за уменьшения времени удерживания на исследуемый пик могут накладываться пики вспомогательных веществ, входящих в состав таблетки.

Для доказательства отсутствия влияния вспомогательных веществ были приготовлены таблетки без действующего вещества («пустышки») и было проведено испытание в тех же условиях, что и для таблеток ДМП. На полученной хроматограмме нет пика действующего вещества с временем удерживания 15 мин (рис. 4).

Согласно ГФ XIII издания для дозированных лекарственных форм, количественное определение можно не проводить, если выдерживается испытание на однородность дозирования. Для таблеток, не покрытых оболочкой, испытание проводится по способу 1. Для 1-го этапа отбираются 10 таблеток, в каждой из которых устанавливается содержание активного вещества по методике, приведенной в разделе «Количественное содержание». Если на 1-м этапе таблетки не проходят тест, то проводят 2-й этап. Как мы видим из таблицы 1, таблетки 11-дезокси-мизопростола соответствуют критерию теста «Однородность дозирования» уже на 1-м этапе, поэтому проведение 2-го этапа испытания не требуется.

Применимость созданной методики для аналитических целей оценивали с помощью валидации по таким критериям, как специфичность, линейность, аналитическая область методики, правильность, повторяемость (сходимость), межлабораторная прецизионность.

Специфичность — свойство методики однозначно устанавливать содержание действующего вещества при наличии сопутствующих компонентов. Для этого анализировали воздействие вспомогательных веществ на итоги

1

5щ

эксперимента: сравнили таблетки ДМП и «пустышки». Полученные результаты подтверждают, что вспомогательные вещества не влияют на обнаружение ДМП в лекарственной форме (таблица 2).

Линейность - это существование линейной зависимости аналитического сигнала от концентрации анализируемого вещества в пробе в интервале аналитической области методики. Линейность методики изучали в области концентраций ДМП от 80 до 120% от номинального значения с шагом в 10% концентрации (таблица 3, рис. 5).

ТАБЛИЦА 1.

Результаты определения теста «Однородность дозирования» по 1-му этапу

Из таблицы 3 видно, что методика линейна: коэффициент корреляции больше 0,99 (г=0,99843, р=0,05).

Требования к аналитической области методики означают, что методика количественного определения должна быть применима в интервале от 80 до 120% от определяемой концентрации вещества. Эти требования были выполнены при определении линейности методики.

Критерий правильности означает, что доверительный интервал среднего результата должен включать истинное значение (100%). Правильность методики проверяли на

ТАБЛИЦА 5.

Результаты количественного определения 11-дезоксимизо-простола в таблетках в разные дни

Результаты определения теста «Однородность дозирования» Критерий

AV = 4,866 AV « 15

ТАБЛИЦА 2. Результаты количественного определения 11-дезоксимизо-простола в лекарственной форме и в модельной смеси вспомогательных веществ

Содержание 11-дезоксимизопростола в одной таблетке, мг

Таблетки 11-дезоксимизопростола 0,2 мг Модельная смесь вспомогательных веществ

0,192±0,015 0

ТАБЛИЦА 3.

Определение линейности валидируемой методики

Площадь пика Sl Содержание 11-дезоксимизо-простола в одной таблетке Коэффициент корреляции у = Ьх + а

Ь а

622678 0,1643 0,99843 3287209,565 82993,696

672147 0,1808

754300 0,2027

806674 0,2182

872348 0,2419

ТАБЛИЦА 4.

Результаты исследований модельных смесей с содержанием 11-дезоксимизопростола от 75 до 125%

№ Истинное значение определяемой величины, мг Экспериментально полученное значение

Абсолютная величина, мг Процент восстановления, %

1.1 0,15 0,148 98,67

1.2 0,15 0,153 102,0

1.3 0,15 0,145 96,67

2.1 0,2 0,198 99,0

2.2 0,2 0,196 98,0

2.3 0,2 0,207 103,5

3.1 0,25 0,252 100,8

3.2 0,25 0,246 98,4

3.3 0,25 0,243 97,2

Средний процент восстановления 99,36±1,752

День испытания Таблетки с содержанием 11-дезоксимизопростола 0,2 мг

Образец № Результаты Стандартное отклонение S Относительное стандартное отклонение RSD % ^критерий Стьюдента

1-й день 1 0,197 экспер. табл.

2 0,197

3 0,203

4 0,199

5 0,196

6 0,204

среднее 0,1993 0,003728 1,7% 0,5065 2,57

2-й день 1 0,201

2 0,203

3 0,196

4 0,198

5 0,204

6 0,195

среднее 0,1995 0,0033864 1,869% 0,3286 2,57

ТАБЛИЦА 6.

Результаты количественного определения 11-дезоксимизопростола в таблетках на двух хроматографах разными аналитиками

Хроматограф/ аналитик Истинное значение содержания в таблетке р = 0,2 мг

Образец № Результаты Стандартное отклонение Б Относительное стандартное отклонение RSD % ^критерий Стьюдента

1-й хроматограф / 1-й аналитик 1 0,195 экспер. табл.

2 0,197

3 0,201

4 0,198

5 0,203

6 0,204

среднее 0,1997 0,003559 1,782% 0,2065 2,57

2-й хроматограф / 2-й аналитик 1 0,203

2 0,202

3 0,198

4 0,199

5 0,205

6 0,197

среднее 0,2007 0,003141 1,565% 0,546 2,57

NK

МЕДИЦИНСКИЙ

АЛЬМАНАХ

модельных смесях, которые готовили в трех концентрациях с содержанием ДМП 75%, 100%, 125% от исходного содержания. Для каждой концентрации проводили по три определения (таблица 4).

Вычисленный средний процент восстановления составил 99,36±1,752%. Так как значение 100% лежит внутри этого интервала, то методика является правильной.

Прецизионность характеризуется рассеянием полученных результатов относительно среднего результата. Для оценки повторяемости (сходимости) испытания проводились в разные дни одним и тем же специалистом в шести повторностях (таблица 5).

Относительное стандартное отклонение RSD ниже 2%, что соответствует требованиям ГФ-13. Критерий Стьюдента экспериментальный меньше табличного, т. е. результаты не оттягощены систематической ошибкой. Критерий Фишера (при s,2>s22) следующий: F =s,2/ s22 = 0,0000139 / 0,0000114653 « 1,212, критерий Фишера табличный Fra& = 10,967. FOT < Fra&, значит, различие дисперсий статистически не значимо, т. е. воспроизводимость результатов количественного определения в разные дни не отличается.

Межлабораторная прецизионность. Исследования проводились в лаборатории БГМУ на жидкостном хроматографе Shimadzu LC-20 PROMINENCE и в лаборатории синтеза низкомолекулярных регуляторов УфИХ РАН на приборе Shimadzu LC-20 PROMINENCE в шести повторностях двумя аналитиками (таблица 6).

FOT = s,2/ s22 = 0,000012668 / 0,000009868 «1,284, FTa& = 10,967. FэкCП < FTa6m следовательно, различие дисперсий статистически не значимо, т. е. воспроизводимость двух методов не отличается.

Согласно выполненной валидационной оценке, методика количественного определения ДМП является специфичной, линейной, воспроизводимой, правильной.

Выводы

Таким образом, разработаны условия количественного определения для таблеток 11-дезоксимизопростола по 0,2 мг. Разработанная методика валидирована и соответствует требованиям ГФ-13.

ЛИТЕРАТУРА

1. Безопасный аборт: рекомендации для систем здравоохранения по вопросам политики и практики [Электронный ресурс]. Второе издание, Женева: издательство ВОЗ, 2012. 132 с. — Режим доступа: http://apps.who.int/ iris/bitstream/10665/70914/19/9789244548431_rus.pdf (дата обраще-ния:13.02.2017).

Bezopasnyi abort: rekomendacii dlya system zdravookhraneniya po voprosam politiki i praktiki [E'lektronnyi resurs]. Vtoroe izdanie, Zheneva: izdatelstvo VOZ, 2012. 132 s. — Rezim dostupa: http://apps.who.int/iris/bitstre am/10665/70914/1/9789241548434_eng.pdf?ua=1 (data obrashcheniya: 13.02.2017).

2. Письмо Министерства здравоохранения Российской Федерации от 15 октября 2015 г. № 15-4/10/2-6120 «О направлении клинических рекомендаций (протокол лечения) «Медикаментозное прерывание беременности».

Pismo Ministerstva zdravoochraneniya Rossiyskoy Federacii ot 15 oktyabrya 2015 g. № 15-4/10/2-6120 «O napravlenii klinicheskikh rekomendaciy (protocol lecheniya) «Medikamentoznoe preryvanie beremennosti».

3. Сухих Г.Т., Серов В.Н., Прилепская В.Н. и др. Медикаментозное прерывание беременности в I триместре. Ж. акуш. и жен. болезн. 2014. № 6. C. 66-86.

Sukhikh G.T., Serov V.N., Prilepskaya V.N. i dr. Medikamentoznoe preryvanie beremennosti v I trimestre. Zh. akush. i zen. bolezn. 2014. № 6. S. 66-86.

4. Иванова Н.А. и др. Средство, представляющее собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина E1, проявляющее утеротоническую активность // Патент № RU 2394814 от 22.05.2009.

Ivanova N.A. i dr. Sredstvo, predstavlyayushchee soboy e'tilovyi efir (±)-11,15-didesoksi-16-metil-16-gidroksiprostaglandina E1, proyavlyayushchee uterotonicheskuyu aktivnost'//Patent № RU 2394814 ot 22.05.2009.

5. Катаева Р.М., Аглетдинов Э.Ф., Катаев В.А. и др. Изучение иммуноток-сичности и аллергенных свойств 11-дезоксимизопростола. Фундаментальные исследования. 2014. № 10. С. 1938-1941.

Kataeva R.M., AgletdinovE.F., Kataev V.A. idr. Izuchenieimmunotoksichnosti i allergennykh svoystv 11-desoksimisoprostola. Fundamental'nye issledovaniya.

2014. № 10. S. 1938-1941.

6. Катаева Р.М., Аглетдинов Э.Ф., Иванова Н.А. и др. Изучение репродуктивной токсичности перспективного нового лекарственного средства «11-дезоксимизопростол». Современные проблемы науки и образования.

2015. № 1. С. 1284-1291.

Kataeva R.M., Agletdinov E.F., Ivanova N.A. i dr. Izuchenie reproduktivnoy toksichnosti perspektivnogo novogo lekarstvennogo sredstva «11-desoksimisoprostol». Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya. 2015. № 1. S. 1284-1291.

7. Габдрахманова С.Ф., Сапожникова Т.А., Басченко Н.Ж. и др. Влияние аналога мизопростола - 11-дезоксимизопростола на сократительную активность матки крыс и его абортивные свойства. Экспер. и клин. фармакология. 2010. Т. 73. № 3. С. 18-20.

Gabdrakhmanova S.F., Sapozhnikova T.A., Baschenko N.Zh. i dr. Vliyanie analoga misoprostola - 11-desoksimisoprostola na sokratitel'nuyu aktivnost' matki krys i ego abortivnye svoystva. Eksper. i klin. farmakologiya. 2010. Т. 73. № 3. S. 18-20.

8. Сапожникова Т.А. Некоторые биохимические механизмы фармакологической активности 2-дезметоксикарбонил-2-этоксикарбонил-11-дезоксимизопростола: автореф. дисс. ... к. б. н. / Т.А. Сапожникова. Уфа, 2004. 145 с.

Sapozhnikova T.A. Nekotorye biokhimicheskie mekhanizmy farmakologicheskoy aktivnosti 2-dezmetoksikarbonil-2-etoksikarbonil-11-desoksimisoprostola: avtoref. diss. ... k. b. n. / T.A. Sapozhnikova. Ufa, 2004. 145 s.

9. Иванова Н.А., Кузнецов О.М., Шайнурова А.М. и др. Простаноиды LXXIV. Противоязвенная активность мизопростола и его 11-дезоксианалога. Синтез мизопростола. Хим.-фарм. журн.1998. № 11. С. 12-14.

Ivanova N.A., Kuznecov O.M., Shaynurova A.M. i dr. Prostanoidy LXXIV. Protivoyazvennaya aktivnost' misoprostola i ego 11-desoksianaloga. Sintez misoprostola. Khim.-farm. zhurn. 1998. № 11. S. 12-14.

10. Сапожникова Т. А., Зарудий Ф. С., Карачурина Л. Т. и др. Фармакологические свойства 11-дезоксимизопростола. Экспер. и клин. фармакология. 2003. Т. 66. № 1. С. 34-36.

Sapozhnikova T.A., Zarudiy F.S., Karachurina L.T. i dr. Farmakologicheskie svoystva 11-desoksimisoprostola. E ksper. i klin. farmakologiya. 2003. T. 66. № 1. S. 34-36.

11. Государственная Фармакопея Российской Федерации. Т. I. МЗСР РФ. 13-е изд. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2015. C. 1470.

Gosudarstvennaya Farmakopeya Rossiyskoy Federacii. T. I. MZSR RF. 13-e izd. M.: Nauchnyi centr e kspertizy sredstv medicinskogo primeneniya, 2015. S. 1470.

12. Ялкаев А.Г., Кильдияров Ф.Х., Катаев В.А. и др. Экспериментальное исследование комбинаций вспомогательных веществ в технологии твердой дозированной лекарственной формы 11-дезоксимизопростола. Медицинский вестник Башкортостана. 2016. Т. 11. № 5 (65). С. 102-105.

Yalkaev A.G., Kildiyarov F.Kh., Kataev V.A. i dr. Eksperimentalnoe issledovanie kombinaciy vspomogatel'nykh veshchestv v tekhnologii tverdoy dosirovannoy lekarstvennoy formy 11-desoksimisoprostola. Medicinskiy vestnik Bashkortostana. 2016. Т. 11. № 5(65). S. 102-105.

13. Шатц В.Д., Сахартова О.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография: Основы теории. Методология. Применение в лекарственной химии. Рига: Зинатне, 1988. 390 с.

Shatc V.D., Sakhartova O.V. Vysokoeffektivnaya zhidkostnaya khromatografiya: Osnovy teorii. Metodologiya. Primenenie v lekarstvennoy khimii. Riga: Zinnatne, 1988. 390 s. п-ш