Состояние иммунной системы ягнят при дикроцелиозе при разных показателях интенсивности инвазии

Состояние иммунной системы ягнят при дикроцелиозе при разных показателях интенсивности инвазии

А.Б. Фиапшева, к.б.н., доцент, САБеккиева, к.х.н., доцент, Л.З. Шекихачева, к.с.-х.н., доцент, А.Х. Гузоев, аспирант, Кабардино-Балкарская ГСХА

Авторы свидетельствуют о глубоких изменениях в иммунобиологических механизмах защиты организма животных под влиянием гельминтов. В результате изучения естественной резистентности ягнят, спонтанно зараженных дикроцели-ями, установлено, что клеточные и гуморальные реакции организма животных имеют различную степень выраженности [1—4]. Анализ изменений в гематологическом профиле зараженных животных, начиная с 10-го дня наблюдений, требует дифференцированного подхода вследствие различной по степени выраженности реакции со стороны организма зараженных и контрольных животных. Наиболее существенные сдвиги отмечены у ягнят в динамике эритроцитов и лейкоцитов. У подопытных ягнят отмечали медленное повышение количества эритроцитов с начала заражения животных относительно контрольных аналогов от 5,9 до 9,3 млн./мкл крови [4, 5]. Эритропения у нелеченных ягнят начинается с 26-го дня после выгона на пастбище, а лейкоцитоз — через 47 дней [1]. Эозинофилия начиналась с первых дней после заражения гельминтами от 3,8% (10-день) до 8,5% (на 100-й день) [1,2]. Фагоцитарная активность нейтрофилов у незара-женных ягнят 8—9-мес. возраста — до 35,4% [3]. В динамике комплементарной активности и титре агглютининов константировали одинаковую тенденцию к снижению как спонтанно, так и экспериментально зараженных животных [4]. Перманентное заражение животных сопровождалось постепенным снижением активности (8,2 до 2,9%) на 80-й день исследования [2, 3]. В природе, по всей вероятности, идет (при постоянном заражении гельминтами) истощение иммунной системы, а снижение активности фагоцитов происходит за счет их морфологической и химической анаплазии. Результаты исследований свидетельствуют о глубоких изменениях в иммунобиологических механизмах защиты организма животных под влиянием этих гельминтов [4]. Установлено снижение титра гетерофильных агглютининов у козлят после выхода на пастбище с 3,0 ±0,6 до 1,2+0,2 log 2 (в 2,5 раза). У инвазирован-ных ягнят количество моноцитов постепенно снижалось на протяжении исследований от 8,0+0,12 до 3,9+0,13%, а у незараженных аналогов по мере физиологического роста организма возросло от 13,1 до 17,5% [2, 3]. Интенсивная

инвазия дикроцелиоза снижала в организме животных биологически активные компоненты неспецифической резистентности, увеличивала токсическое, инокуляторное и аллергическое влияние, оказывала отрицательное влияние на иммунный статус [1, 4].

Материалы и методы исследований. Для иммунологических исследований использовали гепа-ринизированную кровь и сыворотку. Количество антителообразующих клеток (АОК) в селезенке определяли по методу СапшгщЬаш (1965) и по индукции гиперчувствительности замедленного типа по методике Манько В.М. и др. (1989). Определение аутологичных розеткообразующих клеток (ауто-РОК) мышей проводили, используя технику реакции, аналогичную выявлению спонтанных розеткообразующих лимфоцитов (Е-РОК) по 1опс1а1 е1; а1. (1984), описанную в «Методических рекомендациях по изучению влияния ант-гельминтиков на иммунный статус животных при гельминтозах» Э.Х. Даугалиева и др. (1989). В качестве эритроцитарного маркера применяли 1,5% -ную суспензию аутологичных эритроцитов. В-лимфоциты мышей идентифицировали по наличию рецептора для третьего компонента комплемента (Сз) на поверхности клеточной мембраны по методу Мепёев е1 а1. (1973), описанному Э.Х. Даугалиевой (1989). В качестве эритроцитарного маркера использовали гетерологические эритроциты быка, сенсибилизированные мышиным компонентом. Определяли абсолютное и относительное количество лимфоцитов. О неспецифической резистентности организма животных судили, изучая гетерофильные агглютинины в сыворотке крови, определяемые в реакции Пау-ля-Буннеля, в модификации Э.Х. Даугалиевой (1989). Материалы исследования обрабатывали статистически по методу Стъюдента.

Результаты и обсуждение. Показатели резистентности ягнят при дикроцелиозе изучали на 28 баранчиках 8-мес. возраста, экспериментально зараженных метацеркариями дикроцелий в дозе по 300 экз./гол.

Комплементарная активность (табл.). У ягнят, зараженных метацеркариями дикроцелий, на протяжении 100 дней наблюдали постепенное снижение комплементарной активности сыворотки крови. Если в начале исследований этот показатель находился в пределах 4,6%, то на 50 сутки заражения снизился до 2,9%. В последующие дни комплементарная активность постепенно повышалась, и ее уровень достиг 4,75%. У ягнят не-зараженной группы отмечено увеличение компле-

Динамика комплементарной активности гетерофильных агглютининов, Т- и В-лимфоцитов и иммуноглобулинов в крови ягнят

Наименование показателей Группы Дни исследования

10 20 40 60 90 110 130 150

Комплементарная активность 1 2 4,6±0,4 4,1±0,4 3,9±0,4 4,5±0,3 3,5±0,4 5,0±0,4 3,1±0,4 5,7±0,4 2,9±0,3 6,8±0,4 3,4±0,4 7,3±0,5 3,2±0,5 8,1±0,5 4,8±0,37 11,2±0,6

Гетерофильные агглютинины, ^2 1 2 3,2±0,2 3,8±0,2 2,7±0,2 3,5±0,3 2,0±0,1 3,2±0,3 1,8±0,2 3,6±0,2 2,0±0,2 3,7±0,4 1,7±0,1 3,9±0,2 1,5±0,3 3,8±0,3 1,2±0,14 4,1±0,34

В-лимфоциты, % 1 2 17,4±1,8 16,7±1,5 15,0±1,6 16,2±1,4 12,6±1,4 13,8±1,1 9,4±1,5 14,6±1,4 8,5±1,1 13,0±1,4 9,3±1,0 16,2±1,6 8,2±1,5 18,4±1,6 9,2±1,4 20,6±2,0

Т-лимфоциты, % 1 2 25,4±1,2 25,2±1,6 23,0±1,5 27,2±1,5 20,4±1,7 29,6±2,0 16,5±1,7 27,6±1,2 17,0±1,2 29,8±1,7 16,0±1,0 33,0±1,5 13,6±1,8 34,9±1,7 10,1±1,3 36,8±2,4

Иммуноглобулины, G 1 2 0,94±0,4 0,84±0,2 1,3±0,28 1,18±0,16 1,2±0,15 1,8±0,2 1,3±0,2 1,2±0,1 1,2±0,15 1,2±0,3 1,2±0,3 1,2±0,1 1,4±0,2 1,2±0,2 1,7±0,12 1,1±0,23

Иммуноглобулины, М 1 2 26,4±3,1 28,6±3,0 31,5±4,1 28,9±3,0 28,8±3,0 25,8±3,0 31,2±7,5 28,7±3,3 30,2±7,3 28,2±2,4 28,8±3,1 28,9±4,1 31,9±2,0 28,3±3,4 36,2±3,2 28,4±2,6

ментарной активности до 11,20+0,56%, которая в 2,4 раза превышала аналогичный показатель инвазированных аналогов.

Гетерофильные агглютинины (табл.). У инвазированных гельминтами особей происходило стойкое снижение титра естественных антител с 3,20+0,16 log 2 до 1,2+0,14 log 2 в последние дни исследования (100-й день). У животных контрольной незараженной группы титры гетерофильных агглютининов постепенно повышались и к концу исследований достигли 4,1+0,34 log 2, что также превышает в 2,8 раза аналогичный показатель зараженных гельминтами ягнят.

Динамика ЕАС-РОК (табл.). У ягнят, зараженных D. lanceatum, ЕАС-РОК имеет тенденцию постепенного снижения с 10 до 60 суток наблюдения с 17,4+1,8 до 8,5+1,1%. Затем содержание в крови В-тамфоцитов незначительно возрастало и к 80-му дню исследований составило 9,2+1,4%. У незараженных агельминтозных аналогов количество В-лимфоцитов в крови находилось в пределах 16,7—20,6%. У инвазированных гельминтом ягнят активность В-лимфоцитарно-го звена иммунитета в 2,2 раза меньше таковой клинически здоровых животных.

Динамика Е-РОК (табл.). У инвазированных ягнят в течение всего периода исследований количество лимфоцитов постепенно снижалось и составило к 100-му дню 10,1 + 1,3% против 25,4+1,2 в первые дни исследования. У контрольных незараженных аналогов относительное количество Т-лимфоцитов было в пределах 25,2+

1,6 — 36,8+2,4%. Из этого следует, что при дик-роцелиозе овец количество иммунокомплемен-тарных Т-лимфоцитов в крови снижается в 3,8 раза относительно контрольных показателей.

Динамика иммуноглобулинов (табл.). У ягнят в течение опыта наблюдали незначительное, но достоверное изменение содержания в сыворотке крови иммуноглобулинов. В течение первого месяца исследования наблюдается незначительное увеличение их количества, затем оно снизилось, а количество достоверно увеличилось.

Копрологические исследования (табл.). Ягнята, зараженные D. lanceatum с 60-го дня начинали выделять с фекалиями единичные яйца, затем наблюдали постепенное увеличение количества яиц трематоды в грамме фекалий. Пик инвазии приходился на конец наблюдений (100 дней), когда количество яиц составляло 31,8+5,2 экз./г фекалий. У контрольной группы на 100-й день яиц дикроцелий не обнаруживали.

Литература

1. Ватникова, Ю.А. Эффекторные и регуляторные механизмы иммунитета при фасциолезе и пути их коррекции / Ю.А. Ватникова: дис. ... канд. вет. наук. М.: ВИГИС, 1993. 149 с.

2. Даугалиева, Э.Х. Механизм развития клеточного и гуморального иммунного ответа при гельминтозах / Э.Х. Даугалиева // Мат. докл. научн. конф. «Гельмин-тозы — меры борьбы и профилактики». М., 1994. 4-5 октября. С. 63—65.

3. Даугалиева, Э.Х. Особенности иммунитета животных при гельминтозах / Э.Х. Даугалиева // Ветеринария. 1996. № 7. С. 37.

4. Даугалиева, Э.Х. Иммунный статус животных при гельминтозах / Э.Х. Даугалиева. М.: Агропромиздат, 1998. 188 с.