Особенности клеточного компонента системного воспаления у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких тяжелой и крайне тяжелой степени тяжести в стадии обострения

УДК 616.24-007.272-036.12-036.65-078.33

особенности клеточного компонента системного воспаления у пациентов

с хронической обструктивной болезнью легких тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести в стадии обострения

О. А. Еникеев

Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа

Изучен клеточный компонент системного воспаления у пациентов тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). В исследовании участвовали 21 пациент с тяжелой и 20 пациентов с крайне тяжелой степенью тяжести ХОБЛ. Контрольную группу составили 20 практически здоровых лиц. У всех пациентов дважды измеряли уровни следующих клеток периферической крови: CD3+CD19-, CD3-CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CDl6+CD56+, CD3+cDl6+CD56+, CD4+CD25++, фагоцитарное число и активность. Установлено, что у пациентов тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести ХОБЛ наблюдается усиление фагоцитарной активности на фоне снижения числа самих фагоцитов (р<0,05). Также отмечены активация Т, В и Т-Ж-клеток (р<0,05), снижение Т-регуляторных клеток (р<0,05). У пациентов крайне тяжелой степени тяжести регистрируется истощение Ж-клеток (р<0,05). Полученные данные сигнализируют о необходимости индукции Т-регуляторных клеток у пациентов с ХОБЛ тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести.

Ключевые слова: хроническая обструктивная болезнь легких, системное воспаление, Т-регулятор-ные клетки.

Введение

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) занимает одно из ведущих мест среди причин смертности и инвалиди-зации взрослого населения развитых стран мира [1]. ХОБЛ занимает 4-е место как причина смерти лиц старше 45 лет [2]. По мнению медицинского экспертного сообщества: «Хроническая обструктивная болезнь легких — это предупреждаемое и излечимое заболевание с некоторыми значительными внелегочными проявлениями, которые могут способствовать усилению тяжести заболевания у отдельных пациентов. Легочный компонент данного заболевания характеризуется ограничением тока воздуха, которое не

полностью обратимо. Ограничение тока воздуха обычно прогрессирует и связано с аномальным воспалительным ответом легких на ядовитые частицы и газы». Слабовыражен-ное системное воспаление считается признаком ХОБЛ, который потенциально связывает ХОБЛ с повышенным уровнем системных проявлений данного заболевания. К таким системным проявлениям относятся кахексия, потеря скелетной мускулатуры [5], остеопороз, депрессия, нормохромная нор-моцитарная анемия [4], повышенный риск сердечно-сосудистых заболеваний при повышении уровня С-реактивного белка (СРБ) [3]. Вместе с тем точные механизмы системного воспаления при ХОБЛ изучены недостаточно.

Цель исследования — оценить клеточный компонент системного воспаления у пациентов тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести хронической обструктивной болезни легких в динамике стационарного лечения обострения данного заболевания.

Материалы и методы

ИССЛЕДОВАНИЯ

Под наблюдением находились 21 больной с тяжелой (1-я группа) и 20 пациентов с крайне тяжелой степенью тяжести (2-я группа) течения ХОБЛ. Пациенты получали традиционную терапию ХОБЛ в соответствии с медико-экономическими стандартами (МЭС). В контрольную группу вошли 20 пациентов, у которых при обследовании патологии легких и других органов не было выявлено (практически здоровые лица — ПЗЛ). Критериями включения больных в исследование явились возраст от 18 до 80 лет, снижение индекса Тиффно ниже 70%, объем форсированного выдоха за 1-ю секунду (ОФВ1) ниже 50%. Анализ всех данных проводился после проведения бронхолитиче-ской пробы с 400 мкг сальбутамола (венто-лин), вне зависимости от обратимости обструкции после ингаляции согласно рекомендациям GOLD (2010). Из исследования исключали больных, у которых в анамнезе были сопутствующие хронические заболевания в фазе обострения, пациентов с пневмонией и застойной сердечной недостаточностью, больных, не способных правильно выполнять дыхательный маневр при тестировании функции внешнего дыхания (ФВД), пациентов, имеющих в анамнезе онкозаболевания, операции по удалению легкого, туберкулез, нарушения опорно-двигательного и вестибулярного аппаратов. Практически здоровые лица и больные ХОБЛ включались в исследование при наличии их информированного согласия, в соответствии со ст. 31 Закона РФ «Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан».

Иммунологические методы исследования проводились двукратно: при поступлении в стационар на 2—3-й день и при выписке на 13—17-й день. Определялись популяции и субпопуляции лимфоцитов с использованием моноклональных антител фирмы «Beckman Coulter», методом проточной цито-флюорометрии по следующим кластерам дифференцировки: CD3+CD19— Т-лимфо-циты (Т-клетки), CD3-CD19+ — В-лимфо-циты (В-клетки), CD3+CD4+ — Т-хелпе-ры, CD3+CD8+ — Т-киллеры, CD3-CD16+CD56+ — натуральные киллеры (NK-клетки), CD3+CD16+CD56+ — Т-на-туральные киллеры (Т-Ж-клетки), CD4+CD25++ — Т-регуляторные клетки (Трег). Исследовали микробицидную активность нейтрофилов крови по спонтанному (с) и индуцированному (и) латексом тесту на восстановление нитрасинего тетразолия (НСТ-тест) и индексу стимуляции [7]. Изучали фагоцитарную активность нейтрофилов крови, используя частички латекса, с определением фагоцитарного индекса (ФИ) и фагоцитарного числа (ФЧ) [5]. Статистическую обработку данных проводили при помощи программы Statistica 7.0 (Statsoft, 2004) с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты и их обсуждение

Анализ иммунологических показателей у больных ХОБЛ позволил выявить различный характер нарушений во всех звеньях иммунной системы (табл.). По сравнению с ПЗЛ у них была обнаружена разнонаправленная динамика показателей клеточного компонента системного воспаления. Так, у всех групп пациентов значимо были повышены уровни лейкоцитов, в том числе лимфоцитов, как при поступлении, так и при выписке (р<0,05). Также у пациентов обеих групп было достоверно повышено абсолютное и относительное количества В-лимфо-цитов как до, так и после лечения. Что касается Т-лимфоцитов, то их относительное количество достоверно не изменялось, тогда как

Таблица

Параметры клеточного иммунитета у пациентов ХОБЛ тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести до и после лечения обострения заболевания

Показатели иммунограммы ПЗЛ

до лечения после лечения до лечения после лечения

Лейкоциты, х109/л 5,38±0,29 7,72±0,66 * 9,3±0,74 * 9,37±1,15 * 10,99±1,55 *

Лимфоциты, % 31,8±0,76 25,05±2,09 * 26,95±1,5 * 20,83±2,73 * 23,54±3,3 *

Лимфоциты, х109/л 1,53±0,05 1,92±0,21 * 2,56±0,32 * 1,81±0,27 2,27±0,33 *

Фагоцитарный индекс, % 61,11±3,99 46,53±2,74 * 44,76±2,76 * 37,83±4,23 * 38,08±4,72 *

Фагоцитарное число 5,92±0,29 4,53±0,35 * 4,42±0,31 * 3,8±0,35 * 4,3±0,7 *

НСТ-тест спонтанный, % 11,5±0,4 13,56±0,94 * 13,1±0,56 * 13,45±1,2 * 15,5±0,77 *

НСТ-тест стимулированный, % 24,2±1,2 29,44±0,76 * 29,86±0,77 * 27,18±1,63 * 31,08±1,63 *

НСТ-тест (индекс стимуляции) 2,2±0,1 2,07±0,11 2,19±0,1 2,1±0,19 1,96±0,12 *

В-клетки, % 8,5±0,5 15,2±1,62 * 16,83±1,39 * 13,24±1,55 * 16,13±1,51 *

В-клетки, х109/л 0,19±0,02 0,323±0,065 * 0,443±0,074 * 0,221±0,029 * 0,367±0,065 *

Т-клетки, % 69,2±1,43 67,5±1,84 71,1±1,66 70,01±6,09 70,42±2,75

Т-клетки, х109/л 1,14±0,07 1,318±0,155 1,794±0,204 * 1,417±0,279 1,639±0,256 *

Т-хелперы, % 50,3±1,58 41,95±1,97 * 45,95±2,05 * 34,45±4,74 * 36,83±3,12 *

Т-хелперы, х109/л 0,8±0,05 0,816±0,099 1,109±0,094 * 0,616±0,117 * 0.854±0,149

Т-киллеры, % 39,4±1,43 24,81±1,58 * 25,45±1,52 * 34,5±3,22 * 34,61±3,84 *

Т-киллеры, х109/л 0,63±0,05 0,480±0,062 * 0,689±0,138 0,689±0,164 0,813±0,165

ИРИ 1,83±0,12 1,89±0,2 2,03±0,2 1,23±0,3 * 1,32±0,26 *

NК-клетки, % 16,9±1,3 16,63±2,12 12,22±1,66 * 11,43±2,32 * 12,94±3,03 *

NК-клетки, х109/л 0,36±0,03 0,275±0,036 * 0,334±0,087 0,166±0,023 * 0,244±0,064 *

Т-NК-клетки, % 3,8±0,52 5,3±0,95 * 4,29±0,65 5,85±1,55 6,83±1,68 *

Т-NК-клетки, х109/л 0,04±0,031 0,09±0,015 * 0,120±0,036 * 0,099±0,026 * 0,173±0,056 *

T-reg, % 3,3±0,8 2,11±0,21 * 1,8±0,34 * 1,55±0,41 * 1,98±0,41 *

T-reg, х109/л 0,07±0,02 0,042±0,007 * 0,042±0,009 0,028±0,007 * 0,039±0,009 *

Примечание. * — р<0,05 по сравнению с практически здоровыми.

их абсолютное количество повышалось после проведенного лечения в стационаре у пациентов обеих групп (р<0,05). Стоит отметить, что относительное содержание Т-хел-перов было сниженным у пациентов обеих групп все время нахождения в стационаре, с тенденцией к увеличению при выписке из стационара. Вместе с тем абсолютное количество Т-хелперов достоверно увеличивалось в ходе лечения и было значимо выше условной нормы после лечения у пациентов

1-й группы и ниже нормы у пациентов

2-й группы при поступлении в стационар (р<0,05). В то же время относительное количество Т-киллеров было значимо сниженным в 1-й группе (р<0,05), тогда как абсолютное количество этих клеток было ниже нормы только у пациентов тяжелой степени тяжести при их поступлении в стационар (р<0,05). Несмотря на указанные выше показатели Т-хелперов и Т-киллеров, соотношение этих клеток — иммунорегуляторный индекс (ИРИ) был достоверно повышен только у пациентов тяжелой степени тяжести после проведенной общепринятой терапии (р<0,05), тогда как у пациентов крайне тяжелой степени тяжести наблюдалось достоверное снижение данного показателя как при поступлении, так и при выписке. Кроме того, во 2-й группе относительное количество Ж-клеток было достоверно сниженным, тогда как в 1-й группе такое снижение наблюдалось лишь при выписке из стационара (р<0,05). Абсолютное же количество Ж-клеток было сниженным у пациентов крайне тяжелой степени тяжести все время нахождения в стационаре, тогда как у пациентов тяжелой степени — при поступлении в стационар (р<0,05). Относительное количество Т-Ж-клеток имело разнонаправленную динамику изменений при лечении в стационаре (р<0,05). Так, относительное количество данных клеток достоверно повышалось у пациентов 1-й группы при поступлении в стационар, а у пациентов 2-й группы — при выписке из стационара. Абсолютное же количество данных клеток

достоверно превышало показатели. Относительное количество Т-регуляторных клеток было достоверно сниженным в обеих группах (р<0,05). Абсолютное же количество данных клеток было сниженным у пациентов 2-й группы и у пациентов 1-й группы при поступлении в стационар (р<0,05). Обострение заболевания у больных ХОБЛ тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести сопровождалось значимым повышением показателей стимулированного и спонтанного НСТ-теста (р<0,05) как до, так и после лечения. Нормализация показателей спонтанного НСТ-теста служит критерием глубины ремиссии и основанием для сокращения сроков лечения [3], что приводит нас к выводу о том, что терапия пациентов обеих степеней тяжести не была достаточно эффективной. Фагоцитарный индекс и фагоцитарное число были достоверно снижены в обеих группах до и после лечения (р<0,05).

Вывод

Обострения ХОБЛ у пациентов тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести характеризуется усилением фагоцитарной активности на фоне снижения числа самих фагоцитов. Также наблюдается активация Т- и В-кле-ток на фоне повышенного уровня Т-Ж-клеток, что свидетельствует в пользу хронического воспаления у пациентов обеих групп. У пациентов обеих групп наблюдается истощение Ж-клеток, более выраженное при крайне тяжелой степени тяжести, что говорит об ослаблении противовирусного и противоопухолевого иммунитета. Достоверное снижение Т-регуляторных клеток у пациентов обеих групп предопределяет столь выраженную степень воспалительных изменений, так как данные клетки подавляют воспалительный ответ. Полученные данные сигнализируют о необходимости индукции Т-регуляторных клеток у пациентов с ХОБЛ тяжелой и крайне тяжелой степеней тяжести.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Заболеваемость хроническими бронхоле-гочными болезнями взрослого населения в Республике Башкортостан/Ю. Г. Азнабае-ва, Ш. З. Загидуллин, Р. З. Тимашева, Е. С. Галимова///Медицинский вестник Башкортостана.— 2010.— № 4.— С. 10—15.

2. Лещенко И. В. Основные направления лечения хронической обструктивной болезни легких/И. В. Лещенко ^//Терапевтический архив.— 2007.— № 8.— С. 7—84.

3. Gan W. Q. Association between chronic obstructive pulmonary disease and systemic inflammation: a systematic review and a me-ta-analysis/W Q. Gan, S. F. Man, A. Senthil-selvan//Thorax.— 2004.— Vol. 59.— № 7.— Р. 574—580.

4. Similowski T. The potential impact of anaemia of chronic disease in COPD/T. Similowski, A. Agusti, W. MacNee//Eur. Respir. J.— 2006.— Vol. 27.— № 2.— Р. 390—396.

5. Systemic effects of chronic obstructive pulmonary disease/A. G. Agusti, A. Noguera, J. Sauleda//Eur. Respir. J.— 2003.— Vol. 21.— № 2.— Р. 347—360.

O.A. Enikeev

peculiarities OF SYSTEMIC INFLAMMATION CELLuLAR COMPONENT IN PATIENTS WITH CHRONIC obstructive pulmonary DISEASE of serious and critical degree

OF SEVERITY IN EXACERBATION

The cellular component of systemic inflammation in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) of serious and

critical degree of severity was studied. 21 patients with serious and 20 patients with critical degree of COPD severity participated in investigation. The control group consisted of 20 practically healthy subjects. All patients were twice measured the following peripheral blood cell levels: CD3+CD19-, CD3-CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD16+ CD56+, CD3+CD16+CD56+, CD4+CD25++, phagocytic number and activity. It was established that in patients with serious and critical degree of COPD severity increase in the phagocytic activity against the background of decreased phagocyte number (p<0,05) was observed. Besides, T, B and T-NK-cell activation (p<0,05) was noted. All patients were also stated reduction of the T-regulatory cells (p<0,05). In patients with critical degree of severity NK-cell exhaustion (p<0,05) was registered. The obtained data signal about the necessity of T-regulatory cell induction in patients with serious and critical COPD.

Keywords: chronic obstructive pulmonary disease, systemic inflammation, T-regulatory cells.

Контактная информация: Еникеев Олег Анатольевич, аспирант кафедры терапии и общей врачебной практики с курсом гериатрии и подготовки интернов терапевтического профиля Института последипломного образования Башкирского государственного медицинского университета, 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, тел 8 (347) 228-79-96

Материал поступил в редакцию 09.11.2011