Лечебно-профилактическая эффективность пробиотика на основе B. bifidum, апифитопрепарата «Вита-Форце м» и противорадиационного глобулина при экспериментальном колибактериозе на фоне радиоиндуцированной иммуносупрессии

APISANE USE AS IMMUNOMODULATOR IN STIMULATION OF POSTVACCINAL

IMMUNITY

Nizamov R.N., Kabirov G.F., Yusupov, R.H., Setdekov R.A., Ivanov A.A.,

Tukhfatulliv, Yusupova G.R.

Summary

By deprotenating and enzymatic hydrolysis of bee dead natural origin chitosan - apisane, which is used as immunomodulator of a new generation was obtained. It is established that the combined use of apisane with antiescherichial vaccine and anti-radiation polyantigene provided immunomodulating and immunostimulating effect through the activation of humoral and cellular immunity. Application of antiescherichial vaccines and radioprotective polyantigene combined with apisane for 1-15 days before the infection and exposure had radioprotective and anti-infectious effect, raising the survival of animals for 30-40% compared with the isolated application of these vaccines.

УДК 619:579.842.11

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОБИОТИКА НА ОСНОВЕ B. BIFIDUM, АПИФИТОПРЕПАРАТА «ВИТА-ФОРЦЕ М» И ПРОТИВОРАДИАЦИОННОГО ГЛОБУЛИНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ НА ФОНЕ РАДИОИНДУЦИРОВАННОЙ ИММУНОСУПРЕССИИ

Низамов Р.Н. - д.в.н., профессор; Тухфатуллов М.З.; Сетдеков Р.А. - к.в.н.;

Иванов А.А. - к.э.н.; Юсупов Р.Х. - д.в.н., профессор; Юсупов Р.Р. - к.в.н. Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности,

г. Казань

Ключевые слова: отечная болезнь, иммуносупрессия,

радиобифидумбактерин, апифитопрепарат «Вита-Форце».

Keywords: enterotoxaemia, immunosupressia, radiobifidumbacterin,

apyphytodrug «Wita-Fortse».

Согласно комплексной программе развития биотехнологий в Российской Федерации на период до 2000 года (утв. Правительством РФ 24.04.2012г. № 1853п-П8) одним из наиболее приоритетных направлений является производство кормовых добавок для сельскохозяйственных животных и производство ветеринарных биопрепаратов. При этом наращивание физических объемов производства кормовых добавок без изменения технологических подходов (переработки отходов сельского хозяйства) станет невозможным.

В России в настоящее время переработке подвергаются не более 30% отходов сельскохозяйственного производства. Среди указанных отходов значительное место занимают отходы пчеловодства - пчелиный подмор, сырьевая база которого составляет до 10 тыс. т в год. Однако этот ценнейший продукт, содержащий мед, пчелиный яд, витамины, гормоны, аминокислоты, микроэлементы, гепарин, глюкозамин, меланин, уксусную кислоту и, главное - хитозан-меланиновый комплекс, используется в весьма ограниченном количестве (около 0,1%), а остальное выбрасывается как отходы производства меда.

Учитывая, что перечисленные компоненты пчелиного подмора обладают антиоксидантным, противоинфекционным,

иммуномодулирующим, иммуностимулирующим, антистрессорным, радиопротекторным, антидотным свойствами, сотрудниками ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» была разработана технология получения биологически активной кормовой добавки «Вита-Форце» на основе отходов производства меда и растениеводства, обеспечивающая повышение сохранности молодняка и привесов животных. Однако сложность состава известной добавки и использование в ней ценных лекарственных субстанций (меда, пчелиного яда, перги, обножки и пчелиного расплода) сдерживает широкомасштабное производство кормовой добавки на основе апипродуктов, в частности, пчелиного подмора.

С учетом изложенного нами были проведены исследования по усовершенствованию технологии изготовления кормовой добавки на основе продуктов пчеловодства (пчелиный подмор), животноводства (эритроцитарно-тромбоцитарная масса), растениеводства (хвойная мука) и природного минерала (монтморилонит). Целью настоящей работы является оценка иммуноформакологической активности

усовершенствованного препарата «Вита-Форце М» на фоне воздействия на организм иммунодепрессантов и инфекционных агентов.

Материалы и методы. Для оценки антистрессорной и антиинфекционной активности препарата «Вита-Форце М» опыты проводили на 110 белых мышах массой 18-20 г, разделенных на 11 групп по 10 животных в каждой. Моделирование иммунодепрессии у животных осуществляли путем однократного внешнего облучения животных на гамма-установке «Пума» с источником излучений 137 Cs при мощности экспозиционной дозы 2,58-10-5 А/кг. В качестве эндогенного носителя и амплификатора генетической детерминанты патогенности, индуцирующей колибактериоз поросят, использовали энтеротоксигенный штамм E. coli «КВ1». Моделирование колибактериоза на фоне действия иммунодепрессанта осуществляли путем внутрибрюшинного введения тест-штамма E. coli «КВ1» в дозе 2-106 м.к./животное сразу же после облучения животных гамма-лучами в дозе 6,0 Гр. В качестве средств антирадиационной и антиинфекционной защиты использовали

противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин, а в качестве дисбиотика - бифидобактерин, натуральную биологически активную кормовую добавку «Вита-Форце М», а также рекомендованные при отечной болезни средства - «Ветом 2».

Для изучения эффективности испытуемых средств при профилактике и лечении колибактериоза на фоне радиогенного стресса было сформировано 11 групп белых мышей. Животных 1-й группы облучали в дозе 6,0 Гр и сразу же заражали внутрибрюшинно E. coli «КВ1» в дозе 2-106 м.к./животное (контроль); зараженным и облученным в указанных дозах животным 2-й группы через 5 суток после контамированного радиационно-биологического воздействия однократно подкожно вводили противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин

(ПРЛГ) в дозе 50 мг/кг (лечебный вариант); животным 3-й группы препарат вводили в аналогичных условиях за 5 суток до комбинированного воздействия (профилактический вариант); животных 4й группы в течение 10 суток до комбинированного воздействия патологических агентов кормили препаратом «Вита-Форце М» из расчета 0,2 г/животное; животных 5-й группы кормили указанным препаратом в течение 10 суток после комбинированного воздействия; животным 6-й группы в течение 10 сут до радиационно-биологического воздействия перорально задавали «Ветом 2» в дозе 20 мг/кг в смеси с кормом (профилактика); животным 7-й группы - аналогичный корм в течение 10 суток после комбинированного воздействия (лечебный вариант); животным 8-й группы - за 5 суток до аналогичного воздействия однократно подкожно вводили радиобифидумбактерин (РББ) в дозе Ы0 м.к./кг (профилактика): животным 9-й группы - в аналогичных условиях воздействия вводили РББ через 5 суток после комбинированного воздействия (лечение); животным 10-й - за 5 суток до комбинированного воздействия однократное подкожное введение ПРЛГ и в течение 5 суток после комбинированного воздействия кормили «Вита-Форце М»; животным 11-й группы - кормление «Вита-Форце М» за 5 суток до и в течение 5 суток после комбинированного воздействия патологических агентов.

За подопытными животными в период применения препаратов вели наблюдение, учитывая заболеваемость их колибактериозом, падеж, сохранность.

Результаты исследований. Динамическое наблюдение за животными показало, что предварительное облучение животных в сублетальной дозе (6,0 Гр) и последующее заражение их энтеротоксигенным штаммом возбудителя колибактериоза оказывало иммунодепрессивное действие, ускоряя появление клинических признаков заболевания колибактериозом. Уже через 15 ч после заражения на фоне облучения зарегистрирован первый случай падежа мышат и гибель всех

животных наступала в период с 1 по 5 суток после воздействия патологических агентов на животных.

Результаты патологоанатомических и бактериологических исследований органов и тканей павших животных потвердили этиологию и диагноз заболевания. Патогномоничные признаки заболевания

(катарально-геморрагический гастроэнтероколит) сопровождались

обсеменением тонкого отдела кишечника и транслокацией патогенной аутомикрофлоры во внутренние органы, обуславливая бактериемию и септицемии.

Лечебно-профилактическая эффективность препаратов при экспериментальном колибактериозе белых мышей на фоне радиогенной иммунодепрессии (облучение 6,0 Гр), п=10

№, вариант опыта Пало Выжило Выживаемость, %

1. Заражение Е. соїі + облучение 10 0 0

2. Лечение зараженных и облученных животных ПРЛГ в дозе 50 мг/кг п/к через 5 суток после комбинированного воздействия 4 6 60

3. Профилактика (за 5 суток до комбинированного воздействия ПРЛГ вводили в аналогичных условиях) 5 5 50

4. Профилактика (кормление животных препаратом «Вита-Форце М» в дозе 0,2 г/животное в течение 10 суток до комбинированного воздействия патологических агентов) 2 8 80

5. Лечение (кормление животных препаратом «Вита-Форце М» в дозе 0,2 г/животное в течение 10 суток после заражения и облучения) 3 7 70

6. Профилактика (кормление препаратом «Ветом 2» в дозе 20 мг/кг в течение 10 суток до заражения и облучения) 6 4 40

7. Лечение (кормление препаратом «Ветом 2» в дозе 20 мг/кг в течение 10 суток после облучения и заражения) 7 3 30

8. Профилактика (1-кратное п/к введение радиобифидумбактерина (РББ) в дозе 1-108 КОЕ/кг за 5 суток до облучения и заражения) 1 9 90

9. Лечение (1-кратное п/к введение РББ в дозе 1 • 108 КОЕ/кг через 5 суток после облучения и заражения) 2 8 80

10. Профилактика (1-кратное п/к введение ПРЛГ и в течение 5 суток кормление «Вита-Форце М» за 5 суток до облучения и заражения) 1 9 90

11. Лечение (через 5 суток после облучения и заражения 1-кратное п/к введение ПРЛГ и кормление «Вита-Форце М» в течение 5 суток) 1 9 90

ПРЛГ - противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин, п/к - подкожное введение.

Применение испытуемых средств оказывало модифицирующее действие на течение и исход колибактериоза, вызванного экспериментальным заражением животных на фоне иммунодепрессии, индуцированной радиогенным стресс-фактором. При этом эффект модифицирующего действия испытуемых препаратов зависел как от их природы, так и от схемы применения, что иллюстрируется данными таблицы.

Из данных таблицы видно, что из испытанных 11 схем наиболее эффективными оказались 4, 8, 10 и 11 схемы применения препаратов «Вита-Форце М», радиобифидумбактерина (РББ), противорадиационного лечебно-профилактического иммуноглобулина (парентерально) и «Вита-Форце М» (перорально). При этом профилактический вариант применения указанных препаратов был эффективнее, чем лечебный. Так, кормление животных в течение 10 сут до комбинированного радиационнобиологического поражения препаратом «Вита-Форце М», 1-кратное

подкожное введение радиобифидумбактерина за 5 сут до облучения и заражения, 1-кратное введение ПРЛГ и кормление в течение 5 сут «Вита-Форце М» обеспечивали 80 (вариант 4) - 90%-ную (варианты 8 и 10) выживаемость пораженных использованными патологическими агентами животных.

Наиболее высокий лечебный эффект из испытанных средств и схем оказали РББ (вариант 9) и ПРЛГ в сочетании с кормлением животных «Вита-Форце М» (вариант 11), которые обеспечивали выживаемость 80 и 90% животных от отечной болезни на фоне радиоиндуцированного дисбактериоза.

Заключение. Таким образом, парентеральное применение радиомодифицированного пробиотика - радиобифидумбактерина, а также противорадиационного иммуноглобулина в сочетании с пероральным применением апифитопрепарата «Вита-Форце М» обеспечивают высокую профилактическую и лечебную эффективность и сохранность пораженных возбудителем колибактериоза на фоне радиогенного стресса белых мышей.

Однократное подкожное введение радиобифидумбактерина в дозе 1-10 КОЕ/кг за 5 суток до и в течение 5 суток после облучения и заражения способствует выздоровлению и снижает гибель животных от отечной болезни, обеспечивая 80%-ную выживаемость животных. Подкожное введение противорадиационного лечебно-профилактического иммуноглобулина в сочетании с пероральным применением кормовой добавки «Вита-Форце М» значительно повышает выживаемость животных (90%-ная защита) как при профилактическом (1-кратное подкожное введение ПРЛГ и кормление «Вита-Форце М» за 5 суток до комбинированного поражения), так и лечебном (подкожное введение ПРЛГ и кормление указанным препаратом в течение 5 суток после воздействия патологических агентов) применении препаратов.

Радиобифидумбактерин технологичен в применении, легко смешивается с кормом и может быть использован в сухом (порошковом) виде в составе «Вита-Форце М».

Сочетанное (парентеральное и пероральное) применение препаратов глобулина, апифитопрепарата и пробиотика «Радиобифидумбактерин» может быть использовано для экстренной защиты животных на фоне изолированного и комбинированного поражения организма факторами радиогенной (облучение) и инфекционной (колибактериоз) природы.

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОБИОТИКА НА ОСНОВЕ B. BIFIDUM, АПИФИТОПРЕПАРАТА «ВИТА-ФОРЦЕ М» И ПРОТИВОРАДИАЦИОННОГО ГЛОБУЛИНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ НА ФОНЕ РАДИОИНДУЦИРОВАННОЙ ИММУНОСУПРЕССИИ

Низамов Р.Н., Тухфатуллов М.З., Сетдеков Р.А., Иванов А.А., Юсупов Р.Х., Юсупов Р.Р.

Резюме

Описано развитие колибактериоза на фоне радиогенной иммуносупрессии и его модификации под воздействием радиобифидумбактерина, противорадиационного глобулина и апифитопрепарата «Вита-Форце М».

THERAPEUTIC AND PROPHYLACTIC EFFICACY OF PROBIOTIC BASED ON B.

BIFIDUM, АPIPHYT OPREPARATION «VITA-ФОРTSE M» AND RADIATIONPROTECTIVE GLOBULIN IN EXPERIMENTAL COLIBACTERIOSIS ON THE BACKGROUND OF RADIOINDUCTIVE IMMUNOSUPPRESSION

Nizamov R.N., Yuchphatullov M.Z., Setdecov R.A., Yusupov R.Kh.,

Yusupov R.R.

Summary

The development of colibacillosis on the background of radiogenic immunosuppression and its modifications under radiobifidumbacterinum, radioprotective globulin and apiphytopreparation «Vita-Fortse M» influence is described.