СПОСОБЫ И ПРОДУКТЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ И ДОСТАВКИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ

1. Способ индуцирования клетки in vivo для экспрессии представляющего интерес белка, включающий приведение клетки в контакт с нуклеиновой кислотой in vivo, в котором нуклеиновая кислота содержит представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
2. Способ лечения пациента, включающий введение пациенту нуклеиновой кислоты, в котором нуклеиновая кислота содержит представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
3. Способ по п. 1, дополнительно приводящий к экспрессии терапевтически эффективного количества представляющего интерес белка в организме пациента.
4. Способ по п. 2, дополнительно включающий введение пациенту представителя из группы: иммуносупрессанта, стероида, антибиотика и противогрибкового средства.
5. Молекула синтетической РНК, кодирующая представляющий интерес белок, и содержащая представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
6. Терапевтическая композиция, содержащая нуклеиновую кислоту и носитель для доставки, в которой нуклеиновая кислота содержит представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
7. Косметическая композиция, содержащая нуклеиновую кислоту и носитель для доставки, в которой нуклеиновая кислота содержит представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что представляющий интерес белок является представителем из группы: белка внеклеточного матрикса, эластина, коллагена, ламинина, фибронектина, витронектина, лизилоксидазы, эластинсвязывающего белка, фактора роста, фактора роста фибробластов, трансформирующего фактора роста бета, колониестимулирующего фактора гранулоцитов, матриксной металлопротеазы, актина, фибриллина, ассоциированного с микрофибриллами гликопротеина, подобного лизилоксидазе белка, циркулирующего белка, эритропоэтина, дарбэпоэтина, фактора роста тромбоцитов, липазы, разобщающего белка, термогенина, вовлеченного в продукцию пигмента белка, тирозиназы, рецептора меланокортина 1 и гиалуронансинтазы.
9. Способ лечения пациента, включающий доставку в организм пациента сериями доз одной или более нуклеиновых кислот, кодирующих один или более белков, причем первая доза дается в первой временной точке, а вторая доза дается во второй временной точке, и при этом количество по меньшей мере одного из одного или более белков, вводимое пациенту во второй временной точке, больше количества указанного белка в первой временной точке, что приводит к накоплению указанного белка в организме пациента.
10. Способ лечения у пациента дистрофического буллезного эпидермолиза, включающий доставку в организм пациента с дистрофическим буллезным эпидермолизом, in vivo или ex vivo, синтетической РНК, кодирующей коллаген VII типа, что приводит к облегчению одного или более симптомов пациента с дистрофическим буллезным эпидермолизом.
11. Способ лечения у пациента дистрофического буллезного эпидермолиза, включающий доставку в организм пациента с дистрофическим буллезным эпидермолизом, in vivo или ex vivo, синтетической РНК, кодирующей редактирующий гены белок, который таргетирует ген COL7, что приводит к облегчению одного или более симптомов пациента с дистрофическим буллезным эпидермолизом.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что способ облегчает один или более признаков или симптомов из: фотоповреждения кожи указанного пациента, старения, включающего старение кожи, рубцевания, синдрома вялой кожи, анемии, синдрома Элерса-Данлоса, буллезного эпидермолиза, включающего дистрофический буллезный эпидермолиз, остеоартрита, псориаза, волосяного кератоза или эластической псевдоксантомы, индуцирует загорание кожи, выравнивает тонус кожи, усиливает пигментацию рубцовой ткани, снижает потерю пигментации, связанную с витилиго, способствует расщеплению жира, уменьшает бычий горб при ВИЧ, снижает жирность кожи, уменьшает угревую сыпь и/или способствует заживлению ран.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество РНК, которая содержит один или более неканонических нуклеотидов, которая не индуцирует значительный клеточный иммунный ответ и практически не снижает экспрессию белков; и фармацевтически приемлемый носитель.
14. Фармацевтическая композиция по п. 13, отличающаяся тем, что один или более неканонических нуклеотидов содержат 5-гидроксицитидин, 5-гидроксиметилцитидин, 5-карбоксицитидин, 5-формилцитидин, 5-гидроксиуридин, 5-гидроксиметилуридин, 5-карбоксиуридин и 5-формилуридин.
15. Способ экспрессии белка в популяции клеток пациента, включающий: внедрение РНК в популяцию клеток, причем РНК, содержащая один или более неканонических нуклеотидов, не индуцирует значительный клеточный иммунный ответ и практически не снижает экспрессию белков, а неканонические нуклеотиды являются одним или более из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что по меньшей мере 50% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что по меньшей мере 75% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что по меньшей мере 90% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что по меньшей мере 95% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что 100% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
21. Способ по любому из пп. 15-20, отличающийся тем, что РНК содержит один из многих дополнительных неканонических нуклеотидов.
22. Способ по любому из пп. 15-21, отличающийся тем, что по меньшей мере 50% остатков цитидина являются неканоническими нуклеотидами, выбранными из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина и 5-формилцитидина.
23. Способ по любому из пп. 15-22, отличающийся тем, что по меньшей мере 75% или по меньшей мере 90% остатков цитидина являются неканоническими нуклеотидами, выбранными из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина и 5-формилцитидина.
24. Способ по любому из пп. 15-23, отличающийся тем, что по меньшей мере 50% остатков уридина являются неканоническими нуклеотидами, выбранными из 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
25. Способ по любому из пп. 15-24, отличающийся тем, что по меньшей мере 75% или по меньшей мере 90% остатков уридина являются неканоническими нуклеотидами, выбранными из 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
26. Способ по любому из пп. 15-25, отличающийся тем, что РНК содержит 5'-кэп структуру.
27. Способ по любому из пп. 15-26, отличающийся тем, что 5'-НТО РНК содержит консенсусную последовательность Козак.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что 5'-НТО РНК содержит последовательность, которая увеличивает стабильность РНК in vivo, а 5'-НТО может содержать 5'-НТО альфа-глобина или бета-глобина.
29. Способ по любому из пп. 15-28, отличающийся тем, что 3'-НТО РНК содержит последовательность, которая увеличивает стабильность РНК in vivo, а 3'-НТО может содержать 3'-НТО альфа-глобина или бета-глобина.
30. Способ по любому из пп. 15-29, отличающийся тем, что РНК содержит 3'-поли(A) хвост.
31. Способ по п. 30, отличающийся тем, что 3'-поли(A) хвост составляет в длину от около 20 нуклеотидов до около 250 нуклеотидов.
32. Способ по любому из пп. 15-31, отличающийся тем, что РНК кодирует белок эластин.
33. Способ по любому из пп. 15-32, отличающийся тем, что популяция клеток содержит клетки кожи.
34. Способ по любому из пп. 15-33, отличающийся тем, что способ ослабляет фотоповреждение кожи указанного пациента.
35. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что способ ослабляет симптомы старения кожи.
36. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что способ снижает рубцевание.
37. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что способ способствует заживлению ран.
38. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что способ ослабляет синдром вялой кожи.
39. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что способ ослабляет эластическую псевдоксантому.
40. Способ по любому из пп. 15-39, отличающийся тем, что способ дополнительно включает удаление или разрушение рогового слоя.
41. Способ по любому из пп. 15-40, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки наложением нестационарного электрического поля.
42. Способ по любому из пп. 1-41, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
43. Способ по любому из пп. 1-42, отличающийся тем, что РНК кодирует коллаген, который необязательно является одним или более из коллагена 1, 3 или 7.
44. Способ по любому из пп. 1-43, отличающийся тем, что популяция клеток содержит клетки кожи.
45. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что способ ослабляет фотоповреждение кожи указанного пациента.
46. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что способ ослабляет симптомы старения кожи.
47. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что способ снижает рубцевание.
48. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что способ способствует заживлению ран.
49. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что способ ослабляет синдром Элерса-Данлоса.
50. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что способ ослабляет буллезный эпидермолиз, который необязательно является дистрофическим буллезным эпидермолизом.
51. Способ по любому из пп. 43-50, отличающийся тем, что способ дополнительно включает удаление или разрушение рогового слоя.
52. Способ по любому из пп. 43-50, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки наложением нестационарного электрического поля.
53. Способ по любому из пп. 43-50, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
54. Способ по любому из пп. 15-53, отличающийся тем, что РНК кодирует гиалуронансинтазу.
55. Способ по п. 54, отличающийся тем, что популяция клеток содержит клетки кожи.
56. Способ по п. 54 или 55, отличающийся тем, что способ ослабляет фотоповреждение кожи указанного пациента.
57. Способ по п. 55 или 56, отличающийся тем, что способ ослабляет симптомы старения кожи.
58. Способ по п. 55 или 56, отличающийся тем, что РНК доставляется в сустав.
59. Способ по п. 58, отличающийся тем, что РНК ослабляет остеоартрит.
60. Способ по любому из пп. 54-59, отличающийся тем, что способ дополнительно включает удаление или разрушение рогового слоя.
61. Способ по любому из пп. 54-60, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки наложением нестационарного электрического поля.
62. Способ по любому из пп. 54-61, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
63. Способ по любому из пп. 15-62, отличающийся тем, что РНК кодирует тирозиназу.
64. Способ по п. 63, отличающийся тем, что популяция клеток содержит клетки кожи.
65. Способ по п. 63, отличающийся тем, что способ индуцирует загорание кожи или выравнивает тонус кожи.
66. Способ по п. 65, отличающийся тем, что способ усиливает пигментацию рубцовой ткани.
67. Способ по п. 63, отличающийся тем, что способ снижает потерю пигментации, связанную с витилиго.
68. Способ по любому из пп. 63-67, отличающийся тем, что способ дополнительно включает удаление или разрушение рогового слоя.
69. Способ по любому из пп. 63-68, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки наложением нестационарного электрического поля.
70. Способ по любому из пп. 63-69, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
71. Способ по любому из пп. 15-70, отличающийся тем, что РНК кодирует меланоцитстимулирующий гормон (МСГ).
72. Способ по п. 71, отличающийся тем, что популяция клеток содержит клетки кожи.
73. Способ по п. 72, отличающийся тем, что способ индуцирует загорание кожи или выравнивает тонус кожи.
74. Способ по п. 72, отличающийся тем, что способ усиливает пигментацию рубцовой ткани.
75. Способ по п. 71, отличающийся тем, что способ снижает потерю пигментации, связанную с витилиго.
76. Способ по любому из пп. 71-75, отличающийся тем, что способ дополнительно включает удаление или разрушение рогового слоя.
77. Способ по любому из пп. 71-76, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки наложением нестационарного электрического поля.
78. Способ по любому из пп. 71-77, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
79. Способ по любому из пп. 15-78, отличающийся тем, что РНК кодирует липазу или белок семейства разобщающих белков (UCP).
80. Способ по п. 79, отличающийся тем, что популяция клеток содержит жировые клетки.
81. Способ по п. 80, отличающийся тем, что способ способствует расщеплению жира.
82. Способ по п. 80, отличающийся тем, что способ уменьшает бычий горб при ВИЧ.
83. Способ по любому из пп. 79-82, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
84. Способ по любому из пп. 15-83, отличающийся тем, что РНК кодирует ретинолдегидрогеназу, которая необязательно является ретинолдегидрогеназой 10.
85. Способ по п. 84, отличающийся тем, что популяция клеток содержит клетки кожи.
86. Способ по п. 85, отличающийся тем, что способ снижает жирность кожи или угревую сыпь.
87. Способ по п. 85, отличающийся тем, что способ ослабляет псориаз.
88. Способ по п. 85, отличающийся тем, что способ ослабляет волосяной кератоз.
89. Способ по любому из пп. 84-88, отличающийся тем, что способ дополнительно включает удаление или разрушение рогового слоя.
90. Способ по любому из пп. 84-89, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки наложением нестационарного электрического поля.
91. Способ по любому из пп. 84-90, отличающийся тем, что РНК вводится в клетки пациента дважды, по меньшей мере три раза, по меньшей мере пять раз или по меньшей мере десять раз.
92. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество РНК, которая содержит один или более неканонических нуклеотидов, которая не индуцирует значительный клеточный иммунный ответ и практически не снижает экспрессию белков; и фармацевтически приемлемый носитель, а неканонические нуклеотиды выбираются из одного или более из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
93. Фармацевтическая композиция по п. 92, отличающаяся тем, что по меньшей мере 50% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
94. Фармацевтическая композиция по п. 93, отличающаяся тем, что по меньшей мере 75% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
95. Фармацевтическая композиция по п. 94, отличающаяся тем, что по меньшей мере 90% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
96. Фармацевтическая композиция по п. 95, отличающаяся тем, что по меньшей мере 95% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
97. Фармацевтическая композиция по п. 96, отличающаяся тем, что 100% неканонических нуклеотидов выбраны из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
98. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-97, отличающаяся тем, что РНК содержит один из многих дополнительных неканонических нуклеотидов.
99. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-98, отличающаяся тем, что по меньшей мере 50% остатков цитидина являются неканоническими нуклеотидами, выбранными из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина и 5-формилцитидина.
100. Фармацевтическая композиция по п. 99, отличающаяся тем, что по меньшей мере 75% или по меньшей мере 90% остатков цитидина являются неканоническими нуклеотидами, выбранными из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина и 5-формилцитидина.
101. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-100, отличающаяся тем, что РНК содержит 5'-кэп структуру.
102. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-101, отличающаяся тем, что 5'-НТО РНК содержит консенсусную последовательность Козак.
103. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-102, отличающаяся тем, что 5'-НТО РНК содержит последовательность, которая увеличивает стабильность РНК in vivo, а 5'-НТО может содержать 5'-НТО альфа-глобина или бета-глобина.
104. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-103, отличающаяся тем, что 3'-НТО РНК содержит последовательность, которая увеличивает стабильность РНК in vivo, а 3'-НТО может содержать 3'-НТО альфа-глобина или бета-глобина.
105. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-104, отличающаяся тем, что РНК содержит 3'-поли(A) хвост.
106. Фармацевтическая композиция по п. 105, отличающаяся тем, что 3'-поли(A) хвост составляет в длину от около 20 нуклеотидов до около 250 нуклеотидов.
107. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-106, отличающаяся тем, что РНК кодирует эластин.
108. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-107, отличающаяся тем, что РНК кодирует коллаген, который необязательно является коллагеном 1, 3 или 7.
109. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-108, отличающаяся тем, что РНК кодирует гиалуронансинтазу.
110. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-109, отличающаяся тем, что РНК кодирует тирозиназу.
111. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-110, отличающаяся тем, что РНК кодирует меланоцитстимулирующий гормон (МСГ).
112. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-111, отличающаяся тем, что РНК кодирует липазу или белок семейства разобщающих белков (UCP).
113. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-112, отличающаяся тем, что РНК кодирует ретинолдегидрогеназу, которая необязательно является ретинолдегидрогеназой 10.
114. Фармацевтическая композиция по п. 113, отличающаяся тем, что ретинолдегидрогеназа представляет собой ретинолдегидрогеназу 10.
115. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 92-114, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция подходит для дерматологического или косметического лечения.
116. Пластырь для доставки нуклеиновых кислот, содержащий:
a. эластичную мембрану и
b. множество игл;
отличающийся тем, что множество игл присоединены к эластичной мембране.
117. Пластырь по п. 116, дополнительно содержащий нуклеиновую кислоту.
118. Пластырь по п. 117, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота находится в растворе.
119. Пластырь по любому из пп. 116-118, отличающийся тем, что множество игл включает одну или более игл, имеющих просвет.
120. Пластырь по любому из пп. 116-119, дополнительно содержащий вторую эластичную мембрану.
121. Пластырь по п. 120, отличающийся тем, что эластичная мембрана и вторая эластичная мембрана расположены с образованием полости.
122. Пластырь по любому из пп. 116-121, отличающийся тем, что полость содержит нуклеиновую кислоту.
123. Пластырь по любому из пп. 116-122, дополнительно содержащий одно или более отверстий, через которые может проходить нуклеиновая кислота.
124. Пластырь по п. 123, отличающийся тем, что одно или более отверстий и одна или более игл, имеющих просвет, расположены чтобы допускать прохождение раствора, содержащего нуклеиновую кислоту, через по меньшей мере одно из одного или более отверстий и через по меньшей мере одну из одной или более игл, имеющих просвет.
125. Пластырь для доставки нуклеиновых кислот, содержащий множество игл, отличающийся тем, что по меньшей мере одна игла содержит просвет, и при этом по меньшей мере две иглы образуют часть высоковольтного контура.
126. Пластырь по п. 125, отличающийся тем, что высоковольтный контур генерирует напряжение более чем около 10 В.
127. Пластырь по пп. 125-126, отличающийся тем, что высоковольтный контур генерирует напряжение более чем около 20 В.
128. Пластырь по любому из пп. 125-127, отличающийся тем, что между двумя иглами создается электрическое поле.
129. Пластырь по любому из пп. 125-128, отличающийся тем, что величина электрического поля составляет по меньшей мере около 100 В/см.
130. Пластырь по любому из пп. 125-129, отличающийся тем, что величина электрического поля составляет по меньшей мере около 200 В/см.
131. Пластырь по любому из пп. 125-130, выполненный с возможностью доставки нуклеиновой кислоты в эпидермис.
132. Пластырь по любому из пп. 125-131, выполненный с возможностью доставки нуклеиновой кислоты в дерму.
133. Пластырь по любому из пп. 125-132, выполненный с возможностью доставки нуклеиновой кислоты в субдермальную ткань.
134. Пластырь по любому из пп. 125-133, выполненный с возможностью доставки нуклеиновой кислоты в мышцу.
135. Пластырь для доставки нуклеиновых кислот, содержащий:
a. эластичную мембрану и
b. множество электродов;
причем множество электродов присоединены к эластичной мембране.
136. Пластырь для доставки нуклеиновых кислот, содержащий:
(a) жесткую структуру и
(b) множество электродов;
причем множество электродов присоединены к жесткой структуре.
137. Способ доставки нуклеиновой кислоты в клетку in vivo, включающий:
(a) нанесение нуклеиновой кислоты на ткань, содержащую клетку in vivo и
(b) наложение нестационарного электрического поля вблизи клетки,
что приводит к интернализации клеткой нуклеиновой кислоты in vivo.
138. Способ по п. 137, отличающийся тем, что одна или более молекул нуклеиновых кислот содержит молекулу синтетической РНК.
139. Способ по любому из пп. 137-138, дополнительно приводящий к интернализации клеткой терапевтически или косметически эффективного количества нуклеиновой кислоты.
140. Способ по любому из пп. 137-139, отличающийся тем, что клетка представляет собой клетку кожи.
141. Способ по любому из пп. 137-140, отличающийся тем, что клетка представляет собой дермальный фибробласт.
142. Способ по любому из пп. 137-141, отличающийся тем, что клетка представляет собой кератиноцит.
143. Способ по любому из пп. 137-142, отличающийся тем, что клетка представляет собой миобласт.
144. Способ по любому из пп. 137-143, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота кодирует представляющий интерес белок.
145. Способ по п. 144, отличающийся тем, что представляющий интерес белок является представителем из группы: флуоресцентного белка и белка внеклеточного матрикса.
146. Способ по п. 145, отличающийся тем, что представляющий интерес белок является представителем из группы: эластина, коллагена, ламинина, фибронектина, витронектина, лизилоксидазы, эластинсвязывающего белка, фактора роста, фактора роста фибробластов, трансформирующего фактора роста бета, колониестимулирующего фактора гранулоцитов, матриксной металлопротеазы, актина, фибриллина, ассоциированного с микрофибриллами гликопротеина, подобного лизилоксидазе белка, фактора роста тромбоцитов, липазы, разобщающего белка, термогенина и белка, вовлеченного в продукцию пигмента.
147. Способ по любому из пп. 137-146, дополнительно включающий доставку нуклеиновой кислоты в эпидермис.
148. Способ по любому из пп. 137-147, дополнительно включающий доставку нуклеиновой кислоты в дерму.
149. Способ по любому из пп. 137-148, дополнительно включающий доставку нуклеиновой кислоты ниже дермы.
150. Способ по любому из пп. 137-149, отличающийся тем, что доставка осуществляется инъекцией.
151. Способ по любому из пп. 137-150, отличающийся тем, что доставка осуществляется путем инъекции с использованием микроигольчатой матрицы.
152. Способ по любому из пп. 137-151, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота находится в растворе.
153. Способ по п. 152, отличающийся тем, что раствор дополнительно содержит фактор роста.
154. Способ по п. 153, отличающийся тем, что фактор роста является одним из: фактора роста фибробластов и трансформирующего фактора роста бета.
155. Способ по п. 152, отличающийся тем, что раствор дополнительно содержит холестерин.
156. Способ индуцирования клетки in vivo для экспрессии представляющего интерес белка, включающий приведение клетки в контакт in vivo с раствором, содержащим:
холестерин и
одну или более молекул нуклеиновых кислот, причем по меньшей мере одна или более молекул нуклеиновых кислот кодируют представляющий интерес белок;
что приводит к экспрессии клеткой представляющего интерес белка.
157. Способ по п. 156, дополнительно приводящий клетку к экспрессии терапевтически или косметически эффективного количества представляющего интерес белка.
158. Способ трансфицирования клетки молекулой нуклеиновой кислоты in vivo, включающий приведение клетки в контакт in vivo с раствором, содержащим:
альбумин, который обработан ионообменной смолой или активированным углем, и
молекулу нуклеиновой кислоты;
что приводит к интернализации клеткой молекулы нуклеиновой кислоты.
159. Способ по п. 158, дополнительно приводящий к интернализации клеткой терапевтически или косметически эффективного количества молекулы нуклеиновой кислоты.
160. Способ по п. 159, отличающийся тем, что молекула нуклеиновой кислоты содержит по меньшей мере одну из: молекулы дцДНК, молекулы оцДНК, молекулы дцРНК, молекулы оцРНК, плазмиды, олигонуклеотида, молекулы синтетической РНК, молекулы миРНК, молекулы мРНК, молекулы киРНК.
161. Способ индуцирования клетки для экспрессии представляющего интерес белка, включающий приведение клетки в контакт с молекулой синтетической РНК, отличающийся тем, что молекула синтетической РНК содержит представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
162. Способ трансфицирования клетки молекулой синтетической РНК, включающий приведение клетки в контакт с раствором, содержащим одну или более молекул синтетических РНК, отличающийся тем, что по меньшей мере одна из одной или более молекул синтетических РНК содержит представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
163. Способ лечения пациента, включающий введение пациенту молекулы синтетической РНК, содержащей представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
164. Способ по п. 163, приводящий к экспрессии представляющего интерес белка в коже пациента.
165. Способ по п.164, дополнительно включающий введение стероида.
166. Способ по п. 165, отличающийся тем, что стероид представляет собой гидрокортизон.
167. Способ по любому из пп. 163-166, дополнительно включающий введение антибиотика.
168. Способ по любому из пп. 163-167, дополнительно включающий введение противогрибкового средства.
169. Способ по любому из пп. 163-168, дополнительно включающий введение ингибитора РНКазы.
170. Способ доставки нуклеиновой кислоты в клетку in vivo, включающий:
разрушение рогового слоя и
приведение клетки в контакт с нуклеиновой кислотой;
что приводит к интернализации клеткой нуклеиновой кислоты.
171. Способ индуцирования клетки in vivo для экспрессии представляющего интерес белка, включающий:
разрушение рогового слоя и
приведение клетки в контакт с нуклеиновой кислотой, кодирующей представляющий интерес белок;
что приводит к экспрессии клеткой представляющего интерес белка.
172. Способ лечения пациента, включающий:
разрушение у пациента рогового слоя и
введение пациенту нуклеиновой кислоты.
173. Способ лечения пациента, включающий:
разрушение рогового слоя и
введение пациенту нуклеиновой кислоты, кодирующей представляющий интерес белок;
что приводит к экспрессии в организме пациента представляющего интерес белка.
174. Способ по п. 173, отличающийся тем, что пациент нуждается в представляющем интерес белке.
175. Способ лечения пациента, включающий доставку в организм пациента композиции, содержащей:
альбумин, который обработан ионообменной смолой или активированным углем, и
одну или более молекул нуклеиновых кислот, причем по меньшей мере одна из одной или более молекул нуклеиновых кислот кодируют представляющий интерес белок;
что приводит к экспрессии в организме пациента представляющего интерес белка.
176. Способ по п. 175, дополнительно приводящий к экспрессии представляющего интерес белка в коже пациента.
177. Способ по любому из пп. 175-176, дополнительно приводящий к экспрессии терапевтически эффективного количества представляющего интерес белка в организме пациента.
178. Способ по любому из пп. 175-177, дополнительно включающий введение стероида.
179. Способ по п. 178, отличающийся тем, что стероид представляет собой гидрокортизон.
180. Молекула синтетической РНК, кодирующая представляющий интерес белок и содержащая представителя из группы: 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.
181. Косметическая композиция, содержащая:
альбумин, который обработан ионообменной смолой или активированным углем, и
молекулу нуклеиновой кислоты.
182. Изделие для косметического лечения, содержащее композицию по п. 181, помещенную в устройство, выполненное с возможностью доставки в организм пациента композиции.
183. Косметическая композиция по п. 181, отличающаяся тем, что молекула нуклеиновой кислоты кодирует представителя из группы: эластина, коллагена, тирозиназы, рецептора меланокортина 1 и гиалуронансинтазы.
184. Способ лечения пациента, включающий доставку в организм пациента сериями доз синтетической РНК, кодирующей один или более белков, отличающийся тем, что первая доза дается в первой временной точке, а вторая доза дается во второй временной точке, и при этом количество по меньшей мере одного из одного или более белков, вводимое пациенту во второй временной точке, больше количества указанного белка в первой временной точке, что приводит к накоплению указанного белка в организме пациента.
185. Терапевтическая композиция, содержащая молекулу синтетической РНК, кодирующую один или более белков, причем по меньшей мере один из одного или более белков представляет собой белок внеклеточного матрикса.
186. Косметическая композиция, содержащая молекулу синтетической РНК, кодирующую один или более белков, причем по меньшей мере один из одного или более белков представляет собой белок внеклеточного матрикса.
187. Способ лечения нарушения пигментации, включающий доставку в организм пациента синтетической РНК, кодирующей тирозиназу.
188. Способ изменения у пациента пигментации, включающий доставку в организм пациента синтетической РНК, кодирующей тирозиназу.
189. Косметическая композиция, содержащая синтетическую РНК, кодирующую тирозиназу.
190. Терапевтическая композиция, содержащая синтетическую РНК, кодирующую тирозиназу.
191. Способ увеличения поглощения ультрафиолетового света кожей пациента, включающий доставку в организм пациента синтетической РНК, кодирующей тирозиназу, что приводит к увеличению поглощения ультрафиолетового света кожей пациента.
192. Способ снижения фотоповреждения кожи человека под воздействием ультрафиолетового света, включающий доставку в организм человека синтетической РНК, кодирующей тирозиназу, что приводит к снижению фотоповреждения кожи человека под воздействием ультрафиолетового света.
193. Способ лечения у пациента пигментной ксеродермы, включающий доставку в организм пациента с пигментной ксеродермой синтетической РНК, кодирующей тирозиназу, что приводит к облегчению одного или более симптомов пациента с пигментной ксеродермой.
194. Способ лечения нарушения пигментации, включающий: a. приведение клетки в контакт с синтетической РНК, кодирующей тирозиназу, и b. доставку клетки в организм пациента с нарушением пигментации, что приводит к облегчению одного или более симптомов пациента.
195. Способ лечения у пациента дистрофического буллезного эпидермолиза, включающий доставку в организм пациента с дистрофическим буллезным эпидермолизом синтетической РНК, кодирующей коллаген VII типа, что приводит к облегчению одного или более симптомов пациента с дистрофическим буллезным эпидермолизом.
196. Способ изменения у пациента пигментации, включающий доставку в организм пациента синтетической РНК, кодирующей рецептор меланокортина 1, что приводит к изменению пигментации пациента.
197. Способ лечения ксероза, включающий доставку в организм пациента синтетической РНК, кодирующей гиалуронансинтазу, что приводит к облегчению одного или более симптомов пациента.
198. Способ по п. 197, отличающийся тем, что у пациента диагностируется атопический дерматит.
199. Способ по п. 197, отличающийся тем, что у пациента диагностируется ихтиоз.
200. Способ индуцирования заживления тканей, включающий доставку в организм пациента синтетической РНК, кодирующей гиалуронансинтазу, что приводит к заживлению тканей.
201. Способ по п. 200, отличающийся тем, что пациенту проводилось хирургическое вмешательство по лечению катаракты.
202. Способ лечения, предотвращения или облегчения дерматологического заболевания, нарушения и/или патологического состояния, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей РНК, содержащей один или более неканонических нуклеотидов, при этом:
дерматологическое заболевание, нарушение и/или патологическое состояние представляет собой одно или более из обыкновенных угрей, солнечных акне, шаровидных угрей, косметических угрей, молниеносных угрей, келоидного фолликулита затылка, механических акне, вызванных медикаментами угрей, милиарных некротических акне, некротических акне, розовых угрей, актинического кератоза, обыкновенных угрей, солнечных акне, шаровидных угрей, косметических угрей, молниеносных угрей, келоидного фолликулита затылка, механических акне, вызванных медикаментами угрей, милиарных некротических акне, некротических акне, розовых угрей, острой крапивницы, аллергического контактного дерматита, гнездной алопеции, ангиоэдемы, эпидермофитии стопы, атопического дерматита, аутоэкзематизации, акне новорожденных, облысения, бластомикоза, черных точек на лице, родинок и других проблем пигментации кожи, чирьев, синяков, укусов и ужалений насекомых, ожогов, целлюлита, укусов клещей, хлоракне, холинэргической или стрессогенной крапивницы, хронической крапивницы, крапивницы простудного типа, сливающегося папулезного папилломатоза, кожных наростов, цист, перхоти, герпетиформного дерматита, дерматографизма, дисгидротической экземы, опрелости, сухой кожи, дисгидроза, эктодермальной дисплазии, такой как гипогидротическая эктодермальная дисплазия и X-сцепленная гипогидротическая эктодермальная дисплазия, экземы, бородавчатой эпидермодисплазии, узловатой эритемы, экскориированных угрей, индуцированного физическими упражнениями анафилактического фолликулита, избыточного жира кожи, фолликулита, веснушек, обморожения, грибковых поражений ногтей, густоты волос, скорости роста волос, вызванных соединениями галогенов акне, выпадения волос, тепловой сыпи, гематомы, инфекций простого герпеса (например, негенитального), гнойного гидраденита, сыпи, гипергидроза, гиперпигментации, гипогидротической эктодермальной дисплазии, гипопигментации, импетиго, вросших волос, крапивницы горячечного типа, вросшего ногтя пальца стопы, младенческих акне или неонатальных акне, кожного зуда, ирритантного контактного дерматита, паховой эпидермофитии, келоида, волосяного кератоза, плоского лишая, склерозирующего лишая, милиарной диссеминированной волчанки лица, мелазмы, бородавок, контагиозного моллюска, скорости роста ногтей, здоровья ногтей, нейродерматита, монетовидной экземы, профессионального акне, масляных угрей, онихомикоза, механической крапивницы, пилонидальной кисты, розового лишая, разноцветного лишая, высыпаний от сумаха ядоносного, помадных угрей, псевдофолликулита зоны роста бороды или келоидного фолликулита затылка, псориаза, псориатического артрита, компрессионной крапивницы или вызванной давлением замедленной крапивницы, колотых ран, таких как порезы и соскобы, сыпи, редкой крапивницы или крапивницы водяночного типа, ринопластии, дерматомикоза, розовых угрей, синдрома Ротмунда-Томсона, обвисания кожи, струпьев, рубцов, себореи, себорейного дерматита, опоясывающего герпеса, рака кожи, мягкой бородавки, крапивницы типа солнечного ожога, укуса пауков, растяжек, солнечных ожогов, смолистых угрей, тропических угрей, утончения кожи, молочницы, разноцветного лишая, транзиторного акантолитического дерматоза, колпака магната или милиарных некротических акне, неравномерного тонуса кожи, варикозного расширения вен, венозной экземы, вибрационной ангиоэдемы, витилиго, наростов, болезни Вебера-Крисчена, морщин, X-сцепленной гипогидротической эктодермальной дисплазии, ксеротической экземы, дрожжевой инфекции и общих признаков старения, а
неканонический нуклеотид представляет собой один или более из одного или более из 5-гидроксицитидина, 5-гидроксиметилцитидина, 5-карбоксицитидина, 5-формилцитидина, 5-гидроксиуридина, 5-гидроксиметилуридина, 5-карбоксиуридина и 5-формилуридина.