Динамические изменения сывороточных уровней макроглобулинов и цитокинов в крови женщин, принимающих микродозированные КОК

КЕРЕМЕЦКАЯ Е.В., БАЖЕНОВА Л.Г., ЗОРИНА P.M., ЗОРИНА В.Н..

Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей,

г. Новокузнецк

ДИНАМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ СЫВОРОТОЧНЫХ УРОВНЕЙ МАКРОГЛОБУЛИНОВ И ЦИТОКИНОВ В КРОВИ ЖЕНЩИН, ПРИНИМАЮЩИХ МИКРОДОЗИРОВАННЫЕ КОК

Целью настоящего исследования было изучение сывороточных уровней провоспали-тельных цитокинов ((ИЛ-6 и ФНО-а) и макроглобулинов: ассоциированного с беременностью a-2-гликопротеина (АБГ) и a-2-макроглобулина (МГ) у женщин, принимающих микродозиро-ванные КОК в динамике. Обследованы в динамике 24 пациентки репродуктивного возраста, принимавших КОК в течение 1 года. Сывороточные уровни АБГ и МГ оценивали методом количественного ракетного иммуноэлектрофореза, уровень цитокинов определяли методом ИФА. Установлено, что сывороточный уровень АБГ повышается у женщин, принимавших 20 мкг этинилэстрадиола и 150 мкг дезогестрела в 83,3 % случаев в 20,6 раз в течение года и только в 41,7 % случаев у женщин, принимавших 20 мкг этинилэстрадиола и 100 мкг ле-воноргестрела (в среднем, в 14 раз). Выявлено достоверное снижение провоспалительных цитокинов (ИЛ-6 и ФНО-a) в крови женщин, принимавших 20 мкг этинилэстрадиола, 150 мкг дезогестрела.

Ключевые слова: комбинированные оральные контрацептивы (КОК); ассоциированный с беременностью a-2-гликопротеин (АБГ); a-2-макроглобулин (МГ); ИЛ-6; ФНО-a; дезогестрел; левоноргестрел.

KEREMETSKAYA E.V., BAZHENOVA L.G., ZORINA V.N., ZORINA R.M.

Novokuznetsk State Institute of Upgrading Doctors’ Qualification, Novokuznetsk

THE DYNAMIC CHANGING OF SERUM LEVELS OF MACROGLOBULINS AND CYTOKINES IN SERA OF WOMEN TAKING MICRODOSE COMBINED ORAL CONTRACEPTIVES

The aim of this study was to investigate serum levels of proinflammatory cytokines (IL-6, TNF-a), alpha-2-macroglobulin (a-2-MG) and pregnancy associated alpha-2-glycoprotein (a-2-PAG) in groups of women taking microdose combined oral contraceptives (COC). We had examined the

dynamic changes of the above mentioned proteins levels in sera of 24 women in reproductive age taking COC during 1 year. The levels of a-2-MG and a-2-PAG were determined by quantitative rocket immunoelectrophoresis, and the level of proinflammatory cytokines - by ELISA. It was shown that in a group of women taking ethinyl estradiol 20 mcg and dezogestrel 150 mcg a-2-PAG serum levels increased significantly in 21 times (totally in 83 % of cases), and in a group taking ethinyl estradiol 20 mcg and levonorgestrel 100 mcg - only in 14 times (totally in 42 % of cases). Moreover, proinflammatory cytokines (IL-6, TNF-a) concentrations were decreased in a group taking ethinyl estradiol 20 mcg, dezogestrel 150 mcg and remind unchangeable in sera of women taking ethinyl estradiol 20 mcg, levonorgestrel 100 mcg.

Key words: combined oral contraceptives (COC); pregnacy associated alpha-2-glycoprotein; alpha-2-macroglobulin; IL-6; TNF-a; dezogestrel; levonorgestrel.

В настоящее время общепризнанным методом контрацепции для планирования семьи и улучшения здоровья женщины являются комбинированные оральные контрацептивы (КОК). Современные препараты КОК содержат микродозы эстрогенного и гестагенного компонентов и, по мнению ряда авторов, их побочные эффекты (мастодиния, увеличение массы тела, изменение либидо, депрессия, тромбозы и тромбоэмболии и т.д.) минимальны [1, 2]. В последнее время активно изучается связь между приемом оральных контрацептивов и злокачественными новообразованиями, в частности, репродуктивной системы. Имеются данные о том, что использование оральных контрацептивов достоверно снижает риск возникновения злокачественных опухолей яичников и рака эндометрия [3]. В то же время, в работе Berrmgton et а! [4] убедительно продемонстрирована прямая связь увеличения риска развития РШМ с длительностью приема КОК. Согласно другим данным, у женщин, начавших принимать КОК в возрасте до 20 лет, повышается риск развития рака молочной железы (на 20 %), в сравнении с женщинами, которые принимали их в более зрелом возрасте [5]. При этом значительных различий в «степени риска» между группами принимавших КОК с разным составом препаратов и дозировкой компонентов не выявлено.

Общепризнано, что одной из причин развития онкопролиферативных процессов является функциональный иммунодефицит на фоне гормональной перестройки организма, стресса и т.п. Однако до настоящего времени в полной мере не проанализировано влияние современных микро-и низкодозированных КОК на отдельные звенья иммунной системы. В частности, единичны сведения о связи КОК и некоторых иммунорегулятор-ных факторов (белков, цитокинов и др.). К числу таких белков относятся макроглобулины: альфа-2-макроглобулин (МГ) и ассоциированный с бере-

Корреспонденцию адресовать:

КЕРЕМЕЦКАЯ Елена Васильевна,

654005, г. Новокузнецк, пр. Строителей, 5,

ГБОУ ДПО НГИУВ Минздравсоцразвития России. Тел.: 8 (3843) 79-68-47. E-mail: keremev@mail.ru

менностью альфа-2-гликопротеин (АБГ). Данные белки играют значительную роль в гуморальном и клеточном иммунном ответе: транспортируют цитокины, гормоны и липиды к клеткам, участвуют в процессинге и презентации антигенов, влияют на антителогенез и апоптоз клеток и обладают выраженными иммуносупрессивными свойствами [6, 7]. По мнению некоторых авторов, АБГ является неспецифическим маркером пролиферации эстроген ассоциированных органов [8-10].

Проведенное в США исследование показало, что у женщин, принимавших КОК, были выявлены изменения концентрации ИЛ-6 в плазме крови, которые коррелировали с дозой прогестагена [11]. Установлено, что сывороточный уровень ИЛ-6 значительно повышается у больных РМЖ в сравнении с контрольной группой здоровых женщин, и незначительно при доброкачественных образованиях молочной железы [12].

Все вышеизложенное послужило предпосылкой проведенного исследования по изучению сывороточных уровней провоспалительных цитокинов и макроглобулинов у женщин, принимающих микродозированные КОК в динамике (в течение 1 года).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обследованы 24 женщины репродуктивного возраста (средний возраст 22,9 ± 0,03 года), принимавшие с контрацептивной целью микродозированные монофазные комбинированные оральные контрацептивы (КОК) в динамике (до приема КОК, через 3 мес., 6 мес. и 9-12 мес. от начала приема препаратов). Из них, 12 женщин (1 группа) принимали 20 мкг этинилэстрадиола, 150 мкг дезогестрела и 12 женщин (2 группа) принимали 20 мкг этинилэстрадиола, 100 мкг ле-воноргестрела.

Критериями включения женщин в исследование были: соматическое здоровье, отсутствие какой-либо патологии при гинекологическом осмотре и обследовании молочных желез, отсутствие указаний на прием КОК в течение 1 года до момента исследования; наличие нормативных показателей биохимического исследования крови и цитологического исследования мазков с шейки

матки, информированное согласие на участие. Критериями исключения явились перенесенные аутоиммунные и онкопролиферативные заболевания в анамнезе, а также исходно повышенный уровень АБГ в крови до приема КОК.

Концентрации ИЛ-6 и ФНО-а исследовали методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) при помощи коммерческих тест-систем. Сывороточные уровни АБГ и МГ оценивали методом количественного ракетного иммуноэлектрофореза с использованием моноспецифических антисывороток против данных белков [13].

Статистическая обработка результатов проводилась при помощи программы для биостатистики InStat-П. Для обработки полученных данных применялось парное межгрупповое сравнение показателей по критерию Стьюдента. Параметры, приводимые в работе и таблицах: п — количество обследованных, М ± т — среднестатистическое значение ± ошибка средней, р — достоверность различий (значимо < 0,05), г — коэффициент корреляции.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

И ОБСУЖДЕНИЕ

При оценке общего состояния и гинекологического статуса женщин не было выявлено каких-либо отклонений у принимавших препарат, содержащий 20 мкг этинилэстрадиола и 100 мкг левоноргестрела в течение всего периода наблюдения, тогда как в группе принимавших 20 мкг

этинилэстрадиола и 150 мкг дезогестрела три женщины (25 %) отмечали появление тошноты в первые месяцы приема препарата, других побочных эффектов также не выявлено.

Проведенное исследование показало, что сывороточный уровень АБГ в динамике исследования (в течение года) статистически значимо повышался через три месяца после начала приема микродозированных КОК независимо от вида препарата (табл.).

Однако среднестатистические значения АБГ в первой группе были значительно выше в сравнении со второй группой женщин. При этом, у принимавших КОК, содержащий 150 мкг дезогестрела, повышение АБГ после 3 месяцев приема КОК наблюдалось в 83,3 % случаев и, в среднем, в 20,6 раз, в то время как прием 100 мкг левоноргестрела сопровождался повышением белка только в 41,7 % и, в среднем, в 14 раз. Наряду с этим, прием 150 мкг дезогестрела сопровождался увеличением концентраций АБГ только в первые 6 месяцев контрацепции, и в дальнейшем уровень белка выходил на плато с тенденцией к некоторому снижению. В то время как динамичное повышение содержания АБГ во второй группе отмечалось в течение всего периода наблюдения (1 год) и было менее выраженным. Эти различия были статистически достоверны: у пациенток первой группы в 3, 6, 9-12 мес. показатели АБГ были выше в сравнении с уровнем данного белка во второй группе.

Таблица

Сывороточное содержание белков семейства макроглобулинов у женщин, принимавших микродозированные КОК (20 мкг этинилэстрадиола, 150 мкг дезогестрела и 20 мкг

этинилэстрадиола, 100 мкг левоноргестрела)

Исследуемые показатели

Группы обследованных АБГ

0,006 ± 0,002 2,59 ± 0,12

3мес 0,087 ± 0,017* 2,61 ± 0,21

1 группа 6мес 0,103 ± 0,023* 2,65 ± 0,25

9-12 мес 0,101 ± 0,018* 2,78 ± 0,21

0,006 ± 0,002 2,72 ± 0,17

3мес 0,020 ± 0,008; р1 = 0,03 2,72 ± 0,17

2 группа 6мес 0,030 ± 0,016; р1 = 0,025 2,77 ± 0,22

9-12 мес 0,033 ± 0,024; р1 = 0,0497 2,4 ± 0,23

Примечание: * достоверность различий в сравнении с контролем (р < 0,0001); р1 — достоверность различий между группами женщин, принимавших разные препараты в 3, 6, 9-12 мес.

Сведения об авторах:

КЕРЕМЕЦКАЯ Елена Васильевна, аспирант, кафедра акушерства и гинекологии, ГБОУ ДПО НГИУВ Минздравсоцразвития России, г. Новокузнецк, Россия. E-mail: keremev@mail.ru

БАЖЕНОВА Людмила Григорьевна, доктор мед. наук, профессор, зав. кафедрой акушерства и гинекологии, ГБОУ ДПО НГИУВ Минздравсоцразвития России, г. Новокузнецк, Россия. E-mail: L_Bagenova@mail.ru

ЗОРИНА Вероника Николаевна, доктор мед. наук, ст. науч. сотрудник, ГБОУ ДПО НГИУВ Минздравсоцразвития России, г. Новокузнецк, Россия.

ЗОРИНА Раиса Михайловна, доктор мед. наук, ведущий научный сотрудник, ГБОУ ДПО НГИУВ Минздравсоцразвития России, г. Новокузнецк, Россия.

Динамичное наблюдение за женщинами с индивидуально высоким повышением уровня АБГ на прием контрацептива, содержащего 100 мкг левоноргестрела (2 группа), показало стабильную тенденцию к повышению концентраций белка в течение года: в 3 мес. — 0,07 ± 0,03 г/л, в 6мес. — 0,098 ± 0,04 г/л, и в 9-12 мес. — 0,111 ± 0,04 г/л. А у принимавших КОК, содержащий в своем составе 150 мкг дезогестрела (1 группа), это повышение концентрации АБГ наблюдалось в 3 мес. — 0,103 ± 0,016 г/л, максимально в 6 мес.

— 0,12 ± 0,02 г/л и оставалось стабильно повышенным в 9-12 мес. — 0,113 ± 0,02 г/л.

У женщин, отличавшихся неизменностью содержания АБГ через 3 мес. после начала приема КОК, вне зависимости от типа препарата, дальнейшее использование гормональной контрацепции также не привело к достоверным изменениям сывороточных концентраций АБГ.

Сывороточные уровни МГ оставались неизменными в течение всего периода наблюдений, и не отличались от показателей данного белка в крови до приема препаратов (табл.). У женщин первой группы значения МГ колебались от 2,59 ± 0,12 г/л до приема КОК до 2,78 ± 0,21 г/л через 6-12 мес. от начала приема КОК. Во второй группе эти значения составили: от 2,72 ± 0,17 г/л до приема до 2,4 ± 0,23 г/л через 9-12 мес.

Динамичное наблюдение за изменениями двух провоспалительных цитокинов в сыворотке крови показало, что при применении 150 мкг дезогестрела (1 группа) концентрации ФНО-а и ИЛ-6 статистически значимо снижались. ФНО-а до приема препарата — 8,7 ± 2,7 пкг/мл, через 6 мес. — 1,8 ± 0,7 пкг/мл, через 9-12 мес. — 0,5 ± 0,4 пкг/мл (р = 0,025). ИЛ-6 до приема — 9,4 ± 3,8 пкг/мл, через 6 мес. — 3,0 ± 1,2 пкг/мл., через 9-12 мес. — 0,8 ± 0,2 пкг/мл (р = 0,049). Тогда как при приеме препарата, содержащего 100 мкг левоноргестрела (2 группа), сывороточные уровни данных цитокинов достоверно не изменялись в течение всего периода наблюдения: ФНО-а до приема — 2,1 ± 0,7 пкг/мл, через 3-6 мес. — 1,9 ± 0,6 пкг/мл, через 9-12 мес.

— 0,9 ± 0,5 пкг/мл; ИЛ-6 до приема — 2,0 ±

0,7 пкг/мл, через 3-6 мес. — 5,3 ± 1,6 пкг/мл, через 9-12 мес. — 4,9 ± 1,3 пкг/мл.

Таким образом, проведенное исследование показало, что прием микродозированного препарата КОК, содержащего 150 мкг дезогестрела, в течение года сопровождался повышением концентраций АБГ в 83,3 % случаев на фоне неизменных показателей другого макроглобулина — МГ и снижением концентраций провоспалительных цитокинов (ИЛ-6 и ФНО-а). У пациенток, принимавших микродозированный КОК, содержащий в качестве гестагенного компонента 100 мкг левоноргестрела, уровни МГ и изученных цитокинов оставались неизменными, а концентрация АБГ по-

вышалась только в 41,7 % случаев. Полученные данные свидетельствуют об угнетении синтеза провоспалительных цитокинов (ИЛ-6 и ФНО-а) у женщин, принимавших КОК, в состав которого входило 150 мкг дезогестрела, в течение 1 года. По всей вероятности, данный факт обусловлен за счет достаточно высоких концентраций АБГ, обладающего выраженными иммуносупрессивны-ми свойствами. Кроме того, нельзя исключать и влияние гестагенного компонента (дезогестрела 150 мкг), входящего в состав данного препарата.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Прилепская, В.Н. Руководство по контрацепции /При-лепская В.Н. - М., 2006. - С. 89-92.

2. Никитин, С.В. К вопросу о современных прогестагенах и комбинированных оральных контрацептивах /Никитин С.В. //РМЖ. - 2003. - Т. 5, № 5. - С. 91-96.

3. Pike, M.C. Hormonal contraception and chemoprevention of female cancers /Pike M.C., Spicer D.V. //Endocr.-Relat. Cancer. - 2000. - V. 7. - P. 73-83.

4. Oral contraceptives and cervical cancer /Berrington A., Jha P., Peto J. et al. //Lancet. - 2002. - V. 360. - P. 410.

5. Bjelic-Radisic, V. Hormonal contraception and breast cancer risk /Bjelic-Radisic V., Petru E. //Wien. Med. Wochenschr.

- 2010. - V. 160, N 19-20. - P. 483-486.

6. Зорина, P.M. Макроглобулины: сравнительная характеристика и участие в иммунологических процессах //P.M. Зорина: Автореф. дис. ... докт. биол. наук. - М., 2002. - 42 с.

7. Birkenmeier, G. Targetting the proteinase inhibitor and immune modulatory function of human alpha 2-macroglobulin /Birkenmeier G. //Mod. Asp. Immunobiol. - 2001. - V. 2.

- P. 32-36.

8. Баженова, Л.Г. Дифференциальная диагностика опухолей и опухолевидных образований яичников /Л.Г. Баженова: Автореф. дис. ... докт. мед. наук. - М., 2007. - 46 с.

9. Белки семейства макроглобулинов (МГ, АБГ), иммунокомплексы МГ-IgG в крови больных с опухолями и опухолевидными образованиями яичников /Баженова Л.Г., Зорина В.Н., Покачалова М.В. и др. //Рос. вестн. акуш.-гинек. - 2005. - № 4. - С. 11-15.

10.Промзелева, Н.В. Прогностическая значимость ассоциированного с беременностью альфа-2-гликопротеина при раке молочной железы /Н.В. Промзелева: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Томск, 1998. - 28 с.

11.Modulation of body temperature, interleukin-6 and leptin by oral contraceptive use /Salkeld B.D., MacAulay J.C., Ball R.W., Cannon J.G. //Neuroimmunomodulation. - 2001. - V. 9(6). - Р. 319-325.

12.Expression of CCL18 and interleukin-6 in the plasma of breast cancer patients as compared with benign tumor patients and healthy controls /Narit;a D., Seclaman E., Ursoniu S. et al. //Rom. J. Morph. Embryol. - 2011. - V. 52(4). - Р. 1261-1267.

13.Белки плазмы и сыворотки крови доноров /Зорин Н.А., Жабин С.Г., Лыкова О.Ф. и др. //Клин. лаб. диагностика. - 1992. - № 9-10. - С. 13-15.