Лентивирусы копытных. I. общая характеристика, история и распространение

определили оптимальную схему иммунизации культуральной вакциной (способ и кратность введения, дозировку) разных видов животных (овец, коров и пушных зверей). Изучены продолжительность иммунитета, срок хранения и стабильность иммуногенных свойств препарата.

В овцеводческих хозяйствах Омской области вакцина защитила от энзоотического аборта 96...98% овцематок. В неблагополучных по хламидиозу хозяйствах Ульяновской и Кировской областей было подтверждено, что вакцина после однократного введения создает протективный иммунитет у свиней в течение 12 мес. В Чувашии и других регионах, где проводили апробацию препарата в течение 2 лет, значительно повысились показатели воспроизводства, резко сократилась частота эндометрита и задержания последа у коров. Перестали регистрировать эндометрит у телок случного возраста, цикл осеменения протекал без нарушений. Прекратились массовые аборты и рождение мертвых телят.

Однако при подкожном и внутримышечном введении культуральной вакцины у отдельных животных в месте инокуляции препарата образовывались длительно нерассасывающи-еся гранулемы. Это потребовало внесения в технологию производства препарата ряда изменений, в т.ч. дополнительной очистки и концентрирования антигена, применения масляного адъ-юванта с меньшей вязкостью. Дозировку препарата снизили в 10 раз и рекомендовали вводить его внутрикожно безигольным инъектором (БИ-7М). Последнее изменение не отразилось на сероконверсии привитых животных. Такой метод иммунизации позволяет значительно снизить объем и дозу вакцины при сохранении ее эффективности. Кроме того, он отличается безболезненностью, быстротой и простотой осуществления, высокой производительностью (за 1 ч прививают 200...250 животных), надежностью и экономичностью [1,4,5].

Заключение

Хламидиозы широко распространены и наносят значительный экономический ущерб животноводству. Стратегия и тактика их искоренения должны включать комплекс мероприятий, основанный на своевременной и точной диагностике, изоляции носителей, уничтожении возбудителя на объектах внешней среды, проведении вакцинации. В условиях неблагополучия по хламидиозу или риска заноса инфекции в хозяйствах следует прививать все восприимчивые виды животных, включая крупный рогатый скот, овец, коз, свиней, а также пушных зверей (песцов, серебристо-черных лисиц и норок).

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Водяков О.Н., Караваев Ю.Д., Калугина И.А. Эффективность иммунизации животных против хламидиоза безигольным методом. Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию ВНИИТиБ, 2005, 55-56.

2. Калугина И.А. Хламидии и их цитопатогенное действие. Дьяконов Л.П., Ситьков В.И. (ред.) «Животная клетка«.-М, Спутник, 2000, 312-315.

3. Караваев ЮД, Калугина ИА, Родин А.Н., Водяков О.Н. Современное состояние изученности хламвдийных инфекций животных и мера борьбы с ними. Материалы международна) научно-производственной конференции, посвященной 100-летию Казахского НИВИ, г. Алма-Ата, 2005, 14-18.

4. Караваев Ю.Д., Маркин Ю.Н. Хламидиозы животных - меры борьбы и специфической про-филактики//Ветеринария, 2003, 6, 4-7.

5. Караваев Ю.Д., Мельник Н.В., Соколов М.Н. Хламидийная инфекция животных//Животно-водство России, 2005, 3, 33-36.

6. Семерджиев В., Огнянов Д, Неорикетсиозы по домашним животным. Земиздат. Болгария, 1969.

7. Everett K.D.E., Bush R.M. & Andersen A.A. Emended description of the order Chlamydiales. Int J System Bact, 1999, 49, 415-440.

8. Kauker E., Minners P. Virus abort desschates und versuche zur Bekamfung mittels einer Formol-Vaczine Berlin München Tie valvzte Wachv, 1956, 69, 265-267.

9. McEwen A.D., Stamp Y.T. and el Euzootie abortion in ewes. Vet Ree, 1951, 63, p.197-201.

10. McEwen A.D., FoggieA. Enzootic abortion ewes comparative studies od different vaccines. Vet Ree, 1954, 66, 393-397.

11. McEwen A.D., Holgate S. Enzootic abortion in ewes. Vet Ree, 1956, 68, 690-691.

12. SchoopY., Kauker E. Infection eines Rinderbestandes durebi ein vims des psittacosis-Ijmphogranuloma - Yruppe. Yenaurfte Aborte in Veriaut der erkrakumgen Deusch Tieraertl Wsche, 1956, 63, 233-235.

УДК 6 9 6 6 98 л антивирусы

копытных.

I. Общая характеристика, история и распространение

Б.Ф. Шуляк, Российский ветеринарный журнал

Ключевые слова: коза, крупный рогатый скот, лентивирусы, лошадь, овца

Сокращения: ВАЭК - вирус артрита-энцефалита коз; ВИК - вирус иммунодефицита КРС; ВМВ - вирус мэди-висны; ИНАН - инфекционная анемия лошадей; КРС - крупный рогатый скот; ЛВ - лентивирусы

Введение

ЛВ — неонкогенные ретровирусы, объединенные в подсемейство Ьегитппае. Свое название подсемейство получило от латинского слова «ленти», означающего «медленный». По определению Б. Сиггурдсона, к числу медленных инфекций относятся инфекции, к которым восприимчив ограниченный круг хозяев, имеющие длительный инкубационный период (месяцы и годы) и прогрессирующее течение, сопровождающиеся поражением определенных органов/тканей и завершающиеся неизбежным летальным исходом [16].

Первоначально в подсем. ЬеЩтппае входили только ВМВ и ВАЭК, а также возбудители иммунодефицитов человека и обезьян. Когда появилась возможность «заглянуть» в геном различных ретровирусов оказалось, что существует много филогенетически близких им агентов, далеко не все из которых вызывают медленные инфекции. Поэтому в подсемейство Ьепиутпае включили (не считая ряда ретровирусов человека и обезьян) 6 ЛВ животных — ВМВ, ВАЭК, вирус ИНАН, вирус болезни Джембрана, ВИК и вирус иммунодефицита кошки.

Историческая справка

ИНАН. Инфекционную анемию лошадей впервые зарегистрировали во Франции в 1843 г. [11]. В 1903 г. Торренс описал эту болезнь в США, где ее назвали «болотной лихорадкой». О ее вирусной этиологии высказывали предположения еще в 1904 г. [22], но патогенез ИНАН и свойства ее возбудителя оставались загадкой более полувека, поскольку не удавалось подобрать чувствительную к нему культуру клеток до 1964 г.

Мэди-висна. Первое упоминание о прогрессирующей пневмонии овец («цвигерзихте») найдено в сообщении голландского ветеринарного врача Ломана (1862 г.). Спустя четверть века о нем начнут писать южно-африканские, американские, французские и голландские специалисты которые называли данную патологию «болезнью Грааф-Рейнета (Митчелл, 1915), «болезнью Монтана1» (X. Марш, 1923) и «бухите» (Ф. Лакем, 1942) соответственно. Но наиболее глубоко болезнь изучили Г. Гислассон, Г. Сигтурдссон и другие исландские исследователи, назвавшие ее респираторную форму «мэди» (одышка) [16], а нервно-паралитическую — «висна» (чахнущий) [17]. Ее возбудителя занесли в эту страну с несколькими бессимптомно инфицированными баранами, привезенными из Германии. В течение нескольких лет инфекция охватила 70% территории Исландии и стала при-

U.D. Karavaev, I.N. Kalugina, N.V. Melnic. Chlamydioses of animals: Enhancement the means of specific profilaxis

1 По названию штата, где она была широко распространена.

-

чиной огромных экономических потерь. Для ее искоренения пришлось прибегнуть к методу стампинг аута и полной замене поголовья пораженных отар овцами из благополучных источников. Поскольку последних в стране оставалось немного, то инфекцию удалось ликвидировать только в 1965 г.2 В ходе этой беспрецендентной борьбы с инфекцией погибло около 105 тыс. и было уничтожено 650 тыс. овец [13]. Возможно, что таких огромных потерь можно было избежать, а срок искоренения мэди-висны в Исландии сократить, если бы были доступны методы серологической диагностики инфекции. Но их стали применять только в 60-х годах XX в.

В Киргизии патоморфологическую картину прогрессирующей пневмонии овец описал В.М. Митрофанов в 1976 г. Отсутствие у него специфических средств диагностики не позволило поставить точный диагноз. В 1984 г. автор этой статьи провел исследование в реакции диффузионной преципитации около 300 проб сыворотки крови из 6 хозяйств этой республики. Неблагополучными по ВМВ оказались 2 хозяйства, в которых уровень серопозитивности к этому агенту составил 9 и 14%.

В конце 70 — начале 80-х годов прошлого века в хозяйствах НЧЗ РСФСР, специализирующихся на выращивании овец романовской породы, появилось неврологическое заболевание. В установлении его этиологии принимал участие и автор этой публикации. Установить, что неврологическое заболевание овец романовской породы вызывает ВМВ, удалось на основании результатов серологических исследований, изоляции и идентификации возбудителя болезни, а также воспроизведения последней на овцах в условиях опытной базы ВИЭВ «о. Лисий» в 1982...83 гг. [1, З]3.

Артрит-энцефалит коз. Одними из первых заболевание коз, напоминавшее прогрессирующую пневмонию овец, описали индийские исследователи в 1964 г. [14]. Позднее аналогичные сообщения стали поступать из Германии [211, а в середине 70-х годов в США у козлят диагностировали ретрови-русный лейкоэнцефаломиелит [5]. Установление того, что оба синдрома вызывает один и тот же возбудитель, послужило основанием для присвоения ему названия ВАЭК |6].

Болезнь Джембрана. Эту болезнь впервые описали в 1964 г. у бантенгов (Bos sondaicus) в индонезийской провинции Джембрана. Ее первая зарегистрированная вспышка характеризовалась высокими заболеваемостью и смертностью 115]. В течение года болезнь охватила весь остров и стала причиной потери почти 10% (26 тыс. гол.) популяции бантенгов. В последующий период она стала эндемичной для Индонезии, что сопровождалось значительным снижением заболеваемости и смертности. В 1993 г. установили вирусную этиологию заболевания [ 10].

11озднее инфекция попала на о-ва Суматра, Ява и Калимантан [18]. В других регионах мира ее пока не регистрируют.

Иммунодефицит КРС. В конце 60-х годов XX в. ученые разных стран пытались установить этиологию лейкемии-лимфосаркомы КРС. В ходе этих исследований американские исследователи [23] обнаружили у животных, больных этим онкологическим заболеванием, ретровирус, морфологически напоминавший ВМВ. Когда стало ясно, что ВМВ и возбудитель иммунодефицита КРС — разные вирусы, последний назвали ВИК [9].

Распространение

Для И HAH и инфекций Л В мелкого рогатого скота характерно широкое распространение. Страны-члены МЭБ регулярно подают отчеты о благополучии по ним. Однако следует различать реальное благополучие и благополучие види-

2 Официально считается, что это произошло в 1952 г., но отдельные случаи болезни зарегистрировали в 1954 и 1965 гг.

3 В ряде хозяйств одновременно диагностировали скрепи.

мое, обусловленное отсутствием регулярных исследований на эти инфекции, которые могут длительно оставаться нераспознанными в неблагополучных стадах животных. К сожалению, пока ни в одной стране мира не проводится поголовное диагностическое обследование восприимчивых животных на инфекции ЛВ.

ИНАН. В период с 1928 по 2004 гг. И HAH регистрировали в следующих регионах мира (в скобках указана дата последней вспышки инфекции): Австралии (2004), Австрии

(2003), Албании (1983), Антильских о-вах (1985), Аргентине

(2004), Белизе (2001), Боливии (2004), Боснии и Герцеговине (2004), Болгарии (1962), Бразилии (2004), Великобритании (1976), Венгрии (1965), Венесуэле (2004), Гаити (2004), Гватемале (2004), Германии (2002), Гондурасе (2004), Гонконге (1976), Греции (2003), Дании (1928), Доминиканской Республике (1998), Италии (2004), Индии (1996), Испании (1983), Камеруне (2004), Киргизии (1989), Колумбии (2004), Коста Рике (2004), Латвии (2002), Литве (2002), Македонии (2004), Мексике (2004), Молдавии (1946), Монголии (2004), Никарагуа (2004), Новой Зеландии (1999), Норвегии (2004), Панаме (2004), Парагвае (2004), Перу (1988), Польше (1960), Республике Беларусь (2001), Республике Корея

(1995), России (2004), Румынии (2004), Сальвадоре (2004), Саудовской Аравии (1998), Сербии (2004), Словении (2004), США (2004),Таиланде (1996), Турции (2004), Узбекистане

(1996), Украине (2003), Уругвае (1995), Филиппинах (2004), Финляндии (1953), Франции (2001), Французской Гвиане (1999), Хорватии (2004), Чили (1988), Швеции (1989), Эквадоре (2004), Эстонии (1997), Эфиопии (1996), Южной Африке (1995) и Японии (1993).

В России в период с 1996 по 2004 гг. произошло 286 вспышек ИНАН, в ходе которых заболело 6223 лошади.

Мэди-висна. За последние 45 лет инфекцию диагностировали в следующих регионах мира (в скобках указана последняя дата регистрации): Австрии (1996), Андорре (2004), Аргентине (2004), Бельгии (2004), Болгарии (2001), Бразилии (1997), Великобритании (2004), Германии (2004), Греции (2004), Дании (2004), Израиле (1991), Индии (1996), Ираке (2004), Ирландии (1986), Исландии (1965), Испании (2004), Канаде (2004), Кипре (2002), Латвии (2004), Люксембурге (2004), Намибии (1988), Нидерландах (2004), Норвегии (2004), Польше (1997), Португалии (2004), Румынии (2004), Сенегале (1997), Словакии (2004), США"(2004), Финляндии (2002), Франции (2004), Чехии (2003), Чили (2004), Швейцарии (2004), Швеции (2004), Эстонии (2003), Эфиопии (2002) и Южной Африке (2004).

Доминирует респираторная форма болезни. Висну регистрируют значительно реже. Наиболее предрасположены к ней овцы исландской [17] и романовской пород [2, 3].

Серологические методы диагностики инфекции показывают, что уровень инфицированное™ неблагополучных по мэди-висне отар может варьировать в широких пределах — от 1 до 90% |7]. По нашим наблюдениям, 40%-й уровень ин-фицированности отар романовской породы критический — его превышение влечет переход от спорадических случаев болезни к массовому заболеванию. Не вызывает сомнений, что уровень распространения инфекции в неблагополучных хозяйствах зависит от системы выращивания овец. Во многих подразделениях комплекса «Марий Эл», в котором в конце 70-х гг. прошлого века была предпринята попытка перевода овцеводства на промышленную основу (т.е. безвыгульного выращивания огромного количества овец в закрытых помещениях), уровень серопозитивности к ВМВ среди взрослых овцематок достигал 60% (личные наблюдения). Инфициро-ванность ярок и ягнят была значительно ниже, что указывает на горизонтальное распространение инфекции.

Артрит-энцефалит коз. Инфекцию официально регистрировали в течение последних 35 лет в 51 регионе мира (в

-

скобках указана дата последней регистрации): Австралии (2004), Алжире (1998), Антильских о-вах (1996), Барбадосе (2002), Бельгии (2004), Болгарии (2001), Боливии (1996), Бразилии (1996), Великобритании (2004), Венгрии (2004), Венесуэле (19960, Виргинских о-вах (1995), Гаити (1996), Германии (2004), Греции (2002), Дании (2004), Джамайке (1996), Доминиканской Республике (2003), Зимбабве (1987), Израиле (2002), Ирландии (2004), Испании (2004), Италии (1996), Канаде (2004), Кении (2003), Колумбии (1993), Коста Рике (1998), Латвии (2004), Ливане (1994), Лихтенштейне (2000), Марокко (2002), Мексике (2004), Мозамбике (1998), Нидерландах (2004), Новой Зеландии (2004), Новой Каледонии (2004), Норвегии (2004), Панаме (2004), Перу (2004), Румынии (2004), Сингапуре (1989), Словакии (2004), США (2004), Тайпее (2004), Тринидаде и Тобаго (1996), Тунисе (2000), Франции (2004), Французской Гвиане (1999), Чехии (2003), Швейцарии (2004), Швеции (2004) и Японии (2004).

Особенно широко она распространена в стадах молочных коз Европы, США и Канады.

Автор данной публикации в конце 80-х годов прошлого века исследовал сыворотку крови коз сааненской породы из частного хозяйства Тверской области, где наблюдали массовые случаи мастита коз и неврологическое заболевание козлят. В РДП, проведенной с неочищенным антигеном ВМВ, положительную реакцию дали около 7% присланных для исследования проб сыворотки крови животных. Информацией о проведении в России других серологических обследований коз на эту инфекцию мы не располагаем.

Болезнь Джембрана. Данное инфекционное заболевание КРС описано только в Индонезии. Благодаря нелегальному вывозу скота из этой страны инфекция попала на острова Суматра, Ява и Калимантан [18]. В других регионах мира его пока не регистрируют.

Иммунодефицит КРС. Посредством серологических исследований установлено широкое распространение ВИК по всему миру. Инфекцию диагностировали в Австралии, Аргентине, Бразилии, Великобритании, Германии, Дании, Замбии, Италии, Канаде, Корее, Коста Рике, Нидерландах, Пакистане, США, Турции, Франции, Японии. В большинстве случаев уровень серопозитивности к ВИК колеблется от 1,5 до 15%. Исключение составляет Корея, где в обследованных стадах КРС мясного типа специфические антитела к ВИК обнаружили у 33...35% животных [4]. Однако следует учитывать, что проводившие исследования специалисты пользовались нестандартными диагностикумами, разными серологическими тестами и обследовали животных не одного возраста, что затрудняет сопоставление полученных ими результатов.

Ущерб

Данные литературы по этому вопросу неоднозначны. Это не удивительно поскольку в полевых условиях весьма трудно определить истинную причину снижения продуктивности, выбраковки и падежа животных, прежде всего потому, что пораженные стада никогда не бывают свободными от других патогенных или условно-патогенных возбудителей, которых обнаружить значительно легче. В зависимости от генетического и иммунного статусов стада, системы его содержания, а также ряда других факторов медленные инфекции могут не вызывать особого беспокойства или, наоборот, делать нерентабельным дальнейшее разведение животных. Факторы, способствующие интенсивной циркуляции ретро-вирусов среди восприимчивых животных (длительное стойловое содержание, большая концентрация животных и т.д.), делают медленные инфекции копытных экономически более значимыми. Однако у них имеются и некоторые особенности. Например, при мэди-висне первостепенное значение играет форма болезни. В большинстве регионов мира распрост-

ранена мэди, при которой погибает значительно меньше животных (и после более длительного переболевания), чем при висне. Массовое заболевание овец висной имело место только в Исландии и НЧЗ России, где смертность достигала 20...30% [1, 15]. При артрите-энцефалите коз чаще погибает молодняк [6]. При ИНАН летальность наиболее высока во время первого приступа болезни — перенесшие его лошади погибают из-за этой инфекции значительно реже. При болезни Джембрана смертность может достигать 17% [19]. Во время первой вспышки этой болезни Индонезия потеряла около 10% (26000 гол.) КРС. В последующий период она стала эндемичной для Индонезии, что сопровождалось значительным снижением заболеваемости и смертности [15]. ВИК лишь в спорадических случаях становится причиной летального онкологического процесса, хотя иммунодефицит, развивающийся при этой инфекции, делает животных менее восприимчивыми к другим инфекционным и инвазионным агентам, что влечет за собой соответствующие последствия.

Для предотвращения распространения ЛВ необходима изоляция неблагополучных табунов и отар. Возможность длительной персистенции лентивирусов, в процессе которой зараженное животное служит источником инфекции, но остается клинически здоровым, делает медленные инфекции весьма опасными. Они могут незаметно переходить от стада к стаду, из одного района в другой, преодолевая даже государственные границы. Выше уже упоминалось об истории заноса ВМВ в Исландию. Аналогично этот возбудитель попал из Дании в Норвегию, из Шотландии в Канаду, из Англии в Венгрию, из Голландии во Францию, из Швеции в Финляндию [8, 20]. Неблагополучные хозяйства на длительное время (а порой и до полной замены поголовья) утрачивают статус племенных. Находящихся в них животных нельзя продавать, использовать для искусственного осеменения, получения эмбрионов, трансплантатов и других биологических продуктов. Животноводческую продукцию из этих хозяйств обычно используют без ограничений, т.к. нет оснований считать, что возбудители медленных инфекций копытных обладают зооантропонозным потенциалом. Тем не менее, при болезни Джембрана и медленных инфекциях овец и коз происходит заметное снижение молочной продуктивности и привесов животных. При тестикулярной форме мэди-висны бараны утрачивают плодовитость [12].

(Продолжение будет опубликовано в следующем номере журнала ).

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Караваев Ю.Д., Егоров В.Г., Шуляк Б.Ф. Некоторые особенности иммунного, клинического и гематологического ответов при воспроизведении висны у овец романовской породы. Труды ВИЭВ, 1983, т.57, с.148-150.

2. Коромыслов Г.Ф., Караваев Ю.Д., Шуляк Б.Ф. Висна-мэди у овец романовской породы. Бюллетень ВИЭВ, 1984, вып. 55, с. 64.

3. Шуляк Б.Ф. Висна-мэди у овец романовской породы (этиология, распространение и профилактика). Диссертация, М, 1985.

4. Cho К.О., Meas S., Park N.Y. et al. Seroprevalence of bovine immunodeficiency virus in dairy and beef cattle herds in Korea. J Vet Med Sei, 1999, 61, 5, 549-551.

5. CorkLC., HadlowW.J., Crawford T.B. etal. Infectious leukoeneephalomyelitis of young goats. J Inf Dis, 1974, 129, 134-141.

6. Crawford T.B., Adams D.S., Cheevers W.P., Cork L.C. Chronic arthritis in goats caused by a retrovirus. Science, 1980, 207, 997-999.

7. Cutlip R.C., Jackson Т.Д., Laird G.A. Prevalence of ovine progressive pneumonia in a sampling of cull sheep from western and midwestern United States. Am J Vet Res, 1977, 38, 12, 2091-2093.

8. Dukes T.W., Greig A.S., Comer A.H. Maedi-visna in Canadian sheep, Can J Comp Med, 1979,43, 313-320.

9. Gonda M.A., Braun M.J., Carter S.G. et al. Characterization and molecular cloning of a bovine lentivirus related to human immunodeficiency virus. Nature (London), 1987, 330, 388-391.

10. Kertayadnya G., Wilcox G.E., Soeharsono S. et al. Characteristics of a virus associated with Jembrana disease in Bali cattle. J Gen Virol, 1993, 74, 1765-1773.

11. идпй M., Мйпкже et observations sur une maladie de sang, connue sous le nom d'anlwmie hydrolwmie, cachexie acquise du cheval, Ree Med Vet Ec Alfort, 1843, 30-44.

12. Palfi V., Glavits R., Hajtos I. Testicular lesions in rams infected by maedi/visna virus. Acta Vet Hung, 1989, 37, 1-2, 97-102.

13. Palsson P.A. Maedi and visna in sheep. Front Biol, 1976, 44, 17-43.

14. Rajya B.S., Singh C.M. The pathology of pneumonia and associated respiratory disease of sheep and goats. I. Occurrence of jagziekte and maedi in sheep and goats in India. A. Am J Vet Res, 1964,25,61 -67.

15. Ramachandran S. Eady observations and research on Jembrana disease in Bali and other Indonesian islands. In: Jembrana disease and the bovine lentiviruses. ACIAR Proceedings. ACIAR, Canberra. 1997, 5, 7-9.

16. Sigurdsson B. Maedi, a slow progressive pneumonia of sheep: an epizootiological and pathologic study. Br Vet J, 1954, 110, 255-270.

17. Sigurdsson B., Palsson P.A. Visna of sheep; a slow, demyelinating infection. Br J Exp Pathol, 1958, 39, 5, 519-528.

18. Soeharsono S. Current information on Jembrana disease distribution in Indonesia. In: Jembrana disease and the bovine lentiviruses. ACIAR Proceedings. ACIAR, Canberra, 1997, 75, 72-75.

19. Soesanto M„ Soeharsono S., Budiantono A. et al. Studies on experimental Jembrana disease in Bali cattle. II. Clinical signs and haematological changes. J Comp Pathol, 1990, 103, 61-71.

20. SuvegesT., SzekyA. Incidence of maedi (chronic progressive interstitial pneumonia) among sheep in Hungary, Acta Vet Acad Sci Hung, 1973, 23, 205-217.

21. Stavrou 0., Deutschlander N., Dahme E. Granulomatous encephalomyelitis in goats. S J Comp Pathol, 1969, 79, 3, 393-396.

22. Vallée H., Car™ H., Sur la nature infectieuse de l'aniimie du cheval. C R Acad Sci, 1904, 139, 331-333.

23. van der Maaten M.J., BootheA.D. , Seger C.L Isolation of virus from cattle with persistent lymphocytosis. J Natl. Cancer Inst, 1972, 49, 1649-1657.

SUMMARY

B.F. Schuljak. Lentivirus of ungulates. I. Common characteristic, history & prevalence.

In this part of review author describes the history of study & gaves the information about prevalence of 5 lentivirus infections - EIA, maedi-visna, caprine arthritis-encephalomyelitis, bovine immunodeficiency & Jembrana disease.

УДК 6 9 636 6 5 33 Апрамицин и

проблема плазмидной резистентности бактерий

O.A. Волчанская, клинико-диагностическая лаборатория КСКВМ

Ключевые слова: антибиотики, апрамицин, плазмиды Сокращения: ЛУ - лекарственная устойчивость

Введение

Бактерии с множественной ЛУ могут вызывать тяжелые инфекции у животных и людей. В настоящее время они распространены очень широко: более 50% всех штаммов сальмонелл, кишечной палочки и энтерококков резистентны к 3 и более антибактериальным препаратам [2].

Антибиотики часто оказываются неэффективными поскольку число чувствительных к ним мишеней в бактериях крайне ограничено. Это в первую очередь компоненты клеточной стенки (пенициллины, цефалоспорины), ДНК (фтор-хинолоны) и синтезируемые бактериями белки (макролиды, тетрациклины, аминогликозиды) [3]. Проблема множественной ЛУ бактерий усугубляется тем, что после появления фторхинолонов (конец 70-х годов прошлого века) не было разработано ни одного антибактериального препарата с принципиально новым механизмом действия. Все «новые»

антибиотики — это всего лишь незначительно измененные копии известных препаратов, к которым патогенные бактерии рано или поздно станут устойчивыми (как это уже происходит с фторхинолонами и ß-лактамами).

Важнейшей причиной приобретения бактериями устойчивости ко многим широко применяемым антимикробным препаратам (ß-лактамам, макролидам, тетрациклинам, ами-ногликозидам и гликопептидам) является получение ими от других бактерий R-плазмид — небольших, кольцевых вне-хромосомных молекул ДНК, которые несут в себе гены устойчивости к антибиотикам. Они способны передаваться от одной бактерии к другой, делая резистентной всю популяцию бактерий. При утрате бактериями R-плазмид, ассоциированных с ЛУ, появляется возможность эффективного контроля вызываемых ими заболеваний антибиотиками, к которым эти возбудители были ранее резистентны.

Апрамицин (единственный из аминогликозидных антибиотиков) способен предотвращать репликацию (копирование) плазмид в бактериальной клетке, вызывая постепенную утрату этих факторов резистентности. «Излечивая» бактерии от R-плазмид, данный антибиотик нового поколения восстанавливает у микрофлоры (в т.ч. у мультирезистентных штаммов) потерянную ранее чувствительность к лекарственным препаратам 11 ].

Задача проведенного эксперимента состояла в исследовании апрамицина как антибиотика, обладающего помимо непосредственно нротивобактериального действия, активностью в отношении R-плазмид бактерий как носителей генов множественной Л У.

Материалы и методы

Определение эффективности апрамицина для восстановления чувствительности микрофлоры провели на базе диагностической лаборатории КСКВМ. Для исследований использовали штамм А61187 Е. coli, содержащий R-плазмиду с геном ß-лактамазы Ричмонда и Сайкса IV типа. Кишечная палочка, содержащая эту плазмиду, устойчива к ß-лактам-ным антибиотикам , в т.ч. к ампициллину. Именно этот антибиотик использовали для тестирования ß-лактамазной активности Е. coli. Плазмидную ДНК экстрагировали фенол-хлороформенным методом с последующим электрофорети-ческим анализом в агарозном геле с бромидом этидия.

Для культивирования бактерии пользовались минимальной жидкой средой М63 и плотной средой, которую готовили добавлением к последней бактоагара (Difco, США). Культуру Е. coli, выращенную в лунках планшета на среде М63 в присутствии разных концентраций (3, 6, 12, 18 и 25 мкг/мл) апрамицина (Балканфарма, Болгария), пересевали на поверхность плотных сред с такими же концентрациями антибиотика (чашки I). После инкубации и подсчета колоний с каждой чашки получали реплику на поверхности плотных сред с ампициллином (100 мкг/мл) для определения ß-лактамазной активности (чашки-реплики). Отсутствие роста в последних означало потерю R-плазмид (тем самым восстановление чувствительности к ß-лактамам). О степени потери штаммом R-плазмид судили по разнице в числе колоний на чашке I и чашке-реплике. Динамику утраты R-плазмид в процессе смены поколений бактерии (11 поколений за 24 ч) выражали графически на основании подсчета колоний методом серийных разведений.

Результаты и обсуждение

В эксперименте изучали штамм Е. coli, чья ЛУ была обусловлена плазмидной резистентностью. Электрофорети-ческий анализ ДНК, экстрагированной из его бактериальных клеток, выявил наличие R-плазмид, несущих гены ß-лакта-маз. Проверка культур, переставших расти на чашках-репликах с ампициллином после воздействия апрамицина, показа-

-

;

шшшщшйт ШЁШШЁШШШ

ття^ятт

ШШЁШИШЙ,