Молекулярная модель светособирающего комплекса LH1 фотосинтетического центра бактерий Thermochromatium tepidum

УДК 539.196

молекулярная модель светособирающего комплекса lh1 фотосинтетического центра

бактерий Thermochromatium tepidum

М.г. Хренова, и.Б. поляков, Б.Л. Григоренко, А.Б. Иемухин

Методами молекулярного моделирования построена полноатомная трехмерная структура светособирающего комплекса LH1 фотосинтетического центра бактерий Thermochromatium tepidum.

Ключевые слова: фотосинтез, светособирающие комплексы, трехмерная полноатомная модель, молекулярная динамика.

Строение, свойства и функции фотосинтетических центров растений и бактерий привлекают внимание большого числа исследовательских групп, в частности, в связи с актуальными задачами разработки новых источников экологически чистой энергии. Белковые фотосинтетические комплексы включают реакционный центр ^С) и светособира-ющую антенну ^Н), которые находятся в липидной мембране. К настоящему времени экспериментальное определение трехмерной структуры с атомарным разрешением достаточно сложно из-за трудностей выделения и исследования трансмембранных белков. Рентгеноструктурные данные с разрешением 2,0-2,5 А известны для комплексов типа LH2 из пурпурных бактерий [1-4], в то время как для комплексов типа LH1 структуры, полученные с разрешением 4,8 А [5], позволяют представить лишь общие детали строения светособирающей антенны. Отсутствие надежных экспериментальных данных стимулирует применение методов компьютерного молекулярного моделирования для решения задачи о структуре комплекса LH1. В настоящей работе мы рассматриваем структуру модельной системы, состоящей из антенны LH1 и реакционного центра RC из фотосинтетической термофильной бактерии ТкегшоскгошаИиш 1ер1йиш [6], для которой известны результаты спектральных исследований [7-9]. Согласно этим результатам комплекс LH1+RC характеризуется повышенной термостабильностью и необычным красным сдвигом полосы поглощения перехода Qy молекул бактериохлоро-филла (ВСЫ-а), что объясняется [10, 11] присутствием ионов кальция в комплексе. По данным работы [5] характерный бактериальный комплекс LH1 состоит из 16 субъединиц, т.е. пар а- и Р-полипептидных спиралей, между которыми заключены димеры ВСЫ-а и

молекулы каротиноидов, ответственные за первичное поглощение видимого света. Также известно, что на каждую субъединицу комплекса LH1 приходится один ион Ca2+.

Первая попытка восстановить структуру субъединицы LH1 методами молекулярного моделирования с использованием программ SWISS-MODEL и MODELER была описана в работе [9]. Для этого известная первичная последовательность аминокислотных остатков а-, Р-полипептидов LH1 из Thermochromatium tepidum [7] была выравнена по последовательностям а-, Р-полипептидов комплекса LH2 из Rhodopseudomonas acidophila [2] с известной кристаллографической структурой. По результатам анализа построенной модели было высказано предположение, что ионы Ca2+ связываются на С-конце а-спирали [9]. В работе [12] мы предлагали другую модель трехмерной структуры субъединицы комплекса LH1 из Thermochromatium tepidum и другое место локализации ионов кальция в данной структуре. В качестве шаблона была использована структура соответствующего фрагмента, включающего а- и Р-полипептиды, молекулы BChl-а и каротиноида, из комплекса LH2 бактерии Rhodopseudomonas acidophila [3], приведенная в базе данных белковых структур с кодом PDBid: 2FKW. Далее структурные фрагменты были выравнены по позициям остатков гистидина в обоих полипетидах, и была вручную проведена замена каждого аминокислотного остатка в обе стороны от позиции выравнивания так, чтобы, сохранив форму спиралей, полностью восстановить качественный состав.

В настоящей работе предлагается более полная модель комплекса LH1+RC фотосинтетической бактерии Thermochromatium tepidum. Во-первых, в процессе восстановления по шаблону спиралей а- и

Рис. 1. Модельная система LH1+RC внутри липидного бислоя

Рис. 2. Фрагмент структуры субъединицы комплекса LH1 из ТНеттоскготаЫит tepidum

Р-полипептидов на каждом шаге мутаций т ъШео проводилась оптимизация геометрических параметров по минимуму энергии с проверкой корректности конформаций по картам Рамачандрана. Во-вторых, в центр построенного тора из 32 спиралей (16 субъединиц) была вставлена макромолекула реакционного центра ЯС бактерии Ткегтоскготайит tepidum, координаты тяжелых атомов которого взяты из кристаллической структуры с PDBid: 1EYS [13]. В третьих, модельный комплекс LH1+RC был помещен в липидный бислой, составленный из молекул 1-пальмитоил-2-олеоил^п-глицеро-3-фосфоэтаноламина. Вся система была окружена оболочкой из 95000 молекул воды.

Для определения координат атомов в данной полноатомной модели осуществлялись традиционные действия со структурой методами классической молекулярной динамики - расчеты траекторий для условий канонического ансамбля СЫРТ), отжиг, прямая минимизация энергии. На первом этапе рассма-

тривалась модельная система без ионов кальция; на

втором этапе к системе были добавлены ионы Са2+ в

количестве 500 ед., заряды которых были уравнове-

— 2+ шены 1000 ионами хлора С1 . Положения ионов Са

в модельной системе (по одному на каждую субъединицу) были определены с использованием тех же процедур молекулярной динамики, что и на первом этапе.

Во всех случаях расчеты были выполнены с помощью компьютерных программ NAMD 2.6 [14] с применением параметров силового поля СНАЯММ и CGenFF [15, 16]. Для визуализации результатов и конструирования модельных систем использована программа VMD [17].

На рис. 1 показан общий вид модельной системы без оболочек молекул воды, на рис. 2 представлена субъединица комплекса LH1 и указано место локализации иона кальция, предсказанное методами молекулярной динамики.

Важный результат данной работы — создание адекватной полноатомной модели всей бактериальной фотосинтетической системы, включающей реакционный центр внутри светособирающей антенны типа LH1, которая погружена в липидный бислой, передающий влияние мембраны. Другим результатом является предсказанное средствами молекулярного моде-Работа выполнена при поддержке

лирования положение ионов кальция, которое отличается от позиций, предлагаемых в предшествующих работах [9, 12].

Расчеты проведены с использованием суперкомпьютерных ресурсов Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова и вычислительного центра Российской академии наук. •ФИ (проект № 12-03-91158-ГФЕН-а).

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. McDermott G., Prince S.M., Freer A.A., et al. // Nature. 1995. 374. P. 517.

2. Papiz M. Z., Prince S. M., Howard T., et al. // J. Mol. Biol. 2003. 326. P. 1523.

3. Cherezov V., Clogston J., Papiz M.Z., Caffrey M. // J. Mol. Biol. 2006. 357. P. 1605.

4. Koepke J., Hu X., Muenke C., et al. // Structure. 1996. 4. P. 581.

5. RoszakA.W., Howard T.D., Southhal J., et al. // Science. 2003. 302. P. 1969.

6. Madigan M. T. // Science. 1984. 225. P. 313.

7. Suzuki H, Hirano Y., Kimura Y., et al. // Biochim. Biophys. Acta. 2007. 1767. P. 1057.

8. Ma F., Kimura Y., Zhao X.-H., et al. // Biophys. J. 2008. 95. P. 3349.

9. Ma F., Kimura Y., Yu L.-J., et al. // FEBS J. 2009. 276. P. 1739.

10. Kimura Y, Hirano Y, Yu L.-J., et al. // J. Biol. Chem. 2008.

283. P. 13867.

11. Kimura Y, Yu L.-J., Hirano Y, et al. // J. Biol. Chem. 2009.

284. P. 93.

12. Григоренко Б.Л., Немухин А.В., Жан Ж.-П., и др. // Вестн. Моск. ун-та. Сер.2. Химия. 2011. 52. С. 99.

13. Nogi T., Fathir I., Kobayashi M., et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. 2007. 97. P. 13561.

14. Phillips J.C., Braun R., Wang W., et al. //J. Comput. Chem. 2005. 26. P. 1781.

15. MacKerell A. D., Bashford D., Bellott M., et al. //J. Phys. Chem. B. 1998. 102. P. 3586.

16. Vanommeslaeghe K., Hatcher E., Acharya C., et al. //J. Comput. Chem. 2010. 31. P. 671.

17. Humphrey W., Dalke A., Schulten K. // J. Molec. Graphics. 1996. 14. Р. 33.

Поступила в редакцию.15.12.12

molecular model of THE LIGHT harvesting complex LH1 of THE bacterial photosYNTHETIc center of Thermochromatium tepidum

M.G. Khrenova, I.v. polyakov, B.L. Grigorenko, A.v. Nemukhin

By using methods of molecular modeling we have constructed the three-dimensional allatom structure of the light harvesting complex LH1 of the bacterial photosynthetic center of Thermochromatium tepidum.

Key words: photosynthesis, light harvesting complexes, three-dimensional all-atom model, molecular dynamics.

сведения об авторах: Хренова Мария Григорьевна - науч. сотр. лаборатории химической кибернетики кафедры физической химии химического факультета МГУ, канд. физ.-матем. наук (wasabiko13@gmail.com); Поляков Игорь Вадимович - мл. науч. сотр. лаборатории химической кибернетики кафедры физической химии химического факультета МГУ; канд. физ.-матем. наук (polyakoviv@gmail.com); Григоренко Белла Людвиговна — ст. науч. сотр. лаборатории химической кибернетики кафедры физической химии химического факультета МГУ, докт. физ.-матем. наук (bell_grig@ yahoo.com); Немухин Александр Владимирович - профессор кафедры физической химии химического факультета МГУ, лаборатория химической кибернетики, докт. хим. наук (anemukhin@yahoo.com).