Галотолерантность аэромонад, выделенных из воды и судака (Sander lucioperca) в дельте Р. Волги

гиена и санитария. 2017; 96

DOI: http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2017-96-3-240-242_

Оригинальная статья

22. Anderson W.B., Dixon D.G., Mayfield C.I. Estimation of endotoxin inhalation from shower and humidifier exposure reveals potential risk to human health. J. Water Health. 2007; 5(4): 553-72.

23. Olin S.S., ed. Exposure to Contaminants in Drinking Water: Estimating Uptake through the Skin and by Inhalation. Washington: CRC Press; 1998.

24. Krasovskiy G.N., Rakhmanin Yu.A., Egorova N.A. Extrapolation of Toxicological Data from Animals to Man [Ekstrapolyatsiya toksikologicheskikh dannykh s zhivotnykh na cheloveka]. Moscow: Meditsina; 2009.

25. Kuchma V.R. Peculiarities of adolescent health. In: Kuchma V.R., Sukhareva L.M., Pavlovich K.E. Teen-ager: Physiological-hygienic and Psychosocial Bases of Learning and Education [Podrostok: Fiziologo-gigienicheskie i psikhosotsial'nye osnovy obucheniya i vospitaniya]. Moscow: MIOO; 2004: 8-39.

26. Pocock S.J., Shaper A.G., Cook D.G., Packham R.F., Lacey R.F., Powell P. et al. British Regional Heart Study: geographic variations in

cardiovascular mortality, and the role of water quality. Br. Med. J. 1980; 280(6226): 1243-9.

27. Kousa A., Moltchanova E., Viik-Kajander M., Rytkonen M., Tuomilehto J., Tarvainen T. et al. Geochemistry of ground water and the incidence of acute myocardial infarction in Finland. J. Epidemiol. Community Health. 2004; 58(2): 136-9.

28. Lomovtsev A.E. The assessment of health state of population in a system of social and hygienic monitoring at the regional level

29. The Newsletter «assessment of the impact of environmental factors on the health of the population of the Tula region»

30. Mashintsov E.A. The Assessment of the impact of environmental factors on the health status of population of anthropogenically loaded territories based on the system approach: Diss. Tula; 2007.

Поступила 01.03.16 Принята к печати 13.05.16

0 ОБУХОВА О.В., ЛАРЦЕВА Л.В., 2017 УДК 614.777-078

Обухова О.В.1, Ларцева Л.В.2

ГАЛОТОЛЕРАНТНОСТЬ АЭРОМОНАД, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ВОДЫ И СУДАКА (SANDER LUCIOPERCA) В ДЕЛЬТЕ р. ВОЛГИ

1 ФГБОУ ВПО Астраханский государственный технический университет, 414056, Астрахань;

2 ФГБОУ ВПО Астраханский государственный университет, 414056, Астрахань

В статье представлены результаты исследования галотолерантности аэромонад, выделенных от 447 экз. судака и 375 проб воды в местах его обитания в дельте р. Волги. Они были субдоминирующими в микробном пейзаже этих биотопов. Существенных различий высеваемости аэромонад в различных районах дельты не выявлено. Их галотолерантность изучали путем посева суточных чистых культур на мясо-пептонный бульон (МПБ) с 3, 7 и 10% содержанием NaCl; инкубировали при 37 °C. Установлено, что вся исследованная микрофлора этого рода имела значительные показатели галотолерантности с превалированием у водных изолятов. Причем в 3 и 7% концентрациях с NaCl они были выше в 2,2раза, а в 10,0% растворе с NaCl водные и рыбные штаммы имели близкие показатели, что свидетельствует об их «морском» происхождении. Среди выделенных аэромонад, обсеменяющих воду и рыбу, наиболее галофильными были штаммы A. hydrophila и A. sobria, а галофобными - A. caviae. Как правило, их водные штаммы имели показатели устойчивости выше в среднем в 1,3 раза, чем рыбные. Эпидемически значимые штаммы A. sobria чаще выделяли из воды, чем от рыб, а A. hydrophila изолировали в воде и рыбе на одном уровне. Галотоле-рантность выделенных аэромонад в гидроэкосистеме дельты р. Волги имела сезонную специфичность и динамичность. Подъем галотолерантности у водных штаммов аэромонад весной и осенью обусловлен природно-климатическими процессами и повышением солености дельтовых вод. Повышенная галофильность рыбных штаммов в эти сезоны определена их миграцией с рыбой, так как судак в эти сезоны мигрирует из морской в речную экосистему.

Ключевые слова: аэромонады; галотолерантность; сезонная динамика; дельта р. Волги; вода; рыба.

Для цитирования: Обухова О.В., Ларцева Л.В. Галотолерантность аэромонад, выделенных из воды и судака (sander lucioperca) в дельте р. Волги. Гигиена и санитария. 2017; 96(3): 240-242. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2017-96-3-240-242

Obukhova O.V.1, Lartseva L.V.2

HALOTOLERANCE AEROMONADS ISOLATED FROM WATER AND PERCH (SANDER LUCIOPERCA) IN THE DELTA OF THE VOLGA RIVER

Astrakhan State Technical University, Astrakhan, 414056, Russian Federation; 2Astrakhan State University, Astrakhan, 414056, Russian Federation

The article presents the results of a study of halotolerance in aeromonads isolatedfrom 447 specimens of perch (Sander lucioperca) and 375 water samples in areas ofits habitat in the delta ofthe Volga River. They were subdominant in the microbial landscape of these biotopes. There were no significant differences inoculation aeromonads found in various parts of the delta. Their halotolerance was studied by means of inoculation of daily pure cultures of meat--peptone broth with 3, 7 and 10% of sodium chloride content and incubation at 37°C. All the studied microflora of this spieces was established to have significant indices of halotolerance with a predominance in water isolates. Whereby in cases of 3.0 and 7.0% NaCl concentrations were 2.2 times more and in the 10.0% NaCl solution with water andfish strains had similar indices, showing them to be of "marine origin". Among isolated aeromonads, shattering the water and fish most halophilic strains of A. hydrophila and A. sobria, and halophobic strains were presented by A. caviae. As a rule, water strains had stability indices above in the average of 1.3 times higher than fish ones. Epidemiologically important strains of A. sobria were isolated from water more frequently than from fish, whereas A. hydrophila was isolated as in water as in fish at the same level. Halotolerance of isolated aeromonads in hydroecosystems ofthe delta of the Volga River had seasonal specificity and dynamics. The gain in halotolerance in aquatic strains of aeromonads in spring and autumn was caused by natural and climatic processes and the elevation in the salinity of delta waters.

Hygiene & Sanitation

_DOI: http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2017-96-3-240-242

Оriginal article

Enhanced halophilic strains offish in these seasons is determined by their migration with fish, because in seasons pike migrates from the sea to the river ecosystem.

Keywords: aeromonads; halotolerance; seasonal dynamics; delta of the Volga river; water; fish.

For citation: Obukhova O.V., Lartseva L.V. Halotolerance aeromonads isolated from water and perch (Sander lucioperca) in the delta of the Volga River. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2017; 96(3): 240-242. (In Russ.). DOI: http://dx.doi.org/ 10.18821/0016-9900-2017-96-3-240-242

For correspondence: Olga V. Obukhova, MD, PhD, associate professor of the Department of Hydrobiology and General

Ecology of The Astrakhan State Technical University. E-mail: obuhowa-ov@yandex.ru

Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Acknowledgement. The study had no sponsorship.

Received: 04 March 2016

Accepted: 13 May 2016

Введение

Микроорганизмы рода Aeromonas - короткие, грамне-гативные, оксидазопозитивные палочки; факультативные анаэробы. Обитатели пресноводных и морских экосистем зарегистрированы как этиологические агенты заболеваний у различных видов рыб и других гидробионтов, а также как возбудители сапронозных инфекций человека, связанных с пищевым и водным фактором [8].

Солевые растворы подавляют протеолитическую активность бактерий, замедляют гнилостные процессы в рыбе даже тогда, когда происходит рост микроорганизмов. Обладая галофильностью, они остаются жизнеспособными до готовой соленой продукции, снижая ее пищевую ценность [1, 2]. Поэтому изначальное присутствие штаммов аэромонад в воде и рыбном сырье, обладающих гало-толерантностью, можно рассматривать как явление риска. В пользу этого свидетельствуют данные о возникновении диарейных инфекций людей в связи с употреблением в пищу недоброкачественных пищевых рыбных продуктов особенно слабого посола [3].

Материал и методы

Сбор материала проведен в дельте р. Волги в 19952010 гг. с апреля по октябрь в районах Главного, Белинского, Гандуринского банков и р. Бузан от 447 экз. свежевы-ловленного судака и 375 проб воды в местах его обитания. У рыб исследовали жабры, кровь, печень, почки, содержимое кишечника и мышцы, из которых выделено 887, а из воды - 110 штаммов аэромонад. Монотипность изолированных культур контролировали путем микроскопи-рования окрашенных по Граму мазков. Идентификацию бактерий осуществляли по определителю Берджи [4] и Ю.М. Пивоварова и В.В. Королика [4, 5]. Их галотолерант-ность изучали путем посева суточных чистых культур на мясо-пептонный бульон (МПБ) с 3, 7 и 10% содержанием хлорида натрия; инкубировали при 37,0 °C. Результаты учитывали через 24 и 48 ч.

Статистическую обработку проводили с использованием стандартов параметрического и непараметрического критериев, а также пакета компьютерного программирования Statistica for Windows. Значимые различия при р < 0,05.

Результаты

Анализ фактического материала показал, что удельный вес аэромонад в воде составил 17,6 ± 0,7%, в рыбе -24,4 ± 0,9%. И в воде, и в рыбе доминировал один вид -A. hydrophila: 26,4 ± 0,8 и 26,7 ± 0,2% проб соответственно.

Для корреспонденции: Обухова Ольга Валентиновна, канд. биол. наук, доц. каф. Гидробиологии и общей экологии ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет», 414056, Астрахань. E-mail: obuhowa-ov@yandex.ru

При этом изоляты Aeromonas sp., A. schubertii и A. caviae несколько чаще выделяли из рыбы, чем из воды. Их водные штаммы составляли 20,0 ± 0,9, 13,6 ± 0,9 и 17,3 ± 1,2%; рыбные - 22,6 ± 0,8, 14,6 ± 1,1 и 17,8 ± 0,9% проб соответственно. Штаммы A. sobria выделяли чаще из воды - 20,0 ± 0,9%, чем от рыбы 18,2 ± 1,1%, а A. hydrophila изолировали в обоих исследуемых биотопах на одном уровне.

Существенных различий высеваемости аэромонад по районам исследований не выявлено. Однако аэромонадный комплекс в воде и рыбе Северного и Среднего Каспия в 1,6 раза превышал аналогичные показатели обсемененности пресноводной гидроэкосистемы дельты р. Волги, что свидетельствует об их «морском» происхождении [6, 7].

Аэромонады, выделенные из воды и рыбы, имели весьма значимые показатели галофильности, которые при 10% концентрации NaCl превышали таковые даже у энте-робактерий [8].

Анализ фактических материалов свидетельствуют о том, что водные штаммы аэромонад в среднем имели более высокие показатели галофильности, чем рыбные: в 3% растворе NaCl в 1,2; в 7% растворе в 1,5; в 10% в 1,3 раза (р < 0,05), рис. 1. Среди выделенных бактерий этого рода наиболее галофильными были штаммы A. hydrophila и A. sobria. Минимальные ее показатели имели водные и рыбные штаммы A. caviae. Однако гало-толерантность выделенных аэромонад в гидроэкосистеме дельты р. Волги имела сезонную специфичность. Результаты, приведенные на рис. 2, свидетельствуют о сезонной гетерогенности галофильного признака у анализируемой группы бактерий. Они показали стимулирующую роль 3% концентрации хлорида натрия в развитии всех изоля-тов аэромонад.

Установлено, что устойчивость аэромонад, выделенных из воды и рыбы, в 3% растворе с NaCl была весьма значимой, снижаясь в обоих биотопах в летний сезон

0 20 40 60 80 100

0 Вода Щ Рыба

Рис. 1. Средние показатели галотолерантности аэромонад, выделенных из воды и рыбы.

гиена и санитария. 2017; 96

DOI: http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2017-96-3-240-242 Оригинальная статья

90-1

80-  .........................

Весна Лето Осень

-— Штаммы, выделенные из рыбы в 3% растворе NaCI

—— Штаммы, выделенные из воды в 3% растворе NaCI

- д— Штаммы, выделенные из рыбы в 7% растворе NaCI

—— Штаммы, выделенные из воды в 7% растворе NaCI

--*-- Штаммы, выделенные из рыбы в 10% растворе NaCI

--•-- Штаммы, выделенные из воды в 10% растворе NaCI

Рис. 2. Сезонная динамика галотолерантности выделенных из воды и рыбы аэромонад.

только в 1,2 раза по сравнению с весенними и осенними показателями. Водные штаммы аэромонад в 7% концентрации соли проявили максимальную устойчивость летом, снижая свои значения весной в 1,3, к осени в 1,1 раза. Их рыбные штаммы весной и осенью были гало-фильнее летних в 1,5 раза. В 10% растворе NaCl рыбные изоляты этих бактерий имели максимальные показатели летом, снижая их значения в весенний и осенний сезоны соответственно в 1,8 и 1,5 раза. Дэдные изоляты, наоборот, были наиболее галофильны осенью, снижая значения выживаемости в 10% растворе NaCl весной и летом в 1,2 раза. Выявленная тенденция, видимо, связана с активным перемешиванием пресных дельтовых и северокаспийских вод особенно осенью. Максимальная галофильность рыбных штаммов, по-видимому, обусловлена миграцией судака из морской акватории в дельту р. Волги в этот сезон.

Обсуждение

Результаты проведенного анализа показали, что микробиоценозе гидроэосистемы дельты р. Волги доминировали бактерии рода Aeromonas, уступая по частоте встречаемости только энтеробактериям [8]. Штаммы A. hydrophila превалировали в исследуемых биотопах над другими видами аэромонад. Ранее в воде и рыбе бактерии этого вида встречались в 1,1 раза реже [9, 10]. Однако они часто регистрировались при кишечных инфекциях у жителей Астраханской области [11].

Среди выделенных аэромонад, обсеменяющих воду и рыбу, наиболее галофильными были штаммы A. hydrophila и A. sobria, а галофобными - A. caviae. Как правило, их водные штаммы имели показатели устойчивости выше в среднем в 1,3 раза (р < 0,05), чем рыбные. Установлено, что 3% раствор с NaCl стимулировал рост и развитие всех штаммов аэромонад. В 7% растворе NaCl водные штаммы этих микроорганизмов были галофильнее в 2,2 раза (р < 0,05), чем рыбные. В 10% растворе с NaCl водные и рыбные штаммы имели близкие показатели, что свидетельствует об их «морском» происхождении и подтверждено источниками литературы [12].

Подъем галотолерантности у водных штаммов аэромонад весной и осенью обусловлен повышением солености вод из-за перемешивания речной и морской воды в дельте и авандельте под воздействием нагонных «морянных» ветров [12, 13]. Повышенная галофильность рыбных штам-

мов весной и осенью определена их миграцией с рыбой, так как судак в эти сезоны мигрирует из морской в речную экосистему.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о значительной галотолерантности аэромонад и об эпидемиологической опасности при употреблении в пищу рыбных продуктов особенно слабого посола.

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Литература

I. Ларцева Л.В. Гигиеническая оценка по микробиологическим показателям рыбы и рыбных продуктов Волго-Каспийского региона: Авто-реф. Дисс. ... д-ра биол. наук. М.; 1998.

3. Шульгин Ю.П., Лаженцева Л.Ю., Шульгина Л.В. Гигиеническая оценка потребления и качества рыбных продуктов. Гигиена и санитария. 2007; 86(2): 39-42.

4. Хоулт Дж., Криг Н., Смит П., Стейли Дж., Уилльямс С. Определитель бактерий Берджи. Пер. с англ. М.: Из-во Мир; 1997.

5. Пивоваров Ю.П., Королик В.В. Санитарно-значимые микроорганизмы. М.: ИКАР; 2000.

6. Ларцева Л.В., Проскурина В.В., Вьюшкова Л.А. Санитарно-эпизо-отическая ситуация Волго-Каспийского региона на рубеже XXI в. Болезни рыб в аквакультуре: обзорная информация. 2002; (1): 51.

7. Лисицкая И.А. Бактериальные сообщества некоторых компонентов экосистемы дельты Волги и Северного Каспия: Автореф. дисс. ... канд. биол. наук. Астрахань; 2008.

8. Обухова О.В., Ларцева Л.В. Галотолерантность энтеробактерий, выделенных из воды и рыбы в дельте реки Волги. Гигиена и санитария. 2015; 94(5): 28-30.

9. Обухова О.В. Бактериоценоз воды и судака (Stizostedion lucioperca) в дельте Волги: Автореф. Дисс. ... канд. биол. наук. М.; 2004.

10. Обухова О.В., Ларцева Л.В., Лисицкая И.А. Роль аэромонад в санитарно-гигиеническом мониторинге гидроэкосистемы Волго-Ка-спийского региона. Гигиена и санитария. 2011; 90(3): 15-7.

II. Бойко А.В. Микробиологические и экологические аспекты паразитизма вибриофлоры и аэромонад: Автореф. Дисс. ... д-ра мед. наук. Челябинск; 1998.

12. Обухова О.В., Ларцева Л.В. Микробиоценоз воды и судака (Sander lucioperca) в дельте р. Волги. СПб.: Проспект Науки; 2015.

13. Катунин Д.Н. Гидроэкологические основы формирования экоси-стемных процессов в Каспийском море и дельте реки Волги. Астрахань: ФГУП КаспНИРХ; 2014.

References

1. Lartseva L.V. Hygienic assessment of microbiological indicators offish and fish products Volga-Caspian region: Diss. Moscow; 1998.

2. Liston J. Microbial hazards of seafood consumption. Food Technol. 1990; 44(12): 58-62.

3. Shul'gin Yu.P., Lazhentseva L.Yu., Shul'gina L.V. Hygienic evaluation of consumption and quality of fish products. Gigiena i sanitariya. 2007; 86

4. Holt J.G., Krieg N.R., Sneath P.H.A., Staley J.T., Williams S.T. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. Baltimore: Williams & Wilkins; 1994.

5. Pivovarov Yu.P., Korolik V.V. Sanitary and Significant Microorganisms [Sani-tarno-znachimye mikroorganizmy]. Moscow: IKAR; 2000.

6. Lartseva L.V., Proskurina V.V., V'yushkova L.A. Sanitary epizootic situation of the Volga-Caspian region at the turn of the XXI century. Bolezni ryb v akvakul'ture: obzornaya informatsiya. 2002;

7. Lisitskaya I.A. Bacterial community of some components of the ecosystem of the delta of the Volga and Northern Caspian: Diss. Astrakhan; 2008.

8. Obukhova O.V., Lartseva L.V. Halotolerance of enterobacteria isolated from water and fish in the Delta of the Volga river. Gigiena i sanitariya. 2015; 94

9. Obukhova O.V. Bacteriocenosis water and walleye

10. Obukhova O.V., Lartseva L.V., Lisitskaya I.A. Role of aeromonads in sanitary and hygienic monitoring of a hydroecosystem of the Volga-Caspian region. Gigiena i sanitariya. 2011; 90

11. Boyko A.V. Microbiological and ecological aspects of parasitism vibrioflor and aero monads: Diss. Chelyabinsk; 1998.

12. Obukhov O.V., Lartseva L.V. Mikrobiotsenoz of water and a pike perch

13. Katunin D.N. Hydro-geological Basis for the Formation of Ecosystem Processes in the Caspian Sea and the Delta of the Volga River [Gidroeko-logicheskie osnovy formirovaniya ekosistemnykh protsessov v Kaspiyskom more i del te reki Volgi]. Astrakhan': FGUP KaspNIRKh; 2014.

Поступила 04.03.16 Принята к печати 13.05.16