ОПТИМИЗИРОВАННАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ИНЪЕКЦИИ РНК

1. Применение РНК и водного инъекционного буфера, содержащего натриевую соль, кальциевую соль и необязательно калиевую соль, для приготовления раствора для инъекции РНК, предназначенного для увеличения переноса РНК и/или трансляции РНК в организм(е)-хозяин(е)
2
2. Применение по п.1, в котором инъекционный буфер содержит соли, имеющие анионы, которые выбраны из группы, включающей хлориды, йодиды, бромиды, гидроксиды, карбонаты, бикарбонаты или сульфаты, прежде всего инъекционный буфер содержит в качестве солей NaCl, CaCl и необязательно KCl.
2
3. Применение по п.2, в котором инъекционный буфер содержит хлорид натрия (NaCl) в концентрации по меньшей мере 50 мМ, хлорид кальция (CaCl) в концентрации по меньшей мере 0,01 мМ и необязательно хлорид калия (KCl) в концентрации по меньшей мере 3 мМ.
2
4. Применение по п.2, в котором инъекционный буфер содержит хлорид натрия (NaCl) в концентрации от 50 до 800 мМ, предпочтительно от 60 до 500 мМ, более предпочтительно от 70 до 250 мМ, наиболее предпочтительно от 60 до 110 мМ; хлорид кальция (CaCl) в концентрации от 0,01 до 100 мМ, предпочтительно от 0,5 до 80 мМ, более предпочтительно от 1,5 до 40 мМ; и необязательно хлорид калия (KCl) в концентрации от 3 до 500 мМ, предпочтительно от 4 до 300 мМ, более предпочтительно от 5 до 200 мМ.
5. Применение по п.1 или 2, где инъекционный буфер дополнительно содержит лактат.
2
4
2
4
6. Применение по п.1 или 2, в котором инъекционный буфер не содержит буферную систему, такую как HEPES, Трис-HCl, Na(K)HPO/Na(K)HPO и т.д.
7. Применение по п.1 или 2, в котором инъекционный буфер не содержит моно-, ди- или полисахариды.
2
8. Применение по п.1 или 2, в котором инъекционный буфер содержит хлорид натрия (NaCl) в концентрации по меньшей мере 50 мМ, хлорид кальция (CaCl) в концентрации по меньшей мере 0,1 мМ, лактат в концентрации по меньшей мере 15 мМ и необязательно хлорид калия (KCl) в концентрации по меньшей мере 3 мМ.
9. Применение по п.5, где инъекционный буфер содержит лактат в концентрации от 15 до 500 мМ, предпочтительно от 15 до 200 мМ, более предпочтительно от 15 до 100 мМ.
10. Применение по п.1, где РНК представляет собой рРНК, тРНК, siPHK или предпочтительно мРНК.
11. Применение по п.1 или 10, в котором РНК представляет собой «оголенную» РНК, в частности оголенную мРНК или РНК, или в частности мРНК, образующую комплекс с поликатионом.
12. Применение по п.11, в котором мРНК образует комплекс с протамином.
13. Применение по п.1, в котором мРНК имеет по меньшей мере одну встречающуюся в естественных условиях или не встречающуюся в естественных условиях модификацию, где модификация выбрана прежде всего из группы, включающей увеличение содержания G/C в кодирующей области мРНК без изменения кодируемой аминокислотной последовательности, интродукцию по меньшей мере одного рибонуклеотидного аналога, удаление дестабилизирующих последовательностей из последовательности дикого типа (WT) или увеличение содержания A/U в области сайта связывания рибосомы.
14. Раствор для инъекции РНК, содержащий РНК и инъекционный буфер, указанный в пп.1-13, предназначенный для увеличения переноса РНК и/или экспрессии мРНК в организм(е)-хозяина(е).
15. Раствор для инъекций по п.14, где инъекционный буфер дополнительно содержит лактат.
16. Раствор для инъекций по п.15, где инъекционный буфер содержит лактат в концентрации по меньшей мере 15 мМ, более предпочтительно от 15 до 100 мМ.
17. Раствор для инъекций по п.14, где РНК представляет собой рРНК, тРНК или предпочтительно мРНК.
18. Раствор для инъекции РНК по п.14 или 17, в котором РНК представляет собой «оголенную» РНК, предпочтительно оголенную мРНК.
19. Способ увеличения переноса РНК и/или трансляции РНК с мРНК в организм(е)-хозяин(е), заключающийся в том, что осуществляют следующие стадии:
а) приготавливают раствор для инъекции РНК по любому из пп.14-18, и
б) вводят раствор для инъекции мРНК, полученный на стадии а), в организм-хозяин.
20. Способ по п.19, в котором организм-хозяин представляет собой млекопитающее, выбранное из группы, включающей мышь, крысу, свинью, корову, лошадь, собаку, кошку, обезьяну и, прежде всего, человека.
21. Способ трансфекции клеток in vitro, заключающийся в том, что вводят инъекционный раствор по одному из пп.14-18 клетки, прежде всего в лабораторные линии клеток или родительские клетки, необязательно с помощью электропорации.