СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЛОИДНЫХ МЕГАКАРИОЦИТОВ И ТРОМБОЦИТОВ

1. Способ получения полиплоидных мегакариоцитов, включающий принудительную экспрессию гена-супрессора апоптоза в мегакариоцитах, не прошедших полиплоидизацию, и культивирование указанных клеток.
2. Способ по п.1, в котором геном-супрессором апоптоза является ген BCL-XL.
3. Способ по п.1, в котором на стадии культивирования ингибируют экспрессию или функцию продукта гена p53.
4. Способ по п.1, в котором на стадии культивирования мегакариоциты, не прошедшие полиплоидизацию, подвергают по меньшей мере одной из следующих обработок (a)-(c):
(a) обработке ингибитором функции актомиозинового комплекса;
(b) обработке ингибитором ROCK; и
(c) обработке ингибитором HDAC.
5. Способ по п.4, в котором ингибитором ROCK является Y27632; ингибитором HDAC является вальпроевая кислота; а ингибитором функции актомиозинового комплекса является блеббистатин.
6. Способ по п.1, в котором стадию культивирования проводят при температуре выше 37°C.
7. Способ по п.1, в котором мегакариоциты, не прошедшие полиплоидизацию, получают путем принудительной экспрессии онкогена и любого из следующих генов (i)-(iii) в клетках на любой стадии дифференцировки от гемопоэтических клеток-предшественников до мегакариоцитов, не прошедших полиплоидизацию:
(i) гена, подавляющего экспрессию гена p16 или гена p19;
(ii) гена, подавляющего экспрессию гена Ink4a/Arf; и
(iii) гена polycomb; и
культивирования и пролиферации полученных клеток.
8. Способ по п.7, в котором в качестве онкогена используют ген c-MYC, а в качестве любого из генов (i)-(iii) используют BMI1.
9. Способ по п.7, в котором гемопоэтические клетки-предшественники получены из клеток, выбранных из группы, состоящей из ИПС клеток, ЭС клеток, гемопоэтических стволовых клеток, полученных из пуповинной крови, костного мозга или периферической крови, и гемопоэтических стволовых клеток.
10. Композиция клеток крови, содержащая полиплоидные мегакариоциты, полученные посредством способа по п.1.
11. Способ получения тромбоцитов, включающий:
- получение полиплоидных мегакариоцитов способом по п.1 и культивирования клеток; и
- сбор тромбоцитов из культуры полиплоидных мегакариоцитов.
12. Способ по п.11, в котором стадию культивирования полиплоидных мегакариоцитов проводят при подавлении экспрессии гена-супрессора апоптоза, который принудительно экспрессирован, или после удаления гена-супрессора апоптоза из клеток.
13. Способ по п.11, в котором стадию культивирования полиплоидных мегакариоцитов проводят в отсутствие сыворотки и/или при отсутствии фидерных клеток.
14. Способ по п.11, в котором стадию культивирования полиплоидных мегакариоцитов проводят в течение от 1 до 15 суток.
15. Способ по п.11, в котором стадию культивирования полиплоидных мегакариоцитов проводят при 37°C.
16. Способ по п.11, в котором на стадии культивирования полиплоидных мегакариоцитов в среду добавляют ингибитор ROCK и/или ингибитор функции актомиозинового комплекса.
17. Способ по п.16, в котором ингибитором ROCK является Y27632, а ингибитором функции актомиозинового комплекса является блеббистатин.
18. Тромбоциты, полученные способом по п.11.
19. Продукт крови, содержащий тромбоциты по п.18.