Полиморфизм гена глутатион-S-трансферазы (тета) t1 (GSTT1) у потомков лиц, облучённых на реке Тече

Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298). Биология. Вып. 2. С. 117-118.

И. А. Подгорбунских, Е. А. Блинова, Е. И. Пастухова

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ГЛУТАТИОН^-ТРАНСФЕРАЗЫ (ТЕТА) ^ ^Ш) У ПОТОМКОВ ЛИЦ, ОБЛУЧЁННЫХ НА РЕКЕ ТЕЧЕ

Изучен полиморфизм гена глутатион^-трансферазы (тета) Т1 (GSTT1) у первого поколения потомков лиц, облучённых на р. Тече, определены частоты аллелей и генотипов. Были обнаружены достоверные отличия по частотам генотипов гена GSTT1 среди лиц мужского и женского пола.

Ключевые слова: генный полиморфизм, гены детоксикации, глутатион^-трансфераза, GSTT1.

Введение. В настоящее время всё больше возрастает интерес к молекулярно-генетическим исследованиям особенностей полиморфизма генов предрасположенности человека к заболеваниям. К таким генам наиболее часто относят гены, контролирующие ферменты системы детоксикации, гены белков клеточных рецепторов и гены, играющие ключевую роль в различных жизненно важных метаболических циклах организма. Полиморфные варианты генов ферментов системы детоксикации, которые приводят к полному отсутствию соответствующего белка либо к появлению ферментов с измененной, как правило, более низкой, чем в норме, активностью, служат причиной выраженной индивидуальной чувствительности организма к лекарственным препаратам, промышленным и сельскохозяйственным ядам и другим веществам [1].

Ген глутатион^-трансферазы (тета) Т1 (GSTT1) располагается в области 22q11.2 [2], занимает около 8 т. п. н. и состоит из 5 экзонов и 4 интронов. Он кодирует аминокислотную последовательность фермента тета-1 глутатион S-трансферазы, который содержится в эритроцитах и участвует в детоксикации многих ксенобиотиков [3]. Полиморфизм этого гена обусловлен наличием двух аллелей — функционально активной (GSTT1* 1) и неактивной (GSTT1*0) (нулевой). Аллель GSTT1*0 соответствует частичной или полной делеции, приводящей к снижению или отсутствию ферментативной активности, в результате чего способность организма избавляться от некоторых вредных соединений значительно снижается. Это приводит к повышению риска развития различных форм рака, а также ишемической болезни сердца. Во всех случаях риск развития заболеваний многократно увеличивается при курении, а также воздействии некоторых химических канцерогенов [4].

Выявлено, что 15-30 % европеоидов, 22-29 % негроидов и 38-58 % монголоидов являются гомозиготными по делетированному аллелю GSTT1 0 [3]. В популяции русского населения ев-

ропейской части России частота этого генотипа в среднем составляет 18 % [5].

Цель. Оценка частоты встречаемости полиморфных аллелей гена GSTT1 у первого поколения потомков лиц, облучённых на р. Тече.

Материалы и методы. Была обследована группа из 464 потомков, чьи родители подверглись хроническому радиационному воздействию в результате сброса радиоактивных отходов в р. Течу в 1950-х гг. В изучаемой выборке было 30 % мужчин и 70 % женщин. Средний возраст составил 47,4±10,6 года (18-60 лет).

Материалом для исследования послужила ДНК, выделенная из периферической крови с помощью метода фенол-хлороформной экстракции. Образцы ДНК хранили при -20 °C. Анализ проводили методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с помощью реагентов компании «Ген-Эксперт» (ФГУП «ГосНИИгенетика») на амплификаторе StepOne Plus Applied Biosystems (США). Смесь для одной пробы объёмом 10 мкл содержала 6,8 мкл деионизованной воды, 2,0 мкл смеси для ПЦР, 0,2 мкл Taq-полимеразы и 1,0 мкл исследуемого образца (~30 нг ДНК/мл). Условия амплификации: первая денатурация 95 °С — 2:00; (94 °С — 0:10, 60 °С — 1:00) — 40 циклов.

Анализ различий между исследуемыми группами проводился по критерию X2 с применением программного обеспечения SigmaPlot 11.0.

Результаты и обсуждение. Как следует из табл. 1, частота гомозиготных носителей нормального гена GSTT1 +/+ составила 14,2 %, гетерозиготных форм GSTT1 +/0 — 69,2 %, гомозиготных носителей делеции GSTT1 0/0 — 16,6 %. Выявленные частоты соответствуют известным литературным данным [3].

Данные, представленные в табл. 2, свидетельствуют о статистически достоверных различиях в распределении частот генотипов гена GSTT1 у мужского и женского пола (P = 0,002). Интересно отметить, что частота гомозигот по делетированному аллелю практически не отлича-

Таблица 1

Частота аллелей и генотипов по гену GSTT1

Частота аллелей, % Частота генотипов

GSTTi*i GSTTi*0 GSTTi +/+ GSTTi +/G GSTTi G/G

Абс. % Абс. % Абс. %

48,8 5i,2 66 i4,2 32i 69,2 77 i6,6

Таблица 2

Частота генотипов по гену GSTT1 в зависимости от пола

Генотип GSTTi +/+ GSTTi +/G GSTTi G/G Всего, абс.

Пол Абс. % Абс. % Абс. %

Мужчины 8 5,8 i09 78,4 22 i5,8 i39

Женщины 58 i7,9 2i2 65,2 55 i6,9 325

Примечание. Различия между полами по частоте генотипов статистически достоверны, Р = 0,002.

Таблица 3

Частота генотипов по гену 08ТТ1 в зависимости от возраста

^^^^^Генотип Возраст, лЄт^^^^ GSTTi +/+ GSTT1 +/G GSTT1 0/0 Всего, абс.

Абс. % Абс. % Абс. %

i8-39 із 13,3 65 66,3 20 20,4 98

40-60 53 14,5 256 70,0 57 15,5 366

Примечание. Различия статистически недостоверны, P = 0,518.

ется у мужчин и женщин. Наибольшие различия наблюдаются по частоте гетерозиготных генотипов и нормальных гомозигот. На данном этапе исследования не представляется возможным объяснить возникновение таких различий.

Данные, представленные в табл. 3, свидетельствуют об отсутствии статистически достоверных различий в распределении частот генотипов гена GSTT1 в группах лиц различного возраста.

Выводы. В результате проведённого исследования впервые были оценены частоты аллелей и генотипов гена глутатион^-трансферазы (тета) Т1 ^БТИ) в популяции потомков первого поколения облучённого на р. Тече населения. Частота аллеля GSTT1*1 составила 48,8 %, а аллеля GSTT1*0 —

51.2 %. Частота встречаемости гомозиготных носителей нормального гена GSTT1 +/+ составила

14.2 %, гетерозиготных форм GSTT1 +/0 — 69,2 %, гомозиготных носителей делеции GSTT1 0/0 — 16,6 %. Были обнаружены достоверные отличия (Р = 0,002) по частотам генотипов гена GSTT1 среди лиц мужского и женского пола. Не обнаружено статистически достоверных различий в распределении частот генотипов гена GSTT1 в группах лиц различного возраста.

Список литературы

1. Баранов, В. С. Геном человека и гены «предрасположенности»: (Введение в предиктивную медицину). СПб. : Интермедика, 2000. 272 с.

2. Webb, G. Chromosomal localization of the gene for the human theta class glutathione transferase (GSTT1) / G. Webb, V. Vaska, M. Coggan, P. Board // Genomics. 1996. Vol. 33, № 1. P. 121-123.

3. Корчагина, Р. П. Полиморфизм генов биотрансформации ксенобиотиков GSTM1, GSTT1, CYP2D6, вероятных маркеров риска онкологических заболеваний, в популяциях коренных этносов и русских Северной Сибири // Вавилов. журн. генетики и селекции. 2011. Т. 15, № 3. С. 448-461.

4. Дюжев, Ж. А. Глютатион^-трансферазы: генетика, биохимия, значение в медицине [Электронный ресурс]. URL: http://ivgenlab.ru/specs/ gst1.html

5. Хрунин, А. В. Полиморфизм генов глута-тион^-трансфераз в популяциях русского населения европейской части России / А. В. Хрунин, Д. В. Хохрин, С. А. Лимборская // Генетика. 2008. Т. 44. С. 1429-1434.