ВЕКТОРЫ НА ОСНОВЕ АДЕНОАССОЦИИРОВАННЫХ ВИРУСОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МУКОПОЛИСАХАРИДОЗОВ

1. Выделенная нуклеотидная последовательность, кодирующая белок идуронат-2-сульфатазу (IDS), представленный в SEQ ID NO: 1, характеризующаяся тем, что указанная нуклеотидная последовательность на 75-90% идентична SEQ ID NO: 2.
2. Выделенная нуклеотидная последовательность по п. 1, где указанная последовательность представляет собой SEQ ID NO: 5.
3. Выделенная нуклеотидная последовательность по п. 1, где указанная последовательность представляет собой SEQ ID NO: 8.
4. Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 75% идентичную SEQ ID NO: 2.
5. Плазмида по п. 4, характеризующаяся тем, что она содержит нуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-3.
6. Плазмида по любому из п. 4 или п. 5, содержащая нуклеотидную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 8.
7. Плазмида по любому из пп. 4-6, которая представляет собой pAAV-CAG-hIDS с номером доступа DSM 29866, представленную в SEQ ID NO:3.
8. Плазмида по любому из пп. 4-6, которая представляет собой вариант 1 pAAV-CAG-ohIDS с номером доступа DSM 29867, представленный в SEQ ID NO: 6.
9. Плазмида по любому из пп. 4-6, которая представляет собой вариант 2 pAAV-CAG-ohIDS с номером доступа DSM 29868, представленный в SEQ ID NO: 9.
10. Рекомбинантный вектор, содержащий нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 75% идентичную SEQ ID NO: 2, предпочтительно содержащий нуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-3.
11. Рекомбинантный вектор по п. 10, где указанный вектор представляет собой вектор на основе аденоассоциированного вируса серотипа 9, AAV9.
12. Рекомбинантный вектор по любому из п. 10 или п. 11, где нуклеотидная последовательность связана с промотором CAG, представленным в SEQ ID NO: 14.
13. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 10-12, который представляет собой AAV9-CAG-hIDS, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2, связанную с промотором CAG из SEQ ID NO: 14.
14. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 10-12, который представляет собой вариант 1 AAV9-CAG-ohIDS, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 5, связанную с промотором CAG из SEQ ID NO: 14.
15. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 10-12, который представляет собой вариант 2 AAV9-CAG-ohIDS, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 8, связанную с промотором CAG из SEQ ID NO: 14.
16. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество нуклеотидной последовательности по любому из пп. 1-3 или плазмиду по любому из пп. 4-9 или рекомбинантный вектор по любому из пп. 10-15.
17. Фармацевтическая композиция по п. 16 для внутривенного или интрацистернального введения.
18. Нуклеотидная последовательность по любому из пп. 1-3, плазмида по любому из пп. 4-9 или рекомбинантный вектор по любому из пп. 10-15 для применения при лечении мукополисахаридозов II типа.
19. Нуклеотидная последовательность по любому из пп. 1-3, плазмида по любому из пп. 4-9 или рекомбинантный вектор по любому из пп. 10-15 для повышения активность идуронат-2-сульфатазы.
20. Способ получения векторов, определенных в любом из пп. 10-15, предусматривающий стадии:
i) получения первого вектора, содержащего последовательность, кодирующую представляющий интерес белок, расположенную между первым концевым повтором AAV и вторым концевым повтором AAV, промотор CAG, функционально связанный с последовательностью, кодирующей представляющий интерес белок; второго вектора, содержащего rep-ген AAV и cap-ген AAV из серотипа 9; и третьего вектора, содержащего ген хелперного функционального элемента аденовируса;
ii) котрансфекции компетентных клеток векторами из стадии i);
iii) культивирования трансфицированных клеток стадии ii); и
iv) очистки векторов экспрессии от культуры из стадии iii).
21. Способ получения плазмиды по любому из пп. 4-9, предусматривающий стадии:
i) эксцизии последовательности, кодирующей представляющий интерес белок из исходной плазмиды, в результате переваривания при помощи Mlul/EcoRI,
ii) клонирования последовательности, кодирующей представляющий интерес белок между двумя сайтами рестрикции базовой плазмиды на основе AAV pAAV-CAG, тем самым получения соответствующей плазмиды, включающей последовательность, кодирующую представляющий интерес белок.
22. Выделенная клетка, содержащая нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 75% идентичную SEQ ID NO: 2, кодирующей идуронат-2-сульфатазу, SEQ ID NO: 1, предпочтительно содержащая нуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-3, на 75-90% идентичную SEQ ID NO: 2.