ДВОЙНОЙ ВЕКТОР ДЛЯ ПОДАВЛЕНИЯ ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА

1. Экспрессионный вектор, содержащий первую последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую корецептор ВИЧ, и вторую последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую белок, который подавляет слияние ВИЧ с клеткой-мишенью или репликацию ВИЧ.
2. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что экспрессионный вектор является вирусным вектором.
3. Экспрессионный вектор по п.2, отличающийся тем, что вирусный вектор является лентивирусным вектором или ретровирусным вектором.
4. Экспрессионный вектор по п.3, отличающийся тем, что лентивирусный вектор является самоинактивирующимся.
5. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что экспрессионный вектор придает сопротивляемость инфекции Х4-тропным и R5-тропным штаммами ВИЧ при экспрессии в клетке хозяина.
6. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что экспрессионный вектор придает сопротивляемость инфекции штаммами ВИЧ, резистентными к высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ), при экспрессии в клетке хозяина.
7. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что дополнительно содержит третью последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую ингибитор вирусного связывания ВИЧ, вирусного слияния ВИЧ с мембраной клетки-мишени или вирусную репликацию ВИЧ.
8. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что ингибитором корецептора ВИЧ является миРНК или кшРНК, обладающая двухцепочечным участком, причем двухцепочечный участок содержит последовательность, существенно идентичную или комплементарную последовательности указанного корецептора ВИЧ.
9. Экспрессионный вектор по п.8, отличающийся тем, что указанным корецептором ВИЧ является CCR5 или CXCR4.
10. Экспрессионный вектор по п.9, отличающийся тем, что кшРНК имеет последовательность SEQ ID №1.
11. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что ингибитор может снижать экспрессию корецептора ВИЧ, когда указанный вектор экспрессируется в клетке хозяина.
12. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что белком, который подавляет слияние ВИЧ с клеткой-мишенью, является белок С46, белок Т20, энфувиртид, СР32М и сифувиртид.
13. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что белком, который подавляет репликацию ВИЧ, является белок из группы, содержащей: TRIM5α человека, TRIM5α макака-резус, химерный TRIM5α, белок слияния TRIM5 человека - циклофилин, циклофилин, Е3 убиквитин, APOBEC3G и антиген стромальных клеток костного мозга 2 (BST-2).
14. Экспрессионный вектор по п.13, отличающийся тем, что химерный TRIM5α содержит аминотерминальную группу от белка TRIM5α человека и карбокситерминальную группу PRYSPRY от белка TRIM5α макака-резус.
15. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что первая и вторая последовательности нуклеиновых кислот функционально связаны с промотором.
16. Экспрессионный вектор по п.15, отличающийся тем, что указанным промотором является промотор РНК-полимеразы II или РНК-полимеразы III.
17. Экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что указанная первая последовательность нуклеиновых кислот функционально связана с первым промотором, а указанная вторая последовательность нуклеиновых кислот функционально связана со вторым промотором.
18. Экспрессионный вектор по п.17, отличающийся тем, что указанные первый и второй промотор являются одним и тем же промотором.
19. Экспрессионный вектор по п.17, отличающийся тем, что указанные первый и второй промотор являются разными промоторами.
20. Экспрессионный вектор по п.19, отличающийся тем, что указанный первый промотор является промотором РНК-полимеразы III, а указанный второй промотор является промотором РНК-полимеразы II.
21. Экспрессионный вектор по п.7, отличающийся тем, что указанная третья последовательность нуклеиновых кислот функционально связана с третьим промотором.
22. Экспрессионный вектор по п.21, отличающийся тем, что указанный третий промотор является таким же, как первый и второй промоторы, или отличается от первого и второго промоторов.
23. Экспрессионный вектор по п.16, отличающийся тем, что указанный промотор РНК-полимеразы III является промотором HI полимеразы III (H1 pol III).
24. Экспрессионный вектор по п.16, отличающийся тем, что указанный промотор РНК-полимеразы II является промотором УбиквитинС полимеразы II (UbiquitinC po1 II).
25. Клетка хозяина, содержащая Экспрессионный вектор по п.1.
26. Клетка хозяина по п.25, отличающаяся тем, что клетка хозяина обладает сопротивляемостью к инфекции Х4-тропным или R5-тропным штаммом ВИЧ.
27. Клетка хозяина по п.26, отличающаяся тем, что клетка хозяина обладает сопротивляемостью к инфекции штаммами ВИЧ, резистентными к ВААРТ.
28. Клетка хозяина по п.25, отличающаяся тем, что клетка хозяина является гематопоэтической клеткой-предшественником/стволовой клеткой, моноцитом, макрофагом, мононуклеарной клеткой периферической крови, CD4+ Т-лимфоцитом, CD8+ Т-лимфоцитом или дендритной клеткой.
29. Экспрессионный вектор, содержащий первую последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую кшРНК, обладающую последовательностью SEQ ID №1, и вторую последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую белок С46, причем указанная первая последовательность нуклеиновых кислот функционально связана с промотором HI полимеразы III, а указанная вторая последовательность нуклеиновых кислот функционально связана с промотором УбиквитинС полимеразы II.
30. Экспрессионный вектор, содержащий первую последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую первую кшРНК, вторую последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую вторую кшРНК, и третью последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую ингибитор вирусного слияния ВИЧ с клеткой-мишенью или репликацию ВИЧ.
31. Экспрессионный вектор по п.30, отличающийся тем, что указанная первая последовательность нуклеиновых кислот функционально связана с первым промотором, указанная вторая последовательность нуклеиновых кислот функционально связана со вторым промотором и указанная третья последовательность нуклеиновых кислот функционально связана с третьим промотором.
32. Экспрессионный вектор по п.30, отличающийся тем, что первая кшРНК воздействует на CCR5, а вторая кшРНК воздействует на CXCR4.
33. Способ лечения пациентов или профилактики ВИЧ-инфекции, заключающийся в трансфекции гематопоэтических клеток экспрессионным вектором по п.1 и пересадке таких трансфектированных гематопоэтических клеток пациенту, причем указанные трансфектированные гематопоэтические клетки обладают сопротивляемостью к инфекции ВИЧ.
34. Способ по п.33, отличающийся тем, что гематопоэтическими клетками являются гематопоэтические клетки-предшественники/стволовые клетки (ГПСК), CD4+ Т-лимфоциты, CD8+ Т-лимфоциты, моноциты/макрофаги или комбинация указанных клеток.
35. Способ по п.34, отличающийся тем, что пересаженные ГПСК производят гранулоциты, моноциты/макрофаги и лимфоциты, устойчивые к ВИЧ-инфекции.
36. Способ по п.33, отличающийся тем, что гематопоэтические клетки являются аутологичными или аллогенными.
37. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанная первая последовательность нуклеиновых кислот кодирует миРНК или кшРНК, обладающую двухцепочечным участком, причем такой двухцепочечный участок содержит последовательность, существенно идентичную или комплементарную последовательности CCR5.
38. Способ по п.37, отличающийся тем, что кшРНК имеет последовательность SEQ ID №1.
39. Способ по п.37, отличающийся тем, что трансфектированные гематопоэтические клетки снижают уровни белка CCR5 в сравнении с нетрансфектированными гематопоэтическими клетками.
40. Способ по п.33, отличающийся тем, что указанная вторая последовательность нуклеиновых кислот кодирует белок из группы, содержащей: TRIM5α человека, TRIM5α макака-резус, химерный TRIM5α, белок слияния TRIM5 человека - циклофилин и белок С46.
41. Способ по п.40, отличающийся тем, что химерный белок TRIM5α содержит аминотерминальную группу от белка TRIM5α человека и карбокситерминальную группу PRYSPRY от белка TRIM5α макака-резус.
42. Способ по п.40, отличающийся тем, что указанные трансфектированные гематопоэтические клетки экспрессируют повышенные уровни указанного белка в сравнении с нетрансфектированными гематопоэтическими клетками.
43. Способ по п.35, отличающийся тем, что указанные гранулоциты, моноциты/макрофаги и лимфоциты резистентны к инфекции R5- и Х4-тропным штаммом ВИЧ.
44. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанные гранулоциты, моноциты/макрофаги и лимфоциты обладают сопротивляемостью к инфекции штаммами ВИЧ, резистентными к ВААРТ.
45. Способ по п.33, отличающийся тем, что пациент ранее не получал ВААРТ.
46. Способ по п.33, отличающийся тем, что пациент проходит курс ВААРТ.
47. Способ по п.33, отличающийся тем, что пациенту не помогает или не помогла ВААРТ.
48. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество экспрессионного вектора по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
49. Применение фармацевтической композиции по п.48 для получения лекарства для лечения пациентов, инфицированных ВИЧ.
50. Способ лечения или профилактики пациентов, заключающийся во введении пациенту фармацевтической композиции по п.48.
51. Способ по п.50, отличающийся тем, что пациент обладает сопротивляемостью к инфекции R5- и Х4-тропным штаммам ВИЧ после введения композиции пациенту.
52. Способ по п.51, отличающийся тем, что пациент обладает сопротивляемостью к инфекции штаммам ВИЧ, резистентными к ВААРТ, после введения композиции пациенту.
53. Способ по п.50, отличающийся тем, что пациент никогда не получал ВААРТ.
54. Способ по п.50, отличающийся тем, что пациент проходит курс ВААРТ.
55. Способ по п.50, отличающийся тем, что пациенту не помогает или не помогла ВААРТ.
56. Способ по п.50, отличающийся тем, что пациент находится в группе риска заражения ВИЧ.
57. Применение вирусного экспрессионного вектора по п.1 для изготовления лекарства для лечения пациента, инфицированного ВИЧ.
58. Способ получения вирусного экспрессионного вектора, который, присутствуя в клетке, может подавлять связывание ВИЧ с клеткой или предотвращать слияние ВИЧ с клеткой или репликацию ВИЧ, заключающийся в:
синтезе кДНК гена, экспрессирующего белок, способный предотвращать слияние ВИЧ с клеткой или репликацию ВИЧ;
клонировании синтезированной кДНК в сайт рестрикции вирусного вектора и
введении экспрессионного элемента, способного подавлять экспрессию корецептора ВИЧ, в сайт рестрикции вирусного вектора.
59. Способ по п.58, отличающийся тем, что кДНК является С46 кДНК или TRIM5α кДНК, а экспрессионным элементом является кшРНК, воздействующая на CCR5.
60. Способ по п.59, отличающийся тем, что кшРНК обладает последовательностью SEQ ID №1.
61. Способ по п.59, отличающийся тем, что вирусным вектором является лентивирусный вектор FG11F.
62. Способ по п.61, отличающийся тем, что С46 кДНК или TRIM5α кДНК клонируют в сайты рестрикции BamHI и EcoRI вектора FG11F.
63. Способ по п.62, отличающийся тем, что кшРНК вставляют между сайтами рестрикции Xbal/Xhol вектора FG11F.