ФЕРМЕНТ ПРОТЕАЗА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ

1. Молекула выделенной нуклеиновой кислоты, содержащая полинуклеотидную последовательность, кодирующую фермент сериновую протеазу, выбранная из группы, состоящей из:
(а) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, обладающий активностью сериновой протеазы и содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:18;
(б) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, обладающий активностью сериновой протеазы и по меньшей мере на 85% идентичный аминокислотной последовательности SEQ ID NO:18;
(в) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей кодирующую последовательность нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:17;
(г) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей кодирующую последовательность полинуклеотидной последовательности, содержащейся в DSM 24410;
(д) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующая последовательность которой отличается от кодирующей последовательности любой молекулы нуклеиновой кислоты от (в) до (г) вследствие вырожденности генетического кода; и
(е) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей полинуклеотидную последовательность, которая гибридизуется в жестких условиях с молекулой нуклеиновой кислоты по SEQ ID NO:17.
2. Молекула выделенной нуклеиновой кислоты по п.1, характеризуемая тем, что указанная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая полинуклеотидную последовательность, гибридизуется в жестких условиях с полинуклеотидной последовательностью, содержащейся в плазмиде pALK3092, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID No:11 в Е. coli RF8758, депонированной под регистрационным номером DSM 24426, или она гибридизуется в жестких условиях с полинуклеотидной последовательностью, содержащейся в плазмиде pALK3093 содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID No:12, депонированной в E. coli RF8759 под регистрационным номером DSM 24427.
3. Молекула выделенной нуклеиновой кислоты по п.1 или 2, где молекула выделенной нуклеиновой кислоты содержит полинуклеотидную последовательность, которая гибридизуется в жестких условиях с молекулой нуклеиновой кислоты по SEQ ID NO:17.
4. Рекомбинантный вектор экспрессии, содержащий нуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-3 функционально связанную с регуляторными последовательностями, способными направлять экспрессию указанного фермента сериновой протеазы в подходящем хозяине.
5. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантный вектор экспрессии по п.4.
6. Клетка-хозяин по п.5, характеризуемая тем, что указанный хозяин представляет собой хозяин-микроорганизм.
7. Клетка-хозяин по п.5 или 6, характеризуемая тем, что указанный хозяин представляет собой нитчатый гриб.
8. Клетка-хозяин по любому из пп. 5-6, характеризуемая тем, что указанный хозяин относится к родам Trichoderma, Aspergillus, Fusarium, Humicola, Chrysosporium, Neurospora, Rhizopus, Penicillium, Myceliophthora и Mortiriella.
9. Клетка-хозяин по п.8, характеризуемая тем, что указанный хозяин представляет собой Trichoderma или Aspergillus.
10. Клетка-хозяин по п.9, характеризуемая тем, что указанный хозяин представляет собой T. reesei.
11. Способ продукции полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, указанный процесс включает этапы культивирования клетки-хозяина согласно любому из пп. 5-10 и выделения полипептида.
12. Способ по п.11, где молекула выделенной нуклеиновой кислоты включается в геном клетки-хозяина и проводится культивирование в многокомпонентной среде, индуцирующей синтез целлюлазы.
13. Рекомбинантный фермент сериновая протеаза, характеризуемый тем, что указанный фермент обладает активностью сериновой протеазы и содержит аминокислотную последовательность, кодируемую молекулой выделенной нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-3.
14. Рекомбинантный фермент сериновая протеаза по п.13, характеризуемый тем, что указанный фермент содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:18.
15. Рекомбинантный фермент сериновая протеаза по любому из пп. 13-14, характеризуемая тем, что указанный фермент получен из депонированного штамма CBS 128533 Malbranchea ALK04122 или из депонированного штамма CBS 128564 Malbranchea ALK04178.
16. Рекомбинантный фермент сериновая протеаза по любому из пп. 13-14, характеризуемый тем, что зрелая форма указанного фермента имеет молекулярную массу от 20 до 35 кДа, предпочтительно от 25 до 33 кДа, наиболее предпочтительно от 28 до 30 кДа.
17. Рекомбинантный фермент сериновая протеаза по любому из пп. 13-14, характеризуемый тем, что указанный фермент имеет температурный оптимум при рН 8,5, времени реакции 30 мин и использовании казеина в качестве субстрата, составляющий от 50°С до 80°С, предпочтительно 70°С.
18. Рекомбинантная сериновая протеаза по любому из пп. 13-14, характеризуемая тем, что указанный фермент имеет рН оптимум при температуре 50°С, времени реакции 30 мин и использовании казеина в качестве субстрата, равный рН 10.
19. Ферментный препарат, который содержит рекомбинантный фермент сериновую протеазу по любому из пп. 13-18.
20. Ферментный препарат по п.19, характеризуемый тем, что указанный препарат содержит другие ферменты, выбранные из группы, состоящей из протеаз, амилаз, целлюлаз, липаз, ксиланаз, маннаназ, кутиназ, пектиназ и оксидаз, с добавлением или без добавления медиатора.
21. Ферментный препарат по любому из пп. 19-20, характеризуемый тем, что указанный препарат содержит один или более дополнительных компонентов, выбранных из группы, состоящей из стабилизаторов, буферов, сурфактантов, структурообразователей, отбеливающих агентов, медиаторов, антикоррозийных агентов, препятствующих повторному осаждению агентов, щелочей, абразивов, оптических отбеливателей, красителей, отдушек, пигментов и консервантов.
22. Ферментный препарат по любому из пп. 19-20, характеризуемый тем, что указанный ферментный препарат находится в форме жидкости, порошка, гранулята или таблеток.
23. Применение рекомбинантного фермента сериновой протеазы по любому из пп. 13-16 или ферментного препарата по любому из пп. 19-22 в моющих средствах для обработки волокон, для обработки белковых материалов, предпочтительно выбранных из шерсти, волос, кожи и шелка, для обработки пищевых продуктов или кормов или для применений, включающих модификацию, разложение или удаление белковой субстанции.
24. Применение рекомбинантного фермента сериновой протеазы по любому из пп. 13-16 или ферментного препарата по любому из пп. 19-22 в качестве моющей добавки, предпочтительно в жидких моющих средствах, в порошкообразных моющих средствах и в таблетированных моющих средствах.
25. Детергентная композиция, характеризуемая тем, что указанная композиция содержит сурфактанты, рекомбинантный фермент сериновую протеазу по любому из пп. 13-16 или ферментный препарат по любому из пп. 19-22, а также дополнительные компоненты, выбранные из группы, состоящей из стабилизаторов, буферов, структурообразователей, отбеливающих агентов, медиаторов, антикоррозийных агентов, препятствующих повторному осаждению агентов, щелочей, абразивов, оптических отбеливателей, красителей, отдушек, пигментов и консервантов.
26. Детергентная композиция по п.25, характеризуемая тем, что указанная композиция содержит другие ферменты, выбранные из группы, состоящей из протеаз, амилаз, целлюлаз, липаз, ксиланаз, маннаназ, кутиназ, пектиназ и оксидаз, с добавлением или без добавления медиатора.