СПОСОБ СЕЛЕКЦИИ АПТАМЕРОВ К ЗАДАННЫМ БЕЛКОВЫМ МИШЕНЯМ НА ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК

1 Способ селекции аптамеров к заданным белковым мишеням на поверхности клеток, включающий проведение раундов селекции, каждый из которых включает стадии: позитивной селекции - инкубирования библиотеки олигонуклеотидов с биологической мишенью, с удалением несвязавшейся ДНК; негативной селекции - инкубирование полученных аптамеров с негативной мишенью, с отделением связавшихся с негативной мишенью последовательностей; амплификацию полученных в ходе селекции аптамеров, с получением ПЦР-продукта, отличающийся тем, что второй и все последующие раунды селекции начинают с негативной селекции аптамеров, в четвертом раунде селекции после проведения стадий негативной и позитивной селекции аптамеров к комплексам аптамер - клетка добавляют избыток моноклональных антител, специфичных к белковой мишени на поверхности клетки, аптамеры, перешедшие в раствор, отделяют и амплифицируют.
2. Способ селекции по п.1, отличающийся тем, что четвертый раунд селекции повторяют во всех последующих раундах.
3. Способ селекции по п.1, отличающийся тем, что его осуществляют с чередованием третьего и четвертого раундов во всех последующих раундах после четвертого.
4. Способ селекции по п.1, отличающийся тем, что в третьем раунде селекции, после инкубирования ПЦР-продукта с негативными мишенями и отделения от несвязавшихся остатков, полученный надосадок инкубируют с плазмой или сывороткой крови, после чего проводят позитивную селекцию с последующей амплификации аптамеров.
5. Способ селекции по п.4, отличающийся тем, что инкубирование образца с плазмой крови можно проводить через один раунд селекции аптамеров.
6. Способ селекции по п.1, отличающийся тем, что в каждом раунде селекции концентрацию добавляемых антител увеличивают.