СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ДОСТАВКИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО БЕЛКА

1. Способ доставки терапевтического белка в центральную нервную систему (ЦНС) пациента, предусматривающий доставку композиции, содержащей нуклеотид, кодирующей мультидоменный терапевтический белок, в печень пациента с образованием депо в печени для продуцирования и секреции мультидоменного терапевтического средства при постоянном уровне в сыворотке крови, составляющем по меньшей мере 1 мкг/мл, в течение нескольких последовательных дней, недель или месяцев после доставки с получением терапевтически эффективного количества мультидоменного терапевтического белка в ЦНС, где мультидоменный терапевтический белок содержит антитело или его антигенсвязывающую часть, которые связывают CD63 или ITGA7 и ферментный домен.
2. Способ по п.1, где терапевтический белок представляет собой лизосомный фермент.
3. Способ по п.2, где лизосомный фермент представляет собой GAA.
4. Способ по любому из пп.1–3, где композицию, содержащую нуклеотид, вводят посредством вирусного вектора.
12
5. Способ по п.4, где вирусный вектор представляет собой вектор на основе AAV, где необязательно композицию, содержащую нуклеотид, вводят в дозе, составляющей по меньшей мере 2×10 вирусных геномов на килограмм (в.г./кг).
6. Способ по любому из пп.1–5, где антитело или его антигенсвязывающий белок содержат одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv).
7.  Способ по любому из пп.1–6, где антитело или его антигенсвязывающий белок содержат аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:2.
8. Способ по любому из пп.1–7, где терапевтический белок содержит гидролазу.
9. Способ по любому из пп.1–8, где терапевтический белок содержит гликозилазу.
10. Способ по любому из пп.1–9, где терапевтический белок содержит гликозидазу.
11. Способ по любому из пп.1–10, где терапевтический белок содержит альфа-глюкозидазу.
12. Способ по любому из пп.1–11, где терапевтический белок содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:13 или ее фрагмент.
13. Способ по любому из пп.1–12, где полинуклеотид содержит последовательность нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO:11.
14. Способ по любому из пп.1–13, где ферментный домен содержит альфа-глюкозидазу, и где уровни гликогена в любой ткани ЦНС у субъекта снижены в течение по меньшей мере девяти месяцев после лечения.
15. Способ по любому из пп.1–14, где у субъекта имеется болезнь Помпе.
16. Способ по любому из пп.1–15, где уровень в сыворотке крови составляет по меньшей мере 2 мкг/мл.
17. Способ по любому из пп.1–16, где антитело или его антигенсвязывающая часть связывают внеклеточный домен CD63 или ITGA7.
18.  Мультидоменный терапевтический белок, содержащий один или более домен(-ов) доставки и ферментный домен, где один из одного или более домена(-ов) доставки связывают рецептор трансферрина человека (hTfR), и где другой из одного или более домена(-ов) доставки содержит антитело или его антигенсвязывающий белок, которые связывают CD63 или ITGA7.
19. Мультидоменный терапевтический белок по п.18, где каждый из одного или более домена(-ов) доставки содержит антигенсвязывающий белок.
20. Мультидоменный терапевтический белок по п.18 или 19, где по меньшей мере один из одного или более домена(-ов) доставки содержит одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv).
21. Мультидоменный терапевтический белок по любому из пп.18–20, где по меньшей мере один из одного или более домена(-ов) доставки содержит полуантитело.
22. Мультидоменный терапевтический белок по п.21, где домен доставки, который связывает hTfR, представляет собой scFv, где полуантитело связывает CD63, где ферментный домен представляет собой GAA, и где GAA конъюгирован с карбокси-концом полуантитела, которое связывает CD63.
23. Мультидоменный терапевтический белок по п.22, где каждый из одного или более домена(-ов) доставки содержит scFv.
24. Мультидоменный терапевтический белок по любому из пп.20–23, где по меньшей мере один scFv слит с Fc.
25. Мультидоменный терапевтический белок по п.24, где Fc предусматривает изотип IgG4 человека дикого типа или его производное.
26. Мультидоменный терапевтический белок по любому из пп.24–25, где GAA конъюгирован с карбокси-концом Fc.
27. Мультидоменный терапевтический белок по п.23, содержащий scFv к hTfR, scFv к hCD63.
28. Мультидоменный терапевтический белок по п.27, где оба из scFv к hTfR и scFv к hCD63 связаны по своим карбокси-концам с одним ферментом GAA.
29. Мультидоменный терапевтический белок по любому из пп.18–28, где домен доставки представляет собой scFv к hTfR, и ферментный домен связан с карбокси-концом VL-домена scFv.
30. Мультидоменный терапевтический белок по п.29, содержащий другой домен доставки, связанный с N-концом VH-доменаscFv к hTfR.
31. Мультидоменный терапевтический белок по п.30, где второй домен доставки представляет собой scFv к hCD63.
32. Мультидоменный терапевтический белок по любому из пп.18–31, где ферментный домен содержит аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO:1.
33. Мультидоменный терапевтический белок, содержащий по меньшей мере два домена доставки и по меньшей мере один ферментный домен, где каждый из двух доменов доставки независимо выбран из группы, состоящей из антитела, полуантитела и scFv, и где по меньшей мере один или более доменов доставки ассоциированы с по меньшей мере одним ферментным доменом, где предпочтительно один или более доменов доставки ковалентно связаны с по меньшей мере одним ферментным доменом.
34. Мультидоменный терапевтический белок по п.33, содержащий структуру, представленную на фигуре 1C, фигуре 1D, фигуре 1E или фигуре 1F.
35. Полинуклеотид, кодирующий мультивалентный терапевтический белок по любому из пп.18–34.
36. Полинуклеотид по п.35, дополнительно содержащий последовательность вирусной нуклеиновой кислоты и последовательность нуклеиновой кислоты, нацеливающуюся на локус.
37. Полинуклеотид по п.35 или 36, дополнительно содержащий последовательность вирусной нуклеиновой кислоты и последовательность нуклеиновой кислоты, нацеливающуюся на локус, где последовательность вирусной нуклеиновой кислоты представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты аденоассоциированного вируса (AAV).
38. Полинуклеотид по любому из пп.35–37, дополнительно содержащий последовательность вирусной нуклеиновой кислоты и последовательность нуклеиновой кислоты, нацеливающуюся на локус, где последовательность вирусной нуклеиновой кислоты представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты аденоассоциированного вируса (AAV), и где последовательность нуклеиновой кислоты AAV содержит последовательность внутреннего концевого повтора и необязательно тканеспецифический регуляторный элемент, такой как специфический в отношении печени промотор или специфический в отношении нейронов промотор.
39. Полинуклеотид по любому из пп.35–38, дополнительно содержащий последовательность вирусной нуклеиновой кислоты и последовательность нуклеиновой кислоты, нацеливающуюся на локус, где последовательность вирусной нуклеиновой кислоты представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты аденоассоциированного вируса (AAV), содержащую последовательность внутреннего концевого повтора, которая содержит SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 или и то и другое, и необязательно тканеспецифический регуляторный элемент, такой как специфический в отношении печени промотор или специфический в отношении нейронов промотор.
40. Полинуклеотид по любому из пп.35–39, дополнительно содержащий тканеспецифический регуляторный элемент, содержащий последовательность, представленную под SEQ ID NO:8 и/или SEQ ID NO:9.
41. Вектор для генной терапии, содержащий полинуклеотид по любому из пп.35–40.
42.  Вектор для генной терапии по п.41, где вектор для генной терапии выбран из группы, состоящей из
вирусного вектора, где необязательно вирусный вектор представляет собой природный вирус, сконструированный вирус или химерный вирус,
полинуклеотида без дополнительных средств, предусматривающего полинуклеотид по любому из пп.35–40,
полинуклеотидного комплекса, где необязательно полинуклеотидный комплекс представляет собой липидную наночастицу, содержащую полинуклеотид по любому из пп.34–39 и липиды, и любой их комбинации.
43.  Вектор для генной терапии по п.41 или 42, где вектор для генной терапии представляет собой вирусный вектор, выбранный из группы, состоящей из ретровируса, аденовируса, вируса простого герпеса, поксвируса, вируса осповакцины, лентивируса или аденоассоциированного вируса.
44. Вектор для генной терапии по п.42 или 43, где вектор для генной терапии представляет собой AAV9, Anc80, химерный AAV2/8 и/или AAV, псевдотипированный по конкретной ткани, например, печени или нейронной ткани.
45. Применение нуклеотида, который кодирует мультидоменный терапевтический белок по любому из пп.18–34, полинуклеотида по любому из пп.35–40 или вектора для генной терапии по любому из пп.41–44 в способе по любому из пп.1–17.