ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ NPP1

1. Выделенный полипептид, содержащий нацеливающий фрагмент и С-концевой каталитический домен NPP1.
2. Полипептид по п.1, где указанный каталитический домен представляет собой пирофосфатазный или фосфодиэстеразный домен NPP1.
3. Полипептид по п.1, где указанный полипептид представляет собой рекомбинантный белок.
4. Полипептид по п.1, где указанный нацеливающий фрагмент химически связан с указанным каталитическим доменом NPP1.
5. Полипептид по п.1, где указанный каталитический домен NPP1 содержит A205-L591 из SEQ ID NO: 1.
6. Полипептид по п.5, где указанный каталитический домен NPP1 содержит P99-L591 из SEQ ID NO: 1.
7. Полипептид по п.5, где указанный каталитический домен NPP1 содержит A205-D925 из SEQ ID NO: 1.
8. Полипептид по п.5, где указанный каталитический домен NPP1 содержит P99-D925 из SEQ ID NO: 1.
9. Полипептид по п.8, где указанный полипептид представляет собой непрерывный фрагмент полипептида с аминокислотной последовательностью P99-D925 из SEQ ID NO: 1 и содержит по меньшей мере аминокислотные остатки A205-L591 из SEQ ID NO: 1.
10. Полипептид по п.5, где указанный нацеливающий фрагмент представляет собой пептид, содержащий по меньшей мере четыре отрицательно заряженных аминокислотных остатка.
11. Полипептид по п.5, где указанный нацеливающий фрагмент представляет собой пептид, содержащий от приблизительно пяти до приблизительно пятнадцати отрицательно заряженных аминокислотных остатков.
12. Полипептид по п.5, где указанные отрицательно заряженные аминокислотные остатки включают по меньшей мере одну аспарагиновую кислоту или глутаминовую кислоту.
13. Полипептид по п.5, где указанные отрицательно заряженные аминокислотные остатки включают по меньшей мере четыре остатка аспарагиновой кислоты.
14. Полипептид по п.5, где указанные отрицательно заряженные аминокислотные остатки включают по меньшей мере четыре остатка глутаминовой кислоты.
15. Полипептид по п.5, где указанные отрицательно заряженные аминокислотные остатки включают восемь последовательных остатков аспарагиновой кислоты.
16. Полипептид по п.5, где указанный нацеливающий фрагмент слит либо с N-концом, либо с С-концом указанного каталитического домена NPP1.
17. Полипептид по п.5, где указанный нацеливающий фрагмент слит с N-концом и С-концом указанного каталитического домена NPP1.
18. Полипептид по п.12, где указанный полипептид дополнительно содержит полипептидный линкер между указанным нацеливающим фрагментом и указанным каталитическим доменом NPP1.
19. Полипептид по п.1, где указанный полипептид дополнительно содержит Fc-участок иммуноглобулина.
20. Полипептид по п.1, где указанный полипептид дополнительно содержит сигнальный пептид.
21. Полипептид по п.1, где указанный полипептид образует гомодимер.
22. Полипептид по п.1, где указанный полипептидный белок представляет собой мономер.
23. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид по п.1.
24. Вектор репликации или экспрессии, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту по п.23.
25. Клетка-хозяин, трансформированная вектором репликации или экспрессии по п.23.
26. Клетка-хозяин по п.25, где указанная клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки СНО, клетки НЕК293 или клетки COS.
27. Клетка-хозяин по п.20, где указанная клетка-хозяин представляет собой опухолевую клетку птицы.
28. Трансгенное животное, продуцирующее полипептид по п.1.
29. Трансгенное животное по п.28, где указанное трансгенное животное представляет собой млекопитающее или птицу.
30. Способ продуцирования указанного полипептида по п.1 клеткой птицы, включающий культивирование клетки птицы, трансфицированной по меньшей мере одним вектором экспрессии, который содержит единицу транскрипции, имеющую нуклеотидную последовательность, кодирующую указанный полипептид по п.1, которая функционально связана с промотором и терминатором транскрипции, и при этом культивируемая клетка птицы продуцирует указанный полипептид.
31. Способ продуцирования указанного полипептида по п.1 в яйце курицы, причем данный способ включает:
(a) обеспечение вектора на основе вируса лейкоза птиц, содержащего последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую указанный полипептид, и промотор, функционально связанный с указанной последовательностью, где указанный промотор управляет экспрессией кодирующей последовательности в яйцеводе курицы;
(b) введение указанного вектора в эмбриональные клетки курицы стадии X;
(c) инкубирование указанных эмбриональных клеток при условиях, благоприятных для выведения живых цыплят;
(d) выращивание зрелых химерных кур из указанных цыплят;
(e) скрещивание указанных химерных кур, либо естественным путем, либо посредством искусственного оплодотворения, с нетрансгенными курами;
(f) выявление трансгенных кур посредством скрининга потомства из этапа (е) на предмет включения кодирующей белок последовательности в зародышевую линию и
(g) скрещивание трансгенного потомства с нетрансгенными курами с получением яиц, содержащих экзогенный белок.
32. Способ лечения расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей полипептид по п.1.
33. Способ по п.32, где указанный субъект представляет собой млекопитающее.
34. Способ по п.33, где указанное млекопитающее представляет собой человека.
35. Способ по п.32, где указанное расстройство представляет собой артериальную кальцификацию, инсулинорезистентность, гипофосфатемический рахит или оссификацию задней продольной связки позвоночника.
36. Способ по п.35, где указанное расстройство представляет собой артериальную кальцификацию.
37. Способ по п.36, где лечение снижает кальцификацию артерии.
38. Способ по п.36, где артериальная кальцификация представляет собой генерализованную артериальную кальцификацию у новорожденных.