Определение бактерицидной активности озоновоздушной смеси на поверхностях в обрабатываемых помещениях

ниманию низкой эффективности профилактических программ, составленных на основе выявления групп риска. Подобные программы, не ведут к снижению числа преждевременных родов в популяции, поэтому требуется поиск специфических маркеров (предикторов) преждевременных родов, оценивать их самостоятельное значение, а также в сочетании с факторами риска. Выявление предикторов должно осуществляться не только в группах беременных с факторами риска, а во всей популяции, что, возможно, позволит снизить количество преждевременных родов.

Выводы. Прогнозирование преждевременных родов, основанное только на выявлении факторов риска малоперспективно и не ведет к снижению числа преждевременных родов. В их основе лежат осложнения со стороны плаценты и плодных оболочек, многоплодная беременность, воздействующие в сочетании с факторами не медицинского характера. Необходим поиск более чувствительных маркеров (предикторов) преждевременных родов с целью составления прогноза и проведения профилактических вмешательств на уровне всей популяции беременных.

Литература

1Мартыненко П.Г. и др. Л ВНМТ .— 2008 - Т.ХУ, №3 -С. 191-192.

2.Сидельникова В.М., Антонов А.Г. Преждевременные роды. Недоношенный ребенок.- ГЭОТАР-Медиа.- 2006.- 448 с.

3.Хромушин В. А. Методология обработки информации медицинских регистров: Монография.- Тула: ТулГУ, 2005.- 120 с.

4Joyce A. Martin et al. Births: Final Data for 2005.//NVSS.-2007 - Vol.56.-№6.

5.Janet Tucker, William McGuire. Epidemiology of preterm birth. //BMJ - 2004.- Vol. 329.- P. 675-678.

бХромушин В.А., Щеглов В.Н. // ВНМТ.- 1998.- N 3-4.-С. 108-110.

7Хромушин В.А. и др. // ВНМТ.- 2008.- №4.- С.174-175.

УДК 661.94

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ОЗОНОВОЗДУШНОЙ СМЕСИ НА ПОВЕРХНОСТЯХ В ОБРАБАТЫВАЕМЫХ ПОМЕЩЕНИЯХ

Э. С. КУРАКИН*

Внедрение в практику медицинской дезинфекции новых технологий и оборудования является одним из важных аспектов проблемы профилактики внутрибольничных инфекций [1].

Множественная устойчивость возбудителей к антибиотикам и дезинфектантам (в том числе и к новым, особенно на основе ПАВ и ЧАС) диктует необходимость создания и использования в ЛПУ средств, которые были бы достаточно эффективны, то есть обладали бы широким спектром антимикробного действия и к которым бы не вырабатывалась устойчивость микрофлоры.

В последние годы в различных странах (США, Германия, Япония и др.) ведутся работы для решения этой проблемы способами, которыми тысячелетиями пользуется природа, а именно: очистка воздуха в помещениях естественными очистителями атмосферного воздуха - озоном и ультрафиолетовым излучением. Но если бактерицидные ультрафиолетовые облучатели различных модификаций прочно вошли в нашу жизнь, то широкое внедрение озона в медицинской практике задерживалось слабым развитием техники получения озона, его индикации и дозирования. Однако последние разработки позволяют ликвидировать этот недостаток и обеспечить внедрение озона в практику [4].

Использование озона для профилактики инфекционных осложнений у групп пациентов с повышенным риском возникновения ГСИ, а также в терапии уже возникших осложнений (свищей, перитонитов, различных воспалительных процессов, нагноения послеоперационных ран, хирургических швов, ожоговых поверхностей и т.д.) позволило бы значительно повысить эффективность мероприятий по борьбе с внутрибольничной инфекцией [2].

Дезинфекция воздуха озоном в сравнении с УФ-лампами обладает тем преимуществом, что последние не обеззараживают «затененные» пространства поскольку лучи распространяются в

*

300053, Тула, ул. Яблочкова, 1а, Тульская областная клиническая больница, тел.: 48-35-56

пространстве по прямой. Озон же проникает с воздухом в самые труднодоступные места и обеззараживание происходит по всему объему обрабатываемого помещения, что существенно повышает качество дезинфекционных мероприятий.

Дезинфекция поверхностей озоном в сравнении с дезинфицирующими растворами. При их использовании (уборка операционных, перевязочных, инфекционных палат, туалетов и т.д.) медицинский персонал имеет определенный риск заразиться, поскольку контактирует при уборке с инфицированным материалом. Кроме того, качество такой уборки будет не очень высоким. Во-первых: из-за присутствия в помещении самого медработника во время уборки, так как он вторично загрязняет как воздух обрабатываемого помещения, так и поверхности (пол, двери, раковину и т.д.). Поэтому при такой «дезинфекции» затем обязательно требуется включать бактерицидную лампу для «доводки» помещения до необходимой степени чистоты. О недостатках УФ-лампы уже сказано выше. Во-вторых: труднодоступные поверхности обработать таким способом просто невозможно (потолки, радиаторы отопительных приборов, медицинское оборудование с поверхностями сложной конфигурации и т.д.). Все эти проблемы решаемы при использовании озона, когда дезинфекция осуществляется без присутствия человека в помещении заполнением озоновоздушной смесью всего пространства помещения. По окончании дезинфекции медицинский работник лишь смывает загрязнения, уже не представляющие для него никакой эпидемиологической опасности.

Дезинфекция белья - огромная, не решаемая практическим здравоохранением проблема. Сбор, сортировка и транспортирование грязного белья до прачечной (где во время стирки белья проводится и его дезинфекция) связано с риском инфицирования медработников, вынужденных контактировать с этим грязным бельем. Предварительная обработка белья в дезинфицирующих растворах в отделениях сильно осложняет дальнейшую доставку (влажного) белья в прачечную и его сортировку. Особенно это касается отделений, где абсолютно все белье должно проходить дезинфекцию (операционные - окровавленное белье, инфекционные отделения, туберкулезные и т.д.). «Сухая дезинфекция белья озоном в шкафах (ларях) для сбора и предварительного его хранения в отделении может решить и эту проблему.

Дезкамерная обработка верхней одежды (шубы, пальто, шапки, обувь) и постельных принадлежностей (матрацы, одеяла, подушки), осуществляемая пароформалиновой смесью, портит вещи и не доступна (по финансовым соображениям) многим мелким ЛПУ (ЦРБ, участковые, сельские больницы). Дезинфекция этих вещей озоном, вырабатываемом из кислорода воздуха без перегревания и увлажнения вещей (то есть без порчи их в процессе дезинфекции) может стать альтернативой этого метода.

Стерилизация инструментов, особенно эндоскопов, также является трудноразрешимой задачей практического здравоохранения. Существующие способы (высокая температура, повышенное давление) приводят к разрушению термолабильных (резиновых, полимерных) составляющих деталей инструментов. Технология холодной стерилизации в растворах требует последующего отмывания простерилизованных изделий от токсичного стерилизующего средства в стерильной дистиллированной воде, что зачастую приводит к вторичному загрязнению уже простерили-зованных инструментов. Недостаточно хорошо отмытые от сте-рилянта инструменты могут вызвать у пациента при их использовании нежелательные реакции. По эти причинам данный метод не нашел широкого применения в практическом здравоохранении. Холодная газовая стерилизация требует длительного процесса дегазации, специальной вентиляции, удаляющей токсичные газы, что является малодоступным методом стерилизации даже для крупных клиник. Использование озона в качестве стерилизующего газа, который распадается с образованием молекулярного кислорода, является экологически чистым способом и доступным с технологической и экономической точки зрения [3].

Цель исследования - установление целесообразности использования озонатора «Тула-1» для обеззараживания помещений ЛПУ в повседневной практике больничной гигиены.

Материалы и методы. В качестве биологических тест-объектов нами использованы культуры кишечной палочки (E.coli) и стафилококка (Staphilococcus aureus), как санитарнопоказательные микроорганизмы, свидетельствующие о степени загрязнения больничных помещений. Обработку поверхностной микрофлоры озоном проводили в камерах объемом 2 м3 и 0,5 м3.

Оценка эффективности дезинфекции поверхностей помещения. При оценке эффективности обеззараживания озоном поверхностной микрофлоры при инициальной контаминации 2х103 - 2х104 микробных тел в 1 мл исследования проводили по следующей методике: суточную рабочую тест-культуру смывали с косяка стерильной водопроводной водой; полученную взвесь микробов фильтровали через стерильный ватно-марлевый фильтр и разводили до концентрации 2х 103 -2х 104 микробных тел в 1 мл; взвесь рабочего штамма в количестве 0,2 мл наносили на дно чашки Петри (вымытой, высушенной, простерилизованной) и равномерно распределяли ее по поверхности стеклянным шпателем; чашки с культурой помещали в термостат и держали там до полного высыхания взвеси (примерно 1,5-2 часа). При таком способе плотность заражения составляла 5-8 м.к./см2. Обработку микрофлоры озоном вели в герметично закрытой камере с момента достижения нужной концентрации озона. Для количественного определения тест-культур контрольные и опытные чашки Петри заливали питательным агаром, остуженным до 45°С, в объеме 15 мл (Эндо - при работе с Е. coli и солевым агаром - при работе с St. aureus) и инкубировали при Т=37°С в течение 24-48 часов. После выдерживания посевов в термостате подсчитывали число выросших колоний на чашках, плотность заражения на 1 см2 поверхности и процент обеззараживания, принимая число бактерий, выросших в контрольных чашках за 100%.

Таблица 1

Эффективность обеззараживания поверхностной микрофлоры при различных режимах озонирования

Концентрация озона мг/м3 Время обработки мин Количество микробных клеток на 1 см2 поверхности Эффективность %

Исходное Опыт

15 5,31 3,5

30 4,13 24,9

3 45 5,50 3,67 33,3

60 2,06 62,5

90 0,96 82,5

15 3,73 6,10

30 2,60 34,5

5 45 3,97 1,74 56,2

60 0,51 87,2

90 0,07 98,2

15 4,13 4,60

30 1,39 67,9

10 45 4,33 0,16 96,3

60 0,00 100,0

15 15 30 45 4,80 3,34 0,14 0,00 30,4 97,1 100,0

При изучении эффективности обеззараживания озоном поверхностной микрофлоры при инициальной контаминации 2 миллиарда микробных тел в 1 мл так, чтобы плотность заражения поверхности составляла 105-106 м.к./см2. Все исследования вели по инструкции по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств №739-68 от 6.05.68 г. (п. IV, пп.1).

Таблица 2

Эффективность обеззараживания поверхностной микрофлоры при различных режимах озонирования

Концентрация Время Число микробных клеток Эффективность

озона обработки на 1 см пове хности %

мг/м3 мин Исходное Опыт

15 4,16 1,7

30 4,11 2,8

3 45 4,23 2,23 47,3

60 1,34 68,3

90 0,76 82,1

15 3,50 4,6

30 3,09 15,8

5 45 3,67 1,24 66,2

60 0,64 82,6

90 0,41 88,8

15 7,81 7,4

30 4,41 47,7

10 45 8,43 1,93 77,1

60 0,07 99,2

90 0,00 100,0

15 3,93 27,4

15 30 5,41 0,25 95,4

45 0,03 99,5

60 0,00 100,0

Для изучения бактерицидной активности озона в присутствии белка во взвесь бактерий добавляли в качестве белковой защиты 40% инактивированной сыворотки крови крупного рога-

того скота. Инактивацию нормальной сыворотки вели 3-кратным прогревом на водяной бане при Т=59-60°С в течение 30 минут. Испытание бактерицидной активности озона в присутствии белка проводили с теми концентрациями, которые были эффективными при обеззараживании поверхностей с опытными культурами без белковой защиты. Сначала были изучены режимы озонирования при инициальной контаминации поверхностей 2x103-104 кл/мл культурами Е. coli и St. aureus. Результаты этих исследований приведены в табл. 1-5.

Таблица 3

Режимы озонирования, обеспечивающие полное подавление поверхностной микрофлоры,

Тест-культура Концентрация озона, мг/м3

3 5 10 15

Кишечная палочка (Е. coli шт. 1257) Стафилококк (St. aureus шт. 906) >90 >90 >90 >90 60 90 45 60

После отработки режимов озонирования была изучена эффективность обеззараживания поверхностной микрофлоры при высоких степенях контаминации поверхностей, эффективность обеззараживания определялась при тех концентрациях озона, которые обеспечивали полное подавление поверхностной микрофлоры при низких степенях контаминации поверхностей: при С=10 мг/м3 и 15 мг/м3.

Таблица 4

Эффективность обеззараживания поверхностной микрофлоры при высокой степени контаминации поверхностей

Изучаемая тест- Концентрация озона Время обработки Количество микробных клеток на 1 см2 Эффективность обеззараживания

культура мг/м3 мин поверхности %

Исходное Опыт

30 5,8х104 67,8

Кишечная 10 45 60 90 1,8х105 4,4х104 4,1 х 103 1,8х103 57.6 97.7 99,0

(Е. coli шт. 1257) 15 30 45 60 90 120 1,7х105 4,1 х 103 3,5х103 3,1х 103 1,0х102 0,00 97,6 97.9 98,2 99.9 100,0

Стафилококк (St. aureus ШТ. 906) 10 15 30 45 60 90 120 1,9х105 1,1х105 9,8х104 9,3х104 8,1х104 1,3х104 1,8х103 42.1 48.4 51.1 57.4 93.2 99,1

15 15 30 45 60 90 120 1,6х105 9,3х104 9,8х103 5,7х103 4,7х103 1,0х103 0,00 41,9 38,8 64,4 70.6 93.7 100,0

Эффективным режимом и Е. coli, и для St. aureus является следующий режим: 120 мин при С=15 мг/м3. Надо отметить, что увеличение плотности заражения поверхностей влияет на эффективность дезинфекции. Увеличение заражения на пять порядков увеличивает время обработки поверхностей озоном более чем в 2 раза. В процессе проведения опытов (после создания в помещении необходимой концентрации озона) измерялась концентрация его в различных точках помещения. К примеру, концентрация озона при наибольшем ее достижении в боксе 26 м3, замеряемая на трех уровнях от пола составляла:

0,5м - 2,5 мг/м3 - X + М = 2,5±0,27;

1,5м - 2,3 мг/м3 - X + М = 2,3±0,2;

2,5м - 2,34 мг/м3 - X + М = 2,34±0,21.

Отклонение величины концентрации между измеряемыми уровнями не превышало 6-8%, что говорит о равномерном распределении озона в обрабатываемом помещении. Замеры производились без применения вентилятора. Перемешивание слоев воздуха велось только за счет потока воздуха, создаваемого генератором озона. Результаты дают нам право говорить о том, что

эффективность дезинфекции поверхностей озоном не зависит от

их местоположения в обрабатываемом помещении.

Далее определяли эффективность действия озона на тест-культуры при наличии 40% белковой защиты. Опыты вели с теми концентрациями озона, которые были эффективны при обеззараживании тест-культур без белковой защиты, т.е. при С=15 мг/м3.

Наличие органических загрязнений снижает эффективность дезинфекции (табл. 5). Для повышения эффективности дезинфек-

ции при тех же концентрациях озона надо перед началом обработки провести влажную уборку с использованием моющих средств. При обработке помещений, загрязненных биологическими выделениями (кровь, моча, слизь, мокрота, испражнения) и представляющих эпидемиологическую опасность для окружающих, время обработки увеличивается на 60 минут, затем проводится влажная уборка с использованием моющих средств.

Таблица 5

Определение эффективности воздействия озона на культуры при наличии 40% белковой защиты

Тест- культура Концентрация озона мг/м3 Время обработки мин Количество микробных клеток на 1 см2 поверхности Эффективность обеззараживания %

Исходное Опыт

Кишечная 30 6,74х105 13,60

палочка 45 4,98х105 36,15

(Е. coli 15 60 7,8х105 1,56х105 80,00

шт. 1257) 90 2,90х104 96,30

120 1,50х104 98,10

180 99,40

Стафилококк 30 8,12х105 10,77

(St. aureus 45 6,51х105 28,60

шт. 906) 15 60 9,1х 105 3,10х105 65,90

90 3,80х104 95,80

120 2,40х104 97,40

180 9,01х103 99,01

При проведении дезинфекции постоянно контролировали уровень концентрации озона в прилегающих помещениях и коридоре с целью определения возможности обеспечения безопасности проведения данных работ. Во всех случаях концентрация озона там была меньше предельно допустимой нормы (0,1 мг/м3) и зафиксирована в пределах от 0,013 до 0,040 мг/м3.

Заключение. Получены результаты, свидетельствующие о значительном антимикробном действии озоновоздушной смеси. Однако эффективно действующие концентрации ее превосходят предельно допустимые для пребывания людей. Поэтому работы по дезинфекции помещений могут проводиться только в отсутствие людей. Результаты свидетельствуют об антимикробном действии озона на санитарно-показательную микрофлору поверхностей (Е. соН). Уровень озона 15 мг/м3 обеспечивает 100% гибель Е. соН шт. 1257 за 120 мин (при микробной нагрузке 105 м. к. на 1 см2). Отмечено влияние плотности заражения поверхностей на эффективность антимикробного действия озона. При плотности заражения поверхностей 103 м.к. на 1 см2 достаточная концентрация озона - 15 мг/м3 при экспозиции 45 мин. При увеличении плотности заражения поверхности до 106 м.к. на 1 см2 время экспозиции возрастает до 120 мин. Наличие органических загрязнений также снижает эффективность дезинфекции. Для повышения эффективности дезинфекции помещений, необходимо увеличивать время их обработки озоновоздушной смесью.

Положительными свойствами озоновоздушной смеси является сочетание дезинфицирующего и дезодорирующего действия, что по достоинству было оценено персоналом и пациентами ожогового и урологического отделений. Целесообразно проведение дальнейших исследований по изучению аппарата «Тула-1» (воздействие на вирус гепатита В, микобактерии туберкулеза и патогенные грибы) с целью расширения области применения прибора в практике работы лечебно-профилактических учреждений. Для обеспечения безопасной работы персонала необходимо проводить герметизацию обрабатываемого помещения. По окончании работ по дезинфекции люди могут входить туда только по истечении времени, достаточного для полного разложения озона или снижения концентрации озона до уровня ПДК.

Литература

1. Концепция профилактики внутрибольничных инфекций/ Под ред. В.И. Покровского - М.: Минздрав России, 1999. - 21 с.

2. Куракин Э.С. // Мат-лы Всерос. науч. конф, посв. 100-летию со дня рожд. В.И. Вашкова. - М., 2002. - С. 141-142.

3. Михальский В.И. // Мат-лы III Рос. науч.-практ. конф. с межд. участием.- Тез. докл. - СПб, 2003.- С. 258-260.

4. Потехин С.Г., Котов А.Н. // Конверсия в машиностроении.- 2000.- № 4.- С. 50-53.

УДК 616.343-005.1-08-003.96-08-018

АДАПТОМЕТРИЧЕСКИЙ ПОДХОД КОРРЕЛЯЦИОННОЙ ОЦЕНКИ КЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ТОЩЕЙ КИШКИ В МОДЕЛИ ХРОНИЧЕСКОГО ЭКСПЕРИМЕНТА УСЛОВИЙ ИМПУЛЬСОВ ЭЛЕКТРОМАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ

О.А. СВИРИДОВА

Моделирование экспериментальных условий, эквивалентных профессиональной деятельности человека в электромагнито-биологии, является важной задачей для изучения реакций организма на субклеточном и клеточном уровнях, которые опосредованно реализуют свои эффекты через критические системы и приводят к изменениям постоянства внутренней среды, а значит, могут быть результатом нарушений сложных координационных и регуляторных взаимоотношений. Из всего многообразия электромагнитных полей наиболее биологически активными являются импульсные электромагнитные поля (иЭМП) [1-3].

Интестинальная система, слизистая оболочка которой является морфологическим субстратом ведущей функции кишечника - пищеварительно-всасывательной, может считаться наиболее уязвимой, так как покрывающий ее эпителий, относится к обновляющейся клеточной популяции, высокий уровень митотической активности которого сочетается с тесным эпителио-соединительнотканным взаимодействием, составляющим основу микрорайонов, обладающими потенциями саморегуляции [4-6]. Ведущая роль в обеспечении постоянства и функционирования системы кишечного эпителия принадлежит популяции тканевых базофилов (ТБ) межкриптальной стромы собственно пластинки слизистой оболочки, которые являются важным звеном реакции адаптации на тканевом уровне, регулируя гомеостаз [7-8].

Таким образом, в механизме гомеостаза отчетливо проявляется свойство адаптации организма к изменениям условий внешней среды, поэтому в работе был использован адаптометрический подход, позволяющий проанализировать перестройку в изменении связей между митотической активностью (МА) кишечного эпителия и общим числом ТБ (ОЧТБ) межкриптальной стромы слизистой оболочки тощей кишки как проявление приспособительной реакции данных клеточных популяций.

Цель исследования — выявление адаптивных возможностей слизистой оболочки тощей кишки в условиях временной динамики параметров иЭМП на основе корреляционного анализа взаимодействия недифференцированных эпителиоцитов крипт и тканевых базофилов окружающей их стромы.

Материалы и методы. Животных на протяжении 5, 7 и 10 месяцев подвергали воздействию редкоповторяющихся широкополосных высокоамплитудных импульсов электромагнитных полей ультракороткой длительности (15^40 нс). Уровни иЭМП подобраны так, чтобы плотности наведенных токов (ПНТ) в теле человека были эквивалентны уровням в теле экспериментальных животных, которые составили 0,37; 0,7; 0,8; 2,7 кА/м2 и периодичностью импульсов в неделю (И/н) 50, 100 и 500 независимо от их дробности. Контрольные группы животных находились в аналогичных условиях содержания, но без воздействия иЭМП.

Экспериментальная возрастная модель для крыс соответствовала от 4 до 14 месяцев, что эквивалентно профессиональному возрасту персонала, испытывающих на прочность к иЭМИ установки для перспективной военной техники от 22 до 45 лет.

Экспериментальных и контрольных наркотизированных крыс умерщвляли декапитацией в одно и то же время суток через

5, 7 и 10 месяцев после воздействия. Фрагмент тощей кишки фиксировали в растворе Беккера и после обработки заливали в парафин. Для анализа клеточных популяций срезы окрашивали основным коричневым по М. Г. Шубичу с доокраской галлоциа-нином по Эйнарсону [9]. На 20 продольно разрезанных криптах определяли МА кишечного эпителия путем подсчета числа делящихся эпителиоцитов [10], и на таком же по протяженности участке в межкриптальной строме определяли ОЧТБ.

Результаты. По результатам корреляционного анализа [11] между МА кишечного эпителия и ОЧТБ у интактных животных, состояние гомеостаза выражалось преобладанием связей слабой и средней силы спустя 5 и 7 месяцев, а к последнему сроку наблюдалась слабая зависимость пролиферации эпителия от ОЧТБ. При оценке хронодинамики величины коэффициента корреляции в условиях воздействия иЭМП с различными параметрами были получены следующие результаты