ПРОИЗВОДНЫЕ ПЕПТИДОВ ДОЛАПРОИН-ДОЛАИЗОЛЕЙИНА
DERIVATIVES OF DOLAPROIN-DOLAIZOLEIN PEPTIDES

Область техники, к которой относится изобретение
В настоящем описании предоставлены пептидные аналоги долапроин-долаизолейина, фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы лечения злокачественных новообразований с использованием таких соединений.
Предшествующий уровень техники
Рак является второй основной причиной смерти людей, уступая только коронарной болезни сердца. В США на долю злокачественных новообразований приходится примерно 1 из 4 смертей. В мировом масштабе, миллионы людей умирают от рака каждый год. Только в Соединенных Штатах, по сообщениям Американского онкологического общества, рак является причиной смерти значительно более полумиллиона людей ежегодно, с выявлением свыше 1,5 миллиона новых случаев заболевания, диагностируемых в год. В то время как число смертных случаев от заболеваний сердца знчительно упало, количество летальных исходов, являющихся результатом злокачественных новообразований, в целом, возрастает. Предсказывают, что в самом начале следующего века рак станет основной причиной смерти, если не будут найдены новые медицинские средства.
В мировом масштабе, некоторые злокачественные новообразования выделяются как основные причины смерти. В частности, карциномы легкого, простаты, молочной железы, толстой кишки, поджелудочной железы и мочевого пузыря представляют основную причину смерти от рака. Лишь с некоторыми небольшими исключениями, метастатический рак является фатальным. Более того, даже для тех пациентов со злокачественными новообразованиями, которые первоначально выживают после их первичного рака, общий опыт показал, что их жизнь резко меняется. Многие пациенты со злокачественными новообразованиями испытывают сильную нервозность, обусловленную осведомленностью о возможности рецидива или неудачного лечения. Многие пациенты со злокачественными новообразованиями испытывают физическую слабость после лечения. Кроме того, многие пациенты со злокачественными новообразованиями испытывают рецидив.
et al
Int. J. Oncol.
et al. Jpn. J. Cancer Res.
et al. J. Antimicrob. Chemther.
et al.
Antimicrob. Agents Chemother.
et al.
Antimicrob. Agents Chemother.
supra
et al.
Anti-Cancer Drug Des.
et al.
Anti-Cancer Drug Des.
supra
et al.
J. Nat. Prod.
Перспективные новые противораковые терапевтические лекарственные средства включают доластатины и синтетические аналоги доластатинов, такие как ауристатины (Патенты США №№ 5,635,483, 5,780,588, 6,323,315 и 6,884,869; Shnyder . (2007) 31:353-360; Otani, M. 2000, 91, 837-844; PCT Межд. публ. №№ WO 01/18032 A3, WO 2005/039492, WO 2006/132670, и WO 2009/095447; Fennell, B.J. 2003, 51, 833-841). Было показано, что доластатины и ауристатины препятствуют динамике микротрубочек, таким образом, нарушая деление клеток (Woyke (2001) 45(12):3580-3584), и имеют противоопухолевую (Патент США № 5,663,149) и противогрибковую активность (Pettit (1998) 42:2961-2965). К сожалению, несмотря на ранний энтузиазм, доластатин 10 показал слабые результаты в качестве средства для монотерапии на фазе II клинических испытаний (Shnyder (2007), ). Некоторые соединения из семейства ауристатинов проявили себя как многобещаюшие клинические кандидаты с улучшенными эффективностью действия и фармакологическими характеристиками по сравнению с доластатинами (Pettit (1995) 10:529-544; Pettit (1998) 13:243-277; Shnyder (2007), ). Были описаны различные синтетические аналоги этого структурного типа (Патент США № 6,569,834; Патент США № 6,124,431; и Pettit (2011) 74:962-968).
Ауристатины имеют несколько свойств, которые делают их привлекательными для фармацевтической разработки. Во-первых, эти соединения являются крайне активными. Во-вторых, их получение является прямым вследствие пептидного остова. В-третьих, они обладают хорошими фармакокинетическим и метаболическим профилями в сравнении с пептидами в целом, или, в частности, с другими классами противораковых лекарственных средств.
Несмотря на значительный прогресс, все еще остается потребность в новых противоопухолевых терапевтических средствах с желательными фармацевтическими свойствами.
КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем описании предоставлены новые аналоги пептида долапроин-долаизолейина. Таким образом, в настоящем описании предоставлены соединения Формулы (I):
в которой
1
2
каждый из R и R представляет собой независимо -H или алкил;
z
X представляет собой -О-, -NR-, -S-, или отсутствует;
z
где R представляет собой -H или алкил;
3
R является группой формулы: ;
15
16
2
3
2
3
в которой каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, -NH, -SH, -N, алкил, алкенил, алкинил, -алкил-OH, -алкил-NH, -алкил-SH, или -алкил-N;
4
R является группой формулы: ;
17
18
2
3
2
2
3
2
в которой каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, -NH, -SH, -N, COH, алкил, алкенил, алкинил, -алкил-OH, -алкил-NH, -алкил-SH, -алкил-N или -алкил-COH
5
втор
R представляет собой -бутил или изобутил;
6
R представляет собой -H или алкил;
7
8
a
b
c
2
каждый из R и R представляет собой независимо -H, алкил, -COR, CONRR, замещенный или незамещенн фенил, или замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо;
a
где R представляет собой -H или алкил;
b
c
каждый из R и R представляет собой независимо H или алкил;
9
9
4
R представляет собой -H или алкил; или R берется вместе с R и атомами, к которым они присоединены, для образования замещенного или незамещенного гетероциклоалкильного кольца;
10
R представляет собой -H или алкил;
11
R представляет собой -H или алкил;
12
R представляет собой -H или алкил;
13
R представляет собой -H или алкил; и
14
R представляет собой -H, -OH или алкил;
15
16
17
18
8
при условии, что, когда X отсутствует и каждый из R, R, R и R представляет собой метил, тогда R не является замещенным или незамещенным фенилом, или замещенным или незамещенным гетероциклическим кольцом;
или его фармацевтически приемлемая соль.
В настоящем описании также предоставлена фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество по меньшей мере одного соединения Формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтически приемлемый эксципиент.
В настоящем описании также предоставлен способ лечения субъекта, страдающего от злокачественного новообразования, или у которого диагностировано злокачественное новообразование, включающий в себя введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества по меньшей мере одного соединения Формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли.
В настоящем описании также предоставлено применение по меньшей мере одного соединения Формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли, для лечения злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в таком лечении.
В настоящем описании также предоставлено применение по меньшей мере одного соединения Формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли, в производстве лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в таком лечении.
В настоящем описании также предоставлен набор, содержащий по меньшей мере одно соединение Формулы (I), или его фармацевтически приемлемую соль, для применения при лечении злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в таком лечении, и инструкции по применению.
В настоящем описании также предоставлено готовое изделие, содержащее по меньшей мере одно соединение Формулы (I), или его фармацевтически приемлемую соль, для применения при лечении злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в таком лечении.
Краткое описание чертежей
ФИГ. 1 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 2, Примера 4 и Примера 6. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 2 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 1, Примера 3 и Примера 5. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 3 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 8, Примера 9 и Примера 12. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 4 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 7, Примера 10 и Примера 11. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 5 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 19, Примера 20 и Примера 21. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 6 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 13, Примера 16, и Примера 22. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 7 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 14, Примера 15 Примера 18, Примера 20 и Примера 23. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 8 показывает данные по полимеризации тубулина in vitro для тубулина, обработанного соединениями Примера 17, Примера 19, Примера 25 и Примера 26. Необработанный (Буфер) тубулин показывает базальный уровень полимеризации тубулина. Стабилизатор тубулина (Паклитаксел) и дестабилизатор тубулина (Контроль) использовали в качестве контролей. Все соединения применяли при конечной концентрации, равной 10 мкМ.
ФИГ. 9 показывает результаты для соединений Примеров 1, 2, 3 и Паклитаксела в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 10 показывает результаты для соединений Примеров 1, 2, 3 и Паклитаксела в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCT15, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 11 показывает результаты для соединений Примеров 1, 2, 3 и Паклитаксела в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 12 показывает результаты для соединений Примеров 4, 5, и 6 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 13 показывает результаты для соединений Примеров 4, 5, и 6 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCT15, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 14 показывает результаты для соединений Примеров 4, 5, и 6 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 15 показывает результаты для соединений Примеров 7, 8, и 9 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 16 показывает результаты для соединений Примеров 7, 8, и 9 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCT15, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 17 показывает результаты для соединений Примеров 7, 8, и 9 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 18 показывает результаты для соединений Примеров 10, 11, и 12 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 19 показывает результаты для соединений Примеров 10, 11, и 12 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCT15, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 20 показывает результаты для соединений Примеров 10, 11, и 12 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 21 показывает результаты для соединений Примеров 13, 14, и 15 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 22 показывает результаты для соединений Примеров 13, 14, и 15 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 23 показывает результаты для соединений Примеров 16, 21, и 22 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 24 показывает результаты для соединений Примеров 16, 21, и 22 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 25 показывает результаты для соединений Примеров 17, 18, и 19 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 26 показывает результаты для соединений Примеров 17, 18, и 19 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 27 показывает результаты для соединений Примеров 20 и 23 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 28 показывает результаты для соединений Примеров 20 и 23 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 29 показывает результаты для соединений Примеров 25 и 26 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток PC3, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
ФИГ. 30 показывает результаты для соединений Примеров 25 и 26 в эксперименте на цитототоксичность in vitro с использованием клеток HCC-1954, как описано в Примере B1. Данные представлены в виде графика зависимости процента выживаемости от концентрации тестируемого соединения, в сравнении с необработанными контрольными лунками.
Подробное описание
Ради краткости, раскрытия публикаций, цитируемых в данном описании, включая патенты, включены в него посредством ссылки.
Как применяю в настоящем описании, термины ʺвключающийʺ, ʺсодержащийʺ и ʺвключающий в себяʺ используют в их открытом, неограничивающем смысле.
Чтобы предоставить более сжатое описание, некоторые количественные выражения, данные в настоящем описании, не уточняют термином ʺприблизительноʺ. Понятно, что употребляется ли термин ʺприблизительноʺ однозначно или нет, каждое количество, данное в настоящем описании, означает отношение к действительному данному значению, и оно также относится к приближению к такому данному значению, которое бы обоснованно подразумевалось на основании обычной квалификации в области, включая эквиваленты и приближения, обусловленные условиями эксперимента и/или измерения для такого данного значения.
1
12
н-
втор-
трет-бутил
н-
трет-
н-
Термин ʺалкилʺ, самостоятельно или как часть еще одного термина, относится к насыщенному C-Cуглеводороду, содержащему нормальные, вторичные, третичные или циклические атомы углерода. Конкретные алкильные группы являются группами, имеющими от 1 до 8 атомов углерода, от 1 до 6 атомов углерода, или от 1 до 4 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются перечисленным: метил (Me), этил (Et), пропил, изопропил, бутил, изобутил, бутил, (tBu), пентил, изопентил, пентил и гексил, изогексил. В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа содержит нормальные, вторичные или третичные атомы углерода и не имеет циклических атомов углерода.
2
12
2
2
2
2
5
7
2
2
2
2
2
т.е.,
2
Термин ʺалкенилʺ, самостоятельно или как часть еще одного термина, относится к C-C углеводороду, содержащему нормальные, вторичные, третичные или циклические атомов углерода по меньшей мере с одним участком ненасыщенности, углерод-углеродной, sp двойной связью. Конкретные алкенильные группы являются группами, имеющими от 2 до 8 атомов углерода, от 2 до 6 атомов углерода, или от 2 до 4 атомов углерода. Примеры включают, но не ограничиваются перечисленным: винил (-CH=CH), аллил (-CHCH=CH), циклопентенил (-CH), и 5-гексенил (-CHCHCHCHCH=CH). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет нормальные, вторичные или третичные атомы углерода и не имеет циклических атомов углерода.
2
12
2
Термин ʺалкинилʺ, самостоятельно или как часть еще одного термина, относится к a C-C углеводороду, содержащему нормальные, вторичные, третичные или циклические атомы углерода по меньшей мер, с одной sp тройной связью. Конкретные алкинильные группы представляют собой группы, имеющие от 2 до 8 атомов углерода, от 2 до 6 атомов углерода, или от 2 до 4 атомов углерода. Примеры включают, но не ограничиваются перечисленным: этинил (-C≡CH) и 2-пропинил (-CHC≡CH). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет нормальные, вторичные, или третичные атомы углерода и не имеет циклических атомов углерода.
Термин ʺалкоксиʺ относится к -O-алкильной группе, где O является местом присоединения к остальной части молекулы, и алкил является таким, как определено выше.
Термин ʺгетероциклоалкилʺ относится к моноциклической, или конденсированной, мостиковой, или спиро полициклической кольцевой структуре, которая является насыщенной или частично насыщенной и имеет от 3 до 12 кольцевых атомов на кольцевую структуру, выбранную из атомов углерода и до трех гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы. Конкретные гетероциклоалкильные группы представляют собой группы, имеющие от 3 до 8 кольцевых атомов или от 5 до 7 кольцевых атомов на кольцевую структуру. Кольцевая структура может необязательно содержать до двух оксо-групп на углеродных или серных членах кольца. Иллюстративные молекулы, в форме правильно связанных фрагментов, включают:
Термин ʺгетероарилʺ относится к моноциклическому, конденсированному бициклическому или конденсированному полициклическому ароматическому гетероциклу (кольцевой структуре, имеющей атомы кольца, выбранные из атомов углерода и до четырех гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы), имеющему от 3 до 12 кольцевых атомов на гетероцикл. Конкретные гетероарильные группы являются группами, имеющими от 3 до 8 кольцевых атомов или от 5 до 7 кольцевых атомов на кольцевую структуру. Иллюстративные примеры гетероарильных групп включают следующие молекулы, в форме правильно связанных фрагментов:
Термины ʺгетероциклʺ, ʺгетероциклическийʺ или ʺгетероциклилʺ, как применяются в настоящем описании, охватывают как ʺгетероциклоалкильныеʺ, так и ʺгетероарильныеʺ фрагменты, как определено выше.
Квалифицированные специалисты в области поймут, что виды гетероциклильных, гетероарильных и гетероциклоалкильных групп, приведенных или иллюстрированных выше, не являются исчерпывающими, и, что могут также быть выбраны дополнительные виды в пределах объема этих определенных терминов.
Термин ʺгалогенʺ представляет хлор, фтор, бром или йод. Термин ʺгалоʺ представляет хлоро, фторо, бромо или йодо.
Термин ʺзамещенныеʺ означает, что обозначенная группа или фрагмент несет один или несколько заместителей. Термин ʺнезамещеннаяʺ означает, что обозначенная группа не несет заместителей. Термин ʺнеобязательно замещеннаяʺ означает, что обозначенная группа является незамещенной или замещенной одним или несколькими заместителями. Там, где термин ʺзамещеннаяʺ применяют для описания структурной системы, подразумевают, что замещение имеет место по любому разрешенному по валентности положению на системе.
цис-
транс-
Любая формула, приведенная в данном описании, предназначена для представления соединений, имеющих структуры, изображаемые посредством структурной формулы, а также некоторые вариаций или форм. В частности, соединения любой формулы, приведенные в данном описании, могут иметь асимметрические центры и, следовательно, существуют в различных энантиомерных формах. Все оптические изомеры и стереоизомеры соединений общей формулы и их смеси, считаются находящимися в объеме формулы. Таким образом, любая формула, приведенная в данном описании, предназначена для представления рацемата, одной или нескольких энантиомерных форм, одной или нескольких диастереомерных форм, одной или нескольких атропизомерных форм, и их смесей. Кроме того, некоторые структуры могут существовать в виде геометрических изомеров (т.е., и изомеров), в виде таутомеров или в виде атропизомеров. Дополнительно, любая формула, приведенная в данном описании, предназначена для отнесения также к любому одному из гидратов, сольватов и аморфных и полиморфных форм таких соединений, и их смесям, даже, если такие формы не приведены явным образом. В некоторых вариантах осуществления, растворитель является водой, а сольваты являются гидратами.
2
3
11
13
14
15
18
17
31
32
35
18
36
125
14
2
3
18
11
2
Подразумевается, что любая формула, данная в настоящем описании, также предназначена для представления немеченых форм, а также форм соединений, меченых изотопами. Меченые изотопами соединения имеют структуры, изображаемые формулами, приведенными в данном описании, за исключением тех случаев, когда один или несколько атомов заменяют на атом, имеющий выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут включаться в соединения, описанные в данном документе, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора, хлора и йода, такие как H, H, C, C, C, N, O, O, P, P, S, F, Cl и I, соответственно. Такие меченые изотопами соединения являются применимыми в исследованиях метаболизма (предпочтительно, с использованием C), исследованиях кинетики реакций (с использованием, например, H или H), в методах обнаружения или визуализации [таких как позитронная эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ)], включающие анализы распределения лекарственных средств или субстратов в тканях или при лечении пациентов радиоактивными веществами. В частности, соединение, меченное F или C, может быть особенно предпочтительным для исследований методами ПЭТ или ОФЭКТ. Дополнительно, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е. H) может обеспечить некоторые терапевтические преимущества, являющиеся результатом более высокой метаболической стабильности, например, увеличенного времени полужизни, или пониженных требований к дозировке. Соединения, меченные изотопами, описанными в данном документе, и их пролекарства обычно могут быть получены посредством выполнения методик, раскрытых на схемах или в примерах, и способов получения, описанных ниже при замене легкодоступного меченного изотопами реагента на реагент, не меченый изотопами.
При ссылке на любую формулу, данную в настоящем описании, выбор конкретного фрагмента из списка возможных видов для установленной переменной не предназначен для определения такого же выбора вида для переменной, появляющейся где-либо еще. Другими словами, там, где переменная появляется более одного раза, выбор вида из обозначенного списка не зависит от выбора видов для одинаковой переменной где-либо в формуле, если не утверждается иначе.
i-j
1-3
1
2
3
Номенклатура ʺCʺ с j > i, когда ее применяют в данном описании к классу заместителей, подразумевает ссылку на варианты осуществления любой из композиций, любых применений или способов, описанных в данном документе, для которых каждый и всякий без исключения элемент из числа углеродных элементов, от i до j, включая i и j, независимо реализуется. К примеру, термин C относится независимо к вариантам осуществления, которые имеют один углеродный элемент (C), вариантам осуществления, которые имеют два углеродных элемента (C), и вариантам осуществления, которые имеют три углеродных элемента (C).
n-m
Термин Cалкил относится к алифатической цепи, либо прямой или разветвленной, с общим числом N углеродных элементов в цепи, которое соответствует n ≤ N ≤ m, с m > n.
Химические наименования, перечисленные в данном описании, были генерированы с использованием программного обеспечения AutoNOM™. Если между химической структурой и наименованием, приведенным для такой структуры, существует несоответствие, структура имеет приоритет.
В соответствии с приведенными выше интерпретируемыми соображениями по поводу отнесений и номенклатуры, следует понимать, что непосредственная ссылка в данном описании на класс подразумевает, что там, где имеется химическая значимость и отсутствуют иные указания, независимая ссылка на варианты осуществления такого класса, и ссылка на каждый и всякий без исключения из возможных вариантов осуществления подклассов из классов из класса относится к нему непосредственно.
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
1-6
В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо -H или алкил, например, Cалкил. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо -H или метил. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо алкил. В некоторых вариантах осуществления, R и R оба представляют собой метил. В некоторых вариантах осуществления, R и R оба представляют собой -H.
1
2
1
2
1
2
z
z
z
z
1-6
В некоторых вариантах осуществления, X отсутствует. В других вариантах осуществления, X представляет собой -О-. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо алкил, и X отсутствует. В некоторых вариантах осуществления, R и R оба представляют собой метил, и X отсутствует. В других вариантах осуществления, R и R оба представляют собой -H, и X представляет собой -О-. В некоторых вариантах осуществления, X представляет собой -NR-, где R представляет собой -H или алкил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В некоторых вариантах осуществления, X равен R и представляет собой алкил, например, Cалкил или метил.
3
15
16
15
16
15
16
15
16
15
16
15
16
2
3
2
3
2
0-6
2
0-6
2
2
0-6
2
0-6
2
2
0-6
2
0-6
3
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой , где каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, -NH, -SH, -N, алкил, алкенил, алкинил, -алкил-OH, -алкил-NH, -алкил-SH, или -алкил-N. В еще других вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо -H, алкил, -(CH)C≡CH, -(CH)CH=CH, -(CH)OH, -(CH)NH, -(CH)SH, или -(CH)N. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, или алкил. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, или метил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -OH и R представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -OH и R представляет собой метил.
3
3
3
R
S
R
S
В некоторых вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В других вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В некоторых вариантах осуществления, сама группа R содержит один или несколько хирадбных центров, и каждый из этих стереоцентров находится независимо в или конфигурации.
4
17
18
4
17
18
17
18
17
18
17
18
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
0-6
2
0-6
2
2
0-6
2
0-6
2
2
0-6
2
0-6
3
2
3
2
2
3
2
3
2
2
2
2
3
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой , где каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, -NH, -SH, -N, -COH, алкил, алкенил, алкинил, -алкил-OH, -алкил-NH, -алкил-SH, -алкил-Nили-алкил-COH. В других вариантах осуществления, R представляет собой , где R представляет собой -H, -OH, -NH, -SH, -N, -COH, алкил, алкенил, алкинил, -алкил-OH, алкил-NH, -алкил-SH, -алкил-Nили-алкил-COH, и R представляет собой -H, -OH, -NH, -SH, -N, -COH, алкенил, алкинил, -алкил-OH, алкил-NH, -алкил-SH, -алкил-Nили-алкил-COH. В еще других вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо -H, алкил, -(CH)C≡CH, -(CH)CH=CH, -(CH)OH, -(CH)NH, -(CH)SH, или (CH)N. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и Rпредставляет собой независимо -H, -OH, -NH, -SH, N, -COH, алкил, -алкил-NH, или -алкил-N. В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и Rпредставляет собой независимо -H, -OH, -NH, -SH, -N, -COH, метил, -CHNH, или -CHN.
4
9
4
9
2
3
2
3
В некоторых вариантах осуществления, R берется вместе с R и атомами, к которым они присоединены, для образования замещенного или незамещенного гетероциклоалкильного кольца. В некоторых вариантах осуществления, R берется вместе с R и атомами, к которым они присоединены, для образования 5-7-членного гетероциклоалкильного кольца, которое может быть незамещенным или замещенным одной или несколькими группами, выбранными из -OH, -NH, -SH, и -N. В некоторых вариантах осуществления, гетероциклоалкильное кольцо является кольцом пирролидина, которое может быть незамещенным или замещенным одной или несколькими группами, выбранными из -OH, -NH, -SH, и -N.
4
4
4
R
S
R
S
В некоторых вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В других вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В некоторых вариантах осуществления, группа R сама содержит один или несколько хиральных центров, и каждый из этих стереоцентров находится независимо в или конфигурации.
5
5
5
5
5
R
S
S
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой втор-бутил. В других вариантах осуществления, R представляет собой изобутил. В некоторых вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В других вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В некоторых вариантах осуществления, хиральный центр в группе R находится в R конфигурации, а в других вариантах осуществления, этот центр находится в конфигурации.
6
6
1-8
1-4
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В других вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, Cалкил, метил, или этил.
7
8
a
b
c
a
b
c
2
1-6
1-6
В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R независимо представляет собой -H, алкил, -COR или -CONRR; где R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; и каждый из R и R представляет собой независимо -H или алкил, например, Cалкил или метил.
7
8
7
7
8
В некоторых вариантах осуществления, каждый из R и R представляет собой независимо замещенный или незамещенный фенил или замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо, где фенил или гетероциклическое кольцо может быть замещено одной или несколькими группами, выбранными из галогена, оксо, гидрокси, амино, алкил и алкокси. В некоторых других вариантах осуществления, R представляет собой незамещенное 3-8-членное гетероциклическое кольцо. В некоторых других вариантах осуществления, R представляет собой замещенное 3-8-членное гетероциклическое кольцо. В некоторых других вариантах осуществления, R представляет собой фенил, который необязательно является замещенным галогеном.
7
7
R
S
В некоторых вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В других вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы.
8
8
R
S
В некоторых вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В других вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы.
7
a
b
c
a
b
c
8
2
1-6
1-6
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -СOR -CONRR; тетразолил или тиазолил, где R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; и каждый из R и R представляет собой независимо -H или алкил, например, Cалкил или метил; и R представляет собой фенил, который необязательно является замещенным галогеном.
9
9
9
9
1-8
1-4
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В других вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H или метил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой метил.
10
10
10
10
1-8
1-4
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В других вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H или метил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой метил.
11
11
11
11
1-8
1-4
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В других вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H или метил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой метил.
12
12
12
12
1-8
1-4
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В других вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H или метил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой метил.
13
13
13
13
1-8
1-4
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В других вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H или метил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой метил.
14
14
14
1-6
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -H. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -OH.
14
14
R
S
В некоторых вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы. В других вариантах осуществления, R находится в стереохимической конфигурации относительно остальной части молекулы.
7
a
a
8
14
7
b
c
b
c
8
14
7
8
14
7
8
14
7
14
8
7
a
a
8
14
7
a
a
8
14
2
1-6
1-6
1-6
2
1-6
1-6
1-6
2
1-6
1-6
В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -СOR, где R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; R представляет собой фенил; и R представляет собой -H. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -СONRR, где каждый из R и R представляет собой независимо -H или алкил, например, Cалкил или метил; R представляет собой фенил; и R представляет собой -H. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой алкил, например, Cалкил или метил; R представляет собой фенил; и R представляет собой -OH. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой метил, R представляет собой фенил, и R представляет собой -OH. В некоторых вариантах осуществления, оба R и R представляют собой -H, и R is пиридинил, пиперидинил, незамещенный фенил, или фенил, замещенный галогеном, например, фтором, хлором или бромом. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -СOR, где R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; и R представляет собой алкил, например, Cалкил, метил, или этил. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой -СOR, где R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; R представляет собой -H или алкил, например, Cалкил или метил; и R представляет собой -OH.
В некоторых вариантах осуществления,
1
2
1-6
каждый из R и R представляет собой независимо -H или Cалкил;
X представляет собой -О- или отсутствует;
3
15
16
1-6
R представляет собой ; где каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, или Cалкил;
4
17
18
2
3
2
1-6
2
1-6
3
1-6
R представляет собой ; где R представляет собой -OH, -NH, -SH, -N, -COH, -Cалкил-NH, алкинил, алкенил, или -Cалкил-N; и R представляет собой -H или Cалкил;
5
R представляет собой втор-бутил;
6
R представляет собой -H;
7
a
b
c
a
b
c
1-6
2
1-6
1-6
R представляет собой -H, Cалкил, -COR, -CONRR, тетразолил или тиазолил; где R представляет собой -H или Cалкил; и каждый из R и R представляет собой -H или Cалкил;
8
1-6
R представляет собой -H, Cалкил, замещенный или незамещенный фенил или замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо;
9
R представляет собой -H;
10
11
12
13
1-6
каждый из R, R, R, и R представляет собой независимо Cалкил; и
14
1-6
R представляет собой -H, Cалкил или -OH.
В некоторых вариантах осуществления,
1
2
каждый из R и R представляет собой независимо -H или метил;
X представляет собой -О- или отсутствует;
3
15
16
R представляет собой , где каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, или метил;
4
17
18
2
3
2
R представляет собой ; где R представляет собой -OH, -NH, -SH, -N, -COH, аминометил, алкинил, алкенил, или азидометил; и R представляет собой -H или метил;
5
R представляет собой втор-бутил;
6
R представляет собой -H;
7
a
b
c
a
b
c
2
R представляет собой -H, метил, -COR, или -CONRR; где R представляет собой -H или метил; и R и R каждый из представляет собой -H или метил;
8
R представляет собой -H, метил, этил, пиридинил, пиперидинил, незамещенный фенил, фенил, замещенный галогеном;
9
R представляет собой -H;
10
11
12
13
каждый из R, R, R, и R представляет собой метил; и
14
R представляет собой -H, метил или -OH.
В некоторых вариантах осуществления,
1
2
1-6
каждый из R и R представляет собой независимо -H или Cалкил;
X отсутствует;
3
15
16
1-6
R представляет собой ; где каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, или Cалкил;
4
17
18
3
R представляет собой ; где R представляет собой -N, и R представляет собой -H или метил;
5
R представляет собой втор-бутил;
6
R представляет собой -H;
7
a
b
c
a
b
c
1-6
2
1-6
1-6
R представляет собой -H, Cалкил, -COR, -CONRR, тетразолил или тиазолил; где R представляет собой -H или Cалкил; и каждый из R и R представляет собой -H или Cалкил;
8
1-6
R представляет собой -H, Cалкил, замещенный или незамещенный фенил или замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо;
9
R представляет собой -H;
10
11
12
13
1-6
каждый из R, R, R, и R представляет собой независимо Cалкил; и
14
1-6
R представляет собой -H, Cалкил или -OH.
В некоторых вариантах осуществления,
1
2
1-6
каждый из R и R независимо -H или Cалкил;
X представляет собой -О-;
3
15
16
1-6
R представляет собой ; где каждый из R и R представляет собой независимо -H, -OH, или Cалкил;
4
17
18
3
R представляет собой ; где каждый из R представляет собой -N, и R представляет собой -H или метил;
5
R представляет собой втор-бутил;
6
R представляет собой -H;
7
a
b
c
a
b
c
1-6
2
1-6
1-6
R представляет собой -H, Cалкил, -COR, -CONRR, тетразолил или тиазолил; где R представляет собой -H или Cалкил; и каждый из R и R представляет собой -H или Cалкил;
8
1-6
R представляет собой -H, Cалкил, замещенный или незамещенный фенил или замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо;
9
R представляет собой -H;
10
11
12
13
1-6
каждый из R, R, R, и R представляет собой независимо Cалкил; и
14
1-6
R представляет собой -H, Cалкил или -OH.
В некоторых вариантах осуществления Формулы (I), где,
1
2
каждый из R и R представляет собой метил;
X отсутствует;
R3 является группой формулы:
15
16
где каждый из R и R представляет собой метил;
4
R является группой формулы: ;
17
18
3
2,
;
где R представляет собой -N, -NH-OH, -SH, и R представляет собой -H или метил
5
R представляет собой втор-бутил;
6
R представляет собой -H;
7
a
b
c
2
R представляет собой -СOR или CONRR,
a
1-6
где R представляет собой -H или Cалкил;
b
c
1-6
каждый из R и R представляет собой независимо H или Cалкил;
8
R представляет собой фенил;
9
R представляет собой -H;
10
11
12
13
каждый из R, R, R, и R представляет собой независимо метил; и
14
R представляет собой -H.
В некоторых вариантах осуществления Формулы (I), где,
1
2
каждый из R и R представляет собой -H;
X представляет собой -O-;
3
R является группой формулы: ,
15
16
где каждый из R и R представляет собой метил;
4
R является группой формулы: ;
17
18
3
где R представляет собой -N, и R представляет собой -H или метил;
5
R представляет собой втор-бутил;
6
R представляет собой -H;
7
a
b
c
2
R представляет собой -СOR или CONRR,
a
1-6
где R представляет собой -H или Cалкил;
b
c
1-6
каждый из R и R представляет собой независимо H или Cалкил;
8
R представляет собой фенил;
9
R представляет собой -H;
10
11
12
13
каждый из R, R, R и R представляет собой независимо метил; и
14
R представляет собой -H.
Следует понимать, что любое определение переменной группы, предоставленной в настоящем описании, может применяться в комбинации с определением любой другой переменной группы, предоставленной в настоящем описании, таким образом, что предусмотрены все возможные комбинации и перестановки переменных групп, предоставленных в настоящем описании там, где имеются химические обоснования.
В некоторых вариантах осуществления, соединения Формулы (I) выбирают из группы, состоящей из следующих соединений:
S
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
R
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
S
R
S
S
S
R
R
()-2-(диметиламино)-Н-(()-3-гидрокси-1-(((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-3-метилбутанамид;
S
R
S
R
S
S
S
R
R
(2,3)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид;
S
S
R
S
S
S
R
R
(2)-2-(диметиламино)-Н-((2)-3-гидрокси-1-(((3,4,5)-3-метокси-1-((2)-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиперидин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-3-метилбутанамид;
S
R
S
R
S
S
S
R
R
(2,3)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-((3,4,5)-3-метокси-1-((2)-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиперидин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
S
R
S
S
S
R
R
()-Н-(()-3-амино-1-(((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамид;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-4-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-4-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
S
R
S
S
S
R
R
()-2-(()-2-(аминоокси)-3-метилбутанамидо)-Н-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-N,3-диметилбутанамид;
R
R
S
R
S
S
S
S
((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-гидроксипропанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланин;
R
R
S
R
S
S
S
S
R
((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-((2,3)-2-(диметиламино)-3-гидроксибутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланин;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
S
Н-
()-2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота;
S
R
S
S
S
R
R
S
S
R
()-Н-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((2,3)-2-(диметиламино)-3-гидроксибутанамидо)-N,3-диметилбутанамид;
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
S
N
()-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-гидроксипропанамидо)-,3-диметилбутанамид;
S
R
R
S
R
S
S
R
S
Н-
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-меркапто-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
R
S
Н-
()-2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-меркапто-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
()-2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота;
S
R
R
S
R
S
S
S
R
S
Н-
()-2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
N
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-гидроксипропанамидо)-,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
R
N
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-((2,3)-2-(диметиламино)-3-гидроксибутанамидо)-,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
S
()-метил 2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат;
S
R
R
S
R
S
S
S
S
S
Н-
()-2-((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
Н-
(2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(фенэтиламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
R
Н-
(2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-(((1,2)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
(2,3)-3-азидо-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((4-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
(2,3)-3-азидо-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((2-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
Н-
(2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(фенэтиламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
R
Н-
(2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-(((1,2)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
(2,3)-3-амино-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((4-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
(2,3)-3-амино-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((2-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
Н-
()-4-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(фенэтиламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
R
Н-
()-4-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-(((1,2)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
()-4-амино-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((4-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
R
S
S
S
R
R
S
Н-
()-4-амино-Н-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((2-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилпент-4-инамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
S
Н-
(2,3)-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
Н-
(2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
трет-бутил
S
Н-
(2,3)-3-азидо-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-(амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
R
R
S
R
S
S
S
S
S
Н-
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-валинат;
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-6-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилгексанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,4)-4-азидо-1-(диметил-L-валил)-метилпирролидинe-2-карбоксамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
S
S
R
S
S
S
R
R
S
()-3-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-4-(((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-3-((()-1-метокси-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-4-оксобутановая кислота;
S
R
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
R
Н-
(2,3)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-(((1,2)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
R
R
S
R
S
S
S
S
N
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-серинат;
R
R
S
R
S
S
S
S
S
Н-
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-изолейцинат;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
S
Н-
(2,3)-3-амино-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
трет-бутил
S
Н-
(2,3)-3-амино-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-(амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамид;
R
R
S
R
S
S
S
Н-
S
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-(()-3-азидо-метил-2-(()-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)пропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
S
метил ((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-метил-2-(()-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
S
(2,3)-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-3-азидо-метил-2-(()-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамид;
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
трет-бутил
Н-
((2,3)-3-азидо-((3,4,5)-1-(()-2-((1,2)-3-((()-1-(амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамид;
трет-бутил
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
S
((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-метил-2-(()-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
R
R
S
R
S
S
S
S
Н-
S
((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-метил-2-(()-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланин;
трет-бутил
R
R
S
R
S
S
S
S
S
Н-
((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
H
Н-
(2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((()-2-фенил-1-(1-тетразол-5-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
2
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
H
Н-
S
(S,3)-3-азидо-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((()-2-фенил-1-(1-тетразол-5-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метил-2-(()-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамид;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
(2,3)-3-азидо-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((()-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
трет-бутил
R
R
S
R
S
S
S
S
S
Н-
((2,3)-3-(()-1-((3,4,5)-4-((2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат;
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
H
Н-
(2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((()-2-фенил-1-(1-тетразол-5-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид; и
S
S
S
Н-
R
S
S
S
R
R
S
Н-
(2,3)-3-амино-2-(()-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-((3,4,5)-3-метокси-1-(()-2-((1,2)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((()-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-метилбутанамид;
и их фармацевтически приемлемые соли.
В настоящем описании также предоставлены фармацевтически приемлемые соли соединений Формулы (I), предпочтительно, тех соединений, что описаны выше и конкретных соединений, иллюстрируемых примерами в настоящем описании, фармацевтические композиции, содержащие такие соли, и способы с использованием таких солей.
et al
J. Pharm. Sci.
Термин "фармацевтически приемлемые солиʺ предназначен для обозначения солей свободной кислоты или основания соединения, представленного в данном описании, которые являются нетоксичными, биологически переносимымы, или иным образом биологически подходящими для введения субъект. См., в целом, S.M. Berge, . ʺPharmaceutical Saltsʺ, 1977, 66, 1-19. Предпочтительные фармацевтически приемлемые соли представляют собой соли, которые являются фармакологически эффективными и подходящими для контакта с тканями субъектов без излишней токсичности, раздражения или аллергической реакции. Соединение, описанное в настоящем документе, может обладать достаточно кислотной группой, достаточно основной группой или обоими типами функциональных групп, и, соответственно, взаимодействовать с рядом неорганических или органических оснований, и неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают кислотно-аддитивные соли, такие как сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, би сульфиты, фосфаты, моногидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, хлориды, бромиды, йодиды, ацетаты, пропионаты, деканоаты, каприлаты, акрилаты, формиаты, изобутираты, капроаты, гептаноаты, пропиолаты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себацаты, фумараты, малеаты, бутин-1,4-диоаты, гексин-1,6-диоаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, гидроксибензоаты, метоксибензоаты, фталаты, сульфонаты, метилсульфонаты, пропилсульфонаты, безилаты, ксилолсульфонаты, нафталин-1-сульфонаты, нафталин-2-сульфонаты, фенилaацетаты, фенилпропионаты, фенилбутираты, цитраты, лактаты, γ-гидроксибутираты, гликоляты, тартраты и манделаты, и соли с неорганическими основаниями, такие как натрий, калий, магний, кальций, алюминий и т.п., или органическим основаниями, такими как метиламин, этиламин, этаноламин, лизин, орнитин и т.п., соли с различными аминокислотами или производными аминокислот, такие как ацетиллейцин и т.п., соли аммония и т.д.
Для терапевтических целей, фармацевтические композиции, содержащие соединения, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов. Фармацевтически приемлемый эксципиент представляет собой вещество, которое является нетоксичным и по иным причинам биологически пригодным для введения субъекту. Такие эксципиенты способствуют составлению лекарственной формы и введению соединения, описанного в данном документе, и являются совместимыми с активным ингредиентом. Примеры фармацевтически приемлемых эксципиентов включают стабилизаторы, смазывающие вещества, поверхностно-активные вещества, разбавители, антиоксиданты, связывающие вещества, окрашивающие средства, эмульгаторы или модификаторы вкуса. В предпочтительных вариантах осуществления, фармацевтические композиции представляют собой стерильные композиции.
например
Фармацевтические композиции, описанные в данном документе, могут быть составлены как растворы, эмульсии, суспензии или дисперсии в подходящих фармацевтических растворителях или носителях, или как пилюли, таблетки, пастлки, суппозитории, порошки для восстановления или капсулы наряду с твердыми носителями в соответствии с общепринятыми способами, известными в данной области для получения различных дозированных форм. Для местных применений, соединения, описанные в данном документе, предпочтительно составляют как кремы или мази или аналогичную несущую среду, подходящую для местного введения. Фармацевтические композиции и соединения, описанные в данном документе, могут вводиться в способах изобретения посредством подходящего пути доставки, , перорального, назального, парентерального, ректального, местного, глазного или посредством ингаляции.
Термины "лечить" или "лечение", как применяются в настоящем описании, предназначены для обозначения введения соединения, описанного в данном документе, субъекту с целью создания терапевтического благоприятного воздействия. Лечение включает обращение, улучшение состояния, облегчение протекания, ингибирования развития, или снижение тяжести заболевания, расстройства или состояния, или одного или нескольких симптомов злокачественного новообразования. Термин "субъект" относится к пациенту, являющемуся млекопитающим, нуждающемуся в таком лечении, такому как человек.
например
например
В способах лечения, предоставленных в настоящем описании, ʺэффективное количествоʺ означает количество или дозу, достаточные, чтобы, в целом, приводить к желательному терапевтическому благоприятному воздействию у субъектов, нуждающихся в таком лечении. Эффективные количества или дозы соединений, описанных в данном документе, могут быть установлены рутинными методами, такими как моделирование, наращивание дозы или клинические испытания, с учетом рутинных факторов, , режима или пути введения или доставки лекарственного средства, фармакокинетики средства, тяжести и протекания инфекции, статуса здоровья субъекта, состояния и массы тела, и заключения лечащего врача. Примерная доза находится в интервале от приблизительно 1 мкг до 2 мг активного соединения на килограмм массы тела субъекта в день, предпочтительно приблизительно от 0,05 до 100 мг/кг/день, или приблизительно от 1 до 35 мг/кг/день, или приблизительно от 0,1 до 10 мг/кг/день. Общая дозировка может даваться в одиночных или разделенных дозированных единицах (, BID, TID, QID).
Соединения, описанные в настоящем документе, могут применяться в фармацевтических композициях или способах в комбинации с дополнительными активными ингредиентами при лечении злокачественного новообразования. Дополнительные активные ингредиенты могут вводиться отдельно от соединения, описанного в данном документе, или могут быть включены вместе с соединением, описанным здесь, в фармацевтическую композицию, предоставленную в настоящем описании. Например, дополнительные активные ингредиенты представляют собой такие ингредиенты, для которых эффективность при лечении злокачественного новообразования являются известной или обнаруженной, включающие такие активные средства против еще одной мишени, ассоциированной с раком, такие как, но не ограниченные приведенными, Велкэйд, Ритуксимаб, Метотрексат, Герцептин, Винкристин, Преднизон, Иринотекан или т.п., или их комбинация. Такая комбинация может служить для увеличения эффективности действия, снижению одного или нескольких побочных эффектов, или снижению требуемой дозы раскрытого соединения.
Соединения Формулы (I) будут теперь раскрыты посредством ссылки на иллюстративные схемы синтеза для их общего получения ниже и конкретные примеры, которые следуют ниже. Специалисты в области поймут, что для получения различных соединений данного описания, исходные вещества могут быть выбраны подходящим образом, так, чтобы, окончательно, введение желательных заместителей выполнялось по Схеме реакции с защитой или без защиты в соответствии с выходом желательного продукта. Альтернативно, может быть необходимым или желательным использовать, вместо окончательного желательного заместителя, подходящую группу, которая может вводиться по Схеме реакции и заменяться, соответственно, желательным заместителем. Дополнительно, специалист в области сможет понять, что защитные группы могут применяться для защиты некоторых функциональных групп (амино, карбокси, или групп боковых цепей) от условий реакции, и, что такие группы удаляются в стандартных условиях соответствующим образом. Каждую из реакций, изображенных на Схеме A предпочтительно проводят при температуре в интервале от приблизительно комнатной температуры до температуры кипячения с обратным холодильником используемого органического растворителя. Если не установлено иначе, переменные являются такими, как определено выше при ссылке на Формулу (I).
Схема A
et al.
J. Org. Chem.
трет-бутилового
O
N,N,Nʹ,Nʹ-
O
Со ссылкой на Схему A, получение соединения Формулы (I) начинается с защищенной кислотной формы долаизолейина (Dil), обозначенной (A) (см. Pettit (1994) 59:1796-1800). Соединение (A) изображают с защитной группой сложного эфира, но специалист в данной области можеи выбрать подходящую замену. На сочетание азот-защищенного производного валина или изолейцина (B), где PG является подходящей аминозащитной группой, такой как Boc (т-бутоксикарбонильная) или флуоренилметилоксикарбонильная (Fmoc) группа, оказывают воздействие стандартные условия образования пептидной связи. Например, реакции проводят в присутствии диэтилцианофосфоната (DEPC), PyBrOP, PyBOP, BOP, диизопропилкарбодиимида (DIC), дициклогексилкарбодиимида (DCC), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (EDCI), 1-гидроксибензотриазола (HOBt), 1-гидрокси-7-аза-бензотриазола (HOAt), HBTU (-бензотриазол-1-ил-тетраметилурония гксафторфосфата), HATU (-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гксафторфосфата), и т.п. или их комбинаций. Реакции обычно проводят в присутствии основания третичного амина, такого как диизопропилэтиламин. Подходящие растворители включают дихлорметан, N,N-диметилформамид (ДМФА), диметилсульфоксид (ДМСО), этилацетат и т.п. Аминозащитную группу на результирующем дипептиде (C) удаляют посредством снятия защитной группы в подходящих условиях. Например, где PG является Boc-группой, соединение (C) обрабатывают трифторуксусной кислотой с образованием свободного амина (D). Там, где PG является Fmoc-группой, соединение (C) обрабатывают пиперидином или диэтиламином с получением соединения (D). Соединение (D) затем сочетают с производным от аминокислоты (E), в защищенной форме, при необходимости, в условиях образования пептидной связи, как описано выше, с генерацией трипептида (F). Обработка кислотой удаляет карбоксизащитную группу с получением свободной кислоты (G).
Схема B
et al.
J. Org. Chem.
Со ссылкой на Схему B, амино-защищенный долапроин (Dap) обозначенный как (H) (см. Pettit (1994) 59:6287-6295) сочетают с амином (J) (который получают с использованием способов, известных специалистам в области) в условиях образования пептидной связи, как описано выше. Полученный дипептид (K) подвергается удалению защитной группы, как обсуждалось для Схемы A, с получением соединения (L).
Схема C
Со ссылкой на Схему C, кислоту (G) и амин (L) сочетают в условиях образования пептидной связи, как обсуждалось выше, с получением соединения Формулы (I). В тех случаях, где результатом реакции является защищенная форма Формулы (I), используют подходящие условия снятия защитной группы для получения целевого соединения.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры предлагаются для иллюстрации, но не для ограничения композиций, применений и способов, предоставленных в настоящем описании. Соединения получают с использованием общих способов, описанных выше.
Следующие химические сокращения применяют для всех Примеров: Dov (долавалин); Abu (2-аминомасляная кислота); Dil (долаизолейин); Dpr (2,3-диаминопропионовая кислота); Su (сукцинимидинил); Dab (2,4-диаминомасляная кислота); Dap (долапроин); Bzl (бензил); и Tr (тритил).
Значения времен удерживания при ЖХМС определяли на колонке Aquity UPLC BeH C8 1,7 мкм 2,1×50 мм, 40°C, с использованием одного из следущих методов (как указано):
Метод А: 0-0,50 мин: изократический режим 80 воды/10 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде; 0,50-3,50 мин: линейный градиент от 80 воды/10 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде до 0 воды/90 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде; 3,50-3,99 мин изократический режим 0 воды/90 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде; 3,99-4,00 мин линейный градиент от 0 воды/90 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде до 80 воды/10 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде.
Метод В: 0-0,50 мин: изократический режим 85 воды/5 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде; 0,50-1,60 мин: линейный градиент от 85 воды/5 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде до 0 воды/98 ацетонитрила/2 1% муравьиной кислоты в воде; 1,60-1,80 мин изократический режим 0 воды/98 ацетонитрила/2 1% муравьиной кислоты в воде; 1,80-1,90 мин линейный градиент от 0 воды/98 ацетонитрила/2 1% муравьиной кислоты в воде до 85 воды/5 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде; 1,90-2,00 мин изократический режим 85 воды/5 ацетонитрила/10 1% муравьиной кислоты в воде.
Пример 1
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
2
2
2
2
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (8,00 г, 17,1 ммоль) HCl соли и H-Phe-OMe (4,42 г, 20,5 ммоль) в СНCl (20 мл) добавляли диизопропилэтиламин (DIEA; 9,13 мл, 51,3 ммоль), с последующим добавлением диэтилпирокарбоната (DEPC; 5,15 мл, 34,2 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (ЖХМС) показал завершение реакции. Boc-Dap-Phe-OMe выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 2% до 10% MeOH в СНClв качестве элюента. Всего получали 7,45 г Boc-Dap-Phe-OMe (16,61 ммоль, 97% выход).
2
2
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-Phe-OMe (4,67 г, 10,4 ммоль) в СНCl(10 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (ТФУ; 10 мл). Через 10 ч анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,52 г H-Dap-Phe-OMe (6,23 ммоль, 59%) в виде соли ТФУ.
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Ser(Bzl)-OH (2,82 г, 6,76 ммоль) и H-Dil-OtBu гидрохлорида (2,00 г, 6,76 ммоль) в этилацетате (EtOAc; 15 мл) добавляли DIEA (2,17 мл, 12,2 ммоль). Раствор охлаждали до (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли DIEA (2,17 мл, 12,2 ммоль). Раствор охлаждали до (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли йодид 2-Хлор-1-метилпиридиния (CMPI; 2,76 г, 10,8 ммоль) и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (150 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Fmoc-Ser(Bzl)-Dil-OtBu выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 18% до 90% EtOAc в гексанах в качестве элюента. Всего получали 3,75 г Fmoc-Ser(Bzl)-Dil-OtBu (5,69 ммоль, 84% выход).
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Ser(Bzl)-Dil-OtBu (1,79 г, 2,72 ммоль) в MeCN (5 мл) добавляли пиперидин (4 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами, и слой MeCN концентрировали в вакууме с получением неочищенного H-Ser(Bzl)-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной H-Ser(Bzl)-Dil-OtBu и Dov (0,790 г, 5,44 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,45 мл, 8,16 ммоль), с последующим добавлением HATU (2,07 г, 5,44 ммоль). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,882 г Dov-Ser(Bzl)-Dil-OtBu (1,30 ммоль, 48%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору при комнатной температуре Dov-Ser(Bzl)-Dil-OtBu (0,288 г, 0,425 ммоль) в СНCl (5 мл) добавляли ТФУ (4 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,163 г, 0,467 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,303 мл, 1,70 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,323 г, 0,850 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,217 г Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,228 ммоль, 54%) в виде соли ТФУ.
+
+
39
65
5
9
Перемешиваемую при комнатной температуре суспензию трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,217 г, 0,228 ммоль) и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 0,174 г) в МеоН (5 мл) гидрировали в условиях кипячения с обратным холодильником. Через 48 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,104 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,121 ммоль, 47%). ЖХМС RT=2,32 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 748,72 [M+H]; ВРМС m/z 748,4846 [CHNO+H].
Пример 2
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Thr(Bzl)-OH (2,92 г, 6,76 ммоль) и гидрохлорида H-Dil-OtBu (2,00 г, 6,76 ммоль) в EtOAc (15 мл) добавляли DIEA (2,17 мл, 12,2 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли DIEA (2,17 мл, 12,2 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли CMPI (2,76 г, 10,8 ммоль), и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Fmoc-Thr(Bzl)-Dil-OtBu выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 18% до 90% EtOAc в гексанах в качестве элюента. Всего получали 3,71 г Fmoc-Thr(Bzl)-Dil-OtBu (5,51 ммоль, 82% выход).
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Thr(Bzl)-Dil-OtBu (3,71 г, 5,51 ммоль) в MeCN (5 мл) добавляли пиперидин (4 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами, и слой MeCN концентрировали в вакууме с получением неочищенного H-Thr(Bzl)-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной H-Thr(Bzl)-Dil-OtBu и Dov (1,60 г, 11,0 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли DIEA (2,95 мл, 16,5 ммоль), с последующим добавлением HATU (4,19 г, 11,0 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 1,09 г Dov-Ser(Bzl)-Dil-OtBu (1,58 ммоль, 29%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OtBu (0,331 г, 0,478 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (4 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,183 г, 0,526 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,341 мл, 1,92 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,364 г, 0,957 ммоль). Через 24 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,290 г Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,300 ммоль, 63%) в виде соли ТФУ.
+
+
40
67
5
9
Перемешиваемую при комнатной температуре суспензию трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,290 г, 0,300 ммоль) и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 0,232 г) в МеоН (5 мл) гидрировали. Через 24 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,129 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,147 ммоль, 43%). ЖХМС RT=2,40 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 762,75 [M+H]; ВРМС m/z 762,5009 [CHNO+H].
Пример 3
(S)-2-(диметиламино)-Н-((S)-3-гидрокси-1-(((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-3-метилбутанамид
2
2
3
2
2
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (10,0 г, 21,4 ммоль) и 2-(2-пиридил)этиламина (3,83 мл, 32,0 ммоль) в СНCl (20 мл) добавляли DIEA (11,4 мл, 64,1 ммоль), с последующим добавлением DEPC (4,83 мл, 32,0 ммоль). После перемешивания в течение ночи анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Boc-Dap-2-(2-пиридил)этиламина выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 2% до 10% MeOH/1% NEt в СНClв качестве элюента. Всего получали 7,42 г Boc-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (19,0 ммоль, 89% выход).
2
2
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (7,42 г, 19,0 ммоль) в СНCl(10 мл) добавляли ТФУ (10 мл). После перемешивания в течение ночи анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 4,50 г H-Dap-(2-пиридил)этиламина (11,1 ммоль, 59%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору Dov-Ser(Bzl)-Dil-OtBu (0,287 г, 0,423 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (4 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,136 г, 0,466 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,302 мл, 1,70 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,322 г, 0,847 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,258 г Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,288 ммоль, 68%) в виде соли ТФУ.
+
+
36
62
6
7
Перемешиваемую при комнатной температуре суспензию трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,258 г, 0,330 ммоль), формиата аммония (0,062 г, 0,991 ммоль), и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 0,100 г) в МеоН (5 мл) гидрировали. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,014 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,017 ммоль, 5%). ЖХМС RT=1,76 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 691,56 [M+H]; ВРМС m/z 691,4755 [CHNO+H].
Пример 4
(2S,3R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
2
2
К раствору Dov-Thr(Bzl)-Dil-OtBu (0,357 г, 0,618 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (4 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,198 г, 0,680 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,441 мл, 2,47 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,470 г, 1,24 ммоль) и HOBt (0,189 г, 1,24 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,356 г Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,392 ммоль, 63%) в виде соли ТФУ.
+
+
+
37
64
6
7
Перемешиваемую при комнатной температуре суспензию трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,356 г, 0,392 ммоль), формиата аммония (0,085 г, 1,35 ммоль) и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 0,175 г) в МеоН (5 мл) гидрировали. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,010 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,012 ммоль, 3%). ЖХМС RT=1,72 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 705,56 [M+H]; 728,33 [M+Na]; ВРМС m/z 705,4917 [CHNO+H].
Пример 5
(2S)-2-(диметиламино)-Н-((2S)-3-гидрокси-1-(((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((2S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиперидин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-3-метилбутанамид
+
+
36
68
6
7
Указанное в заголовке соединение получали как побочный продукт стадии гидрирования в Примере 3. Всего получали 0,010 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,001 ммоль). ЖХМС RT=1,83 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 697,76 [M+H]; ВРМС m/z 697,5226 [CHNO+H].
Пример 6
(2S,3R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((2S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиперидин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
+
+
37
70
6
7
Указанное в заголовке соединение получали как побочный продукт стадии гидрирования в Примере 4. Всего получали 0,010 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,012 ммоль). ЖХМС RT=1,81 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 711,43 [M+H]; ВРМС m/z 711,5389 [CHNO+H].
Пример 7
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
3
3
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору (2S,3S)-Fmoc-Abu(3-N)-OH (1,00 г, 2,74 ммоль) и гидрохлорида H-Dil-OtBu (0,810 г, 2,74 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли DIEA (0,880 мл, 4,93 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли DIEA (0,880 мл, 4,93 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли CMPI (1,12 г, 4,38 ммоль), и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2) с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного Fmoc-Abu(3-N)-Dil-OtBu (1,12 г, 1,84 ммоль), который использовали без дополнительной очистки.
3
3
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Abu(3-N)-Dil-OtBu (1,00 г, 1,65 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли пиперидин (2 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами, и слой MeCN концентрировали в вакууме с получением неочищенного H-Abu(3-N)-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
3
3
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной H-Abu(3-N)-Dil-OtBu и Dov (0,478 г, 3,29 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,880 мл, 4,94 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,25 г, 3,29 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,670 г Dov-Abu(3-N)-Dil-OtBu (1,07 ммоль, 65%) в виде соли ТФУ.
3
2
2
3
К раствору трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OtBu (0,289 г, 0,425 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (5 мл). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
3
40
66
8
8
+
+
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (1,04 г, 1,82 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (1,59 г, 3,44 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,18 г, 1,60 мл, 9,11 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,74 г, 4,56 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте. Всего получали 935 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (1,12 ммоль, 49%). ЖХМС RT=1,09 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 787,53 [M+H]; ВРМС m/z 787,5072 [CHNO+H].
Пример 8
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Dpr(Boc)-OH (1,44 г, 3,38 ммоль) и H-Dil-OtBu гидрохлорида (1,00 г, 3,38 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли DIEA (1,08 мл, 6,08 ммоль). Раствор охлаждали to (0 °C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли дополнительный DIEA (1,08 мл, 6,08 ммоль) и раствор при 0°C перемешивали в течение 20 мин. затем к реакционной смеси добавляли CMPI (1,38 г, 5,41 ммоль), и реакционная смесь нагревалась до комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Fmoc-Dpr(Boc)-Dil-OtBu выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 18% до 90% EtOAc в гексанах в качестве элюента. Всего получали 1,27 г Fmoc-Dpr(Boc)-Dil-OtBu (1,90 ммоль, 56% выход).
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Dpr(Boc)-Dil-OtBu (1,27 г, 1,90 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли пиперидин (2 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами и слой MeCN концентрировали в вакууме с получением неочищенного H-Dpr(Boc)-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной H-Dpr(Boc)-Dil-OtBu и Dov (0,552 г, 3,80 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,02 мл, 5,70 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,45 г, 3,80 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,598 г Dov-Dpr(Boc)-Dil-OtBu (0,871 ммоль, 46%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору трифторацетатной соли Dov-Dpr(Boc)-Dil-OtBu (1,52 г, 2,65 ммоль) в СНCl (10 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Dpr-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
2
2
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли Dov-Dpr-Dil-OH (1,00 г, 1,89 ммоль) и Fmoc-OSu (0,891 г, 2,64 ммоль) в СНCl (10 мл) добавляли DIEA (0,460 мл, 2,64 ммоль). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 1,49 г обогащенного Dov-Dpr(Fmoc)-Dil-OH в виде соли муравьиной кислоты.
4
К перемешиваемой при 23°C суспензии соли муравьиной кислотыDov-Dpr(Fmoc)-Dil-OH (1,20 г, 1,75 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,982 г, 2,13 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,970 г, 1,30 мл, 7,514 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,43 г, 3,76 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 1,01 г Dov-Dpr(Fmoc)-Dil-Dap-Phe-OMe (1,04 ммоль, 56%).
+
+
39
66
6
8
К перемешиваемому при 23°C раствору Dov-Dpr(Fmoc)-Dil-Dap-Phe-OMe (1,01 г, 1,04 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 3 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенному раствору реакции добавляли гексаны. Слой ацетонитрила концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 413 г указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,521 ммоль, 50%). ЖХМС RT=2,10 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 747,84 [M+H]; ВРМС m/z 747,5008 [CHNO+H].
Пример 9
(S)-Н-((S)-3-амино-1-(((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамид
. Неочищенное
-
-
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенного Dov-Dpr(Fmoc)-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,230 г, 0,789 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,511 мл, 2,87 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,545 г, 1,43 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (25 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакуумемасло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,150 г DovDpr(Fmoc)-DilDap-2-(2-пиридил)этиламина в виде соли ТФУ (0,146 ммоль, 20%).
-
.
+
+
36
63
7
6
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Dpr(Fmoc)-DilDap-2-(2-пиридил)этиламина (0,150 г, 0,146 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли пиперидин (2 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами и слой MeCN концентрировали в вакуумеНеочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего 0,089 г указанного в заголовке соединения получали в виде соли ТФУ (0,111 ммоль, 75%). ЖХМС RT=1,52 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 690,67 [M+H]; ВРМС m/z 690,4917 [CHNO+H].
Пример 10
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору дициклогексиламиновой соли Н-Boc-4-Азидо-Аланина (1,02 г, 2,47 ммоль) и гидрохлорида H-Dil-OtBu (0,730 г, 2,74 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли DIEA (0,792 мл, 4,44 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли DIEA (0,792 мл, 4,44 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли CMPI (1,01 г, 3,95 ммоль), и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2) с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного Н-Boc-4-Азидо-Ala-Dil-OtBu (1,08 г, 2,29 ммоль), который использовали без дополнительной очистки.
2
2
К раствору Н-Boc-4-Азидо-Ala-Dil-OtBu (1,08 г, 2,29 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре, добавляли ТФУ (3 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли H-4-Азидо-Ala-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии Dov (0,739 г, 5,09 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,36 мл, 7,63 ммоль), с последующим добавлением HATU (1,95 г, 5,09 ммоль). Через 10 мин к реакционной смеси добавляли неочищенный H-4-Азидо-Ala-Dil-OH. Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,130 г Dov-4-Азидо-Ala-Dil-OH (0,261 ммоль, 10%) в виде соли ТФУ.
+
+
39
64
8
8
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли Dov-4-Азидо-Ala-Dil-OH (0,130 г, 0,261) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,205 г, 0,588 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,140 мл, 0,783 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,198 г, 0,522 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,015 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,017 ммоль, 7%). ЖХМС RT=2,36 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 773,48 [M+H]; ВРМС m/z 773,4916 [CHNO+H].
Пример 11
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-4-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору дициклогексиламиновой соли Н-Boc-4-Азидо-гомоаланина (1,01 г, 2,37 ммоль) и H-Dil-OtBu гидрохлорида (0,700 г, 2,37 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли DIEA (0,759 мл, 4,26 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли DIEA (0,759 мл, 4,26 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли CMPI (0,967 г, 3,79 ммоль), и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного Н-Boc-4-Азидо-гомоAla-Dil-OtBu (1,09 г, 2,25 ммоль), который использовали без дополнительной очистки.
2
2
К раствору Н-Boc-4-Азидо-гомоAla-Dil-OtBu (1,09 г, 2,25 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (3 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли H-4-Азидо-гомоAla-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии Dov (0,652 г, 4,49 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,20 мл, 6,73 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,71 г, 4,49 ммоль). Через 10 мин к реакционной смеси добавляли неочищенную трифторацетатную соль H-4-Азидо-гомоAla-Dil-OH. Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,127 г Dov-4-Азидо-гомоAla-Dil-OH (0,223 ммоль, 10%) в виде соли ТФУ.
+
+
40
66
8
8
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли Dov-4-Азидо-гомоAla-Dil-OH (0,127 г, 0,223) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,198 г, 0,568 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,140 мл, 0,783 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,198 г, 0,522 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего 0,015 г указанного в заголовке соединения получали в виде соли ТФУ (0,017 ммоль, 7%). ЖХМС RT=2,38 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 787,49 [M+H]; ВРМС m/z 787,5078 [CHNO+H].
Пример 12
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-4-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Dab(Boc)-OH (1,54 г, 3,38 ммоль) и H-Dil-OtBu гидрохлорида (1,00 г, 3,38 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли DIEA (1,08 мл, 6,08 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли дополнительный DIEA (1,08 мл, 6,08 ммоль), и раствор при 0°C перемешивали в течение 20 мин. Затем к реакционной смеси добавляли CMPI (1,38 г, 5,41 ммоль), и реакционная смесь нагревалась до комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Fmoc-Dab(Boc)-Dil-OtBu выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см), используя от 18% до 90% EtOAc в гексанах в качестве элюента. Всего получали 1,18 г Fmoc-Dpr(Boc)-Dil-OtBu (1,73 ммоль, 51% выход).
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Dab(Boc)-Dil-OtBu (1,18 г, 1,73 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли пиперидин (2 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали гексанами, и слой MeCN концентрировали в вакууме с получением неочищенного H-Dab(Boc)-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенного H-Dab(Boc)-Dil-OtBu и Dov (0,502 г, 3,46 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,925 мл, 5,19 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,32 г, 3,46 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,410 г Dov-Dab(Boc)-Dil-OtBu (0,583 ммоль, 34%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору трифторацетатной соли Dov-Dab(Boc)-Dil-OtBu (0,240 г, 0,419 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (2 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Dab-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
2
2
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли Dov-Dab-Dil-OH (0,175 г, 0,406 ммоль) и Fmoc-OSu (0,151 г, 0,447 ммоль) в СНCl (5 мл) добавляли DIEA (0,080 мл, 0,447 ммоль). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенную реакционную смесь растворяли в EtOAc и промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного Dov-Dab(Fmoc)-Dil-OH, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенного Dov-Dab(Fmoc)-Dil-OH (0,363 г, 0,556 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,194 г, 0,420 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,291 мл, 1,67 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,424 г, 1,11 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,2% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 449 мг обогащенного Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-Phe-OMe в виде соли муравьиной кислоты.
+
+
40
68
6
8
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору обогащенной соли муравьиной кислоты Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,449 г) в MeCN (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами, и слой MeCN концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX C18 10 мкм Max-RP 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 43,0 г указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,053 ммоль, 13%). ЖХМС RT=1,24 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 761,57 [M+H]; ВРМС m/z 761,5165 [CHNO+H].
Пример 13
(S)-2-((S)-2-(аминоокси)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-N,3-диметилбутанамид
К раствору гидрохлорида H-Dil-OtBu (0,60 г, 2,03 ммоль) и Fmoc-Val-OH (0,829 г, 2,44 ммоль), перемешиваемых в EtOAc (3 мл), добавляли DIEA (0,65 мл, 3,7 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°C и перемешивали в течение 20 мин с последующим добавлением DIEA (0,65 мл, 3,7 ммоль). Реакционную смесь охлаждали (0°C) в течение дополнительных 20 мин, с последующим добавлением CMPI (0,83 г, 3,7 ммоль). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Реакционную смесь промывали 1 M HCl (25 мл x 2) и насыщенным солевым раствором (50 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Fmoc-Val-Dil-OtBu выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 18% до 90% EtOAc в гексанах в качестве элюента. Всего получали 1,1 г Fmoc-Val-Dil-OtBu (1,9 ммоль, 93% выход).
2
2
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии Fmoc-Val-Dil-OtBu (0,883 г, 1,52 ммоль) и Boc-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,451 г, 1,52 ммоль) в СНCl(10 мл) добавляли ТФУ (5 мл). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакуумес получением неочищенного Fmoc-Val-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-пиридил)этиламина, которые использовали без дополнительной очистки.
3
2
2
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-пиридил)этиламина и Fmoc-Val-Dil-OH в EtOAc (2 мл) добавляли DIEA (1,10 мл, 6,08 ммоль) с последующим добавлением DEPC (0,92 мл, 6,08 ммоль). Через 15 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Реакционную смесь промывали насыщенным раствором NaHCO(50 мл) с последующим добавлением воды (50 мл x 2). Органическую фракцию отфильтровывали через слой сульфата магния и концентрировали в вакууме. Полученное в результате вязкое масло очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 23×123 мм) с использованием от 5% до 10% MeOH в СНCl в качестве элюента. Всего получали 0,888 г Fmoc-Val-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (1,11 ммоль, 73% выход).
2
2
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Val-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (1,75 г, 2,19 ммоль) в СНCl(5 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного H-Val-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной H-Val-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина и Н-Boc-Н-гидроксиVal-OH (0,390 г, 1,67 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли DIEA (0,797 мл, 5,02 ммоль) с последующим добавлением HATU (1,28 г, 3,34 ммоль). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением 0,563 г неочищенного Н-Boc-Н-гидроксиVal-Val-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,712 ммоль, 43%), который использовали без дополнительной очистки.
+
+
36
62
6
7
К раствору Н-Boc-Н-гидроксиVal-Val-Dil-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,563 г, 0,712 ммоль) в ДМФА (2 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (2 мл). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,209 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,302 ммоль, 43%). ЖХМС RT=1,70 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 691,53 [M+H]; ВРМС m/z 691,4755 [CHNO+H].
Пример 14
((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-гидроксипропанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланин
2
4
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору H-Ser(Bzl)-OH (0,500 г, 2,56 ммоль) и параформальдегида (1,15 г, 38,4 ммоль) в МеоН (10 мл) добавляли HCONH(0,808 г, 12,8 ммоль) и палладий на активированном древесном угле (10% Pd основа, 0,250 г). Через 72 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли, и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,168 г N,N-диметилSer(Bzl)-OH (0,498 ммоль, 19%) в виде соли ТФУ.
2
2
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору неочищенного Fmoc-Val-Dil-OtBu (13,3 г, 22,8 ммоль) в СНCl(20 мл) добавляли пиперидин (15 мл). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного H-Val-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенного H-Val-Dil-OtBu и трифторацетатной соли N,N-диметилSer(Bzl)-OH (0,780 г, 3,49 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,25 мл, 6,99 ммоль), с последующим добавлением HATU (1,77 г, 4,66 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,220 г N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-OtBu (0,325 ммоль, 14%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору трифторацетатной соли N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-OtBu (0,220 г, 0,325 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (2 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,166 г, 0,477 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли DIEA (0,207 мл, 1,30 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,330 г, 0,868 ммоль). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,201 г N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-Dap-Phe-OMe (0,211 ммоль, 49%) в виде соли ТФУ.
4
2
38
63
5
9
+
+
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-Dap-Phe-OMe (0,201 г, 0,211 ммоль) и NHHCO (2,00 г, 31,7 ммоль) в МеоН(6 мл) и воде (1,0 мл) добавляли 10% Pd/C (10 мг). Раствор интенсивно перемешивали при комнатной температуре. Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции, наряду с гидролизом метилового эфира фенилаланина. Реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли, и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 63,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,074 ммоль, 31%). ЖХМС RT=2,01 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 734,61 [M+H]; ВРМС m/z 734,4715 [CHNO+H].
Пример 15
((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((2S,3R)-2-(диметиламино)-3-гидроксибутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланин
2
4
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору H-Thr(Bzl)-OH (2,00 г, 9,56 ммоль) и параформальдегида (9,87 г, 95,6 ммоль) в МеоН (40 мл) добавляли HCONH(3,01 г, 47,8 ммоль) и палладий на активированном древесном угле (10% Pd основа, 1,00 г). Через 72 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего 1,54 г N,N-диметилThr(Bzl)-OH (4,38 ммоль, 19%) получали в виде соли ТФУ.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной H-Val-Dil-OtBu и N,N-диметилThr(Bzl)-OH трифторацетатной соли (1,21 г, 5,10 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли DIEA (1,82 мл, 10,2 ммоль), с последующим добавлением HATU (2,59 г, 6,80 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (15 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего 0,161 г N,N-диметилThr(Bzl)-Val-Dil-OtBu (0,234 ммоль, 7%) получали в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору трифторацетатной соли N,N-диметилThr(Bzl)-Val-Dil-OtBu (0,220 г, 0,325 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (2 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли N,N-диметилThr(Bzl)-Val-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли N,N-диметилThr(Bzl)-Val-Dil-OH и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,118 г, 0,339 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли DIEA (0,147 мл, 0,927 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,235 г, 0,618 ммоль). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,186 г N,N-диметилThr(Bzl)-Val-Dil-Dap-Phe-OMe (0,193 ммоль, 62%) в виде соли ТФУ.
4
2
39
65
5
9
+
+
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли N,N-диметилThr(Bzl)-Val-Dil-Dap-Phe-OMe (0,186 г, 0,193 ммоль) и NHHCO (2,00 г, 31,7 ммоль) в МеоН(6 мл)иводе (1,0 мл) добавляли 10% Pd/C (100 мг). Раствор интенсивно перемешивали при комнатной температуре. Через 72 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции, наряду с гидролизом метилового эфира фенилаланина. Реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли, и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 63,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,073 ммоль, 38%). ЖХМС RT=2,04 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 748,58 [M+H]; ВРМС m/z 748,4854 [CHNO+H].
Пример 16
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота
3
39
64
8
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OMe (60 мг, 0,067 ммоль) в МеоН (0,1 мл) и ТГФ (0,1 мл) добавляли моногидрат гидроксида лития (9,6 мг, 0,229 ммоль) в воде (0,1 мл). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 55,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,062 ммоль, 93%). ЖХМС RT=2,25 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 773,45 [M+H]; ВРМС m/z 773,49119 [CHNO+H].
Пример 17
(S)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((2S,3R)-2-(диметиламино)-3-гидроксибутанамидо)-N,3-диметилбутанамид
2
2
39
66
6
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли N,N-диметилThr-Val-Dil-Dap-Phe-OH (40 мг, 0,053 ммоль) в СНCl (10 мл) добавляли хлорид аммония (5,72 мг, 0,107 ммоль), DIEA (28,6 мкл, 0,160 ммоль) и EDCI (30,3 мг, 0,107 ммоль). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 28,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,037 ммоль, 70%). ЖХМС RT=2,14 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 747,61 [M+H]; ВРМС m/z 747,5017 [CHNO+H].
Пример 18
(S)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-гидроксипропанамидо)-N,3-диметилбутанамид
2
2
38
64
6
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли N,N-диметилSer-Val-Dil-Dap-Phe-OH (12 мг, 0,016 ммоль) в СНCl (10 мл) добавляли хлорид аммония (1,00 мг, 0,019 ммоль), DIEA (3,21 мкл, 0,018 ммоль) и EDCI (5,09 мг, 0,018 ммоль). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 10,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,014 ммоль, 83%). ЖХМС RT=2,07 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 733,63 [M+H]; ВРМС m/z 733,4866 [CHNO+H].
Пример 19
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-меркапто-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Cys(Trt)-OH (3,96 г, 6,76 ммоль) и гидрохлорида H-Dil-OtBu (2,00 г, 6,76 ммоль) в EtOAc (15 мл) добавляли DIEA (2,17 мл, 12,2 ммоль). Раствор охлаждали (0°C) и перемешивали в течение 20 мин. Дополнительный DIEA (2,17 мл, 12,2 ммоль) добавляли к реакционной смеси, и раствор при 0°C перемешивали в течение 20 мин. Затем к реакционной смеси добавляли CMPI (2,76 г, 10,8 ммоль), и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (100 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Fmoc-Cys(Trt)-Dil-OtBu выделяли посредством флэш-хроматографии на силикагеле (силикагель 40 мкм, 60 Å, 3,0×17,0 см) с использованием от 18% до 90% EtOAc в гексанах в качестве элюента. Всего получали 4,73 г Fmoc-Cys(Trt)-Dil-OtBu (5,72 ммоль, 85% выход).
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-Cys(Trt)-Dil-OtBu (2,61 г, 3,16 ммоль) в MeCN (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь экстрагировали Гексанами и слой MeCN концентрировали в вакууме с получением неочищенного H-Cys(Trt)-Dil-OtBu, который использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенного H-Cys(Trt)-Dil-OtBu и Dov (0,916 г, 6,31 ммоль) в ДМФА (15 мл) добавляли DIEA (1,69 мл, 9,47 ммоль), с последующим добавлением HATU (2,40 г, 6,31 ммоль). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 1,40 г Dov-Cys(Trt)-Dil-OtBu (1,66 ммоль, 52%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору трифторацетатной соли Dov-Cys(Trt)-Dil-OtBu (1,40 г, 1,66 ммоль) в СНCl (10 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Cys(Trt)-Dil-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии трифторацетатной соли Dov-Cys(Trt)-Dil-OH (0,225 г, 285 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,139 г, 0,301 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,237 мл, 1,33 ммоль), с последующим добавлением HOBt (0,102 г, 0,666 ммоль) и HATU (0,253 г, 0,666 ммоль). После перемешивания в течение ночи анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме и использовали без дополнительной очистки.
+
К раствору трифторацетатной соли Dov-Cys(Trt)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,568 г, 0,507 ммоль) при комнатной температуре добавляли ТФУ (10 мл). Через 12 ч при 60°C, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 10,0 мг указанного в заголовке соединения в виде трифторацетатной соли димера с дисульфидным мостиком (0,011 ммоль, 3%). ЖХМС RT=2,50 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 764,60 [M+H]; ВРМС m/z 763,4547 z=2.
Пример 20
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-меркапто-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (6,47 г, 13,8 ммоль) и HCl соли H-Phe-OtBu (3,91 г, 15,2 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли DIEA (8,78 мл, 55,2 ммоль), с последующим добавлением DEPC (3,12 мл, 20,7 ммоль). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические вещества упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки.
2
2
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-Phe-OtBu (5,25 г, 10,7 ммоль) в СНCl (10 мл) добавляли ТФУ (10 мл). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции с получением фенилаланина в виде смеси свободной карбоновой кислоты и ее трет-бутилового эфира. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,85 г трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OtBu (5,65 ммоль) в виде масло янтарного цвета, и всего получали 2,01 г трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OH (4,49 ммоль) в виде масла желтого цвета.
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Cys(Trt)-Dil-OH (0,208 г) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OtBu (0,144 г, 0,369 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,219 мл, 1,23 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,234g, 0,615 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,509 г обогащенного Dov-Cys(Trt)-Dil-Dap-Phe-OtBu в виде соли ТФУ.
+
+
38
63
5
8
К раствору при комнатной температуре трифторацетатной соли обогащенного Dov-Cys(Trt)-Dil-Dap-Phe-OtBu (0,509) добавляли ТФУ (5 мл). Раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 24 ч. Через 24 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 56,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,065 ммоль, 25%). ЖХМС RT=2,32 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 750,60 [M+H]; ВРМС m/z 750,4460 [CHNOS+H].
Пример 21
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-метилпропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-OH (0,232 г) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OtBu (0,196 г, 0,389 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,326 мл, 1,83 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,348, 0,914 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,378 г Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OtBu (0,380 ммоль, 98%) в виде соли ТФУ.
2
2
К раствору при комнатной температуре трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OtBu (0,455 г, 0,517 ммоль) в СНCl (5 мл) добавляли ТФУ (2 мл). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OH, которую использовали без дополнительной очистки.
+
+
38
63
5
9
Перемешиваемую при комнатной температуре суспензию неочищенной трифторацетатной соли Dov-Ser(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OH с предшествующей стадии и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 10,0 мг) в МеоН (10 мл) гидрировали. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли, и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,115 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,136 ммоль, 28%). ЖХМС RT=2,10 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 734,61 [M+H]; ВРМС m/z 734,4708 [CHNO+H].
Пример 22
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота
К перемешиваемой при комнатной температуре суспензии неочищенной трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OH (0,180 г) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OtBu (0,148 г, 0,294 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,246 мл, 1,38 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,262, 0,690 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,298 г Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OtBu (0,296 ммоль, 78%) в виде соли ТФУ.
2
2
39
65
5
9
+
+
К раствору трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OtBu (0,298 г, 0,296 ммоль) в СНCl (5 мл) при комнатной температуре добавляли ТФУ (2 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OH трифторацетатной соли, которую использовали без дополнительной очистки. Перемешиваемую при комнатной темературе суспензию неочищенной трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-Phe-OH с предшествующей стадии и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 10,0 мг) в МеоН (10 мл) гидрировали. Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 0,120 г указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,139 ммоль, 47%). ЖХМС RT=2,22 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 748,62 [M+H]; ВРМС m/z 748,4842 [CHNO+H].
Пример 23
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-гидроксипропанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
+
+
39
65
5
9
Перемешиваемую при комнатной температуре суспензию трифторацетатной соли N,N-диметилSer(Bzl)-Val-Dil-Dap-Phe-OMe (50,0 мг, 0,053 ммоль) и палладия на активированном древесном угле (10% Pd основа, 10 мг) в МеоН (10 мл) гидрировали. Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли и фильтрат концентрировали. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 8,00 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,009 ммоль, 18%). ЖХМС RT=2,38 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 748,57 [M+H]; ВРМС m/z 748,4849 [CHNO+H].
Пример 24
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((2S,3R)-2-(диметиламино)-3-гидроксибутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
Указанное в заголовке соединение может быть получено с использованием методов, аналогичных методам, описанным в Примерах и общим схемам синтеза.
Пример 25
(S)-метил 2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноат
-
3
2
40
68
6
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OMe (10 мг, 0,011 ммоль) в ТГФ (0,10 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1M, 0,022 мл, 0,022 ммоль). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции, и к реакционной смеси добавляли HO (0,05 мл). Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 6,00 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,007 ммоль, 62%). ЖХМС RT=2,12 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 761,63 [M+H]; ВРМС m/z 761,5159 [CHNO+H].
Пример 26
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропановая кислота
-
3
2
39
66
6
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OH (10 мг, 0,011 ммоль) в ТГФ (0,10 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1M, 0,022 мл, 0,022 ммоль). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции, и к реакционной смеси добавляли HO (0,05 мл). Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,00 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,002 ммоль, 21%). ЖХМС RT=2,02 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 747,65 [M+H]; ВРМС m/z 747,5008 [CHNO+H].
Пример 27
(2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(фенэтиламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
2
2
+
К перемешиваемому при 25°C раствору дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (6,47 г, 13,8 ммоль) и фенэтиламина (3,914 г, 15,19 ммоль) в СНCl (20 мл) добавляли DIEA (8,76 мл, 55,2 ммоль), с последующим добавлением DEPC (3,12 мл, 20,7 ммоль). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические вещества упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 4,04 г Boc-Dap-фенэтиламина (10,3 ммоль). ЖХМС RT=3,00 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 391,37 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемому при 25°C раствору Boc-Dap-фенэтиламина (4,04 г, 10,3 ммоль) в СНCl (15,0 мл) добавляли ТФУ (15,0 мл). Через 14 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические вещества упаривали в вакууме, и неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,51 г H-Dap-фенэтиламина (6,21 ммоль) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=1,72 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 291,29 [M+H].
3
38
64
8
6
вакууме
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (0,300 г, 0,526 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-фенэтиламина (0,191 г, 0,471 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли DIEA (0,343 мл, 1,97 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,501 г, 1,31 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в . Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 196 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,233 ммоль, 49%). ЖХМС RT=2,45 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 729,55 [M+H]; ВРМС m/z 729,5030 [CHNO+H].
Пример 28
(2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
2
2
вакууме
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-OH дициклогексиламиновой соли (10,0 г, 0,021 моль) и (1R,2S)-(-)-Норэфедрина (3,87 г, 0,026 моль) в СНCl(20 мл) добавляли DIEA (11,4 мл, 0,064 моль) и DEPC (6,44 мл, 0,043 моль). Через 14 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенной реакционной смеси добавляли 0,1 M HCl (20,0 мл). Органический слой отделяли, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в с получением неочищенного продукта. Всего получали 7,92 г Boc-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (18,8 ммоль, 88%). ЖХМС RT=2,25 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 421,31 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (7,92 г, 18,8 ммоль) в СНCl (10 мл) добавляли ТФУ (10 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 5,00 г H-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (11,5 ммоль, 61%) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=1,10 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 321,33 [M+H].
3
39
66
8
7
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре трифторацетатной соли раствору Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (0,300 г, 0,526 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (0,211 г, 0,486 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли DIEA (0,351 мл, 1,97 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,501 г, 1,31 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 128 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,147 ммоль, 30%). ЖХМС RT=1,95 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 759,65 [M+H]; ВРМС m/z 759,5121 [CHNO+H].
Пример 29
(2S,3S)-3-азидо-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((4-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
2
2
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (5,00 г, 10,7 ммоль) и 2-(4-хлорфенил)этиламина (1,85 г, 11,7 ммоль) в СНCl(20 мл) добавляли DIEA (6,78 мл, 42,7 ммоль) и DEPC (2,41 мл, 16,0 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические вещества упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 4,25 г Boc-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (10,0 ммоль, 94%). ЖХМС RT=3,10 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 425,32 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (4,25 г, 10,0 ммоль) в СНCl (15 мл) добавляли ТФУ (15 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,27 г H-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (5,18 ммоль, 52%) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=2,05 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 325,24 [M+H].
3
38
63
8
6
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (0,526 г, 0,923 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (0,347 г, 0,792 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,602 мл, 3,46 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,878 г, 2,30 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 596 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,680 ммоль, 85%). ЖХМС RT=2,38 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 763,71 [M+H]; ВРМС m/z 763,4633 [CHNOCl+H].
Пример 30
(2S,3S)-3-азидо-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((2-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
2
2
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (5,00 г, 10,7 ммоль) и 2-(2-хлорфенил)этиламина (1,85 г, 11,7 ммоль) в СНCl(10 мл) добавляли DIEA (4,76 мл, 26,7 ммоль) и DEPC (2,41 мл, 16,0 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические вещества упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 3,98 г Boc-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (9,37 ммоль, 88%). ЖХМС RT=3,04 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 425,23 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (3,98 г, 9,37 ммоль) в СНCl (5 мл) добавляли ТФУ (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,87 г H-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (6,55 ммоль, 70%) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=1,83 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 325,22 [M+H].
3
38
63
8
6
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (0,450 г, 0,789 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (0,320 г, 0,731 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,515 мл, 2,96 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,751 г, 1,97 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 253 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,289 ммоль, 32% в расчете от RSM). ЖХМС RT=1,26 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 763,60 [M+H]; ВРМС m/z 763,4632 [CHNOCl+H].
Пример 31
(2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(фенэтиламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
-
3
38
66
6
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли DovAbu(3-N)-Dil-Dap-PE (25 мг, 0,030 ммоль) в ТГФ (0,5 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,045 мл, 0,045 ммоль). Через 1 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 9,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,012 ммоль, 41%). ЖХМС RT=1,02 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 703,71 [M+H]; ВРМС m/z 703,5117 [CHNO6+H].
Пример 32
(2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
-
3
39
68
6
7
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Норэфедрина (27 мг, 0,031 ммоль) в ТГФ (0,3 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,046 мл, 0,046 ммоль). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной трифторуксуснуй кислоте в качестве элюента. Всего получали 6,8 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,008 ммоль, 26%). ЖХМС RT=1,95 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 733,72 [M+H]; ВРМС m/z 733,5227 [CHNO+H].
Пример 33
(2S,3S)-3-амино-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((4-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
-
3
38
65
6
6
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли DovAbu(3-N)-Dil-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (117 мг, 0,133 ммоль) в ТГФ (0,3 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,2 мл, 0,2 ммоль). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 9,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,011 ммоль, 9%). ЖХМС RT=0,97 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 737,51 [M+H]; ВРМС m/z 737,4731 [CHNOCl+H].
Пример 34
(2S,3S)-3-амино-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((2-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
-
3
38
65
6
6
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты DovAbu(3-N)-Dil-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (46 мг, 0,057 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,085 мл, 0,085 ммоль). Через 1 ч неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 13,6 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,017 ммоль, 30%). ЖХМС RT=1,03 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 737,57 [M+H]; ВРМС m/z 737,4731 [CHNOCl+H].
Пример 35
(S)-4-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(фенэтиламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Dab(Fmoc)-Dil-OH (0,450 г, 0,587 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-фенэтиламина (0,200 г, 0,495 ммоль) в ДМФА (15 мл) добавляли DIEA (0,360 мл, 2,07 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,526 г, 1,38 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 276 мг Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-фенэтиламина (0,266 ммоль, 54%) в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=1,37 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 925,48 [M+H].
+
+
38
66
6
6
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-фенэтиламина (0,276 г, 0,266 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенной реакционной смеси добавляли гексаны. слой ацетонитрила концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 98,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,120 ммоль, 45%). ЖХМС RT=1,02 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 703,78 [M+H]; ВРМС m/z 703,5117 [CHNO+H].
Пример 36
(S)-4-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Dab(Fmoc)-Dil-OH (0,459 г, 0,599 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (0,225 г, 0,518 ммоль) в ДМФА (15 мл) добавляли DIEA (0,376 мл, 2,11 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,536 г, 1,41 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 449 мг Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрин (0,420 ммоль, 81%) в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=1,35 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 955,74 [M+H].
+
+
39
68
6
7
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (0,449 г, 0,420 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенной реакционной смеси добавляли гексаны. слой ацетонитрила концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 53,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,068 ммоль, 14%). ЖХМС RT=0,79 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 733,71 [M+H]; ВРМС m/z 733,5227 [CHNO+H].
Пример 37
(S)-4-амино-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((4-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
[0100]
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Dab(Fmoc)-Dil-OH (0,255 г, 0,333 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (0,127 г, 0,290 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,204 мл, 1,17 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,298 г, 0,781 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 190 мг Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (0,177 ммоль, 61%) в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=1,49 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 959,62 [M+H].
[0101]
+
+
38
65
6
6
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-2-(4-хлорфенил)этиламина (0,190 г, 0,177 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенной реакционной смеси добавляли гексаны. Слой ацетонитрила концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 118 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,151 ммоль, 85%). ЖХМС RT=1,06 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 737,55 [M+H]; ВРМС m/z 737,4729 [CHNOCl+H].
Пример 38
(S)-4-амино-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((2-хлорфенэтил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-Dab(Fmoc)-Dil-OH (0,306 г, 0,399 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (0,170 г, 0,388 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли DIEA (0,300 г, 400 мкл, 2,29 ммоль), с последующим добавлением HATU (360 мг, 0,944 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini 10 мкм Max-RP 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водном NH4OH в качестве элюента. Всего получали 115 мг Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (0,120 ммоль, 26%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС RT=1,40 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 959,75 [M+H].
+
+
38
65
6
6
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Dov-Dab(Fmoc)-Dil-Dap-2-(2-хлорфенил)этиламина (0,115 г, 0,120 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (2 мл). Через 3 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенной реакционной смеси добавляли гексаны. Слой ацетонитрила концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водном NH4OH в качестве элюента. Всего получали 30,0 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (0,041 ммоль, 34%). ЖХМС RT=1,15 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 737,68 [M+H]; ВРМС m/z 737,4729 [CHNOCl+H].
Пример 39
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилпент-4-инамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
+
К перемешиваемому при 25°C раствору Boc-пропаргилGly-OH (1,00 г, 4,69 ммоль) и H-Dil-OtBu HCl соли (1,15 г, 3,90 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли DIEA (1,49 мл, 9,38 ммоль). Раствор охлаждали до (0°C) и перемешивали в течение 20 мин и добавляли дополнительную порцию DIEA (1,49 мл, 9,38 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин. Затем к реакционной смеси добавляли CMPI (1,80 г, 7,04 ммоль) который нагревался до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Неочищенную реакционную смесь промывали 0,1 M HCl (20 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (20 мл x 2). Органическую фракцию сушили над безводным сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Всего получали 2,05 г Boc-пропаргилGly-Dil-OtBu (4,50 ммоль, 96%). ЖХМС RT=3,46 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 455,42 [M+H].
2
2
К перемешиваемому при 25°C раствору Boc-пропаргилGly-Dil-OtBu (2,05 г, 4,50 ммоль) в СНCl (6 мл) добавляли ТФУ (6 мл). Через 14 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 1,30 г H-пропаргилGly-Dil-OH в виде соли ТФУ (3,16 ммоль, 70%).
+
К перемешиваемому при 25°C раствор Dov (1,27 г, 8,71 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (2,33 мл, 13,1 ммоль), с последующим добавлением HATU (3,32 г, 8,71 ммоль). Через 10 мин к реакционной смеси добавляли раствор трифторацетатной соли H-пропаргилGly-Dil-OH (1,30 г, 3,16 ммоль) в ДМФА. Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 455 мг Dov-пропаргилGly-Dil-OH в виде соли ТФУ (0,844 ммоль, 27% выход). ЖХМС RT=1,65 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 425,95 [M+H].
+
+
41
65
5
8
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору трифторацетатной соли Dov-пропаргилGly-Dil-OH (0,198 г, 0,367 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,156 г, 0,338) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,222 мл, 1,40 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,355 г, 0,931 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили с использованием сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 10,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,012 ммоль, 3%). ЖХМС RT=2,50 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 756,44 [M+H]; ВРМС m/z 756,4902 [CHNO+H].
Пример 40
(2S,3S)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
-
3
39
65
9
7
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OH (42,1 мг, 0,051 ммоль), хлорида аммония (7,9 мг, 0,148 ммоль), TBTU (52,5 мг, 0,163 ммоль) в ДМФА (0,2 мл) добавляли основание Хунига (0,045 мл, 0,258 ммоль). Через 16 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном растворе гидроксида аммония в качестве элюента. Всего получали 13,4 мг указанного в заголовке соединения (0,017 ммоль, 33%). ЖХМС RT=1,05 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 772,61 [M+H]; ВРМС m/z 772,5078 [CHNO+H].
Пример 41
(2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((2-(пиридин-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
3
37
63
9
6
+
+
К перемешиваемому при 23°C раствору трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (0,300 г, 0,526 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-2-(2-пиридил)этиламина (0,287 г, 0,709 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (343 мкл, 1,97 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,501 г, 1,31 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водном NH4OH в качестве элюента. Всего получали 139 мг указанного в заголовке соединения (0,190 ммоль, 29%). ЖХМС RT=0,916 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 730,64 [M+H]; ВРМС m/z 730,4985 [CHNO+H].
Пример 42
(2S,3S)-3-азидо-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-(трет-бутиламино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
-
трет-бутиламина
3
39
66
6
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OH (24,0 мг, 0,029 ммоль), гидрохлорида (7,9 мг, 0,072 ммоль), HATU (24,5 мг, 0,064 ммоль) в ДМФА (0,2 мл) добавляли основание Хунига (0,022 мл, 0,124 ммоль). Через 18 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном растворе гидроксида аммония в качестве элюента. Всего получали 15,4 мг указанного в заголовке соединения (0,017 ммоль, 59%). ЖХМС RT=1,27 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 828,8 [M+H]; ВРМС m/z 828,5671 [CHNO+H].
Пример 43
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-валинат
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Dap-OH дициклогексиламина (4,00 г, 8,54 ммоль) и HCl соли H-Val-OMe (1,80 г, 10,7 ммоль) в СНCl (20 мл) добавляли DIEA (4,44 г, 6,00 мл, 34,4 ммоль), с последующим добавлением HATU (2,15 г, 2,00 мл, 0,013 моль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 6,80 г Boc-Dap-Val-OMe в виде бесцветного масла (17,0 ммоль, 80%). ЖХМС RT=1,33 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 401,6 [M+H].
+
Суспензию Boc-Dap-Val-OMe (6,80 г, 17,0 ммоль) в 4,0 M HCl в диоксане (20 мл) перемешивали при 23°C. Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 4,57 г H-Dap-Val-OMe в виде HCl соли (13,6 ммоль, 80%). ЖХМС RT=0,726 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 301,45 [M+H].
3
4
36
66
8
8
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (0,144 г, 0,253 ммоль) и HCl соли H-Dap-Val-OMe (0,332 г, 0,985 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,222 г, 0,300 мл, 1,72 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,240 г, 0,631 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 129 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (0,175 ммоль, 55%). ЖХМС RT=1,15 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 739,75 [M+H]; ВРМС m/z 739,5074 [CHNO+H].
Пример 44
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-6-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилгексанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Lys(Fmoc)-OH (5,60 г, 12,0 ммоль) и H-Dil-OtBu HCl (3,06 г, 10,9 ммоль) в EtOAc (20 мл) добавляли DIEA (4,44 г, 6,00 мл, 34,4 ммоль). Раствор охлаждали до 0°C и перемешивали в течение 0,5 ч. Через 0,5 ч, к реакционной смеси добавляли дополнительный DIEA (4,44 г, 6,00 мл, 34,4 ммоль) и находящуюся при 0°C реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч. Затем к реакционной смеси добавляли CMPI (4,20 г, 16,4 ммоль), и она медленно нагревалась до комнатной температуры, и ее перемешивали в течение 10 ч. Неочищенную реакционную смесь промывали 1 M HCl (30 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (25 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Всего получали 7,38 г Boc-Lys(Fmoc)-Dil-OtBu в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (10,4 ммоль, 86%). ЖХМС RT=1,85 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 710,1 [M+H].
+
Суспензию Boc-Lys(Fmoc)-Dil-OtBu (7,38 г, 10,4 ммоль) в 4,0 M HCl в диоксане (10,0 мл) перемешивали при 23°C. Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 7,05 г H-Lys(Fmoc)-Dil-OH в виде бледно-желтой HCl соли (0,012 mol, 89%). ЖХМС RT=1,20 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 554,54 [M+H].
4
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-OH (2,50 г, 17,2 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли DIEA (4,44 г, 6,00 мл, 0,034 моль), с последующим добавлением HATU (4,82 г, 12,6 ммоль). Через 5 мин, к реакционной смеси добавляли HCl соль H-Lys(Fmoc)-Dil-OH (7,05 г, 0,012 моль). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 4,45 г Dov-Lys(Fmoc)-Dil-OH в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (6,54 ммоль, 78%). ЖХМС RT=1,21 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 681,68 [M+H].
4
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-Lys(Fmoc)-Dil-OH (2,17 г, 3,19 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-OMe (1,78 г, 3,85 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,65 г, 2,20 мл, 12,7 ммоль), с последующим добавлением HATU (1,94 г, 5,10 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini 10 мкм Max-RP 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 2,25 г Dov-Lys(Fmoc)-Dil-Dap-Phe-OMe в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (2,23 ммоль, 70%). ЖХМС RT=1,29 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 1011,77 [M+H].
4
42
72
6
8
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-Lys(Fmoc)-Dil-Dap-Phe-OMe (2,25 г, 2,23 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенному раствору реакции добавляли гексаны. Слой ацетонитрила концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 898 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (1,14 ммоль, 51%). ЖХМС RT=0,840 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 789,5 [M+H]; ВРМС m/z 789,5482 [CHNO+H].
Пример 45
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,4S)-4-азидо-1-(диметил-L-валил)-Н-метилпирролидинe-2-карбоксамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
3
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии цис-Fmoc-Pro(4-N)-OH (2,00 г, 5,27 ммоль) и H-Dil-OtBu HCl (1,49 г, 5,27 ммоль) в EtOAc (20 мл) добавляли DIEA (2,22 г, 3,0 мл, 17,2 ммоль). Раствор охлаждали до 0°C и перемешивали в течение 0,5 ч. К охлажденной реакционной смеси добавляли дополнительн DIEA (2,22 г, 3,0 мл, 17,2 ммоль) и находящуюся при 0°C реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч. Затем к реакционной смеси добавляли CMPI (2,03 г, 7,93 ммоль), и она медленно нагревалась до комнатной температуры, и ее перемешивали в течение 10 ч. Неочищенную реакционную смесь промывали 1 M HCl (30 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (25 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки. Всего получали 3,13 г цис-Fmoc-Pro(4-N)-Dil-OtBu в виде масла желтого цвета (5,05 ммоль, 76%). ЖХМС RT=1,73 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 621,46 [M+H].
3
3
в вакууме,
+
К перемешиваемому при 23°C раствору цис-Fmoc-Pro(4-N)-Dil-OtBu (3,13 г, 4,04 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляли пиперидин (10 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенной реакционной смеси добавляли гексаны. Слой ацетонитрила концентрировали и неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки. Всего получали 1,57 г H-Pro(4-N)-Dil-OtBu в виде прозрачного масла(3,95 ммоль, 88%). ЖХМС RT=1,19 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 398,50 [M+H].
3
4
3
вакууме
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-OH (1,03 г, 7,12 ммоль) и H-Pro(4-N)-Dil-OtBu (1,57 г, 3,56 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,84 г, 2,50 мл, 0,014 моль), с последующим добавлением HATU (2,03 г, 5,33 ммоль). Через 3 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в . Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 817 мг Dov-Pro(4-N)-Dil-OtBu в виде твердого вещества белого цвета (1,56 ммоль, 44%). ЖХМС RT=1,21 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 525,28 [M+H].
3
3
+
Находящуюся при 23°C суспензию Dov-Pro(4-N)-Dil-OtBu (0,817 г, 1,56 ммоль) в 3,0 M HCl диоксане перемешивали. Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 704 мг Dov-Pro(4-N)-Dil-OH в виде HCl соли (1,39 ммоль, 89%). ЖХМС RT=0,676 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 469,44 [M+H].
3
4
41
66
8
8
вакууме
+
+
К перемешиваемои при 23°C суспензии Dov-Pro(4-N)-Dil-OH HCl соли (0,120 г, 0,256 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (0,143 г, 0,310 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,132 г, 0,200 мл, 1,02 ммоль), с последующим добавлением HATU (0,156 г, 0,410 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в . Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 37,0 мг указанного в заголовке соединения в виде масла желтого цвета (0,046 ммоль, 18%). ЖХМС RT=1,13 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 799,43 [M+H]; ВРМС m/z 799,5064 [CHNO+H].
Пример 46
(S)-3-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-4-(((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-3-(((S)-1-метокси-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-4-оксобутановая кислота
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Asp(OBzl)-OH (5,00 г, 15,5 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dil-OtBu (4,36 г, 15,5 ммоль) в EtOAc (20 мл) добавляли DIEA (6,00 г, 8,10 мл, 46,41 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°C и перемешивали в течение 0,5 ч. Через 0,5 ч, к реакционной смеси добавляли дополнительный DIEA (6,00 г, 8,01 мл, 46,4 ммоль), и ее перемешивали в течение 0,5 ч. Затем к реакционной смеси добавляли CMPI (5,93 г, 23,2 ммоль), и она медленно нагревалась до комнатной температуры, и ее перемешивали в течение 10 ч. Неочищенную реакционную смесь промывали 1 M HCl (30 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (25 мл x 2). Органическую фракцию сушили над безводным сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки. Всего получали 7,85 г Boc-Asp(OBzl)-Dil-OtBu в виде масла коричневого цвета (13,9 ммоль, 90%). ЖХМС RT=1,72 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 565,3 [M+H].
+
Находящийся при 23°C раствор Boc-Asp(OBzl)-Dil-OtBu (7,85 г, 13,9 ммоль) в 4,0 M HCl в диоксане (20 мл) перемешивали. Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 7,85 г обогащенного H-Asp(OBzl)-Dil-OH в виде HCl соли. ЖХМС RT=0,951 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 409,40 [M+H].
4
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-OH (3,00 г, 20,7 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли DIEA (6,96 г, 9,40 мл, 0,054 моль) и HATU (7,60 г, 19,9 ммоль), с последующим добавлением соли обогащенного H-Asp(OBzl)-Dil-OH (7,85 г). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 2,00 г Dov-Asp(OBzl)-Dil-OH в виде твердого вещества белого цвета (3,74 ммоль, 28%). ЖХМС RT=1,10 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 536,5 [M+H].
4
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-Asp(OBzl)-Dil-OH (1,00 г, 1,87 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (1,04 г, 2,25 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,970 г, 1,30 мл, 7,47 ммоль), с последующим добавлением HATU (1,14 г, 2,99 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 1,25 г Dov-Asp(OBzl)-Dil-Dap-Phe-OMe (1,44 ммоль, 77%) в виде масла оранжевого цвета. ЖХМС RT=1,21 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 866,6 [M+H].
4
+
+
40
65
5
10
К перемешиваемой при 23°C суспензии Dov-Asp(OBzl)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,525 г, 0,606 ммоль) в МеоН (10 мл) добавляли 10% Pd/C (50 мг), с последующим добавлением атмосферы водорода. Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь отфильтровывали через слой диатомитовой земли, с последующим упариванием летучих органических соединений. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 6,00 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (0,008 ммоль, 1%). ЖХМС RT=1,04 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 776,43 [M+H]; ВРМС m/z 776,4794 [CHNO+H].
Пример 47
(2S,3R)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-3-гидрокси-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
4
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Thr(Bzl)-Dil-OH (561 мг, 0,883 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (345 мг, 0,794 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли DIEA (417 мг, 562 мкл, 3,23 ммоль) с последующим добавлением HATU (820 мг, 2,15 ммоль). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 326 мг Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина в виде твердого вещества белого цвета (0,396 ммоль, 37%). ЖХМС RT=1,20 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 824,76 [M+H].
+
+
39
67
5
8
Перемешиваемую при 23°C суспензию Dov-Thr(Bzl)-Dil-Dap-(1R,2S)-(-)-Норэфедрина (326 мг, 0,396 ммоль) в МеоН (10 мл) загружали в реактор гидрирования с непрерывным потоком с использованием никеля Рэнея (CatCart) и повышенных температуре (120°C) и давлении (80 бар). После элюирования, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NH4OH в качестве элюента. Всего получали 15 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (0,020 ммоль, 5%). ЖХМС RT=1,17 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 734,5 [M+H]; ВРМС m/z 734,5053 [CHNO+H].
Пример 48
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-серинат
4
35
65
5
9
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Val-Dil-OH (583 мг, 1,07 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Ser-OMe (783 мг, 1,97 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (223 мг, 0,324 мл, 1,72 ммоль), с последующим добавлением HATU (1,03 г, 2,71 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 704 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (1,01 ммоль, 74%). ЖХМС RT=0,917 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 700,43 [M+H]; ВРМС m/z 700,4843 [CHNO+H].
Пример 49
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-изолейцинат
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (6,62 г, 14,1 ммоль) и H-Ile-OMe (3,08 г, 21,2 ммоль) в СНCl (20 мл) добавляли DIEA (7,30 г, 9,90 мл, 56,5 ммоль), с последующим добавлением HATU (3,44 г, 3,20 мл, 0,021 моль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 8,56 г Boc-Dap-Ile-OMe в виде масла коричневого цвета (20,7 ммоль, 88%). ЖХМС RT=1,51 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 415,16 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Dap-Ile-OMe (6,62 г, 16,0 ммоль) в СНCl (20 мл) добавляли ТФУ (10 мл). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NH4OH в качестве элюента. Всего получали 3,55 г H-Dap-Ile-OMe в виде масла желтого цвета (8,29 ммоль, 52%). ЖХМС RT=0,691 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 315,16 [M+H].
3
4
37
68
8
8
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (150 мг, 0,329 ммоль) и H-Dap-Ile-OMe (207 мг, 0,657 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (170 мг, 0,220 мл, 1,31 ммоль), с последующим добавлением HATU (251 мг, 0,657 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 90% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 148 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (0,197 ммоль, 60%). ЖХМС RT=1,43 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 753,48 [M+H]; ВРМС m/z 753,5224 [CHNO+H].
Пример 50
(2S,3S)-3-амино-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
-
3
2
39
67
7
7
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-NH (13,4 мг, 0,017 ммоль) в ТГФ (0,1 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,035 мл, 0,035 ммоль). Через 3 ч, добавляли дополнительный триметилфосфин (1 M, 0,020 мл, 0,020 ммоль). Через еще 1 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. раствор разбавляли водой и ДМФА и выдерживали в течение 30 мин. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном растворе гидроксида аммония в качестве элюента. Всего получали 5,8 мг указанного в заголовке соединения (0,008 ммоль, 45%). ЖХМС RT=0,85 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 746,6 [M+H]; ВРМС m/z 746,5173 [CHNO+H].
Пример 51
(2S,3S)-3-амино-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-(трет-бутиламино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамид
-
3
43
75
7
7
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-NHt-Bu (15,4 мг, 0,019 ммоль) в ТГФ (0,1 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,037 мл, 0,037 ммоль). Через 3 ч, добавляли дополнительный триметилфосфин (1M, 0,020 мл, 0,020 ммоль) добавляли. Чере еще 1 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Реакционный раствор разбавляли водой и ДМФА и выдерживали в течение 30 мин. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном растворе гидроксида аммония в качестве элюента. Всего получали 2,7 мг указанного в заголовке соединения (0,003 ммоль, 18%). ЖХМС RT=0,85 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 746,6 [M+H]; ВРМС m/z 802,5799 [CHNO+H].
Пример 52
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-3-азидо-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)пропанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
4
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Fmoc-MeVal-OH (1,03 г, 2,90 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (1,35 мл, 7,74 ммоль), с последующим добавлением HATU (1,11 г, 2,90 ммоль). Через 5 мин, к реакционной смеси добавляли H-4-Азидо-Ala-Dil-OH (0,610 г, 2,90 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (15 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл x 2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 348 мг Fmoc-MeVal-4-Азидо-Ala-Dil-OH (0,535 ммоль, 28%) в виде масла желтого цвета. ЖХМС RT=1,80 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 651,3 [M+H].
+
+
38
62
8
8
К перемешиваемой при 23°C суспензии Fmoc-MeVal-4-Азидо-Ala-Dil-OH (348,00 мг, 0,535 ммоль) и H-Dap-Phe-OMe (372,66 мг, 1,07 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (276 мг, 0,400 мл, 2,14 ммоль) с последующим добавлением HATU (408 мг, 1,07 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции и происходящее одновременно с реакцией снятие защитной Fmoc группы. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 5,00 мг указанного в заголовке соединения (0,006 ммоль, 1%). ЖХМС RT=1,08 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 759,5 [M+H]; ВРМС m/z 759,4753 [CHNO+H].
Пример 53
метил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Fmoc-MeVal-OH (2,46 г, 6,96 ммоль) и H-Abu(3-N)-Dil-OtBu (2,46 г, 6,38 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (3,30 г, 4,5 мл, 25,5 ммоль), с последующим добавлением HATU (3,65 г, 9,57 ммоль). Через 6 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 3,16 г Fmoc-MeVal-Abu(3-N3)-Dil-OtBu (4,12 ммоль, 65%) в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=2,08 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 722,7 [M+H].
3
2
2
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии соли муравьиной кислоты Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OtBu (3,16 г, 4,12 ммоль) в СНCl (5,0 мл) добавляли ТФУ (10,0 мл). Через 14 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением масла. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,26 г Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OH (2,90 ммоль, 66%) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=1,80 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 665,3 [M+H].
3
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OH (80,0 мг, 0,103 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OMe (83,9 мг, 0,182 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляли DIEA (0,083 мл, 0,481 ммоль) с последующим добавлением HATU (91,8 мг, 0,241 ммоль). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли ДМФА и очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 97,0 мг Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OMe (0,093 ммоль, 77%) в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=1,90 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 995,6 [M+H].
3
4
39
64
8
8
+
+
К перемешиваемому при 23°C раствору Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OMe (97,0 мг, 0,093 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенному раствору реакции добавляли гексаны (25 мл x 3), чтобы экстрагировать неполярные побочные продукты. Слой ацетонитрила концентрировали в вакууме, и неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном NHOH в качестве элюента. Всего получали 74,0 мг указанного в заголовке соединения (0,096 ммоль, 103%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС RT=1,09 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 773,5 [M+H]; ВРМС m/z 773,4911 [CHNO+H].
Пример 54
(2S,3S)-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-амино-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-3-азидо-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамид
2
2
2
2
2
2
2
вакууме
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Bod-Dap-OH дициклогексиламина (10,0 г, 21,3 ммоль) и HCl соли H-Phe-NH (6,42 г, 32,0 ммоль) в СНCl (20,0 мл) добавляли DIEA (11,0 г, 14,9 мл, 85,3 ммоль) с последующим добавлением DEPC (5,19 г, 4,80 мл, 0,032 моль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали HO (25 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (25 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в . Неочищенное масло оранжевого цвета очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель 40 мкм, размер 60 Å) с использованием от 2% до 10% метанола в СНCl в качестве элюента. Всего получали 7,25 г Boc-Dap-Phe-NH (16,7 ммоль, 78%) в виде масла желтого цвета. ЖХМС RT=1,28 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 434,19 [M+H].
2
2
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Dap-Phe-NH (7,25 г, 16,7 ммоль) в СНCl (10 мл) добавляли ТФУ (10 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 6,00 г H-Dap-Phe-NH в виде масла оранжевого цвета (13,4 ммоль, 80%). ЖХМС RT=0,691 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 334,17 [M+H].
3
2
3
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OH (456 мг, 0,586 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-NH (457 мг, 1,02 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,350 г, 0,500 мл, 2,74 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,520 г, 1,37 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 526 мг Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-NH в виде соли муравьиной кислоты (0,513 ммоль, 75%). ЖХМС RT=1,81 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 980,39 [M+H].
3
2
38
63
9
7
в вакууме. Неочищенное
+
+
К перемешиваемому при 23°C раствору Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-NH (525 мг, 0,513 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенному раствору реакции добавляли гексаны (15 мл x 3). Слой ацетонитрила концентрировали масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 354 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,406 ммоль, 79%). ЖХМС RT=1,15 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 758,24 [M+H]; ВРМС m/z 758,4915 [CHNO+H].
Пример 55
((2S,3S)-3-азидо-Н-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-(трет-бутиламино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)амино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамид
-
трет-бутиламина
3
42
71
9
7
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Fmoc-MeValAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OH (111 мг, 0,113 ммоль), гидрохлорида (31,5 мг, 0,287 ммоль), HATU (92,0 мг, 0,242 ммоль) в ДМФА (1,0 мл) добавляли основание Хунига (0,079 мл, 0,454 ммоль). Через 1 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли этилацетатом и органическую фракцию промывали 1 N HCl и насыщенным солевым раствором. Органическую фракцию сушили над сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное масло желтого цвета растворяли в пиперидине (2,0 мл) и ацетонитриле (5,0 мл). Через 1 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Слой ацетонитрила экстрагировали Гексанами (2x), и слой ацетонитрила концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водном растворе гидроксида аммония в качестве элюента. Всего получали 50,3 мг указанного в заголовке соединения (0,062 ммоль, 55%). ЖХМС RT=1,29 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 814,1 [M+H]; ВРМС m/z 814,5541 [CHNO+H].
Пример 56
трет-бутил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
+
К перемешиваемому при 25°C раствору дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (6,47 г, 13,8 ммоль) и H-Phe-OtBu (3,91 г, 15,2 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли DIEA (8,76 мл, 55,2 ммоль), с последующим добавлением DEPC (3,12 мл, 20,7). Через 8 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 5,35 г Boc-Dap-Phe-OtBu (10,9 ммоль, 79%). ЖХМС RT=2,89 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 491,48 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору Boc-Dap-Phe-OtBu (5,25 г, 10,7 ммоль) в СНCl (10,0 мл) добавляли ТФУ (10,0 мл). Через 12 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Synergi 10 мкм Max-RP 80 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,05% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 2,85 г H-Dap-Phe-OtBu в виде соли ТФУ (5,65 ммоль, 68%). ЖХМС RT=1,82 мин (Метод А); ЭРИ-МС m/z 391,02 [M+H].
3
42
70
8
8
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OH (410 мг, 0,527 ммоль) и H-Dap-Phe-OtBu Трифторацетатной соли (482 мг, 0,956 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (319 мг, 430 мкл, 2,47 ммоль) с последующим добавлением HATU (470 мг, 1,23 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции наряду с удаленим 10% Fmoc-группы. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 26,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты белого цвета (0,030 ммоль, 5%). ЖХМС RT=1,41 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 815,33 [M+H]; ВРМС m/z 815,5383 [CHNO+H].
Пример 57
((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланин
3
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OH (410 мг, 0,527 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OtBu (482 мг, 0,956 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (319 мг, 430 мкл, 2,47 ммоль) с последующим добавлением HATU (470 мг, 1,23 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 648 мг Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OtBu в виде соли муравьиной кислоты белого цвета(0,598 ммоль, 97%). ЖХМС RT=1,41 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 1037,41 [M+H].
3
2
2
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии соли муравьиной кислоты Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OtBu (648 мг, 0,598 ммоль) в СНCl (5,00 мл) добавляли ТФУ (5,00 мл). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением масла коричневого цвета. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 502 мг Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OH в виде соли ТФУ (0,458 ммоль, 77%). ЖХМС RT=1,81 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 981,22 [M+H].
3
38
62
8
8
в вакууме. Неочищенное
+
+
К перемешиваемому при 23°C раствору трифторацетатной соли Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-Phe-OH (392 мг, 0,382 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенному раствору реакции добавляли гексаны (15 мл x 3). Слой ацетонитрила концентрировали масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего 3 получали 60 мг обогащенного указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=1,19 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 759,13 [M+H]; ВРМС m/z 759,4755 [CHNO+H].
Пример 58
трет-бутил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
3
43
72
8
8
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (327 мг, 0,574 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-Phe-OtBu (0,340 г, 0,675 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,370 г, 0,500 мл, 2,87 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,550 г, 1,43 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 453 мг (0,518 ммоль, 72%) указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=1,42 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 828,94 [M+H]; ВРМС m/z 829,5536 [CHNO+H].
Пример 59
(2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(((S)-2-фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии дициклогексиламиновой соли Boc-Dap-OH (2,48 г, 5,29 ммоль) и (S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (1,00 г, 5,29 ммоль) в СНCl (20,0 мл) добавляли DIEA (2,73 г, 3,7 мл, 21,1 ммоль) с последующим добавлением DEPC (1,29 г, 1,20 мл, 7,93 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 2,52 г Boc-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (4,99 ммоль, 94%) в виде соли муравьиной кислоты. ЖХМС RT=1,35 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 459,2 [M+H].
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (2,52 г, 4,99 ммоль) в СНCl (10,0 мл) добавляли ТФУ (5,00 мл). Через 5 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки. Всего получали 2,43 г H-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (5,14 ммоль, 84%) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=0,575 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 359,2 [M+H].
3
39
64
12
6
вакууме
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (305 мг, 0,668 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (0,36 г, 1,002 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,35 г, 0,5 мл, 2,67 ммоль) с последующим добавлением HATU (509 мг, 1,34 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в . Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 47,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,056 ммоль, 8%). ЖХМС RT=1,24 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 797,3 [M+H]; ВРМС m/z 797,5139 [CHNO+H].
Пример 60
(2S,3S)-3-азидо-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(((S)-2-фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)бутанамидо)бутанамид
3
3
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-OH (0,491 г, 0,631 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (0,532 г, 1,13 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,381 г, 0,500 мл, 2,97 ммоль) с последующим добавлением HATU (0,57 г, 1,486 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в вакууме. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 125 мг Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина в виде соли муравьиной кислоты (0,119 ммоль, 16%). ЖХМС RT=1,94 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 1005,35 [M+H].
3
38
62
12
6
в вакууме.
+
+
К перемешиваемому при 23°C раствору Fmoc-MeVal-Abu(3-N)-Dil-Dap-(S)-2-Фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этанамина (525 мг, 0,499 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавляли пиперидин (5 мл). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. К неочищенному раствору реакции добавляли гексаны (x3). Слой ацетонитрила концентрировали Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 20,0 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,022 ммоль, 5%). ЖХМС RT=1,37 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 783,42 [M+H]; ВРМС m/z 783,4979 [CHNO+H].
Пример 61
(2S,3S)-3-азидо-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(((S)-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
2
2
2
4
вакууме.
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Dap-OH дициклогексиламиновой соли (1,95 г, 4,154 ммоль) и (S)-2-фенил-1-(2-тиазол-2-ил)этиламина (1,00 г, 4,154 ммоль) в СНCl (20,0 мл) добавляли DIEA (2,15 г, 2,9 мл, 16,615 ммоль) с последующим добавлением DEPC (1,01 г, 0,9 мл, 0,006 моль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь промывали HO (25 мл x 2), с последующей промывкой насыщенным солевым раствором (25 мл x 2). Органическую фракцию сушили над слоем MgSO, отфильтровывали и концентрировали в Всего получали 1,65 г Boc-Dap-(S)-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этанамина (3,48 ммоль, 84%) в виде масла желтого цвета. ЖХМС RT=1,59 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 475,2[M+H].
2
2
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии Boc-Dap-(S)-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этанамина (1,65 г, 3,49 ммоль) в СНCl (10,0 мл) добавляли ТФУ (10,0 мл). Через 4 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Летучие органические соединения упаривали в вакууме. Неочищенное масло растворяли в ДМФА (5 мл) и триэтиламине (1 мл) до достижения pH, равного 8. Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 935 мг H-Dap-(S)-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этанамина (1,92 ммоль, 55%) в виде соли ТФУ. ЖХМС RT=1,04 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 375,0 [M+H].
3
41
65
9
6
вакууме
+
+
К перемешиваемой при 23°C суспензии трифторацетатной соли Dov-Abu(3-N)-Dil-OH (302 мг, 0,661 ммоль) и трифторацетатной соли H-Dap-(S)-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этанамина (247 мг, 0,661 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли DIEA (0,34 г, 0,5 мл, 2,65 ммоль) с последующим добавлением HATU (504 мг, 1,32 ммоль). Через 10 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным солевым раствором, сушили над слоем сульфата магния, отфильтровывали и концентрировали в . Неочищенное масло очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini NX-C18 10 мкм 110 Å (150×30 мм) с использованием от 10% до 90% MeCN в 0,1% водной ТФУ в качестве элюента. Всего получали 111 мг указанного в заголовке соединения в виде соли ТФУ (0,120 ммоль, 18%). ЖХМС RT=1,33 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 812,2 [M+H]; ВРМС m/z 812,4835 [CHNOS+H].
Пример 62
трет-бутил ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-метилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)-L-фенилаланинат
-
3
43
74
6
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-Ot-Bu (102,5 мг, 0,117 ммоль) в ДМФА (1,0 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,350 мл, 0,350 ммоль). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 70,1 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,083 ммоль, 70%). ЖХМС RT=1,22 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 803,3 [M+H]; ВРМС m/z 803,5642 [CHNO+H].
Пример 63
(2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(((S)-2-фенил-1-(1H-тетразол-5-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
-
3
39
66
10
8
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-Тетразола (19,4 мг, 0,023 ммоль) в ДМФА (0,2 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,068 мл, 0,068 ммоль). Через 2 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 9,9 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,012 ммоль, 53%). ЖХМС RT=1,07 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 771,2 [M+H]; ВРМС m/z 771,5233 [CHNO+H].
Пример 64
(2S,3S)-3-амино-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-Н-((3R,4S,5S)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(((S)-2-фенил-1-(тиазол-2-ил)этил)амино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-Н-метилбутанамид
-
3
41
67
7
6
+
+
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соли муравьиной кислоты DovAbu(3-N)-Dil-Dap-Phe-Тиазола (37,2 мг, 0,043 ммоль) в ТГФ (0,2 мл) добавляли триметилфосфин в ТГФ (1 M, 0,090 мл, 0,090 ммоль). Через 1 ч, анализ посредством ЖХМС показал завершение реакции. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством препаративной ОФ-ВЭЖХ с использованием колонки Phenomenex Gemini-NX 10 мкм C-18 110 Å (150×30 мм) с использованием от 5% до 95% MeCN в 0,1% водной муравьиной кислоте в качестве элюента. Всего получали 16,8 мг указанного в заголовке соединения в виде соли муравьиной кислоты (0,020 ммоль, 47%). ЖХМС RT=1,15 мин (Метод В); ЭРИ-МС m/z 786,2 [M+H]; ВРМС m/z 786,4940 [CHNOS+H].
in vitro
Пример B1 Эксперименты по определению цитотоксичности
2
2
Эффективность действия соединений in vitro измеряли посредством оценки их цитотоксической активности на различных линиях раковых клеток. Этот тест проводили в обработанных чистой культурой ткани 96-луночных планшетах. Используемые линии клеток представляли собой PC3 (карцинома простаты человека), HCC-1954 (карцинома молочных протоков человека) и HCT15 (колоректальная аденокарцинома человека, Pgp-экспрессирующая). Клетки высевали при приблизительно 1000-1500 клеток на лунку в 50 мкл среды для выращивания (RPMI-1640+10% инактивированной нагревом фетальной бычьей сыворотки) и инкубировали в течение ночи при 37°C с 5% CO, чтобы обеспечить их прикрепление. На следующий день, 50 мкл 2x исходного контрольного растворителя (ДМСО) или соединений при переменных концентрациях добавляли в кажду лунку в трех повторностях. Дополнительно, использовали контрольные лунки, не содержащие клеток, или только необработанные клетки. Планшеты инкубировали в увлажняемом инкубаторе для культур тканей с 5% CO при 37°C в течение от 4 до 6 дней после добавления соединений, чтобы измерить цитотоксичность. Через 4-6 дней, добавляли 20 мкл на лунку реагента PrestoBlue™ (Life Technologies #A13261) для оценки жизнеспособности клеток. Планшеты инкубировали при 37°C в течение 1-2 ч. Флуоресценцию регистрировали при 540 возб./590 эм. с использованием считывающего устройства Biotek Synergy™ H4 для планшетов. Представительные данные отображали графически в виде процента выживаемости в сравнении с необработанными контрольными лунками. Данные для соединений, тестируемых при данном анализе, отображали графически в виде процента выживаемости в сравнении с необработанными контрольными лунками, как показано на ФИГ. 9-30.
Пример B2 Определение полимеризации тубулина
Ингибирование полимеризации тубулина под действием соединений, описанных в данном документе, оценивали на тубулине бычьего мозга. Чтобы оценить активность соединений, тубулин высевали при приблизительно 400 мкг на лунку в 100 мкл общего буфера для тубулина, и затем обрабатывали до конечной концентрации соединения, равной 10 мкМ в двух повторностях при инициации теста. Тесты на полимеризацию тубулина обычно выполняли при 37°C в течение 60 мин после добавления тестируемых соединений. Полимеризацию тубулина определяли посредством спектроскопии поглощения с использованием значения оптической плотности при 340 нм. Для оценки количества полимеризованного тубулина, значение оптической плотности при 340 нм получали каждую минуту после добавления тестируемых соединений. Для анализа, степень полимеризации тубулина посредством обработанного соединением тубулина сравнивали с такой степенью для контроля, которым являлся обработанный буфером тубулин. В частности, исследования ингибирования тубулина выполняли с использованием набора для тестирования полимеризации тубулина HTS-Tubulin Polymerization Assay kit (Cytoskeleton Inc.; Catalog # BK004P), с использованием следующего протокола для образцов:
1. Предварительно нагревают спектрофотометр и 96-луночные планшеты до 37°C в течение 30 мин до начала тестирования. Теплый планшет является существенным для высокой полимеризационной активности и воспроизводимых результатов.
2. Вводят все параметры устройства для считывания планшетов (Поглощение при 340 нм, 37°C, одно считывание каждую минуту), таким образом, чтобы спектрофотометр был готов для использования. Как только тубулин добавляют аликвотами в лунки при 37°C, считывание должно начинаться немедленно.
3. Нагревают 500 мкл общего буфера для тубулина до комнатной температуры. Теплый буфер необходим для разведений лиганда тубулина.
4. Паклитаксел включают в качестве контроля. Применяют 10 мкл Паклитаксела на лунку, что приводит к получению конечной концентрации, равной 10 мкМ.
5. Получают холодный аналитический буфер: общий буфер для тубулина, 1 мМ ГТФ, 10% глицерина.
6. Ресуспендируют 4 мг тубулина с 1 мл холодного аналитического буфера чтобы получить конечную концентрацию белка, равную 4 мг/мл. Помещают пробирки на лед и выдерживают 3 мин для полного ресуспендирования белка.
7. Готовят выбранное соединение при 10X концентрации в аналитическом буфере.
8. Пипеткой добавляют 10 мкл 10X концентрированного соединения в требуемое число лунок предварительно нагретого планшета. Инкубируют планшет в течение 2 мин при 37°C.
9. Пипеткой добавляют 10 мкл аналитического буфера только в две контрольные лунки (обработанный буфером тубулин).
10. Пипеткой добавляют 100 мкл тубулина в требуемое число лунок (две лунки должны являться контролями без соединения, которые обрабатывают буфером).
11. Немедленно помещают планшет в спектрофотометр при 37°C и начинают регистрацию оптической плотности при 340 нм каждую минуту. Увеличение значений оптической плотности при 340 нм приравнивают к увеличению полимеризации тубулина.
Данные для соединений, тестируемых при данном анализе, представлены на ФИГ. 1-8.
Пример B3 Определение эффективности действия тестируемых соединений In Vivo: Оценка эффективности действия на подкожно установленную клеточную линию SW780, раковых клеток мочевого пузыря человека, имплантированную мышам ICR SCID
6
3
Для исследований in vivo на животных, тестируемые соединения разбавляют 20 мМ Гистидина, 5% Сахарозы, pH 6 с использованием 15% ДМСО. Самцов мышей ICR SCID (Taconic Farm, Hudson, NY) помещают в стандартные микроизолирующие клетки для грызунов. Управление состоянием окружающей среды для комнат с животными устанавливают, чтобы поддерживать температуру в интервале 20-24°C, относительную влажность между 30% и 70%, и приблизительно 12-часовой световой/12-часовой темновой цикл. Пищу и воду обеспечивают по потребностям. Через 72 ч акклиматизации, мышам имплантируют раковые клетки мочевого пузыря человека SW780 (2×10 клеток/мышь), суспендированные в 50% полной среде для культуры (Trevigen, Inc.), смешанной с PBS (Gibco), и проводят мониторинг степени роста опухоли. Когда средний объем опухоли достигает ~200 мм, опухоли сортируют по совпадающим размерам, и мышей рандомизируют в группы для обработки (n=8 или 10). Опухоленесущих мышей обрабатывают внутривенно растворителем или тестируемым соединением при 2 или 4 мг/кг (мнк) в режиме дозирования QW в течение 3 недель. Объем опухоли оценивают дважды еженедельно, используя измерения циркулем.
В то время, как приведенное выше письменное описание соединений, применений и способов, описанных в настоящем документе, позволяет рядовому специалисту получать и применять соединения, применения и способы, описанные в настоящем документе, рядовые специалисты в области смогут понять и оценить существование вариаций, комбинаций и эквивалентов конкретного варианта осуществления, способа и примеров в данном описании. Соединения, применения и способы, предоставленные в настоящем описании, следовательно, не должны ограничиваться описанными выше вариантами осуществления, способами или примерами, но скорее охватывают все варианты осуществления и способы в пределах объема и сущности соединений, применений и способов, предоставленных в настоящем описании.