Значение молекул повреждения эндотелия в генезе угрожающего самопроизвольного выкидыша

№ 6 - 2013 г.

14.00.00 медицинские и фармацевтические науки

УДК 618.39:611-018.74-001

ЗНАЧЕНИЕ МОЛЕКУЛ ПОВРЕЖДЕНИЯ ЭНДОТЕЛИЯ В ГЕНЕЗЕ УГРОЖАЮЩЕГО САМОПРОИЗВОЛЬНОГО ВЫКИДЫША

И. А. Невзорова, А. И. Пашов

ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В. Ф. Войно-Ясенецкого» Минздрава России

Целью этого исследования явилась оценка уровня молекулы тромбомодулина (ТМ), фактора Виллебранда как специфических маркеров клеточно-эндотелиальной дисфункции, а также адгезии тромбоцитов к коллагену у беременных с эпизодами раннего самопроизвольного выкидыша (СПВ). В исследование были включены 60 женщин I, II триместров беременности: 30 пациенток с угрозой аборта и 30 женщин с физиологическим течением беременности. Отмечается повышение концентрации ТМ в основной группе с угрозой СПВ во II триместре беременности (14 нг/мл) по отношению к I триместру (6,7 ± 0,6). Показатели активности адгезивного протеина (vWF) у беременных с угрозой СПВ в I триместре был достоверно выше (112,8 ± 5,9) по сравнению с группой контроля в I триместре (74,6 ± 21,1^ < 0,001. Таким образом, повышение уровня ТМ и активности vWF свидетельствует об усилении тромбогенности эндотелия матки, снижении антитромботического потенциала трофобласта и развивающегося эмбриона. Несвоевременная диагностика тромбофилии и коррекция нарушений гемостаза являются причиной развития эндотелиоза и осложнений беременности.

Ключевые слова: привычное невынашивание беременности (ПНБ), угрожающий самопроизвольный выкидыш (СПВ), эндотелиальная дисфункция, тромбомодулин (ТМ), фактор Виллебранда (vWF).

Невзорова Ирина Анатольевна — аспирант кафедры акушерства и гинекологии ИПО ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого», е-mail: Iren2208.85@list.ru;

Пашов Александр Иванович — доктор медицинских наук, профессор кафедры акушерства и гинекологии ИПО ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого», рабочий телефон: 8 (391) 237-17-71, е-mail: pachov@mail.ru

Введение. Самопроизвольным абортом заканчивается до 15 % подтвержденных беременностей, что приводит не только к медицинским, но и демографическим потерям — в РФ не рождается более 200 000 желанных детей. При этом, как правило, развивается системная эндотелиальная дисфункция, активируется провоспалительный ответ и индуцируется протромбогенный потенциал крови, что служит причиной нарушения процессов имплантации, плацентации, созревания плода и плаценты [1].

Согласно общепринятому определению, там, где имели место два и более выкидыша подряд, речь идет о привычном невынашивании беременности (ПНБ). В современном акушерстве одной из важнейших проблем до сих пор остается самопроизвольное прерывание беременности в особенности на ранних сроках. В I триместре беременности огромное значение отводится адекватному развитию и дифференцировке трофобласта, а также воздействию материнской системы гуморальных факторов, в том числе коагуляционных, и функции самого трофобласта, обладающего потенциалом регулировать свертывающую систему [2, 3].

При этом достоверно определено, что одними из важнейших факторов, провоцирующими и запускающими процесс самопроизвольного прерывания беременности, являются те или иные нарушения в системе гемостаза, в частности наличие тромбофилии.

Концепция о роли тромбофилических состояний в патогенезе важнейших осложнений беременности, таких как синдром потери плода, гестозы, преждевременная отслойка плаценты, повторные тромбозы, позволила обосновать новые подходы к эффективной профилактике хорошо известных гравидарных осложнений. Существенной особенностью данных превентивных мероприятий является необходимость их осуществления, начиная с предгравидарного этапа и ранних сроков беременности. Это связано с тем обстоятельством, что патогенетические эффекты генетической тромбофилии и/или антифосфолипидных антител, гипергомоцистеинемии начинают осуществляться непосредственно с периода гестации: момента имплантации, инвазии трофобласта и в дальнейшем плацентации [1, 2].

Материалы и методы. Для выполнения поставленной цели проводилось лабораторное исследование крови на оценку концентрации тромбомодулина (ТМ) у 60-ти пациенток I и II триместров беременности (26,5 ± 1,1). В основную группу были включены 30 пациенток I и II триместра беременности с угрозой аборта (средний возраст 27,6 ± 0,86 года). Группа контроля составили 30 женщин аналогичных сроков гестации с физиологически протекающей беременностью. В анамнезе у пациенток основной группы имелось от 2-х до 5-ти эпизодов потерь беременности в I и II триместрах беременности. В комплекс обязательного обследования пациенток наряду с клиническими и коагулологическими исследованиями входило выявление концентрации ТМ и фактор Виллебранда (vWF) в плазме крови. Работа соответствовала всем этическим стандартам Комитета по экспериментам на человеке с соблюдением требований Хельсинской декларации 1975 года.

Определение содержания ТМ в плазме крови выполнялось на спектрофотометре Stat Fax 3000 AWARNESS (США) методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием реактива «Human sCD141 ELISA CD141 ELISA KIT» производства Diaclon (Франция). vWF оценивался с помощью агрегометра «ChronoLog» (CШA) с использованием набора фирмы Dade Behring (Германия).

Результаты и обсуждение. Одним из важнейших методов диагностики дисфункции эндотелия является оценка содержания в крови различных веществ, образующихся

в эндотелиальном матриксе сосудов. Однако далеко не все показатели имеют одинаковую диагностическую ценность, поскольку значительная часть маркеров функционального состояния эндотелия, кроме эндотелиоцитов, образуются также и в других клетках. К высокоспецифичным маркерам дисфункции эндотелия относится ТМ. CD141 является гликопротеином в составе мембраны эндотелия и клеточным рецептором для тромбина. Он превращает протеин С в активную форму, выполняя антикоагулянтную функцию [3-5].

В таблице представлены показатели концентрации ТМ у обследованных женщин с угрозой самопроизвольного выкидыша (СПВ).

Сравнение концентрации молекул адгезии (ТМ, vWF) и адгезии тромбоцитов у женщин с угрозой СПВ и здоровых беременных

Показатели Основная группа с угрозой СПВ Контрольная группа

I триместр

Срок гестации на момент исследования (недели) 6,7 ± 0,6 [4;10] 14 [14] 9,8 ± 1,08 [6;12] 17,4 ± 2,04 [13;25]

Тромбомодулин (нг/мл) 4,6 ± 1,3** [0;11,1] 6,6 ± 4,7* [3,4;10,6] 7,8 ± 2,2** [0,1;13,6] 7,2 ± 2,7* [0,8;13,5]

Фактор Виллебранда (%) 112,8 ± 5,9** [103;132] 124,2 ± 13,7 [95;147] 74,6 ± 21,1** [26;109] 116,5 ± 12,6 [96;154]

Адгезия тромбоцитов к коллагену (%) 24,5 ± 6,1** [12;36] 29,8 ± 3,6 [18;24] 18,3 ± 4,7** [7;26] 26,5 ± 2,8 [17;25]

Примечание: в квадратных скобках указаны минимальные и максимальные значения показателя в подгруппе, * - р < 0,05 — различия достоверны в сравнении с контрольной группой (контроль I и II); ** - р < 0,001 — различия достоверны в сравнении с контрольной группой I и II; в таблице представлены средние значения переменных М ± ДИ95%

Как следует из таблицы, содержание ТМ имело тенденцию к повышению лишь с ростом гестации. Отмечается повышение концентрации ТМ в основной группе (СПВ) во II триместре беременности по отношению к I триместру. Показатели активности адгезивного протеина (vWF) у беременных с угрозой СПВ в I триместре был достоверно выше по сравнению с группой контроля в I триместре, что было подтверждено оценкой степени адгезии тромбоцитов к коллагену (как матриксу эндотелиальной интимы), последняя составила 24,5 ± 6,5 % (при контроле 18,3 ± 4,7 %, р < 0,001), демонстрируя положительную корреляцию между степенью клеточно-эндотелиальной адгезией и активностью vWF в плазме у беременных с риском СПВ. Данный маркер повреждения эндотелия имеет тенденцию к повышению параллельно с увеличением гестационного срока и ассоциируется в повышенной угрозой СПВ, возникающей во II триместре беременности.

Выводы. Таким образом, повышение уровня ТМ и активности vWF свидетельствует об усилении тромбогенности эндотелия матки, снижении антитромботического потенциала трофобласта и развивающегося эмбриона (за счет нарушения тромбин-индуцированной активации протеина С) и является прогностически неблагоприятным для риска преэмбрионических и поздних репродуктивных потерь у беременных высокой группы риска. Несвоевременная диагностика тромбофилии и коррекция нарушений гемостаза являются причиной развития эндотелиоза

и осложнений беременности.

Список литературы

1. Зайнулина М. С. Маркеры дисфункции эндотелия и тромбофилии в диагностике ПОНРП / М. С. Зайнулина // Журн. акушерства и женских болезней. — 2003. — Т. 2.

- С. 36-42.

2. Кузник Б. И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии / Б. И. Кузник. — Чита : Экспресс издательство, 2010. — 832 с.

3. Esmon C. T. The discovery of thrombomodulin / C. T. Esmon, W. G. Owen // J. Thromb. Haemost. — 2004. — Vol. 2, N 2. — P. 209-213.

4. Brenner B. Thrombophilia in pregnancy and its role in abortion / B. Brenner // Women's Health. — 2005. — Vol. 1. — P. 35-38.

5. First-trimester vaginal bleeding and сomplications later in pregnancy / J. A. Lykke,

K. L. Dideriksen, O. Lidegaard, J. Langhoff-Ross // Obstet. Gynecol. — 2010. — Vol. 115, N 5.

— P. 935-944.

VALUE OF ENDOTHELIUM DAMAGE MOLECULES IN GENESIS OF TREATENED SPONTANEOUS

ABORTION

I. A. Nevzorova, A. I. Pashov

SBEIHPE «Krasnoyarsk State Medical University n. a. professor V.F.Voyno-Yasenetsky

of Ministry of Health»

The purpose of this research was the assessment of level of molecule thrombomodulin (TM), Villebrand's factor as specific markers of cellular and endothelial dysfunction, and also adhesion of thrombocytes to collagen at pregnant women with episodes of early spontaneous abortion (TSA). Research included 60 women on I, II trimesters of pregnancy: 30 patients with threat of abortion and 30 women with physiological course of pregnancy. Rising of concentration of TM in the main group with TSA threat in the II trimester of pregnancy (14 ng/ml) in relation to the I trimester (6,7 ± 0,6) becomes perceptible. Indicators of activity of adhesive protein (vWF) at pregnant women with TSA threat in the I trimester was authentically above (112,8 ± 5,9) in comparison with the group of control in the I trimester (74,6 ± 21,1) p < 0,001. Thus, rising of the TM level and activity of vWF testifies to intensifying of a trombogenicity of endothelium of uterus, depression of antithrombotic potential of trophoblast and developing embryo. Untimely diagnostics of thrombophilia and correction of hemostasis disturbances are the reason of development of endotheliosis and pregnancy complications.

Keywords: habitual noncarrying of pregnancy (HNCP), threatened spontaneous abortion (TSA), endothelial dysfunction, thrombomodulin (TM), Villebrand's (vWF) factor.

About authors:

Nevzorova Irina Anatolyevna — post-graduate student of obstetrics and gynecology chair at PGE at SBEI HPE «Krasnoyarsk State Medical University n. a. professor V.F.Voyno-Yasenetsky of Ministry of Health», e-mail: Iren2208.85@list.ru;

Pashov Alexander Ivanovich — doctor of medical sciences, professor of obstetrics and gynecology chair at PGE at SBEI HPE «Krasnoyarsk State Medical University n. a. professor V.F.Voyno-Yasenetsky of Ministry of Health», office phone: 8 (391) 237-17-71, e-mail: pachov@mail.ru

List of the Literature:

1. Zaynulina M. S. Markers of endothelium dysfunction and thrombophilia in SPNI diagnostics / M S. Zaynulina // Zhurn. obstetrics and female illnesses. — 2003. — V. 2. — P. 36-42.

2. Kuznik B. I. Cellular and molecular mechanisms of regulation of hemostasis system in norm and pathology / B. I. Kuznik. — Chita: Express publishing house, 2010. — 832 P.

3. Esmon C. T. The discovery of thrombomodulin / C. T. Esmon, W. G. Owen // J. Thromb. Haemost. - 2004. - Vol. 2, N 2. - P. 209-213.

4. Brenner B. Thrombophilia in pregnancy and its role in abortion / B. Brenner // Women's Health. - 2005. - Vol. 1. - P. 35-38.

5. First-trimester vaginal bleeding and complications later in pregnancy / J. A. Lykke,

K. L. Dideriksen, O. Lidegaard, J. Langhoff-Ross // Obstet. Gynecol. - 2010. - Vol. 115, N 5. - P. 935-944.