МИКРООРГАНИЗМЫ С ДЕРЕГУЛИРОВАННОЙ СИСТЕМОЙ ВИТАМИНА В12

1. Микроорганизм, продуцирующий чистые химические соединения и генетически модифицированный с целью повышения эффективности поглощения витамина В12, в котором указанная повышенная эффективность достигнута с помощью дерегулированной системы поглощения витамина В12, которая включает нуклеотидные последовательности, кодирующие по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок, последовательность которого представлена в SEQ ID NO:2, и/или по меньшей мере один белок-транспортер ABC-типа, содержащий субъединицы, последовательности которых представлены в SEQ ID NO:4, 6 и 8.
2. Микроорганизм по п.1, в котором указанные нуклеотидные последовательности, кодирующие по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок и по меньшей мере один белок-транспортер ABC-типа организованы в виде оперона, так что указанный по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок модулирует экспрессию указанного по меньшей мере одного белка-транспортера ABC-типа, причем уровень и/или активность указанного по меньшей мере одного осуществляющего негативную регуляцию белка по меньшей мере частично снижена в результате генетического изменения по сравнению с соответствующим исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения.
3. Микроорганизм по п.1, в котором уровень и/или активность указанного по меньшей мере одного белка-транспортера ABC-типа по меньшей мере частично повышена в результате генетического изменения по сравнению с соответствующим исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения.
4. Микроорганизм по п.1, где микроорганизм выбран из грамположительных микроорганизмов, предпочтительно из актинобацилл и более предпочтительно из семейства актиномицетов.
5. Микроорганизм по п.4, где микроорганизм выбран из рода коринебактерий и предпочтительно из штаммов вида С.glutamicum.
6. Микроорганизм по п.1, где микроорганизм представляет собой грамположительный микроорганизм и где система поглощения витамина В12 представляет собой оперон, содержащий нуклеотидные последовательности, которые кодируют по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок, последовательность которого представлена в SEQ ID NO:2, и по меньшей мере один белок-транспортер ABC-типа, содержащий субъединицы, последовательности которых представлены в SEQ ID NO:4, 6 и 8.
7. Микроорганизм по п.6, где микроорганизм выбран из штаммов вида С.glutamicim и где система поглощения витамина В12 представляет собой оперон, содержащий нуклеотидные последовательности, которые кодируют по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок, последовательность которого по меньшей мере на 90% идентична последовательности, представленной в SEQ ID NO:2, и по меньшей мере один белок-транспортер ABC-типа, содержащий субъединицы, последовательности которых по меньшей мере на 90% процентов идентичны последовательностям, представленным в SEQ ID NO:4, 6 и 8.
8. Микроорганизм по п.7, в котором экспрессия указанного по меньшей мере одного осуществляющего негативную регуляцию белка, последовательность которого по меньшей мере на 90% идентична последовательности, представленной в SEQ ID No. 2, частично снижена или полностью устранена в результате генетического изменения, и в котором экспрессия указанного по меньшей мере одного белка-транспортера ABC-типа, содержащего субъединицы, последовательности которых по меньшей мере на 90% идентичны последовательностям, представленным в SEQ ID NO:4, 6 и 8, по меньшей мере частично повышена в результате генетического изменения по сравнению с исходным организмом, не имеющим таких генетических изменений.
9. Микроорганизм по п.8, в котором экспрессия указанного по меньшей мере одного белка-транспортера ABC-типа, содержащего субъединицы, последовательности которых по меньшей мере на 90% идентичны последовательностям, представленным в SEQ ID NO:4, 6 и 8, повышена в результате использования сильного промотора и/или в результате увеличения количества копий нуклеотидных последовательностей, кодирующих указанные субъединицы, по сравнению с исходным организмом, не имеющим таких генетических изменений.
10. Микроорганизм по п.1, в котором в результате генетического изменения дополнительно повышены по сравнению с исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения, уровень и/или активность одного или нескольких из следующих факторов:
metA/X,
metZ/Y,
metF,
metH,
thrA,
metE,
и/или в котором в результате генетического изменения дополнительно понижены по сравнению с исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения, уровень и/или активность одного или нескольких из следующих факторов:
metK,
thrB.
11. Способ получения чистого химического соединения с помощью биологического синтеза, который требует присутствия витамина В12, заключающийся в том, что
а) культивируют микроорганизм, который обладает способностью продуцировать чистые химические соединения и подвергнут генетической модификации с целью повышения эффективности поглощения витамина В12, где указанное повышение эффективности достигают с помощью дерегулированной системы поглощения витамина В12, которая включает нуклеотидные последовательности, кодирующие по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок, последовательность которого представлена в SEQ ID NO:2, и/или по меньшей мере один белок-транспортер ABC-типа, содержащий субъединицы, последовательность которых представлена в SEQ ID NO:4, 6 и 8;
б) получают указанное чистое химическое соединение.
12. Способ по п.11, в котором культивируют микроорганизм по п.1, в котором указанные нуклеотидные последовательности, кодирующие указанный по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок и по меньшей мере один белок-транспортер ABC-типа, организованы в виде оперона, так что указанный по меньшей мере один осуществляющий негативную регуляцию белок модулирует экспрессию указанного по меньшей мере одного белка-транспортера ABC, в котором
а) уровень и/или активность указанного по меньшей мере одного осуществляющего негативную регуляцию белка по меньшей мере частично снижают путем генетического изменения по сравнению с соответствующим исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения, и/или
б) уровень и/или активность указанного по меньшей мере одного белка-транспортера ABC-типа по меньшей мере частично повышают путем генетического изменения по сравнению с соответствующим исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения.
13. Способ по п.11, в котором культивируют указанный микроорганизм, в котором путем генетического изменения дополнительно повышают по сравнению с исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения, уровень и/или активность одного или нескольких из следующих факторов:
metA/X,
metZ/Y,
metF,
metH,
thrA,
metE,
и/или в котором путем генетического изменения дополнительно понижают по сравнению с исходным организмом, не имеющим такого генетического изменения, уровень и/или активность одного или нескольких из следующих факторов:
metK,
thrB.
14. Способ по п.11, в котором чистое химическое соединение выбирают из группы, включающей метионин, S-аденозил и сульфоксид метионина.