ВЛИЯНИЕ ГИДРОХЛОРИДА 1(10)β-ЭПОКСИ-13-ДИМЕТИЛАМИН0-5,7α,6,11β(Н)-ГВАЙ-3(4),11(13)-ДИЕН-6,12-ОЛИДА НА ГЛИОМУ ГОЛОВНОГО МОЗГА И ЕГО ФАРМАКОКИНЕТИКА

30

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

Материалы и методы. «Колегель-диск» требуемого объема и концентрации лекарственного препарата применялись в группе из 38 пациентов: 19 — с диагнозом рак прямой кишки (РПК), 10 — рак молочной железы (РМЖ), 9 — рак дна полости рта. У пациентов с РПК проводилась неоадъювантная лучевая терапия (ЛТ). Больному ректально вводили диск с 5-фторурацилом с экспозицией до 6—8 ч

1—2 раза в сутки (утром и за час до сна). При комбинированном лечении РМЖ применялись диски с 5-фторурацилом в сочетании с облучением в режиме среднего фракционирования. Диск с препаратом накладывался на поверхность опухолевой язвы за 3 сут до начала ЛТ, а далее ежедневно с 1-го дня ЛТ утром и вечером. В случае рака дна полости рта диски применялись ежедневно с 1-го дня ЛТ за 30—40 мин до сеанса облучения и 1—2 раза в день после сеанса ЛТ. При наличии лучевой реакции со стороны слизистой оболочки полости рта в процессе и по окончании ЛТ (в постлучевом периоде) использовались диски с прополисом 2—3 раза в день в течение 1 мес.

Результаты. У всех больных РПК токсические эффекты были минимальны и купировались традиционными методами без осложнений. При применении дисков в лечении РМЖ удалось добиться уменьшения признаков интоксикации и количества отделяемого из язвы, причем результат достигнут при значительно меньших дозах химио-препарата, нежели при стандартном лечении. Эффективность комбинированного лечения доказана по следующим критериям: локальный контроль опухоли, анализ токсичности и непосредственный эффект. У всех пациентов при раке дна полости рта наблюдалось полное заживление опухолевых язв, что позволило в дальнейшем перейти к традиционной химиотерапии.

Заключение. Использование структурированных дисков «Колегель-диск» в группах пациентов с РПК и РМЖ при агрессивной предоперационной химиолучевой терапии обеспечило усиление степени резорбции опухоли при меньших суммарных дозах 5-фторурацила, снижение общей токсичности лечения и возможность выполнения

2-го этапа лечения (операции) в запланированный срок.

С. В. Гусельников. С. В. Кулемзин, А.А. Горчаков, О.Ю. Волкова, А. В. Таранин БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АФФИННЫЕ БЕЛКИ НА ОСНОВЕ ДИВЕРСИФИЦИРОВАННОГО Ш3 ДОМЕНА

ФГБУН ИМКБ СО РАН, Новосибирск

Введение. Создание мультифункциональных антител для иммунотерапии рака является одним из наиболее приоритетных направлений развития медицинской биотехнологии. Агенты, способные распознавать 2 и более мишеней, необходимы для увеличения избирательности противоракового воздействия, для блокирования роста раковых клеток с помощью одновременного воздействия на разные сигнальные пути, для перенацеливания собственных цитотоксических клеток организма. К настоящему времени разработан широкий ряд полиспецифических молекул на основе классических моноклональных антител. Параллельно идет активный поиск и испытание альтернативных антигенраспознающих доменов для конструирова-

ния нового поколения иммунотерапевтических молекул с улучшенными свойствами. Аффинные белки на основе диверсифицированного 10-го домена фибронектина человека 10FnIII (Fn3) являются одной из наиболее перспективных альтернатив классическим антителам. Укладку Fni-домена отличают компактность, отсутствие гликози-лирования, дисульфидных связей, высокая термостабильность и низкая иммуногенность. Тот факт, что в природе такие домены образуют мультидоменные белковые цепи, предполагает возможность создания мультифункциональных терапевтических молекул с помощью последовательного соединения аффинных Fni-доменов разной специфичности.

Цель исследования — определить свойства двухдомен-ных белков, сконструированных на основе Fni-доменов разной специфичности.

Материалы и методы. С помощью методов молекулярного клонирования получены двухдоменные белки различной архитектуры, содержащие Fni-домены, распознающие белки человека VEGFR2 и CEA. Полученные белки содержат междоменный линкер (SGGG) 2SGG и С-концевые Strep-, FLAG- и бхШв-эпитопы. Способность Fni-белков связывать мишени в растворе и на поверхности клеток оценена с помощью иммуноферментного анализа и проточной цитометрии.

Результаты. Показано, что белки, состоящие из тан-демно соединенных VEGFR2- и CEA-связывающих Fn3-доменов, обладают биспецифичностью. Связывающие свойства обоих доменов не зависят от их положения на N-или С-конце.

Заключение. Тандемное соединение Fni-доменов разной специфичности может быть использовано для создания бифункциональных аффинных белков. Полученные результаты послужат основой конструирования трех- и че-тырехдоменных мультифункциональных Fni-агентов для использования в иммунотерапевтических целях.

Работа выполнена при финансовой поддержке Программы фундаментальных научных исследований по теме 0310-2015-0006 в части молекулярного клонировании и гранта РФФИ № 16-04-01469-а в части анализа белок-белковых взаимодействий.

А. К. Даиров, С.М. Адекенов

ВЛИЯНИЕ ГИДРОХЛОРИДА 1(Ю)р-ЭПОКСИ-

13-ДИМЕТИЛАМИНО-5,7а,6,11р(Н)-ГВАЙ-3(4),11(13)-

ДИЕН-6,12-ОЛИДА НА ГЛИОМУ ГОЛОВНОГО МОЗГА

И ЕГО ФАРМАКОКИНЕТИКА

АО МНПХ «Фитохимия», Караганда,

Республика Казахстан

Введение. В настоящее время смертность от онкологических заболеваний по частоте находится на 2-м месте после сердечно-сосудистых заболеваний, поэтому лечение рака любой локализации является важной проблемой современной медицины. В частности, имеющая нейроэктодермаль-ное происхождение глиома головного мозга является самой распространенной группой первичных опухолей головного мозга, их доля от всех первичных внутричерепных новообразований у взрослых составляет более 58 %.

Цель исследования — определить влияние гидрохлорида 1(10)в-эпокси-13-диметиламино-5,7а,6,11р(Н)-гвай-3(4),

№1 / том 15 / 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 31

11(13)-диен-6,12-олида на подавление роста клеток глио- ную, противовоспалительную, антиоксидантную, что об-мы головного мозга в условиях экспериментальных иссле- условлено наличием в структуре сесквитерпенового лакто-дований in vitro. на у-лактонного цикла и экзометиленовой группы. Материалы и методы. Изучение ингибирующего дей- Цель исследования — определить спектр биологической ствия соединения на пролиферацию клеток глиомы голов- активности для сесквитерпеновых лактонов ахиллина, ок-ного мозга проводилось на модели клоногенных клеток сима ахиллина, аустрицина, оксима аустрицина, гроссми-глиомы крысы С6, являющейся экспериментальной мо- зина, оксима гроссмизина, 5Р(Н) — аустрицина, леукоми-делью мультиформной глиобластомы человека, в условиях зина, оксима леукомизина, матрикарина и матрицина in vitro. с помощью компьютерной системы PASS online; провести Результаты. Установлено, что эффективными дозами верификацию результатов компьютерного прогнозирова-гидрохлорида 1(10)Р-эпокси-13-диметиламино-5,7а,6,11р- ния с данными биологических исследований в тест-систе-(Н)-гвай-3(4),11(13)-диен-6,12-олида, достоверно подав- мах in vitro и in vivo. ляющими пролиферацию клоногенных опухолевых клеток, Материалы и методы. Прогнозирование спектра био-являются дозы 20 мг/мл (LD96), 2 мг/мл (LD76), 1 мг/мл логической активности сесквитерпеновых лактонов и их (LD85), 2,5 мкг/мл (LD84), 1 мкг/мл (LD92), 0,25 мкг/мл (LD90). производных проводили с помощью компьютерной систе-Фармакокинетические исследования показали, что эффек- мы PASS online разработки В.В. Поройкова и Д.А. Фили-тивность соединения обусловлена высокой степенью его монова. Цитотоксическую активность соединений оцени-тканевой доступности. Наиболее высокая концентрация вали в тесте выживаемости личинок морских рачков гидрохлорида 1(10)Р-эпокси-13-диметиламино-5,7а,6,11р (Н)- Artemia salina (Leach) в условиях культивирования in vitro. гвай-3(4),11(13)-диен-6,12-олида в течение 1-го часа после Противоопухолевую активность изучали на беспородных введения создается в печени, селезенке, легких. Ко 2-му часу белых крысах с перевиваемыми опухолями мышей и крыс сравнительно высокая концентрация создается в скелет- в условиях in vivo. ных мышцах, почках, тонком кишечнике. К 4-му часу вы- Результаты. Установлено, что для каждого изучаемого сокая концентрация соединения обнаруживается в голов- сесквитерпенового лактона прогнозируется широкий ном мозге и костной ткани. спектр биологической активности: противоопухолевая, Заключение. Проведенные экспериментальные иссле- аналептическая, цитостатическая, противоэкземная, про-дования по изучению ингибирующего действия гидро- тивовоспалительная, противогрибковая. Система PASS хлорида 1(10)р-эпокси-13-диметиламино-5,7а,6,11р (Н-гвай- online прогнозирует высокую вероятность эксперименталь-3(4),11(13)-диен-6,12-олида на пролиферацию клеток ного подтверждения противоопухолевой активности для глиомы головного мозга в условиях in vitro показали, что ахиллина — 94 %, леукомизина — 94 %, матрикарина — 92 %, изучаемое соединение является перспективным противо- аустрицина — 91 %, гроссмизина — 91 %. Обнаружена цито-опухолевым средством в отношении злокачественных но- токсическая активность ахиллина и оксима гроссмизина вообразований головного мозга. При этом гидрохлорид в тесте выживаемости личинок морских рачков Artemia 1(10)Р-эпокси-13-диметиламино-5,7а,6,ИР(Н)-гвай- salina (Leach). При этом установлена цитотоксическая ак-3(4),11(13)-диен-6,12-олида обладает рядом преимуществ, тивность ахиллина в отношении линии опухолевых клеток в частности не оказывает токсического воздействия на ор- P3X63. Ag8.653 (мышиная миелома). Выявлена противо-ганизм, не вызывает иммунодепрессии и не влияет на ге- опухолевая активность ахиллина и гроссмизина в тесте мопоэз, способен эффективно преодолевать гематоэнце- с перевиваемыми опухолями на белых беспородных крысах фалический барьер. в условиях in vivo. Так, сесквитерпеновый лактон ахиллин Работа выполнена при финансовой поддержке КН МОН РК проявляет противоопухолевую активность в отношении по грантовому проекту «Изучение взаимосвязи «структура — актив- штаммов раковых клеток лимфосаркомы Плисса, альвео-ность» на основе модели виртуального скрининга природных тер- лярного рака печени РС-1 и саркомы-45. пеноидов и их производных» (№ государственной регистрации Заключение. Достоверность данных компьютерного 0115РК00182). прогнозирования биологической активности для сес- квитерпеновых лактонов и их производных подтверждена А.К. Даиров, Р.Б. Сейдахметова, С.М. Адекенов экспериментальными данными биологических тестов КОМПЬЮТЕРНОЕ ПРОГНОЗИРОВАНИЕ на противоопухолевую и цитотоксическую активность БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ в условиях in vitro и in vivo. СЕСКВИТЕРПЕНОВЫХ ЛАКТОНОВ Работа выполнена при финансовой поддержке КН МОН РК И ИХ ПРОИЗВОДНЫХ по грантовому проекту «Изучение взаимосвязи «структура — актив-АО МНПХ«Фитохимия», Караганда, Республика Казахстан ность» на основе модели виртуального скрининга природных терпеноидов Введение. В настоящее время из растительных источ- и их производных» (№ государственной регистрации 0115РК00182). ников выделено свыше 4000 сесквитерпеновых лактонов различных структурных типов, которые занимают важное А.М. Дейчман место в разработке и внедрении в практическую медицину ВОЗМОЖНЫЕ НОВЫЕ МЕХАНИЗМЫ новых оригинальных лекарственных препаратов. Повы- В АНТИГЕНПРЕЗЕНТИРУЮЩИХ КЛЕТКАХ шенный интерес исследователей к этому классу природных ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва соединений вызван широким спектром их биологической Введение. Иммунотерапия, например с участием ден-активности, включающей противоопухолевую, антимикроб- дритных клеток (ДК) (активированных ДК-вакцин на ос-

№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ