Способ забора крови у мелких лабораторных животных для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии
METHOD OF BLOOD SAMPLING IN SMALL LABORATORY ANIMALS FOR PERFORMANCE OF LOW-FREQUENCY PIEZOTROMBOELASTOGRAPHY

Изобретение относится к области медицины, а именно экспериментальной хирургии, и предназначено для забора крови у мелких лабораторных животных с целью выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии. Учитывая, что для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии требуется атравматичный забор не менее 0,45 мл крови в течение не больше 10 секунд, задача забора крови у мелких лабораторных животных представляется труднорешаемой.
Известный наиболее близкий способ забора крови для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии: способ определения противосвертывающей активности крови (Тютрин И.И., Шписман М.Н., Клименкова В.Ф, Бочков Ю.А. / Патент RU 2530584 С2, 20.12.2012, от 10.10.2014. Бюл. №28, http://www1.fips.ru/wps/portal/IPS_Ru#1479574745685). Описан способ забора крови у человека с целью выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии, суть которого состоит в том, что силиконированным шприцем объемом 5 мл без наложения жгута из кубитальной вены берут для исследования 0,5 мл цельной нестабилизированной венозной крови и в течение 5-10 секунд помещают в кювету прибора АРП-01М «Меднорд». Недостатком представленного метода является то, что у мелких лабораторных животных невозможно за 5-10 секунд выполнить забор такого объема крови из рекомендуемого венозного сосуда.
Техническая задача: разработать способ забора крови у мелких лабораторных животных для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии. Поставленная задача решается следующим способом.
Забор крови осуществляется из левой сонной артерии. Доступ к сосуду осуществляется в следующем порядке: 1) рассечение ножницами кожи и подкожной клетчатки; 2) отведение тупым способом в разные стороны слюнных желез; 3) отведение кнаружи кивательной мышцы; 4) рассечение ножницами лопаточно-подъязычной мышцы; 5) обнажение сосудисто-нервного пучка и выведение его из дна раны на пинцете; 6) отделение блуждающего нерва от сонной артерии во избежание его повреждения. Под сонную артерию подводят три викриловые лигатуры 2-0 для перевязки отводящего и приводящего конца сосуда после забора крови. Далее трехкомпонентным шприцем объемом 1 мл с иглой 27-29 G, обращенной срезом книзу, располагают параллельно сонной артерии у головного конца выделенного отрезка сосуда.
Прижимая иглу к передней стенке артерии и продвигая ее каудально, осуществляют бескровный доступ и забор крови в объеме 0,45 мл в течение 8 секунд. После извлечения иглы сонная артерия перевязывается ранее подведенными лигатурами: двумя приводящий конец сосуда и одной - отводящий. Анализ образца крови без цитрата сразу же после забора проводят на низкочастотном пьезотромбоэластографе АРП-01М «Меднорд» с помощью информационной компьютерной системы (ИКС) «Гемо-3». При необходимости повторного забора игла может быть фиксирована подведенными лигатурами или заменена на катетер. Предложенный способ позволяет атравматично и бескровно выполнить забор крови за менее чем 10 секунд за счет высокого давления крови в артериальном сосуде в необходимом объеме без ятрогенного влияния на изучаемые параметры.
1
2
3
4
5
6
3
5
Пример: в условиях ксилазин/тилетамин/золазепам анестезии выполнен по предложенной выше методике забор крови из левой сонной артерии у самца крысы линии Wistar массой 250 г в объеме 0,45 мл, кровь помещена в кювету в течение 8 секунд, и начато исследование. Результаты: ИКК=-12,86, t=0,7 мин, ИКД=59,59, t=2,9 мин, КТА=45,45, t=4,9 мин, ИПС=11,4, t=14,9 мин, МА=404, t=25,4 мин, ИРЛС=2,48%, t=35,4 мин, КСПА=5,23. Вывод: у данной крысы по сравнению с референтными значениями человека отмечается более высокая агрегационная активность тромобоцитов и других форменных элементов крови (ИКК [-36;-16]), усилен протеолитический этап III фазы свертывания (t [5,9;9,2], КТА [5,9;9,2], ИКД [32,5;43,5]), увеличена антикоагулянтная активность крови (КСПА [1,9; 2,8]) и более быстрое формирование фибрин-тромбоцитарной структуры (t [27; 38]), но ослаблен полимеризационный этап III фазы свертывания (ИПС [13,65; 19,65]) и уменьшена максимальная плотность сгустка (МА [466,5; 560,5]) (http://ekf.folium.ru/index.php/ekf/article/view/15). По данным литературы представленная информация соответствует результатам, полученным другими методами исследования гемостаза (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3201823/).
Технический результат: разработан способ забора крови у мелких лабораторных животных для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии.