ЭКСПРЕССИОННЫЕ ВЕКТОРЫ ДЛЯ УЛУЧШЕННОЙ СЕКРЕЦИИ БЕЛКА

1. Экспрессионный вектор, включающий в себя
a) промоторную последовательность и
b) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, причем белок содержит сигнальный пептид и еще одну аминокислотную последовательность, а сигнальный пептид содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как SEQ ID NO. 2, или по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как SEQ ID NO. 4, по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как SEQ ID NO. 6, или сигнальный пептид содержит аминокислотную последовательность, которая структурно гомологична по меньшей мере одной из этих последовательностей.
2. Экспрессионный вектор по п. 1, отличающийся тем, что сигнальный пептид, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты b), имеет аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO. 2, SEQ ID NO. 4 или SEQ ID NO. 6.
3. Экспрессионный вектор по п. 1, отличающийся тем, что другая аминокислотная последовательность белка включает в себя аминокислотную последовательность фермента, в особенности протеазы, амилазы, целлюлазы, гемицеллюлазы, маннаназы, танназы, ксиланазы, ксантаназы, ксилоглюканазы, β-глюкозидазы, расщепляющего пектин фермента, каррагиназы, пергидролазы, оксидазы, оксидоредуктазы или липазы.
4. Экспрессионный вектор по п. 1, отличающийся тем, что в белке, кодируемом последовательностью нуклеиновой кислоты b), сигнальный пептид размещается в направлении N-конца от другой аминокислотной последовательности.
5. Экспрессионный вектор по п. 1, отличающийся тем, что белок, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты b), также содержит соединительную последовательность, которая расположена между сигнальным пептидом и другой аминокислотной последовательностью белка, причем, в частности, соединительная последовательность имеет длину от 1 до 50 аминокислот.
6. Экспрессионный вектор по одному из пп. 1-5, отличающийся тем, что другая аминокислотная последовательность белка включает в себя аминокислотную последовательность протеазы, причем аминокислотная последовательность протеазы
по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID NO. 7, или
по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID NO. 8, или
по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID NO. 9, или
по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID NO. 10 и имеет глутаминовую кислоту (Е) или аспарагиновую кислоту (D) в положении 99 при подсчете в соответствии с SEQ ID NO. 10, или
по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID NO. 10 и имеет глутаминовую кислоту (Е) или аспарагиновую кислоту (D) в положении 99 при подсчете в соответствии с SEQ ID NO. 10, кроме того при подсчете в соответствии с SEQ ID NO. 10 имеет по меньшей мере одну из следующих аминокислот:
(a) треонин в положении 3 (3Т),
(b) изолейцин в положении 4 (4I),
(c) аланин, треонин или аргинин в положении 61 (61А, 61T или 61R),
(d) аспарагиновую кислоту или глутаминовую кислоту в положении 154 (154D или 154Е),
(e) пролин в положении 188 (188Р),
(f) метионин в положении 193 (193М),
(g) изолейцин в положении 199 (199I),
(h) аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту или глицин в положении 211 (211D, 211Е или 211G),
(i) комбинации аминокислот от (а) до (h).
7. Клетка-хозяин, не относящаяся к человеку, содержащая по меньшей мере один экспрессионный вектор по одному из пп. 1-6.
8. Клетка-хозяин по п. 7, отличающаяся тем, что она представляет собой бактерию, предпочтительно выбранную из группы родов Escherichia, Klebsiella, Bacillus, Staphylococcus, Corynebakterium, Arthrobacter, Streptomyces, Stenotrophomonas и Pseudomonas, далее предпочтительно таковую, выбранную из Escherichia coli, Klebsiella planticola, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis, Bacillus alcalophilus, Bacillus globigii, Bacillus gibsonii, Bacillus clausii, Bacillus halodurans, Bacillus pumilus, Staphylococcus carnosus, Corynebacterium glutamicum, Arthrobacter oxidans, Streptomyces lividans, Streptomyces coelicolor и Stenotrophomonas maltophilia, в особенности Bacillus licheniformis.
9. Способ получения белка, включающий в себя следующие стадии:
(a) культивирование клетки-хозяина по одному из пп. 7 или 8
(b) выделение белка из культурной среды или из клетки-хозяина.
10. Применение экспрессионного вектора по одному из пп. 1-6 или клетки-хозяина по одному из пп. 7 или 8 для получения белка.