Способ диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции
METHOD FOR DIAGNOSING CHRONIC LYMPHOPROLIFERATIVE DISEASES OF THE NASOPHARYNX IN CHILDREN ASSOCIATED WITH THE COMBINED EFFECT OF ATMOSPHERIC CHEMICAL FACTORS AND PERSISTENT HERPES VIRUS INFECTION

Изобретение относится к области медицины и экологии и может быть использовано для диагностики у детей, страдающих персистирующей герпес-вирусной инфекцией и пребывающих в неблагополучных условиях среды обитания, а именно, в условиях загрязнения атмосферного воздуха металлами и ароматическими соединениями, заболевания в виде хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки. Изобретение может быть использовано в целях установления экологически детерминированной патологии.
Следует пояснить, что к хроническим лимфопролиферативным заболеваниям носоглотки относятся:
хронический тонзиллит (J35.0),
гипертрофия небных миндалин (J35.1),
аденоиды (J35.2).
В условиях загрязнения атмосферного воздуха металлами у 65,8% дошкольников диагностируются хронические заболевания лимфоидной ткани носоглотки. У детей начальной школы вероятность развития патологии лимфоидной ткани носоглотки увеличивается в 3,9-5,3 раза. Полученные результаты свидетельствуют, что высокий уровень антропогенного загрязнения воздушной среды способствует некоторому истощению адаптационных возможностей дыхательной системы детей.
Вместе с этим на заболевания носоглотки оказывает влияние и герпес-вирусная инфекция. Герпетическая инфекция считается заболеванием иммунной системы с нарушением интерферонообразования. По данным ВОЗ из всех известных герпесвирусов чаще у детей встречаются ЦМВ, ВЭБ, ВПГ 1-го, 2-го и 6-го типов. После попадания вируса в эпителий слизистой ротоглотки и верхних дыхательных путей происходит инфицирование лимфоцитарных клеток, что способствует развитию иммунных нарушений. Из анамнестических данных при герпесвирусной инфекции наиболее существенными представляются острые респираторные заболевания, протекающие длительно и волнообразно, с обструктивным синдромом, длительным субфебрилитетом или бактериальными осложнениями (ангины, отиты, гаймориты, бронхиты, пневмонии).
В тоже время, можно предположить, что хроническая экспозиция техногенных химических веществ и персистирующая гепертическая инфекция могут иметь общие механизмы развития заболеваний носоглотки. Выявление закономерностей формирования болезней органов дыхания, в том числе, заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным влиянием техногенных химических веществ атмосферного воздуха и персистирующей герпетической инфекции, может быть использовано для разработки патогенетически обоснованных профилактических мероприятий с целью минимизации риска развития и прогрессирования хронических заболеваний дыхательной системы.
Из уровня техники известен ряд технических решений, обеспечивающих диагностику разного вида воспалительных заболеваний носоглотки.
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
jj
j0
j
j0
j1
1
2
2
jp
p
i
j0
ji
Известен способ диагностики воспалительных и не воспалительных процессов в глоточной миндалине у детей (Патент РФ №2567033). Для этого в венозной крови определяют субпопуляции Т-лимфоцитов, несущих маркеры CD3CD4, CD3CD8, CD47CD8, CD3CD16CD56, CD3+HLA-DR, В-лимфоцитов, естественных киллерных лимфоцитов с маркером CD3" CD16CD56, иммуноглобулины классов А, М, G (IgA, IgM, IgG), фагоцитарный индекс (ФИ), фагоцитарное число (ФЧ), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК), определяют в секреции фракции лимфоцитов уровни концентраций интерлейкина-1β (ИЛ-1β) и интерлейкина-4 (ИЛ-4), фактора некроза опухолей-α (ФНО-α) и определяют суммарный воздушный поток (Fl R+L), суммарное сопротивление воздушному потоку (Res R+L). Задают три канонические дискриминантные функции и оценивают нормированные коэффициенты канонических дискриминантных функций для показателей (b) и константы линейной модели дискриминантной функции (a) для пациентов с прогнозируемой гипертрофией глоточной миндалины I, II и III степени: D=a+bx+bjx+…+bx, где D - линейная дискриминантная функция; j - индикатор группы, j=1…, k-1, k - количество групп; x - дискриминантные переменные; i - индикатор переменной, i=1…, р; р - количество дискриминантных переменных; a - константа дискриминации; b - коэффициент i-й дискриминантной переменной для j-й группы. Пациента относят к группе, для которой линейная дискриминантная функция принимает максимальное значение. При максимальном показателе линейной дискриминантной функции среди показателей трех линейных дискриминантных функций в пределах 79,495-104,965 диагностируют у пациента гипертрофию глоточной миндалины I степени, что соответствует не воспалительному процессу в глоточной миндалине. При максимальном показателе в пределах 120,222-132,774 диагностируют гипертрофию глоточной миндалины II степени, что соответствует воспалительному процессу. При максимальном показателе D в пределах 135,360-296,243 диагностируют гипертрофию глоточной миндалины III степени, что соответствует воспалительному процессу в глоточной миндалине с признаками обострения хронического аденоидита. В промежуточных интервалах 104,965-120,222 и 132,774-135,360 проводят диагностирование воспалительных и не воспалительных процессов в глоточной миндалине у детей через 30-90 суток.
Однако данный известный способ ограничивается морфометрической диагностикой и не учитывает модифицирующего влияния вредных химических факторов среды обитания на формирование хронических воспалительных процессов в носоглотке у детей.
Также известен способ дифференциальной диагностики хронического аденоидита и гипертрофии глоточной миндалины у детей (Патент РФ №2328745). Сущность способа: в мазках периферической крови методом световой микроскопии определяют интенсивность нейтрофильного и моноцитарного ауторозеткообразования. При увеличении содержания моноцитарных розеток до 4,7±1,3% и нейтрофильных до 9,4±2,0% диагностируют гипертрофию глоточной миндалины. При увеличении моноцитарных розеток до 3,1±0,1% и снижении нейтрофильных до 3,1±0,1% диагностируют хронический аденоидит.
Из патента РФ №2569054 известен способ диагностики этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов у детей раннего и дошкольного возраста. Его сущность заключается в том, что производят определение в назальном секрете провоспалительных и проаллергических интерлейкинов, а именно интерлейкина-1-бэта (IL-1beta), интерлейкина-4 (IL-4), рецепторного антагониста интерлейкина-1 (IL-1RA), интерферона-альфа (INF-alpha) и фактора некроза опухоли - альфа (TNF-alpha), и при увеличении содержания INF-alpha, TNF-alpha и IL-1beta более чем в 2 раза по отношению к нормальным значениям диагностируют вирусную этиологию рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов, а увеличение содержания IL-4 выше 26 нг/мл и IL-1RA выше 1000 нг/мл является диагностическим критерием для инфекционно-аллергической этиологии рецидивирующих острых ринофарингитов и аденоидитов.
Однако указанные известные способы также не учитывают модифицирующего влияния вредных химических факторов среды обитания и наличие герпесной инфекции на формирование хронических воспалительных процессов в носоглотке у детей.
4
Из патента РФ №2706126 известен Способ диагностики активности сочетанной инфекции у детей с острыми респираторными инфекциями. Согласно этому способу у детей с идиопатической лейкопенией и фебрильными судорогами в крови определяют наличие, активность и серотип вируса герпеса 6 типа, его количественные характеристики, выявляют иммуноглобулины IgM, IgG класса, определяют авидность иммуноглобулинов IgG класса. При наличии ДНК ВГЧ-6 в количестве не менее 10 копий/мл, генотипа А, антител IgM, IgG с индексом авидности менее 40% диагностируют активный инфекционный герпесвирусный процесс.Изобретение обеспечивает повышение точности постановки диагноза за счет проведения комплексной последовательной вирусологической диагностики с оценкой активности ВГЧ-6, его генотипа и его участия в развитии и тяжести течения заболевания.
Также из Патента РФ №2315300 известен способ диагностики состояния лимфоидной ткани носоглотки и небных миндалин. Сущность способа: берут мазки-отпечатки для риноцитограммы и цитограмм из левой небной миндалины и левой щеки. Исследуют клеточный состав полученных мазков на бинокулярном микроскопе, определяют процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов в цитограммах в общем составе клеток. На основании полученных данных дифференцируют наличие хронического процесса в области носоглоточной миндалины, или наличие хронического процесса в области небных миндалин, или наличие хронического процесса в области лимфоидной ткани носоглотки в сочетании с гипертрофией небных миндалин без признаков воспаления, или наличие хронического процесса лимфоидной ткани носоглотки и небных миндалин. Использование способа позволяет повысить точность диагностики состояния лимфоидной ткани носоглотки и небных миндалин у детей при отсутствии травматичности.
Из патента РФ №2619873 известен способ диагностики у детей возраста 4-12 лет хронических воспалительных заболеваний носоглотки, ассоциированных с ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида. Для этого устанавливают в пробе крови каждого ребенка содержание бензола и формальдегида и при превышении этого содержания выше фонового уровня осуществляют определение функциональных и лабораторных показателей. При этом в качестве функциональных показателей определяют: объемно-скоростные показатели риноманометрии; аденоидные вегетации по данным рентгенографии носоглотки и признаки диффузного поражения печени при ультразвуковом исследовании. В качестве лабораторных показателей устанавливают: содержание в назальном секрете эозинофилов и эозинофильно-лимфоцитарный индекс; содержание иммуноглобулинов IgE, IgA, IgG. Определяют показатели фагоцитарной активности крови: процент фагоцитоза, фагоцитарное число, фагоцитарный индекс; количество В-лимфоцитов в крови; общую антиоксидантную активность крови и содержание в крови супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, каталазы, гидроперекисей липидов, малонового диальдегида МДА; число ретикулоцитов, количество эритроцитов, уровень аспартатаминотрансферазы АСАТ и аланинаминотрансферазы АЛАТ. При снижении объемно-скоростных показателей риноманометрии на 15% и более; наличии увеличенных аденоидных вегетаций по данным рентгенографии носоглотки; ультразвуковых признаках реактивного диффузного поражения печени и увеличении ее размеров на 10% и более; увеличении содержания в назальном секрете эозинофилов на 15% и более; повышении эозинофильно-лимфоцитарного индекса на 10% и более; увеличении содержания общего IgE на 20% и более; увеличении содержания в крови специфического IgE к формальдегиду; снижении количества IgA на 15% и более; повышении уровня содержания IgG к бензолу на 10% и более; снижении показателей фагоцитарной активности крови: процента фагоцитоза на 15% и более, фагоцитарного числа на 15% и более, фагоцитарного индекса на 15% и более; снижении В-лимфоцитов в крови в абсолютных числах и процентном отношении на 10% и более; повышении общей антиоксидантной активности крови на 10% и более; повышении супероксиддисмутазы на 20% и более; повышении глутатионпероксидазы на 20% и более; повышении каталазы на 20% и более; повышении уровня гидроперекисей липидов на 20% и более; повышении МДА на 20% и более; повышении числа ретикулоцитов на 10% и более; снижении эритроцитов на 10% и более; повышении АСАТ и/или АЛАТ на 15% и более, диагностируют у ребенка хроническое воспалительное заболевание носоглотки, обусловленное ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида. Использование данного способа позволяет диагностировать у детей хронические воспалительные заболевания носоглотки, ассоциированные с ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида, что способствует в последующем назначить адекватную терапию и предупредить развитие осложнений.
Однако указанный известный способ не позволяет установить заболевания носоглотки, ассоциированные одновременно и с воздействием химических токсикантов, и с наличием у ребенка вирусно-герпесной инфекции, что снижает его диагностическую ценность.
При этом из уровня техники не были выявлены известные способы диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.
Технический результат, достигаемый предлагаемым изобретением, заключается в создании информативного и доказательного способа диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.
3
3
3
3
9
3
9
3
3
3
3
Поставленный технический результат достигается предлагаемым способом диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, согласно которому производят отбор пробы крови у ребенка, в анамнезе которого имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, устанавливают в пробе крови содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома, определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющих роль диагностических маркеров, при этом в качестве функциональных показателей определяют: методом кардиоинтервалографии показатель вариационной пульсометрии (Мо), методом риноманометрии суммарный объемный поток (СОП), характеризующий степень выраженности нарушения носового дыхания, методом ультразвукового исследования структурные параметры небных миндалин; реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы и мезентериальных лимфоузлов и структуру и размеры печени; а в качестве лабораторных показателей определяют: уровень моноцитов, содержание общего и прямого билирубина, уровень креатинфосфокиназы (КФК), и иммунологические показатели: абсолютный фагоцитоз, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу и IgG специфического к бензолу, при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза, при наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек, выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см/с, наличие структурных изменений небных миндалин, наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны в крови, увеличении размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры; при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%, при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм, при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм, при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм, при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10/дм - 2,41⋅10/дм, при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см, при содержании уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см, и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, и IgG специфического к бензолу, диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.
Указанный технический результат обеспечивается за счет следующего: использования определенной совокупности диагностических маркеров;
- применения при реализации предлагаемого способа расширенной системы взаимосвязей диагностических маркеров (функциональных и лабораторных показателей) между собой и их взаимосвязи как с химическими соединениями, представляющими опасность для развития заболеваний носоглотки, так и с наличием у ребенка, подвергающегося воздействию указанных химических токсикантов, персистирующей герпес-вирусной инфекции.
Для выявления особенностей и закономерностей диагностики у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки в этих условиях, оценивались причинно-следственные связи, полученные с помощью методов статистического анализа.
2
При проведении моделирования методом регрессионного анализа оценку адекватности и достоверности моделей осуществляли с помощью однофакторного дисперсионного анализа по величине критерия Фишера (F) с 95% уровнем значимости, коэффициенту детерминации (R) и t-критерию Стьюдента для уровня значимости p≤0,05.
Для понимания существа вопроса, следует пояснить, что проблема оценки влияния промышленного загрязнения окружающей среды на здоровье детского населения является актуальной для многих стран мира, в том числе и для России. Детская популяция представляет собой группу высокого риска, так как дети имеют ряд физиологических особенностей, характеризуются наличием критических периодов развития, большей чувствительностью к влиянию токсичных веществ.
Доказано, что распространенность аденотонзиллярной патологии значительно выше у детей, проживающих в условиях экологического неблагополучия, показатели распространенности которой достигают 85,6%. У детей, проживающих на территории относительного экологического благополучия, эта патология регистрируется статистически значимо реже (р<0,05). Хронический аденотонзиллит выявляется достоверно чаще у детей, проживающих на промышленно развитых территориях, где его распространенность составляет 28,5-57,1% (р<0,05), гипертрофия небных миндалин встречается в 2,5 раза чаще (р<0,05). Наличие морфологических нарушений со стороны миндалин может свидетельствовать о напряжении компенсаторных механизмов при воздействии неблагоприятных факторов, большей нагрузке на ЛОР-органы, о напряжении функции иммунной системы, и является показателем возможности более тяжелого течения заболеваний ЛОР-органов и органов дыхания в целом. Многие исследователи подтверждают, что хронический компенсированный тонзиллит диагностируется уже при гипертрофии небных миндалин I степени.
В качестве еще одного неблагоприятного фактора причины проявления заболеваний носоглотки могут также выступать хронические герпесвирусные инфекции, в результате чего индуцируемые ими иммунодефицитные состояния являются причиной повторных эпизодов острых инфекций органов дыхания и носоглотки. Вместе с этим у часто болеющих детей с хронической герпесвирусной инфекцией имеет место гипертрофия небных и глоточных миндалин, увеличение печени и селезенки, патология со стороны сердечно-сосудистой и других систем.
2
Экспериментальным путем были установлены достоверные причинно-следственные связи между уровнем загрязнения атмосферного воздуха бензолом, ксилолом, формальдегидом, марганцем и хромом в количестве 130% и более фоновых (референтных) уровней и возникновению у детей хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки (коэффициент детерминации R=0,18-0,81; критерий Фишера F 37,72≤F≤1224,58; вероятность р=0,0001).
Таким образом, в результате проведенного последовательного моделирования «химический фактор/маркер герпесвируса→индикаторный показатель→заболевание» установлены вероятности развития у детей лимфопролиферативных заболеваний органов носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции у ребенка.
Длительное низкоуровневое воздействие техногенных химических соединений атмосферного воздуха и наличие персистирующей герпесвирусной инфекции приводит к дисбалансу окислительных процессов и антиоксидантной защиты на клеточном уровне, развитию гиперпластических и иммуноаллергических воспалительных процессов в слизистой оболочке дыхательных путей, нарушению вегетативной и иммунной регуляции, что способствует формированию хронической патологии дыхательной системы.
Выявленные индикаторные и маркерные показатели и закономерности формирования негативных эффектов могут служить научно-методическим обоснованием для разработки принципов и программ профилактики, направленных на снижение уровня распространенности у детей заболеваний носоглотки, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпесвирусной инфекции.
Определение показателя вариационной пульсометрии (Мо) вызвано тем, что это позволяет оценить вегетативную регуляцию и уровень функционирования сердечно-сосудистой системы.
Суммарный объемный поток (СОП) риноманомерии характеризует проходимость носовых ходов и указывает на степень выраженности нарушения носового дыхания.
Определение уровня общего и прямого билирубина и КФК в пробе крови для целей диагностирования вызвано тем, что токсиканты обладают цитотоксическим действием, а также подвергаются биотрансформации в печени.
Определение иммунологических показателей и уровня моноцитов в пробе крови для целей диагностирования вызвано тем, что токсиканты оказывают местное раздражающее действие на органы дыхания, угнетают иммунную систему, а хронические герпетические инфекции приводят к вторичной иммунной недостаточности.
Благодаря расширению в предлагаемом способе диагностических информационных показателей и будет обеспечена достоверность оценки влияния как указанных токсикантов, так и других факторов, на диагностику указанной патологии.
Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что поставленный технический результат обеспечивается за счет совокупности всех операций предлагаемого способа, их последовательности и режимов его реализации.
При реализации предлагаемого способа осуществляют следующие операции в нижеуказанной последовательности:
1. проводят отбор детей, проживающих на территории с неблагополучными условиями окружающей среды и в анамнезе которых имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция. Для последующих результатов проводили исследование маркеров герпесвирусов (вирус простого герпеса 1,2 типа - HHV1,2; вирус герпеса 6 типа - HHV6; вирус Эпштейна-Барр - EBV) в образцах биологического материала (кровь, буккальный эпителий) методами иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени на приборе BioRADCFX 96 (Сингапур) в программе TaqMAN.
2. устанавливают в пробе крови содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома. При этом химическо-аналитическое исследование содержания указанных элементов в крови проводили следующим образом:
- формальдегида в соответствии с методическими указаниями МУК 4.1.2111-06 «Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии»;
- ароматических углеводородов (бензола и ксилола) - в соответствии с МУК 4.1.765-99 «Газохроматографический метод количественного определения ароматических углеводородов (бензол, толуол, этилбензол, о-, м-, п-ксилол) в биосредах (кровь)»;
- металлов (марганца, хрома) - в соответствии с МУК 4.1.3230-14 «Измерение массовых концентраций химических элементов в биосредах (кровь, моча) методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой».
Критериями оценки концентраций химических соединений в биосредах детей служили региональные фоновые уровни содержания анализируемых соединений в крови детского населения, проживающего на экологически благополучных территориях
3. определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющих роль диагностических маркеров:
- в качестве функциональных показателей определяют:
- показатель вариационной пульсометрии (Мо) (определяли методом кардиоинтервалографии (КИГ) на компьютерном электрокардиографе «Поли-Спектр-8/EX» (Нейрософт, Россия) с использованием кардиоритмографической программы по стандартной методике с оценкой показателей временного, спектрального анализов и вариационной пульсометрии по P.M. Баевскому);
- суммарный объемный поток (СОП), характеризующий степень выраженности нарушения носового дыхания (носовое дыхания изучали методом передней активной риноманометрии - система ринометрии SRE 2000 с датчиком Rhinostream, Interacoustics A/S, Дания); функцию внешнего дыхания - методами спирографии (СПГ на спирометре Schiller PS spirometry с применением датчика SP-1 (Schiller AG, Швейцария) по стандартной методике.)
- методом ультразвукового исследования (УЗИ) структурные параметры небных миндалин (оценка размеров, эхогенности ткани и структуры, наличие патологических включений); реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы и мезентериальных лимфоузлов и регионарных лимфоузлов (оценка количества, размеров, формы, индекса Солбиати, эхогенности ткани, эхоструктуры, выраженности коркового слоя, характера сосудистого рисунка) на аппарате экспертного класса «Vividiq» (GE Medical systems, Китай) с использованием линейного датчика (4,0-13,0 МГц);
- структуру и размеры печени (эхоструктура, эхогенность паренхимы, размеры долей, диаметры печеночных сосудов) по стандартной методике на ультразвуковом сканере экспертного класса «Vividq» (GE Vingmed Ultrasound AS, Норвегия), с использованием конвексного датчика);
4. определяют у ребенка лабораторные показатели: уровень моноцитов, содержание общего и прямого билирубина, уровень креатинфосфокиназы (КФК); иммунологические показатели: абсолютный фагоцитоз, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 10 (ИЛ-10), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу, уровень специфического IgG к бензолу. При этом указанное клинико-лабораторное исследование выполнялось стандартными унифицированными методами с использованием следующего оборудования: автоматического гематологического анализатора DREW-3 (Biocode Hycel Holdings SAS, Франция), микроскопов «PrimoStar» (Zeiss, Германия), DM 1000 (Leica Microsystem, Германия), автоматического и полуавтоматического биохимических анализаторов Keylab (BPC+Biosed, Италия) и Humalyzer 2000 (Human GmbH, ФРГ), спектрофотометра ПЭ-5300 В (Экохим, Россия), анализатора электролитов крови Easy Lyte Calcium (Medica Corp, США), автоматического аппликатора SAS-lplusn окрашивателя SAS-2 (Helena, Великобритания), иммуноферментных анализаторов Infinite F50 и Sunrise (Тесап, Австрия), проточного цитометра FACS Calibur фирмы «Весгоп Dickinson» с универсальной программой Cell Quest PrO, прибора Bio RADCFX96 (Сингапур) в программе TaqMAN.
5. диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпесвирусной инфекции, в том случае, если ребенок одновременно характеризуется следующими маркерами:
- при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза,
- при наличии совокупности следующих показателей:
- уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек,
3
- выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см/с,
- наличие структурных изменений небных миндалин,
- наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны,
- увеличение размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры;
- при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%,
3
- при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм,
3
- при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм,
3
- при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм,
9
3
9
3
- при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10/дм -2,41⋅10/дм,
3
3
- при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см,
3
- при содержании уровня IgE общего выше 124,66-205,18 МЕ/см
- и при наличии в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, и IgG специфического к бензолу.
На основании полученных результатов делается вывод, что такой ребенок нуждается в дополнительном наблюдении и лечении.
Для выделения маркерных показателей был проведен сравнительный анализ внутренних связей в системе «маркер экспозиции - лабораторный и функциональный показатель ответа» отдельно для группы наблюдения и группы сравнения.
При этом группу наблюдения составили 206 детей с заболеваниями органов дыхания, в анамнезе которых был диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, проживающих на территории с многокомпонентным аэрогенным загрязнением, (50% мальчиков и 50% девочек; средний возраст 10,88±0,47 лет).
В группу сравнения вошли 158 детей с респираторной патологией, проживающих в условиях относительного санитарно-гигиенического благополучия (поселок городского типа Пермского края) (55,06% мальчиков и 44,94% девочек; средний возраст 10,61±0,54 лет), в анамнезе которых отсутствовал диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция.
Группы были сопоставимы по поло-возрастному составу (р=0,167-0,706).
Содержание в крови детей различных групп химических веществ, приведены в таблице 1.
Данные, приведенные в таблице 1, показывают, что в крови детей группы наблюдения содержание бензола в 1,6 раза превышает содержание в крови детей группы сравнения, ксилола в 1,2 раза, марганца в 1,1 раза, формальдегида в 1,3 раза, хрома в 1,1 раза.
Данные о частоте встречаемости отклонений в диагностических маркерах у детей группы наблюдения и группы сравнения, а также об установленном относительном риске (OR) встречаемости диагностических маркеров и критериев, ассоциированных с воздействием химических элементов техногенного происхождения и наличием вирусной герпесной инфекции, приведены в таблице 2.
Таким образом, результаты исследования, приведенные в таблице 2, показывают, что диагностируют у ребенка хронические лимфопролиферативные заболевания носоглотки, ассоциированные с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, в том случае, если ребенок одновременно характеризуется следующими обстоятельствами:
- при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома в крови по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза,
- при наличии совокупности следующих показателей:
- уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек,
3
- выраженной носовой обструкции при СОП менее 500 см/с,
- наличие структурных изменений небных миндалин,
- наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы и лимфоузлов мезентериальной зоны в крови,
- увеличении размеров печени в виде косого вертикального размера левой доли печени 44,0 мм и более и/или наличие реактивных изменений ее структуры;
- при содержании в крови моноцитов в пределах 7,15-7,71%,
3
- при содержании уровня общего билирубина 23,15-27,73 мкмоль/дм,
3
- при содержании прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм,
3
- при содержании КФК в пределах 139,18-191,46 ЕД/дм,
9
3
9
3
- при содержании абсолютного фагоцитоза в пределах 2,07⋅10/дм - 2,41⋅10/дм,
3
3
- при содержании ИЛ-4 в пределах 2,409-3,245 пг/см, ИЛ-10 в пределах 4,722-8,372 пг/см,
3
- при содержании уровня IgE общего выше 124,66-205,18 МЕ/см,
- и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, и IgG специфического к бензолу.
Причинно-следственная связь указанных диагностических критериев заболеваний носоглотки с химическими элементами в крови ребенка и с наличием вирусно-герпесной инфекцией дополнительно подтверждается результатами, приведенными в таблицах 3-9 (результаты для детей группы наблюдения).
Таким образом, данные, приведенные в таблицах 1-9, являются доказательствами того, что предлагаемым способом у детей, страдающих вирусно-герпесной инфекцией и в крови которых имеются в наличии указанные вредные химические элементы, не менее, чем в 1,3 раза превышающие референтную концентрацию, действительно верно будет поставлен диагноз развития хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки, т.к.:
- доказано превышение в пробе крови детей содержание бензола, ксилола, формальдегида, марганца и хрома по сравнению с референтным количеством не менее, чем в 1,3 раза;
- показана причинно-следственная связь этого уровня указанных химических элементов, с рядом функциональных и лабораторных показателей, характеризующих связь хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки с наличием антител вирусно-герпесной инфекции (что доказывает достоверность и точность предлагаемого способа), а также с превышением/снижением от количественных значений заявленных функциональных и клинико-лабораторных показателей.
Ниже приводим пример двух пациентов из группы наблюдения, которым поставлен диагноз развития хронических лимфопролиферативных заболеваний носоглотки.
Пример 1.
Больной К., 8 лет, проживающий на территории промышленного города, с диагнозом «Гипертрофия небных миндалин I степени».
Жалобы: на длительную заложенность носа и повторные простудные заболевания (более 5 раз в год).
3
3
3
3
3
3
3
3
9
3
3
3
3
3
3
При проведении клинико-лабораторного обследования выявлено наличие в крови HSV1,2 IgG - 2,18 у.е., EBV-NA IgG - 95,22 у.е. По данным химико-аналитического исследования содержание бензола в крови составило 0,0019 мг/дм, п-м-ксилола - 0,0048 мг/дм, формальдегида - 0,031 мг/дм, марганца - 0,011 мг/дм, хрома - 0,0022 мг/дм. В общем анализе крови содержание моноцитов составило 7,25%, в биохимическом анализе крови уровень общего билирубина составил 23,2 мкмоль/дм, прямого билирубина -5,55 мкмоль/дм, креатинфосфокиназы - 148,2 Е/дм. Иммунологическое обследование показало, что абсолютный фагоцитоз был 2,29⋅10/дм, уровень ИЛ-4 - 2,91 пг/см, ИЛ-10 - 8,12 пг/см, IgE общего выше 128,5 МЕ/см, выявлены в крови IgE специфического к формальдегиду (0,209 МЕ/см), марганцу (0,216 МЕ/см) и IgG специфического к бензолу (0,753 у.е.).
3
При проведении риноманометрии отмечено снижение показателя суммарной общей скорости носового потока (СОП) с обеих сторон до 423,79 см/с. Оценка показателей вариационной пульсометрии показала у ребенка наличие ваготонического исходного вегетативного тонуса и нормальной вегетативной реактивности, при этом показатель Мо составил 0,78 сек.
При проведении ультразвуковой диагностики выявлено наличие детрита в небных миндалинах, признаки реактивной гиперплазии югуло-дигастрального лимфоузла верхней яремной группы; увеличение размеров печени (косой вертикальный размер левой доли печени составил 46,0 мм), умеренно выраженная реактивная гиперплазия лимфоузлов мезентериальной зоны.
В данном случае, у пациента были выявлены отклонения как функциональных, так и лабораторных показателей, которые предлагается использовать как диагностические критерии в заявляемом способе. Таким образом, была доказана достоверность и точность предлагаемого способа.
Пример 2.
Больная П., 12 лет, проживающая на территории с многокомпонентным загрязнением атмосферного воздуха техногенными химическими веществами, с диагнозом «Хронический тонзиллит».
Жалобы: периодическую заложенность носа, частые простудные заболевания, быструю утомляемость.
3
3
3
3
3
3
3
3
9
3
3
3
3
3
3
По данным клинико-лабораторного обследования выявлено наличие в крови HSV1,2 IgG - 5,88 у.е., EBV-NA IgG - 16,79 у.е. Химико-аналитическое исследования показало, что содержание бензола в крови составило 0,0023 мг/дм, п-м-ксилола - 0,0028 мг/дм, формальдегида -0,034 мг/дм, марганца - 0,015 мг/дм, хрома - 0,0072 мг/дм. В общем анализе крови содержание моноцитов составило 7,58%, в биохимическом анализе крови уровень общего билирубина составил 23,7 мкмоль/дм, прямого билирубина - 5,6 мкмоль/дм, креатинфосфокиназы - 144,1 Е/дм. Иммунологическое обследование показало, что абсолютный фагоцитоз был 2,189⋅10/дм, уровень ИЛ-4 - 2,94 пг/см, ИЛ-10 - 4,96 пг/см, IgE общего выше 125,4 МЕ/см, выявлен в крови IgE специфического к формальдегиду (0,261 МЕ/см), марганцу (0,249 МЕ/см) и IgG специфического к бензолу (0,654 у.е.).
3
По результатам риноманометрии отмечено снижение показателя суммарной общей скорости носового потока с обеих сторон до 408,62 см/с. По данным кардиоинтервалографии показатель Мо составил 0,79 сек.
Ультразвуковая диагностика выявила увеличение размеров небных миндалин и наличие детрита в них, признаки реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; увеличение размеров печени (косой вертикальный размер левой доли печени составил 63,0 мм), наличие реактивных изменений структуры печени; наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов мезентериальной зоны.
В данном случае, у пациента были выявлены отклонения как функциональных, так и лабораторных показателей, которые предлагается использовать как диагностические маркеры в заявляемом способе. Таким образом, была доказана достоверность и точность предлагаемого способа.
Предлагаемый способ применяется с целью выявления контингента детей, в отношении которых необходимо осуществление дополнительной специализированной лечебной и профилактической программы.
Разработанный способ диагностики позволяет получить достоверные и точные данные, не требует дефицитных реактивов, прост в исполнении, экономичен и не имеет противопоказаний.