МОЛЕКУЛЫ, СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С ТИМУСНЫМ СТРОМАЛЬНЫМ ЛИМФОПОЭТИНОМ (TSLP), И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ ТАКИХ МОЛЕКУЛ

1. Молекула, которая специфически связывает человеческий тимусный стромальный лимфопоэтин (TSLP), выбранная из следующих соединений:
а) молекула, которая содержит:
участок определения комплементарности тяжелой цепи 1 (HCDR1), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
участок определения комплементарности тяжелой цепи 2 (HCDR2), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
участок определения комплементарности тяжелой цепи 3 (HCDR3), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;
участок определения комплементарности легкой цепи 1 (LCDR1), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11;
участок определения комплементарности легкой цепи 2 (LCDR2), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
участок определения комплементарности легкой цепи 3 (LCDR3), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13;
b) молекула, которая содержит:
HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5;
HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;
LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14;
LCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15; и
LCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16;
c) молекула, которая содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17;
d) молекула, которая содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25;
e) молекула, которая содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 19;
f) молекула, которая содержит паратоп, содержащий по меньшей мере один из следующих остатков: Thr28, Asp31, Tyr32, Trp33, Asp56, Glu101, Ile102, Tyrl03, Tyrl04, Tyrl05 последовательности тяжелой цепи SEQ ID NO: 22, или Gly28, Ser29, Lys30, Tyr31, Tyr48, Asp50, Asn51, Glu52, Asn65 и Trp92 последовательности легкой цепи SEQ ID NO: 25;
g) фрагмент антитела, который связывает человеческий TSLP и содержит
HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;
LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11;
LCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
LCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13; и
h) фрагмент антитела, который связывает человеческий TSLP и содержит:
HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5;
HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;
LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14;
LCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15; и
LCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.
2. Молекула, которая специфически связывает эпитоп в человеческом TSLP, где эпитоп содержит, по меньшей мере, один из следующих остатков: Lys38, Ala41, Leu44, Ser45, Thr46, Ser48, Lys49, Ile52, Thr53, Ser56, Gly57, Thr58, Lys59, Lys101, Glnl45 и Argl49 последовательности SEQ ID NO: 38.
3. Молекула по п.2, где эпитоп содержит, по меньшей мере, один из следующих наборов остатков последовательности SEQ ID NO: 38:
(a) Lys49 и Ile52,
(b) Gly57 и Lys59,
(c) Lys101,
(d) Glnl45 и Argl49.
4. Молекула по любому из пп.1-3, где молекула представляет собой моноклональное антитело.
5. Молекула по любому из пп.1-3, где молекула представляет собой фрагмент антитела, выбранный из Fab, Fab', F(ab')2, scFv, минитела или диатела.
6. Молекула по любому из пп.1-3, где молекула представляет собой Fab.
7. Молекула по п.6, где молекула представляет собой человеческий или гуманизированный Fab.
8. Молекула по любому из пп.1-4, где молекула представляет собой человеческий иммуноглобулин.
D
9. Молекула по любому из пп.1-8, где молекула связывает человеческий TSLP с константой диссоциации (K) менее 100 пМ.
D
10. Молекула по любому из пп.1-8, где молекула связывает человеческий TSLP с константой диссоциации (K) менее 10 пМ.
11. Фармацевтическая композиция, содержащая молекулу по любому из пп.1-10 и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
12. Фармацевтическая композиция по п.11, где масса молекулы составляет примерно от 5% до 95%, или примерно от 10% до 90%, или примерно от 15% до 85%, или примерно от 20% до 80%, или примерно от 25% до 75% или примерно от 30% до 70%, или примерно от 40% до 60%, или примерно 40-50% (масс./масс.) от массы композиции.
13. Фармацевтическая композиция по п.11, где композиция содержит оболочкообразующее средство.
14. Фармацевтическая композиция по п.13, где оболочкообразующее средство представляет собой трилейцин или лейцин.
15. Фармацевтическая композиция по п.14, где масса трилейцина или лейцина составляет примерно 10-75% (масс./масс.) от массы композиции.
16. Фармацевтическа композици по п.15, где масса трилейцина составляет примерно 10-30% (масс./масс.) от массы композиции, или где масса лейцина составляет примерно 50-75% (масс./масс.) от массы композиции.
17. Фармацевтическая композиция по п.11, где композиция содержит, по меньшей мере, одно стеклообразующее вспомогательное вещество.
18. Фармацевтическая композиция по п.17, где по меньшей мере одно стеклообразующее вспомогательное вещество выбрано из гистидина, трегалозы, маннита, сахарозы или цитрата натрия.
19. Фармацевтическая композиция по п.18, где по меньшей мере одно стеклообразующее вспомогательное вещество выбрано из трегалозы или смеси трегалозы и маннита.
20. Фармацевтическая композиция по п.17, где масса стеклообразующего вспомогательного вещества составляет примерно 15-35% (масс./масс.) от массы композиции.
21. Фармацевтическая композиция по п.11, где композиция содержит буфер.
22. Фармацевтическая композиция по п.21, где буфер выбран из гистидинового, глицинового, ацетатного или фосфатного буфера.
23. Фармацевтическая композиция по п.21, где масса буфера составляет примерно 5-13% от массы композиции.
24. Фармацевтическая композиция по п.11, где композицию получают в виде сухого порошкообразного состава.
25. Фармацевтическая композиция по п.24, где композицию получают в виде сухого порошкообразного состава, подходящего для ингаляции.
26. Фармацевтическая композиция по п.11, где композиция содержит высушенные распылением частицы, имеющие оболочку и ядро, причем оболочка содержит трилейцин или лейцин, а ядро содержит:
i) молекулу, трегалозу, маннит и буфер; или
ii) молекулу, трегалозу, буфер и HCl.
27. Фармацевтическая композиция по п.26, где буфер выбран из гистидинового, глицинового, ацетатного или фосфатного буфера.
28. Фармацевтическая композиция, содержащая высушенные распылением частицы, состоящие из:
i) ядра, содержащего трегалозу, маннит, гистидин и TSLP-связывающую молекулу, или ядра, содержащего трегалозу, гистидин, HCl и TSLP-связывающую молекулу, где TSLP-связывающая молекула представляет собой Fab-фрагмент антитела, который содержит:
a) HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;
HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;
LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11;
LCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и
LCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13; или
b) HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5;
HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3;
LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14;
LCDR2, содержащий; аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15; и
LCDR3, содержащий; аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16; и
ii) оболочки, содержащей трилейцин или лейцин.
29. Фармацевтическая композиция по п.28, содержащая:
a) 40% (масс./масс.) TSLP-связывающей молекулы, 25% (масс./масс.) трилейцина, 30% (масс./масс.) общего количества трегалозы и маннита и 5% (масс./масс.) гистидина;
b) 50% (масс./масс.) TSLP-связывающей молекулы, 15% (масс./масс.) трилейцина, 2,6% (масс./масс.) HCl, 5,6% (масс./масс.) гистидина и 26,8% (масс./масс.) общего количества трегалозы и основания; или
c) 50% (масс./масс.) TSLP-связывающей молекулы, 15% (масс./масс.) трилейцина, 19,4% (масс./масс.) трегалозы, 13,04% (масс./масс.) гистидина и 2,56% (масс./масс.) НС1.
30. Набор, содержащий молекулу по п.1 или фармацевтическую композицию по п.11, и устройство для доставки молекулы или фармацевтической композиции индивидууму.
31. Набор по п.30, где устройство доставляет молекулу или фармацевтическую композицию в аэрозольной форме.
32. Набор по п.30, где устройство представляет собой ингалятор сухого порошка.
33. Способ лечения связанного с TSLP состояния у индивидуума, нуждающегося в этом, где способ включает введение индивидууму терапевтически эффективного количества молекулы по любому из пп.1-10 или фармацевтической композиции по любому из пп.11-29.
34. Молекула по любому из пп.1-10 или фармацевтическая композиция по любому из пп.11-29 для применения в способе лечения связанного с TSLP состояния у индивидуума, нуждающегося в этом.
35. Применение молекулы по любому из пп.1-10 или фармацевтической композиции по любому из пп.11-29 для лечения связанного с TSLP состояния у индивидуума, нуждающегося в этом.
36. Применение молекулы по любому из пп.1-10 в способе промышленного получения лекарственного средства, предназначенного для лечения связанного с TSLP состояния у индивидуума, нуждающегося в этом.
37. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где воспалительное заболевание, связанное с TSLP, выбрано из астмы, хронической обструктивной болезни легких, аллергического ринита, аллергического риносинусита, аллергического конъюнктивита, эозинофильного эзофагита и атопического дерматита.
38. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где связанное с TSLP воспалительное состояние представляет собой астму.
39. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где молекула входит в состав сухого порошкообразного состава, подходящего для ингаляции.
40. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где молекулу вводят индивидууму перорально или интраназально.
41. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где молекулу вводят индивидууму в аэрозольной форме.
42. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где молекулу вводят индивидууму с помощью ингалятора сухого порошка.
43. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, где индивидуум представляет собой человека.
44. Способ по п.33, молекула по п.34, или применение по п.35 или 36, дополнительно включающие в себя введение индивидууму второго средства.
45. Способ, молекула или применение по п.44, где второе средство выбрано из группы, состоящей из кортикостероидов, бронходилататоров, антигистаминных средств, антилейкотриенов и ингибиторов PDE-4.
46. Нуклеиновая кислота, кодирующая молекулу по любому из пп.1-10.
47. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.46.
48. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п.46 или вектор по п.47.
49. Способ получения молекулы по любому из пп.1-10, включающий:
культивирование клетки-хозяина, экспрессирующей нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу; и
сбор молекулы из культуральной среды.
50. Способ получения сухого порошкообразного состава, содержащего молекулу по любому из пп.1-10, где указанный способ включает:
(a) получение водного раствора, содержащего молекулу по любому из пп.1-10, трилейцин или лейцин, стеклообразующее вспомогательное вещество и буфер;
(b) распылительную сушку водного раствора, полученного на стадии (a), при температуре в диапазоне примерно от 120°С до 200°С (на входе) и от 55°С до 75°С (на выходе) с получением частиц сухого порошка; и
(c) сбор частиц сухого порошка.
51. Способ по п. 50, где буфер выбран из гистидинового, глицинового, ацетатного или фосфатного буфера.
52. Способ по п. 50, где стеклообразующее вспомогательное вещество выбрано из гистидина, гистидина HCl, трегалозы, маннита, сахарозы или цитрата натрия.
53. Фармацевтическая композиция по п.11, где массовое отношение вспомогательное вещество:молекула превышает 0,5.