СПОСОБ ТЕСТИРОВАНИЯ ПРОИЗВОДСТВЕННОГО ПРОЦЕССА ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА

1. Способ тестирования производственного процесса получения рекомбинантного белка, при этом способ предусматривает:
обеспечение многолуночного планшета, содержащего по меньшей мере одну лунку, содержащую клетку млекопитающего, помещенную в первую жидкую культуральную среду, причем первая жидкая культуральная среда занимает от 5% до 70% объема лунки, а клетка млекопитающего содержит нуклеиновую кислоту, которая кодирует рекомбинантный белок;
инкубирование многолуночного планшета в течение периода времени при от 31°C до 40°C и с перемешиванием вращением со скоростью от 320 оборотов в минуту (об./мин.) до 500 об./мин;
непрерывно или периодически, в течение периода времени, удаление из лунки первого объема первой жидкой культуральной среды и добавление к первой жидкой культуральной среде в лунке второго объема второй жидкой культуральной среды, причем первый и второй объемы являются равными;
выявление рекомбинантного белка в клетке млекопитающего или в первой или второй жидкой культуральной среде; и
сравнение количества рекомбинантного белка, находящегося в клетке млекопитающего или в первой или второй жидкой культуральной среде, с эталонным уровнем рекомбинантного белка.
2. Способ по п.1, где эталонный уровень рекомбинантного белка представляет собой уровень рекомбинантного белка, получаемый при применении другого способа культивирования.
3. Способ по п.2, где в другом способе культивирования используют другую первую или вторую жидкую культуральную среду, другую клетку млекопитающего, другую температуру, другой уровень перемешивания или другой многолуночный планшет.
4. Способ по п.2, где в другом способе культивирования используют другие исходные материалы, средства, препятствующие агрегации или жидкие культуральные среды с определенным химическим составом.
5. Способ по п.1, где способ применяют для осуществления экспериментов с высокопроизводительными культурами клеток, для осуществления планирования экспериментов (DOE) или исследования в рамках концепции "качество через проектирование" (QDB).
6. Способ по п.1, где рекомбинантный белок выявляют в первой или второй жидкой культуральной среде.
7. Способ по п.6, где рекомбинантный белок представляет собой секретируемый иммуноглобулин, секретируемый фермент, секретируемый фактор роста, секретируемый фрагмент белка или секретируемый сконструированный белок.
8. Способ по п.1, где рекомбинантный белок выявляют в клетке.
9. Способ по п.8, где рекомбинантный белок представляет собой иммуноглобулин, фермент, фактор роста, фрагмент белка или сконструированный белок.
10. Способ по п.1, где первый объем первой жидкой культуральной среды практически не содержит клеток млекопитающих.
11. Способ по п.1, где скорость перемешивания вращением составляет от 320 об./мин до 400 об./мин.
12. Способ по п.1, где:
многолуночный планшет инкубируют в течение периода времени более 7 дней, а в 1-3 день инкубации, в каждый 24-часовой период, первый объем удаляемой первой жидкой культуральной среды и второй объем добавляемой второй жидкой культуральной среды составляют от 30% до 50% объема первой жидкой культуральной среды;
в 4-6 день инкубации, в каждый 24-часовой период, первый объем удаляемой первой жидкой культуральной среды и второй объем добавляемой второй жидкой культуральной среды составляют от 40% до 70% объема первой жидкой культуральной среды; и
в 7 день и при дальнейшей инкубации, в каждый 24-часовой период, первый объем удаляемой первой жидкой культуральной среды и второй объем добавляемой второй жидкой культуральной среды составляют от 90% до 150% объема первой жидкой культуральной среды.
13. Способ по п.1, где многолуночный планшет представляет собой планшет с глубокими лунками, и где лунка имеет внутреннюю высоту от 1 см до 12 см.
14. Способ по п.1, где клетку млекопитающего суспендируют в от 150 мкл до 15 мл первой культуральной среды.
15. Способ по п.1, где первая жидкая культуральная среда и/или вторая жидкая культуральная среда выбраны из группы, состоящей из: жидкой культуральной среды с определенным химическим составом, жидкой культуральной среды, не содержащей сыворотку, жидкой культуральной среды, содержащей сыворотку, жидкой культуральной среды, не содержащей компонентов животного происхождения, и среды, не содержащей белков.
16. Способ по п.1, где удаление первого объема первой жидкой культуральной среды из лунки и добавление к первой жидкой культуральной среде в лунке второго объема второй жидкой культуральной среды осуществляют с применением автоматизированного устройства.
6
6
17. Способ по п.1, где в результате осуществления способа плотность жизнеспособных клеток составляет от 15 × 10 клеток/мл до 60 × 10 клеток/мл в лунке.