Структура микробиоценоза грудных детей - пациентов Национального госпиталя педиатрии г. Ханой, СРВ

Ei

ЗНиСО март №

6. Одум Ю. Экология: В 2-х т. / Пер. с англ. М.: Мир, 1986. Т. 1. 326 с.; Т. 2. 376 с.

7. Burm0lle M. et al. Interactions in multispecies biofilms: do they actually matter? / M. Burm0lle, D. Ren, T. Bjarnsholt, S.J. S0rensen // Trends Microbiol. 2014. № 22 (2). P. 84-91.

8. Farhana I. et al. Survival of Vibrio cholerae O1 on fomites/ I. Farhana, Z.Z. Hossain, S.M. Tulsiani // World J Microbiol Biotechnol. 2016. № 32.

9. Fernández-Delgado M. et al. Biofilm formation of Vibrio cholerae on stainless steel used in food processing / M. Fernández-Delgado, H. Rojas, Z. Duque // Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo. 2016. № 58.

10. Huang J. et al. Quadruplex real-time PCR assay for detection and identification of Vibrio cholerae O1 and O139 strains and determination of their toxigenic potential / J. Huang, Y. Zhu, H. Wen // Appl. Environ. Microbiology. 2009. Vol.75. № 22. P. 6981-6985.

11. Nocker A. et al. Selective removal of DNA from dead cells of mixed bacterial communities by use of ethidium monoazide/ A. Nocker, A.K. Camper // Appl. Environ. Microbiology. 2006. Vol. 72. № 3. P. 1997-2004.

12. Ren D. et al. High-throughput screening of multispecies biofilm formation and quantitative PCR-based assessment of individual species proportions, useful for exploring inter-

specific bacterial interactions / D. Ren, J.S. Madsen, C.I. de la Cruz-Perera // Microb. Ecol. 2014. № 68(1). P. 54-146. ^

13. Roder H.L. et al. Studying Bacterial Multispecies Biofilms: Where to Start? / H.L. R0der, S.J. S0rensen, M. Burm0lle // Trends Microbiol. 2016. №24(6).

14. Silva A.J. et al. Vibrio cholerae biofilms and Cholera Pathogenesis / A.J. Silva, J.A. Benitez // PLOS Neglected Tropical Diseases. 2016. February, 4.

15. Tavernier S. et al. Quantification of Pseudomonas aeruginosa in multispecies biofilms using PMA-qPCR / S. Tavernier, T. Coenye // Peer J. 2015. February, 24.

16. Zettler E.R. et al. Life in the «plastisphere»: microbial communities on plastic marine debris./ E.R. Zettler, T.J. Mincer, L.A. Amaral-Zettler // Environ Sc. Technol. 2013. July, 2.

Контактная информация:

Водопьянов Сергей Олегович,

тел.: +7 (863) 240-22-66; 8-903-402-11-63,

e-mail: serge100v@gmail.com

Contact information:

Vodop'yanov Sergey,

phone: +7 (863) 240-22-66; 8-903-402-11-63, e-mail: serge100v@gmail.com

УДК 616-093/-098

СТРУКТУРА МИКРОБИОЦЕНОЗА ГРУДНЫХ ДЕТЕЙ - ПАЦИЕНТОВ НАЦИОНАЛЬНОГО ГОСПИТАЛЯ ПЕДИАТРИИ Г. ХАНОЙ, СРВ

Т.Ф. Степанова1, Л.В. Катаева1, А.П. Ребещенко1, Кху Тхи Кханх Дунг3, О.В. Посоюзных1, А.Н. Кузнецов2, Ле Тхи Минх Хуонг3, Тран Тхи Най2

1ФБУН «Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии»

Роспотребнадзора, Тюмень, Россия 2Совместный Российско-Вьетнамский тропический научно-исследовательский и технологический центр (Тропический центр), Ханой, Вьетнам 3Национальный госпиталь педиатрии, Ханой, Вьетнам

Представлены результаты исследований структуры микрофлоры, выделенной со слизистых зева и прямой кишки пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных Национального госпиталя педиатрии, г. Ханой. Показано, что структура микробиоценоза детей, получающих лечение в инфекционном блоке отделения, по всем группам бактерий не отличается от микробиоценоза детей неинфекционного блока. Ключевые слова: микробиоценоз, грудные дети, виды бактерий.

T.F. Stepanova, L.V. Kataeva, A.P. Rebeschenko, Khu Thi Khanh Dung, O.V. Posoiuznykh, A.N. Kuznetsov, Le Thi Minh Huong, Tran Thi Nhai  MICROBIOCENOSIS STRUCTURE OF NEWBORN -PATIENTS OF NATIONAL HOSPITAL OF PEDIATRICS, HANOI, VIETNAM  Tyumen Region Infection Pathology Research Institute, Tyumen, Russia; Russian-Vietnamese Tropical Research and Technology Centre (Tropical Centre), Hanoi, Vietnam; National Hospital of Pediatrics (NHP), Hanoi, Vietnam.

The results of studies of the microflora structure isolated from mucous pharynx and rectum of newborn patients of intensive care unit of National Hospital of Pediatrics, Hanoi, are presented. It is shown that the structure of microbiocenosis of children receiving treatment in an infectious separation unit for all groups of bacteria is different from microbiocenosis of children of noninfectious unit. Key words: microbiocenosis, infants, bacterial species.

В рамках реализации программы сотрудничества Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека с Министерством здравоохранения Социалистической Республики Вьетнам по оказанию помощи СРВ в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия населения в 2015-2017 гг. ТНИИКИП Роспотребнадзора проводил работу по внедрению микробиологического мониторинга и систем биологической безопасности медицинской помощи при организации санитарно-эпидемиологического режима в лечебных организациях.

Заболеваемость инфекциями, связанными с оказанием медицинской помощи (ИСМП), является одной из глобальных мировых проблем на современном этапе развития здравоохранения и затрагивает все страны вне зависимости от степени их развития [3]. Широкое распространение ИСМП в медицинских организациях различного профиля, значительный ущерб здоровью населения, экономике и демографической ситуации в различных странах континента определяют актуальность их профилактики на современном этапе [1].

МаРТ № (288) ЗНиСО

55

Исследование проведено на базе Научно-исследовательского института детского здоро-сэ вья Национального педиатрического госпиталя г. Ханой в соответствии с договором о научно-техническом сотрудничестве с Тюменским на-

I_у учно-исследовательским институтом краевой

инфекционной патологии (ТНИИКИП) Роспот-ребнадзора по внедрению систем биологической безопасности медицинской помощи в отдельных лечебных учреждениях (отделения новорожденных). Министерство здравоохранения определило Национальный госпиталь педиатрии (NHP) в качестве ведущего педиатрического учреждения во Вьетнаме, в котором обслуживаются дети из всех провинций Северного Вьетнама, реже - из Центрального и Южного Вьетнама.

Цель исследования - исследование структуры микробиоценоза грудных детей - пациентов Национального госпиталя педиатрии г. Ханой Социалистической Республики Вьетнам.

Материалы и методы. Материалом для исследования послужили мазки со слизистой зева и прямой кишки 49 детей до года (из них новорожденных - 31), получающих лечение в отделении реанимации и интенсивной терапии новорожденных (ОРИТ). Отделение функционально разделено на два блока: для пациентов с инфекционными и неинфекционными заболеваниями. Средний возраст обследованных детей составил 27 дней (от 1 до 98 дней). В блоке с неинфекционными заболеваниями («чистое отделение») обследовано 24 ребенка, в блоке с инфекционными («грязное» отделение) - 25 детей. Всего выделено и идентифицировано 280 штаммов бактерий.

Видовую идентификацию бактерий осуществляли по прямому белковому профилированию с помощью времяпролетной масс-спектро-метрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией (масс-спектрометр MALDI TOF MS серии Microflex LT) с использованием программного обеспечения Maldi BioTyper 3.0. Уровень достоверности идентификации выше 2.0 свидетельствовал о точной видовой идентификации.

Статистическая обработка данных осуществлялась лицензионным программным обеспечением SPSS (версия 22.0), предназначенным для выполнения научных исследований, отвечающих всем требованиям медицины, основанной на доказательствах.

Результаты исследования. Установлено, что из всех 98 проб биоматериала новорожденных (слизистые зева и прямой кишки) 92 пробы дали рост микроорганизмов, что составило 93,88 %. Выделенные бактерии условно распределены на группы: грамположительные; бактерии семейства Enterobacteriaceae; нефер-ментирующие грамотрицательные бактерии (НГОБ) и грибы рода Candida. В группу грам-положительных вошли бактерии родов Streptococcus (S. pneumoniae, S. salivarius), Staphylococcus (S. aureus, S. hominis, S. epidermidis, S. haemolyticus), Enterococcus (E. Faecalis,

E. faecium, E. gallinarum). В группе бактерий семейства Enterobacteriaceae идентифицированы микроорганизмы родов Escherichia (E. coli), Klebsiella (K. pneumoniae, K. oxytoca), Serratia (S. marcescens, S. urelytica), Enterobacter (E. cloacae, E. aerogenes, E. kobei), Proteus (P. mirabilis, P. vulgaris) и Raoultella (R. ornithinolytica). Бактерии родов Acinetobacter (A. baumannii, A. pittii, A. junii, A. nosocomialis, A. johnsonii), Pseudomonas (P. aeruginosa, P. nitroreducens), Stenotrophomonas (S. maltophilia), Burkholderia (B. multivorans, B. cenocepacia), Moraxella (M. osloensis), Comamonas (C. testosteroni), Ach-romobacter (A. xylosoxidans) и Elizabethkingia (E. meningoseptica) составили группу НГОБ. Среди грибов рода Candida определены виды: C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis.

По вышеуказанным группам микрофлора, выделенная из обоих локусов, распределилась следующим образом: 40,72 % бактерий отнесено к семейству Enterobacteriaceae; 32,14 % составили НГОБ; грамположительные бактерии и грибы рода Candida соответственно - 25,71 и 1,43 %. Из 46 проб мазков со слизистой зева обследованных детей, давших рост (93,88 %), выделено и идентифицировано 116 культур микроорганизмов: 51 штамм выделен у детей в «чистом» блоке и 65 штаммов - в «грязном».

Сравнительный анализ микрофлоры, выделенной со слизистой зева обследованных детей по группам (рисунок), свидетельствует о преимущественном присутствии в этом локусе НГОБ и бактерий семейства Enterobacteriaceae. Сопоставление этих данных у пациентов, получающих лечение в «чистых» и «грязных» блоках, статистически значимых различий не выявило. В группе неферментирующих грамотри-цательных бактерий в основном идентифицировались следующие виды: A. baumannii (28,8 %), P. aeruginosa (23,1 %), S. maltophilia (15,4 %), E. meningoseptica (15,4 %). Группа бактерий семейства Enterobacteriaceae на слизистых зева детей была представлена 5 видами: K. Pneumo-niae (73,3 %), K. oxytoca (3,3 %), S. marcescens (10,0 %), S. urelytica (10,0 %), R. ornithinolytica (3,3 %). Среди грамположительных бактерий 58,4 % этой группы составили E. faecalis, E. faecium; 25,0 % - стафилококки, преимущественно S. aureus; 16,6 % пришлось на стрептококки - S. pneumoniae, S. salivarius.

Со слизистой прямой кишки обследованных детей выделено и идентифицировано 164 штамма микроорганизмов: 76 культур выделено у детей в «чистом» блоке и 88 штаммов - в «грязном». В структуре микрофлоры слизистой прямой кишки почти половина выделенных штаммов (46,3 %) относились к семейству En-terobacteriaceae, грамположительные бактерии составили 28,66 %, НГОБ и грибы рода Candida высевались в 23,17 и 1,83 % проб соответственно (рисунок). Сравнительная статистическая характеристика структуры микрофлоры слизистой прямой кишки детей, находящихся на госпитализации в инфекционном и неинфекционном ОРИТ, различий не выявила.

ЕС

ЗНиСО март №

*

ff

чистые палаты

грязные палаты

<г?

«г

<5>

Рис. Распределение микрофлоры по группам микроорганизмов, выделенных у детей со слизистой зева

и прямой кишки (Б) в «чистых» и «грязных» палатах

Рассмотрение структуры бактерий семейства Enterobacteriaceae, выделенных со слизистой прямой кишки детей, показало, что наибольший удельных вес в этой группе составляют бактерии K. pneumoniae (43,42 %). На долю E. coli приходится 25,0 %, реже выделялись бактерии рода Enterobacter (E. cloacae, E. Aero-genes, E. kobei) - 17,11 %, Serratia (S. marces-cens, S. urelytica) - 10,53 %, Proteus (P. mirabilis, P. vulgaris) - 2,6 %. В структуре группы грамположительных бактерий выделялись преимущественно энтерококки (87,23 %). Среди НГОБ, также как и на слизистой зева, обнаружены P. aeruginosa (34,21 %), S. maltophilia (28,95 %), A. baumannii (26,3 %).

Характеризуя структуру микрофлоры слизистой зева обследованных детей - пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных, важно подчеркнуть выраженные нарушения в микробиоценозе, так как в норме резидентная микрофлора слизистой зева представлена преимущественно сапрофитными стрептококками, стафилококками, нейсериями. Обнаружение НГОБ и бактерий семейства En-terobacteriaceae на слизистой зева свидетельствует о снижении защитных иммунных механизмов (активности эпителия, макрофагов, продукции секреторного иммуноглобулина А и др.), что характерно для новорожденных детей и детей в возрасте до 3 месяцев. Вместе с тем, нарушение микробиоценоза верхних дыхательных путей указывает на контаминацию их госпитальными штаммами как при проведении медицинских манипуляций, так и при кормлении детей. Это приводит к проникновению микроорганизмов вглубь бронхиального дерева и, соответственно, может быть одной из причин тяжелых респираторных заболеваний новорожденных и детей первого года жизни. На слизистой прямой кишки обследованных детей также обнаружены бактерии, признанные во всем мире нозокомиальными, такие как K. Pneumo-niae, P. aeruginosa, A. baumannii и другие.

Вывод. Результаты проведенных исследований микробиоценоза слизистых зева и пря-

мои кишки пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных Национального госпиталя педиатрии г. Ханоя выявили большое разнообразие циркулирующих микроорганизмов. Идентифицированы, в том числе, и бактерии, которые являются этиологическими факторами возникновения нозокоми-альных инфекций. Показано также, что структура микрофлоры обследованных детей, получающих лечение как в инфекционном, так и в неинфекционном отделении, не отличалась по всем группам бактерий. Эти результаты указывают на необходимость совершенствования существующей системы биологической безопасности медицинской помощи. Следующим этапом микробиологического мониторинга в комплексе противоэпидемических мероприятий ИСМП [2] будет исследование антибиоти-корезистентности циркулирующей в лечебной организации микрофлоры как у пациентов, так и во внешней среде.

ЛИТЕРАТУРА

1. Коза Н.М. Инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи. Эпидемиология и профилактика (Обзорная лекция) // Пермский медицинский журнал. 2013. ХХХ. № 3. С. 135-143.

2. Корначев А.С. и др. Эпидемиологический надзор за инфекциями, связанными с оказанием медицинской помощи, в отделениях патологии новорожденных на основе нового подхода к организации микробиологического мониторинга / А.С. Корначев, А.Л. Баринов // Здоровье населения и среда обитания. 2015. № 2 (263). С. 42-44.

3. Попова А.Ю. и др. Надзор за соблюдением санитарно-эпидемиологического законодательства при оказании медицинской помощи в целях обеспечения ее качества и безопасности / А.Ю. Попова, Е.Б. Ежлова, Е.П. Иго-нина [и др.] // Вестник Росздравнадзора. 2016. № 1. С. 74-80.

Контактная информация:

Степанова Татьяна Федоровна, тел.: +7 (3452) 28-99-92, e-mail: info@tniikip.rospotrebnadzor.ru Contact information: Stepanova Tatiyana, phone: +7 (3452) 28-99-92, e-mail: info@tniikip.rospotrebnadzor.ru