Метаболиты гельминтов как индукторы апоптоза клеток хозяина

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2005

МЕТАБОЛИТЫ ГЕЛЬМИНТОВ КАК ИНДУКТОРЫ АПОПТОЗА КЛЕТОК ХОЗЯИНА

БЕКИШ В.Я.*, КОНЕВАЛОВА Н.Ю.**, БЕКИШ О.-Я.Л.*

УО «Витебский государственный медицинский университет», кафедра медицинской биологии и общей генетики*, кафедра биологической химии**

Резюме. В обзоре представлены результаты своих исследований и данные литературы, показывающие рост апоптоза соматических и генеративных клеток хозяина, вызванные метаболитами гельминтов in vivo и in vitro. Охарактеризованы возможные механизмы апоптоза клеток хозяина при гельминтозных инвазиях. Показано, что апоптоз клеток в организме хозяина во время инвазии паразитами стимулируется повышением синтеза фактора некроза опухоли, образованием NO, белка теплового шока 60 и предположительно цистеиновых протеаз.

Ключевые слова: метаболиты гельминтов, цитотоксичность, соматические и генеративные клетки хозяина, механизмы апоптоз.

Abstract. In this review the results of the investigations and literature data showing the growth of apoptosis of somatic and germ cells of the host caused by helminths metabolites in vivo and in vitro are presented. Possible host cells apoptosis mechanisms are characterized on helminthiasis invasions. Cell apoptosis in the host organism on helminths invasions is shown to be stimulated by the increase of synthesis of tumor necrosis factor, formation of NO, heat shock protein 60 and, presumably, cystein proteases.

Вопрос о способности метаболитов гельминтов вызывать апоптоз клеток млекопитающих в процессе инвазии изучен недостаточно. При проведении щелочного гель-электрофореза единичных клеток в костном мозге и семенниках мышей-самцов линии СВА, инва-зированных карликовыми цепнями, личинками токсокар, трихинеллами, нами в 2004 г. впервые установлено, что метаболиты паразитов обладают цитотоксическим воздействием как на соматические, так и на генеративные клетки хозяина, обусловливая рост апоптоти-ческих клеток [1, 3, 4]. Цитотоксическое воздействие зависело от особенностей биологии развития гельминтов. При гименолепидозе оно было максимально выражено на стадиях цистицеркоидов (3-й день) и имаго (14-й день),

Адрес для корреспонденции: 210023, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра медицинской биологии и общей генетики - Бекиш В.Я.

а при висцеральном токсокарозе - только на 14-й день инвазии. Рост апоптотических клеток костного мозга и семенников на кишечной стадии развития трихинелл (7-й день) был отмечен только при тяжелом трихинеллезе. На миграционной стадии развития паразитов (14 - 21-й дни) цитотоксическое воздействие метаболитов личинок трихинелл проявлялось при всех дозах заражения. Оно также отмечалось и на стадии инкапсуляции паразитов (28й день). Рост процента апоптотических клеток в костном мозге и семенниках мышей при гименолепидозе зависел от дозы введенного инвазионного материала, взятого при заражении, и возрастал при ее увеличении [1, 3, 4]. При гименолепидозе, миграционном аскаридозе, токсокарозе и трихинеллезе нами отмечено снижение активности сперматогенеза за счет пониженного выхода сперматозоидов в придатки у зараженных мышей, вызванное цитотоксическим воздействием на конечную

стадию сперматогенеза животных [7]. Максимальное снижение активности сперматогенеза было отмечено при трихинеллезе, что может быть связано с наибольшей тяжестью протекания инвазии по отношению к остальным моделям гельминтозов, взятых для эксперимента [7]. Белковые соматические продукты из тканей карликовых цепней, токсокар и секреторно-экскреторно-соматические продукты личинок трихинелл обладают цитоксическим действием на лимфоциты крови доноров, вызывая in vitro рост апоптотических клеток [2]. Цитотоксический эффект зависит от вида гельминта и проявляется при добавлении соматического продукта из тканей карликовых цепней в дозе 400 мкг/мл, из тканей токсокар -100, 200, 400 мкг/мл и секреторно-экскреторно-соматического продукта личинок трихинелл - 200, 400 мкг/мл культуральной суспензии. Цитотоксическое воздействие токсокароз-ного белкового соматического продукта одинаково как при малых, так и при высоких кон -центрациях, тогда как секреторно-экскреторно-соматический продукт личинок трихинелл вызывает рост числа апоптотических клеток в 1,7 раза при двукратном увеличении его концентрации [2].

Полученные нами результаты подтверждаются исследованиями, проведенными при других гельминтозах. Показано повышение уровня апоптоза лимфоцитов шистосомозных гранулем, клеток селезенки хозяина в острую стадию шистосомоза Мэнсона [15, 16, 41]. S.K. Lundy et al. [31] показали, что в течение созревания личинок Schistosoma mansoni (4 недели после заражения) апоптоз в селезеночных CD4+ Т-лимфоцитах не повышался, но многократно возрастал к 6-ой неделе инвазии и коррелировал с временем попадания яиц в печень. Апоптоз CD4+ Т-лимфоцитов селезенки максимально возрастал в острую стадию шисто-сомоза (8 недель после заражения), снижался в хроническую стадию заболевания (16 недель после заражения). Авторы отметили, что 30% гранулематозных CD4+ Т-лимфоцитов были апоптотическими в течение острого и хронического экспериментального шистосомоза Мэнсона [31]. L. Chen et al. [9] в 2002 г. изучили особенности апоптоза в коже, зараженных абдоминально 250 церкариями S. mansoni,

мышей линии C57BL/6. Параллельно иммунизировали отдельную группу животных, зараженных 250 живыми церкариями, облученных дозой в 20 000 рентген, и через 2 недели повторно зараженных 250 нормальными церка-риями. Установлено присутствие большого числа апоптотических клеток вокруг мигрирующих личинок паразитов и вокруг шисто-сомул у зараженных и иммунизированных животных. Иммуногистохимический анализ с использованием aнти-СD3 антител показал, что большинство апоптотических клеток вокруг шистосомул у зараженных и иммунизированных животных являются T-клетками [9]. Растворимый антиген яиц S. mansoni также повышал in vitro уровень апоптоза Т-лимфо-цитов больных асимптомным кишечным ши-стосомозом Мэнсона [8]. M.H. Shin [44] в 2000г. было изучена способность секреторноэкскреторных продуктов (СЭП) метацеркари-ев Paragonimus westermani стимулировать апоптоз эозинофилов человека при их совместном культивировании. Апоптоз был исследован с помощью флуороцитометрии клеток, окрашенных FITC-аннексином V. СЭП P. westermani вызывали достоверное увеличение апоптоза эозинофилов человека, которое зависело от времени инкубации и дозы паразитарного продукта. Первое повышение числа апоптотических клеток (2,8 %) было отмечено через З часа инкубации с СЭП и продолжало увеличиваться после б часов инкубации на 7,б %, 10,9 %, 22,6 % при концентрациях паразитарного продукта 10, 30 и 100 мкг/мл соответственно [44].

S. Lopez-Briones et al. [30] в 2003 г. изучили способность метаболитов Taenia crassiceps вызывать апоптоз клеток селезенки зараженных мышей линии BALB/cAnN. Оказалось, что на 30-й день инвазии в клетках селезенки зараженных мышей отмечалось повышение типичной для апоптоза “лестничноподобной” ДНК - фрагментации и повышение активности фосфатидилсерина. Возрастание уровня апоптоза также было установлено в CD4(+) и CD19(+) спленоцитах инвазирован-ных мышей после их стимуляции антигеном цистицеркоидов паразита in vitro [30]. При проведении щелочного гель-электрофореза единичных клеток Т-лимфоцитов человека

линии Jurkat с цистицерками T. crassiceps было установлено повышение числа апоптотичес-ких клеток через 24 и 48 часов инкубации. Рост апоптоза зависел от числа паразитов и кратно достоверно усиливался при увеличении их количества [37].

Метаболиты микрофилярий Brugia pahangi в процессе инвазии вызывают повышение уровня апоптоза в CD4+ T-лимфоцитах периферической крови инвазированных мышей [386]. Живые микрофилярии Brugia malayi и в меньшей степени их СЭП увеличивают апоптоз дендритных клеток человека при их совместном культивировании in vitro [43]. S.C. Chow et al. [10] установили, что совместная культивация Т- лимфоцитов человека линии Jurkat с живыми половозрелыми Necator americanus, а также с белковыми СЭП этого паразита сопровождается повышением уровней фрагментации ДНК клеток и ростом числа апоптотических клеток. Изменения находились в линейной зависимости от числа паразитов, концентрации белковых продуктов гельминтов и возрастали при их увеличении [10].

В настоящее время идентифицированы четыре основные функциональные группы молекул, которые вовлекаются в процесс апоп-тоза клеток млекопитающих и человека: особые протеолитические ферменты (каспазы); адаптерные белки, контролирующие активацию каспаз; белки суперсемейства рецепторов факторов некроза опухолей (TNF); белки семейства Bcl - 2 [5]. Активация каспаз, которые широко экспрессируются как неактивные зимогены, считается главной ступенью, ведущей к апоптозу. Первоначально механизмы регуляции программ клеточной гибели, базирующиеся на каспазах, казались разными у насекомых, круглых червей и млекопитающих. Однако эти кажущиеся отличия в контроле клеточной гибели - результат неполноты наших знаний [49]. Кроме основных молекул, вызывающих апоптоз клеток, существуют также вещества, которые в высоких концентрациях стимулируют активацию основных механизмов запрограммированной клеточной гибели. Большое значение в индукции апоп-тоза придается АФК и NO, которые при патологических состояниях в высоких концентра-

циях обладают проапоптотическим, а при физиологических состояниях - антиапоптотичес-ким действиями. Механизмы про- и антиапоп-тотического воздействия АФК и NO до конца не ясны, но считается, что они связаны с синтезом белков теплового шока, Bcl - 2 и активацией каспаз [14, 45].

Гельминтозные инвазии сопровождаются ростом апоптоза как в соматических, так и в генеративных клетках хозяина. Механизмы индукции апоптоза клеток хозяина при гель-минтозах до конца не изучены. Из четырех основных молекул, выработка которых вызывает клеточную гибель, гельминты стимулируют продукцию в организме хозяина фактора некроза опухоли (TNF). Считается, что синтез TNF-a применяется хозяином как защитный иммунный ответ при большинстве гель-минтозов, направленный на индукцию апоп-тоза в тканях паразита [20]. Известно, что в гомогенатах печени мышей при шистосомозе Мэнсона при остром и хроническом течении инвазии повышается уровень TNF-a [б]. При инкубации с антигеном из яиц Schistosoma haematobium мононуклеарных клеток периферической крови детей и подростков, больных урогенитальным шистосомозом с патологиями мочевого пузыря, в 54 раза повышается продукция TNF-a по сравнению с контролем [27]. В организме хозяина при шистосомозах с целью защиты гепатоцеллюлярных повреждений, вызванных яйцами паразитов, происходит повышение выработки макрофагами хозяина TNF [12]. В сыворотках больных фас-циолезом при остром течении инвазии и в меньшей степени при хроническом наблюдается повышение уровня TNF-a [38]. P. Jenkins et al. [23] показали, что в плазме мышей, зараженных цестодой Mesocestoides corti, на 14-й и 28-й дни инвазии в 100 раз повышается продукция TNF-a. В эти же сроки инвазии наблюдались максимальные воспалительные и некротические повреждения печени инвазиро-ванных животных. У мышей, зараженных Echinococcus multilocularis, на 31-й день инвазии в перитонеальных клетках отмечается повышение экспрессии гена TNF-a [11], а в плазме больных эхинококкозом печени и легких возрастает активность TNF-a [47]. H. Faulkner et al. [17] отметили высокие уровни

TNF-a и у - интерферона при изучении сывороток 96 людей, живущих в эндемичной области по трихоцефалезу. У школьников, недавно пролеченных от некатороза, наблюдалось повышение спонтанной продукции TNF-a мононуклеарными клетками периферической крови [21]. Половозрелые филярии Onchocerca volvulus секретируют ингибитор цистеинпро-теазы (онхоцистатин), который обладает способностью повышать in vitro продукцию TNF-a мононуклеарными клетками периферической крови человека [42]. При экспериментальном трихинеллезе с 1 -го дня инвазии в плазме животных повышается уровень TNF-a с максимумом на 15-е и 35-е сутки от момента заражения [19, 39].

В 2004 г. P. Tato et al. [46] установили, что метацестоды и цисты свиных цепней сек-ретируют цистеин-протеазу, которая in vitro вызывает в CD4+ T-лимфоцитах человека типичные для апоптоза нарушения (целостность клеточной мембраны, перетяжки и фрагментация ядра, хроматиновая конденсация, появление апоптотических тел и исчезновение микротрубочек).

Все организмы, включая филогенетически отдаленные, синтезируют множество высокоустойчивых клеточных белков, называемых белками теплового шока, или HSPs [29]. До 5 % белков клетки могут быть белками теплового шока и выполнять большое число важных функций в клетках при нормальных и патологических состояниях [18]. Белки теплового шока вовлекаются в разнонаправленные механизмы апоптоза [Зб, 48]. Так, HSP 60 является индуктором апоптоза, а HSP З2 и HSP 70 способны предотвращать стимулированный TNF-a или актиномицином D апоптоз гепато-цитов [25, 26]. Хотя изначально было показано, что высокая температура является главным элементом, вызывающим синтез белков теплового шока [40], на современном этапе считается, что таким же действием обладают активные формы кислорода (АФК), цитокины, тяжелые металлы [29], а также паразитические простейшие [1З, 22]. Установлено, что гельминты способны вырабатывать белки теплового шока: в частности, S. mansoni синтезируют HSP 70 [2B], Echinococcus granulosus -HSP 60, 70, T. crassiceps - HSP 27, З1, ЗЗ, З8,

Защитные реакции на внедрение гельминтов

Повышение

образования

АФК

Повреждения Синтез

наследственного фактора

аппарата, некроза

несовместимые с опухоли

жизнью клетки

Повышение образования NO f«-

ONOO

Белок теплового шока б0

Цистеиновые

протеазы

Апоптоз соматических и генеративных клеток хозяина

Рис. 1 Возможные механизмы апоптоза соматических и генеративных клеток хозяина, вызванные

паразитированием гельминтов.

60, 70, 80, T. solium - HSP 60, 70, 80 [34], Trichinella spiralis и Trichinella pseudospiralis -HSP 11, 20, 26, 31, 35, 37, 41, 45, 47, 50, 53, 50, 64, 70, 80, 86, 90 [32, 33, 35].

Таким образом, можно предположить, что апоптоз соматических и генеративных клеток хозяина при попадании в него гельминтов обусловлен проявлением защитных реакций хозяина на внедрение паразитов. Гибель клеток происходит по физиологическим механизмам за счет повышения синтеза TNF-a, направленного на уничтожение самих паразитов (Рис. 1). Окислительный и нитрозилирующий стресс в организме хозяина приводит к росту уровней АФК и NO, которые считаются косвенными индукторами апоптоза. Клетки хозяина, имеющие несовместимые с жизнью повреждения наследственного аппарата, также подвергаются апоптозу. В свою очередь гельминты способны индуцировать апоптоз клеток хозяина за счет повышения в их организме образования NO, белка теплового шока 60 (HSP 60) и предположительно цистеиновых протеаз (каспаз).

Литература

1. Бекиш В .Я. Повреждения ДНК клеток костного мозга

и семенников при экспериментальном гименолепи-дозе // Вестник ВГМУ - 2004. - Т. 3, № 3. - С. 74-81.

2. Бекиш В.Я., Дурнев А. Д. Генотоксическое и цито-токсическое воздействия белковых соматических продуктов гельминтов на лимфоциты крови доноров in vitro // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2004. - Т. 138, № 8. - С. 198-201.

3. Бекиш В.Я., Дурнев А. Д. Генотоксическое и цито-токсическое воздействия метаболитов личинок ток-сокар на соматические и генеративные клетки хозяина // Вестник ВГМУ - 2004. - Т. 3, № 4. - С. 85-89.

4. Бекиш В.Я., Дурнев А. Д. Повреждения ДНК клеток костного мозга и семенников мышей при экспериментальном трихинеллезе // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2004. - Т. 138, № 9. - С. 320-323.

5. Коничев А.С., Севастьянова Г.А. Молекулярная биология. - М.: Издательский центр «Академия»,

2003. - 400 с.

6. Adewusi O.I., Nix N.A., Lu X. e.a. Schistosoma mansoni: relationship of tumor necrosis factor-? to morbility and collagen deposition in chronic experimental infection // Exp. Parasitol. - 1996. - Vol. 84. - P. 115-123.

7. Bekish VJ. The alterations in genetic apparatus of somatic and generative cells of the host caused by helminthes metabolites // Wiadomosci

Parazytologiczne (Poland). - 2001. - T. 47, Zt. 4. - Р. 891-896.

8. Carneiro-Santos P., Martins-Filho O., Alves-Oliveira L.F. e.a. Apoptosis: a mechanism of immunoregulation during human schistosomiasis mansoni // Parasite Immunol. - 2000. - Vol. 22. - P. 267-277.

9. Chen L., Kakuturu V., Rao N. e.a. Skin-stage schistosomula of Schistosoma mansoni produce an apoptosis-inducing factor that can cause apoptosis of T cells // J. Biol. Chem. - 2002. - Vol. 277, Issue 37. -P. 34329-34335.

10. Chow S.C., Brown A., Pritchard D. The human hookworm pathogen Necator americanus induces apoptosis in T lymphocytes // Parasite Immunology. -2000. - Vol. 22. - P. 29-37.

11. Dai W.J., Gottstein B. Nitric oxide-mediated immunosuppression following murine Echinococcus multilocularis infection // Immunology. - 1999. - Vol. 97, № 1. - P. 107-16.

12. Davies S.J., Lim K.C., Blank R.B. e.a. Involvement of TNF in limiting liver pathology and promoting parasite survival during schistosome infection // Int. J. for Parasitol. - 2004. - Vol. 34, № 1. - P. 27-36.

13. Davis-Hayman S.R., Shah PH., Finley R.W. e.a. Antigenicity of Trichomonas vaginalis heat-shock proteins in human infections // Parasitol. Res. - 2000.

- Vol. 86. - P. 115-120.

14. Dimmeler S., Zeiher A.M. Nitric Oxide and apoptosis: another paradigm for the double-edged role of nitric oxide // Nitric Oxide: Biology and Chemistry. - 1997.

- Vol. 1, №. 4. - P. 275-281.

15. Estaquier J., Marguerite M., Sahuc F. e.a. Interleukin 10-mediated T cell apoptosis during the T helper type 2 cytokine response in murine Schistosoma mansoni parasite infection // Eur. Cytokine Netw. - 1997. - Vol.

8. - P. 153-160.

16. Fallon P.G., Smith P., Dunne D.W. Type 1 type 2 cytokine producing mouse CD4+ and CD8+ cells in acute Schistosoma mansoni infection // Eur. J. Immunol. - 1998. - Vol. 28. - P. 1408-1416.

17. Faulkner H., Turner J., Kamgno J. e.a. Age- and infection intensity-dependent cytokine and antibody production in human trichuriasis: the importance of IgE // J. Infect. Dis. - 2002. - Vol. 185, № 5. - P. 665-672.

18. Feige U., Polla B.S. Heat shock proteins: The hsp70 family (hsp70-a multigene, multistructure, multifunction family with potential clinical applications // Experientia. - 1994. - Vol. 11, № 12. - P. 979-986.

19. Frydas S., Karagouni E., Dotsika E. e.a. Generation of TNF alpha, IFN gamma, IL-6, IL-4 and IL-10 in mouse serum from trichinellosis: effect of the antiinflammatory compound 4-deoxypyridoxine (4-DPD) // Immunol. Lett. - 1996. - Vol. 49, № 3. - P. 179-184.

20. Garside P., Sands W.A., Kusel J.R. е.а. Is the induction of apoptosis the mechanism of the protective effects of TNF alpha in helminth infection? // Parasite Immunol. - 1996. - Vol. 18, № 3. - P. 111-113.

21. Geiger S.M., Massara C.L., Bethony J. e.a. Cellular responses and cytokine production in post-treatment hookworm patients from an endemic area in Brazil // Clin. Exp. Immunol. - 2004. - Vol. 136, № 2. - P. 334-340.

22. Ishikawa H., Hisaeda H., Maekawa Y. e.a. Expression on heat shock protein in host macrophages correlates with a protective potential against infection with Leishmania major in mice // Parasitol. Intern. - 1997.

- Vol. 46. - P. 263-270.

23. Jenkins P., Spiers S., Dixon J.B. e.a. The effects of tumour necrosis factor on host-parasite relations in murine Mesocestoides corti (Cestoda) infection / // Parasitology. - 1992. - Vol. 105, Pt. 3. - P. 453-459.

24. Jenson J.S., O’Connor R., Osborne J., Devaney E. Infection with Brugia microfilariae induced apoptosis of CD4+ T - lymphocytes: a mechanism of immune unresponsiveness in filariasis // Eur. J. Immunol. -

2002. - Vol. 32. - P. 858-863.

25. Kim Y.-M., Bergonia H., Lancaster J.R. Nitrogen oxide-induced autoprotection in isolated rat hepatocytes // FEBS Lett. - 1995. - Vol. 374. - P. 228-232.

26. Kim Y.-M., de Vera M.E., Watkins S.C. е.а. Nitric oxide protects cultured rat hepatocytes from tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis by inducting heat shock protein 70 expression // J. Biol. Chem. -1997. - Vol. 272. - P. 1402-1411.

27. King C.L., Malhotra I., Mungai P. e.a. Schistosoma haematobium-induced urinary tract morbidity correlates with increased tumor necrosis factor-alpha and diminished interleukin-10 production // J. Infect. Dis. - 2001. - Vol. 184, № 9. - P. 1176-1182.

28. Levy-Holtzman R., Schechter I. Schistosome extracts with heat shock factor activity revealed by the gel shift assay // Parasitology. - 1994. - Vol. 108, Pt. 1. - P. 35-42.

29. Lindquist S. The heat shock response // Annual Rev. Biochem. - 1986. - Vol. 55. - P. 1151-1191.

30. Lopez-Briones S., Sciutto E., Ventura J.L. e.a. CD4+ and CD19+ splenocytes undergo apoptosis during an experimental murine infection with Taenia crassiceps // Parasitol. Res. - 2003. - Vol. 90, № 2. - P. 157-163.

31. Lundy S.K., Lerman S.P., Boros D.L. Soluble egg antigen-stimulated T helper lymphocyte apoptosis and evidence for cell death mediated by FasL+ T and B cells during murine Schistosoma mansoni infection // Infection and Immunity. - Vol. 69, № 1. - 2001. - P 271-280.

32. Mak C.H., Sun K.W., Ko R.C. Identification of some heat-induced genes of Trichinella spiralis // Parasitology. - 2001. - Vol. 123. - P. 293-300.

33. Martinez J., Perez-Serrano J., Bernadina W.E. e.a. In vitro stress response to elevated temperature, hydrogen peroxide and mebendazole in Trichinella spiralis muscle larvae // Int. J. for Parasitol. - 1999. - Vol. 29. - P 1457-1464.

34. Martinez J., Perez-Serrano J., Bernadina W.E. е.а. Echinococcus granulosus: in vitro effects of ivermectin and praziquantel on hsp60 and hsp70 Levels // Exp. Parasitol. - 1999. - Vol. 93. - P. 171-180.

35. Martinez J., Perez-Serrano J., Bernadina W.E. е.а. HSP60, HSP70 and HSP90 from Trichinella spiralis as targets of humoral immune response in rats // Parasitol. Res. - 2001. - Vol. 87. - P. 453-458.

36. Mehlen P, Schulze-Osthoff K., Arrigo A.P Small stress proteins as novel regulators of apoptosis. Heat shock

protein 27 blocks Fas/APO-1 and staurosporine-induced cell death // J. Biol. Chem. - 1996. - Vol. 271. - P. 1651016514.

37. O’Connell K.M., Rogan M.T. Apoptosis in human Jurkat T cells after culture with live Taenia crassiceps cysticerci in vitro // Parasitology. - 2000. - Vol. 120. -P 649-655.

38. Osman M.M., Abo-El-Nazar S.Y IL-10, IFN-gamma and TNF-alpha in acute and chronic human fascioliasis // J. Egypt. Soc. Parasitol. - 1999. - Vol. 29, № 1. - P 13-20.

39. Reale M., Frydas S., Barbacane R.C. e.a. Induction of monocyte chemo tactic protein-1 (MCP-1) and TNF alpha by Trichinella spiralis in serum of mice in vivo // Mol. Cell Biochem. - 1998. - Vol. 179, № 1-2. - P 1-5.

40. Ritossa F. A new puffing pattern induced by temperature shock and DNP in Drosophila // Experientia. - 1962. - Vol. 18. - P. 571-573.

41. Rumbley C.A., Zekavat S. A., Sugaya H. e.a. The schistosome granulema: characterization of lymphocyte migration, activation and cytokine production // J. Immunol. - 1998. - Vol. 161. - P. 41294137.

42. Schonemeyer A., Lucius R., Sonnenburg B. e.a. Modulation of human T cell responses and macrophage functions by onchocystatin, a secreted protein of the filarial nematode Onchocerca volvulus // J. Immunology. - 2001. - Vol. 167, № 6. - P. 3207-3215.

43. Semnani R.T., Liu A.Y., Sabzevari H. e.a. Brugia malayi microfilariae induce cell death in human dendritic cells, inhibit their ability to make IL-12 and IL-10, and reduce their capacity to activate CD4+ T cells // J. Immunol. -

2003. - Vol. 171, № 4. - P. 1950-1960.

44. Shin M.H. Excretory-secretory product of newly excysted metacercariae of Paragonimus westermani directly induces eosinophil apoptosis // Korean J. Parasitol. - 2000. - Vol. 38, № 1. - P. 17-23.

45. Simon H.-U., Haj-Yehia A., Levi-Schaffer F. Role of reactive oxygen species (ROS) in apoptosis induction // Apoptosis. - 2000. - Vol. 5. - P. 415-418.

46. Tato P., Fernandez A.M., Solano S. e.a. A cysteine protease from Taenia solium metacestodes induce apoptosis in human CD4+ T-cells // Parasitol. Res. -

2004. - Vol. 92, № 3. - P. 197-204.

47. Touil-Boukoffa C., Sanceau J., Tayebi B. е.а. Relationship among circulating interferon, tumor necrosis factor-alpha, and interleukin-6 and serologic reaction against parasitic antigen in human hydatidosis // J. Interferon Cytokine Res. - 1997. - Vol. 17, № 4. -P 211-217.

48. Wei Y.Q., Zhao X., Kariya Y. e.a. Inhibition of proliferation and induction of apoptosis by abrogation of heat-shock protein (HSP) 70 expression in tumor cells // Cancer Immunol. and Immunotherapy. - 1995. - Vol. 40. - P. 73-78.

49. Zhiwer S., Hermann S. Death by design: mechanism and control of apoptosis // Trends Cell Biol. - 1999. -Vol. 9, № 12. - P. 49-52.

Поступила 07.06.2005 г.

_____________________ Принята в печать 23.06.2005 г.