Состояние мембран тромбоцитов у больных с нарушенным тестом толерантности к глюкозе

Проблемы генетики и патогенеза

Состояние мембран тромбоцитов у больных с нарушенным тестом толерантности к глюкозе

И.Ю. Добрынина, A.A. Нелаева, Т.Н. Коваленко, Л.Я. Лейко

Исследования последних лет демонстрируют важное значение тромбоцитов в развитии сосудистых осложнений у больных с нарушенным тестом толерантности к глюкозе и сахарным диабетом (СД) 2 типа [1, 4, 7, 9].

Материалы и методы

Обследовано 30 пациентов (мужчин и женщин) в возрасте 55± 1,3 г. с нарушенным тестом толерантности к глюкозе (НТТГ), длительностью заболевания 2,5+0,8 г. Контрольную группу составили 30 здоровых лиц, сопоставимых по полу, возрасту, при отсутствии наследственной предрасположенности к СД. Все больные с НТТГ страдали ожирением (ИМТ=37±1,13).

Состояние углеводного метаболизма оценивали по тесту толерантности к глюкозе, уровню гликированного гемоглобина, С-пептида. Микроальбуминурию выявляли методом ИФА с использованием реагентов фирмы "Human".

Показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ), антиок-сидантной защиты (АОЗ), холестерина и фракций фосфолипидов (лизофосфатидилхолина - ЛФХ, фосфатидилсерина - ФС, сфингомиелина — СФМ, фосфатидилэтаноламина — ФЭА) проводили методом тонкослойной хроматографии с использованием пластинок Silufol (Чехия) по А.Э. Шталю (1965). Содержание продуктов ПОЛ в клеточных мембранах тромбоцитов определяли по методу И.Д. Стальной (1997), Ф.З. Меерсона и соавт. (1979); об уровне малонового диальдегида судили по концентрации продуктов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой.

Исследование активности ферментов, антиоксидантной активности проводили следующими методами: супероксиддисму-тазы (СОД) — наборами "РЭНСОД" фирмы”11АЫООХ", глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) — наборами "глкжозо-6-фосфатдегидрогеназа" фирмы "RANDOX", каталазы — по Г.Л. Боборико с соавт. (1998).

Пограничную артериальную гипертензию (ПАГ), АГ, НТТГ, СД диагностировали согласно рекомендациям ВОЗ [5, 6].

Городской эндокринологический центр I (глав, врач — проф. A.A. Нелаева); I Тюменская государственная медицинская академия (ректор ~ проф. Э.А. Кашуба), Тюмень '

Результаты и их обсуждение

У лиц с НТТГ достоверно высоко (р<0,001) содержание токсичных продуктов липопероксидации по сравнению с показателями у здоровых (табл. 1). Увеличение концентрации конечных продуктов ПОЛ отражает напряженность адаптационных механизмов, направленных на нейтрализацию липопере-кисей, которые оказывают повреждающее действие на цитомембраны и повышают риск сосудистых осложнений [1, 3].

Таблица 1

Содержание продуктов ПОЛ, активность антиоксидантных ферментов в мембранах тромбоцитов при НТТГ

Показатель Здоровые НТТГ

Диеновые конъюгаты, нмоль/л 18,60 ±0,1 2 23,61 + 0,32

Шиффовые основания, уел. ед. фл. 7,74 ± 0,02 9,19 ±0,04

ТБК, мкмоль/л 2,25 ± 0,09 3,02 ± 0,05

Супероксиддисмутаза, усл.ед.торм./мг белка 2,61 ±0,03 2,77± 0,02

Каталаза, мкмоль/мин/мг белка 0,86 ±0,01 0,87 ±0,01

Г-6-ФДГ, мед.акт./мг белка 0,23 ± 0,00 0,26 ± 0,00

Примечание: р<0,001.

Активизация ПОЛ у больных СД 2 типа сопровождается нарушением активности антиоксидантных ферментов [2]. При накоплении первичных и вторичных продуктов липопероксидации отмечается увеличение (р<0,001) активности СОД. Уровень каталазы достоверно ниже, а активность Г-6-ФДГ выше по сравнению с показателями у здоровых.

Проблемы генетики и патогенеза

Сахарный лиабет

При НТТГ выявлена перестройка липидного бислоя мембран тромбоцитов (табл. 2).

Таблица 2

Содержание основных фракций фосфолипидов и холестерина в мембранах тромбоцитов при НТТГ

Уровень суммарных фосфолипидов, холестерина и коэффициент соотношения холестерин/фосфолипиды выше (р<0,001) в основной группе. Накопление холестерина (ХС) в мембранах тромбоцитов при СД 2 типа на стадии НТТГ нарушает соотношение холестерин/фосфолипиды [1, 3], приводит к увеличению жесткости мембран, изменению активности ферментов трансмембранного переноса ионов, в частности Са2+, являющегося посредником в активации тромбоцитов. ФЭА определяется в концентрации выше (р<0,001) при НТТГ; это можно оценить

как фазу метаболического напряжения. Уровень ФХ, СФМ, ЛФХ выше (р<0,001) в основной группе больных.

Таким образом, перестройка мембран тромбоцитов у лиц с СД 2 типа при НТТГ несомненна. Увеличение показателей ПОЛ и АОЗ можно объяснить тем, что первая регулируется полиненасьпценнос-тью липидов, их обогащением более ненасыщенными компонентами [8]; одновременно увеличивается уровень холестерина, который при НТТГ может выполнять роль биоантиоксиданта.

Литература

1. Балаболкин М.И. Сахарный диабет. - М., 1 994. с. 168-207.

2. Балаболкин М.И.//Пробл. эндокринол. - 1 997 - Т. 43. - № 6. - С. 3-9.

3. Бобырева Л.Е,//Пробл. эндокринол. - 1996. - Т. 42. - № 6. - С. 1419.

4. Бышевский A.LLI., Галян С.П., Дементьева И.А., Нелаева A.A., Соловьев В.Г. Тромбоциты. Тюмень. 1 996. - С. 50-1 68.

5. Артериальная гипертензия. Доклад комитета ВОЗ (сер. техн. докл. ВОЗ 628) - М., 1978.

6. Сахарный диабет. Доклад комитета экспертов ВОЗ. ВОЗ (сер. техн. докл. ВОЗ 727) - М., 1985.

7. Соколов Е.И. Сахарный диабет и атеросклероз. М., 1 996.

8. Ушкалова В.И., Иоанидис Н.В. и соавт., Сб. науч. тр. Тюмень. Изд-во Тюменского гос. ун., 1 997. - С. 57-64.

9. O' Donnel М J., le Guen C.A., Lawson N., Gyde О.H., Barnett

A.H. I I Diabetic - Med. - 1 991. - Aug.-Sep.-Bd. 8, № 3. - C. 624-628.

Показатель (ммоль/л) Здоровые НТТГ

Лизофосфатидилхолин Фосфатидилсерин Сфингомиелин Фосфатидилхолин Фосфатидилэтаноламин Суммарные фосфолипиды Холестерин Коэффициент ХЛ/ФЛ 0,0043 ±0,0004 0,0365± 0,001 0,0695 ±0,001 0,1662 ±0,004 0,1287 ±0,003 0,4053 ±0,007 0,2383 ±0,002 0,587 0,0047 ±0,000 0,0415 ±0,001 0,0740 ±0,002 0,1815 ±0,003 0,1624 ±0,003 0,4612 ±0,008 0,2734 ±0,003 0,592

21

V2i