АКАРИЦИДНАЯ КОМПОЗИЦИЯ ПРОЛОНГИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ, АКАРИЦИДНАЯ ПОЛОСКА И СПОСОБ БОРЬБЫ С КЛЕЩОМ VARROA DESTRUCTOR
MITICIDE COMPOSITION OF PROLONGED ACTION AND ITS MANUFACTURING PROCESS, A MITICIDE STRIP AND A PROCEDURE TO CONTROL VARROA DESTRUCTOR MITE

Область техники
Настоящее изобретение относится к области акарицидов, применяемых для борьбы с вредителями и обработки пчелиных ульев. В частности, оно сводится к органическим композициям и форме их применения.
В изобретении также предложен способ получения акарицидной композиции, акарицидная полоска и способ борьбы с клещом Varroa destructor с применением указанной акарицидной полоски.
Уровень техники
Варроатоз у медоносных пчел, Apis mellifera L., представляет собой внешний паразитоз, вызванный клещом Varroa destructor, как сообщалось исследователями Laura G. Espinosa  и Ernesto  Novoa, изучавшими эффективность борьбы с клещами Varroa destructor у медоносных пчел с помощью двух натуральных акарицидов - муравьиной кислоты и тимола (Apis mellifera L.) в Villa Guerrero, штат Мехико, Мексика (Veterinaria , vol. 38, number 1, January-March, 2007, pp. 9-19). Варроатоз представляет собой наиболее серьезную проблему, с которой сталкиваются пчеловоды по всему миру. Варроа поражают взрослых пчел, а также их расплод. Продуктивность затрагивается, когда заражение превышает 10% взрослых пчел в колонии. Когда заражение достигает 30%-40%, последствия становятся разрушительными. Они представляют собой низкую массу и снижение продолжительности жизни пчел, что приводит к снижению выработки меда на 60%.
Предпринимались многочисленные попытки борьбы с указанным клещом. Некоторые из них были направлены на применение синтетических акарицидов, но, по некоторым наблюдениям, у клещей развивается устойчивость к ним; они токсичны для пчел и людей и оставляются в следовых количествах в меде и воске.
В будущем предполагается выведение линий пчел, генетически устойчивых к данному клещу, однако такая технология пока находится на стадии разработки.
Известно, что некоторые натуральные акарициды, такие как муравьиная кислота и тимоловое эфирное масло, при их применении демонстрируют низкую токсичность и незначительное воздействие на окружающую среду, а также не оставляют следов в меде и воске, и, кроме того, их остатки разрушаются/деградируют или испаряются за короткое время.
Применение всех без исключения химических веществ связано с двумя потенциальными рисками: развитие устойчивости у клеща к применяемому действующему веществу и присутствие следов акарицида в продуктах пчелиного улья. Репродуктивные признаки и высокая скорость репродукции данного клеща представляют собой факторы, которые делают применяемые стратегии борьбы все более сложными. С момента появления и в течение долгого времени кумафос являлся одной из наиболее эффективных молекул для борьбы с варроатозом. К сожалению, плохое приготовление составов вследствие изъянов в системе фармацевтического контроля на производственных лабораториях, неразборчивое и/или непрофессиональное применение данного действующего вещества вызвали развитие устойчивости клеща к указанным составам на обширной части территории страны.
Такая же ситуация сложилась и в отношении амитраза - другого применяемого действующего вещества, так как в Laboratorio de  ( Laboratory) в Universidad National de Mar del Plata (Национальный университет Map дель Плата) были выявлены первые признаки устойчивости в различных регионах страны. Флуметрин, являющийся пиретроидом, представляет собой единственное синтетическое действующее вещество, которое может оставаться эффективным в течение еще нескольких сезонов. Согласно результатам, которые продемонстрировал его пиретроидный предшественник (флувалинат), проявление устойчивости, вероятно, произойдет в ближайшее время. С другой стороны, присутствующие на рынке органические составы обладают низкой эффективностью в пчелиных ульях с циклами потомства и имеют многочисленные ограничения, связанные с географическим расположением. Таким образом, аргентинские пчеловоды-производители испытывают серьезные трудности, так как без эффективной обработки данного паразитоза они вряд ли смогут поддерживать продуктивность и даже жизнеспособность пчелиных ульев во всех крупных областях страны.
Наиболее важные с точки зрения производства продукции пчеловодства страны серьезно обеспокоены затронутой проблемой, так как ни одна многонациональная компания не способна предложить окончательное решение данной проблемы паразитоза.
Повышенная устойчивость к основным используемым пиретроидным и фосфороорганическим акарицидам, а также присутствие следов этих молекул или их метаболитов в различных продуктах пчелиного производства определило необходимость получения новых акарицидов, которые можно применять в целостной программе, целью которой является борьба с данным паразитарным заболеванием.
Для решения этих проблем было предпринято несколько попыток, таких как описаны в заявке US 2012171268, которая относится к распределительному устройству, заполненному гелем, содержащим С1-С10-карбоновую кислоту и гелеобразующий агент. Указанный гель защищен полиэфирной мембраной. В этой заявке описано получение геля на основе кислоты (предпочтительно муравьиной кислоты), который вводят в биодеградируемое полиэфирное саше для дальнейшего гелеобразования, и где в качестве антифриза может использоваться глицерин. Кроме того, в препарат геля добавляют сахар, растворенный в воде, чтобы стимулировать химическое разрушение контейнера и обеспечить возможность высвобождения муравьиной кислоты. Указанное распределительное устройство позволяет муравьиной кислоте испаряться, воздействуя на клеща, но также убивая пчел.
Известно, что применение щавелевой кислоты в водной среде является трудоемким и неэффективным, не говоря о ее низкой эффективности в присутствии расплода и невозможности применения в холодное время года (Eguaras-Ruffinengo Estrategias Para el control de Farroa/Strategies to control Varroa- Pp. 70-77) http://www.laboratoriobaldan.com/esp/ensayos/eficacia_ab_var_bio.pdf.
В этом отношении в течение некоторого времени уже известно, что эфирные масла, особенно тимол, обладают эффективным действием против варроатоза. Аналогично, можно упомянуть некоторые органические кислоты, такие как молочная и муравьиная кислота, но также известно, что их применение является трудоемким, может существовать риск их неправильного употребления, и, кроме того, применение указанных кислот является дорогостоящим и требует дополнительных усилий от пчеловода.
Акарицидная композиция пролонгированного действия согласно настоящему изобретению обеспечивает возможность эффективного контроля варроатоза у пчел Apis mellifera очень простым способом, решая проблему применения химических соединений и кислотных или органических веществ в водных растворах, которые вызывают побочные эффекты в популяциях пчел.
Краткое описание чертежей
Фигура 1: Соответствует хроматограмме композиции согласно Примеру 1 изобретения, где концентрация щавелевой кислоты составляет 146 мг/г; винной кислоты 714 мг/г и муравьиной кислоты 14 мг/г. Анализ осуществляли с помощью официальной методики АОАС 986.13 (2000) с применением внутренних стандартов и с DAD (215 нм).
Фигура 2: Соответствует хроматограмме композиции согласно Примеру 2 изобретения, где концентрация щавелевой кислоты составляет 90 мг/г; винной кислоты 686 мг/г и муравьиной кислоты 5 мг/г. Анализ осуществляли в соответствии с официальной методикой АО АС 986.13 (2000), с применением внутренних стандартов и с DAD (215 нм).
Фигура 3: Можно наблюдать акарицидные полоски согласно настоящему изобретению - уже помещенные в пчелиный улей и перед помещением в него.
Фигура 4: Оценка влияния толщины целлюлозы и температуры, времени и способа нагревания раствора на эффективность обработки.
Краткое описание изобретения
3
Акарицидная композиция пролонгированного действия согласно настоящему изобретению, которая контролирует варроатоз в колониях Apis mellifera, содержит щавелевую кислоту, глицерин, муравьиную кислоту и С4-дикарбоновую кислоту, предпочтительно винную кислоту или 2-гидроксибутандиовую, более предпочтительно винную кислоту. Данная композиция предпочтительно не содержит полимеров и воды. Кроме того, она не содержит кристаллов в течение периода времени, составляющего по меньшей мере 2 года, при хранении при температуре от 0°С до 40°С. Предпочтительные концентрации указанных компонентов составляют: глицерин в диапазоне 0-20% (масс./масс.); щавелевая кислота в диапазоне 5-20% (масс./масс.), муравьиная кислота в диапазоне 0,5-15% (масс./масс.) и С4-дикарбоновая кислота в диапазоне 50-80% (масс./масс.). Более предпочтительно: глицерин в диапазоне 0-20% (масс./масс.); щавелевая кислота в диапазоне 8-15% (масс./масс.), муравьиная кислота в диапазоне 2-15% (об./об.) и С4-дикарбоновая кислота в диапазоне 65-75% (масс./масс.). Кроме того, указанная композиция согласно изобретению имеет плотность в диапазоне 1-1,5 г/м.
Другой объект настоящего изобретения представляет собой целлюлозную акарицидную полоску, содержащую указанную акарицидную композицию согласно настоящему изобретению, которой указанная полоска пропитана. При этом указанная полоска имеет размер в диапазоне 5-100 мм по ширине и 0,5-5 мм по толщине; и она не содержит кристаллов и полимерных покрытий.
Полоску согласно настоящему изобретению применяют в количестве от 1 до 10 штук на улей, и она имеет эффективность уничтожения клеща Varroa destructor более 90% лишь за счет контакта указанной полоски с пчелами, даже в ульях с развитием большого количества расплода, нарушая цикл уже за одно применение. Предпочтительно указанная эффективность выше 95%, более предпочтительно выше 97%. Кроме того, указанная полоска согласно настоящему изобретению имеет стабильный эффект против клеща Varroa destructor в течение по меньшей мере 40 дней, более предпочтительно в течение по меньшей мере 2 лет при температурах в диапазоне от 0°С до 40°С.
Другой объект настоящего изобретения представляет собой способ получения акарицидной композиции согласно изобретению, включающий стадии:
a. смешивания глицерина и щавелевой кислоты,
b. нагревания указанной смеси,
c. охлаждения указанной смеси.
В частности, для получения акарицидных композиции предложено смешивание глицерина и щавелевой кислоты в соотношении в диапазоне 3:1 - 1:3 согласно стадии а. и нагревание указанной смеси согласно стадии b. до температуры в интервале от 90°С до 150°С в течение периода времени от 1 до 5000 секунд.
В особенно предпочтительном варианте реализации в стадии а. указанного способа содержание глицерина составляет 5-95% (об./об.), предпочтительно 50-75%, и содержание щавелевой кислоты составляет 5-95% (об./об.), предпочтительно 25-50% (об./об.). И в стадии b. он включает нагревание до температуры в интервале от 60°С до 150°С, предпочтительно от 90 С° до 120°С, в течение периода времени от 1 до 5000 секунд, предпочтительно от 1 до 600 секунд. Более предпочтительно указанная стадия b. включает нагревание до температуры в интервале от 100°С до 120°С в течение периода времени от 1 до 120 секунд.
В предпочтительном варианте реализации изобретения указанный способ получения акарицидной композиции согласно настоящему изобретению на стадии b. включает непрерывный процесс и нагревание посредством теплообменника непрерывного действия до температуры в интервале от 100°С до 130°С в течение периода времени 1-60 секунд.
Другой объект настоящего изобретения представляет собой способ получения акарицидной полоски согласно настоящему изобретению, включающий погружение указанной целлюлозной полоски в указанную акарицидную композицию при температуре от 30°С до 120°С в течение периода времени от 1 минуты до 96 часов.
Другой объект настоящего изобретения представляет собой способ борьбы с клещом Varroa destructor, включающий помещение в пчелиный улей акарицидных полосок согласно настоящему изобретению в количестве от 1 до 10 штук. Указанный способ борьбы с клещом Varroa destructor характеризуется эффективностью уничтожения клеща Varroa destructor, составляющей по меньшей мере 90%, предпочтительно по меньшей мере 95%, более предпочтительно по меньшей мере 97%.
Подробное описание изобретения
Термин «акарицид (miticide)» в настоящей заявке эквивалентен термину «акарицид (acaricide)».
Акарицидная композиция пролонгированного действия согласно настоящему изобретению, полученная из щавелевой кислоты и глицерина путем нагревания смеси, приводит к получению высокоэффективного акарицида для борьбы с клещом Varroa destructor - распространенным вредителем, у пчел (Apis mellifera). Полоски подходящего пористого материала, такого как целлюлоза, пропитанные композицией согласно изобретению, позволяют получать ветеринарный продукт, который помещают в ульи.
Термин «пролонгированное действие» относятся к тому факту, что композиция акарицида согласно настоящему изобретению сохраняет свои акарицидные свойства в течение периода времени, который по меньшей мере на 40 дней больше, чем два репродуктивных периода varroa destructor; даже когда полоски согласно настоящему изобретению использовались в течение более двух лет с даты производства, при этом их акарицидные свойства остаются неизменными.
Органическая композиция согласно настоящему изобретению демонстрирует ряд преимуществ по сравнению с альтернативными композициями, предложенными в уровне техники, такие как:
- Она не оставляет следов синтетических материалов.
- Ее применение не вызывает устойчивости в течение короткого или среднепродолжительного периода времени у болезнетворных паразитов, которых обрабатывают указанной композицией.
- Она способна действовать на протяжении последовательных циклов заражений без необходимости повторного применения.
- Она имеет низкую стоимость, что подразумевает снижение экономических затрат в сельскохозяйственной деятельности.
- Легко применяется в пчелиных ульях Langstroth.
- При применении в колониях пчел Apis mellifera она представляет собой эффективный продукт для устранения клещей Varroa spp.
- Не было обнаружено вредного воздействия указанной композиции на колонии Apis mellifera.
- Она способна сохранять остаточную эффективность в течение более чем 42 дней, причем требуется только одно применение, которое нарушает варриатозный цикл и приводит к достижению более высокой эффективности в сравнении с существующими составами органического происхождения.
Настоящее изобретение относится к эффективному агенту для борьбы с клещами осенью, а также весной, когда происходит основная кладка яиц и необходимо минимум 20 дней для нарушения цикла. Применение композиции согласно настоящему изобретению не подразумевает употребления указанной композиции пчелами, что является одним из преимуществ настоящего изобретения, поскольку таким образом удается избежать интоксикации пчел. Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает возможность неконтаминирующей обработки, и, таким образом, оно может использоваться в течение всего года, даже во время сбора урожая, не оставляя при этом следов в продуктах пчел. Наконец, настоящее изобретение можно использовать в течение десятилетий, так как развитие устойчивости практически невозможно благодаря органической природе композиции. На основании вышеизложенного настоящее изобретение представляет собой превосходное решение проблемы борьбы с клещами у популяций пчел и является чрезвычайно полезным для пчеловодов на региональном уровне, в Аргентине и в мире.
Щавелевая кислота представляет собой органическое химическое соединение, которое встречается в природе во фруктах, некоторых растениях и даже в небольших количествах в меде. Это означает, что так как она является разлагаемой, то ее применение против варроа не будет загрязнять мед. Это также касается винной кислоты, которая широко применяется в пищевых продуктах.
Щавелевую кислоту широко применяют в Европе, главным образом в таких странах как Швейцария, Франция и Германия, где данный способ продемонстрировал превосходную эффективность против варроа у пчел без расплода. К настоящему моменту используются две формы применения: в форме спрея или сиропа из смеси воды и сахара. В обоих случаях композицию применяют 3 раза каждые 7 дней.
Эти формы применения обеспечивают лишь около 50% эффективности при отсутствии расплода у пчел или в холодное время года. Это явление включает анализ жизненного цикла варроа, суммарная продолжительность которого составляет 16 дней, из которых 12 представляют собой период, когда он репродуцируется во внутренних стенках ячеек улья, и оставшиеся дни находится на теле хозяина («phoretic state»), т.е. на взрослых пчелах.
При традиционной форме применения - распылении над ячейками сот - через несколько часов после обработки вентиляция и собственная температура колонии вызывают дегидратацию раствора, щавелевая кислота кристаллизуется и теряет свои кислотные свойства.
Композицией согласно настоящему изобретению пропитывают некоторое количество целлюлозы, которая может представлять собой гидроксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, бумагу, картон и т.д., которые в настоящей заявке определены как целлюлозные полоски и которые применяют в колониях, занимающих большое пространство с расплодом, в количестве от 1 до 10 полосок на пчелиный улей для борьбы с Varroa destructor в указанных пчелиных ульях с эффективностью выше 90%, даже выше 97%.
Следующие примеры иллюстрируют более подробно композицию, акарицидные полоски согласно настоящему изобретению, а также способ осуществления изобретения, которое применяют для борьбы с клещами. Такие примеры не предназначены для ограничения объема изобретения, охарактеризованного формулой изобретения, но они предоставляют любому специалисту в данной области техники всю необходимую информацию для воспроизведения изобретения.
Примеры применения
Пример 1
Получение акарицидной композиции пролонгированного действия против Varroa destructor согласно настоящему изобретению посредством прямого нагревания
5 кг щавелевой кислоты и 5 кг глицерина помещали в контейнер на нагревательное устройство, и раствор перемешивали, пока температура не достигала 100°С, и выдерживали полученный раствор в течение 40 минут.
Раствор, упомянутый выше, охлаждали естественным образом, удалив источник тепла, пока температура раствора не опускалась ниже 40°С. Затем указанный раствор разделяли по 1600 грамм в саше 300 микрон.
Таким образом получали композицию согласно настоящему изобретению, хроматограмму которой можно увидеть на Фигуре 1, где концентрация щавелевой кислоты составляет 146 мг/г; винной кислоты 714 мг/г и муравьиной кислоты 14 мг/г.
В отношении методик следует отметить, что анализ осуществляли с применением официальной методики АО АС 986.13 (2000), согласно внутренним стандартам и с DAD (215 нм).
Пример 2
Получение акарицидной композиции пролонгированного действия против Varroa destructor согласно настоящему изобретению посредством непрерывного нагревания
5 кг щавелевой кислоты и 5 кг глицерина смешивали в ПВХ-резервуаре и перемешивали до получения гомогенной смеси. Данную смесь подавали в теплообменник, жидкость теплообменника представляла собой масло с температурой 117°С. Время пребывания смеси в указанном теплообменнике составило 24 минуты.
Раствор, покидая указанный теплообменник, поступает в охлаждающее устройство, в котором указанный раствор доводят до температуры менее чем 40°С, с получением таким образом композиции согласно настоящему изобретению, которую разделяли по 1600 грамм в саше 300 микрон.
Таким образом получали композицию согласно настоящему изобретению, хроматограмму которой можно увидеть на Фигуре 2, где концентрация щавелевой кислоты составляет 90 мг/г; винной кислоты 686 мг/г и муравьиной кислоты 5 мг/г. В отношении применяемых методик следует отметить, что анализ осуществляли с применением официальной методики АО АС 986.13 (2000), согласно внутренним стандартам и с DAD (215 нм).
Пример 3
Получение акарицидной композиции пролонгированного действия против Varroa destructor согласно настоящему изобретению в промышленном масштабе посредством непрерывного нагревания
Процесс производства начинается в 2 вертикальных бункерах, где хранится исходный материал: глицерин и щавелевая кислота. Вследствие высокой вязкости исходного материала при низкой температуре и для того, чтобы гарантировать минимальный показатель текучести по отношению к производственной линии, обеспечивали подходящую степень нагрева посредством электронагревательного устройства меньшей мощности.
Компоненты в соотношении предпочтительно 1:1 посредством пары насосов подают в миксер со дна бункера в ранее установленных пропорциях согласно различным дозам, применениям и/или областям обработки. Вязкость поддерживают на требуемом уровне, как на стадии, предшествующей началу процесса прокачивания, с помощью непрерывного отделения состава и всегда при температуре, контролируемой при помощи нагревания (горячая вода, циркулирующая через оболочку миксера).
Лопастной насос запитан от смесительного блока, обеспечивая таким образом непрерывный поток обрабатываемого состава через теплообменник. На выходе из теплообменника смесь достигает температуры порядка 120°С. Нагревающая жидкость в оболочке представляет собой термальное масло, применение которого позволяет осуществлять операции при температурах нагревания примерно 170°С, поддерживая давление в контуре на уровне атмосферного. Время удержания доводили до 30 секунд.
После стадии нагревания продукт подвергается ускоренному охлаждению посредством теплообменника, который сконструирован аналогично предыдущему, в котором для понижения температуры продукта до около 40°С использовали холодильную камеру или водопроводную воду, которую заливали в промежуточный резервуар для хранения в качестве буфера между стадиями нагревания-охлаждения и конечной стадией дозирования-наполнения.
Акарицидную композицию согласно настоящему изобретению выдерживали в буферном резервуаре при температуре около 40°C с помощью непрерывного нагревания горячей водой, циркулирующей через оболочку резервуара. Одновременно небольшое удаление посредством механической мешалки обеспечивает нужную степень гомогенности.
Устройство наполнения таблетки, пластины или плиты запитано от буферного резервуара путем контролируемой прокачки. Такие таблетки, пластины или плиты предназначены для конечного распределения полученного акарицида согласно настоящему изобретению в пчелиных ульях.
Пример 4
Получение акарицидных полосок согласно изобретению
Акарицидной композицией пролонгированного действия согласно настоящему изобретению против Varroa destructor, полученной в Примере 1, уже разделенной по 1600 грамм, помещенных в саше 300 микрон, пропитывали 32 целлюлозных полоски шириной 30 мм и толщиной 3 мм, которые погружали в указанные саше. Указанные саше, содержащие целлюлозные полоски и указанную композицию, оставляли на 24 часа, не закрывая их, с последующей упаковкой. Таким образом получали упаковки из 32 акарицидных полосок согласно настоящему изобретению.
Пример 5
Эксперименты по оценке эффективности настоящего изобретения
Различные акарицидные полоски согласно изобретению получали, варьируя условия процесса для оценки акарицидной эффективности против Varroa destructor, начиная с композиций согласно Примерам 1, 2 и 3 настоящего изобретения и до их включения в целлюлозные полоски согласно Примеру 4.
Различные акарицидные составы оценивали на основе переработки щавелевой кислоты и глицерина согласно Примерам 1 и 2 в целлюлозных полосках, как в Примере 4, в апреле, мае и июне на пасеке Cabana Cristal, расположенной в General Daniel Cerri (Провинция Буэнос-Айреса), с использованием двух различных способов нагревания, применяемых к раствору: соответственно а) теплообменник (как представлено в Примере 2); и b) прямая теплопередача (как представлено в Примере 1).
Полученные в результате растворы охлаждали, пока температура указанных растворов не опускалась ниже 40°С, и затем разделяли по 2500 грамм в саше 300 микрон, содержащие 100 или 50 целлюлозных полосок в зависимости от их толщины: 1,5 мм или 3 мм. Упаковки с целлюлозными полосками и раствором оставляли открытыми без уплотнения/закрытия. Через 24 часа упаковки запечатывали.
3-го апреля 50 тестируемых ульев делили на 10 групп, из которых брали случайным образом 5. Химическую шоковую обработку, необходимую для получения количества клещей варроа, не контролируемых обработкой, осуществляли через 42 дня с помощью препарата амитраз. Для оценки эффективности использовали сетчатый поддон, который давал возможность подсчета погибших клещей во время обработки и после химической шоковой обработки с использованием амитраза. Эффективность рассчитывали как отношение количества клещей, погибших перед химической шоковой обработкой, к суммарному количеству клещей.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Во-первых, не было обнаружено значительных различий при обработке полосками толщиной 1,5 мм и 3 мм. Степень влияния толщины целлюлозы на практичность применения оказалась незначительной, так как единственное обнаруженное различие состояло в большей мягкости тонкой целлюлозы, которая в некоторых случаях прогибалась.
На Фигуре 4 можно наблюдать, что ширина целлюлозы большего размера повышает эффективность обработок и, в свою очередь, снижает вариабельность. С другой стороны, в обработках, полученных с применением теплообменника, наблюдалось существенное снижение эффективности продукта, получаемого при температурах выше, чем 120°С в течение более длительного периода, чем 30 минут (Оха 13 и Оха 14). В свою очередь, авторы настоящего изобретения пришли к заключению, что обработки, полученные с применением теплообменника при более низких температурах, более эффективны и демонстрируют меньшую вариабельность, чем при прямом нагревании.
Пример 6
Анализ фармакодинамики композиции согласно настоящему изобретению
Определение эффективности и остаточности акарицидной композиции согласно настоящему изобретению, применяемой к колониям пчел с постоянным циклом расплода.
В различных матрицах улья (мед, воск и пчелы) определяли эффективность и уровень следов, образованных путем применения акарицидной композиции согласно настоящему изобретению. С этой целью осуществляли полевые исследования в течение осени 2013 (март-апрель) с использованием 24 пчелиных ульев, поделенных на две группы, одна группа из 7 блоков (пчелиные ульи без обработки, контрольная группа) и другие из 17 (пчелиные ульи, которые получали композицию согласно настоящему изобретению в виде целлюлозных полосок согласно настоящему изобретению). Перед тестами колонии стабилизировали в популяциях пчел и в резервах. Проводили забор образцов из трех матриц в 14 пчелиных ульях (7 из каждой группы, случайно) в два различных момента времени: перед помещением обработки и сразу после ее удаления. Кроме того, отслеживали смертность клещей, вызванную обработкой на 7, 14, 28, 35 и 42 дни. После удаления из пчелиных ульев акарицидных полосок согласно настоящему изобретению осуществляли шоковую обработку с помощью Amivar500. Введение Amivar500 проводили согласно спецификации, предоставленной на маркировке коммерческого продукта. Популяцию взрослых пчел и расплода оценивали количественно перед и после акарицидной обработки для того, чтобы оценить влияние лекарственного средства на состояние популяции колоний. Таким образом, оценивали эффективность новой акарицидной композиции согласно изобретению и потенциальную вариацию следов щавелевой кислоты, образованных указанной композицией в различные моменты мониторинга.
ТЕСТИРОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ
В Таблице 3 представлено количество погибших клещей для каждого времени мониторинга (дни 7, 14, 28, 35 и 42) в пчелиных ульях, которые получали акарицидную обработку согласно настоящему изобретению и в пчелиных ульях без обработки.
АНАЛИЗ ПОПУЛЯЦИЙ ОБРАБОТАННЫХ КОЛОНИЙ
В таблице 4 представлена информация по боксам, покрытым взрослыми пчелами и расплодом перед и после окончания акарицидной обработки. Из соответствующей таблицы можно заметить, что акарицидная обработка согласно настоящему изобретению не оказывает негативного воздействия на пчелиные колонии.
АНАЛИЗ СЛЕДОВ
Физико-химический анализ продукта с помощью GC-FID (Fares Taie Clinical Analysis Laboratory) позволил провести статистическую оценку следов, оставшихся после применения настоящего изобретения после завершения обработки (день 42). Анализ продемонстрировал, что указанный состав не оставляет следов щавелевой кислоты в различных матрицах пчелиного улья, проанализированных по окончании обработки. В таблицах 5 и 6 представлены результаты, касающиеся следов, обнаруженных во время проведения анализа матриц меда и воска, соответственно. Как видно из Таблицы 5, в основном во всех пчелиных ульях по окончании обработки (в обработанных или в необработанных) повышался уровень щавелевой кислоты, что свидетельствует о том, что повышение уровня действующего вещества в меде обусловлено внешними источниками (цветами), а не настоящим изобретением.
ВЫВОДЫ
По окончании обработки акарицидом не наблюдали никакого вреда для колоний пчел. Обработка акарицидом не оставляет следов щавелевой кислоты в меде, воске или в пчелах. Повышение содержания щавелевой кислоты, наблюдаемое после завершения обработки, обусловлено растительными источниками, в частности цветами, из которых берется нектар для получения меда.
Акарицидная композиция эффективна в колониях с расплодом.