КЛЕТКА

1. Цитолитическая клетка для применения в клеточной терапии, где указанная клетка экспрессирует первый химерный антигенный рецептор (CAR), специфичный к первому антигену, и второй CAR, специфичный ко второму антигену, на клеточной поверхности, при этом каждый CAR содержит внутриклеточный, передающий сигналы домен, причем внутриклеточный, передающий сигналы домен первого CAR включает костимулирующий домен; а внутриклеточный, передающий сигналы домен второго CAR включает эндодомен семейства рецепторов TNF.
2. Клетка по п.1, отличающаяся тем, что указанный костимулирующий домен представляет собой костимулирующий домен CD28.
3. Клетка по п.1 или 2, отличающаяся тем, что указанный эндодомен семейства рецепторов TNF представляет собой эндодомен ОХ-40 или 4-1ВВ.
4. Клетка по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что внутриклеточный, передающий сигналы домен первого и второго CAR также включают ITAM-содержащий домен.
5. Клетка по п.4, в которой первый CAR имеет структуру:
AgB1-spacer1-TM1-costim-ITAM,
где AgB1 представляет собой антигенсвязывающий домен первого CAR;
spacer1 представляет собой спейсер первого CAR;
TM1 представляет собой трансмембранный домен первого CAR;
costim представляет собой костимулирующий домен; и
ITAM представляет собой ITAM-содержащий эндодомен;
а второй CAR имеет структуру:
AgB2-spacer2-TM2-TNF-ITAM,
где AgB2 представляет собой антигенсвязывающий домен второго CAR;
spacer2 представляет собой спейсер второго CAR;
TM2 представляет собой трансмембранный домен второго CAR;
TNF представляет собой эндодомен рецептора TNF; и
ITAM представляет собой ITAM-содержащий эндодомен.
6. Молекула  нуклеиновой кислоты, кодирующая как первый, так и второй химерные антигенные рецепторы (CAR), определенные по любому из пп. 1-5.
7. Молекула нуклеиновой кислоты по п.6, которая имеет следующую структуру:
AgB1-spacer1-TM1-costim-ITAM1-coexpr-AbB2-spacer2-TM2-TNF-ITAM2,
где AgB1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антигенсвязывающий домен первого CAR;
spacer1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую спейсер первого CAR;
ТМ1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую трансмембранный домен первого CAR;
costim представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую костимулирующий домен;
ITAM1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую ITAM-содержащий эндодомен первого CAR;
coexpr представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, которая делает возможной коэкспрессию обоих CAR;
AgB2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антигенсвязывающий домен второго CAR;
spacer2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую спейсер второго CAR;
ТМ2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую трансмембранный домен второго CAR;
TNF представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую эндодомен рецептора TNF;
ITAM2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую ITAM-содержащий эндодомен второго CAR,
при этом указанная молекула нуклеиновой кислоты, при экспрессии в клетке, кодирует полипептид, который расщепляется в сайте расщепления таким образом, что первый и второй CAR совместно представлены на клеточной поверхности.
8. Набор, который включает
(i) первую молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую первый химерный антигенный рецептор (CAR), определенный по любому из пп. 1-5, при этом указанная молекула нуклеиновой кислоты имеет следующую структуру:
AgB1-spacer1-TM1-costim-ITAM1,
где AgB1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антигенсвязывающий домен первого CAR;
spacer1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую спейсер первого CAR;
ТМ1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую трансмембранный домен первого CAR;
costim представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую костимулирующий домен;
ITAM1 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей ITAM-содержащий эндодомен первого CAR; и
(ii) вторую молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую второй химерный антигенный рецептор (CAR), определенный по любому из пп. 1-5, при этом указанная молекула нуклеиновой кислоты имеет следующую структуру:
AbB2-spacer2-ТМ2-TNF-ITAM2;
AgB2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антигенсвязывающий домен второго CAR;
spacer2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую спейсер второго CAR;
ТМ2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую трансмембранный домен второго CAR;
TNF представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую эндодомен рецептора TNF; и
ITAM2 представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую ITAM-содержащий эндодомен второго CAR.
9. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.6 или 7.
10. Способ получения клетки по любому из пп.1 -5, который включает стадию введения в подходящую клетку ex vivo: молекулы нуклеиновой кислоты по п.6 или 7; первой молекулы нуклеиновой кислоты и второй молекулы нуклеиновой кислоты, которые определены по п.8; или вектора по п.9.
11. Фармацевтическая композиция для элиминации клеток, которые экспрессируют указанные первый и/или второй антигены, включающая множество клеток по любому из пп. 1-5.
12. Фармацевтическая композиция по п.11 для применения в лечении или профилактике заболевания.