СПОСОБЫ ДОСТАВКИ АГЕНТА В ИКРИНКИ И ЭМБРИОНЫ МЕЧУЩИХ ИКРУ ВОДНЫХ ЖИВОТНЫХ ДЛЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СКРИНИНГА, АНАЛИЗ ТОКСИЧНОСТИ АГЕНТА И ПОЛУЧЕНИЕ БЕСПЛОДНОЙ РЫБЫ

1. Способ доставки по меньшей мере одного агента в икринку (икринки) мечущего икру водного животного, включающий приведение в контакт икринки (икринок) с по меньшей мере одним агентом в присутствии гуанидинсодержащего соединения, эффективно увеличивающего проницаемость хориона икринки (икринок), при этом икринку (икринки) приводят в контакт с по меньшей мере одним агентом в среде для погружения, содержащей по меньшей мере один агент и гуанидинсодержащее соединение.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное приведение в контакт включает хорионическую трансфекцию икринки (икринок).
3. Способ по пп. 1 или 2, отличающийся тем, что концентрация гуанидинсодержащего соединения в среде для погружения находится в диапазоне значений от 1 до 80000 мкМ.
4. Способ по пп. 1-3, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение включает аргинин или его соль.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение представляет собой аргинин.
6. Способ по пп. 1-3, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение включает гуанидин или его соль.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение представляет собой гуанидин-HCl, гуанидин-тиоцианат, гуанидин-ацетат, гуанидин-карбонат, гуанидин-нитрат, гуанидин-сульфат, гуанидин-бикарбонат или гуанидин-гидробромид.
8. Способ по пп. 1-4 или 6, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение включает димер, тример или полимер гуанидина или аргинина.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение выбирают из соединений общих формул (I) - (IV):
1
4
1
4
3
где «R» обозначает атом водорода, нитро, амино, циано, фенил, циклогексил, бензил, или линейный или разветвленный С-С низший алкильный или С-С алкенильный радикал, необязательно замещенный одним или двумя радикалами, выбранными из: гидроксила, амино, диметиламино, метокси, этокси, карбоксила, карбоксамида, N-метилкарбоксамида или SOH, или их солей; и
1
4
переменный линкер, связывающий с основной цепью, представляет собой аминокислоту, нуклеотид, фосфорамидат, гликоль, полиэтиленгликоль, нитро, амино, циано, фенил, циклогексил, бензил, или линейный или разветвленный С-С низший алкил.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение представляет собой полиаргинин/9 мер.
11. Способ по пп. 1-10, отличающийся тем, что по меньшей мере один агент выбирают из группы, состоящей из антител, белков, пептидов, РНК и ДНК.
12. Способ по пп. 1-11, отличающийся тем, что по меньшей мере один агент представляет собой антисмысловой морфолиновый олигомер, эффективно подавляющий экспрессию гена, существенного для гонадального развития мечущего икру водного животного.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что антисмысловой морфолиновый олигомер подавляет экспрессию гена рецептора dead end, nanos, vasa, gnrh или fsh мечущего икру водного животного.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что антисмысловой морфолиновый олигомер подавляет экспрессию гена dead end мечущего икру водного животного.
15. Способ по пп. 1-14 получения репродуктивно стерильных мечущих икру водных животных, отличающийся тем, что агент представляет собой антисмысловой морфолиновый олигомер, который эффективно трансфицирует икринку (икринки) и делает полученную из нее особь (особи) репродуктивно стерильной.
16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что икринка (икринки) представляет собой оплодотворенную или неоплодотворенную икринку (икринки) рыбы, выбранной из группы, состоящей из лососевых, мороновых и цихлид.
17. Способ по п. 15 или 16, отличающийся тем, что указанный способ включает приведение в контакт оплодотворенной икринки (икринок) немедленно после оплодотворения и включает период активации водой и увеличения прочности оболочек в воде антисмысловым морфолиновым олигомером, который эффективно трансфицирует икринку (икринки) и делает полученную из нее особь (особи) репродуктивно стерильной.
18. Способ по пп. 15-17, отличающийся тем, что антисмысловой морфолиновый олигомер представляет собой олигомер с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2, или его вариант.
19. Способ по пп. 1-18, отличающийся тем, что гуанидинсодержащее соединение не связано ковалентно с агентом.
20. Подвергнутая трансфекции икринка мечущего икру водного животного, полученная способом по пп. 1-19.
21. Подвергнутая трансфекции икринка по п. 20, содержащая антисмысловой морфолиновый олигомер, эффективно подавляющий экспрессию гена, существенного для гонадального развития мечущего икру водного животного.
22. Подвергнутая трансфекции икринка по п. 21, отличающаяся тем, что антисмысловой морфолиновый олигомер подавляет экспрессию гена рецептора dead end, nanos, vasa, gnrh или fsh мечущего икру водного животного.
23. Подвергнутая трансфекции икринка по п. 22, отличающаяся тем, что антисмысловой морфолиновый олигомер подавляет экспрессию гена dead end мечущего икру водного животного.
24. Подвергнутая трансфекции икринка по п. 23, содержащая антисмысловой морфолиновый олигомер с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2 или его вариант.
25. Подвергнутая трансфекции икринка по пп. 21-24, отличающаяся тем, что антисмысловой морфолиновый олигомер делает особь, полученную из такой икринки, репродуктивно стерильной.