ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ

1. Соединение, которое содержит
привлекающий NK домен;
активирующий NK домен, функционально связанный с привлекающим NK доменом; и
направляющий домен, который избирательно связывается с клеткой-мишенью и функционально связан с активирующим NK доменом и привлекающим NK доменом.
2. Соединение по п. 1, в котором активирующий NK домен содержит цитокин или его функциональный фрагмент.
3. Соединение по п. 2, в котором цитокин содержит IL-15.
4. Соединение по п. 3, в котором часть IL-15 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 15 или ее функциональный вариант.
5. Соединение по любому предшествующему пункту, в котором привлекающий NK домен содержит фрагмент, который избирательно связывается с NK клеткой.
6. Соединение по п. 5, в котором привлекающий NK домен активирует NK клетку.
7. Соединение по п. 6, в котором фрагмент привлекающего NK домена избирательно связывается с частью CD16.
8. Соединение по п. 7, где CD16 содержит CD16a.
9. Соединение по п. 5, в котором привлекающий NK домен блокирует ингибирование NK клетки.
10. Соединение по любому предшествующему пункту, в котором фрагмент привлекающего NK домена содержит антитело или его связывающий фрагмент.
2
11. Соединение по п. 10, в котором фрагмент антитела содержит scFv, F(ab) или Fab.
12. Соединение по любому предшествующему пункту, в котором направляющий домен содержит фрагмент, который избирательно связывается с опухолевой клеткой.
13. Соединение по п. 12, в котором фрагмент направляющего домена избирательно связывается с частью CD33.
14. Соединение по п. 12, в котором фрагмент направляющего домена избирательно связывается с частью EpCAM.
15. Соединение по п. 12, в котором фрагмент направляющего домена избирательно связывается с частью CD133, CD20, HER2, CEA, EpCAM, VEGF-A, EGFR, CD33, интегрина αVβ3, CD51, CD152, CD125, CTAA16,88, MUC1, CD19, CD22, CD38, мезотелина, ROR1, CSPG4, SS1, или IGFR1, HIV злокачественной опухоли.
16. Соединение по любому предшествующему пункту, в котором направляющий домен содержит фрагмент, который избирательно связывается с клеткой, инфицированной вирусом.
17. Соединение по п. 16, где вирус включает аденовирус, HIC, CMV или HPV.
18. Соединение по любому из пп. 12-17, в котором фрагмент направляющего домена содержит антитело или его фрагмент.
19. Соединение по п. 18, в котором фрагмент антитела содержит scFv.
20. Соединение по любому предшествующему пункту, содержащее по меньшей мере одну фланкирующую последовательность, связывающую два домена.
21. Соединение по п. 20, которое дополнительно содержит вторую фланкирующую последовательность, связывающую два связанных домена с третьим доменом.
22. Соединение по п. 21, в котором фланкирующие последовательности фланкируют активирующий NK домен.
23. Соединение по п. 21, в котором первая фланкирующая последовательность является C-концевой относительно scFv против NK и в котором вторая фланкирующая последовательность является N-концевой относительно последовательности scFv против злокачественной опухоли.
24. Соединение по любому предшествующему пункту, которое дополнительно содержит второй направляющий домен.
25. Соединение по любому из пп. 1-23, которое дополнительно содержит второй привлекающий NK домен.
26. Соединение по любому из пп. 1-23, которое дополнительно содержит второй активирующий NK домен.
27. Соединение, которое содержит
привлекающий T-клетки домен;
активирующий T-клетки домен, функционально связанный с привлекающим T-клетки доменом; и
направляющий домен, который избирательно связывается с клеткой-мишенью и функционально связан с активирующим T-клетки доменом и привлекающим T-клетки доменом.
28. Соединение по п. 27, в котором активирующий T-клетки домен содержит цитокин или его функциональный фрагмент.
29. Соединение по п. 28, в котором цитокин содержит IL-2.
30. Соединение по п. 29, в котором IL-2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 18.
31. Соединение по любому из пп. 27-30, в котором привлекающий T-клетки домен содержит фрагмент, который избирательно связывается с T-клеткой.
32. Соединение по п. 31, в котором привлекающий T-клетки домен активирует T-клетку.
33. Соединение по п. 31, в котором фрагмент привлекающего T-клетки домена избирательно связывается с CD3.
34. Соединение по п. 31, в котором привлекающий T-клетки домен блокирует ингибирование T-клетки.
35. Соединение по любому из пп. 27-34, в котором фрагмент привлекающего T-клетки домена содержит антитело или его связывающий фрагмент.
2
36. Соединение по п. 35, в котором фрагмент антитела содержит scFv, F(ab) или Fab.
37. Соединение по любому из пп. 27-36, в котором направляющий домен содержит фрагмент, который избирательно связывается с опухолевой клеткой.
38. Соединение по п. 37, в котором фрагмент направляющего домена избирательно связывается с опухолевым маркером.
39. Соединение по п. 38, где опухолевый маркер представляет собой CD133, CD20, HERer2, CEA, EpCAM, VEGF-A, EGFR, CD33, интегрин αVβ3, CD51, CD152, CD125, CTAA16,88, MUC1, CD19, CD22, CD38, мезотелин, ROR1, CSPG4, SS1 или IGFR1.
40. Соединение по любому из пп. 27-39, которое дополнительно содержит по меньшей мере одну фланкирующую последовательность, связывающую два домена.
41. Соединение по п. 40, которое дополнительно содержит вторую фланкирующую последовательность, связывающую два связанных домена с третьим доменом.
42. Соединение по п. 41, в котором фланкирующие последовательности фланкируют привлекающий T-клетки домен.
43. Соединение по любому из пп. 27-42, которое дополнительно содержит второй направляющий домен.
44. Соединение по любому из пп. 27-42, которое дополнительно содержит второй привлекающий T-клетки домен.
45. Соединение по любому из пп. 27-42, которое дополнительно содержит второй активирующий T-клетки домен.
46. Соединение, которое содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 1.
47. Соединение, которое содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 13.
48. Композиция, которая содержит
соединение по любому предшествующему пункту; и
фармацевтически приемлемый носитель.
49. Способ, который включает:
введение субъекту соединения по любому из пп. 1-26 в количестве, эффективном для того, чтобы индуцировать NK-опосредованное уничтожение клетки-мишени.
50. Способ по п. 49, в котором соединение содержит SEQ ID № 1.
51. Способ по п. 49, в котором клетка-мишень представляет собой клетку злокачественной опухоли.
52. Способ стимуляции размножения NK клеток in vivo, способ включает:
введение субъекту количества соединения по любому из пп. 1-26, эффективного для того, чтобы стимулировать размножение NK клеток у субъекта.
53. Способ по п. 52, в котором соединение содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 1.
54. Способ лечения злокачественной опухоли у субъекта, способ включает:
введение субъекту количества соединения по любому из пп. 1-26, эффективного для лечения злокачественной опухоли.
55. Способ по п. 54, в котором соединение содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 1.
56. Способ по п. 54, в котором злокачественная опухоль включает злокачественную опухоль предстательной железы, злокачественную опухоль легких, злокачественную опухоль ободочной кишки, злокачественную опухоль прямой кишки, злокачественную опухоль мочевого пузыря, меланому, злокачественную опухоль почки, почечную злокачественную опухоль, злокачественную опухоль ротовой полости, злокачественную опухоль глотки, злокачественную опухоль поджелудочной железы, злокачественную опухоль матки, злокачественную опухоль щитовидной железы, злокачественную опухоль кожи, злокачественную опухоль головы и шеи, злокачественную опухоль шейки матки, злокачественную опухоль яичников или гематопоэтическую злокачественную опухоль.
57. Способ по п. 54, который дополнительно включает введение композиции до, одновременно с или после химиотерапии, хирургической резекции опухоли или лучевой терапии.
58. Способ по п. 57, в котором химиотерапия содержит алтретамин, амсакрин, L-аспарагиназу, коласпазу, блеомицин, бусульфан, капецитабин, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, циклофосфамид, цитофосфан, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, доцетаксел, доксорубицин, эпирубицин, этопозид, фторурацил, флударабин, фотемустин, ганцикловир, гемцитабин, гидроксимочевину, идарубицин, ифосфамид, иринотекан, ломустин, мелфалан, меркаптопурин, метотрексат, митоксантрон, митомицин C, нимустин, оксалиплатин, паклитаксел, пеметрексед, прокарбазин, ралтитрексед, темозоломид, тенипозид, тиогуанин, тиотепу, топотекан, винбластин, винкристин, виндезин и винорелбин.
59. Способ, который включает:
введение субъекту соединения по любому из пп. 27-47 в количестве, эффективном для того, чтобы индуцировать опосредованное T-клетками уничтожение клетки-мишени.
60. Способ по п. 59, в котором соединение содержит SEQ ID № 13.
61. Способ по п. 59, в котором клетка-мишень представляет собой клетку злокачественной опухоли.
62. Способ стимуляции размножения T-клеток in vivo, способ включает:
введение субъекту количества соединения по любому из пп. 27-47, эффективного для того, чтобы стимулировать размножение T-клеток у субъекта.
63. Способ по п. 62, в котором соединение содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 13.
64. Способ лечения злокачественной опухоли у субъекта, способ включает:
введение субъекту количества соединения по любому из пп. 27-47, эффективного для лечения злокачественной опухоли.
65. Способ по п. 64, в котором соединение содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 13.
66. Способ по п. 64, в котором злокачественная опухоль включает злокачественную опухоль предстательной железы, злокачественную опухоль легких, злокачественную опухоль ободочной кишки, злокачественную опухоль прямой кишки, злокачественную опухоль мочевого пузыря, меланому, злокачественную опухоль почки, почечную злокачественную опухоль, злокачественную опухоль ротовой полости, злокачественную опухоль глотки, злокачественную опухоль поджелудочной железы, злокачественную опухоль матки, злокачественную опухоль щитовидной железы, злокачественную опухоль кожи, злокачественную опухоль головы и шеи, злокачественную опухоль шейки матки, злокачественную опухоль яичников или гематопоэтическую злокачественную опухоль.
67. Способ по п. 64, который дополнительно включает введение композиции до, одновременно с или после химиотерапии, хирургической резекции опухоли или лучевой терапии.
68. Способ по п. 67, в котором химиотерапия содержит алтретамин, амсакрин, L-аспарагиназу, коласпазу, блеомицин, бусульфан, капецитабин, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, циклофосфамид, цитофосфан, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, доцетаксел, доксорубицин, эпирубицин, этопозид, фторурацил, флударабин, фотемустин, ганцикловир, гемцитабин, гидроксимочевину, идарубицин, ифосфамид, иринотекан, ломустин, мелфалан, меркаптопурин, метотрексат, митоксантрон, митомицин C, нимустин, оксалиплатин, паклитаксел, пеметрексед, прокарбазин, ралтитрексед, темозоломид, тенипозид, тиогуанин, тиотепу, топотекан, винбластин, винкристин, виндезин и винорелбин.
69. Соединение по п. 4, в котором функциональный вариант IL-15 содержит замену аминокислоты N72D или N72A по сравнению с SEQ ID № 15.