Антиоксидантные свойства аминотиоловых и триазининдоловых антигипоксантов

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ

ПСИХОНЕЙРОФАРМАКОЛОГИЯ

Резюме_______________

В опытах на крысах в модели гипоксической гипоксии изучали антигипоксическую активность 6 производных аминотиола и триазининдола.

По антигипоксической активности соединения располагались в следующем порядке по мере убывания активности: амтизола сукцинат « амтизол « гутимин >

> Т-475 > гутимина сукцинат >

> сукцинат. Наибольшую антигипоксическую активность выявил амтизол. Антигипоксические и антиоксидантные свойства амтизола не потенцировались

при его соединении с янтарной кислотой. Гутимин тормозил активацию перекисного окисления липидов, препятствуя накоплению малонового диальдегида и гидроперекисей липидов, а также падению уровня восстановленного глутатиона во всех изученных органах в условиях гипоксии.

Данные эффекты гутимина сопровождались угнетением супероксиддисмутазы и каталазы. Соединение гутимина с янтарной кислотой потенцировало его тормозное действие на перекисное окисление липидов и устраняло его угнетающее действие на активность супероксиддисмутазы во всех органах.

Антиоксидантные свойства аминотиоловых и триазининдоловых антигипоксантов // Психофармакол. биол. наркол. 2008. Т. 8, № 1-2 (Ч. 1). С. 1-2255-1-2263.

Ключевые слова

гипоксическая гипоксия; амтизол; гутимин; аминотиолы; триазиноиндолы; перекисное окисление липидов; антиоксидантные системы

© М.В. ЛУКК, И.В. ЗАРУБИНА, П.Д. ШАБАНОВ, 2008

Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова МО РФ; акад. Лебедева ул., 6, Санкт-Петербург, 194044, Россия

АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА АМИНОТИОЛОВЫХ И ТРИАЗИНИНДОЛОВЫХ АНТИГИПОКСАНТОВ

ВВЕДЕНИЕ

Гипоксия и ишемия составляют основу патогенетических механизмов многих острых и хронических заболеваний. Особенно это характерно для патологии сердца и сосудов, являющейся одной из главных причин потери трудоспособности и смертности населения. Кроме того, гипоксические и ишемические нарушения становятся ведущими при ряде неотложных состояний. Поэтому разработка средств, предупреждающих или устраняющих проявления гипоксии и ишемии, — антигипоксантов — продолжает оставаться важнейшей задачей современной фармакологии.

Одним из актуальных вопросов фармакологии антигипоксантов является изучение их антиоксидантных свойств в эксперименте и клинике. Уже не вызывает сомнения тот факт, что активация процессов свободнорадикального окисления и угнетение систем ан-тиоксидантной защиты сопровождают как сами эпизоды гипоксии/ ишемии так и постгипоксический/постишемический период. Применение в этих ситуациях антиоксидантов-ловушек радикалов приводит к значительному снижению содержания свободных радикалов и, как следствие, продуктов пероксидации в гипоксических тканях. Однако препараты данной группы не устраняют угнетения ферментов антиоксидантной защиты, которое особенно ярко проявляется при длительном применении этих средств [3]. Казалось, что компенсировать данный недостаток «ловушек радикалов» удастся внедрением препаратов-ферментов антиоксидантной защиты, в частности супероксиддисмутазы и каталазы. Но в ходе клинических испытаний эффективность таких препаратов, первоначально высокая в экспериментах in vitro и in vivo, оказалась далекой от ожидаемой [1, 2], очевидно из-за их быстрого разрушения в крови и трудности проникновения в очаги ишемии.

Поэтому потребовался новый подход к коррекции систем пере-кисного окисления липидов и антиоксидантной защиты при гипоксии. Этот подход в нашей работе заключался в воздействии на единое звено, вовлекаемое в генерацию первичных радикалов и поддержании активности антиоксидантных ферментов. Современные представления о ключевой роли нарушений основного механизма клеточной энергопродукции — митохондриального окисления, сопряженного с фосфорилированием адениннуклеотидов, — в запуске процессов свободнорадикального окисления и угнетении систем антиоксидантной защиты [6] позволяют предположить, что

1-2255

1-2256

сохранение работы данной энергетической системы клетки во время и после гипоксии/ишемии с помощью антигипоксантов предупредит как генерацию свободных радикалов, вызывающих активацию пе-рекисного окисления липидов, так и угнетение анти-оксидантных ферментов. Это положение носит принципиальный характер и лежит в основе данной работы.

Целью исследования явилось изучение действия антигипоксантов на перекисное окисление липидов (ПОЛ) и антиоксидантную систему (АОС) при гипоксии в основных органах.

Для исследования были выбраны высокоэффективные антигипоксанты (гутимин и амтизол), разработанные на кафедре фармакологии Военномедицинской академии (последний Фармакологическим комитетом Минздрава РФ признан эталонным антигипоксантом [7]) и их соли с янтарной кислотой (гутимина сукцинат и амтизола сукцинат). Присоединение сукцината к гутимину и амтизолу преследовало цель усилить общий противогипокси-ческий эффект путем активации янтарной кислотой компенсаторного при гипоксии НАД-независимого сукцинатоксидазного метаболического пути. Имеются данные, что биодоступность и эффективность амтизола несколько повышаются в присутствии янтарной кислоты [10]. Кроме того, было изучено новое перспективное соединение с антигипоксическими свойствами под лабораторным шифром Т-475 , представляющее собой производное триазиноиндола и синтезированное на кафедре фармакологии Военномедицинской академии А.Б. Томчиным. Молекулярные механизмы действия гутимина и амтизола и их солей с янтарной кислотой окончательно не выяснены, но благоприятное влияние на функции митохондрий, приводящее к многообразным позитивным сдвигам неоднократно продемонстрировано в экспериментах. Препараты способны накапливаться в митохондриях, препятствуя в условиях гипоксии угнетению дегидрогеназ, поддерживая работу дыхательной цепи и повышая сопряжение окисления субстратов с фосфорилированием, что увеличивает энергопродукцию на единицу потребленного кислорода [5]. В защищенных гутими-ном и амтизолом клетках, тканях и органах менее значительно снижается содержание высокоэнергетических фосфорных соединений — креатин-фосфата и АТФ. Гутимин и амтизол прошли успешную клиническую апробацию при широком круге заболеваний и критических состояний с гипок-сическими и ишемическими расстройствами и активацией ПОЛ: травматическом и ожоговом шоке, массивной кровопотере, острой и подострой дыхательной

недостаточности, инсультах, инфаркте миокарда, хронической сердечной недостаточности, операциях на сердце, почках, кишечнике, трансплантациях кожно-мышечных лоскутов, внутриутробной гипоксии плода и др. [2]. Поэтому представлялась вполне вероятной возможность устранения данными препаратами активации ПОЛ и торможения активности АОС при гипоксии благодаря защите энергетического аппарата клетки.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Опыты проводились на беспородных белых кры-сах-самцах (всего около 150 животных) массой 160— 180 г. Острую гипоксическую гипоксию создавали путем «подъема» крыс в барокамере со скоростью 50 м/с на «высоту» 11 000 м с последующим 30-минутным пребыванием животных на данной «высоте» при определении выживаемости или путем подъема на «высоту» 8 000 м с пребыванием на ней в течение 30-ти минут при оценке биохимических показателей на фоне гипоксии. По показателям выживаемости рассчитывался коэффициент защиты (КЗ) по формуле:

а/Ь + 1

К3=----------;

а"/Ь" + 1

где а/Ь и а“/Ь“ — выживаемость в подопытной и контрольной группах соответственно; а и а“ — число выживших, Ь и Ь“ — общее число животных в каждой из этих групп. Величина КЗ колеблется в пределах от 0,5 до 2,0, причем значение КЗ = 1,0 соответствует отсутствию различий между опытом и контролем.

Для биохимических исследований крыс забивали после спуска с «высоты» 8 000 м со скоростью 50 м/с с последующим выделением головного мозга, печени, почек, скелетных мышц бедра и сердца. Органы сохранялись в сосуде Дьюара с жидким азотом до определения биохимических показателей, характеризующих активность процессов перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантных систем.

Все препараты вводили внутрибрюшинно за 30 минут до подъема на «высоту» в оптимальных дозах, установленных опытным путем: амтизол, гутимин, сукцинат и препарат Т-475 в дозе 25 мг/кг, а сочетание амтизола или гутимина с сукцинатом в дозе 50 мг/кг. Контрольные группы получали эквивалентное по объему количество растворителя (фи-

зиологического раствора хлорида натрия). Выбор доз проводился на основе литературных данных с последующим уточнением в предварительных опытах.

Об активности процессов свободнорадикального окисления судили по накоплению в исследуемых органах первичных (гидроперекисей липидов — ГПЛ) и вторичных (малонового диальдегида — МДА) продуктов перекисного окисления липидов [8]. Функции антиоксидантных систем оценивали по активностям каталазы (КТ), супероксиддисмутазы (СОД) и содержанию восстановленного глутатиона (ВГ). О состоянии энергетических процессов в исследуемых органах судили по концентрации АТФ, которую определяли на сканирующем устройстве флуорис-центного спектрофотометра в отраженном свете при длине волны 260 нм после предварительного хроматографического разделения адениннуклеотидов на силуфоле и выделении фракции АТФ [4].

Статистическую обработку результатов исследований проводили по общеизвестным методам вариационной статистики с оценкой достоверности различий между группой контроля и опытными группами по 1-критерию Стьюдента. Различия в сравниваемых группах считались достоверными при р < 0,05. Оценку достоверности различий при определении выживаемости проводили по точному методу Фишера.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Установлено, что антигипоксанты амтизол и гу-тимин обладают высокой антигипоктической активностью (табл. 1).

Так, выживаемость крыс при введении этих препаратов достоверно повысилась до 87 % для амтизо-

ла и до 80 % для гутимина (против 27 % в группе контроля), а их антигипоксическая активность, измеряемая коэффициентом защиты, составила 1,47 и 1,42 соответственно. Менее выражено, но достоверно повышал устойчивость животных к гипокси-ческой гипоксии препарат Т-475: выживаемость достигла 70 % уровня; коэффициент защиты для данного препарата равнялся 1,34. Соединение сук-цината с амтизолом и гутимином по-разному повлияло на антигипоксическую активность каждого из препаратов. Так, антигипоксический эффект ам-тизола сукцината оказался практически таким же, как у амтизола: выживаемость крыс при его введении составила 90 %, коэффициент защиты — 1,5 условных единицы. При действии же гутимина сук-цината (КЗ = 1,26) выживаемость животных была на 20 % меньше, чем при действии гутимина. Сама янтарная кислота проявляла слабые анти-гипоксические свойства (КЗ = 1,18), хотя и увеличивала выживаемость крыс почти в 2 раза (с 27 % в контроле до 50 % в опыте), но данные сдвиги оказались недостоверными. Итак, обладая слабыми анти-гипоксическими свойствами, вероятно, вследствие плохого проникновения в клетку, сукцинат практически не влияет на антигипоксическую активность амтизола, заметно снижая противогипоксическое действие гутимина. Причина данного феномена может быть обусловлена физико-химическими свойствами гутимина как соединения с основностью рК = 5,9, связь которого с янтарной кислотой плохо подвергается, по-видимому, гидролизу в водных растворах и, как следствие, в тканях. Это ведет, вероятно, к ухудшению проникновения гутимина сукци-ната в клетку по сравнению с самим гутимином, обусловливая некоторую потерю антигипоксической активности. Амтизол же — соединение с чрезвычайно низкой основностью (рК <2, и в ряде работ [10]

Таблица 1

Влияние антигипоксантов на выживаемость крыс при критической гипоксии

Выживаемость Коэффициент

выжило/общее % защиты РТМФ

Гипоксия 4/15 27 - -

Амтизол 13/15 87 1,47 0,001

Амтизола сукцинат 9/10 90 1,50 0,003

Гутимин 8/10 80 1,42 0,01

Гутимина сукцинат 6/10 60 1,26 0,09

Сукцинат 5/10 50 1,18 0,2

Т-475 7/1 0 70 1,34 0,04

1-2257

1-2258

показано, что амтизола сукцинат уже в водных растворах представляет собой эквимолекулярную смесь амина амтизола и янтарной кислоты. Очевидно поэтому транспорт амтизола в клетку не страдает из-за легкого гидролиза его янтарной соли. В итоге антигипоксическое действие амтизола и амтизола сукцината практически равны.

Описывая действия антигипоксантов, необходимо отметить полное совпадение данных об их анти-гипоксической активности, выявляемой по критерию выживаемости животных, со степенью влияния на энергетику, проявляющейся в сдерживании падения концентрации АТФ в различных органах.

В итоге, сравнительное изучение антигипокси-ческий активности исследуемых препаратов в рамках одного эксперимента выявило, что все средства повышают устойчивость животных к критической гипоксии, и позволило расположить препараты по убыванию антигипоксической активности в следующем порядке: амтизола сукцинат ~ ~ амтизол ~ гутимин > Т-475 > гутимина сукцинат >

> сукцинат.

Установлено, что пребывание животных в условиях гипоксии (8 000 м) вызывает выраженную активацию ПОЛ, приводящую к значительному и достоверному повышению содержания гидроперекисей липидов и МДА во всех исследованных органах (рис. 1 и табл. 2). Наибольшее увеличение концентрации гидроперекисей липидов наблюдалось в головном мозге и почках (на 203 %, т.е. в 3 раза). В тканях печени, сердца и скелетной мускулатуры %

350—

* #

300 гп гп

250 .

200 „ I « —

150

Головной Почки Печень Сердце Мышцы мозг бедра

ГПЛ  МДА

Рис. 1

Содержание гидроперекисей липидов

Примечание: здесь и на рис. 2 значение показателей отражено в % к уровню интактного контроля (100 %); * — достоверность отличий при р < 0,05.

* *

- * 1 id 1

прирост этого показателя был более чем в 2 раза менее выраженным и составил 83, 68 и 90 % соответственно. В то же время в печени накопление МДА было наименьшим (+22 %), а в сердце и скелетных мышцах — наибольшим (+139 и +99 % соответственно). В головном мозге и почках содержание МДА выросло на 48 и 70 % соответственно.

В целом же активация ПОЛ в изученных органах при гипоксии характеризовалась следующими чертами (см. рис. 1). В головном мозге, почках и печени накопление гидроперекисей липидов значительно превосходило прирост МДА (увеличение содержания ГПЛ превосходило повышение концентрации МДА в 3—4 раза). В сердце и скелетной мускулатуре имелось обратное взаимоотношение между данными показателями — увеличение содержания ГПЛ было меньшим, чем рост концентрации МДА. Так, в миокарде накопление гидроперекисей липидов отставало от роста МДА в 2 раза, а в скелетных мышцах такие изменения просматривались менее отчетливо, лишь в виде слабо выраженной тенденции. Вероятно, выраженность сдвигов, произошедших в различных органах, обусловлена спецификой их метаболизма.

Состояние системы антиоксидантной защиты (рис. 2 и табл. 3) во всех органах характеризовалось снижением содержания восстановленного глутатиона и активности СОД. Наиболее выраженное снижение концентрации восстановленного глутатиона на 45 % отмечалось в головном мозге. В скелетной мускулатуре падение данного показателя было наименьшим (27 %), а в почках, печени и миокарде оно составило 34, 35 и 31 % соответственно.

Подавление активности СОД было наиболее заметным в печени (на 82 %), а в головном мозге — наименьшим (на 60 %). Снижение активности фермента в почках, миокарде и скелетных мышцах варьировало от 70 до 74 %. Интересно отметить, что во всех изученных органах торможение активности СОД отчетливо превалировало над уменьшением концентрации восстановленного глутатиона. Так, содержание восстановленного глутатиона падало в 1,25—1,9 раза, а активность СОД — в 2,5—4 раза в различных органах. В отличие от активности СОД и содержания восстановленного глутатиона каталаз-ная активность в изученных органах в целом имела тенденцию к росту, рассматриваемую нами как компенсаторный сдвиг, характерный, вероятно, для той степени острой гипоксии, которая моделировалась в наших опытах (высота 8 000 м, длительность 30 мин). Как показывают результаты других исследований, при более жесткой гипоксии актив-

Таблица 2

Влияние антигипоксантов на показатели ПОЛ в различных органах при острой гипоксии

Группы Органы Показатели ПОЛ

ГПЛ,

Интактные животные Головной мозг 0,029 ±0,002 67,38 ±1,71

Почки 0,030 ±0,006 28,93 ±3,54

Печень 0,060 0,002 21,25 2,31

Сердце 0,056 0,004 13,98 1,82

Скелетные мышцы 0,050 ±0,003 16,91 ±3,41

Контроль (гипоксия) Головной мозг 0,088 0,002 * 99,90 2,09 *

Почки 0,091 0,003 * 49,26 2,43 *

Печень 0,110 ±0,005 * 25,99 ±2,45

Сердце 0,094 ±0,005 * 33,39 2,54 *

Скелетные мышцы 0,095 0,003 * 33,73 3,25 *

Амтизол Головной мозг 0,050 0,005 л 29,90 ± 2,61 л

Почки 0,050 0,004 л 50,12 ±2,22

Печень 0,070 0,001 л 19,91 2,11 л

Сердце 0,070 0,001 л 10,23 3,81 л

Скелетные мышцы 0,050 0,002 л 12,50 ± 2,41 л

Гутимин Головной мозг 0,042 0,004 л 55,99 8,30 л

Почки 0,039 0,002 л 40,06 5,30

Печень 0,063 0,002 л 21,94 ±4,81

Сердце 0,050 0,002 л 14,31 ± 7,00 л

Скелетные мышцы 0,058 0,004 л 15,86 2,70 л

Амтизола сукцинат Головной мозг 0,050 0,004 л 61,21 2,16 л

Почки 0,040 0,002 л 43,80 ± 0,89 л

Печень 0,061 0,003 л 18,21 1,35 л

Сердце 0,060 0,002 л 13,96 1,56 л

Скелетные мышцы 0,070 0,002 л 20,50 1,81 л

Гутимина сукцинат Головной мозг 0,035 0,001 л 41,20 ± 6,70 л

Почки 0,046 0,002 л 27,10 4,20 л

Печень 0,057 0,002 л 20,31 4,50

Сердце 0,071 0,002 л 7,50 2,70 л

Скелетные мышцы 0,056 0,003 л 11,30 2,0 л

Сукцинат Головной мозг 0,047 0,003 л 27,67 2,60 л

Почки 0,049 ±0,001 21,73 ± 3,10 л

Печень 0,067 0,001 л 17,34 ± 2,40 л

Сердце 0,064 0,002л 7,80 1,10 л

Скелетные мышцы 0,068 0,003 л 4,87 1,90 л

Т-475 Головной мозг 0,040 0,001 л 31,76 ± 3,40 л

Почки 0,043 0,001 л 15,95 4,50 л

Печень 0,072 0,004 л 42,82 3,30 л

Сердце 0,076 0,002 л 27,35 ± 3,20

Скелетные мышцы 0,070 0,001 л 11,70 6,30 л

Примечание: здесь и в табл. 3:

* — достоверность отличий от соответствующего показателя в группе интактных животных при р < 0,05;

“ — достоверность отличий от соответствующего показателя в группе гипоксического контроля при р < 0,05.

ность каталазы падает [9]. В нашем исследовании компенсаторное увеличение каталазной активности было наибольшим в мышечных тканях: скелетной мускулатуре (+33 %) и миокарде (+25 %); в пече-

ни и почках оно составило соответственно +18 и +7 %. В головном мозге компенсаторного увеличения каталазной активности не выявлено. В целом очевидно, система антиоксидантной защиты в изу-

1-2259

14С

12С

10С 1-2260 _

80

60

40

20

0

Рис. 2

Содержание восстановленного глутатиона

ченных органах угнетена, поскольку повышение активности каталазы явно не компенсирует потерь восстановленного глутатиона и снижения активности СОД, что в конечном итоге и выражалось значительным накоплением в наших опытах продуктов ПОЛ (гидроперекиси липидов и МДА).

Полученные данные убедительно свидетельствуют о связи гипоксической гипоксии с активацией ПОЛ и угнетением антиоксидантной системы в конкретных органах: головном мозге, почках, печени, сердце и скелетных мышцах.

Таким образом, при гипоксической гипоксии ан-тиоксидантные свойства антигипоксантов в целом включают два компонента: торможение активации ПОЛ и предотвращение угнетения АОС. По способности подавлять ПОЛ все препараты можно расположить в убывающий ряд в следующей последовательности: сукцинат > гутимина сукцинат >

> амтизол > амтизола сукцинат ~ Т-475 ~ гутимин.

Интересны особенности действия сукцината. Обладая наибольшей активностью в подавлении ПОЛ, он повышает данные свойства у гутимина, но не у амтизола. Обращает на себя внимание отсутствие выраженной органоспецифичности действия (предупреждения активации ПОЛ) антигипоксантов, хотя наибольшие изменения при их введении наблюдаются в головном мозге и сердце. При более тщательном рассмотрении заметно, что препараты нивелируют негативные сдвиги, вызванные гипоксией, приблизительно к одному уровню в различных органах несмотря на их первоначальную величину. Поэтому более выраженное действие антигипоксантов проявляется в органах с наибольшими негативными сдвигами, а менее заметное действие — в органах с

мозг бедра

ВГ  КТ  СОД

наименьшей активацией ПОЛ. Единственное исключение из общего правила составил препарат Т-475, для которого характерно дополнительное к действию гипоксии увеличение содержания МДА в печени (в 4 раза), вероятно свидетельствующее о его возможной гепатотоксичности.

Все изученные препараты кроме гутимина оказывали положительное влияние на факторы антиоксидантной защиты (сдерживая снижение количества ВГ, активности СОД и КТ), образуя убывающий ряд в следующей последовательности: амтизол > амтизола сукцинат > сукцинат ~ Т-475 >

> гутимина сукцинат.

Применение гутимина препятствовало падению содержания восстановленного глутатиона во всех органах, угнетая дополнительно (к действию гипоксии) активность СОД и каталазы. При этом негативное влияние на СОД превосходило аналогичное действие на каталазу. Соединение гутимина с сукци-натом полностью устраняло в органах угнетающее действие гутимина на СОД, но не на каталазу (за исключением печени, где активность каталазы возрастала). Сочетание сукцината с амтизолом практически не изменяло его антиоксидантных свойств. Препарат Т-475 вызывал изменения, аналогичные действию амтизола во всех исследуемых органах, за исключением головного мозга, где активность СОД дополнительно к действию гипоксии уменьшалась в 1,5 раза.

Сопоставление антигипоксической и антиок-сидантной активностей антигипоксантов позволяет констатировать, что между антигипоксической и антиоксидантной активностями антигипоксантов жесткой связи нет. Так сильное противогипоксическое действие гутимина не сочетается с его ярко выраженным негативным влиянием на ферменты антиоксидантной защиты. В то же время гутимина сукцинат, имея более низкую антигипоксическую активность по сравнению с гутимином, обладает более выраженными антиоксидантными свойствами. Самая высокая антиоксидантная активность сукци-ната, связанная прежде всего с подавлением ПОЛ, сочетается с его наименьшим противогипоксическим действием в исследуемом ряду. Только амтизол и амтизола сукцинат при гипоксии сочетают в себе высокую антигипоксическую и антиоксидантную активности, причем последняя связана, главным образом, с предотвращением подавления факторов антиоксидантной защиты. Полученные данные не противоречат результатам других исследований.

Таким образом, все изученные соединения обладают антигипоксической активностью при гипоксической гипоксии, образуя убывающий ряд в следу-

Таблица З

Влияние антигипоксантов на показатели антиоксидантной системы в различных органах при острой гипоксии

Группа Орган Восстановленный глутатион,

Интактные животные Головной мозг 32,42 ± 0,82 0,036 ± 0,008 1,53 ± 0,16

Почки 49,02 ± 1,51 0,092 ± 0,008 2,69 ± 0,26

Печень 97,80 ± 1,37 0,057 ± 0,006 4,59 ± 0,12

Сердце 30,13 ± 2,53 0,052 ± 0,007 1,36 ± 0,09

Скелетные 26,46 ± 1,45 0,033 ± 0,005 1,55 ± 0,06

Контроль (гипоксия) Головной мозг 17,90 ± 0,89 * 0,036 ± 0,008 0,62 ± 0,16 *

Почки 32,58 ± 1,52 * 0,098 ± 0,005 0,71 ± 0,02 *

Печень 63,42 ± 0,89 * 0,067 ± 0,005 0,82 ± 0,12 *

Сердце 20,92 ± 0,89 * 0,065 ± 0,005 0,39 ± 0,05 *

Скелетные 19,25 ± 0,44 * 0,044 ± 0,006 0,46 ± 0,02 *

Амтизол Головной мозг 46,56 ± 1,21 л 0,042 ± 0,006 1,52 ± 0,15 л

Почки 61,08 ± 1,69 л 0,110 ± 0,006 1,82 ± 0,06 л

Печень 84,65 ± 1,32 л 0,093 ± 0,009 л 3,13 ± 0,17 л

Сердце 33,04 ± 2,22 л 0,070 ± 0,008 1,37 ± 0,04 л

Скелетные 25,87 ± 2,53 л 0,065 ± 0,008 л 1,66 ± 0,06 л

Гутимин Головной мозг 43,47 ± 1,20 л 0,029 ± 0,003 0,16 ± 0,03 л

Почки 59,68 ± 4,30 л 0,091 ± 0,006 0,42 ± 0,09 л

Печень 115,05 ± 10,0 л 0,072 ± 0,007 0,87 ± 0,14

Сердце 42,59 ± 2,70 л 0,053 ± 0,003 0,14 ± 0,02 л

Скелетные 31,79 ± 2,80 л 0,042 ± 0,008 0,10 ± 0,02

Амтизола сукцинат Головной мозг 41,50 ± 1,12 л 0,035 ± 0,007 1,35 ± 0,17 л

Почки 55,46 ± 0,82 л 0,090 ± 0,009 2,61 ± 0,05 л

Печень 86,28 ± 1,52 л 0,090 ± 0,002 2,65 ± 0,15 л

Сердце 40,20 ± 1,23 л 0,050 ± 0,008 1,43 ± 0,06 л

Скелетные 28,92 ± 0,70 л 0,050 ± 0,009 1,03 ± 0,02 л

Гутимина сукцинат Головной мозг 37,30 ± 1,60 л 0,028 ± 0,009 0,63 ± 0,29

Почки 51,47 ± 1,60 л 0,098 ± 0,020 1,06 ± 0,23 л

Печень 71,70 ± 2,90 л 0,096 ± 0,030 1,14 ± 0,23 л

Сердце 35,70 ± 1,40 л 0,048 ± 0,010 л 0,56 ± 0,16 л

Скелетные 18,19 ± 2,10 0,044 ± 0,007 0,50 ± 0,15 л

Сукцинат Головной мозг 42,14 ± 0,90 л 0,043 ± 0,01 0,85 ± 0,21 л

Почки 49,80 ± 5,40 л 0,090 ± 0,02 1,79 ± 0,27 л

Печень 81,56 ± 7,80 л 0,098 ± 0,007 л 2,43 ± 0,42 л

Сердце 41,89 ± 2,60 л 0,064 ± 0,008 0,64 ± 0,08 л

Скелетные 25,80 ± 1,30 л 0,061 ± 0,007 л 0,82 ± 0,35 л

Т-475 Головной мозг 39,86 ± 3,90 л 0,037 ± 0,005 0,41 ± 0,11 л

Почки 53,16 ± 5,00 л 0,093 ± 0,01 1,17 ± 0,25 л

Печень 75,90 ± 7,50 0,130 ± 0,03 л 1,14 ± 0,27 л

Сердце 40,35 ± 3,10 л 0,066 ± 0,01 л 0,47 ± 0,12

Скелетные 28,62 ± 7,50 0,096 ± 0,02 л 0,58 ± 0,13 л

1-2261

Таблица 4

Сравнение антигипоксических и антиоксидантных свойств антигипоксантов

Препарат Антигипоксическая активность Антиоксидантная активность

подавление ПОЛ влияние на АОС

Амтизол + + + + + + +

Гутимин + + + ± ±

Амтизола сукцинат + + + ± + + +

Гутимина сукцинат + + + +

Сукцинат ± + + + + +

Т-475 + + ± + +

ющем порядке: амтизола сукцинат ~ амтизол ~ ~ гутимин > Т-475 > гутимина сукцинат > сукцинат. В многокомпонентной структуре ответа организма на действие гипоксической гипоксии имеет место активация перекисного окисления липидов и угнетение системы антиоксидантной защиты в головном мозге, почках, печени, миокарде и скелетной мускулатуре, что выражается увеличением содержания малонового диальдегида и гидроперекисей липидов, падением активности супероксиддисмутазы и содержания восстановленного глутатиона. При этом эталонный антигипоксант амтизол устраняет во всех изученных органах негативные сдвиги, вызванные тяжелой гипоксией в системах перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты. Антигипок-сические и антиоксидантные свойства амтизола не потенцируются его соединением с янтарной кислотой. Гутимин тормозит активацию перекисного окисления липидов, препятствуя накоплению малонового диальдегида и гидроперекисей липидов, а также падению уровня восстановленного глутатиона во всех изученных органах в условиях гипоксии. Данные эффекты гутимина сопровождаются угнетением супероксиддисмутазы и каталазы. Соединение гутимина с янтарной кислотой потенцирует его тормозное действие на перекисное окисление липидов и устраняет его угнетающее действие на активность супероксиддисмутазы во всех органах. Антигипоксант Т-475 устраняет во всех изученных органах негативные сдвиги, вызванные тяжелой гипоксией в системах перекисного окисления липидов и антиок-сидантной защиты, кроме накопления малонового диальдегида в печени и угнетения супероксиддисмутазы в головном мозге.

ЛИТЕРАТУРА________

1. Александрова А.Е. Антигипоксическая активность и механизмы действия некоторых синтетических и

природных соединений // Эксперим. и клин. фар-макол. 2005. Т. 68, № 5. С. 72-78.

2. Антигипоксанты и актопротекторы. Итоги и перспективы. СПб., 1994. Ч. 1-2. 300 с.

3. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. М.: Медицина, 1989. 368 с.

4. Зарубина И.В., Криворучко Б.И. Разделение и прямое количественное определение адениннук-леотидов на силуфоле // Укр. биохим. журнал. 1982. Т. 54, № 4. С. 437-439.

5. Зарубина И.В., Шабанов П.Д. Молекулярная фармакология антигипоксантов. СПб.: Н-Л, 2004. 368 с.

6. Лукьянова Л.Д., Ушаков И.Б. Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и медицинские аспекты. М.: Истоки, 2004.

7. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксиче-ских средств. М., 1990.

8. Путилина Ф.Е., Галкина О.В., Ещенко Н.Д., Диже Г.П. и соавт. Практикум по свободнорадикальному окислению. СПб.: Изд-во СПбГУ, 2006. С. 3-10.

9. Миронова О.П. Антигипоксические и антиок-сидантные эффекты амтизола и триметазидина при гипоксии, ишемии и реперфузии головного мозга: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. СПб., 1999. 22 с.

10. Томчин А.Б., Урюпов О.Ю., Смирнов А.В. Производные тиомочевины и тиосемикарбозида. Строение, превращения и фармакологическая активность. III. Антигипоксическое и противовоспалительное действие производных 1,2,1-триазинов [6,5-b] индола // Хим.-фарм. журнал. 1997. Т. 31, № 12. С. 6-12.

Lukk M.V., Zarubina I.V., Shabanov P.D. Antioxidant properties of aminothiol and triazinoindol antihypoxants // Psychopharmacol. Biol. Narcol. 2008. Vol. 8, N 1-2. (Pt. 1). P. 1-2255-1-2263. Military Medical Academy, 6, acad. Lebedeva st., St.-Petersburg, 194044, Russia

Summary: The antihypoxic activity of 6 aminothiol and triazinoindol derivatives was studied in a model of hypobaric (hypoxic) hypoxia in rats. The range of antihypoxic activity was

the following: amtizol succinate » amtizol » gutimin > Т-475 >

> gutimin succinate > succinate. One of the mechanism of action for all antyhypoxants was the inhibition of lipid peroxidation and recovery of hypoxia-induced antioxidant defense system in the brain, kidneys, hepar, heart and muscles (the reduction of the contents of malonic dialdehyde and lipid hydroperoxides, the increase of superoxid dismutase activity and the contents of recovered glutation). Amtizol revealed the most antihypoxic activity. It recovered all negative shifts produced by middle and heavy hypoxia in the organs studied. Succinate did not potentiate antihypoxic and antioxidant

properties of amtizol. Gutimin inhibited the activation of lipid peroxidation preventing the increase of malonic dialdehyde and lipid hydroperoxides and the decrease of recovered glutation produced by hypoxia in all organs studied. Besides, gutimin inhibited both superoxid dismutase and catalase activity. 1-2263 Gutimin succinate strengthened the inhibitory action of gutimin on lipid peroxidation and prevented its inhibitory effect on superoxid dismutase activity in all organs studied.

Key words: hypobaric hypoxia; amtizol; gutimin; aminothiols; triazinoindols; lipid peroxidation; antioxidant systems

Электронная копия статьи. © Архив

http://psychopharmacology.ru

http://www.elibrary.ru