КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ, СНИЖЕНИЯ, ОБЛЕГЧЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ИДИОПАТИЧЕСКОЙ РВОТЫ
COMPOSITION AND METHOD FOR PREVENTING, REDUCING, ALLEVIATING OR TREATING IDIOPATHIC VOMITING

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Данное изобретение относится к пищевой композиции или способу профилактики, снижения, облегчения или лечения идиопатической рвоты у млекопитающих, в частности, домашних кошек, с использованием одного или более растительных материалов или экстрактов, которые обладают ингибирующим действием на 5-гидрокситриптамин-3-серотониновый (5-HT3a) рецептор и/или рецептор нейрокинина-1 (NK-1).
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Хроническая/циклическая идиопатическая рвота или рвотный синдром у кошек был идентифицирован в конце девятнадцатого века. Несмотря на то, что нечастая рвота у кошек при некоторых обстоятельствах может быть приемлемой, например, слишком быстрое или слишком обильное поедание пищи или присутствие избыточных волос или других чужеродных предметов в желудке, частая рвота или срыгивание без причин ("идиопатическая рвота") может приводить к тяжелой недостаточности питания у кошек и вызывать нарушения здорового состояния желудочно-кишечного тракта (ЖК) кошек. Четырьмя основными характеристиками, которые определяют идиопатическую рвоту, являются: 1) три или более возвратных раздельных эпизодов рвоты или срыгивания; 2) меняющиеся интервалы между полностью нормальными, здоровыми периодами между эпизодами; 3) эпизоды являются типичными по отношению к временному режиму наступления, симптомам и продолжительностям; и 4) неизвестные причины рвоты или срыгивания. Субъекты, подверженные идиопатической рвоте, не могут быть идентифицированы посредством стандартного медицинского обследования, включающего физический осмотр и/или анализ крови. У людей идиопатическая рвота может быть описана как синдром циклической рвоты (СЦР), и может быть ассоциирована с дегидратацией, повреждением ЖК тракта (в частности, пищевода), и кариесом зубов (рвотная масса может быть кислой).
Точные причины идиопатической рвоты являются понятными не полностью. Однако недавно было признано, что одна из потенциальных причин у кошек связана с расстройствами центральной нервной системы (ЦНС). В мозге кошек существуют несколько нейротрансмиттерных рецепторов, которые могут быть инициированы, чтоб стимулировать или активировать различные биологические пути, приводящие к рвоте.
Примеры таких рецепторов включают нейрокининовые (NK) рецепторы, гистаминовые рецепторы, ацетилхолиновые рецепторы, серотониновые рецепторы, мю-опиоидные рецепторы и рецепторы дофамина-2. Следовательно, потенциальным путем предотвращения или снижения идиопатической рвоты является ингибировать или частично блокировать такие рецепторы.
Некоторые антагонисты 5-HT3a рецепторов, такие как доласетрон, гранисетрон, ондансетрон и палоносетрон, демонстрировали эффективность в качестве противорвотных средств у людей и применялись для контроля индуцированных химиотерапией тошноты и рвоты у пациентов со злокачественным новообразованием. Дополнительно, для контроля рвоты у людей недавно был разработан новый класс лекарственных средств, известных как антагонисты NK-1 рецептора, которые включают, среди прочих, апрепитант и маропитант. Однако эти соединения часто приводят к побочным эффектам. Дополнительно, является трудным вводить такие соединения посредством скармливания, вследствие их нежелательного вкуса. К сожалению, инъекция не является удобным альтернативным средством введения противорвотных средств. При лечении животных, таких как кошки или собаки, для инъекции может требоваться ветеринарная помощь, в частности, если животное сопротивляется инъекции.
Следовательно, существует постоянная потребность в эффективной и более легко доступной обработке для предотвращения, снижения, облегчения или лечения идиопатической рвоты. Также существует потребность в способах лечения с меньшими побочными эффектами, которые могут легко вводиться, таких как, например, посредством скармливания или другого перорального введения. Еще дополнительно имеется потребность в терапевтических соединениях или композициях природного происхождения. Эти потребности являются, в частности, актуальными для домашних кошек с историей идиопатической рвоты.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Один аспект настоящего изобретения отвечает вышеописанным потребностям, предоставляя пищевую композицию для предотвращения, снижения, облегчения или лечения идиопатической рвоты у домашнего животного, которая содержит один или более растительных материалов или их экстрактов в эффективном количестве для ингибирования 5-гидрокситриптамин-3a серотонинового (5-HT3a) рецептора и/или рецептора нейрокинина-1 (NK-1).
В еще одном другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу профилактики, снижения, облегчения, или лечения идиопатической рвоты у домашнего животного, который включает стадию перорального введения указанному домашнему животному одного или более растительных материалов или их экстрактов в эффективном количестве для ингибирования 5-HT3a рецептора и/или NK-1 рецептора.
В дополнительном аспекте, настоящее изобретение относится к композиции для предотвращения, снижения, облегчения или лечения идиопатической рвоты у домашнего животного, которая содержит один или более растительных материалов или их экстрактов в эффективном количестве для ингибирования 5-HT3a рецептора и/или NK-1 рецептора.
В еще дополнительном аспекте, настоящее изобретение относится к упаковке для предотвращения, снижения, облегчения, или лечения идиопатической рвоты у домашнего животного, содержащей:
(a) пищевую композицию; и
(b) руководство по скармливанию, предоставляющее письменные инструкции для собственника указанного животного.
Конкретно, руководство по скармливанию может включать информацию по: (1) необязательно, методу оценки тяжести состояния идиопатической рвоты домашнего животного; (2) частоте скармливания; (3) продолжительности скармливания; (4) методу скармливания; и (5) необязательно, методу регистрации состояния идиопатической рвоты домашнего животного, чтобы определить время прекращения скармливания. Эти и другие аспекты настоящего изобретения станут более понятными при прочтении следующего подробного описания и примеров изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
ФИГУРЫ 1-39 показывают для 5-HT3a кривые зависимости доза-ответ растительных материалов и экстрактов настоящего изобретения с удивительно высоким ингибирующим действием по отношению к 5-HT3a.
ФИГУРЫ 40-44 являются графиками, показывающими неожиданное синергическое ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством некоторых комбинаций растительных материалов или экстрактов, как обнаружено авторами настоящего изобретения.
ФИГУРЫ 45-64 показывают для NK-1 кривые зависимости доза-ответ растительных материалов и экстрактов настоящего изобретения с удивительно высоким ингибирующим действием по отношению к NK-1.
ФИГ. 65 является графиком, показывающим неожиданное синергическое ингибирующее действие на NK-1, достигаемое посредством конкретной комбинации растительных материалов или экстрактов, как обнаружено авторами настоящего изобретения.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
За исключением тех случаев, когда указано иначе, артикли "a", "an" и "the" означают "один или более". Термин "содержащий" означает, что могут быть добавлены другие стадии и другие ингредиенты, которые не оказывают воздействия на конечный результат, и этот термин охватывает термины "состоящий из" и "состоящий по существу из". Композиции и способы/процессы настоящего изобретения могут включать, состоять из, и состоять по существу из незаменимых элементов и ограничений изобретения, описанных в данном документе, а также любых из дополнительных или необязательных ингредиентов, компонентов, стадий или ограничений изобретения, описанных в данном документе. Все процентные доли, части и отношения приводятся в расчете от общей массы композиций настоящего изобретения, если не установлено иначе. Все такие массы, поскольку относятся к перечисленным ингредиентам, основаны на активном уровне и, следовательно, не включают носители или побочные продукты, которые могут быть включены в материалы, доступные для приобретения. Все отношения представляют собой массовые отношения, если конкретно не установлено иначе. Все температуры указаны в градусах Цельсия, если конкретно не установлено иначе. Все размеры и значения, раскрытые в данном документе, (например, количества, процентные доли, части и пропорции) не должны пониматься, как строго ограниченные приведенными точными числовыми значениями. Вместо этого, если не установлено иначе, подразумевают, что каждый такой размер или каждое такое значение означает как приведенное значение, так и функционально эквивалентный интервал, окружающий это значение. Например, размер, раскрытый как "40 мм" подразумевается, как означающий "около 40 мм".
В данном документе, термин "лечить" "излечение" или "лечение" охватывает все способы лечения заболевания или состояния у животного, представляющего интерес, которые включают: (i) ингибирование заболевания или состояния, т.е., полное прекращение его развития; (ii) снижение заболевания или состояния, т.е., вызывая регресс заболевания или состояния; и (iii) частичное снятие или облегчение симптомов, являющихся результатом заболевания или состояния, т.е., облегчение боли или страдания без решения проблемы основополагающего заболевания или состояния.
Термин "эффективное" означает количество содержимого, активное в достаточной степени, чтобы обеспечить значительную положительную модификацию состояния, подлежащего лечению. Эффективное количество активного содержимого будет варьировать вместе с конкретным состоянием, подвергающимся лечению, тяжестью состояния, продолжительностью лечения, природы одновременно проводящегося лечения и аналогичных факторов.
Термин "рвота" или "извергание рвотных масс", используемый в данном документе, охватывает любой добровольный или принудительный выброс содержимого из чьего-либо желудка или пищевода в рот и иногда в нос. Такие акты могут именоваться различным образом, как извергание рвотных масс, срыгивание, рвота, извергание, тошнота и т.п., но обобщенно охватываются в данном документе одним и тем же термином "рвота" или " извергание рвотных масс".
Термин "домашнее животное, относящееся к кошачьим" или "кошка", используемый в данном документе, широко охватывает всех животных в семействе Felidea, которые могут потенциально быть взяты людьми в качестве либо комнатных или содержащихся вне дома компаньонов, которые включают, но не ограничены перечисленным: домашних кошек, пум, гепардов, рысей, оцелотов, тигров, львов, ягуаров, пантер, леопардов и т.п. Термин "животное-компаньон", используемый в данном документе, включает, но не ограничен перечисленным: домашних животных, относящееся к кошачьим, как описано здесь выше; всех животных в семействе Canidea, которые могут потенциально быть взяты людьми в качестве либо комнатных или содержащихся вне дома компаньонов, таких как домашние собаки (Canis familiaris), волки, лисы, шакалы, койоты и т.п.; других более мелких домашних млекопитающих, таких как хорьки, еноты, кролики, мыши, крысы, хомяки, морские свинки и т.п.
В настоящем изобретении идентифицирована специфичная группа растительных материалов или их экстрактов, которые, в частности, являются эффективными в качестве ингибиторов 5-HT3a и/или NK-1 рецепторов у кошачьих и псовых. Такие растительные материалы или экстракты имеют природное происхождение при небольших или отсутствующих побочных эффектов на домашних животных. Дополнительно, такие растительные материалы или экстракты улучшали вкус или запах в сравнении с синтетическими соединениями. Следовательно, эти растительные материалы или экстракты могут с легкостью применяться для составления пищевых композиций или режимов для контроля и лечения идиопатической рвоты у кошачьих и псовых. Эти растительные материалы или экстракты также могут применяться при контроле или лечении идиопатической рвоты у других домашних животных, или у других млекопитающих, включая людей.
50
Используемый в данном документе, термин "эффективный в качестве ингибиторов 5-HT3a и/или NK-1 рецептора" означает сродство к рецептору 5-HT3a и/или NK-1 (IC) менее, чем 100 частей на миллион, предпочтительно менее, чем 50 частей на миллион, и более предпочтительно, менее, чем 10 частей на миллион. Чтобы определить сродство к рецептору 5-HT3a и/или NK-1, могут легко применяться различные аналитические тесты на связывание с рецептором, хорошо известные в данной области.
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СОСТАВЫ НА ОСНОВЕ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ С ИНГИБИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ НА 5-HT3a РЕЦЕПТОР
Авторами настоящего изобретения было обнаружено, что следующие растительные материалы или их экстракты обладают неожиданно высоким ингибирующим действием на 5-HT3a рецептор при малой или отсутствующей клеточной токсичности:
- экстракт листьев Leptospermum Scoparium (лимонного чайного дерева);
- водорастворимая фракция масла Melaleuca alternifolia (чайного дерева);
- Rheum palmatum (ревень);
- экстракт Lavandula angustifolia (лавандового чайного дерева);
- экстракт Fusanus Spicatus (Австралийского сандалового дерева);
- масло Santalum Album (сандалового дерева);
- плод Evodia Rutaecarpa (эводии);
- ризома Coptis chinensis (коптис);
- масла из Wisteria sinensis;
- экстракт Myrtus Communis (мирта);
- кора Prunus serotina (дикой вишни);
- экстракт смолистой сердцевинной древесины Aquilaria sinensis (Китайского орлиного дерева);
- корень Zingiber officinale (имбиря);
- Calendula officinalis (ноготок);
- Boswellia serrata (босвеллия);
- масло из Boswellia carterii (ладанное масло);
- экстракт Zanthoxylum americanum (плода ксантоксилум);
- экстракт коры Pinus pinaster;
- Marrubium vulgare (шандра обыкновенная);
- плод Citrus aurantium (горького апельсина);
- Angelica archangelica (дягиль);
- масло Cocos nucifera (кокосового ореха);
- Rosa chinensis (Китайская роза);
- Cinnamomum aromaticum (корица);
- экстракт Vaccinium myrtillus (черники);
- экстракт листьев Vaccinium corymbosum (голубики);
- экстракт Daucus carota (моркови);
- экстракт Anthemis eecutita (ромашки);
- экстракт Curcuma longa (куркумы);
- экстракт Vaccinium macrocarpon (клюквы);
- порошок масла Linum usitatissimum (льна);
- экстракт семян Hovenia dulcis (конфетного дерева);
- экстракт Andrographis paniculata (травы Андрографис);
- экстракт пчелиной пыльцы;
- экстракт Eucalyptus radiata (Австралийского эвкалипта);
- экстракт Yerba santa;
- масло Piper nigrum (черного перца);
- экстракт Ginkgo biloba; и
- экстракт Capsicum annuum (кайенского перца).
Дополнительно, было обнаружено, что следующие комбинации растительных материалов или экстрактов действуют в синергизме в качестве ингибиторов 5-HT3a рецептора:
- Curcuma longa (куркума) и Glycyrrhiza glabra (лакрица);
- Куркума, лакрица и имбирь;
- Куркума и имбирь;
- Куркума и ревень; и
- Лакрица, имбирь и ревень.
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СОСТАВЫ НА ОСНОВЕ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ С ИНГИБИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ НА NK-1 РЕЦЕПТОР
Авторами настоящего изобретения было обнаружено, что следующие растительные материалы или их экстракты обладают неожиданно высоким ингибирующим действием на NK-1 рецептор при малой или отсутствующей клеточной токсичности:
- Podophyllum peltatum (подофиллин);
- Rhodiola rosea (родиола);
- Tanacetum parthenium (пиретрум девичий);
- Pinus massoniana (розовая кора);
- Boswellia serrata (босвеллия);
- экстракт Dracaena cinnabari (Драконовой крови)
- Tilia vulgaris (липа);
- Paullinia cupana (гуарана);
- Uncaria tomemtosa (кошачий коготь);
- Hypericum perforatum (Зверобой);
- Calendula officinalis (календула);
- экстракт Camellia sinensis (зеленого чая);
- экстракт Vitis vinifera (винограда);
- экстракт Cinnamomum aromaticum (корицы);
- экстракт Curcuma longa (куркумы);
- экстракт Fructus forsythiae (плода форзиции);
- экстракт Glycyrrhiza glabra (лакрицы);
- масло Litsea cubeba;
- масла Melaleuca alternifolia (чайного дерева); и
- экстракта Phyllanthus emblica (амлы).
Дополнительно, было обнаружено, что комбинация куркумы и лакрицы действует в синергизме в качестве ингибиторов NK-1 рецептора.
СПОСОБЫ ВВЕДЕНИЯ
Перечисленные выше растительные материалы или экстракты могут вводиться посредством любого хорошо известного метода доставки, который включает, но не ограничен перечисленным: пеоральную доставку, ингаляцию, ректальное введение или парентеральную доставку, такую как, например, местное применение, трансдермальное применение, внутривенную инъекцию, подкожную инъекцию, внутримышечную инъекцию и т.п. Такие растительные материалы или экстракты могут вводиться по отдельности или в комбинации с любыми приемлемыми носителями или разбавителями с образованием композиций, таких как сухая мука крупного помола, влажный консервный корм, соусы, лакомства, таблетки, капсулы, пастилки, лепешки, твердые леденцы, порошки, спреи, кремы, бальзамы, суппозитории, желе, гели, пасты, лосьоны, мази, водные суспензии, инъекционные растворы, эликсиры, сиропы и т.п.
В предпочтительном, но необязательном варианте осуществления настоящего изобретения, такие растительные материалы или экстракты перорально вводят домашнему животному, например, в виде части пищевой композиции для домашнего животного. Такая пищевая композиция может являться жидкостью, твердым веществом, или полутвердым веществом. Дополнительно, пищевая композиция может быть составлена либо как корм для домашних животных, который скармливают животному во время приема пищи, или как добавка к корму для домашних животных, которую скармливают животному либо раздельно от корма для домашних животных или в комбинации с кормом для домашних животных для животного.
В качестве корма для домашних животных, пищевая композиция может содержать полноценный в питательном отношении рацион для предназначенного реципиентного домашнего животного. Полноценный в питательном отношении рацион содержит известные требуемые питательные вещества для поддержания жизни домашнего животного, в необходимых количествах и пропорциях, основанных на рекомендациях широко известных органов, включающих правительственные учреждения, такие как Центр управления по контролю за продуктами питания и лекарствами США для ветеринарии, Объединенная коллегия по контролю продуктов питания США, за исключением воды.
Например, композиция корма для домашних животных настоящего изобретения может содержать по меньшей мере источник углеводов, источник белков и необязательно источник жиров. Более предпочтительно, композиция корма для домашних животных обеспечивает домашнее животное полноценным в питательном отношении и сбалансированным рационом, который может содержать: от приблизительно 1% до приблизительно 99%, предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 90% и более предпочтительно от приблизительно 5% до приблизительно 45% по массе, углеводов; от приблизительно 5% до приблизительно 99,9%, предпочтительно от приблизительно 10% до приблизительно 90% и более предпочтительно от приблизительно 20% до приблизительно 60% по массе, белка; от приблизительно 0,1% до приблизительно 50%, предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 40% и более предпочтительно от приблизительно 5% до приблизительно 20% по массе, жира; от приблизительно 0,01% до приблизительно 20%, предпочтительно от приблизительно 1% до приблизительно 11% по массе, пищевых волокон; от приблизительно 0,01% до приблизительно 15%, предпочтительно от приблизительно 0,1% до приблизительно 10% и более предпочтительно от 1% до 8% по массе, витаминов, минералов, антиоксидантов и других питательных веществ, поддерживающих потребности домашнего животного. Углеводы могут быть обеспечены зерновыми культурами, такими как рис, кукуруза, просо, сорго, ячмень, пшеница, овес и т.п. Белок может быть обеспечен либо источниками животного происхождения, такими как мясные продукты (говядина, свинина, мясо ягненка, мясо домашней птицы, рыба и т.п.), яйца и молоко, или источниками растительного происхождения, такими как соя, злаки, семя хлопчатника, арахис и т.п. Пищевые волокна могут быть обеспечены целлюлозой, гемицеллюлозой, пектином, лигнином и камедями. Дополнительно, композиция корма для домашних животных настоящего изобретения может содержать различные ингредиенты, обычно применяемые в кормах для домашних животных, такие как наполнители, ароматизаторы, связующие средства, загустители, стабилизаторы, эмульгаторы, подсластители, красители пищевого назначения, буферы, соли и т.п. В частности, предпочтительные связующими средствами и/или загустителями являются желатин, простые эфиры целлюлозы, крахмал, сложные эфиры крахмала, простые эфиры крахмала и модифицированные крахмалы.
Композиция корма для домашних животных может быть составлена в виде сухой муки крупного помола, влажного консервного корма, соусов или лакомств. Она может скармливаться домашнему животному на суточной основе, либо в регулярное время кормления (такое как, например, от одного до шести раз в день) или непрерывно на протяжении всего дня по необходимости (например, через автоматизированный питатель или просто посредством обеспечения избыточного количества). Композиция может скармливаться ad libitum (по потребности).
В некоторых вариантах осуществления, композиция корма для домашних животных представляет собой лакомство. Лакомства, как этот термин используется в данном документе, относятся к композициям корма для домашних животных, которые дают домашнему животному, чтобы привлечь животное к еде во время, не предназначенное для приема пищи. Лакомства также могут иметь питательную ценность и иметь подобный корму состав, включающий одно или более питательных веществ, как описано выше в данном документе, но сами по себе не являются полноценным рационом в питательном отношении.
Пищевая композиция настоящего изобретения может также быть обеспечена в виде добавки к корму для домашних животных, которую применяют с еще одним кормом, либо одновременно или раздельно, чтобы улучшить питательный баланс или показатели функционирования домашнего животного. Добавки к корму для домашних животных включают, но не ограничены перечисленным, любую композицию, которую скармливают неразбавленной в дополнение к другим кормам, таким образом, предлагая свободный выбор вместе с другими частями рациона животного, которые являются доступными раздельно, или их разбавляют и смешивают с регулярным кормом животного для получения полноценного корма. Ассоциация коллегий по контролю за качеством пищевых продуктов (AAFCO) предоставляет рекомендации, например, которые содержат обсуждение, относящееся к добавкам, которые могут находиться в различных формах, включающих порошки, жидкости, сиропы, пилюли, инкапсулированные композиции, и т.п. Дополнительно, добавка к корму для домашних животных может быть обеспечена в виде части игрушки для домашнего животного, с частично или полностью потребляемыми компонентами.
Пищевые композиции, описанные выше, могут быть легко образованы посредством смешивания одного или более перечисленных выше растительных материалов или экстрактов, способных к ингибированию 5-HT3a и/или NK-1 рецептора с одним или более раскрытых пищевых компонентов, пригодных для домашнего животного.
Чтобы определить эффективную дозировку, могут проводиться множественные полные перекрестные исследования с растительными материалами или экстрактами у домашнего животного, подлежащего лечению, при различных дозах. Оптимальную дозу выбирают на основе максимальной способности снижать или устранять идиопатическую рвоту у домашних животных, проявляющих заметные симптомы идиопатической рвоты. При введении домашнему животному в форме композиции корма для домашних животных, растительные материалы или экстракты, описанные выше в данном документе, предпочтительно вводят при дозировках в интервале от 0,1 частей на миллион (частей на миллион) до 75000 частей на миллион, предпочтительно от 1 частей на миллион до 1000 частей на миллион. При введении в форме добавки, растительные материалы или экстракты, описанные выше в данном документе, предпочтительно вводят при дозировках в интервале от 0,1% до 99%, предпочтительно от 0,5% до 15% по массе, добавки. Композиция предпочтительно является пищевой композицией, но может представлять собой любую другую композицию, которая включает, но не ограничена перечисленным: местные композиции, инъекционные композиции, назальные композиции, ректальные композиции и т.п.
Частота и продолжительность введения могут варьировать в зависимости от состояния животного, вида животного, подлежащего лечению, его индивидуальной реакции на лечение и типа выбранной фармацевтической готовой формы. Частота может находиться в интервале от одного раза в месяц до шести раз в день, предпочтительно от одного раза в неделю до четырех раз в день, и, более предпочтительно, от одного раза в день до трех раз в день. Продолжительность может находиться в интервале от пяти дней до полной длительности жизни животного, например, двадцати пяти лет. Предпочтительно, продолжительность находится в интервале от одной недели до пятнадцати лет, более предпочтительно от двух недель до одного года, и, наиболее предпочтительно, от одного месяца до шести месяцев.
Другие виды рвоты или срыгивания могут происходить одновременно с идиопатической рвотой. Композиции настоящего изобретения могут включать характеристики для снижения других причин рвоты. Например, пищевая композиция может включать крупные частицы корма относительно размера пасти субъектного животного, чтобы препятствовать быстрому поеданию, которое может вызвать срыгивание; или может включать ингредиенты для снижения появления комков шерсти, такие как протеазы, сложные жирнокислотные полиэфиры полиолов, слабительные средства и т.п.; или может включать ингредиенты для стимуляции здорового состояния желудочно-кишечного тракта, такие как пребиотики или пробиотики. Композиции настоящего изобретения могут включать медицинские лекарственные средства с противорвотной активностью.
НАБОР, СОДЕРЖАЩИЙ ПИЩЕВУЮ КОМПОЗИЦИЮ
Настоящее изобретение также охватывает предмет торговли, предпочтительно в форме набора, содержащего пищевую композицию, описанную выше в данном документе, вместе с инструкциями, которые обеспечивают информацию по тому, как перорально вводить или скармливать пищевую композицию домашнему животному. Конкретно, инструкции могут обеспечивать информацию по, например: оценке тяжести состояния идиопатической рвоты домашнего животного; частоте скармливания; продолжительности скармливания; типу скармливания; и регистрации состояния идиопатической рвоты у домашнего животного, чтобы определить, когда модифицировать частоту и/или продолжительность скармливания.
Любая стандартная упаковка, которая является пригодной для доставки и продажи пищевых композиций, раскрытых в данном документе, может применяться для формирования набора. Набор может также включать конкретные письменные утверждения благоприятных эффектов, относящихся к профилактике, снижению и устранению идиопатической рвоты или рвоты у домашних животных. Утверждения благоприятных эффектов могут также относиться к благоприятным воздействиям на здоровье, являющихся результатом профилактики или лечения идиопатической рвоты или рвоты, таким как увеличенные масса тела и уровень энергии, улучшенные иммунные функции и пролонгированная продолжительность жизни.
Настоящее изобретение иллюстрируется следующими примерами. Будет понятно, однако, что изобретение не ограничивается конкретными подробностями этих примеров.
ПРИМЕРЫ
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ СКРИНИНГА ИНГИБИТОРОВ 5-HT3a РЕЦЕПТОРА
Различные известные высокопроизводительные скрининговые аналитические тесты могут применяться для определения ингибирующих действий материала на 5-HT3a рецепторы.
3a
3a
2+
+
+2
+
Например, 5-HT3a рецептор представляет собой лиганд-управляемый, неселективный катионный канал, расположенный в центральной и периферической нервной системе. Активация 5-HT рецептора с последующей быстрой деполяризацией периферических или центральных нейронов вызывает быстрое возрастание цитозольной концентрации Ca и Na посредством индуцирования перемещения кальция и натрия и мобилизации запасов внутриклеточного кальция, а также модуляцию высвобождения нейротрансмиттеров и нейропептидов, таких как дофамин, холецистокинин, ацетилхолин, ГАМК, вещество P или сам серотонин. Вследствие активации 5HT3 рецептора после поступления кальция и натрия и последующего быстрого увеличения внутриклеточного кальция, индикатор кальция (например, Флуо-4 AM) или натриевый краситель может, следовательно, легко применяться для обнаружения поступления сигнала Ca или Na, с использованием анализа на Флуориметрическом Визуализирующем Считывающем устройстве для Планшетов (FLIPR) для идентификации агонистов или антагонистов 5-HT рецепторов.
2
2
2
2
3a
FLIPR анализ 5-HT3a может, конкретно, проводиться посредством следующих стадий. Сначала, клетки HEK-23 (человеческие эмбриональные клетки почек), стабильно экспрессирующие h5HT3A рецептор, выращивают в 16-18 мл среды для выращивания в колбе 75 см в течение 2-3 дней при 37°C в инкубаторе для культур клеток млекопитающих с 5% CО и 90% влажностью. Среда для выращивания может содержать, например, DMEM/F 12 (1:1, Invitrogen 11039), дополненную 10% FBS (фетальной бычьей сывороткой), 100 мкг/мл смеси Антибиотик/Антимикотик и 150 мкг/мл G418. Среду для клеток затем переносят в пробирку объемом 50 мл, и клетки промывают 10 мл PBS. Последовательно, 2 мл 0,05% Трипсин-ЭДТА добавляют для разъединения клеток, и указанную выше среду для клеток добавляют обратно в колбу, чтобы инактивировать трипсин. Далее клетки переносят обратно в указанную выше пробирку объемом 50 мл, которую центрифугируют при 850 об./мин. в течение 3 минут для удаления среды. Клетки, полученные в результате центрифугирования, затем ресуспендируют со средой для выращивания при 1-1,5 мл на колбу с клетками. Один пузырек Флуо-4 AM (индикатора кальция, 50 мкг) последовательно растворяют вместе с 20 мкл Плуроник F-127, и добавляют 10 мкл раствора Флуо-4 AM на колбу с клетками (1 пузырек раствора Флуо-4 AM, 20 мкл, хорошо подходит для 2 колб с клетками). Клетки затем окрашивают Флуо-4 AM в течение 30 мин при комнатной температуре при осторожном встряхивании на качалке, с последующим добавлением 45 мл аналитического буфера [HBSS с CaCl и MgCl (Invitrogen 14025), 20 мМ HEPES, pH 7,2] для однократного промывания клеток. Центрифугирование проводят еще один раз при 850 об./мин. в течение 3 минут для удаления аналитического буфера. Полученный в результате сгусток клеток снова ресуспендируют в аналитическом буфере (18-20 мл аналитического буфера на колбу с клетками). Девяносто микролитров клеток (50K клеток/лунку) загружают в 96-луночные планшеты, которые предварительно загружены растительными материалами или экстрактами, подлежащими тестированию (10 мкл 1 мМ тестируемых материалов, конечная концентрация тестируемых материалов будет равна 100 мкМ). Планшеты помещают в темноту при комнатной температуре в течение 15-30 мин и затем переносят в прибор FLIPR-384 (Molecular Devices). Размещают эталонный планшет, содержащий 6× агониста (60 мкМ серотонина), и все тестируемые планшеты считывают после добавления агониста. Кальциевый сигнал тестируемых планшетов окончательно регистрируется программой FLIPR. Среднее значение и стандартные отклонения рассчитывают, используя Excel, и фоновое значения (буфер) вычитают. Процент (%) ингибирования затем рассчитывают как (1—Тестируемый материал/Контроль агониста)×100. Тестируемый материал будет считаться обладающим ингибирующим действием против 5-HT рецептора, если процентная доля ингибирования составляет выше 40%.
3a
Альтернативно, аналитический тест серотонинового рецептора на клеточной основе может применяться для скрининга ингибиторов 5-HT3a рецептора. Используя агонист серотонин и клетки, совместно трансфицируемые для сверхэкспрессии 5-HT3a рецептора, и люминесцентный репортер экворин, чувствительный к кальцию, этот аналитический тест может проводиться для идентификации подходящих новых активных субстанций, нацеленных на 5-HT рецептор с высокой чувствительностью, масштабируемостью и специфичностью.
2
+2
Экворин представляет собой фотобелок, источником которого является медуза Aequorea Victoria. Он первоначально транслируется как апофермент, для которого необходима гидрофобная группа коэлентеразина, чтобы инициировать превращение в экворин. При связывании кальция, коэлентеразин окисляется экворином в коэлентерамид (BFP), что приводит к испусканию синего света и CО. Следовательно, он, в частности, является применимым для визуализации или обнаружения сигнала поступления Ca.
6
5
2
Аналитический тест серотонинового рецептора с помощью экворина может выполняться со следующими стадиями. Крио-консервированные Человеческие Клетки (родительская линия HEK293), соэкспрессирующие Серотониновый 5HT3a рецептор, и Эквориновый сенсор кальция, γ-облученный (Perkin Elmer, Кат. №. ES-402-AF) оттаивают и культивируют 18-24 часов в DMEM/F12 с буфером Hepes, без фенольного красного + 10% FBS без антибиотиков (Invitrogen, Кат. № 11039-021). Через 18-24 ч культивирования, клетки осторожно разъединяют промывкой струей их среды клеточной культуры. Промывка дополнительными 10 мл среды для клеточной культуры будет гарантировать, что захвачено оптимальное число клеток. Клетки затем центрифугируют при 150× г, подсчитывают и ресуспендируют при 1×10 клеток/мл в среде BSA [DMEM/Ham F12 (с 15 мМ HEPES, L-глутамином, без фенольного красного) для культиврования (Invitrogen, Кат. № 11039-021) + 10% беспротеазной BSA (Sigma Aldrich, Кат. № A9205) в HO при конечной концентрации BSA 0,1%] в пробирке Falcon. Коэлентеразин добавляют до конечной концентрации 5 мкМ в аналитической среде. Поскольку исходный раствор коэлентеразина находится в метаноле, его хорошо смешивают во время добавления раствора коэлентеразина к клеточной суспензии, чтобы избежать повреждения клеток. Пробирку Falcon затем завертывают в алюминиевую фольгу и помещают на вращающееся колесо (угол около 45° и 7 об./мин). Клетки последовательно инкубируют от 4 часов до 18 часов при ~20°C (температура должна оставаться ниже 25°C). В день анализа, клетки разбавляют в среде BSA до конечной концентрации 2,0×10 клеток/мл. Клетки снова инкубируют в течение по меньшей мере 1 ч при комнатной температуре. Затем готовят планшеты для скрининга. Антагонисты разбавляют в среде BSA, указанной выше при 2× концентрации, и распределяют по 50 мл на лунку.
5
4
Пятьдесят микролитров клеточной суспензии (2,0×10/мл до конечной концентрации 1,0×10/лунку) добавляют в лунки с антагонистами и затем инкубируют в течение 15 минут в темноте при комнатной температуре. К назначенному времени готовят только один планшет. Пятьдесят микролитров серотонина (3×EC80 (EC обозначает Эффективную Концентрацию) при концентрации (30 мкМ), чтобы получить конечную концентрацию 1×EC80 (10 мкМ)) инжектируют, используя инжекторы считывающих устройств для планшетов, в смесь клеток и антагониста, и испускаемый свет регистрируют в течение 10 с. Проводят построение 8-точечной кривой дозовой зависимости, используя агонист серотонин, чтобы определить EC50 для данной системы. Дозы находились в интервале от 3,9E-7 до 5E-5 [M]. Было определено, что полученная в результате EC50 составляет 1,925E-6 ± 3,715E-6 [M].
ФИГУРЫ 1-39 показывают для 5-HT3a кривые зависимости «доза-эффект» растительных материалов и экстрактов, описанных здесь выше, с высоким ингибирующим действием на 5-HT3a. Конкретно, ФИГ. 1 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта листьев лимонного чайного дерева. ФИГ. 2 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» водорастворимой фракции масла чайного дерева. ФИГ. 3 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» ревеня. ФИГ. 4 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта лавандового чайного дерева. ФИГ. 5 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта Австралийского сандалового дерева. ФИГ. 6 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» масла сандалового дерева. ФИГ. 7 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» плода эводии. ФИГ. 8 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» ризома коптис. ФИГ. 9 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» масел из Wisteria sinensis. ФИГ. 10 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта мирта. ФИГ. 11 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» коры дикой вишни. ФИГ. 12 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта смолистой сердцевинной древесины Китайского орлиного дерева. ФИГ. 13 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» корня имбиря. ФИГ. 14 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» ноготка. ФИГ. 15 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» босвеллии. ФИГ. 16 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» ладанного масла. ФИГ. 17 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» плода ксантоксилум. ФИГ. 18 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта коры Pinus pinaster. ФИГ. 19 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» шандры обыкновенной. ФИГ. 20 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» плода горького апельсина. ФИГ. 21 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» дягиля. ФИГ. 22 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» масла кокосового ореха. ФИГ. 23 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» Китайской розы. ФИГ. 24 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» корицы. ФИГ. 25 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» черники. ФИГ. 26 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» листьев голубики. ФИГ. 27 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта моркови. ФИГ. 28 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» ромашки. ФИГ. 29 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» куркумы. ФИГ. 30 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» клюквы. ФИГ. 31 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» порошка масла льна. ФИГ. 32 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта семян Конфетного дерева. ФИГ. 33 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» травы Андрографис. ФИГ. 34 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» пчелиной пыльцы. ФИГ. 35 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» экстракта Австралийского эвкалипта. ФИГ. 36 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» Yerba santa. ФИГ. 37 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» масла черного перца. ФИГ. 38 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» гингко билоба. ФИГ. 39 показывает для 5-HT3a кривую зависимости «доза-эффект» кайенского перца.
Дополнительно, ФИГУРЫ 40-44 являются графиками, показывающими синергическое ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством некоторых комбинаций растительных материалов или экстрактов, как описано выше в данном документе. Конкретно, ФИГ. 40 показывает комбинированное ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством комбинации куркумы (T) и лакрицы (L), которое превышает сумму ингибирующих действий 5-HT3a, достигаемых раздельно посредством куркумы и лакрицы. ФИГ. 41 показывает комбинированное ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством комбинации куркумы (T), лакрицы (L) и имбиря (G), которое превышает сумму ингибирующих действий на 5-HT3a, достигаемых раздельно посредством куркумы, лакрицы и имбиря. ФИГ. 42 показывает комбинированное ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством комбинации куркумы (T) и имбиря (G), которое превышает сумму ингибирующих действий на 5-HT3a, достигаемых раздельно посредством куркумы и имбиря. ФИГ. 43 показывает комбинированное ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством комбинации куркумы (T) и ревеня (R), которое превышает сумму ингибирующих действий на 5-HT3a, достигаемых раздельно посредством куркумы и ревеня. ФИГ. 44 показывает комбинированное ингибирующее действие на 5-HT3a, достигаемое посредством комбинации лакрицы (L), имбиря (G) и ревеня (R), которое превышает сумму ингибирующих действий на 5-HT3a, достигаемых раздельно посредством лакрицы, имбиря и ревеня.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ СКРИНИНГА ИНГИБИТОРОВ РЕЦЕПТОРА NK-1
Различные известные высокопроизводительные аналитические тесты для скрининга также могут применяться для определения ингибирующих действий материалов на рецепторы NK-1.
2
2
Одним иллюстративным аналитическим тестом являются Tango™ аналитические тесты на клеточной основе на рецепторы, сочетанные с G-Белком (GPCR) от Invitrogen. Сначала, клетки TACRl-W U20S (от Invitrogen) культивируют в среде МакКоя. Культивированные в DMEM клетки затем помещают в 96-луночные планшеты (15125 клеток/лунку в 90 мкл/лунку). Через 16-24 часов, клетки обрабатывают тестируемыми материалами или антагонистом положительного контроля (который представляет собой 100 нM Апрепитант) и затем инкубируют в течение 30-60 минут при 37°C в 5% CO. Последовательно, клетки обрабатывают 1 нМ агониста Вещества P SAR9 и повторно инкубируют в течение 5 часов при 37°C в 5% CO. Планшеты удаляют из инкубатора и уравновешивают при комнатной температуре в течение 15 минут. Во время стадии уравновешивания, готовят раствор субстрата LiveBlazer для обнаружения (от Invitrogen). Шестикратное количество смеси субстрата добавляют в каждую лунку с последующей инкубацией планшетов в темноте при комнатной температуре в течение 2 часов. Планшеты считывают на считывающем устройстве Envision для микропланшетов по двум каналам, с использованием протокола "Geneblazer 451", которые включают синий канал (Возбуждение при 405 и Испускание при 460) и зеленый канал (Возбуждение при 405 и Испускание при 535).
ФИГУРЫ 45-64 показывают для NK-1 кривые зависимости «доза-эффект» растительных материалов и экстрактов, описанных здесь выше, с высоким ингибирующим действием на NK-1. Конкретно, ФИГ. 45 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» подофиллина. ФИГ. 46 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» родиолы. ФИГ. 47 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» пиретрума девичьего. ФИГ. 48 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» розовой коры. ФИГ. 49 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» босвеллии. ФИГ. 50 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» драконовой крови. ФИГ. 51 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» липы. ФИГ. 52 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» гуараны. ФИГ. 53 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» кошачьего когтя. ФИГ. 54 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» зверобоя. ФИГ. 55 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» календулы. ФИГ. 56 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» зеленого чая. ФИГ. 57 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» экстракта винограда. ФИГ. 58 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» корицы. ФИГ. 59 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» куркумы. ФИГ. 60 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» плода форзиции. ФИГ. 61 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» лакрицы. ФИГ. 62 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» масла Litsea cubeba. ФИГ. 63 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» масла чайного дерева. ФИГ. 64 показывает для NK-1 кривую зависимости «доза-эффект» амлы.
Дополнительно, ФИГ. 65 показывает синергическое ингибирующее действие на NK-1, достигаемое посредством некоторых комбинаций растительных материалов или экстрактов, как описано выше в данном документе. Конкретно, ФИГ. 65 показывает комбинированное ингибирующее действие на NK-1, достигаемое посредством комбинации куркумы (T) и лакрицы (L), которое является более сильным, чем сумма ингибирующих действий на NK-1, достигаемых раздельно посредством куркумы и лакрицы.
Каждый документ, цитируемый в данном описании, включая любые, указанные в перекрестной ссылке или родственные патент или заявку, таким образом, является полностью включенным в данное описание посредством ссылки, если в явно выраженной форме не исключен или иным образом ограничен. Цитирование какого-либо документа не является допущением, что он представляет собой предшествующий уровень техники по отношению к любому изобретению, раскрытому или заявленному в данном описании, или, что он по отдельности, или в какой-либо комбинации с любой другой ссылкой или ссылками, излагает, предполагает или раскрывает любое такое изобретение. Дополнительно, в случаях, когда любое значение или определение термина в этом документе вступает в противоречие с любым значением или определением такого же термина в документе, включенном посредством ссылки, значение или определение, закрепленные за таким термином в этом документе, будет приоритетным.
В то время как конкретные варианты осуществления настоящего изобретения были иллюстрированы и описаны, для квалифицированных специалистов в данной области было бы очевидным, что различные другие изменения и модификации могут быть сделаны без отступления от сущности и объёма изобретения. Следовательно, прилагаемая формула изобретения предназначена для охвата всех таких изменений и модификаций, которые включены в объем данного изобретения.