Влияние глипролина (Pgp) и его аргинисодержащего аналога (RGP) на процессы язвообразования в слизистой оболочке желудка белых мышей на модели НПВП-гастропатии

8. Обут Т. А. Дегидроэпиандростерон, сетчатая зона коры надпочечников и устойчивость к стрессовым воздействиям и патология // Вестн. РАМН. - 1998. -№ 10. - С. 18-22.

9. Розен В. Б. Основы эндокринологии. - М.: Изд-во Московского ун-та. - 1994. - 383 с.

10. Рыжавский Б.Я. Развитие головного мозга: отдаленные последствия влияния некомфортных условий. -Изд. 3-е. - Хабаровск: Изд-во ДВГМУ, 2009. - 278 с.

11. Рыжавский Б.Я. Головной мозг при эксперимен-

тальной акселерации (морфологические аспекты). -Хабаровск: Изд-во ДВГМУ, 2015. - 116 с.

12. Сауткин М.Ф., Стунева Г.И. Материалы многолетних исследований физического развития школьников // Здравоохранение Рос. Фед. - 2005. - № 1. -С. 55-57.

13. Ткач О.В., Рыжавский Б.Я. Изменения активности некоторых ферментов в клетках мозга крыс при акселерации // Дальневосточный медицинский журнал. - 2014. - № 3. - С. 86-89.

Literature

1. Velichkovsky B.T., Baranov A.A., Kuchma VR. Growth and development of children and adolescents in Russia // Herald of the RAMS. - 2004. - № 1. - P. 43-45.

2. Goncharov N.D., Lapin B.A. Adrenal androgens: age peculiarities of synthesis and regulation of production in a man and monkeys // Herald of the RAMS. - 2005. -№ 8. - P. 44-50.

3. Godina E.Z. Secular trend: history and perspectives // Human Physiology. - 2009. - Vol. 35, № 6. - P. 128-135.

4. Kirillov O.I. Stress-induced adrenal hypertrophy. -M.: Nauka, 1994. - 176 p.

5. Kozlov VK. The health of children and adolescents in the Far East. - Novosibirsk, 2003. - 288 p.

6. Krasilnikov V.A., Buduk-ool L.K., Aizman R.I. Morphofuctional development of Tuvinian and Russian pupils // Human Physiology. - 2008. - Vol. 34, № 1. -P. 74-81.

7. Loida Z., Gossrau R., Shibler T. Histochemistry of enzymes (laboratory methods) - M.: Mir, 1980. - 270 p.

8. Obut T.A. Dehydroepiandrosteron, adrenocortical reticular zone and resistance to the effect of stress, pathology // Herald of the RAMS - 1998. - № 10. -P. 18-22.

9. Rozen VB. Basics of Endocrinology. - M.: Moscow University Publishing House, 1994. - 383 p.

10. Ryzhavsky B.Ya. Brain development: remote consequences of uncomfortable conditions. 3-rd edition. -Khabarovsk: FESMU Publishing House, 2009. - 278 p.

11. Ryzhavsky B.Ya. Brain during experimental acceleration (morphological aspects). - Khabarovsk: FESMU Publishing House, 2015. - 116 p.

12. Sautkin M.F., Stuneva G.I. Study records of long-term research of pupils' physical growth and development // Russian Federation Healthcare - 2005. -№ 1. - P. 55-57.

13. Tkach O.V, Ryzhavsky B.Ya. Some enzymes activity changes in rats' brains during acceleration // Far Eastern Medical Journal. - 2014. - № 3. - P. 86-89.

Координаты для связи с авторами: Рыжавский Борис Яковлевич - д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой биологии и гистологии ДВГМУ, тел. 8-(4212)-76-13-96, е-таП: nauka@mail.fesmu.ru; Литвинцева Екатерина Марковна - канд. биол. наук, доцент кафедры химии ДВГМУ, тел. 8-(4212)-76-13-96, е-таП: nauka@mail.fesmu.ru; Лазинская Ольга Владимировна - аспирант кафедры биологии и гистологии ДВГМУ, тел. 8-(4212)-76-13-96, е^П: nauka@mail.fesmu.ru.

УДК 612.015.1:577.15.07:599.323.4 И.В. Толстенок, В.В. Брашна, М.Ю. Флейшман

ВЛИЯНИЕ ГЛИПРОЛИНА (PGP) И ЕГО АРГИНИСОДЕРЖАЩЕГО АНАЛОГА (RGP) НА ПРОЦЕССЫ ЯЗВООБРАЗОВАНИЯ В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДКА БЕЛЫХ МЫШЕЙ НА МОДЕЛИ НПВП-ГАСТРОПАТИИ

Дальневосточный государственный медицинский университет, 680000, ул. Муравьева-Амурского, 35, тел. 8-(4212)-32-99-64, e-mail: marfl@yandex.ru, г. Хабаровск

Резюме

Изучали протективные свойства PGP и RGP на модели индометацин-индуцируемого язвообразования. Оценивали площадь язвенно-эрозивных поражений СОЖ белых мышей на модели НПВП-гастропатии. Наблюдали формирование язвенно-эрозивных повреждений СОЖ после зондового введения индометацина. Площадь повреждения уменьшалась после пятикратного применения PGP и не изменялась после введения RGP. PGP, в отличие от RGP, обладает гастропротективными свойствами на модели НПВП-гастропатии.

Ключевые слова: НПВП-гастропатия, язвы, глипролины.

I.V. Tolstenok, V.V. Bragina, M.Yu. Fleishman

INFLUENCE OF GLYPROLINES ON THE ULCER DISEASE IN THE MUCOUS MEMBRANE OF THE STOMACH OF WHITE MOUSE ON THE NPVP-GASTROPATHY MODEL

Far Eastern State Medical University, Khabarovsk Summary

Protective properties of PGP and RGP on model of indomethacin-induced ulceration were studied. Area of ulceration in stomach of white mice was measured after modeling of NSAID-gastropathy. The ulcers were formed after enteral administration of indomethacin. The area of damage was reduced after the five-time use of PGP, and did not change after the introduction of the RGP.

Unlike RPG, PGP has gastroprotective properties model of NSAID gastropathy.

Key words: NSAID-gastropathy, ulcer, glyprolines.

Нестероидные противовоспалительные препараты занимают ведущее место в фармакотерапии различных заболеваний [13]. Длительный прием НПВП, являющихся препаратами выбора при ревматизме и некоторых других заболеваниях, повышает риск возникновения нежелательных побочных эффектов (риск язвообразования) в 3-10 раз [11], а хронический прием НПВП провоцирует возникновение язв в 15-30 % случаев [12]. В терапии язвенной болезни желудочно-кишечного тракта применяется регуляторный пептид (РП) семейства опиоидов - даларгин, являющийся официнальным препаратом. Перспективным также считается РП семейства глипролинов - PGP. Глипро-

Материалы

Эксперимент проведен на 48 белых мышах-самцах (масса 23-28 г). Исследования соответствовали принципам Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации и приказа Минздравсоцразвития РФ от 23.08.2010 № 708н «Об утверждении Правил лабораторной практики». Глипролины пролил-гли-цил-пролин (PGP) и аргинил-глицил-пролин (RGP) вводили животным внутрибрюшинно в дозе 1 мг/кг однократно в течение 5 суток. На 5-е сутки животные, кроме инъекции, интрагастрально получали индомета-цин (зондовое введение) в дозе 250 мг/кг Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество 0,9 % раствора хлорида натрия. Животные выводились из эксперимента путем декапитации на 7-е сутки,

Результаты и

Введение животным индометацина привело к формированию язвенно-эрозивных повреждений (таблица). Инъекции PGP и RGP вызывали единичные изъязвления слизистой оболочки желудка (СОЖ), составляющие для глипролинов PGP и RGP - 0,42±0,06 и 0,46±0,14 мм2 соответственно (таблица). На модели экспериментальной НПВП-гастропатии, в группе «PGP + индометацин» отмечали достоверное снижение язвенно-эрозивных повреждений СОЖ. В группе «RGP + индометацин» не отмечали коррекции площади язвенно-эрозивных повреждений СОЖ по сравнению с группой «индометацин» (таблица).

лины, как класс регуляторных пептидов был выделен и классифицирован И.П. Ашмариным [1]. Олигопеп-тиды глипролинового ряда имеют широкий спектр биологической активности, в том числе, противоязвенные эффекты на различных моделях (введение нестероидных противовоспалительных препаратов, этанола; стресс) [2, 6, 7, 9]. Нами была выбрана модель НПВП-гастропатии. Среди всех вышеприведенных способов моделирования язв, НПВП-гастропатию отличает то, что подобный процесс может развиваться на фоне длительного приема НПВП, и, порой с фатальным исходом [8].

и методы

предварительно мыши оглушались скользящим движением инструмента по затылочной части черепа. Извлеченный желудок разрезали по большой кривизне, расправляли на предметном стекле. Фотографировали зону поражения слизистой оболочки с помощью лупы х6. Полученные изображения СОЖ загружались в систему «МЕКОС-Ц», измеряли площадь поражения с применением оригинального программного обеспечения. Статистическую обработку результатов проводили с помощью t-критерия Стьюдента, различия считали достоверными при p<0,05. Предварительно малые выборки проверялись на нормальность распределения по асимметрии и эксцессу. Использовали программное обеспечение Statistica 6.0 и Microsoft Office Excel.

обсуждение

Таблица

Влияние пептидов PGP и RGP на площадь язвенно-эрозивных повреждений в слизистой оболочке желудка белых мышей, получавших индометацин

Экспериментальная группа Площадь язв, мм2

Контроль, n=8 -

PGP, n=8 0,42±0,06*

RGP, n=9 0,46±0,14*

Индометацин, n=7 3,23±0,24

PGP + индометацин, n=8 0,37±0,01*

RGP + индометацин, n=8 3,42±0,70

Примечание. * - p<0,05 по сравнению с группой «Индометацин».

В исследовании на крысах [5] глипролин RGP демонстрировал защитные эффекты на модели эта-нолового язвообразования в дозе 1 мг/кг. По результатам настоящего исследования, площадь язвенно-эрозивных дефектов в СОЖ у мышей, получавших индометацин на фоне пятикратного введения гли-пролина PGP, уменьшалась в 8,7 раза по сравнению с группой мышей, получавших только индометацин. Глипролин RGP на модели НПВП-гастропатии не влиял на площадь язв в СОЖ белых мышей. Можно предположить, что, как и в наших предыдущих

исследованиях [10], отсутствие профилактики язвенных поражений глипролином RGP опосредуется инверсией эффектов системы NOS-NO [4]. В зависимости от концентрации и редокс-фона окись азота способна запускать каскады реакций, направленных на пролиферацию, либо на апоптоз [14]. В проведенных ранее в ЦНИЛ исследованиях аргинин-содержа-щий пептид даларгин (Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg), введенный в дозе в 10 раз меньше (100 мкг/кг), проявлял защитное действие в СОЖ экспериментальных животных [3].

Выводы

1. PGP, в отличие от RGP, обладает гастропротек- RGP на СОЖ может быть обусловлено высокой дозой тивными свойствами на модели НПВП-гастропатии. пептида (1 мг/кг).

2. Отсутствие защитного действия глипролина

Литература

1. Ашмарин И.П. Каменский А.А., Ляпина Л.А. и др. Глипролины как самостоятельные регуляторы и стабилизаторы других пептидов // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. -2002. - № 1. - С. 24.

2. Бакаева З.В., Бадмаева К.Е., Желязник Н.Я. и др. Протекторный эффект внутрибрюшинного и вну-трижелудочного введения PGP на этаноловое эро-зирование и ацетатное язвообразование у крыс // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2004. - № 4. - С. 82-84.

3. Животова Е.Ю., Лебедько О.А., Флейшман М.Ю. и др. Участие регуляторных пептидов в регуляции тканевого гомеостаза слизистой оболочки желудка // Дальневосточный медицинский журнал. - 2013. -№ 1. - С. 101-105.

4. Животова Е.Ю., Масленникова Н.В., Флейш-ман М.Ю. и др. Система NOS-NO - универсальное звено в реализации гастропротективных эффектов опиоидных пептидов // Дальневосточный медицинский журнал. - 2011. - № 4. - С. 83-86.

5. Мерчиева С.А. Влияние коротких глипролинов с присоединенными к N- или C-концам аминокислотными остатками аргинина или лейцина на устойчивость слизистой оболочки желудка к действию стресса // Материалы Международного молодежного научного форума «Л0М0Н0С0В-2010» / Отв. ред. И.А. Алеш-ковский, П.Н. Костылев, А.И. Андреев, А.В. Андрия-нов [Электронный ресурс] - М.: МАКС Пресс, 2010. -С. 279-280. - Режим доступа: http://lomonosov-msu.ru/ archive/Lomonosov_2010/02.pdf.

6. Самонина Г.Е., Копылова Г.Н., Умарова Б.А. и др. Некоторые механизмы противоязвенных эффектов гли-пролинов // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2011. - Т. 9, № 4. - С. 58-64.

7. Сангаджиева А.Д., Бакаева З.В., Самонина Г.Е. и др. Изменение цитокинового профиля крыс при протекторных противоязвенных эффектах глипролинов.

Влияние глипролинов (PGP и N-Acetyl-PGP) на экспрессию генов цитокинов при этаноловом повреждении желудка // Вестник Московского университета. Серия 16: Биология. - 2013. - № 2. - С. 7-11.

8. Трухан Д.И. Выбор нестероидного противовоспалительного препарата с позиций профилактики НПВП-гастропатии и лекарственной безопасности // Consilium Medicum. - 2014. - Т. 16, № 8. - С. 34-39.

9. Фалалеева Т.М., Самонина Г.Е., Береговая Т.В. и др. Влияние глипролинов PGP, GP, PG на гомеостаз слизистой оболочки желудка при этаноловой модели язвообразования у крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2010. - Т. 149, № 6. -С. 637-639.

10. Флейшман М.Ю., Толстенок И.В., Лебедько О.А. и др. Влияние глипролинов на синтез ДНК и свободнорадикальное окисление в слизистой оболочке желудка мышей в физиологических условиях и при приеме нестероидных противовоспалительных препаратов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2015. - Т. 159, № 4. - С. 500-503.

11. Хотимченко М.Ю., Разина Т.Г., Шилова Н.В. и др. Профилактический эффект альгината кальция при повреждении слизистой оболочки желудка, вызванном индометацином, у крыс // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2007. - № 4. - С. 42-44.

12. Laine L., Kivitz A.J., Bello A.E. Double-blind randomized trials of single-tablet ibuprofen/high-dose famotidine vs. ibuprofen alone for reduction of gastric and duodenal ulcers // American Journal of Gastroenterol-ogy. - 2012. - Vol. 107, № 3. - P. 379-386.

13. Svintsitskyi A. NSAID-gastropathy: current state of the problem // Крымский терапевтический журнал. -2010. - Т. 2, № 2 (15). - С. 280-286.

14. Thomas D.D., Ridnour L.A., Isenberg J.S., et al. The chemical biology of nitric oxide: implications in cellular signaling // Free Radical Biology and Medicine. -2008. - Vol. 45, № 1. - P. 18-31.

Literature

1. Ashmarin I.P., Kamensky A.A., Lyapina L.A., et al. Glyprolines as independent regulators and stabilizers of other peptides // Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry. - 2002. - № 1. -P. 24.

2. Bakayeva Z.V., Badmayeva K.E., Zhelyaznik NYa., et al. Protecting effect of intra-peritoneal and intragastric injection of PGP on ethanol erosion and acetate ulceration in rats // Experimental and Clinical Gastroenterology. -2004. - № 4. - P. 82-84.

3. Zhivotova E.Yu., Lebedko O.A., Fleishman M.Yu., et. al. Regulatory peptides participation in regulation of gastric mucous tissue homeostasis // Far Eastern Medical Journal. - 2013. - № 1. - P. 101-105.

4. Zhivotova E.Yu., Maslennikova N.V, Fleishman M. Yu., et. al. NOS-NO system as a universal link providing gastroprotective effects of opioid peptides // Far Eastern Medical Journal. - 2011. - № 4. - P. 83-86.

5. Merchiyeva S.A. The effect of short glyprolines with N- or C- end attached aminoacid residues of argi-nine or leucine on the resistance of gastric mucosa to the effect of stress // Proceedings of the «Lomonosov-2010» International Youth Forum / managing editors: Alesh-kovsky I.A., Kostylev P.N., Andreyev A.I., Andriya-nov A.V [URL] - M.: MAX Press, 2010. - P. 279280. - Access mode: http://lomonosov-msu.ru/archive/ Lomonosov_2010/02.pdf.

6. Samonina G.E., Kopylova G.N., Umarova B.A., et al. Some mechanisms of antiulcerative effects of glypro-lines // Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry. - 2011. - Vol. 9, № 4. - P. 58-64.

7. Sangadzhieva A.D., Bakayeva Z.V, Samonina G.E., et al. The change of cytokine profile of rats in protective antiulcerative effects of glyprolines. Impact of glyprolines (PGP u N-Acetyl-PGP) on cytokines gene expression in ethanol-induced erosion of the stomach // Moscow University Biological Sciences Bulletin. - Series 16. - 2013. -№ 2. - P. 7-11.

8. Trukhan D.I. The choice of a non-steroidal antiinflammatory drug from the perspective of prevention

NSAID-gastropathy and drug safety // Consilium Medi-cum. - 2014. - Vol. 16, № 8. - P. 34-39.

9. Falaleyeva T.M., Samonina G.E., Beregovaya T.V, et al. The effect of PGP, GP, PG glyprolines on homeosta-sis of gastric mucosa in rats with ethanol-induced gastric ulcers // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. -2010. - Vol. 149, № 6. - P. 637-639.

10. Fleishman M.Yu., Tolstenok I.V, Lebedko O.A., et al. Effects of glyprolines on DNA synthesis and free radical oxidation in mouse gastric mucosa under physiological conditions and during therapy with non-steroidal anti-inflammatory drugs // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2015. - Vol. 159, № 4. - P. 500-503.

11. Khotimchenko M.Yu., Razina T.G., Shilova N.V., et al. Prophylactic effect of calcium alginate in case of indomethacin-induced injuries of rats' stomach mucous membrane // Pacific Medical Journal - 2007. - № 4. -P. 42-44.

12. Laine L., Kivitz A.J., Bello A.E. Double-blind randomized trials of single-tablet ibuprofen/high-dose fa-motidine vs. ibuprofen alone for reduction of gastric and duodenal ulcers // American Journal of Gastroenterol-ogy. - 2012. - Vol. 107, № 3. - P. 379-386.

13. Svintsitskyi A. NSAID-gastropathy: current state of the problem // Crimean therapeutic journal. - 2010. -Vol. 2, № 2 (15). - P. 280-286.

14. Thomas D.D., Ridnour L.A., Isenberg J.S., et al. The chemical biology of nitric oxide: implications in cellular signaling // Free Radical Biology and Medicine. -2008. - Vol. 45, № 1. - P. 18-31.

Координаты для связи с авторами: Толстенок Иван Владимирович - соискатель ЦНИЛ ДВГМУ, тел. 8-(4212)-32-99-64, e-mail: toiv@bk.ru; Брагина Валентина Владимировна - научный сотрудник ЦНИЛ ДВГМУ, тел. 8-(4212)-32-99-64, e-mail: valent.bragina@ya.ru; Флейшман Марина Юрьевна - д-р мед. наук,

доцент, зав. ЦНИЛ ДВГМУ, тел. 8-(4212)-32-99-64, e-mail: marfl@yandex.ru.

УДК 615.22:616-007.274-085:611.018.2 С.В. Скальский, Т.Ф. Соколова

ВЛИЯНИЕ БЛОКАТОРОВ МЕДЛЕННЫХ КАЛЬЦИЕВЫХ КАНАЛОВ ВЕРАПАМИЛА И ДИЛТЕАЗЕМА НА ИНТЕНСИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ И АПОПТОЗА ФИБРОБЛАСТОВ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРПЛАЗИИ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ ПРИ СПАЙКООБРАЗОВАНИИ

Омский государственный медицинский университет, 644099, ул. Ленина, 12, e-mail: pharm@omsk-osma.ru, г. Омск

Резюме

Изучено влияние блокаторов медленных кальциевых каналов верапамила и дилтиазема на интенсивность процессов пролиферации и апоптоза фибробластов в условиях гиперплазии соединительной ткани при спайкообразо-вании. Исследования проведены в первичной культуре перитонеальных фибробластов крыс с гемоперитонеумом. Установлено, что при индукции спаечного процесса в брюшной полости крыс происходит усиление процессов пролиферации фибробластов, сопровождающееся активацией фактора транскрипции NF-kB, приводящей к блоки-