Взаимосвязь полиморфного аллельного варианта rs619203 гена-рецептора тирозинкиназы ( ROS1) с сердечно-сосудистыми заболеваниями у пациентов с ишемическим инсультом

Взаимосвязь полиморфного аллельного варианта rs619203 гена-рецептора тирозинкиназы (ROS1) с сердечнососудистыми заболеваниями у пациентов с ишемическим инсультом

Д.А.Никулин, В.А.Шульман, С.В.Прокопенко, С.Ю.Никулина, А.А.Чернован, И.М.Платунова, В.Н.Чернов

ГБОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого Минздрава России. 660022, Россия, Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1

Проведено изучение взаимосвязи полиморфного аллельного варианта rs6l9203 гена ROS1 с сердечно-сосудистыми заболеваниями у лиц с ишемическим инсультом (ИИ). С целью изучения роли однонуклеотидного полиморфизма (ОНП) rs6l9203 гена ROS1 в развитии инсультов прогенотипированы 124 пациента с ИИ с сердечно-сосудистой патологией и 475 человек группы контроля. Лица с ИИ разделены на подгруппы согласно половой принадлежности, пораженной артерии, имеющимся сердечно-сосудистых заболеваниям, факторов риска, таким как повышенный индекс массы тела, отягощенная наследственность по инсульту, курение. Для верификации диагноза всем больным проведены стандартное неврологическое обследование, компьютерная томография головного мозга, а также ретроспективный анализ результатов предыдущих обследований (при их наличии), для определения генотипа по ОНП гена ROS1 - молекулярно-генети-ческое исследование ДНК. Полученные результаты показали преобладание гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю среди пациентов с ИИ, имеющих гипертоническую болезнь (ГБ), по сравнению с контрольной группой. Таким образом, генотип GG обладает условно протективным эффектом в отношении развития ИИ у лиц с ГБ. Ключевые слова: ишемический инсульт, аллельный вариант rs6l9203 гена ROS1, ишемическая болезнь сердца, гипертоническая болезнь, фибрилляция предсердий, сердечная недостаточность, сахарный диабет.

Hanechkachernova@yandex.ru

Для цитирования: Никулин Д.А., Шульман В.А., Прокопенко С.В. и др. Взаимосвязь полиморфного аллельного варианта rs6l9203 гена-рецептора тирозинкиназы (ROS1) с сердечно-сосудистыми заболеваниями у пациентов с ишемическим инсультом. КардиоСоматика. 2015; 6 (2):

Interrelation of polymorphic allelic rs619203 option of a gene receptor of a tirozinkinaza (ROS1) with cardiovascular diseases at patients with an ischemic stroke

D.A.Nikulin, V.A.Shulman, S.V.Prokopenko, S.Yu.Nikulina, A.A.Chernova^, I.M.Platunova, V.N.Chernov Prof. V.F.Voino-Yasenetski Krasnoyarsk State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation. 660022, Russian Federation, Krasnoyarsk, ul. Partizana Zhelezniaka, d. 1

Studying of interrelation of polymorphic allelic rs6l9203 option of a gene of ROS1 with cardiovascular diseases at persons with the ischemic stroke is carried out. For the purpose of studying of a role of single nucleotide polymorphism of rs6l9203 of a gene of ROS1 in development of strokes of a genotiping 124 patients with ischemic stroke and cardiovascular pathology and 475 people of group of control. Persons with ischemic stroke are divided into subgroups according to a sex, the affected artery, the diseases which are available cardiovascular, risk factors, such as the raised body weight index, the burdened heredity on a stroke, smoking. For verification of the diagnosis by all patient standard neurologic examination, a computer tomography of a brain, and also the retrospective analysis of results of the previous inspections (are conducted at their existence), for definition of a genotype on ROS1 gene ONP -molecular and genetic research DNA. The received results showed prevalence of a homozygous genotype of GG on extended allel among patients from ischemic stroke having the arterial hypertension in comparison with control group. Thus, the genotype of GG has conditionally protective effect concerning development of ischemic stroke in persons with arterial hypertension. Key words: ischemic stroke, allelic rs6l9203 option of a gene of ROS1, coronary heart disease, arterial hypertension, atrial fibrillation, heart failure, diabetes mellitus.

Hanechkachernova@yandex.ru

For citation: Nikulin D.A., Shul'man VA., Prokopenko S.V et al. Interrelation of polymorphic allelic rs6l9203 option of a gene receptor of a tirozinkinaza (ROS1) with cardiovascular diseases at patients with an ischemic stroke. Cardiosomatics. 2015; 6 (2):

Ген ROS1 имеет позицию в хромосоме -117,301,021 и функционально значимый полиморфизм rs6l9203, Cys2229Ser. Полиморфизм rs619203 гена ROS1 изучен у пациентов с инфарктом миокарда (ИМ) [1-3]. Независимое исследование

3657 лиц с острым ИМ на наличие полиморфизмов rs12510359 (PALLD), rs619203 (ROS1), rs1376251 (TAS2R50), rs1151640 (OR13G1) и rs4804611 (ZNF627) не выявило корреляции с данными однонуклеотидного полиморфизма (ОНП) [3]. Было изучено 11 053

Таблица 1. Половозрастная характеристика пациентов с ИИ

Пол ИИ

n M±ç Минимальный-максимальный возраст больных Среднее значение; [Q2-Q75]

Мужчины 75 57±11,51 25-79 57 [50; 64,5]

Женщины 49 60,46±11,04 33-76 63 [54; 70]

Суммарно 96 58,41 ±11,39 25-79 60 [51 ; 66,75]

Здесь и в табл. 1-3. - квадратичное отклонение, Q - перцентили.

Таблица 2. Половозрастная характеристика лиц с ИИ в связи с ССЗ

Сердечно-сосудистая патология Пол ИИ

n M±ç Минимальный-максима льный возраст больных Среднее значение; [Q25 Q75]

ГБ (п=116) Мужчины 69 55,00±12,52 35-73 57 [48,5; 67,5]

Женщины 47 58,07±10,22 35-72 58,5 [53,5; 65,5]

Суммарно 116 56,72±11,15 35-73 58 [51,0; 64,5]

Отсутствие ГБ (п=30) Мужчины 10 54,6±18,11 13-74 59,5 [42,5; 67,5]

Женщины 20 61,7±11,48 44-86 62,5 [51; 70]

Суммарно 30 59,33±14,13 13-86 62,5 [49,5; 70]

ФП (п=9) Мужчины 5 62,75±10,31 52-73 63 [53; 72,25]

Женщины 4 66,0±4,36 63-71 64 [63; 71]

Суммарно 9 64,14±7,90 52-73 64 [56; 71]

Отсутствие ФП (п=115) Мужчины 73 56,57±11,57 25-79 57 [49,5; 64]

Женщины 42 60,0±11,33 33-76 63 [52,5; 69,25]

Суммарно 115 57,96±11,53 25-79 59 [51 ; 56]

ИБС (п=20) Мужчины 9 66,33±7,28 56-79 65 [60,5; 72,5]

Женщины 11 67,57±8,48 51-76 71 [63; 74]

Суммарно 20 66,88±7,58 51-79 67 [62,25; 72,75]

Отсутствие ИБС (п=104) Мужчины 58 55,25±11,02 25-73 55 [48,25; 63]

Женщины 46 58,91±11,36 33-76 63 [52,5; 65,75]

Суммарно 104 56,71±11,30 25-76 57 [50; 64]

СН (п=17) Мужчины 7 60,40±3,65 56-64 62 [56,5; 63,5]

Женщины 10 65,38±8,67 51-74 69 [56,25; 71,75]

Суммарно 17 63,46±7,39 51-74 63 [56,5; 71]

Отсутствие СН (п=106) Мужчины 71 56,39±11,92 25-79 57 [49; 65]

Женщины 35 59,19±11,34 33-76 63 [52; 66]

Суммарно 106 57,45±11,71 25-79 58,5 [50; 62,25]

СД (п=17) Мужчины 8 58,38±11,21 43-73 56,50 [48,75; 70,75]

Женщины 9 65,50±9,59 51-76 65 [56,25; 75,50]

Суммарно 17 61,94±10,73 43-76 63,5 [51,75; 72,75]

Отсутствие СД (п=105) Мужчины 69 56,78±11,66 25-79 58 [50; 64]

Женщины 36 58,67±10,99 33-74 63 [51,75; 66,25]

Суммарно 105 57,49±11,38 25-79 59 [51 ; 65]

ОНП в 6891 генах и установлено, что носительство rs6l9203 повышает риск возникновения ИМ в 1,15 раза для гетерозигот (CG) и в 1,75 раза - для гомозигот (TT) [4]. Изучена взаимосвязь между ОНП, имеющими взаимосвязь с ишемической болезнью сердца (ИБС): гена rs1151640OR13G1, гена rs11881940HNRPUL1, гена rs3746731 CD93, генов rs10757274CDKN2A и CDKN2B у 2145 лиц с семейной гиперхолестеринемией на модели пропорциональных рисков Кокса. В то же время не найдено ассоциации полиморфизма rs529038 (Asp2213Asn) гена ROS1 с ИБС в греческой популяции [5].

Цель исследования: изучение роли полиморфного аллельного варианта rs619203 гена ROS1 в связи с ССЗ у пациентов с ишемическим инсультом (ИИ).

Материал исследования

Проведено обследование 124 лиц с ИИ. Участники находились на лечении в неврологическом центре ФГБУЗ Сибирский клинический центр ФМБА России (Красноярск). Главным критерием включения в основную группу стал подтвержденный диагноз ИИ.

Критерии отбора в основную группу:

1. Наличие подтвержденного диагноза «острое нарушение мозгового кровообращения».

2. Место основного проживания - Красноярск.

3. Способность больного выполнять необходимые процедуры.

4. Подписание информированного согласия на исследование.

Таблица 3. Половозрастная характеристика пациентов контрольной группы

Группа Пол Контроль

n M±ç Минимальный-максимальный возраст больных Среднее значение; [Q25 Q75]

Контрольная группа (n=475) Мужчины 320 57,01 ±7,03 41-69 56,37 [51,51; 63,51]

Женщины 155 58,24±7,57 38-69 61,07 [50,99; 64,38]

Суммарно 475 57,41 ±7,23 38-69 57,46 [51,44; 63,80]

Таблица 4. Распределение частот генотипов и аллелей rs619203 гена ROS1 среди пациентов с инсультом на фоне ГБ и лиц контрольной группы

Генотипы: Инсульт на фоне ГБ (n=116) Контроль (n=475) Р*

n %±m n %±m

GG 75 64,7±4,4 234 49,3±2,3 0,004

CG 34 29,3±4,2 203 42,7±2,3 0,011

CC 7 6,0±2,2 38 8,0±1,2 0,603

Аллели:

Аллель G 184 79,3±2,7 671 70,6±1,5 0,010

Аллель C 48 20,7±2,7 279 29,4±1,5 0,010

ОШ; 95% ДИ 1,594; 1,127-2,255

Генотип GG 75 64,7±4,4 234 49,3±2,3 0,004

Генотипы CG+CC 41 35,3±4,4 241 50,7±2,3 0,004

ОШ; 95% ДИ 1,884; 1,237-2,870

Здесь и далее в табл. 4-8: р - уровень значимости при сравнении распределения генотипов с показателями группы контроля.

Таблица 5. Распределение частот генотипов и аллелей полиморфизма rs619203 гена ROS1 среди больных с ИИ на фоне ФП и ее отсутствия

Генотипы: ИИ без ФП (n=115) ИИ на ФП (n=9) p

n %±m n %±m

GG 72 62,6±4,5 5 55,6±16,6 0,950

CG 34 29,6±4,3 4 44,4±16,6 0,577

CC 9 7,8±2,5 0 0 0,828*

Аллели:

Аллель G 178 77,4±2,8 14 77,8±9,8 0,970

Аллель C 52 22,6±2,8 4 22,2±9,8 0,970*

ОШ; 95% ДИ 0,978;0,309-3,099

Генотип GG 72 62,6±4,5 5 55,6±16,6 0,950*

Генотипы CG+CC 43 37,4±4,5 4 44,4±16,6 0,950*

ОШ; 95% ДИ 0,747; 0,190-2,932

Здесь и далее в табл. 5-8: р*- уровень значимости, достигнутый точным критерием Фишера.

Критерии исключения:

1. Пациенты с неуточненным диагнозом «острое нарушение мозгового кровообращения».

2. Жители, проживающие вне Красноярска.

3. Лица, не способные выполнять необходимые процедуры.

4. Отказ от включения в исследование. Распределение участников с ИИ по полу и их средний возраст представлены в табл. 1.

В группе лиц с ИИ были 124 человека, средний возраст - 58,41±11,39 года, из которых - 75 мужчины (средний возраст - 57± 11,51 года) и 49 женщин, средний возраст - 60,46±11,04 (см. табл. 1).

В табл. 2 представлена половозрастная характеристика пациентов с ИИ в зависимости от имеющихся ССЗ.

Группа контроля представлена популяционной выборкой из 475 человек (125 женщин, 320 мужчин), жителей Новосибирска, обследованных в рамках программы Всемирной организации здравоохранения «MONICA». Средний возраст лиц группы контроля составил 57,41±7,23 года. Обследование контроль-

ной группы включало: данные антропометрии (рост, массу тела), социально-демографические характеристики, опрос о курении, потреблении алкоголя (частота и типичная доза), уровень физической активности, измерение артериального давления (АД), оценка липидного профиля (общий холестерин, триглицериды, холестерин липопротеидов высокой плотности), опрос на выявление стенокардии напряжения (Rose), электрокардиография покоя в 12 отведениях с оценкой по Миннесотскому коду.

В табл. 3 представлена половозрастная характеристика контрольной группы.

Методы исследования

Клиническое обследование включало оценку неврологических симптомов, исследование соматического статуса, контроль АД, запись электрокардиограммы, рентгенографию органов грудной клетки, общий и биохимический анализы крови, компьютерную и/или магнитно-резонансную томографию головного мозга. Анализировались продолжительность, тяжесть и последовательность развития сопут-

Таблица 6. Распределение частот генотипов и аллелей полиморфизма rs619203 гена ROS1 среди больных с ИИ на фоне ИБС

Генотипы: ИИ без ИБС (n=104) ИИ на фоне ИБС (n=20) Р

n %±m n %±m

GG 64 61,5±4,8 13 65,0±10,7 0,968

CG 32 30,8±4,5 6 30,0±10,2 0,844

CC 8 7,7±2,6 1 5,0±4,9 0,964*

Аллели:

Аллель G 160 76,9±2,9 32 80,0±6,3 0,826

Аллель C 48 23,1±2,9 8 20,0±6,3 0,826

ОШ; 95% ДИ 0,833; 0,360-1,929

Генотип GG 64 61,5±4,8 13 65,0±10,7 0,968

Генотипы CG+CC 40 38,5±4,8 7 35,0±10,7 0,968

ОШ; 95% ДИ 0,862; 0,317-2,342

ствующих соматических заболеваний и факторов риска. Изучался семейный анамнез, включавший оценку наличия нарушений мозгового кровообращения в анамнезе, состояние АД, наличие артериальной гипертензии, заболеваний сердца (ИМ, нарушения ритма, сердечная недостаточность - СН), наличие факторов риска (курение, повышенный индекс массы тела, отягощенная наследственность, сахарный диабет - СД).

Молекулярно-генетические методы исследования

Данные генотипирования предоставлены ФГБУ НИИ терапии и профилактической медицины (Новосибирск) и получены в рамках договора о сотрудничестве от 01.12.2008 г. В соответствии с Хельсин-ской декларацией для проведения исследования были получены разрешение Локального этического комитета при ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого, а также информированное согласие на проведение молекулярно-генетического исследования (Протокол № 16 от 16.12.2014 г.). Молекулярно-генетическое исследование проводили в ФГБУ НИ-ИТПМ (Новосибирск). Геномную ДНК выделяли из 5-10 мл периферической крови по стандартной методике с применением протеиназы К с последующей экстракцией фенол-хлороформом. К образцу крови (10 мл) добавляли 5-6 объемов буфера А (10 мМтрис-НС1, pH=7,5; 10 мМ NaCl; 3 мМ MgCl2), растирали сгустки в гомогенизаторе. Осадки, полученные центрифугированием при 2500 g, промывали 2 раза буфером А и ресуспензировали в 0,5 мл буфера В (10 мМ этилендиаминтетраацетата; 100 мМ^О; 50 мМтрис-НС1, pH=8,5). После добавления SDS (буфера для выделения ДНК) до 0,5% и протеиназы К до 200 мкг/мл смесь инкубировали в течение ночи при 37°. Депротеинизацию проводили последовательно во-донасыщенным фенолом, смесью фенол-хлороформа (1:1) и, наконец, хлороформом. Потом добавляли изопропиловый спирт, аккуратно перемешивали до образования клубочка, затем охлаждали в морозильнике (-20ЛС) в течение 1 ч. Осадок, полученный центрифугированием на микроцентрифуге «Eppendorf», в течение 10 мин промывали 70% этанолом (2 раза), высушивали и растворяли в воде до концентрации ДНК 0,5 мкг/мкл [6, 7].

Методы статистического анализа данных

Статистическую обработку данных проводили с применением пакета программ Statistica 7.0 [8].

Статистическую обработку данных выполняли с использованием пакета прикладных программ Excel,

Statistica for Windows 6.0 и SPSS 13. Качественные критерии представлены в виде процентных долей со стандартной ошибкой доли. Для определения статистической значимости различий между качественными признаками применяли критерий с2. Если ожидаемые частоты были менее 5, то применяли точный критерий Фишера. Различия в распределении частот аллелей и генотипов изучаемых генов между группами оценивали посредством критерия с2. Если объем выборки не превышал 5 случаев, применяли критерий Фишера [9, 10].

Относительный риск заболевания по конкретному аллелю или генотипу вычисляли как отношение шансов (ОШ). Для оценки ассоциации между определенными генотипами и риском развития заболевания оценивали ОШ по стандартной формуле 00=(axd)/(bxc), где a - частота аллеля (генотипа) в выборке больных, b - частота аллеля (генотипа) в контрольной группе, c - сумма частот остальных аллелей (генотипов) в выборке, d - сумма частот остальных аллелей (генотипов) в контрольной выборке. ОШ указано с 95% доверительным интервалом (ДИ). Критический уровень значимости (p) при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05 [11, 12].

Результаты

С целью изучения роли полиморфного аллельного варианта rs619203 гена ROS1 в развитии инсультов прогенотипировано 124 пациента с ИИ и 475 человек из контрольной группы.

Нами проведено выделение в отдельную подгруппу лиц с ИИ на фоне гипертонической болезни (ГБ). Так, частота гомозиготного генотипа AA по распространенному аллелю у больных с ИИ на фоне ГБ составила 64,7%±4,4; гетерозиготного генотипа CG -29,3%±4,2 и гомозиготного генотипа CC по редкому аллелю - 6,0%±2,2. В контрольной группе 49,3%±2,3 были носителями гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю; 42,7%±2,3 -гетерозиготного генотипа CG и 8,0%±1,2 - гомозиготного генотипа CC по редкому аллелю.

По результатам исследования установлено, что частота носителей гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю среди пациентов c ИИ на фоне Гб (64,7%±4,4) была статистически значимо выше по сравнению с контрольной группой (49,3%±2,3); р=0,004. Также наблюдается статистически значимое преобладание гетерозиготного генотипа CG в группе контроля (42,7%±2,3) в сравнении с лицами с ИИ на фоне ГБ (29,3%±4,2; p=0,011); табл. 4.

Таблица 7. Распределение частот генотипов и аллелей полиморфизма rs619203 гена ROS1 среди пациентов с ИИ на фоне СН

Генотипы: ИИ без СН (n=106) ИИ на фоне СН (n=17) p

n %±m n %±m

GG 68 64,2±4,7 8 47,1 ±12,1 0,281

CG 30 28,3±4,4 8 47,1 ±12,1 0,204

CC 8 7,5±2,6 1 5,9±5,7 0,797*

Аллели:

Аллель G 166 87,3±2,7 24 70,6±7,8 0,438

Аллель C 46 21,7±2,7 10 29,4±7,8 0,438

ОШ; 95% ДИ 0,665; 0,297-1,490

Генотип GG 68 64,2±4,7 8 47,1 ±12,1 0,281

Генотипы CG+CC 38 35,8±4,7 9 52,9±12,1 0,281

ОШ; 95% ДИ 0,497; 0,177-1,394

Таблица 8. Распределение частот генотипов и аллелей полиморфизма rs619203 гена ROS1 среди лиц с инсультом на фоне СД

Генотипы: ИИ без СД (n=106) ИИ на фоне СД (n=17) p

n %±m n %±m

GG 67 63,2±4,7 9 52,9±12,1 0,589

CG 33 31, 1 ±4,5 5 29,4±11,1 0,888

CC 6 5,7±2,3 3 17,6±9,2 0,208*

Аллели:

Аллель G 167 78,8±2,8 23 67,6±8,0 0,224

Аллель C 45 21,2±2,8 11 32,4±8,0 0,244

ОШ; 95% ДИ ОШ 0,563; 0,256-1,242

Генотип GG 67 63,2±4,7 9 52,9±12,1 0,589

Генотипы CG+CC 39 36,8±4,7 8 47,1 ±12,1 0,589

ОШ; 95% ДИ 0,655; 0,234-1,836

Разделение больных, перенесших ИИ, по отсутствию и имеющейся фибрилляции предсердий (ФП) позволило обнаружить следующие отличия. Так, частота гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю у лиц с ИИ без ФП составила б2,6%±4,5; гетерозиготного генотипа CG - 29,6%±4,3 и гомозиготного генотипа СС по редкому аллелю -7,8%±2,5. В группе участников с ИИ и ФП 55,6%±16,6 были носителями гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю; 44,4%±16,6 - носителями гетерозиготного генотипа CG и ни одного обследуемого - носителя гомозиготного генотипа СС по редкому аллелю. По результатам исследования установлено, что статистически значимого преобладания ни одного из генотипов в обследуемых группах нет (см. табл. 5).

При выделении в отдельную группу пациентов с инсультом на фоне ИБС распределение генотипов по сравнению с больными без ИБС было статистически неразличимо. Так, в группе лиц с ИИ без ИБС генотип GG имели 61,5%±4,8; гетерозиготный генотип CG -30,8%±4,5 и генотип СС - 7,7%±2,6, в группе пациентов с инсультом на фоне ИБС генотип GG имели 65,0%±10,7; гетерозиготный генотип CG - 30,0%±10,2 и генотип СС - 5,0%±4,9 (табл. 6).

Распределение генотипов у пациентов с ИИ на фоне СН по сравнению с больными без СН не обнаружено статистически значимых различий. Так, в группе лиц с ИИ с отсутствием СН генотип GG имели 64,2%±4,7; гетерозиготный генотип CG - 28,3%±4,4 и генотип СС - 7,5%±2,6. В группе больных с инсультом на фоне СН генотип GG имели 47,1%±12,1; гетерозиготный генотип CG - 47,1%±12,1 и генотип СС - ни один обследуемый (табл. 7).

Нами проведено выделение в отдельную подгруппу пациентов с ИИ на фоне СД. Так, частота гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю у лиц с ИИ с отсутствием СД составила 63,2%±4,7; гетерозиготного генотипа CG - 31,1%±4,5 и гомозиготного генотипа СС по редкому аллелю - 5,7%±2,3. В группе больных с ИИ на фоне СД 52,9%±12,1 были носителями гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю; 29,4%±11,1 - носителями гетерозиготного генотипа CG и 17,6%±9,2 - носителями гомозиготного генотипа СС по редкому аллелю.

По результатам исследования установлено, что частота носителей гомозиготного генотипа СС по редкому аллелю среди больных с ИИ на фоне СД (17,6%±9,2) была статистически незначимо выше по сравнению с пациентами с инсультом без СД (5,7%±2,3; р=0,208); табл. 8.

Частота носителей аллеля G среди пациентов с ИИ без отягощенной наследственности составила 78,9%±2,6, у лиц с отягощенной наследственностью -68,8%±11,8. Частоты носителей аллеля С распределились следующим образом: пациенты с ИИ без отягощенной наследственности - 21,1%±2,8 и с отягощенной наследственностью - 31,3%±11,8. Не установлено статистической значимости по аллелям данного гена (см. табл. 8).

Обсуждение

Согласно результатам исследования установлено, что частота носителей гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю среди пациентов с ИИ, имеющих ГБ, была статистически значимо выше по сравнению с контрольной группой. Таким образом, генотип GG обладает условно протективным эффек-

том в отношении развития ИИ у лиц с ГБ, ОШ обнаружить носителя генотипа GG в группе с инсультом составляет 1,59 по сравнению с носителями двух других генотипов. Это несколько противоречит данным зарубежных ученых. В исследовании, проведенном японскими учеными, участвовали 1362 пациента с инсультом (822 - с тромбоэмболическим инсультом, 333 - с внутричерепным кровоизлиянием и 207 - с субарах-ноидальным кровотечением) и 2070 человек группы контроля. Было проанализировано 50 полиморфизмов в 38 кандидатных генах методами полимеразной цепной реакции и секвенирования. Установлено, что полиморфизм rs619203 (G C (Cys2229Ser) гена ROS1 ассоциирован с тромбоэмболическим инсультом [13]. Полученные нами данные могут быть обусловлены некоторыми генетическими особенностями сибирской популяции, зависящими от климатических условий, географии проживания и подтверждают мульти-факторный характер развития ИИ на фоне ГБ. При оценке частот распространенности генотипов гена ROS1 во взаимосвязи с другой сердечно-сосудистой патологией статистически значимых различий не получено. Однако имеющиеся ССЗ являются отягчающим фактором при развитии ИИ, и ввиду отсутствия данных по ОНП гена ROS1 в других популяциях этот вопрос требует дальнейшего изучения.

Заключение

Таким образом, результаты проведенного исследования показывают, что в группе пациентов с ИИ с ГБ имеются статистически значимое преобладание гомозиготного генотипа GG по распространенному аллелю гена ROS1 и тенденция к снижению числа носителей гетерозиготного генотипа CG в группе лиц с ИИ и ГБ. Полученные данные подтверждают мульти-факторный характер ИИ, ассоциированного с ГБ, и свидетельствуют о том, что носительство генотипа GG гена ROS1 обладает условно протективным эффектом в отношении развития ИИ у пациентов с ГБ.

Литература/References

1. Horne BD, CarlquistJF. Associations with myocardial infarction of six polymorphisms selected from a three-stage genome-wide association study.AmHeartJ2007; 154 (Issue 5): 969-75.

2. Horne BD, CarlquistJF, Muhlestein JB et al. Association of variation in the chromosome 9p21 locus with myocardial infarction versus chronic coronary artery disease. Circ Cardiovasc Genet 2008; 1: 85-92.

3. Werner K, Serin T, Erl A et al. The chromosome 9p21 region and myocardial infarction in a European population. Atherosclerosis 2011; 217 (Issue 1): 220-6.

4. PaynterNP, Chasman DI, BuringJE et al. Cardiovascular disease risk prediction with and without knowledge of genetic variation at chromosome 9p213. Ann Intern Med2009; 150:65-72.

5. TheodorakiEV, Nikopensius T, Suhorutsenko J et al. ROS1 Asp2213Asnpolymorphism is not associated with coronary artery disease in a Greek case-control study. Clin Chem Lab Med 2009;47 (12): 1471-3.

6. Маниатис Т., Сэмбрук ФДжЭ. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование: пер. с англ. М.: Мир, 1984./ Maniatis Т., Sembruk F.DzhE. Metody geneticheskoi in-zhenerii. Molekuliarnoe klonirovanie: per. s angl. M.: Mir, 1984. [in Russian]

7. Маниатис Т., Сэмбрук ФДжЭ. Молекулярное клонирование: пер. с англ. ТМаниатис. М.: Мир, 1984./Maniatis Т., Sembruk F.Dzh.E. Molekuliarnoe klonirovanie:per. s angl. TManiatis. M.: Mir, 1984. [in Russian]

8. Боровиков ВП. и др. Statistica: искусство анализа данных на компьютере. СПб.: Питер, 2001./ Borovikov VP. i dr. Statistica: iskusstvo analiza dannykh na komp'iutere. SPb.: Piter, 2001. [in Russian]

9. Зайцев ВМ, Лимфлянский ВГ, Маринкин ВИ. Прикладная медицинская статистика: учеб. пособие. СПб.: Фолиант, 2003. / Zaitsev VM, Limflianskii V.G., Marinkin VI. Prikladnaia meditsinskaia statistika: ucheb.posobie. SPb.: Foliant, 2003. [in Russian]

10. ПоллардДж. Справочник по вычислительным методам статистики: пер. с англ. Дж.Поллард. М.: Финансы и статистика, 1982./PollardDzh. Spravochnikpo vychislitel'nym metodam statistiki:per. s angl. DzhPollard. M.: Finansy i statistika, 1982. [in Russian]

11. Математические методы в изучении генетики мульти-факториальных заболеваний: учебно-методическое пособие для студентов мед. вузов и врачей. Под ред. ВНШаба-лина. М.: ВУНМЦ, 1994-/ Matematicheskie metody v izuchenii genetiki mul'tifaktorial'nykh zabolevanii: uchebno-metodiche-skoeposobie dlia studentov med. vuzov i vrachei. Pod red. VNShabalina. M.: VUNMTs, 1994- [in Russian]

12. Флейс Дж. Статистические методы для изучения таблиц долей и пропорций: пер. с англ. М.: Финансы и статистика, 1989./ Fleis Dzh. Statisticheskie metody dlia izucheniia tablits dolei i proportsii:per. s angl. M.: Finansy i statistika, 1989. [in Russian]

13. Yamada Y, MetokiN, Yoshida H et al. Genetic factors for ischemic and hemorrhagic stroke in Japanese individuals. Stroke 2008; 39 (8): 2211-8.

Сведения об авторах

Никулин Дмитрий Александрович - ассистент каф. неврологии с курсом реабилитации последипломного образования ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: nikulin86@list.ru

Шульман Владимир Абрамович - д-р. мед. наук, проф. каф. внутренних болезней №1 ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: Shulman36@mail.ru

Прокопенко Семен Владимирович - д-р мед. наук, зав. каф. неврологии с курсом реабилитации последипломного образования ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: Psv@mail.ru

Никулина Светлана Юрьевна - д-р мед. наук, проф., проректор по учебной работе ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: nikulina@mail.ru

Чернова Анна Александровна - д-р мед. наук, доц. каф. внутренних болезней №1 ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: anechkachernova@yandex.ru

Платунова Ирина Михайловна - аспирант каф. внутренних болезней №1 ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: platunova_irina@mail.ru

Чернов Владимир Николаевич - канд. мед. наук, доц. каф. ортопедической стоматологии ГБОУ ВПО КрасГМУ им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого. E-mail: сhernovortstom@mail.ru