ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ИММУНОРЕГУЛЯТОРНЫМ СВОЙСТВОМ, ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
DRUG PREPARATION POSSESSING IMMUNOREGULATORY PROPERTY FOR TREATING IMMUNE DISEASES

Область техники, к которой относится разработанное изобретение.
Изобретение относится к биофармакологии и медицине и касается лекарственных средств для лечения различных аутоиммунных заболеваний (таких как ревматоидный артрит, рассеянный склероз, системная склеродермия, инсулинозависимый сахарный диабет и др., всего около 50 наименований) за счет своих иммунорегуляторных свойств.
В настоящее время в связи с резким повышением количества аутоиммунных заболеваний населения (более 7% населения земного шара) и особенно молодых, перед практической медициной стоит важная задача повышения эффективности разрабатываемых лекарственных средств с точки зрения сроков лечения болезни, стабильности лечебного эффекта, стоимости лечения.
Эффективного лечения аутоиммунных заболеваний не существует, гак как применяемые на сегодняшний день средства в процессе лечения не устраняют причину данных заболеваний и обладают многими побочными эффектами, вследствие чего эти заболевания приобретают длительное хроническое течение, и четверть от общего числа вольных приобретают инвалидность.
Уровень техники.
Известно средство для лечения различных аутоиммунных заболевании с помощью трофобластического β-1-гликопротеина (далее - ТБГ), (патент №2056852, МПК: A61K, 35/50, 1994 г.), который проявляет иммунорегуляторные свойства.
ГБГ используется в качестве патогенетического средства для лечения аутоиммунных заболеваний, связанных с дефицитом супрессорной активности лимфоцитов больных, за счет способности избирательно повышать супрессорную активность лимфоцитов.
При обострении заболевания супрессорная активность лимфоцитов больного резко снижена и составляет приблизительно около 20% (тогда как в норме у здорового человека данный показатель составляет приблизительно 60%).
Иммунокоррекция ТБГ на стадии обострения заболевания позволяет в определенной мере купировать данное обострение, а на стадии ремиссии - предупредить появление последующих обострений заболевания.
Недостатком данного лекарственного средства при его использовании в вышеуказанном качестве является низкая эффективность лечения, так как при использовании его, например, на стадии обострения аутоиммунного заболевания оно может проявлять свое действие лишь через 4-5 дней после его введения в организм больного.
Известно проявление иммунорегуляторных свойств иммуноглобулинами для внутривенного введения и на основе этого применение их для терапии различных аутоиммунных заболеваний, например, препараты Intragam, Интраглобин-F, Octagam, Venimmun-N, Santoglobulin на основе иммуноглобулина IgG (Ева Майда "Справочник по рассеянному склерозу для больных и их близких", 1999, Интер эксперт, стр.83-94).
Недостатками данных лекарственных средств являются:
- они не предназначены для использования на стадии обострения аутоиммунного заболевания, а могут применяться только на стадии ремиссии:
- необходимость продолжительной (не менее 2-х лет) терапии с частым (ежедневным или еженедельным в зависимости от конкретного препарата) введением препарата, что является дорогостоящим и не соответствует современным техническим требованиям введения препарата (инфузии).
Известно средство для лечения различных аутоиммунных заболеваний, основанное на смеси ТБГ с иммуноглобулином одного определенного класса (или с IgG, или с IgM, или с IgA) (патент РФ на изобретение №2303995 C1, МПК: A61K, 38/16; 2006 г.).
Недостатками данного лекарственного средства являются не отвечающая современным требованиям эффективность лечения и нестабильность проявляемых лечебных характеристик по причине различных изначальных свойств иммуноглобулинов, а также отсутствие обосновынных соотношений компонентов данного препарата и дозировок его на курс лечения, что подтверждается тем фактом, что за 6 лет существования патента до сих пор не налажено ни производство востребованного здравоохранением препарата и не продано ни одной лицензии кому-либо, что говорит о том, что средство по данному патенту разработано больше на широту охвата патентных прав, чем на практическую реализацию.
Последнее средство взято авторами в качестве прототипа предложенного, как наиболее близкое по составу компонентов, так и по достигаемому лечебному эффекту при использовании.
Раскрытие изобретения.
Задачей, которую авторы ставили при разработке нового лекарственного средства для лечения аутоиммунных заболеваний, являлось повышение эффективности лечения аутоиммунных заболеваний как на стадии ремиссии так и при обострениях, путем стабильного увеличения супрессорной активности мононуклеарных клеток периферической крови (лимфоцитов) и секреции цитокинов ТФР-β (трансформирующий фактор роста β) у больных.
Данная задача решена в предложенном смесевом лекарственном средстве, которое содержит 4 компонента, взятых в следующих весовых соотношениях:
- трофобластический β-1 - гликопротеин
от 2,0 до 5,0%;
- иммуноглобулин класса A
от 10,0 до 30,0%;
- иммуноглобулин класса M
от 15,0 до 35,0%;
- иммуноглобулин класса G
остальное до 100%.
Новыми признаками в предложенной композиции по отношению к прототипу являются:
- выполнение добавки препарата из смеси иммуноглобулинов трех классов - IgA, IgM и IgG;
- диапазон процентного весового сочетания ингредиентов в композиции.
Вышеуказанное сочетание известных в фармакологии компонентов и их процентное весовое соотношение в смесевой композиции, по мнению авторов, образует совокупность признаков изобретения, которую можно назвать существенной, т.к. вышеуказанный лечебный результат, а именно, повышение эффективности лечения аутоиммунных заболеваний как на стадии ремиссии, так и при обострениях, до настоящей композиции известными средствами еще в мире не достигался.
Вышеуказанная комбинация позволяет существенно усилить супрессорную активность мононуклеарных клеток, что показано через такие расчетные показатели как, индекс ингибиции (ИИ) и индекс супрессии (ИС), а также секрецию цитокинов ТФР-β лимфоцитами у больных с возможным одновременным обеспечением стабильности вышеуказанных характеристик в процессе лечения разных больных.
Краткое описание графиков и таблиц.
Вышеуказанное подтверждено нашими исследованиями, основанными на результатах экспериментов, и экспериментально-расчетными данными, которые изложены на графиках и в сравнительной таблице (см. фиг.1-5), где:
На фиг.1 и фиг.2 представлены графики изменения индекса ингибиции (ИИ) и индекса супрессии (ИС) - расчетных показателей супрессорной активности мононуклеарных клеток в зависимости от дозы трофобластического β-1-гликопротеина (ТБГ) п препарате.
На фиг.3 и фиг.4 представлены графики изменения тех же расчетных показателей в зависимости от дозы каждого из трех иммуноглобулинов добавки (IgA, IgM и IgG) в препарате.
ИЗ графиков на фиг.1 и 2 видно, что для эффективного действия ТБГ в заявляемом препарате необходимо содержание его в препарате по нижней границе 1,50% и верхней границе 18,0% (значения показателей ИИ и ИС для практического использования должны быть более 20%).
Из графиков на фиг.3 и 4 видно, что эффективность действия иммуноглобулинов классов IgA и IgM в добавке в концентрации, превышающей 30% и 35% соответственно, нестабильна in vivo и они разрушаются, за счет чего показатели ИИ и ИС существенно снижаются до величин менее 20%, тогда как иммуноглобулин класса IgG, являясь обязательным активным компонентом в смеси иммуноглобулинов (см. аналоги на его основе), более стабилен, его концентрация не столь критично влияет на эффективность лечения, что дает право использовать данный компонент как наполнитель до 100% в заявляемом лекарственном средстве.
Вместе с этим, процентное содержание компонентов IgA и IgM, ниже 10% и 15% соответственно, является недостаточными для практического применения заявляемого лекарственного средства, т.к. в этом случае показатели супрессорной активности мононуклеарных клеток ИС и ИИ менее 20%, что также недопустимо.
В таблице, приведенной на фиг.5. представлены смводные данные по роезультатам постановки реакций с различными соотношениями основы(ТБГ) к добавке (смесь иммуноглобулинов IgA, IgM и IgG. Под препаратом в таблице указано заявляемое лекарственное средство.
Из таблицы на фиг.5 видно, что с учетом количественных ограничений значений индекса ингибиции (ИИ) и индекса супрессии (ИС), следующих из графиков на фиг.1-4, диапазон соотношения основы - трофобластического β-1 - гликопротеина (ТБГ) и добавки в виде смеси иммуноглобулинов классов IgA, IgM и IgG, в котором обеспечивается стабильная практическая эффективность разработанного препарата, довольно широк и лежит в пределах от 1:9 до 1:49, при этом значения показателей супрессорной активности мононуклеарных клеток ТИТ и ИС заявляемого лекарственного средства превышают аналогичные показатели прототипа более чем на 25%.
Осуществление изобретения.
Предлагаемое лекарственное средство для лечения аутоиммунных заболеваний может быть изготовлено, например, следующим образом. При получении данного лекарственного препарата исходным сырьем являются плазма донорской крови и ретроплацентарная сыворотка.
Плазму донорской крови планируется получать по договорам от станций переливания крови, а ретроплацентарную сыворотку - из родильных домов. Сырье в термоконтейнерах по холодовой цепи поступает на предприятие в замороженном состоянии (-25°C), поэтому предварительным этапом обработки сырья является его размораживание (до 0+2°C).
Далее производят измерение количества плазмы и ретроплацентарной сыворотки, после чего производится загрузка реакторов.
В ходе последовательных этапов фракционирования, в частности спиртовое фракционирование по Кону (общеизвестный технологический регламент фракционирования по методу Кона («Типовой комплексный регламент производства белковых препаратов плазмы донорской крови», утвержденный зам. Министра здравоохранения СССР 12.12.1979 г.) на холоде (осаждение необходимыми реагентами в реакторах с последующим центрифугированием), на двух отдельных технологических линиях производится получение иммуноглобулинового смесевого препарата из плазмы донорской крови, и трофобластического β-1-гликопротеина из ретроплацентарной сыворотки.
Для дальнейшего получения ТБГ необходима трехстадийная хроматография для двойной очистки от балластных белков и вирусинактивации.
После получения растворов обоих препаратов необходимо провести постадийно ультрафильтрацию, осветляющую и стерилизующую фильтрации.
Планируется получать несколько форм конечного продукта: для перорального применения - лиофильно высушенная форма препарата, для ректального применения - суппозитории, для внутривенного применения - флаконы с раствором данного препарата.
Для достижения поставленных целей необходимо проведение всех технологических этапов в стерильных условиях. В качестве стабилизатора планируется использование мальтозы, глицина или глюкозы.
В дальнейшем планируется определение оптимальной дозы препарата по результатам клинических испытаний на различных возрастных группах.
При проведении технологических этапов производства предлагаемого средства используются стандартные оборудование и приспособления.
Лечебный эффект заявляемого средства заключающийся в повышении эффективнорсти лечения аутоииммунных заболеваний как на стадии ремиссии, так и при обострениях болезни обеспечен существенным улучшением иммунорегуляторных и иммуномоделирующих свойств лекарства, т.к. оно стабильно обладает на 25-30% лучшей способностью повышать супрессорную активность мононуклеарных клеток периферической крови у больных с аутоиммунными заболеваниями и секрецию ими цитокинов ТФР-Р по сравнению с прототипом.
В настоящее время разработчики проводят работу по промышленному освоению данной технологии на ООО «АУТОФАРМА», а также организацией доклинических и клинических испытаний на базе Гематологического научного центра в Москве.
6