СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ АППЛИКАЦИОННОГО КОЖНОГО ТЕСТА
METHOD OF OBTAINING PREPARATION FOR CARRYING OUT APPLICATION SKIN TEST

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к получению препаратов для исследований в области аллергологии и дерматологии для определения причинных факторов реакций гиперчувствительности к различным соединениям и многокомпонентным смесям, существующим в виде водных растворов с низкими концентрациями.
Известен способ получения препарата для проведения аппликационного кожного теста, основанный на смешивании тестируемого вещества с носителем и растворителем, где в качестве носителя используется расплавленный белый вазелин, а в качестве растворителя используется смесь дистиллированной воды, этилового спирта и ацетона
(RU 2235557 C1, A61K 39/35, 2004 г.)
Однако известный способ не позволяет выявлять наличие гиперчувствительности в тестируемых веществах при проведении аппликационного кожного теста.
Задачей, на решение которой направлено данное изобретение, является разработка способа, который предусматривает выявление реакций гиперчувствительности к тестируемым веществам в виде водных растворов с низкой концентрацией, способных вызывать контактные реакции гиперчувствительности.
Техническим результатом изобретения является получение препарата для проведения аппликационного кожного теста, способного выявлять гиперчувствительность к тестируемым веществам.
Для достижения указанного технического результата в способе получения препарата для проведения аппликационного кожного теста, включающем смешивание тестируемого вещества с носителем и растворителем, согласно изобретению в качестве носителя используют агар-агар, а в качестве растворителя - боратный буфер pH 6,8-7,2, агар-агар в боратном буфере нагревают при перемешивании до полного растворения агар-агара, охлаждают смесь до 40-45°C и вводят тестируемое вещество в количестве 10-50% от общего объема готового препарата.
В качестве тестируемых веществ используют их водные растворы с низкими концентрациями, способные вызывать контактные реакции гиперчувствительности.
Приготовление препарата для проведения кожного аппликационного теста.
3
3
Раствор A: 6,25 г HBO растворяют в 1 л дистиллированной воды.
2
4
7
Раствор B: 40 г NaBO растворяют в 1 л дистиллированной воды.
Раствор C: смешивают растворы A и B в соотношении 40:1, устанавливают pH 6,8-7,2.
К 100 мл раствора C прибавляют 1 г агар-агара, нагревают и перемешивают до полного растворения агар-агара при кипении. Раствор агара охлаждают до 40-45°C, прибавляют 10-50% от общего объема водного раствора тестируемого препарата, перемешивают до получения однородной массы.
Изобретение иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1. Приготовление препарата для выявления гиперчувствительности к ионам никеля.
Берут следующие ингредиенты:
3
3
- HBO;
2
4
7
- NaBO;
- агар-агар;
- воду дистиллированную;
- никель сернокислый кристаллогидрат в качестве тестируемого вещества.
7 г никеля сернокислого кристаллогидрата растворяют в 100 мл дистиллированной воды.
3
3
2
4
7
0,625 г HBO растворяют в 100 мл дистиллированной воды. 4 г NaBO растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают в соотношении 40:1, устанавливают pH 6,8. В 10 мл боратного буфера растворяют при нагревании и перемешивании 0,1 г агар-агара, охлаждают до 40°C. К 1 мл охлажденного раствора прибавляют 1 мл приготовленного раствора никеля сернокислого.
Пример 2. Приготовление препарата для выявления гиперчувствительности к аллергенному экстракту полыни.
Берут следующие ингредиенты:
3
3
- HBO;
2
4
7
- NaBO;
- агар-агар;
- воду дистиллированную;
- аллергенный экстракт полыни (10000 pnu/мл).
3
3
2
4
7
0,625 г HBO растворяют в 100 мл дистиллированной воды. 4 г NaBO растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают в соотношении 40:1, устанавливают pH 7,2. В 10 мл боратного буфера растворяют при нагревании и перемешивании 0,1 г агар-агара, охлаждают до 45°C. К 1 мл охлажденного раствора прибавляют 0,5 мл аллергенного экстракта полыни.
Пример 3. Приготовление препарата для выявления гиперчувствительности к аллергенному экстракту Dermatophagoides pteronyssinus. Берут следующие ингредиенты:
3
3
- HBO;
2
4
7
- NaBO;
- агар-агар;
- воду дистиллированную;
- аллергенный экстракт Dermatophagoides pteronyssinus (10000 pnu/мл).
3
3
2
4
7
0,625 г HBO растворяют в 100 мл дистиллированной воды. 4 г NaBO растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают в соотношении 40:1, устанавливают pH 7,2. В 10 мл боратного буфера растворяют при нагревании и перемешивании 0,1 г агар-агара, охлаждают до 45°C. К 1 мл полученного агара прибавляют 0,25 мл аллергенного экстракта Dermatophagoides pteronyssinus.
Кожу пациента обрабатывают раствором 70% раствором этилового спирта. В аппликационную ячейку помещают 0,02 мл готового препарата с тестируемым веществом. Ячейку прикрепляют на кожу пластырем для обеспечения полного контакта препарата по всей площади ячейки с кожей. В случае отсутствия активной реакции в ближайшее время, через 48 часов снимают ячейку с препаратом. Первичный осмотр места контакта проводят через 24 часа после снятия ячейки. В случае обнаружения в месте контакта гиперемии, зуда, папулезных высыпаний, образования инфильтрата, делают вывод о наличии гиперчувствительности к тестируемому веществу. Если при первичном осмотре место контакта остается без изменений, то наблюдение продолжают еще в течение 2-4 недель, и если изменений нет, то делают вывод о том, что гиперчувствительность к тестируемому веществу отсутствует.