Протеомное исследование гладкомышечного трансгелина в патогенезе атеросклероза, как возможный маркер атеросклеротического процесса

ОСОБЕННОСТИ НАКОПЛЕНИЯ ЭПИКАРДИАЛЬНОГО ЖИРА У ПАЦИЕНТОВ РАЗНОГО ПОЛА С МЕТАБОЛИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ

Д.А. ДЕЕВ, Б.Б. ПИНХАСОВ, Т.Р. МАЦИЕВСКАЯ, В.Г. СЕЛЯТИЦКАЯ Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины», Новосибирск, Россия

Введение. В последние годы особое внимание уделяют исследованию патогенетической роли эпикардиаль-ного жира в развитии сердечно-сосудистых заболеваний. Эпикардиальная жировая ткань является источником биоактивных молекул, таких как свободные жирные кислоты, адипонектин, провоспалительные цитокины, в силу чего она как бы «отражает» функциональную активность интраабдоминального висцерального жира. Высказано предположение, что эхокардиографическое измерение количества этой ткани может быть ранним маркером висцерального ожирения и высокого риска развития кардио-васкулярной патологии, однако для его доказательства необходимы дальнейшие исследования.

Цель исследования. Определить гендерные особенности накопления эпикардиального жира у пациентов с метаболическим синдромом и без него.

Материл и методы. Обследовано 110 пациентов терапевтического профиля (70 мужчин и 40 женщин) случайной последовательной выборки. Средний возраст пациентов составил 53,8±10,2 лет (мужчин - 50,6±9,8, женщин - 59,2±8,5 лет). Пациентам проводили антропометрические измерения; определяли уровень систолического и диастолического артериального давления (САД и ДАД, мм рт.ст.); в сыворотке крови определяли уровни показателей липидного спектра - триглицеридов (ТГ), холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), общего холестерина (ОХ). Метаболический синдром (МС) диагностировали на основании критериев NCEP-ATP III 2005 года. Толщину эпикардиального жира (ТЭЖ) измеряли при проведении стандартного трансторакального эхокардиографического исследования (ЭхоКГ) на аппарате GE Vivid Е 9. Рассчитывали коэффициент ранговой корреляции Спирмена (r). Минимальную вероятность справедливости нулевой гипотезы принимали при p<0,05.

Результаты. В общей группе обследованных пациентов МС был выявлен в 68,2 % случаев. У пациентов с МС ТЭЖ была достоверно больше, чем у пациентов без МС (4,4±2,2 и 2,9±1,6 мм р<0,001 соответственно). Гендерный анализ показал, что у женщин без МС ТЭЖ несколько больше, но достоверно не отличается от ТЭЖ у мужчин (3,2±1,7 и 2,6±1,5 мм р=0,3 соответственно), при этом у женщин с МС ТЭЖ достоверно больше чем у мужчин (5,5±2,4 мм и 4,0±1,9 мм р<0,005 соответственно). Корреляционный анализ ТЭЖ со структурно-функциональными характеристиками сердца показал, что среди пациентов общей выборки толщина задней стенки левого желудка (ЗСЛЖ) и толщина межжелудочковой перегородки (МЖП) достоверно коррелируют с ТЭЖ (г=0,20 и г=0,28 соответственно). У пациентов с МС ко-нечно-диастолический размер (КДР) и конечно-диастоли-ческий объем (КДО) левого желудочка имели достоверные обратные корреляционные связи с ТЭЖ (г= -0,27 и г= -0,26 соответственно), в то время как у пациентов без МС аналогичных связей не обнаружено. У женщин толщина ЗСЛЖ и МЖП имели достоверные прямые корреляционные связи с толщиной ТЭЖ (г=0,46 и г=0,56 соответственно). Среди других анализируемых параметров у женщин выявлены прямые корреляционные связи ТЭЖ с возрастом и уровнем САД (г=0,35 и г=0,32 соответственно); у мужчин - прямая корреляционная связь ТЭЖ с уровнем ТГ и обратная - с уровнем ЛПВП (г=0,28 и г= -0,24 соответственно).

Заключение. У пациентов без МС ТЭЖ не имеет тендерных отличий; наличие МС приводит к увеличению ТЭЖ в 1,5-1,7 раза, при этом у женщин с МС ТЭЖ достоверно больше, чем у мужчин с МС. У женщин в отличие от мужчин ТЭЖ ассоциирована с гипертрофией ЛЖ, а выраженность ТЭЖ коррелирует с возрастом и уровнем САД; у мужчин ТЭЖ связана с показателями липидного обмена (уровнями ЛПВП и ТГ). У пациентов с МС ТЭЖ ассоциирована с нарушениями локальной сократимости ЛЖ.

ПРОТЕОМНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ГЛАДКОМЫШЕЧНОГО ТРАНСГЕЛИНА В ПАТОГЕНЕЗЕ АТЕРОСКЛЕРОЗА, КАК ВОЗМОЖНЫЙ МАРКЕР АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА

Р.А. ЖЕТИШЕВА1, М.А. КОВАЛЕВА 2, И.А. КАМЕНИХИНА 2, А.М. КАРПОВ.1 , М.Х. ШОГЕНОВА \

И.Е. ГАЛАХОВ 1, Л.И. КОВАЛЕВ 2 , В.Г. НАУМОВ1 ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии МЗ РФ, Москва, Россия 2ФГУ Институт биохимии им. А.Н.Баха, ФИЦ Биотехнологии РАН, Москва, Россия

атеросклерозом (n=28). В качестве антигенов использовались белковые экстракты аутопсийных образцов грудного отдела аорты из вышеуказанных образцов.

Для изучения белков применяли комплекс протеом-ных технологий (двумерный электрофорез по О'Фаррел-лу, модификации NEPHGE, IEF, времяпролетную и тандем-ную MALDI-TOF масс-спектрометрию и др.). Изображения анализировали с помощью программы MELANIE.

Результаты. Исследование признаков миграции гладкомышечных клеток в интиму в норме показало,

Цель исследования. Изучить с помощью протеомных технологий гладкомышечный трансгелин 1 при атероскле-ротическом поражении и в норме как возможный маркер атеросклеротического процесса.

Материалы и методы. Биоматериалом исследования являлись аутопсийные образцы грудного отдела аорты, полученные от умерших мужчин (п=15) и женщин (п=9) в возрасте от 35 до 75 лет, в течение 1 суток после смерти. Для выявления аутоантигенов использовали сыворотки крови больных мужчин с начальным и распространенным

что только у 6 из 24 исследованных случаев ткани аорты больных фракции ТДСЬЫ (гладкомышечного трансгели-на) практически не детектировались. В области липофи-брозных бляшек в интиме количество изоформ ТДСЬЫ увеличивалось еще больше, и только в 5 случаях они практически не детектировалось. Во всех случаях количество ТДСЬЫ в интиме было меньше, чем в параллельных образцах медиального слоя. Более того, в тех случаях, где в интиме наблюдалось накопление гладкомышечных клеток (6 из 18), в трети случаев выраженно менялось и соотношение количества разных вариантов трансгелина. Кроме этого, в интиме больных было также выявлено в 11 из 24 случаев увеличение количества трех фракций в зоне липофиброзных бляшек, идентифицированных

как Ы-концевые фрагменты трансгелина. В медиальном слое такие фрагменты если и обнаруживались, то только в следовом количестве. Более того, данные фракции фрагментов ТДСЬЫ оказались и частично окисленными, что характерно для многих белков при атерогенезе, но впервые выявлено для трансгелина.

Выводы. Полученные результаты протеомного исследования в целом показали, что гладкомышечный трансгелин является активным компонентом механизма патогенеза атеросклероза не менее чем у трети больных. У части пациентов выявлено наличие аутоантител к глад-комышечному трансгелину. Показано участие гладкомышечного трансгелина в прогрессировании атеросклероза как его этапа, или одной из форм течения заболевания.

АССОЦИАЦИИ ВАРИАБЕЛЬНЫХ САЙТОВ (^4986790 и ^4986791) ГЕНА ^4 С АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ БРАХИОЦЕФАЛЬНЫХ АРТЕРИЙ У БОЛЬНЫХ СО СТАБИЛЬНОЙ ФОРМОЙ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА

И.И. ЖИДКОВА, А.В. ПОНАСЕНКО, М.В. ХУТОРНАЯ, А.Г. КУТИХИН, О.Л. БАРБАРАШ Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», Кемерово, Россия

Цель исследования. Выявить ассоциации аллельных вариантов генов рецепторов врожденного иммунитета [TLRs (Toll-like receptors)] с риском развития атеросклеро-тического поражения брахиоцефальных артерий (БЦА) у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС).

Материалы и методы исследования. В исследование включены 292 пациента, подвергшиеся аортокоро-нарному шунтированию на базе НИИ КПССЗ, г. Кемерово в 2011-2012 гг. В первую группу пациентов без стенозов и стенозами БЦА < 30% по данным ультразвукового исследования вошли 188 (64,38 %) человек, во вторую группу пациентов со стенозами БЦА более 30% вошли 104 (35,62%) пациента. Материалом служили образцы геномной ДНК. Исследовали 8 аллельных вариантов 4 генов системы TLRs: TLR1 (rs5743551 и rs5743611), TLR2 (rs3804099 и rs5743708), TLR4 (rs4986790 и rs4986791), TLR6 (rs3775073 и rs5743810). Выделение производилось методом фенол-хлороформной экстракции из цельной венозной крови. Генотипиро-вание проводили по технологии TaqMan в формате RT-PCR, по протоколу производителя. Математическая обработка проводилась при помощи программы SNPStats. Для оценки риска, обусловленного наличием определенных алле-

лей или генотипов, высчитывали отношения шансов (ОШ) с 95% доверительными интервалами (95%ДИ). Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

Результаты исследования. Распределение частот генотипов во всех группах соответствовало равновесию Харди-Вайнберга (Hardy-Weinberg equilibrium, HWE). Аллель G вариабельного сайта rs4986790 и аллель T вариабельного сайта rs4986791 гена TLR4 ассоциированы с повышением в 2 раза риска развития стенозов БЦА более 30 % у пациентов с ИБС (ОШ = 2,41, 95% ДИ = 1,30-4,44, p = 0,0046 и ОШ = 2,15, 95% ДИ = 1,20-4,00, p = 0,01, соответственно), независимо от пола и возраста пациентов. Кроме того, гетерозиготный А/G генотип вариабельного сайта rs4986790 гена TLR4 ассоциирован с увеличением в 2 раза риска развития стенозов БЦА более 30% у мужчин с ИБС (ОШ = 2,23, 95% ДИ = 1,09-4,56, p = 0,037).

Заключение. Результаты настоящего исследования продемонстрировали участие генов рецепторов врожденного иммунитета (TLRs): вариабельных сайтов (rs4986790 и rs4986791) гена TLR4 в увеличении риска развития атеросклероза БЦА (наличия стенозов более 30%) у пациентов со стабильной формой ИБС.

АССОЦИАЦИИ ВАРИАБЕЛЬНЫХ САЙТОВ rs5743551 ГЕНА TLR1 И rs4986790 TLR4 СО СТЕПЕНЬЮ ПОРАЖЕНИЯ КОРОНАРНОГО РУСЛА, ОЦЕНЕННОЙ ПО ШКАЛЕ SYNTAX SCORE, У БОЛЬНЫХ С ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА

И.И. ЖИДКОВА, А.В. ПОНАСЕНКО, М.В. ХУТОРНАЯ, А.Г. КУТИХИН, О.Л. БАРБАРАШ Федеральное государственое бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», Кемерово, Россия

Цель исследования. Выявить ассоциации аллель- нитета [TLRs (Toll-like receptors)] со степенью пораже-ных вариантов генов рецепторов врожденного имму- ния коронарного русла у пациентов с ишемической