ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ УСТРОЙСТВО

Полезная модель относится к устройствам для иммунохроматографической диагностики, в частности, для определения белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК) для экспресс-диагностики инфаркта миокарда и может быть использовано в биотехнологии, иммунологии и здравоохранении.
Известно диагностическое устройство Кардиодетект (CardioDetect), разработанное компанией Rennesens GmbH (Германия), представляющее собой иммунохроматографический экспресс-тест, состоящий из комбинации пористых материалов и биологических компонентов, таких, как подушка конъюгата, содержащая антитела к БСЖК, конъюгированные с коллоидным золотом, нитроцеллюлозная мембрана с тестовой и контрольной линиями с иммобилизованными антителами, подушка для внесения образца и адсорбирующая подушка. Недостатком известного диагностического устройства является низкая достоверность его показаний. Так во время болевого синдрома невозможно определить степень развития болезни.
Известна тест-система для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты в цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда, которая содержит иммунологическую планшету с окном для внесения образца и окном для просмотра результатов. Внутри планшетки размещена подложка для ламинирования пористых материалов, на которой последовательно по длине и внахлестку расположены фильтрационная подушка для нанесения исследуемого образца крови, подушка для нанесения конъюгата, пористая мембрана и абсорбционная подушка. Причем подушка для нанесения конъюгата пропитана конъюгатом частиц коллоидного золота с первыми моноклональными мышиными антителами, специфичными к сердечному белку, связывающему жирные кислоты. На пористой мембране, поперек последней и параллельно друг другу, сформированы тестовая полоса, содержащая адсорбированные вторые моноклональные мышиные антитела и контрольная полоса, содержащая адсорбированные кроличьи антитела против иммуноглобулинов мыши. Отличительной особенностью известной тест-системы является то, что на пористой мембране, поперек последней сформирована конкурирующая полоса, расположенная вдоль края подушки для нанесения конъюгата и содержащая слой адсорбированных первых моноклональных мышиных антител, специфичных к сердечному белку, связывающему жирные кислоты /RU 87262, G01N 33/558, 2009/.
Известно диагностическое устройство для выявления белка, связывающего жирные кислоты (БСЖК), методом иммунохроматографического анализа, содержащее полоску из листового полипропилена, на среднюю часть которой приклеена мембрана из нитрата целлюлозы с нанесенными на свободную поверхность тестовой линией из моноклональных антител к БСЖК и двух контрольных линий из антимышиных антител. Полоска помещена в защитный корпус с двумя отверстиями, одно из которых предназначено для внесения образца, а другое для просмотра результата /RU 91435, G01N 33/53, 2009/.
Недостатком известных устройств является, во-первых, сравнительно большое время проведения теста. Время тестирования имеет очень большое значение во время болевого синдрома. Данный недостаток обусловлен тем, что перемещение образца крови от окна для внесения образца до окна для просмотра результатов к тестовым полоскам происходит за счет капиллярных процессов, которые протекают достаточно медленно. Во-вторых, при использовании указанных устройств есть вероятность соприкосновения оператора с кровью пациента. Этот недостаток обусловлен, наличием окон в защитном корпусе.
Задачей заявляемой полезной модели является создание иммунохроматографического диагностического устройства, лишенного указанных недостатков. Технический результат заключается в уменьшении времени тестирования, в уменьшении вероятности контакта оператора с кровью пациента, а также в уменьшении количества забираемой у пациента крови.
Для решения поставленной задачи, а также для достижения заявленного технического результата предлагается иммунохроматографическое диагностическое устройство, содержащее помещенную в разъемный корпус тестовую полоску, состоящую из комбинации пористых материалов и биологических компонентов, таких, как подушка конъюгата, содержащая антитела, конъюгированные с коллоидным золотом, нитроцеллюлозная мембрана с тестовой и контрольной линиями с иммобилизованными антителами, подушка для внесения образца и адсорбирующая подушка. Причем в защитном корпусе выполнено два отверстия, одно из которых расположено над тестовой и контрольной линиями, а другое над подушкой для внесения образца. Отличительной особенностью заявляемого устройства является то, что корпус выполнен с направляющими элементами, предназначенными для пространственной фиксации тестовой полоски, а также снабжен крышкой, размещаемой над отверстием, расположенным над подушкой для внесения образца. Причем указанная крышка выполнена с поршнем, входящим в указанное отверстие. Причем торец поршня выполнен скошенным так, что его максимальная высота обращена к ближайшему краю тестовой полоски, а минимальная высота обращена к тестовой и контрольной линиям.
Дополнительно предлагается устройство оснастить средствами для фиксации крышки в закрытом состоянии.
Выполнение корпуса с направляющими элементами, оснащение его крышкой снабженной поршнем указанной формы позволяет снизить количество забираемой у пациента крови, создать дополнительное направленное давление на жидкость образца, и тем самым, ускорить процесс передвижения жидкости образца по тестовой полоске. Закрытие окна крышкой позволяет снизить вероятность соприкосновения оператора с кровью пациента.
На прилагаемом чертеже представлено заявляемое устройство, на фиг.1 - продольный разрез, на фиг.2 - поперечный, где 1 - тестовая полоска, 2 - подушка конъюгата, 3 - нитроцеллюлозная мембрана с тестовой и контрольной линиями с иммобилизованными антителами, 4 - подушка для внесения образца, 5 - адсорбирующая подушка, 6 - разъемный корпус с отверстиями 7 и 8, 9 и 10 - направляющие элементы, 11 - крышка с поршнем 12.
Устройство работает следующим образом. Образец крови наносят на подушку для внесения образца 4 через первое отверстие 7 в защитном корпусе 6. Белок, связывающий жирные кислоты (БСЖК), находящийся в образце крови, взаимодействует с конъюгатом мышиных моноклональных антител к БСЖК, конъюгированными с коллоидным золотом и нанесенными на тестовую полоску 1. В результате образуется окрашенный комплекс антиген-антитело. Поршень 12 крышки 11 вставляют в отверстие 7 и нажатием защелкивают средства для фиксации крышки 13. Закрытая крышка препятствует контакту оператора с кровью пациента. При этом поршень 12 надавливает на подушку для внесения образца и создает дополнительное направленное давление к давлению капиллярных сил. Образовавшийся окрашенный иммунный комплекс движется под действием указанных сил вдоль нитратоцеллюлозной мембраны 3 и взаимодействует с иммобилизованными на тестовой линии моноклональными антителами к БСЖК. В результате первая тестовая линия окрашивается в пурпурный цвет. Не связавшийся на тестовой линии окрашенный комплекс антиген-аантитело, мигрирует далее вдоль нитратоцеллюлозной мембраны 3 и взаимодействуют с иммобилизованными на контрольной линии анти-мышиными антителами. В результате появляется вторая окрашенная пурпурная линия. Окрашивание в пурпурный цвет только контрольной линии означает, что пациент здоров. При этом, контрольная линия должна проявляться всегда, независимо от присутствия БСЖК в образце крови. Отсутствие окрашенной контрольной линии означает, что анализ проведен не правильно, и его надо повторить на новой тест-полоске. Оценка результата анализа осуществляется визуально через второе отверстие 8 в защитном корпусе 6. При окрашенных тестовой и контрольной линий - острая сердечная недостаточность. Окрашенная только контрольная линия - норма.