СИСТЕМА ТЕСТИРОВАНИЯ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЫЗВАННОГО ГИПОКСИЕЙ ПОВРЕЖДЕНИЯ КЛЕТОК

1. Система тестирования для оценки вызванного гипоксией повреждения клеток у млекопитающего, включая человека, содержащая одноразовое устройство (2) с входным отверстием для пробы (4) и собирающую камеру (32), расположенную вместе с разделительным устройством (3), отличающаяся тем, что собирающая камера (32) соединена с по меньшей мере двумя, первой (5A) и второй (5B), ячейками для визуального обнаружения, из которых по меньшей мере одна расположена вместе с химическими средствами для непосредственного обнаружения, где указанная первая ячейка для обнаружения (5A) предназначена для определения, превышает ли количество гемоглобина (Hb) в пробе жидкости организма (9) указанного млекопитающего заранее определенный уровень, и указанная вторая ячейка для обнаружения (5B) предназначена для оценки уровня общего количества лактатдегидрогеназы (LDH) в указанной пробе посредством указанных химических средств.
2. Система тестирования по п.1, где по меньшей мере две ячейки для обнаружения (5A, 5B) расположены вместе со средствами для непосредственного обнаружения, которые представляют собой любые химические средства для непосредственного обнаружения указанных количеств Hb и LDH, соответственно, химические средства для непосредственного визуального обнаружения посредством колориметрии или химические средства для непосредственного обнаружения посредством спектрофотометрических способов.
3. Система тестирования по любому из пп.1-2, где указанная проба представляет собой любую из проб цельной крови, плазмы крови, сыворотки крови, мочи, спинномозговой жидкости (CSF), внутрибрюшинной жидкости или слюны, и если указанная проба представляет собой пробу цельной крови, то указанное разделительное устройство (3) содержит фильтр (31) для отделения плазмы крови (9') от клеток крови в указанной пробе цельной крови (9).
4. Система тестирования по п.1, где объем пробы жидкости организма (9) составляет от 1 мкл до 100 мкл, более предпочтительно от 10 мкл до 75 мкл.
5. Система тестирования по п.1, где общее количество прогностического маркера в пробе жидкости организма (9) оценивают путем сравнения со стандартной референсной шкалой увеличения интенсивности цвета, где отсутствие цвета или менее интенсивный цвет соответствуют низкой концентрации маркера, и более интенсивный цвет соответствует высокой концентрации маркера.
6. Система тестирования по п.1, где одноразовое устройство (2) содержит более двух ячеек для визуального обнаружения (5A-C), расположенных на карте, предпочтительно каждая из указанных ячеек расположена вместе с химическими средствами в виде композиции реагентов, где каждая из указанных ячеек для визуального обнаружения (5A-C) расположена вместе с композицией реагентов для непосредственного визуального обнаружения одного из членов группы, состоящей из прогностических маркеров Hb, LDH, аспартатаминотрансферазы (AST), аланинаминотрансферазы (ALT), лактата, креатинкиназы (СК), K, Mg и Ca.
7. Система тестирования по п.1, где указанное входное отверстие для пробы (4) содержит интегрированный капиллярный коллектор для пробы (7) для отбора пробы жидкости организма млекопитающего.
+
8. Система тестирования по п.1, где указанные химические средства представляют собой композицию реагентов в виде сухих химических средств или влажных химических средств, где указанная композиция реагентов, предназначенная для определения LDH, содержит тетразолиевое соединение, предпочтительно выбранное из группы, состоящей из нитроголубого тетразолия (NBT), 1-(пара-йодфенил)-5-(пара-нитрофенил)-3-фенилформазана (INT) и 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2Н-тетразолия (MTS), и где указанная композиция реагентов дополнительно содержит медиатор в виде феназинметосульфата (PMS) или 1-метокси-5-метилфеназиния метилсульфата (mPMS), где указанная композиция реагентов дополнительно содержит лактат и NAD (никотинамидадениндинуклеотид).
9. Система тестирования по п.8, где указанная композиция реагентов предназначена для определения LDH в буфере, содержащем N-метил-D-глюкамин, и дополнительно где pH внутри ячеек для обнаружения (5A-C) составляет от 9 до 11, предпочтительно от 9,5 до 10,5, более предпочтительно от 9,8 до 10,2.
10. Система тестирования по п.1, где указанные химические средства представляют собой композицию реагентов в виде сухих химических средств или влажных химических средств, где указанная композиция реагентов, предназначенная для определения Hb, содержит бензидиновое соединение, предпочтительно выбранное из группы, состоящей из тетраметилбензидина (ТМВ) и 3,3'-диаминобензидина (DAB), где указанная композиция реагентов содержит пероксидный субстрат, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из пероксида водорода и трет-бутилгидропероксида (T-hydro), дополнительно где pH внутри ячейки для обнаружения (5A) для определения Hb составляет от 3 до 7, предпочтительно от 4,5 до 5,5.
11. Система тестирования по п.1, где указанное одноразовое устройство (2) включает ячейку (8) с ограничителем реакции для прерывания реакции между прогностическим маркером и указанной композицией реагентов после заранее определенного промежутка времени.
12. Система тестирования по п.1, содержащая средство (14) для создания отрицательного давления внутри указанной собирающей камеры (32) для того, чтобы заставить плазму крови из пробы жидкости организма проходить через указанное разделительное устройство (3) и в по меньшей мере две ячейки для обнаружения (5A-B).
13. Система тестирования по п.1, где указанное одноразовое устройство (2) является портативным и имеет длину (I) от 3 до 15 см, предпочтительно от 5 до 10 см, ширину (W) от 0,5 до 5 см, предпочтительно от 2 до 4 см, и толщину (d) от 0,1 до 3 см, предпочтительно от 0,3 до 0,7 см, дополнительно где указанное одноразовое устройство (2) имеет массу от 5 до 50 г.
14. Способ in vitro оценки вызванного гипоксией повреждения клеток у млекопитающего, при котором осуществляют стадии, на которых:
а) получают пробу жидкости организма (9) млекопитающего, содержащую частицы, такие как клетки крови,
б) выделяют указанные частицы из указанной пробы жидкости организма (9) посредством разделительного устройства (3),
в) приводят в контакт указанную отделенную жидкость организма (9') с химическими средствами для непосредственного обнаружения,
г) определяют, является ли количество Hb в жидкости организма (9') выше или ниже заранее определенного порогового значения, и если количество Hb ниже указанного порогового значения:
д) оценивают уровень общего количества лактатдегидрогеназы (LDH) в жидкости организма (9'), и
е) оценивают риск и/или наличие вызванного гипоксией повреждения клеток по оценке уровня LDH в жидкости организма (9').
15. Способ по п.14, где на стадиях (г)-(д) определение и оценку уровней маркеров Hb и LDH, соответственно, осуществляют путем непосредственного визуального обнаружения посредством колориметрии или спектрофотометрического обнаружения.
16. Способ по любому из пп.14-15, где проба представляет собой жидкость организма (9) в виде любого из: цельной крови, плазмы крови, сыворотки крови, мочи, спинномозговой жидкости (CSF), внутрибрюшинной жидкости или слюны, и где указанное разделительное устройство (3) предпочтительно содержит фильтр (31) для отделения плазмы крови (9') от клеток крови в указанной пробе цельной крови (9).
17. Способ по п.14, где объем пробы жидкости организма (9) составляет от 1 мкл до 100 мкл, более предпочтительно от 10 мкл до 75 мкл.
+
18. Способ по п.14, где указанные химические средства представляют собой композицию реагентов в виде сухих химических средств или влажных химических средств, и где указанная композиция реагентов предназначена для определения LDH и содержит тетразолиевое соединение, предпочтительно выбранное из группы, состоящей из: нитроголубого тетразолия (NBT), 1-(пара-йодфенил)-5-(пара-нитрофенил)-3-фенилформазана (INT) и 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2Н-тетразолия (MTS), где указанная композиция реагентов дополнительно содержит медиатор в виде феназинметосульфата (PMS) или 1-метокси-5-метилфеназиния метилсульфата (mPMS), где указанная композиция реагентов дополнительно содержит лактат и NAD, где указанная композиция реагентов предпочтительно предназначена для определения LDH в буфере, содержащем N-метил-D-глюкамин, и где предпочтительно pH композиции реагентов составляет от 9 до 11, предпочтительно от 9,5 до 10,5, более предпочтительно от 9,8 до 10,2.
19. Способ по п.14, где указанные химические средства представляют собой композицию реагентов в виде сухих химических средств или влажных химических средств, где указанная композиция реагентов предназначена для определения Hb и содержит бензидиновое соединение, предпочтительно выбранное из группы, состоящей из тетраметилбензидина (TMB) и 3,3'-диаминобензидина (DAB), где указанная композиция реагентов содержит пероксидный субстрат, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из пероксида водорода и трет-бутилгидропероксида (T-hydro), и где предпочтительно pH композиции реагентов составляет от 3 до 7, предпочтительно от 4,5 до 5,5.
20. Способ по п.14, где общее количество прогностического маркера, такого как Hb и LDH, соответственно, в пробе жидкости организма (9) оценивают путем сравнения со стандартной референсной шкалой увеличения интенсивности цвета, где отсутствие цвета или менее интенсивный цвет соответствуют низкой концентрации маркера, и более интенсивный цвет соответствует высокой концентрации маркера.