ABX196 ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ
ABX196 FOR USE IN TREATMENT OF BLADDER CANCER

Настоящее изобретение относится к соединению ABX196 и включающим его фармацевтическим композициям для применения при лечении рака мочевого пузыря.
Рак представляет собой основную причину смертности, несмотря на годы исследований и успехи в лечении. В особенности, рак мочевого пузыря представляет собой один из наиболее распространенных видов рака среди мужчин. В 2014 году в Соединенных Штатах насчитывалось примерно 696 440 человек, живущих с раком мочевого пузыря.
Мочевой пузырь представляет собой полый орган в нижней части живота, который хранит мочу до тех пор, пока она не выйдет из организма. При раке мочевого пузыря злокачественные (опухолевые) клетки образуются в тканях мочевого пузыря. Признаки и симптомы рака мочевого пузыря включают кровь в моче (гематурия), боль при мочеиспускании, частое мочеиспускание и боль в пояснице. Известно, что курение и частые инфекции мочевого пузыря могут повлиять на риск развития рака мочевого пузыря.
Диагноз обычно ставится путем цистоскопии с биопсией ткани.
Наиболее распространенный тип рака мочевого пузыря - это переходно-клеточная карцинома, которая представляет собой 90% случаев рака мочевого пузыря и поражает уротелиальные клетки, которые выстилают внутреннюю часть мочевого пузыря. Клетки уротелия представляют собой клетки переходного эпителия, которые способны менять форму и растягиваться, когда мочевой пузырь полон. Этот тип рака также называют уротелиальной карциномой. Другие типы рака мочевого пузыря включают плоскоклеточный рак (рак, который начинается с тонких плоских клеток, выстилающих мочевой пузырь) и аденокарциному (рак, который начинается в клетках, которые производят и выделяют слизь и другие жидкости).
Лечение рака мочевого пузыря зависит от стадии рака. Оно может включать хирургическое вмешательство, лучевую терапию, химиотерапию, иммунотерапию или их комбинации.
В настоящее время существует два вида химиотерапии, которые можно применять для лечения рака мочевого пузыря: внутрипузырная или системная химиотерапия.
При внутрипузырной химиотерапии лекарства доставляют в мочевой пузырь через катетер, который вводят через мочеиспускательный канал. Местное лечение уничтожает только поверхностные опухолевые клетки, которые вступают в контакт с химиотерапевтической композицией. Системную химиотерапию обычно проводят внутривенно или перорально. Комбинированные методы лечения, такие как
- цисплатин и гемцитабин;
- карбоплатин и гемцитабин;
- терапия MVAC, которая объединяет 4 препарата: метотрексат, винбластин, доксорубицин и цисплатин,
представляют собой наиболее распространенные химиотерапевтические схемы лечения при раке мочевого пузыря.
Живой аттенуированный штамм Mycobacterium bovis, называемый Bacillus Calmette-Guerin (БЦЖ), представляет собой стандартную иммунотерапию при раке мочевого пузыря. БЦЖ вводят прямо в мочевой пузырь через катетер. БЦЖ прикрепляется к внутренней оболочке мочевого пузыря и стимулирует разрушение опухоли иммунной системой.
Однако все еще существует острая необходимость в новых способах лечения рака мочевого пузыря, в особенности, в химиотерапии и/или иммунотерапии.
В частности, существует необходимость в улучшенной химиотерапии для лечения рака мочевого пузыря.
Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении лечения рака мочевого пузыря, более конкретно, переходно-клеточной карциномы мочевого пузыря.
Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении противоопухолевого соединения, полезного при лечении рака мочевого пузыря.
Другая цель настоящего изобретения заключается в обеспечении эффективного лечения рака мочевого пузыря, в особенности, в обеспечении лечения, которое уменьшает объем опухоли.
Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении лечения рака мочевого пузыря, которое не представляет собой комбинацию химиотерапевтических и/или иммунотерапевтических средств.
Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении фармацевтической композиции, полезной для лечения рака мочевого пузыря, в виде монотерапии или в сочетании с хирургическим вмешательством и/или радиотерапией.
Таким образом, настоящее изобретение относится к соединению ABX196, имеющему следующую формулу (I):
(I),
или к одной из его фармацевтически приемлемых солей для применения в способе лечения рака мочевого пузыря.
Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединению ABX196, имеющему формулу (I):
(I),
или к одной из его фармацевтически приемлемых солей для применения в способе лечения рака мочевого пузыря, где указанный способ не включает введение дополнительного химиотерапевтического средства и/или иммунотерапевтического средства и/или антигена.
Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что специфический агонист NKT, а именно, производное α-галактозилцерамида ABX196, имеющее формулу (I)
(I),
обладает противоопухолевой активностью против рака мочевого пузыря, особенно при применении в виде монотерапии.
Термин «применяемый в виде монотерапии» может означать, что ABX196 не применяют в сочетании с дополнительным химиотерапевтическим средством и/или иммунотерапевтическим средством и/или антигеном.
Более конкретно, соединение ABX196 неожиданно позволяет снизить или уменьшить объем опухоли мочевого пузыря, если его применяют в виде монотерапии. Эта противоопухолевая активность, полученная без применения дополнительного химиотерапевтического и/или иммунотерапевтического средства и/или антигена, представляет большой интерес. В особенности, при таком лечении можно избежать побочных эффектов другого химиотерапевтического и/или иммунотерапевтического средства (других химиотерапевтических и/или иммунотерапевтических средств). Таким образом, переносимость и соблюдение режима лечения пациентами могут быть улучшены.
Осуществление изобретения
ABX196
Соединение ABX196, имеющее формулу (I),
(I)
применяемое в соответствии с изобретением, представляет собой производное α-галактозилцерамида, которое, как известно, стимулирует клетки NKT (Natural Killer T). Согласно настоящему изобретению соединение ABX196 также относится к одной из его фармацевтически приемлемых солей. Термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства ABX196 и которые не представляют собой биологически или иным образом нежелательные соли. Для обзора фармацевтически приемлемых солей см. Berge, et al. ((1977) J. Pharm. Sd., vol. 66, 1).
Как объяснено выше, согласно настоящему изобретению ABX196 можно применять в виде монотерапии при лечении рака мочевого пузыря. Термин «в виде монотерапии» может означать, что никакое дополнительное химиотерапевтическое средство и/или иммунотерапевтическое средство и/или антиген не применяют или не вводят с ABX196 для лечения рака мочевого пузыря; либо одновременно, либо по отдельности (т.е. в сочетании с ABX196). В конкретном воплощении ABX196 не применяют в качестве вакцинного адъюванта.
В одном из воплощений фармацевтическая композиция по изобретению не включает дополнительного химиотерапевтического средства и/или иммунотерапевтического средства и/или антигена. В другом воплощении указанная фармацевтическая композиция не включает или не представляет собой вакцинную композицию.
Тем не менее, ABX196 можно применять в сочетании с хирургией и/или радиотерапией при лечении рака мочевого пузыря.
Химиотерапевтические средства
Применяемый здесь термин «химиотерапевтическое средство» относится к любому соединению, ингибирующему рост клеток, или к цитотоксическому соединению, применяемому в противораковой химиотерапии, и которое отличается от ABX196, как определено выше.
Такие химиотерапевтические средства хорошо известны специалистам в данной области и включают, например:
- алкилирующие средства, включая азотистые иприты, такие как циклофосфамид, ифосфамид, мехлорэтамин, хлорамбуцил и мелфалан; этиленамины и метилмеламины, такие как тиотепа; производные метилгидразина, такие как прокарбазин; алкилсульфонаты, такие как бусульфан; нитрозомочевины, такие как кармустин или ломустин; триазены, такие как дакарбазин и темозоломид; координационные комплексы платины, такие как цисплатин, карбоплатин и оксалиплатин;
- антиметаболиты, включая аналоги фолиевой кислоты, такие как метотрексат; аналоги пиримидина, такие как фторурацил, цитарабин, гемцитабин и капецитабин; аналоги пурина, такие как меркаптопурин, пентостатин, кладрибин и флударабин;
- алкалоиды барвинка, такие как винбластин, винорелбин и винкристин;
- таксаны, такие как паклитаксел и доцетаксел;
- эпиподофиллотоксины, такие как этопозид и тенипозид;
- камптотецины, такие как топотекан и иринотекан;
- противоопухолевые антибиотики, такие как дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, пликомицин и эпирубицин;
- антрацендионы, такие как митоксантрон, митомицин и блеомицин;
- митотические ингибиторы, такие как доластатины;
- ферменты, такие как L-аспарагиназа;
- замещенные мочевины, такие как гидроксимочевина;
- дифференцирующие средства, такие как третиноин;
- ингибиторы протеинкиназы, такие как иматиниб или бриостатин;
- ингибиторы протеасом, такие как гефтиниб и бортезомиб;
- гормоны и антагонисты, включая адренокортикальные супрессанты, такие как аминоглютетимид; адренокортикостероиды, такие как преднизон; прогестины, такие как ацетат мегестрола и медроксипрогестерон; эстрогены, такие как диэтилстилбестрол; антиэстрогены, такие как тамоксифен, идоксифен, дролоксифен, зиндоксифен, триоксифен, ICI 182780, ЕМ-800 и торемифен; ингибиторы ароматазы, такие как анастрозол, летрозол и экземестан; андрогены, такие как пропионат тестостерона; антиандрогены, такие как флутамид; и гонадотропин-рилизинг-агенты, такие как лейпролид.
Термин «химиотерапевтическое средство» может означать соединение, которое выбирают из группы, состоящей из доксорубицина, циклофосфамида, эпирубицина, идарубицина, митоксантрона и оксалиплатина.
Таким образом, в предпочтительном воплощении, ABX196 не применяют в комбинации с доксорубицином при лечении рака мочевого пузыря, как определено выше. В другом предпочтительном воплощении, ABX196 не применяют в комбинации с химиотерапевтическим средством, выбранным из группы, состоящей из цисплатина, карбоплатина, гемцитабина, метотрексата, винбластина и доксорубицина, при лечении рака мочевого пузыря, как определено выше.
Термин «химиотерапевтическое средство» может относиться к соединению в составе фармацевтической композиции, которая может дополнительно включать фармацевтически приемлемые наполнители.
Иммунотерапевтические средства
Как примененяется в настоящем документе, термин «иммунотерапевтическое средство» относится к противораковому средству, которое опосредует противоопухолевые эффекты, инициируя новый или усиливая существующий иммунный ответ против раковых клеток, например, нацеливая антитела или лимфоциты на опухолевый антиген, и которое отличается от ABX196, как было определено выше.
Иммунотерапевтическое средство может быть классифицировано как «активное» или «пассивное» на основании его способности (ре)активировать иммунную систему хозяина против злокачественных клеток.
«Антитело» может представлять собой природное или обычное антитело, в котором две тяжелые цепи связаны друг с другом дисульфидными связями, а каждая тяжелая цепь связана с легкой цепью дисульфидной связью. Как применено в настоящем документе, термин «антитело» обозначает обычные антитела и их фрагменты, а также однодоменные антитела и их фрагменты, в особенности, вариабельную тяжелую цепь однодоменных антител, и химерные, гуманизированные, биспецифические или мультиспецифические антитела.
Как примененяется в настоящем документе, термин антитела также включает «однодоменные антитела», которые представляют собой антитела, чьи определяющие комплементарность области представляют собой часть однодоменного полипептида. Примеры однодоменных антител включают антитела с тяжелой цепью, антитела, естественно лишенные легких цепей, антитела с одним доменом, полученные из обычных четырехцепочечных антител, сконструированные антитела с одним доменом. Однодоменные антитела могут быть получены из любых видов, включая без ограничений, мышь, человека, верблюда, ламу, козу, кролика и быка. Однодоменные антитела могут представлять собой природные однодоменные антитела, известные как антитела, содержащие только тяжелую цепь, лишенные легких цепей, такие как антитела, продуцируемые видами Camelidae, например, верблюдом, дромадером, ламой, альпакой и гуанако.
Вариабельная тяжелая цепь этих однодоменных антител, лишенных легких цепей, известна в данной области техники как «VHH» или «нанотело». Подобно обычным доменам VH, домены VHH содержат четыре FR и три CDR.
Термин «моноклональное антитело» или «mAb», как применен в настоящем документе, относится к молекуле антитела одного аминокислотного состава, которая направлена против определенного антигена.
Моноклональное антитело может быть продуцировано одним клоном В-клеток или гибридомы, но также может быть рекомбинантным, то есть полученным с помощью белковой инженерии.
Термин «химерное антитело» относится к сконструированному антителу, которое содержит одну область или несколько областей из одного антитела и одну или несколько областей из другого антитела или нескольких других антител. В частности, химерное антитело включает домен VH и домен VL антитела, полученные от животного, не представляющего собой человека, в ассоциации с доменом CH и доменом CL другого антитела, в особенности, антитела человека. В качестве животного, не представляющего собой человека, можно применять любое животное, такое как мышь, крыса, хомяк, кролик или тому подобное. Химерное антитело может также обозначать мультиспецифическое антитело, обладающее специфичностью по меньшей мере для двух разных антигенов. В воплощении химерное антитело имеет вариабельные домены мышиного происхождения и константные домены человеческого происхождения.
Термин «гуманизированное антитело» относится к антителу, которое изначально полностью или частично не происходит от человека, и которое было модифицировано для замены определенных аминокислот, в особенности, в каркасных областях тяжелой и легкой цепей, чтобы избежать иммунного ответа или минимизировать иммунный ответ у людей. В большинстве случаев домены CH и CL человека представляют собой константные домены гуманизированного антитела. В воплощении гуманизированное антитело имеет константные домены, происходящие от человека.
2
2
2
«Фрагменты» (обычных) антител включают часть интактного антитела, в особенности, антигенсвязывающую область или вариабельную область интактного антитела. Примеры фрагментов антител включают Fv, Fab, F(ab'), Fab', dsFv, (dsFv), scFv, sc(Fv), диатела, биспецифические и мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител. Фрагмент обычного антитела также может представлять собой однодоменное антитело, такое как антитело с тяжелой цепью или VHH.
Термин «Fab» обозначает фрагмент антитела, имеющий молекулярную массу около 50000 Да и антигенсвязывающую активность, в котором около половины N-концевой стороны Н-цепи и вся L-цепь среди фрагментов, полученных обработкой IgG протеазой папаином, связаны друг с другом через дисульфидную связь.
2
Термин «F(ab')» относится к фрагменту антитела, имеющему молекулярную массу около 100000 Да и антигенсвязывающую активность, которая немного больше, чем у Fab, связанного посредством дисульфидной связи шарнирной области, среди фрагментов, полученных обработкой IgG протеазой пепсином.
2
Термин «Fab'» относится к фрагменту антитела, имеющему молекулярную массу около 50000 Да и антигенсвязывающую активность, который получают путем разрезания дисульфидной связи шарнирной области фрагмента F(ab').
2
Одноцепочечный полипептид Fv («scFv») представляет собой ковалентно связанный гетеродимер VH::VL, который обычно экспрессируется в результате слияния генов, включая гены, кодирующие VH и VL, связанные кодирующим пептид линкером. Фрагмент scFv человека включает CDR, которые поддерживают в соответствующей конформации, в особенности, с применением методов рекомбинации генов. Фрагменты двухвалентных и многовалентных антител могут образовываться либо самопроизвольно путем ассоциации моновалентных scFv, либо могут быть созданы путем соединения одновалентных scFv с помощью пептидного линкера, например, двухвалентный sc(Fv).
«DsFv» представляет собой гетеродимер VH::VL, стабилизированный дисульфидной связью.
2
Термином «(dsFv)» обозначают два dsFv, связанных пептидным линкером.
Термин «биспецифическое антитело» или «BsAb» обозначает антитело, которое объединяет антигенсвязывающие сайты двух антител в одной молекуле. Таким образом, BsAbs способны связывать два разных антигена одновременно.
Термин «мультиспецифическое антитело» обозначает антитело, которое объединяет антигенсвязывающие сайты двух или более антител в одной молекуле.
Термин «диантитела» относится к небольшим фрагментам антител с двумя антигенсвязывающими сайтами, которые включают вариабельный домен тяжелой цепи (VH), связанный с вариабельным доменом легкой цепи (VL) в той же полипептидной цепи (VH-VL). Применяя линкер, слишком короткий для того, чтобы разрешить спаривание между двумя доменами в одной цепи, вынуждают домены спариваться с комплементарными доменами другой цепи и создавать два антигенсвязывающих сайта.
2
2
2
«Иммунотерапевтическое средство» может означать моноклональное антитело или его фрагмент, в особенности, фрагмент, выбранный из группы, состоящей из Fv, Fab, F(ab'), Fab', dsFv, (dsFv), scFv, sc(Fv), диател и VHH.
Под «иммунотерапевтическим средством» предпочтительно понимают моноклональное антитело.
Иммунотерапевтическое средство может представлять собой антитело, в особенности, моноклональное антитело, специфичное к опухолевому антигену, выбранному из группы, состоящей из Her2/neu, EGFR, VEGF, CD20, CD52, CD33, TACE, катепсина S, uPA, uPAR, PD-1, глипикана-3, клаудина-3, клаудина-4, BMCA и CTLA4. Иммунотерапевтическое средство может представлять собой антитело, в особенности, моноклональное антитело, специфичное к PD-1. В одном из воплощений иммунотерапевтическое средство представляет собой антитело, выбранное из группы, состоящей из антитела против PD-1, против CTLA-4, против PD-L1, против GITR, против CD38, против 4-1BB, против OX40, против LAG3 и против TIM-3. Иммунотерапевтическое средство, в особенности, может представлять собой моноклональное антитело против PD1.
Примеры моноклональных антител, специфичных к опухолевым антигенам, хорошо известны специалистам в данной области техники и включают ритуксимаб, трастузумаб (герцептин), алемтузумаб, цетуксимаб, панитумумаб, бевацизумаб, ипилимумаб, ниволумаб (также известный как MBS-936558, MDX-1106 или MDX-1106 или ONO-4538, антитело против PD-1), пембролизумаб (также известный как МК-3475, антитело против PD-1), пидилизумаб (также известный как CT-011, антитело против PD-1), BMS-936559, антитело против PD-1, MPDL3280A, антитело против PD-1, MEDI4736, антитело против PD-1, MSB0010718C, антитело против PD-1, D1(A12), антитело против TACE, A9, антитело против TACE, Fsn0503h, антитело против катепсина S, ATN-658, антитело против uPAR, или J6M0, антитело против BMCA.
«Иммунотерапевтическое средство» может означать соединение, выбранное из группы, состоящей из ниволумаба, пембролизумаба и пидилизумаба.
В предпочтительном воплощении, таким образом, ABX196 не применяют в сочетании с моноклональным антителом против PD1 или БЦЖ, предпочтительно, моноклональным антителом против PD1, при лечении рака мочевого пузыря, как определено выше.
Иммунотерапевтическое средство также может представлять собой конъюгат, включающий моноклональное антитело, как определено выше, и химиотерапевтический агент, как определено выше в разделе «Химиотерапевтическое средство».
В другом воплощении иммунотерапевтическое средство представляет собой адоптивно перенесенную Т-клетку.
Термин «адоптивный перенос клеток» относится к варианту клеточной противоопухолевой иммунотерапии, который обычно включает (1) сбор циркулирующих или инфильтрирующих опухоль лимфоцитов, (2) их отбор/модификацию/размножение/активацию ex vivo и (3) их (повторное) введение пациентам, чаще всего после предварительной лимфодеплеции и в сочетании с иммуностимулирующими средствами.
Иммунотерапевтическое средство может быть составлено в виде фармацевтической композиции, которая может дополнительно включать фармацевтически приемлемые наполнители, как определено ниже.
Антиген
Термин «антиген», как примененяется в настоящем документе, относится к молекуле, которая способна связываться антителом или антителоподобным связывающим белком. Термин дополнительно относится к молекуле, которая может быть применена у животного для выработки антител, которые способны связываться с эпитопом этого антигена. Целевой антиген может иметь один или несколько эпитопов.
2
Предпочтительно, под «антигеном» подразумевают «опухолевый антиген», который представляет собой антиген, экспрессируемый исключительно в опухолевой ткани, ассоциированный с ней или сверхэкспрессируемый в опухолевой ткани. Типичные опухолевые антигены включают, без ограничений, 5-α-редуктазу, α-фетопротеин (AFP), AM-1, APC, APRIL, ген антигена меланомы B (BAGE), β-катенин, Bcl12, Bcr-Abl, Brachyury, CA-125, каспазу-8 (CASP-8, также известную как FLICE), катепсин S, CD19, CD20, CD21/рецептор комплемента 2 (CR2), CD22/BL-CAM, CD23/FcεRII, CD33, CD35/рецептор комплемента 1 (CRT), CD44/PGP-1, CD45/общий антиген лейкоцитов (LCA), CD46/белок мембранного кофактора (MCP), CD52/CAMPATH-1, CD55/фактор ускорения распада (DAF), CD59/протектин, CDC27, CDK4, карциноэмбриональный антиген (CEA), c-myc, циклооксигеназу-2 (кокс-2), делецию в гене колоректального рака (DCC), DcR3, E6/E7, CGFR, EMBP, Dna78, фарнезилтрансферазу, фактор роста фибробластов-8a (FGF8a), фактор роста фибробластов-8b (FGF8b), FLK-1/KDR, рецептор фолиевой кислоты, G250, семейство генов антигена меланомы G (семейство GAGE), гастрин 17, гормон-высвобождающий гормон, ганглиозид 2 (GD2)/ганглиозид 3 (GD3)/ганглиозид-монозиаловая кислота-2 (GM2), гонадотропин-рилизинг-гормон (GnR H), UDP-GlcNAc:R1Man(α1-6)R [GlcNAc к Man (α1-6)] β1,6-Ν-ацетилглюкозаминилтрансферазу V (GnTV), GP1, gp100/Pme1-17, gp-100-in4, gp15, gp75/родственный тирозину белок-1 (gp75/TRP-1), хорионический гонадотропин человека (ХГЧ), гепараназу, Her2/neu, EGFR, вирус опухоли молочной железы человека (HMTV), 70 кДа белок теплового шока (HSP70), обратную транскриптазу теломеразы человека (hTERT), рецептор-1 инсулиноподобного фактора роста (IGFR-1), рецептор интерлейкина-13 (IL-13R), индуцибельную синтазу оксида азота (iNOS), Ki67, KIAA0205, K-ras, H-ras, N-ras, KSA, LKLR-FUT, семейство, кодирующее антиген меланомы (семейство MAGE, включая, по меньшей мере, MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3 и MAGE-4), маммаглобин, MAP17, антиген Melan-A/меланомы, распознаваемый T-клетками-1 (MART-1), мезотелин, MIC A/B, MT-MMPs, муцин, специфичный для семенников антиген NY-ESO-1, остеонектин, p15, P170/MDR1, p53, p97/меланотрансферрин, PAI-1, тромбоцитарный фактор роста (PDGF), PRAME, пробазин, прогенипоэтин, специфический антиген простаты (PSA), специфический мембранный антиген простаты (PSMА), простатическую кислую фосфатазу (PAP), RAGE-1, Rb, RCAS1, SART-1, семейство SSX, STAT3, STn, TAG-72, трансформирующий фактор роста-α (TGF-α), трансформирующий фактор роста-β (TGF-β), uPA, uPAR, TNF-α-превращающий фермент (TACE), тимозин-β-15, фактор некроза опухолей-α (TNF-α), TP1, TRP-2, тирозиназу, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) ), ZAG, p16INK4, PD-1, PD-L1, PD-L2, глипикан-3, клаудин-3, клаудин-4, BMCA и глутатион-S-трансферазу (GST).
Предпочтительно, соединение ABX196 применяют в виде монотерапии, а не в комбинации с антигеном, предпочтительно, не в комбинации с опухолевым антигеном, таким как антиген, экспрессируемый раковыми клетками меланомы, например TRP-2.
Фармацевтическая композиция
Изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей соединение ABX196, имеющее формулу (I):
(I)
для применения, как определено выше, и одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ).
Фармацевтическая композиция, применяемая в контексте изобретения, может дополнительно содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.
Термин «фармацевтически» или «фармацевтически приемлемый» относится к молекулярным веществам и композициям, которые не вызывают неблагоприятную, аллергическую или другую неблагоприятную реакцию при введении млекопитающему, особенно, человеку, в зависимости от ситуации. Фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель относится к нетоксичному твердому, полутвердому или жидкому наполнителю, разбавителю, инкапсулирующему материалу или вспомогательному составу любого типа.
Фармацевтическая композиция, применяемая в контексте изобретения, может быть введена любым подходящим путем, хорошо известным специалисту в данной области техники. Как понятно специалистам в данной области техники, фармацевтическая композиция может быть составлена соответствующим образом, чтобы быть совместимой с предполагаемым путем введения. Примеры подходящих путей введения включают парентеральное, например, внутривенное, внутрикожное, подкожное, внутримышечное, внутрибрюшинное, пероральное (например, буккальное, ингаляционное, назальное и легочное распыление), внутрикожное, трансдермальное (местное), трансмукозальное, внутриглазное и ректальное введение.
Предпочтительно, ABX 196 или фармацевтическую композицию, применяемую в контексте изобретения, вводят внутривенно, интравезикально (т.е. местно в мочевой пузырь) или внутрь опухоли.
В одном из воплощений ABX196 или фармацевтическую композицию, применяемую в контексте изобретения, вводят интравезикально (т.е. местно в мочевой пузырь) или внутривенно.
ABX 196 или фармацевтическая композиция, применяемая в контексте изобретения, могут быть введены один раз нуждающемуся в этом пациенту, или несколько раз.
Фармацевтическая композиция, применяемая в контексте изобретения, может быть доставлена в дозах соединения ABX196, равных, по меньшей мере, 0,2 мкг/пациент. В одном из воплощений фармацевтическая композиция, применяемая в контексте изобретения, может быть доставлена в дозах соединения ABX196, равных, по меньшей мере, 3 нг/кг, например, от 3 нг/кг до 5 нг/кг. Эффективные дозы также будут варьировать в зависимости от пути введения.
Способ лечения
Настоящее изобретение также относится к способу лечения рака мочевого пузыря, как определено выше, включающему введение нуждающемуся в этом пациенту, терапевтически эффективного количества соединения ABX196, имеющего формулу (I), как определено выше.
(I)
В конкретном воплощении, указанный способ не включает введение дополнительного химиотерапевтического средства и/или иммунотерапевтического средства и/или антигена, как определено выше.
Настоящее изобретение также относится к применению соединения ABX196, имеющего формулу (I)
(I)
для изготовления лекарственного средства для лечения рака мочевого пузыря. В конкретном воплощении указанное применение не включает введение дополнительного химиотерапевтического средства и/или иммунотерапевтического средства и/или антигена, как определено выше.
Рак мочевого пузыря
В одном из воплощений рак мочевого пузыря выбирают из группы, состоящей из переходно-клеточной карциномы мочевого пузыря, плоскоклеточного рака мочевого пузыря и аденокарциномы мочевого пузыря; предпочтительно, переходно-клеточной карциномы мочевого пузыря.
Переходно-клеточная карцинома может быть с низким потенциалом злокачественности или с высоким потенциалом злокачественности. Термин «переходно-клеточная карцинома с низким потенциалом злокачественности» может означать рак мочевого пузыря, который рецидивирует после лечения (рецидивирующий рак). Под «переходно-клеточной карциномой с высоким потенциалом злокачественности» можно понимать рак мочевого пузыря, который рецидивирует после лечения и распространяется в мышечный слой мочевого пузыря и в другие части тела и, в конечном итоге, в лимфатические узлы.
В другом воплощении, рак мочевого пузыря является поверхностным или инвазивным раком.
Под «поверхностным раком мочевого пузыря» подразумевается рак мочевого пузыря, локализованный в слизистой оболочке мочевого пузыря.
Под «инвазивным или инфильтративным раком» подразумевается рак мочевого пузыря, который распространяется через слизистую оболочку мочевого пузыря и проникает в мышечную стенку мочевого пузыря и/или распространяется на близлежащие органы и/или лимфатические узлы.
В конкретном воплощении, рак мочевого пузыря выбирают из рака мочевого пузыря, имеющего одну из следующих стадий:
- Стадия 0а: эту стадию рака обнаруживают только на поверхности внутренней оболочки мочевого пузыря. Этот тип рака мочевого пузыря также называется неинвазивной папиллярной уротелиальной карциномой (Ta, N0, M0).
- Стадия 0is: эта стадия рака, также известная как плоская, обнаруживается только на внутренней оболочке мочевого пузыря и представляет собой высокозлокачественную стадию (Tis, N0, M0).
- Стадия I: рак перерос через внутреннюю оболочку мочевого пузыря в собственную пластинку (T1, N0, M0).
- Стадия II: рак распространился на толстую мышечную стенку мочевого пузыря. Это также называют инвазивным раком или мышечно-инвазивным раком (T2, N0, M0).
- Стадия III: рак распространился по всей мышечной стенке до жирового слоя ткани, окружающей мочевой пузырь. Это может также распространиться на простату у мужчины или матку и влагалище у женщины (T3 or T4a, N0, M0).
- Стадия IV: любое из этих условий:
- Опухоль распространилась на стенку таза или брюшную стенку, но не на лимфатические узлы или другие части тела (T4b, N0, M0).
- Опухоль распространилась на один или несколько регионарных лимфатических узлов, но не на другие части тела (любая из T, N1-3, M0).
- Опухоль может распространяться или не распространяться на лимфатические узлы, но распространяется на другие части тела (любая из T, любая из N, M1).
В конкретном воплощении, в соответствии с применением изобретения, объем опухоли мочевого пузыря после лечения соединением ABX196 уменьшается по сравнению с объемом опухоли мочевого пузыря до лечения.
В другом конкретном воплощении в соответствии с применением изобретения, объем опухоли мочевого пузыря после лечения соединением ABX196 уменьшается по сравнению с объемом опухоли мочевого пузыря после лечения другим химиотерапевтическим средством и/или иммунотерапевтическим средством и/или антигеном, предпочтительно другим иммунотерапевтическим средством, таким как антитело против PD1.
В другом конкретном воплощении в соответствии с применением изобретения, объем опухоли мочевого пузыря после лечения соединением ABX196 уменьшается или равен объему опухоли мочевого пузыря после лечения БЦЖ, предпочтительно, в течение той же продолжительности лечения.
В одном из воплощений в соответствии с применением изобретения, объем опухоли мочевого пузыря после лечения соединением ABX196 уменьшается по сравнению с объемом опухоли мочевого пузыря после лечения контрольным среством. Предпочтительно, указанное лечение с помощью контрольного срества относится к лечению носителем (то есть композицией, не содержащей противоопухолевого агента), иммунотерапевтическим средством или химиотерапевтическим средством, вводимым в пузырь с опухолью, предпочтительно в поцессе тго же самого лечения. В одном из воплощений «объем опухоли мочевого пузыря» относится к среднему значению «объема опухоли мочевого пузыря».
В одном из воплощений отношение Т/С (%) соединения ABX196 составляет от 50% до 60%, например, составляет около 54% и, предпочтительно, меньше или равно 42%.
Процентное соотношение подвергнутый лечению/контрольный (Т/С (%)) можно рассчитать путем деления медианного объема подвергнутой лечению опухоли на медианный контрольный объем опухоли и умножения его на 100. Например, средний подвергнутый лечению объем опухоли получают после введения ABX196, и средний контрольный объем опухоли получают после введения раствора без ABX196, причем указанные объемы опухоли оценивают одновременно.
В конкретном воплощении, указанное лечение рака мочевого пузыря дополнительно включает хирургическое вмешательство и/или лучевую терапию.
Под «хирургическим вмешательством» могут подразумевать трансуретральную резекцию опухоли мочевого пузыря (удаление только опухоли) или частичную или полную цистэктомию (удаление части или всего мочевого пузыря).
Под «лучевой терапией» могут подразумевать применение высокоэнергетического рентгеновского излучения или других частиц для разрушения раковых клеток. Лучевая терапия может проводиться с применением имплантатов. Режим лучевой терапии обычно состоит из определенного количества процедур, проводимых в течение определенного периода времени.
Все вышеупомянутые воплощения относятся к применению ABX196, как определено выше, или к применению фармацевтической композиции, как определено выше, или к способу лечения согласно изобретению.
В соответствии с изобретением термин «пациент», «субъект» или «субъект, нуждающийся в этом» предназначен для человека или млекопитающего, не представляющего собой человека, которые поражены или могут быть поражены раком мочевого пузыря.
В контексте изобретения термин «лечить» или «лечение» означает изменение, облегчение, подавление развития или предотвращение расстройства или состояния, к которому относится такой термин, или одного или нескольких симптомов такого расстройства или состояния.
Под «терапевтически эффективным количеством» соединения по изобретению подразумевается достаточное количество соединения ABX196 для лечения рака мочевого пузыря (например, для ограничения роста или для замедления или блокирования метастазирования опухоли) при разумном соотношении польза/риск применимо к любому медицинскому лечению. Понятно, однако, что общее ежедневное применение соединений по настоящему изобретению будет решаться лечащим врачом в рамках здравого медицинского суждения. Конкретный терапевтически эффективный уровень дозы для любого конкретного субъекта будет зависеть от множества факторов, включая расстройство, которое лечат, и степень тяжести расстройства, активность применяемых конкретных соединений, конкретные применяемые комбинации, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и рацион питания субъекта, время введения, способ введения и скорость выведения конкретных применяемых соединений, продолжительность лечения, лекарственные средства, применяемые в комбинации или одновременно с конкретными применяемыми соединениями, и тому подобные факторы, хорошо известные в области медицины. Например, специалист в данной области техники может начать с уровней дозы соединений, которые ниже уровней, требуемых для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозировку до тех пор, пока не будет достигнут желаемый эффект
Более конкретно, термин «лечение рака мочевого пузыря», как применен в настоящем документе, включает, по меньшей мере, одну из следующих особенностей: ослабление симптомов, связанных с раком мочевого пузыря, уменьшение степени раковой опухоли (например, уменьшение роста опухоли), стабилизация состояния раковой опухоли (например, ингибирование роста опухоли), предотвращение дальнейшего распространения рака (например, метастазирование), предотвращение возникновения или рецидива рака, задержка или замедление прогрессирования рака (например, уменьшение роста опухоли) или улучшение в течении рака (например, уменьшение размера или объема опухоли).
Настоящее изобретение будет дополнительно проиллюстрировано приведенными ниже фигурами и примерами.
Описание чертежей
На фиг. 1 показан средний объем опухоли мочевого пузыря как функция от времени после индукции опухоли в зависимости от различных тестируемых методов лечения.
На фиг. 2 показано ингибирование роста опухоли (T/C%) на 23-й день после индукции опухоли в зависимости от различных тестируемых методов лечения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Противоопухолевая активность соединения ABX196
ЦЕЛИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Определение противоопухолевой активности ABX196 или антитела против PD-1, вводимого системно в виде монотерапии, в сингенных эктопических моделях MBT2 и, в особенности, оценка способности этих средств лечить установленные подкожные опухоли представляет собой целью данного исследования.
МАТЕРИАЛЫ И СПОСОБЫ
1. Продукты
Антитело против PD-1 (ссылка: BE0146, «BioXcell»; клон: RMP1-14, реакционная способность: мышь; изотип: крысиный IgG2a; условия хранения: +4°C). Антитело против PD-1 получали в фосфатно-солевом буфере (PBS) или другом подходящем носителе в соответствии с рекомендацией производителя. Антитело против PD-1 вводили в дозе 10 мг/кг. Антитело против PD-1 вводили в брюшную полость мышей (внутрибрюшинно, IP). Антитело против PD-1 вводили в дозе 10 мл/кг/введение.
ABX196 обеспечивают в виде раствора в концентрации 250 мкг/мл и вводили в дозе 100 нг на мышь. ABX196 вводили внутривенно в хвостовую вену мышей (IV, болюс). ABX196 вводили в объеме фиксированной дозы 100 мкл (т.е. приблизительно 5 мл/кг/введение для одной мыши весом 20 г).
2. Линия раковых клеток
Таблица 1: Линия раковых клеток
Клеточная линия
Тип
Вид
Происхождение
MBT-2
Рак мочевого пузыря
мышь
ATCC <sup>a</sup>
- Клеточная линия мышиных MBT-2 была получена из канцерогенной опухоли мочевого пузыря у мышей C3H/HeJ. Клеточная линия MBT-2 была получена от доктора Cozzi, Мемориальный онкологический центр Слоана-Кеттеринга (Memorial Sloan Kettering Cancer Center) (Нью-Йорк, США).
2
Опухолевые клетки выращивали в виде монослоя при 37°C в увлажненной атмосфере (5% CO, 95% воздуха). Культуральная среда представляла собой среду RPMI 1640, содержавшую 2 мМ L-глутамин (ссылка: BE12-702F, «Lonza», Verviers, Belgium), дополненную 10%-ной фетальной бычьей сывороткой (ссылка: 3302, «Lonza»). Опухолевые клетки прикреплялись к пластиковым флаконам. Для экспериментального применения опухолевые клетки отделяли от культурального флакона путем 5-минутной обработки трипсином-версеном (ссылка: BE02-007E, «Lonza»), в среде Хэнкса без кальция или магния (ссылка: BE10-543F, «Lonza») и нейтрализовали добавлением полной культуральной среды.
Клетки подсчитывали и их жизнеспособность оценивали с помощью анализа исключения 0,25%-ного трипанового синего.
3. Животные
68 (шестьдесят восемь) здоровых самок мышей C3H/HeJ (C3H/HeOuJ) в возрасте 6-7 недель были получены от компании The Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine) для модели MBT-2.
4. Индукция опухолей МБТ-2 у животных
6
Опухоли MBT-2 индуцировали путем подкожной инъекцией 1×10 клеток в 200 мкл RPMI 1640 в правый бок шестидесяти восьми самок животных.
5. Схема лечения
3
Лечение начинали, когда средний объем опухолей достигал 80-120 мм (13-й день в данном эксперименте). Шестьдесят восемь мышей для модели MBT-2 рандомизировали в соответствии с их индивидуальным объемом опухоли в 4 группы (одна не показана) по 12 животных в каждую с применением программного обеспечения Vivo Manager («Biosystemes», Couternon, Франция). Статистический тест (дисперсионный анализ, ANOVA) выполняли для проверки однородности между группами. Был выбран следующий график лечения:
Животные из группы 1 получали внутривенную инъекцию носителя ABX196 и интраперитонеальную инъекцию носителя антитела против PD-1,
Животные из группы 2 получали внутривенную инъекцию 100 нг ABX196,
Животные из группы 3 дважды в неделю получали антитело против PD-1.
Схема лечения приведена ниже в таблице 2.
Table 2: Схема лечения
Группа
Число животных
Лечение
Доза (мг/кг/введение)
Путь введения
Схема лечения
1
12
Носитель для ABX196Носитель для Ab против PD-1
--
IVIP
Q1Dx1TWx2
2
12
ABX196
100 нг
IV
Q1Dx1
3
12
Ab против PD-1
10 мг/кг
IP
TWx2
IP - интраперитонеальная инъекция
IV – внутривенная инъекция
-*: интраперитонеальную инъекцию Ab против PD-1 начинали после первого внутривенного введения ABX196 (сопутствующее введение) без какой-либо задержки.
РЕЗУЛЬТАТЫ
1. Объем опухоли:
Результаты, приведенные на рисунке 1, показывают средний объем опухоли в зависимости от времени после индукции опухоли (после заражения опухолью). Эти результаты показывают, что ABX196 более эффективно уменьшает объем опухоли, чем антитела против PD-1.
2. Ингибирование роста опухоли:
Статистический анализ ингибирования роста опухоли проводили, как показано в ниже таблице 3.
Таблица 3: Статистический анализ роста опухоли на 20 день внутри каждой группы
однофакторный дисперсионный анализ ANOVA; значение р = 0,0226 (*); парный критерий множественных сравнений Бонферрони
Носитель
ABX196
Анти-PD-1
Носитель
*
ns
ABX196
*
ns
Анти-PD-1
ns
ns
Ns: несущественно; p-значение < 0,05 *
Ингибирование роста опухоли (T/C) определяют как отношение средних объемов опухоли получавшей лечение группы по сравнению с контрольной группой. Оптимальное значение представляет собой минимальное отношение Т/С, отражающее максимальное достигнутое ингибирование роста опухоли. На фигуре 2 видно, что ABX196 более эффективно ингибирует рост опухоли, чем антитела против PD-1. Соответствующие значения T/C (%) приведены ниже в таблице 4.
Таблица 4: Значения T/C (%)
ABX196
Анти-PD-1
T/C (%)
54
93
Пример 2: Сравнительное исследование со стандартным лечением рака мочевого пузыря
Цель: сравнить ABX196 с вакциной БЦЖ (стандартное лечение) в модели OT
Стадии протокола:
- Амплификация in vitro линии опухолевых клеток MBT-2;
- Ортотопическая инъекция опухолевых клеток мышам;
- Рандомизация мышей по массе тела (4 группы, 12 мышей/группа);
- Подготовка к лечению;
- Лечение групп мышей в соответствии с приведенным ниже графиком:
Группа
Число животных
Лечение
Доза (мг/кг/введение)
Путь введения
Схема лечения
1
12
Не получавшие лечение
-
-
-
2
12
ABX196
IV
Q1Dx1
3
12
Ab против PD-1
10
IP
TWx2
4
12
БЦЖ
1,35
Инстилляция
Q7Dx3
IP- интраперитонеальная инъекция, IV- внутривенная инъекция
- Два раза в неделю мониторинг мышей на массу тела;
- Ежедневный мониторинг мышей на предмет поведения и выживания; и
- Сбор крови (для приготовления сыворотки) у всех мышей через 12-18 ч после первой инъекции ABX196.
Пример 3: Исследование противоопухолевой активности ABX196, антител, направленных против PD-1, и БЦЖ у мышей, несущих ортотопические опухолевые клетки mbt-2
1. Животные и уход за животными:
Приобрели 105 мышей C3H и содержали их в клетках в условиях SPF в течение 6-ти недель.
2. Исследование противоопухолевой активности:
Стадии протокола:
- Амплификация in vitro линии опухолевых клеток MBT-2;
- Ортотопическая инъекция опухолевых клеток мышам;
- Рандомизация мышей по весу тела (7 групп, 12 мышей/группа, всего 84 мыши); и
- Лечение мышей в соответствии с приведенным ниже графиком:
Группа
Число животных
Лечение
Доза (мг/кг/инъекцию)
Путь введения
Схема лечения
1
12
Не лечили
-
-
-
2
12
ABX196
Должна быть определена
IV
Q1Dx1
3
12
Ab против PD-1
10
IP
TWx2
4
12
БЦЖ
1,35
Инстилляция
Q7Dx3
5
12
ABX196Ab против PD-1
Должна быть определена10
IVIP
Q1Dx1TWx2
6
12
ABX196Ab против PD-1
Должна быть определена10
IVIP
Q10Dx2TWx2
7
12
ABX196БЦЖ
Должна быть определена1,35
IVИнстилляция
Q10Dx2Q7Dx3
IP- интраперитонеальная инъекция, IV- внутривенная инъекция
*Q1Dx1= одно введение
TWx2 = Два раза в неделю
Q7Dx3= 1 инъекция каждые 7 дней, x3
Q10Dx2 : 2 инъекции каждые 10 дней