Антибиотикорезистентность бактерий микробиоценозов водных объектов как показатель антропотехногенной нагрузки на водоем (на примере реки Лены)

5. Морозова Т.И., Завалев В.И., Моклецов Е.Н. Возможности в лечении больных с множественной лекарственной устойчивостью туберкулеза // 12 Национальный Конгресс по болезням органов дыхания: Сб. резюме. — М., 2002. - № 117. - С.300.

6. Морозова Т.И., Паролина Л.Е., Завалев В.И. Туберкулез легких: социальные проблемы // Саратов: Изд-во СГМУ, 2003. - С.150.

7. ПаролинаЛ.Е. Особенности течении туберкулеза у больных с социальной дезадаптацией в современных условиях: Дисс. ... док. мед. наук. — М., 2002 — 328 с.

8. Чуканов В.И., Мишин В.Ю., Васильева И.А. Полирезис-тентный туберкулез — особенности выявления и лечения // Бюллетень СО РАМН. - 2000. - Т. 95, № 1. -С.56-62.

© АНГАНОВА Е.В., КУРНОСОВ А.Д., САМОЙЛОВА И.Ю., САВИЛОВ Е.Д. - 2008

АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ БАКТЕРИЙ МИКРОБИОЦЕНОЗОВ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ КАК ПОКАЗАТЕЛЬ АНТРОПОТЕХНОГЕННОЙ НАГРУЗКИ НА ВОДОЕМ (на примере

реки Лены)

Е.В. Анганова, А.Д. Курносов, И.Ю. Самойлова, Е.Д. Савилов

(Институт эпидемиологии и микробиологии ГУ НЦ медицинской экологии ВСНЦ СО РАМН, г. Иркутск, директор — к.м.н. М.Л. Миронова; ФГУ «Ленское государственное управление водных путей и судоходства», "Республика Саха (Якутия); Территориальное управление Федеральной службы в сфере защиты прав потребителей и благополучия

человека по Республике Саха

Резюме. В статье представлены результаты изучения антибиотикоустойчивости бактерий микробного сообщества реки Лены (Республика Саха (Якутия) на различных участках. Определение резистентности бактерий к антимикробным препаратам проведено стандартным методом серийных разведений. Показано, что на участкереки Якутск-Жатай, испытывающей выраженный антропотехногенный прессинг, бактерии микробиоценоза реки Лены обладают достоверно более высоким уровнем антибиотикоустойчивости по сравнению с микробным сообществом реки на всей ее протяженности.

Ключевые слова: поверхностные водоемы, антропотехногенное загрязнение, устойчивость к антимикробным препаратам. _________________________________

В последние годы в связи с увеличением антропо-техногенного воздействия на окружающую среду значительно усилился интерес к изучению антибиотикоустойчивости микроорганизмов природных, в частности, водных экосистем. Исследованиями Н.Н. Мойсе-енко [3], Л.М. Мамонтовой с соавт. [2], Е.Д. Савилова с соавт. [6], Е.А. Шорниковой [7] и др. показано, что изменение антибиотикоустойчивости штаммов бактерий носит закономерный характер: частота встречаемости микроорганизмов, обладающих множественной резистентностью к антибиотикам, зависит от степени антропогенного загрязнения среды обитания и в районах экологического неблагополучия существенно возрастает. В этой связи отметим, что в Республике Саха (Якутия) река Лена, являющаяся основной транспортной магистралью данного региона, наиболее выраженное антропотехногенное воздействие испытывает на участке Якутск-Жатай. Цель работы — изучение антибио-тикоустойчивости бактерий микробного сообщества р.

Лены на участке Якутск-Жатай в целях определения возможности использования данного показателя для оценки состояния водных экосистем в условиях выраженного антропотехногенного воздействия.

Материалы и методы

Обор проб воды осуществляли согласно ГОСТ 515922000. Всего выделено более 3500 штаммов бактерий. Устойчивость к 12 антимикробным препаратам (АМП) шести фармакологических групп (пенициллины, цефалоспо-рины, аминогликозиды, фторхинолоны, тетрациклины, сульфаниламиды) осуществляли методом серийных разведений в соответствии с Методическими указаниями

4.2.1890-04 [4]. Оценку результатов проводили согласно международным стандартам МССЬ8. Полирезистентными считали штаммы бактерий, устойчивые к шести и более антибиотикам.

Статистическую обработку материалов проводили с использованием стандартных параметрических и непараметрических критериев [1,5], а также пакета компьютерных

программ Statistica for Windows. Значимы различия при р<0,05.

Результаты и обсуждение

На участке р. Лены в районе населенных пунктов Якутск и Жатай расположена столица республики, с высокой для северных городов плотностью населения (1550 чел./кв.м). Промышленность данного города представлена Кангаласским угольным разрезом, ГРЭС, ТЭЦ, предприятиями строительства и производства строительных материалов, переработки сельскохозяйственной продукции и т.д. Практически треть сточных вод г. Якутска сбрасывается в Лену без очистки.

На левом берегу реки в районе пос. Жатай, расположенного в 15 км ниже г. Якутска, находится нефтебаза, с территории которой в поверхностные воды поступают нефтепродукты в результате аварийных или случайных разливов. Кроме того, в Жатае расположен крупный судоремонтно-судостроительный завод. Эффективность очистки промышленных и хозяйственнобытовых сточных вод на канализационных очистных сооружениях п. Жатай составляет: по взвешенным веществам — 59%, БПК-46, азоту аммонийному — 36,3%, нитритам-25, нитратам-55, СПАВ — 25% [8].

На указанном участке реки (Якутск-Жатай), который рассмотрен нами как опытный район, проведен анализ антибиотикорезистентности бактерий микробных сообществ поверхностных вод. Изучение некоторых аспектов антибиотикоустойчивости популяций микроорганизмов вод р. Лена позволило выявить значительные различия в частоте встречаемости резистентных штаммов бактерий в районе Якутска и Жатая по сравнению с усредненными показателями по всей реке, от ее верховья до моря Лаптевых (территория сравнения).

Полученные данные свидетельствуют, что в микробных сообществах реки опытного района достоверно чаще (р<0,01) встречались бактерии, обладающие по-

ЛИТЕРАТУРА

1. Васильева И.А. Эффективность химиотерапии больных лекарственно-устоичивым туберкулезом легких: Дис... докт. мед. наук. — М., 2002. — 224 с.

2. Валиев Р.Ш. Особенность течения и эффективность лечения различных вариантов деструктивного туберкулеза легких в современных социально-экономических условиях: Дис. докт. мед. наук. — Казань, 2000. — 338 с.

3. Мишин В.Ю. Лекарственно-устойчивый туберкулез. — М., 2005. - 184 с.

4. Мишин В.Ю., Степанян И.Э. Контролируемая химиотерапия туберкулеза органов дыхания в современных условиях. Проблема лекарственной устойчивости // Рус. мед. журнал. — 2000. — Т. 8, № 12. — С.496-500.

Рис. 2. Количество устойчивых к исследованным антимикробным препаратам бактерий вод реки Лены на опытном и контрольном участках (%).

лиантибиотикорезистентностью. Так, множественной устойчивостью к антимикробным препаратам обладали 16,7% штаммов бактерий, выделенных из вод реки Лены, а на участке Якутск-Жатай данный показатель оказался выше в два раза и составил 38,8%. Кроме того, на территории сравнения доминировали штаммы бактерий, имеющие узкий спектр резистентности (к трем-пяти препаратам), а в водах опытного района микроорганизмы обладали более широким спектром устойчивости, с доминированием резистентности к четырем-семи антибиотикам. В частности, среди бактерий микробного сообщества вод на опытном участке по сравнению с рекой на всей ее протяженности чаще встречались микроорганизмы, устойчивые к четырем (35,7% и 20,3% соответственно), семи (10,1% и 5,9% соответственно) и девяти (5,7% и 1,1% соответственно) антимикробным препаратам. Напротив, количество бактерий, резистентных к двум (8,6% и 14,2% соответственно) и трем (10,0 и 18,2% соответственно) препаратам, здесь было меньшим по сравнению с р. Леной на участке сравнения (рис. 1).

Также следует отметить, что в микробиоценозе опытного участка реки микроорганизмы с фенотипом устойчивости 0 (чувствительные ко всем протестированным антибиотикам) встречались крайне редко (0,7%); в то же время в целом по р. Лене данный пока-

затель составил 5,4%. Такие микроорганизмы, чувствительные ко всем протестированным антимикробным препаратам, были выявлены в районах 17 населенных пунктов, расположенных на р. Лене, причем в ряде из них они составляли около трети всех культур.

Сравнение устойчивости к отдельным антимикробным препаратам показало, что микроорганизмы, полученные в опытном районе имели более высокий уровень устойчивости к большинству из препаратов

была достоверно выше (р<0,05). Только к трем АМП (хлорамфеникол, цефатаксим и пефлоксацин) резистентность микроорганизмов исследуемых участков реки была примерно равной, и лишь в одном случае (рифам-пицин) устойчивость микроорганизмов на опытном участке оказалась ниже, чем на участке сравнения (рис. 2). Таким образом, по критерию Вилкоксона микроорганизмы, выделенные из воды в опытном районе имели достоверно более высокий уровень устойчивости к антимикробным препаратам по сравнению с территорией сравнения (р = 0,01).

Так, устойчивость бактерий микробиоценоза реки на участке Якутск-Жатай (по сравнению с рекой в целом) к тетрациклину составила 93,0%; цефазолину — 85,3%, ко-три-моксазолу — 61,6%. Среди бактерий, полученных на всей протяженности реки, данные показатели были существенно ниже и составили 67,7; 63,3 и 50,2% соответственно. Кроме того, в воде р. Лена в районе нефтебазы в 2,3 раза чаще встречались микроорганизмы, устойчивые к канамицину, в 2,1 — к гентами-цину, в 1,7 — к стрептомицину.

Таким образом, проведенные исследования показывают, что в створах опытной территории, испытывающей выраженный ант-ропотехногенный прессинг, бактерии микробиоценоза реки Лены обладают достоверно (р<0,01) более высоким уровнем как полиантибиотикоустойчи-вости, так и резистентности к отдельным антимикробным препаратам, а также имеют более широкий спектр резистентности по сравнению со штаммами бактерий из вод территории сравнения. Это свидетельствует о том, что показатель антибиотикорезистентности микроорганизмов, подвергшихся антропотехногенному воздействию, целесообразно использовать в качестве одного из индикаторов экологической нагрузки на водоемы.

01 23456789 10 11 12

Количество антимикробных препаратов

р. Лена в целом К р. Лена на участке Якутск-Жатай Рис. 1. Сравнительная характеристика количественных спектров антибиотикоустойчивости бактерий микробных сообществ р. Лена на всей протяженности реки и на участке Якутск-Жатай (%).

ANTIBIOTIC RESISTANT OF BACTERIA MICROBIC COMMUNITY WATER OBJECTS AS A PARAMETER OF ANTHROPOGENOUS LOADINGS ON A RESERVOIR (ON AN EXAMPLE OF

THE RIVER LENA)

E.V. Anganova, A.D. Kurnosov, I.J. Samojlova, E.D. Savilov

In the article the results of studying antibiotic resistant bacteria of microbic community of the river Lena (Republic Saha (Yakutia) on various sites are given. Definition resistant bacteria to antimicrobic preparations is spent by a standard method of serial cultivations. It is shown, that on a site of the river Yakutsk — Zhataj testing expressed anthropogenous pressure, bacteria of microbic community the rivers of Lena have authentically more high level of antibiotic resistant in comparison with microbic community of the river on all its extent.

2.

4.

ЛИТЕРАТУРА

Амшарин Н.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. — Л.: Медгиз, 1962. - 180 с.

Мамонтова Л.М., Савилов Е.Д., Протодьяконо А.П. и др. Инфекционная «агрессивность» окружающей среды: Концепция микробиологического мониторинга. — Новосибирск: Наука, 2000. — 240 с.

Мойсеенко Н.Н. Характеристика санитарно-бактериологического состояния прибрежной морской воды с

Гигиенические аспекты изучения биологического загрязнения объектов окружающей среды: Мат. X всесо-юзн. конф. «Гигиеническое изучение биологического загрязнения окружающей среды и разработка оздоровительных мероприятий». — М., 1988. — С.98-99. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания

4.2.1890-04. — М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. — 91 с.

5. Савилов Е.Д, Мамонтова Л.М., Астафьев В.А. и др. Применение статистических методов в эпидемиологическом анализе. — М.: МЕДпресс-информ, 2004. — 112 с.

6. Савилов Е.Д., Анганова Е.В., Мамонтова Л.М. Эпидемиологический анализ биологического загрязнения водоемов Сибири и Севера / Актуальные вопросы частной эпидемиологии: Мат. 9 съезда Всерос. науч.-практ. об-ва эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, 26-27 апреля 2007 г. — М.: Санэпидмедиа, 2007. — Т. 1. — С.194-195.

7. Шорникова Е.А. Диагностика состояния экосистем водотоков по гидрохимическим и микробиологическим показателям: Автореф. дисс.канд. биол. наук. — Петрозаводск, 2007. — 23 с.

8. Савилов Е.Д., Долженко Ю.А., Протодьяконов и др. Эко-лого-эпидемиологическая оценка качества вод реки Лены. — Новосибирск: Наука, 2006. — 136 с.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ

© САМБУЕВА З.Г., АЖУНОВА Т.А. - 2008

ВЛИЯНИЕ «ГЕПАТОНА» НА ЖЕЛЧЕВЫДЕЛИТЕЛЬНУЮ И ЖЕЛЧЕОБРАЗОВАТЕЛЬНУЮ ФУНКЦИЮ ПЕЧЕНИ У БЕЛЫХ КРЫС

З.Г. Самбуева, Т.А. Ажунова

Резюме. Установлено выраженное холеретическое действие растительного средства «гепатон» у интактных лабораторных животных и при экспериментальном токсическом гепатите. Показано положительное влияние «гепато-на» на желчеобразовательную функцию печени. По своему стимулирующему влиянию на желчевыделительную и желчеобразовательную функцию печени «гепатон» не уступает, а в ряде случаев превосходит препарат сравнения карсил. Ключевые слова: комплексное растительное средство «гепатон», экспериментальный токсический гепатит, желчеобразовательная и желчевыделительная функция печени.

Несомненно, велика роль желчи в физиологических и патологических процессах, протекающих в организме. Изменение биохимических процессов непременно отражается на количестве и качестве отделяемой желчи, и исследование ее является важным критерием при поиске новых желчегонных и гепатопротекторных средств для лечения и профилактики заболеваний печени и билиарной системы.

Целью настоящей работы явилось определение влияния сухого экстракта комплексного фитосредства «гепатон» на желчевыделительную функцию печени у ин-тактных крыс и у крыс с токсическим повреждением печени (СО4). В состав «гепатона» входят зверобой продырявленный (трава), ромашка аптечная (трава), мята перечная (листья), девясил высокий (корни), солодка голая (корни), боярышник кроваво-красный (плоды), шиповник (плоды).

Материалы и методы

Эксперименты проведены на белых крысах линии ^81аг с массой 160-180 г. Для определения желчегонной активности «гепатон» вводили в двенадцатиперстную кишку интактных крыс однократно, внутрижелудочно в дозах 25, 50 и 100 мг/кг массы. Токсический гепатит воспроизводили классическим методом — подкожным введением тетрахлорметана (0,4 мл/100 г массы 50% масляного раство-

ра СС14, четырехкратно, через день). Исследуемое средство вводили внутрижелудочно в экспериментально-терапевтической дозе 50 мг/кг в форме водного раствора в течение 10 дней (1 раз в сутки). В качестве препарата сравнения использовали карсил в дозе 100 мг/кг [3]. Животным контрольной группы вводили дистиллированную воду по аналогичной схеме. Влияние «гепатона» на желчевыделительную функцию печени оценивали по скорости секреции и общему количеству выделенной желчи, а также по содержанию в ней основных ее ингредиентов: желчных кислот, холестерина [1] и билирубина [5]. Полученные результаты обработаны с применением непараметрического и-кри-терия Манна-Уитни. Значимы различия при р<0,05.

Результаты и обсуждение В результате проведенных исследований установлено, что «гепатон» оказывает выраженное желчегонное действие. Скорость секреции желчи при указанных дозах превышала таковую у крыс контрольной группы, а также исходный фон (1-й час) (табл. 1). Холеретичес-кая реакция сохранялась на высоком уровне в течение всего периода наблюдения. Максимальное ускорение секреции желчи отмечалось при введении «гепатона» в дозе 50 мг/кг: скорость ее секреции возрастала на 3242%. Кроме этого испытуемое средство оказывало наиболее выраженное стимулирующее влияние на синтез