СТАБИЛЬНЫЕ СОСТАВЫ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСА

1. Состав, содержащий:
цитомегаловирус (CMV);
буфер при рН приблизительно 6,0-8,0;
соль щелочного или щелочноземельного металла;
сахар;
производное целлюлозы, выбранное из группы, состоящей из карбоксиметилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы (ГПЦ), гидроксипропилметилцеллюлозы (ГПМЦ), 2-гидроксиэтилцеллюлозы (2-ГЭЦ), кроскармелозы и метилцеллюлозы или их фармацевтически приемлемой соли; и
необязательно, полиол, выбранный из группы, состоящей из пропиленгликоля, полипропиленгликоля, этиленгликоля, полиэтиленгликоля, монометиловых эфиров полиэтиленгликоля и сахарного спирта.
2. Состав по п.1, в котором буфер выбран из группы, состоящей из фосфатного, сукцинатного, L-гистидинового, MES, MOPS, HEPES, ацетатного и цитратного буферов.
3. Состав по п.1 или 2, в котором соль щелочного или щелочноземельного металла представляет собой хлорид магния, хлорид кальция, хлорид калия, хлорид натрия или их комбинацию.
4. Состав по любому из пп. 1-3, в котором сахар представляет собой трегалозу или сахарозу.
5. Состав по любому из пп. 1-4, в котором производное целлюлозы представляет собой фармацевтически приемлемую соль карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ).
6. Состав по любому из пп. 1-5, в котором полиол выбран из группы, состоящей из пропиленгликоля, глицерина и сорбита.
7. Состав по любому из пп. 1-5, в котором полиол представляет собой пропиленгликоль, а производное целлюлозы представляет собой натрий-карбоксиметилцеллюлозу.
8. Состав по п.1, содержащий приблизительно 50-600 мкг/мл CMV, буфер при рН приблизительно от 6,0 до 7,5, приблизительно 50-300 мМ NaCl, приблизительно 40-150 мг/мл сахарозы и приблизительно 0,3-10 мг/мл фармацевтически приемлемой соли карбоксиметилцеллюлозы.
9. Состав по п.1, содержащий приблизительно 50-600 мкг/мл CMV, приблизительно 5-500 мМ буфера при рН приблизительно 6,0-7,5, приблизительно 50-300 мМ NaCl, приблизительно 40-150 мг/мл сахарозы и приблизительно 0,3-10 мг/мл натрий-карбоксиметилцеллюлозы со средней молекулярной массой приблизительно от 50000 до 1000000.
10. Состав по п.1, содержащий приблизительно 50-600 мкг/мл CMV, приблизительно 10-100 мМ гистидинового или TRIS, или HEPES буфера при рН приблизительно 6,0-7,5, приблизительно 50-300 мМ NaCl, приблизительно 40-150 мг/мл сахарозы, приблизительно 2,5-7,5 мг/мл пропиленгликоля (ПГ) и приблизительно 3-10 мг/мл натрий-карбоксиметилцеллюлозы со средней молекулярной массой приблизительно 90000.
11. Состав по п.1, содержащий приблизительно 50-600 мкг/мл CMV, приблизительно 10-100 мМ гистидинового, TRIS, или HEPES буфера при рН приблизительно 6,0-7,5, приблизительно 50-150 мМ NaCl, приблизительно 60-110 мг/мл сахарозы, приблизительно 3-7 мг/мл пропиленгликоля (ПГ) и приблизительно 3-7 мг/мл натрий-карбоксиметилцеллюлозы со средней молекулярной массой приблизительно 90000.
12. Состав по п.1, содержащий приблизительно 100-350 мкг/мл CMV, приблизительно 25 мМ гистидинового, TRIS буфера или их комбинации при рН приблизительно 7,0, приблизительно 75 мМ NaCl, приблизительно 90 мг/мл сахарозы, приблизительно 5 мг/мл пропиленгликоля (ПГ) и приблизительно 5 мг/мл натрий-карбоксиметилцеллюлозы со средней молекулярной массой приблизительно 90000.
13. Состав по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащий адъювант на основе алюминия.
14. Состав по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащий адъювант на основе фосфата алюминия в количестве приблизительно 200-700 мкг/мл.
15. Состав по любому из пп. 1-14, представляющий собой водный раствор до лиофилизации.
16. Состав по любому из пп. 1-14, представляющий собой восстановленный раствор.
17. Состав по любому из пп. 1-14, представляющий собой восстановленный раствор, причем восстановление осуществляют с использованием воды.
18. Состав по любому из пп. 1-14, представляющий собой восстановленный раствор, причем восстановление осуществляют с использованием солевого раствора.
19. Состав по любому из пп. 1-12, представляющий собой восстановленный раствор, причем восстановление осуществляют с использованием разбавителя, содержащего 0,5-1 мл адъюванта на основе алюминия, полученного в буфере, солевом растворе или воде.
20. Состав по п.19, где восстановление осуществляют с использованием 0,7 мл разбавителя, включающего адъювант на основе фосфата алюминия (АРА) и солевой раствор.
21. Состав по п.20, в котором APA составляет приблизительно 400-500 мкг/мл в восстановленном растворе.
22. Состав по п.19, представляющий собой 0,5 мл дозу CMV, содержащую приблизительно 25-300 мкг CMV, приблизительно 1,39-1,9 мг гистидина, приблизительно 6-6,7 мг NaCl, приблизительно 32,2-45 мг сахарозы, приблизительно 1,79-2,5 мг пропиленгликоля (ПГ) и приблизительно 1,79-2,5 мг натрий-карбоксиметилцеллюлозы со средней молекулярной массой приблизительно 90000.
23. Состав по п.1, находящийся в высушенной твердой форме и содержащий приблизительно 25-300 мкг CMV, приблизительно 1,9-2,7 мг гистидина, TRIS или их комбинацию, приблизительно 2,2-3,07 мг NaCl, приблизительно 45-63 мг сахарозы, приблизительно 2,5-3,5 мг пропиленгликоля (ПГ) и приблизительно 2,5-3,5 мг натрий-карбоксиметилцеллюлозы со средней молекулярной массой 90000.
24. Состав по п.1, находящийся в высушенной твердой форме, содержащей в весовом соотношении приблизительно 1 CMV, 6-108 гистидина, 7-123 NaCl, 150-2520 сахарозы, 8-140 пропиленгликоля и 8-140 натрий-карбоксиметилцеллюлозы.
4
8
25. Состав по любому из пп. 1 и 23, 24, представляющий собой сухую твердую форму, в которой титр CMV через 2 года хранения при 2-8°C составляет приблизительно от 7,77×10E до 3,8×10E БОЕ/мл.
26. Состав по любому из пп. 1 и 23, 24, представляющий собой сухую твердую форму, в которой CMV через 6 месяцев хранения при 2-8°С имеет потерю инфективности менее или равную 0,2 log10 по сравнению с контрольным образцом CMV.
27. Состав по любому из пп. 1 и 23, 24, представляющий собой сухую твердую форму, в которой CMV через 2 года хранения при 2-8°С имеет потерю инфективности менее или равную 0,5 log10 по сравнению с контрольным образцом CMV.
28. Состав по любому из пп. 1 и 23-24, представляющий собой сухую твердую форму, в которой CMV через 2 года хранения при 2-8°С имеет потерю инфективности менее или равную 1,0 log10 по сравнению с контрольным образцом CMV.
29. Состав по любому из пп. 1-28, в котором CMV представляет собой живой аттенуированный CMV, убитый CMV или инактивированный CMV.
30. Состав по п.29, в котором CMV представляет собой живой аттенуированный CMV, который является условно дефектным по репликации и содержит: (a) пентамерный gH-комплекс, включающий UL128, UL130, UL131, gH и gL; и (b) нуклеиновую кислоту, кодирующую слитый белок, состоящий из незаменимого белка и дестабилизирующего белка, где незаменимый белок выбирают из группы, состоящей из IE1/2, UL51, UL52, UL79 и UL84.
31. Состав по п.30, в котором дестабилизирующий белок представляет собой FK31-связывающий белок (FKBP) или производное FKBP, причем производное FKBP представляет собой FKBP, содержащее одну или более аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из: F15S, V24A, H25R, F36V, E60G, M66T, R71G, D100G, D100N, E102G, K105I и L106P.
32. Состав по п.31, в котором производное FKBP представляет собой FKBP, содержащий аминокислотные замены F36V и L106P.
33. Состав по любому из пп. 30-32, в котором незаменимый белок представляет собой IE1/2.
34. Состав по любому из пп. 30-32, в котором незаменимый белок представляет собой UL51.
35. Состав по любому из пп. 30-32, в котором CMV содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую по меньшей мере два слитых белка, причем незаменимые белки в каждом из слитых белков являются разными.
36. Состав по п.35, в котором один из слитых белков содержит IE1/2 или UL51.
37. Состав по п.35, в котором первый слитый белок содержит IE1/2, и второй слитый белок содержит UL51.
38. Состав по п.29, в котором CMV представляет собой живой аттенуированный CMV, который является условно дефектным по репликации и содержит: (a) пентамерный gH-комплекс, содержащий UL128, UL130, UL131, gH и gL; и (b) нуклеиновую кислоту, кодирующую первый слитый белок, состоящий из IE1/2 и дестабилизирующего белка, и второй слитый белок, состоящий из UL51 и дестабилизирующего белка, причем дестабилизирующий белок представляет собой производное FK506-связывающего белка (FKBP), содержащее аминокислотные замены F36V и L106P; при этом IE1/2 и UL51 дикого типа больше не присутствуют, и при этом CMV представляет собой аттенуированный штамм, который имеет восстановленную экспрессию gH-комплекса благодаря исправлению мутации в гене UL131.
39. Состав по п.38, в котором (а) первый слитый белок представляет собой SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO: 1; и (b) второй слитый белок представляет собой SEQ ID NO: 3 или аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO: 3.
40. Состав по п.38, в котором первый слитый белок содержит SEQ ID NO: 1, и второй слитый белок содержит SEQ ID NO: 3.
41. Состав по п.38, в котором (а) первый слитый белок кодируется SEQ ID NO: 2 или последовательностью нуклеиновой кислоты, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO: 2; и (b) второй слитый белок кодируется SEQ ID NO: 4 или последовательностью нуклеиновой кислоты, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO: 4.
42. Состав по п.38, в котором первый слитый белок кодируется SEQ ID NO: 2, и второй слитый белок кодируется SEQ ID NO: 4.
43. Состав по п.29, в котором CMV представляет собой живой аттенуированный CMV, который является условно дефектным по репликации и содержит: (a) пентамерный gH-комплекс, включающий UL128, UL130, UL131, gH и gL; и (b) нуклеиновую кислоту, кодирующую первый слитый белок, состоящий из незаменимого белка и дестабилизирующего белка, и второй слитый белок, состоящий из незаменимого белка и дестабилизирующего белка, причем первый слитый белок содержит SEQ ID NO: 1, и второй слитый белок содержит SEQ ID NO: 3, при этом IE1/2 и UL51 дикого типа больше не присутствуют; и при этом CMV представляет собой аттенуированный штамм, который имеет восстановленную экспрессию gH-комплекса благодаря исправлению мутации в гене UL131.
44. Состав по п.43, в котором CMV представляет собой AD169, который имеет восстановленную экспрессию gH-комплекса благодаря исправлению мутации в гене UL131.
45. Состав по п.43, в котором дефектный по репликации CMV имеет геном, приведенный в SEQ ID NO: 14.