Роль маркеров экстрацеллюлярных везикул в диагностике рака яичников

РОЛЬ МАРКЕРОВ ЭКСТРАЦЕЛЛЮЛЯРНЫХ ВЕЗИКУЛ В ДИАГНОСТИКЕ РАКА ЯИЧНИКОВ

Маринюк А. С.

Одесский Национальный Медицинский Университет, ассистент кафедры медицинской химии, к.мед.н.

THE ROLE OF EXTRACELLULAR VESICULES MARKERS IN OVARIAN CANCER DIAGNOSTICS

Marynik G.S.

Odessa National Medical University, assistant of Medical Chemistry Department, PhD

АННОТАЦИЯ

В данной статье рассматриваются экстрацелюлярные везикулы (экзосомы) как потенциальные мишени для диагностики рака яичников. Описывается белковый и РНК состав экзосом, выделяемых опухолевыми клетками в сыворотку крови. Обсуждается разработка методов скрининга рака яичников на основе определения экспрессии галектин-3 (LGALS3BP) и профилирования состава микроРНК сывороточных экзосом.

ABSTRACT

In this article extracellular vesicles (exosomes) are considered as potential targets for the diagnosis of ovarian cancer. The protein and RNA composition of exosomes secreted by tumor cells into serum are described. The development of methods for screening ovarian cancer based on the determination of expression of galectin-3 (LGALS3BP) and the profiling of the composition of microRNAs of serum exosomes are discussed.

Ключевые слова: рак яичников, экзосомы, галектин-3, микроРНК.

Keywords: ovarian cancer, exosomes, galactoside-binding soluble 3 binding protein (LGALS3BP), mi-croRNA.

Рак яичников (РЯ) — пятая по частоте причина смерти от различных эпителиальных опухолей у женщин, ведущая причина смерти от гинекологических злокачественных опухолей, и вторая по частоте диагностирования опухоль в гинекологии. Каждый год в мире регистрируется более 225 тысяч новых случаев карциномы яичника, из которых около 140 тыс. заканчиваются летально. Несмотря на достигнутые успехи в диагностике карциномы яичника, около 75% ее выявляется на поздних стадиях. Пятилетняя выживаемость при третьей стадии составляет около 24 %, при 4-й стадии — 4,6 % [1].

К предраковым заболеваниям яичников относят кистомы, которые наиболее часто перерождаются в злокачественную форму: цилиоэпителиаль-ные (папиллярные); псевдомуцинозные (перерождаются значительно реже, чем папиллярные); гормонопродуцирующие опухоли (феминизирующие или маскулинизирующие); опухоли внутренней оболочки покрышки фолликула (гормоноак-тивные или гормононеактивные). Как показывает клиническая практика, РЯ наиболее часто развивается на почве папиллярной кистомы [2].

До настоящего времени по-прежнему наиболее трудным остается разграничение предраковых заболеваний яичников, опухолей яичников и хронических воспалительных процессов придатков матки. По данным различных клиник 3-19 % больных злокачественными опухолями яичников находятся под наблюдением с ошибочным диагнозом «хроническое воспаление придатков матки», а в 36 % случаев хронические воспалительные процессы в

придатках представляют собой сопутствующие опухолям яичников заболевания. Кроме того, в ряде случаев эти воспалительные процессы являются главным предраковым состоянием яичников, провоцирующим злокачественные преобразования в ранее доброкачественных опухолях яичников [3].

Целью исследования является поиск новых биомаркеров для ранней диагностики и прогнозирования РЯ.

Общепринятым опухолевым маркером для РЯ, который включен в стандарты обследования и динамического наблюдения, является СА-125. В то же время значение СА-125 как предиктора эффективности химиотерапии и оптимальной циторедукции ограничивается низкой чувствительностью и специфичностью [4, 5]. Большие перспективы связывают с использованием нового опухолевого маркера - НЕ4 [6]. Показано, что предоперационный уровень сывороточного НЕ4 в большей степени, чем СА-125, может предсказывать оптимальную циторедукцию у больных с распространенным РЯ [7].

В настоящее время большой интерес представляет изучение новых биологических маркеров рака яичников, которые могут служить полезным инструментом для мониторинга эффективности фармакотерапии (персонализированной медицины), ранней диагностики заболевания и прогноза его клинических исходов [8]. Разработка методов скрининга РЯ является актуальной социальной и научной задачей.

Одним из потенционных маркеров РЯ может выступать галектин-3, который принадлежит к семейству в-галактозид-связывающих протеинов (galactoside-binding soluble 3 binding protein (LGALS3BP)). Благодаря наличию в своей структуре коллагеноподобного домена LGALS3BP связывается с широким спектром протеинов экст-рацеллюлярного матрикса, таких как тенасцин, фи-бронектин и ламинин. LGALS3BP экспрессируется многими клетками, включая нейтрофилы, макрофаги, лаброциты, фибробласты и остеокласты. LGALS3BP обнаружен в легких, желудке, кишечнике, матке и яичниках [9, 10]. Для LGALS3BP характерны многочисленные аутокринные и пара-кринные свойства. Он ответственен за активацию нейтрофилов, лаброцитов и T-клеток, регуляцию клеток адгезии, запуск апоптоза и ангиогенеза. В зависимости от типа клеток и баланса между экст-рацеллюлярным и интрацеллюлярным содержанием LGALS3BP способен как игибировать, так и индуцировать рост и дифференциацию клеток [11, 12].

Учитывая биофизиологические свойства данного белка, он принимает участие в регуляцию и прогрессию опухолевого роста, а также развитие метастатических процессов, что описывается в различных научных исследованиях. Было обнаружено, что значительно повышенная экспрессия LGALS3BP в сыворотке крови или опухолевой ткани связана с плохим клиническим исходом у пациентов с карциномой молочной железы [13, 14, 24], гепатоцеллюлярной карциномой [15,16], плевральной мезотелиомой [17], карциномой поджелудочной железы [18], немелкоклеточной карциномой легкого [19] и нейробластомой [20]. Также было установлено, что уровень экспрессии LGALS3BP в тканях эпителиального РЯ значительно выше, чем в нормальных тканях яичника [23].

Напротив, положительные эффекты LGALS3BP на прогноз рака также были зарегистрированы [21, 22]. Недавно Lee et al. [22] обнаружили, что LGALS3BP обладает противоопухолевой активностью в клетках колоректального рака посредством подавления передачи Wnt-сигналь-ного пути через убиквитинирование в-катенина. Авторы также обнаружили, что блокирование LGALS3BP приводит к увеличению роста опухоли и образованию метастазов на модели колоректаль-ного рака мышей. Эти результаты указывают, что LGALS3BP способствует туморогенезу и является как потенциальной диагностической, так и терапевтической мишенью при лечении различных онкопа-тологий, в том числе и РЯ.

Интересным является тот факт, что LGALS3BP был определен как один из маркеров экстрацеллюлярных везикул (экзосом) [25, 26]. Экзосомы — это микроскопические внеклеточные везикулы (пузырьки) диаметром 30—100 нанометров, выделяемые в межклеточное пространство клетками различных тканей, в том числе и опухолевых [27, 28, 29]. Полость экзосом имеет цитоплаз-матическое происхождение [30] и содержит белки,

РНК и липиды [31,32], мембрана экзосом образуется в результате впячивания внутрь эндосомаль-ной мембраны [33, 34]. Экзосомы обнаружены в различных тканевых жидкостях организма, таких как сыворотка крови [35], спинномозговая жидкость, а также в моче [36, 37], слюне и грудном молоке [38]. Значимость изучения экзосом в биологических жидкостях объясняется их относительной доступностью для исследования и возможностью избежать применения инвазивных методов диагностики онкологических заболеваний. Так плазма крови человека содержит до трех миллионов экзосом в одном микролитре. Молекулярный состав и количество экзосом заметно изменяются при возникновении опухолей и целого ряда других заболеваний. Многочисленные исследования показали, что количество экзосом в крови (в норме составляющее 100-400 миллионов частиц на мл) резко возрастает в процессе канцерогенеза. На последних стадиях развития опухолей различных типов (в отсутствие метастазирования) количество опухолевых экзосом может составлять до 30% от общего количества экзосом сыворотки крови.

В настоящее время к функциям экзосом относят: осуществление межклеточной коммуникации

[39], передача необходимого генетического фенотипа от одной клетки в другую в процессе метаплазии [39], участие в неклассической секреции белков, облегчение иммунного ответа

[40], презентация антигенов [41], в патогенезе болезней, связанных с расстройствами метаболизма [42] и в развитии злокачественных опухолей [43, 44, 45]. Однако роль экзосом полностью ещё не изучена, а также механизмы, которые контролируют сортировку белков для загрузки их в экзосомы, в настоящее время пока не вполне понятны.

Экзосомы могут нести на своей поверхности совместно с LGALS3BP различные белки: CD63, CD81, CD9 (трансмембранные белки-маркеры, функция которых заключается в транспорте микроРНК для идентификации клеток-мишеней), Alix (apoptosis-linked gene 2-interacting protein), Tsg101 (tumour susceptibility gene 101), HSP (белки теплового шока), убиквитин, клатрин, а также белки, участвующие во внутриклеточной передачи сигналов (белки Wnt, EGFR, CDC42, PI3K, ARF1, Мис1сигнальных путей), и др.[46, 47, 63]. Все они могут выступать в качестве маркеров для детекции и характеристики экзосом, выделяемых из биологических жидкостей. Не известным до конца остается взаимодействие представленных экзосомальных белков, влияние их на регуляцию сигнальных путей, регулирующих дифференцировку клеток, апоптоз, неоангиогенез и другие процессы, влияющие на развитие злокачественных опухолей, что привлекает внимание многих исследователей [48, 49].

Полученные в последние годы результаты показывают, что анализ белкового и РНК-состава сывороточных экзосом позволяет заметно увеличить чувствительность диагностики, прогнозирования и послеоперационного мониторинга различных видов опухолей. В течение последних нескольких лет

специфические изменения состава экзосомальной микроРНК были показаны для диагностики многих онкологических заболеваний, включая рак молочной железы [54-58], предстательной железы [59, 60], колоректальный рак [61] и др. С учетом результатов этих работ, анализ не только белков, но и состава микроРНК циркулирующих экзосом рассматривается как новый перспективный метод диагностики, прогнозирования и мониторинга терапии онкологических заболеваний [62]. К настоящему моменту выделены специфические микроРНК в ткани РЯ. Так микро-РНК-200а, микро-РНК-200Ь, микро-РНК-200с, микро-РНК-141 ассоциированы с гистотипом опухоли, мишенью для которых является ген РТРШ2 [64,65]. Высокая экспрессия микро-РНК-214 ассоциирована с резистентностью к химиотерапии, ген-мишень - РТБМ [66]. Высокая экспрессия микро-РНК-410 и микро-РНК-645 ассоциированы с низкой выживаемостью, гены-мишени для обеих микроРНК - ОТ-кВ, HDAC1 [67]. Проведены исследования корреляций этого состава мик-роРНК с различными гистологическими вариантами заболевания и клиническими параметрами, но работы о параллельных изменениях состава данных микроРНК в циркулирующих экзосомах при онко-патологии яичников отсутствуют.

Анализ биомаркеров опухолевых экзосом обладает рядом преимуществ по сравнению с традиционными методами детекции сывороточных биомаркеров. Поскольку опухолевые экзосомы формируются из эндоплазматической мембраны клетки, содержание имеющихся на их поверхности мембранных белков хорошо коррелирует с составом мембранных белков экспортирующих их опухолевых клеток. Дополнительным преимуществом анализа экзосом является то, что число копий индивидуального белка в их мембране обычно весьма велико. В результате, вследствие амплификации сигнала, тесты, основанные на детекции присутствия индивидуального белка или другого биомаркера в составе экзосом, заметно более чувствительны, чем при использовании традиционных методов иммуноанализа.

С учетом структурных и биологических особенностей молекул микроРНК, регулирующих экспрессию генома на посттранскрипционном уровне, анализ экзосомальной фракции микроРНК представляется одним из перспективных направлений развития диагностических технологий [50]. Однако внедрение новой методики в клиническую практику задерживается из-за отсутствия стандартного способа выделения экзосом. Эта технологическая проблема активно обсуждается в современной литературе [51]. В основе существующих методов лежат предположения о специфических характеристиках физической плотности, нано-размерности или наличии специфических белковых маркеров на поверхности экзосом. Экзосомы выделять из биологических жидкостей такими методами, как: ультрацентрифугирование, эксклюзивная хроматография, иммунноафинность (иммуногранулы, имму-нопланшеты) или осаждением с помощью

химических реагентов. Существование принципиально различных подходов свидетельствует об отсутствии оптимального метода. Так, основной проблемой является гетерогенность популяции экзо-сом в составе любой биологической жидкости в плане как физических так и биохимических характеристик [52, 53]. Кроме того, любая биологическая жидкость содержит комплексы молекул или субклеточных образований, которые могут иметь физические или биохимические характеристики, аналогичные экзосомальным, что требует поиска новых алгоритмов выделения и характористики экстравезикулярных везикл.

Учитывая анализ литературных данных можно сделать заключение, что исследование экспрессии LGALS3BP в популяции экзосом, выделяемых опухолевыми клетками яичников в кровь, может расширить диагностические возможности раннего выявления и прогноза данной онкопатологии. Анализ микроРНК экзосом является перспективным методом скрининга РЯ и может быть использован для подбора индивидуальной химиотерапии, что важно для развития персонализированной медицины. LGALS3BP и микроРНК экзосом, выделенных из сыворотки крови, могут составить большую диагностическую ценность и использоваться как дополнительные опухолеспецифические поверхностные маркеры для оптимизации алгоритма скрининга, лечения и прогнозирования неопластических изменений тканей яичников.

Литература

1. Никогосян С. О., Кузнецов В. В. Современная диагностика рака яичников // Российский онкологический журнал. — 2013. — № 5.

2. Порханова Н.В. Методические рекомендации по проведению профилактических осмотров и работе смотровых кабинетов с целью ранней диагностики злокачественных новообразований / Л.Г. Тесленко, Л.Д. Сирота, Н.В. Порханова, С.В. Шаров // Краснодар, 2008. - С. 5-42.

3. Серов В.Н. Хронические воспалительные заболевания органов малого таза: оценка риска развития аутоиммунной овариальной недостаточности / Серов В.Н., Царегородцева М.В. // Российский вестник акушера-гинеколога. — 2008. — №5. — С. 4-9.

4. Kang S., Kim T.J., Nam B.H. Seo S.S., Kim B.G., Bae D.S., Park S.Y. Preoperative serum CA-125 levels and risk of suboptimal cytoreduction in ovarian cancer: a meta-analysis // J. Surg. Oncol. — 2010. — Vol. 101 (1). — P. 13-17.

5. Rodriguez N., Rauch-Hain J.A., Shoni M., Berkowitz R.S., MutoM.G., Feltmate C., Schorge J.O., Del CarmenM.G., Matulonis U.A., HorowitzN.S. Changes in serum CA-125 can predict optimal cytoreduction to no gross residual disease in patient with advanced stage ovarian cancer treated with neoadjuvant chemotherapy // Gynecol. Oncol. — 2012. — Vol. 125 (2). — P. 362-366.

6. SandriM.T., Bottari F., Franchi D., Boveri S., Candiani M., Ron-zoni S., PeirettiM., RadiceD., Pas-seriniR., SideriM. Comparison of HE4, CA125 and

ROMA algorithm in women with a pelvic mass: correlation with pathological outcome // Gynecol. Oncol. — 2013. — Vol. 128 (2). — P. 233-238.

7. Hynninen J., Auranen A., Dean K., Lavoni-usM., Carpen O., Per-heentupaA., SeppanenM., Gren-man S. Serum HE4 profile during primary chemotherapy of epithelial ovarian cancer // Int. J. Gynecol. Cancer. — 2011. —Vol. 21 (9). —P. 1573-1578.

8. Маршутина Н. В., Солохина Н. П., Алентов И. И., Сергеева Н. С. Клиническая значимость биологических маркеров при раке яичников, раке предстательной железы, колоректальном раке. — 2016. — Т. 3, №1. — С. 46-57.

9. Kramer F. Galectin-3: clinical utility and prognostic value in patients with heart failure // Reasearch Reports in Clinical Cardiology. — 2013. — Vol. 4. — P. 13-12.

10. Kim H., Lee J., Hyun J.W. et al. Expression and immunohistochemical localization of galectin-3 in various mouse tissues // Cell Biol Int. — 2007. — Vol. 31, № 7. — P. 655-662.

11. Ochieng J., Leite-Browning M.L., Warfield P. Regulation of cellular adhesion to extracellular matrix proteins by galectin-3 // Biochem Biophys Res Commun. — 1998. — Vol. 246, № 3. — P. 788-791.

12. Grassadonia A., Tinari N., Iurisci I., Piccolo E., Cumashi A., Innominato P. et al. 90K (Mac-2 BP) and galectins in tumor progression and metastasis // Glycoconj J. —2004. — Vol. 19. — P. 551-556.

13. Iacobelli S., Sismondi P., Giai M., D'Egidio M., Tinari N., Amatetti C. et al. Prognostic value of a novel circulating serum 90K antigen in breast cancer // Br J Cancer. — 1994. Vol. 69. — P. 172-176.

14. Tinari N., Lattanzio R., Querzoli P., Natoli C., Grassadonia A., Alberti S. et al. High expression of 90K (Mac-2 BP) is associated with poor survival in node-negative breast cancer patients not receiving adjuvant systemic therapies // Int J Cancer. — 2009. — Vol. 124. — P. 333-338.

15. Correale M., Giannuzzi V., Iacovazzi P.A., Valenza M.A., Lanzillotta S., Abbate I. et al. Serum 90K/MAC-2BP glycoprotein levels in hepatocellular carcinoma and cirrhosis // Anticancer Res. — 1999. — Vol. 19. — P. 3469-3472.

16. Iacovazzi P.A., Notarnicola M., Caruso M.G., Guerra V., Frisullo S., Altomare D.F. Serum levels of galectin-3 and its ligand 90k/mac-2 bp in colorectal cancer patients // Immunopharmacol Immunotoxi-col. — 2010. — Vol. 32. — P. 160-164.

17. Strizzi L., Muraro R., Vianale G., Natoli C., Talone L., Catalano A. et al. Expression of glycoprotein 90K in human malignant pleural mesothelioma: correlation with patient survival // J Pathol. — 2002. Vol. 197. — P. 218-223.

18. Kunzli B.M., Berberat P.O., Zhu Z.W., Martignoni M., Kleeff J., Tempia-Caliera A.A. et al. Influences of the lysosomal associated membrane proteins (Lamp-1, Lamp-2) and Mac-2 binding protein (Mac-2-BP) on the prognosis of pancreatic carcinoma // Cancer. — 2002. — Vol. 94. P. 228-239.

19. Marchetti A., Tinari N., Buttitta F., Chella A., Angeletti C.A., Sacco R. et al. Expression of 90K

(Mac-2 BP) correlates with distant metastasis and predicts survival in stage I non-small cell lung cancer patients // Cancer Res. —2002. — Vol. 62. — P. 25352539.

20. Morandi F., Corrias M.V., Levreri I., Scaruffi P., Raffaghello L., Carlini B. et al. Serum levels of cytoplasmic melanoma-associated antigen at diagnosis may predict clinical relapse in neuroblastoma patients // Cancer Immunol Immunother. —2011. — Vol. 60.

— P. 1485-1495.

21. Zambelli D., Zuntini M., Nardi F., Manara M.C., Serra M., Landuzzi L. et al. Biological indicators of prognosis in Ewing's sarcoma: an emerging role for lectin galactoside-binding soluble 3 binding protein (LGALS3BP) // Int J Cancer. — 2010. — Vol. 126. — P. 41-52.

22. Lee J.H., Bae J.A., Lee J.H., Seo Y.W., Kho D.H., Sun E.G. et al. Glycoprotein 90K, downregulated in advanced colorectal cancer tissues, interacts with CD9/CD82 and suppresses the Wnt/beta-catenin signal via ISGylation of beta-catenin // Gut. — 2010. — Vol. 59. — P. 907-917.

23. Qu H., Chen Y., Cao G., Liu C., Xu J., Deng H., Zhang Z. Identification and validation of differentially expressed proteins in epithelial ovarian cancers using quantitative proteomics // Oncotarget. — 2016.

— Vol. 7, № 50. — P. 83187-83199.

24. Woodman N., Pinder S.E., Tajadura V., Le Bourhis X., Gillett C., Delannoy P., Burchell J.M., Julien S. Two E-selectin ligands, BST-2 and LGALS3BP, predict metastasis and poor survival of ER-negative breast cancer // J Oncol. — 2016 . — Vol. 49, № 1. — P. 265-275.

25. Gamez-Valero A., Monguio-Tortajada M., Carreras-Planella L., Franquesa M.l., Beyer K., Borras F.E. Size-Exclusion Chromatography-based isolation minimally alters Extracellular Vesicles' characteristics compared to precipitating agents // Sci Rep. — 2016. — Vol. 6. — P. 336-341.

26. Gomes J., Gomes-Alves P., Carvalho S.B., Peixoto C., Alves P.M., Altevogt P., Costa J. Extracellular Vesicles from Ovarian Carcinoma Cells Display Specific Glycosignatures // Biomolecules. — 2015. — Vol. 5, № 3. — P.1741-1761.

27. Ludwig A.K., Giebel B. Exosomes: Small vesicles participating in intercellular communication // The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. — 2012. — Vol. 44, № 1. — P. 11—15.

28. Pant S., Hilton H., Burczynski M. E. The mul-tifaceted exosome: Biogenesis, role in normal and aberrant cellular function, and frontiers for pharmacological and biomarker opportunities // Biochemical Pharmacology. — 2012. — Vol. 83, № 11. — P. 1484— 1494.

29. Emerging Concepts of Tumor Exosome-Me-diated Cell-Cell Communication / Editor: H.G. Zhang. — New York: Springer, 2013. — ISBN 978-14614-3697-3. — DOI:10.1007/978-1-4614-3697-3

30. Гусаченко О. Н., Зенкова М. А., Власов В. В. Нуклеиновые кислоты экзосом: маркеры заболеваний и молекулы межклеточной коммуникации // Биохимия. — 2013. — Т.78, № 1. — С.5—13.

31. Vlassov A. V., Magdaleno S., Setterquist R., Conrad R. Exosomes: Current knowledge of their composition, biological functions, and diagnostic and therapeutic potentials // Biochimica et Biophysica Acta. — 2012. — Vol. 1820, № 7. — P. 940—948.

32. Choi D. S., Kim D. K., Kim Y. K., Gho Y. S. Proteomics, transcriptomics, and lipidomics of exosomes and ectosomes // Proteomics. — 2013. — Vol. 13, № 10—11. — P. 1554—1571.

33. Février B., Raposo G. Exosomes: endosomal-derived vesicles shipping extracellular messages // Current Opinion in Cell Biology. — 2004. — Vol. 16, № 4. — P. 415—421.

34. Hanson P. I., Cashikar A. Multivesicular Body Morphogenesis // Annual Review of Cell and Developmental Biology. — 2012. — Vol. 28. — P. 337—362.

35. Grant R., Ansa-Addo E., Stratton D., Antwi-Baffour S., Jorfi S., Kholia S., Krige L., Lange S., Inal J. A filtration-based protocol to isolate human Plasma Membrane-derived Vesicles and exosomes from blood plasma // Journal of Immunological Methods. —

2011. — Vol. 371, № 1—2. — P. 143—151.

36. Fang D. Y., King H. W., Li J. Y., Gleadle J. M. Exosomes and the kidney: Blaming the messenger // Nephrology. — 2013. — Vol. 18, № 1. — P. 1—10.

37. Hata T., Murakami K., Nakatani H., Yama-moto Y., Matsuda T., Aoki N. Isolation of bovine milk-derived microvesicles carrying mRNAs and mi-croRNAs // Biochemical and Biophysical Research Communications. — 2010. — Vol. 396, № 2. — P. 528—533.

38. Bang C., Thum T. Exosomes: New players in cell-cell communication // The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. — 2012. — Vol. 44, № 11. — P. 2060—2064.

39. Quesenberry P. J., Aliotta J. M. Cellular phe-notype switching and microvesicles // Advanced Drug Delivery Reviews. — 2010. — Vol. 62, № 12. — P. 1141—1148.

40. Johnstone R. M. Exosomes biological significance: a concise review // Blood Cells, Molecules, and Diseases. — 2006. — Vol. 36, № 2. — P. 315—321.

41. Théry C., Zitvogel L., Amigorena S. Exo-somes: composition, biogenesis and function // Nature Reviews Immunology. — 2002. — Vol. 2, № 8. — P. 569-579.

42. Müller G. Microvesicles/exosomes as potential novel biomarkers of metabolic diseases // Diabetes, Metabolic Syndrome and Obesity: Targets and Therapy. — 2012. — Vol. 5. — P. 247—282.

43. Штам Т. А., Нарыжный С. Н., Ланда С. Б., Бурдаков В. С., Артамонова Т. О., Филатов М. В. Получение и анализ экзосом, секретируемых злокачественно трансформированными клетками человека в системах in vitro // Цитология. —

2012. — Т.54, № 5. — С.430—438.

44. Ge R., Tan E., Sharghi-Namini S., Asada H. Exosomes in Cancer Microenvironment and Beyond: have we Overlooked these Extracellular Messen-gers?// Cancer Microenvironment. — 2012. — Vol. 5, № 3. — P. 323—332.

45. Kharaziha P., Ceder S., Li Q., Panaretakis T. Tumor cell-derived exosomes: A message in a bottle // Biochimica et Biophysica Acta. — 2012. — Vol. 1826, № 1. — P. 103—111.

46. Gross J. C., Chaudhary V., Bartscherer K., Boutros M. Active Wnt proteins are secreted on exosomes // Nature Cell Biology. — 2012. — Vol. 14, № 10. — P. 1036—1045.

47. Luga V., Zhang L., Viloria-Petit A. M., Ogun-jimi A. A., Inanlou M. R., Chiu E., Buchanan M., Hosein A. N., Basik M., Wrana J. L. Exosomes Mediate Stromal Mobilization of Autocrine Wnt-PCP Signaling in Breast Cancer Cell Migration // Cell. — 2012. — Vol. 151, № 7. — P. 1542-1556.

48. Yingzi Yang Wnt signaling in development and disease // Cell & Biosience. — 2012. — Vol.2, № 1. — P. 14.

49. Lie D.C., Colamarino S.A., Song H.J., Désiré L. et al. Wnt signalling regulates adult hippocampal neurogenesis // Nature. — 2005. — Vol. 37. — P. 1370-1375.

50. Sato-Kuwabara Y., Melo S.A., Soares F.A., Calin G.A. The fusion of two worlds: non-coding RNAs and extracellular vesicles-diagnostic and therapeutic implications (Review). // Int J Oncol. — 2015.

— Vol. 46, № 1. — P. 17-27.

51. Zeringer E., Barta T., Li M., Vlassov A.V. Strategies for isolation of exosomes // Cold Spring Harb Protoc. — 2015. — Vol. 2015, № 4. — P. 319323.

52. Jeppesen D.K., Hvam M.L., Primdahl-Bengtson B., Boysen A.T. et al. Comparative analysis of discrete exosome fractions obtained by differential centrifugation // J Extracell Vesicles. — 2014. — N 3.

— P. 25011.

53. Tauro B.J., Greening D.W., Mathias R.A., Mathivanan S., Ji H., Simpson R.J. Two distinct populations of exosomes are released from LIM1863 colon carcinoma cell-derived organoids // Mol Cell Proteomics. — 2013. — Vol. 12, N 3. —P. 587-598.

54. Guzman N., Agarwal K., Asthagiri D. et al. Breast Cancer-Specific miR Signature Unique to Extracellular Vesicles Includes "microRNA-like" tRNA // Fragments. Mol Cancer Res. — 2015. — Vol. 13, № 5.

— P. 891-901.

55. Fong M.Y., Zhou W., Liu L. et al. Breast-cancer-secreted miR-122 reprograms glucose metabolism in premetastatic niche to promote metastasis // Nat Cell Biol. — 2015. — Vol. 17, № 2. — P.183-94.

56. Singh R., Pochampally R., Watabe K. et al. Exosome-mediated transfer of miR-10b promotes cell invasion in breast cancer // Mol Cancer. — 2014. — Vol. 13. — P.256.

57. Cereghetti D.M., Lee P.P. Tumor-Derived Exosomes Contain microRNAs with Immunological Function: Implications for a Novel Immunosuppression Mechanism // Microrna. — 2014. — Vol. 2, , № 3. P. 194-204.

58. Wei Y., Lai X., Yu S. et al. Exosomal miR-221/222 enhances tamoxifen resistance in recipient ERpositive breast cancer cells // Breast Cancer Res Treat.

— 2014. — Vol. 147, № 2. — P. 423-31.

59. Huang X., Yuan T., Liang M. et al. Exosomal miR-1290 and miR-375 as prognostic markers in castration-resistant prostate cancer // Eur Urol. — 2015. — Vol. 67, № 1. — P.33-41.

60. Kim J., Morley S., Le M. et al. Enhanced shedding of extracellular vesicles from amoeboid prostate cancer cells: potential effects on the tumor microenvironment // Cancer Biol Ther. — 2014. — Vol. 15, № 4. — P. 409-418.

61. Ogata-Kawata H., Izumiya M., Kurioka D. et al. Circulating exosomal microRNAs as biomarkers of colon cancer // PLoS One. — 2014. Vol. 9, № 4:e92921.

62. Sato-Kuwabara Y., Melo S.A., Soares F.A., Calin G.A. The fusion of two worlds: noncoding RNAs and extracellular vesiclesdiagnostic and therapeutic implications (Review) // Int J Oncol. — 2015. — Vol. 46, № 1. — P. 17-27.

63. Строение и функции экзосом. Роль экзосом в патологических процессах // Молодежный научный форум: Естественные и медицинские науки: электр. сб. ст. по материалам XXIII студ. междунар.

заочной науч.-практ. конф. — М.: «МЦНО». — 2015 —№ 4(22) / [Электронный ресурс] — Режим доступа. —

URL: https://nauchforum.ru/archive/MNF nature/4(2 2).pdf

64. Iorio M. V., Visone R., Di Leva G. et al. Mi-croRNA signatures in human ovarian cancer // Cancer Res. — 2007. — Vol. 67, № 18. — 8699-8707.

65. Hu X., Macdonald D. M., Huettner P. C. et al. A miR-200 microRNA cluster as prognostic marker in advanced ovarian cancer // Gynecol Oncol Sep. — 2009. — Vol. 114, № 3. — P. 457-464.

66. Yang H., KongW., He L. et al. MicroRNA expression profiling in human ovarian cancer: miR-214 induces cell survival and cisplatin resistance by targeting PTEN // Cancer Res. — 2008. — Vol. 68. — P. 425-433.

67. Shih K. K., Qin L. X., Tanner E. J. et al. A microRNA survival signature (MiSS) for advanced ovarian cancer // Gynecol Oncol. — 2011. — Vol. 121. — P. 444-450.

СУЧАСН1 ТЕХНОЛОГИ ДОСЛ1ДЖЕННЯ СТАНУ СЛИЗОВО1 ОБОЛОНКИ ШИЙКИ МАТКИ ТА П1ХВИ У ХВОРИХ З М1КСТ-

1НФЕКЦ1СЮ

Бенюк В.О.

Нацюнальний медичний унгверситет 1мет О. О. Богомольця Зав1дувач кафедри акушерства i гтекологи №3

д. мед. н, професор м. Кшв, Украша Щерба О.А.

Нацюнальний медичний унiверситет iменi О. О. Богомольця Кафедра акушерства i гтекологи №3 к. мед. н., асистент м. Кшв, Украша Ластовецька Л.Д.

Нацюнальний медичний унiверситет iменi О. О. Богомольця Кафедра акушерства i гтекологи №3 к. мед. н., доцент м. Кшв, Украша Бу Вейвей

Нацюнальний медичний унiверситет iменi О. О. Богомольця Кафедра акушерства i гтекологи №3, аспiрант

м. Кшв, Украша Витищенко А. С.

Нацюнальний медичний унiверситет iменi О. О. Богомольця Кафедра акушерства i гтекологи №3, лiкар-iнтер

м. Кшв, Украша