Способ профилактики диспепсии и коррекции иммунного гомеостаза у новорожденных телят
METHOD FOR PREVENTION OF DYSPEPSIA AND CORRECTION OF IMMUNE HOMEOSTASIS IN NEWBORN CALVES

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам повышения резистентности и профилактики желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят.
Наиболее часто встречаются желудочно-кишечные болезни, которые относятся к незаразным заболеваниям молодняка и составляют у новорожденных телят до 10-дневного возраста 60-90%, а падёж в первые дни жизни составляет от 14 до 60% [1, 2].
Известен способ лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний телят, включающий использование животными диетического молока, содержащее ферменты - 2-10 мг/л трипсина или 0,2-1 г/л панкреатина и дополнительно 3-10 г/л гидрокарбоната натрия, которое выпаивают в течение 3-5 дней в норме и кратности, соответствующих выпойке для здоровых животных аналогичного возраста (а.с. №829115, опубл. 08.01.1976 г.).
Недостатком данного способа является то, что введенные ферменты в диетическое молоко переваривают иммуноглобулины, что ведет к уменьшению колострального иммунитета.
Кроме того, для решения проблемы болезней молодняка требуется внедрение в производство целого комплекса ветеринарных мер, особенно в биологическом комплексе «мать-плод-новорожденный», надежно обеспечивающих охрану животных от болезней и их продуктивного долголетия [3]. В настоящее время развивается теория о передаче и формировании иммунитета детеныша с помощью и под контролем иммунной системы матери [4].
Иммунологическая реактивность у новорожденных животных формируется постепенно и достигает полноценной зрелости только на определенном уровне индивидуального развития. У новорожденных в первые дни жизни преобладают клеточные факторы резистентности. Гуморальные факторы полностью зависят от поступления иммуноглобулинов с молозивом матери. Колостральный иммунитет - это иммунитет, формирующийся у новорожденных за счет молозивных иммуноглобулинов в течение первых 24-36 часов жизни. Для новорожденных видов сельскохозяйственных животных (жвачные, свиньи и лошади) антитела передаются потомству только через молозиво в постнатальный период [5]. Поэтому интенсивность поглощения адекватных количеств иммуноглобулинов молозива необходима для приобретения пассивного иммунитета. Недостаточность его переноса предопределяет у новорожденных иммунодефицитное состояние и риск заболеваний, главным образом, инфекционной этиологии [6].
Обеспеченность новорожденных колостральными антителами определяется содержанием иммуноглобулинов в молозиве, количеством выпоенного молозива и проницаемостью стенок кишечника [3].
Большую роль в образовании молочной железой высококачественного молозива играют женские половые гормоны - эстрогены (эстрон, эстриол, эстрадиол), синтезирующиеся фолликулами яичников. Биосинтез значительных количеств эстрогенов начинается после наступления половой зрелости. Структурами-мишенями для эстрогенов являются половые органы - яичники, яйцеводы, матка, влагалище, а также молочные железы. Эстрогены стимулируют их рост и развитие. Эстрогены вызывают рост молочных желез. Эстрогены участвуют в регуляции обменных процессов, повышают содержание фосфолипидов в крови, увеличивают синтез белков и накопление мышечной ткани, повышают сопротивляемость организма к вредным воздействиям, усиливают регенерацию при повреждении тканей, улучшают высшую нервную деятельность [7].
В современной ветеринарной медицине имеется дешевый синтетический аналог женского полового гормона - «Синэстрол-2%». Синэстрол (Synoestrolum). Производное стильбена. Синтетический аналог обладает действием естественного женского полового гормона эстрона, но действует медленнее и эффективнее [8].
Вместе с гормоном желтого тела фолликулярный гормон участвует в регуляции менструального цикла. Эстрогены, взаимодействуя со специфическими рецепторами, оказывают влияние на органы-мишени. «Синэстрол-2%» усиливает кровоснабжение половых органов, создает условия для гиперплазии мышечного слоя матки, активирует процессы пролиферации эндометрия, железистого эпителия и эпителия выводящих протоков молочных желез. Повышает чувствительность мышц матки и маточных труб к возбуждающим их моторику лекарственным средствам.
«Синэстрол-2%» по степени воздействия на организм относится к малоопасным веществам (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76), в рекомендованных дозах не оказывает местнораздражающего действия. [9]
Эстрогенный эффект оказывает преимущественно в родовых путях. Дополнительно к показаниям применения эстрона «Синэстрол-2%» применяют при эндометритах, вагинитах, для восстановления лактации у животных после отела, для удаления последа и мумифицированных плодов, для субинволюции матки после родов, при стойких желтых телах, кистах яичников, для стимуляции охоты [8]. Нами была подана заявка на выдачу патента Российской Федерации на изобретение от 09.03.2017, регистрационный № 2017107691, название изобретения: "Стимулятор повышения колострального иммунитета и неспецифической резистентности - "Синэстрол 2%" и способ его применения".

Известен также препарат «Ронколейкин». Торговое название Ронколейкин. Международное непатентованное название: Интерлейкин-2. Лекарственная форма - раствор для инъекций, а также перорального, интраназального и наружного применения. Ронколейкин содержит рекомбинантный интерлейкин-2 (ИЛ-2) человека, выделенный из клеток дрожжей Saccharomyces cerevisiae и вспомогательные вещества: додецилсульфат натрия (ДСН), D-маннит, дитиотреитол (ДТТ), аммоний углекислый кислый, вода для инъекций. 1 ампула (1 мл) содержит: интерлейкина-2 человека рекомбинантного 0,05; 0,1; 0,25 или 0,5 мг (50000, 100000, 250000, 500000 ME); додецилсульфат натрия - 0,5 мг/1 мг/2,5 мг/5 мг; D-маннит - 2,5 мг/5 мг/12,5 мг/25 мг; дитиотреитол - 0,08 мг; аммоний углекислый кислый - 0,79 мг; вода для инъекций - до 1 мл.
1 флакон (10 мл) содержит: интерлейкина-2 человека рекомбинантного 1; 2; 5 или 10 мг (1, 2, 5 или 10 млн. ME); додецилсульфат натрия - 10 мг/20 мг/50 мг/100 мг; D-маннит - 50 мг/100 мг/250 мг/500 мг; дитиотреитол - 0,8 мг; аммоний углекислый кислый - 7,9 мг; вода для инъекций - до 10 мл.
По внешнему виду представляет собой прозрачную бесцветную или светло-желтого цвета жидкость. Фармакотерапевтическая группа: цитокин.
Интерлейкин-2 продуцируется субпопуляцией Т-лимфоцитов (Т-хелперы I) в ответ на антигенную стимуляцию. ИЛ-2 воздействует на Т-лимфоциты, усиливая их пролиферацию и последующий синтез ИЛ-2. Механизм действия ИЛ-2 обусловлен его связыванием со специфическими рецепторами, представленными на различных клеточных мишенях. ИЛ-2 направленно влияет на рост, дифференцировку и активацию Т- и В-лимфоцитов, моноцитов, макрофагов, олигодендроглиальных клеток, эпидермальных клеток Лангерганса. От его присутствия зависит развитие цитолитической активности натуральных киллеров и цитотоксических Т-лимфоцитов. ИЛ-2 вызывает образование лимфокин-активированных киллеров и активирует опухоль-инфильтрующие клетки. Расширение спектра лизирующего действия эффекторных клеток обусловливает элиминацию разнообразных патогенных микроорганизмов, инфицированных и малигнизированных клеток, что обеспечивает иммунную защиту, направленную против роста опухолевых клеток, вирусных, бактериальных и грибковых инфекций.
«Ронколейкин» применяют всем видам животных, включая рыб и рептилий, в качестве иммунокорректора для лечения и профилактики инфекционных, гнойно-воспалительных и онкологических заболеваний, постоперационных осложнений, для нивелирования неблагоприятного воздействия стресс-факторов, для усиления эффективности вакцинации и уменьшения поствакцинальных осложнений, для стимуляции процессов репарации и регенерации тканей после травм и оперативных вмешательств, для нормализации состояния иммунитета старых животных. Противопоказанием к применению является повышенная чувствительность к интерлейкину-2 или любому компоненту препарата в анамнезе. Не рекомендуется вводить лошадям незадолго до или сразу после физической нагрузки; а также в жаркую погоду. Лошадям с тяжелыми поражениями проводящей системы и клапанного аппарата сердца применяют с осторожностью, дробно [10].

Особенностей лекарственной реакции при первичном или курсовом применении препарата не установлено. Лекарственное средство Ронколейкин можно применять у беременных животных, у животных в период лактации и у потомства животных без особенностей применения по вышеуказанным схемам.
Ранее мы применяли Ронколейкин в дозе 0,5 мг (500000 ME) стельным коровам за 3-6 дней до отела, что способствовало накоплению в молочной железе иммуноглобулинов и других иммуногенных факторов и выделению их в составе молозива. Это непосредственно отразилось на картине крови новорожденных телят через сутки. Отмечено повышение количества эритроцитов +14,37% (Р<0,05), лейкоцитов +22,37% (Р<0,05), наблюдался более высокий уровень гемоглобина +20,68% (Р<0,05), общего белка, особенно фракций альбуминов +13,12% (Р<0,05) и γ-глобулинов +16,1% (Р<0,05) [11].
Задачей изобретения является создание такого способа повышения резистентности и профилактики диспепсии, который способствовал бы созданию необходимого уровня колострального иммунитета у новорожденных телят.
Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, состоит в снижении желудочно-кишечных заболеваний, в повышении сохранности молодняка и в повышении среднесуточного прироста массы новорожденных телят.
Для достижения указанного технического результата беременным коровам за 3-6 дней до отела сначала вводят препарат "Синэстрол-2%" в дозе 0,8 мл на животное однократно подкожно в область лопатки, затем препарат "Ронколейкин" в дозе 0,8 мл (400000 ME) на животное однократно подкожно в область шеи, а новорожденным телятам, полученным от этих коров сразу после появления сосательного рефлекса выпаивают молозиво коровы-матери в количестве 1, 2 л от живой массы теленка, в первый день 4 раза, в последующие дни - 3 раза в день в течение 10 дней.
Опыты проводились в родильном отделении для коров и в профилактории для новорожденных телят на молочно-товарной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива "Мир" Нижегородской области на новорожденных телятах черно-пестрой породы, которым сразу же после появления сосательного рефлекса выпаивали молозиво от их коров-матерей.
Для опыта взято 40 глубокостельных коров черно-пестрой породы в возрасте 2-3 отела, 20 коров здоровы, а 20 других - с диагнозом метаболический ацидоз. Коровы-матери были разделены на 8 групп по 5 голов в каждой. 1, 2, 3, 4 группы - здоровые коровы; 5, 6, 7, 8 группы - с метаболическим ацидозом. Полученные от них телята тоже разделены на группы - 1, 2, 3, 4 соответственно своим матерям-коровам, т.е. 1, 2, 3, 4 группы - телята получены от здоровых коров; 5, 6, 7, 8 группы - от коров с метаболическим ацидозом.
1-я и 5-я группы - контрольные. За 3-6 дней до отела коровам 1 и 5 групп вводили подкожно и одноразово физиологический 0,9%-ный раствор хлорида натрия в дозе 1,5 мл в область лопатки.
2-я и 6-я опытные группы и коровам этих групп за 3-6 дней до отела вводили в область лопатки подкожно и одноразово препарат "Синэстрол-2%" в дозе 0,8 мл на 1 животное.
3-я и 7-я - опытные группы и коровам этих групп за 3-6 дней до отела вводили в область шеи подкожно и одноразово препарат "Ронколейкин" в дозе 0,8 мл (400000 ME) на 1 животное.
4- и 8-я - опытные группы и коровам этих групп за 3-6 дней до отела вводили подкожно и одноразово на 1 животное: сначала "Синэстрол-2%" в дозе 0,8 мл в область лопатки, затем "Ронколейкин" в дозе 0,8 мл (400000 ME) в область шеи.
Новорожденным телятам сразу же после появления сосательного рефлекса выпаивали молозиво от их коров-матерей в дозе 1, 2 л от живой массы теленка в первый день - 4 раза в день, в последующие дни - 3 раза в день в течение 10 дней.
Контрольным 1-й и 5-й группам новорожденных телят выпаивали молозиво от контрольных 1-й и 5 групп коров матерей: №1, 2, 3, 4, 5 и №21, 22, 23, 24, 25 в дозе 1, 2 л от живой массы теленка.
2-м и 6-м опытным группам новорожденных телят выпаивали молозиво от опытных 2-й и 6-й групп коров-матерей: №6, 7, 8, 9, 10 и №26, 27, 28, 29, 30 в дозе 1, 2 л от живой массы теленка.
3-м и 7-м опытным группам новорожденных телят выпаивали молозиво от опытных 3-й и 7-й групп коров-матерей: №11, 12, 13, 14, 15 и №31, 32, 33, 34, 35 в дозе 1, 2 л от живой массы теленка.
4-м и 8-м опытным группам новорожденных телят выпаивали молозиво от опытных 4-й и 8-ой групп коров-матерей: №16, 17, 18, 19, 20 и №36, 37, 38, 39, 40 в дозе 1, 2 л от живой массы теленка.
Каждому теленку присваивался номер его коровы-матери. Кормление, лечение, содержание - типичные для хозяйства. Телята подбирались в группы по методу аналогов, одинакового возраста и веса.
За животными велись клинические наблюдения, учитывались среднесуточные привесы.
До начала опыта, через 48 часов, через 10 суток бралась кровь для морфологических, иммунологических и биохимических исследований.
Для исследования молозива коров и крови новорожденных телят использовали следующие методы:
- содержание иммунных глобулинов (Ig) в молозиве (молоке) с натрия сульфитом определяли методами, изложенными в Справочнике «Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики» под редакцией профессора И.П. Кондрахина;
- общий белок на анализаторе AU480 Olympus, Япония;
- морфологические и биохимические исследования крови проводили по общепринятой методике. Иммунологические исследования проводились по методикам Манчини (IgG, IgM, IgA) и (Такт. (РЕ-РОК помощники) хелперы), В.В. Меньшикова (ФАН и БАСК).
Результаты опытов приведены в таблицах 1-6.
Из таблицы 1 видно, что во 2-й и 3-й опытных группах наблюдается повышение среднесуточного привеса новорожденных телят на 7,9 и 11,7% по сравнению с контролем, сохранность телят в обоих случаях составила 100%.
В опытных группах 6-й и 7-й (телята от коров с ацидозом) наблюдается также повышение среднесуточного привеса на 10% и 14,7% по сравнению с контролем соответственно, сохранность телят в этих группах составила 80%.
В опытных 4-й и 8-й группах среднесуточный привес увеличился по отношению к контролю на 17,8% в 4-й группе и на 29,5% в 8-й группе, сохранность телят в обеих группах составила 100%.
Проводились опыты по определению оптимальных вводимых доз препаратов "Синэстрол-2%" и "Ронколейкин" коровам за 3-6 дней до отела, которые показали, что введение сначала дозы менее 0,8 мл препарата "Синэстрол-2%", затем введение препарата "Ронколейкин" в дозе менее 0,8 мл (400000 ME) на животное здоровым коровам и коровам с ацидозом не оказывают достаточного влияния на их организм, не способствуют накоплению в молочной железе иммуноглобулинов и других иммуногенных факторов и у полученных от этих коров телят не происходит достаточного накопления колострального иммунитета, такие телята, так же, как и в контрольных группах, подвержены заболеваниям желудочно-кишечного тракта, сохранность и падёж которых тоже остаются на уровне контрольных групп.
Введение же препаратов в дозе более 0,8 мл на животное нецелесообразно, так как их введение хотя и оказывает достаточное действие на накопление иммуноглобулинов в молочной железе, однако высокие дозы использованных препаратов могут спровоцировать преждевременные роды.
Таким образом, на основе полученных данных можно сделать вывод, что применение глубокостельным коровам за 3-6 дней до отела подкожно и одноразово в дозе 0,8 мл каждого препарата на 1 животное сначала препарата "Синэстрол-2%" в область лопатки, затем препарата "Ронколейкин" в область шеи не только благоприятно влияет на организм коров-матерей и полученных от них телят, но и способствует профилактике желудочно-кишечных заболеваний у телят и нормализует иммунный гомеостаз телят 4-й и 8-й опытных групп.
Из таблиц 2 и 3 видно, что под действием препаратов "Синэстрол-2%" и "Ронколейкин" увеличивается содержание иммуноглобулинов в молозиве здоровых коров. Так в образцах молозива 2 опытной группы этот показатель выше на 10%, а 3 опытной группы - на 16,3% по сравнению с контролем.
Также использование этих препаратов оказало благоприятное влияние на организм 6 и 7 опытных групп коров с метаболическим ацидозом. В молозиве опытной группы 6 содержание иммуноглобулинов было выше на 12,2%, а в 7 опытной на 17,9% по сравнению с контролем. При этом случаев токсической диспепсии не наблюдалось, а возникающие расстройства протекали легко и проходили на 2-й - 3-й день, повысились и сохранность, и среднесуточный привес.
Применение глубокостельным коровам за 3-6 дней до отела подкожно и одноразово в дозе 0,8 мл каждого препарата сначала препарата "Синэстрол-2%" в область лопатки, затем препарата "Ронколейкин" в область шеи, усиливает эффект: молозиво коров 4-й опытной группы содержит иммуноглобулинов больше на 37,4%, а 8-й опытной группе на 29,4% по сравнению с животными контрольных групп.
В таблицах 4, 5, 6 приведены результаты биохимических и иммунологических исследований: общий белок крови, содержание иммуноглобулинов G, М, А, фагоцитарная активность нейтрофилов (ФАН), бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК), определение содержания Такт. (РЕ-РОК помощники) хелперов.
Из таблицы 4, 5, 6 видно, что выпаивание молозива полученного от коров 2-й и 6-й опытных групп способствовало достоверному повышению уровня иммунного гомеостаза у опытных новорожденных телят по сравнению с контрольными аналогами 1-й и 5-й групп. У телят 2-й опытной группы общий белок (г/л) через сутки после рождения составлял 59,49, у контрольных телят 1 группы - 56,42, соответственно в 6-й опытной 54,31 и 49,32.
Содержание основных классов иммуноглобулинов (мг/мл) у телят 2-й опытной группы составляло IgG - 15,87, IgM - 2,32, IgA - 0,70, у контрольных телят IgG - 14,82, IgM - 2,19, IgA - 0,65.
У телят 6-й опытной группы IgG - 11,54, IgM - 1,56, IgA - 0,49; соответственно у телят контрольной группы - 8,65, 1,24, 0,26, что находится в соответствии с достоверным увеличением Такт. (РЕ-РОК помощники) хелперов, основной функцией которых является взаимодействие с В-лимфоцитами, превращая их в плазматические клетки, синтезирующие иммуноглобулины. Содержание Такт. (РЕ-РОК помощники) хелперы в % у телят 2-й опытной группы составило 10,76 (р<0,05) у контрольных - 9,97. У телят 6-й опытной группы соответственно 9,21 и 6,52.
У опытных телят 2-й и 6-й групп отмечалось достоверное (р<0,05) увеличение фагоцитарной активности нейтрофилов и бактерицидной активности сыворотки крови.
Заболеваемость телят 6-й опытной группы снизилась по сравнению с контролем в 1,3 раза, во 2-й опытной группе не изменилась, привесы в данных группах повысились.
У телят 3-й группы общий белок (г/л) через сутки после рождения составлял 61,92, у телят в контроле - 56,42, соответственно в 7-й опытной группе 58,22 и 49,32. Содержание иммуноглобулинов мг/мл через сутки после рождения у телят 3-й группы: IgG - 16,18, IgM - 2,36, IgA - 0,72, у контрольных IgG - 14,82, IgM - 2,19, IgA - 0,65.
У телят 7-й опытной группы IgG - 13,68, IgM - 1,8, IgA - 0,52, соответственно у контрольных - 8,65, 1,24 и 0,26.
Количество Такт. (РЕ-РОК помощники) хелперов (%) через сутки после рождения у телят 3-й опытной группы составляло - 11,04, в контрольной - 9,97. У телят 7-й опытной группы 9,53 и соответственно у контрольных - 6,52.
Фагоцитарная активность нейтрофилов и бактерицидная активность сыворотки крови телят 3-й и 7-й опытных групп также была выше, чем у телят контрольных групп.
Хотя и отмечается положительный сдвиг в указанных показателях, однако в этих группах отсутствует 100% сохранность телят, что свидетельствует о недостаточности профилактического эффекта применения только одного из препаратов Синэстрола-2% или Ронколейкина.
В проведенных нами опытах наиболее оптимальная коррекция иммунного гомеостаза новорожденных телят произошла в 4-й и 8-й опытных группах. На это указывают и более высокие биохимические и иммунологические показатели. В 4-й опытной группе отсутствовали заболевания желудочно-кишечного тракта, в 8-ой группе - этот показатель снизился в 4 раза по сравнению с контролем. Сохранность в этих группах составила 100%. Средние суточные привесы были самыми высокими среди подопытных телят: так в 4-й группе прирост составил 524 г/сут, что выше контроля на 17,7%, а в 8-й - 492 г/сут и соответственно больше, чем в контроле на 29,5%.
У телят 8-й опытной группы только в 1 случае наблюдались расстройства пищеварения в течение первых суток. У телят опытных 4-й и 8-й групп повысился аппетит, они стали более подвижны, хорошо поедали сено и травяную муку.
Таким образом, применение Синэстрола-2% и Ронколейкина коровам-матерям за 3-6 дней до отела способствует формированию колострального иммунитета, обеспечивает 100% сохранность, снижает желудочно-кишечные заболевания на 92,5-100%, повышает средние суточные привесы на 17,7-29,5%, повышает аппетит.
Предлагаемый способ не только снижает желудочно-кишечные заболевания, но и способствует становлению колострального иммунитета новорожденных телят.
Были проведены испытания предлагаемого способа на 200 глубокостельных коровах и полученных от них телятах на молочно-товарной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива "Мир" Нижегородской области, которые снизили желудочно-кишечные заболевания, повысили сохранность телят и их средний суточный привес. Намечено внедрение предлагаемого способа в с/х кооперативе "Мир" и "Нижегородец" Нижегородской области на IV квартал 2018 года.
Источники информации
1. Митюшин В.В. Лечение телят при острых расстройствах пищеварения // Ветеринария, 1985. - №10. - С. 15.
2. Онипенко Н.И., Литвин В.П., Артеменко Ю.Г., Тарабара И.М. Болезни телят. - Киев: изд. "Уражай", 1981. - С. 30-35.
3. Петрянкин Ф.П. Болезни молодняка животных / Ф.П. Петрянкин, О.Ю. Петрова // Учебное пособие. - 2-е изд., перераб. и доп. - СПб.: Изд-во «Лань», 2014. - 352 с.
4. Скопичев В.Г. Физиология репродуктивной системы млекопитающих: Учебное пособие / В.Г. Скопичев, И.О. Боголюбова / СПб.: Изд-во «Лань», 2007. - 5012 с.
5. Svendsen l. Lokal immunited og oral immunisering mod mave - tarmsygdomme hos svinet forarsaget of E. coli // Dansk. Vet. Fidsskr. - 1978. - Agr. 61. - №4. - s. 144-149.
6. Weaver D.M. Passive transfer of colostral immunoglobulins in calves / D.M. Weaver, J.W. Tyler, D.C. VanMetre et al. // J. Vet intern. Med. - 2000. - v. 14. №6. - p. 569-577.
7. Лысов В.Ф. Физиология и этология животных / В.Ф Лысов, Т.В. Ипполитова, В.И. Максимов, Н.С. Шевелев. - М.: Колос, 2004. - 568 с.
8. Соколов В.Д. Фармакология: Учебник / 3-е изд. Исп. и доп. - СПб.: изд-во «Лань», 2013. - 576 с.
9. Инструкция по применению препарата «Синэстрол 2%».
10. Инструкция по применению препарата «Ронколейкин».
11. Кляпнев А.В. Формирование колострального иммунитета и становление неспецифической резистентности у новорожденных телят под действием Ронколейкина / А.В. Кляпнев // Научно-производственный журнал «Ветеринарный врач». - №5, 2016, - С. 27-32.