ПЕРЕКРЕСТНО РЕАКТИВНЫЕ АНТИТЕЛА К JAGGED 1/K JAGGED 2, АКТИВИРУЕМЫЕ АНТИТЕЛА К JAGGED И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Выделенное полностью человеческое моноклональное антитело, которое связывает Jagged 1 и Jagged 2.
2. Антитело по п. 1, которое содержит последовательность CDR1 VH, содержащую аминокислотную последовательность SYAMS (SEQ ID NO: 200); последовательность CDR2 VH, содержащую аминокислотную последовательность SIDPEGRQTYYADSVKG (SEQ ID NO: 208); последовательность CDR3 VH, содержащую аминокислотную последовательность DIGGRSAFDY (SEQ ID NO: 209); последовательность CDR1 VL, содержащую аминокислотную последовательность RASQSISSY (SEQ ID NO: 210); последовательность CDR2 VL, содержащую аминокислотную последовательность AASSLQS (SEQ ID NO: 211); и последовательность CDR3 VL, содержащую аминокислотную последовательность QQTVVAPPL (SEQ ID NO: 212).
3. Антитело по п. 1, которое содержит сочетание последовательности CDR1 VH, последовательности CDR2 VH, последовательности CDR3 VH, последовательности CDR1 VL, последовательности CDR2 VL и последовательности CDR3 VL, выбранное из сочетаний, показанных в таблице 2.
4. Антитело по п. 3, которое содержит сочетание вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи из сочетаний, перечисленных в таблице 4.
5. Антитело по п. 1, которое связывает Jagged 1 и Jagged 2 и предотвращает связывание одного или нескольких Jagged 1 или Jagged 2 с рецептором Notch.
6. Антитело по п. 1, которое является антителом IgG-изотипа.
7. Антитело по п. 6, которое является антителом IgG1-изотипа.
8. Антитело по п. 1, содержащее средство, конъюгированное с антителом.
9. Антитело по п. 8, в котором средством является терапевтическое средство, антинеопластическое средство, токсин или его фрагмент, детектируемый остаток или диагностическое средство.
10. Антитело по п. 8, в котором средство конъюгировано с антителом через линкер.
11. Антитело по п. 10, в котором линкер является расщепляемым линкером.
12. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из предшествующих пунктов и носитель.
13. Активируемое антитело, которое в активированном состоянии связывает Jagged 1 и Jagged 2, содержащее:
антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент (AB), которое специфично связывается с Jagged 1 и Jagged 2;
маскирующий остаток (MM), который ингибирует связывание AB с Jagged 1 и Jagged 2, когда активируемое антитело находится в нерасщепленном состоянии; и
расщепляемый остаток (CM), связанный с AB, где CM представляет собой полипептид, который функционирует в качестве субстрата для протеазы.
14. Активируемое антитело по п. 13, в котором MM имеет равновесную константу диссоциации для связывания с AB, которая больше, чем равновесная константа диссоциации для связывания AB с Jagged 1 и Jagged 2.
15. Активируемое антитело по п. 13, в котором MM не мешает или не конкурирует с AB за связывание с Jagged 1 и Jagged 2, когда активируемое антитело находится в расщепленном состоянии.
16. Активируемое антитело по п. 13, в котором протеаза локализована совместно с Jagged 1 и/или Jagged 2 в ткани, и в котором протеаза расщепляет CM в активируемом антителе, когда активируемое антитело подвергается воздействию протеазы.
17. Активируемое антитело по п. 13, которое в нерасщепленном состоянии имеет следующее распределение структур от N-конца к C-концу: MM-CM-AB или AB-CM-MM.
18. Активируемое антитело по п. 13, которое содержит линкерный пептид между MM и CM.
19. Активируемое антитело по п. 13, которое содержит линкерный пептид между CM и AB.
20. Активируемое антитело по п. 13, которое содержит первый линкерный пептид (LP1) и второй линкерный пептид (LP2), и которое в нерасщепленном состоянии имеет следующее распределение структур от N-конца к C-концу: MM-LP1-CM-LP2-AB или AB-LP2-CM-LP1-MM.
21. Активируемое антитело по п. 20, в котором два линкерных пептида не обязательно должны быть идентичными друг другу.
22. Активируемое антитело по п. 20, в котором каждый из LP1 и LP2 представляет собой пептид длиной примерно от 1 до 20 аминокислот.
23. Активируемое антитело по п. 13, в котором MM представляет собой полипептид длиной примерно от 2 до 40 аминокислот.
24. Активируемое антитело по п. 13, в котором последовательность полипептида MM отличается от последовательности Jagged 1 и Jagged 2 и в котором последовательность полипептида MM не более чем на 50% идентична любому из естественных партнеров по связыванию с AB.
25. Активируемое антитело по п. 13, в котором CM представляет собой полипептид длиной до 15 аминокислот.
2
26. Активируемое антитело по п. 13, в котором его антигенсвязывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из Fab-фрагмента, F(ab')-фрагмента, scFv, scab, dAb, однодоменного антитела с тяжелой цепью и однодоменного антитела с легкой цепью.
27. Активируемое антитело по п. 13, в котором CM является субстратом для фермента, выбранного из группы, состоящей из uPA, легумаина, MT-SP1, ADAM17, BMP-1, TMPRSS3, TMPRSS4, MMP-9, MMP-12, MMP-13 и MMP-14.
28. Активируемое антитело по п. 13, содержащее средство, конъюгированное с AB.
29. Активируемое антитело по п. 28, в котором средством является терапевтическое средство, антинеопластическое средство, токсин или его фрагмент, детектируемый остаток или диагностическое средство.
30. Активируемое антитело по п. 28, в котором средство конъюгировано с AB через линкер.
31. Активируемое антитело по п. 30, в котором линкер является расщепляемым линкером.
32. Активируемое антитело по п. 13, в котором MM содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей, показанных в таблице 9, таблице 11, таблице 12, таблице 13, таблице 14, таблице 19, таблице 20, таблице 21, таблице 22 или таблице 23.
33. Активируемое антитело по п. 13, в котором антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывает Jagged 1 и Jagged 2, содержит последовательность CDR1 VH, содержащую аминокислотную последовательность SYAMS (SEQ ID NO: 200); последовательность CDR2 VH, содержащую аминокислотную последовательность SIDPEGRQTYYADSVKG (SEQ ID NO: 208); последовательность CDR3 VH, содержащую аминокислотную последовательность DIGGRSAFDY (SEQ ID NO: 209); последовательность CDR1 VL, содержащую аминокислотную последовательность RASQSISSY (SEQ ID NO: 210); последовательность CDR2 VL, содержащую аминокислотную последовательность AASSLQS (SEQ ID NO: 211); и последовательность CDR3 VL, содержащую аминокислотную последовательность QQTVVAPPL (SEQ ID NO: 212).
34. Активируемое антитело по п. 13, в котором антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывает Jagged 1 и Jagged 2, содержит сочетание последовательности CDR1 VH, последовательности CDR2 VH, последовательности CDR3 VH, последовательности CDR1 VL, последовательности CDR2 VL и последовательности CDR3 VL, выбранное из сочетаний, показанных в таблице 2.
35. Активируемое антитело по п. 13, в котором антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывает Jagged 1 и Jagged 2, содержит сочетание вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи из сочетаний, перечисленных в таблице 4.
36. Активируемое антитело по п. 13, содержащее аминокислотную последовательность легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 74, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194 и 196, и аминокислотную последовательность тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 76 и 148.
37. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело по п. 1 или активируемое антитело по п. 13.
38. Вектор, содержащий выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по п. 37.
39. Способ получения антитела или активируемого антитела посредством культивирования клетки в условиях, которые приводят к экспрессии антитела или активируемого антитела, где клетка содержит молекулу нуклеиновой кислоты по п. 37.
40. Способ получения активируемого антитела, которое связывает Jagged 1 и Jagged 2 в активированном состоянии, включающий:
(a) культивирование клетки, содержащей конструкцию нуклеиновой кислоты, которая кодирует активируемое антитело в условиях, которые приводят к экспрессии активируемого антитела, где активируемое антитело содержит маскирующий остаток (MM), расщепляемый остаток (CM) и антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент (AB), которое специфично связывает Jagged 1 и Jagged 2,
и (b) извлечение активируемого антитела.
41. Способ по п. 40, в котором CM представляет собой полипептид, который функционирует в качестве субстрата для протеазы.
42. Способ по п. 40, в котором CM расположен в активируемом антителе так, что в нерасщепленном состоянии MM мешает специфичному связыванию AB с Jagged 1 и Jagged 2, а в расщепленном состоянии MM не мешает или не конкурирует со специфичным связыванием AB с Jagged 1 и Jagged 2.
43. Способ ослабления симптома клинического состояния, ассоциированного со злокачественной опухолью, у субъекта, включающий введение антитела по п. 1 или активируемого антитела по п. 13 субъекту, нуждающемуся в этом, в количестве, достаточном для ослабления симптома клинического состояния, ассоциированного со злокачественной опухолью.
44. Способ снижения ангиогенеза, включающий введение антитела по п. 1 или активируемого антитела по п. 13 субъекту, нуждающемуся в этом, в количестве, достаточном для снижения ангиогенеза.
45. Способ снижения передачи сигнала Jagged 1 и/или Jagged 2, включающий введение антитела по п. 1 или активируемого антитела по п. 13 субъекту, нуждающемуся в этом, в количестве, достаточном для снижения передачи сигнала Jagged 1 и/или Jagged 2.
46. Способ по любому из пп. 43-45, в котором указанным субъектом является человек.
47. Способ ослабления симптома фиброза, включающий введение антитела по п. 1 или активируемого антитела по п. 13 субъекту, нуждающемуся в этом, в количестве, достаточном для ослабления симптома фиброза у субъекта.
48. Способ по п. 47, в котором указанным субъектом является человек.