Показатели клеточного и гуморального иммунитета больных хроническим гепатитом С при лечении интерфероном-α

Медицинская иммунология 2001, Т. 3, № 4, стр 557-562 © 2001, СПб РО РААКИ

Краткие сообщения

ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С ПРИ ЛЕЧЕНИИ ИНТЕРФЕРОНОМ-сс

Маммаев С.Н.

Кафедра пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и гепатологии Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова

Резюме. Изучена экспрессия антигенов CD3, CD4, CD8, CD 16, CD25 и CD 19 на лимфоцитах периферической крови больных хроническим гепатитом С (ХГС) до и после 12-недельного курса терапии интерфероном-а (IFN-а). У нелеченых больных обнаружили достоверное (р<0,05) уменьшение процента клеток, экспрессирующих антигены CD4, CD 16 и CD25, тогда как процент лимфоцитов CD8+ (р>0,05) и CD19+ (р<0,05) был увеличен по сравнению с контролем. Через 3 мес. от начала терапии IFN-a отмечено достоверное повышение экспрессии CD4 (р<0,05) и CD25 (р<0,01) на лимфоцитах крови у 80 и 85% больных ХГС соответственно по сравнению с показателями до лечения. На фоне эффективного лечения выявлено достоверное (р<0,05) снижение содержания CD8"-лимфоцитов. Экспрессия CD 19 на лимфоцитах уменьшилась, но оставалась повышенной по сравнению с контролем. Полученные результаты свидетельствуют о недостаточности клеточного иммунного ответа у больных ХГС. Динамика субпопуляционного состава Т-лимфоцитов на фоне эффективного лечения IFN-a свидетельствует о важной роли Т-клеточного звена иммунитета в механизмах противовирусной защиты при хронической HCV-инфекции.

Ключевые слова: хронический гепатит С, Т-и В-лимфоциты, CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, апоптоз, интерферо-нотерапия

Mammaev S.N.

PARAMETERS OF HUMORAL AND CELLULAR IMMUNITY

IN IFN-a TREATMENT OF CHRONIC HEPATITIS С

Abstract. We have studied the expression of CD3, CD4, CD8, CD16, CD25 and CD19 on peripheral blood lymphocytes of patients with chronic hepatitis С before and after 12-week course of IFN-a therapy. In patients who received no IFN-a treatment the significant decrease

~ Введение

Хронический гепатит (ХГ), причиной которого в 70% случаев является вирус гепатита С (HCV), как правило, протекает без клинической симптоматики в течение многих лет, а сопутствующее ему поражение печени варьирует от минимальной до среднетяжелой формы гепатита или цирроза печени. Такие особенности хронической HCV-инфекции

Адрес для переписки:

Маммаев Сулейман Нуратдинович - км.н., кафедра пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и гепатологии Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова. Москва, 119881, ГСП-3, Погодинская, 5.

Тел.: (095) 248-37-00; факс:(095) 248-36-10.

обусловлены состоянием иммунной системы макроорганизма, от которого зависит течение и исход заболевания.

Иммунные реакции при вирусной инфекции могут быть разделены на врожденные, обусловленные системой комплемента, мононуклеарными фагоцитами и естественными киллерами (МК), и адаптивные, формирующиеся в процессе ответа на специфические антигены. Важнейшая особенность адаптивной системы иммунитета - избирательное вовлечение в иммунный ответ только тех лимфоцитов, которые несут рецепторы, распознающие антигены [5].

С04+ Т-клеточный ответ на вирусные белки является важным механизмом защиты макроорганизма, поскольку СБ4+-клетки -Т-хелперы (ТЬ) стимулируют продукцию антител В-лимфоцитами и активируют СЭ8+ Т-клетки, специфичные для ви-русинфицированных клеток. Для активации ТЬ необходимо образование комплекса Т-клеточного рецептора с вирусным антигенным пептидом, представленным молекулами главного комплекса гистосовместимости (МНС) II класса на поверхностной мембране антигенпрезентирующих клеток (АПК). К последним относятся дендритные клетки, В-лим-фоциты и активированные макрофаги. Пролиферация СБ4+ лимфоцитов сопровождается выработкой цитокинов, участвующих в формировании антиген-специфического клеточного (ТЫ) и гуморального (ТЬ2) иммунного ответа [22].

С08+-цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) играют важную роль в патогенезе вирусных заболеваний. Функцией этих клеток является распознавание антигенов на клеточной поверхности в комплексе с молекулами МНС I класса. НСУ-специфи-ческие ЦТЛ постоянно обнаруживаются у больных ХГ С и могут оказывать повреждающее действие на клетки печени [8].

Выраженные нарушения в иммунной системе при хронической НСУ-инфекции служат предпосылками к применению иммунотерапии, одним из перспективных направлений которой является использование цитокинов, в том числе препаратов интерферона (1РМ). Известно, что ШЫ-а совместно с интерлейкином-12 (1Ь-12) усиливает функции ТЫ [11]. Таким образом, использование 1П\г-а может рассматриваться как патогенетическая терапия ХГ С.

К сожалению, стабильных положительных результатов лечения удается достичь лишь у 20-25% больных ХГ С [13,17]. В связи с этим продолжается изучение механизмов “иммунного ускользания” при хронической НСУ-инфекции и поиск путей повышения эффективности терапии 1РЫ-а.

Цель исследования -изучение спектра поверхностных антигенов Т- и В -лимфоцитов крови у больных ХГ С до и после 12-недельного курса терапии 1РЫ-а.

Материал и методы

Исследования проведены у 25 больных (15 мужчин, 10 женщин) ХГ С в возрасте от 17 до 48 лет (средний возраст 32,5±4,8). Контрольную группу составили 20 здоровых добровольцев из числа студентов и ординаторов ММА им. И.М. Сеченова (средний возраст 25,5±2,3).

Диагноз ХГ устанавливали на основании клинического обследования и общепринятых лабораторно-инструментальных методов исследования. Маркеры HCV в сыворотке крови определяли иммуно-ферментным методом. У всех больных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) исследовали в крови HCV РНК (HCV RNA).

Морфологическое исследование биоптатов печени проведено 21 (84%) больному ХГ С с определением индекса гистологической активности по Knodell и степени фиброза по Desmet. Исследование поверхностных антигенов CD3, CD4, CD8, CD16, CD25 и CD19 на лимфоцитах периферической крови проводили на проточном цитофлуори-метре (Partec, Германия) с помощью моноклональных антител CD3-, CD4-, CD16-, CD25- FITC и CD8-,CD19-R-PRE (Caltag, США). После установления клинического диагноза всем больным была назначена терапия IFN-a-2b (Интроном А) в дозе 3 млн ME 3 раза в неделю. Изучение экспрессии антигенов на лимфоцитах проводили до начала и после 12-недельного курса интерферонотерапии.

Полученные результаты обработаны статистически по стандартной программе с вычислением достоверности различия по критерию t Стьюдента.

Результаты

Основным клиническим проявлением у большинства исследованных больных ХГ С был астенонев-ротический синдром. При объективном (физическом или ультразвуковом) исследовании у всех больных выявлена незначительная или умеренная гепа-томегалия, как правило, без сочетанного увеличения селезенки. Активность сывороточных транса-миназ была незначительно повышенной (1,5-3 нормы) у 18 (72%) больных, умеренно повышенной (3,5-5 норм) у 7 (28%) больных.

У всех обследованных больных ХГ С в крови обнаружены анти-HCV антитела и HCV RNA, что в совокупности с результатами биохимического исследования крови явилось показанием для назначения IFN-a.

При гистологическом исследовании диагностических биоптатов печени выявлена картина гепатита с минимальной и слабовыраженной активностью воспалительного процесса (3-8 баллов по Knodell) у 67% больных, с умеренной активностью (9-12 баллов) - у 33%.

По степени фиброза печени больные ХГ С раз-

Табл.1. ДИНАМИКА ЭКСПРЕССИИ ПОВЕРХНОСТНЫХ МАРКЕРОВ Т- И В -ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ БОЛЬНЫХ ХГ С ДО И ПОСЛЕ 12-НЕДЕЛЬНОГО КУРСА ТЕРАПИИ 1т-сс

Группа Обслед. С03,% СР4,% С08,% С04/Сй8 С016,% С019,% С025,%

БольныеХГС до леч.п=25 59,6+1,2 25,3±0,6* 32,5±2,2 0,7±0,2 4,2±0,3* 17,2±3,5* 9,5±1,8*

БольныеХГС пос. леч.п=20 63,9+1,7 37,4+1,1** 21,6+0,4** 1,7±0,5 9,6±1,7 13,8±2,8 32,7±3,3***

Контроль п=20 65,3+1,4 36,5±0,9 24,3±1,3 1,37+0,3 12,7+2,6 8,6+1,3 20,3+2,4

Примечание: *р<0,05 по отношению к контролю, **р<0,05, ***р<0,01 между группами

делились следующим образом: слабый и умеренный фиброз (1-2 балла) обнаружен у 81% больных, у 19% больных была картина тяжелого фиброза (3 балла).

При изучении экспрессии поверхностных антигенов на лимфоцитах крови выявлено снижение СБЗ+, С04+, С016+ и СБ25+ соответственно у 13 (52%), 17 (68%), 18 (72)% и у 21 (84%) больных ХГ С по сравнению с контролем. При этом экспрессия антигенов СБ4, СБ16 и СВ25 достоверно (р<0,05) отличалась от показателей контроля. Исследование экспрессии поверхностного антигена С08+ на лимфоцитах показало значительное, но недостоверное (р>0,05) повышение у 16 (64%) больных ХГ С по сравнению с контролем. Экспрессия антигена С019+ была повышенной у 19 (76%) больных ХГ С и достоверно (р<0,05) отличалась от контрольного уровня (табл.1).

В процессе лечения ГИМ-а 5 больных были исключены из исследования по разным причинам. У остальных 20 больных наблюдалась положительная клинико-лабораторная динамика, что проявлялась нормализацией уровня трансаминаз и исчезновением НСУ ЮМ.

Через 3 месяца от начала терапии 1РЫ-а больных ХГС отмечено повышение экспрессии антигенов СБЗ, СБ4, С016 и СЭ25 у 12 (60%), 16 (80%), 13 (65%) и у 17 (85%) на лимфоцитах крови соответственно по сравнению с показателями до лечения. Экспрессия СБ4 и С0254 достоверно (р<0,05 и р<0,01 соответственно) повысилась по сравнению с исходными данными. Кроме того, на фоне лечения 1ЕМ-а обнаружена положительная корреляция (г=0,48, р<0,05) между экспрессией антигенов СБ4 и СВ25 на лимфоцитах крови (рис.1). Экспрессия антигена СБ8 после 12-недельного курса терапии 1Р1Ч-а достоверно (р<0,05) снизилась у 14 (70%) больных по сравнению с исходным уровнем. Экспрессия СО 19 на лимфоцитах имела тенденцию к снижению, но оставалась повышенной по отношению к контролю.

Обсуждение

Цитотоксический иммунный ответ играет важную роль в защите организма от внутриклеточных патогенов, в том числе вирусов, и включает неспецифическое звено - ЇЧК-клетки, и антигенспецифи-ческое звено адаптивного иммунного ответа - ЦТЛ [5,22].

Активация ЬТК-клеток опосредована секрецией макрофагами 1РЫ-а/Р и особенно 1Ь-12, который способен 100-кратно увеличить активность этих клеток. При этом усиливается адгезивность МК-кле-ток, изменяется экспрессия некоторых мембранных молекул, индуцируется секреция 1РЫ-у [ 6 ].

Реализация функций МК по отношению к клеткам-мишеням обусловлена экспрессией на их поверхности антигена СО 16, который распознает Рс-пор-ции иммуноглобулинов ЄЗ и Єї. Конечным результатом такого распознавания является антителозависимый клеточно-опосредованным цитолиз инфицированных клеток [16,25]. Клетки-эффекторы, которые его осуществляют, называют К-клетками (разновидность МК-клеток).

Достоверно низкая экспрессия антигена СО 16 на лимфоцитах у обследованных нами больных ХГ С по сравнению с контролем может свидетельствовать о слабой противовирусной резистентности мак-

Рис.1. Корреляционная зависимость между экспрессией антигенов СЭ4 и Сй25 на лимфоцитах крови больных ХГС после 12-недельного курса терапии 1РЫ-а (г=0,48, р<0,05).

роорганизма, обусловленной NK-клетками. При хронической HCV-инфекции, вероятно, страдают механизмы активации NK-клеток. Известно, что при ХГ С продукция макрофагами IFN-a и (3 значительно снижена [1]. Сниженная экспрессия CD16 у больных ХГ С, в свою очередь, может определять слабую активность К-клеток и их участие в антителозависимом клеточно-опосредованном цитолизе.

Нормальное функционирование иммунной системы строится на балансе Thl и Th2, основанном на равноценной продукции ими регуляторных ци-токинов. Полученные нами данные о низкой экспрессии CD25 (a-цепи рецептора IL-2) на лимфоцитах согласуются с предположением о нарушении равновесия в активации Thl и Th2 типов по пути доминирования Th2 при хронической HCV-инфек-ции. Постоянная активация лимфоцитов на фоне низкой экспрессии CD25, но обычного содержания IL-4 может привести к постепенному преобладанию ТЬ2-ответа. Кроме того, отмечена способность IL-4, IL-10 подавлять продукцию IL-2 Т-лимфоцитами [19], экспрессию CD25 на Т-лимфоцитах и (3-цепи на В-лимфоцитах и NK-клетках, активность NK [9,18].

Иммунные нарушения при хронической HCV-инфекции в основном отражают дефекты Т-клеточ-ного звена иммунитета, как в количественном, так и в качественном составе Т-клеток. Так, нами выявлена низкая экспрессия CD3 - общего популяционного маркера Т-лимфоцитов у больных ХГС. Достоверно низкая экспрессия молекул CD4 у обследованных нами больных свидетельствует о том, что при хронической HCV-инфекции CD4+ Т -клеточный пролиферативный ответ на антигены HCV является достаточно слабым. Подобные предположения высказываются и другими авторами [10 ].

Известно, что увеличение концентрации IL-lp и туморнекротизирующего фактора-a в сыворотке инфицированных ВИЧ обратно коррелировало с числом СЭ4+-клеток, иммунорегуляторным индексом и пролиферативной активностью лимфоцитов [4]. Высокая концентрация туморнекротизирующего фактора-a в сыворотке крови больных ХГ С обнаружена нами в предыдущих исследованиях [3]. Поскольку биологические характеристики HCV и его взаимодействие с клетками иммунной системы человека во многом сходны с характеристиками и поведением ВИЧ-1 [14], логично предположить, что в ингибировании экспрессии СБ4+-клеток при хронической HCV-инфекции определенную роль играют провоспалительные цитокины.

У большинства больных, инфицированных HCV, ответ ЦТЛ является мультиспецифичным, направленным как на структурные, так и неструктурные белки вируса [15].

Незначительное повышение экспрессии CD8+ Т-лимфоцитов больных ХГ С по сравнению с контро-

лем свидетельствует о том, что ответ ЦТЛ недостаточен для элиминации HCV. Сходные результаты получены и другими авторами [23].

Предполагают существование нескольких путей индукции экспансии и дифференцировки цитоток-сических CD8+ Т-клеток [5,22]. Один из них связан с действием АПК, способных обеспечивать достаточный стимул, чтобы активировать CD8+ клетки и заставить их вырабатывать IL-2-аутокринный фактор, обусловливающий их дальнейшее развитие и пролиферацию. Моноциты, усиленно экспрессирующие CD95 у больных ХГ С [2], возможно, в свою очередь, подвержены апоптозу, что может вести к развитию дефицита АПК и ко-стимулирующих молекул, необходимых для активации С08тклеток.

Допускается, что CD4+ Т-клетки после стимуляции АПК синтезируют большое количество IL-2 (паракринный механизм), которым они обеспечивают умеренно стимулированные СБ8+-клетки. Активация CD8+ Т-клеток и по этому механизму недостаточна, что связано с низкой экспрессией CD4 и CD25 у исследованных нами больных ХГ С.

Существенное прогностическое значение при течении HCV-инфекции имеет отношение количества С04+-лимфоцитов к количеству CD8\ которое в норме превышает единицу, а у больных ХГ С по результатам наших исследований ниже единицы. Изменение количества CD4+ и СБ8+-лимфоци-тов находится в реципрокных взаимоотношениях: лечение IFN-a ведет к повышению количества Т-клеток с фенотипом CD4 и параллельному снижению СВ8-позитивных лимфоцитов.

Повышенная экспрессия CD 19 - общего популяционного рецептора В-лимфоцитов у больных ХГ С свидетельствует об активном участии В-лимфоцитов в противовирусном иммунном ответе. Но вместе с тем их протективная эффективность в условиях персистенции HCV-инфекции ограничена. Причиной “ускользания” от антител, несмотря на повышенную экспрессию CD19, вероятно, является высокая мутационная изменчивость вирусного генома (одновременное существование “квази-штам-мов”), при которой антитела не способны предотвратить инвазию вируса [24].

Увеличение активности NK-клеток и обусловленные ими регуляторные функции под влиянием IFN-

а, по-видимому, происходят через усиление экспрессии CD 16 на их поверхности. Повышение цитотоксичности NK-клеток через активацию перфори-нового пути может быть одним из механизмов противовирусного действия IFN-a при лечении больных ХГ С [21].

После 12-недельного курса лечения IFN-a у больных ХГ С с положительной динамикой клиниколабораторных показателей наблюдали усиление экспрессии CD3, CD4 и С025-молекул, что указывает на важную роль Th 1-клеточного звена имму-

нитета в механизмах элиминации HCV. Положительная корреляция между экспрессией CD25+ и CD4 в процессе лечения IFN-a, вероятно, отражает изменение Thl/Th2 баланса в сторону Thl типа и усиление CD4+T-K/ieT04H0ro пролиферативного ответа на антигены HCV. С этим предположением согласуется отмеченное нами уменьшение экспрессии CD 19 на фоне эффективного лечения IFN-a больных ХГ С. На отсутствие решающей роли В-лимфоцитов в элиминации HCV из организма хозяина свидетельствуют и результаты других клинических исследований [7,12].

Через 3 мес. на фоне успешного лечения IFN-a у обследованных нами больных ХГ С наблюдалось достоверное снижение доли CD8T-K/ieTOK по сравнению с исходным уровнем, что свидетельствует об уменьшении количества Fas-положительных клеток [20].

Благодарности

За коллегиальную помощь и содействие в проведении работы выражаю искреннюю благодарность сотрудникам Гематологического научного центра РАМН и Российской медицинской академии последипломного образования М3 РФ : д.м.н. Лукиной Е.А., д.м.н., проф. Луговской С.А., к.м.н. Почтарь М.Е.

Литература

1. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии.-М.,1996.

2. Маммаев С.Н., Лукина Е.А., Луговская С.А., Шульпекова Ю.О., Левина А.А., Почтарь М.Е., Ивашкин В.Т. Влияние интерферона-а на цитоки-новый профиль больных хроническим вирусным гепатитом С //Медицинская иммунология. -2000.-Том.2.№4.-С.409-414.

3. Маммаев С.Н., Шульпекова Ю.О., Левина А.А., Лукина Е.А., Ивашкин В.Т. Содержание провоспа-лительных цитокинов и факторов роста в сыворотке крови больных хроническими вирусными гепатитами и циррозом печени // Росс.журн.гастроен-терол. гепатол.колопроктол.-2000.-№5.-С.30-34.

4. Шемшура А.Б., Сизякина Л.П. Особенности макрофагального звена в динамике ВИЧ-инфекции у детей различных возрастных групп // Иммуно-логия.-2000.-№1.-С.13-18.

5. Ярилин А.А. Основы иммунологии. - М. Медицина,-1999.-608 с.

6. Bona С., Bonilla F. Textbook of Immunology.-2-d Ed. - Amsterdam, 1996.

7. Burioni R., Plaisant P., Manzin A., Rosa D., Delli C.V., Bugli F„ Solforosi L., Abrignani S., Varaldo PE., Fadda G., Clementi M. Dissection of human humoral immune response against hepatitis С Virus E2

glycoprotein by repertoire cloning and generation of recombinant Fab fragments // Hepatology.- 1998.-Vol.28.-P.810-814.

8. Chang KM., Reherman B., Chisari FV. Immunopathology of hepatitis C. Springer Semin // Immunopathol.-1997.- Vol.l9.-P.57-68.

9. Chastagner P., Moreau J.Jacgues Y., Tanaka T., Miyasaka M„ Kondo M„ Sugamura K., Theze J. Lack of intermediate-affinity interleukin-2 receptor in mice leads to dependence on interleukin-2-receptor alfa, beta and gamma chain expression for T cell growth // Eur.J.Immunol.-1996.-Vol.26.-P.201-206.

10. Cramp ME., Carucci P., Rossol S., Chokshi S.,Maertens G., Williams P., Naoumov NV. Hepatitis C virus (HCV) specific immune response in anti-HCV positive patients without hepatitis C viraemia // Gut-1999.- Vol.44.-P.424-429.

11. Gutterman J.U. Cytokine therapeutics:lessons from interferon alfa // Proc.nat.Acad.Sci.USA.-1994.-Vol.91.-P.1198-1205.

12. Hempel G., Galle P.R., Lohr H.F. Charakterization of HCV-specific cellular and humoral immune responses referred to virus elimination // J.Hepatology.-2000.-Suppl..№.2.-Vol.32.-P.172.

13. Knolle P., Kremp S., Hohler T., Krummenauer F., Schrmacher P., Cerken G. Viral and host factors in the prediction of response to interferon-alpha therapy in chronic hepatitis C after long-term follow-up // J.Viral.Hepat.-1998.- Vol.5.-P.399-406.

14. Koziel MG., Walker BD. Characteristics of the intrahepatic cytotoxic T lymphocyte response in chronic hepatitis C virus infection. Springer Semin // Immunopathol.-1997.-Vol.l9.-P.69-83.

15. Koziel MG. The role of immune responses in the pathogenesis of hepatitis C virus infection // J.Vir.Hepat.-1997.- Vol.4.-Suppl.2.-P.31-41.

16. Mason L.H., Yagita H., Ortaldo J.R. LGL-l:a potential triggering molecule on murine NK-cells // J.Leukocyte Biol.-1994.-Vol.55.-№3.-P.362-370.

17. Me Hutchison J., Gordon S., Schiff E., Shiffman ML., Lee WM., Rustgi VK., Goodman ZD., Ling MH„ Cort S., Albrecht JK. Interferon alpha-2b alone or in combination with ribavirin as initial treatment for chronic hepatitis C. Hepatitis Interventional Therapy Group // N.Eng.J.Med.-1998.-Vol.339.-P. 1485-1492.

18. Moreau J., Chastagner P., Nanaka T., Miyasaka M„ Kondo M., Sugamura K., These J. Control of the IL-2 responsiveness of B lymphocytes by IL-2 and IL-4 // J.Immunol.-1995,-Vol. 155.-P.3401 -3408.

19. Mosmann T., Sad S. The expanding universe of T-cells subsets: Thl, Th2 and more // Immunol.Today.-1996.-Vol.17.-P. 138-146.

20. Okazaki M., Hino K., Fujii K., Kobayashi N.. Okita K. Hepatic Fas antigen expression before and after interferon therapy in patients with chronic hepatitis C // Digest.Dis.Ski.-1996.-Vol.41.-P.2453-2458.

21.Par G., Par A., Rukavina D., Horanyi M., Szekeres-Bartho J., Hegedus G., Paal M„ Mozsik Gy. Decrease in CD3 CD8 and Vy9/V82 TCR* Tcell count and low perforin expression in associated with an impairment of natural killer cell activity in hepatitis C virus (HCV)infection. The enchancing effects of interferon a 2b treatment // J.Hepatology.-2000.-Suppl..№.2.-Vol.32.-P.93.

22.Roitt I., Brostoff J., Male D. Immunology. Fifth edition.- 1998.-P.423.

23.Reherman B., Chang KM., Me Hutchison JG., Kokka R., Houghton M., Chisari FV. Quantitative

analysis of the peripheral blood cytotoxic T lymphocyte response in patients with chronics hepatitis С virus infection //J.Clin.Invest.-1996.- Vol.98.-P.1432-1440.

24.van Doom LJ., Capriles I., Maertens G., Deleys R., Murray K., Kos Т., Schellekens H., Quint W. Sequense evolution of the hypervariable region in the putative envelope region E2/NS1 of hepatitis С virus is correlated with specific humoral immune responses //J.Virol.-1995.- Vol.69.-P.773-778.

25.Wallace P.K., Howell A.L., Fanger M.W. Role of Fc gamma receptors in cancer and infectious disease // J.Leukocyte Biol.-1994.-Vol.55.-№6.-P.816-826.

поступила в редакцию 23.05.2001 принята к печати 05.07.2001