ИММУНОМОДУЛИРУЮЩАЯ И ПРОТИВОИНФЕКЦИОННАЯ КОМПОЗИЦИЯ
IMMUNOMODULATORY AND ANTI-INFECTIOUS COMPOSITION

Изобретение относится к композициям, обладающим биологической активностью, в частности иммуномодулирующими и антибактериальными свойствами, и может быть использовано в медицинской и ветеринарной практике для лечения и профилактики инфекционных заболеваний, сопровождающихся изменением иммунного статуса организма.
Известен патент RU №2203068, опубл. 27.04.2003, «Биологически активные ультрадисперсные алмазы детонационного синтеза», для которого установлена противоопухолевая активность при отсутствии побочного токсического действия (вещество относиться к 4 классу токсичности). Недостатком этой композиции является отсутствие антибактериальной активности.
Известен «Биологически активный препарат» (патент RU №2123329, опубл. 20.12.1998), представляющий собой смесь ультрадисперсных порошков тяжелых металлов: (УДП) меди, серебра, платины, железа, цинка. По назначению данное средство наиболее близко к заявляемой композиции и выбрано в качестве прототипа.
Недостатком прототипа является то, что он обладает побочным токсическим действием на организм, прежде всего иммунотоксическим действием.
Технической задачей изобретения является разработка новой эффективной композиции с участием наноразмерных порошков алмаза, алюминия и серебра и с повышенной биологической активностью, а именно получение малотоксичного препарата, обладающего иммуномодулирующими свойствами в сочетании с антибактериальной активностью.
Поставленная задача решается путем использования не применявшейся ранее композиции, а именно наноразмерного порошка серебра (размер частиц 80-100 нм), наноразмерного порошка алмаза (размер частиц 4-7 нм) и наноразмерного порошка алюминия (размер частиц 80-100 нм) в количественном соотношении, мас.%: 40:30:30.
Состав композиции выбирается, исходя из специфики биологической активности компонентов.
Пример. Наноразмерный порошок серебра 0,4 г смешивают с наноразмерным порошком алюминия в количестве 0,3 г и наноразмерным порошком алмаза в количестве 0,3 г. Из полученной смеси готовят суспензию в 100 мл дистиллированной воды.
Свежеприготовленную по примеру суспензию использовали для тестирования в реакции бластной трансформации лимфоцитов человека (РБТЛ).
С этой целью проводили анализ действия препаратов на иммунокомпетентные клетки, стимулированные фитогемагглютинином (ФГА) после действия препаратов в диапазоне концентраций от 0,001 до 1 мг/мл. Оценка влияния препаратов на пролиферативную активность лимфоцитов в спонтанном и индуцированном ФГА тесте проведена в соответствии с методическими рекомендациями Фармкомитета Минздрава РФ (Ведомости фармакологического комитета, 1999, №1).
Результаты тестирования препаратов в реакции РБТЛ представлены в табл.1.
В результате тестирования установлено, что заявляемая композиция не оказывает угнетающее влияние на индуцированную ФГА пролиферативную активность лимфоцитов. Из таблицы 1 хорошо видно, что заявляемая композиция во всех исследованных концентрациях оказывает стимулирующее действие на активность лимфоцитов в тесте спонтанной пролиферации (без дополнительного стимулирования воздействием ФГА) по сравнению с прототипом.
Свежеприготовленную по примеру суспензию использовали для изучения антибактериальной активности заявленной композиции. Антибактериальная активность определялась методом серийных разведений в бактериальных культурах в концентрации 1,0 мг/мл, 0,5 мг/мл и 0,1 мг/мл. Результаты опытов после 24 часов роста микроорганизмов при 37°С представлены в таблице №2. Из данных таблицы следует, что заявляемая композиция оказывает выраженное бактерицидное действие на микроорганизмы, вызывая 100% их гибель.
Проведены исследования влияния композиции (свежеприготовленная по примеру суспензия) на функциональную активность нейтрофильных лейкоцитов периферической крови доноров в широком диапазоне концентраций. Применялась известная из литературы методика моделирования фагоцитоза с использованием штамма Staphylococcus aureus Н-209 (Новиков Д.К., Новикова В.Н. Оценка иммунного статуса. Москва-Витебск, 1996, 281 с.). Подсчитывался процент активных нейтрофилов (ПАН), процент завершенного фагоцитоза (ПЗФ) при контрольном тестировании без воздействия препаратов и поглотительная способность нейтрофилов. Результаты представлены в таблице №3, из которой видно, что в области исследованных концентраций после воздействия композиции повышается процент завершенного фагоцитоза, процент активных нейтрофилов и их фагоцитарная активность в сравнении с прототипом.
Таблица №1
Иммуномодулирующая и противоинфекционная композиция
Доза, мг/мл
Спонтанная пролиферация
Пролиферация с фитогемагглютинином (ФГА)
Прототип
Композиция
Прототип
Композиция
контроль
7
7
94
94
0,5
цитолиз всех клеток
1
цитолиз всех клеток
40
0,05
3
4
80
95
0,005
6
7
92
94
Таблица 2
Иммуномодулирующая и противоинфекционная композиция
Препарат
Доза, мг/мл
Е. coli
Staphylococcus aureus
Контроль (штамм без препарата)
Прототип
1
100% подавление роста
100% подавление роста
Активный рост колоний
0,5
100% подавление роста
100% подавление роста
0,1
100% подавление роста
100% подавление роста
Заявленная композиция
1
100% подавление роста
100% подавление роста
Активный рост колоний
0,5
100% подавление роста
100% подавление роста
0,1
100% подавление роста
100% подавление роста
Таблица 3
Иммуномодулирующая и противоинфекционная композиция
Доза, мг/мл
Процент активных нейтрофилов (ПАН)
Процент завершенного фагоцитоза (ПЗФ)
Поглотительная способность нейтрофилов
Прототип
Композиция
Прототип
Композиция
Прототип
Композиция
контроль
32
32
53
53
5
5
0,5
12
37
30
58
2
4
0,05
20
40
47
70
3
6
0,005
29
42
50
64
3
5