ПЕПТИД ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВОЗРАСТНОЙ МАКУЛЯРНОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ

1. Мутантный пептид SPINK2, который содержит аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 30 (фиг. 42), и ингибирует протеазную активность человеческой HTRA1.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
2. Пептид по п. 1, где первая Xaa (X) представляет Asp, Glu, Ser, Gly или Ile, вторая Xaa (X) представляет Ala, Gly, Leu, Ser или Thr, третья Xaa (X) представляет Asp, His, Lys, Met или Gln, четвертая Xaa (X) представляет Asp, Phe, His, Ser или Tyr, пятая Xaa (X) представляет Ala, Asp, Glu, Met или Asn, шестая Xaa (X) представляет Met или Trp, седьмая Xaa (X) представляет Gln, Trp, Tyr или Val, восьмая Xaa (X) представляет Phe, Leu или Tyr, девятая Xaa (X) представляет Phe или Tyr, десятая Xaa (X) представляет Ala, Glu, Met или Val, и одиннадцатая Xaa (X) представляет Ala, Thr или Val.
3. Пептид по п. 1, который содержит аминокислотную последовательность, показанную в любой из последовательностей SEQ ID NO: 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21 и 23-29 (фиг. 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33 и 35-41).
4. Пептид по п. 1, который содержит аминокислотную последовательность, полученную связыванием пептидной связью одной-трех аминокислот с аминоконцевым участком аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO: 30 (фиг. 42).
5. Пептид по п. 1, который содержит аминокислотную последовательность, полученную связыванием пептидной связью одной-двух аминокислот с карбоксиконцевым участком аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO: 30 (фиг. 42).
6. Пептид по п. 1, который имеет трехмерную структуру, отличающуюся наличием трех дисульфидных связей и включающую петлевую структуру, α-спираль и β-лист.
7. Полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, содержащуюся в пептиде по любому из пп. 1-6.
8. Вектор, содержащий полинуклеотид по п. 7.
9. Клетка, содержащая полинуклеотид по п. 7 или вектор по п. 8 или продуцирующая пептид по любому из пп. 1-6.
10. Способ получения мутантного пептида SPINK2, который ингибирует протеазную активность HTRA1, включающий следующие стадии (i) и (ii):
(i) культивирование клетки по п.9; и
(ii) выделение мутантного пептида SPINK2 из культуры.
11. Мутантный пептид SPINK2, полученный способом по п. 10.
12. Конъюгат, содержащий пептид по любому из пп. 1-6 и 11, связанный с дополнительной молекулой.
13. Конъюгат по п. 12, который представляет полипептид.
14. Антитело, которое связывается с пептидом по любому из пп. 1-6 и 11, или его функциональный фрагмент.
15. Композиция, содержащая пептид по любому из пп. 1-6 и 11, полинуклеотид по п. 7, вектор по п. 8, клетку по п. 9, конъюгат по пп. 12 или 13 и/или антитело или его функциональный фрагмент по п. 14.
16. Фармацевтическая композиция, содержащая пептид по любому из пп. 1-6 и 11 и/или конъюгат по п. 12 или 13.
17. Фармацевтическая композиция по п. 16 для лечения или профилактики заболевания, связанного с HTRA1.
18. Фармацевтическая композиция по п. 17, где заболевание, связанное с HTRA1, представляет одно, два или более заболеваний, выбранных из группы, состоящей из влажной формы возрастной макулярной дегенерации, сухой формы возрастной макулярной дегенерации, географической атрофии, диабетической ретинопатии, ретинопатии недоношенных, полипоидной хориоидальной васкулопатии, ревматоидного артрита и остеоартрита.
19. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-18, которая содержит одно, два или более дополнительных лекарственных средств.
20. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-18, которая применяется в комбинации с одним, двумя или более дополнительными лекарственными средствами.
21. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-18, которая представляет агент для защиты сетчатки.
22. Способ идентификации терапевтического средства или профилактического средства для возрастной макулярной дегенерации, включающий следующие стадии 1-3:
[стадия 1] инкубация протеазы HTRA1 и субстрата в присутствии и в отсутствии тестируемого вещества;
[стадия 2] детектирование активности протеазы HTRA1 в присутствии и в отсутствии тестируемого вещества; и
[стадия 3] определение тестируемого вещества как положительного, когда активность протеазы HTRA1 в присутствии тестируемого вещества ниже активности протеазы HTRA1 в отсутствии тестируемого вещества.
23. Способ идентификации агента для защиты сетчатки, включающий следующие стадии 1-3:
[стадия 1] инкубация протеазы HTRA1 и субстрата в присутствии и в отсутствии тестируемого вещества;
[стадия 2] детектирование активности протеазы HTRA1 в присутствии и в отсутствии тестируемого вещества; и
[стадия 3] определение тестируемого вещества как положительного, когда активность протеазы HTRA1 в присутствии тестируемого вещества ниже активности протеазы HTRA1 в отсутствии тестируемого вещества.
24. Способ получения модели повреждения сетчатки на кроликах, включающий стадию скармливания кроликам рациона с высоким содержанием жира, включающего гидрохинон, в течение 3-6 месяцев, где клетки ретинального пигментного эпителия модельного кролика гипертрофированы по сравнению с клетками ретинального пигментного эпителия нормального кролика.
25. Модель повреждения сетчатки на кроликах, полученная способом по п. 24, где модель повреждения сетчатки на кроликах имеет гипертрофированные клетки ретинального пигментного эпителия по сравнению с нормальным кроликом.
26. Способ идентификации терапевтического средства или профилактического средства для возрастной макулярной дегенерации или агента для защиты сетчатки, включающий следующие стадии (i) и (ii):
(i) оценка гипертрофии клеток ретинального пигментного эпителия у кролика по п. 25 с и без введения тестируемого вещества; и
(ii) определение тестируемого вещества как положительного, когда гипертрофия клеток ретинального пигментного эпителия при введении тестируемого вещества подавляется по сравнению с гипертрофией клеток ретинального пигментного эпителия без его введения.
27. Способ по п. 26, где оценка на стадии (i) представляет измерение средней площади клеток ретинального пигментного эпителия или числа гипертрофированных клеток ретинального пигментного эпителия.
28. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-18 для лечения или профилактики сухой формы возрастной макулярной дегенерации.
29. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-18 для лечения или профилактики влажной формы возрастной макулярной дегенерации.
30. Применение фармацевтической композиции по п. 16 для лечения и профилактики заболевания, связанного с HTRA1.
31. Применение по п. 30, где заболевание, связанное с HTRA1, представляет одно, два или более заболеваний, выбранных из группы, состоящей из влажной формы возрастной макулярной дегенерации, сухой формы возрастной макулярной дегенерации, географической атрофии, диабетической ретинопатии, ретинопатии недоношенных, полипоидной хориоидальной васкулопатии, ревматоидного артрита и остеоартрита.
32. Применение по п. 30, где фармацевтическая композиция содержит одно, два или более дополнительных лекарственных средств.
33. Применение по п. 30, где фармацевтическая композиция применяется в комбинации с одним, двумя или более дополнительными лекарственными средствами.
34. Применение по любому из пп. 30-33, где фармацевтическая композиция представляет агент для защиты сетчатки.
35. Применение по пп. 30-31, которое предназначено для лечения или профилактики сухой формы возрастной макулярной дегенерации.
36. Применение по пп. 30-31, которое предназначено для лечения или профилактики влажной формы возрастной макулярной дегенерации.