Влияние м,м,2,3-тетрагидрокси-сукцинамида на цитотоксичность комплексов платины

30

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

материалы и методы. Исследованы образцы опухолевой ткани первичного очага 39 больных РЯ, полученные интраоперационно, из них у 10 пациенток изучены образцы метастазов, также 3 образца нормальной ткани яичника при профилактической овариоэктомии. Для получения клеточных суспензий проводили фрагментацию ткани опухолей с использованием Medimachine (BD Biosciences). Все полученные образцы подвергались цитоморфологиче-скому контролю. Структуру субпопуляций клеток оценивали по связыванию с моноклональными антителами различной специфичности методом многопараметровой проточной цитометрии.

результаты. Оценка образцов опухолевых клеток, полученных из первичного опухолевого очага, метастатического очага и ткани нормального яичника, показала, что содержание лимфоидных клеток (TIL) c фенотипом CD45+ в полученных суспензиях имеет неправильное распределение и составило 1,6 (1,4—5,8) %, 3,3 (2,3—5,2) % и 0,25 % соответственно. При сравнении уровня линейных популяций лимфоцитов (Т-В-NK) обнаружено, что в структуре TIL показатели содержания Т-клеток с фенотипом CD45+CD3+CD19- в первичном очаге выше уровня этих клеток в метастазе РЯ: 82,4 (71,3-90,4) % и 78,8 (68,8-89,0) %. Также среди лимфоидной фракции CD45+клеток число NK-клеток с фенотипом CD45+CD3-CD16+CD56+ было выше в ткани первичного очага по сравнению с метастатической опухолью: 8 (3,5-18,0) % и 6,3 (3,8-10,6) % соответственно. Число В-лимфоцитов с фенотипом CD45+CD3-CD19+, напротив, было выше среди TIL в метастатическом очаге по сравнению с первичной опухолью - 3,7 (2,1-11,6) % и 2 (1,1-6,1) % соответственно. Анализ содержания CD4+, CD8+ и NKT+ регуляторных/супрессорных Т-клеток показал, что количество NKT-клеток в опухолевых тканях сопоставимо, при этом содержание CD4+, CD8+ Т-регуля-торных клеток имеет обратную зависимость, в ткани первичной опухоли CD4+ показатели выше, а в ткани метастаза преобладают CD8+ Treg клетки.

Заключение. Количество и структура лимфоцитов, инфильтрирующих первичную опухоль, метастатический очаг и нормальную ткань яичника, сильно различаются.

Т.Н. Заботина, Е.Н. Захарова, О.В. Короткова, А.А. Борунова, Д.В. Табаков, И.В. Паниченко, Р.К. Валиев, М.В. Савостикова, З.Г. Кадагидзе

количественный анализ лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, у первичных больных раком яичников

ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия

Цель исследования. Провести количественный анализ степени инфильтрации лимфоцитами опухолевой ткани у больных раком яичников (РЯ).

материалы и методы. Оценивали процентное содержание CD45+ лимфоцитов (TIL) в клеточных суспензиях, полученных из опухолевой ткани первичных очагов и метастазов 28 больных РЯ. В исследование вошли пациентки с гистологически верифицированным диагнозом, преобладал серозный вариант опухоли, 75,8 % больных IIIA-IIIC стадий, средний возраст составил 56,6 года. Забор опухо-

левой ткани проводили в процессе выполнения хирургического этапа лечения. Клеточные суспензии получали путем фрагментации ткани опухоли с использованием Medimachine (BD Biosciences). Далее осуществляли имму-нофлуоресцентное окрашивание клеток с использованием коммерческих моноклональных антител (Beckman Coulter). Количественный анализ лимфоцитов проводили на проточном цитометре FACSCalibur (BD Biosciences). Все полученные суспензии клеток подвергали цитоморфологи-ческому контролю (жидкостная цитология).

результаты. В зависимости от содержания CD45+ TIL сформированы 3 подгруппы пациенток с РЯ. В 1-ю подгруппу вошли больные с уровнем CD45+, не превышающим 1 %, во 2-ю подгруппу вошли пациентки с уровнем CD45+ от 1,1 до 10 %, 3-ю подгруппу составили больные с уровнем TIL >10,1 %. Процентное содержание TIL в исследуемых образцах первичной опухоли сильно варьировало — от 0,02 до 30,4 %. Наиболее часто (57,1 %) выявлялись больные 2-й подгруппы, при этом число CD45+ TIL составило 2,99 %; 32,1 % больных РЯ имели уровень CD45+ клеток, не превышающий 1 %, а число CD45+ клеток составило 0,35 %, и с меньшей частотой 10,8 % в исследуемой когорте встречались пациентки с уровнем CD45+ TIL >10 %, среднее значение составило 18,9 %. Аналогичным образом изучали ткань метастазов. Только в 1 (8,3 %) из 12 образцов ткани содержание TIL было <1 % (0,4 %), остальные пациентки (91,4 %) вошли во 2-ю подгруппу с уровнем TIL 4,2 %. При этом отсутствовали больные с содержанием TIL в метастазах >10 %.

Заключение. Результаты анализа количества лимфоцитов в первичной опухоли и метастазах больных РЯ показали, что в тканях преобладает промежуточный вариант степени инфильтрации TIL, а высокая степень инфильтрации встречается в первичных опухолях, но не в метастазах.

A.А. Занина1, Н.В. Филатова2, А.Б. Еремеев2,

B.Д. Сень2, Б.С. Федоров2, А.А. Терентьев1,2, 3

влияние м,м,2,3-тетращдрокси-сукцинамида на ЦитотокСичноСТЬ комплексов платины

1МГУим. М.В. Ломоносова, Москва, Россия;

2ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область,

Россия;

3НОЦ«Медицинская химия» МГОУ, Черноголовка, Московская область, Россия

введение. В последние годы в разработке препаратов для лечения онкологических заболеваний большое внимание уделяется классу гидроксамовых кислот, известных как ингибиторы ферментов гистондеацетилазы. Некоторые представители данного класса, такие как вориностат, па-нобиностат и белиностат, показывают высокую противоопухолевую активность in vitro и in vivo и, кроме того, одобрены для клинического применения в лечении опухолевых заболеваний. Известно, что молекулы ингибиторов гистонде-ацетилазы потенциально способны повысить эффективность химиотерапии противоопухолевыми препаратами разных классов. В данной работе представлен новый представитель класса гидроксамовых кислот — Ш,Ш,2,3-тетрагидроксисук-цинамид (ТГСА), содержащий 2 гидроксамовые группировки.

Спецвыпуск / том 17 / 2018

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 31

Предложено изучение его цитотоксических свойств индиви- на сеть микротрубочек клеток карциномы легких человека дуально и в комбинации с платиновыми комплексами. А549. Цель исследования. Исследование влияния ТГСА на Материалы и методы. Методом амидирования моноэ-жизнеспособность опухолевых и нормальных фиброблас- фиров двухосновных кислот с адамантановыми спиртами топодобных клеток, а также на цитотоксические свойства N-дезацетилколхицином в присутствии N-этоксикарбо-комплексов платины. нил-2-этокси-1,2-дигидрохинолина синтезирована серия Материалы и методы. Объектом исследования являет- аналогов #(7-адамант-1-илокси-7-оксогептаноил)-#-де-ся гидроксамовая производная винной кислоты ТГСА. зацетилколхицина. Определение антипролиферативной В качестве платиновых комплексов были выбраны циспла- активности проведено в стандартном колориметрическом тин и аминонитроксильные комплексы платины (IV) е-ам- тесте с 3- (4,5-диметилтиазолил-2)-2,5-дифенил-2Н-тетра-мин^-(4-амино-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил)-а, золилбромидом (МТТ) по отношению к культуре клеток /-бис(ацетат)-6, с-дихлороплатина (IV) и е-аммин-d- карциномы легких человека А549 (CCL-185), а также в экс-(4-амино-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил)-а,/-бис перименте по прямому подсчету клеток под микроскопом. (пентаноат)-б, с-дихлороплатина (IV). Эксперименты про- Эффект на сеть микротрубочек клеток А549 определен водили на опухолевых клетках M-HeLa (эпителиоидная иммунофлуоресцентным методом с использованием монокарцинома шейки матки человека), а в качестве модели клональных антител мышей к ß-тубулину (Sigma, США) нормальных клеток использовали клетки FetMSC (фибро- и флуоресцентно меченных AlexaFlour488 козьих вторич-бластоподобные клетки костного мозга раннего эмбриона). ных антител против иммуноглобулинов мышей (Invitrogen, Исследование цитотоксичности проводили с помощью Германия). МТТ-теста. Определение концентрации IC50 проводили Результаты. Все полученные вещества проявили цито-через 24 и 72 ч после нанесения соединений. токсичность в низком наномолярном интервале концент-Результаты. При 72-часовой экспозиции в диапазоне раций и оказались в 3—6 раз более активны, чем колхицин концентраций от 200 мкМ и выше ТГСА проявляет силь- (IC50 = 30 ± 2 нМ), а 2 конъюгата — более активны, чем со-ное цитотоксическое действие на опухолевые клетки. Жиз- единение-лидер (IC50 = 11 ± 1 нМ). Показано, что умень-неспособность нормальных фибробластоподобных клеток шение длины линкера в структурах конъюгатов приводит не нарушается при аналогичных концентрациях ТГСА. к повышению их цитотоксичности, а позиция сложноэ-Кроме того, выявлено, что ТГСА увеличивает цитотокси- фирной связи не оказывает заметного влияния на актив-ческие свойства платиновых препаратов. ность. Все соединения серии вызывают деполимеризацию Заключение. Гидроксамовая кислота ТГСА обладает тубулина, проявляют сильный кластеризующий эффект высокой избирательной токсичностью по отношению и обладают способностью вызывать апоптоз клеток А549. к опухолевым клеткам. ТГСА обладает способностью зна- Заключение. Цитотоксичность 2 аналогов N-^-ада-чительно усиливать цитотоксический эффект платиновых мант-1-илокси-7-оксогептаноил)-^дезацетилколхицина комплексов. (с меньшей длиной линкера и/или изменением позиции сложноэфирной группы) по отношению к клеткам карци-Н.А. Зефиров, H.A. Чернышов, О.Н. Зефирова номы легких А549 сравнима с таковой для клинически НОВЫЕ КОНЪЮГАТЫ КОЛХИЦИНА используемого препарата таксола. С АДАМАНТАНОМ: АНТИПРОЛИФЕРАТИВНАЯ Работы поддержаны грантом РФФИ № 18-03-00524. АКТИВНОСТЬ И ЭФФЕКТ НА СЕТЬ МИКРОТРУБОЧЕК КЛЕТОК КАРЦИНОМЫ А549 Е. С. Иванова1. В.В. Татарский1. A.A. Зейфман2, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия О.В. Строганов2, В.С. Стройлов2, И.Ю. Титов2, Введение. Тубулокластин ^(7-адамант-2-илокси-7- Ф.Н. Новиков2, A.A. Калинина1, В.Ю. Шульгина2, оксогептаноил)-^дезацетилколхицин представляет собой Г.Г. Чилов2, A.A. Штиль1 конъюгат колхицина с присоединенным через линкерную МЕХАНИЗМЫ ГИБЕЛИ КЛЕТОК ХРОНИЧЕСКОГО цепь адамантановым фрагментом. Это соединение обладает МИЕЛОИДНОГО ЛЕЙКОЗА ПРИ ДЕЙСТВИИ высокой антипролиферативной активностью (IC50 <10 нМ) PF-114 — НОВОГО ИНГИБИТОРА по отношению к различным типам опухолевых клеток. ТИРОЗИНКИНАЗЫ BCR-ABL Введение тубулокластина (в низких дозах) эксперимен- 1ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» тальным животным с трансплантированным лимфолейко- Минздрава России, Москва, Россия; зом Р-388 приводит к значимому и достоверному увеличе- 2ООО «Фьюжн Фарма», Москва, Россия нию продолжительности жизни животных. Тип действия Введение. Резистентность к ингибиторам тирозинки-тубулокластина и его аналога с узловым присоединением назы Bcr-Abl 1-2-го поколений — одна из главных проблем адамантана ^-(7-адамант-1-илокси-7-оксогептаноил)-Ж- при лечении пациентов с хроническим миелоидным лей-дезацетилколхицина] in vitro отличается от такового козом (ХМЛ). С использованием метода молекулярного для свободного колхицина способностью вызывать обра- моделирования разработан ингибитор Bcr-Abl 3-го поко-зование тубулиновых кластеров необычной морфологии. ления PF-114, показавший эффективность в доклиниче-Цель исследования. Синтез гомологов ^(7-адамант- ских исследованиях при ХМЛ с наиболее частой мутацией 1-илокси-7-оксогептаноил-^дезацетилколхицина с лин- T315I. кером меньшей длины и/или изменением позиции сложно- Цель исследования. Изучение механизмов гибели кле-эфирной группы, изучение их цитотоксичности и эффекта ток ХМЛ при действии PF-114.

Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ