ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ

1. Полинуклеотид, содержащий нуклеотидную
последовательность GBA, при этом нуклеотидная последовательность GBA кодирует белок β-глюкоцереброзидазы (ГЦазы) или его фрагмент, и при этом по меньшей мере часть нуклеотидной последовательности GBA не является последовательностью дикого типа, при этом необязательно часть нуклеотидной последовательности GBA, которая не является последовательностью дикого типа, оптимизирована по кодонам, при этом более необязательно, нуклеотидная последовательность GBA кодирует белок ГЦазы или его фрагмент и содержит последовательность, которая является:
(i) на 100% идентичной нуклеотидной последовательности любой SEQ ID NO: 1-8;
(ii) по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или по меньшей мере на 100% идентичной нуклеотидной последовательности любой из SEQ ID NO: 1-8; и/или
(iii) вариантом любой SEQ ID NO: 1-8, кодирующим белок ГЦазы, имеющий активность ГЦазы, при этом указанный вариант является идентичным SEQ ID NO: 1-8 соответственно, за исключением того, что он содержит нуклеотидные замены, вследствие чего белок ГЦазы имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5, до 6, до 7, до 8, до 9 или до 10 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25.
2. Полинуклеотид по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность GBA содержит последовательность, которая является:
(i) на 100% идентичной нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 5;
(ii) по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% идентичной нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 5; и/или
(iii) вариантом SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 5, кодирующим белок ГЦазы, имеющий активность ГЦазы, при этом указанный вариант является идентичным SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 5 соответственно, за исключением того, что он включает нуклеотидные замены, вследствие чего белок ГЦазы имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5, до 6, до 7, до 8, до 9 или до 10 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25.
3. Полинуклеотид по п. 1 или 2, отличающийся тем, что вариант представляет собой вариант SEQ ID NO: 1, при этом вариант SEQ ID NO: 1:
(i) является идентичным SEQ ID NO: 1, за исключением того, что он включает нуклеотидные замены, вследствие чего белок ГЦазы имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5, до 6, до 7, до 8, до 9 или до 10 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25;
(ii) имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5, до 6, до 7, до 8, до 9, до 10, до 20 или до 30 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 1;
(iii) имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5 или до 6 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 1;
(iv) имеет до 4 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 1 и/или кодирует белок ГЦазы, имеющий до 3 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25;
(v) имеет до 3 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 1 и/или кодирует белок ГЦазы, имеющий до 2 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25; и/или
(vi) имеет 1 нуклеотидную замену относительно последовательности SEQ ID NO: 1 и/или кодирует белок ГЦазы, имеющий до 1 аминокислотной замены относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25.
4. Полинуклеотид по п. 1 или 2, отличающийся тем, что вариант представляет собой вариант SEQ ID NO: 5, при этом вариант SEQ ID NO: 5:
(i) является идентичным SEQ ID NO: 5, за исключением того, что он включает нуклеотидные замены, вследствие чего белок ГЦазы имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5, до 6, до 7, до 8, до 9 или до 10 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25;
(ii) имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5, до 6, до 7, до 8, до 9, до 10, до 20 или до 30 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 5;
(iii) имеет 1, до 2, до 3, до 4, до 5 или до 6 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 5;
(iv) имеет до 4 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 5 и/или кодирует белок ГЦазы, имеющий до 3 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25;
(v) имеет до 3 нуклеотидных замен относительно последовательности SEQ ID NO: 5 и/или кодирует белок ГЦазы, имеющий до 2 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25; и/или
(vi) имеет 1 нуклеотидную замену относительно последовательности SEQ ID NO: 5 и/или кодирует белок ГЦазы, имеющий до 1 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25.
5. Полинуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность GBA кодирует белок ГЦазы, имеющий:
(i) до 3 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25;
(ii) до 2 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25; и/или
(iii) до 1 аминокислотной замены относительно аминокислотной последовательности ГЦазы дикого типа SEQ ID NO: 25.
6. Полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность GBA, причем указанная нуклеотидная последовательность GBA кодирует белок ГЦазы или его фрагмент и содержит последовательность, которая по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или на 100% идентична фрагменту из по меньшей мере 1000, по меньшей мере 1200, по меньшей мере 1300, по меньшей мере 1494, по меньшей мере 1611, от 1000 до 1494, от 1000 до 1611, от 1300 до 1494, от 1300 до 1611, примерно 1494 или примерно 1611 нуклеотидов любой из SEQ ID NO: 1-8.
7. Полинуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что по меньшей мере часть нуклеотидной последовательности GBA оптимизирована по кодонам.
8. Полинуклеотид по п. 7, отличающийся тем, что:
(a) по меньшей мере часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, является оптимизированной по кодонам для экспрессии в клетках печени человека;
(b) часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, является непрерывной частью;
(c) нуклеотидная последовательность GBA оптимизирована по кодонам для экспрессии в клетках печени человека;
(d) часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, составляет по меньшей мере 1000, по меньшей мере 1200, по меньшей мере 1300, менее 1494, от 1000 до 1494, от 1300 до 1494, или примерно 1494 нуклеотидов в длину;
(e) часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, соответствует зрелому белку ГЦазы;
(f) часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, не кодирует весь или часть сигнального пептида;
(g) нуклеотидная последовательность GBA или часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, содержит меньшее количество CpG по сравнению с соответствующей частью нуклеотидной последовательности GBA дикого типа; при этом, необязательно, нуклеотидная последовательность GBA или часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, содержит менее 40, менее 20, менее 18, менее 10 или менее 5 CpG, при этом, более необязательно нуклеотидная последовательность GBA или часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, содержит менее 5, менее 4, менее 3 или менее 2 CpG на 100 нуклеотидов, при этом более необязательно нуклеотидная последовательность GBA или часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, не содержит CpG, при этом предпочтительно нуклеотидная последовательность GBA дикого типа представляет собой SEQ ID NO: 9;
(h) часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, является по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или на 100% идентичной фрагменту по меньшей мере из 1000, по меньшей мере из 1200, по меньшей мере из 1300, менее 1494, от 1000 до 1494, от 1300 до 1494 или примерно 1494 нуклеотидов любой из SEQ ID NO: 1-4; и/или
(i) часть нуклеотидной последовательности GBA, которая оптимизирована по кодонам, является по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или на 100% идентичной SEQ ID NO: 1.
9. Полинуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность GBA содержит часть, которая не является оптимизированной по кодонам, при этом необязательно:
(a) часть, которая не оптимизирована по кодонам, кодирует весь или часть сигнального пептида ГЦазы;
(b) часть, которая не оптимизирована по кодонам, составляет по меньшей мере 80, по меньшей мере 90, по меньшей мере 100, по меньшей мере 110, менее 200, менее 170, менее 140 или примерно 117 нуклеотидов; и/или
(c) часть, которая не оптимизирована по кодонам, содержит 1 или более CpG.
10. Полинуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид дополнительно содержит элемент регуляции транскрипции, при этом необязательно указанный элемент регуляции транскрипции содержит специфичный для печени промотор и/или энхансер.
11. Полинуклеотид по п. 10, отличающийся тем, что элемент регуляции транскрипции содержит промотор А1АТ или фрагмент промотора А1АТ, при этом необязательно
(a) промотор А1АТ или фрагмент промотора А1АТ составляет по меньшей мере 100, по меньшей мере 120, по меньшей мере 150, по меньшей мере 180, менее 255, от 100 до 255, от 150 до 225, от 150 до 300 или от 180 до 255 нуклеотидов в длину, при этом более необязательно фрагмент промотора А1АТ составляет от 180 до 255 нуклеотидов в длину;
(b) промотор А1АТ или фрагмент промотора А1АТ составляет по меньшей мере 200, по меньшей мере 250, по меньшей мере 300, менее 500, от 200 до 500, от 250 до 500, от 350 до 450 или примерно 418 нуклеотидов в длину, при этом более необязательно фрагмент промотора А1АТ составляет от 350 до 450 нуклеотидов в длину; и/или
(c) полинуклеотид содержит промотор, который по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или на 100% идентичен SEQ ID NO: 15 или SEQ ID NO: 12.
12. Полинуклеотид по п. 10 или 11, отличающийся тем, что указанный энхансер представляет собой энхансер HCR или фрагмент энхансера HCR, причем необязательно:
(a) энхансер HCR или фрагмент энхансера HCR представляет собой фрагмент по меньшей мере из 80, по меньшей мере из 90, по меньшей мере из 100, менее 192, от 80 до 192, от 90 до 192, от 100 до 250 или от 117 до 192 нуклеотидов в длину, причем более необязательно фрагмент энхансера HCR составляет от 117 до 192 нуклеотидов в длину;
(b) энхансер HCR или фрагмент энхансера HCR представляет собой фрагмент по меньшей мере из 150, по меньшей мере из 190, по меньшей мере из 230, менее 400, от 150 до 400, от 190 до 370, от 230 до 340, от 250 до 340 или примерно 321 нуклеотидов в длину, причем более необязательно фрагмент энхансера HCR составляет от 250 до 340 нуклеотидов в длину;
(c) полинуклеотид содержит энхансер, который по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или на 100% идентичен SEQ ID NO: 16 или SEQ ID NO: 11.
13. Полинуклеотид по п. 10, отличающийся тем, что элемент регуляции транскрипции является по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5%, по меньшей мере на 99,8% или на 100% идентичным SEQ ID NO: 14 или 10.
14. Полинуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что ГЦаза, кодируемая нуклеотидной последовательностью GBA, экспрессируется в клетках печени человека на более высоких уровнях по сравнению с ГЦазой, кодируемой нуклеотидной последовательностью GBA дикого типа в идентичном в остальном эталонном полинуклеотиде, при этом необязательно ГЦаза, кодируемая нуклеотидной последовательностью GBA, экспрессируется в клетках печени человека по меньшей мере в 1,1 раза, по меньшей мере в 1,2 раза, по меньшей мере в 1,3 раза, по меньшей мере в 1,4 или по меньшей мере в 1,5 раза больше по сравнению с ГЦазой, кодируемой нуклеотидной последовательностью GBA дикого типа в идентичном в остальном эталонном полинуклеотиде, при этом более необязательно эталонный полинуклеотид содержит нуклеотидную последовательность GBA дикого типа SEQ ID NO: 9, при этом необязательно эталонный полинуклеотид содержит промотор с SEQ ID NO: 13.
15. Вирусная частица, содержащая рекомбинантный геном, содержащий полинуклеотид согласно любому из предшествующих пунктов.
16. Вирусная частица по п. 15, которая представляет собой AAV, аденовирусную или лентивирусную вирусную частицу, которая необязательно представляет собой вирусную частицу AAV.
17. Вирусная частица по п. 15 или 16, отличающаяся тем, что указанная вирусная частица содержит тропный к печени или тропный к ЦНС капсид.
18. Вирусная частица по п. 17, отличающаяся тем, что тропный к печени капсид содержит последовательность по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5% идентичную фрагменту по меньшей мере из 600, по меньшей мере из 650, по меньшей мере из 700, от 600 до 736, от 650 до 736 или от 700 до 736 аминокислот из SEQ ID NO: 19, 20 или 24, при этом необязательно тропный к печени капсид содержит последовательность, по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 19 или 20.
19. Вирусная частица по п. 17, отличающаяся тем, что тропный к ЦНС капсид содержит последовательность, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99%, по меньшей мере на 99,5% идентичную фрагменту по меньшей мере из 600, по меньшей мере из 650, по меньшей мере из 700, от 600 до 736, от 650 до 736 или от 700 до 736 аминокислот из SEQ ID NO: 21, причем необязательно, тропный к ЦНС капсид содержит последовательность, по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 21.
20. Вирусная частица по любому из пп. 15-19, отличающаяся тем, что рекомбинантный геном дополнительно содержит:
a) AAV2 ITR;
b) последовательность поли А; и/или
c) интрон;
причем необязательно рекомбинантный геном является одноцепочечным.
21. Вирусная частица по любому из пп. 15-20, отличающаяся тем, что при трансдукции в клетки Huh-7 указанная вирусная частица экспрессирует ГЦазу или ее фрагмент, вследствие чего активность ГЦазы в трансдуцированной клетке выше, чем активность ГЦазы или ее фрагмента в клетке, трансдуцированной идентичной в остальном вирусной частицей, содержащей нуклеотидную последовательность GBA SEQ ID NO: 9, при этом необязательно при трансдукции в клетки Huh-7 вирусная частица экспрессирует ГЦазу или ее фрагмент, вследствие чего активность ГЦазы в трансдуцированной клетке по меньшей мере в 2 раза, по меньшей мере в 3 раза, по меньшей мере в 4 раза, по меньшей мере в 5 раз, по меньшей мере в 10 раз или по меньшей мере в 20 раз выше, чем активность ГЦазы или ее фрагмента в клетке, трансдуцированной идентичной в остальном вирусной частицей, содержащей нуклеотидную последовательность GBA SEQ ID NO: 9, при этом более необязательно активность измеряют с использованием флуорометрического субстрата, специфичного для ГЦазы.
22. Композиция, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 1-14 или вирусную частицу по любому из пп. 15-21 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
23. Полинуклеотид по любому из пп. 1-14, вирусная частица по любому из пп. 15-21 или композиция по п. 22 для применения в способе лечения.
24. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по п. 23, где способ лечения включает введение пациенту эффективного количества полинуклеотида по любому из пп. 1-14, вирусной частицы по любому из пп. 15-21 или композиции по п. 22.
25. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по любому из пп. 23-24, где указанный способ лечения представляет собой способ лечения заболевания, связанного с дефицитом ГЦазы.
26. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по любому из пп. 23-24, где указанный способ лечения представляет собой способ лечения болезни Паркинсона.
27. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по любому из пп. 23-24, где указанный способ лечения представляет собой способ лечения болезни Гоше, причем необязательно:
(i) болезнь Гоше представляет собой болезнь Гоше I, II или III типа; и/или
(ii) у пациента есть антитела или ингибиторы к рекомбинантной ГЦазе, с помощью которой пациента ранее лечили в рамках заместительной ферментной терапии.
28. Полинуклеотид по любому из пп. 1-14, вирусная частица по любому из пп. 15-21 или композиция по п. 22 для применения в способе экспрессии нуклеотидной последовательности GBA и достижения стабильной активности ГЦазы у субъекта.
29. Полинуклеотид, по любому из пп. 1-14, вирусная частица по любому из пп. 15-21 или композиция по п. 22 для применения в способе экспрессии нуклеотидной последовательности GBA и обеспечения большей биодоступности ГЦазы у субъекта по сравнению с биодоступностью при заместительной ферментной терапии ГЦазой, где биодоступность измеряют в течение 2 недель с момента введения.
30. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по п. 28 или 29, где достижение стабильной активности ГЦазы и/или обеспечение большей биодоступности ГЦазы приводит к лечению заболевания у субъекта.
31. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по любому из пп. 28-30, где:
(i) активность и/или биодоступность ГЦазы измеряют с использованием флуорометрического субстрата, специфичного для ГЦазы;
(ii) активность ГЦазы измеряют в сыворотке или плазме субъекта;
(iii) активность ГЦазы измеряют в макрофагах субъекта;
(iv) активность ГЦазы является стабильной на уровне по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8 или по меньшей мере 9 мкмоль/ч/мл у субъекта;
(v) активность ГЦазы является стабильной на уровне по меньшей мере 3 мкмоль/ч/мл у субъекта;
(vii) активность ГЦазы является стабильной на уровне по меньшей мере 5 мкмоль/ч/мл у субъекта;
(vii) активность ГЦазы является стабильной на уровне по меньшей мере 9 мкмоль/ч/мл у субъекта;
(viii) способ включает введение субъекту эффективной дозы полинуклеотида, вирусной частицы или композиции;
(ix) стабильная активность ГЦазы представляет собой активность ГЦазы, составляющую по меньшей мере 10%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40% или по меньшей мере 50% относительно активности ГЦазы здорового субъекта;
(x) стабильная активность ГЦазы представляет собой активность ГЦазы, составляющую от 10% до 100%, от 20% до 90%, от 30% до 70%, от 40% до 70% или от 50% до 70% относительно активности ГЦазы здорового субъекта;
(xi) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 5 недель с момента введения;
(xii) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 10 недель с момента введения;
(xiii) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 15 недель с момента введения;
(xiv) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 20 недель с момента введения;
(xv) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 25 недель с момента введения;
(xvi) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 30 недель с момента введения;
(xvii) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 35 недель с момента введения;
(xviii) стабильная активность ГЦазы является стабильной в течение по меньшей мере 40 недель с момента введения;
(xix) способ позволяет достичь большей активности ГЦазы в печени, селезенке и/или костном мозге субъекта в течение по меньшей мере 5, по меньшей мере 10, по меньшей мере 15, по меньшей мере 20, по меньшей мере 25, по меньшей мере 30 или по меньшей мере 35 недель после введения по сравнению с активностью, измеренной у субъекта, которому вводили эффективную дозу заместительной ферментной терапии ГЦазой, при измерении посредством того же анализа в тот же момент времени после введения; и/или
(xx) способ позволяет достичь большей биодоступности ГЦазы в печени, селезенке и/или костном мозге субъекта в течение периода по меньшей мере 5, по меньшей мере 10, по меньшей мере 15, по меньшей мере 20, по меньшей мере 25, по меньшей мере 30 или по меньшей мере 35 недель с момента введения по сравнению с биодоступностью, измеренной у субъекта, которому вводили эффективную дозу заместительной ферментной терапии ГЦазой, при измерении путем того же анализа в тот же момент времени после введения.
32. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по любому из пп. 30-31, где заболевание представляет собой болезнь Гоше, при этом болезнь Гоше необязательно представляет собой болезнь Гоше I, II или III типа.
33. Полинуклеотид по любому из пп. 1-14, вирусная частица по любому из пп. 15-21 или композиция по п. 22 для применения в способе снижения уровней гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина у субъекта, страдающего заболеванием или состоянием, связанным с дефицитом ГЦазы, причем необязательно снижение уровней гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина приводит к лечению заболевания или состояния, связанного с дефицитом ГЦазы.
34. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по п. 33, где:
(i) уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина снижены в 2 раза или более, в 3 раза или более, в 4 раза или более, в 5 раз или более, в 6 раз или более, в 2-3 раза, в 2-4 раза, в 2-5 раз, в 2-6 раз или в 3-5 раз по сравнению с уровнями гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина во время введения полинуклеотида, по любому из пп. 1-14, вирусной частицы по любому из пп. 15-21 или композиции по п. 22;
(ii) снижение уровней гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина больше, чем снижение, достигаемое у субъекта, которому вводят эффективную дозу заместительной ферментной терапии ГЦазой, причем, необязательно, когда уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина измеряют по меньшей мере через 6 недель, по меньшей мере 8 недель, по меньшей мере 10 недель или по меньшей мере 12 недель после введения;
(iii) уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина измеряют в макрофагах субъекта;
(iv) уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина измеряют в селезенке субъекта;
(v) уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина измеряют в печени субъекта;
(vi) уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина измеряют в сыворотке субъекта;
(vii) уровни гексозилцерамида и/или гексозилсфингозина измеряют посредством масс-спектрометрии; и/или
(viii) заболевание представляет собой болезнь Гоше, при этом болезнь Гоше необязательно представляет собой болезнь Гоше I, II или III типа.
35. Полинуклеотид, вирусная частица или композиция для применения по любому из пп. 23-34, где у пациента есть антитела или ингибиторы к рекомбинантной ГЦазе, с помощью которой пациента ранее лечили в рамках заместительной ферментной терапии.