Влияние минеральной воды «Аршан» на морфофункциональное состояние печени у крыс при D-галактозаминовом гепатите

экспериментальные исследования в биологии и медицине

УДК 615.838

С.Ц. Аюшиева, К.С. Лоншакова, И.Э. Раднаева

ВЛИЯНИЕ МИНЕРАЛЬНОЙ ВОДЫ «АРШАН» НА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ У КРЫС ПРИ D-ГАЛАКTОЗАМИНОВОМ ГЕПАТИТЕ

Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН

Результаты экспериментальных исследований показали, что курсовое введение минеральной воды (МВ) «Аршан» при экспериментальном. D-галактозаминовом гепатите способствует, нормализации морфофункциональных показателей в печени животных. МВ «Аршан» обусловила лучшую нормализацию морфофункциональных показателей по сравнению с контролем., препаратом, сравнения карсилом. Ключевые слова: D-галактозаминовый гепатит, МВ «Аршан», регенераторные процессы, морфофункциональное состояние

ТНЕ effects of MiNERAL WATER «ARSHAN» ON MORPHOLOGiCAL CONDiTiON OF RAT’S LiVER AT D-GALACTOZAMiN-iNDUSiNG HEPATiTiS

S.Ts. Ajushieva, K.S. Lonshakova, I.E. Radnaeva

Institute of the General and Experimental Biology of the SB RAS, Ulan-Ude

Buryat State University, Ulan-Ude

The data of experimental researches shows, that the course of introduction, of mineral water «Аrshan» at experimental D-galactozamin-indusinghepatitis to normalize morphological indicators in rat's liver is promote. Mineral water «Аrshan» has caused the best normalization of morphological indicators in comparison, with, the control, a preparation of comparison and phytogathering.

Key words: D-galactozamin-indusing hepatitis, mineral water «Arshan», regenerative processes, morphological condition

Основными причинами роста гепатобилиарной патологии являются ухудшение экологических условий жизни, бесконтрольное применение синтетических лекарственных препаратов, увеличение удельного веса социально-значимых заболеваний (алкоголизм, токсикомании, вирусные гепатиты, ожирение, туберкулез, сахарный диабет). Следует подчеркнуть, что практически вне зависимости от природы патогенного фактора одной из мишеней, в которой реализуются их неблагоприятное влияние, является печень [2, 7, 8]. Нарушения функции печени сопровождаются значительными изменениями в системе регуляции обмена веществ и энергии, что характерно практически для любого заболевания, поэтому разработка методов коррекции метаболических нарушений является актуальной задачей. Решение этой проблемы в рамках методологии восстановительной медицины предполагает изучение возможности нелекарственного воздействия на резервы функциональных систем. Поэтому приоритетным направлением было избрано изучение механизмов лечебно-профилактического применения МВ «Аршан», которая, как правило, не имеет побочных эффектов. В настоящее время лечение больных с острыми и хроническими заболеваниями

печени, несмотря на прогресс современной гепа-тологии, связанный с внедрением новых методов лабораторной и инструментальной диагностики, изучением этиологии и патогенеза заболеваний печени на клеточном и молекулярном уровнях, все еще остается крайне сложным и, в ряде случаев, далеким от удовлетворительного решения проблемы [3, 5].

В связи с этим, актуальным является поиск средств, способных повышать резистентность печени к повреждающему действию токсинов и активизировать процессы дезинтоксикации в организме [6 — 8]. Перспективными для разработки методов фармакологической коррекции заболеваний печени являются препараты природного происхождения, отличающиеся, как правило, широтой терапевтического действия, малой токсичностью и связанной с этим возможностью длительного применения без риска возникновения токсических реакций [3, 5].

Целью настоящего исследования явилась оценка морфофункционального состояния печени крыс при лечебно-профилактическом введении МВ «Аршан» [9, 10] при остром D-галактозаминовом гепатите.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

По классификации В.А. Александрова МВ «Аршан» относится к первому классу минеральных вод и носит название высокогазосодержащей, углекислой, сульфатно-гидро-карбонатной, магниевокальциевой, слабокислой кремнисто-железистой воды. Содержание фтора и брома незначительно. Катионная группа ионов представлена всеми основными ионами: кальцием (58,17 %-экв), магнием (23,34 %-экв), натрием (16,62 %-экв). На долю калия приходится 1—2 %-экв. Отмечено незначительное количество железа (0,20 %-экв), аммония, стронция, лития, селена.

Исследования выполнены на 104 белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой тела 160—180 г. Острый гепатит вызывали вну-трибрюшинным введением животным водного раствора D-галактозамина в дозе 0,2 г/кг массы в течение 3 дней. МВ «Аршан» в объеме 1,6 мл/100 г, препарат сравнения — карсил в дозе 5 мг/100 г массы крысы вводили животным ежедневно в течение 21 дня с начала инъекции D-галактозамина. Животные контрольной группы получали дистиллированную воду в эквивалентном объеме по аналогичной схеме. Исследования проводили на

7, 14 и 21 сутки.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Фармакотерапия животных с D-галакто-заминовым гепатитом испытуемым природным средством обеспечивала нормализацию морфофункционального состояния печени. У животных,

которым осуществлено курсовое введение МВ «Аршан», выявлены снижение дистрофических и отечных изменений, нормализация обмена веществ.

У крыс, получавших МВ «Аршан», гемодинами-ческие нарушения и альтеративные изменения в печени были выражены в гораздо меньшей степени, чем у контрольных животных. Очажки некроза гепатоцитов исчезали. Клеточная инфильтрация внутри долек и по ходу сосудов была выражена незначительно. По патоморфологической картине были налицо менее выраженные, чем в контроле, признаки воспалительного процесса, в частности, явление экссудации с признаками активной регенерации в органе. Об активности регенераторных процессов судили по выявлению гипертрофированных клеток с гиперхромными ядрами, увеличению числа двуядерных гепатоцитов (табл. 1) и частоте митозов (табл. 2).

Число двуядерных клеток в печени животных, получавших D-галактозамин и МВ «Аршан», превышало таковое в контрольной группе на 7, 14 и 21 сутки в 3,7, 2,1 и 1,9 раза соответственно. Пик гипертрофированных клеток при введении МВ «Аршан» приходился на 14 сутки и был равен 59,3. Препарат сравнения карсил в целом уступал по своему действию МВ «Аршан» во все сроки за исключением срока на 14 сутки.

Как видно из данных, приведенных в таблице

2, митотическая активность гепатоцитов при введении МВ «Аршан» во сроки исследования превышала показатели в контрольной группе животных и при введении препарата сравнения карсила.

Таблица 1

Показатели регенерации в печени белых крыс при токсическом D-галактозаминовом гепатите

Условия опыта Срок исследования, сутки

7 14 21

Число двуядерных клеток

Контроль ф-галактозамин) 10,6 ± 0,00* 22,3 ± 0,02* 21,0 ± 0,02*

D-гaлaктoзaмин + мин.вода «Аршан» 37,0 ± 0,03* 47,0 ± 0,07 41,0 ± 0,04*

Карсил 18,6 ± 0,00* 19,6 ± 0,01* 19,0 ± 0,01*

Число гипертрофированных клеток

Контроль ф-галактозамин) 10,6 ± 0,4 22,4 ± 0,02* 24,0 ± 0,01*

D-гaлaктoзoaмин + мин. вода «Аршан» 54,3 ± 0,05* 59,3 ± 0,05* 47,0 ± 0,04*

Карсил 49,0 ± 0,05* 66,3 ± 0,05* 43,7 ± 0,04*

Примечание: различие достоверны между опытом и контролем при Р < 0,05.

Таблица 2

Показатели митотической активности (%) гепатоцитов крыс на фоне фармакотерапии МВ «Аршан» при остром

D-галактозаминовом гепатите

Условия опыта Срок исследования, сутки

7 14 21

Контроль (Р-галактозамин ) 0,3 ± 0,001* 0,7 ± 0,002 0,3 ± 0,001*

D-гaлaктoзaмин + мин. вода «Аршан» 2,7 ± 0,003 2,8 ± 0,001* 2,0 ± 0,001*

Карсил 2,0 ± 0,002 1,0 ± 0,001* 1,0 ± 0,00*

Примечание: достоверность разницы между опытом и контролем во всех случаях Р< 0,001.

Эти явления свидетельствовали о том, что МВ «Аршан» стимулировала регенераторные процессы в печени. Об этом же наглядно свидетельствовали и данные гистохимических исследований. Так, синтез гликогена в печени животных, получавших МВ «Аршан» на фоне введения D-галактозамина происходил значительно активнее.

Жировая инфильтрация печени животных, получавших МВ «Аршан» не обнаруживалась, в то время как у животных контрольной группы она сводилась к появлению в паренхиме печени капелек жира средних размеров.

Гистоэнзимологические исследования позволили выявить, что активность сукцинатдегидрогеназы в печени животных изменялась в зависимости от сроков эксперимента с 7 суток по 21 сутки. Так, на 7 сутки исследований печени белых крыс активность сукцинатдегидрогеназы при введении МВ «Аршан» была ниже по сравнению с таковой у интактных животных. В последующие сроки исследований у животных, получавших изучаемое природное средство, активность фермента сукцинатдегидрогеназы была на уровне таковой у интактных животных.

Данные гистоэнзимологических исследований позволяют судить о состоянии окислительновосстановительных процессов в печени. При наличии альтеративных процессов в органе активность этого фермента была значительно снижена. Было отмечено, что активность СДГ-азы быстрее восстанавливалась при введении МВ «Аршан» и несколько менее активно при введении препарата сравнения карсила.

Таким образом, анализ полученных данных позволяет констатировать, что МВ «Аршан» обусловила лучшую нормализацию морфофункциональных показателей в печени животных с D-галактозаминовым токсическим гепатитом по сравнению с таковой в контроле, а также при использовании препарата сравнения. Такое действие обусловлено противовоспалительными и антиоксидантными свойствами микроэлементного состава МВ «Аршан». Несмотря на содержание в малых количествах, многие микроэлементы МВ обладают выраженной биологической активностью. Микроэлементы входят в состав многих ферментов, гормонов, витаминов и принимают активное участие в жизнедеятельности организма. Железо входит в состав гема, цитохрома Р-450, цитохрома G-5, цитохромов дыхательной цепи митохондрий, антиоксидантных ферментов (каталазы, миело-пероксидазы) и оно играет определенную роль в иммунной системе [4, 6].

Кремний участвует в обмене веществ за счет влияния на ядрышковый аппарат клетки, при этом наблюдается увеличение белоксинтезирующей функции со снижением напряженности уровня биоэнергетических процессов. Доказан противовоспалительный, радиопротекторный механизм

кремния и его соединений, также отмечено его влияние на генетический аппарат клетки, на железы внутренней секреции, усиление репаративных процессов [1].

Результаты исследования могут служить основой перспективного направления в плане применения эффективных и нетоксичных средств природного происхождения в лечении гепатитов в клинике.

ЛИТЕРАТУРА

1. Беляев А.Д. Влияние азотно-кремнистой термальной воды на функциональное состояние желудка при гастродуоденальной патологии / А.Д. Беляев, Н.А. Аникеева // Вопр. курортол. — 1997. - № 2. - С. 19-21.

2. Диагностика и лечение заболеваний желчевыводящих путей / Под ред. Маева И.В. — М., 2003. - 96 с.

3. Катикова О.Ю. Гепатопротекторное действие препаратов растительного происхождения / О.Ю. Катикова, Я.В. Костин, В.С. Тишкин // Экспериментальная клиническая фармакология.

- 2002. - Т. 65, № 1. - С. 41-43.

4. Ковалева Л.П. Сравнительный анализ состояния иммунитета у больных хроническим холециститом, пролеченных разными по продолжительности курсами на курорте «Аршан» / Л.П. Ковалева, Т.П. Сизых, Е.Ю. Коршунова // Сиб-мед. журнал. - 2005. - Т. 7. - С. 47-51.

5. Мембраностабилизирующая активность комплексного фитосредства «нор-бу-дун-тан» / С.М. Николаев [и др.] // Человек и лекарство: Тез. докл. IX Российского национального конгресса. -М., 2002. - С. 615.

6. Михалков Т.А. Усвоение железистых минеральных вод и их применение для профилактики дефицита железа / Т.А. Михалков, Я.М. Рутгайзер, А.И. Суровцева // Вопр. курортол. - 1993. - № 3.

- С. 73-75.

7. Сизых Т.П. Клинико-функциональные особенности течения хронического вирусного гепатита в зависимости от состояния биотранс-формационной функции печени (Сообщение 2) / Т.П. Сизых, Н.К. Сафроненко, Б. Солонго // Сиб. мед. журнал. - 2003. - № 3. - С. 33-38.

8. Состояние биотрансформационной функции печени у больных хроническими вирусными гепатитами / Сафроненко Н.К. [и др.] // Сиб. мед. журнал. - 2002. - № 5. - С. 18-23.

9. Способ получения средства, обладающего желчегонной и противовоспалителной активностью / Г.В. Чехирова, З.Г. Самбуева, Л.В. Ер-баева, Т.А. Асеева. - Патент РФ № 21591237 от 20.11.2000.

10. «Чжуд-ши»: Канон тибетской медицины / Пер. с тибет., предисл., примеч., указатели Д.Б. Да-шиева. - М.: Издат. «Восточная литература» РАН, 2001. - 766 с.