Экспрессия селенсодержащей глутатионпероксидазы при канцерогенном действии тетрахлорметана

являются свидетельством нарушенного функционирования TsPO при данной патологии. Это позволяет говорить о возможности использования TsPO в мониторинге больных ПКР для

прогнозирования эффективности лечения и доклинического выявления рецидивов и генерализации заболевания.

экспрессия селенсодержащей ГЛУТАТИОНПЕРОКСИДАЗЫ ПРИ КАНЦЕРОГЕННОМ ДЕЙСТВИИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНА

И.ю. ИСКУСНЫХ, Т.Н. ПОПОВА, С.Г. РЖЕВСКИЙ, о.с. мушарова

Воронежский государственный университет

Актуальность. В настоящее время установлено, что многие ксенобиотики, индуцируя свободнорадикальное окисление (СО), приводят к опухолевой трансформации. К числу ксенобиотиков с наиболее высокой степенью избирательной гепатотоксичности относятся хлорированные углеводороды, типичным представителем которых является тетрахлорметан (ССЦ). Поскольку усиление свободнорадикального окисления приводит к повреждению молекул ДНК, весьма актуальной является оценка уровня экспрессии ферментов, отвечающих за инактивацию свободных радикалов, участвующих в процессе канцерогенеза.

Цель исследования - изучение количественной экспрессии гена глутатионпероксидазы ^рх1) в печени самцов белых крыс (Rattus тиш) при канцерогенном действии тетрахлор-метана с помощью ПЦР в режиме реального времени.

Методы и материалы. Объектом исследования являлись самцы взрослых белых лабораторных крыс (Яайш гайш) массой 150-200 г. Тетрахлорметан вводили в виде 33% раствора в вазелиновом масле из расчета 64 мкл ССЦ на 100 г веса животного. Забой животных производили на 4-е сутки после введения канцерогенного агента. Контрольным животным вводили соответствующую аликвоту вазелино-

вого масла. Эксперимент проводился в четыре этапа: экстракция тотальной РНК тризоловым методом, удаление примесей геномной ДНК из выделенной тотальной РНК, обратная транскрипция и ПЦР-амплификация в режиме реального времени на приборе АНК-32. Для проведения ПЦР использовали набор, содержащий интеркалирующий краситель SYBR GreenI фирмы «Синтол», и праймеры, подобранные с помощью программы Genamics Expression. Полученные значения пороговых циклов реакций (Ct) были нормализованы относительно Ct трех генов «домашнего хозяйства» и статистически обработаны с помощью программного обеспечения «Relative Expression Software Tool - 2008».

Результаты. Анализ экспрессии гена Gpx^ учетом эффективности амплификации позволил установить, что уровень этих транскриптов увеличивается при канцерогенном действии тетрахлорметана. Экспрессия Gpxl возрастала в 2,5 раза относительно нормы.

Выводы. По-видимому, увеличение экспрессии Gpxl при действии тетрахлорметана происходит благодаря реализации адаптивных процессов на клеточном уровне, направленных на лимитирование образования свободных радикалов, путем более интенсивного функционирования глутатионпероксидазной реакции в условиях окислительного стресса.

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2010. Приложение № 1