ГЕННАЯ ТЕРАПИЯ НЕЙРОНАЛЬНЫХ ЦЕРОИДНЫХ ЛИПОФУСЦИНОЗОВ

1. Рекомбинантный аденоассоциированный вирус (rAAV), содержащий капсид AAV и упакованный в нем векторный геном, причем указанный векторный геном содержит
(a) последовательность 5' инвертированного концевого повтора (ИКП) AAV;
(b) промотор;
(с) кодирующую CLN2 последовательность, кодирующую TPP1 человека;
(d) 3' ИКП AAV.
2. rAAV по п. 1, отличающийся тем, что кодирующая последовательность (c) представляет собой кодон-оптимизированный CLN2 человека, который является на по меньшей мере 70% идентичным нативной человеческой кодирующей последовательности SEQ ID NO: 2.
3. rAAV по п. 1 или 2, отличающийся тем, что кодирующая последовательность (c) представляет собой SEQ ID NO:3.
4. rAAV по любому из пп. 1–3, отличающийся тем, что капсид rAAV представляет собой AAV9 или его вариант.
5. rAAV по любому из пп. 1–4, отличающийся тем, что промотор представляет собой промотор бета-актина кур (CBA).
6. rAAV по любому из пп. 1–5, отличающийся тем, что промотор представляет собой гибридный промотор, который содержит промоторную последовательность CBА и энхансерные элементы цитомегаловируса.
7. rAAV по любому из пп. 1–6, отличающийся тем, что 5' ИКП AAV и/или 3' ИКП AAV получены из AAV2.
8. rAAV по любому из пп. 1–7, отличающийся тем, что векторный геном дополнительно содержит polyA.
9. rAAV по п. 8, отличающийся тем, что polyA является синтетической polyA или полученной из бычьего гормона роста (bGH), гормона роста человека (hGH), SV40, P-глобина кролика (RGB) или модифицированного RGB (mRGB).
10. rAAV по любому из пп. 1–9, который дополнительно содержит интрон.
11. rAAV по п. 10, отличающийся тем, что интрон получен из CBA, бета-глобина человека, IVS2, SV40, bGH, альфа-глобулина, бета-глобулина, коллагена, овальбумина или p53.
12. rAAV по любому из пп. 1–11, который дополнительно содержит энхансер.
13. rAAV по п. 12, отличающийся тем, что энхансер представляет собой энхансер CMV, энхансер RSV, энхансер APB, энхансер ABPS, энхансер альфа mic/bik, энхансер TTR, en34, ApoE.
14. rAAV по любому из пп. 1–13, отличающийся тем, что геном вектора имеет размер от около 3 тысяч оснований до около 5,5 тысяч оснований.
15. rAAV по любому из пп. 1–14, отличающийся тем, что геном вектора имеет размер около 4 тысяч оснований.
16. Композиция, содержащая rAAV по любому из пп. 1–15 и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество, подходящая для доставки в центральную нервную систему.
17. Композиция, содержащая rAAV по любому из пп. 1–15 и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество, подходящая для ИЦВ интратекальной доставки.
9
15
18. Водная суспензия, подходящая для введения субъекту, имеющему болезнь Баттена, причем указанная суспензия содержит водную суспендирующую жидкость и от около 1×10 кг (7,5×9 кг/г мозга) до около 1×10 кг (1×12 кг/г мозга) или вирусных частиц рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV), применимая в качестве терапевтического средства для болезни Баттена, при этом указанный rAAV имеет капсид AAV и упакованный в нем векторный геном, содержащий
(a) последовательность 5' инвертированного концевого повтора (ИКП) AAV;
(b) промотор;
(c) кодирующую последовательность, которая кодирует TPP1 человека; и
(d) 3' ИКП AAV.
19. Суспензия по п. 18, отличающаяся тем, что суспензия является подходящей для интратекальной доставки.
20. Суспензия по п. 18, отличающаяся тем, что суспензия является подходящей для интратекальной доставки, выбранной из ИЦВ и интратекальной люмбальной (ИТ-Л) инъекции.
21. Суспензия по любому из пп. 18–20, отличающаяся тем, что суспензия дополнительно содержит поверхностно-активное вещество, консервант и/или буфер, растворенный в водной суспендирующей жидкости.
22. Суспензия по любому из пп. 18–21, отличающаяся тем, что промотор состоит из нуклеотидов от 3396 до 4061 из SEQ ID NO: 5, а кодирующая последовательность, которая кодирует ТPP1 человека, представляет собой SED ID NO: 3.
23. Суспензия по любому из пп. 18–22 отличающаяся тем, что 5' ИКП AAV представляет собой нуклеотиды от 3199 до 3328 из SEQ ID NO: 5, а 3' ИКП AAV представляет собой нуклеотиды 248–377 из SEQ ID NO: 5.
24. Суспензия по любому из пп. 18–23, отличающаяся тем, что векторный геном дополнительно содержит последовательность polyA из нуклеотидов 33–159 из SEQ ID NO: 5.
25. Суспензия по любому из пп. 18–24, отличающаяся тем, что капсид rAAV представляет собой капсид AAV9.
26. Способ лечения субъекта, имеющего болезнь Баттена, с помощью rAAV по любому из пп. 1–16, суспензии по любому из пп. 18–25 или композиции по п. 16 или 17.
9
16
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что доза rAAV составляет от около 1×10 до около 1×10 векторных геномов в водной суспензии.
28. Способ по любому из пп. 26–27, отличающийся тем, что указанную композицию вводят интратекально.
29. Способ по любому из пп. 26–27, отличающийся тем, что указанное интратекальное введение выбрано из ИЦВ и интратекальной люмбальной (ИТ-Л) инъекции.
9
13
30. Способ по любому из пп. 26–29, отличающийся тем, что указанный rAAV вводят в дозе от 1×10 до 1×10 rAAV в объеме, который содержит около или по меньшей мере 1–20 мл.
31. Способ по любому из пп. 26–30, отличающийся тем, что указанный субъект является человеком.
32. Применение rAAV по любому из пп. 1–16, суспензии по любому из пп. 18–25 или композиции по п. 16 или 17 для приготовления лекарственного препарата для лечения болезни Баттена.
9
16
33. Применение по п. 32, отличающееся тем, что доза rAAV составляет от около 1×10 до около 1×10 векторных геномов в водной суспензии.
34. Применение по любому из пп. 32–33, отличающееся тем, что указанную композицию вводят интратекально.
35. Применение по любому из пп. 32–33, отличающееся тем, что указанное интратекальное введение выбрано из ИЦВ и интратекальной люмбальной (ИТ-Л) инъекции.
9
13
36. Применение по любому из пп. 32–35, отличающееся тем, что указанный rAAV вводят в дозе от 1×10 до 1×10 rAAV в объеме, который содержит около или по меньшей мере 1–20 мл.
37. Применение по любому из пп. 32–36, отличающееся тем, что указанный субъект является человеком.