Анализ относительной экспрессии МРНК СОХ-2 у пациентов с онкопатологией желудка

Относительное число CD-16+-клеток у больных IV группы и абсолютное количество клеток данной субпопуляции у пациенток III и IV групп в периферической крови было значимо выше до лечения в сравнении с контролем.

Высокая спонтанная секреция ТОТ-а после лечения в сравнении с показателями здоровых доноров сохранялась у больных I и II групп, а ^-1 - у пациенток I группы. Низкая спонтанная продукция ^-4 в сравнении с контролем после НАХТ была зарегистрирована у больных с прогрессированием опухолевого процесса. При проведении корреляционного анализа была выявлена прямая зависимость между уровнем спонтанной секреции ТОТ-а и спонтанной и стимулированной продукции ^-10 и эффективностью НАХТ до лечения. Данная зависимость сохранилась в отношении спонтанной секреции ^-10 после НАХТ. Методом регрессионного анализа была обнаружена прямая зависимость эффективности НАХТ от концентрации IgG и

растворимого Fas-лиганда в сыворотке, спонтанной секреции ^-10 МНПК и пролиферативной активности МНПК, стимулированной ФГА. Показатели спонтанной и стимулированной продукции ^-10 и уровень IgG в сыворотке вошли в модель прогноза эффективности НАХТ, созданную методом дискриминантного анализа.

Выводы. Высокая эффективность НАХТ сопряжена с исходно высокими резервами иммунной системы и повышенной спонтанной секрецией провоспалительных цитокинов ТОТ-а и ^-1, высокой экспрессией проапоп-тотического фактора - Fas-лиганда на мембранах лимфоцитов, высокой его концентрацией в сыворотке и прямо коррелирует с уровнем секреции противовоспалительного ^-10. Недостаточная эффективность НАХТ сопряжена с низкой спонтанной секрецией ^-4 и высоким относительным и абсолютным содержанием CD16+-клеток в периферической крови.

АНАЛИЗ ОТНОСИТЕЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИИ МРНК COX-2 У ПАЦИЕНТОВ С ОНКОПАТОЛОГИЕЙ ЖЕЛУДКА

т.а. лапшина1, И.И. БЫКОВ1, А.И. ГЛУХОВ1,

ГОУ ВПО «Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова Росздрава»1 ГУЗ «НИИмедицинской экологии», Департамент здравоохранения, г. Москва2

Актуальность. Рак желудка по заболеваемости и смертности занимает одно из первых мест среди всех злокачественных новообразований человека. Согласно статистическим данным в России ежегодно регистрируется около 50000 новых случаев данной патологии. Более того, у 75% первично выявленных больных заболевание диагностируется уже в Ш-ГУ стадии. Отсутствие методов ранней диагностики стимулирует поиск новых онкомаркеров данной патологии. Циклооксигеназа-2 (сох-2) является индуцибельной изоформой фермента, участвующего в образовании простагландинов (PGs) из арахидоновой кислоты. В опухолевой ткани PGs усиливают пролиферативную активность, инвазивность, способствуют ангиогенезу и метастазированию, кроме того, опосредуют устойчивость к апоптозу. Согласно исследова-

ниям сверхэкспрессия сох-2 обнаруживается во многих опухолях и, как правило, свидетельствует о плохом прогнозе и низкой выживаемости.

Цель исследования - проанализировать уровень экспрессии мРНК сох-2 в ткани желудка: непосредственно в опухоли; в прилегающих областях на различном расстоянии. Оценить диагностическую значимость экспрессии при онкопатологиях желудка.

Материал и методы. Клиническим материалом служили постоперационные образцы от 22 больных с аденокарциномой желудка. Исследовали материал как из самой опухоли так и из прилегающих к опухоли областей (5-10 см вверх/вниз от границы опухоли). Выделение РНК из операционного материала проводили гуанидин-тиоционатным методом. Анализ мРНК сох-2 осуществлялся методом

совмещенных реакций обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР), продукты которой разделяли электрофорезом в 1,5% агарозном геле с бромистым этидием. Гель визуализировали в УФ-свете, снимали на фотокамеру. Полученное изображение анализировали с помощью компьютерной программы ImageJ 1.35!

Результаты. Сверхэкспрессия сох-2 в опухоли наблюдалась у 22,7% пациентов, высокая - у 18,18%, средняя - у 27,27%. Во всех остальных образцах детектировалась либо низкая, либо очень низкая экспрессия. Соотношение среднего уровня экспрессии мРНК сох-2 в опухолевой

ткани к прилежащей составило 6:1 (для интестинального типа) и 1:1,4 (для перстневидноклеточного типа рака).

Выводы. Повышение экспрессии мРНК сох-2 может способствовать развитию опухолевого процесса в желудке посредством активации синтеза PGs. Очень низкая и низкая экспрессия характерна для перстневидноклеточного рака. Диагностический тест может характеризовать паракринный и аутокринный пути развития опухоли и, таким образом, являться хорошим подтверждением развития и прогрессирования опухоли. Анализ экспрессии сох-2 может иметь важное значение при диагностике рака желудка.

РЕГУЛЯТОРНЫЕ CD4+ И CD8+ КЛЕТКИ У Больных с доброкачественными и злокачественными ОБРАЗОВАНИЯМИ ЯИЧНИКОВ

Е.Г ЛАСКАВАЯ1, В.А. ЛЕБЕДЕВА1, ю.И. НАРОВ2, М.А. ТИХОНОВА2, Е.В. КУРГАНОВА3, А.А. ОСТАНИН3, Е.Р. ЧЕРНЫХ3

Городская муниципальная клиническая больница № 1, г. Новосибирск 1 Кафедра онкологии лечебного факультета НГМУ2 НИИ клинической иммунологии СО РАМН, г. Новосибирск3

Актуальность. Опухоли яичников занимают одну из лидирующих позиций в структуре заболеваемости и смертности от онкологических заболеваний у женщин. Ускользание опухоли от иммунного надзора и несостоятельность иммунного ответа обусловлены различными механизмами. Одной из причин неадекватного иммунного ответа при онкопатологиях может быть увеличение количества регуляторных Т-клеток (Т^). Возрастание СD4+CD25+Treg продемонстрировано при различных формах солидных опухолей и гемобластозах у человека. Накопление CD4+CD25+ клеток в асцитической жидкости наблюдается и при раке яичников (РЯ). Однако комплексная характеристика при данном заболевании до сих пор отсутствует. Более того, не ясно, являются ли изменения различных типов патогномоничными только для злокачественных опухолей, поэтому актуально провести сравнительное исследование у больных РЯ и женщин с доброкачественными образованиями яичников (ДОЯ).

Цель исследования - изучить содержание различных субпопуляций регуляторных Т-клеток у больных с доброкачественными и злокачественными образованиями яичников.

Материал и методы. Объектом исследования стали 21 пациентка с ДОЯ и 22 пациентки с диагнозом РЯ. Контрольную группу составили 27 здоровых женщин. Оценку популяции проводили во фракции мононуклеаров периферической крови и асцитической жидкости пациенток. Содержание CD4+CD25+, CD4+CD25hlgh. CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+ определяли методом проточной цитофлюориметрии с использованием меченых моноклональных антител. Функциональную активность Т-лимфоцитов оценивали по включению Н3-тимидина при стимуляции анти-CD3 антителами. Математическая обработка результатов проводилась на персональном компьютере с использованием программы «Statistica 6.0».

Результаты. В группе женщин с ДОЯ уровень СD4+CD25+ и CD4+CD25hlgh клеток в пе-