Способ определения показаний к интравитреальному введению цилиарного нейротрофического фактора при лечении заболеваний зрительно-нервного аппарата глаза
METHOD FOR DETERMINATION OF INDICATIONS FOR INTRAVITREAL INJECTION OF CILIARY NEUROTROPHIC FACTOR DURING TREATMENT OF EYE VISUAL-NERVE APPARATUS DISEASES

Способ относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может применяться для определения показаний к интравитреальному введению цилиарного нейротрофического фактора (ЦНТФ) для лечения заболеваний зрительно-нервного аппарата глаза, например возрастной макулярной дегенерации, пигментного ретинита, первичной открытоугольной глаукомы.
ЦНТФ - один из наиболее распространенных в нервной ткани цитокинов, играющий большую роль в процессах дифференциации и регенерации нейронов. Снижение уровня ЦНТФ является важным звеном патогенеза многих инвалидизирующих офтальмологических заболеваний, таких как глаукома, возрастная макулярная дегенерация, пигментный ретинит. Имплантат для интравитреального введения, содержащий живые генно-модифицированные клетки, продуцирующие ЦНТФ (NT-501, Neurotech), показал свою эффективность при указанных заболеваниях на второй фазе клинических исследований [Zhang K., et all. // Proc. Natl. Acad. Sci. 2011. Vol. 108. P. 6241-6245; Kauper K., et all. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2012. Vol. 53. P. 7484-7491]. Однако существующие показания к введению имплантата разработаны без учета содержания ЦНТФ в глазу, что затрудняет отбор пациентов для лечения. На практике невозможно изучение концентрации ЦНТФ во внутриглазных структурах, за исключением плановых хирургических вмешательств. Поэтому актуальной является неинвазивная оценка содержания ЦНТФ для определения показаний к его интравитреальному введению.
В настоящее время отсутствуют способы определения показаний для интравитреального введения ЦНТФ, учитывающие его содержание в глазу.
Предложен способ определения показаний к интравитреальному введению ЦНТФ при лечении заболеваний зрительно-нервного аппарата глаза.
Техническим результатом является создание способа определения показаний к интравитреальному введению ЦНТФ при лечении заболеваний зрительно-нервного аппарата глаза.
Технический результат данного способа достигается тем, что определяют концентрацию ЦНТФ в слезной жидкости (СЖ) пациентов методом твердофазного неконкурентного иммуноферментного анализа (ИФА) (например, наборами реагентов для ИФА Human Quantikine ELISA). При концентрации ЦНТФ в СЖ менее 17 пикограмм/мл (пг/мл) показано интравитреальное введение ЦНТФ.
Обоснованием для предлагаемого способа являются результаты, полученные в ходе клинико-лабораторного обследования 40 пациентов (40 глаз), оперированных по поводу возрастной катаракты. Забор стимулированной СЖ производили пипеточным дозатором в день перед операцией, а влаги передней камеры глаза (ВПК) - канюлей на инсулиновом шприце через парацентез роговицы во время факоэмульсификации катаракты. Объем исследуемого материала составлял 100-150 мкл. Пробы разводили до 300 мкл фосфатным буфером (PBS) с добавлением 1% бычьего сывороточного альбумина (BSA). Коэффициент разведения рассчитывают следующим образом: 300 мкл делят на исходный объем материала. Полученную концентрацию ЦНТФ умножают на коэффициент разведения. Эмпирически было определено соотношение концентрации ЦНТФ во ВПК к концентрации ЦНТФ в СЖ, которое составило 1,4±0,5 (Μ±σ). Средняя концентрация ЦНТФ во ВПК составила 58,7±26,4 пг/мл. Минимально допустимая концентрация ЦНТФ в СЖ, которая не требует интравитреального введения ЦНТФ, составляет 17 пг/мл и рассчитана по формуле:
1
2
МДК=М/М,
где МДК - минимально допустимая концентрация,
1
Μ - нижняя граница допустимого уровня концентрации ЦНТФ во ВПК, рассчитана как разность Μ-σ для эмпирических значений,
2
М - верхняя граница соотношения ЦНТФ во ВПК и СЖ, рассчитана как сумма Μ+σ для эмпирических значений.
Содержание ЦНТФ в СЖ и ВПК было изучено у пациентов с возрастной катарактой. Выбор данного контингента пациентов объяснялся широкой распространенностью заболевания, частой необходимостью хирургического лечения, относительно доброкачественным течением, которое не сопровождается существенными изменениями воспалительного или иммунного характера, во многом благодаря тому, что хрусталик является бессосудистой и лишенной нервов структурой.
Пример 1. Больной Д., 59 лет. Диагноз правого глаза: Миопия средней степени. Возрастная макулярная дегенерация. Острота зрения этого глаза 0,1 со sph - 3,5 дптр = 0,4. При офтальмоскопии в макулярной зоне визуализируются множественные друзы, стушеванный макулярный рефлекс. На оптической когерентной томограмме (ОКТ) обнаружены множественные сливные друзы разных размеров. Концентрация ЦНТФ в СЖ составила 8,8 пг/мл. Учитывая результат исследования слезной жидкости, рекомендовано интравитреальное введение ЦНТФ.
Пример 2. Больной М., 65 лет. Диагноз левого глаза: Первичная оперированная открытоугольная 3а глаукома. Осложненная начальная катаракта. Острота зрения 0,3 не коррегирует. При обследовании методом биомикроскопии начальные помутнения в кортикальных слоях хрусталика; офтальмоскопически диск зрительного нерва серый, широкая глаукоматозная экскавация (соотношение экскавация/диск = 0,8); при компьютерной периметрии (программа 30-2) среднее снижение светочувствительности (MD) составляет -16.01 dB, распространенные скотомы в зоне Бьеррума и в области от слепого пятна к периферии; на ОКТ истончение перипапиллярного слоя нервных волокон сетчатки во всех квадрантах, кроме темпорального. Исследована слезная жидкость из левого глаза. Значение ЦНТФ составило 10,3 пг/мл. Учитывая результат исследования слезной жидкости, рекомендовано интравитреальное введение ЦНТФ.
Пример 3. Больной К., 62 лет. Диагноз правого глаза: Пресбиопия. Возрастная макулярная дегенерация. Острота зрения этого глаза 0,2 со sph+1,5 D=1,0. При офтальмоскопии глазного дна в макулярной зоне визуализируются единичные друзы. На ОКТ единичные друзы мелкие и средних размеров. Концентрация ЦНТФ в СЖ составила 55,4 пг/мл. Учитывая, что полученная величина больше заявленной минимально допустимой концентрации ЦНТФ в СЖ, рекомендовано воздержаться от интравитреального введения ЦНТФ.
Пример 4. Больной Л., 49 лет. Диагноз левого глаза: Первичная открытоугольная 1а глаукома. Острота зрения 1,0. При обследовании хрусталик прозрачен, диск зрительного нерва бледно-розовый, соотношение экскавация/диск = 0,4; при компьютерной периметрии (программа 30-2) среднее снижение светочувствительности (MD) составляет -4,91 dB, тест полуполей за пределами нормальных значений; на ОКТ умеренное истончение перипапиллярного слоя нервных волокон сетчатки в нижнем сегменте. Исследована слезная жидкость из левого глаза. Значение ЦНТФ составило 45,3 пг/мл. Учитывая, что полученная величина больше заявленной минимально допустимой концентрации ЦНТФ в СЖ, рекомендовано воздержаться от интравитреального введения ЦНТФ.
Таким образом, полученные данные могут послужить основанием для определения показаний к интравитреальному введению ЦНТФ при возрастной макулярной дегенерации и других заболеваниях глаза неинвазивным методом.