УСОВЕРШЕНСТВОВАННЫЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 5-(2,6-ДИ-4-МОРФОЛИНИЛ-4-ПИРИМИДИНИЛ)-4-ТРИФТОРМЕТИЛПИРИДИН-2-АМИНА
IMPROVED METHOD OF PREPARING THE 5-(2,6-DI-4-MORPHOLINYL-4-PYRIMIDINYL)-4-TRIFLUOROMETHYL PYRIDINE-2-AMINE

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к новым, усовершенствованным стадиям в способах получения производных пиримидина, к их промежуточным соединениям и к получению промежуточных соединений. Настоящее изобретение направлено на усовершенствованные способы получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина (соединения A, смотрите ниже), моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина и их промежуточных соединений.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
WO 2007/084786 (дата приоритета: 20 января 2006 г.) описывает некоторые производные пиримидина, имеющие ингибирующие свойства по отношению к фосфатидилинозитол-3-киназе (далее в настоящем описании называемой "PI3K"), их применение в качестве фармацевтических средств и способы их получения. Одно производное пиримидина, раскрытое в WO 2007/084786, представляет собой соединение 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амин, являющееся селективным ингибитором фосфатидилинозитол-3-киназы, далее в настоящем описании называемое как "соединение A" или "соединение формулы A".
Соединение A описано в WO 2007/084786 в свободной форме и в виде соли хлористоводородной кислоты. Промышленный способ получения соединения A описан в примере 10 данного документа. Способы получения, описанные в нем, хотя и являются подходящими для мелкомасштабного производства, рассматриваются как неблагоприятные для промышленного производства.
Международная заявка на патент WO PCT/US2011/053808 раскрывает способ получения пиримидиновых соединений, включающих соединение A, и их соответствующих солей и полиморфов. Способ получения соединения A и моногидрохлоридной соли обобщен на фиг.1. Вторая стадия способа, которая приводит к бороновой кислоте или бороновому сложному эфиру, является затрудненной, с выходами в интервале 30-60%. Выбор основания, требуемого для взаимодействия с кислотным протоном амида, является решающим и требует 5 эквивалентов амида лития в дополнение к 2,5 эквивалента бутиллития при низкой температуре для реакции обмена Li/Br. Дополнительные осложнения возникают в результате осаждения аниона. Кроме того, бороновая кислота является неустойчивой при высоких значениях pH (>9) и низких значениях pH (<1). Стадия сочетания Сузуки также осложняется требованием Pd-катализатора и удалением Pd-катализатора во время выделения продукта реакции. Стадия солеобразования также является усложненной, так как добавление более чем 1 эквивалента HCl приводит в результате к образованию моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина наряду с количествами дигидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина, причем последняя соль ограничивает чистоту моногидрохлоридной соли.
Существует потребность в усовершенствованных способах получения таких соединений, особенно там, где чистота промежуточных соединений улучшает чистоту активного ингредиента продукта, соединения A, и его фармацевтически приемлемых солей. В частности, существует потребность в создании способов, которые соответствуют одному или нескольким следующим критериям: являются масштабируемыми, более безопасными; имеют более высокую суммарную чистоту; имеют более высокие выходы и являются более экономичными по сравнению с раскрытым способом.
КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Соответственно, изобретение, таким образом, предоставляет усовершенствованные способы получения соединения A, которые представлены в обобщенном виде на фиг.2-5.
Соответственно, изобретение предоставляет способ получения соединения формулы A,
включающий стадии:
(a) ацилирования 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина с образованием N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
(b) взаимодействия N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с алкиловым реагентом Гриньяра с последующим взаимодействием с триалкилборатом и 2,2'-азандиилдиэтанолом с образованием N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
(c) сочетания N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции Сузуки с образованием N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
и
(d) проведения гидролиза N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в кислотных условиях с образованием соединения формулы A
Изобретение также предоставляет способ получения N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида, включающий стадии:
(a) взаимодействия N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с изопропилмагнийхлоридом, хлоридом лития в тетрагидрофуране;
(b) добавления трис(изопропилбората); и
(c) дополнительного добавления 2,2'-азандиилдиэтанола
Изобретение также предоставляет способ получения N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида, включающий стадию сочетания N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида и 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолина] посредством реакции сочетания Сузуки, где палладиевый катализатор генерируют in situ, с использованием смеси ацетата палладия(II), трифенилфосфина и водного основания
Изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы A,
включающий стадии:
(a) взаимодействия трианиона 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина с триалкилборатом с последующим взаимодействием с 2,2'-азандиилдиэтанолом с образованием N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина
(b) сочетания N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции сочетания Сузуки с образованием соединения формулы A
Изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы A
включающий стадии:
(a) сочетания реагента Гриньяра, полученного из дианиона N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида и 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолина] посредством катализируемой металлом реакции сочетания Кумада с образованием N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
и
(b) проведения гидролиза N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в кислотных условиях с образованием соединения формулы A
Изобретение также предоставляет способ получения соединения формулы A,
включающий стадию:
сочетания реагента Гриньяра, полученного из трианиона 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина, и 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолина] посредством катализируемой металлом реакции сочетания Кумада с образованием соединения формулы A
Изобретение также предоставляет усовершенствованный способ получения соли моногидрохлорида 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина, включающий стадию взаимодействия 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина в растворе изопропанола, воды и пиридина с водной хлористоводородной кислотой в изопропаноле при 60°C
Было обнаружено, что усовершенствованные способы получения, описанные в настоящем описании, включающие конкретную стадию процесса солеобразования, соответствуют одному или нескольким следующим критериям: являются более безопасными; обеспечивают более высокую суммарную чистоту; имеют более высокие выходы и являются более экономичными при сравнении с известными способами получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина и его фармацевтически приемлемых солей. Дополнительно, способы получения, описанные в настоящем описании, являются масштабируемыми, что делает их подходящими для промышленного производства.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Предшествующие аспекты и многие сопутствующие преимущества настоящего изобретения станут более легко оценимыми, поскольку они становятся лучше понятыми при ссылке на следующее ниже подробное описание, когда его рассматривают в сочетании с сопроводительными чертежами, где:
фиг.1 представляет в общем виде способ получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина, обобщенный в PCT/US2011/053808;
фиг.2 обобщает один усовершенствованный способ получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина;
фиг.3 обобщает альтернативный усовершенствованный способ получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина;
фиг.4 обобщает альтернативный усовершенствованный способ получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина;
фиг.5 обобщает альтернативный усовершенствованный способ получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Известно, что соединение 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амин имеет ингибирующие свойства по отношению к PI3K. Соответственно, соединение представляет ценность для лечения различных заболеваний, в частности, для профилактики или лечения пролиферативных заболеваний. Таким образом, существует большая потребность в предоставлении усовершенствованных способов получения 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина и его фармацевтически приемлемых солей.
Изобретение будет лучше понято, а задачи, отличные от задач, изложенных выше, станут очевидными, когда будут рассмотрены с учетом следующего подробного описания, включающего следующие словарные термины, заключительные примеры и чертежи. В данном описании будут применяться следующие общие определения, если не установлено иначе:
th
Термин "защищенные" по отношению к гидроксильным группам, аминогруппам и сульфгидрильным группам относится к формам этих функциональностей, которые являются защищенными от нежелательной реакции с помощью защитной группы, известной специалистам в данной области, такой как приведенные в Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, T.W.; Wuts, P. G. M., John Wiley & Sons, New Jersey, (4 Edition, 2007), которые могут быть добавлены или удалены с использованием методик, приведенных в указанной книге. Примеры защищенных гидроксильных групп включают, но не ограничены ими, силиловые простые эфиры, такие как соединения, полученные посредством реакции гидроксильной группы с реагентом, таким как, но не ограниченным ими, трет-бутилдиметилхлорсилан, триметилхлорсилан, триизопропилхлорсилан, триэтилхлорсилан; замещенные метиловые и этиловые простые эфиры, такие как, но не ограниченные ими, метоксиметиловый эфир, метилтиометиловый эфир, бензилоксиметиловый эфир, трет-бутоксиметиловый эфир, 2-метоксиэтоксиметиловый эфир, тетрагидропиранильные эфиры, 1-этоксиэтиловый эфир, аллиловый эфир, бензиловый эфир; сложные эфиры, такие как, но не ограниченные ими, бензилформиат, формиат, ацетат, трихлорацетат и трифторацетат. Примеры защищенных аминогрупп включают, но не ограничены ими, амиды, такие как, формамид, ацетамид, трифторацетамид и бензамид; имиды, такие как фталимид и дитиосукцинимид; и другие. Примеры защищенных сульфгидрильных групп включают, но не ограничены ими, простые тиоэфиры, такие как S-бензиловый тиоэфир и S-4-пиколиловый тиоэфир; замещенные S-метильные производные, такие как гемитио-, дитио- и аминотиоацетали; и другие.
"Карбокси-защитная группа" относится к карбонильной группе, которая была этерифицирована одной из общеиспользуемых сложноэфирных защитных групп для карбоновой кислоты, применяемых, чтобы блокировать или защищать функцию карбоновой кислоты, в то время как проводят реакции, включающие другие функциональные участки соединения. В дополнение, карбокси-защитная группа может быть присоединена к твердой подложке, посредством которой соединение остается соединенным с твердой подложкой в виде карбоксилата, до расщепления гидролитическими методами с высвобождением соответствующей свободной кислоты. Представительные карбокси-защитные группы включают, например, алкиловые сложные эфиры, вторичные амиды и т.п.
Как используют в настоящем описании, термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к солям нетоксичной кислоты или щелочноземельных металлов пиримидиновых соединений изобретения. Эти соли могут быть получены in situ во время конечных выделения и очистки пиримидиновых соединений, или посредством раздельного взаимодействия основных или кислотных функций с подходящими органическими или неорганическими кислотой или основанием, соответственно. Представительные соли включают, но не ограничены ими, следующие: ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, диглюконат, циклопентанпропионат, додецилсульфат, этансульфонат, глюкогептаноат, глицерофосфат, геми-сульфат, гептаноат, гексаноат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, пиридингидрохлорид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метан-сульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат и ундеканоат. Также, основные азотсодержащие группы могут быть кватернизированы с помощью таких агентов, как алкилгалогениды, такие как метил-, этил-, пропил- и бутилхлорид, бромиды и йодиды; диалкилсульфаты, такие как диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты, галогениды с длинной цепью, такие как децил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, бромиды и йодиды, аралкилгалогениды, такие как бензил- и фенэтилбромиды, и другие. Таким образом, получают водо- или маслорастворимые или диспергируемые продукты.
Там, где применяется форма множественного числа (например, соединения, соли), она включает форму единственного числа (например, единственное соединение, единственная соль). "Соединение" не исключает того, что (например, в фармацевтической лекарственной форме) присутствует больше соединений, чем одно соединение формулы A (или его соль).
Там, где применяется форма единственного числа (например, растворитель, основание), она включает форму множественного числа (например, растворители, основания). "Растворитель", "основание" не исключают того, что (например, в реакционной смеси) присутствует несколько растворителей или оснований.
Соли соединений формулы A предпочтительно представляют собой фармацевтически приемлемые соли; такие соли являются известными в данной области.
Синтез 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина (соединения A)
Соответственно, один вариант выполнения изобретения предоставляет усовершенствованный способ, как обобщено на фиг.2, получения соединения формулы A
включающий стадии:
(a) ацилирования 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина с образованием N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
(b) взаимодействия N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с алкиловым реагентом Гриньяра, с последующим взаимодействием с триалкилборатом и 2,2'-азандиилдиэтанолом с образованием N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
(c) сочетания N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции сочетания Сузуки с образованием N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
и
(d) проведения гидролиза N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в условиях кислой среды с образованием соединения формулы A.
Стадия (a)
5
5
2
1-6
В примерном варианте осуществления, 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амин ацилируют с образованием N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в реакционной смеси, содержащей один или несколько растворителей и ангидрид кислоты формулы (RC=О)О, такой, что R представляет собой Cалкил и фенил. Один или несколько растворителей выбирают из ароматических растворителей, алифатических растворителей, галогенированных растворителей, полярных апротонных растворителей, сложноэфирных растворителей и эфирных растворителей. В одном варианте осуществления один или несколько растворителей стадии (a) содержат этилацетат и гептан, а ангидрид кислоты представляет собой уксусный ангидрид. Типовые значения времени реакции находятся в интервале от 4 от 8 часов. Типовые значения температур реакции находятся в интервале от 70°C до 90°C в условиях нагревания с обратным холодильником. В одном варианте осуществления уксусный ангидрид непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 3 часам, и реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 5 часов. Один или несколько растворителей удаляли в вакууме, и продукт осаждали посредством добавления дополнительного гептана и охлаждения. Продукт N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид собирали посредством фильтрации, сушили в вакууме и использовали на стадии (b). Преимущества усовершенствованного способа состоят в том, что исключают растворитель диметиламинопиридин (DMAP), ранее используемый в качестве растворителя на стадии (a) международной заявки на патент WO PCT/US2011/053808, и в том, что чистота продукта соответственно является высокой (>99%), в сочетании с выходами продукта от 94-96%.
Стадия (b)
1-6
В примерном варианте осуществления, N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид взаимодействует с алкиловым реагентом Гриньяра, с последующим добавлением триалкилбората и дальнейшим добавлением 2,2'-азандиилдиэтанола с образованием N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в реакционной смеси, содержащей один или несколько растворителей. Один или несколько растворителей выбирают из ароматических растворителей, алифатических растворителей и эфирных растворителей. Типовые алкиловые реагенты Гриньяра выбирают из CMgX (X представляет собой Cl, Br, I). Типовые реагенты Гриньяра представляют собой реагенты, которые могут применяться для осуществления селективного замещения металлом водорода, соединенного с углеродными атомами, а именно, реагент Гриньяра, солевой комплекс. В одном варианте осуществления алкиловым реагентом Гриньяра является изопропилмагнийхлорид, комплекс хлорида лития, и один или несколько растворителей представляют собой тетрагидрофуран, а триалкилборат представляет собой триизопропилборат.
В одном варианте осуществления способ стадии (b) получения N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида дополнительно включает стадии:
(i) взаимодействия N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с изопропилмагнийхлоридом, хлоридом лития в тетрагидрофуране;
(ii) добавления триизопропилбората в одном или нескольких растворителях; и
(iii) дальнейшего добавления 2,2'-азандиилдиэтанола в одном или нескольких растворителях.
Типовые значения температуры реакции для стадии (i) находятся в интервале от 0°C до 10°C. Преимущества использования алкилового реагента Гриньяра состоят в том, что он функционирует как селективное основание во время депротонирования и производит устойчивый дианион посредством реакции трансметаллирования. Способ имеет дополнительное преимущество перед депротонированием/трансметаллированием с использованием бутиллития при низких температурах, состоящее в том, что моноанион не осаждается и используют меньше эквивалентов алкилового реагента Гриньяра в сравнении с литийорганическим реагентом для обмена бромид/металл. Типовые значения температуры реакции для стадии (ii) находятся в интервале от 10°C до 30°C. В одном варианте осуществления, после завершения добавления триизопропилбората, тетрагидрофурановый растворитель заменяют на 2-метилтетрагидрофуран. Типовые значения температуры реакции для стадии (iii) находятся в интервале от 0°C до 30°C. В одном варианте осуществления один или несколько растворителей представляют собой 2-метилтетрагидрофуран и изопропанол. Продукт в виде сложного эфира бороновой кислоты, N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида, имеет несколько преимуществ перед соединением бороновой кислоты, включающих чистоту, выход и термоустойчивость по сравнению с бороновой кислотой.
Стадия (c)
В примерном варианте осуществления, N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид сочетают с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции Сузуки, включающей катализатор, основание и один или несколько растворителей, с образованием N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида.
3
4
Реакция Сузуки, которую используют во многих реакциях, описанных выше, является, в принципе, известной реакцией в органической химии и означает катализируемое палладием сочетание двух веществ, участвующих в реакции, где одно из веществ, участвующее в реакции, содержит реакционно-способный галогенидный фрагмент, а другое вещество, участвующее в реакции, содержит реакционно-способный фрагмент сложного эфира бороновой кислоты или бороновой кислоты. Подходящие условия для данной реакции ("условия Сузуки") являются известными специалистам в данной области и относятся конкретно к выбору катализатора, разбавителя, дополнительных вспомогательных средств для реакции, значениям времени реакции и температур реакции. Данная реакция еще не применялась с использованием конкретных исходных веществ, как описано в настоящем описании, где она таким образом образует новый и изобретательский способ. В конкретном варианте осуществления способа, Pd-катализатор представляет собой Pd(PPh), генерируемый in situ.
2
В одном варианте осуществления растворитель стадии (c) содержит один или несколько растворителей, выбранных из ароматических растворителей, алифатических растворителей, галогенированных растворителей, полярных апротонных растворителей, сложноэфирных растворителей, эфирных растворителей и воды. В еще одном варианте осуществления растворитель стадии (c) содержит один или несколько растворителей, выбранных из диметоксиэтана, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, 2-метилтетрагидрофурана и воды. В конкретном варианте осуществления растворитель стадии (c) содержит диметоксиэтан и воду. В дополнительном конкретном варианте осуществления растворитель стадии (c) содержит тетрагидрофуран и воду. Основание стадии (c) выбирают из ацетатов, фосфатов и карбонатов. В конкретном варианте осуществления основание стадии (c) представляет собой карбонат калия. Катализатор стадии (c) содержит палладий. В некоторых вариантах осуществления катализатор выбирают из тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) и дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия(II). В других вариантах осуществления палладиевый катализатор стадии (c) образуют посредством комбинирования Pd(OAc) с фосфиновым лигандом. Подходящие фосфиновые лиганды известны специалистам в данной области; неограничивающие примеры включают трифенилфосфин и трис(4-метокси-3,5-диметилфенил)фосфин. В конкретном варианте осуществления катализатор стадии (c) представляет собой тетракис(трифенилфосфин)палладий(0). Подходящие количества катализатора находятся в интервале от 0,1 до 20 мол.% до предпочтительно от 1 до 10 мол.%. Типовые значения времени реакции находятся в интервале от 1 мин до 2 дней, предпочтительно от 10 мин до 10 часов, особенно предпочтительно от 1 до 3 часов. Типовые значения температуры реакции находятся в интервале от 20°C до условий кипячения с обратным холодильником, предпочтительно от 30°C до 90°C, особенно предпочтительно 40-60°C.
В дополнительном преимущественном варианте осуществления изобретение относится к способу в соответствии со способом стадии (c), где обработка первоначально полученной реакционной смеси включает стадии i) отделения нерастворимого материала (например, посредством фильтрации нерастворимых веществ, предпочтительно посредством фильтрации с использованием вспомогательного средства для фильтрации, такого как слой целита), ii) отделения органической фазы и необязательно замены растворителя на другой растворитель (такой как изопропилацетат), iii) удаления остаточного палладия, и iv) кристаллизации продукта (предпочтительно после экстракции водной кислотой и осаждения с контролируемым pH).
Преимущества изобретения состоят в том, что катализатор Сузуки может генерироваться in situ, и в том, что очистку продукта и удаление палладиевого катализатора осуществляют, используя экстракцию, без манипуляций с твердыми веществами. Дополнительным преимуществом является то, что стадии (c) и (d) могут быть объединены в виде одиночной стадии способа.
Стадия (d)
В примерном варианте осуществления, N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид гидролизуют в одном или нескольких растворителях в условиях кислой среды с образованием соединения формулы A.
В одном варианте осуществления растворитель стадии (d) содержит один или несколько растворителей, выбранных из ароматических растворителей, алифатических растворителей, галогенированных растворителей, полярных апротонных растворителей, сложноэфирных растворителей, эфирных растворителей и воды. В конкретном варианте осуществления один или несколько растворителей стадии (d) являются водой. В еще одном конкретном варианте осуществления один или несколько растворителей стадии (d) представляют собой воду и изопропилацетат.
На стадии (d), удаление ацетильного фрагмента также влечет за собой замену данного фрагмента на атом водорода. Удаление ацетильного фрагмента может осуществляться посредством методов, известных специалистам в данной области. Не ограничивающие примеры таких методов включают реакции, опосредованные кислотой, основанием и металлами. Конкретным примером таких методов является опосредованный кислотой гидролиз. В одном варианте осуществления стадии (d), реагент для удаления ацетильного фрагмента выбирают из кислот, оснований и металлических катализаторов. В конкретном варианте осуществления стадии (d), реагент для удаления ацетильного фрагмента представляет собой хлористоводородную кислоту.
В некоторых вариантах осуществления, стадии (a)-(d) независимо включают дополнительные стадии или процедуры (например, чтобы удалить побочные продукты реакции, или обработать, выделить или очистить продукты реакции), как подробно описано в примерах настоящего описания.
В некоторых вариантах осуществления, стадии (a)-(d) сопровождаются солеобразованием.
Квалифицированный специалист-практик распознает некоторые параметры приведенных выше способов, которые могут преимущественно изменяться, чтобы получить желательный результат. Эти параметры включают, например, способы и средства очистки компонентов реакции и растворителей; порядок добавления указанных компонентов реакции и растворителей к реакционной смеси; продолжительность реакции указанных компонентов реакции и растворителей; и температура и скорость перемешивания, смешивания или встряхивания компонентов реакции и растворителей во время указанной реакции.
Было обнаружено, что способ, воплощаемый посредством стадий (a)-(d) (также включающих конкретные стадии способа), соответствует одним или нескольким следующим критериям: является более безопасным; является более простым; обеспечивает более высокие выходы и является более экономичным при сравнении с известными способами получения соединения формулы A. Дополнительно, способ, как описан в настоящем описании, рассматривают, как масштабируемый, что делает его подходящим для промышленного производства.
Альтернативный синтез 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина (соединения A)
Изобретение также предоставляет альтернативный способ (фиг.3) получения соединения формулы A
включающий стадии:
(a) взаимодействия 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина с алкиловым реагентом Гриньяра с последующим взаимодействием с триалкилборатом и 2,2'-азандиилдиэтанолом с образованием N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина
(b) сочетания N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции сочетания Сузуки с образованием соединения формулы A
Стадия (a)
1-6
В примерном варианте осуществления, 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амин взаимодействует с 3,5 эквивалента алкилового реагента Гриньяра, с последующим добавлением триалкилбората и при дальнейшем добавлении 2,2'-азандиилдиэтанола с образованием N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина в реакционной смеси, содержащей один или несколько растворителей. Один или несколько растворителей выбирают из ароматических растворителей, алифатических растворителей и эфирных растворителей. Типовые алкиловые реагенты Гриньяра выбирают из CMgX (X представляет собой Cl, Br, I). Типовые реагенты Гриньяра представляют собой реагенты, которые могут применяться для осуществления селективных металлирований, а именно, реагент Гриньяра, солевой комплекс. В одном варианте осуществления алкиловым реагентом Гриньяра является изопропилмагнийхлорид, комплекс хлорида лития, а один или несколько растворителей представляют собой тетрагидрофуран, а триалкилборат является триизопропилборатом.
Стадия (b)
В примерном варианте осуществления, N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амин сочетают с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции Сузуки, включающей катализатор, основание и один или несколько растворителей с образованием 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина (соединения A).
3
4
3
4
Реакция Сузуки, которую используют во многих реакциях, описанных выше, представляет собой, в принципе, известную реакцию в органической химии и означает катализируемое палладием сочетание двух веществ, участвующих в реакции, где одно из веществ, участвующих в реакции, содержит реакционно-способный галогенидный фрагмент, а другое вещество, участвующее в реакции, содержит реакционно-способный фрагмент боронового сложного эфира или бороновой кислоты. Подходящие условия для данной реакции ("условия Сузуки") известны специалистам в данной области и относятся, в частности, к выбору катализатора, разбавителя, дополнительных вспомогательных средств для реакции, значений времени реакции и температур реакции. Данная реакция до сих пор еще не применялась с использованием конкретных исходных веществ, как описано в настоящем описании, где она, таким образом, образует новый и изобретательский способ. В одном варианте осуществления способа, Pd-катализатор представляет собой Pd(PPh). В еще одном варианте осуществления способа, Pd-катализатором является Pd(PPh), который генерируется in situ.
2
В одном варианте осуществления растворитель стадии (b) содержит один или несколько растворителей, выбранных из ароматических растворителей, алифатических растворителей, галогенированных растворителей, полярных апротонных растворителей, сложноэфирных растворителей, эфирных растворителей и воды. В еще одном варианте осуществления растворитель стадии (b) содержит один или несколько растворителей, выбранных из диметоксиэтана, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, 2-метил-тетрагидрофурана и воды. Основание стадии (b) выбирают из ацетатов, фосфатов и карбонатов. В конкретном варианте осуществления основание стадии (b) является карбонатом калия. Катализатор стадии (b) содержит палладий. В некоторых вариантах осуществления катализатор выбирают из тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) и дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия(II). В других вариантах осуществления палладиевый катализатор стадии (b) образуется посредством комбинирования Pd(OAc) с фосфиновым лигандом. Подходящие фосфиновые лиганды известны специалистам в данной области; не ограничивающие примеры включают трифенилфосфин и трис(4-метокси-3,5-диметилфенил)фосфин. В конкретном варианте осуществления катализатор стадии (b) представляет собой тетракис(трифенилфосфин)палладия(0). Подходящие количества катализатора находятся в интервале от 0,1 до 20 мол.% до предпочтительно от 1 до 10 мол.%. Типовые значения времени реакции находятся в интервале от 1 мин до 2 дней, предпочтительно от 10 мин до 10 часов, особенно предпочтительно от 1 до 3 часов. Типовые значения температуры реакции находятся в интервале от 20°C до условий кипячения с обратным холодильником, предпочтительно от 30°C до 90°C, особенно предпочтительно 40-60°C.
В одном варианте осуществления, стадии (a) и (b) могут быть объединены в одну стадию.
Альтернативный синтез 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина (соединения A)
Изобретение также предоставляет альтернативный способ (фиг.4) получения соединения формулы A
включающий стадии:
(a) сочетания дианиона N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида и 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолина] посредством палладий-катализируемой реакции сочетания Кумада с образованием N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
и
(b) проведения гидролиза N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в условиях кислой среды с образованием соединения формулы A
Стадия (a)
1-6
2
2
В примерном варианте осуществления, N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид взаимодействует с 2,5 эквивалента алкилового реагента Гриньяра в реакционной смеси, содержащей один или несколько растворителей с образованием реагента Гриньяра, который представляет собой дианион N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид. Один или несколько растворителей выбирают из ароматических растворителей, алифатических растворителей и эфирных растворителей. Типовые алкиловые реагенты Гриньяра выбирают из CMgX (X представляет собой Cl, Br, I). Типовые реагенты Гриньяра представляют собой реагенты, которые могут применяться для осуществления селективных металлирований, а именно, реагент Гриньяра, солевой комплекс. В одном варианте осуществления алкиловым реагентом Гриньяра является комплекс изопропилмагнийхлорида с хлоридом лития, а один или несколько растворителей представляют собой тетрагидрофуран. Реакция Кумада, которую используют во многих реакциях, описанных выше, представляет собой, в принципе, известную реакцию в органической химии и означает катализируемое палладием или никелем углерод-углеродное сочетание двух веществ, участвующих в реакциях, где одно из веществ, участвующих в реакции, содержит реакционно-способный галогенидный фрагмент, а другое вещество, участвующее в реакции, содержит реакционно-способный реагент Гриньяра. Подходящие условия для этой реакции ("условия Кумада") являются известными специалистам в данной области и относятся, в частности, к выбору катализатора, разбавителя, дополнительных вспомогательных средств для реакции, значений времени реакции и температур реакции. Эту реакцию до сих пор еще не применяли с использованием конкретных исходных веществ, как описано в настоящем описании, где она, таким образом, образует новый и изобретательский способ. В одном варианте осуществления способа, Pd-катализатор представляет собой Pd(ацетат) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен. В еще одном варианте осуществления способа, Pd-катализатор представляет собой NiCl(dppf).
2
В одном варианте осуществления растворитель стадии (a) содержит один или несколько растворителей, выбранных из эфирных растворителей и воды. В еще одном варианте осуществления растворитель стадии (a) содержит один или несколько растворителей, выбранных из диметоксиэтана, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, 2-метил-тетрагидрофурана и воды. В других вариантах осуществления палладиевый катализатор стадии (a) образуют посредством комбинирования Pd(OAc) с фосфиновым лигандом. Подходящие фосфиновые лиганды известны специалистам в данной области; не ограничивающие примеры включают трифенилфосфин и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен. Подходящие количества катализатора находятся в интервале от 0,1 до 20 мол.% до предпочтительно от 1 до 10 мол.%. Типовые значения времени реакции находятся в интервале от 1 мин до 2 дней, предпочтительно от 10 мин до 10 часов, особенно предпочтительно от 1 до 3 часов. Типовые значения температуры реакции находятся в интервале от 20°C до температуры условий кипячения с обратным холодильником, предпочтительно от 30°C до 90°C, особенно предпочтительно 40-60°C.
Альтернативный синтез 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина (соединения A)
Изобретение также предоставляет альтернативный способ (фиг.5) получения соединения формулы A
включающий стадию:
сочетания трианиона 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина с 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)ди[морфолином] посредством палладий-катализируемой реакции сочетания Кумада с образованием соединения формулы A
1-6
2
2
В примерном варианте осуществления, N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амин взаимодействует с 3,5 эквивалента алкилового реагента Гриньяра в реакционной смеси, содержащей один или несколько растворителей с образованием реагента Гриньяра, который является трианионом N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина. Один или несколько растворителей выбирают из ароматических растворителей, алифатических растворителей и эфирных растворителей. Типовые алкиловые реагенты Гриньяра выбирают из CMgX (X представляет собой Cl, Br, I). Типовые реагенты Гриньяра представляют собой реагенты, которые могут применяться для осуществления селективных металлирований, а именно, реагент Гриньяра, солевой комплекс. В одном варианте осуществления алкиловый реагент Гриньяра представляет собой комплекс изопропилмагнийхлорида и хлорида лития, а один или несколько растворителей представляют собой тетрагидрофуран. Реакция Кумада, которую используют во многих реакциях, описанных выше, является, в принципе, известной реакцией в органической химии и означает катализируемое палладием или никелем углерод-углеродное сочетание двух веществ, участвующих в реакции, где одно из веществ, участвующих в реакции, содержит реакционно-способный галогенидный фрагмент, а другое вещество, участвующее в реакции, содержит реакционно-способный реагент Гриньяра. Подходящие условия для этой реакции ("условия Кумада") являются известными специалистам в данной области и относятся, частности, к выбору катализатора, разбавителя, дополнительных вспомогательных средств для реакции, значений времени реакции и температур реакции. Данная реакция до сих пор еще не применялась с использованием конкретных исходных веществ, как описано в настоящем описании, где она, таким образом, образует новый и изобретательский способ. В одном варианте осуществления способа, Pd-катализатор представляет собой Pd(ацетат) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен. В еще одном варианте осуществления способа, Pd-катализатор является NiCl(dppf).
2
В одном варианте осуществления растворитель стадии (a) содержит один или несколько растворителей, выбранных из эфирных растворителей и воды. В еще одном варианте осуществления растворитель стадии (a) содержит один или несколько растворителей, выбранных из диметоксиэтана, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана, 2-метил-тетрагидрофурана и воды. В других вариантах осуществления палладиевый катализатор стадии (a) образуют посредством комбинирования Pd(OAc) с фосфиновым лигандом. Подходящие фосфиновые лиганды известны специалистам в данной области; не ограничивающие примеры включают трифенилфосфин и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен. Подходящие количества катализатора находятся в интервале от 0,1 до 20 мол.% до предпочтительно от 1 до 10 мол.%. Типовые значения времени реакции находятся в интервале от 1 мин до 2 дней, предпочтительно от 10 мин до 10 часов, особенно предпочтительно, от 1 до 3 часов. Типовые значения температуры реакции находятся в интервале от 20°C до температуры условий кипячения с обратным холодильником, предпочтительно от 30°C до 90°C, особенно предпочтительно 40-60°C.
Усовершенствованный способ получения моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина
Был обнаружен усовершенствованный способ образования моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина в виде кристаллической формы A. Водная хлористоводородная кислота (в количествах от менее одного, например, 0,94 до более одного эквивалента, например 1,1 эквивалента) в спиртовом растворе в присутствии пиридина при повышенной температуре при добавлении к 1 эквиваленту 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина предоставляет моногидрохлоридную соль 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина в виде кристаллической формы A, с высокой чистотой, без примесей от дигидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина. Пиридин функционирует, чтобы забуферивать количества HCl, более чем один эквивалент, чтобы образовывалась моногидрохлоридная соль. Соль пиридингидрохлоридной кислоты (менее, чем от 1 эквивалента до 2 эквивалентов, например 1,1 эквивалента) в спиртовом/водном растворителе(растворителях) может также использоваться с образованием моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина в виде кристаллической формы A. Типовые повышенные температуры находятся в интервале от 25-80°C. Типовые растворители включают, например, этанол, изопропанол и их водные смеси. Типовые используемые концентрации HCl находятся в интервале от 0,1 н. до 6 н. HCl, включая 2,25 н. и 4,5 н. HCl.
В примерном варианте осуществления был обнаружен усовершенствованный способ образования моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина в виде кристаллической формы A, который включает добавление пиридина и 1,11 эквивалента 4,5 н. HCl в растворе изопропанола к 1 эквиваленту 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина в растворе изопропанола при 60°C. Кристаллическую форму A моногидрохлоридной соли подтверждали посредством XRD (рентгеновской дифракции), XRD, как раскрыто в WO PCT/US2011/053808. Одно преимущество усовершенствованного способа состоит в том, что предотвращается образование дигидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина, которая действует как примесь к моногидрохлоридной соли 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина.
Исходные вещества, вспомогательные средства для реакции, используемые на данной стадии способа, являются известными или получаемыми по аналогии с известными способами. Преимущественно, исходные вещества получают, как описано в настоящем описании.
Было обнаружено, что твердые формы соединения формулы A и его солей неожиданно обладают особенно благоприятными фармакокинетическими свойствами, которые делают их особенно подходящими для получения фармацевтических композиций, содержащих соединение формулы A и его соли. Различные кристаллические формы имеют различные физические свойства, такие как температуры плавления, гигроскопичности, растворимости, свойства сыпучести или термодинамические устойчивости, и, следовательно, различные кристаллические формы обеспечивают выбор наиболее подходящей формы для определенного применения или аспекта, например, применения в качестве промежуточного соединения в способе производства лекарственного средства или в различных формах для введения, таких как таблетки, капсулы, мази или растворы.
Соединение A было первоначально описано в WO2007/084786, содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки. Соединение A представляет собой ингибитор PI3K (фосфатидилинозитол-3-киназы) и модулирует фосфорилирование AKT в биохимических, а также клеточных аналитических тестах. Соответственно, соединение A и его фармацевтически приемлемые соли, и фармацевтические композиции, содержащие соединение A или его фармацевтически приемлемую соль, могут применяться для предотвращения, улучшения состояния или лечения заболеваний, зависящих от PI3K. Как описано в настоящем описании, свободное основание соединения A может представлять собой твердую форму, которая существует в виде одной или нескольких полиморфных форм, включающих безводные формы и гидраты. Моногидрохлоридная соль соединения A может представлять собой твердую форму, которая существует в виде одной или нескольких полиморфных форм, включающих безводные формы гидраты и сольваты. Эти полиморфные формы (альтернативно известные в данной области, как полиморфные формы или кристаллические формы) различаются в том, что касается их порошковых рентгеновских дифрактограмм, спектроскопических, физико-химических и фармакокинетических свойств, а также по их термодинамической устойчивости.
В настоящее время было неожиданно обнаружено, что при определенных условиях могут быть обнаружены новые конкретные твердые формы соединения A, его гидратов, его солей и гидратов или сольватов его солей, которые описаны далее в настоящем описании и которые имеют преимущественные области применения и свойства.
Твердые, предпочтительно кристаллические формы соединения формулы A, его гидратов, его солей и гидратов или сольватов его солей могут предпочтительно применяться при лечении клеточных пролиферативных заболеваний, таких как опухолевый и/или злокачественный рост клеток, опосредованный PI3K. В частности, соединение формулы A, его гидраты, его соли и гидраты или сольваты его солей являются применимыми для лечения человеческих или животных (например, мышиных) злокачественных новообразований, включающих, например, злокачественные новообразования легких и бронхов; простаты; молочной железы; поджелудочной железы; толстой кишки и прямой кишки; щитовидной железы; печени и внутрипеченочных желчных протоков; гепатоцеллюлярные; желудочные; глиому/глиобластому; эндометрия; меланомы; почек и почечных лоханок; мочевого пузыря; тела матки; шейки матки; яичника; множественной миеломы; пищевода; острой миелогенной лейкемии; хронической миелогенной лейкемии; лимфоцитарной лейкемии; миелоидной лейкемии; мозга; полости рта и глотки; гортани; тонкого кишечника; неходжкинской лимфомы; меланомы и ворсинчатой аденомы толстой кишки.
В одном варианте осуществления изобретение относится к применению полиморфа Формы A 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-трифторметилпиридин-2-амина моногидрохлорида при лечении злокачественных новообразований.
Примеры
Следующие ниже примеры иллюстрируют изобретение без ограничения его объема притязаний. Следует понимать, что изобретение не ограничивается вариантами осуществления, приведенными в настоящем описании, но охватывает все такие его формы, которые попадают в пределы объема раскрытия.
Пример 1: получение N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
В реактор загружали 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амин (50 г, 207,462 ммоль). Добавляли этилацетат (50 мл), и смесь перемешивали в течение 10 минут. Добавляли гептан (100 мл). Смесь нагревали до 80°C в пределах 30 минут. Уксусный ангидрид (27,404 мл, 290,446 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 3 часам. Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 5 часов. Растворитель удаляли перегонкой (80°C, 750-550 мбар) до получения остаточного объема 60 мл. Смесь охлаждали до 0°C. Добавляли гептан (200 мл), и смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Продукт собирали посредством фильтрации. Остаток промывали гептаном (25 мл) и сушили в полочной сушилке в течение 16 ч при 40°C, <20 мбар с получением 55,2 г (94,6%) N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида в виде слегка коричневого твердого вещества
Пример 2: получение N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
В реактор загружали N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид (70,000 г, 247,310 ммоль) и тетрагидрофуран (480,261 мл, 5861,254 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут. Смесь охлаждали до 2°C в пределах 30 минут. Изопропилмагнийхлорид-хлорид лития 1,3M в ТГФ (197,848 мл, 247,310 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 2 часам. Смесь нагревали до 22°C в пределах 30 минут. Вторую часть изопропилмагнийхлорида-хлорида лития 1,3M в ТГФ (257,203 мл, 321,503 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 2 часам. Смесь перемешивали при 22°C в течение 30 минут после завершения добавления реагента Гриньяра. Триизопропилборат (116,280 г, 618,276 ммоль) добавляли к перемешиваемой смеси в течение 1 часа. Растворитель удаляли перегонкой (20°C, 430-80 мбар) до получения остаточного объема 550 мл. Растворитель 2-метилтетрагидрофуран (500 мл) добавляли при 20°C, и смесь перемешивали. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении до получения остаточного объема 550 мл. Дополнительное количество растворителя 2-метилтетрагидрофурана (200 мл) добавляли при 20°C, и смесь перемешивали. Смесь декантировали и добавляли по каплям во второй реактор, загруженный 70,0 г концентрированной HCl (водн.), 280 мл насыщенного солевого раствора и 300 г воды. Смесь охлаждали до 7°C, и pH смеси доводили до 2,97 посредством добавления 148,1 г 1 н. NaOH (водн.) и нагревали до 20°C, и смесь перемешивали. pH доводили до 3 добавлением еще 10,8 г 1 н. NaOH (водн.). Органическую фазу отделяли от водной фазы, и 500 мл 2-метилтетрагидрофурана добавляли к органической фазе. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении до получения остаточного объема, равного 750 мл. Азеотропную перегонку органической фазы проводили дополнительно два раза с 2×500 мл 2-метилтетрагидрофурана, добавленного к органической фазе. 750 мл смеси отфильтровывали и непрерывно добавляли в третий реактор, загруженный 2,2'-азандиилдиэтанолом (26,001 г, 247,310 ммоль) и 900 мл iPrOH в течение 1 часа при 23°C, и смесь перемешивали. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении до получения остаточного объема, равного 300 мл. Дополнительное количество изопропанола (900 мл) добавляли при 20°C, и смесь перемешивали. Растворитель удаляли перегонкой при пониженном давлении до получения остаточного объема, равного 300 мл. Смесь охлаждали до -10°C, и суспендированные твердые вещества собирали посредством фильтрации, промывали 100 мл изопропанола при этой температуре с получением 57,5 г (73,3%) продукта, N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида.
Пример 3: получение N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
2
3
N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид (25 г, 78,846 ммоль) растворяли в смеси диметоксиэтана (200 мл) и воды (100 мл) при 2-7°C, и раствор переносили в снабженную рубашкой, предварительно охлажденную капельную воронку при температуре рубашки 3°C. Температуру капельной воронки поддерживали при 3°C. Соединение 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)диморфолин (22,45 г, 78,843 ммоль) и KCО (21,8 г, 157,7 ммоль) помещали в заполненный инертным газом реактор объемом 1 л, и добавляли 1,2-диметоксиэтан (200 мл) с последующим добавлением воды (25 мл). Реактор вакуумировали до 100 мбар и продували азотом два раза. Суспензию нагревали до 74-78°C. Образовывался двухфазный раствор. Раствор перемешивали в течение дополнительных 10 минут в условиях кипячения с обратным холодильником, и добавляли раствор трифенилфосфина (0,822 г) в диметоксиэтане (15 мл, 3,134 ммоль). Перемешивание в условиях кипячения с обратным холодильником продолжали в течение дополнительных 10 минут, после чего раствор палладийацетата (0,176 г, 0,784 ммоль) в диметоксиэтане (15 мл) добавляли к кипящей с обратным холодильником реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 10 минут в условиях кипячения с обратным холодильником. К этой смеси при интенсивном перемешивании, раствор N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида добавляли через капельную воронку в течение 4,5 часа, поддерживая реакционную смесь при кипячении с обратным холодильником и температуру капельной воронки при 3°C. Интенсивное перемешивание продолжали в течение дополнительных 15 минут при кипячении с обратным холодильником, и температуру охлаждали до 45-60°C. Часть растворителя (270 мл) перегоняли при 45-60°C/125 мбар и одновременно добавляли воду (200 мл). Дополнительный растворитель (100 мл) перегоняли при пониженном давлении и одновременно добавляли воду (100 мл). Суспензию охлаждали до внутренней температуры 25°C, перемешивали в течение 30 минут при этой температуре, и осадок выделяли посредством фильтрации. Фильтровальную лепешку промывали водой (2×100 мл), и продукт сушили в течение ночи при 2 мбар/25°C с получением 37,3 г (количественный выход) N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида. Продукт применяли как таковой для следующей стадии.
При альтернативной методике, N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид (25 г) растворяли в смеси тетрагидрофурана (200 мл) и воды (100 мл) при 2-5°C, и раствор переносили в снабженную рубашкой, предварительно охлажденную капельную воронку с температурой рубашки 3°C. Температуру капельной воронки поддерживали при приблизительно 3°C.
2
3
4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)диморфолин (22,45 г) и KCО (21,8 г) помещали в заполненный инертным газом реактор объемом 1 л и добавляли тетрагидрофуран (100 мл) с последующим добавлением воды (25 мл). Двухфазную смесь перемешивали и нагревали до кипячения с обратным холодильником при 80°C (температура рубашки) при перемешивании. Раствор, полученный таким образом, перемешивали в течение дополнительных 10 минут в условиях кипячения с обратным холодильником, и добавляли раствор трифенилфосфина (1,241 г) в тетрагидрофуране (5 мл). Перемешивание в условиях кипячения с обратным холодильником продолжали в течение дополнительных 10 минут, после этого времени раствор палладийацетата (0,266 г) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли к кипящей с обратным холодильником смеси. Перемешивание продолжали в течение дополнительных 10 мин при 80°C (температура рубашки) в условиях кипячения с обратным холодильником. К этой смеси, в условиях интенсивного перемешивания, раствор N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида добавляли через капельную воронку в течение приблизительно 6 часов, поддерживая реакционную смесь при кипячении с обратным холодильником и температуру капельной воронки при приблизительно 3°C. Интенсивное перемешивание продолжали в течение дополнительных 15 минут в условиях кипячения с обратным холодильником, и температуру охлаждали до 65-70°C (температура рубашки). Изопропанол (60 мл) добавляли к реакционной смеси с последующим добавлением воды (100 мл). Часть растворителя (приблизительно 170 мл) отгоняли при 70°C (температура рубашки) при пониженном давлении, начиная при 800 мбар до достижения приблизительно 400 мбар. Воду (100 мл) добавляли к смеси, и еще одну порцию растворителя (приблизительно 100 мл) отгоняли при 70°C (температура рубашки) при пониженном давлении до приблизительно 400 мбар. Суспензию, полученную таким образом, охлаждали до 25°C и перемешивали в течение 1 час при этой температуре. Продукт выделяли посредством фильтрации, и фильтровальную лепешку промывали водой (100 мл). Продукт сушили в течение ночи при 50°C и 30 мбар с получением N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида (34,39 г; 96,4% выход неочищенного продукта). Неочищенный продукт применяли как таковой для следующей стадии.
Пример 4: получение 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина (соединения A)
N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид (36,1 г, 76,52 ммоль) суспендировали в деминерализованной воде (180 мл). Суспензию обрабатывали водной 2 н. HCl (180 мл), и смесь нагревали до 70-75°C. Реакционную смесь перемешивали при 75°C в течение 3 часов при этой температуре. Реакционную смесь затем охлаждали до 25°C и отфильтровывали. Фильтровальную лепешку промывали водой (2×50 мл). Изопропилацетат (ИПА, 100 мл) добавляли к фильтрату, и pH бифазного раствора доводили до 1,75 посредством медленного добавления водн. 2 н. NaOH (105 г) при интенсивном перемешивании. Перемешивание продолжали в течение дополнительных 15 минут при 20-25°C, и фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали дополнительным ИПА (2×50 мл), и фазы разделяли. pH водной фазы доводили до 9,1 посредством медленного добавления 2 н. NaOH (114 г). Образовывалась суспензия.
Изопропилацетат (400 мл) добавляли к суспензии, и смесь нагревали до 40°C при перемешивании с получением двухфазного раствора. Фазы разделяли, и водную фазу экстрагировали повторно изопропилацетатом (50 мл). Органические фазы объединяли. Водный раствор N-ацетил-L-цистеина (140 мл) добавляли к органической фазе, и смесь перемешивали при 50°C в течение 1 часа. Фазы разделяли. Органическую фазу повторно обрабатывали водным раствором N-ацетил-L-цистеина (140 мл) в течение дополнительного 1 часа при 60°C, и фазы разделяли. Окончательно, органическую фазу промывали деминерализованной водой (70 мл), и температуру охлаждали до 20°C. Водный раствор 1 н. HCl (200 мл) добавляли медленно к органической фазе, поддерживая температуру при 20-25°C. Смесь интенсивно перемешивали в течение 10 минут, и фазы разделяли. Органическую фазу экстрагировали повторно водным раствором 1 н. HCl (50 мл) и водой (50 мл). Фазы водной HCl и воды отфильтровывали до прозрачности и объединяли. pH объединенной водной фазы доводили до 7,1 медленным добавлением водного раствора 2 н. NaOH (123 г), и образованную суспензию перемешивали в течение по меньшей мере 3 часов при 20-25°C. Продукт выделяли посредством фильтрации, и фильтровальную лепешку промывали деминерализованной водой (3×100 мл). Продукт сушили в вакууме при 50°C в течение ночи с получением 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина (>99,5% чистота, как определено посредством ВЭЖХ) и с 85% суммарным выходом.
Получение раствора N-ацетил-L-цистеина:
N-ацетил-L-цистеин (300,6 г) растворяли в деминерализованной воде (300 мл), и водный раствор 4 н. NaOH (46,8 г) добавляли по каплям до достижения pH 7,0. 70 мл этого раствора разбавляли 210 мл деминерализованной воды, и раствор применяли для экстракций, описанных выше.
Пример 5: моногидрохлорид 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина
В продутом азотом реакторе объемом 3 л, который оборудован верхнеприводной мешалкой, холодильником, вводом/выводом азота и капельной воронкой с объемом 500 мл, 10,5 г (25,59 ммоль, 1 экв.) 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина суспендировали в смеси изопропанола (79,0 г), воды и пиридина (0,2 г) (97:2,5:0,3 м/м/м) при комнатной температуре. Суспензию нагревали до 70°C, и получали слегка мутный раствор. Мутный раствор отфильтровывали при 70°C. Прозрачный раствор охлаждали до 60°C, и добавляли первую порцию (1,03 мл, 4,39 ммоль, 0,2 экв.) 4,5 н. HCl в изопропаноле. Все еще прозрачный раствор охлаждали до 55°C, засевали 0,19 г формы A моногидрохлоридной соли соединения A, суспендированной в смеси изопропанол:вода (97:2,5 м/м) и перемешивали в течение 15 минут. Вторую порцию (4,67 мл, 19,94 ммоль, 0,91 экв.) 4,5 н. HCl в изопропаноле добавляли очень медленно. Суспензию перемешивали в течение 60 минут и охлаждали до -10°C за 16 часов, и перемешивали в течение дополнительных 60 мин при -10°C. Твердый продукт выделяли посредством фильтрации и промывали три раза предварительно охлажденным изопропанолом (3×18 г). Твердый продукт сушили при 90°C в вакууме в течение по меньшей мере 24 часов с получением 8,64 г (88,2% выход) моногидрохлорида 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидинил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина в виде желтого кристаллического твердого вещества, полиморфа формы A.
Другие эксперименты по образованию моногидрохлоридной соли, в которых получают кристаллическую форму A моногидрохлоридной соли, обобщены ниже:
Эксперименты с гидрохлоридом пиридина
Растворители
Состав растворителя
Интервал гидрохлорида пиридина
Этанол:изопропанол:вода
65:32:2 (м:м:м)
1,1-1,15 экв.
Этилацетат
2 экв.
Эксперименты с пиридином
Растворители
Состав растворителя
Пиридин
HCl в изопропаноле
Этанол:изопропанол:вода
68:32:2 (м:м:м)
0,23 экв., 0,08-1,15 экв., 0,11 экв.
0,95, 1,11 экв., 1,54 экв.
Изопропанол:вода
75:2 (м:м)
0,115-0,37 экв.
0,94-1,28 экв.
Изопропанол:вода
75:2 (м:м)
0,115-0,37 экв.
0,94-1,28 экв.
Изопропанол
64,3:2,5 (м:м)
0,115
1,11 экв.
Пример 6: получение N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина
В реактор загружали 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амин (10,000 г, 41,49 ммоль) и тетрагидрофуран (44 мл). Смесь перемешивали. Смесь охлаждали до 0°C. Четыре эквивалента изопропилмагнийхлорида-хлорида лития 1,3M в ТГФ (121,4 г, 165,97 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 45 мин, при поддержании температуры при <10°C. Смесь нагревали при 44°C после завершения добавления реагента Гриньяра, и перемешивали в течение 4,5 ч при этой температуре. Триизопропилборат (31,85 г, 165,97 ммоль) в тетрагидрофуране (32 мл) добавляли к перемешиваемой смеси в пределах 15 мин, и смесь перемешивали в течение дополнительных 30 мин при 44°C. Смесь охлаждали до 0°C. К смеси добавляли по каплям 5 н. HCl (30,18 мл; 165,97 ммоль) в изопропаноле. Смесь нагревали при 22°C и перемешивали в течение ночи. Образованное твердое вещество удаляли посредством фильтрации, фильтровальную лепешку промывали 50 мл тетрагидрофурана и утилизировали. К фильтрату медленно добавляли в течение 45 мин раствор диэтаноламина (13,22 г) в тетрагидрофуране (95 мл). Образованную суспензию перемешивали в течение 30 мин, и твердое вещество удаляли посредством фильтрации. Фильтровальную лепешку промывали тетрагидрофураном (50 мл) и утилизировали. Фильтрат разбавляли изопропилацетатом (100 мл), и растворитель частично упаривали до конечного объема, приблизительно равного 80 мл. Раствор разбавляли дополнительным изопропилацетатом (20 мл), и добавляли насыщенный водн. NaCl (100 мл). pH водной фазы доводили до 5-6 2M HCl, и воду (25 мл) добавляли к двухфазной смеси. Фазы разделяли, и органическую фазу повторно промывали насыщенным водным NaCl-раствором. Водные фазы повторно экстрагировали изопропилацетатом (100 мл), и органические фазы объединяли. К органической фазе добавляли раствор диэтаноламина (4,4 г) в тетрагидрофуране (44 мл) в пределах интервала, равного 30 мин. Растворитель частично упаривали при пониженном давлении при 35-40°C до конечного объема, приблизительно равного 100 мл. Образованную суспензию перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре, и продукт выделяли посредством фильтрации. Фильтровальную лепешку промывали изопропилацетатом (50 мл) и сушили в вакууме при комнатной температуре с получением 8,73 г (76,5%) продукта, N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амина.
Пример 7: получение 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина (соединения A)
2
3
Соединение 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)диморфолин (2,85 г, 9,99 ммоль) и KCО (2,76 г, 19,97 ммоль) помещали в заполненный инертным газом реактор объемом 1 л, и добавляли 1,2-диметоксиэтан (100 мл) с последующим добавлением воды (25 мл). Реактор вакуумировали до 100 мбар и продували азотом два раза. Суспензию нагревали до 60°C. Добавляли раствор 0,1 г тетракистрифенилфосфинпалладия в 2 мл диметоксиэтана (0,100 г, 0,087 ммоль). Суспензию нагревали до 78°C и перемешивали в течение трех часов. N-(5-(1,3,6,2-диоксазаборокан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)амин (2,75 г, 9,99 ммоль) растворяли в смеси диметоксиэтана (20 мл) и 200 мл воды. Реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 10 минут в условиях кипячения с обратным холодильником при 95°C. Суспензию охлаждали до 25°C и перемешивали в течение 30 минут при этой температуре. Продукт выделяли посредством фильтрации, и фильтровальную лепешку промывали деминерализованной водой (3×100 мл). Продукт представлял собой 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амин, как определяли посредством ВЭЖХ.
Пример 8: получение трианиона 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина с использованием 3,5 эквивалента изопропилмагнийхлорида, комплекса хлорида лития
В реактор загружали 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амин (1,000 г, 4,149 ммоль) и тетрагидрофуран (7,72 мл). Смесь перемешивали в течение 10 минут. Смесь охлаждали до 0°C в пределах интервала, равного 30 минут. Изопропилмагнийхлорид-хлорид лития 1,3M в ТГФ (6,383 мл, 8,298 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 1,5 часа, при 0°C. Дополнительные 1,5 эквивалента изопропилмагнийхлорида-хлорида лития, 1,3M в ТГФ (4,788 мл, 6,224 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 1,5 часа, при 0°C. Дополнительные 0,5 эквивалента изопропилмагнийхлорида-хлорида лития, 1,3M в ТГФ (1,596 мл, 2,075 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 1 час, при 0°C. Продукт представлял собой трианион 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина, как определяли посредством ВЭЖХ и ЖХ/МС.
Пример 9: получение 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амина (соединения A)
Соединение 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)диморфолин (0,40 г, 1,405 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (0,040 г, 0,070 ммоль) и ацетат палладия (0,016 г, 0,070 ммоль) и 2 мл тетрагидрофурана помещали в заполненный инертным газом реактор. Реактор вакуумировали до 100 мбар и продували азотом два раза. Изопропилмагнийхлорид-хлорид лития 1,3M в ТГФ (1,405 ммоль) добавляли при 30°C с последующим добавлением эквивалентного количества трианиона 5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-амина (1,405 ммоль). Суспензию перемешивали в течение 0,5 часа. Продукт представлял собой 5-(2,6-ди-4-морфолинил-4-пиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амин, как определяли посредством ВЭЖХ и ЖХ/МС.
Пример 10: получение дианиона N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида с использованием 2,5 эквивалента изопропилмагнийхлорида, в комплексе с хлоридом лития
В реактор загружали N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид (1,405 ммоль) и тетрагидрофуран (2 мл), смесь перемешивали в течение 10 минут. Смесь охлаждали до 0°C в пределах интервала, равного 30 минут. Изопропилмагнийхлорид-хлорид лития, 1,3M в ТГФ (мл, 1,405 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 1 час, при 0°C. Дополнительные 1,5 эквивалента изопропилмагнийхлорида-хлорида лития, 1,3M в ТГФ (4,788 мл, 2,107 ммоль) непрерывно добавляли в пределах периода времени, равного 1,5 часа, при 0°C. Продукт представлял собой дианион N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида, как определяли посредством ВЭЖХ и ЖХ/МС.
Пример 11: получение N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
Соединение 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)диморфолин (0,40 г, 1,405 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (0,040 г, 0,070 ммоль) и ацетат палладия (0,016 г, 0,070 ммоль) и 2 мл тетрагидрофурана помещали в заполненный инертным газом реактор. Реактор вакуумировали до 100 мбар и продували азотом два раза. Изопропилмагнийхлорид-хлорид лития, 1,3M в ТГФ (1,405 ммоль) добавляли при 30°C с последующим добавлением эквивалентного количества дианиона N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида (1,405 ммоль) и 1-йодоадамантана (0,413 г, 1,405 ммоль). Суспензию перемешивали в течение 0,5 часа. Продукт представлял собой N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид, как определяли посредством ВЭЖХ и ЖХ/МС.
Пример 12: получение N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида
2
Соединение 4,4'-(6-хлорпиримидин-2,4-диил)диморфолин (0,40 г, 1,405 ммоль), NiCl(dppf) 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (0,048 г, 0,070 ммоль) и 2 мл тетрагидрофурана помещали в заполненный инертным газом реактор. Реактор вакуумировали до 100 мбар и продували азотом два раза. Изопропилмагнийхлорид-хлорид лития, 1,3M в ТГФ (1,405 ммоль) добавляли при 30°C с последующим добавлением эквивалентного количества дианиона N-(5-бром-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамида (1,405 ммоль). Суспензию перемешивали в течение 0,5 часа. Продукт представлял собой N-(5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-ил)ацетамид, как определяли посредством ВЭЖХ и ЖХ/МС.