СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОСАЖДЕННОГО ПРЕПАРАТА ИЗ БЕРЕЗОВОГО ГРИБА ЧАГА
METHOD OF PRODUCING PRECIPITATED PREPARATION OF SHELF FUNGUS

Изобретение относится к фармацевтической, косметической промышленности.
Прототипом является способ получения осажденного препарата из березового гриба чага (патент №2366439, А61К 36/06, авторы Сысоева М.А., Гамаюрова В.С., Иванова Г.А., Кутырев Г.А.).
Недостатками являются низкая антиоксидантная активность и низкая гепатопротекторная активность.
Задачей является повышение антиоксидантной активности и гепатопротекторной активности.
-7
-20
Задача осуществляется тем, что в способе получения осажденного препарата из гриба чага, включающем получение диффузионного сока чаги, его обработку водным раствором гиперразветвленного полимера с концентрацией 1·10-10·10%, в соотношении 10:1 при комнатной температуре в течение 0,5-1,5 часа, осаждение полифенольного комплекса 20% раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2 с получением осадка полифенольного комплекса, согласно изобретению в качестве гиперразветвленного полимера используют Boltorn 40.
Для экспериментальной проверки осажденного препарата из березового гриба чага было приготовлено несколько образцов, описанных в примерах 1-2.
-8
r
Пример 1. Диффузионный сок чаги, полученный из 10 г сырья, обрабатывают водным раствором гиперразветвленного полимера Boltorn 40 с концентрацией 1·10%, используя соотношение диффузионный сок:раствор гиперразветвленного полимера Boltorn 40-10:1, при комнатной температуре в течение 0,5-1,5 часа. Проводят осаждение полифенольного комплекса 20% раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2, получают 1,31 г осадка. Антиоксидантная емкость (АОЕ) выделенного полифенольного комплекса - ПФК (1) - составляет 116±1,2 кКл/100 г, S=0,05.
-14
r
Пример 2. Диффузионный сок чаги, полученный из 10 г сырья, обрабатывают водным раствором гиперразветвленного полимера Boltorn 40 с концентрацией 1·10%, используя соотношение 10:1, при комнатной температуре в течение 1 часа. Проводят осаждение полифенольного комплекса 20% раствором соляной кислоты до рН 2,0-2,2, получают 1,36 г осадка. Антиоксидантная емкость (АОЕ) выделенного полифенольного комплекса ПФК (2) составляет 93±1 кКл/100 г, S=0,05.
Результаты многократно проведенных экспериментов обсчитаны с помощью программы «Статистика 6», которые представлены в таблице 1, при Р=0,95, n=5.
Таблица 1
Антиоксидантная активность осажденного полифенольного комплекса при использовании Boltorn 30 и Boltorn 40
Образец
Концентрация полимера, %
Масса ПФК,
АОЕ ПФК, кКл/100 г
г
% к сырью
По прототипу Boltorn 30
Контроль
0
1,3470±0,0019
13,47
37±1,0
1
10<sup>-12</sup>
1,3259±0,0074
13,25
64±1,4
2
10<sup>-20</sup>
1,3367±0,0064
13,36
67±1,7
По изобретению Boltorn 40
Контроль
0
1,3470±0,0019
13,47
37±1,0
1* (Пример 1)
10<sup>-8</sup>
1,3116±0,0027
13,11
116±1,2
2* (Пример 2)
10<sup>-14</sup>
1,3572±0,0093
13,57
93±1,0
3*
10<sup>-18</sup>
1,4075±0,0041
14,07
99±1,0
Используемый в изобретении гиперразветвленный полимер Boltorn 40 отличается от применяемого в прототипе гиперразветвленного полимера Boltorn 30 по строению и химическим свойствам. Их молекулярная масса составляет у Boltorn 40-7250, у Boltorn 30-3570. Молекула Boltorn 40 имеет 64 периферийные гидроксильные группы, что в два раза больше, чем у молекулы Boltorn 30. Имея большее количество периферийных гидроксильных групп, Boltorn 40 может оказывать большее влияние на частицы полифенольного комплекса, что способствует значительному повышению антиоксидантной активности осажденного полифенольного комплекса, а также проявлению им гепатопротекторной активности.
Согласно данным Таблицы 1 количество осажденного полифенольного комплекса по изобретению одинаково по сравнению с количеством осажденного полифенольного комплекса по прототипу и с контролем. В прототипе антиоксидантная активность осажденного полифенольного комплекса повышается по отношению к контролю на 81%. Использование полимера Boltorn 40 по изобретению способствует повышению антиоксидантной активности осажденного полифенольного комплекса на 213% (Пример 1) по сравнению с контролем и на 73% по сравнению с прототипом.
4
Проведены эксперименты по исследованию гепатопротекторной активности осажденного полифенольного комплекса. Опыты проведены на беспородных белых крысах. Крысы содержались в виварии на стандартной диете со свободным доступом к еде и воде, при естественном световом режиме. Получены данные по гепатопротекторной активности осажденного полифенольного комплекса по изобретению (Пример 2) в модели CCl-гепатита. Для сравнения использован широко применяемый в медицинской практике в качестве гепатопротектора препарат «Карсил». Данные Таблицы 2 свидетельствуют о повышенной гепатопротекторной активности осажденного полифенольного комплекса по изобретению, где ПФК - осажденный полифенольный комплекс (Контроль), ПФК40 - осажденный полифенольный комплекс по изобретению.
Таблица 2
Биохимические показатели сыворотки крови подопытных крыс
Группы животных
В сыворотке крови
ЩФ*, Е/Л
АсАТ*, Е/Л
АлАТ*, Е/Л
Белок, г/л
Билирубин общий, мкмоль/л
Холестерин, ммоль/л
Мочевина, моль/л
Интактные
92±28,1
59,36±5,47
39,36±2,25
67,30±5,02
3,74±0,17
4,87±0,16
4,28±0,13
CCl<sub>4</sub>-гепатит
458±35,41
138,64±16,40
68,54±6,79
42,94±3,43
14,22±0,14
10,5±0,86
7,35±0,14
ПФК (100 мг/кг) + CCl<sub>4</sub>-гепатит
187±15,16
79±6,18
55,46±2,78
50,73±2,45
8,72±0,32
6,78±0,93
5,63±0,19
ПФК40 (100 мг/кг) + CCl<sub>4</sub>-гепатит
167±22,65
65,46±7,54
48,45±3,33
55,1±4,01
6,94±0,19
6,12±0,24
5,39±0,02
Карсил (100 мг/кг) + CCl<sub>4</sub>-гепатит
196±18,74
93,18±9,17
61,47±8,33
51,37±4,36
9,41±0,23
7,66±0,31
6,37±0,17
Примечание: * - ЩФ - щелочная фосфатаза, АсАТ - аспартатаминотрансфераза, АлАТ - аланинаминотрансфераза
В патогенезе острого гепатита, вызванного интоксикацией организма четыреххлористым углеродом, существенную роль играет перекисное окисление липидов. По биохимическим показателям сыворотки крови животных можно судить о значительном снижении интенсивности процессов липопероксидации, следовательно, и разрушении мембран гепатоцитов. Количественное содержание печеночных ферментов (АсАТ, АлАТ), билирубина, холестерина в сыворотке крови животных, получавших в опыте осажденный полифенольный комплекс по изобретению, более приближено к содержанию этих показателей в сыворотке крови здоровых животных по сравнению с животными, принимавшими препарат «Карсил».
Получены микрофотографии срезов печени опытных животных. Показано, что в случае употребления животными осажденного полифенольного комплекса по изобретению (Пример 2) в дозе 100 мг/кг структура печеночных долей этих животных сравнима со структурой печеночных долей здоровых животных. Фиброзные изменения в печени животных, принимавших осажденный полифенольный комплекс по изобретению, выражены меньше.
Использование предлагаемого изобретения позволяет:
- повысить антиоксидантную активность полифенольного комплекса, полученного по изобретению, в 1,7 раз по сравнению с полифенольным комплексом, полученным по прототипу;
- значительно повысить гепатопротекторную активность полифенольного комплекса, полученного по изобретению по сравнению с фармакологическим препаратом "Карсил", о чем свидетельствуют показатели сыворотки крови подопытных животных и микрофотографии срезов печени.
Изобретение может быть использовано для получения на его основе лекарственных препаратов, биологически активных добавок, функциональных продуктов питания и косметических средств.