ИНГИБИТОРЫ ОКСИДАЗЫ D-АМИНОКИСЛОТ И ИХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
D-AMINO ACID OXIDASE INHIBITORS AND THEIR THERAPEUTIC USE

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
В этой заявке испрашивается приоритет заявки на патент США, U.S.S.N. 15/787557, зарегистрированной 18 октября 2017 года, полное содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Центральная нервная система (ЦНС) включает головной мозг и спинной мозг. ЦНС подвержена различным нарушениям, которые могут быть вызваны различными факторами, включающими генетические факторы, травму, инфекции, дегенерацию, структурные дефекты и/или повреждение, опухоли, нарушение кровотока и аутоиммунные нарушения. Симптомы нарушения ЦНС зависят от зоны нервной системы, которая вовлечена в патологический процесс, и причины нарушения.
Создание эффективных методов лечения нарушений ЦНС отстала от других областей терапии из-за сложности таких нарушений и отсутствия эффективной технологии доставки терапевтических средств через гематоэнцефалический барьер. В связи с этим, представляет большой интерес разработка новых подходов к лечению нарушений ЦНС.
Оксидаза D-аминокислот (DAAO) представляет собой пероксисомальный фермент, который окисляет D-аминокислоты до соответствующих иминокислот. Сообщалось, что DAAO участвует в метаболизме D-аминокислот головного мозга, в том числе D-серина, и в регуляции глутаматергической нейротрансмиссии. В связи с этим, DAAO может быть мишенью для лечения нарушений центральной нервной системы (ЦНС), которые связаны с D-серином и/или глутаматергической нейротрансмиссией.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение основано, по меньшей мере, помимо всего прочего, на создании соединений, способных эффективно ингибировать активность DAAO у субъекта. Поэтому, такие соединения могли бы оказывать положительный эффект при лечении заболеваний и нарушений, связанных с DAAO и/или глутаматергической нейротрансмиссией, таких как нарушения ЦНС.
Соответственно, в изобретении предлагаются соединения формулы (I) и их применение для ингибирования активности DAAO у субъекта и/или лечения или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения.
В одном аспекте, в настоящем изобретении предлагается соединение формулы (I):
1
2
2
2-10
2-10
2-10
2
n
2
или его фармацевтически приемлемая соль, где каждый из A, B, C, D и E, независимо представляет собой C, N, N-H, O, S, или отсутствует; изображает одинарную или двойную химическую связь; каждый из X, Y и Z, независимо представляет собой арил, гетероарил, аралкил, H, или отсутствует; каждый из L и L независимо  представляет собой фрагмент, выбранный из O, CH, C=O, C алкила, C алкенила, C алкинила, -((CH)-W)-, где n=0, 1, 2, 3, 4 или 5, и W представляет собой O или S, или отсутствует; и когда L отсутствует, Z представляет собой арил или гетероарил, конденсированный с B  C.
В другом аспекте, в настоящем изобретении предлагаются композиции (например, фармацевтические композиции, нутрицевтические композиции, продукты диетического питания или продукты лечебного питания), включающие эффективное количество соединения формулы (I) и носитель.
В еще одном аспекте, в настоящем изобретении предлагаются способы ингибирования DAAO у субъекта и/или лечения или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или эффективного количества описанной в изобретении композиции.
Далее будут изложены более подробно один или более вариантов осуществления изобретения. Другие характерные черты, объекты и преимущества изобретения станут очевидными при ознакомлении с подробным описанием, примерами и формулой изобретения.
Определения
th
rd
Ниже приводится более подробное описание определений конкретных функциональных групп и химических терминов. Химические элементы обозначены в соответствии с Периодической таблицей элементов, версии CAS, приведенной на внутренней стороне обложки справочника Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed., а конкретные функциональные группы обычно определяются так, как описано в изобретении. Кроме того, общие принципы органической химии, а также специфические функциональные фрагменты и реакционная способность описаны в пособиях и монографиях Thomas Sorrell, Organic Chemistry, University Science Books, Sausalito, 1999; Smith and March, March’s Advanced Organic Chemistry, 5 Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001; Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., New York, 1989; и Carruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3 Edition, Cambridge University Press, Cambridge, 1987. Предполагается, что настоящее изобретение никоим образом не ограничивается приведенным в изобретении в качестве примера перечнем заместителей.
Описанные в изобретении соединения могут включать один или более центров асимметрии и, вследствие этого, могут существовать в различных изомерных формах, например, в форме энантиомеров и/или диастереомеров. Например, описанные в изобретении соединения могут находиться в форме индивидуального энантиомера, диастереомера или геометрического изомера, или могут находиться в форме смеси стереоизомеров, включая рацемические смеси и смеси, обогащенные одним или более стереоизомерами. Изомеры могут быть выделены из смесей методами, известными специалистам в данной области, которые включают хиральную высокоэффективную жидкостную хроматографию (HPLC) и образование и кристаллизацию хиральных солей; или предпочтительные изомеры могут быть получены асимметричным синтезом, смотрите, например, руководства и монографии Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981); Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); and Wilen, Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972). Кроме того, изобретение включает описанные в изобретении соединения в форме индивидуальных изомеров, которые практически не содержат других изомеров, и, в качестве варианта, в форме смесей различных изомеров.
В формуле, обозначает  одинарную химическую связь в тех случаях, когда тут же не указана стереохимия фрагментов,  обозначает одинарную химическую связь или ее отсутствие, и  или  обозначает одинарную или двойную химическую связь.
1-6
1
2
3
4
5
6
1-6
1-5
1-4
1-3
1-2
2-6
2-5
2-4
2-3
3-6
3-5
3-4
4-6
4-5
5-6
В случаях, когда указан диапазон значений, предполагается, что он включает в себя каждое значения и поддиапазон внутри диапазона. Например, предполагается, что "C" включает в себя C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C, C и C.
Термин "алифатический" включает как насыщенные, так и ненасыщенные, линейные (то есть, неразветвленные), разветвленные, ациклические, циклические или полициклические алифатические углеводороды, которые необязательно замещены с помощью одной или более функциональных групп. Для любого специалиста в данной области является очевидным, что в настоящем изобретении термин "алифатический" включает, но этим не ограничивая, алкильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкильные, циклоалкенильные и циклоалкинильные фрагменты. Таким образом, термин "алкил" включает линейные, разветвленные и циклические алкильные группы. Аналогичное правило применяется к другим общим терминам, таким как "алкенил", "алкинил", и к другим подобным терминам. Кроме того, термины "алкил", "алкенил", "алкинил" и другие подобные термины включают как замещенные, так и незамещенные группы. В некоторых вариантах осуществления, термин "низший алкил" используется для обозначения алкильных групп (циклических, ациклических, замещенных, незамещенных, разветвленных или неразветвленных), имеющих 1-6 углеродных атомов.
2
2
2
2
В конкретных вариантах осуществления, используемые в изобретении алкильные, алкенильные и алкинильные группы содержат 1-20 алифатических углеродных атомов. В других конкретных вариантах осуществления, используемые в изобретении алкильные, алкенильные и алкинильные группы содержат 1-10 алифатических углеродных атомов. В еще одних вариантах осуществления, используемые в изобретении алкильные, алкенильные и алкинильные группы содержат 1-8 алифатических углеродных атомов. В еще одних вариантах осуществления, используемые в изобретении алкильные, алкенильные и алкинильные группы содержат 1-6 алифатических углеродных атомов. В еще одних вариантах осуществления, используемые в изобретении алкильные, алкенильные и алкинильные группы содержат 1-4 углеродных атомов. Таким образом, иллюстративные примеры алифатических групп включают, но этим не ограничивая, например, метильные, этильные, н-пропильные, изопропильные, циклопропильные, -CH-циклопропильные, винильные, аллильные, н-бутильные, вторбутильные, изобутильные, третбутильные, циклобутильные, -CH-циклобутильные, н-пентильные, вторпентильные, изопентильные, третпентильные, циклопентильные, -CH-циклопентильные, н-гексильные, вторгексильные, циклогексильные, -CH-циклогексильные фрагменты и другие подобные фрагменты, которые могут также нести один или более заместителей. Алкенильные группы включают, но этим не ограничивая, например, этенил, пропенил, бутенил, 1-метил-2-бутен-1-ил, и другие подобные группы. Типичные алкинильные группы включают, но этим не ограничивая, этинил, 2-пропинил (пропаргил), 1-пропинил, и другие подобные группы.
1-10
1-9
1-8
1-7
1-6
1-5
1-4
1-3
1-2
1
2-6
1-6
1
2
3
5
6
7
8
1-10
1-6
1-3
3
1-10
1-6
1-3
3
2
Термин "алкил" относится к радикалу линейной или разветвленной насыщенной углеводородной группы, имеющей от 1 до 10 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 9 углеродных атомов ("Cалкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 8 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 7 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 6 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 5 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 4 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 3 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 1 до 2 углеродных атомов ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет 1 углеродный атом ("C алкил"). В некоторых вариантах осуществления, алкильная группа имеет от 2 до 6 углеродных атомов ("C алкил"). Примеры C алкильных групп включают метил (C), этил (C), пропил (C) (например, н-пропил, изопропил), бутил (C4) (например, н-бутил, третбутил, вторбутил, изобутил), пентил (C) (например, н-пентил, 3-пентанил, амил, неопентил, 3-метил-2-бутанил, третичный амил) и гексил (C) (например, н-гексил). Дополнительные примеры алкильных групп включают н-гептил (C), н-октил (C), и другие подобные группы. Если не указано иное, то в каждом случае присутствия, алкильная группа независимо является незамещенной ("незамещенный алкил") или замещенной ("замещенный алкил") с помощью одного или более заместителей (например, с помощью галогена, такого как F, или -OH). В конкретных вариантах осуществления, алкильная группа представляет собой незамещенный C алкил (такой как незамещенный Cалкил или Cалкил, например, -CH). В конкретных вариантах осуществления, алкильная группа представляет собой замещенный C алкил (такой как замещенный C алкил или Cалкил, например, -CF или CHOH).
2-20
2-10
2-9
2-8
2-7
2-6
2-5
2-4
2-3
2
2-4
2
3
3
4
4
4
2-6
2-4
5
5
6
7
8
8
2-10
2-10
3
"Алкенил" относится к радикалу линейной или разветвленной углеводородной группы, имеющей от 2 до 20 углеродных атомов, одну или более двойных связей углерод-углерод, и не имеющей тройных связей ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 10 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 9 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 8 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 7 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 6 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 5 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 4 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет от 2 до 3 углеродных атомов ("C алкенил"). В некоторых вариантах осуществления, алкенильная группа имеет 2 углеродных атома ("Cалкенил"). Одна или более двойных связей углерод-углерод могут быть внутренними (такими как в 2-бутениле) или концевыми (такими как в 1-бутениле). Примеры C алкенильных групп включают этенил (C), 1-пропенил (C), 2-пропенил (C), 1-бутенил (C), 2-бутенил (C), бутадиенил (C), и другие подобные группы. Примеры C алкенильных групп включают упомянутые выше C алкенильные группы, а также пентенил (C), пентадиенил (C), гексенил (C), и другие подобные группы. Дополнительные примеры алкенила включают гептенил (C), октенил (C), октатриенил (C), и другие подобные группы. Если не указано иное, то, в каждом случае присутствия, алкенильная группа независимо является необязательно замещенной, то есть, незамещенной ("незамещенный алкенил") или замещенной ("замещенный алкенил") с помощью одного или более заместителей. В конкретных вариантах осуществления, алкенильная группа представляет собой незамещенный C алкенил. В конкретных вариантах осуществления, алкенильная группа представляет собой замещенный C алкенил. В алкенильной группе, двойная связь C=C, для которой не указана стереохимия (например, -CH=CHCH или  ), может быть (E)- или (Z)-двойной связью.
2-20
2-10
2-9
2-8
2-7
2-6
2-5
2-4
2-3
2
2-4
2
3
3
4
4
2-6
2-4
5
6
7
8
2-10
2-10
"Алкинил" относится к радикалу линейной или разветвленной углеводородной группы, имеющей от 2 до 20 углеродных атомов, одну или более тройных связей углерод-углерод и, необязательно, одну или более двойных связей ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 10 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 9 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 8 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 7 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 6 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 5 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 4 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет от 2 до 3 углеродных атомов ("C алкинил"). В некоторых вариантах осуществления, алкинильная группа имеет 2 углеродных атома ("C алкинил"). Одна или более тройных связей углерод-углерод могут быть внутренними (такими как в 2-бутиниле) или концевыми (такими как в 1-бутинили). Примеры C алкинильных групп включают, без ограничения, этинил (C), 1-пропинил (C), 2-пропинил (C), 1-бутинил (C), 2-бутинил (C), и другие подобные группы. Примеры C алкинильных групп включают упомянутые выше C алкинильные группы, а также пентинил (C), гексинил (C), и другие подобные группы. Дополнительные примеры алкинила включают гептинил (C), октинил (C), и другие подобные группы. Если не указано иное, то, в каждом случае присутствия, алкинильная группа независимо является необязательно замещенной, то есть, незамещенной ("незамещенный алкинил") или замещенной ("замещенный алкинил") с помощью одного или более заместителей. В конкретных вариантах осуществления, алкинильная группа представляет собой незамещенный C алкинил. В конкретных вариантах осуществления, алкинильная группа представляет собой Cалкинил.
"Аралкил" представляет собой подкласс алкила и арила и относится к необязательно замещенной алкильной группе, замещенной с помощью необязательно замещенной арильной группы. В конкретных вариантах осуществления, аралкил представляет собой необязательно замещенный бензил. В конкретных вариантах осуществления, аралкил представляет собой бензил. В конкретных вариантах осуществления, аралкил представляет собой необязательно замещенный фенетил. В конкретных вариантах осуществления, аралкил представляет собой фенетил.
6-14
6
10
14
6-14
6-14
"Арил" относится к радикалу моноциклической или полициклической (например, бициклической или трициклической) 4n+2 ароматической кольцевой системы (например, имеющей 6, 10, или 14 π электронов, равномерно распределенных между кольцевыми атомами), имеющей 6-14 кольцевых углеродных атомов и ноль гетероатомов, образующих ароматическую кольцевую систему ("C арил"). В некоторых вариантах осуществления, арильная группа имеет шесть кольцевых углеродных атомов ("Cарил", например, фенил). В некоторых вариантах осуществления, арильная группа имеет десять кольцевых углеродных атомов ("Cарил", например, нафтил, такой как 1-нафтил и 2-нафтил). В некоторых вариантах осуществления, арильная группа имеет четырнадцать кольцевых углеродных атомов ("Cарил", например, антрацил). "Арил" также включает кольцевые системы, в которых определенное выше арильное кольцо конденсировано с одной или более карбоциклильными или гетероциклильными группами, где радикал или точка присоединения находится на арильном кольце, в таком случае, число углеродных атомов продолжает обозначать число углеродных атомов в арильной кольцевой системе. Если не указано иное, то, в каждом случае присутствия, арильная группа независимо является необязательно замещенной, то есть, незамещенной ("незамещенный арил") или замещенной ("замещенный арил") с помощью одного или более заместителей. В конкретных вариантах осуществления, арильная группа представляет собой незамещенный C арил. В конкретных вариантах осуществления, арильная группа представляет собой замещенный C арил.
"Гетероарил" относится к радикалу 5-14 членной моноциклической или полициклической 4n+2 ароматической кольцевой системы (например, имеющей 6, 10 или 14 π электронов, равномерно распределенных между кольцевыми атомами), имеющей кольцевые углеродные атомы и 1-4 кольцевые гетероатомы, образующие ароматическую кольцевую систему, где каждый гетероатом независимо выбирают из азота, кислорода и серы ("5-14 членный гетероарил"). В гетероарильных группах, которые содержат один или более атомов азота, точкой присоединения может быть атом углерода или атом азота, если это не противоречит правилам валентности. Гетероарильные полициклические кольцевые системы могут включать один или более гетероатомов в одном или обоих кольцах. "Гетероарил" также включает кольцевые системы, в которых определенное выше гетероарильное кольцо конденсировано с одной или более арильными группами, где точка присоединения находится или на арильном или гетероарильном кольце, и в таких случаях, число кольцевых членов обозначает число кольцевых членов в конденсированной (арил/гетероарил) кольцевой системе. В полициклических гетероарильных группах, в которых одно кольцо не содержит гетероатома (например, индолил, хинолинил, карбазолил, и другие подобные группы), точка присоединения может находиться на любом кольце, то есть, или на кольце, содержащем гетероатом (например, 2-индолил), или на кольце, которое не содержит гетероатома (например, 5-индолил). К ним также относятся полициклические гетероарильные группы, в которых два или три кольца независимо содержат гетероатом (например, фуропирролил, тианопирролил, и другие подобные группы).
В некоторых вариантах осуществления, гетероарильная группа представляет собой 5-14 членную ароматическую кольцевую систему, имеющую кольцевые углеродные атомы и 1-4 кольцевые гетероатомы, образующие ароматическую кольцевую систему, где каждый гетероатом независимо выбирают из азота, кислорода и серы ("5-14 членный гетероарил". В некоторых вариантах осуществления, гетероарильная группа представляет собой 5-8 членную ароматическую кольцевую систему, имеющую кольцевые углеродные атомы и 1-4 кольцевые гетероатомы, образующие ароматическую кольцевую систему, где каждый гетероатом независимо выбирают из азота, кислорода и серы ("5-8 членный гетероарил"). В некоторых вариантах осуществления, гетероарильная группа представляет собой 5-6 членную ароматическую кольцевую систему, имеющую кольцевые углеродные атомы и 1-4 кольцевые гетероатомы, образующие ароматическую кольцевую систему, где каждый гетероатом независимо выбирают из азота, кислорода и серы ("5-6 членный гетероарил"). В некоторых вариантах осуществления, 5-6 членный гетероарил имеет 1-3 кольцевых гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы. В некоторых вариантах осуществления, 5-6 членный гетероарил имеет 1-2 кольцевых гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы. В некоторых вариантах осуществления, 5-6 членный гетероарил имеет 1 кольцевой гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы. Если не указано иное, то, в каждом случае присутствия, гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной, то есть, незамещенной ("незамещенный гетероарил") или замещенной ("замещенный гетероарил") с помощью одного или более заместителей. В конкретных вариантах осуществления, гетероарильная группа представляет собой незамещенный 5-14 членный гетероарил. В конкретных вариантах осуществления, гетероарильная группа представляет собой замещенный 5-14 членный гетероарил.
Примеры 5-членных гетероарильных групп, содержащих один гетероатом, включают, без ограничения, пирролил, фуранил и тиофенил. Примеры 5-членных гетероарильных групп, содержащих два гетероатома, включают, без ограничения, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил и изотиазолил. Примеры 5-членных гетероарильных групп, содержащих три гетероатома, включают, без ограничения, триазолил, оксадиазолил и тиадиазолил. Примеры 5-членных гетероарильных групп, содержащих четыре гетероатома, включают, без ограничения, тетразолил. Примеры 6-членных гетероарильных групп, содержащих один гетероатом, включают, без ограничения, пиридил. Примеры 6-членных гетероарильных групп, содержащих два гетероатома, включают, без ограничения, пиридазинил, пиримидил и пиразинил. Примеры 6-членных гетероарильных групп, содержащих три или четыре гетероатома, включают, без ограничения, триазинил и тетразинил, соответственно. Примеры 7-членных гетероарильных групп, содержащих один гетероатом, включают, без ограничения, азепинил, оксепинил и тиепинил. Примеры 5,6-бициклических гетероарильных групп включают, без ограничения, индолил, изоиндолил, индазолил, бензотриазолил, бензотиофенил, изобензотиофенил, бензофуранил, бензоизофуранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензизоксазолил, бензоксадиазолил, бензтиазолил, бензизотиазолил, бензтиадиазолил, индолизинил и пуринил. Примеры 6,6-бициклических гетероарильных групп включают, без ограничения, нафтиридинил, птеридинил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, хиноксалинил, фталазинил и хиназолинил.
"Ненасыщенная" или "частично ненасыщенная" относятся к группе, которая включает, по меньшей мере, одну двойную или тройную связь. Предполагается, что "частично ненасыщенная" кольцевая система дополнительно включает кольца, имеющие много мест ненасыщенности, но не включает ароматические группы (например, арильные или гетероарильные группа). Аналогично этому, "насыщенная" относится к группе, которая не содержит двойной или тройной связи, то есть, содержит все одинарные связи.
Атом, фрагмент или группа, описанные в изобретении, могут быть незамещенными или замещенными, если это не противоречит правилам валентности, и если в явном виде не предусмотрено иное. Термин "необязательно замещенная" относится к замещенной или к незамещенной.
Группа является необязательно замещенной, если в явном виде не предусмотрено иное. Термин "необязательно замещенная" относится к случаю замещения или незамещения. В конкретных вариантах осуществления, алкильные, алкенильные, алкинильные, карбоциклильные, гетероциклильные, арильные и гетероарильные группы являются необязательно замещенными (например, "замещенная" или "незамещенная" алкильная, "замещенная" или "незамещенная" алкенильная, "замещенная" или "незамещенная" алкинильная, "замещенная" или "незамещенная" карбоциклильная, "замещенная" или "незамещенная" гетероциклильная, "замещенная" или "незамещенная" арильная или "замещенная" или "незамещенная" гетероарильная группы). Обычно, термин "замещенная", независимо от того, следует он после термина "необязательно" или нет, означает, что, по меньшей мере, один атом водорода, присутствующий в группе (например, атом углерода или азота), замещен с помощью соответствующего заместителя, например, заместителя, который после осуществления замещения приводит к образованию стабильного соединения, например, соединения, которое спонтанно не подвергается трансформации, такой как перегруппировка, циклизация, отщепления, или другой реакции. Если не указано иное, то "замещенная" группа имеет заместитель в одном или нескольких замещаемых положениях в группе, и когда более чем одно положение в любой данной структуре замещено, заместитель в каждом положении может быть одинаковым или различным. Предполагается, что термин "замещенный" включает замещение с помощью всех возможных заместителей для органических соединений, с помощью любых из описанных в изобретении заместителей, которое приводит к образованию стабильного соединения. Настоящее изобретение предполагает использование всех возможных таких комбинаций для получения стабильного соединения. Применительно к этому изобретению, гетероатомы, такие как азот, могут иметь водородные заместители и/или любой описанный в изобретении подходящий заместитель, который не нарушает правило валентности для гетероатомов и приводит к образованию стабильного фрагмента. В конкретных вариантах осуществления, заместителем является заместитель для атома углерода. В конкретных вариантах осуществления, заместителем является заместитель для атома азота. В конкретных вариантах осуществления заместитель является заместителем для атома кислорода. В конкретных вариантах осуществления, заместителем является заместитель для атома серы.
2
3
2
3
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
4
4
2
3
2
3
4
4
2
2
1-10
1-10
2-10
2-10
3-10
6-14
2
2
aa
bb
bb
bb
+
-
cc
bb
aa
cc
aa
cc
aa
aa
aa
bb
bb
bb
aa
bb
aa
bb
bb
bb
aa
bb
aa
bb
aa
bb
aa
bb
bb
bb
bb
bb
bb
bb
bb
aa
bb
aa
bb
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
bb
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
cc
aa
cc
bb
bb
bb
aa
bb
cc
bb
bb
cc
cc
cc
+
−
cc
+
−
cc
cc
cc
cc
+
−
cc
cc
+
−
cc
cc
aa
cc
aa
cc
dd
−
bb
bb
aa
bb
aa
bb
aa
bb
cc
Примеры заместителей для углеродного атома включают, но этим не ограничивая, галоген, -CN, -NO, -N, -SOH, -SOH, -OH, -OR, -ON(R), -N(R), -N(R)X, -N(OR)R, -SH, -SR, -SSR, -C(=O)R, -COH, -CHO, -C(OR), -COR, -OC(=O)R, -OCOR, -C(=O)N(R), -OC(=O)N(R), -NRC(=O)R, -NRCOR, -NRC(=O)N(R), -C(=NR)R, -C(=NR)OR, -OC(=NR)R, -OC(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -OC(=NR)N(R), -NRC(=NR)N(R), -C(=O)NRSOR, -NRSOR, -SON(R), -SOR, -SOOR, -OSOR, -S(=O)R, -OS(=O)R, -Si(R), -OSi(R) -C(=S)N(R), -C(=O)SR, -C(=S)SR, -SC(=S)SR, -SC(=O)SR, -OC(=O)SR, -SC(=O)OR, -SC(=O)R,-P(=O)(R), −P(=O)(OR), -OP(=O)(R), -OP(=O)(OR), -P(=O)(N(R)), -OP(=O)(N(R)), −NRP(=O)(R), -NRP(=O)(OR), -NRP(=O)(N(R)), -P(R), −P(OR), -P(R)X, −P(OR)X, −P(R), −P(OR), -OP(R), -OP(R)X, −OP(OR), −OP(OR)X, −OP(R), −OP(OR), -B(R), -B(OR), -BR(OR), C алкил, C пергалогеналкил, C алкенил, C алкинил, C карбоциклил, 3-14 членный гетероциклил, C арил и 5-14 членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R; где X представляет собой противоион, или два неминальных водорода на углеродном атоме замещены с помощью группы =O, =S, =NN(R), =NNRC(=O)R, =NNRC(=O)OR, =NNRS(=O)R, =NR или =NOR;
aa
aa
dd
1-10
1-10
2-10
2-10
3-10
6-14
в каждом случае присутствия, R независимо выбирают из C алкила, C пергалогеналкила, C алкенила, C алкинила, C карбоциклила, 3-14 членного гетероциклила, C арила и 5-14 членного гетероарила, или две группы R объединяют с образованием 3-14 членного гетероциклильного или 5-14 членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R;
bb
aa
cc
aa
cc
aa
aa
cc
aa
cc
cc
cc
cc
cc
aa
cc
cc
cc
aa
cc
cc
bb
dd
−
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
1-10
1-10
2-10
2-10
3-10
6-14
в каждом случае присутствия, R независимо выбирают из водорода, -OH, -OR, -N(R), -CN, -C(=O)R, -C(=O)N(R), -COR, -SOR, -C(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -SON(R), -SOR, -SOOR, -SOR, -C(=S)N(R), -C(=O)SR, -C(=S)SR, -P(=O)(R), −P(=O)(OR),-P(=O)(N(R)), C алкила, C пергалогеналкила, C алкенила, C алкинила, C карбоциклила, 3-14 членного гетероциклила, C арила и 5-14 членного гетероарила, или две группы R объединяют с образованием 3-14 членного гетероциклильного или 5-14 членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R; где X представляет собой противоион;
cc
cc
dd
1-10
1-10
2-10
2-10
3-10
6-14
в каждом случае присутствия, R независимо выбирают из водорода, C алкила, C пергалогеналкила, C алкенила, C алкинила, C карбоциклила, 3-14 членного гетероциклила, C арила и 5-14 членного гетероарила, или две группы R объединяют с образованием 3-14 членного гетероциклильного или 5-14 членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R;
dd
ee
ff
ff
ff
+
-
ee
ff
ee
ee
ee
ee
ee
ee
ff
ff
ff
ee
ff
ee
ff
ff
ff
ee
ff
ee
ff
ee
ff
ff
ff
ff
ff
ff
ff
ff
ee
ff
ee
ee
ee
ee
ee
ee
ff
ee
ee
ee
ee
ee
ee
ee
gg
dd
−
2
3
2
3
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
2
2
2
2
2
1-6
1-6
2-6
2-6
3-10
6-10
в каждом случае присутствия, R независимо выбирают из галогена, -CN, -NO, -N, -SOH, -SOH, -OH, -OR, -ON(R), -N(R), -N(R)X, -N(OR)R, -SH, -SR, -SSR, -C(=O)R, -COH, -COR, -OC(=O)R, -OCOR, -C(=O)N(R), -OC(=O)N(R), -NRC(=O)R, -NRCOR, -NRC(=O)N(R), -C(=NR)OR, -OC(=NR)R, -OC(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -OC(=NR)N(R), -NRC(=NR)N(R),-NRSOR, -SON(R), -SOR, -SOOR, -OSOR, -S(=O)R, -Si(R), -OSi(R), -C(=S)N(R), -C(=O)SR, -C(=S)SR, -SC(=S)SR, -P(=O)(OR), -P(=O)(R), -OP(=O)(R), -OP(=O)(OR), C алкила, C пергалогеналкила, C алкенила, C алкинила, C карбоциклила, 3-10 членного гетероциклила, C арила, 5-10 членного гетероарила, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или групп 5 R, или два геминальных заместителя R могут быть объединены с образованием =O или =S; где X представляет собой противоион;
ee
gg
1-6
1-6
2-6
2-6
3-10
6-10
в каждом случае присутствия, R независимо выбирают из C алкила, C пергалогеналкила, C алкенила, C алкинила, C карбоциклила, C арила, 3-10 членного гетероциклила и 3-10 членного гетероарила, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R;
ff
ff
gg
1-6
1-6
2-6
2-6
3-10
6-10
в каждом случае присутствия, R независимо выбирают из водорода, C алкила, C пергалогеналкила, C алкенила, C алкинила, C карбоциклила, 3-10 членного гетероциклила, C арила и 5-10 членного гетероарила, или две R объединяют с образованием 3-14 членного гетероциклильного или 5-14 членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R; и
gg
+
-
+
-
+
-
+
-
gg
-
2
3
2
3
1-6
1-6
2
1-6
2
1-6
3
1-6
2
2
1-6
3
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
2
1-6
1-6
2
1-6
2
1-6
2
1-6
1-6
1-6
1-6
2
1-6
1-6
2
1-6
2
1-6
1-6
1-6
1-6
2
1-6
2
1-6
2
1-6
2
1-6
2
2
2
1-6
2
1-6
2
2
1-6
2
2
2
1-6
2
1-6
2
1-6
1-6
1-6
3
1-6
3
1-6
2
1-6
2
1-6
1-6
1-6
1-6
2
1-6
2
1-6
2
1-6
2
1-6
1-6
2-6
2-6
3-10
6-10
в каждом случае присутствия, R независимо представляет собой галоген, -CN, -NO, -N, -SOH, -SOH, -OH, -OC алкил, -ON(C алкил), -N(C алкил), -N(C алкил)X, -NH(C алкил)X, -NH(C алкил)X, -NHX, -N(OC алкил)(C алкил), -N(OH)(C алкил), -NH(OH), -SH, -SC алкил, -SS(C алкил), -C(=O)(C алкил), -COH, -CO(C алкил), -OC(=O)(C алкил), -OCO(C алкил), -C(=O)NH, -C(=O)N(C алкил), -OC(=O)NH(C алкил), -NHC(=O)(C алкил), -N(C алкил)C(=O)( C алкил), -NHCO(C алкил), -NHC(=O)N(C алкил), -NHC(=O)NH(C алкил), -NHC(=O)NH, -C(=NH)O(C алкил), -OC(=NH)(C алкил), -OC(=NH)OC алкил, -C(=NH)N(C алкил), -C(=NH)NH(C алкил), -C(=NH)NH, -OC(=NH)N(C алкил), -OC(NH)NH(C алкил), -OC(NH)NH, -NHC(NH)N(C алкил), -NHC(=NH)NH, -NHSO(C алкил), -SON(C алкил), -SONH(C алкил), -SONH,-SOC алкил, -SOOC алкил, -OSOC алкил, -SOC алкил, -Si(C алкил), -OSi(C алкил) -C(=S)N(C алкил), C(=S)NH(C алкил), C(=S)NH, -C(=O)S(C алкил), -C(=S)SC алкил, -SC(=S)SC алкил, -P(=O)(OC алкил), -P(=O)(C алкил), -OP(=O)(C алкил), -OP(=O)(OC алкил), C алкил, C пергалогеналкил, C алкенил, C алкинил, C карбоциклил, C арил, 3-10 членный гетероциклил, 5-10 членный гетероарил; или два геминальных заместителя R могут быть объединены с образованием =O или =S; где X представляет собой противоион.
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
2−
2−
3−
2−
2−
2−
3
4
2
4
4
4
4
6
6
6
3
2
6
3
4
4
3
3
4
11
12
11
5
6
3
4
4
,
4
7
4
2
3
"Противоион" или "анионный противоион" представляет собой отрицательно запряженную группу, ассоциированную с положительно заряженной группой для сохранения электронейтральности. Анионный противоион может быть одновалентным (то есть, включающим один формальный отрицательный заряд). Анионный противоион может быть также многовалентным (то есть, включающим более чем один формальный отрицательный заряд), например, двухвалентным или трехвалентным. Примеры противоионов включают галогенидные ионы (например, F, Cl, Br, I), NO, ClO, OH, HPO, HSO, сульфонатные ионы (например, метансульфонат, трифторметансульфонат, п-толуолсульфонат, бензолсульфонат, 10-камфорсульфонат, нафталин-2-сульфонат, нафталин-1-сульфоновая кислота-5-сульфонат, этан-1-сульфоновая кислота-2-сульфонат, и другие подобные противоионы), карбоксилатные ионы (например, ацетат, пропаноат, бензоат, глицерат, лактат, тартрат, гликолат, глюконат, и другие подобные ионы), BF, PF, PF, AsF, SbF, B[3,5-(CF)CH]], BPh, Al(OC(CF)), и карборановые ионы (например, CBH или (HCBMeBr)). Примеры противоионов, которые могут быть многовалентными, включают CO, HPO, POBO, SO, SO, карбоксилатные анионы (например, тартрат, цитрат, фумарат, малеат, малат, малонат, глюконат, сукцинат, глутарат, адипат, пимелат, суберат, азелат, себацинат, салицилат, фталаты, аспартат, глутамат, и другие подобные противоионы), и карбораны.
"Гало" или "галоген" относится к фтору (фтор, -F), хлору (хлор, -Cl), брому (бром, -Br) или йоду (йод, -I).
aa
aa
bb
bb
aa
bb
aa
bb
bb
bb
aa
bb
aa
aa
aa
bb
2
2
2
2
2
"Ацил" относится к фрагменту, выбранному из группы, состоящей из -C(=O)R,-CHO, -COR, -C(=O)N(R), -C(=NR)R, -C(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -C(=O)NRSOR, -C(=S)N(R), -C(=O)SR или -C(=S)SR, где R и R определены в изобретении.
aa
cc
aa
cc
aa
aa
bb
aa
cc
aa
cc
cc
cc
cc
cc
aa
cc
cc
cc
cc
aa
cc
cc
dd
aa
bb
cc
dd
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
1-10
1-10
2-10
2-10
3-10
6-14
Атомы азота могут быть замещенными или незамещенными, если это не противоречит правилам валентности, и включают первичные, вторичные, третичные и четвертичные атомы азота. Примеры заместителей для атома азота включают, но этим не ограничивая, водород, -OH, -OR, -N(R), -CN, -C(=O)R, -C(=O)N(R), -COR, -SOR, -C(=NR)R, -C(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -SON(R), -SOR, -SOOR, -SOR, -C(=S)N(R), -C(=O)SR, -C(=S)SR, -P(=O)(OR), -P(=O)(R),-P(=O)(N(R)), C алкил, C пергалогеналкил, C алкенил, C алкинил, C карбоциклил, 3-14 членный гетероциклил, C арил и 5-14 членный гетероарил, или две группы R, присоединенные к атому азота, объединяют с образованием 3-14 членного гетероциклильного или 5-14 членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R, и где R, R, Rи R определены выше.
aa
cc
aa
cc
aa
aa
cc
aa
cc
aa
cc
cc
cc
cc
cc
aa
cc
cc
cc
dd
aa
bb
cc
dd
rd
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
1-10
2-10
2-10
3-10
6-14
В конкретных вариантах осуществления, заместитель, присутствующий на атоме азота, является защитной группой для азота (также называемой защитной группой для аминогруппы). Защитные группы для азота включают, но этим не ограничивая, -OH, -OR, -N(R), -C(=O)R, -C(=O)N(R), -COR, -SOR, -C(=NR)R, -C(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -SON(R), -SOR, -SOOR, -SOR, -C(=S)N(R), -C(=O)SR, -C(=S)SR, C алкильные (например, аралкильные), C алкенильные, C алкинильные, C карбоциклильные, 3-14 членные гетероциклильные, C арильные и 5-14 членные гетероарильные группы, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, аралкил, арил и гетероарил независимо замещен с помощью 0, 1, 2, 3, 4 или 5 групп R, и где R, R, Rи R определены выше. Защитные группы для азота хорошо известны и включают группы, описанные более подробно в монографии Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3 edition, John Wiley & Sons, 1999, содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
aa
Например, защитные группы для азота, такие как амидные группы (например, -C(=O)R), включают, но этим не ограничивая, формамид, ацетамид, хлорацетамид, трихлорацетамид, трифторацетамид, фенилацетамид, 3-фенилпропанамид, пиколинамид, 3-пиридилкарбоксамид, производное N-бензоилфенилаланила, бензамид, п-фенилбензамид, o-нитрофенилацетамид, o-нитрофенокси-ацетамид, ацетоацетамид, (Nʽ-дитиобензилоксиациламино)ацетамид, 3-(п-гидроксифенил)пропанамид, 3-(o-нитрофенил)пропанамид, 2-метил-2-(o-нитрофенокси)пропанамид, 2-метил-2-(o-фенилазо-фенокси)пропанамид, 4-хлорбутанамид, 3-метил-3-нитробутанамид, o-нитроциннамид, производное N-ацетилметионина, o-нитробензамид и o-(бензоилоксиметил)бензамид.
aa
Защитные группы для азота, такие как карбаматные группы (например, -C(=O)OR), включают, но этим не ограничивая, метилкарбамат, этилкарбамат, 9-флуоренилметилкарбамат (Fmoc), 9-(2-сульфо)флуоренилметилкарбамат, 9-(2,7-дибром)флуоренилметил-карбамат, 2,7-дитретбутил-[9-(10,10-диоксо-10,10,10,10-тетра-гидротиоксантил)]метилкарбамат (DBD-Tmoc), 4-метоксифенацил- карбамат (Phenoc), 2,2,2-трихлорэтилкарбамат (Troc), 2-триметилсилилэтилкарбамат (Teoc), 2-фенилэтилкарбамат (hZ), 1-(1-адамантил)-1-метилэтилкарбамат (Adpoc), 1,1-диметил-2-галогенэтилкарбамат, 1,1-диметил-2,2-дибромэтилкарбамат (DB-t-BOC), 1,1-диметил-2,2,2-трихлорэтилкарбамат (TCBOC), 1-метил-1-(4-бифенилил)этилкарбамат (Bpoc), 1-(3,5-дитретбутилфенил)-1-метилэтилкарбамат (t-Bumeoc), 2-(2ʽ- и 4ʽ-пиридил)этилкарбамат (Pyoc), 2-(N, N-дициклогексилкарбоксамидо)этилкарбамат, третбутилкарбамат (BOC или Boc), 1-адамантилкарбамат (Adoc), винилкарбамат (Voc), аллилкарбамат (Alloc), 1-изопропилаллил- карбамат (Ipaoc), циннамилкарбамат (Coc), 4-нитроциннамил- карбамат (Noc), 8-хинолилкарбамат, N-гидроксипиперидинил- карбамат, алкилдитиокарбамат, бензилкарбамат (Cbz), п-метокси-бензилкарбамат (Moz), п-нитробензилкарбамат, п-бромбензил- карбамат, п-хлорбензилкарбамат, 2,4-дихлорбензилкарбамат, 4-метилсульфинилбензилкарбамат (Msz), 9-антрилметилкарбамат, дифенилметилкарбамат, 2-метилтиоэтилкарбамат, 2-метил-сульфонилэтилкарбамат, 2-(п-толуолсульфонил)этилкарбамат, [2-(1,3-дитианил)]метилкарбамат (Dmoc), 4-метилтиофенилкарбамат (Mtpc), 2,4-диметилтиофенилкарбамат (Bmpc), 2-фосфониоэтил- карбамат (Peoc), 2-трифенилфосфониоизопропилкарбамат (Ppoc), 1,1-диметил-2-цианоэтилкарбамат, м-хлор-п-ацилоксибензилкарбамат, п-(дигидроксиборил)бензилкарбамат, 5-бензизоксазолилметил- карбамат, 2-(трифторметил)-6-хромонилметилкарбамат (Tcroc), м-нитрофенилкарбамат, 3,5-диметоксибензилкарбамат, o-нитробензил- карбамат, 3,4-диметокси-6-нитробензилкарбамат, фенил(o-нитро-фенил)метилкарбамат, третамилкарбамат, S-бензилтиокарбамат, п-цианобензилкарбамат, циклобутилкарбамат, циклогексилкарбамат, циклопентилкарбамат, циклопропилметилкарбамат, п-децилокси-бензилкарбамат, 2,2-диметоксиацилвинилкарбамат, o-(N, N-диметил-карбоксамидо)бензилкарбамат, 1,1-диметил-3-(N, N-диметил-карбоксамидо)пропилкарбамат, 1,1-диметилпропинилкарбамат, ди(2-пиридил)метилкарбамат, 2-фуранилметилкарбамат, 2-йодэтил- карбамат, изоборнилкарбамат, изобутилкарбамат, изоникотинил- карбамат, п-(пʽ-метоксифенилазо)бензилкарбамат, 1-метил-циклобутилкарбамат, 1-метилциклогексилкарбамат, 1-метил-1-циклопропилметилкарбамат, 1-метил-1-(3,5-диметоксифенил)этил- карбамат, 1-метил-1-(п-фенилазофенил)этилкарбамат, 1-метил-1-фенилэтилкарбамат, 1-метил-1-(4-пиридил)этилкарбамат, фенил- карбамат, п-(фенилазо)бензилкарбамат, 2,4,6-тритретбутилфенил- карбамат, 4-(триметиламмоний)бензилкарбамат и 2,4,6-триметил-бензилкарбамат.
2
aa
Защитные группы для азота, такие как сульфонамидные группы (например, -S(=O)R), включают, но этим не ограничивая, п-толуолсульфонамид (Ts), бензолсульфонамид, 2,3,6,-триметил-4-метоксибензолсульфонамид (Mtr), 2,4,6-триметоксибензол-сульфонамид (Mtb), 2,6-диметил-4-метоксибензолсульфонамид (Pme), 2,3,5,6-тетраметил-4-метоксибензолсульфонамид (Mte), 4-метокси-бензолсульфонамид (Mbs), 2,4,6-триметилбензолсульфонамид (Mts), 2,6-диметокси-4-метилбензолсульфонамид (iMds), 2,2,5,7,8-пента-метилхроман-6-сульфонамид (Pmc), метансульфонамид (Ms), β-триметилсилилэтансульфонамид (SES), 9-антраценсульфонамид, 4-(4ʽ,8ʽ-диметоксинафтилметил)бензолсульфонамид (DNMBS), бензил-сульфонамид, трифторметилсульфонамид и фенацилсульфонамид.
Другие защитные группы для азота включают, но этим не ограничивая, производное фенотиазинил-(10)-ацила, производное Nʽ-п-толуолсульфониламиноацила, производное Nʽ-фениламинотиоацила, производное N-бензоилфенилаланила, производное N-ацетилметионина, 4,5-дифенил-3-оксазолин-2-он, N-фталимид, N-дитиасукцинимид (Dts), N-2,3-дифенилмалеимид, N-2,5-диметилпиррол, аддукт N-1,1,4,4-тетраметилдисилилазациклопентана (STABASE), 5-замещенный 1,3-диметил-1,3,5-триазациклогексан-2-он, 5-замещенный 1,3-дибензил-1,3,5-триазациклогексан-2-он, 1-замещенный 3,5-динитро-4-пиридон, N-метиламин, N-аллиламин, N-[2-(триметилсилил)этокси]метиламин (SEM), N-3-ацетоксипропиламин, N-(1-изопропил-4-нитро-2-оксо-3-пироолин-3-ил)амин, четвертичные аммониевые соли, N-бензиламин, N-ди(4-метоксифенил)метиламин, N-5-дибензосубериламин, N-трифенилметиламин (Tr), N-[(4-метокси-фенил)дифенилметил]амин (MMTr), N-9-фенилфлуорениламин (PhF), N-2,7-дихлор-9-флуоренилметиленамин, N-ферроценилметиламин (Fcm), Nʽ-оксид N-2-пиколинамина, N-1,1-диметилтиометиленамин, N-бензилиденамин, N-п-метоксибензилиденамин, N-дифенилметиленамин, N-[(2-пиридил)мезитил]метиленамин, N-(Nʽ,Nʽ-диметиламинометилен)-амин, N, Nʽ-изопропилидендиамин, N-п-нитробензилиденамин, N-салицилиденамин, N-5-хлорсалицилиденамин, N-(5-хлор-2-гидрокси-фенил)фенилметиленамин, N-циклогексилиденамин, N-(5,5-диметил-3-оксо-1-циклогексенил)амин, производное N-борана, производное N-дифенилбориновой кислоты, N-[фенил(пентаацилхром- или вольфрам)ацил]амин, хелат N-меди, хелат N-цинка, N-нитроамин, N-нитрозоамин, N-оксид амина, дифенилфосфинамид (Dpp), диметилтиофосфинамид (Mpt), дифенилтиофосфинамид (Ppt), диалкилалкилфосфорамидаты, дибензилфосфорамидат, дифенил- фосфорамидат, бензолсульфенамид, o-нитробензолсульфенамид (Nps), 2,4-динитробензолсульфенамид, пентахлорбензолсульфенамид, 2-нитро-4-метоксибензолсульфенамид, трифенилметилсульфенамид и 3-нитропиридинсульфенамид (Npys).
aa
aa
aa
aa
bb
bb
aa
bb
aa
bb
bb
aa
aa
aa
cc
cc
+
−
cc
cc
+
−
aa
cc
bb
−
aa
bb
cc
rd
2
2
2
2
3,
2
3
2
3
2
2
2
2
Примеры заместителей для атома кислорода включают, но этим не ограничивая, -R, -C(=O)SR, -C(=O)R, -COR, -C(=O)N(R), -C(=NR)R, -C(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -S(=O)R, -SOR, -Si(R)-P(R), -P(R)X, −P(OR), −P(OR)X, -P(=O)(R), -P(=O)(OR) и -P(=O)(N(R)), где X, R, R и R определены в изобретении. В конкретных вариантах осуществления, заместитель для атома кислорода, присутствующий на атоме кислорода, является защитной группой для кислорода (также называемой защитной группой для гидроксильной группы). Защитные группы для кислорода хорошо известны и включают группы, описанные более подробно в монографии Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3 edition, John Wiley & Sons, 1999, содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее. Примеры защитных групп для кислорода включают, но этим не ограничивая, метил, третбутилоксикарбонил (BOC или Boc), метоксилметил (MOM), метилтиометил (MTM), третбутилтиометил, (фенилдиметилсилил)метоксиметил (SMOM), бензилоксиметил (BOM), п-метоксибензилоксиметил (PMBM), (4-метоксифенокси)метил (p-AOM), гваяколметил (GUM), третбутоксиметил, 4-пентенилоксиметил (POM), силоксиметил, 2-метоксиэтоксиметил (MEM), 2,2,2-трихлорэтокси-метил, бис(2-хлорэтокси)метил, 2-(триметилсилил)этоксиметил (SEMOR), тетрагидропиранил (THP), 3-бромтетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, 1-метоксициклогексил, 4-метокситетрагидро-пиранил (MTHP), 4-метокситетрагидротиопиранил, 4-метокси-тетрагидротиопиранила S, S-диоксид, 1-[(2-хлор-4-метил)фенил]-4-метоксипиперидин-4-ил (CTMP), 1,4-диоксан-2-ил, тетрагидро-фуранил, тетрагидротиофуранил, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-октагидро-7,8,8-триметил-4,7-метанобензофуран-2-ил, 1-этоксиэтил, 1-(2-хлорэтокси)этил, 1-метил-1-метоксиэтил, 1-метил-1-бензилоксиэтил, 1-метил-1-бензилокси-2-фторэтил, 2,2,2-трихлорэтил, 2-триметил-силилэтил, 2-(фенилселенил)этил, третбутил, аллил, п-хлорфенил, п-метоксифенил, 2,4-динитрофенил, бензил (Bn), п-метоксибензил, 3,4-диметоксибензил, o-нитробензил, п-нитробензил, п-галоген-бензил, 2,6-дихлорбензил, п-цианобензил, п-фенилбензил, 2-пиколил, 4-пиколил, 3-метил-2-пиколил N-оксидо, дифенилметил, п, пʽ-динитробензгидрил, 5-дибензосуберил, трифенилметил, α-нафтилдифенилметил, п-метоксифенилдифенилметил, ди(п-метокси-фенил)фенилметил, три(п-метоксифенил)метил, 4-(4′-бромфенацил-оксифенил)дифенилметил, 4,4′,4″-трис(4,5-дихлорфталимидофенил)-метил, 4,4′,4″-трис(левулиноилоксифенил)метил, 4,4′,4″-трис(бензоилоксифенил)метил, 3-(имидазол-1-ил)бис(4′,4″-диметоксифенил)метил, 1,1-бис(4-метоксифенил)-1′-пиренилметил, 9-антрил, 9-(9-фенил)ксантенил, 9-(9-фенил-10-оксо)антрил, 1,3-бензодисульфуран-2-ил, бензизотиазолил S, S-диоксидо, триметилсилил (TMS), триэтилсилил (TES), триизопропилсилил (TIPS), диметилизопропилсилил (IPDMS), диэтилизопропилсилил (DEIPS), диметилгексилсилил, третбутилдиметилсилил (TBDMS), третбутилдифенилсилил (TBDPS), трибензилсилил, три-п-ксилилсилил, трифенилсилил, дифенилметилсилил (DPMS), третбутилметокси-фенилсилил (TBMPS), формиат, бензоилформиат, ацетат, хлорацетат, дихлорацетат, трихлорацетат, трифторацетат, метоксиацетат, трифенилметоксиацетат, феноксиацетат, п-хлорфеноксиацетат, 3-фенилпропионат, 4-оксопентаноат (левулинат), 4,4-(этилендитио)пентаноат (левулиноилдитиоацеталь), пивалоат, адамантоат, кротонат, 4-метоксикротонат, бензоат, п-фенилбензоат, 2,4,6-триметилбензоат (мезитоат), алкилметилкарбонат, 9-флуоренилметилкарбонат (Fmoc), алкилэтилкарбонат, алкил 2,2,2-трихлорэтилкарбонат (Troc), 2-(триметилсилил)этилкарбонат (TMSEC), 2-(фенилсульфонил)этилкарбонат (Psec), 2-(трифенил-фосфонио)этилкарбонат (Peoc), алкилизобутилкарбонат, алкилвинил- карбонат, алкилаллилкарбонат, алкил-п-нитрофенилкарбонат, алкил- бензилкарбонат, алкил-п-метоксибензилкарбонат, алкил-3,4-диметоксибензилкарбонат, алкил o-нитробензилкарбонат, алкил п-нитробензилкарбонат, алкил S-бензилтиокарбонат, 4-этокси-1-нафтилкарбонат, метилдитиокарбонат, 2-йодбензоат, 4-азидобутират, 4-нитро-4-метилпентаноат, o-(дибромметил)бензоат, 2-формил-бензолсульфонат, 2-(метилтиометокси)этил, 4-(метилтиометокси)-бутират, 2-(метилтиометоксиметил)бензоат, 2,6-дихлор-4-метилфеноксиацетат, 2,6-дихлор-4-(1,1,3,3-тетраметилбутил)-феноксиацетат, 2,4-бис(1,1-диметилпропил)феноксиацетат, хлор-дифенилацетат, изобутират, моносукциноат, (E)-2-метил-2-бутеноат, o-(метоксиацил)бензоат, α-нафтоат, нитрат, алкил N, N,Nʽ,Nʽ-тетраметилфосфородиамидат, алкил N-фенилкарбамат, борат, диметилфосфинoтиоил, алкил 2,4-динитрофенилсульфенат, сульфат, метансульфонат (мезилат), бензилсульфонат и тозилат (Ts).
aa
bb
aa
aa
aa
bb
bb
aa
bb
aa
bb
bb
aa
aa
aa
cc
cc
aa
aa
cc
bb
bb
aa
bb
cc
rd
2
2
2
2
2
3,
2
3
2
2
2
2
2
2
В конкретных вариантах осуществления, заместитель, присутствующий на атоме серы, является защитной группой для серы (также называемой защитной группы для тиола). Защитные группы для серы включают, но этим не ограничивая, -R, -N(R), -C(=O)SR, -C(=O)R, -COR, -C(=O)N(R), -C(=NR)R, -C(=NR)OR, -C(=NR)N(R), -S(=O)R, -SOR, -Si(R)-P(R), -P(R), -P(=O)R, -P(=O)(R), -P(=O)(OR), -P(=O)N(R), и -P(=O)(NR), где R, R и R определены в изобретении. Защитные группы для серы хорошо известны и включают группы, описанные более подробно в монографии Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3 edition, John Wiley & Sons, 1999, содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
Используемый в изобретении термин "соль" относится ко всем возможным солям и включает фармацевтически приемлемые соли.
Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые по результатам тщательной медицинской оценки могут применяться в случаях их контакта с тканями людей и низших животных без проявления чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и других подобных проявлений и которые удовлетворяют приемлемому соотношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны. Например, фармацевтически приемлемые соли подробно описаны в публикации Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, содержание которой включено в изобретение путем ссылки на нее.
+
-
1-4
4
Фармацевтически приемлемые соли описанных в изобретении соединений включают соли, образованные из подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых солей присоединения нетоксичных кислот являются соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и хлорная кислота, или органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или образованные другими методами, известными в данной области, такими как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипатные, альгинатные, аскорбатные, аспартатные, бензолсульфонатные, бензоатные, бисульфатные, боратные, бутиратные, камфоратные, камфорсульфонатные, цитратные, циклопентанпропионатные, диглюконатные, додецилсульфатные, этансульфонатные, формиатные, фумаратные, глюкогептонатные, глицерофосфатные, глюконатные, полусульфатные, гептаноатные, гексаноатные, гидроиодидные, 2-гидрокси-этансульфонатные, лактобионатные, лактатные, лауратные, лаурилсульфатные, малатные, малеатные, малонатные, метансульфонатные, 2-нафталинсульфонатные, никотинатные, нитратные, олеатные, оксалатные, пальмитатные, памоатные, пектинатные, персульфатные, 3-фенилпропионатные, фосфатные, пикратные, пивалатные, пропионатные, стеаратные, сукцинатные, сульфатные, тартратные, тиоцианатные, п-толуолсульфонатные, ундеканоатные, валератные соли и другие подобные соли. Соли, образованные из соответствующих оснований, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, аммония и N(C алкил). Типичные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и другие подобных металлов. Кроме того, фармацевтически приемлемые соли включают, когда это необходимо, соли нетоксичных катионов аммония, четвертичного аммония и амина, образованные с использованием противоионов, таких как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, низший алкилсульфонат и арилсульфонат.
Термины "ингибирование", "ингибирующий", "ингибировать" или "ингибитор" относятся к способности соединения формулы (I) снижать, замедлять, останавливать или предотвращать активность конкретного биологического процесса в клетке по сравнению с плацебо.
Термин "субъект", которому предполагается вводить лекарственное средство, относится к человеку (то есть, мужчине или женщине любой возрастной группы, например, пациенту детского возраста (например, младенцу, ребенку или подростку) или взрослому человеку (например, совершеннолетнему молодому человеку, человеку среднего возраста или пожилому человеку)) или к низшему примату. Термин "пациент" относится к человеку, для которого необходимо лечении имеющегося у него заболевания.
Термины "вводить" или "введение" относятся к имплантированию, всасыванию, проглатыванию, инъецированию, ингаляции или же к введению иным способом описанного в изобретении соединения формулы (I) или его композиции субъекту.
Термины "лечение" и "лечить" относятся к регрессу, облегчению, отсрочке начала или замедлению прогрессирования описанного в изобретении заболевания. В некоторых вариантах осуществления, лечения может быть назначено после развития или обнаружения одного или более признаков или симптомов заболевания. В других вариантах осуществления, лечение может быть назначено при отсутствии признаков или симптомов заболевания. Например, лечение может быть назначено предрасположенному к заболеванию субъекту до появления симптомов (например, учитывая наличие симптомов в анамнезе и/или учитывая воздействия патогена), для того чтобы отсрочить или предотвратить возникновение заболевания. Лечение также может быть продолжено после устранения симптомов, например, для отсрочки или предотвращения повторного проявления симптомом.
Термины "состояние" "заболевание" и "нарушение" используются в изобретении взаимозаменяемо.
"Эффективное количество" описанного в изобретении соединения формулы (I) относится к количеству, достаточному для достижения желаемого биологического ответа (то есть, для лечение болезненного состояния). Для обычных специалистов в этой области является очевидным, что эффективное количество описанного в изобретении соединения формулы (I) может изменяться в зависимости от таких факторов, как ожидаемый биологический результат, фармакокинетика соединения формулы (I), подвергаемое лечению состояние, способ введения, возраст и состояние здоровья субъекта. В конкретных вариантах осуществления, эффективное количество является терапевтически эффективным количеством. В конкретных вариантах осуществления, эффективное количество является профилактически эффективным количеством. В конкретных вариантах осуществления, эффективным количеством является количество описанного в изобретении соединения формулы (I) в разовой дозе. В конкретных вариантах осуществления, эффективным количеством является суммарное количество описанного в изобретении соединения формулы (I) в разделенных многократных дозах.
"Терапевтически эффективное количество" описанного в изобретении соединения формулы (I) представляет собой количество, которое является достаточным для достижения положительного терапевтического эффекта при лечении болезненного состояния или для отсрочки проявления или минимизации одного или более симптомов, связанных с болезненным состоянием. Терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) обозначает количество терапевтического средства, в отдельности или в комбинации с другими видами терапии, которое обеспечивает положительный терапевтический эффект при лечении болезненного состояния. Термин "терапевтически эффективное количество" может включать количество, которое позволяет улучшать суммарные результаты терапии, уменьшать или исключать симптомы, признаки или причины состояния и/или повышать терапевтическую эффективность другого терапевтического средства.
"Профилактически эффективное количество" описанного в изобретении соединения формулы (I) представляет собой количество, которое является достаточным для предотвращения возникновения болезненного состояния или одного или более симптомов, связанных с болезненным состоянием, или для предотвращения его повторного проявления. Профилактически эффективное количество соединения формулы (I) обозначает количество терапевтического средства, в отдельности или в комбинации с другими средствами, которое обеспечивает положительный профилактический эффект при предотвращении возникновения болезненного состояния. Термин "профилактически эффективное количество" может включать количество, которое позволяет улучшать общий профилактический эффект или усиливать профилактическую эффективность другого профилактического средства.
Термин "психоневрологическое нарушение" включает неврологические заболевания или психические расстройства или нарушения ЦНС (центральной нервной системы), или относится к расстройству, которое включает либо психиатрические симптомы или синдромы, либо синдромы, вызванные органическими нарушениями головного мозга. Основные характеристики психоневрологических симптомов включают возникновение различных психиатрических симптомов или вероятность развития ранних церебральных симптомов. Например, психоневрологическое нарушение может включать, но этим не ограничивая, шизофрению, психотические расстройства, болезнь Альцгеймера, деменцию, лобно-височную деменцию, умеренные когнитивные нарушения, легкую форму забывчивости, закрытую травму головы, расстройство аутистического спектра, синдром Аспергера, синдром дефицита внимания с гиперактивностью, обсессивно-компульсивное расстройство, тиковые расстройства, нарушения способности к обучению в детском возрасте, предменструальный синдром, депрессивное состояние, суицидальное настроение и/или поведение, биполярное расстройство, тревожные расстройства, посттравматическое стрессовое расстройство, хроническую боль, нарушения пищевого поведения, наркотические и лекарственные зависимости, личностные нарушения, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, рассеянный склероз или боковой амиотрофический склероз.
Используемый в изобретении термин "шизофрения" относится к психическому расстройству, которое включает, по меньшей мере, два из следующих расстройств: бредовые идеи, галлюцинации, дезорганизованную речь, чрезвычайно дезорганизованное или кататоническое поведение или негативные симптомы. Пациенты могут быть диагностированы как страдающие шизофренией путем использования классификации в соответствии с Диагностическим и статистическим руководством по психическим расстройствам DSMIV (APA, 1994, Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (Fourth Edition), Washington, D.C.) или критериев DSMV (APA, 2013, Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (Fourth Edition), Washington, D.C.).
Используемый в изобретении термин "личностные нарушения" относятся к психическим нарушениям, которые характеризуются устойчивыми недостаточно адаптированными формами поведения, когнитивной деятельности и внутренних переживаний, проявляемыми во многих ситуациях и значительно отклоняющимися от тех форм, которые приняты в сфере духовной деятельности человека. Эти формы проявляются рано, они не поддаются адаптации и связаны со значительным дистрессом или ограничением физических и умственных возможностей. Личностные нарушения включают, но этим не ограничивая, параноидальные, шизофренические, шизотипические, антисоциальные, пограничные, истерические, нарциссические, неконтактные, зависимые и обсессивно-компульсивные личностные нарушения.
Термины "продукты диетического питания" или "продукты лечебного питания" относятся к любому типу жидких и твердых/полутвердых материалов, которые используют для питания людей и животных с целью улучшения основных поведенческих функций, состояний гиперактивности, тревоги, депрессии, сенсоромоторной фильтрации, с целью улучшения порога болевой чувствительности, функционирования памяти и/или когнитивного функционирования, показателя массы тела или с целью содействия лечению любого из упомянутых в изобретении заболеваний-мишеней. Термин "нутрицевтическая композиция" относится к композициям, содержащим компоненты из пищевых источников, которые обеспечивают дополнительное положительное воздействие на здоровье в дополнении к основной питательной ценности, обеспечиваемой пищевыми продуктами.
Термины "лечебное питание" или "продукт лечебного питания" относятся к продукту питания, приготовленному для потребления или энтерального введения, включающему продукт питания, который обычно применяют под руководством лечащего врача с целью проведения специальной диетотерапии заболевания-мишени, такого как описанные в изобретении заболевания. Композиция "продукта лечебного питания" может относится к композиции, которую специально приготавливают и подвергают обработке (в отличие от природных пищевых продуктов, используемых в их естественном состоянии) для пациента, нуждающегося в лечении (например, для людей, страдающих заболеванием, или для тех людей, которым требуется использование продукта в качестве основного активного средства для облегчения заболевания или состояния путем проведения специальной диетотерапии).
Далее будут изложены более подробно один или более вариантов осуществления изобретения. Другие характерные черты, объекты и преимущества изобретения станут очевидными при ознакомлении с подробным описанием, примерами и формулой изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фигуре 1 в графическом виде представлен пример дизайна эксперимента по исследованию локомоции в условиях открытого пространства.
На фигуре 2 в графическом виде представлены результаты спонтанной локомоции мышей после введения им соединения из примера 1.
На фигуре 3 в графическом виде представлен пример дизайна экспериментов по исследованию неограниченного пространства и преимпульсного ингибирования.
На фигуре 4 приведены диаграммы, демонстрирующие эффекты воздействия соединения из примера 1 на локомоцию мышей, которым вводили MK801.
На фигуре 5 приведена диаграмма, демонстрирующая эффекты воздействия соединения из примера 1 на преимпульсное ингибирование у мышей, которым вводили MK801.
На фигуре 6 приведена диаграмма, демонстрирующая эффекты воздействия соединения 56 на локомоцию мышей, которым вводили MK801.
На фигуре 7 приведена диаграмма, демонстрирующая эффекты воздействия соединения 56 на преимпульсное ингибирование у мышей, которым вводили MK801.
На фигуре 8 приведена диаграмма, демонстрирующая эффекты воздействия соединения 78 на локомоцию мышей, которым вводили MK801.
На фигуре 9 приведена диаграмма, демонстрирующая эффекты воздействия соединения 78 на преимпульсное ингибирование у мышей, которым вводили MK801.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предлагаются соединения формулы (I), способные эффективно ингибировать оксидазу D-аминокислот (DAAO), и их применение для ингибирования, лечении и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения.
I. Соединения и композиции
В одном аспекте настоящего изобретения представлены характерные признаки соединения формулы (I):
или его фармацевтически приемлемой соли, где
каждый из A, B, C, D и E независимо представляет собой C, N, N-H, O, S, или отсутствует;
изображает одинарную или двойную химическую связь;
каждый из X, Y и Z, независимо представляет собой арил, гетероарил, аралкил, H, или отсутствует;
1
2
2
2-10
2-10
2-10
2
n
2
каждый из L и L, независимо представляет собой фрагмент, выбранный из O, CH, C=O, C алкила, C алкенила, C алкинила, -((CH)-W)-, где n=0, 1, 2, 3, 4 или 5, и W представляет собой O или S, или отсутствует; и когда L отсутствует, Z представляет собой арил или гетероарил, конденсированный с B  C.
В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I), D и E независимо представляют собой углерод и соединены через двойную связь, и каждый из A, B и C независимо представляет собой C, N, N-H, O или S.
В некоторых вариантах осуществления, фрагмент  соединения формулы (I) представляет собой  или  . В некоторых вариантах осуществления, фрагмент  соединения формулы (I) представляет собой  . В некоторых вариантах осуществления, фрагмент  соединения формулы (I) представляет собой  . В некоторых вариантах осуществления, фрагмент  соединения формулы (I) представляет собой  .
1
2
2
2-10
2
n
1
2
2
2
1
2
1
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I), L и L независимо выбирают из CH, C алкила, -((CH)-W)-, где n=0, 1, 2, 3, 4 или 5, и W представляет собой O или S, или отсутствует. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)- или -(CH)-. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)-. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)-. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)-, -(CH)- или -(CH)S-. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)-. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)-. В некоторых вариантах осуществления, L представляет собой -(CH)S-.
2
2
В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I), L отсутствует, и Z представляет собой арил или гетероарил, конденсированный с B  C. В некоторых вариантах осуществления, L отсутствует, и Z представляет собой необязательно замещенный фенил, конденсированный с B  C с образованием фрагмента формулы:  .
В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (I), каждый из X, Y и Z независимо выбирают из бензила, пиридила, пиримидила, пиридазинила, пиразинила, пирролила, пиразолила, оксазолила, тиазолила, нафтила, фуропирролила, тианопирролила, индолила, или отсутствует. В некоторых вариантах осуществления, X представляет собой необязательно замещенный фенил. В некоторых вариантах осуществления, X представляет собой фенил, необязательно замещенный с помощью галогена. В некоторых вариантах осуществления, X представляет собой фенил, необязательно замещенный с помощью хлора или фтора. В некоторых вариантах осуществления, X имеет формулу:  ,  . В некоторых вариантах осуществления, X имеет формулу:  . В некоторых вариантах осуществления, X представляет собой нафтил. В некоторых вариантах осуществления, X имеет формулу:  . В некоторых вариантах осуществления, Y представляет собой  или  . В некоторых вариантах осуществления, Y представляет собой  . В некоторых вариантах осуществления, Y представляет собой  . В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой необязательно замещенный фенил или необязательно замещенный нафтил. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой необязательно замещенный фенил. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой необязательно замещенный нафтил. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой незамещенный нафтил. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой фенил, необязательно замещенный с помощью галогена. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой фенил, необязательно замещенный с помощью хлора или фтора. В некоторых вариантах осуществления, Z имеет формулу:  или  . В некоторых вариантах осуществления, Z имеет формулу:  . В некоторых вариантах осуществления, Z имеет формулу:  .
В некоторых вариантах осуществления, соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (I-a):
1
2
1
10
2
или его фармацевтически приемлемую соль, где B и F независимо представляют собой C или N; C представляет собой C, X и Z независимо представляют собой арил или гетероарил; каждый из L и L независимо представляет собой C-C фрагмент, или отсутствует; и когда L отсутствует, Z представляет собой арил или гетероарил, конденсированный с B=C. В некоторых вариантах осуществления, F представляет собой C. В некоторых вариантах осуществления, соединение формулы (I-a) имеет формулу:
, или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления, соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (I-b):
1
2
1
10
или его фармацевтически приемлемую соль, где X и Z каждый независимо представляет арил; и каждый из L и L независимо представляет собой C-C фрагмент.
В некоторых вариантах осуществления, соединение формулы (I) может быть одним из следующих соединений:
,
В некоторых вариантах осуществления, любое одно из соединений в примерах 1-26 или любое одно из соединений в таблице 1 представляет собой соединение по настоящему изобретению. Любое из описанных в изобретении соединений формулы (I) может быть приготовлено в форме фармацевтической композиции, нутрицевтической композиции, продукта диетического питания или продукта лечебного питания.
TM
TM
В некоторых примерах, описанная в изобретении композиция представляет собой фармацевтическую композицию, которая дополнительно включает фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или стабилизатор (Remington: The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. (2000) Lippincott Williams and Wilkins, Ed. K. E. Hoover). Приемлемые носители, вспомогательные вещества или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов при применяемых дозах и концентрациях и могут включать буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты, антиоксиданты, в том числе аскорбиновую кислоту и метионин, консерванты (такие как октадецилдиметилбензиламмония хлорид, гексаметония хлорид, бензалкония хлорид, бензетония хлорид, фенол, бутиловый или бензиловый спирт, алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехин, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол, бензоаты, сорбат и м-крезол), низкомолекулярные полипептиды (менее чем приблизительно 10 остатков), белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины, гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон, аминокислоты, такие как глицин, глютамин, аспарагин, гистидин, аргинин, серин, аланин или лизин, моносахариды, дисахариды и другие углеводы, в том числе глюкозу, маннозу или декстраны, хелатообразующие реагенты, такие как ЭДТА, сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит, солеобразующие противоионы, такие как натрий, комплексы металлов (например, комплексы Zn-белок) и/или неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN, PLURONICS или полиэтиленгликоль (PEG).
TM
В других примерах, описанная в изобретении фармацевтическая композиция может быть приготовлена в форме с замедленным высвобождением. Подходящие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащих дубильные кислоты, причем эти матрицы имеют форму профилированных изделий, например, пленок или микрокапсул. Примеры матриц с замедленным высвобождением включают полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтилметакрилат) или поливиниловый спирт, полилактиды (патентный документ U.S. Pat. No. 3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и этил-L-глутамата, неразлагаемый сополимер этилена и винилацетата, разлагаемые сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной кислоты, гликолевой кислоты и лейпролид ацетата), сахарозы ацетат изобутират и поли-D-(-)-3-гидроксимасляную кислоту.
Фармацевтические композиции, применяемые для in vivo введения, должны быть стерильными. Это легко достигается, например, фильтрацией через стерильные фильтрующие мембраны. Терапевтические композиции обычно помещают в контейнер со стерильным входным отверстием, например, в мешок для внутривенного раствора или флакон с пробкой, прокалываемой иглой для подкожных инъекций.
Описанные в изобретении фармацевтические композиции могут находиться в лекарственных формах с разовой дозой, таких как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, растворы или суспензии, или суппозитории, для перорального, парентерального или ректального введения, или введения путем ингаляции или инсуффляции, или для внутримышечного или внутримозгового введения.
Для приготовления твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент может быть смешан с фармацевтическим носителем, например, с традиционными ингредиентами для таблетирования, такими как кукурузный крахмал, лактоза, сахароза, сорбит, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния, дикальцийфосфат или камеди, и другими фармацевтическими разбавителями, например, с водой, для образования предварительно приготовленной твердой композиции, применяемой затем для формования, содержащей гомогенную смесь соединения по настоящему изобретению или его нетоксичную фармацевтически приемлемую соль. При упоминании этих предварительно приготовленных композиций в качестве гомогенных, подразумевается, что активный ингредиент равномерно распределен по всей композиции, в результате чего композицию можно легко разделить на одинаково эффективные лекарственные формы с разовой дозой, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Эту предварительно приготовленную твердую композицию затем разделяют на лекарственные формы с разовой дозой описанного выше типа, содержащие от 0,1 до примерно 500 мг активного ингредиента по настоящему изобретению. Таблетки или пилюли из этой новой композиции могут быть покрыты оболочкой или же компаундированы иным образом для получения лекарственной формы, позволяющей использовать преимущество пролонгированного действия. Например, таблетка или пилюля могут включать компонент внутренней дозы и компонент наружной дозы, причем последний находится в форме оболочки над первым компонентом. Два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который служит для противодействия распаду в желудке и позволяет внутреннему компоненту без изменений проходить в двенадцатиперстную кишку или задерживаться при высвобождении. Для таких энтеросолюбильных слоев или покрытий могут быть использованы различные материалы, такие как материалы, включающие ряд полимерных кислот и смеси полимерных кислот с такими материалами, как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.
TM
TM
Подходящие поверхностно-активные вещества включают, в частности, неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как полиоксиэтиленсорбитаны (например, Tween 20, 40, 60, 80 или 85) и другие сорбитаны (например, Span 20, 40, 60, 80 или 85). Композиции с поверхностно-активным веществом обычно включают от 0,05 до 5% поверхностно-активного вещества, и могут содержать от 0,1 до 2,5% поверхностно-активного вещества. Очевидно, что при необходимости, могут быть добавлены и другие ингредиенты, например маннит или другие фармацевтически приемлемые среды.
TM
TM
TM
TM
TM
Подходящие эмульсии могут быть приготовлены с использованием выпускаемых промышленностью жировых эмульсий, таких как Intralipid, Liposyn, Infonutrol, Lipofundin и Lipiphysan. Активный ингредиент может быть либо растворен в предварительно смешанной эмульсионной композиции, либо, в качестве варианта, он может быть растворен в масле (например, в соевом масле, сафлоровом масле, хлопковом масле, кунжутном масле, кукурузном масле или миндальном масле) и эмульсии, образованной при смешивании с фосфолипидом (например, с яичными фосфолипидами, соевыми фосфолипидами или соевым лецитином) и водой. Очевидно, что могут быть добавлены и другие ингредиенты, например, глицерин или глюкоза, для регулирования тоничности эмульсии. Применяемые эмульсии обычно содержат до 20% масла, например от 5 до 20%.
Фармацевтические композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых водных или органических растворителях или в их смесях, и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать указанные выше подходящие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. В некоторых вариантах осуществления, композиции вводят перорально или респираторно через нос для местного или системного воздействия.
Композиции, предпочтительно, в стерильных фармацевтически приемлемых растворителях могут распыляться путем использования газов. Распыленные растворы могут быть введены путем вдыхания непосредственно из распыляющего устройства, или распыляющее устройство может быть прикреплено к лицевой маске, палатке или аппарату для искусственной вентиляции легких с прерывистым дыханием с положительным давлением. Раствор, суспензию или порошковую композицию предпочтительно вводить перорально или назально с помощью устройств, которые доставляют лекарственную форму соответствующим способом.
В некоторых вариантах осуществления, описанные в изобретении композиции могут быть продуктом диетического питания, или могут быть продуктом диетического питания, который представляет собой любые виды жидких и твердых/полутвердых материалов, которые используются для питания людей и животных, для корректировки основных функций поведения, гиперактивности, тревожного состояния, депрессивного состояния, сенсоромоторной фильтрации, болевого порога, памяти и/или когнитивных функций, или для выполнения вспомогательной функции при лечении любого из указанных в изобретении заболеваний-мишеней (например, психоневрологического нарушения, в том числе описанных в изобретении психоневрологических нарушений). Продукт диетического питания может представлять собой пищевой продукт (например, напитки на основе чая, соки, безалкогольные напитки, кофе, молоко, желе, печенье, изделия из дробленого зерна, шоколад, закуски, экстракты трав, молочные продукты (например, мороженое и йогурт)), пищевую/диетическую добавку или нутрицевтическую композицию.
Описанный в изобретении продукт диетического питания может включать один или более съедобных носителей, которые обеспечивают продукту одно или несколько описанных в изобретении преимуществ. Примеры съедобных носителей включают крахмал, циклодекстрин, мальтодекстрин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, ксантановую камедь и их водные растворы. Другие примеры включают растворители, дисперсионные среды, покрытия, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты, консерванты (например, антибактериальные средства, противогрибковые средства), изотонические средства, замедляющие всасывание средства, стабилизаторы, желатин, связующие вещества, вспомогательные вещества, дезинтеграторы, смазывающие вещества, подсластители, ароматизаторы красители, и другие подобные материалы и их комбинации, известные любому специалисту в данной области. В некоторых примерах, описанные в изобретении продукты диетического питания могут дополнительно включать нейропротективные продукты, такие как рыбий жир, льняное масло и/или бензоат.
В некоторых примерах, продукт диетического питания представляет собой нутрицевтическую композицию, которая относится к композициям, содержащим компоненты из пищевых источников и обеспечивающим дополнительное положительное воздействие на здоровье в дополнение к основной питательной ценности, обнаруживаемой в пищевых продуктах. Описанная в изобретении нутрицевтическая композиция включает описанное в изобретении соединение формулы (I) и дополнительные ингредиенты и добавки, которые способствуют поддержанию хорошего здоровья и/или повышают стабильность и биологическую активность соединения формулы (I).
Воздействие нутрицевтических композиций может быть быстрым и/или кратковременным, или может способствовать в достижении описанных в изобретении долгосрочных целей лечения, таких как, например, корректировка основных функций поведения, гиперактивности, тревожного состояния, депрессивного состояния, сенсоромоторной фильтрации, болевого порога, памяти и/или когнитивных функций, например, у людей, которые уже имеют психоневрологическое нарушение или подвергаются риску возникновения психоневрологического нарушения. Эти нутрицевтические композиции могут содержаться в съедобном материале, например, в качестве пищевой добавки или фармацевтической композиции. В качестве пищевой добавки могут быть включены дополнительные питательные вещества, такие как витамины, минералы или аминокислоты. Композиция также может представлять собой напиток или пищевой продукт, например чай, безалкогольный напиток, сок, молоко, кофе, печенье, изделие из дробленого зерна, шоколад и закуску. При необходимости, композиция может быть подслащена путем добавления подсластителя, такого как сорбит, мальтит, гидрированный сироп глюкозы и гидролизат гидрированного крахмала, кукурузный сироп с высоким содержанием фруктозы, тростниковый сахар, свекловичный сахар, пектин или сукралоза.
Раскрытая в изобретении нутрицевтическая композиция может быть приготовлена в форме раствора. Например, нутрицевтическая композиция может быть приготовлена в среде, такой как буфер, растворитель, разбавитель, инертный носитель, масло или крем. В некоторых примерах, композиция присутствует в водном растворе, который необязательно содержит неводный сорастворитель, такой как спирт. Нутрицевтическая композиция может быть также приготовлена в форме порошка, пасты, желе, капсулы или таблетки. Лактоза и кукурузный крахмал обычно используются в качестве разбавителей для капсул и в качестве носителей для таблеток. Для формования таблеток обычно добавляют смазывающие средства, такие как стеарат магния.
Продукты диетического питания могут быть приготовлены для соответствующего способа введения, например, перорального введения. Композиция для перорального введения может, например, иметь форму таблеток или капсул, приготовленных традиционными методами с использованием соответствующих вспомогательных веществ, таких как связующие вещества (например, предварительно желатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон или гидроксипропилметилцеллюлоза), наполнители (например, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза или гидрофосфат кальция), смазывающие вещества (например, стеарат магния, тальк или диоксид кремния), дезинтегранты (например, картофельный крахмал или натрия крахмала гликолят) или смачивающие средства (например, лаурилсульфат натрия). Таблетки могут быть покрыты оболочкой с помощью методов, хорошо известных в данной области. Кроме того, лекарственные формы композиций для перорального введения включают жевательные резинки и другие жевательные формы.
В некоторых примерах, продукт диетического питания может быть приготовлен в жидкой форме, и один или несколько съедобных носителей могут представлять собой растворитель или дисперсионную среду, включающие, но этим не ограничивая, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль), липиды (например, триглицериды, растительные масла, липосомы) или их комбинации. Соответствующая текучесть может быть обеспечена, например, путем использования образующего покрытие вещества, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в результате диспергирования в носителях, таких как, например, жидкий полиол или липиды, путем использования поверхностно-активных веществ, таких как, например, гидроксипропилцеллюлоза, или их комбинаций. Во многих случаях целесообразно добавлять изотоническое средство, такое как, например, сахара, хлорид натрия или их комбинации.
Жидкие препараты для перорального введения могут иметь, например, форму растворов, сиропов или суспензий, или они могут быть приготовлены в форме сухого продукта для разведения водой или другой подходящей средой перед использованием. В одном варианте осуществления, жидкие препараты могут быть приготовлены для введения с фруктовым соком. Такие жидкие препараты могут быть приготовлены традиционными методами с использованием фармацевтически приемлемых добавок, таких как суспендирующие средства (например, сироп сорбита, производные целлюлозы или гидрогенизированные пищевые жиры), эмульгаторы (например, лецитин или аравийская камедь), неводные среды (например, миндальное масло, масляные эфиры, этиловый спирт или фракционированные растительные масла) и консерванты (например, метил- или пропил-п-гидроксибензоаты, бензоат или сорбат).
В конкретных вариантах осуществления, композиция представляет собой продукт лечебного питания, который может представлять собой пищевой продукт, приготовленный для потребления или введения энтерально. Такой пищевой продукт обычно применяют под наблюдением врача для проведения специальной диетотерапии описанного в изобретении заболевания-мишени. В некоторых случаях, такую композицию продукта лечебного питания специально приготавливают и подвергают обработке (в отличие от природных пищевых продуктов, используемых в их естественном состоянии) для пациента, нуждающегося в лечении (например, для людей, страдающих заболеванием, или для тех людей, которым требуется использование продукта в качестве основного активного средства для облегчения заболевания или состояния путем проведения специальной диетотерапии). В некоторых примерах, описанная в изобретении композиция продукта лечебного питания не относится к числу тех, которые лечащий врач просто рекомендует в качестве части общей диеты для лечения симптомов или снижения риска возникновения заболевания или состояния.
Любой из описанных в изобретении продуктов лечебного питания, включающий соединение формулы (I) и, по меньшей мере, один носитель (например, описанный в изобретении носитель), может быть приготовлен в форме жидкого раствора, порошка, батончика, капсулы-имплантанта, суспензии в подходящей жидкости или в подходящей эмульсии, как подробно описано ниже. По меньшей мере, один носитель, который может быть природного происхождения, либо синтетическим (не встречающимся в природе), может обеспечить одно или более положительных свойств соединению формулы (I) в композиции, например, стабильность, биодоступность и/или биологическую активность. Любой из описанных в изобретении носителей может быть использован для приготовления композиции продукта лечебного питания. В некоторых вариантах осуществления, композиция продукта лечебного питания может дополнительно включать один или несколько дополнительных ингредиентов, выбранных из группы, включающей, но этим не ограничивая, натуральные ароматизаторы, искусственные ароматизаторы, следовые количества и микроследовые количества основных минеральных веществ, минеральные вещества, витамины, овес, орехи, специи, молоко, яйцо, соль, муку, лецитин, ксантановую камедь и/или подсластители. Композиция продукта лечебного питания может быть помещена в подходящий контейнер, который может дополнительно содержать, по меньшей мере, дополнительное терапевтическое средство, такое как описанные в изобретении дополнительные терапевтические средства.
В конкретных вариантах осуществления, описанное в настоящем изобретении соединение формулы (I) вводят в фармацевтическую композицию в эффективном количестве. В конкретных вариантах осуществления, эффективным количеством является терапевтически эффективное количество (например, количество, которое является эффективным для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта, нуждающегося в этом). В конкретных вариантах осуществления, психоневрологическое нарушение представляет собой неврологическое нарушение, например, болезнь Альцгеймера. В конкретных вариантах осуществления, психоневрологическое нарушение представляет собой шизофрению. В конкретных вариантах осуществления, эффективным количеством является профилактически эффективное количество (например, количество, которое является эффективным для ингибирования оксидазы D-аминокислот (DAAO) у субъекта, нуждающегося в этом, или количество, которое является эффективным для лечения или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта, нуждающегося в этом).
Описанные в изобретении фармацевтические композиции могут быть приготовлены любым известным в области фармакологии методом. Обычно, такие методы приготовления включают связывание описанного в изобретении соединения формулы (I) (то есть, "активного ингредиента") с носителем или вспомогательным веществом, и/или с одним или более другими вспомогательными ингредиентами, и затем, если это необходимо и/или желательно, формование и/или расфасовку продукта в требуемую лекарственную форму с разовой дозой или в многодозовую форму.
Фармацевтические композиции могут быть приготовлены, расфасованы и/или реализованы на рынке фармацевтических препаратов нерасфасованными в форме разовой дозы и/или форме множества разовых доз. "Разовая доза" представляет собой дискретное количество фармацевтической композиции, включающее заданное количество активного ингредиента. Количество активного ингредиента обычно равно дозе активного ингредиента, которую вводят субъекту, и/или удобной для введения доли такой дозы, например, половине или одной трети такой дозы.
Относительные количества активного ингредиента, фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества и/или любых дополнительных ингредиентов в описанной в изобретении фармацевтической композиции будут изменяться в зависимости от индивидуальных особенностей, размера и/или состояния здоровья подвергаемого лечению субъекта, и, кроме того, в зависимости от предполагаемого способа введения композиции. Композиция может включать от 0,1 до 100% (по массе) активного ингредиента.
Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, используемые в производстве предлагаемых в изобретении фармацевтических композиций, включают инертные разбавители, диспергирующие и/или гранулирующие средства, поверхностно-активные вещества и/или эмульгаторы, дезинтегрирующие средства, связующие вещества, консерванты, буферные вещества, смазывающие вещества и/или масла. В композиции также могут присутствовать такие вспомогательные вещества, как масло какао и воски для суппозиториев, окрашивающие вещества, вещества для нанесения покрытий, подсластители, ароматизаторы и отдушки.

Жидкие лекарственные формы для перорального и парентерального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо активных ингредиентов, жидкие лекарственные формы могут включать инертные разбавители, обычно используемые в фармацевтике, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (например, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и эфиры жирных кислот и сорбита и их смеси. Помимо инертных разбавителей, пероральные композиции могут включать такие вспомогательные вещества, как смачивающие средства, эмульгирующие и суспендирующие средства, подсластители, ароматизаторы и отдушки. В конкретных вариантах осуществления, для парентерального введения, смешивают описанные в изобретении конъюгаты с солюбилизирующими средствами, такими как Cremophor, спирты, масла, модифицированные масла, гликоли, полисорбаты, циклодекстрины, полимеры и их смеси.
Инъекционные препараты, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии, могут быть приготовлены известными методами с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих средств и суспендирующих средств. Стерильный инъекционный препарат может представлять собой стерильный инъекционный раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. К числу приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, относятся вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели можно использовать любое смягчающее нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при приготовлении инъекционных препаратов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Инъецируемые лекарственные формы могут быть стерилизованы, например, путем фильтрации через удерживающий бактерии фильтр или путем введения стерилизующих средств в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или другой стерильной инъецируемой среде перед использованием.
Для того чтобы пролонгировать действие лекарственного средства, часто является желательным замедлить всасывание лекарственного средства, введенного путем подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть осуществлено в результате использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с низкой растворимостью в воде. Скорость всасывания лекарственного средства в этом случае зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристалла и его кристаллической формы. В качестве варианта, замедленное всасывание лекарственной формы для парентерального введения может быть осуществлено путем растворения или суспендирования лекарственного средства в масляной среде.
Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах, активный ингредиент смешивают, по меньшей мере, с одним инертным фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или (а) наполнителями или твердыми разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, (b) связующими веществами, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза и аравийская камедь, (c) увлажнители, такими как глицерин, (d) дезинтегрирующими средствами, такими как агар, карбонат кальция, картофельный или кукурузный крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, (е) замедляющими растворение средствами, такими как парафин, (f) ускорителями всасывания, такими как четвертичные аммониевые соединения, (г) смачивающими средствами, такими как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина, (h) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и (i) смазывающими веществами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственная форма может включать буферное средство.
Твердые композиции подобного типа можно использовать в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах, используя такие вспомогательные вещества, как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли с высокой молекулярной массой и другие подобные вещества. Твердые лекарственные формы, такие как таблетки, драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут быть приготовлены с нанесенными слоями покрытия и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в фармакологии. Они могут необязательно включать затемняющие вещества и могут представлять собой композицию, из которой высвобождается активный (активные) ингредиент (ингредиенты) только, или предпочтительно, в определенной части пищеварительного тракта, необязательно, с задержкой. Примеры инкапсулирующих композиций, которые можно использовать, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции подобного типа можно использовать в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах, используя такие вспомогательные вещества, как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли с высокой молекулярной массой и другие подобные вещества.
Активный ингредиент может находиться в микрокапсулированной форме с одним или более вспомогательными веществами, указанными выше. Твердые лекарственные формы, такие как таблетки, драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут быть приготовлены с нанесенными слоями покрытия и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия, покрытия с контролируемым высвобождением, и другие покрытия, хорошо известные в фармакологии. В таких твердых лекарственных формах, активный ингредиент может быть смешан, по меньшей мере, с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие лекарственные формы могут включать, как это принято в обычной практике, дополнительные вещества, не являющиеся инертными разбавителями, например, смазки для таблетирования и другие вспомогательные средства для таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственные формы могут включать буферные вещества. Они могут необязательно включать затемняющие вещества и могут представлять собой композицию, из которой высвобождается активный (активные) ингредиент (ингредиенты) только, или предпочтительно, в определенной части пищеварительного тракта, необязательно, с задержкой. Примеры инкапсулирующих веществ, которые могут быть использованы, включают, но этим не ограничивая, полимерные вещества и воски.
Несмотря на то, что приведенные в изобретении описания фармацевтических композиций в основном относятся к фармацевтическим композициям, которые применяют для введения людям, тем не менее, такие композиции, как правило, могут применяться для введения животным всех видов. Модификация фармацевтических композиций, применяемых для введения людям, с целью создания композиций, которые можно применять для введения различным животным, является хорошо известной, и обычный опытный фармаколог в области ветеринарии может разработать и/или осуществить такую модификацию путем проведения обычных экспериментов.
Предлагаемое в изобретении соединение формулы (I) обычно приготавливают в лекарственной форме с разовой дозой для простоты введения и постоянства дозирования. Однако, следует иметь в виду, что суммарная суточная доза описанной в изобретении композиции должна определяться лечащим врачом на основании тщательной медицинской оценки. Конкретный уровень терапевтически эффективной дозы для любого конкретного субъекта или организма будет зависеть от ряда факторов, включающих подлежащее лечению заболевание и его тяжесть, активность конкретно используемого активного ингредиента, конкретно используемую композицию, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и рацион питания субъекта, время введения, способ введения и скорость выведения конкретно используемого активного ингредиента, продолжительность лечения, лекарственные средства, используемые в комбинации или одновременно с конкретным активным ингредиентом, и другие подобные факторы, хорошо известные в медицине.
II. Способы лечения
В другом аспекте настоящего изобретения предлагается способ ингибирования активности оксидазы D-аминокислот (DAAO) у субъекта и/или лечения или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества упомянутого выше соединения формулы (I) или содержащей его композиции.
Описанное в изобретении соединение формулы (I) применяется для ингибирования активности DAAO у субъекта и/или для лечения или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта (например, у человека с подозрением на наличие психоневрологическое нарушение или подверженного риску возникновения у него психоневрологического нарушения). В некоторых вариантах осуществления, психоневрологическое нарушение включает в себя шизофрению, психотические расстройства, болезнь Альцгеймера, лобно-височную деменцию, деменцию, умеренное когнитивное нарушение, легкою форму забывчивости, закрытую травму головы, расстройство аутистического спектра, синдром Аспергера, синдром дефицита внимания с гиперактивностью, обсессивно-компульсивное расстройство, тиковые расстройства, нарушения способности к обучению в детском возрасте, предменструальный синдром, депрессивное состояние, суицидальное настроение и/или поведение, биполярное расстройство, тревожные расстройства, посттравматическое стрессовое расстройство, хроническую боль, нарушения пищевого поведения, наркотические и лекарственные зависимости, личностные нарушения, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, рассеянный склероз или боковой амиотрофический склероз.
Предложенное в изобретении соединение формулы (I) или содержащая его композиция может быть введена соответствующим способом, известным специалистам в данной области, включающим энтеральное (например, пероральное), парентеральное, внутривенное, внутримышечное, внутриартериальное, интрамедуллярное, интратекальное, подкожное, интравентрикулярное, трансдермальное, интрадермальное, ректальное, интравагинальное, интраперитонеальное, местное (например, с помощью порошков, мазей, кремов и/или капель) введение. В частности, предполагаемые способы введения включают пероральное введение, внутривенное введение (например, системное внутривенное введение), регионарное введение путем подачи в кровь и/или лимфу, и/или прямое введение в пораженную область организма. Обычно, выбор наиболее подходящего способа введения будет зависеть от ряда факторов, включающих свойства лекарственного средства (например, его стабильность в среде желудочно-кишечного тракта) и/или состояние субъекта (например, способности субъекта переносить пероральное введение).
Точное количество соединения формулы (I), содержащегося в упомянутой выше композиции, требующееся для достижения эффективного количества, будет изменяться от субъекта к субъекту, в зависимости, например, от вида, возраста и общего состояния здоровья субъекта, тяжести побочных эффектов или нарушения, особых свойств конкретного соединения формулы (I), способа введения и других подобных параметров. Эффективное количество может быть включено в лекарственную форму с разовой дозой (например, в пероральную лекарственную форму с разовой дозой) или в лекарственную форму с многократными дозами (например, в пероральную лекарственную форму с многократными дозами). В конкретных вариантах осуществления, в случаях, когда многократные дозы вводят субъекту или вводят их в биологический образец, ткань или клетку, любые две дозы из многократных доз включают различные или практически одинаковые количества описанного в изобретении соединения формулы (I). В конкретных вариантах осуществления, в случаях, когда многократные дозы вводят субъекту или вводят их в биологический образец, ткань или клетку, частота введения многократных доз субъекту или введения многократных доз в ткань или клетку составляет три дозы в сутки, две дозы в сутки, одна доза в сутки, одна доза через день, одна доза каждые три дня, одна доза каждую неделю, одна доза каждые две недели, одна доза в месяц или одна доза через месяц. В конкретных вариантах осуществления, частота введения многократных доз субъекту или введения многократных доз в ткань или клетку составляет одну дозу в сутки. В конкретных вариантах осуществления, частота введения многократных доз субъекту или введение многократных доз в ткань или клетку составляет две дозы в сутки. В конкретных вариантах осуществления, в случаях, когда многократные дозы вводят субъекту или вводят их в биологический образец, ткань или клетку, промежуток времени между введением первой дозы и последней дозы из многократных доз составляет один день, два дня, четыре дня, одну неделю, две недели, три недели, один месяц, два месяца, три месяца, четыре месяца, шесть месяцев, девять месяцев, один год, два года, три года, четыре года, пять лет, семь лет, десять лет, пятнадцать лет, двадцать лет или продолжительность жизни субъекта, биологического образца, ткани или клетки. В конкретных вариантах осуществления, промежуток времени между введением первой дозы и последней дозы из многократных доз составляет три месяца, шесть месяцев или один год. В конкретных вариантах осуществления, промежуток времени между введением первой дозы и последней дозы из многократных доз равняется продолжительности жизни субъекта, биологического образца, ткани или клетки. В конкретных вариантах осуществления, описанная в изобретении доза (например, разовая доза или любая доза из многократных доз) независимо включает от 1 мг до 3 мг, от 3 мг до 10 мг, от 10 мг до 30 мг, от 30 мг до 100 мг, от 100 мг до 300 мг, от 300 мг до 1000 мг или от 1 г до 10 г включительно описанного в изобретении соединения формулы (I). В конкретных вариантах осуществления, описанная в изобретении доза независимо включает от 3 мг до 10 мг включительно описанного в изобретении соединения формулы (I). В конкретных вариантах осуществления, описанная в изобретении доза независимо включает от 10 мг до 30 мг включительно описанного в изобретении соединения формулы (I). В конкретных вариантах осуществления, описанная в изобретении доза независимо включает от 30 мг до 100 мг включительно описанного в изобретении соединения формулы (I). В конкретных вариантах осуществления, описанная в изобретении доза независимо включает от 100 мг до 300 мг включительно описанного в изобретении соединения формулы (I). В конкретных вариантах осуществления, описанная в изобретении доза независимо включает от 300 мг до 1000 мг включительно описанного в изобретении соединения формулы (I).
Описанные в изобретении диапазоны доз рекомендуются для введения предложенных в изобретении фармацевтических композиций взрослому человеку. Количество, которое может быть введено, например, ребенку или подростку, может быть определено лечащим врачом или специалистом в данной области, и это количество может быть ниже или таким же, как и для взрослого.
III. Комбинированное лечение
Описанное в изобретении соединение формулы (I) может быть введено в комбинации с одним или более дополнительными фармацевтическими средствами (например, терапевтически и/или профилактически активными средствами), применяемыми для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения. Дополнительные фармацевтические средства могут повышать активность (например, активность (например, активность и/или эффективность) соединения при лечении и/или при снижении риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта, нуждающегося в этом), повышать биодоступность, повышать безопасность, уменьшать резистентность к лекарственному средству, понижать и/или изменять метаболизм, замедлять экскрецию и/или модифицировать распределение соединения в организме субъекта, биологическом образце, ткани или клетке. Следует также иметь в виду, что применяемая терапия может способствовать достижению требуемого эффекта для одного и того же нарушения, и/или она может способствовать достижению различных эффектов. В конкретных вариантах осуществления, описанное в изобретении соединение формулы (I) и дополнительное фармацевтическое средство проявляет синергетический эффект, который отсутствует при лечении с применением в отдельности одного из соединений формулы (I) и одного дополнительного фармацевтического средства, но не обоих вместе.
Соединение формулы (I) можно вводить параллельно, до, одновременно или после введения одного или более дополнительных фармацевтических средств, которые могут применяться в виде, например, комбинированной терапии при лечении и/или снижении риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта. В некоторых примерах, соединение и дополнительное фармацевтическое средство (средства) приготавливают в форме одной композиции. В других примерах, соединение и дополнительное фармацевтического средство (средства) приготавливают в форме отдельных композиций.
Фармацевтические средства включают терапевтически активные средства. Фармацевтические средства также включают профилактически активные средства. Фармацевтические средства включают малые органические молекулы, такие как лекарственные соединения (например, соединения, одобренные для применения на людях или для ветеринарного применения Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (US FDA) в соответствии со Сводом нормативных актов федеральных органов исполнительной власти США (CFR)), пептиды, белки, углеводы, моносахариды, олигосахариды, полисахариды, нуклеопротеины, мукопротеины, липопротеины, синтетические полипептиды или белки, антитела, малые молекулы, связанные с белками, такие как антитела, гликопротеины, стероиды, нуклеиновые кислоты, ДНК, РНК, нуклеотиды, нуклеозиды, олигонуклеотиды, антисмысловые олигонуклеотиды, липиды, гормоны, витамины и клетки. В конкретных вариантах осуществления, дополнительное фармацевтическое средство представляет собой фармацевтическое средство, применяемое для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта. В конкретных вариантах осуществления, дополнительное фармацевтическое средство представляет собой фармацевтическое средство, одобренное органом государственного регулирования (например, FDA США) для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения у субъекта. Каждое дополнительное фармацевтическое средство может быть введено в форме дозы и/или в соответствии с режимом введения, определенным для этого фармацевтического средства. Дополнительные фармацевтические средства могут быть также введены вместе друг с другом и/или с композицией, содержащей описанное в изобретении соединение формулы (I), в разовой дозе или введены отдельно в разных дозах. Конкретная комбинация для применения в режиме дозирования будет выбрана с учетом совместимости описанного в изобретении соединения формулы (I) с дополнительным фармацевтическим средством (средствами) и/или с учетом возможности достижения требуемого терапевтического и/или профилактического эффекта. Обычно, предполагается, что дополнительное фармацевтическое средство (средства) в комбинации должно использоваться при уровнях доз, которые не превышают уровни доз, при которых они используются при монотерапии. В некоторых вариантах осуществления, уровни, используемые при комбинации, будут ниже, чем уровни, используемые при монотерапии.
В конкретных вариантах осуществления, дополнительное фармацевтическое средство выбирают из средств для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения или их комбинаций. В конкретных вариантах осуществления, фармацевтические композиции, содержащие описанное в изобретении соединение формулы (I), можно вводить в комбинации с терапией для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения.
В конкретных вариантах осуществления, дополнительное фармацевтическое средство представляет собой средство для лечения и/или снижения риска возникновения психоневрологического нарушения, которое может представлять собой антипсихотическое средство, антидепрессант, стабилизатор настроения (нормотимик), анксиолитическое средство, психостимулятор и средство для лечения синдрома дефицита внимания с гиперактивностью (ADHD), или средство для лечения болезни Альцгеймера (AD).
Антипсихотическое средство включает, но этим не ограничивая, бутирофенон, фенотиазин, флуфеназин, перфеназин, прохлорперазин, тиоридазин, трифлуперазин, мезоридазин, промазин, трифлупромазин, левомепромазин, прометазин, тиоксантен, хлорпротиксен, флупентиксол, тиотиксен, зуклопентиксол, клозапин, оланзапин, рисперидон, кветиапин, зипрасидон, амисульприд, азенапин, палиперидон, арипипразол, азенапин, карипразин, илоперидон, пимавансерин, лурадизон, брекспипразол, каннабидиол, LY2140023, дроперидол, пимозид, бутаперазин, карфеназин, ремоксиприд, пиперацетазин, сульпирид, акампросат и тетрабеназин.
Антидепрессант включает, но этим не ограничивая, ингибиторы моноаминоксидазы (MAOI), трициклические антидепрессанты (TCA), тетрациклические антидепрессанты (TeCA), селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (SSRI), норадренергические и специфические серотонинергические антидепрессанты (NASSA), ингибиторы обратного захвата норэпинефрина (норадреналина), ингибиторы обратного захвата норэпинефрина-допамина или ингибиторы обратного захвата серотонина-норэпинефрина (SNRI). Примеры антидепрессантов включают, но этим не ограничивая, флуоксетин, пароксетин, эсциталопрам, циталопрам, сертралин, флувоксамин, венлафаксин, десвенлафаксин, вортиоксетин, левомилнаципран, вилазодон, селегилин, кетамин, милнаципин, дулоксетин, миртазапин, миансерин, ребоксетин, бупропион, амитриптилин, нортриптилин, протриптилин, дезипрамин, тримипрамин, амоксапин, бупропион, кломипрамин, дезипрамин, доксепин, изокарбоксазид, транилципромин, тразодон, нефазодон, фенелзин, ламатрогин, литий, топирамат, габапентин, карбамазепин, окскарбазепин, вальпроат, мапротилин, брофаромин, гепирон, моклобемид, изониазид и ипрониазид.
Психостимулятор или средство для лечения синдрома дефицита внимания с гиперактивностью (ADHD) включает, но этим не ограничивая, метилфенидат, декстро-трео-метилфенидат, изопропилфенидат, кокаин, амфетамин, метамфетамин, декстроамфетамин, 3,4-метилендиоксиметамфетамин, пемолин, фенметразин, диэтилпропион, хлорфентермин, пипрадол, п-гидроксиморфедрин, фенфлурамин, 1-(2,5-диметокси-4-метилфенил)-2-аминопропан, бупропион, статины, модафинил, ареколин, дексметилфенидат, лиздексамфетамина димезилат, смешанные соли амфетамина, атомоксетин, клонидина гидрохлорид, гуанфацина гидрохлорид и ареколин.
Стабилизатор настроения (нормотимик) включает, но этим не ограничивая, литий, ламотригин, карбамазепин, окскарбазепин, топирамат, золпидем, карбамазепин и вальпроат.
Анксиолитическое средство включает, но этим не ограничивая, диазепам, алпразолам, триазолам, индиплон, залеплон, бромазепам, оксазепам, буспирон, гидроксизин, меклоквалон, медетомидин, метомидат, адиназолам, хлордиазепоксид, клобензепам, флуразепам, лоразепам, лопразолам, мидазолам, алпидем, алсерокслон, амфенидон, азациклонол, бромисовалум, клоразепат, кальция N-карбамоиласпартат, каптодиамин, капурид, карбклорал, карбромал, хлорал бетаина, энсипразин, флесиноксан, ипсапираон, ипсапирон, лесопитрон, локсапин, метаквалон, метприлон, пропанoлол, тандоспирон, тразодон, зопиклон и золпидем.
Средство для лечения болезни Альцгеймера (AD) включает, но этим не ограничивая, донепезил, ривастигмин, галантамин, мемантин, селфотел, мидафотел, такрин, селегилин и витамин Е.
IV. Наборы для лечения
Настоящее изобретение также включает в себя наборы для использования при лечении любого из описанных в изобретении заболеваний-мишеней. Предлагаемые в изобретении наборы могут включать описанное в изобретении соединение формулы (I) или содержащую его композицию. Набор может, необязательно, дополнительно включать одно или более описанных в изобретении дополнительных фармацевтических средств.
Любой из описанных в изобретении наборов может включать один или более контейнеров (например, флакон, ампулу, бутылочку, шприц и/или упаковку с дозатором или другой подходящий контейнер), в которых находятся указанные в изобретении активные ингредиенты. В некоторых вариантах осуществления, предлагаемые наборы могут включать кроме того контейнер, содержащий фармацевтическое вспомогательное вещество для разбавления или суспензию фармацевтической композиции, включающей описанное в изобретении соединение формулы (I), и, необязательно, дополнительные фармацевтические средства. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическую композицию, включающую описанное в изобретении соединение формулы (I), находящуюся в одном или более контейнерах, объединяют с целью формирования одной лекарственной формы с разовой дозой.
В конкретных вариантах осуществления, описанный в изобретении набор дополнительно содержит инструкции по применению включенной в набор композиции, содержащей соединение формулы (I). Описанный в изобретении набор может также включать информацию, наличие которой требуется органом государственного регулирования, таким как Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA). В конкретных вариантах осуществления, информация, включенная в наборы, является инструкцией по медицинскому применению препарата. В конкретных вариантах осуществления, наборы и инструкции предусматривают лечение и/или снижение риска возникновения психоневрологического расстройства. Описанный в изобретении набор может включать одно или несколько описанных в изобретении дополнительных фармацевтических средств в форме отдельной композиции.
Предполагается, что любой специалист в данной области в результате ознакомления с приведенным выше описанием изобретения может применить настоящее изобретение в его наиболее полном объеме без проведения дополнительных исследований. Поэтому, приведенные далее конкретные варианты осуществления следует интерпретировать только как иллюстративные и никоим образом не ограничивающие остальные части изобретения. Полное содержание всех публикаций, процитированных в изобретении, включено в настоящее изобретение путем ссылки на них.
ПРИМЕРЫ
1
Все используемые химические реагенты приобретали у таких фирм-поставщиков, как Sigma Aldrich и Alfa Aesar. Используемый в экспериментах МК801, антагонист рецептора NMDA, был поставлен фирмой Sigma (Sigma-Aldrich, США). Самцов мышей линии C57BL/6J приобретали в Центре лабораторных животных при Медицинском колледже Национального университета Тайваня (Laboratory Animal Center in the College of Medicine, National Taiwan University). Мышей разбивали на группы и содержали с доступом без ограничения к корму и воде в вентилируемых клетках из полисульфона (фирмы Alternative Design, AR, USA) (3-5 мышей в клетке) в помещениях для животных фирмы SyneuRx International (Taiwan) Corp. H ЯМР-спектры регистрировали на спектрометре Bruker 300 MHz или BRUKER 400 MHz, и химические сдвиги выражали в величинах δ (ppm) с использованием триметилсилана в качестве внутреннего эталона. Масс-спектры регистрировали на одинарном квадрупольном хроматомасс-спектрометре Shimadzu LCMS-2020 Quadrupole LC/MS.
Пример 1: Синтез 6-(гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 1H-пиррол-2-карбоксилата (1)
6-(Гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 1H-пиррол-2-карбоксилат (1)
1
+
6
К перемешиваемой суспензии пиррол-2-карбоновой кислоты (3,0 г, 27,1 ммоль) в дихлорметане (18 мл) при комнатной температуре (RT) добавляли одной порцией оксалилхлорид (8,5 мл, 99,0 ммоль). Через 2-3 часа, дихлорметан и оксалилхлорид удаляли при пониженном давлении. Добавляли к остатку бензол и удаляли при пониженном давлении. Добавляли к остатку дихлорметан (20 мл), и полученный раствор добавляли по каплям в раствор 5-гидрокси-2-(гидроксиметил)-4H-пиран-4-она (5,8 г, 40,5 ммоль) в пиридине (20 мл) при 0°C в течение 2 часов. Смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Дихлорметан удаляли путем испарения при пониженном давлении, и остаток разбавляли эквивалентным объемом воды. Осадок отфильтровывали, и фильтрат выливали в 1 л воды, затем выдерживали при 4°C в течение ночи. Твердое вещество фильтровали с отсасыванием и промывали этанолом. После сушки под вакуумом, получали 6-(гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 1H-пиррол-2-карбоксилат (1) в виде желтовато-белого твердого вещества (2,2 г, 34,5%), что подтверждается спектром H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,14 (уш.с, 1H), 8,53 (с, 1H), 7,14 (м, 1H), 6,98 (м, 1H), 6,45 (с, 1H), 6,26 (с, 1H), 5,89 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,36 (д, J=6,0 Гц, 2H). ESI-MS, m/z=236 [M+H].
Пример 2: Синтез 6-(гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (5)
Этил 4-(2-(4-хлорфенил) ацетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (2)
2
4
+
К раствору 4-хлорбензолацетилхлорида (54,0 г, 300,0 ммоль) в дихлорметане (500 мл) добавляли хлорид алюминия (38,0 г, 280,0 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Затем к смеси добавляли по каплям при 0°C раствор этилпиррол-2-карбоксилата (20,0 г, 140,0 ммоль) в дихлорметане (200 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь гасили насыщенным водным раствором NHCl. Смесь экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием 0-30% этилацетата в петролейном эфире с получением этил 4-(2-(4-хлорфенил)ацетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (2) в виде коричневого твердого вещества (23,0 г, 55%). ESI-MS, m/z=292 [M+H].
Этил 4-(4-хлорфенил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (3)
+
К раствору этил 4-(2-(4-хлорфенил)ацетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (2, 23,0 г, 78,8 ммоль) в трифторуксусной кислоте (200 мл) добавляли триэтилсилан (40 мл, 244,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием 0-30% этилацетата в петролейном эфире с получением этил 4-(4-хлорфенил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (3) в виде пурпурного твердого вещества (12 г, 55%). ESI-MS, m/z=278 [M+H].
4-(4-Хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоновая кислота (4)
1
+
6
К раствору этил 4-(4-хлорфенил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (3, 2,0 г, 8,3 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли раствор гидроксида лития (1,0 г, 41,5 ммоль) в воде (20 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали под вакуумом. Величину pH доводили до 5-6 с помощью 1N HCl. Смесь фильтровали, и твердое вещество собирали и сушили с получением 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты (4) в виде желтовато-белого твердого вещества (0,91 г, 48%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,08 (с, 1H), 11,4 (с, 1H), 7,33-7,23 (м, 4H), 6,73 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 2,84-2,80 (м, 2H), 2,71-2,67 (м, 2H). ESI-MS, m/z=278 [M+H].
6-(Гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (5)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты (4, 0,5 г, 2,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (15 мл) добавляли 5-гидрокси-2-(гидроксиметил)-4H-пиран-4-он (0,3 г, 2,0 ммоль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (0,4 г, 2,0 ммоль) и гидроксибензотриазол (0,3 мг, 2,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 6 часов. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси дихлорметан/метанол (95:5) с получением 6-(гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (5) в виде белого твердого вещества (0,4 г, 53%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 11,91 (с, 1H), 8,57 (с, 1H), 7,34-7,32 (м, 2H), 7,26-7,24 (м, 2H), 6,92-6,91 (м, 1H), 6,87-6,86 (м, 1H), 6,45 (с, 1H), 5,79-5,76 (м, 1H), 4,38 (д, J=6,1 Гц, 2H), 2,87-2,80 (м, 2H), 2,76-2,72 (м, 2H). ESI-MS, m/z=374 [M+H].
Пример 3. Синтез 6-(гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (9)
Этил (Z)-2-азидо-3(фуран-2-ил)акрилат (6)
4
3
1
К перемешиваемому раствору этанола (200 мл) добавляли натрий (8,3 г, 360,9 ммоль) на ледяной бане, и затем медленно добавляли этил 2-азидоацетат (44,8 г, 347,0 ммоль) и фуран-2-карбальдегид (28,8 г, 299,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора NHCl (30 мл). Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (2×100 мл), и органические слои объединяли. Затем органический слой промывали солевым раствором (50 мл). Смесь сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:9) с получением этил (Z)-2-азидо-3(фуран-2-ил)акрилата (6) в виде желтого масла (10,0 г, 16%). H ЯМР (CDCl, 300 МГц) δ 7,54-7,46 (м, 1H), 7,11 (д, J=3,7 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 6,54 (м, 1H), 4,36 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 1,39 (т, J=7,1 Гц, 3H).
Этил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилат (7)
1
+
6
Раствор этил (Z)-2-азидо-3(фуран-2-ил)акрилата (6, 10,0 г, 48,3 ммоль) в ксилоле (100 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:9) с получением этил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (7) в виде желтого твердого вещества (7,2 г, 83%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 11,64 (с, 1H), 7,79 (д, J=2,2 Гц, 1H), 6,74 (дд, J=1,8, 0,9 Гц, 1H), 6,61 (дд, J=2,2, 0,9 Гц, 1H), 4,26 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 1,30 (т, J=7,1 Гц, 3H). ESI-MS, m/z=180 [M+H].
4H-Фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоновая кислота (8)
1
+
6
К перемешиваемому раствору этил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (7, 1,8 г, 10,1 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли раствор гидроксида натрия (1,2 г, 30,0 ммоль) в воде (10 мл). Полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 3 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь фильтровали. Твердое вещество собирали и очищали путем перекристаллизации с использованием смеси ацетат/петролейный эфир (1:4) с получением 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоновой кислоты (8) в виде коричневого твердого вещества (1,6 г, 100%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,36 (с, 1H), 11,51 (с, 1H), 7,76 (д, J=2,1 Гц, 1H), 6,69 (дд, J=1,8, 0,9 Гц, 1H), 6,58 (дд, J=2,1, 0,9 Гц, 1H). ESI-MS, m/z=152 [M+H].
6-(Гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилат (9)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоновой кислоты (8, 0,3 г, 2,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (15 мл) добавляли 5-гидрокси-2-(гидроксиметил)-4H-пиран-4-он (0,3 г, 2,2 ммоль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (0,4 г, 2,0 ммоль) и гидроксибензотриазол (0,3 г, 2,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 часов и затем разбавляли этилацетатом (50 мл). Смесь промывали водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95) с получением 6-(гидроксиметил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (9) в виде белого твердого вещества (0,2 г, 28%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 8,62 (с, 1H), 7,89 (д, J=2,2 Гц, 1H), 6,97 (д, J=0,9 Гц, 1H), 6,67 (дд, J=2,2, 0,9 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H), 5,80 (с, 1H), 4,39 (с, 2H). ESI-MS, m/z=276 [M+H].
Пример 4. Синтез 6-(((4-хлорфенил)тио)метил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (14)
1
+
6
Смесь 5-гидрокси-2-(гидроксиметил)-4H-пиран-4-она (90,0 г, 630,0 ммоль), 4-метоксибензилхлорида (110,0 г, 700,0 ммоль) и карбоната калия (132,0 г, 1000,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (500 мл) перемешивали при 50°C в течение 16 часов. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (2:8) с получением 2-(гидроксиметил)-5-((4-метоксибензил)- окси)-4H-пиран-4-она (10) в виде желтого твердого вещества (130,0 г, 78%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 8,15 (с, 1H), 7,35 (д, J=6,3 Гц, 2H), 6,95 (д, J=6,3 Гц, 2H), 6,32 (с, 1H), 5,75-5,70 (м, 1H), 4,87 (с, 2H), 4,30 (д, J=4,0 Гц, 2H), 3,77 (с, 3H). ESI-MS, m/z=263 [M+H].
2-(Бромметил)-5-((4-метоксибензил)окси)-4H-пиран-4-он (11)
1
+
6
К раствору 2-(гидроксиметил)-5-((4-метоксибензил)окси)-4H-пиран-4-она (10, 30,0 г, 110,0 ммоль) в дихлорметане (500 мл) добавляли 2,6-диметилпиридин (26,0 мл, 170,0 ммоль), трифенилфосфин (51,0 г, 170,0 ммоль) и тетрабромметан (57,0 г, 170,0 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:4) с получением 2-(бромметил)-5-((4-метоксибензил)окси)-4H-пиран-4-она (11) в виде желтого твердого вещества (20,0 г, 54%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 7,57 (с, 1H), 7,35-7,32 (м, 2H), 6,92-6,90 (м, 2H), 6,47 (с, 1H), 5,03 (с, 2H), 4,16 (с, 2H), 3,83 (с, 3H). ESI-MS, m/z=325 [M+H].
2-(((4-Хлорфенил)тио)метил)-5-((4-метоксибензил)окси)-4H-пиран-4-он (12)
1
+
3
К смеси 2-(бромметил)-5-((4-метоксибензил)окси)-4H-пиран-4-она (11, 19,5 г, 60,0 ммоль), 4-хлорбензолтиола (11,0 г, 76,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (100 мл) добавляли карбонат калия (12,0 г, 80,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов и затем концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:2) с получением 2-(((4-хлорфенил)тио)метил)-5-((4-метоксибензил)- окси)-4H-пиран-4-она (12) в виде желтого твердого вещества (20,0 г, 84%). H ЯМР (CDCl-d, 400 МГц) δ 7,50 (с, 1H), 7,34-7,32 (м, 6H), 6,93-6,91 (м, 2H), 6,20 (с, 1H), 5,02 (с, 2H), 3,84-3,79 (м, 5H). ESI-MS, m/z=389 [M+H].
2-(((4-Хлорфенил)тио)метил)-5-гидрокси-4H-пиран-4-он (13)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 2-(((4-хлорфенил)тио)метил)-5-((4-метоксибензил)окси)-4H-пиран-4-она (12, 1,3 г, 3,0 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (5,0 мл, 66,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и концентрировали под вакуумом. Остаток растирали с диэтиловым эфиром с получением 2-(((4-хлорфенил)тио)метил)-5-гидрокси-4H-пиран-4-она (13) в виде желтовато-белого твердого вещества (0,13 г, 16%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 9,15 (с, 1H), 8,03 (с, 1H), 7,44-7,39 (м, 4H), 6,28(с, 1H), 4,18 (с, 2H). ESI-MS, m/z=269 [M+H].
6-(((4-Хлорфенил)тио)метил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (14)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 2-(((4-хлорфенил)тио)метил)-5-гидрокси-4H-пиран-4-она (13, 280,0 мг, 1,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) добавляли 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоновую кислоту (4, 200,0 мг, 0,8 ммоль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (153,0 мг, 0,8 ммоль) и гидроксибензотриазол (108,0 мг, 0,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 часов и затем разбавляли этилацетатом (30 мл). Полученную смесь промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/гексан (3:7) с получением 6-(((4-хлорфенил)тио)метил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (14) в виде белого твердого вещества (150,0 мг, 37%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 11,89 (с, 1H), 8,56 (с, 1H), 7,55-7,35 (м, 4H), 7,32 (дд, J=6,2, 2,0 Гц, 2H), 7,24 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,91 (д, J=2,7 Гц, 1H), 6,87-6,80 (м, 1H), 6,42 (с, 1H), 4,27 (с, 2H), 2,95-2,80 (м, 2H), 2,76-2,65 (м, 2H). ESI-MS, m/z=500 [M+H].
Пример 5. Синтез 6-(((4-хлорфенил)тио)метил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (15)
6-(((4-Хлорфенил)тио)метил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4H-фуро-[3,2-b]пиррол-5-карбоксилат (15)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 2-(((4-хлорфенил)тио)метил)-5-гидрокси-4H-пиран-4-она (13, 450,0 мг, 1,7 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоновую кислоту (8, 360,0 мг, 2,4 ммоль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)- карбодиимид (450,0 мг, 2,4 ммоль) и гидроксибензотриазол (320,0 мг, 2,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь экстрагировали водой и солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением 6-(((4-хлорфенил)тио)метил)-4-оксо-4H-пиран-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (15) в виде желтовато-белого твердого вещества (159,1 мг, 24%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 11,99 (с, 1H), 8,62 (с, 1H), 7,89 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,49-7,42 (м, 4H), 6,95 (с, 1H), 6,67 (с, 1H), 6,64 (с, 1H), 4,29 (с, 2H). ESI-MS, m/z=402 [M+H].
Пример 6. Синтез 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (18)
5-Хлор-3-метоксихинолин-2(1H)-он (16)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 4-хлориндолин-2,3-диона (3,6 г, 20,0 ммоль), диэтиламина (25,0 мл, 240,0 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляли (триметилсилил)диазометан (20,0 мл, 30,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Твердое вещество осаждали из реакционной смеси и собирали фильтрацией и споласкивали этанолом (3×10 мл) с получением 5-хлор-3-метоксихинолин-2(1H)-она (16) в виде серого твердого вещества (2,6 г, 65%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,5 (с,1H), 7,36-7,20 (м, 4H), 3,88 (с, 3H). ESI-MS, m/z=210 [M+H].
5-Хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-он (17)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 5-хлор-3-метоксихинолин-2(1H)-она (16, 2,6 г, 12,4 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли трибромид бора (62,4 г, 248,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Твердое вещество собирали фильтрацией и споласкивали метанолом (2×20 мл) с получением 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-она (17) в виде серого твердого вещества (1,2 г, 50%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,26 (с, 1H), 10,07 (с, 1H), 7,32-7,23 (м, 4H). ESI-MS, m/z=196 [M+H]
5-Хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (18)
1
+
6
Смесь 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты (4, 0,4 г, 1,7 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимида (0,35 г, 1,7 ммоль), 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-она (17, 0,3 г, 1,5 ммоль) и 4-пирролидинопиридина (0,24 г, 0,2 ммоль) в 50 мл дихлорметана перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь концентрировали под вакуумом, и неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (18) в виде желтовато-белого твердого вещества (0,15 г, 23%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,50 (с, 1H), 11,93 (с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,54 (м, 1H), 7,48-7,13 (м, 6H), 6,72-6,52 (м, 2H), 2,97-2,86 (м, 2H), 2,76-2,40 (м, 2H). ESI-MS, m/z=427 [M+H].
Пример 7. Синтез 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (19)
5-Хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилат (19)
1
+
6
Смесь 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоновой кислоты (8, 0,5 г, 3,0 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимида (0,6 г, 3,0 ммоль), 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-она (17, 0,6 г, 3,0 ммоль) и 4-пирролидинопиридина (0,4 г, 0,3 ммоль) в дихлорметане (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь концентрировали под вакуумом, и остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси метанолом/дихлорметан (5:95) с получением 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксилата (19) в виде белого твердого вещества (0,13 г, 13%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,55 (с, 1H), 12,05 (с, 1H), 8,04 (с, 1H), 7,91 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,57-7,51 (м, 1H), 7,42-7,34 (м, 2H), 7,01 (с, 1H), 6,69-6,68 (м, 1H). ESI-MS, m/z=329 [M+H].
Пример 8. Синтез 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилата (23)
Этил 4-(2-фенилацетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (20)
2
4
+
Этил 1H-пиррол-2-карбоксилат (20,0 г, 140,0 ммоль) в дихлорметане (400 мл) добавляли к охлаждаемой льдом перемешиваемой смеси хлорида алюминия (23,0 г, 280,0 ммоль) и 2-фенилацетилхлорида (44,0 г, 280,0 ммоль) в дихлорметане (200 мл) в атмосфере N. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов, затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора NHCl (200 мл). Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3×500 мл), и органические слои объединяли. Затем органический слой промывали солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и испаряли. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением этил 4-(2-фенилацетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (20) в виде белого твердого вещества (28,0 г, 76%). ESI-MS, m/z=358 [M+H].
Этил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилат (21)
+
К перемешиваемому раствору этил 4-(2-фенилацетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (20, 19,0 г, 70,0 ммоль) в трифторуксусной кислоте (50 мл) добавляли триэтилсилан (70,0 мл, 434,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением этил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилата (21) в виде белого твердого вещества (14,0 г, 78%). ESI-MS, m/z=244 [M+H].
4-Фенетил-1H-пиррол-2-карбоновая кислота (22)
1
+
6
К перемешиваемому раствору этил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилата (21, 1,5 г, 6,2 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляли раствор гидроксид лития (0,7g, 31,0 ммоль) в воде (15 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали под вакуумом. Полученную смесь подкисляли (pH=5~6) путем добавления по каплям 10% HCl. Белое твердое вещество, которое осаждали из реакционной смеси, отфильтровывали и промывали водой. Твердое вещество очищали препаративной HPLC с получением 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты (22) в виде розового твердого вещества (0,13 г, 10%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,21 (с, 1H), 11,51 (с, 1H), 7,53-7,14 (м, 5H), 6,55 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 3,34-2,90 (м, 2H), 2,79-2,66 (м, 2H). ESI-MS, m/z=216 [M+H].
5-Хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилат (23)
1
+
6
Смесь 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты (22, 1,2 г, 5,6 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимида (1,2 г, 5,8 ммоль), 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-она (17, 1,0 г, 5,1 ммоль) и 4-пирролидинопиридина (0,9 г, 0,5 ммоль) в дихлорметане (150 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь концентрировали под вакуумом, и остаток очищали препаративной HPLC с получением 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилата (23) в виде желтовато-белого твердого вещества (0,13 г, 6%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,50 (с, 1H), 11,93 (с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,56-7,52 (м, 1H), 7,41-7,17 (м, 8H), 6,96-6,92 (м, 1H), 3,34-2,86 (м, 2H), 2,81-2,75 (м, 2H). ESI-MS, m/z=393 [M+H].
Пример 9. Синтез 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (27)
Метил 2,4-диоксо-6-фенилгексаноат (24)
+
К перемешиваемому раствору бензилацетона (30,0 г, 200,0 ммоль) в осушенном метаноле (300 мл) добавляли диметилоксалат (27,0 г, 230,0 ммоль) и метоксид натрия (42,0 мл, 200,0 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь медленно подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Смесь разбавляли этилацетатом (500 мл) и солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и испаряли. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением метил 2,4-диоксо-6-фенилгексаноата (24) в виде желтого твердого вещества (13,0 г, 27%). ESI-MS, m/z=235 [M+H].
Метил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилат (25)
+
К перемешиваемому раствору метил 2,4-диоксо-6-фенилгексаноата (24, 13,0 г, 56,0 ммоль) в этаноле (56 мл) добавляли гидразин (51 масс.% водный раствор) (10,0 мл, 213,9 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (2:3) с получением метил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (25) в виде желтого масла (6,0 г, 50%). ESI-MS, m/z=231 [M+H].
3-Фенетил-1H-пиразол-5-карбоновая кислота (26)
1
+
6
К перемешиваемому раствору метил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (25, 5,0 г, 20,0 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл) добавляли раствор гидроксид лития (1,0 г, 100,0 ммоль) в воде (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Большую часть тетрагидрофурана испаряли под вакуумом. Величину pH смеси доводили до 2 с помощью 1N HCl. Смесь фильтровали и собирали твердое вещество. Твердое вещество очищали препаративной HPLC с получением дополнительно очищенной с помощью препаративной HPLC 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (26) в виде белого твердого вещества (83,9 мг, 2%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,97 (с, 2H), 7,30-7,17 (м, 5H), 6,48 (с, 1H), 2,92 (с, 4H). ESI-MS, m/z=217 [M+H].
5-Хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилат (27)
1
+
6
Смесь 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (26, 100,0 мг, 0,5 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимида (100 мг, 0,5 ммоль), 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-она (17, 84,0 мг, 0,4 ммоль) и 4-пирролидинопиридина (7,0 мг, 0,05 ммоль) в дихлорметане (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь концентрировали под вакуумом, и неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (27) в виде белого твердого вещества (17,0 мг, 10%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 13,54 (с, 1H), 12,55 (с, 1H), 8,04 (с, 1H), 7,55 (м, 1H), 7,42-7,19 (м, 7H), 6,72 (с, 1H), 2,99 (с, 4H). ESI-MS, m/z=394 [M+H].
Пример 10. Синтез 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (32)
4-(4-Хлорфенил) бутан-2-он (28)
1
+
3
К перемешиваемому раствору 1-хлор-4-(хлорметил)бензола (22,0 г, 136,6 ммоль) в этаноле (200 мл) добавляли карбонат калия (19,0 г, 137,5 ммоль) и пентан-2,4-дион (14,4 г, 143,8 ммоль). Полученную смесь нагревали при 80°C в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:9) с получением 4-(4-хлорфенил)бутан-2-она (28) в виде бесцветного твердого вещества (18,0 г, 72%). H ЯМР (CDCl-d, 300 МГц) δ = 7,32-7,24 (м, 2H), 7,20-7,10 (м, 2H), 2,95-2,85 (м, 2H), 2,83-2,71 (м, 2H), 2,17 (с, 3H). ESI-MS, m/z=183 [M+H].
Метил 6-(4-хлорфенил)-2,4-диоксогексаноат (29)
+
К раствору метанола (90 мл) добавляли порциями гидрид натрия (4,8 г, 201,3 ммоль), затем добавляли к смеси при комнатной температуре 4-(4-хлорфенил)бутан-2-он (28, 22,0 г, 120,5 ммоль) и диметилоксалат (14,2 г, 120,3 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 5 часов при комнатной температуре. После завершения реакции, смесь гасили с помощью 1N HCl. Смесь испаряли под вакуумом для удаления большей части растворителя. Остаток разбавляли этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием петролейного эфира с получением метил 6-(4-хлорфенил)-2,4-диоксогексаноата (29) в виде желтого масла в форме смеси (3,7 г, 11%). ESI-MS, m/z=269 [M+H].
Метил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (30)
+
К перемешиваемому раствору метил 6-(4-хлорфенил)-2,4-диоксогексаноата (29, 500,0 мг, 1,9 ммоль) в метаноле (6 мл) добавляли гидразин (51 масс.% водный раствор) (0,1 мл, 2,1 ммоль). Полученную смесь нагревали при 70°C в течение 3 часов. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с обращенной фазой с получением метил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (30) в виде белого твердого вещества в форме смеси (100,0 мг, 20%). ESI-MS, m/z=265 [M+H].
3-(4-Хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновая кислота (31)
1
+
6
К смеси метил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (30, 1,1 г, 4,2 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли гидроксид натрия (0,7 г, 16,7 ммоль) и воду (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали препаративной HPLC с получением 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (31) в виде белого твердого вещества (0,9 г, 90%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 12,97 (с, 2H), 7,34-7,32 (м, 2H), 7,24 (д, 2H, J=8,4 Гц), 6,48 (с, 1H), 2,95-2,87 (м, 4H). ESI-MS, m/z=250 [M+H].
5-Хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (32)
1
+
6
К раствору 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (31, 250,0 мг, 1,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) добавляли 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-он (17, 292,5 мг, 1,5 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимид (309,3 мг, 1,5 ммоль) и 4-(пирролидин-1-ил)пиридин (27,7 мг, 0,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции, смесь разбавляли водой, экстрагировали дихлорметаном, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (1:9) с получением 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (32) в виде серого твердого вещества(18,9 мг, 4%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ = 13,52 (с, 1H), 12,54 (с, 1H), 8,03 (с, 1H), 7,56-7,51 (м, 1H), 7,41-7,34 (м, 4H), 7,31-7,25 (м, 2H), 6,71 (с, 1H), 3,17-2,98 (м, 4H). ESI-MS, m/z=428 [M+H].
Пример 11. Синтез 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (39)
2-(Нафталин-1-ил)ацетилхлорид (33)
К перемешиваемому раствору 2-(нафталин-1-ил)уксусной кислоты (18,0 г, 95,0 ммоль) в дихлорметане (300 мл) и N, N-диметилформамида (0,5 мл) добавляли по каплям при 0°Cоксалилхлорид (8,5 мл, 100,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали под вакуумом с получением 2-(нафталин-1-ил)ацетилхлорид (33) (21,0 г, неочищенный) в виде желтого масла.
N-Метокси-N-метил-2-(нафталин-1-ил)ацетамид (34)
+
К смеси метокси(метил)амина гидрохлорида (6,0 г, 98,0 ммоль), триметиламина (20,0 мл, 149,0 ммоль) и дихлорметана (200 мл) добавляли 2-(нафталин-1-ил)ацетилхлорид (33, 17,0 г, 83,0 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при 0°C. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:1) с получением N-метокси-N-метил-2-(нафталин-1-ил)- ацетамида (34) в виде желтого масла (7,0 г, 50%). ESI-MS, m/z=230 [M+H].
1-(Нафталин-1-ил)пропан-2-он (35)
+
4
К перемешиваемому раствору N-метокси-N-метил-2-(нафталин-1-ил)ацетамида (34, 7,0 г, 31,0 ммоль) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляли по каплям при 0°Cметилмагнийбромид (60,0 мл, 1,0 M в тетрагидрофуране). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора NHCl (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением 1-(нафталин-1-ил)пропан-2-она (35) в виде желтого масла (3,5 г, 61%). ESI-MS, m/z=185 [M+H].
Этил 5-(нафталин-1-ил)-2,4-диоксопентаноат (36)
2
+
К перемешиваемому раствору 1-(нафталин-1-ил)пропан-2-она (35, 3,0 г, 16,0 ммоль) диэтилоксалата (3,0 г, 20,0 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляли третбутоксид натрия (1,5 г, 16,0 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов и затем подогревали до комнатной температуры в течение ночи. Растворитель удаляли, и остаток растворяли в воде и нейтрализовывали до pH 2 с помощью 1N HCl и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу объединяли и промывали солевым раствором, и сушили над безводным сульфатом натрия. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:1) с получением этил 5-(нафталин-1-ил)-2,4-диоксопентаноата (36) в виде желтого масла (1,5 г, 33%). ESI-MS, m/z=285 [M+H].
Этил 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (37)
+
Смесь гидразина (51 масс.% водный раствор) (1,0 мл, 21,4 ммоль), этил 5-(нафталин-1-ил)-2,4-диоксопентаноата (36, 1,5 г, 5,3 ммоль) в этаноле (50 мл) перемешивали при 80°C в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:1) с получением этил 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (37) в виде желтого твердого вещества (0,8 г, 57%). ESI-MS, m/z=281 [M+H].
3-(Нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоновая кислота (38)
1
+
6
К перемешиваемому раствору этил 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (37, 0,8 г, 2,9 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляли раствор гидроксид лития (0,4 г, 14,5 ммоль) в воде (15 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали под вакуумом, и затем подкисляли до pH 1 с помощью 10% HCl. Осаждали белое твердое вещество, собирали его фильтрацией и промывали водой. Твердое вещество затем очищали препаративной HPLC с получением 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (38) в виде белого твердого вещества (79,9 мг, 11%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ 13,11 (уш.с, 2H), 8,14-8,12 (м, 1H), 7,75-7,73 (м, 1H), 7,93-7,85 (м, 1H), 7,82-7,40 (м, 4H), 6,38 (с, 1H), 4,43 (с, 2H). ESI-MS, m/z=253 [M+H].
5-Хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (39)
1
+
6
К раствору 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (38, 500,0 мг, 2,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) добавляли 5-хлор-3-гидроксихинолин-2(1H)-он (17, 273,0 мг, 1,4 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимид (1,9 г, 9,0 ммоль) и 4-(пирролидин-1-ил)пиридин (110,0 мг, 0,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции, смесь разбавляли водой, экстрагировали дихлорметаном, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанолом/дихлорметан (5:95) с получением 5-хлор-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-3-ил 3-(нафталин-1-илметил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (39) в виде белого твердого вещества (30,0 мг, 5%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,73 (с, 1H), 12,52 (с, 1H), 8,16-7,86 (м, 4H), 7,61-7,32 (м, 7H), 6,57 (с, 1H), 4,53 (с, 2H). ESI-MS, m/z=430 [M+H].
Пример 12. Синтез 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 1H-пиразол-5-карбоксилата (47)
2,3-Диметоксипиридин (40)
+
К перемешиваемому раствору метоксида натрия (300,0 мл, 30% в метаноле) добавляли 2-хлор-3-метоксипиридин (55,0 г, 383,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:5) с получением 2,3-диметоксипиридина (40) в виде желтого масла (42,0 г, 79%). ESI-MS, m/z=140 [M+H].
5-Бром-2,3-диметоксипиридин (41)
3
+
К перемешиваемому раствору 2,3-диметоксипиридина (40, 27,0 г, 194,0 ммоль) в дихлорметане (200 мл) добавляли бром (9,0 мл, 174,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Величину pH смеси доводили до 6 с помощью насыщенного водного раствора NaHCO. Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×300 мл), промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:5) с получением 5-бром-2,3-диметоксипиридина (41) в виде желтого масла (22,0 г, 52%). ESI-MS, m/z=218 [M+H].
5,6-Диметоксиникотинальдегид (42)
2
4
°C
+
К раствору 5-бром-2,3-диметоксипиридина (41, 21,7 г, 99,5 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (200 мл) добавляли по каплям н-бутиллитий (48,0 мл, 2,5 моль/л в гексане) при -78°C в атмосфере N. Смесь перемешивали при -78 в течение 1 часа. Затем к смеси при -78°C добавляли N, N-диметилформамид (16,2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение еще 30 минут при -78°C. После завершения реакции, смесь гасили насыщенным водным раствором NHCl, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением 5,6-диметоксиникотинальдегида (42) в виде желтого твердого вещества (13,5 г, 81%). ESI-MS, m/z=168 [M+H].
(5,6-Диметоксипиридин-3-ил)метанол (43)
4
4
+
К перемешиваемому раствору 5,6-диметоксиникотинальдегида (42, 21,0 г, 125,6 ммоль) в метаноле (200 мл) добавляли порциями NaBH (17,1 г, 452,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции, смесь гасили насыщенным водным раствором NHCl. Смесь экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси дихлорметан/метанол (9:1) с получением (5,6-диметоксипиридин-3-ил)метанола (43) в виде желтого твердого вещества (10,5 г, 49%). ESI-MS, m/z=170 [M+H].
5-(Бромметил)-2,3-диметоксипиридин (44)
2
+
К раствору (5,6-диметоксипиридин-3-ил)метанола (43, 10,3 г, 60,9 ммоль) в дихлорметане (200 мл) добавляли трифенилфосфин (24,0 г, 91,5 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°C. Затем к смеси добавляли тетрабромметан (30,0 г, 91,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой, экстрагировали дихлорметаном, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:5) с получением 5-(бромметил)-2,3-диметоксипиридина (44) в виде коричневого твердого вещества (6,6 г, 47%). ESI-MS, m/z=232 [M+H].
5-(((3,4-Дихлорфенил)тио)метил)-2,3-диметоксипиридин (45)
+
К смеси 5-(бромметил)-2,3-диметоксипиридина (44, 540,0 мг, 2,3 ммоль) и 3,4-дихлорбензол-1-тиола (498,4 мг, 2,8 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) добавляли карбонат калия (646,0 мг, 4,7 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой, экстрагировали дихлорметаном, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (3:7) с получением 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2,3-диметоксипиридина (45) в виде коричневого твердого вещества (640,0 мг, 83%). ESI-MS, m/z=330 [M+H].
5-(((3,4-Дихлорфенил)тио)метил)-3-гидроксипиридин-2(1H)-он (46)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2,3-диметоксипиридина (45, 330,0 мг, 1,0 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли трибромборан (10,0 мл, 1,0 M в дихлорметане). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов. Полученную смесь испаряли под вакуумом. Величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь экстрагировали дихлорметаном, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали препаративной HPLC с получением 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-3-гидроксипиридин-2(1H)-она (46) в виде розового твердого вещества (132,6 мг, 44%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 11,51 (с, 1H), 9,14 (с, 1H), 7,59 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,70 (д, J=2,4 Гц, 1H), 4,03 (с, 2H). ESI-MS, m/z=302 [M+H].
5-(((3,4-Дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 1H-пиразол-5-карбоксилат (47)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-3-гидроксипиридин-2(1H)-она (46, 302,0 мг, 1,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (15 мл) добавляли N, N-дициклогексилкарбодиимид (309,0 мг, 1,5 ммоль), 1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (168,0,0 мг, 1,5 ммоль), 4-(пирролидин-1-ил)пиридин (30,0 мг, 0,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (2×50 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95), и затем препаративной HPLC с получением 5-(((3,4-дихлор-фенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 1H-пиразол-5-карбоксилата (47) в виде белого твердого вещества (31,7 мг, 8%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,71 (с, 1H), 11,96 (с, 1H), 7,96 (1, 1H), 7,64-7,48 (м, 3H), 7,35-7,30 (м, 2H), 6,90 (с, 1H), 4,13 (с, 2H). ESI-MS, m/z=396 [M+1].
Пример 13. Синтез 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (48)
5-(((3,4-Дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (48)
18
t
6
1
+
Смесь 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (31, 200,0 мг, 0,8 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимида (198,0 мг, 1,0 ммоль), 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-3-гидроксипиридин-2(1H)-она (46, 240,0 мг, 0,8 ммоль) и 4-(пирролидин-1-ил)- пиридина (24,0 мг, 0,2 ммоль) в N, N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученную смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с использованием смеси дихлорметан/метанол (95:5) и затем очищали препаративной HPLC при следующих условиях: колонка SunFire Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм 10 нм; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 52% B до 77% B через 7 минут; 254/220 нм; R: 6,82 мин, с получением 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил 3-(4-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (48) в виде белого твердого вещества (60,0 мг, 14%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,45 (с, 1H), 11,94 (с, 1H), 7,64 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,56 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,36-7,24 (м, 6H), 6,65 (с, 1H), 4,12 (с, 2H), 2,96 (с, 4H). ESI-MS, m/z=534 [M+H].
Пример 14. Синтез 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (49)
5-(((3,4-Дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилат (49)
18
6
1
+
К перемешиваемому раствору 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-3-гидроксипиридин-2(1H)-она (46, 300,0 мг, 1,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (15 мл) добавляли N, N-дициклогексилкарбодиимид (248,0 мг, 1,2 ммоль), 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (26, 250,0 мг, 1,2 ммоль), 4-(пирролидин-1-ил)пиридин (30,0 мг, 0,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (2×80 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95), затем препаративной HPLC при следующих условиях: колонка SunFire Prep C OBD, 19 × 150 мм 5 мкм 10 нм; подвижная фаза, вода (0,1% муравьиная кислота) и ацетонитрил (от 53% ацетонитрила до 70% через 7 минут) с получением 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (49) в виде белого твердого вещества (152,0 мг, 18%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,47 (с, 1H), 11,94 (с, 1H), 7,64 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,57 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,35-7,17 (м, 7H), 6,65 (с, 1H), 4,13 (с, 2H), 2,97 (с, 4H). ESI-MS, m/z=500 [M+H].
Пример 15. Синтез 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилата (50)
5-(((3,4-Дихлорфенил)тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилат (50)
1
+
6
К перемешиваемому раствору 5-(((3,4-дихлорфенил)тио)метил)-3-гидроксипиридин-2(1H)-она (46, 450,0 мг, 1,5 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) добавляли N, N-дициклогексилкарбодиимид (371,0 мг, 1,8 ммоль), 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоновую кислоту (323,0 мг, 1,5 ммоль), 4-(пирролидин-1-ил)пиридин (45,0 мг, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95), и затем препаративной HPLC с получением 5-(((3,4-дихлорфенил)-тио)метил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил 4-фенетил-1H-пиррол-2-карбоксилата (50) в виде белого твердого вещества (97,9 мг, 13%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 11,89 (с, 1H), 11,83 (с, 1H), 7,63 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,56 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,42-7,10 (м, 7H), 6,90 (д, J=2,1 Гц, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,12 (с, 2H), 2,92-2,80 (м, 2H), 2,80-2,70 (м, 2H). ESI-MS, m/z=499 [M+1].
Пример 16. Синтез 6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (56)
3-Хлорбензо[5,6][1,4]диоксино[2, 3-c] пиридазин (51)
+
К суспензии гидрида натрия (15,0 г, 375,0 ммоль) в 1,4-диоксане (400 мл) добавляли на ледяной бане бензол-1,2-диол (36,0 г, 320,0 ммоль) и 3,4,6-трихлорпиридазин (60,0 г, 320,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 100°C в течение 10 часов, затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора NaCl (100 мл). Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3×500 мл), и органические слои объединяли. Затем органический слой промывали солевым раствором. Смесь сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением 3-хлорбензо[5,6]-[1,4]диоксино[2,3-c]пиридазина (51) в виде белого твердого вещества (32,0 г, 50%). ESI-MS, m/z=221 [M+H].
3-Винилбензо[5,6][1,4]диоксино[2,3-c]пиридазин (52)
2
+
К перемешиваемому раствору 3-хлорбензо[5,6][1,4]диоксино-[2,3-c]пиридазина (51, 30,0 г, 136,0 ммоль) в 1,4-диоксане (300 мл) добавляли 4,4,5,5-тетраметил-2-винил-1,3,2-диоксаборолан (25,2 г, 164,0 ммоль), Pd(dppf)Cl (20,1 г, 27,6 ммоль), карбонат натрия (28,8 г, 272,0 ммоль) и воду (60 мл). Полученный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3×500 мл), и органические слои объединяли. Затем органический слой промывали солевым раствором. Смесь сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением 3-винилбензо[5,6][1,4]диоксино[2,3-c]пиридазина (52) в виде белого твердого вещества (18,0 г, 65%). ESI-MS, m/z=213 [M+H].
(E)-3-(3,5-Дифторстирил)бензо[5,6][1,4]диоксино[2,3-c]- пиридазин (53)
+
К перемешиваемому раствору 3-винилбензо[5,6][1,4]- диоксино[2,3-c]пиридазина (52, 15,0 г, 74,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (100 мл) добавляли диацетат палладия (0,81 г, 3,6 ммоль), три(o-толил)фосфин (4,5 г, 15,0 ммоль), триэтиламин (144,0 г, 1410,0 ммоль) и 1-бром-3,5-дифторбензол (17,1 г, 90,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 85°C в течение 16 часов. Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3×500 мл), и органические слои объединяли. Затем органический слой промывали солевым раствором. Смесь сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:3) с получением (E)-3-(3, 5-дифторстирил)бензо[5,6]-[1,4]диоксино[2,3-c]пиридазина (53) в виде желтовато-белого твердого вещества (9,0 г, 41%). ESI-MS, m/z=325 [M+H].
(E)-3,4-Бис(бензилокси)-6-(3,5-дифторстирил)пиридазин (54)
+
К раствору бензилового спирта (6,0 г, 55,6 ммоль) в толуоле (50 мл) добавляли третбутоксид натрия (6,4 г, 57,6 ммоль) при 0°C. К упомянутой выше реакционной смеси добавляли по каплям при 0°C раствор (E)-3-(3,5-дифторстирил)бензо[5,6][1,4]диоксино-[2,3-c]пиридазина (53, 8,4 г, 26,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (30 мл) и толуоле (10 мл), и реакционную смесь нагревали до 120°C в течение 4 часов. Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3×200 мл), и органические слои объединяли. Затем органический слой промывали солевым раствором. Смесь сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:1) с получением (E)-3,4-бис(бензилокси)-6-(3,5-дифторстирил)пиридазина (54) в виде коричневого твердого вещества (2,8 г, 25%). ESI-MS, m/z=431 [M+H].
6-(3,5-Дифторфенетил)-4-гидроксипиридазин-3(2H)-он (55)
1
+
6
К раствору (E)-3,4-бис(бензилокси)-6-(3,5-дифторстирил)- пиридазина (54, 500,0 мг, 1,2 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли 10% палладия на угле (90,0 мг, 0,1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов в атмосфере водорода. Реакционную смесь пропускали через слой целита, и фильтрат концентрировали под вакуумом с получением твердого вещества. Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением 6-(3, 5-дифторфенетил)-4-гидроксипиридазин-3(2H)-она (55) в виде розового твердого вещества (60,0 мг, 21%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,71 (с, 1H), 10,78 (уш.с, 1H), 7,06-6,96 (м, 3H), 6,60 (с, 1H), 6,88 (с, 1H), 2,97-2,89 (м, 2H), 2,81-2,77 (м, 2H). ESI-MS, m/z=253 [M+H].
6-(3,5-Дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилат (56)
1
+
6
Раствор 6-(3, 5-дифторфенетил)-4-гидроксипиридазин-3(2H)-она (55, 500,0 мг, 2,0 ммоль), N, N-дициклогексилкарбодиимида (450,0 мг, 2,2 ммоль), 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты (4, 550,0 мг, 4,4 ммоль), 4-пирролидинопиридина (30,0 мг, 0,2 ммоль) в дихлорметане (50 мл) перемешивали при приблизительно 25°C в течение 16 часов. Полученную смесь концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением 6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 4-(4-хлорфенетил)-1H-пиррол-2-карбоксилата (56) в виде белого твердого вещества (48,7 мг, 5%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ = 13,17 (с, 1H), 11,99 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,33 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,26 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,17-6,98 (м, 3H), 6,97 (с, 1H), 6,89 (с, 1H), 2,99-2,84 (м, 6H), 2,76-2,72 (м, 2H). ESI-MS, m/z=484 [M+H].
Пример 17. Синтез 6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидро-пиридазин-4-ил 1H-пиразол-5-карбоксилата (57)
6-(3,5-Дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 1H-пиразол-5-карбоксилат (57)
18
t
6
1
+
К перемешиваемому раствору 6-(3,5-дифторфенетил)-4-гидроксипиридазин-3(2H)-она (55, 252,0 мг, 1,0 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли раствор пропилфосфинового ангидрида (50% в этилацетате) (1,2 мл, 2,0 ммоль), пиридин (1,0 мл, 12,2 ммоль) и 1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (168,0 мг, 1,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95) и препаративной HPLC (колонка: SunFire Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм 10 нм; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 27% B до 47% B через 7 минут; 254/220 нм; R: 6,88 мин) с получением 6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 1H-пиразол-5-карбоксилата (57) в виде белого твердого вещества (10,2 мг, 3%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,22 (с, 1H), 12,70 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,13-6,92 (м, 4H), 6,59 (с, 1H), 3,05-2,85 (м, 2H), 2,85-2,69 (м, 2H). ESI-MS, m/z=347 [M+H].
Пример 18. Синтез 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (62)
(Нафталин-1-илметил)цинка(II) бромид (58)
При давлении 400 паскалей, смесь хлорида лития (5,5 г, 130,0 ммоль) и цинка (8,3 г, 130,0 ммоль) перемешивали при 170°C в течение 0,5 часа, охлаждали до комнатной температуры, затем медленно добавляли 1,2-дибромэтан (1,9 г, 9,9 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа, повторно охлаждали до комнатной температуры, добавляли хлортриметилсилан (1,1 г, 9,9 ммоль), и смесь перемешивали вы течение еще 1 часа, добавляли 1-(бромметил)- нафталин (11,0 г, 49,8 ммоль) и перемешивали в течение 1 часа. После фильтрации, фильтрат непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3-(Нафталин-1-илметил)бензо[5,6][1,4]диоксино[2,3-c]- пиридазин (59)
2
2
6
1
+
К смеси (нафталин-1-илметил)цинка(II) бромида (58) с предыдущей стадии добавляли 3-хлорбензо[5,6][1,4]диоксино[2,3-c]пиридазин (51, 2,8 г, 12,5 ммоль), Pd(dppf)Cl (1,5 г, 2,1 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере N. Полученную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:5) с получением 3-(нафталин-1-илметил)бензо[5,6][1,4]- диоксино[2,3-c]пиридазина (59) в виде желтого твердого вещества (632,0 мг, 16%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 8,24-8,17 (м, 1H), 7,97-7,91 (м, 1H), 7,88-7,83 (м, 1H), 7,59-7,45 (м, 4H), 7,16-7,10 (м, 2H), 7,08-6,98 (м, 3H), 4,59 (с, 2H). ESI-MS, m/z=327 [M+H].
3,4-Бис(бензилокси)-6-(нафталин-1-илметил)пиридазин (60)
+
К смеси 3-(нафталин-1-илметил)бензо[5,6][1,4]диоксино[2,3-c]пиридазина (59, 632,0 мг, 1,9 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) и толуоле (20 мл) добавляли третбутоксид натрия (868,0 мг, 7,7 ммоль) и бензиловый спирт (837,0 мг, 7,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 16 часов, охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (3:7) с получением 3,4-бис(бензил-окси)-6-(нафталин-1-илметил)пиридазина (60) в виде желтого твердого вещества (320 мг, 38%). ESI-MS, m/z=433 [M+H].
4-Гидрокси-6-(нафталин-1-илметил)пиридазин-3(2H)-он (61)
2
6
1
+
К раствору 3,4-бис(бензилокси)-6-(нафталин-1-илметил)- пиридазина (60, 330,0 мг, 0,8 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли 10% палладия на угле (100,0 мг, 0,1 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов в атмосфере H. Катализатор отфильтровывали, и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси дихлорметан/метанол (95:5) с получением 4-гидрокси-6-(нафталин-1-илметил)пиридазин-3(2H)-она (61) в виде желтого твердого вещества (150,0 мг, 78%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,68 (с, 1H), 8,13-8,06 (м, 1H), 7,96-7,89 (м, 1H), 7,83 (дд, J=5,7, 3,8 Гц, 1H), 7,59-7,43 (м, 4H), 6,41 (с, 1H), 4,26 (с, 2H). ESI-MS, m/z=253 [M+H].
6-(Нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилат (62)
18
6
1
+
К раствору 4-гидрокси-6-(нафталин-1-илметил)пиридазин-3(2H)-она (61, 500,0 мг, 2,0 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли раствор пропилфосфинового ангидрида (50% в этилацетате) (1,2 мл, 2,0 ммоль), пиридин (1,0 мл, 12,2 ммоль) и 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (26, 428,0 мг, 2,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95) и затем очищали препаративной HPLC (колонка: XBridge Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм C0013; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 45% B до 67% B через 7 минут; 254/220 нм) с получением 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилата (62) в виде желтовато-белого твердого вещества (50,5 мг, 5%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,54 (с, 1H), 13,24 (с, 1H), 8,15-8,12 (м, 1H), 7,97-7,93 (м, 1H), 7,88-7,84 (м, 1H), 7,60-7,44 (м, 5H), 7,31-7,16 (м, 5H), 6,65 (с, 1H), 4,48 (с, 2H), 2,96 (с, 4H). ESI-MS, m/z=451 [M+H].
Пример 19. Синтез 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (67)
4-(3-Хлорфенил)бутан-2-он (63)
+
Смесь 1-хлор-3-(хлорметил)бензола (49,0 г, 304,3 ммоль), пентан-2,4-диона (30,6 г , 304,3 ммоль) и карбоната калия (42,3 г, 304,3 ммоль) в этаноле (500 мл) нагревали при 80°C в течение 16 часов. После завершения реакции, смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:9) с получением 4-(3-хлорфенил)бутан-2-она (63) в виде желтого масла (20,0 г, 27%). ESI-MS, m/z=183 [M+H].
Этил 6-(3-хлорфенил)-2,4-диоксогексаноат (64)
+
К раствору гидрида натрия (5,6 г, 232,0 ммоль) в этаноле (150 мл) добавляли смесь 4-(3-хлорфенил)бутан-2-она (63, 19,6 г, 107,3 ммоль) и диэтилоксалата (15,7 г, 107,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции, смесь охлаждали до комнатной температуры. Величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием петролейного эфира с получением этил 6-(3-хлорфенил)-2,4-диоксогексаноата (64) в виде желтого масла (17,9 г, 59%). ESI-MS, m/z=283 [M+H].
Этил 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (65)
+
К раствору 6-(3-хлорфенил)-2,4-диоксогексаноата (64, 17,2 г, 60,8 ммоль) в этаноле (200 мл) добавляли гидразин (51 масс.% водный раствор) (13,0 мл, 213,1 ммоль). Полученную смесь нагревали при 80°C в течение 3 часов. После завершения реакции, смесь охлаждали до комнатной температуры и затем испаряли под вакуумом. Остаток очищали путем перекристаллизации в смеси этанол/этилацетат/петролейный эфир (1:10:1) с получением этил 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (65) в виде белого твердого вещества (15,6 г, 90%). ESI-MS, m/z=279 [M+H].
3-(3-Хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновая кислота (66)
1
+
6
К раствору этил 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (65, 1,0 г, 3,6 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли гидроксид натрия (288,0 мг, 7,2 ммоль) в воде (3 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом с получением 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (66) в виде белого твердого вещества (700 мг, 78%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,96 (с, 2H), 7,33-7,17 (м, 4H), 6,48 (с, 1H), 2,95-2,87 (м, 4H). ESI-MS, m/z=250 [M+H].
6-(Нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (67)
18
6
1
+
К перемешиваемому раствору 4-гидрокси-6-(нафталин-1-ил-метил)пиридазин-3(2H)-она (61, 500,0 мг, 2,0 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли раствор пропилфосфинового ангидрида (50% в этилацетате) (1,2 мл, 2,0 ммоль), пиридин (1,0 мл, 12,2 ммоль) и 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (66, 500,0 мг, 2,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95) и затем очищали препаративной HPLC (колонка: XBridge Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм C0013; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 45% B до 65% B через 10 минут; 254/220 нм) с получением 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-(3-хлорфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (67) в виде светло-желтого твердого вещества (114,2 мг, 12%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,54 (с, 1H), 13,24 (с, 1H), 8,15-8,12 (м, 1H), 7,97-7,84 (м, 2H), 7,63-7,50 (м, 5H), 7,49-7,17 (м, 4H), 6,67 (с, 1H), 4,43 (с, 2H), 2,97 (с, 4H). ESI-MS, m/z=485 [M+H].
Пример 20. Синтез 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-ди-гидропиридазин-4-ил 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (72)
4-(4-Фторфенил)бутан-2-он (68)
+
Смесь 1-(хлорметил)-4-фторбензола (30,0 г, 207,5 ммоль), пентан-2,4-диона (20,8 г, 207,8 ммоль) и карбоната калия (28,8 г, 208,4 ммоль) в этаноле (200 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 16 часов. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (6:94) с получением 4-(4-фторфенил)бутан-2-она (68) в виде светло-желтого масла (21,0 г, 61%). ESI-MS, m/z=167 [M+H].
Этил 6-(4-фторфенил)-2,4-диоксогексаноат (69)
+
К охлаждаемому льдом раствору этанола (100 мл) добавляли порциями гидрид натрия (6,6 г, 164,5 ммоль). Затем к смеси добавляли при этой же температуре смесь 4-(4-фторфенил)бутан-2-она (68, 21,0 г, 126,4 ммоль) и диэтилоксалата (18,5 г, 126,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Величину pH полученной смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Большую часть растворителя удаляли под вакуумом. Остаток смеси экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (1:9) с получением этил 6-(4-фторфенил)-2,4-диоксо-гексаноата (69) в виде желтого масла (24,3 г, 72%). ESI-MS, m/z=267 [M+H].
Этил 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (70)
+
К раствору этил 6-(4-фторфенил)-2,4-диоксогексаноата (69, 24,3 г, 91,3 ммоль) в этаноле (200 мл) добавляли гидразин (51 масс.% водный раствор) (14,0 мл, 229,5 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом. Остаток очищали путем перекристаллизации в смеси этанол/этилацетат/петролейный эфир (1:8:1) с получением этил 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (70) в виде белого твердого вещества (20,0 г, 84%). ESI-MS, m/z=263 [M+H].
3-(4-Фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновая кислота (71)
18
t
6
1
+
К раствору этил 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (70, 100,0 мг, 0,4 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли раствор гидроксида натрия (836,0 мг, 20,9 ммоль) в воде (3 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученную смесь испаряли под вакуумом. Величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали препаративной HPLC при следующих условиях: колонка SunFire Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм 10 нм; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 15% B до 55% B через 7 минут; 254/220 нм; R: 6,22 мин, с получением 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (71) в виде белого твердого вещества (40,0 мг, 42%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 12,96 (с, 2H), 7,27-7,22 (м, 2H), 7,14-7,06 (м, 2H), 6,47 (с, 1H), 2,93-2,85 (м, 4H). ESI-MS, m/z=235 [M+H].
6-(Нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (72)
18
6
1
+
К раствору 4-гидрокси-6-(нафталин-1-илметил)пиридазин-3(2H)-она (61, 300,0 мг, 1,2 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли раствор пропилфосфинового ангидрида (50% в этилацетате) (1,0 мл, 1,7 ммоль), пиридин (0,8 мл, 9,8 ммоль) и 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (71, 278,6 мг, 1,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции, смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95) и затем очищали препаративной HPLC (колонка: XBridge Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм C0013; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 45% B до 66% B через 7 минут; 254/220 нм) с получением 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-(4-фторфенетил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (72) в виде желтовато-белого твердого вещества (114,2 мг, 12%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,53 (с, 1H), 13,23 (с, 1H), 8,15-8,11 (м, 1H), 7,97-7,92 (м, 1H), 7,88-7,84 (м, 1H), 7,60-7,44 (м, 5H), 7,27-7,23 (м, 2H), 7,13-7,07 (м, 2H), 6,65 (с, 1H), 4,43 (с, 2H), 2,94 (с, 4H). ESI-MS, m/z=469 [M+H].
Пример 21. Синтез 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоксилата (77)
Этил 5-(4-хлорфенил)-2, 4-диоксопентаноат (73)
+
К охлаждаемому льдом раствору этанола (500 мл) добавляли порциями гидрид натрия (15,6 г, 650,0 ммоль). Затем к смеси добавляли смесь 1-(4-хлорфенил)пропан-2-она (50,0 г, 296,5 ммоль) и диэтилоксалата (43,5 г, 297,3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции, величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси этилацетат/петролейный эфир (3:7) с получением этил 5-(4-хлорфенил)-2,4-диоксопентаноата (73) в виде желтого масла (59,0 г, 74%). ESI-MS, m/z=269 [M+H].
Этил 3-(4-хлорбензил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (74)
+
К раствору этил 5-(4-хлорфенил)-2,4-диоксопентаноата (73, 59,0 г, 219,6 ммоль) в этаноле (260 мл) добавляли гидразин (51 масс.% водный раствор) (11,0 мл, 180,3 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом. Остаток очищали путем перекристаллизации в смеси этанол/этилацетат/PE (1:8:1) с получением этил 3-(4-хлорбензил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (74) в виде желтовато-белого твердого вещества (32,0 г, 55%). ESI-MS, m/z=265 [M+H].
Этил 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоксилат (75)
2
6
1
+
К раствору этил 3-(4-хлорбензил)-1H-пиразол-5-карбоксилата (74, 5,0 г, 18,9 ммоль) в метаноле (150 мл) добавляли 10% Pd/C (1,2 г, 1,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов в атмосфере H. После завершения реакции, смесь фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией с обращенной фазой с получением этил 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоксилата (75) в виде желтого твердого вещества (2,2 г, 50%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 7,35-7,19 (м, 5H), 6,48 (с, 1H), 4,23 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 3,97 (с, 2H), 1,26 (т, J=7,2 Гц, 3H). ESI-MS, m/z=231 [M+H].
3-Бензил-1H-пиразол-5-карбоновая кислота (76)
18
t
6
1
+
К раствору этил 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоксилата (75, 500,0 мг, 2,2 ммоль) в смеси метанол/вода (10/2 мл) добавляли гидроксид натрия (176,0 мг, 4,4 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа. После завершения реакции, смесь испаряли под вакуумом для удаления большей части растворителей. Величину pH смеси доводили до 1 с помощью 1N HCl. Смесь экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали препаративной HPLC при следующих условиях: колонка SunFire Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм 10 нм; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 15% B до 35% B через 9 минут; 254/220 нм; R: 8,9 мин, с получением 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (76) в виде белого твердого вещества (130,0 мг, 30%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,04 (с, 2H), 7,33-7,19 (м, 5H), 6,46 (с, 1H), 3,96 (с, 2H). ESI-MS, m/z=203 [M+H].
6-(Нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоксилат (77)
18
6
1
+
К перемешиваемому раствору 4-гидрокси-6-(нафталин-1-илметил)пиридазин-3(2H)-она (61, 500,0 мг, 2,0 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляли раствор пропилфосфинового ангидрида (50% в этилацетате) (1,5 мл, 2,5 ммоль), пиридин (0,8 мл, 9,8 ммоль) и 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (76, 404,0 мг, 2,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат испаряли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием смеси метанол/дихлорметан (5:95) и затем очищали препаративной HPLC (колонка: XBridge Prep C OBD 19 × 150 мм 5 мкм C0013; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ацетонитрил; расход: 25 мл/мин; градиент: от 45% B до 66% B через 7 минут; 254/220 нм) с получением 6-(нафталин-1-илметил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-бензил-1H-пиразол-5-карбоксилата (77) в виде желтовато-белого твердого вещества (73,0 мг, 8%). H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц) δ 13,68 (с, 1H), 13,24 (с, 1H), 8,14-8,11 (м, 1H), 7,97-7,92 (м, 1H), 7,88-7,83 (м, 1H), 7,59-7,44 (м, 5H), 7,34-7,20 (м, 5H), 6,63 (с, 1H), 4,45 (с, 2H), 4,02 (с, 2H). ESI-MS, m/z=437 [M+H].
Пример 22. In vitro измерения активностей оксидазы D-аминокислот (DAAO)
2
2
2
2
Активность pkDAAO (DAAO свиной почки) измеряли с использованием D-пролина в качестве субстрата для продуцирования пероксида водорода (HO). Продуцированный HO окислялся пероксидазой, а полученные свободные радикалы реагировали с реагентом 1,2-фенилендиамином (OPD). Продукт реакции характеризовался поглощением при 450 нм. В качестве показателя активности pkDAAO использовали данные по измерению оптической плотности OD450. Все соединения растворяли в DMSO. Каждое соединение разбавляли в DMSO при 3-кратном или 4-кратном серийном разведении для построения 9-точечной кривой зависимости "доза-эффект". Каждый образец в трех экземплярах добавляли по 10 мкл/лунка в 96-луночный аналитический микропланшет. В лунки с положительным контролем добавляли 10 мкл DMSO. Разбавленные соединения инкубировали с pkDAAO в темноте в течение 10 минут и затем подвергали реакции с D-пролином. Конечная реакционная смесь состояла из 0,01 ед/мл pkDAAO, 0,03% OPD, 25 мкг/мл HRP и 40 мМ D-пролина в PBS. Реакционные планшеты затем инкубировали в темноте при комнатной температуре. Считывание оптической плотности OD450 проводили через 0 и 20 минут с помощью планшетного ридера Molecular Device Spectra Max Plus. Величины ингибирования в процентах для каждой лунки рассчитывали по следующему уравнению:
образца, 20 минут
образца, 0 минут
DMSO, 20 минут
DMSO, 0 минут
Процент ингибирования = (OD450  - OD450 ) / (OD450  - OD450 ) x 100%
50
Для расчета величины IC для каждого соединения использовали нелинейную модель подбора аппроксимирующей кривой с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 5.
2
2
2
2
Активность hDAAO (DAAO человека) измеряли с использованием D-серина в качестве субстрата для продуцирования HO. Продуцированный HO окислялся пероксидазой, а образующиеся свободные радикалы далее подвергали реакции с реагентом Amplex Red для инициирования флуоресцентного излучения. В качестве показателя активности hDAAO измеряли интенсивность флуоресценции при 590 нм. Все соединения растворяли в DMSO. Каждое соединение разбавляли в DMSO при 3-кратном серийном разведении для построения 9-точечной кривой зависимости "доза-эффект". Каждый образец в трех экземплярах добавляли по 1 мкл/лунку в 96-луночные черные планшеты. В лунки с положительным контролем добавляли 1 мкл DMSO. Затем в каждую лунку планшета добавляли с помощью многоканальной пипетки 49 мкл буфера для анализа (100 мМ Трис-HCl, pH 8,5), содержащего 1,2 нг/мл hDAAO, 900 нМ FAD, 0,2 ед/мл HRP и 100 мкМ Amplex Red. Затем добавляли 50 мкл 100 мМ D-серина в буфере для анализа. Реакционные планшеты затем инкубировали в темноте при комнатной температуре. Величину флуоресцентного излучения регистрировали через 0 и 20 минут с помощью флуоресцентного планшетного ридера Molecular Device Gemini EM, используя следующие настройки: фильтр возбуждения 530 нм и фильтр эмиссии 590 нм. Величины процента ингибирования для каждой лунки рассчитывали по следующему уравнению:
образец, 20 мин
образец, 0 мин
DMSO, 20 мин
DMSO, 0 мин
Процент ингибирования = (флуоресценция  - флуоресценция ) / (флуоресценция  - флуоресценция ) х 100%
50
Для расчета величины IC для каждого соединения использовали нелинейную модель подбора аппроксимирующей кривой с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 5.
Таблица 1. Ингибирующая активность соединений в отношении DAAO
Соединение№
hDAAO IC<sub>50</sub> (мкМ)
pkDAAO IC<sub>50</sub> (мкM)
1
100-500
10000-50000
5
10-100
10-100
9
1-10
10-100
14
1-10
10-100
18
0,1-0,5
1-10
23
0,1-1
1-10
27
0,1-0,5
0,1-1
32
0,1-1
0,1-0,5
49
1-10
0,1-1
50
1-10
1-10
56
1-10
10-100
62
0,1-1
0,01-0,1
67
0,1-0,5
0,01-0,1
72
0,1-0,5
0,01-0,1
77
0,1-1
0,01-0,1
<img file="00000069.jpg" he="43" wi="65" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,1-0,5
0,01-0,1
<img file="00000070.jpg" he="47" wi="67" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,1-0,5
0,01-0,1
<img file="00000071.jpg" he="47" wi="64" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,1-0,5
0,01-0,1
<img file="00000072.jpg" he="39" wi="68" img-content="undefined" img-format="jpg" />
0,1-0,5
0,01-0,1
50
50
50
50
Величины IC для некоторых соединений приведены в таблице 1. В начальной стадии исследования, подвергавшиеся испытанию соединения не обеспечивали высокой ингибирующей активности. Величины IC составляли более 100 мкМ. После испытания соединений с модифицированной структурой, были получены величины IC ниже 1 мкМ. Самые активные соединения характеризовались величинами IC ниже 0,5 мкМ.
Пример 23. Терапевтические эффекты соединения из примера 1
Воздействие соединения из примера 1 на спонтанную локомоцию мышей
Мышей разбивали на группы и содержали с доступом без ограничения к корму и воде в вентилируемых клетках из полисульфона (фирмы Alternative Design, AR, USA) (3-5 мышей в клетке) в помещениях для животных фирмы SyneuRx International (Taiwan) Corp.. Колонию мышей содержали при цикле 12/12 часов свет/темнота при температуре 22 ± 2°C, и все поведенческие исследования проводили в течение темного цикла. Все животные, использовавшиеся в этом исследовании, были взрослыми мышами (в возрасте, по меньшей мере, 2,5 месяца). Все процедуры на животных выполняли в соответствии с протоколами, утвержденными Институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC).
Соединение из примера 1 помещали в 100% PEG400 и подвергали воздействию ультразвуковой вибрации до тех пор, пока раствор не становился прозрачным. К прозрачному раствору соединения из примера 1 в PEG400 добавляли соответствующее количество PBS (забуференного фосфатом физиологического раствора) для достижения конечной концентрации для каждого уровня дозы. Взрослых мышей случайным образом распределяли по трем группам: контроль с плацебо (со средой), введение соединения из примера 1 в дозе 446 мг/кг и в дозе 892 мг/кг.
Пример дизайна эксперимента представлен на фигуре 1. Мышей, которым перорально вводили либо плацебо (среду), либо низкую/высокую дозу соединения из примера 1, немедленно подвергали испытанию в открытом поле, и показатель спонтанной локомоции выражали как суммарное расстояние перемещения, измеренное в течение определенного периода времени.
Мышей помещали в клетку из плексигласа (37,5 см × 21,5 см × 18 см) при интенсивности освещения 50-65 люкс, и измеряли спонтанную локомоцию в течение 120 минут с использованием системы видеонаблюдения EthoVision (Noldus Information Technology, the Netherlands). В качестве показателя спонтанной локомоции измеряли расстояние перемещения каждой мыши.
На фигуре 2 представлены результаты по спонтанной локомоции после введения соединения из примера 1 при регистрации данных во временных файлах по 5 минут.
Мышам в каждой группе давали возможность привыкнуть к испытательной камере в течение 30 минут. В течение 120 минут наблюдения не было обнаружено значительных различий между группами.
Воздействие соединения из примера 1 на мышей, которым вводили МК801
Мышей содержали в группе (3-5 мышей на клетку) с доступом без ограничения к корму и воде в вентилируемых клетках из полисульфона (фирмы Alternative Design, AR, USA) в помещениях для животных фирмы SyneuRx International (Taiwan) Corp.. Колонию мышей содержали при цикле 12/12 часов свет/темнота при температуре 22 ± 2°C, и все поведенческие исследования проводили в течение темного цикла. Все животные, использовавшиеся в этом исследовании, были взрослыми мышами (в возрасте, по меньшей мере, 2,5 месяца). Все процедуры на животных выполняли в соответствии с протоколами, утвержденными Институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC). Мышей случайным образом распределяли на четыре группы: группа 1 - контроль с плацебо, группа 2 - MK801, группа 3 - соединение из примера 1 в дозе 446 мг/кг+MK801, группа 4 - соединение из примера 1 в дозе 892 мг/кг+MK801. Мышам в группах 2-4 однократно вводили MK-801 (Sigma-Aldrich USA, антагонист рецептора NMDA, растворенного в физиологическом растворе, 0,1 мг/кг, интраперитонеально) за 20 минут до проведения поведенческих тестов. С другой стороны, каждой мыши в группах 4-5 перорально однократно вводили 446 или 892 мг/кг соединения из примера 1 (растворенного в PBS с 30% PEG400) за 20 минут до введения МК801. Кроме того, корректировали дозу МК801 в зависимости от требований каждой теста (0,1 мг/кг для открытого поля, 0,2 мг/кг для преимпульсного ингибирования).
Всех мышей в экспериментах подвергали испытанию в тесте в открытом поле и в тесте преимпульсного ингибирования, по меньшей мере, с интервалом в одну неделю между двумя тестами. Тест в открытом поле использовали для оценки возможности соединения из примера 1 вызывать обратное развитие состояния гиперлокомоции, вызванного введением MK801. Аппаратура и метод регистрации для теста открытого поля были такими же, как описано выше, за исключением введения лекарственных средств. Тест на преимпульсное ингибирование (PPI) с использованием прибора для индуцирования испуга SR-LAB (San Diego Instruments, San Diego, CA, USA) использовали для определения возможности соединения из Примера 1 облегчать вызванное MK801 нарушение функции сенсомоторной фильтрации у мышей. В условиях фонового шума 72 дБ, каждая сессия состояла из 5-минутного период аккумуляции, за которым следовали 64 испытания в четырех блоках. Испытание только с одним импульсом (PA) представляло собой импульс длительностью 40 мс белого шума с мощностью 120 дБ. В случае преимпульсных (pp) + импульсных испытаний, преимпульсные стимулы длительностью 20 мс белого шума с мощностью 78 дБ (pp6), 82 дБ (pp10), 90 дБ (pp18) подавались за 100 мс до импульса с длительностью 40 мс с мощностью 120 дБ. Испытания без подачи стимула (NS) представляли только фоновый шум. Начальный и последний блоки состояли из шести испытаний PA, соответственно. Два средних блока состояли из испытаний PA, pp+pulse и NS. Эти испытания проводили в псевдо произвольном порядке и были разделены интервалом между испытаниями, составляющим в среднем 15 секунд (варьирующим от 10 до 20 секунд). Процент преимпульсного ингибирования рассчитывали по следующей формуле: % PPI=100 × [(балльная оценка PA) - (бальная оценка pp-P)] / (бальная оценка PA), где бальная оценка PA представляло собой среднюю величину PA в средних блоках.
Пример дизайна настоящих экспериментов представлен на фигуре 3. Спонтанную локомоцию и функцию сенсомоторной фильтрации каждой мыши подвергали тестированию в тесте открытого поля и преимпульсного ингибирования, соответственно, с минимальной интервалом между тестами в 1 неделю. За двадцать минут до инъекции MK801 (или физиологического раствора), каждой мыши через желудочный зонд вводили соединение из примера 1 (или плацебо). За двадцать минут до проведения поведенческих тестов, каждой мыши интраперитонеально вводили МК801 (или физиологический раствор).
На фигуре 4 показано воздействие соединения из примера 1 на локомоцию у мышей, которым вводили МК801. По сравнению с контрольной группой, в группе, в которой вводили MK801, в течение 120 минут проведения тестирования наблюдалась гиперлокомоция в тесте в открытом поле. Мыши, которые получали либо низкую, либо высокую дозу соединения из примера 1, до введения им MK801, демонстрировали в течение 120 минут проведения тестирования такой же уровень двигательной активности, как и мыши в контрольной группе, что указывает на примере этих мышей на снижение гиперлокомоции, вызванной введением MK801.
На фигуре 5 представлены результаты по воздействию соединения из примера 1 на преимпульсное ингибирование у мышей, которым вводили МК801. По сравнению с контрольной группой, группа, в которой вводили МК801, характеризовалась более низким процент преимпульсного ингибирования при каждой интенсивности преимпульса. По сравнению с контрольной группой, в группах, в которых вводили низкую/высокую дозу соединения из примера 1, обнаруживался одинаковый уровень процента преимпульсного ингибирования при каждой интенсивности преимпульса.
Давно известно, что симптомы психоза сложно наблюдать и измерять в моделях на животных. Однако последние разработки в этой области значительно повысили полезность и достоверность моделей на животных. В силу этого, типы поведения, связанные с психозом, могут быть протестированы в моделях на животных, включающих психомоторное возбуждение, симптомы возбуждения, фильтрацию сенсорной информации и чувствительность к психотомиметическим препаратам, таким как МК801 (Arguello & Gogos, 2006; Lai et al., 2014). У мышей параметры, относящиеся к гиперлокомоции и изменению локомоции, вызванной новизной (либо обусловленным нарушением привыкания к новизне, либо усилением стремления к исследованию), в тесте с открытым полем могут использоваться для измерения психомоторного возбуждения и симптомов возбуждения, соответственно (Lai et al. al., 2014; Powell & Miyakawa, 2006; Vardigan et al., 2010). В настоящем исследовании, введение соединения из примера 1 приводило к обратному развитию/защищало MK801-индуцированную локомоцию в тесте в открытом поле (фигура 4). Результат показал, что соединение из примера 1 является потенциальным лекарственным средством для лечения симптомов психоза (например, бреда и галлюцинации).
Модели на животных, включающие индуцированную с помощью MK-801 гиперактивность, обычно используют для изучения различных психоневрологических нарушений и разработки анализа состояний, включающих, но этим не ограничивая, шизофрению, биполярное расстройство, синдром дефицита внимания с гиперактивностью, обсессивно-компульсивное расстройство, синдром Туретта, расстройства аутистического спектра, синдром ломкой X-хромосомы, болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви и сенильную деменцию (смотрите публикации Rubia et al., 2010; Sheppard and Bradshaw, 1999; Bent et al., 2014; Powell and Miyakawa, 2006; Nestler and Hyman, 2010; Bubenı´kova´ -Valesˇova et al., 2008; Gobira et al., 2013; Lai et al., 2014; Maio et al., 2014; Sontag et al., 2010; Ding et al., 2014; Walitza et al., 2007; Finestone et al., 1982; Golimstok et al., 2011).
В тесте на преимпульсное ингибирование, введение соединения из примера 1 как в низких, так и в высоких дозах, избавляло/защищало от индуцированных с помощью MK801 дефицитов PPI. Дефицит преимпульсного ингибирования обычно считают шизофреническим эндофенотипом в модели на мышах, так как у человека можно идентифицировать такие же проявления дефицита (Arguello & Gogos, 2006; Geyer & Braff, 1987; Lai et al., 2014). Дефицит преимпульсного ингибирования был также обнаружен при других заболеваниях центральной нервной системы, включающих шизофрению, расстройство аутистического спектра, синдром Аспергера, обсессивно-компульсивное расстройство, болезнь Хантингтона, ночное недержание мочи, синдром дефицита внимания, синдром дефицита внимания c гиперактивностью, тиковое расстройство, большое депрессивное расстройство, расстройства личности, синдром Туретта, блефароспазм, неэпилептические припадки, посттравматическое стрессовое расстройство, паническое расстройство, биполярное расстройство, легкую деменцию при болезни Альцгеймера, деменцию с тельцами Леви и болезнь Альцгеймера (смотрите публикации McAlonan et al., 2002; Braff et al., 2001; Giakoumaki et al., 2007; Ueki et al., 2006; Perriol et al., 2005; Ludewig et al., 2002; Castellanos et al., 1996; Cadenhead et al., 2000; Matsuo et al., 2017; Lai et al., 2014; McCool et al., 2003; Arguello and Gogos, 2006).
Таким образом, результаты описанных в изобретении экспериментов свидетельствуют о том, что описанные в изобретении соединения являются высоко активными ингибиторами DAAO и являются перспективными потенциальными лекарственными препаратами для лечения нарушений ЦНС, в частности, в которые вовлечена оксидаза D-аминокислот (DAAO).
Пример 24. Терапевтические эффекты соединения 56
Воздействие соединения 56 на мышей, которым вводили МК-801
Самцов мышей линии C57BL/6J содержали в группе (3-5 мышей на клетку) с доступом без ограничения к корму и воде в вентилируемых клетках из полисульфона (фирмы Alternative Design, AR, USA) в помещениях для животных фирмы SyneuRx. Колонию мышей содержали при цикле 12/12 часов свет/темнота при температуре 22 ± 2°C, и все поведенческие исследования проводили в течение темного цикла. Все животные, использовавшиеся в этом исследовании, были взрослыми мышами (в возрасте, по меньшей мере, 2,5 месяца). Все процедуры на животных выполняли в соответствии с протоколами, утвержденными Институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC).
2
Мышей случайным образом распределяли на пять групп: группа 1 - контроль с плацебо, группа 2 - МК-801, группа 3 - соединение 56 в дозе 10 мг/кг+МК-801, группа 4 - соединение 56 в дозе 30 мг/кг+МК -801, группа 5 - соединение 56 в дозе 100 мг/кг+МК-801. Мышам в группе 2-5 однократно вводили MK-801 (Sigma-Aldrich USA), антагонист рецептора NMDA, растворенный в физиологическом растворе, в дозе 0,2 мг/кг для открытого поля и 0,3 мг/кг для преимпульсного ингибирования (PPI), соответственно, путем интраперитонеальной инъекции за 20 минут до проведения поведенческих тестов. Каждой мыши в группе 3-5 однократно перорально вводили соединение 56 в дозах 10, 30 и 100 мг/кг (растворенное в дважды дистиллированной HO с 65% PEG400 и 10% DMSO) за 20 минут до введения МК-801. Всех мышей подвергали испытанию в тесте в открытом поле и в тесте преимпульсного ингибирования.
Тест в открытом поле представляет собой стандартный метод измерения индуцированного новизной исследовательского поведения и общей активности у мышей и крыс. Цель этого эксперимента заключалась в оценки эффективности воздействия соединения 56 на ослабление гиперлокомоции, вызванной введением МК-801. В этом исследовании мышей помещали в клетку из плексигласа (37,5 см × 21,5 см × 18 см) при интенсивности освещения 50-65 люкс. Их спонтанную локомоцию измеряли в течение 60 минут с использованием системы исследования форм поведения с помощью с фотодатчика в открытом поле Photobeam Activity System (PAS)-open field (San Diego Instuments, San Diego, CA, USA). Измеряли суммарное количество прерываний светового луча (прерываний луча) каждой мышью в качестве показателя локомоции.
Для определения воздействия соединения 56 по снижению индуцированного МК-801 дефицита функции сенсомоторной фильтрации у мышей, использовали преимпульсное ингибирование с использованием прибора для индуцирования испуга SR-LAB (San Diego Instruments, San Diego, CA, USA). В условиях фонового шума 65 дБ, каждая сессия состояла из 5-минутного период аккумуляции, за которым следовали 64 испытания в четырех блоках. Испытание только с одним импульсом (PA) представляло собой импульс длительностью 40 мс белого шума с мощностью 120 дБ. В случае преимпульсных (pp) + импульсных испытаний, преимпульсные стимулы длительностью 20 мс белого шума с мощностью 71 дБ (pp6), 75 дБ (pp10) и 83 дБ (pp18) подавались за 100 мс до импульса с длительностью 40 мс с мощностью 120 дБ. Испытания без подачи стимула (NS) представляли только фоновый шум. Начальный и последний блоки состояли из шести испытаний PA, соответственно. Два средних блока состояли из испытаний PA, pp+pulse и NS. Эти испытания проводили в псевдо произвольном порядке и были разделены интервалом между испытаниями, составляющим в среднем 15 секунд (варьирующим от 10 до 20 секунд). Процент преимпульсного ингибирования рассчитывали по следующей формуле: % PPI=100 × [(балльная оценка PA) - (бальная оценка pp-P)] / (бальная оценка PA), где бальная оценка PA представляло собой среднюю величину PA в средних блоках.
На фигуре 6 представлены результаты по исследованию воздействию соединения 56 (введение доз 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг соединения 56) на локомоцию (количество прерываний луча) у мышей, которым вводили МК-801. По сравнению с контрольной группой с плацебо, группа, которой вводили только MK-801 (группа MK-801), характеризовалась гиперлокомоцией в тесте на открытом поле. По сравнению с группой МК-801, в группе, в которой вводили низкую дозу (10 мг/кг) соединения 56 (и МК-801), эффект не обнаруживался, и группа, в которой вводили среднюю дозу (30 мг/кг) соединения 56 (и MK-801), характеризовалась незначительно более низкой локомоцией, в то время как в группе, в которой вводили высокую дозу (100 мг/кг) соединения 56 (и MK-801), обнаруживалось значительное снижение гиперлокомоции, индуцированной путем введения MK-801.
На фигуре 7 представлены результаты по исследованию воздействию соединения 56 (введение доз 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг соединения 56) на преимпульсное ингибирование у мышей, которым вводили МК-801, при различных уровнях интенсивности преимпульса (71 дБ, 75 дБ, 83 дБ). По сравнению с контрольной группой с плацебо, группа, в которой вводили МК-801 (группа МК-801), характеризовалась дефицитом преимпульсного ингибирования при всех уровнях интенсивности преимпульса. При интенсивности преимпульса 71 дБ, введение соединения 56 в дозе 10 мг/кг приводило к незначительному улучшению дефицита преимпульсного ингибирования, но при введении соединения 56 в дозе 30 мг/кг и 100 мг/кг мышам, которым вводили МК-801, достигался значительно более высокий процент преимпульсного ингибирования (повышенные эффекты избавления при дефиците преимпульсного ингибирования). При интенсивностях преимпульса 75 и 83 дБ, введение соединения 56 как в дозе 30 мг/кг, так и в дозе 100 мг/кг, приводило к снижению дефицита преимпульсного ингибирования, индуцированного введением МК-801, до уровня, аналогичного уровню в контрольной группе, в которой вводили плацебо, и продемонстрировало улучшенные эффекты избавления при дефиците преимпульсного ингибирования.
Пример 25. Синтез соединения (78)
Синтез 6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 1H-пиразол-5-карбоксилата (78)
6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилат (78)
1
+
6
Соединение 78 синтезировали такими же методами, как методы, которые описаны в примере 17 для соединения 57, и в соответствии с приведенной выше схемой синтеза. Реакцию проводил при загрузке исходного реагента 252 мг и получали 6-(3,5-дифторфенетил)-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил 3-фенетил-1H-пиразол-5-карбоксилат (78) в виде белого твердого вещества (30,2 мг, 7%). H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ 13,56 (с, 1H), 13,19 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,32-7,17 (м, 5H), 7,00-7,08 (м, 3H), 6,69 (с, 1H), 2,98-2,73 (м, 8H). ESI-MS, m/z=451 [M+H].
Пример 26. Терапевтические эффекты соединения 78
Воздействие соединения 78 на мышей, которым вводили МК-801
Самцов мышей линии C57BL/6J содержали в группе (3-5 мышей на клетку) с доступом без ограничения к корму и воде в вентилируемых клетках из полисульфона (фирмы Alternative Design, AR, USA) в помещениях для животных фирмы SyneuRx. Колонию мышей содержали при цикле 12/12 часов свет/темнота при температуре 22 ± 2°C, и все поведенческие исследования проводили в течение темного цикла. Все животные, использовавшиеся в этом исследовании, были взрослыми мышами (в возрасте, по меньшей мере, 2,5 месяца). Все процедуры на животных выполняли в соответствии с протоколами, утвержденными Институциональным комитетом по уходу и использованию животных (IACUC).
2
Мышей случайным образом распределяли на пять групп: группа 1 - контроль с плацебо, группа 2 - МК-801, группа 3 - соединение 78 в дозе 10 мг/кг+МК-801, группа 4 - соединение 78 в дозе 30 мг/кг+МК -801, группа 5 - соединение 78 в дозе 100 мг/кг+МК-801. Мышам в группе 2-5 однократно вводили MK-801 (Sigma-Aldrich USA), антагонист рецептора NMDA, растворенный в физиологическом растворе, в дозе 0,2 мг/кг для открытого поля и 0,3 мг/кг для преимпульсного ингибирования (PPI), соответственно, путем интраперитонеальной инъекции за 20 минут до проведения поведенческих тестов. Каждой мыши в группе 3-5 однократно перорально вводили соединение 78 в дозах 10, 30 и 100 мг/кг (растворенное в дважды дистиллированной HO с 65% PEG400 и 10% DMSO) за 20 минут до введения МК-801.
Всех мышей подвергали испытанию в тесте в открытом поле и в тесте преимпульсного ингибирования. Тесты в открытом поле и на преимпульсное ингибирование использовали для оценки эффективности воздействия соединения 78 по снижению индуцированной МК-801 гиперлокомоции и дефицита сенсомоторной фильтрации у мышей, соответственно. Устройство и способ записи, используемые для тестов с открытым полем и преимпульсного ингибирования, были такими же, как описано выше в примере 24.
На фигуре 8 представлены результаты по исследованию воздействию соединения 78 на локомоцию у мышей, которым вводили МК-801. По сравнению с контрольной группой с плацебо, группа, которой вводили только MK-801 (группа MK-801), характеризовалась гиперлокомоцией в тесте в открытом поле. По сравнению с группой МК-801, в группе мышей, которым вводили низкую и среднюю дозу (10 мг/кг и 30 мг/кг) соединения 78 (и МК-801), обнаруживалась незначительно более низкая локомоция, тогда как мыши, которым вводили высокую дозу соединения 78 (и MK-801), характеризовались значительным снижение гиперлокомоции, индуцированной путем введения MK-801.
На фигуре 9 представлены результаты по исследованию воздействию соединения 78 (введение в дозах 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг соединения 78) на преимпульсное ингибирование у мышей, которым вводили МК-801. По сравнению с контрольной группой с плацебо, в группе, в которой вводили только МК-801 (группа МК-801), обнаруживался дефицит преимпульсного ингибирования при всех уровнях интенсивности преимпульса. При интенсивности преимпульса 71 дБ, соединение 78 оказывало более сильное воздействие на дефицит преимпульсного ингибирования и характеризовалось значительно более высоким процентом преимпульсного ингибирования при введении соединения 78 в дозах 10 мг/кг and 100 мг/кг. При интенсивностях преимпульса 75 и 83 дБ, введение соединения 78 приводило к зависимому от дозы снижению дефицита преимпульсного ингибирования, индуцированного путем введения МК-801 .
Эквиваленты и объем изобретения
В пунктах формулы изобретения, применение формы единственного числа может обозначать один или более чем один предмет, если не указано иное, или же иное не очевидно из контекста. Пункты формулы изобретения или описания, которые включают слово "или" между одним или несколькими членами группы, считают удовлетворяющими требования для исполнения, если один, более чем один или все члены группы присутствуют в данном продукте или способе, используются в них или же относятся к данному продукту или способу, если не указано иное, или же иное не очевидно из контекста. Изобретение включает варианты осуществления, в которых ровно один член группы присутствует в данном продукте или способе, используется в них, или же относится к данному продукту или способу. Изобретение включает варианты осуществления, в которых более чем один или все члены группы присутствует в данном продукте или способе, используются в них, или же относятся к данному продукту или способу.
Кроме того, изобретение включает в себя все варианты, комбинации и перестановки, в которых одно или более ограничений, один или более элементов, одна или более частей формулы изобретения и один или более описательных терминов из одного или более перечисленных пунктов формулы изобретения включены в другой пункт формулы изобретения. Например, любой пункт формулы изобретения, которой является зависимым от другого пункта формулы изобретения, может быть изменен с целью включения одного или нескольких ограничений, обнаруженных в любом другом пункте формулы изобретения, который является зависимым от того же основного пункта формулы изобретения. В случаях, когда элементы представлены в виде списков, например, в формате группы Маркуша, описывается также каждая подгруппа элементов, и любой элемент (элементы) может быть удален из группы. Следует иметь в виду, что обычно, в тех случаях, когда изобретение или аспекты изобретения характеризуют как включающие конкретные элементы и/или признаки, конкретные варианты осуществления изобретения или аспекты изобретения состоят или, по существу, состоят из таких элементов и/или признаков. В целях упрощения изложения, эти варианты осуществления не были конкретно изложены в этом изобретении. Кроме того, следует отметить, что предполагается, что термины "включающий" и "содержащий" являются открытыми и допускают включение дополнительных элементов или стадий. В случаях, когда указываются диапазоны, конечные точки входят в указанный диапазон. Кроме того, если не указано иное, или же иное не очевидно из контекста и для понимания специалиста в данной области, то величины, которые выражены в виде диапазонов, могут принимать любое конкретное значение или входить в поддиапазон в пределах указанных диапазонов в различных вариантах осуществления изобретения до одной десятой единицы нижнего предела диапазона, если из контекста однозначно не следует иное.
В этой заявке приводятся ссылки на различные патенты, опубликованные патентные заявки, журнальные статьи и другие публикации, полное содержание которых включено в настоящее изобретение путем ссылки на них. Если возникает конфликт между содержанием любой из включенных в изобретение ссылок и настоящим изобретением, преимущественную силу будет иметь изобретение. Кроме того, любой конкретный вариант осуществления настоящего изобретения, который подпадает под определение предшествующего известного уровня техники, может быть в явной форме исключен из любого одного или более пунктов формулы изобретения. Поскольку такие варианты осуществления считаются известными для любого обычного специалиста в данной области, они могут быть исключены, даже если это исключение в явном виде не изложено в изобретении. Любой конкретный вариант осуществления изобретения может быть исключен из любого пункта формулы изобретения по любой причине, независимо от того, связано ли это, или не связано с существованием предшествующего известного уровня техники.
Специалисты в данной области могут признавать или могут выявить, используя не более чем обычные эксперименты, существование множество эквивалентов описанных в изобретении конкретных вариантов осуществления. Предполагается, что объем описанных в изобретении вариантов осуществления не ограничивается приведенным выше описанием, и более того, этот объем ограничивается только пунктами прилагаемой формулы изобретения. Для обычных специалистов в данной области является очевидным, что в этом изобретении могут быть сделаны различные изменения и модификации без отклонения от сущности или объема настоящего изобретения, определенного в приведенных далее пунктах формулы изобретения.