О бактериях, выделенных из останков мамонтовой фауны и мёрзлых толщ в Якутии

Виктор Фёдорович Чернявский,

кандидат медицинских наук, врач-эпидемиолог Федерального бюджетного учреждения здравоохранения (ФБУЗ) «Центр гигиены и эпидемиологии в РС(Я)», заслуженный врач РФ

Лариса Анатольевна Ерофеевская,

научный сотрудник Института проблем нефти и газа СО РАН

о бактериях, выделенных из

останков мамонтОвой

фауны и мёрзлых толщ в якутии

В. Ф. Чернявский, Л. А. Ерофеевская, Н. А. Антонов, О. Н. Софронова, О. И. Никифоров

Микроорганизмы обитают в самых разнообразных условиях внешней среды, в том числе и в криолито-зоне. Оказалось, что их «комфортной колыбелью» являются и различные палеонтологические останки мамонтовой фауны. Научно-практический интерес представляют не только факты макро- и микробиосохран-ности в криолитозоне, но и возможности использования новых данных на практике.

Санитарно-эпидемиологические подходы и эпизотолого-эпидемио-логические исследования якутских ученых и инженеров направлены на решение медико-экологических проблем Крайнего Севера, новых био- и промышленных технологий [1-4]. Были разработаны новые биопрепараты на основе микроорганизмов-нефтедеструкторов, выделенных из природных экотопов Якутии. Эти результаты представлены на выставках:

«Открытые инновации - 2012» (Москва); «РосБиоТех - 2012» (Москва); «СахаЭкспо - 2012» (Москва); «Нефть. Газ. Экология. Энергетика - 2012» (Новосибирск - Якутск). Биопрепараты и технология их применения в природно-климатических условиях Крайнего Севера отмечены двумя золотыми и одной серебряной медалью в номинациях «Биопрепараты для ликвидации нефтезагрязнений» и «Инновационные разработки в области экологии».

Микробиологические исследования мамонтовой фауны

Микробиологические исследования мамонтовой фауны выполняются нами с использованием бактериоскопии, классических методов бактериологии и вирусологии, гистоморфоло-гических и других специальных технологий [5]. Было изучено 47 проб, отобранных из биоматериала (голова

Ньургун Анатольевич Антонов,

врач-эпидемиолог инфекций

ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в РС(Я)»

Октябрина Николаевна Софронова,

заведующий лабораторией особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в РС(Я)»

Олег Иннокентьевич Никифоров,

специалист-зоолог ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в РС(Я)»

Юкагирского мамонта и останки Оймяконского мамон-тёнка), в том числе: 4 образца почвы; 4 - волосяного покрова; 4 и 8 - кожно-мышечных фрагментов; 2 - костной ткани; 6 - содержимого черепной коробки; 4 - мозгового вещества; для гистоморфологического исследования -3 пробы в спирте, 4 - в формалине, 4 - в глицерине.

Предварительные данные по микробиологическому и гистологическому анализу указанных образцов показали наличие микроорганизмов в количестве до 1x105 клеток в 1 грамме ткани. Выделено 4 группы бактерий, идентификация штаммов которых продолжается. Несомненный интерес представляют первичные таксономические сравнения этих микроорганизмов по данным, полученным различными методами (табл. 1).

При анализе чистых культур микроорганизмов из мозга Юкагирского мамонта было выделено 7 бактериальных морфотипов. При микроскопировании не обнаружены какие-либо вирусные или вирусоподобные частицы. Традиционный классический анализ морфологических и биохимических характеристик позволил отнести штаммы к следующим родам: Pseudomonas (грамотрицательные аэробные неспорообразующие почвенные бактерии, широко используются в хозяйственной практике, а также в качестве моделей для многочисленных теоретических исследований); Alcaligenes (род эубактерий, относящийся к группе грамнефермен-тирующих бактерий, спор и капсул не образуют, строгие аэробы); Flavobacterium (род палочковидных или кок-ковидных подвижных либо неподвижных аспорогенных

грам-хемоорганотрофных аэробных бактерий, псих-рофилы, обитающие в почве и воде, обнаруживаются на овощах и фруктах, а также в молочных продуктах); Bacillus (обширный, около 217 видов, род грамположи-тельных палочковидных бактерий, образующих внутриклеточные споры. Большинство бацилл - почвенные сапрофиты. Некоторые бациллы вызывают болезни животных и человека, например: сибиркую язву и токси-коинфекции) Cellulomonas (род из грамположительных бактерий, одной из основных отличительных особенностей которых является их способность к разложению целлюлозы с помощью ферментов). Подробные авторские характеристики штаммов описаны также микробиологами Якутского научно-исследовательского института сельского хозяйства СО РАСХН [2, 7, 8].

Использование различных методов исследований показало значительную сходимость полученных результатов. Не вызвало сомнения отнесение штаммов 1 и 4 к роду Pseudomonas, а штамма 7 - к роду Flavobacterium, но к новым видам. Исключение составлял только микроорганизм (штамм 3N), углубленное изучение которого по дополнительному межгенному анализу продолжается [9].

Из мозга Юкагирского мамонта выделялись только бактерии, в результате изучения которых с помощью электронного микроскопа были выявлены их разнообразные морфологические типы. Часть микробных популяций имела признаки «типичных» грамположительных, а другая - грамотрицательных бацилл1.

Таблица 1

Сравнительный анализ штаммов [6]

Номера образцов Таксономическая группа Известные формы Индекс сходства 16S рибосомная РНК Сходство, %

1 Pseudomonas sp. Pseudomonas putida biotype В 0.612 Pseudomonas halodenitrificans 98

2 Alcaligenes sp. Yersinia pseudotuberculosis 0.594 Alcaligenes sp. 97

3N Bacillus sp. - - Bacillus anthracis 100

ЗМ Cellulomonas sp. Cellulomonas turbata 0.389 No similarity with Cellulomonas -

4 Pseudomonas sp. Pseudomonas putida biotype В 0.612 Pseudomonas halodenitrificans 98

5 Alcaligenes sp. - - - -

6 Pseudomonas sp. Cellulomonas turbata 0.318 Pseudomonas halodenitrificans 95

7 Flavobacterium sp. Flavobacterium jonsoniae 0.022 Flavobacteriaceae str. EP105, Flavobacterium sp. AMS2 9 9 U1 U1

1 Метод Грама - метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. Предложен в 1884 г датским врачом Г. К. Грамом. По Граму бактерии окрашивают анилиновыми красителями - генциановым или метиловым фиолетовым и другим, затем краситель фиксируют раствором йода. При последующем промывании окрашенного препарата спиртом те виды бактерий, которые оказываются прочно окрашенными, называют грамположительными бактериями (обозначаются Грам (+)), в отличие от грамотрицательных (Грам (-)), которые при промывке обесцвечиваются.

Наибольший интерес представляли микроорганизмы, наблюдавшиеся в ткани мозга мамонта (рис. 1) и выделенные в культуре (рис. 2).

Клетки этих микробов, имеющих форму коротких палочек, обладали электронно-плотной цитоплазмой. В центре клеток находится нуклеоид с хорошо структурированными нитями нуклеопротеида, формирующими отчетливую сеточку.

Таким образом, в результате изучения микроорганизмов из останков замороженного мозга Юкагирского мамонта, сохранившегося в условиях вечной мерзлоты, удалось выявить высокую концентрацию жизнеспособных аэробных бактерий, существующих при низких температурах [2, 6, 10].

Данные микробиологических и гистоморфологических исследований якутских и новосибирских специалистов (Якутского научного центра СО РАМН, Якутского научно-исследовательского института сельского хозяйства СО РАСХН, Научно-исследовательского института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН и ГНЦ ВБ «Вектор») были высоко оценены и представлены в виде презентации на Всемирной выставке в Японии [6, 8, 11].

Новая палеонтологическая

находка - «Оймяконский мамонтё-нок» [12] - представляет собой переднюю часть туловища мамонтёнка с кожным покровом. Сохранилась голова с глазницами, ушами, фрагментом хобота, а также передняя часть спины и груди. Хорошо видна кожа буровато-серого цвета, под ней - мумифицированные мышцы. Гибель детёныша, по-видимому, была довольно быстрой, так как признаков истощения у него не обнаружено. Вероятный срок гибели животного определен в 15 - 40 тыс. лет.

В отличие от Юкагирского мамонта в процессе исследований в выделенных культурах бактерий был обнаружен штамм-аэроб [13], по признакам не относящийся к микробам рода ВасП^. Эта культура имела схожие морфологические признаки с микробом, выделенным в 1980 г. из биоматериала мамонтёнка «Дима», найденного в Магаданской области в 1978 г. Этот факт может интерпретироваться как территориально-географическое соседство двух биот (мамонтов и их микробных сообществ). Выделенная культура предварительно отнесена к роду Киг!Ыа, ее точная идентификация требует дополнительных исследований, а штамм зарезервирован в международной коллекции [13-15].

Рис. 1. Ультратонкий срез участка головного мозга Юкагирского мамонта. Между тяжами остатков миелиновых оболочек нервных волокон располагаются микроорганизмы

1 мкм

Рис. 2. Микроорганизмы (слева - 5-й штамм, справа - 4-й штамм), выделенные из головного мозга Юкагирского мамонта

Обозначенное выше биоразнообразие микробов, выделенных из отдельных объектов останков представителей мамонтовой фауны, было дополнено результатами микробиологических находок от шерстистого носорога [15] и особенно Хромского мамонтёнка [16].

Анализ штаммов микроорганизмов, конечно, не дает ответа на вопрос о причине смерти исследованных животных. Однако полученные результаты могут расцениваться как эпизотолого-эпидемиологическое эхо прошлого. Отмечается стабильность генетических признаков после оживления древних микроорганизмов, а полученные результаты позволяют заключить, что выделенные штаммы бактерий не только могут выживать после 20 - 40-тысячелетней консервации в вечной мерзлоте, но и сохранять способность к продуцированию биологически активных веществ, что представляет фундаментальный интерес для микробиологии и биотехнологии [7, 15, 16].

(лишённых микробного заселения) останков мамонтов не отмечалось.

Научно-прикладной интерес представляет проблема ископаемых и современных бактерий рода Bacillus [3, 20, 24]. Эти бактерии были выделены в результате криобиологических [21] исследований из реликтовых мёрзлых толщ Центральной Якутии в обнажении Мамонтовой горы2 (рис. 4-6) [22].

Отличительные особенности изолятов из Мамонтовой горы от других реликтовых микроорганизмов поставили их в особую группу, а выявленные биологические свойства бактерий, наряду с самим фактом сохранения ими жизнеспособности на протяжении значительного промежутка времени, позволили говорить о фактах сверхнеожиданных свойств. Оказалось, что это самые долгоживущие бактерии. «Эликсир их жизни» стал предметом беспрецедентного научного результата, который повышает качество жизни лабораторных животных, а в дальнейшем может быть применен и к человеку. Помогут ли «якутские» бактерии спастись от старости, вопрос не только интригующий, но и имеющий большое социально-демографическое значение.

Микробиологические особенности современных почв криолитозоны

Сравнение микробных сообществ в образцах, отобранных на участках с различным типом мерзлотных

мость проведения профилактической вакцинации. К сожалению, при ее проведении регистрировались эпизоды аварийных постпрививочных реакций у людей, привлекаемых к массовой иммунизации животных.

Приведенные примеры свидетельствуют об актуальности определения потенциала положительных или отрицательных свойств спорообразующих бактерий из рода Bacillus, в том числе их таксономических родственников из палеонтологических времен. Находки подобных штаммов должны, на наш взгляд, иметь авторские паспорта и соответствующую маркировку. В частности, в отношении штамма, выделенного от Хромского мамон-тёнка, нами была заявлена аббревиатура «COH» (Софронова Октябрина Николаевна - автор штамма). Следует отметить, что в ходе исследований «чистых»

Рис. 3. Рука больного с диагнозом: Сибирская язва

Сам факт идентификации близкородственных спо-рообразующих бактерий [17], с возможным клинико-эпи-демиологическим потенциалом, системно вписывается в современные проблемы сибирской язвы [18], которая является компонентой [15] особо опасных инфекций (рис. 3). Наличие 285 сибиреязвенных захоронений на территории Якутии [15, 19] обусловливает необходи-

Рис. 4. У термоденудационного обрыва Мамонтовой горы

2 На левом берегу р. Алдана, в 310 км выше устья, между пос. Крест-Хальджай Таттинского района и устьем р. Татты, располо-

жен уникальный комплекс среднемиоценовых растительных остатков и остатков среднеплейстоценовых млекопитающих. Разрез

Мамонтовой горы является опорным для неоген-четвертичных отложений Верхояно-Чукотской области. Он входит в маршруты международных геологических экскурсий. Предлагается в качестве палеонтологического ГПП мирового ранга с заповедным режимом охраны. По мнению ряда геологов, объект заслуживает статуса палеонтологического заказника. Собственно Мамонтова гора представляет собой структурное плато высотой около 80 м. Его береговые обнажения тянутся вдоль берега р. Алдана на

5 км. Ниже по течению к плато примыкает 50-метровая терраса, простирающаяся на 6 км.

Рис. 5. Морфология колоний штаммов № 17 (а) и 40 (б) на ГРМ-агаре, выделенные из обнажения

на Мамонтовой горе

Рис. 6. Морфология клеток штаммов № 17 (а) и 40 (б) на третьи сутки культивирования

почв, показывает некоторое сходство, что, вероятно, обусловлено природно-климатическими условиями Якутии. В состав установленной микрофлоры нефте-загрязненных почв вошли различные систематические группы бактерий, грибов и актиномицетов (табл. 2).

Родовое разнообразие микроорганизмов по мере убывания численности в гумусных горизонтах мерзлотных почв составляло следующую цепочку: Enterobacter > Bacillus > Aspergillus > Pseudomonas > Candida > Streptococcus > Acinetobacter > Clostridium > Actlnomyces > Penicillium > Klebsiella > Rhodococcus > Citrobacter > Proteus > Fusarium >Trichoderma > Stahiobotris > Cladosporium > Alternaria > Azotobacter >Exyuobacterium.

С каждым годом наука получает все больше подтверждений о том, что жизнеспособные микроорганизмы в литосфере распространены до значительных глубин. Их обнаружение в осадочных породах свидетельствует о том, что по объему и массе бактериальная жизнь в глубоких слоях земной толщи не только сравнима с

существованием поверхностных живых организмов, но и может существенно превосходить ее [3]. Целый ряд бактерий, обнаруженный в нефти, питается ею, меняя химический состав. Под действием микроорганизмов происходит разложение органических веществ и выделяется водород, необходимый для превращения органического материала в нефть. В результате проведенных нами исследований установлено, что при использовании микробиологических технологий возможно увеличение исходного природного объема для добычи нефти [20].

В 2008 - 2012 гг. сотрудниками Института проблем нефти и газа СО РАН (г Якутск) и лаборатории особо опасных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Саха (Якутия)» был проведен отбор и микробиологические исследования образцов биоматериалов Оймяконского мамон-тёнка и шерстистого носорога, нефти Талаканского, Иреляхского и Среднеботуобинского месторождений, керна кембрийских отложений (500 - 600 млн лет) и

Таблица 2

Установленные микробные популяции в различных типах мерзлотных почв

Порядок Семейство Род Вид

Мерзлотно-таёжные почвы

Eubacteriales Bacillacae Bacillus megaterium

Eubacteriales Bacillacae Bacillus cereus

Eubacteriales Bacillacae Bacillus mycoides

Eubacteriales Eubacteriales Bacillacae Bacillacae Bacillus Clostridium vallismortis perfringens

Mycota Ascomycetes Aspergillus albus

Mycota Ascomycetes Aspergillus citreus

Mycota Ascomycetes Aspergillus niger

Mycota Actinomycetales Eubacteriales Eubacteriales Ascomycetes Actinomycetaceae Pseudomonadaceae Enterobacteriaceae Pénicillium Actinomyces Pseudomonas Klebsiella sp. albus aeruginosa ozaenae

Eubacteriales Enterobacteriaceae Citrobacter ammolanaticus

Eubacteriales Eubacteriales Enterobacteriaceae Neisseriaceae Enterobacter Acinetobacter agglomerans calcoaceticus

Суглинистые почвы

Eubacteriales Bacillacae Bacillus agglomeratus

Eubacteriales Bacillacae Bacillus cereus

Eubacteriales Bacillacae Bacillus atropheus

Eubacteriales Bacteriaceae Azotobacter sp.

Mycota Ascomycetes Aspergillus albus

Mycota Ascomycetes Aspergillus niger

Mycota Ascomycetes Penicillium sp.

Actinomycetales Actinomycetaceae Actinomyces albus

Eubacteriales Pseudomonadaceae Pseudomonas aeruginosa

Eubacteriales Neisseriaceae Acinetobacter sp.

Песчано-гравийные почвы

Eubacteriales Bacillacae Bacillus mycoides

Eubacteriales Bacillacae Bacillus agglomeratus

Mycota Ascomycetes Aspergillus niger

Mycota Ascomycetes Aspergillus fumigatus

Eubacteriales Pseudomonadaceae Pseudomonas aeruginosa

Eubacteriales Enterobacteriaceae Klebsiella ozaenae

Eubacteriales Eubacteriales Enterobacteriaceae Enterobacteriaceae Citrobacter Proteus freundii vulgaris

проб нефтезагрязненных объектов окружающей среды (почва, снежный покров, лед, талые воды, вода открытых водоемов, донные отложения) на аварийных территориях нефтегазового комплекса Якутии.

Из всего разнообразия выделенной микрофлоры наибольшее распространение имеют бактерии рода

Bacillus. Они были обнаружены практически во всех исследуемых образцах, существенно дополняя данные [3, 20]. Для исключения заноса посторонней микрофлоры из окружающей среды образцы керна кембрийского отложения перед исследованием дробили в стерильных условиях. Во время посева проводился контроль

воздуха помещения, бокса, питательных сред и лабораторной посуды на стерильность.

Колонии выделенных бактерий имели различные морфологические признаки (рис. 7).

Бактерии Ваа!^ cereus, выделенные из нефтеза-грязненных почв, образовывали крупные белые распластанные колонии со слегка изрезанными краями, окруженные широкой зоной глубокого белого равномерного матового коагулята и зоной просветления.

Культуры, выделенные из биоматериала шерстистого носорога, росли в виде влажных выпуклых оранжевых колоний с ровными краями, диаметром до 2 мм.

Ваcillus sporotermoduraus и Ваcillus sfericus, выделенные из биоматериала шерстистого и Оймяконского мамонтёнка, образовывали почти прозрачные или слегка беловатые, выпуклые и дискообразные, влажные колонии.

Bacillus, выделенные из керна кембрийских отложений, продуцировали ярко-желтый (лимонный) пигмент. Колонии нефтяных бациллюсов были белыми, крупными, склонными к расползанию.

Ваcillus mycoides, выделенные из снежного покрова, имели вид мешочков, с суховатой складчатой поверхностью и неровными краями.

Большая часть бактерий рода Bacillus, выделенных из изученных нами объектов, по морфологическим признакам и биохимическим реакциям были дифференцированы как B. cereus, B. c. mycoides, B. agglomeratus и B. megaterium. При этом выявлена их способность развиваться на средах с нефтью и деструктировать (утилизировать) нефть (табл. 3).

Если данные (см. табл. 2) отражают способность бактерий рода Bacillus, выделенных из исследуемых объектов, расти на питательных средах, содержащих нефть и разлагать ее, то факты о способности ископаемых и современных бактерий рода Bacillus, выделенных на территории Якутии, развиваться на средах с нефтью и деструктировать нефть зафиксированы в фотодокументах (рис. 8).

Перспективы использования микроорганизмов в современной биотехнологии и экологии будут определяться рамками целесообразных подходов в некоторых областях прикладной науки и практики.

Рис. 7. Колонии выделенных бактерий рода Bacillus из различных объектов

Рис. 8. Рост выделенных бактерий рода Bacillus на питательных средах, содержащих нефть

Таблица 3

Способность ископаемых и современных бактерий рода Bacillus, выделенных на территории Якутии, развиваться на средах с нефтью и деструктировать нефть

Объект исследования Виды бактерий рода Bacillus Отношение к нефти

Способность расти на питательных средах с нефтью Способность разрушать нефть

Хобот Оймяконского мамонтёнка B. sfericus + +

Кожа спины Оймяконского мамонтёнка B. sporotermodurans - -

Биоматериал шерстистого носорога B. cereus - -

Биоматериал шерстистого носорога Bacillus не установленного вида - -

Нефть Иреляхского месторождения Bacillus не установленного вида + -

Нефть Талаканского месторождения Bacillus не установленного вида + -

Нефть Среднеботуобинского месторождения Bacillus не установленного вида + -

Керн, добытый из скважины Талаканского месторождения Bacillus не установленного вида + -

Нефтезагрязнённая почва аварийного участка трассы нефтепровода Талакан - Витим В. megaterium В. mesentericus В. cereus В. mycoides + + + +

Нефтезагрязнённая почва аварийного участка Амгинской нефтебазы В. agglomeratus В. cereus В. mycoides + + + +

Нефтезагрязнённая почва аварийного участка склада ГСМ с. Хонуу, Момский район В. mycoides В. agglomeratus - -

Вода, ручей Безымянный (Талакан - Витим) В. megaterium - -

Вода, озеро Талое (Талакан - Витим) В. megaterium В. mycoides + -

Донные отложения, ручей Безымянный (Талакан - Витим) В. mycoides +

Донные отложения, озеро Талое (Талакан - Витим) В. mycoides + -

Снежный покров, автовокзал г Якутска со стороны ул. Горького (поверхностный слой) В. mycoides + -

Снежный покров, тайга, Вилюйский тракт (приземный слой) В.cereus В. mycoides - -

Снежный покров, частная АЗС «Стройнефтетранс», Вилюйский тракт (приземный слой) В. mycoides - -

Способностью расти на минеральных средах, содержащих нефть, обладали более 55% изученных нами штаммов бактерий рода Bacillus, в том числе 1 ископаемый штамм (B. Sfericus), выделенный из хобота Оймяконского мамонтёнка, и все бациллюсы, выделенные из нефти и керна. Однако активными деструкторами нефти оказались только Ваcillus mycoides и Ваcillus cereus, выделенные из загрязнённых нефтью почв аварийных территорий временной трассы нефтепровода Талакан - Витим и Амгинской нефтебазы ОАО «Саханефтегазсбыт», а также Ваcillus sfericus, выделенные из хобота Оймяконского мамонтёнка. Эти виды микроорганизмов можно с успехом применять для разработки биологических сорбентов, в целях восстановления нарушенных территорий на объектах нефтегазовых комплексов.

Низкие температуры, застойное увлажнение, присутствие близко залегающей многолетней мерзлоты, слабое преобразование органической и минеральной частей, недостаток питательных веществ, короткий вегетационный период, низкая активность микробных популяций - все это отражается на морфологии и свойствах северных почв и сдерживает процессы естественного восстановления экосистем, загрязненных нефтяными углеводородами.

Ускорить деградацию нефтезагрязнений и сократить сроки реабилитации аварийных территорий возможно методом интродукции в загрязненный субстрат микроорганизмов-нефтедеструкторов. При этом метод активации аборигенной микрофлоры наиболее эффективен, в сравнении с обработкой почв биопрепаратами на основе лиофильно высушенных культур, не свойственных конкретным типам почв.

Лабораторно-полевые исследования, проведенные нами на различных аварийных объектах нефтегазового комплекса, показали, что численность аборигенных нефтедеструкторов в почвах Якутии составляет не более нескольких тысяч клеток на 1 г абсолютно сухого веса почвы. При этом в мерзлотно-таёжных и торфяно-болотных почвах их количество на 1-2 порядка выше, чем в суглинистых и песчано-гравийных.

Таким образом, установленная способность микроорганизмов рода Ваcillus использовать для своего развития и размножения в качестве основного и полноценного продукта питания углеводороды нефти предполагает возможность их успешного использования для реабилитации техногенно нарушенных территорий, в том числе для ликвидации последствий аварийных разливов нефти.

Список литературы

1. Егоров, И. Я. Историзм и современность на службе медико-экологических проблем Крайнего Севера / И. Я., Егоров, А. П. Протодьяконов, В. Ф. Чернявский // Материалы Международного симпозиума. - Хабаровск, 2000. - С. 97.

2. Тарабукина, Н. П. Палеомикрофлора мамонтов из вечной мерзлоты / Н. П. Тарабукина,

М. П. Неустроев, И. Б. Павлова [и др.] // Тезисы докладов IV Международной мамонтовой конференции. -Якутск, 2007. - С. 73.

3. Ерофеевская, Л. А. Ископаемые и современные бактерии рода Bacillus и нефть / Л. А. Ерофеевская, О. Н. Софронова, В. Н. Софронова // Проблемы и перспективы современной медицины, биологии и экологии. Фундаментальные науки и практика. - 2010. -Т. 1, № 1. - С. 165-169.

4. Фишер, Д. К. Анализ истории жизни Юкагирского мамонта /Д. К. Фишер // Юкагирский мамонт : результаты первого этапа научных исследований. - Якутск, 2004. - С. 16-17.

5. Чернявский, В. Ф. Организационно-методологические и научно-методические подходы в микробиологическом и гистоморфологическом сопровождении проекта «Мамонт» / В. Ф. Чернявский, В. Е. Репин,

B. Г. Пугачев [и др.] // Юкагирский мамонт : результаты первого этапа научных исследований. - Якутск, 2004. - С. 26-27.

6. Repin, V. What secrets does Yukagir mammoth brain harbor? / V. Repin, V. Pugachev, О. Taranov [et all.] // lnternational symposium on Yukagir mammoth : Recent advance in Yukagir mammoth researches. - Japan, 2005. -P. 18.

7. Тарабукина, Н. П. Микробиологические исследования Юкагирского мамонта / Н. П. Тарабукина, М. П. Неустроев, С. И. Парникова [и др.] // Юкагирский мамонт : результаты первого этапа научных исследований. - Якутск, 2004. - С. 29.

8. Neustroev, M. P. Research of bacteria of soft Bacillus allocated from the Yukagir mammoth (electronical-microscopic research) / M. P. Neustroev, N. P. Tarabukina, A. M. Smirnov [et all]. // International symposium on Yukagir mammoth : Recent advance in Yukagir mammoth researches. - Japan, 2005. - P. 19.

9. Буланцев, А. Л. Спонтанные генетические процессы у Bacillus anthracis и у близкородственных бацилл / А. Л. Буланцев, А. В. Линницкий // Проблемы особо опасных инфекций. - Саратов, 2003. - № 86. -

C. 79-85.

10. Таранов, О. С. Микробиологические и гистологические исследования головы Юкагирского мамонта / О. С. Таранов, О. Д. Тотменина, В. Г. Пугачев [и др.] // Юкагирский мамонт : результаты первого этапа научных исследований. - Якутск, 2004. - С. 25.

11. Argunov, V. Histomorfology of some tissues of the Yukagir mammoth / V. Argunov, O. Nikiforov, V. Chernyavsky // Intemational symposium on Yukagir mammoth : Recent advance in Yukagir mammoth researches. - Japan, 2005. - P. 17.

12. Лазарев, П. А. Новая находка - Оймяконский ма-монтёнок / П. А. Лазарев, Г. Г. Боескоров // Юкагирский мамонт : результаты первого этапа научных исследований. - Якутск, 2004. - С. 40.

13. Софронова, О. Н. Результаты микробиологических исследований проб мышечной ткани спины Оймяконского мамонтёнка / О. Н. Софронова, А. В. Родзиковский, З. Ф. Дугаржапова [и др.] // Тезисы

докладов IV Международной мамонтовой конференции. - Якутск, 2007. - С. 72.

14. Софронова, О. H. Результаты микробиологических исследований проб мышечной ткани спины Оймяконского мамонтёнка / О. H. Софронова, В. Ф. Чернявский, О. И. Hикифоров [и др.] // Тезисы докладов IV Международной мамонтовой конференции. -Якутск, 2010. - С. 47-53.

15. Чернявский, В. Ф. Сибирская язва (стационарно-неблагополучные очаги) и их эпизотолого-эпидеми-ологическая оценка / В. Ф. Чернявский, И. Я. Егоров, О. И. Hикифоров [и др.] ; под ред. А. И. Белых // Сб. статей межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 80-летию ИГМУ. - Иркутск, 2010. - С. 127-132.

16. Sofronova, O. N. Isolation de cultures d'un microbe de type Bacillus a partir de la trompe du bebe mammouth Oymyakon / O. N. Sofronova, I. A. Kasyan, E. C. Kazakova [et all.]//International Journal of the French Quaternary Association/Quaternaire. - 2010. - Hors-serie -Numero 3. - P. 58-59.

17. Методические указания. МУ 3.4.2552-09. Бактерии, образующие споры. - М., 2008. - 102 с.

18. Куличенко, А. H. Современные проблемы сибирской язвы в Российской Федерации / А. H. Куличенко,

Е. И. Ерёминко, О. И. Цыганкова // Вестник Российской военно-медицинской академии. - 2008. - № 2. -С. 619-620.

19. Макарова, Л. М. Об обеспечении стойкого ветеринарного благополучия в Республике Саха (Якутия) / Л. М. Макарова, А. А. Никитина // Вопросы регионального гигиены и санитарии, эпидемиологии и медицинской экологии. - Якутск, 2009. - С. 361-378.

20. Ерофеевская, Л. А. Ископаемые и современные бактерии рода Bacillus и нефть / Л. А. Ерофеевская, О. Н. Софронова, В. М. Софронова. - Электрон. дан. -Режим доступа: http://tele-conf.ru/problemvi-infektologii-protistologii/iskopaemvie-i-sovremennyie-bakterii-roda-bacillus-i- neft.html. - Загл. с экрана. - Яз. рус.

21. Ли, Н. Г. Криобиология : низкотемпературные исследования геологических систем / Н. Г. Ли // Якутский медицинский журнал. - 2009. - № 4. -С. 123-125.

22. Петерсон, A. M. Бактерии, выделенные из реликтовых мерзлых толщ Центральной Якутии / А. М. Петерсон, И. В. Гпинская, Г. И. Гоива [и др.] // Якутский медицинский журнал. - 2001. - № 4. -С. 70-77.

отжт&сиш

-РДдИОИМПЕДАНСНОЕ ЗОНДИРОВАНИЕ

ЖЕШВЙЕШ^швш

Ефремов, В. Н. Радиоимпедансное зондирование мерзлых грунтов /

В. Н. Ефремов; отв. ред. А. Д. Андросов; Сиб. отд.-ние, ФГБУН Институт мерзлотоведения им. П. И. Мельникова СО РАН. - Якутск : Изд-во ФГБУН Ин-т мерзлотоведения им. П. И. Мельникова СО РАН, 2013. - 204 с.

В основу работы положены результаты многолетних исследований поверхностного импеданса мерзлых толщ в различных районах Якутии. Исследования включали численное моделирование и натурные определения частотной зависимости поверхностного импеданса мерзлых толщ в радиоволновом диапазоне и проводились на основных для региона типах горных пород и участках с характерным геокриологическим строением. Результаты исследований рассмотрены в контексте изучения мерзлых грунтов, на основе оценки электрических параметров и параметров залегания основных горизонтов и слоев мерзлой толщи. Предложены модели геоэлектрического строения типовых по строению и составу мерзлых толщ для переменных полей радиоволнового диапазона. Рассмотрены методические и практические вопросы применения радиоимпедансного зондирования в мерзлотоведении, инженерных изысканиях и инженерной геофизике криолитозоны. Предложена технология выполнения радиоимпедансных зондирований и показано ее применение для решения типовых задач.

Монография будет полезна научным сотрудникам и инженерам, аспирантам и студентам, использующим и изучающим электроразведку для решения различных задач геофизики в криолитозоне.