ПЕРЕРАБОТКА МАКРОНУТРИЕНТОВ

1. Способ модифицирования макронутриентов, включающий стадии
- получения по меньшей мере одного синтетического гена, кодирующего по меньшей мере один фермент или его функциональную часть, способные к модифицированию макронутриентов,
- экспрессии по меньшей мере одного фермента или его функциональной части,
- при необходимости, активации по меньшей мере одного фермента или его функциональной части так, чтобы он мог демонстрировать ферментативную активность, и
- приведения макронутриентов в контакт с по меньшей мере с одним ферментом или его функциональной частью, демонстрирующими ферментативную активность.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий стадии
- клонирования указанного синтезированного гена в микроорганизме, способном к экспрессии данного гена,
- выращивания данного микроорганизма в культуре и экспрессии фермента или его функциональной части и
- приведения макронутриентов в контакт с культурой микроорганизма или его частью, демонстрирующими ферментативную активность.
3. Способ по п.1, в котором макронутриенты выбирают из группы, состоящей из углеводов, белков и жиров, предпочтительно белков, и/или при котором макронутриенты предоставляются в форме пищевого продукта или его части, предпочтительно в виде молока или его белковой фракции.
4. Способ по п.1, в котором макронутриенты включают молочную белковую фракцию, подвергнутую модификации посредством обработки молочной белковой фракции по меньшей мере одной протеиназой, полученной из синтетического гена.
5. Способ по п.1, в котором синтетический ген клонируется в микроорганизме с помощью трансформации микроорганизма вектором экспрессии, содержащим синтетический ген.
6. Способ по п.1, в котором микроорганизм является пищевым микроорганизмом.
7. Способ по п.1, в котором по меньшей мере один фермент выбирают из группы, состоящей из оксидоредуктаз, трансфераз, гидролаз, лиаз, изомераз, лигаз или их предшественников.
8. Способ по п.4, в котором гидролазу выбирают из группы, состоящей из гидролаз
- расщепляющих эфирные связи, например эстераз, например нуклеаз, фосфодиэстераз, липаз, фосфатаз;
- расщепляющих сахара, например гликозилаз/ДНК-гликозилаз, гликозид-гидролаз;
- расщепляющих эфирные связи;
- расщепляющих пептидные связи, например протеаз или пептидаз;
- расщепляющих связи углерод-азот, помимо пептидных связей;
- расщепляющих ангидриды кислот, например ангидрид-гидролаз, включая геликазы и ГТФазу;
- расщепляющих связи углерод-углерод;
- расщепляющих галидные связи;
- расщепляющих связи азот-фосфор;
- расщепляющих связи сера-азот;
- расщепляющих связи углерод-фосфор;
- расщепляющих связи сера-сера и/или
- расщепляющих связи углерод-сера.
9. Способ по п.1, в котором генная последовательность оптимизируется, например, по частоте встречаемости кодонов экспрессирующего микроорганизма.
10. Способ по п.1, в котором синтетический ген, кодирующий фермент или его функциональную часть, является синтетическим геном, основанным на свином, бычьем или человеческом гене.
11. Способ по п.1, в котором синтетический ген клонируется в микроорганизме в полигенном экспрессирующем кластере, содержащем синтетический ген и по меньшей мере одну регуляторную последовательность.
12. Способ по п.1, в котором функциональная часть фермента обладает по меньшей мере 80%-ной активностью природного фермента.
13. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором ген получают тотальным генным синтезом, лигированием преформированных дуплексов перекрывающихся фосфорилированных олигонуклеотидов; способом с Fok I; способом сборки с помощью ПЦР и/или способами, включающими самоамплификацию продуктов ПЦР; двойную асимметричную ПЦР (DA-PCR); сборку на основе ПЦР; матричнозависимое лигирование (TDL); применение термодинамически сбалансированной обратной ПЦР (TBIO); двухступенчатым полным генным синтезом, объединенным с двойной асимметричной ПЦР и ПЦР с удлинением перекрывающихся фрагментов; двухступенчатым синтезом ДНК на основе ПЦР; ПЦР с последовательным удлинением; методом мультиплексного генного синтеза на основе микрочипов; или с помощью аппаратов для синтеза ДНК.
14. Продукт, содержащий макронутриент, модифицированный ферментом или его функциональной частью, полученными с помощью синтетического гена.
15. Продукт по п.14, в котором продукт является пищевой композицией, содержащей молочную белковую фракцию, гидролизованную трипсином и/или химотрипсином, полученными с помощью синтетического гена с последовательностью ДНК свиного трипсина и/или химотрипсина.