Применение 9-бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-диона в качестве средства, обладающего противогрибковой активностью
USE OF 9-BENZOYL-8-HYDROXY-6-(2-HYDROXYETHYL)-2-PHENYL-1-THIA-3,6-DIAZASPIRO[4.4]NONE-2,8-DIEN-4,7-DIONE AS AN ANTIFUNGAL DRUG

Изобретение относится к области органической химии, а именно к применению индивидуальных соединений класса 2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дионов, которые могут быть использованы в фармакологии в качестве противогрибкового средства.
Заявленные соединения 9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дионы и способ синтеза их производных известны из уровня техники. Производные заявляемых соединений являются продуктами взаимодействия 3-ароилпирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-трионов с тиобензамидом (Патент РФ №2631432, C07D 513/10, А61Р 31/04, опубл. 22.09.2017 Бюл. №27), образующихся по следующей схеме:
6
4
6
4
где 1,2: X = Cl, Ar = Ph (а); X = Н, Ar = 4-BrCH(б), 4-ClCH(в).
Противогрибковая активность 9-бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дионов ранее не была исследована.
Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих противомикробной активностью, и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача решается тем, что соединение 9-бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дион проявляет высокую противомикробную активность в концентрации в 62.5-1000 мкг/мл.
Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия 8-бензоил-3,4-дигидро-1Н-пирроло[2,1-с][1,4]оксазин-1,6,7-триона с тиобензамидом в среде растворителя с последующим выделением целевых продуктов, по следующей схеме:
Процесс ведут при температуре 110 С, а в качестве растворителя используют безводный толуол.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. 9-Бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дион (4).
21
16
2
5
К раствору 0.830 ммоль 8-бензоил-3,4-дигидро-1H-пирроло[2,1-с][1,4]оксазин-1,6,7-триона (3) в 4 мл безводного толуола добавляли 0.830 ммоль тиобензамида, кипятили 15 мин, охлаждали, образовавшийся осадок отфильтровывали. Выход 77%, т.пл. 183-185 С.Соединение (4) CHN0S.
Найдено, %: С 61.98; Н 3.81; N 6.69
Вычислено, %: С 61.76; Н 3.95; N 6.86.
Соединение (4) - бесцветное кристаллическое вещество, легкорастворимое в ДМСО и ДМФА, труднорастворимое в ацетоне, этилацетате, хлороформе, 1,4-диоксане, среднерастворимое в этаноле, нерастворимое в ароматических углеводородах, алканах и воде. Устойчиво при хранении в обычных условиях.
-1
-1
-1
-1
-1
В ИК спектре соединения (4), записанном в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний спиртовой группы ОН в виде узкого пика при 3535 см, енольной группы ОН в виде широкой полосы при 3092 см, двух лактамных карбонильных групп при 1718 см и при 1703 см и бензоильной карбонильной группы при 1628 см.
1
6
В спектре ЯМР Н соединения (4), записанном в растворе в ДМСО-d, кроме сигналов протонов ароматических колец, присутствуют группа из 4 метиленовых протонов гидроксиэтильного заместителя при 3.18-3.28 м.д. (м, 1Н), 3.36 м.д. (ддд, 1Н), 3.48 м.д. (ддд, 1Н), 3.55-3.64 (м, 1Н) соответственно, и уширенный синглет протона группы ОН гадроксизтильного заместителя при 6,64 м.д.
Пример 2, Фармакологическое исследование соединения (4) на наличие противомикробной активности.
Для исследований использовали общепринятый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ - М.: И-во Медицина, 2005]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСО) на. 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2,5*] 0 * клеток/мл,
Противомикробные свойства химического вещества изучали на 3-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (штамм 906), Escherichia coli (штамм 1257), Candida albicans (РКПГУ 1353/1277), полученных в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России. Факт ингибирования (торможения роста) микробных клеток в разведениях препаратов отмечали после 20-ти часового термостатирования при 37°С, Окончательные результаты фиксировали через 7 суток после высева на скошенный агар РПА. Максимально испытанная концентрация соединений соответствовала 1000,0 мкг/мл. Противомикробную (ингибирующую, бактерицидную) активность оценивали по минимально действующей концентрации.
Анализ полученных данных показал: соединение 4 обладает антимикробным действием в отношении культуры S, aureus; ингибирующим действием в концентрации 250,0 мкг/мл, гибель наступает от концентрации в 1.000,0 мкг/мл, а также обладает ингибирующим действием в отношении культуры С albicans в концентрации 62,5 мкг/мл.
Предлагаемое вещество 9-бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4,4]нон-2,8-диен-4,7-дион (4) обладает противогрибковой активностью, и может найти применение в фармакологии в качестве потенциального лекарственного средства.