Влияние регуляторных пептидов на становление структурного гомеостаза трахеи белых крыс в раннем постнатальном периоде

ЛИТЕРАТУРА

1. Малышев И.Ю., Манухин Е.Б. Стресс, адаптация и оксид азота // Биохимия.- 1998.- Т.63.- С.992-1006.

2. Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам.- М.: Медицина, 1988.- 253 с.

3. Мотавкин П.А., Гельцер Б.И. Клиническая и экспериментальная патофизиология легких.- М.: Наука, 1998.- 336с.

4. Реутов В.П., Сорокина Е.Г. NO-синтазная и нитроредуктазная компоненты цикла оксида азота // Биохимия. - 1998. - Т.63. - С.1029-1040.

5. Bames P.J. Nitric oxide and airway disease // Ann. Med. - 1995. -Vol.27, N3. - P.389-393.

6. Brett S.J., Evans T.W. Measurement of endoge-

nous nitric oxide in lungs of patients with the acute respiratory syndrome // Amer.J.Resp.CritCare.-1998.-

Vol.157, №3.- P.993-997.

7. Gard V.C., Hassid A. Nitric oxide-generating vasodilators and 8-bromocyclic guanosinemonophos-phate inhibit mitogenesis and proliferation of cultured rat

vascular smooth muscle cells // J.Clin.Invest.-1989.-Vol.83.- P.1774-1777.

8. Hope B.T., Vincent S.R. Histochemical characterization of neuronal NADPH-diaphorase // J.Histochem. Cytochem. - 1989. - Vol.37. - P.653-661.

9. Kobayashi A., Hashimoto S., Kooguchi K. et al. Nitric oxide in lung disease// Chest.-1998.- Vol. 113, №6.- P.1632-1639.

10. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs A. Nitric oxide: Physiology, pathophysiology and pharmacology // Pharmacol.Rev.- 1991.- Vol.43.- P.109-142.

11. Rogers N.E., Ignaro L.J. Constutive nitric oxide synthase from cerebellum is reversibly inhibited by nitric oxide formed from L-arginine // Biochem.Biophys.Res. Commun.-1992.- Vol.189.- P.242-249.

12. Sadhu M., Datta U.K., Mukherjee S. et al. Role of nitric oxide in health and disease // J.Indian Med. Assoc.- 1997.- Vol.95, №10.- P.561-563.

13. Zhang Z., Gao L., Zhang H., Liy Q. Catalytic simultaneous spectrophotometric determination of nintrite and nitrate with a flow injection system // Analytica ^mica Acta.- 1998.-Vol.370.- P.59-63.

УДК 611.2.018.6 - 092.9 : 577.175.82 : 577.95

С.С.Тимошин, О.А.Лебедько

ВЛИЯНИЕ РЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ НА СТАНОВЛЕНИЕ СТРУКТУРНОГО ГОМЕОСТАЗА ТРАХЕИ БЕЛЫХ КРЫС В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ

Хабаровский филиал ДНЦ ФПД СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства, Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск

РЕЗЮМЕ

SUMMARY

Методом авторадиографии с Н-тимидином исследовали влияние вазоактивных и опиоидных пептидов, а также пептидного морфогена гидры и его фрагментов на синтез ДНК в эпителиоцитах и гладких миоцитах трахеи новорожденных белых крыс. Эндотелин I (5' 10-8 М/кг), ангиотензин II ( 5' 10-8 М/кг), аналог дерморфина А10 ( 10-7 М/кг), динорфин А(1-13) (10-7 М/кг), даларгин (10-7 М/кг), пептидный морфоген гидры и его фрагменты 6С и 5К (10-7 М/кг) вводили новорожденным белым крысам пятикратно, внутрибрюшинно, с 2 по 6 сутки жизни. Получены данные об участии исследуемых пептидов в регуляции активности ДНК-синтетических процессов эпителиоцитов и гладкомышечных клеток трахеи белых крыс в раннем постнатальном периоде.

S.S.Timoshin, O.A.Lebedko

EFFECT OF REGULATORY PEPTIDES ON FORMATION OF STRUCTURE HOMEOSTASIS IN TRACHEA OF WHITE RATS DURING EARLY POSTNATAL PERIOD

Using a method of autoradiography with H-thymidine, we studied the effects of vasoactive and opiods peptides, peptide morphogen of hydra and his fragments on DNA synthesis in tracheal epithelium and smooth muscle cells in neonate white rats. Endothelin I (5' 10-8 М/kg) or angiotensin II ( 5' 10-8 М/kg), or analog of dermorphine А10 ( 10-7 М/kg), or dinorphine А(1-13) (10-7 М/кг), or dalargine (10-7 М/kg), or peptide morphogen of hydra, or his fragments 6C and 5N ( 10-7 М/kg) were daily intraperitonealy

administrated for 5 days (from 2 to 6 days of rat postnatal life). Our results indicate that investigated peptides take part in regulation of DNA synthesis of rat tracheal epithelium and smooth muscle cells during early postnatal period.

В раннем онтогенезе действие биорегуляторов имеет морфогенетическое начало [3]. В ряде случаев морфогенетические изменения приводят к долговременному сохранению структурного следа дизадапта-ции. Вопрос о влиянии регуляторных пептидов на основной показатель структурного гомеостаза - синтез ДНК в периоде новорожденности остается малоизученным. В системе органов дыхания этот аспект регуляторного действия биологически активных пептидов практически не исследован, хотя легкие являются активными участниками пептидергической регуляции организма [21]. В настоящее время в литературе появились данные о роли и возрастных особенностях эпителиально-гладкомышечных взаимодействий в воздухоносных путях, в частности, о способности эпителия модулировать сократительную реакцию гладкой мускулатуры респираторного тракта и обеспечивать адекватную воздухонаполняемость легких на разных стадиях постнатального онтогенеза [2, 4]. Контроль этих функций осуществляется респираторным эпителием за счет продукции ряда биологически активных веществ, в том числе и пептидной природы. Нарушение формирования структурного гомеостаза эпителиально-гладкомышечноклеточной популяции в воздухоносных путях на ранних этапах онтогенеза может повысить риск развития бронхоспастических реакций на более поздних этапах развития [2]. Целью настоящей работы было исследование характера влияния регуляторных пептидов разных классификационных групп на ДНК-синтетические процессы в эпителиоцитах и гладкомышечных (ГМ) клетках трахеи новорожденных белых крыс.

Материалы и методы

Эксперименты проводили на 305 новорожденных белых крысах. Для нивелирования генетически обусловленных межвыводковых различий контрольную и подопытные группы формировали методом расщепления выводков. Исследовали три классификационные группы регуляторных пептидов: вазоактивные, опиоидные, а также пептидный морфоген гидры (ПМГ) и его фрагменты. Применяли режим пятикратного воздействия: пептиды вводиди внутрибрю-шинно, ежесуточно, в интервале с 1000 до 1100 часов, со вторых по шестые сутки жизни. Контрольным животным инъецировали эквиобъемное (0,1 мл) количество изотонического раствора NaCl.

Вазоактивные пептиды - эндотелин I (ЭТ-I) и ангиотензин II (АТ-II) - вводили в дозе 5' 10-8 М/кг массы животного. Семейство опиоидных пептидов представляли: А10 - аналог дерморфина, являющийся высокоселективным агонистом мю-рецепторов, со структурной формулой - H-Tyr-DOrn-Phe-Gly-OH; динорфин А (1-13) - биологически активный фраг-

мент динорфина А, селективный агонист каппа-рецепторов - H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro-Lys-Leu-Lys; даларгин - аналог лей-энкефалина, преимущественный агонист дельтарецепторов. Опиоидные пептиды вводили в дозе 10-7 М/кг массы. ПМГ, его структурные фрагменты С-концевой: 6С (Glu-Pro-Pro-Gly-Gly-Ser) и N-концевой: 5N(Lys-Val-Ile-Leu-Phe) вводили в дозе 10-7 М/кг массы животного. Вещества, использованные в экспериментах, были изготовлены в лаборатории синтеза пептидов РАМН (г.Москва) под руководством проф. М.И.Титова.

Через 24 часа после заключительного воздействия исследовали синтез ДНК в эпителии и гладкой мускулатуре трахеи методом авторадиографии. 3Н-тимидин (молярная активность -1570 ТБк/М) инъецировали животным в дозе 1 мкКи/г внутрибрю-шинно за 1 час до эвтаназии. Радиоавтографы готовили по стандартной методике. Подсчитывали количество клеток, находящихся в S-периоде (индекс меченых ядер-ИМЯ,%) и среднее количество треков над меченым ядром (интенсивность метки-ИМ). Полученные данные анализировали с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования

Введение ЭТ-I новорожденным крысам привело к угнетению ДНК-синтетических процессов в эпителии трахеи: по отношению к контрольному уровню

ИМЯ достоверно снизился в 1,5 раза. Уменьшение пролиферативного пула эпителиоцитов сопровождалось понижением скорости прохождения ими S-фазы клеточного цикла: ИМ достоверно снизился в 1,3 раза. Изменения синтеза ДНК в ГМ-клетках носили противоположный характер, об этом свидетельствует статистически значимое по отношению к контролю увеличение обоих исследуемых показателей: ИМЯ -в 1,4 раза и ИМ - в 1,2 раза (табл. 1). Имеются данные о том, что in vitro ЭТ-I проявляет прямое или индуцированное митогенное действие в отношении культивируемых эпителиоцитов и ГМ-клеток воздухоносной системы [10, 13, 14, 20]. Однако анализ доступной нам литературы продемонстрировал отсутствие подобных исследований в условиях целостного организма. С этой точки зрения интерес представляют данные о том, что при бронхиальной астме увеличение экспрессии и продукции ЭТ-I сопровождается деструктивными изменениями эпителиального пласта и гиперплазией ГМ-клеток воздухоносных путей [22]. Поскольку в механизме подобных морфогенетических проявлений значительную роль играют соответствующие изменения активности ДНК-синтетических процессов, исследования Vignola A.M., Chiappara G., Chanez P. et al. (1997) [22] косвенно подтверждают результаты нашего исследования воздействия экзогенного ЭТ-I в отношении эпи-телиально-ГМ-клеточной популяции трахеи. Таким образом, результаты экспериментов свидетельствуют, что в неонатальном периоде экзогенный ЭТ-I способен проявлять дифференцированную морфогенетическую активность в отношении процессов про-

лиферации эпителиоцитов и ГМ-клеток трахеи..

Введение АТ-11 новорожденным крысам привело к достоверному увеличению ИМЯ в сравнении с контролем в эпителии трахеи 1,4 раза. При этом ИМ статистически значимо не изменилась (табл. 1). В ранее проведенных исследованиях нами был выявлен стимулирующий характер воздействия АТ- II на процессы пролиферации в эпителиальной ткани двенадцатиперстной кишки и кожи новорожденных крыс [1].

В ГМ-клетках АТ-11 также стимулировал синтез ДНК. Об этом свидетельствует достоверное увеличение (по сравнению с аналогичными показателями контроля) ИМЯ и ИМ - в 1,6 и 1,2 раза, соответственно (табл. 1). По данным литературы инкубация в течение 8 часов культуры ГМ-клеток бронхов человека с АТ- II (в концентрации 100 нМ) индуцирует синтез ДНК в миоцитах [11]. В наших предыдущих исследованиях АТ- II активировал синтез ДНК в гладкомышечной ткани двенадцатиперстной кишки

[5].

АТ- II функционально сопряжен с активностью ЭТ-1, молекулярной основой этой связи является общая генная структура рецепторов АТ- II и ЭТ-! [15]. Известно, что АТ-П способен индуцировать повышение базального уровня ЭТ-! [9]. Возможно, что в реализации выявленных нами эффектов АТ- II принимала участие активация системы эндогенного ЭТ-1. Полученные данные свидетельствуют об однонаправленной реакции эпителия и ГМ-клеток трахеи новорожденных крысят в ответ на введение АТ- II и подтверждают наличие у АТ- II митогенных свойств по отношению к клеточным популяциям эпителиоци-тов и гладкомышечных клеток различного происхождения и локализации.

Помимо системы вазоактивных пептидов органы дыхания контролируются центральным и местными опиоидергическими механизмами. В респираторном тракте нейроэндокриноциты, секретирующие опио-идные пептиды, локализуются в эпителии [8], а различные типы субпопуляций опиоидных рецепторов экспрессируются в гладкомышечных клетках [24].

Анализ полученных данных показал (табл. 2), что повторное введение А10 достоверно стимулировало синтез ДНК в эпителии трахеи: ИМЯ повысился в 1,5 раза. Митогенное действие динорфина А(1-13) проявилось в статистически значимом увеличении ИМЯ и ИМ эпителиоцитов - в 1,6 раза и 1,4 раза соответственно. Введение даларгина привело к достоверному возрастанию ИМ - в 1,4 раза при стабильном относительно контроля ИМЯ. Таким образом, воздействие А10 и динорфина А (1-13) увеличивало количество ДНК-синтезирующих эпителиоцитов. Даларгин не влиял на численность эпителиоцитов в S-периоде митотического цикла, но, как и динорфин А (1-13), ускорял синтез ДНК.

При исследовании пролиферативной активности ГМ-клеток трахеи обнаружено (табл. 2), что введение А 10 приводило к достоверному (по сравнению с контролем) увеличению ИМЯ и ИМ - в 1,3 и 1,3 раза, соответственно. Эффект динорфина А (1-13) был менее выражен: ИМЯ статистически значимо не изменилось, ИМ возросла в 1,4 раза. При введении да-ларгина изменений показателей клеточного деления зарегистрировано не было. Следовательно, в ГМ-клеточной популяции только А10 увеличивал количество клеток, содержащих 3 Н-тимидин, влияние динорфина А (1-13) ограничивалось ускорением синтеза ДНК, а даларгин в отношении ДНК-синтетических процессов активности не проявил.

Таблица 1

Влияние повторного введения ЭТ-1 и АТ-ІІ в дозе 5 ' 10-8 М/кг массы тела на показатели синтеза ДНК в эпителии и гладкомышечных клетках трахеи новорожденных белых крыс

Группы Эпителиоциты Миоциты

ИМЯ,% ИМ ИМЯ,% ИМ

Контроль 1,94+0,12 23,81+0,75 0,б47+0,0З7 21,19+0,89

ЭТ-I 1,30+0,08* 18,9б+0,72* 0,93б+0,07б* 25,24+1,02*

АТ-II 2,б1+0,1З* 23,01+1,01 0,97б+0,07б* 24,57+1,23*

Примечание: здесь и далее * - р<0,05 по отношению к контролю.

Таблица 2

Влияние повторного введения А 10, динорфина А

Группы Эпителиоциты Миоциты

ИМЯ,% ИМ ИМЯ,% ИМ

Контроль 1,70+0,10 18,14+0,85 0,7бЗ+0,0б2 1б,З0+0,92

А10 2,52+0,13* 20,21+0,98 0,990+0,074* 21,14+1,04*

Динорфин А (1-13) 2,71+0,14* 25,25+1,04* 0,8б4+0,0бЗ 22,82+0,9б*

Даларгин 1,81+0,09 25,34+1,10* 0,б95+0,078 17,40+0,92

Таблица 3

Влияние повторного введения ПМГ в дозе 10-7 М/кг массы тела на показатели синтеза ДНК в эпителии и гладкомышечных клетках трахеи новорожденных белых крыс

Группы Эпителиоциты Миоциты

ИМЯ, % ИМ ИМЯ, % ИМ

Контроль 1,88±0,10 24,12±0,65 0,633±0,047 19,82±0,95

ПМГ 2,29±0,11* 23,21±0,97 0,363±0,029* 21,13±1,03

5N 1,50±0,09* 19,40±0,94* 0,271±+0,019* 17,40±0,92

6C 2,76±0,09*’** 25,37±0,91 0,246±0,018*** 15,76±0,89***

Примечание: * - p<0,05 по отношению к контролю;

Наиболее морфогенетически активным в данной экспериментальной ситуации следует признать высокоселективный агонист мю- рецепторов А10, наименее активным - преимущественный агонист дельтарецепторов даларгин. Известно, что даларгин, наряду с выраженным аффинитетом к дельта-рецепторам, обладает гораздо более слабой способностью взаимодействовать с мю-рецепторами. Возможно, эффект даларгина в отношении ДНК-синтети-ческих процессов трахеального эпителия обеспечивается именно этой особенностью рецепции пептида, так как в неонатальном периоде система дельтарецепторов, в отличие от мю- и каппарецепторов, менее развита [7] и не участвует в регуляции респираторных функций [12]. Следует отметить, что мю-агонисты способны модулировать индуцированную трахеобронхоконстрикцию [23]. ЭТ-I и АТ-II, обладающие свойством повышать сократительную активность респираторного тракта, также стимулировали синтез ДНК ГМ-клеток трахеи. Таким образом, в условиях данного эксперимента дерморфин А10 и динорфин А (1-13) продемонстрировали однонаправленный стимулирующий эффект разной степени выраженности в отношении ДНК-синтетических процессов в эпителиоцитах и ГМ-клеток трахеи новорожденных крыс.

В организме Hydra attenuate ПМГ в функционирует как универсальный фактор роста и цитодиффе-ренцировки, в том числе и по отношению к эпителиально-мышечным клеткам [17, 19]. У млекопитающих выявлено выраженное снижение тканевой концентрации ПМГ в ходе постнатального онтогенеза [16, 18], что несомненно указывает на участие пептида в регуляции морфогенеза.

В наших экспериментах введение ПМГ стимулировало процессы пролиферации в эпителии трахеи новорожденных крыс, о чем свидетельствует достоверное по сравнению с контрольным уровнем увеличение ИМЯ в 1,2 раза. При введении 6С фрагмента митогенный эффект, наблюдавшийся при воздействии нативной молекулы ПМГ, не только сохранился, но и достоверно усилился. По сравнению с аналогичным показателем в группе животных, получавших ПМГ, ИМЯ эпителиоцитов трахеи крыс, подвергшихся воздействию 6С фрагмента, увеличился в 1,2 раза. При этом ни ПМГ, ни его 6С фрагмент на ИМ эпителиоцитов не влияли (табл. 3). Косвенным свидетельством вовлечения эндогенного ПМГ в форми-

** - p<0,05 по отношению к группе с введением ПМГ.

рование структурного гомеостаза системы органов дыхания служат результаты опытов с антагонистом нативной молекулы ПМГ - 5N фрагментом. Введение этого пептида угнетало синтез ДНК в эпителиоцитах трахеи: ИМЯ и ИМ достоверно снизились по сравнению с контролем в 1,2 и 1,2 раза соответственно (табл. 3). Сходная картина имела место и в других эпителиальных тканях новорожденных крыс [6]. При исследовании пролиферативной активности ГМ-клеток трахеи выявлено, что введение ПМГ приводило к достоверному (по сравнению с контролем) снижению ИМЯ - в 1,7 раза. Эффект 6С фрагмента был более выражен: ИМЯ статистически значимо уменьшился не только относительно контроля - в 2, 6 раза, но и по сравнению с аналогичным показателем в группе животных с введением ПМГ - в 1,5 раза. Если величина ИМ ГМ-клеток при воздействии ПМГ оставалась в пределах контрольного уровня, то при применении 6С фрагмента аналогичный показатель достоверно снижался в 1,2 раза (табл. 3). В отличие от дифференцированной реакции процессов синтеза ДНК миоцитов по сравнению с эпителиоцитами на введение ПМГ и 6С фрагмента эффект 5N фрагмента имел однонаправленный ингибирующий характер. При введении 5N фрагмента пролиферативная активность ГМ-клеток достоверно снижалась: ИМЯ в сравнении с аналогичным показателем в контроле уменьшился в 2,3 раза, ИМ оставалась в пределах контрольного уровня (табл. 3). Таким образом, в условиях данного эксперимента ПМГ и его 6С фрагмент продемонстрировали разнонаправленный эффект в отношении процессов синтеза ДНК: стимулирующий - в эпителиоцитах, угнетающий - в ГМ-клетках. 5N фрагмент независимо от тканевой принадлежности исследуемых клеточных популяций проявил себя как ингибитор процессов клеточного деления.

Следовательно, результаты экспериментов свидетельствуют о вовлечении исследуемых пептидов в формирование эпителиально-ГМ-клеточной популяции воздухоносной системы новорожденных крыс. Характер, направление и степень выраженности изменений ДНК-синтетических процессов, наблюдаемых при воздействии исследуемых пептидов, указывают на онтогенетические особенности созревания, экспрессии, популяционной селективности соот-ветствуюших рецепторов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Животова Е.Ю., Тимошин С.С. Влияние ангиотензина II на синтез ДНК в миокарде и эпителиальных тканях новорожденных белых крыс //Бюл.эксперим.биол. и мед.- 1998.- Т.126, №12. -С.63-645.

2. Возрастные особенности эпителиальногладкомышечных взаимодействий в трахее крыс / М.В.Кусков, Л.В.Капилевич, М.Б.Баскаков, М.А. Медведев //Бюл.эксперим. биол. и мед.- 1998.- Т.126, №12.- С. 625-627.

3. Мицкевич М.С. Становление нейроэндокринной регуляции в онтогенезе //Онтогенез.- 1990.- Т.21, №3.- С.242-253.

4. Невзорова В.А. Нитроксидергические механизмы регуляции бронхов и их значение в патогенезе бронхиальной астмы и хронического бронхита: Автореф. дис. ... д-ра.мед.наук.- Владивосток, 1997.

5. Сазонова Е.Н., Животова Е.Ю., Сазонов О.А. и др. Влияние регуляторных пептидов на синтез ДНК в гладкой мышечной ткани двенадцатиперстной кишки белых крыс в раннем постнатальном периоде //Бюл.эксперим.биол. и мед.- 1999.- Т.127, №6.-С.651-653.

6. Роль пептидного морфогена гидры в становлении гомеостаза белых крыс на раннем этапе пост-натального онтогенеза / С.С.Тимошин, Е.Н.Сазонова, О.А.Лебедько, В.В. Кулаева // Бюл.эксперим.биол. и мед. - 1998.- Т.126, №12.- С.681-684.

7. Opioid receptor gene expression in the rat brain during ontogeny, with special reference to the mesostriatal system: an in situ hybridization study / F.Georges, E.Normand, B.Bloch, C.Le Moine // Brain Res.Dev.Brain Res.- 1998.- Vol.109, №2.- P.187-199.

8. Johnson D.E. The airway epithelium: physiology, pathology and pharmacology. - New York: Marcel Dec-cer, 1991.- P.335-397.

9. Luscher T.F. Endothelin: systemic arterial and pulmonary effects of a new peptide with potent biologic properties // Am.Rev.Respir.Dis.- 1992.- Vol. 146, №5.-Pt. 2.- P.56-60.

10. Malarkey K., Chilvers E.R., Lawson M.F. et al. Stimulation by endothelin-1 of mitogen-activated protein kinases and DNA synthesis in bovine tracheal smooth muscle cells // Pharmacol.- 1995.- Vol. 116, №4.- P. 2267-2273.

11. Angiotensin II induces hypertrophy of human airway smooth muscle cells: expression of transcription factors and transforming growth factor-beta 1 /S.McKay, J.C.de Jongste, P.R.Saxena, H.S.Sharma // Am.J.Respir. Cell.Mol.Biol.- 1998.- Vol.18, № 6.- P. 823-833.

12. Moss I.R., Scott S.C., Inman J.D.G. Respiratory responses to single and episodic hypoxia during development: mechanisms of adaptation //Am.J.Physiol.-1993.-Vol.264.- P.754-760.

13. Endothelin-1 stimulates proliferation of normal airway epithelial cells /C.G.Murlas, A.Gulati, G.Singh, F.Najmabadi //Biochem.Biophy s.Res. Common. - 1995.-Vol.212, №3. - P.953-959.

14. Pannettieri R.A.., Goldie R.G., Rigby P.J. et al. Endothelin-1-induced potentiation of human airway smooth muscle proliferation: an ETA receptor mediated phenomenon //J.Pharmacol.- 1996.- Vol.118, №1.-P.191-197.

15.Ruiz-Opazo N., Hirayama K., Аkimoto K. et al. Molecular characterization of adual endothelin-1/Angiotensin II receptor // Mol.Med.- 1998.- Vol 4, №2.- P.96-108.

16. Sakura H., Aoki S., Osawa T. et al. The neuropeptide head activator in human placenta and serum from pregnant women // Acta Endocrinol. Copenh. - 1991.-Vol.125, №5.- P.454-458.

17. Schaller H.C. Action of the head activator as a growth hormone in hydra // Cell Differ.- 1976.- Vol.5, №1.- P.1-11.

18. Schaller H.C., Hoffmeister S.A., Dubel S. Role of the neuropeptide head activator for growth and development in hydra and mammals //Development.- 1989.-Vol.107.- P.99-107.

19. Schaller H.C., Hofmann M., Javois L.C. Effect of head activator on proliferation, head-specific determination of epithelial cells in hydra //Differentiation.- 1990.-Vol. 43, №3.- P.157-164.

20. Takimoto M., Oda K., Sasaki Y., Okada T. En-dothelin-A receptor-mediated prostanoid secretion via autocrine and deoxyribonucleic acid synthesis via paracrine signalling in human bronchial epithelial cells //Endocrinology.- 1996.- Vol.137, №11.- P.4520-4550.

21. Terzakis J.A. Sommers S.C., Anderson B. Neurosecretory appearing cells of human segmental bronchi // Lab. Invest.- 1972.- №26.- P.127-132.

22. Vignola A.M., Chiappara G., Chanez P. et al. Growth factors in asthma //Monaldi.Arch.Chest.Dis.-1997.- Vol.52, №2.- P.159-169.

23. Zappi l., Nicosia F., Rocchi D. et al. Opioid agonists modulate release of neurotransmitter in bovine tracheal muscle // Anesthesiology.- 1995.- Vol.83, №3.-P.543-551.

24. Zebraski S.E., Kochenash S.M., Raffa R.B. Lung opioid receptors: pharmacology and possible target for nebulized morphine in dyspnea //Life Sci.- 2000.- Vol. 66, №23.- P.2221-2231.