Определение распространенности генетических заболеваний крупного рогатого скота абердин-ангусской породы с использованием ДНК-тестов

doi: 10.24411/0235-2451-2020-10208 УДК 636.223.1, 636.2.033

Определение распространенности генетических заболеваний крупного рогатого скота абердин-ангусской породы с использованием ДНК-тестов*

Е. Н. КОНОВАЛОВА, О. В. КОСТЮНИНА, О. С. РОМАНЕНКОВА

Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика Л. К. Эрнста, пос. Дубровицы, 60, Подольский р-н, Московская обл., 142132, Российская Федерация

Резюме. У крупного рогатого скота абердин-ангусской породы отмечены случаи проявления наследственных заболеваний, вызываемых генными мутациями. Цель работы - анализ частот встречаемости животных-носителей генетических дефектов множественного артрогрипоза (АМ), остеопетроза (OS) и дупликации развития (DD) среди российских популяций крупного рогатого скота абердин-ангусской породы, а также оценка риска распространения наследственных аномалий путем передачи мутантных аллелей от родителей потомству. В качестве материала использовали препараты ДНК (n = 4087) крупного рогатого скота абердин-ангусской породы из 31 хозяйства Центрального региона России. ДНК выделяли из биоматериала животных (кровь, молоко, ушной выщип и др.) Частоты встречаемости животных-носителей мутантных аллелей, ассоциированных с Ам и OS, определяли с использованием ранее разработанных тест-систем, основанных на методе аллель-специфичной полимеразной цепной реакции, частоты встречаемости животных-носителей DD - ПЦР с последующим анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ). ПДРФ-анализ проводили с использованием фермента эндонуклеазы рестрикции BstMWI с последовательностью узнавания GCNNNNNfNNGC. Средняя частота встречаемости животных - носителей АМ составила 1,5 %, OS - 1,02 %, DD - 5,84 %. Риск передачи мутантных аллелей от родителей потомству оценивали на 107 коровах (поколение F1) и 107 телках (поколение F2). Разница в частоте встречаемости животных-носителей дефектов OS и DD между поколениями была незначимой. Частота встречаемости животных-носителей дефекта АМ в поколении F2 была существенно выше, чем в F1: 11,20 и 0,93 % соответственно. Частота встречаемости мутантного аллеля АМ, выраженная в долях, в поколении F2 была в 6 раз выше величины этого показателя в F1: 0,06 и 0,01 соответственно. Критерий х2 для F1 составил 0,01, для F2 - 0,38, что свидетельствует об отсутствии селекционного давления в отношении генетического дефекта АМ в этих популяциях.

Ключевые слова: крупный рогатый скот, абердин-ангусская порода, генетический дефект, множественный артрогрипоз, остеопетроз, дупликация развития.

Сведения об авторах: Е. Н. Коновалова, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник (е-mail: konoval-elena@ yandex.ru); О. В. Костюнина, доктор биологических наук, зав. лабораторией; О. С. Романенкова, кандидат биологических наук, научный сотрудник.

Для цитирования: Коновалова Е. Н., Костюнина О. В., Романенкова О. С. Определение распространенности генетических заболеваний крупного рогатого скота абердин-ангусской породы с использованием ДНК-тестов // Достижения науки и техники АПК. 2020. Т. 34. № 2. С. 39-42. doi: 10.24411/0235-2451-2020-10208.

*исследования проводили в рамках задания Министерства образования и науки Российской Федерации № АААА-А18-118021590138-1 и при поддержке проектов РФФИ №№ 19-016-00007 и 19-016-20024.

Determining the prevalence of genetic diseases in Aberdeen Angus cattle using DNA tests

E. N. Konovalova, O. V. Kostiunina, O. S. Romanenkova

Federal Scientific Center of Animal Husbandry - Ernst All-Russian Research Institute of Animal Husbandry, pos. Dubrovitsy, 60, Podol'skii r-n, Moskovskaya obl., 142132, Russian Federation

Abstract. There were registered the cases of the manifestation of hereditary diseases caused by gene mutations in the cattle of Aberdeen-Angus breed. The purpose of the work was to analyze the frequencies of animal carriers of genetic defects of arthrogryposis multip^ (AM), osteopetrosis (OS), and development duplication (DD) among Russian populations of cattle of Aberdeen-Angus breed, as well as to assess the risk of the spread of hereditary anomalies by transmitting mutant alleles from parents to offspring. The material was DNA preparations (n = 4087) of Aberdeen-Angus cattle from 31 farms of the Central region of Russia. DNA was isolated from animal biomaterial (blood, milk, ear pluck, etc.). Frequencies of animals-carriers of mutant alleles associated with AM and OS were determined using previously developed test systems based on the allele-specific polymerase chain reaction method, frequency of DD-carriers - by PCR followed by the analysis of restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). RFLP analysis was performed using BstMWI restriction endonuclease with the recognition sequence GCNNNNNNNGC. The average frequency of AM-carriers was 1.5%; the frequency of OS-carriers was 1.02%; frequency of DD-carriers was 5.84%. The risk of transmission of mutant alleles from parents to offspring was assessed on 107 cows (F1 generation) and 107 heifers (F2 generation). The difference in the frequency of animal-carriers of OS and DD defects between generations was insignificant. The frequency of animal-carriers of AM defect in F2 generation was significantly higher than in F1 generation - 11.20% and 0.93%, respectively. In F2 generation, the frequency of the mutant AM allele was 6 times higher than in F1 generation - 0.06 and 0.01, respectively. The chi2 criterion for F1 was 0.01; for F2, it was 0.38, which indicates the absence of selection pressure in relation to the genetic AM defect in these populations.

Keywords: cattle; Aberdeen-Angus breed; genetic defect; arthrogryposis multiplex; osteopetrosis; development duplication. Author details: E. N. Konovalova, Cand. Sc. (Biol.), senior research fellow (е-mail: konoval-elena@yandex.ru); O. V. Kostiunina, D. Sc. (Biol.), head of laboratory; O. S. Romanenkova, Cand. Sc. (Biol.), research fellow.

For citation: Konovalova EN, Kostiunina OV, Romanenkova OS. [Determining the prevalence of genetic diseases in Aberdeen Angus cattle using DNA tests]. Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2020;34(2):39-42. Russian. doi: 10.24411/0235-2451-2020-10208.

Крупный рогатый скот абердин-ангусской породы обладает высоким генетическим потенциалом, отлично акклиматизируется, его мясо имеет хорошие вкусовые качества [1, 2, 3]. Однако в его популяциях известны случаи проявления наследственных

заболеваний, вызванных генными мутациями. Эту проблему нельзя оставлять без внимания, поскольку по мере накопления в стаде мутантных аллелей, связанных с врожденными патологиями, возрастает риск клинического проявления наследственных аномалий [4].

357 п.н^_ 242 п.№-

500 п.н. 400 п.н. _ 300 п.н. 200 п.н. "100 п.н*

404 п.]

320 п.]

84 п.№—I

АМС AMF АМС АМС АМС

— — --«а

- 500 п.н. I 400 п.н.

300 п.н* " 200 п.н.

I— 100 п.н.

DDF DDC DDF DDF DDC DDF DDC M

532 n.ib— 229 п.№-

500 п.н. 400 п.н. 300 п.н. - 200 п.н.

100 п.н.

OSF OSC OSF OSF OSC OSF OSF OSC OSC M

остеопетроза и дупликации развития в российских популяциях абердин-ангусского скота с помощью тест-систем, а также оценка риска распространения мутаций путем передачи по наследству.

Условия, материалы и методы. Исследования проводили в лаборатории молекулярных основ селекции ФГБНУ ФНУ ВИЖ им. Л. К. Эрнста в 2017-2019 гг. В качестве

Рис. 1. Результаты гель-электрофореза ПЦР-диагностики: А - множественного артро-грипоза; Б - дупликации развития; В - остеопетроза; AMC - носитель АМ (arthrogriposis multiplex carrier), AMF - животное, свободное от мутации АМ (arthrogriposis multiplex free); DDC - носитель мутации DD (Developmental duplication carrier), DDF - животное, свободное от мутации DD (Developmental duplication free); OSC - носитель остеопетроза (osteopetrosis carrier); OSF - животное, свободное от мутации OS (osteopetrosis free); M - маркер молекулярного веса (500 п.н.).

С 2017 г. в лаборатории молекулярных основ селекции ФГБНУ ФНЦ ВИЖ им. Л. К. Эрнста изучают мутации, вызывающие врожденные аномалии крупного рогатого скота абердин-ангусской породы, принципы их наследования и способы ДНК-диагностики [5]. Особое внимание при этом уделяют таким генетическим дефектам, как множественный артрогрипоз, остеопетроз и дупликация развития. Ранее были описаны клинические признаки этих заболеваний и вызывающие их мутации [6, 7, 8].

Множественный артрогрипоз (АМ) и остеопетроз (OS) - летальные генетические дефекты, приводящие к ранней эмбриональной смертности или рождению больного нежизнеспособного потомства. Их проявления снижают выход телят, и тем самым наносит экономический ущерб хозяйствам, разводящим абердин-ангусскую породу крупного рогатого скота [6, 7].

Генетический дефект дупликации развития (DD) - не летальный. Наиболее часто он проявляется в форме нотомелии, то есть рождении телят с дополнительными конечностями. После их удаления и восстановительного периода животное может нормально развиваться и быть продуктивным. В этом случае экономический ущерб связан с затратами на лечение больных животных [8].

В 2018-2019 гг. на базе ФГБНУ ФНЦ ВИЖ им. Л. К. Эрнста были разработаны тест-системы для диагностики генетических дефектов множественного артрогрипоза, остеопетроза и дупликации развития, проявляющихся у крупного рогатого скота абердин-ангусской породы [9, 10, 11].

Цель работы - анализ частот встречаемости животных-носителей множественного артрогрипоза,

материала использовали препараты ДНК (n = 4087) крупного рогатого скота абердин-ангусской породы хозяйств Центрального региона РФ из банка ДНК лаборатории и полученные в ходе исследований. Препараты ДНК выделяли из биоматериала (кровь, молоко, ушной выщип и др.) по стандартным методикам [12].

Весь материал исследовали на наличие генетических дефектов АМ, OS и DD при помощи разработанных ранее ДНК-тестов. Для анализа аномалий АМ и OS использовали аллель-специфичную полимеразную цепную реакцию (АС-ПЦР), для определения DD - ПЦР с последующим анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ) [9, 10, 11]. ПДРФ-анализ проводили при помощи фермента эндонуклеазы рестрикции BstMWI с последовательностью узнавания GCNNNNN|NNGC (рис. 1). После генотипирования во всех популяциях считали долю животных-носителей изучаемых генетических дефектов.

Риск распространения генетических дефектов оценивали по двум популяциям (n = 214), принадлежащим одному хозяйству: поколение F1 - коровы (n = 107), поколение F2 - телки от коров F1 (n = 107). Животных проверяли на наличие генетических дефектов АМ, OS и DD и определяли частоты встречаемости мутантных аллелей и животных-носителей [13].

Для статистической оценки полученных данных использовали показатели дисперсии выборки (s2) и t-критерий Стьюдента. Разницу в частотах встречаемости считали достоверной (p < 0,05) при t > 1,972 и уровне значимости а = 0,05. Вероятность случайности наблюдаемых значений определяли по критерию X2 [14]. Частоты аллелей считали не случайными (р < 0,05) при I2 > 3,84. Расчеты проводили с использованием программного обеспечения Microsoft Excel и онлайн-калькулятора (http://medstatistic.ru./calcula-tors/averagestudent.html).

Результаты и обсуждение. В изученных популяциях животных абердин-ангусской породы на территории России носители мутаций АМ и OS встречались в 1,58 и 1,02 % случаев соответственно (табл. 1).

Частота встречаемости носителей мутации DD составила в среднем 5,84 % и сильно варьировала

Таблица 1. Результаты скрининга крупного рогатого скота абердин-ангусской породы российских популяций по генетическим дефектам АМ, ОБ и DD

Генетический дефект Число популяций Общее поголовье Средняя частота встречаемости носителей дефекта (% ± э2)*

Множественый артрогрипоз 6 1456 1,58 ± 0,68

Остеопетроз 13 1075 1,02 ± 0,74

Дупликация развития 12 1556 5,84 ± 14,39

*в? - дисперсия выборки.

в зависимости от стада (в2 = 14,39). Такие особи обнаружены практически в каждой популяции. Это согласуется с данными другого исследования [15], выявившего животных-носителей DD во всех 38 исследованных популяциях (п = 2585) со средней частотой 11,8 %. Результаты этих работ указывают на необходимость особого контроля за генетическим дефектом дупликации развития.

Анализ популяций F1 и F2, соответствующих поколениям матерей и дочерей, показал наличие животных-носителей мутаций АМ, ОБ и DD в обоих поколениях (табл. 2).

Таблица 2. Частоты встречаемости носителей генетических дефектов АМ, ОБ и DD в поколениях родителей и потомков

ОБ и DD [9, 10, 11] показало, что по чувствительности и специфичности они не уступают зарубежным аналогам [17, 18, 19]. Указанные тест-системы позволяют проводить раннее выявление животных-носителей независимо от пола, возраста и физиологического состояния. Таких особей можно использовать в селекционных программах без выбраковки - скрещивая с животными, свободными от мутации и получая здоровое

Популяция

Частота встречаемости животных-носителей генетического дефекта, %

AM

OS

DD

0,93 11,20*

1,87 0,93

0,93 0,93

*различия достоверны, по сравнению с популяцией Г1, при Г = 2,85; р = 0,004863.

По генетическому дефекту DD разница в частоте встречаемости животных-носителей между поколениями отсутствовала, по дефекту ОБ доля носителей во втором поколении незначимо снизилась на 0,94 %. Частота встречаемости носителей дефекта АМ в популяции F2 была выше, чем в F1, на 10,27 % (р = 0,004863).

Частота встречаемости мутантного аллеля АМ в популяции F2 была выше, чем в популяции F1, в 6 раз (рис. 2). Величина критерия X2 для поколения F1 составила 0,01, для F2 - 0,38, что свидетельствует об отсутствии селекционного давления в отношении генетического дефекта АМ в этих популяциях [16].

Применение на практике разработанных тест-систем для диагностики генетических дефектов АМ,

Рис. 2. Частоты встречаемости мутантного аллеля множественного артрогрипоза (АМ), в популяции коров и их потомков ^2), выраженные в долях.

потомство [20]. Это способствует реализации Постановления Правительства РФ в части стабильного роста производства сельскохозяйственной продукции на основе применения современных средств экспертизы генетического материала [21].

Выводы. Средняя частота встречаемости животных-носителей генетических дефектов множественного артрогрипоза, остеопетроза и дупликации развития среди российских популяций крупного рогатого скота абердин-ангусской породы составила 1,58, 1,02 и 5,84 % соответственно.

Количество носителей множественного артрогрипоза в популяции телок, по сравнению с популяцией матерей, увеличилось на 10,27 % (1 = 2,85, р = 0,004863). Во втором поколении не отмечено значимого возрастания числа животных-носителей остеопетроза и дупликации развития.

Литература.

1. Acclimatization ability and meat production of Angus steers (Australian selection) imported in lower Volga region in Russia / L. V. Gorlov, A. S. Filatov, A. N. Sivko, et al. //Advances in Animal and Veterinary Sciences. 2018. Vol. 6. No. 11. Pp. 456-461. doi: 10.17582/journal.aavs/2018/6.10.461.466.

2. Productive performance and carcass traits of Nellore x Aberdeen Angus and Nellore x Red Angus heifers under tropical conditions/ P. S. A. Moreira, F. J. Lourenco, A. P. Neto, et al. // Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. 2015. Vol. 28. No. 3. Pp. 247-254. doi: 10.17533/udea.rccp.v28n3a5.

3. Bioeconomic model and selection indices in Aberdeen Angus cattle / G. Campos, J. B. Neto, R. P. Oaigen, et al. // J Anim Breed Genet. 2014. Vol. 131. No. 4. Pp. 305-312. doi: 10.1111/jbg.12069.

4. Gholap P. N., Kale D. S., Sirothia A. R. Genetic Diseases in Cattle: A Review. Research Journal of Animal, Veterinary and Fishery Sciences. 2014. Vol. 2. No. 2. Pp. 24-33.

5. Генетические дефекты мясных пород крупного рогатого скота и стратегии их контроля / Е. Н. Коновалова, Е. А. Гладырь, О. В. Костюнина и др. // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2017. № 7. С. 42-52.

6. Arthrogryposis Multiplex Questions and Answers //American Angus Association. 11/25/2008 [Электронный ресурс]. URL: http://www.angus.org/aaa_am_faq1.pdf (дата обращения: 09.12.2019).

7. Neuropathology and craniofacial lesions of osteopetrotic Red Angus Calves / D. O'Toole, S. Swist, L. Steadman, et al. // Vet Pathol. 2012. Vol. 49. No. 5. Pp. 746-754. doi: 10.1177/0300985811412621.

8. Denholm L., Martin L. Developmental duplications (DD) in Angus calves // Flock & Herd. 4 December 2013 [Электронный ресурс]. URL: http://www.flockandherd.net.au/cattle/reader/developmental-duplication-angus.html. (дата обращения: 09.12.2019).

9. Коновалова Е. Н., Костюнина О. В., Романенкова О. С. Генетический дефект множественного артрогрипоза и его ДНК-диагностика у крупного рогатого скота абердин-ангусской породы //Достижения науки и техники АПК. 2018. Т. 32. № 2. C. 58-61. doi: 10.24411/0235-2451-2018-10215.

2

10. Коновалова Е. Н., Костюнина О. В. ДНК-диагностика генетического дефекта дупликации развития (DD) у крупного рогатого скота абердин-ангусской породы//Молочное и мясное скотоводство. 2018. № 4. С. 20-24.

11. Генетический дефект остеопетроза крупного рогатого скота: создание диагностического ДНК-теста и анализ частоты встречаемости животных-носителей мутации среди российских популяций/ Е. Н. Коновалова, О. В. Костюнина, О. С. Романенкова и др. // Проблемы биологии продуктивных животных. 2019. № 3. C. 20-24.

12. Зиновьева Н. А. Введение в молекулярную генную диагностику сельскохозяйственных животных. Дубровицы: ВИЖ, 2002. 112 с.

13. Rodriguez S., Gaunt T. R., Day I. M. N. Hardy-Weinberg Equilibrium Testing of Biological Ascertainment for Mendelian Randomization Studies //American Journal of Epidemiology. 2009. Vol. 169. No. 4. Pp. 505-514. doi: 10.1093/aje/kwn359.

14. Glantz A. S. Primer of Biostatistics. M.: Practica, 1998. Pp. 459.

15. Коновалова Е. Н., Костюнина О. В. Распространение генетических дефектов множественного артрогрипоза (AM) и дупликации развития (DD) среди российских популяций крупного рогатого скота абердин-ангусской породы // Генетика и разведение животных. 2019. № 1. C. 18.

16. Konovalova E. N., Volkova V. V., Romanenkova O. S. Aberdeen Angus cattle breed in Russia: prevention of the genetic defects and evaluation of the risk of their spread by transferring from parents to offspring // IOP Conf. Series: Earth Environ. Sci. 2019. Vol. 315. No. 042008. Pp. 1-6. doi:10.1088/1755-1315/315/4/042008.

17. Beever J. E. Likely presence of lethal genetic defect in a specific line of Angus cattle //American Angus Association. 2008 [Электронный ресурс]. URL: http://www.angus.org/pub/am/aaa_notice.pdf (дата обращения: 09.12.2019).

18. A deletion mutation in bovine SLC4A2 is associated with osteopetrosis in Red Angus cattle / S. N. Meyers, T. G. McDaneld, S. L. Swist, et al.//BMC Genomics. 2010. Vol. 11. No. 1. Pp. 337. doi: 10.1186/1471-2164-11-337.

19. Case Study: Polymelia in a Holstein calf/M. Neupane, K. D. Moss, F. Avila, et al.// PAS. 2017. Vol. 33. No. 3. Pp. 378-386. doi: 10.15232/pas.2016-01594.

20. Genetic disorders in beef cattle: a review/ A. Cieploch, K. Rutkowska, J. Oprzadek, et al. // Genes Genom. 2017. Vol. 39. Pp. 461-471. doi: 10.1007/s13258-017-0525-8.

21. Об утверждении Федеральной научно-технической программы развития сельского хозяйства на 2017-2025 годы. Постановление Правительства Российской Федерации №996 от 25 августа 2017 г. //Правительство России [Электронный ресурс]. URL: http://government.ru/docs/29004/(дата обращения: 09.12.2019).

References

1. Gorlov LV, Filatov AS, Sivko AN, et al. Acclimatization ability and meat production of Angus steers (Australian selection) imported in lower Volga region in Russia. Advances in Animal and Veterinary Sciences. 2018;6(11):456-61. doi: 10.17582/journal. aavs/2018/6.10.461.466.

2. Moreira PSA, Lourenco FJ, Neto AP, et al. Productive performance and carcass traits of Nellore x Aberdeen Angus and Nellore x Red Angus heifers under tropical conditions. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. 2015;28(3):247-54. doi: 10.17533/udea.rccp.v28n3a5.

3. Campos G, Neto JB, Oaigen RP, et al. Bioeconomic model and selection indices in Aberdeen Angus cattle. J Anim Breed Genet. 2014;131(4):305-12. doi: 10.1111/jbg.12069.

4. Gholap PN, Kale DS, Sirothia AR. Genetic diseases in cattle: A review. Research Journal of Animal, Veterinary and Fishery Sciences. 2014;2(2):24-33.

5. Konovalova EN, Gladyr' EA, Kostyunina OV, et al. [Genetic defects of meat breeds of cattle and strategies for their control]. Veterinariya, zootekhniya i biotekhnologiya. 2017;(7):42-52. Russian.

6. American Angus Association [Internet]. Saint Joseph (MO): American Angus Association; c2020. Arthrogryposis multiplex questions and answers; 2008 Nov 25 [cited 2019 Dec 9]; [3 p.]. Available from: http://www.angus.org/aaa_am_faq1.pdf.

7. O'Toole D, Swist S, Steadman L, et al. Neuropathology and craniofacial lesions of osteopetrotic Red Angus Calves. Vet Pathol. 2012;49(5):746-54. doi: 10.1177/0300985811412621.

8. Flock & Herd [Internet]. [place unknown]; c2006-2019. Denholm L, Martin L. Developmental duplications (DD) in Angus calves; 2013 Dec 4 [cited 2019 Dec 9]; [about 17 screens]. Available from: http://www.flockandherd.net.au/cattle/reader/ developmental-duplication-angus.html.

9. Konovalova EN, Kostyunina OV, Romanenkova OS. [Genetic defect of multiple arthrogryposis and its DNA diagnostics in Aberdeen Angus cattle]. Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2018;32(2):58-61. Russian. doi: 10.24411/0235-2451-201810215.

10. Konovalova EN, Kostyunina OV. [DNA diagnosis of a genetic development duplication defect (DD) in Aberdeen Angus cattle]. Molochnoe i myasnoe skotovodstvo. 2018;(4):20-4. Russian.

11. Konovalova EN, Kostyunina OV, Romanenkova OS, et al. [Cattle osteopetrosis genetic defect: development of a diagnostic DNA test and analysis of the frequency of occurrence of mutation-bearing animals among Russian populations]. Problemy biologii produktivnykh zhivotnykh. 2019;(3):20-4. Russian.

12. Zinov'eva NA. Vvedenie v molekulyarnuyu gennuyu diagnostiku sel'skokhozyaistvennykh zhivotnykh [Introduction to the molecular genetic diagnosis of farm animals]. Dubrovitsy (Russia): VIZh; 2002. 112 p. Russian.

13. Rodriguez S, Gaunt TR, Day IMN. Hardy-Weinberg Equilibrium testing of biological ascertainment for Mendelian randomization studies. American Journal of Epidemiology. 2009;169(4):505-14. doi: 10.1093/aje/kwn359.

14. Glantz AS. Primer of biostatistics. Moscow: Practica; 1998. p. 459.

15. Konovalova EN, Kostyunina OV. [Distribution of genetic defects of multiple arthrogryposis (AM) and duplication of development (DD) among Russian populations of cattle of Aberdeen-Angus breed]. Genetika i razvedenie zhivotnykh. 2019;(1):18. Russian.

16. Konovalova EN, Volkova VV, Romanenkova OS. Aberdeen Angus cattle breed in Russia: prevention of the genetic defects and evaluation of the risk of their spread by transferring from parents to offspring. IOP Conf. Series: Earth Environ. Sci. 2019;315(042008):1-6. doi:10.1088/1755-1315/315/4/042008.

17. American Angus Association [Internet]. Saint Joseph (MO): American Angus Association; c2020. Beever JE. Likely presence of lethal genetic defect in a specific line of Angus cattle; 2008 [cited cited 2019 Dec 9]; [7 p.]. Available from: http:// www.angus.org/pub/am/aaa_notice.pdf.

18. Meyers SN, McDaneld TG, Swist SL, et al. A deletion mutation in bovine SLC4A2 is associated with osteopetrosis in Red Angus cattle. BMC Genomics. 2010;11(1):337. doi: 10.1186/1471-2164-11-337.

19. Neupane M, Moss KD, Avila F, et al. Case study: Polymelia in a Holstein calf. PAS. 2017;33(3):378-86. doi: 10.15232/ pas.2016-01594.

20. Cieploch A, Rutkowska K, Oprzadek J, et al. Genetic disorders in beef cattle: a review. Genes Genom. 2017;39:461-71. doi: 10.1007/s13258-017-0525-8.

21. Ob utverzhdenii Federal'noi nauchno-tekhnicheskoi programmy razvitiya sel'skogo khozyaistva na 2017-2025 gody. Postanovlenie Pravitel'stva Rossiiskoi Federatsii No. 996 [On approval of the Federal scientific and technical program for the development of agriculture for 2017-2025. Decree of the Government of the Russian Federation No. 996] (Aug. 25, 2017).