КОНЦЕНТРИРОВАННЫЕ БЕЛКОВЫЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
CONCENTRATED PROTEIN PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND THEIR APPLICATION

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По данной заявке испрашивается приоритет в соответствии с 35 U.S.С. §119 по предварительной заявке США 61/339191, поданной 1 марта 2010, полное содержание которой включено в настоящее описание в качестве ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к стабильным белковым фармацевтическим составам, в частности, концентрированным белковым фармацевтическим составам и способам их применения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Разработка концентрированных фармацевтических белковых составов, включающих белки в концентрации более 100 мг/мл, имеет много проблем. При таких высоких концентрациях эти белки ограничиваются растворимостью, объемом введения и производственными ограничениями, проблемами со стабильностью и существуют затруднения доставки. Разработка фармацевтических составов, в которых белковый компонент присутствует в высокой концентрации, может также иметь проблемы агрегации. Концентрированные белковые фармацевтические составы, специфические для инъекционного введения, имеют сложность в том, что они обычно высоковязкие. Мало того, что данные фармацевтические составы имеют возможные трудности во время подкожного введения человеку, но также во время приготовления и производства.
Существует необходимость в высококонцентрированных белковых фармацевтических составах, имеющих низкую вязкость, особенно для готового введения лекарственных средств и биопрепаратов на белковой основе субъектам парентеральным путем. Настоящее изобретение обеспечивает решение этой потребности.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В одном из данных аспектов, настоящее изобретение обеспечивает концентрированный белковый фармацевтический состав, композицию или препарат низкой вязкости, который является гипотоническим и может быть легко введен субъекту, включая человека, и без труда производиться и храниться.
1) Изобретение также относится к фармацевтическому составу, включающему концентрированный белок, регулятор тоничности, содержащий соль и буфер, присутствующие в комбинированном количестве от приблизительно 110 мМ до приблизительно 120 мМ, и сурфактанты, отличающемуся тем, что он является гипотоническим. В воплощении настоящего изобретения, концентрированный белок находится в количестве более приблизительно или равном ПО мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, или в количестве от приблизительно 162 мг/мл до приблизительно 175 мг/мл. В воплощении настоящего изобретения, концентрированный белок представляет собой фермент, полипептид, пептид, антитело или фрагмент антитела, моноклональное антитело, поликлональное антитело, нанотело или гибридное антитело. В воплощении настоящего изобретения, концентрированный белок представляет собой моноклональное антитело, которое является гуманизированным или фрагментом гуманизированного антитела.
2) Заявленные фармацевтические составы включают соль в количестве менее чем 100 мМ, или в количестве, которое приблизительно 90 мМ, приблизительно 95 мМ, равном 90 мМ, или равном 95 мМ. Соль может быть одна или несколько из хлорида аммония, сульфата аммония, тиоционата аммония, аргинина гидрохлорида, хлорида кальция, хлорида магния, ацетата натрия, хлорида натрия, глюконата натрия, лактата натрия, тиоцианата натрия, хлорида цинка или любое их сочетание. Буферный раствор в фармацевтических составах присутствует в количестве приблизительно или равном от 5 мМ до приблизительно или равном 25 мМ, или приблизительно или равном от 5 мМ до приблизительно или равном до 20 мМ, и может включать одну или несколько аминокислот или производных или их L-молекулярные формы. Одна или несколько аминокислот могут быть гистидином, глицином или сочетанием гистидина и глицина. Другие подходящие буферные реагенты включают винную кислоту, малеиновую кислоту, янтарную кислоту, лимонную кислоту и уксусную кислоту.
3) Фармацевтические составы могут содержать сурфактант, который присутствует в количестве от приблизительно или равном 0.001% масса/объем до приблизительно или равном 0.2% масса/объем, в количестве от приблизительно или равном 0.005% до приблизительно или равном 0.2%, или в количестве от приблизительно или равном 0.05% до приблизительно или равном 0.2%.

Сурфактантом может быть детергент, плюроник, полисорбат, полисорбат 20 (например, Твин20), полиэтиленгликоль или их сочетание.
4) Фармацевтические составы могут также содержать стабилизирующее вещество, которое может быть в количестве от приблизительно или равном 0.05% масса/объем до приблизительно или равном 1.8% масса/объем, или от приблизительно или равном 0.2% до приблизительно или равном 1.8% масса/объем, или от приблизительно или равном 0.3% до приблизительно или равном 1.5% масса/объем от общего фармацевтического состава. Стабилизирующим веществом может быть моносахарид, дисахарид или их сочетание. Стабилизирующим веществом может быть также сахар, сахароспирт или его производное.
5) Фармацевтические составы обладают вязкостью от приблизительно 25 сП до приблизительно 60 сП, или вязкостью от приблизительно 40 сП до приблизительно 50 сП. Фармацевтические составы имеют рН от приблизительно 5.4 до приблизительно 6.4, или рН от приблизительно 5.4 до приблизительно 6, или рН от 5.4 до 5.6. Фармацевтические составы имеют осмоляльность менее чем приблизительно 290 мОсм/кг или осмоляльность от приблизительно 250 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг, или осмоляльность приблизительно 260 мОс/кг.
6) Заявленные фармацевтические составы могут включать терапевтический белок, такой как любой тип антитела или его фрагмент, для введения субъекту, нуждающемуся в этом. В воплощении изобретения, фармацевтический состав представляет собой жидкий или растворимый фармацевтический состав.
7) Изобретение также включает жидкий или растворимый фармацевтический состав, который включает концентрированный белок в количестве более или равном 100 мг/мл и менее чем или равном 200 мг/мл; соль в количестве более или равном 90 мМ или 95 мМ и менее чем или равном 100 мМ; буферный раствор в количестве более или равном 5 мМ и менее чем или равном 25 мМ; сурфактант в количестве более или равном 0.001% масса/объем и менее чем или равном 0.2% масса/объем; и, необязательно, стабилизирующее вещество в количестве от приблизительно 0.05% масса/объем до приблизительно 1.8% масса/объем; отличающийся тем, что фармацевтический состав имеет осмоляльность от приблизительно 250 до приблизительно 280 миллиосмоль; вязкость от приблизительно 25 сП до приблизительно 60 сП, рН от 5.4 до 6.4 и осмоляльность от приблизительно 250 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг.
8) Изобретение также включает гипотонический жидкий фармацевтический состав низкой вязкости, который включает концентрированный белок в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, отличающийся тем, что концентрированный белок представляет собой любой тип антитела или его фрагмент; соль в количестве приблизительно или равном 90 мМ или 95 мМ; буфер в количестве приблизительно или равном 20 мМ; сурфактант в количестве приблизительно 0.005% масса/объем; и, необязательно, стабилизирующее вещество в количестве приблизительно 0.05%-0.5% масса/объем.
9) Изобретение также включает гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости, который включает в себя концентрированное антитело или его фрагмент в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл; соль в количестве приблизительно 90 мМ или 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор является гистидиновым; сурфактант в количестве приблизительно 0.005% масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат; и стабилизирующее вещество в количестве приблизительно 0.3% масса/объем или приблизительно 0.6% масса/объем, отличающийся тем, что стабилизирующее вещество представляет собой сорбитол или сахарозу, соответственно. Фармацевтический состав может быть жидким или растворимым фармацевтическим составом.
10) Изобретение также включает гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости, который включает в себя концентрированное антитело или его фрагмент в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл; соль в количестве приблизительно или равном 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно или равном 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор представляет собой сочетание глицина и гистидина; и сурфактант в количестве приблизительно или равном 0.005%) масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат. Фармацевтический состав может также включать стабилизирующее вещество в количестве от приблизительно 0.001% до 1.5% масса/объем, отличающийся тем, что стабилизирующее вещество представляет собой сорбитол или сахарозу.
Изобретение также включает готовое изделие, которое включает в себя контейнер и фармацевтический состав, включающий белок в концентрации более 100 мг/мл и менее чем 200 мг/мл, солевой и буферный регуляторы тоничности, присутствующие в количестве от приблизительно 110 мМ до 120 мМ, сурфактант и инструкцию по применению. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав в готовом изделии также включает стабилизирующее вещество в количестве от приблизительно 0.001% до 1.5% масса/объем. В варианте воплощения изобретения, контейнер выбран из бутылки, флакона, шприца, шприца-ручки, насоса, многодозового шприца с иглой, многодозового шприца-ручки, безыгольного инъектора, шприца-тюбика, автоинжектора, предварительно заполненного шприца или их сочетание. В воплощении изобретения, фармацевтический состав включен в контейнер готового изделия.
Эти и другие аспекты настоящего изобретения станут очевидными для специалиста в данной области техники после прочтения следующего подробного описания, включающего в себя наглядные варианты осуществления и примеры.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение направлено на стабильные, низкой вязкости фармацевтические составы, композиции или препараты, которые являются гипотоническими и включают один или несколько белков, присутствующих в высокой концентрации, то есть более 100 мг/мл и менее чем 200 мг/мл. Заявленные фармацевтические составы, композиции или препараты являются полезными при доставке терапевтического или профилактического лекарственного препарата, биопрепарата, лекарственного средства и т.п. субъекту, нуждающемуся в этом. В данном изобретении, термины фармацевтический состав, композиция и препарат употребляются как синонимы.
Более конкретно, стабильные фармацевтические составы, содержащие высококонцентрированный белок, обладают низкой вязкостью, являющейся существенной для парентерального и подкожного введения. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав является фармацевтически и/или физиологически приемлемым и обеспечивает стабильную основу для белка, который находится в высокой концентрации. Фармацевтические составы могут быть представлены в наборе или готовом изделии для выхода на рынок и применения.
Следует отметить, что процентное содержание компонентов фармацевтического состава, описанных в данной заявке, представлено в масса/объем от общего фармацевтического состава.
В одном из вариантов осуществления, изобретение включает в себя белок в количестве более приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл; соль в количестве менее чем приблизительно 100 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 95 мМ, приблизительно или равном 90 мМ или приблизительно или равном 95 мМ, буферный раствор в количестве от приблизительно или равном 5 мМ до приблизительно или равном 20 мМ; менее чем приблизительно 20 мМ или равном 20 мМ; и сурфактант в количестве от приблизительно 0.001% до приблизительно 0.2%. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав является гипотоническим. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав находится в форме жидкости или раствора. В некоторых вариантах воплощения изобретения, фармацевтический состав также включает в себя, помимо соли в качестве регулятора тоничности, второй регулятор тоничности, не содержащий соль, такой как сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид или такое их сочетание, что осмоляльность фармацевтического состава менее чем приблизительно 290 мОсм/кг или приблизительно 260 мОсм/кг.
В других вариантах воплощения, заявленный фармацевтический состав включает в себя концентрированный белок или высококонцентрированный белок в количестве от более приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл; соль и буферный раствор, присутствующие в сочетание в количестве от приблизительно 100 мМ до приблизительно 120 мМ, приблизительно 100 мМ до приблизительно 115 мМ, приблизительно 100 мМ до приблизительно 110 мМ, приблизительно или равном 100 мМ, приблизительно или равном 110 мМ, или приблизительно или равном 115 мМ; и сурфактант в количестве от приблизительно 0.001% до приблизительно 0.2%, или приблизительно 0.005% до приблизительно 0.2%, или приблизительно 0.05% до приблизительно 0.02%. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав является гипотоническим. В варианте осуществления изобретения, фармацевтический состав обладает низкой вязкостью. В воплощении изобретения, фармацевтический состав также включает в себя сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав находится в форме жидкости или раствора. В воплощении изобретения, соль и, необязательно, сахар, сахароспирт, моно- и/или ди-сахарид выполняют функцию одного или нескольких стабилизирующих веществ или регуляторов тоничности в фармацевтическом составе.
В других вариантах воплощения, заявленный фармацевтический состав включает в себя концентрированный белок в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, где концентрированный белок является любым желательным белком, таким как, но не ограничиваясь ими, антитело или его фрагмент, фактор свертываемости крови, фермент, пептид, полипептид или их сочетание; соль в количестве более 90 мМ, но менее чем 100 мМ, или более или равном 95 мМ, но менее чем 100 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой, например, хлорид натрия, глюконат натрия, лактат натрия или их сочетание; буферный раствор в количестве от приблизительно 5 мМ до приблизительно 20 мМ; приблизительно или равном 20 мМ или приблизительно или равном 25 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор представляет собой, например, аминокислотный буфер, такой как глициновый, гистидиновый или их сочетание, или буферные растворы органических кислот, таких как янтарная кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота или уксусная кислота, или их сочетание; и сурфактант в количестве от приблизительно 0.001% до приблизительно 0.2% или приблизительно 0.005% до приблизительно 0.2%, например, неионный детергент, полисорбат и т.п., или их сочетание. Фармацевтический состав также может включать в себя сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид или их сочетание в количестве более чем приблизительно или равном 0.05% масса/объем и менее чем приблизительно или равном 1.6% масса/объем или 1.8% масса/объем или в количестве, достаточном для обеспечения осмоляльности фармацевтического состава приблизительно 260-280 мОсм/кг, отличающийся тем, что неограничивающие примеры включают в себя сорбитол, маннитол, сахарозу, трегалозу, глицерин, мальтозу или лактозу или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, белок присутствует в количестве более 100 мг/мл и менее чем 200 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве более или равном 100 мг/мл и менее чем или равном 180 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве более или равном 100 мг/мл и менее чем или равном 175 мг/мл.
В еще одном варианте воплощения, заявленный фармацевтический состав включает концентрированный белок в количестве более или равном 100 мг/мл и менее чем или равном 200 мг/мл, отличающийся тем, что концентрированный белок представляет собой антитело; соль в количестве приблизительно 90 мМ или приблизительно 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор является глициновым и/или другими формами глицина; сурфактант в количестве приблизительно 0.001%-0.2% масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат или плюроник; и, необязательно, моно- или дисахарид в количестве от приблизительно 0.3% масса/объем до приблизительно 1.5% масса/объем. В варианте воплощения изобретения, белок присутствует в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 180 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 175 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 165 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 162 мг/мл.
В еще одном воплощении, заявленный фармацевтический состав включает в себя концентрированный белок в количестве более или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, отличающийся тем, что концентрированный белок представляет собой антитело; соль в количестве от приблизительно 90 мМ до приблизительно 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор является гистидиновым и/или другими формами гистидина; сурфактант в количестве приблизительно 0.005%) масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат; и, необязательно, сахар, сахароспирт, моно- или дисахарид, или их сочетание, в количестве от приблизительно 0.3% масса/объем до приблизительно 1.5% масса/объем. В варианте воплощения изобретения, белок присутствует в количестве более или равном 100 мг/мл и менее чем или равном 180 мг/мл. В варианте осуществления изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 175 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 165 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 162 мг/мл.
В других вариантах воплощения, заявленный фармацевтический состав включает в себя концентрированный белок в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, отличающийся тем, что концентрированный белок представляет собой антитело; соль в количестве приблизительно 90 мМ или приблизительно 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор представляет собой сочетание глицина и гистидина и/или других форм глицина или гистидина; сурфактант в количестве приблизительно 0.005% масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат; и, необязательно, сахар, сахароспирт моно- или дисахарид, или их сочетание, в количестве от приблизительно 0.05% до приблизительно 1.8%. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 180 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 175 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 165 мг/мл. В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 162 мг/мл.
В других вариантах воплощения изобретения, заявленный фармацевтический состав включает в себя концентрированный белок в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, отличающийся тем, что концентрированный белок представляет собой любой желательный белок, такой как, но не ограничиваясь ими, антитело или его фрагмент, фактор свертываемости крови, фермент, пептид, полипептид или их сочетание; соль и буферный раствор в комбинированном количестве от приблизительно или равном 100 мМ до приблизительно или равном 120 мМ, или от приблизительно или равном 100 мМ до приблизительно или равном 110 мМ, или от приблизительно или равном 100 мМ до приблизительно или равном 115 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой, например, хлорид натрия, глюконат натрия, лактат натрия или их сочетание, а буферный раствор представляет собой, например аминокислотный буфер, такой как глициновый, гистидининовый или их сочетание, или буфер органических кислот, таких как янтарная кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, уксусная кислота или их сочетание; и сурфактант в количестве от приблизительно 0.001%) до приблизительно 0.2%, например, неионогенный детергент, полисорбат, плюроник и т.п., или их сочетание. Фармацевтический состав может также включать в себя сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид или их сочетание, которое действует как регулятор тоничности в количестве более приблизительно или равном 0.005% масса/объем и менее чем приблизительно или равном 1.8% масса/объем, или в количестве более приблизительно или равном 0.2% масса/объем и менее чем приблизительно или равном 1.8% масса/объем, отличающийся тем, что неограничивающие примеры включают в себя сорбитол, маннитол, сахарозу, трегалозу или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, регулятор тоничности присутствует в количестве, достаточном для обеспечения осмоляльности фармацевтического состава от приблизительно 260 мОс/кг до приблизительно 280 мОсм/кг.В воплощении изобретения, белок присутствует в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл. В варианте осуществления изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 180 мг/мл. В варианте воплощения изобретения, белок присутствует в количестве приблизительно или равном 175 мг/мл.
Согласно изобретению, и без связи с теорией, соль и сахар, сахароспир, моно- и дисахарид или их сочетание, могут выполнять функцию регулятора тоничности в описанных фармацевтических составах. В некоторых вариантах воплощения изобретения, буферные растворы, в частности аминокислотные буферы, также могут применяться в качестве регуляторов тоничности в фармацевтических составах. Такие регуляторы тоничности служат для достижения подходящей осмоляльности фармацевтических составов.
Заявленные жидкие фармацевтические составы обладают низкой вязкостью. Как правило, низкая вязкость фармацевтических составов манипулируется посредством 25 g до 27 g иглой шприца, предпочтительно тонкостенным шприцом, и, как правило, приблизительно 50 сП до приблизительно 60 сП. В воплощении изобретения, вязкость фармацевтических составов составляет менее чем приблизительно или равна 40 сП.
В варианте воплощения изобретения, вязкость фармацевтических составов составляет менее чем приблизительно или равна 50 сП.
Заявленные жидкие фармацевтические составы являются гипотоническими и обладают осмоляльностью менее чем 290 миллиосмоль (mOsm). Как правило, изотничность эквивалентна значению приблизительно 290 миллиосмоль. В воплощении изобретения, осмоляльность заявленных фармацевтических составов составляет приблизительно 240 миллиосмоль до приблизительно 270 миллиосмоль. В воплощении изобретения, осмоляльность заявленных фармацевтических составов составляет приблизительно 250 миллиосмоль до приблизительно 260 миллиосмоль.
рН заявленных фармацевтических составов находится в диапазоне от приблизительно или равном рН 5.4 до приблизительно или равном рН 6.4, или от приблизительно или равном рН 5.4 до приблизительно или равном рН 6.0, или от приблизительно или равном рН 5.4 до приблизительно или равном рН 5.6, или от приблизительно или равном рН 5.4 до приблизительно или равном рН 5.5.
Согласно изобретению, описанные фармацевтические составы являются стабильными при температуре от приблизительно 2°С до приблизительно 8°С по меньшей мере два месяца и дольше, то есть дольше шести месяцев, в течение приблизительно одного года, дольше одного года, дольше восемнадцати месяцев или дольше двух лет. В контексте настоящего изобретения, стабильный фармацевтический состав, в котором структурная целостность белка остается по меньшей мере приблизительно 90% неповрежденной, по существу не содержащий агрегатов и/или продуктов распада, и, необязательно, в котором по меньшей мере приблизительно 90% белка сохраняет активность. Структурная целостность белка может быть оценена различными биофизическими способами, включающими, но не ограничиваясь ими, ИЭФ гель, ИЭФ в капилляре, ионный обмен, ВЭЖХ, ТСК гельфильтрационную хроматографию (TosoHaas, Montgomeryville, PA), электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (SDS-PAGE), путем измерения концентрации белка как чистого поглощения УФ излучения при длине волны 280 нм и путем визуального осмотра жидких фармацевтических составов на наличие частиц против светового и темнового фона. Способы для определения активности белка могут быть выполнены путем, например, экспериментов начальной скорости, экспериментов кривой реакции, экспериментов предстационной кинетики и экспериментов релаксации.
В других вариантах осуществления изобретения, фармацевтический состав по существу не содержит агрегатов и/или продуктов распада, или приблизительно 4% или менее агрегатов и/или продуктов распада, или приблизительно 3% или менее агрегатов и/или продуктов распада. В других вариантах воплощения изобретения, фармацевтический состав содержит приблизительно 2% или менее агрегатов и/или продуктов распада. В заявленных фармацевтических составах концентрированный белок обладает предполагаемым для применения структурным строением или конформацией, которая является функциональной и/или полезной для лечения субъекта, нуждающегося в этом. В заявленных фармацевтических составах, концентрированный белок обладает конформацией, которая позволяет ему осуществлять свою деятельность в качестве активного компонента в фармацевтическом составе и его функциональное назначение после доставки или введения субъекту или человеку, нуждающемуся в этом.
В воплощении изобретения, фармацевтический состав по существу не содержит продуктов дезаминирования и/или продуктов распада. По существу свободный относится к приблизительно 20% или менее продуктов дезаминирования и/или продуктов распада, и/или изменения распределения изоформ, или приблизительно 10% или менее продуктов дезаминирования и/или продуктов распада, и/или изменения в распределении изоформ. В других вариантах осуществления изобретения, фармацевтический состав содержит приблизительно 5% или менее продуктов дезаминирования и/или продуктов распада, и/или изменения в распределении изоформ.
Во всех приведенных выше вариантах воплощения изобретения, дополнительные компоненты могут, необязательно, быть добавлены к заявленным фармацевтическим составам. Примерами таких компонентов являются те, которые полезны в изменении вязкоупругих свойств, тем самым позволяя лучшую технологичность и доставку фармацевтического состава и ее компонентов субъекту. Дополнительные компоненты, оптимально, не вмешиваются в функциональность или активность ингредиента(ов) и других ингредиентов фармацевтического состава. Неограничивающие примеры необязательных или дополнительных компонентов предоставлены ниже.
Концентрированный белок
Хотя заявленные фармацевтические составы могут включать в себя белок, пептид, полипептид или антитело, пригодные в терапевтических или фармакологических фармацевтических составах, фармацевтические составы являются наиболее пригодными для концентрированных белков, то есть белков, которые присутствуют в фармацевтическом составе в высокой концентрации. Желательно, белок является по существу выделенным или очищенным и по существу свободным от нежелательных примесей. Высококонцентрированный белок может обладать концентрацией более приблизительно или равной 100 мг/мл до приблизительно или равной 200 мг/мл. Высококонцентрированный белок может обладать концентрацией приблизительно или равной 185 мг/мл, приблизительно или равной 180 мг/мл, приблизительно или равной 175 мг/мл, приблизительно или равной 170 мг/мл или приблизительно или равной 165 мг/мл. В частности, белок присутствует в фармацевтических составах в количестве от 150 мг/мл до 200 мг/мл, или в количестве на 1 мг/мл от 150 мг/мл до 200 мг/мл, например, 151 мг/мл, 152 мг/мл, 152 мг/мл, 153 мг/мл, 154 мг/мл, 155 мг/мл, 156 мг/мл, 157 мг/мл, 158 мг/мл, 159 мг/мл, 160 мг/мл, 161 мг/мл, 162 мг/мл, 163 мг/мл, 164 мг/мл, 165 мг/мл и т.д.
Применение крупных сложных белковых молекул в качестве терапевтических веществ имеет повышенный интерес, особенно в качестве терапевтических и лекарственных средств. Длина последовательности белка может быть, например, в пределах от 100 до 1000 аминокислот, где аминокислотная последовательность обычно определяет структурную конформацию белка. Внутренние связи, такие как серные и водородные связи, могут обеспечить белку его окончательный вид и форму. Сложные белки могут быть дополнительно обработаны путем добавления фосфатных групп, так называемым фосфорилированием, или молекул углевода, так называемым гликозилированием, которые изменяют функцию белка. Эти белки могут быть крайне важными в биологии клетки и, тем самым, иметь возможность применения в предотвращении, лечении и возможно даже лечении заболеваний и расстройств. Данные белки могут включать в себя, но не ограничиваясь ими, ферменты или факторы крови, которые влияют на сердечные приступы, инсульты, фиброзно-кистозную дегенерацию, болезнь Гоше; эритропоэтин для анемии, фактор свертываемости крови для гемофилии; или, инсулин для лечения диабета, все, которые могут применяться в фармацевтическом составе по настоящему изобретению.
Концентрированные белки, которые могут применяться в заявленных фармацевтических составах, включают в себя антитела. Антитела, применяемые в фармацевтическом составе по настоящему изобретению, включают в себя, но не ограничиваются ими, поликлональные, моноклональные, диатела, нанотела, моновалентные, биспецифические, гетероконъюгированные, мультиспецифичные, аутоантитела, человеческие, гуманизированные или химерные антитела, одноцепочечные антитела, Fab фрагменты, F(ab)’2 фрагменты, фрагменты, полученные библиотекой экспрессируемых последовательностей Fab, антиидиотипические (анти-Id) антитела, эпитоп-связывающие фрагменты и CDR-содержащие фрагменты или части любых из вышеупомянутых. В воплощении изобретения, антитела представляют собой гуманизированное моноклональное антитело, как описано в патенте США No. 7,122,185, выданном 17 октября 2006, содержание которого включено посредством ссылки в настоящую заявку. Фармацевтический состав, содержащий такие антитела, может применяться в лечении ВИЧ-инфицированных людей.
Антитела относятся к молекулам иммуноглобулинов и частям молекул иммуноглобулинов, которые иммунологически активны, т.е. молекулы, которые содержат участок связывания антигена, который специфически связывает антиген или иммуноген. Молекулы иммуноглобулинов настоящего изобретения могут быть любого типа или изотипа (например, IgA, IgD, IgE, IgG, IgM и IgY), класса или подкласса (например, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl и IgA2) молекул иммуноглобулинов. Кроме того, дополнительно к антителам, функциональные фрагменты антител (такие как, например, Fab, Fab’, F(ab’)2, или Fd фрагменты, одноцепочечные Fvs (scFv), одноцепочечные антителам, дисульфид-связанные Fvs (sdFv) и фрагменты, включающие любой VL или VH домен, фрагменты антигенсвязывающих антител, включающие одноцепочечные антитела, которые могут включать только вариабельную область(и) или в сочетание с целым или частью следующих: шарнирной областью, CH1, СН2 и СНЗ доменами, также рассматриваются в фармацевтических составах, описанных в данной заявке. Продукты Fab или библиотеки экспрессируемых последовательностей иммуноглобулина, а также, химерные, одноцепочечные и гуманизированные антитела могут применяться в фармацевтическом составе по настоящему изобретению.
Антитела настоящего изобретения могут быть от любого млекопитающего. Без ограничения, антитела включают антитела, которые являются человеческими, собачьими, кошачьими, мышиными (например, мышей и крыс), обезьяньими, ослиными, кроличьими, козьими, морской свинки, бычьими, свиньи, лошадиными, цыпленка и в этом роде, которые были бы применимы. Данные антитела могут быть выделены из, например, библиотеки человеческих иммуноглобулинов или из трансгенных млекопитающих для одного или нескольких человеческих иммуноглобулинов и, которые не экспрессируют иммуноглобулины эндогенно. Антитела, применимые в фармацевтическом составе по настоящему изобретению, могут быть моноспецифическими, биспецифическими, триспецифическими или более мультиспецифическими. Мультиспецифические антитела могут быть специфическими для различных эпитопов того или иного пептида или могут быть спицифическими как для специфического пептида, так и для гетерологического эпитопа, такого как гетерологический пептид или твердый носитель.
Антитела или их функциональные фрагменты могут быть применяться и показали эффективность в лечении многочисленных заболеваний и состояний, таких как, например, различные заболевания, связанные с онкологией, заболевания, связанные с вирусами или инфекцией, заболевания или состояния, связанные с гастроэнтерологией, заболевания сердца, воспаления, отторжения при трансплантации, кожных, кровяных, неврологических, респираторных, аллергических и аутоиммунных заболеваний, и, более конкретно, например, рака молочной железы, не-ходжкинской лимфомы, рака предстательной железы, ревматоидного артрита, респираторно-синцитиального вируса, флавивируса, особенно таких вирусов, как все штаммы и генотипы ВИЧ, HCV, HBV, HAV, HEV, HPV, HSV и т.п.. Антитела, которые нацелены на рецепторы клеточной поверхности, например, рецепторы факторов роста и рецепторы, участвующие в контакте клетки с клеткой или стимуляции/пролиферации клеток, или другие молекулы-мишени клеточной поверхности, являются особенно пригодными в лечении целого ряда заболеваний, таких как злокачественные заболевания, опухоли, клеточнопролиферативные заболевания и подобные. Такие антитела являются пригодными для применения в заявленных фармацевтических составах. Антитела были также произведены против зубного кариеса, холеры, диареи Е. coli, малярии, Норовируса, риновируса, гриппа и применяются в описанном фармацевтическом составе. Антитела или их фрагменты, направленные против бактериальных токсинов, таких как токсины, вырабатываемые бактериями, например, Staphylococcus, Streptococcus, Campylobacter, Clostridium и т.п., могут применяться в заявленных фармацевтических составах для лечения инфекции или заболевания, вызванных данными микроорганизмами. В частности, фармацевтические составы и композиции, описанные в данной заявке, могут включать антитела, включающие в себя моноклональные антитела, гуманизированные антитела или их фрагменты, направленные против токсина А или токсина В Clostridium difficile или его доменов. Кроме того, антитела, такие как анти-CCR5 гуманизированные моноклональные антитела PRO 140 или антитела, направленные против простатоспецифического мембранного антигена (PSMA), могут применяться в белковых фармацевтических составах, описанных в данной заявке. Антитела могут быть связаны, соединены или конъюгированы с другими молекулами, такими как токсин, низкомолекулярное лекарство или молекулами, подобными лекарству, для усиления их терапевтической активности, эффективности и/или полезности.
Белок или концентрированное количество белка, применяемые в заявленных фармацевтических составах, могут быть получены любым из нескольких известных способов. Это может быть выполнено, например, путем трансформации или трансфекции подходящих клеток-хозяев с экспрессионным или клонирующим вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую соответствующий белок, и культивированием в общепринятой среде с изменениями или без при необходимости для индуцирования промотеров, отделения белка от эндогенного источника, или синтетически посредством рекомбинантных способов и синтеза пептида, или сочетанием данных способов. Условия культивирования, такие как среда, температура, рН, скорость перемешивания и т.п. могут быть выбраны специалистом в данной области без лишнего экспериментирования. Обычно, принципы, протоколы и практические способы для оптимизации производительности клеточных культур могут быть найдены в Mammalian Cell Biotechnology: A Practical Approach, M. Butler, Ed., New York: IRL Press, 1991) и Sambrook и др., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2000. В тех случаях, когда концентрированный белок, применяемый в фармацевтическом составе по настоящему изобретению, представляет собой антитело, специалисты в данной области техники знакомы со способами для производства антител, таких как, но не ограничиваясь ими, включающих в себя поликлональные, моноклональные, гуманизированные, биспецифические и гетероконъгированные антитела и т.п.
Стабильность структуры концентрированного белка против изменений в некоторых переменных, а именно рН, температуры, ионной силы, напряжения сдвига и цикл замораживания и оттаивания, можно оценить, используя принятые в данной области способы и методики.
Буферные растворы и регуляторы тоничности
Регуляторы тоничности применяют для установления тоничности фармацевтического состава. Для гипотонического фармацевтического состава, тоничность фармацевтического состава должна быть установлена так, чтобы тоничность была менее чем у изотонического фармацевтического состава. Как правило, концентрация только растворенных веществ, которые не могут пересечь мембрану, определяет тоничность фармацевтического состава. Заявленные фармацевтические составы включают компоненты, которые выполняют функцию регуляторов тоничности для получения фармацевтических составов и композиций, которые обладают низкой вязкостью и являются стабильными и гипотоническими. В то время как буферные растворы стабилизируют фармацевтические составы, было обнаружено, что присутствие соли способствует снижению вязкости композиций. Соли и буферы в фармацевтических составах являются физиологически и фармацевтически приемлемыми, такими как множество общеизвестных и применяемых кислот или металлов, образующих основания, аминов и аминокислот.
Неограничиваясь примерами, соли, используемые в фармацевтических составах по настоящему изобретению, включают хлорид аммония, сульфат аммония, тиоционат аммония, аргинина гидрохлорид, кальций, хлорид кальция, хлорид магния, ацетат натрия, хлорид натрия, глюконат натрия, лактат натрия, тиоционат натрия, хлорид цинка, их сочетания и т.п.
Буферные растворы, которые применяли в заявленных фармацевтических составах, включают кислоты, например, малеиновую кислоту, янтарную кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, уксусную кислоту; основы; и/или аминокислотные буферы. Примеры аминокислот (аминоксилотных буферов) включают в себя глицин, гистидин, моногидрохлорид гистидина, их сочетание и т.п. Подходящие аминокислоты также включают формы, такие как L-аминокислоты, и могут включать моногидрохлориды, дигидрохлориды и т.п. В различных вариантах воплощения изобретения, другие формы глицина или гистидина включают, но не ограничиваются ими, L-формы этих аминокислот, формы моногидрохлорида этих аминокислот, их сочетания и подобное. Например, глицин включает в себя глицин, моногидрохлорид глицина и моногидрохлорид L-глицина, а гистидин включает гистидин, моногидрохлорид гистидина и моногидрохлорид L-гистидина. В воплощении изобретения, соли и буферные растворы фармацевтических составов являются моновалентными. В различных вариантах осуществления изобретения, одна или несколько аминокислот могут присутствовать в фармацевтических составах в количестве от приблизительно 5 мМ до приблизительно 20 мМ, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 25 мМ, от 5 мМ до 20 мМ или от 5 мМ до 25 мМ.
В воплощении изобретения, одна или несколько аминокислот присутствуют в фармацевтическом составе в концентрации приблизительно или равной 20 мМ или 25 мМ. Без привязки к какой либо теории, аминокислоты обеспечивают буферизирующие и/или стабилизирующие свойства в заявленных фармацевтических составах. В воплощении изобретения, стабилизирующая аминокислота или буферное вещество представляют собой глицин или гистидин, сочетание глицина и гистидина и/или других форм глицина или гистидина, например, моногидрохлорид L-глицина, моногидрохлорид L-гистидина. В других вариантах осуществления изобретения, другие аминокислоты могут применяться в сочетание в фармацевтических составах. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав содержит гистидин и/или другие его формы в сочетание с глицином и/или другими его формами так, что общее количество данных аминокислот в сочетании составляет приблизительно или равно 20 мМ, или приблизительно или равно 25 мМ. Для иллюстрации и без ограничения, одна аминокислота может присутствовать в количестве приблизительно или равном 5 мМ, а другая аминокислота может присутствовать в количестве приблизительно или равном 15 мМ, одна аминокислота может присутствовать в количестве приблизительном или равном 10 мМ, а другая аминокислота может присутствовать в количестве приблизительно или равном 15 мМ.
1-4
Неограничивающие примеры других веществ, которые могут быть включены в заявленные фармацевтические составы и/или применяться в качестве буферных растворов, включают буфер неорганических и органических кислот, неорганических и органических оснований, карбоновый, бромистоводородный, хлористоводородный, йодистово дородный, азотный, хлорный, фосфорный, сульфаниловый, сульфиновый, сульфоновый, серный, алкилы с прямой и разветвленной цепью, ароматический, арилалифатический, насыщенный, ненасыщенный, моно, ди- и три-карбоновый, 1,2-этандисульфоновый, 2-ацетокси-бензойный, 2-гидроксиуксусный, 2-гидроксиэтансульфоновый, 2-гидроксипропионовый, 2-оксопропионовый, 3-(4-гидроксибензоил)-бензойный, 3-фенилпропионовый, 4,4’-метиленбис-3(гидрокси-2-ен-карбоновая кислота), 4-хлорбензолсульфоновый, 4-метилбицикло[2.2.2]-окт-2-ен-карбоновый, ацетатный, уксусный, аминобензойный, аскорбиновый, бензолсульфоновый, бензойный, бутан дионовый, бутановый, камфорсульфоновый, коричный, лимонный, цикличный, циклоалифатический, циклопентанпропионовый, эмбоновый, этансульфоновый, муравьиный, фумаровый, глюкогептоновый, глюконовый, глициновый, гликолевый, глюконовый, глиоксалевый, HEPES, гетероциклический, гистидиновый, гидроксималеиновый, гидроксинафтойный, лактатный, лаурил-сернокислотный, малеиновый, яблочный, малоновый, миндальный, метилсульфониловый, метансульфоновый, муконовый, нафталин-2-сульфоновый, щавелевый, пальминовый, пальмитиновый, фенилуксусный, фталевый, малоновый, пропионовый, р-толуолсульфоновый, пировиноградный, салициловый, стеариновый, сукцинатный, янтарный, янтарный, винный, т-бутил уксусный, тиоциановый, трифторуксусный, триметилуксусный или их сочетание. Дополнительные примеры, которые применяются в фармацевтическом составе включают, но не ограничиваются ими, 2-диэтиламиноэтанол, аланин, алюминий, аммоний, аргинин,аспарагин, бетаин, кофеин, кофеин, кальций, холин, красная медь, дициклогексиламин, дициклогексинамин, диэтиламин, диэтиламин, этаноламин, этаноламин, этилендиамин, глюкозамин, глутамин, глутаминовая кислота, глицин, гистидин, гидрабамин, железо, изопропиламин, изопропиламин, лейцин, литий, лизин, магний, марганец, метилглюкамин, морфолин, N-этилпиперидин, N-метилглюкамин, фенилаланин, пиперазин,пиперидин, пиперидин и огранические нетоксичные основания, включающие полиаминные смолы, калийные, первичные, прокаин, пурины, вторичные и третичные амины, серии, натрий, замещенные амины, треобромин, треонин, триэтиламин, трипропиламин, цинк, циклические амины и основные ионнообменные смолы, например, N(R’)+(где R представляет собой независимый Н или Салкил, например, Трис и аммоний), L-формы аминокислот, моногидрохлориды или дигидрохлориды аминокислот, их сочетание и подобное.
В воплощении изобретения, заявленные фармацевтические составы включают одну или несколько соединений без соли или вещества в качестве регуляторов тоничности. Не ограничиваясь примерами, подходящие регуляторы тоничности также включают соединения, которые могут быть известны и применяться области техники в качестве лиопротекторов. Кроме того, подходящие регуляторы тоничности, не содержащие соль, включают одну или несколько моносахаридов и/или дисахаридов. Заявленные фармацевтические составы могут содержать одно или несколько стабилизирующих веществ, регуляторов тоничности в количестве отношения массы к объему (масса/объем) приблизительно 0.05% до приблизительно 2%, в количестве от приблизительно 0.1% до приблизительно 1.8% масса/объем, в количестве от приблизительно 0.1% до приблизительно 1.5% масса/объем, в количестве от приблизительно 0.2%» до приблизительно 2% масса/объем, в количестве от приблизительно 0.3 до приблизительно 2% масса/объем или в количестве от приблизительно 0.5 до приблизительно 2%. Кроме того, моносахариды могут присутствовать в заявленных фармацевтических составах в количестве от приблизительно 0.2% масса/объем до приблизительно 1.5% масса/объем, в количестве от 0.15% до 1% масса/объем или в количестве от 0.1% до 0.9% масса/объем. Дисахариды могут присутствовать в заявленном фармацевтическом составе в количестве от приблизительно 0.4% до приблизительно 3% масса/объем, в количестве от 0.3 до 2 масса/объем или в количестве от 0.2% масса/объем до 1.8% масса/объем. Количество стабилизирующего вещества может быть определено для обеспечения стабильности, не уменьшая межмолекулярные взаимодействия.
Примеры подходящих регуляторов тоничности включают, но не ограничиваются ими, моносахариды, дисахариды, сахар, сахароспирт, арабит, бетаин, целлобиоза, декстран, ди-фруктоза, ди-глюкоза, эритрит, фруктоза, желатин, сорбитол, глюкоза, глицерин, мальтоза, мальтулоза, изо-мальтулоза, лактитол, лактоза, лактулоза, лиотропная соль, сульфат магния, мальтитол, маннитол, маннотриоза, стахиоза, мелицитоза, меллибиоза, метиламин, моногликозиды, глутамат натрия или гистидин, PLURONICS, ПОЛОКСАМЕР 188 (Pluronics188), полиэтиленгликоль, полиол, пропиленгликоль, раффиноза, сорбит, сахароза, трегалоза, трехосновная кислота, тураноза, ксилитол или их сочетание.
Одно из воплощений изобретения относится к фармацевтическим составам, включающим буферные растворы, выбранные из любых аминокислот или комбинаций аминокислот, в которых аминокислоты отличаются, например, зарядом, таким как неполярные/нейтральные; полярные/положительные;
полярные/нейтральные; и полярные/отрицательные. В конкретном варианте осуществления изобретения, буферный раствор представляет собой одну аминокислоту или сочетание аминокислоты, которая является неполярной/нейтральной или полярной/положительной.
В некоторых вариантах воплощения изобретения, солевой и буферный растворы, которые включают солевой/буферный регулятор тоничности в заявленных фармацевтических составах, присутствуют в количествах, которые в сочетании не превышают 115 мМ или 120 мМ. Вязкость заявленных фармацевтических составов измеряли при различных концентрациях соли, как описано в Примере 2 настоящей заявки. Вязкость заявленного фармацевтического состава в некоторых вариантах осуществления изобретения измеряли с помощью способа, описанного в Примере 2 настоящей заявки.
Еще один вариант воплощения изобретения относится к фармацевтическим составам, включающим один или несколько буферных растворов, таких как одна или несколько аминокислот, в концентрации 20 мМ. Было неожиданно обнаружено, что такие фармацевтические составы существенно влияли на вязкоупругие свойства концентрированного белка, например, антитела. В воплощении изобретения, фармацевтический состав, включающий концентрированный белок, например, антитело, подвергали ультрафильтрации и процессу диафильтрации, используемые для удаления мелких примесей от биологического препарата. В концентрированных белковых фармацевтических составах присутствие одной или нескольких неполярных/нейтральных аминокислотных буферных веществ в общей концентрации 20 мМ, снижало длительность процесса ультрафильтрации и диафильтрации от приблизительно 3.5 часов до приблизительно 2.5 часов для 100 г белка. Максимальная концентрация белка в процессе ультрафильтрации была ниже в тех фармацевтических составах, включающих одну или несколько неполярных/нейтральных аминокислотных буферных веществ по сравнению с фармацевтическими составами, не содержащими таких буферных растворов, претерпевающие высокую вязкость. Стабильные фармацевтические составы с низкой вязкостью, применяемые для высококонцентрированных белков, как описано в настоящей заявке, дают преимущества в виде улучшенной возможности производства и пригодности для применения высококонцентрированных белковых фармацевтических составов в устройствах для изготовления и/или введения. Пример 3 настоящей заявки показывает воздействия буферных растворов и концентрации буфера на общую вязкость фармацевтических составов.
Сурфактанты
Сурфактанты обычно применяют в заявленных фармацевтических соствах для избежания агрегации и частичного формирования в продолжение обработки или хранения. Неограничиваясь примерами, подходящие сурфактанты включают неионогенные сурфактанты, такие как детергенты, цетил-бетаин, кокамидопропилбетаин, сополимеры этилена и пропиленгиликоля, плюроники (например, Pluronics, PF68, и т.д.), двунатриевый метил олеиловый таурат, изостеарамидопропил-бетаин, изостеарамидопропил-диметиламин, лауроамидопропил-бетаин, лаурин-саркозин, лаурин-сульфобетаин, линолеамидопропил-бетаин, ленолеилмиристил-бетаин, ленолеил-саркозин, линолеил-сульфобетаин, серии MONAQUA™ (Mona Industries, Inc., Paterson, N.J.), миристамидопропил-бетаин, миристамидопропил-диметиламин, миристил-саркозин, миристил-сульфобетаин, пальмидопропил-бетаин, пальмидопропил-диметиламин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, поликсомеры (например, Poloxamer 181 или 188), полипропленгликоль, полисорбаты (например, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат или полисорбат-20 (Твин 20), полиоксиэтилен сорбитанмонопальмитат или полисорбат-40 (Твин 40), полиоксиэтилен сорбитанмоностеарат или полисорбат-60, полиоксиэтиленсорбитал моноолеат или полисорбат-80 (Твин 80) или их сочетание), метилкокоилтаурат натрия, октил гликозид натрия, стеарил-саркозин, стеарил-сульфобетаин, Тритон.
Количество сурфактанта, добавляемого в фармацевтический состав, будет изменяться и может быть вычислено и отрегулировано в количестве так, что снижается образование частиц в фармацевтическом составе. В растворимых или жидких заявленных фармацевтических составах сурфактант может присутствовать в количестве от приблизительно или равном 0.001% до приблизительно или равном 0.2% масса/объем, или в количестве от приблизительно или равном 0.005% до приблизительно или равном 0.2% масса/объем, или в количестве от приблизительно или равном 0.05% до приблизительно или равном 0.2% масса/объем. Для иллюстрации, сурфактант представляет собой сахарозу, сорбитол, маннитол, трегалозу, глицерин, мальтозу, лактозу или их сочетание. Дисахариды, такие как мальтоза и лактоза, содержат восстанавливающий сахар, который может быть нежелательным в качестве других подходящих сурфактантов.
Другие фармацевтически и физиологически приемлемые добавки, носители, наполнители и стабилизаторы могут быть включены в описанные фармацевтические составы. Они могут быть выбраны из тех, которые известны в данной области техники или как описано в Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Philadelphia, PA., David B. Troy Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005).
Характеристика фармацевтического состава Осмоляльность/Тоничность
Заявленные фармацевтические составы являются гипотоническими, где осмоляльность фармацевтических составов менее чем осмоляльность фармацевтического состава, который является изотоническим или гипертоническим, отличающиеся тем, что осмоляльность изотонического приблизительно 290 мОсм/кг, например, а осмоляльность гипертонического >290 мОсм/кг, например. В связи с низкой вязкостью, фармацевтические составы предоставлены для введения или доставки высококонцентрированного белка субъекту, особенно путем подкожного введения. Кроме того, по причине их низкой вязкости, фармацевтические составы могут быть введены без чрезмерной боли или раздражительности ткани на инъекцию или прививку субъекту. В одном из вариантов осуществления, заявленный фармацевтический состав обладает осмоляльностью менее чем приблизительно 290 мОсм/кг. В воплощении изобретения, заявленный фармацевтический состав обладает осмоляльностью менее чем приблизительно 280 мОсм/кг. В других вариантах воплощения изобретения, заявленный фармацевтический состав обладает осмоляльностью от приблизительно 225 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг, от приблизительно 235 мОсм/кг до приблизительно 265 мОсм/кг, или от приблизительно 240 мОсм/кг до приблизительно 260 мОсм/кг. В других вариантах осуществления изобретения, заявленные фармацевтические составы обладают осмаляльностью 230 мОсм/кг, 240 мОсм/кг, 250 мОсм/кг или 260 мОсм/кг. Осмоляльность может быть измерена с помощью понижения температуры замерзания (Advanced Model 3320 Micro Osmometer; Advanced Instruments Inc.; Norwood, MA). В некоторых вариантах воплощения, осмоляльность заявленного фармацевтического состава измеряли путем понижения температуры замерзания. Реагенты фармацевтических составов, например, регуляторы тоничности, соли, буферные растворы, стабилизирующие вещества, могут применяться для изменения и регулирования осмоляльности фармацевтических составов для получения необходимой гипотоничности.
Вязкость
Заявленные фармацевтические составы, которые содержат высококонцентрированный белок, имеют низкую вязкость. В данном аспекте, фармацевтические составы, описанные в настоящем изобретении, особенно эффективны по сравнению с другими типами фармацевтических составов для подкожного введения. В воплощении изобретения, низкая вязкость фармацевтических составов манипулируется посредством от 25 g до 27 g иглы шприца, предпочтительно тонкостенным шприцом/иглой. В воплощении изобретения, фармацевтические составы обладают вязкостью от приблизительно 30 сП до приблизительно 60 сП. В воплощении изобретения, фармацевтические составы обладают вязкостью между приблизительно 40 сП до приблизительно 50 сП. В различных вариантах осуществления настоящего изобретения, вязкость заявленного фармацевтического состава менее чем или равна 55 сП, менее чем или равна 50 сП, менее чем или равна 40 сП, или менее или равна 30 сП. Для иллюстрации, заявленный фармацевтический состав, включающий белок в концентрации 200 мг/мл, обладает вязкостью приблизительно 40 сП; заявленный фармацевтический состав, включающий белок в концентрации 175 мг/мл, обладает вязкостью приблизительно 20 сП.
Во всех вариантах осуществления изобретения, вязкость заявленного фармацевтического состава будет достаточно низкой для обеспечения возможности правильного и безопасного введения субъекту, нуждающемуся в этом. Например, вязкость фармацевтического состава, включающего количество концентрированного белка, не препятствует подкожному введению субъекту. Вязкость заявленного фармацевтического состава выбрана так, что фармацевтический состав может применяться и храниться в соответствии с требуемыми условиями. Способы измерения вязкости хорошо известны из уровня техники и можно использовать вискозиметр с падающим шариком (Gilmont GV-2200; Thermo Fisher Scientific; Waltham, MA) капиллярный вискозиметр или риометр. При этом, стеклянный капилляр вискозиметра, вискозиметр Цана, чашечный вискозиметр Форда, вискозиметр Штормера, колебательный вискозиметр, такой как Dynatrol, акустический вискозиметр или в этом роде могут быть использованы для измерения вязкости. Вязкость заявленного фармацевтического состава, в некоторых вариантах осуществления изобретения, измеряли любым из вышеперечисленных способов.
рн
Фармацевтические составы для высококонцентрированных белков, как описано в настоящей заявке, обладают рН в диапазоне более или равном рН 5.4 и менее чем или равном рН 6.4. В одном из вариантов осуществления изобретения, рН фармацевтического состава составляет приблизительно 5.4 до приблизительно 6.0. В одном из вариантов осуществления изобретения, рН фармацевтического состава составляет приблизительно или равно рН 5.4 или приблизительно или равно рН 5.5. рН будет находиться в том диапазоне, который приводит к получению фармацевтического состава, являющегося физиологически приемлемым и подходящим, принимая во внимание требования к композиции. Различные соли, буферные растворы, сурфактанты и стабилизирующие вещества могут применяться в соответствующих количествах для того, что бы регулировать рН до желательного рН. Например, соотношение между аминокислотой и ее гидрохлоридом может применяться для изменения рН раствора от приблизительно 5.4 до приблизительно 5.5. Низкий рН, например, рН 5.4, может восполнить низкую буферную емкость при низкой концентрации буфера и высокой концентрации белка, такой как, например, приблизительно 20 мМ для буфера и 175 мг/мл для белка, в продолжение обработки и хранения. Пример 2 ниже иллюстрирует вязкость фармацевтического состава по всему диапазону рН. Согласно изобретению, наличие соли, например, NaCl, в фармацевтических составах, описанных в настоящей заявке, смягчает влияние рН.
Способ получения фармацевтических составов
Заявленные фармацевтические составы могут быть получены способами, широко используемыми и известными из уровня техники, и не должны быть ограничены состоянием вещества фармацевтической композиции. В сущности, в ходе приготовления такого фармацевтического состава учитывают желаемый объем и способ введения концентрированного белкового фармацевтического состава. Поскольку фармацевтический состав будет вводиться субъектам, включающим в себя людей, стерильное оборудование имеет большое значение. Соответственно, в варианте осуществления, изобретение направлено на стерильный фармацевтический состав, применяемый для введения in vivo. Фармацевтический состав получают с использованием стерильных способов, известных и широко применяемых в уровне техники, например, стерильной фильтрации, автоклавирование всех компонентов, не содержащих белок, и т.п.
Концентрированный белок для применения в фармацевтической композиции может присутствовать в растворе, например, в рН-буферном растворе таком, что конечный рН гипотонического фармацевтического состава будет в диапазоне от приблизительно 5.4 до приблизительно 6.4. Примерными буферными растворами и/или солевыми растворами являются те, которые фармацевтически и физиологически приемлемы и могут быть приготовлены из соответствующих кислот, оснований и их солей, как уже упоминалось выше.
В других вариантах осуществления изобретения, заявленные фармацевтические составы могут содержать один или несколько белков, если более чем один белок является полезным для конкретного показания лечения, и в случае, когда присутствие одного белка не оказывает отрицательного влияния на действие других. Для иллюстрации, два и более белков могут обладать комплементарной, дополняющей и синергитической активностями. Когда эти белки присутствуют в сочетание, они находятся в количестве, которое эффективно для предусмотренного назначения и которое соответствуют заявленным фармацевтическим составам. В воплощении изобретения, фармацевтические составы, описанные в настоящей заявке, находятся в жидкой форме и хранятся в растворе. Фармацевтические составы могут включать наполнитель, который применяется для стабилизации хранящегося фармацевтического состава. Неограничивающие примеры наполнителей включают например, сахара, полимеры, сурфактанты и аминокислоты. Некоторые наполнители именуются и/или применяются в фармацевтических составах как лиопротекторы и криопротекторы. Фармацевтические составы в виде растворов могут быть заморожены и сохранены. Согласно изобретению, растворимые фармацевтические составы могут оптимально храниться по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или дольше, при температуре в диапазоне от приблизительно 2°С до 8°С.
Заявленные фармацевтические составы, содержащие белок, обладают специфическими свойствами, характеризующиеся их осмоляльностью, вязкостью и плотностью. Данные свойства можно измерить любыми известными способами. Например, осмоляльность можно измерить понижением температуры замерзания (Advanced Model 3320 Micro Osmometer; Advanced Instruments Inc.; Norwood, MA); вязкость с помощью вискозиметра с падающим шариком (Gilmont GV-2200; Thermo Fisher Scientific; Waltham, MA) или вискозиметром с конусом и плоскостью (Brookfield), (Brookfield Engineering Laboratories, Inc., Middleboro, MA); и плотность с помощью колеблющегося денситометра (Densito 30РХ; Mettler-Toledo Inc.; Columbus, ОН). Вязкость и/или осмоляльность заявленного фармацевтического состава, в некоторых вариантах осуществления изобретения, измеряют с помощью любого из этих вышеупомянутых способов, соответственно. Пример 4 обеспечивает результаты этих свойств в зависимости от различных концентраций белка в заявленном фармацевтическом составе.
Применение заявленного фармацевтического состава
Заявленные фармацевтические составы содержат один или несколько активных компонентов, таких как белки, например, антитела, которые применяются в лечении различных заболеваний, состояний или расстройств путем введения субъекту, нуждающемуся в этом. Субъекты могут быть, но не ограничиваются ими, млекопитающими, низшими приматами, людьми (именуемыми в настоящей заявке как лицо, субъект или пациент), собаками, кошками, лошадьми, обезьянами/шимпанзе, мышами, крысами, кроликами, цыплятами, ослами, козами, морскими свинками, свиньями, коровами, баранами и подобными, страдающими заболеванием, состоянием или расстройством и нуждающимися в лечении. В сущности, любой активный компонент, такой как белок в высокой концентрации, предполагается для применения в заявленных фармацевтических составах в зависимости от заболевания, состояния или расстройства, подлежащего лечению, облегчению или излечению.
Другие варианты включают концентрированный белок, являющийся также полезным в фармацевтических составах, применяемых в профилактическом лечении субъекта, который, как ожидается, будет нуждаться в этом, например, восприимчивый субъект, который подвергается риску заражения заболеванием, состоянием или расстройством. Заявленные фармацевтическе составы, которые содержат различные типы концентрированных белков, предназначены для доставки или введения концентрированного белка и не направлены на ограничение особенным применением или заболеванием. Концентрированные белки, такие как антитела, например, моноклональные антитела, человеческие антитела, гуманизированные антитела, химерные антитела и т.п., в высокой концентрации для лечения конкретного заболевания, состояния или расстройства являются полезными для лечения конкретного заболевания, состояния или расстройства, то есть воздействуют антителами. Любые антитела, описанные в настоящей заявке или известные из уровня техники, могут применяться в заявленных фармацевтических составах.
Фармацевтические составы могут быть введены субъекту, нуждающемуся в этом, различными способами и в соответствии с оптимальным способом доставки для конкретного лечения. Например, введение может быть путем инъекции, болюсной инъекции или непрерывного вливания. Фармацевтические составы или композиции можно вводить несколькими способами введения, такими как, например, внутрикожным, внутримышечным, внутрикостным, внутривенным, внутрибрюшинным, парентеральным, назальным, интраокулярным, подкожным и подобное. Другие формы для введения включают, не ограничиваясь, жидкие, полужидкие и твердые лекарственные формы, такие как жидкие растворы (например, инъекционные и нерастворимые растворы), дисперсии или суспензии, таблетки, пилюли, порошки, липосомы и т.п. Необходимость небольшого объема высококонцентрированных белков в фармацевтических составах, особенного для подкожного введения, встречается у фармацевтических составов, описанных в настоящей заявке. Для введения фармацевтического состава инъекция/введение могут быть выполнены с применением, например, но не ограничиваясь, инжектора, инфузионного устройства, автоинжектора, безыгольного инжектора, шприца-тюбика, шприца, многоразового или многодозового шприца с иглой, предварительно заполненного шприца, предварительно заполненного многоразового или многодозового шприца с иглой или устройства шприца-ручки, шприца-ручки, насоса и подобного. Для простоты или удобства применения, полезно иметь устройство, содержащее предварительно заполненное, предопределенное количество заявленного фармацевтического состава, содержащего концентрированное терапевтическое средство. Устройство для введения может обеспечить фармацевтический состав в лекарственной форме, в нескольких дозах или в заранее определенном количестве.
Фармацевтические составы могут быть в различных формах, таких как, но не ограничиваясь ими, суспензии, растворы и эмульсии в масляных или водных носителях, и могут содержать вспомогательные вещества, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие вещества. В воплощении изобретения, суспензии и растворы являются водными. Кроме того, активный компонент может быть сухим, сублимированным, лиофилизированным или порошкообразной формы для растворения с подходящим носителем, например, стерильной апирогенной водой, буферным раствором или в этом роде, перед применением.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения, белок, например, антитело, разрабатывают в соответствии с обычными методиками как фармацевтический состав, приспособленный для подкожного введения нуждающимся субъектам, таким как, например, людям, страдающим заболеванием, которое можно вылечить конкретным антителом, которое должно быть введено субъекту в концентрированном количестве в разумном объеме. Как правило, фармацевтические составы для подкожного введения представляют собой стерильные водные растворы. Примерами заявленных фармацевтических составов и терапевтического применения фармацевтических составов посредством подкожного введения описаны в Примерах 2 и 6, соответственно, настоящей заявки. В случае необходимости, фармацевтический состав или композиция может также включать солюбилизирующий компонент, консервант и местный анестетик, такой как лигнокаин, лидокаин или бензиловый спирт для облегчения возможной боли в месте инъекции. Обычно, компоненты фармацевтического состава поставляются отдельно друг от друга или смешиваются в единичной лекарственной форме, например, сухой лиофилизированный порошок или концентрат, не содержащий воды, в герметичной таре, такой как флакон или двухкамерный картридж с указанием количества активного вещества. Кроме того, фармацевтический состав находится в форме раствора в подходящем контейнере или устройстве для доставки, имеющего предопределенную дозировку. В случае, если фармацевтический состав подлежит введению путем вливания, то он может обойтись без вливания флакона, содержащего стерильную воду фармацевтической категории или физиологический раствор. В случае, если фармацевтический состав вводят путем инъекции подходящим устройством для доставки, например, шприцом или предварительно заполненным шприцом, содержащим стерильную воду, физиологический раствор или буферный раствор для инъекции, осуществляется таким образом, что фармацевтический состав может быть смешан или растворен перед введением. В иных случаях, фармацевтический состав, содержащий высококонцентрированный белок, вводят из подходящего устройства для доставки без предварительного смешивания или растворения. В воплощении изобретения, фармацевтический состав представляет собой раствор, содержащий высококонцентрированный белок, и доставляется устройством без предварительного смешивания или растворения. Количество белка, применяемого в заявленном фармацевтическом составе, является такое, которое эффективно в терапии или лечении, снижении, отмене, ингибировании, улучшении или устранении заболевания, расстройства или состояния, связанного с, например, абберантной или сверх-экспрессией и/или активностью мишеней высококонцентрированного белка, обычно, что устанавливают стандартными клиническими способами. Кроме того, количество белка, применяемого в фармацевтическом составе, будет в количестве, эффективном в качестве профилактического средства. Анализ in vitro может, необязательно, применяться для помощи в определении оптимального диапазона доз. Точная доза, применяемая в фармацевтическом составе, будет также зависеть от способа введения и серьезности заболевания, расстройства или состояния. Практикующий врач, используя свое оптимальное решение, исходя из обстоятельств каждого субъекта, может определить наилучшую дозу и терапию для нуждающегося субъекта. Эффективные дозы могут быть экстраполированы из кривой доза-ответ, полученной из испытаний на моделях систем in vitro или животных (in vivo).
Например, доза фармацевтического состава, содержащего антитела, вводимого субъекту, является, обычно, приблизительно 0.1 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг массы тела пациента, более приблизительно или равна 0.1 мг/кг или более приблизительно или равна 1 мг/кг. В других вариантах воплощения изобретения, доза может быть менее чем приблизительно или равна 25 мг/кг массы тела пациента, менее чем приблизительно или равна 20 мг/кг массы тела пациента, менее чем приблизительно или равна 15 мг/кг массы тела пациента или менее чем приблизительно или равна 10 5 мг/кг или 5 мг/кг или 2 мг/кг массы тела пациента. Обычно, человеческие или гуманизированные антитела имеют более длительный период полураспада в организме человека, чем антитела из других видов в связи с иммунным ответом на последние чужие полипептиды. Таким образом, более низкая доза человеческих или гуманизированных антител и менее частое введение является во многих случаях возможными. Кроме того, доза и частота введения антител применяемых заявленных фармацевтических составов может быть снижена с помощью улучшения усвоения и проникания в ткани антител путем модификаций, например, липидизации как средства для лучшего нацеливания на клетки и ткани мозга. Однако, квалифицированный практик, исходя из данных о зависимости между дозой и эффектом и опыта, обладает знаниями и средствами для определения наилучшего протокола дозирования для лечения нуждающегося субъекта. Применяя как профилактическое средство, количество доз и протокол могут также быть определены квалифицированным практиком.
Заявленные фармацевтические составы могут применяться в сочетании с одним или несколькими дополнительными или другими лекарствами, терапевтическими средствами, медикаментами или препаратами. Например, совместное введение нуждающемуся субъекту высококонцентрированного белка с веществом А и/или веществом В, например, включает изобретение, в котором дополнительные вещества растворяются или перемешиваются в тех же заявленных фармацевтических составах. Кроме того, заявленный фармацевтический состав, содержащий белок, вводят субъекту с последующим введением вещества А, с последующим введением вещества В в раздельных фармацевтических составах или наоборот. Заявленные фармацевтические составы, содержащие белок, могут быть введены в одно время или в разное время, нежели одно или несколько дополнительных или других терапевтических средств, которые вводят совместно. Вариант воплощения изобретения включает в себя способы комбинированного или сопутствующего терапевтического лечения и сочетание фармацевтических составов.
Готовое изделие
Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к упакованным фармацевтическим композициям, которые включают в себя концентрированный белок, такой как, например, концентрированное антитело, в фармацевтических составах, описанных в настоящей заявке. При этом, упакованная фармацевтическая композиция, готовое изделие или набор обеспечивает фармацевтический состав, описанный в настоящей заявке, или обычно обеспечивает инструкцию по ее применению. Готовое изделие или набор включает контейнер, подходящий для содержания и, возможно, доставки или введения фармацевтического состава. Упаковка, готовое изделие или набор могут включать в себя один концентрированный белковый фармацевтический состав или один или несколько концентрированных белковых фармацевтических составов, где активное вещество или белок присутствует либо совместно в одном фармацевтическом составе либо раздельно в двух и более фармацевтических составах. Неограничивающие примеры подходящих контейнеров включают в себя сосуды, флаконы, одно- или двухкамерные флаконы, картриджи, шприцы, одно- или двухкамерные шприцы, многоразовые или многодозовые шприцы с иглой, безыгольные шприцы, шприцы-ручки, многодозовые шприцы-ручки, насосы, шприцы-тюбики, автоинжекторы, инжекторы, предварительно заполненные шприцы, пробирки, небулайзеры, ингаляторы (например, дозирующие ингаляторы или порошковые ингаляторы), накопители и подобное. Контейнер, содержащий фармацевтический состав, может быть устройством или шприцом или шприцом-ручкой, имеющий многократные дозы, которые предусматривают повторные введения заранее определенного количества (напр. от 2-10 доз) фармацевтического состава.
В воплощении изобретения, герметичный контейнер может содержать заявленный фармацевтический состав. В других вариантах осуществления изобретения, фармацевтический состав может содержаться в предварительно заполненном шприце. В еще одном варианте осуществления изобретения, фармацевтический состав может содержаться в любом их вышеописанных контейнеров, подходящих для доставки фармацевтического состава субъекту. В еще одном воплощении, фармацевтический состав может содержаться в инфузионном мешке или герметизирующем сосуде. В других вариантах осуществления изобретения, фармацевтический состав является подходящим для парентерального введения, которое может осуществляться внутривенно, подкожно или внутримышечно. Контейнер может быть выполнен из различного ряда материалов, таких как, но не ограничиваясь ими, стекло, металл, пластмасса (например, поликарбонат, полистирол, полипропилен) или любого другого материала, пригодного для содержания фармацевтического состава без каких-либо неблагоприятных реакций для компонентов или активных ингредиентов в ней. Либо на или связанной с контейнером этикетке с инструкцией по применению приводятся ингредиенты и/или побочные эффекты. Этикетка может включать в себя ингредиенты фармацевтического состава, показания, применение, дозировку, введение, а также предупреждения, меры предосторожности, побочные эффекты, побочные реакции и взаимодействие лекарств. Готовое изделие может обладать дополнительными контейнерами. Например, второй контейнер содержит любой подходящий носитель, растворитель, эксципиент, наполнитель или буферный раствор. Упакованные контейнеры в готовом изделии могут быть представлены по отдельности или в комплекте или в распределительном устройстве, содержащие металлическую или полимерную пленку, такую как блистерная упаковка. Кроме того, упаковка или распределительное устройство, контейнеры и фармацевтические составы могут быть представлены в наборе для коммерческого распространения с этикетками с инструкциями, ингредиентами и/или предупреждениями. Контейнер может также содержать одну или несколько заранее определенных единиц дозы фармацевтического состава. Готовое изделие также содержит этикетку или аннотацию на или в связи с контейнером.
Другие варианты направлены на дополнительные терапевтические средства, медикаменты, лекарственные средства или соединения, которые могут быть включены в заявленный стабильный белковый фармацевтический состав низкой вязкости. Эти дополнительные компоненты могут быть активными веществами или ингредиентами, которые не будут негативно взаимодействовать с другим концентрированным белком фармацевтического состава. Предпочтительно, эти активные вещества обеспечивают дополнительные преимущества в лечении субъекта, страдающего данным заболеванием, расстройством или состоянием и нуждающегося в лечении. Поскольку может быть множество биологических путей, которые приводят к одному и тому же заболеванию, расстройству или состоянию, применение нескольких веществ позволяет биологическими эффектами лечить субъект аналогичными или несвязанными механизмами действия. Таким образом, несколько активных веществ, которые ослабляют или лечат по меньшей мере один симптом, связанный с таким же нацеленным заболеванием, могут применяться в том же фармацевтическом составе или в нескольких раздельных фармацевтических составах, которые вводят в комбинации. Введение нескольких активных веществ могут обладать дополнительными или синергетическими эффектами или преимуществами.
В других вариантах осуществления, изобретения относится к применению заявленных белковых фармацевтических составах низкой плотности в комбинированной терапии с другими активными веществами, лекарственными средствами, химиотерапией и/или радиотерапией. Концентрированные белковые фармацевтические составы могут быть снабжены одним или несколькими другими активными веществами и/или химиотерапией и/или радиотерапией в предварительном, последующем или совместном введении.
Другие варианты осуществления изобретения
В одном аспекте, изобретение обеспечивает низкой вязкости фармацевтический состав, композицию или препарат, содержащие концентрированный белок, например, присутствующий в фармацевтическом составе в высокой концентрации, отличающийся тем, что белок в количестве от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл; соль, которая, без связи с теорией, выполняет функцию регулятора тоничности в данной заявке, присутствующая в количестве менее чем или равном 100 мМ, приблизительно или равном 90 мМ, или приблизительно или равном 95 мМ, буфер присутствует в количестве от приблизительно или равном 5 мМ до приблизительно или равном 20 мМ; и сурфактант в количестве приблизительно 0.001% до приблизительно 0.2%. В некоторых вариантах воплощения, композиция также включает регулятор тоничности, не содержащий соли. В различных вариантах осуществления изобретения, регулятор тоничности, не содержащий соль представляет собой, для иллюстрации, сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид или их сочетание, присутствующие в количестве, достаточном для обеспечения осмоляльности от приблизительно 230 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг.В одном варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав, композиция или препарат является гипотоническим. В одном варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав, композиция или препарат находятся в жидкой или растворимой форме.
В другом аспекте, изобретение обеспечивает фармацевтический состав низкой вязкости, композицию или препарат, содержащие концентрированный белок или высококонцентрированный белок, отличающиеся тем, что белок находится в количестве от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл; солевой раствор и буфер присутствуют в сочетание (солевой/буферный раствор), отличающееся тем, что сочетание солевого раствора и буфера в количестве от приблизительно 100 мМ до приблизительно 120 мМ, в количестве от приблизительно 100 мМ до приблизительно 115 мМ, в количестве от приблизительно 100 мМ до приблизительно 110 мМ, в количестве от 100 мМ до 120 мМ, в количестве от 100 мМ до 115 мМ или в количестве от 100 мМ до 110 мМ; и сурфактант в количестве от приблизительно 0.005% до приблизительно 0.2% масса/объем. В некоторых вариантах осуществления изобретения, фармацевтический состав также содержит регулятор тоничности, не содержащий соль. В различных вариантах воплощения изобретения, регулятор тоничности, не содержащий соль, представляет собой, для иллюстрации, сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид иди их сочетание, и присутствует в количестве от приблизительно 0.05% масса/объем до приблизительно 1.8% масса/объем от общего фармацевтического состава, или в количестве, достаточном для обеспечения осмоляльности от приблизительно 230 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг. В воплощении изобретения, фармацевтический состав, композиция или препарат является гипотоническим. В воплощении изобретения, фармацевтический состав, композиция или препарат находятся в жидкой или растворимой форме.
Изобретение также включает фармацевтический состав, включающий концентрированный белок, солевой раствор и буфер, отличающийся тем, что солевой раствор и буфер в сочетание присутствуют в количестве от приблизительно НО мМ до приблизительно 120 мМ, и сурфактант, отличающийся тем, что фармацевтический состав имеет низкую вязкость. В варианте воплощения изобретения, концентрированный белок находится в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл. В варианте осуществления изобретения, концентрированный белок присутствует в количестве от приблизительно или равном 162 мг/мл до приблизительно или равном 175 мг/мл. В варианте воплощения настоящего изобретения, концентрированный белок представляет собой пептид, фермент, полипептид, антитело или фрагмент антитела. В воплощении изобретения, концентрированный белок представляет собой моноклональное антитело, поликлональное антитело, нанотело, гибридное антитело или фрагмент антитела. В варианте осуществления изобретения, концентрированный белок представляет собой моноклональное антитело, которое является гуманизированным, или фрагмент гуманизированного антитела. В варианте воплощения изобретения, антитело или его фрагмент направлены против полипептидов ВИЧ, HCV, ВИЧ или HCV или молекул-мишеней, связанных с раком. В варианте воплощения изобретения, соли присутствует в количестве менее чем 100 мМ или в количестве, которое приблизительно или равном 95 мМ. В варианте осуществления изобретения, соль может быть одна или несколько, выбранная из хлорида аммония, сульфата аммония, тиоционата аммония, аргинина гидрохлорид, хлорид кальция, хлорид магния, ацетат натрия, хлорид натрия, глюконат натрия, лактат натрия, тиоционат натрия, хлорид цинка или их сочетание. В варианте осуществления изобретения, соль представляет собой хлорид натрия. В варианте воплощения изобретения, буферный раствор присутствует в количестве от приблизительно 5 мМ до приблизительно 20 мМ. В варианте воплощения изобретения, буферный раствор присутствует в количестве приблизительно или равном 20 мМ. В варианте осуществления изобретения, буферный раствор представляет собой одну или несколько аминокислот, или производных или их L-молекулярную форму. В варианте воплощения изобретения, одна или несколько аминокислот представляют собой гистидин, глицин или сочетание гистидина и глицина, или их L-молекулярную форму. В варианте воплощения изобретения, сурфактант присутствует в количестве от приблизительно или равном 0.001% масса/объем до приблизительно или равном 0.2% масса/объем. В варианте осуществления изобретения, сурфактант присутствует в количестве приблизительно или равном 0.005% масса/объем. В варианте осуществления изобретения, сурфактантом может быть детергент, плюроник, полисорбат, полисорбат-20 (например, Твин20), полиэтиленгликоль или их сочетание. В варианте осуществления изобретения, фармацевтический состав также содержит регулятор тоничности, не содержащий соль, который может присутствовать в фармацевтическом составе в количестве от приблизительно 0.05% масса/объем до приблизительно 1.8% масса/объем от общего фармацевтического состава. В варианте воплощения изобретения, такого рода регулятор тоничности представляет собой сахар, сахароспирт, моносахарид, дисахарид или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав имел вязкость от приблизительно 25 сП до приблизительно 60 сП, или вязкость от приблизительно 40 сП до приблизительно 50 сП. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав имел рН от приблизительно 5.4 до приблизительно 6.4, или рН от приблизительно 5.4 до приблизительно 6, или рН от 5.4 до 5.6. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав имел осмоляльность менее чем приблизительно 290 мОсм/кг, или осмоляльность от приблизительно 230 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг, или осмоляльность приблизительно 260 мОсм/кг.
В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав также включает терапевтический белок для введения субъекту, нуждающемуся в этом. В варианте осуществления изобретения, фармацевтический состав вводят путем инъекции, болюсной инъекции, внутрикожно, внутримышечно, внутрикостно, внутривенно или подкожной инъекцией. В варианте осуществления изобретения, фармацевтический состав вводят с помощью использования шприца, шприца-ручки, насоса, картриджа, двухкамерного картриджа, многоразового шприца с иглой, многодозового шприца с иглой, многодозового шприца-ручки, безыгольного шприца, шприца-тюбика, автоинжектора или предварительно заполненного шприца, доставляя фармацевтический состав. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав представляет собой жидкий или растворимый фармацевтический состав.
Изобретение также включает фармацевтический состав, который включает в себя концентрированный белок в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл; соль в количестве более приблизительно или равном 90 мМ или менее чем приблизительно или равном 100 мМ или более приблизительно или равном 95 мМ и менее чем приблизительно или равном 100 мМ; буферный раствор в количестве более приблизительно или равном 5 мМ и менее чем приблизительно или равном 25 мМ; сурфактант в количестве более приблизительно или равном 0.001% масса/объем и менее чем приблизительно или равном 0.2% масса/объем; и, необязательно, регулятор тоничности, не содержащий соль, в количестве от приблизительно 0.05% масса/объем до приблизительно 1.8% масса/объем; отличающийся тем, что фармацевтический состав обладает осмоляльностью от приблизительно 250 до приблизительно 280 мОсм/кг. В варианте воплощения изобретения, концентрированный белок представляет собой антитело или его фрагмент, фактор свертываемости крови, фермент, пептид или их сочетание. В варианте осуществления изобретения, белок представляет собой моноклональное антитело, человеческое моноклональное антитело или гуманизированное моноклональное антитело. В варианте воплощения изобретения, соль представляет собой хлорид натрия, глюконат натрия, лактат натрия или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, буферный раствор представляет собой глициновый, гистидиновый, янтарную кислоту, малеиновую кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, сурфактант представляет собой полисорбат-20 (полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат 20; коммерчески известный как Твин20), полисорбат-40 (полиоксиэтиленсорбитанмонопальмитат (40); коммерчески известный как Твин40), полисорбат-60 (полиоксиэтиленсорбитанмоностеарат (60), коммерчески известный как Твин60), полисорбат-80 (полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат (80), коммерчески известный как Твин80) или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, регулятор тоничности, не содержащий соль, выбран из одного или нескольких из сорбитола, маннитола, сахарозы, трегалозы, глицерола или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав обладает вязкостью от приблизительно 25 сП до приблизительно 60 сП. В варианте осуществления изобретения, фармацевтический состав обладал вязкостью от 25 сП до 60 сП. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав имел рН 5.4-6.4. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав имел осмоляльность от приблизительно 240 мОсм/кг до приблизительно 280 мОсм/кг. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав представлял собой жидкий или растворимый фармацевтический состав.
Изобретение также включает гипотонический жидкий фармацевтический состав низкой вязкости, который включает в себя концентрированный белок в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл, отличающийся тем, что концентрированный белок представляет собой антитело или его фрагмент; соль в количестве приблизительно или равном 90 мМ или 95 мМ; буфер в количестве приблизительно или равном 20 мМ; сурфактант в количестве приблизительно 0.005% масса/объем; и, необязательно, регулятор тоничности, не содержащий соль, в количестве от приблизительно 0.05% масса/объем до приблизительно 1.8% масса/объем. В варианте воплощения изобретения, антитело представляет собой моноклональное антитело или гуманизированное моноклональное антитело; соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор представляет собой глициновый буфер, гистидиновый буфер или их сочетание; сурфактант представляет собой полисорбат или плюроник; и регулятор тоничности, не содержащий соль, представляет собой сорбитол, маннитол, сахарозу или трегалозу.
Изобретение также включает гипотонический жидкий фармацевтический состав низкой вязкости, который включает в себя концентрированное антитело или его фрагмент в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл; соль в количестве от приблизительно или равном 90 мМ до приблизительно или равном 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор представляет собой гистидиновый буфер; сурфактант в количестве приблизительно 0.005% масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат; и регулятор тоничности, не содержащий соль, в количестве приблизительно 0.3% масса/объем, отличающийся тем, что регулятор тоничности, не содержащий соль, представляет собой сорбитол или сахарозу.
Изобретение также включает гипотонический жидкий фармацевтический состав низкой вязкости, который включает в себя концентрированное антитело или его фрагмент в количестве более приблизительно или равном 100 мг/мл и менее чем приблизительно или равном 200 мг/мл; соль в количестве приблизительно или равном 90 мМ или приблизительно или равном 95 мМ, отличающийся тем, что соль представляет собой хлорид натрия; буферный раствор в количестве приблизительно или равном 20 мМ, отличающийся тем, что буферный раствор представляет собой сочетание глицина и гистидина; и сурфактант в количестве приблизительно или равном 0.005% масса/объем, отличающийся тем, что сурфактант представляет собой полисорбат. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав также включает в себя регулятор тоничности, не содержащий соль, в количестве от приблизительно 1% до 1.5% масса/объем, отличающийся тем, что регулятор тоничности представляет собой сорбитол или сахарозу.
Согласно различным вариантам осуществления настоящего изобретения, описанные фармацевтические составы обладают осмоляльностью менее чем приблизительно 290 мОсм/кг.
Изобретение также включает в себя готовое изделие, которое включает контейнер и фармацевтический состав, содержащий белок в концентрации более 100 мг/мл и менее чем 200 мг/мл, солевой раствор и буфер присутствуют в комбинированном количестве от приблизительно 110 мМ до приблизительно 120 мМ, сурфактант и инструкцию по применению. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав в готовом изделии также включает регулятор тоничности, не содержащий соль. В варианте осуществления изобретения, контейнер выбран из сосуда, флакона, шприца, шприца-ручки, насоса, многодозового шприца с иглой, многодозового шприца-ручки, безыгольного шприца, шприца-тюбика, автоинжектора, предварительно заполненного шприца или их сочетание. В варианте воплощения изобретения, фармацевтический состав включен в контейнер готового изделия.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры дополнительно описывают и показывают варианты осуществления изобретения в рамках настоящего изобретения. Примеры приведены исключительно с целью иллюстрации, а не рассматриваются как ограничивающие настоящее изобретение, так как многие варианты возможны без отступления от существа и объема настоящего изобретения.
В нижеизложенных Примерах плотность, осмоляльность и вязкость измерялись с помощью осцилляционного денситометра (Densito 30РХ; Mettler-Toledo Inc.; Columbus, ОН); понижения температуры замерзания (Advanced Model 3320 Micro Osmometer; Advanced Instruments Inc.; Norwood, MA), вискозиметром с конусом и плоскостью (Brookfield), (Brookfield Engineering Laboratories, Inc., Middleboro, MA) и вискозиметром с падающим шариком viscometer (Gilmont GV-2200; Thermo Fisher Scientific; Waltham, MA). По причине того, что имеются различные средства для измерения этих свойств, указанные способы и устройства не предназначены для ограничения. Плотность, осмоляльность и/или вязкость заявленного фармацевтического состава в некоторых вариантах осуществления изобретения, измеряются любыми из этих способов, соответственно.
Пример 1
Белковые фармацевтические составы низкой вязкости, содержащие высококонцентрированный белок.
Для приготовления фармацевтических составов низкой вязкости, которые содержат высококонцентрированный белок и являются гипотоническими, осмоляльность фармацевтических составов предполагалась быть менее чем изотонической композиции. В некоторых фармацевтических составах, осмоляльность была менее чем приблизительно 290 мОсм/кг, менее чем приблизительно или равной 260 мОсм/кг, менее чем приблизительно или равной 250 мОсм/кг, или менее чем приблизительно или равной 210 мОсм/кг, по сравнению с изотоническими фармацевтическими составами, обладающими осмоляльностью приблизительно 290 мОсм/кг.
Гипотонические жидкие фармацевтические составы, включающие концентрированное антитело, были приготовлены с использованием 100-200 мг/мл антитела. В частности, фармацевтические составы содержат антитело в концентрации 0 мг/мл, 75.3 мг/мл, 92.8 мг/мл, 126.3 мг/мл, 148.6 мг/мл, 175 мг/мл, 203.3 мг/мл, 216.9 мг/мл и 225.8 мг/мл. Применяемые препараты, включающие концентрированный белок, обладали вязкостью менее чем 75 сП, менее чем 50 сП, менее чем 25 сП и менее 15 сП. Фармацевтические составы содержат соль между 50 мМ и 95 мМ, выбранную из хлорида натрия, лактата натрия, глюконата натрия или их сочетания, а также включают в себя буферный раствор от 5 мМ до 20 мМ, такой как глициновый, гистидиновый или их сочетание. Концентрация сочетания солевого раствора и буфера, например, солевого/буферного регулятора тоничности, была от 65 мМ до 115 мМ. Некоторые препараты имели в составе сурфактант в количестве, изменяющемся от 0.001% до 0.2% масса/объем, тогда как другие препараты содержали сурфактант в количестве 0.005% масса/объем. Сурфактанты включали в себя полисорбат, например, полисорбат-20 (Твин20). В некоторых приготовленных фармацевтических составах моносахариды, дисахариды, сахароспирты или их сочетание были включены в качестве стабилирующих и регуляторов тоничности, в количестве, изменяющемся от 0.1% масса/объем до 5% масса/объем, в частности, от 0.1% масса/объем до 1.8% масса/объем. Примеры стабилизирующих веществ включают в себя сахара, такие как сахарозу и сорбитол, или синтетические соединения, подобные природным сахарами или сахароспиртами. рН конкретных фармацевтических составов находился в пределах от рН 5.4 до рН 6.4. Фармацевтические составы были приготовлены так, что они были стабильны со сроком годности по меньшей мере 18 месяцев при температуре в пределах от приблизительно 2°С до приблизительно 8°С.
Примерными заявленными фармацевтическими составами являются те, которые состоят из любого сочетания из следующих групп ингредиентов: (А) Буферный раствор (20 мМ), например, глициновый, гистидиновый, глициновый/гистидиновый в любом сочетании, винная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, уксусная кислота; (В) Соль (90 мМ или 95 мМ), например, NaCl, глюконат Na, лактат Na; (С) регулятор тоничности (в пределах - 260 мОсм/кг), напр. сахароспирт, дисахариды, сорбитол, маннитол, сахароза, трегалоза, глицерин, мальтоза, лактоза; (D) Сурфактант (0.001%-0.2% масса/объем), например, полисорбат 20 (Твин 20), полисорбат 80 (Твин 80), ПОЛОКСАМЕР 188 (Pluronics 188). Дисахариды, такие как мальтоза и лактоза, могут быть использованы, но могут быть менее желательного, поскольку они содержат восстанавливающий сахар.
Различные растворимые и жидкие фармацевтические составы согласно изобретению приготавливали так, что в результате получали фармацевтический состав гипотоническим (менее чем приблизительно 290 мОсм/кг) и низкой вязкости. Первый гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости приготавливали для содержания анти-CCR5, гуманизированных, моноклональных антител PRO 140 в концентрации 162 мг/мл; хлорида натрия в концентрации 95 мМ; гистидина в концентрации 20 мМ; сурфактанта Твин20 в концентрации 0.005%; и сахарозы в концентрации 1.5%, рН 5.5. Второй гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости приготавливали для содержания aHTH-CCR5 гуманизированных моноклональных антител PRO 140 в концентрации 162 мг/мл; хлорида натрия в концентрации 95 мМ; глицина в концентрации 20 мМ; сурфактанта Твин20 в концентрации 0.005%; и сахарозы в концентрации 1.5%, рН 5.5. Третий гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости приготавливали для содержания анти-CCR5 гуманизированных моноклональных антител PRO 140 в концентрации 175 мг/мл; хлорида натрия в концентрации 95 мМ; гистидина в концентрации 5 мМ; глицина в концентрации 15 мМ; сурфактанта Твин20 в концентрации 0.005%; и сорбитол в концентрации 0.3%, рН 5.5. Четвертый гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости включал анти-CCR5, гуманизированные моноклональные антитела PRO 140 в концентрации 175 мг/мл; хлорид натрия в концентрации 95 мМ; янтарную кислоту в концентрации 20 мМ; сурфактант Твин20 в концентрации 0.005%; и сахарозу в концентрации 1.5%, рН 5.5. Четвертый гипотонический фармацевтический состав низкой вязкости включал анти-CCR5 гуманизированные моноклональные антитела PRO 140 в концентрации 175 мг/мл; хлорид натрия в концентрации 95 мМ; малеиновую кислоту в концентрации 20 мМ; сурфактант Твин20 в концентрации 0.005%; и сахарозу в концентрации 1.5%, рН 5.5.
Пример 2
Вязкость фармацевтического состава при различных диапазонах рН и концентрациях соли.
Для изучения роли рН, буфера и регулятора тоничности по отношению к вязкости, приготавливали четыре фармацевтических состава. Фармацевтические составы антител, содержащие концентрированные антитела 154 мг/мл, наблюдались по всему диапазону рН от рН 4 до рН 7.4. При сравнении характеристик четырех различных фармацевтических составов, содержащих следующие буферные растворы или солевой/буферный: 20 мМ гистидина, гистидин/глицина, NaCl/гистидина и сахароза/гистидин, результаты показали, что вязкость находилась в диапазоне от 10 сП до 30 сП. Изоэлектрическая точка антитела была pi 7.5, но когда антитело было в заряженной, кислой форме, фармацевтические составы, содержащие гистидин/глицин, сахарозу/гистидин и только гистидин была обнаружена более низкая вязкость при рН менее чем 6. Концентрация гистидинового буфера в этом фармацевтическом составе была 20 мМ. Было обнаружено, что не было никакого влияния рН, если соль, например, ионный регулятор тоничности, было включено в фармацевтический состав. Без связи с теорией, было обнаружено, что присутствие соли уменьшает межмолекулярные взаимодействия антитела и, соответственно, уменьшает вязкость фармацевтического состава.
Было установлено, что фармацевтические составы, содержащие белки в двух различных концентрациях более чем 100 мМ и концентрации соли в диапазоне от 0 мМ до приблизительно 600 мМ, обладали вязкостью в диапазоне от приблизительно 13 сП до 20 сП. Когда фармацевтические составы сравнили и исследовали, было установлено, что вязкость фармацевтических составов оптимально уменьшалась при концентрации соли приблизительно 100 мМ и менее.
Пример 3
Влияние буферных растворов на вязкость при высокой и низкой скоростях
сдвига
-3
4
-1
-1
-4
-1
Различные фармацевтические составы были исследованы на скорости сдвига с использованием капиллярного вискозиметра, который может анализировать большое число скоростей сдвига, например, 1×10 сек -1 до 1×10 сек. Примеры фармацевтических составов изменяются в зависимости от типов буферных растворов и сочетания буферных растворов, однако все фармацевтические составы имеют одинаковую общую концентрацию буфера 20 мМ. При высокой скорости сдвига (от 1 до 100 сек), фармацевтические составы обладают вязкостью в диапазоне 15 мП до 17 мП. Например, фармацевтический состав с полярный/положительный аминокислотный буфер обладал низкой вязкостью, тогда как фармацевтический состав с неполярным/нейтральным буферным раствором обладал высокой вязкостью. При низкой скорости сдвига (от 1×10 до 1 сек), фармацевтические составы имели противоположный результат, например, фармацевтический состав с полярным/позитивным аминокислотным буфером обладал высокой вязкостью в эксперименте с низкой скорости сдвига. При низкой скорости сдвига, фармацевтические составы обладали вязкостью в диапазоне от 1150 мП до 4745 мП. Это различие в вязкости при низкой скорости сдвига является важным фактором в способе изготовления лекарственной субстанции, готовой лекарственной формы и устройств. Выбор соответствующего буферного раствора влияет на время изготовления и конечную концентрацию белка. Нежелательный буферный раствор может увеличить время изготовления и уменьшить концентрацию белка. В частности, фармацевтический состав, содержащий полярный/позитивный аминокислотный буфер, имеет более длительный процесс изготовления и низкую концентрацию белка, хотя по прежнему концентрированного и более 100 мг/мл, по сравнению с фармацевтическим составом, содержащим неполярный/нейтральный аминокислотный буфер. Такого рода вязкоупругие свойства следует рассматривать применительно к фильтрации, процессу засыпки и доставки концентрированного белка фармацевтического состава с помощью шприца или иглы, например.
Пример 4
Осмоляльность, вязкость и плотность различных белковых фармацевтических составов настоящего изобретения
Эксперименты осуществлялись для измерения осмоляльности, вязкости и плотности фармацевтических составов согласно изобретению. Данные осмоляльности и вязкости от одной конкретной части анти-СС115, гуманизированных моноклональных антител PRO 140, при этом данные плотности были получены от двух различных частей одного и того же антитела. Было отмечено, что изменения в осмоляльности и плотности были незначительными, т.е. приблизительно 20% в осмоляльности и менее чем приблизительно 5% в плотности, в широком диапазоне концентраций белка от 75 мг/мл до 225 мг/мл. Осмоляльность колебалась в пределах от 222 мОсм/кг до 265 мОсм/кг, а плотность колебалась в пределах от 1.02 г/мл до 1.06 г/мл. Однако, влияние различных концентраций белка на вязкость было значительно более. Вязкость колебалась в пределах от приблизительно 2 сП до приблизительно 75 сП. Увеличение концентрации белка (т.е. от 75 до 225 мг/мл) приводило к линейному увеличению осмоляльности и плотности исследуемых фармацевтических составов, тогда как наблюдалось экспоненциальное увеличение вязкости.
Экстраполированные данные плотности в данной концентрации белка были определены. Было определено, что если концентрация белка была приблизительно 150 мг/мл, приблизительно 175 мг/мл, приблизительно 200 мг/мл, приблизительно 225 мг/мл и приблизительно 250 мг/мл, тогда ее плотность была экстраполирована приблизительно 1.045 г/мл, приблизительно 1.052 г/мл, приблизительно 1.059 г/мл, приблизительно 1.065 г/мл и приблизительно 1.072 г/мл, соответственно.
Пример 5
Подкожное введение PRO 140 заявленного фармацевтического состава низкой вязкости
Клинические исследования, включающие подкожное введение высокой концентрации гуманизированных моноклональных антител PRO 140, которые направлены против хемокинового рецептора CCR5, в заявленном фармацевтическом составе предназначены для определения различных участков инъекций у нормальных здоровых взрослых испытуемых. Исследование также определяет параметр самовведения фармацевтического состава, содержащего антитело в высокой концентрации субъектам, записанных в исследовании.
Исследование (PRO 1401103) предназначено для оценки безопасности и переносимости PRO 140, которые вводятся подкожно (SC) с использованием устройства для доставки автоинжектора (Autoject2), (Owen Mumford Ltd., UK). В исследовании изучали PRO 140 в дозе 350 мг, вводимых подкожно с использованием устройства Autoject2 субъекту в живот, руку и бедро в общем объеме 2 мл (две 1 мл инъекции). Устройство Autoject2 позволяет пассивное введение объема 1 мл. Субъектам вводят конечные одну или две инъекции в продолжении второго из двух дней дозирования, с последующим обучением манипуляции, связанной с самовведением. Таким образом, изучение далее оценивает способность субъектов к самостоятельному введению лекарственного средства. Фармакокинетические данные (РК) оценивали по исследованию, используемому для установления относительной сопоставимости абсорбции PRO 140, следующей после SC инъекции в живот, руки и бедра.
Протокол исследования 1103 представляет собой одноцентровое, открытое клиническое исследование приблизительно 15 нормальных здоровых взрослых субъектов. Образцы крови получали отбором для определения отвечают ли субъекты критерию включения/исключения и включению серологических, гематологических, комплексных химических и метаболических профилей, общий анализ мочи и анализ мочи на лекарственное средство. На 1 день (2 Посещение) субъекты получали в общей сложности 350 мг (2.0 мл) в виде двух инъекций. Обе инъекции вводились ведущим исследователем или уполномоченным лицом. Первая инъекция 1.0 мл вводилась с использованием Autoject2 в живот, руку и бедро. Вторую инъекцию 1.0 мл также вводили с использованием Autoject2 на контралатеральной стороне живота, бедра или руки (в зависимости от того, где вводили первую инъекцию). На 8 день (8 Посещение), субъекты получали в общей сложности 350 мг (2.0 мл) в виде двух инъекций. Обе инъекции вводились ведущим исследователем или уполномоченным лицом. Первая инъекция 1.0 мл вводилась с использованием Autoject2 в живот, руку и бедро. Вторая инъекция 1.0 мл также вводилась с использованием Autoject2 на контралатеральной стороне живота, бедра или руки (в зависимости от того, где вводили первую инъекцию). Введение лекарственного средства на 8 день (8 Посещение) отличается от 1 дня тем, что ведущий исследователь или уполномоченное лицо вводит первую инъекцию, а субъект самостоятельно вводит вторую инъекцию. Следует понимать, что в качестве варианта, протокол допускает, что ведущий исследователь или уполномоченное лицо вводит обе первую и вторую инъекции. Безопасность, по оценке побочных эффектов (AEs), реакции в месте инъекции (ISRs) и основные физиологические показатели контролируются на протяжении всего исследования. Образцы крови также получали для данных по концентрации лекарственного средства в продолжении исследования на 1, 2, 3, 5 и 8 дни (2, 3, 4, 5 и 6 Приемы, соответственно).
Исследование включает в себя три этапа, а именно, этап отбора (длительностью до четырнадцати дней), этап лечения (длительностью четырнадцать дней) и конечный этап исследования (продолжительностью 1 день). На этапе отбора, до четырнадцати дней перед дозированием и после получения их подписанного и датированного письменного информированного согласия, субъекты проходят оценку состояния пригодности перед участием в исследовании. Субъекты, которые отвечают всем критериям включения и исключения, были включены в исследование и наблюдались на протяжении всего исследования. В конечном этапе исследования, субъекты, которые завершили этап лечения, вернулись на исследовательский центр после семи дней в конце этапа оценки.
Фармацевтический состав, содержащий высокую концентрацию (175 мг/мл) гуманизированных моноклональных антител (PRO 140), вводили парентерально. Способ введения представлял собой подкожный; автоижекторным устройством, т.е. использовали Autoject2; и инъекции осуществляли либо в руку, живот или в бедро субъекта с использованием 27 g иглы. Пятнадцать субъектов рандомизированно разделены в соотношении 1:1:1 для получения инъекций в живот, руку или бедро. Обобщенные результаты терапевтического лечения, лекарственной формой, режима дозирования и способа введения приведены в Таблице ниже:
Терапевтическое лечение, лекарственная форма, режим и способ введения
Исследуемый препарат и Посещение
Лекарственная форма
Концентрация PRO 140
Место инъекции
Частота приема лекарственного средства и количество
Способ введения
Первая Доза:
Раствор для
175 мг/мл
Живот,
Две инъекции:
SC
Исследуемый
Лекарственная
Концентрация
Место
Частота
Способ
препарат и
форма
PRO 140
инъекции
приема
введения
Посещение
лекарственного
средства и
количество
1 день
парентерального
рука или
(2
введения
бедро
1.0 мл
Посещение)
Autoject2
PRO 140
и
1.0 мл
Autoject2
Вторая доза:
Раствор для
175 мг/мл
Живот,
Две инъекции:
SC
8 день
парентерального
рука или
(6
введения
бедро
1.0 мл
Посещение)
Autoject2
PRO 140
и
1.0 мл
Autoject2
Исследуемый препарат вводили на противоположных сторонах живота, на противоположной руке или на противоположном бедре. После каждой SC доставки лекарственного средства, тщательно исследовали противоположные руки, что бы оценить, если произошло любое ISRs. Каждая доза исследуемого лекарственного средства вводилась последовательно SC инъекцией с использованием двух шприцов. Пять субъектов рандомизированно разделены для получения своих инъекций в живот; пять субъектов рандомизированно разделены для получения своих инъекций в руку; и пять субъектов рандомизированно разделены для получения своих инъекций в бедро. Для мест инъекций живота и бедра, вторая инъекция вводилась на контралатеральной стороне, используемой для первой инъекции.
Первая доза вводилась субъекту на 1 день, 2 Посещение всего 350 мг (общий объем 2.0 мл), в виде двух раздельных инъекций по 1 мл с использованием Autoject2. Первая инъекция (шприцом, содержащим 1.0 мл) вводили в живот, руку или бедро ведущий исследователь или уполномоченное лицо. Вторую инъекцию (шприцом, содержащим 1.0 мл) вводили на контралатеральной стороне от места первоначального введения ведущим исследователем или уполномоченным лицом. Вторую дозу вводили субъекту на 8 день (6 Посещение) и содержала 350 мг дозы (общий объем 2.0 мл) вводили как две раздельные инъекции по 1.0 мл с использованием Autoject2. Первую инъекцию (шприцом, содержащим 1.0 мл) вводили в живот, руку или бедро ведущий исследователь или уполномоченное лицо.
Вторую инъекцию (шприцом, содержащим 1.0 мл) вводили на контралатеральной стороне от места первоначального введения субъект.
Пример 7
Подкожное введение PRO 140 заявленного фармацевтического состава низкой вязкости является хорошо переносимым
Клиническое исследование было выполнено согласно протоколу, описанному в Примере 5, с исключением того, что на 8 день, 6 Посещение, вторую дозу исследуемого лекарственного средства не вводили субъекту (т.е., без самостоятельной инъекции), но взамен было введено посредством инъекции ведущим исследователем или уполномоченным лицом. Окончание такого клинического исследования показало, что подкожная доставка PRO 140 посредством устройства Autoject2 была успешной у всех принимающих участие субъектов. Не было никаких сообщений о значительных неблагоприятных эффектах, полученных от введения высокой концентрации гуманизированных моноклональных антител PRO 140, что свидетельствует о безопасности и переносимости фармацевтического состава с высокой концентрацией PRO 140.
Содержание всех патентов, заявок на патенты, опубликованных статей, книг, справочников и рефератов, противопоставленных в настоящей заявке, включены посредством ссылки в полном объеме для более полного описания известного уровня техники, которое имеет отношение к изобретению. Ссылки на любые патенты, заявки на патенты, опубликованные статьи, книги, справочники и рефераты и т.д., приведенные в настоящей заявке, не предназначены для признания того, что они являются в действительности известным уровнем техники.
Следует понимать, что описание является только иллюстрацией настоящего изобретения. Различные альтернативы и модификации могут быть разработаны специалистами в данной области техники, не выходя за пределы изобретения. Соответственно, настоящее изобретение охватывает все альтернативы, модификации и варианты, которые попадают под действие прилагаемых пунктов формулы изобретения.