Соматический экстракт из сетарий (Setaria labiato-papilosa) в диагностике дирофиляриоза собак

признаками поражения слепых кишок и падежа среди ослабленного молодняка. У индеек данной инвазии не регистрировали.

Значительному расширению производства индюшиного мяса будет способствовать сданный в эксплуатацию Башкирский птицеводческий комплекс по производству индюшиного мяса. Данный комплекс расположен в Мелеузовском районе и носит имя «Мажита Гафури» - известного Башкирского писателя. Мощность комплекса планируется на 15 тысяч тонн мяса в год. По мощности он считается четвертым в России, построен при помощи Государства Израиль и работает по их технологии. С учетом использования этих материалов, достижений науки и опыта передовых индейководческих хозяйств России, по заказу Ветеринарного управления при Министерстве СХ РБ сотрудниками Башгосагроуниверситетом были разработаны рекомендации по профилактике инвазионных болезней индеек. Они будут способствовать совершенствованию методов профилактики инфекционных и инвазионных болезней индеек, обеспечению стойкого ветеринарного благополучия хозяйств различной форм собственности.

Литература: 1.Труды Башкирской гельминтологической экспедиции. -Уфа, Башкнигоиздат, 1938.-407с. 2.Хазиев Г.З., Сагитова А.С. //Вестник Башкирского государственного аграрного университета. Научный журнал, № 2.- Уфа: Издательство БГАУ, 2002.-С. 50-52.

Infections of turkeys and their prophylaxis. Haziev G.Z., Sagitova A.S. Bashkir State Agrarian University.

Summary. Based on the results of coproscopic examinations one concluded that turkeys were infected by Heterakis gallinarum; the extensity of infection was 65% as while the infection intensity value appeared to be 25-115 specimens. Echinostoma revolutum were recovered in small intestines of turkeys.

СОМАТИЧЕСКИЙ ЭКСТРАКТ ИЗ СЕТАРИЙ (SETARIA LABIATO-PAPILOSA) В ДИАГНОСТИКЕ ДИРОФИЛЯРИОЗА СОБАК

Хайдаров К.А., Написанова Л.А., Бережко В.К.

ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина

Введение. Использование антигенов близкородственных видов гельминтов в качестве иммунодиагностических и иммунопрофилактических средств известно достаточно давно. Так, для диагностики эхинококкоза в РСК, преципитации или кожным тестом с успехом использовали антигены из других видов цестод, антигеном из Ascaris lumbricoides диагностировали филяриоз человека кожной пробой, а экстрактом из Fasciola hepatica - шистосомоз (2).

403

С положительным результатом в широких эпидемиологических исследованиях был использован антиген Dirofilaria immitis для выявления онхоцеркоза (9).

Получение гетерологичных антигенных препаратов в диагностических целях особенно привлекательно в тех случаях, когда существует проблема получения гомологичного антигенного материала. Так, трудность получения филярий для приготовления диагностического антигена была успешно решена применением антигена из Ascaris suum, имеющего с филяриями большое число общих антигенных компонентов (6). Аналогично для диагностики онхоцеркоза использовали экстракты из других видов нематод, как A. lumbricoides, Toxocara canis, Neoascaris vitulorum и др. (7).

Положительные результаты получены также при использовании антигенов из Cysticercus pisiformis и C. taenuicollis в диагностике экспериментального цистицеркоза телят (5).

Исходя из данных научной литературы и учитывая, что дирофилярии и сетарии являются представителями одного и того же семейства Filariidae, провели исследования по установлению возможности использования соматического экстракта из сетарий для диагностики дирофиляриоза собак иммуноферментной реакцией (ИФР).

Материалы и методы. Для приготовления соматического экстракта использовали половозрелые сетарии, выделенные от убойного крупного рогатого скота. Экстракт из сетарий готовили так же, как из дирофилярий (1).

В полученном экстракте определяли содержание белка на спектрофотометре при длине волны 280 нм по калибровочной кривой на основе бычьего сывороточного альбумина (фракция 5).

ИФР ставили в непрямом варианте для выявления антител к D.immitis в сыворотке крови инвазированных собак. Соматический экстракт из сетарий, используемый для сенсибилизации полистироловых планшетов, испытали в следующих разведениях: 4, 8, 12, 16, 30, 40, 50 и 60 мкг белка-антигена/ мл, а также 4, 8, 16 и 40 мкг белка-антигена на лунку.

Экстракт разводили в 0,1 М карбонатно-бикарбонатном буфере рН=9,6.

Испытаны следующие режимы сенсибилизации: при 40С 18-20 часов; при 370С - 1 час с последующей выдержкой при 40С в течение 18-20 часов.

Реакцию ставили с сыворотками естественно инвазированных D.immitis собак, различающихся по степени иммунного ответа, сывороткой крови клинически здорового животного и с гетерологичной инвазией (Toxocara canis, Babesia canis) в разведении 1:100.

Для определения временного режима инкубации сенсибилизированных антигеном планшетов с исследуемыми сыворотками испытали режимы: 30, 40, 45 и 60 мин при 370С.

Конъюгат (антитела диагностические против IgG сыворотки крови собак) испытали в разведении 1:6000, 1:8000 и 1:12000, время инкубации с конъюгатом 60, 45, 40, 30, 20 и 15 мин при 370С.

404

Результаты и обсуждение. Проведенные исследования показали, что соматический экстракт из сетарий содержит диагностически активные компоненты, позволяющие дифференцировать сыворотки инвазированных дирофиляриями собак. Тем не менее результативность во многом зависит от правильного подбора параметров и режима постановки ИФР, включая определение оптимальной концентрации антигена для сенсибилизации полистироловых планшетов, разведения сывороток и видоспецифического конъюгата, а также времени инкубации. Испытав более 15 различных комбинаций с разными концентрациями экстракта из сетарий, разведений конъюгата и времени инкубации как с исследуемыми сыворотками, так и с конъюгатом, установили наибольшую разницу в оптической плотности (ОП) между положительными и отрицательными контрольными сыворотками собак и сыворотками с гетерологичной инвазией при концентрации антигена-экстракта 50 мкг/мл, разведении сывороток - 1:100 и конъюгата - 1:6000. Режим сенсибилизации планшетов составлял 18-20 час при 40С, время инкубации с сыворотками - 60 мин, с конъюгатом - 25 мин при 370С. При соблюдении этих условий разница в ОП между референс сыворотками составила 0.09, что несколько ниже аналогичных данных, полученных в ИФР с гомологичным антигеном.

Исходя из того, что диагностически активные антигенные компоненты составляют незначительную часть соматического экстракта, для повышения эффективности иммунореакций необходимы дальнейшие исследования по его очистке, что позволит выделить компоненты, обладающие наибольшей чувствительностью и специфичностью при дирофиляриозе. Дополнительная очистка соматических экстрактов гельминтов, используемых в иммунодиагностике, как правило, позволяет значительно повысить эти показатели.

К такому выводу пришел Медведев А.Ю.

Антигенные фракции из Fasciola hepatica показали хорошие результаты внутрикожной пробы при шистосомозе (8). Антигены из Setaria equina и других видов гельминтов нашли применение в диагностике филяриоза человека (10).

Таким образом, использование антигенов из гетерологичных видов гельминтов оправдано, особенно при гельминтозах, возбудители которых непосредственно локализуются в тканях животного или в ранней стадии

405

мигрируют по кровеносному руслу и внутренним органам, как это происходит при дирофиляриозе.

Литература: 1.Бережко В.К., Хайдаров К.А., Дахно И.С., Шкурка Е.П. //Материалы докл. научн. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями», М. - 2008. - вып. 9. - С. 69-73. 2.Кульбертсон Д.Т .// Иммунитет к паразитным заболеваниям. - М.: И.Л. - 1948. -328с. З.Медведев А.Ю.// Труды Всеросс. ин-та гельминтол. - 2006. - т. 43. - С. 196-202. 4.Benex J. // Bull. soc. pathol. exot. - 1972. - v. 65, №4. - p. 563-569. 5.Calamel M., Soule C. // Rev. Med. Vet. - 1972. - v. 123, №8-9. - p. 1105-1114. 6.Niel Y., Gentilini M., Couture J. et al. // Bull. soc. pathol. exot. - 1972. - v. 65, №4. - p. 569-579. 7.Petithory J., Brumpt L., Bahno N. // Ann. parasinol. hum. et comp. - 1973. - v. 48, №2. - p. 343350. 8.Rifast M.A., Khalil H.M. // 2-nd Europ. multicol. parasitol. Yugoslavia. - 1-6 september. - 1975. - p. 63. 9.Somorin A.O., Meiner D.C. // Clin. Allergy. 1976. -v.6, №6. - p. 573-576. 10. Twaiko G.L., Mkufya A. // E. Afr. Med. J. - 1977. -v.54, №12. - p. 680-683.

Somatic extract from Setaria labiato-papillosa in diagnosis of Dirofilaria immitis infection of dogs. Haidarov K.A., Napisanova L.A., Berezhko V.K. AllRussian K.I. Skryabin Institute of Helminthology.

Summary. One revealed that ELISA using S. labiato-papillosa extract at concentration of 50 mcg protein-antigen/ml at sensibilization of plates for 18-20 hours at 4oC, dilution of tested sera 1:10, species-specific conjugate 1:6000 (the incubation time with sera 60 min as while with conjugate - 20 min at 37oC) allows to differentiate sera originated from dogs infected by D. immitis.

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ МОНО- И ПОЛИИНВАЗИИ

Халиуллина О.Х.

ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Введение. Кровь, как один из видов тканей внутренней среды, имеет большое значение для жизни организма животных. Кровь вместе с органами кроветворения и разрушения образуют сложную в морфологическом и функциональном отношении систему. Поэтому состав периферической крови отражает, прежде всего, состояние кроветворных органов, производной которых она является (К.А. Сидорова, О.А. Драгич, С.А. Пашаян, М.Б. Калашникова, С.В. Козлова, 2004).

В периферической крови животных при нормальных физиологических условиях организма образование форменных элементов и их разрушение находятся в состоянии равновесия. Г ельминты, локализующиеся в желудочно-

406