МОДИФИКАЦИЯ Т-КЛЕТОК

1. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая
(i) первую нуклеотидную последовательность, кодирующую биоактивную молекулу,
(ii) вторую нуклеотидную последовательность, кодирующую антигенный рецептор;
(iii) индуцируемый промотор, функционально связанный с первой нуклеотидной последовательностью, и
(iv) конститутивный промотор, функционально связанный со вторым нуклеотидом.
2. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 1, где экспрессия с индуцируемого промотора индуцируется посредством активации Т-клеток.
3. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где индуцируемый промотор содержит транскрипционный ответный элемент (TRE) для ядерного фактора активированных Т-клеток (NFAT).
4. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где TRE NFAT имеет последовательность нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO:14 или ее вариант.
5. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где индуцируемый промотор содержит три или более копий TRE NFAT.
6. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где конструкция нуклеиновой кислоты содержит последовательность под SEQ ID NO: 1.
7. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где конститутивный промотор представляет собой промотор гена фактора элонгации 1-альфа человека.
8. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где первая нуклеотидная последовательность кодирует цитокин.
9. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 8, где цитокин представляет собой интерлейкин 7 (IL-7).
10. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 9, где IL-7 представляет собой IL-7 человека.
11. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где антигенный рецептор представляет собой Т-клеточный рецептор (TCR).
12. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 11, где TCR представляет собой TCR с повышенной аффинностью.
13. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 11 или 12, где TCR специфически связывается с МНС, демонстрирующим пептидный фрагмент антигена.
14. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 13, где антиген представляет собой опухолевый антиген, экспрессируемый раковыми клетками.
15. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 11-14, где TCR содержит аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NO: 5, 6 или 11.
16. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-10, где антигенный рецептор представляет собой химерный антигенный рецептор (CAR).
17. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 16, где CAR специфически связывается с антигеном, экспрессируемым клеткой.
18. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 17, где антиген представляет собой опухолевый антиген, экспрессируемый раковыми клетками.
19. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 14 или 18, где опухолевый антиген представляет собой NY-ESO-1 или MAGE-A10.
20. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из предыдущих пунктов, где первая нуклеотидная последовательность выполнена с возможностью экспрессии в первом направлении и вторая нуклеотидная последовательность выполнена с возможностью экспрессии в первом направлении и.
21. Вектор, содержащий конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-20.
22. Вектор по п. 21, где вектор представляет собой лентивирусный вектор.
23. Вирусная частица, содержащая вектор по п. 21 или 22.
24. Популяция Т-клеток, содержащая конструкцию нуклеиновой кислоты, вектор или вирусную частицу по любому из предыдущих пунктов.
25. Популяция Т-клеток, которые конститутивно экспрессируют гетерологичный антигенный рецептор и индуцибельно экспрессируют биоактивную молекулу при активации Т-клеток.
26. Популяция по п. 25, где нуклеотидная последовательность, кодирующая биоактивную молекулу, функционально связана с индуцируемым промотором, а нуклеотидная последовательность, кодирующая гетерологичный антигенный рецептор, функционально связана с конститутивным промотором.
27. Популяция по п. 26, где индуцируемый промотор содержит транскрипционный ответный элемент (TRE) для ядерного фактора активированных Т-клеток (NFAT).
28. Популяция по п. 27, где TRE NFAT имеет последовательность нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO:14 или ее вариант.
29. Популяция по любому из пп. 26-28, где индуцируемый промотор содержит три или более копий TRE NFAT.
30. Популяция по любому из пп. 26-29, где конститутивный промотор представляет собой промотор гена фактора элонгации 1-альфа человека.
31. Популяция по любому из пп. 25-30, где первая нуклеотидная последовательность кодирует цитокин.
32. Популяция по п. 31, где цитокин представляет собой интерлейкин 7 (IL-7).
33. Популяция по любому из пп. 25-32, где антигенный рецептор является таким, как определено в любом из пп. 11-17.
34. Фармацевтическая композиция, содержащая популяцию Т-клеток по любому из пп. 24-33 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
35. Популяция Т-клеток по любому из пп. 24-33 для применения в способе лечения организма человека или животного.
36. Популяция Т-клеток по любому из пп. 24-33 для применения в способе лечения рака у индивидуума.
37. Применение популяции Т-клеток по любому из пп. 24-33 при изготовлении лекарственного препарата для лечения рака у индивидуума.
38. Способ лечения рака, предусматривающий введение индивидууму с раком популяции Т-клеток по любому из пп. 24-33.
39. Популяция для применения по п. 36, применение по п. 37 или способ по п. 38, где рак характеризуется наличием одной или более раковых клеток, которые связываются с указанным антигенным рецептором.
40. Популяция для применения, применение или способ по любому из пп. 36-39, где Т-клетки являются аутогенными.
41. Популяция для применения, применение или способ по любому из пп. 36-40, где Т-клетки являются аллогенными.
42. Способ получения популяции модифицированных Т-клеток, предусматривающий введение конструкции нуклеиновой кислоты или вектора по любому из пп. 1-22 в популяцию Т-клеток, полученных от индивидуума-донора, с получением популяции модифицированных Т-клеток.
43. Способ по п. 42, предусматривающий размножение и/или хранение модифицированных Т-клеток.
44. Способ по п. 42 или 43, предусматривающий составление популяции модифицированных Т-клеток с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
45. Способ по любому из пп. 42-44, предусматривающий введение популяции модифицированных Т-клеток индивидууму-реципиенту.
46. Способ по п. 45, где индивидуум-реципиент имеет раковое состояние.
47. Способ по п. 46, где раковое состояние характеризуется наличием одной или более раковых клеток, которые связываются с указанным антигенным рецептором.
48. Способ по любому из пп. 42-47, где индивидуум-донор и индивидуум-реципиент являются одним и тем же индивидуумом.
49. Способ по любому из пп. 42-47, где индивидуум-донор и индивидуум-реципиент являются различными.