Информативность лейкоцитарных индексов в лабораторном скрининге лёгочной патологии у телят

Информативность лейкоцитарных индексов в лабораторном скрининге лёгочной патологии у телят

А.П. Жуков, д.в.н., профессор, Е.Б. Шарафутдинова, к.б.н., А.П. Датский, аспирант, ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ

В клинической практике при выборе протокола лечения животных необходимо располагать доступными методами, позволяющими дать быструю, но эффективную оценку защитному потенциалу организма. Таким простым и общедоступным методом является общий анализ крови с выведением лейкограммы, составляющие элементы которой чутко реагируют на любые изменения гомеостаза в организме [1, 2].

Используя параметры лейкограммы, можно оперировать лейкоцитарными индексами, имеющими диагностическое и прогностическое значение, так как они позволяют оценить работу эффективных механизмов иммунной системы и уровень иммунологической реактивности, которые определяют процесс формирования неспецифических адаптационных реакций [3].

Использование лейкоцитарных индексов в практической ветеринарной медицине весьма ограниченно, за исключением нескольких работ по изучению адаптации животных к воздействию экстремальных факторов [4].

Целью исследования являлось изучение особенностей лейкограммы и лейкоцитарных индексов на различных стадиях острой формы бронхопневмонии у телят.

Материал и методы исследования. Исследование проведено в клинике кафедры незаразных болезней животных и филиалах Оренбургского ГАУ, где был систематизирован и изучен материал по изменению клинического статуса, лейкограммы и индексов у семи телят 3-4-месячного возраста при острой бронхопневмонии на фоне проведённого комплексного лечения. Животных содержали в типовых помещениях, нормы кормления в основном соответствовали виду и возрасту животных.

Изучали лейкограмму, лейкоцитарные индексы и количество лейкоцитов по общепринятым методикам. По лейкограмме рассчитывали лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ), ядерный индекс сдвига (ЯИ), индекс сдвига лейкоцитов (ИСЛК), уровень интоксикации (УИ), индексы стресса (ИС) и адаптации (ИА) или СПНР — суммарный показатель неспецифической реактивности, лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ЛГИ), ядерный индекс степени эндотоксикоза (ЯИСЭ), индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ), индексы Бредекка (иБ) и Кребса (иК) [5, 6]. Также была апробирована методика прогнозирования исхода болезни по П.В. Сарапу и др. (2002), которая предусматривает использование частных от разностей последовательных

показателей белой крови, взятых до болезни и на разных этапах лечения, а именно лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ), индекса стресса (ИС) по Л.Х. Гаркави (1977) и количество лейкоцитов х109/л, которые делят друг на друга, и при получении двух отрицательных значений из трёх вышеуказанных показателей делают вывод о плохом прогнозе [7].

Результаты исследования. Причиной бронхопневмонии явились погрешности в кормлении и содержании телят, а также ослабление их иммунного статуса и повышенная аллергизация в результате постоянно действующих стрессоров (переохлаждение, вдыхание раздражающих газов, кормовые токсикозы и пр.). Немаловажным фактором в развитии болезни следует считать патогенные штаммы пневмококков и диплококков.

В начале заболевания у телят было выражено угнетение, анорексия, слабость, повышение температуры тела до 40,8°С, громкий болезненный кашель, смешанная одышка, жёсткое везикулярное и бронхиальное патологическое дыхание. В проекции верхушечных и сердечных долей при рентгеноскопии были выявлены участки затемнения лёгких с усилением хилюсного рисунка. Установлено увеличение количества лейкоцитов в крови, нейтрофилия с гиперрегенеративным сдвигом ядра влево (табл. 1).

Эозинопения в сочетании с нейтрофилией косвенно указывают на хорошую реакцию органов гемопоэза. Благоприятный прогноз предвещает лейкоцитоз, сочетающийся с нейтрофилией и устойчивым уровнем моноцитов в крови телят.

При оценке лейкограммы крови у 3-4-месячных телят следует учитывать общие закономерности онтогенеза белой крови, которые сводятся к резкому уменьшению концентрации нейтрофилов (с 53 до 17%) и увеличению лимфоцитов (с 40 до 75%), что необходимо принять во внимание при анализе лейкоцитарных индексов в этот переломный период роста [8].

На фоне проведённого комплексного лечения у телят на 3-й день болезни снизилась температура тела до 39,9°С, исчезла смешанная одышка и бронхиальное патологическое дыхание, появился аппетит. В крови телят уменьшилось количество лейкоцитов до 9,2 • 109/л, гетерофилов, но увеличилось количество эозинофилов, моноцитов и лимфоцитов (Р < 0,01).

Через 9 дн. с начала заболевания состояние телят заметно улучшилось, они охотно принимали корм, адекватно реагировали на раздражители. Признаки дыхательной недостаточности были купированы. Количество лейкоцитов, насыщение крови базофилами, нейтрофилами в крови было

1. Динамика лейкограммы телят, больных бронхопневмонией

День болезни Лейк. х109/л Б Э Нейтрофилы Л М

М Ю П С всего

1-й 11,3± 0,5± 0,3± 1,1± 9,1± 18,3± 16,6± 45,1± 50,0± 4,1±

0,33** 0,001 0,001* 0,08 0 ¿ц«* 0,69*** 0,58* 3,86*** 0,24**

3-й 9,2± - 3,2± - 6,7± 14,9± 15,8± 37,4± 53,5± 5,9±

0,29** 0,21** 0 ^*** 0,53*** 0,53* 2,86*** 4,12** 0,32**

9-й 8,4± 0,7± 7,5± - 1,2± 4,5± 15,7± 21,4± 62,5± 7,9±

0,31** 0,09 0 ^*** 0,02*** 0,31** 0,69 1,96** 4,96** 0,47**

Здоровые телята 8,1± 0,2± 0,9± - 0,3± 3,1± 14,1± 17,6± 75,7± 5,7±

0,26 0,001 0,06 0,08 0,08 0,49 1,32 6,73 0,29

Примечание: (здесь и далее): * — Р<0,05; ** — Р<0,01; *** — Р<0,001 по сравнению со здоровыми телятами

2. Показатели лейкоцитарных индексов у телят при бронхопневмонии на разных стадиях процесса

День болезни ЛИИ ЯИ ИСЖ УИ ИА ИС ЛГИ ЯИСЭ ИСЛМ иБ иК

1-й 0,81± 1,63± 0,85± 1,0 9± 3,01± 0,33± 10,89± 1,81± 11,22± 2,89± 0,91±

0,11** 0,21*** 0 0 II*** 0,29** 0,07** 0,63*** 0,13*** 0,77* 0,26*** Q09*«

3-й 0,59± 1,37± 0,59± 0,85± 3,3 8± 0,2 9± 13,18± 1,74± 9,03± 3,57± 0,72±

0,06** 0,16* 0,06** Q 09*« 0,31** 0,03* 0 у£*** 0,26*** 0,61*** 0 29*** 0,08***

9-й 0,27± 0,36± 0,42± 0,35± 4,12± 0,2 5± 21,11± 0,86± 7,91± 13,83± 0,34±

0,01** 0,07** 0,03** 0,03** 0,27* 0,02* 1,13* 0,09** 0,52*** 0,96* 0,04**

Здоровые телята 0,36± 0,2 3± 0,26± 0,27±0,02 5,36± 0,21± 20,61± 0,57± 13,21± 11,15± 0,2 5±

0,03 0,02 0,01 0,46 0,02 1,63 0,08 1,23 1,01 0,02

близким к референтным показателям, но превышено содержание эозинофилов и моноцитов. За счёт столь своеобразного перераспределения лейкоцитов количество лимфоцитов снижалось (табл. 1).

На следующем этапе исследования мы использовали наиболее известные лейкоцитарные индексы, которые представляют собой интегрально-математические значения и позволяют дать комплексную оценку состоянию организма. Все изучаемые соотношения были представлены индексами: интоксикации (ЛИИ, ЯИ, ЯИСЭ, ИСЛК); неспецифической реактивности (иК, иБ, ИА, ИСЛМ, ИС) и активности воспаления (ЛГИ).

Для определения уровня интоксикации (УИ) суммировали значения ЛИИ+ЯИ + ИСЛК/3. Полученные результаты в начале заболевания свидетельствовали о том, что эндотоксикоз является главной составляющей воспалительно-деструктивного патологического процесса в организме телят при острой форме бронхопневмонии, т.к. его уровень был в пять раз выше, чем у здоровых сверстников (Р< 0,001). На 3-й день болезни УИ снизился на 23%, что являлось следствием проведённой комплексной дезинтоксикации, включающей инфузи-онную терапию с введением 5-процентных растворов глюкозы, аскорбиновой кислоты и глюконата кальция по два раза в день в течение 5 дн. подряд. 9-й день ознаменовался улучшением состояния животных и уменьшением уровня интоксикации в три раза (Р< 0,01).

Следовательно, индексы, свидетельствующие об уровне эндотоксикоза, прямо коррелируют с динамикой патологического процесса. Кроме того, благоприятный исход болезни прогнозировали результаты, полученные по методике П.В. Сарапа и др. (2002), которые показали, что все изучаемые тесты дали достоверный положительный результат.

Ядерный индекс степени эндотоксикоза (ЯИСЭ) имел такую же тенденцию, как и УИ и ИС, т.е. в начале заболевания их величина было максимальной, что свидетельствовало о выраженной эндогенной интоксикации больных, а затем по мере устранения причин болезни и эффективного лечения они уменьшались, приходя к значениям, близким у здоровых телят (табл. 2).

Индекс соотношения моноцитов и лимфоцитов отображает активность системы мононуклеарных фагоцитов и содержания в периферической крови продуцентов лимфокинов. Как показали наблюдения, он увеличивается в стадии появления обнадёживающих симптомов выздоровления, и поэтому это следует признать валеопозитивным признаком (табл. 1, 2).

Индекс Кребса (иК) представляет собой отношение общего количества (%) нейтрофилов к лимфоцитам, косвенно характеризует, во-первых, активность фагоцитарных реакций и факторов специфического иммунитета, во-вторых, их участие

в поддержании общей реактивности организма. Индекс у здоровых телят имел значения, близкие к 0,25+0,03 усл. ед., тогда как в начале болезни он был близок к единице (Р<0,001), что являлось следствием функционального угнетения пролифе-ративной активности костного мозга и выражалось значительным увеличением числа молодых форм в пуле нейтрофилов. На 3-й день болезни в крови телят было выявлено снижение числа миелоцитов и палочкоядерных гетерофилов на фоне 3,5% увеличения лимфоцитов, при этом иК уменьшился до 0,72+0,09 усл. ед. (Р< 0,001). Наиболее значительные изменения индекса последовали в период выздоровления телят, когда количество лимфоцитов превышало представительство всех форм нейтрофилов почти в три раза.

Индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ) отображает взаимоотношения аффектор-ного и эффекторного звеньев иммунологического процесса. В начале заболевания в крови телят было выявлено наименьшее содержание моноцитов и лимфоцитов за весь период наблюдения. Перелом наступил к 9-му дню болезни, когда ситуация резко изменилось из-за двукратного увеличения в крови моноцитов и выраженной тенденции к активному насыщению лимфоцитами крови больных телят (Р<0,001).

Индексы неспецифической реактивности в начале болезни телят существенно отличались от референтных величин. Так, суммарный показатель неспецифической реактивности (СПНР), или ИА, в 1-й день исследования был равен 3,01+0,21 (Р<0,01), на 3-й день он увеличился до 3,38+0,32 (Р< 0,01) усл. ед., а на фоне выздоровления достиг максимального значения — 4,12+0,36 (Р<0,05). Индекс Бредекка, являясь интегральным критерием функционального состояния организма, указывает на его уровень резистентности. Данные таблицы 2 показывают, что в начале заболевания из-за гиперрегенеративного сдвига ядра нейтрофилов и крайнего напряжения органов гемопоэза иБ имели минимальные значения, но затем по мере излечения больных индекс увеличился до максимальной величины на 9-й день наблюдения. ИС, характеризующий стрессустойчивость, изменялся литически. В начале болезни он был увеличен до 0,33+0,09, а затем уменьшился до референтных значений на завершающем этапе визитаций (Р<0,05).

Анализ клинического статуса, лейкограммы и лейкоцитарных индексов у телят на различных стадиях острой бронхопневмонии позволил сделать следующие выводы:

1. При оценке лейкограммы и лейкоцитарных индексов у телят красной степной породы 3-4-месячного возраста необходимо учитывать возрастные количественные преобразования пула лимфоцитов и нейтрофилов.

2. Валеопозитивность исхода острой бронхопневмонии у телят предвещает лейкоцитоз, соче-

тающийся с нейтрофилией и устойчивым уровнем моноцитов в крови больных.

3. Эндотоксикоз является главной составляющей воспалительно-деструктивного патологического процесса при бронхопневмонии, что подтверждено значениями ЛИИ, ЯИ, ИСЛК и УИ.

4. Стадия реконвалесценции сопровождается не только манифестирующими клиническими признаками и характерными изменениями в лейкограмме, но и достоверным, однонаправленным градиентом интегральных индексов неспецифической реактивности (ИА, иБ, иК, ИС, ИСЛМ).

5. Скрининг крови телят на различных этапах патологического процесса позволил выявить размах колебаний интегральных гематологических индексов, характерных для выздоравливающих и здоровых телят, равных для иК, ЯИ, ИС — 0,2—0,3; ЛИИ, УИ, ИСЛК - 0,3-0,5; для ЯИСЭ - 0,5-1,0; ИСЛМ, иБ - 8-15 и ЛГИ - 20-25.

Литература

1. Габунщина О.Д. Лейкограмма и лейкоцитарные индексы в крови верблюдов калмыцкой породы // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2012. № 1 (13). С. 3-5.

2. Жуков А.П., Бикчентаева Г.Ю., Ростова Н.Ю. Морфологические показатели и индексы крови у голштинов канадской селекции в процессе длительной адаптации // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2012. № 2 (34). С. 86-90.

3. Гринь В.К., Фисталь Э.Я., Сперанский И.И. Интегральные гематологические показатели лейкоцитарной формулы как критерий оценки тяжести течения ожоговой болезни // Комбустиология. 2006. № 27. С. 43-45.

4. Ткаченко Е.А., Дерхо М.А. Лейкоцитарные индексы при экспериментальной кадмиевой интоксикации мышей // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2014. № 3 (47). С. 81-83.

5. Карабанов Г.Н. Использование лейкоцитарной формулы крови для оценки тяжести интоксикации // Вестник хирургии. 1989. № 4. С. 146-149.

6. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. Ростов-на-Дону: Изд-во Рост. ун-та, 1990. 223 с.

7. Сарап П.В., Тутынин К.В., Булыгин Г.В. Метод прогнозирования и выявления осложнений в раннем послеоперационном периоде: Патент, ЯЬ2190216. GO1 №33/39. 27.09.2009.

8. Никитин В.Н. Общие закономерности онтогенеза белой крови крупного рогатого скота, свиней, лошадей. М.: Агро-промиздат, 1947. С. 4-39.

Влияние Витадаптина на минеральный обмен у коров и телят

И.М. Донник, академик РАН, д.б.н., профессор, ФГБОУ ВО Уральский ГАУ; И.А. Шкуратова, д.в.н., профессор, ФГБУН Уральский НИВИ; Г.М. Топурия, д.б.н., профессор, Л.Ю. Топурия, д.б.н., профессор, ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ

Широкое внедрение в животноводство промышленной технологии, погрешности в кормлении и содержании, многочисленные стресс-факторы способствуют нарушению нормальных процессов метаболизма и развитию болезней обмена веществ, которые зачастую протекают без характерных клинических признаков. Такие патологии трудно диагностируются и причиняют большой экономический ущерб [1, 2].

В связи с этим в последнее время в практику животноводства и ветеринарной медицины внедряются препараты и биологически активные вещества, нормализующие обменные процессы и повышающие продуктивность сельскохозяйственных животных и птиц [3-5].

Целью наших исследований явилось изучение влияния нового отечественного препарата Витадаптин на минеральный обмен коров и их потомство.

Материал и методы исследования. Для проведения опытов было сформировано две группы коров симментальской породы по 10 гол. в каждой. Коровам опытной группы за 30 и 15 сут. до родов внутримышечно инъецировали препарат Витадаптин по 10 мл на гол. Крупный рогатый скот контрольной группы препарат не получал.

Для биохимического анализа пробы крови отбирали у коров за 30, 15 сут. до отёла, а также через 1 и 10 сут. после родов. У телят, полученных от коров подопытных групп, забор крови проводили в суточном и месячном возрасте.

В сыворотке крови определяли количество кальция, фосфора, магния, а также активность щелочной фосфатазы.

Витадаптин - инъекционный препарат с иммуностимулирующей активностью, полученный на основе масла зародышей пшеницы. В его состав входят бета-каротин, микроэлементы, витамин Е, эргостерин, линолевая, линоленовая, арахидоновая кислоты [6].

Результаты исследования. Минеральные вещества играют огромную роль в нормальном функционировании организма животных [7, 8].

Кальций - преимущественно внеклеточный элемент. Более 90% его находится в костной ткани, остальное количество - во внеклеточной жидкости. Данный элемент - один из важнейших компонентов системы, регулирующей проницаемость мембран. Его ионы способствуют взаимодействию актина и миозина, т.е. сокращению мышечных волокон, а также активируют процесс свёртывания крови. Всасывание, транспортировка, распределение в тканях и выделение кальция протекают с участием активных форм витамина Д и паратгормона. Гипокальцемия сопровождает алиментарную остеодистрофию, рахит, вторичную остеодистрофию и другие заболевания. Уровень кальция в крови стабильно удерживается дли-