B-КЛЕТКИ, ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ДЛЯ СЕКРЕЦИИ ФОЛЛИСТАТИНА, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СВЯЗАННЫХ С ФОЛЛИСТАТИНОМ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СОСТОЯНИЙ, НАРУШЕНИЙ И ДЛЯ УВЕЛИЧЕНИЯ РОСТА И СИЛЫ МЫШЦ

1. Рекомбинантная В-клетка, содержащая ген фоллистатина.
2. В-клетка по п. 1, где ген фоллистатина функционально связан с промотором.
3. В-клетка по п. 1 или 2, где ген фоллистатина представляет собой ген фоллистатина человека.
4. В-клетка по любому из пп. 1-3, где ген фоллистатина представляет собой вариант участка сплайсинга FST-344 фоллистатина человека.
5. В-клетка по любому из пп. 1-4, где В-клетка представляет собой В-клетку человека.
6. В-клетка по любому из пп. 1-5, где В-клетка была трансдуцирована или транспонирована геном фоллистатина.
7. В-клетка по любому из пп. 1-6, где В-клетка содержит ген фоллистатина, поскольку была трансдуцирована геном фоллистатина с использованием системы транспозона.
8. В-клетка по п. 7, где система транспозона представляет собой систему транспозона sleeping beauty или систему транспозона Piggybac.
9. В-клетка по любому из пп. 1-7, где В-клетка экспрессирует ген фоллистатина благодаря трансдукции вирусом, несущим ген фоллистатина.
10. В-клетка по любому из пп. 1-7, где В-клетка содержит ген фоллистатина, поскольку она была трансдуцирована ретровирусом, лентивирусом, аденовирусом или аденоассоциированным вирусом, содержащим ген фоллистатина.
11. В-клетка по любому из пп. 1-7, где В-клетка модифицирована, чтобы содержать ген фоллистатина, с использованием способа направленной интеграции.
12. В-клетка по п. 11, где в направленной интеграции используется одна или более нуклеаз с цинковыми пальцами, подобных активаторам транскрипции эффекторных нуклеаз (TALEN) и/или систем CRISPR/Cas, включая, но без ограничения, системы CRISPR/Cas9.
13. В-клетка по любому из пп. 1-7, где В-клетка модифицирована, чтобы содержать ген фоллистатина, посредством введения кодирующей фоллистатин нуклеиновой кислоты с использованием способа, выбранного из группы, состоящей из ретровирусных векторов, лентивирусных векторов, аденоассоциированных вирусных векторов, аденовирусных векторов, любых других РНК- или ДНК-вирусных векторов, невирусной ДНК и/или РНК, кодирующей фоллистатин, введенных с использованием химических или физических способов, таких как липофекция, образование комплексов с поликатионами, электропорация и т.п.
14. В-клетка по любому из пп. 1-13, где белок фоллистатин секретирован рекомбинантной В-клеткой.
15. Способ доставки фоллистатина субъекту, включающий введение рекомбинантной В-клетки, содержащей ген фоллистатина.
16. Способ доставки фоллистатина нуждающемуся в этом субъекту, включающий введение рекомбинантной В-клетки по любому из пп. 1-14.
17. Способ по п. 15 или 16, где субъект представляет собой млекопитающее.
18. Способ по любому из пп. 15-17, где субъект представляет собой человека.
19. Способ по любому из пп. 15-18, где субъект имеет мышечную дистрофию.
20. Способ по любому из пп. 15-19, где субъект имеет мышечную дистрофию Беккера.
21. Способ по любому из пп. 15-20, где введение рекомбинантной В-клетки субъекту обеспечивает лечение заболевания, нарушения или состояния субъекта.
22. Способ по любому из пп. 15-20, где введение рекомбинантной В-клетки субъекту обеспечивает лечение мышечной дистрофии.
23. Способ по любому из пп. 15-22, где введение рекомбинантной В-клетки субъекту вызывает увеличение массы тела субъекта.
24. Способ по п. 23, где масса тела субъекта увеличивается по меньшей мере приблизительно на 4%.
25. Способ по п. 24, где значительное увеличение массы тела происходит в течение 30 суток.
26. Способ по п. 24, где значительное увеличение массы тела происходит за приблизительно 30 суток.
27. Способ по любому из пп. 15-26, где введение рекомбинантной В-клетки субъекту вызывает увеличение мышечной массы у субъекта.
28. Способ по любому из пп. 15-27, где введение рекомбинантной В-клетки субъекту вызывает увеличение силы субъекта.
29. Способ по любому из пп. 15-28, где введение рекомбинантной В-клетки приводит к увеличению уровней фоллистатина в плазме субъекта.
30. Способ лечения, предотвращения или облегчения мышечного нарушения посредством введения рекомбинантной В-клетки, содержащей ген фоллистатина.
31. Способ лечения, предотвращения или облегчения мышечной дистрофии посредством введения рекомбинантной В-клетки по любому из пп. 1-13.
32. Рекомбинантная В-клетка по любому из пп. 1-13, где рекомбинантная В-клетка происходит из В-клетки, полученной от субъекта, или В-клетки, происходящей из клетки, полученной от субъекта.
33. Рекомбинантная В-клетка по п. 32, где рекомбинантная В-клетка происходит из предшественника В-клетки, полученного от субъекта.
34. Рекомбинантная В-клетка по п. 32, где рекомбинантная В-клетка происходит из клетки, полученной от субъекта, дифференцированной в В-клетку или предшественник В-клетки.
35. Рекомбинантная В-клетка по любому из пп. 1-13 и 32-34, где рекомбинантная В-клетка модифицирована посредством
(a) сбора и выделения иммуноцитов из крови субъекта;
(b) трансдукции клеток ДНК, кодирующей фоллистатин;
ex vivo
(c) размножения отобранных клеток ; и
ex vivo
(d) дифференцировки размноженных клеток  в плазматические клетки и/или плазмабласты;
36. Рекомбинантная В-клетка по п. 35, где выделенные иммуноциты со стадии a представляют собой положительные по CD19 клетки.
37. Рекомбинантная В-клетка по п. 35 или 36, где трансдукцию на стадии b проводят посредством электропорации.
38. Рекомбинантная В-клетка по п. 37, где в электропорации используют систему транспозона sleeping beauty.
39. Рекомбинантная В-клетка по любому из пп. 35-38, где дифференцированные клетки являются CD38(+) и CD20(-).
40. Способ, включающий введение субъекту рекомбинантной В-клетки по любому из пп. 35-39.
41. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-40, где способ включает введение двух или более последовательных доз генетически модифицированных В-клеток субъекту.
42. Способ по п. 41, где введение включает две или более дозы генетически модифицированных В-клеток в субоптимальных концентрациях однократных доз.
43. Способ по п. 41, где введение включает три или более дозы генетически модифицированных В-клеток.
44. Способ по п. 41, где генетически модифицированные В-клетки являются аутологичными для субъекта.
45. Способ по п. 41, где генетически модифицированные В-клетки являются аллогенными для субъекта.
46. Способ по п. 41, где субъект представляет собой человека.
47. Способ по п. 41, где генетически модифицированные В-клетки представляют собой CD20-, CD38- и CD138-.
48. Способ по п. 41, где генетически модифицированные В-клетки представляют собой CD20-, CD38+ и CD138+.
49. Способ по п. 41, где генетически модифицированные В-клетки представляют собой CD20-, CD38+ и CD138-.
50. Способ по п. 41, где введение включает внутривенную, внутрибрюшинную, подкожную, интратекальную, внутрикамерную или внутримышечную инъекцию.
51. Способ по п. 50, где введение включает внутривенную инъекцию.
52. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-51, где генетически модифицированные В-клетки модифицируют на сутки 2 или сутки 3 после культивирования.
53. Способ по п. 52, где генетически модифицированные В-клетки модифицируют с использованием способа, включающего электропорацию.
54. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-53, где
in vitro
(a) генетически модифицированные В-клетки собирают для введения субъекту на сутки в диапазоне от суток 1 до суток 12 культивирования ;
(b) генетически модифицированные В-клетки собирают для введения субъекту на сутки 4, сутки 5, сутки 6 или сутки 7, или сутки 8 в культуре после модификации.
55. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-54, где генетически модифицированные В-клетки собирают для введения субъекту на сутки 8 от начала культивирования, или позже, после модификации.
56. Способ по п. 55, где генетически модифицированные В-клетки собирают для введения субъекту на сутки 10 от начала культивирования, или ранее, после модификации.
57. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-56, где собранные генетически модифицированные В-клетки не продуцируют значительных уровней провоспалительных цитокинов.
58. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-57, где генетически модифицированные В-клетки собирают во временной точке в культуре, в которой определено, что они не продуцируют значительных уровней провоспалительных цитокинов.
59. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-58, где генетически модифицированные В-клетки выращивают в системе культивирования, содержащей каждый из IL-2, IL-4, IL-10, IL-15, IL-31 и мультимеризованного лиганда CD40, на протяжении всего периода культивирования до и после модификации.
60. Способ по п. 59, где мультимеризованный лиганд CD40 представляет собой меченный HIS лиганд CD40, мультимеризованный с использованием антитела к his.
61. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-60, дополнительно включающий размножение генетически модифицированных В-клеток до введения субъекту.
62. Способ по п. 61, где для конечной популяции размноженных генетически модифицированных В-клеток показана высокая степень поликлональности.
63. Способ по п. 61, где любой конкретный клон В-клеток в конечной популяции размноженных генетически модифицированных В-клеток составляет менее 0,2% общей популяции В-клеток.
64. Способ по п. 61, где любой конкретный клон В-клеток в конечной популяции размноженных генетически модифицированных В-клеток составляет менее 0,05% общей популяции В-клеток.
65. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-64, где генетически модифицированные В-клетки содержат полинуклеотид, кодирующий селективный маркер.
66. Способ по п. 65, где селективный маркер представляет собой ген DHFR человека с увеличенной устойчивостью к метотрексату.
67. Способ по п. 66, где ген DHFR человека с увеличенной устойчивостью к метотрексату содержит мутации замены лейцина на тирозин в положении аминокислоты 22 и фенилаланина на серин в положении аминокислоты 31.
68. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-67, включающий обработку генетически модифицированных В-клеток метотрексатом до сбора для введения.
69. Способ по п. 68, где обработку метотрексатом проводят от 100 нМ до 300 нМ.
70. Способ по п. 69, где обработку метотрексатом проводят при 200 нМ.
71. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-70, где генетически модифицированные В-клетки мигрируют к различным тканям при введении субъекту.
72. Способ по любому из пп. 15-31 и 35-71, где по меньшей мере одна генетически модифицированная В-клетка из популяции генетически модифицированных В-клеток, которые вводят субъекту, мигрирует в одну или несколько тканей, выбранных из группы, состоящей из костного мозга, кишечника, мышцы, селезенки, почки, сердца, печени, легкого и головного мозга.
73. Способ по п. 72, где по меньшей мере одна генетически модифицированная В-клетка из популяции генетически модифицированных В-клеток, которые вводят субъекту, мигрирует в костный мозг, кишечник, мышцу, селезенку, почку, сердце, печень, легкое и головной мозг субъекта.
74. Модифицированная В-клетка, трансдуцированная для экспрессии гена фоллистатина и гена DHFR.
75. Способ лечения мышечного нарушения, включающий введение субъекту В-клетки, генетически модифицированной для экспрессии фоллистатина.
76. Способ по п. 75, где мышечное нарушение выбрано из мышечной дистрофии, воспалительного мышечного нарушения, повреждения или травмы мышцы, бездействия мышцы и атрофии или ослабления мышцы.
77. Способ по п. 75 или 76, где мышечная дистрофия представляет собой мышечную дистрофию Дюшенна, мышечную дистрофию Беккера или лице-лопаточно-плечевую мышечную дистрофию.
78. Способ по п. 75 или 76, где воспалительное мышечное нарушение представляет собой миозит с тельцами включения.
79. Способ по п. 75 или 76, где бездействие мышцы возникает после длительного постельного режима или иммобилизации конечности.
80. Способ по п. 75 или 76, где атрофия или ослабление мышцы вызваны старением, злокачественной опухолью или хроническими заболеваниями.
81. Способ по п. 75, где мышечное нарушение представляет собой саркопению.
82. Способ по п. 75, где мышечное нарушение представляет собой спинальную мышечную атрофию (SMA).
83. Способ по п. 75, где мышечное нарушение представляет собой боковой амиотрофический склероз (ALS).
84. Способ по п. 75, где мышечное нарушение представляет собой болезнь Помпе.
85. Способ по любому из пп. 75-84, где фоллистатин содержит аминокислотную последовательность, указанную в любой из SEQ ID NO: 1-4.