ЖИРНОКИСЛОТНЫЕ ФУМАРАТНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ
FATTY ACID FUMARATE DERIVATIVES AND USES THEREOF

ЗАЯВЛЕНИЕ ПРИОРИТЕТА
[0001] Данная заявка объявляет приоритет предварительной заявки США под номером 61/293396 от 8 января 2010 года и предварительной заявки США под номером 61/294578 от 13 января 2010 года, которые включены в данную заявку путем ссылки во всей полноте и для всех целей.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0002] Данное изобретение касается жирнокислотных фумаратных производных; композиций, включающих эффективное количество жирнокислотного фумаратного производного; и способов лечения или предупреждения рака, и метаболических, аутоиммунных или нейродегенеративных расстройств, включающих использование эффективного количества жирнокислотного фумаратного производного. Все патенты, патентные заявки и публикации, процитированные здесь, включены путем ссылки во всей их полноте.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Жирная рыба холодных вод, такая как лосось, форель, сельдь и тунец, является источником диетических морских омега-3 жирных кислот, где ключевыми омега-3 жирными кислотами морского происхождения являютя эйкозапентаеновая (ЭПК) и докозагексаеновая (ДГК) кислоты. Как было показано, омега-3 жирные кислоты повышают чувствительность к инсулину и толерантность к глюкозе у нормогликемических людей и тучных индивидуумов. Омега-3 жирные кислоты, как также было показано, улучшают резистентность к инсулину у тучных и нетучных пациентов с воспалительным фенотипом. Было показано, что липидный, глюкозный и инсулиновый метаболизм улучшаются у субъектов с гипертензией, имеющих избыточный вес, посредством лечения омега-3 жирными кислотами. Как также было показано, омега-3 жирные кислоты (ЭПК/ДГК) снижают уровень триглицеридов и риск внезапной смерти, обусловленной сердечной аритмией, в дополнение к снижению смертности у пациентов с риском сердечно-сосудистого приступа. Омега-3 жирные кислоты применяются также как часть терапии, связанной с диетическими добавками, используемой для лечения дислипидемии, и как обладающие противовоспалительными свойствами. Более значительное поглощение омега-3 жирных кислот снижает уровни циркулирующих TNF-a и IL-6, двух из цитокинов, которые заметно возрастают при воспалительных процессах (Chapkin et al, Prostaglandins, Leukot Essent Fatty Acids 2009, 81, p.187-191; Duda et al, Cardiovasc Res 2009, 84, p.33-41). Кроме того, как было показано, более значительное поглощение омега-3 жирных кислот повышает уровни хорошо описанного противовоспалительного цитокина IL-10 (Bradley et al, Obesity (Silver Spring) 2008, 16, p.938-944). Недавнее исследование (Wang et al, Molecular Pharmaceutics 2010,7, p.2185-2193) продемонстрировало, что ДГК может также индуцировать Nrf2 и Nrf2-таргетную генную гем-оксигеназу 1 (НО-1), и этот путь может играть существеную роль в подавлении LPS-опосредованного воспаления.
[0004] ДГК и ЭПК характеризуются как длинноцепочечные жирные кислоты (алифатический участок длиной 12-22 углеродных атомов). Среднецепочечные жирные кислоты характеризуются как имеющие алифатический участок длиной 6-12 углеродных атомов. Липоевая кислота является среднецепочечной жирной кислотой, которая находится природным образом в организме. Она играет многие важные роли, такие как поглотитель свободных радикалов, хелатор для тяжелых металлов и медиатор сигнальной трансдукции в различных воспалительных и метаболических путях, включая NF-кВ путь (Shay, K. P. et al. Biochim. Biophys. Acta 2009, 1790, 1149-1160). Липоевая кислота, как было найдено, полезна в лечении ряда хронических заболеваний, которые ассоциируются с оксидантным стрессом (обзор смотри в работе Smith, A. R. et al Curr. Med. Chem. 2004, 11, p.1135-46). В настоящее время липоевая кислота оценивается в клинических испытаниях для лечения диабета (Morcos, М. et al Diabetes Res. Clin. Pract. 2001, 52, p.175-183) и диабетической невропатии (Mijnhout, G. S. et al Neth. J. Med. 2010, 110, p.158-162). Липоевая кислота, как также было установлено, потенциально полезна в лечении сердечно-сосудистых заболеваний (Ghibu, S. et al., J. Cardiovasc. Pharmacol. 2009, 54, p.391-8), болезни Альцгеймера (Maczurek, A. et al, Adv. Drug Deliv. Rev. 2008, 60, p.1463-70) и рассеянного склероза (Yadav, V. Multiple Sclerosis 2005, 11, p.159-65; Salinthone, S. et al, Endocr. Metab. Immune Disord. Drug Targets 2008, 8, p.132-42).
[0005] Фумаровая кислота и ее эфирные производные, как моноалкил гидро фумараты так и диалкил фумараты, используются как терапевтические агенты для лечения псориаза, аутоиммунного и Th1-опосредованного кожного заболевания (Altmeyer et al, J. of the American Academy of Dermatology 1994, 30, p.977-981). В клинических исследованиях с участием пациентов с псориазом, которым назначали фумараты, наблюдалось снижение периферических CD4+и CD8+-T лимфоцитов. Эти агенты, как сообщалось, ингибируют LPS-индуцированную NF-кВ активацию в дендритных клетках и эндотелиальных клетках in vitro (Loewe et al., J. Immunol. 2004, 168, 4781-4787; Litjens et al., Eur. J. Immunol. 2004, 34, 565-575). Диалкил и моноалкил фумараты также продемонстрировали оральную эффективность в хронической экспериментальной аутоиммунной энцефаломиелитной (ЕАЕ) модели рассеянного склероза (MS) у мышей. В этой конкретной модели, C57BL/6 мышей подвергали контрольному заражению иммунопептидом MOG 35-55 с целью индуцирования инвалидизации, эквивалентной той, что обнаруживали пациенты с рассеянным склерозом. Пероральное лечение диалкил или моноалкил фумаратом давало существенное улучшение показателя инвалидизации. Содержание противовоспалительного цитокина IL-10 в крови было особенно повышено у животных, которые подвергались лечению диалкил или моноалкил фумаратом. Кроме того, гистологический анализ спинного мозга животных, подвергавшихся лечению диалкил или моноалкил фумаратом, показал значительное снижение макрофагового воспаления (Schilling et al., Clinical and Experimental Immunology 2006, 145, 101-107). Диалкил и моноалкил фумаратные эфиры использовались также в ряде исследований, о которых сообщалось, с участием пациентов, обнаруживающих рецидивирующую-ремиттирующую форму рассеянного склероза. Пациенты, которые подвергались ежесуточному лечению 720 мг фумаратных эфиров в течение 70 недель, обнаруживали значительное снижение числа воспалительных мозговых очагов, как отмечалось по снижению новых усиленных гадолинием (Gd+) поражений в различных магнитно-резонансных томографических исследованиях в курсе данного лечения (Schimrigk et al., Eur. J. Neurology 2006, 13, 604-610). Позже было показано, что фумараты активируют Nrf2, фактор транскрипции, который ответствен за индукцию ряда важных антиоксидантов и детоксификационных энзимов, которые защищают клетки млекопитающих от реакционных кислород/азотных частиц и электрофилов (Lukashev, М. Е. "Nrf2 screening assays and related methods and compositions" WO 08097596 A2; Wilms et al., Journal of Neuroinflammation 2010, 7:30).
[0006] Хронический оксидантный стресс и воспаление теперь связывают с развитием и прогрессированием ряда инвалидизирующих заболеваний, кроме рассеянного склероза. Некоторые из этих болезней включают почечную недостаточнось, сердечную недостаточность, атеросклероз, остеопороз, рак, хроническое обструктивное заболевание легких (ХОЗЛ), болезнь Паркинсона и болезнь Альцгеймера. Активация Nrf2 пути с целью устранения этого хронического оксидантного стресса и воспаления, как представляется, является особенно многообещающим новым терапевтическим подходом (обзор смотри в работе Gozzelino, R. et al Аппи. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2010, 50, p.323-54). Например, маломолекулярные активаторы Nrf2, как теперь было показано, эффективны в модели индуцированной цисплатином нефротоксичности у мышей (Aleksunes et al, J. Pharmacology & Experimental Therapeutics 2010, 335, p.2-12), модели болезни Альцгеймера у трансгеной Tgl9959 мыши (Dumont et al, J. Neurochem. 2009, 109, p.502-12), модели ХОЗЛ у мышей (Sussan, Т. E. et al Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2009, 106, p.250-5), и модели опухоли молочной железы у мыши 4Т1 (Ling, X. et al Cancer Res. 2007, 67, p.4210-8).
[0007] Возможность представлять эффекты жирных кислот и фумаратов синергическим образом может дать преимущества в лечении различных видов рака, метаболических, аутоиммунных и нейродегенеративных заболеваний.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0008] Данное изобретение основывается, отчасти, на открытии жирнокислотных фумаратных производных и их продемонстрированных эффектов в достижении улучшенного лечения, которое не может быть достигнуто путем использования фумаратов или жирных кислот отдельно или в комбинации. Эти новые соединения полезны в лечении или предупреждении метаболических заболеваний, включая атеросклероз, дислипидемию, коронарную сердечную недостаточность, гиперхолестеремию, диабет типа 2, повышенный уровень холестерина, метаболический синдром, диабетическую нефропатию, IgA нефропатию, хроническое заболевание почек (ХЗП) и сердечно-сосудистые заболевания. Кроме того, они полезны в лечении аутоиммунных заболеваний, таких как ревматоидный артрит, псориаз, системная красная волчанка, воспалительные заболевания кишечника (включая колит и болезнь Крона), респираторные заболевания, такие как астма, муковисцидоз, ХОЗЛ и нейродегенеративные заболевания, такие как рассеянный склероз, болезнь Паркинсона и болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона, боковой амиотрофический склероз (БАС) и мышечная дистрофия. Описанные здесь соединения также полезны в лечении различных видов рака, такого как карцинома, саркома, лимфома, лейкоз, меланома, мезотелиома, множественная миелома, семинома, и рак мочевого пузыря, крови, кости, мозга, молочной железы, центральной нервной системы, ободочной кишки, эндометрия, пищевода, мочеполового тракта, головы, гортани, печени, легких, шеи, яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, яичек, селезенки, тонкой кишки, толстой кишки или желудка.
[0009] Соответственно, в одном аспекте, описан молекулярный конъюгат, который включает фумарат и жирную кислоту, где данная жирная кислота выбирается из группы, состоящей из омега-3 жирных кислот, жирных кислот, которые преобразуются in vivo до омега-3 жирных кислот, и липоевой кислоты, и данный конъюгат способен гидролизоваться с получением свободного фумарата и свободной жирной кислоты. В некоторых вариантах, данная жирная кислота выбирается из группы, состоящей из все-цис-7,10,13-гексадекатриеновой кислоты, а-линоленовой кислоты, стеаридоновой кислоты, эйкозатриеновой кислоты, эйкозатетраеновой кислоты, эйкозапентаеновой кислоты (ЭПК), докозапентаеновой кислоты, докозагексаеновой кислоты (ДГК), тетракозапентаеновой кислоты, тетракозагексаеновой кислоты и липоевой кислоты. В других вариантах, данная жирная кислота выбирается из эйкозапентаеновой кислоты, докозагексаеновой кислоты и липоевой кислоты. В некоторых вариантах гидролиз является ферментативным.
[0010] В другом аспекте, описаны соединения Формулы I и Формулы II:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
1
2
1
2
'
'
'
'
каждая W, W, W , и W  является, независимо, нулевой, О, S, NH, или NR, или W и W, или W  и W  могут быть взяты вместе с образованием необязательно замещенной имидазолидиновой или пиперазиновой группы;
3
3
2
3
каждая а, b, с, d, а', b', с', и d' является, независимо, -Н, -D, -СН, -ОСН, -ОСНСН, -C(O)OR, -O-Z, или бензилом, или две из а, b, с, и d или любые две из а', b', с', и d' могут быть взяты вместе с одним углеродом, с которым они связаны, с образованием циклоалкила или гетероцикла;
каждая n, о, р, q, n', о', р', и q' равняется, независимо, 0, 1, или 2;
2
1
6
3
6
каждая L и L' является, независимо, нулевой, -О-, -С(О)-, -S-, -S(O)-, -S(O)-, -S-S-, -(C-Салкил)-, -(С-Сциклоалкил)-, гетероциклом, гетероарилом,
, , , , , , ,
, , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , ,
, , , , или ;
1
1
'
где представление L и L' не ограничено направлением слева направо, как это изображено, скорее, либо левая сторона, либо правая сторона L и L' может быть связана с W или W  стороной соединения Формулы I или Формулы И, соответственно;
6
1
4
1
4
1
4
1
3
1
3
1
4
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
каждая R представляет собой, независимо, -Н, -D, -С-Салкил, -галоген, циано, оксо, тиооксо, -ОН, -C(O)C-C алкил, -О-арил, -О-бензил, -ОС(O)С-Салкил, -С-Салкен, -С-Салкин, -С(O)С-С алкил, -NH, -NH(C-Cалкил), -N(C-Cалкил), -NH(C(O)C-Cалкил), -N(C(O)C-Cалкил), -SH, -S(C-Cалкил), -S(O)C-Cалкил, -S(O)C-Cалкил;
каждая g равняется, независимо, 2, 3, или 4;
каждая h равняется, независимо, 1, 2, 3, или 4;
каждая m и m' равняется, независимо, 0, 1, 2, или 3; если m или m' больше 1, тогда L или L' могут быть одинаковыми или разными;
каждая m1 равняется, независимо, 0, 1, 2, или 3;
k равняется 0, 1, 2, или 3;
z равняется 1, 2, или 3;
4
1
6
1
6
4
4
4
каждая R представляет собой, независимо, Н или необязательно замещенный С-Салкил, где метиленовая единица данного С-Салкила может быть необязательно замещена либо О, либо NR, и в NRR, обе R, если они взяты вместе с азотом, к которому присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, такое как пирролидин, пиперидин, морфолин, пиперазин или пиррол;
каждая Z и Z' является, независимо, Н,
; или
;
при условии, что
в данном соединении имеется, по меньшей мере, одна
, , или
каждая t равняется, независимо, 0 или 1;
каждая r равняется, независимо, 2, 3, или 7;
каждая s равняется, независимо, 3, 5, или 6;
каждая v равняется, независимо, 1, 2, или 6;
1
2
1
4
1
4
1
4
1
3
1
3
1
4
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
каждая R и R представляет собой, независимо, -Н, -D, -С-Салкил, -галолген, -ОН, -С(O)С-Салкил, -О-арил, -О-бензил, -OC(O)C-Cалкил, -С-Салкен, -С-Салкин, -С(O)С-Салкил, -NH, -NH(C-Cалкил), -N(C-Cалкил), -NH(C(O)C-Cалкил), -N(C(O)C-Cалкил), -SH, -S(C-Cалкил), -S(O)C-Cалкил, -S(O)C-Cалкил;
3
1
6
2
2
каждая R является, независимо, Н, -C-Салкилом или -С(СНОН);
5
1
10
2
2
2
6
4
каждая R представляет собой, независимо, е, Н или прямой или разветвленный С -Салкил, который может быть необязательно замещен ОН, NH, COR, CONH, фенилом, СНОН, имидазолом или аргинином;
каждая е представляет собой, независимо, Н или любую из боковых цепей природных аминокислот;
1
4
каждая R представляет собой, независимо, -Н или прямой или разветвленный С-Салкил, необязательно замещенный ОН или галогеном;
при условии, что
1
2
если каждая из m, n, о, р, и q, равна 0, каждая W и W является нулевой, и Z является
, или
тогда t должна равняться 0;
если каждая из m', n', о', р', и q', равняется 0, каждая WT и W2' является нулевой, и Z' является
, или ,
тогда t должна быть равна 0; и
1
2
1
2
'
'
если каждая из m, n, о, р, и q равняется 0, и каждая W и W является нулевой, или если каждая из m', n', о', р', и q', равняется 0, каждая W  и W  является нулевой, тогда Z или Z' не должны быть
[0011] В другом аспекте, описаны соединения Формулы IA:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
каждая W и W является, независимо, нулевой, О, S, NH, или NR, или W и W могут быть взяты вместе с образованием необязательно замещенной имидазолидиновой или пиперазиновой группы;
3
3
2
3
каждая а, b, с, и d является, независимо, -Н, -D, -СН, -ОСН, -ОСНСН, -C(O)OR, или бензилом, или две из а, b, с, и d могут быть взяты вместе с одним углеродным атомом, с которым они связаны, с образованием циклоалкила или гетероцикла;
каждая n, о, р, и q равняется, независимо, 0, 1, или 2;
2
1
6
3
каждая L является, независимо, нулевой, -О-, -C(O)-,-S-, -S(O)-, -S(O)-, -S-S-, -(С-Салкил)-, -(С-циклоалкил)-, гетероциклом, гетероарилом,
, , , , , , ,
, , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , ,
, , , , или ;
1
где представление L не ограничено направлением слева направо, как это изображено, скорее, либо левая сторона, либо правая сторона L может быть связана с W стороной соединения Формулы IA;
6
1
4
1
4
1
4
1
3
1
3
1
4
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
каждая R представляет собой, независимо, -Н, -D, -С-Салкил, -галоген, циано, оксо, тиооксо, -ОН, -C(O)C-Cалкил, -О-арил, -О-бензил, -OC(O)C-Cалкил, -С-Салкен, -С-Салкин, -С(O)С-Салкил, -NH, -NH(C-Cалкил), -N(C-Cалкил), -NH(C(O)C-Cалкил), -N(C(O)C-Cалкил), -SH, -S(C-Cалкил), -S(O)C-Cалкил, -S(O)C-Cалкил;
каждая g равняется, независимо, 2, 3, или 4;
каждая h равняется, независимо, 1, 2, 3, или 4;
каждая m равняется, независимо, 0, 1,2, или 3; если m больше 1, тогда L могут быть одинаковыми или разными;
каждая m1 равняется, независимо, 0, 1, 2, или 3;
k равняется 0, 1, 2, или 3;
z равняется 1, 2, или 3;
4
1
6
1
6
4
4
4
каждая R представляет собой, независимо, Н или необязательно замещенный С-Салкил, где метиленовая единица данного C-Cалкила может быть необязательно замещена либо О, либо NR, и в NRR, обе R, если они взяты вместе с азотом, к которому они присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, такое как пирролидин, пиперидин, морфолин, пиперазин или пиррол;
3
1
6
2
2
каждая R является, независимо, Н, -C-Салкилом или -С(СНOН);
5
1
10
2
2
2
6
4
каждая R представляет собой, независимо, е, Н или прямой или разветвленный C-Салкил, который может быть необязательно замещен ОН, NH, COR, CONH, фенилом, СНОН, имидазолом или аргинином;
каждая е представляет собой, независимо, Н или любую из боковых цепей природных аминокислот;
1
4
каждая R представляет собой, независимо, -Н, или прямой или разветвленный С-Салкил, необязательно замещенный ОН, или галогеном.
[0012] В другом аспекте, описаны соединения Формулы IB:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
каждая W и W является, независимо, нулевой, О, S, NH, или NR, или W и W могут быть взяты вместе с образованием необязательно замещенной имидазолидиновой или пиперазиновой группы;
3
3
2
3
каждая a, b, с, и d является, независимо, -Н, -D, -СН, -ОСН, -ОСНСН, -C(O)OR, или бензилом, или две из а, b, с, и d могут быть взяты вместе с одним углеродным атомом, с которым они связаны, с образованием циклоалкила или гетероцикла;
каждая n, о, р, и q равняется, независимо, 0, 1, или 2;
2
1
6
3
6
каждая L является, независимо, нулевой, -О-, -C(O)-,-S-, -S(O)-, -S(O)-, -S-S-, -(C-Салкил)-, -(С-Сциклоалкил)-, гетероциклом, гетероарилом,
, , , , , , ,
, , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , ,
, , , , или ;
1
где представление L не ограничено направлением слева направо, как это изображено, скорее, либо левая сторона, либо правая сторона L может быть связана с W стороной соединения Формулы IB;
6
1
4
1
4
1
4
3
1
3
1
4
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
каждая R представляет собой, независимо, -Н, -D, -С-Салкил, -галоген, циано, оксо, тиооксо, -ОН, -C(O)C-Cалкил, -О-арил, -О-бензил, -ОС(O)С-Салкил, -С-Салкен, -С-Салкин, -С(O)С-Салкил, -NH, -NH(C-Cалкил), -N(C-Cалкил), -NH(C(O)C-Cалкил), -N(C(O)C-Cалкил), -SH, -S(C-Cалкил), -S(O)C-Cалкил, -S(O)C-Cалкил;
каждая g равняется, независимо, 2, 3, или 4;
каждая h равняется, независимо, 1, 2, 3, или 4;
каждая m равняется, независимо, 0, 1, 2, или 3; если m больше 1, тогда L могут быть одинаковыми или разными;
каждая m1 равняется, независимо, 0, 1, 2 или 3;
k равняется 0, 1, 2, или 3;
z равняется 1, 2, или 3;
4
1
6
1
6
4
4
4
каждая R представляет собой, независимо, Н или необязательно замещенный С-Салкил, где метиленовая единица данного C-Cалкила может быть необязательно замещена либо О, либо NR, и в NRR, обе R, если они взяты вместе с азотом, к которому присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, такое как пирролидин, пиперидин, морфолин, пиперазин или пиррол;
3
1
6
2
2
каждая R является, независимо, Н, -C-Салкилом или -С(СНОН);
5
1
10
2
2
2
6
4
каждая R представляет собой, независимо, е, Н или прямой или разветвленный С-Салкил, который может быть необязательно замещен ОН, NH, COR, CONH, фенилом, СНОН, имидазолом или аргинином;
каждая е представляет собой, независимо, Н или любую из боковых цепей природных аминокислот;
каждая R является, независимо, -Н, или прямым или разветвленным С1-С4 алкилом, необязательно замещенным ОН, или галогеном.
[0013] В другом аспекте, описаны соединения Формулы IС:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
каждая W и W является, независимо, нулевой, О, S, NH, или NR, или W и W могут быть взяты вместе с образованием необязательно замещенной имидазолидиновой или пиперазиновой группы;
3
3
2
3
каждая а, b, с, и d является, независимо, -Н, -D, -СН, -ОСН, -ОСНСН, -C(O)OR, или бензилом, или две из а, b, с, и d могут быть взяты вместе с одним углеродным атомом, с которым они связаны, с образованием циклоалкила или гетероцикла;
каждая n, о, р, и q равняется, независимо, 0, 1, или 2;
2
1
6
3
6
каждая L является, независимо, нулевой, -О-, -C(O)-,-S-, -S(O)-, -S(O)-, -S-S-, -(С-Салкил)-, -(С-Сциклоалкил)-, гетероциклом, гетероарилом,
, , , , , , ,
, , , , ,
, , , , , ,
, , , , , ,
, , , , ,
, , , , ,
, , , , или ;
1
где представление L не ограничено направлением слева направо, как это изображено, скорее, либо левая сторона, либо правая сторона L может быть связана с W стороной соединения Формулы IС;
6
1
4
1
4
1
4
1
3
3
1
4
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
1
3
каждая R представляет собой, независимо, -Н, -D, -С-Салкил, -галоген, циано, оксо, тиооксо, -ОН, -С(O)С-Салкил, -О-арил, -О-бензил, -ОС(O)С-Салкил, -С-Салкен, -С-Салкин, -C(O)C-Cалкил, -NH, -NH(С-Салкил), -N(C-Cалкил), -NH(C(O)C-Cалкил), -N(C(O)C-Cалкил), -SH, -S(C-Cалкил), -S(O)C-Cалкил, -S(O)C-Cалкил;
каждая g равняется, независимо, 2, 3, или 4;
каждая h равняется, независимо, 1, 2, 3, или 4;
каждая m равняется, независимо, 0, 1, 2, или 3; если m больше 1, тогда L могут быть одинаковыми или разными;
каждая m1 равняется, независимо, 0, 1, 2, или 3;
k равняется 0, 1, 2, или 3;
z равняется 1, 2, или 3;
4
1
6
1
6
4
4
4
каждая R является, независимо, Н или необязательно замещенным C-Салкилом, где метиленовая единица данного C-Салкила может быть необязательно замещена либо О, либо NR, и в NRR, обе R, если они взяты вместе с азотом, к которому присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, такое как пирролидин, пиперидин, морфолин, пиперазин или пиррол;
3
1
6
2
2
каждая R является, независимо, Н, -С-Салкилом или -С(СНОН);
5
1
10
2
2
2
6
4
каждая R представляет собой, независимо, е, Н или прямой или разветвленный C-Салкил, который может быть необязательно замещен ОН, NH, COR, CONH, фенилом, СНОН, имидазолом или аргинином;
каждая е представляет собой, независимо, Н или любую из боковых цепей природных аминокислот;
1
4
каждая R является, независимо, -Н, или прямой или разветвленный С-Салкил, необязательно замещенный ОН или галогеном.
1
6
[0014] В соединениях Формул I, IA, IB, IС, и II, любой один или несколько Н могут быть замещены дейтерием. Также очевидно, что в соединениях Формул I, IA, IB, IС, и II, метиловый заместитель может быть замещен C-Салкилом.
[0015] Также описаны фармацевтические композиции, включающие, по меньшей мере, одно жирнокислотное фумаратное производное.
[0016] Также здесь описаны способы лечения заболевания, восприимчивого к лечению жирнокислотным фумаратным производным, у пациента, который нуждается в нем, путем введения данному пациенту эффективного количества жирнокислотного фумаратного производного.
[0017] Также здесь описаны способы лечения метаболических заболеваний или аутоиммунных заболеваний, или нейродегенеративных болезней путем введения пациенту, который нуждается в этом, эффективного количества жирнокислотного фумаратного производного.
[0018] Также здесь описаны способы лечения нейродегенеративных заболеваний путем введения пациенту, который нуждается в этом, эффективного количества жирнокислотного фумаратного производного.
[0019] Также здесь описаны способы лечения рака путем введения пациенту, который нуждается в этом, эффективного количества жирнокислотного фумаратного производного.
[0020] Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, которые включают эффективное количество жирнокислотного фумаратного производного и фармацевтически приемлемый носитель. Данные композиции полезны для лечения или предупреждения метаболического заболевания, нейродегенеративных заболеваний и рака. Данное изобретение включает жирнокислотное фумаратное
[0021] Детали данного изобретения представлены в приведенном ниже описании. Хотя в практике или тестировании настоящего изобретения могут быть использованы способы и материалы, схожие с описанными здесь или эквивалентные им, далее будут описаны иллюстративные способы и материалы. Другие особенности, предметы и преимущества данного изобретения станут очевидными из описания и формулы изобретения. В данной спецификации и прилагаемой формуле изобретения сингулярные формы также включают множественные, если в контексте четко не указано иное. Если не определено иное, все технические и научные термины, использованные здесь, имеют то же самое значение, которое общепонятно любому обычному специалисту в данной области, к которой принадлежит это изобретение. Все патенты и публикации, цитированные в этой спецификации, включены здесь путем ссылки в их полноте.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
Фигура 1 является графическим представлением эффекта IL-1β и TNF-α генной экспрессии в RAW264.7 макрофагах, которые обрабатывались либо соединением I-1, либо комбинацией монометил фумарата и ДГК.
Фигура 2 является графическим представлением уровня TNF-α в сыворотке самцов мышей Swiss Webster, которым вводили дозы либо соединения 1-1, либо дексаметазона за 90 минут до контрольного заражения LPS.
Фигура 3 является графическим представлением Hmox1 таргетной генной экспрессии в RAW264.7 макрофагах, которые обрабатывались соединением 1-1.
Фигура 4 является графическим представлением IL-β и Hmox1 таргетной генной экспрессии в RAW264.7 макрофагах, которые обрабатывались либо контрольной, либо двумя разными концентрациями соединения 1-105 (50 мкМ и 100 мкМ).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0022] Метаболические расстройства представляют собой широкое множество медицинских заболеваний, которые вредят метаболизму пациента. Метаболизм является процессом, который организм пациента использует для превращения пищи в энергию. Метаболизм пациента с метаболическим расстройством некоторым образом нарушается. Аутоиммунные заболевания возникают из-за сверхактивной иммунной реакции организма против тканей, которые обычно присутствуют в данном организме. Нейродегенеративные заболевания являются результатом дегенерации нейронов или их миелиновых оболочек, которая, в конечном счете, может привести к множеству дисфункций, связанных с центральной нервной системой. Жирнокислотные фумаратные производные обладают способностью лечить или предупреждать метаболические заболевания, аутоиммунные или нейродегенеративные заболевания. Кроме того, жирнокислотные фумаратные производные могут также использоваться для лечения многих видов рака, таких как карцинома, саркома, лимфома, лейкоз, меланома, мезотелиома, множественная миелома, семинома, и рак мочевого пузыря, крови, кости, мозга, молочной железы, центральной нервной системы, ободочной кишки, эндометрия, пищевода, мочеполового тракта, головы, гортани, печени, легких, шеи, яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, яичек, селезенки, тонкой кишки, толстой кишки или желудка.
[0023] Жирнокислотные фумаратные производные были созданы с целью объединить фумаровую кислоту и ее эфирные аналоги, и жирные кислоты в единый молекулярный конъюгат. Активность данных жирнокислотных фумаратных производных значительно выше, чем суммы компонентов, что позволяет предположить, что активность, индуцированная жирнокислотными фумаратными производными, носит синергический характер.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
[0024] В связи с жирнокислотными фумаратными производными используются следующие определения:
[0025] Термин «жирнокислотные фумаратные производные» включает любой и все возможные изомеры, стереоизомеры, энантиомеры, диастереомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты и промедикаменты жирнокислотных фумаратных производных, описанных здесь.
[0026] Единственное число используемое в этой заявке, относится к одному или большему числу (т.е., по меньшей мере, одному) грамматических объектов. В качестве примера, «элемент» означает один элемент или больше, чем один элемент.
[0027] Термин «и/или» используется в этой заявке со значением либо «и» либо «или», если не оговорено иное.
[0028] Если специально не указано иное, термин «арил» касается циклических, ароматических углеводородных групп, которые имеют 1-2 ароматических кольца, включая моноциклическую или бициклическую группы, такие как фенил, бифенил или нафтил. Ароматические кольца данной арильной группы, если они содержат два ароматических кольца (бициклические и т.д.), могут быть соединены в одной точке (например, бифенил), или могут быть конденсированными (например, нафтил). Данная арильная группа может быть необязательно замещена одним или несколькими заместителями, например, 1-5 заместителями, в любой точке присоединения. Данные заместители могут необязательно быть сами замещены.
1
3
1
3
[0029] «C-Салкил» касается насыщенного углеводорода с прямой или разветвленной цепью, содержащего 1-3 углеродных атома. Примеры С-С алкильной группы включают, но не ограничиваясь этим, метил, этил, пропил и изопропил.
1
4
1
4
[0030] «С-Салкил» касается насыщенного углеводорода с прямой или разветвленной цепью, содержащего 1-4 углеродных атома. Примеры С-С алкильной группы включают, но не ограничиваясь этим, метил, этил, пропил, бутил, изопропил, изобутил, emop-бутил и трет-бутил.
1
5
1
5
[0031] «С-Салкил» касается насыщенного углеводорода с прямой или разветвленной цепью, содержащего 1-5 углеродных атомов. Примеры С-С алкильной группы включают, но не ограничиваясь этим, метил, этил, пропил, бутил, пентил, изопропил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, изопентил и неопентил.
1
6
1
6
[0032] «C-Салкил» касается насыщенного углеводорода с прямой или разветвленной цепью, содержащего 1-6 углеродных атомов. Примеры C-Салкильной группы включают, но не ограничиваясь этим, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, изопентил и неопентил.
1
3
[0033] Термин «циклоалкил» касается циклического углеводорода, содержащего 3-6 углеродных атомов. Примеры циклоалкильной группы включают, но не ограничиваясь этим, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Очевидно, что любой из заместимых водородов в циклоалкиле может быть замещен галогеновой, С-С алкильной, гидроксильной, алкокси и циано группами.
[0034] Термин «гетероцикл», используемый в настоящем документе, касается моноциклического или бициклического углеводорода, содержащего 3-12 углеродных атомов, где, по меньшей мере, один из углеродных атомов замещен О, N, или S. Примеры гетероцикла включают, но не ограничиваясь этим, азиридин, оксиран, тииран, азетидин, оксетан, тиетан, пирролидин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, пиперидин, тетрагидропиран, тиан, имидазолидин, оксазолидин, тиазолидин, диоксолан, дитиолан, пиперазин, оксазин, дитиан, диоксан, диазабициклогептан и диазабициклооктан.
1
3
[0035] Термин «гетероарил», используемый в настоящем документе, касается моноциклической или бициклической кольцевой структуры, имеющей 5-12 кольцевых атомов, где один или несколько данных кольцевых атомов является гетероатомом, например, N, О или S и где одно или несколько колец бициклической кольцевой структуры является ароматическим. Некоторыми примерами гетероарила являются пиридил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, тетразолил, бензофурил, ксантены и дигидроиндол. Очевидно, что любой из заместимых водородов в гетероариле может быть замещен галогеновой, С-Салкильной, гидроксильной, алкокси и циано группами.
[0036] Термин «любая из боковых цепей природных аминокислот», используемый в настоящем документе, означает боковую цепь любой из следующих аминокислот: изолейцин, аланин, лейцин, аспарагин, лизин, аспартат, метионин, цистеин, фенилаланин, глутамат, треонин, глутамин, триптофан, глицин, валин, пролин, аргинин, серии, гистидин и тирозин.
[0037] Термин «жирная кислота», используемый в настоящем документе, означает омега-3 жирную кислоту, жирные кислоты, которые метаболизируются in vivo до омега-3 жирных кислот, и липоевую кислоту. Неограничивающими примерами жирных кислот являются все-цис-7,10,13-гексадекатриеновая кислота, α-линоленовая кислота (ALA или все-цис-9,12,15-октадекатриеновая кислота), стеаридоновая кислота (STD или все-цис-6,9,12,15-октадекатетраеновая кислота), эйкозатриеновая кислота (ЕТЕ или все-цис-11,14,17-эйкозатриеновая кислота), эйкозатетраеновая кислота (ЕТА или все-цис-8,11,14,17-эйкозатетраеновая кислота), эйкозапентаеновая кислота (ЭПК или все-цис-5,8,11,14,17-эйкозапентаеновая кислота), докозапентаеновая кислота (DPA, клупанодоновая кислота или все-цис-7,10,13,16,19-докозапентаеновая кислота), докозагексаеновая кислота (ДГК или все-цис-4,7,10,13,16,19-докозагексаеновая кислота), тетракозапентаеновая кислота (все-цис-9,12,15,18,21-докозагексаеновая кислота), тетракозагексаеновая кислота (низиновая кислота или все-цис-6,9,12,15,18,21-тетракозеновая кислота) и стереоизомеры липоевой кислоты.
[0038] «Пациент» является млекопитающим, например, человеком, мышью, крысой, морской свинкой, собакой, котом, лошадью, коровой, свиньей или нечеловеческим приматом, таким как обезьяна, шимпанзе, павиан или макак-резус.
[0039] Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие эффективное количество жирнокислотного фумаратного производного и фармацевтически приемлемый носитель. Изобретение включает жирнокислотное фумаратное производное, представленное как фармацевтически приемлемый промедикамент, гидрат, соль, такую как фармацевтически приемлемая соль, энантиомеры, стереоизомеры или их смеси.
[0040] Репрезентативные «фармацевтически приемлемые соли» включают, например, водорастворимые и водонерастворимые соли, такие как ацетатныеные, амсонатные (4,4-диаминостильбен-2, 2-дисульфонат), бензолсульфонатные, бензоатные, бикарбонатные, бисульфатные, битартратные, боратные, бромидные, бутиратные, кальциевые, кальция эдетат, камзилатные, карбонатные, хлоридные, цитратные, клавулариатные, дигидрохлоридные, эдетатные, эдизилатные, эстолатные, эзилатные, фьюнаратные, глюцептатные, глюконатные, глутаматные, гликоллиларсанилатные, гексафторфосфатные, гексилрезорцинатные, гидрабаминные, гидробромидные, гидрохлоридные, гидроксинафтоатные, йодидные, изотионатные, лактатные, лактобионатные, лауратные, магниевые, малатные, малеатные, манделатные, мезилатные, метилбромидные, метилнитратные, метилсульфатные, мукатные, напсилатные, нитратные, N-мети л глюкам и н аммониевая соль, 3-гидрокси-2-нафтоатные, олеатные, оксалатные, пальмитатные, памоатные (1,1-метен-бис-2-гидрокси-3-нафтоат, эйнбонат), пантотенатные, фосфат/дифосфатные, пикратные, полигалактуронатные, пропионатные, п-толуолсульфонатные, салицилатные, стеаратные, субацетатные, сукцинатные, сульфатные, сульфосалицилатные, сураматные, таннатные, тартратные, токлатные, тозилатные, триэтйодидные, и валератные соли.
[0041] Термин «метаболическое расстройство», используемый в настоящем документе, касается расстройств, заболеваний и синдромов, включая дислипидемию, и термины метаболическое расстройство, метаболическое заболевание и метаболический синдром используются здесь взаимозаменяемо.
[0042] «Эффективное количество», при использовании в связи с жирнокислотным фумаратным производным, является количеством, эффективным для лечения или предупреждения метаболического расстройства.
[0043] Термин «носитель», используемый в настоящем описании, охватывает носители, формообразующие средства и разбавители, и означает материал, композицию или наполнитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, формообразующее средство, растворитель или материал для инкапсулирования, задействованные в перенесении или транспортировке фармацевтического агента от одного органа или части тела, к другому органу или другой части тела.
[0044] Термин «лечение», в отношении пациента, касается улучшения, по меньшей мере, одного симптома расстройства данного пациента. Лечение может быть исцеляющим, улучшающим, или, по меньшей мере, частично ослабляющим данное расстройство.
[0045] Термин «расстройство», используемый в настоящем описании, означает и применяется взаимозаменяемо с терминами заболевание, состояние или болезнь, если не указано иное.
[0046] Термин «вводить» или «введение», используемый в настоящем описании, касается либо прямого введения соединения или фармацевтически приемлемой соли данного соединения, или композиции пациенту, либо введения промедикаментного производного или аналога данного соединения, или фармацевтически приемлемой соли соединения, или композиции пациенту, которые могут образовывать эквивалентное количество активного соединения в организме пациента.
[0047] Термин «промедикамент», используемый в настоящем описании, означает соединение, которое может преобразовываться in vivo метаболическими средствами (например, путем гидролиза) в жирнокислотное фумаратное производное.
[0048] Здесь используются следующие аббревиатуры, которые имеют указанные определения: BSA - бычий сывороточный альбумин, ДЦК дициклогексилкарбодиимид, CDI - 1,1'-карбонилдиимидазол, DMEM модифицированная Дюльбеко (Dulbecco) среда Игл (Eagle), EDC - 1-этил-3-[3-диметиламинопропил]карбодиимид гидрохлорид, EtOAc - этилацетат, HATU - 2-(1Н-7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний гексафторофосфат метанаминий, RT-комнатная температура, ТФУК - трифтороуксусная кислота, и ч. - час.
СОЕДИНЕНИЯ
[0049] Настоящее изобретение представляет жирнокислотные фумаратные производные в соответствии с Формулами I, IA, IB, IС, и II, как изложено ниже.
[0050] Здесь описаны соединения Формулы I и Формулы II:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
3
4
5
6
1
2
'
W, W, a, b, с, d, m, m1, n, о, p, q, L, Z, r, s, t, v, R, R, R, R, R, R, R, W , W', a', c', b', d', n', 0', p', q', m1', L', и Z' являются такими, как определено выше для Формулы I и Формулы II,
при условии, что в данном соединении имеется, по меньшей мере, одна
, ,
или
;
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и r равна 2.
В некоторых вариантах, одна Z является
и r равна 3.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и r равна 7.
В других вариантах, одна Z является
,
и s равна 3.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и s равна 5.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и s равна 6.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и v равна 1.
В других вариантах, одна Z является
,
и v равна 2.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и v равна 6.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и s равна 3.
В некоторых вариантах, одна Z является
,
и s равна 5.
В других вариантах, одна Z является
,
и s равна 6.
В других вариантах, Z является
,
и t равна 1.
В некоторых вариантах, Z является
,
и t равна 1.
[0051] В другом аспекте описаны соединения Формулы IA:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
3
4
5
6
W, W, а, b, с, d, m, m1, n, о, p, q, L, R, R, R, R, R, R, R являются такими, как описано выше для Формулы IA.
[0052] В другом аспекте описаны соединения Формулы IB:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
3
4
5
W, W, a, b, с, d, m, m1, n, о, p, q, L, R, R, R, R; R, R) R6 являются такими, как описано выше для Формулы IB.
[0053] В другом аспекте описаны соединения Формулы IС:
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, промедикаменты, энантиомеры и стереоизомеры;
где
1
2
1
2
3
4
5
6
W, W, a, b, с, d, m, m1, n, о, p, q, L, R, R, R, R, R, R, и R являются такими, как описано выше для Формулы IС.
Следующие варианты иллюстрируют соединения Формул I, IA, IB, IС, и II.
3
3
В некоторых вариантах R является СН.
3
2
3
В некоторых вариантах R является -СНСН
3
В некоторых вариантах R является Н.
1
В некоторых вариантах W является NH.
2
В некоторых вариантах W является NH.
1
В некоторых вариантах W является О.
2
В некоторых вариантах W является О.
1
В некоторых вариантах W является нулевой.
2
В некоторых вариантах W является нулевой.
1
2
В некоторых вариантах W и W, каждая, является NH.
1
2
В некоторых вариантах W и W, каждая, является нулевой.
1
2
В некоторых вариантах W является О, и W является NH.
1
2
3
В некоторых вариантах W и W является NR, и R является СН.
В некоторых вариантах m равна 0.
В других вариантах m равна 1.
В других вариантах m равна 2.
В некоторых вариантах L является -S- или -S-S-.
В некоторых вариантах L является -О-.
В некоторых вариантах L является -С(О)-.
В некоторых вариантах L является гетероарилом.
В некоторых вариантах L является гетероциклом.
В некоторых вариантах L является
.
В некоторых вариантах L является
.
В некоторых вариантах L является
.
В некоторых вариантах L является
,  или
В некоторых вариантах L является
,  или .
В некоторых вариантах L является
,  или .
В некоторых вариантах L является
.
В некоторых вариантах L является
, , , , , или .
В некоторых вариантах L является
, ,  или .
В некоторых вариантах L является
или .
В некоторых вариантах L является
, , , , , , , ,
В других вариантах одна из n, о, р, и q равна 1.
В некоторых вариантах две из n, о, р, и q, каждые, равняются 1.
В других вариантах три из n, о, р, и q, каждые, равняются 1.
В некоторых вариантах, n, о, р, и q, каждая, равняется 1.
В некоторых вариантах две из n, о, р, и q, каждые, равняются 1, и две других, каждые, равняются 0.
В некоторых вариантах r равна 2, и s равна 6.
В некоторых вариантах r равняется 3, и s равна 5.
В некоторых вариантах t равна 1.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равняется 0, n и о, каждая, равна 1, и р и q, каждая, равна 0.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, и L является О.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, и L является -S-S-.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n и о, каждая, равна 0, р и q, каждая, равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, к является 0, n и о, каждая, равна 0, р и q, каждая, равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n и о, каждая, равна 1, р и q, каждая, равна 0, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, k равна 0, n равна 1, о, р и q, каждая, равна 0, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о и р, каждая, равна 0, и q равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, к равна 1, n, о и р, каждая, равна 0, и q равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n равна 1, и о, р и q, каждая, равна 0, и L является
.
В некоторых вариантах, Wi и W2, каждая, является NH, m равна 1, к равна 1, о, р и q, каждая, равна 0, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, и L является
.
В некоторых вариантах, W| и W2, каждая, является NH, m равна 1, п, о, р и q, каждая, равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 0, k равна 1, о и р, каждая, равна 1, и q равна 0.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 0, n, о, р и q, каждая, равна 1.
1
2
3
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 0, n и о, каждая, равна 1, р и q, каждая, равна 0, и каждая а является СН.
1
2
3
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 0, n и о, каждая, равна 1, р и q, каждая, равна 0, и каждая b является СН.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, R4 является Н, и L является
.
1
2
4
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, р и q, каждая, равна 1, и о равна 2, R является Н, и L является
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 1, и q равна 2, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n и р, каждая, равна 1, и о и q, каждая, равна 0, и L является -С(О)-.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n и р, каждая, равна 1, и о, и q, каждая, равна 0, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р, q, каждая, равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, h равна 1, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 1, и L является -S-.
1
2
3
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, одна d является -СН, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, W и W, каждая, является NH, m равна 2, n, о, р и q, каждая, равна 0, одна L является
, и
одна L является .
1
2
В некоторых вариантах, m равна 0, n, о, р и q, каждая, равна 0, и W и W взяты вместе с образованием необязательно замещенной пиперазиновой группы.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W и W, каждая, является нулевой, и L является
.
1
2
3
6
В некоторых вариантах, m равна 1, n и р, каждая, равна 1, о и q, каждая, равна 0, W и W, каждая, является NH, и L является С-Сциклоалкилом.
1
2
3
6
В некоторых вариантах, m равна 1, n равна 1, о, р и q, каждая, равна 0, W и W, каждая, является NH, и L является С-Сциклоалкилом.
1
2
3
6
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, W и W, каждая, является NH, и L является С-Сциклоалкилом.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n равна 1, о, р и q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р и q, каждая, равна 0, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n равна 1, о, р и q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равняется 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах,, m равна 1, n равна 1, о, р и q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, q, каждая, равна 0, W и W являются нулевыми, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, q, каждая, равна 0, W и W являются нулевыми, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, q, каждая, равна 0, W является NH, W является нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, q, каждая, равна 0, W является нулевой, W является NH, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, W и W, каждая, являются NH, нулевой, и L является
.
1
2
В некоторых вариантах, m равна 1, n, о, р, каждая, равна 0, q равна 1, W и W, каждая, является NH, нулевой, и L является гетероарилом.
В некоторых из предшествующих вариантов, r равна 2, s равна 6, и t равна 1.
В некоторых из предшествующих вариантов, r равна 3, s равна 5, и t равна 1.
В некоторых из предшествующих вариантов, Z является
и
t равна 1.
[0054] В соединениях Формул I, IA, IB, IС и II, любой один или несколько Н могут быть замещены дейтерием.
[0055] В других иллюстративных вариантах, соединения Формул I, IA, IB, 1С и II являются такими как изложено ниже:
(Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-1);
(Е)-метил 4-(2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноат (1-2);
(Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-3);
(Е)-метил 4-(2-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)(метил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-4);
(Е)-метил 4-(2-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)дисульфанил)этиламино)-4-оксобут-2-еноат(I-5);
(S)-метил 6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (I-6);
(S)-6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-7);
;
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (I-8)
(S)-метил 2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат(I-9);
(S)-2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-10);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (I-11);
(Е)-метил 4-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-1-метокси-1-оксопропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноат (I-12);
3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пропановая кислота (I-13);
(Е)-метил 4-(1-(1,3-дигидроксипропан-2-илокси)-3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-1-оксопропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноат (I-14);
(Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-3-метокси-3-оксопропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-15);
2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-3-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пропановая кислота (I-16);
(Е)-метил 4-(3-(1,3-дигидроксипропан-2-илокси)-2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-3-оксопропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-17);
2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)-4-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)бутановая кислота (I-18);
(Е)-метил 4-(3-((1,3-дигидроксипропан-2-илокси)карбонил)-5-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидопентиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-19);
(Е)-метил 4-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидопропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-20);
(Е)-метил 4-(4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидобутиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-21);
(Е)-метил 4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-метилпропан-2-иламино-4-оксобут-2-еноат (I-22);
(Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-24);
(Е)-метил 4-(3-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)пропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-25);
(Е)-метил 4-(2-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидопропиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-26);
(Е)-метил 4-(2-((3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидопропил)(этил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-27);
(Е)-метил 4-(2-(N-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидопропил)ацетамидо)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-28);
(Е)-метил 4-(2-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)(2-морфолиноэтил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-29);
(Е)-метил 4-(2-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)(3-(пиперазин-1-ил)пропил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-30);
(Е)-метил 4-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-оксопропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-31);
(Е)-метил 4-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-морфолинопропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-32);
(Е)-метил 4-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-(пиперазин-1-ил)пропиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-33);
(Е)-метил 4-(5-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-3-гидроксипентиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-34);
(Е)-метил 4-(5-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-3-морфолинопентиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-35);
(Е)-метил 4-(2-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтокси)этокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-36);
(Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтилтио)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-37);
(Е)-метил 4-((R)-3-(1-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)-2,5-диоксопирролидин-3-илтио)-1-метокси-1-оксопропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноат (I-39);
(Е)-метил 4-(4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилпиперазин-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-40);
(Е)-метил 4-((2R,6S)-4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-41);
(Е)-метил 4-((1S,4S)-5-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноил)-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-42);
(Е)-метил 4-((2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)циклопропил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-43);
(Е)-метил 4-((4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоциклогексил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-44);
(Е)-метил 4-(4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)циклогексиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-45);
(Е)-метил 4-(3-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаноил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-6-иламино)-4-оксобут-2-еноат (I-46);
(Е)-метил 4-(6-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-4-оксобут-2-еноат(I-47);
(Е)-метил 4-((S)-1-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноил)пирролидин-3-иламино)-4-оксобут-2-еноат (I-48);
(Е)-метил 4-((S)-3-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)пирролидин-1-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-49);
(Е)-метил 4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилпирролидин-2-ил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-50);
(Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)пирролидин-1-ил)-4-оксобут-2-еноат(I-51);
(Е)-метил 4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилпиперидин 4-иламино)-4-оксобут-2-еноат (I-52);
(Е)-метил 4-(4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидопиперидин-1-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-53);
(Е)-метил 4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилпиперидин-4-ил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-54);
(Е)-метил 4-(4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)пиперидин-1-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-55);
(Е)-метил 4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилпиперидин-2-ил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-56);
(Е)-метил 4-(2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)пиперидин-1-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-57);
(Е)-метил 4-((4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилморфолин-3-ил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-58);
(Е)-метил 4-(3-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)морфолино)-4-оксобут-2-еноат (I-59);
(Е)-метил 4-(5-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноил-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-60);
(Е)-метил 4-(1-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноил-гексагидропирроло[3,4-b]пиррол-5(1Н)-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-61);
(Е)-метил 4-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилоктагидропирроло[1,2-а]пиразин-7-ил)метиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-62);
(Е)-метил 4-(7-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноамидометил)-гексагидропирроло[1,2-а]пиразин-2(1Н)-ил)-4-оксобут-2-еноат (I-63);
(Е)-метил 4-(4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)фениламино)-4-оксобут-2-еноат (I-64);
(Е)-метил 4-(6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидометил)пиридин-2-иламино)-4-оксобут-2-еноат(I-65);
(Е)-этил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-66);
(Е)-этил 4-(2-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)(метил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-67);
(S)-6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-этокси-4 оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-69);
(S)-2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-6-((Е)-4-этокси-4 оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-70);
(S)-6-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-71);
(S)-2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-72);
(Е)-метил 4-(2-(2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-73);
(Е)-метил 4-(2-((2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтил)(метил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-74);
(Е)-этил 4-(2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-75);
(S)-2-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-6-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)гексановая кислота (I-76);
(S)-6-((Е)-4-этокси-4-окосбут-2-енамидо)-2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)гексановая кислота (I-77);
(Е)-этил 4-(2-((2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтил)(метил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-78);
(Е)-этил 4-(2-(2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-79);
(S)-5-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси 4-оксобут-2-енамидо)пентановая кислота (I-80);
(S)-2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-5-((Е)-4-метокси 4-оксобут-2-енамидо)пентановая кислота (I-81);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 5-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пентаноат(I-82);
(S)-5-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пентановая кислота (I-84);
(S)-2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-5-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пентановая кислота (I-85);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 5-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пентаноат (I-86);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-5-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)пентаноат (I-87);
(S)-5-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)пентановая кислота (I-88);
(S)-2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-5-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)пентановая кислота (I-89);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 5-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)пентаноат (I-90);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-5 -((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)пентаноат (I-91);
(S)-2-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-5-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)пентановая кислота (I-92);
(S)-5-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)пентановая кислота (I-93);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-5-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)пентаноат (I-94);
(8)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 5-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)пентаноат (I-95);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 6-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат(I-96);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат(I-97);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-6-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)гексаноат (I-99);
(S)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-6-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (I-100);
(8)-1,3-дигидроксипропан-2-ил 6-((Е)-4-этокси-4-оксобут-2-енамидо)-2-((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)гексаноат (I-101);
(E)-4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-окосбут-2-еновая кислота (I-102);
2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил метил фумарат (I-103);
(Е)-метил 4-(метил(2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-N-метилдокоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)этил)амино)-4-оксобут-2-еноат (I-104);
(R,Е)-метил 4-(2-(5-(1,2-дитиолан-3-ил)пентанамидо)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-105);
6-(5-((R)-1,2-дитиолан-3-ил)пентанамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-106);
2-(5-((R)-1,2-дитиолан-3-ил)пентанамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановая кислота (I-107);
(R,Е)-метил 4-(2-(2-(5-(1,2-дитиолан-3-ил)пентанамидо)этиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-108);
(R,E)-метил 4-(2-((2-(5-(1,2-дитиолан-3-ил)пентанамидо)этил)(метил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (I-109);
1
4
N,N-бис(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)фумарамид (II-1); и
1
N-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)-N4-(2-(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидоэтил)фумарамид (II-2).
Спопобы использования жирнокислотных фумаратных производных
[0056] В данном изобретении также представлен способ ингибирования, предупреждения или лечения воспаления или воспалительного заболевания у пациента. Данное воспаление может ассоциироваться с воспалительным заболеванием или заболеванием, где воспаление вносит вклад в данную болезнь. Воспалительное заболевание может возникать там, где имеет место воспаление ткани тела. Это включает локальные воспалительные реакции и системное воспаление. Примеры таких заболеваний включают, но не ограничиваясь этим: отторжение трансплантата; реоксигенационную травму, обусловленную трансплантацией органа (смотри работу Grupp et al., J. Mol. Cell Cardiol. 31: 297-303 (1999)), включая, но не ограничиваясь этим, трансплантацию следующих органов: сердца, легких, печени и почки; хронические воспалительные заболевания суставов, включая артрит, ревматоидный артрит, остеоартрит и костные заболевания, сязанные с повышенной резорбцией; воспалительные заболевания кишечника, такие как илеит, язвенный колит, синдром Барретта, и болезнь Крона; воспалительные заболевания легких, такие как астма, респираторный дистресс-синдром взрослых, хроническое обструктивное заболевание дыхательных путей, и муковисцидоз; воспалительные заболевания глаз, включая дистрофию роговицы, трахому, онхоцеркоз, увеит, симпатический офтальмит и эндофтальмит; хронические воспалительные заболевания десен, включая гингивит и периодонтит; ХЗП; IgA нефропатию; воспалительные заболевания почек, включая уремические осложнения, гломерулонефрит и нефроз; воспалительные заболевания кожи, включая склеродерматит, псориаз и экзему; воспалительные заболевания центральной нервной системы, включая хронические демиелинизирующие болезни нервной системы, рассеянный склероз, СПИД-связанную нейродегенерацию и болезнь Альцгеймера, инфекционный менингит, энцефаломиелит, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, боковой амиотрофический склероз и вирусный или аутоиммунный энцефалит. Метаболические заболевания, такие как сахарный диабет типа И; предупреждение диабета типа I; дислипидемия; гипертриглицеридемия; диабетические осложнения, включая, но не ограничиваясь этим, глаукому, ретинопатию, отек макулы, нефропатию, такую как микроальбуминурия и прогрессирующая диабетическая нефропатия, полиневропатию, диабетическую невропатию, атеросклеротическое заболевание коронарной артерии, болезнь периферических артерий, некетонную гипергликемическую гиперосмолярную кому, мононевропатии, автономную невропатию, проблемы с суставами, и осложнения кожи и слизистых оболочек, такие как инфекция, "расколотая голень", кандидоз или липоидный некроз кожи; иммунный-комплексный васкулит, системная красная волчанка; воспалительные заболевания сердца, такие как кардиомиопатия, ишемическая болезнь сердца, гиперхолестеринемия и атеросклероз; также как и различные другие болезни, которые могут иметь значительные воспалительные компоненты, включая преэклампсию; хроническую печеночную недостаточность, травмы головного и спинного мозга, и рак. Воспалительное заболевание может также быть системным воспалением организма, иллюстрируемым грамположительным или грамотрицательным шоком, геморрагическим или анафилактическим шоком, или шоком, индуцированным раковой химиотерапией как реакция на провоспалительные цитокины, например, шок, связанный с провоспалительными цитокинами. Такой шок может быть индуцирован, например, химиотерапевтическим агентом, который используется как раковая терапия. Другие расстройства включают депрессию, ожирение, аллергические заболевания, острые сердечнососудистые приступы, аритмию, предупреждение внезапной смерти, гипотрофию мышц, такую как мышечная дистрофия Дюшенна, воспалительные миопатии, такие как дерматомиозит, инклюзионный телесный миозит и полимиозит, и раковая кахексия. Также с помощью жирнокислотного фумаратного производного может лечиться воспаление, являющееся результатом хирургического вмешательства и травмы.
[0057] Соединения, описанные здесь, также полезны в лечении различных видов рака, такого как карцинома, саркома, лимфома, лейкоз, меланома, мезотелиома, множественная миелома, семинома, и рак мочевого пузыря, крови, кости, мозга, молочной железы, центральной нервной системы, ободочной кишки, эндометрия, пищевода, мочеполового тракта, головы, гортани, печени, легких, шеи, яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, яичек, селезенки, тонкой кишки, толстой кишки или желудка.
[0058] В некоторых вариантах пациенту назначается эффективное количество жирнокислотного фумаратного производного.
[0059] Эффективные дозовые количества соединений настоящего изобретения, при их использовании для указанных эффектов, варьируют от приблизительно 20 мг до приблизительно 5000 мг данного жирнокислотного фумаратного производного в сутки. Композиции для использования in vivo или in vitro могут содержать приблизительно 20, 50, 75, 100, 150, 250, 500, 750, 1000, 1250, 2500, 3500, или 5000 мг жирнокислотного фумаратного производного. В одном варианте, даные композиции находятся в форме таблеток, которые можно считать. Эффективные уровни жирнокислотного фумаратного производного в плазме могут варьировать от приблизительно 0,002 мг до приблизительно 100 мг на кг веса тела в сутки. Подходящие дозы жирнокислотных фумаратных производных могут быть определены, как изложено в работе Goodman, L. S.; Gilman, A. The Pharmacological Basis of Therapeutics, 5th ed.; MacMillan: New York, 1975, pp.201-226.
[0060] Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, полезные для лечения или предупреждения метаболического расстройства, или для ингибирования метаболического расстройства, или более одной из этих функций. Композиции могут подходить для внутреннего использования и включают эффективное количество жирнокислотного фумаратного производного и фармацевтически приемлемого носителя. Данные жирнокислотные фумаратные производные особенно полезны тем, что они демонстрируют очень низкую периферическую токсичность или отсутствие периферической токсичности.
[0061] Использование жирнокислотных фумаратных производных может осуществляться посредством любого способа введения терапевтических агентов. Эти способы включают системное или локальное использование, такое как пероральная, назальная, парентеральная, трансдермальная, подкожная, вагинальная, буккальная, ректальная или местная схемы введения.
[0062] В зависимости от предполагаемой схемы введения, данные композиции могут быть в твердой, полужидкой или жидкой лекарственной форме, такой, например, как инъекции, таблетки, суппозитории, пилюли, капсулы с заданным временем выделения, эликсиры, настойки, эмульсии, сиропы, порошки, жидкости, суспензии, или подобное, иногда в виде стандартных форм, и согласуются с обычной фармацевтической практикой. Подобно этому, они могут также использоваться внутривенно (как болюс, так и инфузия), интраперитонеально, подкожно или внутримышечно, все используемые формы хорошо известны специалистам в области фармации.
[0063] Иллюстративными фармацевтическими композициями являются таблетки и желатиновые капсулы, содержащие жирнокислотное фумаратное производное и фармацевтически приемлемый носитель, такой как а) разбавитель, например, очищенная вода, триглицеридные масла, такие как гидрированное или частично гидрированное растительное масло, или их смеси, кукурузное масло, оливковое масло, подсолнечное масло, сафлоровое масло, рыбьи жиры, такие как ЭПК или ДГК, или их эфиры или триглицериды, или их смеси, омега-3 жирные кислоты или их производные, лактоза, декстроза, сахароза, маннит, сорбит, целлюлоза, сода, сахарин, глюкоза и/или глицин; b) смазочное вещество, например, кремнезем, тальк, стеариновая кислота, ее магниевая или кальциевая соль, олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и/или полиэтиленгликоль; такжед ля таблеток; с) связывающее вещество, например, силикат магния-алюминия, крахмальная паста, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза, карбонат магния, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, кукурузные подсластители, природные и синтетические смолы, такие как гуммиарабик, трагакант или альгинат натрия, воски и/или необязательно поливинилпирролидон; d) дезинтеграторы, например, крахмалы, агар, метилцеллюлоза, бентонит, ксантановая камедь, альгиновая кислота или ее натриевая соль, или шипучие смеси; е) абсорбент, краситель, ароматизатор и подсластитель; f) эмульгатор или диспергатор, такой как Tween 80, Labrasol, НРМС, DOSS, капроил 909, лабрафак, лабрафил, пекеол, транскутол, капмул МСМ, капмул PG-12, каптекс 355, гелуцир, витамин Е TGPS или другой приемлемый эмульгатор; и/или g) агент, усиливающий абсорбцию данного соединения, такой как циклодекстрин, гидроксипропил-циклодекстрин, PEG400, PEG200.
[0064] Жидкие, в частности, для инъекций, композиции могут, например, быть приготовлены путем растворения, диспергирования и т.д. Например, жирнокислотное фумаратное производное растворено или смешано с фармацевтически приемлемым растворителем, таким как, например, вода, солевой раствор, водная декстроза, глицерин, этанол, и такое подобное, образуя, таким образом, изотонический раствор или суспензию для инъекций. Для солюбилизации жирнокислотных фумаратных производных могут использоваться протеины, такие как альбумин, хиломикронные частицы или сывороточные протеины.
[0065] Данные жирнокислотные фумаратные производные могут также быть представлены в виде суппозитория, который может быть приготовлен из жирных эмульсий или суспензий; с использованием полиалкиленгликолей, таких как пропиленгликоль, в качестве носителя.
[0066] Жирнокислотные фумаратные производные могут также использоваться в форме липосомных систем доставки, таких как малые однослойные везикулы, большие однослойные везикулы и многослойные везикулы. Липосомы могут образовываться из различных фосфолипидов, содержащих холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины. В некоторых вариантах, пленка липидных компонентов гидратируется водным раствором лекарства с образованием липидного слоя, инкапсулирующего данное лекарство, как описано в патенте США №5262564.
[0067] Жирнокислотные фумаратные производные могут также доставляться путем использования моноклональных антител как индивидуальных носителей, к которым присоединены жирнокислотные фумаратные производные. Жирнокислотные фумаратные производные могут также сочетаться с растворимыми полимерами как целевыми носителями лекарства. Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, пирановый сополимер, полигидроксипропилметакриламид-фенол, полигидроксиэтиласпанамидфенол, или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоильными остатками. Кроме того, жирнокислотные фумаратные производные могут сочетаться с классом биоразрушающихся полимеров, полезных для достижения контролированного выделения лекарства, например, таких как полимолочная кислота, полиэпсилон капролактон, полигидрокси масляная кислота, полиортоэфиры, полиацетаты, полидигидропираны, полицианоакрилаты и структурированные или амфифатические блок-сополимеры гидрогелей. В одном варианте, жирнокислотные фумаратные производные ковалентно не связаны с полимером, например, полимер полимерной оксикислоты, или полиакрилат.
[0068] Парентеральная схема введения с помощью инъекций обычно используется для подкожных, внутримышечных или внутривенных инъекций и инфузий. Препараты для инъекций могут быть получены в удобных формах, либо как жидкие растворы, либо суспензии, или как твердые формы, подходящие для растворения в жидкости перед инъекцией.
[0069] Композиции могут быть приготовлены в соответствии с обычными методами смешивания, гранулирования или нанесения покрытий, соответственно, и настоящие фармацевтические композиции могут содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 80%, от приблизительно 5% до приблизительно 60%, или от приблизительно 1% до приблизительно 20% жирнокислотного фумаратного производного по весу или объему.
[0070] Схема приема лекарственного средства с использованием жирнокислотного фумаратного производного выбирается в соответствии с множеством факторов, включая тип, вид, возраст, вес, пол и медицинское состояние данного пациента; тяжесть состояния, которое подлежит лечению; схему приема; почечную или печеночную функции пациента; и конкретного применяемого жирнокислотного фумаратного производного. Обычный врач или ветеринар может легко определить и назначить эффективное количество данного лекарства, необходимого для предупреждения, противодействия или остановки прогрессирования данного состояния.
[0071] Жирнокислотные фумаратные производные могут использоваться в виде одной суточной дозы, или полная суточная доза может использоваться в виде разделенных доз два, три или четыре раза в сутки. Кроме того, жирнокислотные фумаратные производные могут применяться в интраназальной форме путем местного использования подходящих интраназальных носителей, или посредством трансдермальных схем, с использованием трансдермальных кожных пластырей, которые хорошо известны обычным специалистам в этой области. При использовании в форме трансдермальной системы доставки дозировка может быть скорее непрерывной, чем прерывистой. Другие иллюстративные препараты местного действия включают кремы, мази, лосьоны, аэрозольные спреи и гели, где концентрация данного жирнокислотного фумаратного производного варьирует от приблизительно 0,1% до приблизительно 15%, вес/вес или вес/объем.
Способы получения жирнокислотных фумаратных производных
[0072] Примеры синтетических путей, полезных для получения жирнокислотных фумаратных производных Формул I, IA, IB, IС и II, изложены в Примерах ниже и обобщены на Схемах 1-11.
Схема 1
2
2
[0073] Моно-ВОС защищенный амин Формулы В может быть получен из промышленных источников или приготовлен в соответствии с процедурами, очерченными в работе Krapcho et al, Synthetic Communications 1990, 20, p.2559-2564. Имеющееся в продаже соединение А может быть амидировано амином В с использованием реагента сочетания, такого как ДЦК, CDI, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с последующим депротектированием ВОС группы кислотами, такими как трифтороуксусная (ТФУК) или НСl, в растворителе, таком как СНСl или диоксан, с получением соединения сочетания С.Активация соединения С агентом сочетания, таким как HATU, в присутствии амина, такого как ДИЭА, с последующим добавлением жирной кислоты Формулы D дает соединения Формулы Е. Специалистам в данной области очевидно, что жирная кислота D на этой и последующей схемах может быть замещена липоевой кислотой. Схема 2
2
2
[0074] Ацилированный амин Формулы F может быть получен с использованием процедур, очерченных в работе Andruszkiewicz et al, Synthetic Communications, 2008, 38, p.905-913. Соединение А может быть амидировано амином F с использованием агента сочетания, такого как ДЦК, CDI, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с последующим депротектированием ВОС группы кислотами, такими как ТФУК или НСl, в растворителе, таком как СНСl или диоксан, с получением соединения сочетания G. Активация соединения G агентом сочетания, таким как HATU, в присутствии амина, такого как ДИЭА, с последующим добавлением жирной кислоты Формулы D дает соединения Формулы Н.
2
2
[0075] Соединение А может быть амидировано соответствующим амином I (где i=0, 1, 2 или 3) с использованием агента сочетания, такого как ДДК, CDI, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с последующим депротектированием ВОС группы кислотами, такими как ТФУК или НСl, в растворителе, таком как CHCl или диоксан, с получением соединения сочетания J. Активация соединения J агентом сочетания, таким как HATU, в присутствии амина, такого как ДИЭА, с последующим добавлением жирной кислоты Формулы D дает соединения Формулы К. Гидролиз данного эфира в щелочных условиях, таких как NaOH или LiOH, дает соответствующую кислоту, которая может быть соединена с глицидилом с получением соединений Формулы L.
Схема 4
2
2
[0076] Амин М может быть получен в соответствии с процедурами, очерченными в работе Dahan et al, J. Org. Chem. 2007, 72, p.2289-2296. Соединение А может быть соединено с амином М с использованием агента сочетания, такого как ДЦК, CDl, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с последующим депротектированием ВОС группы кислотами, такими как ТФУК или НСl, в растворителе, таком как СНСl или диоксан, с получением соединения сочетания N. Активация соединения N агентом сочетания, тким как HATU, в присутствии амина, такого как ДИЭА, с последующим добавлением жирной кислоты Формулы D дает соединения Формулы О.
Схема 5
2
2
2
2
[0077] Соединение А может быть амидировано имеющимся в продаже амином Р с использованием агента сочетания, такого как ДЦК, CDI, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с получением соединения Q. ВОС группа в соединении Q может быть удалена кислотами, такими как ТФУК или НСl, в растворителе, таком как СНСl или диоксан, и результирующий амин может быть подвергнут сочетанию с жирной кислотой Формулы D с использованием агента сочетания, такого как HATU, в присутствии амина, такого как ДИЭА, с получением соединений Формулы R. Для специалистов в данной области, серная группа в Формуле Q может быть окислена до соответствующего сульфоксида или сульфона с использованием окислителя, такого как НO или оксон.
Схема 6
2
2
[0078] Амин Т может быть приготовлен из имеющегося в продаже диамина в соответствии с процедурами, описанными в работе Dahan et al, J. Org. Chem. 2007, 72, p.2289-2296. Соединение А может быть амидировано амином Т с использованием агента сочетания, такого как ДЦК, CDl, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, ДМАП, с получением соединения U. ВОС группа соединения U может быть удалена кислотами, такими как ТФУК или НСl, в растворителе, таком как CHCl или диоксан, и результирующий амин может быть подвергнут сочетанию с жирной кислотой Формулы D с использованием HATU в присутствии амина, такого как ДИЭА, с получением соединений Формулы V. Для специалистов в данной области, гидроксильная группа в соединении U может быть затем ацилирована или превращена в аминогруппу с использованием стандартной химии мезилирования с последующим замещением азидом натрия и гидрированием на катализаторе, таком как палладий на углероде. Данный амин может быть затем ацилирован или алкилирован с последующим удалением ВОС группы. Результирующий амин может быть подвергнут сочетанию с жирной кислотой Формулы D с получением соединений Формулы W.
Cхема 7
2
2
[0079] Соединение А может быть амидировано имеющимся в продаже амином X с использованием агента сочетания, такого как ДЦК, CDI, EDC, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с получением соединения Y. ВОС группа в соединении Y может быть удалена кислотами, такими как ТФУК или НСl, в растворителе, таком как CHCl или диоксан. Результирующий амин может быть подвергнут сочетанию с жирной кислотой Формулы D с использованием агента сочетания, такого как HATU, в присутствии амина, такого как ДИЭА, с получением соединений Формулы Z.
Схема 8
[0080] Соединение А может быть амидировано имеющимся в продаже метиловым эфиром цистеина с использованием агента сочетания, такого как ДЦК, CDI, EDC, или, необязательно, третичного аминного основания и/или катализатора, например, ДМАП, с получением соединения АА. Имеющееся в продаже малеимидное производное ВВ может быть подвергнуто сочетанию с жирной кислотой Формулы D с использованием агента сочетания, такого как HATU или EDCI, с получением соединений Формулы СС. Соединение АА может быть подвергнуто сочетанию с соединениями Формулы СС в растворителе, таком как ацетонитрил, с получением соединений Формулы DD.
Схема 9
[0081] Имеющиеся в продаже аминокислотные эфиры ЕЕ могут быть подвергнуты сочетанию с жирной кислотой Формулы D с использованием агента сочетания, такого как EDCI или HATU, с последующим щелочным гидролизом данного метилового эфира с получением соединений Формулы FF. Соединения Формулы FF могут быть подвергнуты сочетанию с имеющимися в продаже ВОС-аминокислотными производными GG с использованием агента сочетания, такого как EDCI или HATU. ВОС группа может быть удалена путем обработки кислотами, такими как ТФУК или НСl, с получением соединений Формулы НН, которые затем могут сочетаться с соединением А с получением соединений Формулы II.
Схема 10
[0082] Соединение А может сочетаться с амином Формулы JJ с использованием либо EDCl, либо HATU с получением соединений Формулы КК. ВОС группа может быть удалена путем обработки кислотами, такими как ТФУК или НСl, и результирующий амин может быть подвергнут сочетанию с жирной кислотой Формулы D с получением соединения LL. Метиловая группа эфира может быть гидролизована путем обработки основанием, таким как LiOH или NaOH, и результирующая кислота может сочетаться с амином JJ с получением соединения ММ. ВОС группа может быть удалена путем обработки кислотами, такими как ТФУК или НСl, и результирующий амин может сочетаться с жирной кислотой Формулы D с использованием либо EDCl, либо HATU с получением соединения NN.
Схема 11
[0083] Соединение А может сочетаться с ВОС-защищенным диамином общей Формулы DA с получением ВОС-защищенного амидного производного. После обработки НСl в диоксане результирующий амин ОО может сочетаться с жирной кислотой Формулы D для получения соединений Формулы PP. В продаже имеется множество разнообразных ВОС-защищенных диаминов. Диамины DA1, DA2, DA3, и DA4
, , , и
и их производные могут быть получены в соответствии с процедурами, рассмотренными в соответствующих работах: диамин DAI, Stocks et al, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2010, p.7458; диамин DA2, Fritch et al, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2010, p.6375; диамин DA3 и DA4, Moffat et al, J. Med. Chem. 2010, 53, p.8663-8678), которые включены здесь путем ссылки во всей полноте. Подробные методики для получения различных моно-защищенных диаминов можно также найти в следующих ссылках: WO 2004092172, WO 2004092171, и WO 2004092173, которые включены здесь путем отсылки во всей полноте.
[0084] Данная заявка дополнительно иллюстрируется следующими примерами, которые не следует рассматривать как ограничивающие эту заявку по объему или сути описанными здесь процедурами. Следует понимать, что данные примеры представлены для иллюстрации некоторых вариантов и что они не предполагают каких-либо ограничений в отношении объема этой заявки. Кроме того, следует понимать возможность обращения к различным другим ее вариантам, модификациям и эквивалентам, которое может быть сделано специалистами в данной области без отхода от сути настойщей заявки и/или объема прилагаемой формулы изобретения.
Пример 1
[0085] Влияние соединений настоящего изобретения на NFkB уровни в RAW 264.7 макрофагах
[0086] Клетки RAW 264.7, стабильно экспрессирующие 3х NFkB стимулированный ответным элементом люциферазный репортер, засевались в 96-луночные планшеты в бессывороточной среде (Optimem) за 18 часов до применения соединения. Соединения данного изобретения готовили, получив сначала 100 мМ маточные растворы в ЕЮН. Затем маточные растворы разбавляли 1:100 в FBS с низким содержанием LPS (Gemini BenchMark 100-106), энергично перемешивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем готовили 1:2 серийные разведения в FBS, дополненном 1% EtOH, энергично перемешивали и снова инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут перед добавлением к RAW 264.7 репортерным клеткам (конечные концентрации: 10% FBS, самое высокое разведение соединения 100 мкМ, 0,1% EtOH) в течение 2-часовой предварительной обработки перед стимулированием LPS. Затем клетки стимулировали 200 нг/мл LPS или контрольным носителем в течение 3 часов в присутствии соединений данного изобретения. Набор из шести растворов с носителем оставался непростимулированным LPS для определения минимального уровня в данном анализе. Краситель для определения жизнеспособности аламар голубой (AlamarBlue) (Invitrogen) добавляли к клеткам одновременно с доставкой LPS (конечная концентрация AlamarBlue 10%). После 3-часового инкубационного периода с LPS, жизнеспособность клеток измеряли путем считывания флуоресценции (возбуждение 550 нм, эмиссия 595 нм) с помощью планшетного ридера типа Perkin Elmer Victor V. Затем клеточную среду аспирировали из каждой ячейки. Затем сигнал люциферазы формировался путем добавления реактива Britelite Plus (Perkin Elmer). Активность люциферазы измеряли с помощью планшетного ридера типа Perkin Elmer Victor V. NF-кВ активность выражали в виде процента от контрольных ячеек с носителем (стимулированных LPS). Для определения значений 1С50 соединения тестировались при 6 дозовых точечных троекратных титрованиях.
<mrow><munder accentunder="true"><mrow><mo><</mo><mtext> </mtext><mtext> </mtext></mrow><mo stretchy="true">_</mo></munder><mn>200</mn><mtext> </mtext><mi>м</mi><mi>к</mi><mi>М</mi></mrow>
[0087] В Таблице 1 приведена сводка значений IC50 для ряда жирнокислотных фумаратных конъюгатов в этом NF-кВ люциферазном репортерном анализе. В данной таблице, MMF=монометил фумарат. А (-) указывает, что данное соединение не проявляет ингибиторной активности
. А (+) указывает, что данное соединение проявляет ингибиторную активность между >50 мкМ и ≤200 мкМ. А (++) указывает, что данное соединение проявляет ингибиторную активность при ≤50 мкМ.
Таблица 1
Соединение
NF-kB ингибиторная активность
MMF
-
MMF+ДГК
-
I-1
++
I-2
++
I-3
++
I-4
++
I-5
+
I-6
++
I-22
++
I-39
+
I-40
++
I-41
+
I-66
+
I-67
++
I-72
+
I-102
-
I-103
+
I-104
-
Пример 2
[0088] Влияние жирнокислотных фумаратных производных на IL-1β и TNF-α
[0089] RAW264.7 макрофаги засевались при плотности 100000 клеток/лунку в 96-луночном планшете в DMEM, дополненном 10% FBS и Penn/strep. Через 16 часов среду аспирировали и заменяли бессывороточным DMEM при 90 мкл/лунку. Жирнокислотный фумаратный конъюгат, ДГК и монометил-фумарат (MMF) доводили в 100% ЕЮН до концентрации 100 мМ и затем разбавляли 1:100 в 100% FBS для получения маточного раствора, содержащего 1 мМ соединения и 1% ЕЮН. Затем эти маточные растворы разбавляли 1:10 в FBS, дополненном 1% ЕЮН, с получением 100 мкМ жирнокислотного фумаратного конъюгата и 100 мкМ каждого из ДГК и MMF. Затем 10 мкл добавляли к RAW246.7 клеткам с получением конечных концентраций 10 мкМ жирнокислотного фумаратного конъюгата или 10 мкМ каждого из ДГК и MMF, параллельно только с контрольным носителем. Данные соединения предварительно инкубировали в течение 2 часов перед стимулированием 100 нг/мл LPS (в каждую ячейку добавляли по 10 мкл 1 мкг/мл LPS). После 3-часового LPS стимулирования клетки промывали один раз в 1x PBS, аспирировали до сухого состояния и быстро замораживали в жидком азоте. Затем выделяли РНК и превращали в кДНК с использованием набора Cells to cDNA (Ambion) в соответствии с протоколом производителя. Затем измеряли IL-1β и TNF-α транскрипционные уровни с использованием Taqman праймер/зондовых наборов для анализа (Applied Biosystems), нормализированных по GAPDH с использованием дельта Ct способа, и данные выражали относительно контрольных образцов только с носителем. Макрофаги, обработанные соединением 1-1, проявляли большее снижение IL-1β и TNF-α генной экспрессии, чем клетки, обработанные комбинацией монометил фумарата (MMF) и ДГК (Фигура 1). Статистический анализ проводили с использованием ANOVA с классификацией по одному признаку, ** р<0,05, ° р<0,005.
Пример 3
[0090] Проба на выделение TNFα в RAW 264.7 макрофагах
[0091] Целью этой пробы было определение способности малых молекул ингибировать секрецию TNFa в выращенных макрофагах, стимулированных липополисахаридом (LPS). Обработка макрофагов LPS активирует воспалительные цитокиновые пути, главным образом, через TLR4-NFκB сигнальную ось. Соединения данного изобретения ингибируют транскрипционную активацию NFκB и, таким образом, снижают продуцирование и выделение TNFα. Дексаметазон, сильный агонист глюкокортикоидного рецептора, используется как позитивный контроль ингибирования TNFa выделения.
2
2
[0092] Сутки 1: Засевают RAW 264.7 макрофаги в 96-луночных культуральных планшетах. Удаляют культуральную среду от RAW 264.7 клеток, выращиваемых в 75 мм тканевой культуральной колбе (клетки должны иметь конфлюэнс -70%) и добавляют 10 мл подогретой питательной среды полного состава (DMEM+10%FBS+1X pen/step). Клетки соскабливают в суспензию с использованием стерильного планшетного скребка и гомогенизируют путем пипетирования с помощью 10 мл серологической пипетки. Концентрацию клеток определяют с использованием клинического гематоцитометра. Затем клетки разбавляют до 150000 клеток на мл в ростовой среде. Разбавленные клетки затем переносят в стерильный реакционный сосуд, и по 100 мкл клеточной суспензии пипетируют в каждую ячейку 96-луночного культурального планшета с использованием многоканальной пипетки (15000 клеток/лунку). Затем планшеты инкубируют при 37°С при нормальных условиях для выращивания тканевой культуры (37°С, увлажненная СО камера).
[0093] Сутки 2: Готовят планшет для тестируемого соединения. Тестируемые соединения готовят в ростовой среде. Соединения доставляют в среду из 1000Х маточных растворов в 100% ДМСО (например, для 10 мкМ конечной концентрации тестируемого соединения добавляют 2 мкл 10 мМ тестируемого соединения к 2 мл среды). По меньшей мере, 150 мкл IX соединения в среде вводят в 96-луночный планшет для образцов. Для исключения краевых эффектов периметрические ячейки 96-луночного планшета не используются. Двенадцать лунок для образцов готовят со средой плюс 0,1% ДМСО (эти образцы служат контрольными образцами с носителем; LPS-стимулированные и нестимулированные; 10 мкМ дексаметазон используется как позитивный контроль). Затем культуральные планшеты возвращают в ростовой инкубатор на 2 часа. После этого клетки стимулируют путем добавления 25 мкл 50 нг/мл LPS в каждую лунку (за исключением 6 непростимулированных контрольных лунок с носителем: конечная концентрация 10 нг/мл LPS). Планшеты возвращают в ростовой инкубатор на 3 часа. Затем 100 мкл супернатанта среды удаляют и переносят в 96-луночный планшет для образцов с v-образным дном. Планшет с супенрнатантом среды центрифугируют в течение 5 минут при 1000 оборотов/минуту в центрифуге с качающимся коромыслом, с осаждением всех продуктов распада клеток, которые могут оставаться в супернатанте. 80 мкл супернатанта удаляют из планшета для образцов и переносят в свежий 96-луночный планшет с v-образным дном. Жизнеспособность клеток определяют с использованием набора Celltiter-glo. Путем измерения жизнеспособности клеток, влияние данного соединения на секрецию TNFα позволяет определить, обусловлены ли данные эффекты цитотоксичностью или истинным ингибированием воспалительной индукции. Добавляют по 100 мкл реактива Celltiter-glo в каждую лунку культурального клеточного планшета и затем измеряют сигнал люминесценции (CPS) данного планшета с использованием планшетного ридера типа Victor 5 (0,3 с считывание; 60 с встряхивание планшета перед считыванием). Жизнеспособность клеток данного соединения при данной концентрации вычисляется следующим образом:
Жизнеспособность клеток=CPS образца/(средний CPS
непростимулированных контрольных образцов)*100
[0094] Используют по 20 мкл супернатанта среды на лунку для TNFa ELISA. Следуют протоколу производителя Invitrogen/Biosource для ELISA TNFa мыши. Хромогенное проявление осуществляется обычно в течение 20-30 минут, как описано в протоколе производителя. После добавления стоп-раствора измеряют оптическую плотность (OD) при 450 нм с использованием планшетного ридера типа Victor 5 (0,1 с/цикл сканирования лунки). Определяют процент TNFα секреции относительно контрольного образца. Для вычисления процента TNFα секреции контрольного образца:
100 X (OD 450 нм образца X)-(средняя OD 450 нм непростимулированных контрольных образцов с носителем)
(средняя OD 450 нм LPS стимулированных контрольных образцов с носителем)-
(средняя OD 450 нм непростимулированных контрольных образцов с носителем)
[0095] Для каждого тестируемого соединения, процент TNFα секреции контрольного образца может быть представлен графически в виде зависимости от концентрации соединения с использованием четырехпараметрического подгоночного уравнения доза-реакция (XLFIT модель №205):
fit=(A+((B-A)/(l+((C/x)^D))))
inv=(С/((((В-А)/(у-А))-1)^(1/D)))
res=(y-fit)
Пример 4
[0096] In vivo эффекты соединений настоящего изобретения в TNFα модели мыши с контрольным LPS-заражением
[0097] Для определения влияния соединений на TNFα секрецию in vivo, самцам мышей Swiss Webster (n=10 животных на группу) вводили дозы либо с помощью орального зонда, либо путем интраперитонеальной инъекции каждого испытываемого соединения (объем дозировки 15 мл/кг). Все соединения представлены в подходящих носителях (примеры носителей, которые могут быть использованы, включают комбинации растворителей, таких как полиэтиленгликоль и пропиленгликоль, липидов, таких как глицеринмоноолеат и соевое масло, и поверхностно-активных веществ, таких как полисорбат 80 и кремофор EL). Через 90 минут после введения соединения животных обрабатывали 0,2 мг/кг LPS (липополисахарид) путем интраперитонеальной инъекции. Через 90 минут после контрольного заражения LPS мышей подвергали анестезии и отбирали кровь путем сердечной пункции в пробирки для отделения сыворотки (с гепарином натрия). Крови давали возможность свернуться при комнатной температуре в течение 2 часов, и затем пробирки центрифугировали в течение 20 минут при 2000 xg. Сыворотку собирали из пробирок (100-150 мкл на животное) и замораживали при -70°С. Уровни TNFα в сыворотке измеряли с использованием имеющихся в продаже наборов для анализа TNFa ELISA (*р<0,05 с использованием 2-шлейфового t-теста). В качестве репрезентативного примера, дозировка соединения 1-1 осуществлялась исходя из 300 мг/кг (интраперитонеально, при 300 мг/г соединения в 42% Tween, 16% Cremophor, 31% глицеринмоноолеата, 10% пропиленгликоля и разбавлялась 6 мл воды). Дексаметазон (при дозе 0,5 мг/кг, перорально, в такой же композиции) использовался как позитивный контроль в данном экспреименте. Сводка данных приведена на Фигуре 2. Статистический анализ проводился путем использования ANOVA с классификацией по одному признаку, * р<0,05.
Пример 5
[0098] Влияние жирнокислотных фумаратных производных на таргетный ген Hmox1 в RAW макрофагах
[0099] RAW264.7 макрофаги засевают при плотности 100000 клеток/лунку в 96-луночном планшете в DMEM, дополненном 10% FBS и Penn/strep. Через 16 часов среду аспирируют и заменяют бессывороточным DMEM при 90 мкл/лунку. Жирнокислотный фумаратный конъюгат, ДГК и ЭПК доводят в 100% EtOH до концентрации 100 мМ и затем разбавляют 1:100 в 100% FBS для получения 20х маточного раствора, состоящего из 1 мМ соединения и 1% EtOH. 20х маточные растворы жирнокислотного фумаратного конъюгата разбавляют 1:2 в FBS, дополненном 1% ЕЮН для 500 мкМ 10х маточного раствора, тогда как равные объемы ДГК и ЭПК 20х маточных растворов смешивают с получением 1 Ох маточного раствора, содержащего по 500 мкМ каждого из ДГК и ЭПК. Затем 1 Ох маточные растворы разбавляют серийно 1:2 в FBS, дополненном 1% EtOH, и по 10 мкл каждого разбавления добавляют к RAW246.7 клеткам для получения конечных концентраций 50, 25, 12,5, 6,25, 3,12 и 1,6 мкМ. Данные соединения предварительно инкубируют в течение 2 часов перед стимулированием 100 нг/мл LPS (по 10 мкл 1 мкг/мл LPS добавляют в каждую ячейку). После стимулирования в течение 3 часов LPS, клетки промывают один раз 1x PBS, аспирируют до сухого состояния и быстро замораживают в жидком азоте. Затем выделяют РНК и конвертируют в кДНК с использованием набора Cells to cDNA (Ambion) в соответствии с протоколом производителя. Затем измеряют транскрипционные уровни с использованием ABI Taqman праймер/зондовых наборов для анализа, нормализированных по GAPDH с использованием дельта О способа, и данные выражают относительно контрольных образцов только с носителем. Фигура 3, приведенная ниже, резюмирует позитивный эффект соединения 1-1 в отношении таргетного гена Hmox1. Фигура 4 резюмирует позитивный эффект липоевокислотного фумаратного производного 1-105 в отношении таргетного гена Hmox1 и IL-1β (протоколы для получения IL-1β генной экспрессии детализованы в Примере 1).
Пример 6
[0100] Эффект жирнокислотных фумаратных конъюгатов в отношении крыс с диабетом, индуцированным стрептозотоцином
[0101] Для исследования использовали самок крыс Sprague-Dawley (возрастом 8 недель, со средним весом 150 г). Диабет индуцировался посредством одной инъекции в хвостовую вену стрептозотоцина (STZ) в 0,1 моль/л натрий цитратного буфера, pH 4,5. Наличие диабета затем подтверждали путем измерения уровней глюкозы в крови через двое и трое суток после введения STZ. Диабетическими животными считались те, у которых содержание глюкозы в плазме превышало 16 нмоль/л. Затем диабетических животных разделяли на контрольную группу с носителем и на лечебную группу (каждая группа включала 12 животных). Все животные содержались отдельно в условиях светового-темнового цикла по 12 часов при свободном доступе к пище и воде. Для сохранения веса тела и ограничения гипергликемии диабетических животных обрабатывали 3 М.Е. (IU) инсулина сверхдлительного действия три раза в неделю после полудня (приблизительно в 15-16 часов). Для сохранения диабетического контроля по мере того как животные набирали вес, дозу инсулина на 15-ой неделе повышали до 5 М.Е. Животных дозировали носителем или жирнокислотным фумаратным конъюгатом в течение периода в 28 недель (примеры носителей, которые могут использоваться, включают комбинации растворителей, таких как полиэтиленгликоль и пропиленгликоль, липидов, таких как глицеринмоноолеат и соевое масло, и поверхностно-активных веществ, таких как полисорбат 80 и кремофор EL). Развитие почечной болезни оценивали путем ежемесячных измерений содержания в моче альбумина и содержания в плазме креатинина. Для уринарных исследований крыс помещали в метаболические клетки на 24 часа. Количественное определение альбумина в моче осуществлялось методом конкурентного анализа ELISA в соответствии с протоколами, приведенными в работе Degenhardt et al, Kidney International 2002, 61, p.939-950. Концентрации креатинина в плазме измеряли с помощью процедуры с пикриновой кислотой Яффе, с использованием стандартного набора от фирмы Sigma (каталог Sigma №555-А). Статистические анализы могут проводиться с использованием программы SigmaStat для Windows VI.00. Р значения могут вычисляться методом непараметрического анализа Mann-Whitney Rank Sum. Через 28 недель дислипидемию оценивали путем измерения содержания в плазме триглицеридов и суммарного холестерина. Эти липиды в плазме могут быть определены с помощью ферментативного, колориметрического анализов, анализа по конечной точке с использованием стандартизированных, имеющихся в продаже наборов. Суммарный холестерин может быть измерен с использованием набора Sigma (каталог №352) и триглицериды могут быть определены с помощью набора Sigma (каталог №37, GOP Grinder).
Пример 7
[0102] Эффект жирнокислотных фумаратных конъюгатов в модели индуцированной цисплатином нефротоксичности у мышей
[0103] Для этого исследования использовали 10-12 недельных самцов мышей C57BL/6 с приблизительным весом тела 30 г. После нормального периода акклиматизации животные находились на стандартной диете и при свободном доступе к воде. Затем мышам делали одну интраперитонеальную инъекцию либо носителя, либо цисплатина (20 мг/кг, при концентрации 1 мг/мл в солевом растворе). На лечебную группу использовалось десять животных. Для данной лечебной группы, начиная за 24 часа до инъекции цисплатина, животным вводили жирнокислотный фумаратный конъюгат (представленный в виде комбинаций растворителей, таких как полиэтиленгликоль и пропиленгликоль, липидов, таких как глицеринмоноолеат и соевое масло, и поверхностно-активных веществ, таких как полисорбат 80 и кремофор EL). Затем дозирование продолжали в течение 72 часов. После этого животных умерщвляли и собирали кровь и почечные ткани. Определяли азот мочевины крови (BUN) и креатинин. Уровни TNF-α в сыворотке могут быть определены с использованием иммуноферментного твердофазного анализа (ELISA). Ткани обрабатываются для гистологии и выделения РНК. Повреждения канальцев могут оцениваться на PAS-окрашенных срезах с использованием полуколичественной шкалы, описанной в работе "G. Ramesh and W. В. Reeves, Kidney International, 2004, 65, p.490-498".
Пример 8
[0104] Хроническая экспериментальная аутоиммунная энцефаломиелитная (ЭАЭ) модель рассеянного склероза (MS) у мышей.
3
[0105] Для ЕАЕ модели использовались самки C57BL/6 мышей возрастом 8-12 недель с весом тела в интервале 20-30 г. Для индукции ЭАЭ мышам вводили подкожную инъекцию в бок и основание хвоста 50 мкг MOG35-55 иммунопептида (имеющегося в продаже от лабораторий Hooke, Lawrence, MA) в PBS, эмульгированного в равном объеме полного адъюванта Фрейнда (CFA), содержащего Mycobacterium tuberculosis H7RA при конечной концентрации 0,5 0,5 мг/мл. На 0 и 2 сутки вводили две инъекции коклюшного токсина (200 нг на мышь, внутриперитонеально). Медикаментозное лечение назначалось в указанном носителе с использованием орального зонда, начиная с 3-их суток после иммунизации до завершения данного исследования. Каждая лечебная группа состояла из 8 животных; один носитель в качестве негативного контроля или жирнокислотное фумаратное производное. Животных взвешивали и оценивали в отношении клинических признаков болезни на суточной основе в течение курса данного исследования (28 суток). Тяжесть болезни может быть оценена с использованием шкалы, варьирующей от 0 до 10; со следующими балльными показателями: 0 = нормальный; 1 = сниженный тонус хвоста; 2 = вялый хвост, нарушенный рефлекс выпрямления; 3 = отсутствие рефлекса выпрямления; 4 = атактическая походка; 5 = легкий парапарез или параплегия; 8 = тетрапарез; 9 = агония; 10 = смерть. С показателями 7 или выше мышей обычно умерщвляли.
[0106] Следующие неограничивающие примеры соединений служат для иллюстрации дополнительных вариантов жирнокислотных фумаратных производных. Следует понимать, что любые варианты, перечисленные в разделе Примеры, являются вариантами жирнокислотных фумаратных производных и, как таковые, подходят для использования в описанных выше способах и композициях.
Пример 9
[0107] Получение (Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидэтиламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение I-1)
3
2
2
2
4
2
2
[0108] Монометил фумарат (1,7 г, 13,1 ммоль) растворяли в 20 мл СНгСЬ параллельно с оксалилхлоридом (1,1 мл, 13,1 ммоль). После добавления нескольких капель ДМФ данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до растворения всех твердых веществ и прекращения выделения газа (1 ч). Этот свежеприготовленный раствор хлороангидрида добавляли по каплям при 0°С к раствору, содержащему трет-бутил 2-аминоэтилкарбамат (2,1 г, 13,1 ммоль) и EtN (2,8 мл, 19,6 ммоль) в 200 мл CHCl. Результирующую реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и размешивали в течение 2 часов. Затем ее промывали рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под пониженным давлением. Очистка методом хроматографии (CHCl) дала 2,2 г (Е)-метил 4-(2-(трет-бутоксикарбонил)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (62% выход). (Е)-метил 4-(2-(трет-бутоксикарбонил)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (2,2 г, 8,1 ммоль) растворяли в 10 мл 4 М НСl в диоксане. Результирующую реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем разбавляли 50 мл EtOAc и концентрировали под сниженным давлением с получением НСl соли (Е)-метил 4-(2-аминоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата.
3
3
2
4
2
2
[0109] НСl соль (Е)-метил 4-(2-аминоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата (8,1 ммоль) растворяли в 40 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеновой кислотой (ДГК, 2,66 г, 8,1 ммоль), HATU (3,4 г, 12,1 ммоль) и ДИЭА (4,2 мл). Результирующую реакционную смесь пермешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и разбавляли EtOAc. Органический слой промывали насыщенным водным NaHCO, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl, 5% МеОН) дала 1,4 г (Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата. MS (EI) рассчит. для C29H42N204: 482,31; найдено 483 (М+1).
Пример 10
[0110] Получение (E)-4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еновой кислоты (Соединение I-102)
2
4
28
40
2
4
[0111] (Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноат (200 мг, 0,41 ммоль) растворяли в 5 мл ТГФ параллельно с 2 мл 5 N NaOH. Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, концентрировали под сниженным давлением для удаления ТГФ и разбавляли водой (10 мл). Водный слой подкисляли до pH=2 при помощи 3 N НСl и затем экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением 190 мг (Е)-4-(2-(4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19 г)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еновой кислоты (97% выход). MS (EI) рассчит. для CHNO: 468,30; найдено 469 (М+1).
Пример 11
[0112] Получение (Е)-метил 4-(l-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-метилпропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение I-22)
2
2
[0113] 2-метилпропан-1,2-диамин (1,52 г, 14,5 ммоль) растворяли в 50 мл СНСl и охлаждали до 0°С. Затем по каплям добавляли бензил хлороформиат (2,0 мл, 14,5 ммоль) при 0°С в течение 10 мин. Результирующую реакционную смесь подогревали до комнатной температуры, перемешивали в течение 4 часов и затем концентрировали под сниженным давлением с получением бензил 2-амино-2-метилпропилкарбамата как НСl соли.
3
3
2
4
2
2
[0114] Монометил фумарат (455 мг, 3,5 ммоль) растворяли в 10 мл CHCN параллельно с НСl солью бензил 2-амино-2-метилпропилкарбамата (3,5 ммоль), ДИЭА (0,50 мл) и EDCI (1,2 г). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов и разбавляли EtOAc. Органический слой промывали насыщенным водным NaHCO, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl, 5% МеОН) дала 400 мг метилового эфира 3-(2-трет-бутоксикарбониламино-1,1-диметил-этилкарбамоил)-акриловой кислоты (34% выход).
3
3
2
4
2
2
31
46
2
4
[0115] Метиловый эфир 3-(2-трет-бутоксикарбониламино-1,1-диметил-этилкарбамоил)-акриловой кислоты (400 мг, 1,2 ммоль) растворяли в 3 мл 33% HBr в ледяной уксусной кислоте и выдерживали при комнатной температуре в течение 1 часа. Результирующую реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением с получением HBr соли метилового эфира 3-(2-амино-1,1-диметил-этилкарбамоил)-акриловой кислоты. Этот материал растворяли в 5 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеновой кислотой (ДГК, 393 мг, 1,2 ммоль), HATU (547 ммоль, 1,3 ммоль) и ДИЭА (0,63 мл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и разбавляли. Органический слой промывали насыщенным водным NaHCO, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) дала 200 мг (Е)-метил 4-(1-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо-2-метилпропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноата (33% выход). MS (EI) рассчит. для CHNO: 510,35; найдено 511 (М+1).
Пример 12
[0116] Получение (Е)-метил 4-(2-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)дисульфанил)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение I-5)
2
2
4
2
4
[0117] Цистамин дигидрохлорид (1,0 г, 4,44 ммоль) растворяли в 50 мл МеОН. При комнатной температуре добавляли тризтиламин (1,85 мл, 3 экв.) и затем по каплям добавляли ВосO (0,97 г, 4,44 ммоль) в виде раствора в 5 мл МеОН. Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем ее концентрировали под сниженным давлением, и результирующий остаток растворяли в 20 мл 1М NaHPO. Водный слой промывали 10 мл 1:1 раствора пентан/EtOAc, подщелоченного до pH 9 при помощи 1 М NaOH, и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением 500 мг трет-бутил 2-(2-(2-аминоэтил)дисульфанил)этилкарбамата (44% выход).
2
2
2
2
2
4
2
2
[0118] Отдельно, монометил фумарат (263 мг, 2,02 ммоль) растворяли в 10 мл СНСl параллельно с оксалилхлоридом (170 мкл, 2,02 ммоль). После добавления нескольких капель ДМФ данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до растворения всех твердых веществ и прекращения выделения газа (1 час). Этот свежеприготовленный раствор хлорангидрида добавляли по каплям при 0°С к раствору, содержащему трет-бутил 2-(2-(2-аминоэтил)дисульфанил)этилкарбамат (500 мг) и Et3N (420 мкл, 3 ммоль) в 20 мл СНСl. Результирующую реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Затем ее промывали расолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (СНСl) дала 450 мг (Е)-метил 4-(2-(2-(2-(трет-бутоксикарбонил)этил)дисульфанил)этиламино)-4-оксобут-2-еноата. Этот
2
2
3
3
2
4
2
2
31
46
2
4
2
материал растворяли в 5 мл 25% растворе ТФУК в СНСl и выдерживали при комнатной температуре в течение 4 часов. Затем данную реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением с получением ТФУК соли (Е)-метил 4-(2-(2-(2-аминоэтил)дисульфанил)этиламино)-4-оксобут-2-еноата. Этот материал растворяли в 10 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докозв-4,7,10,13,16,19-гексаеновой кислотой (ДГК, 403 мг, 1,23 ммоль), HATU (517 мг, 1,35 ммоль) и ДИЭА (0,640 мл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем ее разбавляли EtOAc и промывали последовательно насыщенным водным NaHCO и рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) дала 200 мг (Е)-метил 4-(2-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)дисульфанил)этиламино-4-оксобут-2-еноата. MS (EI) рассчит. для CHNOS: 574,29; найдено: 575 (М+1).
Пример 13
[0119] Получение (Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение I-3)
2
2
[0120] Гидроксид натрия (400 мг, 10 ммоль) растворяли в 70 мл МеОН, и добавляли 2-(2-аминоэтокси)этанамин дигидрохлорид (1,0 г, 5,65 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем по каплям добавляли раствор, содержащий Вос20 (740 мг, 3,40 ммоль) в 15 мл ТГФ, при комнатной температуре, в течение 15 минут. Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов, затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток растворяли в 200 мл СНСl и энергично перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Данную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением с получением 850 мг трет-бутил 2-(2-аминоэтокси)карбамата (74% выход).
3
3
2
4
2
2
14
24
2
6
[0121] Затем трет-бутил 2-(2-аминоэтокси)этилкарбамат (1,0 г, 4,90 ммоль) растворяли в 20 мл CHCN параллельно с монометил фумаратом (637 мг, 4,90 ммоль) и EDCI (1,7 г.5,39 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Затем ее разбавляли EtOAc (20 мл), промывали насыщенным водным NaHCO, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток очищали методом хроматографии (9:1 СНСl/МеОН) с получением 1,0 г (Е)-метил 4-(2-(2-(трет-бутоксикарбонил)этокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (64% выход). MS (EI) рассчит. для СНNO: 316,16; найдено: 317 (М+1).
2
2
3
3
[0122] (Е)-метил 4-(2-(2-(трет-бутоксикарбонил)этокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноат (1,0 г, 3,16 ммоль) растворяли в 10 мл 25% ТФУК в СНСl. Данную реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем концентрировали под сниженным давлением с получением (Е)-метил 4-(2-(2-аминоэтокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноата в виде ТФУК соли. Затем этот материал растворяли в 10 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеновой кислотой (ДГК, 1,0 г, 3,16 ммоль), HATU (1,30 г, 3,5 ммоль) и ДИЭА (1,6 мл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем разбавляли EtOAc и промывали последовательно насыщенным водным NaHCO и рассолом.
2
4
[0123] Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (60% EtOAc, 40% пентан) дала 220 мг (Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19 г)-докоза-4,7,10,13,16,19-
гексаенамидоэтокси)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (13% выход). MS (EI) рассчит. для C3iH46N205: 526,34; найдено: 527 (М+1).
2
2
2
2
2
4
2
2
[0125] Монометил фумарат (650 мг, 5,0 ммоль) растворяли в 10 мл СНСl и добавляли оксалилхлорид (420 мкл, 5,0 ммоль). После добавления нескольких капель ДМФ, данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до прекращения выделения газа (1 час). Этот свежеприготовленный раствор хлорангидрида затем добавляли по каплям при 0°С к раствору, содержащему Вос-пиперазин (930 мг) и триэтиламин (1,0 мл, 7,5 ммоль) в 20 мл СНСl. Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и промывали рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (СНСl) дала 310 мг (Е)-трет-бутил 4-(4-метокси-4-оксобут-2-еноил)пиперазин-1-карбоксилата (21% выход).
2
2
3
3
2
4
2
2
[0126] (Е)-трет-бутил 4-(4-метокси-4-оксобут-2-еноил)пиперазин-1 -карбоксилат (310 мг, 1,04 ммоль) растворяли в 5 мл 25% ТФУК в СНСl и выдерживали при комнатной температуре в течение 2 часов. Данную реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением с получением ТФУК соли (Е)-метил 4-оксо-4-(пиперазин-1-ил)бут-2-еноата. Этот материал растворяли в 10 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-rekcaehobofi кислотой (ДГК, 375 мг, 1,04 ммоль), HATU (435 мг, 1,14 ммоль) и ДИЭА (540 мкл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем ее разбавляли EtOAc и промывали последовательно насыщенным водным NaHCO и рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали при сниженном давлении. Очистка методом хроматографии (СНСl) дала 80 мг (Е)-метил 4-(4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-.
[0124] Получение (Е)-метил 4-(4-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноилпиперазин-1-ил)-4-оксобут-2-еноата (Соедиение 1-40)
Пример 15
[0127] Получение 2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-
гексаенамидоэтил метил фумарата (Соединение 1-103)
3
3
2
4
2
2
2
2
2
4
[0128] (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеновую кислоту (ДГК, 1,2 г, 3,66 ммоль) растворяли в 20 мл CHCN параллельно с этаноламином (220 мкл, 3,66 ммоль), HATU (1,5 г, 4,0 ммоль) и ДИЭА (950 мкл, 5,49 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем разбавляли EtOAc. Органический слой промывали насыщенным водным NaHCO, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением неочищенного (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-N-(2-гидроксиэтил)докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамида. Этот материал растворяли в 15 мл CHCI параллельно с (Е)-метил 4-хлор-4-оксобут-2-еноатом (3,66 ммоль) и триэтиламином (765 мкл, 5,49 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Затем ее разбавляли СНСl и промывали рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (60% EtOAc, 40% пентан) дала 380 мг 2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-
гексаенамидоэтил метил фумарата (21% выход). MS (EI) рассчит. для C29H41NO5: 483,3; найдено: 484 (М+1).
Пример 16
[0129] Получение (Е)-метил 4-((R)-3-(l-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза -4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)-2,5-диоксопирролидин-3-илтио)-1-метокси-1-оксопропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-39)
3
2
4
2
2
[0130] ТФУК соль 1-(2-аминоэтил)-1Н-пиррол-2,5-диона (Aldrich, 280 мг, 1,10 ммоль) растворяли в 10 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеновой кислотой (ДГК, 360 мг, 1,1 ммоль), HATU (460 мг, 1,2 ммоль) и ДИЭА (0,58 мл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем ее разбавляли EtOAc и промывали последовательно насыщенным водным NaHCCh и рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (СНСl) дала 350 мг (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-N-(2-(2,5-диоксо-2H-пиррол-1 (5Н)-ил)этил)докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамида (70% выход).
3
[0131] Отдельно, монометил фумарат (100 мг, 0,77 ммоль) растворяли в 4 мл CHCN параллельно с гидрохлоридом метилового эфира L-цистеина (132 мг, 0,77 ммоль), EDCI (245 мг, 0,77 ммоль) и N-метилморфолином (85 мкл, 0,77 ммоль).
2
4
3
2
2
37
51
3
8
Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем ее разбавляли EtOAc. Органический слой промывали водным насыщенным NaHC03 и рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением неочищенного (Я,Е)-метил 4-(3 -меркапто-1 -метокси-1 -оксопропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноата. Этот материал затем растворяли в 3 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-N-(2-(2,5-диоксо-2Н-пиррол-1(5Н)-ил)этил)докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидом (173 мг, 0,38 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Данную реакционную смесь затем концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (СНСl) дала 60 мг (Е)-метил 4-((R)-3-(l-(2-(4Z.7Z, 1 OZ, 13Z, 16Z, 19 г)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)-2,5-диоксопирролидин-3-илтио)-1 -метокси-1 -оксопропан-2-иламино)-4-оксобут-2-еноата (22%). MS (EI) рассчит. для CHNОS: 697,34; найдено: 698 (М+1).
Пример 17
[0132] Получение (Е)-метил 4-(2-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)(метил)амино)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-4)
2
2
2
2
2
2
2
4
[0133] Н1-(2-Аминоэтил)-Ж-метилэтан-1,2-диамин (5,0 г, 42,7 ммоль) растворяли в 100 мл СНСl и охлаждали до 0°С. Затем по каплям добавляли раствор ди-трет-бутилкарбоната (0,93 г, 4,27 ммоль) в СНСl (10 мл) при 0°С в течение 15 минут. Результирующую реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут и затем нагревали до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь разбавляли СНСl (100 мл). Органический слой промывали рассолом (3 х 25 мл), осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением 1,1 г трет-бутил 2-((2-аминоэтил)(метил)амино)этиларбамата.
3
2
4
2
2
17
27
3
4
[0134] трет-Бутил 2-((2-аминоэтил)(метил)амино)этилкарбамат (500 мг, 2,3 ммоль) растворяли в 10 мл CHCN параллельно с салициловой кислотой (310 мг, 2,3 ммоль) и EDCI (485 мг, 2,53 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов и затем разбавляли EtOAc. Органический слой промывали насыщенным водным NaHC03, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток очищали методом хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) с получением 380 мг трет-бутил 2-((2-(2-гидроксибензамидо)этил)(метил)амино)этилкарбамата (49% выход). MS (EI) рассчит. для CHNО: 337,2; найдено: 338 (М+1).
2
2
3
2
4
2
2
34
49
3
3
[0135] трет-Бутил 2-((2-(2-гидроксибензамид)этил)(метил)амино)этилкарбамат (380 мг, 1,13 ммоль) растворяли в 5 мл 25% ТФУК в СНСl и выдерживали при комнатной температуре в течение 3 часов. Данную реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением с получением ТФУК соли N-(2-((2-аминоэтил)(метил)амино)этил)-2-гидроксибензамида. Этот материал растворяли в 10 мл CHCN параллельно с (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)^OKO3a-4,7,10,13,16,19-rekcaehoboft кислотой (ДГК, 370 мг, 1,13 ммоль), HATU (472 мг, 1,24 ммоль) и ДИЭА (0,59 мл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем ее разбавляли EtOAc и промывали последовательно насыщенным водным NaHC03 и рассолом. Органический слой осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) дала 420 мг N-(2-((2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтил)(метил)амино)этил)-2-гидроксибензамида. MS (EI) рассчит. для CHNО: 547,38; найдено: 548 (М+1).
Пример 18
[0136] Получение (Е)-метил 4-(2-(5Z,8Z,llZ,14Z,17Z)-эйкоза-5,8,l 1,14,17-пентаенамидоэтиламино-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-2)
3
2
4
2
2
[0137] НСl соль (Е)-метил 4-(2-аминоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата (0,735 ммоль) растворяли в 40 мл CHCN параллельно с (5Z,8Z,1 lZ,14Z,17Z)-3UK03a-5,8,l 1,14,17-пентаеновой кислотой (ЭПК, 222 мг, 0,735 ммоль), HATU (307 мг, 0,81 ммоль) и ДИЭА (380 мкл). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и разбавляли EtOAc. Органический слой промывали насыщенным водным NaHC03, рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) дала 300 мг (Е)-метил 4-(2-(5Z,8Z,l 1Z, 14Z, 17 г)-эйкоза-5,8,11,14,17-
27
40
2
4
пентаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата (89%) выход). MS (EI) рассчит. для CHNО: 456,3; найдено: 457 (М+1).
Пример 19
[0138] Получение (Е)-этил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-66)
На схеме; диоксан
30
40
2
4
[0139] Моноэтил фумарат (имеется в продаже) подвергали действию тех же реакционных условий, которые изложены выше при получении (Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19 г)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата. Необходимый продукт, а именно, (Е)-этил 4-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноат, был получен после очистки методом силикагелевой хроматографии. MS (EI) рассчит. для CHNO: 496,33; найдено 497 (М+1).
Пример 20
[0140] Получение (Е)-метил 4-( метил (2-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-N-
метилдокоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)этил)амино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-104)
1
2
2
2
2
2
2
2
2
4
31
46
2
4
[0141] трет-Бутил метил(2-(метиламино)этил)карбамат получали следующим образом: N,N-диметилэтан-1,2-диамин (40 ммоль) растворяли в 100 мл СНСl и охлаждали до 0°С. Затем по каплям добавляли раствор ди-трет-бутилкарбоната (4,0 ммоль) в СНСl (10 мл) при 0°С в течение 15 минут. Результирующую реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут и затем нагревали до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов данную реакционную смесь разбавляли СНСl (100 мл). Органический слой промывали рассолом (3 х 25 мл), осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением трет-бутил метил(2-(метиламино)этил)карбамата. Данный амин подвергали действию тех же условий реакции, которые изложены выше при получении (Е)-метил 4-(2-(4Z,7Z, 10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата. Необходимый продукт, а именно, (Е)-метил 4-(метил(2-((4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19Z)- N -метилдокоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)этил)амино)-4-оксобут-2-еноат, был получен после очистки методом силикагелевой хроматографии. MS (EI) рассчит. для CHNО: 510,35; найдено 511 (М+1).
Пример 21
[0142] Получение (Е)-метил 4-((2R,6S)-4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаноил)-2,6-диметилпиперазин-1-ил)-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-41)
3
[0143] (2К,68)-2,6-Диметилпиперазин (173 мг, 1,52 ммоль) растворяли в 8 мл CHCN параллельно с ДГК (500 мг, 1,52 ммоль) и EDC (320 мг). Результирующую
2
4
3
2
4
33
48
2
4
реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток растворяли в EtOAc, промывали рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением с получением (4 г,7 г,10 г,13 г,1бг,19 г)-1-((3^58)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)докоза-4,7,10,13,16,19-гексаен-1-она. Этот материал растворяли в 10 мл CHCN параллельно с монометил фумаратом (198 мг, 1,52 ммоль) и HATU (635 мг, 1,67 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и разбавляли EtOAc. Органический слой промывали рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (градиентное элюирование, от пентана до 80% EtOAc, 20% пентана) дала 180 мг (Е)-метил 4-((2R,6S)-4-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаеноил)-2,6-диметилпиперазин-1 -ил)-4-оксобут-2-еноата. MS (EI) рассчит. для СНNО: 536,36; найдено 537 (М+1).
Пример 22
[0144] Получение (К,Е)-метил 4-(2-(5-(1,2-дитиолан-3-
ил)пентанамидо)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (Соединение 1-105)
3
2
4
2
2
15
24
2
4
[0145] НСl соль (Е)-метил 4-(2-аминоэтиламино)-4-оксобут-2-еноата (0,515 ммоль) растворяли в 10 мл CHCN параллельно с R-липоевой кислотой (TCI, 106 мг, 0,515 ммоль), HATU (215 мг, 0,567 ммоль) и ДИЭА (270 мкл, 1,55 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов и разбавляли EtOAc. Органический слой промывали рассолом, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) дала 120 мг (ВД-метил 4-(2-(5-(1,2-дитиолан-3-ил)пентанамидо)этиламино)-4-оксобут-2-еноата. MS (EI) рассчит. для CHN0S: 360,12; найдено 361 (М+1).
Пример 23
2
2
2
2
2
3
2
4
2
4
[0147] В типичном опыте, Cbz-Lys(OtBu) NH гидрохлорид (10 г, 26,8 ммоль) растворяли в CHCl (100 мл) и обрабатывали N-метилморфолином (6,18 мл, 56,3 ммоль). Данный раствор медленно добавляли к раствору 4-нитрофенил хлороформиата (5,66 г, 28,2 ммоль) в 100 мл CHCl при 0°С. Данную реакционную смесь затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После промывания насыщенным водным NaHCO (3 * 100 мл), рассолом, данный раствор осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Остаток очищали методом силикагелевой хроматографии (10%EtOAc/90% пентан) с получением промежуточного 4-нитрофенильного производного (11 г; 81%). Это промежуточное 4-нитрофенильное производное (10 г, 20 ммоль) растворяли в 150 мл безводного ТГФ параллельно с 2-(триметилсилил) этанолом (4,3 мл, 30 ммоль) и охлаждали до 0°С. Затем под защитным слоем аргона добавляли t-BuOK (2,9 г, 26 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем разделяли между EtOAc (300 мл) и рассолом (300 мл). Органический слой промывали рассолом, осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток очищали методом силикагелевой хроматографии (градиентное элюирование с использованеим смеси EtOAc/пентан) с получением (S)-
[0148] (S)-TpeT-Бутил 6-(бензилоксикарбонил)-2-((2-
2
2
2
(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноат (4 г, 8,33 ммоль) растворяли в 40 мл МеОН параллельно с Pd/C (10%, 400 мг). Результирующую реакционную смесь тщательно продували азотом и затем размешивали под 1 атм Н при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через слой из целита, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток очищали методом силикагелевой хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) с получением (S)-трет-бутил 6-амино-2-((2-(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноата (2 г; 69%).
2
4
[0149] К перемешиваемой смеси (8)-трет-бутил 6-амино-2-((2-(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноата (800 мг, 2,31 ммоль), монометил фумарата (361 мг, 2,77 ммоль), ДИЭА (1,1 мл, 6,93 ммоль) в 10 мл ацетонитрила добавляли HATU (1,14 г, 3,00 ммоль) одной порцией при 0°С под интертной атмосферой аргона. Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали рассолом, осушивали над NaSO, и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (EtOAc/пентан) дала (8,Е)-трет-бутил 6-(4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)-2-((2-(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноат (900 мг, 85%).
[0150] Этот силилированный материал (900 мг, 1,97 ммоль) растворяли в 15 мл 1М раствора тетра-н-бутиламмоний фторида в ТГФ и перемешивали при комнатной температуре под инертной атмосферой аргона в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением с получением (8,Е)-трет-бутил 2-амино-6-(4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноата. Этот материал использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.
2
4
[0151] Неочищенный (8,Е)-трет-бутил 2-амино-6-(4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат, полученный выше, растворяли в 40 мл ацетонитрила параллельно с ЭПК (654 мг, 2,17 ммоль), ДИЭА (1,6 мл, 9,85 ммоль), HATU (973 мг, 2,56 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток растворяли в 50 мл EtOAc и промывали водой, рассолом. Органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка
методом силикагелевой хроматографии (EtOAc/пентан) дала (8)-трет-бутил 2-((5Z,8Z, 11Z, 14Z, 17 г)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (200 мг, 17% для 2 стадий).
2
4
31
46
2
6
[0152] (8)-трет-бутил 2-((5Z,8Z,l lZ,14Z,17Z)-икоза-5,8,l 1,14,17-пентаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (200 мг, 0,334 ммоль) растворяли в 3 мл 4 N раствора НСl в диоксане и перемешивали при комнатной температуре под инертной атмосферой аргона в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением, и результирующий остаток разделяли между 30 мл EtOAc и 30 мл воды. Органический слой дополнительно промывали рассолом до достижения величины pH водного слоя, близкой к нейтральной, осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием смеси водного ацетонитрила и 0,1%» трифтороуксусной кислоты дала (S)-2-((5Z,8Z,l 1Z,14Z,17Z)-икоза-5,8,11,14,17-пентаенамидо)-6-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановую кислоту (90 мг; 50%). MS (EI) рассчит. для СНN0: 542,34; найдено 543 (М+1).
Пример 24
[0153] Получение (S)-6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановой кислоты (1-7)
[0154] В типичном опыте, (8)-трет-бутил 6-амино-2-((2-
2
4
(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноат, (2 г, 5,78 ммоль) растворяли в 30 мл ацетонитрила параллельно с HATU (3,29 г, 8,67 ммоль), ДГК (2,28 г, 6,94 ммоль) и ДИЭА (2,9 мл, 17,4 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре под инертной атмосферой аргона в течение 2 часов и затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток растворяли в 100 мл EtOAc и промывали рассолом. Органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (EtOAc/пентан) дала (S)-трет-бутил 6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((2-(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноат (2,8 г; 80%).
[0155] (8)-трет-бутил 6-((4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((2-(триметилсилил)этокси)карбонил)гексаноат (2,8 г, 4,26 ммоль) растворяли в 50 мл 1 М раствора тетра-н-бутиламмоний фторида в ТГФ и перемешивали при комнатной температуре под инертной атмосферой аргона в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением, и результирующий неочищенный продукт использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.
2
4
[0156] Неочищенный (S)-трет-бутил 2-амино-6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)гексаноат, полученный выше, растворяли в 40 мл ацетонитрила параллельно с монометил фумаратом (610 мг, 4,69 ммоль), ДИЭА (3,0 мл, 18,8 ммоль) и HATU (2,4 г, 6,39 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток растворяли в 100 мл EtOAc и промывали водой и рассолом. Органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (EtOAc/пентан) дала (8)-трет-бутил 6-((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (500 мг, 30%).
[0157] (8)-трет-бутил 6-((4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексаноат (500 мг) растворяли в 6 мл 4 N раствора НСl в диоксане и перемешивали при комнатной температуре под инертной атмосферой аргона в течение 2 часов. Данную реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением, и результирующий остаток разделяли
2
4
33
48
2
6
между 30 мл EtOAc и 30 мл воды. Органический слой дополнительно промывали рассолом до достижения величины pH водного слоя, близкой к нейтральной, осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием смеси водного ацетонитрила и 0,1% трифтороуксусной кислоты дала (S)-6-((4Z,7Z, 10Z, 13Z, 16Z, 19 г)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидо)-2-((Е)-4-метокси-4-оксобут-2-енамидо)гексановую кислоту (160 мг; 35%). MS (El) рассчит. для CHNO: 568,35; найдено 569 (М+1).
Пример 25
[0158] Получение (Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноата (1-24)
[0159] (2-Амино-этил)-(2-бензилоксикарбониламино-этил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир получали из бензил 2-аминоэтилкарбамата с использованием такой же реакционой последовательности, что описана в работе Andruszkiewicz et al in Synthetic Communications 2008, 38, p.905-913 (реакция с акрилонитрилом, с последующей защитой вторичного амина ВОС группой, и превращение нитрильной группы в аминогруппу, имеющую на одну метиленовую единицу меньше, с использованием перегруппировки Гоффмана). (2-Амино-этил)-(2-
2
2
бензилоксикарбониламино-этил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (500 мг, 1,48 ммоль) растворяли в 15 мл СНСl параллельно с 4-метилморфолином (449 мг, 4,44 ммоль) и охлаждали до 0°С. Затем добавляли 4-нитрофенил хлороформиат (328 мг, 1,63 ммоль) при 0°С. Результирующую реакционную смесь подогревали до
2
4
2
2
комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Затем ее разбавляли водой. Органический слой отделяли, осушивали (NaSO) и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом хроматографии (95% СНСl 5% МеОН) дала промежуточный нитрофенил карбамат (480 мг; 64%).
2
4
2
2
[0160] К трет-бутоксиду калия (113 мг, 1,01 ммоль) добавляли смесь, содержащую промежуточный нитрофенил карбамат (480 мг, 0,96 ммоль) и 2-(триметилсилил) этанол (136 мг, 1,15 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°С. Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов и затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток разделяли между EtOAc и водой. Органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (3:1 пентан/EtOAc) дала полностью защищенное триаминовое производное (190 мг; 41%). Этот полностью защищенный триамин (190 мг, 0,40 ммоль) растворяли в МеОН (5 мл) параллельно с 5% PaVC (50 мг), и результирующую смесь перемешивали под 1 атм водорода при комнатной температуре в течение 16 часов. Данную реакционную смесь фильтровали через слой из целита, и прозрачный фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (9:1 СНСl/МеОН) дала (2-амино-этил)-[2-(2-триметилсиланил-этоксикарбониламино)-этил]-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (80 мг; 58%).
2
4
2
4
31
47
3
4
[0161] (2-Амино-этил)-[2-(2-триметилсиланил-этоксикарбониламино)-этил]-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (80 мг, 0,23 ммоль) растворяли в 5 мл ацетонитрила параллельно с монометил фумаратом (30 мг, 0,23 ммоль), ДИЭА (90 мг, 0,69 ммоль) и HATU (105 мг, 0,28 ммоль). Результирующую реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем концентрировали под сниженным давлением. Результирующий остаток растворяли в EtOAc и промывали рассолом. Органический слой осушивали над MgSO и затем концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом силикагелевой хроматографии (3:1 пентан/EtOAc) дала требуемое амидное производное в виде маслянистого вещества (80 мг; 75%>). Этот материал растворяли в 3 мл 4 N раствора НСl в диоксане и перемешивали при комнатной температуре под инертной атмосферой аргона в течение 1 часа. Данную реакционную смесь концентрировали под сниженным давлением, и результирующий остаток разделяли между 30 мл EtOAc и 30 мл воды. Органический слой дополнительно промывали рассолом до достижения величины pH водного слоя, близкой к нейтральной, осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением. Очистка методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием смеси водного ацетонитрила и 0,1% трифтороуксусной кислоты (ТФУК) дала (Е)-метил 4-(2-(2-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-докоза-4,7,10,13,16,19-гексаенамидоэтиламино)этиламино)-4-оксобут-2-еноат. MS (EI) рассчит. для CHNO: 525,36; найдено 526 (М+1).
ЭКВИВАЛЕНТЫ
[0162] Специалисты в данной области распознают или могут удостовериться, с использованием лишь обычных экспериментов, многочисленные эквиваленты конкретных вариантов, описанных здесь специально. Такие эквиваленты, как предполагается, охватываются объемом последующей формулы изобретения.