СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АНОМАЛИЙ УПАКОВКИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗОИДОВ ПРИ МУЖСКОМ БЕСПЛОДИИ И ДИАГНОСТИКУМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ

1. Способ диагностики аномалий упаковки хроматина сперматозоидов при мужском бесплодии, включающий осаждение сперматозоидов центрифугированием, промывку их в буферном растворе с рН 7,6÷8,0, ресуспендирование осадка в буферном растворе с рН 7,8÷8,2 в присутствии 10÷15 мМ Трис-HCl, инкубирование при охлаждении, осаждение клеток центрифугированием с последующим промыванием осадка, ресуспендированием промытого осадка в растворе с рН 7,8÷8,2 в присутствии 8,0÷12 мМ Трис-HCl, добавление к полученной суспензии микрококковой нуклеазы, инкубирование образцов при температуре от 10 до 40°С, остановку гидролиза с последующей гомогенизацией и повторным центрифугированием образцов с получением осадка, содержащего нерастворимый хроматин, и супернатанта, содержащего растворимый хроматин, и по содержанию растворимого хроматина не менее 18,4% и растворимого хроматина не выше 81,4% диагностируют наличие аномалии упаковки хроматина сперматозоидов при мужском бесплодии, отличающийся тем, что для определения количества сперматозоидов аликвоту эякулята вносят в пробирку с крышкой, осаждают сперматозоиды центрифугированием, промывают осадок однократным натрий-фосфатным буфером, центрифугированием отделяют осадок, подкисляют его действием разбавленной хлорной кислоты, кипятят на водяной бане и осаждают материал центрифугированием с последующим определением в осадке концентрации ДНК.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно в аликвоте эякулята измеряют спектрофотометрически концентрацию ДНК, характеризующую содержание кислоторастворимой фракции хроматина.
3. Диагностикум определения мужского бесплодия, представляющий собой аномалию содержания растворимого и нерастворимого хроматина в экуляте, определенных по п. 1.
4. Диагностикум по п. 3, отличающийся тем, что при диагностике мужского бесплодия дополнительно используют кислотно-растворимый хроматин.