СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ H.PYLORI У ПАЦИЕНТОВ С ПАТОЛОГИЕЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

Полезная модель относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использована для повышения чувствительности 13С-мочевинного дыхательного теста в диагностике инфекции Helicobacter pylori - H.pylori у пациентов с пептической язвой желудка и двенадцатиперстной кишки на этапе контроля эрадикации.
В качестве прототипа выбран способ диагностики H.pylori у пациентов с патологией желудочно-кишечного тракта (Передерий В. Г., Швец Н. И., Ткач СМ. Место дыхательных тестов в диагностике заболеваний органов пищеварения //Сучасна гастроентеролопя - 2000. -№1. - С. 21-25.) путем применения 13С-мочевинного дыхательного теста, который заключается в приеме пациентом 75 мг мочевины меченной НС-углеродом, растворенной в 150 мл апельсинового сока с последующей оценкой изменения уровня концентрации 13С нерадиоактивного изотопа углерода углекислого газа в выдыхаемом воздухе на 30 минуте.
Признаками, совпадающими с общими признаками заявляемого способа, являются: применение 13С-мочевинного дыхательного теста с использованием растворителя реактива.
Причинами, препятствующими достижению ожидаемого технического результата (повышение точности диагностики), являются: низкая степень обсеменения микроорганизмами и низкая активность уреазы H.pylori, особенно на фоне распространенных атрофических изменений слизистой оболочки желудка, сопровождающихся гипоацидным состоянием, на фоне приема ингибиторов протонной помпы, что препятствует расщеплению микроорганизмами мочевины меченной ПС-углеродом, приводя к ложно-отрицательным результатам.
В основу полезной модели поставлена задача усовершенствования способа-прототипа путем использования в качестве растворителя реактива лимонной кислоты, разведенной в дистиллированной воде, что позволяет во время исследования значительно сместить внутрижелудочный рН в
кислую сторону, повысить активность бактериальной уреазы, а следовательно, дает возможность определять присутствие H.pylori при минимальной степени обсеменения, выраженном распространенном гастрите и на фоне приема ингибиторов протонной помпы.
Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики Н. pylori у больных с патологией желудочно-кишечного тракта, включающем применение 13С-мочевинного дыхательного теста с использованием растворителя реактива, согласно полезной модели, реактив добавляют в раствор, содержащий 2,0 г лимонной кислоты, растворенной в 150,0 мл дистиллированной воды.
Между совокупностью существенных признаков заявляемого способа и ожидаемым техническим результатом определяется следующая причинно-следственная связь: применение в качестве растворителя мочевины раствора лимонной кислоты в дистиллированной воде вызывает снижение моторики желудка у пациентов, обеспечивая более длительный контакт реактива со слизистой, также раствор лимонной кислоты, снижая уровень внутрижелудочного рН, особенно антрального отдела, значительно повышает активность уреазы H.pylori и приводит к более активному расщеплению мочевины даже при минимальной степени обсеменения микроорганизмов, что позволяет значительно повысить точность определения H.pylori.
Способ заключается в следующем.
Утром, натощак, до приема реактива у пациента собирают пробу выдыхаемого воздуха для определения базального уровня 13С-углерода. После этого в 150 мл дистиллированной воды комнатной температуры сначала растворяют 2,0 г лимонной кислоты, а затем 50 мг 13С-мочевины. Пациент максимально быстро выпивает приготовленный раствор, после чего ополаскивает рот дистиллированной водой, чтобы избежать оседания реактива на слизистой ротовой полости и исключить перекрёстную
реакцию продуцирующими уреазу ротоглоточными бактериями.
Спустя 30 минут после приема реактива повторно собирают образцы выдыхаемого воздуха.
2
2
2
Затем в полученных пробах воздуха на инфракрасном спектрометре IRIS определяют удельный вес ИСО от общего количества углекислого газа и рассчитывают значение показателя delta over baseline - DOB, который определяют по формуле DOB = Δs - Δο, где Δο - показатель до приема растворителя реактива, Δs - после приема, Δ - соотношение концентрации 1ЗСО/12СО в сравнении с эталонной пробой воздуха, хранящейся в приборе.
Значения DOB равное или выше 3,5% свидетельствует о наличии инфекции H.pylori.
Инфракрасную спектроскопию используют для количественного анализа газовых смесей, определения концентраций отдельных газов.
Абсорбцию газов определяют путем измерения длины волны отраженного луча света с применением дисперсных элементов - решетки, интерферометра. В недисперсной инфракрасной спектроскопии использую т источник света с широким диапазоном и акустико-оптический детектор, чувствительный только к тем показателям длины волны, при которых абсорбируется исследуемый газ.
Концентрацию исследуемого газа подсчитывают путем определения разницы абсорбции отраженного света в эталонной газовой камере и в камере с исследуемым газом.
Способ был использован для диагностики у 60 пациентов с диагнозом пептической язвы желудка и двенадцатиперстной кишки, ассоциированной с H.pylori.
Сформированная группа была однородна по возрасту, полу и длительности заболевания.
Обследование больных включало проведение фиброгастроскопии с
быстрым уреазным тестом, взятие биопсии из антрального отдела и тела желудка с гистологической оценкой атрофических изменений слизистой, иммунно-гистохимическим исследованием на H.pylori и многочасовую рН-метрию.
В таблице приведены сравнительные результаты при диагностике заявляемым способом и способом-прототипом.
Заявляемый способ позволяет значительно повысить диагностическую точность определения Н. pylori по сравнению со способом- прототипом в целом в популяции с 90% до 100%, а в группах с высоким риском ложноотрицательных реакций с 76% до 100%.
Применение заявляемого способа показывает его хорошую переносимость больными, отсутствие побочных и аллергических реакций.
При проведении 13С-мочевинного дыхательного теста но заявленному способу определялось статистически значимое большее число пациентов в H.pylori инфицированной популяции, как в популяции в целом, р<0,01, так и в отдельных подгруппах, р<0,001.
При определении рН в антральном отделе желудка на фоне приема раствора мочевины регистрировались статистически значимые более кислые значения рН при использовании лимонной кислоты, р<0,01.
Средние значения DOB, получаемые при проведении 13С-мочевинного дыхательного теста заявленным способом на 30 минуте статистически выше, чем при способе-прототипе, р<0,01.
Полученные данные свидетельствуют о том, что применение заявляемого способа эффективнее по сравнению со способом-прототипом, и позволяет достичь более высокого уровня чувствительности при обследовании на H.pylori, особенно в случаях с высокой вероятностью получения ложноотрицательного результата.
В то же время, при использовании способа-прототипа регистрировался статистически более низкий уровень выявления инфекции
среди H.pylori-положительных пациентов.
Заявляемый способ подтверждается следующими примерами его выполнения.
Пример 1.
Больной К., 33 лет. При фиброгастродуоденоскопии: активная язва на задней стенке двенадцатиперстной кишки размером 0,8×0,3 см.
Во время проведения взяты биоптаты из антрального отдела, тела желудка, проведен быстрый уреазный тест.
После проведения эрадикационной терапии первой линии с назначением последующей кислотосупрессивной терапии ингибиторами протонной помпы, на 4 неделе после окончания лечения отмечается возвращение клинической симптоматики, в связи с чем пациент самостоятельно в течение 4-х дней принимал ингибиторы протонной помпы.
При повторной фиброгастродуоденоскопии язва зарубцевалась, быстрый уреазный тест отрицательный.
При иммунно-гистохимическом исследовании определялась минимальная степень обсеменения H.pylori слизистой оболочки желудка.
Результат 13С-мочевинного дыхательного теста, выполненного но способу- ближайшему аналогу, сомнительный, DOB - 2,9%.
При повторном проведении 13С-мочевинного дыхательного теста но заявляемому способу спустя сутки DOB - 6,4%, результат в комплексе с данными иммунно-гистохимического исследования расценен как положительный.
Рекомендована эрадикационная терапия второй линии
Пример 2.
Больная К., 27 лет. Жалобы на боли в эпигастрии, тяжесть, тошноту после еды. При фиброгастродуоденоскопи выявлена активная язва тела желудка размером 0,4×0,9 см.
Взяты биоптаты из антрального отдела, тела желудка, результат быстрого уреазного теста отрицательный.
При иммунно-гистохимическом исследовании определялась минимальная степень обсеменения Н. pylori слизистой оболочки желудка.
13С-мочевинный дыхательный тест, выполненный по способу-ближайшему аналогу, дал отрицательный результат, DOB - 1,8%.
При повторном проведении 13С-мочевинного дыхательного теста по заявляемому способу спустя сутки DOB - 7,9%, результат в комплексе с данными иммунно-гистохимического исследования расценен как положительный. Назначена эрадикационная терапия первой линии.
Данная полезная модель обеспечивает повышение уровня чувствительности 13С-мочевинного теста в диагностике инфекции Н. pylori у больных с пептической язвой желудка и двенадцатиперстной кишки посредством повышения активности бактериальной уреазы при взаимодействии с раствором лимонной кислоты в полости желудка, снижения моторики желудка и увеличения времени контакта слизистой оболочки с реактивом. Создание оптимальных условий для расщепления 13С-мочевины уреазой Н. pylori дает возможность использовать меньшее количество 13С-мочевины с повышением чувствительности методики, позволяя снизить затраты на проведение теста. Модифицированный 13С-мочевинный дыхательный тест может быть рекомендован для широкого применения в клинической практике. Активация бактериальной уреазы при закислении внутрижелудочной среды, особенно антрального отдела, позволит уменьшить количество используемого реактива для проведения теста и снизить стоимость исследования.
Применение заявляемого способа диагностики приводит к достижению более высоких, диагностически значимых концентраций 13С02 в выдыхаемом воздухе на 30 минуте при использовании меньшего количества реактива по сравнению со способом-прототипом, что позволяет
диагностировать наличие инфекции Н. pylori не только при низкой степени обсемененности бактериями и выраженной атрофии слизистой желудка, но и на фоне приема ингибиторов протонной помпы, снижающих активность уреазы, а также позволяет снизить затраты на проведение процедуры, делая способ более доступным для использования в клинической практике.