СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И ОЧИСТКИ ИНГИБИНА-А ЧЕЛОВЕКА

Способ получения и очистки ингибина-А, заключающийся в приготовлении экстракта из биологических тканей, последовательном осаждении белка органическими растворителями и сульфатом аммония, проведением хроматографии, отличающийся тем, что кусочки плаценты измельчают и гомогенизируют, добавляют физиологический раствор в соотношении 1:2, к полученной массе добавляют бутиловый спирт в расчете 1:10 и оставляют на сутки в холодильнике при t+4C, затем смесь центрифугируют с эфиром 1:3 в течение 10-12 мин при 5000 об/мин, в рефрижераторной центрифуге двукратно, надосадочную жидкость, содержащую ингибин, помещают в колбе в холодильник при t+4C на сутки, затем еще раз центрифугируют и определяют общий белок в надосадочной жидкости, полученный раствор смешивают с равным объемом насыщенного раствора сульфата аммония и центрифугируют в рефрижераторной центрифуге в течении 45-50 мин при 10000 об/мин, полученный осадок растворяют в ТРИС - HCl буфере с рН=7,8, наносят на колонку лектин - сефарозы, уравновешенную ТРИС - HCl буфером, пропускают весь объем растворенного осадка, полученного на предшествующей стадии, колонку промывают 1М раствором хлорида натрия, забуференного ТРИС - HCl буфером, затем элюируют связанный на колонке ингибин-А 0,1М раствором лактозы в боратном буфере рН=9,0, элюат диализуют и концентрируют.