Разработка и оценка диагностической ценности препарата для выявления РНК вирусов Денге (I-IV типов) методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции

2012, Т. 2, № 1-2

Современное лабораторное обеспечение.

Целью настоящей работы явилось сравнительное изучение микрофлоры новорожденных во взаимосвязи с состоянием вагинальных и кишечных микробиоценозов условно здоровых первородящих беременных.

У 24 женщин бактериологическим методом изучали микрофлору содержимого заднего свода влагалища и фекалий на 32 и 38 неделях гестации. У детей, рожденных естественным путем в сроке гестации 39±1 недель, проведена оценка присутствия микроорганизмов в меконии. У беременных на 32 неделе выявлено снижение лактобацилл, но частота их обнаружения к родам достигла 100%. Аналогичная тенденция наблюдалась и в кишечной микрофлоре с достоверным снижением (p < 0,05) бифидо- и лакто-бактерий в различные сроки гестации. Выявленные нарушения носили компенсированный характер, коррекция микрофлоры не проводилась. У новорожденных из мекония выделены золотистый стафилококк (lg 4,5±1,5), кишечная палочка (lg6,0±0,1), энтерококки (lg8,0±0,1) в 40% случаев, гафнии (lg7,0±0,1) коринебактерии и микрококки (lg3,0±0,1) — в 20%, у 40% — меконий был стерилен. Выделение из меко-ния золотистого стафилококка, кишечных палочек и энтерококков корреспондировало с обнаружением данных бактерий только в толстом кишечнике беременных. Гафнии и микрококки обнаружены только в меконии. На 5 сутки энтерококки выделяли у всех новорожденных (lg8,1±1,0), у 86% регистрировали лактобактерии (lg8,1±1,0), у 71% — бифидобактерии (lg6,4±2,8) и банальные эшерихии (lg7,6±2,5).

Таким образом, у обследованных беременных наблюдаются компенсированные дисбиотические изменения в микрофлоре исследуемых биотопов. Обнаружение бактерий в меконии можно связать с нарушением барьерной функции слизистой оболочки кишечника беременной, связанным с дисбио-зом, что приводит к транслокации бактерий факультативной группы в кровяное русло. Гематогенным путем, они могут проникать через трансплацентарный барьер, не вызывая манифестации внутриутробной инфекции. На 5 сутки в фекалиях новорожденных регистрируются представители резидентной микрофлоры толстого кишечника.

РАЗРАБОТКА И ОЦЕНКА ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ РНК ВИРУСОВ ДЕНГЕ (I-IV ТИПОВ) МЕТОДОМ ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ И ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ

Е.В. Найденова, И.В. Шульгина, О.А. Лобовикова, С.А. Щербакова, В.В. Кутырев

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», г. Саратов

Ежегодно из неблагополучных по лихорадке Денге стран на территорию Российской Федерации прибывает более 1 млн человек, и выявляются завозные случаи этой инфекции.

Целью нашей работы являлась государственная регистрация в установленном порядке препарата для выявления РНК вирусов Денге I-IV типов.

Ранее нами был разработан «Набор реагентов для выявления РНК вирусов Денге (I-IV типов) методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с электрофоретическим учетом результатов (ГенДенге-РЭФ)». Для регистрации

разработанного препарата подготовлены проекты научно-технической документации (НТД) (технические условия, инструкция по применению) и проведены технические и медицинские испытания. Технические испытания проводили на базе ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора, в соответствии с НТД. По результатам технических испытаний, образцы разработанных наборов соответствуют всем предъявляемым требованиям. Медицинские испытания набора «ГенДенге — РЭФ» проводили на базе лаборатории вирусологии ФКУЗ «СтавНИПЧИ» Роспотребнадзора и кафедры клинической лабораторной диагностики РАМАПО. В результате медицинских испытаний показано соответствие предоставленных образцов препаратов заявленным показателям чувствительности, специфичности и воспроизводимости при исследовании панели кДНК гомологичных (Денге 1-1У типов) и ге-терологичных (желтой лихорадки, Западного Нила, клещевого энцефалита, ККГЛ) вирусов (8 образцов), а так же искусственно контаминированных проб клинического и биологического материала (41 образец). Панель кДНК была получена в ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского. Набор реагентов «ГенДенге-РЭФ» характеризовался следующими показателями: чувствительность — 1х104 ГЭ/мл СОП К+ Денге; специфичность — 100%; воспроизводимость — 100%.

Таким образом, разработанный набор реагентов «ГенДенге-РЭФ» для диагностики лихорадки Денге соответствует требованиям, предъявляемым к генодиагностическим препаратам, и может быть рекомендован для серийного производства с целью практического использования в санитарно-профилактических и лечебно-профилактических учреждениях.

Работа выполнена в рамках НИР «Разработка современных средств диагностики геморрагической лихорадки Денге, трахомы, лепры, гельминтозов и других забытых тропических болезней, актуальных для стран Центральной Азии (2009—2012 гг.)».

О ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ ОСТРЫМИ КИШЕЧНЫМИ ИНФЕКЦИЯМИ В ПСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ

А.В. Нестерук, В.С. Яковлева, Е.Л. Калинина

Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Псковской области, г. Псков

Эпидемическая обстановка по заболеваемости острыми кишечными инфекциями в период 2007— 2011 гг. оставалась в целом стабильной.

В Псковской области в настоящее время ежегодно регистрируется от 4 тысяч до 5 тысяч случаев ОКИ. В 2011 г. общее число случаев ОКИ установленной и неустановленной этиологии составило 4347 случаев

Острые кишечные инфекции остаются наиболее значимой группой болезней, ответственной за формирование эпидемических очагов. В 2011 г. зарегистрировано 9 очагов инфекции с фекально-оральным механизмом передачи с общим числом пострадавших 122 человека.

Вспышки ОКИ ежегодно составляют от 60 до 90% среди всех зарегистрированных очагов.

Уровни заболеваемости бактериальной дизентерией в Псковской области в последние годы