Новый способ целенаправленной цитокиновой иммуномодулирующей и гепатопротекторной терапии при остром гнойном холангите

размерах, напряжена, инфильтрирована, с участками размягчений и жирового некроза. При гистологическом исследовании были отмечены обширные очаги некроза ацинусов.

В третьей серии у животных в комплексе лечения использованы малые дозы ПЭТ. Собаки быстро выходили из наркоза. В этой серии опытов отмечалось достоверное снижение ферментной активности крови и приближение к исходным цифрам через 48-72 часа от начала лечения. Из 10 собак с деструктивным панкреатитом, которых лечили по вышеописанной методике погибли трое на 5-7 сутки (30%). Остальные 7 выведены из опыта путем передозировки эфира на 10,20 сутки.

При вскрытии животных через 10 суток: явлений перитонита нет, поджелудочная железа розового цвета, уплотнена, более темная на местах некроза. При гистологическом исследовании отмечено формирование нежноволокнистой соединительной ткани на местах некроза ацинусов.

Через 20 суток: поджелудочная железа незначительно уплотнена, розового цвета. Гистологическое исследование показало, что в поджелудочной железе погибшие ацинусы замещены соединительной тканью.

Таким образом, исходя из полученных экспериментальных данных можно сделать следующие выводы:

1. Клинические, морфологические и гистологические изменения при данной модели заболевания свидетельствуют о развитии деструктивного процесса в поджелудочной железе уже в первые сутки, а в последующие дни прогрессирование панкреонекроза служит причиной гибели животных в 100 % случаев через 1-3 сутокбезлечения.

Использование малых доз ПЭТ в комплексе лечения оказывает противовоспалительное действие, способствует ускоренному отторжению некротических тканей, стиханию воспалительного процесса, также стимулирует регенеративные процессы в поджелудочной железе, тем самым позволяет снизить летальностьуэкспериментальныхживотныхс60% до 30%.

ТАЙГУЛОВ Е.А., ЦОЙ О.Г., БАЛЖАНОВ Ж.М.

НОВЫЙ СПОСОБ ЦЕЛЕНАПРАВЛЕННОЙ ЦИТОКИНОВОЙ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЙ И ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ОСТРОМ ГНОЙНОМ ХОЛАНГИТЕ

АО «Медицинский университетАстана», г.Астана, Республика Казахстан

Острый гнойный холангит (ОГХ) является наиболее тяжелым заболеванием неотложной гепатобилиарной хирургии, сопровождается высокой летальностью (15-60%) и именно ему принадлежит ведущая роль в развитии билиарного сепсиса. Основным патогенетическим механизмом при этом является нарушение функции печеночных макрофагов (клеток Купфера), сопровождающееся недостаточностью барьера между эндотоксинами в синусоидах печени и общим кровотоком, вследствие чеговозникаетсистемнаяэндотоксемия, SIRS, сепсис, полиорганннаянедостаточность.

Целью настоящего исследования является создание нового способа целенаправленной фармакотерапии рекомбинантным 11_-2(ронколейкином) вкомплексномлечении ОГХ.

Материал и методы исследования. Транспортные гуморальные системы с ронколейкином, включенным в эритроцитарные оболочки, создавались в лабораторных условиях с использованием венозной крови от 15 половозрелых беспородных белых крыс и 20 доноров. Экспериментальный раздел исследования по изучению целенаправленной доставки цитокинового препарата в различные органы (печень, селезенка, легкие) лабораторныхживотных выполнен на 30 крысах, разделенных на три группы по 10 животных в каждой. Группа А - контрольная; группа В - животные, которым препарат вводился традиционно внутривенно; группа С - крысы, получавшие ронколейкин, включенный в аутологичные эритроцитарные оболочки. Объектом клинической части работы являлись 60 больных ОГХ, условно поделенных натри равночисленные группы: 1) контрольную, получавшуютрадиционное консервативное лечение; 2) 1-ю основную, которой традиционная консервативная терапия была дополнена внутривенной инфузией ронколейкина и 3) 2-ю основную, получавшую ронколейкин в составе аутологичных эрироцитарныхоболочек- эритроцитарные фармакоциты (ЭФ).

Результаты исследования и ихобсуждение.

Избранная цельреализована посредством последовательного решениятрехконкретныхзадач:

1. Конструирование транспортных систем с ронколейкином, на основе эритроцитарных оболочек -

ЭФ.

28 Батыс Казахстан медицина журналы №3 (31) 2011 ж. / ' '

__/ Медицинский журнал Западного Казахстана №3 (31) 2011 г.

2. Исследование кумулятивных свойств ронколейкина в органах экспериментальных животных при традиционном внутривенном ихвведении, атакжевсоставе ЭФ.

3. Клинические испытания эффективности ЭФ с ронколейеином в комплексном лечении больных

ОГХ.

На первом этапе в лабораторных опытах проведено изучение возможности включения ронколейкина в эритроцитарные оболочки методом гипоосмотического гемолиза. Концентрация ^-2 в суспензии ЭФ, их супернатанте и непосредственно в них определялась методом иммуно-ферментного анализа (ИФА). Установлено, что содержание исследуемого цитокина было в супернатанте ЭФ недостоверно выше, чем в суспензии. Тогда как в гемолизате ЭФ концентрация ^-2 превышала таковую в суспензии и супернатанте соответственно в 6,3 и 5,7 раза (р<0,001). Результаты выполненных лабораторных опытов свидетельствовали о возможности включения ронколейкина в эритроцитарные оболочки в высоких концентрациях, т.е. осоздании ЭФсрекомбинантным цитокином.

Второй экспериментальный этап выполнен на 30 беспородных белых крысах. В норме ( группа A) наибольшая концентрация ^-2 определялась в печени; она была почти в 1,5 раза выше, чем в сыворотке крови, и более чем в 2 раза превышала таковую в легких и в селезенке. У крыс, которым ронколейкин вводился внутривенно, согласно сопроводительной рекомендации (группа В), через 16 часов содержание ^-2 в сыворотке крови увеличивалось на 35,5%. В печени концентрация интерлейкина была недостоверно выше исходной, влегкихив селезенкетакжестатистически незначимо ниже.

В указанные сроки после внутривенного введения ронколейкина, включенного в аутологичные эритроцитарные оболочки (группа С), уровень ^-2 был в 3 раза выше исходного и в 3,2 раза превышал аналогичный показательживотных2-й группы (р<0,05).

Полученные результаты экспериментальных исследований обосновали целесообразность назначения в комплексном лечении больных ОГХ ЭФ с ронколейкином, обладающих целенаправленным, в отношении печени, кумулятивным и пролонгированным эффектом.

Третий этап работы является перспективным рандомизированным клиническим испытанием клинико-лабораторной эффективности ЭФ с ронколейкином в комплексном лечении больных ОГХ.

Установлено, что применение ронколейкина, включенное в аутологичные эритроцитарные оболочки, сопровождается более ранним, по сравнению с пациентами контрольной и 1-ой основной групп, исчезновением болевого синдрома, гипертермии, желтухи, статистически достоверным снижением содержания билирубина в сыворотке крови на 10-е сутки после декомпрессии желчных путей. В эти же сроки статистически значимо быстрее, чем в сравниваемых группах больных, нормализовалась концентрация ферментов - показателей уровня цитолиза (АЛТ, АСТ).

Изучение основных показателей клеточного и гуморального звеньев иммунитета, фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов показало, что дополнение комплексной консервативной терапии внутривенным введением ЭФ с ронколейкином сопровождалось более ускоренной динамикой регресса сдвигов количественного состава основных показателей клеточного звена (СД20+, СД25+, СД56+, СД95+, НLА-клеток, соотношения СД4+/СД8+), а также показателей фагоцитарной активности (фагоцитарная активность, фагоцитарноечисло, стимулированный фагоцитоз, НСТ-тест).

Применение ЭФ с ронколейкином, в отличие от традиционного внутривенного введения препарата, через 12 часов приводило к двукратному повышению уровня ^ -2 в желчи. Местные иммунологические последствия при этомхарактеризовалисьдостовернымувеличениемвжелчи содержания 1дМ и 1дО.

Таким образом, разработанный способ целенаправленной фармакотерапии ронколейкина при ОГХ позволил более чем в 4 раза снизить частоту послеоперационных осложнений. Сроки стационарного лечения по сравнению с контрольной группой (1-ая) и больными, получавшими ронколейкин внутривенно (2-ая), сократились соответственно на 3,0 и 5,8 дней.

Выводы:

1. Методом гипоосмотического гемолиза возможно создание ЭФ с высокой концентрацией ронколейкина.

2. При введении внутривенно ронколейкина, встроенного внутрь аутологичных эритроцитарных оболочек, препарат в высоких концентрацияхдлительно накапливается в печени.

3. Применение в комплексном лечении ОГХ ЭФ с ронколейкином сопровождается выраженным системным и местным иммуномодулирующим и гепатопротекторным эффектом.

Клиническая эффективность ронколейкина, включенного в аутологичные эритроцитарные тени, у больныхОГХсочетаетсясчетырехкратнымуменьшением гнойныхпослеоперационных осложнений.

„ , _I I „„ _______ ^^ Батыс Казахстан медицина журналы №3 (31) 2011

Медицинский журнал Западного Казахстана №3 (31) 2011 г. \ ___