Изменение клеточного цикла в участках кишечной метаплазии на фоне хронического атрофического гастрита

Литература

1. Дегтярева, Л. В. Эпизоотологическое значение некоторых видов иксодовых клещей в природном очаге туляремии Ставропольского края / Л. В. Дегтярева, Н. И. Тихенко, Б. И. Левченко // Материалы науч..-практ. конф., посвящ. 100-летию образования проти-вочум. службы России. - Саратов, 1997. - Т. 1. - С. 35.

2. Эпизоотическая значимость различных биотопов микроочага «Сенгилеевский» / Б.И. Левченко [и др.] // Сб. науч. трудов, посвящ. 50-летию Дагестанской противо-чум. станции. - Махачкала: ДПЧС, 2002. - С. 81-85.

3. Роль землероек белозубок в эпизоотическом процессе природного очага туляремии степного типа /

ЭПИЗООТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ

ПРИРОДНОГО ОЧАГА ТУЛЯРЕМИИ

В СТАВРОПОЛЬСКОМ КРАЕ

П. Н. ПОПОВ, Л. В. РТИЩЕВА, Л. В. ДЕГТЯРЕВА,

Б. И. ЛЕВЧЕНКО, Н. И. ТИХЕНКО, В. В. ОСТАПОВИЧ

За период 1972-2010 гг. прослежена эпизоотическая активность природного очага туляремии в Ставропольском крае. Подтверждена связь эпизоотий с численностью мелких млекопитающих. Наиболее высокие волны эпизоотической активности приходились на 1972- 1974 и 1981-1982 гг. С 1983 по 2010 г. отмечается снижение лоймопотенциала очага, при этом эпизоотии имели локальный характер. Снижение активности природного очага туляремии обусловлено тем, что в течение многих лет интенсивная деятельность человека сказалась на структуре и численности основных носителей инфекции. Полученные данные при проведении эпизоотологического мониторинга за природным очагом туляремии Ставропольского края свидетельствуют о непрерывности эпизоотического процесса, что подтверждает необходимость придания ему статуса природного очага туляремии степного типа с постоянной эпизоотической активностью.

Ключевые слова: мелкие млекопитающие, природный очаг туляремия, эпизоотии

© Коллектив авторов, 2011 УДК 616.53.

Б. И. Левченко [и др.] // Эрдэм шинжилгээний бутэ-эл. - Уланбатор, 1999. - № 7. - С. 410.

4. Эпидемиологический надзор за туляремией: методические указания МУ 3.1 2007-05. - М., 2005. - 36 с.

5. Мирошниченко, М. А. Краткая история туляремии в Ставропольском крае за период с 1938 по 1961 гг / М. А. Мирошниченко // Труды Армянской противочум. станции. - Ереван, 1964. - Вып. 3. - С. 241-262.

6. Заболевания людей туляремией в природном очаге степного типа в Ставропольском крае / Н. И. Тихенко [и др.] // Эпидемиол. и инфекцион. болезни. - 2000. -№ 2. - С. 15-16.

EPIZOOTIC ACTIVITY OF NATURAL FOCI OF TULAREMIA IN THE STAVROPOL TERRITORY

POPOV P. N., RTISCHEVA L. V., DEGTYAREVA L. V., LEVCHENKO B. I., TIKHENKO N. I., OSTAPOVICH V. V.

During the period of 1972-2010 the epizootic activity of a natural focus of tularemia in the Stavropol Territory was traced. The relationship of epizootics with the number of small mammals is confirmed. The highest wave of epizootic activity was in 1972 - 1974 and 1981-1982. From 1983 to 2010 there was a decline of the focus loymopotential, and the epizootics had a local character. Decrease in the activity of a natural focus of tularemia is caused by the fact that for many years intensive human activity has affected the structure and size of the main carriers of the infection. The data obtained during the epizootic monitoring of natural foci of tularemia in the Stavropol Territory indicate continuity of the epizootic process, which confirms the need to give it the status of a natural focus of a steppe type tularemia with constant epizootic activity.

Keywords: small mammals, natural focus, tularemia, epizootic

ИЗМЕНЕНИЕ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА

В УЧАСТКАХ КИШЕЧНОЙ МЕТАПЛАЗИИ

НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОГО АТРОФИЧЕСКОГО ГАСТРИТА

С. З. Чуков1, А. В. Балабеков2, Ю. В. Громова2, М. Б. Полякова1

1 Ставропольская государственная медицинская академия

2 Ставропольский краевой клинический центр специализированных видов медицинской помощи

Чуков Сергей Залимович, доктор медицинских наук, профессор кафедры патологической анатомии с курсом судебной медицины Ставропольской государственной медицинской академии, тел.: (8652) 713467; e-mail: diukov@mail.ru.

Балабеков Андрей Вагифович, кандидат медицинских наук, врач патологоанатомического отделения Ставропольского краевого клинического центра специализированных видов медицинской помощи, тел.: 89280126477.

Громова Юлия Владимировна, врач патологоанатомического отделения Ставропольского краевого клинического центра специализированных видов медицинской помощи, тел.: (8652) 718102.

Полякова Мария Борисовна, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры патологической анатомии с курсом судебной медицины Ставропольской государственной медицинской академии; тел.: (8652) 713467.

Рак желудка развивается с высокой долей вероятности в случаях прогрессирования H. ру/оп-ассоциированного антрального хронического гастрита с распространением поражения на фундальный отдел желудка и формированием мультифокального атрофического гастрита, с исчезновением главных желудочных желез и появлением нового типа слизистой оболочки - кишечной метаплазии [2].

В России рак желудка (РЖ) занимает второе место в структуре заболеваемости мужчин (14,7 %) и третье - в структуре заболеваемости женщин (10,8 %) и является причиной, по меньшей мере, 750 тысяч случаев смертей в год во всем мире [1].

В 1992 году P. Correa постулировал последовательность развития патологии слизистой оболочки

и ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ. ОНКОЛОГИЯ

желудка от нормального состояния до возникновения рака [2]. По его мнению, именно цепь «атрофия-метаплазия-дисплазия» является каскадом, ведущим к раку желудка.

Кишечная метаплазия слизистой оболочки желудка представляет собой неопухолевое изменение клеточного фенотипа, которое обычно возникает в ответ на персистирование неблагоприятных условий окружающей среды. Измененный фенотип является следствием соматических мутаций стволовых клеток или эпигенетических изменений, приводящих к нарушенной дифференцировке клеток потомства. Последующее возникновение измененного фенотипа в качестве доминирующей популяции является результатом селекционного давления, оказываемого измененной микросредой [5]. В слизистой оболочке желудка кишечная метаплазия (КМ) представляет собой переход от желудочного эпителиального фенотипа к тонко- или толстокишечному эпителиальному фенотипу [6]. Метаплазия всегда ассоциируется с патологическим усилением роста клеток, например, в процессе регенерации после повреждения слизистой оболочки желудка, и может быть транзиторной. Персистирование метаплазии может свидетельствовать об изменении наследственных механизмов, ответственных за клеточное деление, о повреждении стволовых клеток и может указывать на наличие длительной эпигенетической модуляции нормальной последовательности генной экспрессии, которая происходит в процессе клеточной дифференцировки и определяет окончательный клеточный фенотип. Последнее предположение согласуется с адаптивным характером метаплазии и предполагает возможность реверсии [3]. Частота выявления КМ тесно коррелирует с уровнем смертности от РЖ в человеческой популяции, а в проспективных исследованиях показано, что эти состояния часто предшествуют развитию РЖ. КМ чаще обнаруживается и имеет более обширный характер распространения в желудках пациентов, страдающих РЖ, чем у пациентов с ЯБ, и существуют гистологически доказанные случаи развития в ме-таплазированных участках РЖ, особенно кишечного типа [4].

Цель исследования: изучить экспрессию маркеров клеточного обновления - мутантного протеина р53 и протеина К1-67 в слизистой оболочке желудка при кишечной метаплазии эпителия на фоне хронического атрофического гастрита.

Материал и методы. Исследованы биоптаты слизистой оболочки желудка 180 последовательных пациентов с диспептическими жалобами. Наличие хронического атрофического гастрита установлено у 55 пациентов. Контрольную группу составили 15 Н. ру!оп-негативных добровольцев, у которых в анамнезе отсутствовали заболевания желудочно-кишечного тракта, и при гистологическом исследовании слизистая оболочка желудка оценивалась как практически неизмененная. Биоптаты (2 из антрального отдела, 1 из области инцизуры и 2 из фундальной слизистой оболочки желудка) фиксировали в 10 % нейтральном формалине, после чего подвергали стандартной гистологической обработке с окраской гематоксилином-эозином и пикрофуксином по Ван Гизону; состояние железистого аппарата слизистой оболочки оценивали при окраске альциановым синим при рН 1 и 2,5 в сочетании с ШИК-реакцией.

Экспрессию мутантного протеина р53 и протеина К1-67 в слизистой оболочке желудка определяли иммуногистохимически на парафиновых срезах толщиной 5 мкм. Экспрессия протеина К1-67 служила

маркером пролиферативной активности клеток желудочного эпителия, экспрессия мутантного протеина р53 служила маркером нарушения процессов апоп-тоза. Для иммуногистохимической идентификации протеинов К1-67 и р53 использовали первичные антитела к этим антигенам производителя DakoCytomation (Denmark-USA), обработку материала проводили в соответствии с инструкциями производителя. Докраску ядер осуществляли гематоксилином Майера. В гистологических препаратах подсчитывали не менее 1000 клеток в 5 произвольных полях зрения в области пролиферативного компартмента для определения М-67-позитивных элементов. Затем подсчитывали процент М-67-позитивных клеток, результат выражали как индекс метки (ИМ) М-67, в процентах. Результаты выявления протеина р53 выражали как процент позитивных результатов от общего числа исследованных срезов, при этом позитивными считались результаты ядерного окрашивания не менее 30 % изученных клеток. Полученные данные обрабатывали статистически (хи-квадрат и точный критерий Фишера).

Результаты и обсуждение. В биоптатах пациентов с хроническим атрофическим гастритом выявлены различная частота и степень выраженности атрофии в зависимости от исследуемого отдела желудка. В антральном отделе атрофические изменения различной степени преобладали у 20 из 55 пациентов (36,36 %), из них слабая, умеренная и выраженная степени атрофии определялись соответственно у 5, 9 и 6 пациентов. Корпус-доминирующий хронический атрофический гастрит диагностирован у 16 пациентов из 55 (29,09 %), при этом слабая, умеренная и выраженная степени атрофии определялись соответственно у 3, 6 и 7 пациентов. Мультифокальный хронический атрофический гастрит диагностирован у 19 из 55 пациентов (34,55 %) со слабой, умеренной и выраженной степенями атрофии соответственно у 6, 6 и 7 пациентов. Кишечная метаплазия выявлялась у всех пациентов с хроническим атрофическим гастритом независимо от степени выраженности атрофии. В соответствии с топографическим распределением кишечная метаплазия желудочного эпителия обнаружена у 36 из 55 (65,5 %) пациентов в антральном отделе, у 34 из 55 (61,8 %) пациентов в области инцизуры и у 24 из 55 (43,6 %) пациентов в теле желудка.

антрум инцизура тело

контроль  кишечная метаплазия

Рис. 1. Экспрессия протеина Ю-67 у исследуемых пациентов * - Р < 0,05 по сравнению с контрольной группой

Иммуногистохимическое исследование маркеров клеточного обновления показало следующие результаты. ИМ Ю-67 в биоптатах контрольной группы составил

в среднем 28,2±6,7 для антрального отдела, 26,4±8,8 для инцизуры и 26,1±8,4 для тела желудка. ИМ Ю-67 в биоптатах пациентов с хроническим атрофическим гастритом с кишечной метаплазией эпителия составил в среднем 49,2±6,2 для антрального отдела, 48,4±8,6 для инцизуры и 49,6±7,4 для тела желудка. Иммуногистохимически экспрессия протеина Ю-67 выявлялась в области шеечных отделов желудочных желез, что топографически соответствовало расположению пролиферативного компартмента слизистой оболочки. Полученные результаты достоверно превышали соответствующие показатели в контроле (р<0,05 для каждой локализации), но не имели достоверных различий в зависимости от локализации очагов кишечной метаплазии на фоне хронического атрофического гастрита.

Рис. 2. Экспрессия мутантного протеина р53 у исследуемых пациентов

Экспрессия р53 в ядрах эпителиальных клеток слизистой оболочки желудка в контрольной группе и при хроническом неатрофическом гастрите не выявлялась. Экспрессия Р53 в ядрах желудочных эпителиоцитов при кишечной метаплазии выявлялась в антральном отделе у 21 (58,3 %) пациентов, в области инцизуры -

у 20 (58,8 %) и в теле - у 14 (58,3 %) пациентов. Таким образом, развитие кишечной метаплазии на фоне хронического атрофического гастрита сопровождалось нарушением процессов апоптоза желудочного эпителия, но частота выявления экспрессии мутантного гена р53 не различалась достоверно в зависимости от локализации очагов кишечной метаплазии.

Заключение. Проведенное исследование выявило нарушение процессов клеточного цикла при кишечной метаплазии желудочного эпителия на фоне хронического атрофического гастрита, что документировалось повышением экспрессии мутантного белка Р53 и протеина Ki-67 в слизистой оболочке желудка. Полученные результаты свидетельствуют о несостоятельности процессов апоптоза и усилении процессов пролиферации, что служит фактором риска развития рака желудка у пациентов с хроническим атрофическим гастритом.

Литература

1. Пасечников, В. Д. Эпидемиология рака желудка / В. Д. Пасечников, С. З. Чуков // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2002. -Т. 12. - № 3. - С. 18-26.

2. Correa, P. Human gastric carcinogenesis: a multistep and multifactorial process. First American Cancer Society Award Lecture on Cancer Epidemiology and Prevention / P. Correa // Cancer Res. -1992. - Vol.52. - P. 6735-6742.

3. Farber, E. Reversible and irreversible lesions in processes of cancer development / E. Farber // lARC Sci. Publ. - 1980. - P. 143-151.

4. Helicobacter and Cancer Collaborative Group. Gastric cancer and H. pylori: a combined analysis of 12 case control studies nested within prospective cohorts // Gut. - 2001. - Vol. 49. - P. 347-353.

5. Scotiniotis, I. A. Altered gastric epithelial cell kinetics in Helicobacter pylori-associated intestinal metaplasia: implications for gastric carcinogenesis / I. A. Scotiniotis, T. Rokkas, E. E. Furth // Int. J. Cancer. - 2000. - Vol.85, № 2. - P. 192-200.

6. Stemmermann, G. N. Intestinal metaplasia of the stomach. A status report / G. N. Stemmermann // Cancer. - 1994. - Vol. 74. - P. 556-564.

ИЗМЕНЕНИЕ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА В УЧАСТКАХ КИШЕЧНОЙ МЕТАПЛАЗИИ НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОГО АТРОФИЧЕСКОГО ГАСТРИТА

С. З. ЧУКОВ, А. В. БАЛАБЕКОВ,

Ю. В. ГРОМОВА, М. Б. ПОЛЯКОВА

Иммуногистохимически и гистологически изучена экспрессия маркеров клеточного обновления - мутантного протеина р53 и протеина Ki-67 в биоптатах слизистой оболочки желудка при кишечной метаплазии эпителия на фоне хронического атрофического гастрита. Использована новая международная система (OLGA) оценки выраженности атрофии слизистой оболочки желудка. Показано, что при хроническом

H. pylori'-ассоциированном гастрите экспрессия протеинов Ki-67 и р53 увеличивается по мере нарастания атрофии слизистой оболочки желудка. Результаты свидетельствуют о несостоятельности процессов апоптоза и усилении процессов пролиферации, что служит фактором риска развития рака желудка у пациентов с хроническим атрофическим гастритом.

Ключевые слова: H. Pylori, атрофия, пролиферация, апоптоз, гастрит

CHANGES OF THE CELLULAR CYCLE

IN AREAS OF METAPLASIA

AT CHRONIC ATROPHIC GASTRITIS

CHUKOV S. Z., BALABEKOV A. V.,

GROMOVA J. V., POLYAKOVA M. B.

The aim of the study was to evaluate the expression of P53 and Ki-67 proteins in stomach mucosa in H. pylori-associated chronic atrophic gastritis according to the stage of atrophy.

The immunohistochemical and histological study of gastric mucosal biopsies from dyspeptic patients was performed. The new international system of gastric mucosal atrophy evidence (OLGA) was used.

The rates of cellular proliferation increase along the rising of the stage of stomach mucosal atrophy in H. pylori-associated chronic atrophic gastritis.

The results demonstrate failure of apoptosis and enhancement of proliferation that is a risk factor for gastric cancer in patients with chronic atrophic gastritis.

Key words: H. pylori, atrophy, proliferation, gastritis