СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОРОШКА ИЗ ЛИЧИНОК ТРУТНЕЙ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ И ПОРОШОК НА ЕГО ОСНОВЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БАЛАНТИДИОЗА И САЛЬМОНЕЛЛЕЗА
METHOD FOR MAKING DRONE LARVA POWDER FOR INCREASING ANIMAL'S BODY RESISTANCE AND BASED POWDER FOR TREATING BALANTIDIASIS AND SALMONELLOSIS

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способу получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных и порошку на его основе для лечения балантидиоза и сальмонеллеза, и может быть использовано для повышения общей и специфической стимуляции организма животных при лечении балантидиоза и сальмонеллеза.
Уровень техники
Известен способ приготовления порошка «Билар» из биомассы трутневых, маточных личинок и личинок рабочих особей пчел путем сублимационного вакуумного высушивания, при этом порошок «Билар» не токсичен, не патогенен, не вызывает побочных эффектов и аллергию (см. «Биологическая и пищевая ценность порошков «БИЛАР», А.И.Черкасова, И.А.Прохода, С.К.Мельникова, журнал Пчеловодство, №2, 2005, с. 58-59).
Недостатком данного способа являются высокие затраты на получение лечебного продукта.
Известен способ получения спиртового экстракта личинок большой восковой моли, включающий сбор личинок, их гомогенизацию, с добавлением стабилизирующей среды (см. «Новая жизнь старого лекарства», А.К.Рачков, М.Н.Конрашова, Н.А.Спиридонов, журнал Пчеловодство №5, 2000, с. 58-59).
Недостатком данного способа является непродолжительное время хранения препарата.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятым авторами за прототип является способ приготовления препарата для стимуляции организма животных из личинок трутней, включающий сбор личинок трутней, их гомогенизацию с добавлением стабилизирующей среды, при этом перед гомогенизацией личинки трутней замораживают при температуре (-4; -5°С) в течение 12-14 часов, затем размораживают в течение 3-5 минут до +18°С, при этом в качестве стабилизирующей среды используют 5% раствор глюкозы в соотношении 1:10 с добавлением 5% раствора хлороформа или 2% салициловой кислоты с последующей сублимацией, причем сублимацию проводят в вакуумной камере при температуре подогрева полок до 30-45°С, при этом при достижении температуры препарата 20-22°С температуру полок снижают до 25°С и производят досушивание в течение 22-24 часов (см. пат. RU №2258522, МПК А61K 35/64, А61Р 37/04, опубл. 20.08.2005).
Недостатком данного способа получения препарата является его невысокий срок хранения и эффективность повышения общей и специфической стимуляции организма животных при лечении балантидиоза и сальмонеллеза.
Раскрытие изобретения
Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных и порошка на его основе для лечения балантидиоза и сальмонеллеза, обладающего длительным сроком хранения, повышением общей резистентности организма, увеличением количества эритроцитов, гемоглобина и биохимических показателей крови животных при лечении балантидиоза и сальмонеллеза, а также получения более дешевого и доступного препарата в виде порошка.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к длительному хранению до 2-х лет, повышению общей резистентности, увеличению количества эритроцитов, гемоглобина и биохимических показателей крови животных, получению более дешевого и доступного препарата.
Технический результат достигается с помощью способа получения порошка для повышения резистентности организма животных, включающий сбор личинок трутней, их гомогенизацию, при этом перед гомогенизацией личинки трутней замораживают при температуре (-4; -5°С) в течение 12-14 часов, затем размораживают в течение 3-5 минут до +18°С и фасуют, при этом дополнительно перед гомогенизацией после первого замораживания и размораживания проводят второе замораживание при температуре (-18)-(-20)°С в течение 60-72 часов с последующими размораживанием при комнатной температуре, сушкой под потоком теплого воздуха при температуре (+55)-(+60)°С до полного исчезновения жидкости с поверхности личинок, досушивании и обеззараживании при температуре (+80)-(+85)°С в течение 3,5-4,0 часов, при этом гомогенизацию сухих личинок трутней ведут в течение 1-2 минут, а фасование проводят в вакуумную упаковку.
В способе сбор личинок трутней проводят в 10-12-дневном возрасте вместе с трутневым молочком.
Технический результат достигается с помощью порошка для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных, включающий порошок из личинок трутней 10-12-дневного возраста вместе с трутневым молочком, при этом он дополнительно содержит порошок тилозина и диметридазола при следующем соотношении компонентов, г/кг:
порошок тилозина
0,090-0,010
порошок диметридазола
0,200-0,225
порошок из личинок трутней
остальное
Таким образом, введение в способ получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных повторного замораживания дает возможность получить при гомогенизации более однородную структуру с меньшим размером частиц, из которой затем получают порошок, при этом последний лучше и в короткие сроки всасывается и выводится организмом животных, а внесение порошка тилозина и диметридазола в порошок из личинок трутней, совместно, дает возможность снизить потери в привесах при лечении балантидиоза и сальмонеллеза и дает высокий терапевтический эффект.
Сущность способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных и порошка на его основе для лечения балантидиоза и сальмонеллеза заключается в следующем.
Проводят сбор личинок трутней в 10-12-дневном возрасте вместе с трутневым молочком, затем их гомогенизируют, при этом перед гомогенизацией личинки трутней замораживают при температуре (-4; -5°С) в течение 12-14 часов, затем размораживают в течение 3-5 минут до +18°С и фасуют, при этом дополнительно перед гомогенизацией после первого замораживания и размораживания проводят второе замораживание при температуре (-18)-(-20)°С в течение 60-72 часов с последующими размораживанием при комнатной температуре, сушкой под потоком теплого воздуха при температуре (+55)-(+60)°С до полного исчезновения жидкости с поверхности личинок, досушивании и обеззараживании при температуре (+80)-(+85)°С в течение 3,5-4,0 часов, при этом гомогенизацию сухих личинок трутней ведут в течение 1-2 минут, а фасование проводят в вакуумную упаковку.
В полученный порошок из личинок трутней 10-12-дневного возраста вместе с трутневым молочком добавляют и перемешивают до однородного состояния порошок тилозина и диметридазола при следующем соотношении компонентов, г/кг:
порошок тилозина
0,090-0,100
порошок диметридазола
0,200-0,225
порошок из личинок трутней
остальное
Осуществление изобретения
Примеры конкретного выполнения способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных и порошок на его основе для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных.
Пример 1. На пасеке проводят сбор 10-12-дневного возраста личинок трутней вместе с трутневым молочком, затем перед гомогенизацией их замораживают при -4°С, выдерживают в течение 12 часов и размораживают в течение 3-5 минут при комнатной температуре (+18-20°С), затем после размораживания перед гомогенизацией личинки трутней вторично замораживают в течение 24 часов (-5°С) и снова размораживают в течение 8-10 часов, затем проводят сушку под потоком теплого воздуха при температуре 25-30°С и досушивание в термостате при температуре 120-125°С в течение 48-50 часов, при этом сухой материал гомогенизируют в течение 30-60 с.
Результат: получают однородный порошок красно-коричневого цвета, обсемененный микрофлорой, с запахом гари, специфичным неприятным запахом и плохо смачивающимся.
Для получения порошка для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных на основании способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных берут порошок из личинок трутней 10-12-дневного возраста вместе с трутневым молочком и в него дополнительно вносят порошок тилозина и диметридазола при следующем соотношении компонентов, г/кг:
порошок тилозина
0,050
порошок диметридазола
0,150
порошок из личинок трутней
остальное
Результат: для создания терапевтической дозы в организме животных расходовалось много порошка из личинок трутней, а при необходимой дозе порошка из личинок трутней не достигалась терапевтическая доза антибиотиков.
Пример 2. Проводят аналогично примеру 1, но перед гомогенизацией личинки трутней замораживают при -5°С, выдерживают в течение 14 часов и размораживают в течение 3-5 минут при комнатной температуре (+18-20°С), затем после размораживания перед гомогенизацией личинки трутней вторично замораживают в течение 60 часов (-18°С) и снова размораживают в течение 4,0-5,0 часов, затем проводят сушку под потоком теплого воздуха при температуре 55°С до полного исчезновения жидкости с поверхности личинок и досушивание в термостате при температуре 80°С в течение 3,5-4,0 часов, при этом сухой материал гомогенизируют в течение 30-60 с.
Результат: получают однородный порошок красно-коричневого цвета, без микрофлоры, с приятным специфическим запахом и хорошо смачивающимся.
Получение порошка для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных на основании способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных проводят аналогично примеру 1, но берут порошок из личинок трутней 10-12-дневного возраста вместе с трутневым молочком и в него дополнительно вносят порошок тилозина и диметридазола при следующем соотношении компонентов, г/кг:
порошок тилозина
0,09
порошок диметридазола
0,20
порошок из личинок трутней
остальное
Результат: при задаче порошка необходимые концентрации всех действующих веществ были достигнуты в нужных соотношениях. Ярко проявились все необходимые терапевтические эффекты.
Пример 3. Проводят аналогично примеру 1, но вторичное замораживание проводят в течение 72 часов при температуре (-20°С), затем размораживают в течение 4,0-5,0 часов, проводят сушку под потоком теплого воздуха при температуре 60°С до полного исчезновения жидкости с поверхности личинок и досушивание в термостате при температуре 85°С в течение 3,5-4,0 часов, при этом сухой материал гомогенизируют в течение 30-60 с.
Результат: получают однородный порошок красно-коричневого цвета, без микрофлоры, с приятным специфическим запахом и хорошо смачивающимся.
Получение порошка для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных на основании способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных проводят аналогично примеру 1, но берут порошок из личинок трутней 10-12-дневного возраста вместе с трутневым молочком и в него дополнительно вносят порошок тилозина и диметридазола при следующем соотношении компонентов, г/кг:
порошок тилозина
0,100
порошок диметридазола
0,225
порошок из личинок трутней
остальное
Результат: при задаче порошка необходимые концентрации всех действующих веществ были достигнуты в нужных соотношениях. Ярко проявились все необходимые терапевтические эффекты.
Пример 4. Проводят аналогично примеру 1, но вторичное замораживание проводят в течение 75 часов при температуре (-20°С), затем размораживают в течение 4-5 часов, проводят сушку под потоком теплого воздуха при температуре 65°С до полного исчезновения жидкости с поверхности личинок и досушивание в термостате при температуре 90°С в течение 3,5-4,0 часов, при этом сухой материал гомогенизируют в течение 30-60 с.
Результат: получают однородный порошок красно-коричневого цвета, без микрофлоры, с приятным специфическим запахом и хорошо смачивающимся.
Получение порошка для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных на основании способа получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных проводят аналогично примеру 1, но берут порошок из личинок трутней 10-12-дневного возраста вместе с трутневым молочком и в него дополнительно вносят порошок тилозина и диметридазола при следующем соотношении компонентов, г/кг:
порошок тилозина
0,200
порошок диметридазола
0,300
порошок из личинок трутней
остальное
Результат: при задаче порошка необходимые концентрации всех действующих веществ были достигнуты в нужных соотношениях. Терапевтические эффекты по цифровым показателям проявились аналогично примерам 2 и 3, однако произошло увеличение себестоимости готового препарата - порошка.
Таким образом, наиболее оптимальными являются способ получения порошка из личинок трутней для повышения резистентности организма животных и порошок на его основе для лечения балантидиоза и сальмонеллеза по примерам 2 и 3.
В таблице 1 дан химический состав сырья и готового препарата -порошка, а также его токсичность. Как показывают исследования химического состава, потерь аминокислот и БЭВ в готовом порошке нет после приготовления. Порошок не токсичен.
Аминокислоты являются незаменимыми структурными элементами белка органов и тканей животного, при этом отдельные аминокислоты обладают специфическими функциями регуляторов нормального состояния организма и его обмена веществ, и поэтому необходимы для образования «защитных» веществ (антител и т.д.). Аминокислоты входят в состав выделений желез внутренней и внешней секреции, в частности гормонов, ферментов и других регуляторов обмена веществ и содействуют регуляции осмотического давления и реактивных особенностей клеток и тканей, содействуют регулированию водного баланса организма, участвуют в транспорте многочисленных групп веществ - липидов, гормонов, минеральных веществ, витаминов, шлаков обмена веществ и т.д. (см. Е.Crasemann, 1995; А.В.Архипов, Л.В.Топорова, 1984; Н.Г.Григорьев и др., 1989; И.С.Попов и др., 1975).
Таблица 1
Химический состав сырья и готового препарата, токсичность
Показатели
Личинки трутней сырые
Готовый препарат
Влага(%)
78,9
7,74
Сырой протеин(%)
7,78
33,98
Сырой жир(%)
4,43
19,36
БЭВ(%)
8,15
35,71
Аминокис-лоты, %
Аспарагиновая к-та
0,682
2,983
Треонин
0,291
1,271
Серии
0,308
1,348
Глютаминовая к-та
1,076
4,708
Пролин
0,532
2,327
Глицин
0,323
1,415
Алании
0,392
1,714
Валин
0,395
1,728
Изолейцин
0,383
1,674
Лейцин
0,592
2,588
Тирозин
0,369
1,614
Фенилаланин
0,322
1,408
Гистидин
0,229
1,002
Лизин
0,266
1,165
Аргинин
0,393
1,718
Цистин
0,135
0,589
Метионин
0,255
1;116
Токсичность
Проба с водным экстрактом
Нетоксичен
Нетоксичен
Проба с ацетоновым экстрактом
Нетоксичен
Нетоксичен
Аспарагиновая кислота - присутствует в головном мозге и усиливает неврологическую активность, также помогает преобразовывать углеводы в мышечную энергию, при этом из нее строятся иммуноглобулины и антитела, уменьшает уровень аммиака после физических нагрузок, помогает печени выводить из организма остаточные продукты лекарств и химикатов, повышает работоспособность и играет важную роль в процессе усвоения некоторых минералов: аспарагина кальция, аспарагина калия и аспарагина магния.
Треонин - является важной составляющей многих белков, которые есть в организме. Он необходим для образования белка зубной эмали, эластина и коллагена, при этом прием треонина приводит к ослаблению мышечного тонуса, он также обезвреживает токсины, помогает предотвратить накопление жира в печени и является важным компонентом коллагена, а вместе с цистеином, лизином, аланином и аспарагиновой кислотой укрепляет иммунитет. Треонин необходим для здоровья вилочковой железы, которая в значительной степени определяет состояние иммунной системы организма. Треонин также выступает в качестве липотропика вещества, которое контролирует накопление жира в печени, причем в случае дефицита холина, другой аминокислоты, эта функция треонина обретает большее значение.
Серин - необходим для нормального обмена жиров и жирных кислот, роста мышечной ткани и поддержания нормального состояния иммунной системы.
Глютаминовая кислота - аминокислота, необходимая для профилатики потери мышечной массы, а также при лечении артритов и заболеваний соединительной ткани. Глютаминовая кислота поддерживает нормальное кислотно-щелочное равновесие в организме.
Пролин - главный компонент коллагена, который в сочетании с витамином С способствует укреплению соединительной ткани и заживлению ран, важен для восстановления и хорошего функционирования хрящевых поверхностей суставов, укрепляет сухожилия и связки, участвует в образовании биологически важных пептидов. При окислении пролинового и лизинового радикалов внутри молекулы коллагена образуются две аминокислоты, практически не встречающиеся в других белках - оксипролин и оксилизин, отвечающие за прочность коллагена. Нарушение нормального течения процесса окисления приводит к образованию рыхлого коллагена, что приводит к снижению прочности кожи, связок, хрящевой ткани.
Глицин - синтезируемая аминокислота. Замедляет дегенерацию мышечной ткани, так как является источником креатина, который необходим для восстановления поврежденных тканей, для центральной нервной системы. Адекватное количество глицина в организме обеспечивает его энергией, понижает кислотность желудочной среды, усиливает рост костной ткани.
Аланин - присутствует в мышцах и является одной из нескольких аминокислот, превращающихся в глюкозу, которую организм использует в качестве источника энергии, участвует в выработке лимфоцитов, регулирует уровень сахара в крови и работу надпочечников, является основным компонентом соединительных тканей.
Главный посредник в глюкозо-аланиновом цикле, позволяющий мышцам и другим тканям получать энергию из аминокислот, укрепляет иммунную систему.
Валин, изолейцин и лейцин - особое значение для кожи, мышц, костей и связок. Действуя вместе, эти аминокислоты защищают мышечную ткань от деструкции, являясь строительным материалом для синтеза белков костно-мышечного аппарата, а также источником энергии, особенно необходимы в восстановительный период после травм и операции.
Тирозин - хорошее средство для лечения депрессии и тревожности, тирозин - также важен для процессов метаболизма. Организм производит его из другой аминокислоты - фенилаланина, как кислота - антидепрессант он полезен для снижения тревожности и повышения общего тонуса. Эта аминокислота обладает умеренным антиоксидантным действием, связывает свободные радикалы (нестабильные молекулы), которые могут нанести вред клеткам и тканям.
Фенилаланин - незаменимая аминокислота, участвует в синтезе коллагена и соединительной ткани, улучшает функционирование кровеносной сети, способствует образованию инсулина.
Гистидин - незаменимая аминокислота. Способствует росту и восстановлению тканей, входит в состав миелиновых оболочек, защищающих нервные клетки, необходим для образования красных и белых клеток крови, защищает организм от воздействия радиации, способствует выведению тяжелых металлов, необходим для поддержания иммунитета.
Лизин - незаменимая аминокислота. Входит в состав практически всех белков, необходим для нормального обмена азота и роста, способствует усвоению кальция и поддержанию нормального обмена азота у взрослых, участвует в создании антител, гормонов, ферментов, формировании коллагена и восстановлении тканей.
Аргинин - незаменимая аминокислота, важнейший компонент обмена веществ мышечной ткани, способствует поддержанию оптимального азотного баланса в организме, обладает способностью замедлять рост опухолей, стимулирует иммунную систему, улучшает состояние кожи, участвует в восстановлении хрящевых поверхностей суставов, укрепляет связки и сердечную мышцу. Аргинин называют "веществом молодости", т.к. он "заведует" синтезом многих гормонов и стимулирует выработку инсулина. При недоставке аргинина наступает быстрое старение организма.
Цистин - важная аминокислота, содержащая серу, при этом цистин является мощным антиоксидантом, который печень использует для нейтрализации разрушительных свободных радикалов, укрепляет соединительные ткани и усиливает антиокислительные процессы в организме, способствует процессам заживления, стимулирует деятельность белых кровяных телец, помогает уменьшить болевые ощущения при воспалениях, очень важная кислота для кожи и волос, эта аминокислота необходима также для защиты от химических токсинов. Цистин играет важную роль в ежедневной работе организма по восстановлению клеток печени.
Метионин - незаменимая аминокислота, необходим для нормализации функции печени, участвует в переработке жиров, уменьшает мышечную слабость, снижает остроту химической аллергии, инактивирует свободные радикалы, участвует в синтезе нуклеиновых кислот, коллагена и многих других белков, предотвращает выпадение волос.
Результаты исследования порошка для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных из личинок трутней на лабораторных крысах даны в таблицах 2 и 3.
Лабораторные опыты
Препарат - порошок из личинок трутней, полученный по предлагаемому изобретению, был испытан на лабораторных крысах в дозе 0,75 г/кг массы тела. Препарат давался внутрь 2 раза в день в течение 12 суток. Животных взвешивают до и после опыта, проводят исследования гематологических показателей крови крыс сразу после опыта на 14 день. Для контроля результата используют контрольную группу животных, в крови определяют количество эритроцитов, гемоглобин, тромбоцитов, лейкоцитов, гематокрит, средний объем эритроцита, среднее содержание гемоглобина в эритроците.
Результаты исследований представлены в таблицах 2,3.
Таблица 2
Динамика массы тела лабораторных крыс
№ группы
Количество животных в группе, (голов)
Препарат, дозы (мг/кг)
Дозы, (мг/кг)
Средние показатели массы тела животных, (г)
до опыта
после опыта
1 опыт
3
Препарат из личинок трутней
750
253
293
2 контроль
3
-
-
273
280
Таблица 3
Средние гематологические показатели у крыс
Гематологические показатели
Группы
опыт
контроль
Гемоглобин, g/l
136
85
Эритроциты, m/ul
7.19
4.97
Гематокрит, %
41.76
38
Лейкоциты, k/ul
3.72
6.7
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, pg
18.9
17.1
Средний объем эритроцита, fl
58.2
55.2
Тромбоциты
961
691
Анализируя полученные результаты, следует отметить, что в опытной группе масса тела увеличилась на 13.7%, а в контрольной лишь на 2.5%. Также в опытной группе по сравнению с контрольной возросло: количество гемоглобина на 37.5%, количество эритроцитов на 30.9%, гематокрит на 9%, среднее содержание гемоглобина в эритроците на 9.6%, средний объем эритроцита на 5.2%, количество тромбоцитов на 28.1%.
Результаты исследования порошка из личинок трутней, тилозина и деметридазола для лечения балантидиоза и сальмонеллеза животных.
Препарат из личинок трутней, тилозина и деметридазола, полученный по предлагаемому способу, был испытан на лабораторных крысах в дозе 7,82 г на 10 кг массы тела. Препарат дают внутрь 2 раза в день в течение 12 суток. Животных взвешивают до и после опыта, проводят исследования гематологических показателей крови крыс сразу после опыта на 14 день. Для контроля результата используют контрольную группу животных. Результаты исследований представлены в таблице 4. Анализируя полученные результаты, следует отметить, что в 1 опытной группе масса тела увеличилась на 0,7%, во второй опытной уменьшилась на 11,9%, а в контрольной увеличилась на 2,5%, отсюда можно сделать вывод, что совместное применение тилозина и диметридазола с порошком из личинок трутней на 11,9% снижает потери в привесах при лечении балантидиоза и сальмонеллеза животных.
Таблица 4
Динамика массы тела лабораторных крыс
№ группы
Количество животных в группе, (голов)
Препарат
Дозы, (мг/кг)
Средние показатели массы тела животных, (г)
до опыта
после опыта
1 опыт
3
Препарат из личинок трутней, тилозина и диметридазола
782
298
300
2 опыт
3
Тилозин + диметридазол
100+225 соответственно
350
313
3 контроль
3
-
-
273
280
Тилозин - является бактериостатическим действующим антибиотиком, разработанным специально для применения животным. Тилозин действует на грамположительные и некоторые грамотрицательные бактерии, в том числе: Е. coli, Bacillus anthracis, Pasteurella spp., Haemophilus spp., Leptospira spp., Stapylococcus spp., Streptococcus spp., Erysipelothrix spp., Corynebacterium spp., Mycoplasma spp., Chlamydia spp., Treponema spp.(Brachispira) и др. (см. инструкцию).
Диметридазол - губительно действует на многих простейших: трихомонад, балантидий, амеб, гистомонад. Препарат обладает активностью в отношении анаэробных бактерий (споро- и неспорообразующих). Не действует против аэробных бактерий. Диметридазол хорошо всасывается из пищеварительного тракта и достигает максимальной концентрации в крови через 1-2 часа. Проникает в органы и ткани, проходит через плаценту, гематоэнцефалический барьер, накапливается в печени. Препарат малотоксичен (см. инструкцию).
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными решениями имеет следующие преимущества:
- длительный срок хранения, до 2-х лет,
- повышение резистентности организма,
- имеет невысокую стоимость,
- прост в изготовлении,
- снижение потерь в весе.