СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ КЛЕТОК И ПОЛУЧЕНИЯ КЛЕТОЧНЫХ МАТРИЦ

1. Способ культивирования эмбриональных клеток и получения клеточной матрицы с целью трансплантации путем использования биополимерных подложек в присутствии факторов роста в полной питательной среде, отличающийся тем, что в качестве подложки используют коллаген-хитозановую конструкцию, состоящую из 2% раствора ацетата коллагена, 2% раствора аскорбата хитозана молекулярной массы 100-700 kD и степенью дезацеталирования свыше 95%, содержащего в своем составе аскорбиновую кислоту - 1,8 г/г сухого хитозана, хондроитинсерную кислоту - 5-100 мг/г сухого хитозана, D-глюкуроновую кислоту - 10-100 мг/г сухого хитозана, гепарин - 2,5-5 мг/г сухого хитозана и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» - 11-220 мкг/г сухого хитозана, которую подвергают предварительной нейтрализации в стерильном бикарбонатном буфере.
2. Способ по п.1 отличающийся тем, что коллаген-хитозановая конструкция представляет собой губку, пленку, микросферы, волокна.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на коллаген-хитозановую конструкцию наносят эмбриональные фибробласты в полной питательной среде без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF).
4. Способ по пп.1 - 3, отличающийся тем, что на эмбриональные фибробласты после их прикрепления на коллаген-хитозановой конструкции наслаивают кондиционированную питательную среду без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF), эмбриональные стволовые или стволовые мультипотентные клетки в полной питательной среде без присутствия основного фактора роста фибробластов (bFGF).
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что культивирование на клеточной матрице осуществляют в течение 72 ч.
6. Способ по п.4, отличающийся тем, что для получения кондиционированной питательной среды отдельно осуществляют культивирование in vitro эмбриональных фибробластов в полной питательной среде в присутствии основного фактора роста фибробластов (bFGF) с последующим его удалением путем фильтрации.
7. Способ по п.4, отличающийся тем, что для получения стволовых эмбриональных или стволовых мультипотентных клеток осуществляют их предварительное культивирование in vitro в полной питательной среде с добавлением основного фактора роста фибробластов (bFGF) с последующим его удалением путем фильтрации.
8. Способ по п.4, отличающийся тем, что трансплантацию эмбриональных клеток или их дифференцированных производных осуществляют вместе с коллаген-хитозановой матрицей без предварительного снятия клеток с ее поверхности.