(2R)-2-[(4-СУЛЬФОНИЛ)АМИНОФЕНИЛ]ПРОПАНАМИДЫ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
(2R)-2-[(4-SULPHONYL)AMINOPHENYL]PROPANAMIDE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
+
Настоящее изобретение относится к новым (2R)-2-фенилпропанамидам, несущим 4-сульфониламиновый заместитель в положении 4 фенильной группы, и к содержащим их фармацевтическим композициям, которые можно использовать в качестве ингибиторов хемотаксиса полиморфно-нуклеарных и мононуклеарных клеток и которые можно использовать при лечении различных расстройств, опосредуемых хемокином ELRCXC. В частности, соединения этого изобретения можно использовать при лечении и контроле специфических CXCR2-зависимых патологий, таких как СОБ (синдром облитерирующего бронхиолита), ХОЗЛ (хроническое обструктивное заболевание легких), ангиогенез и меланома.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Хемокины составляют большое семейство цитокинов хемотаксиса, которые оказывают свое действие через взаимодействие с рецепторами, относящимися к семейству 7TM-GPCRs. Система хемокинов является ключевой для регуляции и контроля базального перемещения лейкоцитов при гомеостазе и воспалении. Функциональные следствия активации рецепторов хемокинов включают перемещение лейкоцитов, дегрануляцию, транскрипцию генов, митогенные и апоптозные эффекты. Клетки многих типов, наряду с гемопоэтическими клетками, экспрессируют рецепторы хемокинов; к ним относятся эндотелиальные клетки, клетки гладких мышц, стромальные клетки, нейроны и этителиальные клетки. Их активация распространяет эффекты активации рецепторов хемокинов на другие аспекты тканевой регуляции и гомеостаза, такие как ангиогенез и морфогенетические перемещения при органогенезе (в дополнение к развитию рака и метастазированию).
in vivo
+
Ангиогенез, характеризующийся новообразованием кровеносных сосудов, является существенным фактором для ряда физиологических и патофизиологических явлений, таких как эмбриональное развитие, заживление ран, хроническое воспаление и рост злокачественных опухолей, и хемокины через различные механизмы влияют на все эти аспекты анагиогенеза. Первым, описанным еще в 1992 г., сильным ангиогенным хемокином был CXCL8 (также называемый IL-8) [Koch A.E. et al., Science, 258, 1798, 1992]. С патофизиологической точки зрения, регуляция ангиогенеза хемокинами представляется очень важной для образования и роста опухолей. Известны два рецептора CXCL8 (CXCR1 и CXCR2); они связывают CXCL8 с высоким сродством. CXCR1 является селективным для CXCL8, тогда как CXCR2 взаимодействует и с другими хемокинами как с естественными лигандами. В настоящее время накапливаются свидетельства того, что, например, CXCL8 играет патогенетическую роль в развитии кожной меланомы, опосредуемую CXCR2. Было показано, что образцы меланомы и линии клеток, выделенные из них, экспрессируют несколько хемокинов, включая CXCL8 и CXCL1 (а также GRO-α). CXCL8 влияет на процессы развития опухолей и метастазирование, поскольку было показано, что он является аутокринным фактором роста [Schadendorf D. et al, J. Immunol, 151, 2667, 1993], индуцирует ангиогенез [Strieter R. M. et al., Am. J. Pathol., 141, 1279, 1992] и влияет на миграцию клеток меланомы [Wang J.M. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 169, 165, 1990] посредством связывания и активации своих рецепторов. Оба эти рецептора экспрессируются в клетках нескольких типов (эндотелиальных клетках и клетках меланомы) и также участвуют в ангиогенной реакции [Addison CL. et al., J. Immunol, 165, 5269, 2000], но другим образом. Сообщалось [Norgauer J. et al J. Immunol, 156, 1132, 1996], что низкую экспрессию CXCR2 можно обнаружить в нормальных меланоцитах человека, но этот рецептор стимулируется обработкой фактором TNF-α, что проявляется в усилении пролиферации в ответ на воздействие CXCL8, тогда как в том же самом эксперименте экспрессия CXCR1 не детектируется. Хорошо оценена роль CXCL8 как важного ангиогенного фактора, и было продемонстрировано, что рецептор CXCR2 является предполагаемым ангиогенным рецептором. Лишь недавно выяснилась роль специфических рецепторов CXCR1 и 2 в развитии меланомы [Varney M. L. et al, Am. J. Clin. Pathol, 125, 209, 2006]. Было продемонстрировано in vitro, что в отличие от CXCR1, который повсеместно экспрессирован в злокачественных человеческих меланомах всех уровней по Кларку, CXCR2 экспрессирован преимущественно в меланомных опухолях высших степеней и что имеются значительные различия в уровнях экспрессии CXCR2 между толстыми и тонкими меланомами, что предполагает различные роли, выполняемые CXCR2 и CXCR1 . CXCR1 и CXCR2 участвуют в механизме ангиогенной реакции и гаптотаксической миграции и хемотаксиса клеток меланомы. Несмотря на примерно одинаковое сродство к CXCL8 и приблизительно одинаковое количество этих рецепторов, хемотаксис нейтрофилов опосредуется преимущественно рецептором CXCR1 [Quan J.M. et al, Biochem. Biophys. Res. Commun., 219, 405, 1996], а экспрессия CXCL8 эндотелиальными клетками стимулирует хемотаксическую реакцию клеток меланомы, опосредуемую рецептором CXCR1. Как указывалось выше, рецептор CXCR2 считают предполагаемым рецептором, опосредующим ангиогенез, индуцированный хемокином ELRCXC, чем подтверждается заключение о различных ролях, исполняемых CXCR1 и CXCR2 в модулировании агрессивного злокачественного фенотипа, и о том, что при развитии меланомы и метастазировании экспрессия CXCL8 взаимосвязана с экспрессией CXCR2, но не с экспрессией CXCR1 [Varney M. L. et al, Am. J. Clin. Pathol, 125, 209, 2006].
Ингибирование продуцирования и/или активности CXCL8 могло бы быть идеальной мишенью (посредством модулирования CXCR2) для воздействия на злокачественную меланому.
Уже описана возможная патогенетическая роль CXCL8 в заболеваниях легких (повреждение легких, синдром острой дыхательной недостаточности, астма, хроническое воспаление легких и муковисцидоз) и, конкретно, в патогенезе ХОЗЛ (хроническое обструктивное заболевание легких) по пути, опосредуемому CXCR2 [Hill A.T. et al, Am. J. Respir. Crit. Care med., 160, 893, 1999]. ХОЗЛ - это заболевание, характеризующееся воспалением периферических дыхательных путей, протекающим с участием многих воспалительных клеток и медиаторов. Оно сопряжено с усиленным притоком воспалительных клеток, включая увеличение числа макрофагов в дыхательных путях и в ткани. Альвеолярные макрофаги развиваются из моноцитов; они способны вызвать патологические изменения, характерные для ХОЗЛ. Сообщалось, что увеличенное количество макрофагов при ХОЗЛ является результатом привлечения моноцитов из системного кровотока. Исследования хемотаксиса мононуклеарных клеток периферической крови пациентов с ХОЗЛ показывают повышенные по сравнению с контролем хемотаксические ответы по отношению к GRO-α, но не к MCP-1, CXCL8 или NAP(ENA)-78 [Traves S. L. et al., J. Leuk. Biol, 76, 441, 2004]. Этот ответ не опосредуется различиями в экспрессии клеточных рецепторов CXCR1 и CXCR2, но у пациентов с ХОЗЛ экспрессия CXCR2 в моноцитах регулируется иначе: CXCR1 реагирует на высокие концентрации CXCL8 и отвечает за активацию нейтрофилов и выделение пероксидных анионов и нейтрофильной эластазы, тогда как CXCR2 реагирует на низкие концентрации СХС-хемокинов и участвует в хемотаксических реакциях. В настоящее время разработаны сильные низкомолекулярные ингибиторы CXCR2, такие как SB225002, в качестве блокаторов хемотаксической реакции нейтрофилов на CXCL8 и GRO-α. Этот антагонист обладает значительным ингибирующим эффектом по отношению к хемотаксической реакции на мокроту пациентов с ХОЗЛ, при которой увеличиваются концентрации GRO-α [Traves S.L., et al., Thorax, 57, 590, 2002]. Поэтому антагонисты CXCR2 могут также ослаблять хемотаксис моноцитов и накопление макрофагов у больных с ХОЗЛ. Эти результаты демонстрируют потенциал селективных низкомолекулярных антагонистов CXCR2 (в отличие от CXCR1) при лечении ХОЗЛ и для контроля поражения легких.
+
В последнее время высказываются предположения о возможной роли хемокинов ELRCXC в развитии синдрома облитерирующего бронхиолита (СОБ). СОБ - это фиброзный процесс, приводящий к постепенному сужению просвета бронхиол и обструкции дыхательных путей (затрудненности дыхания). Обычно СОБ развивается после аденовирусной инфекции или инфекции Mycoplasma pneumoniae, но это заболевание также связано с хроническим отторжением трансплантированных легких, особенно с хроническим отторжением легочных аллотрансплантатов. Кумулятивная частота СОБ к 5 годам после трансплантации легких составляет 50-80%, а 5-летняя приживаемость трансплантата после начала СОБ составляет только 30-50% [Douglas, LS. et al., J. Clin. Invest. 115, 1133, 2005]. СОБ характеризуется инфильтрацией перибронхиолярных лейкоцитов, которые проникают в подслизистую оболочку, базальную мембрану и эпителий дыхательных путей и разрушают их. За повреждением ткани бронхов, опосредуемым инфильтрацией и активацией лейкоцитов, следует фибропролиферация и образование грануляционной ткани [Trulock, E. P. Am. J. Respir. Crit Care Med. 155, 789, 1997].
+
+
+
+
+
+
Подавление функций CXCR2 антителами, специфичными к этому рецептору, ингибировало раннюю инфильтрацию полиморфно-нуклеарных лейкоцитов в экспериментальной модели СОБ у мышей [Belperio, J.A., et al., J Clin Invest. 115, 1150, 2005]. Считают также, что ангиогенез является ключевым фактором развития фиброза при СОБ и что хемокины ELR непосредственно вовлечены в механизм ангиогенеза при этом синдроме. Ангиогенная активность в бронхоальвеолярной лаважной жидкости у пациентов с СОБ является следствием, прежде всего, присутствия хемокинов ELRCXC. Кроме того, исследования, выполненные на модели СОБ у мышей, также продемонстрировали усиленное ремоделирование сосудов, происходившее параллельно с экспрессией хемокинов ELRCXC в аллотрансплантате трахеи. Взятые вместе эти данные подтверждают гипотезу о том, что патофизиологическая роль, исполняемая хемокинами ELRCXC при развитии СОБ, должна быть двоякой: на первой фазе хемокины ELRCXC влияют на привлечение полиморфно-нуклеарных лейкоцитов (т.е. на стадии ишемического/реперфузионного поражения), а на поздней хронической стадии они участвуют в ремоделировании сосудов и ангиогенезе (т.е. на фибропролиферативной стадии). Это означает, что блокада активности хемокинов ELRCXC могла бы быть действенным терапевтическим средством при лечении этого синдрома.
Молекулы, являющиеся предметом этого изобретения, представляют собой новые терапевтические агенты для лечения и контроля специфических заболеваний, связанных с CXCL8, особенно патологий, при которых хорошо установлена явная патофизиологически ключевая роль CXCR2 (таких как СОБ, ХОЗЛ и развитие опухолей). Хорошо известно, что контроль движения, активации и дифференцировки лейкоцитов определяет систему цитокинов с ее главной ролью и при иммунной реакции хозяина на вторжение патогенов. Это подтверждается тем, что вирусы индуцируют или кодируют хемокины, рецепторы хемокинов или белки, связывающие хемокины, которые различным образом воздействуют на иммунную систему [Murphy, PM., Nature Immunol., 2, 116, 2001]. Установлено, что чувствительность к CXCL8 необходима уже на самой ранней стадии иммунной реакции хозяина на инфекцию [McCoIl SR. et al., J. Immunol, 163, 2829, 1999; Moore TA et al. J. Immunol, 164, 908, 2000] и что CXCR1 является преобладающим подтипом рецепторов CXCL8, экспрессируемых на нейтрофилах человека. В недавней статье [Hess C, et al. Blood, 104, 3463, 2004] рецептор CXCR1 описан как система, способная определять подмножество «быстро реагирующих» Т-клеток (подобных Т-клеткам типа CD8+), которые заполняют промежуток между врожденными и приобретенными иммунными реакциями, не создавая на ранней стадии высокоцитотоксичную антиген-специфичную эффекторную функцию, действующую в очаге инфекции еще до появления новых эффекторных клеток. Более того, вследствие строгого контроля уровней CXCR1 на нейтрофилах и Т-клетках типа CD8+, важной особенностью тонкой настройки иммунной реакции является различная чувствительность к агонистам и антагонистам CXCR1. В заключение можно высказать гипотезу о том, что при лечении хронических заболеваний с четко выявленной главной ролью CXCR2 [т.е. при онкологических (меланома) и легочных (ХОЗЛ, СОБ) заболеваниях], не требуется блокада рецептора CXCR1 (осуществляемая большинством известных модуляторов CXCL8); более того, вследствие ненужной аномальной иммунной реакции, являющейся результатом необходимого длительного лечения, такая блокада была бы вредной.
Недавно были описаны новые классы «2R-арилпропиониламидов» (WO 02/58858) и «2-арилпропионовых кислот» (WO 03/043625), которые можно использовать для ингибирования хемотаксической активации полиморфно-нуклеарных лейкоцитов посредством взаимодействия CXCL8 с CXCR1 и CXCR2. Было заявлено, что соединения класса 2-арилпропионовых кислот обладают биологической активностью по отношению к обоим рецепторам CXCL8; кроме того, были описаны соединения с селективной активностью по отношению к рецептору CXCR2. Соединения класса амидов не проявляли заметной селективности по отношению к подтипам рецепторов CXCR1 и CXCR2. Химическая трансформация подмножества 2-арилпропионовых кислот в амиды усиливала селективность по отношению к CXCR2 у соединений, которые без этого преобразования являются двойными ингибиторами CXCR1/2. Отмеченная селективность и новые физико-химические характеристики делают это подмножество амидов предпочтительными соединениями этого изобретения, особо полезными для лечения специфических CXCR2-зависимых патологий в онкологии (меланома) и пульмонологии (ХОЗЛ и СОБ).
РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
+
+
-8
-7
-6
50
В настоящем изобретении описан новый класс (2R)-2-фенилпропанамидов, несущих 4-сульфониламиновый заместитель в положении 4 фенильной группы, и содержащие их фармацевтические композиции, которые можно использовать как ингибиторы хемотаксиса полиморфно-нуклеарных и мононуклеарных клеток и которые можно использовать для лечения различных заболеваний, опосредуемых хемокинами ELRCXC, подобными острым воспалительным заболеваниям, таким как ХОЗЛ, или ангиогенез, опосредуемый хемокинами ELRCXC, который может привести к туморигенезу, как при злокачественной меланоме. Эти соединения характеризуются хорошей растворимостью в воде вследствие химических особенностей R'-заместителя в кольце и независимо от природы остатка R. Примерами таких заместителей являются алкилсульфониламино-, арилсульфониламино- и гетероарилсульфониламиногруппы. Некоторые из описанных амидов являются производными уже описанных 2-арилпропионовых кислот, проявляющих хорошую специфичность к GROα-индуцированному хемотаксису. Неожиданно оказалось, что химическое модифицирование этих кислот в амиды позволило получить новые соединения, не проявляющие активности по отношению к рецептору CXCR1, но с повышенной активностью по отношению к CXCR2. Селективность новых описанных амидов по отношению к CXCR2 оценивали в экспериментах по ингибированию миграции трансфектантов CXCR1/L1.2 и CXCR2/L1.2 в ответ на воздействие CXCL8. Данные, приведенные в Таблице 1, показывают, что эти соединения являются сильными ингибиторами CXCL1-индуцированного хемотаксиса человеческих полиморфно-нуклеарных лейкоцитов с IC около 10 M. В отличие от этого, те же самые соединения при концентрации 10 M не оказывают значительного ингибирующего эффекта по отношению к CXCL8-индуцированному хемотаксису человеческих полиморфно-нуклеарных лейкоцитов. Эти результаты согласуются с главной ролью, исполняемой CXCR1 в стимуляции хемотаксиса, индуцированного CXCL8. В то же время исследования селективности показали, что эти соединения не проявляют значительной ингибирующей активности по отношению к миграции трансфектантов CXCR1/L1.2 в ответ на воздействие CXCL8 в концентрациях до 10 M. Более того, у соединений этого класса было подтверждено полное отсутствие активности циклооксигеназного пути. На основании материала, описанного выше во введении, очевидна потенциальная роль этого нового класса соединений в лечении CXCR2-зависимых патологий в области онкологии (конкретно, меланомы) и в области пульмонологии (ХОЗЛ, СОБ).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящее время обнаружен новый класс (2R)-2-фенилпропанамидов как ингибиторов хемотаксиса полиморфно-нуклеарных и монуклеарных клеток. В частности, соединения этого изобретения являются сильными ингибиторами хемотаксиса нейтрофилов, индуцированного CXCL1, с улучшенными фармакокинетическими и фармакологическими профилями активности. Таким образом, настоящее изобретение предоставляет (2R)-2-фенилпропанамидные производные формулы (I):
и их фармацевтически приемлемые соли,
где R выбран из
1
5
3
6
2
5
1
5
- H, OH, C-C-алкила, C-C-циклоалкила, C-C-алкенила, C-C-алкоксигруппы и фенила;
- гетероарильной группы, выбранной из замещенных и незамещенных пиррола, тиофена, фурана, индола, имидазола, тиазола, оксазола, пиридина и пиримидина;
2
2
2
2
1
5
- остатка формулы -CH-CH-O-(CH-CHO)nR", где R" представляет собой H или C-C-алкил, n равно целому числу от 0 до 2;
или R, вместе с NH-группой, к которой он присоединен, является группой-радикалом первичных амидов природных аминокислот, таких как (2S)-2-аминопропанамид, (2S)-2-амино-3-фенилпропанамид, (2S)-2-амино-3-гидроксипропанамид, (2S)-2-амино-3-карбоксипропанамид, (2S)-2,6-диаминогексанамид. NH-группа, упомянутая выше, как часть группы-радикала первичных амидов природных аминокислот, представляет собой аминогруппу природной аминокислоты.
R' выбран из
1
5
3
6
2
5
- линейного или разветвленного C-C-алкила, C-C-циклоалкила, C-C-алкенила и трифторметила;
- замещенного или незамещенного фенила;
- замещенного или незамещенного бензила;
- гетероарильной группы, выбранной из замещенных и незамещенных пиридина, пиримидина, пиррола, тиофена, фурана, индола, тиазола и оксазола.
Далее, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I) для применения в качестве лекарственных средств. В частности, такие лекарственные средства являются ингибиторами CXCL1-индуцированного хемотаксиса полиморфно-нуклеарных и мононуклеарных клеток.
Соединения настоящего изобретения относятся к химическому классу (2R)-2-(4-сульфонил)аминофенилпропанамидов. Соединения формулы (I) по своей природе включены в общие формулы соединений, описанных прежде в WO 01/58852, но их характеристики отличаются от предпочтительных соединений вышеупомянутых изобретений значительными преимуществами.
in vivo
Неожиданно оказалось, что этот класс соединений обладает повышенной селективностью по отношению к рецептору CXCR2, как показано при определении активности по отношению к рецептору CXCR1 в исследовании хемотаксиса, что позволяет использовать этот класс соединений в качестве лекарственных средств для лечения различных хронических или острых CXCR2-зависимых патологических состояний, особенно неопластических расстройств, таких как меланома. Фактически было продемонстрировано, что CXCR2 экспрессируется преимущественно меланомными опухолями и метастазами высоких степеней и что имеются значительные различия в уровнях экспрессии CXCR2 между толстыми и тонкими меланомами, что предполагает различные роли для CXCR2 и CXCR1 также и  [Varney M. L. et al, Am. J. Clin. Pathol, 125, 209, 2006]. Кроме того, антагонисты CXCR2 находят особенно полезное терапевтическое применение при лечении важных легочных заболеваний, таких как ХОЗЛ [Hay D.W.P. et al., Current Opinion in Pharmacology, 1, 242, 2001].
Предпочтительными R-группами являются:
1
5
3
6
H, C-C-алкил, C-C-циклоалкил, L-2-амино-1-метил-2-оксоэтил; гетероарильная группа, выбранная из замещенных и незамещенных тиазола, оксазола, пиридина.
Предпочтительными R'-группами являются:
1
5
3
6
1
4
1
4
линейный или разветвленный C-C-алкил, C-C-циклоалкил, трифторметил, бензил; фенил, незамещенный или замещенный группой, выбранной из галогена, C-C-алкила, C-C-алкоксигруппы, трифторметила, тиофена.
Особо предпочтительными соединениями этого изобретения являются:
1 - (2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид;
2 - (2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамида, натриевая соль;
3 - (2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид;
4 - (2R)-2-{4-{[(2,6-дихлорфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид;
5 - (2R)-2-{4-[(метилсульфонил)амино]фенил}пропанамид;
6 - (2R)-2-{4-[(фенилсульфонил)амино]фенил}пропанамид;
7 - (2R)-2-{4-{[(4-метилфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид;
8 - (2R)-2-{4-{[(4-метоксилфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид;
9 - (2R)-2-(4-[(бензилсульфонил]амино}фенил)пропанамид;
10 - (2R)-2-(4-{[(4-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид;
11 - (2R)-2-(4-{[(4-(трифторметил)фенил]сульфонил}амино) фенил]пропанамид;
12 - (2R)-2-{4-[(тиен-2-илсульфонил)амино]фенил}пропанамид;
13 - (2R)-2-{4-[(циклопентилсульфонил)амино]фенил} пропанамид;
14 - (2R)-2-(4-{[(трифторметил)сульфонил]амино} фенил)пропанамид;
15 - (2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-метилпропанамид;
16 - (2R)-N-[(1S)-2-амино-1-метил-2-оксоэтил]-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид;
17 - (2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-[4-(трифторметил)-1,3-тиазол-2-ил]пропанамид;
18 - (2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-[4-(трифторметил)-1,3-тиазол-2-ил] пропанамид;
19 - (2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-[2-(2-гидроксиэтокси)этил] пропанамид;
20 - (2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-циклопропилпропанамид.
Наиболее предпочтительным соединением в этом списке является соединение 1 и соответствующая натриевая соль.
Соединения этого изобретения являются мощными ингибиторами хемотаксиса человеческих полиморфно-нуклеарных лейкоцитов, индуцированного CXCL1. Соединения этого изобретения формулы (I) обычно выделяют в форме их аддитивных солей с органическими и неорганическими фармацевтически приемлемыми основаниями.
Примерами таких оснований являются гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид кальция, (D,L)-лизин, L-лизин, трометамин.
in vitro
Соединения этого изобретения формулы (I) оценивали  в отношении их способности ингибировать хемотаксис полиморфно-нуклеарных лейкоцитов (далее обозначаемых как PMNs) и моноцитов, индуцированных фракциями IL-8 и GRO-α. Для этой цели, чтобы выделить PMNs, из гепаринизованной человеческой крови, полученной от здоровых взрослых добровольцев, удалили мононуклеары (седиментацией на декстране, согласно процедуре, раскрытой у WJ. Ming et al., J. Immunol, 138, 1469, 1987) и красные кровяные клетки (гипотоническим раствором). Жизнеспособность клеток рассчитывали по исключению трипанового синего, а отношение циркулирующих полиморфно-нуклеарных клеток оценивали в центрифугате после окрашивания красителем Diff Quick.
-5
-8
При исследовании CXCL8-индуцированного хемотаксиса использовали рекомбинантный человеческий CXCL8 (Pepro Tech) в качестве стимулятора в экспериментах по хемотаксису: лиофилизованный белок растворяли в объеме HBSS, содержавшем 0,2% бычьего сывороточного альбумина (БСА), чтобы получить запасной раствор с концентрацией 10 M, который разбавляли в HBSS до концентрации 10 M, которую использовали при исследовании хемотаксиса.
Ингибирование хемотаксиса, индуцированного GRO-α, оценивали в аналогичных тестах.
2
В экспериментах по хемотаксису PMNs инкубировали с соединениями этого изобретения, имеющими формулу (I), в течение 15 мин при 37°С в атмосфере, содержавшей 5% CO.
Во время теста на хемотаксис [W. Falket et al., J. Immunol. Methods, 33, 239, 1980] использовали фильтры без PVP с 5-мкм порами и микрокамеры, пригодные для репликации.
-6
-10
Соединения этого изобретения, имеющие формулу (I), испытывали при концентрации в диапазоне между 10 и 10 M; для этого их добавляли в этой концентрации к нижним и верхним порам микрокамеры. Способность соединений этого изобретения, имеющих формулу (I), ингибировать хемотаксис человеческих моноцитов оценивали согласно раскрытому способу [Van Damme J. et al.,Eur. J. Immunol, 19, 2367, 1989].
ex vivo
Соединения формулы (I) испытывали для оценки их селективности в миграционном тесте, используя клетки L1.2, трансфецированные CXCR1 и CXCR2. Анализ проводили, используя фильтры Transwell с порами размером 5 мкм и следуя описанной процедуре [Imai T. et al., J. Biol. Chem, 273, 1764, 1998]. Клетки L1.2 - это мышиные пре-Т-лимфоциты, трансфецированные вектором (pc-DNA-CXCR1 или CXCR2), содержащим ген, кодирующий специфический белок (CXCR1 или CXCR2). В тестах, проведенных с цельной кровью согласно процедуре, раскрытой Patrignani et al., in J. Pharmacol. Exper. Ther., 271, 1705, 1994, было найдено, что соединения формулы (I) полностью неэффективны как ингибиторы фермента циклооксигеназы (COX).
-5
-7
2
2
В большинстве случаев соединения формулы (I) в концентрациях 10-10 M не мешают продуцированию PGE, индуцированному в мышиных макрофагах стимуляцией липополисахаридами (LPS, 1 мкг/мл). Ингибирование продуцирования PGE, которое можно зарегистрировать, в большинстве случаев находится на пределе статистической значимости, чаще всего ниже 15-20% базального значения. Пониженная эффективность ингибирования COX является выгодной для терапевтического применения соединения этого изобретения, поскольку ингибирование синтеза простагландинов стимулирует макрофаги увеличивать синтез TNF-α (индуцированный LPS или пероксидом водорода), который является важным медиатором активации нейтрофилов и стимулятором продуцирования такого цитокина, как интерлейкин-8.
+
Ингибиторы активации CXCR2 находят полезное применение, как подробно изложено выше, особенно при лечении хронических воспалительных патологий, при которых предполагается, что рецепторы CXCL8 и GRO-α играют ключевую патофизиологическую роль в развитии заболевания. Конкретно, предполагают, что активация CXCR2 является существенной при опосредовании ангиогенной активности хемокинов ELRCXC, опосредованной CXCL8 пролиферации эпидермальных клеток, ангиогенезе и меланоме в моделях на животных [Keane M. P. et al. J. Immunol, 172, 2853, 2004] и у пациентов с различными уровнями злокачественной меланомы [Varney M. L. et al, Am. J. Clin. Pathol, 2006, 125, 209].
Кроме того, антагонисты CXCR2 находят особенно полезное терапевтическое применение при лечении таких важных пульмонологических заболеваний, как хроническое обструктивное заболевание легких (ХОЗЛ) (D. WP Hay и H.M. Sarau., Current Opinion in Pharmacology 2001, 1:242-247) и синдром облитерирующего бронхиолита (СОБ) [Trulock, E. P. Am. J. Respir. Crit Care Med. 155, 789, 1997].
Поэтому следующим предметом настоящего изобретение является создание соединений для использования при лечении ангиогенеза, меланомы, хронического обструктивного заболевания легких (ХОЗЛ) и синдрома облитерирующего бронхиолита (СОБ), а также использование таких соединений при изготовлении лекарственного средства и для лечения описанных выше заболеваний.
В объем настоящего изобретения также входят фармацевтические композиции, включающие соединение этого изобретения и его подходящий носитель.
Соединения этого изобретения, вместе с традиционно применяемыми адъювантом, носителем, разбавителем или эксципиентом, можно фактически поместить в форму фармацевтических композиций и их единичных лекарственных форм и в такой форме их можно применять в твердом виде, таком как таблетки или наполненные капсулы, или в виде жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или капсулы, заполненные этими жидкостями, или в виде, предназначенном для перорального применения, или в форме стерильных инъецируемых растворов для парентерального (включая подкожное) использования. Такие фармацевтические композиции и их единичные лекарственные формы могут включать в себя ингредиенты в традиционных пропорциях, совместно с дополнительными активными соединениями или факторами или без них, и такие единичные лекарственные формы могут содержать любое допустимое эффективное количество активного ингредиента, соизмеримое с предполагаемым диапазоном применяемой суточной дозы.
При применении в качестве фармацевтических средств соединения этого изобретения обычно вводят в форме фармацевтической композиции. Такие композиции можно приготовить в форме, хорошо известной в фармацевтике и включающей в себя по меньшей мере одно активное соединение. Обычно соединения этого изобретения вводят в фармацевтически эффективном количестве. Количество реально вводимого соединения обычно определяют на основании существенных обстоятельств, включая то патологическое состояние, которое подвергается лечению, выбранный путь введения, природу вводимого соединения, возраст, массу тела и реакцию конкретного пациента, тяжесть симптомов у этого пациента и т.п.
Фармацевтические композиции этого изобретения можно вводить различными путями, включая пероральный, ректальный, трансдермальный, подкожный, внутривенный, внутримышечный и интраназальный. В зависимости от предполагаемого пути доставки эти соединения готовят предпочтительно в виде инъецируемых или пероральных композиций. Композиции для перорального введения могут принимать форму нерасфасованных жидких растворов или суспензий или нерасфасованных порошков. Однако более обычно эти композиции предоставляют в виде готовых форм, расфасованных на единичные дозы, для облегчения точного дозирования при приеме. Термин «единичные лекарственные формы» относится к физически дискретным единицам, применимым в качестве единичных доз для людей и других животных, причем каждая единица содержит предопределенное количество активного материала, рассчитанного на создание желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим эксципиентом. Типичные единичные лекарственные формы включают предварительно наполненные и предварительно измеренные ампулы или шприцы с жидкими композициями или, в случае твердых композиций, пилюли, таблетки, капсулы и т.п. В таких композициях кислотное соединение обычно является меньшим по количеству компонентом (составляющим от примерно 0,1 до примерно 50% по массе или, предпочтительно, от примерно 1 до примерно 40% по массе), а остальное количество составляют различные наполнители или носители со вспомогательными средствами, облегчающими технологическую обработку и формирование желаемой готовой формы.
Жидкие формы, применимые для перорального введения, могут включать в себя приемлемый водный или неводный носитель с буферными веществами, суспендирующими и диспергирующими средствами, красителями, отдушками и т.п. Жидкие формы, включая инъецируемые композиции, описанные здесь ниже, всегда хранят в темноте во избежание каталитического эффекта света, такого как образование гидропероксида или пероксида. Твердые формы могут включать в себя, например, любой из следующих ингредиентов или соединения похожей природы: связующее вещество, такое как микрокристаллическая целлюлоза, камедь трагаканта или желатин; эксципиент, такой как крахмал или лактоза; дезинтегратор, такой как альгиновая кислота, примогель или кукурузный крахмал; смазывающее вещество, такое как стеарат магния; глидант, такой как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или отдушка, такая как перечно-мятная, метилсалицилатная или апельсиновая отдушка.
Инъецируемые композиции обычно основаны на инъецируемом стерильном физиологическом растворе соли или физиологическом растворе соли с фосфатным буфером или на других инъекционных носителях, известных в данной области. Как указано выше, кислое производное формулы (I) в таких композициях обычно является меньшим по количеству компонентом, часто составляющим 0,05-10% по массе, а остальное количество приходится на инъецируемый носитель и т.п. Средняя суточная доза будет зависеть от различных факторов, таких как серьезность заболевания и состояние пациента (возраст, пол и масса тела). Обычно доза варьируется от 1 мг или нескольких мг до 1500 мг соединения формулы (I) в день, необязательно, разделенных на неоднократные приемы. Благодаря малой токсичности соединений этого изобретения можно также вводить более высокие дозы в течение длительных периодов времени.
th
Описанные выше компоненты для перорально вводимых или инъецируемых композиций являются лишь типичными примерами. Дополнительные материалы, а также технологические способы и т.п., описаны в Части 8 монографии "Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook", 18 Edition, 1990, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania, которая включена сюда в качестве ссылки. Соединения этого изобретения можно также вводить в формах с продолжительным высвобождением или из систем доставки лекарственных средств с продолжительным высвобождением. Описание типичных материалов с продолжительным высвобождением можно также найти в материалах, включенных в руководство Ремингтона, указанное выше.
Настоящее изобретение проиллюстрировано следующими примерами, которые не должны рассматриваться как ограничивающие объем этого изобретения.
ПРИМЕРЫ
Алкил- и арилсульфонилхлориды, использованные в качестве реагентов при синтезе соединений формулы (I), являются известными продуктами, обычно доступными коммерчески, или их можно приготовить способами, описанными в литературе.
(2R)-2-(4-Аминофенил)пропанамид
2
2
4
2
4
(2R)-2-(4-Нитрофенил)пропановую кислоту (6 г, 30,6 ммоль) растворяли в сухом CHCl (80 мл) и добавляли 1,1-карбонилдиимидазол (5,58 г, 34,41 ммоль) и полученный раствор 2 ч перемешивали при комнатной температуре. Через этот раствор барботировали газообразный аммиак до полного исчезновения промежуточного продукта, определенного ИК-анализом (8 ч). К органическому раствору добавляли насыщенный раствор NHCl (20 мл) и разделяли две фазы. Органическую фазу опять промывали водой (2×25 мл), осушали над NaSO, профильтровывали, выпаривали под вакуумом и получали (2R)-2-(4-нитрофенил)пропанамид в виде белого твердого вещества (5,1 г, 26,15 ммоль).
3
D
3
3
2
25
1
(2R)-2-(4-Нитрофенил)пропанамид (4,9 г, 25,2 ммоль) растворяли в смеси THF (30 мл) и CHOH (30 мл) и полученный раствор охлаждали до T=0-5°C. Добавляли формиат аммония (8 г, 126 ммоль), затем порциями осторожно добавляли 10% Pd/C (1,6 г). Полученную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи, до полного исчезновения исходного материала (по данным ТСХ). После фильтрования под вакуумом через слой целита и отгонки растворителя при пониженном давлении выделяли чистый (2R)-2-(4-аминофенил)пропанамид в виде белого порошка (4 г, 24,24 ммоль). Выход 96,2%. т.пл. 110-112°C; [α]  (c=0,6, CHOH): -1,9°; H-ЯМР (CDCl) δ 7,10 (д, 2H, J=7 Гц), 6,65 (д, 2H, J=7 Гц), 5,35 (ушир.с, 2H, CONH), 3,52 (м, 1H), 1,50 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(Изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид (1)
2
2
2
4
D
3
6
2
2
2
25
1
(2R)-2-(4-Аминофенил)пропанамид (0,5 г, 3,05 ммоль) растворяли в пиридине (2 мл) и добавляли 2-пропансульфонилхлорид (0,53 мл, 3,66 ммоль). Полученный раствор 4 ч кипятили с обратным холодильником и оставляли на ночь при комнатной температуре. После полного исчезновения исходного амида раствор разбавили EtO (10 мл) и органический слой промывали 1 н HCl (2×5 мл) и HO (2×5 мл), сушили над NaSO, профильтровывали, выпаривали под вакуумом и получали (2R)-2-{(4-[(изопропилсульфонил) амино]фенил}пропанамид в виде бледно-желтого твердого вещества (667 мг, 2,47 ммоль). Выход 81%, т.пл. 125-127°C; [α]  (c=0,3, CHOH): -12,7°; H-ЯМР (DMSO-d) δ 9,65 (ушир.с, 1H, SONH), 7,40 (ушир.с, 1H, CONH), 7,25 (д, 2H, J=7 Гц), 7,12 (д, 2H, J=7 Гц), 6,80 (ушир.с, 1H, CONH), 3,52 (кв, 1H, J=7 Гц), 3,15 (м, 1H), 1,22 (д, 3H, J=7 Гц ), 1,18 (д, 6H, J=7 Гц).
Следуя вышеописанной процедуре и исходя из соответствующих сульфонилхлоридов, приготовили следующие амиды:
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид (2)
D
3
3
2
2
25
1
; воскообразное твердое вещество; [α]  (c=0,5, CHOH): -8,3°; H-ЯМР (CDCl) δ 8,10 (д, 1H, J=7 Гц), 7,52-7,45 (м, 2H+NH), 7,32-7,27 (м, 1H), 7,13 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 5,55 (ушир.с, 1H, CONH), 5,28 (ушир.с, 1H, CONH), 3,48 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,42 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-{[(2,6-дихлорфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид (3)
D
3
3
2
2
25
1
; воскообразное твердое вещество; [α]  (c=0,5, CHOH): -10°; H-ЯМР (CDCl) δ 7,52 (ушир.с, 1H, NH), 7,35-7,20 (м, 3H), 7,13 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 5,55 (ушир.с, 1H, CONH), 5,28 (ушир.с, 1H, CONH), 3,48 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,42 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(метилсульфонил)амино]фенил}пропанамид (4)
D
3
6
2
2
25
1
; воскообразное твердое вещество; [α]  (C=0,5, CHOH): -12,5°; H-ЯМР (DMSO-d) δ 9,65 (ушир.с, 1H, NH), 7,40 (ушир.с, 1H, CONH), 7,25 (д, 2H, J=7 Гц), 7,12 (д, 2H, J=7 Гц), 6,80 (ушир.с, 1H, CONH), 3,64 (c, 3H), 3,52 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,22 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(фенилсульфонил)амино]фенил}пропанамид (5)
D
3
6
2
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 152-153°C; [α]  (c=0,5, CHOH): -13,5°; H-ЯМР (DMSO-d) δ 7,92 (м, 2H), 7,74-7,62 (м, 3H+NH), 7,40 (ушир.с, 1H, CONH), 7,30 (д, 2H, J=7 Гц), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 6,88 (ушир.с, 1H, CONH), 3,60 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,40 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-{[(4-метилфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид (6)
D
3
3
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 138-140°C; [α]  (c=0,2, CHOH): -7,1°; H-ЯМР (CDCl) δ 7,65 (д, 2H, J=7 Гц), 7,28-7,15 (м, 4H), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 6,45 (ушир.с, 1H, NH), 5,25 (ушир.с, 1H, CONH), 3,52 (кв, 1H, J=7 Гц), 2,38 (c, 3H), 1,47 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-{[(4-метоксилфенил)сульфонил]амино}фенил) пропанамид (7)
D
3
3
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 118-120°C; [α]  (c=0,2, CHOH): -3,6°; H-ЯМР (CDCl) δ 7,70 (д, 2H, J=7 Гц), 7,22 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 6,90 (д, 2H, J=7 Гц), 6,52 (ушир.с, 1H, NH), 5,25 (ушир.с, 2H, CONH), 3,85 (c, 3H), 3,55 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,45 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-(4-[(бензилсульфонил]амино}фенил)пропанамид (8)
D
3
3
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 68-70°C; [α  (c=0,2, CHOH): -2,5°; H-ЯМР (CDCl) δ7,40-7,35 (м, 3H), 7,30-7,25 (м, 4H), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 6,21 (ушир.с, 1H, NH), 5,31 (ушир.с, 2H, CONH), 4,35 (c, 2H), 3,58 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,57 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-(4-{[(4-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид (9)
D
3
3
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 150-153°C; [α]  (c=0,2, CHOH): -3,6°; H-ЯМР (CDCl) δ 7,75 (д, 2H, J=7 Гц), 7,45 (д, 2H, J=7 Гц), 7,25 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 6,68 (ушир.с, 1H, NH), 5,28 (ушир.с, 2H, CONH), 3,55 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,50 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-(4-{[(4-(трифторметил)фенил]сульфонил}амино)фенил] пропанамид (10)
D
3
3
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 178-180°C; [α]  (c=0,2, CHOH): -2,5°; H-ЯМР (CDCl) δ 9,20 (ушир.с, 1H, NH), 7,90 (д, 2H, J=7 Гц), 7,68 (д, 2H, J=7 Гц), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 5,45- 5,30 (ушир.с, 2H, CONH), 3,48 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,45 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(тиен-2-илсульфонил)амино]фенил}пропанамид (11)
D
3
3
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 58-60°C; [α]  (c=0,2, CHOH): -3,5°; H-ЯМР (CDCl) δ 7,58 (д, 1H, J=2 Гц ), 7,52 (д, 1H, J=2 Гц), 7,25 (д, 2H, J=7 Гц), 7,10 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 1H, J=2 Гц, 6,75 (ушир.с, 1H, NH), 5,35 (ушир.с, 2H, CONH), 3,58 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,48 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(циклопентилсульфонил)амино]фенил}пропанамид (12)
D
3
6
2
2
25
1
; воскообразное твердое вещество; [α]  (C=0,5, CHOH): -10,2°; H-ЯМР (DMSO-d) δ7,75 (ушир.с, 1H, NH), 7,40 (ушир.с, 1H, CONH), 7,30 (д, 2H, J=7 Гц), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 6,88 (ушир.с, 1H, CONH), 3,60 (кв, 1H, J=7 Гц), 3,34 (м, 1H), 2,08-1,97 (м, 2H), 1,85-1,75 (м, 2H), 1,60-1,50 (м, 4H), 1,40 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-(4-{[(трифторметил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид (13)
D
3
6
2
2
25
1
; воскообразное твердое вещество; [α]  (c=0,5, CHOH): -24,5°; H-ЯМР (DMSO-d) δ 9,60 (ушир.с, 1H, NH), 7,65 (д, 2H, J=7 Гц), 7,40 (ушир.с, 1H, CONH), 7,12 (д, 2H, J=7 Гц), 6,85 (ушир.с, 1H, CONH), 3,52 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,40 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-метилпропанамид (14)
2
2
2
2
2
2
2
2
4
D
3
2
3
2
25
1
(2R)-2-{[4-(изопропилсульфониламино)фенил]}пропановую кислоту, приготовленную как описано в WO 03/042625, (0,65 г, 2,4 ммоль) растворяли в CHCl (8 мл); добавляли гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида (WSC) (0,46 г, 2,4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазолгидрат (HOBT) (0,324 г, 2,4 ммоль) и полученную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем по каплям добавляли смесь гидрохлорида метиламина (0,155 г, 2,43 ммоль) и триэтиламина (0,33 мл, 2,4 ммоль) в CHCl (2 мл) и полученную смесь оставляли на ночь при комнатной температуре. Эту смесь разбавили CHCl (10 мл) и органический слой промывали 1 н. HCl (2×10 мл) и HO (2×10 мл), осушали над NaSO, профильтровывали, выпаривали под вакуумом и получали (2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-метилпропанамид в виде воскообразного твердого вещества (0,63 г, 2,23 ммоль). Выход 93%. [α]  (c=1, CHCHOH): -20,5°; H-ЯМР (CDCl) δ 9,65 (ушир.с, 1H, SONH), 7,25 (д, 2H, J=7 Гц), 7,12 (д, 2H, J=7 Гц), 5,30 (ушир.с, 1H, NH), 3,52 (кв, 1H, J=7 Гц), 3,15 (м, 1H), 2,78 (д, 3H, J=3 Гц), 1,22 (д, 3H, J=7 Гц ), 1,18 (д, 6H, J=7 Гц).
Следуя вышеописанной процедуре и исходя из соответствующих коммерческих гидрохлоридов аминов и пропановых кислот формулы (II)
где R' определен выше, приготовили следующие амиды:
(2R)-N-[(1S)-2-амино-1-метил-2-оксоэтил]-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид (15)
D
3
6
2
2
2
25
1
; белый порошок; т.пл. 132-135°C; [α]  (c=1, CHOH): -22,5°; H-ЯМР (DMSO-d) δ 9,65 (ушир.с, 1H, SONH), 8,35 (ушир.с, 1H, NH), 7,70 (д, 2H, J=7 Гц), 7,62 (д, 2H, J=7 Гц), 7,50-7,35 (ушир.с, 1H, CONH), 7,15-7,05 (ушир.с, 1H, CONH), 4,45-4,32 (м, 1H), 4,05 (кв, 1H, J=7 Гц), 3,15 (м, 1H), 1,55 (д, 3H, J=7 Гц), 1,35 (д, 3H, J=7 Гц), 1,18 (д, 6H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-[4-(трифторметил)-1,3-тиазол-2-ил]пропанамид (16)
D
3
3
2
25
1
; стеклообразное твердое вещество; [α]  (c=0,5, CHOH): -8,4°; H-ЯМР (CDCl) δ 9,65 (ушир.с, 1H, SONH), 8,75 (ушир.с, 1H, NH), 7,45 (д, 2H, J=7 Гц), 7,30 (д, 2H, J=7 Гц), 7,25 (c, 1H), 3,82 (кв, 1H, J=7 Гц), 3,15 (м, 1H), 1,24 (д, 3H, J=7 Гц ), 1,15 (д, 6H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-[4-(трифторметил)-1,3-тиазол-2-ил]пропанамид (17)
D
3
3
2
25
1
; воскообразное твердое вещество; [α]  (c=0,5, CHOH): -5,5°; H-ЯМР (CDCl) δ 9,50 (ушир.с, 1H, SONH), 8,72 (ушир.с, 1H, NH), 8,10 (д, 1H, J=7 Гц), 7,50-7,48 (м, 2H), 7,32-7,27 (м, 1H), 7,20 (c, 1H), 7,13 (д, 2H, J=7 Гц), 7,05 (д, 2H, J=7 Гц), 3,48 (кв, 1H, J=7 Гц), 1,42 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-[2-(2-гидроксиэтокси)этил]пропанамид (18)
D
3
3
2
25
1
; бесцветное масло; [α]  (c=0,5, CHOH): -4,5°; H-ЯМР (CDCl) δ 9,50 (ушир.с, 1H, SONH), 8,10 (д, 1H, J=7 Гц), 7,50-7,48 (м, 2H), 7,32-7,27 (м, 1H), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 7,08 (д, 2H, J=7 Гц), 6,10 (ушир.с, 1H, NH), 3,70-3,60 (м, 3H), 3,55-3,40 (м, 6H), 2,05 (ушир.с, 1H, OH), 1,52 (д, 3H, J=7 Гц).
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-циклопропилпропанамид (19)
D
3
3
2
25
1
; бесцветное масло; [α]  (c=0,5, CHOH): -11,5°; H-ЯМР (CDCl) δ 9,50 (ушир.с, 1H, SONH), 8,10 (д, 1H, J=7 Гц), 7,50-7,48 (м, 2H), 7,32-7,27 (м, 1H), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 7,08 (д, 2H, J=7 Гц), 5,45 (ушир.с, 1H, NH), 3,50 (кв, 1H, J=7 Гц), 2,75-2,62 (м, 1H), 1,52 (д, 3H, J=7 Гц), 0,8 (м, 2H), 0,42 (м, 2H).
(2R)-2-{4-[(Изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид, натриевая соль
3
D
3
2
25
1
(2R)-2-{(4-[(Изопропилсульфонил)амино]фенил}пропанамид (1) (500 мг, 1,85 ммоль) растворяли в CHOH (15 мл). По каплям добавляли NORMEX 1 н NaOH (1,85 мл, 1,85 ммоль) и полученный раствор оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. После испарения растворителя добавляли воду (3 мл) и прозрачный раствор замораживали, лиофилизовали и получали натриевую соль (2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил) пропанамида (541 мг, 1,85 ммоль) в виде бледно-желтого порошка. Количественный выход. [α]  (c=0,4, CHOH): -11,75°; H-ЯМР (DO) δ 7,32 (д, 2H, J=7 Гц), 7,15 (д, 2H, J=7 Гц), 3,82 (кв, 1H, J=7 Гц), 3,35 (м, 1H), 1,54 (д, 3H, J=7 Гц ), 1,35 (д, 6H, J=7 Гц).
Натриевые соли соединений 2-19 были приготовлены по той же вышеописанной процедуре.
Таблица содержит данные о биологической активности типичных соединений настоящего изобретения
Название
Структура
CXCL1 (% ингиби-рования при10<sup>-8</sup> M)
CXCL8 (% ингиби-рования при10<sup>-7</sup> M)
(2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид(1)
<img file="00000003.tif" he="16" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
67±7
7±18
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид(2)
<img file="00000004.tif" he="18" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
41±7
19±5
(2R)-2-{4-{[(2,6-дихлорфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид(3)
<img file="00000005.tif" he="18" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
39±10
14±5
(2R)-2-{4-[(метилсульфонил)амино] фенил}пропанамид(4)
<img file="00000006.tif" he="16" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
75±7
10±7
(2R)-2-{4-[(фенилсульфонил)амино]фенил}пропанамид(5)
<img file="00000007.tif" he="19" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
44±9
15±10
(2R)-2-{4-{[(4-метилфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид(6)
<img file="00000008.tif" he="21" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
65±4
12±10
(2R)-2-{4-{[(4-метоксилфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид (7)
<img file="00000009.tif" he="12" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
71±11
9±7
(2R)-2-(4-[(бензилсульфонил]амино}фенил)пропанамид(8)
<img file="00000010.tif" he="14" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
58±6
14±9
(2R)-2-(4-{[(4-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид(9)
<img file="00000011.tif" he="20" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
53±12
20±4
(2R)-2-(4-{[(4-(трифторметил)фенил]сульфонил}амино)фенил]пропанамид(10)
<img file="00000012.tif" he="21" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
69±5
15±7
(2R)-2-{4-[(тиен-2-илсульфонил)амино]фенил}пропанамид(11)
<img file="00000013.tif" he="18" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
50±2
17±4
(2R)-2-{4-[(циклопентилсульфонил)амино]фенил}пропанамид(12)
<img file="00000014.tif" he="19" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
67±7
21±10
(2R)-2-(4-{[(трифторметил)сульфонил]амино}фенил)пропанамид(13)
<img file="00000015.tif" he="17" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
75±11
24±7
(2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-метилпропанамид(14)
<img file="00000016.tif" he="16" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
64±8
8±9
(2R)-N-[(1 S)-2-амино-1-метил-2-оксоэтил]-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)пропанамид (15)
<img file="00000017.tif" he="14" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
58±2
10±8
(2R)-2-{4-[(изопропилсульфонил]амино}фенил)-N-[4-(трифторметил)-1,3-тиазол-2-ил]пропанамид(16)
<img file="00000018.tif" he="12" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
49±10
11±7
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-[4-(трифторметил)-1,3-тиазол-2-ил]пропанамид(17)
<img file="00000019.tif" he="13" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
40±12
14±11
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-[2-(2-гидроксиэтокси)этил]пропанамид(18)
<img file="00000020.tif" he="12" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
59±5
6±7
(2R)-2-{4-{[(2-хлорфенил)сульфонил]амино}фенил)-N-циклопропилпропанамид(19)
<img file="00000021.tif" he="16" wi="31" img-content="undefined" img-format="tif" />
60±8
19±4