СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АРГИНИНА, ИЗОЛЕЙЦИНА И ЛИЗИНА В ПОЛИАМИНОКИСЛОТНЫХ ПРЕПАРАТАХ
METHOD OF DETECTING ARGININE, ISOLEUCINE AND LYSINE IN POLYAMINO ACID PREPARATIONS

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть использовано для определения аминокислот в составе фармацевтических средств и препаратах для спортивного питания.
Технической задачей изобретения является разработка способа определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах с применением высаливателя и смеси гидрофильных растворителей.
Для решения технической задачи предложен способ определения аргинина, изолейцина и лизина, характеризующийся тем, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105».
Технический результат заключается в определении активных компонентов (аргинина, изолейцина и лизина) в водной вытяжке полиаминокислотного препарата с применением высаливателя и смеси гидрофильных растворителей на уровне концентраций 5-15 мг/мл.
Предлагаемый способ определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах осуществляют по следующей методике.
Таблетки полиаминокислотного препарата, содержащего аргинин, изолейцин и лизин, взвешивают на аналитических весах, измельчают в ступке и готовят водную вытяжку, содержащую аминокислоты, с концентрациями (мг/мл): аргинин - 8,5; лизин - 6; изолейцин - 13. К 30 мл водной вытяжки аминокислот добавляют 20-25 мас.% высаливателя (кристаллический сульфат лития). Предварительно готовят смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, которую затем добавляют к водно-солевому раствору аргинина, изолейцина и лизина в количестве 3 мл (соотношение водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1). Далее экстрагируют на вибросмесителе 5 мин до установления межфазного равновесия, выдерживают 1-2 мин, после расслаивания фаз экстракт отделяют и анализируют методом капиллярного электрофореза («Капель-105»).
Осуществление способа иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Таблетки, содержащие аргинин, изолейцин и лизин, взвешивают на аналитических весах и измельчают в ступке, предварительно удалив окрашенную оболочку. Точную навеску измельченных таблеток растворяют в 30 мл дистиллированной воды, интенсивно перемешивая, раствор фильтруют через фильтр «белая лента». Концентрация аминокислот в полученной водной вытяжке составляет (мг/мл): аргинин - 8,5; лизин - 6; изолейцин - 13. К 30 мл водной вытяжки аминокислот добавляли 25 мас.% высаливателя (кристаллический сульфат лития), раствор тщательно перемешивали до полного растворения высаливателя, добавляли 3 мл (соотношение водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1) предварительно приготовленной смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 50 мас.% н. бутилового спирта, 20 мас.% этилацетата и 30 мас.% ацетона, экстрагируют на вибросмесителе 5 мин (в течение этого времени достигается межфазное равновесие), выдерживают 1-2 мин. Полученный экстракт анализировали методом капиллярного электрофореза («Капель-105»).
В органическую фазу переходит 98,2, 98,9 и 95,3 мас.% аргинина, лизина и изолейцина соответственно. Достигается практически полное извлечение аминокислот, способ выполним.
Пример 2
Анализ выполняли аналогично примеру 1, но к водной вытяжке, содержащей аргинин, изолейцин и лизин, добавляли высаливатель в количестве 25 мас.%. В органическую фазу переходит 97,5, 98,3 и 97,8% аргинина, лизина и изолейцина соответственно от их содержания в исходном растворе. Достигается практически полное извлечение аминокислот, способ выполним.
В таблице приведена сравнительная характеристика примеров определения аргинина, лизина и изолейцина в полиаминокислотном препарате по заявляемому способу.
Таблица
Сравнительная характеристика примеров определения аргинина, лизина и изолейцина в полиаминокислотных препаратах по заявляемому способу
Номер примера
Содержание, мас.%
Степень извлечения, %
высаливателя
н. бутиловый спирт
этилацетат
ацетон
аргинин
изолейцин
лизин
1
20
50
20
30
98,2
98,9
95,3
2
25
50
20
30
97,5
98,3
97,8
Как следует из таблицы, положительный эффект по предлагаемому способу достигается при содержании высаливателя 20-25 мас.%, применении смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 50 мас.% н. бутилового спирта, 20 мас.% этилацетата и 30 мас.% ацетона, соотношении водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1.
При содержании высаливателя в системе менее 20 мас.%, органическая фаза не образуется, при содержании более 25 мас.% выделяются кристаллы соли, экстракция неосуществима.