СТИМУЛИРУЮЩАЯ ПРИРОСТ МАССЫ КОРМОВАЯ ДОБАВКА, КОРМОВАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
STIMULATING WEIGHT GAIN FEED ADDITIVE, FOOD COMPOSITION FOR LIVE-STOCK ANIMALS AND A WAY OF FARMING LIVE-STOCK ANIMALS

Область техники
Настоящее изобретение относится к стимулирующей прирост массы кормовой добавке, которая незамедлительно поглощается организмом сельскохозяйственных животных, не накапливается в нем и поэтому быстро используется в качестве источника энергии, к кормовой композиции для сельскохозяйственных животных и к способу выращивания сельскохозяйственных животных.
Уровень техники
Корм относится к материалу, который обеспечивает органические или неорганические питательные вещества, необходимые для поддержания жизни сельскохозяйственных животных и производства молока, мяса, яиц, меха или кожи. Корм представляет собой смесь питательных веществ, таких как различные источники энергии, белки, витамины и минералы, необходимые сельскохозяйственным животным, стимулятор роста и вакцину.
Корм играет различные роли, например, в обеспечении питательными веществами, необходимыми для выживания сельскохозяйственных животных и производства продуктов животноводства при потреблении сельскохозяйственным животным, укрепления иммунных функций, улучшения качества продуктов животноводства и улучшения условий в сооружениях сельскохозяйственного назначения.
В частности, повышение продуктивности животноводства достигается за счет улучшения условий в сооружениях сельскохозяйственного назначения или эффективности корма, и были изучены различные способы улучшения эффективности корма, такие как добавление новых ингредиентов в существующую кормовую композицию, изменение соотношения ингредиентов и изменение способа кормления.
Например, публикация не прошедшей экспертизу заявки на патент Кореи № 2006-35444 относится к корму для животных и способу кормления с его использованием и предлагает корм для животных, содержащий универсальный корм для животных и бамбуковый уголь для увеличения массы тела или прироста массы тела.
Жир, который является одним из основных питательных веществ для сельскохозяйственных животных, имеет более высокую энергетическую ценность, чем другие питательные вещества, и является самым дорогим источником энергии на единицу веса. Поэтому, когда эффективность использования жира в организме улучшается, можно улучшить не только продуктивность сельскохозяйственных животных, но и получить возможность снизить затраты на производство из-за снижения стоимости сырья для корма.
Диглицерид представляет собой липидную композицию, в которой жирные кислоты связаны в 1-м и 2-м или 1-м и 3-м положениях глицерина путем переэтерификации между глицерином и жирными кислотами, и обрабатываются не так, как обычный липид, называемый «триглицеридом». В последнее время было обнаружено, что при потреблении диглицерид характеризуется физиологическим эффектом отсутствия увеличения уровня триглицеридов в крови и отсутствия накопления жира в организме, так как по сравнению с обычным нейтральным липидом диглицерид имеет те же механизмы расщепления и абсорбции, но является структурно стабильным и с трудом ресинтезируется в триглицериды после разложения и абсорбции с помощью липазы. Поэтому диглицерид различным образом используется для лечения ожирения и для потери веса. В выложенной публикации патента Японии № 2007-512407 предполагается, что липидная композиция, содержащая большое количество диглицерида конъюгированной линолевой кислоты, может быть использована для пищевой или фармацевтической композиции или в качестве кормовой добавки для предотвращения накопления жира в организме, предотвращения заболевания, обеспечения питательных веществ и т. п. Выложенная публикация патента Японии № 1996-269478 относится к липидной композиции, содержащей 31 мас. % или больше триглицерида, имеющего два длинноцепочечных остатка С8-С10 жирных кислот в его молекуле, и предполагает, что липидная композиция метаболизируется быстрее, чем традиционно используемое растительное масло, и накапливает небольшое количество жира в организме. Кроме того, выложенная публикация патента Японии № 1993-56755 относится к кормовой добавке для сельскохозяйственных животных и корму для сельскохозяйственных животных и предполагается, что кокцидиоз можно предотвратить, используя триглицерид с длинноцепочечными жирными кислотами, содержащими от 6 до 12 атомов углерода, и что этот триглицерид может ингибировать аномальное накопление жира в организме.
(Патентный документ 1) публикация не прошедшей экспертизу заявки на патент Кореи № 2006-35444
(Патентный документ 2) патент Кореи № 10-0740564
(Патентный документ 3) выложенная публикация патента Японии № 2007-512407
Раскрытие
Техническая задача
Настоящее изобретение направлено на обеспечение стимулирующей прирост массы кормовой добавки, которая может быть незамедлительно использована в качестве источника энергии, тем самым способствуя росту и повышению продуктивности сельскохозяйственных животных, не накапливаясь в виде жира при скармливании сельскохозяйственным животным в качестве источника липидов, кормовой композиции для сельскохозяйственных животных и способа выращивания сельскохозяйственных животных.
Технический результат
Для достижения цели настоящего изобретения настоящее изобретение обеспечивает стимулирующую прирост массы кормовую добавку, которая представляет собой липидную композицию, включающую от 50 до 70 мас. % диглицерида, и триглицерид, моноглицерид, свободную жирную кислоту или их смесь в виде остальной части для общего количества 100 мас. %,
где диглицерид включает 40 мас. % или больше 1,3-диглицерида, а среди жирных кислот,  входящих в состав диглицерида, жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, составляют от 70 до 90 мас. %, а жирные кислоты, содержащие 16 атомов углерода или больше, составляют от 10 до 30 мас. %, и жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, составляют от 60 до 80 мас. % относительно жирных кислот, связанных с 1-м и 3-м положениями, среди жирных кислот, входящих в состав диглицерида.
В настоящем изобретение также обеспечивается кормовая композиция для сельскохозяйственных животных, которая включает стимулирующую прирост массы кормовую добавку и смесь на основе комбикорма.
Настоящее изобретение также обеспечивает способ выращивания сельскохозяйственных животных, включающий их кормление кормовой композицией для сельскохозяйственных животных.
В настоящем изобретение также обеспечивается кормовая композиция для сельскохозяйственных животных, полученная путем замены от 40 до 60 мас. % источника липидов в смеси на основе комбикорма стимулирующей прирост массы кормовой добавкой.
В настоящем изобретение также обеспечивается способ выращивания сельскохозяйственных животных, который включает их кормление данной кормовой композицией для сельскохозяйственных животных.
Полезные эффекты
Стимулирующая прирост массы кормовая добавка в соответствии с настоящим изобретением может быть незамедлительно использована в качестве источника энергии без накопления в виде жира во время липидного обмена в организме сельскохозяйственных животных, тем самым способствуя росту и повышению продуктивности сельскохозяйственных животных.
Описание графических материалов
ФИГ. 1 представляет собой набор графиков, изображающих массу тела и прирост массы тела камбалы, определенные по завершении эксперимента, описанного в экспериментальном примере 4, который проводили для подтверждения эффектов от введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 2 представляет собой набор графиков, изображающих удельную скорость роста и скорость потребления корма камбалой, определенные в соответствии с экспериментальным примером 4, который проводили для подтверждения эффектов введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 3 представляет собой набор графиков, изображающих коэффициент кормоотдачи и коэффициент эффективности белка для камбалы, определенные в соответствии с экспериментальным примером 4, который проводили для подтверждения эффектов от введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 4 представляет собой график, изображающий коэффициент выживаемости камбалы, определенный в соответствии с экспериментальным примером 4, который проводили для подтверждения эффектов от введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 5 представляет собой набор графиков, изображающих массу тела и прирост массы тела камбалы, определенные по завершении эксперимента из экспериментального примера 5, который проводили для подтверждения эффектов введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 6 представляет собой набор графиков, изображающих удельную скорость роста и скорость потребления корма камбалой, определенные в соответствии с экспериментальным примером 5, который проводили для подтверждения эффектов от введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 7 представляет собой набор графиков, изображающих коэффициент кормоотдачи и коэффициент эффективности белка для камбалы в соответствии с экспериментальным примером 5, который проводили для подтверждения эффектов от введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
ФИГ. 8 представляет собой график, изображающий коэффициент выживаемости камбалы, определенный в соответствии с экспериментальным примером 5, который проводили для подтверждения эффектов от введения с пищей стимулирующей прирост массы кормовой добавки в соответствии с настоящим изобретением при выращивании камбалы.
Способы по настоящему изобретению
В дальнейшем настоящее изобретение будет описано более подробно.
Стимулирующая прирост массы кормовая добавка по настоящему изобретению включает 50 мас. % или больше диглицерида, где среди входящих в состав жирных кислот, жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, составляют от 10 до 90 мас. %, а жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, и связанные с 1-м и 3-м положениями составляют от 10 до 80 мас. %.
Стимулирующая прирост массы кормовая добавка включает в себя большое количество диглицерида, имеющего высокое содержание жирных кислот, содержащих 14 атомов углерода или меньше, в качестве входящих в состав жирных кислот. Как правило, триглицерид, используемый в качестве источника липидов в корме, расщепляется на 2-моноглицерид и свободную жирную кислоту липолитическим ферментом в организме сельскохозяйственных животных, а 2-моноглицерид ресинтезируется в триглицерид и накапливается в виде жира в подкожной жировой клетчатке. Напротив, 1,3-диглицерид расщепляется до глицерина липолитическим ферментом и не превращается в 2-моноглицерид, который ресинтезируется в триглицерид, а свободные жирные кислоты, полученные при расщеплении, доставляются в печень и быстро метаболизируются как источник энергии. Поэтому липидная композиция для корма по настоящему изобретению не накапливается при введении в качестве источника липидов для сельскохозяйственных животных, но легко используется в качестве источника энергии, что повышает продуктивность сельскохозяйственных животных.
Кроме того, жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, входящие в состав диглицерида, расщепляются до свободных жирных кислот ферментом в организме, легко абсорбируются в клетках тонкого кишечника и переносятся в печень через портальную вену в виде свободных жирных кислот и, таким образом, быстро метаболизируются как источник энергии. Однако жирные кислоты, содержащие 16 атомов углерода или больше, регенерируют до триглицеридов путем этерификации клетками слизистой оболочки кишечника и взаимодействуют с белками и т. д. с образованием липопротеинов, называемых хиломикронами, после чего они доставляются по всему организму и накапливаются в виде жира в организме. В отличие от жирных кислот, содержащих 16 атомов углерода или больше, жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, не нуждаются во введении карнитина в митохондрии для β-окисления и, таким образом, быстро метаболизируются.
В частности, в стимулирующей прирост массы кормовой добавке по настоящему изобретению массовое соотношение жирных кислот, содержащих 14 атомов углерода или меньше, и жирных кислот, содержащих 16 атомов углерода или больше, составляет от 4 до 7, среди жирных кислот, входящих в состав диглицерида, составляет от 4 до 7, что получено при увеличении содержания жирных кислот, содержащих 14 атомов углерода или меньше, которые не накапливаются при расщеплении до свободных жирных кислот, и снижении содержания жирных кислот, содержащих 16 атомов углерода или больше, которые ресинтезируются в триглицерид и накапливаются в виде жира в организме.
Диглицерид содержит 1,3-диглицерид в качестве основного компонента. Предпочтительно, диглицерид содержит 40 мас. % или больше 1,3-диглицерида. 1,2-Диглицерид и 2,3-диглицерид расщепляются до 2-моноглицерида и жирной кислоты липолитическим ферментом, таким как липаза, в организме сельскохозяйственного животного. 2-Моноглицерид и жирная кислота используются в качестве источников энергии, или жирная кислота, которая не используется в качестве источника энергии, используется для ресинтеза глицерида или триглицерида и, таким образом, накапливается в виде жира в подкожной жировой клетчатке. С другой стороны, поскольку 1,3-диглицерид расщепляется до глицерина и двух жирных кислот липазой в организме сельскохозяйственного животного, когда дают 1,3-диглицерид, в крови сельскохозяйственного животного присутствует высокий уровень жирных кислот и низкий уровень триглицеридов по сравнению с тем, когда дают 1,2-диглицерид или 2,3-диглицерид.
Такой диглицерид содержится в количестве от 50 до 70 мас. % в стимулирующей прирост массы кормовой добавке по настоящему изобретению. Если данное содержание ниже, чем указанный диапазон, то содержание триглицерида, который является причиной чрезмерного накопления жира у сельскохозяйственных животных, относительно увеличивается. Напротив, когда содержание превышает указанный диапазон, экономическая обоснованность может уменьшиться из-за необходимости дополнительного процесса очистки, и, поскольку содержание триглицеридов, необходимых для роста сельскохозяйственных животных и улучшения качества мяса, уменьшается, рост может замедлиться или качество мяса может ухудшиться; поэтому содержание диглицерида должно быть соответствующим образом выбрано в пределах указанного диапазона.
В физиологическом аспекте предпочтительно, чтобы жирные кислоты, входящие в состав диглицерида, включали от 70 до 90 мас. % жирных кислот, содержащих 14 атомов углерода или меньше, и от 10 до 30 мас. % жирных кислот, содержащих 16 атомов углерода или больше, так чтобы их можно было легко использовать в качестве источников энергии. В частности предпочтительно, чтобы жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше, составляли от 60 до 80 мас. % жирных кислот, входящих в состав диглицерида, были связаны в положениях 1 и 3 и расщеплялись до свободных жирных кислот липазой в организме сельскохозяйственных животных.
В данном документе жирные кислоты, содержащие 14 атомов углерода или меньше среди жирных кислот, входящие в состав диглицерида, могут быть любого типа, известного в данной области техники, и настоящее изобретение не ограничивается конкретным типом жирной кислоты. В качестве типичного примера используют жирную кислоту, выбранную из группы, состоящей из каприловой кислоты, пеларгоновой кислоты, каприновой кислоты, ундекановой кислоты, лауриновой кислоты, миристиновой кислоты и их смеси. В физиологическом аспекте для легкого использования в качестве источника энергии более предпочтительно, чтобы жирная кислота была выбрана из группы, состоящей из каприловой кислоты, каприновой кислоты, лауриновой кислоты, миристиновой кислоты и их смеси.
В качестве жирной кислоты, содержащей 16 атомов углерода или больше, предпочтительным является тип, выбранный из группы, состоящей из пальмитиновой кислоты, олеиновой кислоты, линолевой кислоты, стеариновой кислоты и их смеси, и тип, выбранный из группы, состоящей из пальмитиновой кислоты, стеариновой кислоты и их смеси, является более предпочтительным с точки зрения окислительной стабильности липидной композиции и расщепления и абсорбции жирной кислоты.
Стимулирующая прирост массы кормовая добавка по настоящему изобретению может быть использована для замены источника липидов в смеси на основе комбикорма или может быть добавлена в смесь на основе комбикорма в качестве добавки.
Кормовая композиция для сельскохозяйственных животных по настоящему изобретению включает в себя стимулирующую прирост массы кормовую добавку и в пересчете на общую массу смеси на основе комбикорма содержит от 0,005 до 2,5 мас. % диглицерида, и, в частности, кормовая композиция для сельскохозяйственных животных включает от 0,01 до 5,0 мас. %, предпочтительно от 0,01 до 3,0 мас. % стимулирующей прирост массы кормовой добавки в пересчете на общую массу смеси на основе комбикорма. Когда содержание стимулирующей прирост массы кормовой добавки в смеси на основе комбикорма для сельскохозяйственных животных ниже указанного диапазона, трудно ожидать эффекта от использования кормовой добавки, а когда содержание кормовой добавки превышает указанный диапазон, условия питания выращиваемых сельскохозяйственных животных могут быть несбалансированными.
Кроме того, в кормовой композиции для сельскохозяйственных животных по настоящему изобретению от 40 до 60 мас. % источника липидов смеси на основе комбикорма могут быть заменены стимулирующей прирост массы кормовой добавкой. Замена источника липидов в смеси на основе комбикорма не приводит к изменению качества, в отличие от случаев с говяжьим жиром, рыбьим жиром и соевым молоком, которые традиционно использовались в качестве источника липидов, и при этом имеет место экономическое преимущество из-за низкой стоимости применения.
Кормовая композиция для сельскохозяйственных животных может быть составлена с включением липидной композиции по настоящему изобретению в дополнение к любой коммерчески доступной или известной в данной области техники смеси на основе комбикорма, и поскольку композиция и способ получения смеси на основе комбикорма для сельскохозяйственных животных могут варьироваться в зависимости от типа сельскохозяйственных животных, подлежащих кормлению, настоящее изобретение не ограничено конкретной композицией и способом получения смеси кормов для сельскохозяйственных животных. В данном документе сельскохозяйственными животными могут быть свиньи, куры, утки, перепела, гуси, фазаны, индейки, коровы, буйволы, крупный рогатый скот, лошади, ослы, овцы, козы, собаки, кошки, кролики или различные виды выращиваемой рыбы и креветок.
Кроме того, кормовая композиция в соответствии с настоящим изобретением может включать в себя различные типы антибиотиков, пробиотиков, ферментов, органических кислот, ароматизаторов, подсластителей, антиоксидантов и других функциональных веществ по мере необходимости для улучшения состояния здоровья животного или для получения положительных эффектов повышения продуктивности и производства высококачественных продуктов животноводства.
Кормовая композиция в соответствии с настоящим изобретением может вводиться в течение обычного периода времени, пока сельскохозяйственное животное не достигнет массы, соответствующей цели выращивания данного сельскохозяйственного животного.
Настоящее изобретение обеспечивает способ выращивания сельскохозяйственных животных, который включает введение сельскохозяйственным животным данной кормовой композиции для сельскохозяйственных животных.
Когда сельскохозяйственное животное питается кормовой композицией для сельскохозяйственных животных в соответствии с настоящим изобретением, повышается суточный прирост и эффективность корма, что приводит к значительному повышению продуктивности по сравнению с введением обычного корма. В частности, уровень триглицеридов в крови снижается, а уровни жирных кислот у сельскохозяйственного животного возрастают.
Далее будут представлены примеры и экспериментальные примеры настоящего изобретения. Однако следующие примеры являются просто примерами настоящего изобретения и не ограничивают настоящее изобретение.
Пример 1. Получение липидной композиции в качестве кормовой добавки
Композицию на основе глицерида в соответствии с настоящим изобретением получали посредством получения сложноэфирного соединения, имеющего кислотное число 1 или меньше, путем этерификации смеси жирных кислот (400 г) и глицерина (92 г) в течение 2 часов при 250°С с добавлением NaOH в качестве щелочного катализатора. Жирные кислоты и глицерид полученной композиции на основе глицерида анализировали по способу, описанному ниже, и результаты этого приведены в таблице 1 и таблице 2 ниже.
1. Газовая хроматография для анализа состава жирных кислот
Для анализа образец в концентрации 25 г/л вводили в условиях, включающих HP-INNOWAX (Agilent, США) в качестве колонки, гелий (2,1 мл/мин.) в качестве газа-носителя, температуру печи от 150 до 260°C и пламенно-ионизационный детектор (FID) при 275°C.
2. Жидкостная хроматография для анализа композиции на основе глицерида
В качестве колонки (жидкостная хроматография) для анализа композиции на основе глицерида использовали Supelcosil LC-Si (5 мкм, 25 см, Aupelco, США) и растворитель А (бензол: хлороформ: уксусная кислота = 70:30:2) и растворитель B (этилацетат) использовали в качестве растворителей подвижной фазы. Образец вводили в концентрации 1 мг/мл (в растворителе - хлороформе) и анализ проводили с использованием испарительного нефелометрического детектора (ELSD) при условии скорости потока 2,3 мл/мин.
3. Жидкостная хроматография для анализа позиционных изомеров глицерида
В качестве колонки использовали ChromSpher Lipids (5 мкм, 25 см, Varian, США), а в качестве растворителя подвижной фазы использовали н-гексан, содержащий 0,5% ацетонитрила, и образец вводили в концентрации 1 мг/мл (в растворителе - хлороформе). Анализ проводили с использованием ELSD при условии скорости потока 2,3 мл/мин.
[Таблица 1]
[Таблица 2]
Экспериментальный пример 1. Оценка липидной композиции для поросят-отъемышей
Экспериментальные животные и схема эксперимента
Испытание проводили на ста шестидесяти поросятах-отъемышах с тройным скрещиванием [(Landrace×Yorkshire)×Duroc], их масса тела в начале эксперимента составляла 6,84 ± 0,87 кг и эксперимент по кормлению проводили в течение 6 недель. Для экспериментального кормления подготовили два типа корма: положительный контроль (PC) и отрицательный контроль (на 100 ккал меньше, чем PC). В этом случае каждую группу животных обрабатывали, как указано ниже, каждую обработку повторяли четыре раза и по 5 свиней случайным образом распределяли на каждую обработку: (% представляет собой процентное содержание по массе (мас. %))
-Положительный контроль: корм
-Экспериментальная группа 1: корм + 0,1 мас. % липидной композиции из примера 1
-Экспериментальная группа 2: корм + 0,2 мас. % липидной композиции из примера 1
-Экспериментальная группа 3: корм + 0,3 мас. % липидной композиции из примера 1
-Отрицательный контроль: на 100 ккал сокращенный корм
-Группа сравнения 1: на 100 ккал сокращенный корм + 0,1 мас. % липидной композиции из примера 1
-Группа сравнения 2: на 100 ккал сокращенный корм + 0,2 мас. % липидной композиции из примера 1
-Группа сравнения 3: на 100 ккал сокращенный корм + 0,3 мас. % липидной композиции из примера 1
Экспериментальный корм, кормление и уход
У свиней был свободный доступ к универсальному корму, состоящему в основном из кукурузной и соевой муки, и составленному в соответствии с требованиями к питательным веществам NRC (2012) в качестве экспериментального корма, и им обеспечили свободный доступ к питьевой воде из автоматической поилки.
Объекты исследования
(1) Продуктивность
Показатели ежедневного прироста получали путем измерения массы тела в каждой группе обработки в момент начала, на 2-й неделе и по завершении эксперимента (6-я неделя). Ежедневное потребление корма рассчитывали путем вычитания из подаваемого количества корма остатка на момент измерения массы тела, а эффективность корма определяли путем деления прироста массы на потребление корма. Результаты показаны в таблице 3.
(2) Усвояемость питательных веществ
2
3
Чтобы оценить усвояемость питательных веществ, корм, содержащий 0,2% оксида хрома (CrO), который добавляли в качестве индикатора, подавали свиньям в течение 7 дней, а затем экскременты собирали методом анального массажа на 2-й неделе и по завершении эксперимента (6-я неделя). Собранные экскременты сушили в сушилке при 60°C в течение 72 часов и измельчали с использованием мельницы Wiley для применения в анализе. Общие компоненты корма и Cr, добавленные в качестве индикатора, анализировали способом AOAC (2000). Результаты показаны в таблице 4.
(3) Профили крови
3
Для взятия проб крови по завершении эксперимента из каждой группы обработки случайным образом выбирали по 8 свиней (6-я неделя), 2 мл крови брали из яремной вены с использованием вакуумной пробирки с KEDTA (Becton Dicknson Vacutainer Systems, Франклин Лейкс, Нью-Джерси), а затем белые клетки крови (WBC), красные клетки крови (RBC) и лимфоциты анализировали с использованием автоматического анализатора крови (ADVID 120, Bayer, США). Кроме того, для биологического теста с помощью ферментативного колориметрического способа (Allain et al., 1974) и проведения центрифугирования при 4°C и 3000 об./мин. в течение 15 минут анализировали сыворотку, полученную путем взятия 5 мл крови из яремной вены с использованием вакуумной пробирки (Becton Dickinson Vacutainer Systems, Франклин Лейкс, Нью-Джерси), и проводили реакцию общего холестерина и холестерина HDL с тестовым реагентом (набор Cholesterol № 352, Sigma Chemical, Сент-Луис, Миссури, США), и их концентрации измеряли с использованием автоматического биохимического анализатора (HITACHI 747, Япония), а концентрацию холестерина LDL измеряли способом Naoyuki и Yoshiharu (1995). Результаты показаны в таблице 5.
(4) Микробный состав экскрементов
3
7
По завершении теста (6-я неделя) выбирали по 8 свиней из каждой группы обработки, собирали экскременты у свиней методом анального массажа, хранили замороженными при -20°C до использования в эксперименте, гомогенизировали путем суспендирования в стерильном физиологическом растворе, а затем последовательно разводили от 10 до 10 раз для использования в качестве образца для подсчета жизнеспособных клеток. Для подсчета бактериальных клеток Lactobacillus и E. coli в свиных экскрементах, полученных при экспериментальной обработке, Lactobacillus культивировали в агаре MRS и E. coli культивировали в агаре MacConkey (Difco, США) при 37 °C в течение 38 часов, а затем клетки подсчитывали. Результаты показаны в таблице 6.
(5) Образование веществ с неприятным запахом в экскрементах
Для анализа образования неприятного запаха в экскрементах поросенка-отъемыша измеряли содержание аммиака, общего меркаптана и сероводорода. С этой целью по завершении испытания (6-я неделя) экскременты, образованные в каждой группе обработки за одинаковый период времени, собирали у всех поросят-отъемышей. Собирали 300 г экскрементов, помещали в герметичный пластиковый контейнер объемом 2600 мл, ферментировали в течение 24 часов и хранили при комнатной температуре в течение 5 дней и измеряли аммиак, суммарный меркаптан, сероводород и летучие жирные кислоты с использованием детекторных трубок для газов от Gastec (Model GV-100, Gastec, Япония) на 5-й день хранения. Результаты показаны в таблице 7.
(6) Оценка экскрементов
Оценку экскрементов регистрировали ежедневно в течение всего периода тестирования и рассчитывали, как указано ниже: (Оценка = 1 твердая сухая гранула; 2 твердый сформированный стул, 3 мягкий влажный стул, который сохраняет форму, 4 мягкий бесформенный стул, который принимает форму контейнера, 5 водянистая жидкость, которую можно разлить). Результаты показаны в таблице 8.
Результаты
(1) Продуктивность
Группы обработки из экспериментальной группы 2 и экспериментальной группы 3 демонстрировали значительно более высокие ежедневные приросты в ходе фазы 1, чем группы отрицательного контроля и группы обработки из групп сравнения. Экспериментальная группа 1, экспериментальная группа 2, экспериментальная группа 3, группа сравнения 2 и группа сравнения 3 показали значительно более высокие ежедневные приросты в фазе 2, чем отрицательный контроль. Группа обработки из экспериментальной группы 3 демонстрировала значительно более высокие ежедневные приросты в течение всего периода испытания, чем у отрицательного контроля и группы сравнения 1, а группы обработки из экспериментальной группы 1 и экспериментальной группы 3 демонстрировали значительно более высокую эффективность корма, чем эффективность корма у отрицательного контроля.
[Таблица 3]
(2) Усвояемость питательных веществ
Как показано в таблице 4 ниже, между группами обработки не было существенной разницы в отношении усвояемости сухого вещества, азота и энергии.
[Таблица 4]
(3) Показатели крови
Как показано в таблице 5 ниже, не было существенной разницы между группами обработки в отношении концентраций WBC, RBC, лимфоцитов, холестерина HDL, холестерина LDL и общего холестерина.
[Таблица 5]
(4) Микробный состав экскрементов
Как показано в таблице 6 ниже, между группами обработки не было существенной разницы в отношении количества клеток Lactobacillus и E. coli в экскрементах.
[Таблица 6]
(5) Образование веществ с неприятным запахом в экскрементах
Как показано в таблице 7 ниже, между группами обработки не было существенной разницы в отношении образования аммиака, сероводорода и суммарного меркаптана.
[Таблица 7]
(6) Оценка экскрементов
Как показано в таблице 8 ниже, между группами обработки не было существенной разницы в оценке экскрементов в течение всего периода тестирования.
[Таблица 8]
Экспериментальный пример 2. Оценка липидной композиции для 1 цыплят-бройлеров
Экспериментальные животные и схема эксперимента
Испытание проводили на пятистах десяти однодневных цыплятах ROSS 308 (самки и самцы), масса тела в начале испытания составляла 41 ± 0,17 г, и эксперимент по кормлению проводили в течение 5 недель. Каждую группу животных обрабатывали, как указано ниже, каждую обработку повторяли шесть раз и по 17 цыплят ROSS 308 полностью случайным образом распределили для каждой обработки.
- Положительный контроль: корм
- Отрицательный контроль: на 100 ккал сокращенный корм
- Экспериментальная группа 1: на 100 ккал сокращенный корм + 0,075 мас. % липидной композиции из примера 1
- Экспериментальная группа 2: на 100 ккал сокращенный корм + 0,10 мас. % липидной композиции из примера 1
- Экспериментальная группа 3: на 100 ккал сокращенный корм + 0,15 мас. % липидной композиции из примера 1
Экспериментальный корм, кормление и уход
В качестве экспериментального корма использовали корм порошкового типа, состоящий в основном из кукурузной и соевой муки и составленный в соответствии с требованиями NRC (1994). Цыплят ROSS 308 выращивали в 3-уровневых клетках, места в каждой группе обработки были заданы, корм и вода находились в свободном доступе.
Объекты и способы исследования
(1) Продуктивность
Прирост массы определяли путем измерения массы тела в каждой группе обработки в начале, на 1-й неделе, на 3-й неделе и по завершении (5-я неделя) испытания. Потребление корма рассчитывали путем вычитания из подаваемого количества корма остатка на момент измерения массы тела, и коэффициент кормоотдачи определяли путем деления потребления корма на прирост массы.
(2) Показатели качества мяса
По завершении испытания (5-я неделя) по 6 цыплят выбирали случайным образом из каждой группы обработки и умерщвляли путем смещения шейных позвонков, а затем взвешивали их печень, селезенку, сумку Фабрициуса, абдоминальный жир, грудные мышцы и желудок и рассчитывали их соотношения в живом организме. Значение рН измеряли с помощью рН-метра (77P, Istek, Корея), цвет мяса каждого образца мяса грудки измеряли дважды с использованием дифференциального колориметра (модель CR-410. Minolta Co., Япония). В данном документе параметры пластинки колориметрического эталона были следующими: L*=89,2, a*=0,921, b*=0,783. Потери вследствие вытекания сока получали путем обрезки образца обычной формы толщиной 4 см, помещения его в полиэтиленовый пакет и измерения потерь, образованных в дни 1, 3, 5 и 7 при хранении образца в холодильнике при 4°C в течение 7 дней.
(3) Показатели крови
Для взятия проб крови по 6 цыплят случайно выбирали при каждом типе обработки и по завершении испытания (5-я неделя) 2 мл крови брали из яремной вены с использованием вакуумной пробирки с K3EDTA (Becton Dicknson Vacutainer Systems, Франклин Лейкс, Нью-Джерси) и анализировали, а затем исследовали свободные жирные кислоты (FFA) с использованием автоматического анализатора крови (ADVID 120, Bayer, США). Кроме того, для проведения биохимического теста в сыворотке по завершении испытания (5-я неделя) из яремной вены брали 5 мл крови с использованием вакуумной пробирки (Becton Dickinson Vacutainer Systems, Франклин Лейкс, Нью-Джерси) и центрифугировали при 4°C и 3000 об./мин. в течение 15 минут, получая таким образом сыворотку, которую использовали при анализе. Содержание белка, BUN, креатинина, триглицеридов и глюкозы в выделенной сыворотке определяли с использованием нефелометра (Behring, Германия) нефелометрическим способом.
(4) Степень образования веществ с неприятным запахом в экскрементах
Степень образования газа в экскрементах оценивали путем измерения образования аммиака, сероводорода и суммарного меркаптана. С этой целью по завершении испытания (5-я неделя) экскременты, полученные каждой группой обработки за одинаковый период времени, собирали для использования в анализе. Измерение аммиака, сероводорода и суммарного меркаптана осуществляли путем помещения 300 г экскрементов в герметичный пластиковый контейнер объемом 2600 мл, ферментации экскрементов в течение 24 часов, хранения в контейнере при комнатной температуре в течение 5 дней и последующего измерения с использованием детекторной трубки для газов от Gastec (Model GV-100, Gastec, Япония) на 5-й день хранения.
(5) Усвояемость питательных веществ
2
3
Чтобы оценить усвояемость питательных веществ, корм, содержащий 0,2% оксида хрома (CrO), который добавляли в качестве индикатора, подавали цыплятам в течение 7 дней, а затем экскременты собирали по окончании эксперимента (5-я неделя). Собранные экскременты сушили в сушилке при 60°C в течение 72 часов и измельчали с использованием мельницы Wiley для применения в анализе. Общие компоненты корма и Cr, добавленный в качестве индикатора, анализировали способом AOAC (2000).
Результаты
(1) Продуктивность
Влияние добавки липидной композиции по настоящему изобретению к корму для цыплят-бройлеров на продуктивность цыплят-бройлеров показано в таблице 9 ниже. В дни 7-21 экспериментальная группа 1, экспериментальная группа 2 и экспериментальная группа 3 демонстрировали значительно более высокий прирост массы тела (BWG), чем отрицательный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции прирост массы тела линейно возрастал. Экспериментальная группа 1, экспериментальная группа 2 и экспериментальная группа 3 демонстрировали значительно более низкие коэффициенты кормоотдачи (FCR), чем отрицательный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции коэффициент конверсии корма линейно снижался. В дни 21-35 экспериментальная группа 1 демонстрировала значительно более низкий коэффициент кормоотдачи, чем отрицательный контроль. В течение всего периода испытаний экспериментальная группа 1 демонстрировала значительно более высокий прирост массы тела, чем отрицательный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции прирост массы тела линейно возрастал. Экспериментальная группа 1 демонстрировала значительно более низкий коэффициент кормоотдачи, чем отрицательный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции коэффициент конверсии корма линейно снижался.
[Таблица 9]
(2) Показатели качества тушки и мяса
Влияние добавки липидной композиции по настоящему изобретению к корму для цыплят-бройлеров на показатели качества тушки и мяса цыплят-бройлеров показано в таблице 10 ниже. На 1-й день отрицательный контроль демонстрировал значительно более высокие потери вследствие вытекания сока, чем экспериментальная группа 2, и по мере добавления большего количества липидной композиции потери вследствие вытекания сока линейно снижались. На 5-й день отрицательный контроль показал значительно более высокие потери вследствие вытекания сока, чем экспериментальная группа 3. На 7-й день не было существенной разницы в потерях вследствие вытекания сока между группами обработки, но по мере добавления большего количества липидной композиции потери вследствие вытекания сока линейно возрастали. Что касается показателей тушки, то не было никаких существенных различий между группами обработки в отношении рН, цвета мяса, печени, селезенки, сумки Фабрициуса, абдоминального жира, грудных мышц и желудка.
[Таблица 10]
(3) Показатели крови
Влияние добавки липидной композиции по настоящему изобретению к корму для цыплят-бройлеров на показатели крови цыплят-бройлеров показано в таблице 11 ниже. Не было существенной разницы между группами обработки в отношении белка, BUN, креатинина, триглицеридов, FFA и глюкозы.
[Таблица 11]
(4) Вещества с неприятным запахом в экскрементах
Влияние добавки липидной композиции по настоящему изобретению к корму для цыплят-бройлеров на вещества с неприятным запахом в экскрементах цыплят-бройлеров показано в таблице 12 ниже. Не было существенной разницы между группами обработки по образованию аммиака, сероводорода и суммарного меркаптана в экскрементах.
[Таблица 12]
(5) Усвояемость питательных веществ
Влияние добавки липидной композиции по настоящему изобретению к корму для цыплят-бройлеров на усвояемость питательных веществ у цыплят-бройлеров показано в таблице 13 ниже. Экспериментальная группа 3 демонстрировала значительно более высокую усвояемость сухого вещества, чем отрицательный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции усвояемость сухого вещества линейно возрастала. Экспериментальная группа 1, экспериментальная группа 2 и экспериментальная группа 3 демонстрировали значительно более высокую усвояемость азота, чем отрицательный контроль и положительный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции усвояемость азота линейно возрастала. Экспериментальная группа 2 и экспериментальная группа 3 демонстрировали значительно более высокую усвояемость энергии, чем отрицательный контроль, и по мере добавления большего количества липидной композиции усвояемость энергии линейно возрастала.
[Таблица 13]
Экспериментальный пример 3. Оценка липидной композиции 2 для цыплят-бройлеров
Шестьсот однодневных цыплят ROSS 308 (4 обработки × 5 повторений, 30 цыплят для каждой обработки) получали липидную композицию из примера 1. Здесь липидную композицию добавляли к коммерчески доступному корму для цыплят-бройлеров при соотношениях 0,1, 0,2 и 0,4 мас. % и цыплят кормили полученным кормом в течение 36 дней. Первым кормом (ME, 3080 ккал/кг; CP, 20,5%) кормили в течение 20 дней, а последним кормом (ME, 3100 ккал/кг; CP, 19,5%) кормили в течение 16 дней.
Здесь каждую группу животных обрабатывали следующим образом: (% представляет собой мас. %)
- Положительный контроль: корм
-Экспериментальная группа 1: корм + 0,1 мас. % липидной композиции из примера 1
-Экспериментальная группа 2: корм + 0,2 мас. % липидной композиции из примера 1
-Экспериментальная группа 3: корм + 0,4 мас. % липидной композиции из примера 1
[Таблица 14]
Как показано в таблице 14, наблюдалась тенденция к увеличению массы тела с добавлением липидной композиции из примера 1. На ранней стадии эксперимента ежедневный прирост массы тела с добавлением липидной композиции значительно и линейно увеличивался и коэффициент кормоотдачи также линейно улучшался.
Концентрация свободных жирных кислот в крови линейно возрастала при добавлении липидной композиции из примера 1, и, наоборот, концентрация триглицеридов в крови линейно и значительно снижалась.
Экспериментальный пример 4. Оценка липидной композиции 1 для камбалы
Выращивали по сорок особей камбалы на резервуар, и средняя масса тела рыбы в каждом резервуаре составляла 13,4 г. В 8:00 и 18:00 обеспечивали достаточное количество корма. Температура в резервуаре была от 15 до 21°C и рыбу выращивали в течение 12 недель. Здесь каждую группу животных обрабатывали (кормили), как показано в таблице 15 ниже. Чтобы исследовать скорость роста и эффективность использования корма, рассчитывали удельную скорость роста (%), потребление корма, коэффициент кормоотдачи и коэффициент эффективности белка, как показано ниже, и результаты приведены на ФИГ. 1-4.
Удельная скорость роста (%) = (Ln конечная масса (г) - Ln исходная масса (г))/дни эксперимента × 100
Потребление корма (г/рыбу) = скормленный сухой корм/рыбу
Коэффициент кормоотдачи = скормленный сухой корм/прирост сырого веса
Коэффициент эффективности белка = прирост сырого веса/общее потребление белка
Выживаемость (%) = конечное количество рыб/исходное количество рыб×100
[Таблица 15]
ФИГ. 1 представляет собой набор графиков, изображающих массу тела и прирост массы тела камбалы, измеренные по завершении эксперимента, ФИГ. 2 представляет собой набор графиков, изображающих удельную скорость роста и потребление корма для камбалы, ФИГ. 3 представляет собой набор графиков, изображающих коэффициент кормоотдачи и коэффициент эффективности белка, и ФИГ. 4 представляет собой график, изображающий выживаемость камбалы.
Как показано на ФИГ. 1-4, в результате выращивания камбалы с кормом, в котором 50 мас. % источника липидов корма для камбалы заменили липидной композицией по настоящему изобретению, не было существенной разницы между контрольной и экспериментальной группами в отношении массы тела, удельной скорости роста (%) и выживаемости камбалы, измеренных по завершении эксперимента.
Экспериментальный пример 5. Оценка липидной композиции 2 для камбалы
Выращивали по пятьдесят особей камбалы на отдельный резервуар, и средняя масса тела рыбы в каждом резервуаре составляла 6,8 г. В 8:00 и 18:00 обеспечивали достаточное количество корма. Температура в резервуаре была от 23 до 28 °C и рыбу выращивали в течение 8 недель. Здесь каждую группу животных кормили, как показано в таблице 16 ниже. Результаты приведены на ФИГ. 5-8.
[Таблица 16]
ФИГ. 5 представляет собой набор графиков, изображающих массу тела и прирост массы тела камбалы, измеренные по завершении эксперимента, ФИГ. 6 представляет собой набор графиков, изображающих удельную скорость роста и потребление корма для камбалы, ФИГ. 7 представляет собой набор графиков, изображающих коэффициент кормоотдачи и коэффициент эффективности белка, и ФИГ. 8 представляет собой график, изображающий выживаемость камбалы.
Как показано на ФИГ. 5-8, может быть подтверждено, что конечная масса тела камбалы возросла при добавлении липидной композиции из примера 1.