ГИБРИДНЫЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ СРЕДСТВА ОКСАЗОЛИДИНОН-ХИНОЛОН, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
HYBRID ANTIBACTERIAL AGENTS OXAZOLIDINONE-QUINOLONE INTENDED FOR PARENTERAL ADMINISTRATION FOR TREATMENT OR PREVENTION OF BACTERIAL DISEASES

Настоящее изобретение относится к применению гибридных средств оксазолидинон-хинолон для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к улучшенным способам введения гибридных антибактериальных средств оксазолидинон-хинолон.
В более предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению гибридных средств оксазолидинон-хинолон для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики кишечных заболеваний, которые вызваны грамположительными бактериями (например, S. aureus, Enterococcus spp.), в особенности грамположительными анаэробными микроорганизмами, такими как Clostridium spp., в частности, Clostridium difficile и Clostridium perfringens (в особенности Clostridium difficile).
Гибридные средства оксазолидинон-хинолон применимы в качестве противомикробных средств, эффективных для борьбы с различными патогенами человека и животных. Гибридные средства оксазолидинон-хинолон описаны в предшествующем уровне техники (например, в WO 02/059116, WO 03/002560, WO 03/031443, WO 03/032962, WO 2004/096221, WO 2005/058888, WO 2007/017828, WO 2008/056335, WO 2008/062379 и WO 2009/136379).
Clostridium difficile, грамположительная спорогенная анаэробная бацилла, является главной причиной возникновения связанной с антибиотиком диареи, в особенности в больницах и лечебных учреждениях для хронических больных, а также у подверженных низкому риску людей, таких как здоровые люди в группах населения, и в перинатальном периоде у женщин. Инфекции Clostridium difficile могут возникнуть у пациентов, например, вследствие лечения широким спектром антибактериальных средств, которые изменяют экологическое равновесие в симбионтной флоре кишечника, что обеспечивает возможность пролиферации С. difficile и выработки токсинов, а также прорастания спор С. difficile. Симптомы инфекций Clostridium difficile могут быть разными, от слабой диареи до опасных для жизни клинических проявлений, таких как молниеносный колит, псевдомембранозный колит, токсический мегаколон, и смерти. Эти симптомы в основном вызваны цитотоксическим воздействием продуцируемых С. difficile токсина А и токсина В.
За последние 15 лет эпидемиология инфекций Clostridum difficile (CDI) изменилась, поскольку увеличивается численность пожилых людей: возраст >65 является одним из важнейших факторов риска возникновения CDI и большинство CDI возникает у пациентов в возрасте >65 лет: с 1996 по 2009 г. количество случаев CDI у пациентов в возрасте >65 лет увеличилось всего на 200% (National Hospital Discharge Survey Annual files 1996-2009: http://www.cdc/nchs/nhds.htm, accessed on May 22, 2013).
В настоящее время в большинстве случае CDI лечат путем перорального введения антибактериальных средств, метронидазола, ванкомицина или фидаксомицина. Частота рецидивов CDI составляет от 20 до 25% в случае метронидазола или ванкомицина и примерно 13% в случае фидаксомицина (Tillotson GS and Tillotson J: Clostridium difficile - a moving target. F1000 Medicine Reports 2011, 3:6 doi: 10.3410/M3-6). С увеличением возраста страдающих CDI пациентов снижается эффективность перорального лечения и увеличивается частота рецидивов (Pepin J, Alary ME, Valiquette L, Raiche E, Ruel J, Fulop K, Godin D, Bourassa C: Increasing risk of relapse after treatment of Clostridium difficile colitis in Quebec, Canada. Clin Infect Dis 2005; 40: 1591-1597). Кроме того, с увеличением возраста повышается смертность страдающих CDI пациентов (Miller М, Gravel D, Mulvey М, Taylor G, Boyd D, Simor A, Gardam M, McGeer A, Hutchinson J, Moore D, Kelly S: Health care-associated Clostridium difficile infection in Canada: Patient age and infecting strain type are highly predictive of severe outcome and mortality. Clin Infect Dis 2010; 50: 194-201).
Парентеральное (предпочтительно внутривенное) введение для лечения или профилактики CDI является предпочтительным по следующим причинам:
1) Пожилые пациенты часто испытывают затруднения с пероральным приемом антибактериальных средств, т.е. с проглатыванием таблеток, которые можно преодолеть с помощью парентерального (предпочтительно внутривенного) введения при лечении CDI.
2) Клинические проявления CDI характеризуются водянистым стулом и частым неоформленным стулом в течение суток. Вследствие этого перорально введенные антибактериальные средства быстро удаляются/выводятся из организма (Yoo J, Lightner AL: Clostridium difficile infections: what every clinician should know. The Permanente Journal 2010; 14: 35-40). Парентеральное (предпочтительно внутривенного) введение при лечении существенно продлевает воздействие антибактериального средства на Clostridium difficile в желудочно-кишечном тракте.
3) У пациентов, страдающих тяжелой формой CDI, например, с кишечной непроходимостью или токсическим мегаколоном, может быть сильно замедлено перемещение перорально введенных антибактериальных средств из желудка в толстую кишку, что приводит к низким и неравномерным концентрациям антибактериального средства в месте инфекции (Wenisch JM, Schmid D, Tucek G, Kuo HW, Allerberger F, Michl V, Tesik P, Laferl H, Wenisch C. A prospective cohort study on hospital mortality due to Clostridium difficile infection. Infection. 2012; 40 (5): 479-484). Парентеральное (предпочтительно внутривенное) введение при лечении обеспечивает длительное воздействие антибактериального средства на Clostridium difficile в желудочно-кишечном тракте.
4) Развитие инфекции С. difficile характеризуется адгезией и колонизацией в кишечнике (при участии некоторых патогенных факторов, таких протеолитические ферменты и адгезины) и последующим продуцированием двух токсинов (TcdA и TcdB), которые повреждают слизистую оболочку толстой кишки так, что бактерии С. difficile проникают в клетки слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта. Таким образом патогенез CDI характеризуется ростом внутри слоев слизистой оболочки и внутри клеток желудочно-кишечного тракта, таким образом, вегетативные (активные) формы бактерий С. difficile не являются легко доступными для перорально вводимых антибактериальных средств, распределенных внутри фекальной матрицы. Кроме того, CDI главным образом возникает у пациентов, которые использовали антибактериальные средства для лечения инфекционных заболеваний, например, инфекций мочевых или дыхательных путей, что практически всегда приводит к изменениям в симбионтной микробиоте кишечника, нарушает сопротивляемость колонизации и может способствовать прорастанию спор С. difficile (неактивная форма), росту вегетативных клеток, продуцированию токсина и развитию резистентности, вследствие чего полное количество вегетативных клеток С. difficile и спор, скрытых в слизи желудочно-кишечного тракта, клетках слизистой оболочки, ворсинках и микроворсинках и/или углублениях и железах желудочно-кишечного тракта, значительно увеличивается. Эти устойчивые вегетативные бактерии и споры недоступны для перорально вводимых антибактериальных средств, но доступны для антибактериальных средств, вводимых парентерально (Deneve С, Janoir С, Poilane I, Fantinato С, Collignon A: New trends in Clostridium difficile virulence and pathogenesis. Int J Antimicrob Agents 2009; 33: S24-S28).
5) Лечение повторяющейся CDI является затруднительным, поскольку в настоящее время не существует утвержденных к применению режимов внутривенного введения для лечения, альтернативных пероральному введению ванкомицина и пероральному введению фидаксомицина. Однако повторяющиеся приступы CDI происходят все чаще. При первом повторном приступе CDI лечение обычно проводят в таком же режиме, как и в первый раз, и при последующих повторных приступах лечение проводят путем введения метронидазола или ванкомицина в режиме постепенно уменьшающихся доз и/или в импульсном режиме (Stuart Н. Cohen, MD; Dale N. Gerding, MD; Stuart Johnson, MD; Ciaran P. Kelly, MD; Vivian G. Loo, MD; L. Clifford McDonald, MD; Jacques Pepin, MD; Mark H. Wilcox, MD. Clinical Practice Guidelines f или Clostridium difficile Infection in Adults: 2010 Update by the Society for Healthcare Epidemiology of America (SHEA) and the Infectious Diseases Society of America (IDSA). Infect Control Hosp Epidemiol 2010; 31 (5): 431-455). Однако длительное лечение ванкомицином и метронидазолом сопровождается нейротоксичностью (метронидазол) и нефротоксичностью (ванкомицин).
Неожиданно было установлено, что парентеральное (предпочтительно внутривенное) введение соединения формулы (I) обеспечивает выраженное воздействие на грамположительные бактерии и грамположительные анаэробные микроорганизмы в желудочно-кишечном тракте людей. Кроме того, соединения формулы (I) являются эффективными по отношению к С. difficile in vitro, хотя два фармакофора, содержащиеся в соединениях формулы (I), неэффективны по отношению к С. difficile. Поэтому невозможно предположить, что соединения формулы (I) могут воздействовать на жизнеспособные микроорганизмы Clostridium spp. in vivo: ципрофлоксацин не является активным in vitro и не является эффективным in vivo по отношению к анаэробным микроорганизмам, в частности, не является эффективным по отношению к грамположительным анаэробным микроорганизмам, несмотря на высокую концентрацию в фекалиях. В отличие от него, линезолид является активным in vitro по отношению к С. difficile, но не является активным в модели кишечника человека in vitro. Отсутствие активности линезолида в этой модели находится в соответствии с пренебрежимо низкой концентрацией линезолида в фекалиях (0,2% дозы выводится с фекалиями).
Одним объектом настоящего изобретения являлась разработка способов введения гибридных средств оксазолидинон-хинолон в терапевтически эффективных количествах.
Настоящее изобретение относится к способу введения гибридного средства оксазолидинон-хинолон, включающему введение нуждающемуся в нем пациенту гибридного средства оксазолидинон-хинолон при скорости вливания, равной от 0,4 до 3,0 (предпочтительно равной от 0,4 до 1,5; особенно предпочтительно равной от 0,4 до 0,75) мг/((кг массы тела)×ч).
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу применения гибридного средства оксазолидинон-хинолон для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения бактериальной инфекции у нуждающегося в нем пациента, в котором гибридное средство оксазолидинон-хинолон вводят при скорости вливания, равной от 0,4 до 3,0 (предпочтительно равной от 0,4 до 1,5; особенно предпочтительно равной от 0,4 до 0,75) мг/((кг массы тела)×ч).
Кроме того, настоящее изобретение относится к гибридному средству оксазолидинон-хинолон, предназначенному для применения для лечения бактериальной инфекции, указанное лечение включает введение гибридного средства оксазолидинон-хинолон при скорости вливания, равной от 0,4 до 3 (предпочтительно равной от 0,4 до 1,5; особенно предпочтительно равной от 0,4 до 0,75) мг/((кг массы тела)×ч).
Предпочтительно, если гибридное средство оксазолидинон-хинолон вводят в течение от 20 мин до 24 ч; предпочтительно в течение от 20 мин до 5 ч; более предпочтительно в течение от 4 до 12 ч в течение суток при скорости вливания, предлагаемой в настоящем изобретении. Такую суточную дозу можно, например, ввести за один раз или, например, ее можно вводить в течение до 5 дней или в течение до 10 дней, или даже в течение до 6 месяцев в зависимости от тяжести инфекции.
Предпочтительно, если гибридное средство оксазолидинон-хинолон выбрано из числа соединений, описанных в WO 02059116, WO 03002560, WO 03031443, WO 03032962, WO 2005058888, WO 2005023801, WO 2004096221, WO 2007017828, WO 2008056335, WO 2008062379 и/или WO 2009136379.
Кроме того, предпочтительно, если гибридным средством оксазолидинон-хинолон является соединение формулы (I),
в которой
А обозначает алкиленовую группу, алкениленовую группу, алкиниленовую группу, гетероалкиленовую группу, циклоалкиленовую группу, гетероциклоалкиленовую группу, ариленовую группу или гетероариленовую группу, все эти группы могут быть замещенными;
7
X обозначает CR или N;
6
Y обозначает CR или N;
n равно 1, 2 или 3;
m равно 1, 2 или 3;
1
2
R обозначает Н, F, Cl, Br, I, ОН, NH, алкильную группу или гетероалкильную группу;
2
R обозначает Н, F или Cl;
3
R обозначает Н, алкильную группу, алкенильную группу, алкинильную группу, гетероалкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, алкилциклоалкильную группу, гетероалкилциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, алкиларильную группу или гетероарилалкильную группу; все эти группы могут быть замещены 1, 2 или большим количеством атомов галогенов, таких как F или Сl, или аминогрупп.
4
9
10
10
9
9
10
3
2
3
2
3
3
2
R обозначает атом водорода, группу формулы POR или SOR, или гетероалкильную группу, содержащую по меньшей мере одну группу ОН, NH, SOR, POR или СООН, или группу эфира природной аминокислоты или ее производного, где группы R независимо друг от друга обозначают Н, алкил, циклоалкил, арил или арилалкил, и где R обозначает Н, алкил, циклоалкил, арил или арилалкил;
5
R выбран из числа следующих групп:
6
R обозначает H, F, Сl или OMe;
7
2
R обозначает Н, F, Сl, ОН, NH, замещенную или незамещенную алкильную группу, или замещенную или незамещенную гетероалкильную группу, или
3
7
3
7
2
R и R могут быть связаны через алкиленовую, алкениленовую или гетероалкиленовую группу или являться частью циклоалкиленовой или гетероциклоалкиленовой группы; в случае, если R не обозначает Н и R не обозначает Н, F, ОН, NH или Cl; и
8
1
6
1
6
R обозначает C-С-алкильную, C-С-гетероалкильную или гетероарилалкильную группу, каждая из которых необязательно может быть замещенной;
или его фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий его препарат.
2
2
Термин алкил означает обладающую линейной или разветвленной цепью насыщенную углеводородную группу, предпочтительно содержащую от 1 до 10, особенно предпочтительно от 1 до 6 атомов углерода, например, означает метильную, этильную, пропильную, изопропильную, бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, н-пентильную, изопентильную, н-гексильную, 2,2-диметилбутильную, н-октильную или н-пентильную группы. Любая алкильная группа, определенная в настоящем изобретении, может содержать 1, 2 или большее количество заместителей, например, F, Cl, Br, I, NH, ОН, SH или NO.
2
2
Термины алкенил и алкинил означают обладающую линейной или разветвленной цепью ненасыщенную углеводородную группу (содержащую 1, 2 или большее количество двойных и/или тройных связей, предпочтительно, если алкенил содержит 1 или 2 двойные связи и предпочтительно, если алкинил содержит 1 или 2 тройные связи), предпочтительно содержащую от 2 до 10, более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода, например, означает: этенильную (винильную), пропенильную (аллильную), изопропенильную, н-пентенильную, бутенильную, изопренильную или гекса-2-енильную; этинильную, пропинильную или бутинильную группы. Любая алкенильная или алкинильная группа, определенная в настоящем изобретении, может содержать 1, 2 или большее количество заместителей, например, F, Cl, Br, I, NH, ОН, SH или NO.
2
2
2
Термин гетероалкил означает алкильную, алкенильную или алкинильную группу, определенную в настоящем изобретении, в которой один или большее количество атомов углерода заменены атомом кислорода, азота, фосфора или серы, или группой SO, или группой SO, например, означает алкоксигруппу, такую как метоксигруппа, этоксигруппа, пропоксигруппа, изопропоксигруппа, бутоксигруппа или трет-бутоксигруппа, алкоксиалкильную группу, такую как метоксиметил, этоксиметил, 1-метоксиэтил, 1-этоксиэтил, 2-метоксиэтил или 2-этоксиэтил, алкиламиногруппу, такую как метиламиногруппа, этиламиногруппа, пропиламиногруппа, изопропиламиногруппа, диметиламиногруппа или диэтиламиногруппа, алкилтиогруппу, такую как метилтиогруппа, этилтиогруппа или изопропилтиогруппа, или цианогруппу. Термин также может означать одну из указанных выше групп, содержащую кетогруппу. Кроме того, термин гетероалкил означает группу, образованную из карбоновой кислоты или амида карбоновой кислоты, такую как ацетил, пропионил, ацетилоксигруппа, пропионилоксигруппа, ацетиламиногруппа или пропиониламиногруппа, карбоксиалкильную группу, такую как карбоксиметил, карбоксиэтил или карбоксипропил, группу сложного карбоксиалкилового эфира, алкилтиокарбоксиаминогруппу, алкоксииминогруппу, алкиламинотиокарбоксиаминогруппу или алкоксикарбониламиногруппу. Любая гетероалкильная группа, определенная в настоящем изобретении, может содержать 1, 2 или большее количество заместителей, например, F, Cl, Br, I, NH, ОН, SH или NO.
1
6
Термин C-С-гетероалкил означает гетероалкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода и 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из группы, включающей О, S и/или N (предпочтительно О и/или N).
2
3
2
Термин циклоалкил означает насыщенную или частично ненасыщенную (содержащую 1, 2 или большее количество двойных и/или тройных связей) циклическую группу, включающую 1, 2 или большее количество колец, содержащую от 3 до 14 кольцевых атомов углерода, предпочтительно содержащую от 5 или 6 до 10 кольцевых атомов углерода, например, означает циклопропильную, циклобутильную, циклопентильную, циклогексильную, тетралиновую, циклопентенильную или циклогекс-2-енильную группы. Любая циклоалкильная группа, определенная в настоящем изобретении, может содержать 1, 2 или большее количество заместителей, например, F, Cl, Br, I, ОН, =O, NH, =NH, SH, =S, N, NO, алкильные группы, такие как метил или этил, гетероалкильные группы, такие как метоксигруппа, метиламиногруппа, диметиламиногруппа или цианидная группа.
1-2
Термин гетероциклоалкил означает циклоалкильную группу, определенную в настоящем изобретении, в которой 1, 2 или большее количество кольцевых атомов углерода заменены 1, 2 или большим количеством атомов кислорода, азота, фосфора или серы, или группами S(O), например, означает пиперидиновую, морфолиновую или пиперазиновую группы.
Термин алкилциклоалкил означает группы, которые содержат циклоалкильную, а также алкильную, алкенильную или алкинильную группы, обладающие указанными выше определениями, например, означает алкилциклоалкильную, циклоалкилалкильную, алкилциклоалкенильную, алкенилциклоалкильную и алкинилциклоалкильную группы. Предпочтительно, если алкилциклоалкильная группа содержит циклоалкильную группу, которая включает 1 или 2 кольца, содержащих от 3 до 10 (предпочтительно 3, 4, 5, 6 или 7) кольцевых атомов углерода, и 1 или 2 алкильные, алкенильные или алкинильные группы (предпочтительно алкильные группы), содержащие от 1 или 2 до 6 атомов углерода.
2
Термин гетероалкилциклоалкил означает алкилциклоалкильные группы, определенные выше, в которых один или большее количество (предпочтительно 1, 2 или 3) атомов углерода заменены атомом кислорода, азота, фосфора или серы (предпочтительно атомом кислорода, серы или азота), или группой SO, или группой SO. Предпочтительно, если гетероалкилциклоалкильная группа включает 1 или 2 кольца, содержащих от 3 до 10 (предпочтительно 3, 4, 5, 6 или 7) кольцевых атомов, и 1 или 2 алкильные, алкенильные, алкинильные или гетероалкильные группы (предпочтительно алкильные или гетероалкильные группы), содержащие от 1 или 2 до 6 атомов углерода. Примерами таких групп являются алкилгетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкенил, алкенилгетероциклоалкил, алкинилгетероциклоалкил, гетероалкилциклоалкил, гетероалкилгетероциклоалкил и гетероалкилгетероциклоалкенил, циклические группы являются насыщенными или моно-, ди- или триненасыщенными.
2
3
2
Термин арил означает ароматическую циклическую группу, включающую 1, 2 или большее количество колец, содержащую от 5 до 14 кольцевых атомов углерода, предпочтительно содержащую от 5 или 6 до 10 кольцевых атомов углерода, например, означает фенильную или нафтильную группы. Любая арильная группа, определенная в настоящем изобретении, может содержать 1, 2 или большее количество заместителей, например, F, Cl, Br, I, ОН, NH, SH, N, NO, алкильные группы, такие как метил или этил, гетероалкильные группы, такие как метоксигруппа, метиламиногруппа, диметиламиногруппа или цианидная группа.
3
2
2
Термин гетероарил означает ароматическую группу, включающую одно или большее количество колец, содержащую от 5 до 14 кольцевых атомов, предпочтительно от 5 до 10 (предпочтительно 5 или 6, или 9 или 10) кольцевых атомов, и в дополнение к кольцевым атомам углерода содержащую один или большее количество (предпочтительно 1, 2, 3 или 4) кольцевых атомов кислорода, азота, фосфора или серы (предпочтительно О, S или N). Кроме того, термин гетероарил означает группы, которые замещены атомами фтора, хлора, брома или йода, или группами ОН, SH, N, NH или NO. Примерами являются пиридильная (например, 4-пиридильная), имидазолильная (например, 2-имидазолильная), фенилпирролильная (например, 3-фенилпирролильная), тиазолильная, изотиазолильная, 1,2,3-триазолильная, 1,2,4-триазолильная, оксадиазолильная, тиадиазолильная, индолильная, индазолильная, тетразолильная, пиразинильная, пиримидинильная, пиридазинильная, оксазолильная, изоксазолильная, триазолильная, тетразолильная, изоксазолильная, индазолильная, индолильная, бензимидазолильная, бензоксазолильная, бензизоксазолильная, бензтиазолильная, пиридазинильная, хинолинильная, изохинолинильная, пирролильная, пуринильная, карбазолильная, акридинильная, пиримидильная, 2,3'-бифурильная, пиразолильная (например, 3-пиразолильная) и изохинолинильная группы.
Термин аралкил (или арилалкил, или алкиларил) означает группы, которые содержат арильные, а также алкильные, алкенильные, алкинильные и/или циклоалкильные группы.
1-2
Термин гетероаралкил (или гетероарилалкил, или гетероалкиларил, или гетероалкилгетероарил и т.п.) означает аралкильную группу, определенную в настоящем изобретении, в которой 1, 2, 3 или большее количество атомов углерода заменены 1, 2, 3 или большим количеством атомов кислорода, азота, фосфора или серы, или групп S(O), другими словами, означает группы, содержащие арил или гетероарил соответственно, а также алкильные, алкенильные, алкинильные и/или гетероалкильные, и/или циклоалкильные, и/или гетероциклоалкильные группы, обладающие приведенными выше определениями.
2
2
Предпочтительно, если любые алкильные, алкенильные, алкинильные, гетероалкильные, циклоалкильные, гетероциклоалкильные, алкилциклоалкильные, гетероалкилциклоалкильные, арильные, гетероарильные, арилалкильные или гетероарилалкильные группы, определенные в настоящем изобретении, могут быть замещены одним или большим количеством атомов галогенов, группами NH, SH, NO или ОН, или незамещенными алкильными, гетероалкильными, арильными, арилалкильными группами, арилалкилоксигруппами, гетероарильными, циклоалкильными или гетероциклоалкильными группами, определенными в настоящем изобретении.
2
2
2
Термин "необязательно замещенные" или "замещенные" означает группы, в которых один или большее количество атомов водорода заменены атомами галогенов, группой NH, SH, =NH, =S, =O, NO или ОН, или незамещенной алкильной, гетероалкильной, арильной, арилалкильной группой, арилалкилоксигруппой, гетероарильной, циклоалкильной или гетероциклоалкильной группой, определенными в настоящем изобретении. Предпочтительными заместителями являются F, Сl, ОН и NH.
В контексте настоящего изобретения предпочтительно, если термины антибактериальный агент (агенты), антибактериальное средство (средства), противомикробный агент (агенты), противомикробное средство (средства) и антибактериальное соединение (соединения) обладают одинаковыми значениями. Кроме того, в контексте настоящего изобретения предпочтительно, если термин гибридное средство оксазолидинон-хинолон означает гибридные антибактериальные средства оксазолидинон-хинолон.
Предпочтительные и/или полезные варианты осуществления являются объектами, соответствующими зависимым пунктам формулы изобретения.
1
Предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой Rобозначает Н.
2
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает F или Н.
3
3
6
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает этильную, 2-пропильную, С-С-циклоалкильную (т.е. циклопропильную, циклобутильную, циклопентильную или циклогексильную), фенильную или пиридильную группу. Все эти группы могут быть замещены 1, 2, 3 или большим количеством атомов фтора или аминогрупп.
3
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает циклопропильную группу.
7
3
2
2
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R и R вместе образуют мостик формулы -O-CH-N(Me)- или -О-СН-СН(Ме)-, где атом кислорода присоединен в положении X. В контексте настоящего изобретения предпочтительной стереохимической конфигурацией хирального центра является такая, которая обеспечивает (S)-конфигурацию в конечном соединении.
4
3
3
2
2
3
2
2
2
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает атом водорода или группу формулы SOH, РОН, СНОРOН или СОСНСНСООН.
4
2
2
3
2
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает группу эфира природной аминокислоты или ее производного (предпочтительно группу формулы -COCHR'NH или ее производное, такое как ее эфир, амид или алкиламин, где R' обозначает боковую цепь природной аминокислоты, такой как аспарагиновая кислота, глутаровая кислота, лизин и т.п.; например, диметиламиноглицин OCOCHN(CH)).
4
3
2
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает атом водорода или группу формулы РОН.
3
2
Наиболее предпочтительными являются соединения формулы (I), (II) или (III), в которой R обозначает группу формулы РОН, или их соли (предпочтительной является натриевая соль).
5
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обладает следующей структурой:
5
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обладает следующей структурой:
5
1
6
1
6
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает С-С-алкильную или C-С-гетероалкильную группу.
8
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает группу формулы -СНNHСОСН=СН-арил, -СНО-гетероарил (предпочтительно -окса-3-оксазол), -CHNHSOMe, -CHNHCOOMe, -CHNHCOMe, -CHNHCSMe, -CHNHCSMe -CHNHCSNH, -CHNHCSOMe или -NHCOMe; предпочтительно -CHNHCSMe, -CHOH или -CHNHCOMe.
8
2
2
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает группу формулы -CHNHСОМе или -СНОН.
5
Кроме того, особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обладает следующей структурой:
5
Кроме того, особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обладает следующей структурой:
7
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает Н, F, Cl или метоксигруппу, которая может быть замещена 1, 2 или 3 атомами фтора.
7
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой R обозначает Н или метоксигруппу.
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой X обозначает N или СН; особенно предпочтительно, если X обозначает СН.
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой Y обозначает СН.
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой n равно 1 или 2; особенно предпочтительно 2.
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой m равно 2.
1
6
2
6
2
6
1
6
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой А обозначает С-С-алкилен, С-С-алкенилен, С-С-алкинилен, C-С-гетероалкилен, циклопропилен, эпоксид, азиридин, тиоэпоксид, лактам или лактон, все эти группы могут быть замещенными.
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой А обозначает группу формулы -СНСН-, -ОСН-, -ОСНСН-, -SCH-, -SCHCH-, -СН=СН-, -С≡С-, -СН(ОН)СН(ОН)- или -CH(NH)CH(OH)-. Особенно предпочтительно, если А обозначает группу формулы -ОСН-, где атом кислорода связан с ароматическим кольцом, содержащим группу Y.
1
4
2
4
2
4
1
4
4
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой А обозначает группу формулы -О-В-, в которой В обозначает С-С-алкиленовую группу, С-С-алкениленовую группу, С-С-алкиниленовую группу или С-С-гетероалкиленовую группу, все эти группы могут быть замещены 1, 2 или большим количеством гидроксигрупп или аминогрупп. При этом атом кислорода связан с ароматическим кольцом, содержащим Y, и В связан с гетероциклоалкильной группой через атом углерода, к которому присоединена группа -O-R.
2
2
2
2
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которой В обозначает СН или СНСН; особенно предпочтительно СН.
Особенно предпочтительно, если гибридным средством оксазолидинон-хинолон является соединение формулы (II)
3
4
8
в которой R, R, R, X, В, n и m являются такими, как определено выше, или его фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий его препарат.
2
2
3
2
2
2
3
7
7
3
4
8
В предпочтительном варианте осуществления В обозначает СН; X обозначает СН, N или С-ОМе и R обозначает циклопропил, или X обозначает CR, и R и R вместе образуют мостик формулы -О-СН-CH(Ме)-, где предпочтительной стереохимической конфигурацией хирального центра является такая, которая обеспечивает (S)-конфигурацию в конечном соединении, n равно 1, 2 или 3 (предпочтительно 1 или 2), m равно 1, 2 или 3 (предпочтительно 2), R обозначает атом водорода или группу формулы РОН и R обозначает группу формулы -CHNHCOMe или -СНОН, или его фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий его препарат.
Кроме того, предпочтительно, если гибридным средством оксазолидинон-хинолон является соединение формулы (III):
4
3
2
в которой X обозначает N или СН (особенно предпочтительно СН) и R обозначает атом водорода или группу формулы РОН, или его фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий его препарат.
4
4
3
2
3
2
Кроме того, предпочтительными являются моно-, ди- или тринатриевые соли (наиболее предпочтительными являются мононатриевые соли) соединений формулы (I), (II) или (III), или их смеси, в особенности, если R обозначает РОН. Особенно предпочтительными являются моно-, ди- или тринатриевые соли (наиболее предпочтительными являются мононатриевые соли) соединений формулы (I), (II) или (III), в которой R обозначает РОН, или их смеси.
Особенно предпочтительно, если гибридное средство оксазолидинон-хинолон выбрано из числа следующих соединений:
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил} -4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(58)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота; 7-[4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-(2,6-диаминогексаноилокси)пиперидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
Моно-[4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-1-(6-карбокси-8-циклопропил-3-фтор-5-оксо-5,8-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-ил)пиперидин-4-ил]овый эфир янтарной кислоты;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
9-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-8-фтор-3-метил-6-оксо-2,3-дигидро-6Н-1-окса-3а-азафенален-5-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
9-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-8-фтор-3-метил-6-оксо-2,3-дигидро-6Н-1-окса-3а-азафенален-5-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксиазепан-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксиазепан-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[5S-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфенилэтинил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[5S-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфенилэтинил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-[4-(2-{4-[5S-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфенил}-этил)-4-гидроксипиперидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
1-Циклопропил-6-фтор-7-[4-({2-фтор-4-[(5R)-5-(гидроксиметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]фенокси}метил)-4-гидроксипиперидин-1-ил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
или их фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий их препарат.
Кроме того, особенно предпочтительной является натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты или ее фармакологически приемлемый сольват, гидрат или содержащий ее препарат.
Более предпочтительно, если гибридное средство оксазолидинон-хинолон выбрано из числа следующих соединений:
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
и
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
или их соль, такая как, например: натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты.
Наиболее предпочтительно, если гибридным средством оксазолидинон-хинолон является натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты.
В особенно предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу введения гибридного средства оксазолидинон-хинолон, включающему введение нуждающемуся в нем пациенту гибридного средства оксазолидинон-хинолон при скорости вливания, равной от 0,4 до 3,0 (предпочтительно равной от 0,4 до 1,5; особенно предпочтительно равной от 0,4 до 0,75) мг/((кг массы тела)×ч), где гибридным средством оксазолидинон-хинолон является:
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
или ее соль, такая как, например: натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты.
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу применения гибридного средства оксазолидинон-хинолон для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения бактериальной инфекции у нуждающегося в нем пациента, в котором гибридное средство оксазолидинон-хинолон вводят при скорости вливания, равной от 0,4 до 3,0 (предпочтительно равной от 0,4 до 1,5; особенно предпочтительно равной от 0,4 до 0,75) мг/((кг массы тела)×ч), где гибридным средством оксазолидинон-хинолон является:
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
или ее соль, такая как, например: натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты.
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к гибридному средству оксазолидинон-хинолон, предназначенному для применения для лечения бактериальной инфекции, указанное лечение включает введение гибридного средства оксазолидинон-хинолон при скорости вливания, равной от 0,4 до 3 (предпочтительно равной от 0,4 до 1,5; особенно предпочтительно равной от 0,4 до 0,75) мг/((кг массы тела)×ч), где гибридным средством оксазолидинон-хинолон является:
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
или ее соль, такая как, например: натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты.
В контексте настоящего изобретения особенно предпочтительной является скорость вливания, равная от 0,4 до 0,75 мг/((кг МТ)×ч) (МТ - масса тела).
Скорости вливания, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать для пациентов в клинических условиях и в ветеринарии. Скорости вливания (мг/((кг МТ)×ч)) гибридных средств оксазолидинон-хинолон, предлагаемые в настоящем изобретении, являются безопасными и эффективными для применения в клинических условиях и в ветеринарии.
В особенно предпочтительном варианте осуществления скорость вливания, предлагаемая в настоящем изобретении, равна 0,5 мг/((кг МТ)×ч).
Кроме того, особенно предпочтительным является введение людям натриевой соли 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты при дозе, равной 6 мг/(кг массы тела) в течение 12 ч в течение 5 последовательных дней.
Способы, предлагаемые в настоящем изобретении, также можно применять на практике при одновременном введении одного или большего количества антибиотиков, отличающихся от гибридного антибактериального средства оксазолидинон-хинолон.
Способы, предлагаемые в настоящем изобретении, являются особенно подходящими для лечения бактериальных инфекций, вызванных грамположительными бактериями.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I),
в которой
А обозначает алкиленовую группу, алкениленовую группу, алкиниленовую группу, гетероалкиленовую группу, циклоалкиленовую группу, гетероциклоалкиленовую группу, ариленовую группу или гетероариленовую группу, все эти группы могут быть замещенными;
7
X обозначает CR или N;
6
Y обозначает CR или N;
n равно 1, 2 или 3;
m равно 1, 2 или 3;
1
2
R обозначает Н, F, Cl, Br, I, ОН, NH, алкильную группу или гетероалкильную группу;
2
R обозначает Н, F или Сl;
3
R обозначает Н, алкильную группу, алкенильную группу, алкинильную группу, гетероалкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, алкилциклоалкильную группу, гетероалкилциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, алкиларильную группу или гетероарилалкильную группу; все эти группы могут быть замещены 1, 2 или большим количеством атомов галогенов, таких как F или Сl, или аминогрупп.
4
9
10
10
9
10
3
2
3
2
3
3
2
R обозначает атом водорода, группу формулы POR или SOR, или гетероалкильную группу, содержащую по меньшей мере одну группу ОН, NH, SOR, POR или СООН, или группу эфира природной аминокислоты или ее производного, где группы R независимо друг от друга обозначают Н, алкил, циклоалкил, арил или арилалкил, и где R обозначает Н, алкил, циклоалкил, арил или арилалкил;
5
R выбран из числа следующих групп:
6
R обозначает Н, F, О или ОМе;
7
2
R обозначает Н, F, О, ОН, NH, замещенную или незамещенную алкильную группу, или замещенную или незамещенную гетероалкильную группу, или
3
7
3
7
2
R и R могут быть связаны через алкиленовую, алкениленовую или гетероалкиленовую группу или являться частью циклоалкиленовой или гетероциклоалкиленовой группы; в случае, если R не обозначает Н и R не обозначает Н, F, ОН, NH или Cl; и
8
1
6
1
6
R обозначает C-С-алкильную, C-С-гетероалкильную, гетероарилалкильную, гетероалкиларильную или гетероалкилгетероарильную группу, каждая из которых может быть необязательно замещенной;
или их фармакологически приемлемой соли, сольвату, гидрату или содержащему их препарату,
предназначенному для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (II)
3
4
8
в которой R, R, R, X, В, n и m являются такими, как определено выше, или их фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий их препарат, предназначенный для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
2
2
3
2
2
2
3
7
7
3
4
8
В предпочтительном варианте осуществления В обозначает СН; X обозначает СН, N или С-ОМе и R обозначает циклопропил, или X обозначает CR, и R и R вместе образуют мостик формулы -O-СН-СН(Ме)-, где предпочтительной стереохимической конфигурацией хирального центра является такая, которая обеспечивает (S)-конфигурацию в конечном соединении, n равно 1, 2 или 3 (предпочтительно 1 или 2), m равно 1, 2 или 3 (предпочтительно 2), R обозначает атом водорода или группу формулы РОН и R обозначает группу формулы -СНNНСОМe или -СНОН, или его фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий его препарат.
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (III):
4
3
2
в которой X обозначает N или СН (особенно предпочтительно СН) и R обозначает атом водорода или группу формулы РОН, или их фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий их препарат, предназначенный для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
4
3
2
Кроме того, предпочтительными являются моно-, ди- или тринатриевые соли (наиболее предпочтительными являются мононатриевые соли) соединений формулы (I), (II) или (III), или их смеси. Особенно предпочтительными являются моно-, ди- или тринатриевые соли (наиболее предпочтительными являются мононатриевые соли) соединений формулы (I), (II) или (III), в которой R обозначает РОН, или их смеси, предназначенные для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
Особенно предпочтительными являются следующие соединения:
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-[4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-(2,6-диаминогексаноилокси)пиперидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
Моно-[4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-1-(6-карбокси-8-циклопропил-3-фтор-5-оксо-5,8-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-ил)пиперидин-4-ил]овый эфир янтарной кислоты;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
9-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-8-фтор-3-метил-6-оксо-2,3-дигидро-6Н-1-окса-3а-азафенален-5-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-1-циклопропил-8-метокси-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
9-(3-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-3-гидроксипирролидин-1-ил)-8-фтор-3-метил-6-оксо-2,3-дигидро-6Н-1-окса-3а-азафенален-5-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксиазепан-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[(5S)-5-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксиазепан-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[5S-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфенилэтинил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
7-(4-{4-[5S-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфенилэтинил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-3-карбоновая кислота;
7-[4-(2-{4-[5S-(Ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфенил}-этил)-4-гидроксипиперидин-1-ил]-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
1-Циклопропил-6-фтор-7-[4-({2-фтор-4-[(5R)-5-(гидроксиметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]фенокси}метил)-4-гидроксипиперидин-1-ил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота;
или их фармакологически приемлемая соль, сольват, гидрат или содержащий их препарат, предназначенный для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
Кроме того, особенно предпочтительной является натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты или ее фармакологически приемлемый сольват, гидрат или содержащий ее препарат, предназначенный для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
Наиболее предпочтительными являются следующие соединения:
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
и
7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота:
или их соль, такая как, например: натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты, предназначенная для применения для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний.
Фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, содержат гибридное средство оксазолидинон-хинолон (например, соединение формулы (I), (И) или (III)) в качестве активного средства и необязательно носители и/или разбавители, и/или вспомогательные вещества. Фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, также необязательно могут содержать дополнительные известные антибиотики.
Соединения и фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем изобретении, можно использовать для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний, предпочтительно для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики кишечных заболеваний, которые вызваны грамположительными бактериями (например, S. aureus, Enterococcus spp.), в особенности грамположительными анаэробными микроорганизмами, такими как Clostridium spp., в частности, Clostridium difficile, Clostridium perfringens (в особенности Clostridium difficile).
Другим объектом настоящего изобретения является получение соединений формулы (I), (II) или (III), определенных в настоящем изобретении, или фармацевтической композиции, определенной в настоящем изобретении, предназначенной для приготовления лекарственного средства, предназначенного для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики бактериальных заболеваний, предпочтительно для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики кишечных заболеваний, которые вызваны грамположительными бактериями (например, S. aureus, Enterococcus spp.), в особенности грамположительными анаэробными микроорганизмами, такими как Clostridium spp., в частности, Clostridium difficile, Clostridium perfringens (в особенности Clostridium difficile).
Кроме того, объектом настоящего изобретения является разработка способа лечения или профилактики бактериальных заболеваний (предпочтительно с помощью парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики кишечных заболеваний, которые вызваны грамположительными бактериями (например, S. aureus, Enterococcus spp.), в особенности грамположительными анаэробными микроорганизмами, такими как Clostridium spp., в частности, Clostridium difficile, Clostridium perfringens (в особенности Clostridium difficile)), включающего парентеральное (предпочтительно внутривенное) введение нуждающемуся в нем пациенту соединения или фармацевтической композиции, описанной в настоящем изобретении, в терапевтически эффективном количестве.
Кишечные заболевания, которые предполагается предупреждать или лечить в соответствии с настоящим изобретением, включают, например, диарею, колит и псевдомембранозный колит. Указанные кишечные заболевания могут быть вызваны, например, Clostridium difficile (и в особенности продуцирующим токсин штаммом Clostridium difficile).
Особенно предпочтительно, если соединения и фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем изобретении, можно использовать для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики тяжелых или осложненных бактериальных заболеваний (в особенности заболеваний, связанных с Clostridium difficile), таких как кишечная непроходимость, токсический мегаколон, молниеносный колит, перфорация толстой кишки или при необходимости проведения колэктомии.
Кроме того, особенно предпочтительно, если соединения и фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем изобретении, можно использовать для парентерального (предпочтительно внутривенного) введения для лечения или профилактики рецидивирующих бактериальных заболеваний (в особенности заболеваний, связанных с Clostridium difficile, таких как диарея, связанная с Clostridium difficile).
Настоящее изобретение также относится к фармакологически приемлемым солям или сольватам и гидратам соединений формулы (I), (II) или (III) соответственно, и к содержащим их композициям и препаратам. Кроме того, настоящее изобретение также относится к применению фармакологически приемлемых солей или сольватов и гидратов гибридных средств оксазолидинон-хинолон (например, соединений формулы (I), (II) или (III)) соответственно, и содержащих их композиций и препаратов.
Примерами фармакологически приемлемых солей в достаточной степени основных соединений формулы (I), (II) или (III) являются соли, образованные с физиологически приемлемыми неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная, бромистоводородная, серная и фосфорная кислота; или соли, образованные с органическими кислотами, такими как метансульфоновая, п-толуолсульфоновая, молочная, уксусная, трифторуксусная, лимонная, янтарная, фумаровая, малеиновая и салициловая кислота. Кроме того, в достаточной степени кислое соединение формулы (I), (II) или (III) может образовывать соли с щелочными или щелочноземельными металлами, например, соли с натрием, калием, литием, кальцием или магнием; соли с аммиаком; или соли с неорганическими основаниями, например, соли с метиламином, диметиламином, триметиламином, триэтиламином, этилендиамином, этаноламином, гидроксидом холина, меглумином, пиперидином, морфолином, трис-(2-гидроксиэтил)амином, лизином или аргинином.
Соединения формулы (I), (II) или (III) могут быть сольватированными, предпочтительно гидратированными. Гидратация может произойти во время процедуры получения или являться следствием гигроскопичности изначально не содержащих воду соединений формулы (I), (II) или (III).
Следует понимать, что некоторые соединения формулы (I), (II) или (III), указанные в настоящем описании, могут существовать в таутомерных формах и только одна из них может быть конкретно указана или изображена в настоящем описании, в виде разных геометрических изомеров (которые обычно обозначены, как цис/транс-изомеры, или чаще, как (Е)- и (Z)-изомеры) или в виде разных оптических изомеров вследствие наличия одного или большего количества хиральных атомов углерода (для описания обычно используют номенклатуру Кана-Ингольда-Прелога или R/S). Кроме того, некоторые соединения могут обладать полиморфизмом. Все эти таутомерные формы, геометрические или оптические изомеры (а также рацематы и диастереоизомеры) и полиморфные формы включены в настоящее изобретение. Соединения формулы (I), (II) или (III) также могут находиться в виде ахиральных соединений, смесей диастереоизомеров, смесей энантиомеров или в виде оптически чистых соединений.
Как отмечено выше, терапевтически применимые средства, которые содержат соединения формулы (I), (II) или (III), их сольваты, соли или содержащие их препараты, также входят в объем настоящего изобретения.
В контексте настоящего изобретения гибридные средства оксазолидинон-хинолон (например, соединения формулы (I), (II) или (III)) вводят парентерально, включая введение путем внутривенной, внутримышечной и подкожной инъекции, например, в виде раствора или суспензии для инъекции. Предпочтительно, если гибридные средства оксазолидинон-хинолон (например, соединения формулы (I), (II) или (III)) вводят внутривенно.
Для приготовления жидких растворов, эмульсий или суспензий в качестве инертных наполнителей можно использовать, например, воду, спирты, водный раствор соли, водный раствор декстрозы, полиолы, глицерин, липиды, фосфолипиды, циклодекстрины, растительные, минеральные, животные или синтетические масла. Особенно предпочтительными являются липиды и более предпочтительными являются фосфолипиды (предпочтительно природного происхождения; особенно предпочтительно обладающие размером частиц, равным от 300 до 350 нм), предпочтительно в забуференном фосфатом физиологическом растворе (рН= от 7 до 8, предпочтительно 7,4).
При внутривенном введении животным нескольких видов, в число которых входят мыши и крысы, натриевая соль 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-фосфонооксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты (соединение 1) быстро превращается в активное вещество, 7-(4-{4-[(5S)-5-(ацетиламинометил)-2-оксооксазолидин-3-ил]-2-фторфеноксиметил}-4-гидроксипиперидин-1-ил)-1-циклопропил-6-фтор-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту (соединение 2). Вследствие очень хорошей растворимости соединения 1 в водных средах его легко включить в препарат с помощью лиофилизации. Для улучшения стабильности и для уменьшения времени, необходимого для восстановления лиофилизата, соединение 1 можно, например, включить в препарат с сорбитом и гидроксидом натрия и лиофилизировать в стеклянных сосудах. Лиофилизат можно восстановить путем добавления воды для инъекций и осторожного встряхивания и получить желтый стерильный раствор, готовый для внутривенной инъекции.
Фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, также могут содержать добавки, предназначенные для консервирования и/или стабилизации, например, УФ-стабилизаторы, эмульгаторы, соли, предназначенные для изменения осмотического давления, буферы и антиоксиданты.
Соединения формулы (I), (II) и (III) можно синтезировать по методикам, описанным в предшествующем уровне техники (например, в WO 02/059116, WO 03/002560, WO 03/031443, WO 03/032962, WO 2004/096221, WO 2005/058888, WO 2008/056335 и WO 2009/136379). Антибактериальная активность этих соединений описана в этих документах и, кроме того, например, в US 8329908 и US 8513231 и в цитированных в них документах.
th
th
Например, соединение 2 обладает приведенными ниже активностями по отношению к нескольким штаммам бактерий. Определение МИК (минимальная ингибирующая концентрация) проводили в соответствии с рекомендациями CLSI (ранее NCCLS): Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing 11 Informational Supplement, Vol. 21 No 1, M100-S11, Jan. 2001. NCCLS. Revised edition: 17 Informational Supplement, Vol. 27 No 1, M100-S16, Jan. 2007.
Примеры
Пример 1 (скорость вливания):
Соединение 1 вводили животным разных видов (в том числе мышам и крысам) путем внутривенной (ВВ) болюсной инъекции. Продолжительность этой болюсной инъекции устанавливали равной 2 мин для обеспечения максимально возможного при заданной дозе воздействия пролекарства (соединение 1), а также лекарственного средства (соединение 2).
max
max
В соответствии с принципами распределения лекарственного средства в кровотоке во время и после ВВ болюсной инъекции максимальная концентрация (С) пролекарства (соединение 1) в плазме наблюдалась при завершении болюсной инъекции. Кроме того, на основании результатов, полученных во всех соответствующих исследованиях на животных, установлено, что лекарственное средство (соединение 2) очень быстро образуется из пролекарства (соединение 1): во всех исследованиях С лекарственного средства (соединение 2) наблюдалась в момент самого первого отбора образцов (т.е. через ≤5 мин после завершения ВВ болюсной инъекции).
Для доказательства возможности максимального воздействия также у людей было разработано исследование с использованием соединения 1. При этом в проводимом впервые на людях исследовании считающиеся безопасными увеличивающиеся дозы пролекарства (соединение 1) вводили 38 добровольцам - здоровым мужчинам-европеоидам путем проводимых в течение 2 мин ВВ болюсных инъекций.
Добровольцам вводили дозы соединения 1, равные до 3,0 мг/(кг массы тела (МТ)), путем ВВ болюсной инъекции в течение 2 мин. Кроме того, дозы соединения 1, равные 1,5 и 3,0 мг/(кг МТ), вводили путем кратковременного вливания в течение 20 мин, что обеспечивало скорости вливания, равные 4,5 и 9,0 мг/((кг МТ)×ч) соответственно.
max
Так же, как и для всех исследованных видов животных, для людей также при всех вводимых дозах наблюдалось очень быстрое превращение пролекарства (соединение 1) в лекарственное средство (соединение 2); С лекарственного средства (соединение 2) наблюдалась уже через 10 мин после ВВ болюсного введения пролекарства.
Эти наблюдения позволили заключить, что увеличение продолжительности ВВ введения от 2 мин в случае болюса до 20 мин в случае кратковременного вливания не может привести к дальнейшему увеличению степени превращения пролекарства (соединение 1) в лекарственное средство (соединение 2).
max
Однако неожиданно было установлено, что воздействие лекарственного средства (соединение 2) гораздо сильнее после проводимого в течение 20 мин вливания (скорость вливания 9 мг/((кг МТ)×ч)), чем после болюсного введения 3,0 мг/(кг МТ), т.е. 149 и 130% для площади под кривой (ППК) и для максимальной концентрации (С) соответственно (см. таблицу 1). В случае вливания дозы, равной 1,5 мг/(кг МТ) в течение 20 мин (скорость вливания 4,5 мг/((кг МТ)×ч)) нормированные на дозу данные, полученные для лекарственного средства (соединение 2), даже выше, чем данные, полученные для дозы, равной 3 мг/(кг МТ), независимо от того, вводят ли ее путем ВВ болюса или вливания в течение 20 мин (см. таблицу 1).
Соответственно, вливание дозы, равной 1,5 мг/(кг МТ), при скорости, равной 4,5 мг/((кг МТ)×ч), обеспечивает такое же воздействие, как вливание дозы, равной 3,0 мг/(кг МТ), при скорости, равной 9,0 мг/((кг МТ)×ч).
С случае пролекарства (соединение 1) увеличение продолжительности введения дозы, равной 3,0 мг/(кг МТ), до 20 мин путем вливания приводит к уменьшению ППК по сравнению с введением болюса вследствие более эффективного превращения в лекарственное средство (соединение 2).
С учетом результатов, полученных в проводимом впервые на людях исследовании, влияние скорости вливания на эффективность превращения пролекарства (соединение 1) в лекарственное средство (соединение 2) исследовали систематическим образом.
В этом клиническом исследовании про лекарство (соединение 1) вводили 30 добровольцам - здоровым мужчинам-европеоидам, при скоростях вливания, равных от 0,4 до 3,0 мг/((кг МТ)×ч). Этот диапазон скоростей вливания обеспечивали путем комбинирования разных доз (1-6 мг/(кг МТ)) с разными продолжительностями вливания (20-720 мин).
Соответственно, можно было оценить 3 когорты (группы) добровольцев, в каждой из которых проводили вливание при скоростях вливания, диапазон которых обеспечивали путем использования разных доз и продолжительностей вливания, применяющихся в этой группе.
Отношение значения ППК лекарственного средства к ППК пролекарства (соединение 2/соединение 1) использовали для оценки эффективности превращения. Скорости вливания, использующиеся для соответствующих когорт, и полученные отношения приведены в таблице 2; чем выше отношение, тем более эффективно превращение пролекарства (соединение 1) в лекарственное средство (соединение 2).
Обычно значения отношений (ППК соединения 2)/(ППК соединения 1) находятся в диапазоне от 0,86 до 0,60. Установлено, что отношения являются сходными при одинаковых скоростях вливания, даже если введенные дозы являются разными.
В случае когорты 1 наблюдалось постоянное увеличение среднего значения отношения от 0,65 до 0,86 с уменьшением скорости вливания от 3 до 0,75 мг/((кг МТ)×ч). В случае когорты 2 наблюдалось увеличение среднего значения отношения от 0,75 до 0,83 с уменьшением скорости вливания от 1,5 до 0,75 мг/((кг МТ)×ч). В случае когорты 2 при самой низкой скорости вливания, равной 0,4 мг/((кг МТ)×ч), получено значение отношения, равное 0,62, и оно не отличалось от значений отношений, полученных в случае когорты 3 при скорости вливания, равной 0,5 мг/((кг МТ)×ч), которое постоянно находилось в диапазоне от 0,60 до 0,65.
Соответственно, путем систематического фармакокинетического исследования, проводимого на людях, установлено, что диапазон скорости влияния, составляющий от 0,4 до 3 мг/((кг МТ)×ч), является предпочтительным диапазоном для обеспечения максимального количества лекарственного средства (соединение 2), образовавшегося из введенного путем вливания пролекарства (соединение 1).
Кроме того, для данной введенной путем вливания дозы с уменьшением скорости вливания улучшается безопасность и переносимость.
Соответственно, особенно предпочтительной является скорость вливания, равная от 0,4 до 0,75 мг/((кг МТ)×ч).
Пример 2 (лечение кишечных заболеваний):
Здоровым людям-добровольцам проводили ВВ вливание соединения 1 при дозе, равной 6 мг/(кг массы тела) в течение 12 ч в течение 5 последовательных дней. В день 5 у всех добровольцев концентрации соединения 2 в фекалиях находилась в диапазоне от 98 до 226 мг/(кг фекалий). Эти концентрации соединения 2 в фекалиях преобразовывали в выраженное воздействие на грамположительную аэробную и анаэробную микрофлору. Уменьшение количества жизнеспособных микроорганизмов Clostridium spp. в диапазоне от момента времени перед введением дозы до дня 5 составляло 3,0 log 10 КОЕ/г (КОЕ - колониеобразующие единицы) и количество жизнеспособных микроорганизмов уменьшалось до находящегося ниже предела обнаружения до дня 3 после введения дозы у всех, за исключением одного добровольца. Количество жизнеспособных лактобацилл в диапазоне от момента времени перед введением дозы до дня 5 уменьшалось на 4,0 log 10 КОЕ/г. Наиболее выраженным являлось воздействие соединения 2 на бифидобактерии: количество жизнеспособных микроорганизмов в диапазоне от момента времени перед введением дозы до дня 5 уменьшалось на 7,9 log 10 КОЕ/г. Аналогичным образом, количество энтерококков в диапазоне от момента времени перед введением дозы до дня 5 в среднем уменьшалось на 3,8 log 10 КОЕ/г. Обработка фекальной флоры с помощью МСВ3681 не оказывала влияние на грамотрицательные штаммы.
Оценка активности соединения 2 по отношению к Clostridium difficile:
114 Штаммов Clostridium difficile выделяли от 67 пациентов и исследовали наличие продуцируемого С. difficile токсина В с помощью исследования нейтрализации клеточной цитотоксичности, генов токсина А, токсина В, бинарных токсинов и делеции в TcdC с помощью ПЦР (полимеразная цепная реакция). Все штаммы были также риботипированы с помощью ПЦР. МИК соединения 2 по отношению к изолятам определяли по методике разведения в агаре. Все изоляты содержали токсин В. 113 Изолятов содержали гены токсинов А и В. Кроме того, 13 изолятов содержали бинарные токсины. Идентифицировали 32 разных риботипа. Не обнаружен штамм, соответствующий риботипу 027. Все 114 изолятов обладали чувствительностью по отношению к соединению 2 (диапазон МИК: 0,008-0,5 мг/л). Соответственно, соединение 2 обладает высокой активностью in vitro по отношению к С. difficile.
1. Материалы и методики:
1.1. Выделение и типирование штаммов
114 Штаммов С. difficile выделяли от 67 пациентов (26 мужчин и 41 женщина), страдающих первичной и/или рецидивной CDI. Средний возраст пациентов составлял 74 года (интервал возраста 19-97 лет). Штаммы (изоляты, полученные от 67 пациентов, страдающих первичной инфекцией, и 47 пациентов, страдающих рецидивной инфекцией) идентифицировали с помощью характерной морфологии колонии, типичного запаха и окрашивания по методике Грама. Для конечной идентификации использовали газовую хроматографию, с помощью которой исследовали продуцирование летучих обладающих короткой цепью жирных кислот штаммами С. difficile.
1.2. Детектирование токсина и гена токсина
Продуцирование токсина В определяли с помощью исследования нейтрализации клеточной цитотоксичности. Ген токсина А детектировали с помощью обычной ПЦР [Kato Н, Kato N, Watanabe K, Iwai N, Nakamura H, Yamamoto T, et al. Identification of toxin A-negative, toxin B-positive Clostridium difficile by PCR. J Clin Microbiol 1998; 36: 2178-82]. Гены токсина В, бинарный токсин и делецию в TcdC детектировали путем исследования с помощью ПЦР в режиме реального времени с использованием системы GeneXpert (Cepheid, Sunnyvale, СА, USA) [Huang H, Weintraub A, Fang H, Nord CE. Comparison of a commercial multiplex real-time PCR to the cell cytotoxicity neutralization assay for diagnosis of Clostridium difficile infections. J Clin Microbiol 2009; 47: 3729-31].
1.3. Риботипирование
Риботипирование с помощью ПЦР и электрофорез гелей проводили по описанной ранее методике [Stubbs SL, Brazier JS, O'Neill GL, Duerden BI. PCR targeted to the 16S-23S rRNA gene intergenic spacer region of Clostridium difficile and construction of a library consisting of 116 different PCR ribotypes. J Clin Microbiol 1999; 37: 461-3; Rashid MU, Lozano HM, Weintraub A, Nord CE. In vitro activity of cadazolid against Clostridium difficile strains isolated from primary and recurrent infections in Stockholm, Sweden. Anaerobe 2013; 20: 32-5]. Гели сканировали и анализировали с помощью программного обеспечения Bionumerics, version 6.6. (Applied Maths, Kortrijk, Belgium). Стандартизацию размера молекул (100 ПО (пары оснований); GE Healthcare, Little Chalfont, Buckinghamshire, UK) проводили во всех гелях в 4-5 узких интервалах для корректировки структур гелей. В каждом геле проводили сравнение с двумя известными полученными с помощью ПЦР риботипами (005 и 012), использовавшимися в качестве контрольных. Характеры исчерченности сравнивали с имеющимися в базе данных, включая эталонные штаммы С. difficile. Стабильность, достоверность и однородность имеющихся в базе данных характеров исчерченности, присущим каждому типу, исследовали с помощью алгоритма кластерной корреляции по методике невзвешенного попарного арифметического среднего и с использованием точного совмещения.
1.4. Чувствительность к противомикробным средствам
Чувствительность штаммов С. difficile к противомикробным средствам определяли в соответствии с рекомендациями CLSI по методике разведения в агаре с использованием в качестве эталонных штаммов Bacteroides fragilis АТСС 25285 и С. difficile АТСС 700057 [CLSI. Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria; Approved Standard-Eighth Edition. 2012]. Соединение 2 получали, как описано в WO 2005/058888.
МИК определяли, как самую низкую концентрацию лекарственного средства, при которой происходит полное подавление роста. МИК50/90 соответствует концентрациям, при которых происходит подавление роста исследуемых штаммов на 50 и 90% соответственно.
1.5. Статистические методики
Профили полученного с помощью ПЦР риботипа, полученные для клинических штаммов, сравнивали с профилями, имеющимися в базе данных, с помощью наибольшего паросочетания с использованием корреляции Пирсона. Для расчета 50-го и 90-го процентилей значений МИК использовали программное обеспечение IBM SPSS Statistics 22 (Armonk, NY, USA). Для обобщения результатов использовали описательную статистику.
2. Результаты
2.1. Детектирование токсина
По данным исследования нейтрализации клеточной цитотоксичности 114 штаммов содержали токсин В. 113 Штаммов содержали гены токсинов А и В. Кроме того, 13 штаммов содержали гены бинарного токсина. Ни в одном из штаммов не происходила делеция в TcdC.
2.2. Риботипы
Идентифицировали 32 разных риботипа (таблица 1). Риботипами для 13 штаммов, содержащих гены токсина А, токсина В и бинарный токсин, являлись 023, 075, 078/126 и 019. Один штамм не соответствовал ни одному известному риботипу и им являлся кластер SE 91. Наиболее распространенными риботипами являлись 020 (14,9%), 014/077 (8,8%), 078/126 (7%), 001 (6,1%) и 026 (6,1%). Ни в одном изоляте не обнаружен риботип 027.
Идентифицирован один штамм каждого из риботипов 003, 019, 029, 046, 087, SE14b, SE20d, SE24, SE48, SE49 и кластер риботипов SE91.
2.3. Чувствительность к противомикробным средствам
90
Примеры чувствительности к противомикробным средствам представлены в таблице 2. Все штаммы обладали чувствительностью по отношению к соединению 2, значения MIC составляли 0,064 мг/л. Ни один из 114 штаммов С. difficile не обладал резистентностью по отношению к соединению 2.