The influence of chloretetracycline on the pore formation in plasma membrane of cow granulosa cells | Влияние хлортетрациклина на образование пор в плазматической мембране клеток гранулезы коров

The influence of chloretetracycline on the pore formation in plasma membrane of cow granulosa cells | Влияние хлортетрациклина на образование пор в плазматической мембране клеток гранулезы коров

2020

Denisenko, V.Yu., All-Russia Research and Development Inst. of Farm Animal Genetics and Breeding, St. Petersburg

Russian. Соединения, для которых отсутствуют необходимые рецепторы на поверхности клеток, не способны проникать внутрь клеток. Для обеспечения их поступления в клетки используются различные методы (пермеабилизация, инъекция этих соединений внутрь клетки и т. д.). Однако эти способы дорогостоящие в применении, либо оказывают на клетки эффект, не совместимый с дальнейшей жизнедеятельностью. Вход в нагруженные флуоресцентными зондами хлортетрациклин (ХТЦ) и Фура-2АМ клетки гранулезы коров различных соединений вызывает изменение концентрации цитоплазматического и запасенного во внутриклеточных депо кальция. В интактных нагруженных ХТЦ клетках гранулезы добавление пролактина (ПРЛ) стимулировало освобождение Ca2+ из внутриклеточных депо. В необработанных клетках гепарин не способен самостоятельно проникать в клетки. Для обеспечения входа гепарина в клетки используется процедура пермеабилизации, то есть клетки предварительно обрабатываются детергентом (дигитонином). Использование гепарина приводило к ингибированию освобождения Ca2+ из внутриклеточных депо, стимулированного добавлением ПРЛ. Обработка клеток дигитонином не оказывала влияния на стимулированное ПРЛ освобождение Ca2+ из депо и ингибирующее действие гепарина на выход Ca2+ из внутриклеточных депо. В интактных нагруженных Фура-2АМ клетках гранулезы добавление ПРЛ не приводило к увеличению концентрации цитоплазматического кальция. После обработки дигитонином нагруженных Фура-2АМ клеток гранулезы внесение ПРЛ приводило к увеличению концентрации цитоплазматического Ca2+, которое ингибировалось при добавлении гепарина. Полученные данные позволяют предположить, что ХТЦ образует поры на поверхности клеток гранулезы, способствуя таким образом проникновению в клетки различных соединений.

Show more [+]

Less [-]

English. In the absence of the necessary receptors on the cell membrane surface, the compounds are not able to penetrate into the cells. Various methods are used to ensure the entry of such compounds into the cells (permeabilization, compound injection into the cell, etc.), however, all these methods are expensive to use or have a negative effect on the cellular viability. The penetration of various compounds into the granulosa cells of cows treated with chlortetracycline (CTC) and Fura-2AM fluorescent probes causes a change in the concentration of cytoplasmic calcium and calcium stored in intracellular stores. In intact CTC-treated granulosa cells, the addition of prolactin (PRL) stimulated the Ca2+ release from the intracellular stores. In untreated cells, heparin is not able to independently penetrate into the cells. To ensure the penetration of heparin into the cells, the permeabilization procedure when the cells are pre-treated with a detergent digitonin) is used. The usage of heparin led to the inhibition of Ca2+ release from the intracellular stores stimulated by the PRL. The treatment of the cells with digitonin did not affect the PRL- stimulated release of Ca2+ and the inhibitory effect of heparin on the Ca2+ release from the stores. In intact Fura-2AM-treated granulosa cells, the addition of PRL did not increase the concentration of cytoplasmic calcium. After digitonin treatment of Fura-2AM-treated granulose cells, the supplementation of PRL led to an increase in the concentration of cytoplasmic Ca2+, which was inhibited by the heparin addition. The obtained data suggest that CTC forms pores in the membrane of granulosa cells facilitating the penetration of various compounds into cells.

Show more [+]

Less [-]

Bibliographic information

Dairy and beef cattle breeding

Issue

1

ISSN

0026-9034

Other Subjects

Echange d'ion; Federacion de rusia; Intercambio ionico; Cultivo de ovulos; Federation de russie