AGRIS - 

2014

Singina, G.N. | Volkova, N.A. | Bagirov, V.A. | Zinov'eva, N.A., All-Russia Research and Development Inst. of Livestock Husbandry, Moscow Region

The role of banks in the management of genetic resources and the preservation and improvement of the gene pool of farm animals and poultry, as well conservation of endangered species is noticeable. Most cryobanks focus on the cryopreservation of gametes (primarily sperm) and embryos. Their main goal is to produce offspring using reproductive technologies, which include artificial insemination, in vitro fertilization and embryo transfer. To obtain viable cryopreserved cell lines very small amount of biopsy material, including that of dead animals, is sufficient. The cryopreserved somatic cells after repeated thawing are capable to regenerate, i.e. almost infinitely may serve as a source of biomaterial. Almost all cell types of (e.g. embryonic cells, mammary cells, cumulus, granulosa, oviduct, liver, fibroblasts, white blood cells and embryonic stem cells) can be used for the production of cloned animals, but the cloning efficiency depends significantly on the type of cells. The fetal fibroblasts as donors of nuclear material are preferably. Alternatively, the stem cells may be a source of the nuclei. It permit to increase the number of cloned embryos significantly. Numerous examples show that somatic cells are the most promising material for the recovery of animal genetic resources. Particularly from 1997 to 2012 using the differentiated somatic cells the domestic and wild animals of different species such as sheep, mice, cows, goats, pigs, guar, mouflon, domestic cat, rabbits, mule, horse, rat, wildcat, dog, banteng, ferret, wolves, buffalo, deer, mountain goat, camel, coyote were obtained. Cattle are still the leader in the production of cloned offspring with the efficacy 10% on average, and in some cases up to 25%, while for most other animals it does not exceed 1%. Under controlled conditions, the productivity of clones should vary only within the remaining natural variability and mitochondrial genetic variability due to cloning technology. | Банки генетических ресурсов играют большую роль в сохранении генофонда с.-х. животных и птицы, а также исчезающих видов животных. Большинство криобанков консервирует гаметы (особенно сперму) и эмбрионы для получения потомства с использованием репродуктивных технологий (искусственное оплодотворение, экстракорпоральное оплодотворение, трансплантация эмбрионов). Создание криобанков соматических клеток (СК) - доноров ядер для клонирования - рассматривается как вспомогательный инструмент . Для создания жизнеспособных клеточных линий СК достаточно небольшого количества биопсийного материала, в т. ч. от умершего животного. СК способны к регенерации после многократного размораживания, т.е. могут служить источником материала практически бесконечно. Для клонирования животных можно использовать практически любые типы СК (эмбриональные клетки, клетки молочной железы, кумулюса, гранулезы, яйцевода, печени, фибробласты, лейкоциты и эмбриональные стволовые клетки), но предпочтительно использование фетальных фибробластов. Альтернативным источником ядер при клонировании могут служить стволовые клетки. При этом можно значительно увеличить число получаемых клонированных эмбрионов. На многочисленных примерах показано успешное использование СК для восстановления генетических ресурсов животных разных видов. За 1997-2012 гг. с использованием дифференцированных СК были получены овцы, мыши, коровы, козы, свиньи, гуар, муфлон, домашняя кошка, кролики, мул, лошадь, крыса, дикая кошка, собака, бантенг, хорек, волк, буйвол, благородный олень, горный козел, верблюд, койот. Лидером по клонированию остается крупный рогатый скот, результативность рождения потомства у которого в среднем составляет 10, а в ряде случаев 25% (для большинства других видов животных - не более 1%). В стандартизированной окружающей среде продуктивность клонов должна различаться только в пределах остающейся природной изменчивости и обусловленной технологией клонирования митохондриальной генетической изменчивости.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2014

Krasil'nikova, A.A. | Tikhomirov, A.M., Astrakhan State Technical Univ.

Объект исследований – половые продукты русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Brandt, 1833), сибирского осетра ленской популяции (Acipenser baerii Brandt, 1869) и белорыбицы (Stenodus leucichthys Guldenstadt, 1772). Изучали возможность замораживания мужских репродуктивных клеток осетровых рыб при сверхвысоких значениях скорости охлаждения в виде "тонких пленок" на пластиковых или алюминиевых сетках, а также путем предварительного высушивания мазка спермы в термостате при температуре 20, 27 или 35 град. С в течение 12, 23 или 5-6 мин. Оттаивание проводили при 20 град. С. При замораживании семенной жидкости рыб в виде "тонкой пленки" время жизни сперматозоидов после дефростации во всех опытных образцах составило больше 14 минут. Это указывает на эффективность применения данного способа подготовки семенной жидкости к низкотемпературному консервированию и на пригодность замороженно-оттаянных репродуктивных клеток для рыбоводных целей. Наибольшее время жизни сперматозоидов как русского, так и сибирского осетров отмечено при замораживании на пластиковых сетках. При подготовке к криоконсервации путем предварительного высушивания мазка спермы в термостате оптимальным является режим 20 град. С, 5-6 мин. После размораживания среднее время жизни сперматозоидов составило 41 с, при этом наблюдали колебательные движения лишь у 20% замороженного материала, остальные клетки сильно пострадали от обезвоживания. Этот способ подготовки клеток к криоконсервации рассматривается как перспективный, но требующий доработки и совершенствования. | The sexual products of the Russian sturgeon (Acipenser gueldenstaedtii Brandt, 1833), the Siberian sturgeon of Lena population (Acipenser baerii Brandt, 1869) and white salmons (Stenodus leucichthys Guldenstadt, 1772) were used as an object of this research. Studied was the possibility of freezing of fish reproductive male cells of sturgeon fishes in the form of "thin films" on plastic or aluminum meshes at ultra-high cooling rates, and also by preliminary drying of a sperm smear in the thermostat at temperature of 20, 27 or 35 degrees C for 12, 23 or 5-6 min. Defrosting was carried out at 20 deg. C. When freezing fish semen in the form of a "thin film" the lifespan of spermatozoids after defrostation in all experimental samples was more than 14 minutes. It points to the efficiency of application of this method of preparation of sperm to cryopreservation and the suitability of frozen-thawed reproductive cells for aquaculture purposes. The highest spermatozoa lifespan of both Russian and Siberian sturgeons is detected when freezing on plastic meshes. In preparation for cryopreservation by preliminary drying of a sperm smear in the thermostat the mode 20 deg. C, 5-6 min is optimal. After defrosting the mean lifespan of spermatozoids was 41 s, there were observed fluctuating motions only in 20% of frozen material, the rest of the cells strongly suffered from dehydration. This method of preparation of cells for cryopreservation is considered as promising, but requiring modification and improvement.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation