AGRIS - 

Data provenance by Country

2020

Romantseva, Yu.N., Federal Altai Scientific Center of Agro-Biotechnologies, Barnaul

Tuberculosis mycobacteria grow relatively slowly which greatly delays the time of bacteriological diagnosis of tuberculosis. Therefore, nutrient media rich in various chemicals in a ready-to digest form are required; and extracts obtained from byproducts of velvet antler deer husbandry meet these requirements. To improve the methods of mycobacteria isolation on solid nutrient media and to reduce the time before primary bacterial growth, 3 prototypes were made. For this experiment, Löwenstein-Jensen media without L-asparagine in the saline solution were used. The experimental media were prepared with aqueous extracts from powdered maral velvet antlers, tails and penises. As a result of comparative testing of three experimental and control samples, it was found that the timing of the appearance of primary growth of colonies in the experimental groups was the same and exceeded the control 4 times. The most visible differences from the control in terms of the colonies growth rate were observed in the 1st test tube (velvet antlers) and 3rd test tube (genital organs of maral stags). In the 1st variant, the number of colonies exceeds that in the control sample 3.43 times, and in the 3rd variant – 1.74 times. By analyzing the informative value of the nutrient media, the intensity and time required for the growth of mycobacterium cultures, as well as the cost of ingredients, it may be concluded that the optimal nutrient medium for bacteriological studies is the Löwenstein-Jensen medium that has no L-asparagine and contains dry powder made of maral stag genital organs. Its use will allow reducing the time of isolating mycobacteria and accelerating the diagnosis of tuberculosis. | Микобактерии туберкулеза на питательных средах растут относительно медленно, что замедляет постановку бактериологической диагностики туберкулеза. Поэтому требуются питательные среды, богатые разнообразными химическими веществами в готовом для усвоения виде. Этим требованиям в значительной степени отвечают экстракты, полученные из побочной продукции пантового оленеводства. Для усовершенствования способов изоляции микобактерий на плотных питательных средах и сокращения сроков появления первичного роста были созданы 3 опытных образца. В опытных средах за основу взята технология изготовления среды Левенштейна-Йенсена без добавления в солевой раствор L-аспарагина. Опытные среды готовили с использованием водных экстрактов из порошков пантов, хвостов и пенисов маралов. В результате сравнительного испытания опытных и контрольных образцов установлено, что сроки появления первичного роста колоний в опытных группах были одинаковыми и превосходили контроль в 4 раза. Наиболее видимые отличия от контроля по интенсивности роста колоний получены в 1-м (панты марала) и 3-м (половые органы самцов маралов) вариантах. В 1-м варианте колоний получено больше, чем в контроле, в 3,43 раза, в 3-м варианте – в 1,74. Анализируя информативность питательных сред, интенсивность и сроки роста культур микобактерий, а также стоимость ингредиентов, оптимальной питательной средой для проведения бактериологических исследований является среда Левенштейна-Йенсена без L-аспарагина с добавлением сухого порошка половых органов самцов маралов. Её применение позволит сократить сроки изоляции микобактерий и ускорить диагностику туберкулеза.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Najmanov, A.Kh. | Ustinova, G.I. | Tolstenko, N.G. | Vangeli, E.P. | Kucheruk, O.D. | Kalmykov, V.M. | Soshnikova, E.M. | Polyakov, V.F., The Ya.R. Kovalenko All-Russia Research and Development Inst. of Experimental Veterinary, Moscow

Presented are the results of researches and substantiation of theoretical and practical bases for the necessity of creating of new complex allergen from non-tuberculosis mycobacteria (NTNB) for differentiation of nonspecific responses to tuberculin. It is established that in the territory of the Russian Federation from the animals reacting to tuberculin with non-specific responses up to 75% of cases fast-growing NTMB 4 gr. according to the Runyon classification are identified. Complex allergen of mycobacteria (CAM) having been used in the veterinary practice since 1978 is prepared from two types of atypical mycobacteria: Mycobacterium scrofulaceum (2 gr.) and M. intracellulare (3 gr.). At the present stage of the control of bovine tuberculosis, CAM should be prepared from the most frequently isolated mycobacteria of 2, 3 and 4 groups, having sensitizing properties. On the Guinea pigs sensitized by different types of mycobacteria it was found that from NTMB 4 gr. M. fortuitum and M. scrofulaceum have the greatest sensitizing properties. According to the research results, new complex allergens CAM-2 and CAM-3 made of mycobacteria 2, 3 and 4 groups haven been developed. | Представлены результаты исследований и обоснование теоретических и практических основ необходимости создания нового комплексного аллергена из нетуберкулёзных микобактерий (НТМБ) для дифференциации неспецифических реакций на туберкулин. Установлено, что на территории Российской Федерации от реагирующих на туберкулин животных с неспецифическими реакциями до 75% случаев выделяются быстрорастущие НТМБ 4 гр. по классификации Раньона. Комплексный аллерген из микобактерий (КАМ), используемый в ветеринарной практике с 1978 г., готовится из двух видов атипичных микобактерий: Mycobacterium scrofulaceum (2 гр.) и M. intracellulare (3 гр.). На современном этапе борьбы с туберкулёзом крупного рогатого скота КАМ необходимо готовить из наиболее часто выделяемых микобактерий 2, 3 и 4 групп, обладающих сенсибилизирующими свойствами. На сенсибилизированных различными видами микобактерий морских свинках установлено, что из НТМБ 4 гр. наибольшими сенсибилизирующими свойствами обладают M. fortuitum и M. scrofulaceum. По результатам проведенных исследований разработаны новые комплексные аллергены КАМ-2 и КАМ-3, изготовленные из микобактерий 2, 3 и 4 групп.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2017

Pavlova, I.B., All-Russia Research and Development Inst. of Veterinary Sanitation, Hygiene and Ecology, Moscow

The morphology of biofilms (BF) was studied by optical and scanning electron microscopy. In the experiments we used the certified test cultures of microorganisms Mycobacterium avium; Mycobacterium B5 №12. Microorganisms were cultured on a Levenstein-Jensen medium at 37 deg. C for 24-96 hours. In studying the formation of BF, mycobacteria were cultivated in the liquid medium ( meat-peptone broth). For morphological studies of the population of mycobacteria, the preparations were fixed in pairs of 25.0% (by active substance) solution of glutaraldehyde for 3-5 hours, for contrasting, pairs 2.0-4.0% aqueous solution of osmium acid (OsO4) for 2-3 minutes. The formation of BF of mycobacteria occurs within 48-72 hours. In the process of maturation, the stages of synthesis of the components of the biofilms and the formation of complex architectonics of BF in the form of clusters were distinguished. Each cluster is united by biofilm, within which groups of mycobacteria are viewed. During the formation of biofilms in intercellular spaces single cells of the oval form were detected, which indicates the process of heteromorphism in the form of protoplastic cells with the formation of stable and unstable L-forms. BFs formed by mycobacteria in the process of adhesion of bacterial cells to hard surfaces also represent a complex dynamic biological system that protects microorganisms from the actions of unfavorable environmental factors. It can be assumed that cyclicity and discreteness of epizootics is explained by the persistence of populations of mycobacteria in the state of heteromorphism in the external environment during interepizootic periods, when active circulation among natural hosts in natural foci does not occur. The method of making of preparations for optical and electron microscopy as developed makes it possible to detect the growth phases of mycobacteria at the population level and to investigate the morphology of bacterial populations and the process of formation of biofilms without disturbing architectonics. | Морфологию биопленок (БП) изучали методами оптической и сканирующей электронной микроскопии. В опытах использовали паспортизированные тест-культуры микроорганизмов Mycobacterium avium; Mycobacterium B5 № 12. Микроорганизмы культивировали на среде Левенштейна–Йенсена при 37 град. С в течение 24...96 ч. При изучении формирования БП микобактерии культивировали в жидкой питательной среде (мясо-пептонный бульон). Для морфологических исследований популяции микобактерий препараты фиксировали парами 25,0%-го (по ДВ) раствора глутарового альдегида в течение 3...5 ч, для контрастирования применяли пары 2,0...4,0%-го водного раствора осмиевой кислоты (OsO4) в течение 2...3 мин. Формирование БП микобактерий происходит в пределах 48...72 ч. В процессе созревания различали стадии синтеза компонентов матрикса БП и формирования сложной архитектоники БП в виде кластеров. Каждый кластер объединен биопленкой, внутри которых просматриваются группы микобактерий. При формировании БП в межклеточных пространствах выявлялись единичные клетки овальной формы, что свидетельствует о процессе гетероморфизма в виде клеток протопластного типа с образованием стабильных и нестабильных L-форм. БП, формируемые микобактериями в процессе адгезии бактериальных клеток к твердым поверхностям, также представляют собой комплексную динамичную биологическую систему, которая обеспечивает защиту микроорганизмов от воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды Можно предположить, что цикличность и дискретность эпизоотий объясняется персистенцией популяций микобактерий, находящихся в состоянии гетероморфизма, во внешней среде в течение межэпизоотических периодов, когда активной циркуляции среди естественных хозяев в природных очагах не происходит. Разработанный метод приготовления препаратов для оптической и электронной микроскопии позволяет выявлять фазы роста микобактерий на популяционном уровне и исследовать морфологию популяций бактерий и процесс формирования БП без нарушения архитектоники.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2017

Makarov, Yu.A. | Gorkovenko, N.E., Kuban State Agrarian Univ., Krasnodar

Considered is the problem of a persistence of the changed mycobacterial forms of tuberculosis in a macroorganism where they keep ability to reverse in an initial bacterial. This phenomenon determines the existence in a human body and animal body of a constant potential center of an infection, because the disease passes into a latent form. At the same time it is difcult to diagnose the disease because the changed forms of mycobacteria can't almost be identified by the traditional bacteriological methods. Noncultivated forms of mycobacteria can become a factor of recurrent otuberculosis outbreaks at the sanitized cattle farms . A series of experoments has been preformed for the purpose of development of a method for detecting mycobacteria from cattle's biomaterial without evident pathologicoanatomic indications of tuberculosis. The research involved 3 groups of guinea pigs who were infected with biomaterial suspension. The biomaterial was passed through an animalorganism of thrice at an interval of 21 days. When passaging the biomaterial 12.5 mg/head Cortisonum was administered intramusculary to guinea pigs. As a result after the third passage on a FAST-3L medium mycobacteria were isolated. As a result of the researches a method of identifcation of noncultivated forms of mycobacteria of bovine tuberculosis is proposed. The developed way restores the ability of the changed tuberculosis mycobacteria to grow on a medium, reduces time and increases accuracy of diagnosis. | Рассмотрена проблема персистирования измененных форм микобактерий туберкулеза в макроорганизме и сохранения ими способности реверсировать в исходный бактериальный вид. Данный феномен обусловливает наличие в организме человека и животных постоянного потенциального очага инфекции, так как заболевание переходит в латентную форму. При этом заболевание трудно диагностировать, так как измененные формы микобактерий практически невозможно выделить традиционными бактериологическими методами. Некультивируемые формы микобактерий могут стать фактором возникновения рецидивирующих вспышек туберкулеза крупного рогатого скота в оздоровленных хозяйствах. Проведена серия экспериментов с целью разработки способа изоляции микобактерий из биоматериала от вынужденно убитого крупного рогатого скота без явных патолого-анатомических признаков туберкулеза. Исследования выполнены на трех группах морских свинок, которых заражали суспензией отобранного биоматериала и осуществляли пассирование биоматериала через организм животных трижды с интервалом 21 сут. Морским свинкам при проведении пассажей вводили внутримышечно кортизон в дозе 12,5 мг/гол. В итоге после третьего пассажа на среде ФАСТ-3Л были выделены микобактерии. В результате проведенных исследований предложен способ выявления некультивируемых форм микобактерий туберкулеза крупного рогатого скота. Разработанный способ позволяет восстановить способность измененных форм микобактерий туберкулеза к росту на питательной среде, сокращает сроки и повышает точность диагностики.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2015

Naymanov, A.Kh. | Ustinova, G.I. | Tolstenko, N.G. | Vangeli, E.P. | Kucheruk, O.D., The Ya.R. Kovalenko All-Russia Research and Development Inst. of Experimental Veterinary, Moscow

The studies of sensitizing properties of atypical mycobacteria and related bacteria Nocardia and Rhodococcus were conducted in 3 stages. At each stage were used 11 groups of 3 Guinea pigs. A total of 99 animals were used in the study. At the first stage, Guinea pigs were infected with 9 mycobacteria species, Nocardia transvalensis and Rhodococcus bronchialis at a dose of 1 mg of wet bacterial mass of the microbial culture per 1 ml of saline solution. In the second stage, new groups of Guinea pigs were infected by the same microbial cultures in a dose of 1 mg/ml of solvent mixed with Freund's incomplete adjuvant. In the third phase, another groups of Guinea pigs were infected with the cultures of micro-organisms in a dose of 5 mg/ml of physiological solution. After 21-30 days in Guinea pigs was investigated simultaneous test with tuberculin (purified protein derivative) for mammals and complex allergen from atypical mycobacteria. Accounting of allergic reactions carried out after 24-48 h. On the territory of the Russian Federation fast-growing atypical mycobacteria of 4th group according to the classification of Runyon are isolated from the reacting with a nonspecific reaction to cattle tuberculin in most cases (59.5 to 75.0%). M.intracellularae (3d group) and M.scrofulaceum (2nd group) have the most sensitizing properties among slow-growing mycobacteria. M. fortuitum and M. smegmatis have the most sensitizing properties among bacteria of 4th group. The minimal infective dose for studying of the sensitizing properties of atypical mycobacteria in Guinea pigs should not be less than 5 mg of wet bacterial mass of mycobacteria. To obtain more reliable results it is advisable reinfection after 14 days at a dose of 5 mg/ml saline. When the Guinea pigs where injected with Nocardia transvalensis and Rhodococcus bronchialis at a dose of 1-5 mg/ml of saline solution, the sensitizing properties haven`t been found. For the making of complex allergen from atypical mycobacteria to differentiate nonspecific reaction to tuberculin in Russia is advisable to use M. scrofulaceum (2nd gr.), M. intracellularae (3d gr.), M. fortuitum and M. smegmatis (4th gr.).

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2013

Сорокина А.И.

Целью исследований было выявление некультивируемых форм микобактерий туберкулеза в случае их присутствия в биоматериале от реагирующего крупного рогатого скота. По результатам проведённых исследований получен патент на изобретение №2309681. | The aim of the investigation was exposure of not cultivated forms of mycobacterium of tuberculosis in case of their presence in biomaterial from reacted cattle. In result of the investigations the patent №2309681 was gotten.

Show more [+]

Less [-]

Marina Sokolova Publishings - Russian Federation

2013

Сорокина А.И.

The aim of the investigation was exposure of not cultivated forms of mycobacterium of tuberculosis in case of their presence in biomaterial from reacted cattle. In result of the investigations the patent №2309681 was gotten. | Целью исследований было выявление некультивируемых форм микобактерий туберкулеза в случае их присутствия в биоматериале от реагирующего крупного рогатого скота. По результатам проведённых исследований получен патент на изобретение №2309681.

Show more [+]

Less [-]

Marina Sokolova Publishings - Russian Federation

2009

Ivanova, M.A. | Makarova, M.V. | Vasiliev, E. | Aleksandrov, M.T. | Pashkov, E.P., The I.M. Sechenov Moscow Medical Academy

An express method has been developed to identify Mycobacterium tuberculosis complex and conventionally pathogenic bacteria based on laser fluorescence. The properties of spectral fluorescent characteristics of 17 species of mycobacteria in different concentrations and associations were studied. They are M. tuberculosis, M. bovis, M. avoum, M. intracellulare, M. vaccae and some others, as well as Staphylococcus aureus and Escherichia coli. As is found, mycobacteria fluoresce poorly enough even in high concentrations, have low fluorescence power resulting in difficult identification and differentiation in microbial associations. Effect of myramistin for increasing the intensity of mycobacteria fluorescence is needed. The intensity of fluorescence of live culture fluorescence under influence of myramistin sharply rises after 1-2 hours progressively increasing for the first 2 days, while the fluorescent properties of a killed culture added with myramistin is not practically change. Accounting the diffracting characteristics of medium for adjustment of spectral characteristics of mycobacteria and data processing by factor analysis further increases the susceptibility of the method for identifying mycobacteria. In view of this, a laser fluorescence method has been developed to identify and differentiate M. tuberculosis complex and conventionally pathogenic bacteria. The use of myramistin enhanced the fluorescence intensity of all 19 bacteria studied and made it possible to differentiate live and dead bacteria by their spectral fluorescent characteristic increasing thereby the diagnostic value of the express-method

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

1996

Sozinov, V.A. | Fedoryaka, V.P. | Nechval', I.T. | Sheverenko, P.S. | Sviridov, V.D. | Lyashenko, N.P. | Kosolapov, E.A.

The infecting to the cattle by atypical mycobacteria is shown by the allergia to the tuberculin and by the persistating of the exciter without the pathological characteristics of tuberculosis. The elimination of the exciter brings to the reinfection of susceptible animals and further to long passing of the episootical process in case of this infection

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

1995

Donchenko, A.S. | Donchenko, V.N.

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation