AGRIS - 

2015

Gorshkov Ivan G. | Viktorov Denis А. | Vasilyev D.A.

Bacteriophages, active against bacteria of the genus Aeromonas, are of scientific and practical interest, especially as a tool for the identification of named bacteria (phage typing methods and reaction of increasing phage titer), as well as a means of decontamination. Bacteria of the genus Aeromonas play a significant role in infectious ichthyopathology. Aeromonosis of fish is a disease that occurs in fish farms and caused by bacteria: Aeromonas salmonicida, Aeromonas hydrophila, Aeromonas caveae, Aeromonas sobria. Since existing methods of diagnosis do not involve the typing of pathogens of aeromonosis to species, treatment of the disease is the use of broad-spectrum antibiotics, high-molecular compounds containing iodine, formalin. In the study, 16 water sources has been studied and 8 strains of bacteriophages active against A. sobria were allocated. The lytic activity of bacteriophages (using method Gracia) was studied, it was from 0,6(±0,1)х106 tо 2,0(±0,2)х1010 BOЕ/ml. Selected bacteriophages are stable in temperature up to 48 °C for 20 minutes and is completely inactivated at 54 °C, and they are sensitive to treatment with chloroform in a ratio of 1:10 duration over 5 minutes. The selected phages possess species specificity. | Бактериофаги, активные в отношении бактерий рода Aeromonas, вызывают научный и практический интерес, прежде всего, как средство выявления названных бактерий (методами фаготипирования и реакции нарастания титра фага), а также как средство деконтаминации. Бактерии рода Aeromonas играют существенную роль в инфекционной ихтиопатологии. Аэромонозы рыб – это заболевание, встречающееся в рыбоводческих хозяйствах и вызываемое бактериями: Aeromonas salmonicida, Aeromonas hydrophila,Aeromonas caveae, Aeromonas sobria. Поскольку существующие методы диагностики не предусматривают типирование возбудителей аэромонозов до вида, лечение заболевания заключается в применении антибиотиков широкого спектра, высокомолекулярных соединений, содержащих йод, формалин. В ходе исследования было изучено 16 водных источников и выделено 8 штаммов бактериофагов, активных в отношении A. sobria. Была изучена литическая активность бактериофагов (по методу Грациа), которая составила от 0,6(±0,1)х106 до 2,0(±0,2)х1010 БОЕ/мл. Выделенные бактериофаги устойчивы в воздействию температуры до 48 °С в течение 20 минут и полностью инактивируются при 54 °С, а так же неустойчивы к обработке хлороформом в соотношении 1:10 продолжительностью свыше 5 минут. Выделенные фаги обладают видовой специфичностью.

显示更多 [+]

显示较少 [-]

Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin - Russian Federation

2015

Gorshkov Ivan G. | Viktorov Denis А. | Vasilyev D.A.

Bacteriophages, active against bacteria of the genus Aeromonas, are of scientific and practical interest, especially as a tool for the identification of named bacteria (phage typing methods and reaction of increasing phage titer), as well as a means of decontamination. Bacteria of the genus Aeromonas play a significant role in infectious ichthyopathology. Aeromonosis of fish is a disease that occurs in fish farms and caused by bacteria: Aeromonas salmonicida, Aeromonas hydrophila, Aeromonas caveae, Aeromonas sobria. Since existing methods of diagnosis do not involve the typing of pathogens of aeromonosis to species, treatment of the disease is the use of broad-spectrum antibiotics, high-molecular compounds containing iodine, formalin. In the study, 16 water sources has been studied and 8 strains of bacteriophages active against A. sobria were allocated. The lytic activity of bacteriophages (using method Gracia) was studied, it was from 0,6(±0,1)х106 tо 2,0(±0,2)х1010 BOЕ/ml. Selected bacteriophages are stable in temperature up to 48 °C for 20 minutes and is completely inactivated at 54 °C, and they are sensitive to treatment with chloroform in a ratio of 1:10 duration over 5 minutes. The selected phages possess species specificity. | Бактериофаги, активные в отношении бактерий рода Aeromonas, вызывают научный и практический интерес, прежде всего, как средство выявления названных бактерий (методами фаготипирования и реакции нарастания титра фага), а также как средство деконтаминации. Бактерии рода Aeromonas играют существенную роль в инфекционной ихтиопатологии. Аэромонозы рыб – это заболевание, встречающееся в рыбоводческих хозяйствах и вызываемое бактериями: Aeromonas salmonicida, Aeromonas hydrophila,Aeromonas caveae, Aeromonas sobria. Поскольку существующие методы диагностики не предусматривают типирование возбудителей аэромонозов до вида, лечение заболевания заключается в применении антибиотиков широкого спектра, высокомолекулярных соединений, содержащих йод, формалин. В ходе исследования было изучено 16 водных источников и выделено 8 штаммов бактериофагов, активных в отношении A. sobria. Была изучена литическая активность бактериофагов (по методу Грациа), которая составила от 0,6(±0,1)х106 до 2,0(±0,2)х1010 БОЕ/мл. Выделенные бактериофаги устойчивы в воздействию температуры до 48 °С в течение 20 минут и полностью инактивируются при 54 °С, а так же неустойчивы к обработке хлороформом в соотношении 1:10 продолжительностью свыше 5 минут. Выделенные фаги обладают видовой специфичностью.

显示更多 [+]

显示较少 [-]

Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin - Russian Federation

2014

Маstilenko Аndrey V. | Vasilyev Dmitry А. | Borisova Оlga Yu. | Vasilyeva Yuliya B.

Microbiological differentiation of bacteria of the genus Bordetella, which cause respiratory diseases in humans and animals and at the present time is tricky, due to a phenomenon typical features of these pathogens. The results of modern studies indicate that the molecular-genetic differentiation B. bronchiseptica, B. pertussis and B. parapertussis can be based on the inserted elements (IS). We have put an aim to develop a system of differentiation B. bronchiseptica and B. pertussis based on multiplex PCR in real time mode. After selection and design of relevant oligonucleotides and fluorescent probes, we have conducted studies that have proven that the use as a target of the gene fragment bfrZ allows identification B. bronchiseptica and differentiation from closely related species of B. pertussis and B. parapertussis. The use as a target with the identification of B. pertussis specific fragment of transposase IS481 do not allow to differentiate this type of B. bronchiseptica and B. parapertussis. The proposed primers and fluorescent probe for transposase IS481 can be used as a genus specific target by PCR in real time to identify B. bronchiseptica, B. pertussis and B. parapertussis without specific differentiation. | Микробиологическая дифференциация бактерий рода Bordetella, являющихся возбудителями респираторных заболеваний человека и животных, в настоящее время представляет определенную сложность, обусловленную фенотипическими особенностями данных патогенов. Результаты ряда современных исследований свидетельствуют, что молекулярно-генетическая дифференциация B. bronchiseptica, B. pertussis и B. parapertussis может быть основана на вставочных элементах (IS). Нами была поставлена цель разработать систему дифференциации B. bronchiseptica и B. pertussis на основе мультиплексной ПЦР в режиме «реального времени». После подбора и дизайна соответствующих олигонуклеотидов и флуоресцентных зондов нами были проведены исследования, доказавшие, что использование в качестве мишени фрагмента гена bfrZ позволяет проводить идентификации B. bronchiseptica и дифференциацию от близкородственных видов B. pertussis и B. parapertussis. Использование в качестве мишени при идентификации B. pertussis специфического фрагмента гена траспозазы IS481 не позволяет дифференцировать данный вид от B. bronchiseptica и B. parapertussis. Предложенные праймеры и флуоресцентный зонд для траспозазы IS481 могут быть использованы в качестве родоспецифической мишени при проведении ПЦР в режиме «реального времени» для идентификации B. bronchiseptica, B. pertussis и B. parapertussis без видовой дифференцировки.

显示更多 [+]

显示较少 [-]

Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin - Russian Federation

2014

Маstilenko Аndrey V. | Vasilyev Dmitry А. | Borisova Оlga Yu. | Vasilyeva Yuliya B.

Microbiological differentiation of bacteria of the genus Bordetella, which cause respiratory diseases in humans and animals and at the present time is tricky, due to a phenomenon typical features of these pathogens. The results of modern studies indicate that the molecular-genetic differentiation B. bronchiseptica, B. pertussis and B. parapertussis can be based on the inserted elements (IS). We have put an aim to develop a system of differentiation B. bronchiseptica and B. pertussis based on multiplex PCR in real time mode. After selection and design of relevant oligonucleotides and fluorescent probes, we have conducted studies that have proven that the use as a target of the gene fragment bfrZ allows identification B. bronchiseptica and differentiation from closely related species of B. pertussis and B. parapertussis. The use as a target with the identification of B. pertussis specific fragment of transposase IS481 do not allow to differentiate this type of B. bronchiseptica and B. parapertussis. The proposed primers and fluorescent probe for transposase IS481 can be used as a genus specific target by PCR in real time to identify B. bronchiseptica, B. pertussis and B. parapertussis without specific differentiation. | Микробиологическая дифференциация бактерий рода Bordetella, являющихся возбудителями респираторных заболеваний человека и животных, в настоящее время представляет определенную сложность, обусловленную фенотипическими особенностями данных патогенов. Результаты ряда современных исследований свидетельствуют, что молекулярно-генетическая дифференциация B. bronchiseptica, B. pertussis и B. parapertussis может быть основана на вставочных элементах (IS). Нами была поставлена цель разработать систему дифференциации B. bronchiseptica и B. pertussis на основе мультиплексной ПЦР в режиме «реального времени». После подбора и дизайна соответствующих олигонуклеотидов и флуоресцентных зондов нами были проведены исследования, доказавшие, что использование в качестве мишени фрагмента гена bfrZ позволяет проводить идентификации B. bronchiseptica и дифференциацию от близкородственных видов B. pertussis и B. parapertussis. Использование в качестве мишени при идентификации B. pertussis специфического фрагмента гена траспозазы IS481 не позволяет дифференцировать данный вид от B. bronchiseptica и B. parapertussis. Предложенные праймеры и флуоресцентный зонд для траспозазы IS481 могут быть использованы в качестве родоспецифической мишени при проведении ПЦР в режиме «реального времени» для идентификации B. bronchiseptica, B. pertussis и B. parapertussis без видовой дифференцировки.

显示更多 [+]

显示较少 [-]

Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin - Russian Federation