AGRIS - 

2021

Moiseeva, A.A. | Prisnyj, A.A. | Skvortsov, V.N. | Tarasova, Yu.V.

Сальмонеллез является серьезной патологией инфекционного происхождения, приводящей к большим экономическим потерям в птицеводстве. Особая опасность болезни заключается в том, что зараженная птица может быть скрытым бактерионосителем, кроме того сальмонеллез представляет угрозу и для человека. С целью профилактических, а также лечебных мер, применяют антибактериальные лекарственные средства, одним из которых является представитель фторхинолонов – энрофлоксацин. Несмотря на данные о хорошем антимикробном эффекте препарата, мало исследованным является его влияние на физиологическое состояние птиц, в частности, воздействие энрофлоксацина на показатели белой крови. Для осуществления исследования были сформированы 4 группы, из которых II и III получали энрофлоксацин в дозах 200 мг/л и 100 мг/л, в то время как I и IV – обычную питьевую воду, при этом группы II, III, IV подверглись экспериментальному заражению культурой Salmonella infantis в концентрации 30 млн. КОЕ/0,5 мл. Отбор крови проводили на 1, 3, 5, 7 и 9 сутки после отмены препарата. Были изучены следующие показатели: содержание лейкоцитов в крови, лейкоцитарная формула, а также динамика показателей лейкоцитарных индексов. Выявленные изменения во всех опытных группах свидетельствуют о неоднозначном антибактериальном эффекте применения энрофлоксацина, хотя использование дозы 200 мг/л, в некоторой степени, было более действенным. Тем не менее, в целом, несмотря на выявленные достоверные сдвиги изученных показателей у цыплят опытных групп, негативного воздействия препарата на организм петушков не обнаружено. | Salmonellosis is a serious pathology of infectious origin, leading to high economic losses in poultry farming. A particular danger of the disease is that infected poultry may be a hidden bacterial carrier, and salmonellosis is also a threat to humans. For preventive, as well as therapeutic measures, antibacterial drugs are used, one of which is a representative of fluoroquinolones –Enrofloxacin. Despite the data on the good antimicrobial effect of the drug, little research has been conducted on its impact on the physiological condition of birds, in particular, the impact of Enrofloxacin on white blood. For the study 4 groups were formed, from which II and III received Enrofloxacin in doses of 200 mg/l and 100 mg/l, while I and IV – normal drinking water, and groups II, III, IV were experimentally infected with Salmonella infantis culture in the concentration of 30 million COE/0.5 ml. Blood samples were taken on the 1st, 3rd, 5th, 7th and 9th day after the drug withdrawal. The following parameters were studied: blood leukocyte content, leukocyte formula, and dynamics of leukocyte indices. The revealed changes in all experimental groups indicate the ambiguous antibacterial effect of the use of Enrofloxacin, although the use of 200 mg/l dosage, to some extent, was more effective. Nevertheless, on the whole, in spite of the revealed reliable shifts of the studied indicators in chickens of the experimental groups, no negative effect of the preparation on the cockerels' organism was revealed.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2020

Lenchenko, E.M. | Stepanov, D.V.

Учет количества микроорганизмов, выделенных из пищевого сырья, проводили общепринятым методом серийных разведений и методом разделенного импеданса с применением анализатора "БакТрак 4300", предназначенного для ускоренного подсчета мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов. При количественном учете микроорганизмов в пробах пищевого сырья (n=82) было выявлено несоответствие микробиологических показателей безопасности, превышение КМАФАнМ в 23 (28,0%) пробах пищевого сырья, из которых проб говядины – 11 (47,2%); мяса субпродуктов и полуфабрикатов птицы – 12 (20,3%). На основе сравнительной оценки ростообеспечивающих и селективных свойств апробированы и подобраны эффективные диагностические среды и тест-системы для дифференциации микроорганизмов сходных видов. Из числа изолятов, выделенных из пищевого сырья (n=122), идентифицировано 36 культур микроорганизмов: Salmonella spp. – 10 (13,1%) культур микроорганизмов; бактерий группы кишечной палочки – 25 (24,3%); Listeria monocytogenes – 1 (1,3%). Оптимизация процедуры подготовки образцов к исследованию и исключение рутинных стадий подсчета колоний значительно увеличивают число проводимых анализов, сокращают сроки исследований и материальные затраты. За счет простоты операций и минимума ручного труда увеличиваются производительность, повышается безопасность работы, снижаются затраты рабочего времени персонала, исключаются субъективные факторы. Преимущество использования анализатора заключается также в количественном определении общего числа дрожжей и плесеней в исследуемых образцах через 3 сут, тогда как общепринятым способом указанные показатели можно определить только через 5 сут. | CSAL | The number of microorganisms was recorded by the conventional serial dilution method and by the parted impedance method using an analyzer BakTruck 4300 for accelerated calculation the amount of mesophilic aerobic and facultative anaerobic microorganisms. A quantitative analysis of microorganisms of food samples (n = 82) revealed a mismatch of microbiological safety indicators, excess QMAFAnM: 23 (28.0%) samples food raw materials, of which 11 beef samples (47.2%); meat of offal and semi-finished poultry – 12 (20.3%). Based on a comparative assessment of growth-supporting and selective properties, effective diagnostic environments and test systems for differentiating similar types of micro-organisms have been tested and selected. From the number of isolates allocated from food raw materials (n = 122), 36 microbial cultures were identified: Salmonella spp. – 10 (13.1%) microbial cultures; coliforms – 25 (24.3%); Listeria monocytogenes – 1 (1.3%). Optimization of sample preparation for research and elimination of routine stages of colony counting significantly increases the number of performed analyses, saves research time and material costs. Due to the simplicity of operations and a minimum of manual labor, productivity and security are increased, labor costs of staff time are reduced, and subjective factors are excluded. The advantages are also in quantitative indicators of the total number of yeast and molds in the studied samples within 72 hours, whereas in the conventional method, the indicators are presented only after 5 days.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2020

Kolokolova, A.Yu. | Ilyukhina, N.V. | Trishkaneva, M.V. | Korolev, A.A., All-Russia Research and Development Inst. of Conservation Technology, Moscow Region

24 ref. | The research results concerning the application of physical methods of plant raw materials influencing - fresh beetroot - to inhibit pathogenic microorganisms - Salmonella genus were presented. The use of effective and available physical methods of influence in the fruit and vegetable processing technology allows us to ensure the maximum conservation of physiologically valuable components of the raw material and its safety. Microwave (microwave field) and ultraviolet radiation (UVR) were chosen as physical methods for research. The sterilizing effect of the microwave field was clearly expressed - the bacteria survival after such a treatment was 2 or more times less than during heat treatment. Treatment with UVR has a bactericidal effect and is characterized by a minimal effect on the plant materials organoleptic properties. A comparative assessment of the effectiveness of the inhibition of the Salmonella test culture on diced fresh beets after treatment with the selected physical methods was carried out during the study. The samples temperature rose up to 43–46 deg. C under the influence of a microwave field in the selected mode with a power of 400 W, a duration of 40 s, and a flux density of 0.44 W/cm2. Treatment with UVR in the C-band (wavelength 253.7 nm) was carried out for 15 min with a dose of 50 kJ/m2 with a total power of ultraviolet lamps equal to 60 V. Processing of fresh chopped beets with UV radiation reduced the number of microorganisms by 5 orders of magnitude from the initial amount. Processing in a microwave field allowed reducing the initial seed contamination of raw materials by 7 orders of magnitude. Sequential processing in a microwave field and subsequent UVR allowed us to reduce the initial beets seedling by 8 orders of magnitude. The combination of processing methods (microwave + UVR) showed the effectiveness of their application to reduce pathogenic microflora. | Summaries (En, Ru) | Представлены результаты исследования по применению физических методов воздействия на растительное сырье (свежую столовую свеклу) с целью ингибирования патогенных микроорганизмов р.Salmonella. Применение в технологии переработки фруктов и овощей эффективных и доступных физических методов воздействия позволяет обеспечить максимальное сохранение физиологически ценных компонентов сырья и его безопасность. Для исследования в качестве физических методов были выбраны микроволновое (СВЧ-поле) и ультрафиолетовое излучение (УФИ). Стерилизующий эффект СВЧ-поля явно выражен – выживаемость бактерий после такой обработки в 2 и более раз меньше, чем при тепловой обработке. Обработка УФИ обладает бактерицидным эффектом и характеризуется минимальным воздействием на органолептические свойства растительного сырья. В ходе исследования проведена сравнительная оценка эффективности ингибирования тест-культуры Salmonella на нарезанных кубиках свежей свеклы после обработки выбранными физическими методами. Под воздействием СВЧ-поля при выбранном режиме с мощностью 400 Вт, продолжительностью 40 с и плотностью потока 0,44 Вт/см2 температура образцов поднималась до 43–46 град. С. Обработку УФИ в С-диапазоне (длина волны 253,7 нм) проводили в течение 15 мин с дозой 50 кДж/м2 при суммарной мощности ультрафиолетовых ламп 60 В. Обработка свежей нарезанной свеклы УФИ снизила количество микроорганизмов на 5 порядков от начального количества. Обработка в СВЧ-поле позволила снизить начальную обсемененность сырья на 7 порядков. Последовательная обработка в микроволновом поле и последующим УФИ позволила снизить начальную обсемененность свеклы на 8 порядков. Комбинация методов обработки (СВЧ + УФ) показала эффективность их применения для снижения патогенной микрофлоры.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2019

Pavlova, I.B. | Kononenko, A.B. | Bannikova, D.A., All-Russia Research and Development Inst. of Veterinary Sanitation, Hygiene and Ecology, Moscow

The aim of the work is to study the survival strategy of salmonella populations in water medium with the formation of biofilms and L-transformation processes. Collection strain Salmonella typhimurium №1957 and a culture isolated from water samples from the Oka-river taken in autumn were chosen as a test culture. For the quantitative account of the growth of Salmonella and their morphology, an accelerated method of serial dilution was used with a seeding of 0.05 ml on membrane filters No. 4-5 production «Vladipor» placed on the dense nutrient medium of the BSA. Biochemical properties were determined by accelerated method using MTS-Salm system. For scanning electronic microscopy, the preparations were fixed with an aqueous solution of glutaraldehyde, dehydrated with propylene oxide. The preparations were sprayed with platinum or gold ions. The work was carried out on a scanning electron microscope Hitachi TM3030. The study of Salmonella preparations from water samples in vitro by method SEM showed that after 7 days of Salmonella existence in water at temperature of 26 deg. C, the populations were united in microcolonies, covered from all sides by dense biofilm. After 2 months, the main part of the salmonella population was represented by the formed multilayer biofilm. After 6 months (observation deadline) at 26 deg. C, the population of Salmonella cells was at the stage of L-transformation. The ability of Salmonella to long surviving testifies to an epidemic danger of water bodies, more than that the strains resistant to antibiotics and to some unfavorable conditions circulate in water. | Цель работы – изучить стратегию выживания популяций сальмонелл в водной среде с образованием биопленок и процессов L-трансформации. В качестве тест-культур были выбраны коллекционный штамм Salmonella typhimurium № 1957 и культура, выделенная из проб воды в р. Оке, взятых в весенний период . Для количественного учета роста сальмонелл и их морфологии использовали ускоренный метод серийных разведений с высевом 0,05 мл на мембранные фильтры, помещенные на плотную питательную среду ВСА. Биохимические свойства определяли ускоренным методом с использованием системы МТС-сальм. Для сканирующей электронной микроскопии препараты фиксировали водным раствором глутарового альдегида, обезвоживали пропиленоксидом. Препараты напыляли ионами платины или золота. Исследование препаратов сальмонелл из проб воды in vitro методом СЭМ показало, что через 7 сут существования сальмонелл в воде при температуре 26 град. С популяции были объединены в микроколонии, со всех сторон закрытые плотной биопленкой. Через 2 мес. основная часть популяции сальмонелл была представлена сформированной многослойной биопленкой. Через 6 мес. (предельный срок наблюдения) при t 26 град. С популяция клеток сальмонелл находилась в стадии L-трансформации. Способность сальмонелл к длительному выживанию в воде свидетельствует об эпидемической опасности водных объектов, тем более, что в воде циркулируют штаммы, устойчивые к антибиотикам и к ряду неблагоприятных условий.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2019

Nityaga, I.M. | Usha, B.V. | Lutsaj, V.I., Moscow State Univ. of Food Production

Of great threat to human health in the epidemiology of salmonellosis is latent salmonella carriage in poultry and secondary contamination of carcasses during poultry processing. One of tools allowing decontaminating carcasses may be bivalent bacteriophage against salmonellosis in poultry. Studied was a possibility and efficiency of using bivalent decontamination of poultry carcasses from salmonella. To make a bivalent bacteriophage preparation, the phages to к Salmonella enteritidis and S. typhimurium were used. Broiler chickens were infected with salmonella subcatenously. After 3 days the poultry was slaughtered and the salmonella content was confirmed by bacteriological inoculation. To decontaminate a carcass, it was placed in a solution comprising phages of two salmonella species for 20 min. Further the absence of salmonella contamination was confirmed, organoleptic and physicochemical quality characteristics of poultry meat were evaluated. The study showed high efficiency of using the bivalent bacteriophage preparation against salmonellosis in poultry for sanitation of slaughter product in poultry breeding. The use of phage prevents contamination of other carcasses from Salmonella carrier, which ensures the sanitary safety of a poultry farm and slaughterhouses, as well as meets the requirements of improving the quality and safety of foods. Organoleptic characteristics of chicken meat, treated with bivalent bacteriophage against salmonellosis of birds, have no difference compared to the meat of untreated carcasses, which makes it possible to recommend the use of the drug for decontamination without any restrictions. | Скрытое сальмонеллоносительство у птиц и вторичная контаминация тушек при переработке птицы представляют определенную угрозу здоровью человека. Одним из средств, позволяющих обеззаразить тушки птицы от сальмонелл, может выступить бивалентный бактериофaг против сальмонеллеза птиц. Изучали возможность и эффективность использования бивалентного обеззараживания тушек птиц от сальмонелл. Для получения препарата бивалентного бактериофага использовали фаги к Salmonella enteritidis и S. typhimurium. Цыплят-бройлеров инфицировали сальмонеллами подкожно. Через 3 сут птицу забивали и методами бактериологического посева подтверждали зараженность сальмонеллами. Для обеззараживания тушки на 20 мин помещали в раствор, содержащий фаги 2 видов сальмонелл. Далее подтверждали отсутствие обсемененности сальмонеллами, оценивали органолептические и физико-химические показатели качества мяса птицы. Исследования показали высокую эффективность использования препарата бивалентного бактериофага против сальмонеллеза птиц для санирования продуктов убоя в птицеводстве. Использование фага позволяет предотвратить контаминацию других тушек от сальмонеллоносителя, что обеспечивает санитарное благополучие птицефермы и пунктов убоя, а также отвечает запросам повышения качества и безопасности пищевых продуктов. По органолептическим показателям мясо кур, обработанных препаратом, не отличается от мяса необработанных тушек, что позволяет рекомендовать использование препарата с целью деконтаминации без ограничений.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Chugunova, E.O., Perm State Agro-Technological Univ.

The article deals with the issue of influence of propylene glycol as a component of buffered peptone water on the reproduction of Salmonella spp. and certain microbial associents. The aim of research is to select an agent that completely or partially inhibit the growth of concomitant microflora without a negative effect on Salmonella cells. The research was carried out in 2018 using the bacteriological method. Material for the tests was the archival strains of Salmonella spp., Escherichia coli, Shigella flexneri, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes obtained from the "Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products" of the Ministry of Health of the Russian Federation. Eventually, it was established that biomass of Staphylococcus aureus after incubation in buffered peptone water with propylene glycol was by 17.53% less than in the control samples; Proteus vulgaris and Escherichia coli – by 20%; cells of Listeria monocytogenes – by 34.21%, Shigella flexneri – more than 50% less. In this case, the positive effect of propylene glycol on the reproduction for Salmonella spp. was noted. Particularly, bacterial mass of Salmonella spp. accumulated by buffered peptone water with propylene glycol was by 38.57% greater than the control samples. | Изучен вопрос влияния пропиленгликоля в составе забуференной пептонной воды на размножение сальмонелл и ряд микробов-ассоциантов. Цель работы – выбор агента, позволяющего полностью или частично угнетать рост сопутствующей микрофлоры и не оказывать отрицательного воздействия на клетки сальмонелл. Работа проведена бактериологическим методом в 2018 г. Материалом для испытаний служили музейные штаммы Salmonella spp., Escherichia coli, Shigella flexneri, Proteus vulgaris, Staphilococcus aureus и Listeria monocytogenes, полученные из Научного центра экспертизы средств медицинского применения Минздрава России. В результате установили, что биомасса золотистого стафилококка после инкубации в забуференной пептонной воде с содержанием пропиленгликоля была на 17,53% меньше, чем в контроле; протея и кишечной палочки – на 20%; листерий – на 34,21%, шигелл – более чем на 50%. При этом отмечено положительное влияние пропиленгликоля на размножение клеток бактерий рода Salmonella, в частности, бактериальная масса сальмонелл, накопление которых происходило в присутствии пропиленгликоля, оказалась на 38,57% больше, чем контрольных образцов.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Davydova, N.V. | Afonyushkin, V.N., Siberia Federal Scientific Center of Agrobiotechnology, Novosibirsk Region

In recent years, there has been an increase in the number of Salmonella strains resistant to antibiotics of fluoroquinolone series. The occurrence of Salmonella resistant to enrofloxacin was assessed at poultry farms of the Russian Federation in 2007 and 2017. In 2007 sensitivity of 23 salmonella cultures to enrofloxacin was studied and in 2017 the same study was done with 15 Salmonella cultures isolated from poultry. Antibiotic resistance was determined by the disc-diffusion method in compliance with the generally accepted requirements. From 2007 to 2017 the frequency of Salmonella isolation resistant to enrofloxacin increased from 0 to 23.08%. Evaluation of the efflux (active removal of antimicrobial substances by a bacterial cell) was carried out using a classical test with ethidium bromide. It was established that the presence of efflux in Salmonella cultures was associated with an insignificant increase in resistance to enrofloxacin, trimethoprim with sulfamethoxazole and trimethoprim with sulfadimezine. The effect of amlodipine on the sensitivity of Salmonella to enrofloxacin was evaluated by cultivation of Salmonella in the presence of amlodipine in various concentrations. It was revealed that the specific proportion of Salmonella strains which became higher sensitivity to enrofloxacin increased with the simultaneous rise in amlodipine concentration (Pearson correlation, r = 0.9). Administration of amlodipine in concentration of 250 microgram/ml to S. enterica cultures, in the presence of subinhibitory concentrations of enrofloxacin, increased their sensitivity to enrofloxacin in 87.5% of cases. | Отмечен рост в последние годы числа штаммов сальмонелл, устойчивых к антибиотикам фторхинолонового ряда. Оценена встречаемость сальмонелл, устойчивых к энрофлоксацину, на птицефабриках Российской Федерации в 2007 и 2017 гг. Исследована чувствительность к энрофлоксацину у 23 культур сальмонелл, выделенных в 2007 г., и 15 – изолированных из с.-х. птицы в 2017 г. Антибиотикорезистентность определяли дискодиффузионным методом в соответствии с общепринятыми требованиями. С 2007 по 2017 г. частота выделения сальмонелл, устойчивых к энрофлоксацину, возросла от 0 до 23,08%. Оценку наличия эффлюкса (активного выведения бактериальной клеткой антимикробных веществ) проводили с использованием классического исследования с бромистым этидием. Установлено, что наличие эффлюкса у культур сальмонелл ассоциировалась с незначимым повышением устойчивости к энрофлоксацину, триметоприму с сульфаметаксазолом и триметоприму с сульфадимезином. Исследовано влияние амлодипина на чувствительность сальмонелл к энрофлоксацину путем культивирования сальмонелл в присутствии различных концентраций амлодипина. Установлено, что удельная доля штаммов сальмонелл, повысивших чувствительность к энрофлоксацину, возросла при одновременном увеличении концентрации амлодипина (корреляция по Пирсону, r = 0,9). Введение амлодипина в концентрации 250 мкг/мл в культуры Salmonella enterica в присутствии субингибирующих концентраций энрофлоксацина повышало чувствительность к данному антибиотику в 87,5% случаев.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Chugunova, E.O., Perm State Agro-Technological Univ.

The article considers the problem of Salmonella isolating from meat and meat products contaminated with concomitant microflora, particularly, from the aggregation with Proteus spp. The research was carried out in Perm in 2018. The aim of the study was to obtain typical colonies of Salmonella spp. from microbial aggregation in tested meat products. The material for research was samples of chicken meat products with high total microbial contamination which were artificially contaminated with Proteus spp. and Salmonella spp. Inoculation dose ranged from 10E1 to 10E8 of Salmonella and Proteus microbial bodies. Being inhibitors of foreign microflora and Proteus, propylene glycol and bacteriophage were applied into the medium for non-selective enrichment of Salmonella. Samples of meat products were divided into two groups, control and experimental. The control group was examined according to GOST 31659-2012 (state standard), the experimental group was exposed to inhibitors. After non-selective enrichment, materials were transferred to agar medium. As a result, routine method of research did not allow isolating salmonella from artificially contaminated meat products and took 90±0.0 hours for the analyses, whilst isolating of typical colonies from the prototypes was successful. It is established that applied inhibitors did not change and affect biochemical and serological properties of Salmonella. Time spent on prototype samples research was inversely related to the number of Salmonella cells inoculated to those samples and ranged from 72.0±0.0 to 76.8±8.39 that is less than in control group. In order to increase the effectiveness of Salmonella isolation from meat and meat products, we recommend injecting 7.0 сm3 of propylene glycol and 2.5 сm3 of Proteus bacteriophage in 225 сm3 of buffered peptone water. | Рассмотрена проблема выделения сальмонелл из мяса и мясных продуктов, контаминированных сопутствующей микрофлорой, в частности, из ассоциации с Proteus spp. Работа выполнена в г. Пермь в 2018 г. Цель исследования - получение типичных колоний бактерий р. Salmonella из микробных ассоциаций, присутствующих в испытуемых мясных продуктах. Материалом для исследований служили пробы мясных куриных продуктов с высокой общей микробной обсемененностью, искусственно контаминированных протеем и сальмонеллами. Посевная доза составила от 10E1 до 10E8 микробных тел сальмонелл и протея. В качестве ингибиторов посторонней микрофлоры и протея были выбраны пропиленгликоль и протейный бактериофаг, которые вносили в среду для неселективного обогащения сальмонелл. Были сформированы контрольные и опытные образцы мясной продукции, которую исследовали согласно ГОСТ 31659-2012 и опытные, подвергшиеся действию ингибиторов. После неселективного обогащения производили пересев на агаровые среды. В итоге, при рутинном методе анализа сальмонеллы из искусственно контаминированных мясных продуктов выделить не удалось, при этом на анализ было затрачено 90±0,0 ч, в то время как из опытных образцов выделили характерные колонии сальмонелл. Получив чистую культуру возбудителя, выяснили, что применяемые ингибиторы не изменили и не исказили биохимические и серологические свойства сальмонелл. Время исследований опытных проб оказалось обратно пропорционально количеству клеток сальмонелл, инокулированных в образцы и варьировало от 72,0±0,0 до 76,8±8,39 ч, что достоверно меньше, чем в контроле. Для повышения эффективности выделения сальмонелл из мяса и мясных продуктов рекомендуем в 225 см3 забуференной пептонной воды вводить 7,0 см3 пропиленгликоля и 2,5 см3 протейного бактериофага.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2017

Chugunova, E.O. | Tatarnikova, N.A., Perm State Agricultural Academy

Research on the development of a phage identification scheme for Salmonella spp. was carried out by the Perm Veterinary Diagnostic Center in the period from 2014 to 2017. There were used strains of Salmonella spp., Escherichia coli, Shigella flexneri, Proteus spp., Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes (total of 131 strains). For the preparation of bacteriophages, white laboratory mice weighing 16-18 g (n = 22) were used. For purposes of investigation, an initial bacterial suspension containing 10E8 cells/cm3 was prepared by the Densi-La-Meter (Erba Lachema, Czech Republic) from the daily agar cultures of the microorganisms studied. Next, a series of successive dilutions was made to obtain a slurry containing 10E1 cells/cm3. As a result, an inoculum containing 10 cells of Salmonella was added to 9.0 cm3 of selenite broth and a similar volume of RVS- broth, an indicator phage in an amount of 0.1 to 3.0 cm3 was added. As a result, it was established that the combined incubation of Salmonella and the eponymous phage for 24 + 3 h in selenite and RVS-brothes promotes the lysis of Salmonella spp., which can serve as a diagnostic sign for the identification of Salmonella. Having conducted a similar experiment with microbial associates, visualized were varying degrees of turbidity and / or the presence of sediment, which led to the conclusion that the proposed method for identifying the desired bacteria is highly sensitive. The developed method for identification of Salmonella with the use of isolated bacteriophages surpassed the classical analogue for a number of indicators: sensitivity, efficiency, material and labor costs, and allowed saving 24 h of time. | Исследование по разработке схемы фагоидентификации бактерий рода Salmonella проводилось в Пермском ветеринарном диагностическом центре в 2014-2017 гг. Работали с референтными и полевыми штаммами Salmonella spp., Escherichia coli, Shigella flexneri, Proteus spp., Staphilococcus aureus и Listeria monocytogenes (всего 131 штамм). Для получения бактериофагов использовали белых лабораторных разнополых мышей массой 16-18 г (n=22). В целях исследования из суточных агаровых культур изучаемых микроорганизмов с помощью оптического прибора Densi-La-Meter (Erba Lachema, Чехия) готовили исходную бактериальную суспензию, содержащую 10E8 МТ/см3. Далее делали ряд последовательных разведений до получения суспензии c 10 МТ/см3. В итоге инокулюм, содержащий 10E1 МТ сальмонелл, вносили в 9,0 см3 селенитового бульона и аналогичный объем RVS-бульона, добавляли индикаторный фаг в количестве от 0,1 до 3,0 см3. В результате установили, что совместная инкубация сальмонелл и одноименного фага в течение 24 +-3 ч в селенитовом и RVS-бульонах способствует лизису бактерий р. Salmonella, что может служить диагностическим признаком идентификации сальмонелл. Проведя аналогичный опыт с микробами-ассоциантами, визуализировали разной степени помутнение и/или наличие осадка, что позволило сделать вывод о высокой чувствительности предложенного способа идентификации искомых бактерий. Разработанный способ идентификации сальмонелл с использованием выделенных бактериофагов превзошел классический аналог по ряду показателей: по чувствительности, эффективности, материальным, трудовым затратам и позволил сэкономить 24 ч времени.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2017

Zabrovskaya, A.V., St. Petersburg Research and Development Inst. of Epidemiology and Microbiology

There was conducted an epizootic analysis of isolation of Salmonella strains from production animals and animal products in the North-Western Federal District (NWFD) of Russia in the period 2006–2016 in comparison with the monitoring data dissemination of salmonella isolated from similar sources in the EU and the USA. For 2006 –2015 in the NWFD from farm animals, animal products and feeds 1131 strains of Salmonella enteric subsp. enterica belonging to 71 serological variant were isolated. A significant proportion of Salmonella strains isolated from diseased, slaughtered and fallen animals (44.5%), belongs to the serological variants of S. enteritidis, S. typhimurium and S. infantis. Salmonella serovars adapted to specific animal species represented by S. choleraesuis and S. typhisuis – in pigs, S. dublin in cattle, S. gallinarum –poultry. Each species of farm animals was characterized by its own range of serological variants of Salmonella isolated. Serological variant of S. infantis holds a significant share in the structure of salmonella isolated from poultry and from poultry products, both in our country and abroad. Strains of serovar S. typhimurium in the analyzed period were found in all species of farm animals, and all types of products of animal origin. This serological option for many years remains the most common in the EU and the US, also standing out from almost all kinds of productive animals and animal products. In the last decades on the territory of the EU and the United States monophasic variant of serovar S. typhimurium with antigenic formula 4, 5, 12:I circulates whose isolation in Russia is not recorded. | Проведен эпизоотологический анализ выделения штаммов сальмонелл от продуктивных животных и из продукции животноводства в Северо-Западном федеральном округе (СЗФО)России в период 2006 –2016 гг. в сравнении с данными мониторинга распространения сальмонелл, выделенных из аналогичных источников в странах ЕС и США. За 2006 –2015 гг. на территории СЗФО от с.-х. животных, из продукции животноводства и кормов был выделен 1131 штамм Salmonella enterica subsp. enterica, принадлежащих к 71 серологическому варианту. Значительная доля штаммов сальмонелл, выделенных от больных, вынужденно убитых и павших животных (44,5%), принадлежит к серологическим вариантам S. enteritidis, S. typhimurium и S. infantis. Серовары сальмонелл, адаптированные для конкретного вида животных представлены S. choleraesuis и S. typhisuis – у свиней, S. dublin – у крупного рогатого скота, S. gallinarum – у птиц. Для каждого вида с.-х. животных был характерен свой спектр серологических вариантов выделяемых сальмонелл. Серологический вариант S. infantis занимает значительный удельный вес в структуре сальмонелл, выделенных от птиц и из продукции птицеводства, как в нашей стране, так и за рубежом. Штаммы серовара S. typhimurium в анализируемый период обнаруживались у всех видов с.-х. животных, и во всех видах продукции животного происхождения. Этот серологический вариант на протяжении многих лет остается самым распространенным в странах ЕС и США, выделяясь также практически от всех видов продуктивных животных и продукции животноводства. В последние десятилетия на территории стран ЕС и США циркулирует монофазный вариант серовара S. typhimurium с антигенной формулой 4,5,12:I, выделения которого на территории РФ не зафиксировано.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation