AGRIS - 

2022

Gasanova, G. | Huseynov, S. | Zeinalli, D. | Rahimli, S.

Приведены сведения об электрофоретическом анализе резервных белков глиадина 17 местных сортов пшеницы мягкой, созданных в НИИСХ. В результате исследования установлен широкий полиморфизм между сортами. Разновидности отличаются друг от друга по всем электрофоретическим компонентам. Как бы ни была велика эта разница, в процессе селекции особое внимание уделялось хромосомам Gld 1A и Gld 1B и Gld 1D. Высокая встречаемость блока компонентов глиадина GLd 1D связана с отсутствием сильных морозов и тем, что большинство территорий относятся к засушливой зоне. Совпадение блоков компонентов GLd 1A5, GLd 1A4 и GLd 1B1 связано с тем, что их совместное присутствие в генотипе положительно влияет на качество хлеба. | Data on the electrophoretic analysis of gliadin reserve proteins of 17 Triticum aestivum land varieties developed at the Research Institute of Agriculture are presented. As a result of the study, a wide polymorphism between varieties was established. The species differ from each other in all electrophoretic components. No matter how great this difference was, during the selection process, special attention was paid to the chromosomes Gld 1A and Gld 1B and Gld 1D. The high occurrence of the block of gliadin components GLd 1D is associated with the absence of severe frosts and the fact that most of the territories belong to the arid zone. The coincidence of the blocks of components GLd 1A5, GLd 1A4 and GLd 1B1 is due to the fact that their joint presence in the genotype has a positive effect on the quality of bread.

Show more [+]

Less [-]

Publishing center Science and Practice - Russian Federation

2018

Sidorova, V.V. | Kerv, Yu.A. | Matveeva, G.V. | Konarev, A.V., The N.I. Vavilov All-Russia Inst. of Plant Genetic Resources, St. Petersburg

For the first time, zein electrophoresis was used to analyze waxy maize old landraces and breeding lines. Zein electrophoresis was carried out in vertical 10% PAA gels with 8 M urea. The solution for zein extraction contained 6 M urea and 0.01 M dithiothreitol. The present research pursued the following aims: to use zeinelecrophoretic patterns (protein markers) in screening waxy maize landraces and lines for their identification and fingerprinting; to determine the biotype composition of landraces and their polymorphism and degree of relationship; and to demonstrate the possibility of applying zein markers in the development of new waxy maize inbred lines by backcrossing the wx1 gene into the initial dent maize line. Zein electrophoretic patterns showed the uniqueness of each waxy maize accession. All the studied new lines are united by a decreased intensity of most zein pattern components, as well as by the presence of an intensive component 47 which is absent in the pattern of the initial lines of dent maize. Component 47 may serve as a protein marker for identifying waxy maize lines. All landraces were found to be composed of several biotypes (from two to five). Regardless of the intravarietal polymorphism, every variety has specific patterns which facilitate its identification. | Объектом исследования послужили стародавние местные сорта и селекционные линии восковидной кукурузы (ВК), состоящие из 100% амилопектинового крахмала, контролируемого геном waxy (wxl). Образцы были впервые изучены методом электрофореза зеина -запасного белка кукурузы. Электрофорез проводили в вертикальных пластинах 10%-ного полиакриламидного геля, содержащего 8 М мочевину. В раствор для экстракции зеина входила 6 М мочевина и 0,01 М дитиотрейтол. Зеиновые маркеры эффективны в анализе селекционного материала, контроля генетической однородности и установления генетической целостности (подлинности) самоопыленных линий, сортов и гибридов в ходе семеноводства и промышленного производства. Задачи исследований заключались в проведении скрининга местных сортов и самоопыленных линий ВК по электрофоретическим спектрам зеина (белковым маркерам) с целью их идентификации и паспортизации; определении биотипного состава стародавних местных сортов ВК, их полиморфизма и степени родства; демонстрации возможности сопровождения зеиновыми маркерами процесса создания новых инбредных линий ВК путем насыщения (беккросса) исходной зубовидной линии геном wx1. По электрофоретическим спектрам зеина установлена уникальность каждого образца ВК. Все изученные новые линии этого подвида имеют два общих характерных признака - снижение интенсивности большинства компонентов спектра зеина, и присутствие интенсивного компонента 47, которого нет в спектрах исходных линий зубовидной кукурузы. Компонент 47 может служить белковым маркером для идентификации линий ВК. У всех местных сортов ВК выявлено несколько биотипов (от двух до пяти). Несмотря на внутрисортовой полиморфизм, каждый сорт имеет специфичные типы спектра, по которым его можно идентифицировать.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2015

Eggy, E.E., The N.I. Vavilov All-Russia Inst. of Plant Genetic Resources, St. Petersburg

In Russia, electrophoresis is used as standard laboratory method for the determination of varietal purity of seed lots and commercial grain. Cross-fertilized cultures due to high intrapopulation heterogeneity and large polymorphism of the protein spectra are difficult to the use of electrophoresis. Seeds of four Galega varieties obtained from the collection of the N. I. Vavilov All-Russia Institute of Plant Genetic Resources were used as material for the investigation. By electrophoresis studied the component composition of seed proteins and polymorphism of the varieties. For the isolation of proteins the individual seeds were ground, then flour took a sample of 5 mg, which was filled with 140 μl of the electrode buffer (Tris-glycine, pH 8.3) and insisted for 1 h. Electrophoresis was performed in 12.5% of PAAG in dissociating system with mercaptoethanol by Laemmli. The procedure of electrophoresis and processing of the gel plates was developed for proteins of pea seeds, but it Is applied successfully for analysis of lupine seeds and other dicotyledonous crops. Proteins of the seeds of Galega separated by electrophoresis on Laemmli like proteins of other dicots, presents multi-component spectrum in which the polypeptides are arranged from the cathode to the anode with increasing molecular mass. Twenty eight kinds of spectra were revealed in major polypeptides zone within the target population. Analysis the occurrence of the major polypeptides of 11S globulin allowed to reliably distinguish and identify varieties of this crop. The possibility of using part of the spectrum for protein identification and registration of polymorphic varieties of other crops is discussed. The conclusion made, that the major polypeptide zone is a promising object to develop a method for identification of Galega varieties by SDS electrophoresis. The method should be tested for other cross-fertilized legumes. | В России электрофорез используется в качестве лабораторного стандартного метода для определения сортовой чистоты партий семян и товарного зерна. Определенную сложность для использования электрофореза представляют перекрестно опыляемые культуры вследствие высокой внутрипопуляционной гетерогенности и большого полиморфизма белковых спектров. Материалом для исследования послужили семена 4 сортов козлятника восточного. Образцы получены из коллекции ВИР. Методом электрофореза изучен компонентный состав белков семян и полиморфизм сортов. Для выделения белков отдельные семена размалывали, из муки брали навески по 5 мг, которые заливали 140 мкл электродного буфера (трис-глициновый, рН 8,3) и настаивали в течение 1 ч. Электрофорез проводили в 12,5% ПААГ в диссоциирующей системе с меркаптоэтанолом по Лаемли. Процедура электрофореза и обработки гелевых пластин была разработана для белков семян гороха, но успешно применяется для анализа семян люпина и других двудольных культур. Белки семян козлятника восточного, разделенные электрофорезом по Лаемли, подобно белкам других двудольных, представлены многокомпонентным спектром, в котором полипептиды расположены от катода к аноду с увеличением молекулярных масс. В изучаемой совокупности семян встретилось 28 типов спектров зоны основных полипептидов. Анализ частот встречаемости основных полипептидов 11S глобулина позволил надежно различать и идентифицировать сорта козлятника. Обсуждается возможность использования части белкового спектра для идентификации и регистрации полиморфных сортов других культур. Сделан вывод, что зона основных полипептидов – перспективный объект для разработки метода идентификации сортов козлятника восточного с помощью SDS электрофореза. Метод следует апробировать и для других перекрестно опыляемых бобовых культур.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2015

Gubareva, N.K. | Gavrilyuk, I.P. | Konarev, A.V., The N.I. Vavilov All-Russia Inst. of Plant Genetic Resources, St. Petersburg

Работы по использованию запасных белков зерна как маркеров в изучении генетических ресурсов растений, идентификации сортов пшеницы и других злаков были начаты во Всесоюзном НИИ растениеводства под руководством В.Г. Конарева в 1967 г., когда в институте была создана лаборатория белка и нуклеиновых кислот, переименованная позже в отдел молекулярной биологии. Преимущество белка как генетического маркера связано с тем, что белок является первичным и непосредственным продуктом генетической системы. Для идентификации сортов пшеницы, ячменя, овса и других зерновых культур используют электрофорез в вертикальных пластинах 6,5% ПААГ в кислой среде. В статье обсуждаются некоторые итоги и перспективы использования электрофореза запасных белков семян злаков – проламинов – в идентификации сортов, а также пути стандартизации этого метода. На примере пшеницы и ячменя показана перспективность использования его в селекции, семеноводстве, семенном контроле, а также в генных банках для изучения, систематизации и документации генофонда культурных растений и их диких родичей, для контроля за генетической стабильностью образцов, выявления дублетов или генетически близких образцов. К настоящему времени в виде белковых формул зарегистрировано более 5000 образцов пшеницы, ячменя, овса из коллекции ВИР; составлено 20 каталогов белковых формул, в том числе 7 в электронном виде. Отмечена роль академика РАСХН В.Г.Конарева (1915-2006) и руководимого им коллектива в разработке отечественных и международных (в сотрудничестве с ISTA – International Seed Testing Association) стандартных лабораторных методов семенного контроля (идентификации сортов), основанных на электрофорезе запасных белков семян. | The work on the use of reserve protein of grains as markers in studies of plant genetic resources and identification of wheat varieties and other cereals were initiated at N. I. Vavilov All-Russia Institute of Plant Genetic Resources (VIR) under the leadership of V. G. Konarev in 1967, when the laboratory of protein and nucleic acids was established in the Institute, later to be renamed the Department of molecular biology. The advantage of the protein as a genetic marker is due to the fact that protein is the primary and immediate product of the genetic system. To identify varieties of wheat, barley, oats, and other crops electrophoresis in vertical plates of 6.5% PAAG in an acidic environment was used. Some results and prospects of the use of electrophoresis of reserve proteins of seeds of cereals (prolamines) in the identification of the varieties and also ways of standardizing this method are discussed. For example, wheat and barley are the prospects of its use in breeding, seed production, and seed control, as well as in gene banks for study, systematization, and documentation of the gene pool of cultivated plants and their wild relatives, to monitor the genetic stability of samples, detection of doublets or genetically close samples. To date, in the form of protein formulas registered more than 5,000 samples of wheat, barley, and oat from VIR collection; composed of 20 directories, protein formulas, including 7 in electronic form. The role of the academician of Russian Academy of Agrarian Sciences V. G. Konarev (1915-2006) and led team in the development of domestic and international (in collaboration with ISTA – International Seed Testing Association) standard laboratory methods of seed testing (identification of varieties), based on the electrophoresis of reserve proteins of seeds is noted.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2003

Wang, Yongliang | Wu, Chang-Yi | Chang, Chen-Tien | Sung, Hsien-Yi

Two proteinaceous invertase inhibitors, designated ITI-L and ITI-R, were purified to electrophoretic homogeneity. ITI-L was purified from acetone powder of sweet potato leaves through sequential steps entailing buffer extraction, acid treatment, DEAE-Sephacel ion-exchange chromatography, and Sephacryl S-100 gel filtration. ITI-R was purified from sweet potato tuberous roots by sequentially applying buffer extraction, Con A-Sepharose affinity chromatography, DEAE-Sephacel ion-exchange chromatography, Sephacryl S-200, and Superose 12 gel filtration. The optimal pHs for interaction between ITI-L and ITI-R and acid invertase from sweet potato leaves were 5.5 and 5.0, respectively. The molecular masses of ITI-L and ITI-R were 10 and 22 kDa, respectively, as estimated by both gel filtration and SDS-PAGE. Both inhibitors were thermostable (90% of the activity remained after incubation at 100 °C for 20 min), and Western blotting showed them to be immunologically related.

Show more [+]

Less [-]

National Agricultural Library - United States of America

1981

Osterman, L. A

National Agricultural Library - United States of America