AGRIS - 

2023

Martínez, María N | von Müller, Axel R | Quinteros, Claudia P | Bava, José | Tejera, Luis

RESUMEN En la Patagonia sur, el fuego y la herbivoría doméstica son los principales disturbios que controlan la dinámica de los bosques nativos. La respuesta de la diversidad y estructura de las comunidades vegetales frente a los disturbios fuego y ganado depende de la intensidad de los mismos y a las características del tipo de rodal que se considere. El objetivo general del trabajo fue evaluar la diversidad y estructura bajo distintas intensidades de disturbios de fuego y ganado en bosques de Nothofagus antarctica (Ñire) en tres tipos de rodales contrastantes. Se evaluaron dos tipos de disturbios: fuego y ganado en tres tipos de áreas: con intensidades máximas de disturbio, con intensidades medias de disturbio, y áreas sin disturbio en tipos de rodales altos, intermedios y bajos. Se calcularon parámetros ecológicos y de estructura para cada unidad experimental y sus correspondientes interacciones. La diversidad aumentó para los tres tipos de rodales a intensidades máximas y media de disturbio. Las herbáceas aumentaron para los tres tipos de rodales a intensidades máximas y media de disturbio. La cobertura de arbustivas disminuyó en los rodales altos e intermedios, por efecto de los disturbios, pero no para los rodales bajos. Comprender la respuesta de la comunidad vegetal al fuego y ganado doméstico bajo distintas intensidades y tipos de rodales es fundamental para predecir la dinámica de recuperación de la vegetación nativa y orientar las prácticas de manejo sustentable para esta especie. | SUMMARY In southern Patagonia, fire and domestic herbivory are the main disturbances affecting native forest dynamics. The effects of disturbances such as fire and livestock on the diversity and structure of plant communities depends on the intensity of these disturbances and the characteristics of the stand type. The overall objective of this study was to evaluate changes in forest diversity and structure under varying intensities of fire and livestock disturbances in Nothofagus antarctica forests in three different stand types. Two types of disturbances, fire and cattle, were evaluated at three different intensities; maximum disturbance, medium disturbance and no disturbance in high, medium and low stand types. Ecological and structural parameters were calculated for each experimental unit and their corresponding interactions. Diversity increased for the three stand types at maximum and medium disturbance intensities. Herbaceous cover increased for the three stand types at maximum and medium disturbance intensities. Shrub cover decreased in the high and medium stands due to the disturbances, but not in the lower stands. Understanding the responses of plant communities to fire and domestic livestock disturbances under different intensities and stand types is fundamental to predict the dynamics of native vegetation recovery and to guide sustainable management practices for each stand type.

Show more [+]

Less [-]

Scientific Electronic Library Online Chile - Chile

2023

Tarchokov, T.T. | Gasaraeva, Kh.M. | Taov, I.Kh. | Magomedov, K.G.

The genotype effect on udder morphofunctional properties and reproductive ability in cows of different genotypes were evaluated. The research was carried out in the Republic of Dagestan in 2017-2022. The sample of daughters of the Angler and Holstein stud bulls kept in one of large agrocomplexes was involved. Three groups of experimental animals differing in genotype were formed, 15 heads each. The control group included the first calf heifers obtained from crossing Red Steppe cows with Angler stud bulls; 1-st experimental group were the first calf heifers of the 1/4 RS +1/4A+1/2H genotype; 2-d experimental group included the first calf heifers of the 1/8RS+1/8A+3/4H genotype. The reproductive ability of cows was taken into account by the fertilization of heifers and cows after the first insemination, insemination index, service period duration. It was realized by counting the days from calving to fruitful insemination, reproductive ability coefficient (RAC) that is the ratio of calendar year duration (365 days) to calving interval duration. The udder functional features were studied by the conventional methods. In the process of improving the Red Steppe breed using Angler and Holstein service bulls, crossbred animals were obtained, which are characterized by higher performance indicators compared with the original parent breed. The use of Holstein cattle in a herd of anglerized Red Steppe cows contributes to an increase in the functional properties of cow udders, an increase in the insemination index, the duration of service period and calving interval and a decrease in the RAC from 0.97 to 0.89-0.92. The economically useful features of the improved herds of Red Steppe cattle of different genotypes were comprehensive assessed for the first time in the conditions of the flat terrain zone of the Republic of Dagestan, as well as the genotype influence on udder morphofunctional properties of and reproductive ability of cows with different genotypes was shown. | Оценивали влияние генотипа на морфофункциональные свойства вымени и воспроизводительную способность коров разных генотипов. Исследования проведены в 2017-2022 гг. в АО "Кизлярагрокомплекс" Республики Дагестан на массиве дочерей быков англерских и голштинских производителей. Были сформированы три группы подопытных животных, различающихся по генотипу, по 15 голов в каждой. В контрольную группу входили первотелки, полученные от скрещивания коров красной степной породы с быками – производителями англерской породы; 1-ю опытную группу формировали из числа первотелок генотипа 1/4КС+1/4А+1/2Г; во 2-ю опытную группу входили первотелки генотипа 1/8КС+1/8А+3/4Г. Воспроизводительную способность коров учитывали по оплодотворяемости телок и коров после первого осеменения, индексу осеменения, продолжительности сервис-периода – путем подсчета дней от отела до плодотворного осеменения, коэффициенту воспроизводительной способности (КВС) – отношением продолжительности календарного года (365 дн.) к продолжительности межотельного периода. Изучение функциональных свойств вымени проводилось по общепринятым методикам. В процессе совершенствования красной степной породы с использованием англерских и голштинских производителей получены помесные животные, которые отличаются более высокими показателями продуктивности по сравнению с исходной материнской породой. Использование голштинского скота в стаде англеризированных коров красной степной породы способствует повышению функциональных свойств вымени коров, увеличению показателей индекса осеменения, продолжительности сервис-периода, межотельного периода и снижению коэффициента воспроизводительной способности с 0,97 до 0,89-0,92. Впервые в условиях равнинной зоны Республики Дагестан проведена комплексная оценка хозяйственно-полезных признаков улучшенных стад красного степного скота разных генотипов, показано влияние генотипа на морфофункциональные свойства вымени и воспроизводительную способность коров разных генотипов.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2023

Shigimaga, V.A. | Fajzullin, R.A. | Osokina, A.S.

There is given the substantiation of the main parameters of an unmanned automated herd monitoring system on a pasture by automating the measurement of current physiological indicators of animals to improve the efficiency and rate of supervision over them in free grazing conditions. The studies were based on the theory of radio communication about the propagation of radio waves, and also there was used a graphoanalytic method for calculating the parameters of component elements as parts of an unmanned system for automated monitoring of animals on pasture. The DJI Phantom 4 Advanced quadcopter was used to measure the flight time of an unmanned aerial vehicle (UAV) over the real pasture. An experimental field with an area of 200 hectares, located in the Kharkov region, was used as a pasture. The research was carried out in summer of 2021. According to the results of well-known studies of the processes, methods, and facilities of monitoring the physiological state of animals on pasture, it has been established that the advanced facilities including air-launch vehicles should be used for remote monitoring. Among them are helicopter-type UAVs, as well as elements of the radio telemetry system (RTM), individual tags and sensors of the physiological parameters of the animal. At the same time, an unmanned automated monitoring system in combination with RTM elements is able to provide the transmission of physiological data from any sensors located on the animal's body or inside it. The data are transmitted to the main reading sites for processing on a PC and giving recommendations to specialists (veterinarians, zootechnicians, etc.). The power of the relay equipment on board the UAV is calculated to be at least 60 mW and the communication range with the animal transponder of not more than 800 m. The main parameters of the UAV flight over a pasture of 200 ha have been experimentally established: the height is 20 m, the speed is 8.7 km/h, the time is 27.5 min, and the work load is 350 g. | Приведено обоснование основных параметров беспилотной системы автоматизированного мониторинга стада на пастбище за счет автоматизации измерения текущих физиологических показателей животных для повышения эффективности и оперативности надзора за ними в условиях свободного выпаса. Исследования основывались на теории радиосвязи о распространении радиоволн, а также применен графоаналитический метод для расчета параметров элементов в составе беспилотной системы автоматизированного мониторинга животных на пастбище. Для измерения времени полета беспилотного летательного аппарата (БПЛА) над реальным пастбищем был применен квадрокоптер типа DJI Phantom 4 Advanced. В качестве пастбища использовали опытное поле площадью 200 га, находящееся в Харьковской области. Исследования выполнены летом 2021 г. На основе известных исследований процессов, способов и технических средств мониторинга физиологического состояния животных на пастбище установлено, что для дистанционного мониторинга целесообразно применять новейшие технические средства, включая аппараты воздушного базирования. Среди них БПЛА вертолетного типа, а также элементы системы радиотелеметрии (РТМ), индивидуальные бирки и датчики физиологических параметров животного. Беспилотная система автоматизированного мониторинга в сочетании с элементами РТМ сможет обеспечить передачу физиологических данных с любых датчиков, находящихся на теле животного или внутри него. Данные передаются на основной пункт приема информации с целью обработки на компьютере и выдачи рекомендаций специалистам (ветеринарам, зоотехникам и т.п.). Рассчитаны мощность аппаратуры ретрансляции на борту БПЛА (не менее 60 мВт) и дальность связи с транспондером животного (не более 0,8 км). Экспериментально установлены основные параметры полета БПЛА над пастбищем площадью 200 га: высота 20 м, скорость 8,7 км/ч, время 27,5 мин, полезная нагрузка 350 г.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2023

Anon.

University of the Philippines at Los Baños - Philippines

2023

Savchenkova, I.P. | Nadtochej, G.A.

Mammalian mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) produce extracellular vesicles (EVs) associated with the plasma cell membrane, which may contain growth factors, chemokines, cytokines, and microRNAs. The purpose of the work is to obtain EVs from conditioned media (CM) of MSCs of bone marrow (BM), umbilical cord blood (UCB) and adipose tissue (AT) of animals; both of farm (cattle, sheep, horses) and of small domestic (dogs, cats) ones. There were used MSCs that were previously obtained from the bovine and ovine BM, equine UCB, ovine, bovine, equine, canine and feline AT. MSCs were thawed and inoculated into 25 cm2 growth area flasks, after 48 h they were reinoculated into 175 cm2 growth area flasks in a ratio 1:7 and incubated for 10 days until the cells reached a complete monolayer. Then the CM from all MSC samples was poured into 50 mL sterile centrifuge tubes and EVs were isolated. For this purpose, there was used the differential centrifugation method followed by ultracentrifugation. In all samples, electron microscopy revealed round or irregularly shaped microparticles of different sizes. The diameters of individual EVs did not differ statistically between different animal species (p = 0.1). When comparing the number of particles isolated from 50 mL of CM from MSCs of different animal species, no statistically significant differences were detected (p = 0.1). So, on one mesh of MSC (BM) and MSC (AT), 3±0.1 and 6±0.07 particles with a size of 50-100 nm, 7±0.02 and 4±0.03 particles of 100-150 nm, as well as 3±0.4 and 2±0.06 particles larger than 150 nm were detected. EVs from CM of canine MSC (AT) were the most homogeneous in both shape (round) and size, and the main part was found in the range of 50-100 nm (12±0.02 particles). In samples isolated from the CM of ovine, bovine, equine MSC (AT) and equine MSC (UCB), the number of particles with a diameter of 50-100 nm was 7±0.2; 7±0.01; 5±0.7 and 8±0.02. | Мезенхимные стволовые/стромальные клетки (МСК) млекопитающих продуцируют внеклеточные везикулы (ВВ), связанные с плазматической клеточной мембраной, в которых могут присутствовать факторы роста, хемокины, цитокины, микроРНК. Цель работы - получить внеклеточные везикулы из кондиционированных сред мезенхимных стволовых/стромальных клеток костного мозга, пуповинной крови и жировой ткани с.-х. (крупный рогатый скот, овцы, лошади) и мелких домашних (собаки, кошки) животных. В работе использовали МСК, полученные ранее из костного мозга (КМ) крупного рогатого скота (КРС) и овец, пуповинной крови (ПК) лошадей, жировой ткани (ЖТ) овец, КРС, лошадей, собак и кошек. МСК размораживали и засевали в матрасы с площадью роста 25 см2, через 48 ч пересевали в матрасы с площадью роста 175 см2 в соотношении 1:7 и инкубировали в течение 10 сут до достижения клеткам полного монослоя. Затем КС из всех образцов МСК сливали в стерильные центрифужные пробирки объемом 50 мл и выделяли ВВ. Для этого использовали метод дифференциального центрифугирования (ДЦ) с последующим ультрацентрифугированием (УЦ). Во всех образцах с помощью электронной микроскопии были выявлены округлые или не совсем правильной формы микрочастицы разного размера. Диаметры отдельных ВВ у разных видов животных статистически не различались (p = 0,1). При сравнении числа частиц, выделенных из 50 мл КС МСК разных видов животных, статистически значимых различий не выявили (р = 0,1). Так, на одной сетке МСК (КМ) и МСК (ЖТ) КРС обнаружили соответственно 3±0,1 и 6±0,07 частицы размером 50-100 нм, 7±0,02 и 4±0,03 частицы 100-150 нм, а также 3±0,4 и 2±0,06 частицы размером более 150 нм. ВВ из КС МСК (ЖТ) собак были наиболее гомогенными и по форме (округлые), и по размеру (основная часть имела размер 50-100 нм; 12±0,02 частиц). В образцах, выделенных из КС МСК (ЖТ) овец, кошек, лошадей и ПК лошадей, число частиц с диаметром 50-100 нм составляло 7±0,2; 7±0,01; 5±0,7 и 8±0,02.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2023

Furaeva, N.S. | Zvereva, E.A. | Vorob'eva, S.S. | Finogeev, V.P. | Podgornova, N.G.

There is presented an analysis of the influence of such genetic factors as linear belonging and paternal bull on the milk producing ability and reproductive qualities of Holstein cows kept in one of the breeding farms in the Yaroslavl region. The maximum milk yields with high fat content in milk are obtained from cows of their own reproduction. Among imported livestock, the highest yields, milk fat and protein contents are in animals imported from Hungary and Germany. Most of the analyzed cow population belongs to the lines Vis Ideal (1922 heads or 56.0%) and Reflection Sovering (1470 heads or 42.8%). Cows of the Vis Ideal line had high milk yields according to the first lactation, short service period, early age at the first fertile insemination and a high live weight. Montvik Chieftain cows are characterized by an increased fat content in milk, as well as a higher milk yield during the highest lactation. The cows of the related group Rosafe Citation were largest at first calving. In animals of the Reflection Sovering line all studied indicators are at the average level for the herd. First-calf heifers from Canadian and American fathers are equal in milk yield (+13 and +28 kg to the average for the herd, respectively). The milk fat percentage is higher in Canadian animals (+0.02% and +2.8 kg of milk fat), and the milk protein content is higher in American cows (+0.02% and +3.2 kg of milk protein). As for the highest lactation the combination of maximum milk yield, fat and protein contents in milk is typical for cows whose fathers are of German origin (+167 kg of milk, +0.03% and 9.5 kg of milk fat, +5.6 kg of milk protein compared to herdmates). The herd leader in milk yield of daughters for 305 days of the first lactation (10916 kg) is bull Stantons PP 12652442 of the Vis Ideal line. This bull took 18th place according to the results of the BLUP-assessment of breeding value among 11,922 living and retired Holstein servicing bulls in the Russian Federation in 2023; these data are provided by the All-Russian Research Institute of Animal Breeding. | Представлен анализ влияния таких генетических факторов, как линейная принадлежность и бык-отец, на молочную продуктивность и воспроизводительные качества коров голштинской породы, содержащихся в племзаводе ООО "Красный маяк" Ярославской области. Максимальный удой при высоком содержании жира в молоке получены от коров собственной репродукции. Среди импортного скота наибольшие удои, жирно- и белковомолочность – у животных, завезённых из Венгрии и Германии. Большая часть анализируемого поголовья коров относится к линиям Уес Идеал (1922 гол., или 56,0%) и Рефлекшн Соверинг (1470 гол., или 42,8%). Коровы линии Уес Идеал отличаются высокими удоями молока по итогам первой лактации, коротким сервис-периодом, ранним возрастом при первом плодотворном осеменении при высокой живой массе. Для коров линии Монтвик Чифтейн характерно повышенное содержание жира в молоке, а также более высокий удой за наивысшую лактацию. Коровы родственной группы Розейф Ситейшн были самыми крупными при первом отёле. У животных линии Рефлекшн Соверинг все исследуемые показатели находятся на уровне среднего по стаду. Первотёлки от отцов канадского и американского происхождения выровнены по удою (+13 и +28 кг к среднему по стаду соответственно). Жирномолочность выше у животных канадского происхождения (+0,02% и +2,8 кг молочного жира), а белковомолочность – у коров американского происхождения (+0,02% и +3,2 кг молочного белка). По наивысшей лактации сочетание максимального удоя, содержания жира и белка в молоке характерно для коров, отцы которых немецкого происхождения (+167 кг молока, +0,03% и 9,5 кг молочного жира, +5,6 кг молочного белка к сверстницам стада). Лидером стада по удою дочерей за 305 дней первой лактации (10916 кг) является бык Стентонс РР 12652442 линии Уес Идеал. По результатам BLUP-оценки племенной ценности 11922 живых и выбывших быков-производителей голштинской породы в 2023 году в РФ этот бык занял 18 место (данные Всероссийского НИИ племенного дела).

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2023

Ximena Pérez-Otáñez | Valeria Paucar-Quishpe | José Buitrón | Lenin Ron-Garrido | Jorge Grijalva | Cecilia Pérez-Escalante | Susana Arciniegas-Ortega | Darío Cepeda-Bastidas | Sandra Enríquez | Claude Saegerman | Sophie O. Vanwambeke | Richar Rodríguez-Hidalgo

En Ecuador, Rhipicephalus microplus es la principal garrapata que afecta al ganado bovino, cuyo control exige conocer su comportamiento. El objetivo de este estudio fue evaluar el grado de infestación de R. microplus, examinando la ubicación anatómica de las garrapatas y su posible asociación con factores intrínsecos de los animales como son el estado general de salud, condición corporal, color del pelaje. Se llevaron a cabo cuatro muestreos cada tres meses en un total de 15 fincas en el Noroccidente de Pichincha (localidad1) y 15 fincas en el Valle de los Quijos (localidad2). Las garrapatas mayores a 0.5cm fueron contadas en 5 animales escogidos al azar. Como resultados, en cuatro muestreos realizados en las dos localidades, se encontró un promedio de 99.39 ± SD156.28(0–1426) garrapatas por animal, y un promedio de 108.8±SD179.43(0–1426) y 88.2 ± SD122.80(0–824) para la localidad 1 y 2, respectivamente. Solo la variable "salud aparente de piel y pelaje" mostró una asociación estadística positiva, con un valor P<0.05 y odds ratios de 5.13(IC 95%: 2.04-13.65) y 25.83(IC 95%: 7.63-109.39) en las categorías "regular" y "malo" respecto del estado considerado como bueno. Además, la categoría animal denominado "viejo" en la variable Edad tuvo un valor P=0.05 y un odds ratio de 2.88(IC 95%: 1.04-8.80). Anatómicamente se encontraron más garrapatas en la zona anatómica correspondiente a muslos, ubre posterior, pierna y corvejón, con un promedio de 38.52±SD70.17(0–448) garrapatas. En conclusión, la infestación con garrapatas representa un problema grave que afecta a las ganaderías de regiones tropicales del país, este estudio ayuda a direccionar de mejor manera las formas y prácticas de control sobre los bovinos.

Show more [+]

Less [-]

Directory of Open Access Journals - Sweden

2023

Islas-Moreno, Asael | Rodríguez-Ortega, Alejandro | Aguirre-Álvarez, Gabriel

Resumen El éxito empresarial es tan difícil de alcanzar como de definir. En la agricultura, la ganadería y la agroindustria ya se han estudiado casos de éxito, pero aún se carece de respuestas precisas a la pregunta ¿qué es una empresa exitosa en el ámbito de dichos sectores? El estudio acudió con 27 expertos de tres perfiles distintos (académico-científico, empresario y proveedor o cliente) y vinculados a un total de nueve actividades (tres agrícolas, tres pecuarias y tres agroindustriales) para que de manera abierta respondieran la pregunta. La convergencia y divergencia entre las respuestas de los expertos fueron examinadas mediante técnicas de análisis de contenido escrito, específicamente por medio de nubes de palabras. De acuerdo con los hallazgos del estudio, los expertos definen el éxito con base en los medios y no en los fines, como lo pudieran ser las utilidades y los ingresos económicos o la satisfacción personal. En cambio, actuaciones ligadas a los conceptos de intensificación y eficiencia, integración vertical y diferenciación, son los medios con los cuales los expertos definen el éxito empresarial en los sectores agrícola, pecuario y agroindustrial, respectivamente. Asimismo, el contar con una administración sólida es un rasgo vinculado al éxito en los tres sectores. | Abstract Entrepreneurial success is as difficult to achieve as it is to define. In agriculture, livestock, and agro-industry, success stories have already been studied, but there are still no precise answers to the question: what is a successful enterprise in the field of these sectors? The study consulted 27 experts of three different profiles (academic scientist, entrepreneur, and supplier or client), and linked to a total of nine activities (three agricultural, three livestock and three agro-industrial) so that they freely answered the question. The convergence and divergence between the answers of the experts were examined using written content analysis techniques, specifically through word clouds. According to the study&#8217;s findings, experts define success based on the means and not on the ends, such as economic profits and income or personal satisfaction. Instead, actions linked to the concepts of intensification and efficiency, vertical integration and differentiation, are the means by which experts define business success in the agricultural, livestock and agro-industrial sectors, respectively. Likewise, having a solid administration is a trait linked to success in all three sectors.

Show more [+]

Less [-]

Scientific Electronic Library Online Chile - Chile

2023

Krutikova, A.A. | Peglivanyan, G.K.

The research object is wild reindeer and domestic reindeer kept on farms of the Taimyr Peninsula and Evenkia. The material is DNA isolated by the classical phenolic method from the blood of domestic reindeer of two breeds - Nenets (n=20) and Evenk (n=20), as well as from tissue samples of wild reindeer (n=20). A search and selection of potential variants of genetic polymorphism in the BMP2 gene responsible for the formation of bone tissue and skeletal muscles, which can serve as markers and be used in the practice of breeding reindeer to increase meat productivity, was carried out. For the first time, the nucleotide sequence of significant regions of the BMP2 gene in reindeer was determined by Sanger sequencing. The identified polymorphic loci in the BMPR2 gene had differences in the frequency of occurrence of mutant and wild-type alleles in the studied samples. This indicates the effect of selection factors on the region of the BMP2 gene. The revealed genetic variability of the studied region in reindeer breeds contrasting in performance is a preliminary confirmation of the influence of genetic polymorphism in the BMP2 gene on the variability of phenotypes in key indicators affecting the formation of reindeer meat production. It is suggested that some of the identified variants of genetic polymorphism in the studied region of the BMP2 gene may turn out to be casual mutations affecting the formation of quantitative traits in domestic reindeer. | Объект исследований - дикие северные олени и домашние, содержащиеся в хозяйствах полуострова Таймыр и Эвенкии. Материал - ДНК, выделенная классическим фенольным методом из крови домашнего северного оленя двух пород - ненецкой (n=20) и эвенкийской (n=20), а также из образцов тканей дикого северного оленя (n=20). Провели поиск и отбор потенциальных вариантов генетического полиморфизма в гене BMP2, отвечающего за формирование костной ткани и скелетной мускулатуры, которые могут служить маркерами и использоваться в практике селекции северных оленей на увеличение мясной продуктивности. Методом секвенирования по Сэнгеру впервые была определена нуклеотидная последовательность значимых участков гена BMP2 северных оленей. Выявленные полиморфные локусы в гене BMP2 имели различия по частоте встречаемости аллелей мутантного и дикого типов в изученных выборках. Это говорит о действии факторов отбора на регион гена BMP2. Выявленная генетическая изменчивость исследуемого региона у контрастных по продуктивности пород северного оленя является предварительным подтверждением влияния генетического полиморфизма в гене BMP2 на вариабельность фенотипов по ключевым показателям, влияющим на формирование мясной продуктивности северных оленей. Сделано предположение, что некоторые из выявленных вариантов генетического полиморфизма в изученном регионе гена BMP2 могут оказаться казуальными мутациями, влияющими на формирование количественных признаков у домашних северных оленей.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2023

Donnik, I.M. | Makutina, V.A. | Krivonogova, A.S. | Isaeva, A.G. | Dejkin, A.V. | Koshchaev, A.G.

The results of research into genetic methods of breeding agricultural animals with improved characteristics are presented. A significant number of animals with an edited genome have been obtained. Methods of genome modification in cattle are constantly improving. The approaches of gene editing of bovine embryos, delivery of edited constructs and improvement of embryo survival after introduction of editing systems have been studied. The studies were performed on cattle embryos. BLG and SD209 gene editing systems were developed and approbated. Delivery variants of the editing system into cattle cells were studied: microinjection into the zygote of plasmid DNA encoded sequence with CRISPR/Cas9 c sgRNA, the method of viral vectors (adeno-associated AAV viruses, serotypes AAV1, AAV2, AAV6, AAV9, AAVDJ), co-injection of plasmid DNA and sperm into the oocyte at the MII stage, and microinjection of Cas9 and guide RNAs. Different techniques for performing micro-injections have been investigated and refined, and different variants of preparation of Cas9 RNA and guide RNA mixtures have been tested. Based on these results, the protocol for performing microinjection of the editing system was optimized and a model experiment was performed on 160 oocytes, with 80 cells per each construct. The findings have shown that the efficiency of editing has generally increased. When injected with guide RNA against BLG gene and spCas9 mRNA, 84% of the surviving cells initiated cleavage, blastulation was 20%, and BLG knockout was 69.2%. When injected against the CD209 gene and spCas9 mRNA, 44.4% of the surviving embryos started cleaving, blastulation was 16.7%, with CD209 knockout at 44.4%. The novelty of the work lies in obtaining data on the development of editing systems with specific target genes, in improving the delivery system and cultivation of bovine embryos. | Представлены результаты исследования генетических методов создания с.-х. животных с улучшенными характеристиками. Получено значительное количество животных с отредактированным геномом. Методы модификации генома у крупного рогатого скота (КРС) постоянно совершенствуются. Изучены подходы генного редактирования эмбрионов крупного рогатого скота, доставки отредактированных конструкций, повышения выживаемости эмбрионов после внесения систем редактирования. Исследования проводили на эмбрионах КРС. Разработаны и апробированы системы редактирования генов BLG и СД209. Изучены варианты доставки системы редактирования в клетки КРС: микроинъекция в зиготу плазмидной ДНК с закодированной последовательностью с CRISPR/Cas9 c sgRNA, способ вирусных векторов (аденоассоциированные вирусы AAV, серотипы AAV1, AAV2, AAV6, AAV9, AAVDJ), совместное введение плазмидной ДНК и сперматозоида в ооцит на стадии MII, а также микроинъекции РНК Cas9 и гидовых РНК. Исследованы и усовершенствованы различные методики выполнения микроинъекций и опробованы различные варианты приготовления смеси РНК Cas9 и гидовых РНК. На основе полученных результатов оптимизирован протокол выполнения микроинъекции системы редактирования и проведен модельный эксперимент на 160 ооцитах, по 80 клеток на каждую конструкцию. В результате установили, что эффективность редактирования в целом повысилась. При инъекции гидовой РНК против гена BLG и мРНК spCas9 дробление начали 84% выживших клеток, бластуляция составила 20%, оказались с нокаутом по BLG – 69,2%. При инъекции против гена CD209 и мРНК spCas9 дробление начали 44,4% выживших эмбрионов, бластуляция составила 16,7%, с нокаутом по CD209 – 44,4%. Новизна работы заключается в получении данных о разработке систем редактирования с определенными генами-мишенями, в усовершенствовании системы доставки и культивирования эмбрионов КРС.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation