AGRIS - 

2018

Brigadirov, Yu.N. | Kotsarev, V.N. | Shaposhnikov, I.T. | Mikhajlov, E.V. | Chernitskij, A.E. | Boldyrev, I.A., All-Russia Research and Development Veterinary Inst. of Pathology, Pharmacology and Therapy, Voronezh

The aim was to determine oxidative-antioxidant status, nitric oxide content and cytokine profile in sows with latent endometritis (LE). The trials were carried out in 2015 on a pig-breeding complex of the Voronezh region on 25 animals of Large White/Landrace cross selected on the 105th – 107th day of gestation. These animals were retrospectively divided into 3 groups according to the course of postpartum period and presence of inflammatory process in reproductive organs during estrus. The diagnosis of postpartum endometritis and metritis-mastitis-agalactia was made by common methods, and LE – according to the results of studying uterine cervical mucus obtained during the heat for the content of gamma-glutamiltransferase enzyme in it. Group I (n=7) contained clinically healthy sows, group II (n=9) – sows with normal course of postpartum period and LE, group III (n=9) – animals with postpartum complications and LE. Blood indices in sows were determined at the beginning of the trial and at the renewal of sex cyclicity. Sows with LE comparing with clinically healthy animals demonstrated higher concentrations of malonic dialdehide by 6.7 – 28.3%, average weight molecules (AWM) at wave length (WL) of 238 nm – by 2.9 – 10.3%, at WL 254 nm – by 4.0 – 8.0%, index of endogenous intoxication (IEI) – by 4.9 – 20.0%, NO – by 4.6-36.7%, under lower activity of glutathione peroxidase (GPO) - by 4.9 – 23.9%, under a lower content of vitamins A and E – by 20.5 – 25.0% and 5.7 – 24.3% during pregnancy. Concentration of malonic dialdehyde during estrus was higher by 4.5–18.0%, AWM at WL 238 nm– higher by 6.1 – 14.3%, at WL 254 nm – by 3.6 – 14.3%, IEI – by 11.9 – 17.7%, at a lower GPO activity – by 4.6 – 12.8% and decreased content of vitamins A and E – by 12.6 – 28.4% and 10.9 – 23.7%, respectively. NO concentration was higher by 10. 3 – 48.6% and indices of interleukin-10 – higher by 46.3 – 93.1%. The stated data can be used as tests for prognosis of the risk of development and diagnosis of LE in sows. | Цель – установить оксидантно-антиоксидантный статус, содержание оксида азота (ОА) и цитокинового профиля у свиноматок (СМ) при скрыто протекающем эндометрите (СЭ). Опыты проводили в 2015 г. на базе свиноводческого комплекса Воронежской обл. на 25 помесных СМ пород крупная белая и ландрас, отобранных на 105–107-й день беременности. Ретроспективно, в зависимости от характера течения послеродового периода и наличия воспалительного процесса в репродуктивных органах во время течки их разделили на 3 группы. Послеродовой эндометрит и метрит-мастит-агалактию диагностировали общепринятыми методами, а СЭ – по результатам исследования цервикально-маточной слизи, полученной в стадию возбуждения полового цикла, на содержание фермента гаммаглутамилтрансферазы. В 1-ю гр. (n=7) входили клинически здоровые СМ; во 2-ю (n=9) – матки с нормальным течением послеродового периода и со СЭ; в 3-ю (n=9) – животные с послеродовыми осложнениями и со СЭ. Кровь у СМ исследовали в начале опыта и при возобновлении половой цикличности. У СМ со СЭ по сравнению с клинически здоровыми животными во время беременности концентрация малонового диальдегида в крови была выше на 6,7–28,3%, молекул средней массы (МСМ) при длине волны (ДВ) 238 нм – на 2,9–10,3%, при ДВ 254 нм – на 4,0–8,0%, индекс эндогенной интоксикации (ИЭИ) – на 4,9–20,0%, ОА – на 4,6–36,7% при более низкой активности глутатионпероксидазы (ГПО) – на 4,9–23,9%, меньшем содержании витаминов А и Е – на 20,5–25,0 и 5,7–24,3%. Во время течки концентрация малонового диальдегида была больше на 4,5–18,0%, МСМ при ДВ 238 нм – на 6,1–14,3%, при ДВ 254 нм– на 3,6–14,3%, ИЭИ – на 11,9–17,7%, ОА – на 10,3–48,6%, интерлейкина-10 – на 46,3–93,1%, при этом активность ГПО была меньше на 4,6–12,8%, а содержание витаминов А и Е – ниже, соответственно, на 12,6–28,4 и 10,9–23,7%. Установленные данные могут быть использованы в качестве тестов прогнозирования риска развития и диагностики СЭ у СМ.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Konovalova, E.N. | Kostyunina, O.V., The L.K. Ehrnst All-Russia Research and Development Inst. of Animal Husbandry, Moscow Region

In the meat cattle populations there are often genetic defects that can cause serious economic damage to the beef cattle breeding. One of them, occurring in the Aberdeen Angus breed, is developmental duplication (polymelia, DD). The aim of the work was to develop a method of DNA diagnostics for the detection of mutant allele causing of polymelia, which helped to carry out an analysis of spreading animals- carrying this pathology among the Russian populations of Aberdeen Angus cattle. Material of the investigation were DNA samples from the animals (n=1342) from 10 Aberdeen Angus cattle populations from different regions of the Russian Federation. DNA was extracted from the biomaterial samples of animals (skin, sperm and blood) by using the conventional methods. There has been developed a test system of diagnostics of DD genetic defect based on PCR-RFLP analysis. The screening of n cattle populations has revealed 0.9-12.8% animals carrying the mutant allele of the NHLRC2 gene. Review of the American Angus Association database has shown that in 2017-2018 the frequency of animals-DD-carriers is more 20%. Due to the high occurrence of mutant allele of the NHLRC2 gene, which causes the manifestation of clinical cases of developmental duplication, both in Russian and foreign populations of Aberdeen-Angus cattle, there is a risk of spreading this pathology in Russia. Therefore, the identification of animal-carriers of the developmental duplication genetic defect for the purpose of prevention of its appearance and spread is pressing and timely, and the developed test system due its high specificity is suitable for solving this problem. | В популяциях крупного рогатого скота мясного направления продуктивности часто встречаются генетические дефекты, проявление которых может наносить серьезный экономический ущерб мясному скотоводству. Одним из таких дефектов, характерных для животных абердин-ангусской породы, является дупликация развития (полимелия, DD). Для выявления мутантного аллеля, обусловливающего проявление полимелии, был разработан способ ДНК-диагностики, посредством которого был проведен анализ распространения животных-носителей данной патологии среди российских популяций крупного рогатого скота абердин-ангусской породы. Материалом исследования были пробы ДНК животных (n=1342), принадлежащих 10 популяциям абердин-ангусов из различных субъектов Российской Федерации. ДНК выделяли из образцов биоматериала животных (кожа, сперма и кровь) при помощи стандартных методов. Была разработана тест-система диагностики генетического дефекта DD на основе ПЦР-ПДРФ анализа. Скрининг популяций крупного рогатого скота выявил 0,9-12,8% животных-носителей мутантного аллеля гена NHLRC2. Обзор базы данных Американской ассоциации абердин-ангусской породы показал, что за 2017-2018 гг. частота встречаемости животных-носителей DD составила более 20%. В связи с высокой частотой встречаемости мутантного аллеля гена NHLRC2, обусловливающего проявление клинических случаев дупликации развития, как в российских, так и в зарубежных популяциях крупного рогатого скота абердин-ангусской породы, существует риск распространения данной патологии на территории России. Поэтому выявление животных-носителей генетического дефекта дупликации развития с целью профилактики его возникновения и распространения является актуальным и своевременным, а разработанная тест-система вследствие своей высокой специфичности подходит для решения этой проблемы.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Konovalova, E.N. | Kostyunina, O.V. | Romanenkova, O.S., The L.K. Ehrnst All-Russia Research and Development Inst. of Animal Husbandry, Moscow Region

A molecular genetic test system based on the multiplex single-tube allele-specific PCR (STAS PCR) was developed to identify carriers of mutation responsible for the occurrence of multiple arthrogryposis in cattle. The spread of this mutation has been studied in the Russian beef cattle populations. DNA samples of calves, steers, heifers, cows and bulls from 5 populations (n=1205) of Aberdeen-Angus breed: PP1 (n=282), PP2 (n=101), PP3 (n=731), PP4; (n=60), PP5 (n=31) respectively, and one mixed population (hybrid of Kalmyk and Aberdeen-Angus breeds) – PP6: (n=37) were used in the study. The experiment was conducted in the farms of Leningrad (PP 1, 4), Kaluga (P5), Smolensk (P6), Bryansk (P3) and Voronezh (P2) regions. The primer design was developed using the Primer3Plus software. The method provided that from DNA-probes of mutation-free animals will be amplified the normal allele (357 b.p.) only, and from mutation carriers ones - the normal (357 b.p) and mutant (242 b.p) alleles simultaneously. The presence of 2 fragments on the electrophoregramm corresponding to the normal and mutant allele let us to identify carriers of mutation. Screening showed the presence of carriers of multiple arthrogryposis of PP2 cows with a frequency of 0.99% (101 heads) and in 2 PP bulls (PP 1 and 3, 282 heads) with frequencies of 1.06 and 0.94% respectively. The mutation was not detected among cows and young stock in PP 3-6. Carriage of multiple arthrogryposis is relatively rare in Russian populations of cattle, nevertheless the development of measures to prevent spread of this genetic anomaly remains relevant. | Разработана молекулярно-генетическая тест-система на основе метода мультиплексной однопробирочной аллель-специфичной ПЦР (STAS PCR) для выявления носителей мутации, ответственной за возникновение множественного артрогрипоза КРС (МА). Изучали распространение этой мутации в популяциях мясного скота России. Использовали пробы ДНК телят, бычков, телок, коров и быков 5 популяций (ПП) (n=1205) абердин-ангусской породы: ПП1 (n=282), ПП2 (n=101), ПП3 (n=731), ПП4; (n=60), ПП5 (n=31) и одной смешанной ПП (гибрид калмыцкой и абердин-ангусской пород) – ПП6: (n=37), принадлежащих хозяйствам Ленинградской (ПП1, 4), Калужской (ПП5), Смоленской (ПП6), Брянской (ПП3) и Воронежской (ПП2) обл. Дизайн праймеров был разработан с использованием программного обеспечения Primer3Plus и предусматривал у животных, свободных от мутации, амплификацию в ходе ПЦР только нормального аллеля длиной 357 п.н., а у носителей мутации - одновременную амплификацию нормального (357 п.н.) и мутантного (242 п.н.) аллелей. Носителей МА выявляли по наличию на электрофореграмме 2 фрагментов, соответствующих нормальному и мутантному аллелям. Скрининг показал наличие носителей МА в ПП2 коров с частотой 0,99% (101 гол.) и в 2 ПП быков (ПП 1 и 3, 282 гол.) с частотами 1,06 и 0,94% соответственно. Среди коров и молодняка ПП 3-6 мутации не выявляли. Несмотря на относительно низкую частоту встречаемости носительства МА в российских популяциях КРС, разработка мер по профилактике его распространения очень важна.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Upadyshev, M.T., All-Russia Selection and Technological Inst. of Horticulture and Plant Breeding, Moscow

The prevalence of viral diseases of fruit and small fruit crops in Russia varies from 32 to 80% depending on the crop. The main ways to solve the problem of sanitation of horticultural crops from viruses in Russia are the creation of breeding and nursery centers and the introduction of a modern system of planting material certification. Virus diagnosis is an important task in breeding and nursery centers. Diagnosis is carried out by testing on indicators, using serological and molecular methods, electron microscopy. The methods of ELISA and PCR are increasingly used now. Modern methods of virus diagnostics must meet the requirements of high sensitivity, specificity, reliability, suitability for mass testing of samples. Diagnostic methods need to be adapted to the biological characteristics of specific cultures and types of viruses. For successful testing, the optimal timing and type of samples, the distribution of viruses in the plant, the composition of the extractive buffer, preventing the destruction of viruses, are of great importance. The optimal period of diagnosis of viruses on fruit and small fruit crops by ELISA in open ground in Central Russia is the period from the second half of May to the end of June. The advantage of PCR is the possibility of effective diagnosis of the virus in the tissues in the rest of the plants. Improvement of the PCR method should be carried out in the direction of increasing its productivity, reducing the stages, simplifying and improving the efficiency of procedures for the release of nucleic acids from plant material. Currently, All-Russian Research Horticultural Institute for Breeding, Cultivation and Nursery is working on the sanitation and identification of plants, which are free from malicious viruses: for 2011-2017 16 thousand analysis were made and 3 thousand of virus-free plants were selected. Diagnosis of viruses on fruit and small fruit crops is one of the most important stages in the breeding and nursery centers. | Распространенность вирусных болезней в условиях России варьирует от 32 до 80% в зависимости от культуры. Основными путями решения проблемы оздоровления садовых культур от вирусов являются создание селекционно-питомниководческих центров и внедрение современной системы сертификации посадочного материала. Важная задача этих центров - диагностика вирусов. Диагностика проводится путем тестирования на индикаторах, серологическими, молекулярными методами, электронной микроскопией. Все более широкое применение находят методы иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР). Современные методы диагностики вирусов должны отвечать требованиям высокой чувствительности, специфичности, достоверности, пригодности для массового тестирования образцов. Методы диагностики необходимо адаптировать к биологическим особенностям конкретных культур и видам вирусов. Для успешного тестирования большое значение имеют оптимальные сроки отбора и вид образцов, распределение вирусов по растению, состав экстрагирующего буфера, предотвращающий разрушение вирусов. Оптимальным сроком диагностики вирусов на ягодных и плодовых культурах методом ИФА в условиях открытого грунта средней полосы России является период со второй половины мая до конца июня. Преимущество ПЦР - возможность эффективной диагностики вирусов в тканях, находящихся в состоянии покоя растений. Совершенствование метода ПЦР должно проводиться в направлении повышения его производительности, сокращения этапов, упрощения и повышения эффективности процедур выделения нуклеиновых кислот из растительного материала. Во Всероссийском селекционно-технологическом институте садоводства и питомниководства проводится работа по оздоровлению и выделению свободных от вредоносных вирусов растений: за 2011-2017 гг. выполнено 16 тыс. анализов на вирусы и отобрано 3 тыс. свободных от вирусов растений. Диагностика вирусов на плодовых и ягодных культурах является одним из самых важных этапов в работе селекционно-питомниководческих центров.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Stafford, V.V. | Drozdova, E.I., The Ya.R. Kovalenko All-Russia Research and Development Inst. of Experimental Veterinary, Moscow

The purpose of the work is to identify a possibility of differential diagnosis of porcine reproductive and respiratory syndrome and porcine circovirus infection type 2 by immunohistochemical examination of pathological material. The similarity of clinical manifestations and postmortem changes dictates the necessity of using specific methods for their differential diagnosis. To solve such a problem there was used a complex histological method including the detection of histological changes and antigens of pathogens in the sections of target organs. A pathological material to be studied was selected at the pig farms of Russia where outbreaks of diseases were recorded regularly. Direct and indirect variants of immunohistochemical analysis were used respectively to detect porcine circovirus type 2 and porcine reproductive and respiratory syndrome virus in tissues. The antigens of these pathogens in mononuclear cells of lungs and lymph nodes were localized. The time taken to conduct the test (including time for preparing sections) was 2 days. It has been concluded that to determine the status of a farm in terms of above diseases it is sufficiently to study a material obtained by technological slaughter of several heads of pigs. | Цель работы – определить возможность дифференциальной диагностики репродуктивного и респираторного синдрома свиней и цирковирусной инфекции свиней 2 типа с помощью иммуногистохимического исследования патологического материала. Сходство клинических проявлений и патоморфологических изменений диктует необходимость применения для их дифференциальной диагностики специфических методов. Для решения такой задачи был использован комплексный гистологический метод, включавший выявление патоморфологических изменений и антигенов возбудителей в гистосрезах органов-мишеней. Патматериал для исследования отбирали в свиноводческих хозяйствах России, в которых регулярно регистрировали вспышки заболеваний. Для обнаружения цирковируса свиней 2 типа и вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней в тканях применили соответственно прямой и непрямой варианты иммуногистохимического анализа. Установили локализацию антигенов этих возбудителей в мононуклеарных клетках легких и лимфатических узлов. Время, затраченное на проведение теста (с учетом изготовления гистосрезов), составило 2 дня. Сделан вывод, что для определения статуса хозяйства по указанным выше заболеваниям достаточно исследовать материал, полученный при технологическом убое от нескольких голов свиней.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Batrakov, A.Ya. | Yashin, A.V. | Videnin, V.N. | Donskaya, T.K., St. Petersburg State Academy of Veterinary Medicine (Russian Federation) | Korchagina, A.S.

Ready to use blue colored reagent Compomol M-Test and preparations Alvelsol and Mastomycin were tested for the diagnosis and treatment of mastitis in cows. The number of somatic cells in milk has been detected for 4 months, by mixing a solution of Compomol M-Test with milk of lactating cows. The therapeutic efficacy of Alvelsol injection solution and gel for intracisternal administration of Mastomycin was researched on Black-and White breed cows with subclinical mastitis. Cows were kept in one of the farms of the Leningrad region. The physiological parameters of the tested cows were evaluated by biochemical researches of blood serum. The number of somatic cells at the level of 712-912 thousand/million indicated the presence of subclinical mastitis through the use of the Compomol M-Test. Decrease in serum albumin (15.3-22.7 g/l), glucose (0.8-1.5 mmol/l), reserve alkalinity (35.4-42.5 vol/%) with increasing levels of urea and alkaline phosphatase correlated with these data. The therapeutic efficacy of the drug Alvesol in the treatment of subclinical mastitis was provided when it was administered intramuscularly at a dose of 10 ml per a head 3 times every 24 hours. Cows recovered in 76.6% of cases. Mastomycin has been turned to treat catarrhal mastitis. The drug was administered intracisternally at a dose of 10 ml/head 3 times every 24 hours. Recovery of cows in 70.0% of cases was provided. The development of new methods for the diagnosis and treatment of mastitis helps to increase the time for the productive use of dairy cows. | Провели апробацию готового реагента синего цвета - Компомол М-Тест для диагностики и препаратов Алвелсол и Мастомицин – для лечения мастита у коров. В течение 4 мес. методом смешивания раствора Компомол М-Тест с молоком лактирующих коров выявляли количество соматических клеток в молоке. Терапевтическую эффективность раствора для инъекций Алвелсол и геля для интрацистернального введения Мастомицин оценивали на больных субклиническим маститом коровах черно-пестрой породы, содержащихся в одном из хозяйств Ленинградской обл. Физиологические показатели тестируемых коров оценивали путем биохимического исследования сыворотки крови. Установлено, что частота выявления субклинического мастита с использованием Компомол М-Теста (уровень соматических клеток достигал 712-912 тыс/млн) коррелировала со снижением в сыворотке крови животных альбуминовых фракций белка (15,3-22,7 г/л), глюкозы (0,8-1,5 ммоль/л), показателей резервной щелочности (35,4-42,5 об/%) при повышении уровня мочевины и щелочной фосфатазы. Установлена терапевтическая эффективность препарата Алвесол при лечении субклинического мастита (введение его внутримышечно в дозе 10 мл/гол. 3-кратно каждые 24 ч обеспечивало выздоровление в 76,6% случаев), Мастомицин – при лечении катарального (введение интерцистернально в дозе 10 мл/гол. 3-кратно каждые 24 ч обеспечивало выздоровление в 70,0% случаев). Разработка новых методов диагностики и лечения мастита способствует повышению сроков продуктивного использования молочных коров.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation

2018

Romanenkova, O.S. | Volkova, V.V. | Kostyunina, O.V. | Zinov'eva, N.A., The L.K. Ehrnst All-Russia Research and Development Inst. of Animal Husbandry, Moscow Region

Holstein HH5 fertility haplotype is a recessive hereditary genetic defect, homozygous carriers of which die in the early stages of fetal development. This haplotype in the European and North American Holstein cattle population in 2013 was identified. It was traced by origin from the bull of Canadian selection - HOCANM264804 Thornlea Texal Supreme (born in 1957). In 2016, a corresponding mutation (deletion of 138 bp) in the gene of the mitochondrial transcription factor B1 (TFB1M) associated with the lethal genotype was identified. Using the data from the OMIA database a test system is proposed for identifying the mutant allele of the TFB1M gene associated with the haplotype fertility of Holstein cattle - HH5. For the simulation of the test system, a single-tube method of allele-specific polymerase chain reaction was selected. By dint of the developed test system, 1202 sires and 708 cows of Holstein and Black-and-White cattle bred in Russia were screened. The presence of 39 bulls and 10 cows - carriers of the mutant allele of the TFB1M gene was revealed which corresponds to the frequencies of 3.24% and 1.41%, respectively. The conducted analysis of the pedigrees showed that the identified carriers of the HH5 haplotype have different origins and belong to the W is Burke 1013415 and Reflection Sovering 198998. The developed test system possible to use in the diagnosis of farm animals for detecting the TFB1M gene polymorphism of cattle, associated with haplotype HH5 for the subsequent application of the obtained results in the breeding and selection of cattle. | Гаплотип фертильности голштинского скота HH5 представляет собой рецессивный наследственный генетический дефект, гомозиготные носители которого погибают на ранних стадиях эмбрионального развития. Данный гаплотип был идентифицирован в европейской и североамериканской популяции голштинского скота в 2013 г. Было прослежено его происхождение от быка канадской селекции CAN264804 Thornlea Texal Supreme (1957 г. рождения). В 2016 г. идентифицирована соответствующая мутация (делеция размером 138 п.о.) в гене митохондриального транскрипционного фактора В1 (TFB1M), ассоциированная с летальным генотипом. С использованием данных базы OMIA была предложена и апробирована тест-система для идентификации мутантного аллеля гена TFB1M, ассоциированного с гаплотипом фертильности голштинского скота НН5. Для моделирования тест-системы был выбран однопробирочный метод аллелеспецифической полимеразной цепной реакции. С помощью разработанной тест-системы был произведен скрининг 1202 быков-производителей и 708 коров голштинской и голштинизированных пород, разводимых в России, который показал наличие 39 быков и 10 коров носителей мутантного аллеля гена TBF1M, что соответствует частотам встречаемости 3,24% и 1,41% соответственно. Проведенный анализ родословных показал, что выявленные носители гаплотипа НН5 имеют различное происхождение и принадлежат к линиям Вис Бэк Айдиал 1013415 и Рефлекшн Соверинг 198998. Разработанная тест-система может использоваться в диагностике с.-х. животных для выявления полиморфизма гена TBF1M крупного рогатого скота, ассоциированного с гаплотипом HН5, с целью последующего применения полученных результатов в разведении и селекции крупного рогатого скота.

Show more [+]

Less [-]

Central Scientific Agricultural Library - Russian Federation