Metanogen

**Metanogen** adalah mikroorganisme yang menghasilkan metana sebagai produk sampingan metabolik dalam kondisi *anoxic*. Makhluk ini digolongkan sebagai arkea, suatu kelompok kehidupan yang cukup berbeda dari bakteri. Mereka umumnya hidup di lingkungan basah dan umumnya gas yang terjadi pada daerah rawa-rawa dan metana dari bersendawa pada hewan *ruminansia* dan perut kembung pada manusia. Pada sedimen laut *biomethanation* umumnya terbatas pada daerah yang kandungan sulfatnya sudah tidak ada lagi, yaitu di bawah lapisan atas. Jenis yang lain juga ditemukan di lingkungan seperti ventilasi hidrotermal air panas dan kapal selam serta pada bebatuan lapisan luar dari kerak bumi *(rock solid)*, beberapa kilometer di bawah permukaan air laut.

## Deskripsi fisik

Metanogen biasanya berbentuk *coccoid* (berbentuk bulat), basil (berbentuk batang), dan ada beberapa spesies yang berbentuk spirilum (spiral). Ada lebih dari 50 spesies yang dapat dikategorikan dalam kelompok metanogen yang tidak membentuk kelompok monofiletik, meskipun semua metanogen berada dalam group arkea.

Metanogen memiliki beberapa sifat khusus yang membedakannnya beberapa prokariota lainnya, yaitu:
# Anaerob
# Biasanya ditumbuhkan pada garam mineral dengan kondisi atmosfer
# Pada umumnya mesofilik, beberapa ekstremofilik (suhu sangat tinggi, sangat rendah, kondisi garam tinggi)

Beberapa jenis metanogen, disebut sebagai *hydrogenotrophic*, menggunakan karbon dioksida (CO2) sebagai sumber karbon dan hidrogen. Beberapa CO2 direaksikan dengan hidrogen untuk menghasilkan metana yang dapat menghasilkan gradien elektrokimia melintasi membran, digunakan untuk menghasilkan ATP *(adenosine triphosphate)* melalui proses kemiosmosis.

## Habitat
Metanogen memainkan peranan ekologis penting di lingkungan anaerobik yaitu berperan untuk menghilangkan kelebihan hidrogen dan produk fermentasi yang dihasilkan dari respirasi anserobik. Metanogen tumbuh dan berkembang ketika di lingkungan kandungan molekul yang berperan sebagai akseptor elektron selain CO2 habis, contohnya oksigen, nitrat, besi, dan sulfat. Metanogen yang terdapat di batuan basalt yang terdapat di dalam samudra memperoleh hidrogen melalui reaksi serpentinisasi dari olivin (Magnesium Iron Silicate), sumber hidrogen lain dapat berasal dari penguraian termal air dan radiolisis air.

Metanogen merupakan agen utama dari remineralisasi karbon organik yang terdapat di dalam sedimen akuatik dengan laju sedimentasi dan bahan organik yang tinggi. Di bawah tekanan kondisi dan temperatur, metana biogenik terakumulasi dalam deposit metana hidrat. Metanogen ditemukan di lingkungan ekstrem seperti pada es di Greenland dan tanah gurun yang panas dan kering. Mikroba pengoksidasi metana berkaitan erat dengan metanogen karena menggunakan metana sebagai substratnya yang berhubungan dengan reduksi sulfat dan nitrat. Mayoritas Metanogen digolongkan kedalam mikroba autotrof tetapi yang mengoksidasi CH3COO- digolongkan kedalam kemotrof.

## Perbandingan genomik dan ciri molekuler
Analisis perbandingan proteomik telah mengarah ke pengidentifikasian 31 protein yang khas dan spesifik dimiliki oleh Metanogen. Sebagian besar dari protein tersebut berhubungan dengan metanogenesis serta dapat berfungsi sebagai penanda molekuler untuk Metanogen. Kemudian, 10 protein yang ditemukan di semua metanogen dimiliki oleh Arcaheglobus sehingga menunjukkan kedua kelompok memiliki kekerabatan. Pada pohon filogenetik, Metanogen tidak monofiletik dan umumnya dibagi menjadi 3 clade. Hal tersebut menunjukkan adanya protein unik yang dimiliki oleh mayoritas Metanogen, hal ini disebabkan karena terdapat transfer gen lateral. Selain itu, terdapat protein yang berkaitan dengan sulfide trafficking yabg telah dikaitkan dengan Metanogen Archaea. Analisis proteomik yang lebih mendalam diperlukan agar dapat mengungkapkan jalur baru untuk metabolisme metanogenesis dan lebih membedakan secara spesifik genera dalam kelas Metanogen.

Melalui pendekatan sekuensing DNA atau RNA telah menjelaskan beberapa penanda genom khusus untuk beberapa kelompok metanogen. Salah satu temuan tersebut mengisolasi sembilan metanogen dari genus Methanoculleus dan menemukan bahwa setidaknya ada 2 gen sintase trehalosa yang ditemukan di kesembilan genom. Selama ini gen tersebut hanya diamati pada genus ini, oleh karena itu dapat digunakan sebagai penanda untuk mengidentifikasi archaea Methanoculleus. Seiring kemajuan teknik sekuensing dan database dihuni dengan data genom yang melimpah, sejumlah besar galur dan sifat dapat diidentifikasi, tetapi banyak genera yang belum dipelajari. Misalnya, metanogen halofilik merupakan mikroba yang berpotensi penting untuk siklus karbon di ekosistem lahan basah pesisir tetapi tampaknya masih belum banyak dipelajari. Satu publikasi baru-baru ini mengisolasi strain baru dari genus Methanohalophilus yang berada di air laut yang kaya sulfida. Menariknya, mereka telah mengisolasi beberapa bagian dari genom strain ini yang berbeda dari strain terisolasi lain dari genus ini (Methanohalophilus mahii, Methanohalophilus halophilus, Methanohalophilus portucalensis, Methanohalophilus euhalbius). Beberapa perbedaan termasuk genom yang sangat kekal, metabolisme sulfur dan glikogen dan resistensi virus. Penanda genom yang sesuai dengan lingkungan mikroba telah diamati pada banyak kasus lain. Salah satu studi tersebut menemukan bahwa archaea penghasil metana yang ditemukan di zona rekahan atau patahan hidrolik memiliki genom yang bervariasi seiring dengan kedalaman vertikal pada zona tersebut. Hal ini penting untuk diketahui bahwa penanda genom yang menunjuk pada faktor-faktor yang relevan dengan lingkungan sering kali tidak eksklusif. Penelitian dari *Methanogenic thermoplasmata* menunjukkan bahwa mikrorganisme ini selain ditemukan di saluran usus manusia dan hewan juga ditemukan di lingkungan metanogenik lain seperti tanah lahan basah, kelompok yang diisolasi di lahan basah cenderung memiliki lebih banyak gen yang mengkode enzim anti-oksidasi yang tidak ada pada kelompok yang sama yang diisolasi pada manusia dan saluran usus hewan. Masalah umum dalam mengidentifikasi dan menemukan spesies baru metanogen adalah terkadang perbedaan genom bisa sangat kecil, tetapi kelompok peneliti memutuskan bahwa mereka cukup berbeda untuk dipisahkan menjadi spesies individu. Suatu studi dengan mengambil sekelompok Methanocellales dan menjalankan studi genomik komparatif, menunjukkan bahwa ketiga strain tersebut awalnya dianggap identik, tetapi setelah dilakukan pendekatan rinci untuk isolasi genom menunjukkan adanya perbedaan antara genom identik yang sebelumnya dianggap sama. Perbedaan terlihat pada jumlah salinan gen dan ada juga keragaman metabolik yang terkait dengan informasi genom. Genomic signatures tidak hanya memungkinkan seseorang menandai metanogen unik dan gen yang relevan dengan kondisi lingkungan, hal tersebut juga mengarah pada pemahaman yang lebih baik tentang evolusi archaea. Beberapa metanogen harus secara aktif melakukan mitigasi terhadap lingkungan oksik. Gen fungsional yang terlibat dengan produksi antioksidan telah ditemukan dalam metanogen, dan beberapa kelompok tertentu cenderung memiliki pengayaan pada fitur genomik ini. Metanogen yang mengandung genom dengan sifat antioksidan yang diperkaya dapat memberikan bukti bahwa penambahan genom ini mungkin terjadi selama peristiwa oksigenasi. Dalam studi lain, tiga strain dari garis keturunan Thermoplasmatales yang diisolasi dari saluran pencernaan hewan mengungkapkan perbedaan evolusioner. Gen histon mirip eukariotik yang ada di sebagian besar genom metanogen tidak ada, menghindari bukti bahwa cabang leluhur hilang di dalam Thermoplasmatales dan garis keturunan terkait. Lebih lanjut, kelompok Methanomassiliicoccus memiliki genom yang telah kehilangan banyak gen yang mengkode untuk beberapa langkah pertama metanogenesis. Gen-gen ini telah digantikan oleh gen yang mengkode jalur metogenik baru yang dimetilasi. Jalur ini telah dilaporkan dalam beberapa jenis lingkungan, menunjuk ke evolusi spesifik non-lingkungan, dan mungkin menunjukkan penyimpangan leluhur.

## Metabolisme

### Produksi metana
Metanogen dapat menghasilkan metana dari substrat seperti H2 / CO2, asetat, format, metanol dan metilamina dalam proses yang disebut metanogenesis. Reaksi metanogenik dikatalisasi oleh kumpulan enzim dan koenzim yang unik. Sementara mekanisme reaksi dan energetika bervariasi antara satu reaksi dan lainnya, semua reaksi ini berkontribusi pada produksi energi positif bersih dengan menciptakan gradien konsentrasi ion yang digunakan untuk mendorong sintesis ATP. Reaksi keseluruhan untuk metanogenesis H2 / CO2 adalah:

CO2 + 4H2 -> CH4 + 2H2O (∆G˚’ = -134 kJ/mol CH4)

Organisme yang dipelajari dengan baik yang menghasilkan metana melalui metanogenesis H2 / CO2 termasuk *Methanosarcina barkeri*, *Methanobacterium thermoautotrophicum*, dan *Methanobacterium wolfei*. Organisme ini biasanya ditemukan di lingkungan anaerobik.

Pada tahap paling awal metanogenesis H2 / CO2, CO2 berikatan dengan methanofuran (MF) dan direduksi menjadi formil-MF. Proses reduksi endergonik ini (∆G˚ '= +16 kJ / mol) bergantung pada ketersediaan H2 dan dikatalisis oleh enzim formyl-MF dehydrogenase.

CO2 + H2 + MF -> HCO-MF + H2O

Konstituen formil dari formil-MF kemudian ditransfer ke koenzim tetrahidromethanopterin (H4MPT) dan dikatalisis oleh enzim terlarut yang dikenal sebagai formil transferase. Ini menghasilkan pembentukan formil-H4MPT.

HCO-MF + H4MPT -> HCO-H4MPT + MF

Formil-H4MPT kemudian direduksi menjadi metenil-H4MPT. Metenil-H4MPT kemudian mengalami hidrolisis satu langkah diikuti dengan reduksi dua langkah menjadi metil-H4MPT. Reduksi bolak-balik dua langkah dibantu oleh koenzim F420 yang akseptor hidrida teroksidasi secara spontan.

HCO-H4MPT + H+ -> CH-H4MPT+  +  H2O (Formyl-H4MPT reduction)

CH-H4MPT+  + F420H2  -> CH2=H4MPT + F420 + H+  (Methenyl-H4MPT hydrolysis)

CH2=H4MPT + H2  ->  CH3-H4MPT + H+ (H4MPT reduction)

Selanjutnya, gugus metil dari metil-M4MPT ditransfer ke koenzim M melalui reaksi yang dikatalisis metiltransferase.

CH3-H4MPT + HS CoM  ->  CH3 S CoM + H4MPT

Langkah terakhir metanogenik H2 / CO2 melibatkan reduktase metil-koenzim M dan dua koenzim: N-7 mercaptoheptanoylthreonine phosphate (HS-HTP) dan koenzim F430. HS-HTP menyumbangkan elektron ke metil-koenzim M memungkinkan pembentukan metana dan disulfida campuran dari HS-CoM. Disisi lain, F430 berfungsi sebagai kelompok prostetik untuk reduktase. H2 mendonasikan elektron ke disulfida campuran dari HS-CoM dan meregenerasi koenzim M.

CH3-S-CoM + HS-HTP  ->  CH4 + CoM-S-S-HTP (Formation of methane)

CoM-S-S-HTP + H2  ->  HS-CoM + HS-HTP (Regeneration of coenzyme M)

### Pengolahan air limbah
Metanogen banyak digunakan dalam digester anaerobik untuk mengolah air limbah serta polutan organik berair. Industri telah memilih metanogen karena kemampuannya untuk melakukan biometanasi selama dekomposisi air limbah sehingga menjadikan prosesnya berkelanjutan dan hemat biaya. Biodekomposisi dalam digester anaerobik melibatkan empat tahap yang dilakukan oleh mikroorganisme yang berbeda. Tahap pertama adalah hidrolisis bahan organik terpolimerisasi yang tidak larut oleh anaerob seperti Streptococcus dan Enterobacterium. Pada tahap kedua, asidogen memecah polutan organik terlarut dalam air limbah menjadi asam lemak. Pada tahap ketiga, asetogen mengubah asam lemak menjadi asetat. Pada tahap akhir, metanogen memetabolisme asetat menjadi gas metana. Metana produk sampingan meninggalkan lapisan air dan berfungsi sebagai sumber energi untuk menggerakkan pemrosesan air limbah di dalam digester, sehingga menghasilkan mekanisme mandiri.

Metanogen juga efektif menurunkan konsentrasi bahan organik dalam limpasan air limbah. Misalnya, air limbah pertanian, yang sangat kaya akan bahan organik, telah menjadi penyebab utama degradasi ekosistem perairan. Ketidakseimbangan kimiawi dapat menyebabkan konsekuensi yang parah seperti eutrofikasi. Melalui pencernaan anaerobik, pemurnian air limbah dapat mencegah perkembangan tak terduga dalam sistem air serta menjebak metanogenesis di dalam digester. Ini mengalokasikan biometana untuk produksi energi dan mencegah pelepasan gas rumah kaca yang kuat, metana, ke atmosfer. Komponen organik air limbah sangat bervariasi. Struktur kimiawi bahan organik memilih metanogen tertentu untuk melakukan pencernaan anaerobik. Contohnya adalah anggota genus Methanosaeta yang mendominasi pencernaan limbah pabrik kelapa sawit (POME) dan limbah brewery. Modernisasi sistem pengolahan air limbah untuk memasukkan keanekaragaman mikroorganisme yang lebih tinggi untuk mengurangi kandungan organik dalam pengolahan sedang dalam penelitian aktif di bidang teknik mikrobiologi dan kimia. Generasi baru saat ini dari Reaktor Anaerob Bertahap Multi-Fase dan sistem reaktor Aliran Lumpur Atas Aliran Lumpur dirancang untuk memiliki fitur-fitur inovatif untuk melawan masukan air limbah beban tinggi, kondisi suhu ekstrem, dan kemungkinan senyawa penghambat.

## Referensi