N-etilmaleimida

{{chembox
| Verifiedfields = changed
| Watchedfields = changed
| verifiedrevid = 412519205
| Name =*N*-Etilmaleimida
| Reference =
| ImageFile =N-Ethylmaleimide Structural Formula V.1.svg
| ImageSize =140px
| IUPACName =1-Etilpirrole-2,5-diona
| OtherNames =Etilmaleimida
|Section1={{Chembox Identifiers
| IUPHAR_ligand = 5335
| Abbreviations =NEM
| ChemSpiderID_Ref = 
| ChemSpiderID = 4209
| KEGG_Ref = 
| KEGG = C02441
| InChI = 1/C6H7NO2/c1-2-7-5(8)3-4-6(7)9/h3-4H,2H2,1H3
| InChIKey = HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYAE
| ChEMBL_Ref = 
| ChEMBL = 8211
| StdInChI_Ref = 
| StdInChI = 1S/C6H7NO2/c1-2-7-5(8)3-4-6(7)9/h3-4H,2H2,1H3
| StdInChIKey_Ref = 
| StdInChIKey = HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N
| CASNo_Ref = 
| CASNo =128-53-0
| PubChem =4362
| DrugBank_Ref = 
| DrugBank = DB02967
| UNII_Ref = 
| UNII = O3C74ACM9V
| ChEBI_Ref = }
| ChEBI = 44485
| SMILES = O=C1\C=C/C(=O)N1CC
}}
|Section2=
|Section3=
}}
A '''*N*-etilmaleimida'* (NEM) é un composto orgánico que deriva do ácido maleico.  Contén un grupo funcional imida, pero a súa característica máis importante é que é un alqueno que reacciona con grupos tiol e utilízase comunmente para modificar residuos de cisteína en proteínas e péptidos.

## Química orgánica 
A NEM é un aceptor de Michael, o que significa que engade nucleófilos a grupos tiol.  Os tioéteres resultantes presentan un forte enlace C-S e a reacción é virtualmente irreversible. A reacción con grupos tiol ocorre no intervalo de pH de 6,5 a 7,5. A NEM pode reaccionar con aminas ou sufrir hidrólise a pH máis alcalino. A NEM foi amplamente utilizada para probar o papel funcional de grupos tiol en encimoloxía. A NEM é un inhibidor irreversible de todas as cisteína peptidases, e a alquilación ten lugar no grupo tiol do sitio activo (ver esquema). 
[miniatura|esquerda|500px|Mecanismo da [inhibición encimática|inhibición   irreversible dunha cisteína peptidase con NEM.]]

## Experimentación 
En experimentos demostrouse que a NEM bloquea a fusión das membranas das vesículas sinápticas coa membrana plasmática da neurona presináptica durante a neurotransmisión ao inactivar un factor natural presente nas neuronas, que se denominou factor sensible á *N''-etilmaleimida ou NSF. Este factor foi descuberto por James Rothman e colegas en 1987, que o identificaron ao observar a súa inactivación polo tratamento con NEM. Este ensaio permitiulles purificar o NSF.

En tampóns de lise, utilízase NEM a 20 a 25 mM para inhibir a des-sumoilación de proteínas para análises de western blot. A NEM tamén se utilizou como inhibidor de des-ubiquitinases.

Arthur Kornberg e colegas utilizaron a NEM para inutilizar a ADN polimerase III para comparar a súa actividade coa da ADN polimerase I (pol III e I, respectivanmente). Kornberg fora galardoado co Premio Nobel polo seu descubrimento da pol I, que daquela se cría que era a utilizada para a replicación do ADN bacteriano, aínda que neste experimento demostrou que, realmente, a pol III era o encima utilizado pola maquinaria replicativa.

A NEM activa o fluxo de K dependente de Cl insensible á ouabaína en glóbulos vermellos de ovella e cabra. Este descubrimento contribuíu á identificación molecular do cotransportador K-Cl (KCC) nas células embrionarias humanas transfectadas polo ADNc da isoforma KCC1, 16 anos despois. Desde entón, a NEM foi amplamente utilizada como ferramenta de diagnóstico para descubrir ou manipular a presenza nas membranas de cotransportador K-Cl en células de moitas especies animais. Malia os repetidos intentos fracasados para identificar quimicamente o grupo tiol cargado, a pH fisiolóxico, a NEM pode formar adutos con grupos tiol de proteína quinases que fosforilan o cotransportador de K-Cl (KCC) en residuos específicos de serina e treonina principalmente no dominio C-terminal do transportador. A subseguinte desfosforilación do KCC por proteína fosfatases causa a activación do KCC.

## Notas 
## Véxase tamén
### Ligazóns externas 
* Base de datos MEROPS para peptidases e os seus inhibidores: NEM