Complexo silenciador inducido por ARN

O **complexo silenciador inducido por ARN**, abreviado como **RISC** (do inglés *RNA-induced silencing complex*), é un complexo multiproteico ou máis especificamente unha ribonucleoproteína, que contén unha das febras dun fragmento de ARN bicatenario, como pode ser un ARN interferente pequeno (siRNA) ou un microARN (miRNA). Esta febra monocatenaria de ARN que leva incorporada actúa como un molde para que o RISC recoñeza un transcrito de ARN mensaxeiro (ARNm) complementario, que é o ARNm diana sobre o que actuará o RISC. Unha vez que o encontra, unha das proteínas que forma parte do RISC, chamada Argonauta, actívase e cliva (corta) o ARNm. Este proceso denomínase interferencia de ARN (RNAi) e prodúcese en moitos eucariotas; é un proceso clave no silenciamento de xenes e unha defensa contra as infeccións virais.

## Descubrimento 
A identificación bioquímica do RISC realizárona Gregory Hannon e os seus colegas no Cold Spring Harbor Laboratory. Ocorreu só un par de anos despois do descubrimento da interferencia de ARN en 1998 feito por Andrew Fire e Craig Mello, que compartiron o Premio Nobel de Medicina de 2006. Estes fragmentos de ARN bicatenario son cargados no RISC e cada febra vai ter un destino diferente baseándose no fenómeno da regra da asimetría.

* A febra co extremo 5' menos estable é seleccionada pola RNase Argonauta e integrada no RISC. Esta febra coñécese como febra guía. 
* A outra febra, coñecida como febra pasaxeira, é degradada polo RISC.

miniatura|Parte da vía de interferencia de ARN cos diferentes modos en que RISC pode silenciar xenes por medio do seu ARNm.

### Regulación xénica 
O RISC usa a febra guía unida para unirse á rexión 3'-UTR complementaria de transcritos de ARNm por apareamento de bases. O RISC pode agora regular a expresión xénica do transcrito de ARNm de varios modos.

#### Degradación do ARNm 
A función máis coñecida do RISC é degradar un ARNm diana, o cal reduce os niveis de transcrito dispoñibles para ser traducidos nos ribosomas. Para que teña lugar a degradación do ARNm son precisas dúas cousas:

* unha correspondencia por complementariedade de bases case perfecta entre a febra guía e a secuencia do ARNm diana, e
* unha proteína Argonauta cataliticamente activa, chamada "rebandadora" (*"slicer"*) para que clive o ARNm diana.

#### Represión transcricional 
O RISC pode modular a carga do ribosoma e de factores accesorios para a tradución para reprimir a expresión do transcrito de ARNm unido. A represión traducional só require unha correspondencia de secuencia de bases parcial entre a febra guía e o ARNm diana.

A tradución pode regularse en pasos post-iniciación por medio do seguinte:
* promover a terminación prematura da tradución nos ribosomas, ou,
* facer máis lenta a elongación.

Aínda se especula sobre se as represións traducionais na iniciación ou post-iniciación son mutuamente excluíntes.

#### Formación da heterocromatina 
Algúns RISCs poden unirse directamente ao xenoma ao recrutar histona metiltransferases para formar heterocromatina no locus xénico e, por tanto, silenciar o xene. Estes RISCs toman a forma do que se chama complexo silenciador transcricional inducido por ARN ou RITS (do inglés *RNA-induced transcriptional silencing complex*). O exemplo mellor estudado é o do RITS de lévedos.

O mecanismo non se comprende ben pero o RITS degrada os transcritos de ARNm nacentes. Propúxose que este mecanismo actúa como un 'bucle de retroalimentación autorreforzado' ao utilizárense os transcritos nacentes degradados pola ARN polimerase dependente de ARN (RdRp) para xerar máis ARNs interferentes pequenos.

#### Eliminación do ADN 
Os RISCs parecen ter un papel na degradación do ADN durante o desenvolvemento do macronúcleo somático nos protozoos *Tetrahymena*. É similar á formación da heterocromatina e está implicada na defensa contra elementos xenéticos invasores.

## Proteínas asociadas ao RISC 
A estrutura completa do RISC aínda non está resolta. Diversos estudos informaron de varios valores de tamaños e compoñentes do RISC, máis non é completamente seguro se esta diverxencia se debe a que hai varios complexos RISC distintos ou a que os diferentes estudos utilizaron distintas fontes de mostras.

Ago, Argonauta; Dcr, Dicer; Dmp68, ortólogo de *D. melanogaster* da p68 RNA unwindase de mamíferos; eIF2C1, factor de iniciación da tradución eucariótico 2C1; eIF2C2, factor de iniciación da tradución eucariótico 2C2; Fmr1/Fxr, ortólogo de *D. melanogaster* da proteína de atraso mental X fráxil; miRNP, complexo miARN-proteína; NR, non reportado (sen datos); Tsn, nuclease estafilocócica tudor; Vig, xene intrónico vasa.

[miniatura|A proteína Argonauta de tamaño completo da [arquea da especie *Pyrococcus furiosus*.]]

En calquera caso, parece que as proteínas Argonauta están presentes e son esenciais para o funcionamento do proceso. Ademais, téñense coñecementos de varias proteínas claves do complexo (ademais da Argonauta), que permiten ao RISC levar a cabo a súa función.

### Proteínas Argonauta 
As proteínas Argonauta (*Argonaute*) son unha familia de proteínas que se encontra en procariotas e eucariotas. As súas funcións nos procariotas son descoñecidas pero en eucariotas son as responsables da interferencia de ARN. A familia de proteínas Argonauta humanas ten oito membros dos cales só a Argonauta 2 está exclusivamente implicada na clivaxe do ARN diana no RISC.

[miniatura|O complexo de carga de RISC permite que se carguen fragmentos de ARN bicatenarios (xerados por [Dicer) en Argonauta 2 (coa axuda de TRBP) como parte da vía de interferencia de ARN.]]

### Complexo de carga de RISC 
O complexo de carga de RISC (RLC) é a estrutura esencial necesaria para cargar os fragmentos de ARN bicatenarios no RISC para por medio deles unirse ao ARNm diana. O RLC consta de Dicer, a proteína de unión ao ARN de resposta transactivante ao VIH (TRBP) e Argonauta 2.

* **Dicer** é unha endonuclease RNase III que xera os fragmentos de ARN bicatenario para ser cargados que dirixe a interferencia de ARN.
* **TRBP** é unha proteína con tres dominios de unión a ARN bicatenario. 
* **Argonauta 2** é unha RNase e é o centro catalítico do RISC.

Dicer asóciase coa TRBP e Argonauta 2 para facilitar a transferencia dos fragmentos de ARN bicatenarios xerados por Dicer a Argonauta 2.

Investigacións máis recentes mostraron que a ARN helicase A humana podería tamén facilitar a ensamblaxe do RLC.

### Outras proteínas 
Algúns membros recentemente identificados do RISC son SND1 e MTDH. SND1 e MTDH son oncoxenes e regulan a expresión de varios xenes.

Ago, Argonauta; Dcr, Dicer; Dmp68, ortólogo de *D. melanogaster* da p68 ARN unwindase de mamífero; eIF2C1, factor de iniciación da tradución eucariótico 2C1; eIF2C2, factor de iniciación da tradución eucariótico 2C2; Fmr1/Fxr, ortólogo de *D. melanogaster* da proteína de atraso mental X fráxil; Tsn, nuclease estafilocócica tudor; Vig, xene intrónico vasa.

## Unión ao ARNm 
miniatura|350px|Diagrama da actividade do RISC con miARNs.
Aínda non está claro como o complexo RISC activado localiza os ARNm diana na célula, aínda que se demostrou que o proceso pode ocorrer en situacións distintas ás dunha tradución en curso de proteínas a partir do ARNm.

O miARN expresado endoxenamente en animais xeralmente non é perfectamente complementario a un gran número de xenes e modula a expresión por medio da represión traducional. Porén, nas plantas, o proceso ten unha especificidade moito maior para unirse ao ARNm e normalmente cada miARN só se une a un ARNm. Unha maior especificidade significa que é máis probable que ocorra a degradación do ARNm.

## Notas 
## Véxase tamén 
### Outros artigos 
* Interferencia de ARN

### Bibliografía 
* 
* 
* 

### Ligazóns externas 
* Dcr-1 e Dcr-2 teñen papaei distintos pero solapados nas vías de silenciamento dos siRNA e miRNA
* 
* RNAiAtlas - base de datos de librarías de siRNA e os seus resultados de análises de dianas