Fosfatidilinositol (3,5)-bisfosfato

miniatura|dereita|Fórmula do Fosfatidilinositol (3,5)-bisfosfato (cando R = fosfato).
O **fosfatidilinositol 3,5-bisfosfato** (PtdIns(3,5)*P*2 ou PI(3,5)P2)  é un dos sete fosfoinosítidos que se encontran nas membranas das células eucarióticas. En células quiescentes os niveis de PtdIns(3,5)*P*2, cuantifícanse normalmente por  HPLC, e son os máis baixos de entre os fosfoinosítidos presentes constitutivamente na membrana. Son aproximadamente de 3 a 5 veces menores que os do PtdIns3P e o PtdIns5P, e máis de 100 veces menores que o dos abondosos PtdIns4P e PtdIns(4,5)*P*2. O PtdIns(3,5)*P*2 descubriuse nos fibroblastos de rato e no lévedo *Saccharomyces cerevisiae* en 1997. Esta resposta ás condicións hiperosmóticas non está conservada na maioría das células de mamíferos examinadas agás nos adipocitos 3T3L1 diferenciados.

## Metabolismo
A única vía coñecida actualmente para a produción de PtdIns(3,5)*P*2 é a síntese catalizada pola fosfoinosítido quinase PIKfyve. Experimentos realizados en fibroblastos de ratos revelaron que o PtdIns(3,5)*P*2 é revertido a PtdIns3P pouco despois da súa síntese. Estes dous encimas non interaccionan directamente, senón que son reunidos por un regulador asociado de PIKfyve, chamado ArPIKfyve/VAC14, que crea o armazón dun complexo regulador ternario, chamado o complexo PAS (siglas das primeiras letras de PIKfyve/ArPIKfyve/Sac3). A PIKfyve únese ao complexo PAS sobre microdominios endosómicos enriquecidos en Rab5GTP/PtdIns3P por medio do seu dominio dedo FYVE, que se une selectivamente a PtdIns3P. O papel esencial do complexo PAS na síntese de PtdIns(3,5)P2 e o seu recambio está apoiado en datos de silenciamento de proteínas mediada por ARN interferente pequeno e a expresión heteróloga dos compoñentes do complexo PAS en varios tipos celulares, e en datos de knockout de xenes de proteínas da complexo PAS. 

Unha vía adicional para o recambio do PtdIns(3,5)*P*2 implica as fosfatases da familia da miotubularina. A miotubularina 1 e a MTMR2 desfosforilan a posición 3 do PtdIns(3,5)*P*2; por tanto, o produto desta hidrólise é o PtdIns5P, en vez do PtdIns3P. As proteínas do complexo PAS están conservadas evolutivamente con ortólogos que se encontran en *S. cerevisae* (é dicir, as proteínas Fab1p, Vac14p, e Fig4p) e en todos os eucariotas aos que se lles secuenciou o xenoma. Por tanto, crese que o PtdIns(3,5)*P*2 está presente en todos os eucariotas, nos que regula funcións celulares similares. As proteínas de lévedo Fab1p, Vac14p, e Fig4p tamén forman un complexo, chamado complexo Fab1. Porén, o complexo Fab1 contén a maiores outras proteínas adicionais, que poderían engadir unha capa reguladora adicional do PtdIns(3,5)*P*sub>2 en lévedos. A composición de complexos proteicos que regulan os niveis de PtdIns(3,5)P2 noutras especies aínda non está aclarado.

## Funcións e regulación
O PtdIns(3,5)*P*2 regula operacións endosómicas (fisión e fusión) que manteñen a homeostase das endomembranas e o correcto funcionamento das vías de tráfico celular que proceden ou pasan polos endosomas. A diminución dos niveis de PtdIns(3,5)*P*2 por perturbacións da PIKfyve celular por expresión heteróloga de mutantes puntuais de PIKfyve encimaticamente inactiva, silenciamento mediado por ARN interferente pequeno, inhibición farmacolóxica e knockout de PIKFYVE
sobreexpresión de PIKfyve

Un tratamento agudo con insulina incrementa os niveis de PtdIns(3,5)*P*2 nos adipocitos 3T3L1, tanto en membranas illadas coma en células intactas para promover o efecto da insulina sobre a translocación na superficie celular do transportador GLUT4 e o transporte de glicosa.

a activación da proteína quinase C polo PMA  en plaquetas

e a estimulación por factor de crecemento epidérmico (EGF) de células COS, 

tamén incrementan os niveis de PtdIns(3,5)*P*2.

O PtdIns(3,5)*P*2 xoga un papel clave no crecemento e desenvolvemento como se evidencia na letalidade preimplantación en modelos de ratos knockout para PIKfyve.

Xa que logo, non está claro se os niveis anormais de PtdIns(3,5)*P*2 afectan selectivamente ás funcións das neuronas periféricas e como o fan.

## Efectores 
Os fosfoinosítidos considéranse xeralmente como sinais ancorados na membrana que recrutan proteínas efectoras citosólicas específicas. Ata agora, propuxéronse varias destas proteínas como posibles efectores do PtdIns(3,5)*P*2. Desafortunadamente, as expectativas que se tiñan de que eses efectores estarían evolutivamente conservados e que compartirían un motivo común de unión ao PtdIns(3,5)*P*2 de alta afinidade non se cumpriron. Por exemplo, a deleción de Atg18p, unha proteína implicada tamén na autofaxia en *S. cerevisae*, causa o agrandamento dos vacúolos e unha multiplicación por 10 dos niveis de PtdIns(3,5)*P*2. A Atg18p únese ao PtdIns(3,5)*P*2 con alta afinidade e especificidade.

Porén, excepto para a autofaxia, os ortólogos de mamífero da Atg18p non comparten funcións similares. 

Outras dúas proteínas dos lévedos (Ent3p e Ent5p) que se atoparon en estruturas endosómicas e prevacuolares son efectores potenciais do PtdIns(3,5)*P*2 na clasificación dos corpos multivesiculares. Conteñen un dominio ENTH para a unión de fosfoinosítidos e a súa deleción causa defectos na clasificación dos corpos multivesiculares que lembran aos observados na deleción de Fab1p.
 
Porén, nin Ent3p nin Ent5p teñen especificidade de unión de alta afinidade preferencial para o PtdIns(3,5)*P*2 in vitro. 

O VPS24 de mamífero (un membro da familia de proteínas de corpos multivesiculares cargados ou CHMPs) é outro posible efector do PtdIns(3,5)*P*2. 

As medidas de resonancia plasmónica de superficie non apoian que haxa un recoñecemento específico ou de alta afinidade do PtdIns(3,5)*P*2 para os VPS24 de mamíferos ou de lévedos. 

Pero a deleción da proteína ortóloga en lévedos non causa o agrandamento dos vacúolos,

o que pon en dúbida a conservación evolutiva deste mecanismo efector.
Cómpren máis estudos para validar isto ou para descubrir efectores aínda non coñecidos do PtdIns(3,5)*P*2.

## Notas
## Véxase tamén
### Outros artigos
*Fosfoinosítidos
*Fosfatidilinositol bisfosfato
*Fosfatidilinositol (3,4)-bisfosfato
*Fosfatidilinositol (4,5)-bisfosfato

### Ligazóns externas
*