MIS18BP1

**MIS18-vezujući protein 1** je protein koji je kod ljudi kodiran genom **MIS18BP1**. Gen je poznat i kao LKNL2, M18BP1, C14orf106 i HSA242977.

## Aminokiselinska sekvenca
Dužina polipeptidnog lanca je  1.132  aminokiseline, a molekulska težina   129.085 Da..

1020304050
MIATPLKHSRIYLPPEASSQRRNLPMDAIFFDSIPSGTLTPVKDLVKYQN
SSLKLNDHKKNQFLKMTTFNNKNIFQSTMLTEATTSNSSLDISAIKPNKD
GLKNKANYESPGKIFLRMKEKVLRDKQEQPSRNSSLLEPQKSGNNETFTP
NRVEKKKLQHTYLCEEKENNKSFQSDDSSLRASVQGVPLESSNNDIFLPV
KQKIQCQQEKKAPLHNLTYELPTLNQEQENFLAVEARNKTLTRAQLAKQI
FHSKESIVATTKSKKDTFVLESVDSADEQFQNTNAETLSTNCIPIKNGSL
LMVSDSERTTEGTSQQKVKEGNGKTVPGETGLPGSMKDTCKIVLATPRLH
ITIPRRSKRNISKLSPPRIFQTVTNGLKKNQVVQLQEWMIKSINNNTAIC
VEGKLIDVTNIYWHSNVIIERIEHNKLRTISGNVYILKGMIDQISMKEAG
YPNYLIRKFMFGFPENWKEHIDNFLEQLRAGEKNREKTKQKQKTGRSVRD
IRKSMKNDARENQTDTAQRATTTYDFDCDNLELKSNKHSESPGATELNMC
HSNCQNKPTLRFPDDQVNNTIQNGGGDDLSNQELIGKKEYKMSSKKLKIG
ERTNERIIKSQKQETTEELDVSIDILTSREQFFSDEERKYMAINQKKAYI
LVTPLKSRKVIEQRCMRYNLSAGTIKAVTDFVIPECQKKSPISKSMGTLE
NTFEGHKSKNKEDCDERDLLTVNRKIKISNLEKEQMLTSDFKKNTRLLPK
LKKIENQVAMSFYKHQSSPDLSSEESETEKEIKRKAEVKKTKAGNTKEAV
VHLRKSTRNTSNIPVILEPETEESENEFYIKQKKARPSVKETLQKSGVRK
EFPITEAVGSDKTNRHPLECLPGLIQDKEWNEKELQKLHCAFASLPKHKP
GFWSEVAAAVGSRSPEECQRKYMENPRGKGSQKHVTKKKPANSKGQNGKR
GDADQKQTIKITAKVGTLKRKQQMREFLEQLPKDDHDDFFSTTPLQHQRI
LLPSFQDSEDDDDILPNMDKNPTTPSSVIFPLVKTPQCQHVSPGMLGSIN
RNDCDKYVFRMQKYHKSNGGIVWGNIKKKLVETDFSTPTPRRKTPFNTDL
GENSGIGKLFTNAVESLDEEEKDYYFSNSDSA

:Simboli

**C**:  Cistein 
**D**: Asparaginska kiselina 
**E**: Glutaminska kiselina 
**F**:  Fenilalanin 
**G**:  Glicin 
**H**:  Histidin 
**I**:  Izoleucin 
**K**: Lizin 
**L**: Leucin 
**M**:  Metionin 
**N**:  Asparagin 
**P**:  Prolin 
**Q**:  Glutamin 
**R**:  Arginin 
**S**:  Serin 
**T**:  Treonin 
**V**:  Valin 
**W**:  Triptofan 
**Y**:  Tirozin

## Kloniranje i ekspresija
Koristeći tečnu hromatografiju sa tandemskom masenom spektrometrijom, Fujita et al. (2007) identificirali su MIS18BP1 kao komponentu kompleksa MIS18 u ekstraktima HeLa ćelija. Protein MIS18BP1 sadrži Myb / SANT domenu koja može vezati DNA i ima izračunatu molekularnu masu od 129 kD. Identificirali su ortologe MIS18BP1 kod svih pregledanih kičmenjaka, ali ne i kod drugih eukariota, uključujući i  *S. pombe*. Analiza imunofluorescencije otkrila je da je MIS18BP1 lokaliziran na centromernoj telofazi-G1 u transficiranim ćelijama HeLa.

## Funkcija gena
Koristeći masenu spektroskopiju, imunoprecipitaciju i 2– i 3-hibridne analize kvasca, Fujita et al. (2007) otkrili su da su ljudski MIS18-alfa, MIS18-beta i MIS18BP1 tvorili MIS18 kompleks. Analiza imunofluorescencije potvrdila je da su se sva tri proteina kolokalizirala u centromerama u HeLa ćelija, ovisano o ciklusu. Kolokalizacija se dogodila tokom mitotskog izlaza koji je započeo u anafazi/telofazi, a proteini su ostali povezani tokom rane G1-faze. Analiza nokdauna posredstvom RNK posredovanja u HeLa ćelijama pokazala je da je ljudski kompleks MIS18 presudan za poravnavanje metafaza i pravilnu segregaciju hromosoma. Centromerna lokalizacija tri proteina MIS18 bila je bitna za naknadno regrutovanje *de novo* sintetiziranog CENPA. Analiza mutacije otkrila je da je konzervirani motiv MIS18-alfa potreban za ispravnu lokalizaciju i funkciju proteina MIS18. Inhibicija histonskih deacetilaza poboljšala je regrutaciju novosintetiziranog CENPA u ćelijama osiromašenim MIS18 , oviso o dozi, pokazujući da je centromerni histon potrebno acetilirati prije taloženja CENPA na centromere. Pored toga, MIS18-alfa, MIS18-beta i MIS18BP1 međusobno su ovisili o lokalizaciji centromere. Nokdaun bilo kojeg od tri proteina MIS18 ukinuo je regrutaciju centromere novo sintetiziranog CENPA, praćeno defektima kao što su neusklađeni hromosomi, pogrešno anafazno razdvajanje i mikrofaze.

Analizom ekspresije u čelijama HeLa, Spiller et al. (2017) pokazali su da je N-terminalna regija MIS18BP1 dovoljna za direktnu interakciju s MIS18A-MIS18B da formira kompleks MIS18. Testiranje *in vitro* potvrdilo je da je MeDiY domen MIS18A, a ne MIS18B, direktno komunicirao sa N-terminalnom regijom MIS18BP1. Međutim, MIS18A-MIS18B MeDiY-ni heterodimer vezao je MIS18BP1 snažnije od samog MIS18A MeDiY, što ukazuje da MIS18A MeDiY ostvaruje dodatne kontakte s MIS18BP1, u prisustvu MIS18B MeDiY ili da MIS18B MeDiY jača vezivanje MIS18A MeDI1.

Utvrdili da su četiri kopije MIS18A i dvijekopije MIS18B formirale heteroheksamer koji je povezao dvije kopije MIS18BP1, da bi se formirao heterooktamerni MIS18 kompleks. Heteroheksamer MIS18A-MIS18B sastavljen je od heterotrimera formiranih preko C-terminalnog alfa-heliksnih domena MIS18A i MIS18B, koji su zatim sastavljeni u heteroheksamer putem MeDiY interfejsa za dimerizaciju. Ovaj  je takođe bio potreban za vezivanje dvije kopije MIS18BP1, da bi se formirao MIS18 hetero-oktamer i za taloženje CENPA na centromeri. Dva konsenzusna mjesta CDK1 fosforilacija unutar N-terminalne regije MIS18BP1 bila su direktno uključena u vezivanje MIS18A-MIS18B, što ukazuje na to da sklop MIS18 kompleksa i centromerna lokalizacija vjerovatno reguliraju CDK1 na način ovisan o [ćelijski ciklus|[ćelijskom ciklusu]].

## Modelni organizmi
U proučavanju PNPO funkcije, korišteni su modelni organizmi.  Uvjetna linija nokaut-miševa, zvana *Mis18bp1 * generirana je kao dio programa Međunarosnog konzorcija za miševe – visokopropusnog projekta mutageneze za generiranje i distribuciju životinjskih modela bolesti zainteresiranim naučnicima.

Muške i ženske životinje prolazile su standardizirani fenotipski skrining, kako bi se utvrdili efekti delecije. Od 24 izvedena  testa ina mutantnim miševima, uočene su tri značajne abnormalnosti. Tokom gestacije,  nije utvrđen homozigotni mutantni embrion, pa tako nijedan nije preživio do odvikavanja. Preostali testovi su izvedeni na mutiranim heterozigotnim odraslim miševima; nisu opažene nikakve dodatne značajne abnormalnosti kod ovih životinja.

## Reference
## Dopunska literatura 
*
*
*

Kategorija:Geni na hromosomu 14
Kategorija:Ljudski proteini
Kategorija:Proteomika
Kategorija:Mišji mutirani geni