ENTPD5

**Ektonukleozidna trifosfat-difosfohidrolaza 5** je enzim koji je kod ljudi kodiran genom **ENTPD5**.

Fluorescentnom *in situ* hibridizacijom i analizom veza, Chadwick et al. (1998) locirali su gen MNTPaze na mišjem hromosomu 12, u regiji koja pokazuje homologiju sinteze sa ljudskim hromozomom 14q. Analizom hibridnih ploča hibridnih i somatskih zračenih ćelija, Chadwick i Frischauf (1998) potvrdili su da se CD39L4 nalazi na ljudskom hromosomu 14, pozicija q24. Zaključili su da je CD39L4 ljudski homolog MNTPaze.

ENTPD5 je sličan nukleotidazama E-tipa (NTPaze)/ekto-ATPaza/apirazama. NTPaze, poput CD39, posreduju katabolizam vanćelijskih nukleotida. ENTPD5 sadrži četiri konzrrvirane regije apiraza, što je karakteristično za NTPaze..

1020304050
MATSWGTVFFMLVVSCVCSAVSHRNQQTWFEGIFLSSMCPINVSASTLYG
IMFDAGSTGTRIHVYTFVQKMPGQLPILEGEVFDSVKPGLSAFVDQPKQG
AETVQGLLEVAKDSIPRSHWKKTPVVLKATAGLRLLPEHKAKALLFEVKE
IFRKSPFLVPKGSVSIMDGSDEGILAWVTVNFLTGQLHGHRQETVGTLDL
GGASTQITFLPQFEKTLEQTPRGYLTSFEMFNSTYKLYTHSYLGFGLKAA
RLATLGALETEGTDGHTFRSACLPRWLEAEWIFGGVKYQYGGNQEGEVGF
EPCYAEVLRVVRGKLHQPEEVQRGSFYAFSYYYDRAVDTDMIDYEKGGIL
KVEDFERKAREVCDNLENFTSGSPFLCMDLSYITALLKDGFGFADSTVLQ
LTKKVNNIETGWALGATFHLLQSLGISH

:Simboli

**C**:  Cistein 
**D**: Asparaginska kiselina 
**E**: Glutaminska kiselina 
**F**:  Fenilalanin 
**G**:  Glicin 
**H**:  Histidin 
**I**:  Izoleucin 
**K**: Lizin 
**L**: Leucin 
**M**:  Metionin 
**N**:  Asparagin 
**P**:  Prolin 
**Q**:  Glutamin 
**R**:  Arginin 
**S**:  Serin 
**T**:  Treonin 
**V**:  Valin 
**W**:  Triptofan 
**Y**:  Tirozin

## Kloniranje i ekspresija
Nukleozidne trifosfataze (NTPaze) su dvovalentni transmembranski glikoproteini koji zavise od kationa i hidroliziraju vanćelijske nukleozidne tri– i/ili difosfate. NTPaze karakterizira prisustvo četiri motiva poznata kao regije konzervirane apiraze (ACR). Chadwick et al. (1998) identificirali su cDNK koje kodiraju mišju NTPazu,  simbolizirajući MNTPazu. Pretražujući EST bazu podataka za sekvence slične onim MNTPaze, Chadwick i Frischauf (1998) identificirali su cDNK koje odgovaraju dvama ljudskim genimaa, CD39L2 i CD39L4. Kodirajuće regije mišjeg i ljudskog gena CD39L4 dijele 88% identiteta nukleotidne sekvence. Predviđeni protein CD39L4 od 428 aminokiselina sadrži sva četiri ACR-a, jedan N-terminalni transmembranski segment i veliki vanćelijski C-terminalni domen. Northern blot analiza otkrila je da je CD39L4 eksprimiran kao iRNK od 4,8 kb u svim testiranim tkivima. Nekoliko manjih traka takođe je primijećeno u tkivima sa najjačom ekspresijom CD39L4.

Fang et al (2010) pokazali su da je Entpd5 označen fluorescencijom lokaliziran markerom endoplazmatskog retikuluma (ER) u mišjim  embrionskim fibroblastima(MEF).

## Funkcija gena
PCR analizom cDNK biblioteka, Mulero et al. (1999) otkrili su CD39L4 samo u makrofagima. Funkcionalnom i Western blot analizom utvrđeno je da je aktivnost ADPaze i nukleotid-difosfataze izlučenog proteina od 51 kD pojačana prisustvom dvovalentnih kationa. Liječenje glikozidazom ili tunikamicinom (Mulero et al., 2000) smanjilo je veličinu proteina na predviđenih 46 kD i smanjilo količinu sekrecije; za razliku od CD39L3, međutim, nije umanjio enzimsku aktivnost. 
Fang et al. (2010) pokazali su da *in vitro* translatirani ENTPD5 hidrolizira UDP i GDP, ali ne i druge nukleotide. Delecija Ptena u MEF rezultira aktivacijom puta PI3 kinaze / Akt, koji promovira rast i preživljavanje ćelija, uz istovremeno povećanje translacije proteina. Pokazali su da su ekspresija Entpd5 i hidroliza ATP značajno povišeni u Pten –/– MEF.  Masenom spektrometrijskom analizom identificirani su ENTPD5, UMP/CMP kinaza-1 (CMPK1) i adenilat-kinaza-1 (AK1) kao komponente ciklusa hidrolize ATP u HeLa ćelijama. Unutar ovog ciklusa, ENTPD5 je pružio kritične UMP ili GMP kofaktore za hidrolizu ATP u AMP i nedostatak bilo kojeg od tri enzima koji su ugrozili hidrolizu ATP. Nokdaun Entpd5 u Pten –/– MEF povećao je ekspresiju markera ER stresa, smanjio N-glikozilaciju proteina i smanjio proizvodnju laktata. Western blot, imunohistokemijske i analize mikromreža pokazale su da je regulacija ENTPD5 korelirala s aktivacijom AKT-a u ljudskim ćelijskim linijama karcinoma prostate i primarnim uzorcima tumora prostate. Nokdaun ENTPD5 u LNCaP ćelijaa kamrcinoma prostate smanjio je rast tumora kod golih miševa. Zaključili su da ENTPD5 ima kritičnu ulogu u N-glikozilaciji i doprinosi Warburgovom efektu, tj. povišenoj proizvodnji laktata u aerobnim uvjetima, u ćelijama tumora.
## Reference
## Dopunska literatura
*
*
*
*
*
*
*
*
*

Kategorija:Geni na hromosomu 14
Kategorija:Ljudski proteini
Kategorija:Proteomika