Western blot

m koje prepoznaje modificirane proteine putem lipoične kiseline]]
**Western blot**, ponekad zvani i kao   **proteinski imunoblot** ili **western blotiranje**, je široko upotrebljavana analitička tehnika u molekulskoj biologiji i imunogenetici za otkrivanje specifičnih proteina u uzorku homogenata ili ekstrakta tkiva.

Da bi postigla razdvajanje određenog proteina od kompleksa, western blot tehnika koristi tri elementa:  razdvajanje po veličini, prijenos proteina na čvrsti nosač i obilježavanje ciljnog proteina pomoću primarnog i sekundarnog antitijela,  za vizualizaciju. Stvara se sintetsko ili životinjsko antitijelo (poznato kao primarno antitijelo) koje prepoznaje i veže se za određenu metu proteina. Membrana za elektroforezu se opere u rastvoru koji sadrži primarno antitijelo, prije nego što se ispere višak antitijela. Dodaje se sekundarno antitijelo koje prepoznaje i veže se za primarno antitijelo. Sekundarno antitelo se vizualizira različitim metodima, kao što su bojenje, imunofluorescencija i radioaktivnost, omogućavajući indirektno otkrivanje specifičnog ciljnog proteina.

Ostale srodne tehnike uključuju dot blot analizu, kvantitativni tačkasti blot, imunohistohemijske i imunocitohemijske postupke, gdje se antitijela koriste za otkrivanje proteina u tkivima i ćelijama i enzimski imunski test (ELISA).

Naziv 'western blot' igra je na u poređenju sa Southern blot, tehnikom za otkrivanje DNK koja je nazvana po svom pronalazaču, engleskom biologu Edwinu Southernu. Slično tome, otkrivanje RNK naziva se Northern blot.

Western blot se takođe koristi kao konačni test za  varijantnu Creutzfeldt-Jakobove bolesti, tipa prionske bolesti povezane sa konzumacijom kontaminirane govedine od goveda sa goveđom spongiformnom encefalopatijom (BSE, obično se naziva i 'bolest ludih krava').

Ostala područja primjene su u dijagnozi tularemije. Procjena sposobnosti Western blot-a da detektira antitijela protiv *F. tularensis* otkrila je da je njegova osjetljivost gotovo 100%, a specifičnost 99,6%.

Neki oblici testiranja na lajmsku bolest koriste Western bloting. A western blot can also be used as a confirmatory test for Hepatitis B infection and HSV-2 (Herpes Type 2) infection. U veterinarskoj medicini se Western blot ponekad koristi za potvrđivanje FIV + statusa kod mačaka.

Daljnja primjena Western blot tehnike uključuju upotrebu  Svjetske antidoping agencije (WADA). Doping krvi je zloupotreba određenih tehnika i / ili supstanci za povećanje nečije mase crvenih krvnih zrnaca, što omogućava tijelu da transportuje više kisika u mišiće i time povećava izdržljivost i performanse. Postoje tri široko poznate supstance ili metode koje se koriste za doping krvi, a to su eritropoetin (EPO), sintetski nosači kisika i transfuzija krvi. Svaka je zabranjena WADA-inom listom zabranjenih supstanci i metoda. Western blot tehnika korištena je tokom FIFA-inog svjetskog kupa 2014. u antidoping kampanji za taj događaj.  Ukupno je preko Reichela i saradnika  Usvajanjem horizontalne SAR-PAGE u kombinaciji sa Velum SAR gelovima koji su podržani od gotovog filma, diskriminacijski kapacitet primjene mikro-doze rEPO je značajno pojačan.

## Također pogledajte 
* Far-western blot
* Eastern blot
* Northwestern blot
* Brza paralelna proteoliza

## References 
## Vanjski linkovi
* 
* 
* 

Kategorija:Dijagnostička virologija
Kategorija:Proteinske metode
Kategorija:Molekularna biologija
Kategorija:Laboratorijske tehnike
Kategorija:Tehnike molekularne biologije