VGLUT3

**Transporter 3 vezikulskog glutamata** (**VGLUT3**) je protein koj je kod ljudi   kodiran genom *SLC17A8* .

**Aminokiselinska sekvenca**

Dužina polipeptidnog lanca je 714   aminokiselina, a molekulska težina   78.239 Da.

:Simboli

**C**:  Cistein 
**D**: Asparaginska kiselina 
**E**: Glutaminska kiselina 
**F**:  Fenilalanin 
**G**:  Glicin 
**H**:  Histidin 
**I**:  Izoleucin 
**K**: Lizin 
**L**: Leucin 
**M**:  Metionin 
**N**:  Asparagin 
**P**:  Prolin 
**Q**:  Glutamin 
**R**:  Arginin 
**S**:  Serin 
**T**:  Treonin 
**V**:  Valin 
**W**:  Triptofan 
**Y**:  Tirozin

1020304050
MTQMSQVQELFHEAAQQDALAQPQPWWKTQLFMWEPVLFGTWDGVFTSCM
INIFGVVLFLRTGWLVGNTGVLLGMFLVSFVILVALVTVLSGIGVGERSS
IGSGGVYSMISSVLGGQTGGTIGLLYVFGQCVAGAMYITGFAESISDLLG
LGNIWAVRGISVAVLLALLGINLAGVKWIIRLQLLLLFLLAVSTLDFVVG
SFTHLDPEHGFIGYSPELLQNNTLPDYSPGESFFTVFGVFFPAATGVMAG
FNMGGDLREPAASIPLGSLAAVGISWFLYIIFVFLLGAICTREALRYDFL
IAEKVSLMGFLFLLGLYISSLASCMGGLYGAPRILQCIAQEKVIPALACL
GQGKGPNKTPVAAICLTSLVTMAFVFVGQVNVLAPIVTINFMLTYVAVDY
SYFSLSMCSCSLTPVPEPVLREGAEGLHCSEHLLLEKAPSYGSEGPAQRV
LEGTLLEFTKDMDQLLQLTRKLESSQPRQGEGNRTPESQKRKSKKATKQT
LQDSFLLDLKSPPSFPVEISDRLPAASWEGQESCWNKQTSKSEGTQPEGT
YGEQLVPELCNQSESSGEDFFLKSRLQEQDVWRRSTSFYTHMCNPWVSLL
GAVGSLLIMFVIQWVYTLVNMGVAAIVYFYIGRASPGLHLGSASNFSFFR
WMRSLLLPSCRSLRSPQEQIILAPSLAKVDMEMTQLTQENADFATRDRYH
HSSLVNREQLMPHY

**LC17A8** nalazi se na dugom (q) kraku hromosoma 12.]]

## Kloniranje i ekspresija
Traženjem homologa VGLUT1 (SLC17A7) i VGLUT2 (SLC17A6), Takamori et al. (2002) identificirali su genomsku sekvencu koja sadrži VGLUT3. Koristeći kombinaciju PCR-a i 3-prime RACE, klonirali su VGLUT3 pune dužine biblioteke iz cDNK fetusnog mozga. Izvedeni protein od 589 aminokiselina ima izračunatu molekulsku masu od oko 65 kD. VGLUT3 sadrži osam segmenata koji se protežu kroz membranu i dugačak C kraj, slično SLC17A7 i SLC17A6, s kojima dijeli 72,5%, odnosno 72% aminokiselinskog identiteta. Analiza Northern blot-a otkrila je transkript od oko 3,9 kb, eksprimiran u nekoliko regija mozga, s najvećom ekspresijom u amigdali, meduli i kičmenoj moždini. Slabija ekspresija otkrivena je u hipokampusu, talamusu i malom mozgu, a nije otkrivena ekspresija u nekoliko drugih dijelova mozga.

## Funkcija gena
Ekspresijom VGLUT3 u ljudskoj neuroendokrinoj  ćelijskoj liniji, Takamori et al. (2002) pokazali su unos radioaktivno obilježenog glutamata zavisnog od ATP-a u vezikulske lagane membrane. Prekid protonskog gradijenta protonskim ionoforom ili direktnom inhibicijom V-ATPaza, smanjila je akumulaciju glutamata. Daljnja karakterizacija ukazala je da su za punu aktivnost potrebni i membranski električni potencijal i gradijent pH povezan sa protonskim gradijentom. VGLUT3 preferira glutamat nad aspartatom kao supstratom.
Seal et al. (2008) pokazali su da u pužnici VGLUT3 akumulira glutamat u sinapsnim vezikulama osjetnih unutrašnjih  trwepljastih ćelija (IHC) prije nego što ga oslobađa u receptore terminala slušnog živca.

## Molekulska genetika
U dvije porodice koje su segregirale autosomno dominantnu gluhoću (DFNA25; 605583), uključujući porodicu češkog porijekla koju su prvobitno opisasali Greene et al. (2001) i porodicu njemačkog porijekla, Ruel et al. (2008) identificirali su heterozigotnu misens mutaciju (A211V) u genu SLC17A8, koja nije bila prisutna u 267 kontrola.

Kod 47-godišnjeg Korejca (porodica SD-38) s DFNA25, Ryu et al. (2016) identificirali su heterozigotnost za mutaciju pomicanja okvira (c.616dupA) u genu SLC17A8. Pacijent je imao obostrani teški senzorineuralni gubitak sluha. Rečeno je da su pogođeni i drugi članovi porodice, ali nikakve druge studije DNK nisu provedene.

## Životinjski model
Seal et al. (2008) generirali su Slc17a8-null miševe homolognom rekombinacijom u matičnim stanicama mišjeg embriona. Miševi kojima nedostaje Vglut3 duboko su gluhi zbog neoslobađanja glutamata iz trepljastih ćelija  u prvoj sinapsi slušnog puta. Rana degeneracija nekih pužnićnih ganglijskih neurona kod nokaut-miševa ukazala je na važnu razvojnu ulogu glutamata koji se oslobađa u trepljaste ćelijama prije početka slušanja.
Ruel et al. (2008) izvijestili su da Slc17a8-nulti miševi nisu imali reakcije slušnog živca na akustične podražaje, iako bi slušni odgovori moždanog stabla mogli biti izazvani električnim podražajima i zabilježene su snažne otoakustičke emisije. Promet sinapsnih vezikula koje pokreću kalcijevi ioni bio je normalan u unutrašnjim trepljastim ćelijama kod nul-miševa Slc17a8, kada su sondirani pomoću membranskih mjerenja kapaciteta. Kasnije je opadao broj aferentnih sinapsi, spiralnih ganglijskih neurona i bočnih eferentnih završetaka, ispod senzornih unutrašnjih trepljastih ćelija. Vrpce koje su ostale do tri mjeseca starosti imale su normalan ultrastrukturni izgled. Zaključili su da je gluhoća kod miševa s nedostatkom Slc17a8 posljedica specifičnog defekta usvajanja i oslobađanja vezikulskog glutamata i da je VGLUT3 ključan za slušno kodiranje u unutrašnjoj sinapsi trepljaste ćelije.
Seal et al. (2009) izvijestili su da mali podskup ćelija u dorzalnom korijenu ganglije eksprimira  vezikulskii transporter glutamata VGLUT3 s malim udjelom. U leđnom rogu kičmene moždine, ti se aferentni elementi projiciraju na laminu I i najunurrašnjiji sloj lamine II, što je implicirano u trajnom bolu uzrokovanom ozljedom . Budući da različite izoforme VGLUT uglavnom imaju nepotrebni obrazac  ekspresije, za procjenu uloge primarnih aferenata VGLUT3 + u ponašanju, kao odgovor na somatosenzorni unos, koristili su nokaut-miševe Vglut3. Gubitak Vglut3 posebno narušava mehanički osjet bola, a posebno mehaničku preosjetljivost na normalno neškodljive podražaje koji prate upalu, ozljedu živaca i traumu. Direktno snimanje sa Vglut3 + neurona u korijenu dorzalne ganglije dalje ih je identificiralo kao slabo shvaćenu skupinu nemijeliniziranih mehanoreceptora sa niskim pragom (C-LTMR). Seal et al. (2009) zaključili su da njihova analiza Vglut3-null miševa ukazuje na kritičnu ulogu C-LTMR u mehaničkoj preosjetljivosti uzrokovanoj ozljedom.
1.	Ryu, N., Sagong, B., Park, H.-J., Kim, M.-A., Lee, K.-Y., Choi, J. Y., Kim, U.-K. Screening of the SLC17A8 gene as a causative factor for autosomal dominant non-syndromic hearing loss in Koreans. BMC Med. Genet. 17: 6, 2016. [PubMed: 26797701, related citations] [Full Text]
2.	Seal, R. P., Akil, O., Yi, E., Weber, C. M., Grant, L., Yoo, J., Clause, A., Kandler, K., Noebels, J. L., Glowatzki, E., Lustig, L. R., Edwards, R. H. Sensorineural deafness and seizures in mice lacking vesicular glutamate transporter 3. Neuron 57: 263-275, 2008. [PubMed: 18215623, images, related citations] [Full Text]
3.	Seal, R. P., Wang, X., Guan, Y., Raja, S. N., Woodbury, C. J., Basbaum, A. I., Edwards, R. H. Injury-induced mechanical hypersensitivity requires C-low threshold mechanoreceptors. Nature 462: 651-655, 2009. [PubMed: 19915548, images, related citations] [Full Text]
4.	Takamori, S., Malherbe, P., Broger, C., Jahn, R. Molecular cloning and functional characterization of human vesicular glutamate transporter 3. EMBO Rep. 3: 798-803, 2002. [PubMed: 12151341, images, related citations] [Full Text]

## Reference
## Dopunska literatura
*
*
*
*
*
*
*
*
*

Kategorija:Ljudski proteini
Kategorija:Geni na hromosomu 12
Kategorija:Proteomika