Himotripsin

**Himotripsin** (EC 3.4.21.1), himotripsini A i B, alfa-himar ofth, avazim, himar, himotest, enzeon, himotraza, alfa-himar, alfa-himotripsin A, alfa-himotripsin) je probavni enzim, komponenta pankreasnog soka koja djeluje u dvanaestopalačnom crijevu, gdje vrši proteolizu, razgradnju proteina i polipeptida. Himotripsin preferencijalno cijepa peptidne amidne veze gdje je bočni lanac aminokiseline N-terminalno u odnosu na cijepanu amidnu vezu (P1 pozicija) velika hidrofobna aminokiselina (tirozin, triptofan i fenilalanin). Ove aminokiseline sadrže aromatski prsten u svom bočnom lancu koji se uklapa u hidrofobni džep (S1 položaj) enzima. Aktivira se u prisustvu tripsina. Hidrofobna i komplementarnost oblika između bočnog lanca peptida supstrat P1 i šupljine za vezivanje enzima S1 objašnjava specifičnost supstrata ovog enzima.  Himotripsin također hidrolizira druge amidne veze u peptidima sporijim brzinama, posebno one koje sadrže leucin na P1 poziciji. Rezultirajuća molekula je od tri-polipeptida, međusobno povezana putem disulfidnih veza.

## Mehanizam djelovanja i kinetika 
left|450px|thumb| Tetraedarski međuprodukti himotripsina: Molekularni mehanizam hidrolize peptidne veze katalizirane himotripsinom. Jedan ključni aspekt je tetraedarski međuprodukt Tet 1.

*In vivo*, himotripsin je proteolitski enzim (serin-proteaza) koji djeluje u probavnim sistemima mnogih organizama. Olakšava cijepanje peptidnih veza reakcijom hidrolize, koja se, uprkos tome što je termodinamički povoljna, odvija izuzetno sporo u odsustvu katalizatora. Glavni supstrati himotripsina su peptidne veze u kojima je aminokiselina N-terminalno veza triptofan, tirozin, fenilalanin ili leucin. Kao i mnoge proteaze, himotripsin također hidrolizira amidne veze *in vitro*, što je omogućilo upotrebu analoga supstrata kao što je N-acetil-L-fenilalanin p-nitrofenil amid za enzimske testove.

Himotripsin cijepa peptidne veze napadajući nereaktivnu karbonilnu grupu snažnim nukleofilom, ostatkom serina 195 koji se nalazi u aktivnom mjestu enzima, koji se nakratko kovalentno veže za supstrat, formirajući međuprodukt enzim-supstrat. Zajedno sa histidinom 57 i asparaginskom kiselinom 102, ovaj serinski ostatak čini katalitsku trijadu aktivnog mjesta.

Ovi nalazi se zasnivaju na testovima inhibicije i proučavanju kinetike cijepanja prethodno spomenutog supstrata, iskorištavajući činjenicu da međuprodukt enzim-supstrat *p*-nitrofenolat ima žutu boju, što omogućava mjerenje njegove koncentracije mjerenjem apsorbancije svjetlosti na 410 nm.

Kataliza hidrolize proteinskog supstrata (crvenom bojom) himotripsinom izvodi se u dva koraka. Prvo, nukleofilnost Ser-195 je pojačana općom baznom katalizom, u kojoj se proton serinske hidroksilne grupe prenosi na imidazolni dio His-57, tokom njegovog napada na karbonilni ugljik glavnog lanca protein-supstrata kojem nedostaju elektroni (k1 korak). To se događa putem usklađenog djelovanja ostataka od triaminokiseline  u katalitskoj trijadi. Nakupljanje negativnog naboja na rezultirajućem tetraedarskom međuproduktu stabilizira se u oksianionskoj rupi enzimskog aktivnog mjesta, formiranjem dvije vodikove veze sa susjednim amid-vodicima glavnog lanca.

Imidazolijski dio His-57 formiran u k1 koraku je opći kiseli katalizator za k-1 reakciju. Međutim, dokazi za sličnu opću kiselinsku katalizu k2 reakcije (Tet2) has been controverted; Izgleda da voda osigurava proton amino odlazećoj grupi.

Razgradnja Tet1 (preko k3) generira acilni enzim, koji se hidrolizira s His-57 koji djeluje kao opća baza (kH2O) formirajući tetraedarski međuprodukt, koji se razgrađuje regenerirajući serinski hidroksilni dio, kao i proteinski fragment s novoformiranim karboksilnim krajem.

## Upotreba 
### Medicinska upotreba 
Himotripsin se koristi tokom operacije katarakta. It was marketed under the brand name Zolyse.

## Isozimi 
## Također pogledajte
*Tripsin
*PA klan proteaza

## Reference
## Dodatni mizvori 
* 
* 

## Vanjski linkovi
* The MEROPS online database for peptidases and their inhibitors: S01.001 
* 

Kategorija:EC 3.4.21
Kategorija:Enzimi

Kategorija:Proteaze
Kategorija:Povučeni lijekovi