DNK sekvencer

, Illumina, Life Technologies, Beckman Coulter, Pacific Biosciences, MGI/BGI, Oxford Nanopore Technologies.]]
**DNK sekvencer** je naučni instrument koji se koristi za automatizaciju procesa DNK sekvenciranja. Za dati uzorak DNK, DNK sekvencer koristi se za određivanje redoslijeda četiri baze: G (guanin), C (citozin), A (adenin) i T (timin). Ovo se zatim prijavljuje kao tekst string, koji se naziva čitanje. Neki DNK sekvenceri se također mogu smatrati optičkim instrumentima jer analiziraju svetlosne signale koji potiču od fluorohroma vezanih za nukleotide.

Prvi automatizirani DNK sekvencer, koji je izumio Lloyd M. Smith, predstavio je Applied Biosystems 1987. Koristio je metod Sangerovsko sekvenciranje, tehnologiju koja je činila osnovu "prve generacije" DNK sekvencera  i omogućio završetak Projekta ljudskog genoma u 2001. Ova prva generacija DNK sekvencera su u suštini automatizovani elektroforezni sistemi koji detektuju migraciju obeleženih DNK fragmenata. Stoga se ovi sekvenceri također mogu koristiti u genotipizaciji genetičkih markera, gdje je potrebno odrediti samo dužinu fragmenta DNK (npr. mikrosateliti, AFLP-ovi).

Projekt ljudskog genoma podstakao je razvoj jeftinijih, visokopropusnih i preciznijih platformi poznatih kao sekventori sljedeće generacije (NGS) za sekvenciranje ljudskog genoma. To uključuje 454, SOLiD i Illumina platforme za sekvenciranje DNK. Sljedeće generacije strojeva za sekvenciranje značajno su povećale stopu sekvenciranja DNK u usporedbi s prethodnim Sangerovim metodama. Uzorci DNK mogu se automatski pripremiti za samo 90 minuta,

Novija, treća generacija DNK sekvencera kao što su PacBio SMRT i Oxford Nanopore mjere dodavanje nukleotida jednoj molekuli DNK u realnom vremenu. Obe tehnologije nude mogućnost sekvenciranja dugih molekula, u poređenju sa tehnologijama za kratko čitanje kao što su Illumina SBS ili DNBSEQ kompanije MGI Tech.

Zbog ograničenja u tehnologiji DNK sekvencera, očitavanja mnogih od ovih tehnologija su kratka, u poređenju sa dužinom genoma; stoga čitanja moraju biti sastavljena u duže kontige. Podaci također mogu sadržati greške, uzrokovane ograničenjima u tehnici sekvenciranja DNK ili greškama tokom PCR amplifikacija. Proizvođači DNK sekvencera koriste brojne različite metode da otkriju koje su baze DNK prisutne. Specifični protokoli koji se primjenjuju na različitim platformama za sekvenciranje imaju uticaj na konačne podatke koji se generiraju. Stoga, poređenje kvaliteta podataka i troškova u različitim tehnologijama može biti zastrašujući zadatak. Svaki proizvođač daje svoje vlastite načine informiranja o greškama u sekvenciranju i rezultatima. Međutim, greške i rezultati između različitih platformi ne mogu se uvijek direktno porediti. Budući da se ovi sistemi oslanjaju na različite pristupe sekvenciranju DNK, izbor najboljeg DNK sekvencera i metoda obično će ovisiti o ciljevima eksperimenta i dostupnom budžetu.

## Poređenje
Ponude u tehnologiji sekvenciranja DNK pokazuju dominantnog proizvođača: Illumina (Decembar 2019.), zatim PacBio, MGI i Oxford Nanopore.

## Reference
Kategorija:DNK sekvenciranje
Kategorija:Genetičke tehnike
Kategorija:Laboratorijska oprema za molekularnu biologiju
Kategorija:Naučni instrumenti