限制酶

120px|thumb|平滑末端。圖為SmaI的切位。
限制酶（）又稱限制內切酶或限制性內切酶，全稱限制性內切核酸酶高中《生物学》选择性必修 3 - 生物技术与工程，人民教育出版社，是一種能將雙股DNA切開的酶。它的切割方法是將醣類分子與磷酸之間的鍵結切斷，進而於兩條DNA鏈上各產生一個切口，且不破壞核苷酸與鹼基。切割形式有兩種，分別是可產生具有突出單股DNA的黏狀末端，以及末端平整無凸起的平滑末端。由於斷開的DNA片段可由另一種稱為DNA連接酶的酶黏合，因此染色體或DNA上不同的限-{制}-片段，得以經由剪接作用而結合在一起。

限制酶在分子生物學與遺傳工程領域有廣泛的應用，此類酶最早發現於某些品系的大腸桿菌體內，這些品系能夠「限制」噬菌體對其感染，因此得名。科學家認為限制酶是細菌所演化出來對抗病毒感染，並幫助將已殖入的病毒序列移除的機制。是限制修飾系統的一部分。約翰霍普金斯大學的丹尼爾·那森斯、漢彌爾頓·史密斯與伯克利加州大學的沃納·亞伯因為限制酶的發現及研究，而共同獲得1978年的諾貝爾生理學或醫學獎。此酶最早的應用之一，是用來將胰島素基因轉殖到大腸桿菌，使其具備生產人類胰島素的能力。

 命名 
限制酶的命名是根據細菌種類而定，以EcoRI為例：

 E  Escherichia （屬） co  coli （種） R  RY13 （品系） I  首先發現  在此類細菌中發現的順序

 類型 
根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。

 第一型限制酶 
同時具有修飾及限制性切割的作用；另有识别DNA上特定鹼基序列的能力，通常其切割位距離识别位点可達數千個鹼基之遠，并不能准确定位切割位点，所以并不常用。例如：EcoB、EcoK。

 第二型限制酶 
只具有限制性切割的作用，修飾作用由其他酶進行。所识别的位置多為短的迴文序列；所剪切的鹼基序列通常即為所识别的序列。是遺傳工程上，實用性較高的限制酶種類。例如：EcoRI、HindIII。

 第三型限制酶 
與第一型限制酶類似，同時具有修飾及识别切割的作用。可识别短的不對稱序列，切割位與识别序列約距24-26個鹼基對，并不能准确定位切割位点，所以并不常用。例如：EcoPI、HinfIII。

 例子 
名称來源识别序列切割位点EcoRIEscherichia coli 5'GAATTC
 3'CTTAAG 5'---G     AATTC---3'
 3'---CTTAA     G---5'BamHIBacillus amyloliquefaciens 5'GGATCC
 3'CCTAGG 5'---G     GATCC---3'
 3'---CCTAG     G---5'HindIIIHaemophilus influenzae 5'AAGCTT
 3'TTCGAA 5'---A     AGCTT---3'
 3'---TTCGA     A---5'TaqIThermus aquaticus 5'TCGA
 3'AGCT 5'---T   CGA---3'
 3'---AGC   T---5'NotINocardia otitidis 5'GCGGCCGC
 3'CGCCGGCG 5'---GC   GGCCGC---3'
 3'---CGCCGG   CG---5'HinfIHaemophilus influenzae 5'GANTC
 3'CTNAG 5'---G   ANTC---3'
 3'---CTNA   G---5'Sau3AStaphylococcus aureus 5'GATC
 3'CTAG 5'---     GATC---3'
 3'---CTAG     ---3'PovII*Proteus vulgaris 5'CAGCTG
 3'GTCGAC 5'---CAG  CTG---3'
 3'---GTC  GAC---5'SmaI*Serratia marcescens 5'CCCGGG
 3'GGGCCC 5'---CCC  GGG---3'
 3'---GGG  CCC---5'HaeIII*Haemophilus egytius 5'GGCC
 3'CCGG 5'---GG  CC---3'
 3'---CC  GG---5'AluI*Arthrobacter luteus 5'AGCT
 3'TCGA 5'---AG  CT---3'
 3'---TC  GA---5'EcoRV*Escherichia coli 5'GATATC
 3'CTATAG 5'---GAT  ATC---3'
 3'---CTA  TAG---5'KpnIMolecular cell biology. Lodish, Harvey F. 5. ed. : - New York : W. H. Freeman and Co., 2003, 973 s. b ill. ISBN 0-7167-4366-3Klebsiella pneumonia 5'GGTACC
 3'CCATGG 5'---GGTAC  C---3'
 3'---C  CATGG---5'PstIProvidencia stuartii 5'CTGCAG
 3'GACGTC 5'---CTGCA  G---3'
 3'---G  ACGTC---5'SacIStreptomyces achromogenes 5'GAGCTC
 3'CTCGAG 5'---GAGCT  C---3'
 3'---C  TCGAG---5'SalIStreptomyces albue 5'GTCGAC
 3'CAGCTG 5'---G  TCGAC---3'
 3'---CAGCT  G---5'SphIStreptomyces phaeochromogenes 5'GCATGC
 3'CGTACG 5'---G  CATGC---3'
 3'---CGTAC  G---5'XbaIXanthomonas badrii 5'TCTAGA
 3'AGATCT 5'---T  CTAGA---3'
 3'---AGATC  T---5'* = 平滑末端（blunt ends）

 參考文獻 

 外部連結 
 Restriction Enzyme Digestion of DNA Protocol 
 Restriction enzymes: protein data bank molecule of the month 
 Restriction Homepage  - Six different tools

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