Lowry protein tahlili

Lowry protein tahlil solusyondaki total protein konsantrasyonunu belirlemek için uygulanan biyokimyasal tahlil. Total protein konsantrasyonu numune solusyonundaki renk değişikliği ile gözlemlenir. Bu renk değişimi protein konsantrasyonuna oranla değişir ve kolorimetrik tekniklerle ölçülebilir. Tahlilin ismini 1940' larda tahlil reaktifini geliştiren biyokimyager Oliver H. Lowry' den alır. Lowry' nin bu tekniği açıklayan 1951'de yayınladığı makale, 300,000 kere ile bilim literatüründeki en çok atıf yapılan makaledir.

 Mekanizma 
Metot bakır iyonlarının alkalin ortamda peptit bağları ile verdiği tepkimeler (Biüret testi) ile aromatik protein birimlerinin yükseltgenmesini kombine eder. Lowry metodu, peptit bağları tarafından indirgenmiş olan Cu+ iyonlarının  Folin–Ciocalteu reaktifi (Folin–Ciocalteu reaksiyonundaki  fosfotungstik asit ve fosfomolibdik asitin bir karışımı) ile reaksiyonu temeline deyanır. Tepkime mekanizması çok iyi anlaşılmamıştıır ama Folin–Ciocalteu reaktifinin indirgenmesini ve  aromatic birimlerin yükseltgenmesini (başlıca triptofan ve tirozin) içerdiği bilinmektedir. Deneyler aynı zamanda sisteinin reaktif ile tepkime verdiğini göstermiştir. Yani sistein birimleri de muhtemelen Lowry tahlilinde gözlenen absorbansa katkıda bulunmaktadır. Bu tepkimenin sonucunda yoğun mavi bir molekül olan heteropolimolibdenum Mavi ortaya çıkar. İndirgenmiş Folin reagent (heteropolimolibdenum Mavi) reaksiyonu 660 nm' de absorbans ile ölçülür. Sonuç olarak, numunedeki total protein konsantrasyonu-  Folin–Ciocalteu reaktifini indirgeyen- triptofan ve tirozin birimlerinin konsantrasyonlarından anlaşılabilir.

Metot ilk kez Lowry tarafından 1951'de öne sürülmüştür. Bikinkoninik asit  ve Hartree–Lowry tahlilleri orijinal lowry metodunun modifikasyonu ile üretilmiştir.

 Ayrıca bakınız 

 Biüret testi
 Bradford protein tahlili

 Kaynakça 

 Dış bağlantılar 

 A simplification of the protein assay method of Lowry et al. which is more generally applicable

Kategori:Analitik kimya
Kategori:Kimyasal testler
Kategori:Protein yöntemleri