Protoplas

Sel tanaman pada umumnya dilindungi oleh dinding sel dari selulosa yang keras untuk menopang struktur tanaman. Sel tanaman yang telah kehilangan dinding selnya disebut dengan istilah protoplas.Wu FH et al. 2009. Tape-Arabidopsis Sandwich - a simpler Arabidopsis protoplast isolation method. Plant Methods 5: 16. Protoplas dapat diisolasi dari berbagai macam jaringan ataupun organ tanaman seperti daun, tunas, akar, dan buah.Vasil I, Ahuja MR, Vasil V. 1979. Plant tissue cultures in genetics and plant breeding. Adv Genetics 20: 127-215.

 Isolasi Protoplas 
Protoplas dapat diisolasi dari jaringan dengan metode secara mekanik dan kimia.

 Metode Mekanik 
Protoplas dapat diisolasi dari jaringan dengan metode secara mekanik dan kimia. Isolasi protoplas secara mekanik diperkenalkan sekitar 100 tahun yang lalu, dan fusi pertama dengan metode isolasi ini pada tahun 1909.Gautheret, R.J. 1985. History of plant tissue and cell culture: A personal account, in Cell Culture and Somatic Cell Genetics of Plants (Vasil, I. K., ed.), Vol 2. Hal 1-59. New York: Academic Press.

Pada awal 1892, Klercker jhjsdfhdalsjfh jaringan.Klercker JA. 1892. Eine Methode zur Isolierung Iebender Protoplasten. Hal 463-471. Stockholm: Oefvers.

 Metode Kimia 
Pada tahun 1960, Cocking menggunakan metode isolasi protoplas dengan reaksi enzimatis. Cocking menggunakan selulase kasar dari Myrothecium verrucaria untuk mengisolasi protoplas dari akar tomat.Cocking EC. 1960. Selection and somatic hybridization. In Frontiers of Plant Tissue Culture. Hal 151-158. Calgary: Univ of Calgary Press. Prinsip dari metode isolasi menggunakan enzim adalah digesti dinding sel tanaman dengan menggunakan enzim selulase dan macerozim untuk menghasilkan protoplas.

 Kelebihan dan Kekurangan 
Keuntungan yang utama dari fusi protoplas tanaman adalah dapat dilakukan hibridisasi antara spesies tanaman yang secara seksual tidak kompatibel atau yang sulit untuk dilakukan hibridisasi seksual. Keuntungan lainnya adalah protoplas dapat menyerap molekul dan organel asing dengan cara fagositosis. Hal ini menguntungkan dalam studi virologi karena protoplas lebih mudah diinfeksi dan dapat diinfeksi oleh virus yang berbeda dalam satu sel.Sengbusch PV. 2003. Protoplasts. [terhubung berkala]. http://www.biologie.uni-hamburg.de/b-online/e29/29c.htm  [20 Mei 2010].
Meskipun dengan fusi protoplas ini dapat menghibridisasi semua spesies tanaman. Namun, fusi protoplas memiliki kelemahan, yaitu rendahnya regenerasi tanaman dari protoplas. Jarang sekali terjadinya pembentukan kalus dari protoplas hasil hibridisasi.Ahuia MR. 1982. Isolation, Culture, and Fusion of Protoplasts, Problems and Prospects. Silvae Genetica 31(2-3): 66-77.

 Referensi 

Kategori:Biologi