Taq polimerase

Taq polimerase (disingkat Taq pol) merupakan enzim DNA polimerase (EC 2.7.7.7) stabil suhu pertama yang berhasil dipurifikasi dari bakteri termofil ekstrem Thermus aquaticus yang hidup pada dinding geiser vulkanik.

Enzim Taq pol pertama kali dipurifikasi pada tahun 1976. Enzim ini bebas dari fosfomomonoesterase, fosfodiesterase, dan aktivitas eksonuklease utas tunggal. Suhu optimum Taq pol adalah 80 °C.

Untuk dapat beraktivitas maksimum, enzim ini memerlukan keempat deoksiribonukleotida dan DNA timus anak sapi yang diaktivasi. Selain itu, dibutuhkan juga kofaktor kation divalen yaitu Mg2+ atau paling tidak Mn2+. Kation monovalen pada konsetrasi 0.1 M tidak menunjukkan efek inhibitor yang signifikan. pH optimum dari enzim ini adalah 8.0 pada buffer tris(hidroksimetil)aminomethan-hidroklorida.

Massa molekuler pertama kali diestimasi mencapai 63.000-68.000, dengan metode sentrifugasi gradien sukrosa dan filtrasi gel menggunakan Sephadex G-100. Ukuran yang kecil, tahan suhu tinggi, dan memiliki sedikit saja aktivitas nuklease adalah faktor-faktor yang membedakan enzim polimerase ini dengan DNA polimerase dari  E. coli.Chien A, Edgar DB, Trela JM. 1976. Deoxyribonucleic acid polymerase from the extreme thermophile Thermus aquaticus. J Bacteriol 127:1550-1557. Enzim Taq pol memiliki aktivitas 5’—3’ eksonuklease. Namun, struktur domain aktivitas 3’—5’ eksonuklease telah teralterasi sehingga aktivitas tersebut tidak terdapat dalam enzim termostabil seperti Taq pol.Eom SH, Wang J, Steitz TA. 1996. Structure of Taq polymerase with DNA at the polymerase active site. Nature 382:278-281.

Taq pol sangat luas penggunaannya dalam teknik PCR meskipun telah ditemukan sumber DNA polimerase lainnya karena sifatnya yang termostabil.

 Referensi 

Polimerase Taq
Kategori:Bakteri
Kategori:Mikroorganisme
Kategori:Reaksi berantai polimerase
Kategori:Ekstremofili