आइसोप्रोपाइल β-d-1-थियोगैलेक्टोपाइरानोसाइड

{{DISPLAYTITLE:Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside}}

आइसोप्रोपाइल β--1-थियोगैलेक्टोपाइरानोसाइड' (आईपीटीजी) एक आण्विक जीव विज्ञान अभिकर्मक है। यह यौगिक एलोलैक्टोज, एक लैक्टोज मेटाबोलाइट का एक आणविक अनुकरण है जो लैक ऑपेरॉन] के ट्रांसक्रिप्शन को ट्रिगर करता है। ], और इसलिए इसका उपयोग प्रोटीन अभिव्यक्ति को प्रेरित करने के लिए किया जाता है जहां जीन लाख ऑपरेटर के नियंत्रण में होता है।

क्रिया का तंत्र

एलोलैक्टोज़ की तरह, आईपीटीजी लैस रिप्रेसर से जुड़ता है और लैक ऑपरेटर से टेट्रामेरिक रिप्रेसर को एलोस्टेरिक तरीके से छोड़ता है, जिससे लैक ऑपेरॉन में जीन के प्रतिलेखन की अनुमति मिलती है, जैसे कि  के लिए जीन कोडिंग बीटा-गैलेक्टोसिडेज़, एक हाइड्रॉलेज़ एंजाइम जो β-गैलेक्टोसाइड्स के हाइड्रोलिसिस को मोनोसैकेराइड में उत्प्रेरित करता है। लेकिन एलोलैक्टोज के विपरीत, सल्फर (एस) परमाणु एक रासायनिक बंधन बनाता है जो कोशिका द्वारा गैर-हाइड्रोलाइजेबल होता है, जो कोशिका को प्रेरक को चयापचय या क्षरण करने से रोकता है। इसलिए, प्रयोग के दौरान इसकी सांद्रता स्थिर रहती है।

ई द्वारा आईपीटीजी ग्रहण। कोलाई लैक्टोज परमीज़ की क्रिया से स्वतंत्र हो सकता है, क्योंकि इसमें अन्य परिवहन मार्ग भी शामिल हैं। आईपीटीजी प्रेरक प्रवर्तकों के प्रेरण पर लैसी जीन, एस्चेरिचिया कोली और स्यूडोमोनास फ्लोरेसेंस में अध्ययन किया गया कम सांद्रता पर, IPTG लैक्टोज परमीज़ के माध्यम से कोशिकाओं में प्रवेश करता है, लेकिन उच्च सांद्रता में (आमतौर पर प्रोटीन प्रेरण के लिए उपयोग किया जाता है), आईपीटीजी लैक्टोज परमीज़ से स्वतंत्र रूप से कोशिकाओं में प्रवेश कर सकता है।

प्रयोगशाला में उपयोग
जब 4 °C या उससे कम तापमान पर पाउडर के रूप में संग्रहीत किया जाता है, तो IPTG 5 वर्षों तक स्थिर रहता है। यह समाधान में काफी कम स्थिर है; सिग्मा कमरे के तापमान पर एक महीने से अधिक समय तक भंडारण की सिफारिश नहीं करता है।https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma-Aldrich/Product_Information_Sheet/ i5502pis.pdf  आईपीटीजी 100 μmol/L से 3.0 [[विक्षनरी:मिलिमोलर] की सांद्रता सीमा में प्रोटीन अभिव्यक्ति का एक प्रभावी प्रेरक है |एमएमओएल/एल. आम तौर पर, IPTG का एक बाँझ, फ़िल्टर किया हुआ 1 mol/L घोल तेजी से बढ़ते बैक्टीरिया कल्चर में 1:1000 मिलाया जाता है, जिससे 1 mmol/L की अंतिम सांद्रता मिलती है। उपयोग की गई सांद्रता आवश्यक प्रेरण की शक्ति, साथ ही उपयोग की जाने वाली कोशिकाओं या प्लास्मिड के जीनोटाइप पर निर्भर करती है। यदि lacIq, एक उत्परिवर्ती जो लैक दमनकारी का अत्यधिक उत्पादन करता है, मौजूद है, तो IPTG की उच्च सांद्रता आवश्यक हो सकती है।
 सन्दर्भ