Ficoeritrina

A ficoeritrina (PE) é un complexo proteína-pigmento vermello da familia das ficobiliproteínas captadoras de luz, presente nas algas vermellas e criptófitas,, que funciona como un pigmento accesorio para a clorofila durante a fotosíntese.

Como todas as ficobiliproteínas, está composta por unha parte proteica que está covalentemente unida a uns cromóforos chamados ficobilinas. Na familia da ficooeritrina, as ficobilinas máis comúns son: ficoeritrobilina, que é o cromóforo aceptor máis típico na ficoeritrina, e máis raramente a ficourobilina. As ficoeritrinas están compostas por monómeros (αβ), que xeralmente se dispoñen formando un trímero con forma de disco (αβ)3 ou un hexámero (αβ)6 (o segundo é a unidade funcional das barras antena). Estes complexo típicos conteñen tamén un terceiro tipo de subunidade, a cadea γ.

Son as ficobiliproteínas que se unen ao maior número de ficobilinas (ata dez por monómero αβ).

 Ficobilisomas 

miniatura|260px|As ficobiliproteínas (como a ficoeritrina) forman xeralmente barras feitas de discos amontoados constituíndo ficobilisomas.
As ficobiliproteínas son parte de enormes complexos proteicos antena captadores de luz chamados ficobilisomas. Nas algas vermellas están ancorados no lado estromal das membrana dos tilacoides dos cloroplastos, mentres que nas criptófitas os ficobilisomas son reducidos (aquí son moléculas de ficobiliproteína 545 PE545) e están densamente empaquetadas dentro do lume dos tilacoides.

A ficoeritrina é un pigmento accesorio para o principal pigmento responsable da fotosíntese, que é a clorofila. A enerxía da luz é captada pola ficoeritrina e despois é cedida ao par de clorofilas do centro de reacción, a maior parte das veces por medio das ficobiliproteínas ficocianina e aloficocianina.

 Características estruturais 
As ficoeritrinas agás a ficoeritrina 545 (PE545) están compostas por monómeros (αβ) ensamblados en hexámeros con forma de disco (αβ)6 ou trímeros (αβ)3 con simetría 32 ou 3, que encerran un canal central. Nos ficobilisomas (PBS) cada trímero ou hexámero contén como mínimo unha proteína de enlace localizada no canal central. A B-ficoeritrina (B-PE) e a R-ficoeritrina (R-PE) das algas vermellas ademais das cadeas α e β teñen unha terceira cadea chamada subunidade γ que é unha cadea que combina as funcións de enlace e de captación de luz, xa que leva cromóforos.

miniatura|none|580px|Estrutura cristalina da B-ficoeritrina da alga vermella Porphyridium cruentum ( ). A unidade asimétrica ()2 á esquerda e a molécula biolóxica asumida ()3. Contén ,  e .

A R-ficoeritrina (R-PE) é producida predominantemente polas algas vermellas. A proteína consta polo menos de tres subunidades diferentes e varía segundo a especie. A estrutura da subunidade da R-ficoeritrina máis común é (αβ)6γ. A subunidade α ten dúas ficoeritrobilinas (PEB), a subunidade β ten 2 ou 3 ficoeritrobilinas e unha ficourobilina (PUB), mentres que as subunidades gamma teñen 3 ficoeritrobilinas e dúas ficourobilinas (γ1) ou 1 ou 2 ficoeritrobilinas e 1 ficourobilina (γ2). O peso molecular da R-ficoeritrina é de 250.000 Da.

As estruturas cristalinas dispoñibles no Protein Data Bank  conteñen unha unidade asimétrica (αβ)2 ou (αβγ)2 de diferentes ficoeritrinas:

miniatura|280px|A ficoeritrobilina é o típico cromóforo da ficoeritrina. É similar á porfirina da clorofila por exemplo, pero o tetrapirrol é lineal, xa que non está pechado formando un anel cun metal no centro.
miniatura|280px|A alga vermella Gracilaria contén R-ficoeritrina.

 Cromóforo ou outramolécula non proteica  Ficoeritrina  Cadea                    PE545  B-PE  R-PE  outros tipos Bilinas  8  10  10  10  α e β - Ficoeritrobilina (PEB)  6  10  0 ou 8  8  β (PE545)or α e β - 15,16-dihidrobiliverdina (DBV)  2  -  -  -  α (-3 e -2) - Ficocianobilina (CYC)  -  -  8 ou 7 ou 0  -  α e β - Biliverdina IX alfa (BLA)  -  -  0 ou 1  -  α - Ficourobilina (PUB)  -  -  2  2  β 5-hidroxilisina (LYZ)  1 ou 2  -  -  -  α (-3 ou -3 e -2) N-metil asparaxina (MEN)  2  2  0 ou 2  2  β Ión sulfato SO42- (SO4)  -  5 ou 1  0 ou 2  -  α ou α e β Ión cloruro Cl- (CL)  1  -  -  -  β Ión magnesio Mg2+ (MG)  2  -  -  -  α-3 e β ficheiros PDB inspeccionados  1XG01XF61QGW  3V573V58  1EYX1LIA1B8D  2VJH

miniatura|400px|Estrutura cristalina da ficoeritrina 545 (PE545) da criptófita unicelular Rhodomonas CS24 ( ). Cores: cadeas - , , ,  (hélices, follas en amarelo), ,  (15,16-DHBV), , , , .
A molécula biolóxica asumida de ficoeritrina 545 (PE545) é (αβ)2 ou máis ben . Os números 3 e 2 despois de α na segunda fórmula son parte dos nomes da cadea aquí, non as súas cantidades. O nome sinónimo nas criptófitas da cadea α3 é cadea α1.

A ensamblaxe máis grande de B-ficoeritrina (B-PE) é o trímero (αβ)3 , pero en preparacións de algas vermellas obtívose tamén o hexámero (αβ)6 . No caso da R-ficoeritrina (R-PE) a molécula máis grande asumida aquí é (αβγ)6,  ou (αβ)6 dependendo da publicación, para outros tipos de ficoeritrina (αβ)6. Estas cadeas γ de Protein Data Bank son moi pequenas e constan só de 6 ou 3 aminoácidos recoñecibles (), mentres que a cadea de enlace γ descrita ao inicio desta sección é grande (por exemplo de 277 aminoácidos e 33 kDa no caso da γ33 da alga vermella Aglaothamnion neglectum) . Isto débese a que por problemas cristalográficos só poden modelarse uns poucos aminoácidos (   ).

Para (αβγ)6, (αβ)6 ou  os valores da táboa deberían simplemente multiplicarse por 3, (αβ)3 contén números intermedios de moléculas non proteicas.

Nas ficoeritrinas PE545 de arriba, unha cadea α (-2 ou -3) únese a 1 molécula de bilina, noutros exemplos 2 moléculas de cadea β sempre 3 moléculas, que a pequena cadea γ ningunha.

Dúas moléculas de N-metil asparaxina únense á cadea β, unha 5-hidroxilisina á α (-3 ou -2), un Mg2+ á α-3 e β, un Cl- á β, 1-2 moléculas de SO42- á α ou β.

Debaixo a estrutura cristalina da R-ficoeritrina de Protein Data Bank:

miniatura|none|580px|Estrutura cristalina da R-ficoeritrina da alga vermella Gracilaria chilensis  . Oligómero básico ()2 (denominada unidade asimétrica). Contén , , , , . Un fragmento da cadea γ en vermello, o segundo branco porque non se considera hélice alfa a pesar da súa secuencia de aminoácidos idéntica.

miniatura|none|580px|O oligómero enteiro de R-ficoeritrina de Gracilaria chilensis ()6  .

 Características espectrais 
miniatura|Espectro de fluorescencia da ficoeritrina.
Os picos de absorción no espectro da luz visible aparecen a 495 e 545/566 nm, dependendo dos cromóforos que leven unidos e o organismo considerado. Hai un forte pico de emisión a 575 ± 10 nm. (é dicir, a ficoeritrina absorbe luz azul-verdosa/amarelenta e emite luz laranxa-amarela).
              Máximo de absorción
        565 nm

              Pico de absorción adicional
        498 nm

              Máximo de emisión
        573 nm

              Coeficiente de extinción (ε)
        1.96 x 106 M−1cm−1

              Rendemento cuántico (QY)
        0.84

              Brillo (ε x QY)
        1.65 x 106 M−1cm−1



As bilinas PEB e DBV en PE545 absorben na rexión do espectro verde tamén, cuns máximos a 545 e 569 nm respectivamente. O máximo de emisión de fluorescencia é a 580 nm.

 Variacións da R-ficoeritrina 
miniatura|Perfís de excitación e emisión da R-ficoeritrina de dúas algas distintas. Tamén se indican as lonxitudes de onda da excitación láser común.
Como se mencionou anteriormente, a ficoeritrina pode encontrarse en diversas especies de algas. Hai variacións na eficiencia da absorbancia e emisión de luz requirida para a facilitación da fotosíntese. Este podería ser o resultado do lugar da columna de auga onde vive unha determinada especie de alga e como consecuencia da necesidade dunha maior ou menor eficiencia dos pigmentos accesorios.

Cos avances nas tecnoloxías de detección e da imaxe que poden evitar o fotobranqueamento rápido, os fluoróforos de proteínas convertéronse nunha ferramenta potente e viable para os investigadores en campos como a microscopia, análise de micromatrices e aplicación da técnica do western blot. Tendo en conta isto, pode ser útil para os investigadores cribar estas R-ficoeritrinas variables para determinar cal é a máis apropiada para a súa aplicación particular. Mesmo un pequeno incremento na eficiencia da fluorescencia podería reducir o ruído de fondo e rebaixar o grao de resultados de falso negativo.

 Aplicacións 
A R-ficoeritrina é útil no laboratorio como un indicador baseado na fluorescencia da presenza de cianobacterias e para etiquetar anticorpos na inmunofluorescencia, entre outras aplicacións. Hai tamén outros tipos de ficoeritrinas, como a B-ficoeritrina, que ten propiedades espectrais lixeiramente diferentes. A B-ficoeritrina absorbe fortemente nos 545 nm (cor verde amarelenta) e emite fortemente a 572 nm (amarelo) o que podería ser mellor para algúns instrumentos. A B-ficoeritrina pode tamén ser menos "pegañenta" que a R-ficoeritrina e contribúe menos ao sinal de fondo debido a unións non específicas en certas aplicacións.

A R-ficoeritrina e a B-ficoeritrina están entre as tinguiduras fluorescentes máis brillantes que foron identificadas.

 Notas 

 Outros artigos 
 Biliproteína

 Ligazóns externas 


Categoría:Proteínas
Categoría:Pigmentos biolóxicos
Categoría:Pigmentos fotosintéticos
Categoría:Cianobacterias
Categoría:Algas