Método para a lipofuscina

O método para a lipofuscina é unha técnica para a demostración deste pigmento, creado polo AFIP (Instituto de patoloxía das Forzas Armadas dos Estados Unidos).

A lipofuscina é un pigmento marrón dourado formado nos lisosomas de células que sofren auto oxidación progresiva e prolongada de lípidos insaturados.
Este pigmento tende a se acumular nas células (nos lisosomas, coma un pigmento en gran de café claro, localizado preto do polo nuclear da célula) cun metabolismo elevado, coma neuronas, epitelio tiroide e tecido muscular, particularmente cardíaco, e aparece sobre todo co avellentamento en casos de deficiencia de vitamina D. Está composto de lipoproteínas, e a súa acumulación nun tecido denomínase lipofucsinosis ou atrofia parda.

 Tecido control e diana 
Os órganos mais afectados son: corazón, fígado e sistema nervioso. O fixador tisular óptimo é o formol 10%, o medio de inclusión preferible é a parafina, e o grosor de corte ideal é de 6 micrómetros.

 Reactivos 
 Solución de Carbolfuscina de Kinyoun (filtrar antes de usar):
 4gr Fucsina básica
 8gr Fenol (ácido carbólico) en cristais derretidos
 20cc Alcohol etílico ó 95%
 100cc Auga destilada
 Solución alcohólica ácida ó 1%:
 1cc Ácido Clorhídrico
 99cc Etanol ó 70%
 Solución acuosa de ácido pícrico:
 2gr Ácido pícrico
 100cc Auga destilada

 Procedemento 
 desparafinar e hidratar as láminas até chegar á auga destilada.
 colorear coa solución de carbolfuscina durante unha hora.
 enxaugar con auga destilada, varias veces.
 diferenciar coa solución de alcohol ácido, mergullando as láminas de 5 a 6 veces, ou até que as seccións tornen dunha cor rosada pálida.
 lavar con auga corrente durante 5 minutos e logo enxaugar con auga destilada.
 contrastar coa solución de ácido pícrico por 1 minuto aproximadamente.
 deshidratar e aclarar co alcohol etílico ó 95 %, alcohol etílico absoluto e xileno, 2 veces cada un, 2 minutos cada un.

 Resultados 
 Lipofuscina: vermello.
 Fondo: amarelo.
Os pigmentos amosan unha cor parda fluorescente na luz ultravioleta.

 Véxase tamén 
 Bibliografía 


 Ligazóns externas 
 Pigmentos de lipofuscina nos nenos

Categoría:Tinguiduras histolóxicas