Técnica de May Grünwald Giemsa

A técnica de May Grünwald Giemsa emprégase para a demostración de bacterias ou outros microorganismos en sangue.

 Características 
O frotis, unha vez seco, fíxase e tínguese mediante colorantes adecuados. Xeralmente, nos laboratorios hematolóxicos empregan colorantes baseados na tinguidura de Romanowsky, baseada nunha combinación de eosina e azul de metileno. Aínda que cada laboratorio emprega a súa receita, os colorantes e os métodos de tinguidura máis empregados son os de Giemsa, Wright e May Grünwald Giemsa.

A técnica de May Grünwald Giemsa baséase na acción complementaria de dous colorantes neutros e na afinidade dos elementos celulares polos colorantes ácidos ou básicos. Estes dous colorantes son May Grünwald e Giemsa, son solubles en alcohol metílico e son, polo tanto, inactivos: é o contacto coa auga o que lles da un poder colorante. Os sales disócianse entón coloreando ácido (eosina) e básico (azul de metileno).

Ocasionalmente utilízase en tecidos incluídos en parafina e cortados a 6 micrómetros.

 Reactivos 
 Solución stock de Jenner:
 Líquido de Jenner, 1gr
 Alcohol metílico, 400cc
 Solución de traballo de Jenner:
 Solución stock de Jenner, 25cc
 Auga destilada, 25cc
 Solución colorante de Giemsa:
 Giemsa en po, 1gr
 Glicerina, 66cc
 Alcohol metílico, 66cc
Mesturar o Giemsa coa glicerina. Metelo na estufa a 60 °C durante 2 horas. Engadir o alcohol e mesturar ben.
 Solución diferenciadora de resina ó 1%
 Resina, 1gr
 Alcohol etílico ó 95 %, 100cc
 Auga destilada (buffer pH 7):
 Solución A
 Fosfato dibásico sódico, 9,47 gr
 Auga destilada, 1000cc
 Solución B
 Fosfato monobásico potásico, 9,80 gr
 Auga destilada, 1000cc
Para cada 100 ml de auga destilada (buffer pH 7), combinar: 
49.6 ml de solución a
50.4 ml de solución b.

 Procedemento 
 Desparafinar e hidratar ata a auga destilada.
 Meter en alcohol metílico, 2 cambios de 5 minutos cada un.
 Poñer os portaobxectos en solución de traballo de Jenner durante 6 minutos.
 Aclarar na solución de auga destilada (buffer pH 7).
 Poñer os portaobxectos en solución de Giemsa 45 minutos.
 Aclarar rapidamente na solución diferenciadora de resina. Chequear ó microscopio.
 Aclarar en auga destilada.
 Deshidratar en alcohol de graduación ascendente.
 Aclarar en xilol e montar.

 Resultados 
 Núcleo: azul.
 Citoplasma: rosa a rosa escuro.
 Bacterias: azul palo.

 Véxase tamén 

 Bibliografía 


 Ligazóns externas 

Categoría:Tinguiduras histolóxicas