তরল ক্রোমাটোগ্রাফি–ভর স্পেকট্রোমেট্রি

তরল ক্রোমাটোগ্রাফি–ভর স্পেকট্রোমেট্রি (এলসিএমএস) হলো একটি বিশ্লেষণাত্মক রসায়ন কৌশল যা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি (বা এইচপিএলসির) গাঠনিক পৃথকীকরণ ক্ষমতার সাথে ভর স্পেকট্রোমেট্রি (এমএস) এর ভর বিশ্লেষণ ক্ষমতাকে একত্রিত করে। রাসায়নিক বিশ্লেষণে সংযোজিত ক্রোমাটোগ্রাফি–এমএস পদ্ধতিগুলো অত্যন্ত জনপ্রিয়, কারণ প্রতিটি কৌশলের নিজস্ব ক্ষমতা একত্রে মিলে আরও কার্যকর ফলাফল দেয়। তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যেখানে বহু-উপাদানবিশিষ্ট মিশ্রণকে পৃথক করে, সেখানে ভর স্পেকট্রোমেট্রি প্রতিটি পৃথক উপাদানের পরিচয় শনাক্ত করতে (বা নিশ্চিত করতে) বর্ণালীগত তথ্য সরবরাহ করে। এমএস কেবল সংবেদনশীলই নয়, এটি অত্যন্ত সুনির্দিষ্টভাবে শনাক্তকরণে সক্ষম, যার ফলে নিখুঁত ক্রোমাটোগ্রাফিক পৃথকীকরণের প্রয়োজনীয়তা কমে যায়। এলসি–এমএস বিস্তৃত পরিসরের রাসায়নিকের ওপর কাজ করতে পারে বলে এটি মেটাবোলোমিক্সের জন্যও উপযুক্ত। এই দ্বৈত কৌশলটি পরিবেশগত ও জৈবিক উৎস থেকে পাওয়া জটিল নমুনায় উপস্থিত জৈবরাসায়নিক, জৈব এবং অজৈব যৌগ বিশ্লেষণে ব্যবহৃত হয়। ফলে জৈবপ্রযুক্তি, পরিবেশ পর্যবেক্ষণ, খাদ্য প্রক্রিয়াকরণ, এবং ঔষধ শিল্প, কৃষি-রাসায়নিক ও প্রসাধনী শিল্পে এলসি–এমএস প্রয়োগ করা সম্ভব। ২০০০-এর দশকের শুরু থেকে ক্লিনিক্যাল ক্ষেত্রেও এলসি–এমএস (বিশেষ করে এলসি–এমএস/এমএস) ব্যবহার করা শুরু হয়েছে।

তরল ক্রোমাটোগ্রাফি এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি যন্ত্র ছাড়াও একটি এলসি-এমএস পদ্ধতিতে একটি ইন্টারফেস থাকে, যা এলসি কলাম থেকে পৃথক করা উপাদানগুলোকে কার্যকরভাবে এমএস আয়ন উৎসে স্থানান্তরিত করে। এলসি এবং এমএস যন্ত্রগুলো মৌলিকভাবে একে অপরের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ নয় বলে এই ইন্টারফেসের প্রয়োজন হয়। এলসি পদ্ধতিতে মোবাইল ফেজ হিসেবে উচ্চ চাপের তরল ব্যবহৃত হয়, অন্যদিকে এমএস বিশ্লেষকগুলো সাধারণত উচ্চ শূন্যস্থানে কাজ করে। তাই এলসি কলাম থেকে নিঃসৃত তরলকে সরাসরি এমএস উৎসে পাম্প করা সম্ভব নয়। মোটের ওপর ইন্টারফেস হলো এলসি-এমএস সিস্টেমের একটি যান্ত্রিকভাবে সাধারণ অংশ যা সর্বোচ্চ পরিমাণ বিশ্লেষ্য বস্তু স্থানান্তর করে, এলসিতে ব্যবহৃত মোবাইল ফেজের উল্লেখযোগ্য অংশ অপসারণ করে এবং ক্রোমাটোগ্রাফির ফলাফলের রাসায়নিক বৈশিষ্ট্য অক্ষুণ্ণ রাখে। শর্তানুসারে, ইন্টারফেসটি এমএস সিস্টেমের আয়নকরণ দক্ষতা এবং শূন্যস্থানগত অবস্থায় কোনো ব্যাঘাত ঘটাবে না। বর্তমানে সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত এলসি-এমএস ইন্টারফেসগুলো বায়ুমণ্ডলীয় চাপ আয়নকরণ (এপিআই) কৌশলের ওপর ভিত্তি করে তৈরি, যেমন ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়নকরণ (ইএসআই), বায়ুমণ্ডলীয়-চাপ রাসায়নিক আয়নকরণ (এপিসিআই) এবং বায়ুমণ্ডলীয় চাপ আলোক-আয়নকরণ (এপিপিআই)। দুই দশক ধরে গবেষণা ও উন্নয়নের পর ১৯৯০-এর দশকে এই ইন্টারফেসগুলো ব্যবহারের উপযোগী হয়।

 ইতিহাস 
এমএসের সাথে ক্রোমাটোগ্রাফির সংযোজন রাসায়নিক বিশ্লেষণের একটি সুপ্রতিষ্ঠিত কৌশল, যার সূত্রপাত ১৯৫০-এর দশকে। ১৯৫২ সালে যখন এ. টি. জেমস এবং এ. জে. পি. মার্টিন ট্যান্ডেম পৃথকীকরণ–ভর বিশ্লেষণ কৌশল তৈরির চেষ্টা করছিলেন, তখন প্রথম গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি (জিসি)-এমএস প্রবর্তিত হয়। জিসি পদ্ধতিতে বিশ্লেষ্য বস্তুগুলো গ্যাস হিসেবে কলাম থেকে বেরিয়ে আসে এবং এমএস সিস্টেমের ইলেক্ট্রন আয়নকরণ (ইআই) বা রাসায়নিক আয়নকরণ (সিআই) উৎসের সাথে এর সংযোগ স্থাপন যান্ত্রিকভাবে বেশ সহজ ছিল। একারণে জিসি-এমএস সিস্টেমের উন্নয়ন এলসি-এমএস এর তুলনায় দ্রুত হয়েছে এবং ১৯৭০-এর দশকে এই সিস্টেমগুলো প্রথম বাণিজ্যিকভাবে বাজারজাত করা হয়। এলসি-এমএস সিস্টেমের উন্নয়ন হতে জিসি-এমএস এর চেয়ে বেশি সময় লেগেছিল এবং তা সরাসরি সঠিক ইন্টারফেস তৈরির ওপর নির্ভরশীল ছিল। ভিক্টর ট্যালরোজ এবং রাশিয়ায় তার সহযোগীরা ১৯৬০-এর দশকের শেষদিকে এলসি-এমএস তৈরির কাজ শুরু করেন, যখন তারা প্রথম একটি ইআই উৎসের সাথে এলসি কলামকে যুক্ত করতে ক্যাপিলারি ব্যবহার করেছিলেন। ১৯৭৩ সালে ম্যাকল্যাফার্টি এবং তার সহযোগীরা একই ধরনের কৌশল নিয়ে গবেষণা করেন যেখানে তারা এলসি কলামকে একটি সিআই উৎসের সাথে যুক্ত করেছিলেন, যা উৎসের ভেতরে বেশি পরিমাণে তরল প্রবাহের সুযোগ করে দেয়। এটিই ছিল এলসি এবং এমএসকে যুক্ত করার প্রথম ও সবচেয়ে সহজ উপায় এবং এটি 'ক্যাপিলারি ইনলেট ইন্টারফেস' নামে পরিচিত ছিল। এলসি-এমএসের জন্য এই অগ্রগামী ইন্টারফেসটির বিশ্লেষণ ক্ষমতা জিসি-এমএস এর মতোই ছিল এবং এটি মূলত উদ্বায়ী বিশ্লেষ্য বস্তু ও নিম্ন আণবিক ভরের (৪০০ ডাল্টনের নিচে) অপোলার যৌগগুলোর মধ্যে সীমাবদ্ধ ছিল। ক্যাপিলারি ইনলেট ইন্টারফেসে ক্যাপিলারির ভেতরে মোবাইল ফেজের বাষ্পীভবনই ছিল অন্যতম প্রধান সমস্যা। এলসি-এমএস তৈরির প্রথম বছরগুলোতে অনলাইন এবং অফলাইন উভয় বিকল্পই প্রস্তাব করা হয়েছিল। সাধারণত অফলাইন সংযোগে ফ্র্যাকশন সংগ্রহ, দ্রাবকের বাষ্পীভবন এবং প্রোব ব্যবহার করে এমএস এ বিশ্লেষ্য বস্তু স্থানান্তর করা হতো। অফলাইন প্রক্রিয়ায় প্রচুর সময় লাগত এবং নমুনা দূষিত হওয়ার ঝুঁকি ছিল। দ্রুতই বোঝা গেল যে জটিল মিশ্রণ বিশ্লেষণের জন্য এলসি-এমএস এ একটি সম্পূর্ণ স্বয়ংক্রিয় অনলাইন সংযোগ ব্যবস্থা প্রয়োজন।

রুটিন বিশ্লেষণমূলক কাজ হিসেবে এলসি-এমএসের ব্যাপক জনপ্রিয়তা ও সফলতার মূলে রয়েছে এর ইন্টারফেস এবং তরল-ভিত্তিক এলসি ও শূন্যস্থান-ভিত্তিক এমএসের মধ্যবর্তী আয়ন উৎস। আধুনিক বায়ুমণ্ডলীয়-চাপ আয়নকরণ ইন্টারফেসের পথে নিচের ইন্টারফেসগুলো মাইলফলক হিসেবে কাজ করেছে, যা ঐতিহাসিক গুরুত্বের কারণে নিচে বর্ণনা করা হলো।

 মুভিং-বেল্ট ইন্টারফেস 
মুভিং-বেল্ট ইন্টারফেস (এমবিআই) ১৯৭৭ সালে ম্যাকফ্যাডেন এবং তার সহযোগীরা তৈরি করেন এবং ফিনিগান কোম্পানি এটি বাজারজাত করে। এই ইন্টারফেসে একটি চলন্ত বেল্ট থাকত যার ওপর এলসি কলামের তরল জমা হতো। বেল্টের ওপর হালকা তাপ দিয়ে দ্রাবকটি বাষ্পীভূত করা হতো এবং দুটি ভ্যাকিউয়াম চেম্বারে নিম্ন চাপে দ্রাবক বাষ্পগুলো বের করে দেওয়া হতো। তরল অংশটি চলে যাওয়ার পর বেল্টটি একটি হিটারের ওপর দিয়ে যেত যা বিশ্লেষ্য বস্তুগুলোকে এমএস আয়ন উৎসে বাষ্পীভূত করে পাঠাত। মুভিং-বেল্ট ইন্টারফেসের অন্যতম সুবিধা ছিল বিভিন্ন ধরনের ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার সাথে এর সামঞ্জস্য। ১৯৭৮ থেকে ১৯৯০ সালের মধ্যে এলসি-এমএস প্রয়োগে এটি সফলভাবে ব্যবহৃত হয়েছে কারণ এটি ইআই, সিআই এবং ফাস্ট-অ্যাটম বোমবার্ডমেন্ট (এফএবি) আয়ন উৎসের সাথে সংযোগ স্থাপনে সক্ষম ছিল। এই ইন্টারফেসের মাধ্যমে সাধারণত ম্যাগনেটিক সেক্টর এবং কোয়াড্রপোল যন্ত্রের সাথে এলসি কলাম যুক্ত করা হতো। মুভিং-বেল্ট ইন্টারফেসের ফলে ঔষধ, কীটনাশক, স্টেরয়েড, অ্যালকালয়েড এবং পলিসাইক্লিক অ্যারোমেটিক হাইড্রোকার্বন বিশ্লেষণে এমএসের ব্যাপক প্রয়োগ সম্ভব হয়। তবে যান্ত্রিক জটিলতা, বেল্ট পরিষ্কারের অসুবিধা এবং অত্যন্ত সংবেদনশীল জৈব অণু বিশ্লেষণে অকার্যকর হওয়ার কারণে বর্তমানে এটি আর ব্যবহৃত হয় না।

 ডিরেক্ট লিকুইড-ইনট্রোডাকশন ইন্টারফেস 
ডিরেক্ট লিকুইড-ইনট্রোডাকশন (ডিএলআই) ইন্টারফেস ১৯৮০ সালে তৈরি হয়। ক্যাপিলারি ইনলেট ইন্টারফেসে তরল বাষ্পীভবনের সমস্যা সমাধানের জন্য এটি তৈরি করা হয়েছিল। ডিএলআই-তে এলসি প্রবাহের একটি ছোট অংশকে একটি সূক্ষ্ম ছিদ্র বা ডায়াফ্রামের (সাধারণত ১০ মাইক্রোমিটার ব্যাস) মধ্য দিয়ে চালিত করে তরল জেট তৈরি করা হতো, যা পরে একটি চেম্বারে শুকানো হতো। এখানে দ্রাবক-সহায়তাকারী রাসায়নিক আয়নকরণ উৎস ব্যবহার করে বিশ্লেষ্য বস্তুগুলোকে আয়নিত করা হতো, যেখানে এলসি দ্রাবকগুলোই রিএজেন্ট গ্যাস হিসেবে কাজ করত। এই ইন্টারফেসটি ব্যবহারের জন্য এলসি কলাম থেকে আসা প্রবাহকে বিভক্ত করা প্রয়োজন ছিল, কারণ প্রবাহের মাত্র একটি ছোট অংশই (প্রতি মিনিটে ১ মিলিলিটারের মধ্যে ১০ থেকে ৫০ মাইক্রোলিটার) এমএস সিস্টেমের শূন্যস্থান বজায় রেখে উৎসে প্রবেশ করানো সম্ভব ছিল। বিকল্পভাবে, কর্নেল বিশ্ববিদ্যালয়ের হেনিয়ন মাইক্রো-বোর এলসি পদ্ধতি ব্যবহার করে সফল হন যাতে এলসির পুরো প্রবাহই ব্যবহার করা যেত। ডিএলআই ইন্টারফেসের অন্যতম প্রধান সমস্যা ছিল ডায়াফ্রামের ছিদ্র বারবার বন্ধ হয়ে যাওয়া। ১৯৮২ থেকে ১৯৮৫ সালের মধ্যে কীটনাশক, কর্টিকোস্টেরয়েড, ঘোড়ার প্রস্রাবের মেটাবোলাইট, ইরিথ্রোমাইসিন এবং ভিটামিন বি১২ বিশ্লেষণে এটি ব্যবহৃত হয়েছিল। তবে পরবর্তীতে এটি থার্মোস্প্রে ইন্টারফেস দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়, যা প্রবাহের হার সংক্রান্ত সীমাবদ্ধতা এবং ছিদ্র বন্ধ হয়ে যাওয়ার সমস্যা দূর করেছিল।

একটি সম্পর্কিত যন্ত্র ছিল পার্টিক্যাল বিম ইন্টারফেস (পিবিআই), যা ১৯৮৪ সালে উইলবি এবং ব্রাউনার তৈরি করেন। ১৯৮৮ সাল নাগাদ এটি এমবিআই এর জায়গা দখল করে নেয়। পার্টিক্যাল বিম ইন্টারফেস একটি হিলিয়াম গ্যাস নেবুলাইজার ব্যবহার করে তরল মিশ্রণকে শূন্যস্থানে স্প্রে করত, যেখানে ফোঁটাগুলো শুকিয়ে যেত এবং দ্রাবক বাষ্প বের করে দেওয়া হতো, আর বিশ্লেষ্য বস্তু কণাগুলো উৎসে প্রবেশ করত। উৎসের বাইরে ফোঁটাগুলো শুকানো এবং একটি জেট সেপারেটর ব্যবহার করে দ্রাবক বাষ্প সরিয়ে নেওয়ায় কণাগুলো খুব সহজেই নিম্ন-চাপের ইআই  উৎসে প্রবেশ করে বাষ্পীভূত হতে পারত। এমবিআই এর মতো এখানেও লাইব্রেরি-সার্চযোগ্য ইআই বর্ণালী তৈরির ক্ষমতা অনেক ক্ষেত্রে বাড়তি সুবিধা দিত। হিউলেট-প্যাকার্ড এবং পরবর্তীতে ভিজি ও এক্সট্রেল দ্বারা বাজারজাত করা এই প্রযুক্তিটি বেশ সফল হয়েছিল। তবে বর্তমানে ইলেক্ট্রোস্প্রে এবং এপিসিআই এর মতো বায়ুমণ্ডলীয় চাপের ইন্টারফেসগুলো এর স্থান দখল করেছে, যা আরও বিস্তৃত পরিসরের যৌগ বিশ্লেষণে সক্ষম।
 থার্মোস্প্রে ইন্টারফেস 
থার্মোস্প্রে (টিএসপি) ইন্টারফেসটি ১৯৮০ সালে হিউস্টন বিশ্ববিদ্যালয়ের মার্ভিন ভেস্টাল ও তাঁর সহকর্মীরা উদ্ভাবন করেন। ভেস্টেক এবং বেশ কয়েকটি প্রধান মাস স্পেকট্রোমিটার নির্মাতা প্রতিষ্ঠান এটি বাজারজাত করেছিল। উচ্চ প্রবাহ হার (১ মিলি/মিনিট) নিয়ন্ত্রণে সক্ষম এবং ডিএলআই ইন্টারফেসের প্রবাহ বিভাজন এড়ানো যায়—এমন একটি এলসি-এমএস ইন্টারফেস তৈরির দীর্ঘমেয়াদী গবেষণা প্রকল্পের ফলাফল ছিল এই প্রযুক্তি। থার্মোস্প্রে ইন্টারফেসটি একটি উত্তপ্ত প্রোব, একটি ডি-সলভেশন চেম্বার এবং একটি আয়ন ফোকাসিং স্কিমার নিয়ে গঠিত। এলসি বর্জ্য উত্তপ্ত প্রোবের মধ্য দিয়ে যাওয়ার সময় বাষ্প এবং ক্ষুদ্র কণার জেট হিসেবে নিম্ন চাপে ডি-সলভেশন চেম্বারে প্রবেশ করে। শুরুতে আয়ন তৈরির জন্য ফিলামেন্ট বা ডিসচার্জ ব্যবহার করা হলেও (যা বাষ্পীভূত বিশ্লেষকের জন্য সিআই উৎস হিসেবে কাজ করত), শীঘ্রই দেখা গেল যে ফিলামেন্ট বা ডিসচার্জ বন্ধ থাকলেও আয়ন তৈরি হচ্ছে। এটি হয়তো ইলেকট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন বা আয়ন ইভাপোরেশনের মতো প্রক্রিয়ার মাধ্যমে তরল ফোঁটা থেকে সরাসরি আয়নের নির্গমন, অথবা বাফার আয়ন (যেমন অ্যামোনিয়াম অ্যাসিটেট) থেকে বাষ্পীভূত বিশ্লেষক অণুর রাসায়নিক আয়নাইজেশনের কারণে ঘটেছিল। কিছু বড় বিশ্লেষক অণুর ক্ষেত্রে বহু-আধানযুক্ত আয়নের উপস্থিতি ইঙ্গিত দেয় যে, অন্তত কিছু ক্ষেত্রে সরাসরি আয়ন নির্গমন ঘটছিল। এই ইন্টারফেসটি এলসি কলাম থেকে প্রতি মিনিটে ২ মিলি পর্যন্ত তরল গ্রহণ করতে পারত এবং কার্যকরভাবে তা এমএস ভ্যাকুয়াম সিস্টেমে পৌঁছে দিত। টিএসপি মূলত রিভার্সড ফেজ লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (আরটি-এলসি) যুক্ত এলসি-এমএস ব্যবহারের জন্য বেশি উপযোগী ছিল। সময়ের সাথে সাথে এর যান্ত্রিক জটিলতা কমে আসে এবং এটি ওষুধ শিল্পে ওষুধ, মেটাবোলাইট, কনজুগেট, নিউক্লিওসাইড, পেপটাইড, প্রাকৃতিক পণ্য এবং কীটনাশক বিশ্লেষণের প্রথম আদর্শ এলসি-এমএস ইন্টারফেস হিসেবে জনপ্রিয় হয়ে ওঠে। টিএসপি এর উদ্ভাবন এলসি-এমএস সিস্টেমে এক উল্লেখযোগ্য উন্নতি এনেছিল এবং ১৯৯০-এর দশকের শুরু পর্যন্ত এটি সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত ইন্টারফেস ছিল। পরবর্তীতে বায়ুমণ্ডলীয় চাপ আয়নাইজেশন (এপিআই) ভিত্তিক ইন্টারফেসগুলো এর স্থান দখল করে।

 এফএবি ভিত্তিক ইন্টারফেস 
প্রথম ফাস্ট অ্যাটম বোম্বার্ডমেন্ট (এফএবি) এবং কন্টিনিউয়াস ফ্লো-এফএবি (সিএফ-এফএবি) ইন্টারফেসগুলো যথাক্রমে ১৯৮৫ এবং ১৯৮৬ সালে উদ্ভাবিত হয়। উভয় ইন্টারফেসই প্রায় একই রকম ছিল, তবে মূল পার্থক্য ছিল সংযোগকারী চ্যানেল হিসেবে প্রথমটিতে পোরাস ফ্রিট প্রোব এবং সিএফ-এফএবি-তে প্রোব টিপ ব্যবহার করা হতো। এর মধ্যে সিএফ-এফএবি ইন্টারফেসটি এলসি-এমএস হিসেবে বেশি সফল ছিল এবং অনুদ্বায়ী ও তাপীয়ভাবে অস্থিতিশীল যৌগ বিশ্লেষণের জন্য উপযোগী ছিল। এই ইন্টারফেসগুলোতে এলসি বর্জ্য ফ্রিট বা সিএফ-এফএবি চ্যানেলের মধ্য দিয়ে প্রবাহিত হয়ে ডগায় একটি সুষম তরল স্তর তৈরি করত। সেখানে আয়ন বিম বা উচ্চ শক্তির পরমাণু (ফাস্ট অ্যাটম) দিয়ে তরলটিকে আঘাত করা হতো। স্থিতিশীলভাবে কাজ করার জন্য এই ইন্টারফেসগুলো মাত্র ১–১৫ মাইক্রোলিটার তরল প্রবাহ নিয়ন্ত্রণ করতে পারত এবং এগুলোর ব্যবহার মাইক্রোবোর ও ক্যাপিলারি কলামের মধ্যেই সীমাবদ্ধ ছিল। এফএবি মাস স্পেকট্রোমেট্রি আয়নাইজেশন উৎসে ব্যবহারের জন্য বিশ্লেষক উপাদানগুলোকে একটি ম্যাট্রিক্সের (যেমন গ্লিসারল) সাথে মেশাতে হতো, যা এলসি কলামে পৃথকীকরণের আগেও বা পরেও যোগ করা যেত। পেপটাইডের বৈশিষ্ট্য নির্ধারণে এফএবি ভিত্তিক ইন্টারফেসগুলো ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হলেও ১৯৮৮ সালে ইলেকট্রোস্প্রে ভিত্তিক ইন্টারফেস উদ্ভাবনের পর এর জনপ্রিয়তা কমে যায়।

 লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি 

লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি বা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি হলো ভৌত পৃথকীকরণের একটি পদ্ধতি যেখানে একটি তরল মিশ্রণের উপাদানগুলো দুটি অমিশ্রণীয় দশায় (স্থির ও গতিশীল দশা) বিন্যস্ত থাকে। এলসির ব্যবহারকে পাঁচটি প্রধান ভাগে ভাগ করা যায়, যথা: অধিশোষণ ক্রোমাটোগ্রাফি, বিভাজন ক্রোমাটোগ্রাফি, আয়ন-বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি, আকার-বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি। এর মধ্যে সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত পদ্ধতি হলো বিভাজন ক্রোমাটোগ্রাফির 'রিভার্সড ফেজ' (আরপি) মোড, যেখানে একটি অপোলার (হাইড্রোফোবিক) স্থির দশা এবং একটি পোলার গতিশীল দশা ব্যবহার করা হয়। সাধারণ ক্ষেত্রে, গতিশীল দশা হিসেবে পানি এবং অন্যান্য পোলার দ্রাবকের (যেমন মিথানল, আইসোপ্রোপানল এবং অ্যাসিটোনাইট্রাইল) মিশ্রণ ব্যবহার করা হয়। স্থির দশাটি সাধারণত ৫ মাইক্রোমিটার ব্যাসের অনিয়মিত বা গোলাকার ছিদ্রযুক্ত সিলিকা কণার অভ্যন্তরীণ ও বাহ্যিক তলে দীর্ঘ-শিকল অ্যালকাইল গ্রুপ (যেমন এন-অক্টাডিসিল বা C18) যুক্ত করে তৈরি করা হয়।

এইচপিএলসি পদ্ধতিতে সাধারণত ২০ মাইক্রোলিটার নমুনা উচ্চচাপ পাম্পের মাধ্যমে প্রবাহিত গতিশীল দশায় প্রবেশ করানো হয়। বিশ্লেষকযুক্ত গতিশীল দশাটি একটি নির্দিষ্ট অভিমুখে স্থির দশার স্তরের মধ্য দিয়ে প্রবাহিত হয়। গতিশীল ও স্থির দশার সাথে রাসায়নিক আকর্ষণের পার্থক্যের ভিত্তিতে মিশ্রণের উপাদানগুলো আলাদা হয়ে যায়। স্থির দশার সংস্পর্শে তরলটির বারবার শোষণ ও বিশোষণ প্রক্রিয়ার মাধ্যমে এই পৃথকীকরণ ঘটে। তরল দ্রাবকটিকে (গতিশীল দশা) অত্যন্ত উচ্চ চাপে (৪০০ বার বা ৫৮০০ পিএসআই পর্যন্ত) স্থির দশা সমৃদ্ধ কলামে পাঠানো হয়। ক্রোমাটোগ্রাফি পরীক্ষার ফলাফলের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা নিশ্চিত করতে এবং প্রবাহের হার স্থির রাখতে এই উচ্চ চাপের প্রয়োজন হয়। নমুনা উপাদানগুলো স্থির ও গতিশীল দশার মধ্যে বণ্টনের পার্থক্যের কারণে ভিন্ন ভিন্ন সময়ে কলাম থেকে বেরিয়ে আসে। কলাম হলো এলসি সিস্টেমের সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ অংশ এবং এটি তরলের উচ্চ চাপ সহ্য করার মতো করে তৈরি করা হয়। প্রচলিত এলসি কলামগুলো ১০০–৩০০ মিলিমিটার দীর্ঘ হয় এবং এগুলোর বাইরের ব্যাস ৬.৪ মিলিমিটার ও অভ্যন্তরীণ ব্যাস ৩.০–৪.৬ মিলিমিটার হয়ে থাকে। এলসি-এমএস পরীক্ষার ক্ষেত্রে কলামের দৈর্ঘ্য কিছুটা কম (৩০–৫০ মিলিমিটার) হতে পারে এবং এতে ৩–৫ মাইক্রোমিটার ব্যাসের কণা ঠাসা থাকে। প্রচলিত মডেল ছাড়াও ন্যারো বোর, মাইক্রোবোর, মাইক্রোক্যাপিলারি এবং ন্যানো-এলসি কলামও ব্যবহৃত হয়। এই কলামগুলোর অভ্যন্তরীণ ব্যাস কম হওয়ায় পৃথকীকরণ আরও নিখুঁত হয় এবং এগুলো ১ মিলি/মিনিটের কম তরল প্রবাহে কাজ করতে পারে। পৃথকীকরণের দক্ষতা এবং রেজোলিউশন বাড়াতে এইচপিএলসির পরিবর্তে আল্ট্রা পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (ইউএইচপিএলসি) ব্যবহার করা যেতে পারে। এই পদ্ধতিতে আরও ক্ষুদ্র সিলিকা কণা (~১.৭ মাইক্রোমিটার ব্যাস) সমৃদ্ধ কলাম এবং অনেক বেশি চাপ (৬০০০ থেকে ১৫০০০ পিএসআই) প্রয়োজন হয়।

 মাস স্পেকট্রোমেট্রি 
প্রতিটি পৃথক শিখরের এলসি-এমএস বর্ণালী|thumb|450x450px

মাস স্পেকট্রোমেট্রি (এমএস) বা ভর স্পেকট্রোমেট্রি হলো একটি বিশ্লেষণাত্মক কৌশল যা আধানযুক্ত কণার (আয়ন) ভর ও চার্জের অনুপাত (m/z) পরিমাপ করে। যদিও অনেক ধরনের মাস স্পেকট্রোমিটার রয়েছে, তবে সবগুলোই বৈদ্যুতিক বা চৌম্বক ক্ষেত্র ব্যবহার করে নমুনার আয়নের গতিবিধি নিয়ন্ত্রণ করে এবং তাদের m/z নির্ণয় করে। একটি মাস স্পেকট্রোমিটারের মূল অংশগুলো হলো আয়ন উৎস, ভর বিশ্লেষক, ডিটেক্টর এবং ডেটা ও ভ্যাকুয়াম সিস্টেম। আয়ন উৎসে নমুনার উপাদানগুলোকে ইলেকট্রন বিম, প্রোটন বিম (ইউভি আলো), লেজার বিম বা করোনা ডিসচার্জের মাধ্যমে আয়নিত করা হয়। ইলেকট্রোস্প্রে আয়নাইজেশনের ক্ষেত্রে আয়ন উৎসটি তরল দ্রবণে থাকা আয়নগুলোকে গ্যাসীয় দশায় নিয়ে যায়। এই আয়ন উৎস নিরপেক্ষ অণুগুলোকে গ্যাসীয় আয়নে রূপান্তরিত ও খণ্ডিত করে ভর বিশ্লেষকে পাঠায়। ভর বিশ্লেষক যখন বৈদ্যুতিক ও চৌম্বক ক্ষেত্রের মাধ্যমে ভর অনুযায়ী আয়নগুলোকে বিন্যস্ত করে, তখন ডিটেক্টর সেই আয়নের প্রবাহ পরিমাপ ও পরিবর্ধন করে প্রতিটি নির্দিষ্ট ভরের আয়নের পরিমাণ গণনা করে। মানুষের সহজে বোঝার উপযোগী একটি ভর বর্ণালী বা মাস স্পেকট্রাম তৈরির জন্য ডেটা সিস্টেম কম্পিউটারে এই তথ্যগুলো সংরক্ষণ, প্রক্রিয়াজাত ও প্রদর্শন করে।

ভর বর্ণালী ব্যবহার করে বিশ্লেষক বস্তুর ভর, তাদের উপাদান ও আইসোটোপীয় গঠন নির্ণয় করা যায় অথবা নমুনার রাসায়নিক গঠন ব্যাখ্যা করা যায়। মাস স্পেকট্রোমেট্রি পরীক্ষাটি অবশ্যই গ্যাসীয় দশায় এবং ভ্যাকুয়াম বা বায়ুশূন্য স্থানে (১.৩৩ * ১০−২ থেকে ১.৩৩ * ১০−৬ প্যাসকাল) সম্পন্ন করতে হয়। তাই উচ্চ চাপে থাকা ঘন দশার (কঠিন বা তরল) নমুনাকে ভ্যাকুয়াম সিস্টেমে স্থানান্তরের উপযোগী যন্ত্রের উদ্ভাবন এমএস-কে পেপটাইডের মতো জৈব যৌগ শনাক্তকরণ ও পরিমাপের একটি শক্তিশালী হাতিয়ার হিসেবে প্রতিষ্ঠিত করেছে। বর্তমানে বিভিন্ন যৌগের ভৌত, রাসায়নিক বা জৈবিক বৈশিষ্ট্য বিশ্লেষণের জন্য ল্যাবরেটরিগুলোতে এমএস এর ব্যাপক ব্যবহার রয়েছে। এলসি-এমএস সিস্টেমে ব্যবহৃত প্রধান ভর বিশ্লেষকগুলোর মধ্যে রয়েছে কোয়াড্রপোল, টাইম-অফ-ফ্লাইট (টিওএফ), আয়ন ট্র্যাপ এবং হাইব্রিড কোয়াড্রপোল-টিওএফ (কিউ-টিওএফ) বিশ্লেষক।
 ইন্টারফেস 
তরল দশা পদ্ধতি (এইচপিএলসি) এর নিরবচ্ছিন্নভাবে প্রবাহিত ইলুয়েট এবং ভ্যাকুয়ামে পরিচালিত গ্যাস দশা পদ্ধতির মধ্যে ইন্টারফেস তৈরি করা দীর্ঘকাল ধরে একটি কঠিন কাজ ছিল। ইলেকট্রোস্প্রে আয়নাইজেশনের উদ্ভাবন এই পরিস্থিতি বদলে দেয়। বর্তমানে সর্বাধিক ব্যবহৃত এলসি-এমএস ইন্টারফেসগুলো হলো ইলেকট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন (ইএসআই), অ্যাটমোস্ফিয়ারিক প্রেশার কেমিক্যাল আয়নাইজেশন (এপিসিআই) এবং অ্যাটমোস্ফিয়ারিক প্রেশার ফটো-আয়নাইজেশন (এপিপিআই)। এগুলো হলো আধুনিক এমএস আয়ন উৎস যা উচ্চচাপ পরিবেশ (এইচপিএলসি) থেকে এমএস অ্যানালাইজারের জন্য প্রয়োজনীয় উচ্চ ভ্যাকুয়াম অবস্থায় উত্তরণকে সহজতর করে। যদিও এই ইন্টারফেসগুলোকে আলাদাভাবে বর্ণনা করা হয়েছে, তবে এগুলো দ্বৈত ইএসআই/এপিসিআই, ইএসআই/এপিপিআই বা এপিসিআই/এপিপিআই আয়ন উৎস হিসেবে বাণিজ্যিকভাবেও পাওয়া যায়। অতীতে বিভিন্ন ডিপোজিশন এবং ড্রাইং টেকনিক (যেমন মুভিং বেল্ট) ব্যবহৃত হতো, তবে এগুলোর মধ্যে সবচেয়ে সাধারণ ছিল অফ-লাইন মালডি ডিপোজিশন। ডাইরেক্ট-ইআই এলসি-এমএস ইন্টারফেস নামে একটি নতুন পদ্ধতি বর্তমানে উন্নয়নাধীন রয়েছে, যা একটি ন্যানো এইচপিএলসি সিস্টেম এবং ইলেকট্রন আয়নাইজেশন সমৃদ্ধ একটি ভর স্পেকট্রোমেট্রি যন্ত্রের মধ্যে সংযোগ স্থাপন করে।

 ইলেকট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন (ইএসআই) 
এলসি-এমএস সিস্টেমের জন্য ইএসআই ইন্টারফেস ১৯৮৮ সালে জন ফেন এবং তাঁর সহযোগীরা তৈরি করেন। এই আয়ন উৎস বা ইন্টারফেসটি মধ্যম পোলার এবং এমনকি অত্যন্ত পোলার অণু (যেমন মেটাবোলাইট, জেনোবায়োটিক, পেপটাইড, নিউক্লিওটাইড, পলিস্যাকারাইড) বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। এলসি কলাম থেকে বেরিয়ে আসা তরল ইলুয়েট ৩ থেকে ৫ কেভি (kV) বিভবে রাখা একটি ধাতব ক্যাপিলারির দিকে পরিচালিত হয়। ক্যাপিলারির ডগায় গ্যাসের উচ্চ-গতির সমাক্ষ প্রবাহের মাধ্যমে এটি নেবুলাইজড বা কুয়াশার মতো সূক্ষ্ম কণায় পরিণত হয়, যা ভ্যাকুয়াম চেম্বারের প্রবেশপথের সামনে চার্জযুক্ত ফোঁটার একটি সূক্ষ্ম স্প্রে তৈরি করে। বাফার এবং লবণের মাধ্যমে ভ্যাকুয়াম সিস্টেমের দূষণ এড়াতে, এই ক্যাপিলারিটি সাধারণত এমএস সিস্টেমের ইনলেটে লম্বভাবে স্থাপন করা হয়। কিছু ক্ষেত্রে প্রবেশপথের সামনে শুষ্ক নাইট্রোজেনের একটি বিপরীত প্রবাহ থাকে যার মাধ্যমে বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের সাহায্যে আয়নগুলি পরিচালিত হয়। কিছু উৎসে ভ্যাকুয়াম প্রবেশপথের সামনে স্প্রে প্লামের সাথে অতিরিক্ত গরম গ্যাসের প্রবাহ মিশিয়ে দ্রুত ফোঁটা বাষ্পীভবন এবং সর্বোচ্চ আয়ন নির্গমন নিশ্চিত করা হয়। অন্যান্য উৎসে ফোঁটাগুলো ভ্যাকুয়ামে প্রবেশের সময় একটি উত্তপ্ত ক্যাপিলারি টিউবের মধ্য দিয়ে টানা হয় যা ফোঁটার বাষ্পীভবন এবং আয়ন নির্গমনকে ত্বরান্বিত করে। ফোঁটা বাষ্পীভবন বাড়ানোর এই পদ্ধতিগুলো এখন ১-২ মিলি/মিনিট তরল প্রবাহ হার ব্যবহার করার অনুমতি দেয় এবং একইসাথে দক্ষ আয়নাইজেশন ও উচ্চ সংবেদনশীলতা নিশ্চিত করে। ফলে আগে যেখানে সর্বোত্তম কার্যকারিতার জন্য ১-৩ মিমি মাইক্রোবোর কলাম এবং ৫০-২০০ মাইক্রোলিটার/মিনিট নিম্ন প্রবাহ হার প্রয়োজনীয় মনে করা হতো, সেই সীমাবদ্ধতা এখন আর অতটা গুরুত্বপূর্ণ নয়; বরং বড় কলামের উচ্চতর ধারণক্ষমতা এখন ইএসআই এলসি-এমএস সিস্টেমে সুবিধাজনকভাবে ব্যবহার করা যায়। পোলারিটি পরিবর্তনের মাধ্যমে ধনাত্মক এবং ঋণাত্মক উভয় চার্জযুক্ত আয়ন তৈরি করা যেতে পারে এবং একই এলসি রান-এর মধ্যে দ্রুত পর্যায়ক্রমিক ধনাত্মক ও ঋণাত্মক মোড বর্ণালী সংগ্রহ করা সম্ভব। বেশিরভাগ বড় অণু (আণবিক ওজন ১৫০০-২০০০ এর বেশি) ইএসআই উৎসে মাল্টিপল চার্জযুক্ত আয়ন তৈরি করলেও ক্ষুদ্র অণুর অধিকাংশই একক চার্জযুক্ত আয়ন তৈরি করে।

 অ্যাটমোস্ফিয়ারিক প্রেশার কেমিক্যাল আয়নাইজেশন (এপিসিআই) 

এলসি-এমএস এর জন্য এপিসিআই ইন্টারফেসের বিকাশ ১৯৭৩ সালের শুরুর দিকে হর্নিং এবং তাঁর সহযোগীদের হাত ধরে শুরু হয়। তবে ১৯৮৬ সালে হেনিয়ন এবং সহযোগীরা এলসি-এপিসিআই-এমএস ইন্টারফেসের উন্নতি করার পর ১৯৯০-এর দশকের শুরুতে এর বাণিজ্যিক প্রয়োগ শুরু হয়। এপিসিআই আয়ন উৎস ক্ষুদ্র, নিরপেক্ষ, তুলনামূলকভাবে অপোলার এবং তাপীয়ভাবে স্থিতিশীল অণু (যেমন স্টেরয়েড, লিপিড এবং চর্বিতে দ্রবণীয় ভিটামিন) বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। এই যৌগগুলো ইএসআই ব্যবহার করে ভালোভাবে আয়নিত হয় না। এছাড়া এপিসিআই বাফারিং এজেন্টযুক্ত মোবাইল ফেজ প্রবাহও পরিচালনা করতে পারে। এলসি সিস্টেম থেকে তরল একটি ক্যাপিলারির মাধ্যমে পাম্প করা হয় এবং ক্যাপিলারির ডগায় নেবুলাইজেশন ঘটে যেখানে করোনা ডিসচার্জ ঘটে। প্রথমে ইন্টারফেসের চারপাশের আয়নাইজিং গ্যাস এবং মোবাইল ফেজ দ্রাবক আয়ন উৎসে কেমিক্যাল আয়নাইজেশনের শিকার হয়। পরবর্তীতে এই আয়নগুলি বিশ্লেষ্য বস্তুর সাথে বিক্রিয়া করে এবং তাদের চার্জ স্থানান্তর করে। এরপর নমুনার আয়নগুলি আয়ন-ফোকাসিং লেন্স বা ছোট ছিদ্রযুক্ত স্কিমারের মাধ্যমে উচ্চ ভ্যাকুয়াম অঞ্চলে প্রবেশ করে ভর বিশ্লেষণের শিকার হয়। এই ইন্টারফেসটি ধনাত্মক এবং ঋণাত্মক চার্জ মোডে কাজ করতে পারে এবং এতে মূলত একক চার্জযুক্ত আয়ন তৈরি হয়। এপিসিআই আয়ন উৎস ৫০০ থেকে ২০০০ মাইক্রোলিটার/মিনিট প্রবাহ হার পরিচালনা করতে পারে এবং এটি সরাসরি প্রচলিত ৪.৬ মিমি আইডির কলামের সাথে সংযুক্ত করা যায়।

 অ্যাটমোস্ফিয়ারিক প্রেশার ফটো-আয়নাইজেশন (এপিপিআই) 

২০০০ সালে ব্রুইন্স এবং সায়েজ যুগপৎভাবে এলসি-এমএস এর জন্য এপিপিআই ইন্টারফেস উদ্ভাবন করেন। এপিপিআই হলো এলসি-এমএস এর আরেকটি আয়ন উৎস বা ইন্টারফেস যা ইএসআই এর মাধ্যমে আয়নিত করা যায় না এমন নিরপেক্ষ যৌগ বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়। এই ইন্টারফেসটি এপিসিআই এর মতোই, তবে করোনা ডিসচার্জের পরিবর্তে এখানে ডিসচার্জ ল্যাম্প থেকে আসা ফোটন ব্যবহার করে আয়নাইজেশন ঘটানো হয়। ডাইরেক্ট-এপিপিআই মোডে ফোটন শোষণ এবং ইলেকট্রন বর্জনের মাধ্যমে একক চার্জযুক্ত আণবিক আয়ন গঠিত হয়। ডোপ্যান্ট-এপিপিআই মোডে মোবাইল ফেজ বা নেবুলাইজিং গ্যাসে একটি সহজে আয়নযোগ্য যৌগ (ডোপ্যান্ট) যোগ করা হয় যা ডোপ্যান্ট আণবিক আয়ন এবং বিশ্লেষ্য বস্তুর মধ্যে চার্জ বিনিময়ের বিক্রিয়াকে ত্বরান্বিত করে। আয়নিত নমুনাটি পরে ছোট ছিদ্রযুক্ত স্কিমারের মাধ্যমে উচ্চ ভ্যাকুয়ামে ভর অ্যানালাইজারে স্থানান্তরিত হয়।

 প্রয়োগ 
এলসি সিস্টেমের সাথে এমএস এর সংযোগ অত্যন্ত কার্যকর, কারণ তরল ক্রোমাটোগ্রাফি সূক্ষ্ম এবং জটিল প্রাকৃতিক মিশ্রণকে আলাদা করতে পারে যাদের রাসায়নিক গঠন সঠিকভাবে নির্ধারণ করা প্রয়োজন (যেমন জৈবিক তরল, পরিবেশগত নমুনা এবং ওষুধ)। এছাড়া উড্ডয়ী বিস্ফোরক অবশিষ্টাংশ বিশ্লেষণে এলসি-এমএস এর প্রয়োগ রয়েছে। বর্তমানে এলসি-এমএস সবচেয়ে বহুল ব্যবহৃত রাসায়নিক বিশ্লেষণ পদ্ধতিগুলোর একটিতে পরিণত হয়েছে কারণ ৮৫%-এরও বেশি প্রাকৃতিক রাসায়নিক যৌগ পোলার এবং তাপীয়ভাবে অস্থির, যা জিসি-এমএস  পদ্ধতিতে বিশ্লেষণ করা সম্ভব নয়। উদাহরণস্বরূপ এইচপিএলসি-এমএস বর্তমানে প্রোটিওমিক্স এবং ওষুধ গবেষণাগারের শীর্ষস্থানীয় বিশ্লেষণ পদ্ধতি হিসেবে বিবেচিত। এলসি-এমএস এর অন্যান্য গুরুত্বপূর্ণ প্রয়োগের মধ্যে রয়েছে খাদ্য, কীটনাশক এবং উদ্ভিদ ফেনল বিশ্লেষণ।

 ফার্মাকোকাইনেটিক্স 
এলসি-এমএস জৈব বিশ্লেষণে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় এবং বিশেষ করে ওষুধের ফার্মাকোকাইনেটিক গবেষণায় এর গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রয়েছে। শরীর থেকে কোনো ওষুধ কত দ্রুত নিষ্কাশিত হবে এবং যকৃতের রক্তপ্রবাহ নির্ধারণে ফার্মাকোকাইনেটিক গবেষণা প্রয়োজন। এইচপিএলসি সিস্টেমে ব্যবহৃত সাধারণ ইউভি ডিটেক্টরের তুলনায় এমএস অ্যানালাইজারগুলোর স্বল্প বিশ্লেষণ সময় এবং উচ্চতর সংবেদনশীলতা ও সুনির্দিষ্টতার কারণে এগুলো গবেষণায় বেশ কার্যকর। এর একটি বড় সুবিধা হলো ট্যান্ডেম এমএস-এমএস এর ব্যবহার, যেখানে ডিটেক্টরকে নির্দিষ্ট আয়ন ভেঙে ফেলার জন্য প্রোগ্রাম করা যায়। পরিমাপকৃত পরিমাণ হলো অপারেটর কর্তৃক নির্বাচিত অণু খণ্ডগুলোর সমষ্টি। যতক্ষণ কোনো হস্তক্ষেপ বা এলসি-এমএস এ আয়ন অবদমন না ঘটে, ততক্ষণ এলসি বিভাজন বেশ দ্রুত হতে পারে।

 প্রোটিওমিক্স/মেটাবলোমিক্স 
জটিল মিশ্রণের উপাদানগুলো শনাক্ত করার পদ্ধতি হিসেবে প্রোটিওমিক্সে এলসি-এমএস ব্যবহৃত হয়। বটম-আপ প্রোটিওমিক্স এলসি-এমএস পদ্ধতিতে সাধারণত প্রোটিয়েজ ডাইজেস্টশন অন্তর্ভুক্ত থাকে যেখানে প্রোটিয়েজ হিসেবে ট্রিপসিন, তৃতীয় স্তরের গঠন নষ্ট করতে ইউরিয়া এবং সিস্টাইন অবশিষ্টাংশ পরিবর্তনের জন্য আয়োডোঅ্যাসিটামাইড ব্যবহৃত হয়। ডাইজেস্টশনের পর এলসি-এমএস পেপটাইড মাস ফিঙ্গারপ্রিন্টিং এর জন্য ব্যবহৃত হয় অথবা একক পেপটাইডের অনুক্রম বের করতে এলসি-এমএস/এমএস (ট্যান্ডেম এমএস) ব্যবহৃত হয়। এলসি-এমএস/এমএস সাধারণত এমন সব জটিল নমুনার প্রোটিওমিক বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয় যেখানে উচ্চ-রেজোলিউশন ভর স্পেকট্রোমেট্রিণেও পেপটাইডের ভরগুলো একে অপরের ওপর আপতিত হতে পারে। আধুনিক এলসি-এমএস/এমএস সিস্টেমে জটিল জৈবিক নমুনা (যেমন মানুষের সিরাম) বিশ্লেষণ করা যায় যা ১০০০-এরও বেশি প্রোটিন শনাক্ত করতে পারে। তবে এই উচ্চ পর্যায়ের প্রোটিন শনাক্তকরণ কেবল নমুনাটিকে এসডিএস-পেজ  জেল বা এইচপিএলসি-এসসিএক্স এর মাধ্যমে আলাদা করার পরেই সম্ভব। সম্প্রতি এলসি-এমএস/এমএস পেপটাইড বায়োমার্কার খোঁজার কাজেও প্রয়োগ করা হচ্ছে। উদাহরণ হিসেবে ব্যাকটেরিয়া ঘটিত শ্বাসযন্ত্রের চারটি প্রধান প্যাথোজেন (স্ট্যাফাইলোকক্কাস অরিয়াস, মোরাক্সেলা ক্যাটারহালিস; হিমোফিলাস ইনফ্লুয়েঞ্জা এবং স্ট্রেপ্টোকক্কাস নিউমোনিয়া) এবং সার্স-কোভ-২ ভাইরাসের পেপটাইড বায়োমার্কার আবিষ্কার ও যাচাইকরণের কথা বলা যায়।

জৈবিক টিস্যুর (যেমন রক্তরস, সিরাম, প্রস্রাব) গ্লোবাল মেটাবোলাইট প্রোফাইলিংয়ে এলসি-এমএস অন্যতম বহুল ব্যবহৃত পদ্ধতিতে পরিণত হয়েছে। এলসি-এমএস প্রাকৃতিক পণ্য বিশ্লেষণ এবং উদ্ভিদের সেকেন্ডারি মেটাবোলাইট প্রোফাইলিংয়েও ব্যবহৃত হয়। এই ক্ষেত্রে এমএস-ভিত্তিক সিস্টেমগুলো জটিল জৈবিক নমুনা থেকে বিস্তৃত যৌগের বিস্তারিত তথ্য সংগ্রহে কার্যকর। উদ্ভিদ মেটাবলোমিক্সে এলসি-পারমাণবিক চৌম্বকীয় অনুনাদ বা এলসি-এনএমআর (এনএমআর) ব্যবহৃত হয়, তবে এই পদ্ধতিটি কেবল সর্বাধিক পরিমাণে থাকা মেটাবোলাইটগুলো শনাক্ত ও পরিমাণ নির্ধারণ করতে পারে। এলসি-এমএস উদ্ভিদ মেটাবলোমিক্স গবেষণাকে এগিয়ে নিতে সহায়ক ভূমিকা পালন করেছে, যার লক্ষ্য হলো পরিবেশের প্রতিক্রিয়ায় উদ্ভিদের মেটাবলোমের নিরপেক্ষ বৈশিষ্ট্য নির্ধারণের মাধ্যমে আণবিক পর্যায়ে উদ্ভিদ সিস্টেম অধ্যয়ন করা। উদ্ভিদ মেটাবলোমিক্সে এলসি-এমএস এর প্রথম প্রয়োগ ছিল কুকারবিটা ম্যাক্সিমার ফ্লোয়েম কলা থেকে বিস্তৃত পরিসরে অত্যন্ত পোলার মেটাবোলাইট, অলিগোস্যাকারাইড, অ্যামিনো অ্যাসিড, অ্যামিনো সুগার এবং সুগার নিউক্লিওটাইড শনাক্ত করা। উদ্ভিদ মেটাবলোমিক্সে এলসি-এমএস এর আরেকটি উদাহরণ হলো আরবিডোপসিস থালিয়ানার পাতার নির্যাস থেকে গ্লুকোজ, সুক্রোজ, র‍্যাফিনোজ, স্ট্যাকিওজ এবং ভারবাসকোজের দক্ষ পৃথকীকরণ এবং শনাক্তকরণ।

 ওষুধ বিকাশ 
ওষুধ বিকাশে এলসি-এমএস ঘন ঘন ব্যবহৃত হয় কারণ এটি দ্রুত আণবিক ওজন নিশ্চিতকরণ এবং গঠন শনাক্ত করতে দেয়। এই বৈশিষ্ট্যগুলো সম্ভাব্য কার্যকর বিপুল সংখ্যক পণ্য থেকে কোনো আবিষ্কার তৈরি, পরীক্ষা এবং যাচাই করার প্রক্রিয়াকে ত্বরান্বিত করে। ওষুধ বিকাশের জন্য এলসি-এমএস প্রয়োগগুলো অত্যন্ত স্বয়ংক্রিয় পদ্ধতি যা পেপটাইড ম্যাপিং, গ্লাইকোপ্রোটিন ম্যাপিং, লিপিডোমিক্স, ইন ভিভো ড্রাগ স্ক্রিনিং, মেটাবোলিক স্ট্যাবিলিটি স্ক্রিনিং, মেটাবোলাইট শনাক্তকরণ, অপদ্রব্য শনাক্তকরণ, পরিমাণগত জৈব বিশ্লেষণ এবং গুণমান নিয়ন্ত্রণে ব্যবহৃত হয়।

 আরও দেখুন 
 গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি-ভর স্পেকট্রোমেট্রি
 ক্যাপিলারি ইলেক্ট্রোফোরেসিস-ভর স্পেকট্রোমেট্রি
 আয়ন-মোবিলিটি স্পেকট্রোমেট্রি-ভর স্পেকট্রোমেট্রি

 তথ্যসূত্র 

 আরও পড়ুন 

বিষয়শ্রেণী:ক্রোমাটোগ্রাফি
বিষয়শ্রেণী:ভর স্পেকট্রোমেট্রি