পিবিআর ৩২২

পিবিআর ৩২২ একটি প্ল্যাসমিড এবং এটি সর্বপ্রথম ব্যবহৃত ই. কোলি ক্লোনিং ভেক্টরগুলির মধ্যে একটি । ক্যালিফোর্নিয়া বিশ্ববিদ্যালয়, সান ফ্রান্সিসকোতে হারবার্ট বয়ার পরীক্ষাগারে ১৯৭৭ সালে নির্মিত, এটি পোস্টডক্টোরাল গবেষক ফ্রান্সিসকো বলিভার জাপাটার এবং রেমন্ড এল. রদ্রিগেজের নামে নামকরণ করা হয়েছে। ''পি'-টির অর্থ দাঁড়ায় "প্ল্যাসমিড," এবং 'বিআর' এর অর্থ যথাক্রমে  "বলিভার" এবং "রদ্রিগেজ"।

পিবিআর ৩২২ এর  দৈর্ঘ্য ৪৩৬১ বেস জোড়া   এবং দুই এন্টিবায়োটিক প্রতিরোধের জিন আছে - জিন বিলএ এনকোডিং এম্পিসিলিন প্রতিরোধের (অ্যাম্প আর) প্রোটিন, এবং জিন টেট আর এনকোডিং টেট্রাসাইক্লিন সহ্য করার ক্ষমতা (টেট আর) প্রোটিন। এটিতে পিএমবি ১-র প্রতিরূপের উৎস এবং রোপ জিন রয়েছে যা প্লাজমিড অনুলিপি সংখ্যার একটি প্রতিরোধককে এনকোড করে। চল্লিশেরও বেশি বিধিনিষেধের এনজাইমগুলির জন্য প্লাজমিডে অনন্য বিধিনিষেধের সাইট রয়েছে । এই চল্লিশটি সাইটের মধ্যে এগারটি টেট আর জিনের মধ্যে রয়েছে। টেট আর জিনের প্রবর্তকের মধ্যে সীমাবদ্ধ এনজাইমগুলি হিন্দ-III এবং ক্লে-I জন্য দুটি সাইট রয়েছে। অ্যাম্প আর জিনের অভ্যন্তরে ছয়টি মূল নিষেধাজ্ঞার সাইট রয়েছে । 

বৃত্তাকার   ক্রমটি এমনভাবে সংখ্যায়িত করা হয়েছে যে 0 টি অনন্য ইকোআরআই সাইটের মাঝখানে এবং টেট আর জিনের মাধ্যমে গণনা বৃদ্ধি পায়। আম্প আর জিনটি পেনিসিলিন বিটা-ল্যাকটামেস । প্রোমোটার  পি১ এবং P3 বিটা-ল্যাকটামেজ জিনের জন্য। P3 প্রাকৃতিক প্রোমোটার এবং পিবিআর ৩২২ তৈরি করতে দুটি ভিন্ন ডিএনএ টুকরার লাইগেশন  দ্বারা P1 কৃত্রিমভাবে  তৈরি করা হয়  । পি 2 P1 এর মত  একই অঞ্চলে রয়েছে  , তবে এটি বিপরীত স্ট্র্যান্ডে রয়েছে এবং টেট্রাসাইক্লিন প্রতিরোধ জিনের দিকে প্রতিলিপি শুরু করে। 

 পটভূমি 
প্রাথমিক ক্লোনিং পরীক্ষাগুলি প্রাকৃতিক প্লাজমিড যেমন ColE1 এবং pSC101 ব্যবহার করে পরিচালিত হতে পারে। এই প্লাজমিডগুলির প্রতিটিটির এর সুবিধা এবং অসুবিধা থাকতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, ColE1 প্লাসমিড এবং তার ডেরাইভেটিভসদের উচ্চতর কপি সংখ্যা সুবিধা আছে এবংপ্লাসমিড  উচ্চ ফলন উৎপাদন করতে জন্য  chloramphenicol প্লাসমিড অনুমতি এর বিকাস, তবে ইমিউনিটি প্রদর্শণের জন্য  colicin ই 1 প্রযুক্তিগতভাবে  সহজ নয়।  প্লাজমিড পিএসসি ১০১, সালমোনেলা পানামার প্রাকৃতিক প্লাজমিড, টেট্রাসাইক্লিন প্রতিরোধকে সম্মানিত করে যা অ্যান্টিবায়োটিক নির্বাচনের মাধ্যমে সহজ স্ক্রিনিংয়ের প্রক্রিয়াটিকে অনুমতি দেয় তবে এটি একটি কম কপি নম্বর প্লাজমিড যা প্লাজমিডের উচ্চ ফলন দেয় না। আর একটি প্লাজমিড, আরএসএফ ২১২৪, যা কোলই ১ এর একটি ডেরাইভেটিভ, এম্পিসিলিন প্রতিরোধের প্রস্তাব দেয় তবে এটি আরও বড়।

ক্লোনিংয়ের উদ্দেশ্যে আদর্শ হতে পারে এমন একটি তৈরি করার জন্য অন্যান্য অনেক প্লাজমিডগুলি কৃত্রিমভাবে তৈরি করা হয়েছিল এবং পিবিআর ৩২২ অনেকের কাছে সর্বাধিক বহুমুখী  ছিল এবং তাই এটি সবচেয়ে জনপ্রিয়ভাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।  এটিতে দুটি অ্যান্টিবায়োটিক প্রতিরোধের জিন রয়েছে, বাছাইযোগ্য চিহ্নিতকারী হিসাবে এবং বেশ কয়েকটি সুবিধাজনক অনন্য বাধা সাইট রয়েছে যা এটিকে ক্লোনিং ভেক্টর হিসাবে উপযুক্ত করেছে। প্লাসমিডটি জিনগত উপাদানের ৩টি প্রধান উৎস থেকে নির্মাণ করা হয়েছিল  pSC101এর টেট্রাসাইক্লিন  প্রতিরোধের জিন, আরএসএফ ২১২৪ এর এম্পিসিলিন প্রতিরোধের জিনের , এবং রেপ্লিকেশন উপাদান pMB1, ColE1 প্লাসমিড  এর একটি ঘনিষ্ঠ আত্মীয়। 

পিবিআর ৩২২ এর উপর ভিত্তি করে প্রচুর পরিমাণে অন্যান্য প্লাজমিডগুলি তখন থেকে বিভিন্ন উদ্দেশ্যে নির্মিত হয়েছে।   উদাহরণস্বরূপ প্লাজমিডগুলির পিইউসি সিরিজ অন্তর্ভুক্ত।  এক্সট্রা ক্রোমোসোমাল প্রোটিন এক্সপ্রেশন এবং শাটল ভেক্টরগুলির জন্য বেশিরভাগ এক্সপ্রেশন ভেক্টরগুলি পিবিআর৩২২ মূলটির প্রতিরূপ ধারণ করে এবং ক্রোমোজোম থেকে ডিএনএ-এর টার্গেট ইন্টিগ্রেশন এবং এক্সাইজেশন জন্য ইন্ট্রাস্পেসি শাটল বা বাইনারি ভেক্টর এবং ভেক্টর নির্মাণে পিবিআর ৩২২ এর টুকরোগুলো  খুব জনপ্রিয়। 

 ডিএনএ ক্রম 
পিবিআর ৩২২ এর ক্রমটি হলো 
pBR322
1 ttctcatgtt tgacagctta tcatcgataa gctttaatgc ggtagtttat cacagttaappa

       61 ttgctaacgc agtcaggcac cgtgtatgaa atctaacaat gcgctcatcg tcatcctcgg

      121 caccgtcacc ctggatgctg taggcatagg cttggttatg ccggtactgc cgggcctctt

      181 gcgggatatc gtccattccg acagcatcgc cagtcactat ggcgtgctgc tagcgctata

      241 tgcgttgatg caatttctat gcgcacccgt tctcggagca ctgtccgacc gctttggccg

      301 ccgcccagtc ctgctcgctt cgctacttgg agccactatc gactacgcga tcatggcgac

      361 cacacccgtc ctgtggatcc tctacgccgg acgcatcgtg gccggcatca ccggcgccac

      421 aggtgcggtt gctggcgcct atatcgccga catcaccgat ggggaagatc gggctcgcca

      481 cttcgggctc atgagcgctt gtttcggcgt gggtatggtg gcaggccccg tggccggggg

      541 actgttgggc gccatctcct tgcatgcacc attccttgcg gcggcggtgc tcaacggcct

      601 caacctacta ctgggctgct tcctaatgca ggagtcgcat aagggagagc gtcgaccgat

      661 gcccttgaga gccttcaacc cagtcagctc cttccggtgg gcgcggggca tgactatcgt

      721 cgccgcactt atgactgtct tctttatcat gcaactcgta ggacaggtgc cggcagcgct

      781 ctgggtcatt ttcggcgagg accgctttcg ctggagcgcg acgatgatcg gcctgtcgct

      841 tgcggtattc ggaatcttgc acgccctcgc tcaagccttc gtcactggtc ccgccaccaa

      901 acgtttcggc gagaagcagg ccattatcgc cggcatggcg gccgacgcgc tgggctacgt

      961 cttgctggcg ttcgcgacgc gaggctggat ggccttcccc attatgattc ttctcgcttc

     1021 cggcggcatc gggatgcccg cgttgcaggc catgctgtcc aggcaggtag atgacgacca

     1081 tcagggacag cttcaaggat cgctcgcggc tcttaccagc ctaacttcga tcactggacc

     1141 gctgatcgtc acggcgattt atgccgcctc ggcgagcaca tggaacgggt tggcatggat

     1201 tgtaggcgcc gccctatacc ttgtctgcct ccccgcgttg cgtcgcggtg catggagccg

     1261 ggccacctcg acctgaatgg aagccggcgg cacctcgcta acggattcac cactccaaga

     1321 attggagcca atcaattctt gcggagaact gtgaatgcgc aaaccaaccc ttggcagaac

     1381 atatccatcg cgtccgccat ctccagcagc cgcacgcggc gcatctcggg cagcgttggg

     1441 tcctggccac gggtgcgcat gatcgtgctc ctgtcgttga ggacccggct aggctggcgg

     1501 ggttgcctta ctggttagca gaatgaatca ccgatacgcg agcgaacgtg aagcgactgc

     1561 tgctgcaaaa cgtctgcgac ctgagcaaca acatgaatgg tcttcggttt ccgtgtttcg

     1621 taaagtctgg aaacgcggaa gtcagcgccc tgcaccatta tgttccggat ctgcatcgca

     1681 ggatgctgct ggctaccctg tggaacacct acatctgtat taacgaagcg ctggcattga

     1741 ccctgagtga tttttctctg gtcccgccgc atccataccg ccagttgttt accctcacaa

     1801 cgttccagta accgggcatg ttcatcatca gtaacccgta tcgtgagcat cctctctcgt

     1861 ttcatcggta tcattacccc catgaacaga aatccccctt acacggaggc atcagtgacc

     1921 aaacaggaaa aaaccgccct taacatggcc cgctttatca gaagccagac attaacgctt

     1981 ctggagaaac tcaacgagct ggacgcggat gaacaggcag acatctgtga atcgcttcac

     2041 gaccacgctg atgagcttta ccgcagctgc ctcgcgcgtt tcggtgatga cggtgaaaac

     2101 ctctgacaca tgcagctccc ggagacggtc acagcttgtc tgtaagcgga tgccgggagc

     2161 agacaagccc gtcagggcgc gtcagcgggt gttggcgggt gtcggggcgc agccatgacc

     2221 cagtcacgta gcgatagcgg agtgtatact ggcttaacta tgcggcatca gagcagattg

     2281 tactgagagt gcaccatatg cggtgtgaaa taccgcacag atgcgtaagg agaaaatacc

     2341 gcatcaggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc

     2401 ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata

     2461 acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg

     2521 cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct

     2581 caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa

     2641 gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc

     2701 tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt

     2761 aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg

     2821 ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg

     2881 cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct

     2941 tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc tgcgctctgc

     3001 tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg

     3061 ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc

     3121 aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt

     3181 aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa

     3241 aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat

     3301 gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct

     3361 gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg

     3421 caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag

     3481 ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta

     3541 attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg

     3601 ccattgctgc aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg

     3661 gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct

     3721 ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta

     3781 tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg

     3841 gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc

     3901 cggcgtcaac acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg

     3961 gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga

     4021 tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg

     4081 ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat

     4141 gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc

     4201 tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca

     4261 catttccccg aaaagtgcca cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg acattaacct

     4321 ataaaaatag gcgtatcacg aggccctttc gtcttcaaga a

 আরো দেখুন 

 তথ্যসূত্র 

 বহিঃসংযোগ 
pBR322 Map
pBR322 Features
pBR322 DNA 

বিষয়শ্রেণী:ডিএনএ ভ্রাম্যমাণ বংশাণুগত উপাদান
বিষয়শ্রেণী:আণবিক জীববিজ্ঞান প্রযুক্তি
বিষয়শ্রেণী:প্লাজমিড