تنظير متحد البؤر

التنظير متحد البؤر  أو التنظير المجهري الداخلي بالليزر  (CLE)، هو تقنية تصوير حديثة تسمح بفحص الميزات المجهرية والنسيجية في الوقت الفعلي داخل الجسم. في كلمة "endomicroscopy"، تشير "endo-" إلى "داخل"، بينما تعني "-skopein" "أن تنظر أو تشاهد". يمكن لتقنية التنظير متحد البؤر، التي تعرف أيضًا بـ"الخزعة الضوئية"، تحليل الميزات النسيجية والخلويّة للنسيج، وهو أمر لا يمكن إجراؤه عادةً إلا من خلال أخذ خزعة من الأنسجة. على غرار المجهر البؤري، يعمل الليزر في التنظير متحد البؤر من خلال فلتر مجهز بفتحة دقيقة يعمل على إثارة الصبغة الفلورية من خلال مقسم الحزمة والعدسة الشيئية. تتبع الانبعاثات الفلورية مسارات مشابهة للوصول إلى المستشعر. تُستخدم الفتحة الدقيقة لاختيار الانبعاثات من بؤرة العدسة المطلوب. يوجد نوعان من التنظير متحد البؤر، وهما: النوع القائم على المجس (pCLE)، والنوع الأقل شيوعًا القائم على المنظار الداخلي (eCLE).

يمكن إدخال تقنية التنظير متحد البؤر لدراسة الجهاز الهضمي (القناة الهضمية) وأعضاء الجهاز الهضمي الملحقة باستخدام صبغة فلورية. يمكن تشخيص مجموعة متنوعة من الأمراض، مثل داء الأمعاء الالتهابي ومرض مريء باريت، من خلال المشاهدة المكبرة والمتعمقة بالإضافة إلى التنظير الداخلي التقليدي.

 الأهمية 
تستطيع تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر تحديد الآفات على أعماق صغيرة تحت الأنسجة، وذلك على عكس المستوى السطحي الذي يظهر في التنظير التقليدي. كما تسمح للأطباء بالتمييز بين الآفات الحميدة والخبيثة من خلال التشخيص النسيجي الفوري، إذ تكشف عن خصائص الصفيحة على المستوى الخلوي.

من الأمثلة على ذلك داء ويبل. يعرض التنظير التقليدي الغشاء المخاطي الاثني عشري بنمط أبيض. في المقابل، تنتج تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر صورتين؛ تظهر الصور السطحية تسرب الشعيرات الدموية في الغشاء المخاطي الاثني عشري، بينما تظهر الصور العميقة خلايا الغشاء المخاطي الاثني عشري، بما في ذلك الخلايا الكأسية والخلايا البلعمية الرغوية في الصفيحة السليمة. وبالمقارنة مع الفحص النسيجي للموقع الاثني عشري نفسه بعد التلوين بحمض شيف الدوري، تحدد تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر أنماطًا مماثلة من الخلايا الكأسية والخلايا البلعمية الرغوية.

 الأنواع 
اُخترع نوعان من تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر، هما: النوع القائم على المجس (pCLE) والنوع القائم على المنظار الداخلي (eCLE).

 النوع القائم على المجس 
تُطوّر هذه التقنية من قبل شركة "مونا كيا تكنولوجيز"، وتعتمد على حزمة ألياف تمر عبر قناة العمل (الفتحة المجوفة) التي يبلغ قطرها 2.8 ملم في المنظار الداخلي القياسي وصولًا إلى الجهاز الهضمي. وتعمل كل ليفة كفتحة دقيقة لتصفية الضوضاء غير المرغوبة، مع وجود مستوى ثابت للتصوير. يتراوح معدل الإطارات ما بين 9 إلى 12 صورة في الثانية.
منتجات pCLE الاستخدام جاسترو فليكس الجهاز الهضمي العلوي كونول فليكس الجهاز الهضمي السفلي تشولانجيو فليكس تصوير الأقنية الصفراوية والبنكرياسية AQ-19 خزعة بالإبرة الدقيقة التنظير متحد البؤر القائم على الإبرة إبرة الموجات فوق الصوتية بالمنظار (EUS)

 النوع القائم على المنظار الداخلي 
تُطوّر هذه التقنية من قبل شركة بينتاكس، وتعتمد على مجهر بؤري مثبت في نهاية أنبوب المنظار الداخلي. الآلة المدمجة له أكبر من النوع القائم على المجس من حيث القطر، مما يجعل إدخال المنظار الداخلي إلى الجهاز الهضمي أكثر صعوبة. توقف تسويق هذا النوع تجاريًا بسبب عدم مرونة الكاميرا.

 الاستخدامات الطبية 
تصغير|450x450بك|سرطان القولون والمستقيم

 المريء 
تعد تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر فعالة في الكشف عن الآفات ما قبل الخبيثة، مثل مريء باريت، والآفات الخبيثة (السرطانية) في الجزء العلوي من الجهاز الهضمي. يمكن تحديد التغيرات التي تطرأ على الغشاء المخاطي والتي تظهر في علم أمراض الأنسجة كدليل على الخباثة تحت تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر، مثل خلل التنسج عالي الدرجة. يمكن أيضًا استخدام تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر في علاج مريء باريت عن طريق قياس الامتداد الجانبي للأورام.

يُعد "تصنيف ميامي" النظام الأكثر شيوعًا في تشخيص المريء بتقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر.

 المعدة والاثني عشر 
على غرار المريء، يستطيع التنظير المجهري الداخلي بالليزر الكشف عن سرطان المعدة المبكر، بالإضافة إلى الحالات ما قبل الخبيثة مثل التهاب المعدة والحؤول المعوي. يمكن للتنظير المجهري الداخلي بالليزر تحديد أنماط حفر المعدة وتمييزها لتشخيص المرض وفقًا لتصنيف ميامي، والذي جرى تحسينه عام 2016 ليشمل أنماط الحفر وبنية الأوعية الدموية. يتيح هذا التصنيف المحسّن للأطباء التمييز بين الآفات الورمية وغير الورمية.

يمكن أيضًا تحديد وجود بكتيريا الملوية البوابية (هيليكوباكتر بيلوري) باستخدام التنظير المجهري الداخلي بالليزر من خلال مشاهدة التغيرات المورفولوجية في الأنسجة.

 الجهاز الهضمي السفلي 
يكشف التنظير المجهري الداخلي بالليزر عن "نمط يشبه كرة القدم" من الشعيرات الدموية الأضيق في حالات الأورام اللمفاوية الخبيثة؛ كما تكشف عن بنية مشوهة وتسرب الفلوريسين من التجويف في حالات السرطان الغدي القولوني؛ وتظهر الزغابات والخبايا ذات الشكل غير الحاد وزيادة الخلايا اللمفاوية داخل الظهارية في الداء الزلاقي.

يمكن استخدام التنظير المجهري الداخلي بالليزر لتحديد الورم الغدي والورم في سلائل وآفات القولون والمستقيم. يوفر تصنيف ميامي إرشادات للأطباء للتمييز بين الآفات الورمية وغير الورمية.

 داء الأمعاء الالتهابي (IBD) 
يمكن استخدام تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر لتحديد داء الأمعاء الالتهابي وأنواعه الفرعية (داء كرون والتهاب القولون التقرحي) بناءً على ملاحظة الخصائص المورفولوجية، مثل التشوه في البنية، وانخفاض كثافة الخبايا، وعدم انتظام الخبايا، وكثافة عالية بشكل غير طبيعي للفجوات الظهارية. كما يمكن التنبؤ بمسار تطور داء الأمعاء الالتهابي على الظهارة غير الملتهبة، مما يمهد الطريق لنهج علاجي جديد يسمى "العلاج المستهدف".

 البنكرياس 
من خلال دمجها مع التنظير بالموجات فوق الصوتية (EUS)، يمكن لتقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر أن تشخص بدقة الآفات الكيسية البنكرياسية، بما في ذلك الآفات الكيسية المخاطية وغير المخاطية. وتُستخدم إبر خاصة لجمع الأنسجة السائلة وأنسجة جدار الكيس لاختبارها. ويمكن أيضًا رؤية السرطانة الغدية القنوية البنكرياسية (PDAC) بواسطة التنظير المجهري الداخلي بالليزر. عند ملاحظة الآفات الكيسية والسرطانة الغدية القنوية البنكرياسية، يستطيع الأطباء تحديد التهاب البنكرياس المزمن في مراحله المبكرة وتحديد خباثة الآفات.

 القناة الصفراوية 
يمكن رؤية تضيق القناة الصفراوية باستخدام تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر. ويمكن تكييف تصنيفي ميامي وباريس للتمييز بين الأسباب السرطانية والالتهابية.

 استخدامات أخرى 
تصغير|349x349بك|تولد الأوعية في الورم (تكوين الأوعية الدموية) بواسطة عامل النمو البطاني الوعائي.
يمكن التمييز بين الالتهاب والورم الخبيث في الرئة والجهاز البولي باستخدام تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر، ويخضع هذا حاليًا للبحث. كما اُقترحت بعض الاستخدامات الأخرى مثل تشخيص سرطان الفم وسرطانات الرأس والرقبة الأخرى.

 التصوير الجزيئي 
تُستخدم الأجسام المضادة الموجهة ضد الأهداف الجزيئية في تشخيص أمراض الجهاز الهضمي عن طريق فحص الأنسجة. تلتقط تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر التألق الناتج عن ارتباط أجسام مضادة محددة بعامل نمو البطانة الوعائية (VEGF). وبمقارنة الاختلاف الكبير في شدة التألق، يستطيع الأطباء التمييز بين الأنسجة الطبيعية والورمية. يمكن تطبيق التصوير الجزيئي باستخدام الأجسام المضادة على التنظير المجهري الداخلي بالليزر كمعيار تشخيصي بفضل ارتباطه العالي بالمجهر خارج الجسم.

يمكن استخدام تقنية التصوير الجزيئي بأسلوب مماثل في فحص سرطانات الرأس والعنق باستخدام التنظير المجهري الداخلي بالليزر، على الرغم من أن الأهداف التشخيصية قد تختلف عن تلك الموجودة في الجهاز الهضمي.

 الآلية 
بديل=|تصغير|350x350بك|مبدأ عمل مستشعر النقطة البؤرية - 1) مصدر الضوء، 2) مقسم الحزمة، 3) العينة، 4) المستوى البؤري، 5) فتحة الاستقبال الدقيقة، 6) كاشف الصورة، 7) فتحة الإضاءة الدقيقة، 8) حزمة الإضاءة، 9) حزمة الملاحظة من المستوى البؤري، 10) حزمة الملاحظة الخارجة عن المستوى البؤري.

 الآلية الأساسية 
يُطلق الليزر من خلال فتحة دقيقة في تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر، حيث ينعكس بواسطة مقسم الحزمة أو المرآة ثنائية اللون، ثم يُركّز بواسطة العدسة الشيئية. تُثار الصبغة الفلورية في النسيج المستهدف وتُطلق طولاً موجيًا محددًا. بعد ذلك، يُجمَع الانبعاث الصادر من المستوى البؤري للنسيج بواسطة العدسة الشيئية ومقسم الحزمة. وفي النهاية، يُفلتر الليزر بواسطة فتحة دقيقة أخرى لتقليل الضوضاء خارج نطاق التركيز، ليدخل إلى الكاشف أو أنبوب التضخيم الضوئي.

 الصبغات الموضعية 
يمكن استخدام صبغتي كِريسيل فيوليت وأكري فلاڤين كصبغات موضعية. صبغة كريسيل فيوليت هي صبغة شائعة في علم الأنسجة وتُستخدم لشرائح المجهر الضوئي، خاصة لشرائح الدماغ. في تقنية التنظير المجهري الداخلي بالليزر، يمكنها تحسين رؤية السيتوبلازم، إلا أنها محدودة في اختراق الأنسجة ولا تظهر أي شيء عن الأوعية الدموية. أما الأكري فلاڤين فهو معقم وصبغة. في التنظير المجهري الداخلي بالليزر، يمكنه صبغ أنوية الخلايا الظهارية السطحية في الجهاز الهضمي. ومع ذلك، فهو يتمتع بخصائص سامة للخلايا ومطفرة، بالإضافة إلى آثاره الجانبية الشائعة مثل التهيج.

 الأصباغ الوريدية 
تصغير|التركيب الكيميائي للفلوريسين.
الفلوريسين هو الصبغة الوريدية الأكثر شيوعًا في التنظير المجهري الداخلي بالليزر. الفلوريسين صبغة معتمدة من إدارة الغذاء والدواء وتُستخدم بشكل روتيني في عيادات طب العيون، حيث تبدو باللون الأخضر تحت الضوء الأزرق الكوبالتي. تُطبق هذه الصبغة عادةً موضعيًا لتحديد أمراض القرنية باستخدام مجاهر القرنية، مثل خدش القرنية، وقرحها، والالتهابات. أو يمكن حقنها وريديًا لتحديد أمراض الشبكية بالتصوير الوعائي، مثل التنكس البقعي واعتلال الشبكية السكري. في سياق التنظير المجهري الداخلي بالليزر، تُعطى الصبغة عادةً وريديًا مباشرةً قبل إدخال الأنبوب (التنبيب) في التنظير. وورد أن التألق يكون في أقصى درجاته من بضع ثوانٍ إلى 8 دقائق. يُزال الفلوريسين ببطء من الجسم؛ وعليه، فإن التألق يتلاشى تدريجيًا إلى مستوى يمكن اكتشافه بعد ساعة واحدة، مما يمنح الأطباء نافذة زمنية للتحقق.

 خوارزمية التعرف والتدفق البصري 
يجعل ضيق الساحة البصرية في التنظير المجهري الداخلي بالليزر من الصعب على الأطباء تحديد موقع ومسار المسبار، مما يمثل تحديًا في مطابقة الصورة التي يتم الحصول عليها بموقع الآفة واتجاهها. وقد اقترحت الأبحاث خوارزمية للتعرف على الخبايا، تتنبأ بإزاحة البكسل بناءً على زاوية الحركة والمسافة. وباستعادة مسار استكشاف التنظير المجهري الداخلي بالليزر، يمكن للأطباء تحديد المواقع محل الاهتمام وتحسين كفاءة التشخيص.

 تقييم جودة الصورة 
اقترحت الأبحاث طريقة تقييم جديدة لترشيح الصور التي يتم الحصول عليها من التنظير المجهري الداخلي بالليزر. وبما أن هذا التنظير غالبًا ما يواجه تشوهات في الصورة، فإن تدهور جودة الصورة وفقدان معلوماتها يؤدي في النهاية إلى زيادة صعوبة التشخيص الدقيق. ويعمل نظام جديد لتقييم جودة الصورة (IQA)، الذي يستخدم قانون ويبر والمواصفات المحلية، على تقييم الجودة وترشيح الصور ذات القيمة التشخيصية المنخفضة.

 القيود 
تصغير|التنظير الداخلي باستخدام ملقط الخزعة في القناة العاملة (الأنبوب المجوف).
تُعد أنواع الحالات المرضية التي يمكن تحديدها بواسطة التنظير المجهري الداخلي بالليزر محدودة. فالتشخيص النسيجي مقتصر على الآفات السرطانية والالتهابات، حيث أن عدد الأمراض المحددة القابلة للتعريف ليس كثيرًا. علاوة على ذلك، يتطلب الأمر تدريبًا متخصصًا لتشغيل جهاز التنظير المجهري الداخلي بالليزر وتفسير الصور الناتجة عنه بشكل صحيح، وهي مهارات نادرًا ما يستخدمها خبراء التنظير. وبسبب ضيق مجال البصر، قد تكون تطبيقات التنظير المجهري الداخلي بالليزر محدودة. قد يكون التشخيص بمساعدة الحاسوب باستخدام تقنية الذكاء الاصطناعي مفيدًا في تشخيص صور التنظير المجهري الداخلي بالليزر.

يُعد الفلوريسين الصبغة الآمنة الوحيدة المعتمدة، في حين أن صبغتي كريزيل فيوليت وأكريافلافين هما عاملان شائعا الاستخدام. وقد يحد نقص الخيارات في عوامل التباين من تطبيقات التنظير المجهري الداخلي بالليزر. على سبيل المثال، يجب على المرضى الذين يعانون من حساسية تجاه الفلوريسين ألا يخضعوا أبدًا للتنظير المجهري الداخلي بالليزر الذي يتضمن استخدام هذه الصبغة الوريدية.

يتكون النظام البصري من أدوات بصرية مجهرية معقدة، يصعب تصنيعها وتجميعها. ولذلك، تُعد الأداة باهظة الثمن.

يُستخدم التنظير المجهري الداخلي بالليزر في الغالب بالاشتراك مع تقنيات أخرى بدلًا من أن يحل محل التنظير التقليدي المصحوب بالخزعة. يمكن أن يكون هذا التنظير مكملاً للخزعة التقليدية. ومن خلال استخدام نفس القناة التشغيلية، يمكن إجراء الخزعة التقليدية والتنظير المجهري الداخلي بالليزر بالتناوب من خلال إدخال أنبوب واحد.

 الآثار السلبية 
تصغير|297x297بك|تنبيب المنظار
تُعد خصائص الفلوريسين المسببة للحساسية، وهو الصبغة الفلورية الوريدية الشائعة الاستخدام في التنظير المجهري الداخلي بالليزر، هي السبب الرئيسي في حدوث الآثار الجانبية الخفيفة.

 إدخال الأنبوب (التنبيب) 
قد يؤدي التنظير المجهري الداخلي بالليزر، شأنه شأن تقنيات التنظير التشخيصي الأخرى، إلى التهاب البنكرياس عند استخدامه لفحص البنكرياس. وتُعد احتمالية الإصابة بالتهاب البنكرياس مرتفعة بشكل خاص في حالات التنظير المجهري المعتمد على الإبرة. ويمكن تقليل نسبة حدوث هذا الالتهاب عن طريق تقصير مدة الفحص وتجنب الحركة المفرطة للإبرة داخل جدار كيس البنكرياس.

 الفلوريسين 
بديل=|تصغير|195x195بك|اختبار وخز الجلد للحساسية
الآثار الجانبية الخفيفة، التي نادراً ما تحدث، تشمل:
 الغثيان
 القيء مع ألم خفيف في منطقة فم المعدة
 طفح جلدي في موقع الحقن
 انخفاض عابر في ضغط الدم دون صدمة
 احمرار منتشر

يمكن التحكم في هذه الآثار ما لم يكن لدى المرضى تجارب سابقة بها.

وقد سجلت حالات من صدمة الحساسية عند استخدام الفلوريسين في طب العيون. ويمكن للاستخدام الوقائي لمضادات الهيستامين أن يقلل من فرص حدوث تفاعلات الحساسية، أو يمكن أن تحدد اختبارات حساسية الجلد خطر الإصابة بتفاعلات الحساسية.

 الأكريافلافين 
يُحتمل أن يكون الأكريافلافين، وهو عامل تباين آخر يُستخدم في التنظير المجهري الداخلي بالليزر، مادة مسرطنة للبشر بسبب قدرته المعروفة على التسبب في الطفرات. ولذلك، لم تُعتمد هذه الصبغة من قبل إدارة الغذاء والدواء.

 التاريخ 
يُعد التنظير المجهري الداخلي بالليزر تعديلًا حديثًا وحيًا للمجهرية متحد البؤر، وهي تقنية المجهر التي اخترعها مارفن مينسكي في عام 1957. ومنذ عام 2004، يُستخدم التنظير المجهري الداخلي بالليزر لمراقبة التغيرات النسيجية المرضية في أنسجة الجهاز الهضمي.

 انظر أيضا 
 المجهر البؤري
 التنظير الداخلي
 عامل التباين

 المراجع 

تصنيف:طب
تصنيف:تنظير داخلي
تصنيف:طب الجهاز الهضمي التشخيصي