В США установлен допустимый предел воздействия дихлофоса для человека 1 мг/м3 в воздухе рабочей зоны в течение 8-часовой смены. Концентрации до 50 мг/м3 непрерывно до 4 часов вызывали признаки интоксикации при ингибировании ацетилхолинэстеразы: раздражение дыхательных путей, насморк, тяжесть в груди.  При содержании ДДВФ в воздухе более 50 мг/м3 к этим признакам добавляется нарушение зрения и дыхания, слюнотечение, головная боль. Симптомы токсичности после приема внутрь включают тошноту, рвоту, боль в животе и диарею. В крайних случаях возможны тремор, паралич, судороги, аритмия, кома. Признаки отравления могут быть очень выраженными при длительном контакте с кожей. Известны антидоты атропин и дипироксим, в тяжелых случаях применяются оба.Концентрация в воздухе 100 мг/м3 – непосредственно опасное для жизни или здоровья значение. Минимальная смертельная доза при пероральном приеме для человека – 50 мг/кг массы тела.Хроническое воздействие малых доз на животных не действует, для развития болезни необходима доза дихлофоса, в разы больше дозы, ингибирующей холинэстеразу. Крысы переносили пероральный прием до 62 мг/кг в день 90 дней без признаков заболевания, в то время как 0,25 мг/кг в день за 4 дня приводил к снижению уровня холинэстеразы.  Дихлофос высокотоксичен для птиц, водных организмов и пчел.