Отчет 57 с., 3 ч., 8 рис., 10 табл.,109 источников, без прил вРожденный иммунитет, иглокожие, асцидии, приобретенный иммунитет, стволовые клетки, регенерация,

Реферат



Отчет 57 с., 3 ч., 8 рис., 10 табл.,109 источников, без прил.

вРОЖДЕННЫЙ ИММУНИТЕТ, ИГЛОКОЖИЕ, АСЦИДИИ, ПРИОБРЕТЕННЫЙ ИММУНИТЕТ, СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ, РЕГЕНЕРАЦИЯ, РЕПАРАЦИЯ, ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ, ЦИТОКИНЫ, ПОПУЛЯЦИИ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ КЛЕТОК, МЕЖКЛЕТОЧНАЯ КОПЕРАЦИЯ, ПРОДУКЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА, ФАГОЦИТОЗ. 



Основными объектами экспериментальных исследований в ходе работы стали асцидия Halocynthia purpurea и морская звезда Asterias rubens. Целью работы на 1 этапе 

Для осуществления проекта были разработаны и адаптированы к объектам два новых метода оценки пролиферативной активности циркулирующих клеток беспозвоночных, основанных на применении метода проточной цитометрии. В отличие от данных литературы, относящихся к 1970-80 гг. и основанных на использовании меченого тимидина, не подтвержден факт митоген-пролиферации циркулирующих клеток интактных морских звезд и асцидий in vitro. В ответ на тканевое повреждение как у иглокожих, так и асцидий в циркуляции изменяется соотношение лимфоцитоподобных и специализированных клеток за счет появления новых лимфоцитоподобных клеток, которые способны к митоген-индуцированной пролиферации in vitro. Цитотоксической активностью обладают лимфоцитоподобные клетки асцидий, которые в ходе ответа на аллогенные клетки также пролиферируют. У иглокожих цитотоксической активностью обладают как лимфоцитоподобные клетки, так и агранулярные амебоциты, при этом сама цитотоксическая активность не связана с пролиферацией клеток и опосредована только выделением ферментов. Впервые разработана модель оценки цитотоксических реакций иглокожих. Впервые оценена временнáя динамика продукции оксида азота NO целомоцитами иглокожих на фоне митогенной и антигенной стимуляции. Экспериментально доказана способность целомоцитов иглокожих к распознаванию растворимых и корпускулярных антигенов и различный характер ответа на эти антигены. Впервые получены данные о влиянии иммуноактивных молекул человека на свойства целомоцитов иглокожих и о временной динамике продукции цитокиноподобных молекул иглокожих в ответ на антигенную и митогенную стимуляции. Разработанный метод оценки пролиферативной активности может быть использован при изучении защитных реакций представителей разных таксонов беспозвоночных животных. Полученные экспериментальные доказательства влияния цитокинов человека на функции целомоцитов иглокожих свидетельствуют о большей эволюционной древности цитокинов IL-1, TNF, IFN, чем считалось ранее. Накопленный материал существенно дополняет данные о ранних этапах эволюции иммунной системы и может быть использован в педагогическом процессе в рамках лекционных курсов по общей и сравнительной иммунологии.

Впервые проведено исследование различных популяций гемоцитов асцидии с применением методов проточной цитометрии. Впервые выявлена способность морулярных клеток к автофлуоресценции, что может служить основным критерием для определения относительного содержания данных клеток в гемолимфе. Впервые для исследования циркулирующих клеток беспозвоночных были использованы трехпараметрические гистограммы, что позволило оценить клеточный состав не только гемолимфы , но и исследовать состав отдельных фракций гемоцитов, полученных при помощи градиентного центрифугирования.