Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы

САМАРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ























Курсовая работа

Тема: «Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады , лямблии, трипаносомы.»









Исполнитель:

студентка I  курса

факультета 

сверхнормативного

 образования 

Баринова Ю.Ю.



Проверил:

Аршина С.Г.







Сызрань 2000 год


План

I. Общая характеристика простейших.

II. Класс жгутиков.

III. Лейшмании:

Виды

Строение

Цикл развития

Источники инфекции

Клиника

Диагностика

Профилактика

IV. Трипаносомы:

Строение

Жизненный цикл

Клиника

Диагностика

V. Лямблии:

Строение

Цикл развития

Клиника

Диагностика

VI. Трихомонады:

Виды 

Строение

Клиника

Диагностика


 Простейшие

Многочисленные виды одноклеточных организмов по современной зоологической классификации относятся к подцарству простейших. Часть из них ведет паразитический образ жизни.

Тело простейших состоит из цитоплазмы, ядра, различных органелл, обеспечивающих функции питания, движения, выделения. Простейшие передвигаются с помощью псевдоподий (саркодовые), жгутиков и ундулирующих мембран (жгутиконосцы), ресничек (ресничные инфузории). Пищей одноклеточным служат органические частицы, в том числе и живые микроорганизмы, а также растворенные в окружающей среде питательные вещества.

Простейшие некоторых видов способны инцистироваться, т. е. они округляются и покрываются плотной оболочкой. Цисты более устойчивы к воздействию неблагоприятных внешних факторов, чем вегетативные формы. При попадании в благоприятные условия простейшие выходят из цисты и начинают размножаться. Размножение происходит бесполым (поперечное, продольное и множественное деление) и половым путем. Простейшие многих видов, ведущие паразитический образ жизни, размножаются последовательно в нескольких хозяевах. Например, малярийный плазмодий проходит цикл развития в теле комара и в организме человека. Простейшие, обитающие в организме человека, относятся к четырем классам: саркодовые; жгутиконосцы; споровики, ресничные инфузории.

Классы подразделяются на отряды, семейства, роды (схема 1). Последние включают один или несколько видов.






КЛАСС

ЖГУТИКОНОСЦЫ (МАSТ1G0РНОRА)

Основное отличие простейших этого класса — наличие на одной из стадий развития одного или нескольких жгутиков. В теле жгутиконосцев у основания жгута имеется особый органоид—кинетопласт, функция которого связана с выработкой энергии для движения жгута. У некоторых жгутиконосцев один из жгутиков проходит вдоль тела и соединён с ним тонкой перепонкой, образуя волнообразную (ундулирующую) мембрану. Последняя обеспечивает поступательное движение простейшего.

Из многочисленных видов данного класса для человека имеют наибольшее патогенное значение лейшманий и трипаносомы. Передаются они человеку через кровососущих переносчиков (москиты, мухи це-це и др.). Другие представители класса жгутиконосцев —• лямблии — обитают в кишечнике, а различные виды трихомонад — в кишечнике, ротовой полости и мочеполовых путях. Распространены эти простейшие очень широко.

Лейшмании

Виды.

Различают три вида лейшманий, паразитирующих у человека. Leishmania tropica вызывает у человека кожный лейшманиоз. Этот паразит был впервые обнаружен русским врачом и ученым П. Ф. Боровским (1897).

Выделяют две формы кожного лейшманиоза — антропонозную (городскую) и зоонозную (пустынную). Leishmania brasiliesis встречается в Южной Америке и вызывает кожно-слизистый (американский) лейшманиоэ. Leishmania donovani поражает внутренние органы, поэтому заболевание называется висцеральным (внутренним) лейшманиозом. Лейшмании этого вида названы по имени английских ученых, впервые обнаруживших их в селезенке больных людей в Индии [Лейшман (1900) и Донован (1903)]. Различают две основные географические формы: средиземноморский висцеральный лейшманиоз, встречающийся также и в СССР, и индийский кала-азар.

Строение.

Лейшмании в своем развитии проходят две стадии. Безжгутиковая форма имеет овальное тело длиной 2—6 мкм. Ядро округлое, занимает до 1/3  клетки. Рядом с ним находится кинетопласт, имеющий вид короткой палочки.

При окраске по Романовскому цитоплазма серовато-голубая, голубая или голубовато-сиреневая, ядро — красно-фиолетовое, кинетопласт окрашивается более интенсивно, чем ядро (рис. 1).



Рис. № 1 Leishmania donovani (А) 1 лейшмания свободнолежащая, 2 лейшмании внутриклеточные, 3 эритроцит, 4 нормобласт, 5 промиелоцит. Leishmania tropika (Б) 1 лейшмания свободнолежащая, 2 лейшмании внутриклеточные, 3 эритроцит, 4 нейтрофил, 5 лимфоцит..

Лейшмании на этой стадии неподвижны, жгутиков не имеют. Встречаются в теле позвоночного хозяина (человек, собаки, грызуны), паразитируют внутриклеточно в макрофагах, клетках костного мозга, селезенки, печени. В одной пораженной клетке может содержаться до нескольких десятков лейшманий. Размножаются простым делением.

Жгутиковая форма подвижная, имеет жгутик длиной 15—20 мкм. Форма тела удлиненная, веретенообразная, длиной до 10—20 мкм. Деление продольное. Развивается в теле беспозвоночного хозяина — переносчика (москита). В культуре на питательных средах также развиваются жгутиковые формы лейшманий.

Цикл развития.

Паразитируя в организме человека и некоторых животных, могут находиться в крови и коже. Москиты, мелкие насекомые, насосавшись крови больных людей или животных, заражаются лейшманиями.

Впервые же сутки заглоченные безжгутиковые паразиты превращаются в подвижные жгутиковые формы, начинают размножаться и спустя 6—8 дней скапливаются в глотке москита.

При укусе человека зараженным москитом подвижные формы лейшманий из его глотки проникают в ранку и затем внедряются в клетки кожи или внутренних органов в зависимости от вида лейшманий. Здесь происходит их превращение в безжгутиковые формы.             . 

	 Рис № 2 Собака, пораженная висцеральным лейшманиозом.



Источники инфекции.

На возможную роль собак как источника инфекции при средиземноморском висцеральном лейшманиозе впервые указал французский ученый Ш. Николь, а подтвердили это советские ученые Н. И. Ходукин и М. С. Софиев. Кроме собак, источником инфекции могут быть и некоторые дикие животные (шакалы, дикообразы, лисицы). При индийском лейшманиозе (кала-азаре) источником инфекции являются больные люди.

У собаки, пораженной висцеральным лейшманиозом (рис. 2), развивается истощение, появляются язвы на голове и коже тела, шелушение кожи, особенно вокруг глаз. При этом важно учитывать, что если у молодых собак заболевание может протекать остро и даже приводить их к гибели, то у взрослых животных течение болезни нередко более стертое или даже бессимптомное (носительство).

В СНГ висцеральный лейшманиоз встречается спорадически в Средней Азии, на юге Казахстана и в Закавказье.

При кожном лейшманиозе источником инфекции являются больные люди  или, как это впервые показал в 1937—1940 гг. Н. И. Латышев, дикие грызуны (при зоонозной форме, “пендинской язве”). Основными хранителями лейшманий являются большая песчанка (рис. 3) и краснохвостая песчанка. Зоонозный кожный лейшманиоз встречается во многих оазисах южной части Туркмении и Узбекистане. Передача этого лейшманиоза иногда идет столь интенсивно, что местные жители переболевают им еще в дошкольном возрасте. Жизненные циклы лейшманий представлены на рис. 4 и 5



Рис. № 3. Большая песчанка.



Рис № 4 Жизненный цикл Leishmania donovani



Рис № 5 Жизненный цикл Leishmania  tropika

 Клиника.

Висцеральным лейшманиозом чаще заболевают дети. После инкубационного периода длительностью от нескольких недель до нескольких месяцев у заболевшего повышается температура тела, в разгаре болезни достигающая 39—40°С, появляется вялость, адинамия, бледность, исчезает аппетит, увеличивается, иногда резко, селезенка  и печень, вследствие чего заметно выступает живот (рис.№ 6)

 

	 Рис № 6 Ребенок, больной висцеральным лейшманиозом.

Развиваются анемия и истощение больного.

Заболевание тянется несколько месяцев и при отсутствии лечения обычно заканчивается смертью, непосредственной причиной которой часто являются такие осложнения, как пневмония, диспепсия.

При заражении человека возбудителем кожного лейшманиоза после инкубационного периода от 1— 2 нед до нескольких месяцев (при зоонозном типе этот период обычно короткий) в местах укусов москитов появляются небольшие бугорки. Они буровато-красноватого цвета, средней плотности, обычно малоболезненные. Бугорки постепенно увеличиваются и затем изъязвляются — через 3— 6 нед при антропонозной форме и через 1—3 нед при зоонозной. Возникают язвы с отеком окружающей ткани, воспалением и увеличением лимфатических узлов.

Процесс тянется несколько месяцев (при антропонозной форме—больше года), заканчиваясь выздоровлением. На месте язв остаются рубцы. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет.

Диагностика.

 При постановке клинического диагноза указанные выше основные симптомы заболевания являются опорными. Следует учитывать эпидемиологические данные

(проживание в неблагополучных по лейшманиозу местах и т.д.). Окончательный и достоверный диагноз висцерального лейшманиоза ставится на основании обнаружения возбудителя. 

Исследование пунктата костного мозга

С целью обнаружения возбудителя висцерального лейшманиоза, а в ряде случаев и других простейших исследуют костный мозг.

Костный мозг получают, пунктируя гребень подвздошной, головку большеберцовой кости или грудину. Во всех случаях пункция является ответственной процедурой и производится только врачом.

Полученный при пункции костный мозг помещают на предметное стекло и, осторожно размазывая тонким слоем с помощью шлифованного стекла, готовят мазок. При значительной примеси крови в пунктате на стекле находят маленькие белые комочки и готовят из них мазки.

Фиксация мазка. Мазок сушат на воздухе, фиксируют 30 мин в абсолютном этиловом спирте или 5 мин в метаноле (метиловом спирте), снова высушивают на воздухе. Фиксированные мазки можно хранить до окраски несколько дней.

Окраска мазка. Стекла укладывают мазками кверху на стеклянные палочки в фотокювете. На всю поверхность мазка наливают разведенную в фосфатном буфере (рН 6,9—7,1) краску Романовского на 30—50 мин. Продолжительность окраски зависит от температуры помещения — в теплом она меньше, в холодном — больше. После окраски препарат ополаскивают дистиллированной водой (или кипяченой) и высушивают. Исследуют под иммерсией.

Оценка результатов. В разгаре болезни лейшмании могут обнаруживаться легко. В ранней стадии и в период лечения требуется более длительный просмотр мазка — не менее 40 мин.

В препаратах лейшманий могут находиться группами или поодиночке, как внутриклеточно, так и вне клеток в связи с разрушением их во время приготовления мазка.

При кожном лейшманиозе исследуют мазки из не распавшихся бугорков или из инфильтратов вблизи язв. 

Пункция кожных поражений и лимфатических узлов.

При некоторых болезнях протозойной этиологии, например, кожном лейшманиозе, исследуют материал из кожных поражений, а в ряде случаев исследуют пунктат лимфатических узлов (лейшманиоз, трипаносомоз, токсоплазмоз).

При кожном лейшманиозе мазки готовят из не распавшихся бугорков и язв. Кожу в области бугорка протирают спиртом, двумя пальцами слегка сдавливают и иглой или кончиком скальпеля делают прокол или поверхностный надрез. Из выступившей серозно-кровянистой жидкости готовят на предметном стекле мазок.

При наличии язв материал брать непосредственно из них не рекомендуется, так как наличие микрофлоры и остатков разрушенных клеток затрудняет поиски лейшманий. Поэтому после предварительной обработки кожи спиртом область вокруг язвы сжимают двумя пальцами и в зоне инфильтрата по краю язвы делают прокол иглой или поверхностный разрез скальпелем. Для приготовления мазков используют каплю серозно-кровянистой жидкости или полученный при поскабливании скальпелем по краю разреза материал.

Мазки сушат на воздухе, фиксируют смесью Никифорова и красят по Романовскому.

Оценка результатов. В препарате должны быть хорошо различимы клетки инфильтрата — макрофаги, эндотелиальные, плазматические, лимфоидные клетки, фибробласты и небольшая примесь клеток периферической крови. Наличие в препарате эпителиальных клеток, бесструктурных глыбок, окрашивающихся в равномерно сиреневый цвет, означает, что соскоб был взят поверхностно и должен быть повторен. В мазке не должно быть слишком много крови, а также гноя и бактерий.

Лейшмании обнаруживаются в макрофагах, а также вне клеток в виде округлых, овальных или удлиненных телец размером 3—5 мкм.

Лейшмании легко обнаруживаются на начальных стадиях изъязвления. В гнойном отделяемом язвы могут быть обнаружены лишь деформированные и разрушающиеся лейшмании, по которым трудно поставить диагноз. На стадии заживления обнаруживаются редко.

Пункция увеличенных лимфатических узлов обычно проводится врачом с помощью инъекционной иглы после соответствующей обработки кожи. Узел придерживают рукой, содержимое через иглу насасывают шприцем и наносят на предметное стекло.

 В ряде случаев применяют метод посева крови больного или материала из кожных поражений или костного мозга на среду, которая готовится из агара с добавлением дефибринированной крови кролика. В положительном случае на 2— 10-й день в культуре появляются жгутиковые формы лейшманий.



Профилактика.



 	Профилактические мероприятия выбираются применительно к виду лейшманиоза. При лейшманиозе проводят подворные обходы для раннего выявления больных, организуют систематическое уничтожение безнадзорных собак и осмотры зарегистрированных собак ценных пород (охотничьи, сторожевые, служебные и т.д.). При антропонозной форме кожного лейшманиоза основным профилактическим мероприятием является выявление и лечение больных людей. При зоонозной форме организуют истребление диких грызунов.

Надежным средством индивидуальной профилактики являются прививки живой культуры жгутиковых форм. Важным разделом борьбы против всех видов лейшманиоза служит уничтожение москитов и предохранение людей от их укусов.



Трипаносомы



Строение.



 Для человека патогенны три вида из рода Trypanosoma , причем два вида вызывают африканский трипаносомоз (сонную болезнь) и один вид —американский трип аносомоз (болезнь Шагаса).

Тело трипаносом продолговатое, узкое, имеет жгутики и ундулирующую мембрану. Длина тела 17—28 мкм. Переносчиком возбудителей африканского трипаносомоза являются мухи рода Glossina, или це-це (рис.№  7 и 8  ). 







Рис. № 7 Жизненный цикл Trypanosoma rhodesiense

 

Рис № 8 Жизненный цикл  Tripanosoma  gambiense

Болезнь Шагаса переносится триатомовыми клопами (рис. 9).



Рис №    Жизненный цикл Trypanosoma cruzi



Клиника.

При нападении на человека зараженного переносчика трипаносомы проникают в кровь, затем — во внутренние органы и центральную нервную систему, где и размножаются. У больных повышается температура тела, появляется сыпь на теле, увеличиваются лимфатические узлы.

При сонной болезни поражается центральная нервная система, развивается менингоэнцефалит, обычно приводящий больного к гибели по истечении нескольких месяцев или лет.

Болезнь Шагаса — тяжелое заболевание, поражающее внутренние органы, сердечную мышцу, головной мозг. В СНГ могут выявляться только завозные случаи трипаносомозов.

Диагностика.

При африканском трипаносомозе паразитологическое исследование имеет свои особенности, зависящие от стадии заболевания. Возбудителя можно обнаружить в начальном периоде заболевания на месте укуса зараженной мухой це-це, а также в периферической крови. В поздний период лихорадки или по окончании его трипаносом обнаруживают в пунктате увеличенных лимфатических узлов. В период проявления симптомов поражения центральной нервной системы паразитов, в крови и в лимфатических узлах нет. На этой стадии болезни более эффективно исследование спинномозговой жидкости.



Для обнаружения трипаносом исследуют свежие или окрашенные препараты. В первом случае каплю крови, смешанную с цитратом, пунктат лимфатического узла или спинномозговой жидкости помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Подвижных трипаносом можно заметить даже при малом увеличении микроскопа, хотя лучше их видно при большом увеличении. Более распространенным является исследование постоянных окрашенных по Романовскому препаратов, для чего готовят мазки и толстые капли обычным способом. В окрашенных препаратах трипаносомы легко распознаются среди клеточных элементов. При окраске по Романовскому тело трипаносом окрашивается в голубоватый цвет, ядро и жгуты— в красный. На препарате можно видеть мембрану, соединяющую волнообразно извитой жгутик с краем тела.

Если в свежих или окрашенных препаратах не удается обнаружить возбудителя, используют метод заражения лабораторных животных. Наиболее чувствительны к заражению трипаносомами белые мыши, у которых после введения исследуемого материала подкожно или внутримышечно уже на 2—3-й день в крови появляются паразиты.

При американском трипаносомозе возбудитель обнаруживается в острой стадии болезни в периферической крови в свежих или окрашенных по Романовскому препаратах. Однако по сравнению с африканской формой болезни число трипаносом здесь значительно меньше, поэтому требуется просматривать большое число препаратов. В хронической стадии паразиты в крови встречаются очень редко, поэтому исследование периферической крови бывает малоэффективным. В таких случаях рекомендуется заражение белых мышей или морских свинок, а также посевы на питательные среды. С целью диагностики используют серологические реакции: связывания комплемента, агглютинации, флюоресцирующих антител.

Лямблии

Строение.

Лямблия (Lamblia intestinalis) впервые была описана русским ученым Д. Ф. Лямблем (1859), в честь которого она и получила свое название.

Лямблия существует в виде вегетативной формы (трофозоит) и цисты (рис. 10).

 Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидная, передний конец тела закруглен, задний заострен. Длина 9—18 мкм. В передней части тела находится присасывательный диск в виде углубления. Имеет 2 ядра, 4 пары жгутиков. Жгутики, проходя частично в цитоплазме, образуют два хорошо видимых при окраске продольных пучка.



	Рис № 10 Лямблии

При наблюдении в живом состоянии движение очень характерное, паразит все время переворачивается боком за счет вращательного движения вокруг продольной оси. В препарате при комнатной температуре лямблии быстро погибают. Пищу всасывают всей поверхностью. Размножаются продольным делением.

Цисты — это неподвижные неактивные формы паразита. Длина 10—14 мкм. Форма овальная. Оболочка сравнительно толстая, хорошо очерчена, часто в значительной своей части как бы отслоена от тела самой цисты. Этот признак помогает отличать цисты лямблий от других сходных образований.

В растворе Люголя окрашиваются в желтовато-коричневатый цвет. Окрашивание позволяет видеть в зрелой цисте 4 ядра.

Цикл развития.

Обитают в верхнем отделе тонкого кишечника. С помощью присасывательного диска прикрепляются к ворсинкам. В желчном пузыре лямблий не живут, так как желчь на них действует губительно. Частое обнаружение их при дуоденальном зондировании объясняется тем, что лямблий попадают в содержимое двенадцатиперстной кишки с ее стенок.

Обычно вегетативные формы с испражнениями не выделяются, однако при поносах их можно обнаружить в свежевыделенных жидких фекалиях. Лямблий, попадая в нижние отделы кишечника, где условия для них неблагоприятные, превращаются в цисты, которые и выделяются обычно с испражнениями.

Цисты хорошо сохраняются во внешней среде, в зависимости от влажности и окружающей температуры — до месяца; при высушивании погибают очень быстро.

Заражение может произойти через загрязненные руки, игрушки, пищу и воду. Цисты, попадая в кишечник, превращаются там в вегетативные формы. Одна циста образует две вегетативные формы.

Клиника.

Лямблии распространены очень широко, особенно часто они встречаются у детей. По мнению некоторых ученых, лямблии, особенно при большом их числе, могут вызывать механическое раздражение слизистой оболочки кишечника, в определенной степени затруднять всасывание жиров и жирорастворимых витаминов. При этом могут возникать нерезкие боли в животе, расстройство стула, снижение аппетита, иногда боли в правом подреберье (лямблиоз). В некоторых случаях лямблии могут ухудшить течение других заболеваний кишечника и желчных путей. Ряд ученых считают лямблии непатогенными. Таким образом, вопрос о патогенности лямблии в настоящее время окончательно не решен.

Диагностика.

Обнаружить лямблии у зараженного человека обычно сравнительно легко. 

.

Исследование желчи.

Желчь и содержимое двенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматривают и выбирают комочки слизи на предметное стекло и микроскопируют. Кроме того, материал центрифугируют, просматривают под микроскопом осадок. Этим методом можно обнаружить вегетативные стадии лямблий. В свежевыделенном  материале, полученном при дуоденальном зондировании, можно обнаружить подвижные вегетативные формы. 

Исследование испражнений/

Сбор материала. Фекалии исследуют с целью обнаружения простейших кишечника.

Движение простейших — одно из самых характерных и отличительных свойств, которое позволяет поставить правильный диагноз. Поэтому основное правило, которое необходимо неукоснительно выполнять — это подвергать исследованию только свежий материал. Промежуток времени от момента выделения до исследования не должен превышать 30 мин., т. е. в лабораторию должны доставляться фекалии в теплом виде. Под термином “теплые фекалии” надо понимать фекалии, не остывшие после выделения их из организма, но отнюдь не подогретые искусственно. Исследование оформленных испражнений допускается в течение 2 ч после выделения.

Исследуемый материал собирают в чистую сухую посуду. Наиболее подходящими для этой цели являются картонные парафинированные стаканчики, которые после одноразового использования сжигают. Если фекалии собирают в стеклянную или фарфоровую посуду, то перед употреблением ее стерилизуют кипячением.

Вегетативные формы простейших весьма чувствительны к химическим веществам, и если в посуде, куда собирают : фекалии, остаются следы дезинфицирующих веществ, простейшие быстро погибают и распознавание их становится трудным, а иногда и невозможным.

Доставленный в лабораторию материал прежде всего подвергают макроскопическому осмотру. При этом отмечают консистенцию кала, наличие слизи и крови. Если в лабораторию доставлено одновременно несколько проб фекалий, в первую очередь подлежат исследованию неоформленные фекалии с патологическими примесями/

Сохранять пробу до исследования надо при обычной температуре в вытяжном шкафу. Помещать в термостат не следует, так как при повышенной температуре быстрее происходит размножение бактерий, больше образуется продуктов метаболизма, что приводит к быстрой дегенерации  простейших.

При каждом анализе испражнений с целью обнаружения простейших кишечника обязательным является исследование нативного препарата и мазка, окрашенного раствором Люголя.

Нативный мазок. Жидкие кровянисто-слизистые испражнения без видимой примеси фекальных масс могут быть исследованы без добавления изотонического раствора хлорида натрия. Деревянной палочкой каплю испражнений переносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Пользоваться стеклянными палочками не рекомендуется, так как ими невозможно набирать слизистые комочки, в которых находятся простейшие. Правильно приготовленный препарат должен быть опрятным, покровное стекло должно плотно прилегать к предметному с равномерным распределением жидкости между стеклами без ее выступания за пределы покровного стекла. Мазок должен быть умеренной толщины. Густой мазок малопрозрачен и его трудно микроскопировать, если же взято слишком мало фекалий, то мазок получится разведенным и простейших можно не обнаружить. Через правильно приготовленный мазок должен быть виден печатный текст.

Микроскопическое исследование свежего мазка нужно проводить, обязательно соблюдая следующие правила: 

освещение препарата не должно быть ярким. Правильное освещение достигается соответствующим положением конденсора, который опускают тем больше, чем сильнее источник света. Используют также светофильтр; 

 препарат просматривают сначала под малым увеличением микроскопа (X 10), а потом с сухой системой большого увеличения;

 передвигать препарат надо с таким расчетом, чтобы не пропустить какие-либо участки мазка или не попасть повторно на уже просмотренное место. 

При правильном освещении даже под малым увеличением можно увидеть вегетативные стадии и цисты лямблий. После ориентировочного просмотра под малым увеличением обязательно применяют большое увеличение (х10, х40).

Циста в нативном мазке отличается от вегетативной стадии постоянной формой благодаря оболочке. Строение цист в нативном препарате плохо заметно, невидны ядра. Поэтому для уточнения вида применяют мазок, окрашенный раствором 'Люголя.

Окраска раствором Люголя. Раствор Люголя по унифицированной методике рекомендуется следующего состава: йодид калия—3. г, кристаллический йод—'1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Вначале растворяют йодид калия, затем йод. Раствор стабилен в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре не более месяца. 

Цисты окрашиваются в золотисто-коричневый цвет. На фоне цитоплазмы заметны ядра, их строение и число. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в разные оттенки коричневого цвета.

Методика просмотра препарата, окрашенного раствором Люголя, такая же, как и нативного мазка. Следует учитывать, что при окраске раствором Люголя вегетативные стадии погибают и определяются с трудом.

Так, если фекалии оформленные, то в нативном мазке при микроскопии ( х 400) обнаруживают цисты. Сочетание методов копроскопии и дуоденального зондирования повышает частоту выявления лямблиоза.

Следует отметить, что широкое распространение лямблии (носительство) нередко вводит в заблуждение и вызывает гипердиагностику лямблиоза. Поэтому при наличии клинической картины поражения желудочно-кишечного тракта или желчных путей необходимо исключить другие возможные причины заболевания, например провести бактериологические исследования.

Трихомонады.

Виды.

 У человека обитают три вида трихомонад (рис. 11):Trichomonas hominis— кишечная, обитающая в толстом кишечнике; Trichomonas tenax— ротовая, обитающая в полости рта; Trichomonas vagimalis— влагалищная, паразитирующая в мочеполовых путях.



Рис № 11. Трихомонады

а- трихомонада влагалищная, б- трихомонада кишечная, в- трихомонада ротовая.

Строение.

 Кишечная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 8—20 мкм. От переднего конца тела отходят обычно 5 жгутиков.  С одной стороны тела по всей его длине расположена волнообразна; перепонка (ундулирующая мембрана), по наружному краю которой про ходит тонкая нить, выступающая своим свободным концом в виде жгутика. В цитоплазме при окраске видны ядро и осевая нить. Движение трихомонады активное, беспорядочное, “суетливое”. 

Наряду с поступательным движением трихомонады вращаются вокруг продольной оси. Мембрану удается заметить только при замедлении движения трихомонады или при ее остановке в виде периодически пробегающих волн по одной из сторон тела. Размножается делением. Цист не образует. Обитает в толстом кишечнике человека. В жидких испражнениях может обнаруживаться в очень больших количествах. В ряде случаев играет определенную роль в развитии или ухудшении течения заболеваний толстого кишечника, особенно у детей раннего возраста.

Ротовая трихомонада по строению похожа на кишечную, ее длина 6—13 мкм, ундулирующая мембрана не достигает конца тела. Цист не образует.

Патогенное значение не доказано, хотя и имеются данные о значительно более частой встречаемости у лиц с различными заболеваниями полости рта и зубов (гингивит, пародонтоз, кариес зубов) и о неблагоприятной роли этих простейших в поддержании патологического процесса. Некоторые исследователи обнаруживали трихомонад в мокроте больных легочными заболеваниями, а также в удаленных хирургическим путем бронхоэктазах и абсцессах легких. Все это заставляет обратить внимание на необходимость более широкого применения лабораторных методов исследования с целью выявления ротовых трихомонад в стоматологических и терапевтических медицинских учреждениях.

Трихомонад обнаруживают при микроскопии нативных или окрашенных мазков из соскоба ротовой полости (с зубов, десен, из очагов воспаления и нагноения), в бронхиальной слизи и мокроте. Выявляемость увеличивается с применением методов посева на питательные среды.

Влагалищная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 14—30 мкм (см. рис. 12). 



Рис № 12. Трихомонада влагалищная

I – мазок на культуры,II- мазок из влагалища, III- мазок из влагалища ( окраска метиленовым синим) а- трихомонада: 1 ядро, 2 базальные тельца, 3 передние жгутики, 4 ундулирующая мембрана, 5 аксостиль, 6 парабазальная нить, 7 лейкоциты. в – эпителиальные клетки.



На переднем конце тело имеет 4 жгутика и ундулирующую мембрану, доходящую только до середины тела. Ближе к переднему концу располагается ядро. Сквозь все тело проходит осевая нить (аксостиль), выступающая на заднем конце в виде шипика. Цитоплазма содержит вакуоли. Цист не образует, во внешней среде быстро погибает. Играет заметную роль в патологии мочеполовой системы, особенно у женщин. Наблюдается и длительное бессимптомное носительство, чаще у мужчин. Основными симптомами заболевания, которое называется мочеполовым трихомонозом, являются зуд, боль, жжение, серозно-гнойные выделения (бели).

Трихомонады этого вида передаются лишь половым путем. Иногда высказываемое мнение о том, что трихомонады могут переселиться во влагалище из кишечника, неверно, так как кишечная и влагалищная трихомонады — это разные виды с различными требованиями к условиям среды обитания. Диагноз ставят при обнаружении трихомонад в выделениях мочеполовых путей методом микроскопии нативных или окрашенных по Романовскому мазков 

Диагностика.

Исследование выделений мочеполовых путей.

При воспалительных заболеваниях мочеполовых путей обязательно исследование на наличие влагалищных трихомонад.

Патологические выделения у женщин берут для исследования с помощью влагалищных зеркал и тампона со слизистой оболочки влагалища или из его заднего свода, а при обилии выделений — с наружных половых органов или с пальца резиновой перчатки после осмотра больной врачом.

	Из уретры получают материал с помощью специальной ложечки, которую вводят до сфинктера.

У мужчин до мочеиспускания из уретры выдавливают каплю выделений. Для исследования мочевого пузыря мочу получают катетером и микроскопируют осадок после ее центрифугирования.

Во всех случаях 1—-2 капли выделений необходимо сразу же поместить в каплю изотонического раствора хлорида натрия на предметном стекле, накрыть покровным стеклом и исследовать при среднем увеличении (Х40, х10) с сухой системой.

В препарате, приготовленном указанным способом, вследствие быстрого высыхания подвижность трихомонад вскоре прекращается. Поэтому рекомендуют готовить препарат по типу “висячей капли”. В получающейся при этом влажной камере, где благодаря вазелиновой прокладке создается герметичность и замедляется высыхание препарата, подвижность трихомонад может наблюдаться иногда в течение часа. Это дает возможность готовить препараты в процедурном кабинете и направлять их в лабораторию (в холодное время года препараты надо доставлять в утепленном биксе).

В нативном препарате трихомонады легко отличаются от лейкоцитов и других клеток по движению, а также по наличию жгутов и ундулирующей мембраны. Более четко трихомонады видны при исследовании в темном поле или при фазово-контрастной микроскопии. В несвежем или подсохшем мазке трихомонады быстро прекращают свое движение, и в таком случае их определение становится практически невозможным.

Для диагностики трихомонадного поражения из исследуемого материала в процедурном кабинете готовят мазки и направляют в лабораторию, где их после подсушивания фиксируют и красят по Романовскому.

В окрашенных препаратах достаточно четко выявляются особенности морфологии трихомонад, что наряду с неограниченным временем исследования (в противоположность нативному мазку, где сроки доставки и микроскопии ограничены временем сохранения подвижности трихомонад) делает этот метод достаточно удобным для практических условий.

Окраска по Романовскому дает лучшие результаты в модификации Н. А. Цагикян (1954). Для этого фиксированный тонкий мазок красят 40 мин краской следующего состава: воды дистиллированной 100 мл, 1% раствора карбоната натрия 15 капель и краски Романовского 4 мл. По указанной модификации более четко красятся жгутики, трихомонады становятся хорошо различимыми. Ядра окрашиваются в фиолетово-рубиновый или фиолетовый цвет, цитоплазма—в голубой, жгутики и некоторые другие структурные образования — в розово--красный.

Повышению эффекта лабораторного исследования способствует просмотр нативных и окрашенных препаратов.




Список используемой литературы.



Генис Д.Е. Медицинская паразитология, М. «Медицина», 1985 г

Воробьев А.А. Микробиология и иммунология, М. «Медицина», 1999 г.

Коротеев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, С-П., 1998 г.

Золотницкий В.С. Руководство к практическим занятиям по эпидемиологии и паразитологии, М. «Медицина», 1975 г.

Слюсарев А.А. Биология с общей генетикой, М. «Медицина», 1978 г.

Чернес Ф.К. Микробиология, М. «Медицина», 1987 г.

Ярыгин В.Н. Биология, М. «Медицина», 1980 г.