一平板の乳酸菌の集落数三〇個から三〇〇個までのもの（一平板の乳酸菌の集落数が三〇個から三〇〇個までのものがないときは、拡散集落の部分が平板の二分の一以下で他の集落がよく分散していて算定に支障のないもの）の乳酸菌の集落数を集落計算器を用いて常に一定した光線の下で計測し、希釈倍率が同一の試料ごとに各平板の乳酸菌の集落数を平均した値に当該試料に係る希釈倍率を乗じて得た数値を加算し、有効であつた平板の希釈倍率別による種類の数で除して得た値を乳酸菌数とする。
ただし、次の場合は、これを試験室内事故とする。
ａ
拡散集落の部分が平板の二分の一をこえた場合
ｂ
汚染されたことが明らかなもの
ｃ
その他不適当と思われるもの
〇培地
Ｂ・Ｃ・Ｐ・加プレートカウント寒天培養基
酵母エキス二・五ｇ、ペプトン五ｇ、ブドウ糖一ｇ、ツイーン８０一ｇ、Ｌ―システイン〇・一ｇ及び粉末寒天一五ｇを水一、〇〇〇ｍｌに合して加熱して溶かし、ＰＨを六・八から七・〇までに修正し、これにＢ・Ｃ・Ｐ・を〇・〇〇四から〇・〇〇六％の割合に加えて高圧滅菌する。
４
大腸菌群の測定法
２検体の採取及び試料の調製法に規定する一〇倍希釈液について、（２）アイスクリーム類の３大腸菌群の測定法に規定する方法により行うものとする。
（４）
バター及びバターオイル
１
水分の定量法
試料約二ｇをひよう量管に正確に採り、（１）
乳及び乳製品の１
乳及び乳製品の無脂乳固形分の定量法の項に定める方法と同様の方法により乾燥物質量を求め、乾燥減量を試料の採取量で除した数に一〇〇を乗じ、水分のパーセント量とする。
２
乳脂肪分の定量法
水分を定量したひよう量管に石油エーテル一五ｍｌを加え、ガラス棒ですりつぶしながらよく混ぜて十分溶かし、これをるつぼ型すり合わせガラスろ過器に移し、更に少量の石油エーテルを用いてひよう量管の内壁をよく洗い、これをろ過器に流し込む。ろ過器は一〇〇ｍｌの石油エーテルを用いて数回に分けて洗浄して脂肪を溶かし出す。次にろ過器を沸騰している蒸気乾燥器の中で恒量となるまで乾燥し、残留物質量を求める。
１により求めた乾燥物質量と残留物質量との差を試料の採取量で除した数に一〇〇を乗じ、乳脂肪分のパーセント量とする。
３
大腸菌群の測定法
ａ
検体の採取及び試料の調製法
検体は、容器包装のまま採取するか、又はその成分規格に適合するかしないかを判断することのできる数量を無菌的に滅菌採取びんに採取し、四度以下の温度で保持し、又は運搬し、採取後四時間以内に試験に供しなくてはならない。
検体は、四五度をこえない温度の恒温
槽
そう
で温め、一五分間以内に滅菌器具を用いてよくこね、滅菌スプーン又は滅菌駒込ピペツトで無菌的にその一〇ｇを共
栓
せん
三角フラスコ（
栓
せん
を除いて重量八五ｇ以下で一〇〇ｍｌの所にかく線を有するもの）に採り、四〇度の滅菌生理食塩水を加えて一〇〇ｍｌとし、一〇倍希釈したものを試料液とする。
ｂ
大腸菌群の測定法
（２）
アイスクリーム類の３
大腸菌群の測定法に規定する方法とする。
（５）
プロセスチーズ及び濃縮ホエイ
１
乳固形分の定量法
次の方法により求めた乳脂肪量と乳蛋白量との和を乳固形分とする。
なお、濃縮ホエイにあつては、更に（１）
乳及び乳製品の７
乳製品の糖分の定量法のａ
乳糖の定量法により求めた乳糖量を加え乳固形分とする。
ａ
乳脂肪分の定量法
試料一ｇを小型の背の高いビーカーに採り、蒸留水九ｍｌ及び希アンモニア水一ｍｌを加え、ガラス棒で練つて均一の乳濁液とし、少し温めてやわらかくする。塩酸で中和し、更に塩酸一〇ｍｌを加える。精製白砂を少量加え、時計皿でおおい、静かに約五分間煮沸する。冷却して内容物をリヨーリツヒ管に移し、ビーカーはエタノール一〇ｍｌ及びエチルエーテル二五ｍｌで洗い、その洗液をリヨーリツヒ管に加えて、よく振り混ぜ、以下（１）
乳及び乳製品の３
乳及び乳製品の乳脂肪分の定量法のｂ
濃縮乳、無糖練乳、加糖練乳、全粉乳、クリームパウダー、加糖粉乳及びクリームの乳脂肪分の定量法の項に定める濃縮乳、無糖練乳及び加糖練乳の方法と同様の方法により行うものとする。
ｂ
乳蛋白量の定量法
試料〇・二～一・〇ｇを正確に量り、ケルダール分解フラスコ（一〇〇～一五〇ｍｌのもの）に採る。これに分解促進剤（硫酸カリウム九分と硫酸銅一分とを別々に磨砕した後混和したもの）を〇・五ｇ加え、次いで分解フラスコの内壁を伝わらせて硫酸一〇ｍｌを静かに加えて混和する。分解台上で徐々に加熱し、時々注意して緩やかに混和する。亜硫酸ガスの白煙が生じはじめたら火力を強め、泡末の大部分が消失したら強熱して内容液が淡青緑色で透明になるまで分解を続ける。透明になつたら冷却して分解びんのくびの部分を少量の蒸留水で洗い、更に三〇分間加熱を続ける。分解が終つたら冷却し、蒸留水約二〇ｍｌを加えて放冷した後、漏斗を用いて分解液を一〇〇ｍｌメスフラスコに洗い込み、蒸留水で標線まで満たして、これを試料液とする。
ケルダール蒸留装置の受器（一〇〇～一五〇ｍｌの三角フラスコ）に、〇・〇一ｍｏｌ／ｌ硫酸一〇ｍｌを正確に採り入れ、メチレンブルー・メチルレツド混合指示薬一～二滴を加え、冷却器先端のガラス管が、受器の底部に達し、液内に没するように固定し、廃液排出口及び試料注入口を開き、冷却水を還流させ、試料注入口の漏斗から試料液一〇ｍｌを正確に二重蒸留管内に注入する。更に少量の蒸留水を用いて漏斗を洗い、次に、三〇％水酸化ナトリウム一〇ｍｌを試料注入口漏斗から加え、再び少量の蒸留水で漏斗を洗い、直ちに試料注入口を閉じ、蒸気発生装置の加熱を強め、廃液排出口からはげしく蒸気が出た後、廃液排出口を閉じ、二重蒸留管内で蒸留を始める。初留の先端が受器に達してから四～五分間蒸留を続けた後、受器を下げ、冷却器先端のガラス管を液面からはずし、更に二分間蒸留を行う。そのガラス管先端を蒸留水で洗い、受器を装置からはずす。
直ちに、〇・〇二ｍｏｌ／ｌ水酸化ナトリウム溶液で滴定する。なお、盲検として、試料以外の試薬を同量用いて、全く同様の操作を行い、同様に滴定する。
乳蛋白量は次式によつて計算する。
乳蛋白量（％）＝０．２８×Ｆ（Ｘ－Ｙ）×（１００／１０）×（１／Ｓ）×６．３８×１００
Ｆ
〇・〇二ｍｏｌ／ｌ水酸化ナトリウム溶液のフアクター
Ｘ
盲検の滴定量（ｍｌ）
Ｙ
試料の滴定量（ｍｌ）
Ｓ
試料の採取量（ｍｇ）
２
大腸菌群の測定法
本品の大腸菌群の測定法は、（４）
バター及びバターオイルの３
大腸菌群の測定法に規定する方法とする。
（６）
常温保存可能品及び充塡後殺菌製品
１
発育し得る微生物の試験法
ａ
恒温試験
検体を容器包装のまま採取し、三五・〇度±一・〇度で一四日間保持する。この間において容器包装の膨張の有無又は内容物の漏えいの有無を観察する。この場合、容器包装の膨張の有無は約二〇度に冷却して観察するものとし、容器包装の膨張又は内容物の漏えいを認めたものは、発育し得る微生物が陽性であるとみなす。
恒温試験で陰性の結果を得た検体については、細菌試験を行う。
ｂ
細菌試験
Ａ
試料の調製
恒温試験の結果陰性であった検体について、その開封部の表面をアルコール綿でよく拭き、滅菌した器具を用いて開封し、その内容物（内容物の全部又は一部が固形状のものである場合は、滅菌ハサミ等を用いて細切したもの）の全部を無菌的に混合した後、その二五ｇを無菌的に採り、滅菌リン酸緩衝希釈水二二五ｍｌを加えて細砕する。その一ｍｌを滅菌ピペットを用いて滅菌試験管に採り、滅菌リン酸緩衝希釈水九ｍｌを加えてよく混和し、これを試料とする。
Ｂ
試験法
試料を一ｍｌずつ五本のチオグリコール酸塩培養基に接種し、三五・〇度±一・〇度で四八時間（前後三時間の余裕を認める。）培養する。この場合、培養基のいずれかに菌の増殖を認めたものは陽性とする。
チオグリコール酸塩培養基
Ｌ―シスチン〇・五ｇ、ブドウ糖五ｇ、酵母エキス五ｇ、ペプトン一五ｇ、チオグリコール酸塩〇・五ｇ、食塩二・五ｇ、レサズリン〇・〇〇一ｇ及び粉末寒天〇・八ｇを精製水一、〇〇〇ｍｌに加えて加温溶解し、これをｐＨ七・〇～七・二に修正し、試験管に一〇ｍｌずつ分注した後、一二一度で一五分間滅菌する。