この省令の施行の際現にあるこの省令による改正前の様式（次項において「旧様式」という。）により使用されている書類は、この省令による改正後の様式によるものとみなす。
２
この省令の施行の際現にある旧様式による用紙については、当分の間、これを取り繕って使用することができる。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
附　則
（施行期日）
第一条
この省令は、公布の日から施行する。
（経過措置）
第二条
この省令の施行の際現にあるこの省令による改正前の様式（次項において「旧様式」という。）により使用されている書類は、この省令による改正後の様式によるものとみなす。
２
この省令の施行の際現にある旧様式による用紙については、当分の間、これを取り繕って使用することができる。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
附　則
（施行期日）
第一条
この省令は、改正法附則第一条第二号に掲げる規定の施行の日（令和三年八月一日）から施行する。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
附　則
この省令は、令和三年十月一日から施行する。
ただし、次の各号に掲げる規定は、当該各号に定める日から施行する。
一
別表第二の一の項の改正規定中５に係る部分及び同表第二の三の項の改正規定中８に係る部分
令和四年十月一日
二
別表第二の二の項の改正規定中５（３）に係る部分
令和五年四月一日
三
別表第二の二の項の改正規定中１０に係る部分
令和六年四月一日
附　則
この省令は、令和四年四月一日から施行する。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
附　則
この省令は、令和六年四月一日から施行する。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
ただし、第三条中土地改良法施行規則第八条、第五十七条の二の二第一項、第八十一条、第九十一条第二項及び第百六条の改正規定、第六条から第八条まで並びに第十一条の規定、第十三条中入会林野等に係る権利関係の近代化の助長に関する法律施行規則第十六条の改正規定並びに第十四条から第十六条までの規定は、令和六年四月一日から施行する。
附　則
この省令は、令和六年四月一日から施行する。
附　則
この省令は、デジタル社会の形成を図るための規制改革を推進するための農林水産省関係政令の一部を改正する政令の施行の日（令和六年四月一日）から施行する。
附　則
この省令は、公布の日から施行する。
別記様式第一号
（第四条関係）
様式第二号
（第七条関係）
様式第三号から第五号まで
削除
様式第六号
（第十三条関係）
様式第七号
（第十三条関係）
様式第八号
（第十三条関係）
様式第九号
（第十四条関係）
様式第十号
（第十四条関係）
様式第十一号
（第十五条関係）
様式第十二号
削除
様式第十三号
（第二十条，第四十二条関係）
様式第十四号
削除
様式第十五号
（第二十五条関係）
様式第十六号
（第三十九条関係）
様式第十七号
（第三十九条関係）
様式第十八号
（第三十九条関係）
様式第十九号
（第四十二条関係）
様式第二十号
（第四十四条関係）
様式第二十一号
（第四十四条関係）
様式第二十一号の二
（第四十四条の二関係）
様式第二十一号の三
（第四十七条の三関係）
様式第二十一号の四
（第四十七条の三関係）
様式第二十二号
（第四十八条関係）
様式第二十三号
（第四十九条関係）
様式第二十四号
（第五十一条関係）
様式第二十五号及び様式第二十六号
（第五十一条関係）
様式第二十七号
（第五十一条関係）
様式第二十八号
（第五十一条関係）
様式第二十九号
（第五十二条関係）
様式第三十号
（第五十四条関係）
様式第三十一号
（第五十六条の六関係）
様式第三十二号
（第五十六条の六、第五十六条の二十三、第五十六条の二十四、第五十六条の二十八、第五十六条の三十三関係）
様式第三十三号
（第五十六条の十関係）
様式第三十四号
（第五十六条の十関係）
様式第三十五号
（第五十六条の十一関係）
様式第三十六号
（第五十六条の十三関係）
様式第三十七号
（第五十六条の十四関係）
様式第三十八号
（第五十六条の十六関係）
様式第三十九号
（第五十六条の十八関係）
様式第四十号
（第五十六条の十八関係）
様式第四十一号
（第五十六条の二十関係）
様式第四十二号
（第五十六条の二十五関係）
様式第四十三号
（第五十六条の二十五関係）
様式第四十四号
（第五十六条の二十五関係）
様式第四十五号
（第五十六条の二十六関係）
様式第四十六号
（第五十六条の二十八関係）
様式第四十七号
（第五十六条の三十関係）
様式第四十八号
（第五十七条の二関係）
様式第四十九号
（第五十九条関係）
別表第一
（第九条、第四十条関係）
検査の方法
区分
方法
要領
判定
ヨーネ病
１　予備的抗体検出法又は予備的遺伝子検出法（以下「スクリーニング法」という。）による検査
牛についての検査の場合に実施することができる。ただし、検査の反応が陽性である場合には、２又は５の検査を行うものとする。
２　リアルタイムＰＣＲ法による検査
ヨーネ菌ＤＮＡを検出するヨーネ病診断用リアルタイムＰＣＲキットを用いて実施する。
３　ヨーニン検査
注射に用いるヨーニンは、ヨーニン原液とし、尾根部の
雛壁
すうへき
の軟部の皮内に〇・一ミリリットルを注射するものとする。
４　補体結合反応検査
次の場合に実施する。
一　ヨーネ病にかかつているおそれがあると認められためん羊又は山羊についての検査の場合
二　患畜又は疑似患畜と同居しためん羊又は山羊についての検査の場合
三　その他めん羊又は山羊についての検査として必要と認める場合
５　リアルタイムＰＣＲ法による検査、ヨーニン検査による検査及び補体結合反応検査以外の検査
一　疫学的検査
二　臨床検査
三　細菌検査
四　その他必要な検査
１　スクリーニング法（ヨーネ病診断用抗原固相化酵素抗体反応キット（マイコバクテリウム・フレイ菌抽出抗原で血清処理するものに限る。）による方法）による検査の場合
一　ヨーネ菌粗抽出抗原を固相化したプレート（以下「スクリーニングプレート」という。）に、試料希釈吸収液で所定の倍数に希釈し、十五分間十六度から二十六度までの温度で感作した指示血清及び被検牛血清を分注した後、密封し、四十五分間十六度から二十六度までの温度で感作すること。
二　一により感作したスクリーニングプレートを洗浄液で洗浄し、これに標識抗体希釈液で所定の倍数に希釈した酵素標識抗体を分注した後、密封し、三十分間十六度から二十六度までの温度で感作すること。
三　二により感作したスクリーニングプレートを洗浄液で洗浄し、これに基質溶液を分注した後、十分間十六度から二十六度までの温度で反応させ、反応停止液を分注し、所定の波長で測定した吸光度値により算出した指示血清に対する相対吸光度値で判定すること。
四　指示血清に対する相対吸光度値が六十以上であるものを陽性とし、六十未満であるものを陰性とする。
２　スクリーニング法（ヨーネ病診断用抗原固相化酵素抗体反応キット（マイコバクテリウム・フレイ菌可溶化
蛋
たん
白で血清処理するものに限る。）による方法）による検査の場合
一　スクリーニングプレートに、試料希釈吸収液で所定の倍数に希釈し、十五分間二十五度の温度で感作した指示血清及び被検血清を分注した後、密封し、四十五分間二十五度の温度で感作すること。
二　一により感作したスクリーニングプレートを洗浄液で洗浄し、これに標識抗体希釈液で所定の倍数に希釈した酵素標識抗体を分注した後、密封し、四十五分間二十五度の温度で感作すること。
三　二により感作したスクリーニングプレートを洗浄液で洗浄し、これに基質溶液（使用する直前に調整したもの）を分注した後、十五分間二十五度の温度で反応させ、反応停止液を分注し、所定の波長で測定した吸光度値により算出した指示血清に対する相対吸光度値で判定すること。
四　指示血清に対する相対吸光度値が〇・三以上であるものを陽性とし、〇・三未満であるものを陰性とする。
２の２　スクリーニング法（ヨーネ病診断用リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応キット（サイバーグリーンを用いるものに限る。）による方法）による検査の場合
一　ヨーネ菌核酸抽出試薬を用いて、検体の
糞
ふん
便から
糞
ふん
便抽出ＤＮＡ液を作製すること。
二　リアルタイムＰＣＲ反応液（ＤＮＡポリメラーゼ、サイバーグリーン、プライマー、ウラシル―Ｎ―グリコシラーゼ、リボヌクレアーゼフリー水を含むものをいう。以下この号において同じ。）〇・〇四五ミリリットルに一で作製した
糞
ふん
便抽出ＤＮＡ液〇・〇〇五ミリリットルを混合したもの（以下この項において「検体調整液」という。）及びリアルタイムＰＣＲ反応液〇・〇四五ミリリットルに指示陽性ＤＮＡ液（あらかじめヨーネ菌のＤＮＡ濃度が明らかであるＤＮＡ液を十倍段階希釈したもの）〇・〇〇五ミリリットルを混合したもの（以下この項において「指示陽性調整液」という。）を、それぞれ〇・二ミリリットル容量のＰＣＲ用チューブ二本又はＰＣＲ用九十六穴プレートの二穴に〇・〇二五ミリリットルずつ分注すること。
三　二のチューブ又はプレートをリアルタイムＰＣＲ装置により、五十度の温度で二分間、九十五度の温度で十五分間感作した後、九十五度の温度での三十秒間及び六十八度の温度での一分間の感作を四十五回繰り返すこと。
四　三の感作後に、二の検体調整液の蛍光強度が上昇したもののうち、六十度から九十八度までの間で解離曲線解析を行つて検体調整液が指示陽性調整液の解離温度と同様の解離温度を示した検体を陽性とし、それ以外の検体を陰性とすること。