Los primeros fondos que sirvieron para la fundación del museo se componían de los restos hallados en las excavaciones de Itálica, objetos que fueron reunidos alrededor de 1780 por el alcaide del Alcázar, Don Francisco de Bruna y Ahumada, depositados en el Real Alcázar de Sevilla, que hizo a su vez de “museo temporal”; en 1788 se añadieron las esculturas de los emperadores Trajano y Adriano, resultado de las excavaciones realizadas en Santiponce, además de los objetos extraídos en las excavaciones oficiales de Itálica efectuadas entre 1839 y 1840 por Don Ivo de la Cortina, y restos descubiertos desde 1862 por Don Demetrio de los Ríos.