Los primeros españoles en llegar a estos territorios fueron los de las expediciones dirigidas por los capitanes Juan de Ayolas y su lugarteniente Domingo Martínez de Irala, en donde fundaron el 2 de febrero de 1537 el fuerte de La Candelaria, en la zona meridional de la gran «Laguna de Jarayes» —en un mapa del año 1600 lo ubica frente al futuro Fuerte Olimpo, al sur de la desembocadura del río brasileño Nabileque que se vuelve a unir al río Paraguay fomando una isla pero también podría haber estado entre las latitudes 21º S y 19º S, siendo una posible ubicación en el punto medio, en los alrededores de la Bahía Negra— pero sería despoblado en agosto del mismo año, luego en 1542, Irala volvió a pasar por la zona, quien más al norte y en la zona septentrional de la misma gran laguna —actual La Gaiba— fundaría el 6 de enero de 1543 la ciudad llamada «Puerto de los Reyes» pero también sería abandonada el 23 de marzo de 1544 por orden del entonces adelantado Álvar Núñez Cabeza de Vaca, y que en sus cercanías en septiembre de 1568 fuera muerto el fundador de Santa Cruz de la Sierra: Ñuflo de Chaves.