Pero por desavenencias con Martínez de Irala fue depuesto Francisco Ruiz Galán del cargo titular asunceno e Irala se autoasignó de facto para ocuparlo, y por tanto como sucesor de Juan de Ayolas, si no se lo encontrara con vida, quien por fallecimiento del adelantado Pedro de Mendoza fuera nombrado como gobernador titular de Nueva Andalucía del Río de la plata de forma nominal desde el 23 de junio de 1537.