<!DOCTYPE html>

<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml">

<head><title>
	Pravilnik o kakvoći meda i drugih pčelinjih proizvoda
</title><meta http-equiv="Content-Type" content="text/html;charset=UTF-8" /><meta http-equiv="X-UA-Compatible" content="IE=edge" /><meta content="width=device-width, initial-scale=1.0, maximum-scale=1.0, minimum-scale=1.0" name="viewport" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/article.css?v=0.7" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/userProfile.css" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/print.css" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/uikit.min.css" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="/css/blueprint/reset_clearfix.min.css" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/web.css?v=1" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/webL.css?v=0.2" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/medium.css?v=1" /><link rel="stylesheet" type="text/css" href="../../css/small.css?v=1" />
    <script src="/js/jquery.min.js"></script>
    <script src="/js/initArticle.js?v=1.04"></script>
    <script src="/js/topStitcher.js"></script>
    </head>
<body>
    <!--Cached 29.3.2026. 21:47:59-->

    <div class="page clearfix">

<div class="header-newbar">
    <div class="content">
        <div class="left">

        </div>
        <div class="right">
            <div class="links uk-grid">
                <div class="link-child uk-width-1-2 uk-width-small-1-3">
                    <img src="/img/icon-info.gif" />
                    <a href="/upute.aspx" style="color: black;"><strong>Upute za korištenje</strong> </a>
                </div>
                <div class="link-child uk-width-1-2 uk-width-small-1-3" style="display:none;">
                    <img src="/img/icon-mail.gif" />
                    <a href="/email.aspx">Elektronička pošta</a>
                </div>
                <div class="link-child uk-width-1-1 uk-width-small-1-3">
                    <img src="/img/icon-home.gif" />
                    <a href="/search.aspx">Početna stranica</a>
                </div>
            </div>

        </div>
    </div>
</div>

<div class="header outer sivo">
    <div class="inner-header">
        <div class="glagoljica inner uk-grid">
            <img class="uk-width-1-3" src="/img/nn-glagoljica.gif">
            <img class="uk-width-1-3" src="/img/nn-glagoljica.gif">
            <img class="uk-width-1-3" src="/img/nn-glagoljica.gif">
        </div>
    </div>
</div>
<div class="header outer">
    <div class="inner">
        <div class="logo-link">
            <a href="/search.aspx">
                <img src="/img/logo.gif" /></a>
        </div>

    </div>
</div>

        <div class="divider outer"></div>

        <div class="articleContent outer clearfix">
            <div class="articleDetails inner">
                <div id="sticky-anchor"></div>
                <div id="sticky" class="title">

                    <h2>Pravilnik o kakvoći meda i drugih pčelinjih proizvoda</h2>
                </div>

                <div id="full" class="contentLeft">

                    <div class="contentLeft">
                        <div id="html-content-frame">
                            <span class="title-for-print">
                                <h3>NN 20/2000 (16.2.2000.), Pravilnik o kakvoći meda i drugih pčelinjih proizvoda</h3>
                            </span>

<!-- Article content cached on 29.3.2026. 21:47:59-->

   <style>
     .sl-content .doc .article-column{
       font-size:16px !important;
     }
     .sl-content .doc .article-column table tr {
       font-size: 10pt !important;
     }
     .sl-content .doc .article-column table{
       margin-top:10px;
       margin-bottom:20px;
     }
     .sl-content .fullwidth {
       width: 44.89em !important;
     }
     .sl-content p{
       line-height:1.4em !important;
     }
     div.story {
        width: 100% !important;
        left: 0% !important;
    }
     #html-content-frame DIV.sl-content TABLE {
       display: table !important;
     }
     .sl-content p.TB-NA18 {
       text-transform:uppercase;
    }
     .sl-content TABLE TR TD {
    padding-bottom: 0.2em !important;
    padding-top: 0.2em !important;
    padding-left: 0.2em !important;
    padding-right: 0.2em !important;

}

   </style>
<style>.sl-content *{
		font-family:'Minion Pro';
	}
.sl-content img{
		max-width:100%;
		height:auto;
		width:auto	;
	}
.sl-content TABLE{
		display:table;
		max-width:100%;
	}
.sl-content pre{
		white-space:pre-wrap;
	}</style><style>.sl-content *{
		font-family:'Minion Pro';
	}
.sl-content img{
		max-width:100%;
		height:auto;
		width:auto	;
	}
.sl-content TABLE{
		display:table;
		max-width:100%;
	}
.sl-content pre{
		white-space:pre-wrap;
	}</style>
<div class="sl-content"><div class="doc"><div class="article-column leftcolumn fullwidth">
<p>
<h1 align=CENTER>MINISTARSTVO POLJOPRIVREDE I &#138;UMARSTVA</h1>
<p>
<b>280</b>
<p>
Na temelju članka 38. stavka 4. Zakona o stočarstvu
(&#187;Narodne novine&#171; br. 70/97. i 36/98.) ministar poljoprivrede
i &#154;umarstva, uz suglasnost ravnatelja Dr&#158;avnog zavoda
za normizaciju i mjeriteljstvo, donosi
<p>
<h2 align=CENTER>PRAVILNIK</h2>
<p>
<h3 align=CENTER>O KAKVOĆI MEDA I DRUGIH PČELINJIH PROIZVODA</h3>
<p>
<center>I. OPĆE ODREDBE</center>
<p>
<center>Članak 1.</center>
<p>
Ovim se Pravilnikom propisuju temeljni zahtjevi za kakvoću
meda, matične mliječi, peluda, propolisa, pčelinjeg
voska i pčelinjeg otrova (u daljnjem tekstu: med i drugi
pčelinji proizvodi) te proizvoda na osnovi meda i drugih
pčelinjih proizvoda, uvjeti za očuvanje njihove
kakvoće, uvjeti stavljanja na tr&#158;i&#154;te, sadr&#158;aj
deklaracije i evidencije o proizvodu, postupci uzimanja uzoraka
i metode ispitivanja udovoljavanja temeljnim zahtjevima kakvoće.
<p>
<center>Članak 2.</center>
<p>
Med i drugi pčelinji proizvodi i proizvodi na osnovi meda
i drugih pčelinjih proizvoda prigodom stavljanja na tr&#158;i&#154;te
moraju udovoljavati uvjetima kakvoće propisanim ovim Pravilnikom.
<p>
Odredbe ovog Pravilnika odnose se i na med i druge pčelinje
proizvode i proizvode na osnovi meda i drugih pčelinjih
proizvoda iz uvoza.
<p>
<center>Članak 3.</center>
<p>
Kakvoća u smislu ovog Pravilnika jest skupno svojstvo proizvoda
uvjetovano osnovnim sastavom, pridodanim tvarima, tehnolo&#154;kim
postupcima, pakiranjem meda i drugih pčelinjih proizvoda,
proizvoda na osnovi meda i drugih pčelinjih proizvoda,
njihova čuvanja i skladi&#154;tenja.
<p>
<center>II. MED I DRUGI PČELINJI PROIZVODI</center>
<p>
<center>MED</center>
<p>
<center>Članak 4.</center>
<p>
Med jest sladak, gust, viskozni, tekući ili kristaliziran
proizvod &#154;to ga medonosne pčele proizvode od nektara
cvjetova medonosnih biljaka ili od medne rose, koje pčele
skupljaju, dodaju mu vlastite specifične tvari i odla&#158;u
u stanice saća da sazrije.
<p>
Med sadr&#158;i &#154;ećere, prije svega glukozu i fruktozu,
te saharozu, maltozu i druge polisaharide (uključujući
i dekstrine), zatim bjelančevine, aminokiseline, enzime,
organske kiseline, pelud, mineralne i druge tvari.
<p>
Boja meda mo&#158;e varirati od vrlo svijetlih do tamnijih nijansi.
<p>
Med mo&#158;e biti tekuće ili kremaste konzistencije, djelomice
ili potpuno kristaliziran.
<p>
<center>Članak 5.</center>
<p>
Prema podrijetlu medonosnih biljaka ili medne rose med se razvrstava
na:
<p>
1. nektarni med,
<p>
2. medljikovac.
<p>
Nektarni med jest proizvod &#154;to ga pčele proizvode
od nektara medonosnih biljaka različitih vrsta (lipa, bagrem,
kadulja, livadno bilje i dr.), a mo&#158;e biti monoflorni i poliflorni.
<p>
Medljikovac jest med &#154;to ga pčele proizvode od medne
rose (crnogorice ili bjelogorice). Medljikovac se od cvjetnog
meda razlučuje metodom električne vodljivosti, koja
mora biti veća od 1,00 mS/cm (mili Simensa po centimetru).
<p>
<center>Članak 6.</center>
<p>
Monoflorni med jest med koji u netopivom sedimentu sadr&#158;i
najmanje 45 % peludnih zrnaca iste biljne vrste.
<p>
Iznimno od odredbe stavka 1. ovoga članka, med se razvrstava
u skupinu monoflorni ako udio peludnih zrnaca u netopivom sedimentu
iznosi najmanje za:
<p>
- pitomi kesten (Castanea sativa) 85%;
<p>
- lucernu (Medicago sp.) 30%;
<p>
- ru&#158;marin (Rosmarinus officinalis) 30%;
<p>
- lipu (Tilia sp.) 25%;
<p>
- kadulju (Salvia sp.) 20%;
<p>
- bagrem (Robinia pseudacacia) 20%;
<p>
- lavandu (Lavandula sp.) 20%.
<p>
Poliflorni med jest mje&#154;avina meda različitih vrsta.
<p>
Mije&#154;ani med jest mje&#154;avina nektarnog meda i medljikovca.
<p>
<center>Članak 7.</center>
<p>
Med koji se stavlja na tr&#158;i&#154;te mora udovoljavati ovim
uvjetima:
<p>
1. da sadr&#158;i najmanje 65% reducirajućih &#154;ećera
računatih kao invertni &#154;ećer, a medljikovac,
najmanje 60% reducirajućih &#154;ećera;
<p>
2. da ne sadr&#158;i vi&#154;e od 5 % saharoze, osim za med od
vrijeska <i>(Satureia sp.)</i>, kadulje (<i>Salvia sp.)</i>, ru&#158;marina
<i>(Rosmarinus officinalis)</i> i drače <i>(Paliurus spina-christi),
</i>u kojih je dopu&#154;teno do 8% saharoze, a za med od bagrema
<i>(Robinia pseudacacia),</i> lavande <i>(Lavandula sp.)</i> i
medljikovca do 10% saharoze;
<p>
3. da ne sadr&#158;i vi&#154;e od 20% vode;
<p>
4. da ne sadr&#158;i vi&#154;e od 0,6% mineralnih tvari, osim
medljikovca, koji smije sadr&#158;avati do 1,2% mineralnih tvari;
<p>
5. da mu ukupna kiselost nije veća od 40 mmol kiseline na
1000 gr. te da mu ona nije umjetno smanjena;
<p>
6. da ne sadr&#158;i vi&#154;e od 0,1% tvari netopljivih u vodi;
<p>
7. da mu aktivnost očitane dijastaze nakon mije&#154;anja
nije ni&#158;a od 8,0, a ako je ni&#158;a od 8,0, hidroksimetilfurfurol
(HMF) ne smije biti veći od 15 mg/kg;
<p>
8. da udio hidroksimetilfurfurola (HMF) nije veći od 40
mg/kg;
<p>
9. da pri dekristalizaciji med nije zagrijavan na temperaturu
vi&#154;u od 40&#176;C;
<p>
10. da je svojstvenog okusa i mirisa bez stranih primjesa;
<p>
11. da u njemu nije počeo proces vrenja, da nije u stanju
vrenja i da nije provrio;
<p>
12. da mu nisu dodavani &#154;ećer (saharoza) ni drugi proizvodi
koji su konzistencijom i sastavom slični medu;
<p>
13. da nije dobiven hranjenjem pčela &#154;ećerom
i &#154;ećernim proizvodima, i da nije pomije&#154;an s
medom dobivenim na taj način;
<p>
14. da nije oneči&#154;ćen stranim organskim i mineralnim
tvarima, kukcima i njihovim dijelovima, leglom, izmetom, plijesni
i dr.;
<p>
15. da nije obojen nikakvim bojama;
<p>
16. da mu nisu dodavana sredstva za konzerviranje i aromatiziranje.
<p>
Nije dozvoljeno mije&#154;anje domaćeg i uvoznog meda namijenjenog
tr&#158;i&#154;tu.
<p>
<center>Članak 8.</center>
<p>
Med se čuva u zatvorenim posudama i suhim, tamnim, provjetrenim
prostorijama, na sobnoj temperaturi.
<p>
<center>MATIČNA MLIJEČ</center>
<p>
<center>Članak 9.</center>
<p>
Matična mliječ jest proizvod mliječne &#158;lijezde
mladih pčela radilica, mliječne boje, guste konzistencije,
karakteristična okusa i mirisa.
<p>
Matična mliječ mora biti izvađena od 48 do 50
sati nakon presađivanja ličinaka, a ne smije potjecati
iz zatvorenih matičnjaka ni iz legla trutova.
<p>
<center>Članak 10.</center>
<p>
Matična mliječ stavlja se na tr&#158;i&#154;te u
izvornom obliku ili liofilizirana.
<p>
Matična mliječ koja se stavlja na tr&#158;i&#154;te
u izvornom obliku mora udovoljavati ovim uvjetima:
<p>
1. da sadr&#158;i najmanje 30% suhe tvari,
<p>
2. da sadr&#158;i najmanje 11% bjelančevina.
<p>
<center>Članak 11.</center>
<p>
Matična mliječ mora se čuvati u hermetički
zatvorenim tamnim posudama, na temperaturi od -18 &#176;C.
<p>
Rok trajanja matične mliječi u izvornom obliku jest
jedna godina, a u liofiliziranom obliku dvije godine.
<p>
<center>PELUD</center>
<p>
<center>Članak 12.</center>
<p>
Pelud jest proizvod &#154;to ga pčele radilice skupljaju
na cvjetovima i oblikuju u grudice.
<p>
Prema načinu dobivanja pelud se dijeli na pelud skupljen
skidačem (skidani pelud) i pelud dobiven vađenjem iz
stanica saća (vađeni pelud).
<p>
<center>Članak 13.</center>
<p>
Pelud se stavlja na tr&#158;i&#154;te osu&#154;en u obliku grudica
ili mljeven, odnosno pothlađen.
<p>
Pelud koji se stavlja na tr&#158;i&#154;te mora udovoljavati ovim
uvjetima:
<p>
1. da osu&#154;en sadr&#158;i najmanje 92 %, a pothlađen 60
% suhe tvari,
<p>
2. mora biti karakterističnog okusa,
<p>
3. ne smije biti su&#154;en na temperaturi vi&#154;oj od 40&#176;C,
<p>
4. ne smije sadr&#158;avati kukce i njihove dijelove, leglo, izmet
i skladi&#154;ne &#154;tetnike,
<p>
5. ne smije biti u&#158;egao.
<p>
<center>Članak 14.</center>
<p>
Svje&#158;i pelud mora se čuvati pothlađen na &#173;18&#176;C,
umije&#154;an u med ili steriliziran su&#154;enjem u tamnoj hermetički
zatvorenoj ambala&#158;i.
<p>
Rok trajanja svje&#158;eg peluda jest jedna godina, a umije&#154;anog
u med dvije godine.
<p>
<center>PROPOLIS</center>
<p>
<center>Članak 15.</center>
<p>
Propolis jest pčelinji proizvod koji sadr&#158;i smolaste
tvari koje pčele skupljaju s pupoljaka drvenastih biljaka.
<p>
<center>Članak 16.</center>
<p>
Propolis koji se stavlja na tr&#158;i&#154;te mora udovoljavati
ovim uvjetima:
<p>
1. mora sadr&#158;avati najmanje 35% tvari koje se ekstrahiraju
alkoholom,
<p>
2. ne smije sadr&#158;avati katran ni spojeve slične katranu
odnosno katranske smole,
<p>
3. ne smije sadr&#158;avati vi&#154;e od 5% mehaničkih
nečistoća ni dijelova pčela,
<p>
4. ne smije sadr&#158;avati vi&#154;e od 30% voska.
<p>
<center>PČELINJI VOSAK</center>
<p>
<center>Članak 17.</center>
<p>
Pčelinji vosak jest proizvod vo&#154;tanih &#158;lijezda
pčela radilica, koji one koriste za izgradnju saća.
<p>
Pčelinji vosak jest kompleksna smjesa lipida i ugljikovodika.
<p>
Pčelinji vosak dobiva se pretapanjem saća i vo&#154;tanih
poklopaca.
<p>
<center>Članak 18.</center>
<p>
Pčelinji vosak stavlja se na tr&#158;i&#154;te kao:
<p>
- neproči&#154;ćeni pčelinji vosak,
<p>
- proči&#154;ćeni pčelinji vosak (Cera flava),
<p>
- proči&#154;ćeni bijeli pčelinji vosak (Cera
alba),
<p>
- satne osnove.
<p>
<center>PČELINJI OTROV</center>
<p>
<center>Članak 19.</center>
<p>
Pčelinji otrov jest proizvod otrovne &#158;lijezde pčela
radilica.
<p>
<center>Članak 20.</center>
<p>
Pčelinji otrov stavlja se na tr&#158;i&#154;te su&#154;en
u obliku bijelog kristaličnog praha.
<p>
<center>Članak 21.</center>
<p>
Rok trajanja pčelinjeg otrova je jedna godina.
<p>
<center>III. PROIZVODI NA OSNOVI MEDA I DRUGIH PČELINJIH
PROIZVODA</center>
<p>
<center>Članak 22.</center>
<p>
Proizvodi na osnovi meda i drugih pčelinjih proizvoda jesu
mje&#154;avine meda s drugim pčelinjim proizvodima ili
međusobne mje&#154;avine drugih pčelinjih proizvoda
u koje se mo&#158;e dodati ljekovito bilje i/ili njihovi ekstrakti
(valerijana, sljez, timijan, anis, breza i sl.).
<p>
Medu i drugim pčelinjim proizvodima mo&#158;e se dodavati
ljekovito bilje i/ili njihovi ekstrakti.
<p>
Proizvodi iz stavka 1. i 2. ovoga članka mogu biti u obliku:
kapi, tableta, kapsula, masti i sirupa.
<p>
Dodavanje drugih pčelinjih proizvoda medu ne dr&#158;i
se obogaćivanjem sastava meda.
<p>
<center>Članak 23.</center>
<p>
Med s dodacima jest mje&#154;avina meda s prehrambenim proizvodima
(voće, proizvodi od voća i povrća, proizvodi
od mlijeka, kakaa, margarina i sl.) u koju se mo&#158;e dodavati
ljekovito bilje i / ili ekstrakti ljekovitog bilja.
<p>
Med s dodacima mora sadr&#158;avati najmanje 60 % meda u gotovom
proizvodu.
<p>
<center>Članak 24.</center>
<p>
Proizvodi iz članka 22. i 23. ovoga Pravilnika moraju udovoljavati
temeljnim zahtjevima kakvoće koji su propisani ovim Pravilnikom
i koji se koriste za njihovu proizvodnju.
<p>
<center>IV. PAKIRANJE</center>
<p>
<center>Članak 25.</center>
<p>
Med i drugi pčelinji proizvodi i proizvodi na osnovi meda
i drugih pčelinjih proizvoda stavljaju se na tr&#158;i&#154;te
kao pakovina s označenom nazivnom količinom punjenja
sukladno posebnom propisu o mjeriteljskim zahtjevima za pakovine.
<p>
Ambala&#158;a u koju se pakira med i drugi pčelinji proizvodi
i proizvodi na osnovi meda i drugih pčelinjih proizvoda
mora udovoljavati posebnom propisu o uvjetima u pogledu zdravstvene
ispravnosti predmeta opće uporabe koji se mogu stavljati
u promet.
<p>
<center>Članak 26.</center>
<p>
Medu i drugom pčelinjem proizvodu i proizvodu na osnovi
meda i drugih pčelinjih proizvoda ne smiju se dodavati
sredstva kao &#154;to su bojila, zaslađivači, arome,
konzervansi i ne smiju se zračiti ionizirajućim ili
ultravioletnim zrakama.
<p>
<center>V. DEKLARACIJA I EVIDENCIJA O PROIZVODU</center>
<p>
<center>Članak 27.</center>
<p>
Med i drugi pčelinji proizvodi i proizvodi na osnovi meda
i drugih pčelinjih proizvoda koji se stavljaju na tr&#158;i&#154;te
kao pakovine moraju na ambala&#158;i, omotu, naljepnici ili privjesnici
imati deklaraciju s ovim podacima:
<p>
1. naziv proizvoda i njegovo ime namijenjeno tr&#158;i&#154;tu,
ako ga proizvod ima,
<p>
2. naziv tvrtke, odnosno ime i prezime i adresa proizvođača
ili onoga koji je proizvod pakirao, ako ga nije pakirao proizvođač,
i veterinarski kontrolni broj odobrenog objekta,
<p>
3. datum proizvodnje, odnosno pakiranja za proizvode koji imaju
ograničen rok trajanja,
<p>
4. rok trajanja ili tekst &#187;upotrebljivo do&#171;,
<p>
5. neto&#173;količinu (masu ili obujam) proizvoda,
<p>
6. za med - naziv medljikovac, ako je nektarni med naziv biljne
vrste za monoflorni, odnosno naziv cvjetni za poliflorni med,
te mije&#154;ani med za mje&#154;avinu nektarnog meda i medljikovca,
<p>
7. za druge pčelinje proizvode i proizvode na osnovi meda
i drugih pčelinjih proizvoda &#173; osnovne sastojke proizvoda
i njihove količine izra&#158;ene u mjernim jedinicama ili
postocima prema opadajućim vrijednostima,
<p>
8. druge podatke va&#158;ne za potro&#154;ača u skladu
s posebnim propisima.
<p>
Tekst na deklaraciji mora udovoljavati posebnom propisu o mjeriteljskim
zahtjevima za pakovine.
<p>
<center>Članak 28.</center>
<p>
Na deklaraciji uvoznog meda koji je namijenjen obradi uz podatke
iz članka 27. ovoga Pravilnika mora biti podatak o zemlji
podrijetla i podatak o nazivu i adresi uvoznika.
<p>
<center>Članak 29.</center>
<p>
Na deklaraciji uvoznog meda i drugih pčelinjih proizvoda
i proizvoda na osnovi meda i drugih pčelinjih proizvoda,
uz podatke iz članka 27. ovoga Pravilnika mora biti i tekst
&#187;uvozni&#171; med, drugi pčelinji proizvod ili proizvod
na osnovi meda i drugog pčelinjeg proizvoda, podaci o zemlji
podrijetla te nazivu i adresi uvoznika ako se uvozi kao gotov
proizvod.
<p>
<center>Članak 30.</center>
<p>
Med koji ne udovoljava uvjetima propisanim u članku 7.
ovoga Pravilnika mo&#158;e se koristiti kao sirovina u proizvodnji
drugih proizvoda i mora se deklarirati kao &#187;med nije za potro&#154;nju&#171;.
<p>
<center>Članak 31.</center>
<p>
Za med i druge pčelinje proizvode i proizvode na osnovi
meda i drugih pčelinjih proizvoda koji ne udovoljavaju
temeljnim zahtjevima kakvoće &#154;to ih propisuje ovaj
Pravilnik, ne mo&#158;e se upotrebljavati naziv med, drugi pčelinji
proizvod, proizvod na osnovi meda i drugih pčelinjih proizvoda,
ni sličan naziv koji navodi na to da se proizvod dr&#158;i
medom odnosno nekim drugim pčelinjim proizvodom.
<p>
<center>Članak 32.</center>
<p>
Proizvođač je du&#158;an za med i drugi pčelinji
proizvod i proizvod na osnovi meda i drugog pčelinjeg proizvoda
imati evidenciju o proizvodu.
<p>
Evidencija o proizvodu sadr&#158;i kratak opis tehnolo&#154;kog
postupka proizvodnje određenog proizvoda te izvje&#154;će
o obavljenoj laboratorijskoj analizi proizvoda i njegovim senzorskim
svojstvima.
<p>
Evidencija o proizvodu mora sadr&#158;avati i sljedeće podatke:
<p>
1. naziv proizvoda i njegovo ime namijenjeno tr&#158;i&#154;tu,
ako ga proizvod ima,
<p>
2. datum početka proizvodnje,
<p>
3. skupinu kojoj proizvod pripada prema odredbama ovog Pravilnika.
<p>
<center>VI. ISPITIVANJE</center>
<p>
<center>Članak 33.</center>
<p>
Ispitivanje udovoljavanja temeljnim zahtjevima kakvoće meda
i drugih pčelinjih proizvoda i proizvoda na osnovi meda
i drugih pčelinjih proizvoda obavlja ovla&#154;teni laboratorij
(u daljnjem tekstu: laboratorij) registriran za obavljanje te
djelatnosti ili je u sastavu pravne osobe registrirane za obavljanje
te djelatnosti, a ispunjava i ostale uvjete propisane ovim Pravilnikom.
<p>
<center>Članak 34.</center>
<p>
Laboratorij mora imati posebne radne prostorije za:
<p>
1. preuzimanje i pohranjivanje uzoraka,
<p>
2. smje&#154;taj uređaja i instrumenata za ispitivanje,
<p>
3. smje&#154;taj kemikalija, laboratorijskog suđa i opreme,
<p>
4. pranje i su&#154;enje laboratorijskog suđa i opreme,
<p>
5. obradu rezultata i pripremu izvje&#154;ća.
<p>
<center>Članak 35.</center>
<p>
Laboratorij mora raspolagati uređajima, instrumentima i drugom
opremom za ispitivanje koja je u suglasju s odnosnim stanjem znanosti
i tehnike.
<p>
<center>Članak 36.</center>
<p>
Laboratorij mora imati pisane upute za provođenje metoda ispitivanja
te za uporabu i rad svih uređaja i instrumenata koji se koriste
za pripremu uzoraka i ispitivanje.
<p>
<center>Članak 37.</center>
<p>
Laboratorij mora imati u radnom odnosu stručno osposobljene
zaposlenike, i to:
<p>
a) najmanje jednog zaposlenika sa zavr&#154;enim dodiplomskim
studijem kemijskog, prehrambenog, poljoprivrednog, veterinarskog
ili farmaceutskog područja i dvije godine radnog iskustva;
<p>
b) zaposlenike četvrtog (IV) stupnja obrazovanja: kemijski,
prehrambeni, poljoprivredni, veterinarski ili farmaceutski tehničari,
osposobljeni za rad na odgovarajućim poslovima - broj zaposlenika
primjeren opsegu rada laboratorija;
<p>
c) PKV/NKV - pomoćno osoblje prema opsegu rada laboratorija.
<p>
Nalaze ispitivanja potpisuje ovla&#154;tena osoba - voditelj laboratorija.
<p>
<center>Članak 38.</center>
<p>
Laboratorij podnosi Ministarstvu poljoprivrede i &#154;umarstva
(u daljnjem tekstu: Ministarstvo) zahtjev za dobivanje ovla&#154;tenja,
uz koji prila&#158;e:
<p>
1. izvadak iz registra Trgovačkog suda,
<p>
2. dokaz o prostornim uvjetima smje&#154;taja,
<p>
3. popis uređaja, instrumenata i tehničke opreme,
<p>
4. dokaz o stručnoj osposobljenosti i broju zaposlenika.
<p>
<center>Članak 39.</center>
<p>
Ispunjavanje propisanih uvjeta za dobivanje ovla&#154;tenja utvrđuje
stručno povjerenstvo koje imenuje ministar poljoprivrede
i &#154;umarstva (u daljnjem tekstu: ministar).
<p>
Stručno povjerenstvo sastoji se od tri člana.
<p>
Stručno povjerenstvo obavlja očevid, nakon čega
sastavlja zapisnik s prijedlogom za dobivanje ovla&#154;tenja.
<p>
Na temelju zapisnika i prijedloga stručnog povjerenstva,
uz suglasnost Dr&#158;avnog zavoda za normizaciju i mjeriteljstvo,
Ministarstvo izdaje rje&#154;enje o ovlasti.
<p>
Popis ovla&#154;tenih laboratorija objavljuje se u &#187;Narodnim
novinama&#171;.
<p>
<center>Članak 40.</center>
<p>
Ako laboratorij ne ispunjava uvjete propisane ovim Pravilnikom,
Ministarstvo će rje&#154;enjem oduzeti ovla&#154;tenje i
brisati ga s popisa ovla&#154;tenih laboratorija.
<p>
<center>VII. ZAVR&#138;NE ODREDBE</center>
<p>
<center>Članak 41.</center>
<p>
Laboratorij mora do 31. prosinca 2002. godine udovoljiti uvjetima
koje propisuje hrvatska norma HRN EN 45 001: 1996.
<p>
<center>Članak 42.</center>
<p>
Postupci uzimanja uzoraka meda i drugih pčelinjih proizvoda
i proizvoda na osnovi meda i drugih pčelinjih proizvoda
te metode fizikalnih i kemijskih analiza za ispitivanje udovoljavanja
temeljnim zahtjevima kakvoće obavljaju se na temelju detaljnih
opisa danih u prilogu ovog Pravilnika i čine njegov sastavni
dio.
<p>
<center>Članak 43.</center>
<p>
Danom početka primjene ovog Pravilnika prestaje va&#158;iti
Pravilnik o kvaliteti meda i drugih pčelinjih proizvoda
te o metodama kontrole kvalitete meda i drugih pčelinjih
proizvoda (&#187;Narodne novine&#171;, broj 53/91.).
<p>
<center>Članak 44.</center>
<p>
Ovaj Pravilnik stupa na snagu osmog dana od dana objave u &#187;Narodnim
novinama&#171;, a primjenjuje se od 1. svibnja 2000. godine.
<p>
Klasa: 011-02/00-01/7<br>
Urbroj: 525-01-00-01<br>
Zagreb, 2. veljače 2000.
<p>
<center>Ministar<br>
<b>mr. sc. Bo&#158;idar Pankretić,</b> v. r.</center>

<p>
<center><b>POSTUPCI UZIMANJA UZORAKA MEDA <br>
I DRUGIH PČELINJIH PROIZVODA</b></center>
<p>
Postupcima uzimanja uzoraka meda i drugih pčelinjih proizvoda
utvrđuju se uvjeti i načini uzimanja uzoraka na kojima
se obavlja ispitivanje udovoljavanja temeljnim zahtjevima kakvoće.
<p>
Uzorci meda i drugih pčelinjih proizvoda uzimaju se:
<p>
1. u proizvodnji - iz proizvodnih partija,
<p>
2. u trgovini - iz ambala&#158;nih jedinica po&#154;iljke,
<p>
3. u inspekcijskom nadzoru.
<p>
Proizvodna je partija odgovarajuća količina proizvoda
iste vrste proizvedena istog dana, odgovarajućeg obujma,
s obvezatnom oznakom za identifikaciju.
<p>
Ambala&#158;ne jedinice meda i drugih pčelinjih proizvoda
jesu utvrđene količine proizvoda iste vrste pakirane
u pojedinačna pakiranja odgovarajuće mase, s obvezatnom
oznakom za identifikaciju. Ambala&#158;ne jedinice mogu biti pakirane
u zajednička transportna pakiranja, na koja se primjenjuju
odredbe ovog Pravilnika.
<p>
Po&#154;iljka jest istovremeno isporučena količina
proizvoda iste vrste u pojedinačnim i zajedničkim
pakiranjima &#154;to se stavljaju u promet.
<p>
Uzorak za ispitivanje mora po sastavu biti prosječan u
odnosu prema cjelokupnoj količini proizvoda od kojeg se
uzima.
<p>
Uzorak za ispitivanje iz kante ili bačve uzima se sondom
po cijeloj dubini posude.
<p>
Uzorak za ispitivanje proizvoda čine najmanje tri istovjetne
po sastavu i obujmu jednake ambala&#158;ne jedinice od ukupno
uzetog uzorka. Uzorke proizvoda mora uzimati stručna odnosno
ovla&#154;tena osoba, koja o tome obvezatno sastavlja zapisnik,
u koji unosi podatke va&#158;ne za rezultat ispitivanja: mjesto,
datum i vrijeme uzimanja uzorka, svrhu uzimanja uzorka, vrstu
i količinu proizvoda od kojega se uzorak uzima, broj pojedinačno
uzetih uzoraka i količinu ukupno uzetog uzorka, oznake
za identifikaciju uzorka i količinu uzorka &#154;to se
stavlja na ispitivanje.
<p>
Zapisnik potpisuje stručna odnosno ovla&#154;tena osoba
koja uzima uzorak i predstavnik tvrtke.
<p>
Uzorak se pakira u staklene ili plastične posude koje se
zatvaraju čistim i suhim zatvaračima i označavaju
tako da se oznaka ne mo&#158;e lako skinuti ni izbrisati, a zatim
se u njih utiskuje slu&#158;beni pečat ili se na njih stavlja
plomba.
<p>
Uzorci se čuvaju uz uvjete propisane ovim Pravilnikom za
odgovarajuće proizvode.
<p>
Ako su proizvodi pakirani u originalne ambala&#158;ne jedinice
manjeg obujma ili mase, uzorak mo&#158;e biti svaka slučajno
uzeta pojedina jedinica.
<p>
Broj jedinica uzoraka za ispitivanje ovisi o vrsti proizvoda i
veličini proizvodne partije odnosno po&#154;iljke.
<p>
Broj jedinica uzoraka utvrđuje se na temelju ove tablice:

<table border=1>
<tr>
<td>
<center><p>Vrsta pakiranja</p></center>
</td>

<td> Količina od koje <br>
se uzorak uzima</td>

<td>
<center><p>  Broj ambalažnih jedinica<br>
koje se uzimaju kao uzorak </p></center>
</td>

<td>
<center><p>  Masa ukupno uzetog uzorka (u g)</p></center>
</td>
</tr>

<tr>
<td>
<center><p>Kante ili bačve</p></center>
</td>

<td>  1 jedinica<br>
d 2 do 5 jedinica<br>
&gt; 5 do 60 jedinica<br>
&gt; 60 do 80 jedinica <br>
&gt; 80 do 100 jedinica</td>

<td>
<center><p>1<br>
2<br>
3<br>
4<br>
5</p></center>
</td>

<td>
<center><p> 500 <br>
 500 <br>
1.000 <br>
1.000 <br>
1.000 </p></center>
</td>
</tr>

<tr>
<td colspan=4>
<center><p>Za svaku daljnju stotinu ili započetu stotinu kanti odnosno
bačvi broj kanti odnosno bačvi za uzimanje uzoraka povećava se za 1.</p></center>
</td>
</tr>

<tr>
<td>
<center><p>Staklenke<br>
(do 1 kg)</p></center>
</td>

<td>od 1 do 100 jedinica<br>
&gt; 100 do 500 jedinica<br>
&gt; 500 do 1.000 jedinica <br>
&gt; 1.000 do 10.000 jedinica </td>

<td>
<center><p>1<br>
2<br>
3<br>
4</p></center>
</td>

<td>
<center><p>500<br>
500<br>
500<br>
500</p></center>
</td>
</tr>

<tr>
<td colspan=4>
<center><p>Ako je pošiljka veća od 10.000 staklenki, na svakih daljnjih
2.500 staklenki uzima se još po jedan uzorak.</p></center>
</td>
</tr>

<tr>
<td>
<center><p>Ostale vrste pakiranja<br>
(do 250 g) </p></center>
</td>

<td>
<center><p>do 5.000 jedinica <br>
za svakih daljnjih 2.000 jedinica </p></center>
</td>

<td>
<center><p>1<br>
1</p></center>
</td>

<td>
<center><p>–<br>
–</p></center>
</td>
</tr>
</table>

<p>
Ako svaki uzeti uzorak meda sadr&#158;i vi&#154;e od tri ambala&#158;ne
jedinice, od njih se formira jedan uzorak, pri čemu za
svaku ambala&#158;nu jedinicu uzorka mora postojati jednaka mogućnost
da bude izdvojena kao ambala&#158;na jedinica uzorka za ispitivanje.
<p>
Za uzimanje uzorka meda upotrebljava se metalna sonda s odjeljcima
(slika br. 1.). Metalna se sonda sastoji od dvije koncentrične
cijevi koje ulaze jedna u drugu. Donji dio sonde je za&#154;iljen.
Unutarnja cijev sonde ima ručicu kojom se, ako je okrenemo
za 90°, sonda mo&#158;e zatvoriti.
<p>
Uzorak meda uzima se tako &#154;to se zatvorena čista i
osu&#154;ena sonda uroni u med do kraja zajedničkog otvora.
U medu se ona otvori pa zatvori. Tada se, s uzetim uzorkom, izvlači
iz proizvoda.

<p>
<center><b>METODE FIZIKALNIH I KEMIJSKIH ANALIZA ZA ISPITIVANJE
UDOVOLJAVANJA TEMELJNIM ZAHTJEVIMA KAKVOĆE MEDA I DRUGIH
PČELINJIH PROIZVODA</b></center>
<p>
Fizikalne i kemijske analize kojima se ispituje udovoljavanje
temeljnim zahtjevima kakvoće meda i drugih pčelinjih
proizvoda obuhvaćaju metode:
<p>
1. priprema uzorka za analizu,
<p>
2. određivanje reduciranih &#154;ećera,
<p>
3. određivanje saharoze,
<p>
4. određivanje vode u medu,
<p>
5. određivanje tvari netopljivih u vodi (gravimetrijska metoda),
<p>
6. određivanje pepela,
<p>
7. određivanje kiselosti,
<p>
8. određivanje aktivnosti dijastaze,
<p>
9. određivanje hidroksimetilfurfurola (fotometrijska metoda
po Winkleru),
<p>
10. analize cvjetnog praha za med,
<p>
11. određivanje vode u matičnoj mliječi i cvjetnom
prahu,
<p>
12. određivanje bjelančevina u matičnoj mliječi,
<p>
13. određivanje ekstrakta propolisa u alkoholnoj otopini.
<p>
<center>1. PRIPREMA UZORAKA ZA ANALIZU</center>
<p>
Ovisno o konzistenciji meda, uzorci za analizu pripremaju se na
razne načine.
<p>
Ako je med u tekućem stanju, prije početka analize
polako se izmije&#154;a &#154;tapićem ili se protrese.
<p>
Ako je med granuliran, zatvorena posuda s uzorkom stavi se u vodenu
kupelj i zagrijava 30 minuta na temperaturi od 60°C, a prema potrebi
i na temperaturi od 65°C. U toku zagrijavanja mo&#158;e se promije&#154;ati
&#154;tapićem ili kru&#158;no protresti, a zatim brzo prohladiti.
<p>
Ako se određuje dijastaza ili hidroksimetilfurfurol, med se
ne zagrijava.
<p>
Ako med sadr&#158;ava strane tvari, kao &#154;to su vosak, dijelovi
pčela ili dijelovi saća, uzorak se zagrijava u vodenoj
kupelji na temperaturi od 40°C, a zatim procijedi kroz tkaninu,
koja se stavlja na ljepilo zagrijavano toplom vodom.
<p>
Ako je med u saću, saće se otvori, procijedi kroz
&#158;ičano sito s kvadratnim otvorima promjera 0,5 mm
x 0,5 mm. Ako dio saća i voska prođe kroz sito, uzorak
se zagrijava u vodenoj kupelji na temperaturi od 60°C , a prema
potrebi zagrijava se 30 minuta i na temperaturi od 65°C. Za vrijeme
zagrijavanja promije&#154;a se &#154;tapićem ili protrese
kru&#158;nim pokretima, a zatim brzo prohladi.
<p>
Ako je med u saću granuliran, zagrijava se da bi se vosak
otopio, promije&#154;a se i ohladi. Nakon hlađenja vosak se
odstrani.
<p>
<center>2. ODREĐIVANJE REDUCIRANIH ŠEĆERA</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Metoda se temelji na redukciji Fehlingove otopine titracijom s
pomoću otopine reduciranih &#154;ećera iz meda, a
uz upotrebu metilenskog modrog bojila kao indikatora.
<p>
<i>Reagensi</i>
<p>
1) Fehlingova otopina
<p>
Otopina A: Otopi se 69,28 g bakrenog sulfata (CuSO<sub>4</sub> x 5H<sub>2</sub>O) i
tome se doda destilirana voda do jedne litre. Otopina se pripremi
24 sata prije titracije.
<p>
Otopina B: Otopi se 346 g kalijnatrijeva tartarata (C<sub>4</sub>H<sub>4</sub>KNaO<sub>6</sub>
x 4H<sub>2</sub>O) i 100 g natrijeva hidroksida (NaOH) u litri destilirane
vode. Otopina se zatim filtrira.
<p>
2) Standardna otopina invertnog &#154;ećera (10 g/l vode):
Izva&#158;e se 9,5 g čiste saharoze, doda 5 ml otopine
solne kiseline (oko 36,5 %) i destilirane vode do 100 ml. Otopina
se mo&#158;e pohraniti nekoliko dana, ovisno o temperaturi: na
temperaturi od 12°C do 15°C do sedam dana, a na temperaturi od
20°C do 25°C tri dana. Pripremljenoj otopini doda se vode do jedne
litre. Neposredno prije upotrebe odgovarajuća se količina
otopine neutralizira 1 mol otopinom NaOH/1, a zatim se razrijedi
do zahtijevane potrebne koncentracije (2 g/l) - standardna otopina.
<p>
Napomena: 1%-tna zakiseljena otopina invertnog &#154;ećera
stabilna je nekoliko mjeseci.
<p>
3) Otopina metilenskog modrog bojila: otopi se 2 g metilenskog
modrog bojila u destiliranoj vodi, a zatim se razrijedi vodom
do jedne litre.
<p>
4) Stipsa (alaun)
<p>
Otopina stipse: Pripremi se hladno zasićena otopina [K<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>Al<sub>2</sub>
(SO<sub>4</sub>)<sub>3</sub> x 24H<sub>2</sub>O] u vodi. Zatim
se uz stalno mije&#154;anje &#154;tapićem dodaje amonijev
hidroksid dok otopina ne postane alkalna, &#154;to se utvrđuje
lakmusom. Pusti se da se otopina slegne, provodi se ispiranje
vodom, uz dekantiranje sve dok je voda slabo pozitivna pri testu
na sulfate, &#154;to se utvrđuje otopinom barijeva klorida.
Vi&#154;ak se vode odlije, a preostala pasta pohrani u boci s
bru&#154;enim zatvaračem.
<p>
<i>Priprema uzorka</i>
<p>
Postupak I. - primjenljiv na med s talogom:
<p>
a) Izva&#158;e se 25 g (W<sub>1</sub>) homogeniziranoga meda i prenese u
odmjerenu tikvicu obujma 100 ml, doda se 5 ml stipse i tikvica
se dopuni vodom do oznake, pri temperaturi od 20°C, pa se otopina
filtrira.
<p>
b) U odmjerenu tikvicu obujma 500 ml otpipetira se 10 ml uzorka
pod a) i to se razrijedi destiliranom vodom do oznake na tikvici
(razrijeđena otopina meda).
<p>
Postupak II. :
<p>
a) Izva&#158;e se 2 g homogeniziranoga meda (W<sub>2</sub>), prenese u odmjerenu
tikvicu obujma 200 ml i otopi u vodi, a tikvica se dopuni vodom
do oznake (otopina meda).
<p>
b) Odmjeri se 50 ml otopine meda pod a) i doda joj se destilirane
vode do 100 ml (razrijeđena otopina meda).
<p>
<i>Standardizacija Fehlingove otopine</i>
<p>
Fehlingova se otopina standardizira tako &#154;to se otpipetira
5 ml Fehlingove otopine A i pomije&#154;a sa 5 ml Fehlingove otopine
B. Ta otopina mora potpuno reagirati s 0,050 g invertnog &#154;ećera
dodanoga u količini od 25 ml kao standardna otopina invertnog
&#154;ećera (2 g/l).
<p>
<i>Prethodna titracija</i>
<p>
Ukupni obujam tvari koja reagira na kraju redukcijske titracije
mora biti 35 ml, a to se posti&#158;e dodavanjem određene
količine vode prije početka titracije. S obzirom
na to da se Pravilnikom za med propisuje vi&#154;e od 60% reduciranih
&#154;ećera (računatih kao invertni &#154;ećer),
potrebno je najprije obaviti titraciju, da bi se utvrdio točan
obujam vode &#154;to se dodaje da bi se u postupku analize osigurala
redukcija pri stalnom obujmu. Obujam potrebne količine
vode dobiva se odbijanjem potro&#154;enog obujma razrijeđene
otopine meda u prethodnoj titraciji ("Xml") od 25 ml
(25 ml - "X ml").
<p>
Pipetom se odmjeri 5 ml Fehlingove otopine A i prenese u sto&#158;astu
Erlenmeyerovu tikvicu obujma 250 ml, doda se 5 ml Fehlingove otopine
B, 7 ml destilirane vode, malo plovućca ili drugoga sličnog
sredstva i 15 ml razrijeđene otopine meda iz birete. Medna
se mje&#154;avina zagrijava do vrenja, pa dvije minute polako
vrije, za koje se vrijeme doda 1 ml 0,2 %-tne otopine metilenskog
modrog bojila. Titracija se zavr&#154;i ukupno za tri minute,
ponovnim dodavanjem razrijeđene otopine meda sve dok ne i&#154;čezne
boja indikatora. Potro&#154;eni obujam razrijeđene otopine
meda koji je potpuno reduciran obilje&#158;ava se s "X ml".
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Pipetom se odmjeri 5 ml Fehlingove otopine A i prenese u sto&#158;astu
Erlenmeyerovu tikvicu obujma 250 ml te se doda 5 ml Fehlingove
otopine B. Zatim se doda (25 ml - "X ml") destilirane
vode, malo kamena plovućca ili drugoga odgovarajućeg
sredstva i iz birete razrijeđena otopina meda, tako da za
kompletnu titraciju ostane oko 1,5 ml ("X ml" -1,5 ml).
Zatim se hladna mje&#154;avina zagrijava do vrenja i dvije minute
odr&#158;ava umjereno vrenje. Za vrijeme vrenja doda se 1,0 ml
0,2%-tne otopine metilenskoga modrog bojila. Titracija se, dodavanjem
razrijeđene otopine meda do obezbojenja indikatora, mora zavr&#154;iti
ukupno za tri minute. Potro&#154;ena količina razrijeđene
otopine meda obilje&#158;ava se s "Y ml".
<p>
Izračunavanje
<p>
Invertni se &#154;ećer izra&#158;ava u g/100 g (%) i izračunava
u ovisnosti o načinu pripreme uzoraka (postupak I. ili
II.).
<p>
Ako se primijeni postupak I., upotrijebit će se formula:
<p>
postotak invertnog &#154;ećera, C = 25/W<sub>1</sub> x 1000/Y<sub>1</sub>
<p>
gdje je:
<p>
C - invertni &#154;ećer, u g
<p>
W<sub>1</sub> - masa uzetog uzorka, u g
<p>
Y<sub>1</sub> - obujam razrijeđene otopine meda potro&#154;enoga za određivanje,
u ml.
<p>
Ako se primijeni postupak II., upotrijebit će se formula:
<p>
postotak invertnog &#154;ećera, C = 2/W<sub>2</sub> x 1000/Y<sub>2</sub>
<p>
gdje je:
<p>
C - invertni &#154;ećer, u g
<p>
W<sub>2</sub> - masa uzetog uzorka, u g
<p>
Y<sub>2</sub> - obujam razrijeđene otopine meda, potro&#154;enoga za
određivanje, u ml.
<p>
Napomena: Radi preciznosti i ponovljivosti rezultata nu&#158;no
je da se za svaki pokus odredi koliki obujam vode valja dodati
da bi ukupan obujam iznosio 35 ml. U ovoj su tablici dane pribli&#158;ne
vrijednosti, uz pretpostavku da je početna masa uzorka
iznosila 25 g odnosno 2 g.
<p>
<pre>
_______________________________________________________________
 	Udio invertnog 			Potrebna količina
 	&#154;ećera, u % 			vode, u ml
_______________________________________________________________

		60 &nbsp;				 8,3
		65 &nbsp;				 9,6
		70 				10,7
 		75 				11,6

_______________________________________________________________
</pre>
<p>
<i>Ponovljivost</i>
<p>
Razlika između titracija u dva određivanja obavljena istovremeno
ili ubrzo jedno za drugim ne smije iznositi vi&#154;e od 0,1 ml.
<p>
<center>3. ODREĐIVANJE SAHAROZE</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Metoda se temelji na hidrolizi saharoze, redukciji Fehlingove
otopine titracijom reduciranim &#154;ećerom iz hidrolizata
meda uz metilensko modro bojilo.
<p>
<i>Reagensi</i>
<p>
1) Fehlingova otopina (A i B), utvrđena metodom određivanja
reduciranih &#154;ećera,
<p>
2) standardna otopina invertnog &#154;ećera, utvrđena
metodom određivanja reduciranih &#154;ećera,
<p>
3) solna kiselina<i> C</i> (HCl) = 6,34 mol/l,
<p>
4) otopina natrijeva hidroksida <i>C</i> (NaOH) = 5 mol/l,
<p>
5) 2 %-tna otopina metilenskoga modrog bojila (2 g/l).
<p>
<i>Priprema uzorka</i>
<p>
Postupak I.
<p>
Izva&#158;e se 25 g (W<sub>1</sub>) homogeniziranog meda i prenese u odmjernu
tikvicu obujma 100 ml, doda se 5 ml stipse i tikvica dopuni vodom
do oznake, pri temperaturi od 20°C, pa se otopina filtrira.
<p>
Odmjeri se 10 ml te otopine i doda destilirane vode do obujma
250 ml - otopina meda (za određivanje saharoze).
<p>
Postupak II.
<p>
Izva&#158;e se 2 g (W<sub>2</sub>) homogeniziranog meda, prenese u odmjernu
tikvicu i otopi u destiliranoj vodi pa se tikvica dopuni vodom
do obujma 200 ml (otopina meda).
<p>
<i>Hidroliza uzorka</i>
<p>
Otopina meda (50 ml) prenese se u odmjernu tikvicu obujma 100
ml i doda se 25 ml destilirane vode. Toplomjer se zaroni u pripremljeni
uzorak, koji se zagrijava do temperature od 65°C u kipućoj
vodenoj kupelji. Tikvica se zatim iznese iz kupelji i doda se
10 ml solne kiseline[C(HCl) = 6 mol/l].
Pusti se da se otopina hladi 15 minuta, zatim se temperatura ugodi
na 20°C i otopina neutralizira 5 mol otopinom NaOH/1, uz upotrebu
lakmusova papira kao indikatora. Ponovno se ohladi (20°C ) te
se tikvica dopuni vodom do obujma 100 ml (razrijeđena otopina
meda).
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Određivanje je istovjetno s određivanjem reduciranih &#154;ećera,
a odnosi se na prethodnu titraciju i postupak određivanja
količine invertnog &#154;ećera prije inverzije.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Prvo se obračunava postotak invertnog &#154;ećera
nakon inverzije, pri čemu se primjenjuje formula za određivanje
postotka invertnog &#154;ećera prije inverzije.
<p>
Saharoza se iskazuje u g/100 g meda i izračunava prema
formuli:
<p>
masa saharoze, g/100 g = (količina invertnog &#154;ećera
nakon inverzije - količina invertnog &#154;ećera
prije inverzije) x 0,95.
<p>
<center>4. ODREĐIVANJE VODE U MEDU</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Metoda se temelji na refraktometrijskom određivanju.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Uz uobičajenu laboratorijsku opremu potreban je i refraktometar.
<p>
<i>Priprema uzorka</i>
<p>
Uzorak se priprema na način utvrđen za metodu pripreme
uzoraka za analizu, a zatim se indeks refrakcije uzorka odredi
refraktometrom, pri stalnoj temperaturi od 20°C. Na temelju indeksa
refrakcije izračuna se količina vode (% m/m), s
pomoću prilo&#158;ene tablice. Ako se indeks ne odredi na
temperaturi od 20°C, uzme se u obzir korekcija temperature i rezultati
se svedu na temperaturu od 20°C .
<p>
Tablica za proračun udjela vode u medu:
<pre>
_______________________________________________________________________________
	Indeks 		Udio	Indeks		Udio	Indeks		Udio
	refrakcije 	vode	refrakcije	vode	refrakcije	vode
	(20°C )		(%)	(20°C )		(%)	(20°C )		(%)
_______________________________________________________________________________
	1,5044		13,0	1,4935		17,2	1,4830		21,4
	1,5038		13,2	1,4930		17,4	1,4825		21,6
	1,5033		13,4	1,4925		17,6	1,4820		21,8
	1,5028		13,6	1,4920		17,8	1,4815		22,0
	1,5023		13,8	1,4915		18,0	1,4810		22,2
	1,5018		14,0	1,4910		18,2	1,4805		22,4
	1,5012		14,2	1,4905		18,4	1,4800		22,6
	1,5007		14,4	1,4900		18,6	1,4795		22,8
	1,5002		14,6	1,4895		18,8	1,4790		23,0
	1,4997		14,8	1,4890		19,0	1,4785		23,2
	1,4992		15,0	1,4885		19,2	1,4780		23,4
	1,4987		15,2	1,4880		19,4	1,4775		23,6
	1,4982		15,4	1,4875		19,6	1,4770		23,8
	1,4976		15,6	1,4870		19,8	1,4765		24,0
	1,4971		15,8	1,4865		20,0	1,4760		24,2
	1,4966		16,0	1,4860		20,2	1,4755		24,4
	1,4961		16,2	1,4855		20,4	1,4750		24,6
	1,4956		16,4	1,4850		20,6	1,4745		24,8
	1,4951		16,6	1,4845		20,8	1,4740		25,0
	1,4946		16,8	1,4840		21,0
	1,4940		17,0	1,4835		21,2
_______________________________________________________________________________

Napomena: Korekcija temperature – indeks refrakcije:
– temperatura viša od 20° – dodati 0,00023 za svaki °C,
– temperatura do 20° – oduzeti 0,00023 za svaki °C.
</pre>

<p>
<center>5. ODREĐIVANJE TVARI NETOPLJIVIH U VODI <br>
(GRAVIMETRIJSKA METODA)</center>
<p>
<i>Priprema uzorka</i>
<p>
Izva&#158;e se 20 g uzorka s točno&#154;ću <u>+</u>
10 mg, otopi se u određenoj količini destilirane vode
na temperaturi od 80°C i dobro izmije&#154;a.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Pripremljeni se uzorak najprije filtrira kroz osu&#154;eni i izvagani
sinterirani lijevak, veličine pora od 15<font face="Symbol">m</font><font face="Times-NewRoman">m
do 40</font><font face="Symbol">m</font><font face="Times-NewRoman">m.
Talog se ispere vrućom vodom (80°C), pri čemu se
oslobodi &#154;ećer, &#154;to se utvrđuje testom po
Mohru.</font>
<p>
Lijevak se su&#154;i jedan sat na temperaturi od 135°C, ohladi
i va&#158;e s točno&#154;ću 0,1 mg.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Količina tvari netopljivih u vodi iskazuje se u postocima
(m/m) i izračunava prema formuli
<p>
postotak tvari netopljivih u vodi = 100 x količina ostatka
/ izvagani uzorak
<p>
<center>6. ODREĐIVANJE PEPELA</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Metoda se temelji na postupku izgaranja uzorka na 600°C do stalne
mase.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Osim uobičajene laboratorijske opreme upotrebljava se:
<p>
1) platinska posuda ili posuda od silicija,
<p>
2) vodena kupelj,
<p>
3) pje&#154;čana kupelj,
<p>
4) peć za &#158;arenje.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
U i&#158;arenu odmjernu platinsku posudu izva&#158;e se od 5 g
do 10 g uzorka i to se zagrijava u vodenoj kupelji dok veći
dio vode ne ispari. Zatim se uzorak stavi na pje&#154;čanu
kupelj do pougljenja. Ostatak se potom &#158;ari u peći
za &#158;arenje na temperaturi od 600°C do stalne mase. Prije
vaganja uzorak se hladi.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Masa pepela iskazuje se u g/100 g proizvoda i izračunava
prema formuli
<p>
masa pepela g/100 g = ostatak x 100 / izvagani uzorak
<p>
<center>7. ODREĐIVANJE AKTIVNOSTI DIJASTAZE
</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Pripremljeni se uzorak titrira, uz fenoftalein, otopinom 0,1 mol/l
natrijeva hidroksida do pojave svijetloru&#158;ičaste boje.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Pri određivanju stupnja kiselosti upotrebljava se uobičajena
laboratorijska oprema.
<p>
<i>Reagensi</i>
<p>
1) otopina natrijeva hidroksida <i>c </i>(NaOH) = 0,1 mol/l (bez
karbonata),
<p>
2) 1%-tna otopina fenoftaleina (<i>m</i>/V) u etanolu, neutralizirana;
<p>
3) destilirana voda bez CO<sub>2</sub> dobivena kuhanjem, a zatim ohlađena.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Izva&#158;e se 10 g uzorka i otopi u 75 ml destilirane vode. Pripremljeni
se uzorak titrira sa 0,1 mol otopinom (NaOH)/l, uz 4-5 kapi fenoftaleina
kao indikatora. Na kraju titracije boja mora biti postojana 10
sekundi.
<p>
Za uzorke tamne boje izva&#158;e se manja količina.
<p>
Alternativno se mo&#158;e upotrijebiti pH-metar i uzorak titrirati
do pH - 8,3.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Kiselost se iskazuje u milimolima kiseline/kg i izračunava
se prema formuli
<p>
kiselost = 10 x V
<p>
gdje je:
<p>
V - broj potro&#154;enih ml 0,1 mol (NaOH)/l za neutralizaciju
10 g meda.
<p>
<center>8. ODREĐIVANJE AKTIVNOSTI DIJASTAZE</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Metoda se temelji na hidrolizi 1%-tne otopine &#154;kroba enzimom
iz 1 g meda u toku jednog sata na temperaturi od 40°C.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Osim uobičajene laboratorijske opreme upotrebljavaju se:
<p>
1) odmjerene tikvice obujma 1 litra, 0,5 litre i 0,1 litre,
<p>
2) sto&#158;asta tikvica obujma 0,250 l,
<p>
3) plamenik,
<p>
4) vodena kupelj temperature 40°C <u>+</u> 0,2°C ,
<p>
5) spektrofotometar s očitavanjem na 660 nm.
<p>
<i>Reagensi</i>
<p>
1) Matična jodna otopina: Otopi se 8,8 g joda p. a., pomije&#154;a
s 22 g kalijeva jodida i otopi u 30-40 ml vode, a zatim se otopina
razrijedi do jedne litre.
<p>
2) Jodna otopina [C (J<sub>2</sub>/2) 0,0007 mol/l]: U odmjerenoj tikvici
obujma 500 ml otopi se 20 g kalijeva jodida p.a. u 30-40 ml vode.
Doda se 5 ml matične jodne otopine i tikvica dopuni vodom
do oznake.
<p>
Otopina se mora pripremiti svaki drugi dan.
<p>
3) Acetatni pufer - pH 5,3: Otopi se 87 g natrijeva acetata (CH<sub>3</sub>COONa
x 3 H<sub>2</sub>O) u 400 ml vode, doda oko 10,5 ml ledene octene kiseline
i vode do obujma 500 ml. Ako je potrebno, natrijevim se acetatom
ili octenom kiselinom dotjera pH-vrijednost do 5,3, uz upotrebu,
prema potrebi, pH-metra.
<p>
4) Otopina natrijeva klorida, <i>c</i> (NaCl) = 0,5 mol/l: Otopi
se 14,5 g natrijeva klorida u prokuhanoj destiliranoj vodi i doda
vode do obujma 500 ml. Rok trajanja te otopine ograničen
je.
<p>
5) Priprema topljivog &#154;kroba: U sto&#158;astu tikvicu s povratnim
hladilom koja je uronjena u vodenu kupelj izva&#158;e se 20 g
&#154;kroba, doda se mje&#154;avina 100 ml 95%-tnog etanola i
7 ml 1 mol/l solne kiseline. Ostavi se da to vrije jedan sat.
Otopina se ohladi, filtrira kroz filter (veličina pora
od 90<font face="Symbol">m</font>m do 150<font face="Symbol">m</font>m),
pa se provodi ispiranje vodom sve dok voda za ispiranje ne prestane
pokazivati reakciju na kloride.
<p>
&#138;krob se potpuno osu&#154;i na zraku temperature od 35°C.
&#138;krobna se otopina mora pohraniti u dobro zatvorenu tikvicu.
<p>
6) Određivanje vode u topljivom &#154;krobu:
<p>
Izva&#158;e se oko 2 g topljivog &#154;kroba i u tankom sloju
rasporedi po dnu posudice promjera 5 cm. Su&#154;i se 1,5 sat
na temperaturi od 130°C. Zatim se ohladi u eksikatoru i izva&#158;e.
<p>
Gubitak mase na 100 g jest količina vode. Količina
vode pripremljenog &#154;kroba mora iznositi od 7% (mm) do 8%
(mm), ovisno o vla&#158;nosti zraka na kojemu je uzorak su&#154;en.
<p>
7) Otopina &#154;kroba
<p>
Upotrebljava se &#154;krob s plavom vrijednosti između 0,5
i 0,55, određenoj prema postupku koji se opisuje u nastavku
teksta i očitanoj u kiveti od 1 cm.
<p>
Izva&#158;e se količina &#154;kroba koja odgovara masi
od 2 g bezvodnog &#154;kroba i izmije&#154;a s 90 ml vode u sto&#158;astoj
tikvici obujma 250 ml. Odmah se prenese na plamenik, preko kojega
je postavljena azbestna mre&#158;ica, i pusti da tri minute polako
vrije. Zatim se otopina ukloni s plamenika, pokrije i ostavi da
se postupno ohladi do sobne temperature. Potom se prenese u odmjerenu
bocu obujma 100 ml i stavi u vodenu kupelj zagrijanu na temperaturu
od 40°C.
<p>
Kad otopina dostigne tu temperaturu, boca se dopuni vodom do oznake.
<p>
<i>Utvrđivanje plave vrijednosti &#154;kroba</i>
<p>
Količina &#154;kroba &#154;to odgovara masi od 1 g bezvodnog
&#154;kroba otopi se prema opisanom postupku i ohladi, pa joj
se doda 2,5 ml acetatnog pufera i vode u odmjerenoj tikvici do
obujma 100 ml. U odmjerenu tikvicu obujma 100 ml ulije se 75 ml
vode, 1 ml 1 mol/l (HCl) i 1,5 ml otopine 0,02 mol/l (J/2). Otopina
se pusti jedan sat na tamnu mjestu pa se očita apsorbacija
na spektrofotometru pri 660 nm, u kiveti 1 cm, uz pomoć
slijepog pokusa koji se izvodi sa svim sastojcima osim otopine
&#154;kroba.
<p>
Očitana apsorbancija = plava vrijednost.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Priprema uzorka za određivanje
<p>
Uzorak za analizu ne smije se zagrijavati. Izva&#158;e se 10 g
uzorka i prenese u ča&#154;u obujma 50 ml, doda mu se 5
ml acetatnog pufera i 20 ml vode, da bi se otopio pa se promije&#154;a
&#154;tapićem. Uzorak se već na hladno potpuno otopi.
Zatim se ulije 3 ml otopine natrijeva klorida u odmjernu tikvicu
obujma 50 ml i doda otopina meda pa se tikvica dopuni vodom do
oznake.
<p>
Uzorak mora biti puferiziran prije mije&#154;anja s natrijevim
kloridom.
<p>
<i>Priprema standardne otopine</i>
<p>
&#138;krobna otopina zagrijava se na temperaturi od 40°C, a zatim
se 5 ml te otopine otpipetira u 10 ml vode temperature 40°C i
dobro promije&#154;a. Od pripremljene otopine otpipetira se 1
ml i doda u 10 ml 0,0007 mol ( J<sub>2</sub> / 2 )/l jodne otopine pa se
to razrijedi s 35 ml vode i dobro promije&#154;a. Nastala se boja
očitava na 660 nm uz pomoć slijepog pokusa. Vrijednost
apsorbancije mora biti 0,760 &#177; 0,020. Ako je to potrebno,
mo&#158;e se dodati određeni obujam vode, da bi se dobila
ispravna apsorbancija.
<p>
<i>Određivanje apsorbancije</i>
<p>
Pipetom se odmjeri 10 ml otopine meda i prenese u graduirani cilindar
obujma 50 ml, pa se stavi u vodenu kupelj temperature 40°C <u>+</u>
0,20C, zajedno s posudom u kojoj je otopina &#154;kroba. Nakon
15 minuta pipetom se odmjeri 5 ml otopine &#154;kroba i doda otopini
meda. To se promije&#154;a i uključi sat. U razmacima od
pet minuta izdvoji se alikvota od 1 ml i doda u 10 ml 0,0007 mol
( J<sub>2</sub> / 2) / l jodne otopine. Promije&#154;a se i razrijedi do
obujma 35 ml (priprema uzorka za određivanje). Apsorbancija
se odmah određuje na 660 nm, nastavi se uzimati alikvota sve
dok se apsorbancija ne smanji do vrijednosti od 0,235.
<p>
<i>Izračunavanje i izra&#158;avanje rezultata</i>
<p>
U grafikon se unosi vrijednost apsorbancije kao funkcije vremena
(min). Kroz najmanje tri posljednje točke povuče
se ravna crta da bi se odredilo vrijeme kad reakcijska smjesa
dosti&#158;e vrijednost apsorbancije od 0,235. Podijeli se 300
s vremenom iskazanim u minutama, da bi se dobio broj dijastaze
(DN). Taj broj iskazuje aktivnost dijastaze kao ml 1%-tne otopine
&#154;kroba &#154;to je hidrolizirana enzimom u 1 g meda jedan
sat pri 40°C . Broj dijastaze odgovara broju na Goetheovoj ljestvici.
<p>
Aktivnost dijastaze DN = ml 1%-tne otopine &#154;kroba po g meda/h
pri temperaturi 40°C .
<p>
Napomena: broj dijastaze = 60/t x 0,10/0,01 x 1,0/2 - 300/t
<p>
gdje je <i>t</i> redukcija u min.
<p>
<center>9. ODREĐIVANJE HIDROKSIMETILFURFUROLA <br>
(FOTOMETRIJSKA METODA PO WINKLERU)</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Ova se metoda temelji na reakciji hidroksimetilfurfurola s barbiturnom
kiselinom i p-toluidinom, pri čemu nastaje ru&#158;ičasta
boja, koja se mora mjeriti na valnoj duljini od 550 nm.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Osim uobičajene laboratorijske opreme upotrebljava se:
<p>
1) odmjerna tikvica obujma 50 ml i 100 ml,
<p>
2) vodena kupelj,
<p>
3) spektrofotometar (očitavanje na 550 nm).
<p>
<i>Reagensi</i>
<p>
1) Otopina barbiturne kiseline: Izva&#158;e se 500 mg barbiturne
kiseline i sa 70 ml vode prenese u odmjernu tikvicu obujma 100
ml. Stavi se u vodenu kupelj da se otopi, zatim se ohladi i tikvica
dopuni vodom do oznake.
<p>
2) Otopina p-toluidina: Izva&#158;e se 10 g p-toluidina i postupnim
zagrijavanjem u vodenoj kupelji otopi u pribli&#158;no 50 ml izopropanola.
S izopropanolom se prenese u odmjernu tikvicu obujma 100 ml pa
se doda 10 ml ledene octene kiseline. Otopina se ohladi i tikvica
dopuni izopropanolom do oznake. Otopina se čuva na tamnu
mjestu i ne upotrebljava najmanje 24 sata.
<p>
3) Destilirana voda bez kisika: Kroz vruću vodu propu&#154;ta
se du&#154;ik. Voda se zatim ohladi.
<p>
<i>Pripreme uzorka</i>
<p>
Uzorak se priprema na način utvrđen za metodu pripreme
uzorka za analizu, bez zagrijavanja.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Izva&#158;e se 10 g uzorka i bez zagrijavanja otopi u 20 ml destilirane
vode bez kisika. Zatim se prenese u odmjernu tikvicu obujma 50
ml, koja se dopuni vodom do oznake (otopina meda). Odmah nakon
pripreme nastavi se određivanje.
<p>
Od pripremljenog uzorka odmjeri se pipetom 2 ml, prenese se u
svaku od dviju epruveta, pa se doda 5 ml p-toluidina. U jednu
se epruvetu otpipetira 1 ml vode, a u drugu 1 ml otopine barbiturne
kiseline, pa se sadr&#158;aj dobro promije&#154;a. Epruveta u
kojoj je voda upotrijebit će se za slijepi pokus. Reagens
se treba dodavati bez prekida, a sve se mora zavr&#154;iti za
1-2 minute. Kad intenzitet boje dostigne maksimum (3-4 minute)
očita se apsorbancija na 550 mm u kiveti od 10 mm.
<p>
Količina hidroksimetilfurfurola izra&#158;ava se u mg/100
g meda, i grubo se izračunava prema formuli
<p>
mg HMF/100 g meda = apsorbancija/debljina sloja x 19,2
<p>
Napomena:
<p>
Količina HMF mo&#158;e se izračunati s pomoću
ba&#158;darnog dijagrama, primjenom standardnih otopina od 5<font face="Symbol">m</font><font face="Times-NewRoman">g
do 300</font><font face="Symbol">m</font><font face="Times-NewRoman">g.</font>
<p>
<center>10. PELUDNA ANALIZA</center>
<p>
Deset grama dobro izmije&#154;anog meda otopi se u 20 ml vode.
Stavi se u vodenu kupelj na temperaturu od 45°C. Nakon zagrijavanja
otopina se centrifugira 15 min. na 3.500 okretaja. Tekući
dio se odlije, a sediment se prenese mikropipetom na predmetno
staklo i ravnomjerno razma&#158;e na povr&#154;inu 15 x 20 mm.
Preparat se osu&#154;i u termostatu na temperaturi ne vi&#154;oj
od 40° C i uklopi u glicerin &#158;elatinu. Uvijek se rade dva
paralelna uzorka istog meda. Prilikom uklapanja, jedan uzorak
boji se dodavanjem kapi fuksina u glicerin &#158;elatinu. Uzorak
se pokrije pokrovnicom i vraća u termostat na su&#154;enje.
Mikroskopira se pri povećanju 200 do 600 puta. Prebroje
se sva peludna zrnca u vidnom polju. Mijenjaju se vidna polja
dok se ne izbroji 300 zrnaca. Prebrojana peludna zrnca se razvrstavaju
prema biljnoj vrsti. Biljna vrsta određuje se prema obliku,
veličini zrnca, građi i boji vanjske stjenke, te prema
obliku i broju pora klijanja. Peludna zrnca uspoređuju se
s referentnim preparatima.
<p>
<center>11. ODREĐIVANJE VODE U MATIČNOJ MLIJEČI
I CVJETNOM PRAHU</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Metoda se temelji na predestilaciji vode iz ispitnog uzorka, u
specijalnom aparatu, s pomoću organskog otapala koje se
ne mije&#154;a s vodom. Zatim se predestilirana količina
izmjeri u graduiranoj menzuri.
<p>
Ovom se metodom određuje voda u matičnoj mliječi
i cvjetnom prahu.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Osim uobičajene laboratorijske opreme upotrebljava se:
<p>
1) aparat za određivanje vode po Dean-Starku obujma 250 ml,
<p>
2) analitička vaga,
<p>
3) menzure obujma 10 ml i 100 ml.
<p>
Reagens: ksilol.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Izva&#158;e se 5 g matične mliječi odnosno 30 g
cvjetnog praha, stavi u tikvicu za destilaciju i prelije s 150
ml ksilola. Zatim se aparat sastavi, voda pusti kroz hladnjak
i počne destilacija. Smjesa se polako destilira, pri čemu
se vodena para i para organskog otapala kondenziraju i skupljaju
u graduiranoj cijevi, a vi&#154;ak otapala vraća. Destilacija
traje sve dok kondenzat ne postane potpuno bistar. Tada se zagrijavanje
prekida i kondenzat ostavi određeno vrijeme da se voda potpuno
izluči. Donji (vodeni) sloj ispusti se u menzuru te se
očita količina vode.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Količina vode iskazuje se u postocima i izračunava
prema formuli:
<p>
postotak vode = 100 a / b
<p>
gdje je:
<p>
a - broj ml očitane vode,
<p>
b - izvagani uzorak, u g.
<p>
<center>12. ODREĐIVANJE BJELANČEVINA U MATIČNOJ
MLIJEČI</center>
<p>
<i>Načelo</i>
<p>
Ova se metoda temelji na biuretskoj reakciji odnosno reakciji
bakra s peptidnom vezom, pri čemu nastaje ljubičasta
boja, koja se određuje spektrofotometrijski na 546 nm. Izmjerena
apsorbancija razmjerna je koncentraciji bjelančevina u
otopini.
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Osim uobičajene laboratorijske opreme upotrebljava se:
<p>
1) spektrofotometar,
<p>
2) analitička vaga,
<p>
3) centrifuga,
<p>
4) odmjerna tikvica obujma 100 ml i 1000 ml,
<p>
5) kiveta,
<p>
6) pipeta obujma 1 ml i 10 ml.
<p>
<i>Reagensi</i>
<p>
1) Biuretski reagens: 4,5 g kalinatrijeva tartarata otopi se u
40 ml NaOH 0,2 mol/l, doda se 1,5 g CuSO<sub>4</sub> x 5H<sub>2</sub>O, koji je prije
toga otopljen u 10 ml destilirane vode, i 0,5 g kalijeva jodida.
Otopina se polako promije&#154;a i kvantitativno prenese u odmjernu
tikvicu obujma 100 ml, koja se dopuni do 100 ml 0,5 mol/l, otopinom
NaOH/l. Otopina mora biti bistra i bez taloga.
<p>
2) Otopina natrijeva hidroksida <i>c </i>(NaOH) = 0,2 mol/l: U
odmjernoj tikvici obujma 1000 ml otopi se 8,4 g NaOH u oko 950
ml destilirane vode. Otopina se ohladi i tikvica dopuni vodom
do oznake.
<p>
3) Otopina za stabilizaciju: Otopi se 5 g kalijeva jodida u 0,2
mol NaOH/l i doda se otopine 0,2 mol NaOH/l do 1000 ml.
<p>
4) Bjelančevinski standard 6 g/l: krvni serum u kojemu
je poznata količina bjelančevina i kristalizirani
ljudski albumin.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Na aluminijskoj foliji promjera 15 mm x 15 mm izva&#158;e se na
analitičkoj vagi 100 mg matične mliječi.
Sve se prenese u kivetu za centrifugiranje i s pomoću staklenog
&#154;tapića potopi do dna kivete.
<p>
Pipetom se doda 8 ml otopine za stabilizaciju i to se dobro promije&#154;a
da bi se mliječ rastopila. Centrifugira se 10 min na 3000
okretaja. Nakon centrifugiranja odmjeri se 4 ml otopine mliječi,
prenese u drugu kivetu pa se doda 1 ml biuretskog reagensa.
<p>
Istovremeno se pripremi uzorak za slijepi pokus od 4 ml reagensa
za stabilizaciju i 1 ml biuretskog reagensa.
<p>
Nakon 30 minuta izmjeri se apsorbancija na 546 nm valne duljine.
Uz iste se uvjete odredi i apsorbancija standardne otopine.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Količina bjelančevina iskazuje se u postocima i
izračunava prema formuli:
<p>
postotak bjelančevina = (Av - Asl/f x 2 x 110)/ a
<p>
gdje je:
<p>
Av - apsorbancija uzorka,
<p>
Asl - apsorbancija pri slijepom pokusu,
<p>
f - faktor = As-Asl/Cs,
<p>
a - količina uzorka, u mg,
<p>
As - apsorbancija standarda,
<p>
Cs - količina bjelančevina u standardu.
<p>
<center>13. ODREĐIVANJE EKSTRAKTA PROPOLISA U ALKOHOLNOJ OTOPINI</center>
<p>
<i>Aparatura i pribor</i>
<p>
Za određivanje ekstrakta propolisa u alkoholnoj otopini upotrebljava
se uobičajena laboratorijska oprema.
<p>
Reagens: etanol.
<p>
<i>Određivanje</i>
<p>
Izva&#158;e se 5 g propolisa, prenese u sto&#158;astu tikvicu
(Erlenmeyerovu) i prelije s 50 g etanola, pa se na sobnoj temperaturi
preko noći ekstrahira. Nakon toga tekućina se filtrira
i uzima alikvota od tri grama filtrata, koja se dva sata su&#154;i
u su&#154;ioniku na temperaturi od 105°C. Nakon dva sata uzorak
se izvadi iz su&#154;ionika, stavi u eksikator i ohladi pa se
izva&#158;e.
<p>
<i>Izračunavanje</i>
<p>
Količina suhe tvari (ekstrakta) iskazuje se u postocima
i izračunava prema formuli
<p>
postotak ekstrakta = 100 x b x c / d x (a-c)
<p>
gdje je:
<p>
a - masa filtrata, u g,
<p>
b - masa otapala, u g,
<p>
c - masa suhog ostatka, u g,
<p>
d - masa uzorka, u g.
<br><br>
<img src=dodatni/374785.gif>

</p></div></div></div>

                            <div style="width: 100%; height: 100px; display: block; clear: both;"></div>
                        </div>
                    </div>
                </div>

                <div id="sticky-anchor2"></div>
                <div id="sticky2" class="contentRightOuter" data-top="20">
                    <div class="contentRightOuter" style="">
                        <div class="contentRight metadata">
                            <div class="strip"></div>
                            <div class="strip2"></div>
                            <div class="mobile">
                                <span>Pravilnik, NN 20/2000-280 </span>
                                <div class="more">
                                    Više <i class="uk-icon-angle-down"></i>
                                </div>
                            </div>
                            <div id="article-details-scroll">
                                <table class="detailsTable">
                                    <tr>
                                        <td><span class='key'>Dio NN:</span> Službeni</td>
                                    </tr>

                                    <tr>
                                        <td><span class='key'>Vrsta dokumenta:</span> Pravilnik</td>
                                    </tr>

                                    <tr>

                                        <td><span class='key'>Izdanje:</span>
                                            NN 20/2000&nbsp;&nbsp;&nbsp;<div class="edition-icon"></div>

                                        </td>
                                    </tr>

                                    <tr>

                                        <td><span class='key'>Broj dokumenta u izdanju:</span> 280</td>
                                    </tr>

                                    <tr>
                                        <td><span class="key">Donositelj:</span>MINISTARSTVO POLJOPRIVREDE I ŠUMARSTVA</td>
                                    </tr>

                                    <tr>
                                        <td><span class='key'>Datum tiskanog izdanja:</span> 16.2.2000.</td>
                                    </tr>

                                    <tr>
                                        <td><span class='key'>ELI:</span> <a href="https://narodne-novine.nn.hr/eli/sluzbeni/2000/20/280">/eli/sluzbeni/2000/20/280</a></td>
                                    </tr>

                                </table>
                                <table class="metaTable">

                                </table>

                            </div>
                            <div>

                                <div class="print" style="display: inline-block;">&nbsp;</div>

                            </div>

                            <div id="view-full"></div>

                        </div>

                    </div>
                </div>
                <!-- end of sticky -->
            </div>
        </div>
    </div>

<div id="footer">
    <div class="links uk-grid">
        <div class="left uk-width-1-1 uk-width-medium-1-1">
            <span class="left link" style="color: #666666 !important;" data-id="#opci">Opći uvjeti korištenja</span><span class="left link" style="color: #666666 !important;" data-id="#priv">Zaštita privatnosti</span><a class="link eli" href="/data_access_hr.aspx">Pristup podatcima</a><a class="link eli" href="/about_eli_hr.aspx">ELI</a><div class="footertekst">©2026. g. Narodne novine d.d.</div><span class="footertekst">, izrada&nbsp;</span><a class="link" target="_blank" href="http://novena.hr/">Novena d.o.o.</a>
        </div>
        <div class="footer-info">
            <div id="opci" class="tabse" style="display: none;">
                <br />