natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Lumbriculus variegatus can be removed from the cultures e.g. by transferring substrate with a fine mesh net, or organisms using a fire polished wide mouth (approximately 5 mm diameter) glass pipette, to a separate beaker.
Efter regenerering under 10–14 dagar bör intakta hela maskar som aktivt simmar eller kryper efter lätt mekanisk retning användas för testet.
If substrate is co-transferred to this beaker, the beaker containing worms and substrate is left overnight under flow-through conditions, which will remove the substrate from the beaker, while the worms remain at the bottom of the vessel.
Skador eller autotomi bör undvikas, t.ex. genom att man använder pipetter med flampolerade kanter eller tandläkarsonder av rostfritt stål vid hanteringen av maskarna.
They can then be introduced to newly prepared culture tanks, or processed further for the test as outlined in (3) and (4), or in the following.
Källor för startkulturer för Lumbriculus variegatus (adresserna i USA har tagits från (4))
An issue to be regarded critically when using L. variegatus in sediment tests is its reproduction mode (architomy or morphallaxis, e.g. (6)).
Europa
This asexual reproduction results in two fragments, which do not feed for a certain period until the head or tail part is regenerated (e.g., (7), (8)).
Förenta staterna
This means that in L. variegatus exposure via ingestion of contaminated sediment does not take place continuously.
Department of Fisheries and Wildlife No.
Therefore, a synchronisation should be performed to minimise uncontrolled reproduction and regeneration, and subsequent high variation in test results.
13 Natural Resources Building
Such variation can occur, when some individuals, which have fragmented and therefore do not feed for a certain time period, are less exposed to the test chemical than other individuals, which do not fragment during the test (9), (10), (11).
Sammanfattning av ringtestresultaten
10 to 14 days before the start of exposure, the worms should be artificially fragmented (synchronisation).
Sedimenttoxicitetstest med Lumbriculus variegatus
Large (adult) worms, which preferably do not show signs of recent morphallaxis should be selected for synchronisation.
Resultat av enskilda ringtestomgångar:
These worms can be placed onto a glass slide in a drop of culture water, and dissected in the median body region with a scalpel.
Genomsnittligt antal maskar i kontrollerna och i kontrollerna med lösningsmedel vid testets slut;
Care should be taken that the posterior ends are of similar size.
SD = standardavvikelse;
The posterior ends should then be left to regenerate new heads in a culture vessel containing the same substrate as used in the culture and reconstituted water until the start of exposure.
CV = variationskoefficient.
Regeneration of new heads is indicated when the synchronised worms are burrowing in the substrate (presence of regenerated heads may be confirmed by inspecting a representative subsample under a binocular microscope).
antal maskar i kontrollerna (genomsnitt)
The test organisms are thereafter expected to be in a similar physiological state.
antal maskar i kontrollerna med lösn. medel (genomsnitt)
This means, that when reproduction by morphallaxis occurs in synchronised worms during the test, virtually all animals are expected to be equally exposed to the spiked sediment.
interlaborativt medelvärde
Feeding of the synchronised worms should be done once as soon as the worms are starting to burrow in the substrate, or 7 d after dissection.
Maskarnas genomsnittliga totala torrvikt per replikat i kontroller och kontroller med lösningsmedel i slutet av testet;
The feeding regimen should be comparable to the regular cultures, but it may be advisable to feed the synchronised worms with the same food source as is to be used in the test.
CV = variationskoefficient.
The worms should be held at test temperature, at 20 ± 2 °C.
maskarnas torrvikt totalt per replikat (kontroller)
After regenerating, intact complete worms, which are actively swimming or crawling upon a gentle mechanical stimulus, should be used for the test.
maskarnas torrvikt totalt per replikat (kontroller med lösningsmedel)
Injuries or autotomy in the worms should be prevented, e.g. by using pipettes with fire polished edges, or stainless steel dental picks for handling these worms.
Toxicitet, PCP:
Sources of starter cultures for Lumbriculus variegatus (addresses in the U.S. adopted from (4))
Sammanfattning av endpoints i ringtestet;
U.S.A.
biologisk parameter
Department of Fisheries and Wildlife
inter-laborativt medelvärde (mg/kg)
No. 13 Natural Resources Building
inter-laborativ faktor
Summary of the ring test results
geo-metriskt medel-värde (mg/kg)
“Sediment Toxicity Test with Lumbriculus variegatus”
totalt antal maskar
Results of individual ring test runs:
maskarnas torrvikt totalt
Mean worm numbers in the controls and solvent controls at the end of the test;
dödlighet/överlevnad
SD = standard deviation;
reproduktion (ökning av antalet maskar per replikat)
CV = coefficient of variation
tillväxt (ökning av biomassan per replikat)
mean worm number in the controls
C.36 REPRODUKTIONSTEST FÖR ROVKVALSTER (HYPOASPIS (GEOLAELAPS) ACULEIFER) I JORD
mean worm number in the solvent controls
Denna testmetod motsvarar OECD:s testriktlinje (TG) 226 (2008).
interlaboratory mean
Metoden är avsedd att användas för bestämning av effekterna av kemikalier i jord på reproduktionskapaciteten hos den jordlevande kvalsterarten Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer Canestrini (Acari: Laelapidae), och gör det möjligt att fastställa hämningen av den specifika tillväxthastigheten hos en population (1) (2).
Mean total dry weights of worms per replicate in the controls and solvent controls at the end of the test;
Reproduktionskapaciteten innebär här antalet juveniler i slutet av testperioden.
CV = coeff. of variation
H. aculeifer representerar ytterligare en trofisk nivå jämfört med de arter för vilka testmetoder redan finns tillgängliga.
total dry weight of worms per replicate (controls)
Ett reproduktionstest utan särskiljning och kvantifiering av reproduktionscykelns olika stadier anses tillräckligt för denna testmetod.
total dry weight of worms per replicate (solvent controls)
För kemiska ämnen med en annan exponeringsväg än via jord kan andra metoder vara lämpligare (3).
Toxicity of PCP:
Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer anses vara en lämplig representant för markfaunan i allmänhet och rovkvalster i synnerhet.
Summary of endpoints in the ring test;
Arten finns över hela världen (5) och kan lätt samlas in och odlas i laboratoriet.
interlaboratory means for EC50, NOEC and LOEC;
En sammanfattning av biologin hos H. aculeifer finns i tillägg 7.
minimum detectable difference from the control values during hypothesis testing;
Bakgrundsinformation om kvalsterartens ekologi och dess användning i ekotoxikologisk testning finns i (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10), (11), (12).
used as a measure of statistical power.
Adulta honor exponeras för en serie koncentrationer av testkemikalien som blandas ner i jorden.
biological parameter
Testet inleds med tio adulta honor per replikatkärl.
Inter- laboratory mean (mg/kg)
Hanar införs inte i testet, eftersom erfarenheten har visat att honor parar sig omedelbart eller kort efter att de kläckts från deutonymfstadiet om det är hanar närvarande.
Inter- laboratory factor
Dessutom skulle hanarnas närvaro förlänga testet på ett sätt som gör att ett arbetskrävande särskiljande av olika åldersstadier blir nödvändigt.
geometr. mean (mg/kg)
Parning ingår således inte i testet.
total number of worms
Honorna införs i provet 28–35 dagar efter äggläggningsperiodens början under synkroniseringsstadiet (se tillägg 4), eftersom man då kan betrakta det som att honorna redan har parat sig och genomgått förstadiet till äggläggningen.
total dry weight of worms
Vid en temperatur på 20 °C slutar testet på dag 14 efter införandet av honor (dag 0) vilket gör det möjligt för den första kontrollavkomman att nå deutonymfstadiet (se tillägg 4).
mortality/survival
Den viktigaste uppmätta variabeln är antalet juveniler per testkärl och dessutom antalet överlevande honor.
reproduction (increase of number of worms per replicate)
Testkemikaliens vattenlöslighet, log Kow, fördelningskoefficient jord/vatten och ångtryck ska helst vara kända.
growth (biomass increase per replicate)
Det är önskvärt med ytterligare uppgifter om testkemikaliens omvandling, spridning och fördelning i jord, t.ex. i form av biotisk och abiotisk nedbrytningshastighet.
C.36 PREDATORY MITE (HYPOASPIS (GEOLAELAPS) ACULEIFER) REPRODUCTION TEST IN SOIL
Följande kriterier bör uppfyllas i de obehandlade kontrollerna för att testresultatet ska anses vara giltigt:
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 226 (2008).
Honornas genomsnittliga dödlighet bör inte överskrida 20 % vid testets slut.
This test method is designed to be used for assessing the effects of chemicals in soil on the reproductive output of the soil mite species Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer Canestrini (Acari: Laelapidae), hence allowing for the estimation of the inhibition of the specific population growth rate (1,2).
Det genomsnittliga antalet juveniler per replikat (med ursprungligen tio adulta honor) bör vara minst 50 vid testets slut.
Reproductive output here means the number of juveniles at the end of the testing period.
Variationskoefficienten som beräknas för antalet juveniler per replikat bör inte överstiga 30 % vid det definitiva testets slut.
H. aculeifer represents an additional trophic level to the species for which test methods are already available.
ECx eller NOEC för en referenskemikalie måste fastställas för att säkerställa att testförhållandena i laboratoriet är tillräckliga goda och för att kontrollera att testorganismernas respons inte har förändrats med tiden.
A reproduction test without discrimination and quantification of the different stages of the reproductive cycle is considered adequate for the purpose of this test method.
Dimetoat (CAS-nr 60-51-5) är en lämplig referenskemikalie som har visat sig påverka populationsstorleken (4).
For chemicalsubstances with another exposure scenario than via the soil other approaches might be appropriate (3).
Borsyra (CAS-nr 10043-35-3) kan användas som en alternativ referenskemikalie.
Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer is considered to be a relevant representative of soil fauna and predatory mites in particular.
Man har mindre erfarenhet av denna kemikalie.
It is worldwide distributed (5) and can easily be collected and reared in the laboratory.
Två utformningslösningar är möjliga:
A summary on the biology of H. aculeifer is provided in Appendix 7.
Referenskemikalien kan testas parallellt med att toxiciteten bestäms för varje testkemikalie vid en koncentration vars kapacitet att leda till en effekt på > 50 % reducering av avkomman måste styrkas på förhand i en dos-responsstudie.
Background information on the ecology of the mite species and the use in ecotoxicological testing is available (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10), (11), (12).
I detta fall bör antalet replikat vara detsamma som i kontrollerna (se punkt 29).
Adult females are exposed to a range of concentrations of the test chemical mixed into the soil.
Alternativt kan referenskemikalien testas 1–2 gånger per år i ett dos-responstest.
The test is started with 10 adult females per replicate vessel.
Antalet koncentrationer, replikat, och avståndsfaktorn varierar beroende på den valda utformningen (se även punkt 29), men man bör uppnå en respons på 10–90 % effekt (avståndsfaktor 1,8).
Males are not introduced in the test, because experience has shown that females mate immediately or shortly after hatching from the deutonymph stage, if males are present.
för dimetoat baserat på antalet juveniler bör ligga i intervallet mellan 3,0 och 7,0 mg verksamt ämne/kg jord (torrvikt).
In addition, inclusion of males would prolong the test in a way that the demanding discrimination of age stages would become necessary.
På grundval av de resultat som hittills erhållits med borsyra bör EC50 baserat på antalet juveniler ligga i intervallet 100–500 mg/kg torrvikt jord.
Thus, mating itself is not part of the test.
Testkärl och annan utrustning
The females are introduced into the test 28-35 days after the start of the egg laying period in the synchronisation (see Appendix 4), as the females can then be considered as already mated and having passed the pre-oviposition stage.
Man bör använda testkärl av glas eller annat kemiskt inert material med en storlek på 3–5 cm i diameter (jordlagrets höjd ≥ 1,5 cm) och som har tättslutande lock.
At 20 °C the test ends at day 14 after introducing the females (day 0), which allows the first control offspring to reach the deutonymph stage (see Appendix 4).
Skruvlock är att föredra och i så fall kan kärlen luftas två gånger i veckan.
For the main measured variable, the number of juveniles per test vessels and additionally the number of surviving females are determined.
Alternativt kan man använda lock som möjliggör direkt gasutbyte mellan substratet och den omgivande luften (t.ex. gasväv).
The reproductive output of the mites exposed to the test chemical is compared to that of the controls in order to determine the ECx (e.g. EC10, EC50) or the no observed effect concentration (NOEC) (see Appendix 1 for definitions), depending on the experimental design (see paragraph 29).
Eftersom vattenhalten måste vara tillräckligt hög under testet är det viktigt att kontrollera varje testkärls vikt under testets gång och vid behov fylla på med vatten.
An overview of the test schedule is given in Appendix 8.
Detta kan vara särskilt viktigt om inga skruvlock finns att tillgå.
The water solubility, the log Kow, the soil water partition coefficient and the vapour pressure of the test chemical should preferably be known.
Om ett ogenomskinligt testkärl används ska locket vara gjort av ett material som möjliggör tillgång till ljus (t.ex. ett perforerat genomskinligt lock) och samtidigt förhindrar att kvalster slipper ut.
Additional information on the fate of the test chemical in soil, such as the rates of biotic and abiotic degradation, is desirable.
Testkärlets storlek och typ beror på extraktionsmetoden (se tillägg 5 för detaljer).
The following criteria should be satisfied in the untreated controls for a test result to be considered valid:
Om värmeextraktion ska användas direkt i testkärlet kan man infoga ett bottennät med lämplig maskstorlek (som hålls förseglat till dess att extraktionen inleds), och jorden bör vara tillräckligt djup för att tillåta en ökning av temperatur och fuktighet.
Mean adult female mortality should not exceed 20 % at the end of the test;
Normal laboratorieutrustning krävs, och i synnerhet följande:
The mean number of juveniles per replicate (with 10 adult females introduced) should be at least 50 at the end of the test;
helst glasbehållare med skruvlock,
The coefficient of variation calculated for the number of juvenile mites per replicate should not be higher than 30 % at the end of the definitive test.
borstar för överföring av kvalster,
The ECx and/or NOEC of a reference chemical must be determined to provide assurance that the laboratory test conditions are adequate and to verify that the response of the test organisms did not change over time.
pH-mätare och luxmätare,
Dimethoate (CAS 60-51-5) is a suitable reference chemical that has shown to affect population size (4).
lämplig utrustning för reglering av luftfuktigheten (inte nödvändigt om exponeringskärlen har lock),
Boric acid (CAS 10043-35-3) may be used as an alternative reference chemical.
temperaturreglerad inkubator eller ett temperaturreglerat litet rum,
Less experience has been gained with this chemical.
utrustning för extraktion (se tillägg 5) (13),
Two design options are possible:
överliggande ljusarmatur med ljusreglage,
The reference chemical can be tested in parallel to the determination of the toxicity of each test chemical at one concentration, which has to be demonstrated beforehand in a dose response study to result in an effect of > 50 % reduction of offspring.
insamlingsburkar för extraherade kvalster.
In this case, the number of replicates should be the same as that in the controls (see paragraph 29).
I detta test används syntetisk jord.
Alternatively, the reference chemical is tested 1 - 2 times a year in a dose-response test.
Den syntetiska jorden består av följande komponenter (alla värden baseras på torrvikt):
Depending on the design chosen, the number of concentrations and replicates and the spacing factor differ (see paragraph 29), but a response of 10 - 90 % effect should be achieved (spacing factor of 1,8).
5 % vitmosstorv (Sphagnum), lufttorkad och finfördelad (en partikelstorlek på 2 ± 1 mm kan godtas),
The EC50 for dimethoate based on the number of juveniles should fall in the range between 3,0 and 7,0 mg a.s./kg soil (dw).
ca 74 % lufttorkad sand av industrikvalitet (beroende på den mängd CaCO3 som behövs), övervägande fin sand där mer än 50 % av partiklarna har en storlek mellan 50 och 200 μm.
Based on the results obtained with boric acid so far, the EC50 based on the number of juveniles should fall in the range between 100 and 500 mg/kg dw soil.
Den exakta mängden sand beror på mängden CaCO3 (se nedan).
Test vessels and equipment
De bör tillsammans uppgå till 75 %.
Screw lids are preferred and in that case, the vessels could be aerated twice a week.
Mängden kalciumkarbonat som ska tillsättas beror främst på torvens kvalitet/beskaffenhet (se anmärkning 1),
Alternatively, covers that permit direct gaseous exchange between the substrate and the atmosphere (e.g. gauze) can be used.
Den mängd CaCO3 som behövs beror på jordsubstratets beståndsdelar och bör bestämmas genom mätning av pH-värdet i delproverna med jord omedelbart före testets början (14).
Since moisture content must be kept high enough during the test, it is essential to control the weight of each experimental vessel during the test and replenish water if necessary.
Torvinnehållet i den syntetiska jorden avviker från torvinnehållet i andra testmetoder för markorganismer, där man i de flesta fall använder 10 % torv (t.ex.
This may be especially important if no screw lids are available.
(15)).
If a non-transparent test vessel is used, the cover should be made of material that allows for access to light (e.g. by means of a perforated transparent cover) whilst preventing the mites from escaping.
Enligt EPPO (16) innehåller en typisk jordbruksmark dock högst 5 % organiskt material, och minskningen av torvinnehållet återspeglar således de minskade möjligheterna i en naturlig jord till sorption av testkemikalien till organiskt kol.
The size and type of the test vessel depends on the extraction method (see Appendix 5 for details).
Om så krävs, t.ex. för särskilda teständamål, kan även naturliga jordar från oförorenade platser användas som test- och/eller odlingssubstrat.
If heat extraction is applied directly to the test vessel, then a bottom mesh of appropriate mesh size could be added (sealed until extraction), and soil depth should be sufficient to allow for a temperature and moisture gradient.
Om naturjord används bör man minst ange dess ursprung (insamlingsplats), pH, textur (partikelstorleksfördelning) och halten av organiskt material.
Standard laboratory equipment is required, specifically the following:
Om möjligt bör man även ange jordens typ och namn i enlighet med jordklassificering, och jorden måste vara fri från eventuella föroreningar.
preferably glass vessels with screw lids;
Om testkemikalien är en metall eller en metallorganisk förening bör även katjonbyteskapaciteten (CEC) hos den naturliga jorden fastställas.
brushes for transferring mites
Särskild uppmärksamhet bör ägnas åt att uppfylla giltighetskriterierna eftersom bakgrundsinformation om naturjordar vanligtvis är sällsynt.
pH-meter and luxmeter;
För bestämning av pH-värdet används en blandning av jord och 1 M kaliumklorid (KCl) eller 0,01 M kalciumkloridlösning (CaCl2) i förhållandet 1:5 (se (14) och tillägg 3).
temperature-controlled incubator or small room;
Om jorden är för alkalisk kan detta justeras genom tillsats av mer av en blandning innehållande de första tre komponenterna som beskrivs i punkt 10, men inget CaCO3.
equipment for extraction (see Appendix 5) (13)
Två till sju dagar innan testet inleds förhandsfuktas den torra syntetiska jorden med tillräcklig mängd destillerat eller avjonat vatten till en vattenhalt som motsvarar cirka hälften av den slutliga vattenhalten, dvs. 40–60 % av den maximala vattenhållningskapaciteten (WHC).
overhead light panel with light control
Fukthalten justeras till 40–60 % av den maximala vattenhållningskapaciteten (WHC) genom tillsats av lösningen med testkemikalien och/eller destillerat eller avjonat vatten (se punkterna 16–18).
collection jars for extracted mites.
Ytterligare en summarisk kontroll av jordens fukthalt kan göras genom att man försiktigt pressar jorden i handen, och om vattenhalten är korrekt sipprar små vattendroppar ut mellan fingrarna.
For this test, an artificial soil is used.
Jordens fukthalt bestäms i början och i slutet av testet genom torkning till konstant vikt vid 105 °C i enlighet med ISO 11465 (17), och jordens pH-värde i enlighet med tillägg 3 eller ISO 10390 (14).
The artificial soil consists of the following components (all values based on dry mass):
Dessa mätningar bör utföras på ytterligare prover utan kvalster, både från jorden i kontrollerna och från testjorden för varje testkoncentration.
5 % sphagnum peat, air-dried and finely ground (a particle size of 2 ± 1 mm is acceptable);
Vattenhalten bör övervakas under testets gång genom att kärlen regelbundet vägs (se punkterna 20 och 24).
approximately 74 % air-dried industrial sand (depending on the amount of CaCO3 needed), predominantly fine sand with more than 50 % of the particles between 50 and 200 microns.
Den art som används i testet är Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer (Canestrini, 1883).
The exact amount of sand depends on the amount of CaCO3 (see below), together they should add up to 75 %.
Man måste ha adulta kvalsterhonor som kommer från en synkroniserad kohort för att påbörja testet.
< 1,0 % calcium carbonate (CaCO3, pulverised, analytical grade) to obtain a pH of 6,0 ± 0,5;
Kvalstren bör introduceras ca 7–14 dagar efter att de har nått adult stadium, 28–35 dagar efter inledningen av äggläggningen under synkroniseringen (se punkt 3 och tillägg 4).
the amount of calcium carbonate to be added may depend principally on the quality/nature of the peat (see Note 1).
Kvalstrens ursprung eller leverantören av laboratorieodlingen samt underhållet av denna bör anges.
The amount of CaCO3 required will depend on the components of the soil substrate and should be determined by measuring the pH of soil sub-samples immediately before the test (14).
Om man håller en laboratorieodling rekommenderas det att man bekräftar identiteten på den art som används minst en gång om året.
The peat content of the artificial soil deviates from other test methods on soil organisms, where in most cases 10 % peat is used (e.g. (15)).
En identifieringsblankett bifogas som tillägg 6.
However, according to EPPO (16) a typical agricultural soil has not more than 5 % organic matter, and the reduction in peat content thus reflects the decreased possibilities of a natural soil for sorption of the test chemical to organic carbon.
Testkemikalien blandas ner i jorden.
If required, e.g. for specific testing purposes, natural soils from unpolluted sites may also serve as test and/or culture substrate.
Organiska lösningsmedel som används för att underlätta behandlingen av jorden med testkemikalien bör väljas på grundval av deras låga toxicitet för kvalster och en lämplig kontroll med lösningsmedel ska tas med i testupplägget (se punkt 29).
However, if natural soil is used, it should be characterised at least by origin (collection site), pH, texture (particle size distribution) and organic matter content.
Det rekommenderas att man använder en lämplig mängd vatten för att nå önskad fukthalt, dvs. 40–60 % av den maximala vattenhållningskapaciteten (WHC) (se punkt 12).