natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Twice or three times a week:
Vitellogenin mäts hos knölskallelöja, japansk risfisk och sebrafisk, medan de sekundära könskaraktärerna endast mäts hos knölskallelöja och japansk risfisk.
supply with sufficient food
Detta biologiska test fungerar som ett screeningtest in vivo av vissa endokrina verkningsmekanismer och dess tillämpning bör ses mot bakgrund av OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals (28).
Day – 5 (+/- 2)
INLEDANDE ÖVERVÄGANDEN OCH BEGRÄNSNINGAR
Prepare artificial soil
Vitellogenin produceras vanligen i levern hos honor av äggläggande ryggradsdjur som respons på cirkulerande endogent östrogen.
Day – 4 (+/- 2)
Det är en prekursor till ägguleproteiner, och när det väl har producerats i levern förs det med blodet till äggstockarna, där det tas upp och modifieras av ägg som är under utveckling.
Determine WHC of artificial soil
Vitellogenin är nästan inte påvisbart i plasman hos icke könsmogna hon- och hanfiskar eftersom de saknar tillräckliga halter av cirkulerande östrogen.
Dry over night
Levern kan dock bilda och utsöndra vitellogenin som respons på exogen östrogenstimulans.
Next day:
Mätningen av vitellogenin gör det möjligt att påvisa kemikalier med olika östrogena verkningsmekanismer.
weigh samples and calculate WHC
Man kan påvisa ämnen med östrogena kemikalier genom mätning av vitellogenininduktionen hos hanfiskar, och detta har dokumenterats många gånger i den fackgranskade vetenskapliga litteraturen (t.ex.
Day – 4 (+/– 2)
(7)).
Pre moisture artificial soil to achieve 20 - 30 % of WHC
Vitellogenininduktion har också påvisats efter exponering för aromatiserbara androgener (8, 9).
Start test:
En minskning av nivåerna av cirkulerande östrogen hos honor, till exempel genom hämning av aromatas som omvandlar det endogena androgenet till det naturliga östrogenet 17-beta-östradiol, orsakar en minskning av vitellogeninkoncentrationen, som används för att påvisa kemikalier med aromatashämmande egenskaper (10, 11).
add test chemical to artificial soil
Den biologiska relevansen av den vitellogeninrespons som följer östrogen hämning och aromatashämning har fastställts och har dokumenterats i stora drag.
Introduce 10 females to each replicate
Det är dock möjligt att produktionen av VTG hos honor även kan påverkas av allmän toxicitet och icke-endokrina toxiska verkningsmekanismer, t.ex. hepatotoxicitet.
Weigh each replicate
Flera mätmetoder har framgångsrikt utvecklats och standardiserats för rutinmässig användning.
Set up abiotic controls for moisture content and pH, 2 replicates for each treatment
Detta gäller artspecifika testmetoder för ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) som använder immunokemiska tekniker för kvantifiering av det vitellogenin som producerats i små blod- eller leverprover som insamlats från enskilda fiskar (12, 13, 14, 15, 16, 17, 18).
Dry moisture controls over night
Prov tas på blod från knölskallelöja, blod eller huvud/stjärthomogenat från sebrafisk och lever från risfisk för mätning av VTG.
weigh moisture controls
Hos risfisk finns det en god korrelation mellan VTG mätt i blod och i leverprover (19).
measure pH of dried abiotic controls
Tillägg 6 innehåller rekommenderade förfaranden för provtagning för analys av vitellogenin.
Day 3, 6, 9, 12 (approx.)
Utrustning för mätning av vitellogenin är lätt att få tag på.
weigh water content controls
Flera studier finns tillgängliga i den vetenskapliga litteraturen som dokumenterar denna typ av respons hos knölskallelöja (20) och risfisk (21).
measure pH of dried controls
En minskning av de sekundära könskaraktärerna hos hanar bör tolkas med försiktighet på grund av dålig statistisk giltighet, och bör i stället bygga på en expertbedömning och på vikten av de sammanlagda bevisen.
Day 16
Möjligheten att använda sebrafisk i detta test är begränsad, eftersom dessa fiskar inte har några kvantifierbara sekundära könskaraktärer som är mottagliga för androgena kemikalier.
Terminate extraction
Hos knölskallelöja är den viktigaste indikatorn på exogen exponering för androgener antalet parningstuberkler på honornas nosar.
Day 16 +
Hos risfisk utgör antalet papillära utväxter det huvudsakliga kännetecknet hos honor för exogen exponering för androgena kemikalier.
Record number of adults and juveniles in extracted material
I tilläggen 5A och 5B anges rekommenderade förfaranden som bör följas vid utvärdering av könskaraktärerna hos knölskallelöja och risfisk.
Report results on template tables
Definitioner som används i denna testmetod finns i tillägg 1.
Report testing procedure in test protocol sheets
Med denna metod exponeras han- och honfiskar som befinner sig i ett reproduktivt tillstånd tillsammans i testkärlen.
C.37.
Deras status som vuxna djur som befinner sig i ett reproduktionsstadium innebär att könen är tydligt särskiljbara och att de är mottagliga för exogena kemikalier, och därmed kan man göra en könsrelaterad analys av varje endpoint.
AY FISH ASSAY:
Vid slutet av testet bekräftas könet med hjälp av makroskopisk undersökning av könskörtlarna efter att buken öppnats ventralt med sax.
A SHORT-TERM SCREENING FOR OESTROGENIC AND ANDROGENIC ACTIVITY, AND AROMATASE INHIBITION
En översikt över de relevanta betingelserna för ett biologiskt test återfinns i tillägg 2.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 230 (2009).
Testet inleds normalt med fisk som tagits från en population som befinner sig i lekstadium.
The need to develop and validate a fish assay capable of detecting certain endocrine active chemicals originates from the concerns that environmental levels of chemicals may cause adverse effects in both humans and wildlife due to the interaction of these chemicals with the endocrine system.
Åldrade djur bör inte användas.
In 1998, the OECD initiated a high-priority activity to revise existing guidelines and to develop new guidelines for the screening and testing of potential endocrine disrupters.
Vägledning om fiskarnas ålder och reproduktiva status finns i avsnittet om urval av fisk.
One element of the activity was to develop a Test Guideline for the screening of chemicals active on the endocrine system of fish species.
Testet genomförs med tre kemiska exponeringskoncentrationer och en vattenkontroll, och vid behov en lösningsmedelskontroll.
The 21-day Fish Endocrine Screening Assay underwent an extensive validation programme consisting of inter-laboratory studies with selected chemicals to demonstrate the relevance and reliability of the assay for the detection of oestrogenic and aromatase inhibiting chemicals (1, 2, 3, 4, 5) in the three fish species investigated (the fathead minnow, the Japanese medaka and the zebrafish);
Två kärl eller replikat per behandling används för risfisk och sebrafisk (varje kärl innehåller fem hanar och fem honor), medan fyra kärl eller replikat per behandling används för knölskallelöja (varje kärl innehåller två hanar och fyra honor).
the detection of androgenic activity is possible in the fathead minnow and the medaka, but not in the zebrafish.
Detta är för att tillgodose knölskallelöjhanens territoriella beteende samtidigt som testets statistiska styrka upprätthålls.
This test method does not allow the detection of anti-androgenic chemicals.
Exponeringens varaktighet är 21 dagar, och provtagningen på fiskarna sker på dag 21 av exponeringen.
The validation work has been peer-reviewed by a panel of experts nominated by the National Coordinators of the Test Guideline Programme (6).
Vid provtagningen på dag 21 avlivas alla djuren på ett humant sätt.
The assay is not designed to identify specific mechanisms of hormonal disruption because the test animals possess an intact hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis, which may respond to chemicals that impact on the HPG axis at different levels.
För att testresultaten ska kunna godtas måste följande villkor uppfyllas:
The Fish Short Term Reproduction assay (OECD TG 229) includes fecundity and, as appropriate, gonadal histopathology for the fathead minnow, as well as all endpoints included in this test method.
Mortaliteten i vatten- eller lösningsmedelskontrollen bör inte överstiga 10 % i slutet av exponeringsperioden.
OECD TG 229 provides a screening of chemicals which affect reproduction through various mechanisms including endocrine modalities.
Halten av löst syre bör vara minst 60 % av luftmättnadsvärdet (ASV) under hela exponeringsperioden.
This should be considered prior to selecting the most appropriate test method.
Vattentemperaturen bör inte vid någon tidpunkt under exponeringsperioden variera med mer än ± 1,5 °C mellan olika testkärl, och får variera med högst 2 °C från de temperaturgränser som specificerats för den art som används i testet (se tillägg 2).
This test method describes an in vivo screening assay where sexually mature male and spawning female fish are held together and exposed to a chemical during a limited part of their life-cycle (21 days).
Bevis bör finnas tillgängliga som visar att koncentrationen av testkemikalien i lösningen på ett tillfredsställande sätt har hållits inom ± 20 % av de genomsnittliga uppmätta värdena.
At termination of the 21-day exposure period, depending on the species used, one or two biomarker endpoint(s) are measured in males and females as indicators of oestrogenic, aromatase inhibition or androgenic activity of the test chemical;
Normal laboratorieutrustning, och särskilt
these endpoints are vitellogenin and secondary sexual characteristics.
syrgas- och pH-mätare,
Vitellogenin is measured in fathead minnow, Japanese medaka and zebrafish, whereas secondary sex characteristics are measured in fathead minnow and Japanese medaka only.
utrustning för bestämning av vattnets hårdhet och alkalinitet,
This bioassay serves as an in vivo screening assay for certain endocrine modes of action and its application should be seen in the context of the “OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals” (28).
lämplig utrustning för temperaturreglering, helst med kontinuerlig övervakning,
INITIAL CONSIDERATIONS AND LIMITATIONS
akvarier tillverkade av kemiskt inert material och tillräckligt stora för den rekommenderade fisk- och antalstätheten (se tillägg 2),
Vitellogenin is normally produced by the liver of female oviparous vertebrates in response to circulating endogenous oestrogen.
leksubstrat för knölskallelöja och sebrafisk (tillägg 4 innehåller de uppgifter som behövs),
It is a precursor of egg yolk proteins and, once produced in the liver, travels in the bloodstream to the ovary, where it is taken up and modified by developing eggs.
lämplig precisionsvåg (t.ex. noggrannhet ± 0,5 mg).
Vitellogenin is almost undetectable in the plasma of immature female and male fish because they lack sufficient circulating oestrogen;
Allt vatten i vilket testarten uppvisar lämplig överlevnad och tillväxt kan användas som testvatten.
however, the liver is capable of synthesizing and secreting vitellogenin in response to exogenous oestrogen stimulation.
Vattnet ska hålla jämn kvalitet under hela testperioden.
The measurement of vitellogenin serves for the detection of chemicals with various oestrogenic modes of action.
Vattnets pH bör ligga inom intervallet 6,5–8,5 men får dock under ett givet test variera med högst ± 0,5 pH-enheter.
The detection of oestrogenic chemicals is possible via the measurement of vitellogenin induction in male fish, and it has been abundantly documented in the scientific peer-reviewed literature (e.g. (7)).
För att säkerställa att utspädningsvattnet inte påverkar testresultaten på oönskat sätt (t.ex. genom komplexbildning med testkemikalien) bör vattenprover tas regelbundet för analys.
Vitellogenin induction has also been demonstrated following exposure to aromatizable androgens (8, 9).
Mätningar av tungmetaller (t.ex.
A reduction in the circulating level of oestrogen in females, for instance through the inhibition of the aromatase converting the endogenous androgen to the natural oestrogen 17β-estradiol, causes a decrease in the vitellogenin level, which is used to detect chemicals having aromatase inhibiting properties (10, 11).
Cu, Pb, Zn, Hg, Cd och Ni), viktiga anjoner och katjoner (t.ex.
The biological relevance of the vitellogenin response following oestrogenic/aromatase inhibition is established and has been broadly documented.
Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl– och SO42–), bekämpningsmedel (t.ex. total mängd organiska fosforföreningar eller total mängd organiska klorföreningar), halten organiskt kol och uppslammade partiklar bör göras t.ex. var tredje månad i fall där man vet att utspädningsvattnet håller en relativt jämn kvalitet.
However, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Om vattenkvaliteten har visat sig vara jämn under minst ett år kan dessa kontroller göras med längre intervaller (t.ex. var sjätte månad).
Appendix 6 provides the recommended procedures for sample collection for vitellogenin analysis.
Användning av lösningsmedel som bärämne rekommenderas inte.
Secondary sex characteristics in male fish of certain species are externally visible, quantifiable and responsive to circulating levels of endogenous androgens;
OECD:s vägledningsdokument om akvatisk toxicitetstestning av svåra ämnen och blandningar bör konsulteras i sådana fall (22).
this is the case for the fathead minnow and the medaka — but not for zebrafish, which does not possess quantifiable secondary sex characteristics.
Valet av lösningsmedel avgörs av testkemikaliens kemiska egenskaper.
Females maintain the capacity to develop male secondary sex characteristics, when they are exposed to androgenic chemicals in water.
OECD:s vägledningsdokument rekommenderar högst 100 μl/l, en rekommendation som bör iakttas.
Several studies are available in the scientific literature to document this type of response in fathead minnow (20) and medaka (21).
En färsk undersökning (23) visade dock på ytterligare problem vid användning av lösningsmedel när man testar för endokrin aktivitet.
A decrease in secondary sex characteristics in males should be interpreted with caution because of low statistical power, and should be based on expert judgement and weight of evidence.
Det rekommenderas därför att koncentrationen av ett eventuellt lösningsmedel begränsas till ett minimum om det är tekniskt genomförbart (beroende på testkemikaliens fysikalisk-kemiska egenskaper).
There are limitations to the use of zebrafish in this assay, due to the absence of quantifiable secondary sex characteristics responsive to androgenic acting chemicals.
Ett genomflödestestsystem ska användas.
In the fathead minnow, the main indicator of exogenous androgenic exposure is the number of nuptial tubercles located on the snout of the female fish.
Ett sådant system portionerar och späder kontinuerligt ut en stamlösning av testkemikalien (t.ex. med mätpump, proportionalitetslösningssystem och mättnadskärlsystem) för att tillföra en serie koncentrationer till testbehållarna.
In the medaka, the number of papillary processes constitutes the main marker of exogenous exposure to androgenic chemicals in female fish.
Stamlösningens och utspädningsvattnets flödeshastighet bör kontrolleras regelbundet under testets gång, helst dagligen, och får inte variera med mer än 10 % under hela testet.
Appendix 5A and Appendix 5B indicate the recommended procedures to follow for the evaluation of sex characteristics in fathead minnow and in medaka, respectively.
Man bör vara noga med att undvika att använda plaströr av låg kvalitet eller andra material som kan innehålla biologiskt aktiva kemikalier.
Definitions used in this test method are given in Appendix 1.
Vid val av materialet för genomflödessystemet bör man beakta möjligheten att testkemikalien eventuellt kan adsorberas till detta material.
In the assay, male and female fish in a reproductive status are exposed together in test vessels.
Fiskhållning
Their adult and reproductive status enables a clear differentiation of each sex, and thus a sex-related analysis of each endpoint, and ensures their sensitivity towards exogenous chemicals.
Testfiskarna ska tas från en laboratoriepopulation från en enda stam som under minst två veckor före testets början har acklimatiserats för testet genom att hållas i vatten med samma kvalitet och ljusförhållanden som det som används i testet.
At test termination, sex is confirmed by macroscopic examination of the gonads following ventral opening of the abdomen with scissors.
Det är viktigt att fisk- och antalstätheten (för definitioner, se tillägg 1) anpassas för de arter som testas (se tillägg 2).
An overview of the relevant bioassay conditions is provided in Appendix 2.
Efter en anpassningsperiod på 48 timmar ska mortaliteten registreras och följande kriterier tillämpas:
The assay is normally initiated with fish sampled from a population that is in spawning condition;
Om mer än 5 % av populationen har dött under den andra sjudagarsperioden ska hela partiet förkastas.
senescent animals should not be used.
Fiskarna bör inte ges någon behandling mot sjukdomar under acklimatiseringsperioden, under förexponeringen, eller under exponeringsperioden.
Guidance on the age of fish and on the reproductive status is provided in the section on Selection of fish.
Förexponering och urval av fisk
The assay is conducted using three chemical exposure concentrations as well as a water control, and a solvent control if necessary.
En veckolång förexponeringsperiod rekommenderas då djuren placeras i kärl som liknar de som används i det verkliga testet.
Two vessels or replicates per treatment are used (each vessel containing 5 males and 5 females) in medaka and zebrafish, whereas four vessels or replicates per treatment are used (each vessel containing 2 males and 4 females) in fathead minnow.
Fiskarna bör utfodras ad libitum under hela hållningsperioden och under exponeringsfasen.
This is to accommodate the territorial behaviour of male fathead minnow while maintaining sufficient power of the assay.
Exponeringen inleds med sexuellt dimorf vuxen fisk från en laboratoriesamling med könsmogna djur (t.ex. med tydligt synbara sekundära könskaraktärer när det gäller knölskallelöja och risfisk) som aktivt leker.
The exposure is conducted for 21 days and sampling of fish is performed at day 21 of exposure.
För allmän vägledning (detta bör inte betraktas isolerat från observationer av ett fiskbestånds faktiska reproduktiva status), bör knölskallelöjorna vara ungefär 20 (± 2) veckor gamla, förutsatt att de har odlats vid en temperatur på 25 ± 2 °C under hela deras livstid.
On sampling at day 21, all animals are killed humanely.
Japanska risfiskar bör vara ungefär 16 (± 2) veckor, förutsatt att de har odlats vid en temperatur på 25 ± 2 °C under hela deras livstid.
Secondary sex characteristics are measured in fathead minnow and medaka (see Appendix 5A and Appendix 5B);
Sebrafiskar bör vara ungefär 16 (± 2) veckor, förutsatt att de har odlats vid en temperatur på 26 ± 2 °C under hela deras livstid.
blood samples are collected for determination of vitellogenin in zebrafish and fathead minnow, alternatively head/tail can be collected for the determination of vitellogenin in zebrafish (Appendix 6);
TESTETS UTFORMNING
liver is collected for VTG analysis in medaka (Appendix 6).
Tre koncentrationer av testkemikalien, en kontroll (vatten) och, vid behov, en lösningsmedelskontroll används.
TEST ACCEPTANCE CRITERIA
Uppgifterna kan analyseras för att fastställa statistiskt signifikanta skillnader mellan responsen i behandlingarna och i kontrollen.
For the test results to be acceptable the following conditions apply:
Dessa analyser kommer att klargöra huruvida ytterligare testning av mer långsiktiga negativa effekter (dvs. överlevnad, utveckling, tillväxt och reproduktion) krävs för kemikalien, snarare än att de används för riskbedömning (24).
the mortality in the water (or solvent) controls should not exceed 10 % at the end of the exposure period;
För sebrafisk och risfisk undersöks på testdag 21 hanar och honor från varje behandlingsnivå (fem hanar och fem honor i vart och ett av de två replikaten) och från kontrollgruppen eller -grupperna för mätning av vitellogenin och sekundära könskaraktärer, i tillämpliga fall.
the dissolved oxygen concentration should be at least 60 % of the air saturation value (ASV) throughout the exposure period;
För knölskallelöja undersöks på dag 21 av exponeringen hanar och honor (två hanar och fyra honor i vart och ett av de fyra replikaten) och från kontrollgruppen eller -grupperna för mätning av vitellogenin och sekundära könskaraktärer.
the water temperature should not differ by more than ± 1,5 °C between test vessels at any one time during the exposure period and be maintained within a range of 2 °C within the temperature ranges specified for the test species (Appendix 2);
Vid utförandet av detta test bör den högsta testkoncentrationen fastställas utifrån den högsta tolererade koncentrationen (MTC), vilken bestäms på grundval av ett preliminärt test eller andra uppgifter om toxicitet, eller 10 mg/l, eller högsta löslighet i vatten, beroende på vilket som är lägst.
evidence should be available to demonstrate that the concentrations of the test chemical in solution have been satisfactorily maintained within ± 20 % of the mean measured values.
MTC definieras som den högsta testade koncentrationen av testkemikalien som leder till mindre än 10 % mortalitet.
Normal laboratory equipment and especially the following:
Denna metod förutsätter att det finns empiriska uppgifter om akut toxicitet eller toxikologiska uppgifter utifrån vilka MTC kan uppskattas.
oxygen and pH meters;
Uppskattningar av MTC-koncentrationen kan vara otillförlitliga och kräver vanligen ett visst mått av fackmässigt omdöme.
equipment for determination of water hardness and alkalinity;
För detta krävs tre testkoncentrationer som skiljer sig åt med en konstant faktor som inte överstiger 10 och en kontroll med utspädningsvatten (och en lösningsmedelskontroll vid behov).
adequate apparatus for temperature control and preferably continuous monitoring;
Ett intervall för spridningsfaktorer på mellan 3,2 och 10 rekommenderas.
tanks made of chemically inert material and of a suitable capacity in relation to the recommended loading and stocking density (see Appendix 2);
Val och vägning av testfiskarna
spawning substrate for fathead minnow and zebrafish, Appendix 4 gives the necessary details;
Det är viktigt att minimera fiskarnas variationer i vikt vid början av testet.
suitably accurate balance (i.e. accurate to ± 0,5 mg).
I tillägg 2 anges lämpliga storleksintervall för de arter som rekommenderas för användning i detta test.
Any water in which the test species shows suitable long-term survival and growth may be used as test water.
För hela det fiskbestånd som används i testet bör variationen mellan individernas vikt för hanar och honor vid testets början om möjligt hållas inom ± 20 % av den aritmetiska medelvikten för samma kön.
It should be of constant quality during the period of the test.
Det rekommenderas att ett delprov av fiskbeståndet vägs före testet i syfte att uppskatta medelvikten.
The pH of the water should be within the range 6,5 to 8,5, but during a given test it should be within a range of ± 0,5 pH units.
Exponeringsförhållanden
In order to ensure that the dilution water will not unduly influence the test result (for example by complexion of test chemical), samples should be taken at intervals for analysis.
Testperiodens längd är 21 dagar efter en förexponeringsperiod.
Measurements of heavy metals (e.g. Cu, Pb, Zn, Hg, Cd, and Ni), major anions and cations (e.g. Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl-, and SO42-), pesticides (e.g. total organophosphorus and total organochlorine pesticides), total organic carbon and suspended solids should be made, for example, every three months where dilution water is known to be relatively constant in quality.
Den rekommenderade förexponeringsperioden är en vecka.
If water quality has been demonstrated to be constant over at least one year, determinations can be less frequent and intervals extended (e.g. every six months).
Fiskarna bör utfodras ad libitum med lämpligt foder (tillägg 2) i tillräcklig mängd för att upprätthålla kroppskonditionen.