natgillin/translations-raw huggingface dataset:
During the exposure, the test vessels should be observed in order to assess visually any behavioural differences in the worms (e.g. sediment avoidance, fecal pellets visible on the sediment surface) compared with the controls.
Från det tunna skiktet av sörjan kan maskarna plockas upp med en nål av stål eller en pincett (som används mer som en gaffel än en pincett för att undvika att skada maskarna) och överföras till rent vatten.
Observations should be recorded.
Efter att maskarna har separerats från sedimentsörjan ska de sköljas i testmediet och räknas.
At the end of the test, each replicate is examined (additional vessels designated for chemical analyses may be excluded from examination).
Oberoende av vilken metod som används bör laboratorierna kunna visa att deras personal kan avlägsna i genomsnitt minst 90 % av testorganismerna från sedimentet.
An appropriate method should be used to recover all worms from the test vessel.
Till exempel kan ett visst antal testorganismer tillsättas kontroll- eller testsediment och andelen avlägsnade maskar kan fastställas efter 1 timme (7).
Care should be taken that all worms are recovered uninjured.
Det totala antalet levande och döda individer per replikat bör registreras och utvärderas.
One possible method is sieving the worms from the sediment.
Följande grupper av maskar anses vara döda:
A stainless steel mesh of appropriate mesh size can be used.
maskar som inte reagerar på lätt mekanisk retning
Most of the overlying water is carefully decanted, and the remaining sediment and water is agitated to result in a slurry, which can be passed through the sieve.
maskar som visar tecken på förruttnelse (i kombination med a))
Using a 500 μm mesh, most of the sediment particles will pass the sieve very quickly;
maskar som saknas
however, sieving should be done quickly, in order to prevent the worms from crawling into or through the mesh.
Dessutom kan de levande maskarna hänföras till en av tre grupper:
Using a 250 μm mesh will prevent the worms from crawling into or through the mesh;
stora, hela maskar (adulter) utan återbildade kroppspartier
however, care should be taken that as little as possible of the sediment particles is retained on the mesh.
hela maskar med återbildade kroppspartier med ljusare färg (dvs. med nya bakre delar, med nya främre delar, eller med både nya bakre och främre delar)
The sieved slurry of each replicate vessel may be passed through the sieve a second time in order to ensure that all worms are recovered.
ofullständiga maskar (dvs. maskar som nyligen delats med kroppspartier som inte återbildats)
An alternative method could be warming of the sediment by placing the test vessels in a water bath at 50 – 60 °C;
Dessa ytterligare överväganden är inte obligatoriska, men kan användas för utökad tolkning av de biologiska resultaten (t.ex. ett stort antal maskar i grupp c) kan tyda på en försening av reproduktionen eller återbildandet i en viss testgrupp).
the worms will leave the sediment and can be collected from the sediment surface by use of a fire-polished wide-mouth pipette.
Om man upptäcker skillnader i utseendet (t.ex. skador på integumentet, ödematösa kroppspartier) mellan testmaskar och kontrollmaskar bör dessa registreras.
Another alternative method could be to produce a sediment slurry and pour this slurry onto a shallow pan of suitable size.
Omedelbart efter räkningen/bedömningen ska de levande maskarna i varje replikat överföras till torra, tidigare vägda och märkta vågskålar (en per replikat) och avlivas med en droppe etanol per vågskål.
From the shallow layer of slurry the worms can be picked up by a steel needle or watchmakers' tweezers (to be used rather like a fork than forceps to avoid injuring the worms) and transferred to clean water.
Vågskålarna placeras i ett torkskåp med en temperatur på 100 ± 5 °C och får torka över natten, varefter de vägs efter att de har svalnat i en exsickator och torrvikten maskar fastställs (helst i gram, med minst fyra decimaler).
After separating the worms from the sediment slurry, these are rinsed in test medium and counted.
Utöver den totala torrvikten kan man fastställa den askfria torrvikten enligt beskrivningen i (49) för att redovisa oorganiska komponenter som härrör från förtärt sediment som förekommer i maskarnas matsmältningsorgan.
Independently of the method used, laboratories should demonstrate that their personnel are able to recover an average of at least 90 % of the organisms from whole sediment.
Biomassan fastställs som biomassa totalt per replikat inklusive adulter och juveniler.
For example, a certain number of test organisms could be added to control sediment or test sediments, and recovery could be determined after 1 h (7).
Döda maskar bör inte beaktas vid fastställandet av biomassa per replikat.
The total number of living and dead individuals per replicate should be recorded and assessed.
Kontroll av koncentrationer av testkemikalien
The following groups of worms are considered to be dead:
Provtagning
there is no reaction after a gentle mechanical stimulus
Prover för kemisk analys av testkemikalien bör tas åtminstone för den högsta koncentrationen och en lägre koncentration, samt åtminstone i slutet av stabiliseringsfasen (före tillsats av testorganismerna) och i slutet av testet.
there are signs of decomposition (in combination with “a”)
Prover bör tas åtminstone av bulksedimentet och det överliggande vattnet för analys.
number of missing worms
Minst två prover bör tas per matris och behandling för varje provtagningsdag.
Additionally, the living worms can be assigned to one of three groups:
Ett av duplikatproverna får lagras som reserv (för att analyseras t.ex. om den inledande analysen faller utanför det ± 20-procentiga intervallet för den nominella koncentrationen).
large complete worms (adults) without regenerated body regions
När det gäller särskilda kemiska egenskaper, t.ex. om man förväntar sig en snabb nedbrytning av testkemikalien, kan den analytiska tidsplanen vidareutvecklas (t.ex. ökad provtagningsfrekvens, analys av flera koncentrationsnivåer) på grundval av en expertbedömning.
These additional observations are not mandatory, but can be used for additional interpretation of the biological results (for example, a high number of worms assigned to group c may indicate a delay of reproduction or regeneration in a given treatment).
Provens volymer ska registreras.
Additionally, if any differences in appearance (e.g. lesions of the integument, oedematous body sections) are observed between treated and control worms, these should be recorded.
Efter att det överliggande vattnet har avlägsnats bör sedimentet homogeniseras och överföras till en lämplig behållare.
Immediately after counting/assessment, the living worms found in each replicate are transferred to dried, pre-weighed and labelled weigh pans (one per replicate), and killed using a drop of ethanol per weigh pan.
Vikten för det våta sedimentprovet registreras.
The weigh pans are placed in a drying oven at 100 ± 5 °C to dry overnight, after which they are weighed after cooling in a desiccator, and worm dry weight is determined (preferably in g, at least 4 post-decimal digits).
Om det även måste göras en analys av testkemikalien i porvattnet centrifugeras de homogeniserade och vägda sedimentproverna så att porvattnet erhålls.
In addition to the total dry weight, the ash-free dry weight may be determined as described in (49) in order to account for inorganic components originating from ingested sediment present in the alimentary tract of the worms.
Cirka 200 ml vått sediment kan till exempel överföras till 250 ml centrifugeringsbägare.
The biomass is determined as total biomass per replicate including adult and young worms.
Därefter centrifugerar man proverna utan filtrering för att isolera porvattnet, t.ex. vid 10000 ± 600 × g i 30–60 min vid en temperatur som inte överstiger testtemperaturen.
Dead worms should not be taken into account for the determination of biomass per replicate.
Efter centrifugeringen hälls eller pipetteras supernatanten av.
Verification of test chemical concentrations
Man bör då se till att inga sedimentpartiklar tillförs, och att volymen registreras.
Sampling
Den återstående sedimentpelletens vikt registreras.
Samples for chemical analysis of the test chemical should be taken at least of the highest concentration and a lower one, at least at the end of the equilibration phase (before adding the test organisms), and at the end of the test.
Det kan underlätta uppskattningen av massbalansen eller utbytet av testkemikalien i vatten/sediment-systemet om sedimentets torrvikt bestäms för varje provtagningsdag.
At least the bulk sediment and the overlying water should be sampled for analysis.
I vissa fall är det kanske inte möjligt att analysera koncentrationerna i porvattnet på grund av att provet är för litet.
At least two samples should be taken per matrix and treatment on each sampling date.
Om analysen inte görs omedelbart ska alla prover förvaras på lämpligt sätt, exempelvis under de lagringsförhållanden som rekommenderas för minsta möjliga nedbrytning av testkemikalien i fråga (miljöprover lagras t.ex. vanligtvis i mörker vid – 18 °C).
One of the duplicate samples may be stored as a reserve (to be analysed e.g. in the event that initial analysis falls outside the ± 20 % range from the nominal concentration).
Ta reda på de korrekta lagringsförhållandena för testkemikalien – t.ex. varaktighet och förvaringstemperatur, extraktionsmetoder osv. – innan studien inleds.
In case of specific chemical properties, e.g. if rapid degradation of the test chemical is expected, the analytical schedule may be refined (e.g. more frequent sampling, analysis of more concentration levels) on the basis of expert judgment.
Analysmetod
Samples may then be taken on intermediate sampling dates (e.g. on day seven after start of exposure).
Eftersom hela proceduren i huvudsak styrs av den noggrannhet, precision och känslighet som analysmetoden för testkemikalien har ska man kontrollera experimentellt att precisionen och reproducerbarheten för den kemiska analysen, såväl som utbytet av testkemikalien från vatten- och sedimentproverna, är tillfredsställande för den aktuella metoden, åtminstone vid de högsta och lägsta testkoncentrationerna.
The overlying water should be sampled by carefully decanting or siphoning off the overlying water so as to minimise perturbation of the sediment.
Dessutom bör man kontrollera att testkemikalien inte kan påvisas i kontrollkamrarna i koncentrationer som är högre än bestämningsgränsen.
The volume of the samples should be recorded.
Korrigera vid behov de nominella koncentrationerna för utbytet från kvalitetskontrolltopparna (t.ex. när utbytet ligger utanför 80–120 % av den spikade mängden).
After the overlying water has been removed, the sediment should be homogenised and transferred to a suitable container.
Hantera alla prover under hela testet på ett sådant sätt att förorening och förlust minimeras (t.ex. till följd av att testkemikalien adsorberas på provtagningsutrustningen).
The weight of the wet sediment sample is recorded.
Utbytet av testkemikalien, bestämningsgränsen och detektionsgränsen i sedimentet och vattnet bör registreras och rapporteras.
For example, approximately 200 ml of wet sediment can be filled into 250 ml centrifugation beakers.
Alternativt kan reproduktionen (ökningen av antalet maskar) och tillväxten (ökningen av den torra biomassan) också utvärderas.
Thereafter the samples should be centrifuged without filtration to isolate the porewater, e.g. at 10000 ± 600 × g for 30 - 60 min at a temperature not exceeding the temperature used in the test.
I så fall ska en uppskattning av maskarnas torrvikt i början av exponeringen göras, t.ex. genom att man fastställer torrvikten av ett representativt delprov av det parti med synkroniserade maskar som ska användas i testet.
After centrifugation, the supernatant is decanted or pipetted taking care that no sediment particles are introduced, and the volume is recorded.
Även om dödlighet är inte en endpoint i detta test bör dödligheten utvärderas så långt det är möjligt.
The weight of the remaining sediment pellet is recorded.
När dödligheten uppskattas ska antalet maskar som inte reagerar på lätt mekanisk retning eller visar tecken på förruttnelse samt de maskar som saknas anses vara döda.
It may facilitate the estimation of the mass balance or recovery of the test chemical in the water-sediment system, if the sediment dry weight is determined at each sampling date.
Dödligheten bör som minst registreras och beaktas vid tolkningen av testresultaten.
In some cases it might not be possible to analyse concentrations in the pore water as the sample size is too small.
Effektkoncentrationerna uttrycks i mg/kg torrvikt sediment.
Failing immediate analysis, all samples should be stored by an appropriate method, e.g. under the storage conditions recommended for minimum degradation of the particular test chemical (e.g., environmental samples are commonly stored at – 18 °C in the dark).
Om det utbyte av testkemikalien som uppmätts i sedimentet, eller i sedimentet och det överliggande vattnet i början av exponeringen, motsvarar mellan 80 och 120 % av de nominella koncentrationerna kan effektkoncentrationerna (ECx, NOEC, LOEC) uttryckas utifrån de nominella koncentrationerna.
Since the whole procedure is governed essentially by the accuracy, precision and sensitivity of the analytical method used for the test chemical, check experimentally that the precision and reproducibility of the chemical analysis, as well as the recovery of the test chemical from water and sediment samples are satisfactory for the particular method at least at the lowest and highest test concentrations.
ECx-värden för de parametrar som beskrivs i punkt 60 beräknas med hjälp av lämpliga statistiska metoder (t.ex. probit-analys, logistiska funktioner eller Weibull-funktioner, den modifierade Spearman-Karbermetoden eller enkel interpolering).
Also, check that the test chemical is not detectable in the control chambers in concentrations higher than the limit of quantification.
Riktlinjer för statistisk utvärdering finns i (15) och (50).
If necessary, correct the nominal concentrations for the recoveries of quality control spikes (e.g. where recovery is outside 80 - 120 % of spiked amount).
Om en statistisk analys används för att bestämma NOEC/LOEC är det nödvändigt att sammanställa statistiska uppgifter för varje enskilt kärl (enskilda kärl anses utgöra replikat).
Handle all samples throughout the test in such a manner so as to minimise contamination and loss (e.g. resulting from adsorption of the test chemical on the sampling device).
Lämpliga statistiska metoder ska användas.
The recovery of test chemical, the limit of quantification, and the limit of detection in sediment and water should be recorded and reported.
I allmänhet ska negativa effekter av testämnet jämfört med kontrollen undersökas genom en ensidig (mindre) hypotesprövning vid p ≤ 0,05.
The main mandatory response variables of the test to be evaluated statistically are the biomass and the total number of worms per replicate.
Exempel ges i de följande punkterna.
Optionally, reproduction (as increase of worm numbers) and growth (as increase of dry biomass) could be also evaluated.
Vägledning rörande val av lämpliga statistiska metoder ges i (15) och (50).
In this case, an estimate of the dry weight of the worms at start of exposure should be obtained e.g. by measurement of the dry weight of a representative sub-sample of the batch of synchronised worms to be used for the test.
Normalfördelningen av data kan kontrolleras t.ex. med Kolmogorov-Smirnovs test av anpassningsgraden, kvoten mellan variationsvidden och standardavvikelsen (R/s-testet) eller Shapiro-Wilks test (dubbelsidigt, p ≤ 0,05).
Although mortality is not an endpoint of this test, mortalities should be evaluated as far as possible.
Cochrans test, Levenes test eller Bartletts test (dubbelsidigt, p ≤ 0,05) kan användas för att testa varianshomogeniteten.
In order to estimate mortalities, the number of worms that do not react to a gentle mechanical stimulus or showed signs of decomposition, and the missing worms should be considered dead.
Om förutsättningarna för parametriska testförfaranden (normalitet, varianshomogenitet) är uppfyllda, kan ensidiga variansanalyser (ANOVA) och därpå följande flerjämförelsetester utföras.
Mortalities should at least be recorded and considered when interpreting the test results.
Parvisa jämförelser (t.ex.
Effect concentrations should be expressed in mg/kg sediment dry weight.
Dunnetts t-test) eller step-down-grundade trendtester (t.ex.
If the recovery of test chemical measured in the sediment, or in sediment and overlying water at start of exposure, is between 80 and 120 % of the nominal concentrations, the effect concentrations (ECx, NOEC, LOEC) may be expressed based on nominal concentrations.
Williams test) kan användas för att beräkna om det finns betydande skillnader (p ≤ 0,05) mellan kontrollerna och de olika testämneskoncentrationerna.
If recovery deviates from the nominal concentrations by more than ± 20 % of the nominal concentrations, the effect concentrations (ECx, NOEC, LOEC) should be based on the initially measured concentrations at the beginning of the exposure, e.g. taking into account the mass balance of the test chemical in the test system (see paragraph 30).
I annat fall bör icke-parametriska metoder (t.ex.
In these cases, additional information can be obtained from analysis of stock and/or application solutions in order to confirm that the test sediments were prepared correctly.
Bonferronis U-test enligt Holm eller Jonckheere-Terpstras trendtest) användas för att bestämma NOEC och LOEC.
ECx-values for the parameters described in paragraph 60 are calculated using appropriate statistical methods (e.g. probit analysis, logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
Om ett toleranstest (jämförelse av endast ett testkärl och en kontroll) har utförts och de nödvändiga förutsättningarna för parametriska testförfaranden (normalitet, homogenitet) är uppfyllda, kan metriska responser (maskarnas totala antal och biomassan som maskarnas torrvikt) utvärderas genom Students test (t-test).
Guidance on statistical evaluation is given in (15) and (50).
Om dessa krav inte uppfylls kan man använda t-testet med olika varians (Welchs t-test) eller ett icke-parametriskt test, såsom Mann-Whitneys U-test.
To compute the EC50 or any other ECx, the per-treatment means ( X
En del information om den statistiska styrka som konstaterats under hypotesprövningen i ringtestet för metoden finns i tillägg 6.
If a statistical analysis is intended to determine the NOEC/LOEC, per-vessel statistics (individual vessels are considered replicates) are necessary.
Om man inte upptäcker betydande skillnader med dessa tester kan alla kontroll- och lösningsmedelskontrollreplikat sammanföras.
Examples are given in the following paragraphs.
Alla avvikelser från denna metod ska noteras.
If the prerequisites of parametric test procedures (normality, variance homogeneity) are fulfilled, One-way Analysis of Variance (ANOVA) and subsequent multi-comparison tests can be performed.
tillämpat testförfarande (t.ex. statiskt, semistatiskt eller genomflöde),
Pairwise comparisons (e.g. Dunnett's t-test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test item concentrations.
testupplägg, t.ex. testkamrarnas antal och storlek, vattenvolymen per kärl, sedimentets vikt och volym per kärl, (för genomflöde eller semistatiskt förfarande: vattenväxlingshastigheten), eventuell luftning före och under testet, antalet replikat, antalet maskar per replikat, antalet testkoncentrationer, konditioneringstidens längd, stabiliserings- och exponeringstiden samt provtagningsfrekvensen,
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) should be used to determine the NOEC and the LOEC.
sedimentets och det överliggande vattnets djup,
If a limit test (comparison of control and one treatment only) has been performed and the prerequisites of parametric test procedures (normality, homogeneity) are fulfilled, metric responses (total worm number, and biomass as worm dry weight) can be evaluated by the Student test (t-test).
förbehandlings- och spiknings-/appliceringsmetod för testkemikalien,
The unequal-variance t-test (Welch t-test) or a non parametric test, such as the Mann-Whitney-U-test may be used, if these requirements are not fulfilled.
de nominella testkoncentrationerna, uppgifter om provtagning för kemisk analys och de analytiska metoder med vilka koncentrationerna av testkemikalien bestämdes,
Some information on the statistical power found during hypothesis testing in the ring test of the method is given in Appendix 6.
beredningen av testvattnet (om rekonstituerat vatten används) och dess egenskaper (syrehalt, pH, konduktivitet, hårdhet och alla andra utförda mätningar) innan testets början,
To determine significant differences between the controls (control and solvent control), the replicates of each control can be tested as described for the limit test.
detaljerad information om utfodringen, inklusive typ av foder, beredning, mängd och utfodringsprogram,
If these tests do not detect significant differences, all control and solvent control replicates may be pooled.
ljusintensitet och fotoperiod(er),
Otherwise all treatments should be compared with the solvent control.
de metoder som använts för bestämning av alla biologiska parametrar (t.ex. provtagning, inspektion, vägning av testorganismer) och abiotiska faktorer (t.ex. kvalitetsparametrar för vatten och sediment),
The results should be interpreted with caution if there were deviations from this test method, and where measured concentrations of test concentrations occur at levels close to the detection limit of the analytical method used.
volymen och/eller vikten av alla prover för kemisk analys,
Any deviations from this test method must be noted.
detaljerad information om behandlingen av alla prover för kemisk analys, inbegripet detaljer om beredning, lagring, spikningsförfaranden, extraktion och analytiska förfaranden (inklusive precision) för testkemikalien och utbyte av testkemikalien.
The test report should include at least the following information:
vattenkvaliteten i testkärlen (pH, temperatur, halten löst syre, hårdhet, ammoniakkoncentrationerna och alla andra utförda mätningar),
chemical identification data (common name, chemical name, structural formula, CAS number, etc.) including purity and analytical method for quantification of test chemical; source of the test chemical, identity and concentration of any solvent used.
halten av organiskt kol (TOC), förhållandet mellan torrvikt och våtvikt, pH i sedimentet, och eventuella andra gjorda mätningar,
any information available on the physical nature and physical-chemical properties as obtained prior to start of the test, (e.g. water solubility, vapour pressure, partition coefficient in soil (or in sediment if available), log Kow, stability in water, etc.);
det totala antalet maskar och, om detta fastställts, antalet hela och ofullständiga maskar i varje testkammare vid testets slut,
scientific name, source, any pre-treatment, acclimation, culture conditions, etc..
maskarnas torrvikt i varje testkammare vid testets slut och, om detta har uppmätts, torrvikten av ett delprov av maskarna vid testets början,
test procedure used (e.g. static, semi-static or flow-through);
allt onormalt beteende som observerats i jämförelse med kontrollerna (t.ex. undvikande av sedimentet, närvaro eller frånvaro av fekala pelletar),
test design (e.g. number, material and size of test chambers, water volume per vessel, sediment mass and volume per vessel, (for flow-through or semi-static procedures: water volume replacement rate), any aeration used before and during the test, number of replicates, number of worms per replicate at start of exposure, number of test concentrations, length of conditioning, equilibration and exposure periods, sampling frequency);
all observerad dödlighet,
depth of sediment and overlying water;
uppskattningar av toxiska endpoints (t.ex.