natgillin/translations-raw huggingface dataset:
APPLICATION
Normal laboratorieutrustning och
The results of the tests, which would be applied because the pattern of use and disposal of the substance in question indicated a route to the sea, give a first impression of biodegradability in seawater.
250–300 ml BOD-kolvar med glaspropp eller smalhalsade 250 ml kolvar med glaspropp kan användas,
If the result is positive (> 70 % DOC removal; > 60 % ThOD — theoretical oxygen demand), it may be concluded that there is a potential for biodegradation in the marine environment.
flera 2-, 3- och 4-liters kolvar med litergradering för förberedelse av försöket och för tappning av BOD-kolvarna,
However, a negative result does not preclude such a potential but indicates that further study is necessary, for example, using as low a concentration of the test substance as possible.
vattenbad eller rum med konstant temperatur för att hålla kolvarna vid konstant temperatur (± 1 °C) i mörker,
In either case, if a more definitive value for the rate or degree of biodegradation in seawater at a particular site is required, other more complex and sophisticated, and hence more costly, methods would have to be applied.
utrustning för analys av löst syre,
For example, a simulation test could be applied using a concentration of test substance nearer to the likely environmental concentration.
membranfilter, 0,2–0,45 μm (frivilligt),
Also, non-fortified, non-pre-treated seawater taken from the location of interest could be used and primary biodegradation could be followed by specific chemical analysis.
utrustning för särskild analys (frivilligt).
For ultimate biodegradability, 14C-labelled substances would be necessary in order that the rates of the disappearance of soluble organic 14C and the production of 14CO2 at environmentally realistic concentrations could be measured.
Samla in ett havsvattenprov i en väl rengjord behållare och transportera det till laboratoriet, helst inom en eller två dagar efter insamlingen.
CHOICE OF METHODS
Provets temperatur under transporten får inte avsevärt överstiga den temperatur som råder vid testet.
The selection of which method to use depends on a number of factors;
Ange insamlingsplatsen exakt och beskriv den i fråga om förorenings- och näringsstatus.
the following Table is given to help the selection.
Särskilt när det gäller kustvatten eller förorenade vatten bör det i denna beskrivning ingå en räkning av kolonier av heterotrofa mikroorganismer och en bestämning av koncentrationerna för löst nitrat, ammonium och fosfat.
While substances of water solubility below the equivalent of about 5 mg C/l cannot be tested in the Shake Flask Method, at least, in principle, poorly soluble substances may be tested in the Closed Bottle Method.
provets utseende – grumligt osv.,
Table
löst organiskt kol (DOC),
Advantages and disadvantages of the shake flask and closed bottle test
Om DOC-halten i provet befinns vara hög eller om det kan antas att det blankprovets BOD efter 28 dagar kommer att mer än 30 procent högre än för referensämnena rekommenderas att havsvattnet får åldras i cirka en vecka före användning.
METHOD
Låt provet åldras genom lagring under aeroba förhållanden vid testtemperaturen och i mörker eller indirekt ljus.
ADVANTAGES
I ringtestet (3) framkom det inga skillnader mellan nedbrytningspotentialen i åldrade och nyinsamlade havsvattenprov.
DISADVANTAGES
Före användning ska havsvattnet förbehandlas för att avlägsna grova partiklar, exempelvis genom filtrering genom ett nylonfilter eller grovt pappersfilter (inte membran eller GF/C-filter), eller genom sedimentering och dekantering.
SHAKE FLASK
Ange den metod som har använts.
simple apparatus except C analyser
Om man låter vattnet åldras, görs förbehandlingen efter detta.
60 d duration is not a problem
Följande stamlösningar framställs av reagens av analyskvalitet:
no interference from nitrification
Tillsätt 1 ml av var och en av de ovannämnda stamlösningarna per liter förbehandlat havsvatten.
can be adapted for volatile substances
Mättnadskoncentrationen för löst syre som en funktion av salthalt och temperatur kan avläsas i det nomogram som bifogas denna testmetod (tillägg 4).
needs C analyser
Fastställ (eventuellt) antalet kolonibildande heterotrofer i havsvattentestmediet (och helst också i de ursprungliga havsvattenproverna), t.ex. genom platträkning med marin agar.
uses 5-40 mg DOC/1, could be inhibitory
Beredning av testkolvarna
DOC determination is difficult at low concentrations in seawater (chloride effect)
Utför alla nödvändiga modifieringar inbegripet åldrande och förbehandling av havsvattnet vid den valda testtemperaturen mellan 15–20 °C, och se till att alla glaskärl är rena men inte sterila.
DOC sometimes high in seawater
Förbered grupper av BOD-kolvar för bestämningen av BOD för test- och referensämnena i samtidiga försöksserier.
CLOSED BOTTLE
Utför alla analyser på två kolvar (blankprov, referens- och testämnen), dvs. bered två kolvar för varje bestämning.
simple apparatus
Utför analyser åtminstone på dag 0, 5, 15 och 28 (fyra bestämningar).
simple end determination
För syreanalyser måste man för fyra bestämningar ha sammanlagt 3 × 2 × 4 = 24 kolvar (blankprov, referens- och testämne), och därmed ca 8 liter testmedium (för en testämneskoncentration).
could be difficult to maintain air-tightness of bottles
Se till att salthalten i havsvattenmediet inte ändras avsevärt om stamlösningar av test- och/eller referensämnen används.
wall growth of bacteria can lead to false values
Välj koncentrationer för test- och referensämnen genom att beakta
blank O2 uptake values can be high especially after 28 days;
lösligheten för syre i havsvatten vid den rådande testtemperaturen och salthalten (se bifogat nomogram – tillägg 4),
could be overcome by ageing the seawater
testämnets förväntade biologiska nedbrytbarhet.
possible interference from O2 uptake by nitrification
Vid 15 °C och 20 °C och en salthalt på 32 promille (vatten från öppet hav) är lösligheten för syre ca 8,1 respektive 7,4 mg/l.
SHAKE FLASK METHOD
Syreförbrukningen i havsvattnet i sig (respirationen i blankprovet) kan vara 2 mg O2/l eller mer om havsvattnet inte har fått åldras.
This method is a seawater variant of the Modified OECD Screening Test described in Chapter C.4B of this Annex (2).
För att garantera att en betydande koncentration av syre återstår efter oxidering av testämnet använder man en startkoncentration för testämnet på ca 2–3 mg/l (beroende på ThOD) för de ämnen som förväntas brytas ned helt under testbetingelserna (t.ex. referensämnen).
It was finalised as a result of a ring test organized for the European Commission (EC) by the Danish Water Quality Institute (3).
Testa mindre nedbrytbara ämnen vid högre koncentrationer, upp till ca 10 mg/l, under förutsättning att det inte förekommer några toxiska verkningar.
In common with the accompanying marine Closed Bottle Method, the results from this test are not to be taken as indicators of ready biodegradability, but are to be used specifically for obtaining information about the biodegadability of substances in marine environments.
Det kan vara fördelaktigt att köra parallella test med en låg (cirka 2 mg/l) och en hög (cirka 10 mg/l) koncentration av testämnet.
The solution of the test substance in the test medium is incubated under agitation in the dark or in diffuse light under aerobic conditions at a fixed temperature (controlled to ± 2 °C) which will normally be within the range 15-20 °C.
2 mg per liter lätt nedbrytbart ämne, t.ex. någon av de referensämnen som anges,
In cases where the objective of the study is to simulate environmental situations, tests may be carried out beyond this normal temperature range.
x mg per liter testämne (x är vanligtvis 2),
The recommended maximum test duration is about 60 days.
2 mg per liter lätt nedbrytbart ämne plus x mg per liter testämne.
Degradation is followed by DOC measurements (ultimate degradation) and, in some cases, by specific analysis (primary degradation).
Om man använder sig av möjligheten att använda särskilda analyser ska ett fysikalisk-kemiskt experiment utföras för att kontrollera huruvida testämnet elimineras genom abiotiska mekanismer, t.ex. hydrolys eller adsorption.
In order to know whether the test may be applied to a particular substance, some of its properties must be known.
Ett fysikalisk-kemiskt kontrolltest kan utföras genom tillsats av kvicksilver(II)klorid (HgCl2) [11] (50–100 mg/l) i två kolvar med testämne i syfte att hejda den mikrobiella aktiviteten.
The organic carbon content of the substance must be established, its volatility must be such that significant losses do not occur during the course of the test and its solubility in water should be greater than the equivalent of 25-40 mg C/l.
En betydande minskning av det särskilda ämnets koncentration under testets gång visar på abiotiska elimineringsmekanismer.
Also, the test substance should not significantly adsorb onto glass surfaces.
Antal BOD-kolvar i en typisk testomgång
Information on the purity or the relative proportions of major components of the test substance is required in order that the results obtained can be interpreted, especially when the result lies close to the “pass” level.
I en typisk testomgång används följande antal kolvar:
Information on the toxicity of the test substance to bacteria, for example as measured in short-term respiration rate tests (4), may be useful when selecting appropriate test concentrations and may be essential for the correct interpretation of low biodegradation values.
minst 8 som innehåller testämne,
However, such information is not always sufficient for interpreting results obtained in the biodegradation test and the procedure described in paragraph 18 is more suitable.
minst 8 som endast innehåller näringsmättat havsvatten,
Suitable reference substances must be used to check the microbial activity of the seawater sample.
minst 8 som innehåller referensämne, och, vid behov,
Sodium benzoate, sodium acetate and aniline are examples of substances which may be used for this purpose.
6 kolvar som innehåller test- och referensämnen (toxicitetskontroll).
The reference substances must be degraded within a reasonably short time span, otherwise it is recommended that the test be repeated using another seawater sample.
Tappa efter beredningen omedelbart upp varje lösning med en hävert från den nedersta fjärdedelen (inte från botten) av de stora kolvarna för att fylla respektive grupp med BOD-kolvar.
In the EC ring test where seawater samples were taken at different locations and at different times of the year (3), the lag phase (tL) and time to achieve 50 per cent degradation (t50), excluding the lag phase, were 1 to 4 days and 1 to 7 days respectively for sodium benzoate.
Analysera omedelbart nollkontrollerna (tid: noll) med avseende på löst syre (punkt 33) eller bevara dem för senare kemisk analys genom utfällning med MnCl2 (mangan(II)klorid) och NaOH (natriumhydroxid).
For aniline the tL ranged from 0 to 10 days, whilst the t50 ranged from 1 to 10 days.
Inkubera återstående parallella BOD-kolvar vid testtemperaturen (15–20 °C), förvara dem mörkt och avlägsna dem från inkubationsområdet vid lämpliga tidsintervall (t.ex. efter 5, 15 och 28 dagar som ett minimum) och analysera dem med avseende på löst syre (punkt 33).
REPRODUCIBILITY AND SENSITIVITY OF THE METHOD
Membranfiltrera (0,2–0,45 μm) eller centrifugera i 15 minuter proven för särskilda analyser (frivilligt).
The reproducibility of the method was established in the ring test (3).
Lagra i upp till 48 timmar vid 2–4 °C eller under längre tid vid -18 °C om de inte analyseras omedelbart (om det är känt att testämnet förblir oförändrat, surgör innehållet till pH 2 före lagring).
The lowest concentration of test substance, for which this method can be used with DOC analysis, is largely determined by the detection limit of the organic carbon analysis (about 0,5 mg C/l, at present) and the concentration of dissolved organic carbon in the seawater used (usually of the order of 3-5 mg/l for water from the open sea).
Bestämning av löst syre
The background concentration of DOC should not exceed about 20 % of the total DOC concentration after addition of test substance.
Bestäm koncentrationen av det upplösta syret med hjälp av kemiska eller elektrokemiska metoder som erkänts på nationell eller internationell nivå.
If this is not feasible, the background concentration of DOC may sometimes be reduced by ageing the seawater prior to testing.
Behandling av resultaten
If the method is used with specific chemical analysis only (by which primary degradation is measured), the investigator must document, by supplying additional information, whether ultimate degradability can be expected.
Registrera analysresultaten på de bifogade resultatformulären (tillägg 5).
This additional information may consist of the results from other tests for ready or inherent biodegradability.
Beräkna BOD som skillnaden mellan syreförlusten i ett blankprov och en testämneslösning under testbetingelserna.
Normal laboratory apparatus and:
Dividera nettosyreförlusten med ämnets koncentration (w/v) för att uttrycka BOD som mg BOD/mg testämne.
a.
Nedbrytningen definieras som förhållandet mellan den biokemiska syreförbrukningen och antingen, företrädesvis, den teoretiska syreförbrukningen (ThOD) eller den kemiska syreförbrukningen (COD) uttryckt i procent (se punkt 36).
b.
ThOD teoretisk syreförbrukning (beräkning, tillägg 3)
c.
Ibland får man olika resultat med de två beräkningsmetoderna (procent av ThOD eller procent av COD).
Membrane filtration apparatus, or centrifuge;
Det bästa är att använda ThOD, eftersom en del ämnen inte oxideras helt i COD-testet.
d.
Illustrera nedbrytningstestets förlopp grafiskt i ett diagram (se exempel i avsnittet ’Resultatens giltighet och deras tolkning’.
Membrane filters, 0,2-0,45 μm;
Om det finns tillräckliga data bör man utifrån bionedbrytningskurvan beräkna lagfasen (tL) och den tid som krävs för att nå 50 procents eliminering från lagfasens slut (t50).
e.
Om en särskild analys har utförts (valfritt) ska procentandelen primär nedbrytning anges som procentandelen av det särskilda ämne som har eliminerats inom testperioden (korrigerat för analytiska blankprov).
Carbon analyser;
beskrivning av provtagningsstället och dess läge:
f.
beskrivning av provet (datum för provtagning, djup, utseende, temperatur, salthalt, DOC (frivillig uppgift), tid mellan provtagningen och användning i testet),
Equipment for specific analysis (optional).
metod som används för bestämning av COD (om detta utförts),
Seawater
metod som används för syremätningar,
Collect a sample of seawater in a thoroughly cleansed container and transport to the laboratory, preferably within one or two days of collection.
dispergeringsförfarande för ämnen som är svårlösliga under försöksbetingelserna,
During transport, do not allow the temperature of the sample to exceed significantly the temperature to be used in the test.
metod som används för att fastställa antalet heterotrofer i havsvattnet (platträkning eller alternativt förfarande),
Identify the sampling location precisely and describe it in terms of its pollutional and nutrient status.
metod för bestämning av DOC i havsvatten (frivillig uppgift),
Especially for coastal waters, include in this characterization a heterotrophic microbial colony count and the determination of the concentrations of dissolved nitrate, ammonium and phosphate.
andra metoder som används för att karakterisera havsvattnet (mätning av ATP-halten osv.).
Provide the following information for the seawater sample itself:
analysdata som rapporteras på ett resultatformulär (se bifogat exempel, tillägg 5),
date of collection;
nedbrytningstestets förlopp representerat grafiskt i ett diagram som visar lagfasen (tL), lutningen och den tid det tar (från lagfasens slut) för att nå 50 procent av den slutliga syreupptagningen som orsakas av oxidering av testämnet (t50).
depth of collection;
Lagfasen kan uppskattas grafiskt såsom visas i den bifogade figuren, eller kan lämpligen antas vara den tid som krävs för 10 procents nedbrytning,
appearance of sample — turbid, etc.;
procent nedbrytning mätt efter 28 dagar.
temperature at the time of collection;
Respirationen i blankprovet bör inte överstiga 30 procent av syrehalten i testkolven.
salinity;
Om det inte är möjligt att uppfylla detta kriterium med nyligen insamlat havsvatten måste havsvattnet åldras (stabiliseras) före användning.
delay between collection and use in the test.
Man bör beakta möjligheten att ämnen som innehåller kväve kan påverka resultaten.
If the DOC content of the seawater sample is found to be high (paragraph 8), it is recommended that the seawater be aged for about a week prior to use.
Resultat som erhållits med referensämnena natriumbensoat och anilin bör vara jämförbara med de resultat som uppnåddes i ringtestet (3) (punkt 9).
Age by storing under aerobic conditions at the test temperature and in the dark or in diffuse light.
Testämnet kan anses vara bakteriehämmande (vid den koncentration som används) om BOD för blandningen av referens- och testämnen är mindre än summan av BOD för de separata lösningarna av dessa två ämnen.
If necessary, maintain aerobic conditions by gentle aeration.
På grund av de relativt höga testkoncentrationer som används jämfört med de koncentrationer som förekommer i de flesta naturliga system (och följaktligen ett ogynnsamt förhållande mellan testämnets och andra kolkällors koncentrationer) bör metoden betraktas som ett preliminärt test som kan användas för att ge en antydan om huruvida ett ämne är lätt biologiskt nedbrytbart.
During ageing, the content of easily degradable organic material is reduced.
Ett lågt resultat behöver därför inte nödvändigtvis betyda att testämnet inte är bionedbrytbart i marina miljöer, men visar att det krävs mer arbete för att detta förhållande ska kunna fastställas.
In the ring test (3), no difference was revealed between the degradation potential of aged and freshly collected seawater samples.
Ett exempel på ett teoretiskt nedbrytningsförsök som illustrerar ett möjligt sätt att uppskatta värdena för tL (lagfasens längd) och t50, det tidsintervall (med början vid tL) som krävs för att uppnå 50 % av den slutliga syreupptagningen orsakad av oxidering av testämnet, återges nedan:
Prior to use, pre-treat the seawater to remove coarse particles, e.g. by filtration through a nylon filter or coarse paper filter (not membrane or GF-C filters), or by sedimentation and decanting.
Kapitel C.4-B i denna bilaga:
The procedure used must be reported.
Bestämning av ’lätt’ bionedbrytbarhet, del III: modifierat OECD-screeningtest
Carry out pre-treatment after ageing, if used.
Biologisk nedbrytbarhet – Aktiverat slam – respirationshämningstest.
Stock solutions for mineral nutrients
Kapitel C.4-E i denna bilaga:
Prepare the following stock solutions, using analytical grade reagents:
Bestämning av organiskt kol i havsvatten
Potassium dihydrogen orthophosphate, KH2PO4
För bestämning av det organiska kolet i ett vattenprov oxideras de organiska föreningarna i provet till koldioxid, i allmänhet med hjälp av en av följande tre tekniker:
8,50 g
våtoxidation av persulfat/UV-strålning,
Dipotassium hydrogen orthophosphate, K2HPO4
våtoxidation av persulfat/förhöjd temperatur (116–130 °C),
21,75 g
förbränning.
Disodium hydrogen orthophosphate dihydrate, Na2HPO4·2H2O
Alternativt kan CO2 reduceras till metan, som kvantifieras med en flamjoniseringsdetektor (FID).
33,30 g
Persulfat/UV-metoden används vanligen för analys av ’rent’ vatten med låg halt av partiklar.
Ammonium chloride, NH4Cl
De senare två metoderna kan användas för de flesta typer av vattenprover.
0,50 g
Persulfat/förhöjd temperatur-oxidation är den mest lämpliga metoden för prov med låga nivåer och förbränningstekniken kan tillämpas på prov som har en halt av icke-flyktigt organiskt kol (NVOC) som ligger långt över 1 mg C/l.
Dissolve and make up to 1 litre with distilled water.
Störningar
Calcium chloride, CaCl2
Alla tre metoderna är beroende av att man eliminerar eller kompenserar för oorganiskt kol (IC) som finns i provet.
27,50 g
Avgasning av koldioxid från det surgjorda provet är den vanligaste metoden för att eliminera det oorganiska kolet, även om detta också leder till en förlust av flyktiga organiska föreningar (1).
Magnesium sulphate heptahydrate, MgSO4·7H2O
En fullständig eliminering eller kompensation för oorganiskt kol måste garanteras för varje provmatris, och det flyktiga organiska kolet (VOC) måste bestämmas utöver NVOC beroende på provtypen.
Iron (III) chloride hexahydrate, FeCl3·6H2O
Genom användning av ett oxidationsreagens som modifierats genom tillsats av kvicksilver(II)nitrat kan man dock avlägsna denna störning.
0,25 g
Det rekommenderas att den högsta tillåtliga provvolymen används för att utvärdera varje typ av kloridhaltigt prov.
Precipitation in solution (d) may be prevented by adding one drop of concentrated HCl or 0,4 g ethylenediaminetetra-acetic acid (EDTA, disodium salt) per litre.
Höga saltkoncentrationer i prov som analyserats med förbränningsmetoden kan orsaka saltbeläggning på katalysatorn och kraftig korrosion av förbränningsröret.
If a precipitate forms in a stock solution, replace it with freshly made solution.
Åtgärder bör vidtas enligt tillverkarens anvisningar.
Preparation of test medium
Mycket grumliga prover och prover som innehåller partiklar kan oxideras ofullständigt när man använder persulfat/UV-metoden.
Add 1 ml of each of the above stock solutions per litre of pre-treated seawater.
Exempel på en lämplig metod
Do not add a specific inoculum in addition to the micro-organisms already present in the seawater.
Icke-flyktigt organiskt kol bestäms genom oxidation med persulfat/UV-strålning och därpå följande kvantifiering av utvecklad CO2 med hjälp av icke-dispersiv infraröd spektroskopi.
Determine (optionally) the number of colony-forming heterotrophs in the seawater test medium (and preferably also in the original seawater samples) e.g. by plate count, using marine agar.
Oxidationsreagenset modifieras i enlighet med de förslag som anges i (2) på de sätt som beskrivs i tillverkarens manual:
This is particularly desirable for samples from coastal or polluted sites.
8,2 g HgCl2 och 9,6 g Hg(NO3)2 · H2O löses upp i flera hundra milliliter reagensvatten med låg kolhalt.
Check the heterotrophic microbial activity in the seawater by performing a test with a reference substance.
20 g K2S2O8 löses upp i den kvicksilverhaltiga saltlösningen.
Preparation of flasks
5 ml HNO3 (konc.) tillsätts till blandningen.
Ensure that all glassware is scrupulously clean, not necessarily sterile, (e.g. using alcoholic hydrochloric acid), rinsed and dried before use in order to avoid contamination with residues from previous tests.
reagenset späds ut till 1000 ml.
The flasks must also be cleaned before first use.
Störningen från klorid avlägsnas om man använder 40 μl provvolym för 10 procent klorid och 200 μl provvolym för 1,9 procent klorid.
Dissolve the test substances in the test medium — they may be conveniently added via a concentrated stock solution — to give the desired starting concentrations of normally 5-40 mg DOC/l.
RESULTATFORMULÄR
Test the reference substance normally at a starting concentration corresponding to 20 mg DOC/l.
LABORATORIUM:
If stock solutions of test and/or reference substances are used, ensure that the salinity of the seawater medium is not greatly altered.
DATUM FÖR INLEDNING AV TESTET:
If toxic effects can be expected or cannot be ruled out, it may be advisable to include an inhibition experiment, in duplicate, in the test design.
TESTÄMNE:
Add the test and reference substances to the same vessel, the concentration of the reference substance being normally the same as in the control test (i.e. 20 mg DOC/l) in order to allow comparison.
Namn:
Dispense adequate amounts of test solutions into the Erlenmeyer flasks (up to about half the flask volume is a convenient amount) and subsequently provide each flask with a loose cover (e.g. aluminium foil) that makes gas exchange between the flask and the surrounding air possible.
Stamlösningens koncentration:
(Cotton wool plugs are unsuitable if DOC analysis is used).
mg/l som ämne
Place the vessels on the shaker and shake continuously at a gentle rate (e.g. 100 rpm) throughout the test.
Startkoncentration i mediet, t0: