natgillin/translations-raw huggingface dataset:
However, absence of overt morphological changes or evidence of developmental delay warrants histological analyses.
I vissa klassiska fenotyper förekommer försening eller avsaknad av utvecklingen av framben trots normal eller accelererad utveckling av vävnaderna i bakben och svans, eller en tidig resorption av gälarna i förhållande till omvandlingen av bakben och svans.
All test tanks should be checked daily for dead tadpoles and the numbers recorded for each tank.
Histopatologi
The date, concentration and tank number for any observation of mortality should be recorded.
Om kemikalien inte orsakar uppenbar toxicitet och inte accelererar utvecklingen eller orsakar asynkron utveckling, utvärderas sköldkörtelns histopatologi med hjälp av lämpliga vägledningsdokument (9).
Dead animals should be removed from the test tank as soon as observed.
Utvecklingsstörningar i frånvaron av toxicitet är ett tydligt tecken på sköldkörtelhämmande aktivitet, men analysen av utvecklingsstadier är mindre känslig och mindre diagnostisk än en histopatologisk undersökning av sköldkörteln.
Mortality rates exceeding 10 % may indicate inappropriate test conditions or toxic effects of the test chemical.
Därför är det i detta fall nödvändigt att utföra histopatologiska analyser av sköldkörteln.
Additional Observations
Effekter på sköldkörtelns histologi har påvisats i frånvaro av effekter på utvecklingen.
Cases of abnormal behaviour and grossly visible malformations and lesions should be recorded.
Om det förekommer förändringar av sköldkörtelns histopatologi anses kemikalien vara sköldkörtelaktiv.
The date, concentration and tank number for any observation of abnormal behaviour, gross malformations or lesions should be recorded.
Om inga förseningar i utvecklingen eller sjukliga histologiska förändringar i sköldkörteln observeras anses kemikalien vara sköldkörtelinaktiv.
Normal behaviour is characterised by the tadpoles being suspended in the water column with tail elevated above the head, regular rhythmic tail fin beating, periodic surfacing, operculating, and being responsive to stimulus.
Den logiska grunden för detta beslut är att sköldkörteln påverkas av TSH (tyreoideastimulerande hormon), och alla kemikalier som har tillräckligt stor effekt på cirkulerande sköldkörtelhormon för att ändra utsöndringen av TSH leder till histopatologiska förändringar i sköldkörteln.
Abnormal behaviour would include, for example, floating on the surface, lying on the bottom of the tank, inverted or irregular swimming, lack of surfacing activity, and being nonresponsive to stimulus.
Olika verkningssätt och -mekanismer kan ändra cirkulerande sköldkörtelhormon.
In addition, gross differences in food consumption between treatments should be recorded.
Nivån av sköldkörtelhormon vittnar om en sköldkörtelrelaterad effekt, men detta är alltså inte tillräckligt för att avgöra vilka verkningssätt eller verkningsmekanismer som står i samband med responsen.
Gross malformations and lesions could include morphological abnormalities (e.g. limb deformities), hemorrhagic lesions, bacterial or fungal infections, to name a few.
Eftersom man inte kan använda sig av grundläggande statistiska metoder när det gäller denna endpoint kan man fastställa att en effekt inträffar som är förknippad med exponeringen för kemikalien genom ett expertutlåtande från en patolog.
These determinations are qualitative and should be considered akin to clinical signs of disease/stress and made in comparison to control animals.
Fördröjd utveckling (bestäms på basis av utvecklingsstadium, bakbenslängd, kroppsvikt och längd från nos till kloak)
If the occurrence or rate of occurrence is greater in exposed tanks than in the controls, then these should be considered as evidence for overt toxicity.
Fördröjd utveckling kan inträffa på grund av sköldkörtelhämmande mekanismer och på grund av indirekt toxicitet.
Data Collection
Små förseningar i utvecklingen tillsammans med tydliga tecken på toxicitet tyder sannolikt på icke-specifika toxiska effekter.
All data should be collected using electronic or manual systems which conform to good laboratory practices (GLP).
Utvärderingen av toxicitet som inte påverkar sköldkörteln är en viktig del av testet som minskar sannolikheten för falskt positiva resultat.
Characterisation of the test chemical:
En överdrivet hög dödlighet är ett tydligt tecken på närvaron av andra toxiska mekanismer.
physical-chemical properties;
På samma sätt tyder små minskningar i tillväxten, som bestämts av våtvikten och/eller längden från nos till kloak, också på toxicitet som inte påverkar sköldkörteln.
information on stability and biodegradability;
Tydliga ökningar i tillväxten observeras ofta med kemikalier som påverkar den normala utvecklingen negativt.
Chemical information and data:
Följaktligen tyder förekomsten av djur med större storlek inte nödvändigtvis på toxicitet som inte påverkar sköldkörteln.
method and frequency of preparation of dilutions.
Man bör dock inte enbart förlita sig på tillväxten för att fastställa sköldkörteltoxicitet.
Test chemical information includes actual and nominal concentrations of the test chemical, and in some cases, non-parent chemical, as appropriate.
Man bör hellre använda tillväxten, i kombination med utvecklingsstadier och sköldkörtelns histopatologi, för att fastställa sköldkörtelaktivitet.
Test chemical measurements may be required for stock solutions as well as for test solutions;
Andra endpoints bör också beaktas för att fastställa tydlig toxicitet, inklusive ödem, blödande sår, letargi, minskat foderintag, erratiskt/förändrat simbeteende, etc. Om alla testkoncentrationer uppvisar tecken på uppenbar toxicitet bör testkemikalien utvärderas på nytt vid lägre testkoncentrationer innan man fastställer om kemikalien är potentiellt sköldkörtelaktiv eller sköldkörtelinaktiv.
Solvent (if other than water):
I frånvaro av andra tecken på uppenbar toxicitet tyder statistiskt signifikanta förseningar i utvecklingen på att kemikalien är sköldkörtelaktiv (antagonistisk).
justification of the choice of solvent, and characterisation of solvent (nature, concentration used);
I avsaknad av tydliga statistiska responser kan detta resultat kompletteras med resultat från sköldkörtelns histopatologi.
Operational records:
Statistiska analyser
these consist of observations pertaining to the functioning of the test system and the supporting environment and infrastructure.
För alla kontinuerliga kvantitativa endpoints (bakbenslängd, längd från nos till kloak, våtvikt) som är förenliga med en monoton dos-respons bör Jonckheere-Terpstras test tillämpas på step-down-grund för att fastställa en betydande behandlingseffekt.
Typical records include:
För alla kontinuerliga kvantitativa endpoints som inte är förenliga med en monoton dos-respons bör erhållna data bedömas med avseende på normalitet (helst med hjälp av Shapiro-Wilks test eller Anderson-Darlings test) och på varianshomogenitet (helst med hjälp av Levenes test).
ambient temperature, test temperature, photoperiod, status of critical components of the exposure system (e.g. pumps, cycle counters, pressures), flow rates, water levels, stock bottle changes, and feeding records.
Båda testerna utförs på residualerna från en variansanalys (ANOVA).
General water quality parameters include:
Expertbedömning kan användas i stället för dessa formella tester med avseende på normalitet och varianshomogenitet, även om de formella testerna är att föredra.
pH, DO, conductivity, total iodine, alkalinity, and hardness;
Om resultaten visar på icke-normalitet eller variansheterogenitet bör man försöka göra en variansstabiliserande omvandling.
Deviations from the test method:
Om erhållna data (kanske efter en omvandling) är normalfördelade med homogen varians kan en signifikant behandlingseffekt fastställas med hjälp av Dunnetts test.
this information should include any information or narrative descriptions of deviations from the test method;
Om erhållna data (kanske efter en omvandling) är normalfördelade med heterogen varians kan en signifikant behandlingseffekt fastställas med hjälp av Tamhane-Dunnetts test, även kallat T3, eller Mann-Whitney-Wilcoxons U-test.
Biological observations and data:
Om det inte går att finna någon normaliserande omvandling kan en signifikant behandlingseffekt fastställas med hjälp av Mann-Whitney-Wilcoxons U-test med en Bonferroni-Holm-justering av p-värdena.
these include daily observations of mortality, food consumption, abnormal swimming behaviour, lethargy, loss of equilibrium, malformations, lesions, etc.
Dunnetts test tillämpas oberoende av eventuella ANOVA (F-test), och Mann-Whitneys test tillämpas oberoende av eventuella övergripande Kruskall-Wallis test.
Data reporting
Flödesschema över statistiska metoder för kontinuerliga responsdata.
Appendix 2 contains daily data collection spreadsheets that can be used as guidance for raw data entry and for calculations of summary statistics.
Särskilda överväganden för dataanalys
Additionally, reporting tables are provided that are convenient for communicating summaries of endpoint data.
Användning av behandlingsnivåer som inte gått förlorade
Reporting tables for histological assessments can be found in Appendix 2.
Flera faktorer ska beaktas när man fastställer huruvida ett replikat eller en hel behandling uppvisar uppenbar toxicitet och bör avlägsnas ur analysen.
Performance Criteria and Test Acceptability/Validity
Uppenbar toxicitet definieras som > 2 dödsfall i varje enskilt replikat som endast kan förklaras av toxicitet snarare än av tekniska fel.
Generally, gross deviations from the test method will result in unacceptable data for interpretation or reporting.
Andra tecken på uppenbar toxicitet omfattar blödning, onormala beteenden, onormala simmönster, anorexi och andra kliniska tecken på sjukdom.
Therefore, the following criteria in Table 4 have been developed as guidance for determining the quality of the test performed, the general performance of the control organisms.
För subletala tecken på toxicitet kan det bli nödvändigt att göra kvalitativa utvärderingar, och dessa bör alltid göras i jämförelse med kontrollgruppen med rent vatten.
Table 4
Kontroller med lösningsmedel
Performance criteria for the AMA
Användningen av lösningsmedel bör endast ses som en sista utväg när alla andra alternativ för kemiska bärämnen har övervägts.
Criterion
Om lösningsmedel används ska man samtidigt ha en kontroll med rent vatten.
Acceptable limits
I slutet av testet bör en utvärdering göras av lösningsmedlets eventuella effekter.
Test concentrations
Detta görs genom en statistisk jämförelse av kontrollgruppen med lösningsmedel och kontrollgruppen med rent vatten.
Maintained at ≤ 20 % CV (variability of measured test concentration) over the 21 day test
De mest relevanta endpoints som ska beaktas i denna analys är utvecklingsstadier, längd från nos till kloak och våtvikt, eftersom dessa kan påverkas av toxicitet som inte påverkar sköldkörteln.
Mortality in controls
Om statistiskt signifikanta skillnader med avseende på dessa endpoints påvisas mellan kontrollen med rent vatten och kontrollgruppen med lösningsmedel ska studiens endpoints för responsmåtten fastställas med hjälp av kontrollen med rent vatten.
≤ 10 % — mortality in any one replicate in the controls should not exceed 2 tadpoles
Om det inte finns några statistiskt signifikanta skillnader mellan kontrollen med rent vatten och kontrollerna med lösningsmedel för alla uppmätta responsvariabler ska studiens endpoints för responsmåtten fastställas med hjälp av de sammanlagda kontrollerna med utspädningsvatten och lösningsmedel.
Minimum median developmental stage of controls at end of test
Behandlingsgrupper som uppnår utvecklingsstadium 60 och däröver
Spread of development stage in control group
En metod är att endast beakta grodyngel som är i utvecklingsstadium 60 eller tidigare för statistiska analyser av våtvikt och/eller längd från nos till kloak.
The 10th and the 90th percentile of the development stage distribution should not differ by more than 4 stages
Denna metod anses ge tillräckligt tillförlitlig information om de möjliga tillväxteffekternas allvarlighetsgrad förutsatt att bara en liten andel av försöksdjuren avlägsnas från analyserna (≤ 20 %).
Dissolved Oxygen
Om ett ökat antal grodyngel utvecklas bortom stadium 60 (≥ 20 %) i en eller flera nominella koncentrationer bör en tvåfaktors ANOVA med en nästlad (hierarkisk) variansstruktur utföras för samtliga grodyngel för att bedöma tillväxteffekter som beror på kemiska behandlingar, samtidigt som man tar hänsyn till den effekt de senare utvecklingsstadierna har på tillväxten.
≥ 40 % air saturation [8]
Tillägg 3 innehåller vägledning om tvåfaktors variansanalys av vikt och längd.
pH should be maintained between 6,5-8,5.
Nr 77.
The inter-replicate/inter-treatment differentials should not exceed 0,5.
Paris.
± 1 °C — the inter-replicate/inter-treatment differentials should not exceed 0,5 °C
E 1439-98.
Test concentrations without overt toxicity
Lofts, B. (red.), Academic Press, New York, s. 467–599.
Replicate performance
Försöksbetingelser för det 21 dagar långa testet på groddjursmetamorfos
≤ 2 replicates across the test can be compromised
Försöksdjur
Special conditions for use of a solvent
Yngel av Xenopus laevis
If a carrier solvent is used, both a solvent control and clean water control should be used and results reported
Inledande yngelstadium
See below for more information
Exponeringstid
Special conditions for static renewal system
21 dagar
Representative chemical analyses before and after renewal should be reported
Urvalskriterier, yngel
Ammonia levels should be measured immediately prior to renewal
Utvecklingsstadium och total längd (frivilligt)
All water quality parameters listed in Table 1of Appendix 1 should be measured immediately prior to renewal
Testkoncentrationer
Renewal period should not exceed 72 hours
Minst tre koncentrationer som spänner över ungefär en storleksordning
Appropriate feeding schedule (50 % of the daily food ration of commercial tadpole feed)
Exponeringssystem
Test Validity
Genomflöde (föredras) och/eller statisk förnyelse
The following requirements should be met to deem a test acceptable/valid:
Testsystemets flödeshastighet
Valid experiment in a test determined to be negative for thyroid activity:
25 ml/min (fullständig förnyelse av volymen ungefär per 2,7 timmar)
For any given treatment (including controls), mortality cannot exceed 10 %.
Primära endpoints/Bestämningsdag
For any given replicate, mortality cannot exceed three tadpoles, otherwise the replicate is considered compromised
Dag 7 och 21
At least two treatment levels, with all four uncompromised replicates, should be available for analysis
Sköldkörtelns histologi
At least two treatment levels without overt toxicity should be available for analysis
Utspädningsvatten/Laboratoriekontroll
Valid experiment in a test determined to be positive for thyroid activity:
Avklorerat kranvatten (kolfiltrerat) eller motsvarande laboratoriekälla
Mortality of no more than two tadpoles/replicate in the control group can occur
Yngeltäthet
Decision logic for the conduct of the AMA
20 larver per testkärl (5/l)
Decision logic was developed for the AMA to provide logical assistance in the conduct and interpretation of the results of the bioassay (see flow chart in Figure 3).
Testlösning/Testkärl
The decision logic, in essence, weighs the endpoints in that advanced development, asynchronous development and thyroid histopathology are weighed heavily, while delayed development, snout-vent length and wet body weight, parameters that can potentially be affected by general toxicity, are weighed less heavily.
4–10 l (10–15 cm minsta vattendjup)/Testkärl av glas eller rostfritt stål (t.ex.
Advanced development (determined using developmental stage, SVL and HLL)
22,5 cm × 14 cm × 16,5 cm)
Advanced development is only known to occur through effects which are thyroid hormone related.
Replikation
These may be peripheral tissue effects such as direct interaction with the thyroid hormone receptor (such as with T4) or effects which alter circulating thyroid hormone levels.
Fyra replikattestkärl per testkoncentration och kontroll
In either case, this is considered sufficient evidence to indicate that the chemical has thyroid activity.
Godtagbar dödlighetsfrekvens i kontrollerna
Advanced development is evaluated in one of two ways.
≤ 10 % per replikattestkärl
First, the general developmental stage can be evaluated using the standardised approach detailed in Nieuwkoop and Faber (8).
Sköldkörtelfixering
Second, specific morphological features may be quantified, such as hind limb length, at both days 7 and 21, which is positively associated with agonistic effects on the thyroid hormone receptor.
Antal fixerade
If statistically significant advances in development or hind limb length occur, then the test indicates that the chemical is thyroid active.
Samtliga grodyngel (fem per replikat utvärderas initialt)
The evaluation of test animals for the presence of accelerated development relative to the control population will be based on results of statistical analyses performed for the following four endpoints:
Område
hind limb length (normalised by SVL) on study day 7
Huvudet eller hela kroppen
hind limb length (normalised by SVL) on study day 21
Fixermedel
developmental stage on study day 7
Davidsons fixativ
developmental stage on study day 21.
Foder
Statistical analyses of hind limb length should be performed based on measurements of the length of the left hind limb.
Sera Micron® eller motsvarande
Acceleration of development is then indicated by a significant increase of mean hind limb length (normalised) in a chemical treatment group compared to the control group on study day 7 and/or study day 21 (see Appendix 3).
Belysning
Statistical analyses of developmental stage should be performed based on determination of developmental stages according to the morphological criteria described by Nieuwkoop and Faber (8).
Fotoperiod
Acceleration of development is indicated when the multi-quantal analysis detects a significant increase of developmental stage values in a chemical treatment group compared to the control group on study day 7 and/or study day 21.
Intensitet
In the AMA test method, a significant effect on any of the four endpoints mentioned above is regarded sufficient for a positive detection of accelerated development.
600–2000 lux (mätt vid vattenytan)
In turn, significant effects on developmental stage at a specific time point do not require corroboration by significant effects at developmental stage on the alternative time point nor by significant effects on hind limb length at this specific time point.
6,5–8,5
The weight of evidence for accelerated development will nevertheless increase if significant effects are detected for more than one endpoint.
Halt av löst syre
The inability to clearly establish the developmental stage of an organism using the suite of morphological endpoints considered typical of any given stage indicates that the tissues are developing asynchronously through metamorphosis.
En gång per vecka (fyra provtagningar per test)
Asynchronous development is an indicator of thyroid activity.
Rapporteringstabeller för rådata och sammanställda data
The only known modes of action causing asynchronous development are through effects of chemicals on peripheral thyroid hormone action and/or thyroid hormone metabolism in developing tissues such as is observed with deiodinase inhibitors.
Allmän information om testkemikalien
The evaluation of test animals for the presence of asynchronous development relative to the control population will be based on gross morphological assessment of test animals on study day 7 and study day 21.
Kemisk information
The description of normal development of Xenopus laevis by Nieuwkoop and Faber (8) provides the framework for identifying a sequential order of normal tissue remodelling.
Ange testkemikalie, koncentrationsenheter och behandlingar
The term “asynchronous development” refers specifically to those deviations in tadpole gross morphological development that disallow the definitive determination of a developmental stage according to the criteria of Nieuwkoop and Faber (8) because key morphological landmarks show characteristics of different stages.
Koncentrationsenheter:
As implicated by the term “asynchronous development”, only cases showing deviations in the progress of remodelling of specific tissues relative to the progress of remodelling of other tissues should be considered.
Behandling 1
Some classical phenotypes include delay or absence of fore limb emergence despite normal or advanced development of hind limbs and tail tissues, or the precocious resorption of gills relative to the stage of hind limb morphogenesis and tail resorption.
Behandling 2
An animal will be recorded as showing asynchronous development if it cannot be assigned to a stage because it fails to meet a majority of the landmark developmental criteria for a given Niewkoop and Faber stage (8), or if there is extreme delay or acceleration of one or more key features (e.g. tail completely resorbed, but forelimbs not emerged).
Behandling 3
This assessment is performed qualitatively and should examine the full suite of landmark features listed by Nieuwkoop and Faber (8).
Behandling 4
However it is not necessary to record the developmental state of the various landmark features of animals being observed.
Datum (dag 0):
Animals recorded as showing asynchronous development are not assigned to a Nieuwkoop and Faber (8) development stage.
Ange datum (dd/mm/åå)
Thus, a central criterion for designating cases of abnormal morphological development as “asynchronous development” is that the relative timing of tissue remodelling and tissue morphogenesis is disrupted whereas the morphology of affected tissues is not overtly abnormal.
Datum (dag 7):
One example to illustrate this interpretation of gross morphological abnormalities is that retarded hind limb morphogenesis relative to development of other tissues will fulfil the criterion of “asynchronous development” whereas cases showing missing hind limbs, abnormal digits (e.g. ectrodactyly, polydactyly), or other overt limb malformations should not be considered as “asynchronous development”.
Datum (dag 21):
In this context, the major morphological landmarks that should be evaluated for their coordinated metamorphic progress should include hind limb morphogenesis, fore limb morphogenesis, fore limb emergence, the stage of tail resorption (particularly the resorption of the tail fin), and head morphology (e.g. gill size and stage of gill resorption, lower jaw morphology, protrusion of Meckel's cartilage).
Insamlingsformulär för rådata för dagarna 7 och 21
Dependent on the mode of chemical action, different gross morphological phenotypes can occur.
DAG X
Some classical phenotypes include delay or absence of fore limb emergence in spite of normal or advanced development of hind limbs and tail tissues, precocious gill resorption relative to hind limb and tail remodelling.
DATUM 00/00/00
Histopathology
Behandlings-nummer
If the chemical does not cause overt toxicity and does not accelerate development or cause asynchronous development, then histopathology of the thyroid glands is evaluated using the appropriate guidance document (9).
Replikat nummer
Developmental retardation, in the absence of toxicity, is a strong indicator of anti-thyroid activity, but the developmental stage analysis is less sensitive and less diagnostic than the histopathological analysis of the thyroid gland.
Individ nummer
Therefore, conducting histopathological analyses of the thyroid glands is required in this case.
Individuellt igenkännings-tecken
Effects on thyroid gland histology have been demonstrated in the absence of developmental effects.
Längd från nos till kloak (mm)
If changes in thyroid histopathology occur, then the chemical is considered to be thyroid active.
Bakbenslängd (mm)
If no developmental delays or histological lesions are observed in the thyroid glands, then the chemical is considered to be thyroid inactive.
Hela organismens våtvikt (mg)