natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If permanent burrowing failure or sediment avoidance are observed (e.g. more than 20 % over more than half of the uptake phase), this indicates that either the test conditions are not appropriate, or the test organisms are not healthy, or that the concentration of the test substance elicits this behaviour.
A och B utgör storleken på avdelningarna (i procent av de totala resterna i vävnaderna), där A är avdelningen med snabb förlust av ämnet och B avdelningen med långsam förlust av testämnet.
In such a case the test should be stopped and repeated at improved conditions.
Summan av A och B motsvarar 100 % av hela djurets avdelningsvolym vid ett stabilt tillstånd. ka och kb representerar motsvarande elimineringskonstanter (d– 1).
Additional information on sediment ingestion can be obtained by using methods described in (35)(36), which specify sediment ingestion or particle selection in the test organisms.
Om two-compartmentmodellen anpassas till depureringsdata kan upptagningskonstanten ks bestämmas på följande sätt (53) (54):
If observable, at least the presence or absence of fecal pellets on the sediment surface, which indicate sediment ingestion by the worms, should be recorded and considered for the interpretation of the test results with respect to exposure pathways.
[ekvation 5]
An artificial sediment based on the artificial soil described in test method C.8 (40) is recommended for use in both the tests and the laboratory cultures of the worms (Appendix 5), since natural sediments of appropriate quality may not be available throughout the year.
Dessa modellekvationer bör dock användas med försiktighet, särskilt när förändringar i testämnets biotillgänglighet inträffar under testets gång (42).
In addition, indigenous organisms as well as the possible presence of micropollutants in natural sediments might influence the test.
Som ett alternativ till de ovan beskrivna modellekvationerna kan kinetiken (ks och ke) även beräknas i ett steg genom att tillämpa modellen för första ordningens kinetik på alla data från både upptagnings- och elimineringsfasen tillsammans.
Several test species can survive, grow, and reproduce in the artificial sediment (8).
För en beskrivning av en metod som möjliggör en sådan kombinerad beräkning av upptagnings- och elimineringskonstanterna, se hänvisningarna (55), (56) och (57).
The artificial sediment should be characterised at least by origin of the constituents, grain size distribution (percent sand, silt, and clay), organic carbon content (TOC), water content, and pH.
De icke-eliminerade resterna (NER) bör beräknas som en sekundär endpoint genom att multiplicera förhållandet mellan den genomsnittliga koncentrationen i maskarna (Ca) på dag 10 av elimineringsfasen och den genomsnittliga koncentrationen i maskarna (Ca) vid ett stabilt tillstånd (dag 28 i upptagningsfasen) med 100:
Measurement of redox potential is optional.
Exempel på provtagningsschema för ett 28-dagars bioackumuleringstest
However, natural sediments from unpolluted sites may serve as test and/or culture sediment (1).
Upptagningsfas (inbegripet en fyra dagars stabiliseringsfas)
Natural sediments should be characterised at least by origin (collection site), pH and ammonia of the pore water, organic carbon content (TOC), particle size distribution (percent sand, silt, and clay), and percent water content (6).
Aktiviteter
It is recommended that, before it is spiked with the test substance, the natural sediment be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test, if ammonia development is expected.
Bered torvlösningen för sedimentet, konditionera lösningen i 48 timmar.
Analysis of the sediment or its constituents for micro-pollutants prior to use might provide useful information.
Skilj testorganismerna från odlingen för acklimatisering.
Handling of natural sediments prior to their use in the laboratory is described in (1)(6)(44).
Kontrollera lufttillförseln, maskarnas beteende och temperaturen.
The preparation of the artificial sediment is described in Appendix 5.
Samma som dag 1.
The storage of natural sediments in the laboratory should be as short as possible.
4–6
U.S.
Samma som dag 2.
EPA (6) recommends a maximum storage period of 8 weeks at 4 ± 2 °C in the dark.
8–13
There should be no headspace above the sediment in the storage containers.
15–20
Recommendations for the storage of artificial sediment are given in Appendix 5.
22–27
Application of the test substance
Aktiviteterna för dag 2 bör genomföras dagligen (åtminstone på arbetsdagar).
The sediment is spiked with the test substance.
Elimineringsfas
The spiking procedure involves coating of one or more of the sediment constituents with the test substance.
0 (dag 28 i upp-tagnings-fasen)
For example, the quartz sand, or a portion thereof (e.g. 10 g of quartz sand per test vessel), can be soaked with a solution of the test substance in a suitable solvent, which is then slowly evaporated to dryness.
8–9
The coated fraction can then be mixed into the wet sediment.
Vissa fysikalisk-kemiska egenskaper hos godtagbart utspädningsvatten
The amount of sand provided by the test-substance-and-sand mixture has to be taken into account when preparing the sediment, i.e. the sediment should thus be prepared with less sand (6).
DET REKOMMENDERADE REKONSTITUERADE VATTNETS SAMMANSÄTTNING
With a natural sediment, the test substance may be added by spiking a dried portion of the sediment as described above for the artificial sediment, or by stirring the test substance into the wet sediment, with subsequent evaporating of any solubilising agent used.
Summan av kalcium- och magnesiumjoner i denna lösning är 2,5 mmol/l.
Suitable solvents for spiking wet sediment are ethanol, methanol, ethylene glycol monomethyl ether, ethylene glycol dimethyl ether, dimethylformamide and triethylene glycol (5)(34).
pH-värdet för godtagbart utspädningsvatten bör ligga i intervallet 6–9.
Toxicity and volatility of the solvent and the solubility of the test substance in the chosen solvent should be the main criteria for the selection of a suitable solubilising agent.
Syntetiskt sediment – rekommendationer om beredning och lagring
Additional guidance on spiking procedures is given in Environment Canada (1995)(41).
I motsats till kraven i testmetod C.8 (40) rekommenderas att torvinnehållet i det syntetiska sedimentet ska vara 2 % i stället för 10 % torrsubstans, för att motsvara en låg till måttlig halt av organiska ämnen i naturliga sediment (58).
Care should be taken to ensure that the test substance added to sediment is thoroughly and evenly distributed within the sediment.
Den procentuella andelen torra beståndsdelar i det syntetiska sedimentet:
Replicated sub-samples of the spiked sediment should be analysed to check the concentrations of the test substance in the sediment, and to determine the degree of homogeneity of test substance distribution.
% av torrt sediment
Once the spiked sediment with overlying water has been prepared, it is desirable to allow partitioning of the test substance between the sediment and the aqueous phase.
Folia urticae, pulvriserade blad av Urtica sp.
Appropriate equilibration time is sediment and substance specific, and can be in the order of hours to days and in rare cases up to several weeks (4-5 weeks) (28)(42).
Om man förväntar sig förhöjda koncentrationer av ammoniak, t.ex. om det är känt att testämnet hämmar nitrifikationen, kan det vara lämpligt att ersätta 50 % av det kväverika nässlelpulvret med cellulosa (t.ex. alfacellulosapulver, kemiskt rent, partikelstorlek ≤ 0,5 mm).
Depending on the purpose of the study, e.g., when environmental conditions are to be mimicked, the spiked sediment may be equilibrated or aged for a longer period (11).
Torven lufttorkas och mals ner till ett fint pulver (kornstorlek ≤ 0,5 mm, inga synliga växtrester).
It may be useful to conduct a preliminary experiment in order to optimise the test conditions of the definitive test, e.g. selection of test substance concentration(s) and duration of the uptake and elimination phases.
En suspension med den erforderliga mängden torvpulver bereds med en del av det avjonade vatten som ska tillsättas det torra sedimentet (en vattenvolym på 11,5 × torrvikt torv har visat sig användbar för att producera en rörbar torvsörja (8)) med hjälp av en högpresterande homogeniseringsapparat.
Duration of the uptake phase
Om man förväntar sig utveckling av ammoniak, kan det syntetiska sedimentet konditioneras i sju dagar under samma betingelser som råder i det efterföljande testet (t.ex. ett förhållande mellan sediment och vatten på 1: 4, sedimentskiktets tjocklek som i testkärlen) innan det spikas med testämnet, dvs. det bör fyllas på med vatten, som bör luftas.
The test organisms are exposed to the test substance during the uptake phase.
Prover tas av sedimentet för att bestämma torrvikten och halten av organiskt kol (t.ex. tre prov).
The first sample should be taken between 4 and 24 h after start of uptake phase.
Därefter blandas den spikade kvartssanden med sedimentet för varje behandlingsnivå, och sedimentet fördelas till replikattestkärlen, som fylls på med testvatten (t.ex. förhållande mellan sediment och vatten 1:4, sedimentskiktets tjocklek samma som i testkärlen).
The uptake phase should be run for up to 28 days (1)(6)(11) unless it can be demonstrated that equilibrium has been reached earlier.
Den valda foderkällan bör läggas till före eller under spikningen av sedimentet med testämnet.
The steady state occurs when:
För att se till att fodret är i tillräcklig kontakt med testämnet bör foderkällan blandas med sedimentet senast samma dag som sedimentet spikas med testämnet.
a plot of the bioaccumulation factors at each sampling period against time is parallel to the time axis;
Undantag kan göras om stabiliseringsperiodens längd leder till en alltför stor mikrobiell nedbrytning av fodret innan testorganismerna tillförs.
three successive analyses of BAF made on samples taken at intervals of at least two days vary no more than ± 20 % of each other;
Prover tas av sedimentet för att bestämma torrvikten och halten av organiskt kol (t.ex. tre prover av det spikade sedimentet eller kontrollsedimentet).
Duration of the elimination phase
100 % torrvikt + 46 % vatten betyder att till 1000 g torrvikt tillsätts sammanlagt 460 ml vatten, vilket ger 1460 g vått sediment).
The first sample should be taken between 4 and 24 h after start of elimination phase, since during the initial period, rapid changes in tissue residue may occur.
Det syntetiska sedimentets torra beståndsdelar kan lagras i ett torrt och svalt utrymme vid rumstemperatur.
It is recommended to terminate the elimination phase either when the concentration of test substance is less than 10 % of steady-state concentration, or after a maximum duration of 10 days.
Det färdigberedda våta sedimentet kan lagras (endast för fortsatt användning i kulturen) vid 4 ± 2 °C i mörker under en period på 2–4 veckor från beredningsdagen (8).
The residue level in the worms at the end of the elimination phase is reported as a secondary endpoint.
Sediment som spikats med testämne bör användas omedelbart, med undantag för om det finns information om att sedimentet i fråga kan förvaras utan att testämnets toxicitet och biotillgänglighet påverkas.
The period may, however, be governed by the period over which the concentration of the test substance in the worms remains above the analytical detection limit.
Prover av spikat sediment kan lagras under de förhållanden som rekommenderas för testämnet i fråga fram till analysen.
Numbers of test worms
Arter av oligochaeta som rekommenderas för bioackumuleringstester
The number of worms per sample must provide a mass of worm tissue such that the mass of test substance per sample at the beginning of the uptake phase and at the end of the elimination phase, respectively, is significantly higher than the detection limit for the test substance in biological material.
Tubifex tubifex (MÜLLER), Tubificidae, Oligochaeta
In the mentioned stages of uptake and elimination phases the concentration in the test animals is usually relatively low (6)(8)(18).
Glattmasken Tubifex tubifex (Müller) (Tubificidae, Oligochaeta) lever i sötvattenssediment i rör som är fodrade med slem.
Since the individual weight in many species of aquatic oligochaetes is very low (5-10 mg wet weight per individual for Lumbriculus variegatus and Tubifex tubifex), the worms of a given replicate test chamber may be pooled for weighing and test chemical analysis.
Maskarna lever i dessa rör med huvudet nedåt och äter sedimentpartiklar från vilka de tillgodogör sig mikroorganismer och organiskt material.
For test species with higher individual weight (e.g. Branchiura sowerbyi) replicates containing one individual may be used, but in such cases the number of replicates should be increased to five per sampling point (11).
Bakdelen tjänar som andningsorgan och vajar normalt sett i det överliggande vattnet.
It should however be noted that B. sowerbyi was not included in the ring test (12), and is therefore not recommended as a preferable species in the method.
Även om denna art lever i ett stort antal sedimenttyper över hela norra halvklotet, föredrar Tubifex tubifex relativt små kornstorlekar (59).
Worms of similar size should be used (for L. variegatus see Appendix 6).
Denna arts lämplighet för ekotoxikologisk testning beskrivs exempelvis i (8) (29) (31) (39) (60) (62) (63).
They should come from the same source, and should be adult or large animals of the same age class (see Appendix 6).
För att man ska få ett tillräckligt antal Tubifex tubifex för bioackumuleringstester måste maskarna hållas i en permanent laboratorieodling.
The weight and age of an animal may have a significant effect on the BAF-values (e.g. due to different lipid content and/or presence of eggs);
Ett system som består av syntetiskt sediment baserat på syntetisk jord i enlighet med testmetod C.8 (40) och rekonstituerat vatten i enlighet med testmetod C.1 rekommenderas för odling av T. tubifex (8).
these parameters should be recorded accurately.
Varje odlingsbehållare fylls med ett skikt fuktigt syntetiskt sediment som beretts enligt anvisningarna i tillägg 5.
To measure the mean wet and dry weight a sub-sample of worms should be weighed before starting the test.
Sedimentskiktets djup bör vara lämpligt för maskarnas naturliga grävbeteende (minst 2 cm djup för T. tubifex).
With Tubifex tubifex and Lumbriculus variegatus, reproduction is expected during the test period.
Rekonstituerat vatten tillsätts till systemet.
A lack of reproduction in a bioaccumulation test should be recorded, and considered when interpreting the test results.
Man bör undvika att störa sedimentet.
High sediment-to-worm and water-to-worm ratios should be used in order to minimise the reduction of test substance concentration in the sediment during the uptake phase, and to avoid decreases in dissolved oxygen concentration.
Vattnet ska luftas försiktigt (t.ex.
The chosen loading rate should also correspond to naturally occurring population densities of the chosen species (43).
2 bubblor per sekund med 0,45 μm-filtrerad luft) via en pasteurpipett placerad 2 cm ovanför sedimentets yta.
For example, for Tubifex tubifex, a loading rate of 1-4 mg of worm tissue (wet weight) per gram of wet sediment is recommended (8)(11).
Den rekommenderade odlingstemperaturen är 20 ± 2 °C.
References (1) and (6) recommend a loading rate of ≤ 1 g dry weight of worm tissue per 50 g sediment organic carbon for L. variegatus.
Maskarna tillförs till odlingssystemet med en högsta djurtäthet på 20000 individer/m2 sedimentyta.
The worms to be used in a test are removed from the culture by sieving the culture sediment.
En större djurtäthet kan leda till minskad tillväxt och fortplantning (43).
The animals (adult or large worms without signs of recent fragmentation) are transferred to glass dishes (e.g. petri dishes) containing clean water.
I odlingar med syntetiskt sediment måste maskarna utfodras.
If the test conditions differ from the culture conditions, an acclimation phase of 24 h should be sufficient.
Foder bestående av finmalt fiskfoder, t.ex.
Prior to weighing, excess water should be removed from the worms.
TetraMin®, kan tjäna som tilläggsnäring (8);
This can be done by gently placing the worms on a pre-moistened paper tissue.
Klerks 1994, pers. medd.
It is not recommended to use absorbing paper to dry the worms as this may cause stress or damage to the worms.
Utfodringsfrekvensen bör möjliggöra tillräcklig tillväxt och fortplantning och minimera ackumuleringen av ammoniak och svamptillväxt i odlingen.
recommend using non-blotted worms of approximately 1,33 times the target biomass.
Utfodring bör ske två gånger per vecka (t.ex.
At the start of the uptake phase (day 0 of the test), the test organisms are removed from the acclimatisation chamber and distributed randomly to vessels (e.g. petri dishes) containing reconstituted water by adding groups of two worms to each vessel, until each vessel contains ten worms.
Praktiska erfarenheter har visat att applicering av foder som suspenderats och homogeniserats i avjonat vatten kan underlätta en homogen foderdistribution på sedimentytan i odlingsbehållarna.
Each of these groups of worms are then randomly transferred to separate test vessels, e.g. using soft steel forceps.
För att undvika ackumulering av ammoniak bör det överliggande vattnet bytas ut via ett genomflödessystem, eller manuellt åtminstone en gång i veckan.
The test vessels are subsequently incubated under test conditions.
Sedimentet bör bytas ut var tredje månad i stamodlingarna.
In order not to underestimate the exposure of the test organisms, e.g. by selectively feeding uncontaminated food, the food necessary for reproduction and growth of the test organisms should be added to the sediment once before or during application of the test substance (see Appendix 5).
För insamling av kokonger behövs en 0,5 mm sikt, och för juvenila maskar en 0,25 mm sikt.
Sediment-water ratio
Siktarna kan placeras i rekonstituerat vatten efter det att sedimentet har passerat igenom dem.
The recommended sediment-water ratio is 1:4 (45).
Maskarna lämnar nätet och kan därefter plockas upp ur vattnet med hjälp av en mjuk stålpincett eller en pipett med flampolerade kanter.
This ratio is considered suitable to maintain oxygen concentrations at appropriate levels, and to avoid the build-up of ammonia in the overlying water.
Endast intakta och tydligt identifierade exemplar av Tubifex tubifex (t.ex.
The oxygen content in the overlying water should be maintained at ≥ 40 % saturation.
(64)) används för att inleda ett test eller starta nya odlingar.
The overlying water of the test vessels should be gently aerated (e.g. 2 - 4 bubbles per second) via a pasteur pipette positioned approximately 2 cm above the sediment surface so as to minimise perturbation of the sediment.
Sjuka eller skadade maskar samt kokonger angripna av svamphyfer måste kastas bort.
The photoperiod in the culture and the test is 16 hours (1)(6).
En synkroniserad odling kan tillhandahålla maskar med specificerad ålder i lämpliga intervall när så önskas.
Light intensity in the test area should be kept at about 500-1000 lx.
Vid de valda intervallen (t.ex. varannan vecka) startas nya odlingar i separata kärl med djur i en viss ålder (t.ex. kokonger).
The temperature should be 20 ± 2 °C throughout the test.
Vid de odlingsbetingelser som beskrivs här når maskarna vuxen ålder efter 8–10 veckor.
One test concentration (as low as possible) is used for determination of the uptake kinetics, but a second (higher) concentration may be used (e.g. (46)).
Odlingarna kan skördas när maskarna har producerat nya kokonger, t.ex. efter tio veckor.
In that case, samples are taken and analysed at steady state or after 28 d to confirm the BAF measured at the lower concentration (11).
De insamlade vuxna djuren kan användas för tester, och nya kulturer kan startas med kokongerna.
The higher concentration should be selected so that adverse effects can be excluded (e.g. by choosing approximately 1 % of the lowest known chronic effect concentration ECx as derived from relevant chronic toxicity studies).
Lumbriculus variegatus (Lumbriculidae, Oligochaeta) lever också i sötvattenssediment över hela världen och används allmänt för ekotoxikologisk testning.
The lower test concentration should be significantly higher than the detection limit in sediment and biological samples by the analytical method used.
Information om arternas biologi, odlingsförhållanden och känslighet finns i (1) (6) (9) (36).
If the effect concentration of the test substance is close to the analytical detection limit, the use of radiolabelled test substance with high specific radioactivity is recommended.
Lumbriculus variegatus kan med vissa begränsningar också odlas i det syntetiska sediment som rekommenderas för T. tubifex enligt (8).
Treated and Control Replicates
Eftersom L. variegatus i naturen föredrar grövre sediment än T. tubifex (59) kan laboratorieodlingar med det syntetiska sediment som används för T. tubifex upphöra efter 4–6 månader.
The minimum number of treated replicates for kinetic measurements should be three per sampling point (11) throughout uptake and elimination phase.
Praktiska erfarenheter visar att L. variegatus kan hållas i ett sandigt substrat (t.ex. kvartssand, fint grus) i ett genomflödessystem med fiskfoder som näringskälla under flera år utan att man behöver förnya substratet.
Additional replicates should be employed e.g. for optional additional sampling dates.
En stor fördel med L. variegatus framför andra vattenlevande oligochaeter är dess snabba fortplantning, vilket leder till en snabbt ökande biomassa i laboratorieodlade populationer (1) (6) (9) (10).
For the elimination phase, a matching number of replicates is prepared with non-spiked sediment and overlying water, so that the treated worms can be transferred from designated treated vessels to non-treated vessels at the end of the uptake phase.
, ASTM (2000) (1), U.S.
The total number of treated replicates should be sufficient for both uptake and elimination phase.
Maskarna kan odlas i stora akvarier (57–80 liter) vid 23 °C med fotoperiod på 16 timmar ljus (100–1000 lux) och 8 timmar mörker med dagligen förnyat naturligt vatten (45–50 liter per akvarium).
Alternatively, the worms designated for sampling during the elimination phase may be exposed in one large container containing spiked sediment of the same batch as used for uptake kinetics.
Nytt substrat i akvariet räcker i allmänhet i ungefär två månader.
It should be demonstrated that the test conditions (e.g. sediment depth, sediment water ratio, loading, temperature, water quality) are comparable to the replicates designated for the uptake phase.
Varje maskodling startas upp med 500–1000 maskar som utfodras med en 10 ml suspension innehållande 6 g yngelfoder för öring tre gånger per vecka under förnyelse- eller genomflödesförhållanden.
At the end of the uptake phase, water, sediment and worm samples should be taken from this container for analysis, and a sufficient number of large worms that show no sign of recent fragmentation, should be removed carefully and transferred to the replicates prepared for the elimination phase (e.g. ten organisms per replicate vessel).
Statiska eller semistatiska odlingar bör ha lägre utfodringsfrekvens för att förebygga tillväxt av bakterier och svamp.
If no solvent other than water is used, at least 9 replicates of a negative control (at least 3 sampled at start, 3 at end of uptake and 3 at end of elimination) should be provided for biological and background analysis.
Foder och papperssubstrat bör analyseras med avseende på de ämnen som ska användas i bioackumuleringstesterna.
If any solubilising agent is used for application of the test substance, a solvent control should be run (at least 3 replicates should be sampled at start, 3 at the end of the uptake phase, and 3 at the end of the elimination phase).
Under dessa förhållanden fördubblas vanligen antalet individer i odlingen på cirka 10–14 dagar.