natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Weight loss > 2 % is replenished by the addition of de-ionised water.
Alla åtgärder bör vidtas samtidigt som hoppstjärtarna hålls i en fuktig atmosfär för att undvika stress på grund av torka, t.ex. genom att man använder fuktade ytor osv.
The pH should be measured at the beginning and the end of both the range-finding test and the definitive test.
Vänd behållaren upp och ner och knacka på den för att överföra hoppstjärtarna till jorden.
Measurements should be made in one extra control sample and one extra sample of the treated (all concentrations) soil samples prepared and maintained in the same way as the test cultures, but without addition of the collembolans.
Statisk elektricitet bör neutraliseras, annars kan djuren komma att flyga ut i luften, eller fastna på testbehållarens sidor och torka ut.
Test procedure and measurements
En joniserare eller en fuktig trasa under behållaren kan användas för neutralisering.
For each test concentration, an amount of test soil corresponding to 30 g fresh weight is placed into the test vessel.
Fodret bör fördelas över hela jordytan och inte bara i en enda klump.
Water controls, without the test chemical, are also prepared.
Under transporten och under testperioden bör man undvika att knacka på eller på annat sätt fysiskt rubba testbehållarna, eftersom detta kan öka jordens sammanpackning och försvåra interaktionen mellan hoppstjärtarna.
If a vehicle is used for application of the test chemical, one control series containing the vehicle alone should be run in addition to the test series.
Alternativa hoppstjärtarter
The individual springtails are carefully transferred into each test vessel (allocated randomly to the test vessels) and placed onto the surface of the soil.
Andra hoppstjärtarter kan väljas för testning enligt denna testmetod, t.ex.
For efficient transfer of the animals, a low-suction air flow device can be used.
Proisotoma minuta, Isotoma viridis, Isotoma anglicana, Orchesella cincta, Sinella curviseta, Paronychiurus kimi, Orthonychiurus folsomi, Mesaphorura macrochaeta.
The number of replicates for test concentrations and for controls depends on the test design used.
Ett antal förutsättningar bör vara uppfyllda innan man använder alternativa arter:
For the F. fimetaria test twenty adults, 10 males and 10 females, 23-26 days old should be used per test-vessel.
De bör vara otvetydigt identifierbara.
On day 21 collembolans are extracted from the soil and counted.
Motivering för valet av art bör anges.
For F. fimetaria the gender are discriminated by size in the synchronised animal batch used for the test.
Det bör säkerställas att reproduktionsbiologin ingår i testfasen så att den utgör ett potentiellt mål under exponeringen.
Females are distinctively larger than the males (See Appendix 3)
Deras livshistoria bör vara känd:
For the F. candida test, ten 9-12 days old juveniles per test vessel should be used.
ålder vid könsmognad, äggutvecklingens varaktighet och stadier som utsätts för exponering.
On day 28, the collembolans are extracted from the soil and counted.
Optimala förutsättningar för tillväxt och reproduktion bör tillhandahållas genom testsubstratet och fodret.
As a suitable food source, a sufficient amount, e.g. 2-10 mg, of granulated dried baker's yeast, commercially available for household use, is added to each container at the beginning of the test and after about 2 weeks.
Variabiliteten bör vara tillräckligt låg för att en exakt och tillförlitlig uppskattning av toxiciteten ska kunna göras.
At the end of the test, mortality and reproduction are assessed.
Insamling och räkning av djur
After 3 weeks (F. fimetaria) or 4 weeks (F. candida), collembolans are extracted from the test soil (see Appendix 4) and counted (12).
Två insamlingsmetoder kan användas.
A collembolan is recorded as dead if not present in the extraction.
Första metoden:
The extraction and counting method should be validated.
En extraktor med kontrollerad temperaturökning baserad på MacFadyens principer kan användas (1).
The validity includes extraction efficiency of juveniles greater than 95 %, e.g. by adding a known number to soil.
Värmen kommer från ett värmeelement överst i extraktionslådan (som regleras med hjälp av en termistor som placeras på ytan av jordprovet).
Practical summary and timetable of the test procedure are described in Appendix 2.
Temperaturen i den kylda vätskan som omger insamlingskärlet regleras med hjälp av en termistor som sitter på insamlingskärlets yta (som placeras under jordprovet).
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example, five test chemical concentrations of 0,1, 1,0, 10, 100, and 1000 mg/kg dry weight of soil and two replicates for each treatment and control.
Termistorerna är kopplade till en programmerbar kontrollenhet som höjer temperaturen enligt en förprogrammerad tidsplan.
Additional information, from tests with similar chemicals or from literature, on mortality or reproduction of Collembola may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the range-finding test.
Djuren samlas upp i den kylda insamlingslådan (2 °C) med ett bottenskikt av gips/kol.
The duration of the range-finding test is two weeks for F. fimetaria and 3 weeks for F. candida to ensure one clutch of juveniles has been produced.
Andra metoden:
At the end of the test, mortality and reproduction of the Collembola are assessed.
Efter den experimentella inkubationstiden bedöms antalet juvenila hoppstjärtar med hjälp av flotation.
The number of adults and the occurrence of juveniles should be recorded.
För detta ändamål utförs testet i kärl med en volym på ca 250 ml.
At least two replicates for each test concentration treatment and six control replicates are recommended.
Vid testets slut tillsätts ca 200 ml destillerat vatten.
The spacing factor may vary depending on the dose-response pattern.
Jorden rörs försiktigt om med en liten pensel så att hoppstjärtarna flyter upp till vattenytan.
For determination of the NOEC/LOEC, at least five concentrations in a geometric series should be tested.
En liten mängd, ca 0,5 ml, svart Kentmeres fotografiska färgämne kan tillsättas vattnet för att underlätta räkningen genom att öka kontrasten mellan vattnet och de vita hoppstjärtarna.
Four replicates for each test concentration treatment plus eight controls are recommended.
Färgämnet inte är giftigt för hoppstjärtar.
A combined approach allows for determination of both the NOEC/LOEC and ECx.
Räkning:
For this combined approach, eight treatment concentrations in a geometric series should be used.
Räkning av antalet djur kan utföras med blotta ögat eller under ljusmikroskop med hjälp av ett rutnät som placeras över flotationskärlet eller genom att fotografera ytan i varje kärl och senare att räkna hoppstjärtarna på uppförstorade foton eller projicerade diabilder.
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using a test concentration of 1000 mg/kg and the control.
Räkningarna kan även utföras med hjälp av digitala bildbehandlingstekniker (12).
A limit test will provide the opportunity to demonstrate that there is no statistically significant effect at the limit concentration.
Alla tekniker bör valideras.
The reproductive output is the main endpoint (e.g. the number of juveniles produced per test vessel).
Bestämning av jordens maximala vattenhållningskapacitet (WHC)
The statistical analysis, e.g. ANOVA procedures, compares treatments by Student t-test, Dunnett's test, or Williams' test.
Följande metod för bestämning av den maximala vattenhållningskapaciteten (WHC) har konstaterats vara lämplig.
95 % confidence intervals are calculated for individual treatment means.
Den beskrivs i bilaga C till ISO DIS 11268-2 (Markundersökningar – Föroreningars effekt på daggmaskar (Eisenia fetida).
The number of surviving adults in the untreated controls is a major validity criterion and should be documented.
Del 2: Bestämning av effekter på reproduktion).
As in the range-finding test, all other harmful signs should be reported in the final report as well.
Täck rörets botten med bit vått filterpapper och placera det sedan i en ställning i ett vattenbad.
LCx and ECx
Vattenhållningskapaciteten (WHC) ska beräknas enligt följande:
ECx-values, including their associated lower and upper 95 % confidence limits for the parameter, are calculated using appropriate statistical methods (e.g. logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
Markundersökningar – Bestämning av pH.
To compute the EC50 or any other ECx, the complete data set should be subjected to regression analysis.
TOXICITETSTEST I SEDIMENT- OCH VATTENFAS PÅ CHIRONOMIDLARVER MED SPIKAT SEDIMENT ELLER SPIKAT VATTEN
is usually estimated by probit analysis or similar analysis that takes into account the binomially distributed mortality data.
Denna testmetod motsvarar OECD:s testriktlinje (TG) 233 (2010).
Appropriate statistical methods should be used according to OECD Document 54 on the Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application (9).
Den är utformad för att bedöma effekterna av livslång exponering för kemikalier på sötvattenslevande fjädermyggor Chironomus spp., och täcker helt den första generationen (P-generationen) och inledningen av den andra generationen (F1-generationen).
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Det är en utvidgning av de befintliga testmetoderna C.28 (1) och C.27 (15) med användning av ett exponeringsscenario med spikat vatten eller ett scenario med spikat sediment.
Normal distribution and variance homogeneity can be tested using an appropriate statistical test, e.g. the Shapiro-Wilk test and Levene test, respectively (p ≤ 0,05).
Det tar hänsyn till befintliga toxicitetstestprotokoll för Chironomus riparius och Chironomus dilutus (tidigare benämnd C. tentans (2)) som har tagits fram i Europa och Förenta staterna (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) och därefter ringtestats (1) (7) (10) (11) (12).
One-way Analysis of Variance (ANOVA) and subsequent multi-comparison tests can be performed.
Även andra väldokumenterade chironomider kan användas, t.ex.
Multiple comparisons (e.g. Dunnett's test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test chemical concentrations (selection of the recommended test according to OECD Document 54 (9)).
Chironomus yoshimatsui (13) (14).
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) could be used to determine the NOEC and the LOEC.
Exponeringens totala varaktighet är ca 44 dagar för C. riparius och C. yoshimatsui och ca 100 dagar för C. dilutus.
the identity of the test chemical, batch, lot and CAS-number, purity;
Exponeringsscenarier för både vatten och sediment beskrivs i denna testmetod.
physico-chemical properties of the test chemical (e.g. log Kow, water solubility, vapour pressure, Henry's constant (H) and preferably information on the fate of the test chemical in soil) if available;
Valet av lämpligt exponeringsscenario beror på den avsedda tillämpningen för testet.
the formulation of the test chemical and the additives should be specified if not the pure chemical is tested;
Vattenexponeringsscenariot, i vilket vattenkolumnen spikas, är avsett att simulera vindavdrift av bekämpningsmedel och täcker den inledande maximala koncentrationen i ytvattnet.
identification of species and supplier of the test organisms, description of the breeding conditions and age range of test organisms;
Spikning av vatten kan även användas för andra typer av exponering (inklusive utsläpp av kemikalier), men inte för ackumuleringsprocesser i sedimentet som varar längre än testperioden.
detailed specification if natural soil is used (origin, history, particle size distribution, pH, organic matter content);
I ett sådant fall, och även när avrinning är bekämpningsmedlets huvudsakliga tillförselväg till vattenmassor, kan ett spikat sediment vara lämpligare.
water holding capacity of the soil;
Om andra exponeringsscenarier är av intresse, kan man lätt anpassa utformningen av testet till detta.
description of the technique used to apply the test chemical to the soil;
Om till exempel fördelningen av testkemikalien mellan vattenfas och sedimentlager inte är av intresse och adsorptionen till sedimentet måste minimeras kan man överväga att använda ett alternativt syntetiskt sediment (t.ex. kvartssand).
all information and observations helpful for the interpretation of the results;
De endpoints som mäts är det totala antalet kläckta vuxna exemplar (både för första och andra generationen), utvecklingshastigheten (både för första och andra generationen) könsfördelningen för fullständigt kläckta levande vuxna djur (både för första och andra generationen), antal äggband per honor (endast för första generationen) och äggbandens fertilitet (endast för första generationen).
power of the actual test if hypothesis testing is done (9);
Det rekommenderas starkt att använda syntetiskt sediment.
deviations from procedures described in this Test Method and any unusual occurrences during the test;
Syntetiskt sediment har flera fördelar jämfört med naturliga sediment:
validity of the test;
variationen mellan testen reduceras eftersom syntetiskt sediment bildar en reproducerbar ’standardmatris’, och behovet av att få fram oförorenade och rena sediment elimineras,
for NOEC, when estimated, the minimal detectable difference.
testen kan inledas när som helst utan att beakta säsongvariationer i testsedimentet och det behövs ingen förbehandling av sedimentet för att få bort naturligt förekommande fauna,
Wiles JA and Krogh PH (1998) Testing with the collembolans I. viridis, F. candida and F. fimetaria.
kostnaden är lägre jämfört med insamling på fältet av tillräckliga mängder sediment för rutintestning,
In Handbook of soil invertebrate toxicity tests (ed.
syntetiskt sediment ger möjlighet till jämförelser av toxicitet mellan undersökningarna och till klassificering av kemikalierna i enlighet med detta (3).
H Løkke and CAM Van Gestel), pp. 131-156.
Första stadiets chironomidlarver exponeras för ett urval koncentrationer av testämnet i ett sediment/vattensystem.
Chapter C.36 of this Annex, Predatory mite (Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer) reproduction test in soil.
Testet inleds genom att man placerar första stadiets larver (första generationen) i testbägare som innehåller spikat sediment eller alternativt att vattnet spikas med testkemikalien efter tillsättning av larverna.
Toxicity testing with the collembolans Folsomia fimetaria and Folsomia candida and the results of a ringtest.
Andelen kläckta chironomider, tid fram till kläckningen och könsfördelningen för fullständigt kläckta och levande myggor bedöms.
Danish Environmental Protection Agency, Environmental Project No. 1256, pp. 66.
Kläckta vuxna exemplar överförs till odlingsbehållare för att underlätta svärmning, parning och äggläggning.
In Soil Zoology (Kevan D.K. McE., Ed).
Antalet producerade äggband och deras fertilitet bedöms.
Butterworths, London, pp. 412-416
Från dessa äggband erhålls andra generationens larver i första stadiet.
Chemical is a substance or a mixture.
Dessa larver placeras i nyberedda testbägare (samma spikningsförfarande som för den första generationen) för att fastställa den andra generationens livskraft genom en bedömning av andelen kläckta individer, tid fram till kläckningen och könsfördelningen för fullständigt kläckta och levande myggor (en schematisk presentation av livscykeltestet finns i tillägg 5).
Main actions and timetable for performing a collembolan test
Alla data analyseras antingen med en regressionsmodell i syfte att uppskatta den koncentration som skulle orsaka X % minskning av endpointen i fråga, eller med hjälp av hypotesprövning för att bestämma koncentrationen utan observerad effekt (NOEC).
Time (day)
Det senare kräver en jämförelse av behandlingsresponserna med lämpliga kontrollresponser med hjälp av statistiska tester.
Action
När det gäller snabbt nedbrytbara kemikalier bör noteras att i scenariot med spikat vatten kan de senare livsstadierna i varje generation (t.ex. puppfasen) exponeras för en betydligt lägre koncentrationsnivå i det överliggande vattnet än det första stadiets larver.
23 to – 26
Om detta är ett problem, och det behövs en jämförbar exponering i varje stadium av livscykeln, kan följande ändringar av testmetoden kan övervägas:
Preparation of synchronous F. fimetaria culture
parallella testomgångar med spikning under olika stadier i livscykeln, eller
Check pH of artificial soil and adjust accordingly
upprepad spikning (eller förnyelse av det överliggande vattnet) i testsystemet under båda testfaserna (första och andra generationen), varvid spikningsintervallerna (förnyelseintervallerna) bör anpassas till testkemikaliens egenskaper när det gäller dess omvandling, spridning och fördelning i miljön.
9 to – 12
Sådana ändringar är endast möjliga i scenariot med spikat vatten, och inte i scenariot med spikat sediment.
Preparation of synchronous F. candida culture
Testkemikaliens vattenlöslighet, ångtryck och log Kow, uppmätta eller beräknade fördelning i sedimentet samt stabilitet i vatten och sediment bör vara kända.
2 to – 7
Det ska finnas en tillförlitlig analysmetod för kvantifiering av testkemikalien i det överliggande vattnet, porvattnet och sedimentet med känd och rapporterad noggrannhet och detektionsgräns.
Pre-moist soil
Användbar information inbegriper testkemikaliens strukturformel och renhet.
Distribute juveniles into batches
Hur testkemikalien reagerar kemiskt (t.ex. upplösning, abiotisk och biotisk nedbrytning osv.) hör också till den information som är användbar.
Prepare stock solutions and apply test chemical if solvent required
Närmare vägledning för testning av kemikalier vars fysikalisk-kemiska egenskaper gör dem svåra att testa finns i (16).
stock solutions and apply test chemical if solid chemical, water soluble or surface application is required.
Referenskemikalier kan regelbundet testas för att säkerställa att känsligheten hos laboratoriets försöksdjurspopulation inte har ändrats.
Measure soil pH and weigh the containers.
Med dafnier skulle det räcka att göra ett 48-timmars akut test (efter 17).
Add food.
Innan en validerad akut riktlinje finns tillgänglig kan man dock överväga att utföra ett kroniskt test enligt kapitel C.28 i denna bilaga.
Introduce collembolans.
För att testet ska vara giltigt måste följande villkor uppfyllas:
Range-finding test F. fimetaria:
den genomsnittliga andelen kläckta djur i kontrollförfarandet bör vara minst 70 % i slutet av exponeringsperioden för båda generationerna (1) (7),
Definitive tests:
För C. dilutus är en period på 20 till 65 dagar godtagbar,
Measure moisture content and replenish water and add 2-10 mg yeast
Syrekoncentrationen bör vara minst 60 % av luftmättnadsvärdet (ASV [9]), och pH-värdet i det överliggande vattnet bör vara mellan 6 och 9 i alla testkärl,
Definitive F. fimetaria test:
variationen i vattentemperaturen får inte vara större än ± 1,0 °C.
Range-finding F. candida:
Testkärl och odlingsbehållare
Definitive F. candida test:
Larverna exponeras i 600 ml glasbägare som mäter cirka 8,5 cm i diameter (se tillägg 5).
Guidance on rearing and synchronisation of F. fimetaria and F. candida
Även andra slags kärl kan användas, men då måste det gå att garantera att det överliggande vattnet och sedimentet har lämpliga djup.
The time and durations given in this guidance should be checked for each specific collembolan strain to ensure that timing will allow for sufficient synchronised juveniles.
Sedimentytan bör vara tillräckligt stor för att ge 2–3 cm° per larv.
Basically, the incidence of oviposition after the adults are transferred to fresh substrate and egg hatching determines the appropriate day for egg collection and collection of synchronous juveniles.
Förhållandet mellan sedimentskiktets djup och det överliggande vattnets djup bör vara ca 1:4.
It is recommended to have a permanent stock culture consisting of e.g. 50 containers/Petri dishes.
En tvåliters kristalliseringsskål innehållande testvatten och sediment placeras i varje behållare för myggorna att lägga ägg i.
The stock culture should be kept in a good feeding condition by weekly feeding, watering and removal of old food and carcasses.
Även för kristalliseringsskålen bör förhållandet mellan sedimentskiktets djup och det överliggande vattnets djup vara ca 1:4.
Too few collembolans on the substrate may result in inhibition by more fungal growth.
Efter att äggbanden har samlas in från kristalliseringsskålen placeras de i en 12-brunnars mikrotiterplatta (ett band per brunn innehållande minst 2,5 ml vatten från den spikade kristalliseringsskålen) varefter plattorna täcks med ett lock för att förhindra betydande avdunstning.
If the stock culture is used for egg production too often, the culture may get fatigue.
Andra kärl som är lämpliga att ha äggbanden i kan också användas.
Signs of fatigue are dead adults and mould on the substrate.
Med undantag för mikrotiterplattor bör alla testkärl och annan apparatur som kommer i kontakt med testsystemet vara gjorda uteslutande av glas eller annat kemiskt inert material (t.ex. polytetrafluoreten).
The remaining eggs from the production of synchronous animals can be used to rejuvenate the culture.
Den art som används i testet ska helst vara Chironomus riparius.
In a synchronous culture of F. fimetaria, males are distinguished from females primarily by size.
C. yoshimatsui kan också användas.
Males are clearly smaller than females, and the walking speed of the males is faster than for females.
C. dilutus kan också vara lämplig, men den är svårare att hantera och kräver en längre testperiod.
Correct selection of the gender requires little practice and can be confirmed by microscopic inspection of the genital area (13).
Uppgifter om odlingsmetoder ges i tillägg 2 för C. riparius.
Preparation of culturing substrate
Identifieringen av arterna bör bekräftas före testningen men är inte nödvändig före varje test om organismerna härrör från en odling inom laboratoriet.
The culturing substrate is plaster of Paris (calcium sulphate) with activated charcoal.
Helst ska syntetiskt sediment användas (även kallat rekonstituerat eller konstgjort sediment).
This provides a moist substrate, with the function of the charcoal being to absorb waste gases and excreta (14) (15).
Om naturligt sediment används bör dess egenskaper dock fastställas (minst pH, halten organiskt kol, och gärna även andra parametrar såsom förhållandet C/N och granulometri).
Different forms of charcoal may be used to facilitate observations of the Collembola.
Sedimentet bör även vara fritt från föroreningar och andra organismer som kan konkurrera med eller leva på chironomiderna.
For example, powdered charcoal is used for F. candida and F. fimetaria (producing a black/grey plaster of Paris):
Det rekommenderas också att sedimenten konditioneras före testet i sju dagar under testbetingelser.
Substrate constituents:
Följande syntetiska sediment, såsom beskrivs i (1), rekommenderas (1) (20) (21):
20 ml of activated charcoal
Det är viktigt att använda torv i pulverform, finmald (partikelstorlek ≤ 1 mm), och uteslutande lufttorkad,
200 ml of plaster of Paris
20 % (torrvikt) kaolinlera (kaolinithalt helst över 30 %),
50 g of activated pulverized charcoal
c.
260-300 ml of distilled water
75–76 % (torrvikt) kvartssand (till största delen bestående av fin sand där mer än 50 % av partiklarna har storleken 50–200 μm),
400 g plaster of Paris.
d. avjonat vatten tillsätts så att blandningen får en slutlig fukthalt på omkring 30–50 %,
The substrate mixture is allowed to set before use.
e. kemiskt rent kalciumkarbonat CaCO3) tillsätts för att justera den slutliga sedimentblandningens pH till 7,0 ± 0,5,
Breeding
f.
Collembolans are held in containers such as Petri dishes (90 mm × 13 mm), with the bottom covered by a 0,5 cm layer of plaster /charcoal substrate.
Den slutliga blandningens kolhalt bör vara 2 % (± 0,5 %) och kan justeras med hjälp av lämpliga mängder torv och sand, enligt punkterna (a) och (c).