natgillin/translations-raw huggingface dataset:
In this design, a minimum of 5 males and 5 females are tested at each concentration level resulting in a design using a minimum of 40 animals (20 males and 20 females, plus relevant positive controls.)
Individuell vikt hos försöksdjuren vid försökets början och slut, inklusive kroppsviktsintervall, medelvärde och standardavvikelse för varje grupp.
The analysis partitions the variability in the dataset into that between the sexes, between the concentrations and that related to the interaction between the sexes and the concentrations.
Resultat från en preliminär undersökning (om en sådan utförs).
Full details of the underlying methodology are available in many standard statistical textbooks (see references) and in the 'help' facilities provided with statistical packages.
Grund för administreringsväg.
CURRENT LIMITATIONS OF THE ASSAY
Injektionspunkt (för subkutana eller intravenösa undersökningar).
Due to the current status of knowledge, several limitations are associated with the in vivo comet assay.
Metoder för provberedning, i förekommande fall histopatologiska analyser, särskilt för kemikalier som ger positiv kometrespons.
It is expected that these limitations will be reduced or more narrowly defined as there is more experience with application of the assay to answer safety issues in a regulatory context.
Grund för valet av vävnad.
Some types of DNA damage may be short-lived, i.e. may be repaired too quickly to be observed 24 hours or more after the last dose.
Metoder för att verifiera att testkemikalien nått målvävnaden eller den allmänna cirkulationen om negativa resultat erhålls.
There is no identifiable list of the types of short-lived damages, nor of the chemicals which are likely to cause this type of damage, nor is it known over what time period this type of damage can be detected.
Uppgifter om diet- och vattenkvalitet.
The optimum sampling time(s) may also be chemical- or route-specific and sampling times should be determined from kinetic data (for example the time, Tmax, at which the peak plasma or tissue concentration is achieved), when such data are available.
Detaljerad beskrivning av behandlings- och provtagningsscheman samt motivering av valen (t.ex. toxikokinetiska data om sådana finns tillgängliga).
Most of the validation studies supporting this test method specified necropsy 2 or 3 hours following administration of the final dose.
Smärtlindringsmetod, bedövningsmedel.
Most studies in the published literature describe administration of the final dose between 2 and 6 hours prior to sacrifice.
Förfaranden för att isolera och bevara vävnader.
Therefore, these experiences were used as the basis for the recommendation in the test method that, in the absence of data indicating otherwise, the final dose should be administered at a specified time point between 2 and 6 hours prior to necropsy.
Metoder för beredning av suspensioner med enstaka celler/kärnor.
There are no identifiable study data that examine the sensitivity of the test for the detection of short-lived DNA damage following administration in food or drinking water compared to administration by gavage.
Ursprung och partinummer för alla reagenser (om möjligt).
DNA damage has been detected following administration in feed and drinking water, but there are relatively few such reports compared to the much greater experience with gavage and i.p. administration.
Utvärderingsmetoder för cytotoxicitet.
Thus the sensitivity of the assay may be reduced for chemicals which induce short-lived damage administered through feed or drinking water.
Elektroforesbetingelser.
No inter-laboratory studies have been conducted in tissues other than liver and stomach, therefore no recommendation has been established for how to achieve a sensitive and reproducible response in tissues other than liver, such as expected positive and negative control ranges.
Färgningstekniker.
For the liver, agreement on setting a lower limit to the negative control value also could not be reached.
Metoder för klassificering och mätning av kometer.
Although there are several publications demonstrating the confounding effect of cytotoxicity in vitro, very little data have been published in vivo and therefore no single measure of cytotoxicity could be recommended.
Allmänna kliniska observationer i förekommande fall, före och under testperioden för varje djur.
Histopathological changes such as inflammation, cell infiltration, apoptotic or necrotic changes have been associated with increases in DNA migration however, as demonstrated by the JaCVAM validation trial (OECD, 2014), these changes do not always result in positive comet findings and consequently no definitive list of histopathological changes that are always associated with increased DNA migration is available.
Bevis på cytotoxicitet i förekommande fall.
Hedgehogs (or clouds, ghost cells) have previously been suggested as an indicator of cytotoxicity, however, the etiology of the hedgehogs is uncertain.
För undersökningar som varar längre än en vecka: individuell vikt under försöket, inklusive kroppsviktsintervall, medelvärde och standardavvikelse för varje grupp samt foderkonsumtion.
Data exist which suggest that they can be caused by chemical-related cytotoxicity, mechanical/enzyme-induced damage initiated during sample preparation (Guerard et al., 2014) and/or a more extreme effect of test chemical genotoxicity.
Dos-responsförhållande, då detta är uppenbart.
Other data seem to show they are due to extensive, but perhaps repairable DNA damage (Lorenzo et al., 2013).
För varje vävnad/djur, procentandel DNAi kometsvans (eller andra mått i förekommande fall) samt medelvärden per analysplattform, medelvärden per djur och medelvärden per grupp.
Tissues or cell nuclei have been successfully frozen for later analysis.
Parallella och historiska negativa kontrolldata med omfång, medelvärden/medianvärden och standardavvikelser för varje utvärderad vävnad.
This usually results in a measurable effect on the response to the vehicle and positive control (Recio et al., 2010; Recio at al., 2012; Jackson at al., 2013).
Parallella och historiska positiva kontrolldata.
If used, the laboratory should demonstrate competency in freezing methodologies and confirm acceptable low ranges of % tail DNA in target tissues of vehicle treated animals, and that positive responses can still be detected.
För andra vävnader än lever, en dos-responskurva utifrån den positiva kontrollen.
In the literature, the freezing of tissues has been described using different methods.
Dos-responskurvan kan tas fram från data som samlats in under kvalifikationsprocessen (se punkterna 16–17) och bör åtföljas av en motivering med hänvisningar till aktuell litteratur, för att visa att omfattningen och spridningen av responser på kontroller hos vävnaden i fråga är lämpliga.
However, currently there is no agreement on how to best freeze and thaw tissues, and how to assess whether a potentially altered response may affect the sensitivity of the test.
Statistiska analyser och metoder samt kriterier för bedömning av responsen som positiv, negativ eller tvetydig.
Recent work demonstrates that the list of critical variables is expected to continue to become shorter and the parameters for critical variables more precisely defined (Guerard et al., 2014).
Frekvens av hedgehogs i varje grupp och per djur.
Lorenzo,Y. et al.
Durand (1990), Heterogeneity in radiation-induced DNA damage and repair in tumor and normal cells using the ”Comet” assay, Radiation Research, vol.
, Comparison of Comet assay dose-response for ethyl methanesulfonate using freshly prepared versus cryopreserved tissues, Environmental and Molecular Mutagenesis, Vol.
122/1, s.
53/2, pp. 101-13. ’
86–94.
In Part C, Chapter C.13 is replaced by the following:
Kapitel B.8 i denna bilaga: Subakut inhalationstoxicitet: 28-dagars studie.
Bioaccumulation in Fish: Aqueous and Dietary Exposure
Kapitel B.29 i denna bilaga: Subkronisk inhalationstoxicitet: 90-dagars studie.
This test method (TM) is equivalent to OECD test guideline (TG) 305 (2012).
OECD (2002), ”Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation”, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No.
The major goal of this revision of test method is two-fold.
19, OECD Publishing, Paris.
Firstly, it is intended to incorporate a dietary bioaccumulation [20] test suitable for determining the bioaccumulation potential of substances with very low water solubility.
Alkaline single cell gel electrophoresis (enkelcell-gelelektrofores under alkaliska betingelser)
Secondly, it is intended to create a test method that, when appropriate, utilises fewer fish for animal welfare reasons, and that is more cost-effective.
känslig teknik för detektion av primära DNA-skador i individuella celler/kärnor.
In the years since adoption of the consolidated test method C.13 (1), numerous substances have been tested, and considerable experience has been gained both by laboratories and by regulatory authorities.
Komet
This has led to the conviction that the complexity of the test can be reduced if specific criteria are met (cf. paragraph 88), and that a tiered approach is possible.
den form som nukleoider antar efter att ha utsatts för ett elektroforesfält.
Experience has also shown that biological factors such as growth and fish lipid content can have a strong impact on the results and may need to be taken into account.
Namnet beror på att de liknar kometer: komethuvudet är kärnan och kometsvansen består av DNA som migrerar ut från kärnan i det elektriska fältet.
In addition, it has been recognised that testing very poorly water soluble substances may not be technically feasible.
Kritisk variabel/parameter
In addition, for substances with very low water solubility in the aquatic environment, exposure via water may be of limited importance in comparison to the dietary route.
protokollvariabel för vilken en liten ändring kan ha stor inverkan på försökets slutsatser.
This has led to the development of a test method in which fish are exposed via their diet (cf. paragraph 7-14 and 97 onwards).
Kritiska variabler kan vara vävnadsspecifika.
Validation (ring test) of the dietary exposure test was conducted in 2010 (51).
De kritiska variablerna bör inte ändras, särskilt inte inom ett test, utan att man först överväger hur ändringen kommer att påverka försöksresponsen, t.ex. enligt omfattning och variabilitet i de positiva och negativa kontrollerna.
The main changes include:
Ändringar av kritiska variabler som gjorts under testet eller jämfört med laboratoriets standardprotokoll ska anges i testrapporten och varje ändring ska motiveras.
The testing of only one test concentration can be considered sufficient, when it is likely that the bioconcentration factor (BCF) is independent of the test concentration.
Intensitet i kometsvans eller procentandel DNA i kometsvans (Tail intensity eller % tail DNA)
A minimised aqueous exposure test design in which a reduced number of sample points is possible, if specific criteria are met.
motsvarar intensiteten i kometsvansen i förhållande till total intensitet (komethuvud plus kometsvans).
Fish lipid content should be measured so that BCF can be expressed on a 5 % lipid content basis.
Avspeglar antalet DNA-brott, uttryckt i procent.
Greater emphasis on kinetic BCF estimation (when possible) next to estimating the BCF at steady state.
UTFORMNING AV FAKTORFÖRSÖK FÖR IDENTIFIERING AV SKILLNADER MELLAN KÖNEN I IN VIVO COMET ASSAY
For certain groups of substances, a dietary exposure test will be proposed, where this is considered more suitable than an aqueous exposure test.
I denna utformning testas minst fem hanar och fem honor vid varje koncentrationsnivå, vilket innebär att minst 40 djur måste användas (20 hanar och 20 honor plus relevanta positiva kontroller).
Fish weight should be measured so that BCFk can be corrected for growth dilution.
Analysen delar upp variationen i datauppsättningen mellan kön, koncentrationer och interaktionen mellan kön och koncentrationer.
Before carrying out any of the bioaccumulation tests, the following information about the test substance should be known:
Fullständig information om den underliggande metoden finns i många statistiska läroböcker (se litteraturhänvisningar) och i hjälpavsnitt i statistiska paket.
Sensitivity of the analytical technique for measuring tissue and aqueous or food concentrations of both the test substance and possible metabolites (cf. paragraph 65).
AKTUELLA BEGRÄNSNINGAR HOS FÖRSÖKET
Solubility in water [TM A.6; (2)]; this should be determined in accordance with a method that is appropriate for the (estimated) range of the solubility to obtain a reliable value.
På grund av nuvarande kunskapsstatus har kometmetoden flera begränsningar.
For hydrophobic substances, this will generally be the column elution method.
Det förväntas att dessa begränsningar kommer att minskas eller definieras mer snävt allteftersom erfarenheterna av tillämpningen av försöket ökar för att bemöta säkerhetsfrågor i lagstiftningssammanhang.
n-Octanol-water partition coefficient, KOW [21] [TMs A.8 (4), A.24 (5), A.23 (6)]; or other suitable information on partitioning behaviour (e.g. sorption to lipids, KOC); this should be determined in accordance with a method that is appropriate for the (estimated) range of the KOW to obtain a reliable value.
Vissa typer av DNA-brott kan vara kortlivade, dvs. kan repareras för snabbt för att kunna observeras 24 timmar eller senare efter den sista dosen.
For hydrophobic substances, this will generally be the slow-stirring method [TM A.23 (6)];
Det saknas uppgifter om typerna av kortlivade skador och de kemikalier som kan orsaka sådana skador.
Substance stability in water (hydrolysis [TM C.7 (7)]);
Den tidsperiod då denna typ av skada kan detekteras är inte heller känd.
Substance stability in food (specifically when a dietary exposure test approach is chosen);
Optimala provtagningstillfällen kan även vara specifika för kemikalien eller administreringsvägen och bör därför fastställas med utgångspunkt i kinetiska data (t.ex. den tidpunkt (Tmax) då högsta värde för plasma eller vävnadskoncentration (Cmax) uppnås) om sådana data finns tillgängliga.
Information on phototransformation relevant for the irradiation conditions in the test (8);
Enligt de flesta valideringsstudier som stöder denna testmetod bör obduktion utföras två eller tre timmar efter administreringen av slutdosen.
Surface tension (i.e. for substances where the log KOW cannot be determined) [TM A.5 (9)];
Enligt de flesta studier i den publicerade litteraturen bör slutdosen ges mellan två och sex timmar före avlivning.
Vapour pressure [TM A.4 (10)];
Dessa erfarenheter användes som underlag för testmetodens rekommendation att slutdosen, om inte annat anges i tillgängliga data, bör administreras vid en angiven tidpunkt mellan två och sex timmar före obduktion.
Any information on biotic or abiotic degradation in water, such as (but not restricted to) ready biodegradability [TMs C.4 parts II to VII (11), C.29 (12)], where appropriate;
Det finns inga uppgifter om testets känslighet för detektion av kortlivade DNA-skador efter administrering i foder eller dricksvatten jämfört med administrering via sond.
Information on metabolites: structure, log KOW, formation and degradability, where appropriate;
DNA-skador har detekterats efter administrering i foder och dricksvatten, men det finns relativt få sådana rapporter jämfört med den mycket större erfarenheten av administrering via sond eller intraperitonealt (i.p.).
Acid dissociation constant (pKa) for substances that might ionise.
Försökets känslighet kan därför minskas för kemikalier som inducerar kortlivad skada och som administreras via föda eller dricksvatten.
If necessary, the pH of the test water should be adjusted to ensure that the substance is in the unionised form in the test if compatible with fish species.
Inga interlaborativa undersökningar har utförts av andra vävnader än lever och magsäck.
Independent of the chosen exposure method or sampling scheme, this test method describes a procedure for characterising the bioaccumulation potential of substances in fish.
Därför saknas rekommendationer om hur en känslig och reproducerbar respons uppnås i andra vävnader än lever, t.ex. förväntade positiva och negativa kontrollintervall.
Although flow-through test regimes are much to be preferred, semi-static regimes are permissible, provided that the validity criteria (cf. paragraphs 24 and 113) are satisfied.
För lever har man inte kunnat enas om att fastställa en lägre gräns även för det negativa kontrollvärdet.
In the dietary exposure route, the flow-through system is not necessary to maintain aqueous concentrations of the tested substance, but will help maintain adequate dissolved oxygen concentrations and help ensure clean water and remove influences of e.g. excretion products.
Även om flera publikationer visar på en störande effekt på cytotoxicitet in vitro finns mycket få in vivo-data, och därför kan inget särskilt cytotoxicitetsmått rekommenderas.
Independent of the chosen test method, sufficient details are given in this test method for performing the test while allowing adequate freedom for adapting the experimental design to the conditions in particular laboratories and for varying characteristics of test substances.
Histopatologiska förändringar såsom inflammation, cellinfiltration och apoptotiska och nekrotiska ändringar har kopplats till ökningar i DNA-migrationen.
The aqueous exposure test is most appropriately applied to stable organic substances with log KOW values between 1,5 and 6,0 (13) but may still be applied to strongly hydrophobic substances (having log KOW > 6,0), if a stable and fully dissolved concentration of the test substance in water can be demonstrated.
Såsom visats av JaCVAM:s valideringsförsök (OECD, 2014) leder dessa ändringar inte alltid till positiva komet-resultat och därför finns ingen definitiv förteckning över histopatologiska ändringar som alltid kan kopplas till ökad DNA-migration.
If a stable concentration of the test substance in water cannot be demonstrated, an aqueous study would not be appropriate thus the dietary approach for testing the substance in fish would be required (although interpretation and use of the results of the dietary test may depend on the regulatory framework).
Hedgehogs (eller moln, spökceller) har tidigare föreslagits som en indikator på cytotoxicitet, men etiologin för hedgehogs är osäker.
Pre-estimates of the bioconcentration factor (BCF, sometimes denoted as KB) for organic substances with log KOW values up to about 9,0 can be obtained using the equation of Bintein et al.
Det finns data som tyder på att de kan orsakas av kemikalierelaterad cytotoxicitet, mekanisk/enzyminducerad skada som uppstår under provberedningen (Guerard m.fl., 2014) och/eller en mer extrem effekt av testkemikaliens gentoxicitet.
The pre-estimate of the bioconcentration factor for such strongly hydrophobic substances may be higher than the steady-state bioconcentration factor (BCFSS) value expected to be obtained from laboratory experiments, especially when a simple linear model is used for the pre-estimate.
Andra data tyder på att de beror på omfattande men kanske reparerbar DNA-skada (Lorenzo m.fl., 2013).
Parameters which characterise the bioaccumulation potential include the uptake rate constant (k1), loss rate constants including the depuration rate constant (k2), the steady-state bioconcentration factor (BCFSS), the kinetic bioconcentration factor (BCFK) and the dietary biomagnification factor (BMF) [22].
Vävnader och cellkärnor har med framgång frysts ned för senare analys.
Radiolabelled test substances can facilitate the analysis of water, food and fish samples, and may be used to determine whether identification and quantification of metabolites will be necessary.
Detta leder vanligen till en mätbar effekt av responsen på vehikeln och den positiva kontrollen (Recio m.fl., 2010; Recio m.fl., 2012, Jackson m.fl., 2013).
If total radioactive residues are measured alone (e.g. by combustion or tissue solubilisation), the BCF or BMF is based on the total of the parent substance, any retained metabolites and also assimilated carbon.
Om nedfrysning används ska laboratoriet visa att det är kvalificerat för frysningsmetoder och bekräfta godtagbara låga intervall för procentandelen DNA i kometsvans i målvävnaderna hos vehikelbehandlade djur samt att positiva responser fortfarande kan detekteras.
BCF or BMF values based on total radioactive residues may not, therefore, be directly comparable to a BCF or BMF derived by specific chemical analysis of the parent substance only.
Olika metoder för nedfrysning av vävnader beskrivs i litteraturen.
Separation procedures, such as TLC, HPLC or GC [23] may be employed before analysis in radiolabelled studies in order to determine BCF or BMF based on the parent substance.
För närvarande råder det dock inte enighet om det bästa sättet att frysa ned och tina upp vävnader och hur man bedömer huruvida en eventuellt ändrad respons kan påverka testets sensitivitet.
When separation techniques are applied, identification and quantification of parent substance and relevant metabolites should be performed [24] (cf. paragraph 65) if BCF or BMF is to be based upon the concentration of the parent substance in fish and not upon total radiolabelled residues.
Nya uppgifter visar att förteckningen över kritiska variabler kommer att bli kortare och parametrarna för kritiska variabler mer exakt definierade (Guerard m.fl., 2014).
It is also possible to combine a fish metabolism or in vivo distribution study with a bioaccumulation study by analysis and identification of the residues in tissues.
Lorenzo,Y. m.fl.
The possibility of metabolism can be predicted by suitable tools (e.g. OECD QSAR toolbox (15) and proprietary QSAR programs).
I del C ska kapitel C. 13 ersättas med följande:
The decision on whether to conduct an aqueous or dietary exposure test, and in what set-up, should be based on the factors in paragraph 3 considered together with the relevant regulatory framework.
Bioackumulering i fisk: exponering via vatten och föda
For example, for substances, which have a high log KOW but still show appreciable water solubility with respect to the sensitivity of available analytical techniques, an aqueous exposure test should be considered in the first instance.
Denna testmetod motsvarar OECD:s testriktlinje (TG) 305 (2012).
However it is possible that information on water solubility is not definitive for these hydrophobic types of substances, so the possibility of preparing stable, measurable dissolved aqueous concentrations (stable emulsions are not allowed) applicable for an aqueous exposure study should be investigated before a decision is made on which test method to use (16).
Revisionen av denna testmetod har ett dubbelt syfte.
It is not possible to give exact prescriptive guidance on the method to be used based on water solubility and octanol-water partition coefficient “cut off” criteria, as other factors (analytical techniques, degradation, adsorption, etc.) can have a marked influence on method applicability for the reasons given above.
För det första är syftet att inbegripa ett lämpligt bioackumuleringstest med exponering via föda [20] för att fastställa bioackumuleringspotentialen hos ämnen med mycket dålig upplösningsförmåga i vatten.
However, a log KOW above 5 and a water solubility below ~ 0,01 - 0,1 mg/l mark the range of substances where testing via aqueous exposure may become increasingly difficult.
Det andra syftet är att skapa en testmetod där man om så är lämpligt använder färre fiskar av djurskyddsskäl, samtidigt som den är mer kostnadseffektiv.
Other factors that may influence test choice should be considered, including the substance's potential for adsorption to test vessels and apparatus, its stability in aqueous solution versus its stability in fish food (17) (18), etc.
Under de år som gått sedan den konsoliderade testmetoden C.13 (1) antogs har många ämnen testats och både laboratorierna och tillsynsmyndigheterna har vunnit avsevärd erfarenhet.