natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For determination of the ECx (e.g. EC10, EC50), at least five concentrations should be tested and the concentrations should bracket ECx in order to enable ECx interpolation and not extrapolation At least four replicates for each test concentration and four control replicates are recommended.
Vid slutet av provet bedöms maskarnas dödlighet.
The spacing factor may vary, i.e. less than or equal to 1,8 in the expected effect range and above 1,8 at the higher and lower concentrations.
En mask registreras som död om den inte reagerar på mekanisk retning på främre delen.
A combined approach allows for determination of both the NOEC and ECx.
Ytterligare information rörande dödligheten kan också vara användbar för att avgöra vilket koncentrationsintervall som ska användas i det definitiva testet.
Eight treatment concentrations in a geometric series should be used.
Förändringar i adulternas beteende (t.ex. oförmåga att gräva ner sig i jorden, maskar ligger orörliga mot testkärlets glasvägg) och morfologi (t.ex. öppna sår) bör därför också registreras, liksom eventuell förekomst av juveniler.
Four replicates for each treatment plus eight controls are recommended.
Det senare kan fastställas med hjälp av den färgningsmetod som beskrivs i tillägg 6.
Ten adult worms per test vessel should be used (see paragraph 23).
Ett approximativt värde på LC50 kan fastställas genom beräkning av mortalitetsuppgifternas geometriska medelvärde.
Food is added to the test vessels at the beginning of the test and then once a week (see paragraph 29) up to and including Day 21.
När man fastställer koncentrationsintervallet för det definitiva testet antas effekterna på fortplantningen vara lägre än LC50 med en faktor på upp till 10.
On Day 21 the soil samples are carefully hand searched and living adult worms are observed and counted and changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and in morphology (e.g. open wounds) are recorded.
Detta är dock ett empiriskt förhållande och i ett enskilt fall kan det skilja sig.
All adult worms are then removed from the test vessels and the test soil.
Ytterligare iakttagelser i det preliminära testet, t.ex. förekomst av juveniler, kan bidra till att finjustera det koncentrationsintervall för testkemikalien som ska användas i det definitiva testet.
The test soil containing any cocoons that had been produced are incubated for three additional weeks under the same test conditions except that feeding takes place only on Day 35 (i.e. 25 mg ground rolled oats per vessel).
För att en noggrann bestämning av LC50 ska kunna göras rekommenderas att testet utförs med minst fyra replikat för varje koncentration av testkemikalien och ett tillräckligt antal koncentrationer för att framkalla minst fyra olika statistiskt signifikanta genomsnittliga responser på dessa koncentrationer.
After six weeks, the newly hatched worms are counted.
Ett liknande antal koncentrationer och replikat för kontrollerna ska användas när detta är tillämpligt.
The method based on Bengal red staining (see Appendix 6) is recommended although other wet (but not heat) extraction and floatation techniques (see Appendix 6) have also proved suitable (4)(10)(11)(20).
Utformning av det definitiva reproduktionstestet
Bengal red staining is recommended because wet extraction from a soil substrate can be hampered by turbidity caused by suspended clay particles.
Tre utformningar föreslås på grundval av de rekommendationer som ett ringtest ger upphov till (2).
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using 1000 mg/kg in order to demonstrate that the NOEC for reproduction is greater than this value.
För bestämning av NOEC bör minst fem koncentrationer i en geometrisk serie testas.
Summary and timetable for the test
Det rekommenderas att man använder fyra replikat för varje testkoncentration plus åtta kontroller.
The steps of the test can be summarised as follows:
Koncentrationerna bör skilja sig åt med en faktor på högst 1,8.
Time
För bestämning av ECx (t.ex.
Day –7 or earlier
EC10, EC50), bör minst fem koncentrationer testas, och ECx ska ligga innanför intervallet av testkoncentrationer så att det blir möjligt att interpolera snarare än extrapolera ECx.
Prepare artificial soil (mixing of dry constituents)
Det rekommenderas att man använder minst fyra replikat för varje testkoncentration och fyra kontrollreplikat.
Day –5
Koncentrationernas inbördes avståndsfaktor kan variera, dvs. den kan vara mindre än eller lika med 1,8 i det förväntade effektintervallet och större än 1,8 vid högre och lägre koncentrationer.
Check pH of artificial soil
Ett kombinerat tillvägagångssätt möjliggör bestämning av både ECx och NOEC.
Measure max WHC of soil
Man bör använda åtta testkoncentrationer i en geometrisk serie.
Day –5 to –3
Det rekommenderas att man har fyra replikat per testkärl plus åtta kontroller.
Sort worms for acclimatisation
Varje testkärl ska innehålla tio adulter (se punkt 23).
Day — 3 to 0
Foder tillsätts i testbehållarna i början av testet och därefter en gång per vecka (se punkt 29) upp till och inklusive dag 21.
Acclimatise worms for at least 24 hours
Dag 21 genomsöks jordproven försiktigt för hand och de levande adulta maskarna undersöks och räknas, och förändringar i beteende (t.ex. oförmåga att gräva ner sig i jorden, maskar ligger orörliga mot testkärlets glasvägg) och morfologi (t.ex. öppna sår) registreras.
Day –1
Alla adulter avlägsnas från testkärlen och testjorden.
Pre-moisten artificial soil and distribute into batches
Testjorden med de kokonger som har producerats inkuberas i ytterligare tre veckor under samma testförhållanden, förutom att utfodring sker endast dag 35 (25 mg malda havregryn per kärl).
Day 0
Efter sex veckor räknas de nykläckta maskarna.
Prepare stock solutions
Det rekommenderas att man använder metoden som bygger på kontrastfärgning med rött (se tillägg 6), även om andra våta (men inte varma) extraktions- och flotationstekniker (se tillägg 6) också har visat sig vara lämpliga (4) (10) (11) (20).
Apply test chemical
Röd kontrastfärgning rekommenderas eftersom våt extraktion från ett jordsubstrat kan förhindras av grumlighet som orsakas av suspenderade lerpartiklar.
Weigh test substrate into test vessels
Om inga effekter observeras vid den högsta koncentrationen i det preliminära testet (dvs. 1000 mg/kg), kan reproduktionstestet utföras som ett toleranstest med 1000 mg/kg för att visa att NOEC för reproduktion är större än detta värde.
Mix in food
Sammanfattning och tidsplan för testet
Introduce worms
Stegen i testet kan sammanfattas på följande sätt:
Measure soil pH and moisture content
Tid
Day 7
Dag – 7 eller tidigare
Check soil moisture content
Bered syntetisk jord (blandning av torra beståndsdelar).
Feed
Dag – 5
Day 14
Kontrollera pH i den syntetiska jorden
Determine adult mortality
Mät jordens maximala vattenhållningskapacitet.
Estimate number of juveniles
Dag – 5 till – 3
Day 21
Sortera maskar för acklimatisering
Observe adult behaviour
Dag – 3 till 0
Remove adults
Låt maskarna acklimatisera sig i minst 24 timmar
Day 28
Dag – 1
No feeding
Förhandsfukta den syntetiska jorden och fördela i partier
Count juvenile worms
Applicera testkemikalien
Treatment of results
Väg testsubstratet i testkärlen
Although an overview is given in Appendix 7, no definitive statistical guidance for analysing test results is given in this test method.
Blanda ner foder
In the range finding test, the main endpoint is mortality.
Tillsätt maskarna
Changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and morphology (e.g. open wounds) of the adult worms should however also be recorded along with the presence of any juveniles.
Mät jordens pH-värde och vattenhalt
Probit analysis (21) or logistic regression should normally be applied to determine the LC50.
Dag 7
However, in cases where this method of analysis is unsuitable (e.g., if less then three concentrations with partial kills are available), alternative methods can be used.
Kontrollera jordens fukthalt
These methods could include moving averages (22), the trimmed Spearman-Karber method (23) or simple interpolation (e.g., geometrical mean of LC0 and LC100, as computed by the square root of LC0 multiplied by LC100).
Utfodra
In the definitive test, test endpoint is fecundity (i.e. number of juveniles produced).
Dag 14
However, as in the range-finding test, all other harmful signs should be recorded in the final report.
Fastställ dödligheten bland adulter
The statistical analysis requires the arithmetic mean and the standard deviation per treatment and per control for reproduction to be calculated.
Uppskatta antalet juveniler
If an analysis of variance has been performed, the standard deviation, s, and the degrees of freedom, df, may be replaced by the pooled variance estimate obtained from the ANOVA and by its degrees of freedom, respectively — provided variance does not depend on the concentration.
Dag 21
In this case, use the single variances of control and treatments.
Observera beteendet hos adulter
Those values are usually calculated by commercial statistical software using the per-vessel results as replicates.
Avlägsna adulter
If pooling of data for the negative and solvent controls appears reasonable rather than testing against one of those, they should be tested to see that they are not significantly different (for appropriate tests see paragraph 45 and Appendix 7).
Dag 28
Further statistical testing and inference depends on whether the replicate values are normally distributed and are homogeneous with regard to their variance.
Ingen utfodring
NOEC Estimation
Dag 35
The application of powerful tests should be preferred.
Dag 42
One should use information e.g. from previous experience with ring-testing or other historic data on whether data are approximately normally distributed.
Räkna juveniler
Variance homogeneity (homoscedasticity) is more critical.
Behandling av resultaten
Experience tells that the variance often increases with increasing mean.
Även om en översikt ges i tillägg 7 ges ingen definitiv statistisk vägledning för hur testresultaten ska analyseras i denna testmetod.
In these cases, a data transformation could lead to homoscedasticity.
I det preliminära testet är den huvudsakliga endpointen dödlighet.
However, such a transformation should be based on experience with historic data rather than on data under investigation.
Förändringar i adulternas beteende (t.ex. oförmåga att gräva ner sig i jorden, maskar ligger orörliga mot testkärlets glasvägg) och morfologi (t.ex. öppna sår) bör dock också registreras, liksom eventuell förekomst av juveniler.
With homogeneous data, multiple t-tests such as Williams' test (α = 0,05, one-sided) (24)(25) or in certain cases Dunnett's test (26)(27) should be performed.
Probitanalys (21) eller logistisk regressionsanalys bör normalt användas för bestämning av LC50.
It should be noted that, in the case of unequal replication, the table t-values must be corrected as suggested by Dunnett and Williams.
I de fall då denna analysmetod är olämplig (t.ex. om färre än tre koncentrationer med partiell dödlighet finns tillgängliga) kan alternativa metoder tillämpas.
Sometimes, because of large variation, the responses do not increase/decrease regularly.
Exempel på sådana är glidande medelvärden (22), den modifierade Spearman-Karbermetoden (23) eller enkel interpolering (t.ex. det geometriska medelvärdet av LC0 och LC100, som beräknats genom att kvadratroten av LC0 multiplicerats med LC100).
In this case of strong deviation from monotonicity the Dunnett's test is more appropriate.
I det definitiva testet är endpointen fekunditet (dvs. antalet avkommor som producerats).
If there are deviations from homoscedasticity, it may be reasonable to investigate possible effects on variances more closely to decide whether the t tests can be applied without losing much power (28).
Liksom i det preliminära testet bör alla andra skadliga tecken registreras i slutrapporten.
(see also the scheme in Appendix 7).
Om en variansanalys har utförts kan standardavvikelsen s och frihetsgraderna df ersättas av den sammanlagda uppskattningen av variansen som erhållits från variansanalysen (ANOVA) respektive dess frihetsgrader – förutsatt att variansen inte är beroende av koncentrationen.
If a limit test has been performed and the prerequisites of parametric test procedures (normality, homogeneity) are fulfilled, the pair-wise Student t-test can be used or otherwise the Mann-Whitney-U-test procedure (29).
I detta fall ska de enskilda varianserna i kontroll- och testenheter användas.
ECx Estimation
Dessa värden beräknas normalt med hjälp av kommersiell programvara för statistik med användning av resultaten per kärl som replikat.
To compute any ECx value, the per-treatment means are used for regression analysis (linear or non-linear), after an appropriate dose-response function has been obtained.
Om det förefaller vara rimligt att slå ihop data för negativa kontroller och kontroller med lösningsmedel snarare än att testa mot en av dem bör de testas för att säkerställa att det inte finns betydande skillnader mellan dem (för lämpliga tester se punkt 45 och tillägg 7).
For the growth of worms as a continuous response, ECx- -values can be estimated by using suitable regression analysis (35).
Ytterligare statistisk testning och slutsatser beror på om värdena för replikaten är normalt fördelade och enhetliga med avseende på variansen.
Among suitable functions for quantal data (mortality/survival and number of offspring produced) are the normal sigmoid, logistic or Weibull functions, containing two to four parameters, some of which can also model hormetic responses.
Uppskattning av NOEC
If a dose-response function was fitted by linear regression analysis a significant r2 (coefficient of determination) and/or slope should be found with the regression analysis before estimating the ECx by inserting a value corresponding to x % of the control mean into the equation found by regression analysis.
Man bör främst använda kraftfulla tester.
95 %-confidence limits are calculated according to Fieller (cited in Finney (21)) or other modern appropriate methods.
Man bör använda information t.ex. från tidigare erfarenheter med ringtester eller andra tidigare uppgifter om huruvida data är ungefär normalt fördelade.
Alternatively, the response is modelled as a percent or proportion of model parameter which is interpreted as the control mean response.
Variansens homogenitet (homoskedasticitet) är av mer avgörande betydelse.
In these cases, the normal (logistic, Weibull) sigmoid curve can often be easily fitted to the results using the probit regression procedure (21).
Erfarenheter visar att variansen ofta ökar med ett ökande medelvärde.
In these cases the weighting function has to be adjusted for metric responses as given by Christensen (36).
I dessa fall kan en datatransformation leda till homoskedasticitet.
However, if hormesis has been observed, probit analysis should be replaced by a four-parameter logistic or Weibull function, fitted by a non-linear regression procedure (36).
En sådan omvandling bör dock bygga på erfarenheterna från tidigare uppgifter i stället för på uppgifter som håller på att undersökas.
If a suitable dose-response function cannot be fitted to the data, one may use alternative methods to estimate the ECx, and its confidence limits, such as Moving Averages after Thompson (22) and the Trimmed Spearman-Karber procedure (23).
Med homogena data bör flera t-tester, såsom Williams test (α = 0,05, asymmetriskt) (24) (25) eller i vissa fall Dunnetts test (26) (27), utföras.
The test report must include the following information:
När det gäller ojämn förökning bör det noteras att t-värdena i tabellen måste korrigeras i enlighet med Dunnett och Williams.
physical nature and, where relevant physical-chemical properties (e.g. water solubility, vapour pressure);
Ibland ökar/minskar reaktionerna inte regelbundet på grund av stor variation.
chemical identification of the test chemical according to IUPAC nomenclature, CAS-number, batch, lot, structural formula and purity;
I ett sådant fall med kraftig avvikelse från monotonicitet är Dunnetts test lämpligare.
expiry date of sample.
Om det finns avvikelser från homoskedasticiteten kan det vara rimligt att närmare undersöka de möjliga effekterna på variansen för att besluta om t-testerna kan tillämpas utan att förlora mycket av sin effekt (28).
test animals used:
Om ett toleranstest har utförts och de nödvändiga förutsättningarna för parametriska testförfaranden (normalitet, homogenitet) är uppfyllda, kan ett parvist Students t-test användas eller i annat fall Mann och Whitneys U-testförfarande (29).
species, scientific name, source of organisms and breeding conditions.
Bestämning av ECx
ingredients and preparation of the artificial soil;
När man beräknar ECx-värden används medelvärdena per testkärl för regressionsanalys (linjär eller icke-linjär) efter att en lämplig dos-responsfunktion har erhållits.
method of application of the test chemical;
För maskarnas tillväxt som en kontinuerlig respons kan ECx-värdena uppskattas genom användning av en lämplig regressionsanalys (35).
description of the test conditions, including temperature, moisture content, pH, etc.;
Bland lämpliga funktioner för dikotoma data (mortalitet/överlevnad och antal avkommor) återfinns de normala sigmoida eller logistiska funktionerna eller Weibull-funktionen med två till fyra parametrar, varav vissa även kan uttrycka hormetiska responser.
full description of the experimental design and procedures.
Om en dos-respons-funktion anpassas genom linjär regressionsanalys bör en signifikant determinationskoefficient (r2) och/eller lutning konstateras med regressionsanalysen innan ECx uppskattas genom att ett värde som motsvarar x % av genomsnittet för kontrollen infogas i den ekvation som utgör resultatet av regressionsanalysen.
Test results:
De 95-procentiga konfidensgränserna beräknas enligt Fieller (hänvisning i Finney (21)) eller andra lämpliga moderna metoder.
mortality of adult worms after two weeks and the number of juveniles at the end of the range-finding test;
Alternativt kan responsen uttryckas som en procentandel eller en andel av den modellparameter som tolkas som den genomsnittliga responsen för kontrollen.
mortality of adult worms after three weeks exposure and the full record of juveniles at the end of the definitive test;
I dessa fall kan den normala (logistiska, Weibullska) sigmoida kurvan ofta lätt anpassas till resultaten med hjälp av probitregressionsförfarandet (21).
any observed physical or pathological symptoms and behavioural changes in the test organisms;
I dessa fall måste viktningsfunktionen justeras för metriska responser i enlighet med Christensen (36).
the LC50, the NOEC and/or ECx (e.g. EC50, EC10) for reproduction if some of them are applicable with confidence intervals, and a graph of the fitted model used for its calculation all information and observations helpful for the interpretation of the results.
Om hormesis har iakttagits bör probitanalysen dock ersättas med en logistisk funktion eller en Weibullfunktion, i båda fallen med fyra parametrar, anpassad genom ett icke-linjärt regressionsförfarande (36).
Deviations from procedures described in this test method and any unusual occurrences during the test.
Om en lämplig dos-responsfunktion inte kan anpassas till data kan man använda alternativa metoder för att uppskatta ECx och dess konfidensgränser, t.ex. glidande medelvärden efter Thompson (22) och det modifierade Spearman-Karberförfarandet (23).
Frankfurt für das Umweltbundesamt (Berlin), FE-Vorhaben 106 03 051/01.
Testrapporten ska innehålla följande uppgifter:
Chapter C.8 of this Annex, Toxicity for Earthworms.
fysikalisk form och i tillämpliga fall fysikalisk-kemiska egenskaper (t.ex. vattenlöslighet, ångtryck),
Part 1:
kemisk identifiering av testkemikalien i enlighet med IUPAC-nomenklatur, CAS-nummer, sändning, parti, strukturformel och renhet,
Part 2:
provets utgångsdatum.
Determination of effects on reproduction, No. 11268-2.
de använda försöksdjuren:
For the purpose of this test method the following definitions are applicable:
art, vetenskapligt namn, källa och uppfödningsbetingelser.
In this test the effect concentrations are expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
ingredienser till och beredning av den syntetiska jorden,
(No lethal concentration) is the concentration of a test chemical that does not kill any of exposed test organisms within a given time period.
appliceringsmetod för testkemikalien,
In this test the LC0 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
beskrivning av testbetingelserna, inklusive temperatur, vattenhalt, pH-värde etc.,
(Median lethal concentration) is the concentration of a test chemical kills 50 % of exposed test organisms within a given time period.
fullständig beskrivning av experimentets utformning och förfaranden.
In this test the LC50 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
Testresultat:
(Totally lethal concentration) is the concentration of a test chemical kills 100 % of exposed test organisms within a given time period.
dödligheten bland adulter efter två veckor samt antal juveniler i slutet av det preliminära testet,
In this test the LC100 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
dödligheten bland adulter efter tre veckors exponering och fullständiga uppgifter om juvenilerna i slutet av det definitiva testet,
LOEC (Lowest Observed Effect Concentration) is the lowest test chemical concentration that has a statistically significant effect (p < 0,05).
alla observerade fysiska eller patologiska symtom eller beteendeförändringar hos testorganismerna,
In this test the LOEC is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
, NOEC och/eller ECx (t.ex.
All test concentrations above the LOEC should normally show an effect that is statistically different from the control.
EC50, EC10) för reproduktionen om vissa av dem är tillämpliga med konfidensintervallen, och en kurva som representerar den anpassade modell som har använts för beräkningen, samt alla uppgifter och observationer som kan vara till nytta vid tolkningen av resultaten.
Any deviations from the above in identifying the LOEC must be justified in the test report.
Avvikelser från de förfaranden som beskrivs i denna testmetod och ovanliga händelser under testets gång.
NOEC (No Observed Effect Concentration) is the highest test chemical concentration immediately below the LOEC at which no effect is observed.
Kapitel C.8 i denna bilaga, Toxicitet hos daggmaskar.
Reproduction rate is the mean number of juvenile worms produced per a number of adults over the test period.
Del 1:
Determination of the maximum water holding capacity
Del 2:
Determination of the water holding capacity of the artificial soil
Bestämning av effekter på reproduktion, nr 11268-2.
The following method has been found appropriate.
I denna testmetod gäller följande definitioner: Kemikalie
It is described in Annex C of the ISO DIS 11268-2.
I detta test uttrycks effektkoncentrationerna som testkemikaliens vikt per torrvikt testjord.
Collect a defined quantity (e.g. 5 g) of the test soil substrate using a suitable device (auger tube etc.).
(letal koncentration 0 %) den koncentration av testkemikalien som inte orsakar någon av de exponerade testorganismernas död under en given tidsperiod.
Cover the bottom of the tube with a piece of filter paper and, after filling with water, place it on a rack in a water bath.
I detta test uttrycks LC0-värdet som testkemikaliens vikt per torrvikt testjord.
The tube should be gradually submerged until the water level is above to the top of the soil.
(letal koncentration 50 %) den koncentration av testkemikalien som orsakar 50 % av de exponerade testorganismernas död under en given tidsperiod.
It should then be left in the water for about three hours.
I detta test uttrycks LC50-värdet som testkemikaliens vikt per torrvikt testjord.