natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This length range is indicated in the Testing Methods for New Chemical Substances etc. based on the Japan's Chemical Substances Control Law (CSCL).
Totalt organiskt kol (TOC) är ett mått på koncentrationen av kol som härrör från alla organiska källor i testmediet, inklusive partiklar och upplösta källor.
Theoretical example of a sampling schedule for a full aqueous exposure bioconcentration test of a substance with log KOW = 4.
Konstanten för upptagningsförhållandet (k1) är det numeriska värde som definierar ökningshastigheten av koncentrationen av det undersökta ämnet i/på den undersökta fisken eller specificerad vävnad därav, när fisken exponeras för nämnda ämne (k1 uttrycks som l kg– 1 dag– 1).
Fish Sampling Sample time schedule
Ämnen med okänd eller varierande sammansättning, komplexa reaktionsprodukter eller biologiskt material benämns UVCB-ämnen.
No. of water samples [1]
Kemikalie ett ämne eller en blandning.
No. of fish per sample [1] Minimal required frequency (days) [2] Additional sampling (days) [2] Uptake phase
Testkemikalie varje ämne eller blandning som testas med denna testmetod.
(3 [6]) 2 0,3 2
Kapitel A.8 i denna bilaga, Fördelningskoefficient (n-oktanol/vatten): Skakkolvmetoden
8 5,9
NÅGRA KEMISKA EGENSKAPER FÖR GODTAGBART UTSPÄDNINGSVATTEN
TOTAL
Koncentrationsgränsvärde
Theoretical example of sampling schedule for dietary bioaccumulation test of substance following 10 day uptake and 42 day depuration phases.
Partiklar
Sampling event
Halt av organiskt kol
Sample time schedule
Icke-joniserad ammoniak
No. food samples
Resterande mängd klor
No. fish per sample
Total mängd bekämpningsmedel som innehåller organiska fosforföreningar
Day of phase
< 50 ng/l
Additional fish samples?
Total mängd bekämpningsmedel som innehåller organiska klorföreningar plus polyklorerade bifenyler
Test Group
Total mängd organiskt klor
Control Group
< 25 ng/l
Uptake phase
Arsenik
3 — test group
Krom
3 — control group [7]
Kobolt
Yes [10]
Koppar
Depuration phase
Järn
Note on phase and sampling timings: The uptake phase begins with the first feeding of spiked diet.
Bly
An experimental day runs from one feeding until shortly before the next, 24 hours later.
Zink
The first sampling event (1 in the table) should be taken shortly before the first feeding (e.g. one hour).
Kadmium
Sampling during a study should ideally be carried out shortly before the following day's feeding (i.e. about 23 hours after the sample day's feeding).
< 100 ng/l
The uptake phase ends shortly before the first feeding with unspiked diet, when the depuration phase begins (test group fish are likely to be still digesting spiked feed in the intervening 24 hours after the last spiked diet feeding).
Kvicksilver
Pre-test estimate of k2 for log KOW of 4,0 is 0,652 days– 1.
Rekommenderat temperaturområde för undersökningen (°C)
The total duration of the experiment is set to 3 × tSS = 3 × 4,6 days, i.e. 14 days.
Rekommenderad total längd på det undersökta djuret (cm) [2]
For the estimation of tSS refer to Appendix 5.
(Hamilton-Buchanan) Sebrafisk
Sample water after a minimum of 3 “chamber-volumes” has been delivered.
(Rafinesque) Knölskallelöja
These fish are sampled from the stock population.
(Linnaeus) Karp
If greater precision or metabolism studies are necessary that require more fish, these should be sampled particularly at the end of the uptake and depuration phases (cf. paragraph 40).
(Temminck och Schlegel) Risfisk
At least 3 additional fish may be required for lipid content analysis if it is not possible to use the same fish sampled for substance concentrations at the start of the test, the end of the uptake phase and the end of the depuration phase.
(Rafinesque) Blågälad solabborre
Note it should be possible in many cases to use the 3 control fish alone (cf. paragraph 56).
(Walbaum) Regnbåge
3 samples of feed from both control and test groups analysed for test substance concentrations and for lipid content.
(Linnaeus) Storspigg
Fish are sampled from the stock population as near to the start of the study as possible; at least 3 fish from the stock population at test start should be sampled for lipid content.
18–20
(Optional) sampling early in the uptake phase provides data to calculate dietary assimilation of test substance that can be compared with the assimilation efficiency calculated from the depuration phase data.
Flera söt- och saltvattenarter har använts i mindre utsträckning, t.ex.
5 extra fish may be sampled for tissue-specific analysis.
Slätkväkare
Note it should be possible in many cases to use the 3 control fish alone (cf. paragraphs 56 and 153).
Sheepshead minnow (art av tandkarp)
GENERAL CALCULATIONS
Silverlax
Introduction
Abborre
Prediction of the duration of the uptake phase
Sjötunga
Prediction of the duration of the depuration phase
(Leptocottus armatus) Storspigg
Sequential method: determination of depuration (loss) rate constant k2
Havsabborre
Sequential method: determination of uptake rate constant k1 (aqueous exposure method only)
Löja
Lipid normalisation to 5 % lipid content (aqueous exposure method only)
Dessa fiskar finns tillgängliga i stora delar av världen.
The general fish aquatic bioaccumulation model can be described in terms of uptake and loss processes, ignoring uptake with food.
Det bör noteras att i själva testet är vikt att föredra som mått för att härleda storlek och tillväxtkonstanter.
The differential equation (dCf/dt) describing the rate of change in fish concentration (mg·kg– 1·day– 1) is given by (1):
Längd är dock ett mer praktiskt mått om fisken väljs på avstånd i början av försöket (dvs. från stampopulationen).
[Equation A5.1]
Detta längdintervall anges i testningsmetoder för nya kemiska ämnen osv., baserat på Japans lag om kontroll av kemiska ämnen (CSCL).
Where
1 Teoretiskt exempel på ett provtagningsschema för ett fullständigt biokoncentrationstest av ett ämne via vattenexponering med log KOW = 4.
First order rate constant for uptake into fish (l·kg– 1·day– 1).
Antal vattenprover [1]
First order rate constant for depuration from fish (day– 1).
TOTALT
First order rate constant for fish growth (‘growth dilution’) (day– 1)
Teoretiskt exempel på ett provtagningsschema för ett bioackumuleringstest av ett ämne via föda efter en upptagningsfas på 10 dagar och en utsöndringsfas på 42 dagar.
First order rate constant for metabolic transformation (day– 1)
Provtagningshändelse
First order rate constant for faecal egestion (day– 1)
Tidsschema för provtagning
It should be noted that the ln-transformation of the water concentration is suitable when exponential decay between renewal periods is expected, e.g. in a semi-static test design.
Testgrupp
In a flow through system, ln-transformation of exposure concentrations may not be needed.
Kontrollgrupp
If TWA water concentrations are derived, they should be reported and used in subsequent calculations.
Upptagningsfas
In a standard fish BCF test uptake and depuration can be described in terms of two first order kinetic processes.
3 – testgrupp
Rate of uptake = k1 × Cw
3 – kontrollgrupp [7]
[Equation A5.2]
Ja [10]
Overall loss rate = (k2 + kg + km + ke) × Cf
Utsöndringsfas
[Equation A5.3]
Anmärkning om tidpunkter för de olika faserna samt provtagning: Upptagningsfasen inleds med den första utfodringen med behandlat foder.
At steady-state, assuming growth and metabolism are negligible (i.e. the values for kg and km cannot be distinguished from zero), the rate of uptake equals the rate of depuration, and so combining Equation A5.2 and Equation A5.3 gives the following relationship:
En försöksdag löper från en utfodring till kort före nästa utfodring, 24 timmar senare.
[Equation A5.4]
Det första provtagningstillfället (1 i tabellen) bör utföras kort före den första utfodringen (t.ex. en timme).
Concentration in fish at steady-state (mg kg– 1 wet weight).
Provtagningen bör helst utföras kort före följande dags utfodring (dvs. cirka 23 timmar efter provdagens utfodring).
Concentration in water at steady-state (mg l– 1).
Upptagningsfasen slutar kort före den första utfodringen med behandlat foder, när utsöndringsfasen börjar (testgruppens fiskar håller sannolikt fortfarande på att smälta det behandlade fodret under de mellanliggande 24 timmarna efter den sista utfodringen med behandlat foder).
The ratio of k1/k2 is known as the kinetic BCF (BCFK) and should be equal to the steady-state BCF (BCFSS) obtained from the ratio of the steady-state concentration in fish to that in water, but deviations may occur if steady-state was uncertain or if corrections for growth have been applied to the kinetic BCF.
Detta innebär att provet i slutet av upptagningsfasen bör tas kort före den första utfodringen med obehandlat foder.
However, as k1 and k2 are constants, steady-state does not need to be reached to derive a BCFK.
Värden inom parentes står för antal prover (vatten, fisk) som ska tas om tilläggsprovtagning görs.
Based on these first order equations, this Appendix 5 includes the general calculations necessary for both aqueous and dietary exposure bioaccumulation methods.
Föregående uppskattning för k2, för log KOW på 4,0 är 0,652 dagar– 1.
However, sections 5, 6 and 8 are only relevant for the aqueous exposure method but are included here as they are “general” techniques.
Försökets totala varaktighet är fastställd till 3 × tSS = 3 × 4,6 dagar, dvs. 14 dagar.
The sequential (sections 4 and 5) and simultaneous (section 6) methods allow the calculation of uptake and depuration constants which are used to derive kinetic BCFs.
För uppskattning av tSS, se tillägg 5.
The sequential method for determining k2 (section 4) is important for the dietary method as it is needed to calculate both assimilation efficiency and BMF.
Ta prover på vattnet när minst tre kärlvolymer har levererats.
Appendix 7 details the calculations that are specific to the dietary method.
Dessa fiskar provtas från stampopulationen.
PREDICTION OF THE DURATION OF THE UPTAKE PHASE
Om större precision eller metabolismstudier är nödvändiga som kräver användning av fler fiskar, bör dessa fiskar särskilt provtas i slutet av upptagnings- och utsöndringsfaserna (jfr punkt 40).
Before performing the test, an estimate of k2 and hence some percentage of the time needed to reach steady-state may be obtained from empirical relationships between k2 and the n-octanol/water partition coefficient (KOW) or k1 and BCF.
Minst tre ytterligare fiskar kan krävas för analysen av fetthalt om det inte är möjligt att använda samma provtagningsfisk som för ämneskoncentrationerna i början av testet, i slutet av upptagningsfasen och i slutet av utsöndringsfasen.
It should be realised, however, that the equations in this section only apply when uptake and depuration follow first-order kinetics.
Observera att det i många fall är möjligt att använda endast tre kontrollfiskar (jfr punkt 56).
If this is clearly not the case it is advised to seek advice from a biostatistician and/or pharmacokineticist, if predictions of the uptake phase are desirable.
Tre foderprover från både kontroll- och testgrupperna analyseras med avseende på testämneskoncentrationer och fetthalt.
An estimate of k2 (day– 1) may be obtained by several methods.
Provtagningsfisk tas från stampopulationen, vilket ska ske så sent som möjligt innan undersökningen inleds.
[Equation A5.6]
Dessa data kan jämföras med den upptagningseffektivitet som har beräknats på grundval av data från utsöndringsfasen.
Where k1 = 520 × W– 0,32 (for substances with a log KOW > 3)
Fem extra fiskar kan provtas för en vävnadsspecifik analys.
(r2=0,85)[(4); Equation A5.7]
Observera att det i många fall är möjligt att använda endast tre kontrollfiskar (jfr punkterna 56 och 153).
AndBCF
ALLMÄNNA BERÄKNINGAR
(r2=0,90)[(5); Equation A5.8]
Inledning
W = mean treated fish weight (grams wet weight) at the end of uptake/start of depuration [2]
Prediktion av upptagningsfasens längd
For other related relationships see (6).
Prediktion av utsöndringsfasens längd
It may be advantageous to employ more complicated models in the estimation of k2 if, for example, it is likely that significant metabolism may occur (7) (8).
Stegvis metod: bestämning av utsöndringskonstanten (förlust) k2
However as the complexity of the model increases, greater care should be taken with the interpretation of the predictions.
Stegvis metod: bestämning av upptagningskonstanten k1 (endast vattenexponeringsmetoden)
The time to reach a certain percentage of steady-state may be obtained, by applying the k2-estimate, from the general kinetic equation describing uptake and depuration (first-order kinetics), assuming growth and metabolism is negligible.
Normalisering av fetthalten till 5 % (endast vattenexponeringsmetoden)
In such cases, it is better to use the growth corrected k2g as described later (see Section 7 of this Appendix):
Den differentialekvation (dCf/dt) som beskriver förändringshastigheten för koncentrationen i fisk (mg · kg– 1·dag– 1) anges med (1):
or, if Cw is constant:
där
[Equation A5.11]
första ordningens konstant för metabolisk transformation (dag– 1)
Then BCF × Cw is an approximation to the concentration in the fish at steady-state (Cf-SS).
koncentration i vatten (mg·l– 1)
Similarly the time to reach 95 percent of steady-state is:
Upptagningskonstanten motsvarar utsöndringskonstanten.
[Equation A5.17] For example, the duration of the uptake phase (i.e. time to reach a certain percentage of steady-state, e.g. t80 or t95) for a test substance with log KOW = 4 would be (using Equation A5.5, Equation A5.16 and Equation A5.17):
En kombination av ekvation A5.2 och ekvation A5.3 ger då följande förhållande:
logk2 = 1,47 – 0,414 · 4
[Ekvation A5.4]
k2 = 0,652 day– 1
Koncentration i fisken vid stabilt tillstånd, mg kg– 1 våtvikt)
or t95
Koncentration i vatten vid stabilt tillstånd (mg l– 1).
Alternatively, the expression:
Förhållandet k1/k2 kallas kinetisk BCF (BCFK) och bör motsvara BCF i stabilt tillstånd (BCFSS), som erhålls från förhållandet mellan den stabila koncentrationen i fisk och den stabila koncentrationen i vatten.
[Equation A5.18]
Avvikelser kan dock förekomma om det stabila tillståndet var osäkert eller om tillväxtkorrigeringar har tillämpats på den kinetiska BCF.
may be used to calculate the time for effective steady-state (teSS) to be reached (12).
Eftersom k1 och k2 är konstanter behöver stabilt tillstånd inte nås för att härleda en BCFK.
For a test substance with log KOW = 4 this results in:
Tillägg 5 innehåller de allmänna beräkningar som behövs för bioackumuleringsmetoden med exponering via vatten och via föda.
PREDICTION OF THE DURATION OF THE DEPURATION PHASE
Beräkningarna grundas på dessa första ordningens ekvationer.
A prediction of the time needed to reduce the body burden to a certain percentage of the initial concentration may also be obtained from the general equation describing uptake and depuration (assuming first order kinetics, cf.
Den stegvisa metoden för bestämning av k2 (avsnitt 4) är viktig för metoden med exponering via föda, eftersom den behövs för att beräkna både assimileringseffektivitet och BMF.
Equation A5.9 (1) (13).
De beräkningar som är specifika för metoden med exponering via föda anges i tillägg 7.
For the depuration phase, Cw (or Cfood for the dietary test) is assumed to be zero.
PREDIKTION AV UPPTAGNINGSFASENS LÄNGD
The equation may then be reduced to:
Innan provet påbörjas ska en uppskattning av k2 göras, och hänsyn till hur stor del av tiden som krävs för att nå stabilitet kan inhämtas från empiriska förhållanden mellan k2 och fördelningskoefficienten n-oktanol/vatten (KOW) eller k1, och BCF.
k 2 C f
Man bör dock vara medveten om att ekvationerna i detta avsnitt endast gäller när upptagnings- och utsöndringsfaserna följer första ordningens kinetik.
[Equation A5.19] or C f
Om så uppenbart inte är fallet bör man dock inhämta råd från biostatistiker och/eller farmakokinetiker om förutsägelser av upptagningsfasen är önskvärda.
C f,0
En uppskattning av k2 (dag-1) kan erhållas med flera metoder.
k 2
Följande empiriska förhållanden kan t.ex. användas som ett första steg [1]:
[Equation A5.20]
(r2 = 0,95) [(3), ekvation A5.5]
where Cf,0 is the concentration at the start of the depuration period.
[Ekvation A5.6]
50 percent depuration will then be reached at the time (t50):
där k1 = 520 × W– 0,32 (för ämnen med en log KOW > 3)
Similarly 95 percent depuration will be reached at:
(r2 = 0,85) [(4), Ekvation A5.7]
If 80 % uptake is used for the first period (1,6/k2) and 95 % loss in the depuration phase (3,0/k2), then depuration phase is approximately twice the duration of the uptake phase.
ochBCF
Note that the estimations are based on the assumption that uptake and depuration patterns will follow first order kinetics.
(r2 = 0,90) [(5), Ekvation A5.8]
If first-order kinetics is obviously not obeyed, these estimations are not valid.
W = vikt för behandlad fisk (gram våtvikt) i slutet av upptagningsfasen/i början av utsöndringsfasen [2].
SEQUENTIAL METHOD: DETERMINATION OF DEPURATION (LOSS) RATE CONSTANT K2
För andra relaterade förhållanden se (6).
Most bioconcentration data have been assumed to be ‘reasonably’ well described by a simple two-compartment/two-parameter model, as indicated by the rectilinear curve which approximates to the points for concentrations in fish (on an ln scale), during the depuration phase.
Det kan vara fördelaktigt att tillämpa mer komplicerade modeller för uppskattningen av k2 om det t.ex. är sannolikt att betydlig metabolism kan förekomma (7) (8).
Note that deviations from a straight line may indicate a more complex depuration pattern than first order kinetics.
Eftersom komplexiteten ökar bör man dock vara försiktigare med tolkningen av uppskattningarna.
The graphical method may be applied for resolving types of depuration deviating from first order kinetics.
Förekomsten av nitrogrupper kan t.ex. tyda på snabb metabolism, men så är inte alltid fallet.
To calculate k2 for multiple time (sampling) points, perform a linear regression of ln(concentration) versus time.
Vid schemaläggningen av undersökningen bör man därför väga resultaten från den prediktiva metoden mot kemisk struktur och annan relevant information (t.ex. preliminära undersökningar).
The slope of the regression line is an estimate of the depuration rate constant k2 [3].
I ett sådant fall är det bättre att använda den tillväxtkorrigerade k2g, vilket beskrivs senare (se avsnitt 7 i detta tillägg):
From the intercept the average concentration in the fish at the start of the depuration phase (C0,d; which equals the average concentration in the fish at the end of the uptake phase) can easily be calculated (including error margins) [3] In most programs that allow a linear regression, also standard errors and confidence interval (CI) of the estimates are given, e.g. in Microsoft Excel using the Data Analysis tool pack.
[Ekvation A5.9]
[Equation A5.21]
eller om Cw är konstant:
To calculate k2 when only two time (sampling) points are available (as in the minimised design), substitute the two average concentrations into the following equation
[Ekvation A5.10]
[Equation A5.22]
När stabiliteten börjar närma sig (t → ∞), kan ekvation A5.10 reduceras (jfr (9) (10)) till:
Where ln(Cf1) and ln(Cf2) are the natural logarithms of the concentrations at times t1 and t2, respectively, and t2 and t1 are the times when the two samples were collected relative to the start of depuration [4].
[Ekvation A5.11]
SEQUENTIAL METHOD: DETERMINATION OF UPTAKE RATE CONSTANT K1 (AQUEOUS EXPOSURE METHOD ONLY)
[Ekvation A5.12]
To find a value for k1 given a set of sequential time concentration data for the uptake phase, use a computer program to fit the following model:
Då är BCF × Cw en approximation till koncentrationen i fisken vid stabilt tillstånd (Cf-SS).
[Equation A5.23]
[Obs: samma metod kan användas för uppskattningar av en stabil BMF i testet med exponering via föda.
Where k2 is given by the previous calculation, Cf(t) and Cw(t) are the concentrations in fish and water, respectively, at time t.
I detta fall ersätts BCF med BMF och Cw med Cfood, koncentration i fodret, i ovanstående ekvationer.]
To calculate k1 when only two time (sampling) points are available (as in the minimised design), use the following formula:
Ekvation A5.10 kan skrivas om på följande sätt:
[Equation A5.24]
[Ekvation A5.13]
Where k2 is given by the previous calculation, Cf is the concentration in fish at the start of the depuration phase, and Cw is the average concentration in the water during the uptake phase [5].
[Ekvation A5.14]
Visual inspection of the k1 and k2 slopes when plotted against the measured sample point data can be used to assess goodness of fit.
Vid användning av ekvation A5.14 kan tiden för att nå viss stabilitet förutsägas när k2 förutbestäms med ekvation A5.5 eller A5.6.
If it turns out that the sequential method has given a poor estimate for k1 then the simultaneous approach to calculate k1 and k2 should be applied (see next section 6).
Som riktlinje kan sägas att den statistiskt optimala längden på upptagningsfasen, för produktion av statistiskt acceptabla data (BCFk) är den period som krävs för att kurvan över koncentrationslogaritmen för det undersökta ämnet i fisken, avsatt mot en linjär tidsaxel, till att nå minst 50-procentig stabilitet (dvs. 0,69/k2), men inte mer än 95-procentig stabilitet (dvs. 3,0/k2) (11).
Again, the resulting slopes should be compared against the plotted measured data for visual inspection of goodness of fit.
Om ackumuleringen går utöver 95 % stabilt tillstånd kan en beräkning av BCFSS göras.
If the goodness of fit is still poor this may be an indication that first order kinetics do not apply and other more complex models should be employed.
Tiden för att nå 80 % stabilt tillstånd är (med användning av ekvation A5.14):
SIMULTANEOUS METHOD FOR CALCULATION OF UPTAKE AND DEPURATION (LOSS) RATE CONSTANTS (AQUEOUS EXPOSURE METHOD ONLY)
[Ekvation A5.15]
Computer programs can be used to find values for k1 and k2 given a set of sequential time concentration data and the model:
[Ekvation A5.16]
[Equation A5.25]
Likaså är tiden för att nå 95 % stabilt tillstånd:
[Equation A5.26]
k2 = 0,652 dag– 1
time at the end of the uptake phase.
eller t95
This approach directly provides standard errors for the estimates of k1 and k2.
Alternativt kan följande uttryck användas:
When k1/k2 is substituted by BCF (cf.
[Ekvation A5.18]
Equation A5.4) in Equation A5.25 and Equation A5.26, the standard error and 95 % CI of the BCF can be estimated as well.
kan användas för att beräkna den tid det tar tills faktiskt stabilt tillstånd (teSS) uppnås (12).
This is especially useful when comparing different estimates due to data transformation.
För ett testämne med logg Kow = 4 resulterar detta i:
The dependent variable (fish concentration) can be fitted with or without ln transformation, and the resulting BCF uncertainty can be evaluated.
PREDIKTION AV UTSÖNDRINGSFASENS LÄNGD
As a strong correlation exists between the two parameters k1 and k2 if estimated simultaneously, it may be advisable first to calculate k2 from the depuration data only (see above); k2 in most cases can be estimated from the depuration curve with relatively high precision. k1 can be subsequently calculated from the uptake data using non-linear regression [6].
Prediktion av den tid som krävs för att minska mängden ämne i kroppen, till en viss del av den ursprungliga koncentrationen, kan också göras med den allmänna ekvationen för upptagning och utsöndring (med första ordningens kinetik), jfr Ekvation A5.9 (1) (13).
It is advised to use the same data transformation when fitting sequentially.
För utsöndringsfasen antas Cw (eller Cfood för testet med exponering via föda) vara noll.
Visual inspection of the resulting slopes when plotted against the measured sample point data can be used to assess goodness of fit.
Ekvationen kan därefter reduceras till:
If it turns out that this method has given a poor estimate for k1 then the simultaneous approach to calculate k1 and k2 can be applied.
[Ekvation A5.20]
Again, the fitted model should be compared against the plotted measured data for visual inspection of goodness of fit and the resulting parameter estimates for k1, k2 and resulting BCF and their standard errors and/or confidence intervals should be compared between different types of fit.
där Cf,0 är koncentrationen vid början av utsöndringsperioden.