natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The intermediate sampling point is recommended as a check on the uptake and depuration kinetics [41].
En sammanfattning av relevanta uppmätta och beräknade data, enligt följande:
For calculations, see Appendixes 5 and 6.Interpretation of the results
Upptagnings- och utsöndringskonstanter för ämnet samt biokoncentrationsfaktorer (BCF)
To assess the validity and informative value of the test, verify that the depuration period exceeds one half-life.
kg (tillväxtkonstant, dag– 1):
Also, the BCFKm (kinetic BCF derived from a minimised test) should be compared to the minimised BCFSS value (which is the BCFSS calculated at the end of the uptake phase, assuming that steady-state has been reached.
Insatsvärde (95 % CI) [38]
This can only be assumed, as the number of sampling points is not sufficient for proving this).
k1 (total upptagningskonstant, l kg– 1 dag– 1):
If the BCFKm < minimised BCFSS, the minimised BCFSS should be the preferred value.
k2 (total utsöndringskonstant, dag– 1):
If BCFKm is less than 70 % of the minimised BCFSS, the results are not valid, and a full test should be conducted.
k2g (tillväxtkorrigerad utsöndringskonstant, dag– 1):
If the minimised test gives a BCFKm in the region of any value of regulatory concern, a full test should be conducted.
Cf (kemisk koncentration i fisken vid stabilt tillstånd, mg kg– 1):
If the result is far from any regulatory value of concern (well above or below), a full test may not be necessary, or a single concentration full test may be conducted if required by the relevant regulatory framework.
Insatsvärde ± SD [39]
If a full test is found to be necessary after a minimised test at one concentration, this can be conducted at a second concentration.
Cw (kemisk koncentration i vattnet, mg l– 1):
If the results are consistent, a further full test at a different concentration can be waived, as the bioconcentration of the substance is not expected to be concentration dependent.
Ln (normaliseringsfaktor för fetthalt):
If the minimised test has been conducted at two concentrations, and the results show no concentration dependence, the full test may be conducted with only one concentration (cf. paragraph 87).
Insatsvärde (3)
The test report for the minimised test should include all the information demanded for the full test (cf. paragraph 81), except that which is not possible to elaborate (i.e. a curve showing the time to steady-state and the steady-state bioconcentration factor; for the latter the minimised BCFss should be given instead).
BCFSS (BCF i stabilt tillstånd l kg– 1)
Additionally, it should also include the reasoning for using the minimised test and the resulting BCFKm.
BCFSSL (normaliserad fetthalt, BCF i stabilt tillstånd, l kg– 1):
C.13 - III: Dietary Exposure Bioaccumulation Fish Test
Insatsvärde (3) ± SD [39]
The method described in this section should be used for substances where the aqueous exposure methodology is not practicable (for example because stable, measurable water concentrations cannot be maintained, or adequate body burdens cannot be achieved within 60 days of exposure; see previous sections on the aqueous exposure method).
BCFK (kinetisk BCF, l kg– 1)
It should be realised though that the endpoint from this test will be a dietary biomagnification factor (BMF) rather than a bioconcentration factor (BCF) [42].
BCFKg (tillväxtkorrigerad kinetisk BCF, l kg– 1)
In May 2001 a new method for the bioaccumulation testing of poorly water soluble organic substances was presented at the SETAC Europe conference held in Madrid (36).
t1/2g (tillväxtkorrigerad halveringstid, dag):
This work built on various reported bioaccumulation studies in the literature using a dosing method involving spiked feed (e.g. (37)).
BCFKL (kinetisk BCF normaliserad för fetthalt, l kg– 1):
Early in 2004 a draft protocol (38), designed to measure the bioaccumulation potential of poorly water soluble organic substances for which the standard water exposure bioconcentration method was not practicable, together with a supporting background document (39), was submitted to an EU PBT working group.
Insatsvärde
Further justification given for the method was that potential environmental exposure to such poorly soluble substances (i.e. log KOW >5) may be largely via the diet (cf. (40) (41) (42) (43) (44)).
BCFKLG (normaliserad fetthalt, tillväxtkorrigerad kinetisk BCF, l kg– 1):
For this reason, dietary exposure tests are referred to in some published chemicals regulations [43].
Resultat som redovisas som t.ex. ”ej upptäckt/kvantifierad vid detektions-/kvantifieringsgränsen” vid framtagningen av undersökningsmetoden och dess experimentella utformning bör undvikas, eftersom sådana resultat inte kan användas för beräkning av hastighetskonstanter.
It should be realised however, that in the method described here exposure via the aqueous phase is carefully avoided and thus a BMF value from this test method cannot directly be compared to a BMF value from a field study (in which both water and dietary exposure may be combined).
C.13 – II: Test på fisk med minimerad exponering via vatten
This section of the present test method is based on this protocol (38) and is a new method that did not appear in the previous version of TM C.13.
Den ökande erfarenheten av att utföra och tolka det fullständiga testet, både bland laboratorier och tillsynsmyndigheter, visar att första ordningen kinetik, med vissa undantag, gäller för uppskattningen av upptagnings- och utsöndringskonstanterna.
This alternative test allows the dietary exposure pathway to be directly investigated under controlled laboratory conditions.
Upptagnings- och utsöndringskonstanterna kan därför uppskattas med ett minimum av provtagningspunkter, och kinetisk BCF kan härledas.
Potential investigators should refer to paragraphs 1 to 14 of this test method for information on when the dietary exposure test may be preferred over the aqueous exposure test.
Syftet med att undersöka alternativa utformningar av BCF-undersökningar var ursprungligen att utveckla ett mindre test som kan användas i det mellanliggande testningssteget för att vederlägga eller bekräfta BCF-uppskattningar baserat på KOW och QSAR:s, och eliminera behovet av en fullständig undersökning för många ämnen.
Information on the various substance considerations is laid out, and should be considered before a test is conducted.
Ett annat skäl var att minska kostnaderna och användningen av försöksdjur genom att minska provtagningen och antalet analytiska sekvenser.
The use of radiolabelled test substances can be considered with similar considerations as for the aqueous exposure method (cf. paragraphs 6 and 65).
Det nya testet har samma utformning som den tidigare testmetoden för att möjliggöra integration av testresultaten med befintlig BCF-data och underlätta testningen och tolkningen genom att tillhandahålla BCF-uppskattningar med tillräcklig noggrannhet och precision för riskbedömningsbeslut.
The dietary method can be used to test more than one substance in a single test, so long as certain criteria are fulfilled; these are explored further in paragraph 112.
Många av övervägandena är desamma som i det fullständiga testet, t.ex. giltighetskriterierna (jfr punkt 24) och att testet ska upphöra om obetydlig upptagning registreras i slutet av upptagningsfasen (jfr punkterna 16 och 38).
For simplicity the methodology here describes a test using only one test substance.
De ämnen som kan komma i fråga för det minimerade testet bör höra till det allmänna område som testmetoden utvecklades för, dvs. icke-polära organiska ämnen (jfr punkt 49).
The dietary test is similar to the aqueous exposure method in many respects with the obvious exception of the exposure route.
Om det finns indikationer på att det ämne som ska testas kan bete sig på ett annorlunda sätt (t.ex. en tydlig avvikelse från första ordningens kinetik) bör ett fullständigt test utföras för tillsynsändamål.
Hence many aspects of the method described here overlap with the aqueous exposure method described in the previous section.
Det minimerade testet körs vanligen inte under en kortare period än standard-BCF-testet, men antalet provtagningar är färre (grunden för detta anges i tillägg 6).
Cross-reference to relevant paragraphs in the previous section has been made as far as possible, but in the interests of readability and understanding a certain amount of duplication is unavoidable.
Utsöndringsperioden kan dock förkortas för snabbt utsöndrande ämnen för att undvika att koncentrationerna i fisken faller under detektions-/kvantifieringsgränsen innan testet avslutas.
Flow-through or semi-static conditions can be employed (cf. paragraph 4); flow-through conditions are recommended to limit potential exposure of test substance via water as a result of any desorption from spiked food or faeces.
Ett minimerat fiskexponeringstest med en enda koncentration kan användas för att fastställa om ett fullständigt test behövs.
The test consists of two phases: uptake (test substance-spiked feed) and depuration (clean, untreated feed) (cf. paragraph 16).
Om de data som används för att beräkna konstanter och BCF är robusta (jfr punkt 93) kan man avstå från att utföra det fullständiga testet om den resulterande BCF ligger långt från lagstadgade riskgränser.
In the uptake phase, a “test” group of fish are fed a set diet of a commercial fish food of known composition, spiked with the test substance, on a daily basis.
I vissa fall kan det vara fördelaktigt att utföra det minimerade testet med fler än en testkoncentration som ett preliminärt test för att avgöra om BCF-uppskattningarna för ett ämne är koncentrationsberoende.
Fish ideally should consume all of the offered food (c.f. paragraph 141).
Om BCF-uppskattningarna från det minimerade testet visar koncentrationsberoende måste det fullständiga testet utföras.
Fish are then fed the pure, untreated commercial fish food during the depuration phase.
Om BCF-uppskattningarna baserat på ett minimerat test inte är koncentrationsberoende men resultaten inte anses vara definitiva, kan ett eventuellt fullständigt test utföras vid en enda koncentration.
As for the aqueous exposure method, more than one test group with different spiked test substance concentrations can be used if necessary, but for the majority of highly hydrophobic organic test substances one test group is sufficient (cf. paragraphs 49 and 107).
På så sätt används färre djur jämfört med ett fullständigt test med två (eller flera) koncentrationer.
If semi-static conditions are used fish should be transferred to a new medium and/or a new test chamber at the end of the uptake phase (in case the medium and/or apparatus used in the uptake phase has been contaminated with the test substance through leaching).
Ämnen som eventuellt kan komma i fråga för det minimerade testet bör uppfylla följande kriterier:
The concentrations of the test substance in the fish are measured in both phases of the test.
Sannolikt uppvisa ungefärlig första ordningens upptagnings- och utsöndringskinetik, härlett från jämförelser med liknande ämnen.
In addition to the group of fish fed the spiked diet (the test group), a control group of fish is held under identical conditions and fed identically except that the commercial fish food diet is not spiked with test substance.
Ha en log KOW < 6, om inte snabb metabolism förväntas [40].
This control group allows background levels of test substance to be quantified in unexposed fish and serves as a comparison for any treatment-related adverse effects noted in the test group(s) [44].
Vara tillräckligt vattenlösliga med avseende på analystekniken (jfr punkt 24).
It also allows comparison of growth rate constants between groups as a check that similar quantities of offered diet have been consumed (potential differences in palatability between diets should also be considered in explaining different growth rate constants; cf. paragraph 138).
Vara tydligt kvantifierbara (dvs. koncentrationerna bör vara minst en storleksordning över kvantifieringsgränsen) både i fisk och vatten.
It is important that during both the uptake and depuration phases, diets of nutritional equivalency are fed to the test and control groups.
Radioaktiv märkning rekommenderas (jfr punkt 23).
An uptake phase that lasts 7-14 days is generally sufficient, based on experience from the method developers (38) (39).
Ha en utsöndringsperiod som är längre än den förutsagda halveringstiden (jfr tillägg 5 för beräkningar), eller så bör utsöndringsfasens varaktighet justeras därefter (jfr punkt 91).
This range should minimise the cost of undertaking the test whilst still ensuring sufficient exposure for most substances.
Undantag från denna regel är tillåtna om ämnet förväntas ha en snabb metabolism.
However, in some cases the uptake phase may be extended (cf. paragraph 127).
PROVTAGNINGSSCHEMA FÖR DET MINIMERADE TESTET
During the uptake phase the substance concentration in the fish may not reach steady-state so data treatment and results from this method are usually based on a kinetic analysis of tissue residues.
Provtagning av fisk
(Note: Equations for estimating time to steady-state can be applied here as for the aqueous exposure test — see Appendix 5).
Provtagningen av fisken minskas till fyra provtagningspunkter:
The depuration phase begins when the fish are first fed unspiked diet and typically lasts for up to 28 days or until the test substance can no longer be quantified in whole fish, whichever is the sooner.
I mitten och i slutet av upptagningsfasen (den senare utgör början av utsöndringsfasen), t.ex. efter 14 och 28 dagar (33).
The depuration phase can be shortened or lengthened beyond 28 days, depending on the change with time in measured chemical concentrations and fish size.
I mitten av utsöndringsfasen och när undersökningen avslutas (om ämneskoncentrationen är < 10 % av den maximala koncentrationen eller åtminstone tydligt längre än en halveringstid för ämnet), t.ex. efter 7 och 14 dagars utsöndring (33).
This method allows the determination of the substance-specific half-life (t1/2, from the depuration rate constant, k2), the assimilation efficiency (absorption across the gut; a), the kinetic dietary biomagnification factor (BMFK), the growth-corrected kinetic dietary biomagnification factor (BMFKg), and the lipid-corrected [45] kinetic dietary biomagnification factor (BMF KL) (and/or the growth- and lipid-corrected kinetic dietary biomagnification factor, BMFKgL) for the test substance in fish.
Om snabb utsöndring förväntas eller observeras kan det vara nödvändigt att förkorta utsöndringsperioden för att undvika att koncentrationerna i fisken faller under kvantifieringsgränsen.
As for the aqueous exposure method, increase in fish mass during the test will result in dilution of test substance in growing fish and thus the (kinetic) BMF will be underestimated if not corrected for growth (cf .paragraphs 162 and 163).
Mätning av fetthalten som i en fullständig undersökning.
In addition, if it is estimated that steady-state was reached in the uptake phase an indicative steady-state BMF can be calculated.
Korrigering för tillväxt som i en fullständig undersökning.
Approaches are available that make it feasible to estimate a kinetic bioconcentration factor (BCFK) from data generated in the dietary study (e.g. (44) (45) (46) (47) (48).
BCB beräknas som kinetisk BCF.
Pros and cons of such approaches are discussed in Appendix 8.
Vattenprovtagning
The test was designed primarily for poorly soluble non-polar organic substances that follow approximately first order uptake and depuration kinetics in fish.
I det minimerade testet tas prover av vattnet som i den fullständiga undersökningen (jfr punkt 54) eller åtminstone vid fem tillfällen jämnt fördelade under upptagningsfasen samt veckovis under utsöndringsfasen.
In case a substance is tested that does not follow approximately first order uptake and depuration kinetics, then more complex models should be employed (see references in Appendix 5) and advice from a biostatistician and/or pharmacokineticist sought.
Ändringar av utformningen
The BMF is normally determined using test substance analysis of whole fish (wet weight basis).
Med beaktande av testämnets egenskaper, giltiga QSAR-prediktioner och det specifika ändamålet med undersökningen kan vissa ändringar av undersökningens utformning övervägas:
If relevant for the objectives of the study, specific tissues (e.g. muscle, liver) can be sampled if the fish is divided into edible and non-edible parts (cf. paragraph 21).
Om större precision krävs kan fler fiskar (sex eller åtta i stället för fyra) användas för provet i slutet av upptagningsfasen.
Furthermore, removal and separate analysis of the gastrointestinal tract may be employed to determine the contribution to whole fish concentrations for sample points at the end of the uptake phase and near the beginning of the depuration phase, or as part of a mass balance approach.
En extra grupp av fiskar kan inbegripas om utsöndringen efter 14 dagar (eller när utsöndringsfasen beräknas avslutas) inte har varit tillräcklig för lämplig utsöndring (dvs. > 50 %).
Lipid content of sampled whole fish should be measured so that concentrations can be lipid-corrected, taking account of lipid content of both the diet and the fish (cf. paragraphs 56 and 57, and Appendix 7).
Om den förutsagda varaktigheten av utsöndringsfasen är kortare eller längre än 14 dagar kan provtagningsschemat anpassas (dvs. en grupp av fiskar vid den tidpunkt då utsöndringsfasen beräknas avslutas och en grupp efter halva den tiden).
Fish weight of sampled individuals should be measured and recorded, and be linked to the analysed chemical concentration for that individual (e.g. reported using a unique identifier code for each fish sampled), for the purpose of calculating growth that may occur during the test.
Två testkoncentrationer kan användas för att undersöka eventuellt koncentrationsberoende.
Fish total length should also be measured where possible [46].
Om resultaten från det minimerade testet utfört med två testkoncentrationer visar att BCF inte är koncentrationsberoende (dvs. varierar med mindre än 20 %) kan en testkoncentration anses vara tillräcklig i det fullständiga testet, om det utförs.
Weight data are also necessary for estimating BCF using depuration data from the dietary test.
Modeller för bioackumuleringsprocesser som den som föreslagits av Arnot m.fl.
Information on the test substance as described in paragraphs 3 and 22 should be available.
kan sannolikt användas som hjälp i planeringen av längden för upptagnings- och utsöndringsfaserna (se även tillägg 5).
An analytical method for test substance concentrations in water is not usually necessary; methods with suitable sensitivity for measuring concentrations in fish food and fish tissue are required.
Beräkningar
The method can be used to test more than one substance in a single test.
Den logiska grunden för denna metod är att biokoncentrationsfaktorn i ett fullständigt test antingen kan bestämmas som biokoncentrationsfaktorn i stabilt tillstånd (BCFSS) genom att beräkna förhållandet mellan koncentrationen av testämnet i fiskens vävnader och testämnets koncentration i vatten, eller genom att beräkna den kinetiska biokoncentrationsfaktorn (BCFK) som förhållandet mellan upptagningshastighetskonstanten k1 och utsöndringskonstanten k2.
However, test substances should be compatible with one another such that they do not interact or change their chemical identity upon spiking into fish food.
BCFK är giltig även om ämnets koncentration inte uppnår stabilt tillstånd under upptagningsfasen, under förutsättning att upptagningen och utsöndringen sker ungefär enligt första ordningens kinetiska processer.
The aim is that measured results for each substance tested together should not differ greatly from the results that would be given if individual tests had been run on each test substance.
Som ett absolut minimum krävs två datapunkter för att uppskatta upptagnings- och utsöndringskonstanterna, en i slutet av upptagningsfasen (dvs. i början av utsöndringsfasen) och en i slutet (eller efter en betydande del) av utsöndringsfasen.
Preliminary analytical work should establish that each substance can be recovered from a multiply-spiked food and fish tissue sample with i) high recoveries (e.g. > 85 % of nominal) and ii) the necessary sensitivity for testing.
Den mellanliggande provtagningspunkten rekommenderas som kontroll av upptagnings- och utsöndringskinetiken [41].
The total dose of substances tested together should be below the combined concentration that might cause toxic effects (cf. paragraph 51).
Beräkningar anges i tilläggen 5 och 6.Tolkning av resultaten.
Furthermore, possible adverse effects in fish and the potential for interactive effects (e.g. metabolic effects) associated with testing multiple substances simultaneously should be taken into consideration in the experimental design.
För att bedöma testets giltighet och informationsvärde måste man kontrollera att utsöndringsperioden är längre än en halveringstid.
Simultaneous testing of ionisable substances should be avoided.
Även BCFkm (kinetisk BCF, härledd från ett minimerat test) bör jämföras med det minimerade värdet för BCFSS (som är BCFSS beräknad i slutet av upptagningsfasen, med antagandet att stabilt tillstånd har uppnåtts).
In terms of exposure, the method is also suitable for complex mixtures (cf. paragraph 13, although the same limitations in analysis as for any other method will apply).
Detta kan bara antas, eftersom antalet provtagningspunkter inte är tillräckligt för att bevisa detta.
For a test to be valid the following conditions apply (cf. paragraph 24):
Om BCFkm < minimerad BCFSS bör minimerad BCFSS vara det föredragna värdet.
Water temperature variation is less than ± 2 °C in treatment or control groups
Om BCFkm är mindre än 70 % av den minimerade BCFSS är resultaten inte giltiga och ett fullständigt test bör genomföras.
Concentration of dissolved oxygen does not fall below 60 % of the air saturation value
Om det minimerade testet ger en BCFkm i intervallet för ett värde som ger upphov till risk bör ett fullständigt test utföras.
The concentration of the test substance in fish food before and at the end of the uptake phase is within a range of ± 20 % (based on at least three samples at both time points)
Om resultatet ligger långt ett utanför ett värde som ger upphov till risk (långt över eller långt under) kan ett fullständigt test inte vara nödvändigt, eller så kan ett fullständigt test med en enda koncentration utföras om det krävs enligt det relevanta regelverket.
A high degree of homogeneity of substance in food should be demonstrated in preliminary analytical work on the spiked diet; at least three sample concentrations for the substance taken at test start should not vary more than ± 15 % from the mean
Om ett fullständigt test visar sig vara nödvändigt efter ett minimerat test vid en koncentration kan det fullständiga testet utföras vid en andra koncentration.
Concentrations of test substance are not detected, or are present only at typical trace levels, in un-spiked food or control fish tissues relative to treated samples
Om resultaten är konsekventa behöver man inte utföra ett ytterligare fullständigt test vid en annan koncentration eftersom ämnets biokoncentration inte förväntas vara koncentrationsberoende.
Mortality or other adverse effects/disease in both control and test group fish should be ≤ 10 % at the end of the test; if the test is extended for any reason, adverse effects in both groups are ≤ 5 % per month, and ≤ 30 % cumulatively.
Om det minimerade testet har utförts vid två koncentrationer och resultaten inte visar på koncentrationsbeteende kan det fullständiga testet utföras med endast en koncentration (jfr punkt 87).