natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier, different fish species, significant change of fish size, fish food or spiking method, etc.) have been made, it is advisable that a technical proficiency study is conducted, using a reference substance.
Testrapporten för det minimerade testet ska innehålla all information som krävs för det fullständiga testet (jfr punkt 81), med undantag för uppgifter som inte kan tas fram (dvs. en kurva som visar tiden till stabilt tillstånd och biokoncentrationsfaktorn för stabilt tillstånd; för den senare bör minimerad BCFss anges i stället).
The reference substance is primarily used to establish whether the food spiking technique is adequate to ensure maximum homogeneity and bioavailability of test substances.
Testrapporten ska även innehålla en förklaring av skälet till att det minimerade testet använts samt resulterande BCFkm.
The flow rates should be recorded.
Forskare bör konsultera punkterna 1 till 14 i denna testmetod för information om när testet med exponering via föda är att föredra framför vattenexponeringstestet.
Test water should be used as described in the aqueous exposure method (cf. paragraphs 27-29).
Avsnittet innehåller även information om vad man bör tänka på när det gäller olika ämnen och denna information bör konsulteras innan ett test genomförs.
The test medium should be characterised as described and its quality should remain constant during the test.
Användning av radioaktivt märkta testämnen kan övervägas och här gäller samma hänsynstaganden som för vattenexponeringsmetoden (jfr punkterna 6 och 65).
The natural particle content and total organic carbon should be as low as possible (≤ 5 mg/l particulate matter; ≤ 2 mg/l total organic carbon) before test start.
Metoden med exponering via föda kan användas för att testa fler än ett ämne i ett enda test.
TOC need only be measured before the test as part of the test water characterisation (cf. paragraph 53).
Vissa villkor måste dock vara uppfyllda, som beskrivs närmare i punkt 112.
Diet
För enkelhetens skull används endast ett testämne i den testmetod som beskrivs här.
A commercially available fish food (floating and/or slow sinking pelletised diet) that is characterised in terms of at least protein and fat content is recommended.
Testet med exponering via föda liknar vattenexponeringsmetoden i många avseenden, naturligtvis med undantag för exponeringsvägen.
The food should have a uniform pellet size to increase the efficiency of the feed exposure, i.e. the fish will eat more of the food instead of eating the larger pieces and missing the smaller ones.
Många aspekter av den metod som beskrivs här överlappar därför den vattenexponeringsmetod som beskrivs i det föregående avsnittet.
The pellets should be appropriately sized for the size of the fish at the start of the test (e.g. pellet diameters roughly 0,6-0,85 mm for fish between 3 and 7 cm total length, and 0,85-1,2 mm for fish between 6 and 12 cm total length may be used).
Korshänvisningar till relevanta punkter i föregående avsnitt görs i möjligaste mån, men för att underlätta läsningen och förståelsen är det oundvikligt att viss information upprepas.
Pellet size may be adjusted depending on fish growth at the start of the depuration phase.
Genomflödes- eller semistatiska betingelser kan användas (jfr punkt 4).
An example of a suitable food composition, as commercially supplied, is given in Appendix 7.
Genomflödesbetingelser rekommenderas för att begränsa eventuell exponering av testämnet via vatten till följd av desorption från behandlat foder eller avföring.
Test diets with total lipid content between 15 and 20 % (w/w) have commonly been used in the development of this method.
Det är viktigt att test- och kontrollgrupperna utfodras med foder med samma näringsvärde under både upptagnings- och utsöndringsfasen.
Fish food with such a high lipid concentration may not be available in some regions.
Baserat på metodutvecklarnas erfarenheter är en upptagningsfas på 7–14 dagar vanligen tillräcklig (38) (39).
In such cases studies could be run with a lower lipid concentration in the food, and if necessary the feeding rate adjusted appropriately to maintain fish health (based on preliminary testing).
Denna längd kan minimera kostnaden för testet, samtidigt som tillräcklig exponering säkerställs för de flesta ämnen.
The total lipid content of the test group and control group diets needs to be measured and recorded before the start of the test and at the end of the uptake phase.
I vissa fall kan upptagningsfasen dock behöva förlängas (jfr punkt 127).
Details provided by the commercial feed supplier of analysis for nutrients, moisture, fibre and ash, and if possible minerals and pesticide residues (e.g. “standard” priority pollutants), should be presented in the study report.
Ämneskoncentrationen i fisken kanske inte når stabilt tillstånd under upptagningsfasen.
When spiking the food with test substance, all possible efforts should be made to ensure homogeneity throughout the test food.
Databehandling och resultat från denna metod baseras därför vanligen på en kinetisk analys av vävnadsrester.
The concentration of test substance in the food for the test group should be selected taking into account the sensitivity of the analytical technique, the test substance's toxicity (NOEC if known) and relevant physicochemical data.
(Obs: Ekvationer för uppskattning av tiden till stabilt tillstånd kan tillämpas på samma sätt som för exponeringstestet i vatten – se tillägg 5).
If used, the reference substance should preferably be incorporated at a concentration around 10 % of that of the test substance (or in any case as low as is practicable), subject to analysis sensitivity (e.g. for hexachlorobenzene a concentration in the food of 1-100 μg/g has been found to be acceptable; cf. (47) for more information on assimilation efficiencies of HCB).
Utsöndringsfasen inleds när fisken börjar utfodras med obehandlat foder och varar i regel upp till 28 dagar eller tills testämnet inte längre kan kvantifieras i hel fisk, beroende av vad som inträffar först.
The test substance can be spiked to the fish food in several ways depending on its physical characteristics and solubility (see Appendix 7 for more details on spiking methods):
Utsöndringsfasen kan förkortas eller förlängas utöver de 28 dagarna, beroende på förändringar i tid i uppmätta kemiska koncentrationer och fiskens storlek.
If the substance is soluble and stable in triglycerides, the substance should be dissolved in a small amount of fish oil or edible vegetable oil before mixing with fish food.
Denna metod gör det möjligt att bestämma ämnesspecifik halveringstid (t1/2, från utsöndringskonstanten, k2), assimileringseffektivitet (absorption genom tarmen, a), kinetisk biomagnifikationsfaktor för födotest (BMFK), tillväxtkorrigerad kinetisk biomagnifikationsfaktor för födotest (BMFKg) och kinetisk biomagnifikationsfaktor korrigerad för fetthalt [45] (BMF KL) (och/eller biomagnifikationsfaktor korrigerad för tillväxt och fetthalt, BMFKgL) för testämnet i fisken.
In this instance, care should be taken to avoid producing a ration that is too high in lipid, taking into account the natural lipid content of the spiked feed, by adding the minimum known quantity of oil required to achieve distribution and homogeneity of the test substance in the food, or;
Precis som för vattenexponeringsmetoden kommer ökningen av fiskmassa under testet att leda till en utspädning av testämnet i växande fisk, och (den kinetiska) BMF kommer att underskattas om den inte korrigeras för tillväxt (jfr punkterna 162 och 163).
The food should be spiked using a suitable organic solvent, so long as homogeneity and bioavailability are not compromised (it is possible that (micro)crystals of the test substance may form in the food as a consequence of solvent evaporation and there is no easy way to prove this has not occurred; cf.
Om det uppskattas att stabilt tillstånd uppnåddes i upptagningsfasen kan en vägledande BMF för stabilt tillstånd beräknas.
(49)), or;
Det finns metoder som gör det möjligt att uppskatta en kinetisk biokoncentrationsfaktor (BCFK) från de data som genereras i testet med exponering via föda (t.ex. (44) (45) (46) (47) (48).
Non-viscous liquids should be added directly to fish food but they should be well mixed to promote homogeneity and facilitate good assimilation.
För- och nackdelar med sådana metoder diskuteras i tillägg 8.
The technique for mixing should ensure homogeneity of the spiked feed.
Testet utformades ursprungligen för svårlösliga icke-polära organiska ämnen, som ungefär följer första ordningens kinetik för upptagning och utsöndring hos fisk.
In few cases, e.g. less hydrophobic test substances more likely to desorb from the food, it may be necessary to coat prepared food pellets with a small quantity of corn/fish oil (see paragraph 142).
Om ett testat ämne inte ungefär följer första ordningens kinetik för upptagning och utsöndring ska mer komplexa modeller tillämpas (se litteraturhänvisningar i tillägg 5) och råd inhämtas från biostatistiker och/eller farmakokinetiker.
If an oil or carrier solvent is used as a vehicle for the test substance, an equivalent amount of the same vehicle (excluding test substance) should be mixed with the control diet in order to maintain equivalency with the spiked diet.
Dessutom kan man avlägsna mag-tarmkanalen och analysera den separat för att bestämma bidraget till koncentrationer i hela fiskar för provtagningspunkter i slutet av upptagningsfasen och nära början av utsöndringsfasen, eller som en del av en massbalansmetod.
The spiked diet should be stored under conditions that maintain stability of the test substance within the feed mix (e.g. refrigeration) and these conditions reported.
Fetthalten i hela provtagningsfiskar bör mätas så att koncentrationerna kan korrigeras för fetthalt, med beaktande av fetthalten både i fodret och hos fisken (jfr punkterna 56 och 57 samt tillägg 7).
Selection of fish species
Enskilda provtagningsfiskars vikt bör mätas och registreras och kopplas till den analyserade kemiska koncentrationen hos de enskilda fiskarna (t.ex. rapporterad med en unik identifieringskod för varje provtagningsfisk) för att beräkna eventuell tillväxt under testet.
Fish species as specified for the aqueous exposure may be used (cf. paragraph 32 and Appendix 3).
Fiskens totala längd bör också mätas om det är möjligt [46].
Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), carp (Cyprinus carpio) and fathead minnow (Pimephales promelas) have been commonly used in dietary bioaccumulation studies with organic substances before the publication of this TM.
Viktdata är också nödvändiga för att uppskatta BCF med hjälp av utsöndringsdata från testet med exponering via föda.
The test species should have a feeding behaviour that results in rapid consumption of the administered food ration to ensure that any factor influencing the concentration of the test substance in food (e.g. leaching into the water and the possibility of aqueous exposure) is kept to a minimum.
Information om testämnet enligt beskrivningen i punkterna 3 och 22 bör finnas tillgänglig.
Fish within the recommended size/weight range (cf. Appendix 3) should be used.
Vanligen behövs ingen analytisk metod för testämneskoncentrationerna i vatten.
Fish should not be so small as to hamper ease of analyses on an individual basis.
Metoderna måste vara tillräckligt känsliga för att mäta koncentrationerna i fiskfodret och fiskvävnaderna.
Species tested during a life-stage with rapid growth can complicate data interpretation, and high growth rates can influence the calculation of assimilation efficiency [48].
Metoden kan användas för att testa fler än ett ämne i ett enda test.
Holding of fish
Testämnena bör emellertid vara kompatibla med varandra så att de inte samverkar eller ändrar sin kemiska identitet när de blandas i fiskfodret.
Pre-study analytical work is necessary to demonstrate recovery of the substance from spiked food/spiked fish tissue.
Den totala dosen för ämnen som testas tillsammans bör vara lägre än den kombinerade koncentration som kan orsaka toxiska effekter (jfr punkt 51).
A range-finding test to select a suitable concentration in the food is not always necessary.
Dessutom bör eventuella negativa effekter hos fisken och risken för interaktiva effekter (t.ex. metaboliska effekter) i samband med testning av flera ämnen samtidigt beaktas i utformningen av försöket.
For the purposes of showing that no adverse effects are observed and evaluating the palatability of spiked diet, sensitivity of analytical method for fish tissue and food, and selection of suitable feeding rate and sampling intervals during depuration phase etc., preliminary feeding experiments may be undertaken but are not obligatory.
Samtidig testning av ämnen som kan joniseras bör undvikas.
A preliminary study may be valuable to estimate numbers of fish needed for sampling during the depuration phase.
När det gäller exponering är metoden även lämplig för komplexa blandningar (jfr punkt 13), även om samma analysbegränsningar som för andra metoder gäller).
This can result in significant reduction in the number of fish used, especially for test substances that are particularly susceptible to metabolism.
För att ett test ska vara giltigt måste följande villkor uppfyllas (jfr punkt 24):
Conditions of exposure
Vattentemperaturen ska variera med mindre än ± 2 °C hos behandlings- och kontrollgrupperna.
Uptake Phase duration
Koncentrationen löst syre får inte falla under luftmättnadsvärdet på 60 %.
An uptake phase of 7-14 days is usually sufficient, during which one group of fish are fed the control diet and another group of fish the test diet daily at a fixed ration dependent on the species tested and the experimental conditions, e.g. between 1-2 % of body weight (wet weight) in the case of rainbow trout.
Koncentrationen av testämnet i fiskfodret före och efter slutet av upptagningsfasen ska ligga inom intervallet ± 20 % (baserat på minst tre prover vid båda tidpunkterna).
If needed the uptake phase may be extended based on practical experience from previous studies or knowledge of the test substance's (or analogue's) uptake/depuration in fish.
Ämnet ska visa en hög nivå av homogenitet i fodret i den preliminära analysen av det behandlade fodret.
The start of the test is defined as the time of first feeding with spiked food.
Minst tre provkoncentrationer för ämnet som tas vid teststarten ska inte variera med mer än ± 15 % från medelvärdet.
An experimental day runs from the time of feeding to shortly before the time of next feeding (e.g. one hour).
Koncentrationer av testämnet ska inte detekteras eller endast förekomma vid typiska spårnivåer i obehandlat foder eller i kontrollfiskarnas vävnader i förhållande till de behandlade proverna.
Thus the first experimental day of uptake runs from the time of first feeding with spiked food and ends shortly before the second feeding with spiked food.
Dödlighet eller andra negativa effekter/sjukdomar hos både kontroll- och testgrupperna ska vara ≤ 10 % i slutet av testet.
In practice the uptake phase ends shortly before (e.g. one hour) the first feeding with unspiked test substance as the fish will continue to digest spiked food and absorb the test substance in the intervening 24 hours.
Om testet förlängs av någon anledning ska negativa effekter i båda grupperna vara ≤ 5 % per månad och ≤ 30 % kumulativt.
It is important to ensure that a sufficiently high (non-toxic) body burden of the test substance is achieved with respect to the analytical method, so that at least an order of magnitude decline can be measured during the depuration phase.
Om ett laboratorium inte har utfört testet tidigare eller väsentliga förändringar (t.ex. förändringar av fiskstammen eller leverantören, andra fiskarter, signifikant ändring av fiskens storlek, foder eller inblandningsmetod osv.) har gjorts är det lämpligt att en teknisk kompetensstudie utförs med ett referensämne.
In special cases an extended uptake phase (up to 28 days) may be used with additional sampling to gain an insight into uptake kinetics.
Referensämnet används främst för att fastställa huruvida tekniken för att behandla fodret är lämplig för att garantera maximal homogenitet och biotillgänglighet för testämnena.
During uptake the concentration in the fish may not reach steady-state.
Ett exempel som har använts när det gäller icke-polära hydrofoba ämnen är hexaklorbensen (HCB) men andra ämnen med tillförlitliga data om upptagning och biomagnifikation bör övervägas med tanke på HCB:s farliga egenskaper [47].
Equations for estimating time to steady-state, as an indication of the likely duration needed to achieve appreciable fish concentrations, can be applied here as for the aqueous exposure test (cf. Appendix 5).
Om referensämnen används bör grundläggande information anges i testrapporten, inklusive beteckning, renhet, CAS-nummer, struktur och toxicitetsdata (i förekommande fall), precis som för testämnena (jfr punkterna 3 och 22).BESKRIVNING AV TESTMETODEN
In some cases it may be known that uptake of substance in the fish over 7-14 days will be insufficient for the food concentration used to reach a high enough fish concentration to analyse at least an order of magnitude decline during depuration, either due to poor analytical sensitivity or to low assimilation efficiency.
Material och apparater bör användas enligt beskrivningen i vattenexponeringsmetoden (jfr punkt 26).
In such cases it may be advantageous to extend the initial feeding phase to longer than 14 days, or, especially for highly metabolisable substances, a higher dietary concentration should be considered.
Ett testsystem med genomflöde eller statisk förnyelse som ger en tillräcklig volym av utspädningsvatten till testtankarna bör användas.
However, care should be taken to keep the body burden during uptake below the (estimated) chronic no effect concentration (NOEC) in fish tissue (cf. paragraph 138).
Flödestakten bör registreras.
Depuration typically lasts for up to 28 days, beginning once the test group fish are fed pure, untreated diet after the uptake phase.
Testvatten bör användas enligt beskrivningen i vattenexponeringsmetoden (jfr punkterna 27–29).
This depuration period is designed to capture substances with a potential half-life of up to 14 days, which is consistent with that of bioaccumulative substances [49], so 28 days comprises two half-lives of such substances.
TOC behöver endast mätas före testet som en del av testvattenkarakteriseringen (jfr punkt 53).
In cases of very highly bioaccumulating substances it may be advantageous to extend the depuration phase (if indicated by preliminary testing).If a substance is depurated very slowly such that an exact half-life may not be determined in the depuration phase, the information may still be sufficient for assessment purposes to indicate a high level of bioaccumulation.
Foder
Conversely, if a substance is depurated so fast that a reliable time zero concentration (concentration at the end of uptake/start of depuration, C0,d) and k2 cannot be derived, a conservative estimate of k2 can be made (cf. Appendix 7).
Ett kommersiellt tillgängligt fiskfoder (flytande och/eller långsamt sjunkande pelleterat foder) som karakteriseras för minst protein- och fetthalt rekommenderas.
If analyses of fish at earlier intervals (e.g. 7 or 14 days) show that the substance has depurated below quantification levels before the full 28-day period, then subsequent sampling may be discontinued and the test terminated.
Foderpelletarna bör ha en enhetlig storlek för att öka effektiviteten i foderexponeringen, dvs. fisken äter mer av fodret i stället för att äta de större bitarna och missa de mindre.
In few cases no measurable uptake of the test substance may have occurred at the end of the uptake period (or with the second depuration sample).
Pelletarna bör ha en lämplig storlek i förhållande till fiskens storlek i början av testet (t.ex. kan pellets med en diameter på ungefär 0,6–0,85 mm för fisk med en total längd på 3–7 cm och 0,85–1,2 mm för fisk med en total längd på 6–12 cm användas).
If it can be demonstrated that: i) the validity criteria in paragraph 113 are fulfilled; and ii) lack of uptake is not due to some other shortcoming of the test (e.g. uptake duration not long enough, deficiency in food spiking technique leading to poor bioavailability, lack of sensitivity of the analytical method, fish not consuming food, etc.); it may be possible to terminate the study without the need to re-run it with a longer uptake duration.
Pelletsstorleken kan justeras beroende på fiskens tillväxt i början av utsöndringsfasen.
If preliminary work has indicated that this may be the case, analysis of faeces, if possible, for undigested test substance may be advisable as part of a “mass balance” approach.
Ett exempel på en lämplig fodersammansättning som finns kommersiellt tillgänglig ges i tillägg 7.
Similar to the aqueous exposure test, fish of similar weight and length should be selected, with the smallest fish being no less than two-thirds of the weight of the largest (cf. paragraphs 40-42).
Testfoder med en total fetthalt på mellan 15 och 20 viktprocent har vanligen använts vid utvecklingen av denna metod.
The total number of fish for the study should be selected based on the sampling schedule (a minimum of one sample at the end of the uptake phase and four to six samples during the depuration phase, but depending on the phases' durations), taking into account the sensitivity of the analytical technique, the concentration likely to be achieved at the end of the uptake phase (based on prior knowledge) and the depuration duration (if prior knowledge allows estimation).
Fiskfoder med en så hög fetthalt kanske inte finns tillgänglig i vissa regioner.
Five to ten fish should be sampled at each event, with growth parameters (weight and total length) being measured before chemical or lipid analysis.
I ett sådant fall kan undersökningen utföras med foder med en lägre fetthalt, och vid behov kan utfodringsintervallerna justeras på lämpligt sätt för att upprätthålla fiskens hälsa (baserat på preliminära tester).
Owing to the inherent variability in the size, growth rate, and physiology among fish and the likely variation in the quantity of administered diet that each fish consumes, at least five fish should be sampled at each interval from the test group and five from the control group in order to adequately establish the average concentration and its variability.
Den totala fetthalten i fodret för test- och kontrollgruppen ska mätas och registreras innan testet inleds och i slutet av upptagningsfasen.
Fish should be stored, weighed individually (even if it proves necessary for the sample results to be combined subsequently) and total length measured.
Koncentrationen av testämnet i fodret för testgruppen bör väljas med hänsyn till analysteknikens sensitivitet, testämnets toxicitet (NOEC om känt) samt relevanta fysikalisk-kemiska data.
For a standard test with, for example, a 28-day depuration duration including five depuration samples, this means a total of 59-120 fish from test and 50-110 from control groups, assuming that the substance's analytical technique allows lipid content analysis to be carried out on the same fish.
Om ett referensämne används bör det helst inbegripas i en koncentration kring 10 % av testämnets koncentration (den bör i alla händelser vara så låg som möjligt) beroende på analysens sensitivitet (för hexaklorbensen har t.ex. en koncentration i fodret på 1–100 μg/g befunnits godtagbar, jfr (47) för mer information om HCB:s assimileringseffektivitet).
If lipid analysis cannot be conducted on the same fish as chemical analysis, and using control fish only for lipid analysis is also not feasible (cf. paragraph 56), an additional 15 fish would be required (three from the stock population at test start, three each from control and test groups at the start of depuration and three each from control and test groups at the end of the experiment).
Testämnet kan blandas i fiskfodret på olika sätt beroende på dess fysikaliska egenskaper och löslighet (närmare uppgifter om inblandningsmetoder anges i tillägg 7):