natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Designs for ECx, NOEC and a limit test are described below.
Vid användning av ANOVA-metoder bör värdena för antalet kläckta djur först transformeras genom arcsin-kvadratsrotstransformation eller Freeman-Tukeytransformation för att få en ungefärlig normalfördelning och jämna ut varianserna.
Design for analysis by regression
Cochran-Armitages test, Fishers exakta test (Bonferroni) eller Mantel-Haenszels test kan användas när absoluta frekvenser används.
The effect concentration (ECx) and the concentration range over which the effect of the test chemical is of interest, should be spanned by the test, such that the endpoint is not extrapolated outside the bounds of the data generated.
För att göra en arcsin-kvadratrotstransformation tar man inverterad sinus (sin– 1) av kvadratroten av antalet kläckta djur.
Extrapolation much below the lowest or above the highest concentration should be avoided.
För antalet kläckta djur beräknas ECx-värdena med regressionsanalys (t.ex. probit-, logit- eller Weibullmodellerna (28)).
A preliminary range-finding test according to Test Methods C.27 or C.28 may be helpful for selecting a suitable range of test concentrations.
Om regressionsanalysen inte lyckas (om det t.ex. finns mindre än två partiella responser) kan man använda andra icke-parametriska metoder, såsom glidande medelvärde eller enkel interpolering.
For an ECx approach, at least five concentrations and eight replicates for each concentration are required.
Utvecklingshastighet
For each concentration two breeding cages should be used (A and B).
Med genomsnittlig utvecklingstid avses den genomsnittliga tidsperioden mellan tillsättningen av larver (testdag 0) och kläckningen av den experimentella kohorten myggor (för beräkning av den faktiska utvecklingstiden bör man ta hänsyn till larvernas ålder vid tillsättningstidpunkten).
The eight replicates are divided into two groups of four replicates to serve each breeding cage.
Utvecklingshastigheten (enhet: 1/dag) är det reciproka värdet av tidsenheten för utveckling och representerar den andel larvutveckling som sker per dag.
This merger of replicates is necessary due to the number of midges needed in the cage for sound reproduction assessments.
Utvecklingshastigheten är det mått som helst ska användas för utvärdering av dessa sedimenttoxicitetsstudier eftersom variansen är lägre och homogenare samt ligger närmare normalfördelningen i jämförelse med utvecklingstiden.
However, the 2nd generation has eight replicates again, which are initiated from the exposed populations in the breeding cages.
Mer kraftfulla parametriska testförfaranden kan alltså användas baserade på utvecklingshastighet i stället för på utvecklingstid.
The factor between concentrations should not be greater than two (an exception could be made in cases when the dose response curve has a shallow slope).
För utvecklingshastigheten som en kontinuerlig respons kan ECx-värden uppskattas med hjälp av regressionsanalys (t.ex.
The number of replicates at each treatment can be reduced to six (three for each breeding case) if the number of test concentrations with different responses is increased.
(29) (30)).
Increasing the number of replicates or reducing the size of the test concentration intervals tends to lead to narrower confidence intervals around the ECX.
NOEC för den genomsnittliga utvecklingshastigheten kan fastställas med hjälp av ANOVA-metoder, t.ex.
Design for estimation of a NOEC
Dunnetts eller Williams test.
For a NOEC approach, five test concentrations with at least eight replicates (4 for each breeding cage, A and B) should be used and the factor between concentrations should not be greater than two.
Eftersom hanar kläcks tidigare än honor, dvs. har en högre utvecklingshastighet, är det lämpligt att beräkna utvecklingshastigheten för vartdera könet separat utöver utvecklingshastigheten för alla myggor totalt.
The number of replicates should be sufficient to ensure adequate statistical power to detect a 20 % difference from the control at the 5 % level of significance (α = 0,05).
För statistiska test antas antalet myggor observerade på inspektionsdag x ha kläckts i mitten av tidsintervallet mellan dag x och dag x – l (l är inspektionsintervallets längd, i regel en dag).
For the development rate, fecundity and fertility an analysis of variance (ANOVA) is usually appropriate, followed by Dunnett's test or Williams' test (22-25).
Den genomsnittliga utvecklingshastigheten per kärl ( x
For the emergence ratio and sex ratio the Cochran-Armitage, Fisher's exact (with Bonferroni correction), or Mantel-Haentzal tests may be appropriate.
) beräknas enligt följande:
A limit test may be performed (one test concentration and control(s)) if no effects are observed in the optional preliminary range-finding test up to a maximum concentration.
genomsnittlig utvecklingshastighet per kärl
The purpose of the limit test is to indicate that any toxic effects of the test chemical are found at levels greater than the limit concentration tested.
i index för inspektionsintervall
For water, 100 mg/l and for sediment 1000 mg/kg (dry weight) are suggested.
m maximalt antal inspektionsintervall
Usually, at least eight replicates for both the treatment and control are necessary.
antal myggor som kläckts under inspektionsintervallet i
Adequate statistical power to detect a 20 % difference from the control at the 5 % level of significance (α = 0,05) should be demonstrated.
totalt antal myggor som kläckts i slutet av experimentet (Σfi)
With metric responses (e.g. development rate), the t-test is a suitable statistical method if data meet the requirements of this test (normality, homogeneous variances).
utvecklingshastighet för myggor som kläckts under intervallet i
An unequal-variance t-test or a non-parametric test, such as the Wilcoxon-Mann-Whitney test may be used, if these requirements are not fulfilled.
dag i
With the emergence ratio, Fisher's exact test is appropriate.
inspektionsdag (dagar från införandet av larverna)
Preparation of the water-sediment system (water spiking)
inspektionsintervallets längd i (dagar, i regel en dag)
a.
Könsfördelning
Formulated sediment (see paragraphs 13-14 and Appendix 3) is added to each test vessel and crystallising dish to form a layer of at least 1,5 cm (for the crystallising dish it may be somewhat lower) but maximally 3 cm.
Data rörande könsfördelningen är dikotoma (tvåpunktsfördelade) och bör därför utvärderas genom ett Fishers exakta test eller andra lämpliga metoder.
Water (see paragraph 15) is added so that the ratio of the depth of the sediment layer and the depth of the water does not exceed 1:4.
Den naturliga könsfördelningen för C. riparius är ett, dvs. hanar och honor är lika många.
After preparation of the test vessels the sediment-water system should be left under gentle aeration for approximately seven days prior to addition of the first instar larvae of the 1st or 2nd generation (see paragraph 14 and Appendix 3).
Data rörande könsfördelningen bör behandlas på samma sätt för båda generationerna.
The sediment-water system of the crystallising dishes is not aerated during the test, since they do not need to support larval survival (before hatching the egg ropes are already collected).
Eftersom det högsta antalet myggor per kärl (dvs. 20) är för lågt för att en meningsfull statistisk analys ska kunna utföras, lägger man ihop det totala antalet fullständigt kläckta levande myggor av varje kön för alla kärlen i en behandling.
To avoid separation of sediment ingredients and re-suspension of fine material during addition of test water in the water column, the sediment can be covered with a plastic disc while water is poured onto it.
Dessa otransformerade data testas mot kontrollen (med lösningsmedel) eller mot hoplagda data för kontrollerna i en 2 × 2 kontingenstabell.
The disc is removed immediately afterwards.
Reproduktionen, uttryckt som fekunditet, beräknas som antalet äggband per hona.
Other devices may also be appropriate.
Mer exakt divideras det totala antalet äggband som producerats i en odlingsbehållare med det totala antalet levande och oskadade honor som tillsatts denna behållare.
Preparation of the water-sediment system (spiked sediment)
NOEC för fekunditeten kan fastställas med hjälp av ANOVA-metoder, t.ex.
b.
Dunnetts eller Williams test.
The spiked sediments prepared according to paragraph 16b are placed in the vessels and crystallising dish and overlying water is added to produce a sediment-water volume ratio of 1:4.
Äggbandens fertilitet används för att fastställa antalet fertila äggband per hona.
The depth of the sediment layer should be in the range of 1,5 to 3 cm (it may be somewhat lower for the crystallising dish).
Det totala antalet fertila äggband som produceras i en odlingsbehållare divideras med det totala antalet levande och oskadade honor som tillsatts denna behållare.
To avoid separation of sediment ingredients and re-suspension of fine material during addition of test water in the water column, the sediment can be covered with a plastic disc while water is poured onto it, and the disc removed immediately afterwards.
NOEC för fertiliteten kan fastställas med hjälp av ANOVA-metoder, t.ex.
Appropriate equilibration time is sediment and chemical specific, and can be in the order of hours to days and in rare cases up to five weeks.
Testrapporten ska innehålla följande uppgifter:
As this would leave time for degradation of many chemicals, equilibrium is not awaited but an equilibration period of 48 hours is recommended.
fysikalisk natur och fysikalisk-kemiska egenskaper (vattenlöslighet, ångtryck, log Kow, fördelningskoefficient i jord (eller i sediment, om denna uppgift finns tillgänglig), stabilitet i vatten och sediment etc.),
However, when the degradation half-life of the chemical in sediment is known to be long (see paragraph 8), the equilibration time may be extended.
kemiska identifieringsdata (trivialnamn, kemiskt namn, strukturformel, CAS-nummer osv.) inklusive renhet och analysmetod för kvantifiering av testkemikalien.
At the end of this further equilibration period, the concentration of the test chemical should be measured in the overlying water, the pore water and the sediment, at least at the highest concentration and a lower one (see paragraph 38).
de testorganismer som använts:
These analytical determinations of the test chemical allow for calculation of a mass balance and expression of results based on measured concentrations.
information om hanteringen av vuxna exemplar från den första generationen med hjälp av en exhauster osv.
Test vessels should be covered (e.g. by glass plates).
(se tillägg 5),
If necessary, during the study the water levels may be topped up to the original volume in order to compensate for evaporation.
den ålder testorganismerna från den första och andra generationen hade vid tidpunkten för införandet i provkärlen.
This should be performed using distilled or deionised water to prevent any build-up of salts.
det sediment som använts (dvs. naturligt eller syntetiskt (konstgjort) sediment),
Crystallising dishes in the breeding cages are not covered and may, but do not need to be adjusted to compensate for water loss during the test period, since the egg ropes are only in contact with the water for about one day and the dishes are only used during a short phase of the test.
naturligt sediment:
Addition of test organisms
insamlingsplatsens belägenhet och en beskrivning av denna plats (inklusive, om möjligt, föroreningshistoria);
Four to five days before adding the first instar larvae for the 1st generation, egg masses should be taken from the culture and placed in small vessels in culture medium.
sedimentets egenskaper:
Aged medium from the stock culture or freshly prepared medium may be used.
pH, halten av organiskt kol, C/N-kvot och granulometri (om tillämpligt),
In any case, a small amount of food, e.g. a few droplets of filtrate from a finely ground suspension of flaked fish food, should be added to the culture medium (see Appendix 2).
syntetiskt sediment:
Only freshly laid egg masses should be used.
beredning, beståndsdelar och egenskaper (halten organiskt kol, pH, fukthalt osv. vid testets början),
Normally, the larvae begin to hatch a couple of days after the eggs are laid (2 to 3 days for C. riparius at 20 °C and 1 to 4 days for C. dilutus at 23 °C and C. yoshimatsui at 25 °C) and larval growth occurs in four instars, each of 4-8 days duration.
beredning av testvatten (om rekonstituerat vatten används) och egenskaper (syrehalt, pH, hårdhet osv. vid testets början).
First instar larvae (maximum 48 h post hatching) should be used in the test.
sediments och det överliggande vattnets djup i testkärlen och kristalliseringsskålarna,
The instar stage of larvae can potentially be checked using head capsule width (7).
testkärl (material och storlek),
Twenty first instar larvae for the 1st generation are allocated randomly to each test vessel containing the sediment-water system, using a blunt pipette.
kristalliseringsskålar (material och storlek),
Aeration of the water is stopped whilst adding larvae to test vessels and should remain so for 24 hours following addition of larvae (see paragraph 32).
odlingsbehållare (material och storlek),
According to the test design used (see paragraphs 19 and 20), the number of larvae used per concentration is at least 120 (6 replicates per concentration) for the ECX approach and 160 for the NOEC approach (8 replicates per concentration).
metoden för beredning av stamlösningar och testkoncentrationer för testkärlen och kristalliseringsskålarna,
In the spiked sediment design, exposure starts with the addition of the larvae.
applicering av testkemikalien i testkärlen och kristalliseringsskålarna:
Spiking the overlying water
testkoncentrationer, antal replikat och lösningsmedel om sådana behövs,
Twenty-four hours after adding the first instar larvae for the 1st generation, the test chemical is spiked into the overlying water column, and slight aeration is again supplied (for possible amendments of the test design, see paragraph 7).
inkuberingsförhållanden för testkärlen:
Small volumes of the test chemical stock solutions are applied below the surface of the water using a pipette.
temperatur, ljuscykel och intensitet, luftning (bubblor per sekund),
The overlying water should then be mixed with care not to disturb the sediment.
inkuberingsförhållanden för odlingsbehållarna och kristalliseringsskålarna:
In the spiked water design, exposure starts with the spiking of the water (i.e. one day after addition of the larvae).
temperatur, ljuscykel och intensitet,
Collecting emerged adults
inkuberingsförhållanden för äggbanden i mikrotiterplattorna (eller andra typer av kärl):
Emerged midges of the 1st generation are collected at least once, but preferably twice a day (see point 36) from the test vessels using an aspirator, exhauster or similar device (see Appendix 5).
temperatur, ljuscykel och intensitet,
Special care should be taken not to damage the adults.
detaljerad information om utfodringen, inklusive typ av foder, beredning, mängd och utfodringsschema.
The collected midges from four test vessels within one treatment are released into a breeding cage to which they had been previously assigned.
nominella testkoncentrationer, uppmätta testkoncentrationer och resultaten av alla analyser för att fastställa koncentrationen av testkemikalien i testkärlen och kristalliseringsskålarna,
At the day of first (male) emergence, crystallising dishes are spiked by pipetting a small volume of the test chemical stock solution below the water surface (spiked water design).
vattenkvaliteten i testkärlen och kristalliseringsskålarna, dvs. pH, temperatur, löst syre, hårdhet och ammoniak,
The concentration of test chemical in the crystallising dish is nominally the same as in the treatment vessels which are assigned to that specific breeding cage.
ersättning av avdunstat testvatten för testkärlen, i förekommande fall,
For the spiked sediment design, the crystallising dishes are prepared at around day 11 after the start of the exposure (i.e. addition of the 1st generation larvae) so that they can equilibrate for about 48 hours before the first egg ropes are produced.
antalet kläckta hon- och hanmyggor per kärl och dag för första och andra generationen,
Egg ropes are collected from the crystallising dish in the breeding cage using tweezers or a blunt pipette.
könsfördelning för fullständigt kläckta levande myggor per behandling för första och andra generationen,
Each egg rope is placed into a vessel containing culture medium from the crystallising dish it was collected from (e.g. a well of a 12-well micro-plate together with at least 2,5 ml of medium).
antalet larver som inte utvecklats till myggor per kärl för första och andra generationen,
The vessels with the egg ropes are covered with a lid to prevent significant evaporation.
procentandel/andel kläckta exemplar per replikat- och testkoncentration (han- och honmyggor sammanlagt) för första och andra generationen,
Egg ropes are kept for observation for at least six days after they have been produced so that they can be classified as fertile or infertile.
den genomsnittliga utvecklingshastigheten för fullständigt kläckta och levande myggor per replikat och behandlingsnivå (han- och honmyggor separat och även sammanlagt) för första och andra generationen,
For starting the 2nd generation, at least three but preferably six fertile egg ropes are selected from each breeding cage and together with some food allowed to hatch.
antalet äggband som lagts i kristalliseringskärlen per odlingsbehållare och dag,
These egg ropes should have been produced at the peak of oviposition, which normally occurs around test day 19 in the controls.
egenskaperna hos varje äggband (storlek, form och fertilitet),
Ideally, the 2nd generation of all treatments is initiated on the same day, but due to chemical related effects on larval development, this may not always be possible.
fekunditet – det totala antalet äggband per totalt antal honor som tillsatts i odlingsbehållaren,
In such a case, the higher concentrations may be initiated later than the lower treatments and the (solvent) control.
fertilitet – det totala antalet fertila äggband per totalt antal honor som tillsatts i odlingsbehållaren,
a.
uppskattning av toxiska endpoints, t.ex.
In the spiked water design, the sediment-water system for the 2nd generation is prepared by spiking the test chemical into the overlying water column ca.
ECx (och därmed förbundna konfidensintervall), NOEC och de statistiska metoder som använts för bestämningen av dem,
1 hour before adding the first instar larvae to the test vessels.
Kapitel C.28 i denna bilaga, Toxicitetstest i sediment- och vattenfas på Chironomid-larver med kontaminerat vatten.
Small volumes of the test chemical solutions are applied below the surface of the water using a pipette.
Kapitel C.27 i denna bilaga, Toxicitetstest i sediment- och vattenfas på Chironomid-larver med kontaminerat sediment.
After spiking, slight aeration is supplied.
J. Amer.
b.
a Guidance to Application, OECD Series on Testing and Assessment nr 54, 146 s., ENV/JM/MONO(2006)18, OECD, Paris.
In the spiked sediment design, the exposure vessels containing the sediment-water system for the 2nd generation are prepared in the same way as for the 1st generation.
Syntetiskt sediment eller rekonstituerat eller konstgjort sediment en blandning av material som är avsedda att efterlikna de fysiska beståndsdelarna i naturligt sediment.
Twenty first instar larvae (maximum 48 h post hatching) of the 2nd generation are allocated randomly to each test vessel containing the spiked sediment-water system, using a blunt pipette.
Överliggande vatten det vatten som täcker sedimentet i testkärlet.
Aeration of the water should be stopped while adding the first instar larvae to the test vessels and remain so for another 24 hours after addition of the larvae.
Porvatten det vatten som finns i mellanrummen mellan sediment- eller jordpartiklar.
According to the test design used (see paragraphs 19 and 20), the number of larvae used per concentration is at least 120 (6 replicates per concentration) for the ECX approach and 160 for the NOEC approach (8 replicates per concentration).
Spikat vatten testvatten till vilket testkemikalien har tillsatts.
It is necessary to feed the larvae in the test vessels, preferably daily or at least three times per week.
Rekommendationer för odling av Chironomus riparius
Fish-food (a suspension in water or finely ground food, e.g. Tetra-Min or Tetra-Phyll; see details in Appendix 2) of 0,25 - 0,5 mg (0,35 - 0,5 mg for C. yoshimatsui) per larvae per day is an adequate amount of food for young larvae during the first 10 days of their development.
Chironomus-larver kan odlas i kristalliseringskärl eller större behållare.
Slightly more food may be necessary for older larvae:
Fin kvartssand sprids ut i ett tunt skikt på cirka 5–10 mm på behållarens botten.
0,5 - 1,0 mg per larvae per day should be sufficient for the rest of the test.
Kiselgur (t.ex.
The food ration should be reduced in all treatments and control if fungal growth is seen or if mortality is observed in controls.
Merck, Art.
If fungal development cannot be stopped the test should be repeated.
8117) har visat sig vara ett lämpligt substrat (det räcker med ett tunt lager på några mm).
The toxicological relevance of exposure via ingestion is generally higher in chemicals with a high affinity for organic carbon or chemicals covalently binding to the sediment.
Lämpligt vatten tillsätts sedan till ett djup på flera cm.
Hence, when testing chemicals with such properties, the amount of food necessary to ensure survival and natural growth of the larvae may be added to the formulated sediment before the stabilisation period, depending on the regulatory demand.
Vattennivåerna bör fyllas på efter behov för att ersätta avdunstat vatten och förebygga uttorkning.
To prevent deterioration of the water quality, plant material should be used instead of fish food, e.g. addition of 0,5 % (dry weight) finely ground leaves of stinging nettle (Urtica dioica), mulberry (Morus alba), white clover (Trifolium repens), spinach (Spinacia oleracea) or other plant material (Cerophyl or α-cellulose).
Vattnet kan ersättas vid behov.
Addition of the complete ration of an organic food source to the sediment before spiking is not trivial with respect to water quality and biological performance (21), nor a standardised method, but recent studies provide indications that this method works (19) (26).
Skonsam luftning bör tillhandahållas.
Adult midges in the breeding cage need no feeding normally, but fecundity and fertility are enhanced when a cotton wool pad soaked in a saturated sucrose solution is offered as a food source for emerged adults (34).
De kärl som innehåller larver bör förvaras i en lämplig behållare som hindrar kläckta exemplar från att rymma.
Gentle aeration of the overlying water in the test vessels is supplied 24 hours after addition of the first instar larvae of both generations and is continued throughout the test (care should be taken that the dissolved oxygen concentration does not fall below 60 % of ASV).
Behållaren bör vara tillräckligt stor för att de vuxna exemplaren ska kunna svärma, annars kan kopulationen utebli (minimum är cirka 30 × 30 × 30 cm).
Aeration is provided through a glass Pasteur pipette of which the outlet is fixed 2-3 cm above the sediment layer giving a few bubbles/sec.
Behållarna ska hållas i rumstemperatur eller i ett tempererat utrymme vid 20 ± 2 °C med en fotoperiod på 16 timmar ljus (intensitet ca 1000 lux) och 8 timmar mörker.
When testing volatile chemicals, consideration should be given not to aerate the sediment-water system, while at the same time the validity criterion of minimal 60 % ASV (paragraph 10) should be fulfilled.
Det har rapporterats att en luftfuktighet på under 60 % relativ luftfuktighet kan hämma reproduktionen.
Further guidance is provided in (16).
Allt lämpligt naturligt eller syntetiskt vatten kan användas.
The test with C. riparius is conducted at a constant temperature of 20 °C (± 2 °C).
Ofta används källvatten, avklorerat kranvatten och artificiella medier (t.ex.
For C. dilutus and C. yoshimatsui, recommended temperatures are 23 °C and 25 °C (± 2 °C), respectively.
Elendt M4 eller M7, se nedan).