natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Preparation of this media is described in the Appendix 1.
Testförfarandet varierar beroende på hur testkemikalien tillsätts (dvs. via vatten- eller sedimentfasen).
The pH of the media (water phase) at test initiation should be between 7,5 and 8,0 for optimum plant growth.
Testkemikaliens sannolika beteende i vatten–sedimentsystemet bör övervägas som underlag för valet av exponeringssystem i testet (dvs. statisk exponering eller statisk förnyelse, spikat vatten eller spikat sediment).
Experimental design
I vissa fall kan spetsade sedimenttester vara att föredra för kemikalier som förväntas fördelas till sediment i avsevärd utsträckning.
The test should incorporate a minimum of six replicate test vessels for the untreated control and a minimum of four replicate test vessels for each of a minimum of five concentration levels.
Etableringsfas
Each test vessel represents a replicate containing three shoots.
Friska skottspetsar/toppar, dvs. utan sidoskott, klipps av från odlingsväxterna för att få en skottlängd på 6 cm (± 1 cm).
There are two options for growing three shoots in each test vessel:
För testutformning A (ett skott per kruka och tre krukor per kärl) planteras enskilda skottoppar i varje kruka.
Test Design A: one shoot per pot and three pots per vessel.
För testutformning B (tre skott per kruka och en kruka per kärl) planteras fyra till fem skottspetsar i varje kruka med sediment.
Test Design B: three shoots per pot and one pot per vessel.
I båda fallen bör extra krukor planteras så att ett urval av enhetliga växter kan väljas ut när testet inleds.
Alternative test designs of one shoot per pot per test vessel are acceptable provided that replication is adjusted as required to achieve the required validity criteria.
De kan dessutom användas som reservväxter för att kontrollera rotväxten omedelbart före behandling och växterna kan skördas för mätningar av skottens biomassa och längd på dag 0.
The individual test vessels should be randomly assigned to the treatment groups.
Skotten planteras så att omkring 3 cm av skottet och minst två knutar finns under sedimentytan.
A randomised design for the location of the test vessels in the test area is required to minimise the influence of spatial differences in light intensity or temperature.
Krukorna överförs sedan till testkärlen under samma miljöförhållanden som under exponeringsfasen och förvaras i sju dagar i Smart- och Barko-medium för att framkalla rotutveckling.
Test chemical concentrations and control groups
Efter denna tid bör flera växter i reservkrukorna avlägsnas för kontroll av rotväxten.
Concentrations should typically follow a geometric series; the separation factor between test concentrations should not exceed 3,2.
Om rotväxten inte är synlig (dvs. rotspetsar är inte synliga) bör etableringsfasen förlängas tills rotväxten är synlig.
Prior knowledge of the toxicity of the test chemical from a range-finding test will help to select suitable test concentrations.
Detta steg rekommenderas för att säkerställa att plantorna växer aktivt vid den tidpunkt då testet inleds.
To determine an ECx, test concentrations should bracket the ECx to ensure an appropriate level of confidence.
Val av enhetligt växtmaterial
The use of more test concentrations will improve the confidence interval around the resulting ECx value.
För testutformning A (ett skott per kruka och tre krukor per kärl) väljs enhetliga krukor ut innan testet inleds.
To determine the LOEC/NOEC (optional endpoint), the lowest test concentration should be sufficiently low such that growth is not significantly different from growth in control plants.
För testutformning B (tre skott per kruka och en kruka per kärl) avlägsnas överskottsplantor så att tre plantor som är enhetliga i storlek och utseende finns kvar.
In addition, the highest test concentration should be sufficiently high such that growth is significantly lower than that in the control.
Exponering via vattenfasen
The use of more replicates will enhance the statistical power of the no effect-concentration/ ANOVA design.
De krukor som valts ut för enhetlighet placeras i testkärlen enligt testutformningen.
In cases where a range-finding test indicates that the test chemical does not have an adverse effect at concentrations up to 100 mg/l or up to its limit of solubility in the test medium, or in the case of a formulation up to the limit of dispersibility, a limit test may be undertaken to facilitate comparison of responses in a control group and one treatment group — 100 mg/l or a concentration equal to the limit of solubility, or 1000 mg/kg dry sediment.
Smart- och Barko-medier tillsätts sedan till testkärlen.
This test should follow the general principles of a standard dose-response test, with the exception that an increase in the minimum number of replicates to six test vessels per control and concentration is advised.
Var noga med att undvika störningar för sedimentet.
Test solutions are usually prepared by dilution of a stock solution, prepared by dissolving or dispersing the test chemical in Smart and Barko media, using demineralised (i.e. distilled or deionised) water (see Appendix 1).
För att undvika störningar kan mediet tillsättas hjälp av en tratt eller en plastskiva för att täcka sedimentet medan mediet hälls i testkärlen.
The highest test concentration should normally not exceed the water solubility of the test chemical or, in the case of formulations, the dispersibility under the test conditions.
Skivan måste dock avlägsnas omedelbart efteråt.
For test chemicals of low water solubility, it may be necessary to prepare a concentrated stock solution or dispersion of the chemical using an organic solvent or dispersant in order to facilitate the addition of accurate quantities of the test chemical to the test medium and aid in its dispersion and dissolution.
Alternativt kan krukorna placeras i testkärlen efter det att mediet tillsatts.
Every effort should be made to avoid the use of such solvents or dispersants.
I båda fallen kan färskt medium användas i början av exponeringsfasen om det är nödvändigt för att minimera eventuell uppkomst av alger och bakterier eller för att möjliggöra beredning av enstaka testlösningssatser i replikaten.
For example, commonly used solvents, which do not cause phytotoxicity at concentrations up to 100 μl/l, include acetone and dimethylformamide.
Skottens längd över sedimentet mäts, antingen före eller efter tillsatsen av mediet.
If a solvent or dispersant is used, its final concentration should be reported and kept to a minimum (≤ 100 μl/l).
Relevanta mängder av testkemikalien kan tillsättas testmediet innan de tillsätts testkärlen.
Under these circumstances all treatments and (solvent) controls should contain the same concentration of solvent or dispersant.
Alternativt kan testkemikalien införas i mediet efter det att det har tillsatts testkärlen.
Untreated control replicates that do not contain a solvent or dispersant are also incorporated into the test design.
I detta fall är det viktigt att säkerställa att testkemikalien fördelas homogent i hela testsystemet utan att störa sedimentet.
Further guidance on the use of dispersants is given in an OECD Guidance Document (11).
I samtliga registreras testmediets utseende (t.ex. klart, grumligt osv.) när testet inleds.
The test procedure varies according to the application route of the test chemical (i.e. via the water or sediment phase).
Exponering via sediment
The likely behaviour of the test chemical in a water-sediment system should be considered to inform the choice of exposure regime used in the test (i.e. static or static renewal, spiked water or spiked sediment).
Spikat sediment med vald koncentration bereds genom tillsättning av en lösning av testkemikalien direkt i nytt sediment.
Spiked sediment tests may be preferred in some cases for chemicals that are predicted to significantly partition to sediment.
En stamlösning av testkemikalien upplöst i avjonat vatten blandas med det syntetiska sedimentet i en valskvarn, matningsblandare eller manuellt.
Establishment phase
Om den är svårlöslig i vatten kan testkemikalien lösas upp i minsta möjliga volym lämpligt organiskt lösningsmedel (t.ex. hexan, aceton eller kloroform).
Healthy shoot apices/tips, i.e. without side shoots, are cut from the culture plants to give a shoot length of 6 cm (± 1 cm).
Denna lösning blandas sedan med cirka 10 g fin kvartssand för ett testkärl.
For Test Design A (one shoot per pot and three pots per vessel) single shoot tips are planted into each pot.
Lösningsmedlet får avdunsta och därefter blandas sanden med lämplig mängd sediment per testbägare.
For Test Design B (three shoots per pot and one pot per vessel) four to five shoot apices are planted into each pot containing the sediment.
Endast ämnen som avdunstar lätt får användas för att upplösa, dispergera eller emulgera testkemikalien.
In both cases surplus pots should be planted to allow for selection of uniform plants at test initiation, as well as to provide spare plants to be used for inspection of root growth immediately prior to treatment and spare plants to be harvested for shoot biomass and length measurements on Day 0.
Man bör hålla i åtanke att volymen/vikten för den sand som spikas med testkemikalien måste beaktas när sedimentet bereds (dvs. sedimentet bör beredas med en mindre mängd sand).
Shoots are inserted such that approximately three cm, covering at least two nodes, are beneath the sediment surface.
Man bör vara noga med att se till att testkemikalien som tillsätts sedimentet fördelas omsorgsfullt och jämnt i sedimentet.
Pots are then transferred to test vessels under the same environmental conditions as for the exposure phase and maintained for seven days in Smart and Barko medium to induce root development.
Det spikade sedimentet fylls i krukorna (enligt beskrivningen ovan).
After this time, several plants in spare pots should be removed for inspection of root growth.
Växter som valts ut för enhetlighet och har ett lämpligt rotsystem avlägsnas från de krukor som används under etableringsfasen och planteras om i det spikade sediment som beskrivs ovan.
If root growth is not visible (i.e. root tips are not visible), then the establishment phase should be extended until root growth is visible.
Krukorna placeras i testkärlen enligt testutformningen.
This step is recommended to ensure that plants are actively growing at the time of test initiation.
Smart- och Barko-medier tillsätts sedan försiktigt (med användning av en tratt), för att undvika störningar i sedimentet.
Selection of uniform plant material
Skottens längd över sedimentet mäts, antingen före eller efter tillsatsen av mediet.
For Test Design A (one shoot per pot and three pots per vessel) pots are selected for uniformity prior to test initiation.
Upprätthållande av vattennivåer under testperioden
For Test Design B (three shoots per pot and one pot per vessel), surplus plants are removed to leave three plants that are uniform in size and appearance.
Den slutliga vattenvolymen ska registreras och vattennivån markeras på varje testkärl.
Exposure via the water phase
Om vatten avdunstar med mer än 10 % under testet bör vattennivån justeras med destillerat vatten.
Pots, selected for uniformity, are placed into the test vessels as required for the experimental design.
Vid behov kan bägarna täckas löst med genomskinliga lock, t.ex. genomskinliga plastlock, för att minimera avdunstning och föroreningar från algsporer.
Smart and Barko medium is then added to the test vessels.
Lysrörsbelysning med varmt eller kallt vitt ljus används för att åstadkomma en ljusstrålning i ett intervall på ungefär 140 (± 20) μE·m– 2 s– 1, varvid intensiteten mäts inom ett fotosyntetiskt aktivt våglängdsområde (400–700 nm) vid vattenytan.
Care should be taken to avoid disturbance of the sediment.
Ljus-mörkerperioden ska vara 16:8 timmar.
For this purpose, media may be added using a funnel or a plastic disc to cover the sediment while the medium is poured into the test vessels provided that the disc is removed immediately afterwards.
Ljusstrålningen får inte variera mer än ± 15 % över testytan.
Alternatively, plant pots may be placed in the test vessels after the addition of the media.
Temperaturen i testkärlen ska vara 20 ± 2 °C.
In both cases, fresh media may be used at the beginning of the exposure phase, if necessary to minimise the potential build-up of algae and bacteria or to allow preparation of single batches of test solution across replicates.
Kontrollmediets pH får inte öka med mer än 1,5 enheter under testet.
The shoot length above sediment is measured, either prior to or after the addition of the medium.
En avvikelse på mer än 1,5 gör dock inte testresultaten ogiltiga om det kan visas att de tidigare angivna kriterierna för testresultatens giltighet är uppfyllda.
The relevant amounts of the test chemical may be added to the test medium before it is added to the test vessels.
Testets varaktighet
Alternatively, the test chemical may be introduced into the medium after it has been added to the test vessels.
Exponeringsperioden är 14 dagar.
In this case, care should be taken to ensure that the test chemical is homogeneously distributed throughout the test system without disturbing the sediment.
Efter etableringsfasen och omedelbart före behandling (dvs på dag 0) skördas reservväxter från fem slumpvis utvalda krukor för testutformningen med tre växter per kruka eller 15 krukor för testutformningen med en växt per kruka.
In all cases, the appearance (e.g. clear, cloudy, etc.) of the test media is recorded at test initiation.
Därefter utförs bedömningen av skottens längd samt färsk- och torrvikt enligt beskrivningen ovan.
Exposure via sediment
När det gäller växter som överförs till exponeringsfasen görs följande bedömningar enligt tabell 1:
Spiked sediments of the chosen concentration are prepared by addition of a solution of the test chemical directly to fresh sediment.
Bedömningar av huvudskottets längd och antalet sidoskott och deras längd registreras åtminstone i slutet av exponeringsperioden (t.ex. på dag 14).
A stock solution of the test chemical dissolved in deionised water is mixed with the formulated sediment by rolling mill, feed mixer or hand mixing.
Visuella bedömningar av växternas hälsa registreras åtminstone tre gånger under exponeringstiden (t.ex. dagarna 0, 7 och 14).
If poorly soluble in water, the test chemical can be dissolved in as small a volume as possible of a suitable organic solvent (e.g. hexane, acetone or chloroform).
Bedömningar av skottens färsk- och torrvikt görs i slutet av testet (dvs. på dag 14).
This solution is then mixed with ca.
Skottlängden bestäms med hjälp av en linjal.
10 g of fine quartz sand for one test vessel.
Om det finns sidoskott registreras antalet och även deras längd mäts.
The solvent is allowed to evaporate and the sand is then mixed with the suitable amount of sediment per test beaker.
Visuella bedömningar av växternas hälsa görs genom att växternas utseende och testmediets allmänna tillstånd registreras.
Only agents that volatilise readily can be used to solubilise, disperse or emulsify the test chemical.
Följande iakttagelser bör noteras:
It should be borne in mind that the volume/weight of sand spiked with the test chemical has to be taken into account in the final preparation of the sediment (i.e. the sediment should thus be prepared with less sand).
Nekros, kloros eller annan missfärgning, såsom överdriven rödfärgning jämfört med kontrollväxterna.
Care should be taken to ensure that the test chemical added to sediment is thoroughly and evenly distributed within the sediment.
Utveckling av kontaminering från bakterier eller alger.
The spiked sediment is filled into the pots (as described above).
Tillväxtstörningar, såsom dvärgväxt, förändrad internodlängd, förvridna skott/blad, spridning av sidoskott, tappade blad, förlorad turgor och splittring av stammen.
Plants, selected for uniformity and an adequate root system, are removed from the pots used during the establishment phase and transplanted into the spiked sediment as described above.
Visuella bedömningar av rötternas tillstånd görs i slutet av testet.
Pots are placed into the test vessels as required for the experimental design.
Segmentet tvättas försiktigt bort från rötterna så att rotsystemet kan observeras.
Smart and Barko medium is then added carefully (i.e. using a funnel) in order to avoid disturbance of the sediment.
Nedan visas en föreslagen bedömningsskala i förhållande till kontrollväxterna:
The shoot length above sediment is measured, either prior to or after the addition of the media.
inga rötter
Maintenance of water levels over the test duration
få rötter
The final water volume must be recorded and the water level marked on each test vessel.
måttlig rotutveckling
Warm and/or cool white fluorescent lighting are used to provide light irradiance in the range of about 140 (± 20) μE·m–2 s–1 when measured as a photosynthetically active radiation (400-700 nm) at the water surface and using a light:dark ratio of 16:8 h.
Skottet skärs av vid sedimentnivå och klappas torrt före vägning.
Any differences from the selected light irradiance over the test area should not exceed the range of ± 15 %.
Det är viktigt att avlägsna sedimentpartiklar som kan ha fastnat på skottets bas.
The temperature in the test vessels is 20 ± 2 °C.
Skottmaterialet placeras sedan i en torkugn vid cirka 60 °C och torkas till konstant vikt, före omvägning och registrering av torrvikten.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
En sammanfattning av de biologiska bedömningar som minst krävs under testperioden ges i tabell 1.
However, deviation of more than 1,5 units would not invalidate the test when it can be shown that the validity criteria specified previously are met.
Bedömningsschema
Test duration
A anger att bedömningar krävs vid dessa tillfällen.
The exposure period is 14 days.
anger att mätningar inte krävs.
After the establishment phase and immediately prior to treatment (i.e. on Day 0), spare plants from five randomly selected pots for the three plants per pot design or 15 pots for the one plant per pot design, are harvested for assessment of shoot length and fresh and dry weight as described below.
Dag efter behandling
For plants transferred into the exposure phase, the following assessments are made as shown in Table 1:
(DEB)
Assessments of main shoot length, side shoot number and side shoot length are recorded at least at the end of the exposure period (e.g. on day 14).
Skottlängd, sidoskottens längd och antal
Visual assessments of plant health are recorded at least three times during the exposure period (e.g. on days 0, 7 and 14).
Visuell bedömning av skotten
Assessments of shoot fresh weight and dry weight are made at the end of the test (i.e. on Day 14).
Skottens färsk- och torrvikt
Shoot length is determined using a ruler.
Visuell bedömning av rötter
If side shoots are present, their numbers and length should also be measured.
Mätfrekvens och analytiska bestämningar
Visual assessments of plant health are made by recording the appearance of plants and the general condition of the test medium.
Temperaturen hos mediet i ett kompletterande kärl med enbart testmedium som hålls under samma betingelser i odlingskammaren, inkubatorn eller klimatrummet ska registreras minst en gång per dag.
Necrosis, chlorosis or other discoloration such as excessive reddening relative to control plants.
Mätningarna bör alltid utföras vid samma tid på dagen.
Development of bacterial or algal contamination;
Om bulklösningar används för att bereda alla replikat för varje testkoncentration, är en enda mätning av varje bulklösning är godtagbar på dag 0.
few roots
Analytiska mätningar av testkemikalien bör göras för att säkerställa att testkemikaliekoncentrationerna appliceras korrekt.
moderate root development
Vattenprover bör samlas in för analysen av testkemikalien strax innan testet inleds (dvs. samma dag som de stabila testkemikalierna appliceras eller en timme efter appliceringen för kemikalier som inte är stabila) och i slutet av testet för alla testkoncentrationer.
Care should be taken to remove sediment particles that may adhere to the base of the shoot.
Provtagning av sedimentet när testet inleds kommer sannolikt att störa testsystemet.
60 °C and dried to a constant weight, prior to re-weighing and recording the dry weight.
Om mellanliggande bedömningar anses vara nödvändiga, dvs. på dag 7, och analyserna kräver stora sedimentprover som är svåra att avlägsna från testsystemet bör de analytiska bestämningarna göras med hjälp av ytterligare testkärl som behandlas på samma sätt som de testkärl som används för biologiska bedömningar.
A summary of the minimum biological assessments required over the test duration is provided in Table 1.
Centrifugering vid t.ex.
Assessment schedule
10000 g och 4°C under 30 minuter rekommenderas för isolering av porvattnet.
A indicates that assessments are required on these occasions
Om testkemikalien bevisligen inte absorberas på filter kan även filtrering godtas.
indicates that measurements are not required.
I vissa fall är det kanske inte möjligt att analysera koncentrationerna i porvattnet om provet är för litet.
Day after treatment
Vid semistatiska tester (dvs. exponering via vattenfasen) där koncentrationen av de relevanta testkemikalierna inte förväntas hålla sig inom 20 % av den nominella koncentrationen under testperioden utan förnyelse av testlösningar, bör använda och nyberedda testlösningar provtas för analyser av testkemikaliens koncentration vid varje förnyelse.
Shoot length, side shoot length and number
Under alla omständigheter behöver bestämning av testkemikaliens koncentration bara göras för ett enda replikatkärl per testkoncentration.
Shoot fresh and dry weight,
Om man kan visa att testkemikaliens koncentration har hållits inom 20 % av den nominella eller uppmätta startkoncentrationen genom hela testet kan analysen av resultaten och härledningen av endpoints baseras på nominella eller uppmätta startvärden.
The pH and dissolved oxygen concentration of the test medium should be checked at test initiation, at least once during the study and at the end of the study in all replicate vessels.
Om användning av lösningsmedel/dispergeringsmedel är nödvändig kan data från lösningsmedelskontroller och obehandlade kontroller slås ihop för de statistiska analyserna, under förutsättning att responserna från lösningsmedelskontrollerna och de obehandlade kontroller inte skiljer sig på ett statistiskt signifikant sätt.
If bulk solutions are used to prepare all replicates at each test concentration, then a single measurement of each bulk solution is acceptable on Day 0.
Denna responsvariabel baseras på förändringar i logaritmerna för skottets totala längd samt färsk- och torrvikt över tiden i kontrollerna och i varje behandlingsgrupp.
Irradiance should be measured in the growth chamber, incubator or room at points equivalent to level of the water surface.
Den beräknas för varje replikat i varje kontroll- och behandlingsgrupp.
Measurements should be made at least once at test initiation or during the test.
Genomsnittlig längd och vikt för de tre växterna per testkärl (replikaten) och tillväxttakten för varje replikat bör beräknas med hjälp av följande formel:
The method of light detection and measurement, in particular the type of sensor, will affect the measured value.
Från replikatens responser ska ett medelvärde för tillväxthastigheten liksom en uppskattning av variansen räknas fram för varje test- och kontrollgrupp.
Analytical measurements of test chemical
Den procentuella tillväxthämningen (Ir) beräknas sedan för varje testkoncentration (testgrupp) med formeln
The correct application of the test chemical should be supported by analytical measurements of test chemical concentrations.
μC är medelvärdet av μ i kontrollgruppen, och
Concentrations in sediment and sediment pore-water should be determined at test initiation and test termination, at least in the highest test concentration, unless the test chemicals are known to be stable in water (> 80 % of nominal).
Denna responsvariabel baseras på förändringar av total längd, färskvikt och torrvikt för skottet över tiden i kontrollerna och varje behandlingsgrupp.