natgillin/translations-raw huggingface dataset:
A reduction in the circulating level of oestrogen in females, for instance through the inhibition of the aromatase converting the endogenous androgen to the natural oestrogen 17β-estradiol, causes a decrease in the VTG level which is used to detect chemicals having aromatase inhibiting properties (10, 11).
Det är en prekursor till ägguleproteiner, och när det väl har producerats i levern förs det med blodet till äggstockarna, där det tas upp och modifieras av ägg som är under utveckling.
The biological relevance of the vitellogenin response following oestrogenic/aromatase inhibition is established and has been broadly documented.
Vitellogenin är nästan inte påvisbart i plasman hos icke könsmogna hon- och hanfiskar eftersom de saknar tillräckliga halter av cirkulerande östrogen.
However, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Levern kan dock bilda och utsöndra vitellogenin som respons på exogen östrogenstimulans.
Several measurement methods have been successfully developed and standardised for routine use.
Mätningen av vitellogenin tjänar till att påvisa kemikalier med olika östrogena verkningsmekanismer.
This is the case of species-specific Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) methods using immunochemistry for the quantification of VTG produced in small blood or liver samples collected from individual fish (12, 13, 14, 15, 16, 17, 18).
Man kan påvisa ämnen med östrogena kemikalier genom mätning av vitellogenininduktionen hos hanfiskar, och detta har dokumenterats många gånger i den fackgranskade vetenskapliga litteraturen (t.ex.
Fathead minnow blood, zebrafish blood or head/tail homogenate, and medaka liver are sampled for VTG measurement.
(7)).
In medaka, there is a good correlation between VTG measured from blood and from liver (19).
Vitellogenininduktion har också påvisats efter exponering för aromatiserbara androgener (8, 9).
Appendix 6 provides the recommended procedures for sample collection for VTG analysis.
En minskning av nivåerna av cirkulerande östrogen hos honor, till exempel genom hämning av aromatasen som omvandlar det endogena androgenet till det naturliga östrogenet 17-beta-östradiol, orsakar en minskning av VTG-koncentrationen, som används för att påvisa kemikalier med aromatashämmande egenskaper (10, 11).
Kits for the measurement of VTG are widely available; such kits should be based on a validated species-specific ELISA method.
Den biologiska relevansen av den vitellogeninrespons som följer östrogen hämning och aromatashämning har fastställts och har dokumenterats i stora drag.
Secondary sex characteristics in male fish of certain species are externally visible, quantifiable and responsive to circulating levels of endogenous androgens; this is the case for the fathead minnow and the medaka — but not for zebrafish which does not possess quantifiable secondary sex characteristics.
Det är dock möjligt att produktionen av VTG hos honor även kan påverkas av allmän toxicitet och icke-endokrina toxiska verkningsmekanismer, t.ex. hepatotoxicitet.
Females maintain the capacity to develop male secondary sex characteristics, when they are exposed to androgenic chemicals in water.
Flera mätmetoder har framgångsrikt utvecklats och standardiserats för rutinmässig användning.
Several studies are available in the scientific literature to document this type of response in fathead minnow (20) and medaka (21).
Detta gäller artspecifika testmetoder för ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) som använder immunokemiska tekniker för kvantifiering av det VTG som producerats i små blod- eller leverprover som insamlats från enskilda fiskar (12, 13, 14, 15, 16, 17, 18).
A decrease in secondary sex characteristics in males should be interpreted with caution because of low statistical power, and should be based on expert judgement and weight of evidence.
Prov tas på blod från knölskallelöja, blod eller huvud/stjärthomogenat från sebrafisk och lever från medaka för mätning av VTG.
There are limitations to the use of zebrafish in this assay, due to the absence of quantifiable secondary sex characteristics responsive to androgenic acting chemicals.
Hos medaka finns det en god korrelation mellan VTG mätt i blod och i leverprover (19).
In the fathead minnow, the main indicator of exogenous androgenic exposure is the number of nuptial tubercles located on the snout of the female fish.
Tillägg 6 innehåller de rekommenderade förfarandena för provtagning för analys av VTG.
In the medaka, the number of papillary processes constitutes the main marker of exogenous exposure to androgenic chemicals in female fish.
Utrustning för mätning av VTG är lätt att få tag på.
Appendix 5A and Appendix 5B indicate the recommended procedures to follow for the evaluation of sex characteristics in fathead minnow and in medaka, respectively.
Denna utrustning bör bygga på en validerad artspecifik ELISA-metod.
The 21-day fish assay includes the evaluation of quantitative egg production and preservation of gonads for optional histopathology examination.
De sekundära könskaraktärerna hos hanarna av vissa fiskarter är externt synliga, kvantifierbara och mottagliga för cirkulerande nivåer av endogena androgener.
Some regulatory authorities may require this additional endpoint for a more complete evaluation of the reproductive fitness of the test animals, or in cases where vitellogenin and secondary sex characteristics did not respond to the chemical exposure.
Detta är fallet för knölskallelöja och medaka, men inte för sebrafisk, som inte har några kvantifierbara sekundära könskaraktärer.
Although some endpoints may be highly diagnostic (e.g. VTG induction in males and tubercle formation in females), not all endpoints (e.g. fecundity and gonad histopathology) in the assay are intended to unequivocally identify specific cellular mechanisms of action.
Honor behåller förmågan att utveckla sekundära hanliga könskaraktärer om de exponeras för androgena kemikalier i vattnet.
Rather, the suite of endpoints, collectively, allows inferences to be made with regard to possible endocrine disturbances and thus provide guidance for further testing.
Flera studier finns tillgängliga i den vetenskapliga litteraturen som dokumenterar denna typ av respons hos knölskallelöja (20) och medaka (21).
Although not endocrine specific, fecundity, due to its demonstrated sensitivity across known endocrine active chemicals (5), is an important endpoint to include because when it and other endpoints are unaffected one is more confident that a compound is not likely endocrine active.
En minskning av de sekundära könskaraktärerna hos hanar bör tolkas med försiktighet på grund av dålig statistisk giltighet, och bör i stället bygga på en expertbedömning och på vikten av de sammanlagda bevisen.
However, when fecundity is affected it will contribute heavily in weight of evidence inferences.
Det finns begränsningar för användningen av sebrafisk i detta test, eftersom dessa fiskar inte har några kvantifierbara sekundära könskaraktärer som är mottagliga för androgena kemikalier.
Guidance on data interpretation and acceptance of test results is provided further in this test method.
Hos knölskallelöja är den viktigaste indikatorn på exogen exponering för androgener antalet parningstuberkler på honornas nosar.
Definitions used in this test method are given in Appendix 1.
Hos medaka utgör antalet papillära utväxter det huvudsakliga kännetecknet hos honor för exogen exponering för androgena kemikalier.
In the assay, male and female fish in a reproductive status are exposed together in test vessels.
I tilläggen 5A och 5B anges rekommenderade förfaranden som man bör följa när man utvärderar könskaraktärerna hos knölskallelöja och medaka.
Their adult and reproductive status enables a clear differentiation of each sex, and thus a sex-related analysis of each endpoint, and ensures their sensitivity towards exogenous chemicals.
Det 21 dagar långa fisktestet omfattar utvärdering av kvantitativ äggproduktion och bevarande av könskörtlar för valfri histopatologisk undersökning.
At test termination, sex is confirmed by macroscopic examination of the gonads following ventral opening of the abdomen with scissors.
Vissa tillsynsmyndigheter kan kräva denna ytterligare endpoint för en mer komplett utvärdering av testdjurens reproduktiva lämplighet, eller i fall där vitellogenin och sekundära könskaraktärer inte reagerat för kemisk exponering.
An overview of the relevant bioassay conditions are provided in Appendix 2.
Vissa endpoints kan vara mycket diagnostiska (t.ex.
The assay is normally initiated with fish sampled from a population that is in spawning condition; senescent animals should not be used.
VTG-induktion hos hanar och knölbildning hos honor), men inte alla endpoints (t.ex. fruktsamhet och könskörtlarnas histopatologi) i testet är avsedda att entydigt identifiera specifika cellulära verkningsmekanismer.
Guidance on the age of fish and on the reproductive status is provided in the section on Selection of fish.
Det är snarare uppsättningen endpoints i stort som gör det möjligt att dra slutsatser om eventuella endokrina störningar, och därmed ge vägledning för vidare testning.
The assay is conducted using three chemical exposure concentrations as well as a water control, and a solvent control if necessary.
Fruktsamhet är inte är endokrinspecifikt, men är bevisat känsligt för kända endokrinaktiva kemikalier (5) och är därför en viktig endpoint att inkludera.
Two vessels or replicates per treatment are used for zebrafish (each vessel containing 5 males and 5 females).
Om fruktsamhet och andra endpoints inte påverkas kan man nämligen vara mer säker på att en sammansättning sannolikt inte är endokrinaktiv.
Four vessels or replicates per treatment are used for fathead minnow (each vessel containing 2 males and 4 females).
Om fruktsamheten påverkas kommer denna endpoint emellertid att bidra starkt till interferenser i vikten av de sammanlagda bevisen.
This is to accommodate the territorial behaviour of male fathead minnow while maintaining sufficient power of the assay.
Närmare vägledning om tolkning av data och acceptans av testresultat ges i testmetoden.
Four vessels or replicates per treatment are used for medaka (each vessel containing 3 males and 3 females).
De definitioner som används i denna testmetod finns i tillägg 1.
The exposure is conducted for 21-days and sampling of fish is performed at day 21 of exposure.
Med denna metod exponeras han- och honfiskar som är i ett reproduktivt stadium tillsammans i testkärlen.
Quantitative fecundity is monitored daily.
Deras status som vuxna djur i reproduktivt stadium gör att könen är tydligt särskiljbara och att de är mottagliga för exogena kemikalier, och därmed kan man göra en könsrelaterad analys av varje endpoint.
Secondary sex characteristics are measured in fathead minnow and medaka (see Appendix 5A and Appendix 5B); blood samples are collected for determination of VTG in zebrafish and fathead minnow, alternatively head/tail can be collected for the determination of VTG in zebrafish (Appendix 6); liver is collected for VTG analysis in medaka (Appendix 6); gonads are fixed either in whole or dissected for potential histopathological evaluation (22).
En översikt över de relevanta betingelserna för ett biologiskt test återfinns i tillägg 2.
TEST ACCEPTANCE CRITERIA
Testet inleds normalt med fisk som tagits från en population som befinner sig i lekstadium.
For the test results to be acceptable the following conditions apply:
Äldre djur bör inte användas.
the mortality in the water (or solvent) controls should not exceed 10 per cent at the end of the exposure period;
Vägledning om fiskarnas ålder och reproduktiva status finns i avsnittet om urval av fisk.
the dissolved oxygen concentration should be at least 60 per cent of the air saturation value (ASV) throughout the exposure period;
Testet genomförs med tre kemiska exponeringskoncentrationer och en vattenkontroll, och vid behov en lösningsmedelskontroll.
the water temperature should not differ by more than ± 1,5 °C between test vessels at any one time during the exposure period and be maintained within a range of 2 °C within the temperature ranges specified for the test species (Appendix 2);
Detta är för att tillgodose knölskallelöjhanens territoriella beteende samtidigt som testets giltighet upprätthålls.
evidence should be available to demonstrate that the concentrations of the test chemical in solution have been satisfactorily maintained within ±20 % of the mean measured values;
Fyra kärl eller replikat per behandling används för medaka (varje kärl innehåller 3 hanar och 3 honor).
evidence that fish are actively spawning in all replicates prior to initiating chemical exposure and in control replicates during the test.
Exponeringens varaktighet är 21 dagar, och provtagningen på fiskarna sker på dag 21 av exponeringen.
oxygen and pH meters;
Vid provtagningen på dag 21 avlivas alla djuren på ett humant sätt.
equipment for determination of water hardness and alkalinity;
De sekundära könskaraktärerna mäts hos knölskallelöja och medaka (se tillägg 5A och 5B), blodprov tas för bestämning av VTG i sebrafisk och knölskallelöja eller huvud/stjärt samlas in för bestämning av VTG i sebrafisk (tillägg 6), och levern samlas in för VTG-analys av medaka (tillägg 6).
adequate apparatus for temperature control and preferably continuous monitoring;
Könskörtlarna fixeras antingen hela eller dissekeras för eventuell histopatologisk bedömning (22).
tanks made of chemically inert material and of a suitable capacity in relation to the recommended loading and stocking density (see Appendix 2);
KRITERIER FÖR GODKÄNNANDE AV TESTET
spawning substrate for fathead minnow and zebrafish, Appendix 4 gives the necessary details.
För att testresultaten ska kunna godtas måste följande villkor uppfyllas:
suitably accurate balance (i.e. accurate to ± 0,5 mg).
Dödligheten i vatten- eller lösningsmedelskontrollen bör inte överstiga 10 % i slutet av exponeringsperioden.
Any water in which the test species shows suitable long-term survival and growth may be used as test water.
Koncentrationen löst syre bör vara minst 60 % av luftmättnadsvärdet (ASV) under hela exponeringsperioden.
The pH of the water should be within the range 6,5 to 8,5, but during a given test it should be within a range of ± 0,5 pH units.
Vattentemperaturen bör inte vid någon tidpunkt under exponeringsperioden variera med mer än ± 1,5 °C mellan olika testkärl, och får variera med högst 2 °C från de temperaturgränser som specificerats för den art som används i testet (se tillägg 2).
In order to ensure that the dilution water will not unduly influence the test result (for example by complexion of test chemical); samples should be taken at intervals for analysis.
Bevis bör finnas tillgängliga som visar att koncentrationen av testkemikalien i lösningen på ett tillfredsställande sätt har hållits inom ± 20 % av de genomsnittliga uppmätta värdena.
Measurements of heavy metals (e.g. Cu, Pb, Zn, Hg, Cd, and Ni), major anions and cations (e.g. Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl–, and SO42–), pesticides (e.g. total organophosphorus and total organochlorine pesticides), total organic carbon and suspended solids should be made, for example, every three months where dilution water is known to be relatively constant in quality.
Bevis för att fisken aktivt leker i alla replikat innan den kemiska exponeringen inleds och i kontrollreplikaten under testet.
If water quality has been demonstrated to be constant over at least one year, determinations can be less frequent and intervals extended (e.g. every six months).
Normal laboratorieutrustning, och särskilt följande:
Some chemical characteristics of acceptable dilution water are listed in Appendix 3.
a. syrgas- och pH-mätare,
The stock solution should preferably be prepared by simply mixing or agitating the test chemical in dilution water by using mechanical means (e.g. stirring or ultrasonication).
b. utrustning för bestämning av vattnets hårdhet och alkalinitet,
Saturation columns (solubility columns) can be used for achieving a suitable concentrated stock solution.
c. lämplig utrustning för temperaturreglering, helst med kontinuerlig övervakning,
However, in case a solvent is necessary, a solvent control should be run in parallel, at the same solvent concentration as the chemical treatments.
d. akvarier tillverkade av kemiskt inert material och tillräckligt stora för den rekommenderade fisk- och antalstätheten (se tillägg 2),
For difficult to test chemicals, a solvent may be technically the best solution; the OECD guidance document on aquatic toxicity testing of difficult substances and mixtures should be consulted (23).
e. leksubstrat för knölskallelöja och sebrafisk (tillägg 4 innehåller de uppgifter som behövs),
The choice of solvent will be determined by the chemical properties of the substance or mixture.
f. lämplig precisionsvåg (t.ex. noggrannhet ± 0,5 mg).
The OECD guidance document recommends a maximum of 100 μl/l, which should be observed.
Allt vatten i vilket testarten uppvisar lämplig överlevnad och tillväxt kan användas som testvatten.
However a recent review (24) highlighted additional concerns when using solvents for endocrine activity testing.
Vattnets pH bör ligga inom intervallet 6,5–8,5 men får dock under ett givet test variera med högst ± 0,5 pH-enheter.
Therefore it is recommended that the solvent concentration, if necessary, is minimised wherever technically feasible (dependent on the physical-chemical properties of the test chemical).
För att säkerställa att utspädningsvattnet inte påverkar testresultaten på oönskat sätt (t.ex. genom komplexbildning med testkemikalien) bör vattenprover tas regelbundet för analys.
A flow-through test system will be used.
Mätningar av tungmetaller (t.ex.
Such a system continually dispenses and dilutes a stock solution of the test chemical (e.g. metering pump, proportional diluter, saturator system) in order to deliver a series of concentrations to the test chambers.
Cu, Pb, Zn, Hg, Cd och Ni), viktiga anjoner och katjoner (t.ex.
The flow rates of stock solutions and dilution water should be checked at intervals, preferably daily, during the test and should not vary by more than 10 % throughout the test.
Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl– och SO42–), bekämpningsmedel (t.ex. total mängd organiska fosforföreningar eller total mängd organiska klorföreningar), halten organiskt kol och uppslammade partiklar bör göras t.ex. var tredje månad i fall där man vet att utspädningsvattnet håller en relativt jämn kvalitet.
Care should be taken to avoid the use of low-grade plastic tubing or other materials that may contain biologically active chemicals.
Om vattenkvaliteten har visat sig vara jämn under minst ett år kan dessa kontroller göras med längre intervaller (t.ex. var sjätte månad).
When selecting the material for the flow-through system, possible adsorption of the test chemical to this material should be considered.
Några kemiska egenskaper för godtagbart utspädningsvatten anges i tillägg 3.
Test fish should be selected from a laboratory population, preferably from a single stock, which has been acclimated for at least two weeks prior to the test under conditions of water quality and illumination similar to those used in the test.
Stamlösningen bör helst beredas genom att man helt enkelt blandar eller skakar testkemikalien i utspädningsvattnet på mekanisk väg (t.ex. omrörning eller ultraljud).
It is important that the loading rate and stocking density (for definitions, see Appendix 1) be appropriate for the test species used (see Appendix 2).
Mättnadskolonner (löslighetskolonner) kan användas för att få en stamlösning med lämplig koncentration.
mortalities of greater than 10 % of population in seven days: reject the entire batch;
Om ett lösningsmedel måste användas kan man dock inrätta en lösningsmedelskontroll som testas parallellt med samma lösningsmedelskoncentration som i de kemiska behandlingarna.
mortalities of between 5 % and 10 % of population: acclimation for seven additional days; if more than 5 % mortality during second seven days, reject the entire batch;
För kemikalier som är svåra att testa kan lösningsmedel tekniskt sett vara den bästa lösningen.
mortalities of less than 5 % of population in seven days: accept the batch.
OECD:s vägledningsdokument om akvatisk toxicitetstestning av svåra ämnen och blandningar bör konsulteras i sådana fall (23).
Fish should not receive treatment for disease during the acclimation period, in the pre-exposure period, or during the exposure period.
Valet av lösningsmedel avgörs av testkemikaliens eller blandningens kemiska egenskaper.
Pre-exposure and selection of fish
OECD:s vägledningsdokument rekommenderar högst 100 μl/l, en rekommendation som bör iakttas.
The one to two-week pre-exposure period is recommended with animals placed in vessels similar to the actual test.
En färsk undersökning (24) visade dock på ytterligare problem vid användning av lösningsmedel när man testar för endokrin aktivitet.
Fish should be fed ad libitum throughout the holding period and during the exposure phase.
Det rekommenderas därför att koncentrationen av ett eventuellt lösningsmedel begränsas till ett minimum om det är tekniskt genomförbart (beroende på testkemikaliens fysikalisk-kemiska egenskaper).
The exposure phase is started with sexually dimorphic adult fish from a laboratory supply of reproductively mature animals (e.g. with clear secondary sexual characteristics visible as far as fathead minnow and medaka are concerned), and actively spawning.
Ett genomflödestestsystem ska användas.
For general guidance only (and not to be considered in isolation from observing the actual reproductive status of a given batch of fish), fathead minnows should be approximately 20 (± 2) weeks of age, assuming they have been cultured at 25 ± 2 °C throughout their lifespan.
Ett sådant system portionerar och späder kontinuerligt ut en stamlösning av testkemikalien (t. ex. med mätpump, proportionalitetslösningssystem och mättnadskärlsystem) för att tillföra en serie koncentrationer till testbehållarna.
Japanese medaka should be approximately 16 (± 2) weeks of age, assuming they have been cultured at 25 ± 2 °C throughout their lifespan.
Stamlösningens och utspädningsvattnets flödeshastighet bör kontrolleras regelbundet under testets gång, helst dagligen, och får inte variera med mer än 10 % under hela testet.
Zebrafish should be approximately 16 (± 2) weeks of age, assuming they have been cultured at 26 ± 2 °C throughout their lifespan.
Man bör vara noga med att undvika att använda plaströr av låg kvalitet eller andra material som kan innehålla biologiskt aktiva kemikalier.
Egg production should be assessed daily during the pre-exposure phase.
Vid val av materialet för genomflödessystemet bör man beakta möjligheten att testkemikalien eventuellt kan adsorberas till detta material.
It is recommended that spawning be observed in all replicate tanks prior to inclusion in the exposure phase of the assay.
Testfiskarna ska tas från en laboratoriepopulation från en enda stam som under minst två veckor före testets början har acklimatiserats för testet genom att hållas i vatten med samma kvalitet och ljusförhållanden som det som används i testet.
Quantitative guidance on desirable daily egg production cannot be provided at this stage, but it is relatively common to observe average spawns of > 10 eggs/female/day for each species.
Det är viktigt att fisk- och antalstätheten (för definitioner, se tillägg 1) anpassas för de arter som testas (se tillägg 2).
A randomised block design according to egg production output should be used to allocate replicates to the various experimental levels to ensure balanced distribution of replicates.
Om mortaliteten under sju dagar är högre än 10 % av beståndet bör hela beståndet förkastas.
TEST DESIGN
Om mortaliteten ligger mellan 5 % och 10 % av beståndet fortsätts acklimatiseringen under ytterligare sju dagar.
Three concentrations of the test chemical, one control (water) and, if needed, one solvent control are used.
Om mer än 5 % av beståndet har dött under den andra sjudagarsperioden ska hela beståndet förkastas.