natgillin/translations-raw huggingface dataset:
An example sampling schedule with fish numbers can be found in Appendix 4.
Om testämnet är lösligt och har stabila triglycerider bör ämnet lösas upp i en liten mängd fiskolja eller ätbar vegetabilisk olja innan det blandas med fiskfodret.
Similarly high water-to-fish ratios should be used as for the aqueous exposure method (cf. paragraphs 43 and 44).
I detta fall bör man vara noga med att undvika att producera en ranson som har för hög fetthalt, med hänsyn till den naturliga fetthalten i det behandlade fodret, genom att tillsätta den minsta kända oljemängd som krävs för att uppnå en jämn fördelning av testämnet i fodret.
Although fish-to-water loading rates do not have an effect on exposure concentrations in this test, a loading rate of 0,1-1,0 g of fish (wet weight) per litre of water per day is recommended to maintain adequate dissolved oxygen concentrations and minimise test organism stress.
Fodret bör behandlas med hjälp av ett lämpligt organiskt lösningsmedel, utan att det påverkar homogeniteten och biotillgängligheten (det kan hända att (mikro)kristaller av testämnet bildas i fodret till följd av lösningsmedlets avdunstning och det är svårt att visa att detta inte har skett, jfr (49)).
Test diet and Feeding
Icke-viskösa vätskor bör tillsättas direkt i fiskfodret, men de bör vara väl blandade för att säkerställa homogenitet och underlätta assimilering.
During the acclimatisation period, fish should be fed an appropriate diet as described above (paragraph 117).
Blandningstekniken bör säkerställa homogenitet i det behandlade fodret.
If the test is being conducted under flow-through conditions, the flow should be suspended while the fish are fed.
I ett fåtal fall, t.ex. när det gäller mindre hydrofoba testämnen som mer sannolikt desorberas från fodret, kan det vara nödvändigt att täcka de beredda foderpelletarna med en liten mängd majs-/fiskolja (se punkt 142).
During the test, the diet for the test group should adhere to that described above (paragraphs 116-121).
I ett sådant fall bör kontrollfodret behandlas på liknande sätt och det färdigberedda fodret användas för mätning av fetthalten.
In addition to consideration of substance-specific factors, analytical sensitivity, expected concentration in the diet under environmental conditions and chronic toxicity levels/body burden, selection of the target spiking concentration should take into account palatability of the food (so that fish do not avoid eating).
Om referensämnen användas bör deras resultat vara jämförbara med data från litteraturen om undersökningar som har utförts under liknande förhållanden med jämförbara utfodringsintervaller (jfr punkt 45) och specifika parametrar för referensämnena bör uppfylla de relevanta kriterierna i punkt 113 (tredje, fjärde och femte styckena).
Nominal spiking concentration of the test substance should be documented in the report.
Om en bärarolja eller ett bärarlösningsmedel används som vehikel för testämnet bör en motsvarande mängd av samma vehikel (exklusive testämnet) blandas med kontrollfodret så att den motsvarar det behandlade fodret.
Based on experience, spiking concentrations in the range of 1-1000 μg/g provide a practical working range for test substances that do not exhibit a specific toxic mechanism.
Det behandlade fodret bör förvaras under förhållanden där testämnets stabilitet i foderblandningen upprätthålls (t.ex. kylning).
For substances acting via a non-specific mechanism, tissue residue levels should not exceed 5 μmol/g lipid since residues above this level are likely to pose chronic effects (19) (48) (50) [50].
Förvaringsförhållandena ska redovisas.
For other substances care should be taken that no adverse effects occur from the accumulated exposure (cf. paragraph 127).
Val av fiskart
This is especially true if more than one substance is being tested simultaneously (cf. paragraph 112).
Samma fiskarter som anges för vattenexponeringstestet kan användas (jfr punkt 32 och tillägg 3).
The appropriate amount of the test substance can be spiked to the fish food in one of three ways, as described in paragraph 119 and Appendix 7.
Regnbåge (Oncorhynchus mykiss), karp (Cyprinus carpio) och knölskallelöja (Pimephales promelas) har ofta använts i studier av bioackumulering av organiska ämnen vid exponering via föda innan denna testmetod publicerades.
The methods and procedures for spiking the feed should be documented in the report.
Testarterna bör ha ett födobeteende som ger snabb konsumtion av de givna foderransonerna för att säkerställa att eventuella faktorer som kan påverka testämnets koncentration i fodret (t.ex. läckage till vatten och möjlighet till vattenexponering) begränsas till ett minimum.
Untreated food is fed to the control fish, containing an equivalent quantity of unspiked oil vehicle if this has been used in the spiked feed for the uptake phase, or having been treated with “pure” solvent if a solvent vehicle was used for test group diet preparation.
Fisk inom det rekommenderade storleks-/viktintervallet (jfr tillägg 3) bör användas.
The treated and untreated diets should be measured analytically at least in triplicate for test substance concentration before the start and at the end of the uptake phase.
Fisken får inte vara så liten att den blir svår att analysera individuellt.
After exposure to the treated feed (uptake phase), fish (both groups) are fed untreated food (depuration phase).
Fiskarter som testas under ett stadium med snabb tillväxt kan försvåra datatolkningen, och hög tillväxttakt kan påverka beräkningen av assimileringseffektiviteten [48].
Fish are fed at a fixed ration (dependent on species; e.g. approximately 1-2 % of wet body weight per day in the case of rainbow trout).
Fiskhållning
The exact feeding rate set during the experiment should be recorded.
Acceptanskriterierna för acklimatisering, dödlighet och sjukdom är desamma som för vattenexponeringstestet innan testet utförs (jfr punkterna 33–35).
Initial feeding should be based on the scheduled weight measurements of the stock population just prior to the start of the test.
Förberedande arbete och preliminärt test
The amount of feed should be adjusted based on the wet weights of sampled fish at each sampling event to account for growth during the experiment.
Förberedande analytiskt arbete är nödvändigt för att visa att ämnet återhämtas från det behandlade fodret/den behandlade fiskvävnaden.
Weights and lengths of fish in the test and control tanks can be estimated from the weights and total lengths of fish used at each sampling event; do not weigh or measure the fish remaining in the test and control tanks.
Ett preliminärt test för att välja en lämplig koncentration i fodret är inte alltid nödvändigt.
It is important to maintain the same set feeding rate throughout the experiment.
Preliminära försök kan utföras för att visa att inga negativa effekter observeras och utvärdera om det behandlade fodret är smakligt samt av analysmetodens sensitivitet för fiskvävnader och foder och val av lämpliga utfodrings- och provtagningsintervall under utsöndringsfasen osv. Detta är dock inte obligatoriskt.
Feeding should be observed to ensure that the fish are visibly consuming all of the food presented in order to guarantee that the appropriate ingestion rates are used in the calculations.
En preliminär undersökning kan dock vara värdefull för att uppskatta det fiskantal som behövs för provtagning under utsöndringsfasen.
Preliminary feeding experiments or previous experience should be considered when selecting a feeding rate that will ensure that all food from once-daily feeding is consumed.
Detta kan leda till en avsevärd minskning av fiskantalet, speciellt för testämnen som är särskilt mottagliga för metabolism.
In the event that food is consistently being left uneaten, it may be advisable to spread the dose over an extra feeding period in each experimental day (e.g. replace once-daily feeding with feeding half the amount twice daily).
Exponeringsförhållanden
If this is necessary, the second feeding should occur at a set time and be timed so that the maximum period of time possible passes before fish sampling (e.g. time for second feeding is set within the first half of an experimental day).
Upptagningsfasens längd
Although fish generally rapidly consume the food, it is important to ensure that the substance remains adsorbed to the food.
En upptagningsfas på 7–14 dagar är vanligen tillräcklig.
Efforts should be made to avoid the test substance becoming dispersed in water from the food, thereby exposing the fish to aqueous concentrations of the test substance in addition to the dietary route.
Under denna fas utfodras en fiskgrupp dagligen med kontrollfodret och en annan grupp med testfodret med en fast ranson beroende på vilka arter som testas och försöksbetingelserna, t.ex.
This can be achieved by removing any uneaten food (and faeces) from the test and control tanks within one hour of feeding, but preferably within 30 minutes.
1–2 % av kroppsvikten (våtvikt) för regnbåge.
In addition, a system where the water is continuously cleaned over an active carbon filter to absorb any ‘dissolved’ contaminant may be used.
Vid behov kan upptagningsfasen förlängas baserat på praktisk erfarenhet från tidigare undersökningar eller kunskap om testämnets (eller det analoga ämnets) upptagning/utsöndring i fisk.
Flow-through systems may help to flush away food particles and dissolved substances rapidly [51].
Teststarten är tidpunkten för den första utfodringen med behandlat foder.
In some cases, a slightly modified spiked food preparation technique can help to alleviate this problem (see paragraph 119).
En försöksdag löper från utfodringstidpunkten till kort före tidpunkten för nästa utfodring (t.ex. en timme).
Light and Temperature
Den första försöksdagen för upptagningen löper således från tidpunkten för den första utfodringen med behandlat foder och avslutas kort före den andra utfodringen med behandlat foder.
As for the aqueous exposure method (cf. paragraph 48), a 12 to 16 hour photoperiod is recommended and temperature (± 2 °C) appropriate for the test species used (cf. Appendix 3).
I praktiken avslutas upptagningsfasen kort före (t.ex. en timme) den första utfodringen med obehandlat testfoder, eftersom fisken fortsätter att smälta det obehandlade fodret och absorberar testämnet under de mellanliggande 24 timmarna.
Type and characteristics of illumination should be known and documented.
Det är viktigt att se till att en tillräcklig hög (icke-toxisk) kroppsbelastning uppnås för testämnet med avseende på analysmetoden, så att åtminstone en minskning av storleksordningen kan mätas under utsöndringsfasen.
One control group should be used, with fish fed the same ration as the test group but without the test substance present in the feed.
I specialfall kan en förlängd upptagningsfas (upp till 28 dagar) användas med ytterligare provtagning för att ge insikt i upptagningskinetiken.
If an oil or solvent vehicle has been used to spike the feed in the test group, the control group food should be treated in exactly the same way but with the absence of test substance so that the diets of the test group and control group are equivalent (cf. paragraphs 121 and 139).
Koncentrationen i fisken får inte nå stabilt tillstånd under upptagningsfasen.
The conditions described in the aqueous exposure method apply here also, except that TOC need only be measured before the test as part of the test water characterisation (cf. paragraph 53).
Ekvationer för uppskattning av tiden till stabilt tillstånd som en indikation på den tid som sannolikt krävs för att uppnå uppskattbara koncentrationer i fisken kan tillämpas här på samma sätt som för vattenexponeringstestet (jfr tillägg 5).
Sampling and Analysis of Fish and Diet
I vissa fall kan det vara känt att upptagning av ämnet i fisken under 7–14 dagar inte är tillräckligt för att den använda foderkoncentrationen ska nå en tillräcklig hög koncentration i fisken så att minst en minskning av storleksordningen kan analyseras under utsöndringsfasen, antingen på grund av dålig analyskänslighet eller låg assimileringseffektivitet.
Analysis of Diet Samples
I sådana fall kan det vara lämpligt att förlänga den inledande utfodringsfasen länge än 14 dagar, eller överväga en högre foderkoncentration, särskilt för starkt metaboliserande ämnen.
Samples of the test and control diets should be analysed at least in triplicate for the test substance and for lipid content at least before the beginning and at the end of the uptake phase.
Det är dock viktigt att se till att kroppsbelastningen under upptaget hålls under den (uppskattade) kroniska nolleffektkoncentrationen (NOEC) i fiskvävnad (jfr 138).
Pre-study work should be conducted to establish the limit of quantification, percent recovery, interferences and analytical variability in the intended sample matrix.
7 eller 14 dagar) visar att ämnet har utsöndrats under kvantifieringsnivåerna innan hela 28-dagarsperioden kan provtagningen avbrytas och testet avslutas.
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
I ett fåtal fall kan det hända att ingen mätbar upptagning av testämnet har uppstått vid slutet av upptagningsperioden (eller i det andra utsöndringsprovet).
Analysis of Fish
Om det kan påvisas att i) giltighetskriteriet i punkt 113 är uppfyllt, och ii) att den bristande upptagningen inte beror på andra brister i testet (t.ex. att upptagningsfasen inte är tillräckligt lång, brister i tekniken för att behandla fodret som leder till dålig biotillgänglighet, bristande känslighet hos analysmetoden, fisken konsumerar inte fodret osv.) kan undersökningen avslutas utan att behöva göras om med en längre upptagningsfas.
At each fish sampling event, 5-10 individuals will be sampled from exposure and control treatments (in some instances numbers of control fish can be reduced; cf. paragraph 134).
Om preliminärt arbete har visat att så kan vara fallet kan det vara lämpligt att analysera avföring (om det är möjligt) för osmält testämne som ett led i en massbalansmetod.
Sampling events should occur at the same time on each experimental day (relative to feeding time), and should be timed so that the likelihood of food remaining in the gut during the uptake phase and the early part of the depuration phase is minimised to prevent spurious contributions to total test substance concentrations (i.e. sampled fish should be removed at the end of an experimental day, keeping in mind that an experimental day starts at the time of feeding and ends at the time of the next feeding, approximately 24 hours later.
Antal testfiskar
Depuration begins with the first feeding of unspiked food; cf. paragraph 128).
Den minsta fiskens vikt får inte vara mindre än minst två tredjedelar av den största fiskens vikt (jfr punkterna 40–42)
The first depuration phase sample (taken shortly before the second feeding with unspiked food) is important as extrapolation back one day from this measurement is used to estimate the time zero concentration (C0,d, the concentration in the fish at the end of uptake/start of depuration).
Totalt fiskantal för undersökningen bör väljas baserat på provtagningsschemat (minst ett prov i slutet av upptagningsfasen och fyra till sex prover under utsöndringsfasen, men detta beror på fasernas längd), med hänsyn till analysteknikens sensitivitet, den koncentration som sannolikt kommer att uppnås i slutet av upptagningsfasen (baserat på befintlig kunskap) och utsöndringsfasens varaktighet (om befintlig kunskap möjliggör uppskattningar).
Optionally, the gastrointestinal tract of the fish can be removed and analysed separately at the end of uptake and at days 1 and 3 of depuration.
Fem till tio fiskar bör provtas varje gång.
At each sampling event fish should be removed from both test vessels and treated in the same way as described in the aqueous method (cf. paragraphs 61-63).
Tillväxtparametrarna (vikt och total längd) mäts före den kemiska analysen eller analysen av fetthalt.
Concentrations of test substance in whole fish (wet weight) are measured at least at the end of the uptake phase and during the depuration phase in both control and test groups.
På grund av de naturliga variationerna i storlek, tillväxttakt och fysiologi mellan fiskarna och den sannolika variationen i mängden foder som varje fisk konsumerar bör minst fem fiskar provtas i varje intervall från testgruppen och fem från kontrollgruppen för att korrekt fastställa den genomsnittliga koncentrationen och dess variabilitet.
During the depuration phase, four to six sampling points are recommended (e.g. 1, 3, 7, 14 and 28 days).
Variabiliteten mellan den använda fisken bidrar sannolikt mer till den totala okontrollerade variabiliteten i testet än de analytiska metodernas inneboende variabilitet, vilket motiverar användningen av upp till tio fiskar per provtagningspunkt i vissa fall.
Optionally, an additional sampling point may be included after 1-3 days' uptake to estimate assimilation efficiency from the linear phase of uptake for the fish while still near the beginning of the exposure period.
Om bakgrundstestämnets koncentrationer i kontrollfisken inte är mätbara i början av utsöndringsfasen är kemisk analys av två–tre kontrollfiskar i det sista provtagningsintervallet endast tillräckligt om prover tas av den återstående kontrollfisken vid samtliga kontrollpunkter för att kontrollera vikt och total längd (så att prover tas från samma antal fiskar från test- och kontrollgrupperna för att kontrollera tillväxten).
Two main deviations from the schedule exist: i) if an extended uptake phase is employed for the purposes of investigating uptake kinetics, there will be additional sampling points during the uptake phase and so additional fish will need to be included (cf. paragraph 126); ii) if the study has been terminated at the end of the uptake phase owning to no measurable uptake (cf. paragraph 131).
Fisken lagras, vägs individuellt (även om det visar sig vara nödvändigt att kombinera provresultaten i ett senare skede) och den totala vikten mäts.
Individual fish that are sampled should be weighed (and their total length measured) to allow growth rate constants to be determined.
För ett standardtest med en 28 dagar lång utsöndringsfas med fem utsöndringsprover innebär detta att det behövs sammanlagt 59–120 fiskar från testgruppen och 50–110 från kontrollgruppen, om man förutsätter att analystekniken för ämnet gör det möjligt att utföra en analys av fetthalten av samma fisk.
Concentrations of the substance in specific fish tissue (edible and non-edible portions) can also be measured at the end of uptake and selected depuration times.
Om analysen av fetthalt inte kan utföras på samma fisk som den kemiska analysen och det inte heller är möjligt att bara använda kontrollfisken för att analysera fetthalten (jfr punkt 56), behövs ytterligare 15 fiskar (tre från stampopulationen vid teststarten, tre var från kontroll- och testgrupperna i början av utsöndringsfasen och tre var från kontroll- och testgrupperna i slutet av försöket).
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
Ett exempel på provtagningsschema med fiskantal finns i tillägg 4.
For the periodic use of a reference substance (cf. paragraph 25), it is preferable that concentrations are measured in the test group at the end of uptake and at all depuration times specified for the test substance (whole fish); concentrations need only be analysed in the control group at end of uptake (whole fish).
En liknande hög fisktäthet som för vattenexponeringsmetoden bör användas (jfr punkterna 43 och 44).
In certain circumstances (for example if analysis techniques for test substance and reference substance are incompatible, such that additional fish would be needed to follow the sampling schedule) another approach may be used as follows to minimise the number of additional fish required.
Även om fisktätheten inte påverkar exponeringskoncentrationerna i testet rekommenderas en fisktäthet på 0,1–1,0 g fisk (våtvikt) per liter vatten per dag för att upprätthålla lämpliga koncentrationer löst syre och minimera stressen för testorganismerna.
Concentrations of the reference substance are measured during depuration only on days 1, 3 and two further sampling points, selected such that reliable estimations of time zero concentration (C0,d) and k2 can be made for the reference substance.
Testfoder och utfodring
If possible the lipid content of the individual fish should be determined on each sampling occasion, or at least at the start and end of the uptake phase and at the end of the depuration phase.
Under acklimatiseringsperioden bör fisken utfodras med lämpligt foder enligt beskrivningen ovan (punkt 117).
(cf. paragraphs 56 and 67).
Om testet utförs under genomflödesförhållanden bör flödet stängas av medan fisken utfodras.
Depending on the analytical method (refer to paragraph 67 and to Appendix 4), it may be possible to use the same fish for both lipid content and test substance concentration determination.
Under testet bör det foder som ges till testgruppen följa beskrivningen ovan (punkterna 116–121).
This is preferred on the grounds of minimising fish numbers.
Förutom att överväga ämnesspecifika faktorer, analytisk sensitivitet, förväntad koncentration i fodret under miljöförhållanden och kroniska toxicitetsnivåer/kroppsbelastning bör man vid val av målkoncentration efter inblandning av testämnet även beakta fodrets smaklighet (så att fisken inte undviker att äta).
However, should this not be possible, the same approach as described in the aqueous exposure method can be used (see paragraph 56 for these alternative lipid measurement options).
Nominell koncentration efter inblandning av testämnet ska dokumenteras i rapporten.
The method used to quantify the lipid content should be documented in the report.
Baserat på tidigare erfarenhet ger koncentrationer i intervallet 1–1000 μg/g en praktisk verkningsradie för testämnen som inte har en specifik toxisk mekanism.
Quality of the analytical method
För ämnen som verkar via en icke-specifik mekanism bör resthalterna i vävnaden inte överstiga 5 μmol/g fett, eftersom rester över denna nivå sannolikt kommer att innebära kroniska effekter (19) (48) (50) [50].
Experimental checks should be conducted to ensure the specificity, accuracy, precision and reproducibility of the substance-specific analytical technique, as well as recoveries of the test substance from both food and fish.
För andra ämnen är det viktigt att säkerställa att inga negativa effekter uppstår till följd av ackumulerad exponering (jfr punkt 127).
At the start of the test a sample of fish from the stock population need to be weighed (and their total length measured).
Detta gäller särskilt om fler än ett ämne testas samtidigt (jfr punkt 112).
These fish should be sampled shortly before the first spiked feeding (e.g. one hour), and assigned to experimental day 0.
En lämplig mängd av testämnet ska blandas i fiskfodret.
The number of fish for this sample should be at least the same as that for the samples during the test.
Det finns tre sätt att göra detta, som beskrivs i punkt 119 och tillägg 7.
Some of these can be the same fish used for lipid analysis before the start of the uptake phase (cf. paragraph 153).
Metoderna och procedurerna för att behandla fodret ska dokumenteras i rapporten.
At each sampling interval fish are first weighed and their length measured.
Analytiska mätningar av testämneskoncentrationen i det behandlade och obehandlade fodret bör göras i minst tre exemplar innan upptagningsfasen inleds och vid slutet av upptagningsfasen.
In each individual fish the measured weight (and length) should be linked to the analysed chemical concentration (and lipid content, if applicable), for example using a unique identifier code for each sampled fish.
Efter exponering för det behandlade fodret (upptagningsfasen) utfodras fisken (båda grupperna) med obehandlat foder (utsöndringsfasen).