natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Such fragments (e.g. heterocycles, anthraquinone, azobenzene) can then be combined with the Hansch- π values or with Rekker or Leo fragment constants.
Andra alternativa parametrar inbegriper cellvolym, flourescens, optisk täthet etc. En omvandlingsfaktor mellan den uppmätta alternativa parametern och biomassan bör vara känd.
Remarks:
Endpoint i testet är tillväxthämning, där tillväxt uttrycks som den logaritmiska ökningen av biomassan (den genomsnittliga specifika tillväxthastigheten) under exponeringsperioden.
The calculation methods are only applicable to partly or fully ionised substances when the necessary correction factors are taken into account.
Från de genomsnittliga specifika tillväxthastigheter som uppmätts i en serie testlösningar fastställer man den koncentration av testkemikalien som ger upphov till en specificerad minskning av tillväxthastigheten, x % (t.ex.
If the existence of intramolecular hydrogen bonds can be assumed, the corresponding correction terms (approx. + 0,6 to + 1,0 log Pow units) must be added (1).
50 %).
Indications on the presence of such bonds can be obtained from stereo models or spectroscopic data.
Värdet uttrycks som ErCx (t.ex.
If several tautomeric forms are possible, the most likely form should be used as the basis of the calculation.
ErC50).
The revisions of lists of fragment constants should be followed carefully.
I den här testmetoden används även producerad mängd biomassa som responsvariabel, något som kan vara nödvändigt för att uppfylla gällande krav i vissa länder.
LITERATURE ON CALCULATION METHODS
Denna variabel definieras som biomassans storlek vid exponeringstidens slut minus biomassans storlek vid exponeringstidens början.
Chapter C.3 is replaced by the following:
Med utgångspunkt i den mängd biomassa som producerats i en serie testlösningar beräknar man den koncentration av testkemikalien som ger upphov till en viss, fastställd minskning av mängden producerad biomassa, x % (t.ex.
FRESHWATER ALGA AND CYANOBACTERIA, GROWTH INHIBITION TEST
50 %).
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 201 (2006, annex corrected in 2011).
Detta värde uttrycks som EyCx (t.ex.
The need to extend the test method to include additional species and update it to meet the requirements for hazard assessment and classification of chemicals has been identified.
EyC50).
This revision has been completed on the basis of extensive practical experience, scientific progress in the field of algal toxicity studies, and extensive regulatory use, which has occurred since the original adoption.
Den lägsta koncentrationen med observerad effekt (LOEC) och den högsta koncentrationen utan observerad effekt (NOEC) kan också bestämmas statistiskt.
Definitions used are given in Appendix 1.
INFORMATION OM TESTKEMIKALIEN
PRINCIPLE OF THE TEST
Information om testkemikalien som kan vara av värde när man fastställer testbetingelserna är bland annat strukturformel, renhetsgrad, ljusbeständighet, stabilitet under testbetingelserna, ljusabsorberande förmåga, pKa samt resultat från undersökningar av kemikaliens omvandling, inklusive bionedbrytbarhet i vatten.
The purpose of this test is to determine the effects of a chemical on the growth of freshwater microalgae and/or cyanobacteria.
Testkemikaliens vattenlöslighet, fördelningskoefficient oktanol/vatten (Pow) och ångtryck ska vara kända, och det ska finnas en validerad metod för kvantitativ bestämning av kemikalien i testlösningarna.
Exponentially growing test organisms are exposed to the test chemical in batch cultures over a period of normally 72 hours.
Metodens utbyte och detektionsgräns ska vara kända.
In spite of the relatively brief test duration, effects over several generations can be assessed.
TESTETS GILTIGHET
The system response is the reduction of growth in a series of algal cultures (test units) exposed to various concentrations of a test chemical.
För att testresultaten ska vara giltiga måste följande effektivitetskriterier vara uppfyllda:
The response is evaluated as a function of the exposure concentration in comparison with the average growth of replicate, unexposed control cultures.
Biomassan i kontrollkulturerna ska ha ökat exponentiellt med minst en faktor 16 inom testperioden (72 timmar).
For full expression of the system response to toxic effects (optimal sensitivity), the cultures are allowed unrestricted exponential growth under nutrient sufficient conditions and continuous light for a sufficient period of time to measure reduction of the specific growth rate.
Detta motsvarar en specifik tillväxthastighet på 0,92/dygn– 1.
Growth and growth inhibition are quantified from measurements of the algal biomass as a function of time.
De mest använda arterna har vanligen en betydligt högre tillväxthastighet (se tillägg 2).
Algal biomass is defined as the dry weight per volume, e.g. mg algae/litre test solution.
Kravet kan dock inte alltid uppfyllas när man använder sig av arter som växer långsammare än de som anges i tillägg 2.
However, dry weight is difficult to measure and therefore surrogate parameters are used.
Testperioden ska då förlängas så att man erhåller en minst 16-faldig tillväxt i kontrollkulturerna, och tillväxten måste vara exponentiell under hela testperioden.
Of these surrogates, cell counts are most often used.
Testperioden kan även förkortas ända ner till 48 timmar om detta krävs för att uppnå obegränsad exponentiell tillväxt under testet.
Other surrogate parameters include cell volume, fluorescence, optical density, etc.
Ett villkor för detta är dock att tillväxtfaktorn är minst 16-faldig.
A conversion factor between the measured surrogate parameter and biomass should be known.
Variationskoefficientens medelvärde för sektionsvisa specifika tillväxthastigheter (dagarna 0–1, 1–2 och 2–3 för 72-timmarstester) i kontrollkulturerna (se tillägg 1 under ’variationskoefficient’) får inte överskrida 35 %.
The test endpoint is inhibition of growth, expressed as the logarithmic increase in biomass (average specific growth rate) during the exposure period.
I punkt 49 beskrivs hur man beräknar den sektionsvisa specifika tillväxthastigheten.
From the average specific growth rates recorded in a series of test solutions, the concentration bringing about a specified x % inhibition of growth rate (e.g. 50 %) is determined and expressed as the ErCx (e.g. ErC50).
Detta kriterium tillämpas på medelvärdet för de variationskoefficienter som beräknats för kontrollreplikaten.
An additional response variable used in this test method is yield, which may be needed to fulfil specific regulatory requirements in some countries.
I tester med Pseudokirchneriella subcapitata och Desmodesmus subspicatus får variationskoefficienten för genomsnittlig specifik tillväxthastighet i kontrollreplikaten inte överskrida 7 % under hela testperioden.
It is defined as the biomass at the end of the exposure period minus the biomass at the start of the exposure period.
För arter som inte används så ofta i testsammanhang får värdet inte överstiga 10 %.
From the yield recorded in a series of test solutions, the concentration bringing about a specified x % inhibition of yield (e.g., 50 %) is calculated and expressed as the EyCx (e.g. EyC50).
REFERENSKEMIKALIEN
In addition, the lowest observed effect concentration (LOEC) and the no observed effect concentration (NOEC) may be statistically determined.
Referenskemikalie(r), t.ex.
INFORMATION ON THE TEST CHEMICAL
3,5-diklorfenol, som används i det internationella ringtestet (1), kan testas för att kontrollera testförfarandet.
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes structural formula, purity, stability in light, stability under the conditions of the test, light absorption properties, pKa, and results of studies of transformation including biodegradability in water.
För grönalger kan även kaliumdikromat användas som referenskemikalie.
The water solubility, octanol water partition coefficient (Pow) and vapour pressure of the test chemical should be known and a validated method for the quantification of the chemical in the test solutions with reported recovery efficiency and limit of detection should be available.
Referenskemikalier bör testas minst två gånger per år.
VALIDITY OF THE TEST
TESTMETODENS TILLÄMPBARHET
For the test to be valid, the following performance criteria should be met:
Denna testmetod är lättast att tillämpa på vattenlösliga kemikalier som under testförhållandena sannolikt kommer att stanna kvar i vattnet.
The biomass in the control cultures should have increased exponentially by a factor of at least 16 within the 72-hour test period.
Om man vill testa kemikalier som är flyktiga, starkt adsorberande, färgade, svårlösliga i vatten eller som kan påverka tillgången på näringsämnen och mineraler i testmediet kan det krävas vissa modifieringar av den beskrivna metoden (t.ex. slutna system, anpassningar av testkärlen).
This corresponds to a specific growth rate of 0,92 day– 1.
Några exempel på lämpliga modifieringar ges i (2) (3) och (4).
For the most frequently used species the growth rate is usually substantially higher (see Appendix 2).
BESKRIVNING AV TESTMETODEN
This criterion may not be met when species that grow slower than those listed in Appendix 2 are used.
Testkärl och annan utrustning som kommer i kontakt med testlösningarna ska vara tillverkade uteslutande av glas eller något annat kemiskt inert material.
In this case, the test period should be extended to obtain at least a 16-fold growth in control cultures, while the growth has to be exponential throughout the test period.
Utrustningen rengörs noggrant, så att inga organiska eller oorganiska föroreningar påverkar algernas tillväxt eller testlösningarnas sammansättning.
The test period may be shortened to at least 48 hours to maintain unlimited, exponential growth during the test as long as the minimum multiplication factor of 16 is reached.
Testkärlen är normalt glaskolvar vars storlek tillåter mätningar på en tillräckligt stor volym av testkulturen under testet och ett tillräckligt högt utbyte av CO2 med den omgivande luften (se punkt 30).
The mean coefficient of variation for section-by-section specific growth rates (days 0-1, 1-2 and 2-3, for 72-hour tests) in the control cultures (See Appendix 1 under “coefficient of variation”) must not exceed 35 %.
Observera att vätskevolymen måste vara tillräckligt stor för analytiska bestämningar (se punkt 37).
See paragraph 49 for the calculation of section-by-section specific growth rate.
Dessutom behövs åtminstone en del av följande utrustning:
This criterion applies to the mean value of coefficients of variation calculated for replicate control cultures.
Odlingsutrustning.
The coefficient of variation of average specific growth rates during the whole test period in replicate control cultures must not exceed 7 % in tests with Pseudokirchneriella subcapitata and Desmodesmus subspicatus.
Man bör använda ett odlingsskåp eller en odlingskammare där inkuberingstemperaturen kan regleras med en noggrannhet av ± 2 °C.
For other less frequently tested species, the value should not exceed 10 %.
Instrument för ljusmätning.
REFERENCE CHEMICAL
Observera att mätvärdena för ljusintensitet kan påverkas av mätmetoden, särskilt typen av ljussensor (mottagare).
Reference chemical(s), such as 3,5-dichlorophenol used in the international ring test (1), may be tested as a means of checking the test procedure.
Mätningarna bör helst göras med en sfärisk (4 π) sensor (som mäter både direkt och reflekterat ljus från alla vinklar ovanför och under mätplanet), eller en 2 π -sensor (som mäter ljus från alla vinklar ovanför mätplanet).
Potassium dichromate can also be used as a reference chemical for green algae.
Utrustning för att bestämma algbiomassa.
It is desirable to test a reference chemical at least twice a year.
Cellantal, som är den oftast använda alternativa parametern för algbiomassa, kan bestämmas med hjälp av elektronisk partikelräknare, mikroskop utrustat med räknekammare eller flödescytometer.
APPLICABILITY OF THE TEST
Andra alternativ till biomassa kan mätas med hjälp av flödescytometer, fluorimeter, spektrofotometer eller kolorimeter.
This test method is most easily applied to water-soluble chemicals which, under the conditions of the test, are likely to remain in the water.
Man bör helst beräkna omvandlingsfaktorn mellan cellantal och torrvikt.
For testing of chemicals that are volatile, strongly adsorbing, coloured, having a low solubility in water or chemicals that may affect the availability of nutrients or minerals in the test medium, certain modifications of the described procedure may be required (e.g., closed system, conditioning of the test vessels).
När koncentrationen av biomassa är låg kan det vid spektrofotometriska mätningar vara nödvändigt att använda sig av kyvetter med en strålgång på minst 4 cm för att få fram användbara mätvärden.
Guidance on some appropriate modifications is given in (2) (3) and (4).
Testorganismer
DESCRIPTION OF THE TEST METHOD
Ett stort antal arter icke-fastsittande mikroalger och cyanobakterier kan användas.
Test vessels and other apparatus which will come into contact with the test solutions should be made entirely of glass or other chemically inert material.
De stammar som förtecknas i tillägg 2 har visat sig vara lämpliga för denna testmetod.
The items should be thoroughly washed to ensure that no organic or inorganic contaminants may interfere with the algal growth or composition of the test solutions.
Om man använder sig av andra arter ska stammen och/eller ursprunget anges.
The test vessels will normally be glass flasks of dimensions that allow a sufficient volume of culture for measurements during the test and a sufficient mass transfer of CO2 from the atmosphere (see paragraph 30).
Bekräfta att de alger som används kan tillväxa exponentiellt under hela testperioden under rådande testförhållanden.
Note that the liquid volume must be sufficient for analytical determinations (see paragraph 37).
Odlingsmedium
In addition some or all of the following equipment may be required:
Det rekommenderas att man använder antingen OECD-mediet eller AAP-mediet som odlingsmedium.
Culturing apparatus:
Sammansättningen av dessa medier framgår av tillägg 3.
a cabinet or chamber is recommended, in which the chosen incubation temperature can be maintained at ± 2 °C.
Observera att de två medierna har olika utgångsvärde för pH och olika buffringsförmåga (motverkar pH-ökningar).
Light measurement instruments:
Testresultaten kan därför variera beroende på vilket medium som används, särskilt när man testar joniserande kemikalier.
it is important to note that the method of measurement of light intensity, and in particular the type of receptor (collector), may affect the measured value.
Biomassans startkoncentration
Measurements should preferably be made using a spherical (4 π) receptor (which responds to direct and reflected light from all angles above and below the plane of measurement), or a 2 π receptor (which responds to light from all angles above the measurement plane).
Biomassans startkoncentration ska vara densamma för alla testkulturer.
Apparatus to determine algal biomass.
Den ska också vara tillräckligt låg för att möjliggöra exponentiell tillväxt under hela inkuberingen utan att några näringsämnen tar slut.
Cell count, which is the most frequently used surrogate parameter for algal biomass, may be made using an electronic particle counter, a microscope with counting chamber, or a flow cytometer.
Startvärdet får inte överskrida 0,5 mg/l, räknat på torrvikt.
Other biomass surrogates can be measured using a flow cytometer, fluorimeter, spectrophotometer or colorimeter.
Följande cellkoncentrationer rekommenderas:
A conversion factor relating cell count to dry weight is useful to calculate.
5 × 103 – 104 celler/ml
In order to provide useful measurements at low biomass concentrations when using a spectrophotometer, it may be necessary to use cuvettes with a light path of at least 4 cm.
2–5 × 103 celler/ml
Test organisms
104 celler/ml
Several species of non-attached microalgae and cyanobacteria may be used.
5 × 104 – 105 celler/ml
The strains listed in Appendix 2 have been shown to be suitable using the test procedure specified in this test method.
Testkemikaliens koncentrationer
If other species are used, the strain and/or origin should be reported.
Det koncentrationsområde där det är troligt att testkemikalien ger effekt kan bestämmas på grundval av resultat från preliminära tester (range-finding tests).
Confirm that exponential growth of the selected test alga can be maintained throughout the test period under the prevailing conditions.
För det slutliga testet bör minst fem koncentrationer väljas i en geometrisk serie vars faktor inte överstiger 3,2.
Growth medium
För testkemikalier med plan dos-responskurva kan det vara befogat att använda en högre faktor.
The compositions of these media are shown in Appendix 3.
Replikat och kontroller
Note that the initial pH value and the buffering capacity (regulating pH increase) of the two media are different.
För varje koncentration av testkemikalien ska det finnas tre replikat.
Therefore the results of the tests may be different depending on the medium used, particularly when testing ionising chemicals.
Om NOEC inte behöver bestämmas kan man ändra testupplägget så att antalet koncentrationer ökas medan antalet replikat per koncentration minskas.
Modification of the growth media may be necessary for certain purposes, e.g. when testing metals and chelating agents or testing at different pH values.
Minst tre kontrollreplikat ska användas, och helst bör de vara dubbelt så många som antalet replikat för varje koncentration av testkemikalien.
Use of a modified medium should be described in detail and justified (3) (4).
En extra serie testlösningar kan beredas för analytisk bestämning av testkemikaliens koncentrationer (se punkterna 36 och 38).
Initial biomass concentration
Om ett lösningsmedel används för att lösa upp testkemikalien måste man ta med ytterligare kontroller där koncentrationen av lösningsmedel är densamma som i testkulturerna.
The initial biomass in the test cultures must be the same in all test cultures and sufficiently low to allow exponential growth throughout the incubation period without risk of nutrient depletion.
Beredning av ympkultur
The initial biomass should not exceed 0,5 mg/l as dry weight.
En ympkultur bereds i testmedium 2–4 dagar innan testet påbörjas.
The following initial cell concentrations are recommended:
Syftet med detta är att algerna ska kunna anpassa sig till testförhållandena och befinna sig i en exponentiell tillväxtfas när de senare ympas i testlösningarna.
5 × 103 – 104 cells/ml
Algbiomassan bör regleras så att ympkulturen fortsätter att tillväxa exponentiellt till dess att testet inleds.
2-5 × 103 cells/ml
Ympkulturen inkuberas under samma förhållanden som testkulturerna.
104 cells/ml
En mätning görs av ökningen av ympkulturens biomassa, så att man kan förvissa sig om att tillväxten befinner sig inom det normala intervallet för den använda stammen under rådande odlingsbetingelser.
5 × 104 – 105 cells/ml
I tillägg 4 ges ett exempel på en metod för algodling.
Concentrations of test chemical
Det kan krävas ett andra förökningssteg för ympkulturen för att undvika synkron celldelning under testet.
The concentration range in which effects are likely to occur may be determined on the basis of results from range-finding tests.
Beredning av testlösningar
For the final definitive test at least five concentrations, arranged in a geometric series with a factor not exceeding 3.2, should be selected.
Alla testlösningar ska innehålla samma koncentration av odlingsmediet och samma startkoncentration av algbiomassan.
For test chemicals showing a flat concentration response curve a higher factor may be justified.
Testlösningar av de valda koncentrationerna bereds vanligen genom att man blandar en stamlösning av testkemikalien med odlingsmedium och ympkultur.
The concentration series should preferably cover the range causing 5-75 % inhibition of algal growth rate.
Stamlösningar brukar beredas genom upplösning av kemikalien i testmediet.
Replicates and controls
Lösningsmedel som aceton, tert-butylalkohol och dimetylformamid kan användas som bärare när man tillsätter kemikalier med låg vattenlöslighet till testmediet (2) (3).
The test design should include three replicates at each test concentration.
Lösningsmedlets koncentration får inte överstiga 100 μl/l, och det tillsatta lösningsmedlet ska vara av samma koncentration för alla kulturer (inklusive kontroller) i testserien.
If determination of the NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Inkubering
The number of control replicates must be at least three, and ideally should be twice the number of replicates used for each test concentration.
Testkärlen försluts med luftgenomsläppliga proppar.
A separate set of test solutions may be prepared for analytical determinations of test chemical concentrations (see paragraphs 36 and 38).
Kärlen skakas och placeras sedan i odlingsutrustningen.
When a solvent is used to solubilise the test chemical, additional controls containing the solvent at the same concentration as used in the test cultures must be included in the test design.
Under testet måste man hålla algerna i suspension och underlätta ett tillräckligt stort utbyte av CO2.
Preparation of inoculum culture
Därför ska innehållet hela tiden skakas eller röras om.
In order to adapt the test alga to the test conditions and ensure that the algae are in the exponential growth phase when used to inoculate the test solutions, an inoculum culture in the test medium is prepared 2-4 days before start of the test.
Temperaturen i kulturerna ska vara 21–24 °C, och den ska kunna regleras med en noggrannhet av ± 2 °C.
The algal biomass should be adjusted in order to allow exponential growth to prevail in the inoculum culture until the test starts.
När det gäller arter som inte förtecknas i tillägg 2 (t.ex. tropiska arter) kan det vara lämpligt med en högre temperatur.
Incubate the inoculum culture under the same conditions as the test cultures.
Detta förutsätter dock att kriterierna för testresultatens giltighet är uppfyllda.
Measure the increase in biomass in the inoculum culture to ensure that growth is within the normal range for the test strain under the culturing conditions.
Kolvarna bör placeras slumpvis i inkubatorn och flyttas om dagligen.
An example of the procedure for algal culturing is described in Appendix 4.
Kontrollmediets pH får inte öka med mer än 1,5 enheter under testet.
To avoid synchronous cell divisions during the test a second propagation step of the inoculum culture may be required.
När det gäller metaller samt ämnen som delvis joniseras vid det använda pH-värdet kan det vara nödvändigt att begränsa pH-förskjutningen för att få fram reproducerbara och tydliga resultat.
Preparation of test solutions
Det går att begränsa förskjutningen till mindre än 0,5 enheter om man ser till att utbytet av CO2 mellan testlösningen och den omgivande luften är tillräckligt högt, t.ex. genom att öka skakapparatens hastighet.
All test solutions must contain the same concentrations of growth medium and initial biomass of test alga.
En annan möjlighet är att reducera behovet av CO2 genom att minska biomassans startkoncentration eller testets längd.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by mixing a stock solution of the test chemical with growth medium and inoculum culture.
Den yta där kulturerna inkuberas ska kontinuerligt belysas med fluorescerande ljus av enhetligt slag, t.ex. kallt vitt ljus eller dagsljus.
Stock solutions are normally prepared by dissolving the chemical in test medium.
Olika stammar av alger och cyanobakterier kan ha olika ljuskrav.
Solvents, e.g. acetone, t-butyl alcohol and dimethyl formamide, may be used as carriers to add chemicals of low water solubility to the test medium (2)(3).
Ljusets intensitet ska anpassas efter den testorganism som används.