natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Examination/Test
Av dessa djur sövs och fixeras 10 djur/kön/dosnivå (dvs. 1 hane och 1 hona per kull) genom perfusion vid studiens avslutning (cirka PND 70).
20 m + 20 f
Ytterligare en uppsättning av 20 ungar/kön/dosnivå används för testning av kognitiv funktion hos unga vuxna (dvs. 1 hane och 1 hona per kull).
10 m + 10 f
Av dessa avlivas 10 djur/kön/grupp (dvs. 1 hane och 1 hona per kull) vid avslutningen, och hjärnan avlägsnas och vägs.
PND 22 brain weight/neuropathology/morphometry
Tabell 3
PND 22 brain weight
Unge nr [11]
Learning and memory (PND 25)
PND 11 hjärnvikt
Young adult brain weight/neuropathology/morphometry ~ PND 70
Beteendeontogeni (motorisk aktivitet)
Learning and memory (young adults)
Inlärning och minne (PND 27)
Young adult brain weight ~ PND 70
Plötsliga ljud (ungdjur och unga vuxna)
Reserve animals for replacements or additional tests
Olika ungar används för kognitiva tester på PND 23 och för unga vuxna (t.ex. jämna/udda kullar av totalt 20).
Example 2
Tillägg 2
Out of these animals, 10 pups/sex/dose level (1 male or 1 female per litter), are humanely killed at PND 11.
Definitioner
Another set of 20 animals/sex/dose level (1 male and1 female per litter) is used for post-weaning examinations (detailed clinical observations, motor activity, assessing age of sexual maturation and motor and sensory function).
kemikalie Ett ämne eller en blandning.
Of these animals, 10 animals/sex/dose level (i.e.1 male or 1 female per litter) are anesthetised and fixed via perfusion at study termination (approximately PND 70).
testkemikalie Alla ämnen eller blandningar som testas med denna testmetod.
After additional fixation in situ, the brain is removed, weighed and processed for neuropathological evaluation.
B.54 UTEROTROF BIOASSAY PÅ GNAGARE:
For cognitive function testing in adolescents and young adults, 10 pups/sex/dose level are used(i.e. 1 male or 1 female per litter).
ETT KORTTIDSSCREENINGTEST FÖR ÖSTROGENA EGENSKAPER
Different animals are used for testing for cognitive function tests at PND 23 and young adults.
Denna testmetod motsvarar OECD:s testriktlinje (TG) 440 (2007).
At termination, the 10 animals/sex/group tested as adults are killed, the brain is removed and weighed.
OECD inledde en högprioriterad verksamhet under 1998 för att se över befintliga riktlinjer och ta fram nya riktlinjer för screening och testning av potentiellt hormonstörande ämnen (se hänvisning 1).
The remaining 20 animals/sex/group not selected for testing are killed and discarded at weaning.
En del av verksamheten var att ta fram en riktlinje för den uterotrofa bioassayen på gnagare.
Table 2
Den uterotrofa bioassayen på gnagare undergick då ett omfattande valideringsprogram, inklusive sammanställandet av ett detaljerat bakgrundsdokument (se hänvisning 2, 3) och genomförandet av omfattande studier inom och mellan laboratorier för att visa testets relevans och reproducerbarhet med en potent referensöstrogen, svaga östrogenreceptoragonister, en stark östrogenreceptorantagonist och en negativ referenskemikalie (se hänvisning 4, 5, 6, 7, 8, 9).
Pup No [9]
Denna testmetod B.54 är resultatet av de erfarenheter som vunnits under valideringen av testprogrammet och de resultat som erhållits därigenom med östrogena agonister.
PND 11 brain weight/neuropathology/morphometry
Den uterotrofa bioassayen är ett korttidsscreeningtest som har sitt ursprung på 1930-talet (se hänvisning 27, 28) och som först standardiserades för screening av en expertkommitté 1962 (se hänvisning 32, 35).
10 m + 10 f [10]
Den baseras på ökningen av livmodervikt eller uterotrof respons (för översikt, se hänvisning 29).
Learning and memory (PND 23)
Den utvärderar en testkemikalies möjlighet att framkalla biologiska aktiviteter som är förenliga med agonister eller antagonister för naturliga östrogener (t.ex.
Young adult brain weight
17-ß-östradiol), dock används den inte lika ofta för att upptäcka antagonister som för agonister.
Animals killed and discarded PND 21.
Livmodern svarar på östrogen på två sätt.
Example 3
En första reaktion är viktökning på grund av vattenupptag.
One set 20 pups/sex/dose level (i.e. 1 male and 1 female per litter) is used for brain weight and neuropathology assessment at PND 11.
Detta följs av viktökning på grund av vävnadstillväxt (se hänvisning 30).
Out of these animals, 10 pups/sex/dose level (i.e. 1 male or 1 female per litter) are humanely killed at PND 11 and brains are removed, weighed and processed for histopathologic evaluation.
Livmoderns reaktion hos råttor och möss är kvalitativt jämförbara.
Another set of of 20 animals/sex/dose level (i.e. 1 male and 1 female per litter) are used for behavioural ontogeny (motor activity), post-weaning examinations (motor activity and assessing age of sexual maturation), and cognitive function testing in adolescents.
Den uterotrofa bioassayen är avsedd att ingå i en serie in vitro- och in vivo-tester för att identifiera kemikalier med potential att interagera med det endokrina systemet, vilket slutligen leder till riskbedömningar för människors hälsa eller miljön.
Another set of 20 animals/sex/dose level (i.e. 1 male and 1 female per litter) is used for motor and sensory function tests (auditory startle) and detailed clinical observations.
OECD:s valideringsprogram använder både starka och svaga östrogenagonister för att utvärdera metodens prestanda att identifiera östrogena kemikalier (se hänvisning 4, 5, 6, 7, 8).
Of these animals, 10 animals/sex/dose level (i.e. 1 male or 1 female per litter) are anesthetised and fixed via perfusion at study termination (approximately PND 70).
Därigenom visades att metodens känslighet när det gäller östrogenagonister var god, vid sidan av en god reproducerbarhet inom och mellan laboratorier.
Another set of 20 pups/sex/dose level are usedfor cognitive function testing in young adults (i.e. 1 male and 1 female per litter).
När det gäller negativa kemikalier, så ingick bara en enda ’negativ’ referenskemikalie som redan rapporterats negativ genom uterotrof bioassay samt in vitro-receptorbindning och receptortest i valideringsprogrammet, men ytterligare testdata, som inte är relaterade till OECD:s valideringsprogram, har utvärderats, vilket ger ytterligare stöd till den särskilda karaktären hos den uterotrofa bioassayen för screening av östrogenagonister (se hänvisning 16).
Pup No [11]
Detta har potentialen att leda till negativa hälsorisker, inklusive reproduktions- och utvecklingseffekter.
PND 11 brain weight
Därför föreligger behovet av att snabbt bedöma och utvärdera en kemikalie som en möjlig östrogenagonist eller -antagonist.
Behavioural ontogeny (motor activity)
Affiniteten hos en ligand för en östrogenreceptor eller en transkriptionell aktivering av rapportörgener in vitro är informativ men den är bara en av flera faktorer som är avgörande för eventuella risker.
Learning and memory (PND 27)
Andra bestämningsfaktorer kan omfatta metabolisk aktivering och avaktivering vid införandet i kroppen, fördelning till målgruppsvävnader samt utträde ur kroppen, beroende, åtminstone delvis, på administreringsväg och kemikalien som testas.
Auditory startle (adolescents and young adults)
Detta medför att det är nödvändigt att granska en kemikalies möjliga aktivitet in vivo enligt tillämpliga villkor, såvida inte kemikaliens egenskaper vad gäller absorption, distribution, metabolism och eliminering (Adme) redan ger lämplig information.
For this example, litters are culled to 4 males + 4 females;
Livmodervävnader svarar med snabb och kraftig tillväxt vid östrogenstimulering, särskilt hos laboratoriegnagare då brunstcykeln varar cirka 4 dagar.
male pups are numbered 1 through 4, female pups 5 through 8.
Gnagare, framför allt råtta, är också vanliga i toxicitetsstudier för riskbedömning.
Different pups are used for cognitive tests at PND 23 and in young adults (e.g. even/odd litters from total of 20).
Därför är gnagares livmoder ett lämpligt målorgan för in vivo-screeningen av östrogenagonister och -antagonister.
Appendix 2
Denna testmetod baseras på de protokoll som används i OECD:s valideringsstudie som har visat sig vara tillförlitlig och repeterbar i studier inom och mellan laboratorier (se hänvisning 5, 7).
Definitions
För närvarande finns det två metoder tillgängliga, en metod med ovariektomerade vuxna honor (OVX-adultmetod) och en metod med ej ovariektomerade omogna honor (immaturmetod).
Chemical A substance or a mixture
Det visades i OECD:s valideringstestprogram att båda metoderna har jämförbar känslighet och reproducerbarhet.
Test chemical Any substance or mixture tested using this test method
Immaturmetoden är dock något mindre specifik eftersom den har en intakt hypotalamus-hypofys-gonad-axel (HPG-axeln), men den täcker ett större undersökningsområde än ovariektomerade djur eftersom den kan reagera på kemikalier som interagerar med HPG-axeln och inte bara med östrogenreceptorn.
B.54 UTEROTROPHIC BIOASSAY IN RODENTS:
Råttans HGP-axel är funktionell när djuret är ca 15 dygn gammalt.
A SHORT-TERM SCREENING TEST FOR OESTROGENIC PROPERTIES
Dessförinnan kan puberteten inte påskyndas med behandlingar som GnRH.
This test method is equivalent to OECD Test Guideline (TG) 440 (2007).
Allteftersom honorna börjar nå puberteten, före vaginal öppning, har honan flera tysta cykler som inte resulterar i vaginal öppning eller ägglossning men där det finns vissa hormonella svängningar.
The OECD initiated a high-priority activity in 1998 to revise existing guidelines and to develop new guidelines for the screening and testing of potential endocrine disrupters (1).
Om en kemikalie stimulerar HPG-axeln direkt eller indirekt leder det till tidig pubertet, tidig ägglossning och påskyndad vaginal öppning.
One element of the activity was to develop a test guideline for the rodent Uterotrophic Bioassay.
Det är inte bara kemikalier som verkar på HPG-axeln som leder till detta, utan vissa typer av föda med högre metaboliserbara energinivåer än andra stimulerar tillväxten och påskyndar vaginal öppning utan att vara östrogena.
The rodent Uterotrophic Bioassay then underwent an extensive validation programme including the compilation of a detailed background document (2)(3) and the conduct of extensive intra- and interlaboratory studies to show the relevance and reproducibility of the bioassay with a potent reference oestrogen, weak oestrogen receptor agonists, a strong oestrogen receptor antagonist, and a negative reference chemical (4)(5)(6)(7)(8)(9).
Sådana kemikalier framkallar inte en uterotrof respons hos ovariektomerade vuxna djur eftersom deras HPG-axel inte fungerar.
This test method B.54 is the outcome of the experience gained during the validation test programme and the results obtained thereby with oestrogenic agonists.
Av djurskyddsskäl bör företräde ges till den metod som använder omogna råttor, undviker kirurgisk förbehandling av djuren samt även undviker en eventuell icke-användning av de djur som visar eventuella tecken på brunst (se hänvisning 30).
It evaluates the ability of a chemical to elicit biological activities consistent with agonists or antagonists of natural oestrogens (e.g. 17ß-estradiol), however, its use for antagonist detection is much less common than for agonists.
Eventuell respons kan analyseras histologiskt för keratinisering och förhorning av vaginan (se hänvisning 30).
The uterus responds to oestrogens in two ways.
Oavsett det möjliga ursprunget till responsen, bör ett positivt utfall av en uterotrof bioassay normalt initiera åtgärder för vidare utredning.
An initial response is an increase in weight due to water imbibition.
Ytterligare bevis på östrogenicitet kan komma från in vitro-metoder, såsom ER-bindnings- och transkriptionsaktiveringstesterna, eller från andra in vivo-metoder såsom honligt pubertetstest.
This response is followed by a weight gain due to tissue growth (30).
Med beaktande av att den uterotrofa bioassayen tjänar som ett in vivo-screeningtest, tog valideringsstrategin både hänsyn till djurens välbefinnande och fungerade som en strategi för stegvis testning.
The uterus responses in rats and mice qualitatively are comparable.
För detta ändamål riktades ansträngningarna mot att noggrant validera reproducerbarheten och känsligheten hos östrogenicitet – det största problemet för många kemikalier, medan liten ansträngning riktades mot antiöstrogenicitetskomponenten i testet.
This bioassay serves as an in vivo screening assay and its application should be seen in the context of the “OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals” (Appendix 2).
Endast ett antiöstrogen med kraftig aktivitet testades, eftersom antalet kemikalier med en tydlig antiöstrogen profil (som inte skyms av någon östrogen aktivitet) är mycket begränsad.
In this Conceptual Framework the Uterotrophic Bioassay is contained in Level 3 as an in vivo assay providing data about a single endocrine mechanism, i.e. oestrogenicity.
Denna testmetod är således avsedd för det östrogena protokollet, medan protokollet som beskriver testets antagonistläge ingår i ett vägledningsdokument (se hänvisning 37).
The Uterotrophic Bioassay is intended to be included in a battery of in vitro and in vivo tests to identify chemicals with potential to interact with the endocrine system, ultimately leading to risk assessments for human health or the environment.
Testets reproducerbarhet och känslighet för kemikalier med uteslutande antiöstrogen aktivitet kommer att definieras tydligare längre fram, efter det att testförfarandet har använts rutinmässigt under en tid och fler kemikalier med detta verkningssätt har identifierats.
The OECD validation programme used both strong and weak oestrogen agonists to evaluate the performance of the assay to identify oestrogenic chemicals (4)(5)(6)(7)(8).
Alla djurbaserade förfaranden ska uppfylla lokala normer för djurskötsel.
Thereby the sensitivity of the test procedure for oestrogen agonists was well demonstrated besides a good intra- and interlaboratory reproducibility.
De beskrivningar av vård och behandling som anges nedan är minimala prestandakrav som kommer att ersättas av lokala föreskrifter som t.ex.
With regard to negative chemicals, only one “negative” reference chemical already reported negative by uterotrophic assay as well as in vitro receptor binding and receptor assays was included in the validation programme, but additional test data, not related to the OECD validation programme, have been evaluated, giving further support to the specificity of the Uterotrophic Bioassay for the screening of oestrogen agonists (16).
Europaparlamentets och rådets direktiv 2010/63/EU av den 22 september 2010 om skydd av djur som används för vetenskapliga ändamål (se hänvisning 38).
INITIAL CONSIDERATIONS AND LIMITATIONS
Ytterligare vägledning om human behandling av djur finns i OECD (se hänvisning 25).
Oestrogen agonists and antagonists act as ligands for oestrogen receptors a and b and may activate or inhibit, respectively, the transcriptional action of the receptors.
Som med alla tester som använder sig av levande djur är det viktigt att se till att uppgifterna verkligen är nödvändiga innan testet påbörjas.
This may have the potential to lead to adverse health hazards, including reproductive and developmental effects.
Två förhållanden där data kan krävas är:
Therefore, the need exists to rapidly assess and evaluate a chemical as a possible oestrogen agonist or antagonist.
Hög exponeringspotential (nivå 1 i den konceptuella ramen, tillägg 2) eller indikationer på östrogenicitet (nivå 2) för att undersöka om sådana effekter kan uppstå in vivo.
While informative, the affinity of a ligand for an oestrogen receptor or transcriptional activation of reporter genes in vitro is only one of several determinants of possible hazard.
Effekter som indikerar östrogenicitet i in vivo-tester på nivå 4 eller 5, för att styrka att effekterna var relaterade till en östrogen mekanism som inte kan belysas med hjälp av ett in vitro-test.
Other determinants can include metabolic activation and deactivation upon entering the body, distribution to target tissues, and clearance from the body, depending at least in part on the route of administration and the chemical being tested.
Definitioner som används i denna testmetod finns i tillägg 1.
This leads to the need to screen the possible activity of a chemical in vivo under relevant conditions, unless the chemical's characteristics regarding Absorption — Distribution — Metabolism — Elimination (ADME) already provide appropriate information.
Den uterotrofa bioassayen förlitar sig på känsligheten hos ett djurtestsystem där hypotalamus-hypofys-ovarie-axeln inte är funktionell, vilket leder till låga endogena nivåer av cirkulerande östrogen.
Uterine tissues respond with rapid and vigorous growth to stimulation by oestrogens, particularly in laboratory rodents, where the oestrous cycle lasts approximately 4 days.
Detta säkerställer en låg livmoderreferensvikt och ett maximalt responsområde för administrerade östrogener.
Rodent species, particularly the rat, are also widely used in toxicity studies for hazard characterisation.
Två östrogenkänsliga tillstånd hos hongnagare uppfyller detta krav:
Therefore, the rodent uterus is an appropriate target organ for the in vivo screening of oestrogen agonists and antagonists.
Omogna honor efter avvänjning och före puberteten och
This test method is based on those protocols employed in the OECD validation study which have been shown to be reliable and repeatable in intra- and interlaboratory studies (5)(7).
unga vuxna honor efter ovariektomi med tillräcklig tid för livmodervävnaden att gå i regress.
Currently two methods, namely the ovariectomised adult female method (ovx-adult method) and the immature non-ovariectomised method (immature method) are available.
Testkemikalien tillförs dagligen via sondmatning eller subkutan injektion.
It was shown in the OECD validation test programme that both methods have comparable sensitivity and reproducibility.
Stegvisa testkemikaliedoser ges till minst två behandlingsgrupper av försöksdjur (se punkt 33 för vägledning), med en dosnivå per grupp, och för immaturmetoden en administreringsperiod av tre på dagar i följd och för OVX-adultmetoden en administreringsperiod av minst tre dagar i följd.
However, the immature, as it has an intact hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis, is somewhat less specific but covers a larger scope of investigation than the ovariectomised animal because it can respond to chemicals that interact with the HPG axis rather than just the oestrogen receptor.
Djuren obduceras cirka 24 timmar efter sista dosen.
The HGP axis of the rat is functional at about 15 days of age.
För östrogenagonister utvärderas medelvärdet för livmodervikten hos de behandlade djurgrupperna i förhållande till vehikelgruppen avseende en statistiskt signifikant ökning.
Prior to that, puberty cannot be accelerated with treatments like GnRH.
En statistiskt signifikant ökning av den genomsnittliga livmodervikten hos en testgrupp visar en positiv respons i denna bioassay.
As the females begin to reach puberty, prior to vaginal opening, the female will have several silent cycles that do not result in vaginal opening or ovulation, but there are some hormonal fluctuations.
BESKRIVNING AV METODEN
If a chemical stimulates the HPG axis directly or indirectly, precocious puberty, early ovulation and accelerated vaginal opening result.
Vanligen använda stammar av laboratoriegnagare kan användas.
Not only chemicals that act on the HPG axis do this but some diets with higher metabolisable energy levels than others will stimulate growth and accelerate vaginal opening without being oestrogenic.
Till exempel användes Sprague-Dawley- och Wistar-råttstammar vid valideringen.
Such chemicals would not induce an uterotrophic response in OVX adult animals as their HPG axis does not work.
Stammar med en livmoder som är eller misstänks vara mindre känslig bör inte användas.
For animal welfare reasons preference should be given to the method using immature rats, avoiding surgical pre-treatment of the animals and avoiding also a possible non-use of those animals which indicate any evidence entering oestrous (see paragraph 30).
Laboratoriet bör påvisa känslighet hos den stam som används, enligt beskrivningen i punkt 26 och 27.
The uterotrophic response is not entirely of oestrogenic origin, i.e. chemicals other than agonists or antagonists of oestrogens may also provide a response.
Råtta och mus har rutinmässigt använts för den uterotrofa bioassayen sedan 1930-talet.
For example, relatively high doses of progesterone, testosterone, or various synthetic progestins may all lead to a stimulative response (30).
OECD:s valideringsstudier har endast utförts med råttor, grundat på en förståelse för att båda arterna bedöms vara likvärdiga och att det därmed bör räcka med en art för den världsomfattande valideringen för att spara resurser och djur.
Any response may be analysed histologically for keratinisation and cornification of the vagina (30).
Råttan är den art som används i de flesta studier om reproduktions- och utvecklingstoxicitet.
Irrespective of the possible origin of the response, a positive outcome of an Uterotrophic Bioassay should normally initiate actions for further clarification.
Med hänsyn till att det finns en stor historisk databas för möss och därmed möjlighet att bredda testmetoden för uterotrof bioassay på gnagare och använda möss som testart, har en begränsad uppföljande valideringsstudie genomförts på möss (se hänvisning 16).
Additional evidence of oestrogenicity could come from in vitro assays, such as the ER binding assays and transcriptional activation assays, or from other in vivo assays such as the female pubertal assay.
En överbryggande studie, med ett begränsat antal testkemikalier och deltagande laboratorier och utan kodad provtestning, har valts i enlighet med den ursprungliga avsikten att spara resurser och djur.
Taking into account that the Uterotrophic Bioassay serves as an in vivo screening assay, the validation approach taken served both animal welfare considerations and a tiered testing strategy.
Denna överbryggande valideringsstudie visar för den uterotrofa bioassayen på unga vuxna ovariektomerade möss att data som erhålls från råttor och möss överensstämmer väl, både kvalitativt och kvantitativt.
To this end, effort was directed at rigorously validating reproducibility and sensitivity for oestrogenicity — the main concern for many chemicals-, while little effort was directed at the antioestrogenicity component of the assay.
Resultatet från den uterotrofa bioassayen kan bli inledningen till en långsiktig studie, vilket gör att djur från samma stam och ursprung kan användas i båda försöken.
Only one antioestrogen with strong activity was tested since the number of chemicals with a clear antioestrogenic profile (not obscured by some oestrogenic activity) is very limited.
Den överbryggande studien begränsades till OVX-möss och rapporten ger inte en robust datauppsättning för att validera immaturmodellen, och därför beaktas inte immaturmodellen för möss i denna testmetod.
Thus this test method is dedicated to the oestrogenic protocol, while the protocol describing the antagonist mode of the assay is included in a Guidance Document (37).
Således kan, i vissa fall, möss användas i stället för råttor.
The reproducibility and sensitivity of the assay for chemicals with purely anti-oestrogenic activity will be more clearly defined later on, after the test procedure has been in routine use for some time and more chemicals with this modality of action are identified.
En motivering bör ges för denna art baserat på toxikologiska, farmakokinetiska och/eller andra kriterier.
It is acknowledged that all animal based procedures will conform to local standards of animal care;
Ändringar i protokollet kan bli nödvändigt för möss.
the descriptions of care and treatment set forth below are minimal performance standards, and will be superseded by local regulations such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (38).
Till exempel är foderkonsumtionen hos möss i förhållande till kroppsvikt högre än den hos råttor och därför bör innehållet av fytoöstrogen i fodret vara lägre för möss än för råttor (se hänvisning 9, 20, 22).