natgillin/translations-raw huggingface dataset:
However, it is clear that the dose of TP should not be too high to block the effects of weak androgen receptor (AR) antagonists or so low that the androgenic tissues display little growth response even without antiandrogen coadministration.
Vid screening för potentiell androgen aktivitet, administreras testkemikalien dagligen genom oral sondmatning eller subkutan injektion under en period av tio dagar i följd.
The growth response of the individual androgen-dependent tissues is not entirely of androgenic origin, i.e. chemicals other than androgen agonists can alter the weight of certain tissues.
Testkemikalier administreras till minst två behandlingsgrupper av försöksdjur med en dosnivå per grupp.
However, the growth response of several tissues concomitantly substantiates a more androgen-specific mechanism.
En statistiskt signifikant ökning av vikter för två eller flera målorgan i testkemikaliegrupperna jämfört med vehikelkontrollgruppen, tyder på att testkemikalien är positiv för potentiell androgen aktivitet (se punkt 60).
For example, high doses of potent oestrogens can increase the weight of the seminal vesicles;
Androgener som trenbolon, som inte kan 5α-reduceras har mer uttalade effekter på LABC och GP kontra TP, men alla vävnader bör visa ökad tillväxt.
however, the other androgen-dependent tissues in the assay do not respond in a similar manner.
Vid screening av potentiell antiandrogen aktivitet, administreras testkemikalien dagligen via oral sondmatning eller subkutan injektion under en period av tio dagar i följd tillsammans med dagliga TP-doser (0,2 eller 0,4 mg/kg/d) genom subkutan injektion.
Antiandrogenic chemicals can act either as androgen receptor antagonists or 5a-reductase inhibitors.
Det fastställdes i valideringsprogrammet att endera 0,2 eller 0,4 mg/kg/d av TP kan användas eftersom båda är effektiva vid upptäckt av antiandrogener och därför bör man endast använda en dos i testet.
reductase inhibitors have a variable effect, because the conversion to more potent dihydrotestosterone varies by tissue.
Graderade testkemikaliedoser administreras till minst tre behandlingsgrupper av försöksdjur, med en dosnivå per grupp.
Antiandrogens that inhibit 5α-reductase, like finasteride, have more pronounced effects in the ventral prostate than other tissues as compared to a potent AR antagonist, like flutamide.
En statistiskt signifikant minskning av vikterna hos två eller flera målorgan i testkemikalie- plus TP-grupperna jämfört med endast TP-kontrollgruppen, tyder på att testkemikalien är positiv för potentiell antiandrogen aktivitet (se punkt 61).
This difference in tissue response can be used to differentiate between AR mediated and 5α-reductase mediated modes of action.
Val av art och stam
In addition, the androgen receptor is evolutionarily related to that of other steroid hormones, and some other hormones, when administered at high, supraphysiological dosage levels, can bind and antagonise the growth-promoting effects of TP (13).
Råttan har rutinmässigt använts i Hershbergers bioassay sedan 1930-talet.
Further, it also is plausible that enhanced steroid metabolism and a consequent lowering of serum testosterone could reduce androgen-dependent tissue growth.
Det är biologiskt sannolikt att både råtta och mus visar liknande responser, men baserat på 70 års erfarenhet av råttmodellen är råttan den art som väljs för Hershbergers bioassay.
Therefore, any positive outcome in the Hershberger Bioassay should normally be evaluated using a weight of evidence approach, including in vitro assays, such as the AR and oestrogen receptor (ER) binding assays and corresponding transcriptional activation assays, or from other in vivo assays that examine similar androgen target tissues such as the male pubertal assay, 15-day intact adult male assay, or 28-day or 90-day repeat dose studies.
Dessutom, eftersom data från Hershbergers bioassay kan användas som förberedelse för en långtids flergenerationsstudie, möjliggör detta att djur från samma art, stam och ursprung används för båda studierna.
Experience indicates that xenobiotic androgens are rarer than xenobiotic antiandrogens.
Vanligen använda laboratorieråttstammar kan användas, men stammar som mognar betydligt senare än 42 dagar bör inte användas, eftersom kastrering av dessa hanar vid 42 dagars ålder kan hindra mätningar av ollonvikter, vilket endast kan göras efter det att förhuden separerats från penisskaftet.
The expectation then is that the Hershberger bioassay will be used most often for the screening of antiandrogens.
Därför bör stammar som härrör från Fisher 344-råttan inte användas, utom i sällsynta fall.
However, the procedure to test for androgens could, nevertheless, be recommended for steroidal or steroid-like chemicals or for chemicals for which an indication of possible androgenic effects was derived from methods contained in Level 1 or 2 of the conceptual framework (Appendix 2).
Fisher 344-råttan utvecklas sexuellt vid en annan tidpunkt jämfört med andra oftare använda stammar såsom Sprague Dawley- eller Wistar-stammar (se hänvisning 16).
Similarly, adverse effects associated with (anti)androgenic profiles may be observed in Level 5 assays, leading to the need to assess whether a chemical operates by an endocrine mode of action.
Om en sådan stam ska användas bör laboratoriet kastrera dem vid en något högre ålder och kunna påvisa känsligheten hos den stam som används.
It is acknowledged that all animal-based procedures should conform to local standards of animal care;
Laboratoriet bör tydligt ange motiveringen för valet av råttstam.
the descriptions of care and treatment set forth below are minimal performance standards, and will be superseded by local regulations such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (26).
När screeningtestet är inledningen till en upprepad oralstudie, en reproduktions- och utvecklingsstudie eller en långtidsstudie ska helst djur från samma stam och ursprung användas till alla studierna.
Further guidance of the humane treatment of animals is given by the OECD (17).
Alla förfaranden bör överensstämma med samtliga lokala normer för laboratoriedjurvård.
As in any bioassay using experimental animals, careful considerations should be given to the necessity to carry out this study.
Dessa beskrivningar av vård och behandling är minimikrav och kommer att ersättas av mer stringenta lokala föreskrifter som t.ex.
Basically there may be two reasons for such a decision:
Europaparlamentets och rådets direktiv 2010/63/EU av den 22 september 2010 om skydd av djur som används för vetenskapliga ändamål (se hänvisning 26).
high exposure potential (Level 1 of the Conceptual Framework) or indications for (anti)androgenicity in in vitro assays (Level 2) supporting investigations whether such effects may occur in vivo;
Gruppinhysning är att föredra framför isolering, på grund av djurens låga ålder och det faktum att råttor är sociala djur.
effects consistent with (anti)androgenicity in Level 4 or 5 in vivo tests supporting investigations of the specific mode of action, e.g. to determine whether the effects were due to an (anti)androgenic mechanism.
Genom inhysning av två eller tre djur per bur undviks trängsel och åtföljande stress som kan störa den hormonella kontrollen av utvecklingen av de tillhörande könsvävnaderna.
The Hershberger Bioassay achieves its sensitivity by using males with minimal endogenous androgen production.
Burarna bör rengöras noggrant för att avlägsna eventuella föroreningar, och placeras på ett sådant sätt att eventuell påverkan på grund av placeringen minimeras.
This is achieved through the use ofcastrated males provided an adequate time after castration for the target tissues to regress to a minimal and uniform baseline weight is allowed.
Burar av lämplig storlek (~ 2000 kvadratcentimeter) förhindrar överbeläggning.
Thus, when screening of potential androgenic activity, there are low endogenous levels of circulating androgens, the hypothalamic — pituitary — gonad axis is rendered unable to compensate via feedback mechanisms, the ability of the tissues to respond is maximised, and the starting tissue weight variability is minimised.
Varje djur ska identifieras individuellt (t.ex. öronmärkning eller etikett) med en human metod.
When screening of potential anti-androgenic activity, a more consistent tissue weight gain can be achieved when the tissues are stimulated by a reference androgen.
Identifieringsmetoden bör registreras.
As a result, the Hershberger Bioassay requires only 6 animals per dose group whereas other assays with intact pubertal or adult males suggest using 15 males per dose group.
Laboratorier som utför Hershbergers bioassay bör använda det laboratoriefoder som normalt används i deras kemikalietestningsarbete.
Castration of peripubertal male rats should be done in an appropriate manner using approved anaesthetics and aseptic technique.
I valideringsstudierna för bioassayen observerades inga effekter eller variationer som kan hänföras till fodret.
Analgesics should be administered on the first few days following surgery to eliminate post-surgical discomfort.
Det foder som används registreras, och ett prov av laboratoriefodret bör behållas för framtida analys.
Castration enhances the precision of the assay to detect weak androgens and antiandrogens by eliminating compensatory endocrine feed-back mechanisms present in the intact animal that can attenuate the effects of administered androgens and antiandrogens and by eliminating the large inter-individual variability in serum testosterone levels.
Prestandakriterier för androgenberoende organvikter
Hence, castration reduces the numbers of animals required to screen for these endocrine activities.
Under valideringsstudien fanns inga bevis för att en minskning av kroppsvikten påverkade ökningar eller minskningar av tillväxten av vävnadsvikter hos målvävnaderna (dvs. detta bör vägas in i denna studie).
When screening for potential androgenic activity, the test chemical is administered daily by oral gavage or subcutaneous (sc) injection for a period of 10 consecutive days.
Bland de olika råttstammar som framgångsrikt använts i valideringsprogrammet, är de androgenberoende organvikterna större hos de tyngre råttstammarna än hos de lättare stammarna.
Test chemicals are administered to a minimum of two treatment groups of experimental animals using one dose level per group.
Därför inkluderar inte prestandakriterierna för Hershbergers bioassay absoluta förväntade organvikter för positiva och negativa kontroller.
A statistically significant increase in two or more target organ weights of the test chemical groups compared to the vehicle control group indicates that the test chemical is positive for potential androgenic activity (See paragraph 60).
Eftersom variationskoefficienten för en vävnad har ett omvänt förhållande till statistisk styrka, är prestationskriterierna för Hershbergers bioassay baserat på maximala CV-värden för varje vävnad (tabell 1).
It was determined in the validation programme that either 0,2 or 0,4 mg/kg/d of TP could be used as both were effective in the detection of antiandrogens and, therefore, only one dose should be selected for use in the assay.
Högsta tillåtna variationskoefficienter som fastställts för målkönets tillhörande vävnader i kastratmodellen i OECD:s valideringsstudier [12].
Graduated test chemical doses are administered to a minimum of three treatment groups of experimental animals using one dose level per group.
Vävnad
A statistically significant decrease in two or more target organ weights of the test chemical plus TP groups compared to the TP only control group indicates that the test chemical is positive for potential antiandrogenic activity (See paragraph 61).
Antiandrogena effekter
Selection of species and strain
Androgena effekter
The rat has been routinely used in the Hershberger Bioassay since the 1930s.
Sädesblåsor
Although it is biologically plausible that both the rat and mouse would display similar responses, based upon 70 years of experience with the rat model, the rat is the species of choice for the Hershberger Bioassay.
Ventral prostata
In addition, since Hershberger Bioassay data may be preliminary to a long-term multigenerational study, this allows animals from the same species, strain and source to be used in both studies.
Cowpers körtlar
This protocol allows laboratories to select the strain of rat to be used in the assay which should generally be that used historically by the participating laboratory.
Ollon
Commonly used laboratory rat strains may be used;
Regelefterlevnad och laboratoriekontroll
however, strains that mature significantly later than 42 days of age should not be used since castration of these males at 42 days of age could preclude measurement of glans penis weights, which can only be done after the prepuce is separated from the penile shaft.
Till skillnad från den uterotrofa assayen (kapitel B.54 i denna bilaga) är en demonstration av laboratoriets kompetens innan studien påbörjas inte nödvändig för Hershbergers bioassay eftersom jämsides behandlade positiva (testosteronpropionat och flutamid) och negativa kontroller körs som en integrerad del av testet.
Thus, strains derived from the Fisher 344 rat should not be used, except in rare cases.
Varje behandlad grupp och kontrollgrupp bör bestå av minst 6 djur.
The Fisher 344 rat has a different timing of sexual development compared with other more commonly used strains such as Sprague Dawley or Wistar strains (16).
Detta gäller både det androgena och det antiandrogena protokollet.
If such a strain is to be used, the laboratory should castrate them at a slightly older age and be able to demonstrate the sensitivity of the strain used.
Kastrering
The rationale for the choice of rat strain should be clearly stated by the laboratory.
Efter mottagandet av djuren bör de få en inledande acklimatiseringsperiod på flera dagar så att man ser att de är friska och trivs.
Where the screening assay may be preliminary to a repeated dose oral study, a reproductive and developmental study, or a long-term study, preferably animals from the same strain and source should be used in all studies.
Eftersom djur som kastreras före 42 dagars ålder eller postnatal dag (PND) 42 kanske inte uppvisar preputial separation, så bör djuren kastreras på PND 42 eller senare, inte tidigare.
All procedures should conform to all local standards of laboratory animal care.
Djuren kastreras under bedövning genom att ett snitt görs i pungen, och både testiklarna och bitestiklarna avlägsnas med underbindning av blodkärl och sädesledare.
These descriptions of care and treatment are minimum standards and will be superseded by more stringent local regulations, such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (26).
Efter att det bekräftats att ingen blödning uppstått bör pungen tillslutas med sutur eller autoclips.
Group housing is preferable to isolation because of the young age of the animals and the fact that rats are social animals.
Djuren bör behandlas med smärtstillande medel under de närmaste dagarna efter operationen för att lindra eventuella postoperativa obehag.
Housing of two or three animals per cage avoids crowding and associated stress that may interfere with the hormonal control of the development of the sex accessory tissue.
Om kastrerade djur köps från en djurleverantör så bör djurens ålder och könsmognad garanteras av leverantören.
Cages should be thoroughly cleaned to remove possible contaminants and arranged in such a way that possible effects due to cage placement are minimised.
Acklimatisering efter kastreringen
Cages of a proper size (~ 2000 square centimetres) will prevent overcrowding.
Djuren bör fortsätta sin acklimatisering till laboratoriemiljön för att låta målvävnadsvikterna gå i regress under minst sju dagar efter kastreringen.
Each animal should be identified individually (e.g. ear mark or tag) using a humane method.
Djuren bör observeras dagligen, och alla djur som visar tecken på sjukdom eller fysiska avvikelser bör tas bort.
The method of identification should be recorded.
Således kan behandling med dosering (studie) påbörjas så tidigt som PND 49, dock inte senare än PND 60.
Laboratories executing the Hershberger Bioassay should use the laboratory diet normally used in their chemical testing work.
Ålder vid obduktionen bör inte vara högre än PND 70.
Performance Criteria for androgen-dependent organ weights
Skillnader i individuella kroppsvikter är en källa till variabilitet i vävnadsvikterna både inom och mellan grupper av djur.
During the validation study, there was no evidence that a decrease in body weight affected increases or decreases in the growth of tissue weights for target tissues (i.e. that should be weighted in this study).
Ökande vävnadsviktsvariabilitet resulterar i en ökad variationskoefficient (CV) och minskar den statistiska styrkan i testet (ibland kallad testkänslighet).
Among the different strains of rat used successfully in the validation programme, androgen-dependent organ weights are larger in the heavier rat strains than in the lighter strains.
Därför bör variationer i kroppsvikt kontrolleras både experimentellt och statistiskt.
Therefore, the Hershberger Bioassay performance criteria do not include absolute expected organ weights for positive and negative controls.
Experimentell kontroll innebär små variationer i kroppsvikt inom och mellan studiegrupperna.
Because the Coefficient of Variation (CV) for a tissue has an inverse relationship with statistical power, the Hershberger Bioassay performance criteria are based on maximum CV values for each tissue (Table 1).
För det första bör ovanligt små eller stora djur undvikas och inte placeras ut i studiekohorten.
The CVs are derived from the OECD validation studies.
Vid studieinledningen bör viktskillnaden mellan djuren som används inte överstiga ± 20 % av medelvikten (t.ex.
In the case of negative outcomes, laboratories should examine the CVs from the control group and the high dose treatment group to determine if the maximum CV performance criteria have been exceeded.
175 g ± 35 g för kastrerade peripubertala råttor).
The study should be repeated when:
För det andra bör djuren anvisas till grupper (både kontroll- och behandlingsgrupper) genom slumpmässig viktfördelning, så att medelvärdet för kroppsvikten i varje grupp inte statistiskt skiljer sig från andra grupper.
three or more of the 10 possible individual CVs in the control and high dose treatment groups exceed the maximums designated for agonist and antagonist studies in Tables 1 and 2) at least two target tissues were marginally insignificant, i.e. r values between 0,05 and 0,10.
Det förfarande som används för blockrandomisering bör registreras.
Maximum allowable CVs Determined for the Target Sex Accessory Tissues for the castrate model in the OECD Validation Studies [12].
Eftersom toxicitet kan minska kroppsvikten hos de behandlade grupperna jämfört med kontrollgruppen kan kroppsvikten på den första dagen för testkemikalieadministration användas som den statistiska kovariaten, och inte kroppsvikten vid obduktion.
Tissue
För att fastställa huruvida en testkemikalie kan ha androgen verkan in vivo, räcker det oftast med två dosgrupper av testkemikalien plus positiv kontroll och vehikelkontroll (negativ) (se punkt 43).
Antiandrogenic effects
Denna utformning är därför att föredra av djurskyddsskäl.
Androgenic effects
Om information utöver identifiering av androgen aktivitet (t.ex. en uppskattning av potens) krävs, bör ett annat doseringsschema övervägas.
Seminal vesicles
För att testa för antiandrogener ges testkemikalien tillsammans med en referensandrogenagonist.
Ventral prostate
Minst 3 testgrupper bör användas med olika doser av testkemikalien, samt en positiv och en negativ kontroll (se punkt 44).
Cowper's glands
Om en vehikel används för att tillföra testkemikalien bör kontrollgruppen tillföras vehikeln i den största volym som används för testgruppen.
Glans penis
Den högsta dosnivån bör först ta hänsyn till LD50 och/eller information som akut giftighet för att undvika dödsfall, svår smärta och lidande hos djuren (se hänvisning 17, 18, 19, 20), och för det andra ta hänsyn till tillgänglig information om de doser som använts i subkroniska och kroniska studier.
Regulatory compliance and laboratory verification
I allmänhet bör högsta den dosen inte orsaka en minskning av den slutliga kroppsvikten hos djuren som är större än 10 % av kontrollvikten.
Unlike the Uterotrophic assay (Chapter B.54 of this Annex), a demonstration of laboratory competence prior to the initiation of the study is not necessary for the Hershberger assay because concurrent positive (Testosterone Propionate and Flutamide) and negative controls are run as an integral part of the assay.
Den högsta dosen bör antingen vara 1) den högsta dos som garanterar djurens överlevnad utan signifikant toxicitet eller lidande för djuren efter tio dagar i följd med administrering upp till en maximal dos på 1000 mg/kg/dag (se punkt 36) eller 2) en dosinducerande (anti-)androgen effekt, beroende på vilken som är lägre.
Each treated and control group should include a minimum of 6 animals.
Vid en screening är stora mellanrum, t.ex. en halv log-enhet (motsvarande en dosprogression av 3,2) eller till och med en log-enhet mellan doseringarna acceptabla.
This applies to both the androgenic and antiandrogenic protocols.
Om det inte finns några lämpliga data tillgängliga, kan en dosfinnande studie (se punkt 37) genomföras som hjälp för att bestämma vilka doser som ska användas.
Castration
Dosnivågräns
There should be an initial acclimatisation period of several days after receipt of the animals to ensure that the animals are healthy and thriving.
Om ett test vid dosgränsen 1000 mg/kg kroppsvikt/dag och en lägre dos, med hjälp av de förfaranden som beskrivs för denna studie, inte leder till en statistiskt signifikant förändring av reproduktionsorganens vikter, anses ytterligare dosnivåer vara onödiga.
Since animals castrated before 42 days of age or postnatal day (pnd) 42 may not display preputial separation, animals should be castrated on pnd 42 or thereafter, not before.
Dosgränsen tillämpas utom när human exponering anger att en högre dosnivå ska användas.
The animals are castrated under anaesthesia by placing an incision in the scrotum and removing both testes and epididymides with ligation of blood vessels and seminal ducts.
Vid behov kan en preliminär dosfinnande studie genomföras med några få djur för val av lämpliga dosgrupper (med hjälp av metoder för testning av akut toxicitet [kapitel B.1a, B.1b i denna bilaga (se hänvisning 27), OECD TG 425 (se hänvisning 19)]).
After confirming that no bleeding is occurring, the scrotum should be closed with suture or autoclips.
Målet för Hershbergers bioassay är att välja doser som garanterar djurens överlevnad och som inte innebär signifikant toxicitet eller lidande för djuren efter tio dagar i följd med administrering av kemikalien upp till en gränsdos på 1000 mg/kg/dag som angetts i punkterna 35 och 36.
Animals should be treated with analgesics for the first few days after surgery to alleviate any post-surgical discomfort.
För detta ändamål kan man använda OECD:s vägledning (se hänvisning 17) som definierar kliniska tecken som tyder på toxicitet eller lidande för djuren.
If castrated animals are purchased from an animal supplier, the age of animals and stage of sexual maturity should be assured by the supplier.
Om det är möjligt inom denna dosfinnande studie kan, efter tio dagars tillförsel, målorganen skäras ut och vägas ca 24 timmar efter att sista dosen getts.
Acclimatisation after castration
Dessa data kan sedan användas som hjälp vid valet av doser i huvudstudien.
The animals should continue acclimation to the laboratory conditions to allow for the regression in the target tissue weights for a minimum of 7 days following castration.
Referenskemikalier och vehikel
Animals should be observed daily, and any animals with evidence of disease or physical abnormalities should be removed.
Referensandrogenagonist bör vara testosteronpropionat (TP), CAS-nr 57-82-5.