natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The solvent concentration should not exceed 100 µl/l, and the same concentration of solvent should be added to all cultures (including controls) in the test series.
Koncentrationen av lösningsmedel ska inte överstiga 100 µl/l, och det tillsatta lösningsmedlet ska vara av samma koncentration för alla kulturer (inklusive kontroller) i testserien.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 24 °C, controlled at ±2 °C.
Kulturerna inkuberas vid 21–24 °C, och temperaturen ska kunna regleras med en noggrannhet av ±2 °C.
For species other than those listed in Appendix 1, e.g. tropical species, higher temperatures may be appropriate, providing that the validity criteria can be fulfilled.
När det gäller arter som inte förtecknas i tillägg 1 (t.ex. tropiska arter) kan det vara lämpligt med en högre temperatur. Detta förutsätter dock att kriterierna för testresultatens giltighet är uppfyllda.
It is recommended to place the flasks randomly and to reposition them daily in the incubator.
Kolvarna bör placeras slumpvis i inkubatorn och sedan flyttas om dagligen.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
Kontrollmediets pH får inte öka med mer än 1,5 enheter under testet.
For metals and compounds that partly ionise at a pH around the test pH, it may be necessary to limit the pH drift to obtain reproducible and well defined results.
När det gäller metaller samt ämnen som delvis joniseras vid det använda pH-värdet, kan det vara nödvändigt att justera för pH-förändringar för att få fram reproducerbara och tydliga resultat.
A drift of < 0,5 pH units is technically feasible and can be achieved by ensuring an adequate CO2 mass transfer rate from the surrounding air to the test solution, e.g. by increasing the shaking rate.
Det går att begränsa pH-svängningar till mindre än 0,5 enheter om man ser till att utbytet av CO2 mellan testlösningen och den omgivande luften är tillräckligt högt, t.ex. genom att öka skakapparatens hastighet.
Another possibility is to reduce the demand for CO2 by reducing the initial biomass or the test duration.
En annan möjlighet är att reducera behovet av CO2 genom att minska biomassans startkoncentration eller testets längd.
The surface where the cultures are incubated should receive continuous, uniform fluorescent illumination e.g. of ‘cool-white’ or ‘daylight’ type.
Den yta där kulturerna inkuberas ska kontinuerligt belysas med fluorescerande ljus av enhetligt slag, t.ex. kallt vitt ljus eller dagsljus.
For the recommended species of green algae, the light intensity at the level of the test solutions shall be selected from the range of 60-120 µE·m–2·s–1 when measured in the photosynthetically effective wavelength range of 400-700 nm using an appropriate receptor.
För de rekommenderade grönalgsarterna ska intensiteten, mätt vid testlösningarna, ligga inom intervallet 60–120 µE·m–2·s–1 när mätningen görs i det fotosyntetiskt verksamma våglängdsområdet 400–700 nm med lämplig sensor.
Some species, in particular Anabaena flos-aquae, grow well at lower light intensities and may be damaged at high intensities.
Vissa arter, särskilt Anabaena flos-aquae, tillväxer utan problem vid låga ljusintensiteter och kan även skadas av höga intensiteter.
For such species an average light intensity in the range 40-60 µE·m–2·s–1 should be selected.
För sådana arter ska den genomsnittliga ljusintensiteten ligga på 40–60 µE·m–2·s–1.
(For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 4440-8880 lux for cool white light corresponds approximately to the recommended light intensity 60-120 µE·m–2·s–1).
(För mätinstrument som kalibrerats i lux motsvarar den rekommenderade ljusintensiteten 60–120 µE·m–2·s–1 för kallt vitt ljus ungefär 4440–8880 lux.)
The light intensity shall not vary more than ±15 % from the average light intensity over the incubation area.
Ljusintensiteten över inkuberingsytan får inte variera mer än ±15 % jämfört med genomsnittsvärdet.
The test duration is normally 72 hours.
Testet ska normalt pågå i 72 timmar.
However, shorter or longer test durations may be used, provided that all validity criteria in section 1.7 can be met.
Man kan dock använda kortare eller längre testperioder, förutsatt att samtliga kriterier för testresultatens giltighet i avsnitt 1.7 är uppfyllda.
Measurements and analytical determinations
Mätningar och analytiska bestämningar
The algal biomass in each flask is determined at least daily during the test period.
Algbiomassan i varje kolv bestäms minst en gång per dag under testperioden.
If measurements are made on small volumes removed from the test solution by pipette, these should not be replaced.
Om mätningarna görs på små volymer som pipetterats från testlösningarna ska dessa volymer inte ersättas.
Measurement of biomass is done by manual cell counting by microscope or an electronic particle counter (by cell counts and/or biovolume).
Biomassan bestäms genom manuell cellräkning i mikroskop eller med hjälp av en elektronisk partikelräknare (mätning av celltal eller biovolym).
Alternative techniques, e.g. flow cytometry, in vitro or in vivo chlorophyll fluorescence (6)(7), or optical density can be used providing a satisfactory correlation with biomass can be demonstrated over the range of biomass occurring in the test.
Alternativa metoder, t.ex. flödescytometri, klorofyllfluorescens in vitro eller in vivo (6)(7) och absorbans kan också användas, förutsatt att man kan påvisa en tillfredsställande korrelation med biomassan för de värden på densamma som kan förekomma i testet.
The pH of the solutions shall be measured at the beginning and at the end of the test.
Lösningarnas pH mäts i början och slutet av testet.
Provided an analytical procedure for determination of the test substance in the concentration range used is available, the test solutions should be analysed to verify the initial concentrations and maintenance of the exposure concentrations during the test.
Om det finns en analytisk bestämningsmetod för testsubstansen i det valda koncentrationsintervallet ska testlösningarna analyseras för att kontrollera startkoncentrationerna och för att se till att exponeringskoncentrationerna inte förändras under testet.
Analysis of the concentration of the test substance at the start and end of the test of a low and high test concentration, and a concentration around the expected EC50 may be sufficient where it is likely that exposure concentrations will vary less than 20 % from nominal values during the test.
Om det är troligt att exponeringskoncentrationerna under testet kommer att variera med mindre än 20 % från de nominella värdena kan det räcka med att man i början och slutet av testet bestämmer testsubstansens koncentration på tre nivåer: en hög koncentration, en låg koncentration, och en koncentration runt det förväntade EC50-värdet.
Analysis of all test concentrations at the start and end of the test is recommended where concentrations are unlikely to remain within 80-120 % of nominal.
Om koncentrationerna av testsubstansen sannolikt inte kommer att hålla sig inom 80–120 % av de nominella värdena bör man i stället bestämma samtliga koncentrationer av testsubstansen vid testets början och slut.
For volatile, unstable or strongly adsorbing test substances, additional sampling for analysis at 24 hour intervals during the exposure period is recommended in order to better define loss of the test substance.
För flyktiga, instabila eller starkt adsorberande testsubstanser bör ytterligare prov för analys tas med 24 timmars mellanrum under hela exponeringstiden. På så vis får man ett säkrare mått på hur mycket testsubstans som försvinner.
For these substances, extra replicates will be needed.
Sådana ämnen kräver också att man använder extra replikat.
In all cases, determination of test substance concentrations need only be performed on one replicate vessel at each test concentration (or on the contents of the vessels pooled by replicate).
Under alla omständigheter behöver bestämningar av testsubstansens koncentration bara göras på ett replikatkärl för varje koncentration (eller på det samlade innehållet från samtliga replikat).
Test media prepared specifically for analysis of exposure concentrations during the test should be treated identically to those used for testing, i.e. they should be inoculated with algae and incubated under identical conditions.
Testmedier som beretts särskilt för bestämning av exponeringskoncentrationer under testet ska behandlas på samma sätt som dem som används för tester, dvs. de ympas med alger och inkuberas under identiska förhållanden.
If analysis of the dissolved test substance concentration is required, it may be necessary to separate algae from the medium.
Om den lösta testsubstansens koncentration måste bestämmas kan det vara nödvändigt att isolera algerna från mediet.
Separation should preferably be made by centrifugation at a low g-force, sufficient to settle the algae.
Separeringen bör helst göras genom centrifugering vid lågt g-tal (men tillräckligt högt för att algerna ska kunna avskiljas).
If there is evidence that the concentration of the substance being tested has been satisfactorily maintained within ±20 % of the nominal or measured initial concentration throughout the test, analysis of the results can be based on nominal or measured initial values.
Om man kan visa att testsubstansens koncentration under hela testet på ett tillfredsställande sätt har hållits inom ±20 % av den nominella eller uppmätta startkoncentrationen, kan analysen av resultaten baseras på nominella eller uppmätta startvärden.
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is greater than ±20 %, analysis of the results should be based on geometric mean concentration during exposure or on models describing the decline of the concentration of test substance (3)(8).
Om avvikelsen från den nominella eller uppmätta startkoncentrationen är större än ±20 % ska analysen i stället grunda sig på det geometriska medelvärdet för koncentrationen under exponeringen, eller på modeller som beskriver hur testsubstansens koncentration minskar (3)(8).
The alga growth inhibition test is a more dynamic test system than most other short-term aquatic toxicity tests.
Bestämning av tillväxthämning hos alger är en mer dynamisk metod än de flesta andra akvatiska toxicitetstester med kort testperiod.
As a consequence, the actual exposure concentrations may be difficult to define, especially for adsorbing substances tested at low concentrations.
De faktiska exponeringskoncentrationerna kan därför vara svåra att bestämma, särskilt för adsorberande ämnen som testas vid låga koncentrationer.
In such cases, disappearance of the substance from solution by adsorption to the increasing algal biomass does not mean that it is lost from the test system.
Om ämnet i sådana fall adsorberas till den ökande algbiomassan och därför inte längre återfinns i lösningen, innebär detta dock inte att ämnet försvinner från testsystemet.
When the result of the test is analysed, it should be checked whether a decrease in concentration of the test substance in the course of the test is accompanied by a decrease in growth inhibition.
Vid analysen av testresultat ska man undersöka om en minskad koncentration av ämnet under testperioden kan korreleras med en reducerad tillväxthämning.
If this is the case, application of a suitable model describing the decline of the concentration of test substance (8) may be considered.
Om så är fallet bör man överväga att genom en lämplig modell beskriva testsubstansens minskande koncentration (8).
If not, it may be appropriate to base the analysis of the results on the initial (nominal or measured) concentrations.
I annat fall kan det vara motiverat att basera resultatanalysen på testsubstansens nominella eller uppmätta startkoncentration.
Microscopic observation should be performed to verify a normal and healthy appearance of the inoculum culture and to observe any abnormal appearance of the algae (as may be caused by exposure to the test substance) at the end of the test.
Kontrollera i mikroskop att ympkulturen ser normal och frisk ut. I slutet av testet ska man också notera eventuella avvikelser från normalt utseende (som kan ha orsakats av exponeringen för testsubstansen).
Under some circumstances, e.g. when a preliminary test indicates that the test substance has no toxic effects at concentrations up to 100 mg·l–1 or up to its limit of solubility in the test medium (whichever is the lower), a limit test involving a comparison of responses in a control group and one treatment group (100 mg·l–1 or a concentration equal to the limit of solubility), may be undertaken.
Under vissa omständigheter, t.ex. när ett förberedande test tyder på att testsubstansen inte har några toxiska effekter vid koncentrationer upp till 100 mg/l – eller upp till dess löslighetsgräns i testmediet, om denna gräns är lägre – kan man utföra ett gränstest. Man jämför då responsen mellan en kontrollgrupp och en testgrupp (med en koncentration på 100 mg/l eller lika med löslighetsgränsen).
It is strongly recommended that this be supported by analysis of the exposure concentration.
Jämförelsen måste underbyggas med en analys av exponeringskoncentrationen, dvs. den verkliga koncentrationen som kan variera över tiden för testets genomförande.
All previously described test conditions and validity criteria apply to a limit test, with the exception that the number of treatment replicates should be at least six.
Alla tidigare beskrivna testbetingelser och kriterier för provresultatens giltighet gäller även för gränstestet, sånär som på att testreplikaten ska vara minst sex till antalet.
The response variables in the control and treatment group may be analysed using a statistical test to compare means, e.g. a Student'’t's t-test.
Responsvariablerna i kontroll- och testgruppen kan analyseras med hjälp av ett statistiskt test där man jämför medelvärden, t.ex. Students t-test.
If variances of the two groups are unequal, a t-test adjusted for unequal variances should be performed.
Om de två grupperna inte har samma varians måste t-testet anpassas efter detta.
Modification for strongly coloured substances
Anpassning för starkt färgade ämnen
The irradiation (light intensity) should be in the highest end of the range prescribed in this Testing Method: 120µE m-2 s-1 or higher.
Bestrålningen (ljusets intensitet) bör ligga i den övre delen av det intervall som beskrivs i denna testmetod, dvs. 120µE m-2 s-1 eller högre.
The light path should be shortened by reduction of the volume of the test solutions (in the range of 5-25 ml).
Strålgången bör kortas genom att lösningarnas volym minskas (med mellan 5 och 25 ml).
Sufficient agitation (for example by moderate shaking) should be performed in order to obtain a high frequency of exposure of the algae to high irradiation at the surface of the culture.
Man bör sörja för tillräcklig omrörning (till exempel genom måttlig skakning) så att algerna frekvent utsätts för hög ljusbestrålning vid odlingens yta.
PLOTTING GROWTH CURVES
PLOTTNING AV TILLVÄXTKURVOR
The biomass in the test vessels may be expressed in units of the surrogate parameter used for measurement (e.g. cell number, fluorescence).
Mängden biomassa i testkärlen kan uttryckas i enheten för den alternativa parameter som använts vid mätningen (t.ex. celltal, fluorescens).
Tabulate the estimated biomass concentration in test cultures and controls together with the concentrations of test material and the times of measurement, recorded with a resolution of at least whole hours, to produce plots of growth curves.
De framräknade värdena för biomassans koncentration i testkulturer och kontroller förs in i en tabell, tillsammans med testmaterialets koncentrationer och mättidpunkterna (noterade med en upplösning på minst hela timmar). Tabellvärdena används sedan för att ta fram plottade tillväxtkurvor.
Both logarithmic scales and linear scales can be useful at this first stage, but logarithmic scales are mandatory and generally give a better presentation of variations in growth pattern during the test period.
Både logaritmiska och linjära skalor kan vara användbara på detta inledande stadium, men logaritmiska skalor är obligatoriska, och de ger också i allmänhet en bättre uppfattning om variationer i tillväxtmönstret under testperioden.
Note that exponential growth produces a straight line when plotted on a logarithmic scale, and that the inclination of the line (slope) indicates the specific growth rate.
Observera att exponentiellt ökande mätvärden ger en rak linje när de plottas på en logaritmisk skala, och att kurvans lutning anger den specifika tillväxthastigheten.
Using the plots, examine whether control cultures grow exponentially at the expected rate throughout the test.
Kontrollera med hjälp av plottarna om kontrollkulturerna har tillväxt exponentiellt och med förväntad hastighet under hela testet.
Critically examine all data points and the appearance of the graphs, and check raw data and procedures for possible errors.
Alla datapunkter och kurvor bör undersökas kritiskt, och rådata samt metoder bör kontrolleras med avseende på eventuella fel.
Check in particular any data point that seems to deviate by a systematic error.
Kontrollera särskilt alla datapunkter som verkar avvika på grund av systematiska fel.
If it is obvious that procedural mistakes can be identified and/or considered highly likely, the specific data point is marked as an outlier and not included in subsequent statistical analysis.
Om man konstaterar uppenbara eller mycket sannolika fel i testutförandet ska de berörda datapunkterna markeras som avvikande värden (”outliers”) och inte tas med i den efterföljande statistiska analysen.
(A zero algal concentration in one out of two or three replicate vessels may indicate the vessel was not inoculated correctly, or was improperly cleaned).
(Om algkoncentrationen är noll i hälften eller en tredjedel av kärlen med replikat kan detta tyda på att kärlen inte ympats på rätt sätt eller inte rengjorts ordentligt.)
Reasons for rejection of a data point as an outlier must be clearly stated in the test report.
Det ska tydligt framgå av testrapporten varför en datapunkt betraktats som avvikande och därför inte använts.
Accepted reasons are only (rare) procedural mistakes and not just bad precision.
Det enda giltiga skälet är (enstaka) misstag i utförandet av testet. Dålig precision räknas däremot inte som ett giltigt skäl.
Statistical procedures for outlier identification are of limited use for this type of problem and cannot replace expert judgement.
Statistiska metoder för att identifiera avvikande värden är av begränsat värde när det gäller den här typen av problem, och de kan inte ersätta expertbedömningar.
Outliers (marked as such) should preferably be retained among the data points shown in any subsequent graphical or tabular data presentation.
Avvikande värden (som markerats som sådana) bör helst behållas bland de datapunkter som visas i senare presentationer av data i grafisk form eller tabellform.
RESPONSE VARIABLES
RESPONSVARIABLER
The purpose of the test is to determine the effects of the test substance on the growth of algae.
Syftet med testet är att bestämma testsubstansens effekt på tillväxten hos alger.
This Testing Method describes two response variables, as member countries have different preferences and regulatory needs.
Två responsvariabler används eftersom lagbestämmelser och etablerade variabler skiljer sig åt mellan medlemsstaterna.
In order for the test results to be acceptable in all member countries, the effects should be evaluated using both response variables (a) and (b) described below.
För att testresultaten ska kunna godtas i samtliga medlemsstater ska effekterna bedömas med hjälp av båda de responsvariabler (a och b) som beskrivs nedan.
Average specific growth rate: this response variable is calculated on the basis of the logarithmic increase of biomass during the test period, expressed per day.
Genomsnittlig specifik tillväxthastighet: responsvariabel som beräknas utifrån den logaritmiska ökningen i biomassa under testperioden, uttryckt per dygn.
Yield: this response variable is the biomass at the end of the test minus the starting biomass.
Producerad mängd biomassa: responsvariabel som motsvarar skillnaden mellan den ursprungliga mängden biomassa och biomassan vid testets slut.
For the application of this method within the EU regulatory framework, calculation of results should be based on an average specific growth rate for the reasons described below.
För tillämpning av denna metod inom ramen för EU-lagstiftningen bör resultatberäkningen baseras på en genomsnittlig specifik tillväxthastighet av de skäl som anges nedan.
It should be noted that toxicity values calculated by using these two response variables are not comparable and this difference must be recognised when using the results of the test.
Förändringarna bestäms i kontrollerna och respektive testgrupp ända till slutet av testet. Observera att de värden på toxiciteten som beräknas med hjälp av dessa två responsvariabler inte är jämförbara, och man måste ha denna skillnad i åtanke när man använder resultaten från testet.
ECx values based upon average specific growth rate (ErCx) will generally be higher than results based upon yield (EyCx) if the test conditions of this Testing Method are adhered to, due to the mathematical basis of the respective approaches.
ECx-värden som grundar sig på den genomsnittliga specifika tillväxthastigheten (ErCx) är i allmänhet högre än de som grundar sig på den producerade mängden biomassa (EyCx) om de föreskrivna testbetingelserna är uppfyllda.
This should not be interpreted as a difference in sensitivity between the two response variables, simply that the values are different mathematically.
Detta ska inte tolkas som en skillnad i mätkänslighet mellan de två responsvariablerna – skillnaden beror bara på att värdena erhållits på två olika sätt.
The concept of average specific growth rate is based on the general exponential growth pattern of algae in non-limited cultures, where toxicity is estimated on the basis of the effects on the growth rate, without being dependent on the absolute level of the specific growth rate of the control, on the slope of the concentration-response curve or on test duration.
Variabeln genomsnittlig specifik tillväxthastighet är baserad på den (vanligen exponentiella) tillväxten hos alger i obegränsade kulturer, där toxiciteten bestäms på grundval av dess effekter på tillväxthastigheten, utan att vara beroende av vare sig det absoluta värdet på kontrollens specifika tillväxthastighet, på dos-respons-kurvans lutning, eller på testets varaktighet.
In contrast, results based upon the yield response variable are dependent upon all these other variables.
Responsvariabeln ”producerad mängd biomassa” är däremot beroende av alla de tre sistnämnda variablerna.
While the use of average specific growth rate for estimating toxicity is scientifically preferred, toxicity estimates based on yield are also included in this Testing Method so as to satisfy current regulatory requirements in some countries.
Det är ur vetenskaplig synvinkel att föredra om toxiciteten bestäms utifrån den genomsnittliga specifika tillväxthastigheten. På grund av gällande bestämmelser i vissa länder omfattar den här testmetoden dock även toxicitetsbestämningar baserade på producerad mängd biomassa.
Average growth rate
Genomsnittlig tillväxthastighet
The average specific growth rate for a specific period is calculated as the logarithmic increase in biomass from the equation for each single vessel of controls and treatments:
Den genomsnittliga specifika tillväxthastigheten under en period beräknas som den logaritmiska ökningen i biomassa för varje enskilt kärl med kontroller och testlösningar, enligt formeln:
(day–1)
(dygn–1)
is the average specific growth rate from time i to j;
genomsnittlig specifik tillväxthastighet under tidsperioden i–j;
is the biomass at time i;
biomassa vid tidpunkten i
is the biomass at time j.
biomassa vid tidpunkten j
For each treatment group and control group, calculate a mean value for growth rate along with variance estimates.
För varje test- och kontrollgrupp ska ett medelvärde för tillväxthastigheten liksom en uppskattning av variansen räknas fram.