natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Add 2,00 ml concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Tillsätt 2,00 ml koncentrerad lösning av intern standard (α-metyltryptofan) (3.16).
Cool the vessels on water/ice bath for 15 minutes.
Kyl kärlet i isvattenbad i 15 minuter.
Then, add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Tillsätt 5 ml ortofosforsyra (3.14).
Keep the vessel in the cooling bath and neutralise with HCl (3.11) whilst stirring and adjust the pH to 3,0 using HCl (3.12).
Låt kärlet vara kvar i kylbadet och neutralisera lösningen med saltsyra (3.11) under omrörning.
Add sufficient methanol to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Justera pH till 3,0 med saltsyra (3.12). Tillsätt så mycket metanol att koncentrationen blir 10–30 % i slutvolymen.
Transfer to a volumetric flask of appropriate volume and dilute with water to the defined volume necessary for the chromatography (for example 100 ml).
Överför till en mätkolv av lämplig volym och späd med vatten till den volym som behövs för kromatografi (t.ex. 100 ml).
The addition of methanol shall not cause precipitation.
Tillsatsen av metanol bör göras utan att någon fällning bildas.
Protect standard solution and hydrolysates against direct sunlight.
Skydda standardlösning och hydrolysat mot direkt solljus.
If it is not possible to analyse the hydrolysates the same day, they may be stored at 5 oC for a maximum of 3 days.
Om hydrolysaten inte kan analyseras samma dag kan de lagras vid 5 oC i högst tre dagar.
HPLC determination
HPLC-bestämning
The following conditions for isocratic elution are offered for guidance; other conditions may be used, provided they yield equivalent results (see also observations 9.1 and 9.2):
Andra betingelser kan väljas om de ger likvärdiga resultat (se även 9.1 och 9.2).
Liquid chromatographic column (4.2):
HPLC kolonn (4.2):
125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing or equivalent
125 × 4 mm, C18, 3 μm packning eller motsvarande
Column temperature:
Kolonntemperatur:
Room temperature
Rumstemperatur
Mobile phase (3.22):
Mobil fas (3.22):
3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2- methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1 g/100 ml).
3,00 g ättiksyra (3.18) + 900 ml vatten (3.1) + 50,0 ml lösning (3.21) av 1,1,1-triklor-2-metyl-2-propanol (3.19) i metanol (3.8) (1 g/100 ml).
Make up to 1000 ml with water (3.1)
Späd till 1000 ml med vatten (3.1)
Flow rate:
Flödeshastighet:
Total run time:
Total körningstid:
approx. 34 min.
ca 34 minuter
Detection wavelength:
Detektionsvåglängd:
Injection volume
Injektionsvolym:
The amount of tryptophane (X), in g per 100g sample, is calculated as follows:
Mängden tryptofan (X) i gram per 100 g prov beräknas med formeln
A peak area of internal standard, calibration standard solution (3.17)
A topparea för intern standard, kalibreringsstandardlösning (3.17)
B peak area of tryptophan, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
B topparea för tryptofan, extrakt (5.2) eller hydrolysat (5.3)
volume in ml (2 ml) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to the calibration solution (3.17)
volym i ml (2 ml) av koncentrerad tryptofanlösning (3.15) som satts till kalibreringslösningen (3.17)
c concentration in μmol/ml (= 2,50) of concentrated tryptophan solution (3.15) added to calibration solution (3.17)
c koncentration i μmol/ml (= 2,50) av koncentrerad tryptofanlösning (3.15) som satts till kalibreringslösningen (3.17)
volume in ml of concentrated internal standard solution (3.16) added at the extraction (5.2) (= 5,00 ml) or to the hydrolysate (5.3) (= 2,00 ml)
volym i ml av koncentrerad lösning av intern standard (3.16) som satts till vid extraktionen (5.2) (= 5,00 ml) eller till hydrolysatet (5.3) (= 2,00 ml)
C peak area of internal standard, extract (5.2) or hydrolysate (5.3)
C topparea för intern standard, extrakt (5.2) eller hydrolysat (5.3)
D peak area of tryptophan, calibration standard solution (3.17)
D topparea för tryptofan, kalibreringsstandardlösning (3.17)
volume in ml (= 2,00 ml) of concentrated internal standard solution (3.16) added to calibration standard solution (3.17)
volym i ml (2,00 ml) av koncentrerad lösning av intern standard (3.16) som satts till kalibreringsstandardlösningen (3.17)
m sample weight in g (corrected to original weight if dried and/or defatted)
m provets vikt i gram (korrigerad till den ursprungliga vikten om provet har torkats och/eller avfettats)
M molar weight of tryptophan (= 204,23 g/mol)
M molvikt för tryptofan (= 204,23 g/mol).
The difference between the results of two parallel determinations carried out on the same sample must not exceed 10 % relative to the highest result.
Skillnaden mellan resultaten från två parallella bestämningar som utförs på samma prov får inte överstiga 10 % av det högre värdet.
Results of a collaborative study
Resultat av en provningsjämförelse
An EC collaborative study (4th intercomparison) was arranged in which three samples were analysed by up to 12 laboratories to certify the method for hydrolysis.
I en provningsjämförelse inom EU (fjärde jämförelsen) analyserades tre prov av upp till tolv laboratorier för att hydrolysmetoden skulle kunna certifieras.
Replicate (5) analyses were performed on each sample.
Varje prov analyserades fem gånger.
The results are given in the following table:
Resultaten redovisas i nedanstående tabell.
Pig feed
Grisfoder
Pig feed supplemented with L-tryptophan
Grisfoder med tillsats av L-tryptofan
Sample 3
Prov 3
Feed concentrate for pigs
Kraftfoder för grisar
Mean [g/kg]
Medelvärde [g/kg]
L number of laboratories submitting results
L antal laboratorier som lämnade in resultat
n number of single results retained eliminating outliers (identified by Cochran, Dixon outlier test)
n antal återstående enskilda resultat efter eliminering av extremvärden (enligt Cochran-Dixons extremvärdestest)
standard deviation of repeatability
standardavvikelse för repeterbarhet
standard deviation of reproducibility
standardavvikelse för reproducerbarhet
r repeatability
r repeterbarhet
R reproducibility
R reproducerbarhet
coefficient of variation of repeatability, %
variationskoefficient för repeterbarhet, %
coefficient of variation of reproducibility, %
variationskoefficient för reproducerbarhet, %
Another EC collaborative study (3rd intercomparison) was arranged in which two samples were analysed by up to 13 laboratories to certify the method for extraction of free tryptophan.
I en annan provningsjämförelse inom EU (tredje jämförelsen) analyserades två prov av upp till tretton laboratorier för certifiering av extraktionsmetoden för fritt tryptofan.
Sample 4
Prov 4
Wheat and soya mixture
Vete- och sojablandning
Sample 5
Prov 5
Wheat and soya mixture (= sample 4) with added tryptophan (0,457g/kg1)
Vete- och sojablandning (= prov 4) med tillsats av tryptofan (0,457g/kg)
n number of single results retained after eliminating outliers (identified by Cochran, Dixon outlier test)
n antalet återstående enskilda resultat efter eliminering av extremvärden (enligt Cochran-Dixons extremvärdestest)
Another EC intercomparison study was arranged in which four samples were analysed by up to 7 laboratories with the aim of a tryptophan certification for hydrolysis.
I ytterligare en provningsjämförelse inom EU analyserades fyra prov av upp till sju laboratorier för certifiering av metoden för tryptofanhydrolys.
The results are given below.
Resultaten redovisas i nedanstående tabell.
Mixed pig feed
Blandat grisfoder
Low fat fish meal
Fiskmjöl med låg fetthalt
Soybean meal
Sojamjöl
Following special chromatographic conditions may give better separation between tryptophan and α-methyl-tryptophan.
För att få bättre separation mellan tryptofan och α-metyltryptofan kan man prova att använda följande kromatografiska parametrar:
Isocratic elution followed by gradient column cleaning:
Isokratisk eluering följt av gradientkolonnrening:
Liquid chromatographic column:
HPLC-kolonn:
125 mm x 4 mm, C18, 5 μm packing or equivalent
125 × 4 mm, C18, 5 μm packning eller motsvarande
Mobile phase:
Mobil fas :
0,01 mol/l KH2PO4/méthanol, 95+5 (V+V).
A: 0,01 mol/l KH2PO4/metanol, 95+5 (v+v)
approx. 33 min.
ca 33 min
The chromatography will vary according to the type of HPLC and column packing material used.
Kromatografin varierar beroende på typen av HPLC och vilket slags packning som används i kolonnen.
The chosen system must be capable of giving baseline separation between the tryptophan and the internal standard.
Det valda systemet måste klara av att ge baslinjeseparation mellan tryptofan och intern standard.
Moreover it is important that degradation products are well separated from the tryptophan and the internal standard.
Det är också viktigt att nedbrytningsprodukter tydligt kan separeras från tryptofan och intern standard.
Hydrolysates without internal standard shall be run in order to check the base line under the internal standard for impurities.
Man bör köra hydrolysat utan intern standard för att kunna upptäcka eventuella orenheter på baslinjen under den interna standarden.
It is important that the run time is sufficiently long for the elution of all the degradation products, otherwise late eluting peaks may interfere with subsequent chromatographic runs.
Det är viktigt att körningstiden är så lång att alla nedbrytningsprodukter hinner elueras ut, annars kan sena elueringstoppar störa efterföljande körningar.
In the range of operation, the chromatographic system shall give linear response.
Kromatografisystemet måste ge linjär respons i driftsintervallet.
The linear response shall be measured with a constant (the normal) concentration of the internal standard and varying concentrations of tryptophan.
Den linjära responsen ska mätas med en konstant koncentration (den normala) av intern standard och varierande koncentrationer av tryptofan.
It is of importance that the size of both the tryptophan and internal standard peaks are within the linear range of the HPLC/fluorescence system.
Det är viktigt att topparna för både tryptofan och intern standard ligger inom det linjära intervallet för HPLC-/fluorescenssystemet.
If either the tryptophan and/or the internal standard peak(s) is (are) too small or too high the analysis shall be repeated with another sample size and/or a changed final volume.
Om topparna för tryptofan och/eller intern standard är för låga eller för höga bör bestämningen göras om med annan provstorlek och/eller slutvolym.
Barium hydroxide
Bariumhydroxid
With age barium hydroxide becomes more difficult to dissolve.
Bariumhydroxid blir mer svårlösligt när det åldras.
This results in an unclear solution for the HPLC determination, which may produce low results for tryptophan.
Detta ger en grumlig lösning för HPLC-bestämning, vilket kan ge alltför låga värden för tryptofan.
DETERMINATION OF CRUDE OILS AND FATS
BESTÄMNING AV RÅFETT
This method is for the determination of crude oils and fats in feed.
Med denna metod kan råfetthalten i foder bestämmas.
It does not cover the analysis of oil seeds and oleaginous fruit.
Metoden omfattar inte analys av oljeväxtfrön och oljehaltiga frukter.
The use of the two procedures described below depends on the nature and composition of the feed and the reason for carrying out the analysis.
Beroende på fodrets egenskaper och sammansättning samt bestämningens syfte används en av nedanstående två metoder.
Procedure A — Directly extractable crude oils and fats
Metod A – direkt extraherbart råfett
This method is applicable to feed materials of plant origin, except those included within the scope of Procedure B.
Denna metod är tillämplig på foderråvaror av vegetabiliskt ursprung, utom dem som omfattas av metod B.
Procedure B — Total crude oils and fats
Metod B – total råfetthalt
This method is applicable to feed materials of animal origin and to all compound feeds.
Denna metod är tillämplig på foderråvaror av animaliskt ursprung och på alla foderblandningar.
It is to be used for all materials from which the oils and fats cannot be completely extracted without prior hydrolysis (e.g. glutens, yeast, potato proteins and products subjected to processes such as extrusion, flaking and heating).
Den ska användas för alla råvaror från vilka fett inte kan extraheras helt utan föregående hydrolys, till exempel gluten, jäst, potatisprotein och produkter som genomgår processer såsom extrudering, bearbetning till flingor samt uppvärmning.
In all cases where a higher result is obtained by using Procedure B than by Procedure A, the result obtained by Procedure B shall be accepted as the true value.
I samtliga fall där ett högre resultat fås genom metod B än metod A, ska resultatet av metod B räknas som det sanna värdet.
Procedure A
Metod A
The sample is extracted with light petroleum.
Provet extraheras med petroleumeter.
The solvent is distilled off and the residue dried and weighed.
Lösningsmedlet destilleras av och återstoden torkas och vägs.
Procedure B
Metod B
The sample is treated under heating with hydrochloric acid.
Provet behandlas under uppvärmning med saltsyra.
The mixture is cooled and filtered.
Blandningen kyls och filtreras.
The residue is washed and dried and submitted to the determination according to Procedure A.
Återstoden sköljs och torkas och bestäms enligt metod A.
Light petroleum, boiling range: 40 to 60 oC.
Petroleumeter, kokpunktsintervall 40–60 oC.
The bromine value must be less than 1 and the residue on evaporation less than 2 mg/100 ml.
Bromtalet måste vara lägre än 1 och återstoden efter förångning mindre än 2 mg/100 ml.
Sodium sulfate, anhydrous.
Vattenfritt natriumsulfat.
Hydrochloric acid, c = 3 mol/l
Saltsyra, c = 3 mol/l.
Filtration aid, e.g. Kieselguhr, Hyflo-supercel.
Filtreringshjälpmedel, till exempel kiselgur, Hyflo-supercel.
Extraction apparatus.
Extraktionsutrustning.
If fitted with a siphon (Soxhlet apparatus), the reflux rate shall be such as to produce about 10 cycles per hour; if of the non-siphoning type, the reflux rate shall be about 10 ml per minute.
Om denna är försedd med hävert (Soxhletapparat), ska förångningstakten vara sådan att ca tio kretslopp sker per timme. Om hävert saknas ska förångningstakten vara ca 10 ml per minut.
Extraction thimbles, free of matter soluble in light petroleum and having a porosity consistent with the requirements of point 4.1.
Extraktionshylsorna måste vara fria från ämnen som är lösliga i petroleumeter och ha en porositet som överensstämmer med kraven i 4.1.
Drying oven, either a vacuum oven set at 75 ± 3 oC or an air-oven set at 100 ± 3 oC.
Torkugn, antingen en vakuumtorkugn inställd på 75 ± 3 oC eller en varmluftsugn inställd på 100 ± 3 oC.
Procedure A (see point 8.1)
Metod A (se punkt 8.1)
Weigh 5 g of the sample to the nearest 1 mg, transfer it to an extraction thimble (4.2) and cover with a fat-free wad of cotton wool.
Väg 5 gram av provet med en noggrannhet av 1 mg, överför det till en extraktionshylsa (4.2) och täck med en fettfri bomullstuss.
Place the thimble in an extractor (4.1) and extract for six hours with light petroleum (3.1).
Placera hylsan i en extraktionsapparat (4.1) och extrahera i sex timmar med petroleumeter (3.1).
Collect the light petroleum extract in a dry, weighed flask containing fragments of pumice stone.
Samla upp petroleumeterextraktet i en torr, vägd kolv med pimpstensskärvor.
Distil off the solvent.
Destillera av lösningsmedlet.
Dry the residue maintaining the flask for one and a half hours in the drying oven (4.3).
Torka återstoden i 1,5 timmar i torkugnen (4.3).
Leave to cool in a desiccator and weigh.
Kyl i en exsickator och väg.
Dry again for 30 minutes to ensure that the weight of the oils and fats remains constant (loss in weight between two successive weighings must be less than or equal to 1 mg).
Torka igen i 30 minuter för att säkerställa att fettets vikt är konstant (viktförlusten mellan två på varandra följande vägningar får inte överstiga 1 mg).
Weigh 2,5 g of the sample to the nearest 1 mg (see point 8.2), place in a 400 ml beaker or a 300 ml conical flask and add 100 ml of hydrochloric acid (3.3) and fragments of pumice stone.
Väg upp 2,5 gram av provet med en noggrannhet av 1 mg (se punkt 8.2) i en 400 ml bägare eller en 300 ml E-kolv. Tillsätt 100 ml saltsyra (3.3) och pimpstensskärvor.
Cover the beaker with a watch glass or fit the conical flask with a reflux condenser.
Täck över bägaren med ett urglas eller koppla E-kolven till en återloppskylare.
Bring the mixture to a gentle boil over a low flame or a hot-plate and keep it there for one hour.
Låt blandningen koka sakta i 1 timme över en svag låga eller värmeplatta.
Do not allow the product to stick to the sides of the container.
Låt inte produkten fastna på behållarens insida.
Cool and add a quantity of filtration aid (3.4) sufficient to prevent any loss of oil and fat during filtration.
Kyl och tillsätt så mycket filtreringshjälpmedel (3.4) att inget fett förloras under filtreringen.
Filter through a moistened, fat-free, double filter paper.
Filtrera genom ett fuktat, fettfritt, dubbelt filtrerpapper.
Wash the residue in cold water until a neutral filtrate is obtained.
Skölj återstoden i kallt vatten tills ett neutralt filtrat erhålls.
Check that the filtrate does not contain any oil or fats.
Kontrollera att filtratet inte innehåller något fett.
Their presence indicates that the sample must be extracted with light petroleum, using Procedure A, before hydrolysis.
Om så ändå är fallet ska provet extraheras med petroleumeter, enligt metod A, före hydrolys.
Place the double filter paper containing the residue on a watch glass and dry for one and a half hours in the air oven (4.3) at 100 ± 3 oC.
Lägg det dubbla filtrerpappret med återstoden på ett urglas och torka i 1,5 timmar i varmluftsugnen (4.3) vid 100 ± 3 oC.
Place the double filter paper containing the dry residue in an extraction thimble (4.2) and cover with a fat-free wad of cotton wool.
Placera det dubbla filtrerpappret med den torra återstoden i en extraktionshylsa (4.2) och täck med en fettfri bomullstuss.
Place the thimble in an extractor (4.1) and proceed as indicated in the second and third paragraphs of point 5.1.
Placera hylsan i en extraktionsapparat (4.1) och följ anvisningarna i punkt 5.1 andra och tredje styckena.
Expression of result
Resultatangivelse
Express the weight of the residue as a percentage of the sample.
Återstodens vikt uttrycks i procent av provet.
The difference between the results of two parallel determinations carried out on the same sample by the same analyst shall not exceed:
Skillnaden mellan resultaten från två parallella bestämningar som utförs på samma prov av samma person får inte överstiga
0,2 %, in absolute value, for contents of crude oils and fats lower than 5 %,
0,2 % i absoluta tal för råfetthalter under 5 %,
4,0 % relative to the highest result for contents of 5 % to 10 %,
4,0 % av det högre värdet för halter på 5–10 %,
0,4 %, in absolute value, for contents above 10 %.
0,4 % i absoluta tal för halter över 10 %.
For products with a high content of oils and fats, which are difficult to crush or unsuitable for drawing a homogeneous reduced test sample, proceed as follows.
För produkter med hög fetthalt, som är svåra att krossa eller från vilka det är svårt att få fram ett homogent reducerat prov, används följande förfarande.
Weigh 20 g of the sample to the nearest 1 mg and mix with 10 g or more of anhydrous sodium sulfate (3.2).
Väg upp 20 gram av provet med en noggrannhet av 1 mg och blanda med minst 10 gram vattenfritt natriumsulfat (3.2).
Extract with light petroleum (3.1) as indicated in point 5.1.
Extrahera med petroleumeter (3.1) enligt punkt 5.1.
Make up the extract obtained to 500 ml with light petroleum (3.1) and mix.
Späd extraktet med petroleumeter (3.1) till 500 ml och blanda.
Take 50 ml of the solution and place in a small, dry, weighed flask containing fragments of pumice stone.
Överför 50 ml av lösningen till en liten, torr, vägd kolv som innehåller pimpstensskärvor.
Distil off the solvent, dry and proceed as indicated in the last paragraph of point 5.1.
Destillera bort lösningsmedlet, torka och följ anvisningarna i punkt 5.1 sista stycket.
Eliminate the solvent from the extraction residue left in the thimble, crush the residue to a fineness of 1 mm, return it to the extraction thimble (do not add sodium sulfate) and proceed as indicated in the second and third paragraphs of point 5.1.
Avlägsna lösningsmedlet från extraktionsåterstoden i hylsan, krossa återstoden till 1 mm partikelstorlek, återför till extraktionshylsan (tillsätt inte natriumsulfat) och följ anvisningarna i punkt 5.1 andra och tredje styckena.
Calculate the content of oils and fats as a percentage of the sample by using the following formula:
Provets fetthalt i procent beräknas med formeln
weight in grams of the residue after the first extraction (aliquot part of the extract),
återstodens vikt i gram efter första extraktionen (den alikvot av extraktet som används för analys)
weight in grams of the residue after the second extraction.
återstodens vikt i gram efter andra extraktionen.
For products low in oils and fats the test sample may be increased to 5 g.
För produkter med låg fetthalt kan provmängden ökas till 5 gram.
Pet foods containing a high content of water may need to be mixed with anhydrous sodium sulfate prior to hydrolysis and extraction as per Procedure B.
Sällskapsdjursfoder med hög vattenhalt kan behöva blandas med vattenfritt natriumsulfat före hydrolys och extraktion enligt metod B.
In paragraph 5.2 it may be more effective to use hot water in place of cold water to wash the residue after filtration.
I punkt 5.2 kan det vara effektivare att använda varmt vatten i stället för kallt vatten för att tvätta återstoden efter filtrering.
The drying time of 1,5 h may need to be extended for some feed.
Torktiden på 1,5 timmar kan behöva förlängas för vissa foder.
Excessive drying shall be avoided as this can lead to low results.
För lång torktid bör undvikas eftersom detta kan leda till låga resultat.
A microwave oven can also be used.
En mikrovågsugn kan också användas.
I. DETERMINATION OF CRUDE FIBRE
I. BESTÄMNING AV VÄXTTRÅD
This method makes it possible to determine fat-free organic substances in feed which are insoluble in acid and alkaline media and are conventionally described as crude fibre.
Med denna metod är det möjligt att bestämma foders halt av fettfria organiska ämnen som är olösliga i sur och basisk miljö och som vanligen betecknas växttråd.
The sample, defatted where necessary, is treated successively with boiling solutions of sulphuric acid and potassium hydroxide of specified concentrations.
Provet, som vid behov avfettas, behandlas i tur och ordning med kokande lösningar av svavelsyra och kaliumhydroxid i bestämda koncentrationer.
The residue is separated by filtration on a sintered-glass filter washed, dried, weighed and ashed within a range of 475 to 500 oC.
Återstoden separeras genom filtrering på ett sintrat glasfilter och sköljs, torkas, vägs och föraskas vid en temperatur på 475–500 oC.
The loss of weight resulting from ashing corresponds to the crude fibre present in the test sample.
Viktförlusten efter föraskning motsvarar andelen växttråd i analysprovet.
Sulphuric acid, c = 0,13 mol/l.
Svavelsyra, c = 0,13 mol/l.
Anti-foaming agent (e.g. n-octanol).
Skumdämpningsmedel (t.ex. n-oktanol).
Filter aid (Celite 545 or equivalent), heated at 500 oC for four hours (8.6).
Filtreringshjälpmedel (Celite 545 eller motsvarande), upphettat till 500 oC i fyra timmar (8.6).
Light petroleum boiling-range 40 to 60 oC.
Petroleumeter, kokpunktsintervall 40–60 oC.
Hydrochloric acid, c = 0,5 mol/l.
Saltsyra, c = 0,5 mol/l.
Potassium hydroxide solution, c = 0,23 mol/l.
Kaliumhydroxidlösning, c = 0,23 mol/l.
Heating unit for digestion with sulphuric acid and potassium hydroxide solution, equipped with a support for the filter crucible (4.2) and provided with an outlet tube with a tap to the liquid outlet and vacuum, possibly with compressed air.
Värmeenhet för uppslutning med svavelsyra och kaliumhydroxidlösning, försedd med en hållare för filterdegeln (4.2) och ett utloppsrör med kran för avtappning av vätska samt anslutning för vakuum och eventuellt tryckluft.
Before use each day preheat the unit with boiling water for five minutes.
Innan enheten tas i bruk varje dag ska den förvärmas med kokande vatten i 5 minuter.