natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For the preincubation method (2)(3)(5)(6), the test substance/test solution is preincubated with the test strain (containing approximately 108 viable cells) and sterile buffer or the metabolic activation system (0,5 ml) usually for 20 min. or more at 30-37 oC prior to mixing with the overlay agar and pouring onto the surface of a minimal agar plate.
För förinkubationsmetoden (2) (3) (5) (6), förinkuberas testsubstansen/testlösningen med teststamman (innehållande ungefär 108 livsdugliga celler) och steril buffert eller med system för metabolisk aktivering (0,5 ml), vanligen under 20 minuter eller längre vid 30–37 oC, innan den blandas med toppskiktsagarn och hälls uppå ytan på en minimalagarplatta.
Usually, 0,05 or 0,1 ml of test substance/test solution, 0,1 ml of bacteria, and 0,5 ml of S9-mix or sterile buffer are mixed with 2,0 ml of overlay agar.
Vanligen blandas 0,05 eller 0,1 ml av testsubstansen/testlösningen, 0,1 ml bakterier och 0,5 ml av S9-blandningen eller steril buffert blandat med 2,0 ml av toppskiktsagar.
Tubes should be aerated during pre-incubation by using a shaker.
Rören bör luftas under förinkubationen med hjälp av en skakmaskin.
For an adequate estimate of variation, triplicate plating should be used at each dose level.
För att möjliggöra en rimlig uppskattning av variationen bör tre plattor användas vid varje dosnivå.
The use of duplicate plating is acceptable when scientifically justified.
Användning av två plattor är acceptabelt när detta är vetenskapligt motiverat.
The occasional loss of a plate does not necessarily invalidate the assay.
Förlust av en enstaka platta innebär inte nödvändigtvis att ett försök blir ogiltigt.
Gaseous or volatile substances should be tested by appropriate methods, such as in sealed vessels (12)(14)(15)(16).
Gasformiga eller flyktiga substanser bör testas med lämpliga metoder, såsom i slutna kärl (12) (14) (15) (16).
Incubation
Inkubering
All plates in a given assay should be incubated at 37 oC for 48-72 hours.
Alla plattor i en given assay bör inkuberas vid 37 oC under 48–72 timmar.
After the incubation period, the number of revertant colonies per plate is counted.
Efter inkubationsperioden räknas antalet återmuterande kolonier per plattor.
Data should be presented as the number of revertant colonies per plate.
Data bör presenteras som antalet återmuterande kolonier per platta.
The number of revertant colonies on both negative (solvent control, and untreated control if used) and positive control plates should also be given.
Antalet återmuterande kolonier på såväl negativa (lösningsmedelskontroll och obehandlad kontroll, om en sådan används) och positiva kontrollplattor bör även anges.
Individual plate counts, the mean number of revertant colonies per plate and the standard deviation should be presented for the test substance and positive and negative (untreated and/or solvent) controls.
Individuella platträkningar, medelantalet för de återmuterande kolonierna per platta och standardavvikelsen bör uppges för såväl testsubstansen som för positiva och negativa (obehandlade och/eller (lösningsmedels) kontroller).
Negative results need to be confirmed on a case-by-case basis.
Negativa resultat måste bekräftas från fall till fall.
Study parameters that might be modified include the concentration spacing, the method of treatment (plate-incorporation or liquid pre-incubation), and metabolic activation conditions.
De försöksparametrar som skulle kunna modifieras innefattar koncentrationsindelningen, metoden för behandling (plattinkorporering eller förinkubation i vätska), och betingelser för metabolisk aktivering.
There are several criteria for determining a positive result, such as a concentration-related increase over the range tested and/or a reproducible increase at one or more concentrations in the number of revertant colonies per plate in at least one strain with or without metabolic activation system (23).
Det finns ett flertal kriterier som används för att bestämma om ett resultat är positivt, t.ex. en koncentrationsrelaterad ökning över hela det testade området och/eller en reproducerbar ökning, vid en eller flera koncentrationer, av antalet återmuterande kolonier per platta för minst en stam, med eller utan ett system för metabolisk aktivering (23).
Statistical methods may be used as an aid in evaluating the test results (24).
Statistiska metoder kan användas som en hjälp vid utvärdering av testresultatet (24).
However, statistical significance should not be the only determining factor for a positive response.
Statistisk signifikans bör dock inte vara den enda faktor som bestämmer om resultatet är positivt.
Positive results from the bacterial reverse mutation test indicate that the substance induces point mutations by base substitutions or frameshifts in the genome of either Salmonella typhimurium and/or Escherichia coli.
Positiva resultat från testet av återmutation hos bakterier indikerar att substansen inducerar punktmutationer genom bassubstitutioner eller förskjutningar i genomet hos antingen Salmonella typhimurium och/eller Escheri-chia coli.
Negative results indicate that under the test conditions, the test substance is not mutagenic in the tested species.
Negativa resultat indikerar att testsubstansen inte är mutagen hos den testade sorten under dessa försöksbetingelser.
justification for choice of solvent/vehicle,
motivering för valet av lösningsmedel/vehikel
Strains:
Stammar:
strains used,
stammar som används
number of cells per culture,
antalet celler per kultur
strain characteristics.
karakteristika för stammen
amount of test substance per plate (mg/plate or μl/plate) with rationale for selection of dose and number of plates per concentration,
mängd av testsubstansen per platta (mg/platta eller μl/platta) med grund för val av dos och antal plattor per koncentration
media used,
använda medier
treatment procedures.
behandlingsprocedurer
individual plate counts,
individuella platträkningar
the mean number of revertant colonies per plate and standard deviation,
medelantalet återmuterande kolonier per platta och standardavvikelse
concurrent negative (solvent/vehicle) and positive control data, with ranges, means and standard deviations,
samtidiga negativa (lösningsmedel/vehikel) och positiva kontrolldata, med omfattning, medelvärden och standardavvikelser
historical negative (solvent/vehicle) and positive control data with ranges, means and standard deviations.
historiska negativa (lösningsmedel/vehikel) och positiva kontrolldata, med omfattning, medelvärden och standardavvikelser
Ames, B.N., McCann, J. and Yamasaki E., (1975) Methods for Detecting Carcinogens and Mutagens with the Salmonella/Mammalian-Microsome Mutagenicity Test.
Ames, B. N., McCann,). and Yamasaki E. (1975), Metods for Detecting Carcinogens and Mutagens with the Salmonella/Mammalian-Microsome Mutagenitic Test.
Gatehouse, D., Haworth, S., Cebula, T., Gocke, E., Kier, L., Matsushima, T., Melcion, C., Nohmi, T., Venitt, S. and Zeiger, E., (1994) Recommendations for the Performance of Bacterial Mutation Assays.
Gatehouse, D., Haworth, S., Cebula, T., Gocke. E., Kier, L. Matsushima, T. Melcion, C, Nohmi, T., Venitt, S. and Zeiger, E. (1994), Recommendations for the Performance of Bacterial Mutation Assays. Mutation Res.
Mutation Res., 312, p. 217-233.
312, s. 217–23 3.
Kier, L.D., Brusick D.J., Auletta, A.E., Von Halle, E.S., Brown, M.M., Simmon, V.F., Dunkel, V., McCann, J., Mortelmans, K., Prival, M., Rao, T.K. and Ray V., (1986) The Salmonella typhimurium/Mammalian Microsomal Assay: A Report of the U.S.
Kier, L. D. , Brusick I., Auletta, A. E., Von Halle, E. S., Brown, M. M, Simmon, V. R, dunkel, V., McCann, J., Mortelmans, K., Prival, M., Rao, T.K. and Ray V. (1986), The Salmonella typhimurium/Mam malian Microsomal Assay: A Report of the U.S.
Environmental Protection Agency Gene-Tox Program.
Environmental Protection Agency Gene-Tox Program. Mutation Res.
Mutation Res., 168, p. 69-240.
168, s. 69–240.
Yahagi, T., Degawa, M., Seino, Y.Y., Matsushima, T., Nagao, M., Sugimura, T. and Hashimoto, Y., (1975) Mutagenicity of Carcinogen Azo Dyes and their Derivatives, Cancer Letters, 1, p. 91-96.
Yahagi, T., Degawa, M., Seino, Y. Y. , Matsushima, T., Nagao, M., Sugimura, T. and Hashimoto, Y. (1975), Mutagenicity of Carcinogen Azo Dyes and their Derivatives, Cancer Letters, 1, s. 91–96.
Gatehouse, D.G., Rowland, I.R., Wilcox, P., Callender, R.D. and Foster, R., (1980) Bacterial Mutation Assays.
Gatehouse, D. G., Rowland, 1. R., Wilcox.
Aeschacher, H.U., Wolleb, U. and Porchet, L., (1987) Liquid Preincubation Mutagenicity Test for Foods.
Aeschacher, H. U., Wolleb. U. and Porchet, L. (1987), Liquid Preincubation Mutagenicity Test for Foods.
Food Safety, 8, p. 167-177.
l:ood Safety, 8, s. 167–177.
Hubbard, S.A., Green, M.H.L., Gatehouse, D. and J.W.
Hubbard, S. A., Green, M. H. L, Gatehouse, D. and Bridges,]. W.
Thompson, E.D. and Melampy, P.J., (1981) An Examination of the Quantitative Suspension Assay for Mutagenesis with Strains of Salmonella typhimurium.
Thompson, E. D. and Melampy, P. J. (1981), An Examination of the Quantitative Suspension Assay for Mutagenesis with Strains of Salmonella lyphimuriurn, Environmental Mutagenesis.
Environmental Mutagenesis, 3, p. 453-465.
3, s. 453–465.
Mutagen., 19, p. 2-141.
Mutagen., 19, s. 2–141.
Elsevier, Amsterdam, p. 249-258.
Elsevier, Ams terdam, s. 249–258.
Proc.
(1990), Molecular Dissection of Mutations at the Heterozygous Thymidine Kinase Locus in Mouse Lymphoma Cells, Proc.
Sci.
Technol (ung.
de Serres et al.
(. de Serres et al.
Mahon, G.A.T., Green, M.H.L., Middleton, B., Mitchell, I., Robinson, W.D. and Tweats, D.J., (1989) Analysis of Data from Microbial Colony Assays.
Mahon, G. A. T., Green, M. H. L, Middleton, B., Mitchel. I., Robinson, W.
UKEMS Sub-Committee on Guidelines for Mutagenicity Testing.
and Tweats, D. J. (1989), Analysis of Data from Microbial Colony Assays, in: UKEMS Sub-Committee on Guidelines for MutagenicityTesting.
Kirkland, D.J., Cambridge University Press, p. 28-65.
Kirkland, D.]., Cambridge University Press, s. 28–65.
A variety of haploid and diploid strains of the yeast Saccharomyces cerevisiae can be used to measure the production of gene mutations induced by chemical agents with and without metabolic activation.
En rad olika haploida och diploida stammar av jästen Saccaromyces cerevisiae kan användas vid undersökning av genmutationer, som induceras av kemiska ämnen med och utan metabolisk aktivering.
Forward mutation systems in haploid strains, such as the measurement of mutation from red, adenine-requiring mutants (ade-1, ade-2) to double adenine-requiring white mutants and selective systems such as the induction of resistance to canavnaine and cycloheximide, have been utilised.
Man har använt framåtmutationssystem med haploida stammar vid t.ex. bestämning av mutation från röda, adeninberoende mutanter (ade-1, ade-2) till dubbelt adeinberoende vita mutanter och selektiva system t.ex. induktion av canavanin-resistens och cycloheximid-resistens.
The most extensively validated reverse mutation system involves the use of the haploid strain XV 185-14C which carries the ochre nonsense mutations ade 2-1, arg 4-17, lys 1-1 and trp 5-48, which are reversible by base substitution mutagens that induce site specific mutations or ochre suppressor mutations.
De bäst validerade tillbakamutationssystemen bygger på användning av den haploida stammen XV 185-14C, som är bärare av de ockra nonsensmutationerna ade 2-1, arg 4-17, lys 1-1 och trp 5-48, som tillbakamuterar med basparsubstitutionsmutagener, som inducerar punktmutationer eller ockra suppressormutationer.
XV 185-14C also carries the his 1-7 marker, a missense mutation reverted mainly by second site mutations, and the marker hom 3-10 which is reverted by frameshift mutagens.
XV 185-14C är också bärare av bis 1-7 markören som är en missensemutation som huvudsakligen tillbakamuterar vid mutationer i andra loci, och markören bom 3-10 som tillbakamuterar med frameshift-mutagener.
In diploid strains of S. cerevisiae the only extensively used strain is D7 which is homozygous for ilv 1-92.
I diploida stammar av Saccaromyces cerevisiae är D7 som är homozygot för ilv 1-92, den enda med omfattande användning.
Solutions of test chemicals and control should be prepared just prior to testing, using an appropriate vehicle.
Lösningar av testämne och kontrollämne framställs omedelbart före försöket med hjälp av en passande vehikel.
In the case of organic compounds, which are not water soluble, not more than a 2 % solution v/v of organic solvents such as ethanol, acetone or dimethylsulphoxide (DMSO) should be used.
Om organiska kemiska förbindelser som inte går att lösa i vatten används, bör organiska lösningsmedel som etanol, aceton eller dimetylsulfoxid (DMSO) användas i koncentrationer på upp till 2 % v/v.
The final concentration of the vehicle should not significantly affect cell viability and growth characertistics.
Koncentrationen av vehiklen bör inte orsaka någon ändring av cellers livskraft eller växtegenskaper.
Cells should be exposed to test chemicals both in the presence and absence of an appropriate exogenous metabolic activation system.
Cellerna exponeras för testämnet både i närvaro och i frånvaro av ett lämpligt exogent metaboliskt aktiveringssystem.
The most commonly used system is a co-factor supplemented post-mitochondrial fraction from the livers of rodents pre-treated with enzyme inducing agents.
Det mest använda systemet består av en post-mitokondrial fraktion som kompletterats med en co-faktor, framställd från lever av gnagare som förbehandlats med enzyminducerande medel.
The use of other species, tissues, post-mitochondrial fractions, or procedures may also be appropriate for metabolic activation.
Användningen av andra arter, vävnader, post-mitokondriala faktorer, eller förfarande kan också vara lämplig för metabolisk aktivering.
Tester strains
Teststammar
The haploid strain XV 185-14C and the diploid strain D7 are the most used in gene mutation studies.
Den haploida stammen XV 185-14C och den diploida stammen D, är de mest vanligen använda i genmutationstester.
Other strains may also be appropriate.
Även andra stammar kan vara lämpliga.
Appropriate culture media are used for the determination of survival and mutant numbers.
Vid bestämning av överlevnadsgrad och antal mutanter används lämpliga kulturmedier.
Use of negative and positive controls
Användning av negativa och positiva kontroller
Positive, untreated and solvent controls should be performed concurrently.
Testbetingelser Teststammar
Appropriate positive control chemicals should be used for each specific mutational endpoint.
Lämpliga positiva kontrollämnen ska användas för varje enskild genetisk endpoint.
At least five adequately spaced concentrations of the test substance should be used.
Även andra stammar kan vara lämpliga. Media
Sub-cultures should be used with spontaneous mutation frequencies within the accepted normal range.
Subkulturer bör användas med spontana mutationsfrekvenser inom allmänt accepterade gränser.
In the case of experiments using markers such as hom 3-10 with a low mutation rate, the number of plates used must be increased to provide statistically relevant data.
När man testar markörer med, som t.ex. horn 3–10, en låg mutationsfrekvens, kan antalet plattor ökas så att en statistiskt relevant mängd data erhålls.
Treatment of S. cerevisiae strains is usually performed in a liquid test procedure involving either stationary or growing cells.
Stammar av Saccaromyces cerevisiae exponeras normalt genom test i vätska som inbegriper antingen celler i stationär fas eller celler i växtfas.
Initial experiments should be carried out on growing cells: 1-5 × 107 cells/ml are exposed to the test chemical for up to 18 hours at 28 to 37 oC with shaking; an adequate amount of metabolic activation system is added during treatment when appropriate.
1-5 x 107 celler per ml exponeras för testämnet i upp till 18 timmar vid 28–37 oC under skakning. Om det behövs tillsätts en passande mängd metabolisk aktiveringssystem under exponeringen.
At the end of the treatment, cells are centrifuged, washed and seeded upon an appropriate culture medium.
Efter behandlingen centrifugeras och tvättas cellerna varefter de utsås på ett lämpligt kulturmedium.
After incubation, plates are scored for survival and the induction of gene mutation.
Efter inkubationen registreras induktionen av genmutationer och antal överlevande per platta.
If the first experiment is negative, then a second experiment should be carried out using stationary phase cells.
Om det första testet utfaller negativt bör ett andra utföras med användning av celler i stationär fas.
If the first experiment is positive it is confirmed in an appropriate independent experiment.
Om det första testet utfaller positivt ska det bekräftas genom ett oberoende test.
Data should be presented in tabular form indicating the number of colonies counted, number of mutants, survival and mutant frequency.
Data ska ställas upp i tabellform och ange antal räknade kolonier, antal mutanter, överlevnadsfrekvens och mutationsfrekvens.
All results should be confirmed in an independent experiment.
Alla resultat ska bekräftas genom ett oberoende test.
The dara should be evaluated using appropriate statistical methods.
Utvärderingen av resultaten bör ske på grundval av en lämplig statistisk metod.
The test report shall, if possible, contain the following information:
Testrapporten ska om möjligt innehålla minst följande uppgifter:
strain used,
Använd stam.
test conditions: stationary phase or growing cells, compositions of media, incubation temperature and duration, metabolic activation system,
Testbetingelser: stationär fas eller växtceller, sammansättning av media, inkubationstemperatur och inkubationsperiod, metaboliskt aktiveringssystem.
treatment conditions: exposure levels, procedure and duration of treatment, treatment temperature, positive and negative controls,
Exponeringsbetingelser, exponeringskoncentrationer, förfarande och varaktighet, exponeringstemperatur positiva och negativa kontroller.
number of colonies counted, number of mutants, survival and mutant frequency, dose/response relationship if applicable, statistical evaluation of data,
Antal räknade kolonier, antal mutanter, Överlevnadsfrekvens och mutationsfrekvens, förhållandet mellan dos och effekt när detta är möjligt, statistisk utvärdering av data.
discussion of results,
Diskussion om resultaten.
Mitotic recombination in Saccharomyces cerevisiae can be detected between genes (or more generally between a gene and its centromere) and within genes.
Hos Saccaromyces cerevisiae kan mitotisk rekombination mellan gener (eller mer generellt mellan en gen och dess centromer) och inom samma gen konstateras.
The former event is called mitotic crossing-over and generates reciprocal products whereas the latter event is most frequently non-reciprocal and is called gene conversion.
Den förstnämnda formen kallas mitotisk överkorsning och framkallar reciproka produkter medan den andra formen för det mesta inte är reciprok och kallas genkonversion.
Crossing-over is generally assayed by the production of recessive homozygous colonies or sectors produced in a heterozygous strain, whereas gene conversion is assayed by the production of prototrophic revertants produced in an auxotrophic heteroallelic strain carrying two different defective alleles of the same gene.
Överkorsning bestäms normalt genom framkallande av recessiva homozygotiska kolonier eller sektorer i en heterozygotisk stam, medan genkonversion bestäms genom framkallande av prototrofa revertanter i en auxotrof heteroallelisk stam, som är bärare till olika, defekta alleler av samma gen.
The most commonly used strains for the detection of mitotic gene conversion are D4 (heteroallelic at ade 2 and trp 5) D7 (heteroallelic at trp 5) BZ34 (heteroallelic at arg 4) and JDl (heteroallelic at his 4 and trp 5).
De mest använda stammarna vid undersökning av mitotisk genkonversion är D4 (med heteroallel ade 2 och trp 5), D7 (med heteroallel trp 5), BZ34 (med heteroallel arg 4) och JD1 (med heteroallel bis 4 och trp 5).
Mitotic crossing-over producing red and pink homozygous sectors can be assayed in D5 or in D7 (which also measures mitotic gene conversion and reverse mutation at ilv 1-92) both strains being heteroallelic for complementing alleles of ade 2.
Mitotisk överkorsning som framkallar röda och ljusröda homozygotiska sektorer kan undersökas i D5 eller i D7 (som även mäter mitotisk genkonversion och omvänd mutation av ilv 1-92), eftersom bägge stammar är heteroalleliska för att komplettera alleler av ade 2.
Solutions of test chemicals and control or reference compounds should be prepared just prior to testing, using an appropriate vehicle.
Lösningar av testämne och kontroll- eller referensämne framställs omedelbart före försöket med hjälp av passande vehikel.
The system most commonly used is a co-factor supplemented post-mitochondrial fraction from the livers of rodents pre-treated with enzyme inducing agents.
Metabolisk aktivering
For toxic chemicals, the highest concentration tested should not reduce survival below 5 to 10 %.
Användning a v negativa och positiva kontroller Positiva kontroller, obehandlade kontroller och kontroller med lösningsmedel ska användas jämsides. Lämpliga positiva kontrollämnen ska användas för varje enskild genetisk endpoint. Exponeringskoncentration Minst fem olika koncentrationer av testämnet med passande intervaller mellan koncentrationerna ska användas. Här måste man ta hänsyn till faktorer som cytotoxicitet och löslighet.
Relatively water-insoluble chemicals should be tested up to the limit of solubility using appropriate procedures.
De lägsta koncentrationerna bör inte ha någon verkan på cellernas överlevnadsfrekvens. För toxiska ämnen ska den högsta koncentrationen som testas inte minska överlevnadsgraden till mindre än 5–10 %.
For freely water-soluble non-toxic substances the upper concentration should be determined on a case by case basis.
Ämnen som är relativt oupplösliga i vatten testas på lämpligt sätt upp till gränsen för löslighet. Den högsta koncentrationen av icke-toxiska testämnen, som är fritt lösliga i vatten, fastställs från test till test.
Cells may be exposed to test chemicals in either the stationary phase or during growth for periods of up to 18 hours.
Celler i stationär fas eller växtfas kan exponeras för testämnet i upp till 18 timmar.
However, for long treatment times cultures should be microscopically inspected for spore formation, the presence of which invalidates the test.
Om långa exponeringsperioder används bör dock kulturerna undersökas mikroskopiskt för sporbildning vars närvaro gör testet värdelöst.
Incubation conditions
Inkuberingsförhållanden
The plates are incubated in the dark for four to seven days at 28 to 30 oC.
Plattorna inkuberas i 4–7 dagar vid 28–30 oC i mörker.
Plates used for the assay of red and pink homozygous sectors produced by mitotic crossing-over should be kept in a refrigerator (about 4 oC) for a further one to two days before scoring to allow for the development of the appropriate pigmented colonies.
Plattor som används för bestämning av röda och ljusröda homozygota sektorer, som framkallats genom mitotisk överkorsning, förvaras i kylskåp (ca 4 oC) i ytterligare 1-2 dagar innan räkning för att möjliggöra utveckling av lämpliga pigmenterade kolonier.
Spontaneous mitotic recombination frequencies
Spontana mitotiska rekombinations frekvenser
Sub-cultures should be used with spontaneous mitotic recombination mutation frequencies within the accepted normal range.
Subkulturer bör användas med spontana mutationsfrekvenser inom allmänt accepterade gränser.
Number of replicates
Antal parallella plattor
A minimum of three replicate plates should be used per concentration for the assay of prototrophs produced by mitotic gene conversion and for viability.
Minst tre parallella plattor används för varje koncentration vid bestämning av prototrofer som framkommit vid genmutation, och av cellernas livskraft.
In the case of the assay of recessive homozygosis produced by mitotic crossing-over, the plate number should be increased to provide an adequate number of colonies.
När man testar recessiva homozygoter, som framkallats genom mitotisk överkorsning, ökas antalet plattor så att ett lämpligt antal kolonier erhålls.