natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Highest sensitivity of detection can be expected when using freshly prepared sample extract and optimal growth conditions.
Högst känslighetsnivå för upptäckt kan förväntas då nyligen preparerade provextrakt används och optimala tillväxtförhållanden tillämpas.
However, the method can be successfully applied to extracts that have been stored under glycerol at –68 to –86 °C.
Metoden kan emellertid med framgång tillämpas på extrakt som har lagrats i glycerol vid –68 till –86 °C.
Some varieties of eggplant provide an excellent selective enrichment medium for the growth of C. m. subsp. sepedonicus even in the absence of symptoms and also provide an excellent confirmatory host test.
Vissa sorters äggplantor utgör ett utmärkt selektivt förökningssubstrat för tillväxt av C. m. subsp. sepedonicus, även i avsaknad av symptom, och är också utmärkta för bekräftande värdtest.
Growth conditions should be optimal to reduce the risk of false negative test results.
Tillväxtförhållandena bör vara optimala för att minska risken för falska negativa testresultat.
For cultural details, see Appendix 8.
Detaljerad information om odling finns i tillägg 8.
Distribute the whole of the remaining test aliquot of the resuspended pellet from section 3.1.6 or 3.2.5 between eggplants by one of the methods given below (7.3 or 7.4).
Fördela hela det återstående testdelprovet av den återsuspenderade pelleten från avsnitt 3.1.6 eller 3.2.5 mellan äggplantorna genom att tillämpa en av nedan angivna metoder (7.3 eller 7.4).
Use only plants at leaf stage two to three up to full expansion of the third true leaf.
Använd endast plantor på bladstadium 2–3 upp till full utveckling av trebladsstadiet.
In order to ensure complete utilisation of the resuspended pellet as well as effective inoculation the procedures outlined below will require 15 to 25 eggplants per sample.
För att säkerställa fullständig användning av den återsuspenderade pelleten och effektiv inokulation kommer de nedan beskrivna förfarandena att kräva 15–25 äggplantor per prov.
Do not water eggplants for one to two days prior to inoculation to reduce turgor pressure.
Undvik att vattna äggplantorna 1–2 dagar före inokulationen för att minska saftspänningen.
Slit inoculation
Inokulation genom skåra
Holding the plant between two fingers, pipette a drop (approximately 5 to 10 µl) of the suspended pellet on the stem between the cotyledons and the first leaf.
Håll plantan mellan två fingrar, droppa med hjälp av en pipett en droppe (ca 5–10 µl) av det uppslammade koncentrerade extraktet på stjälken mellan hjärtbladen och det första bladet.
Using a sterile scalpel, make a diagonal slit, about 1,0 cm long and approximately 2/3 of the stem thickness deep, starting the cut from the pellet drop.
Med en steril skalpell görs en diagonal skåra ungefär 1,0 cm lång och ungefär lika djup som två tredjedelar av stjälkens diameter med början vid droppen med det koncentrerade extraktet.
Seal the cut with sterile vaseline from a syringe.
Förslut skåran med sterilt vaselin från en spruta.
Syringe inoculation
Inokulation med en spruta
Inoculate the eggplant stems just above the cotyledons using a syringe fitted with a hypodermic needle (not less than 23 G).
Inokulera äggplantornas stjälkar precis ovanför hjärtbladen med en spruta som är försedd med injektionsnål (minst 23G).
Distribute the sample between the eggplants.
Fördela provet mellan äggplantorna.
As the positive controls, inoculate 5 plants with an aqueous suspension of 105 to 106 cells per ml of a known culture of C. m. subsp. sepedonicus and, where possible, with naturally infected tuber tissue (see section 4) by the same inoculation method (7.3 or 7.4).
Som positiva kontroller, inokulera 5 plantor med en vattensuspension av 105 till 106 celler per ml av känd kultur av C. m. subsp. sepedonicus och, vid behov, med naturligt angripen knölvävnad (se avsnitt 4) genom samma inokuleringsmetod (7.3 eller 7.4).
As the negative control, inoculate 5 plants with sterile pellet buffer by the same inoculation method (7.3 or 7.4).
Som negativa kontroller, inympa 5 plantor med steril pelletbuffert genom samma inokuleringsmetod (7.3 eller 7.4).
Incubate plants in quarantine facilities for up to four weeks at 18 to 24 °C.
Inkubera plantorna i karantänsanläggningar upp till 4 veckor vid 18–24 °C.
Incubate plants with sufficient light and high humidity (70 to 80 %) and water to prevent water logging or wilting through water deficiency.
Inkubera plantorna med tillräckligt ljus och fuktighet (70–80 %) och vatten för att förhindra vattenmättnad eller vissnande på grund av vattenbrist.
sepedonicus cells are killed at temperatures above 30 °C and the optimum temperature is 21 °C.
sepedonicus celler dör vid temperaturer över 30 °C, och den optimala temperaturen är 21 °C.
To avoid contamination incubate positive control and negative control plants on clearly separated benches in a glasshouse or growth chamber or, in case space is limited, ensure strict separation between treatments.
För att undvika nedsmittning, inkubera positiva och negativa kontrollplantor på strikt separata bänkar i ett växthus eller odlingsrum eller, vid platsbrist, se till att hanteringen sker strikt separat.
If plants for different samples must be incubated close together, separate them with appropriate screens.
Om plantor från olika prover skall inkuberas tätt tillsammans, separera dem med lämpliga skärmar.
When fertilising, watering, inspecting and any other manipulations take great care to avoid cross-contamination.
Vid gödning, bevattning, inspektion och annan behandling, var noga med att undvika korskontaminering.
It is essential to keep glasshouses and growth chambers free of all insect pests since they may transmit the bacterium from sample to sample.
Det är mycket viktigt att hålla växthus och odlingsrum fria från alla skadeinsekter eftersom de kan överföra bakterien från prov till prov.
Examine regularly for symptoms starting after a week.
Efter en vecka undersöks plantorna på vanligt sätt efter symptom.
Count the number of plants showing symptoms.
Räkna antalet plantor som uppvisar symptom.
subsp. sepedonicus causes leaf wilting in eggplants which may commence as a marginal or interveinal flaccidity.
subsp. sepedonicus orsakar vissnade blad hos äggplantor, vilket kan börja som slapphet längs kanterna eller mellan nerverna.
Wilted tissue may initially appear dark green or mottled but turns paler before becoming necrotic.
Vissnad vävnad kan till en början se mörkgrön eller fläckig ut, men bleknar innan den blir nekrotisk.
Interveinal wilts often have a greasy water-soaked appearance.
Vissnade områden mellan bladnerverna ser ofta feta och vattenfyllda ut.
Necrotic tissue often has a bright yellow margin.
Nekrotisk vävnad har ofta en klart gul kant.
Plants are not necessarily killed; the longer the period before symptoms develop, the greater the chance of survival.
Plantorna dör nödvändigtvis inte; ju längre tid som går innan symptomen visar sig, desto större är chansen för överlevnad.
Plants may outgrow the infection.
Plantorna kan kväva infektionen.
Young eggplants are much more susceptible to low populations of C. m. subsp. sepedonicus than are older plants, hence the necessity to use plants at or just before leaf stage 3.
Unga äggplantor är mycket mottagligare för små populationer av C. m. subsp. sepedonicus än äldre plantor. Därför är det nödvändigt att använda plantor på eller lite före bladstadium 3.
Wilts may also be induced by populations of other bacteria or fungi present in the tuber tissue pellet.
Vissnandet kan också orsakas av andra bakterie- eller svamppopulationer som finns i det koncentrerade extraktet av knölarnas vävnad.
These include Ralstonia solanacearum, Erwinia carotovora subsp. carotovora and E. carotovora subsp. atroseptica, Erwinia chrysanthemi, Phoma exigua var. foveata, as well as large populations of saprophytic bacteria.
Dessa kan utgöras av Ralstonia solanacearum, Erwinia carotovora subsp. carotovora och E. carotovora subsp. atroseptica, Erwinia chrysanthemi, Phoma exigua var. foveata och stora bestånd av saprofytiska bakterier.
In particular Erwinia chrysanthemi can cause leaf symptoms and wilt that is very similar to symptoms of C. m. sepedonicus.
Särskilt Erwinia chrysanthemi kan orsaka bladsymptom och vissnande som är mycket lika symptomen på C. m. sepedonicus.
The only difference is blackening of the stems in case in Erwinia chrysanthemi infections.
Den enda skillnaden är svartnandet av stjälkarna vid infektion med Erwinia chrysanthemi.
Other wilts can be distinguished from those caused by C. m. subsp. sepedonicus since whole leaves or whole plants wilt rapidly.
Andra typer av vissnande kan skiljas från det vissnande som orsakas av C. m. subsp. sepedonicus eftersom hela blad eller hela plantor vissnar snabbt.
Also a Gram stain can be prepared: this test will differentiate C. m. subsp. sepedonicus from Erwinia spp.
Även gramfärgning kan göras: detta test skiljer C. m. subsp. sepedonicus från Erwinia spp.
As soon as symptoms in eggplants are observed reisolation should be performed, using sections of wilted leaf tissue or stem tissue from plants (see 3.1. 3 for tissue maceration).
Så snart symptom observeras på äggplantorna bör en reisolation göras, varvid segment av vissnad bladvävnad eller stjälkvävnad används (information om finfördelning av vävnad finns i 3.1.3).
Surface disinfect the eggplant leaves and stems by wiping with 70 % ethanol.
Desinficera ytan på äggplantornas blad och stjälkar genom att torka av dem med 70-procentig etanol.
Perform an IF test or PCR on the eggplant sap and isolate on to suitable (selective) media (see section 8).
Gör ett IF-test eller PCR-test på äggplantans växtsaft och isolera på lämpliga (selektiva) substrat (se avsnitt 8).
A Gram stain (Appendix 9) may also be prepared.
Även gramfärgning (tillägg 9) kan prepareras.
Identify purified cultures of presumptive C. m. subsp. sepedonicus and confirm pathogenicity (see section 9 and 10).
Identifiera renkulturer av presumtiv C. m. subsp. sepedonicus och bekräfta skadegöraren (se avsnitten 9 och 10).
Under certain circumstances, in particular where growing conditions are not optimal, it may be possible for C. m. subsp. sepedonicus to exist as a latent infection within eggplants even after incubation periods up to 4 weeks.
Under vissa omständigheter, i synnerhet då tillväxtförhållandena inte är optimala, är det möjligt för C. m. subsp. sepedonicus att existera som en latent infektion i äggplantorna, till och med efter inkubationsperioder på upp till 4 veckor.
If no symptoms are observed after 4 weeks perform IF/PCR on a composite sample of 1 cm stem sections of each test plant taken above the inoculation site.
Om inga symptom observeras efter 4 veckor: utför IF/PCR på ett blandprov av 1 cm stjälksegment från varje testplanta taget ovanför inokuleringsstället.
If the test is positive reisolation on suitable (selective) media should be performed following the procedure under section 8.
Om testet är positivt bör en omisolering på lämpliga (selektiva) substrat göras enligt förfarandet i avsnitt 8.
Identify purified cultures of presumptive C. m. subsp. sepedonicus and confirm pathogenicity (section 9 and 10).
Identifiera renkulturer av presumtiv C. m. subsp. sepedonicus och bekräfta patogenitet (avsnitten 9 och 10).
Interpretation of the bioassay test result.
Tolkning av resultatet av biotestet
Valid Bioassay test results are obtained when plants of the positive control show typical symptoms, the bacteria can be reisolated from these plants and no symptoms are found on the negative controls.
Giltiga resultat från biotest erhålls om plantor från den positiva kontrollen uppvisar typiska symptom, bakterier kan omisoleras från dessa plantor och inga symptom återfinns på de negativa kontrollerna.
The bioassay test is negative if test plants are not infected by C. m. subsp. sepedonicus, and provided that C. m. subsp. sepedonicus is detected in positive controls.
Biotestet är negativt om testplantorna inte är infekterade med C. m. subsp. sepedonicus och under förutsättning att C. m. subsp. sepedonicus påvisas i de positiva kontrollerna.
The bioassay test is positive if the test plants are infected by C. m. subsp. sepedonicus.
Biotestet är positivt om testplantorna är infekterade med C. m. subsp. sepedonicus.
ISOLATION OF C. M. SUBSP.
ISOLERING AV C. M. SUBSP.
Diagnosis is only completed if C. m. subsp. sepedonicus is isolated, subsequently identified (see section 9). and confirmed by a pathogenicity test (section 10).
Diagnosen är endast fullständig om C. m. subsp. sepedonicus isoleras, därefter identifieras (se avsnitt 9) och bekräftas av ett patogenitetstest (avsnitt 10).
Although C. m. subsp. sepedonicus is a fastidious organism, it can be isolated from symptomatic tissue.
Trots att C. m. subsp. sepedonicus är en skadegörare som är svår att hantera är det möjligt att isolera den utgående från vävnad som visar symptom på angrepp.
However, it may be outgrown by rapidly growing saprophytic bacteria and, therefore, isolations directly from the tuber or stem tissue pellet (section 3.1.6 or 3.2.5) is difficult.
Den kan emellertid kvävas av snabbt växande saprofytiska bakterier och därför är det svårt att utföra isolering direkt från pelleten av stjälk- eller knölvävnad (avsnitt 3.1.6 eller 3.2.5).
With selective medium and appropriate dilution of the resuspended pellet from the heel end cores or stems of potatoes direct isolation of C. m. subsp. sepedonicus may be possible.
Med ett selektivt substrat och lämplig utspädning av den återsuspenderade pelleten från potatisarnas naveländar eller stjälkar kan det vara möjligt att utföra direkt isolering av C. m. subsp. sepedonicus.
Isolations shall be made from all symptomatic potato tubers or stem segments and from eggplants were no symptoms are observed but IF/PCR test from the composite sample was positive (see section 7.10).
Isolering bör göras från alla potatisknölar och stjälksegment och från äggplantor som visserligen inte uppvisat symptom vid observation men vars blandprov givit negativt svar vid IF-/PCR-test (se avsnitt 7.10).
Maceration of eggplants stems when necessary should be carried out as described in section 3.1.3.
Om nödvändigt bör finfördelning av äggplantsstjälkar utföras som i avsnitt 3.1.3.
As positive controls, prepare decimal dilutions from a suspension of 106 cfu per ml of C. m. subsp. sepedonicus (e.g. NCPPB 4053 or PD 406).
Som positiva kontroller preparera decimala utspädningar från en suspension av 106 kolonibildande enheter per ml av C. m. subsp. sepedonicus (t.ex. NCPPB 4053 eller PD 406).
To avoid any possibility of contamination, prepare positive controls totally separated from samples to be tested.
För att undvika risk för nedsmittning, preparera positiva kontroller som är fullständigt åtskilda från de prover som skall testas.
For each newly prepared batch of a selective medium its suitability for growth of the pathogen should be tested before it is used to test routine samples.
För varje nyligen preparerat parti av selektivt substrat bör dess lämplighet för tillväxt av patogenet testas innan det används för att testa rutinprover.
Selective plating
Odling på selektivt substrat
From a 100 µl aliquot from a resuspended potato pellet sample or eggplant sap make 10-fold dilutions in pellet buffer (Appendix 3).
Från ett delprov på 100 µl från ett återsuspenderat potatispelletprov eller äggplantsväxtsaft gör exponentiella utspädningar i en pelletbuffert (tillägg 3).
Isolation from undiluted potato pellet usually fails due to the fastidious growth habit of Cms and competition by saprophytes.
Isolering från outspädd potatispellet misslyckas vanligen på grund av den komplicerade tillväxtkaraktären hos C. m. subsp. sepedonicus och konkurrens från saprofyterna.
Since the bacterium is usually present in high populations in infected tissues, the saprophytes can usually be diluted out, whilst the pathogen remains.
Eftersom bakterien vanligen förekommer i stora populationer i infekterade vävnader kan saprofyter vanligen spädas, samtidigt som patogenet kvarstår.
It is therefore recommended to spread 100 µl from each of the samples, 1/100 up to 1/10000 dilutions onto MTNA medium or NCP-88 medium (Appendix 5) (if using 90 mm diameter petri dishes- adjust volume for alternative dish sizes), using spreaders (hockey sticks) and the spread plate technique.
Det rekommenderas därför att 100 µl från varje prov, 1/100 till 1/10000 utspädningar sprids ut på MTNA-substrat eller NCP-88-substrat (tillägg 5) (om en 90 mm petriskål används, anpassa volymen efter alternativa skålstorlekar), varvid racklor och racklingsteknik används.
An alternative strategy is to spread out the initial 100 µl potato pellet aliquot onto a first agar plate with a spreader and then remove the spreader to a second agar plate, streaking out any residue left on the spreader; finally repeat this with a third plate, thus giving a dilution plating effect via the spreader.
Ett alternativt tillvägagångssätt är att sprida ut den ursprungliga 100 µl potatispelletdelprovet på en första agarplatta med en rackla och därefter överföra racklan till en andra agarplatta, där alla eventuella rester på racklan stryks ut. Upprepa slutligen förfarandet på en tredje platta för att på så sätt få till stånd en utspädningsplatt-effekt med hjälp av racklan.
Incubate plates in the dark at 21 to 23 °C.
Inkubera plattorna i mörker vid 21–23 °C.
Initial examinations of the plates including, by reference to the control plates, counts of any C. m. subsp. sepedonicus like colonies are made after 3 days, with further counts after 5, 7, eventually 10 days.
Inledande undersökningar av plattorna, inklusive, genom hänvisning till kontrollplattorna, räkning av alla C. m. subsp. sepedonicus–liknande kolonier sker efter 3 dagar, och ytterligare räkning sker efter 5, 7 och slutligen 10 dagar.
Purification of suspicious colonies
Rening av misstänkta kolonier
Subculturing of C. m. subsp. sepedonicus-like colonies should be carried out onto YGM media for eggplant inoculation and/or subsequent identification; this should be done before the plates become too overgrown i.e. preferably after three to five days.
Subkulturodling av C. m. subsp. sepedonicus-liknande kolonier bör ske på YGM-substrat för inokulering av äggplantor och/eller efterföljande identifiering. Detta bör ske innan plantorna blir alltför stora, det vill säga helst efter 3–5 dagar.
Streak C. m. subsp. sepedonicus –like colonies on to one of the following media: (formulae are given in Appendix 5):
Stryk C. m. subsp. sepedonicus-liknande kolonier på ett av följande substrat (formler anges i tillägg 5):
nutrient dextrose agar (for use in subculturing only),
Näringsagar med dextros (endast för renkultur).
yeast peptone glucose agar,
Agar med jäst, pepton och glukos.
yeast extract mineral salts agar.
Agar med jästextrakt och mineralsalter.
Incubate at 21 °C to 24 °C for up to 10 days.
Inkubera i 21–24 °C i upp till 10 dagar.
subsp. sepedonicus is slow-growing, usually producing pin-point, cream, domed colonies within 10 days.
subsp. sepedonicus växer långsamt och producerar knappnålsliknande, krämfärgade, kupolformade kolonier inom 10 dagar.
Photos of typical colonies of C. m. subsp. sepedonicus (see web site http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
(Foton på typiska kolonier av C. m. subsp. sepedonicus finns på kommissionens webbplats med adress http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Re-streak to establish purity.
Stryk på nytt för att uppnå renhet.
Growth rates are improved with subculture.
Tillväxttakten förbättras genom renkulturodling.
Typical colonies are creamy-white or ivory, occasionally yellow, rounded, smooth, raised, convex-domed, mucoid-fluidal, with entire edges and usually 1 to 3 mm in diameter.
Typiska kolonier är krämvita eller elfenbensvita, ibland gula, runda, släta, upphöjda, kupolkonvexa, slemaktiga till flytande, har hela kanter och är vanligtvis 1–3 mm i diameter.
A simple Gram stain (Appendix 9) may help to select colonies for further testing.
En enkel gramfärgning (tillägg 9) kan utföras för att underlätta att välja kolonier för ytterligare testning.
Identify presumptive cultures (see section 9) and perform a pathogenicity test (see section 10).
Identifiera presumtiva kulturer (se avsnitt 9) och gör ett patogenitetstest (se avsnitt 10).
IDENTIFICATION
IDENTIFIERING
Identify pure cultures of presumptive C. m. subsp. sepedonicus isolates using at least two of the following tests based on different biological principles.
Identifiera renkulturer av presumtiva C. m. subsp. sepedonicus-isolat genom att utföra minst två av följande tester baserade på olika biologiska principer.
Include known reference strains where appropriate for each test performed.
Ta med kända referensstammar när så är lämpligt vid varje test som utförs.
Nutritional and enzymatic identification tests
Nutrient- och enzymatiska identifikationstester
Determine the following phenotypic properties which are universally present or absent in C. m. subsp. sepedonicus, according to the methods of Lelliott and Stead (1987), Klement et al.
Fastställ följande fenotypiska egenskaper som alltid är närvarande eller frånvarande i C. m. subsp. sepedonicus enligt metoderna Lelliott och Stead (1987), Klement et al.
(1990), Schaad (2001), Anonymous (1987).
(1990), Schaad (2001), anonym (1987).
All media should be incubated at 21 °C and examined after six days.
Alla substrat bör inkuberas vid 21 °C och undersökas efter 6 dagar.
If no growth has occurred, incubate for up to 20 days.
Om ingen tillväxt har skett, inkubera i upp till 20 dagar.
All tests must include a known C. m. subsp.sepedonicus control.
Alla tester skall inbegripa en känd C. m. subsp. sepedonicus-kontroll.
Nutritional and physiological tests must be made using inocula from nutrient agar subcultures.
Näringstester och fysiologiska tester skall utföras med inokulat från subkulturer på näringsagar.
Morphological comparisons must be made from nutrient dextrose agar cultures.
De morfologiska jämförelserna skall göras på grundval av odlingar på näringsagar med dextros.
Tests
Försök
Expected result
Förväntat resultat
Oxidation/Fermentation (O/F) test
Oxidations-/fermenteringstest (O/F-test)
Inert or weakly oxidative
Inert eller svagt oxidativa
Oxidase activity
Oxidasaktivitet
Growth at 37 °C
Tillväxt vid 37 °C
Urease activity
Ureasaktivitet
Aesculin hydrolysis
Hydrolys av aesculin
Starch hydrolysis
Hydrolys av stärkelse
or weak
eller svag
Tolerance of 7 % NaCl
Tolerans hos 7-procentig NaCl
Indole production
Produktion av indol
Catalase activity
Katalasaktivitet
production
Produktion av H2S
Citrate utilization
Utnyttjande av citrat
Gelatin liquefaction
Smältning av gelatin
Acid glycerol
Syra från glycerol
Acid from lactose
Syra från laktos
Acid from rhamnose
Syra från ramnos
Acid from salicin
Syra från salicin
Gram stain (Appendix 9)
Gramfärgning (tillägg 9)
IF-test
IF-test
Prepare a suspension of approximately 106 cells per ml in IF buffer (Appendix 3).
Preparera en suspension av ungefär 106 celler per ml i IF-buffert (tillägg 3).
Prepare a 2-fold dilution series of an appropriate antiserum.
Preparera en serie dubbla utspädningar av ett lämpligt antiserum.
Apply the IF procedure (section 4).
Tillämpa IF-förfarandet (avsnitt 4).
A positive IF test is achieved if the IF titre of the culture is equivalent to that of the positive control.
Ett positivt IF-test erhålls om kulturen har samma IF-titer som den positiva kontrollen.
Prepare a suspension of approximately 106 cells per ml in ultra pure water (UPW).
Preparera en suspension av ungefär 106 celler per ml i ultrarent vatten.
Heat 100 µl of the cell suspension in closed tubes in a heating block or boiling waterbath at 100 °C for four minutes.
Upphetta 100 µl av cellsuspensionen i tillslutna rör i värmeblock eller kokande vattenbad i 100 °C under 4 minuter.
Apply appropriate PCR procedures to amplify C. m. subsp. sepedonicus specific amplicons (e. g. Pastrik, 2000; see Appendix 4; Li and de Boer, 1995; Mills et al., 1997; Pastrik and Rainey, 1999; Schaad et al., 1999.
Tillämpa lämpliga PCR-förfaranden för att amplifiera C. m. subsp. sepedonicus-specifika PCR-produkter (t.ex. Pastrik, 2000; se tillägg 4; Li och de Boer, 1995; Mills et al., 1997; Pastrik och Rainey, 1999; Schaad et al., 1999).