natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Detection of R. solanacearum in surface water is most reliable during late spring, summer and autumn seasons when water temperatures exceed 15 °C.
Upptäckt av of R. solanacearum i ytvatten är mest tillförlitlig under den sena vårsäsongen, samt sommar- och höstsäsongerna, när vattentemperaturerna överstiger 15 °C.
Repeated sampling at different times in the above mentioned period at designated sampling points will increase the reliability of detection by reducing the effects of climatic variation.
Upprepade provtagningar vid olika tidpunkter under ovannämnda period och på bestämda provtagningsplatser ökar tillförlitligheten hos upptäckten genom att reducera inverkan av klimatvariationen.
Take into account the effects of heavy rainfall and the geography of the watercourse to avoid extensive dilution effects that may obscure presence of the pathogen.
Beakta inverkan av kraftiga regnfall och vattendragens geografiska läge för att undvika alltför stora utspädningseffekter, som kan dölja närvaron av patogenet.
Take surface water samples in the vicinity of host plants if these hosts are present.
Ta ytvattenproverna i närheten av värdväxterna om dessa förekommer.
At selected sampling points, collect water samples by filling disposable sterile tubes or bottles at a depth if possible below 30 cm and within 2 m from the bank.
På utvalda provtagningsplatser, samla vattenprover genom att fylla sterila engångsrör eller engångsflaskor om möjligt på ett djup av 30 cm och inom 2 m från strandkanten.
For processing and sewage effluents, collect samples from the point of effluent discharge.
Vid process- och avloppsvatten från verksamheter där potatis förädlas, samla in prover från den punkt där vätskorna släpps ut.
Sample sizes up to 500 ml per sampling point are recommended.
Provstorlekar på upp till 500 ml per provtagningsplats rekommenderas.
If smaller samples are preferred, it is advisable to take samples on at least three occasions per sampling point, each sample consisting of two replicated sub-samples of at least 30 ml.
Om mindre prover föredras rekommenderas att proverna tas vid minst tre olika tillfällen per provtagningsplats och att varje prov består av två lika stora delprover av minst 30 ml.
For intensive survey work, select at least three sampling points per 3 km of watercourse and ensure that tributaries entering the watercourse are also sampled.
Vid intensiva undersökningar, välj minst tre provtagningsplatser per 3 km vattendrag och säkerställ att prover även tas på vattendragets tillflöden.
Transport samples in cool dark conditions (4 to 10 °C) and test within 24 hours.
Transportera proverna svalt och mörkt (4–10 °C) och testa dem inom 24 timmar.
If required, the bacterial fraction may be concentrated using one of the following methods:
Bakteriedelen kan vid behov koncentreras genom en av följande metoder:
Centrifuge 30 to 50 ml sub-samples at 10000 g for 10 minutes (or 7000 g for 15 minutes) preferably at 4 to 10 °C, discard the supernatant and resuspend the pellet in 1 ml pellet buffer (Appendix 4).
Centrifugera 30–50 ml delprover vid 10000 g under 10 minuter (eller 7000 g under 15 minuter), helst vid 4–10 °C. Kasta bort supernatanten och återsuspendera pelleten i 1 ml pelletbuffert (tillägg 4).
Membrane filtration (minimum pore size 0,45 µm) followed by washing the filter in 5 to 10 ml pellet buffer and retention of the washings.
Membranfiltrering (lägsta porstorlek 0,45 µm) och därefter tvättning av filtret i 5–10 ml pelletbuffert och förvaring av tvättvätskan.
This method is suitable for larger volumes of water containing low numbers of saprophytes.
Denna metod är lämplig vid större volymer vatten som innehåller små mängder av saprofyter.
Concentration is usually not advisable for samples of potato processing or sewage effluent since increased populations of competing saprophytic bacteria will inhibit detection of Ralstonia solanacearum.
Koncentrering rekommenderas vanligtvis inte för prover av process- eller avloppsvatten från verksamhet där potatis förädlas, eftersom populationer av konkurrerande saprofytiska bakterier inhiberar upptäckten av R. solanacearum.
See flow chart and description of the tests in the relevant appendices.
Se flödesdiagram och beskrivningar av testerna i de berörda bilagorna.
Soil sample (1)
Stickprov från jord (1)
Extraction of the pathogen
Extraktion av patogenet
selective isolation (2)
Selektiv isolering (2)
optional auxiliary test: enrichment PCR (3) / bioassay (4)
Frivilligt kompletterande test: anrikning plus PCR (3) / biotest (4)
Colonies with typical morphology (5) after isolation
Kolonier med typisk morfologi (5) efter isolering
IDENTIFICATION TESTS (7)
IDENTIFIERINGSTEST (7)
PATHOGENICITY TEST (8)
PATOGENITETSTEST (8)
Sample not contaminted by
Prov ej infekterat med
See Section V.2.1. for recommended sampling procedures.
Rekommenderade provtagningsförfaranden, se avsnitt IV.2.1.
If high saprophyte populations are suspected to affect the reliability of the isolation, then repeat the isolation tests after further dilution of the sample.
Om stora populationer av saprofyter misstänks påverka isoleringens tillförlitlighet, repetera isolationstestet efter ytterligare utspädning av provet.
The validated detection scheme, described in this section, is applicable for pathogen detection in soil samples but can also be used to test samples of solid potato processing waste or sewage sludge.
Det validerade program för upptäckt som beskrivs i detta avsnitt är tillämpligt på upptäckt av patogen i jordprover men kan även användas för testning av prover av fast avfall och avloppsslam från bearbetningen av potatis.
However, it should be noted that these methods are insufficiently sensitive to guarantee detection of low and/or irregularly dispersed populations of Ralstonia solanacearum that may occur in naturally infested samples of these substrates.
Det bör emellertid noteras att dessa metoder inte är tillräckligt känsliga för att garantera upptäckt av små och/eller oregelbundet dispergerade populationer av R. solanacearum som kan förekomma i naturligt angripna prover av dessa substrat.
The limitations in sensitivity of this test scheme should be considered when assessing the reliability of any negative results obtained and also when used in surveys to determine presence or absence of the pathogen in soils or sludges.
Detta testprograms begränsningar i fråga om känslighet bör beaktas vid bedömningen av tillförlitligheten hos alla eventuella negativa resultat och när det används i undersökningar för att påvisa närvaro eller frånvaro av patogenet i jord eller slam.
The most reliable test for presence of the pathogen in a field soil is to plant a susceptible host and monitor it for infection, but even with this method low levels of contamination will escape detection.
Det mest tillförlitliga testet för att påvisa närvaro av patogenet i åkerjord är att plantera en mottaglig värdväxt och kontrollera om denna infekteras, men även med denna metod undgår små mängder av nedsmittning upptäckt.
Sampling of field soil should follow standard principals used for nematode sampling.
Provtagningen av jordmån bör följa standardprinciperna för provtagning av nematoder.
Collect 0,5 to 1 kg of soil per sample from 60 sites per 0,3 ha from a depth of 10 to 20 cm (or in a grid of 7 x 7 metres) If the pathogen is suspected to be present, increase the number of collection points to 120 per 0,3 ha.
Samla in 0,5–1 kg jord per prov från 60 platser per 0,3 ha på ett djup av 10–20 cm (eller i ett rutnät av 7 x 7 m). Om förekomst av patogenet misstänks, öka mängden provtagningsplatser till 120 per 0,3 ha.
Maintain samples at 12 to 15 °C prior to testing.
Förvara proven vid 12–15 °C före testning.
Sample potato processing and sewage sludges by collecting a total of 1 kg from sites representing the total volume of sludge to be tested.
Ta prover på avfall och avloppsslam från bearbetning av potatis genom insamling av totalt 1 kg från platser som är representativa för den totala volym slam som skall testas.
Mix each sample well before testing.
Blanda varje prov väl före testning.
Disperse sub-samples of 10 to 25 g of soil or sludge by rotary shaking (250 rpm) in 60 to 150 ml extraction buffer (Appendix 4) for up to two hours.
Dispergera delprover av 10–25 g jord eller slam genom att skaka på en rotationsskak (250 rpm) i 60–150 ml extraktionsbuffert (tillägg 4) under upp till två timmar.
If required, addition of 0,02 % sterile Tween-20 and 10 to 20 g sterile gravel may assist dispersion.
Finfördelningen kan, om detta krävs, underlättas genom tillsats av 0,02 % steril Tween 20 och 10–20 g steriliserat grus.
Maintain the suspension at 4 °C during testing.
Förvara suspensionen vid 4 °C under testningen.
OPTIMISED PROTOCOLS FOR DETECTION AND IDENTIFICATION OF R. SOLANACEARUM
OPTIMERADE PROTOKOLL FÖR ATT UPPTÄCKA OCH IDENTIFIERA R. SOLANACEARUM
DIAGNOSTIC AND DETECTION TESTS
TEST FÖR DIAGNOS OCH UPPTÄCKT
The presence of R. solanacearum in stems of wilting potato, tomato or other host plants can be indicated by the following simple presumptive test: Cut the stem just above the soil level.
Närvaro av R. solanacearum i stjälkar på vissnande potatis, tomat eller andra värdväxter kan påvisas genom följande enkla presumtiva test: Skär av stjälken strax ovan markytan.
Suspend the cut surface in a tube of clean water.
Suspendera den skurna ytan i ett rör med rent vatten.
Observe for characteristic spontaneous streaming of threads of bacterial slime from the cut vascular bundles after a few minutes.
Sök efter karakteristiska spontana strömningar av trådar av bakterieslem som utsöndras från de avskurna kärlknippena efter några minuter.
Prepare a smear of bacterial ooze from infected tissue or from a 48-hour culture on YPGA or SPA medium (Appendix 2) on a microscope slide.
Preparera ett utstryk av bakteriellt sekret från infekterad vävnad eller en 48-timmars kultur på YPGA- eller SPA-medium (tillägg 1) på ett objektglas.
Prepare positive control smears of a biovar 2 strain of R. solanacearum and, if considered useful, a negative control smear of a known PHB negative sp.
Bered som kontroll positiva utstryk av en biovar 2-stam av R. solanacearum och om det anses lämpligt ett negativt kontrollutstryk från en känd PHB-negativ art.
Allow to air dry and pass the lower surface of each slide rapidly above a flame to fix the smears.
Låt torka och för snabbt undersidan av glaset över lågan för att fixera utstryken.
Stain preparation with either Nile Blue or Sudan Black and observe microscopically as described below:
Preparera färgning med antingen Nilblått A eller Sudansvart B och observera i mikroskop enligt beskrivningen nedan:
Nile blue test:
Nilblåttest:
Flood each slide with 1 % aquous solution of Nile Blue A and incubate for 10 minutes at 55 °C.
Dränk in varje objektglas med 1 % vattenlösning av nilblått och inkubera under 10 minuter vid 55 °C.
Drain off the staining solution.
Dränera av färglösningen.
Wash briefly in gently running tap water.
Tvätta snabbt i långsamt rinnande kranvatten.
Remove excess water with tissue paper.
Avlägsna överskottsvatten med läskpapper.
Flood the smear with 8 % aqueous acetic acid and incubate for one minute at ambient temperature.
Dränk in utstryket med 8 % lösning av ättiksyra i vatten, och inkubera i 1 minut vid rumstemperatur.
Re-moisten with a drop of water and apply a coverslip.
Återfukta med en droppe vatten och lägg på ett täckglas.
Examine the stained smear with an epifluorescence microscope at 450 nm under oil immersion at a magnification of 600 to 1000 using an oil- or water-immersion objective.
Undersök det färgade utstryket i epifluorescensmikroskop vid 450 nm under oljeimmersion vid 600–1000 gångers förstoring med ett olje- eller vattenimmersionsobjektiv.
Observe for bright orange fluorescence of PHB granules.
Leta efter ljusorange fluorescens av PHB-korn.
Also observe under transmitted normal light to ensure that the granules are intracellular and that cell morphology is typical of R. solanacearum.
Undersök också provet i genomfallande vanligt ljus för att säkerställa att kornen är intracellulära och att cellmorfologin är typisk för R. solanacearum.
Sudan Black test:
Sudansvarttest:
Flood each slide with 0,3 % Sudan Black B solution in 70 % ethanol and incubate for 10 minutes at ambient temperature.
Dränk in varje objektglas med 0,3 % Sudansvart B-lösning i 70 % etanol och inkubera i 10 minuter vid rumstemperatur.
Drain off the staining solution and wash briefly in tap water, removing excess water with tissue paper.
Dränera av färglösningen och tvätta snabbt i kranvatten, varvid överskottsvatten avlägsnas med läskpapper.
Dip the slides briefly in xylol and blot dry on tissue paper.
Doppa glasen hastigt i xylol och torka med mjukpapper.
Caution: Xylol is harmful, take necessary safety precautions and work in a fume cupboard.
Varning: Xylol är skadligt. Vidta nödvändiga säkerhetsåtgärder och arbeta i ett dragskåp.
Flood the slides with 0,5 % (w/v) aqueous safranin and leave for 10 seconds at ambient temperature.
Dränk in glasen med 0,5 % (w/v) safranin i vatten och lämna i 10 sekunder vid rumstemperatur.
Caution: Safranin is harmful, take necessary safety precautions and work in a fume cupboard.
Varning: Xylol är skadligt. Vidta nödvändiga säkerhetsåtgärder och arbeta i ett dragskåp.
Wash in gently running tap water, blot dry on tissue paper and apply a coverslip.
Tvätta försiktigt i rinnande kranvatten, torka med mjukpapper och lägg på ett täckglas.
Examine stained smears with a light microscope using transmitted light under oil immersion at a magnification of 1000 using an oil-immersion objective.
Undersök de färgade utstryken i ljusmikroskop (genomfallande ljus) under oljeimmersion vid 1000 gångers förstoring med ett oljeimmersionsobjektiv.
Observe for blue-black staining of PHB granules in cells of R. solanacearum with pink-stained cell walls.
Sök efter blåsvart färgning av PHB-korn i celler av R. solanacearum rosafärgade cellväggar.
Agglutination of R. solanacearum cells in bacterial ooze or symptomatic tissue extracts is best observed using validated antibodies (see Appendix 3) labelled with appropriate coloured markers such as red Staphylococcus aureus cells or coloured latex particles.
Agglutinering av R. solanacearum-celler i bakteriellt sekret eller symtomatisk vävnad observeras bäst genom användning av validerade antikroppar (se tillägg 3) försedda med lämpliga färgmärkningar, såsom röda Staphylococcus aureus-celler eller färgade latexpartiklar.
If using a commercially available kit (see Appendix 3), follow the manufacturers instructions.
Om en sats används som är tillgänglig i handeln (se tillägg 3), skall tillverkarens instruktioner följas.
Otherwise perform the following procedure:
Om inte, skall följande förfarande tillämpas:
Mix drops of a suspension of labelled antibody and bacterial ooze (approximately 5 µl each) on windows of multiwell test slides.
Blanda droppar av suspension av märkt antikropp och bakteriellt sekret (ungefär 5 µl var) på fönstren på multispot-objektglas.
Prepare positive and negative controls using suspensions of R. solanacearum biovar 2 and a heterologous strain.
Preparera positiva och negativa kontroller, varvid suspensioner av R. solanacearum biovar 2 och en heterolog stam används.
Observe for agglutination in positive samples after gentle mixing for 15 seconds.
Sök efter agglutination i positiva prover efter försiktig blandning under 15 sekunder.
Note: Before using this method for the first time, perform preliminary tests to ensure reproducible detection of 103 to 104 colony-forming units of R. solanacearum per ml added to extracts from samples which previously tested negative.
Anmärkning: Innan denna metod används för första gången, gör preliminära tester för att möjliggöra reproducerbar upptäckt av 103–104 koloniformande enheter av R. solanacearum per ml som tillsätts till provextrakt som tidigare testats och gett negativt svar.
Use an appropriately validated selective medium such as SMSA (as modified by Elphinstone et al., 1996; see Appendix 2).
Använd ett lämpligt validerat selektivt medium, såsom SMSA (modifierat av Elphinstone et al., 1996.
Care is required to differentiate R. solanacearum from other bacteria able to develop colonies on the medium.
Se tillägg 2). R. solanacearum måste noga skiljas från andra bakterier som kan utveckla kolonier på mediet.
Furthermore, colonies of R. solanacearum may show atypical morphology if plates are overcrowded or antagonistic bacteria are also present.
Kolonier av R. solanacearum kan även uppvisa atypisk morfologi om plattorna är överfulla eller om antagonistiska bakterier även är närvarande.
Where effects of competition or antagonism are suspected, the sample should be re-tested using a different test.
Om inverkan av konkurrens eller antagonism misstänks, bör provet testas igen, varvid ett annat test används.
Highest sensitivity of detection by this method can be expected when using freshly prepared sample extracts.
Denna metod har högsta känslighetsnivå när nyligen preparerade provextrakt testas.
However, the method is also applicable for use with extracts which have been stored under glycerol at –68 to –86 °C.
Metoden är emellertid även tillämplig på extrakt som har lagrats i glycerol vid –68 till –86 °C.
As positive controls, prepare decimal dilutions from a suspension of 106 cfu per ml of a virulent biovar 2 strain of R. solanacearum (e.g. NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857).
Som positiva kontroller preparera decimala utspädningar från en suspension av 106 kolonibildande enheter per ml av R. solanacearum (t.ex. NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857).
To avoid any possibility of contamination, prepare positive controls totally separately from samples to be tested.
För att undvika risk för smitta, preparera positiva kontroller som är fullständigt åtskilda från de prover som skall testas.
For each newly prepared batch of a selective medium its suitability for growth of the pathogen should be tested before it is used to test routine samples.
För varje nyligen preparerat parti av selektivt medium bör dess lämplighet för tillväxt av patogenet testas innan det används för att testa rutinprover.
Perform an appropriate dilution plating technique aiming to ensure that any background saprophytic colony-forming populations are diluted out.
Gör en lämplig plattspridning från spädningsserie för att se till att alla saprofytiska kolonibildande bakgrundspopulationer späds ut.
Spread 50 - 100 µl per plate of sample extract and each dilution.
Utsprid 50–100 µl per platta av provextrakt och för varje utspädning.
Incubate plates at 28 °C.
Inkubera plattorna vid 28 °C.
Read plates after 48 hours and daily thereafter up to six days.
Avläs plattorna efter 48 timmar och därefter dagligen under högst sex dagar.
Typical R. solanacearum colonies on SMSA medium are milky white, flat, irregular and fluidal and after three days incubation develop pink to blood-red coloration in the centre with internal streaking or whorling. (see website http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Typiska kolonier av R. solanacearum på SMSA-medium är mjölkvita, platta, oregelbundna, flödiga kolonier och utvecklar efter tre dagars inkubation rosa till blodröda centra med inre strimmor eller virvlar (se webbplats http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main).
Note: Atypical colonies of R. solanacearum sometimes form on this medium.
Anmärkning: Atypiska kolonier av R. solanacearum bildas ibland på detta medium.
These may be small, round, entirely red in colour and non-fluidal or only partially fluidal and therefore difficult to distinguish from saprophytic colony-forming bacteria.
De kan vara små, runda, helt rödfärgade och icke-flödiga eller partiellt flödiga och därför svåra att urskilja från saprofytiska kolonibildande bakterier.
Purify presumptive R. solanacearum colonies after streaking or dilution plating onto a general nutrient medium to obtain isolated colonies (see Appendix 2).
Rena presumtiva kolonier av R. solanacearum efter utstryk eller plattspridning från spädningsserie på ett vanligt näringsmedium för att erhålla isolerade kolonier (se tillägg 2).
Store cultures short-term in sterile water (pH 6 to 8, chlorine free) at room temperature in the dark, or long term in a suitable cryoprotectant medium at –68 to –86 °C or lyophilised.
Lagra kolonierna under lång tid i sterilt vatten (pH 6–8, klorfritt) i rumstemperatur i mörker, eller under kort tid i lämpligt frysskyddmedel i –68 till –86 °C eller frystorkat.
Identify presumptive cultures (see Section VI.B.) and perform a pathogenicity test (see Section VI.
Identifiera presumtiva kulturer (se avsnitt VI. B) och gör ett patogenitetstest (se avsnitt VI.
Interpretation of selective plating test results
Tolkning av resultaten av odlingen på selektivt medium
The selective plating test is negative if no bacterial colonies are observed after six days or if no presumptive colonies typical of R. solanacearum are found, provided that no inhibition is suspected due to competition or antagonism by other bacteria and that typical R. solanacearum colonies are found in the positive controls.
Odlingen på selektivt medium är negativ om inga bakteriekolonier observeras efter sex dagar eller om inga förmodade kolonier typiska för R. solanacearum påvisas, förutsatt att ingen inhibition misstänks på grund av konkurrens eller antagonism från andra bakterier och att typiska kolonier av R. solanacearum påvisas i de positiva kontrollerna.
The selective plating test is positive if presumptive R. solanacearum colonies are isolated.
Odlingen på selektivt medium är positiv om presumtiva kolonier av R. solanacearum isoleras.
Use a validated enrichment medium such as modified Wilbrink broth (see Appendix 2).
Använd ett validerat anrikningsmedium, såsom modifierad Wilbrink-buljong (se tillägg 2).
This procedure can be used to selectively increase R. solanacearum populations in sample extracts and increase sensitivity of detection.
Detta förfarande kan användas för att selektivt öka populationerna av R. solanacearum i provextrakten och för att öka känsligheten för upptäckt.
The procedure also effectively dilutes inhibitors of the PCR reaction (1:100).
Förfarandet späder dessutom effektivt ut inhibitorer av PCR-reaktion (1:100).
It should be noted, however, that enrichment of R. solanacearum can fail due to competition or antagonism by saprophytic organisms which are often simultaneously enriched.
Det bör emellertid noteras att anrikning av R. solanacearum kan misslyckas på grund av konkurrens eller antagonism från saprofytiska organismer, som ofta anrikas samtidigt.
For this reason, isolation of R.solanacearum from enriched broth cultures may be difficult.
Därför kan isolering av R. solanacearum från anrikningsbuljonger vara svårt.
In addition, since populations of serologically related saprophytes can be increased, the use of specific monoclonal antibodies rather than polyclonal antibodies is recommended where the ELISA test is to be used.
Eftersom populationerna av serologiskt besläktade saprofyter kan förökas, rekommenderas dessutom att specifika monoklonala antikroppar används i stället för polyklonala antikroppar om ELISA-test används.
For enrichment-PCR, transfer 100 µl of sample extract into 10 ml of enrichment broth (Appendix 2) previously aliquoted into DNA-free tubes or flasks.
Vid anriknings-PCR tillsätt 100 µl provextrakt till 10 ml anrikningsbuljong (tillägg 2) som dessförinnan portionerats i DNA-fria rör eller flaskor.
For enrichment-ELISA, higher proportions of sample extract to broth can be used (e.g. 100 µl in 1,0 ml of enrichment broth).
Vid anriknings-ELISA kan en proportionellt större andel provextrakt i förhållande till buljong användas (t.ex. 100 µl i 1,0 ml anrikningsbuljong).
Incubate for 72 hours at 27 to 30 °C in shaking culture or static culture with caps loosely- fitted to permit aeration.
Inkubera under 72 timmar vid 27–30 °C med eller utan skak med locket löst påsatt för luftning.
Mix well before using in ELISA or PCR tests.
Blanda väl före användning i ELISA- eller PCR-test.
Treat enriched broth in an identical manner as the sample(s) in the above tests.
Behandla anrikningsbuljongen på exakt samma sätt som provet (proverna) i ovannämnda test.