natgillin/translations-raw huggingface dataset:
To reduce the frequency of culture maintenance (e.g. when no Myriophyllum tests are planned for a period), cultures can be held under reduced illumination and temperature (50 μE m–2 s–1, 20 ± 2 °C).
Za določitev ECx z ustrezno ravnijo zaupanja morajo preskusne koncentracije oklepati vrednost ECx.
Details of culturing are given in Appendix 3.
Z uporabo več preskusnih koncentracij se bo izboljšal interval zaupanja okoli posledične vrednosti ECx.
At least 14 to 21 days before testing, sufficient test organisms are transferred aseptically into fresh sterile medium and cultured for 14 to 21 days under the conditions of the test as a pre culture.
Za določitev vrednosti LOEC/NOEC (izbirna končna točka) mora biti najmanjša preskusna koncentracija dovolj majhna, da se rast ne razlikuje bistveno od rasti kontrolnih rastlin.
Details for preparation of a pre-culture are given in Appendix 4.
Poleg tega mora biti najvišja preskusna koncentracija dovolj visoka, da je rast bistveno manjša od rasti v kontroli.
Only one nutrient medium is recommended for Myriophyllum spicatum in a sediment-free test system, as described in Appendix 2.
Z uporabo več ponovljenih vzorcev se bo povečala statistična pomembnost koncentracije brez učinka/načrta analize variance.
A modification of the Andrews' medium is recommended for culturing and testing with Myriophyllum spicatum as described in (1).
Kadar preskus za določanje območja delovanja pokaže, da preskusna kemikalija nima škodljivih učinkov pri koncentracijah do 100 mg/l ali do svoje meje topnosti v preskusnem gojišču ali v primeru pripravka do meje razpršljivosti, se lahko izvede mejni preskus, da se omogoči primerjava odzivov v kontrolni skupini in eni tretirani skupini (100 mg/l ali koncentracija, ki je enaka meji topnosti, ali 1000 mg/kg suhe usedline).
From five separately prepared nutrient stock solutions with addition of 3 % sucrose the modified Andrews' medium will be arranged.
Ta preskus je treba izvesti v skladu s splošnimi načeli standardnega preskusa odziva na odmerek, vendar se priporoča, da se najmanjše število ponovljenih vzorcev poveča na šest preskusnih posod na kontrolo in koncentracijo.
Details about preparation of the medium are given in Appendix 2.
Testne raztopine se običajno pripravijo z razredčitvijo osnovne raztopine, ki se pripravi tako, da se preskusna kemikalija raztopi ali razprši v gojišču po Smartu in Barku z demineralizirano (tj. destilirano ali deionizirano) vodo (glej Dodatek 1).
A tenfold concentrated, modified Andrews' medium is needed for obtaining the test solutions (by dilution as appropriate).
Najvišja preskusna koncentracija običajno ne sme preseči topnosti preskusne kemikalije v vodi ali v primeru pripravkov razpršljivosti v preskusnih pogojih.
The composition of this medium is given in Appendix 2.
Za preskusne kemikalije z majhno topnostjo v vodi bo morda treba pripraviti koncentrirano osnovno raztopino ali dispergirati kemikalijo s pomočjo organskega topila ali disperzijskega sredstva, da se omogoči dodajanje točnih količin preskusne kemikalije v preskusno gojišče ter olajšata njeno dispergiranje in raztapljanje.
Test solutions are usually prepared by dilution of a stock solution.
Čim bolj si je treba prizadevati preprečiti uporabo takih topil ali disperzijskih sredstev.
Stock solutions of the test chemical are normally prepared by dissolving the chemical in demineralised (i.e. distilled or deionised) water.
Pogosto uporabljeni topili, ki ne povzročata fitotoksičnosti pri koncentracijah do 100 μl/l, sta na primer aceton in dimetilformamid.
The addition of the nutrients will be achieved by using the tenfold concentrated, modified Andrews' medium.
Če se uporabi topilo ali disperzijsko sredstvo, je treba njegovo končno koncentracijo navesti v poročilu in jo ohranjati na najnižji ravni (≤ 100 μl/l).
The stock solutions of the test chemical can be sterilised by autoclave at 121 °C for 20 minutes or by sterile filtration, provided that the sterilisation technique used does not denaturise the test chemical.
V teh okoliščinah morajo vsa tretiranja in kontrole (s topilom) vsebovati isto koncentracijo topila ali disperzijskega sredstva.
Test solutions can also be prepared in sterile demineralised water or medium, under sterile conditions.
Netretirani kontrolni ponovljeni vzorci, ki ne vsebujejo topila ali disperzijskega sredstva, so prav tako vključeni v načrt preskusa.
The thermo-stability and the adsorption on different surfaces should the taken into account in the selection of the sterilisation procedure of the stock solutions of the test chemical.
Dodatna navodila o uporabi disperzijskih sredstev so na voljo v Smernicah OECD (11).
Because of that, it is recommended that the stock solutions be prepared under sterile conditions, i.e. using sterile material for dissolving the test chemical under sterile conditions (e.g. flame sterilisation, laminar-flow hoods, etc.) into sterile water.
Preskusni postopek se razlikuje glede na način dodajanja preskusne kemikalije (tj. prek vodne faze ali faze usedline).
This technique of preparation of sterile stock solutions is valid for both substances and mixtures.
Upoštevati je treba verjetno obnašanje preskusne kemikalije v sistemu vode in usedline, da se na podlagi teh podatkov izbere režim izpostavljenosti, uporabljen pri preskusu (tj. statični preskus ali statična zamenjava, voda s primešano preskusno snovjo ali usedlina s primešano preskusno snovjo).
The highest tested concentration of the test chemical should normally not exceed its water solubility under the test conditions.
Preskusi z usedlino s primešano preskusno snovjo so v nekaterih primerih najprimernejša možnost za kemikalije, ki naj bi imele znatno porazdelitev v usedlino.
For test chemicals of low water solubility it may be necessary to prepare a concentrated stock solution or dispersion of the chemical using an organic solvent or dispersant in order to facilitate the addition of accurate quantities of the test chemical to the test medium and aid in its dispersion and dissolution.
Faza vzpostavitve
Every effort should be made to avoid the use of such materials.
Zdravi vršički/konci poganjka, tj. brez stranskih poganjkov, se odrežejo od rastlin iz kulture, da je poganjek dolg 6 cm (± 1 cm).
There should be no phytotoxicity resulting from the use of auxiliary solvents or dispersants.
Pri načrtu preskusa A (en poganjek v lončku in trije lončki na posodo) se v vsak lonček posadi en konec poganjka.
For example, commonly used solvents which do not cause phytotoxicity at concentrations up to 100 μl/l, include acetone and dimethylformamide.
Pri načrtu preskusa B (trije poganjki v lončku in en lonček na posodo) se v lonček, ki vsebuje usedlino, posadi pet vršičkov poganjkov.
If a solvent or dispersant is used, its final concentration should be reported and kept to a minimum (≤ 100 μl/l), and all treatments and controls should contain the same concentration of solvent or dispersant.
V obeh primerih je treba rastline posaditi v dodatne lončke, da se lahko na začetku preskusa izberejo enotne rastline ter zagotovijo nadomestne rastline, ki se uporabijo za preverjanje rasti korenin takoj pred tretiranjem, in nadomestne rastline, ki se požanjejo za meritve biomase in dolžine poganjka na dan 0.
Further guidance on the use of dispersants is given in (5).
Poganjki se posadijo tako, da usedlina prekriva vsaj tri centimetre poganjkov, ki zajemajo vsaj dve kolenci.
Test and control groups
Lončki se nato prestavijo v preskusne posode v enakih okoljskih razmerah kot pri fazi izpostavljenosti ter vzdržujejo sedem dni v gojišču po Smartu in Barku, da se inducira razvoj korenin.
Prior knowledge of the toxicity of the test chemical to Myriophyllum spicatum from a range-finding test will help in selecting suitable test concentrations.
Potem je treba več rastlin v nadomestnih lončkih odstraniti, da se preveri rast korenin.
In the definitive toxicity test, there should normally be five (like in the Lemna growth inhibition test, Chapter C.26 of this Annex) to seven test concentrations arranged in a geometric series; they should be chosen in order that the NOEC and EC50 values are bracketed by the concentration range (see below).
Če rast korenin ni vidna (tj. konci korenin niso vidni), je treba fazo vzpostavitve podaljšati za toliko, da je vidna rast korenin.
Preferably the separation factor between test concentrations should not exceed 3,2; however, a larger value may be used where the concentration-response curve is flat.
Priporoča se, da se ta korak izvede za zagotovitev, da rastline aktivno rastejo na začetku preskusa.
Justification should be provided when fewer than five concentrations are used.
Izbira enotnega rastlinskega materiala
At least five replicates should be used at each test concentration.
Pri načrtu preskusa A (en poganjek v lončku in trije lončki na posodo) se pred začetkom preskusa lončki izberejo tako, da se zagotovi enotnost.
In setting the range of test concentrations (for range-finding and/or for the definitive toxicity test), the following should be considered:
Pri načrtu preskusa B (trije poganjki v lončku in en lonček na posodo) se odvečne rastline odstranijo, da ostanejo tri rastline enotne velikosti in videza.
To determine an ECx, test concentrations should bracket the ECx value to ensure an appropriate level of confidence.
Izpostavljenost prek vodne faze
For example, if estimating the EC50, the highest test concentration should be greater than the EC50 value.
Lončki, izbrani zaradi enotnosti, se prestavijo v preskusne posode v skladu z načrtom poskusa.
If the EC50 value lies outside of the range of test concentrations, associated confidence intervals will be large and a proper assessment of the statistical fit of the model may not be possible.
Nato se v preskusne posode doda gojišče po Smartu in Barku.
If the aim is to estimate the LOEC/NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that growth is not significantly less than that of the control.
Pri tem je treba paziti, da se v čim večji meri prepreči dvigovanje usedline.
In addition, the highest test concentration should be high enough so that growth is significantly lower than that in the control.
Za ta namen se lahko gojišče doda z lijem ali pa se usedlina prekrije s plastičnim pokrovom, medtem ko se gojišče doliva v preskusne posode, če se pokrov nato takoj odstrani.
If this is not the case, the test will have to be repeated using a different concentration range (unless the highest concentration is at the limit of solubility or the maximum required limit concentration, e.g. 100 mg/l).
Lončki za rastline se lahko v preskusne posode dodajo tudi potem, ko se doda gojišče.
Every test should include controls consisting of the same nutrient medium, test organism (choosing plant material as homogeneous as possible, fresh lateral branches from pre-cultures, shortened to 2,5 cm from base), environmental conditions and procedures as the test vessels but without the test chemical.
V obeh primerih se lahko na začetku faze izpostavljenosti uporabi sveže gojišče, če je to potrebno, da se čim bolj zmanjša možnost kopičenja alg in bakterij ali da se omogoči priprava ene serije testne raztopine za vse ponovljene vzorce.
If an auxiliary solvent or dispersant is used, an additional control treatment with the solvent/dispersant present at the same concentration as that in the vessels with the test chemical should be included.
Pred dodajanjem gojišča ali po njem se izmeri dolžina poganjka nad usedlino.
If determination of NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Preskusna kemikalija se lahko gojišču doda tudi potem, ko je že bilo dodano v preskusne posode.
However, in any case the number of control replicates should be at least ten.
V tem primeru je treba paziti, da se preskusna kemikalija homogeno porazdeli po celotnem preskusnem sistemu, ne da bi pri se pri tem dvigovala usedlina.
Exposure
V vseh primerih se na začetku preskusa zabeleži videz preskusnega gojišča (npr. prozorno, motno gojišče itd.).
Fresh lateral branches from pre-culture shortened to 2,5 cm from base are assigned randomly to the test vessels under aseptic conditions; each test vessel should contain one 2,5 cm lateral branch that should have an apical meristem on one end.
Izpostavljenost prek usedline
The chosen plant material should be the same quality in each test vessel.
Usedline s primešano preskusno snovjo izbrane koncentracije se pripravijo z dodajanjem raztopine preskusne kemikalije neposredno v svežo usedlino.
A randomised design for location of the test vessels in the incubator is required to minimise the influence of spatial differences in light intensity or temperature.
Osnovna raztopina preskusne kemikalije, raztopljene v deionizirani vodi, se zmeša s formulirano usedlino z valjčnim mlinom, mešalnikom za krmo ali ročno.
A blocked design or random repositioning of the vessels (or repositioning more frequently) when observations are made is also required.
Če je preskusna kemikalija slabo topna v vodi, se lahko raztopi v čim manjši količini ustreznega organskega topila (npr. heksana, acetona ali kloroforma).
If a preliminary stability test shows that the test chemical concentration cannot be maintained (i.e. the measured concentration falls below 80 % of the measured initial concentration) over the test duration (14 days), a semi-static test regime is recommended.
Ta raztopina se nato zmeša s približno 10 g finega kremenovega peska na eno preskusno posodo.
In this case, the plants should be exposed to freshly prepared test and control solutions on at least one occasion during the test (e.g. day 7).
Topilo naj izhlapi in pesek se nato zmeša z ustrezno količino usedline na preskusno čašo.
The frequency of exposure to fresh medium will depend on the stability of the test chemical; a higher frequency may be needed to maintain near-constant concentrations of highly unstable or volatile chemicals.
Za raztapljanje, razpršitev ali emulgiranje preskusne kemikalije se lahko uporabijo samo sredstva, ki hitro izhlapijo.
The exposure scenario through a foliar application (spray) is not covered in this test method.
Ne smemo pozabiti, da je treba pri končni pripravi usedline upoštevati količino/težo peska s primešano preskusno kemikalijo (tj. usedlino je torej treba pripraviti z manj peska).
Warm and/or cool white fluorescent lighting should be used to provide light irradiance in the range of about of 100-150 μE m–2 s–1 when measured as a photosynthetically active radiation (400-700 nm) at points the same distance from the light source as the bottom of the test vessels (equivalent ca. 6000 to 9000 lux) and using a light-dark cycle of 16:8 h.
Paziti je treba, da je preskusna kemikalija, ki se doda usedlini, v njej temeljito in enakomerno razporejena.
The method of light detection and measurement, in particular the type of sensor, will affect the measured value.
Z usedlino s primešano preskusno snovjo se napolnijo lončki (kot je opisano zgoraj).
Spherical sensors (which respond to light from all angles above and below the plane of measurement) and “cosine” sensors (which respond to light from all angles above the plane of measurement) are preferred to unidirectional sensors, and will give higher readings for a multi-point light source of the type described here.
Rastline, izbrane zaradi enotnosti in ustreznega koreninskega sistema, se odstranijo iz lončkov, ki so se uporabljali med fazo vzpostavitve, in presadijo v usedlino s preskusno snovjo, kot je opisano zgoraj.
The temperature in the test vessels should be 23 ± 2 °C.
Lončki se prestavijo v preskusne posode v skladu z načrtom poskusa.
Additional care is needed on pH drift in special cases such as when testing unstable chemicals or metals; the pH should remain in a range of 6-9.
Nato se previdno doda gojišče po Smartu in Barku (tj. z uporabo lijaka), da se prepreči dvigovanje usedline.
See (5) for further guidance.
Pred dodajanjem gojišč ali po njem se izmeri dolžina poganjka nad usedlino.
The test is terminated 14 days after the plants are transferred into the test vessels.
Vzdrževanje nivoja vode med preskusom
Measurements and analytical determinations
Zabeležiti je treba končno količino vode in nivo vode, ki je označen na vsaki preskusni posodi.
At the start of the test, the main shoot length of test organism is 2,5 cm (see paragraph 29); it is measured with a ruler (see Appendix 4) or by photography and image analysis.
Če med preskusom izhlapi več kot 10 % vode, je treba nivo vode uravnati z destilirano vodo.
The main shoot length of test organism appearing normal or abnormal needs to be determined at the beginning of the test, at least once during the 14-day exposure period and at test termination.
Po potrebi se lahko čaše ohlapno prekrijejo s prozornim pokrovom, kot so prozorni plastični pokrovi, da se zmanjšata izhlapevanje in kontaminacija s trosi alg.
Note: As an alternative for those who do not have image analysis, if the workbench is sterilised prior to addition of plants to test vessels, a sterile ruler can also be used to measure the length of the main shoot at test initiation and during the test.
Uporabiti je treba toplo in/ali hladno belo fluorescenčno osvetlitev, da se zagotovi obsevanost s svetlobo v območju približno 140 (± 20) μE m-2 s-1, ko se meri kot fotosintetsko aktivno sevanje (400–700 nm) na vodni površini, in cikel svetlobe in teme v razmerju 16: 8 ur.
Changes in plant development, e.g. in deformation in the shoots, appearance, indication of necrosis, chlorosis, break-up or loss of buoyancy and in root length and appearance, should be noted.
Morebitne razlike v izbrani obsevanosti s svetlobo na preskusnem območju ne smejo biti večje od ± 15 %.
Significant features of the test medium (e.g. presence of undissolved material, growth of algae, fungi and bacteria in the test vessel) should also be noted.
Temperatura preskusnih posod mora biti 20 °C ± 2°C.
In addition to determinations of main shoot length during the test, effects of the test chemical on three (or more) of the following measurement variables should be also assessed:
Vrednost pH kontrolnega gojišča se med preskusom ne sme povečati za več kot 1,5 enote.
Total lateral branches length
Vendar odstopanje za več kot 1,5 enote ne pomeni razveljavitve preskusa, če se lahko dokaže, da so izpolnjena zgoraj navedena merila za veljavnost.
Total shoot length
Trajanje preskusa
Total root length
Obdobje izpostavljenosti traja 14 dni.
Fresh weight
Po fazi vzpostavitve in takoj pred tretiranjem (tj. na dan 0) se požanjejo nadomestne rastline iz petih naključno izbranih lončkov za načrt s tremi rastlinami v lončku ali petnajstih lončkov za načrt z eno rastlino v lončku za oceno dolžine, sveže teže in suhe teže poganjka, kot je opisano v nadaljevanju.
Dry weight
Pri rastlinah, prenesenih v fazo izpostavljenosti, je treba opraviti naslednje ocene, kot je prikazano v preglednici 1:
Number of whorls
ocene dolžine glavnega poganjka, števila stranskih poganjkov in dolžine stranskih poganjkov se zabeležijo vsaj na koncu obdobja izpostavljenosti (npr. na dan 14);
Note 1:
vizualne ocene zdravja rastlin se zabeležijo vsaj trikrat med obdobjem izpostavljenosti (npr. na dneve 0, 7 in 14);
The observations made during the range-finding test could help in selecting relevant additional measurements among the six variables listed above.
ocene sveže teže in suhe teže poganjka se opravijo na koncu preskusa (tj. na dan 14).
Note 2:
Dolžina poganjka se izmeri z ravnilom.
The determination of the fresh and dry weights (parameters iv and v) is highly desirable.
Če obstajajo stranski poganjki, jih je treba prešteti in izmeriti tudi njihovo dolžino.
Note 3:
Vizualne ocene zdravja rastlin je treba opraviti tako, da se zabeleži videz rastlin in splošno stanje preskusnega gojišča.
Due to the fact that sucrose and light (exposure of roots to light during the test) may have an influence on auxin (plant growth hormone) transport carriers, and that some chemicals may have an auxin-type mode of action, the inclusion of root endpoints (parameter iii) is questionable.
Zabeležiti je treba med drugim naslednja opažanja:
Note 4:
nekrozo, klorozo ali drugo razbarvanje, kot je prekomerna pordečitev glede na kontrolne rastline;
The ring test results show high coefficients of variation (> 60 %) for the total lateral branch length (parameter i).
razvoj bakterijskih okužb ali kontaminacijo z algami;
Total lateral branch length is in any case encompassed within the total shoot length measurement (parameter ii) which shows more acceptable coefficients of variation of < 30 %.
anomalije pri rasti, kot so pritlikavost, spremenjena dolžina med kolenci, deformirani poganjki/listi, proliferacija stranskih poganjkov, odpadanje listov, upad pritiska celične vsebine na celične stene in fragmentacija stebla;
Note 5:
vizualna ocena zdravja korenin se opravi na koncu preskusa, tako da se usedlina previdno spere s korenin in s tem omogoči opazovanje koreninskega sistema.
Resulting from the above considerations, the recommended main measurement endpoints are: total shoot length, fresh weight and dry weight (parameters ii, iv and v); parameter vi — number of whorls — is left to the experimenter's judgment.
Predlagana lestvica za oceno glede na kontrolne rastline je prikazana v nadaljevanju:
Main shoot length and number of whorls have an advantage, in that they can be determined for each test and control vessel at the start, during, and at the end of the test by photography and image analysis, although a (sterile) ruler can also be used.
odsotnost korenin,
Total lateral branches length, total root length (as a sum of all lateral branches or roots) and total shoot length (as a sum of main shoot length and total lateral branches length) can be measured with a ruler at the end of exposure.
nekaj korenin,
The fresh and/or dry weight should be determined at the start of the test from a sample of the pre-culture representative of what is used to begin the test, and at the end of the test with the plant material from each test and control vessel.
zmeren razvoj korenin,
Total lateral branches length, total shoot length, total root length, fresh weight, dry weight and number of whorls may be determined as follows:
zelo dober razvoj korenin, podoben kontrolam.
The lateral branch length may be determined by measuring all lateral branches with a ruler at the end of exposure.
Ocene sveže teže se opravijo na začetku in na koncu preskusa, tako da se poganjek odreže na ravni usedline, nato pa se pred tehtanjem z njega popivna voda do suhega.
The total lateral branches length is the sum of all lateral branches of each test and control vessel.
Paziti je treba, da se odstranijo delci usedline, ki se lahko prilepijo na dno poganjka.
The main shoot length may be determined by image analysis or using a ruler.
Material poganjka se nato postavi v sušilnik s temperaturo približno 60 °C in suši do konstantne teže, preden se ponovno stehta in zabeleži suha teža.
The total shoot length is the sum of the total lateral branches length and the main shoot length of each test and control vessel at the end of exposure.
V preglednici 1 so povzete minimalne biološke ocene, ki jih je treba opraviti med trajanjem preskusa.
The root length may be determined by measuring all roots with a ruler at the end of exposure.
Časovni načrt ocenjevanja
The total root length is the sum of all roots of each test and control vessel.
O pomeni, da je ob tem času potrebno ocenjevanje.
The fresh weight may be determined by weighing the test organisms at the end of exposure.
pomeni, da meritve niso potrebne.
All plant material of each test and control vessel will be rinsed with distilled water, dabbed dry with cellulose paper.
Dan po
After this preparation the fresh weight will be determined by weighing.
tretiranju
The starting biomass (fresh weight) is determined on the basis of a sample of test organisms taken from the same batch used to inoculate the test vessels.
dolžina poganjka, dolžina in število stranskih poganjkov
After the preparations for the determination of the fresh weight the test organisms will be dried at 60 °C to a constant weight.
vizualna ocena poganjkov
This mass is the dry weight.
sveža in suha teža poganjka,