natgillin/translations-raw huggingface dataset:
eggs per conc./ control
Druga možnost je, da se simulira izpostavljenost prek usedline tako, da se umetni usedlini primeša preskusna kemikalija, rastline pa se presadijo v to usedlino s primešano preskusno snovjo.
Spawning unit
V obeh primerih se rastline nato 14 dni vzdržujejo v nadzorovanih okoljskih razmerah.
ATLAS OF LETHAL ENDPOINTS FOR THE ZEBRAFISH EMBRYO ACUTE TOXICITY TEST
Učinki na rast se ugotovijo na podlagi kvantitativnih ocen dolžine poganjka, sveže teže in suhe teže ter kvalitativnih opažanj simptomov, kot so kloroza, nekroza ali deformacije pri rasti.
The following apical endpoints indicate acute toxicity and, consequently, death of the embryos: coagulation of the embryo, non-detachment of the tail, lack of somite formation and lack of heartbeat.
Učinki, odvisni od kemikalije, se kvantificirajo tako, da se rast v testnih raztopinah primerja z rastjo kontrolnih rastlin, nato pa se določi koncentracija, ki povzroča navedeno x-odstotno zaviranje rasti, in izrazi kot ECx, pri čemer je lahko „x“ katera koli vrednost, kar je odvisno od regulativnih zahtev, npr. EC10, EC20 in EC50.
The following micrographs have been selected to illustrate these endpoints.
Določiti je treba tako povprečno specifično hitrost rasti (ocenjeno na podlagi ocen dolžine, sveže teže in suhe teže poganjka) kot prirast (ocenjen na podlagi povečanja dolžine, sveže teže in suhe teže poganjka) netretiranih in tretiranih rastlin.
Coagulation of the embryo:
Po potrebi se lahko na podlagi ocen povprečne specifične hitrosti rasti in prirasta določita najnižja koncentracija z opaženim učinkom (LOEC) in koncentracija brez opaznega učinka (NOEC).
Under bright field illumination, coagulated zebrafish embryos show a variety of intransparent inclusions.
Na voljo mora biti analitska metoda z zadostno občutljivostjo za kvantifikacijo kemikalij v preskusnem gojišču.
Figure 2
Informacije o preskusni kemikaliji, ki so lahko koristne za določitev preskusnih pogojev, so med drugim strukturna formula, sestava v primeru snovi z več sestavinami, UVCB, zmesi ali pripravkov, čistost, topnost v vodi, obstojnost v vodi in na svetlobi, disociacijska konstanta kisline (pKa), porazdelitveni koeficient n-oktanol/voda (Kow), Kd v usedlino, parni tlak in biološka razgradljivost.
Lack of somite formation:
Topnost v vodi in parni tlak se lahko uporabita za izračun Henryjeve konstante, ki pokaže, ali so med preskusnim obdobjem verjetne znatne izgube preskusne kemikalije.
Although retarded in development by approx.
Če so verjetne izgube preskusnih kemikalij, jih je treba kvantificirati in dokumentirati nadaljnje ukrepe za nadzorovanje takih izgub.
10 hrs, the 24 hrs old zebrafish embryo in (a) shows well-developed somites (→), whereas the embryo in (b) does not show any sign of somite formation (→).
Če so informacije o topnosti in obstojnosti preskusnih kemikalij nejasne, se priporoča, da se te lastnosti ocenijo v pogojih preskusa, tj. v gojišču, pri temperaturi in režimu osvetlitve, ki se bodo uporabili v preskusu.
Although showing a pronounced yolk sac oedema (*), the 48 hrs old zebrafish embryo in (c) shows distinct formation of somites (→), whereas the 96 hrs old zebrafish embryo depicted in (d) does not show any sign of somite formation (→).
Opomba: če se preskušajo herbicidi, ki peroksidirajo in so odvisni od svetlobe, mora uporabljena laboratorijska razsvetljava zagotavljati enako raven sončne ultravijolične svetlobe kot naravna sončna svetloba.
Note also the spinal curvature (scoliosis) and the pericardial oedema (*) in the embryo shown in (d).
V preskusnem gojišču je treba meriti vrednost pH in jo po potrebi prilagoditi.
Bud in lateral view (a: →; 96 hrs old zebrafish embryo).
Nadzorovanje vrednosti pH preskusnega gojišča je še posebej pomembno na primer pri preskušanju kovin ali kemikalij, ki so hidrolitično neobstojne.
Note also the lack of the eye bud (*).
Dodatna navodila za preskušanje kemikalij s fizikalno-kemijskimi lastnostmi, ki otežujejo njihovo preskušanje, so na voljo v Smernicah OECD (11).
Figure 4
Za veljavnost rezultatov preskusa se morata povprečna skupna dolžina poganjka in povprečna skupna sveža teža poganjka pri kontrolnih rastlinah med fazo izpostavljenosti preskusa vsaj podvojiti.
Lack of heartbeat is, by definition, difficult to illustrate in a micrograph.
Poleg tega kontrolne rastline ne smejo kazati nobenih vidnih simptomov kloroze in zanje se lahko s prostim očesom oceni, da niso kontaminirane z drugimi organizmi, kot so sloji alg in/ali bakterij na rastlinah, na površini usedline in v preskusnem gojišču.
Lack of heartbeat is indicated by non-convulsion of the heart (double arrow).
Povprečni koeficient variacije za prirast, ki temelji na meritvah sveže teže poganjka (tj. od začetka do konca preskusa), v kontrolnih kulturah ni večji od 35 % med ponovljenimi vzorci.
Immobility of blood cells in, e.g. the aorta abdominalis (→ in insert) is not an indicator for lack of heartbeat.
Referenčne kemikalije, kot je na primer 3,5-diklorofenol, uporabljen pri krožnem testu (9), je treba redno preskušati, da se preveri učinkovitost preskusa v daljšem obdobju.
Note also the lack of somite formation in this embryo (*, homogenous rather than segmental appearance of muscular tissues).
Podatki krožnega testa kažejo, da so bila aritmetična povprečja vrednosti EC50 3,5-diklorofenola za različne spremenljivke odziva med 4,7 mg/l in 6,1 mg/l (za podrobne podatke o pričakovanem intervalu zaupanja za navedene vrednosti glej poročilo o krožnem testu).
The observation time to record an absence of heartbeat should be at least of one minute with a minimum magnification of 80×.
Priporočljivo je, da se referenčna kemikalija preskusi najmanj dvakrat letno oziroma skupaj z dokončnimi preskusi toksičnosti, kadar se preskušanja izvajajo redkeje.
C.50 Sediment-free Myriophyllum spicatum toxicity test
Navodila o pričakovanih vrednostih EC50 za 3,5-diklorofenol vsebuje statistično poročilo o mednarodnem krožnem testu (9).
This test method is equivalent to OECD test guideline 238 (2014).
Preskusna oprema
It is designed to assess the toxicity of chemicals to Myriophyllum spicatum, a submersed aquatic dicotyledon, a species of the water milfoils family.
Preskus je treba izvesti v nadzorovanih okoljskih razmerah, tj. v rastni komori, prostoru za rast ali laboratoriju, v katerem se lahko nadzorujejo dolžina dneva, svetloba in temperatura (glej odstavke od 56 do 58 v oddelku „Preskusni pogoji“).
It is based on an ASTM existing test method (1) modified as a sediment-free test system (2) to estimate the intrinsic ecotoxicity of test chemicals (independent of the distribution-behaviour of the test chemical between water and sediment).
Založne kulture je treba vzdrževati ločeno od preskusnih posod.
A test system without sediment has a low analytical complexity (only in the water phase) and the results can be analysed in parallel and/or comparison with those obtained in Lemna sp. test (3); in addition, the required sterile conditions allow to keep the effects of microorganisms and algae (chemical uptake/ degradation, etc.) as low as possible.
Za študijo je treba uporabiti steklene preskusne posode, kot so akvariji ali čaše, običajno pa se uporabljajo dvolitrske steklene čaše (z višino približno 24 cm in premerom 11 cm).
This test does not replace other aquatic toxicity tests; it should rather complement them so that a more complete aquatic plant hazard and risk assessment is possible.
Vendar so lahko primerne tudi druge (tj. večje) posode, če omogočajo, da je vodna gladina dovolj visoko za neomejeno rast in da so rastline med celotnim trajanjem preskusa potopljene.
The test method has been validated by a ring-test (4).
Plastični ali stekleni lončki za rastline (s premerom približno 9 cm, višino 8 cm in prostornino 500 ml) se lahko uporabijo kot posode za sajenje rastlin v usedlino.
Details of testing with renewal (semi-static) and without renewal (static) of the test solution are described.
Lahko se uporabijo tudi steklene čase in so v nekaterih primerih najprimernejša možnost (npr. preskušanje hidrofobnih kemikalij ali kemikalij z visokim Kow).
Depending on the objectives of the test and the regulatory requirements, the use of semi-static method is recommended, e.g. for substances that are rapidly lost from solution as a result of volatilisation, adsorption, photodegradation, hydrolysis, precipitation or biodegradation.
Premisliti je treba o izbiri lončka/čaše in preskusnih posod ter najprimernejšem načrtu preskusa (glej v nadaljevanju).
Further guidance is given in (5).
Če se uporabi načrt preskusa A (en poganjek v lončku s tremi lončki na posodo), bodo potrebni manjši lončki ali večje posode.
This test method applies to substances, for which the test method has been validated, (see details in the ring-test report (4)) or to formulations, or known mixtures; if a mixture is tested, its constituents should be as far as possible identified and quantified.
Če se uporabi načrt preskusa B (trije poganjki v lončku in en lonček na posodo), morata biti navedeni lonček in posoda ustrezne velikosti.
The sediment-free Myriophyllum spicatum test method complements the water-sediment Myriophyllum spicatum Toxicity Test (6).
V vseh primerih mora biti vodna gladina 12 cm nad vrhom usedline, razmerje med površino/prostornino usedline in površino/prostornino vode pa je treba zabeležiti.
Before use of the test method for the testing of a mixture intended for a regulatory purpose, it should be considered whether, and if so why, it may provide adequate results for that purpose.
Splošni pristopi, opisani v tej preskusni metodi, se lahko uporabljajo za preskušanje številnih vrst vodnih rastlin.
Continuously growing plant cultures of Myriophyllum spicatum (only in modified Andrews' medium, see Appendix 2) are allowed to grow as monocultures in different concentrations of the test chemical over a period of 14 days in a sediment-free test system.
Vendar so pogoji, opisani v tej preskusni metodi, prilagojeni za preskušanje rmanca vrste Myriophyllum spicatum.
The objective of the test is to quantify chemical-related effects on vegetative growth over this period based on assessments of selected measurement variables.
Ta vrsta spada v družino dvokaličnic Haloragaceae.
Growth of shoot length, of lateral branches and roots as well as development of fresh and dry weight and increase of whorls are the measurement variables.
Klasasti rmanec (Myriophyllum spicatum) je potopljena, ukoreninjena vrsta, ki lahko raste v številnih pogojih in tako v statičnih kot tekočih vodnih telesih.
In addition, account is taken of distinctive qualitative changes in test organisms, such as disfigurement or chlorosis and necrosis indicated by yellowing or white and brown colouring.
Klasasti rmanec (Myriophyllum spicatum) je trajnica, ki med zimo odmre do korenin.
To quantify chemical-related effects, growth in the test solutions is compared with that of the controls and the concentration bringing about a specified x % inhibition of growth is determined and expressed as the ECx; “x” can be any value depending on the regulatory requirements, e.g. EC10, EC20, EC50.
Rastline običajno cvetijo in se prosto osemenijo, čeprav je vegetativno razmnoževanje iz pomožnih zarodnih brstičev ali delov stebla, ki se ločijo naravno ali po motnji, pogosto glavna metoda kolonizacije.
It should be noted that estimates of EC10 and EC20 values are only reliable and appropriate in tests where coefficients of variation in control plants fall below the effect level being estimated, i.e. coefficients of variation should be < 20 % for robust estimation of an EC20.
Gojenje preskusnega organizma
Both average specific growth rate (estimated from assessments of main shoot length and three additional measurement variables) and yield (estimated from the increase in main shoot length and three additional measurement variables) of untreated and treated plants should be determined.
Rastline se lahko pridobijo iz naravnih populacij ali prek dobaviteljev vodnih rastlin.
Specific growth rate (r) and yield (y) are subsequently used to determine the ErCx (e.g. ErC10, ErC20, ErC50) and EyCx (e.g. EyC10, EyC20, EyC50), respectively.
V obeh primerih je treba dokumentirati vir rastlin in preveriti identiteto vrste.
In addition, the lowest observed effect concentration (LOEC) and the no observed effect concentration (NOEC) may be statistically determined.
V primeru dvoma se priporoča, da se uporabijo preverjene laboratorijske kulture iz znanih virov.
An analytical method, with adequate sensitivity for quantification of the test chemical in the test medium, should be available.
Rastline, ki so bile izpostavljene kakršnim koli kemičnim onesnaževalcem ali so bile zbrane na mestih, za katera je znano, da so kontaminirana, se pri tem preskusu ne smejo uporabiti.
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes the structural formula, purity and impurities, water solubility, stability in water and light, acid dissociation constant (pKa), partition coefficient octanol-water (Kow), vapour pressure and biodegradability.
Na območjih, na katerih klasasti rmanec (Myriophyllum spicatum) ni zlahka dostopen v zimskih mesecih, je treba založne kulture dolgoročno vzdrževati v rastlinjaku ali v laboratorijskih pogojih.
Water solubility and vapour pressure can be used to calculate Henry's Law constant, which will indicate if significant losses of the test chemical during the test period are likely.
Založne kulture je treba vzdrževati v pogojih, ki so podobni preskusnim pogojem, čeprav sta lahko obsevanost in temperatura nižja, da se zmanjša pogostost vzdrževanja kulture (npr. kadar se za določeno obdobje ne načrtujejo preskusi z vrsto Myriophyllum).
This will help indicate whether particular steps to control such losses should be taken.
Priporočljivo je, da se uporabijo večji akvariji in lončki za rastline, kot bi se uporabili pri preskusih, da je dovolj prostora za proliferacijo.
Where information on the solubility and stability of the test chemical are uncertain, it is recommended that these be assessed under the conditions of the test, i.e. growth medium, temperature, lighting regime to be used in the test.
Sestava gojišča iz usedline in vode mora biti enaka sestavi, ki se uporablja za preskuse, čeprav se lahko uporabijo alternativne metode za gnojenje usedline (npr. uporaba komercialnih pripravkov gnojil s počasnim sproščanjem).
The pH control of the test medium is particularly important, e.g. when testing metals or substances which are hydrolytically unstable.
Pri rastlinah za založno kulturo se lahko s prostim očesom oceni, da niso kontaminirane z drugimi organizmi, vključno s polži, nitastimi algami, glivami in žuželkami, npr. z jajčeci ali ličinkami dristavčeve vešče Paraponyx stratiotata in ličinkami ali odraslimi rmancevimi vodnimi bičkarji Eubrychius velutus.
Further guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to test is provided in a OECD Guidance Document (5).
Da se odpravi vidna kontaminacija, je treba rastlinski material sprati v sladki vodi.
For the test to be valid, the doubling time of main shoot length in the control must be less than 14 days.
Poleg tega si je treba prizadevati čim bolj zmanjšati razvoj enoceličnih alg in bakterijskih okužb, čeprav ni nujno, da je rastlinski material popolnoma sterilen.
Using the media and test conditions described in this test method, this criterion can be attained using a static or semi-static test regime.
Založne kulture je treba spremljati in po potrebi presaditi, da se preprečijo kontaminacija z algami in bakterijske okužbe.
The mean coefficient of variation for yield based on measurements of shoot fresh weight (i.e. from test initiation to test termination) and the additional measurement variables (see paragraph 37) in the control cultures do not exceed 35 % between replicates.
Če kontaminacija z algami ali bakterijske okužbe postanejo težava, lahko pomaga prezračevanje založnih kultur.
More than 50 % of the replicates of the control group are kept sterile over the exposure period of 14 days, which means visibly free of contamination by other organisms such as algae, fungi and bacteria (clear solution).
V vseh primerih se rastline ustrezno obdobje (tj. več kot dva tedna) pred uporabo v preskusu gojijo/aklimatizirajo v pogojih, ki so podobni pogojem, ki se uporabljajo pri preskusu, vendar ni nujno, da so enaki.
Note: Guidance on how to assess sterility is provided in the ring-test report (4).
Cvetoče založne kulture se v preskusu ne smejo uporabiti, saj se hitrost vegetativne rasti med cvetenjem in po njem običajno zmanjša.
REFERENCE CHEMICAL
Usedlina
Reference chemical(s), such as 3,5-dichlorophenol used in the ring test (4), may be tested as a mean of checking the test procedure; from the ring test data, the mean EC50-values of 3,5-DCP for the different response variables (see paragraphs 37-41 of this test method) are between 3,2 mg/l and 6,9 mg/l (see ring test report for details about confidence interval for these values).
Za uporabo v tem preskusu se priporoča uporaba naslednje formulirane usedline, ki temelji na umetni usedlini, uporabljeni v poglavju C.28 te priloge (8).
It is advisable to test a reference chemical at least twice a year or, where testing is carried out at a lower frequency, in parallel to the determination of the toxicity of a test chemical.
Usedlina se pripravi, kot je opisano v TM C.28, razen dodatka hranilnih snovi, ki se pripravi, kot je opisano v nadaljevanju:
All equipment in contact with the test media should be made of glass or other chemically inert material.
4–5 % šote (suha teža v skladu z 2 % ± 0,5 % organskega ogljika) čim bližje vrednosti pH od 5,5 do 6,0, pomembno pa je, da se uporabi fino mleta šota v prahu (delci naj bodo po možnosti manjši od 1 mm), ki je sušena le na zraku;
Glassware used for culturing and testing purposes should be cleaned of chemical contaminants that might leach into the test medium and should be sterile.
20 % (suhe teže) kaolinske gline (vsebnost kaolinita naj bo po možnosti večja od 30 %);
The test vessels should be long enough for the shoot in the control vessels to grow in the water phase without reaching the surface of the test medium at the end of the test.
75–76 % (suhe teže) kremenovega peska (prevladovati mora fini pesek, pri katerem je več kot 50 % delcev velikih od 50 μm do 200 μm);
Thick-walled borosilicate glass test tubes without lip, inner diameter approximately 20 mm, length approximately 250 mm, with aluminium caps are recommended.
doda se vodno hranilno gojišče, tako da končna serija usedline vsebuje 200 mg/kg suhe usedline amonijevega klorida in natrijevega fosfata, odstotek vlage v končni zmesi pa znaša od 30 % do 50 %;
Since the modified Andrews' medium contains sucrose (which stimulates the growth of fungi and bacteria), the test solutions have to be prepared under sterile conditions.
doda se kemijsko čist kalcijev karbonat (CaCO3), da se vrednost pH v končni zmesi usedline uravna na 7,0 ± 0,5.
All liquids as well as equipment are sterilised before use.
Vir šote, kaolinske gline in peska mora biti znan in dokumentiran.
Sterilisation is carried out via heated air treatment (210 °C) for 4 hours or autoclaving for 20 minutes at 121 °C.
Če je izvor neznan ali je lahko razlog za skrb, je treba preveriti, da v zadevnih sestavinah ni kemičnih onesnaževal (npr. težkih kovin, organoklornih spojin in organofosfornih spojin).
In addition, all flasks, dishes, bowls etc. and other equipment undergo flame treatment at a sterile workbench just prior to use.
Suhe sestavine usedline je treba homogeno premešati, preden se v usedlino v celoti vmeša vodna hranilna raztopina.
The cultures and test vessels should not be kept together.
Vlažno usedlino je treba pripraviti vsaj dva dni pred uporabo, da se šota v celoti namoči in da hidrofobni delci šote ne priplavajo na površje, ko je usedlina prekrita z gojiščem, pred uporabo pa se lahko vlažna usedlina hrani v temi.
This is best achieved using separate environmental growth chambers, incubators, or rooms.
Za preskus se usedlina premesti v posode ustrezne velikosti, kot so lončki za rože takega premera, da se lahko postavijo v steklene posode (površina usedline mora prekrivati približno 70 % ali več površine posode).
Illumination and temperature should be controllable and maintained at a constant level.
Če ima posoda na dnu luknje, bo kos filtrirnega papirja na dnu posode pomagal, da usedlina ne bo uhajala iz posode.
Test organism
Lončki se napolnijo z usedlino tako, da je površina usedline ravna, nato pa se prekrijejo s tanko plastjo (~ 2 mm do 3 mm) inertnega materiala, kot je na primer pesek ali fini vrtnarski pesek (ali koralni pesek), da usedlina ne uhaja.
Myriophyllum spicatum — a submersed aquatic dicotyledon — is a species of the water milfoils family.
Za gojenje in preskušanje klasastega rmanca (Myriophyllum spicatum) se priporoča gojišče po Smartu in Barku (12).
Between June and August, inconspicuous pink-white flowers protrude above the water surface.
Priprava tega gojišča je opisana v Dodatku 1.
The plants are rooted in the ground by a system of robust rhizomes and can be found in the entire northern hemisphere in eutrophic, however non-polluted and more calciferous still waters with muddy substrate.
Vrednost pH gojišča (vodna faza) na začetku preskusa mora biti med 7,5 in 8,0, da se zagotovi optimalna rast rastlin.
Myriophyllum spicatum prefers fresh water, but is found in brackish water as well.
Načrt poskusa
For the sediment-free toxicity test, sterile plants are required.
Preskus mora vključevati najmanj šest preskusnih posod s ponovljenimi vzorci za netretirano kontrolo in najmanj štiri preskusne posode s ponovljenimi vzorci za vsako od najmanj petih ravni koncentracije.
If the testing laboratory does not have regular cultures of Myriophyllum spicatum, sterile plant material may be obtained from another laboratory or (unsterile) plant material might be taken from the field or provided by a commercial supplier; if plants come from the field a taxonomic verification of the species should be envisaged.
Vsaka preskusna posoda je ponovljeni vzorec, ki vsebuje tri poganjke.
If collected from the field or provided by a commercial supplier, plants should be sterilised (1) and maintained in culture in the same medium as used for testing for a minimum of eight weeks prior to use.
Obstajata dve možnosti za gojenje treh poganjkov v vsaki preskusni posodi:
Field sites used for collecting starting cultures have to be free of obvious sources of contamination.
Načrt preskusa A: en poganjek v lončku in trije lončki na posodo.
Great care should be taken to ensure that the correct species is obtained when collecting Myriophyllum spicatum from the field, especially in regions where it can hybridise with other Myriophyllum species.
Načrt preskusa B: trije poganjki v lončku in en lonček na posodo.
If obtained from another laboratory they should be similarly maintained for a minimum of three weeks.
Alternativni načrti preskusa z enim poganjkom v enem lončku na preskusno posodo so sprejemljivi, če se ponovljeni vzorec prilagodi, kot je potrebno za izpolnjevanje zahtevanih meril za veljavnost.
The source of plant material and the species used for testing should always be reported.
Posamezne preskusne posode morajo biti naključno dodeljene tretiranim skupinam.
The quality and uniformity of the plants used for the test will have a significant influence on the outcome of the test and should therefore be selected with care.
Na preskusnem območju je treba preskusne posode razporediti naključno, da se zmanjša vpliv prostorskih razlik v obsevanosti in temperaturi.
Young, rapidly growing plants without visible lesions or discoloration (chlorosis) should be used.
Koncentracije preskusne kemikalije in kontrolne skupine
Details about preparation of the test organism are given in Appendix 4.
Koncentracije morajo biti običajno razporejene v geometrijske serije, faktor separacije med preskusnimi koncentracijami pa ne sme biti večji od 3,2.
Cultivation
Pri izbiri primernih preskusnih koncentracij je v pomoč predhodno poznavanje toksičnosti preskusne kemikalije na podlagi podatkov iz preskusa za določanje območja delovanja.