natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Mortality or other adverse effects/disease in both control and test group fish should be ≤ 10 % at the end of the test; if the test is extended for any reason, adverse effects in both groups are ≤ 5 % per month, and ≤ 30 % cumulatively.
Če pa to ni mogoče, se lahko uporabiti enak pristop, kot je opisan pri metodi vodne izpostavljenosti (glej odstavek 56 za te druge možnosti merjenja lipidov).
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier, different fish species, significant change of fish size, fish food or spiking method, etc.) have been made, it is advisable that a technical proficiency study is conducted, using a reference substance.
Metodo, ki se uporabi za količinsko opredelitev vsebnosti lipidov, je treba opisati v poročilu.
The reference substance is primarily used to establish whether the food spiking technique is adequate to ensure maximum homogeneity and bioavailability of test substances.
Kakovost analitske metode
One example that has been used in the case of non-polar hydrophobic substances is hexachlorobenzene (HCB), but other substances with existing reliable data on uptake and biomagnification should be considered due to the hazardous property of HCB [47].
Izvesti je treba preverjanja s preskušanjem, da se zagotovi specifičnost, točnost, natančnost in obnovljivost analitske tehnike, značilne za snov, ter izkoristke preskusne snovi iz hrane in rib.
If used, basic information on the reference substance should be presented in the test report, including name, purity, CAS number, structure, toxicity data (if available) as for test substances (cf. paragraphs 3 and 22).
Na začetku preskusa je treba stehtati vzorec rib iz populacije staleža (in izmeriti njihovo skupno dolžino).
DESCRIPTION OF THE METHOD
Te ribe je treba vzorčiti malo prvim hranjenjem s hrano z dodatkom (npr. eno uro) in jih dodeliti preskusnemu dnevu 0.
Materials and apparatus should be used as described in the aqueous exposure method (cf. paragraph 26).
Število rib za ta vzorec mora biti vsaj enako kot za vzorce med preskusom.
A flow-through or static renewal test system that provides a sufficient volume of dilution water to the test tanks should be used.
Nekatere od teh rib so lahko iste kot te, ki so uporabljene za analizo lipidov pred začetkom faze absorpcije (prim. odstavek 153).
The flow rates should be recorded.
Ob vsakem intervalu vzorčenja se ribe najprej stehtajo in izmeri se njihova dolžina.
Test water should be used as described in the aqueous exposure method (cf. paragraphs 27-29).
Za vsako posamezno ribo je treba izmerjeno težo (in dolžino) povezati z analizirano koncentracijo kemikalije (in vsebnostjo lipidov, kadar je to ustrezno), na primer z uporabo edinstvene identifikacijske kode za vsako vzorčeno ribo.
The test medium should be characterised as described and its quality should remain constant during the test.
Meritve teh vzorčenih rib se lahko uporabijo za oceno teže (in dolžine) preostalih rib v preskusnem in kontrolnem bazenu.
The natural particle content and total organic carbon should be as low as possible (≤ 5 mg/l particulate matter; ≤ 2 mg/l total organic carbon) before test start.
Preskusno vrednotenje
TOC need only be measured before the test as part of the test water characterisation (cf. paragraph 53).
Vsak dan je treba izvesti in zabeležiti opazovanja v zvezi s smrtnostjo.
Diet
Izvesti in zabeležiti je treba dodatna opazovanja za neželene učinke, na primer nenavadno vedenje ali pigmentacijo.
A commercially available fish food (floating and/or slow sinking pelletised diet) that is characterised in terms of at least protein and fat content is recommended.
Ribe se obravnavajo kot mrtve, če ni dihalnega gibanja in ni mogoče zaznati odziva na rahli mehanski dražljaj.
The food should have a uniform pellet size to increase the efficiency of the feed exposure, i.e. the fish will eat more of the food instead of eating the larger pieces and missing the smaller ones.
Vse mrtve ali jasno umirajoče ribe je treba odstraniti.
The pellets should be appropriately sized for the size of the fish at the start of the test (e.g. pellet diameters roughly 0,6-0,85 mm for fish between 3 and 7 cm total length, and 0,85-1,2 mm for fish between 6 and 12 cm total length may be used).
Rezultati preskusa se uporabijo za izpeljavo konstante hitrosti očiščenja (k2) kot funkcije skupne mokre teže rib.
Pellet size may be adjusted depending on fish growth at the start of the depuration phase.
Izračuna se konstanta hitrosti rasti, kg, ki temelji na povprečnem povečanju teže rib, in uporabi za izračun konstante hitrosti očiščenja, popravljene glede na rast, k2g, kadar je to ustrezno.
An example of a suitable food composition, as commercially supplied, is given in Appendix 7.
Poleg učinkovitosti asimilacije (a; absorpcija v črevesju), je treba v poročilu navesti kinetični biomagnifikacijski faktor (BMFK) (ki je po potrebi popravljen glede na rast, BMFKg), njegovo vrednost, popravljeno glede na lipide (BMFKL ali BMFKgL, če je popravljen glede na razredčitev zaradi rasti), in stopnjo hranjenja.
Test diets with total lipid content between 15 and 20 % (w/w) have commonly been used in the development of this method.
Izračunati je mogoče tudi oceno časa, ki je potreben za doseganje stacionarnega stanja v fazi absorpcije (npr. 95 % stacionarnega stanja ali t95 = 3,0/k2), in vključi se lahko ocena stacionarnega BMF (BMFSS) (prim. odstavka 105 in 106 ter Dodatek 5), če je iz vrednosti t95 razvidno, da so bili morda doseženi pogoji stacionarnega stanja.
Fish food with such a high lipid concentration may not be available in some regions.
Ta BMFSS je treba popraviti glede na lipide tako kot kinetično izpeljan BMF (BMFK), da se dobi vrednost, popravljena glede na lipide, BMFSSL (opozoriti je treba, da ni na voljo dogovorjenega postopka za popravljanje stacionarnega BMF glede na razredčitev zaradi rasti).
In such cases studies could be run with a lower lipid concentration in the food, and if necessary the feeding rate adjusted appropriately to maintain fish health (based on preliminary testing).
Formule in primeri izračunov so predstavljeni v Dodatku 7.
The total lipid content of the test group and control group diets needs to be measured and recorded before the start of the test and at the end of the uptake phase.
Na voljo so pristopi, ki omogočajo oceno kinetičnega biokoncentracijskega faktorja (BKFK) na podlagi podatkov, pridobljenih v prehranski študiji.
Details provided by the commercial feed supplier of analysis for nutrients, moisture, fibre and ash, and if possible minerals and pesticide residues (e.g. “standard” priority pollutants), should be presented in the study report.
Ti so opisani v Dodatku 8.
When spiking the food with test substance, all possible efforts should be made to ensure homogeneity throughout the test food.
Mokra teža in dolžina posameznih rib za vsa časovna obdobja se predstavita v preglednici ločeno za preskusno in kontrolno skupino za vse dneve vzorčenj med fazo absorpcije (populacija staleža za začetek absorpcije; kontrolno in preskusno skupino za konec absorpcije in, če se izvede, zgodnjo fazo (npr. 1.–3. dan absorpcije) ter fazo očiščenja (npr. 1., 2., 4., 7., 14. in 28. dan za kontrolno in preskusno skupino).
The concentration of test substance in the food for the test group should be selected taking into account the sensitivity of the analytical technique, the test substance's toxicity (NOEC if known) and relevant physicochemical data.
Po možnosti se teža uporabi kot merilo za rast za namene popravljanja glede na razredčitev zaradi rasti Glej opise v nadaljevanju (odstavka 162 in 163) ter Dodatek 5 za metode, uporabljene za popravljanje podatkov glede na razredčitev zaradi rasti.
If used, the reference substance should preferably be incorporated at a concentration around 10 % of that of the test substance (or in any case as low as is practicable), subject to analysis sensitivity (e.g. for hexachlorobenzene a concentration in the food of 1-100 μg/g has been found to be acceptable; cf. (47) for more information on assimilation efficiencies of HCB).
Podatki o koncentraciji preskusne snovi v ribah
The test substance can be spiked to the fish food in several ways depending on its physical characteristics and solubility (see Appendix 7 for more details on spiking methods):
V preglednici se predstavijo meritve ostankov preskusne snovi v posameznih ribah (ali združenih vzorcev rib, če meritve posameznih rib niso mogoče), izražene v smislu koncentracije na mokro težo (masni delež), za preskusne in kontrolne ribe za posamezna vzorčenja.
If the substance is soluble and stable in triglycerides, the substance should be dissolved in a small amount of fish oil or edible vegetable oil before mixing with fish food.
Če je bila na vsak vzorčeni ribi izvedena analiza lipidov, se lahko izpeljejo in v preglednici predstavijo posamezne koncentracije, popravljene glede na lipide, v smislu koncentracije lipidov (masni delež lipidov).
In this instance, care should be taken to avoid producing a ration that is too high in lipid, taking into account the natural lipid content of the spiked feed, by adding the minimum known quantity of oil required to achieve distribution and homogeneity of the test substance in the food, or;
Meritve ostankov preskusne snovi v posameznih ribah (ali združenih vzorcev rib, če meritve posameznih rib niso mogoče, prim. odstavek 66) za fazo očiščenja se pretvorijo v njihove naravne logaritme in grafično prikažejo v odvisnosti od časa (dan).
The food should be spiked using a suitable organic solvent, so long as homogeneity and bioavailability are not compromised (it is possible that (micro)crystals of the test substance may form in the food as a consequence of solvent evaporation and there is no easy way to prove this has not occurred; cf.
Če vizualni pregled grafičnega prikaza pokaže očitne osamelce, se lahko uporabi statistično veljaven preskus osamelcev, da se odstranijo napačne podatkovne točke in zagotovi utemeljitev za njihovo opustitev.
(49)), or;
Izračuna se linearna korelacija po metodi najmanjših kvadratov za ln(koncentracijo) v odvisnosti od podatkov o očiščenju (dan).
Non-viscous liquids should be added directly to fish food but they should be well mixed to promote homogeneity and facilitate good assimilation.
Naklon in osni odsek se v poročilu navedeta kot skupna konstanta hitrosti očiščenja (k2) in naravni logaritem izpeljane koncentracije ob času nič (C0,d) (prim. Dodatek 5 in Dodatek 7 za nadaljnje podrobnosti).
The technique for mixing should ensure homogeneity of the spiked feed.
Če to ni mogoče, ker koncentracije padejo pod mejo določljivosti za drugi vzorec očiščenja, se lahko izvede previdna ocena k2 (prim. Dodatek 7).
In few cases, e.g. less hydrophobic test substances more likely to desorb from the food, it may be necessary to coat prepared food pellets with a small quantity of corn/fish oil (see paragraph 142).
Variance v naklonu in osnem odseku se izračunajo s standardnimi statističnimi postopki, na podlagi teh rezultatov pa se ovrednotijo in predstavijo 90-odstotni (ali 95-odstotni) intervali zaupanja.
In such cases, control food should be treated similarly and the final prepared feed used for lipid measurement.
Izračuna se tudi povprečna izmerjena koncentracija v ribah za zadnji dan absorpcije (izmerjena koncentracija ob času nič, C0,m) in primerja z izpeljano vrednostjo C0,d.
If used, the results of the reference substance should be comparable with literature study data carried out under similar conditions with a comparable feeding rate (cf. paragraph 45) and reference substance-specific parameters should meet the relevant criteria in paragraph 113 (3rd, 4th and 5th points).
Če je izpeljana vrednost nižja od izmerjene vrednosti, lahko ta razlika kaže na prisotnost neprebavljene hrane z dodatkom v črevesju.
If an oil or carrier solvent is used as a vehicle for the test substance, an equivalent amount of the same vehicle (excluding test substance) should be mixed with the control diet in order to maintain equivalency with the spiked diet.
Če je izpeljana vrednost precej višja od izmerjene vrednosti, lahko to kaže na to, da je vrednost, izpeljana iz linearne regresije podatkov o očiščenju, napačna in da jo je treba znova ovrednotiti (glej Dodatek 7).
The spiked diet should be stored under conditions that maintain stability of the test substance within the feed mix (e.g. refrigeration) and these conditions reported.
Hitrost očiščenja in biomagnifikacijski faktor
Selection of fish species
Za izračun bimagnifikacijskega faktorja iz podatkov je naprej treba pridobiti učinkovitost asimilacije (absorpcijo preskusne snovi v črevesju, α).
Fish species as specified for the aqueous exposure may be used (cf. paragraph 32 and Appendix 3).
Za to je treba uporabiti enačbo A7.1 iz Dodatka 7, ki zahteva, da so znani izpeljana koncentracija v ribah ob času nič faze očiščenja (C0,d), (skupna) konstanta hitrosti očiščenja (k2), koncentracija v hrani (Chrana), konstanta hitrosti zaužitja hrane (I) in trajanje faze absorpcije (t).
Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), carp (Cyprinus carpio) and fathead minnow (Pimephales promelas) have been commonly used in dietary bioaccumulation studies with organic substances before the publication of this TM.
Naklon in osni odsek linearnega razmerja med ln(koncentracijo) in trajanjem očiščenja se navedeta kot skupna konstanta hitrosti očiščenja (k2 = naklon) in koncentracija ob času nič (C0,d = eintercept), kot je opisano zgoraj.
The test species should have a feeding behaviour that results in rapid consumption of the administered food ration to ensure that any factor influencing the concentration of the test substance in food (e.g. leaching into the water and the possibility of aqueous exposure) is kept to a minimum.
Preveriti je treba, da so izpeljane vrednosti biološko verodostojne (npr. učinkovitost asimilacije kot delež ni višja od 1).
Fish within the recommended size/weight range (cf. Appendix 3) should be used.
se izračuna tako, da se masa hrane deli z maso rib, ki se hranijo vsak dan (če se hranijo z 2 % telesne teže, (I) znaša 0,02).
Fish should not be so small as to hamper ease of analyses on an individual basis.
Stopnjo hranjenja, uporabljeno v izračunu, pa je morda treba prilagoditi glede na rast rib (to se lahko izvede z znano konstanto hitrosti rasti, da se oceni teža rib v vsaki točki časa med fazo absorpcije; prim. Dodatek 7).
Species tested during a life-stage with rapid growth can complicate data interpretation, and high growth rates can influence the calculation of assimilation efficiency [48].
Kadar ni mogoče izpeljati k2 in C0,d, ker so na primer koncentracije padle pod mejo zaznavnosti za drugi vzorec očiščenja, se lahko izvede previdna ocena k2 in BMFk „zgornje meje“ (prim. Dodatek 7).
Pre-study work and range-finding test
Rast rib med fazo očiščenja lahko zniža izmerjene koncentracije kemikalije v ribah, kar pomeni, da je skupna konstanta hitrosti očiščenja, k2, višja, kot bi bila zgolj na podlagi procesov odstranjevanja (npr. metabolizem, izločanje) (prim. odstavek 72).
Pre-study analytical work is necessary to demonstrate recovery of the substance from spiked food/spiked fish tissue.
Vsebnost lipidov v preskusnih ribah (ki je tesno povezana z bioakumulacijo hidrofobnih snovi) in vsebnost lipidov v hrani se lahko v praksi tako razlikujeta, da jih je treba popraviti, zato da se lahko biomagnifikacijske faktorje smiselno predstavi.
A range-finding test to select a suitable concentration in the food is not always necessary.
Biomagnifikacijski faktor je treba popraviti glede na razredčitev zaradi rasti (tako kot kinetični BKF pri metodi vodne izpostavljenosti) in glede na vsebnost lipidov v hrani, ki je povezana z vsebnostjo lipidov v ribah (korekcijski faktor za lipide).
For the purposes of showing that no adverse effects are observed and evaluating the palatability of spiked diet, sensitivity of analytical method for fish tissue and food, and selection of suitable feeding rate and sampling intervals during depuration phase etc., preliminary feeding experiments may be undertaken but are not obligatory.
Enačbe in primeri teh izračunov so opisani v Dodatku 5 oziroma Dodatku 7.
A preliminary study may be valuable to estimate numbers of fish needed for sampling during the depuration phase.
Za popravek glede na razredčitev zaradi rasti je treba izračunati konstanto hitrosti očiščenja, popravljeno glede na rast (k2g) (glej Dodatek 5 za enačbe).
This can result in significant reduction in the number of fish used, especially for test substances that are particularly susceptible to metabolism.
Ta konstanta hitrosti očiščenja, popravljena glede na rast (k2g), se nato uporabi za izračun biomagnifikacijskega faktorja, popravljenega glede na rast, kot je opisano v odstavku 73.
Conditions of exposure
V nekaterih primerih ta pristop ni mogoč.
Uptake Phase duration
Ta pristop je preprost, saj bi v preskusih, skladnih s to metodo, zabeležene koncentracije v tkivih morale biti povezane s težo posameznih rib.
An uptake phase of 7-14 days is usually sufficient, during which one group of fish are fed the control diet and another group of fish the test diet daily at a fixed ration dependent on the species tested and the experimental conditions, e.g. between 1-2 % of body weight (wet weight) in the case of rainbow trout.
Opozoriti je treba, da je v poročilu še vedno treba oceniti in navesti k2, čeprav je uporabljen drugi pristop.
If needed the uptake phase may be extended based on practical experience from previous studies or knowledge of the test substance's (or analogue's) uptake/depuration in fish.
Da se popravijo vrednosti glede na vsebnost lipidov v hrani in ribah, kadar analiza lipidov ni bila izvedena na vseh vzorčenih ribah, se izpeljejo povprečni deleži lipidov (masni delež) v ribah in hrani [52].
The start of the test is defined as the time of first feeding with spiked food.
Nato se izračuna korekcijski faktor za lipide ( Lc), tako da se povprečni delež lipidov v ribah deli s povprečnim deležem lipidov v hrani.
An experimental day runs from the time of feeding to shortly before the time of next feeding (e.g. one hour).
Biomagnifikacijski faktor, popravljen glede na rast ali ne, kot je ustrezno, se deli s korekcijskim faktorjem za lipide, da se izračuna biomagnifikacijski faktor, popravljen glede na lipide.
Thus the first experimental day of uptake runs from the time of first feeding with spiked food and ends shortly before the second feeding with spiked food.
Če so bile analize kemikalije in lipidov izvedene na istih ribah v vsaki točki vzorčenja, se lahko podatki o tkivu, popravljeni glede na lipide, za posamezne ribe uporabijo neposredno za izračun BMF, popravljenega glede na lipide (prim. (37)).
In practice the uptake phase ends shortly before (e.g. one hour) the first feeding with unspiked test substance as the fish will continue to digest spiked food and absorb the test substance in the intervening 24 hours.
Z grafičnim prikazom koncentracije, popravljene glede na lipide, se dobi C0,d na podlagi lipidov in k2.
It is important to ensure that a sufficiently high (non-toxic) body burden of the test substance is achieved with respect to the analytical method, so that at least an order of magnitude decline can be measured during the depuration phase.
Nato se lahko izvede matematična analiza z enakimi enačbami iz Dodatka 7, učinkovitost asimilacije (a) pa se izračuna s konstanto hitrosti zaužitja hrane, normalizirano glede na lipide (Ilipid), in koncentracijo v hrani na podlagi lipidov (Chrana-lipid).
In special cases an extended uptake phase (up to 28 days) may be used with additional sampling to gain an insight into uptake kinetics.
Parametri, popravljeni glede na lipide, se nato podobno uporabijo za izračun BMF (opozoriti je treba, da se popravek konstante hitrosti rasti uporabi tudi za delež lipidov, ne pa za mokro težo ribe, da se izračuna BMFKgL, popravljen glede na lipide in rast).
During uptake the concentration in the fish may not reach steady-state.
Konstanti hitrosti rasti ali krivulji rasti obeh skupin je treba primerjati z ustreznim postopkom [53]).Poročilo o preskusu
Equations for estimating time to steady-state, as an indication of the likely duration needed to achieve appreciable fish concentrations, can be applied here as for the aqueous exposure test (cf. Appendix 5).
Po koncu študije se pripravi končno poročilo z informacijami o preskusni snovi, preskusni vrsti in preskusnih pogojih v skladu z odstavkom 81 (kot pri metodi vodne izpostavljenosti).
In some cases it may be known that uptake of substance in the fish over 7-14 days will be insufficient for the food concentration used to reach a high enough fish concentration to analyse at least an order of magnitude decline during depuration, either due to poor analytical sensitivity or to low assimilation efficiency.
Poleg tega se zahtevajo naslednji podatki:
In such cases it may be advantageous to extend the initial feeding phase to longer than 14 days, or, especially for highly metabolisable substances, a higher dietary concentration should be considered.
Preskusna snov:
However, care should be taken to keep the body burden during uptake below the (estimated) chronic no effect concentration (NOEC) in fish tissue (cf. paragraph 138).
kakršne koli informacije o obstojnosti preskusne snovi v pripravljeni hrani.
Depuration typically lasts for up to 28 days, beginning once the test group fish are fed pure, untreated diet after the uptake phase.
nominalna koncentracija snovi v hrani, tehnika za dodajanje snovi v hrano, količina vehikla (lipidov), uporabljena pri postopku dodajanja snovi v hrano (če se uporabi), meritve koncentracije preskusne snovi v hrani z dodatkom za vsako analizo (vsaj tri pred začetkom študije in ob koncu absorpcije) in povprečne vrednosti;
Depuration begins with the first feeding of “unspiked” food rather than straight after the last “spiked” food feeding as the fish will continue to digest the food and absorb the test substance in the intervening 24 hours, as noted in paragraph 126.
vrsta in kakovost oljnega nosilca ali topila (kategorija, dobavitelj itd.), ki in če se je uporabil za dodajanje k hrani;
Hence the first sample in the depuration phase is taken shortly before the second feeding with unspiked diet.
uporabljena vrsta hrane (približna analiza [54], kategorija ali kakovost, dobavitelj itd.), stopnja hranjenja med fazo absorpcije, količina dane hrane in pogostost (vključno z morebitnimi prilagoditvami na podlagi teže vzorčenih rib);
This depuration period is designed to capture substances with a potential half-life of up to 14 days, which is consistent with that of bioaccumulative substances [49], so 28 days comprises two half-lives of such substances.
čas, ko so bile ribe zbrane in evtanazirane za kemijsko analizo za vsako točko vzorčenja (npr. eno uro pred hranjenjem naslednjega dne).
In cases of very highly bioaccumulating substances it may be advantageous to extend the depuration phase (if indicated by preliminary testing).If a substance is depurated very slowly such that an exact half-life may not be determined in the depuration phase, the information may still be sufficient for assessment purposes to indicate a high level of bioaccumulation.
rezultati kakršnih koli predhodnih študij;
Conversely, if a substance is depurated so fast that a reliable time zero concentration (concentration at the end of uptake/start of depuration, C0,d) and k2 cannot be derived, a conservative estimate of k2 can be made (cf. Appendix 7).
informacije o kakršnih koli ugotovljenih neželenih učinkih;
If analyses of fish at earlier intervals (e.g. 7 or 14 days) show that the substance has depurated below quantification levels before the full 28-day period, then subsequent sampling may be discontinued and the test terminated.
popoln opis vseh uporabljenih postopkov kemijske analize, vključno z mejo zaznavnosti in določljivosti, variabilnostjo in izkoristkom;
In few cases no measurable uptake of the test substance may have occurred at the end of the uptake period (or with the second depuration sample).
izmerjene koncentracije lipidov v hrani (hrana z dodatkom in kontrolna hrana), vrednosti za posamezne ribe, povprečne vrednosti in standardni odkloni;