natgillin/translations-raw huggingface dataset:
is the number of fish per volume of water.
Skupaj mora v negativni kontroli (z vodo za redčenje) ali kontroli s topilom, kadar je to primerno, do zaključka 96-urne izpostavljenosti preživeti ≥ 90 % zarodkov.
vitellogenin is a phospholipoglycoprotein precursor to egg yolk protein that normally occurs in sexually active females of all oviparous species.
Izpostavljenost pozitivni kontroli (npr. 4,0 mg/l 3,4-dikloroanilina pri cebricah) mora ob zaključku 96-urne izpostavljenosti povzročiti najmanj 30-odstotno umrljivost.
EXPERIMENTAL CONDITIONS FOR THE FISH ENDOCRINE SCREENING ASSAY
Odstotek izvalitve v negativni kontroli (in kontroli s topilom, kadar je to primerno) mora ob zaključku 96-urne izpostavljenosti znašati ≥ 80 %.
(Pimephales promelas)
Ob zaključku 96-urne izpostavljenosti morata koncentracija raztopljenega kisika v negativni kontroli in najvišja preskusna koncentracija znašati ≥ 80 % nasičenosti.
Medaka (Oryzias latipes)
Pregled priporočenega vzdrževanja in preskusnih pogojev je na voljo v Dodatku 2.
Test type
Potrebna je naslednja oprema:
Flow-through
akvariji iz kemijsko inertnih materialov (npr. stekleni) in primerne prostornine glede na priporočeno obremenitev (glej odstavek 14 „Vzdrževanje plemenskih rib“);
Water temperature
obrnjeni mikroskop in/ali binokularni mikroskop z zmogljivostjo vsaj 80-kratne povečave.
Illumination quality
Če temperature prostora, ki se uporablja za beleženje opažanj, ni mogoče nastaviti na 26 °C ± 1 °C, je treba zagotoviti križno mizico z uravnavanjem temperature ali druge metode za vzdrževanje temperature;
Fluorescent bulbs (wide spectrum)
preskusne komore, npr. standardne plošče s 24 jamicami, globokimi približno 20 mm (glej odstavek 11 „Preskusne komore“);
Light intensity
npr. samolepilna folija za prekrivanje plošč s 24 jamicami;
10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
inkubator ali klimatiziran prostor z nadzorovano temperaturo, ki omogoča vzdrževanje 26 °C ± 1 °C v jamicah (ali preskusnih komorah);
Photoperiod (dawn / dusk transitions are optional, however not considered necessary) 16 h light, 8 h dark
oksimeter;
12-16 h light, 12-8 h dark
oprema za določanje trdote vode in prevodnosti;
< 5 g per l
lovilna posoda za ikre: pladnji iz stekla, nerjavnega rekla ali drugih inertnih materialov z žičnato mrežo (velikost rešetk 2 mm ± 0,5 mm) iz nerjavnega jekla ali drugega inertnega materiala, da se zaščitijo odložene ikre, in substrat za drstenje (npr. imitacije rastlin iz inertnih materialov) (TM C.48, Dodatek 4a (23));
Test chamber size
pipete s širšimi odprtinami za zbiranje iker;
10 l (minimum)
steklene posode za pripravo različnih preskusnih koncentracij in vode za redčenje (čaše, merilne bučke, merilni valji in polnilne pipete) ali za zbiranje iker cebrice (npr. čaše, kristalizirke);
2 l (minimum)
če se za izvajanje preskusa uporabijo nadomestni sistemi izpostavljenosti, kot je na primer pretočni preskus (24) ali pasivno odmerjanje (25), je treba zagotoviti ustrezne prostore in opremo.
5 l (minimum)
Uporabiti je treba steklene preskusne komore ali preskusne komore iz polistirena (npr. plošče s 24 jamicami, v vsako jamico pa se lahko natoči 2,5–5 ml tekočine).
Test solution volume
Če obstaja sum adsorpcije v polistiren (npr. pri nepolarnih, planarnih snoveh z visokim Kow), je treba uporabiti inertne materiale (steklo), da se zmanjšajo izgube zaradi adsorpcije (26).
8 l (minimum)
Preskusne komore je treba naključno postaviti v inkubator.
1,5 l (minimum)
Voda in preskusni pogoji
4 l (minimum)
Priporočljivo je razredčiti vodo za vzdrževanje, da se dosežejo ravni trdote, ki so običajne za številne površinske vode.
Volume exchanges of test solutions
Vodo za redčenje je treba pripraviti iz modelne razredčevalne vode (27).
Minimum of 6 daily
Nastala stopnja trdote mora znašati 100–300 mg/l CaCO3, da se prepreči presežno obarjanje kalcijevega karbonata.
Minimum of 5 daily
Uporabi se lahko tudi druga površinska voda z značilnostmi vode iz vodnjaka ali voda iz vodnjaka.
Age of test organisms
Modelna razredčevalna voda se lahko prilagodi vodi za vzdrževanje nizke trdote tako, da se z deionizirano vodo razredči do razmerja 1: 5 na najmanjšo trdoto 30–35 mg/l CaCO3.
See paragraph 21
Pred dodajanjem preskusne kemikalije se voda prezrači do nasičenosti s kisikom.
Approximate wet weight of adult fish (g)
Med preskusom je treba v jamicah ohranjati temperaturo 26 ± 1°C.
Females: 1,5 ± 20 %
Med preskusom mora biti vrednost pH med 6,5 in 8,5, znotraj tega območja pa se ne sme razlikovati za več kot 1,5 enote.
Males: 2,5 ± 20 %
Če se pričakuje, da vrednost pH ne bo ostala v tem območju, jo je treba prilagoditi pred začetkom preskusa.
Females: 0,35 ± 20 %
Prilagoditev vrednosti pH je treba opraviti tako, da se koncentracija osnovne raztopine ne spremeni bistveno in da se ne povzroči kemijska reakcija ali obarjanje preskusne kemikalije.
Males: 0,35 ± 20 %
Priporoča se, da se za popravljanje vrednosti pH v raztopinah, ki vsebujejo preskusno kemikalijo, uporabita klorovodik (HCl) in natrijev hidroksid (NaOH).
Females: 0,65 ± 20 %
Testne raztopine izbranih koncentracij se lahko pripravijo na primer z razredčitvijo osnovne raztopine.
Males: 0,4 ± 20 %
Najbolje je, če se osnovne raztopine pripravijo preprosto z mešanjem ali stresanjem preskusne kemikalije v vodi za redčenje z mehanskimi sredstvi (npr. z mešanjem in/ali ultrazvočno kopeljo).
No. of fish per test vessel
Če se preskusna kemikalija v vodi težko raztopi, je treba upoštevati postopke, opisane v Smernicah OECD št. 23 za ravnanje z zahtevnimi snovmi in zmesmi (28).
6 (2 males and 4 females)
Izogibati se je treba uporabi topil, vendar je v nekaterih primerih morda potrebna, da se pripravi primerno koncentrirana osnovna raztopina.
6 (3 males and 3 females)
Če se pri pripravi osnovne raztopine kot pomoč uporabi topilo, njegova končna koncentracija ne sme biti večja od 100 μl/l in mora biti enaka v vseh preskusnih posodah.
10 (5 males and 5 females)
Če se uporabi topilo, je potrebna dodatna kontrola s topilom.
No. of treatments
Vzdrževanje plemenskih rib
= 3 (plus appropriate controls)
Za proizvajanje iker se uporabi matična jata neizpostavljenih divjih cebric z dobro dokumentirano stopnjo oplojenosti iker.
No. vessels per treatment
Ribe ne smejo imeti makroskopsko opaznih simptomov okužbe ali bolezni, dva meseca pred drstenjem pa se ne smejo (akutno ali preventivno) zdraviti z zdravilom.
4 minimum
Matične ribe se hranijo v akvarijih s priporočeno prostornino 1 l vode na ribo in določenim 12–16-urnim obdobjem osvetljenosti (29) (30) (31) (32) (33).
2 minimum
Prilagoditi je treba optimalne stopnje filtracije in ne smejo se uporabljati prevelike stopnje filtracije, ki zelo vznemirjajo vodo.
No. of fish per test concentration
Za pogoje hranjenja glej Dodatek 2.
16 adult females and 8 males (4 females and 2 males in each replicate vessel)
Izogibati se je treba prekomernemu hranjenju in redno spremljati kakovost vode in čistočo akvarijev, po potrebi pa jih je treba znova vrniti v začetno stanje.
12 adult females and 12 males (3 females and 3 males in each replicate vessel)
Preverjanje usposobljenosti
10 adult females and 10 males (5 females and 5 males in each replicate vessel)
Kot referenčno kemikalijo je treba v celotnem območju odziva na koncentracijo preskusiti 3,4-dikloroanilin (uporablja se v validacijskih študijah (1) (2)), da se preveri občutljivost uporabljene vrste rib, in sicer po možnosti dvakrat na leto.
Feeding regime
Laboratoriji, ki ta preskus izvajajo prvič, morajo uporabiti referenčno kemikalijo.
Live or frozen adult or nauplii brine shrimp two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Laboratoriji lahko uporabijo to kemikalijo, da dokažejo, da so tehnično usposobljeni za izvajanje tega preskusa, preden podatke predložijo v regulativne namene.
Brine shrimp nauplii two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Proizvajanje iker
Pre- exposure period
Za odvzem iker se v akvarije za drstenje ali akvarije za vzdrževanje pred stemnitvijo na dan pred preskusom ali pred svitom na dan preskusa namestijo lovilne posode za ikre.
7-14 days recommended
Da se odraslim cebricam prepreči plenjenje iker, se lovilne posode za ikre prekrijejo z inertno žičnato mrežo z ustrezno velikostjo rešetk (približno 2 mm ± 0,5 mm).
Chemical exposure duration
Po potrebi se lahko na mrežo pritrdijo umetne rastline iz inertnega materiala (npr. iz plastike ali stekla) za spodbujanje drstenja (3) (4) (5) (23) (35).
Biological endpoints
Uporabiti je treba plastične materiale, izpostavljene vremenskim vplivom, ki se ne lužijo (npr. ftalate).
survival
Parjenje, drstenje in oploditev se začnejo v 30 minutah po svitu in lovilne posode za ikre z odvzetimi ikrami se lahko previdno odstranijo.
behaviour
Priporoča se, da se ikre po odstranitvi iz lovilnih posod za ikre sperejo z modelno razredčevalno vodo.
fecundity
Diferenciacija iker
sex characteristics
Pri 26 °C oplojene ikre po približno 15 minutah prestanejo prvo brazdanje in z zaporednimi sinhronimi brazdanji se oblikuje 4, 8, 16 in 32 celičnih blastomer (glej Dodatek 3) (35).
optionally gonadal histopathology
V teh fazah se lahko oplojene ikre zlahka opredelijo, saj se razvije blastula.
Test acceptability
Preskusni kemikaliji je izpostavljenih dvajset zarodkov na posamezno koncentracijo (en zarodek na jamico).
Dissolved oxygen ≥ 60 % of saturation; mean temperature of 25 ± 2 °C; 90 % survival of fish in the controls; measured test concentrations within 20 % of mean measured values per treatment level.
Izpostavljenost mora biti taka, da se med preskusom ohrani ±20 % nominalne koncentracije kemikalije.
Dissolved oxygen ≥ 60 % of saturation; mean temperature of 26 ± 2 °C; 90 % survival of fish in the controls; measured test concentrations within 20 % of mean measured values per treatment level.
Če to v statičnem sistemu ni mogoče, je treba uporabiti obvladljiv polstatičen interval zamenjave (npr. zamenjava vsakih 24 ur).
SOME CHEMICAL CHARACTERISTICS OF ACCEPTABLE DILUTION WATER
V teh primerih je treba koncentracije izpostavljenosti preveriti vsaj pri najvišji in najnižji preskusni koncentraciji na začetku in na koncu vsakega intervala izpostavljenosti (glej odstavek 36).
COMPONENT
Če koncentracije izpostavljenosti v višini ±20 % nominalnih koncentracij ni mogoče ohraniti, je treba vse koncentracije izmeriti na začetku in na koncu vsakega intervala izpostavljenosti (glej odstavek 36).
CONCENTRATIONS
Ob zamenjavi vode je treba zagotoviti, da so zarodki prekriti z majhno količino starih testnih raztopin, da se ne izsušijo.
< 20 mg/l
Načrt preskusa se lahko prilagodi, da se izpolnijo zahteve preskušanja specifičnih snovi (npr. pretočnega preskušanja (24) ali sistemov pasivnega odmerjanja (25) za lahko razgradljive ali zelo adsorptivne snovi (29) ali drugih preskušanj za hlapne snovi (36) (37)).
< 2 mg/l
V vsakem primeru je treba paziti, da so zarodki pod čim manjšim stresom.
Unionised ammonia
Preskusne komore je treba pred začetkom preskusa vsaj 24 ur kondicionirati s testnimi raztopinami.
< 1 μg/l
Preskusni pogoji so povzeti v Dodatku 2.
< 10 μg/l
Običajno je potrebnih pet koncentracij preskusne kemikalije, ki se med seboj razlikujejo za konstantni faktor, ki ni večji od 2,2, da se izpolnijo statistične zahteve.
Total organophosphorus pesticides
Če se uporabi manj kot pet koncentracij, je treba to utemeljiti.
< 50 ng/l
Najbolje je, če najvišja preskusna koncentracija povzroči 100 % smrtnost, najnižja preskusna koncentracija pa ne bi smela imeti opaznega učinka, kot je opredeljeno v odstavku 28.
< 25 ng/l
Preskus za določanje območja delovanja pred končnim preskusom omogoča, da se izbere ustrezno območje koncentracije.
Appendix 4A
Ta preskus se običajno izvede z desetimi zarodki na posamezno koncentracijo.
SPAWNING SUBSTRATE FOR ZEBRAFISH
Navodila v nadaljevanju se nanašajo na izvajanje preskusa na ploščah s 24 jamicami.
Spawning tray
Če se uporabijo drugačne preskusne komore (npr. majhne petrijevke) ali če se preskuša več koncentracij, je treba navodila ustrezno prilagoditi.
all glass instrument dish, for example 22 × 15 × 5,5 cm (l × w × d), covered with a removable stainless steel wire lattice (mesh width 2mm).
Podrobni podatki in slikovna navodila za porazdelitev koncentracij po ploščah s 24 jamicami so na voljo v odstavku 27 in na sliki 1 v Dodatku 4.
The lattice should cover the opening of the instrument dish at a level below the brim.
Kontrole z vodo za redčenje so potrebne kot negativne kontrole in kot notranje kontrole plošč.
On the lattice, spawning substrate should be fixed.
Če se pri notranji kontroli plošč opazi več kot en mrtev zarodek, se plošča zavrne, s čimer se zmanjša število koncentracij, uporabljenih za izračun LC50.
It should provide structure for the fish to move into.
Če se zavrne celotna plošča, sta ocenjevanje in zaznavanje opaženih učinkov lahko težja, zlasti če je zavrnjena plošča plošča s kontrolo s topilom ali plošča, v kateri so prizadeti tudi tretirani zarodki.
For example, artificial aquaria plants made of green plastic material are suitable (NB: possible adsorption of the test chemical to the plastic material should be considered).
V prvem primeru je treba preskus ponoviti.
The plastic material should be leached out in sufficient volume of warm water for sufficient time to ensure that no chemicals may be disposed to the test water.
V drugem primeru lahko izguba celotne tretirane skupine zaradi notranje umrljivosti v kontroli omeji zmožnost ocenjevanja učinkov in določanja vrednosti LC50.
When using glass materials it should be ensured that the fish are neither injured nor cramped during their vigorous actions.
Pozitivna kontrola pri nespremenljivi koncentraciji 4 mg/l 3,4-dikloroanilina se opravi pri vsaki seriji iker, ki se uporabi za preskušanje.
The distance between the tray and the glass panes should be at least 3 cm to ensure that the spawning is not performed outside the tray.
Če se uporabi topilo, se mu izpostavi dodatna skupina 20 zarodkov na ločeni plošči s 24 jamicami kot kontrola s topilom.
The eggs spawned onto the tray fall through the lattice and can be sampled 45-60 min after the start of illumination.
Preskus se šteje za sprejemljivega, če se dokaže, da topilo nima bistvenih učinkov na čas izvalitve in preživetje ter drugih škodljivih učinkov na zarodke (primerjaj odstavek 8c).
The transparent eggs are non-adhesive and can easily be counted by using transversal light.
Začetek izpostavljenosti in trajanje preskusa
When using five females per vessel, egg numbers up to 20 at a day can be regarded as low, up to 100 as medium and more than 100 as high numbers.
Preskus se začne čim prej po oploditvi iker in konča po 96 urah izpostavljenosti.
The spawning tray should be removed, the eggs collected and the spawning tray re-introduced in the test vessel, either as late as possible in the evening or very early in the morning.
Pred začetkom brazdanja blastodiska ali najpozneje do faze šestnajstih celic je treba zarodke potopiti v testne raztopine.
The time until re-introduction should not exceed one hour since otherwise the cue of the spawning substrate may induce individual mating and spawning at an unusual time.
Da se izpostavljenost začne s čim manjšo zamudo, se naključno izbere vsaj dvakrat večje število iker na posamezno tretirano skupino, ki se prenesejo v zadevne koncentracije in kontrole (npr. v 100 ml kristalizirkah, pri čemer morajo biti ikre v celoti prekrite) najpozneje 90 minut po oploditvi.
If a situation needs a later introduction of the spawning tray, this should be done at least 9 hours after start of the illumination.
Oplojene ikre, sposobne preživetja, je treba ločiti od neoplojenih iker in prenesti na plošče s 24 jamicami, ki so se predhodno 24 ur kondicionirale in ki se v 180 minutah po oploditvi ponovno napolnijo z 2 ml/jamico sveže pripravljenih testnih raztopin.
At this late time of the day, spawning is not induced any longer.
S stereomikroskopom (po možnosti z vsaj 30-kratno povečavo) se izberejo oplojene ikre, pri katerih poteka brazdanje in pri katerih med brazdanjem niso bile odkrite očitne nepravilnosti (npr. nesimetričnost, oblikovanje mešičkov) ali poškodbe horija.
Appendix 4B
Za zbiranje in ločevanje iker glej sliki 1 in 3 v Dodatku 3 ter sliko 2 v Dodatku 4.
SPAWNING SUBSTRATE FOR FATHEAD MINNOW
Porazdelitev iker po ploščah s 24 jamicami
Two or three combined plastic/ceramic/glass or stainless steel spawning tiles and trays are placed in each of the test chamber (e.g. 80 mm length of grey semi-circular guttering sitting on a lipped tray of 130mm length) (see picture).
Ikre se porazdelijo po ploščah z jamicami v skladu z naslednjimi števili (glej tudi sliko 1 v Dodatku 4):
Properly seasoned PVC or ceramic tiles have demonstrated to be appropriate for a spawning substrate (Thorpe et al, 2007).
20 iker na eni plošči za vsako preskusno koncentracijo,
It is recommended that the tiles are abraded to improve adhesion.
20 iker kot kontrola s topilom na eni plošči (po potrebi),
The tray should also be screened to prevent fish from access to the fallen eggs unless the egg adhesion efficiency has been demonstrated for the spawning substrate used.
20 iker kot pozitivna kontrola na eni plošči,
The base is designed to contain any eggs that do not adhere to the tile surface and would therefore fall to the bottom of the tank (or those eggs laid directly onto the flat plastic base).
4 ikre v vodi za redčenje kot notranja kontrola plošč na vsaki zgornji plošči,
All spawning substrates should be leached for a minimum of 12 hours, in dilution water, before use.
24 iker v vodi za redčenje kot negativna kontrola na eni plošči.
Appendix 5A
Opažanja na višjem nivoju biološke organizacije, ki se opravijo pri vsakem preskušanem zarodku, vključujejo koagulacijo zarodkov, odsotnost oblikovanja somitov, odsotnost ločenosti repa in odsotnost srčnega utripa (preglednica 1).
ASSESSMENT OF SECONDARY SEX CHARACTERISTICS IN FATHEAD MINNOW FOR THE DETECTION OF CERTAIN ENDOCRINE ACTIVE CHEMICALS
Ta opažanja se uporabljajo za ugotavljanje smrtnosti.
Overview
Morebiten pozitiven rezultat pri enem od navedenih opažanj pomeni, da je zarodek cebrice mrtev.
Potentially important characteristics of physical appearance in adult fathead minnows in endocrine disrupter testing include body colour (i.e., light/dark), coloration patterns (i.e., presence or absence of vertical bands), body shape (i.e., shape of head and pectoral region, distension of abdomen), and specialised secondary sex characteristics (i.e., number and size of nuptial tubercles, size of dorsal pad and ovipositor).
Poleg tega se po 48 urah vsak dan zabeleži izvalitev v tretiranih in kontrolnih skupinah.
Nuptial tubercles are located on the head (dorsal pad) of reproductively-active male fathead minnows, and are usually arranged in a bilaterally-symmetric pattern (Jensen et al.
Opažanja se zabeležijo vsakih 24 ur do konca preskusa.
2001).
Opažanja na višjem nivoju biološke organizacije v zvezi z akutno toksičnostjo pri zarodkih cebric 24–96 ur po oploditvi.
Control females and juvenile males and females exhibit no tubercle development (Jensen et al.
Čas izpostavljenosti
2001).
24 ur
There can be up to eight individual tubercles around the eyes and between the nares of the males.
48 ur
The greatest numbers and largest tubercles are located in two parallel lines immediately below the nares and above the mouth.
72 ur
In many fish there are groups of tubercles below the lower jaw; those closest to the mouth generally occur as a single pair, while the more ventral set can be comprised of up to four tubercles.
96 ur
The actual numbers of tubercles is seldom more than 30 (range, 18-28; Jensen et al.
Koagulirani zarodki
2001).
Odsotnost oblikovanja somitov
The predominant tubercles (in terms of numbers) are present as a single, relatively round structure, with the height approximately equivalent to the radius.
Odsotnost ločenosti repa
Most reproductively-active males also have, at least some, tubercles which are enlarged and pronounced such that they are indistinguishable as individual structures.
Odsotnost srčnega utripa
Some types of endocrine-disrupting chemicals can cause the abnormal occurrence of certain secondary sex characteristics in the opposite sex; for example, androgen receptor agonists, such as 17α-methyltestosterone or 17β-trenbolone, can cause female fathead minnows to develop nuptial tubercles (Smith 1974; Ankley et al.
Koagulacija zarodka: koagulirani zarodki so mlečno beli in temni pod mikroskopom (glej sliko 1 v Dodatku 5).
2001; 2003), while oestrogen receptor agonists may decrease number or size of nuptial tubercles in males (Miles-Richardson et al.
Število koaguliranih zarodkov se določi po 24, 48, 72 in 96 urah.
1999; Harries et al.
Odsotnost oblikovanja somitov: po 24 urah se pri 26 °C ± 1 °C v zarodku cebric, ki se normalno razvija, oblikuje približno 20 somitov (glej sliko 2 v Dodatku 5).
2000).
Pri normalno razvitem zarodku se opazijo spontani gibi (stransko krčenje).
Below is a description of the characterisation of nuptial tubercles in fathead minnows based on procedures used at the U.S. Environmental Protection Agency lab in Duluth, MN.
Spontani gibi pomenijo oblikovanje somitov.
Specific products and/or equipment can be substituted with comparable materials available.
Odsotnost somitov se zabeleži po 24, 48, 72 in 96 urah.
Viewing is best accomplished using an illuminated magnifying glass or 3X illuminated dissection scope.
Če se somiti po 24 urah ne oblikujejo, je to lahko posledica splošnega zaostajanja pri razvoju.
View fish dorsally and anterior forward (head toward viewer).
Najpozneje po 48 urah bi se morali oblikovati somiti.
Place fish in small Petri dish (e.g. 100 mm in diameter), anterior forward, and ventral down.
V nasprotnem primeru se zarodki štejejo za mrtve.
Focus viewfinder to allow identification of tubercles.
Odsotnost ločenosti repa: v zarodku cebric, ki se normalno razvija, se ločitev repa (glej sliko 3 v Dodatku 5) od rumenjaka opazi po podaljšanju zadnjega dela telesa zarodka.
Gently and slowly roll fish from side to side to identify tubercle areas.
Odsotnost ločenosti repa se zabeleži po 24, 48, 72 in 96 urah.
Count and score tubercles.
Odsotnost srčnega utripa: v zarodku cebric, ki se normalno razvija, je pri 26 °C ± 1 °C srčni utrip viden po 48 urah (glej sliko 4 v Dodatku 5).
Repeat the observation on the ventral head surface by placing the fish dorsal anterior forward in the Petri dish.
Pri beleženju te končne točke je potrebna posebna previdnost, saj se nepravilen (neenakomeren) srčni utrip ne sme zabeležiti kot smrtonosen.
Observations should be completed within 2 min for each fish.
Poleg tega se vidni srčni utrip brez obtoka v abdominalni aorti šteje za nesmrtonosnega.
Tubercle Counting and Rating
Za beleženje te končne točke je treba zarodke, pri katerih ni viden srčni utrip, vsaj eno minuto opazovati pod najmanj 80-kratno povečavo.
Six specific areas have been identified for assessment of tubercle presence and development in adult fathead minnows.
Odsotnost srčnega utripa se zabeleži po 48, 72 in 96 urah.
A template was developed to map the location and quantity of tubercles present (see end of this appendix).
Odstotke izvalitve vseh tretiranih in kontrolnih skupin je treba začeti beležiti in poročati po 48 urah.
The number of tubercles is recorded and their size can be quantitatively ranked as: 0- absence, 1-present, 2-enlarged and 3-pronounced for each organism (Fig.
Čeprav izvalitev ni končna točka, ki se uporablja za izračun LC50, zagotavlja izpostavljenost zarodka brez morebitne pregradne funkcije horija in lahko zato pomaga pri razlagi podatkov.
1).
Primeri normalnega (35) in neobičajnega razvoja zarodkov cebric so podrobno opisani v dodatkih 3 in 5.
Rate 0 — absence of any tubercle.
Analitske meritve
Rating 1 — present, is identified as any tubercle having a single point whose height is nearly equivalent to its radius.
Na začetku in na koncu preskusa se izmerijo vrednost pH, skupna trdota in prevodnost v kontrolah ter v največji koncentraciji preskusne kemikalije.
Rating 2 — enlarged, is identified by tissue resembling an asterisk in appearance, usually having a large radial base with grooves or furrows emerging from the centre.
V polstatičnih sistemih zamenjave je treba vrednost pH izmeriti pred zamenjavo vode in po njej.