natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Other gonadal lesions like oocyte atresia, testicular degeneration, and stage changes, may have various causes.
Za vsa jetra se pripravi seznam s količinami homogenizacijskega pufra.
The Guidance document on fish gonadal histopathology specifies procedures that will be used in the dissection, fixation, sectioning and histopathological evaluation of the gonads (22).
Priprava jeter za predhodno tretiranje
Where a solvent control is used, an appropriate statistical test should be performed between the dilution water and solvent controls for each endpoint.
Poleg tega je treba preskusne skupine predhodno tretirati po naslednjem vrstnem redu: kontrola, kontrola s topilom (kadar je to ustrezno), najnižja koncentracija, srednja koncentracija, najvišja koncentracija in pozitivna kontrola.
Guidance on how to handle dilution water and solvent control data in the subsequent statistical analysis can be found in OECD, 2006c (28).
Število 1,5-mililitrskih mikroepruvet z vzorci jeter, vzetih iz zamrzovalnika ob danem času, ne sme presegati števila, ki se lahko centrifugira hkrati.
All biological response data should be analysed and reported separately by sex.
Na zamrzovalnem stojalu se 1,5-mililitrske mikroepruvete z vzorci jeter razporedijo glede na številko vzorca (jeter ni treba odtajati).
If the required assumptions for parametric methods are not met — non-normal distribution (e.g. Shapiro-Wilk's test) or heterogeneous variance (Bartlett's test or Levene's test), consideration should be given to transforming the data to homogenise variances prior to performing the ANOVA, or to carrying out a weighted ANOVA.
Izvedba predhodnega tretiranja
Dunnett's test (parametric) on multiple pair-wise comparisons or a Mann-Whitney with Bonferroni adjustment (non-parametric) may be used for non-monotonous dose-response.
Dodajanje homogenizacijskega pufra
Other statistical tests may be used (e.g. Jonckheere-Terpstra test or Williams test) if the dose-response is approximately monotone.
Na seznamu se preveri količina homogenizacijskega pufra, ki ga je treba uporabiti za posamezen vzorec jeter, mikropipeta pa se nastavi (območje količine: 100–1000 μl) na ustrezno količino.
A statistical flowchart is provided in Appendix 8 to help in the decision on the most appropriate statistical test to be used.
Na mikropipeto se namesti čista konica.
Reporting of test results
Homogenizacijski pufer se doda v vse 1,5-mililitrske mikroepruvete z jetri v skladu z zgoraj opisanim postopkom.
Study data should include:
Konice mikropipete ni treba zamenjati z novo.
Testing facility:
Če je konica kontaminirana ali bi lahko bila kontaminirana, jo je treba zamenjati.
Responsible personnel and their study responsibilities
Homogenizacija jeter
Each laboratory should have demonstrated proficiency using a range of representative chemicals
Na homogenizator mikroepruvete se namesti novo pestilo.
Characterisation of test chemical
Pestilo se vstavi v 1,5-mililitrsko mikroepruveto.
Physical nature and relevant physicochemical properties
Homogenizator mikroepruvete se drži tako, da stisne jetra med površino pestila in notranjo steno 1,5-mililitrske mikroepruvete.
Method and frequency of preparation of test concentrations
Homogenizator mikroepruvete mora delovati od 10 do 20 sekund.
Information on stability and biodegradability
Med delovanjem se 1,5-mililitrska mikroepruveta ohlaja z zdrobljenim ledom.
Characterisation of solvent (nature, concentration used)
Pestilo se dvigne iz 1,5-mililitrske mikroepruvete in približno 10 sekund pusti počivati.
Justification of choice of solvent (if other than water)
Nato se izvede vizualni pregled stanja suspenzije.
Species and strain
Če se v suspenziji opazijo deli jeter, se ponovita koraka (3) in (4), da se pripravi zadovoljiv homogenat jeter.
Supplier and specific supplier facility
Suspendirani homogenat jeter se do centrifugiranja hladi na zamrzovalnem stojalu.
Age of the fish at the start of the test and reproductive/spawning status
Za vsak homogenat se pestilo zamenja z novim.
Details of animal acclimation procedure
Vsa jetra se homogenizirajo s homogenizacijskim pufrom v skladu z zgoraj opisanim postopkom.
Body weight of the fish at the start of the exposure (from a sub-sample of the fish stock)
Centrifugiranje suspendiranega homogenata jeter
Test procedure used (test-type, loading rate, stocking density, etc.);
Temperatura ohlajene komore za centrifugiranje se potrdi pri ≤ 5 °C.
Method of preparation of stock solutions and flow-rate;
V ohlajeno centrifugo se vstavijo 1,5-mililitrske mikroepruvete s suspendiranim homogenatom jeter (po potrebi se prilagodi ravnotežje).
The nominal test concentrations, weekly measured concentrations of the test solutions and analytical method used, means of the measured values and standard deviations in the test vessels and evidence that the measurements refer to the concentrations of the test chemical in true solution;
Suspendirani homogenat jeter se 10 minut centrifugira pri 13000 g in ≤ 5 °C.
Dilution water characteristics (including pH, hardness, alkalinity, temperature, dissolved oxygen concentration, residual chlorine levels, total organic carbon, suspended solids and any other measurements made)
Če so supernatanti ustrezno ločeni, se lahko centrifugalna sila in čas centrifugiranja po potrebi prilagodita.
Water quality within test vessels: pH, hardness, temperature and dissolved oxygen concentration;
Po centrifugiranju se preveri, ali so supernatanti ustrezno ločeni (vrhnja plast: lipid, srednja plast: supernatant, spodnja plast: jetrno tkivo).
Detailed information on feeding (e.g. type of food(s), source, amount given and frequency and analyses for relevant contaminants if available (e.g. PCBs, PAHs and organochlorine pesticides).
Če ločitev ni ustrezna, se suspenzija ponovno centrifugira v enakih pogojih.
Evidence that the controls met the acceptance criteria of the test;
Vsi vzorci se odstranijo iz ohlajene centrifuge in na zamrzovalnem stojalu razvrstijo glede na številko vzorca.
Data on mortalities occurring in any of the test concentrations and control;
Paziti je treba, da se ločene plasti po centrifugiranju ne suspendirajo ponovno.
Statistical analytical techniques used, treatment of data and justification of techniques used;
Odvzemanje supernatanta
Data on biological observations of gross morphology, including secondary sex characteristics, egg production and VTG;
Štiri 0,5-mililitrske mikroepruvete za shranjevanje supernatanta se položijo na stojalo za epruvete.
Results of the data analyses preferably in tabular and graphical form;
Z mikropipeto se odvzame 30 μl vsakega supernatanta (ločenega kot srednja plast) in prenese v eno 0,5-mililitrsko mikroepruveto.
Incidence of any unusual reactions by the fish and any visible effects produced by the test chemical
Paziti je treba, da se ne odvzame lipid z vrhnje plasti ali jetrno tkivo s spodnje plasti.
GUIDANCE FOR THE INTERPRETATION AND ACCEPTANCE OF THE TEST RESULTS
Supernatant se odvzame in prenese v drugi dve 0,5-mililitrski mikroepruveti na enak način, kot je opisano zgoraj.
This section contains a few considerations to be taken into account in the interpretation of test results for the various endpoints measured.
Z mikropipeto se odvzame preostali supernatant (če je mogoče: ≥ 100 μl).
The results should be interpreted with caution where the test chemical appears to cause overt toxicity or to impact on the general condition of the test animal.
Nato se supernatant prenese v preostalo 0,5-mililitrsko mikroepruveto.
In setting the range of test concentrations, care should be taken not to exceed the maximum tolerated concentration to allow a meaningful interpretation of the data.
Pokrov 0,5-mililitrske mikroepruvete se zapre in na nalepko zapiše količina supernatanta.
It is important to have at least one treatment where there are no signs of toxic effects.
Takoj zatem se mikroepruvete ohladijo na zamrzovalnem stojalu.
Signs of disease and signs of toxic effects should be thoroughly assessed and reported.
Za vsak supernatant se konica mikropipete zamenja z novo.
For example, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Če se na konico prime veliko lipida, se takoj zamenja z novo, da se prepreči kontaminacija ekstrakta jeter z maščobo.
However, interpretation of effects may be strengthened by other treatment levels that are not confounded by systemic toxicity.
Ves centrifugirani supernatant se prenese v štiri 0,5-mililitrske mikroepruvete v skladu z zgoraj opisanim postopkom.
There are a few aspects to consider for the acceptance of test results.
Ko se supernatant prenese v 0,5-mililitrske mikroepruvete, se te postavijo na stojalo za epruvete z identifikacijskimi nalepkami in takoj nato zamrznejo v zamrzovalniku.
As a guide, the VTG levels in control groups of males and females should be distinct and separated by about three orders of magnitude in fathead minnow and zebrafish, and about one order of magnitude for medaka.
Če se koncentracije VTG merijo takoj po predhodnem tretiranju, se ena 0,5-mililitrska mikroepruveta (ki vsebuje 30 μl supernatanta) ohrani hladna na stojalu za epruvete in prenese na delovno postajo, kjer se izvaja ELISA.
Examples of the range of values encountered in control and treatment groups are available in the validation reports (1, 2, 3, 4).
V takem primeru se preostale mikroepruvete postavijo na rešetke za epruvete in zamrznejo v zamrzovalniku.
High VTG values in control males could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect weak oestrogen agonists.
Po odvzemu supernatanta se ostanki primerno zavržejo.
Low VTG values in control females could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect aromatase inhibitors and oestrogen antagonists.
Shranjevanje vzorcev
The validation studies were used to build that guidance.
Dokler se 0,5-mililitrske mikroepruvete s supernatantom homogenata jeter ne uporabijo za ELISA, se shranijo pri ≤ –70 °C.
Concerning the quantification of egg production, this is subject to important variations [the coefficient of variation (CV) may range from 20 to 60 %] that impinge the ability of the assay to detect a significant decrease in egg production smaller than 70 % as the CV approaches 50 % or more.
Postopek 3A:
When the CV is confined to lower values (around 20-30 %), then the assay will have acceptable power (80 %) to detect 40-50 % decrease in egg production.
Cebrica, odvzem krvi iz repne vene/arterije
The test design used for the fathead minnow, including four replicates per treatment level, should allow more power to the fecundity endpoint, compared to a test design with 2 replicates only.
Takoj po anesteziji se repno steblo prečno prereže in odvzame kri iz repne arterije/vene s heparinizirano mikrohematokritsko kapilarno cevko.
It is recommended that chemicals covering a range of modes of action or impacts on a number of the test endpoints are used.
V mikrokapilarno cevko se doda enaka količina pufra aprotinina (6 mikrogramov/ml v PBS), plazma pa se od krvi loči s centrifugiranjem (5 minut pri 600 g).
In practice, each laboratory is encouraged to build its own historical control data for males and females and to perform a positive control chemical for estrogenic activity (e.g. 17β-estradiol at 100 ng/l, or a known weak agonist) resulting in increased VTG in male fish, a positive control chemical for aromatase inhibition (e.g. fadrozole or prochloraz at 300 μg/l) resulting in decreased VTG in female fish, and a positive control chemical for androgenic activity (e.g. 17β-trenbolone at 5 μg/l) resulting in induction of secondary sex characteristics in female fathead minnow and medaka.
Plazma se zbere v preskusnih epruvetah in shrani pri –20 °C, dokler se ne analizira za VTG ali druge želene beljakovine.
All these data can be compared to available data from the validation studies (1, 2, 3) to ensure laboratory proficiency.
Postopek 3B:
In general, VTG measurements should be considered positive if there is a statistically significant increase in VTG in males (p < 0,05), or a statistically significant decrease in females (p < 0,05) at least at the highest dose tested compared to the control group, and in the absence of signs of general toxicity.
Cebrica, odvzem krvi s punkcijo srca
A positive result is further supported by the demonstration of a biologically plausible relationship between the dose and the response curve.
Da se preprečita koagulacija krvi in razgradnja beljakovin, se vzorci odvzamejo v fosfatnem pufru s soljo (PBS), ki vsebuje heparin (1000 enot/ml) in aprotinin, ki zavira proteazo (2 TIU/ml).
As mentioned earlier, the VTG decrease may not entirely be of endocrine origin; however a positive result should generally be interpreted as evidence of endocrine activity in vivo, and should normally initiate actions for further clarification.
Za sestavine pufra se priporočajo heparin, amonijeva sol in liofilizirani aprotinin.
Gonadal histopathology evaluation may be required by regulatory authorities to determine the reproductive fitness of the test animals and to allow a weight of evidence assessment of the test results.
Za vzorčenje krvi se priporoča brizga (1 ml) s pritrjeno tanko iglo (npr. Braun Omnikan-F).
Performance of gonadal histopathology may not be necessary in cases where either, VTG or secondary sex characteristics is positive (i.e. VTG increase or decrease, or induction of secondary sex characteristics).
Brizga mora biti predhodno napolnjena s pufrom (približno 100 mikrolitrov), da se iz vseh rib v celoti eluirajo majhne količine krvi.
OECD (2006b).
Vzorci krvi se odvzamejo s punkcijo srca.
OECD (2007).
Najprej je treba ribe anestezirati z MS-222 (100 mg/l).
Owens JW (2007).
Ustrezna stopnja anestezije uporabniku omogoča, da razloči srčni utrip cebrice.
US EPA (2007).
Med punkcijo srca naj bo bat brizge pod rahlo napetostjo.
OECD (2008).
Odvzeta količina krvi je v območju 20–40 mikrolitrov.
Sumpter J.P. and S. Jobling (1995).
Po srčni punkciji je treba zmes krvi in pufra prenesti v preskusno epruveto.
Pawlowski S., et al.
Plazma se od krvi loči s centrifugiranjem (20 minut, 5000 g) in jo je treba shraniti pri –80 °C, dokler se ne potrebuje za analizo.
Andersen L., et al (2006).
Postopek 3C
Ankley G.T., et al.
SOP: cebrica, homogenizacija glave in repa
Panter G.H., et al.
Ribe se anestezirajo in evtanazirajo v skladu z opisom preskusa.
Parks L.G., et al.
Glava in rep ribe se odrežeta v skladu s sliko 1.
Part C Pharmacology, toxicology and endocrinology; 123(2):113-25.
Opozorilo: med ravnanji s posameznimi ribami je treba vse instrumente za seciranje in rezalno desko sprati in ustrezno očistiti (npr. s 96-odstotnim etanolom), da se prepreči kontaminacija neinduciranih samcev z vitelogeninom zaradi samic ali induciranih samcev.
Application of an ELISA to quantify vitellogenin concentrations in fathead minnows (Pimephales promelas) exposed to endocrine disrupting chemicals.
Za histologijo spol. žlez
CEFIC-EMSG research report reference AQ001.
Za analizo VTG
CEFIC, Brussels, Belgium.
Rez za to črto
Fenske M., et al.
Za analizo VTG
Development and validation of a homologous zebrafish (Danio rerio Hamilton- Buchanan) vitellogenin enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and its application for studies on estrogenic chemicals.
Teža zbranih glav in repov posameznih rib se izmeri na miligram natančno.
Comp.
Po tehtanju se deli vnesejo v ustrezne epruvete (npr. 1,5-mililitrske Eppendorfove epruvete) in zamrznejo pri –80 °C do homogenizacije oziroma dokler se ne homogenizirajo neposredno na ledu z dvema plastičnima pestiloma.
Biochem.
Ko dobimo homogeno maso, se ji doda 4-kratna teža tkiva ledeno mrzlega homogenizacijskega pufra [1].
Phys.
Delo s pestiloma je treba nadaljevati, dokler zmes ni homogena.
C 129 (3): 217-232.
Opozorilo: za vsako ribo se uporabita novi pestili.
Holbech H., et al.
Vzorci se postavijo na led do začetka centrifugiranja pri 4 °C in 50000 g za 30 minut.
Development of an ELISA for vitellogenin in whole body homogenate of zebrafish (Danio rerio).
S pipeto se supernatant odmeri na dele po 20 μl v vsaj dve epruveti, tako da se konica pipete potopi pod plast maščobe na površini in supernatant previdno izsesa brez delcev maščobe ali peletov.
Comparative Biochemistry and Physiology.
Epruvete se do uporabe hranijo pri – 80 °C.
Part C Pharmacology, toxicology and endocrinology; 130: 119-131 (16) Rose J., et al.
OBOGATENI VZORCI VITELOGENINA IN MEDPRESKUSNI REFERENČNI STANDARD
Vitellogenin induction by 17β-estradiol and 17α-ethinylestradiol in male zebrafish (Danio rerio).
Vsak dan izvedbe preskusov VTG se analizira obogateni vzorec, pripravljen z medpreskusnim referenčnim standardom.
C 131: 531-539.
VTG, uporabljen za pripravo medpreskusnega referenčnega standarda, je iz serije, ki se razlikuje od serije, uporabljene za pripravo kalibracijskih standardov za preskus, ki se izvaja.
Brion F., et al.
Obogateni vzorec se pripravi z dodajanjem znane količine medpreskusnega standarda vzorcu plazme kontrolnih samcev.
Development and validation of an enzyme-linked immunosorbent assay to measure vitellogenin in the zebrafish (Danio rerio).
Vzorec se obogati, da se doseže koncentracija VTG, ki je med 10- in 100-krat večja od pričakovane koncentracije vitelogenina pri kontrolnih ribjih samcih.
Environmental Toxicology and Chemistry; vol 21: 1699-1708.
Vzorec plazme kontrolnih samcev, ki se obogati, lahko izvira iz ene ribe ali pa je sestavljen iz več rib.
Yokota H., et al.
Podvzorec neobogatene plazme kontrolnih samcev se analizira v vsaj dveh podvojenih jamicah.
Development of an ELISA for determination of the hepatic vitellogenin in Medaka (Oryzias latipes).
Tudi obogateni vzorec se analizira v vsaj dveh podvojenih jamicah.
Jpn J Environ Toxicol 4:87–98.
Srednja količina vitelogenina v dveh neobogatenih vzorcih plazme kontrolnih samcev se prišteje izračunani količini VTG, dodanega obogatenim vzorcem, da se določi pričakovana koncentracija.
(19) Tatarazako N., et al.
Razmerje med pričakovano koncentracijo in izmerjeno koncentracijo se sporoči skupaj z rezultati posameznih nizov preskusov, izvedenih na isti dan.
Journal of Health Science 50:301-308.
DIAGRAM POTEKA ZA IZBIRO STATISTIČNE ANALIZE
Effects of the androgenic growth promoter 17-beta-trenbolone on fecundity and reproductive endocrinology of the fathead minnow.
Srednje vrednosti ponov. niso normalno porazdeljene.
Environmental Toxicology and Chemistry; 22(6): 1350-60.
Ugnezdena analiza varianc je normalna.
Seki M, et al (2004).
Tamhane-Dunnettov test
Fish full life-cycle testing for androgen methyltestosterone on medaka (Oryzias latipes).
Regresijski test po Jonckheereju ali Willamsov test
OECD (2010).
Srednje vrednosti ponov. so normalne in homogene.
Guidance Document on Fish Gonadal Histopathology.
Dunnov ali Mann-Whitneyjev test s srednjimi vrednostmi ponov.
OECD Environmental Health and Safety Publications Series on Testing and Assessment No. 123, Paris.
Dunnov test s srednjimi vrednostmi ponov.
OECD (2000) Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures.
Srednje vrednosti ponov. niso normalne ali niso homogene.
Paris
Dunnov ali Mann-Whitneyjev test
Hutchinson T.H., et al.
Transformacija za stabilizacijo varianc?
Aquatic Toxicology, 76; pp.69–92.
Transformacija za normalizacijo?
(2006b).
Ugnezdena analiza varianc je normalna.
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as “signposts”, not “traffic lights,” in risk assessment.
Transformacija za stabilizacijo varianc?
Environmental Health Perspectives; 114 Suppl 1:106-14.
Enake variance
Miles-Richardson S.R., et al.
Regresijski test po Jonckheereju
Effects of waterborne exposure to 17β-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
Nemonoton
Aquat.
Monoton
Toxicol.
Določite, ali je odziv na odmerek monoton.
47, 129-145.
C.49 Preskus akutne toksičnosti ribjega zarodka
Martinovic D., et al.
Ta preskusna metoda (TM) je enakovredna Smernici za preskušanje OECD (TG) 236 (2013).
Characterization of reproductive toxicity of vinclozolin in the fathead minnow and co-treatment with an androgen to confirm an anti-androgenic mode of action.
Opisuje preskus akutne toksičnosti ribjega zarodka pri cebrici (Danio rerio).
Environ.
Preskus je zasnovan tako, da se ugotovi akutna toksičnost kemikalij na embrionalnih fazah rib.
Toxicol.
Preskus akutne toksičnosti ribjega zarodka temelji na študijah in dejavnostih validacije, opravljenih na cebrici (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) (13) (14).
Chem.
Preskus akutne toksičnosti se uspešno uporablja pri številnih kemikalijah z različnimi načini delovanja, topnostjo, hlapnostjo in hidrofobnostjo (njihov pregled je na voljo v virih 15 in 16).
27, 478-488.
Pravkar oplojene ikre cebric se za 96 ur izpostavijo preskusni kemikaliji.
OECD (2006c), Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: A Guidance to Application, OECD Environmental Health and Safety Publications, Series on Testing and Assessment No.54, OECD, Paris.
Vsakih 24 ur se kot indikatorji smrtnosti (6) zabeležijo do štiri opažanja na višjem nivoju biološke organizacije, in sicer (i) koagulacija oplojenih iker, (ii) odsotnost oblikovanja somitov, (iii) odsotnost ločenosti repa od vrečice rumenjaka in (iv) odsotnost srčnega utripa.
(29) US EPA (2008), Peer-Review Results for the Fish Short-Term Reproduction Assay, dated 30 January 2008, US Environmental Protection Agency, Washington DC.
Na koncu obdobja izpostavljenosti se akutna toksičnost določi na podlagi pozitivnega rezultata pri katerem koli od štirih opažanj na višjem nivoju biološke organizacije in izračuna se LC50.
OECD (2012), OECD Conceptual Framework for Testing and Assessment of Endocrine Disrupters, OECD Environmental Health and Safety Publications, Series on Testing and Assessment No. 150, OECD, Paris.
Med uporabne informacije o specifičnih lastnostih snovi spadajo strukturna formula, molekulska masa, čistost, obstojnost v vodi in na svetlobi, pKa in Kow, topnost v vodi, parni tlak in rezultati preskusa za lahko biološko razgradljivost (TM C.4 (17) ali TM C.29 (18)).
ABBREVIATIONS & DEFINITIONS:
Topnost in parni tlak se lahko uporabita za izračun Henryjeve konstante, ki pokaže, ali so verjetne izgube zaradi izhlapevanja preskusne kemikalije.
a substance or a mixture
Na voljo mora biti zanesljiva analitska metoda za kvantifikacijo snovi v testnih raztopinah z znano in izpričano točnostjo ter mejo zaznavnosti.
coefficient of variation
Če se preskusna metoda uporablja za preskušanje zmesi, mora biti njena sestava v čim večji meri opredeljena s kemijsko identiteto sestavin, kvantitativnim pojavljanjem in specifičnimi lastnostmi snovi (glej odstavek 4).
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
Obstajajo dokazi, da imajo zarodki cebric zmožnost biotransformacije za snovi, ki se lahko aktivirajo s presnovo (19) (20) (21) (22).
HPG axis
Vendar presnovna zmogljivost zarodka ribe ni vedno podobna presnovni zmogljivosti mladic ali odraslih rib.
hypothalamic-pituitary-gonadal axis
Pri preskusu akutne toksičnosti na primer ni bil odkrit protoksični alil alkohol (9).
Loading rate
Če torej obstajajo kakršni koli znaki, da so lahko metaboliti ali drugi pomembni produkti pretvorbe bolj strupeni kot izhodiščna spojina, se priporoča tudi, da se preskus izvede s temi metaboliti/produkti pretvorbe in da se tudi ti rezultati uporabijo pri ugotavljanju toksičnosti preskusne kemikalije ali pa da se opravi še en preskus, ki v večji meri upošteva presnovo.
the wet weight of fish per volume of water.
Pri snoveh z molekulsko maso ≥ 3 kDa in zelo veliko molekulsko strukturo ter snoveh, ki povzročajo poznejšo izvalitev, kar bi lahko preprečilo ali zmanjšalo izpostavljenost po izvalitvi, se pričakuje, da zarodki ne bodo občutljivi zaradi omejene biološke dostopnosti snovi, zato bi lahko bili primernejši drugi preskusi toksičnosti.
MTC
Za veljavnost rezultatov preskusa morajo biti izpolnjena naslednja merila:
Maximum Tolerated Concentration, representing about 10 % of the LC50
Skupna stopnja oplojenosti vseh zbranih iker mora v vsaki seriji, ki se preskuša, znašati ≥ 70 %.
Stocking density
Temperatura vode v preskusnih komorah med preskusom nikoli ne sme biti višja ali nižja od 26 °C ± 1 °C.