natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If total amounts of CO2 plus CH4 are to be measured, the pH of the liquid phase is reduced to about pH 2 by the injection of H3PO4 into each relevant bottle and measuring the pressure after 30 minutes shaking at the temperature of the test.
Postopki ravnanja z naravnimi usedlinami pred uporabo v laboratoriju so opisani v (3), (7) in (12).
However, more information on the quality of the inoculum may be obtained by measuring the pressure in each bottle before and after acidification.
Priprava in shranjevanje umetne usedline, priporočene za uporabo v preskusu z vrsto Lumbriculus, je opisana v Dodatku 4.
For example when the rate of CO2 production is much higher than that of methane, the sensitivity of the fermentative bacteria may be altered and/or methanogenic bacteria are preferentially affected by the test chemical.
Preskusna kemikalija se primeša usedlini.
A.18 Paragraph 36:
Ker se pričakuje, da je večina preskusnih kemikalij slabo topna v vodi, jih je za pripravo založne raztopine treba raztopiti v primernem organskem topilu (npr. acetonu, n-heksanu, cikloheksanu) v čim manjši količini.
If H3PO4 is to be used some extra bottles, to which no H3PO4 is added, would have to be set up especially for the pH measurement.
Založna raztopina mora biti za pripravo preskusnih raztopin razredčena z enakim topilom.
REFERENCE:
Strupenost in hlapnost topila ter topnost preskusne kemikalije v izbranem topilu bi morale biti glavna merila za izbiro primernega sredstva za raztapljanje.
Table A.1.
Za vsako raven koncentracije mora biti uporabljena enaka količina ustrezne raztopine.
Examples of the test set-up for test batches
Preskusna kemikalija se primeša v usedlino v celoti za vsako raven koncentracije, da se kar najbolj zmanjša variabilnost med ponovitvami vsake ravni koncentracije preskusne kemikalije.
Reaction Mixture constituents
Vsaka od preskusnih raztopin se nato zmeša s kremenovim peskom, kot je opisano v odstavku 22 (npr. 10 g kremenovega peska na preskusno posodo).
Example 1
Ugotovljeno je, da količina 0,20–0,25 ml na gram peska zadošča za to, da je kremenov pesek v celoti namočen.
Example 2
Nato morajo topila izhlapeti do suhega stanja.
Normal order of addition
Za kar najmanjše izgube preskusne kemikalije zaradi hkratnega izhlapevanja (npr. odvisnega od parnega tlaka kemikalije) mora biti prevlečeni pesek uporabljen takoj po sušenju.
Concentration of prepared inoculum (g/l)
Suhi pesek se zmeša s primerno količino formulirane usedline z ustrezno ravnjo koncentracije.
Volume of inoculum added (ml)
Upoštevati je treba količino peska, prinesenega z mešanico preskusne kemikalije in peska (usedlino je torej treba pripraviti z manj peska).
Concentration of inoculum in test bottles (g/l) 0,20
Glavna prednost tega postopka je, da v usedlino ni vnesenega skoraj nič topila (7).
Volume of test medium added (ml)
Namesto tega se lahko, npr. pri naravni usedlini, preskusna kemikalija doda s primešanjem posušenega in fino zmletega dela usedline, kot je zgoraj opisano za kremenov pesek, ali pa z vmešanjem preskusne kemikalije v vlažno usedlino, pri čemer nato kakršno koli uporabljeno sredstvo za raztapljanje izhlapi.
Volume of dilution water added (ml)
Paziti je treba, da je preskusna kemikalija, dodana usedlini, v njej temeljito in enakomerno razporejena.
Concentration of yeast extract in test bottles (g/l)
Po potrebi je mogoče za potrditev ciljnih koncentracij v usedlini in določanje stopnje homogenosti analizirati podvzorce.
Volume of test chemical stock solution (ml)
Za potrditev ciljnih koncentracij v usedlini je lahko uporabna tudi analiza podvzorcev preskusnih raztopin.
Total liquid volume (ml)
Ker je za prevlečenje kremenovega peska s preskusno kemikalijo uporabljeno topilo, je treba uporabiti kontrolo s topilom, pripravljeno z enako količino topila, kot je uporabljena pri preskusnih usedlinah.
For the purpose of this test method the following definitions are used:
Poročati je treba o metodah, uporabljenih za primešanje, in razlogih za izbiro določenega postopka primešanja, ki ni enak zgoraj opisanemu.
C.35 SEDIMENT-WATER LUMBRICULUS TOXICITY TEST USING SPIKED SEDIMENT
Metode primešanja je mogoče prilagoditi fizikalno-kemijskim lastnostim preskusne kemikalije, npr. za preprečevanje izgub zaradi izhlapevanja med primeševanjem ali uravnoteževanjem.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 225 (2007).
Dodatne smernice o postopkih primešanja so podane v Environment Canada (1995) (46).
Sediment-ingesting endobenthic animals are subject to potentially high exposure to sediment bound chemicals and should therefore be given preferential attention, e.g. (1), (2), (3).
Ko je usedlina s primešano preskusno kemikalijo pripravljena, porazdeljena v ponovitvene preskusne posode in je vanjo dotočena preskusna voda, je zaželeno, da se omogoči porazdelitev preskusne kemikalije iz usedline v vodno fazo (npr. (3)(7)(9)).
Among these sediment-ingesters, the aquatic oligochaetes play an important role in the sediments of aquatic systems.
To je po možnosti treba storiti v temperaturnih in prezračevalnih pogojih, ki bodo uporabljeni v preskusu.
By bioturbation of the sediment and by serving as prey these animals can have a strong influence on the bioavailability of such chemicals to other organisms, e.g. benthivorous fish.
Ustrezen čas za uravnoteženje je odvisen od značilnosti usedline in kemikalije, lahko pa traja od več ur do več dni in v redkih primerih do več tednov (4–5 tednov) (npr. (27)(47)).
In contrast to epibenthic organisms, endobenthic aquatic oligochaetes (e.g. Lumbriculus variegatus) burrow in the sediment, and ingest sediment particles below the sediment surface.
V tem preskusu se na uravnoteženje ne čaka, ampak se za to priporoča obdobje od 48 ur do 7 dni.
This ensures exposure of the test organisms to the test chemical via all possible uptake routes (e.g. contact with, and ingestion of contaminated sediment particles, but also via porewater and overlying water).
Tako bo čas za razgradnjo preskusne kemikalije najkrajši.
This test method is designed to assess the effects of prolonged exposure of the endobenthic oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller) to sediment-associated chemicals.
Usedlino s primešano preskusno kemikalijo je, odvisno od namena študije, npr. če je treba posnemati okoljske pogoje, mogoče uravnoteževati ali starati preko daljšega obdobja.
It is based on existing sediment toxicity and bioaccumulation test protocols, e.g. (3), (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10).
Ob koncu obdobja za uravnoteženje je treba vzeti vsaj vzorce vode nad usedlino in glavnine usedline za analizo koncentracije preskusne kemikalije ter vsaj pri najvišji koncentraciji in nižji koncentraciji.
The method is described for static test conditions.
Te analitske določitve preskusne kemikalije morajo omogočati izračun masne bilance in izražanje rezultatov na podlagi izmerjenih začetnih koncentracij.
The exposure scenario used in this test method is spiking of sediment with the test chemical.
V splošnem vzorčenje moti ali uniči sistem vode in usedline.
Using spiked sediment is intended to simulate a sediment contaminated with the test chemical.
Zato navadno ni mogoče uporabiti istih ponovitev za vzorčenje usedlin in črvov.
Chemicals that need to be tested towards sediment-dwelling organisms usually persist in this compartment over long time periods.
Pripraviti je treba dodatne ‚analitske‘ posode, ki bodo obdelane na enak način (vključno s prisotnostjo preskusnih organizmov), vendar se ne bodo uporabile za biološka opazovanja.
Sediment-dwelling organisms may be exposed via several routes.
Dimenzije posod je treba izbrati tako, da bodo omogočale količine vzorcev, ki jih zahteva analitska metoda.
The relative importance of each exposure route, and the time taken for each to contribute to the overall toxic effects, depends on the physical-chemical properties of the chemical concerned and its ultimate fate in the animal.
Podrobnosti vzorčenja so navedene v odstavku 53.
For strongly adsorbing chemicals (e.g. with log Kow > 5) or for chemicals covalently binding to sediment, ingestion of contaminated food may be a significant exposure route.
IZVEDBA PRESKUSA
In order not to underestimate the toxicity of such chemicals, the food necessary for reproduction and growth of the test organisms is added to the sediment before application of the test chemical (11).
Če informacije strupenosti preskusne kemikalije za vrsto Lumbriculus variegatus niso na voljo, je lahko koristna izvedba predhodnega preskusa za določanje območja koncentracij, ki bodo preskušene v dokončnem preskusu, in za optimizacijo preskusnih pogojev dokončnega preskusa.
The test method described is sufficiently detailed so that the test can be carried out whilst allowing for adaptations in the experimental design depending on the conditions in particular laboratories and the varied characteristics of test chemicals.
Za ta namen se uporabi niz široko razmaknjenih koncentracij preskusne kemikalije.
The test method is aimed to determine effects of a test chemical on the reproduction and the biomass of the test organisms.
Črvi so izpostavljeni vsaki koncentraciji preskusne kemikalije v obdobju (npr. 28 dni, kot v dokončnem preskusu), ki omogoča oceno ustreznih preskusnih koncentracij;
The measured biological parameters are the total number of surviving worms and the biomass (dry weight) at the end of the exposure.
ponovitve niso zahtevane.
These data are analysed either by using a regression model in order to estimate the concentration that would cause an effect of x % (e.g. EC50, EC25, and EC10), or by using statistical hypothesis testing to determine the No Observed Effect Concentration (NOEC) and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC).
Med predhodnim preskusom je treba opazovati in beležiti vedenje črvov, na primer izogibanje usedlini, ki bi ga lahko povzročila preskusna kemikalija in/ali usedlina.
Chapter C.27 of this Annex, “Sediment-water chironomid toxicity test using spiked sediment” (6), provided many essential and useful details for the performance of the presented sediment toxicity test method.
V predhodnem preskusu ne smejo biti preskušene koncentracije, višje od 1000 mg/kg suhe teže usedline.
Hence, this document serves as a basis on which modifications necessary for conducting sediment toxicity tests with Lumbriculus variegatus were worked out.
V dokončnem preskusu mora biti uporabljenih in izbranih vsaj pet koncentracij, npr. na podlagi rezultata predhodnega preskusa za določanje območja delovanja (odstavek 31), in kot je opisano v odstavkih 35, 36, 37 in 38.
Further documents that are referred to are e.g. the ASTM Standard Guide for Determination of the Bioaccumulation of Sediment-Associated Contaminants by Benthic Invertebrates (3), the U.S. EPA Methods for Measuring the Toxicity and Bioaccumulation of Sediment-Associated Contaminants with Freshwater Invertebrates (7), and the ASTM Standard Guide for Collection, Storage, Characterization, and Manipulation of Sediments for Toxicological Testing and for selection of samplers used to collect benthic invertebrates (12).
Poleg preskusne serije je treba izvesti še kontrolo (za ponovitve glej odstavke 36, 37 in 38), ki vsebuje vse sestavine, razen preskusne kemikalije.
In addition, practical experience obtained during ring-testing the test method (13), ring-test report), and details from literature are major sources of information for drawing up this document.
Če se za uporabo preskusne kemikalije uporablja kakršno koli sredstvo za raztapljanje, to ne sme imeti pomembnega vpliva na preskusne organizme, kar pokaže dodatna kontrola, v kateri je samo topilo.
PREREQUISITE AND GUIDANCE INFORMATION
Načrt preskusa se nanaša na izbiro števila preskusnih koncentracij in razmikov med njimi, število posod za vsako koncentracijo in število dodanih črvov na posodo.
Information on the test chemical such as safety precautions, proper storage conditions and analytical methods should be obtained before beginning the study.
Načrti za oceno vrednosti ECx in NOEC ter izvedbo mejnega preskusa so opisani v odstavkih 35, 36, 37 in 38.
Guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to perform the test is provided in (14).
S koncentracijami, vključenimi v preskus, bi morala biti zajeta koncentracija z učinkom (npr. EC50, EC25, EC10) in razpon koncentracije, v katerem je zanimiv vpliv preskusne snovi.
Before carrying out a test, the following information about the test chemical should be known:
Izogibati se je treba ekstrapolaciji veliko pod najnižjo koncentracijo, ki vpliva na preskusne organizme, ali veliko nad najvišjo preskušano koncentracijo.
common name, chemical name (preferably IUPAC name), structural formula, CAS registry number, purity;
Če je – v izjemnih primerih – takšna ekstrapolacija izvedena, mora biti v poročilu to podrobno pojasnjeno.
solubility in water.
Če je treba oceniti vrednost ECx, je treba preskusiti vsaj pet koncentracij in najmanj tri ponovitve za vsako koncentracijo;
The following additional information is considered useful before starting the test:
za kontrolo ali kontrolo s topilom, če se uporablja, se za izboljšanje ocene variabilnosti kontrole priporoča šest ponovitev.
octanol-water partition coefficient, Kow;
Vsekakor je priporočljivo uporabiti dovolj preskusnih koncentracij, da se omogoči dobra ocena modela.
organic carbon-water partitioning coefficient, expressed as Koc;
Faktor med koncentracijami ne sme biti večji od dve (izjema je dopustna, kadar je naklon krivulje koncentracija-odziv majhen).
hydrolysis;
Število ponovitev na posamezno tretirano skupino se lahko zmanjša, če se poveča število preskusnih koncentracij v razponu 5–95 %.
phototransformation in water;
Povečanje števila ponovitev ali zmanjšanje velikosti razmikov med preskusnimi koncentracijami običajno vodi do ožjih intervalov zaupanja za preskus.
biodegradability;
Če je treba oceniti vrednosti LOEC/NOEC, je treba uporabiti vsaj pet preskusnih koncentracij z vsaj štirimi ponovitvami (za kontrolo ali kontrolo s topilom, če se uporablja, se za izboljšanje ocene variabilnosti kontrole priporoča šest ponovitev), faktor med koncentracijami pa ne sme biti večji od dve.
surface tension.
Nekatere informacije o statistični moči, ugotovljene med preskušanjem domnev v krožnem preskusu preskusne metode, so podane v Dodatku 6.
Information on certain characteristics of the sediment to be used should be acquired before the start of the test (7).
Lahko se opravi mejni preskus (z uporabo ene preskusne koncentracije in kontrol), če do 1000 mg/kg suhe teže usedline ni pričakovati nobenih učinkov (npr. iz preskusa določanja območja delovanja) ali če bo preskušanje ene same koncentracije dovolj za potrditev zadevne vrednosti NOEC.
For details see paragraphs 22 to 25.
V slednjem primeru je treba v poročilo o preskusu vključiti podrobno utemeljitev za izbiro mejne koncentracije.
Worms of similar physiological state (synchronised as described in Appendix 5) are exposed to a series of toxicant concentrations applied to the sediment phase of a sediment-water system.
Namen mejnega preskusa je izvesti preskus pri dovolj visoki koncentraciji, da lahko nosilci odločanja izključijo mogoče strupene učinke preskusne kemikalije, meja pa je določena pri koncentraciji, za katero ni pričakovati, da bi se pojavila v katerem koli primeru.
Artificial sediment and reconstituted water should be used as media.
Priporočenih je 1000 mg/kg (suhe teže).
Test vessels without the addition of the test chemical serve as controls.
Običajno je potrebnih vsaj šest ponovitev za tretirane skupine in kontrole.
The test chemical is spiked into the sediment in bulk for each concentration level in order to minimise variability between replicates of each concentration level, and the test organisms are subsequently introduced into the test vessels in which the sediment and water concentrations have been equilibrated (see paragraph 29).
Pogoji izpostavljenosti
The test animals are exposed to the sediment-water systems for a period of 28 days.
Preskus se izvede z vsaj 10 črvi za vsako ponovitev, uporabljeno za določanje bioloških parametrov.
In view of the low nutrient content of the artificial sediment, the sediment should be amended with a food source (see paragraphs 22 to 23, and Appendix 4) to ensure that the worms will grow and reproduce under control conditions.
To število črvov ustreza približno 50– 100 mg mokre biomase.
In this way it is ensured that the test animals are exposed through the water and sediment as well as by their food.
S predpostavko, da vsebnost suhe snovi znaša 17,1 % (48), to pomeni približno 9– 17 mg suhe biomase na posodo.
The preferred endpoint of this type of study is the ECx (e.g. EC50, EC25, and EC10; effect concentration, affecting x % of the test organisms) for reproduction and biomass, respectively, compared to the control.
V metodah US EPA (2000 (7)) je priporočena uporaba stopnje obremenitve, ki ne presega 1:
It should however be noted, that considering the high uncertainty of low ECx (e.g. EC10, EC25) with extremely high 95 %-confidence limits (e.g. (15)) and the statistical power calculated during hypothesis testing, the EC50 is regarded the most robust endpoint.
50 (suha biomasa: skupni organski ogljik).
In addition, the No Observed Effect Concentration (NOEC), and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC) may be calculated for biomass, and reproduction, if the test design and the data support these calculations (see paragraphs 34 to 38).
Za formulirano usedlino, opisano v odstavku 22, to ustreza približno 43 g usedline (suhe teže) na 10 črvov pri vsebnosti skupnega organskega ogljika, ki znaša 2,0 % suhe usedline.
The purpose of the study, ECx or NOEC derivation, will determine the test design.
V primerih, ko je na posodo uporabljenih več kot 10 črvov, je treba ustrezno prilagoditi količino usedline in vode nad njo.
REFERENCE TESTING
Vsi črvi, uporabljeni v preskusu, morajo prihajati iz istega vira in biti v enakem fiziološkem stanju (glej Dodatek 5).
Performance of the control organisms is expected to demonstrate sufficiently the ability of a laboratory to perform the test, and if historical data are available, the repeatability of the test.
Izbrati je treba črve podobnih velikosti (glej odstavek 39).
In addition, reference toxicity tests may be conducted in regular intervals using a reference toxicant to assess the sensitivity of the test organisms.
Priporočeno je, da se podvzorci serije ali zaloge črvov pred preskusom stehtajo, da se tako oceni srednja teža.
96 h reference toxicity tests in water only may satisfactorily demonstrate the sensitivity and condition of the test animals (4)(7).
Črvi, ki bodo uporabljeni v preskusu, se odstranijo iz kulture (za podrobnosti glej Dodatek 5).
Information on the toxicity of pentachlorophenol (PCP) in complete tests (28 d exposure to spiked sediment) is included in Appendix 6, and in the report on the ring test of the Test Method (13).
Velike (odrasle) živali, ki ne kažejo znakov nedavne fragmentacije, se prenesejo v steklene posode (npr. petrijevke), ki vsebujejo čisto vodo.
The acute, water-only toxicity of PCP is described e.g. in (16).
Nato se sinhronizirajo, kot je opisano v Dodatku 5.
This information can be used for comparison of test organism sensitivity in reference tests with PCP as reference toxicant.
Po obnavljanju, ki traja od 10 do 14 dni, se za preskus uporabijo nepoškodovani, celi črvi podobne velikosti, ki po nežnem mehanskem dražljaju dejavno plavajo ali se plazijo.
Potassium chloride (KCl) or copper sulphate (CuSO4) have been recommended as reference toxicants with L. variegatus (4)(7).
Če se preskusni pogoji razlikujejo od pogojev gojenja (npr. v temperaturi, režimu osvetljenosti in vodi nad usedlino), bi morala faza aklimatizacije, ki traja npr. 24 ur pri enaki temperaturi, režimu osvetljenosti in vodi nad usedlino, kot so uporabljeni v preskusu, zadoščati za prilagoditev črvov preskusnim pogojem.
To date, establishment of quality criteria based on toxicity data for KCl is difficult due to lack of literature data for L. variegatus.
Prilagojene maloščetince je treba naključno dodeliti preskusnim posodam.
Information on the toxicity of copper towards L. variegatus can be found in (17) to (21).
Ker se hrana usedlini doda pred (ali med) vnosom preskusne kemikalije, se črvi med preskusom ne hrani še dodatno.
For a test to be valid, the following requirements should be fulfilled:
Svetloba in temperatura
A ring-test (13) has shown that for Lumbriculus variegatus, the average number of living worms per replicate in the controls should have increased by a factor of at least 1,8 at the end of exposure compared to the number of worms per replicate at the start of exposure.
Obdobje osvetljenosti v kulturi in preskusu običajno traja 16 ur (3), (7).
The pH of the overlying water should be between 6 and 9 throughout the test.
Jakost svetlobe mora ostati nizka (npr. 100–500 lx), da se posnema naravne pogoje na površini usedline, izmeriti pa jo je treba vsaj enkrat med obdobjem izpostavljenosti.
The oxygen concentration in the overlying water should not be below 30 % of air saturation value (ASV) at test temperature during the test.
Temperatura mora biti ves čas preskusa 20 ± 2 °C.
Static systems without renewal of the overlying water are recommended.
Na določen dani datum merjenja razlika v temperaturi med preskusnimi posodami ne sme presegati ± 1 °C.
If the sediment-to-water ratio (see paragraph 15) is appropriate, gentle aeration will normally suffice to keep the water quality at acceptable levels for the test organisms (e.g. maximise dissolved oxygen levels, minimise build-up of excretory products).
Preskusne posode je treba postaviti v preskusni inkubator ali preskusno območje naključno, da se npr. kar najbolj zmanjša vpliv mesta posode na razmnoževanje.
Semi-static or flow-through systems with intermittent or continuous renewal of overlying water should only be used in exceptional cases, since regular renewal of overlying water is expected to affect chemical equilibrium (e.g. losses of test chemical from the test system).
Prezračevanje
The exposure should be conducted in glass beakers of e.g. 250 ml measuring 6 cm in diameter.
Vodo nad usedlino v preskusnih posodah je treba rahlo prepihovati (npr. z 2–4 mehurčki na sekundo) prek Pasteurjeve pipete, postavljene približno 2 cm nad površino usedline, da se usedlino čim manj vznemirja.
Other suitable glass vessels may be used, but they should guarantee a suitable depth of overlying water and sediment.
Treba je paziti, da koncentracija raztopljenega kisika ne pade pod 30 % nasičenosti zraka (ASV).
Each vessel should receive a layer of approximately 1,5 – 3 cm of formulated sediment.
Dovod zraka je treba nadzirati in po potrebi vsaj enkrat na dan ob delavnikih prilagoditi.
The ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be 1:4.
Meritve kakovosti vode
The vessels should be of suitable capacity in compliance with the loading rate, i.e. the number of test worms added per weight unit of sediment, (see also paragraph 39).
V vodi nad usedlino je treba meriti naslednje parametre kakovosti:
Test vessels and other apparatus that will come into contact with the test chemical should be made entirely of glass or other chemically inert material.
vsaj v eni preskusni posodi vsake ravni koncentracije in eni preskusni posodi kontrol enkrat na teden ter na začetku in koncu obdobja izpostavljenosti.
Care should be taken to avoid the use of materials, for all parts of the equipment that can dissolve, absorb test chemicals or leach other chemicals and have an adverse effect on the test animals.
po možnosti se lahko dodatno, npr. v enournih časovnih razmikih, izmeri temperatura okoliškega medija (zraka ali vodne kopeli).
Polytetrafluoroethylene (PTFE), stainless steel and/or glass should be used for any equipment having contact with the test media.
Koncentracija raztopljenega kisika:
For organic chemicals known to adsorb to glass, silanised glass may be required.
izražena v mg/l in % ASV (nasičenosti zraka).
In these situations the equipment will have to be discarded after use.
Dovod zraka:
Test species
treba ga je nadzirati in ga po potrebi vsaj enkrat na dan ob delavnikih prilagoditi.