natgillin/translations-raw huggingface dataset:
(removal = females used for the test)
Pregled zadevnih pogojev biološkega preskusa je naveden v Dodatku 2.
20 days
Preskus se običajno začne z ribo, ki je bila vzorčena iz populacije, ki se drsti;
The adult test animals are removed from the synchronised culture and introduced into the test vessels between the 28th and the 35th day after the parental females have started egg laying (i.e. 7 – 14 days after they became adult).
starajoče se živali se ne smejo uporabiti.
This ensures that the test animals have already passed their preoviposition period and have been mated by males that are also present in the culture vessel.
Smernice glede starosti rib in razmnoževalnega stanja so navedene v razdelku Izbira rib.
Observations in laboratory cultures suggest, that females mate immediately or shortly after becoming adult if males are present (Ruf, Vaninnen, pers. obs.).
Preskus se izvede s tremi koncentracijami kemikalije za izpostavljanje, kontrolo z vodo in po potrebi kontrolo s topilom.
The period of seven days is chosen to facilitate integration in laboratory routine and to buffer individual developmental variability among mites.
Pri medaki in cebrici se uporabita dve posodi ali ponovitvi na tretiranje (vsaka posoda vsebuje 5 samcev in 5 samic), pri črnoglavem pisancu pa štiri posode ali ponovitve na tretiranje (vsaka posoda vsebuje 2 samca in 4 samice).
The oviposition should be started with at least the same number of females that is eventually needed for the test (If for example 400 females are needed in the test, at least 400 females should be allowed to oviposit for two to three days.
To je namenjeno prilagoditvi teritorialnega vedenja samcev črnoglavega pisanca ob hkratni ohranitvi ustrezne moči preskusa.
At least 1200 eggs should be the starting point for the synchronised population (sex ratio ca.
Izpostavljenost traja 21 dni, vzorčenje rib pa se izvaja 21. dan izpostavljenosti.
0,5, mortality ca. 0,2).
Pri vzorčenju na 21. dan se vse živali humano usmrtijo.
To avoid cannibalism, it is more feasible to keep not more than 20-30 ovipositing females in one vessel.
Sekundarne spolne značilnosti se merijo pri črnoglavem pisancu in medaki (glej Dodatek 5A in Dodatek 5B);
Extraction methods
MERILA ZA SPREJEMLJIVOST PRESKUSA
For micro-arthropods a heat extraction is an appropriate method to separate specimens from the soil / substrate (see figure below).
Za sprejemljivost rezultatov preskusa morajo biti izpolnjeni naslednji pogoji:
The method is based on the activity of the organisms, so only mobile specimens will have the chance to be recorded.
smrtnost v kontrolah z vodo (ali topilom) ob koncu obdobja izpostavljenosti ne sme preseči 10 %,
The principle of the heat extraction is to make conditions for the organisms gradually worse in the sample, so that they will leave the substrate and fall in a fixing liquid (e.g. ethanol).
koncentracija raztopljenega kisika mora biti v celotnem obdobju izpostavljenosti vsaj 60 % nasičenosti z zrakom (ASV),
Crucial points are the duration of the extraction and the gradient of good to moderate to bad conditions for the organisms.
razlika v temperaturi vode v različnih preskusnih posodah v obdobju izpostavljenosti nikoli ne sme biti večja od ± 1,5 °C in jo je treba vzdrževati v razponu 2 °C znotraj temperaturnih razponov, ki so določeni za preskusno vrsto (Dodatek 2),
The duration of extraction for ecotoxicological tests have to be as short as possible, because any population growth during the time of extraction would falsify the results.
na voljo morajo biti dokazi, da so se koncentracije preskusne kemikalije v raztopini zadovoljivo vzdrževale v okviru ± 20 % srednjih izmerjenih vrednosti.
On the other hand the temperature and moisture conditions in the sample have to be always in a range that allows the mites to move.
Običajna laboratorijska oprema in zlasti naslednje:
The heating of a soil sample leads to a desiccation of substrate.
oksimetri in merilniki pH;
If the desiccation is too quick, some mites might also desiccated before they managed to escape.
oprema za določanje trdote in alkalnosti vode;
Therefore the following procedure is proposed (24) (25): Apparatus:
ustrezne naprave za nadzor temperature in, po možnosti, stalno spremljanje;
Tullgren funnel or comparable methods like e.g. McFadyen (heating from above, sample is put over a funnel) Heating regime:
bazeni, izdelani iz kemijsko inertnih materialov, ter primerne prostornine glede na priporočeno obremenitev in gostoto rib (glej Dodatek 2);
25 °C for 12 h, 35 °C for 12 h, 45 °C for 24 hours (in total 48 h).
substrat za drstenje črnoglavega pisanca in cebrice; potrebne podrobnosti so navedene v Dodatku 4;
The temperature should be measured in the substrate.
primerna točna tehtnica (tj. točna do ± 0,5 mg).
Fixation liquid:
Za preskusno vodo se lahko uporabi katera koli voda, v kateri kaže preskusna vrsta primerno dolgotrajno preživetje in rast.
70 % ethanol
Voda mora biti ves čas trajanja preskusa konstantne kakovosti.
Details:
Vrednost pH vode mora biti med 6,5 in 8,5, v enem preskusu pa mora biti v območju ± 0,5 pH enote.
Take glass vial that was used for the test.
Za zagotovitev, da voda za redčenje ne bi neprimerno vplivala na rezultat preskusa (na primer s kompleksacijo preskusne kemikalije), je treba v časovnih razmikih odvzemati vzorce za analizo.
Remove lid and wrap a piece of mesh or fabric around the opening.
Izvajati je treba meritve težkih kovin (npr. Cu, Pb, Zn, Hg, Cd in Ni), glavnih anionov in kationov (npr. Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl– in SO42–), pesticidov (npr. skupnih organofosfornih in skupnih organoklornih pesticidov), skupnega organskega ogljika in suspendiranih trdnih snovi, na primer vsake tri mesece, kadar se ve, da je voda za redčenje razmeroma konstantne kakovosti.
The fabric should have a mesh size of 1,0 to 1,5 mm.
Če se dokaže, da je bila kakovost vode konstantna vsaj eno leto, se lahko meritve izvajajo manj pogosto, časovni razmiki pa se lahko podaljšajo (npr. na vsakih šest mesecev).
Fix the fabric with an elastic band.
Nekatere kemijske značilnosti sprejemljive vode za redčenje so navedene v Dodatku 3.
Carefully turn the vial upside down and place it in the extraction apparatus.
Preskusne raztopine izbranih koncentracij se pripravijo z redčenjem založne raztopine.
The fabric prevents substrate from trickling in the fixation liquid but allows mites to leave the sample.
Založno raztopino je treba po možnosti pripraviti preprosto z mešanjem ali stresanjem preskusne kemikalije v vodi za redčenje z uporabo mehanskih sredstev (npr. z mešanjem ali ultrazvočnim razbijanjem).
End the extraction after 48 hours.
Uporaba topila kot nosilca ni priporočena.
Remove fixation vials and count mites by means of a dissecting microscope.
Če je topilo potrebno, je treba vzporedno izvajati kontrolo s topilom z enako koncentracijo topila kot pri kemičnih obdelavah.
The extraction efficiency of the chosen method must have been proven once or twice a year using vessels containing a known number of juvenile and adult mites kept in untreated test substrate.
Za kemikalije, ki jih je težko preskusiti, je lahko topilo tehnično najboljša rešitev;
Efficiency should be ≥ 90 % on average combined for all developmental stages.
upoštevati je treba Smernico OECD za preskušanje strupenosti zahtevnih snovi in zmesi v vodnem okolju (22).
Tullgren-type extracting device
Topilo se izbere na podlagi kemijskih lastnosti kemikalije.
Wire mesh barrier
V Smernici OECD se priporoča največ 100 μl/l, kar je treba upoštevati.
How to prepare the test vial after the test is finished, before extraction
Vendar so bili v zadnjem pregledu (23) izraženi dodatni pomisleki glede uporabe topil za preskušanje endokrinega delovanja.
Identification of Hypoaspis (Geolaelaps ) aculeifer
Zato se priporoča, da se koncentracije topila po potrebi čim bolj zmanjšajo, kadar koli je to tehnično izvedljivo (odvisno od fizikalno-kemijskih lastnosti preskusne kemikalije).
Subclass/order/suborder:
Uporabil se bo pretočni preskusni sistem.
Family:
Tak sistem stalno odmerja in redči založno raztopino preskusne kemikalije (npr. merilna črpalka, proporcionalni razredčevalnik in sistem naprav za nasičenje), da dovaja niz koncentracij v preskusne komore.
Genus/subgenus/species:
Pretok založnih raztopin in vode za redčenje je treba preverjati v ustreznih časovnih razmikih, po možnosti vsak dan, med preskusom in se ne sme razlikovati za več kot 10 % med celotnim preskusom.
Author and Date:
Izogibati se je treba uporabi nizkokakovostnega cevnega materiala ali drugih materialov, ki lahko vsebujejo biološko aktivne kemikalije.
Literature used:
Pri izbiri materiala za pretočni sistem je treba upoštevati morebitno adsorpcijo preskusne kemikalije v ta material.
Deterministic characteristics:
Vzdrževanje rib
Tectum with rounded denticulate edge;
Preskusne ribe je treba izbrati iz laboratorijske populacije, po možnosti iz enega staleža, ki so se vsaj dva tedna pred preskusom aklimatizirale, kar zadeva kakovost vode in osvetljenost, v pogojih, podobnih tistim, ki se uporabijo v preskusu.
hypostomal grooves with more than 6 denticles;
Pomembno je, da sta obremenitev in gostota rib (za opredelitvi glej Dodatek 1) primerni za uporabljene preskusne vrste (glej Dodatek 2).
caudal dorsal setae of Z4 not very long;
Po 48 urah od naselitve se zabeleži smrtnost, pri čemer se uporabijo naslednja merila:
dorsal setae setiform;
smrtnost v sedmih dneh je večja od 10 % populacije:
genital shield normal, not very enlarged and not reaching the anal shield;
celotna serija se zavrne,
posterior half of dorsal shield without unpaired setae;
smrtnost med 5 in 10 % populacije:
legs II and IV with some thick macrosetae;
aklimatizacija sedem dodatnih dni;
dorsal seta Z5 about two times longer than J5;
če je v drugih sedmih dneh smrtnost večja od 5 %, se zavrne celotna serija,
fixed digit of chelicera with 12-14 teeth and movable digit with 2 teeth;
smrtnost v sedmih dneh manjša od 5 % populacije:
Idiosoma 520-685 μm long.
serija se sprejme.
Hypoaspis miles is also used in biological control and might get confused with H. aculeifer.
Bolezni rib se v obdobju aklimatizacije, obdobju pred izpostavljenostjo ali v obdobju izpostavljenosti ne smejo zdraviti.
The main difference is:
Predhodna izpostavljenost in izbira rib
H. miles belongs to subgenus Cosmolaelaps and has knife-like dorsal setae while H. aculeifer belongs to subgenus Geolaelaps and has setiform dorsal setae.
Priporoča se enotedensko obdobje predhodne izpostavljenosti, pri čemer so živali v posodah, podobnim posodam v dejanskem preskusu.
Hypoaspis aculeifer, dorsal shield with characteristic setae Hypoaspis aculeifer
Ribe je treba v celotnem obdobju vzdrževanja in med fazo izpostavljenosti hraniti ad libitum.
Original drawings by F. Faraji
Faza izpostavljenosti se začne s spolno dimorfnimi odraslimi ribami iz laboratorijske zaloge razmnoževalno zrelih živali (npr. z jasno vidnimi sekundarnimi spolnimi značilnostmi pri črnoglavem pisancu in medaki) in aktivnim drstenjem.
Hypoaspis miles After Hughes, 1976
Na splošno (vendar se to ne sme upoštevati brez opazovanja dejanskega razmnoževalnega stanja zadevne serije rib) morajo biti črnoglavi pisanci stari približno 20 (±2) tednov, če so bili v celotni življenjski dobi gojeni pri 25 ± 2 °C.
Hypoaspis aculeifer After Hughes, 1976
Japonske medake morajo biti stare približno 16 (±2) tednov, če so bile v celotni življenjski dobi gojene pri 25 ± 2 °C.
Leg IV (female)
Cebrice morajo biti stare približno 16 (±2) tednov, če so bile v celotni življenjski dobi gojene pri 26 ± 2 °C.
Leg II (female)
NAČRT PRESKUSA
Basic information on the biology of Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer
Uporabijo se tri koncentracije preskusne kemikalije, ena kontrola (z vodo) in po potrebi ena kontrola s topilom.
Hypoaspis aculeifer belongs to the family Lealapidae, order Acari (mites), class Arachnida, tribe Arthropoda.
Podatki se lahko analizirajo, da se določijo statistično značilne razlike med odzivi na tretiranje in odzivi v kontrolah.
They are living in all kinds of soil and feed on other mites, nematodes, enchytraeids and collembolans (26).
Te analize bodo pokazale, ali je za kemikalijo potrebno nadaljnje dolgotrajno preskušanje glede škodljivih učinkov (in sicer preživetje, razvoj, rast in razmnoževanje) namesto uporabe za oceno tveganja (24).
In case of food shortage they switch to cannibalism (27).
Pri cebrici in medaki se na 21. dan poskusa samci in samice iz posameznih stopenj tretiranja (5 samcev in 5 samic v vsaki od dveh ponovitev) ter kontrol vzorčijo za meritev vitelogenina in sekundarnih spolnih značilnosti, če je primerno.
Predatory mites are segmented in idiosoma and gnathosoma.
Pri črnoglavem pisancu se na 21. dan izpostavljenosti samci in samice iz posameznih ravni tretiranja (2 samca in 4 samice v vsaki od štirih ponovitev) in kontrol vzorčijo za meritev vitelogenina in sekundarnih spolnih značilnosti.
A clear differentiation of the idiosoma in prosoma (head) and opisthosoma (abdomen) is missing.
Za namen tega preskusa je treba najvišjo preskusno koncentracijo določiti z najvišjo tolerančno koncentracijo (MTC), ki se določi z napravo za ugotavljanje razpona ali na podlagi drugih podatkov o strupenosti, ali 10 mg/l ali največjo topnostjo v vodi, odvisno od tega, katera vrednost je nižja.
The gnathosoma (head shield) contains the instruments for feeding such as palps and chelicera.
MTC je opredeljena kot najvišja preskusna koncentracija kemikalije, ki povzroči manj kot 10-odstotno smrtnost.
The chelicers are trifurcated and tusked with teeth of different shape.
Pri uporabi tega pristopa se domneva, da obstajajo empirični podatki o akutni strupenosti ali drugi podatki o strupenosti, na podlagi katerih je mogoče oceniti MTC.
Beside ingestion the males are using their chelicers mainly to transfer the spermatophores to the females.
Ocena MTC je lahko netočna, pri čemer je običajno potrebna strokovna presoja.
A dorsal shield covers nearly completely the idiosoma.
Potrebne so tri preskusne koncentracije, ki se med seboj razlikujejo za konstantni faktor, ki ne presega 10, in kontrola z vodo za redčenje (ter po potrebi kontrola s topilom).
A big part of the female idiosoma is occupied by the reproductive organs, which are in particular distinct shortly before egg deposition.
Priporoča se razpon faktorjev razmika med 3,2 in 10.
Ventrally, two shields can be found, the sternal and the genital shield.
Izbira in tehtanje preskusnih rib
All legs are provided with bristles and thorns.
Pomembno je, da se že na začetku preskusa čim bolj zmanjša variacija teže rib.
The bristles are used to anchor when moving in or on top of the soil.
Primerni razponi velikosti za različne vrste, priporočene za uporabo v tem preskusu, so navedeni v Dodatku 2.
The thorns of the fourth pair of legs can serve as protection as well as “moving motor” (28).
Pogoji izpostavljenosti
Males are 0,55 - 0,65 mm long and have a weight of 10 - 15 μg.
Preskus traja 21 dni po obdobju predhodne izpostavljenosti.
Females are 0,8 - 0,9 mm long and are weighing 50 - 60 μg (8) (28) (Fig 1).
Priporočeno obdobje predhodne izpostavljenosti traja en teden.
Figure 1
Ribe je treba hraniti ad libitum s primerno hrano (Dodatek 2) dovolj pogosto, da se vzdržuje telesna kondicija.
Female, male, protonymph and larvae of H. aculeifer.
Paziti je treba, da ne pride do rasti mikrobov in kalnosti vode.
At 23 °C, the mites become sexually mature after 16 days (females) and 18 days (males), respectively (6).
Kot splošna smernica se lahko dnevni obrok razdeli na dva ali tri enake dele za večkratno krmljenje, pri čemer morajo med posameznimi krmljenji preteči vsaj tri ure.
The females carry over the sperms by the solenostom where they will be then transferred to the ovar.
En večji obrok je sprejemljiv zlasti ob vikendih.
In the ovar the sperms mature and will be stored.
Hranjenje rib je treba prekiniti 12 ur pred vzorčenjem/nekropsijo.
Fertilisation takes place only after maturation of the sperms in the ovar.
Ribjo hrano je treba oceniti glede na prisotnost onesnaževal, kot so organoklorni pesticidi, policiklični aromatski ogljikovodiki (PAH) in poliklorirani bifenili (PCB).
The fertilised or unfertilised eggs will be deposited by the females in clumps or separately, preferably in crevices or holes.
Izogibati se je treba hrani z višjo ravnjo fitoestrogenov, ki bi lahko ogrozili odziv preskusa na znani agonist estrogena (npr. 17-beta estradiol).
Copulated females can bear juveniles of both sexes whereas from eggs of uncopulated females only male juveniles are hatching.
Neprebavljeno hrano in iztrebke je treba odstraniti iz preskusnih posod vsaj dvakrat na teden, npr. s previdnim čiščenjem dna posameznega bazena z uporabo sesalne natege.
During development to the adult four phases of development (egg — larvae, larvae — protonymph, protonymph — deutonymph, deutonymph — adult) are passed through.
Obdobje osvetljenosti in temperatura vode morata biti ustrezna za preskusno vrsto (glej Dodatek 2).
The egg is milky white, hyaline, elliptical and approximately 0,37 mm long with a solid mantle.
Pogostost analitskih določitev in meritev
According to (8), the larvae are between 0,42 - 0,45 mm in size.
Pred začetkom obdobja izpostavljenosti je treba zagotoviti ustrezno delovanje sistema za dovajanje kemikalije.
They have only three pairs of legs.
Vzpostaviti je treba vse potrebne analitske metode, vključno z zadostnim znanjem o stabilnosti kemikalije v preskusnem sistemu.
In the head region palps and chelicers are developed.
Med preskusom se koncentracije preskusne kemikalije določijo v rednih časovnih razmikih, kot sledi:
The chelicers, having some few small denticles, are used to hatch from the egg.
pretoke redčila in založne raztopine strupene snovi je treba po možnosti preveriti vsak dan, vendar vsaj dvakrat na teden, pri čemer se ves čas preskusa ne smejo razlikovati za več kot 10 %.
After the first moult, 1 - 2 days after hatching, the protonymphs are developed.
Priporoča se, da se dejanske koncentracije preskusne kemikalije izmerijo v vseh posodah na začetku preskusa in nato v tedenskih časovnih razmikih.
They are also white, the size is 0,45 - 0,62 mm (8) and they have four pairs of legs.
Priporoča se, da rezultati temeljijo na merjenih koncentracijah.
On the chelicers the teeth are completely present.
Če pa se je koncentracija preskusne kemikalije v raztopini zadovoljivo vzdrževala znotraj ± 20 % nominalne koncentracije ves čas preskusa, lahko rezultati temeljijo na nominalnih ali merjenih vrednostih.
Beginning with that stadium the mites start to forage.
Vzorce bo morda treba filtrirati (npr. z uporabo filtra z velikostjo por 0,45 μm) ali centrifugirati.
For that reason the cuticula of the prey is pierced with the chelicers and a secretion for the extra intestinal digestion is emitted into the prey.
Če je filtracija potrebna, je priporočeni postopek centrifugiranje.
The food mash can then be sucked by the mite.
Če pa se preskusni material ne adsorbira na filtre, je lahko sprejemljivo tudi filtriranje.
The chelicers can also be used to rip bigger particles out of food nuggets (28).
Temperatura se po možnosti stalno spremlja v vsaj eni preskusni posodi.
After one further moult the deutonymphs are developed.
Med potekom preskusa ali ob prekinitvi preskusa se ocenijo številni splošni (npr. preživetje) in glavni biološki odzivi (npr. ravni vitelogenina).
They are 0,60 - 0,80 mm (8) in size and yellow to light brown in colour.
Meritev in vrednotenje teh končnih točk ter njihova uporabnost so opisani v nadaljevanju.
Beginning with that phase they can be separated into females and males.
Preživetje
After further ecdysis, during which time the animals are inactive and the brown shield is developing (approx. after 14 days) the mites are adult (28) (29) (30).Their life span is between 48 and 100 days at 25 °C (27).
Ribe je treba v obdobju preskusa pregledati vsak dan, vsako smrtnost zabeležiti, mrtve ribe pa čim prej odstraniti.
Appendix 8
Mrtve ribe se ne smejo nadomestiti niti v kontrolnih posodah niti v tretiranih posodah.
Summary and time schedule of the main actions to be taken in order to perform the Hypoaspis test
Spol rib, ki poginejo med preskusom, je treba določiti z makroskopskim vrednotenjem spolnih žlez.
Time (days)
Obnašanje in videz
test start = day 0
Vsako nenormalno obnašanje (glede na kontrole) je treba zabeležiti;
Activity / task
to lahko vključuje znake splošne strupenosti, vključno s hiperventilacijo, nekoordiniranim plavanjem, izgubo ravnotežja in netipičnim mirovanjem ali hranjenjem.
Day – 35
Zabeležiti je treba tudi zunanje nenormalnosti (kot sta hemoragija in razbarvanje).
to – 28
Take znake strupenosti je treba pri razlagi podatkov previdno obravnavati, ker lahko nakazujejo koncentracije, pri katerih biomarkerji endokrinega delovanja niso zanesljivi.
Transfer females from stock culture to clean vessels to start synchronisation
Taka opažanja v zvezi z obnašanjem lahko zagotovijo tudi koristne kvalitativne informacije, ki kažejo mogoče zahteve za prihodnje preskušanje rib.
2 days later:
Na primer teritorialna agresivnost normalnih samcev ali maskuliniziranih samic je bila opažena pri črnoglavem pisancu, ki je bil izpostavljen androgenemu delovanju;
removal of females
pri cebrici se značilno obnašanje pri parjenju in drstenju po svitanju zmanjša ali ga ovira izpostavljenost estrogenemu ali antiandrogenemu delovanju.
Twice or three times a week:
Ker se lahko nekateri vidiki videza (zlasti barva) pri rokovanju hitro spremenijo, je pomembno, da se kvalitativno opazovanje izvede pred odstranitvijo živali iz preskusnega sistema.
supply with sufficient food
Dosedanje izkušnje s črnoglavim pisancem kažejo, da lahko nekatere kemikalije z endokrinim delovanjem na začetku povzročijo spremembe naslednjih zunanjih značilnosti:
Day – 5 (+/- 2)
barvo telesa (svetlo ali temno), vzorce obarvanja (prisotnost navpičnih prog) in obliko telesa (območje glave in prsi).
Prepare artificial soil
Zato je treba opazovanje fizičnega videza rib izvesti med potekom preskusa in ob koncu študije.
Day – 4 (+/- 2)
Humano ubijanje rib
Determine WHC of artificial soil
Na 21. dan, tj. ob prekinitvi izpostavljenosti, je treba ribe evtanazirati s primernimi količinami trikaina (trikain metan sulfonat, metakain, MS-222 (CAS 886-86-2), 100–500 mg/l, pufran s 300 mg/l NaHCO3 (natrijev bikarbonat, CAS 144-55-8)), da se zmanjša draženje sluznice; kri ali tkivo se nato vzorči za določitev vitelogenina, kot je pojasnjeno v razdelku Vitelogenin.
Dry over night
Opazovanje sekundarnih spolnih značilnosti
Next day:
Nekatere kemikalije z endokrinim delovanjem lahko povzročijo spremembe pri določenih sekundarnih spolnih značilnostih (število drstnih izpuščajev pri samcu črnoglavega pisanca in bradavičastih podaljškov pri samcu medake).
weigh samples and calculate WHC
Kemikalije z nekaterimi načini delovanja lahko povzročijo nenormalen pojav sekundarnih spolnih značilnosti pri živalih nasprotnega spola;
Day – 4 (+/– 2)
agonisti androgenega receptorja, kot so trenbolon, metiltestosteron in dihidrotestosteron, lahko na primer pri samici črnoglavega pisanca povzročijo razvoj izrazitih drstnih izpuščajev ali pa pri samici medake razvoj bradavičastih podaljškov (11) (20) (21).
Pre moisture artificial soil to achieve 20 - 30 % of WHC
Obstajajo tudi poročila, da lahko agonisti estrogenega receptorja zmanjšajo število drstnih izpuščajev in velikost dorzalne strani trupa pred hrbtno plavutjo pri odraslih samcih (25) (26).
Start test:
Taka splošna morfološka opažanja lahko zagotovijo koristne kvalitativne in kvantitativne informacije, ki kažejo mogoče zahteve za prihodnje preskušanje rib.
add test chemical to artificial soil
Število in velikost drstnih izpuščajev pri črnoglavem pisancu in bradavičastih podaljškov pri medaki se lahko kvantificira neposredno ali bolj praktično z ohranjenimi vzorci.
Introduce 10 females to each replicate
Priporočeni postopki za vrednotenje sekundarnih spolnih značilnosti pri črnoglavem pisancu in medaki so navedeni v Dodatku 5A oziroma Dodatku 5B.
Weigh each replicate
Vitelogenin (VTG)
Set up abiotic controls for moisture content and pH, 2 replicates for each treatment
Kri se odvzame iz repne arterije/vene s heparinizirano mikrohematokritsko kapilarno cevko ali namesto tega s srčno punkcijo z brizgo.