natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The test species used in this type of study is the freshwater oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller).
Skupna trdota vode:
This species is tolerant to a wide range of sediment types, and is widely used for sediment toxicity and bioaccumulation testing [e.g. (3), (5), (7), (9), (13), (15), (16), (22), (23), (24), (25), (26), (27), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35)].
vsaj v eni ponovitvi kontrol in eni preskusni posodi pri najvišji koncentraciji na začetku in koncu obdobja izpostavljenosti;
The origin of the test animals, the confirmation of species identity (e.g. (36)) as well as the culture conditions should be reported.
izražena v mg/l CaCO3.
Identification of species is not required prior to every test if the organisms come from an in-house culture.
Skupna vsebnost amonijaka:
Culturing of the test organisms
vsaj v eni ponovitvi kontrol in eni preskusni posodi vsake ravni koncentracije na začetku obdobja izpostavljenosti in nato trikrat na teden;
In order to have a sufficient number of worms for conducting sediment toxicity tests, it is useful to keep the worms in permanent laboratory culture.
izražena v mg/l NH4+ ali NH3 ali skupnega amonijskega dušika.
Guidance for laboratory culture methods for Lumbriculus variegatus, and sources of starter cultures are given in Appendix 5.
Če je treba zaradi merjenja parametrov kakovosti vode iz posod odstraniti vzorce znatne količine vode, je za merjenje kakovosti vode priporočljivo pripraviti ločene posode, da se razmerje količine vode in usedline ne spremeni.
For details on culturing this species see references (3), (7), (27).
Biološka opazovanja
To ensure that the tests are performed with animals of the same species, the establishment of single species cultures is strongly recommended.
Med izpostavljenostjo je treba preskusne posode opazovati, da se vizualno ocenijo morebitne spremembe vedenja pri črvih (npr. izogibanje usedlini, iztrebke, vidne na površini usedline) v primerjavi s kontrolami.
Ensure that the cultures and especially the worms used in the tests are free from observable diseases and abnormalities.
Opažanja je treba zabeležiti.
Reconstituted water according to Chapter C.1 of this Annex (37) is recommended for use as overlying water in the tests;
Ob koncu preskusa se vsaka ponovitev pregleda (dodatne posode, namenjene za kemijske analize, se lahko izključijo iz pregleda).
it can also be used for the laboratory cultures of the worms (see Appendix 2 for preparation).
Za odstranitev vseh črvov iz preskusne posode je treba uporabiti primerno metodo.
If required, natural water may be used.
Poskrbeti je treba, da so vsi odstranjeni črvi nepoškodovani.
The chosen water must be of a quality that will allow the growth and reproduction of the test species for the duration of the acclimation and test periods without showing any abnormal appearance or behaviour.
Ena možna metoda je presejanje črvov iz usedline.
Lumbriculus variegatus has been demonstrated to survive, grow, and reproduce in this type of water (30), and maximum standardisation of test and culture conditions is provided.
Uporabiti je mogoče mrežo iz nerjavnega jekla s primerno velikostjo odprtin.
If a reconstituted water is used, its composition should be reported, and the water should be characterised prior to use at least by pH, oxygen content, and hardness (expressed as mg CaCO3/l).
Večino vode nad usedlino se skrbno odlije, preostalo usedlino in vodo pa se stresa, da nastane blato, ki ga je mogoče presejati skozi sito.
Analysis of the water for micropollutants prior to use might provide useful information (see, e.g., Appendix 3).
Presejano blato vsake ponovitvene posode je mogoče drugič presejati, da se zagotovo odstranijo vsi črvi.
The pH of the overlying water should be in the range of 6,0 to 9,0 (see paragraph 13).
Alternativna metoda je lahko ogrevanje usedline s postavitvijo preskusnih posod v vodno kopel s temperaturo 50–60 °C;
If increased ammonia development is expected, it is considered useful to keep the pH between 6,0 and 8,0.
črvi zapustijo usedlino in jih je mogoče z njene površine zbrati z vroče polirano široko pipeto.
For testing of e.g. weak organic acids, it is advisable to adjust the pH by buffering the water to be used in the test, as described e.g. by (16).
Druga alternativna metoda je lahko pridobivanje blata usedline in zlivanje tega blata v plitvo ponev primerne velikosti.
The total hardness of the water to be used in the test should be between 90 and 300 mg CaCO3 per liter for natural water.
Iz plitve plasti blata je mogoče črve pobrati z jekleno iglo ali urarsko pinceto (ki se po možnosti uporablja kot vilice in ne kot klešče, da se črvi ne poškodujejo) in jih prenesti v čisto vodo.
Appendix 3 summarises additional criteria for acceptable dilution water according to OECD Guideline No. 210 (38).
Po ločitvi črvov iz blata usedline se črvi operejo v preskusnem mediju in preštejejo.
Sediment
Neodvisno od uporabljene metode morajo laboratoriji dokazati, da je njihovo osebje iz celotne usedline sposobno odstraniti vsaj 90 % organizmov.
Since uncontaminated natural sediments from a particular source may not be available throughout the year, and indigenous organisms as well as the presence of micropollutants can influence the test, a formulated sediment (also called reconstituted, artificial or synthetic sediment) should preferably be used.
Določeno število preskusnih organizmov je, na primer, mogoče dodati kontrolni usedlini ali preskusnim usedlinam, stopnjo odstranitve pa je mogoče določiti po eni uri (7).
Use of a formulated sediment minimises variability of test conditions as well as introduction of indigenous fauna.
Zabeležiti in oceniti je treba skupno število živih in mrtvih osebkov na ponovitev.
The following formulated sediment is based on the artificial sediment according to (6), (39) and (40).
Za mrtve veljajo naslednje skupine črvov:
It is recommended for use in this type of test ((6), (10), (30), (41), (42), (43)):
po nežnem mehanskem dražljaju ni nobene reakcije;
4-5 % (dry weight) sphagnum peat;
prisotni so znaki razkrajanja (v kombinaciji s točko ‚a‘);
it is important to use peat in powder form, degree of decomposition:
pogrešani črvi.
“medium”, finely ground (particle size ≤ 0,5 mm), and only air-dried.
Poleg tega je mogoče žive črve dodeliti eni od treh skupin:
20 ± 1 % (dry weight) kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %).
veliki celi črvi (odrasli osebki) brez obnovljenih predelov telesa;
75-76 % (dry weight) quartz sand (fine sand, grain size: ≤ 2 mm, but > 50 % of the particles should be in the range of 50-200 μm).
celi črvi z obnovljenimi predeli telesa svetlejše barve (tj. z novim zadnjim delom, z novim sprednjim delom ali z novima zadnjim in sprednjim delom);
Deionised water, 30–50 % of sediment dry weight, in addition to the dry sediment components.
neceli črvi (tj. nedavno fragmentirani črvi z neobnovljenimi predeli telesa).
Calcium carbonate of chemically pure quality (CaCO3) is added to adjust the pH of the final mixture of the sediment.
Ta dodatna opažanja niso nujna, mogoče pa jih je uporabiti za dodatno razlago bioloških rezultatov (veliko število črvov, dodeljenih skupini c, lahko, na primer, kaže na zamudo pri razmnoževanju ali obnavljanju v danem tretiranju).
The total organic carbon content (TOC) of the final mixture should be 2 % (± 0,5 %) of sediment dry weight and should be adjusted by the use of appropriate amounts of peat and sand, according to (a) and (c).
Poleg tega je treba zabeležiti tudi morebitne opažene razlike v videzu tretiranih in kontrolnih črvov (npr. lezije povrhnjice, zabuhli deli telesa).
Food, e.g. powdered leaves of Stinging Nettle (Urtica sp., in accordance with pharmacy standards, for human consumption), or a mixture of powdered leaves of Urtica sp. with alpha-cellulose (1:1), at 0,4 - 0,5 % of sediment d.w., in addition to the dry sediment components;
Takoj po štetju/oceni se živi črvi, najdeni v vsaki ponovitvi, prenesejo v posušene, predhodno stehtane in označene skodelice tehtnice (eno na ponovitev) ter ubijejo s kapljico etanola na skodelico tehtnice.
for details see Appendix 4.
Skodelice tehtnice se nato postavijo v sušilnik pri 100 ± 5 °C, da se čez noč posušijo, potem pa se po ohlajanju v eksikatorju stehtajo in določi se suha teža črvov (po možnosti v gramih in vsaj na 4 decimalke natančno).
The source of peat, kaolin clay, food material, and sand should be known.
Poleg skupne suhe teže je mogoče določiti suho težo brez pepela, kot je opisano v točki (49), da se upoštevajo anorganske sestavine, ki izvirajo iz zaužite usedline, prisotne v prebavnem traktu črvov.
In addition to item g), Chapter C.27 of this Annex (6) lists alternative plant materials to be used as a source of nutrition:
Biomasa je določena kot skupna biomasa na ponovitev, vključno z odraslimi in mladimi črvi.
dehydrated leaves of mulberry (Morus alba), white clover (Trifolium repens), spinach (Spinacia oleracea), or cereal grass.
Pri določanju biomase na ponovitev mrtvi črvi ne smejo biti upoštevani.
The chosen food source should be added prior to or during spiking the sediment with the test chemical.
Preverjanje koncentracij preskusne kemikalije
The chosen food source should allow for at least acceptable reproduction in the controls.
Vzorčenje
Analysis of the artificial sediment or its constituents for micro-pollutants prior to use might provide useful information.
Vzorci za kemijsko analizo preskusne kemikalije morajo biti odvzeti vsaj za najvišjo koncentracijo in eno nižjo, vsaj na koncu faze uravnoteženja (pred dodajanjem preskusnih organizmov) in na koncu preskusa.
An example for the preparation of the formulated sediment is described in Appendix 4.
Za analizo morata biti vzorčeni vsaj glavnina usedline in voda nad usedlino.
Mixing of dry constituents is also acceptable if it is demonstrated that after addition of overlying water a separation of sediment constituents (e.g. floating of peat particles) does not occur, and that the peat or the sediment is sufficiently conditioned (see also paragraph 25 and Appendix 4).
Vsak dan vzorčenja je treba vzeti vsaj dva vzorca na matriks in tretiranje.
The artificial sediment should be characterised at least by origin of the constituents, grain size distribution (percent sand, silt, and clay), total organic carbon content (TOC), water content, and pH.
Enega od dveh vzorcev je mogoče shraniti kot rezervo (ki bo analizirana, če bo npr. začetna analiza zunaj razpona ± 20 % nominalne koncentracije).
Measurement of redox potential is optional.
Pri specifičnih kemijskih lastnostih, npr. če je pričakovana hitra razgradnja preskusne kemikalije, se lahko časovni razpored analize na podlagi strokovnega mnenja natančneje določi (npr. s pogostejšim vzorčenjem, analizo več ravni koncentracij).
If required, e.g. for specific testing purposes, natural sediments from unpolluted sites may also serve as test and/or culture sediment (3).
Nato se vzorci lahko vzamejo na vmesne dni vzorčenja (npr. sedmi dan po začetku izpostavljenosti).
However, if natural sediment is used, it should be characterised at least by origin (collection site), pH and ammonia of the pore water, total organic carbon content (TOC) and nitrogen content, particle size distribution (percent sand, silt, and clay), and percent water content (7), and it should be free from any contamination and other organisms that might compete with, or prey on the test organisms.
Vodo nad usedlino je treba zaradi čim manjšega vznemirjanja usedline vzorčiti tako, da se previdno odlije ali izčrpa.
Measurement of redox potential and cation exchange capacity is optional.
Zabeležiti je treba količino vzorcev.
It is also recommended that, before it is spiked with the test chemical, the natural sediment be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test.
Po tem, ko je voda nad usedlino odstranjena, se mora usedlina homogenizirati in prenesti v primerno posodo.
At the end of this conditioning period, the overlying water should be removed and discarded.
Zabeleži se teža mokrega vzorca usedline.
The sediment to be used must be of a quality that will allow the survival and reproduction of the control organisms for the duration of the exposure period without showing any abnormal appearance or behaviour.
Če je dodatno potrebna analiza preskusne kemikalije v porni vodi, je treba homogenizirane in stehtane vzorce centrifugirati, da se pridobi porna voda.
The control worms should burrow in the sediment, and they should ingest the sediment.
Približno 200 ml mokre usedline je, na primer, mogoče natočiti v 250-mililitrske centrifugirne čaše.
Reproduction in the controls should at least be according to the validity criterion as described in paragraph 13.
Nato je treba vzorce centrifugirati brez filtracije, da se loči porna voda, npr. pri 10000 ± 600 × g 30–60 minut pri temperaturi, ki ne presega v preskusu uporabljene temperature.
The presence or absence of fecal pellets on the sediment surface, which indicate sediment ingestion by the worms, should be recorded and can be helpful for the interpretation of the test results with respect to exposure pathways.
Po centrifugiranju se supernatant odlije ali nakapa s pipeto, pri čemer je treba paziti, da se prepreči vnos delcev, količina pa se zabeleži.
Additional information on sediment ingestion can be obtained by using methods described in (24), (25), (44), and (45), which specify sediment ingestion or particle selection in the test organisms.
Zabeleži se teža peleta preostale usedline.
Manipulation procedures for natural sediments prior to use in the laboratory are described in (3), (7), and (12).
Če je vsak dan vzorčenja določena suha teža usedline, je ocena masne bilance ali obnove preskusne kemikalije v sistemu vode in usedline lažja.
The preparation and storage of the artificial sediment recommended to be used in the Lumbriculus test is described in Appendix 4.
V nekaterih primerih koncentracij v porni vodi zaradi premajhnega vzorca morda ne bo mogoče analizirati.
The test chemical is to be spiked to the sediment.
Če analiza ni takojšnja, je treba vse vzorce shraniti na ustrezen način, npr. pri pogojih shranjevanja, ki so priporočeni za čim manjšo razgradnjo določene preskusne kemikalije (okoljski vzorci se npr. običajno shranjujejo pri – 18 °C v temi).
As most test chemicals are expected to have low water solubility, they should be dissolved in a suitable organic solvent (e.g. acetone, n-hexane, cyclohexane) at a volume as small as possible in order to prepare the stock solution.
Informacije o pravilnih pogojih shranjevanja za določeno preskusno kemikalijo, na primer trajanju in temperaturi shranjevanja, postopkih ekstrakcije itd., pridobite pred začetkom študije.
The stock solution should be diluted with the same solvent to prepare the test solutions.
Analitska metoda
Toxicity and volatility of the solvent, and the solubility of the test chemical in the chosen solvent should be the main criteria for the selection of a suitable solubilising agent.
Ker so za celoten postopek pomembne točnost, natančnost in občutljivost analitske metode, uporabljene za preskusno kemikalijo, se je treba praktično prepričati, da so natančnost in reproduktivnost kemične analize ter ponovna pridobitev preskusne kemikalije iz vzorcev vode in usedline zadovoljive za določeno metodo vsaj pri najnižjih in najvišjih preskusnih koncentracijah.
For each concentration level the same volume of the corresponding solution should be used.
Prepričajte se tudi, da v kontrolnih komorah ni zaznati preskusne kemikalije v koncentracijah, višjih od meje določljivosti.
The sediment should be spiked in bulk for each concentration level in order to minimise between-replicate variability of the test chemical concentration.
Po potrebi popravite nominalne koncentracije za ponovno pridobivanje primešane preskusne kemikalije za nadzor kakovosti (npr. kjer je stopnja ponovnega pridobivanja zunaj območja 80– 120 % količine, v kateri je bila primešana preskusna kemikalija).
Each of the test solutions is then mixed with quartz sand as described in paragraph 22 (e.g. 10 g of quartz sand per test vessel).
V celotnem preskusu je treba z vsemi vzorci ravnati tako, da se kontaminacija in izguba čim bolj zmanjšata (npr. zaradi adsorpcije preskusne kemikalije na napravo za vzorčenje).
In order to soak the quartz sand completely, a volume of 0,20 - 0,25 ml per g of sand has been found sufficient.
Zabeležiti je treba stopnjo ponovnega pridobivanja preskusne kemikalije, mejo zaznavnosti in mejo zaznavnosti v usedlini in vodi ter o njih poročati.
Thereafter, the solvent must be evaporated to dryness.
Glavni obvezni spremenljivki odziva, ki jih je treba v preskusu statistično oceniti, sta biomasa in skupno število črvov na ponovitev.
In order to minimise losses of the test chemical through co-evaporation (e.g. depending on the chemical's vapour pressure), the coated sand should be used immediately after drying.
Neobvezno se lahko oceni tudi razmnoževanje (v obliki povečanja števila črvov) in rast (v obliki povečanja suhe biomase).
The dry sand is mixed with the suitable amount of formulated sediment of the corresponding concentration level.
V tem primeru je treba na začetku izpostavljenosti pridobiti oceno suhe teže črvov, npr. z merjenjem suhe teže reprezentativnega podvzorca serije sinhroniziranih črvov, ki bodo uporabljeni v preskusu.
The amount of sand provided by the test-chemical-and-sand mixture has to be taken into account when preparing the sediment (i.e. the sediment should thus be prepared with less sand).
Čeprav smrtnost ni končna točka tega preskusa, je treba smrtnosti oceniti v čim večji meri.
The major advantage of this procedure is that virtually no solvent is introduced to the sediment (7).
Za oceno smrtnosti morajo črvi, ki ne reagirajo na nežen mehanski dražljaj, ali črvi, ki kažejo znake razkrajanja ter pogrešani črvi veljati za mrtve.
Alternatively, e.g. for field sediment, the test chemical may be added by spiking a dried and finely ground portion of the sediment as described above for the quartz sand, or by stirring the test chemical into the wet sediment, with subsequent evaporating of any solubilising agent used.
Smrtnosti je pri razlagi rezultatov treba vsaj zabeležiti in upoštevati.
Care should be taken to ensure that the test chemical added to sediment is thoroughly and evenly distributed within the sediment.
Učinkovite koncentracije morajo biti izražene v mg/kg suhe teže usedline.
If necessary, subsamples may be analysed to confirm the target concentrations in the sediment, and to determine degree of homogeneity.
Če je rekuperacija preskusne kemikalije, merjene v usedlini ali v usedlini in vodi nad njo ob začetku izpostavljenosti med 80 in 120 % nominalnih koncentracij, je mogoče učinkovite koncentracije (ECx, NOEC, LOEC) izraziti na podlagi nominalnih koncentracij.
It may also be useful to analyse subsamples of the test solutions to confirm the target concentrations in the sediment.
Če ponovno pridobivanje odstopa od nominalnih koncentracij za več kot ± 20 % vrednosti nominalnih koncentracij, morajo učinkovite koncentracije (ECx, NOEC, LOEC) temeljiti na prvotno izmerjenih koncentracijah na začetku izpostavljenosti, npr. upoštevati morajo masno bilanco preskusne kemikalije v preskusnem sistemu (glej odstavek 30).
Since a solvent is used for coating the test chemical on the quartz sand, a solvent control should be employed which is prepared with the same amount of the solvent as the test sediments.
V teh primerih je mogoče dodatne informacije za potrditev, da so bile preskusne usedline pravilno pripravljene, pridobiti iz analize založnih raztopin in/ali uporabljenih raztopin.
The method used for spiking, and the reasons for choosing a specific spiking procedure other than described above should be reported.
Vrednosti ECx za parametre, opisane v odstavku 60, se izračunajo z ustreznimi statističnimi metodami (npr. z analizo probit, logistično ali Weibullovo funkcijo, prilagojeno metodo Spearman-Karber ali enostavno interpolacijo).
The method of spiking may be adapted to the test chemical's physical-chemical properties, e.g. to avoid losses due to volatilisation during spiking or equilibration.
Navodila za statistično ocenjevanje so navedena v (15) in (50).
Additional guidance on spiking procedures is given in Environment Canada (1995) (46).
Za izračun vrednosti EC50 ali katere koli druge vrednosti ECx je treba srednjo vrednost glede na tretirano skupino ( X
Once the spiked sediment has been prepared, distributed to the replicate test vessels, and topped with the test water, it is desirable to allow partitioning of the test chemical from the sediment to the aqueous phase (e.g. (3)(7)(9)).
) analizirati z regresijsko analizo.
This should preferably be done under the conditions of temperature and aeration used in the test.
Če se bo NOEC/LOEC določala s statistično analizo, so potrebni statistični podatki (posamezne posode se štejejo za ponovitve) po posodah.
Appropriate equilibration time is sediment and chemicals specific, and can be in the order of hours to days and in rare cases up to several weeks (4-5 weeks) (e.g. (27)(47)).
Uporabljene morajo biti ustrezne statistične metode.
In this test, equilibrium is not awaited but an equilibration period of 48 hours to 7 days is recommended.
V splošnem se s pomočjo enostransko zastavljenega (manj obsežnega) preskušanja domnev pri p ≤ 0,05 proučijo škodljivi učinki preskusne snovi v primerjavi s kontrolo.
Thus, time for degradation of the test chemical will be minimised.
Primeri so podani v naslednjih odstavkih.
Depending on the purpose of the study, e.g., when environmental conditions are to be mimicked, the spiked sediment may be equilibrated or aged for a longer period.
Navodila za izbiro ustreznih statističnih metod so navedena v (15) in (50).
At the end of this equilibration period, samples should be taken at least of the overlying water and the bulk sediment, at least at the highest concentration and a lower one, for analysis of the test chemical concentration.
Normalno porazdelitev podatkov je mogoče preskusiti npr. s preskusom ustreznosti prileganja Kolmogorov-Smirnov, preskusom razmerja med variacijskim razmikom in standardnim odklonom (preskusom R/s) ali Shapiro-Wilkovim preskusom (dvostranskim, p ≤ 0,05).
These analytical determinations of the test chemical should allow for calculation of mass balance and expression of results based on measured initial concentrations.
Za preskus homogenosti variance se lahko uporabi Cochranov, Levenov ali Bartlettov preskus (dvostranski, p ≤ 0,05).
In general, sampling disturbs or destroys the sediment water system.
Če so izpolnjeni predpogoji postopkov parametričnega preskusa (normalnosti, homogenosti variance), je mogoče izvesti enofaktorsko analizo variance (enofaktorsko ANOVA) in nato preskuse večkratne primerjave.
Therefore it is usually not possible to use the same replicates for sampling of sediment and worms.
Za izračun, ali obstajajo značilne razlike (p ≤ 0,05) med kontrolami in različnimi koncentracijami preskusnih snovi, je mogoče uporabiti parne primerjave (npr. Dunnettov t-preskus) ali regresivne trendnostne preskuse (npr. Williamsov preskus).
Additional “analytical” vessels of appropriate dimensions have to be set up, which are treated in the same way (including the presence of test organisms) but not used for biological observations.
V nasprotnem primeru je treba za določanje vrednosti NOEC in LOEC uporabiti neparametrične metode (npr. Bonferronijev U-preskus v skladu s trendnostnim preskusom po Holmu ali Jonckheere-Terpstraju).
The vessel dimensions should be selected to provide the sample amounts required by the analytical method.
Če je izveden mejni preskus (primerjava kontrole in samo ene tretirane skupine) in če so izpolnjeni predpogoji postopkov parametričnega preskusa (normalnost, homogenost), je mogoče s Studentovim preskusom (t-preskusom) preveriti odzive metrik (skupnega števila črvov in biomase v obliki suhe teže črvov).
Details of sampling are described in paragraph 53.
Če te zahteve niso izpolnjene, se lahko uporabi t-preskus za neenake variance (Welchev t-preskus) ali neparametrični preskus, kot je Mann-Whitneyjev U-preskus.
PERFORMANCE OF THE TEST
Nekatere informacije o statistični moči, ugotovljene med preskušanjem domnev v krožnem preskusu metode, so podane v Dodatku 6.