natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Zebrafish, Blood Collection by Cardiac Puncture
Priporočajo se 24-urna obdobja obnavljanja.
To avoid coagulation of blood and degradation of protein the samples are collected within Phosphate-buffered saline (PBS) buffer containing heparin (1000 units/ml) and the protease inhibitor aprotinin (2 TIU/ml).
Obdobja obnavljanja, ki presegajo 72 ur, niso sprejemljiva.
As ingredients for the buffer, heparin ammonium salt and lyophilised aprotinin are recommended.
Ob koncu vsakega obdobja obnavljanja, neposredno pred obnavljanjem, je treba izmeriti parametre kakovosti vode (npr. raztopljeni kisik, temperaturo, pH itd.).
For blood sampling, a syringe (1 ml) with a fixed thin needle (e.g. Braun Omnikan-F) is recommended.
Razpon preskusnih koncentracij
The syringe should be prefilled with buffer (approximately 100 μl) to completely elute the small blood volumes from each fish.
Uporabiti je treba vsaj tri preskusne koncentracije in kontrole s čisto vodo (ter po potrebi kontrole z vehiklom).
The blood samples are taken by cardiac puncture.
Najmanjša razlika med najnižjo in najvišjo preskusno koncentracijo mora biti približno en red velikosti.
At first the fish should be anesthetized with MS-222 (100 mg/l).
Največja ločitev odmerka je 0,1 in najmanjša 0,33.
The proper plane of anaesthesia allows the user to distinguish the heartbeat of the zebrafish.
Začetek in izvedba preskusa
While puncturing the heart, keep the syringe piston under weak tension.
Izpostavljanje je treba začeti, ko zadostno število paglavcev iz založne populacije pred izpostavljenostjo doseže 51. razvojno fazo po Nieuwkoopu in Faberju (8), pri čemer so glede na oploditev stari manj ali točno 17 dni.
Collectable blood volumes range between 20 - 40 microliters.
Za izbiro preskusnih živali je treba zdrave paglavce iz založne populacije, ki so videti normalni, združiti v eni posodi, ki vsebuje primerno prostornino vode za redčenje.
After cardiac puncture, the blood/buffer-mixture should be filled into the test tube.
Za določanje razvojne faze je treba posamezne paglavce odstraniti iz skupne posode z majhno mrežo ali cedilom in jih prenesti v prozorno merilno komoro (npr. 100-milimetrsko petrijevko) z vodo za redčenje.
Plasma is separated from the blood via centrifugation (20 min; 5000 g) and should be stored at – 80 °C until required for analysis.
Priporočljivo je, da se za določanje faze ne uporablja anestezija, vendar se lahko za anestezijo paglavcev uporabi 100 mg/l trikain metan sulfonata (npr. MS-222), ki je pred uporabo ustrezno pufran z natrijevim karbonatom (pH 7.0).
Procedure 3C:
Če se za anestezijo uporabi npr. MS-222, je treba metodologijo za njegovo ustrezno uporabo pridobiti v izkušenih laboratorijih in jo sporočiti skupaj z rezultati preskusa.
SOP:
Med prenosom je treba z živalmi ravnati zelo previdno, da se čim bolj zmanjša stres zaradi prenosa in se preprečijo poškodbe.
Zebrafish, homogenisation of head & tail
Razvojna faza živali se določi z binokularnim stereomikroskopom.
The fish are anaesthetised and euthanised in accordance with the test description.
Da se zmanjša končna variabilnost v razvojni fazi, je pomembno, da se faza določi čim bolj natančno.
The head and tail are cut of the fish in accordance with Figure 1.
Po Nieuwkoopu in Faberju (8) je glavni razvojni znak za določitev 51. faze pri organizmih morfologija zadnjega kraka.
Important:
Morfološke značilnosti zadnjega kraka je treba pregledati pod mikroskopom.
All dissection instruments, and the cutting board should be rinsed and cleaned properly (e.g. with 96 % ethanol) between handling of each single fish to prevent “vitellogenin pollution” from females or induced males to uninduced males.
Čeprav se je treba za določanje razvojne faze paglavcev seznaniti z Nieuwkoopovimi in Faberjevimi (8) smernicami v celoti, se lahko faza zanesljivo določi na podlagi izrazitih morfoloških znakov.
Cut behind
Naslednja tabela se lahko uporabi za poenostavitev in standardizacijo postopka določanja faze skozi celotno študijo, tako da se določijo izraziti morfološki znaki, ki so povezani z različnimi fazami, pri čemer se predvideva, da je razvoj normalen.
Cut behind dorsal fin
Izraziti morfološki znaki za določanje faze na podlagi smernic Nieuwkoopa in Faberja
For Vtg analysis
Izraziti morfološki znaki
For gonad histology
Razvojna faza
The weight of the pooled head and tail from each fish is measured to the nearest mg.
zadnji krak
After being weighed, the parts are placed in appropriate tubes (e.g. 1,5 ml eppendorf) and frozen at – 80 °C until homogenisation or directly homogenised on ice with two plastic pistils.
sprednji krak
(Other methods can be used if they are performed on ice and the result is a homogenous mass).
kraniofacialna struktura
The tubes should be numbered properly so that the head and tail from the fish can be related to their respective body-section used for gonad histology.
morfologija vohalnega živca
When a homogenous mass is achieved, 4 x the tissue weight of ice-cold homogenisation buffer is added.
dolžina repa
Keep working with the pistils until the mixture is homogeneous.
Za začetek preskusa morajo biti vsi paglavci v 51. fazi.
Important note:
Najizrazitejši morfološki znak za določanje navedene faze je morfologija zadnjega kraka, ki je prikazana na sliki 1.
New pistils are used for each fish.
Morfologija zadnjega kraka pri paglavcu X. laevis v 51. fazi.
The samples are placed on ice until centrifugation at 4 °C at 50000 × g for 30 min.
Poleg izbire razvojne faze se lahko uporabi neobvezna izbira velikosti poskusnih živali.
Use a pipette to dispense portions of 20 μl supernatant into at least two tubes by dipping the tip of the pipette below the fat layer on the surface and carefully sucking up the supernatant without fat- or pellet fractions.
Za ta namen je treba na dan 0 izmeriti dolžino celega telesa (ne SVL) na podvzorcu približno 20 paglavcev v 51. fazi po Nieuwkoopu in Faberju.
The tubes are stored at – 80 °C until use.
Po izračunu srednje dolžine celega telesa te skupine živali se lahko določijo največje in najmanjše mejne dolžine celotnega telesa poskusnih živali, pri čemer je dovoljeni razpon srednje vrednosti ± 3 mm (srednje vrednosti razpona dolžin celotnega telesa med 24,0 in 28,1 mm za paglavce v 51. fazi).
Homogenisation buffer:(50 mM Tris-HCl pH 7,4; 1 % Protease inhibitor cocktail (Sigma)):
Vendar je določanje razvojne faze glavni parameter za ugotavljanje pripravljenosti posamezne preskusne živali.
12 ml Tris-HCl pH 7,4 + 120 μl Protease inhibitor cocktail.TRIS:
Paglavci, ki kažejo zelo vidne deformnosti ali poškodbe, je treba izključiti iz preskusa.
TRIS-ULTRA PURE (ICN) e.g. from Bie & Berntsen, Denmark.Protease inhibitor cocktail:
Paglavci, ki izpolnjujejo merila za fazo, opisana zgoraj, se zadržijo v posodi s čisto vodo za gojenje, dokler ni postopek določanja faze končan.
From Sigma (for mammalian tissue) Product number P 8340.Note:
Ko je določanje faze končano, se ličinke naključno razporedijo v tretirane posode za izpostavljenost, dokler ni v vsaki posodi po 20 ličink.
The homogenisation buffer should be used the same day as manufactured.
V vsaki tretirani posodi se nato pregleda, ali so v njej živali, ki so videti nenormalno (npr. poškodbe, nenormalen način plavanja itd.).
Place on ice during use.
Očitno nezdrave paglavce je treba odstraniti iz tretiranih posod in jih nadomestiti z ličinkami, ki se na novo izberejo iz skupne posode.
Vitellogenin fortification samples and inter-assay reference standard
Za bolj poglobljene informacije o postopkih prekinitve preskusa in obdelavi paglavcev glej Smernico OECD za histologijo ščitnice pri dvoživkah (9).
On each day that vitellogenin assays are performed, a fortification sample made using an inter-assay reference standard will be analysed.
Meritve na 7. dan
The vitellogenin used to make the inter-assay reference standard will be from a batch different from the one used to prepare calibration standards for the assay being performed.
Na 7. dan se iz vsake preskusne posode odstrani pet naključno izbranih paglavcev na ponovitev.
The fortification sample will be made by adding a known quantity of the inter-assay standard to a sample of control male plasma.
Z uporabljenim naključnim postopkom je treba vsakemu organizmu, ki se preskuša, zagotoviti enako verjetnost izbire.
The sample will be fortified to achieve a vitellogenin concentration between 10 and 100 times the expected vitellogenin concentration of control male fish.
To je mogoče doseči z uporabo katere koli metode naključnega vzorca, vendar je pri tem treba ujeti vsakega paglavca.
The sample of control male plasma that is fortified may be from an individual fish or may be a composite from several fish.
Neizbrani paglavci se vrnejo v posodo, iz katere so bili zajeti, izbrani paglavci pa se humano evtanazirajo v npr. 150 do 200 mg/l MS-222 in ustrezno pufrajo z natrijevim karbonatom, da se doseže pH 7,0.
A subsample of the unfortified control male plasma will be analysed in at least two duplicate wells.
Evtanazirani paglavci se sperejo v vodi in posušijo, nato pa se njihova telesna teža določi na najbližji miligram.
The fortified sample also will be analysed in at least two duplicate wells.
Določijo se dolžina zadnjega kraka, dolžina od ust do zadnjične odprtine in razvojna faza (z binokularnim stereomikroskopom) vsakega paglavca.
The mean quantity of vitellogenin in the two unfortified control male plasma samples will be added to the calculated quantity of vitellogenin added to fortification the samples to determine an expected concentration.
Meritve na 21. dan (prekinitev preskusa)
The ratio of this expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
Ob prekinitvi preskusa (21. dan) se preostali paglavci odstranijo iz preskusnih posod in humano evtanazirajo v npr. 150 do 200 mg/l MS-222 ter ustrezno pufrajo z natrijevim bikarbonatom, kot je navedeno zgoraj.
Decision flowchart for the statistical analysis
Paglavci se sperejo v vodi in posušijo, nato pa se njihova telesna teža določi na najbližji miligram.
Dunnett test on nested ANOVA
Izmerijo se razvojna faza, SVL in dolžina zadnjega kraka vsakega paglavca.
No Yes
Vse ličinke se za 48 do 72 ur prestavijo v Davidsonovo fiksirno raztopino kot vzorci celotnega telesa ali kot vzorci obrezanega tkiva glave, ki vključujejo spodnjo čeljust za histološko oceno.
Dunn or Mann-Whitney test on rep means
Za histopatologijo je treba vzorčiti skupaj pet paglavcev iz vsake ponovitvene posode.
variance stabilising transform
Ker je višina folikularnih celic odvisna od faze (10), je najustreznejši pristop vzorčenja za histološke analize uporaba osebkov iste faze, kadar koli je mogoče.
>=4 reps per conc
Za izbiro osebkov iste faze je treba fazo vseh ličink prvič določiti pred izbiro ter nadaljnjo obdelavo za zbiranje podatkov in shranjevanje.
<=3 reps per conc Dunn test Yes
To je potrebno, ker bo zaradi divergence pri razvoju prišlo do različnih porazdelitev faz v posameznih ponovitvenih posodah.
No Normalising transform?
Živali, izbrane za histopatologijo (n = 5 iz vsake ponovitve), je treba uskladiti s srednjo fazo kontrol (združene ponovitve), kadar koli je mogoče.
Tamhane-Dunnett test >=4 reps per conc
Če je v ponovitvenih posodah več kot pet ličink ustrezne faze, se pet ličink naključno izbere.
<=3 reps per conc Nested ANOVA not normal No Yes No
Če je v ponovitvenih posodah manj kot pet ličink ustrezne faze, je treba vzorčiti naključno izbrane osebke naslednje nižje ali višje razvojne faze, da se doseže skupna velikost vzorca petih ličink na ponovitev.
Yes variance stabilising transformation
Priporoča se, da se odločitev o vzorčenju dodatnih ličink iz naslednje nižje ali višje razvojne stopnje sprejme na podlagi splošne ocene porazdelitve faz v kontrolah in skupinah za kemične obdelave.
Dunnett test Variances unequal
To pomeni, da je treba vzorčiti dodatne ličinke iz naslednje nižje faze, če je kemična obdelava povezana z razvojno zaostalostjo.
Variances equal
Če je kemična obdelava povezana s pospešitvijo razvoja, pa je treba vzorčiti dodatne ličinke iz naslednje višje faze.
Not monotone
V primerih resnih sprememb razvoja paglavcev zaradi tretiranja s preskusno kemikalijo se porazdelitev faz v skupinah za kemično obdelavo morda ne bo prekrivala z izračunano srednjo razvojno fazo kontrole.
Stept-down Jonckheere or Williams' test
Samo v teh primerih je treba postopek izbire spremeniti z uporabo faze, ki se razlikuje od srednje faze kontrole, da se doseže vzorčenje ličink enake faze za histopatologijo ščitnice.
Step-down trendtest on replicate means
Če so faze nedoločljive (tj. asinhronost), je treba za histološko analizo naključno izbrati 5 paglavcev iz vsake ponovitve.
Monotone
Vzorčenje katere koli ličinke, ki ni v fazi, enakovredni srednji razvojni fazi kontrole, je treba utemeljiti.
Tamhane-Dunnett test on nested ANOVA
Določanje bioloških končnih točk
Dunn test on rep means
V 21-dnevni fazi izpostavljenosti se 7. in 21. dan izvede meritev primarnih končnih točk, vendar je treba preskusne živali opazovati vsak dan.
Dunn or Mann-Whitney test
V tabeli 3 je naveden pregled končnih točk meritev in ustreznih časovnih točk opazovanja.
Nested ANOVA normal
Podrobnejše informacije za tehnične postopke meritve zgornjih končnih točk in histološke ocene so navedene v smernicah OECD (9).
Rep means normally distributed
Časovne točke opazovanja za primarne končne točke pri AMA
Step-down Jonckheere test
Zgornje končne točke
Rep means normal or not homogenous
vsak dan
Rep means normal & homogenous
smrtnost
Determine whether Dose-Response is monotone
Zadnji krak Dolžina
C.38.
dolžina od ust do zadnjične odprtine
THE AMPHIBIAN METAMORPHOSIS ASSAY
teža mokrega telesa
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 231 (2009).
Histologija ščitnične žleze
The need to develop and validate an assay capable of detecting chemicals active in the thyroid system of vertebrate species originates from concerns that environmental levels of chemicals may cause adverse effects in both humans and wildlife.
Razvojna faza, dolžina zadnjega kraka, SVL in mokra teža so zgornje končne točke AMA, pri čemer je vsaka na kratko obravnavana v nadaljevanju.
In 1998, the OECD initiated a high-priority activity to revise existing TGs and to develop new TGs for the screening and testing of potential endocrine disrupters.
Dodatne tehnične informacije za zbiranje teh podatkov, vključno s postopki za računalniško podprte analize, katerih uporaba se priporoča, so navedene v smernicah, na katere so navedeni sklici.
One element of the activity was to develop a TG for the screening of chemicals active on the thyroid system of vertebrate species.
Razvojna faza paglavcev X. laevis se določi z merili za določanje faze po Nieuwkoopu in Faberju (8).
Both an enhancement of the Repeated dose 28-day oral toxicity study in rodents (Chapter B.7 of this Annex) and the Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) were proposed.
Podatki o razvojni fazi se uporabijo pri ugotavljanju, ali je razvoj pospešen, asinhron, zakasnjen ali nespremenjen.
The enhanced test method B.7 underwent validation and a revised test method has been issued.
Pospešen ali zakasnjen razvoj se določi s primerjavo med srednjo fazo, ki jo dosežejo kontrolne in tretirane skupine.
The Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) underwent an extensive validation programme which included intra- and inter-laboratory studies demonstrating the relevance and reliability of the assay (1, 2).
Asinhroni razvoj je ugotovljen, če pregledana tkiva niso deformirana ali nenormalna, vendar je relativen čas morfogeneze ali razvoja različnih tkiv moten pri enem paglavcu.
Subsequently, the validation of the assay was subject to peer-review by a panel of independent experts (3).
Diferenciacijo in rast zadnjih krakov nadzorujejo hormoni ščitnice in so pomemben razvojni znak, ki se že uporablja za določanje razvojne faze.
This test method is the outcome of the experience gained during the validation studies for the detection of thyroid active chemicals, and of work conducted elsewhere in OECD member countries.
Razvoj zadnjega kraka se pri določanju razvojne stopnje uporablja kvalitativno, vendar se tukaj obravnava kot kvantitativna končna točka.
The Amphibian Metamorphosis Assay (AMA) is a screening assay intended to empirically identify chemicals which may interfere with the normal function of the hypothalamic-pituitary-thyroid (HPT) axis.
Zato se dolžina zadnjega kraka meri kot končna točka za ugotavljanje učinkov na ščitnično os (slika 2).
The AMA represents a generalised vertebrate model to the extent that it is based on the conserved structures and functions of the HPT axis.
Zaradi doslednosti se dolžina zadnjega kraka meri na zadnjem levem kraku.
It is an important assay because amphibian metamorphosis provides a well-studied, thyroid-dependent process which responds to chemicals active within the HPT axis, and it is the only existing assay that detects thyroid activity in an animal undergoing morphological development.
Dolžina zadnjega kraka se oceni 7. dan in 21. dan preskusa.
The general experimental design entails exposing stage 51 Xenopus laevis tadpoles to a minimum of three different concentrations of a test chemical and a dilution water control for 21 days.
Na 7. dan je merjenje dolžine zadnjega kraka enostavno, kot je prikazano na sliki 2.
There are four replicates of each test treatment.
Merjenje dolžine zadnjega kraka na 21. dan pa je bolj zapleteno zaradi ukrivljenosti kraka.
Larval density at test initiation is 20 tadpoles per test tank for all treatment groups.
Zato se mora meritev dolžine zadnjega kraka na 21. dan začeti pri telesni steni in nadaljevati po sredinski črti kraka prek vseh kotov odstopanja.
The observational endpoints are hind limb length, snout to vent length (SVL), developmental stage, wet weight, thyroid histology, and daily observations of mortality.
Spremembe dolžine zadnjega kraka na 7. dan se štejejo za pomembne za potencialno aktivnost ščitnice, čeprav na 21. dan niso očitne.
Test Species
Meritve dolžin se pridobijo na podlagi digitalnih fotografij z uporabo programske opreme za analizo slik, kot je opisano v Smernici OECD za histologijo ščitnice pri dvoživkah (9).
Xenopus laevis is routinely cultured in laboratories worldwide and is easily obtainable through commercial suppliers.
Dolžina telesa in teža mokrega telesa
Reproduction can be easily induced in this species throughout the year using human chorionic gonadotropin (hCG) injections and the resultant larvae can be routinely reared to selected developmental stages in large numbers to permit the use of stage-specific test protocols.
Določanje dolžine od ust do zadnjične odprtine (SVL) (slika 2) in mokre teže je v protokol preskusa vključeno, da se ocenijo možni učinki preskusne kemikalije na hitrost rasti paglavcev v primerjavi s kontrolno skupino, in je koristno pri ugotavljanju posplošene strupenosti za preskusno kemikalijo.
It is preferred that larvae used in the assay are derived from in-house adults.
Ker se lahko zaradi odstranitve adherentne vode za določanje teže ustvarijo stresni pogoji za paglavce in se lahko poškoduje njihova koža, se te meritve izvajajo na 7. dan pri paglavcih iz podvzorca, pri vseh ostalih paglavcih pa ob prekinitvi preskusa (21. dan).
As an alternative although this is not the preferred procedure, eggs or embryos may be shipped to the laboratory performing the test and allowed to acclimate;
Zaradi doslednosti je treba kot repno mejo za meritev upoštevati kranialno stran zadnjične odprtine.
the shipping of larval stages for use in the test is unacceptable.
Dolžina od ust do zadnjične odprtine (SVL) se uporabi za oceno rasti paglavca, kot je prikazano na sliki 2.
Equipment and Supplies
Vrste meritev dolžine telesa in (B) meritve zadnjega kraka pri paglavcih X. laevis (1)
The following equipment and supplies are needed for the conduct of this assay:
Čeprav sta razvojna faza in dolžina zadnjega kraka pomembni končni točki za oceno sprememb pri metamorfnem razvoju, povezanih z izpostavljenostjo, se zakasnjeni razvoj sam po sebi ne more šteti za diagnostični kazalnik protiščitničnega delovanja.
Exposure system (see description below);
Nekatere spremembe so lahko opazne le z rutinsko histopatološko analizo.
Glass or stainless steel aquaria (see description below);
Poročati je treba o razvrstitvi resnosti (4 stopnje).
Breeding tanks;
Informacije o odvzemu in obdelavi vzorcev za histopatološko analizo in izvedbo histopatoloških analiz na vzorcih tkiva so na voljo v dokumentih ‚Preskus metamorfoze dvoživk: Del 1 – Tehnične smernice za morfološko vzorčenje in histološko pripravo‘ in ‚Preskus metamorfoze dvoživk: Del 2 – Pristop k branju študij, diagnostičnim merilom, razvrstitvi resnosti in atlasu‘ (9).
Temperature controlling apparatus (e.g., heaters or coolers (adjustable to 22° ± 1 °C));
Laboratoriji, ki preskus izvajajo prvič, se morajo pred izvedbo histološke analize in oceno ščitnične žleze zaradi usposabljanja posvetovati z izkušenimi patologi.
Thermometer;
Zaradi očitnih in znatnih sprememb zgornjih končnih točk, ki kažejo pospešen razvoj ali asinhronost, morda ne bo potrebna histopatološka analiza ščitnične žleze.
Binocular dissection microscope;
Zaradi odsotnosti očitnih morfoloških sprememb ali dokazov o zakasnjenem razvoju pa so histološke analize upravičene.
Digital camera with at least 4 megapixel resolution and micro function;
Vsak dan je treba pregledati, ali so v preskusnih posodah mrtvi paglavci, in zabeležiti številke za posamezne posode.
Image digitising software;
Za vsak primer smrtnosti je treba zabeležiti datum, koncentracijo in številko posode.
Petri dish (e.g. 100 × 15 mm) or transparent plastic chamber of comparable size;
Mrtve živali je treba takoj po ugotovitvi smrtnosti odstraniti iz preskusnih posod.
Analytical balance capable of measuring to 3 decimal places (mg);
Stopnje smrtnosti, ki presegajo 10 %, lahko kažejo neustrezne preskusne pogoje ali strupene učinke preskusne kemikalije.
Dissolved oxygen meter;
Dodatna opažanja
pH meter;
Primere nenormalnega obnašanja ter zelo vidne deformnosti in lezije je treba zabeležiti.
Light intensity meter capable of measuring in lux units;
Za vsako opaženo nenormalno obnašanje, velike deformnosti ali lezije je treba zabeležiti datum, koncentracijo in številko posode.
Miscellaneous laboratory glassware and tools;
Za normalno obnašanje je značilno, da paglavci v vodnem stolpcu z repom nad glavo redno ritmično udarjajo z repno plavutjo, redno prihajajo na površino, premikajo škržni poklopec in se odzivajo na dražljaje.
Adjustable pipettes (10 to 5000 μl) or assorted pipettes of equivalent sizes;
Nenormalno obnašanje bi na primer vključevalo lebdenje na gladini, ležanje na dnu posode, obrnjen ali nepravilen način plavanja, odsotnost površinske aktivnosti in neodzivanje na dražljaje.
Test chemical in sufficient quantities to conduct the study, preferably of one lot;
Zabeležiti je treba tudi velike razlike pri porabi hrane med tretiranji.
Analytical instrumentation appropriate for the chemical on test or contracted analytical services.
Velike deformnosti in lezije lahko med drugim vključujejo morfološke nenormalnosti (npr. deformacije krakov), hemoragične lezije, bakterijske ali glivične okužbe.
Chemical Testability
Te ugotovitve so kvalitativne, pri čemer jih je treba obravnavati podobno kot klinične znake bolezni/stresa in jih primerjati s kontrolnimi živalmi.
The AMA is based upon an aqueous exposure protocol whereby test chemical is introduced into the test chambers via a flow-through system.
Če je pojavnost ali stopnja pojavnosti v izpostavljenih posodah večja kot v kontrolnih posodah, jo je treba obravnavati kot dokaz očitne strupenosti.
Flow-through methods however, introduce constraints on the types of chemicals that can be tested, as determined by the physicochemical properties of the chemical.
Zbiranje podatkov
Therefore, prior to using this protocol, baseline information about the chemical should be obtained that is relevant to determining the testability, and the OECD Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures (4) should be consulted.
Vse podatke je treba zbrati z elektronskimi ali ročnimi sistemi, ki upoštevajo dobro laboratorijsko prakso (GLP).