natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Four replicates for each treatment plus eight controls are recommended.
Določanje zmogljivosti zadrževanja vode umetnih tal
Ten adult worms per test vessel should be used (see paragraph 23).
Ugotovljeno je bilo, da je primerna naslednja metoda.
Food is added to the test vessels at the beginning of the test and then once a week (see paragraph 29) up to and including Day 21.
Opisana je v Prilogi C standarda ISO DIS 11268-2.
On Day 21 the soil samples are carefully hand searched and living adult worms are observed and counted and changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and in morphology (e.g. open wounds) are recorded.
S primerno napravo (svedrastim vzorčevalnikom itd.) zberite določeno količino (npr. 5 g) substrata preskusnih tal.
All adult worms are then removed from the test vessels and the test soil.
Pokrijte dno vzorčevalnika s koščkom filtrirnega papirja in ga po polnjenju z vodo postavite na stojalo v vodno kopel.
The test soil containing any cocoons that had been produced are incubated for three additional weeks under the same test conditions except that feeding takes place only on Day 35 (i.e. 25 mg ground rolled oats per vessel).
Vzorčevalnik je treba postopno potopiti, dokler ni nivo vode nad vrhom tal.
After six weeks, the newly hatched worms are counted.
Nato ga je treba pustiti v vodi približno tri ure.
The method based on Bengal red staining (see Appendix 6) is recommended although other wet (but not heat) extraction and floatation techniques (see Appendix 6) have also proved suitable (4)(10)(11)(20).
Ker ni mogoče zadržati vse vode, ki jo absorbirajo talne kapilare, mora biti omogočeno, da se vzorec tal dve uri suši, tako da se vzorčevalnik postavi na ležišče iz zelo mokrega, fino mletega kremenovega peska, ki je nameščen v zaprti posodi (da se ne posuši).
Bengal red staining is recommended because wet extraction from a soil substrate can be hampered by turbidity caused by suspended clay particles.
Nato je treba vzorec stehtati in sušiti do konstantne mase pri 105 °C.
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using 1000 mg/kg in order to demonstrate that the NOEC for reproduction is greater than this value.
Zmogljivost zadrževanja vode (WHC) je nato mogoče izračunati po naslednjem postopku:
Summary and timetable for the test
WHCv % suhe mase
The steps of the test can be summarised as follows:
pri čemer je:
Time
S substrat, prepojen z vodo + masa cevi + masa filtrirnega papirja,
Day –7 or earlier
T tara (masa cevi + masa filtrirnega papirja),
Prepare artificial soil (mixing of dry constituents)
D suha masa substrata.
Day –5
VIR:
Check pH of artificial soil
Določanje pH tal
Measure max WHC of soil
Naslednja metoda za določanje vrednosti pH vzorca tal temelji na opisu v ISO 10390 (Kakovost tal – Določevanje pH).
Day –5 to –3
Suspenzija se nato pet minut temeljito stresa.
Sort worms for acclimatisation
Po stresanju se suspenzija vsaj 2 uri in največ 24 ur pusti, da se usede.
Day — 3 to 0
Vrednost pH tekoče faze se nato meri z merilnikom vrednosti pH, ki je pred vsako meritvijo umerjen z ustreznimi vrstami pufrskih raztopin (npr. pH 4,0 in 7,0).
Acclimatise worms for at least 24 hours
Pogoji gojenja vrste enchytraeus
Day –1
Enhitreje vrste Enchytraeus albidus (in drugih vrst Enchytraeus) je mogoče gojiti v velikih plastičnih posodah (npr. 30 × 60 × 10 cm), napolnjenih z zmesjo 1: 1 umetnih tal in naravne, nekontaminirane vrtne prsti.
Pre-moisten artificial soil and distribute into batches
Kompostnemu materialu se je treba izogibati, saj lahko vsebuje strupene kemikalije, kot so težke kovine.
Day 0
Pred uporabo je treba iz tal odstraniti favno (npr. z globokim zamrzovanjem).
Prepare stock solutions
Substrat, ki ga sestavljajo samo umetna tla, je tudi mogoče uporabiti, vendar je lahko hitrost razmnoževanja nižja od tiste pri substratu z mešanimi tlemi.
Apply test chemical
Vrednost pH substrata, uporabljenega za gojenje, mora znašati 6,0 ± 0,5.
Weigh test substrate into test vessels
Kultura se hrani v temi pri temperaturi od 15 do 20 °C ± 2 °C.
Mix in food
Izogibati se je treba temperaturam, višjim od 23 °C.
Introduce worms
Tla je treba ohranjati vlažna, ne pa mokra.
Measure soil pH and moisture content
Da je vsebnost vlage pravilna, kažejo majhne kapljice vode, ki se pojavijo med prsti ob rahlem stiskanju tal.
Day 7
Treba se je izogibati ustvarjanju anoksičnih pogojev, zato je treba poskrbeti, da pokrovi posod, v katerih so kulture, omogočajo zadostno izmenjavo plinov z ozračjem.
Check soil moisture content
Vsak teden je treba tla previdno prekopati, da se pospeši zračenje.
Feed
Črve je mogoče hraniti z ovsenimi kosmiči.
Day 14
Ovseni kosmiči morajo biti shranjeni v zatesnjenih posodah, pred uporabo pa jih je treba avtoklavirati ali segreti, da se prepreči kontaminacija s pršicami iz moke (npr. vrstami Glyzyphagus, Astigmata, Acarina) ali plenilskimi pršicami (npr. Hypoaspis (Cosmolaelaps) miles, Gamasida, Acarina).
Determine adult mortality
Po segrevanju je treba hrano zmleti, tako da jo je mogoče enostavno potresti po površini tal.
Estimate number of juveniles
Občasno se lahko ovsenim kosmičem dodajo vitamini, mleko in ribje olje.
Day 21
Druga primerna vira hrane sta pekovski kvas in ribja hrana ‚Tetramin‘.
Observe adult behaviour
Hranjenje poteka približno dvakrat tedensko.
Remove adults
Ustrezno količino ovsenih kosmičev se potrese na površino tal ali ob prekopavanju tal za pospeševanje zračenja previdno vmeša v substrat.
Day 28
Absolutna količina ponujene hrane je odvisna od števila črvov v substratu.
No feeding
Če je bila vsa hrana použita v istem dnevu, kot je bila ponujena, je to lahko vodilo, da je treba količino hrane povečati.
Day 35
Obratno pa je treba, če hrana v času drugega hranjenja (en teden kasneje) še vedno ostaja na površini, količino zmanjšati.
Day 42
Hrano, kontaminirano z glivami, je treba odstraniti in zamenjati.
Count juvenile worms
Po treh mesecih je treba črve prenesti v sveže pripravljen substrat.
Treatment of results
Pogoji gojenja veljajo za zadovoljive, če:
Although an overview is given in Appendix 7, no definitive statistical guidance for analysing test results is given in this test method.
črvi ne skušajo zapustiti substrata tal, (b) se črvi skozi tla premikajo hitro, (c) imajo svetlečo zunanjo površino, na katero se ne lepijo delci, (d) so bolj ali manj bele barve, (e) so v kulturah črvi različnih starostnih obdobij, (f) se neprestano razmnožujejo.
In the range finding test, the main endpoint is mortality.
Izvedba preskusa pri drugih vrstah enchytraeus
Changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and morphology (e.g. open wounds) of the adult worms should however also be recorded along with the presence of any juveniles.
Izbira vrst
Probit analysis (21) or logistic regression should normally be applied to determine the LC50.
Razen vrste E. albidus je mogoče uporabiti tudi druge vrste, vendar je treba preskusni postopek in merila za veljavnost ustrezno prilagoditi.
However, in cases where this method of analysis is unsuitable (e.g., if less then three concentrations with partial kills are available), alternative methods can be used.
Ker je veliko vrst Enchytraeus lahko dostopnih in jih je mogoče zadovoljivo gojiti v laboratoriju, je najpomembnejše merilo za izbiro drugih vrst, ne vrste E. albidus, ekološka pomembnost in, dodatno, primerljiva občutljivost.
These methods could include moving averages (22), the trimmed Spearman-Karber method (23) or simple interpolation (e.g., geometrical mean of LC0 and LC100, as computed by the square root of LC0 multiplied by LC100).
Lahko obstajajo tudi uradni razlogi za spremembo vrste.
In the definitive test, test endpoint is fecundity (i.e. number of juveniles produced).
V državah, v katerih se npr. vrsta E. albidus ne pojavlja in je ni mogoče uvoziti (npr. zaradi omejitev v zvezi s karanteno), je treba uporabiti drugo vrsto Enchytraeus.
However, as in the range-finding test, all other harmful signs should be recorded in the final report.
Primeri ustreznih alternativnih vrst
The statistical analysis requires the arithmetic mean and the standard deviation per treatment and per control for reproduction to be calculated.
v zadnjih letih se ta vrsta pogosto uporablja v ekotoksikoloških študijah, ker jo je preprosto gojiti in preskušati.
If an analysis of variance has been performed, the standard deviation, s, and the degrees of freedom, df, may be replaced by the pooled variance estimate obtained from the ANOVA and by its degrees of freedom, respectively — provided variance does not depend on the concentration.
Vendar je majhna, zato je ravnanje z njo težje v primerjavi z vrsto E. albidus (še posebej v fazah pred uporabo metode barvanja).
In this case, use the single variances of control and treatments.
Ni zagotovo dokazano, da vrsta E. crypticus obstaja na polju, opisana je bila le na podlagi kultur deževnikov.
Those values are usually calculated by commercial statistical software using the per-vessel results as replicates.
Zato njene ekološke potrebe niso znane.
If pooling of data for the negative and solvent controls appears reasonable rather than testing against one of those, they should be tested to see that they are not significantly different (for appropriate tests see paragraph 45 and Appendix 7).
to ime verjetno zajema skupino vrst v bližnjem sorodstvu, ki jih je morfološko težko ločiti.
Further statistical testing and inference depends on whether the replicate values are normally distributed and are homogeneous with regard to their variance.
Ni priporočena za uporabo pri preskušanju, dokler ni ugotovljeno, kateri vrsti pripadajo posamezni osebki, uporabljeni v preskusu.
NOEC Estimation
E. buchholzi je navadno mogoče najti na travnikih in prizadetih območjih, kot so obcestne površine.
The application of powerful tests should be preferred.
ta vrsta je bila prvotno znana kot E. ‚minutus‘, a je bila nedavno opisana (1).
One should use information e.g. from previous experience with ring-testing or other historic data on whether data are approximately normally distributed.
Prvič jo je odkril U. Graefe (iz Hamburga) na travniku blizu St.
Variance homogeneity (homoscedasticity) is more critical.
Peter-Ordinga (Schleswig-Holstein, Nemčija).
Experience tells that the variance often increases with increasing mean.
E. luxuriosus je približno pol manjša od vrste E. albidus, a je večja od drugih tu opisanih vrst;
In these cases, a data transformation could lead to homoscedasticity.
ta vrsta bi lahko bila dobra alternativa vrsti E. albidus.
However, such a transformation should be based on experience with historic data rather than on data under investigation.
doslej so o tej vrsti poročali, da so jo našli v nemških in španskih mineralnih tleh, kjer je pogosta, vendar ne v velikem obsegu.
With homogeneous data, multiple t-tests such as Williams' test (α = 0,05, one-sided) (24)(25) or in certain cases Dunnett's test (26)(27) should be performed.
V primerjavi z drugimi vrstami tega rodu jo je relativno enostavno določiti.
It should be noted that, in the case of unequal replication, the table t-values must be corrected as suggested by Dunnett and Williams.
O njenem vedenju v laboratorijskih preskusih ali njeni občutljivosti na kemikalije ni ničesar znanega.
Sometimes, because of large variation, the responses do not increase/decrease regularly.
Vendar pa je bilo ugotovljeno, da jo je enostavno gojiti (E. Belotti, osebna komunikacija).
In this case of strong deviation from monotonicity the Dunnett's test is more appropriate.
Pogoji gojenja
If there are deviations from homoscedasticity, it may be reasonable to investigate possible effects on variances more closely to decide whether the t tests can be applied without losing much power (28).
Vse zgoraj omenjene vrste Enchytraeus je mogoče gojiti v enakih substratih, kot se uporabljajo za vrsto E. albidus.
(see also the scheme in Appendix 7).
Življenjski cikel teh vrst je krajši od življenjskega cikla vrste E albidus, zato mora biti hranjenje pogostejše.
If a limit test has been performed and the prerequisites of parametric test procedures (normality, homogeneity) are fulfilled, the pair-wise Student t-test can be used or otherwise the Mann-Whitney-U-test procedure (29).
Preskusni pogoji so v splošnem enaki kot tisti za vrsto E. albidus, razen naslednjega:
ECx Estimation
velikost preskusne posode je lahko manjša (ni pa nujno),
To compute any ECx value, the per-treatment means are used for regression analysis (linear or non-linear), after an appropriate dose-response function has been obtained.
za štetje je zaradi majhnosti mladih črvov zelo priporočljiva metoda barvanja,
For the growth of worms as a continuous response, ECx- -values can be estimated by using suitable regression analysis (35).
merilo za veljavnost, ki se nanaša na ‚število mladičev na preskusno posodo v kontrolnem vzorcu‘, je treba spremeniti v ‚50‘.
Among suitable functions for quantal data (mortality/survival and number of offspring produced) are the normal sigmoid, logistic or Weibull functions, containing two to four parameters, some of which can also model hormetic responses.
Dodatek 6
If a dose-response function was fitted by linear regression analysis a significant r2 (coefficient of determination) and/or slope should be found with the regression analysis before estimating the ECx by inserting a value corresponding to x % of the control mean into the equation found by regression analysis.
Podroben opis tehnik ekstrakcije
95 %-confidence limits are calculated according to Fieller (cited in Finney (21)) or other modern appropriate methods.
Barvanje z barvilom bengal rdeče
Alternatively, the response is modelled as a percent or proportion of model parameter which is interpreted as the control mean response.
To metodo, ki je bila najprej razvita v ekologiji celinskih voda (1), je za štetje mladih enhitrejev v preskusu razmnoževanja enhitrejev naprej predlagal W. de Coen (z Univerze v Gentu, Belgija).
In these cases, the normal (logistic, Weibull) sigmoid curve can often be easily fitted to the results using the probit regression procedure (21).
Neodvisno od njega so prilagojeno različico (barvilo bengal rdeče, zmešano s formaldehidom namesto z etanolom) razvili na inštitutu RIVM v Bilthovnu (2)(3).
In these cases the weighting function has to be adjusted for metric responses as given by Christensen (36).
Ob koncu dokončnega preskusa (tj. po šestih tednih) se tla iz preskusnih posod prenesejo v plitko posodo.
However, if hormesis has been observed, probit analysis should be replaced by a four-parameter logistic or Weibull function, fitted by a non-linear regression procedure (36).
Za ta namen je uporabna posoda Bellaplast ali kad za razvijanje fotografij z rebrastim dnom; slednja zato, ker ‚rebra‘ omejujejo premikanje črvov v polju opazovanja.
If a suitable dose-response function cannot be fitted to the data, one may use alternative methods to estimate the ECx, and its confidence limits, such as Moving Averages after Thompson (22) and the Trimmed Spearman-Karber procedure (23).
Mladiči se fiksirajo z etanolom (s približno 5 ml na ponovitev).
The test report must include the following information:
Posode se napolnijo z vodo do višine od 1 do 2 cm.
physical nature and, where relevant physical-chemical properties (e.g. water solubility, vapour pressure);
Doda se nekaj kapljic (od 200 do 300 μl) barvila bengal rdeče (1-odstotna raztopina v etanolu) (alternativa je 0,5-odstotno barvilo eozin), obe sestavini pa se previdno zmešata.
chemical identification of the test chemical according to IUPAC nomenclature, CAS-number, batch, lot, structural formula and purity;
Po 12 urah bi morali biti črvi obarvani rdečkasto in bi jih moralo biti enostavno prešteti, ker bodo ležali na površini substrata.
expiry date of sample.
Zmes substrata/alkohola je namesto tega mogoče pred štetjem črvov sprati tudi prek sita (velikost mreže: 0,250 mm).
test animals used:
S tem postopkom se bo nekaj kaolinita, šote in peska izpralo, rdečkasto obarvane črve pa bo laže videti in prešteti.
species, scientific name, source of organisms and breeding conditions.
Štetje olajšajo tudi osvetljene leče (leče velikosti vsaj 100 × 75 mm s faktorjem povečave od 2 do 3).
ingredients and preparation of the artificial soil;
S tehniko barvanja se čas štetja skrajša na nekaj minut na posodo, kot vodilo pa lahko služi podatek, da bi morala ena oseba oceniti vse posode iz enega preskusa v največ dveh dneh.
method of application of the test chemical;
Ekstrakcija z vlago
description of the test conditions, including temperature, moisture content, pH, etc.;
Ekstrakcijo z vlago je treba začeti takoj po koncu preskusa.
full description of the experimental design and procedures.
Tla iz vsake preskusne posode se namestijo na plastična sita z velikostjo mreže približno 1 mm.
Test results:
Sita se nato obesijo v plastične sklede, tako da se ne dotikajo tal.
mortality of adult worms after two weeks and the number of juveniles at the end of the range-finding test;
Sklede se previdno polnijo z vodo, dokler vzorci v sitih niso popolnoma pod površino vode.
mortality of adult worms after three weeks exposure and the full record of juveniles at the end of the definitive test;
Da se zagotovi stopnja izkoristka, ki znaša več kot 90 % prisotnih črvov, je treba uporabiti obdobje ekstrakcije 3 dni pri 20 ± 2 °C.
any observed physical or pathological symptoms and behavioural changes in the test organisms;
Na koncu obdobja ekstrakcije se sita odstranijo in voda (razen majhne količine) se počasi odlije, pri čemer je treba paziti, da se ne kali usedlina na dnu skled.
the LC50, the NOEC and/or ECx (e.g. EC50, EC10) for reproduction if some of them are applicable with confidence intervals, and a graph of the fitted model used for its calculation all information and observations helpful for the interpretation of the results.
Plastične sklede se nato rahlo pretresejo, da se suspendira usedlina v vodi nad usedlino.
Deviations from procedures described in this test method and any unusual occurrences during the test.
Voda se prenese v petrijevko, ko pa se delci tal usedejo, je s stereomikroskopom in kleščami iz mehkega jekla mogoče določiti, odstraniti in prešteti enhitreje.
Frankfurt für das Umweltbundesamt (Berlin), FE-Vorhaben 106 03 051/01.
Flotacija
Chapter C.8 of this Annex, Toxicity for Earthworms.
Metodo, ki temelji na flotaciji, je v opombi opisal R. Kuperman (4).
Part 1:
Po fiksiranju vsebine preskusne posode z etanolom se tla poplavijo z disperzijo Ludox (koloidni kremen AM-30, suspenzija v vodi 30 % mase), ki naj sega od 10 do 15 mm nad površino tal.
Part 2:
Po temeljitem mešanju tal s flotacijskim sredstvom od 2 do 3 minute je mogoče mlade črve, ki plavajo na površini, enostavno prešteti.
Determination of effects on reproduction, No. 11268-2.
SETAC 19th Annual Meeting, Charlotte, ZDA.
For the purpose of this test method the following definitions are applicable:
Abstract Book No.
In this test the effect concentrations are expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
PMP069, str. 157.
(No lethal concentration) is the concentration of a test chemical that does not kill any of exposed test organisms within a given time period.
Dodatek 7
In this test the LC50 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
Podatki:
(Totally lethal concentration) is the concentration of a test chemical kills 100 % of exposed test organisms within a given time period.
Je variacija homogena?
In this test the LC100 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
Izločite kontrolo brez topila.
LOEC (Lowest Observed Effect Concentration) is the lowest test chemical concentration that has a statistically significant effect (p < 0,05).
Izločite kontrolo brez topila.
In this test the LOEC is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
Parametrični preskusi Da
All test concentrations above the LOEC should normally show an effect that is statistically different from the control.
U-preskus
Any deviations from the above in identifying the LOEC must be justified in the test report.
Obe kontroli je mogoče združiti.
NOEC (No Observed Effect Concentration) is the highest test chemical concentration immediately below the LOEC at which no effect is observed.
Dodatna kontrola s topilom?
Reproduction rate is the mean number of juvenile worms produced per a number of adults over the test period.
Dodatna kontrola s topilom?
Determination of the maximum water holding capacity
Statistično preskušanje ni priporočljivo.
Determination of the water holding capacity of the artificial soil
Ni uspelo.
The following method has been found appropriate.
Ni uspelo.
It is described in Annex C of the ISO DIS 11268-2.
Pretvori podatke.
Collect a defined quantity (e.g. 5 g) of the test soil substrate using a suitable device (auger tube etc.).
Začetek
Cover the bottom of the tube with a piece of filter paper and, after filling with water, place it on a rack in a water bath.
Neparametrični preskusi
The tube should be gradually submerged until the water level is above to the top of the soil.
PRESKUS RAZMNOŽEVANJA DEŽEVNIKOV (EISENIA FETIDA/EISENIA ANDREI)
It should then be left in the water for about three hours.
Ta preskusna metoda je enakovredna Smernici za preskušanje OECD (TG) 222 (2004).
Since not all water absorbed by the soil capillaries can be retained, the soil sample should be allowed to drain for a period of two hours by placing the tube onto a bed of very wet finely ground quartz sand contained within a closed vessel (to prevent drying).
Zasnovana je za uporabo pri ocenjevanju učinkov kemikalij v tleh na sposobnost razmnoževanja (in druge subletalne končne točke) vrste deževnikov Eisenia fetida (Savigny, 1826) ali Eisenia andrei (Andre, 1963) (1) (2).
The sample should then be weighed, dried to constant mass at 105 °C.
Preskus je bil krožno preskušen (3).
The water holding capacity (WHC) can then be calculated as follows:
Obstaja preskusna metoda za preskus akutne strupenosti pri deževnikih (4).
WHCin % of dry mass
Objavljenih je več drugih mednarodnih in nacionalnih smernic za preskuse akutne in kronične strupenosti za deževnike (5)(6)(7)(8).
Where:
Vrsta Eisenia fetida/Eisenia andrei velja za eno od predstavnic talne favne in še posebej deževnikov.
S water-saturated substrate + mass of tube + mass of filter paper
Na voljo so osnovne informacije o ekologiji deževnikov in njihovi uporabi pri ekotoksikološkem preskušanju (7)(9)(10)(11)(12).
T tare (mass of tube + mass of filter paper)
Odrasli črvi so izpostavljeni več koncentracijam preskusne kemikalije, vmešane v tla ali, v primeru pesticidov, nanesene na tla ali v tla s postopki, skladnimi z vzorcem uporabe kemikalije.
D dry mass of substrate
Način nanosa je odvisen od namena preskusa.
REFERENCES:
Območje preskusnih koncentracij je izbrano tako, da zajema subletalne in smrtne učinke v obdobju osmih tednov.
Determination of soil pH
Smrtnost in učinki na rast odraslih črvov so določeni po 4 tednih izpostavljenosti.
The following method for determining the pH of a soil sample is based on the description in ISO 10390 (Soil Quality — Determination of pH).
Odrasli osebki se nato odstranijo iz tal in po nadaljnjih 4 tednih se s štetjem potomcev ocenijo učinki na razmnoževanje.
A defined quantity of soil is dried at room temperature for at least 12 hours.
Sposobnost razmnoževanja živali, izpostavljenih preskusni kemikaliji, se za določitev (i) koncentracije brez opaznega učinka (NOEC) in/ali (ii) ECx (npr. EC10, EC50) z regresijskim modelom, s katerim se oceni koncentracijo, ki bi povzročila x-odstotno zmanjšanje sposobnosti razmnoževanja, primerja s sposobnostjo razmnoževanja pri kontrolah.
A suspension of the soil (containing at least 5 grams of soil) is then made up in five times its volume of either 1 M of analytical grade potassium chloride (KCl) or a 0,01 M solution of analytical grade calcium chloride (CaCl2).
Preskusne koncentracije morajo oklepati vrednost ECx (npr. EC10, EC50), tako da vrednost ECx nato izvira iz interpolacije in ne iz ekstrapolacije (za opredelitve glej Dodatek 1).