natgillin/translations-raw huggingface dataset:
germination inhibited by darkness (18, 19) warm stratification (1) no special treatments (5, 14, 22, 25, 26)
približno od 0,3 do 1,0 % kalcijevega karbonata (CaCO3, zdrobljenega v prah, analitsko čistega) za doseganje vrednosti pH, ki znaša 6,0 ± 0,5;
(Cleavers)
količina kalcijevega karbonata, ki bo dodana, je lahko odvisna zlasti od kakovosti/značilnosti šote,
arable fields, moist areas, disturbed sites (16, 19)
približno 70 % na zraku posušenega kremenovega peska (odvisno od potrebne količine CaCO3), v glavnem finega peska z več kot 50 % delcev, ki merijo med 50 in 200 mikroni.
cold stratification (1, 18, 19) germination not affected by irradiance (18, 19) light inhibits germination (1) no special treatments (6, 14)
Pred uporabo tal v dokončnem preskusu je priporočljivo dokazati primernost umetnih tal za gojenje črvov in izpolnjevanje meril za veljavnost preskusa.
(Hedge Bedstraw)
Tako preverjanje je posebej priporočljivo za to, da se prepreči ogroženost preskusa, če se vsebnost organskega ogljika v umetnih tleh zniža, npr. z znižanjem vsebnosti mahu na vrednost 4–5 % in ustreznim zvišanjem vsebnosti peska.
hedgebanks, open areas (8)
S takim znižanjem vsebnosti organskega ogljika se lahko zmanjšajo možnosti adsorpcije preskusne kemikalije na tla (organski ogljik), razpoložljivost preskusne kemikalije za črve pa se lahko poveča.
(Foxglove)
Dokazano je, da lahko Enchytraeus albidus izpolnjuje merila za veljavnost v zvezi z razmnoževanjem, če se preskus izvaja z naravnimi tlemi z manjšo vsebnostjo organskega ogljika, npr. 2,7 % (15), (omejene) izkušnje pa kažejo, da je to mogoče doseči tudi pri umetnih tleh s 5 % šote.
Β, Ρ hedgerows, open areas (16, 19)
pri uporabi naravnih tal za dodatno preskušanje (na višjih stopnjah) je treba dokazati tudi primernost tal in izpolnjevanje meril za veljavnost preskusa.
0,1 -0,6 (4, 14, 19)
Suhe sestavine tal se temeljito premešajo (npr. v velikem laboratorijskem mešalniku).
germination inhibited by darkness (1, 17-19) no special treatments (4, 22-26)
To je treba storiti vsaj en teden pred začetkom preskusa.
(Speedwell)
Zmešana tla je treba hraniti dva dneva, da se kislost uravnoteži/stabilizira.
germination inhibited by darkness (18, 19) cold stratification (18) no special treatments (14)
Za določanje vrednosti pH zmesi tal in 1 M kalijevega klorida (KCl) ali 0,01 M kalcijevega klorida (CaCl2) se uporablja raztopina v razmerju 1: 5 (glej (16) in Dodatek 3).
Seed Suppliers Cited
Če so tla bolj kisla, kot je določeno z zahtevanim območjem (glej odstavek 11), jih je mogoče prilagoditi z dodajanjem ustrezne količine CaCO3.
Supplier ID
Če so tla preveč alkalna, jih je mogoče prilagoditi z dodajanjem večje količine zmesi, navedene v odstavku 11, vendar brez CaCO3.
Supplier Information
Največja zmogljivost zadrževanja vode (water holding capacity – WHC) umetnih tal je določena v skladu s postopki, opisanimi v Dodatku 2.
www. herbiseed.com
Dan ali dva pred začetkom preskusa se suha umetna tla predhodno navlažijo z dodajanjem zadostne količine deionizirane vode, da je pridobljena približno polovica končne vsebnosti vode, kar je od 40 do 60 % največje zmogljivosti zadrževanja vode.
344 - 4050
Na začetku preskusa so predhodno navlažena tla razdeljena na dele, ki ustrezajo številu preskusnih koncentracij (in referenčnih kemikalij, kadar je primerno) ter kontrol, uporabljenih za preskus.
#316 Regional Road 60, RR#1, Walsingham, ON N0E 1X0 CANADA (519) 586 - 3985
Vsebnost vlage se z dodajanjem raztopine preskusne kemikalije in/ali z dodajanjem destilirane ali deionizirane vode prilagodi na 40–60 % največje zmogljivosti zadrževanja vode (glej odstavke 19–21).
5380 Vivian St., Arvada, CO 80002 USA (303) 431 - 7333
Vsebnost vlage se določi na začetku in koncu preskusa (s sušenjem na konstantno težo pri 105 °C) in mora biti v optimalnem območju za preživetje črvov.
873 - 3321
Vsebnost vlage v tleh je mogoče preveriti z rahlim stiskanjem tal v roki; če je vsebnost vlage pravilna, se morajo med prsti pojaviti majhne kapljice vode.
Thompson & Morgan
Izbira in priprava preskusnih živali
P.O. Box 1051, Fort Erie, ON L2A 6C7 CANADA (800) 274 - 7333
Priporočena preskusna vrsta je Enchytraeus albidus (Henle, 1837) (enhitrej), član družine Enchytraeidae (red Oligochaeta, deblo Annelida).
REFERENCES CITED
E. albidus je ena od najobsežnejših vrst kolobarnikov iz družine Enchytraeidae, pri kateri so zabeleženi tudi osebki, dolgi do 35 mm (17)(18).
Lower, W. Wang, & M.A.
Vrsta E. albidus je razširjena po vsem svetu in jo najdemo v morskih, sladkovodnih in kopenskih habitatih, v glavnem v razkrajajočih se organskih snoveh (algah, kompostu), redko pa na travnikih (9).
American Society for Testing & Materials, Philadelphia. pp 197 - 208.
Njena široka ekološka toleranca in nekatere morfološke variacije kažejo na to, da morda obstaja več podvrst.
Rationale for the choice of species in the regulatory testing of the effects of pesticides on terrestrial non-target plants.
Vrsta E. albidus je na trgu na voljo kot hrana za ribe.
BCPC — Weeds. pp. 151 - 156.
Treba je preveriti, ali je kultura kontaminirana z drugimi, običajno manjšimi vrstami (1)(19).
Herbicide effects on field margin flora.
V primeru kontaminacije je treba vse črve oprati z vodo v petrijevki.
BCPC — Weeds. pp. 1021-1028.
Nato se (s stereomikroskopom) izberejo veliki odrasli osebki E. albidus za pripravo nove kulture in izločitev vseh drugih črvov.
A = Annuals, В = Biennials, Ρ = Perennials.
Vrsto E. albidus je mogoče enostavno gojiti v mnogih organskih snoveh (glej Dodatek 4).
References 11,14 and 33 referto proportion of light (L) and darkness (D) required to induce seed germination.
Življenjski cikel vrste E. albidus je kratek, ker zrelost doseže v obdobju med 33 dnevi (pri 18 °C) in 74 dnevi (pri 12 °C) (1).
References 3, 6, 9, 10, 13, 20 referto growing conditions in greenhouses.
Za preskus se uporabijo le kulture, ki so bile brez težav 5 tednov (v času ene generacije) gojene v laboratoriju.
0 mm indicates seeds were sown on the soil surface or that seeds need light to germinate.
Primerne so tudi druge vrste rodu Enchytraeus, npr. E. buchholzi (Vejdovsky, 1879) ali E. crypticus (Westheide in Graefe, 1992) (glej Dodatek 5).
Duration of maturation and or stratification not always available.
Živali, uporabljene v preskusih, so odrasli črvi.
Except for cold treatment requirements, temperature conditions are not specified since in greenhouse testing there is limited temperature control.
Na področju kliteluma morajo imeti jajčeca (bele pike) in biti morajo približno enake velikosti (dolgi približno 1 cm).
Most seeds will germinate under normal fluctuation of temperatures found in greenhouses.
Sinhronizacija gojitvene kulture ni potrebna.
Indicates species was utilized in either a pre-emergence (PRE) and/or post-emergence (POST) plant toxicity test involving herbicides.
Če se enhitreji ne gojijo v isti vrsti tal in v pogojih (vključno s hranjenjem), uporabljenih za končni preskus, jih je treba aklimatizirati vsaj 24 ur in do tri dni.
Provides example(s) of commercial seed suppliers.
Na začetku je treba aklimatizirati število odraslih osebkov, ki je večje od števila, potrebnega za izvedbo preskusa, da je omogočena možnost zavrnitve poškodovanih ali kako drugače neprimernih osebkov.
Provides two alternative reference(s) that were consulted.
Ob koncu obdobja aklimatizacije se za preskus izberejo samo črvi, ki imajo jajčeca in se ne vedejo nenormalno (npr. ne poskušajo uiti iz tal).
Examples for appropriate growth conditions for certain crop species
Črvi se s pinceto, s kljukami ali z zankami skrbno izberejo in namestijo v petrijevko, v kateri je malo sladke vode.
The following conditions have been found suitable for 10 crop species, and can be used as a guidance for tests in growth chambers with certain other species as well:
V ta namen je primernejša rekonstituirana sladka voda, kot je predlagano v poglavju C.20 te priloge (Preskus razmnoževanja vrste Daphnia magna), saj deionizirana, demineralizirana ali vodovodna voda lahko črve poškoduje.
Carbon dioxide concentration:
Črvi se pregledajo pod stereomikroskopom in izločijo se vsi, ki nimajo jajčec.
Relative humidity:
Pazljivo se odstranijo in izločijo vse pršice ali vsi skakači, ki so morda kontaminirali kulture.
70 ± 5 % during light periods and 90 ± 5 % during dark periods;
Zdravi črvi, ki se ne uporabijo za preskus, se vrnejo v založno kulturo.
Temperature:
Priprava preskusnih koncentracij
25 ± 3 °C during the day, 20 ± 3 °C during the night;
Preskusne kemikalija, ki je topna v vodi
Photoperiod:
Raztopina preskusne kemikalije se pripravi v deionizirani vodi v dovolj veliki količini za vse ponovitve ene preskusne koncentracije.
16 hour light/8 hour darkness, assuming an average wavelength of 400 to 700 nm;
Priporočljivo je uporabljati zadostno količino vode, da se doseže zahtevana vsebnost vlage, tj. od 40 do 60 % največje vrednosti WHC (glej odstavek 13).
Light:
Vsaka raztopina preskusne kemikalije se temeljito premeša z eno serijo predhodno namočenih tal, preden se doda v preskusno posodo.
luminance of 350 ± 50 μE/m2/s, measured at the top of the canopy.
Preskusna kemikalija, ki ni topna v vodi
The crop species are:
Pri kemikalijah, ki niso topne v vodi, so pa topne v organskih topilih, se preskusna kemikalija lahko raztopi v najmanjši mogoči količini primernega vehikla (npr. acetona).
tomato (Solanum lycopersicon);
Uporabijo se lahko le hlapna topila.
cucumber (Cucumis sativus);
Ta zmes kremenovega peska in preskusne kemikalije se doda predhodno navlaženim tlom in po dodajanju ustrezne količine deionizirane vode temeljito zmeša, da se doseže zahtevana vlaga.
lettuce (Lactuca sativa);
Končna mešanica se vnese v preskusne posode.
soybean (Glycine max);
Pri kemikalijah, ki so slabo topne v vodi in organskih topilih, se ekvivalent 2,5 g fino mletega kremenovega peska na preskusno posodo zmeša z določeno količino preskusne kemikalije, da nastane želena preskusna koncentracija.
cabbage (Brassica oleracea var. capitata);
Ta zmes kremenovega peska in preskusne kemikalije se doda predhodno navlaženim tlom in po dodajanju ustrezne količine deionizirane vode temeljito zmeša, da se doseže zahtevana vsebnost vlage.
carrot (Daucus carota);
Končna mešanica se razdeli v preskusne posode.
oats (Avena sativa);
Postopek se ponovi za vsako preskusno koncentracijo, pri čemer se pripravi tudi ustrezna kontrola.
perennial ryegrass (Lolium perenne);
Kemikalij se običajno ne sme preskušati pri koncentracijah, večjih od 1000 mg/kg suhe mase tal.
corn (Zea mays);
Vendar pa je v skladu s cilji določenega preskusa morda potrebno preskušanje pri višjih koncentracijah.
onion (Allium cepa).
IZVEDBA PRESKUSOV
C.32.
Preskusne in kontrolne skupine
ENCHYTRAEID REPRODUCTION TEST
Za vsako preskusno koncentracijo se količina preskusnih tal, ki ustreza 20 g suhe teže, postavi v preskusno posodo (glej odstavke 19–21).
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 220 (2004).
Pripravijo se tudi kontrolni vzorci brez preskusne kemikalije.
It is designed to be used for assessing the effects of chemicals on the reproductive output of the enchytraeid worm, Enchytraeus albidus Henle 1873, in soil.
Vsaki posodi se v skladu s postopki, opisanimi v odstavku 29, doda hrana.
It is based principally on a method developed by the Umweltbundesamt, Germany (1) that has been ring-tested (2).
V vsako preskusno posodo se naključno razporedi po deset črvov.
Other methods for testing the toxicity of chemicals to Enchytraeidae and earthworms have also been considered (3)(4)(5)(6)(7)(8).
Črvi se previdno prenesejo v vsako preskusno posodo in na primer s pinceto, kljukami ali zankami namestijo na površino tal.
Soil-dwelling annelids of the genus Enchytraeus are ecologically relevant species for ecotoxicological testing.
Število ponovitev za preskusne koncentracije in za kontrolne vzorce je odvisno od uporabljenega načrta preskusa (glej odstavek 34).
Whilst enchytraeids are often found in soils containing earthworms it is also true that they are often abundant in many soils where earthworms are absent.
Preskusne posode se naključno razporedijo po preskusnem inkubatorju in nato vsak teden naključno prerazporedijo.
Enchytraeids can be used in laboratory tests as well as in semi-field and field studies.
Če se za nanos preskusne kemikalije uporablja vehikel, je treba poleg preskusne serije izvesti še eno kontrolno serijo, ki vsebuje kremenov pesek, na katerega se razprši ali z njim zmeša topilo.
From a practical point of view, many Enchytraeus species are easy to handle and breed, and their generation time is significantly shorter than that of earthworms.
Koncentracija topila ali disperzijskega sredstva mora biti enaka kot koncentracija v preskusnih posodah s preskusno kemikalijo.
The duration for a reproduction test with enchytraeids is therefore only 4-6 weeks while for earthworms (Eisenia fetida) it is 8 weeks.
Za kemikalije, ki jih je treba dodajanje v skladu s postopki, opisanimi v odstavku 21, se mora izvesti kontrolna serija, ki vsebuje dodaten kremenov pesek (2,5 g na posodo).
Basic information on the ecology and ecotoxicology of enchytraeids in the terrestrial environment can be found in (9)(10)(11)(12).
Preskusna temperatura je 20 ± 2 °C.
Adult enchytraeid worms are exposed to a range of concentrations of the test chemical mixed into an artificial soil.
Za preprečevanje uhajanja črvov iz tal se preskus izvaja v nadzorovanih ciklih svetlobe in teme (po možnosti 16 ur svetlobe in 8 ur teme) pri osvetljenosti od 400 do 800 luksov na območju preskusnih posod.
The test can be divided into two steps:
Za preverjanje vlažnosti tal se posode na začetku preskusa in nato enkrat tedensko stehtajo.
a range-finding test, in case no sufficient information is available, in which mortality is the main endpoint assessed after two weeks exposure and (b) a definitive reproduction test in which the total number of juveniles produced by parent animal and the survival of parent animals are assessed.
Izguba mase se nadomesti z dodajanjem ustrezne količine deionizirane vode.
The duration of the definitive test is six weeks.
Opozoriti je treba, da se lahko izguba vode zmanjša z vzdrževanjem visoke vlažnosti zraka (> 80 %) v preskusnem inkubatorju.
After the first three weeks, the adult worms are removed and morphological changes are recorded.
Vsebnost vlage in vrednost pH je treba meriti ob začetku in koncu preskusa za določanje območja delovanja in dokončnega preskusa.
After an additional three weeks, the number of offspring, hatched from the cocoons produced by the adults, is counted.
Meritve je treba opraviti v kontrolnih in tretiranih (z vsemi koncentracijami) vzorcih tal, ki so pripravljeni in vzdrževani na enak način kot preskusne kulture, ne vsebujejo pa črvov.
The reproductive output of the animals exposed to the test chemical is compared to that of the control(s) in order to determine (i) the no observed effect concentration (NOEC) and/or (ii) ECx (e.g. EC10, EC50) by using a regression model to estimate the concentration that would cause a x % reduction in reproductive output.
Tem vzorcem tal je treba hrano dodati le v začetku preskusa, da se spodbudi mikrobna dejavnost.
The test concentrations should bracket the ECx (e.g. EC10, EC50) so that the ECx then comes from interpolation rather than extrapolation.
Količina dodane hrane mora biti enaka količini hrane, dodani preskusnim kulturam.
The water solubility, the log Kow, the soil water partition coefficient (e.g. Chapter C.18 or C.19 of this Annex) and the vapour pressure of the test chemical should preferably be known.
Tem posodam med preskusom ni treba dodajati dodatne hrane.
Additional information on the fate of the test chemical in soil, such as the rates of photolysis and hydrolysis is desirable.
Hranjenje
This test method can be used for water soluble or insoluble chemicals.
Uporablja se hrana, ki lahko vzdržuje populacijo enhitrejev.
However, the mode of application of the test chemical will differ accordingly.
Kot primerna hrana so se izkazali ovseni kosmiči, po možnosti avtoklavirani pred uporabo, da se prepreči kontaminacija z mikrobi (primerno je tudi gretje).
The test method is not applicable to volatile chemicals, i.e. chemicals for which the Henry's constant or the air/water partition coefficient is greater than one, or chemicals for which the vapour pressure exceeds 0,0133 Pa at 25 °C.
Najprej se hrana ponudi tako, da se 50 mg grobo mletih ovsenih kosmičev zmeša s tlemi v vsaki posodi, še preden se vanjo namestijo črvi.
For the test to be valid, the following performance criteria should be met in the controls:
Nato pa se hrana dobavlja tedensko, vse do 21. dneva.
adult mortality should not exceed 20 % at the end of the range-finding test and after the first three weeks of the reproduction test.
Hranjenje se 28. dne ne izvede, saj so odrasli osebki na tej stopnji odstranjeni, mladi črvi pa po tem potrebujejo relativno malo dodatne hrane.
assuming that 10 adults per vessel were used in setting up the test, an average of at least 25 juveniles per vessel should have been produced at the end of the test.
Hranjenje med preskusom obsega 25 mg grobo mletih ovsenih kosmičev na posodo, ki se previdno namestijo na površino tal, da ne poškodujejo črvov.
the coefficient of variation around the mean number of juveniles should not be higher than 50 % at the end of the reproduction test.
Za zmanjšanje rasti gliv je treba kosmiče ovsa prekriti z majhno količino tal in jih tako zakopati v tla.
Where a test fails to meet the above validity criteria the test should be terminated unless a justification for proceeding with the test can be provided.
Če hrana ostane nepoužita, je treba obrok zmanjšati.
The justification should be included in the test report.
Načrt za preskus za določanje območja delovanja
A reference chemical should be tested either at regular intervals or possibly included in each test to verify that the response of the test organisms has not changed significantly over time.
Po potrebi se preskus za določanje območja delovanja izvede na primer s petimi koncentracijami preskusnih kemikalij, ki znašajo 0,1, 1,0, 10, 100 in 1000 mg/kg (suhe teže tal).
A suitable reference chemical is carbendazim, which has been shown to affect survival and reproduction of enchytraeids (13)(14), or other chemicals whose toxicity data are well known could be also used.
Zadošča ena ponovitev za vsako tretirano skupino in kontrolo.
A formulation of carbendazim known by the trade name of Derosal™ supplied by AgrEvo Company (Frankfurt, Germany) and containing 360 g/l (32,18 %) active ingredient was used in a ring-test (2).
Preskus za določanje območja delovanja traja dva tedna.
The EC50 for reproduction determined in the ring test was in the range of 1,2 ± 0,8 mg active ingredient (a.i) /kg dry mass (2).
Na koncu preskusa se oceni smrtnost črvov.
If a positive toxic standard is included in the test series, one concentration is used and the number of replicates should be the same as that in the controls.
Črv se zabeleži kot mrtev, če se na sprednjem koncu ne odziva na mehanske dražljaje.
For carbendazim, the testing of 1,2 mg a.i./kg dry weight (tested as a liquid formulation) is recommended.
Pri odločanju o območju koncentracij za uporabo v dokončnem preskusu so poleg informacij o smrtnosti lahko koristne tudi dodatne informacije.
DESCRIPTION OF THE TEST
Zato je treba zabeležiti tudi spremembe vedenja odraslih osebkov (npr. nezmožnost kopanja v tla, negibno ležanje ob stekleni steni preskusne posode) in morfologijo (npr. prisotnost odprtih ran) ter morebitno prisotnost mladičev.
Equipment
Slednjo je mogoče določiti z metodo barvanja, opisano v Dodatku 6.
The test vessels should be made of glass or other chemically inert material.
Vrednost LC50 je mogoče približno določiti z izračunom geometrijske sredine podatkov o smrtnosti.
Glass jars (e.g. volume: 0,20 - 0,25 litre; diameter: ≈ 6 cm) are suitable.
Pri določanju razpona koncentracij za dokončni preskus se predpostavlja, da so učinki na razmnoževanje nižji od vrednosti LC50 za faktor, ki znaša do 10.
The vessels should have transparent lids (e.g. glass or polyethylene) that are designed to reduce water evaporation whilst allowing gas exchange between the soil and the atmosphere.
Vendar je to razmerje empirično in je v vsakem posameznem primeru lahko drugačno.
The lids should be transparent to allow light transmission.
Dodatna opažanja iz preskusa za določanje območja delovanja, kot je pojav mladičev, lahko pripomorejo k natančnejši določitvi razpona koncentracij preskusne kemikalije, ki bo uporabljen v dokončnem preskusu.
Normal laboratory equipment is required, specifically the following:
Za natančno določitev vrednosti LC50 je priporočljivo izvajanje preskusa z vsaj štirimi ponovitvami vsake od koncentracij preskusne kemikalije in število koncentracij, ki je zadostno, da pri teh koncentracijah povzroči vsaj štiri različne statistično značilne povprečne odzive.
drying cabinet;
Podobno število koncentracij in ponovitev za kontrole se uporablja, kadar je to primerno.
stereomicroscope;
Načrt dokončnega preskusa razmnoževanja
pH-meter and photometer;
Na podlagi priporočil, ki izhajajo iz krožnega preskusa, se predlagajo trije načrti (2).
suitable accurate balances;
za določitev vrednosti NOEC je treba preskusiti vsaj pet koncentracij v geometrijski vrsti.
adequate equipment for temperature control;
Priporočene so štiri ponovitve za vsako preskusno koncentracijo in osem kontrol.
adequate equipment for humidity control (not essential if exposure vessels have lids);
Razmik med koncentracijami je treba določiti s faktorjem, ki ne presega 1,8.
incubator or small room with air-conditioner;
Za določitev vrednosti ECx (npr. EC10, EC50) je treba preskusiti vsaj pet koncentracij, da se lahko ECx določi z interpolacijo in ne z ekstrapolacijo pa morajo koncentracije oklepati vrednost ECx.
tweezers, hooks or loops;
Priporočene so vsaj štiri ponovitve za vsako preskusno koncentracijo in štiri kontrolne ponovitve.
photo basin.
Faktor razmika se lahko spreminja, tj. je v pričakovanem območju učinkov lahko manjši ali enak 1,8, pri višjih in nižjih koncentracijah pa je lahko nad 1,8;
Preparation of the artificial soil
kombiniran pristop omogoča določitev vrednosti NOEC in ECx.
An artificial soil is used in this test (5)(7) with the following composition (based on dry weights, dried to a constant weight at 105 °C):
Treba je uporabiti osem koncentracij za tretiranje v geometrijski vrsti.
10 % sphagnum peat, air-dried and finely ground (a particle size of 2 ± 1 mm is acceptable);
Priporočajo se vsaj štiri ponovitve za vsako tretiranje in osem kontrol.
it is recommended to check that a soil prepared with a fresh batch of peat is suitable for culturing the worms before it is used in a test;
Treba je uporabiti deset odraslih črvov na preskusno posodo (glej odstavek 23).
20 % kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %);
V preskusno posodo se hrana doda na začetku preskusa in nato enkrat tedensko (glej odstavek 29) do vključno 21. dneva.
approximately 0,3 to 1,0 % calcium carbonate (CaCO3, pulverised, analytical grade) to obtain a pH of 6,0 ± 0,5;
Na 21. dan se vzorci tal previdno ročno pregledajo; poiščejo in preštejejo se živi odrasli črvi ter zabeležijo spremembe vedenja (npr. nezmožnost kopanja v tla, negibno ležanje ob stekleni steni preskusne posode) in morfologije (npr. odprte rane).
the amount of calcium carbonate to be added may depend principally on the quality/nature of the peat;
Nato se vsi odrasli črvi odstranijo iz preskusnih posod in preskusnih tal.
approximately 70 % air-dried quartz sand (depending on the amount of CaCO3 needed), predominantly fine sand with more than 50 % of the particles between 50 and 200 microns.
Preskusna tla, ki vsebujejo morebitne ustvarjene kokone, se inkubirajo dodatne tri tedne pri enakih preskusnih pogojih, razen hranjenja, ki poteka le 35. dan (tj. 25 mg grobo mletih ovsenih kosmičev na posodo).
It is advisable to demonstrate the suitability of an artificial soil for culturing the worms and for achieving the test validity criteria before using the soil in a definitive test.
Po šestih tednih se preštejejo črvi, ki so se na novo izlegli.