natgillin/translations-raw huggingface dataset:
In order to adapt the test alga to the test conditions and ensure that the algae are in the exponential growth phase when used to inoculate the test solutions, an inoculum culture in the test medium is prepared 2-4 days before start of the test.
Kultura inokuluma se pripravi v preskusnem mediju 2–4 dni pred začetkom preskusa zaradi prilagoditve preskusnih alg preskusnim pogojem in zagotovitve, da so alge v eksponentni fazi rasti, ko se uporabijo za inokulacijo preskusnih raztopin.
The algal biomass should be adjusted in order to allow exponential growth to prevail in the inoculum culture until the test starts.
Algalno biomaso je treba prilagoditi, da lahko eksponentna rast do začetka preskusa prevlada v kulturi inokuluma.
The inoculum culture shall be incubated under the same conditions as the test cultures.
Kultura inokuluma se inkubira pod enakimi pogoji kot preskusne kulture.
Measure the increase in biomass in the inoculum culture to ensure that growth is within the normal range for the test strain under the culturing conditions.
V kulturi inokuluma se meri porast biomase, da se zagotovi rast znotraj normalnega obsega za preskusni sev pod pogoji kultiviranja.
An example of the procedure for algal culturing is described in Appendix 3.
Primer postopka za kultiviranje alg je opisan v Dodatku 3.
To avoid synchronous cell divisions during the test, a second propagation step of the inoculum culture may be required.
Da ne pride do sinhrone delitve celic med preskusom, se lahko zahteva še drugi ukrep razmnoževanja kulture inokuluma.
Preparation of test solutions
Priprava preskusne raztopine
All test solutions must contain the same concentrations of growth medium and initial biomass of test algae.
Vse preskusne raztopine morajo vsebovati enake koncentracije rastnih gojišč in začetno biomaso preskusnih alg.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by mixing a stock solution of the test substance with growth medium and inoculum culture.
Preskusne raztopine izbranih koncentracij se ponavadi pripravijo z mešanjem osnovne raztopine preskusne snovi z rastnim gojiščem in kulturo inokuluma.
Stock solutions are normally prepared by dissolving the substance in test medium.
Osnovne raztopine se ponavadi pripravijo tako, da se snov raztopi v preskusnem mediju.
Solvents, e.g. acetone, t-butyl alcohol and dimethyl formamide, may be used as carriers to add substances of low water solubility to the test medium (2)(3).
Topila, npr. aceton, t-butil alkohol in dimetilformamid, se lahko uporabljajo kot nosilci za dodajanje snovi z nizko topnostjo v vodi preskusnemu mediju (2)(3).
The solvent concentration should not exceed 100 µl/l, and the same concentration of solvent should be added to all cultures (including controls) in the test series.
Koncentracija topila naj ne prekorači 100 µl/l in enaka koncentracija topila naj bo dodana vsem kulturam (tudi kontrolnim) v seriji preskusov.
Cap the test vessels with air-permeable stoppers.
Preskusne posode se zaprejo z zamaški, ki prepuščajo zrak.
The vessels are shaken and placed in the culturing apparatus.
Posode se pretresejo in postavijo v inkubator za kultiviranje.
During the test it is necessary to keep the algae in suspension and to facilitate transfer of CO2.
Med preskusom je potrebno imeti alge v suspenziji in omogočiti prenos CO2.
To this end, constant shaking or stirring should be used.
V ta namen je potrebno nenehno tresenje ali mešanje.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 24 °C, controlled at ±2 °C.
Kulture naj se ohranjajo pri temperaturi obsega 21 do 24 °C, kontrolirani pri ±2 °C.
For species other than those listed in Appendix 1, e.g. tropical species, higher temperatures may be appropriate, providing that the validity criteria can be fulfilled.
Za vrste, razen naštetih v Dodatku 1, npr. tropske vrste, so lahko primerne višje temperature, pod pogojem, da so lahko izpolnjena merila za veljavnost.
It is recommended to place the flasks randomly and to reposition them daily in the incubator.
Priporočeno je, da se bučke v inkubatorju naključno razporedi in dnevno prestavlja.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
Vrednost pH kontrolnega medija se med preskusom ne bi smela povečati za več kot 1,5 enote.
For metals and compounds that partly ionise at a pH around the test pH, it may be necessary to limit the pH drift to obtain reproducible and well defined results.
Za kovine in spojine, ki delno ionizirajo pri pH okrog preskusne pH, je morda treba omejiti premik (drift) pH, da se zagotovijo ponovljivi in natančni rezultati.
A drift of < 0,5 pH units is technically feasible and can be achieved by ensuring an adequate CO2 mass transfer rate from the surrounding air to the test solution, e.g. by increasing the shaking rate.
Premik za < 0,5 pH enot je tehnično izvedljiv in se lahko doseže tako, da se v preskusni raztopini zagotovi primerna stopnja prenosa mase CO2 iz okoliškega zraka, npr. s povečanjem stopnje tresenja.
Another possibility is to reduce the demand for CO2 by reducing the initial biomass or the test duration.
Druga možnost je zmanjšanje potrebe po CO2 z zmanjšanjem začetne biomase ali skrajšanjem trajanja preskusa.
The surface where the cultures are incubated should receive continuous, uniform fluorescent illumination e.g. of ‘cool-white’ or ‘daylight’ type.
Površina, na kateri so kulture inkubirane, naj prejema stalno, enotno fluorescentno osvetljenost, npr. „hladno belo“ svetlobo ali „dnevno svetlobo“.
Strains of algae and cyanobacteria vary in their light requirements.
Sevi alg in cianobakterij se razlikujejo glede svojih zahtev po svetlobi.
The light intensity should be selected to suit the test organism used.
Izbrana jakost svetlobe naj ustreza uporabljenemu preskusnemu organizmu.
For the recommended species of green algae, the light intensity at the level of the test solutions shall be selected from the range of 60-120 µE·m–2·s–1 when measured in the photosynthetically effective wavelength range of 400-700 nm using an appropriate receptor.
Za priporočene vrst zelenih alg se na stopnji preskusnih raztopin izbere jakost svetlobe od 60 do 120 µE·m–2·s–1, kadar se meri v fotosintetično učinkovitem obsegu valovne dolžine 400–700 nm z uporabo primernega sprejemnika.
Some species, in particular Anabaena flos-aquae, grow well at lower light intensities and may be damaged at high intensities.
Nekatere vrste, zlasti Anabaena flos-aquae, dobro rastejo pri nižjih jakostih svetlobe in se pri visokih jakostih lahko poškodujejo.
For such species an average light intensity in the range 40-60 µE·m–2·s–1 should be selected.
Za takšne vrste naj bo izbrana povprečna jakost svetlobe v obsegu 40–60 µE·m–2·s–1.
(For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 4440-8880 lux for cool white light corresponds approximately to the recommended light intensity 60-120 µE·m–2·s–1).
(Pri merilnikih svetlobe, umerjenih v luksih, enakovredno območje 4440–8880 lux za hladno belo svetlobo približno ustreza priporočeni jakosti svetlobe 60–120µE·m–2·s–1.)
The light intensity shall not vary more than ±15 % from the average light intensity over the incubation area.
Jakost svetlobe v inkubacijskem območju ne odstopa od povprečne jakosti svetlobe za več kot ±15 %.
Measurements and analytical determinations
Meritve in analitske določitve
The algal biomass in each flask is determined at least daily during the test period.
Biomasa alg v vsaki bučki se med preskusnim obdobjem določa najmanj enkrat dnevno.
If measurements are made on small volumes removed from the test solution by pipette, these should not be replaced.
Če se merjenje izvaja na majhnih količinah, vzetih iz preskusne raztopine s pipeto, je treba te ohranjati nespremenjene.
Measurement of biomass is done by manual cell counting by microscope or an electronic particle counter (by cell counts and/or biovolume).
Merjenje biomase se izvaja z ročnim štetjem celic s pomočjo mikroskopa ali z elektronskim števcem delcev (s štetjem celic in/ali biovolumnom).
Alternative techniques, e.g. flow cytometry, in vitro or in vivo chlorophyll fluorescence (6)(7), or optical density can be used providing a satisfactory correlation with biomass can be demonstrated over the range of biomass occurring in the test.
Alternativne tehnike, npr. pretočna citometrija, klorofilna fluorescenca in vitro ali in vivo (6)(7) ali optična gostota, se lahko uporabljajo pod pogojem, da je mogoče v območju biomase v preskusu ugotoviti zadovoljivo povezavo z biomaso.
The pH of the solutions shall be measured at the beginning and at the end of the test.
Vrednost pH raztopin se izmeri na začetku in koncu preskusa.
Provided an analytical procedure for determination of the test substance in the concentration range used is available, the test solutions should be analysed to verify the initial concentrations and maintenance of the exposure concentrations during the test.
Če je na voljo analitski postopek za določanje preskusne snovi v uporabljenem območju koncentracije, je treba preskusne raztopine analizirati, da se preverijo začetne koncentracije in vzdrževanje koncentracij izpostavljenosti med preskusom.
Analysis of the concentration of the test substance at the start and end of the test of a low and high test concentration, and a concentration around the expected EC50 may be sufficient where it is likely that exposure concentrations will vary less than 20 % from nominal values during the test.
Analiza koncentracije preskusne snovi na začetku in koncu preskusa nizke in visoke preskusne koncentracije in koncentracija okrog pričakovane EC50 sta lahko zadostni, kadar je verjetno, da se bodo koncentracije izpostavljenosti med preskusom razlikovale za manj kot 20 % od nominalnih vrednosti.
Analysis of all test concentrations at the start and end of the test is recommended where concentrations are unlikely to remain within 80-120 % of nominal.
Analiza vseh preskusnih koncentracij na začetku in koncu preskusa se priporoča, kadar je malo verjetno, da bodo koncentracije ostale znotraj 80–120 % nominalne vrednosti.
For volatile, unstable or strongly adsorbing test substances, additional sampling for analysis at 24 hour intervals during the exposure period is recommended in order to better define loss of the test substance.
Za hlapne, neobstojne ali močno adsorptivne preskusne snovi se priporoča dodatno vzorčenje za analizo v 24-urnih intervalih med obdobjem izpostavljenosti, da se bolje določijo izgube preskusne snovi.
For these substances, extra replicates will be needed.
Za te snovi so potrebne posebne ponovitve.
In all cases, determination of test substance concentrations need only be performed on one replicate vessel at each test concentration (or on the contents of the vessels pooled by replicate).
V vseh primerih je treba izvesti določanje koncentracije preskusne snovi samo na eni ponovitveni posodi pri vsaki preskusni koncentraciji (ali na vsebnostih posod, zbranih s ponovitvijo).
Test media prepared specifically for analysis of exposure concentrations during the test should be treated identically to those used for testing, i.e. they should be inoculated with algae and incubated under identical conditions.
Preskusni medij, pripravljen posebej za analizo koncentracij izpostavljenosti med preskusom, naj se obravnavajo enako kot tisti, uporabljeni za preskušanje; npr. naj se inokulirajo z algami in inkubirajo pod enakimi pogoji.
If analysis of the dissolved test substance concentration is required, it may be necessary to separate algae from the medium.
Če se zahteva analiza raztopljene koncentracije preskusne snovi, je morda treba ločiti alge od medija.
Separation should preferably be made by centrifugation at a low g-force, sufficient to settle the algae.
Najboljše je, da se ločitev izvede s centrifugiranjem z nizkim pospeškom g, ki zadošča, da se alge usedejo.
If there is evidence that the concentration of the substance being tested has been satisfactorily maintained within ±20 % of the nominal or measured initial concentration throughout the test, analysis of the results can be based on nominal or measured initial values.
Če obstajajo dokazi, da se je koncentracija preskušane snovi zadovoljivo ohranila znotraj ±20 % nominalne ali izmerjene začetne koncentracije skozi celoten preskus, se analiza rezultatov lahko utemelji na nominalnih ali izmerjenih začetnih vrednostih.
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is greater than ±20 %, analysis of the results should be based on geometric mean concentration during exposure or on models describing the decline of the concentration of test substance (3)(8).
Če je odstopanje od nominalne ali izmerjene začetne koncentracije večje od ±20 %, se analiza rezultatov utemelji na geometrijski povprečni koncentraciji med izpostavljenostjo ali na modelih, ki opisujejo upad koncentracije preskusne snovi (3)(8).
The alga growth inhibition test is a more dynamic test system than most other short-term aquatic toxicity tests.
Preskus zaviranja rasti alge je bolj dinamičen preskusni sistem od večine drugih kratkoročnih preskusov toksičnosti za vodno okolje.
As a consequence, the actual exposure concentrations may be difficult to define, especially for adsorbing substances tested at low concentrations.
Posledično je morda težko določiti dejanske koncentracije izpostavljenosti, še posebno za adsorptivne snovi, preskušene pri nizkih koncentracijah.
In such cases, disappearance of the substance from solution by adsorption to the increasing algal biomass does not mean that it is lost from the test system.
Izginevanje snovi iz raztopine z adsorpcijo v naraščajočo biomaso alg v takih primerih ne pomeni, da se je snov izgubila iz preskusnega sistema.
When the result of the test is analysed, it should be checked whether a decrease in concentration of the test substance in the course of the test is accompanied by a decrease in growth inhibition.
Ko je rezultat preskusa analiziran, je treba preveriti preveriti, ali upadanje v koncentraciji preskusne snovi med preskusom spremlja upadanje v zaviranju rasti.
If this is the case, application of a suitable model describing the decline of the concentration of test substance (8) may be considered.
Če je tako, se lahko preuči uporaba primernega modela, ki opisuje upadanje koncentracije v preskusni snovi (8).
If not, it may be appropriate to base the analysis of the results on the initial (nominal or measured) concentrations.
Če ne, je morda primerno utemeljiti analizo rezultatov na začetnih (nominalnih ali izmerjenih) koncentracijah.
Other observations
Druga opazovanja
Microscopic observation should be performed to verify a normal and healthy appearance of the inoculum culture and to observe any abnormal appearance of the algae (as may be caused by exposure to the test substance) at the end of the test.
Izvesti je treba mikroskopsko opazovanje, da se preveri normalna in zdrava navzočnost kulture inokuluma in opazuje vsako nenormalno pojavljanje alg (ki ga lahko povzroči izpostavljenost preskusni snovi) na koncu preskusa.
Under some circumstances, e.g. when a preliminary test indicates that the test substance has no toxic effects at concentrations up to 100 mg·l–1 or up to its limit of solubility in the test medium (whichever is the lower), a limit test involving a comparison of responses in a control group and one treatment group (100 mg·l–1 or a concentration equal to the limit of solubility), may be undertaken.
V nekaterih okoliščinah, npr. kadar predhodni preskus pokaže, da preskusna snov nima toksičnih učinkov pri koncentracijah do 100 mg·l–1 ali do svoje meje topnosti v preskusnem mediju (karkoli je nižje), se lahko izvede mejni preskus, ki vključuje primerjavo odzivov v kontrolni skupini in eni tretirani skupini (100 mg·l–1 ali koncentracija, ki je enaka meji topnosti).
It is strongly recommended that this be supported by analysis of the exposure concentration.
Zelo se priporoča, da se ta poskus podpre z analizo koncentracije izpostavljanja.
All previously described test conditions and validity criteria apply to a limit test, with the exception that the number of treatment replicates should be at least six.
Za mejni preskus se uporabljajo vsi prej opisani preskusni pogoji in merila za veljavnost, razen da je število tretiranih ponovitev najmanj šest.
The response variables in the control and treatment group may be analysed using a statistical test to compare means, e.g. a Student'’t's t-test.
Odvisne spremenljivke v kontrolni in tretirani skupini se lahko analizirajo z uporabo statističnega testa za primerjavo načinov, npr. s študentskim t-preskusom.
If variances of the two groups are unequal, a t-test adjusted for unequal variances should be performed.
Če so variance obeh skupin neenake, je treba izvesti t-preskus, prilagojen za neenake variance.
Modification for strongly coloured substances
Sprememba za močno barvane snovi
The irradiation (light intensity) should be in the highest end of the range prescribed in this Testing Method: 120µE m-2 s-1 or higher.
Obsevanje (jakost svetlobe) bi moralo biti na zgornjem koncu območja predvidenega s to preskusno metodo: 120µE m-2 s-1 ali več.
The light path should be shortened by reduction of the volume of the test solutions (in the range of 5-25 ml).
Svetlobna pot bi morala biti zmanjšana z zmanjšanjem količine preskusnih raztopin (v območje od 5 do 25 ml).
Sufficient agitation (for example by moderate shaking) should be performed in order to obtain a high frequency of exposure of the algae to high irradiation at the surface of the culture.
Primerno mešanje (na primer z zmernim stresanjem) bi moralo biti zagotovljeno za večjo pogostost izpostavitve alge večjim obsevanjem na površini kulture.
PLOTTING GROWTH CURVES
IZRIS RASTNIH KRIVULJ
The biomass in the test vessels may be expressed in units of the surrogate parameter used for measurement (e.g. cell number, fluorescence).
Biomasa v preskusnih posodah je lahko izražena v enotah nadomestnega parametra, uporabljenega za merjenje (npr. število celic, fluorescenca).
Tabulate the estimated biomass concentration in test cultures and controls together with the concentrations of test material and the times of measurement, recorded with a resolution of at least whole hours, to produce plots of growth curves.
V tabeli se predstavi ocenjena koncentracijo biomase v preskusnih kulturah in kontrolnih skupinah skupaj s koncentracijami preskusnega materiala in časom meritev, zabeleženim z ločljivostjo vsaj celih ur, da se izdela izris rastnih krivulj.
Both logarithmic scales and linear scales can be useful at this first stage, but logarithmic scales are mandatory and generally give a better presentation of variations in growth pattern during the test period.
Na tej stopnji so lahko uporabne tako logaritmične kot linearne lestvice, vendar so logaritmične lestvice obvezne in na splošno podajo boljšo predstavitev variacij od rastnega vzorca med preskusnim obdobjem.
Note that exponential growth produces a straight line when plotted on a logarithmic scale, and that the inclination of the line (slope) indicates the specific growth rate.
Eksponentna rast pri izrisu na logaritmični lestvici kaže ravno črto in naklonjenost črte (nagib) prikazuje specifično stopnjo rasti.
Using the plots, examine whether control cultures grow exponentially at the expected rate throughout the test.
Z uporabo izrisov se preveri, ali kontrolne kulture skozi celotni preskus rastejo eksponentno glede na pričakovano stopnjo.
Critically examine all data points and the appearance of the graphs, and check raw data and procedures for possible errors.
Zaradi možnih napak se preverijo vse podatkovne točke in videz grafov ter neobdelani podatki in postopki.
Check in particular any data point that seems to deviate by a systematic error.
Zlasti se preverijo vse podatkovne točke, za katere se zdi, da odstopajo zaradi sistematične napake.
If it is obvious that procedural mistakes can be identified and/or considered highly likely, the specific data point is marked as an outlier and not included in subsequent statistical analysis.
Če je mogoče postopkovne napake očitno prepoznati in/ali so zelo verjetne, se specifična podatkovna točka označi kot izločena in se ne vključi v kasnejšo statistično analizo.
(A zero algal concentration in one out of two or three replicate vessels may indicate the vessel was not inoculated correctly, or was improperly cleaned).
(Koncentracija alg nič v eni od dveh ali treh ponovitvenih posod lahko pokaže, da posoda ni bila pravilno inokulirana ali da je bila neprimerno očiščena.)
Reasons for rejection of a data point as an outlier must be clearly stated in the test report.
Razlogi za zavrnitev podatkovnih točk kot izločenih morajo biti jasno navedeni v poročilu o preskusu.
Accepted reasons are only (rare) procedural mistakes and not just bad precision.
Veljavni razlogi so samo (redko) postopkovne napake in ne le slaba natančnost.
Statistical procedures for outlier identification are of limited use for this type of problem and cannot replace expert judgement.
Statistični postopki za prepoznavanje izločitve imajo za to vrsto problema omejeno uporabnost in ne morejo nadomestiti strokovne presoje.
Outliers (marked as such) should preferably be retained among the data points shown in any subsequent graphical or tabular data presentation.
Izločitve (označene kot take) naj se po možnosti ohranijo med podatkovnimi točkami, ki so prikazane v katerikoli grafični ali tabelarni predstavitvi podatkov.
RESPONSE VARIABLES
SPREMENLJIVKE ODZIVA
The purpose of the test is to determine the effects of the test substance on the growth of algae.
Namen preskusa je določiti učinke preskusne snovi na rast alg.
This Testing Method describes two response variables, as member countries have different preferences and regulatory needs.
Ta preskusna metoda opisuje dve spremenljivki odziva, saj imajo države članice različne prednosti in zakonske zahteve.
In order for the test results to be acceptable in all member countries, the effects should be evaluated using both response variables (a) and (b) described below.
Rezultati preskusa bodo sprejemljivi v vseh državah članicah, če se učinki ovrednotijo z obema spremenljivkama odziva, (a) in (b), ki sta opisani spodaj.
Average specific growth rate: this response variable is calculated on the basis of the logarithmic increase of biomass during the test period, expressed per day.
povprečna specifična stopnja rasti: ta odvisna spremenljivka se preračuna na osnovi logaritmičnega naraščanja biomase med preskusnim obdobjem, ki je dnevno izražen;
Yield: this response variable is the biomass at the end of the test minus the starting biomass.
prirast: ta odvisna spremenljivka je biomasa na koncu preskusa manj začetna biomasa.
For the application of this method within the EU regulatory framework, calculation of results should be based on an average specific growth rate for the reasons described below.
Za rabo te metode v zakonodajnem okviru EU bi morali za izračun rezultatov uporabiti povprečno specifično hitrost rasti iz razlogov, ki so opisani spodaj.
It should be noted that toxicity values calculated by using these two response variables are not comparable and this difference must be recognised when using the results of the test.
Opozoriti je treba, da vrednosti strupenosti, ki se izračunajo iz teh dveh spremenljivk odziva niso primerljive. To razliko je treba upoštevati pri uporabi rezultatov preskusa.
ECx values based upon average specific growth rate (ErCx) will generally be higher than results based upon yield (EyCx) if the test conditions of this Testing Method are adhered to, due to the mathematical basis of the respective approaches.
Če se upoštevajo pogoji preskusa iz te preskusne metode, bodo vrednosti ECx, ki temeljijo na povprečni specifični hitrosti rasti (ErCx), ponavadi višje od rezultatov, ki temeljijo na izplenu (EyCx), zaradi matematične osnove teh dveh pristopov.
This should not be interpreted as a difference in sensitivity between the two response variables, simply that the values are different mathematically.
To se ne sme razlagati kot razlika v občutljivosti obeh spremenljivk odziva. Razlika enostavno izvira iz različne matematične narave vrednosti.