natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Short-term cultures of rat hepatocytes are established by allowing freshly dissociated hepatocytes in an appropriate medium to attach themselves to the growing surface.
Kratkotrajne kulture podganjih hepatocitov se določijo tako, da se sveže ločenim hepatocitom v ustreznem gojišču omogoči pritrditev na rastno podlago.
Human lymphocyte cultures are set up using appropriate techniques.
Kulture človeških limfocitov se pripravijo z uporabo ustreznih tehnik.
Treatment of the cultures with the test substance
Tretiranje kultur s preskusno snovjo
Primary rat hepatocytes
Primarni podganji hepatociti
Freshly isolated rat hepatocytes are treated with the test substance in a medium containing 3H-TdR for an appropriate length of time.
Sveže izolirane podganje hepatocite se primerno dolgo tretira s preskusno snovjo na gojišču, ki vsebuje 3H-TdR.
At the end of the treatment period, medium should be drained off the cells, which are then rinsed fixed and dried.
Na koncu obdobja tretiranja je treba celice odstraniti z gojišča, in ji nato sprati, fiksirati in posušiti.
Slides should be dipped in autoradiographic emulsion (alternative stripping film may be used), exposed, developed, stained and counted.
Stekelca je treba potopiti v avtoradiografsko emulzijo (kot alternativo se lahko uporabi tudi odstranjevalni film), izpostaviti, razviti, obarvati in prešteti.
Established cell lines and lymphocytes
Stabilizirane celične linije in limfociti
Autoradiographic techniques: cell cultures are exposed to the test substance for appropriate durations followed by treatment with 3H-TdR.
Avtoradiografske tehnike: celične kulture se ustrezno dolgo izpostavijo preskusni snovi, čemur sledi tretiranje s 3H-TdR.
The times will be governed by the nature of the substance, the activity of metabolising systems and the type of cells.
Čas določa narava snovi, aktivnost metabolnih sistemov in tip celic.
To detect the peak of UDS, 3H-TdR should be added either simultaneously with the test subsrance or within a few minutes after exposure to the test substance.
Da bi odkrili vrhunec nenačrtne sinteze DNK, je treba 3H-TdR dodati bodisi istočasno s preskusno snovjo bodisi nekaj minut po izpostavljenosti preskusni snovi.
The choice between these two procedures will be influenced by possible interactions between test substance and 3H-TdR.
Na izbiro med tema dvema postopkoma bodo vplivale možne interakcije med preskusno snovjo in 3H-TdR.
In order to discriminate between UDS and semi-conservative DNA replication, the latter can be inhibited, for example, by the use of an arginine-deficient medium, low serum content or by hydroxyurea in the culture medium.
Da bi ločili med nenačrtno sintezo DNK in semikonzervativnim podvajanjem DNK je mogoče slednje inhibirati, na primer, z uporabo gojišča brez arginina, nizke vsebnosti seruma ali hidroksiuree na gojišču.
LSC measurements of UDS: prior to treatment with test substance, entry of cells into S-phase should be blocked as described above; cells should then be exposed to test chemical as described for autoradiography.
Meritve nenačrtne sinteze DNK s tekočinskim scintilacijskim štetjem: Pred tretiranjem s preskusno snovjo je treba vstop celic v fazo S blokirati, kot je opisano zgoraj; celice je nato treba izpostaviti preskusni kemikaliji, kot je opisano v primeru avtoradiografije.
At the end of the incubation period, DNA should be extracted from the cells and the total DNA content, and the extent of 3H-TdR, incorporation determined.
Na koncu inkubacijskega obdobja je treba DNK ekstrahirati iz celic in določiti celotno vsebino DNK ter obseg vključitve 3H-TdR.
It should be noted that, where human lymphocytes are used in the above techniques, the suppression of semi-conservative DNA replication is unnecessary in unstimulated cultures.
Treba je upoštevati, da je pri uporabi človeških limfocitov v zgoraj navedenih tehnikah preprečevanje semikonzervativega podvajanja DNK v nestimuliranih kulturah nepotrebno.
Autoradiographic determinations
Avtoradiografske določitve
In determining UDS in cells in culture, S-phase nuclei are not counted.
Pri določanju nenačrtne sinteze DNK v celicah v kulturi se jedra faze S ne štejejo.
At least 50 cells per concentration should be counted.
Prešteti je treba najmanj 50 celic na koncentracijo.
Slides should be coded before counting.
Stekelca je treba kodirati pred štetjem.
Several widely separated random fields should be counted on each slide.
Na vsakem stekelcu je treba prešteti več široko ločenih poljubnih polj.
The amount of 3H-TdR incorporation in the cytoplasm should be determined by counting three nucleus-sized areas in the cyptoplasm of each cell counted.
Količino vključenega 3H-TdR v citoplazmi je treba določiti s preštevanjem treh področij velikosti jedra v citoplazmi vsake preštete celice.
LSC determinations
Določitve s tekočinskim scintilacijskim štetjem
An adequate number of cultures should be used at each concentration and in the controls in LSC UDS determinations.
Pri določanju nenačrtne sinteze DNK s tekočinskim scintilacijskim štetjem je treba pri vsaki koncentraciji in v kontrolah uporabiti ustrezno število kultur.
Data should be presented in tabular form.
Podatki se povzamejo v obliki tabele.
AUTORADIOGRAPHIC DETERMINATIONS
AVTORADIOGRAFSKE DOLOČITVE
The extent of 3H-TdR incorporation in the cytoplasm and the number of grains found over the cell nucleus should be recorded separately.
Obseg vključitve 3H-TdR v citoplazmi in število zrnc, najdenih na celičnem jedru, je treba zabeležiti posebej.
Mean, median and mode may be used to describe the distribution of the extent of 3H-TdR incorporation in the cytoplasm and the number of grains per nucleus.
Za opis porazdelitve obsega vključitve 3H-TdR v citoplazmi in število zrnc na jedro se lahko uporabi sredina, mediana in modus.
LSC DETERMINATIONS
DOLOČITVE S TEKOČINSKIM SCINTILACIJSKIM ŠTETJEM
For LSC determinations, 3H-TdR incorporation should be reported as dpm/μg DNA.
Za namen določitev s tekočinskim scintilacijskim štetjem je treba vključitev 3H-TdR prikazati kot dpm/μg DNK.
The mean dpm/μg DNA with standard deviation may be used to describe the distribution of incorporation.
Srednja vrednost dpm/μg DNK s standardno deviacijo se lahko uporabi za opis porazdelitve vključitve.
Data should be evaluated using appropriate statistical methods.
Podatke je treba oceniti z uporabo ustreznih statističnih metod.
cells used, density and passage number at time of treatment, number of cell cultures,
uporabljene celice, gostoto in število pasaž v času obdelave, število celičnih kultur,
methods used for maintenance of cell cultures including medium, temperature and CO2 concentration,
uporabljene metode za vzdrževanje celičnih kultur, vključno z gojiščem, temperaturo in koncentracijo CO2,
test substance, vehicle, concentrations and rationale for selection of concentrations used in the assay,
preskusna snov, nosilec, koncentracije in utemeljitev izbora koncentracij, uporabljenih v preskusu,
details of metabolic activation systems,
podrobnosti o metabolnem aktivacijskem sistemu,
treatment schedule,
program tretiranja,
autoradiographic technique used,
uporabljena avtoradiografska tehnika,
procedures used to block entry of cells into S-phase,
uporabljeni postopki za blokiranje vstopa celic v fazo S,
procedures used for DNA extraction and determination of total DNA content in LSC determination,
uporabljeni postopki za ekstrakcijo DNK in določanje celotne vsebine DNK pri določitvah s tekočinskim scintilacijskim štetjem,
dose/response relationship, where possible,
razmerje odmerek/odziv, kadar je to mogoče,
statistical evaluation,
statistična ocena,
VALUATION AND INTERPRETATION
OCENA IN RAZLAGA
The Sister Chromatid Exchange (SCE) assay is a short-term test for the detection of reciprocal exchanges of DNA between two sister chromatids of a duplicating chromosome.
Preskus izmenjave sestrskih kromatid (SCE) je kratkotrajni preskus za odkrivanje recipročnih izmenjav DNK med sestrskima kromatidama kromosoma, ki se podvaja.
SCEs represent the interchange of DNA replication products at apparently homologous loci.
Izmenjava sestrskih kromatid predstavlja izmenjavo produktov podvajanja DNK na na videz homolognih lokusih.
The exchange process presumably involves DNA breakage and reunion, although little is known about its molecular basis.
Proces izmenjave predvidoma zajema razpad in ponovno združitev DNK, čeprav je malo poznanega o njegovi molekularni osnovi.
Detection of SCEs requires some means of differentially labelling sister chromatids and this can be achieved by incorporation of bromodeoxyuridine (BrdU) into chromosomal DNA for two cell cycles.
Za odkrivanje izmenjav sestrskih kromatid je potrebnih nekaj načinov diferencialnega označevanja sestrskih kromatid, to pa se lahko doseže z vključitvijo bromdeoksiuridina (BrdU) v kromosomsko DNK za dva celična cikla.
Mammalian cells in vitro are exposed to the test chemical with and without a mammalian exogenous metabolic activation system, if appropriate, and cultured for two rounds of replication in BrdU-containing medium.
Sesalske celice in vitro se izpostavijo preskusni kemikaliji z ali brez sesalskega eksogenega metabolnega aktivacijskega sistema, če je to primerno, in se jih goji skozi dva cikla podvajanja na gojišču, ki vsebuje BrdU.
After treatment with a spindle inhibitor (e.g. colchicine) to accumulate cells in a metaphase-like stage of mitosis (c-metaphase), cells are harvested and chromosome preparations are made.
Po obdelavi z inhibitorjem delitvenega vretena (npr. s kolhicinom), da bi se celice akumulirale v metafazi mitoze (C-metafaza), se celice spravijo in opravijo kromosomske priprave.
Primary cultures, (human lymphocytes) or established cell lines (e.g. Chinese hamster ovary cells) may be used in the assay.
V preskusu je mogoče uporabiti primarne kulture, (človeške limfocite) ali stabilizirane celične linije (npr. celice jajčnikov kitajskega hrčka).
Cell lines should be checked for Mycoplasma contamination,
Celične linije je treba preveriti za okužbo z mikoplazmo.
appropriate culture media and incubation conditions (e.g. temperature, culture vessels, CO2 concentration and humidity) should be used,
Uporabiti je treba ustrezno gojišče in inkubacijske pogoje (npr. temperatura, posode za gojitev, koncentracija CO2 in vlažnost).
test substances may be prepared in culture media or dissolved or suspended in appropriate vehicles prior to treatment of the cells.
Preskusne snovi se lahko pripravijo na gojišču ali raztopijo ali suspendira v ustreznih nosilcih pred tretiranjem celic.
The final concentration of a vehicle in the culture system should not significantly affect, cell viability or growth rate and effects on SCE frequency should be monitored by a solvent control,
Končna koncentracija nosilca v gojitvenem sistemu ne sme bistveno vplivati na sposobnost preživetja celic ali stopnjo rasti, vplive na frekvenco izmenjav sestrskih kromatid pa je treba spremljati z uporabo kontrole s topilom.
cells should be exposed to the test substance both in the presence and absence of an exogenous mammalian metabolic activation system.
Celice je treba izpostaviti preskusni snovi v prisotnosti in v odsotnosti sesalskega metabolnega aktivacijskega sistema.
Alternatively, where cell types with intrinsic metabolic activity are used, the rate and nature of the activity should be appropriate to the chemical class being tested.
Kadar pa so uporabljeni tipi celic z endogeno metabolno aktivacijo, morata stopnja in narava aktivnosti ustrezati kemijskemu razredu, ki se preskuša.
At least duplicate cultures should be used for each experimental point.
Za vsako preskusno točko je potrebno uporabiti najmanj en dvojnik kultur.
Positive controls, using both a direct acting compound and a compound requiring metabolic activation should be included in each experiment; a vehicle control should also be used.
V vsak preskus je treba vključiti pozitivne kontrole z uporabo neposredno delujoče spojine in spojine, ki zahteva aktivacijo presnove; uporabiti je treba tudi kontrolo nosilca.
The following are examples of substances which might be used as positive controls:
Primeri snovi, ki jih je mogoče uporabiti kot pozitivne kontrole, so naslednji:
direct acting compound:
neposredno delujoče spojine:
ethylmethanesulphonate,
etilmetansulfonat,
indirect acting compound:
posredno delujoče spojine:
cyclophosphamide.
ciklofosfamid.
When appropriate, an additional positive control of the same chemical class as the chemical under test may be included.
Kadar je primerno, se lahko vključi dodatna pozitivna kontrola enakega kemijskega razreda, kot je preskušana kemikalija.
At least three adequately spaced concentrations of the test substance should be used.
Uporabiti je treba najmanj tri ustrezno razporejene koncentracije preskusne snovi.
The highest concentration should give rise to a significant toxic effect but must still allow adequate cell replication to occur.
Najvišja koncentracija mora povzročiti opazne strupene učinke, vendar mora še vedno omogočati ustrezno podvajanje celic.
Relatively water-insoluble substances should be tested up to the limit of solubility using appropriate procedures.
Snovi, relativno netopne v vodi, je treba preskušati do meje njihove topnosti z uporabo ustreznih postopkov.
For freely water-soluble non-toxic substances the upper test substance concentration should be determined on a case-by-case basis.
Za dobro vodotopne nestrupene snovi je treba zgornjo koncentracijo preskusne snovi določiti od primera do primera.
Established cell lines are generated from stock cultures (e.g. by trypsinisation or by shaking off), seeded in culture vessels at appropriate density and incubated at 37 oC.
Stabilizirane celične linije se pridobijo iz založnih kultur (npr. s tripsinizacijo ali z otresanjem), nacepljenih v gojitvenih posodah v primerni gostoti in inkubiranih pri 37 oC.
For monolayer cultures, the number of cells per culture vessel should be adjusted so that the cultures are not much more than 50 % confluent at the time of harvest.
V primeru enoplastnih kultur je treba število celic na gojitveno posodo prilagoditi tako, da kulture v času spravila niso konfluentne za dosti več kot 50 %.
Alternatively, cells may be used in suspension culture.
Uporabijo pa se lahko tudi celice v suspenzijski kulturi.
Human lymphocyte cultures are set up from heparinized blood, using appropriate techniques, and incubated at 37 oC.
Kulture človeških limfocitov se z uporabo ustreznih tehnik pridobijo iz heparinizirane krvi in inkubirajo pri 37 oC.
Cells in an exponential stage of growth are exposed to the test substance for a suitable period of time; in most cases one to two hours may be effective, but the treatment time may be extended up to two complete cell cycles in certain cases.
Celice v eksponentni fazi rasti se ustrezno dolgo izpostavijo preskusni snovi; v večini primerov je učinkovito že ena do dve uri, vendar pa se lahko v nekaterih primerih čas obdelave podaljša do dveh zaključenih celičnih ciklov.
Cells without sufficient instrinsic metabolic activity should be exposed to the test chemical in the presence and absence of an appropriate metabolic activation system.
Celice, ki nimajo zadostne endogene metabolne aktivacije, je treba izpostaviti preskusni snovi v prisotnosti in odsotnosti ustreznega sistema metabolne aktivacije.
At the end of the exposure period, cells are washed free of test substance and cultured for two rounds of replication in the presence of BrdU.
Na koncu obdobja izpostavljenosti se s celic spere preskusna snov in celice se gojijo skozi dva cikla podvajanja v prisotnosti BrdU.
As an alternative procedure cells may be exposed simultaneously to the test chemical and BrdU for the complete culture time of two cell cycles.
Lahko pa se uporabi tudi drugi postopek, v katerem se celice istočasno izpostavljajo preskusni kemikaliji in BrdU za celoten čas gojitve dveh celičnih ciklov.
Human lymphocyte cultures are treated while they are in a semisynchronous condition.
Kulture človeških limfocitov se tretirajo v semisinhronih pogojih.
Cells are analysed in their second post-treatment division, ensuring that the most sensitive cell cycle stages have been exposed to the chemical.
Celice se analizirajo v njihovi drugi delitvi po tretiranju, s čimer se zagotovi, da so bile najobčutljivejše faze celičnega ciklusa izpostavljene kemikaliji.
All cultures to which BrdU is added should be handled in darkness or in dim light from incandescent lamps up to the harvesting of cells in order to minimise photolysis of BrdU-containing DNA.
Vse kulture, ki jim je dodan BrdU, se obdelajo v temi ali pri zasenčeni razbeljeni svetlobi žarnic do spravila celic, da bi se kolikor je mogoče zmanjšala fotoliza DNK, ki vsebuje BrdU.
Harvesting of cells
Spravilo celic
Cell cultures are treated with a spindle inhibitor (e.g. colchicine) one to four hours prior to harvesting.
Celične kulture se obdelajo z inhibitorjem delitvenega vretena (npr. s kolhicinom) eno do štiri ure pred spravilom.
Each culture is harvested and processed separately for the preparation of chromosomes.
Vsaka kultura se za pripravo kromosomov spravi in predela posebej.
Chromosome preparation and staining
Priprava in obarvanje kromosomov
Chromosome preparations are made by standard cytogenetic techniques.
Pripravki kromosomov se pridobijo s standardnimi citogenetskimi tehnikami.
Staining of slides to show SCEs can be performed by several techniques, (e.g. the fluorescence plus Giemsa method).
Obarvanje stekelc, za prikaz izmenjav sestrskih kromatid, je mogoče opraviti z več tehnikami (npr. fluorescenca plus Giemsa metoda).
The number of cells analysed should be based on the spontaneous control frequency of SCE.
Število analiziranih celic naj temelji na spontani frekvenci izmenjave sestrskih kromatid v kontroli.
Usually, at least 25 well-spread metaphases per culture are analysed for SCEs.
Običajno se za izmenjavo sestrskih kromatid analizira najmanj 25 dobro razvitih metafaz na kulturo.
Slides are coded before analysis.
Stekelca se kodirajo pred analizo.
In human lymphocytes only metaphases containing 46 centromeres are analysed.
Pri človeških limfocitih se analizirajo le metafaze, ki vsebujejo 46 centromerov.
In established cell lines only metaphases containing ± 2 centromeres of the modal number are analysed.
Pri stabiliziranih celičnih linija se analizirajo le metafaze, ki vsebujejo ± 2 centromera modalnega števila.
It should be stated whether or not centromeric switch of label is, scored as an SCE.
Navesti je treba ali je centrom erična zamenjava oznake zabeležena kot izmenjava sestrskih kromatid.
The results should be confirmed in an independent experiment.
Rezultate je treba potrditi z neodvisnim preskusom.
The number of SCEs for each metaphase and the number of SCEs per chromosome for each metaphase should be listed separately for all treated and control cultures.
Za vsako obdelano in kontrolno kulturo posebej je treba navesti število izmenjav sestrskih kromatid za vsako metafazo in število sestrskih kromatid na kromosom za vsako metafazo.
cells used, methods of maintenance of cell culture,
uporabljene celice, metode vzdrževanja celične kulture,
test conditions: composition of media, CO2 concentration, concentration of test substance, vehicle used, incubation temperature, treatment time, spindle inhibitor used, its concentration and the duration of treatment with it, type of mammalian activation system used, positive and negative controls,
preskusni pogoji: sestava gojišča, koncentracija CO2, koncentracija preskusne snovi, uporabljen nosilec, inkubacijska temperatura, čas tretiranja, uporabljen inhibitor delitvenega vretena, njegova koncentracija in trajanje tretiranja z njim, tip uporabljenega sesalskega aktivacijskega metabolnega sistema, pozitivne in negativne kontrole,
number of cell cultures per experimental point,
število celičnih kultur na preskusno točko,
details of the technique used for slide preparation,
podrobnosti uporabljene tehnike za pripravo stekelc,
number of metaphases analysed (data given separately for each culture),
število analiziranih metafaz (podatki, podani za vsako kulturo posebej),
mean number of SCE per cell and per chromosome (data given separately for each culture),
srednje število izmenjave med sestrskimi kromatidami na celico in na kromosom (podatki, podani za vsako kulturo posebej),
criteria for scoring SCE,
merila za štetje izmenjav sestrskih kromatid,
rationale for dose selection,
utemeljitev izbire odmerka,
dose-response relationship, if applicable,
razmerje odmerek-odziv, če je to primerno,
PRINCIPLES OF THE TEST METHOD
PRINCIP PRESKUSNE METODE
The sex-linked recessive lethal (SLRL) test using Drosophila melanogaster detects the occurrence of mutations, both point mutations and small deletions, in the germ line of the insect.
Preskus spolno vezane recesivne smrtnosti (SLRL) z uporabo Drosophile melanogaster odkriva pojavnost mutacij, in sicer točkastih mutacij in majhnih delecij, v zarodni liniji žuželke.
This test is a forward mutation assay capable of screening for mutations at about 800 loci on the X-chromosome; this represents about 80 % of all X-chromosal loci.
Ta preskus je preskus napredne mutacije, ki je sposoben odkriti mutacije na približno 800 lokusih kromosoma X; to predstavlja približno 80 % vseh lokusov kromosoma X.
The X-chromosome represents approximately one-fifth of the entire haploid genome.
Kromosom X predstavlja približno eno petino celotnega haploidnega genoma.
Mutations in the X-chromosome of Drosophila melanogaster are phenotypically expressed in males carrying the mutant gene.
Mutacije v kromosomu X Drosophile melanogaster se fenotipično izražajo na samcih, ki nosijo mutantni gen.
When the mutation is lethal in the hemizygous condition, its presence is inferred from the absence of one class of male offspring out of the two that are normally produced by a heterozygous female.
Kadar je mutacija v hemizigotnih pogojih letalna, se na njeno prisotnost sklepa iz odsotnosti enega razreda zaroda samcev od dveh, ki jih običajno proizvede heterozigotna samica.
The SLRL test takes advantage of these facts by means of specially marked and arranged chromosomes.
Preskus spolno vezane recesivne smrtnosti izkorišča ta dejstva s pomočjo posebej označenih in razporejenih kromosomov.
Males of a well-defined wild-type stock and females of the Muller-5 stock may be used.
Uporabijo se lahko samci natančno opredeljenih zalog divjega tipa in samice zaloge seva Muller-5.
Other appropriately marked female stocks with multiple inverted X-chromosomes may also be used.
Lahko pa se uporabijo tudi zaloge samic, ki so primerno označene z večkrat invertiranim kromosomom X.
Test substances should be dissolved in water.
Preskusne snovi je treba raztopiti v vodi.
Substances, which are insoluble in water may be dissolved or suspended in appropriate vehicles (e.g. a mixture of ethanol and Tween-60 or 80), then diluted in water or saline prior to administration.
V vodi netopne snovi, se lahko raztopijo ali suspendirajo v ustreznih nosilcih (npr. mešanica etanola in Tween-60 ali 80), nato pa pred dajanjem razredčijo v vodi ali raztopini soli.
Dimethylsulphoxide (Dmso) should be avoided as a vehicle.
Za nosilec naj se ne uporablja dimetilsulfoksid (DMSO).
The test should be designed with a predetermined sensitivity and power.
Preskus je treba zasnovati z vnaprej določeno občutljivostjo in močjo.
The spontaneous mutant frequency observed in the appropriate control will influence strongly the number of treated chromosomes that must be analysed.
Frekvenca spontanih mutacij, opažena v ustrezni kontroli, bo vplivala na število tretiranih kromosomov, ki morajo biti analizirani.
Route of administration
Način dajanja
Exposure may be oral, by injection or by exposure to gases or vapours.
Izpostavljenost je lahko oralna, z injekcijo ali pa se živali izpostavijo plinom ali hlapom.
Feeding of the test substance may be done in sugar solution.
Hranjenje s preskusno snovjo se lahko opravi z raztopino sladkorja.
When necessary, substances may be dissolved in a 0,7 % NaCl solution and injected into the thorax or abdomen.
Kadar je potrebno, se lahko snovi raztopijo v 0,7 % raztopini NaCl in vbrizgnejo v prsni koš ali trebuh.
Negative (vehicle) and positive controls should be included.
Vključiti je treba negativne (nosilec) in pozitivne kontrole.