natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Chapter C.20 of this Annex, Daphnia magna Reproduction Test.
Ak je k dispozícii niekoľko metód, ktorých použitie možno odôvodniť, bolo by rozumné predložiť niekoľko odhadov k1 (a tak aj BCF) alebo škály hodnôt k1 (a BCF) podľa viacerých metód odhadu vychytávania.
, Influence of partition coefficient of lipophilic compounds on bioconcentration kinetics with fish.
Vzhľadom na rozdiely v druhoch modelov a súboroch údajov, ktoré sa použili pri ich vypracovaná, by však nebolo vhodné uplatniť priemernú hodnotu získanú na základe rôznorodo odvodených odhadov.
Wat.
Podľa názoru niektorých výskumníkov si takýto druh odhadov BCF vyžaduje korekciu biologickej dostupnosti v záujme zohľadnenia adsorpcie látky na rozpustený organický uhlík (DOC) za podmienok expozície prostredníctvom vodného prostredia, aby sa odhad zosúladil s výsledkami štúdií venovaných expozícii vo vodnom prostredí [napr. (13) (14)].
Res. 22: 701-707.
Táto korekcia však nemusí byť vhodná vzhľadom na nízke úrovne DOC, ktoré sa vyžadujú v prípade odhadu „najhoršieho scenára“ v rámci štúdie expozície prostredníctvom vodného prostredia (t. j. pomer biologicky dostupnej látky a látky meranej v roztoku).
As with every empirical relationship, it should be verified that the test substance falls within the applicability domain of the relationship
V prípade vysokohydrofóbnych látok môže dôjsť k obmedzeniu vychytávania v žiabrach v dôsledku miery pasívnej difúzie v blízkosti povrchu žiabier.
The weight of fish at the end of the uptake phase can be estimated from previous study data or knowledge of the test species' likely increase in size from a typical test starting weight over a typical uptake duration (e.g. 28 days).
V takomto prípade je možné, že korekciou sa zohľadňuje tento účinok, a nie ten, na ktorý bola určená.
In most programs that allow a linear regression, also standard errors and confidence interval (CI) of the estimates are given, e.g. in Microsoft Excel using the Data Analysis tool pack.
Odporúčame zamerať sa na metódy, ktoré si vyžadujú vstupy, pri ktorých možno okamžite získať údaje o látkach testovaných podľa tu opísanej štúdie expozície prostredníctvom potravy (t. j. log KOW, hmotnosť ryby).
In contrast with the linear regression method, using this formula will not yield a standard error for k2.
Uplatniť sa dajú aj iné metódy, ktoré si vyžadujú zložitejšie vstupy, no je možné, že pri nich budú potrebné ďalšie testovacie merania alebo podrobné znalostí o testovanej látke alebo druhu rýb, a tie možno nebudú všeobecne k dispozícii.
In contrast with a linear fitting procedure, this method will usually not yield a standard error or confidence interval for the estimated k1.
Výber modelu môže okrem toho ovplyvniť aj úroveň validácie a oblasť uplatniteľnosti [na účely preskúmania a porovnania rôznych metód pozri (11)].
It should be realised that the uncertainty in the k2 estimate is not used properly in the bioaccumulation model when this is essentially regarded as constant when fitting k1 in the sequential fit method.
Treba mať na mysli, že výsledné odhady k1 a BCF sú neisté, a teda je možné, že sa k nim bude musieť pristupovať na základe analýzy váhy dôkazov, pričom bude v záujme celkového vnímania bioakumulačného potenciálu látky potrebné uplatniť odvodený BMF a parametre danej látky (napr. veľkosť molekúl).
The resulting BCF uncertainty will therefore be different between the simultaneous and sequential fitting methods.
Interpretácia a použitie týchto parametrov môže závisieť od regulačného rámca.
Appendix 6
Sijm D.T.H.M., Verberne M.E., de Jonge W.J., Pärt P. and Opperhuizen A. (1995), Allometry in the uptake of hydrophobic chemicals determined in vivo and in isolated perfused gills.
EQUATION SECTION FOR AQUEOUS EXPOSURE TEST: MINIMISED TEST DESIGN
Pokiaľ ide o veľmi hydrofóbne látky, je pravdepodobné, že vo voľnej prírode dochádza k najzávažnejším expozíciám vo vodnom prostredí najmä v dôsledku ich požitia.
If a measurement of the concentration of the substance in tissues (Cf1) is made at the time that exposure ends (t1) and the concentration in tissue (Cf2) is measured again after a period of time has elapsed (t2), the depuration rate constant (k2) can be estimated using Equation A5.22 from Appendix 5.
Preto odhad BCF striktne nereprezentuje bioakumulačný potenciál takejto látky.
The uptake rate constant, k1, can then be determined algebraically using Equation A5.23 from Appendix 5 (where Cf equals Cf1 and t equals t1) (1).
V časti C sa kapitola C.20 nahrádza takto:
The kinetic bioconcentration factor for the minimised design (designated as BCFKm to distinguish it from kinetic bioconcentration factors determined using other methods) is thus:
Reprodukčný test na Daphnia magna
[Equation A6.1]
Táto testovacia metóda je rovnocenná s usmernením OECD na vykonávanie testov (TG) 211 (2012).
Concentrations or results should be corrected for growth dilution and normalised to a fish lipid content of 5 %, as is described in Appendix 5.
Usmernenia OECD na vykonávanie testov sa pravidelne revidujú a aktualizujú vzhľadom na vedecký pokrok.
The minimised BCFSS is the BCF calculated at the end of the uptake phase, assuming that steady-state has been reached.
Usmernenie na vykonávanie reprodukčného testu 211 vychádza z časti II usmernenia na vykonávanie testu 202, v ktorej sa uvádza reprodukčný test na Daphnia sp.
This can only be assumed, as the number of sampling points is not sufficient for proving this.
Všeobecne sa uznáva, že údaje získané na základe testov vykonaných podľa uvedeného usmernenia TG 202 sa môžu líšiť.
minimisedBCFSS
Z tohto dôvodu sa v záujme vytvorenia lepšej testovacej metódy vynaložilo značné úsilie zamerané na identifikáciu dôvodov tejto variability.
[Equation A6.2]
Usmernenie na vykonanie testov 211 vychádza z výsledkov týchto výskumných činností, kruhových testov a validačných štúdií vykonaných v rokoch 1992 (1), 1994 (2) a 2008 (3).
Concentration in fish at assumed steady-state at end of uptake (mg kg– 1 wet weight).
Toto sú hlavné rozdiely medzi pôvodnou verziou usmernenia na vykonávanie reprodukčného testu (TG 202, 1984) a jeho druhou verziou (TG 211, 1998):
Concentration in water at assumed steady-state at end of uptake (mg l– 1).
odporúča sa použiť druh Daphnia magna,
Appendix 7
test trvá 21 dní,
EQUATION SECTION FOR DIETARY EXPOSURE TEST
pri polostatickom teste sa počet jedincov, ktoré sa majú použiť pri každej testovanej koncentrácii, znížil z aspoň 40 jedincov, podľa možnosti rozdelených do štyroch skupín po desiatich jedincoch, na aspoň 10 jedincov držaných samostatne (hoci v prípade prietokových testov možno použiť rôzne plány testu),
Example of constituent quantities of a suitable commercial fish food
v súvislosti s testovacím médiom a podmienkami kŕmenia sa sformulovali špecifickejšie odporúčania,
Food spiking technique examples
toto sú hlavné rozdiely medzi druhou verziou usmernenia na vykonávanie reprodukčného testu (TG 211, 1998) a touto verziou:
Calculation of assimilation efficiency and biomagnification factor
hodnota závislej premennej – počet žijúcich potomkov na rodičovského jedinca sa doplnila o ďalšiu závislú premennú týkajúcu sa reprodukcie dafnií, t. j. celkový počet žijúcich potomkov na konci testu na rodičovskú dafniu na začiatku testu, čím sa z analýzy vyradia prípady náhodnej a/alebo mimovoľnej úmrtnosti rodičovských jedincov.
Lipid correction
Účelom ďalšej závislej premennej je zosúladiť túto závislú premennú s ďalšími reprodukčnými testovacími metódami uskutočňovanými na bezstavovcoch.
Evaluation of differences between measured time zero concentration (C0,m) and derived time zero concentration (C0,d)
Okrem toho v súvislosti s touto závislou premennou možno v tejto testovacej metóde odstrániť zdroj chybovosti, a to konkrétne účinok mimovoľnej a/alebo náhodnej úmrtnosti rodičovských jedincov v prípade jej výskytu počas obdobia expozície,
Guidance for very fast depurating test substances
v prípade ECx (napr. EC10 alebo EC50), ako aj prístupu NOEC/LOEC, sa začlenili aj ďalšie štatistické usmernenia týkajúce plánu testu a spracovania výsledkov,
EXAMPLE OF CONSTITUENT QUANTITIES OF A SUITABLE COMMERCIAL FISH FOOD
zavádza sa limitný test.
Major constituent
V dodatku 1 sa uvádzajú definície.
Fish meal
Prvotným cieľom testu je posúdiť účinok chemikálií na reprodukčný výstup Daphnia magna.
Crude Protein
Mladé samice uvedeného druhu (rodičovské jedince), ktoré sú na začiatku testu mladšie ako 24 hodín, sú vystavené testovanej chemikálii pridávanej do vody v rôznych koncentráciách.
Crude fat
Test trvá 21 dní.
Crude Fibre
Na konci testu sa posúdi celkový počet narodených živých potomkov.
Moisture
Reprodukčný výstup rodičovských jedincov možno vyjadriť rôznymi spôsobmi (napr. počet žijúcich potomstva vyprodukovaného na jedinca za deň od prvého dňa, keď bolo spozorované potomstvo).
Ash
Vykazovanie reprodukčného výstupu by sa však malo uskutočňovať popri vykazovaní celkového počtu živých mláďat na konci testu.
FOOD SPIKING TECHNIQUE EXAMPLES
Z dôvodu špecifického plánu polostatického testu v porovnaní s inými testovacími metódami týkajúcimi sa reprodukcie bezstavovcov je zároveň možné stanoviť počet živých potomkov jednotlivých rodičovských jedincov.
General Points
Na rozdiel od iných testovacích metód týkajúcich sa reprodukcie bezstavovcov možno vďaka tomuto testu zabezpečiť, že ak počas testovacieho obdobia dôjde k náhodnému a/alebo mimovoľnému úhynu rodičovského jedinca, z posudzovaných údajov možno vylúčiť ním vyprodukované potomstvo.
Control diets should be prepared in exactly the same way as the spiked diet, but with an absence of test substance.
Ak sa teda u replikátov vystavených účinkom chemikálie vyskytne rodičovská úmrtnosť, malo by sa zvážiť, či v prípade danej úmrtnosti ide o zvyčajnú reakciu na koncentráciu, napr. v prípade významnej regresie reakcie na koncentráciu testovanej chemikálie s pozitívnym sklonom (na tento účel sa môže použiť štatistický test ako Cochranov a Armitageov test trendu).
To check the concentration of the treated diet, triplicate samples of the dosed food should be extracted with a suitable extraction method and the test substance concentration or radioactivity in the extracts measured.
Ak úmrtnosť nie je reakciou na koncentráciu, potom by sa dané replikáty s rodičovskou úmrtnosťou mali z výsledkov testu vylúčiť.
High analytical recoveries (> 85 %) with low variation between samples (three sample concentrations for the substance taken at test start should not vary more than ± 15 % from the mean) should be demonstrated.
Ak úmrtnosť je reakciou na koncentráciu, rodičovská úmrtnosť by sa mala pripísať účinku testovanej chemikálie a replikáty by sa z analýzy nemali vylúčiť.
During the dietary test, three diet samples for analysis should be collected on day 0 and at the end of the uptake phase for the determination of the test substance content in the diet.
Ak rodičovský jedinec uhynie počas testu, t. j. náhodne v dôsledku nesprávneho zaobchádzania alebo nehody, prípadne uhynie mimovoľne v dôsledku nevysvetliteľnej udalosti, ktorá nesúvisela s účinkom testovanej chemikálie, alebo ak vysvitne, že posudzovaný jedinec je samec, potom sa replikát vylúči z analýzy (viac informácií sa uvádza v bode 51).
Fish food preparation with a liquid test material (neat)
Toxické účinky testovanej chemikálie na reprodukčný výstup sa vyjadrujú buď ako ECx, a to prostredníctvom dosadzovania údajov do vhodného modelu a základe nelineárnej regresie s cieľom odhadnúť koncentráciu, ktorá by spôsobila x % zníženie reprodukčného výstupu, alebo sa vyjadrujú ako hodnota NOEC/LOEC (4).
A target, nominal test concentration in the treated fish food is set, for example 500 μg test substance/g food.
Testované koncentrácie by mali podľa možnosti zahŕňať najnižšiu z použitých účinných koncentrácií (napr. EC10), čo znamená, že táto hodnota sa vypočíta pomocou interpolácie, a nie extrapolácie.
The appropriate quantity (by molar mass or specific radioactivity) of neat test substance is added to a known mass of fish food in a glass jar or rotary evaporator bulb.
Zaznamenať by sa mal aj počet rodičovských jedincov, ktorí prežili, a čas narodenia prvého potomstva.
The mass of fish food should be sufficient for the duration of the uptake phase (taking into account the need for increasing quantities at each feed owing to fish growth).
Preskúmať možno aj iné s danou chemikáliou súvisiace účinky na parametre, ako sú napríklad rast (napr. dĺžka) a možná inherentná rýchlosť rastu populácie (pozri bod 44).
The fish feed/test substance should be mixed overnight by slow tumbling (e.g. using a roto-rack mixer or by rotation if a rotary evaporator bulb is used).
INFORMÁCIE O TESTOVANEJ CHEMIKÁLII
The spiked diet should be stored under conditions that maintain stability of the test substance within the feed mix (e.g. refrigeration) until use.
Pri výbere vhodných testovacích koncentrácií v reprodukčných testoch môžu byť užitočné výsledky testu akútnej toxicity (pozri kapitolu C.2 tejto prílohy: Test akútnej imobilizácie dafnií Daphnia sp.), ktorý sa uskutočnil s použitím druhu Daphnia magna.
Fish food preparation with a corn or fish oil vehicle
Je potrebné poznať rozpustnosť testovanej chemikálie vo vode a jej tlak pary, pričom by k dispozícii mala byť spoľahlivá analytická metóda na kvantifikáciu chemikálie v testovacích roztokoch so známou mierou výťažnosti a kvantifikačným limitom.
Solid test substances should be ground in a mortar to a fine powder.
Medzi informácie o testovanej chemikálii, ktoré môžu byť užitočné pri stanovovaní testovacích podmienok, patrí štruktúrny vzorec, čistota chemikálie, stabilita na svetle, stabilita za podmienok testovania, pKa, Pow a výsledky testov na ľahkú biodegradovateľnosť [pozri kapitolu C.4 (Stanovenie „ľahkej“ biodegradovateľnosti) a kapitolu C.29 (Ľahká biodegradovateľnosť – CO2 v hermeticky uzavretých nádobách) tejto prílohy].
Liquid test substances can be added directly to the corn or fish oil.
Aby bol test platný, pri kontrole(-ách) by sa mali splniť tieto kritériá na vykonanie testu:
The test substance is dissolved in a known quantity of corn or fish oil (e.g. 5-15 ml).
úmrtnosť rodičovských jedincov (samice rodu Daphnia) nesmie na konci testu presiahnuť 20 %;
The dosed oil is quantitatively transferred into a rotary evaporation bulb of suitable size.
priemerný počet živých potomkov na jedného rodičovského jedinca, ktoré na konci testu prežili, je ≥ 60.
The flask used to prepare the dosed oil should be flushed with two small aliquots of oil and these added to the bulb to make sure all dissolved test substance is transferred.
Poznámka: Rovnaké validačné kritérium(20 %) možno uplatniť aj v prípade náhodnej a mimovoľnej rodičovskej úmrtnosti v prípade kontrol, ako aj každej z testovaných koncentrácií.
To ensure complete dissolution/dispersion in the oil (or if more than one test substance is being used in the study), a micro-stirrer is added, the flask stoppered and the mixture stirred rapidly overnight.
Testovacie nádoby a iné prístroje, ktoré prichádzajú do styku s testovacími roztokmi, by mali byť celé zo skla alebo iného chemicky inertného materiálu.
An appropriate quantity of fish diet (usually in pellet form) for the test is added to the bulb, and the bulb's contents are mixed homogeneously by continuously turning the glass bulb for at least 30 minutes, but preferably overnight.
Testovacie nádoby sú obvykle sklenené kadičky.
Thereafter, the spiked food is stored appropriately (e.g. refrigerated) to ensure test substance stability in the food until use.
Okrem toho budú potrebné niektoré z týchto zariadení alebo všetky uvedené zariadenia:
Fish food preparation with an organic solvent
oximeter (s mikroelektródou alebo iným vhodným vybavením na meranie rozpusteného kyslíka vo vzorkách s malým objemom),
An appropriate quantity of test substance (by molar mass or specific radioactivity) sufficient to achieve the target dose is dissolved in a suitable organic solvent (e.g. cyclohexane or acetone; 10-40 ml, but a greater volume if necessary depending on the quantity of food to spike).
primerané zariadenie na kontrolu teploty,
Either an aliquot, or all (added portion wise), of this solution is mixed with the appropriate mass of fish food sufficient for the test to achieve the required nominal dose level.
pH-meter;
The food/test substance can be mixed in a stainless steel mixing bowl and the freshly-dosed fish food left in the bowl in a laboratory hood for two days (stirred occasionally) to allow the excess solvent to evaporate, or mixed in a rotary evaporator bulb with continuous rotation.
vybavenie na stanovenie tvrdosti vody,
The excess solvent can be “blown” off under a stream of air or nitrogen if necessary.
vybavenie na stanovenie celkového obsahu organického uhlíka (TOC) vo vode alebo zariadenie na stanovenie chemickej spotreby kyslíka (COD),
Care should be taken to ensure that the test substance does not crystallise as the solvent is removed.
primeraný prístroj na kontrolovanie svetelného režimu a meranie intenzity svetla.
The spiked diet should be stored under conditions (e.g. refrigeration) that maintain stability of the test substance within the feed mix until use.
Testované organizmy
CALCULATION OF ASSIMILATION EFFICIENCY AND BIOMAGNIFICATION FACTOR To calculate the assimilation efficiency, the overall depuration rate constant should first be estimated according to section 4 of Appendix 5 (using the “sequential method”, i.e. standard linear regression) using mean sample concentrations from the depuration phase.
Druh, ktorý sa má použiť v teste je Daphnia magna Straus [57].Klony by sa mali podľa možnosti identifikovať na základe genotypov.
The feeding rate constant, I, and uptake duration, t, are known parameters of the study.
Z výskumu (1) vyplynulo, že reprodukčná schopnosť klonu A (ktorý pochádza z IRCHA vo Francúzsku) (5), stabilne vyhovuje kritériu validity, ktorým je priemerná hodnota ≥ 60 žijúcich potomkov na rodičovského jedinca, ktorý prežíva, ak je chovaný za podmienok opísaných v tejto testovacej metóde.
Cfood, the mean measured concentration of the test substance in the food is a measured variable in the study.
Akceptovateľné sú však aj iné klony, a to za podmienky, že predmetná kultúra dafnií preukázateľne spĺňa kritériá validity na účely testu.
C0,d, the test substance concentration in the fish at the end of the uptake phase, is usually derived from the intercept of a plot of ln(concentration) vs. depuration day.
Na začiatku testu by mali byť jedince mladšie ako 24 hodín a nemali by pochádzať z prvého potomstva.
The substance assimilation efficiency (a, absorption of test substance across the gut) is calculated as: α C 0,d k 2 I C food 1 1 e k 2 t [Equation A7.1] where: C0,d derived concentration in fish at time zero of the depuration phase (mg kg– 1); k2 overall (not growth-corrected) depuration rate constant (day– 1), calculated according to equations in Appendix 5, Section 3; I food ingestion rate constant (g food g– 1 fish day– 1); Cfood concentration in food (mg kg– 1 food); t duration of the feeding period (day) However, the feeding rate, I, used in the calculation may need to be adjusted for fish growth to give an accurate assimilation efficiency, a.
Ak sa rastové médium dafnií, ktoré sa má použiť v teste, líši od média, ktoré sa vyskytuje pri bežnej kultúre dafnií, s cieľom zabrániť spôsobovaniu stresu rodičovským jedincom sa odporúča pred testom zaradiť aklimatizačné obdobie trvajúce obvykle okolo troch týždňov (t. j. jedna generácia).
In a test where fish grow significantly during the uptake phase (in which no correction of feed quantities is made to maintain the set feeding rate), the effective feeding rate as the uptake phase progresses will be lower than that set, resulting in a higher 'real' assimilation efficiency.
Testovacie médium
(Note this is not important for the overall calculation of BMF as the I terms effectively cancel out between Equation A7.1 and Equation A7.4).
V tomto teste odporúčame použiť plne definované médium.
The mean feeding rate corrected for growth dilution, Ig, can be derived in several ways, but a straightforward and rigorous one is to use the known growth rate constant (kg) to estimate the test fish weights at time points during the uptake phase, i.e.:
Vďaka tomu sa možno vyhnúť použitiu ťažko charakterizovateľných prídavných látok (napr. rias, pôdnych extraktov), čím sa následne zlepšujú možnosti štandardizácie medzi laboratóriami.
Wf,0 ek g t
Zistilo sa, že na tento účel sú vhodné Elendtove médiá M4 (6) a M7 (pozri dodatok 2).
[Equation A7.2] where Wf(t) mean fish weight at uptake day t Wf,0
Akceptovateľné sú však aj iné médiá, napr. (7), (8), a to za podmienky, že úžitkovosť kultúry dafnií preukázateľne spĺňa kritériá validity testu.
As the feeding rate was set based on Wf,0, the effective feeding rate for each day of uptake can be calculated using these two weight values.
Ak sa používajú médiá, ktoré obsahujú nedefinované prídavné látky, tieto prídavné látky by sa mali jasne špecifikovať, pričom by sa mali v skúšobnom protokole poskytnúť informácie o zložení, a to predovšetkým s prihliadnutím na obsah uhlíka, keďže práve obsah uhlíka môže prispievať k poskytovanej potrave.
The growth-corrected feeding rate, Ig (g food g-1 fish day– 1), to use instead of I in cases of rapid growth during the uptake phase, can then be calculated as
Odporúča sa, aby sa stanovil celkový obsah organického uhlíka (TOC) a/alebo chemická spotreba kyslíka (COD) v zásobnom roztoku organickej prídavnej látky a aby sa uskutočnil odhad výsledného vplyvu na TOC/COD v testovacom médiu.
[Equation A7.3]
Ďalej sa odporúča, aby úrovne TOC v médiu (t. j. pred pridaním rias) boli pod 2 mg/l (9).
Once the assimilation efficiency has been obtained, the BMF can be calculated by multiplying it with the feeding rate constant I (or Ig, if used to calculate α) and dividing the product by the overall depuration rate constant k2:
Pri testovaní chemikálií s obsahom kovov je dôležité rozpoznať, že vlastnosti testovacieho média (t. j. tvrdosť, chelačná kapacita) môžu mať súvislosť s toxicitou testovanej chemikálie.
[Equation A7.4]
Z tohto dôvodu je vhodné úplne definované médium.
The growth-corrected biomagnification factor should also be calculated in the same way, using the growth corrected depuration rate constant (as derived according to section 7 in Appendix 5).
V súčasnosti sú však jedinými plne definovanými médiami, ktoré sú známe ako vhodné na dlhodobý chov kultúry Daphnia magna, Elendtove médiá M4 a M7.
Again, if Ig has been used to calculate α, it should also be used here instead of I:
Obidve médiá obsahujú chelatotvorné činidlo EDTA.
[Equation A7.5]
Zo skúseností vyplýva (2), že ak sa reprodukčný test uskutoční v médiách M4 a M7, „zjavná toxicita“ kadmia je vo všeobecnosti nižšia ako vtedy, ak sa uvedený test uskutoční v médiách, ktoré činidlo EDTA neobsahujú.
assimilation efficiency (absorption of test substance across the gut);
Preto sa na testovanie chemikálií s obsahom kovov neodporúčajú médiá M4 a M7.
overall (not growth-corrected) depuration rate constant (day– 1), calculated according to equations in Appendix 5, Section 3;
Treba sa vyhnúť aj iným médiám s obsahom známych chelatotvorných činidiel.
growth-corrected depuration rate constant (day– 1);
V prípade chemikálií, ktoré obsahujú kovy, sa odporúča použiť alternatívne médium, napríklad sladkú tvrdú vodu, rekonštituovanú v súlade s predpismi organizácie ASTM (9), ktorá neobsahuje žiadne činidlá EDTA.
food ingestion rate constant (g food g– 1 fish day– 1);
Táto kombinácia sladkej tvrdej vody, rekonštituovanej v súlade s normami organizácie ASTM, a extraktu z rias (10) je pre dlhodobý chov kultúry Daphnie magna (2) vhodná.
The substance assimilation efficiency from the diet can also be estimated if tissue residues are determined during the linear phase of the uptake phase (between days 1 and 3).
Odporúča sa tvrdosť nad 140 mg/l (v podobe CaCO3).
In this case the substance assimilation efficiency (α) can be determined as follows
Testy na tejto úrovni a vyšších úrovniach preukazujú reprodukčnú schopnosť v súlade s kritériami validity (11) a (12).
[Equation A7.7]
Testovacie roztoky so zvolenou koncentráciou sa zvyčajne pripravujú zriedením zásobného roztoku.