natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For an administration period of > 14 days, the limit dose is 1000 mg/kg body weight/day.
Zvieratá, ktoré vykazujú neletálne ukazovatele nadmernej toxicity, by mali byť humánne usmrtené pred ukončením testovacieho obdobia (11).
For administration periods of 14 days or less, the limit dose is 2000 mg/kg/body weight/day.
Vystavenie cieľového tkaniva
Administration of doses
Vzorka krvi by sa mala odobrať vo vhodnom čase(-och), aby bolo možné preskúmať úrovne testovaných chemikálií v plazme na účely preukázania, že došlo k expozícii kostnej drene, ak je to opodstatnené a ak neexistujú iné údaje o expozícii (pozri bod 45).
The anticipated route of human exposure should be considered when designing an assay.
Príprava kostnej drene a chromozómov
Therefore, routes of exposure such as dietary, drinking water, topical, subcutaneous, intravenous, oral (by gavage), inhalation, intratracheal, or implantation may be chosen as justified.
Ihneď po humánnom usmrtení sa zo stehenných alebo holenných kostí zvierat odoberú bunky kostnej drene, ktoré sa vystavia pôsobeniu hypotonického roztoku a následne sa fixujú.
In any case, the route should be chosen to ensure adequate exposure of the target tissue(s).
Bunky v metafáze sa potom rozotrú na sklíčka a zafarbia sa bežnými metódami pozri [(3) (12)].
Intraperitoneal injection is generally not recommended since it is not an intended route of human exposure, and should only be used with specific scientific justification.
Všetky preparáty vrátane pozitívnych a negatívnych kontrol by sa mali pred analýzou nezávisle označiť kódmi a mali by sa náhodne usporiadať, aby hodnotiaci nebol oboznámený s podmienkami testovania.
If the test chemical is admixed in diet or drinking water, especially in case of single dosing, care should be taken that the delay between food and water consumption and sampling should be sufficient to allow detection of the effects (see paragraphs 33-34).
Ako meradlo cytotoxicity by sa mal stanoviť mitotický index, a to aspoň na 1000 bunkách na jedno zviera v prípade všetkých ovplyvňovaných zvierat (vrátane pozitívnych kontrol), neovplyvňovaných alebo negatívnych kontrolných zvierat s nosičom/rozpúšťadlom.
The maximum volume of liquid that can be administered by gavage or injection at one time depends on the size of the test animal.
V prípade každého zvieraťa by sa malo analyzovať aspoň 200 metafáz na štruktúrne chromozómové aberácie vrátane gapov a bez gapov (6).
The volume should not normally exceed 1 ml/100 g body weight except in the case of aqueous solutions where a maximum of 2 ml/100 g may be used.
Ak historická databáza negatívnych kontrol naznačuje, že v testovacom laboratóriu je priemerná hodnota frekvencie štruktúrnych chromozómových aberácií v pozadí < 1 %, malo by sa zvážiť hodnotenie ďalších buniek.
The use of volumes greater than this should be justified.
Aberácie chromatidového a chromozómového typu by sa mali zaznamenávať oddelene a klasifikovať podľa podtypov (zlomy, výmeny).
Except for irritating or corrosive test chemicals, which will normally produce exacerbated effects at higher concentrations, variability in test volume should be minimised by adjusting the concentration to ensure administration of a constant volume in relation to body weight at all dose levels.
Vzhľadom na to, že pri príprave preparátov často dochádza k zlomom časti buniek v metafáze s následnou stratou chromozómov, vyhodnocované bunky by preto mali obsahovať najmenej 2n ± 2 centromér, kde n je haploidný počet chromozómov pre daný druh.
Treatment schedule
Spracovanie výsledkov
Test chemicals are normally administered as a single treatment, but may be administered as a split dose (i.e. two or more treatments on the same day separated by no more than 2-3 hours) to facilitate administering a large volume.
Údaje o jednotlivých zvieratách by sa mali uvádzať v tabuľkovej forme.
Under these circumstances, or when administering the test chemical by inhalation, the sampling time should be scheduled based on the time of the last dosing or the end of exposure.
V prípade každého zvieraťa by sa mal vyhodnotiť mitotický index, počet hodnotených buniek v metafáze, počet aberácií na bunku v metafáze a percentuálny podiel buniek so štruktúrnou chromozómovou aberáciou, resp. aberáciami.
There are little data available on the suitability of a repeated-dose protocol for this test.
V prípade ovplyvňovaných a kontrolných skupín by sa mali uvádzať rôzne typy štruktúrnych chromozómových aberácií s príslušnými počtami a frekvenciami.
However, in circumstances where it is desirable to integrate this test with a repeated-dose toxicity test, care should be taken to avoid loss of chromosomally damaged mitotic cells as may occur with toxic doses.
Gapy, polyploidné bunky a bunky s endoreduplikovanými chromozómami sa zaznamenávajú oddelene.
Such integration is acceptable when the highest dose is greater or equal to the limit dose (see paragraph 29) and a dose group is administered the limit dose for the duration of the treatment period.
Frekvencia gapov sa zaznamenáva, ale vo všeobecnosti sa nezahŕňa do analýzy celkovej frekvencie štruktúrnych aberácií.
The micronucleus test (test method B.12) should be viewed as the in vivo test of choice for chromosomal aberrations when integration with other studies is desired.
Ak neexistujú dôkazy o rozdieloch medzi reakciami rôznych pohlaví, údaje možno na účely štatistickej analýzy kombinovať.
Bone marrow samples should be taken at two separate times following single treatments.
Mali by sa uvádzať aj údaje o toxicite a klinických príznakoch u zvierat.
For rodents, the first sampling interval should be the time necessary to complete 1,5 normal cell cycle lengths (the latter being normally 12-18 hours following the treatment period).
Prijateľnosť testu určujú tieto kritériá:
Since the time required for uptake and metabolism of the test chemical(s) as well as its effect on cell cycle kinetics can affect the optimum time for chromosomal aberration detection, a later sample collection 24 hours after the first sampling time is recommended.
Údaje o súbežných negatívnych kontrolách sa pokladajú za prijateľné na to, aby sa doplnili do historickej databázy kontrol (pozri body 11 – 14).
At the first sampling time, all dose groups should be treated and samples collected for analysis; however, at the later sampling time(s), only the highest dose needs to be administered.
Súbežné pozitívne kontroly alebo kontroly hodnotenia by mali vyvolať reakcie, ktoré sú zlučiteľné s reakciami generovanými v historickej databáze pozitívnych kontrol a viesť k štatisticky významnému nárastu v porovnaní s negatívnou kontrolou (pozri body 20 – 21).
If dose regimens of more than one day are used based on scientific justification, one sampling time at up to approximately 1,5 normal cell cycle lengths after the final treatment should generally be used.
Vykonala sa analýza primeraného počtu dávok a buniek.
Following treatment and prior to sample collection, animals are injected intraperitoneally with an appropriate dose of a metaphase-arresting agent (e.g. colcemid or colchicine), and samples are collected at an appropriate interval thereafter.
Kritériá výberu najvyššej dávky sú v súlade s kritériami opísanými v bodoch 25 – 28.
For mice this interval is approximately 3-5 hours prior to collection and for rats it is 2-5 hours.
Hodnotenie a interpretácia výsledkov
Cells are harvested from the bone marrow, swollen, fixed and stained, and analysed for chromosomal aberrations (12).
Za predpokladu, že sú splnené všetky kritériá prijateľnosti, testovaná chemikália sa pokladá za jasne pozitívnu, ak:
Observations
aspoň jedna z testovaných skupín vykazuje štatisticky významné zvýšenie frekvencie buniek so štruktúrnymi chromozómovými aberáciami (bez gapov) v porovnaní so súbežnou negatívnou kontrolou,
General clinical observations of the test animals should be made and clinical signs recorded at least once a day, preferably at the same time(s) each day and considering the peak period of anticipated effects after dosing.
pri posúdení pomocou vhodného testu trendu sa preukáže, že aspoň pri jednom odbere vzorky toto zvýšenie závisí od dávky, a
At least twice daily during the dosing period, all animals should be observed for morbidity and mortality.
ktorýkoľvek z týchto výsledkov je mimo rozdelenia historických údajov negatívnych kontrol (napr. 95 % regulačné medze podľa Poissonovho rozdelenia).
All animals should be weighed at study initiation, at least once a week during repeated-dose studies, and at euthanasia.
Ak sa preskúma len najvyššia dávka v konkrétnom čase odberu vzorky, testovaná chemikália sa pokladá za jasne pozitívnu, ak dôjde k štatisticky významnému zvýšeniu v porovnaní so súbežnou negatívnou kontrolou a výsledky sú mimo rozdelenia historických údajov negatívnych kontrol (napr. 95 % regulačné medze podľa Poissonovho rozdelenia).
In studies of at least one-week duration, measurements of food consumption should be made at least weekly.
Odporúčania týkajúce sa vhodných štatistických metód možno nájsť v literatúre (13).
If the test chemical is administered via the drinking water, water consumption should be measured at each change of water and at least weekly.
Pri vykonávaní analýzy vzťahu medzi dávkou a reakciou by sa mali analyzovať aspoň tri ovplyvnené dávkové skupiny, v rámci ktorých sa podáva určitá dávka.
Animals exhibiting non-lethal indicators of excessive toxicity should be humanely euthanised prior to completion of the test period (11).
Pri štatistických testoch by sa malo zviera použiť ako experimentálna jednotka.
Target tissue exposure
Pozitívne výsledky testu na chromozómové aberácie naznačujú, že testovaná chemikália indukuje štruktúrne chromozómové aberácie v bunkách kostnej drene testovaného druhu.
A blood sample should be taken at appropriate time(s) in order to permit investigation of the plasma levels of the test chemicals for the purposes of demonstrating that exposure of the bone marrow occurred, where warranted and where other exposure data do not exist (see paragraph 44).
Za predpokladu, že sú splnené všetky kritériá prijateľnosti, sa testovaná chemikália pokladá za jasne negatívnu, ak pri všetkých preskúmaných experimentálnych podmienkach platí, že:
Bone marrow and chromosome preparations
žiadna z testovaných skupín nevykazuje štatisticky významné zvýšenie frekvencie buniek so štruktúrnymi chromozómovými aberáciami (bez gapov) v porovnaní so súbežnou negatívnou kontrolou,
Immediately after humane euthanasia, bone marrow cells are obtained from the femurs or tibias of the animals, exposed to hypotonic solution and fixed.
pri posúdení pomocou vhodného testu trendu sa preukáže, že počas žiadneho odberu vzorky nedochádza k zvýšeniu v závislosti od dávky;
The metaphase cells are then spread on slides and stained using established methods (see (3) (12)).
všetky výsledky sú v rámci rozdelenia historických údajov negatívnych kontrol (napr. 95 % regulačné medze podľa Poissonovho rozdelenia) a
All slides, including those of positive and negative controls, should be independently coded before analysis and should be randomised so the scorer is unaware of the treatment condition.
došlo k vystaveniu kostnej drene účinkom testovanej(-ých) chemikálie(-í).
The mitotic index should be determined as a measure of cytotoxicity in at least 1000 cells per animal for all treated animals (including positive controls), untreated or vehicle/solvent negative control animals.
Odporúčania týkajúce sa najvhodnejších štatistických metód možno nájsť v literatúre (13).
At least 200 metaphases should be analysed for each animal for structural chromosomal aberrations including and excluding gaps (6).
Ako dôkaz o expozícii kostnej drene testovanej chemikálii môže slúžiť zníženie mitotického indexu alebo meranie hladín testovanej chemikálie resp. chemikálií v plazme alebo krvi.
However, if the historical negative control database indicates the mean background structural chromosomal aberration frequency is < 1 % in the testing laboratory, consideration should be given to scoring additional cells.
V prípade intravenózneho podania nie je potrebný dôkaz o expozícii.
Chromatid and chromosome-type aberrations should be recorded separately and classified by sub-types (breaks, exchanges).
Alternatívne možno na preukázanie vystavenia kostnej drene použiť údaje ADME získané v nezávislej štúdii s použitím tej istej cesty podania a toho istého druhu.
Recognising that slide preparation procedures often result in the breakage of a proportion of metaphases with a resulting loss of chromosomes, the cells scored should, therefore, contain a number of centromeres not less than 2n ± 2, where n is the haploid number of chromosomes for that species.
Negatívne výsledky naznačujú, že za daných testovacích podmienok testovaná chemikália neindukuje štruktúrne chromozómové aberácie v bunkách kostnej drene testovaného druhu.
Treatment of Results
Neexistuje požiadavka na overenie jasnej pozitívnej alebo negatívnej reakcie.
Individual animal data should be presented in tabular form.
V prípadoch, keď reakcia nie je jasne negatívna ani pozitívna, a s cieľom pomôcť stanoviť biologickú relevantnosť výsledku (napr. slabé alebo hraničné zvýšenie), by na posúdenie údajov malo slúžiť odborné posúdenie a/alebo ďalšie skúmanie vykonaných pokusov.
The mitotic index, the number of metaphase cells scored, the number of aberrations per metaphase cell and the percentage of cells with structural chromosomal aberration(s) should be evaluated for each animal.
V niektorých prípadoch by mohlo byť užitočné vykonať analýzu viacerých buniek alebo zopakovať pokus s pozmenenými podmienkami.
Different types of structural chromosomal aberrations should be listed with their numbers and frequencies for treated and control groups.
V zriedkavých prípadoch, dokonca aj po ďalších skúmaniach, údaje neumožnia vyvodiť záver, že testované chemikálie vedú k negatívnym alebo pozitívnym výsledkom, a preto sa štúdia uzavrie ako štúdia „s nejasným výsledkom“.
Gaps, as well as polyploid cells and cells with endoreduplicated chromosomes are recorded separately.
Frekvencia výskytu polyploidných, ako aj endoreduplikovaných metafáz medzi všetkými metafázami by sa mala zaznamenávať oddelene.
The frequency of gaps is reported but generally not included in the analysis of the total structural aberration frequency.
Nárast počtu polyploidných/endoreduplikovaných buniek môže naznačovať, že testovaná chemikália má potenciál brzdiť mitotické procesy alebo postup bunkového cyklu (pozri bod 3).
If there is no evidence for a difference in response between the sexes, the data may be combined for statistical analysis.
Skúšobný protokol
Data on animal toxicity and clinical signs should also be reported.
Zhrnutie
The following criteria determine the acceptability of the test:
zdroj, číslo šarže, konečný dátum použitia, ak sú tieto informácie k dispozícii,
The concurrent negative control data are considered acceptable for addition to the laboratory historical control database (see paragraphs 11-14);
stabilita testovanej chemikálie, ak je známa.
The concurrent positive controls or scoring controls should induce responses that are compatible with those generated in the historical positive control database and produce a statistically significant increase compared with the negative control (see paragraphs 20-21);
Príprava testovanej chemikálie:
The appropriate number of doses and cells has been analysed;
zdôvodnenie voľby nosiča,
The criteria for the selection of highest dose are consistent with those described in paragraphs 25-28.
rozpustnosť a stabilita testovanej chemikálie v rozpúšťadle/nosiči, ak je známa,
Evaluation and Interpretation of Results
príprava potravy, pitnej vody alebo inhalačných aplikačných foriem,
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered clearly positive if:
analytické stanovenia týkajúce sa aplikačných foriem (napr. stabilita, homogenita, nominálne koncentrácie) v prípade, že sa vykonáva.
At least one of the treatment groups exhibits a statistically significant increase in the frequency of cells with structural chromosomal aberrations (excluding gaps) compared with the concurrent negative control,
použitý druh/kmeň a zdôvodnenie jeho použitia;
This increase is dose-related at least at one sampling time when evaluated with an appropriate trend test, and
počet, vek a pohlavie zvierat,
Any of these results are outside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits).
zdroj, podmienky umiestnenia, potrava atď.;
If only the highest dose is examined at a particular sampling time, a test chemical is considered clearly positive if there is a statistically significant increase compared with the concurrent negative control and the results are outside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits).
metóda na jedinečnú identifikáciu zvierat;
Recommendations for appropriate statistical methods can be found in the literature (13).
pozitívne a negatívne (rozpúšťadlo/nosič) kontroly,
When conducting a dose-response analysis, at least three treated dose groups should be analysed.
údaje zo štúdie na zistenie rozsahu, ak sa vykonala,
Statistical tests should use the animal as the experimental unit.
odôvodnenie výberu veľkosti dávky,
Positive results in the chromosomal aberration test indicate that a test chemical induces structural chromosomal aberrations in the bone marrow of the species tested.
podrobné údaje o príprave testovanej chemikálie,
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered clearly negative if in all experimental conditions examined:
podrobné údaje o podávaní testovanej chemikálie,
None of the treatment groups exhibits a statistically significant increase in the frequency of cells with structural chromosomal aberrations (excluding gaps) compared with the concurrent negative control,
zdôvodnenie spôsobu a trvania podávania,
There is no dose-related increase at any sampling time when evaluated by an appropriate trend test,
metódy overovania, že testovaná chemikália resp. chemikálie dosiahli veľký krvný obeh alebo kostnú dreň,
All results are inside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits), and
skutočná dávka (mg/kg telesnej hmotnosti/deň) testovanej chemikálie vypočítaná z potravy/pitnej vody, v uplatniteľnom prípade koncentrácia (v ppm) a spotreba,
Bone marrow exposure to the test chemical(s) occurred.
podrobné údaje o kvalite potravy a vody,
Recommendations for the most appropriate statistical methods can be found in the literature (13).
metóda usmrtenia;
Evidence of exposure of the bone marrow to a test chemical may include a depression of the mitotic index or measurement of the plasma or blood levels of the test chemical(s).
metóda analgézie (v prípade použitia),
In the case of intravenous administration, evidence of exposure is not needed.
podrobný opis harmonogramu aplikácie a harmonogramu odberu vzoriek a zdôvodnenie ich voľby,
Alternatively, ADME data, obtained in an independent study using the same route and same species can be used to demonstrate bone marrow exposure.
metódy prípravy preparátov,
Negative results indicate that, under the test conditions, the test chemical does not induce structural chromosomal aberrations in the bone marrow of the species tested.
metódy merania toxicity,
There is no requirement for verification of a clear positive or clear negative response.
identita chemikálie zastavujúcej metafázu, jej koncentrácia, dávka a čas podania pred odberom vzoriek,
In cases where the response is not clearly negative or positive and in order to assist in establishing the biological relevance of a result (e.g. a weak or borderline increase), the data should be evaluated by expert judgement and/or further investigations of the existing experiments completed.
postupy izolácie a uchovávania vzoriek,
In some cases, analysing more cells or performing a repeat experiment using modified experimental conditions could be useful.
počet analyzovaných buniek v metafáze na jedno zviera a počet analyzovaných buniek na určenie mitotického indexu,
In rare cases, even after further investigations, the data will preclude making a conclusion that the test chemical produces either positive or negative results, and the study will therefore be concluded as equivocal.
kritériá prijateľnosti štúdie,
An increase in the number of polyploid/endoreduplicated cells may indicate that the test chemical has the potential to inhibit mitotic processes or cell cycle progression (see paragraph 3).
stav zvieraťa pred testovaním a počas doby testovania vrátane príznakov toxicity,
Test Report
mitotický index uvedený oddelene pre každé zviera,
Summary
typ a počet aberácií a buniek s aberáciami uvedený oddelene pre každé zviera,
source, lot number, limit date for use if available;
celkový počet aberácií na skupinu s priemerom a štandardnou odchýlkou,
stability of the test chemical, if known.
počet buniek s aberáciami na skupinu s priemerom a štandardnou odchýlkou,
Test chemical preparation:
zmeny v ploídii, ak sa pozorovali, vrátane frekvencie polyploidných a/alebo endoreduplikovaných buniek,
justification for choice of vehicle;
vzťah medzi dávkou a reakciou, ak je možné ho určiť,
solubility and stability of the test chemical in solvent/vehicle, if known;
použité štatistické analýzy a štatistická metóda,
preparation of dietary, drinking water or inhalation formulations;
údaje na podporu toho, že došlo k vystaveniu kostnej drene,
analytical determinations on formulations (e.g. stability, homogeneity, nominal concentrations), when conducted.
údaje o súbežných negatívnych a pozitívnych kontrolách s rozsahmi, priemermi a štandardnými odchýlkami,
species/strain used and justification for use;
historické údaje týkajúce sa pozitívnych a negatívnych kontrol, ich rozsahy, priemery, štandardné odchýlky a 95 % regulačné medze rozdelenia, ako aj príslušné časové obdobie a počet pozorovaní,
number, age and sex of animals;
splnené kritériá pre pozitívne alebo negatívne reakcie.
source, housing conditions, diet, etc.;
Záver.
method for uniquely identifying the animals;
Referencie.
for short-term studies: individual weight of the animals at the start and end of the test; for studies longer than one week: individual body weights during the study and food consumption.
, “Cytogenetic Tests in Mammals”, in Mutagenicity Testing: A Practical Approach, Venittand, S., J.M. Parry (eds.), IRL Press, Washington, DC, pp.
Body weight range, mean and standard deviation for each group should be included.
275-306.
positive and negative (vehicle/solvent) controls;
Part I revised, Kirkland, D.J. (ed.), Cambridge University Press, Cambridge, pp.
data from range-finding study, if conducted;
115-141.
rationale for dose level selection;
OECD (2000), “Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation”, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No 19, OECD Publishing, Paris.
details of test chemical preparation;
UKEMS SubCommittee on Guidelines for Mutagenicity Testing, Report, Part III, Kirkland, D.J. (ed.), Cambridge University Press, Cambridge, pp.
details of the administration of the test chemical;
184-232.
rationale for route and duration of administration;
akákoľvek odchýlka od bežného diploidného (alebo haploidného) počtu chromozómov vo forme jedného alebo viacerých chromozómov, nie však vo forme viacnásobkov celého(-ých) súboru(-ov) chromozómov (pozri polyploidia).
methods for verifying that the test chemical(s) reached the general circulation or bone marrow;
Centroméra
actual dose (mg/kg body weight/day) calculated from diet/drinking water test chemical concentration (ppm) and consumption, if applicable;
oblasť(-ti) chromozómu, v ktorej(-ých) sa vlákna deliaceho vretienka pripájajú k chromozómu počas delenia bunky a ktorá(-é) umožňuje(-ú) riadny pohyb dcérskych chromozómov k pólom dcérskych buniek.
details of food and water quality;
štruktúrne chromozómové poškodenie prejavujúce sa ako zlom jednej z chromatíd alebo zlom a opätovné spojenie medzi chromatídami.