natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Test solutions of the selected concentrations can be prepared, e.g. by dilution of a stock solution.
Testovacia metóda bola validovaná kruhovým testom (4).
The stock solutions should preferably be prepared by simply mixing or agitating the test chemical in the dilution water by mechanical means (e.g. stirring and/or ultra-sonification).
Uvádzajú sa informácie o testovaní s obnovou (polostatická metóda) a bez obnovy (statická metóda) testovacieho roztoku.
If the test chemical is difficult to dissolve in water, procedures described in the OECD Guidance Document No. 23 for handling difficult substances and mixtures should be followed (28).
V závislosti od cieľov testu a regulačných požiadaviek sa polostatická metóda odporúča použiť napríklad pre látky, ktoré z roztoku rýchlo unikajú v dôsledku odparovania, adsorpcie, fotodegradácie, hydrolýzy, vyzrážania alebo biodegradácie.
Where a solvent is used to assist in stock solution preparation, its final concentration should not exceed 100 μl/l and should be the same in all test vessels.
Táto testovacia metóda sa vzťahuje na látky, pre ktoré bola táto testovacia metóda validovaná [pozri podrobnosti v správe o kruhovom teste (4)], alebo na prípravky alebo známe zmesi.
Maintenance of brood fish
Táto testovacia metóda v systéme bez sedimentu pre Myriophyllum spicatum dopĺňa test toxicity pre Myriophyllum spicatum v systéme voda – sediment (6).
A breeding stock of unexposed, wild-type zebrafish with well-documented fertilisation rate of eggs is used for egg production.
Pred použitím tejto testovacej metódy na testovanie zmesi na regulačné účely by sa malo posúdiť, či môže poskytnúť primerané výsledky na tieto účely, a ak áno, je nutné to zdôvodniť.
Fish should be free of macroscopically discernible symptoms of infection and disease and should not have undergone any pharmaceutical (acute or prophylactic) treatment for 2 months before spawning.
Nepretržite rastúce rastlinné kultúry Myriophyllum spicatum (iba v upravenom Andrewsovom médiu, pozri dodatok 2) sa nechajú rásť ako monokultúry v rôznych koncentráciách testovanej chemikálie počas obdobia 14 dní v testovacom systéme bez sedimentu.
Breeding fish are maintained in aquaria with a recommended loading capacity of 1 l water per fish and a fixed 12 - 16 hour photoperiod (29)(30)(31)(32)(33).
Cieľom testu je kvantifikovať účinky chemikálie na vegetatívny rast v tomto období na základe hodnotenia zvolených meraných premenných.
For feeding conditions, see Appendix 2.
Okrem toho sa zohľadňujú aj zreteľné kvalitatívne zmeny testovacích organizmov, napríklad deformácia alebo chloróza a nekróza, ktoré sa prejavujú zožltnutím alebo bielym a hnedým sfarbením.
Surplus feeding should be avoided, and water quality and cleanness of the aquaria should be monitored regularly and be reset to the initial state, if necessary.
Na kvantifikovanie účinkov súvisiacich s chemikáliou sa rast v testovacích roztokoch porovnáva s rastom v kontrolách a stanoví sa koncentrácia spôsobujúca špecifickú x % inhibíciu rastu, ktorá sa vyjadrí ako ECx, pričom „x“ môže mať akúkoľvek hodnotu v závislosti od regulačných požiadaviek, napr. EC10, EC20, EC50.
Proficiency Testing
Treba poznamenať, že odhady hodnôt EC10 a EC20 sú spoľahlivé a vhodné len v testoch, v ktorých sú variačné koeficienty pre kontrolné rastliny nižšie ako úroveň účinku, ktorá sa odhaduje, t. j. variačné koeficienty by mali byť < 20 %, aby bolo možné spoľahlivo odhadnúť hodnotu EC20.
As a reference chemical, 3,4-dichloroaniline (used in the validation studies (1)(2)), should be tested in a full concentration-response range to check the sensitivity of the fish strain used, preferably twice a year.
Stanovuje sa priemerná špecifická rýchlosť rastu (odhadnutá z vyhodnotenia dĺžky hlavného výhonku a ďalších troch meraných premenných) a výťažok (odhadnutý z nárastu dĺžky hlavného výhonku a ďalších troch meraných premenných) pre ošetrené a neošetrené rastliny.
For any laboratory initially establishing this assay, the reference chemical should be used.
Špecifická rýchlosť rastu (r) sa následne použije na stanovenie hodnoty ErCx (napr. ErC10, ErC20, ErC50) a výťažok (y) na stanovenie hodnoty EyCx (napr. EyC10, EyC20, EyC50).
A laboratory can use this chemical to demonstrate their technical competence in performing the assay prior to submitting data for regulatory purposes.
Okrem toho je možné štatisticky stanoviť najnižšiu koncentráciu s pozorovaným účinkom (LOEC) a koncentráciu bez pozorovaného účinku (NOEC).
Egg production
Mala by byť k dispozícii analytická metóda s vhodnou citlivosťou na kvantifikáciu testovanej chemikálie v testovacom médiu.
Zebrafish eggs may be produced via spawning groups (in individual spawning tanks) or via mass spawning (in the maintenance tanks).
Informácie o testovanej chemikálii, ktoré môžu byť užitočné pri stanovovaní testovacích podmienok, zahŕňajú štruktúrny vzorec, čistotu a nečistoty, rozpustnosť vo vode, stabilitu vo vode a na svetle, disociačnú konštantu v kyseline (pKa), rozdeľovaciu konštantu oktanol – voda (Kow), tlak pary a biodegradovateľnosť.
In the case of spawning groups, males and females (e.g., at a ratio of 2:1) in a breeding group are placed in spawning tanks a few hours before the onset of darkness on the day prior to the test.
Rozpustnosť vo vode a tlak pary je možné použiť na výpočet Henryho konštanty, ktorá bude udávať, či je pravdepodobné, že počas testu dôjde k značným elimináciám testovanej chemikálie.
Since spawning groups of zebrafish may occasionally fail to spawn, the parallel use of at least three spawning tanks is recommended.
To pomôže pri stanovení, či je potrebné prijať konkrétne opatrenia na kontrolu týchto eliminácií.
To avoid genetic bias, eggs are collected from a minimum of three breeding groups, mixed and randomly selected.
Ak sú informácie o rozpustnosti a stabilite testovanej chemikálie neurčité, odporúča sa, aby sa vyhodnotili za podmienok testu, t. j. s rastovým médiom, teplotou a režimom osvetlenia použitými v teste.
To prevent predation of eggs by adult zebrafish, the spawn traps are covered with inert wire mesh of appropriate mesh size (approx.
Ďalšie informácie o testovaných chemikáliách a ich fyzikálno-chemických vlastnostiach, ktoré sťažujú ich testovanie, sú uvedené v usmerňovacom dokumente OECD (5).
2 ± 0,5 mm).
Na to, aby bol test platný, musí byť čas zdvojnásobenia dĺžky hlavného výhonku v kontrole kratší ako 14 dní.
If considered necessary, artificial plants made of inert material (e.g., plastic or glass) can be fixed to the mesh as spawning stimulus (3)(4)(5)(23)(35).
Pri použití médií a za podmienok testu uvedených v tejto testovacej metóde sa toto kritérium môže splniť s použitím statického alebo polostatického režimu testu.
Weathered plastic materials which do not leach (e.g., phthalates) should be used.
Priemerný variačný koeficient pre výťažok na základe meraní čerstvej hmotnosti výhonku (teda od začatia testu po skončenie testu) a ďalších meraných premenných (pozri bod 37) v kontrolných kultúrach nepresahuje 35 % medzi replikátmi.
Mating, spawning and fertilisation take place within 30 min after the onset of light and the spawn traps with the collected eggs can be carefully removed.
Viac ako 50 % replikátov z kontrolnej skupiny zostalo sterilných počas obdobia expozície 14 dní, čo znamená, že sú viditeľne bez kontaminácie inými organizmami, ako sú riasy, plesne a baktérie (číry roztok).
Rinsing eggs with reconstituted water after collection from spawning traps is recommended.
Poznámka: Usmernenie na posúdenie sterility je uvedené v správe o kruhovom teste (4).
Egg differentiation
REFERENČNÁ CHEMIKÁLIA
At 26 °C, fertilised eggs undergo the first cleavage after about 15 min and the consecutive synchronous cleavages form 4, 8, 16 and 32 cell blastomers (see Appendix 3)(35).
Na overenie testovacieho postupu možno otestovať referenčnú chemikáliu (chemikálie), napríklad 3,5-dichlórfenol použitý v kruhovom teste (4).
Exposure should be such that ± 20 % of the nominal chemical concentration are maintained throughout the test.
Všetky zariadenia, ktoré prichádzajú do styku s testovacím médiom, by mali byť vyrobené zo skla alebo z iného chemicky inertného materiálu.
If this is not possible in a static system, a manageable semi-static renewal interval should be applied (e.g. renewal every 24 hrs).
Sklené nádoby používané na kultiváciu a testovanie by sa mali očistiť od chemických kontaminantov, ktoré by sa mohli lúhovať do testovacieho média, a mali by byť sterilné.
In these cases exposure concentrations need to be verified as a minimum in the highest and lowest test concentrations at the beginning and the end of each exposure interval (see paragraph 36).
Testovacie nádoby by mali byť dostatočne dlhé na to, aby výhonok v kontrolných nádobách mohol rásť vo vodnej fáze bez toho, aby na konci testu dosiahol povrch testovacieho média.
If an exposure concentration of ± 20 % of the nominal concentrations cannot be maintained, all concentrations need to be measured at the beginning and the end of each exposure interval (see paragraph 36).
Odporúča sa používať hrubostenné testovacie skúmavky z borokremičitého skla bez obruby s vnútorným priemerom približne 20 mm, dĺžkou približne 250 mm a s hliníkovými uzávermi.
Upon renewal, care should be taken that embryos remain covered by a small amount of old test solutions to avoid drying.
Keďže upravené Andrewsovo médium obsahuje sacharózu (ktorá stimuluje rast plesní a baktérií), testovacie roztoky sa musia pripravovať v sterilných podmienkach.
The test design can be adapted to meet the testing requirements of specific substances (e.g,. flow-through (24) or passive dosing systems (25) for easily degradable or highly adsorptive substances (29), or others for volatile substances (36)(37)).
Všetky tekutiny i zariadenia sa pred použitím sterilizujú.
In any case, care should be taken to minimise any stress to the embryos.
Sterilizácia sa vykonáva vystavením horúcemu vzduchu (210 °C) na 4 hodiny alebo sterilizáciou v autokláve počas 20 minút pri teplote 121 °C.
Test chambers should be conditioned at least for 24 hrs with the test solutions prior to test initiation.
Okrem toho sa bezprostredne pred použitím všetky banky, podnosy, misky atď. a iné vybavenie sterilizujú plameňom na sterilnej pracovnej ploche.
Test conditions are summarised in Appendix 2.
Kultúry a testovacie nádoby by sa nemali uchovávať spoločne.
Normally, five concentrations of the test chemical spaced by a constant factor not exceeding 2,2 are required to meet statistical requirements.
To sa dá najlepšie dosiahnuť s použitím oddelených environmentálnych rastových komôr, inkubátorov alebo miestností.
Justification should be provided, if fewer than five concentrations are used.
Osvetlenie a teplota by sa mali dať regulovať a udržiavať na konštantnej úrovni.
The highest concentration tested should preferably result in 100 % lethality, and the lowest concentration tested should preferably give no observable effect, as defined in paragraph 28.
Testovací organizmus
A range-finding test before the definitive test allows selection of the appropriate concentration range.
Stolístok klasnatý (Myriophyllum spicatum) je ponorená vodná dvojklíčnolistová rastlina.
The range-finding is typically performed using ten embryos per concentration.
Od júna do augusta vystupujú nad vodnú hladinu nevýrazné ružovobiele kvety.
The following instructions refer to performing the test in 24-well plates.
Rastliny sú zakorenené v zemi prostredníctvom systému mohutných pakoreňov a vyskytujú sa na celej severnej pologuli v eutrofických, ale neznečistených a vápenatejších stojatých vodách s bahnitým substrátom.
If different test chambers (e.g. small Petri dishes) are used or more concentrations are tested, instructions have to be adjusted accordingly.
Myriophyllum spicatum uprednostňuje sladkú vodu, ale možno ho nájsť aj v poloslanej vode.
Details and visual instructions for allocation of concentrations across 24-well plates are available in paragraph 27 and Appendix 4, Figure 1.
Na test toxicity v systéme bez sedimentu sú potrebné sterilné rastliny.
Dilution water controls are required both as negative control and as internal plate controls.
Ak testovacie laboratórium nemá pravidelné kultúry Myriophyllum spicatum, sterilný rastlinný materiál možno získať z iného laboratória, prípadne možno (nesterilný) rastlinný materiál nazbierať v teréne alebo objednať od komerčného dodávateľa.
If more than 1 dead embryo is observed in the internal plate control, the plate is rejected, thus reducing the number of concentrations used to derive the LC50.
Ak rastliny pochádzajú z terénu, je potrebné naplánovať taxonomické overenie druhu.
If an entire plate is rejected the ability to evaluate and discern observed effects may become more difficult, especially if the rejected plate is the solvent control plate or a plate in which treated embryos are also affected.
Ak sa rastliny nazbierajú v teréne alebo objednajú od komerčného dodávateľa, mali by sa sterilizovať (1) a minimálne osem týždňov pred použitím uchovávať v kultúre v rovnakom médiu, aké sa používa na testovanie.
In the first case the test must be repeated.
Terénne lokality použité na zber počiatočných kultúr nesmú obsahovať zrejmé zdroje kontaminácie.
In the second one the loss of an entire treatment group(s) due to internal control mortality may limit the ability to evaluate effects and determine LC50 values.
Treba dávať veľký pozor na to, aby sa pri zbere Myriophyllum spicatum v teréne získal správny druh, a to najmä v regiónoch, kde sa môže krížiť s inými druhmi rodu Myriophyllum.
A positive control at a fixed concentration of 4 mg/l 3,4-dichloroaniline is performed with each egg batch used for testing.
Ak sa materiál získa z iného laboratória, mal by sa takisto uchovávať minimálne tri týždne.
In case a solvent is used, an additional group of 20 embryos is exposed to the solvent on a separate 24-well plate, thus serving as a solvent control.
V správe je vždy potrebné uviesť zdroj rastlinného materiálu a druh použitý na testovanie.
To consider the test acceptable, the solvent should be demonstrated to have no significant effects on time to hatch, survival, nor produce any other adverse effects on the embryos (cf. paragraph 8c).
Kvalita a uniformita rastlín, ktoré sa používajú na test, budú mať značný vplyv na výsledok testu, preto by sa rastliny mali starostlivo vyberať.
Start of exposure and duration of test
Použiť by sa mali mladé, rýchlo rastúce rastliny bez viditeľných lézií alebo straty farby (chlorózy).
The test is initiated as soon as possible after fertilisation of the eggs and terminated after 96 hrs of exposure.
Podrobnosti o príprave testovacieho organizmu sú uvedené v dodatku 4.
The embryos should be immersed in the test solutions before cleavage of the blastodisc commences, or, at latest, by the 16 cell-stage.
Kultivácia
Viable fertilised eggs should be separated from unfertilised eggs and be transferred to 24-well plates pre-conditioned for 24 hrs and refilled with 2 ml/well freshly prepared test solutions within 180 minutes post fertilisation.
Informácie o kultivácii sú uvedené v dodatku 3.
By means of stereomicroscopy (preferably ≥30-fold magnification), fertilised eggs undergoing cleavage and showing no obvious irregularities during cleavage (e.g. asymmetry, vesicle formation) or injuries of the chorion are selected.
Najmenej 14 až 21 dní pred vykonaním testu sa dostatočné množstvo testovacích organizmov asepticky prenesie do čerstvého sterilného média a kultivuje sa 14 až 21 dní za podmienok testu ako predkultúra.
For egg collection and separation, see Appendix 3, Fig. 1 and 3 and Appendix 4, Fig.
Podrobnosti o príprave predkultúry sú uvedené v dodatku 4.
2.
Pre druh Myriophyllum spicatum v testovacom systéme bez sedimentu sa odporúča iba jedno živné médium, ktoré je opísané v dodatku 2.
Distribution of eggs over the 24-well plates
Na kultiváciu a testovanie organizmu Myriophyllum spicatum sa odporúča použiť upravené Andrewsovo médium, ktoré je opísané v literatúre pod číslom (1).
Eggs are distributed to well plates in the following numbers (see also Appendix 4, Fig.
Upravené Andrewsovo médium sa vyrobí z piatich samostatne pripravených živných zásobných roztokov pridaním 3 % sacharózy.
1)
Podrobnosti o príprave média sú uvedené v dodatku 2.
20 eggs on one plate for each test concentration;
Na získanie testovacích roztokov je potrebné desaťnásobne koncentrované upravené Andrewsovo médium (príprava riedením podľa potreby).
20 eggs as solvent control on one plate (if necessary);
Zloženie tohto média je uvedené v dodatku 2.
20 eggs as positive control on one plate;
Testovacie roztoky sa zvyčajne pripravujú zriedením zásobného roztoku.
4 eggs in dilution water as internal plate control on each of the above plates;
Zásobné roztoky testovanej chemikálie sa spravidla pripravujú rozpustením chemikálie v demineralizovanej (teda destilovanej alebo deionizovanej) vode.
24 eggs in dilution water as negative control on one plate.
Pridanie živín sa dosiahne použitím desaťnásobne koncentrovaného upraveného Andrewsovho média.
Apical observations performed on each tested embryo include: coagulation of embryos, lack of somite formation, non-detachment of the tail, and lack of heartbeat (Table 1).
Zásobné roztoky testovanej chemikálie sa môžu sterilizovať v autokláve pri teplote 121 °C počas 20 minút alebo sterilnou filtráciou za predpokladu, že použitá metóda sterilizácie nevedie k denaturácii testovanej chemikálie.
These observations are used for the determination of lethality: Any positive outcome in one of these observations means that the zebrafish embryo is dead.
Testovacie roztoky sa môžu pripraviť aj v sterilnej demineralizovanej vode alebo médiu za sterilných podmienok.
Additionally, hatching is recorded in treatment and control groups on a daily basis starting from 48 hrs.
Pri výbere postupu sterilizácie zásobných roztokov testovanej chemikálie je nutné vziať do úvahy tepelnú stabilitu a adsorpciu na rôznych povrchoch.
Observations are recorded every 24 hrs, until the end of the test.
Z tohto dôvodu sa odporúča, aby sa zásobné roztoky pripravovali za sterilných podmienok, t. j. s použitím sterilného materiálu na rozpustenie testovanej chemikálie v sterilných podmienkach (napr. sterilizácia plameňom, odsávače s laminárnym prúdením atď.) v sterilnej vode.
Apical observations of acute toxicity in zebrafish embryos 24-96 hrs post fertilisation
Táto technika prípravy sterilných zásobných roztokov sa vzťahuje na látky i zmesi.
Exposure times
Najvyššia testovaná koncentrácia testovanej chemikálie by spravidla nemala byť vyššia ako jej rozpustnosť vo vode za podmienok testu.
24 hrs
Pre testované chemikálie s nízkou rozpustnosťou vo vode môže byť potrebné pripraviť koncentrovaný zásobný roztok alebo disperziu chemikálie s použitím organického rozpúšťadla alebo dispergantu, aby sa umožnilo pridanie presných množstiev testovanej chemikálie do testovacieho média a napomohlo sa jej rozptýlenie a rozpustenie.
48 hrs
Použitiu takýchto materiálov sa treba v maximálnej možnej miere vyhýbať.
72 hrs
Použitie pomocných rozpúšťadiel alebo dispergantov by nemalo viesť k žiadnej fytotoxicite.
96 hrs
Medzi bežne používané rozpúšťadlá, ktoré nespôsobujú fytotoxicitu pri koncentráciách do 100 μl/l, patrí napríklad acetón a dimetylformamid.
Coagulated embryos
Ak sa používa rozpúšťadlo alebo dispergant, jeho konečná koncentrácia sa musí zaznamenať a udržiavať na minime (≤ 100 μl/l), pričom by všetky ovplyvňované a kontrolné vzorky mali obsahovať rovnakú koncentráciu rozpúšťadla alebo dispergantu.
Lack of somite formation
Ďalšie informácie o použití dispergantov sú uvedené v literatúre pod číslom (5).
Non-detachment of the tail
Testovacie a kontrolné skupiny
Lack of heartbeat
Pri voľbe vhodných testovaných koncentrácií pomôžu predchádzajúce poznatky o toxicite testovanej chemikálie pre druh Myriophyllum spicatum z testu na vyhľadávanie rozsahu.
Coagulation of the embryo: Coagulated embryos are milky white and appear dark under the microscope (see Appendix 5, Fig.
V konečnom teste toxicity by spravidla malo byť päť (tak ako v teste inhibície rastu druhov rodu Lemna, kapitola C.26 tejto prílohy) až sedem testovaných koncentrácií usporiadaných v geometrickom rade.
1).
Mali by sa zvoliť tak, aby hodnoty NOEC a EC50 boli vnútri rozsahu koncentrácií (pozri ďalej).
The number of coagulated embryos is determined after 24, 48, 72 and 96 hrs.
Rozdeľovací koeficient medzi testovanými koncentráciami by podľa možnosti nemal byť vyšší ako 3,2, môže sa však použiť aj vyššia hodnota, ak je krivka závislosti veličiny od koncentrácie plochá.
Lack of somite formation: At 26 ± 1 °C, about 20 somites have formed after 24 hrs (see Appendix 5, Figure 2) in a normally developing zebrafish embryo.
Ak sa použije menej ako päť koncentrácií, je potrebné uviesť zdôvodnenie.
A normally developed embryo shows spontaneous movements (side-to-side contractions).
Pre každú testovanú koncentráciu by sa malo použiť najmenej päť replikátov.
Non-formation of somites after 24 hrs might be due to a general retardation of development.
Ak sa napríklad odhaduje hodnota EC50, najvyššia testovaná koncentrácia by mala byť vyššia ako hodnota EC50.
At latest after 48 hrs, the formation of somites should be developed.
Ak je hodnota EC50 mimo rozsahu testovaných koncentrácií, príslušné intervaly spoľahlivosti budú veľké a môže sa stať, že nebude možné správne posúdiť vhodnosť modelu na štatistické spracovanie.
If not, the embryos are considered dead.
Ak je cieľom odhad hodnôt LOEC/NOEC, najnižšia testovaná koncentrácia by mala byť dostatočne nízka na to, aby rast nebol významne nižší než v kontrole.
Non-detachment of the tail: In a normally developing zebrafish embryo, detachment of the tail (seeAppendix 5, Figure 3) from the yolk is observed following posterior elongation of the embryonic body.
Najvyššia testovaná koncentrácia by okrem toho mala byť dostatočne vysoká na to, aby bol rast významne nižší než v kontrole.
Absence of tail detachment is recorded after 24, 48, 72 and 96 hrs.
Ak to tak nie je, test sa bude musieť zopakovať s použitím iného rozsahu koncentrácií (pokiaľ najvyššia koncentrácia nie je na úrovni limitu rozpustnosti alebo najvyššieho požadovaného koncentračného limitu, napr. 100 mg/l).
Lack of heartbeat: In a normally developing zebrafish embryo at 26 ± 1 °C, the heartbeat is visible after 48 hrs (see Appendix 5, Figure 4).
Každý test by mal zahŕňať kontroly s rovnakým živným médiom, testovacím organizmom (výber čo najhomogénnejšieho rastlinného materiálu, čerstvé bočné vetvy z predkultúr skrátené na 2,5 cm od základne), podmienkami prostredia a postupmi ako v prípade testovacích nádob, ale bez testovanej chemikálie.
Particular care should be taken when recording this endpoint, since irregular (erratic) heartbeat should not be recorded as lethal.
Ak sa používa pomocné rozpúšťadlo alebo dispergant, mala by sa pridať ďalšia kontrola s aplikáciou rozpúšťadla/dispergantu v rovnakej koncentrácii ako v nádobách s testovanou chemikáliou.
Moreover, visible heartbeat without circulation in aorta abdominalis is considered non-lethal.
Počet replikátov kontrolných nádob (a v prípade potreby nádob s aplikáciou rozpúšťadla) by mal byť minimálne desať.
To record this endpoint, embryos showing no heartbeat should be observed under a minimum magnification of 80x for at least one minute.
Ak sa nevyžaduje stanovenie hodnoty NOEC, koncepcia testu sa môže upraviť tak, že sa zvýši počet koncentrácií a zníži počet replikátov na koncentráciu.
Absence of heartbeat is recorded after 48, 72 and 96 hrs.
Kontrolných replikátov by však v každom prípade malo byť aspoň desať.
Hatching rates of all treatment and control groups should be recorded from 48 hrs onwards and reported.
Expozícia
Although hatching is not an endpoint used for the calculation of the LC50, hatching ensures exposure of the embryo without a potential barrier function of the chorion, and as such may help data interpretation.
Čerstvé bočné vetvy z predkultúr skrátené na 2,5 cm od základne sa náhodne priradia do testovacích nádob za aseptických podmienok.
Detailed descriptions of the normal (35) and examples of abnormal development of zebrafish embryos are illustrated in Appendixes 3 and 5.
Každá testovacia nádoba by mala obsahovať jednu 2,5 cm bočnú vetvu s apikálnym meristémom na jednom konci.