natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The cultures and test vessels should not be kept together.
Poznámka: Ak je rastový model nevystavených organizmov exponenciálny, závisle premenné založené na výťažku sa budú s dĺžkou trvania testu znižovať.
This is best achieved using separate environmental growth chambers, incubators, or rooms.
UPRAVENÉ ANDREWSOVO MÉDIUM NA ZÁSOBNÚ KULTÚRU A PREDKULTÚRU
Illumination and temperature should be controllable and maintained at a constant level.
Z piatich samostatne pripravených živných zásobných roztokov sa pripraví upravené Andrewsovo médium potrebné na zásobnú kultúru a predkultúru pridaním 3 % sacharózy.
Myriophyllum spicatum — a submersed aquatic dicotyledon — is a species of the water milfoils family.
Zloženie Andrewsovho živného roztoku: (označenie ASTM E 1913-04)
Between June and August, inconspicuous pink-white flowers protrude above the water surface.
Výroba živných zásobných roztokov
The plants are rooted in the ground by a system of robust rhizomes and can be found in the entire northern hemisphere in eutrophic, however non-polluted and more calciferous still waters with muddy substrate.
Výroba živného roztoku
Myriophyllum spicatum prefers fresh water, but is found in brackish water as well.
Zásobný roztok
For the sediment-free toxicity test, sterile plants are required.
Počiatočná hmotnosť na 1000 ml
If the testing laboratory does not have regular cultures of Myriophyllum spicatum, sterile plant material may be obtained from another laboratory or (unsterile) plant material might be taken from the field or provided by a commercial supplier; if plants come from the field a taxonomic verification of the species should be envisaged.
ml na 5 l živného roztoku
If collected from the field or provided by a commercial supplier, plants should be sterilised (1) and maintained in culture in the same medium as used for testing for a minimum of eight weeks prior to use.
8,08 g
Field sites used for collecting starting cultures have to be free of obvious sources of contamination.
18,88 g
Great care should be taken to ensure that the correct species is obtained when collecting Myriophyllum spicatum from the field, especially in regions where it can hybridise with other Myriophyllum species.
9,86 g
If obtained from another laboratory they should be similarly maintained for a minimum of three weeks.
Pozri zásobný roztok 3.1 ďalej.
The source of plant material and the species used for testing should always be reported.
2,72 g
The quality and uniformity of the plants used for the test will have a significant influence on the outcome of the test and should therefore be selected with care.
Zásobné roztoky možno uchovávať v chladničke 6 mesiacov (pri teplote 5 – 10 °C).
Young, rapidly growing plants without visible lesions or discoloration (chlorosis) should be used.
Jedine zásobný roztok č. 5 má nižší čas použiteľnosti (dva mesiace).
Details about preparation of the test organism are given in Appendix 4.
Výroba zásobného roztoku 3.1 na prípravu zásobného roztoku 3
Cultivation
Počiatočná hmotnosť g/100 ml
To reduce the frequency of culture maintenance (e.g. when no Myriophyllum tests are planned for a period), cultures can be held under reduced illumination and temperature (50 μE m–2 s–1, 20 ± 2 °C).
Po vytvorení zásobného roztoku 3.1 (tabuľka 2) tento roztok hlboko zmrazte v alikvotných častiach po približne 11 ml (pri teplote aspoň – 18 °C).
Details of culturing are given in Appendix 3.
Hlboko zmrazené časti majú čas použiteľnosti päť rokov.
At least 14 to 21 days before testing, sufficient test organisms are transferred aseptically into fresh sterile medium and cultured for 14 to 21 days under the conditions of the test as a pre culture.
Na výrobu zásobného roztoku 3 rozmrazte zásobný roztok 3.1, prelejte z neho 10 ml do 1 l kalibrovanej odmernej banky a pridajte ultračistú vodu až po mierku banky.
Details for preparation of a pre-culture are given in Appendix 4.
Potom pridajte 150 g rozpustenej sacharózy (3 % na 5 l) a doplňte do kalibrovanej odmernej banky ultračistú vodu až po mierku.
Only one nutrient medium is recommended for Myriophyllum spicatum in a sediment-free test system, as described in Appendix 2.
Nakoniec sa živný roztok naplní do 1 l Schottových baniek a sterilizuje v autokláve pri teplote 121 °C počas 20 minút.
A modification of the Andrews' medium is recommended for culturing and testing with Myriophyllum spicatum as described in (1).
Takto získaný živný roztok možno uchovávať sterilný v chladničke (pri teplote 5 – 10 °C) tri mesiace.
From five separately prepared nutrient stock solutions with addition of 3 % sucrose the modified Andrews' medium will be arranged.
Upravené Andrewsovo médium na test toxicity v systéme bez sedimentu
Details about preparation of the medium are given in Appendix 2.
Z piatich živných zásobných roztokov uvedených v tabuľkách 1 a 2 sa pripraví desaťkrát koncentrované upravené Andrewsovo médium potrebné na získanie testovacích roztokov pridaním 30 % sacharózy.
A tenfold concentrated, modified Andrews' medium is needed for obtaining the test solutions (by dilution as appropriate).
Potom pridajte 30 % rozpustenú sacharózu (300 g na 1000 ml) a doplňte do kalibrovanej odmernej banky ultračistú vodu až po mierku.
The composition of this medium is given in Appendix 2.
Nakoniec sa živný roztok naplní do 0,5 l Schottových baniek a sterilizuje v autokláve pri teplote 121 °C počas 20 minút.
Test solutions are usually prepared by dilution of a stock solution.
Takto získaný desaťkrát koncentrovaný upravený živný roztok možno uchovávať sterilný v chladničke (pri teplote 5 – 10 °C) tri mesiace.
Stock solutions of the test chemical are normally prepared by dissolving the chemical in demineralised (i.e. distilled or deionised) water.
UDRŽIAVANIE ZÁSOBNEJ KULTÚRY
The addition of the nutrients will be achieved by using the tenfold concentrated, modified Andrews' medium.
V tomto dodatku 3 je opísaná zásobná kultúra druhu Myriophyllum spicatum L [1], ponorenej vodnej dvojklíčnolistovej rastliny z čeľade zrnulkovité.
The stock solutions of the test chemical can be sterilised by autoclave at 121 °C for 20 minutes or by sterile filtration, provided that the sterilisation technique used does not denaturise the test chemical.
Na zásobnú kultúru bez sedimentu v laboratórnych podmienkach sú potrebné sterilné rastliny.
Test solutions can also be prepared in sterile demineralised water or medium, under sterile conditions.
Sterilné rastliny sú k dispozícii od ekotoxikologického laboratória nemeckej Spolkovej agentúry pre životné prostredie (Umweltbundesamt).
The thermo-stability and the adsorption on different surfaces should the taken into account in the selection of the sterilisation procedure of the stock solutions of the test chemical.
Alternatívne možno testovacie organizmy pripraviť z nesterilných rastlín v súlade s označením ASTM E 1913-04.
Because of that, it is recommended that the stock solutions be prepared under sterile conditions, i.e. using sterile material for dissolving the test chemical under sterile conditions (e.g. flame sterilisation, laminar-flow hoods, etc.) into sterile water.
V ďalšej časti textu nájdete úryvok zo štandardného usmernenia ASTM s postupom kultivácie rastliny druhu Myriophyllum sibiricum nazbieranej v teréne:
This technique of preparation of sterile stock solutions is valid for both substances and mixtures.
Keďže upravené Andrewsovo médium obsahuje sacharózu (ktorá stimuluje rast plesní a baktérií), všetok materiál, roztoky a rastové médiá sa musia pripravovať v sterilných podmienkach.
The highest tested concentration of the test chemical should normally not exceed its water solubility under the test conditions.
Okrem toho sa bezprostredne pred použitím všetky banky, podnosy, misky atď. a iné vybavenie sterilizujú plameňom na sterilnej pracovnej ploche.
For test chemicals of low water solubility it may be necessary to prepare a concentrated stock solution or dispersion of the chemical using an organic solvent or dispersant in order to facilitate the addition of accurate quantities of the test chemical to the test medium and aid in its dispersion and dissolution.
Zásobné kultúry sa môžu uchovávať pri zníženom osvetlení a teplote (50 μE m– 2 s– 1, 20 ± 2 °C) aj počas dlhšieho obdobia bez toho, aby sa museli znova pripravovať.
Every effort should be made to avoid the use of such materials.
Rastové médium pre rastliny rodu Myriophyllum má byť rovnaké ako to, ktoré sa používa na testovanie, ale na zásobné kultúry sa môžu použiť aj iné médiá bohaté na živiny.
There should be no phytotoxicity resulting from the use of auxiliary solvents or dispersants.
Segmenty rastliny sa rozložia axenicky do niekoľkých 500 ml Erlenmeyerových baniek naplnených 450 ml upraveného Andrewsovho média, resp. a/alebo 2000 ml Fernbachových baniek naplnených 1000 ml upraveného Andrewsovho média.
For example, commonly used solvents which do not cause phytotoxicity at concentrations up to 100 μl/l, include acetone and dimethylformamide.
Banky sa potom axenicky uzatvoria celulózovou zátkou.
If a solvent or dispersant is used, its final concentration should be reported and kept to a minimum (≤ 100 μl/l), and all treatments and controls should contain the same concentration of solvent or dispersant.
Okrem toho je bezprostredne pred použitím absolútne nevyhnutné vybavenie dôkladne sterilizovať plameňom na sterilnej pracovnej ploche.
Further guidance on the use of dispersants is given in (5).
V závislosti od počtu a veľkosti sa rastliny premiestňujú do čerstvého živného roztoku približne každé tri týždne.
Test and control groups
Na túto obnovenú kultúru možno použiť vrcholy i segmenty strednej časti stonky.
Prior knowledge of the toxicity of the test chemical to Myriophyllum spicatum from a range-finding test will help in selecting suitable test concentrations.
Počet a veľkosť premiestnených rastlín (alebo segmentov rastlín) závisia od toho, koľko rastlín je potrebných.
In the definitive toxicity test, there should normally be five (like in the Lemna growth inhibition test, Chapter C.26 of this Annex) to seven test concentrations arranged in a geometric series; they should be chosen in order that the NOEC and EC50 values are bracketed by the concentration range (see below).
Môžete napríklad preniesť päť segmentov výhonku do jednej Fernbachovej banky a tri segmenty výhonku do jednej Erlenmeyerovej banky, každý s dĺžkou 5 cm.
Preferably the separation factor between test concentrations should not exceed 3,2; however, a larger value may be used where the concentration-response curve is flat.
Všetky časti s koreňmi, kvitnúce, mŕtve alebo inak podozrivé časti zlikvidujte.
Justification should be provided when fewer than five concentrations are used.
Narezanie rastlín na zásobnú kultúru a predkultúru po 3 týždňoch kultivácie.
At least five replicates should be used at each test concentration.
odpad
In setting the range of test concentrations (for range-finding and/or for the definitive toxicity test), the following should be considered:
predkultúra
To determine an ECx, test concentrations should bracket the ECx value to ensure an appropriate level of confidence.
zásobná kultúra
For example, if estimating the EC50, the highest test concentration should be greater than the EC50 value.
Kultivácia rastlín sa má vykonať v 500 ml Erlenmeyerových bankách a 2000 ml Fernbachových bankách v chladiacom inkubátore pri teplote 20 ± 2 °C s nepretržitým svetlom s intenzitou približne 100 – 150 μE m– 2 s– 1 alebo 6000 – 9000 luxov (vyžarovaným osvetlením komory s teplotou farby „teplé biele svetlo“).
If the EC50 value lies outside of the range of test concentrations, associated confidence intervals will be large and a proper assessment of the statistical fit of the model may not be possible.
Kultivácia rastlín v chladiacom inkubátore s osvetlením komory.
If the aim is to estimate the LOEC/NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that growth is not significantly less than that of the control.
Mali by sa použiť chemicky čisté (umyté v kyseline) a sterilné sklenené kultivačné nádoby a techniky aseptickej manipulácie.
In addition, the highest test concentration should be high enough so that growth is significantly lower than that in the control.
V prípade kontaminácie zásobnej kultúry, napr. riasami, plesňami a/alebo baktériami, by sa mala pripraviť nová kultúra alebo by sa na obnovu danej kultúry mala použiť zásobná kultúra z iného laboratória.
If this is not the case, the test will have to be repeated using a different concentration range (unless the highest concentration is at the limit of solubility or the maximum required limit concentration, e.g. 100 mg/l).
Carl von Linné (* 23. mája 1707, Råshult /Älmhult; † 10. januára1778, Uppsala).
Every test should include controls consisting of the same nutrient medium, test organism (choosing plant material as homogeneous as possible, fresh lateral branches from pre-cultures, shortened to 2,5 cm from base), environmental conditions and procedures as the test vessels but without the test chemical.
UDRŽIAVANIE PREDKULTÚRY A PRÍPRAVA TESTOVACIEHO ORGANIZMU NA TESTOVANIE
If an auxiliary solvent or dispersant is used, an additional control treatment with the solvent/dispersant present at the same concentration as that in the vessels with the test chemical should be included.
Na získanie predkultúry narežte výhonky zo zásobnej kultúry na segmenty po dvoch praslenoch a vložte segmenty do Fernbachových baniek naplnených upraveným Andrewsovým médiom (s 3 % sacharózou).
The number of replicate control vessels (and solvent vessels, if applicable) should be at least ten.
Každá banka môže obsahovať až 50 segmentov výhonkov.
If determination of NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Treba však dbať na to, aby segmenty boli životaschopné a nemali žiadne korene a bočné vetvy ani ich pupene (pozri obrázok 1 v dodatku 3).
However, in any case the number of control replicates should be at least ten.
Organizmy v predkultúre sa kultivujú 14 až 21 dní v sterilných podmienkach v environmentálnej komore so striedavými fázami svetla/tmy 16/8 hodín.
Exposure
Intenzita svetla má byť v rozsahu 100 – 150 μE m– 2 s– 1.
Fresh lateral branches from pre-culture shortened to 2,5 cm from base are assigned randomly to the test vessels under aseptic conditions; each test vessel should contain one 2,5 cm lateral branch that should have an apical meristem on one end.
Keďže upravené Andrewsovo médium obsahuje sacharózu (ktorá stimuluje rast rias, plesní a baktérií), roztoky testovanej chemikálie by sa mali pripravovať a kultivovať v sterilných podmienkach.
A randomised design for location of the test vessels in the incubator is required to minimise the influence of spatial differences in light intensity or temperature.
Okrem toho sa bezprostredne pred použitím všetky banky, podnosy, misky atď. a iné vybavenie sterilizujú plameňom na sterilnej pracovnej ploche.
A blocked design or random repositioning of the vessels (or repositioning more frequently) when observations are made is also required.
Výhonky sa axenicky vyberú z baniek s predkultúrou, pričom sa vyberie materiál, ktorý je čo najhomogénnejší.
If a preliminary stability test shows that the test chemical concentration cannot be maintained (i.e. the measured concentration falls below 80 % of the measured initial concentration) over the test duration (14 days), a semi-static test regime is recommended.
Každé testovanie si vyžaduje aspoň 60 testovacích organizmov (testovanie s ôsmimi koncentráciami testovanej chemikálie).
In this case, the plants should be exposed to freshly prepared test and control solutions on at least one occasion during the test (e.g. day 7).
Na testovanie vyberte z predkultúr čerstvé bočné vetvy, skráťte ich na 2,5 cm od základne (merané pomocou pravítka) a preneste ich do kadičky obsahujúcej sterilné upravené Andrewsovo médium.
The exposure scenario through a foliar application (spray) is not covered in this test method.
Narezanie rastlín z predkultúry na účely testu toxicity pre Myriophyllum spicatum v systéme bez sedimentu.
The method of light detection and measurement, in particular the type of sensor, will affect the measured value.
čerstvé bočné vetvy na test
The temperature in the test vessels should be 23 ± 2 °C.
Táto testovacia metóda je rovnocenná s usmernením OECD na vykonávanie testov (TG) 239 (2014).
The test is terminated 14 days after the plants are transferred into the test vessels.
V niektorých prípadoch však môžu byť potrebné údaje o ďalších makrofytných druhoch.
Measurements and analytical determinations
V najnovšom usmernení uverejnenom zo semináru o posúdení rizík pesticídov pre vodné makrofyty (Aquatic Macrophyte Risk Assessment for Pesticides – AMRAP) Spoločnosti pre environmentálnu toxikológiu a chémiu (Society of Environmental Toxicology and Chemistry – SETAC) sa navrhlo, aby v prípade, že je známe, že druhy rodu Lemna a riasy nie sú citlivé na spôsob účinku testovaných chemikálií, alebo ak existujú obavy z rozdeľovania do sedimentu vedúcemu k expozícii prostredníctvom koreňovej absorpcie, bolo možné vyžadovať údaje pre zakorenené druhy makrofytov (3).
The main shoot length of test organism appearing normal or abnormal needs to be determined at the beginning of the test, at least once during the 14-day exposure period and at test termination.
Testovacia metóda v systéme voda – sediment pre druh Myriophyllum spicatum dopĺňa test toxicity pre Myriophyllum spicatum v systéme bez sedimentu (7).
Note: As an alternative for those who do not have image analysis, if the workbench is sterilised prior to addition of plants to test vessels, a sterile ruler can also be used to measure the length of the main shoot at test initiation and during the test.
V tomto dokumente sa opisuje testovacia metóda, ktorá umožňuje vyhodnotiť účinky testovanej chemikálie na zakorenený vodný rastlinný druh Myriophyllum spicatum rastúci v systéme voda – sediment.
Significant features of the test medium (e.g. presence of undissolved material, growth of algae, fungi and bacteria in the test vessel) should also be noted.
Metóda voda – sediment bola validovaná medzinárodným kruhovým testom vykonaným na druhoch rodu Myriophyllum pestovaných v statických podmienkach, ktoré boli vystavené testovanej chemikálii aplikovanej prostredníctvom vodného stĺpca (9).
In addition to determinations of main shoot length during the test, effects of the test chemical on three (or more) of the following measurement variables should be also assessed:
Testovací systém sa však ľahko prispôsobí tak, aby umožnil expozíciu prostredníctvom obohateného sedimentu alebo expozíciu prostredníctvom vodnej fázy v polostatických scenároch alebo scenároch s pulzujúcim dávkovaním, hoci tieto scenáre neboli formálne podrobené kruhovému testu.
Total lateral branches length
Okrem toho možno použiť všeobecnú metódu pre iné zakorenené, ponorené a emerzné druhy vrátane iných druhov rodu Myriophyllum (napr. Myriophyllum aquaticum) a druhu Glyceria maxima (10).
Total shoot length
V prípade alternatívnych druhov môžu byť potrebné úpravy testovacích podmienok, koncepcie a trvania testu.
Total root length
Predovšetkým je potrebné lepšie vymedziť vhodné postupy pre druh Myriophyllum aquaticum.
Fresh weight
Tieto možnosti nie sú podrobne opísané v tejto testovacej metóde, v ktorej sa opisuje štandardný prístup expozície druhu Myriophyllum spicatum v statickom systéme prostredníctvom vodnej fázy.
Dry weight
Táto testovacia metóda sa vzťahuje na látky, pre ktoré bola táto testovacia metóda validovaná [pozri podrobnosti v správe o kruhovom teste (9)], alebo na prípravky alebo známe zmesi.
Number of whorls
Test na druhoch rodu Myriophyllum možno vykonať na splnenie požiadavky na údaje stupňa 1, ktorá vyplýva z potenciálu testovanej chemikálie oddeľovať sa do sedimentu alebo zo spôsobu účinku/problémov so selektívnosťou.
Note 1:
Laboratórny test na druhoch rodu Myriophyllum sa môže vyžadovať aj ako súčasť stratégie vyššieho stupňa na riešenie obáv v súvislosti s rizikom pre vodné rastliny.
The observations made during the range-finding test could help in selecting relevant additional measurements among the six variables listed above.
Od konkrétneho dôvodu na vykonanie testu bude závisieť spôsob expozície (t. j. prostredníctvom vody alebo sedimentu).
Note 2:
Pred použitím tejto testovacej metódy na testovanie zmesi na regulačné účely by sa malo posúdiť, či môže poskytnúť primerané výsledky na tieto účely, a ak áno, je nutné to zdôvodniť.
The determination of the fresh and dry weights (parameters iv and v) is highly desirable.
Test je určený na vyhodnotenie účinkov chemikálií na vegetatívny rast rastlín rodu Myriophyllum rastúcich v štandardizovanom médiu (voda, sediment a živiny).
Note 3:
Na tieto účely sa vrcholy výhonkov zdravých nekvitnúcich rastlín zasadia do štandardizovaného umelého sedimentu, do ktorého sa doplnia ďalšie živiny na zabezpečenie primeraného rastu rastlín, a potom sa udržiavajú v Smartovom a Barkovom médiu (dodatok 1).
Due to the fact that sucrose and light (exposure of roots to light during the test) may have an influence on auxin (plant growth hormone) transport carriers, and that some chemicals may have an auxin-type mode of action, the inclusion of root endpoints (parameter iii) is questionable.
Po období založenia, počas ktorého sa vytvorí koreň, sa rastliny vystavia sérii testovaných koncentrácií pridaných do vodného stĺpca.
Note 4:
Alternatívne možno simulovať expozíciu prostredníctvom sedimentu obohatením umelého sedimentu testovanou chemikáliou a presadením rastlín do tohto obohateného sedimentu.
The ring test results show high coefficients of variation (> 60 %) for the total lateral branch length (parameter i).
V oboch prípadoch sa rastliny následne udržiavajú v kontrolovaných podmienkach prostredia počas 14 dní.
Total lateral branch length is in any case encompassed within the total shoot length measurement (parameter ii) which shows more acceptable coefficients of variation of < 30 %.
Účinky na rast sa stanovia z kvantitatívneho vyhodnotenia dĺžky, čerstvej hmotnosti a suchej hmotnosti výhonku, ako aj z kvalitatívnych pozorovaní príznakov, ako je chloróza, nekróza a deformity rastu.
Note 5:
Na kvantifikovanie účinkov súvisiacich s chemikáliou sa rast v testovacích roztokoch porovnáva s rastom v kontrolách a stanoví sa koncentrácia spôsobujúca špecifickú x % inhibíciu rastu, ktorá sa vyjadrí ako ECx, pričom „x“ môže mať akúkoľvek hodnotu v závislosti od regulačných požiadaviek, napr. EC10, EC20, EC50.
Resulting from the above considerations, the recommended main measurement endpoints are: total shoot length, fresh weight and dry weight (parameters ii, iv and v); parameter vi — number of whorls — is left to the experimenter's judgment.
Stanovuje sa priemerná špecifická rýchlosť rastu (odhadnutá z vyhodnotenia dĺžky výhonku, čerstvej hmotnosti výhonku a suchej hmotnosti výhonku) a výťažok (odhadnutý z nárastu dĺžky výhonku, čerstvej hmotnosti výhonku a zo suchej hmotnosti výhonku) pre ošetrené a neošetrené rastliny.
Main shoot length and number of whorls have an advantage, in that they can be determined for each test and control vessel at the start, during, and at the end of the test by photography and image analysis, although a (sterile) ruler can also be used.
Ak je to potrebné, z odhadov priemernej špecifickej rýchlosti rastu a výťažku je možné štatisticky stanoviť najnižšiu koncentráciu s pozorovaným účinkom (LOEC) a koncentráciu bez pozorovaného účinku (NOEC).
Total lateral branches length, total root length (as a sum of all lateral branches or roots) and total shoot length (as a sum of main shoot length and total lateral branches length) can be measured with a ruler at the end of exposure.
Na kvantifikáciu chemikálií v testovacom médiu by mala byť k dispozícii analytická metóda s vhodnou citlivosťou.