natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This SOP covers the measurement of processes on the first fin ray (the fin ray number refers to the order from the posterior end of the anal fin in this SOP).
Potrebné je nastaviť optimálnu rýchlosť filtrácie.
RECOMMENDED PROCEDURES FOR SAMPLE COLLECTION FOR VITELLOGENIN ANALYSIS
Nadmerná rýchlosť filtrácie môže vodu výrazne znehodnotiť, takže sa jej treba vyhnúť.
Care should be taken to avoid cross-contamination between VTG samples of males and females.
Podmienky kŕmenia sú uvedené v dodatku 2.
Procedure 1A:
Treba sa vyhnúť nadmernému kŕmeniu, pravidelne by sa mala monitorovať kvalita vody a čistota akvárií a v prípade potreby je potrebné obnoviť pôvodný stav.
Fathead Minnow, Blood Collection from the Caudal Vein/Artery
Preukázanie odbornosti
After anaesthetisation, the caudal peduncle is partially severed with a scalpel blade and blood is collected from the caudal vein/artery with a heparinised microhematocrit capillary tube.
Referenčná chemikália 3,4-dichlóranilín [použitá vo validačných štúdiách (1)(2)] by sa mala podľa možnosti dvakrát ročne otestovať v celom rozsahu reakcie na koncentráciu s cieľom overiť citlivosť použitého kmeňa rýb.
After the blood has been collected, the plasma is quickly isolated by centrifugation for 3 min at 15000 g (or alternatively for 10 min. at 15000 g at 4 °C).
V každom laboratóriu, ktoré prvýkrát zavádza túto skúšku, by sa mala použiť referenčná chemikália.
If desired, percent haematocrit can be determined following centrifugation.
Predtým, ako laboratórium predloží údaje na regulačné účely, môže použiť túto chemikáliu na preukázanie svojej technickej spôsobilosti na vykonávanie tejto skúšky.
The plasma portion is then removed from the microhematocrit tube and stored in a centrifuge tube with 0,13 units of aprotinin (a protease inhibitor) at – 80 °C until determination of VTG can be made.
Produkcia vajíčok
Depending on the size of the fathead minnow (which is sex-dependent), collectable plasma volumes generally range from 5 to 60 microliters per fish (Jensen et al.
Vajíčka dania pruhovaného možno produkovať metódou trenia v jednotlivých skupinách (v individuálnych trecích nádržiach) alebo masového trenia (v chovných nádržiach).
2001).
V prípade trenia v skupinách sa samce a samice (napr. v pomere 2:1) v neresiacej sa skupine umiestnia v deň pred testom (pred začiatkom súmraku) na niekoľko hodín do trecích nádrží.
Procedure 1B:
Keďže v skupinách dania pruhovaného určených na trenie občas nemusí dôjsť k treniu, odporúča sa súbežne použiť aspoň tri trecie nádrže.
Fathead Minnow, Blood Collection from Heart
S cieľom zabrániť genetickému skresleniu sa odoberú vajíčka od najmenej troch neresiacich sa skupín, následne sa zmiešajú a náhodne vyberú na test.
Alternatively, blood may also be collected by cardiac puncture using a heparinised syringe (1000 units of heparin per ml).
Ak sa to bude považovať za potrebné, k situ sa ako podnet k treniu môžu pripevniť umelé rastliny vyrobené z inertného materiálu (napr. z plastu alebo zo skla) (3)(4)(5)(23)(35).
The blood is transferred into Eppendorf tubes (held on ice) and then centrifuged (5 min, 7000 g, room temperature).
Mali by sa použiť vhodne upravené plastové materiály, ktoré sa nevylúhujú (napr. ftaláty).
The plasma should be transferred into clean Eppendorf tubes (in aliquots if the volume of plasma makes this feasible) and promptly frozen at – 80 °C, until analysed (Panter et al., 1998).
K páreniu, treniu a oplodneniu dochádza do 30 minút od začiatku svitania, potom možno zachytávače vajíčok so zachytenými vajíčkami opatrne odobrať.
Procedure 2A:
Odporúča sa vajíčka po odbere zo zachytávačov vajíčok prepláchnuť rekonštituovanou vodou.
Japanese Medaka, Excision of the Liver in Medaka
Diferenciácia vajíčok
Removal of the test fish from the test chamber
Pri teplote 26 °C prejdú oplodnené vajíčka prvým ryhovaním po približne 15 minútach, pričom následnými synchrónnymi ryhovaniami sa vytvoria blastoméry so 4, 8, 16 a 32 bunkami (pozri dodatok 3) (35).
Test fish should be removed from the test chamber using the small spoon-net.
V týchto fázach možno oplodnené vajíčka jasne identifikovať podľa vývinu blastuly
Be careful not to drop the test fish into other test chambers.
Dvadsať embryí na koncentráciu (jedno embryo na jamku) sa vystaví pôsobeniu testovanej chemikálie.
In principle, the test fish should be removed in the following order: control, solvent control (where appropriate), lowest concentration, middle concentration, highest concentration and positive control.
Expozícia by mala byť taká, že sa počas celého testu udrží ± 20 % nominálnej koncentrácie chemikálie.
In addition, all males should be removed from one test chamber before the remaining females are removed.
Ak to nie je možné dosiahnuť v statickom systéme, treba použiť polostatické obnovovanie so zvládnuteľným intervalom (napr. obnovenie každých 24 hodín).
The sex of each test fish is identified on the basis of external secondary sex characteristics (e.g. the shape of the anal fin).
V týchto prípadoch sa expozičné koncentrácie musia overiť minimálne pri najvyššej a najnižšej testovanej koncentrácii na začiatku a konci každého intervalu expozície (pozri bod 36).
Place the test fish in a container for transport and carry it to the workstation for excision of the liver.
Ak nie je možné udržať expozičnú koncentráciu ± 20 % nominálnej koncentrácie, na začiatku a konci každého intervalu expozície sa musia merať všetky koncentrácie (pozri bod 36).
If the sex cannot be identified by the fish's external appearance, remove all fish from the test chamber.
Koncepciu testu možno prispôsobiť tak, aby spĺňala požiadavky na testovanie konkrétnych látok [napr. prietokové systémy (24) alebo systémy s pasívnym dávkovaním (25) v prípade ľahko degradovateľných alebo vysokoadsorpčných látok (29), alebo iné systémy v prípade prchavých látok (36)(37)].
In this case, the sex should be identified by observing the gonad or secondary sex characteristics under a stereoscopic microscope.
V každom prípade treba dbať na minimalizovanie akéhokoľvek stresu embryí.
Excision of the liver
Testovacie komory by sa aspoň počas 24 hodín pred začatím testu mali ošetriť testovacími roztokmi.
Transfer the test fish from the container for transport to the anaesthetic solution using the small spoon-net.
Podmienky testu sú zhrnuté v dodatku 2.
After the test fish is anesthetised, transfer the test fish on the filter paper (or a paper towel) using tweezers (commodity type).
Na splnenie štatistických požiadaviek je zvyčajne potrebných päť koncentrácií testovanej chemikálie s odstupom s konštantným faktorom nepresahujúcim 2,2.
When grasping the test fish, apply the tweezers to the sides of the head to prevent breaking the tail.
Ak sa použije menej ako päť koncentrácií, je potrebné uviesť zdôvodnenie.
Wipe the water on the surface of the test fish on the filter paper (or the paper towel).
Najvyššia testovaná koncentrácia by ideálne mala vyvolať 100 % letalitu a najnižšia testovaná koncentrácia by ideálne nemala mať žiadne pozorovateľné účinky, ako je uvedené v bode 28.
Then make a small transverse incision partway between the ventral neck region and the mid-abdominal region using dissection scissors.
Test na vyhľadávanie rozsahu vykonaný pred konečným testom umožní vybrať vhodný rozsah koncentrácie.
Insert the dissection scissors into the small incision, and incise the abdomen from a point caudal to the branchial mantle to the cranial side of the anus along the midline of the abdomen.
Vyhľadávanie rozsahu sa zvyčajne vykonáva s použitím desiatich embryí na koncentráciu.
Be careful not to insert the dissection scissors too deeply so as to avoid damaging the liver and gonad.
Nasledujúce pokyny sa vzťahujú na vykonanie testu na 24-jamkových platničkách.
Conduct the following operations under the stereoscopic microscope.
Ak sa použijú odlišné testovacie komory (napr. malé Petriho misky) alebo ak sa testuje viac koncentrácií, pokyny sa musia príslušne upraviť.
Place the test fish abdomen side up on the paper towel (glass Petri dish or slide glass are also available).
Podrobnosti a obrazové pokyny na rozmiestnenie koncentrácií na 24-jamkových platničkách sú uvedené v bode 27 a v dodatku 4, obrázok 1.
Extend the walls of the abdominal cavity with precision tweezers and exteriorise the internal organs.
Kontrolné skupiny udržiavané vo vode na riedenie sú potrebné ako negatívne kontroly, ako aj vnútorné kontroly platničiek.
It is also acceptable to exteriorise the internal organs by removing one side of the wall of the abdominal cavity if necessary.
Ak sa v rámci vnútornej kontroly platničky pozoruje viac ako 1 mŕtve embryo, platnička sa vylúči, čím sa zníži počet koncentrácií použitých na určenie hodnoty LC50.
Expose the connected portion of the liver and gallbladder using another pair of precision tweezers.
Ak sa vylúči celá platnička, môže sa znížiť schopnosť vyhodnotiť a rozpoznať pozorované účinky, najmä ak sa vylúči tá platnička, ktorá slúži na kontrolu s aplikáciou rozpúšťadla, alebo platnička, na ktorej sú zároveň postihnuté embryá ovplyvnené chemikáliou.
Then grasp the bile duct and cut off the gallbladder.
V prvom prípade je nutné test zopakovať.
Grasp the oesophagus and excise the gastrointestinal tract from the liver in the same way.
Vykoná sa pozitívna kontrola pri pevnej koncentrácii 4 mg/l 3,4-dichlóranilínu s každou vzorkou vajíčok použitou na testovanie.
Be careful not to leak the contents of the gastrointestinal tract.
Ak sa používa rozpúšťadlo, na samostatnej 24-jamkovej platničke sa rozpúšťadlu vystaví doplnková skupina 20 embryí, ktorá predstavuje kontrolu s aplikáciou rozpúšťadla.
Excise the caudal gastrointestinal tract from the anus and remove the tract from the abdominal cavity.
Na to, aby sa test mohol považovať za prijateľný, by sa malo sa preukázať, že rozpúšťadlo nemá žiadny významný vplyv na čas liahnutia ani prežitie, a nespôsobuje ani iné nepriaznivé účinky na embryá (pozri bod 8c).
Trim the mass of fat and other tissues from the periphery of the liver.
Začiatok expozície a trvanie testu
Using the precision tweezers, remove any additional fat and extraneous tissue (e.g. abdominal lining), if needed, from the surface of the liver.
Životaschopné oplodnené vajíčka by sa mali oddeliť od neoplodnených vajíčok a preniesť na 24-jamkové platničky, ktoré sa predtým 24 hodín pripravovali v podmienkach testu.
Record the value on the worksheet (read: 0,1 mg).
Prostredníctvom stereomikroskopie (podľa možnosti ≥ 30-násobné zväčšenie) sa vyberú oplodnené vajíčka, v ktorých prebieha ryhovanie a ktoré počas ryhovania nevykazujú žiadne zjavné nepravidelnosti (napr. asymetriu, tvorbu vačkov) ani poškodenia choriónu.
Confirm the identification information on the microtube label.
Informácie o zbere a oddeľovaní vajíčok nájdete v dodatku 3, obr. 1 a 3 a v dodatku 4, obr. 2.
Close the cap of the microtube containing the liver.
Rozloženie vajíčok na 24-jamkových platničkách
Store it in a cooling rack (or ice rack).
Vajíčka sa rozložia na jamkové platničky v týchto počtoch (pozri aj dodatok 4, obr. 1):
Following the excision of one liver, clean the dissection instruments or replace them with clean ones.
20 vajíčok na jednu platničku pre každú testovanú koncentráciu,
After the livers have been excised from all of the fish in the transport container (i.e., all males or females in a test chamber), place all liver specimens in a tube rack with a label for identification and store it in a freezer.
20 vajíčok na jednu platničku ako pozitívna kontrola,
When the livers are donated for pre-treatment shortly after the excision, the specimens are carried to the next workstation in a cooling rack (or ice rack).
4 vajíčka vo vode na riedenie ako vnútorná kontrola platničky na každú z uvedených platničiek,
Following liver excision, the fish carcass is available for gonad histology and measurement of secondary sex characteristics.
24 vajíčok vo vode na riedenie na jednu platničku ako negatívna kontrola.
Specimen
Koncové pozorovania každého testovaného embrya zahŕňajú koaguláciu embryí, nevytvorenie somitov, neoddelenie chvosta a neprítomnosť srdcového tepu (tabuľka 1).
Store the liver specimens taken from the test fish at ≤ – 70 °C if they are not used for the pre-treatment shortly after the excision.
Tieto pozorovania slúžia na stanovenie letality: každý kladný výsledok jedného z týchto pozorovaní znamená, že embryo dania pruhovaného je mŕtve.
A cut is made just anterior to pectoral fins with scissors
Okrem toho sa každý deň od 48. hodiny zaznamenáva liahnutie v ovplyvňovaných i kontrolných skupinách.
The midline of abdomen is incised with scissors to a point approximately 2 mm cranial to the anus
Pozorovania sa zaznamenávajú každých 24 hodín až do konca testu.
The abdominal walls are spread with forceps for exposure of the liver and other internal organs
Koncové pozorovania akútnej toxicity u embryí dania pruhovaného 24 – 96 hodín po oplodnení
(Alternatively, the abdominal walls may be pinned laterally).
Časy expozície
Arrow shows liver
24 hod.
The liver is bluntly dissected and excised using forceps
48 hod.
Figure 5
72 hod.
The intestines are gently retracted using forceps
96 hod.
Figure 6
Koagulované embryá
Both ends of the intestines and any mesenteric attachments are severed using scissors
Nevytvorenie somitov
Figure 7 (female)
Neoddelenie chvostového pupeňa pri pohľade zboku
The procedure is identical for the female
Neprítomnosť srdcového tepu
Figure 8
Koagulácia embrya: Koagulované embryá sú mliečnobiele a pod mikroskopom vyzerajú tmavé (pozri dodatok 5, obr. 1).
The completed procedure
Počet koagulovaných embryí sa stanovuje po 24, 48, 72 a 96 hodinách.
Procedure 2 B:
Nevytvorenie somitov: Pri teplote 26 ± 1 °C sa u normálne sa vyvíjajúceho embrya dania pruhovaného vytvorí po 24 hodinách približne 20 somitov (pozri dodatok 5, obrázok 2).
Japanese Medaka (Oryzias latipes), Liver Pre-treatment for Vitellogenin Analysis
Normálne vyvinuté embryo vykazuje spontánne pohyby (kontrakcie zo strany na stranu).
Take the bottle of homogenate buffer from the ELISA kit and cool it with crushed ice (temperature of the solution: ≤ 4°C).
Spontánne pohyby nasvedčujú vytvoreniu somitov.
If homogenate buffer from EnBio ELISA system is used, thaw the solution at room temperature, and then cool the bottle with crushed ice.
Neprítomnosť somitov sa zaznamenáva po 24, 48, 72 a 96 hodinách.
Calculate the volume of homogenate buffer for the liver on the basis of its weight (add 50 μl of homogenate buffer per mg liver weight).
Nevytvorenie somitov po 24 hodinách môže byť dôsledkom celkového oneskorenia vývinu.
For example, if the weight of the liver is 4,5 mg, the volume of homogenate buffer for the liver is 225 μl.
Somity by mali byť vyvinuté najneskôr po 48 hodinách.
Prepare a list of the volume of homogenate buffer for all livers.
Ak nie, embryá sa považujú za mŕtve.
Preparation of the liver for pre-treatment
Neoddelenie chvosta: U normálne sa vyvíjajúceho embrya dania pruhovaného sa oddelenie chvosta (pozri dodatok 5, obrázok 3) od žĺtka pozoruje po posteriórnom predĺžení tela embrya.
Take the 1,5 ml microtube containing the liver from the freezer just before the pre-treatment.
Neprítomnosť oddelenia chvosta sa zaznamenáva po 24, 48, 72 a 96 hodinách.
Pre-treatment of the liver from males should be performed before females to prevent vitellogenin contamination.
Neprítomnosť srdcového tepu: U normálne sa vyvíjajúceho embrya dania pruhovaného je pri teplote 26 ± 1 °C srdcový tep viditeľný po 48 hodinách (pozri dodatok 5, obrázok 4).
In addition, the pre-treatment for test groups should be conducted in the following order: control, solvent control (where appropriate), lowest concentration, middle concentration, highest concentration and positive control.
Pri zaznamenávaní tohto sledovaného parametra je potrebná mimoriadna obozretnosť, lebo nepravidelný (eratický) srdcový tep by sa nemal zaznamenať ako letálny.
The number of 1,5 ml microtubes containing liver samples taken from the freezer at a given time should not exceed the number that can be centrifuged at that time.
Okrem toho sa za letálny nepovažuje viditeľný srdcový tep bez obehu v brušnej aorte.
Arrange the 1,5 ml microtubes containing liver samples in the order of specimen number on the ice rack (no need to thaw the liver).
Na zaznamenanie tohto sledovaného parametra by sa embryá bez srdcového tepu mali pozorovať pri aspoň 80-násobnom zväčšení aspoň jednu minútu.
Operation of the pre-treatment
Neprítomnosť srdcového tepu sa zaznamenáva po 48, 72 a 96 hodinách.
Addition of the homogenate buffer
Vo všetkých ovplyvňovaných a kontrolných skupinách by sa mala od 48. hodiny zaznamenávať a uvádzať miera liahnutia.
Check the list for the volume of the homogenate buffer to be used for a particular sample of liver and adjust the micropipette (volume range: 100-1000 μl) to the appropriate volume.
Hoci liahnutie nie je finálnym parametrom použitým na výpočet hodnoty LC50, vyliahnutím sa zabezpečí expozícia embrya bez potenciálnej bariérovej funkcie choriónu, čo môže pomôcť pri výklade údajov.
Attach a clean tip to the micropipette.
Podrobný opis normálneho vývinu (35) a príklady abnormálneho vývinu embryí dania pruhovaného sú znázornené v dodatkoch 3 a 5.
Take the homogenate buffer from the reagent bottle and add the buffer to the 1,5 ml microtube containing the liver.
Analytické merania
Add the homogenate buffer to all of 1,5 ml microtubes containing the liver according to the procedure described above.
Na začiatku a na konci testu sa odmeria pH, celková tvrdosť a vodivosť v kontrole (kontrolách) a pri najvyššej koncentrácii testovanej chemikálie.
There is no need to change the micropipette tip to a new one.
V polostatických obnovovacích systémoch by sa hodnota pH mala odmerať pred obnovením vody a po ňom.
However, if the tip is contaminated or suspected to be contaminated, the tip should be changed.
Koncentrácia rozpusteného kyslíka sa meria na konci testu v negatívnych kontrolách a v skupine s najvyššou testovanou koncentráciou so životaschopnými embryami, kde by mala byť v súlade s validačnými kritériami testu (pozri bod 8f).
Homogenisation of the liver
Ak existuje obava, že medzi rôznymi 24-jamkovými platničkami sa líši teplota, odmeria sa v troch náhodne vybraných nádobách.
Attach a new pestle for homogenisation to the microtube homogeniser.
Teplota sa má ideálne zaznamenávať nepretržite počas testu alebo aspoň raz denne.
Insert the pestle into the 1,5 ml microtube.
V statickom systéme by sa koncentrácia testovanej chemikálie mala merať aspoň v skupine s najvyššou a najnižšou testovanou koncentráciou, ale ideálne vo všetkých ovplyvňovaných skupinách, a to na začiatku a konci testu.
Hold the microtube homogeniser to press the liver between the surface of the pestle and the inner wall of the 1,5 ml microtube.
V polostatických (obnovovacích) testoch, kde sa očakáva, že koncentrácia testovanej chemikálie zostane v rozmedzí ± 20 % nominálnych hodnôt, sa odporúča analyzovať aspoň skupinu s najvyššou a najnižšou testovanou koncentráciou, a to bezprostredne po príprave a bezprostredne pred obnovením.
Operate the microtube homogeniser for 10 to 20 seconds.
V testoch, kde sa očakáva, že koncentrácia testovanej chemikálie nezostane v rozmedzí ± 20 % nominálnej hodnoty, sa musia analyzovať všetky testované koncentrácie, a to bezprostredne po príprave a bezprostredne pred obnovením.
Cool the 1,5 ml microtube with crushed ice during the operation.
V prípade nedostatočného objemu na analýzu môže byť užitočné spojiť testovacie roztoky alebo použiť náhradné komory z toho istého materiálu a s tým istým pomerom objemu k ploche povrchu ako 24-jamkové platničky.
Lift up the pestle from the 1,5 ml microtube and leave it at rest for about 10 seconds.
Dôrazne sa odporúča, aby výsledky vychádzali z nameraných koncentrácií.
Then conduct a visual check of the state of the suspension.
Ak koncentrácie nezostanú v rozmedzí 80 – 120 % nominálnej koncentrácie, účinné koncentrácie sa majú vyjadriť v pomere ku geometrickému priemeru nameraných koncentrácií.
If pieces of liver are observed in the suspension, repeat the operations (3) and (4) to prepare satisfactory liver homogenate.
Ďalšie podrobnosti nájdete v kapitole 5 usmerňovacieho dokumentu OECD o testovaní vodnej toxicity náročných látok a zmesí (28).
Cool the suspended liver homogenate on the ice rack until centrifugation.
LIMITNÝ TEST
Change the pestle to the new one for each homogenate.
Pomocou postupov opísaných v tejto testovacej metóde možno vykonať limitný test so 100 mg/l testovanej chemikálie alebo pri limite jej rozpustnosti v testovacom médiu (podľa toho, ktorá hodnota je nižšia) s cieľom preukázať, že hodnota LC50 je vyššia ako táto koncentrácia.
Homogenise all livers with homogenate buffer according to the procedure described above.
Limitný test by sa mal vykonať s použitím 20 embryí v ovplyvňovanej skupine, pozitívnej kontrole a – podľa potreby – v kontrole s aplikáciou rozpúšťadla a s použitím 24 embryí v negatívnej kontrole.
Centrifugation of the suspended liver homogenate
Ak percento letality pri testovanej koncentrácii prekročí úmrtnosť v negatívnej kontrole (alebo v kontrole s aplikáciou rozpúšťadla) o 10 %, mala by sa vykonať úplná štúdia.
Confirm the temperature of the refrigerated centrifuge chamber at ≤ 5 °C.
Všetky pozorované účinky by sa mali zaznamenať.
Insert the 1,5 ml microtubes containing the suspended liver homogenate in refrigerated centrifuge (adjust the balance if necessary).
Ak úmrtnosť v negatívnej kontrole (alebo v kontrole s aplikáciou rozpúšťadla) prekročí 10 %, test je neplatný a mal by sa zopakovať.
Following centrifugation, check that the supernatants are adequately separated (surface: lipid, intermediate: supernatant, bottom layer: liver tissue).
Na výpočet sklonu krivky, hodnôt LC50 a hraníc spoľahlivosti (95 %) by sa mali použiť vhodné štatistické metódy (38) s prihliadnutím na usmerňovací dokument OECD o súčasných prístupoch k štatistickej analýze údajov o ekotoxicite (39).
If the separation is not adequate, centrifuge the suspension again under the same conditions.
identifikácia chemikálie, napríklad názov podľa IUPAC alebo CAS, číslo CAS, kód SMILES alebo InChI, štruktúrny vzorec, čistota, chemická identita nečistôt, ak to je vhodné a prakticky uskutočniteľné, atď. (vrátane obsahu organicky viazaného uhlíka, ak to je vhodné).
Remove all specimens from the refrigerated centrifuge and arrange them in the order of specimen number on the ice rack.
Testovacie organizmy:
Be careful not to resuspend each separated layer after the centrifugation.
použitý testovací postup (napr. polostatický obnovovací),
Collection of the supernatant
fotoperióda,
Place four 0,5 ml microtubes for storage of the supernatant into the tube rack.
koncepcia testu (napr. počet testovacích komôr, druhy kontrol),
Collect 30 μl of each supernatant (separated as the intermediate layer) with the micropipette and dispense it to one 0,5 ml microtube.
charakteristiky kvality vody na chov rýb (napr. pH, tvrdosť, teplota, vodivosť, rozpustený kyslík),
Be careful not to collect the lipid on the surface or the liver tissue in the bottom layer.
koncentrácia rozpusteného kyslíka, pH, celková tvrdosť, teplota a vodivosť testovacích roztokov na začiatku a po 96 hodinách,
Collect the supernatant and dispense it to other two 0,5 ml microtubes in the same manner as described above.
metóda prípravy zásobných roztokov a testovacích roztokov a frekvencia obnovovania,
Collect the rest of the supernatant with the micropipette (if feasible: ≥ 100 μl).
odôvodnenie použitia a výberu rozpúšťadla, ak je iné ako voda,
Then dispense the supernatant to the remaining 0,5 ml microtube.
nominálne testované koncentrácie a výsledky všetkých analýz na stanovenie koncentrácie testovanej chemikálie v testovacích nádobách, mala by sa oznámiť aj účinnosť obnovy a kvantifikačný limit (LoQ),
Close the cap of the 0,5 ml microtube and write the volume of the supernatant on the label.
dôkaz, že kontroly splnili všeobecné validačné kritériá platnosti pre prežitie,
Then immediately cool the microtubes on the ice rack.
miera oplodnenia vajíčok,
Change the tip of the micropipette to the new one for each supernatant.
miera liahnutia v ovplyvňovaných a kontrolných skupinách.