natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Prior to initiation of the exposure period, proper function of the chemical delivery system should be ensured.
živé alebo mrazené dospelé jedince alebo nauplia žiabronôžky soľnej dva- alebo trikrát denne (ad libitum), komerčne dostupná potrava alebo kombinácia uvedenej potravy
All analytical methods needed should be established, including sufficient knowledge on the chemical stability in the test system.
nauplia žiabronôžky soľnej dva- alebo trikrát denne (ad libitum), komerčne dostupná potrava alebo kombinácia uvedenej potravy
During the test, the concentrations of the test chemical are determined at regular intervals, as follows: the flow rates of diluent and toxicant stock solution should be checked preferably daily but as a minimum twice per week, and should not vary by more than 10 % throughout the test.
nauplia žiabronôžky soľnej dva- alebo trikrát denne (ad libitum), komerčne dostupná potrava alebo kombinácia uvedenej potravy
It is recommended that the actual test chemical concentrations be measured in all vessels at the start of the test and at weekly intervals thereafter.
žiadne, pokiaľ koncentrácia rozpusteného kyslíka neklesne pod 60 % hodnoty saturácie vzduchom
It is recommended that results be based on measured concentrations.
Voda na riedenie
However, if concentration of the test chemical in solution has been satisfactorily maintained within ±20 % of the nominal concentration throughout the test, then the results can either be based on nominal or measured values.
s čistým povrchom, studňová alebo rekonštituovaná voda alebo odchlórovaná voda z vodovodu
Samples may need to be filtered (e.g. using a 0,45 μm pore size) or centrifuged.
Obdobie pred expozíciou
If needed, then centrifugation is the recommended procedure.
odporúča sa 7 – 14 dní
However, if the test material does not adsorb to filters, filtration may also be acceptable.
Trvanie expozície chemikálii
During the test, dissolved oxygen, temperature, and pH should be measured in all test vessels at least once per week.
Biologické ukazovatele
Total hardness and alkalinity should be measured in the controls and one vessel at the highest concentration at least once per week.
prežitie
A number of general (e.g. survival) and biological responses (e.g. VTG levels) are assessed over the course of the assay or at termination of the assay.
správanie
The daily quantitative monitoring of fecundity is required.
plodivosť
Measurement and evaluation of these endpoints and their utility are described below.
sek. pohlavné znaky
Survival
voliteľne histopatológia gonád
Fish should be examined daily during the test period and any mortality should be recorded and the dead fish removed as soon as possible.
Prijateľnosť testu
Dead fish should not be replaced in either the control or treatment vessels.
koncentrácia rozpusteného kyslíka ≥ 60 % saturácie; priemerná teplota 25 ± 2 °C; 90 % prežitie rýb v kontrolných skupinách; merané testovacie koncentrácie v rozsahu 20 % stredných meraných hodnôt pre každú úroveň aplikácie chemikálie
Sex of fish that die during the test should be determined by macroscopic evaluation of the gonads.
koncentrácia rozpusteného kyslíka ≥ 60 % saturácie; priemerná teplota 26 ± 2 °C; 90 % prežitie rýb v kontrolných skupinách; merané testovacie koncentrácie v rozsahu 20 % stredných meraných hodnôt pre každú úroveň aplikácie chemikálie
Behaviour and appearance
NIEKTORÉ CHEMICKÉ VLASTNOSTI PRIJATEĽNEJ VODY NA RIEDENIE
Any abnormal behaviour (relative to controls) should be noted; this might include signs of general toxicity including hyperventilation, uncoordinated swimming, loss of equilibrium, and atypical quiescence or feeding.
ZLOŽKA
Additionally external abnormalities (such as haemorrhage, discoloration) should be noted.
KONCENTRÁCIA
Such behavioural observations may also provide useful qualitative information to inform potential future fish testing requirements.
< 2 mg/l
Because some aspects of appearance (primarily colour) can change quickly with handling, it is important that qualitative observations be made prior to removal of animals from the test system.
< 1 μg/l
Experience to date with fathead minnows suggests that some endocrine active chemicals may initially induce changes in the following external characteristics: body colour (light or dark), coloration patterns (presence of vertical bands), and body shape (head and pectoral region).
< 10 μg/l
Daily quantitative observations of spawning should be recorded on a replicate basis.
< 25 ng/l
Egg production should be recorded as the number of eggs/surviving female/day on a replicate basis.
Dodatok 4A
Eggs will be removed daily from the test chambers.
NERESOVÝ SUBSTRÁT PRE DANIO PRUHOVANÉ
Spawning substrates should be placed in the test chamber for the fathead minnow and zebrafish to enable fish to spawn in normal conditions.
Podložka na neresenie
Appendix 4 gives further details of recommended spawning substrates for zebrafish (Appendix 4A) and fathead minnow (Appendix 4B).
celosklená nádoba s rozmermi napríklad 22 x 15 x 5,5 cm (dĺžka × šírka × výška) pokrytá odnímateľnou drôtenou mriežkou z nehrdzavejúcej ocele (s veľkosťou ôk 2 mm).
It is not considered necessary to provide spawning substrate for medaka.
Mriežka by mala pokrývať otvor nádoby pod okrajom nádoby.
Humane killing of fish
Na mriežku by sa mal upevniť substrát na neresenie.
Some endocrine active chemicals may induce changes in specialised secondary sex characteristics (number of nuptial tubercles in male fathead minnow, papillary processes in male medaka).
Uvedený plastový materiál by sa mal dostatočne dlho lúhovať v dostatočnom objeme teplej vody, aby sa zabezpečilo, že do vody použitej na testovanie sa neprenesú žiadne chemikálie.
Notably, chemicals with certain modes of action may cause abnormal occurrence of secondary sex characteristic in animals of the opposite sex; for example, androgen receptor agonists, such as trenbolone, methyltestosterone and dihydrotestosterone, can cause female fathead minnows to develop pronounced nuptial tubercles or female medaka to develop papillary processes (11, 20, 21).
V prípade použitia sklených materiálov by sa malo zabezpečiť, aby sa ryby pri intenzívnom pohybe nezranili ani nezakliesnili.
Such gross morphological observations may provide useful qualitative and quantitative information to inform potential future fish testing requirements.
Vajíčka neresením prenesené na podložku prepadávajú cez mriežku a 45 – 60 minút po spustení osvetlenia z nich možno odobrať vzorky.
The number and size of nuptial tubercles in fathead minnow and papillary processes in medaka can be quantified directly or more practically in preserved specimens.
Priesvitné vajíčka sú nelepivé a ľahko sa počítajú pomocou transverzálneho svetla.
Recommended procedures for the evaluation of secondary sex characteristics in fathead minnow and medaka are available from Appendix 5A and Appendix 5B, respectively.
Pri použití piatich samíc na testovaciu nádobu možno počet vajíčok do 20 za deň považovať za nízky, od 20 do 100 za stredný a nad 100 za vysoký.
Vitellogenin (VTG)
Podložka na neresenie by sa mala odstrániť, vajíčka zozbierať a podložka na neresenie vložiť späť do testovacej nádoby, buď čo najneskôr večer, alebo veľmi skoro ráno.
Blood is collected from the caudal artery/vein with a heparinised microhematocrit capillary tubule, or alternatively by cardiac puncture with a syringe.
Čas, ktorý uplynie do opätovného vloženia, by nemal presiahnuť jednu hodinu, lebo inak stopa substrátu na neresenie môže vyvolať individuálne párenie a neresenie v nezvyčajnom čase.
It is recommended to use a method capable to detect VTG levels as low as few ng/ml plasma (or ng/mg tissue), which is the background level in unexposed male fish.
Do každej testovacej komory sa umiestnia dva alebo tri kombinované plastové/keramické/sklené alebo nerezové oblúkové kryty s podložkami na neresenie (napr. 80 mm dlhý sivý polkruhový žľab uložený na podložke so zvýšeným okrajom a s dĺžkou 130 mm) (pozri obrázok).
For each ELISA method, a test for matrix effect (effect of sample dilution) should be run to determine the minimum sample dilution factor.
Odporúča sa kryty obrúsiť, aby sa zvýšila ich priľnavosť.
Each ELISA plate used for VTG assays should include the following quality control samples: at least 6 calibration standards covering the range of expected VTG concentrations, and at least one non-specific binding assay blank (analysed in duplicate).
Podložka by mala byť prekrytá sieťkou tak, aby sa zabránilo rybám v prístupe k padajúcim vajíčkam, pokiaľ nebola preukázaná účinná lepivosť k neresovému substrátu.
At least two aliquots (well-duplicates) of each sample dilution will be analysed.
Všetky neresové substráty by sa mali pred použitím minimálne 12 hodín lúhovať vo vode na riedenie.
The correlation coefficient (R2) for calibration curves should be greater than 0,99.
POSÚDENIE SEKUNDÁRNYCH POHLAVNÝCH ZNAKOV ČEREBLE POTOČNEJ NA ZISTENIE URČITÝCH CHEMIKÁLIÍ S ÚČINKOM NA ENDOKRINNÝ SYSTÉM
However, a high correlation is not sufficient to guarantee adequate prediction of concentration in all ranges.
Prehľad
In addition to having a sufficiently high correlation for the calibration curve, the concentration of each standard, as calculated from the calibration curve, should all fall between 70 and 120 % of its nominal concentration.
Medzi potenciálne dôležité znaky fyzického vzhľadu dospelých jedincov čereble potočnej pri testovaní endokrinných disruptorov patrí farba tela (t. j. svetlá/tmavá), vzorovanie (t. j. prítomnosť alebo neprítomnosť zvislých pruhov), tvar tela (t. j. tvar hlavovej a prsnej oblasti, brušná distenzia) a špecializované sekundárne pohlavné znaky (t. j. počet a veľkosť tuberkulov, veľkosť záhlavnej časti chrbta a kladielka).
If the nominal concentrations trend away from the calibration regression line (e.g. at lower concentrations), it may be necessary to split the calibration curve into low and high ranges or to use a nonlinear model to adequately fit the absorbance data.
Tuberkuly sa nachádzajú na hlave (záhlavná časť chrbta) reprodukčne aktívnych samcov čereble potočnej a ich usporiadanie je obvykle dvojstranne symetrické (Jensen et al. 2001).
If the curve is split, both line segments should have R2 > 0,99.
Kontrolné skupiny samíc a juvenilné samce a samice nevykazujú vznik žiadnych tuberkulov (Jensen et al. 2001).
The ratio of the expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
V prípade mnohých rýb sa pod dolnou čeľusťou vyskytujú skupiny tuberkulov, pričom tie, ktoré sa nachádzajú najbližšie k ústam sa spravidla vyskytujú ako jediný pár, zatiaľ čo bližšie k brušnej časti to môžu byť skupiny až štyroch tuberkulov.
Evaluation of gonadal histopathology
Celkový počet tuberkulov je zriedkavo vyšší ako 30 (v rozsahu 18 – 28; Jensen et al. 2001).
In this respect, gonads are fixed either whole body or dissected.
Väčšina reprodukčne aktívnych samcov má takisto prinajmenšom niekoľko tuberkulov, ktoré sú zväčšené a výrazné natoľko, že sú nerozoznateľné ako jednotlivé štruktúry.
When histopathology is required, specific endocrine-related responses on the gonads will be looked for in the assessment of the endocrine activity of the test chemical.
Niektoré druhy chemikálií narušujúcich endokrinný systém môžu vyvolávať abnormálny výskyt určitých sekundárnych pohlavných znakov pri živočíchoch opačného pohlavia.
These diagnostic responses essentially include the presence of testicular oocytes, Leydig cell hyperplasia, decreased yolk formation, increased spermatogonia and perifollicular hyperplasia.
Napríklad agonisty androgénových receptorov, ako sú 17α-metyltestosterón alebo 17β-trenbolón, môžu spôsobovať vyvinutie tuberkulov u samíc čereble potočnej (Smith 1974; Ankley et al. 2001; 2003), zatiaľ čo agonisty estrogénových receptorov môžu znížiť počet alebo veľkosť tuberkulov u samcov (Miles-Richardson et al. 1999; Harries et al. 2000).
Other gonadal lesions like oocyte atresia, testicular degeneration, and stage changes, may have various causes.
V ďalšej časti sa uvádza opis charakteristiky tuberkulov čereble potočnej na základe postupov používaných Agentúrou Spojených štátov na ochranu životného prostredia v meste Duluth v štáte Minnesota.
The Guidance document on fish gonadal histopathology specifies procedures that will be used in the dissection, fixation, sectioning and histopathological evaluation of the gonads (22).
Špecifické produkty a/alebo zariadenia možno nahradiť porovnateľnými materiálmi, ktoré sú k dispozícii.
Where a solvent control is used, an appropriate statistical test should be performed between the dilution water and solvent controls for each endpoint.
Ryba sa uloží do malej Petriho misky (napr. s priemerom 100 mm), prednou časťou dopredu a brušnou nadol.
Guidance on how to handle dilution water and solvent control data in the subsequent statistical analysis can be found in OECD, 2006c (28).
Hľadáčik sa zameria tak, aby bola možná identifikácia tuberkulov.
All biological response data should be analysed and reported separately by sex.
Ryba sa jemne a pomaly otáča zo strany na stranu a identifikujú sa oblasti tuberkulov.
If the required assumptions for parametric methods are not met — non-normal distribution (e.g. Shapiro-Wilk's test) or heterogeneous variance (Bartlett's test or Levene's test), consideration should be given to transforming the data to homogenise variances prior to performing the ANOVA, or to carrying out a weighted ANOVA.
Tuberkuly sa spočítajú a priradí sa im skóre.
Dunnett's test (parametric) on multiple pair-wise comparisons or a Mann-Whitney with Bonferroni adjustment (non-parametric) may be used for non-monotonous dose-response.
Ryba sa v Petriho miske uloží chrbtovou časťou nadol, prednou dopredu, a vykoná sa prehliadka povrchu brušnej časti hlavy.
Other statistical tests may be used (e.g. Jonckheere-Terpstra test or Williams test) if the dose-response is approximately monotone.
Pozorovania každej ryby by sa mali ukončiť do dvoch minút.
A statistical flowchart is provided in Appendix 8 to help in the decision on the most appropriate statistical test to be used.
Počítanie a klasifikácia tuberkulov
Reporting of test results
Na mapovanie umiestnenia prítomných tuberkulov a ich množstva bola vypracovaná šablóna (pozri koniec tohto dodatku).
Study data should include:
Počet tuberkulov sa zaznamenáva a ich veľkosť možno v prípade každého organizmu kvantitatívne klasifikovať takto: 0 – neprítomný, 1 – prítomný, 2 – zväčšený a 3 – výrazný (obrázok 1).
Testing facility:
Kategória 0 – neprítomný, nijaký tuberkul nie je prítomný.
Responsible personnel and their study responsibilities
Kategória 1 – prítomný, identifikovaný akýkoľvek jednotlivý tuberkul, ktorého výška sa skoro rovná jeho polomeru.
Each laboratory should have demonstrated proficiency using a range of representative chemicals
Kategória 2 – zväčšený, identifikovaný na základe tkaniva, ktoré vzhľadom pripomína hviezdičku, zvyčajne s veľkou radiálnou základňou s drážkami alebo so žliabkami vychádzajúcimi zo stredu.
Characterisation of test chemical
Vrchná časť tuberkula je často viac vrúbkovaná, ale niekedy môže byť čiastočne zaoblená.
Physical nature and relevant physicochemical properties
Kategória 3 – výrazný, zvyčajne pomerne veľký a zaoblený, s menej rozlíšenou štruktúrou.
Method and frequency of preparation of test concentrations
Tieto tuberkuly niekedy spoločne vytvárajú jednotnú masu v jednej oblasti alebo v kombinácii oblastí (B, C a D, ako je opísané v ďalšej časti).
Information on stability and biodegradability
Sfarbenie a tvar sú podobné ako v rámci kategórie 2, ale niekedy sú dosť málo rozlíšiteľné.
Characterisation of solvent (nature, concentration used)
Použitie tohto systému klasifikácie vo všeobecnosti povedie k celkovému skóre < 50 u bežného kontrolného samca s počtom tuberkulov 18 – 20 (Jensen et al. 2001).
Justification of choice of solvent (if other than water)
Skutočný počet tuberkulov na tele niektorých rýb môže byť väčší ako počet políčok v šablóne pre určitú klasifikovanú oblasť.
Species and strain
V takom prípade je možné vyznačiť ďalšie čísla klasifikácie vpravo alebo vľavo od príslušného políčka.
Supplier and specific supplier facility
Zobrazenie šablóny preto nemusí byť symetrické.
Age of the fish at the start of the test and reproductive/spawning status
Ďalšou technikou mapovania tuberkulov, ktoré sú umiestnené v pároch alebo spolu vertikálne pozdĺž horizontálnej roviny úst, by mohlo byť dvojité značenie dvoch bodov klasifikácie tuberkulov v jednom políčku.
Details of animal acclimation procedure
Mapovanie oblastí:
Body weight of the fish at the start of the exposure (from a sub-sample of the fish stock)
A – tuberkuly nachádzajúce sa okolo očí.
Test procedure used (test-type, loading rate, stocking density, etc.);
Mapujú sa od chrbtovej časti po brušnú časť okolo predného okraja očí.
Method of preparation of stock solutions and flow-rate;
Na telách dospelých kontrolných samcov je spravidla väčší počet, na telách kontrolných samíc nie sú prítomné, na telách samíc vystavených pôsobeniu androgénov sa vo všeobecnosti nachádzajú v páre (jeden pri každom oku) alebo jeden osamotený.
The nominal test concentrations, weekly measured concentrations of the test solutions and analytical method used, means of the measured values and standard deviations in the test vessels and evidence that the measurements refer to the concentrations of the test chemical in true solution;
B-tuberkuly nachádzajúce sa medzi nozdrami (otvormi zmyslových kanálov).
Dilution water characteristics (including pH, hardness, alkalinity, temperature, dissolved oxygen concentration, residual chlorine levels, total organic carbon, suspended solids and any other measurements made)
Na telách kontrolných samcov sa spravidla vyskytujú v pároch, viac vyvinuté (2 – zväčšené alebo 3 – výrazné).
Water quality within test vessels: pH, hardness, temperature and dissolved oxygen concentration;
Na telách kontrolných samíc nie sú prítomné, pričom určitý výskyt a stupeň vývoja sa zaznamenal na telách samíc vystavených pôsobeniu androgénov.
Detailed information on feeding (e.g. type of food(s), source, amount given and frequency and analyses for relevant contaminants if available (e.g. PCBs, PAHs and organochlorine pesticides).
C – tuberkuly nachádzajúce sa bezprostredne pred nozdrami, rovnobežne s ústami.
Evidence that the controls met the acceptance criteria of the test;
Na telách dospelých kontrolných samcov sú vo všeobecnosti zväčšené alebo výrazné.
Data on mortalities occurring in any of the test concentrations and control;
Na telách menej vyvinutých samcov alebo samíc vystavených pôsobeniu androgénov sú prítomné alebo zväčšené.
Statistical analytical techniques used, treatment of data and justification of techniques used;
D – tuberkuly nachádzajúce sa rovnobežne pozdĺž línie úst.
Data on biological observations of gross morphology, including secondary sex characteristics, egg production and VTG;
Na telách kontrolných samcov sa vyvíjajú všeobecne podľa klasifikácie.
Results of the data analyses preferably in tabular and graphical form;
Na telách kontrolných samíc nie sú prítomné, ale na telách samíc vystavených pôsobeniu androgénov sú prítomné.
Incidence of any unusual reactions by the fish and any visible effects produced by the test chemical
E – tuberkuly nachádzajúce sa na dolnej čeľusti, v blízkosti úst, zvyčajne malé a spravidla v pároch.
GUIDANCE FOR THE INTERPRETATION AND ACCEPTANCE OF THE TEST RESULTS
Výskyt je rôzny u kontrolných samcov alebo samcov s aplikovanou chemikáliou a u samíc s aplikovanou chemikáliou.
This section contains a few considerations to be taken into account in the interpretation of test results for the various endpoints measured.
F – tuberkuly nachádzajúce sa v brušnej časti priľahlej k oblasti E. Spravidla sú malé a vyskytujú sa v pároch.
The results should be interpreted with caution where the test chemical appears to cause overt toxicity or to impact on the general condition of the test animal.
Prítomné sú u kontrolných samcov a u samíc vystavených pôsobeniu androgénov.
In setting the range of test concentrations, care should be taken not to exceed the maximum tolerated concentration to allow a meaningful interpretation of the data.
Šablóna tuberkulov:
It is important to have at least one treatment where there are no signs of toxic effects.
Číselná klasifikácia
Signs of disease and signs of toxic effects should be thoroughly assessed and reported.
Dátum
For example, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
1- prítomný
However, interpretation of effects may be strengthened by other treatment levels that are not confounded by systemic toxicity.
Celkové skóre
There are a few aspects to consider for the acceptance of test results.
2- zväčšený
As a guide, the VTG levels in control groups of males and females should be distinct and separated by about three orders of magnitude in fathead minnow and zebrafish, and about one order of magnitude for medaka.
3- výrazný
Examples of the range of values encountered in control and treatment groups are available in the validation reports (1, 2, 3, 4).
Dodatok 5B
High VTG values in control males could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect weak oestrogen agonists.
POSÚDENIE SEKUNDÁRNYCH POHLAVNÝCH ZNAKOV RYŽOVNÍČKY JAPONSKEJ PRI ZISŤOVANÍ URČITÝCH CHEMIKÁLIÍ S ÚČINKOM NA ENDOKRINNÝ SYSTÉM
Low VTG values in control females could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect aromatase inhibitors and oestrogen antagonists.
Ďalej sa uvádza opis merania papilárnych výbežkov [1], ktoré sú sekundárnymi pohlavnými znakmi ryžovníčky japonskej (Oryzias latipes).
The validation studies were used to build that guidance.
Po vyrezaní pečene (dodatok 6) sa telo vloží do kónickej skúmavky, ktorá obsahuje približne 10 ml 10 % neutrálneho tlmeného formalínu (smerom hore: hlava, smerom dolu: chvost).
Concerning the quantification of egg production, this is subject to important variations [the coefficient of variation (CV) may range from 20 to 60 %] that impinge the ability of the assay to detect a significant decrease in egg production smaller than 70 % as the CV approaches 50 % or more.
Ak sa gonáda fixuje inak než 10 % neutrálnym tlmeným formalínom, telo treba rozrezať žiletkou priečnym rezom medzi prednou časťou análnej plutvy a análnym otvorom, pričom treba dbať na to, aby sa nenarušil gonopór ani samotná gonáda (obrázok 3).
When the CV is confined to lower values (around 20-30 %), then the assay will have acceptable power (80 %) to detect 40-50 % decrease in egg production.
Kraniálna strana tela ryby sa umiestni do fixačného roztoku na konzervovanie gonád a chvostová strana tela ryby do 10 % neutrálneho tlmeného formalínu, ako už bolo opísané.
The test design used for the fathead minnow, including four replicates per treatment level, should allow more power to the fecundity endpoint, compared to a test design with 2 replicates only.
Po vložení tela ryby do 10 % neutrálneho tlmeného formalínu sa uchopí predná časť análnej plutvy pinzetou a ohne sa približne na 30 sekúnd, aby sa plutva roztiahla.
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier) have been made it is advisable that a technical proficiency study is conducted.
Pri uchopení análnej plutvy pinzetou uchopte opatrne niekoľko lúčov plutvy v prednej časti, aby sa papilárne výbežky nepoškodili.
It is recommended that chemicals covering a range of modes of action or impacts on a number of the test endpoints are used.
Po roztiahnutí análnej plutvy približne na 30 sekúnd sa telo ryby uloží do 10 % neutrálneho tlmeného formalínu pri izbovej teplote až do začiatku merania papilárnych výbežkov (fixovanie pred meraním by malo trvať najmenej 24 hodín).