natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This can result in significant reduction in the number of fish used, especially for test substances that are particularly susceptible to metabolism.
Pri každom odbere vzoriek sa ryby najskôr odvážia a zmerajú.
Conditions of exposure
Pri každej jednej rybe by sa nameraná hmotnosť a dĺžka mala dať do súvislosti s koncentráciou analyzovanej chemikálie (a v prípade potreby aj s obsahom lipidov) napr. označením každej ryby zo vzorky jedinečným identifikátorom.
Uptake Phase duration
Merania na týchto vzorkách rýb možno použiť na odhad hmotnosti (a dĺžky) rýb, ktoré zostanú v testovacích a kontrolných nádržiach.
An uptake phase of 7-14 days is usually sufficient, during which one group of fish are fed the control diet and another group of fish the test diet daily at a fixed ration dependent on the species tested and the experimental conditions, e.g. between 1-2 % of body weight (wet weight) in the case of rainbow trout.
Experimentálne hodnotenie
If needed the uptake phase may be extended based on practical experience from previous studies or knowledge of the test substance's (or analogue's) uptake/depuration in fish.
Prípady mortality by sa mali denne sledovať a zaznamenávať.
The start of the test is defined as the time of first feeding with spiked food.
Sledovať a zaznamenávať by sa mali aj iné nepriaznivé účinky napr. nezvyčajné správanie alebo pigmentácia.
An experimental day runs from the time of feeding to shortly before the time of next feeding (e.g. one hour).
Ryby sa považujú za uhynuté, ak nemožno pozorovať žiaden respiračný pohyb ani reakciu na slabý mechanický podnet.
Thus the first experimental day of uptake runs from the time of first feeding with spiked food and ends shortly before the second feeding with spiked food.
Všetky uhynuté alebo zjavne hynúce ryby by sa mali odstrániť.
In practice the uptake phase ends shortly before (e.g. one hour) the first feeding with unspiked test substance as the fish will continue to digest spiked food and absorb the test substance in the intervening 24 hours.
Výsledky skúšky sa používajú na určenie rýchlostnej konštanty depurácie (k2) ako funkcie celkovej vlhkej hmotnosti rýb.
It is important to ensure that a sufficiently high (non-toxic) body burden of the test substance is achieved with respect to the analytical method, so that at least an order of magnitude decline can be measured during the depuration phase.
Konštanta rýchlosti rastu kg vychádzajúca z priemeru prírastkov hmotnosti rýb sa v prípade potreby počíta a používa na získanie rýchlostnej konštanty vychytávania k2g opravenej vzhľadom na rast.
In special cases an extended uptake phase (up to 28 days) may be used with additional sampling to gain an insight into uptake kinetics.
Okrem toho by sa do protokolu mala zapísať aj asimilačná účinnosť (a, absorpcia z čriev), kinetický biomagnifikačný faktor (BMFK) (ak je to potrebné, opravený vzhľadom na rast – BMFKg), jeho hodnota opravená vzhľadom na obsah lipidov (BMFKL alebo BMFKgL, ak je opravená aj vzhľadom na rast) a kŕmna dávka.
During uptake the concentration in the fish may not reach steady-state.
Ak je možné urobiť odhad času na dosiahnutie ustáleného stavu vo vychytávacej fáze (napr. 95 % ustáleného stavu alebo t95 = 3,0/k2), možno pridať aj odhad hodnoty BMF v ustálenom stave (BMFSS) (pozri body 105 a 106 a dodatok 5), ak hodnota t95 naznačuje, že sa môžu dosiahnuť podmienky ustáleného stavu.
Equations for estimating time to steady-state, as an indication of the likely duration needed to achieve appreciable fish concentrations, can be applied here as for the aqueous exposure test (cf. Appendix 5).
Hodnota BMFSS by sa mala opraviť vzhľadom na obsah lipidov tak isto ako hodnota kinetického BMF (BMFK), aby bolo možné získať jeho hodnotu opravenú vzhľadom na obsah lipidov – BMFSSL (upozorňujeme, že neexistuje žiaden schválený postup na opravu ustáleného BMF vzhľadom na rast).
In some cases it may be known that uptake of substance in the fish over 7-14 days will be insufficient for the food concentration used to reach a high enough fish concentration to analyse at least an order of magnitude decline during depuration, either due to poor analytical sensitivity or to low assimilation efficiency.
Vzorce a príklad výpočtu sú uvedené v dodatku 7.
In such cases it may be advantageous to extend the initial feeding phase to longer than 14 days, or, especially for highly metabolisable substances, a higher dietary concentration should be considered.
K dispozícii sú postupy, ktoré umožňujú odhad kinetického biokoncentračného faktora (BCFK) z údajov získaných zo skúšky expozície z potravy.
However, care should be taken to keep the body burden during uptake below the (estimated) chronic no effect concentration (NOEC) in fish tissue (cf. paragraph 138).
Tieto sú opísané v dodatku 8.
Depuration typically lasts for up to 28 days, beginning once the test group fish are fed pure, untreated diet after the uptake phase.
Do tabuľky sa zvlášť pre testovanú a kontrolnú skupinu zapíšu vlhké hmotnosti a dĺžky jednotlivých rýb v každom časovom intervale a za všetky dni odberu vzoriek vo vychytávacej fáze (zásobná populácia na začiatku vychytávania, kontrolná a testovaná skupina na konci vychytávacej fázy a v prípade, že sa uskutoční, tak aj v jej počiatočnej fáze (napr. v 1. až 3. deň vychytávania), ako aj počas depuračnej fázy (napr. dni 1, 2, 4, 7, 14, 28 v kontrolnej i testovanej skupine).
Depuration begins with the first feeding of “unspiked” food rather than straight after the last “spiked” food feeding as the fish will continue to digest the food and absorb the test substance in the intervening 24 hours, as noted in paragraph 126.
Hmotnosť je preferovaným parametrom rastu na účely opravy vzhľadom na znižovanie koncentrácie látky vplyvom rastu.
Hence the first sample in the depuration phase is taken shortly before the second feeding with unspiked diet.
Metóda, resp. metódy používané na opravu údajov vzhľadom na rast sú uvedené v bodoch 162 a 163 a v dodatku 5.
This depuration period is designed to capture substances with a potential half-life of up to 14 days, which is consistent with that of bioaccumulative substances [49], so 28 days comprises two half-lives of such substances.
Údaje o koncentrácii testovanej látky v rybách
In cases of very highly bioaccumulating substances it may be advantageous to extend the depuration phase (if indicated by preliminary testing).If a substance is depurated very slowly such that an exact half-life may not be determined in the depuration phase, the information may still be sufficient for assessment purposes to indicate a high level of bioaccumulation.
Merania rezíduí testovanej látky v jednotlivých rybách (alebo v združených vzorkách rýb, ak jednotlivé merania nie sú možné) vyjadrené ako koncentrácia vo vlhkej hmotnosti (v hm. %) sa zapíšu do tabuľky pre testovanú a kontrolnú skupinu rýb pri každom jednom odbere vzoriek.
Conversely, if a substance is depurated so fast that a reliable time zero concentration (concentration at the end of uptake/start of depuration, C0,d) and k2 cannot be derived, a conservative estimate of k2 can be made (cf. Appendix 7).
Ak sa každá vzorka rýb podrobila analýze obsahu lipidov, potom je možné odvodiť a zapísať do tabuľky aj jednotlivé koncentrácie opravené vzhľadom na obsah lipidov vyjadrené ako koncentrácia lipidov (v hm. %).
If analyses of fish at earlier intervals (e.g. 7 or 14 days) show that the substance has depurated below quantification levels before the full 28-day period, then subsequent sampling may be discontinued and the test terminated.
Merania rezíduí testovanej látky v jednotlivých rybách (alebo v združených vzorkách rýb, ak jednotlivé merania nie sú možné, pozri bod 66) počas depuračnej fázy sa prevedú na ich prirodzené logaritmy a zakreslia do grafu v závislosti od času (dňa).
In few cases no measurable uptake of the test substance may have occurred at the end of the uptake period (or with the second depuration sample).
Ak sa vizuálnou kontrolou grafu zistia zjavné odľahlé hodnoty, môže sa použiť štatisticky platná skúška na odľahlé hodnoty, ktorou sa odstránia falošné údaje, a pridať odôvodnenie ich vynechania.
If it can be demonstrated that: i) the validity criteria in paragraph 113 are fulfilled; and ii) lack of uptake is not due to some other shortcoming of the test (e.g. uptake duration not long enough, deficiency in food spiking technique leading to poor bioavailability, lack of sensitivity of the analytical method, fish not consuming food, etc.); it may be possible to terminate the study without the need to re-run it with a longer uptake duration.
Vypočíta sa lineárna zhoda najmenších štvorcov z údajov pre ln (koncentrácia) vo vzťahu k depurácii (deň).
If preliminary work has indicated that this may be the case, analysis of faeces, if possible, for undigested test substance may be advisable as part of a “mass balance” approach.
Smernica a úsek priamky sa zaznamenajú do protokolu ako celková hodnota rýchlostnej konštanty depurácie (k2) a prirodzený logaritmus odvodenej hodnoty koncentrácie v čase nula (C0,d) (podrobnosti sú uvedené v dodatku 5 a dodatku 7).
Similar to the aqueous exposure test, fish of similar weight and length should be selected, with the smallest fish being no less than two-thirds of the weight of the largest (cf. paragraphs 40-42).
Ak by to nebolo možné z dôvodu nižších koncentrácií ako ich kvantifikačný limit v druhej vzorke z depuračnej fázy, môže sa urobiť konzervatívny odhad hodnoty k2 (pozri dodatok 7).
The total number of fish for the study should be selected based on the sampling schedule (a minimum of one sample at the end of the uptake phase and four to six samples during the depuration phase, but depending on the phases' durations), taking into account the sensitivity of the analytical technique, the concentration likely to be achieved at the end of the uptake phase (based on prior knowledge) and the depuration duration (if prior knowledge allows estimation).
Vypočítajú sa odchýlky od smernice a úseku priamky použitím štandardných štatistických metód a 90 % (alebo 95 %) intervaly spoľahlivosti týchto výsledkov sa vyhodnotia a zapíšu.
Five to ten fish should be sampled at each event, with growth parameters (weight and total length) being measured before chemical or lipid analysis.
Vypočíta sa aj priemerná hodnota koncentrácie nameranej v posledný deň vychytávania (koncentrácia nameraná v čase nula C0,m) a porovná sa s odvodenou hodnotu C0,d.
Owing to the inherent variability in the size, growth rate, and physiology among fish and the likely variation in the quantity of administered diet that each fish consumes, at least five fish should be sampled at each interval from the test group and five from the control group in order to adequately establish the average concentration and its variability.
Ak je odvodená hodnota nižšia ako nameraná, ich rozdiel môže svedčiť o prítomnosti nestrávenej obohatenej potravy v črevách.
The variability among the fish used is likely to contribute more to the overall uncontrolled variability in the test than the variability inherent in the analytical methodologies employed, and thus justifies the use of up to ten fish per sample point in some cases.
Ak je odvodená hodnota oveľa vyššia ako nameraná, možno sa domnievať, že hodnota odvodená z lineárnej regresie depuračných údajov nie je správna a mala by sa prehodnotiť (pozri dodatok 7).
However, if background test substance concentrations in control fish are not measurable at the start of depuration, chemical analysis of two-three control fish at the final sampling interval only may be sufficient so long as the remaining control fish at all sample points are still sampled for weight and total length (so that the same number are sampled from test and control groups for growth).
Rýchlosť depurácie a biomagnifikačný faktor
Fish should be stored, weighed individually (even if it proves necessary for the sample results to be combined subsequently) and total length measured.
Na výpočet biomagnifikačného faktora z existujúcich údajov by sa najskôr mala získať hodnota asimilačnej účinnosti (absorpcie testovanej látky v črevách α).
For a standard test with, for example, a 28-day depuration duration including five depuration samples, this means a total of 59-120 fish from test and 50-110 from control groups, assuming that the substance's analytical technique allows lipid content analysis to be carried out on the same fish.
Na tento účel by sa mala použiť rovnica A7.1 uvedená v dodatku 7, pri ktorej treba poznať odvodenú hodnotu koncentrácie v čase nula depuračnej fázy (C0,d), (celkovú) hodnotu rýchlostnej konštanty depurácie (k2), hodnotu koncentrácie v potrave (Cfood), rýchlostnú konštantu trávenia potravy (I) a dĺžku vychytávacej fázy (t).
If lipid analysis cannot be conducted on the same fish as chemical analysis, and using control fish only for lipid analysis is also not feasible (cf. paragraph 56), an additional 15 fish would be required (three from the stock population at test start, three each from control and test groups at the start of depuration and three each from control and test groups at the end of the experiment).
Zaznamená sa smernica a úsek lineárneho vzťahu medzi ln (koncentráciou) a časom depurácie ako celková hodnota rýchlostnej konštanty depurácie (k2= smernica) a koncentrácie v čase nula (C0,d = eúsek), ako je opísané vyššie.
An example sampling schedule with fish numbers can be found in Appendix 4.
Mala by sa skontrolovať biologická plauzibilita odvodených hodnôt (napr. asimilačná účinnosť ako zlomok nie je väčšia ako 1).
Similarly high water-to-fish ratios should be used as for the aqueous exposure method (cf. paragraphs 43 and 44).
Hodnota (I) sa vypočíta každý deň vydelením hmotnosti potravy hmotnosťou kŕmených rýb (ak sú kŕmené množstvom zodpovedajúcim 2 % telesnej hmotnosti, hodnota (I) bude 0,02).
Although fish-to-water loading rates do not have an effect on exposure concentrations in this test, a loading rate of 0,1-1,0 g of fish (wet weight) per litre of water per day is recommended to maintain adequate dissolved oxygen concentrations and minimise test organism stress.
Hodnotu kŕmnej dávky použitú vo výpočte možno bude treba upraviť tak, aby zodpovedala rastu rýb (možno tak urobiť použitím známej rýchlostnej konštanty rastu na odhad hmotnosti rýb pri každom odbere vzoriek počas vychytávacej fázy, pozri dodatok 7).
Test diet and Feeding
Ak nie je možné hodnoty k2 a C0,d odvodiť, napr. z dôvodu koncentrácií pod limitom detekcie v druhej vzorke z depuračnej fázy, možno urobiť konzervatívny odhad hodnoty k2 a „hornej hranice“ hodnoty BMFk (pozri dodatok 7).
During the acclimatisation period, fish should be fed an appropriate diet as described above (paragraph 117).
Po získaní hodnoty asimilačnej účinnosti (α) sa biomagnifikačný faktor môže vypočítať vynásobením hodnoty α rýchlostnou konštantou trávenia (I) a následným vydelením tohto výsledku (celkovou) hodnotou rýchlostnej konštanty depurácie (k2).
If the test is being conducted under flow-through conditions, the flow should be suspended while the fish are fed.
Hodnota biomagnifikačného faktora opravená vzhľadom na rast sa vypočíta rovnako, ale s použitím hodnoty rýchlostnej konštanty depurácie opravenej vzhľadom na rast(k2g, pozri body 162 a 163).
During the test, the diet for the test group should adhere to that described above (paragraphs 116-121).
Alternatívny odhad hodnoty asimilačnej účinnosti je možné urobiť v prípade, že ryby zo vzorky boli podrobené analýze tkaniva v počiatočnej, lineárnej fáze vychytávania, pozri bod 151 a dodatok 7).
In addition to consideration of substance-specific factors, analytical sensitivity, expected concentration in the diet under environmental conditions and chronic toxicity levels/body burden, selection of the target spiking concentration should take into account palatability of the food (so that fish do not avoid eating).
Táto hodnota predstavuje nezávislý odhad asimilačnej účinnosti pre v podstate neexponovaný organizmus (t. j. u rýb tesne pred začiatkom vychytávacej fázy).
Nominal spiking concentration of the test substance should be documented in the report.
Odhad hodnoty asimilačnej účinnosti z údajov v depuračnej fáze sa obyčajne používa na odvodenie hodnoty BMF.
Based on experience, spiking concentrations in the range of 1-1000 μg/g provide a practical working range for test substances that do not exhibit a specific toxic mechanism.
Opravy vzhľadom na obsah lipidov a rast
For substances acting via a non-specific mechanism, tissue residue levels should not exceed 5 μmol/g lipid since residues above this level are likely to pose chronic effects (19) (48) (50) [50].
Rast rýb počas depuračnej fázy môže znížiť hodnoty nameraných chemických koncentrácií v rybách, a tým spôsobiť, že celková hodnota rýchlostnej konštanty depurácie (k2) bude vyššia ako pri samotných procesoch odbúravania (napr. metabolizmom, vypudením, pozri bod 72).
For other substances care should be taken that no adverse effects occur from the accumulated exposure (cf. paragraph 127).
Obsah lipidov v testovaných rybách (ktorý úzko súvisí s bioakumuláciou hydrofóbnych látok) a obsah lipidov v potrave sa môžu v praxi líšiť tak, aby sa ich hodnoty museli opraviť, ak majú byť hodnoty faktorov biomagnifikácie odvodené zmysluplným spôsobom.
This is especially true if more than one substance is being tested simultaneously (cf. paragraph 112).
Hodnota biomagnifikačného faktora by sa mala opraviť vzhľadom na rast (podobne ako hodnota kinetického BCF pri skúške expozície vo vodnom prostredí), ako aj vzhľadom na obsah lipidov v potrave v porovnaní s obsahom lipidov v rybách (korekčný faktor lipidov).
The appropriate amount of the test substance can be spiked to the fish food in one of three ways, as described in paragraph 119 and Appendix 7.
Rovnice a príklady týchto výpočtov sú uvedené v dodatku 5, resp. v dodatku 7.
The methods and procedures for spiking the feed should be documented in the report.
Na účely opravy hodnôt vzhľadom na znižovanie koncentrácie látky vplyvom rastu ryby by sa mala vypočítať hodnota rýchlostnej konštanty depurácie opravená o rast (k2g) (pozri rovnice v dodatku 5).
Untreated food is fed to the control fish, containing an equivalent quantity of unspiked oil vehicle if this has been used in the spiked feed for the uptake phase, or having been treated with “pure” solvent if a solvent vehicle was used for test group diet preparation.
Hodnota rýchlostnej konštanty depurácie opravená vzhľadom na rast (k2g) sa potom použije na výpočet hodnoty biomagnifikačného faktora opravenej o rast tak, ako je uvedené v bode 73.
The treated and untreated diets should be measured analytically at least in triplicate for test substance concentration before the start and at the end of the uptake phase.
Tento postup však v niektorých prípadoch nie je možný.
After exposure to the treated feed (uptake phase), fish (both groups) are fed untreated food (depuration phase).
To sa dá ľahko dosiahnuť, keďže v skúškach podľa tejto testovacej metódy by sa zaznamenané údaje o koncentrácii v tkanivách mali vzťahovať na individuálne hmotnosti rýb.
Fish are fed at a fixed ration (dependent on species; e.g. approximately 1-2 % of wet body weight per day in the case of rainbow trout).
Pripomíname, že hodnota k2 by sa mala odhadovať a zaznamenávať aj vtedy, keď sa použije alternatívny postup.
The exact feeding rate set during the experiment should be recorded.
Na účely opravy hodnôt vzhľadom na obsah lipidov v potrave a v rybách bez vykonania analýzy obsahu lipidov na všetkých rybách zo vzorky sa odvodia priemerné hodnoty lipidových frakcií (v hm. %) v rybách a potrave [52].
Initial feeding should be based on the scheduled weight measurements of the stock population just prior to the start of the test.
Korekčný faktor lipidov ( Lc) sa potom vypočíta vydelením priemeru lipidových frakcií v rybách priemerom lipidových frakcií v potrave.
The amount of feed should be adjusted based on the wet weights of sampled fish at each sampling event to account for growth during the experiment.
Hodnota biomagnifikačného faktora, podľa potreby opravená vzhľadom na rast, sa vydelí korekčným faktorom lipidov a získa sa hodnota biomagnifikačného faktora opravená vzhľadom na obsah lipidov.
Weights and lengths of fish in the test and control tanks can be estimated from the weights and total lengths of fish used at each sampling event; do not weigh or measure the fish remaining in the test and control tanks.
Ak sa chemická analýza a analýza obsahu lipidov pri každom odbere vzoriek vykonajú na tých istých rybách, potom možno na výpočet hodnoty BMF opravenej o obsah lipidov použiť priamo údaje získané z tkanív jednotlivých rýb a opravené vzhľadom na obsah lipidov (pozri bod 37).
It is important to maintain the same set feeding rate throughout the experiment.
Z grafu hodnôt koncentrácií opravených o obsah lipidov je možné získať hodnotu C0,d vzhľadom na obsah lipidov a hodnotu k2.
Feeding should be observed to ensure that the fish are visibly consuming all of the food presented in order to guarantee that the appropriate ingestion rates are used in the calculations.
Potom je možné vykonať matematickú analýzu použitím rovnice v dodatku 7, pričom hodnota asimilačnej účinnosti (a) sa vypočíta použitím rýchlostnej konštanty trávenia potravy normalizovanej o obsah lipidov (Ilipid) a koncentrácie v potrave vzhľadom na obsah lipidov (Cfood-lipid).
Preliminary feeding experiments or previous experience should be considered when selecting a feeding rate that will ensure that all food from once-daily feeding is consumed.
Parametre opravené o obsah lipidov sa potom podobne použijú na výpočet BMF (pripomíname, že na výpočet hodnoty BMFKgL opravenej vzhľadom na rast a obsah lipidov by sa oprava rýchlostnou konštantou rastu mala použiť aj v prípade lipidovej frakcie a nie vlhkej hmotnosti rýb).
In the event that food is consistently being left uneaten, it may be advisable to spread the dose over an extra feeding period in each experimental day (e.g. replace once-daily feeding with feeding half the amount twice daily).
Rýchlostné konštanty rastu alebo rastové krivky v oboch skupinách by sa mali vhodným spôsobom porovnať [53].Skúšobný protokol
If this is necessary, the second feeding should occur at a set time and be timed so that the maximum period of time possible passes before fish sampling (e.g. time for second feeding is set within the first half of an experimental day).
Po ukončení štúdie sa vypracuje záverečný protokol obsahujúci informácie o testovanej látke, testovaných druhoch a podmienkach testu podľa bodu 81 (ako v prípade skúšky expozície vo vodnom prostredí).
Although fish generally rapidly consume the food, it is important to ensure that the substance remains adsorbed to the food.
Okrem toho sa vyžadujú tieto údaje:
Efforts should be made to avoid the test substance becoming dispersed in water from the food, thereby exposing the fish to aqueous concentrations of the test substance in addition to the dietary route.
Testovaná látka:
This can be achieved by removing any uneaten food (and faeces) from the test and control tanks within one hour of feeding, but preferably within 30 minutes.
akékoľvek informácie o stabilite testovanej látky v pripravenej potrave.
In addition, a system where the water is continuously cleaned over an active carbon filter to absorb any ‘dissolved’ contaminant may be used.
nominálna koncentrácia látky v potrave, metóda obohacovania, množstvo (lipidového) nosiča použité v procese obohacovania (ak sa použije), merania koncentrácií testovanej látky v obohatenom krmive pre každú analýzu (najmenej trikrát pred začiatkom štúdie a na konci vychytávacej fázy) a priemerné hodnoty,
Flow-through systems may help to flush away food particles and dissolved substances rapidly [51].
druh a kvalita nosiča s olejom alebo rozpúšťadlom (trieda, dodávateľ atď.) používaného na obohacovanie potravy, ak sa použije,
In some cases, a slightly modified spiked food preparation technique can help to alleviate this problem (see paragraph 119).
druh použitej potravy (približná analýza [54], trieda alebo kvalita, dodávateľ atď.), kŕmna dávka v priebehu vychytávacej fázy, množstvo a frekvencia podávanej potravy (vrátane akýchkoľvek jej úprav podľa hmotnosti rýb vo vzorke),