natgillin/translations-raw huggingface dataset:
the concentration of test substance in the fish at time t (mg kg– 1 wet weight).
Zásobné roztoky by sa mali pripravovať podľa možnosti bez použitia akýchkoľvek rozpúšťadiel alebo dispergujúcich látok, a to miešaním alebo pretrepávaním testovanej chemikálie v testovacom médiu za použitia mechanických postupov vrátane trepania, miešania alebo utrazvuku, prípadne iných vhodných metód.
LIPID CORRECTION
Pred zavedením testovaných organizmov sa odporúča, aby sa testované systémy vystavili pôsobeniu koncentrácií testovanej chemikálie, ktorá sa má použiť v štúdii, a to tak dlho, ako je to potrebné na preukázanie stabilných expozičných koncentrácií.
If lipid content was measured on the same fish as chemical analysis for all sampling intervals, then individual concentrations should be corrected on a lipid basis and the ln(concentration, lipid corrected) plotted against depuration (day) to give C0,d and k2.
Ak sa testovaná chemikália ťažko rozpúšťa vo vode, malo by sa postupovať v súlade s postupmi uvedenými v usmernení OECD o zaobchádzaní s problematickými látkami (13).
Assimilation efficiency (Equation A7.1) can then be calculated on a lipid basis, using Cfood on a lipid basis (i.e. Cfood is multiplied by the mean lipid fraction of the food).
Používaniu rozpúšťadiel alebo dispergujúcich látok by sa síce malo vyhýbať, no v niektorých prípadoch môže byť ich použitie nevyhnutné v záujme vytvorenia zásobného roztoku, ktorý má vhodnú koncentráciu z hľadiska dávkovania.
Subsequent calculation using Equation A7.4 and Equation A7.5 will give the lipid-corrected (and growth-dilution corrected) BMF directly.
Okrem testovania s testovacími koncentráciami treba testovanie uskutočniť s kontrolou vody na riedenie s vhodným počtom replikátov a v prípade nutnosti aj s kontrolou rozpúšťadla s vhodným počtom replikátov.
Otherwise, the mean lipid fraction (w/w) in the fish and in the food are derived for both treatment and control groups (for food and control group fish this is usually from data measured at exposure start and end; for treatment group fish this is usually from data measured at end of exposure only).
V teste by sa mali používať len rozpúšťadlá alebo dispergujúce látky, v prípade ktorých sa na základe skúmania potvrdilo, že nemajú žiadne významné alebo majú len minimálne účinky na hodnotu závislej premennej.
In some studies, fish lipid content may increase markedly; in such cases it is more appropriate to use a mean test fish lipid concentration calculated from the measured values at the end of exposure and end of depuration.
V bode (13) sa uvádzajú príklady vhodných rozpúšťadiel (napr. acetón, etanol, metanol, dimetylformamid a trietylénglykol) a dispergujúcich látok (napr. Cremophor RH40, metylcelulóza 0,01 % a HCO-40).
In general, data from the treatment group only should be used to derive both of the lipid fractions.
V prípade použitia rozpúšťadla alebo dispergujúcej látky by ich finálna koncentrácia nemala presahovať 0,1 ml/l (13) a s výnimkou kontrolny vody na riedenie by vo všetkých testovacích nádobách mala byť rovnaká koncentrácia.
The lipid-correction factor (Lc) is calculated as:
Je však potrebné usilovať sa o minimalizovanie koncentrácie rozpúšťadla.
[Equation A7.8]
Trvanie
where Lfish and Lfood are the mean lipid fractions in fish and food, respectively.
Rodičovské jedince sa držia jednotlivo, teda jeden na testovaciu nádobu zvyčajne s objemom 50 až 100 ml (v prípade Daphnia magna).
The lipid-correction factor is used to calculate the lipid-corrected biomagnification factor (BMFL):
V nádobách možno použiť aj menšie objemy média, a to najmä v prípade menších dafnií, napr. druhu Ceriodaphnia dubia), pokiaľ na testovanie nie je potrebný prietokový model testu.
[Equation A7.9]
Z hľadiska uspokojenia požiadaviek analytického postupu použitého na stanovenie koncentrácie testovanej chemikálie možno niekedy budú musieť byť potrebné väčšie objemy, hoci na účely chemickej analýzy je prípustné aj združenie replikátov.
EVALUATION OF DIFFERENCES BETWEEN MEASURED TIME ZERO CONCENTRATION (C0,M) AND DERIVED TIME ZERO CONCENTRATION (C0,D)
Ak sa použijú objemy väčšie ako 100 ml, možno bude treba zvýšiť dávkovanie potravy s cieľom zabezpečiť dafniám primeranú dostupnosť potravy a súlad s validačnými kritériami.
The measured time zero concentration (C0,m) and derived time zero concentration (C0,d) should be compared.
Testované jedince
If they are very similar, then this supports the first order model used to derive the depuration parameters.
V rámci polostatického testu sa pri každej testovanej koncentrácii používa najmenej 10 jednotlivo držaných jedincov a v kontrolných sériách najmenej 10 jednotlivo držaných jedincov.
In some studies there may be a marked difference between the derived time zero value, C0,d, and the mean measured time zero concentration.
Ukázalo sa, že v prípade prietokových testov je vhodné 40 jedincov rozdeliť do štyroch skupín po 10 na každú testovanú koncentráciu (1).
C0,m (see last bullet point of paragraph 159 of this test method).
Môže sa použiť aj menší počet jedincov, pričom sa odporúča minimálne 20 jedincov na koncentráciu rozdelených do dvoch alebo viacerých replikátov s rovnakým počtom jedincov (napr. štyri replikáty, každý s piatimi dafniami).
If C0,d is very much lower than C0,m (C0,d << C0,m), the difference may suggest the presence of undigested spiked food in the gut.
Pripomíname, že v rámci testov, pri ktorých sú jedince umiestnené v skupinách, nebude možné zo štatistickej analýzy vylúčiť žiadne potomstvo v prípade mimovoľnej alebo náhodnej rodičovskej úmrtnosti, keď sa už začala reprodukcia, a preto by sa v týchto prípadoch mal reprodukčný výstup vyjadriť ako celkový počet žijúcich potomkov vyprodukovaných na rodiča, ktorý bol prítomný na začiatku testu.
This may be tested experimentally by conducting separate analysis on the excised gut if additional (whole fish) samples were taken and stored at the end of the uptake phase.
Priradenie ovplyvňovaných skupín testovacím nádobám a všetky nasledujúce činnosti by sa mali uskutočňovať v náhodnom slede.
Otherwise, if a statistically valid outlier test applied to the depuration phase linear regression indicates that the first sample point of depuration is erroneously elevated, carrying out the linear regression to derive k2 but omitting the first depuration concentration point may be appropriate.
Ak by sa takto nepostupovalo, prípadná zaujatosť by sa dala interpretovať ako účinok koncentrácie.
In such cases, if the uncertainty in the linear regression is greatly decreased, and it is clear that approximately first order depuration kinetics were obeyed, it may be appropriate to use the resulting C0,d and k2 values in the assimilation efficiency calculation.
Najmä vtedy, ak sa s experimentálnymi jednotkami zaobchádza v poradí podľa ovplyvňovania alebo koncentrácie, mohlo by v dôsledku niektorých časovo závislých účinkov, akými sú únava obsluhy alebo iná chyba, dôjsť pri vyšších koncentráciách k výraznejším účinkom.
This should be fully justified in the report.
Okrem toho, ak existuje pravdepodobnosť, že počiatočné alebo environmentálne podmienky testu (napr. umiestnenie v laboratóriu) môžu ovplyvniť výsledky testu, potom by sa malo zvážiť blokové usporiadanie testu.
It is also possible that non-first order kinetics were operating in the depuration phase.
Pri polostatickom teste by sa kŕmenie malo podľa možnosti vykonávať denne, najmenej však trikrát za týždeň (napr. čo zodpovedá výmenám média).
If this is likely (i.e. the natural logarithm transformed data appear to follow a curve compared with the straight-line linear regression plot), then the calculations of k2 and C0,d are unlikely to be valid and the advice of a biostatician should be sought.
Prihliadať by sa malo na možné riedenie expozičných koncentrácií pridaním potravy, pričom by sa mu malo v maximálnej možnej miere zabrániť prostredníctvom dostatočne koncentrovanej suspenzie rias.
If C0,d is very much higher than the measured value (C0,d >> C0,m) this may indicate: that the substance was depurated very fast (i.e. sampling points approached the limit of quantification of the analytical method very early in the depuration phase, cf.
Odchýlky od tohto stavu by sa mali zaznamenávať (napr. pri prietokových testoch).
Section 6 below); that there was a deviation from first order depuration kinetics; that the linear regression to derive k2 and C0,d is flawed; or that a problem with the measured concentrations in the study occurred at some sampling time points.
Počas testu by mala potrava rodičovských jedincov pozostávať zo živých buniek rias týchto druhov: Chlorella sp., Pseudokirchneriella subcapitata (predtým Selenastrum capricornutum) a Desmodesmus subspicatus (predtým Scenedesmus subspicatus).
In such cases the linear regression plot should be scrutinised for evidence of samples at or near the limit of quantification, for outliers and for obvious curvature (suggestive of non-first order kinetics), and highlighted in the report.
Množstvo podávanej potravy by malo vychádzať z množstva organického uhlíka (C) dodaného každému rodičovskému jedincovi.
Any subsequent re-evaluation of the linear regression to improve estimated values should be described and justified.
Z výskumu (14) vyplýva, že pokiaľ ide o Daphnia magna, úrovne dávok v rozmedzí 0,1 až 0,2 mg C/dafnia/deň postačujú na dosiahnutie požadovaného množstva živého potomstva, čím sa zabezpečuje splnenie validačných kritérií testu.
If marked deviation from first order kinetics is observed, then the calculations of k2 and C0,d are unlikely to be valid and the advice of a biostatician should be sought.
Danú dávku potravy možno podávať buď počas celého trvania testu v konštantnej miere, alebo si možno zvoliť podávanie potravy v nižšej miere a počas testu túto mieru zvyšovať v záujme zohľadnenia rastu rodičovských jedincov.
GUIDANCE FOR VERY FAST DEPURATING TEST SUBSTANCES
Aj v tomto prípade by mala daná dávka potravy po celý čas zostať v odporúčanom rozpätí 0,1 až 0,2 mg C/dafnia/deň.
As discussed in paragraph 129 of the test method, some substances may depurate so fast that a reliable time zero concentration, C0,d, and k2 cannot be derived because in samples very early in the depuration phase (i.e. from the second depuration sample onwards) the substance is effectively no longer measured (concentrations reported at the limit of quantification).
Ak sa na účely stanovenia požadovanej úrovne dávky potravy použijú náhradné merania, ako napr. počet buniek rias alebo absorbcia svetla (t. j. z dôvodov praktickosti, pretože meranie obsahu uhlíka je časovo náročné), každé laboratórium by si malo vytvoriť svoj vlastný nomogram súvisiaci s náhradným meraním týkajúcim sa obsahu uhlíka dotknutej kultúry rias (rady týkajúce sa tvorby nomogramov sa uvádzajú v dodatku 3).
This situation was observed in the ring test carried out in support of this test method with benzo[a]pyrene, and has been documented in the validation report for the method.
Nomogram by sa mal kontrolovať najmenej raz do roka a v prípade zmien podmienok týkajúcich sa danej kultúry rias aj častejšie.
In such cases linear regression cannot be carried out reliably, and is likely to give an unrealistically high estimate of C0,d, resulting in an apparent assimilation efficiency much greater than 1.
Zistilo sa, že absorpcia svetla je v porovnaní s počtom buniek vhodnejší náhradný parameter, pokiaľ ide o obsah uhlíka (15).
It is possible to calculate a conservative estimate of k2 and an “upper bound” BMF in these instances.
Dafniám by sa mala podávať koncentrovaná suspenzia rias, aby sa minimalizoval objem média s kultúrou rias prenášaného do testovacích nádob.
Using those data points of the depuration phase where a concentration was measured, up to and including the first “non-detect” concentration (concentration set at limit of quantification), a linear regression (using natural logarithm transformed concentration data against time) will give an estimate of k2.
Koncentrovanie rias možno dosiahnuť odstreďovaním v centrifúge, po ktorom nasleduje opätovná suspenzácia v médiu s kultúrou dafnií.
For these sorts of cases this is likely only to involve two data points (e.g. sample days 1 and 2 of depuration) and then k2 can be estimated using Equation A5.22 in Appendix 5.
Svetlo
This k2 estimate can be used to estimate an assimilation efficiency according to equation A7.1, substituting the C0,d value in the equation with the measured time zero concentration (C0,m) in cases where C0,d is clearly estimated to be much higher than could have been achievable in the test.
Svetelné pôsobenie v trvaní 16 hodín s intenzitou nepresahujúcou 15 až 20 μE · m– 2 · s– 1 meranou na hladine vody v nádobe.
If C0,m was not measureable, then the limit of detection in fish tissue should be used.
V prípade prístrojov na meranie svetla, ktoré sú kalibrované v luxoch, rozmedzie 1000 až 1500 luxov pre studené biele svetlo takmer zodpovedá odporúčanej intenzite svetla 15 až 120 μE·m– 2 · s– 1.
If, in some cases, this gives a value of α > 1, then the assimilation efficiency is assumed to 1 as a “worst case”.
Teplota testovacieho média by sa mala pohybovať v rozmedzí 18 až 22 °C.
Given the purpose of this estimation and the fact that values will be conservative in nature, it is not necessary to correct them for growth dilution or fish and food lipid content.
Možno bude na účely monitorovania teploty vhodné použiť ďalšiu testovaciu nádobu.
In some regions it may only be possible to obtain fish food with a lipid concentration that falls far short of this upper limit.
Prevzdušňovanie
In such cases studies should be run with the lower lipid concentration in the food as supplied, and the feeding rate adjusted appropriately to maintain fish health.
Testovacie nádoby by sa počas testu nemali prevzdušňovať.
Diet lipids should not be artificially increased by the addition of excess oil.
Plán testu
Appendix 8
Test na zistenie rozsahu
APPROACHES TO ESTIMATE TENTATIVE BCFS FROM DATA COLLECTED IN THE DIETARY EXPOSURE STUDY
V prípade potreby sa vykoná test na zistenie rozsahu, napríklad s piatimi koncentráciami testovanej chemikálie a dvoma replikátmi na každú expozíciu a kontrolu.
The dietary method is included in this test method for the bioaccumulation testing of substances that cannot in practice be tested using the aqueous exposure method.
Pri rozhodovaní o rozsahu koncentrácií, ktoré sa majú použiť na test na zisťovanie rozsahu, môžu byť užitočné aj dodatočné informácie o akútnej toxicite týkajúcej sa druhu Daphnia a/alebo iných vodných organizmov, ktoré vyplývajú z testov s podobnými chemikáliami alebo z literatúry.
The aqueous exposure method gives a bioconcentration factor, whereas the dietary method leads directly to information on feeding biomagnification potential.
Test na zistenie rozsahu trvá 21 dní alebo dostatočný čas, v priebehu ktorého možno spoľahlivo predpovedať úrovne účinkov.
In many chemical safety regimes information on aquatic bioconcentration is required (for example in risk assessment and the Globally Harmonization System of Classification).
Na konci testu sa posudzuje reprodukcia dafnií.
Hence there is a need to use the data generated in a dietary study to estimate a bioconcentration factor that is comparable to tests conducted according to the aqueous exposure method [1].
Mal by sa zaznamenať počet rodičovských jedincov a výskyt potomstva.
This section explores approaches that may be followed to do this, while recognising the shortcomings that are inherent in the estimations.
Hlavný test
The dietary study measures depuration to give a depuration rate constant, k2.
Zvyčajne by malo byť k dispozícii aspoň päť testovaných koncentrácií vrátane účinnej koncentrácie (napr. e.g.
If an uptake rate constant can be estimated with the available data for the situation where the fish had been exposed to the test substance via the water, then a kinetic BCF could be estimated.
ECx), ktoré by mali byť zoradené do geometrických sérií so separačným faktorom, ktorý podľa možnosti nepresahuje hodnotu 3,2.
The estimation of an uptake rate constant for water exposure of a test substance is reliant on many assumptions, all of which will contribute to the estimate's uncertainty.
Na každú testovanú koncentráciu by sa mal používať vhodný počet replikátov (pozri body 24 – 25).
Furthermore, this approach to estimating a BCF assumes that the overall rate of depuration (including contributory factors like distribution in the body and individual depuration processes) is independent of the exposure technique used to produce a test substance body burden.
Použije menej ako piatich koncentrácií by sa malo odôvodniť.
The main assumptions inherent in the estimation approach can be summarised as follows.
V testovacom médiu by sa chemikálie nemali testovať nad hranicou ich maximálnej rozpustnosti.
Depuration following dietary uptake is the same as depuration following aqueous exposure for a given substance
Pred vykonaním testu sa odporúča zvážiť štatistickú silu daného plánu testu a použitie vhodných štatistických metód (4).
Uptake from water would follow first order kinetics
Pri stanovovaní rozsahu koncentrácií treba mať na pamäti:
Depending on the method used to estimate uptake:
Pri odhade ECx v súvislosti s účinkami na reprodukciu je vhodné použiť dostatočné koncentrácie s cieľom stanoviť ECx s vhodnou úrovňou spoľahlivosti.
uptake can be correlated with fish weight alone
Použité testované koncentrácie by mali prednostne zahŕňať hodnotu ECx, aby sa táto hodnotax zistila na základe interpolácie, a nie extrapolácie.
uptake can be correlated with the substance's octanol-water partition coefficient alone
Výhodou ďalej uvedených štatistických analýz je skutočnosť, že sa v nich vyskytuje viacero testovaných koncentrácií (napr. 10), menší počet replikátov každej koncentrácie (napr. 5, vďaka čomu sa celkový počet nádob udržiava na konštantnej úrovni) a 10 kontrol.
uptake can be correlated with a combination of fish weight and the substance's octanol-water partition coefficient
Pri odhade LOEC a/alebo NOEC by mala mať najnižšia testovaná koncentrácia natoľko nízku úroveň, aby reprodukčný výstup pri danej koncentrácii nebol výrazne nižší ako výstup z kontroly.
factors that can affect uptake in an aqueous exposure study in practice such as substance bioavailability, adsorption to apparatus, molecular size etc. have little effect
Ak to tak nie je, test by sa mal zopakovať so zníženou najnižšou koncentráciou.
and, crucially:
Pri odhade LOEC a/alebo NOEC by mala mať najvyššia testovaná koncentrácia natoľko vysokú úroveň, aby reprodukčný výstup pri danej koncentrácii bol výrazne nižší ako výstup z kontroly.
The database (“training set”) used to develop the uptake estimation method is representative of the substance under consideration
Ak to tak nie je, test by sa mal zopakovať so zvýšenou najvyššou koncentráciou, pokiaľ sa ako najvyššia testovaná koncentrácia v úvodnom teste nepoužila maximálna požadovaná testovaná koncentrácia pre testovanie chronických účinkov (t. j.
Several publications in the open literature have derived equations relating uptake from water in fish via the gills to a substance's octanol-water partition coefficient, fish weight (1) (2) (3) (4), volume and/or lipid content, membrane permeation/diffusion (5) (6), fish ventilation volume (7) and by a fugacity/mass balance approach (8) (9) (10).
10 mg/l).
A detailed appraisal of such methods in this context is given in Crookes & Brooke (11).
Ak sa v rámci testu na zistenie rozsahu pri najvyššej koncentrácii (napr. pri 10 mg/l) nepozorujú žiadne účinky, alebo ak je vysoko pravdepodobné, že testovaná chemikália bude vykazovať nízku/žiadnu toxicitu vzhľadom na absenciu toxicity vo vzťahu k iným organizmom a/alebo bude vykazovať nízke/žiadne vychytávanie, reprodukčný test možno vykonať ako limitný test s použitím testovanej koncentrácie, a to napr. 10 mg/l, ako aj kontroly.
A publication by Barber (12) focussed on modelling bioaccumulation through dietary uptake is also useful in this context as it includes contributions from gill uptake rate models.
Na účely testovanej, ako aj ovplyvňovanej skupiny, by sa malo použiť desať replikátov.
A section of the background document to the 2004 dietary protocol (13) was also devoted to this aspect.
V prípade potenciálnej potreby vykonať limitný test v prietokovom systéme je vhodné použiť menej replikátov.
Most of these models seem to have been derived using limited databases.
Vďaka limitnému testu sa preukáže, že pri koncentračnom limite nedochádza k žiadnemu štatisticky významnému účinku, no ak dôjde k zaznamenaniu účinkov, zvyčajne je potrebné vykonať úplný test.
For models where details of the database used to build the model are available, it appears that the types of substances used are often of a similar structure or class (in terms of functionality, e.g. organochlorines).
Okrem testovanej série by sa mala zrealizovať jedna kontrolná séria s testovacím médiom a v prípade relevantnosti aj jedna kontrolná séria obsahujúca rozpúšťadlo alebo dispergujúcu látku.
This adds to the uncertainty in using a model to predict an uptake rate constant for a different type of substance, in addition to test-specific considerations like species, temperature, etc.
V prípade použitia rozpúšťadla alebo dispergujúcej látky by ich koncentrácia mala byť rovnaká ako koncentrácia použitá v nádobách obsahujúcich testovanú chemikáliu.
A review of available techniques (11) highlighted that no one method is “more correct” than the others.
Mal by sa použiť náležitý počet replikátov (pozri body 23 – 24.).
Therefore, a clear justification should be given for the model used.
Ak sa test realizuje správne, variačný koeficient v blízkosti priemerného počtu žijúcich potomkov vyprodukovaných na jedného rodičovského jedinca v kontrolnej vzorke(-ách) by mal byť ≤ 25 %, pričom by sa mal zaznamenať na účely testovacích plánov, v ktorých sa používajú samostatne držané jedince.
Where several methods are available for which the use can be justified, it may be prudent to present several estimates of k1 (and so BCF) or a range of k1 values (and BCF) according to several uptake estimation methods.
Obnova testovacieho média
However, given the differences in model types and datasets used to develop them, taking a mean value from estimates derived in different ways would not be appropriate.
Frekvencia obnovy testovacieho média závisí od stability testovanej chemikálie, mala by sa však uskutočňovať najmenej trikrát za týždeň.
Some researchers have postulated that BCF estimates of this sort require a bioavailability correction to account for a substance's adsorption to dissolved organic carbon (DOC) under aqueous exposure conditions, to bring the estimate in line with results from aqueous exposure studies (e.g. (13) (14)).
Ak je z predbežných testov stability (pozri bod 7) zrejmé, že počas maximálneho obdobia obnovy (t. j. troch dní) je koncentrácia testovanej chemikálie nestabilná (t. j. jej hodnota sa pohybuje mimo rozpätia 80 – 120 % nominálnej hodnoty počiatočnej nameranej koncentrácie alebo klesne pod 80 % tejto koncentrácie), mala by sa zvážiť možnosť častejšej obnovy média alebo použitia prietokového testu.
Howeverl this correction may not be appropriate given the low levels of DOC required in an aqueous exposure study for a ‘worst case’ estimate (i.e. ratio of bioavailable substance to substance as measured in solution).
Ak sa pri polostatických testoch realizuje obnova média, pripraví sa druhá séria testovacích nádob, do ktorých sa (napríklad sklenou pipetou s vhodným priemerom) prenesú rodičovské jedince.
For highly hydrophobic substances uptake at the gill may become limited by the rate of passive diffusion near the gill surface; in this case it is possible that the correction may be accounting for this effect rather than what it was designed for.
Objem média preneseného s dafniami by sa mal minimalizovať.
It is advised to focus on methods that require inputs for which data will be readily available for substances tested according to the dietary study described here (i.e. log KOW, fish weight).
Výsledky pozorovaní vykonaných počas testu by sa mali zaznamenať do tabuliek (pozri príklady v dodatkoch 4 a 5).