natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Models
V tomto prípade sa test môže vykonať ako skríningový test, podobne ako test na vyhľadávanie rozsahu alebo limitný test (pozri bod 39), pričom sa berie do úvahy iba celková respirácia.
A regression analysis aims at quantitatively describing the concentration response curve in the form of a mathematical regression function Y = f (C) or more frequently F(Z) where Z = log C. Used inversely C = f– 1 (Y) allows the calculation of, ECx figures, including the EC50, EC10 and EC20, and their 95 % confidence limits.
Tieto informácie by sa však mali posudzovať opatrne v prípade testov ľahkej biodegradovateľnosti (kapitola C.4 A – F a C.29 tejto prílohy), pre ktoré je koncentrácia inokula výrazne nižšia než koncentrácia používaná v tejto testovacej metóde.
Several simple mathematical functional forms have proved to successfully describe concentration — response relationships obtained in algal growth inhibition tests.
Nedostatočná inhibícia v tomto respiračnom teste však neznamená automaticky neinhibičné podmienky testu ľahkej biodegradovateľnosti podľa kapitoly C.4 A – F alebo C.29 tejto prílohy.
Functions include for instance the logistic equation, the nonsymmetrical Weibul equation and the log normal distribution function, which are all sigmoid curves asymptotically approaching zero for C → 0 and one for C → infinity.
Celkovo sa zdá, že test respiračnej inhibície sa od prvého publikovania úspešne používa, no v niektorých prípadoch boli zaznamenané nesprávne výsledky, napríklad (2) (4) (5).
The use of continuous threshold function models (e.g. the Kooijman model “for inhibition of population growth” Kooijman et al.
Respiračné krivky súvisiace s koncentráciou sú niekedy dvojfázové, diagramy vzťahu medzi dávkou a reakciou skreslené a hodnoty EC50 nečakane nízke (5).
1996) is a recently proposed or alternative to asymptotic models.
Prešetrovania ukázali, že takéto výsledky sa dosahujú, ak použitý aktivovaný kal výrazne nitrifikuje a testovaná chemikália má väčší účinok na oxidáciu amónnych iónov ako na všeobecnú heterotrofnú oxidáciu.
This model assumes no effects at concentrations below a certain threshold EC0+ that is estimated by extrapolation of the response concentration relationship to intercept the concentration axis using a simple continuous function that is not differentiable in the starting point.
Preto je možné tieto nesprávne výsledky prekonať vykonaním doplnkových testov použitím špecifického inhibítora nitrifikácie.
Note that the analysis can be a simple minimisation of sums of residual squares (assuming constant variance) or weighted squares if variance heterogeneity is compensated.
Na základe merania miery spotreby kyslíka v prítomnosti a v neprítomnosti takého inhibítora, napríklad N-alylthomočoviny (ATU), sa môžu osobitne vypočítať miery celkovej, heterotrofnej a nitrifikačnej spotreby kyslíka (4) (7) (8).
Procedure
Umožní to stanoviť inhibičné účinky testovanej chemikálie na tieto dva procesy a vypočítať hodnoty EC50 tak pre oxidáciu organického uhlíka (heterotrofnú), ako aj amónnych iónov (nitrifikáciu) zvyčajným spôsobom.
The procedure can be outlined as follows:
Je potrebné si uvedomiť, že v niektorých zriedkavých prípadoch môže byť inhibičný účinok N-alyltiomočoviny čiastočne alebo úplne anulovaný v dôsledku vytvárania komplexov s testovanými chemikáliami alebo doplnkami média, napríklad iónmi Cu++ (6).
Select an appropriate functional equation, Y = f(C), and fit it to the data by non-linear regression.
Ióny Cu++ sú nevyhnutné pre baktérie Nitrosomonas, no vo vyššej koncentrácii sú toxické.
Use preferably the measurements from each individual flask rather than means of replicates, in order to extract as much information from the data as possible.
Potreba nitrifikácie v aeróbnom čistení odpadových vôd ako nevyhnutný krok v procese odstraňovania zlúčenín dusíka z odpadových vôd denitrifikáciou na plynné produkty, sa stala naliehavou najmä v európskych krajinách.
If the variance is high, on the other hand, practical experience suggests that means of replicates may provide a more robust mathematical estimation less influenced by systematic errors in the data, than with each individual data point retained.
EÚ stanovila dolné limity koncentrácie dusíka vo vyčistených výtokoch vypúšťaných do zberných vôd [2].
Plot the fitted curve and the measured data and examine whether the curve fit is appropriate.
Na väčšinu účelov postačuje samotná metóda posúdenia účinku na procesy oxidácie organického uhlíka.
Analysis of residuals may be a particular helpful tool for this purpose.
V niektorých prípadoch je však na interpretáciu výsledkov a pochopenie účinkov potrebné preskúmanie účinku na samotnú nitrifikáciu, alebo na nitrifikáciu a oxidáciu organického uhlíka zvlášť.
If the chosen functional relationship to fit the concentration response does not describe well the whole curve or some essential part of it, such as the response at low concentrations, choose another curve fit option — e.g., a non-symmetrical curve like the Weibul function instead of a symmetrical one.
PRINCÍP TESTOVACEJ METÓDY
Negative inhibitions may be a problem with for instance the log — normal distribution function likewise demanding an alternative regression function.
Rýchlosť spotreby kyslíka aktivovaného kalu vyživovaného syntetickou odpadovou vodou sa meria v uzavretej komore obsahujúcej kyslíkovú elektródu po kontaktnom čase 3 hodiny.
It is not recommended to assign a zero or small positive value to such negative values because this distorts the error distribution.
So zreteľom na reálny expozičný scenár by vyhovovali dlhšie kontaktné časy.
It may be appropriate to make separate curve fits on parts of the curve such as the low inhibition part to estimate EClowx figures.
Ak testovaná chemikália rýchlo degraduje, napríklad abioticky prostredníctvom hydrolýzy, alebo je prchavá a koncentráciu nie je možné primerane udržiavať, je možné použiť kratší čas expozície napr. 30 minút.
Calculate from the fitted equation (by “inverse estimation”, C = f– 1(Y)), characteristic point estimates ECx's, and report as a minimum the EC50 and one or two EClow x estimates.
Citlivosť každej dávky aktivovaného kalu by sa mala v deň expozície overiť pomocou vhodnej referenčnej chemikálie.
Experience from practical testing has shown that the precision of the algal test normally allows a reasonably accurate estimation at the 10 % inhibition level if data points are sufficient — unless stimulation occurs at low concentrations as a confounding factor.
Test sa spravidla používa na stanovenie koncentrácie ECx (napr. EC50) testovanej chemikálie a/alebo koncentrácie bez pozorovaného účinku (NOEC).
The precision of an EC20 estimate is often considerably better than that of an EC10, because the EC20 is usually positioned on the approximately linear part of the central concentration response curve.
Inhibícia spotreby kyslíka mikroorganizmami oxidujúcimi organický uhlík sa môže osobitne vyjadriť zo spotreby kyslíka mikroorganizmami oxidujúcimi amónne ióny meraním rýchlostí spotreby kyslíka v prítomnosti i neprítomnosti N-alyltiomočoviny – špecifického inhibítora oxidácie amónnych iónov na dusitany primárnymi nitrifikačnými baktériami.
So while the EC10 is normally obtainable with a sufficient accuracy it is recommended to report always also the EC20.
Akákoľvek spotreba kyslíka vyplývajúca z abiotických procesov sa môže zistiť stanovením miery spotreby v zmesiach testovanej chemikálie, syntetickej odpadovej vody a vody, bez aktivovaného kalu.
Weighting factors
INFORMÁCIE O TESTOVANEJ CHEMIKÁLII
The experimental variance generally is not constant and typically includes a proportional component, and a weighted regression is therefore advantageously carried out routinely.
Na to, aby bolo možné správne interpretovať výsledky, mala by byť známa identifikácia testovanej chemikálie (najlepšie číslo CAS), jej názov (IUPAC), čistota, rozpustnosť vo vode, tlak pary, prchavosť a adsorpčné vlastnosti.
Weighting factors for a such analysis are normally assumed inversely proportional to the variance:
Prchavé látky spravidla nie je možné primerane testovať, pokiaľ sa neprijmú osobitné opatrenia (pozri bod 21).
Many regression programs allow the option of weighted regression analysis with weighting factors listed in a table.
UPLATNITEĽNOSŤ TESTOVACEJ METÓDY
Conveniently weighting factors should be normalised by multiplying them by n/Σ wi (n is the number of datapoints) so their sum be one.
Testovacia metóda sa môže použiť na chemikálie rozpustné vo vode, slabo rozpustné a prchavé.
Normalising responses
Nie vždy je však možné získať hodnoty EC50 v prípade látok s obmedzenou rozpustnosťou a platné výsledky v prípade prchavých látok je možné dosiahnuť len tak, že časť (napr. > 80 %) testovanej chemikálie zostane v reakčnej zmesi na konci expozičného času, resp. časov.
Normalising by the mean control response gives some principle problems and gives rise to a rather complicated variance structure.
Ak existuje akákoľvek neistota týkajúca sa stability testovanej chemikálie alebo jej prchavosti, mali by sa na spresnenie koncentrácie ECx predložiť doplňujúce podporné analytické údaje.
Dividing the responses by the mean control response for obtaining the percentage of inhibition, one introduces an additional error caused by the error on the control mean.
REFERENČNÉ CHEMIKÁLIE
Unless this error is negligibly small, weighting factors in the regression and confidence limits must be corrected for the covariance with the control (Draper and Smith, 1981).
Referenčné chemikálie by sa mali pravidelne testovať s cieľom zabezpečiť, aby boli testovacia metóda a testovacie podmienky spoľahlivé a skontrolovať citlivosť každej dávky aktivovaného kalu, ktorý sa používa ako mikrobiálne inokulum, v deň expozície.
Note that high precision on the estimated mean control response is important in order to minimise the overall variance for the relative response.
Ako referenčná inhibičná látka sa odporúča 3,5-dichlórfenol (3,5-DCP), keďže ide o známy inhibítor respirácie, ktorý sa používa na mnohé typy testov inhibície/toxicity (4).
This variance is as follows:
Ako referenčná chemikália pre test inhibície celkovej respirácie sa môže použiť aj pentahydrát síranu meďnatého (9).
(Subscript i refers to concentration level i and subscript 0 to the controls)
Ako osobitný referenčný inhibítor nitrifikácie je možné použiť N-metylanilín (4).
Yi = Relative response = ri/r0 = 1 – I = f(Ci)
KRITÉRIÁ PLATNOSTI A REPRODUKOVATEĽNOSŤ
with a variance Var(Yi) = Var (ri/r0) ≅ (∂ Yi/∂ ri) · Var(ri) + ((∂ Yi/∂ r0)2 · Var(r0)
Rchlosť spotreby kyslíka slepými kontrolnými vzorkami (bez testovanej alebo referenčnej chemikálie) by nemala byť nižšia ako 20 mg kyslíka na gram aktivovaného kalu (sušiny suspendovaných tuhých látok) za hodinu.
and since (∂ Yi/∂ ri) = 1/r0 and (∂ Y I/∂ r0) = ri/r02
Ak je táto miera nižšia, test by sa mal zopakovať s premytým aktivovaným kalom alebo s kalom z iného zdroja.
with normally distributed data and mi and m0 replicates:
Variačný koeficient rýchlosti spotreby kyslíka v kontrolných replikátoch by nemal byť vyšší ako 30 % na konci konečného testu.
Var(ri) = σ2/mi
V rámci medzinárodnej porovnávacej skúšky, ktorú v roku 2004 zorganizovala Medzinárodná organizácia pre normalizáciu ISO (4) s použitím aktivovaného kalu získaného z odpadových vôd z domácností, sa zistilo, že hodnoty EC50 látky 3,5-DCP sú v rozsahu od 2 do 25 mg/l pre celkovú respiráciu, 5 až 40 mg/l pre heterotrofnú respiráciu a 0,1 až 10 mg/l pre nitrifikačnú respiráciu.
the total variance of the relative response Yi thus becomes
Ak hodnota EC50 látky 3,5-DCP neleží v očakávanom rozsahu, test by sa mal zopakovať s aktivovaným kalom z iného zdroja.
The error on the control mean is inversely proportional to the square root of the number of control replicates averaged, and sometimes it can be justified to include historic data and in this way greatly reduce the error.
Hodnota EC50 pentahydrátu síranu meďnatého by mala byť v rozsahu od 53 do 155 mg/l pre celkovú respiráciu (9).
An alternative procedure is not to normalise the data and fit the absolute responses including the control response data but introducing the control response value as an additional parameter to be fitted by non linear regression.
Testovacie nádoby a zariadenie
With a usual 2 parameter regression equation, this method necessitates the fitting of 3 parameters, and therefore demands more data points than non-linear regression on data that are normalised using a pre-set control response.
Používať by sa malo bežné laboratórne zariadenie a toto vybavenie:
Inverse confidence intervals
testovacie nádoby – napríklad 1000 ml kadičky obsahujúce 500 ml reakčnej zmesi (pozri bod 5 na obrázku 1);
The calculation of non-linear regression confidence intervals by inverse estimation is rather complex and not an available standard option in ordinary statistical computer program packages.
komora s príslušenstvom na meranie koncentrácie rozpusteného kyslíka;
Approximate confidence limits may be obtained with standard non-linear regression programs with re-parameterisation (Bruce and Versteeg, 1992), which involves rewriting the mathematical equation with the desired point estimates, e.g. the EC10 and the EC50 as the parameters to be estimated.
vhodná kyslíková elektróda;
(Let the function be I = f (α, β, Concentration) and utilise the definition relationships f (α, β, EC10) = 0,1 and f (α, β, EC50 ) = 0,5 to substitute f (α, β, concentration ) with an equivalent function g( EC10, EC50, concentration).
uzavretá komora obsahujúca vzorku, bez voľného priestoru a s registračným prístrojom (napr. body 7, 8, 9 na obrázku 1 v dodatku 2);
A more direct calculation (Andersen et al, 1998) is performed by retaining the original equation and using a Taylor expansion around the means of ri and r0.
alternatívne sa môže použiť BOD fľaša s vhodným manžetovým adaptérom na upevnenie kyslíkovej elektródy na hrdlo fľaše (obrázok 2 v dodatku 3).
Recently “boot strap methods” have become popular.
S cieľom zabrániť strate kvapaliny odobratej pri vložení kyslíkovej elektródy je vhodné najskôr vložiť cez manžetu lievik alebo sklenenú trubicu, alebo použiť nádoby so žliabkovou obrubou.
Such methods use the measured data and a random number generator directed frequent re-sampling to estimate an empirical variance distribution.
V obidvoch prípadoch by sa malo použiť magnetické miešadlo alebo alternatívna metóda miešania, napríklad sonda s automatickým miešaním;
REFERENCES
magnetické miešadlá a snímače pokryté inertným materiálom, na použitie v meracej komore a/alebo v testovacích nádobách;
Chapter C.11 is replaced by the following:
prevzdušňovacie zariadenie:
ACTIVATED SLUDGE, RESPIRATION INHIBITION TEST (CARBON AND AMMONIUM OXIDATION)
v prípade potreby by sa mal vháňať stlačený vzduch cez vhodný filter na odstránenie prachu a oleja a cez premývacie fľaše s vodou na zvlhčovanie vzduchu.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 209 (2010).
Obsah nádob by sa mal prevzdušňovať Pasteurovými pipetami alebo inými prevzdušňovacími zariadeniami, ktoré neadsorbujú chemikálie.
This test method describes a method to determine the effects of a chemical on micro-organisms from activated sludge (largely bacteria) by measuring their respiration rate (carbon and/or ammonium oxidation) under defined conditions in the presence of different concentrations of the test chemical.
Na zabezpečenie spotreby kyslíka pre kal a prekonanie ťažkostí s chemikáliami, ktoré produkujú nadmerné množstvo peny, sú prchavé, a tým vytvárajú straty, alebo sa ťažko rozptyľujú pri prevzdušňovaní vháňaním vzduchu, sa môže použiť orbitálna trepačka s prevádzkovou rýchlosťou rotácie 150 – 250 ot/min a s bankami s objemom napríklad 2000 ml.
The test method is based on the ETAD (Ecological and Toxicological Association of the Dyestuffs Manufacturing industry) test (1) ( 2), on the previous OECD TG 209 (3) and on the revised ISO Standard 8192 (4).
Testovací systém tvoria spravidla viaceré kadičky, ktoré sa sústavne prevzdušňujú a postupne používajú (napr. v intervaloch približne 10 – 15 minút), a potom sa postupne analyzujú.
The purpose of the test is to provide a rapid screening method to assess the effects of chemicals on the microorganisms of the activated sludge of the biological (aerobic) stage of waste-water treatment plants.
Použiť sa môžu aj schválené zariadenia, ktoré umožňujú súčasné prevdzušňovanie a meranie rýchlosti spotreby kyslíka v zmesiach;
The results of the test may also serve as an indicator of suitable non-inhibitory concentrations of test chemicals to be used in biodegradability tests (for example Chapters C.4 A-F, C.9, C.10, C12 and C.29 of this Annex, OECD TG302C).
pH-meter;
In this case, the test can be performed as a screening test, similar to a range-finding or limit test (see paragraph 39), considering the overall respiration only.
odstredivka, spravidla stolná odstredivka na kal s odstredivým zrýchlením 10000 m/s2.
However, this information should be taken with care for ready biodegradability tests (Chapter C.4 A-F and C.29 of this Annex) for which the inoculum concentration is significantly lower than the one used in this test method.
Reaktanty
Indeed, an absence of inhibition in this respiration test does not automatically result in non-inhibitory conditions in the ready biodegradability test of Chapters C.4 A-F or C.29 of this Annex.
Používať by sa mali výlučne reagenty analytickej čistoty.
Overall, the respiration inhibition test seems to have been applied successfully since it was first published, but on some occasions spurious results were reported, e.g. (2) (4) (5).
Voda
Concentration related respiration curves are sometimes bi-phasic, dose-response plots have been distorted and EC50 values have been unexpectedly low (5).
Používať by sa mala destilovaná alebo deionizovaná voda obsahujúca menej ako 1 mg/l rozpusteného organického uhlíka (DOC), s výnimkou prípadov, keď sa vyžaduje voda z vodovodu bez chlóru.
Investigations showed that such results are obtained when the activated sludge used in the test nitrifies significantly and the test chemical has a greater effect on the oxidation of ammonium than on general heterotrophic oxidation.
Zdroj syntetickej odpadovej vody
Therefore, these spurious results may be overcome by performing additional testing using a specific inhibitor of nitrification.
Médium by sa malo pripraviť tak, aby obsahovalo tieto zložky v uvedených množstvách:
By measuring the oxygen uptake rates in the presence and absence of such an inhibitor, e.g. N-allylthiourea (ATU), the separate total, heterotrophic and nitrification oxygen uptake rates can be calculated (4) (7) (8).
peptón
Thus, the inhibitory effects of a test chemical on the two processes may be determined and the EC50 values for both organic carbon oxidation (heterotrophic) and ammonium oxidation (nitrification) may be calculated in the usual way.
16 g
It should be noted that in some rare cases, the inhibitory effect of N-allylthiourea may be partially or completely nullified as a result of complexation with test chemicals or medium supplements, e.g. Cu++ ions (6).
mäsový extrakt (alebo porovnateľný zeleninový extrakt)
Cu++ ions are essential for Nitrosomonas, but are toxic in higher concentration.
11 g
The need for nitrification in the aerobic treatment of wastewaters, as a necessary step in the process of removing nitrogen compounds from wastewaters by denitrification to gaseous products, has become urgent particularly in European countries;
močovina
the EU has now set lower limits for the concentration of nitrogen in treated effluents discharged to receiving waters [2].
3 g
For most purposes, the method to assess the effect on organic carbon oxidation processes alone is adequate.
chlorid sodný (NaCl)
However, in some cases an examination of the effect on nitrification alone, or on both nitrification and organic carbon oxidation separately, are needed for the interpretation of the results and understanding the effects.
0,7 g
PRINCIPLE OF THE TEST METHOD
dihydrát chloridu vápenatého (CaC12, 2H2O)
The respiration rates of samples of activated sludge fed with synthetic sewage are measured in an enclosed cell containing an oxygen electrode after a contact time of 3 hours.
0,4 g
Under consideration of the realistic exposure scenario, longer contact times could be appropriate.
heptahydrát síranu horečnatého (MgSO4, 7H2O)
If the test chemical is rapidly degraded e.g. abiotically via hydrolysis, or is volatile and the concentration cannot be adequately maintained, additionally a shorter exposure period e.g. 30 minutes can be used.
0,2 g
The sensitivity of each batch of activated sludge should be checked with a suitable reference chemical on the day of exposure.
hydrogénfosforečnan didraselný bezvodý (K2HPO4)
The test is typically used to determine the ECx (e.g. EC50) of the test chemical and/or the no-observed effect concentration (NOEC).
destilovaná alebo deionizovaná voda na 1 liter.
The inhibition of oxygen uptake by micro-organisms oxidising organic carbon may be separately expressed from that by micro-organisms oxidising ammonium by measurement of the rates of uptake of oxygen in the absence and presence of N-allylthiourea, a specific inhibitor of the oxidation of ammonium to nitrite by the first-stage nitrifying bacteria.
Hodnota pH tohto roztoku by mala byť 7,5 ± 0,5.
In this case the percentage inhibition of the rate of oxygen uptake is calculated by comparison of the rate of oxygen uptake in the presence of a test chemical with the mean oxygen uptake rate of the corresponding controls containing no test chemical, both in the presence and absence of the specific inhibitor, N-allylthiourea.
Ak sa pripravené médium nepoužije okamžite, malo by sa skladovať na tmavom mieste pri teplote 0 – 4 °C, nie dlhšie ako jeden týždeň, alebo za podmienok, ktoré nemenia jeho zloženie.
Any oxygen uptake arising from abiotic processes may be detected by determining the rate in mixtures of test chemical, synthetic sewage medium and water, omitting activated sludge.
Je potrebné si uvedomiť, že táto odpadová voda má stonásobne vyššiu koncentráciu, než je opísané v Technickej správe OECD:
INFORMATION OF THE TEST CHEMICAL
‚Proposed method for the determination of the biodegradability of surfactants used in synthetic detergents‘ (Navrhnuté metódy stanovovania biodegradovateľnosti surfaktantov používaných v syntetických detergentoch, 11. jún 1976) a navyše s pridaným hydrogénfosforečnanom didraselným.
The identification (preferably CAS number), name (IUPAC), purity, water solubility, vapour pressure, volatility and adsorption characteristics of the test chemical should be known to enable correct interpretation of results to be made.
Alternatívne sa zložky média môžu pred uskladnením jednotlivo sterilizovať, prípadne sa peptón a mäsový extrakt môžu pridať krátko pred vykonaním testu.
Normally, volatile chemicals cannot be tested adequately unless special precautions are taken (see paragraph 21).
Pred použitím by sa médium malo dôkladne premiešať a jeho pH v prípade potreby upraviť na hodnotu 7,5 ± 0,5.
APPLICABILITY OF THE TEST METHOD
Testovaná chemikália
The test method may be applied to water-soluble, poorly soluble and volatile chemicals.
Pre testované látky ľahko rozpustné vo vode by sa mal pripraviť zásobný roztok iba do maximálnej rozpustnosti vo vode (zrážania nie sú prípustné).
However, it may not always be possible to obtain EC50 values with chemicals of limited solubility and valid results with volatile chemicals may only be obtained providing that the bulk (say > 80 %) of the test chemical remains in the reaction mixture at the end of the exposure period(s).
Látky slabo rozpustné vo vode, zmesi so zložkami s rôznou rozpustnosťou vo vode a adsorpčné látky by sa mali odvážiť priamo do testovacích nádob.
Additional analytical support data should be submitted to refine the ECx concentration when there is any uncertainty regarding the stability of the test chemical or its volatility.
V týchto prípadoch môže byť alternatívou použitie zásobných roztokov, ak sa analyticky stanovia koncentrácie rozpustených testovaných chemikálií v testovacích nádobách (pred pridaním aktivovaného kalu).