natgillin/translations-raw huggingface dataset:
High VTG values in control males could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect weak oestrogen agonists.
Po odobratí krvi sa rýchlo izoluje plazma odstreďovaním počas troch minút pri 15000 g (alebo alternatívne počas desiatich minút pri 15000 g a teplote 4 ° C).
Low VTG values in control females could compromise the responsiveness of the assay and its ability to detect aromatase inhibitors and oestrogen antagonists.
Ak sa to vyžaduje, po odstreďovaní je možné stanoviť percentuálnu hodnotu hematokritu.
The validation studies were used to build that guidance.
Časť plazmy sa odoberie z mikrohematokritovej kanyly, vloží sa do odstreďovacej skúmavky spolu s 0,13 jednotky aprotinínu (inhibítor proteázy) a uchová sa pri teplote – 80 ° C, pokým nebude možné stanoviť vitelogenín.
If a laboratory has not performed the assay before or substantial changes (e.g. change of fish strain or supplier) have been made it is advisable that a technical proficiency study is conducted.
V závislosti od veľkosti čereble potočnej (závisí od pohlavia) sa objem plazmy, ktorú je možné odobrať, vo všeobecnosti pohybuje v rozmedzí 5 – 60 μl na jednu rybu (Jensen et al., 2001).
It is recommended that chemicals covering a range of modes of action or impacts on a number of the test endpoints are used.
Postup 1B:
In practice, each laboratory is encouraged to build its own historical control data for males and females and to perform a positive control chemical for estrogenic activity (e.g. 17β-estradiol at 100 ng/l, or a known weak agonist) resulting in increased VTG in male fish, a positive control chemical for aromatase inhibition (e.g. fadrozole or prochloraz at 300 μg/l) resulting in decreased VTG in female fish, and a positive control chemical for androgenic activity (e.g. 17β-trenbolone at 5 μg/l) resulting in induction of secondary sex characteristics in female fathead minnow and medaka.
Čerebľa potočná, odber krvi zo srdca
All these data can be compared to available data from the validation studies (1, 2, 3) to ensure laboratory proficiency.
Alternatívne sa krv môže odobrať srdcovou punkciou pomocou heparinizovanej striekačky (1000 jednotiek heparínu na ml).
In general, vitellogenin measurements should be considered positive if there is a statistically significant increase in VTG in males (p < 0,05), or a statistically significant decrease in females (p < 0,05) at least at the highest dose tested compared to the control group, and in the absence of signs of general toxicity.
Krv sa preloží do Eppendorfových skúmaviek (uložených na ľade) a potom sa odstredí (5 minút, 7000 g, izbová teplota).
A positive result is further supported by the demonstration of a biologically plausible relationship between the dose and the response curve.
Plazma by sa mala presunúť do čistých Eppendorfových skúmaviek (v alikvotných množstvách, ak to objem plazmy umožňuje) a rýchlo zmraziť na – 80 °C, pokým sa nevykoná analýza (Panter et al., 1998).
As mentioned earlier, the vitellogenin decrease may not entirely be of endocrine origin;
Postup 2A:
however a positive result should generally be interpreted as evidence of endocrine activity in vivo, and should normally initiate actions for further clarification.
Medaka japonská, vyrezanie pečene
Vitellogenin induction by 17β-estradiol and 17β-ethinylestradiol in male zebrafish (Danio rerio).
Vybratie testovacej ryby zo skúšobnej komory
Development of an ELISA for determination of the hepatic vitellogenin in Medaka (Oryzias latipes).
Testovacia ryba by sa mala vybrať zo skúšobnej komory pomocou malého podberáka.
Fish full life-cycle testing for androgen methyltestosterone on medaka (Oryzias latipes).
Je potrebné dávať pozor, aby testovacia ryba nespadla do inej skúšobnej komory.
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as “signposts”, not “traffic lights”, in risk assessment.
Testovacie ryby by sa mali v zásade vyberať v tomto poradí:
Effects of waterborne exposure to 17β-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
kontrolná vzorka, kontrolná vzorka s rozpúšťadlom (ak je to vhodné), najnižšia koncentrácia, stredná koncentrácia, najvyššia koncentrácia a pozitívna kontrolná vzorka.
Villeneuve and G.T.
Okrem toho by sa mali z každej skúšobnej komory najskôr vybrať všetci samčekovia, až potom zostávajúce samičky.
Ankley.
Pohlavie každej testovacej ryby sa určí na základe vonkajších sekundárnych pohlavných znakov (napr. tvaru análnej plutvy).
Abbreviations & definitions
Testovacia ryba sa vloží do prepravného kontajnera a premiestni na pracovisko určené na vyrezanie pečene.
Chemical
Je potrebné skontrolovať správnosť údajov na štítkoch na skúšobnej komore a prepravnom kontajneri, aby sa potvrdilo, že počet rýb, ktoré sa vybrali zo skúšobnej komory, a počet rýb, ktoré v skúšobnej komore zostali, je v súlade s očakávaním.
A substance or a mixture
Ak nie je možné určiť pohlavie rýb na základe ich vonkajšieho vzhľadu, vyberú sa všetky ryby zo skúšobnej komory.
Coefficient of variation.
V tom prípade by sa pohlavie malo určiť na základe pozorovania gonád alebo sekundárnych pohlavných znakov stereoskopickým mikroskopom.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.
Vyrezanie pečene
Loading rate
Testovacia ryba sa preloží z prepravného kontajnera do anestetického roztoku pomocou malého podberáka.
Wet weight of fish per volume of water.
Po anestetizovaní sa testovacia ryba pomocou pinzety (spotrebného druhu) uloží na filtračný papier (alebo na papierovú utierku).
Stocking density
Rybu je potrebné uchopiť pinzetou za boky hlavy, aby sa zabránilo zlomeniu chvosta.
Number of fish per volume of water.
Voda z povrchu testovacej ryby sa utrie filtračným papierom (alebo papierovou utierkou).
VTG (Vitellogenin)
Potom sa pomocou pitevných nožníc urobí malý priečny zárez medzi časťou brucha v blízkosti hlavy a strednou časťou brucha.
Phospholipoglycoprotein precursor to egg yolk protein that normally occurs in sexually active females of all oviparous species.
Pitevné nožnice sa vložia do malého rezu a brucho sa rozstrihne pozdĺž stredovej línie od zadného bodu žiabrového krytu po kraniálnu stranu análneho otvoru.
HPG axis
Je potrebné dávať pozor, aby sa pitevné nožnice nevložili príliš hlboko a nedošlo k poškodeniu pečene a gonád.
Hypothalamic-pituitary-gonadal axis.
Ďalšie operácie je potrebné vykonať pomocou stereoskopického mikroskopu.
MTC
Testovacia ryba sa položí brušnou stranou nahor na papierovú utierku (použiť sa môže aj sklená Petriho miska alebo podložné sklíčko).
Maximum Tolerated Concentration, representing about 10 % of the LC50.
Pomocou presnej pinzety sa rozšíria steny brušnej dutiny a vyberú sa z nej vnútorné orgány.
Experimental conditions for the fish endocrine screening assay
Je tiež prípustné, aby sa v prípade potreby vnútorné orgány vybrali odstránením jednej bočnej steny brušnej dutiny.
Recommended species
Pomocou ďalšej presnej pinzety sa odhalí spojená časť pečene a žlčníka.
Fathead minnow
Potom sa uchopí žlčovod a žlčník sa odreže.
(Pimephales promelas)
Je potrebné dávať pozor, aby sa žlčník nepoškodil.
Medaka (Oryzias latipes)
Uchopí sa pažerák a rovnakým spôsobom sa od pečene oddelí tráviaci trakt.
Zebrafish
Je potrebné dávať pozor, aby nedošlo k úniku obsahu tráviaceho traktu.
Test type
Kaudálny tráviaci trakt sa oddelí od análneho otvoru a odstráni z brušnej dutiny.
Flow-through
Z okrajových častí pečene sa odreže tuková hmota a iné tkanivá.
Water temperature
Je potrebné dávať pozor, aby sa pečeň nepoškodila.
Illumination quality
Pečeň sa uchopí presnou pinzetou za oblasť brány a vyberie sa z brušnej dutiny.
Fluorescent bulbs (wide spectrum)
Pečeň sa uloží na podložné sklíčko.
Light intensity 10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
V prípade potreby sa pomocou presnej pinzety odstráni z povrchu pečene akýkoľvek ďalší tuk a cudzie tkanivo (napr. výstelka brucha).
10-20 μE/m2/s, 540-1000 lux, or 50-100 ft-c (ambient laboratory levels)
Hmotnosť pečene sa meria pomocou elektronických analytických váh s mikroskúmavkou 1,5 ml predstavujúcou hmotnosť obalu.
Photoperiod (dawn/dusk transitions are optional, however not considered necessary)
Hodnota sa zaznamená do pracovného hárku (napr.: 0,1 mg).
16 h light, 8 h dark
Je potrebné potvrdiť identifikačné údaje na štítku mikroskúmavky.
12-16 h light, 12-8 h dark
Po vyrezaní jednej pečene je potrebné pitevné nástroje vyčistiť, alebo ich nahradiť čistými.
< 5 g per l
Pečeň sa odoberie z tiel všetkých rýb v prepravnom kontajneri, ako už bolo uvedené.
Test chamber size
Po vyrezaní pečene z tiel všetkých rýb v prepravnom kontajneri (t. j. všetkých samčekov alebo samičiek v skúšobnej komore) sa všetky vzorky pečene uložia v skúmavkách do stojana s identifikačnými štítkami a vložia sa do mraziaceho boxu.
10 l (minimum)
Ak sa pečeň krátko po vyrezaní venuje na predúpravu, vzorky sa na nasledujúce pracovisko prenášajú v chladiacom boxe (alebo mraziacom boxe).
2 l (minimum)
Po vyrezaní pečene je mŕtve telo ryby k dispozícii na meranie sekundárnych pohlavných znakov.
5 l (minimum)
Vzorka
Test solution volume
Ak sa vzorky pečene nepoužijú na predúpravu krátko po vyrezaní z tela testovacej ryby, musia sa skladovať pri teplote ≤ – 70 °C.
8 l (minimum)
Nožnicami sa urobí rez tesne pred prsnými plutvami.
l (minimum)
Obrázok 2
4 l (minimum)
Stredová línia brucha sa nožnicami rozstrihne k bodu približne 2 mm od kraniálnej strany análneho otvoru.
Volume exchanges of test solutions
Obrázok 3
Minimum of 6 daily
Pomocou pinzety sa rozšíria steny brušnej dutiny a odhalí sa pečeň a ďalšie vnútorné orgány.
Minimum of 5 daily
(Alternatívne sa steny brušnej dutiny môžu zboku pripevniť).
Age of test organisms See paragraph 20
Obrázok 4
See paragraph 20
Pečeň sa vyberie a vyreže priamo pomocou pinziet.
See paragraph 20 12.
Obrázok 5
Approximate wet weight of adult fish (g) Females:
Črevá sa jemne odtiahnu pomocou pinzety.
2,5 ± 20 %
Obrázok 7 (samička)
0,65 ± 20 %
Postup je ukončený.
0,4 ± 20 %
Postup 2 B:
No. of fish per test vessel
Medaka japonská (Oryzias latipes), predbežná úprava pečene na analýzu vitelogenínu
6 (2 males and 4 females)
Zo súpravy ELISA sa vyberie fľaša tlmivého roztoku homogenátu a ochladí sa rozdrveným ľadom (teplota roztoku: ≤ 4 °C).
10 (5 males and 5 females)
Ak sa použije tlmivý roztok homogenátu zo systému EnBio ELISA, nechá sa rozmraziť pri izbovej teplote a potom sa fľaša ochladí rozdrveným ľadom.
No. of treatments
Vypočíta sa objem tlmivého roztoku homogenátu pre pečeň na základe jej hmotnosti (pre homogenát sa pridá 50 μl tlmivého roztoku homogenátu na 1 mg hmotnosti pečene).
= 3 (plus appropriate controls)
Napríklad ak je hmotnosť pečene 4,5 mg, objem tlmivého roztoku homogenátu pre pečeň je 225 μl.
No. vessels per treatment
Je potrebné vypracovať zoznam objemu tlmivého roztoku homogenátu pre všetky pečene.
4 minimum
Príprava pečene na predúpravu
2 minimum
Tesne pred predúpravou sa z mraziaceho boxu vyberie 1,5 ml mikroskúmavka obsahujúca pečeň.
No. of fish per test concentration
Predúprava pečene samčekov by sa mala vykonať pred úpravou pečene samičiek, aby sa zabránilo kontaminácii vitelogenínu.
16 adult females and 8 males (4 females and 2 males in each replicate vessel)
Okrem toho, predúprava pre testovacie skupiny by sa mala vykonať v tomto poradí:
10 adult females and 10 males (5 females and 5 males in each replicate vessel)
Počet 1,5 ml mikroskúmaviek so vzorkami pečene, ktoré sa v danom čase vyberú z mraziaceho boxu, by nemal prekročiť počet 1,5 ml mikroskúmaviek, ktoré sa môžu v danom čase odstreďovať.
Feeding regime
1,5 ml mikroskúmavky so vzorkami pečene sa uložia v poradí podľa čísel vzoriek v mraziacom boxe (nie je potrebné pečeň rozmrazovať).
Live or frozen adult or nauplii brine shrimp two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Postup predúpravy
Brine shrimp nauplii two or three times daily (ad libitum), commercially available food or a combination of the above
Pridanie homogenizačného tlmivého roztoku
None unless DO concentration falls below 60 % air saturation
Podľa zoznamu sa zistí objem tlmivého roztoku homogenátu, ktorý sa má použiť pre konkrétnu vzorku pečene, a mikropipeta sa nastaví na príslušný objem (rozsah objemu: 100 – 1000 μl).
Clean surface, well or reconstituted water or dechlorinated tap water
Na mikropipetu sa nasadí čistý hrot.
Pre-exposure period
Tlmivý roztok homogenátu sa odoberie z fľaše reaktantu a pridá sa do 1,5 ml mikroskúmavky obsahujúcej pečeň.
7 days recommended
Uvedeným postupom sa tlmivý roztok homogenátu pridá do všetkých 1,5 ml mikroskúmaviek obsahujúcich pečeň.
Chemical exposure duration
Nie je potrebné meniť hrot mikropipety za nový.
behaviour
Na homogenizátor mikroskúmaviek sa nasadí nové miešadlo na homogenizáciu.
sex characteristics
Do 1,5 ml mikroskúmavky sa vloží miešadlo.
VTG
Homogenizátor sa drží tak, aby bola pečeň pritlačená medzi povrch miešadla a vnútornú stenu mikroskúmavky.
Test acceptability
Homogenizátor sa uvedie do prevádzky na 10 – 20 sekúnd.
Dissolved oxygen > 60 % of saturation;
Počas prevádzky je potrebné chladiť mikroskúmavku rozdrveným ľadom.
mean temperature of 25 ± 2 °C;
Miešadlo sa vytiahne z 1,5 ml mikroskúmavky a nechá sa v pokoji približne 10 sekúnd.
90 % survival of fish in the controls;
Potom sa vykoná vizuálna kontrola stavu suspenzie.
measured test concentrations within 20 % of mean measured values per treatment level.
Ak sa v suspenzii pozorujú kúsky pečene, je potrebné opakovať operácie 3 a 4, aby sa pripravil uspokojivý homogenát pečene.
mean temperature of 24 ± 2 °C;
Suspendovaný homogenát pečene sa chladí v mraziacom boxe až do odstredenia.
mean temperature of 26 ± 2 °C;
Pre každý homogenát je potrebné vymeniť miešadlo za nové.
Some chemical characteristics of acceptable dilution water
Uvedeným postupom sa zhomogenizujú všetky pečene s tlmivým roztokom homogenátu.
< 20 mg/l
Odstreďovanie suspendovaného homogenátu pečene
< 2 mg/l
Je potrebné overiť, či je teplota v chladenej komore centrifúgy ≤ 5 °C.
Total organophosphorus pesticides
Do chladenej centrifúgy sa vložia 1,5 ml mikroskúmavky obsahujúce suspendovaný homogenát pečene (v prípade potreby sa upraví rovnováha).
Appendix 4A
Suspendovaný homogenát pečene sa odstreďuje 10 minút pri 13000 g a teplote ≤ 5 °C.
Spawning substrate for zebrafish
Ak sú však supernatanty dostatočne oddelené, sila a čas odstreďovania sa môžu upraviť podľa potreby.
Spawning tray
Po odstredení je potrebné skontrolovať, či sú supernatanty primerane oddelené (povrchová vrstva: tuk, stredná vrstva: supernatant, spodná vrstva: tkanivo pečene).
all glass instrument dish, for example 22 × 15 × 5,5 cm (l × w × d), covered with a removable stainless steel wire lattice (mesh width 2 mm).
Ak oddelenie nie je primerané, suspenzia sa opäť odstredí za tých istých podmienok.
The lattice should cover the opening of the instrument dish at a level below the brim.
Všetky vzorky sa vyberú z chladenej centrifúgy a uložia v poradí podľa čísel vzoriek v mraziacom boxe.
On the lattice, spawning substrate should be fixed.
Je potrebné dať pozor, aby sa znovu nesuspendovali vrstvy oddelené po odstreďovaní.
It should provide structure for the fish to move into.
Odber supernatantu
For example, artificial aquaria plants made of green plastic material are suitable (NB: possible adsorption of the test chemical to the plastic material should be considered).
Do stojana na skúmavky sa vložia štyri 0,5 ml mikroskúmavky na uloženie supernatantu.
The plastic material should be leached out in sufficient volume of warm water for sufficient time to ensure that no chemicals may be disposed to the test water.
Z každého supernatantu (oddeleného ako stredná vrstva) sa pomocou mikropipety odoberie 30 μl a vloží sa do jednej 0,5 ml mikroskúmavky.
When using glass materials it should be ensured that the fish are neither injured nor cramped during their vigorous actions.
Je potrebné dať pozor, aby sa neodobral tuk z povrchovej vrstvy alebo tkanivo pečene zo spodnej vrstvy.
The distance between the tray and the glass panes should be at least 3 cm to ensure that the spawning is not performed outside the tray.
Supernatant sa odoberie a rozdelí do dvoch ďalších 0,5 ml mikroskúmaviek rovnakým spôsobom, ako už bolo uvedené.
The eggs spawned onto the tray fall through the lattice and can be sampled 45-60 min after the start of illumination.
Zvyšok supernatantu sa odoberie pomocou mikropipety (ak je to možné: ≥ 100 μl).
The transparent eggs are non-adhesive and can easily be counted by using transversal light.
Vloží sa do poslednej 0,5 ml mikroskúmavky.
When using five females per vessel, egg numbers up to 20 at a day can be regarded as low, up to 100 as medium and more than 100 as high numbers.
0,5 ml mikroskúmavka sa uzavrie a na štítok sa napíše objem supernatantu.
The spawning tray should be removed, the eggs collected and the spawning tray re-introduced in the test vessel, either as late as possible in the evening or very early in the morning.
Hneď potom sa mikroskúmavky ochladia v mraziacom boxe.
The time until re-introduction should not exceed one hour since otherwise the cue of the spawning substrate may induce individual mating and spawning at an unusual time.
Hrot mikropipety sa vymení za nový pre každý supernatant.
If a situation needs a later introduction of the spawning tray, this should be done at least 9 hours after start of the illumination.
Ak sa na hrote usadí veľké množstvo tuku, je potrebné ho ihneď vymeniť, aby sa zabránilo kontaminácii pečeňového extraktu tukom.
At this late time of the day, spawning is not induced any longer.
Všetky odstredené supernatanty sa uvedeným postupom vložia do štyroch 0,5 ml mikroskúmaviek.
Appendix 4B
Všetky 0,5 ml mikroskúmavky sa po vložení supernatantu uložia do stojana s identifikačnými štítkami a potom sa okamžite zmrazia v mraziacom boxe.
Spawning substrate for fathead minnow
Ak sa koncentrácie vitelogenínu merajú ihneď po predúprave, jedna 0,5 ml mikroskúmavka (obsahujúca 30 μl supernatantu) sa drží v chladenom stojane a potom sa premiestni na pracovisko, kde sa vykonáva test ELISA.
Two or three combined plastic/ceramic/glass or stainless steel spawning tiles and trays are placed in each of the test chamber (e.g., 80 mm length of grey semi-circular guttering sitting on a lipped tray of 130mm length) (see picture).
V takom prípade sa zostávajúce mikroskúmavky uložia do stojanov a zmrazia v mraziacom boxe.
Properly seasoned PVC or ceramic tiles have demonstrated to be appropriate for a spawning substrate (Thorpe et al, 2007).
Po odbere supernatantu sa zvyšok primerane zlikviduje.
It is recommended that the tiles are abraded to improve adhesion.
Uskladnenie vzoriek
The tray should also be screened to prevent fish from access to the fallen eggs unless the egg adhesion efficiency has been demonstrated for the spawning substrate used.
0,5 ml mikroskúmavky obsahujúce supernatant homogenátu pečene sa udržiavajú pri teplote ≤ – 70 °C, až kým sa nepoužijú na test ELISA.
The base is designed to contain any eggs that do not adhere to the tile surface and would therefore fall to the bottom of the tank (or those eggs laid directly onto the flat plastic base).
Postup 3A:
All spawning substrates should be leached for a minimum of 12 hours, in dilution water, before use.
Dánio pruhované, odber krvi z chvostovej žily/tepny
Appendix 5A
Bezprostredne po anestéze sa priečne nareže chvostový pedunkulus a pomocou heparinizovanej mikrohematokritovej kapilárnej kanyly sa odstráni krv z chvostovej tepny/žily.
Assessment of secondary sex characteristics in fathead minnow for the detection of certain endocrine active chemicals
Objemy krvi sa pohybujú v rozmedzí od 5 do 15 μl v závislosti od veľkosti rýb.
Overview
Rovnaký objem tlmivého roztoku aprotinínu (6 μgml vo fosfátovom tlmivom fyziologickom roztoku) sa pridá do mikrokapilárnej skúmavky a z krvi sa odstreďovaním oddelí plazma (5 minút pri 600 g).
Potentially important characteristics of physical appearance in adult fathead minnows in endocrine disrupter testing include body colour (i.e. light/dark), coloration patterns (i.e. presence or absence of vertical bands), body shape (i.e. shape of head and pectoral region, distension of abdomen), and specialized secondary sex characteristics (i.e. number and size of nuptial tubercles, size of dorsal pad and ovipositor).
Plazma sa odoberie do testovacích skúmaviek a udržiava sa pri teplote – 20 °C, až kým sa nezačne analyzovať na prítomnosť vitelogenínu alebo iných skúmaných proteínov.
Nuptial tubercles are located on the head (dorsal pad) of reproductively-active male fathead minnows, and are usually arranged in a bilaterally-symmetric pattern (Jensen et al.
Postup 3B:
2001).
Dánio pruhované, odber krvi srdcovou punkciou
Control females and juvenile males and females exhibit no tubercle development (Jensen et al.
S cieľom zabrániť zrážaniu krvi a degradácii proteínov sa vzorky odoberajú vo fosfátovom tlmivom fyziologickom roztoku (PBS) obsahujúcom heparín (1000 jednotiek/ml) a inhibítor proteázy aprotinín (2 TIU/ml).
2001).
Ako prísady do tlmivého roztoku sa odporúčajú heparín amóniová soľ a lyofilizovaný aprotinín.
There can be up to eight individual tubercles around the eyes and between the nares of the males.
Na odber vzoriek krvi sa odporúča striekačka (1 ml) s pevnou tenkou ihlou (napr. Braun Omnikan-F).
The greatest numbers and largest tubercles are located in two parallel lines immediately below the nares and above the mouth.
Striekačka by sa mala vopred naplniť tlmivým roztokom (približne 100 μl), aby sa úplne eluovali malé objemy krvi z každej ryby.
In many fish there are groups of tubercles below the lower jaw;
Vzorky krvi sa odoberajú srdcovou punkciou.
those closest to the mouth generally occur as a single pair, while the more ventral set can be comprised of up to four tubercles.
Ryba by sa mala najskôr anestetizovať s MS-222 (100 mg/l).
The actual numbers of tubercles is seldom more than 30 (range, 18-28; Jensen et al.
Správna hladina anestézie umožňuje používateľovi rozpoznať tlkot srdca dánia pruhovaného.
2001).
Pri punkcii srdca je potrebné držať piest striekačky pod miernym tlakom.
The predominant tubercles (in terms of numbers) are present as a single, relatively round structure, with the height approximately equivalent to the radius.
Objem krvi, ktorú je možné odobrať, sa pohybuje v rozsahu 20 – 40 mikrolitrov.
Most reproductively-active males also have, at least some, tubercles which are enlarged and pronounced such that they are indistinguishable as individual structures.
Po srdcovej punkcii by sa mala testovacia skúmavka naplniť zmesou krvi a tlmivého roztoku.
for example, androgen receptor agonists, such as 17β-methyltestosterone or 17β-trenbolone, can cause female fathead minnows to develop nuptial tubercles (Smith 1974; Ankley et al.
Dánio pruhované, homogenizácia hlavy a chvosta
2001; 2003), while oestrogen receptor agonists may decrease number or size of nuptial tubercles in males (Miles-Richardson et al.
Ryby sa umŕtvia a usmrtia v súlade s opisom testu.
1999; Harries et al.
Hlava a chvost sa odrežú z tela ryby podľa obrázka 1.
2000).
Dôležité:
Below is a description of the characterization of nuptial tubercles in fathead minnows based on procedures used at the U.S. Environmental Protection Agency lab in Duluth, MN.
Všetky pitevné nástroje a doska na rezanie by sa mali medzi spracovávaním jednotlivých rýb riadne opláchnuť a vyčistiť (napr. 96 % etanolom), aby sa zabránilo ‚vitelogenínovému znečisteniu‘ neindukovaných samčekov od samičiek alebo indukovaných samčekov.
Specific products and/or equipment can be substituted with comparable materials available.
Rez za
Viewing is best accomplished using an illuminated magnifying glass or 3X illuminated dissection scope.
Rez na chrbtovou plutvou
View fish dorsally and anterior forward (head toward viewer).
Na analýzu VTG
Place fish in small Petri dish (e.g., 100 mm in diameter), anterior forward, and ventral down.
Na histológiu gonád
Focus viewfinder to allow identification of tubercles.
Hmotnosť hlavy a chvosta spolu z každej ryby sa odmeria s presnosťou na mg.