natgillin/translations-raw huggingface dataset:
C.35 SEDIMENT-WATER LUMBRICULUS TOXICITY TEST USING SPIKED SEDIMENT
Keď je obohatený sediment pripravený, rozmiestnený do paralelných testovacích nádob a prekrytý testovacou vodou, je vhodné umožniť rozdelenie testovanej chemikálie zo sedimentu do vodnej fázy [napr. (3), (7), (9)].
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 225 (2007).
To by sa podľa možnosti malo vykonať za rovnakých teplotných a prevzdušňovacích podmienok aké sa použijú v teste.
Sediment-ingesting endobenthic animals are subject to potentially high exposure to sediment bound chemicals and should therefore be given preferential attention, e.g. (1), (2), (3).
Primeraný čas vyvažovania závisí od konkrétneho sedimentu a chemikálie a môže trvať niekoľko hodín až dní a v zriedkavých prípadoch až niekoľko týždňov (štyri až päť týždňov) [napr. (27) (47)].
Among these sediment-ingesters, the aquatic oligochaetes play an important role in the sediments of aquatic systems.
V tomto teste sa neočakáva dosiahnutie rovnovážneho stavu, ale odporúča sa obdobie dosahovania rovnováhy v trvaní 48 hodín až sedem dní.
By bioturbation of the sediment and by serving as prey these animals can have a strong influence on the bioavailability of such chemicals to other organisms, e.g. benthivorous fish.
Preto sa bude minimalizovať čas na degradáciu testovanej chemikálie.
In contrast to epibenthic organisms, endobenthic aquatic oligochaetes (e.g. Lumbriculus variegatus) burrow in the sediment, and ingest sediment particles below the sediment surface.
V závislosti od účelu štúdie, napríklad keď sa napodobňujú podmienky životného prostredia, obohatený sediment sa môže nechať vyvažovať alebo zrieť aj dlhší čas.
This ensures exposure of the test organisms to the test chemical via all possible uptake routes (e.g. contact with, and ingestion of contaminated sediment particles, but also via porewater and overlying water).
Na konci tohto vyvažovacieho obdobia, by sa mali odobrať vzorky na analýzu koncentrácie testovanej chemikálie, prinajmenšom z nadložnej vody a sedimentu, aspoň pri najvyššej koncentrácii a jednej nižšej koncentrácii.
This test method is designed to assess the effects of prolonged exposure of the endobenthic oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller) to sediment-associated chemicals.
Toto analytické skúmanie testovanej látky by malo umožniť výpočet hmotnostnej bilancie a vyjadrenie výsledkov na základe meraných počiatočných koncentrácií.
It is based on existing sediment toxicity and bioaccumulation test protocols, e.g. (3), (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10).
Odoberanie vzoriek vo všeobecnosti narúša alebo ničí systém sedimentu a vody.
The method is described for static test conditions.
Preto zvyčajne nie je možné použiť rovnaké replikáty na odber vzoriek sedimentu a červov.
The exposure scenario used in this test method is spiking of sediment with the test chemical.
Je potrebné pripraviť doplnkové ‚analytické‘ nádoby vhodných rozmerov, s ktorými sa zaobchádza rovnakým spôsobom (vrátane prítomnosti testovaných organizmov), ale ktoré sa nepoužijú na biologické pozorovania.
Using spiked sediment is intended to simulate a sediment contaminated with the test chemical.
Rozmery nádob by sa mali zvoliť tak, aby umožňovali vytvorenie vzoriek dostatočne veľkých pre potreby analytickej metódy.
Chemicals that need to be tested towards sediment-dwelling organisms usually persist in this compartment over long time periods.
Podrobné informácie o odbere vzoriek sú uvedené v bode 53.
Sediment-dwelling organisms may be exposed via several routes.
VYKONANIE TESTU
The relative importance of each exposure route, and the time taken for each to contribute to the overall toxic effects, depends on the physical-chemical properties of the chemical concerned and its ultimate fate in the animal.
Ak nie sú dostupné žiadne informácie o toxicite testovanej chemikálie voči druhu Lumbriculus variegatus, môže byť užitočné vykonať predbežnú skúšku s cieľom určiť rozsah koncentrácií, ktoré sa majú testovať v rámci konečného testu, a optimalizovať podmienky konečného testu.
For strongly adsorbing chemicals (e.g. with log Kow > 5) or for chemicals covalently binding to sediment, ingestion of contaminated food may be a significant exposure route.
Na tento účel sa použije súbor koncentrácií testovanej látky s veľkými rozstupmi.
In order not to underestimate the toxicity of such chemicals, the food necessary for reproduction and growth of the test organisms is added to the sediment before application of the test chemical (11).
Počas predbežného testu je potrebné pozorovať a zaznamenávať správanie červov, napríklad vyhýbanie sa sedimentu, čo môže byť spôsobené testovanou chemikáliou a/alebo sedimentom.
The test method described is sufficiently detailed so that the test can be carried out whilst allowing for adaptations in the experimental design depending on the conditions in particular laboratories and the varied characteristics of test chemicals.
Koncentrácie vyššie ako 1000 mg/kg suchej hmotnosti sedimentu by sa nemali testovať v rámci predbežného testu.
The test method is aimed to determine effects of a test chemical on the reproduction and the biomass of the test organisms.
V rámci konečného testu by sa malo použiť najmenej päť koncentrácií, ktoré sa zvolia napríklad na základe výsledkov predbežnej skúšky na vyhľadávanie rozsahu (bod 31), ako je uvedené v bodoch 35, 36, 37 a 38.
The measured biological parameters are the total number of surviving worms and the biomass (dry weight) at the end of the exposure.
Okrem testovacích sérií sa pripravujú kontrolné vzorky (používanie replikátov je opísané v bodoch 36, 37 a 38), ktoré obsahujú všetky zložky okrem testovanej chemikálie.
These data are analysed either by using a regression model in order to estimate the concentration that would cause an effect of x % (e.g. EC50, EC25, and EC10), or by using statistical hypothesis testing to determine the No Observed Effect Concentration (NOEC) and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC).
Ak sa pri aplikácii testovanej chemikálie použije činidlo zvyšujúce rozpustnosť, nemalo by mať žiadny významný vplyv na testované organizmy, čo preukážu doplnkové kontrolné vzorky iba s rozpúšťadlom.
Chapter C.27 of this Annex, “Sediment-water chironomid toxicity test using spiked sediment” (6), provided many essential and useful details for the performance of the presented sediment toxicity test method.
Koncepcia testu sa vzťahuje na výber počtu a rozstupu testovacích koncentrácií, počtu nádob pre každú koncentráciu a počtu červov vložených do každej nádoby.
Hence, this document serves as a basis on which modifications necessary for conducting sediment toxicity tests with Lumbriculus variegatus were worked out.
Koncepcie odhadu koncentrácií ECx, NOEC a vykonania limitného testu sú opísané v bodoch 35, 36, 37 a 38.
Further documents that are referred to are e.g. the ASTM Standard Guide for Determination of the Bioaccumulation of Sediment-Associated Contaminants by Benthic Invertebrates (3), the U.S. EPA Methods for Measuring the Toxicity and Bioaccumulation of Sediment-Associated Contaminants with Freshwater Invertebrates (7), and the ASTM Standard Guide for Collection, Storage, Characterization, and Manipulation of Sediments for Toxicological Testing and for selection of samplers used to collect benthic invertebrates (12).
Účinná koncentrácia (napr. EC50, EC25, EC10) a rozsah koncentrácií, v ktorom sa skúmajú účinky testovanej chemikálie, by mali byť v rozsahu koncentrácií použitých v rámci testu.
In addition, practical experience obtained during ring-testing the test method (13), ring-test report), and details from literature are major sources of information for drawing up this document.
Je potrebné sa vyhnúť extrapolácii hlboko pod najnižšou koncentráciou, ktorá ovplyvňuje testovaný organizmus, alebo nad najvyššou testovacou koncentráciou.
PREREQUISITE AND GUIDANCE INFORMATION
Ak sa vo výnimočných prípadoch takáto extrapolácia vykoná, musí sa v správe uviesť úplné vysvetlenie.
Information on the test chemical such as safety precautions, proper storage conditions and analytical methods should be obtained before beginning the study.
Ak sa má odhadnúť koncentrácia ECx, malo by sa testovať najmenej päť koncentrácií a minimálne tri replikáty na každú koncentráciu.
Guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to perform the test is provided in (14).
Pre kontrolné vzorky a kontrolné vzorky s rozpúšťadlom, ak sa použijú, sa odporúča šesť replikátov s cieľom zlepšiť odhad variability kontrolných vzoriek.
Before carrying out a test, the following information about the test chemical should be known:
V každom prípade je vhodné použiť dostatočné testovacie koncentrácie, ktoré umožnia dobrý modelový odhad.
common name, chemical name (preferably IUPAC name), structural formula, CAS registry number, purity;
Faktor rozstupu medzi koncentráciami by nemal byť vyšší ako dva (v prípadoch, keď má krivka závislosti reakcie od koncentrácie plytký sklon, je možné urobiť výnimku).
solubility in water.
Počet replikátov pri každej aplikácii testovanej chemikálie sa môže znížiť, ak sa zvýši počet testovacích koncentrácií s reakciou v rozsahu 5 – 95 %.
The following additional information is considered useful before starting the test:
Zvýšenie počtu replikátov alebo zúženie intervalov testovacích koncentrácií zvyčajne vedie k užším intervalom spoľahlivosti testu.
octanol-water partition coefficient, Kow;
Ak sa majú odhadnúť hodnoty koncentrácie LOEC/NOEC, malo by sa použiť najmenej päť testovacích koncentrácií s minimálne štyrmi replikátmi (pre kontrolné vzorky a kontrolné vzorky s rozpúšťadlom, ak sa použijú, sa odporúča šesť replikátov s cieľom zlepšiť odhad variability kontrolných vzoriek) a faktor rozstupu medzi koncentráciami by nemal byť vyšší ako dva.
organic carbon-water partitioning coefficient, expressed as Koc;
Niektoré informácie o štatistickej významnosti, zistené počas testovania hypotézy v rámci kruhového testu testovacej metódy, sú uvedené v dodatku 6.
hydrolysis;
Môže sa vykonať limitný test (s použitím jednej testovacej koncentrácie a kontrolnej vzorky), ak sa neočakávajú žiadne účinky až do koncentrácie 1000 mg/kg suchej hmotnosti sedimentu (napr. na základe predbežnej skúšky na vyhľadávanie rozsahu), alebo ak testovanie s jednou koncentráciou bude dostatočné na potvrdenie zisťovanej hodnoty NOEC.
phototransformation in water;
V druhom uvedenom prípade by sa do protokolu o skúške malo uviesť podrobné zdôvodnenie výberu hraničnej koncentrácie.
biodegradability;
Účelom limitného testu je vykonať test pri dostatočne vysokej koncentrácii, ktorá umožní subjektom zodpovedným za rozhodovanie vylúčiť možné toxické účinky testovanej chemikálie a stanoviť hraničnú hodnotu koncentrácie, ktorej výskyt sa neočakáva v žiadnej situácii.
surface tension.
Odporúča sa hodnota 1000 mg/kg (suchej hmotnosti).
Information on certain characteristics of the sediment to be used should be acquired before the start of the test (7).
Zvyčajne je pre vzorky s aplikovanou chemikáliou aj pre kontrolné vzorky potrebných najmenej šesť replikátov.
For details see paragraphs 22 to 25.
Podmienky expozície
Worms of similar physiological state (synchronised as described in Appendix 5) are exposed to a series of toxicant concentrations applied to the sediment phase of a sediment-water system.
Test sa vykonáva s počtom minimálne desať červov na každý replikát používaný na stanovenie biologických parametrov.
Artificial sediment and reconstituted water should be used as media.
Tento počet červov zodpovedá približne 50 – 100 mg čerstvej biomasy.
Test vessels without the addition of the test chemical serve as controls.
EPA (2000) (7) sa odporúča používať veľkosť náplne nepresahujúcu pomer 1:
The test chemical is spiked into the sediment in bulk for each concentration level in order to minimise variability between replicates of each concentration level, and the test organisms are subsequently introduced into the test vessels in which the sediment and water concentrations have been equilibrated (see paragraph 29).
50 (suchá biomasa: TOC).
The test animals are exposed to the sediment-water systems for a period of 28 days.
V prípade umelo pripraveného sedimentu, opísaného v bode 22, to zodpovedá približne 43 g sedimentu (suchá hmotnosť) na 10 červov pri celkovom obsahu TOC 2,0 % suchého sedimentu.
In view of the low nutrient content of the artificial sediment, the sediment should be amended with a food source (see paragraphs 22 to 23, and Appendix 4) to ensure that the worms will grow and reproduce under control conditions.
V prípadoch, keď sa používa viac ako desať červov na jednu nádobu, by sa malo zodpovedajúcim spôsobom upraviť množstvo sedimentu a nadložnej vody.
In this way it is ensured that the test animals are exposed through the water and sediment as well as by their food.
Červy použité v teste by mali pochádzať z toho istého zdroja a mali by to byť živočíchy v podobnom fyziologickom stave (pozri dodatok 5).
The preferred endpoint of this type of study is the ECx (e.g. EC50, EC25, and EC10; effect concentration, affecting x % of the test organisms) for reproduction and biomass, respectively, compared to the control.
Vyberať by sa mali červy podobnej veľkosti (pozri bod 39).
It should however be noted, that considering the high uncertainty of low ECx (e.g. EC10, EC25) with extremely high 95 %-confidence limits (e.g. (15)) and the statistical power calculated during hypothesis testing, the EC50 is regarded the most robust endpoint.
Odporúča sa pred testom odvážiť čiastkovú vzorku dávky alebo zásoby červov s cieľom odhadnúť ich strednú hmotnosť.
In addition, the No Observed Effect Concentration (NOEC), and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC) may be calculated for biomass, and reproduction, if the test design and the data support these calculations (see paragraphs 34 to 38).
Červy použité v teste sa odoberú z kultúry (podrobnosti sú uvedené v dodatku 5).
The purpose of the study, ECx or NOEC derivation, will determine the test design.
Veľké (dospelé) živočíchy, ktoré nejavia príznaky nedávnej fragmentácie, sa presunú do sklenených misiek (napr. Petriho misiek) obsahujúcich čistú vodu.
REFERENCE TESTING
Následne sa synchronizujú, ako je opísané v dodatku 5.
Performance of the control organisms is expected to demonstrate sufficiently the ability of a laboratory to perform the test, and if historical data are available, the repeatability of the test.
Po regenerácii v trvaní 10 – 14 dní by sa neporušené úplné červy podobnej veľkosti, ktoré po jemných mechanických podnetoch aktívne plávajú alebo lezú, mali použiť na testovanie.
In addition, reference toxicity tests may be conducted in regular intervals using a reference toxicant to assess the sensitivity of the test organisms.
Ak sa podmienky testu líšia od podmienok kultivácie (napr. teplotou, svetelným režimom a nadložnou vodou), fáza aklimatizácie napríklad 24 hodín pri teplote, svetelnom režime a použití rovnakej nadložnej vody ako v rámci testu by mala postačovať, aby sa červy adaptovali na podmienky testu.
96 h reference toxicity tests in water only may satisfactorily demonstrate the sensitivity and condition of the test animals (4)(7).
Adaptované máloštetinavce by sa mali náhodne rozdeliť do testovacích nádob.
Information on the toxicity of pentachlorophenol (PCP) in complete tests (28 d exposure to spiked sediment) is included in Appendix 6, and in the report on the ring test of the Test Method (13).
Keďže potrava sa pridáva do sedimentu pred aplikáciou testovanej chemikálie (alebo počas nej), červy sa počas testu ďalej nekŕmia.
This information can be used for comparison of test organism sensitivity in reference tests with PCP as reference toxicant.
Dĺžka fotoperiódy v kultúre a v rámci testu je zvyčajne 16 hodín (3), (7).
Potassium chloride (KCl) or copper sulphate (CuSO4) have been recommended as reference toxicants with L. variegatus (4)(7).
Intenzita svetla by sa mala udržiavať na nízkej úrovni (napr. 100 – 500 lux), aby sa na povrchu sedimentu napodobňovali prírodné podmienky, a merať by sa mala najmenej raz počas trvania expozície.
To date, establishment of quality criteria based on toxicity data for KCl is difficult due to lack of literature data for L. variegatus.
Teplota by mala byť počas celého testu 20 °C ± 2 °C.
Information on the toxicity of copper towards L. variegatus can be found in (17) to (21).
Počas jedného daného termínu merania by rozdiel v teplote medzi testovacími nádobami nemal byť vyšší ako ± 1 °C.
For a test to be valid, the following requirements should be fulfilled:
Testovacie nádoby by mali byť náhodne umiestnené v testovacom inkubátore alebo testovacom priestore, napríklad s cieľom minimalizovať skreslenie reprodukcie v dôsledku umiestnenia nádoby.
A ring-test (13) has shown that for Lumbriculus variegatus, the average number of living worms per replicate in the controls should have increased by a factor of at least 1,8 at the end of exposure compared to the number of worms per replicate at the start of exposure.
Vetranie
The pH of the overlying water should be between 6 and 9 throughout the test.
Nadložná voda v testovacích nádobách by sa mala jemne prevzdušňovať (napr. 2 až 4 bubliny za sekundu) prostredníctvom Pasteurovej pipety umiestnenej približne 2 cm nad povrchom sedimentu tak, aby sa minimalizovalo narušenie sedimentu.
The oxygen concentration in the overlying water should not be below 30 % of air saturation value (ASV) at test temperature during the test.
Treba dbať na to, aby koncentrácia rozpusteného kyslíka neklesla pod 30 % hodnoty rozpustnosti vzdušného kyslíka.
Static systems without renewal of the overlying water are recommended.
Prívod vzduchu by sa mal kontrolovať a v prípade potreby upraviť najmenej raz denne v pracovné dni.
If the sediment-to-water ratio (see paragraph 15) is appropriate, gentle aeration will normally suffice to keep the water quality at acceptable levels for the test organisms (e.g. maximise dissolved oxygen levels, minimise build-up of excretory products).
Meranie kvality vody
Semi-static or flow-through systems with intermittent or continuous renewal of overlying water should only be used in exceptional cases, since regular renewal of overlying water is expected to affect chemical equilibrium (e.g. losses of test chemical from the test system).
V nadložnej vode by sa mali merať tieto parametre kvality vody:
The exposure should be conducted in glass beakers of e.g. 250 ml measuring 6 cm in diameter.
najmenej v jednej testovacej nádobe na každú úroveň koncentrácie a v jednej testovacej nádobe s kontrolnou vzorkou, raz týždenne a na začiatku a na konci expozície
Other suitable glass vessels may be used, but they should guarantee a suitable depth of overlying water and sediment.
ak je to možné, doplnkovo sa môže zaznamenať teplota v okolitom médiu (okolitý vzduch alebo vodný kúpeľ), napríklad v hodinových intervaloch
Each vessel should receive a layer of approximately 1,5 – 3 cm of formulated sediment.
Obsah rozpusteného kyslíka:
The ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be 1:4.
vyjadrený v mg/l a % rozpustnosti vzdušného kyslíka (ASV)
The vessels should be of suitable capacity in compliance with the loading rate, i.e. the number of test worms added per weight unit of sediment, (see also paragraph 39).
Prívod vzduchu:
Test vessels and other apparatus that will come into contact with the test chemical should be made entirely of glass or other chemically inert material.
mal by sa kontrolovať najmenej raz denne v pracovné dni a v prípade potreby upraviť
Care should be taken to avoid the use of materials, for all parts of the equipment that can dissolve, absorb test chemicals or leach other chemicals and have an adverse effect on the test animals.
Celková tvrdosť vody:
Polytetrafluoroethylene (PTFE), stainless steel and/or glass should be used for any equipment having contact with the test media.
najmenej v jednom replikáte kontrolnej vzorky a v jednej testovacej nádobe s najvyššou koncentráciou, na začiatku a na konci expozície;
For organic chemicals known to adsorb to glass, silanised glass may be required.
vyjadrený v mg/l CaCO3
In these situations the equipment will have to be discarded after use.
Celkový obsah amoniaku:
Test species
najmenej v jednom replikáte kontrolnej vzorky a v jednej testovacej nádobe na každú úroveň koncentrácie, na začiatku a na konci expozície a následne trikrát týždenne;
The test species used in this type of study is the freshwater oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller).
vyjadrený v mg/l NH4+ alebo NH3 alebo ako celkový amoniak.
This species is tolerant to a wide range of sediment types, and is widely used for sediment toxicity and bioaccumulation testing [e.g. (3), (5), (7), (9), (13), (15), (16), (22), (23), (24), (25), (26), (27), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35)].
Ak si meranie parametrov kvality vody vyžaduje odobratie významných vzoriek vody z nádob, môže byť vhodné vytvoriť samostatné nádoby na meranie kvality vody, aby sa nemenil objemový pomer vody a sedimentu.
The origin of the test animals, the confirmation of species identity (e.g. (36)) as well as the culture conditions should be reported.
Biologické pozorovania
Identification of species is not required prior to every test if the organisms come from an in-house culture.
Počas expozície by sa mali testovacie nádoby pozorovať s cieľom vizuálne posúdiť akékoľvek rozdiely v správaní červov (napr. vyhýbanie sa sedimentu, fekálne pelety viditeľné na povrch sedimentu) v porovnaní s kontrolnými vzorkami.
Culturing of the test organisms
Pozorovania je potrebné zaznamenať.
In order to have a sufficient number of worms for conducting sediment toxicity tests, it is useful to keep the worms in permanent laboratory culture.
Na konci testu sa preskúma každý replikát (doplnkové nádoby určené na chemické analýzy môžu byť z preskúmania vylúčené).
Guidance for laboratory culture methods for Lumbriculus variegatus, and sources of starter cultures are given in Appendix 5.
Vhodná metóda by sa mala použiť na vybratie všetkých červov z testovacej nádoby.
For details on culturing this species see references (3), (7), (27).
Treba dbať na to, aby sa všetky červy vybrali nezranené.
To ensure that the tests are performed with animals of the same species, the establishment of single species cultures is strongly recommended.
Jednou z možných metód je získanie červov zo sedimentu preosiatím.
Ensure that the cultures and especially the worms used in the tests are free from observable diseases and abnormalities.
Použiť sa môže sito z nehrdzavejúcej ocele s vhodnou veľkosťou ôk.
Reconstituted water according to Chapter C.1 of this Annex (37) is recommended for use as overlying water in the tests;
Väčšina nadložnej vody sa opatrne vyleje a zvyšný sediment s vodou sa pretrepe, aby vznikol kal, ktorý je možné preosiať cez sito.
it can also be used for the laboratory cultures of the worms (see Appendix 2 for preparation).
Ak sa použije sito s otvormi 500 μm, väčšina častíc sedimentu prejde sitom veľmi rýchlo.
If required, natural water may be used.
Celé preosiatie by sa však malo urobiť rýchlo, aby sa zabránilo červom vliezť do ôk sita, alebo cez ne preliezť.
The chosen water must be of a quality that will allow the growth and reproduction of the test species for the duration of the acclimation and test periods without showing any abnormal appearance or behaviour.
Ak sa použije sito s otvormi 250 μm, zabráni to červom vliezť do ôk sita, alebo cez ne preliezť.
Lumbriculus variegatus has been demonstrated to survive, grow, and reproduce in this type of water (30), and maximum standardisation of test and culture conditions is provided.
Je však potrebné dbať na to, aby na site zostalo čo najmenej častíc sedimentu.
If a reconstituted water is used, its composition should be reported, and the water should be characterised prior to use at least by pH, oxygen content, and hardness (expressed as mg CaCO3/l).
Preosiaty kal z každej nádoby replikátu sa môže preosiať druhýkrát, aby sa zabezpečilo vybratie všetkých červov.
Analysis of the water for micropollutants prior to use might provide useful information (see, e.g., Appendix 3).
Alternatívnou metódou by mohlo byť zahriatie sedimentu uložením testovacích nádob do vodného kúpeľa s teplotou 50 – 60 °C.