natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The moisture content is adjusted to 40-60 % of the maximum WHC by the addition of the test chemical solution and/or by adding distilled or de-ionised water (see paragraphs 19-21).
deň
The moisture content is determined at the beginning and at the end of the test (by drying to constant weight at 105 °C) and should be within the optimal range for the survival of the worms.
kontrola pH umelej pôdy
A rough check of the soil moisture content can be obtained by gently squeezing the soil in the hand, if the moisture content is correct small drops of water should appear between the fingers.
Odmeranie maximálnej WHC pôdy
Selection and preparation of test animals
deň až –3. deň
The recommended test species is Enchytraeus albidus Henle 1837 (white potworm), a member of the family Enchytraeidae (order Oligochaeta, phylum Annelida).
roztriedenie červov na aklimatizáciu
E. albidus is one of the largest species of enchytraeids, with specimens of up to 35 mm in length being recorded (17)(18).
až 0. deň
E. albidus has a world-wide distribution and is found in marine, freshwater and terrestrial habitats, mainly in decaying organic matter (seaweed, compost) and rarely in meadows (9).
aklimatizácia červov najmenej 24 hodín
E. albidus is commercially available, as a fish food.
predvlhčenie umelo pripravenej pôdy a rozdelenie do dávok
It should be checked whether the culture is contaminated by other, usually smaller, species (1) (19).
deň
If contamination occurs, all worms should be washed with water in a petri dish.
príprava zásobných roztokov
Large adult specimens of E. albidus should then be selected (using a stereomicroscope) to start a new culture and all other worms are discarded.
aplikácia testovanej chemikálie
E. albidus can be bred easily in a wide range of organic materials (see Appendix 4).
váženie testovacieho substrátu do testovacích nádob
The life-cycle of E. albidus is short since maturity is reached between 33 days (at 18 °C) and 74 days (at 12 °C) (1).
zamiešanie potravy
Only cultures that have been kept without problems in the laboratory for at least 5 weeks (one generation) will be used for the test.
vloženie červov
Other species of the Enchytraeus genus are also suitable, e.g. E. buchholzi Vejdovsky 1879 or E. crypticus Westheide & Graefe 1992 (see Appendix 5).
meranie pH pôdy a obsahu vlhkosti v pôde
If other species of Enchytraeus are used, they must be clearly identified and the rationale for the selection of the species should be reported.
deň
The animals used in the tests are adult worms.
kontrola vlhkosti pôdy
They should have eggs (white spots) in the clitellum region, and they should be approximately the same size (about 1 cm long).
kŕmenie
Synchronisation of the breeding culture is not necessary.
deň
If the enchytraeids are not bred in the same soil type and under the conditions (including feeding) used for the final test they must be acclimatised for at least 24 hours and up to three days.
stanovenie mortality dospelých jedincov
A larger number of adults than that needed for performing the test should initially be acclimatised to allow scope for rejection of damaged or otherwise unsuitable specimens.
odhad počtu juvenilných jedincov
At the end of the acclimatisation period, only worms containing eggs and exhibiting no behavioural abnormalities (e.g. trying to escape from the soil) are selected for the test.
deň
The worms are carefully removed using jeweller's tweezers, hooks or loops and placed in a petri dish containing a small amount of fresh water.
pozorovanie správania dospelých jedincov
Reconstituted fresh water as proposed in Chapter C.20 of this Annex (Daphnia magna Reproduction Test) is preferred for this purpose since de-ionised, de-mineralised or tap water could be harmful to the worms.
premiestnenie dospelých jedincov
The worms are inspected under a stereomicroscope and any that do not contain eggs are discarded.
deň
Care is taken to remove and discard any mites or springtails that might have infected the cultures.
bez kŕmenia
Healthy worms not used for the test are returned to the stock culture.
deň
Preparation of test concentrations
deň
Test chemical soluble in water
počítanie juvenilných červov
A solution of the test chemical is prepared in deionised water in a quantity sufficient for all replicates of one test concentration.
Spracovanie výsledkov
It is recommended to use an appropriate quantity of water to reach the required moisture content, i.e. 40 to 60 % of the maximum WHC (see paragraph 13).
Hoci v dodatku 7 je uvedený prehľad, žiadne definitívne štatistické usmernenia na analýzu výsledkov testu táto testovacia metóda neposkytuje.
Each solution of test chemical is mixed thoroughly with one batch of pre-moistened soil before being introduced into the test vessel.
V rámci testu na vyhľadávanie rozsahu je hlavným parametrom mortalita.
Test chemical insoluble in water
Preto by sa mali zaznamenať aj zmeny v správaní (napr. neschopnosť zavŕtať sa do pôdy, ležanie bez pohybu pri sklenej stene testovacej nádoby) a morfológii (napr. prítomnosť otvorených rán) dospelých jedincov, ako aj existencia každého juvenilného jedinca.
For chemicals insoluble in water but soluble in organic solvents, the test chemical can be dissolved in the smallest possible volume of a suitable vehicle (e.g. acetone).
Na stanovenie koncentrácie LC50 by sa mala spravidla používať probitová analýza (21) alebo logaritmická regresia.
Only volatile solvents should be used.
Napriek tomu v prípadoch, keď je táto metóda analýzy nevhodná (napr. ak sú k dispozícii menej ako tri koncentrácie čiastočne spôsobujúce usmrtenie), je možné použiť alternatívne metódy.
The vehicle is sprayed on or mixed with a small amount, for example 2,5 g, of fine quartz sand.
Tieto metódy môžu zahŕňať pohyblivé priemery (22), upravenú Spearman-Karberovu metódu (23) alebo jednoduchú interpoláciu (napr. geometrickú strednú hodnotu LC0 a LC100, vypočítanú ako súčin druhej odmocniny LC0 a hodnoty LC100).
The vehicle is eliminated by evaporation under a fume hood for at least one hour.
V rámci konečného testu je hlavným parametrom plodnosť (t. j. počet narodených juvenilných jedincov).
This mixture of quartz sand and test chemical is added to the pre-moistened soil and thoroughly mixed after adding an appropriate amount of de-ionised water to obtain the moisture required.
Pokiaľ však ide o test na vyhľadávanie rozsahu, všetky ostatné škodlivé príznaky by sa mali uviesť v záverečnej správe.
The final mixture is introduced into the test vessels.
Štatistická analýza si vyžaduje výpočet aritmetickej strednej hodnoty a štandardnej odchýlky vo vzťahu k reprodukcii pre vzorky s aplikovanou chemikáliou a kontrolné vzorky.
For chemicals that are poorly soluble in water and organic solvents, the equivalent of 2,5 g of finely ground quartz sand per test vessel is mixed with the quantity of test chemical to obtain the desired test concentration.
Ak sa vykonáva analýza variancie, štandardnú odchýlku (s) a stupne voľnosti (df) môže nahradiť odhad výberovej variancie, získaný postupom ANOVA, a jej stupne voľnosti, za predpokladu, že variancia nezávisí od koncentrácie.
This mixture of quartz sand and test chemical is added to the pre-moistened soil and thoroughly mixed after adding an appropriate amount of de-ionised water to obtain the required moisture content.
V tomto prípade sa použije jedna hodnota rozptylu pre kontrolné vzorky a pre vzorky s aplikovanou chemikáliou.
The final mixture is divided between the test vessels.
Tieto hodnoty sa zvyčajne vypočítajú pomocou komerčného štatistického softvéru s využitím výsledkov pre jednotlivé nádoby ako replikátov.
The procedure is repeated for each test concentration and an appropriate control is also prepared.
Ak sa spájanie údajov pre negatívne kontrolné vzorky a kontrolné vzorky s rozpúšťadlom zdá byť primeranejšie než porovnávanie s jednou z týchto skupín v rámci testu, malo by sa testovaním zistiť, či nie sú výrazne odlišné (vhodné testy sú uvedené v bode 45 a dodatku 7).
Chemicals should not normally be tested at concentrations higher than 1000 mg/kg dry mass of soil.
Ďalšie štatistické testovanie a odvodzovanie závisí od toho, či majú hodnoty pre replikáty normálne rozdelenie a sú homogénne, pokiaľ ide o ich rozptyl.
Testing at higher concentrations may however be required in accordance with the objectives of a specific test.
Odhad koncentrácie NOEC
PERFORMANCE OF THE TESTS
Uprednostniť by sa malo použitie výkonných testov.
Test groups and controls
Mali by sa využívať informácie napríklad z predchádzajúcich skúseností z medzilaboratórnych porovnávacích skúšok, prípadne iné historické údaje o tom, či sú údaje približne normálne rozdelené.
For each test concentration, an amount of test soil corresponding to 20 g dry weight is placed into the test vessel (see paragraphs 19-21).
Homogénnosť rozptylu (homoskedasticita) je kritickejšia.
Controls, without the test chemical, are also prepared.
Zo skúseností vyplýva, že rozptyl sa často zvyšuje s rastúcou strednou hodnotou.
Food is added to each vessel in accordance with procedures described in paragraph 29.
V týchto prípadoch by transformácia údajov mohla viesť k homoskedasticite.
Ten worms are randomly allocated to each test vessel.
Taká transformácia by však mala byť založená na skúsenostiach s historickými údajmi, a nie na údajoch, ktoré sú predmetom prešetrovania.
The worms are carefully transferred into each test vessel and placed on the surface of the soil using, for example, jeweller's tweezers, hooks or loops.
S homogénnymi údajmi by sa mali vykonať viaceré t-testy, ako napríklad Williamsov test (α = 0,05, jednostranný) (24) (25), alebo v určitých prípadoch Dunnettov test (26) (27).
The number of replicates for test concentrations and for controls depends on the test design used (see paragraph 34).
Je potrebné si uvedomiť, že v prípade nerovnakej replikácie sa tabuľkové t-hodnoty musia upraviť tak, ako navrhujú Dunnett a Williams.
The test vessels are positioned randomly in the test incubator and these positions are re-randomised weekly.
Niekedy sa reakcie nezvyšujú/neznižujú pravidelne v dôsledku veľkých odchýlok.
If a vehicle is used for application of the test chemical, one control series containing quartz sand sprayed or mixed with solvent should be run in addition to the test series.
V prípade výraznej odchýlky od monotónnosti je Dunnettov test vhodnejší.
The solvent or dispersant concentration should be the same as that used in the test vessels containing the test chemical.
Ak sa vyskytujú odchýlky od homoskedasticity, môže byť vhodné podrobnejšie preskúmať možné účinky na variancie s cieľom rozhodnúť, či sa t-testy môžu použiť bez výraznejšej straty výkonnosti (28).
A control series containing additional quartz sand (2,5 g per vessel) should be run for chemicals requiring administration in accordance with the procedures described in paragraph 21.
Ak sa vykonáva limitný test a sú splnené podmienky postupov parametrického testu (normalita, homogenita), môže sa použiť Studentov párový t-test, alebo inak Mannov-Whitneyho postup U-testu (29).
The test temperature is 20 ± 2 °C.
Odhad koncentrácie ECx
To discourage worms from escaping from the soil, the test is carried out under controlled light-dark cycles (preferably 16 hours light and 8 hours dark) with illumination of 400 to 800 lux in the area of the test vessels.
Pri výpočte ktorejkoľvek hodnoty ECx sa na regresnú analýzu (lineárnu alebo nelineárnu) používajú stredné hodnoty pre jednotlivé vzorky s aplikovanou chemikáliou, a to po získaní vhodnej funkcie závislosti dávky a reakcie.
In order to check the soil humidity, the vessels are weighed at the beginning of the test and thereafter once a week.
Pre rast červov ako nepretržitú reakciu sa hodnoty ECx môžu odhadnúť použitím vhodnej regresnej analýzy (35).
Weight loss is replenished by the addition of an appropriate amount of deionised water.
Medzi vhodné funkcie pre kvantálne údaje (mortalita/prežitie a počet vyprodukovaných potomkov) patria bežný sigmoid, logistická alebo Weibullova funkcia s dvomi až štyrmi parametrami, pričom niektoré z týchto funkcií môžu modelovať aj hormetické reakcie.
It should be noted that loss of water can be reduced by maintaining a high air-humidity (> 80 %) in the test incubator.
Ak sa lineárnou regresnou analýzou určila funkcia závislosti dávky a reakcie, mal by sa pred odhadom hodnoty ECx nájsť regresnou analýzou významný koeficient determinácie (r2) a/alebo sklon zadaním hodnoty zodpovedajúcej x % strednej hodnoty pre kontrolnú vzorku do rovnice získanej regresnou analýzou.
The moisture content and the pH, should be measured at the beginning and the end of both the range-finding test and the definitive test.
Hranice spoľahlivosti 95 % sa vypočítajú podľa Fiellera [citovaný v práci Finneyho (21)] alebo inými modernými vhodnými metódami.
Measurements should be made in control and treated (all concentrations) soil samples prepared and maintained in the same way as the test cultures but not containing worms.
Alternatívne sa reakcia modeluje ako percentuálna časť alebo podiel modelového parametra, ktorý sa interpretuje ako stredná hodnota reakcie kontrolnej vzorky.
Food should only be added to these soil samples at the start of the test to facilitate microbial activity.
V týchto prípadoch sa výsledky často môžu ľahko znázorniť normálnou (logistickou, Weibullovou) sigmoidnou krivkou s použitím postupu probitovej regresie (21).
The amount of food added should be the same as that added to the test cultures.
V týchto prípadoch sa váhová funkcia musí upraviť na metrické reakcie, ako uvádza Christensen (36).
It is not necessary to add further food to these vessels during the test.
Ak sa však pozoruje horméza, probitovú analýzu by mala nahradiť logistická alebo Weibullova funkcia so štyrmi parametrami, určená postupom nelineárnej regresie (36).
Feeding
Ak z údajov nie je možné určiť vhodnú funkciu závislosti dávky a reakcie, môžu sa na odhad hodnoty ECx a jej hraníc spoľahlivosti použiť alternatívne metódy, ako sú pohyblivé priemery podľa Thompsona (22) a upravený Spearman-Karberov postup (23).
A food capable of maintaining the enchytraeid population can be used.
Protokol o skúške musí obsahovať tieto informácie:
Rolled oats, preferably autoclaved before use to avoid microbial contamination (heating is also appropriate), have been found to be a suitable feeding material.
fyzikálny charakter, a ak je to relevantné, fyzikálno-chemické vlastnosti (napr. rozpustnosť vo vode, tlak pary),
Food is first provided by mixing 50 mg of ground rolled oats with the soil in each vessel before introducing the worms.
chemická identifikácia testovanej chemikálie podľa názvoslovia IUPAC, číslo CAS, číslo šarže, dávky, štrukturálny vzorec a čistota,
Thereafter, food is supplied weekly up to Day 21.
dátum expirácie vzorky.
Feeding is not carried out on Day 28 since the adults have been removed at this stage and the juvenile worms need relatively little additional food beyond this point.
použité testované živočíchy:
Feeding during the test comprises 25 mg of ground rolled oats per vessel placed carefully on the surface of the soil so as to avoid injuring the worms.
druh, vedecký názov, zdroj organizmov a podmienky chovu,
In order to reduce fungal growth, the oats flakes should be buried in the soil by covering with small amounts of soil.
zložky a príprava umelej pôdy,
If food remains uneaten the ration should be reduced.
metóda aplikácie testovanej chemikálie,
Design for the range-finding test
opis testovacích podmienok vrátane teploty, obsahu vlhkosti, pH atď.,
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example, five test chemical concentrations of 0,1, 1,0, 10, 100, and 1000 mg/kg (dry weight of soil).
úplný opis koncepcie experimentu a postupov.
One replicate for each treatment and control is sufficient.
Výsledky testu:
The duration of the range-finding test is two weeks.
mortalita dospelých červov po dvoch týždňoch a počet juvenilných jedincov na konci testu na vyhľadávanie rozsahu,
At the end of the test, mortality of the worms is assessed.
mortalita dospelých červov po troch týždňoch expozície a celý záznam o juvenilných jedincoch na konci konečného testu,
A worm is recorded as dead if it has no reaction to a mechanical stimulus at the anterior end.
akékoľvek pozorované fyzikálne alebo patologické príznaky a zmeny v správaní testovaných organizmov,
Additional information to mortality may also be useful in deciding on the range of concentrations to be used in the definitive test.
hodnoty LC50, NOEC a/alebo ECx (napr. EC50, EC10) pre reprodukciu, ak sú niektoré z nich použiteľné, spolu s intervalmi spoľahlivosti a grafom, ktorý znázorňuje model ich výpočtu, ako aj všetky informácie a pozorovania, ktoré môžu byť nápomocné pri interpretácii výsledkov,
Changes in adult behaviour (e.g. the inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and morphology (e.g. the presence of open wounds) should therefore also be recorded along with the presence of any juveniles.
Uvedú sa odchýlky od postupov opísaných v tejto testovacej metóde a všetky nezvyčajné udalosti počas testu.
The latter can be determined using the staining method described in Appendix 6.
Kapitola C.8 tejto prílohy, Toxicita pre dážďovky.
The LC50 can be approximately determined by calculating the geometrical mean of mortality data.
Part 1: Determination of acute toxicity using Artificial Soil substrate, No.
In setting the concentration range for the definitive test, effects on the reproduction are assumed to be lower than the LC50 by a factor of up to 10.
Part 2: Determination of effects on reproduction, No.
However, this is an empirical relation ship and in any specific case it might be different.
11268-2.
Additional observations made in the range-finding test such as the occurrence of juveniles can help refine the test chemical concentration range to be used for the definitive test.
Na účely tejto testovacej metódy sa používajú tieto vymedzenia pojmov:
In order for an accurate determination of the LC50 performing the test using at least four replicates each of the test chemical concentration and an adequate number of concentrations to cause at least four statistically significantly different mean responses at these concentrations) is recommended.
V rámci tohto testu sa účinné koncentrácie vyjadrujú ako hmotnosť testovanej chemikálie na suchú hmotnosť testovacej pôdy.
A similar number of the concentrations and replicates for the controls are used when they are applicable.
(nulová letálna koncentrácia) je koncentrácia testovanej chemikálie, ktorá v danom časovom úseku nespôsobí usmrtenie testovaných organizmov vystavených jej pôsobeniu.
Design for the definitive reproduction test
V rámci tohto testu sa LC0 vyjadruje ako hmotnosť testovanej chemikálie na suchú hmotnosť testovanej pôdy.
Three designs are proposed based on recommendations arising from a ring test (2)
(stredná letálna koncentrácia) je koncentrácia testovanej chemikálie, ktorá v danom časovom úseku spôsobí usmrtenie 50 % testovaných organizmov vystavených jej pôsobeniu.
For determination of the NOEC, at least five concentrations in a geometric series should be tested.
V rámci tohto testu sa LC50 vyjadruje ako hmotnosť testovanej chemikálie na suchú hmotnosť testovanej pôdy.
Four replicates for each test concentration plus eight controls are recommended.
(absolútna letálna koncentrácia) je koncentrácia testovanej chemikálie, ktorá v danom časovom úseku spôsobí usmrtenie 100 % testovaných organizmov vystavených jej pôsobeniu.
The concentrations should be spaced by a factor not exceeding 1,8.
V rámci tohto testu sa LC100 vyjadruje ako hmotnosť testovanej chemikálie na suchú hmotnosť testovanej pôdy.
For determination of the ECx (e.g. EC10, EC50), at least five concentrations should be tested and the concentrations should bracket ECx in order to enable ECx interpolation and not extrapolation At least four replicates for each test concentration and four control replicates are recommended.
LOEC (najnižšia koncentrácia s pozorovaným účinkom) je najnižšia koncentrácia testovanej chemikálie, ktorá má štatisticky významný účinok (p < 0,05).
The spacing factor may vary, i.e. less than or equal to 1,8 in the expected effect range and above 1,8 at the higher and lower concentrations.
V rámci tohto testu sa LOEC vyjadruje ako hmotnosť testovanej chemikálie na suchú hmotnosť testovacej pôdy.
A combined approach allows for determination of both the NOEC and ECx.
Všetky testovacie koncentrácie vyššie ako LOEC by za normálnych okolností mali vyvolať účinok, ktorý je štatisticky odlišný od kontrolných vzoriek.
Eight treatment concentrations in a geometric series should be used.
Akékoľvek odchýlky od uvedeného pri určovaní LOEC musia byť odôvodnené v správe o teste.
Four replicates for each treatment plus eight controls are recommended.
NOEC (koncentrácia bez pozorovaného účinku) je najvyššia koncentrácia testovanej chemikálie, bezprostredne pod koncentráciou LOEC, pri ktorej sa nepozoruje žiadny účinok.
Ten adult worms per test vessel should be used (see paragraph 23).
Miera reprodukcie je stredná hodnota počtu narodených juvenilných červov na počet dospelých červov počas testu.
Food is added to the test vessels at the beginning of the test and then once a week (see paragraph 29) up to and including Day 21.
Stanovenie maximálnej kapacity zadržiavania vody
On Day 21 the soil samples are carefully hand searched and living adult worms are observed and counted and changes in behaviour (e.g. inability to dig into the soil; lying motionless against the glass wall of the test vessel) and in morphology (e.g. open wounds) are recorded.
Stanovenie kapacity zadržiavania vody umelej pôdy
All adult worms are then removed from the test vessels and the test soil.
Táto metóda sa považuje za vhodnú.
The test soil containing any cocoons that had been produced are incubated for three additional weeks under the same test conditions except that feeding takes place only on Day 35 (i.e. 25 mg ground rolled oats per vessel).
Opísaná je v prílohe C normy ISO DIS 11268-2.
After six weeks, the newly hatched worms are counted.
Pomocou vhodného zariadenia (špirálová trubica atď.) sa odoberie určené množstvo (napr. 5 g) testovacieho pôdneho substrátu.
The method based on Bengal red staining (see Appendix 6) is recommended although other wet (but not heat) extraction and floatation techniques (see Appendix 6) have also proved suitable (4)(10)(11)(20).
Spodná časť trubice sa zakryje kúskom filtračného papiera a po naplnení vodou sa umiestni na stojan vo vodnom kúpeli.
Bengal red staining is recommended because wet extraction from a soil substrate can be hampered by turbidity caused by suspended clay particles.
Rúrku treba postupne ponoriť, kým hladina vody nebude nad povrchom pôdy.
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (i.e. 1000 mg/kg), the reproduction test can be performed as a limit test, using 1000 mg/kg in order to demonstrate that the NOEC for reproduction is greater than this value.
Potom sa nechá vo vode približne tri hodiny.
Summary and timetable for the test
Keďže nie všetka voda, ktorú absorbujú kapiláry pôdy, sa môže zachovať, vzorke pôdy by sa malo umožniť odvodnenie počas dvoch hodín tak, že sa trubica uloží na vrstvu veľmi mokrého jemne drveného kremenného piesku v uzavretej nádobe (aby sa zabránilo vysúšaniu).
The steps of the test can be summarised as follows:
Vzorka sa potom odváži vysušená na konštantnú hmotnosť pri teplote 105 °C.
Time
Kapacitu zadržiavania vody (WHC) je možné vypočítať takto:
Day –7 or earlier
WHCv % suchej hmotnosti
Prepare artificial soil (mixing of dry constituents)
Kde:
Day –5
S substrát saturovaný vodou + hmotnosť rúrky + hmotnosť filtračného papiera,
Check pH of artificial soil
T hmotnosť obalu (hmotnosť rúrky + hmotnosť filtračného papiera),
Measure max WHC of soil
D suchá hmotnosť substrátu.
Day –5 to –3
LITERATÚRA:
Sort worms for acclimatisation
Stanovenie pH pôdy
Day — 3 to 0
Táto metóda stanovenia pH vzorky pôdy je založená na opise uvedenom v norme ISO 10390 (Kvalita pôdy – stanovenie pH).
Acclimatise worms for at least 24 hours
Určené množstvo pôdy sa suší pri teplote miestnosti najmenej 12 hodín.