natgillin/translations-raw huggingface dataset:
As in any bioassay using experimental animals, careful considerations should be given to the necessity to carry out this study.
Potkany sa v Hershbergerovom biologickom teste bežne používajú od 30. rokov 20. storočia.
Basically there may be two reasons for such a decision:
Hoci je z biologického hľadiska pravdepodobné, že reakcie u myší by boli podobné ako u potkanov, na základe 70-ročných skúseností s modelom používajúcim potkany sa pre Hershbergerov biologický test vybral tento druh.
high exposure potential (Level 1 of the Conceptual Framework) or indications for (anti)androgenicity in in vitro assays (Level 2) supporting investigations whether such effects may occur in vivo;
Údaje získané z Hershbergerovho biologického testu môžu navyše priniesť výsledky, ktoré môžu viesť k dlhodobej viacgeneračnej štúdii, preto sa v oboch štúdiách môžu použiť zvieratá z rovnakého druhu, kmeňa a zdroja.
effects consistent with (anti)androgenicity in Level 4 or 5 in vivo tests supporting investigations of the specific mode of action, e.g. to determine whether the effects were due to an (anti)androgenic mechanism.
Protokol umožňuje laboratóriám vybrať kmeň potkanov, ktorý bude použitý v teste, a vo všeobecnosti by to mal byť kmeň, ktorý zúčastnené laboratórium používalo v minulosti.
The Hershberger Bioassay achieves its sensitivity by using males with minimal endogenous androgen production.
Môžu sa použiť bežne používané laboratórne kmene potkanov;
This is achieved through the use ofcastrated males provided an adequate time after castration for the target tissues to regress to a minimal and uniform baseline weight is allowed.
nemali by sa ale používať kmene, u ktorých dochádza k dospievaniu podstatne neskôr ako 42 dní po narodení, pretože kastrácia takýchto samcov vo veku 42 dní by mohla znemožniť meranie hmotnosti žaluďa, ktoré možno vykonať až po oddelení predkožky od tela penisu.
Thus, when screening of potential androgenic activity, there are low endogenous levels of circulating androgens, the hypothalamic — pituitary — gonad axis is rendered unable to compensate via feedback mechanisms, the ability of the tissues to respond is maximised, and the starting tissue weight variability is minimised.
Preto sa až na výnimočné prípady nepožívajú kmene potkanov vyšľachtené z kmeňa Fischer 344.
When screening of potential anti-androgenic activity, a more consistent tissue weight gain can be achieved when the tissues are stimulated by a reference androgen.
Pohlavný vývoj u potkanov z kmeňa Fischer 344 prebieha v inom časovom rozmedzí v porovnaní s inými bežnejšie používanými kmeňmi, ako je Sprague Dawley alebo Wistar (16).
As a result, the Hershberger Bioassay requires only 6 animals per dose group whereas other assays with intact pubertal or adult males suggest using 15 males per dose group.
V prípade použitia takého kmeňa musí laboratórium vykonať kastráciu u zvierat, ktoré sú o niečo staršie, a preukázať citlivosť použitého kmeňa.
Castration of peripubertal male rats should be done in an appropriate manner using approved anaesthetics and aseptic technique.
Laboratórium musí jasne uviesť odôvodnenie výberu kmeňa potkanov.
Analgesics should be administered on the first few days following surgery to eliminate post-surgical discomfort.
Ak je skríningový test predbežným testom štúdie orálnej toxicity pri opakovaných dávkach, reprodukčnej a vývojovej štúdie alebo dlhodobej štúdie, vo všetkých štúdiách sa podľa možnosti použijú zvieratá z toho istého kmeňa a zdroja.
Hence, castration reduces the numbers of animals required to screen for these endocrine activities.
Tieto opisy starostlivosti a zaobchádzania predstavujú minimálne normy a v prípade, že miestne predpisy sú prísnejšie, budú mať prednosť miestne predpisy, ako napríklad smernica Európskeho parlamentu a Rady 2010/63/EÚ z 22. septembra 2010 o ochrane zvierat používaných na vedecké účely (26).
When screening for potential androgenic activity, the test chemical is administered daily by oral gavage or subcutaneous (sc) injection for a period of 10 consecutive days.
S ohľadom na nízky vek zvierat a na skutočnosť, že potkany sú sociálne zvieratá, sa uprednostňuje umiestnenie zvierat v skupinách pred izoláciou zvierat.
Test chemicals are administered to a minimum of two treatment groups of experimental animals using one dose level per group.
Umiestnením zvierat po dvoch alebo troch na klietku sa zabráni stiesneniu zvierat a vzniku súvisiaceho stresu, ktorý by mohol narušiť hormonálnu kontrolu vývoja akcesórnych tkanív pohlavných orgánov.
A statistically significant increase in two or more target organ weights of the test chemical groups compared to the vehicle control group indicates that the test chemical is positive for potential androgenic activity (See paragraph 60).
Klietky sa musia dôkladne vyčistiť, aby sa odstránili možné kontaminanty, a usporiadať tak, aby sa minimalizovali možné vplyvy vzhľadom na ich umiestnenie.
Androgens, like trenbolone that cannot be 5α-reduced have more pronounced effects on the LABC and GP versus TP, but all tissues should display increased growth.
Výberom vhodnej veľkosti klietok (~ 2000 centimetrov štvorcových) sa zabráni ich preplneniu.
When screening for potential antiandrogenic activity, the test chemical is administered daily by oral gavage or subcutaneous injection for a period of 10 consecutive days in concert with daily TP doses (0,2 or 0,4 mg/kg/d) by sc injection.
Každé zviera sa humánnym spôsobom jednotlivo označí (napr. pomocou ušných značiek alebo štítkov).
It was determined in the validation programme that either 0,2 or 0,4 mg/kg/d of TP could be used as both were effective in the detection of antiandrogens and, therefore, only one dose should be selected for use in the assay.
Metóda značenia sa zaznamená.
Graduated test chemical doses are administered to a minimum of three treatment groups of experimental animals using one dose level per group.
Laboratóriá by mali v priebehu Hershbergerovho biologického testu používať laboratórne krmivá, ktoré bežne používajú pri chemickom testovaní.
A statistically significant decrease in two or more target organ weights of the test chemical plus TP groups compared to the TP only control group indicates that the test chemical is positive for potential antiandrogenic activity (See paragraph 61).
Vo validačných štúdiách biologického testu neboli pozorované žiadne účinky ani variabilita na základe použitého krmiva.
Selection of species and strain
Použité krmivo sa zaznamená a vzorka laboratórneho krmiva sa uchová pre prípad neskoršej analýzy.
The rat has been routinely used in the Hershberger Bioassay since the 1930s.
Kritériá pre hmotnosti orgánov podmienených účinkom androgénov
Although it is biologically plausible that both the rat and mouse would display similar responses, based upon 70 years of experience with the rat model, the rat is the species of choice for the Hershberger Bioassay.
Vo validačnej štúdii sa nepreukázalo, že zníženie telesnej hmotnosti má v cieľových tkanivách vplyv na zvýšenie alebo pokles rastu hmotnosti tkaniva (t. j. v tkanivách, ktorých hmotnosť sa má v tejto štúdii vážiť).
In addition, since Hershberger Bioassay data may be preliminary to a long-term multigenerational study, this allows animals from the same species, strain and source to be used in both studies.
Na základe porovnania rôznych kmeňov potkanov, ktoré boli úspešne použité vo validačnom programe, sú hmotnosti orgánov podmienených účinkom androgénov vyššie u ťažších kmeňov potkana ako u ľahších kmeňov.
This protocol allows laboratories to select the strain of rat to be used in the assay which should generally be that used historically by the participating laboratory.
Preto sa v kritériách pre Hershbergerov biologický test neuvádzajú absolútne očakávané hmotnosti orgánov pre pozitívne a negatívne kontroly.
Commonly used laboratory rat strains may be used;
Vzhľadom na to, že variačný koeficient (CV) pre tkanivo má inverzný vzťah k štatistickej významnosti, kritériá pre Hershbergerov biologický test sú založené na maximálnych hodnotách CV pre každé tkanivo (tabuľka 1).
however, strains that mature significantly later than 42 days of age should not be used since castration of these males at 42 days of age could preclude measurement of glans penis weights, which can only be done after the prepuce is separated from the penile shaft.
Hodnoty variačného koeficientu sú odvodené z validačných štúdií OECD.
Thus, strains derived from the Fisher 344 rat should not be used, except in rare cases.
V prípade negatívnych výsledkov by laboratóriá mali preskúmať hodnoty variačného koeficientu (CV) z kontrolnej skupiny a ošetrenej skupiny s vysokými dávkami s cieľom určiť, či boli prekročené kritériá maximálnych hodnôt CV.
The Fisher 344 rat has a different timing of sexual development compared with other more commonly used strains such as Sprague Dawley or Wistar strains (16).
Štúdia sa musí opakovať, ak:
If such a strain is to be used, the laboratory should castrate them at a slightly older age and be able to demonstrate the sensitivity of the strain used.
tri alebo viac z desiatich možných jednotlivých hodnôt variačného koeficientu v kontrolnej skupine a ošetrených skupinách s vysokými dávkami prekročilo maximálne hodnoty stanovené pre štúdie agonistov a antagonistov v tabuľke 1, a 2) aspoň dve cieľové tkanivá vykazovali zanedbateľné hodnoty, t. j., hodnoty r od 0,05 do 0,10.
The rationale for the choice of rat strain should be clearly stated by the laboratory.
Maximálne prípustné hodnoty variačného koeficientu (CV) stanovené pre cieľové akcesórne tkanivá pohlavných orgánov pre model kastrovaných samcov vo validačných štúdiách OECD [12]
Where the screening assay may be preliminary to a repeated dose oral study, a reproductive and developmental study, or a long-term study, preferably animals from the same strain and source should be used in all studies.
Tkanivo
All procedures should conform to all local standards of laboratory animal care.
Antiandrogénne účinky
These descriptions of care and treatment are minimum standards and will be superseded by more stringent local regulations, such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (26).
Androgénne účinky
Group housing is preferable to isolation because of the young age of the animals and the fact that rats are social animals.
Semenné mechúriky
Housing of two or three animals per cage avoids crowding and associated stress that may interfere with the hormonal control of the development of the sex accessory tissue.
Ventrálna prostata
Cages should be thoroughly cleaned to remove possible contaminants and arranged in such a way that possible effects due to cage placement are minimised.
Cowperove žľazy
Cages of a proper size (~ 2000 square centimetres) will prevent overcrowding.
Žaluď
Each animal should be identified individually (e.g. ear mark or tag) using a humane method.
Súlad s predpismi a overovanie laboratória
The method of identification should be recorded.
Na rozdiel od uterotrofického testu (kapitola B.54 tejto prílohy) nie je v Hershbergerovom teste potrebné pred začiatkom štúdie preukázať spôsobilosť laboratória, pretože v rámci testu prebiehajú ako jeho neoddeliteľná súčasť súbežné pozitívne (testosterón-propionát a flutamid) a negatívne kontroly.
Laboratories executing the Hershberger Bioassay should use the laboratory diet normally used in their chemical testing work.
Každá ošetrená a kontrolná skupina by mala zahŕňať minimálne 6 zvierat.
In the validation studies of the Bioassay, no effects or variability were observed that were attributable to the diet.
Týka sa to protokolu v prípade androgénov, ako aj protokolu v prípade antiandrogénov.
The diet used will be recorded and a sample of the laboratory diet should be retained for possible future analysis.
Kastrácia
Performance Criteria for androgen-dependent organ weights
Zvieratám sa po prijatí umožní počiatočná niekoľkodňová aklimatizácia s cieľom uistiť sa, že zvieratá sú zdravé a v dobrom stave.
During the validation study, there was no evidence that a decrease in body weight affected increases or decreases in the growth of tissue weights for target tissues (i.e. that should be weighted in this study).
Zvieratá sa kastrujú, keď dosiahnu vek 42 dní, t. j. na 42. postnatálny deň (PND) alebo neskôr, nie však skôr, pretože u zvierat kastrovaných pred 42.
Among the different strains of rat used successfully in the validation programme, androgen-dependent organ weights are larger in the heavier rat strains than in the lighter strains.
PND nemusí dôjsť k oddeleniu predkožky.
Therefore, the Hershberger Bioassay performance criteria do not include absolute expected organ weights for positive and negative controls.
Pred kastráciou sa zvieratám podá anestézia, potom sa nareže miešok, odstránia sa semenníky spolu s nadsemenníkmi a podviažu sa cievy a semenovod.
Because the Coefficient of Variation (CV) for a tissue has an inverse relationship with statistical power, the Hershberger Bioassay performance criteria are based on maximum CV values for each tissue (Table 1).
Po uistení sa, že nedochádza ku krvácaniu, sa miešok zašije alebo uzavrie pomocou šicích svoriek.
The CVs are derived from the OECD validation studies.
V prvých dňoch po operácii sa zvieratám podávajú analgetiká s cieľom zmierniť pooperačné bolesti.
In the case of negative outcomes, laboratories should examine the CVs from the control group and the high dose treatment group to determine if the maximum CV performance criteria have been exceeded.
Ak sa zakúpia kastrované zvieratá od dodávateľa, dodávateľ musí potvrdiť vek a stupeň pohlavnej zrelosti zvierat.
The study should be repeated when:
Aklimatizácia po kastrácii
three or more of the 10 possible individual CVs in the control and high dose treatment groups exceed the maximums designated for agonist and antagonist studies in Tables 1 and 2) at least two target tissues were marginally insignificant, i.e. r values between 0,05 and 0,10.
Aklimatizácia zvierat na laboratórne podmienky by mala pokračovať minimálne 7 dní po kastrácii, aby sa umožnila regresia hmotnosti cieľového tkaniva.
Maximum allowable CVs Determined for the Target Sex Accessory Tissues for the castrate model in the OECD Validation Studies [12].
Zvieratá je potrebné každý deň pozorovať a odstrániť každé zviera s príznakmi choroby alebo fyzickými abnormalitami.
Tissue
S podávaním dávok (v rámci štúdie) sa teda môže začať už na 49.
Antiandrogenic effects
PND, nie však neskôr ako na 60.
Androgenic effects
PND.
Seminal vesicles
Vek pri pitve nesmie byť vyšší ako 70.
Ventral prostate
PND.
Cowper's glands
Táto flexibilita umožňuje laboratóriu efektívne si naplánovať činnosti pri vykonávaní testu.
Glans penis
Telesná hmotnosť a randomizácia skupín
Regulatory compliance and laboratory verification
Rozdiely v telesnej hmotnosti u jednotlivých zvierat sú zdrojom variability v hmotnostiach tkaniva v rámci jednotlivých skupín zvierat a medzi nimi.
Unlike the Uterotrophic assay (Chapter B.54 of this Annex), a demonstration of laboratory competence prior to the initiation of the study is not necessary for the Hershberger assay because concurrent positive (Testosterone Propionate and Flutamide) and negative controls are run as an integral part of the assay.
Vyššia variabilita hmotnosti tkaniva má za následok zvýšený variačný koeficient (CV) a znižuje štatistickú významnosť testu (niekedy sa označuje ako citlivosť testu).
Each treated and control group should include a minimum of 6 animals.
Preto je potrebné experimentálne a štatistické riadenie odchýlok telesnej hmotnosti.
This applies to both the androgenic and antiandrogenic protocols.
Experimentálne riadenie zahŕňa zavedenie malých odchýlok telesnej hmotnosti v rámci pokusných skupín a medzi nimi.
Castration
Po prvé, nezvyčajne malé alebo veľké zvieratá sa vyradia a nebudú zahrnuté do pokusných skupín.
There should be an initial acclimatisation period of several days after receipt of the animals to ensure that the animals are healthy and thriving.
Na začiatku štúdie by hmotnostné odchýlky použitých zvierat nemali presiahnuť ± 20 % strednej hmotnosti (napríklad 175 g ± 35 g u kastrovaných peripubertálnych potkanov).
Since animals castrated before 42 days of age or postnatal day (pnd) 42 may not display preputial separation, animals should be castrated on pnd 42 or thereafter, not before.
Po druhé, zvieratá sa rozdelia do skupín (kontrolných a ošetrovaných) na základe náhodného rozloženia hmotnosti tak, že stredná telesná hmotnosť každej skupiny sa od akejkoľvek inej skupiny štatisticky nebude odlišovať.
The animals are castrated under anaesthesia by placing an incision in the scrotum and removing both testes and epididymides with ligation of blood vessels and seminal ducts.
Použitý postup blokovej randomizácie sa zaznamená.
After confirming that no bleeding is occurring, the scrotum should be closed with suture or autoclips.
Keďže v dôsledku toxicity sa môže telesná hmotnosť ošetrovaných skupín v porovnaní s kontrolnou skupinou znížiť, namiesto telesnej hmotnosti by sa pri pitve ako štatistická spolupremenná mohla použiť telesná hmotnosť zaznamenaná prvý deň podávania testovanej chemikálie.
Animals should be treated with analgesics for the first few days after surgery to alleviate any post-surgical discomfort.
Na určenie možného androgénneho pôsobenia testovanej chemikálie in vivo zvyčajne postačujú dve dávkové skupiny testovanej chemikálie, pozitívna kontrola a (negatívna) kontrola nosiča (pozri odsek 43), preto sa tento model uprednostňuje v záujme dobrých životných podmienok zvierat.
If castrated animals are purchased from an animal supplier, the age of animals and stage of sexual maturity should be assured by the supplier.
Ak sa vyžadujú informácie nad rámec určenia androgénneho pôsobenia (napríklad odhad účinnosti), je potrebné zvážiť iný dávkový režim.
Acclimatisation after castration
Na účely testovania antiandrogénov sa testovaná chemikália podáva spolu s referenčným androgénnym agonistom.
The animals should continue acclimation to the laboratory conditions to allow for the regression in the target tissue weights for a minimum of 7 days following castration.
Použijú sa najmenej 3 pokusné skupiny s rôznymi dávkami testovanej chemikálie, pozitívna a negatívna kontrola (pozri odsek 44).
Animals should be observed daily, and any animals with evidence of disease or physical abnormalities should be removed.
Ak sa pri podávaní testovanej chemikálie používa nosič, kontrolná skupina dostane nosič v najvyššom používanom objeme, aký sa použil u pokusných skupín.
Thus, treatment with initiation of dosing (on study) may commence as early as pnd 49 days of age, but not later than pnd 60.
Pri určovaní najvyššej dávky sa musí v prvom rade vziať do úvahy úroveň LD50 a/alebo informácie o akútnej toxicite, aby sa predišlo úhynu, ťažkému utrpeniu alebo bolesti zvierat (17) (18) (19) (20), a v druhom rade dostupné informácie o dávkach použitých v štúdiách subchronickej a chronickej toxicity.
Age at necropsy should not be greater than pnd 70.
Najvyššia dávka by vo všeobecnosti nemala spôsobiť zníženie konečnej telesnej hmotnosti zvierat väčšie ako 10 % kontrolnej hmotnosti.
This flexibility allows a laboratory to schedule the experimental work efficiently.
Najvyššia dávka by mala byť buď 1) najvyššia dávka, ktorá zabezpečí prežitie zvierat a nespôsobuje výraznú toxicitu alebo utrpenie zvierat po 10 po sebe nasledujúcich dňoch podávania chemikálie do maximálnej dávky 1000 mg/kg/deň (pozri odsek 36), alebo 2) dávka, ktorá vyvolá (anti)androgénne účinky, podľa toho, ktorá dávka je nižšia.
Body weight and group randomisation
Dlhé intervaly, napr. pol log jednotiek (zodpovedajúce priebehu dávky 3,2) alebo až 1 log jednotiek medzi dávkami sú prípustné.
Differences in individual body weights are a source of variability in tissue weights both within and among groups of animals.
Ak nie sú k dispozícii vhodné údaje, môže sa vykonať štúdia na zistenie rozsahu dávkovania (pozri odsek 37) s cieľom stanoviť dávky, ktoré sa použijú.
Increasing tissue weight variability results in an increased coefficient of variation (CV) and decreases the statistical power of the assay (sometimes referred to as assay sensitivity).
Limitná úroveň dávky
Therefore, variations in body weight should be both experimentally and statistically controlled.
Ak test vykonaný v súlade s opísanými postupmi, pri ktorom sa použije limitná dávka 1000 mg/kg telesnej hmotnosti/deň alebo nižšia dávka, nevyvolá štatisticky významnú zmenu hmotnosti reprodukčných orgánov, potom testovanie s ďalšími úrovňami dávok možno považovať za zbytočné.
Experimental control involves producing small variations in body weight within and among the study groups.
Limitná dávka sa použije s výnimkou prípadov, keď údaje o expozícii u človeka indikujú potrebu použiť vyššiu úroveň dávky.
First, unusually small or large animals should be avoided and not placed in the study cohort.
V prípade potreby sa na niekoľkých zvieratách môže vykonať predbežná štúdia na zistenie rozsahu s cieľom vybrať vhodné dávkové skupiny [na základe metód testovania akútnej toxicity (kapitoly B.1 a, B.1 b tejto prílohy (27), OECD TG 425 (19))].
At study commencement the weight variation of animals used should not exceed ± 20 % of the mean weight (e.g. 175 g ± 35 g for castrated peripubertal rats).
V prípade Hershbergerovho biologického testu je cieľom vybrať dávky, ktoré zabezpečia prežitie zvierat a ktoré nespôsobujú výraznú toxicitu alebo utrpenie zvierat po desiatich po sebe nasledujúcich dňoch podávania chemikálie, až do limitnej dávky 1000 mg/kg/deň, ako sa uvádza v odseku 35 a 36.
Second, animals should be assigned to groups (both control and treatment) by randomised weight distribution, so that mean body weight of each group is not statistically different from any other group.
V tomto ohľade možno vychádzať z usmerňovacieho dokumentu OECD (17), v ktorom sa vymedzujú klinické príznaky indikujúce toxicitu alebo utrpenie zvierat.
The block randomisation procedure used should be recorded.
Ak je to v rámci tejto štúdie na zistenie rozsahu po desiatich dňoch podávania možné, cieľové tkanivá sa môžu odobrať a odvážiť približne 24 hodín po podaní poslednej dávky.
Because toxicity may decrease the body weight of treated groups relative to the control group, the body weight on the first day of test chemical administration could be used as the statistical covariate, not the body weight at necropsy.
Tieto údaje možno následne použiť ako východisko pri výbere dávok v hlavnej štúdii.
In order to establish whether a test chemical can have androgenic action in vivo, two dose groups of the test chemical plus positive and vehicle (negative) controls (See paragraph 43) are normally sufficient, and this design is therefore preferred for animal welfare reasons.
Referenčné chemikálie a nosič
If information beyond identification of androgenic activity (such as an estimate of potency) is required, a different dosing regimen should be considered.
Referenčným androgénnym agonistom je testosterón propionát (TP), č. CAS 57-82-5.
To test for antiandrogens, the test chemical is administered together with a reference androgen agonist.
Úroveň dávky referenčného TP môže byť 0,2 mg/kg telesnej hmotnosti/deň alebo 0,4 mg/kg telesnej hmotnosti/deň.
A minimum of 3 test groups with different doses of the test chemical and a positive and a negative control (See paragraph 44) should be used.
Referenčným androgénnym antagonistom je flutamid (FT), č. CAS 1311-84-7.
If a vehicle is used in administering the test chemical, the control group should receive the vehicle in the highest volume used with the test groups.
Úroveň dávky referenčného FT je 3 mg/kg telesnej hmotnosti/deň a mala by sa podávať spolu s dávkou referenčného TP.
The highest dose level should first take into consideration the LD50 and/or acute toxicity information in order to avoid death, severe suffering or distress in the animals (17)(18)(19)(20) and, second, take into consideration available information on the doses used in subchronic and chronic studies.
Keďže mnohé androgénne ligandy alebo ich metabolické prekurzory sú však väčšinou hydrofóbne, najbežnejším prístupom je použitie roztoku/suspenzie v oleji (napr. kukuričný, arašidový, sezamový alebo olivový olej).