natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If there are significant differences between the sexes in terms of toxicity or metabolism, then both males and females will be required.
Po 28-dňovej expozícii s následnou dobou 3 dní odberu vzoriek predstavujú naakumulované spermie zhromaždené zo semenovodu/chvosta semenníka (7) (8) populáciu buniek exponovaných počas približne druhej polovice spermatogenézy, čo zahŕňa meiotické a postmeiotické obdobie, ale nie obdobie spermatogonálnych buniek alebo obdobie kmeňových buniek.
Administration Period
Na primeraný odber vzoriek buniek v semenovode/chvoste semenníka, ktoré boli spermatogonálnymi kmeňovými bunkami počas obdobia expozície, je po skončení podávania potrebný ďalší čas na odber vzoriek v trvaní minimálne 7 týždňov (myši) alebo 10 týždňov (potkany).
Based on observations that mutations accumulate with each treatment, a repeated-dose regimen is necessary, with daily treatments for a period of 28 days.
Bunky extrudované zo semenotvorných tubulov po režime 28 + 3 dni tvoria zmiešanú populáciu obohatenú o všetky stupne vyvíjajúcich sa zárodočných buniek (7) (8).
This is generally considered acceptable both for producing a sufficient accumulation of mutations by weak mutagens, and for providing an exposure time adequate for detecting mutations in slowly proliferating organs.
Odber vzoriek z týchto buniek na zistenie génovej mutácie neposkytuje také presné posúdenie stupňov, v ktorých boli indukované mutácie zárodočných buniek, aké možno získať z odberu vzoriek spermií zo semenovodu/chvostu semenníka (keďže tam sú rôzne typy zárodočných buniek, z ktorých sa odobrali vzorky z tubulov, a bude tam niekoľko somatických buniek, ktoré kontaminujú túto populáciu buniek).
Alternative treatment regimens may be appropriate for some evaluations, and these alternative dosing schedules should be scientifically justified in the protocol.
Odber vzoriek zo semenotvorných tubulov spoločne so spermiami zo semenovodu/chvostu semenníka len v režime 28 + 3 dní by však určitým spôsobom pokryl bunky exponované vo väčšine fáz vývoja zárodočných buniek a mohol by byť užitočný na zistenie určitých mutagénov zárodočných buniek.
Treatments should not be shorter than the time required for the complete induction of all the relevant metabolising enzymes, and shorter treatments may necessitate the use of multiple sampling times that are suitable for organs with different proliferation rates.
Najmenej raz denne je nutné uskutočniť všeobecné klinické pozorovania, najlepšie vždy v tom istom čase s ohľadom na časový vrchol očakávaných účinkov po podaní.
In any case, all available information (e.g. on general toxicity or metabolism and pharmacokinetics) should be used when justifying a protocol, especially when deviating from the above standard recommendations.
Mal by sa zaznamenať zdravotný stav zvierat.
While it may increase sensitivity, treatment times longer than 8 weeks should be explained clearly and justified, since long treatment times may produce an apparent increase in mutant frequency through clonal expansion (29).
Najmenej dvakrát denne je potrebné sledovať chorobnosť a úmrtnosť zvierat.
Dose Levels
Všetky zvieratá by sa mali vážiť najmenej raz za týždeň a pri usmrtení.
Dose levels should be based on the results of a dose range-finding study measuring general toxicity that was conducted by the same route of exposure, or on the results of pre-existing sub-acute toxicity studies.
Spotreba potravy by sa mala merať aspoň raz týždenne.
Non-transgenic animals of the same rodent strain may be used for determining dose ranges.
Ak sa testovaná chemikália podáva vo vode na pitie, spotreba vody by sa mala merať pri každej výmene vody a aspoň raz za týždeň.
In the main test, in order to obtain dose response information, a complete study should include a negative control group (see paragraph 22) and a minimum of three, appropriately-spaced dose levels, except where the limit dose has been used (see paragraph 28).
Zvieratá, ktoré vykazujú neletálne ukazovatele nadmernej toxicity, by mali byť usmrtené pred dokončením testovacieho obdobia (23).
The top dose should be the Maximum Tolerated Dose (MTD).
Zhromažďovanie tkaniva
The MTD is defined as the dose producing signs of toxicity such that higher dose levels, based on the same dosing regimen, would be expected to produce lethality.
Treba jasne vymedziť odôvodnenie zhromažďovania tkanív.
Chemicals with specific biological activities at low non-toxic doses (such as hormones and mitogens), and chemicals which exhibit saturation of toxicokinetic properties may be exceptions to the dose-setting criteria and should be evaluated on a case-by-case basis.
Keďže indukciu mutácie je možné skúmať prakticky v každom tkanive, výber zhromažďovaných tkanív by mal byť založený na dôvode vykonania štúdie a na akýchkoľvek existujúcich údajoch o mutagenite, karcinogenite alebo toxicite skúmanej chemikálie.
If dose range-finding experiments, or existing data from related rodent strains, indicate that a treatment regime of at least the limit dose (see below) produces no observable toxic effects,and if genotoxicity would not be expected based upon data from structurally related chemicals, then a full study using three dose levels may not be considered necessary.
Tie by mali predstavovať tkanivá s rýchlou proliferáciou, pomalou proliferáciou a plochy kontaktných tkanív.
For an administration period of 28 days (i.e. 28 daily treatments), the limit dose is 1000 mg/kg body weight/day.
Okrem toho by sa mali zhromažďovať spermie zo semenovodu/chvosta semenníka a vyvíjajúce sa zárodočné bunky zo semenotvorných tubulov (ako sa opisuje v odsekoch 32 a 33), ktoré by sa mali uskladniť pre prípad, žeby bola v budúcnosti potrebná analýza mutagenity zárodočných buniek.
For administration periods of 14 days or less, the limit dose is 2000 mg/kg/body weight/day (dosing schedules differing from 28 daily treatments should be scientifically justified in the protocol; see paragraph 26).
Orgány by sa mali vážiť a v prípade väčších orgánov by sa mala zo všetkých zvierat zhromažďovať rovnaká časť.
Administration of Doses
Uskladňovanie tkanív a DNA
The test chemical is usually administered by gavage using a stomach tube or a suitable intubation cannula.
Tkanivá (alebo homogenáty tkanív) by sa mali uskladňovať pri teplote nižšej ako - 70 °C a na izoláciu DNA by sa mali použiť do 5 rokov.
In general, the anticipated route of human exposure should be considered when designing an assay.
Izolovaná DNA, uchovávaná zmrazená pri teplote 4 °C vo vhodnom tlmivom roztoku, by sa mala na analýzu mutácií optimálne použiť do jedného roka.
Therefore, other routes of exposure (such as drinking water, subcutaneous, intravenous, topical, inhalation, intratracheal, dietary, or implantation) may be acceptable where they can be justified.
Výber tkanív na analýzu mutácií
Intraperitoneal injection is not recommended since it is not a physiologically relevant route of human exposure.
Výber tkanív by mal byť založený na týchto úvahách:
The maximum volume of liquid that can be administered by gavage or injection at one time depends on the size of the test animal.
spôsob podávania alebo miesto prvého kontaktu (napr. žľaznatý žalúdok pri orálnom podávaní, pľúca pri podávaní prostredníctvom inhalácie alebo koža pri lokálnej aplikácii);
The volume should not exceed 2 ml/100 g body weight.
a 2) farmakokinetické parametre pozorované v štúdiách všeobecnej toxicity, z ktorých vyplýva tkanivová dispozícia, retencia alebo akumulácia alebo cieľové orgány toxicity.
The use of volumes greater than this should be justified.
Ak sa štúdie vykonávajú v nadväznosti na štúdie karcinogenity, mali by sa zvážiť cieľové tkanivá karcinogenity.
Except for irritating or corrosive chemicals, which will normally reveal exacerbated effects at higher concentrations, variability in test volume should be minimised by adjusting the concentration to ensure a constant volume at all dose levels.
Výberom tkanív pre analýzu by sa mala maximalizovať detekcia chemikálií, ktoré sú priamo pôsobiacimi mutagénmi in vitro, ktoré sa rýchlo metabolizujú, sú vysoko reaktívne alebo sa zle absorbujú alebo u ktorých je cieľové tkanivo určené spôsobom podávania (6).
Sampling Time
Ak neexistujú podkladové informácie a po zvážení miesta kontaktu vyplývajúceho zo spôsobu podávania by sa mali na mutagenitu posudzovať pečeň a najmenej jedno rýchlo sa deliace tkanivo (napr. žľaznatý žalúdok, kostná dreň).
Somatic Cells
Vo väčšine prípadov možno uvedené požiadavky splniť analýzou dvoch starostlivo vybraných tkanív, ale v niektorých prípadoch môžu byť potrebné tri alebo viaceré tkanivá.
The sampling time is a critical variable because it is determined by the period needed for mutations to be fixed.
Ak existujú dôvody na osobitné znepokojenie s ohľadom na účinky na zárodočné bunky vrátane pozitívnych reakcií v somatických bunkách, mali by sa tkanivá zárodočných buniek hodnotiť na mutácie.
This period is tissue-specific and appears to be related to the turnover time of the cell population, with bone marrow and intestine being rapid responders and the liver being much slower.
Metódy merania
A suitable compromise for the measurement of mutant frequencies in both rapidly and slowly proliferating tissues is 28 consecutive daily treatments (as indicated in paragraph 26) and sampling three days after the final treatment;
Na detekciu mutácií sú dostupné štandardné laboratórne alebo zverejnené metódy pre odporúčané transgénne modely:
although the maximum mutant frequency may not manifest itself in slowly proliferating tissues under these conditions.
lacZ lambda bakteriofág a plazmid (30);
If slowly proliferating tissues are of particular importance, then a later sampling time of 28 days following the 28 day administration period may be more appropriate (16) (29).
lacI myši (2) (18);
In such cases, the later sampling time would replace the 3 day sampling time, and would require scientific justification.
gpt delta myši (22);
Germ Cells
gpt delta potkany (28);
TGR assays are well-suited for the study of gene mutation induction in male germ cells (7) (8) (27), in which the timing and kinetics of spermatogenesis have been well-defined (27).
Zmeny by mali byť opodstatnené a riadne zdokumentované.
The low numbers of ova available for analysis, even after super-ovulation, and the fact that there is no DNA synthesis in the oocyte, preclude the determination of mutation in female germ cells using transgenic assays (31).
Údaje z viacerých spojení možno agregovať a použiť na dosiahnutie primeraného počtu plakov alebo kolónií.
The sampling times for male germ cells should be selected so that the range of exposed cell types throughout germ cell development is sampled, and so that the stage targeted in the sampling has received sufficient exposure.
Keď je však na dosiahnutie primeraného počtu plakov potrebný väčší počet spájacích reakcií, môže to byť znak nekvalitnej DNA.
The time for the progression of developing germ cells from spermatogonial stem cells to mature sperm reaching the vas deferens/cauda epididymisis ~ 49 days for the mouse (36) and ~70 days for the rat (34) (35).
V týchto prípadoch by sa údaje mali posudzovať opatrne, pretože môžu byť nespoľahlivé.
Following a 28-day exposure with a subsequent three day sampling period, accumulated sperm collected from the vas deferens/cauda epididymis (7)(8) will represent a population of cells exposed during approximately the latter half of spermatogenesis, which includes the meiotic and postmeiotic period, but not the spermatogonial or stem cell period.
Optimálny celkový počet plakov alebo kolónií na vzorku DNA určuje štatistická pravdepodobnosť zistenia dostatočného počtu mutácií pri danej frekvencii spontánnych mutácií.
In order to adequately sample cells in the vas deferens/cauda epididymis that were spermatogonial stem cells during the exposure period, an additional sampling time at a minimum of 7 weeks (mice) or 10 weeks (rat), after the end of treatment is required.
Vo všeobecnosti je potrebných minimálne 125000 až 300000 plakov, ak je frekvencia spontánnych mutácií v ráde 3 × 10–5 (15).
Cells extruded from seminiferous tubules after a 28 + 3 day regimen comprise a mixed population enriched for all stages of developing germ cells (7) (8).
V prípade skúšky Big Blue® lacI je dôležité preukázať, že možno zistiť celý rad fenotypov farebných mutácií začlenením vhodných farebných kontrol súbežne s každým očkovaním.
Sampling these cells for gene mutation detection does not provide as precise an assessment of the stages at which germ cell mutations are induced as can be obtained from sampling spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis (since there is a range of germ cell types sampled from the tubules, and there will be some somatic cells contaminating this cell population).
Tkanivá a výsledné vzorky (položky) by sa mali spracúvať a analyzovať s použitím blokového dizajnu, v rámci ktorého sa položky z kontrolnej skupiny používajúcej nosič/rozpúšťadlo, z pozitívnej kontrolnej skupiny (ak sa používa) alebo z pozitívnej kontrolnej DNA (v náležitých prípadoch) a z každej pokusnej skupiny spracúvajú spoločne.
However, sampling cells from seminiferous tubules in addition to spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis following only a 28 + 3 day sampling regimen would provide some coverage of cells exposed across the majority of phases of germ cell development, and may be useful for detecting some germ cell mutagens.
Spracovanie výsledkov
General clinical observations should be made at least once a day, preferably at the same time(s) each day and considering the peak period of anticipated effects after dosing.
Údaje o jednotlivých zvieratách sa uvádzajú v tabuľkovej forme.
The health condition of the animals should be recorded.
Pokusnou jednotkou je jedno zviera.
At least twice daily, all animals should be observed for morbidity and mortality.
Správa by mala obsahovať celkový počet jednotiek tvoriacich plaky (pfu) alebo jednotiek tvoriacich kolónie (cfu), počet mutácií a frekvenciu mutácií pre každé tkanivo z každého zvieraťa.
All animals should be weighed at least once a week, and at sacrifice.
V prípade viacerých spájacích/záchranných reakcií treba uviesť počet reakcií na vzorku DNA.
Measurements of food consumption should be made at least weekly.
Treba síce uchovávať údaje pre každú jednotlivú reakciu, vykazujú sa však len celkové jednotky tvoriace plaky a jednotky tvoriace kolónie.
If the test chemical is administered via the drinking water, water consumption should be measured at each change of water and at least weekly.
Treba vykazovať údaje o toxicite a o klinických príznakoch podľa odseku 34.
Animals exhibiting non-lethal indicators of excess toxicity should be euthanatised prior to completion of the test period (23).
Mali by sa predkladať všetky výsledky sekvenovania pre každú analyzovanú mutáciu a mali by sa uviesť výpočty vyplývajúcej frekvencie mutácií pre každé zviera a tkanivo.
Tissue Collection
Štatistické vyhodnocovanie a interpretácia výsledkov
The rationale for tissue collection should be defined clearly.
Je viacero kritérií na určenie pozitívneho výsledku, ako je zvýšenie frekvencie mutácií súvisiace s dávkou alebo jasné zvýšenie frekvencie mutácií v skupine s jednou dávkou v porovnaní s kontrolnou skupinou používajúcou rozpúšťadlo/nosič.
Since it is possible to study mutation induction in virtually any tissue, the selection of tissues to be collected should be based upon the reason for conducting the study and any existing mutagenicity, carcinogenicity or toxicity data for the chemical under investigation.
Na zabezpečenie dostatočných údajov na analýzu vzťahu medzi dávkou a reakciou treba analyzovať najmenej tri pokusné skupiny.
Important factors for consideration should include the route of administration (based on likely human exposure route(s)), the predicted tissue distribution, and the possible mechanism of action.
Biologická relevantnosť výsledkov by síce mala byť prvoradá, pri vyhodnocovaní výsledkov testov sa však ako pomôcka môžu použiť vhodné štatistické metódy (4) (14) (15) (25) (26).
In the absence of any background information, several somatic tissues as may be of interest should be collected.
V použitých štatistických testoch by sa malo zviera posudzovať ako pokusná jednotka.
These should represent rapidly proliferating, slowly proliferating and site of contact tissues.
Testovaná chemikália, ktorej výsledky nespĺňajú uvedené kritériá v žiadnom tkanive, sa v tejto skúške nepovažuje za mutagénnu.
In addition, spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis and developing germ cells from the seminiferous tubules (as described in paragraphs 32 and 33) should be collected and stored in case future analysis of germ cell mutagenicity is required.
Pre biologickú relevantnosť negatívneho výsledku treba potvrdiť expozíciu tkaniva.
Organ weights should be obtained, and for larger organs, the same area should be collected from all animals.
Pre sekvenčné analýzy DNA sú dostupné viaceré štatistické postupy, ktoré pomáhajú pri interpretácií výsledkov (1) (5) (9) (19).
Storage of Tissues and DNA
Zváženie toho, či sú pozorované hodnoty v rozsahu historickej kontroly alebo mimo nej, môže poskytnúť usmernenie pri hodnotení biologického významu reakcie (32).
Tissues (or tissue homogenates) should be stored at or below – 70 °C and be used for DNA isolation within 5 years.
identifikačné údaje a číslo CAS, ak je známe;
Isolated DNA, stored refrigerated at 4 °C in appropriate buffer, should be used optimally for mutation analysis within 1 year.
zdroj, číslo dávky, ak je k dispozícii;
Selection of Tissues for Mutant Analysis
fyzikálna povaha a čistota;
The choice of tissues should be based on considerations such as:
fyzikálnochemické vlastnosti relevantné na vykonanie štúdie;
the route of administration or site of first contact (e.g. glandular stomach if administration is oral, lung if administration is through inhalation, or skin if topical application has been used);
stabilita testovanej chemikálie, ak je známa;
and 2) pharmacokinetic parameters observed in general toxicity studies, which indicate tissue disposition, retention or accumulation, or target organs for toxicity.
Rozpúšťadlo/nosič:
If studies are conducted to follow up carcinogenicity studies, target tissues for carcinogenicity should be considered.
odôvodnenie voľby nosiča;
The choice of tissues for analysis should maximise the detection of chemicals that are direct-acting in vitro mutagens, rapidly metabolised, highly reactive or poorly absorbed, or those for which the target tissue is determined by route of administration (6).
rozpustnosť a stabilita testovanej chemikálie v rozpúšťadle/nosiči, ak je známa;
In the absence of background information and taking into consideration the site of contact due to route of administration, the liver and at least one rapidly dividing tissue (e.g. glandular stomach, bone marrow) should be evaluated for mutagenicity.
príprava zloženia krmiva, pitnej vodyalebo inhalácie;
In most cases, the above requirements can be achieved from analyses of two carefully selected tissues, but in some cases, three or more would be needed.
analytické určenie zložení (napr. stabilita, homogénnosť, nominálne koncentrácie);
If there are reasons to be specifically concerned about germ cell effects, including positive responses in somatic cells, germ cell tissues should be evaluated for mutations.
použité druhy/kmeň a odôvodnenie voľby;
Methods of Measurement
počet, vek a pohlavie zvierat;
Standard laboratory or published methods for the detection of mutants are available for the recommended transgenic models:
zdroj, podmienky umiestnenia, krmivo atď.;
lacZ lambda bacteriophage and plasmid (30);
hmotnosť jednotlivých zvierat na začiatku testu vrátane rozsahu telesnej hmotnosti, strednej hodnoty a štandardnej odchýlky pre každú skupinu;
lacI mouse (2) (18);
údaje o pozitívnych a negatívnych (rozpúšťadlo/nosič) kontrolných skupinách;
gpt delta mouse (22);
údaje zo štúdie na zistenie rozsahu;
gpt delta rat (28);
podrobné údaje o príprave testovanej chemikálie;
Modifications should be justified and properly documented.
odôvodnenie spôsobu podávania;
Data from multiple packagings can be aggregated and used to reach an adequate number of plaques or colonies.
metódy merania toxicity zvierat vrátane, keď to je možné, histopatologických alebo hematologických analýz, a frekvencia pozorovaní a vážení zvierat;
However, the need for a large number of packaging reactions to reach the appropriate number of plaques may be an indication of poor DNA quality.
metódy overovania, či testovaná chemikália dosiahla cieľové tkanivo alebo všeobecnú cirkuláciu, ak sa dosiahnu negatívne výsledky;
In such cases, data should be considered cautiously because they may be unreliable.
skutočná dávka (mg/kg telesnej hmotnosti/deň) vypočítaná z koncentrácie testovanej chemikálie (ppm) v krmive/pitnej vode a zo spotreby krmiva/pitnej vody, ak sa uplatňuje;
The optimal total number of plaques or colonies per DNA sample is governed by the statistical probability of detecting sufficient numbers of mutants at a given spontaneous mutant frequency.
podrobné údaje o kvalite krmiva a vody;
In general, a minimum of 125000 to 300000 plaques is required if the spontaneous mutant frequency is in the order of 3 × 10–5 (15).
podrobný popis rozvrhov podávania a odoberania vzoriek a odôvodnenie volieb;
For the Big Blue® lacI assay, it is important to demonstrate that the whole range of mutant colour phenotypes can be detected by inclusion of appropriate colour controls concurrent with each plating.
metóda eutanázie;
Tissues and the resulting samples (items) should be processed and analysed using a block design, where items from the vehicle/solvent control group, the positive control group (if used) or positive control DNA (where appropriate), and each treatment group are processed together.
postupy izolácie a uchovávania tkanív;
Treatment of Results
metódy izolácie genómovej DNA hlodavcov, získavania preneseného génu z genómovej DNA a prenášania transgénnej DNA na bakteriálneho hostiteľa;
Individual animal data should be presented in tabular form.
zdroj a čísla dávok všetkých buniek, súprav a reagentov (v náležitých prípadoch);
The experimental unit is the animal.
metódy vyčísľovania mutácií;
The report should include the total number of plaque-forming units (pfu) or colony-forming units (cfu), the number of mutants, and the mutant frequency for each tissue from each animal.
metódy molekulárnej analýzy mutácií a použitie pri korekcii o klonalitu a/alebo metódy výpočtu frekvencie mutácií, ak sa uplatňujú;
If there are multiple packaging/rescue reactions, the number of reactions per DNA sample should be reported.
Výsledky:
While data for each individual reaction should be retained, only the total pfu or cfu need be reported.
stav zvieraťa pred testovaním a počas obdobia testovania vrátane príznakov toxicity;
Data on toxicity and clinical signs as per paragraph 34 should be reported.
váha tela a orgánov pri usmrtení;
Any sequencing results should be presented for each mutant analysed, and resulting mutation frequency calculations for each animal and tissue should be shown.
pre každé tkanivo/zviera počet mutácií, počet hodnotených plakov alebo kolónií, frekvencia mutácií;
Statistical Evaluation and Interpretation of Results
pre každé tkanivo/skupinu zvierat počet spájacích reakcií na vzorku DNA, celkový počet mutácií, stredná frekvencia mutácií, štandardná odchýlka;
There are several criteria for determining a positive result, such as a dose-related increase in the mutant frequency, or a clear increase in the mutant frequency in a single dose group compared to the solvent/vehicle control group.
vzťah medzi dávkou a reakciou, ak je možné ho určiť;
At least three treated dose groups should be analysed in order to provide sufficient data for dose-response analysis.
pre každé tkanivo/zviera počet nezávislých mutácií a stredná frekvencia mutácií, keď sa vykonala molekulárna analýza mutácií;
While biological relevance of the results should be the primary consideration, appropriate statistical methods may be used as an aid in evaluating the test results (4) (14) (15) (25) (26).
paralelné a historické údaje o negatívnych kontrolných skupinách s rozsahmi, strednými hodnotami a štandardnými odchýlkami;