natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Among the variables that can affect many measures of behaviour, including motor activity, are sound level, size and shape of the test cage, temperature, relative humidity, light conditions, odours, use of home cage or novel test cage and environmental distractions.
U mláďat usmrtených na 22. postnatálny deň sa posudzuje mozgové tkanivo;
Motor and sensory function should be examined in detail at least once for the adolescent period and once during the young adult period (e.g. PND 60-70).
u zvierat usmrtených na konci sa posudzujú tkanivá centrálnej nervovej sústavy (CNS), ako aj tkanivá periférnej nervovej sústavy (PNS).
Sufficient testing should be conducted to ensure an adequate quantitative sampling of sensory modalities (e.g. somato-sensory, vestibular) and motor functions (e.g. strength, coordination).
Zvieratá usmrtené na 22. postnatálny deň alebo skôr možno fixovať ponorením alebo perfúziou.
A few examples of tests for motor and sensory function are extensor thrust response (46), righting reflex (47)(48), auditory startle habituation (40)(49)(50)(51)(52)(53)(54), and evoked potentials (55).
Zvieratá usmrtené na konci štúdie sa fixujú perfúziou.
Learning and memory tests
Všetky aspekty prípravy vzoriek tkanív, od perfúzie zvierat, po pitvu vzoriek tkanív, spracovanie tkanív a farbenie sklíčok by sa mali vykonať podľa vyváženej schémy, aby každá sada obsahovala reprezentatívne vzorky z každej dávkovej skupiny.
A test of associative learning and memory should be conducted post-weaning (e.g. 25 ± 2 days) and for young adults (PND 60 and older).
Ďalšie usmernenia k neuropatológii sa uvádzajú v usmerňovacom dokumente OECD č. 20 (9), pozri aj (103).
The same or separate test(s) may be used at these two stages of development.
Spracovanie vzoriek tkanív
Some flexibility is allowed in the choice of test(s) for learning and memory in weanling and adult rats.
Všetky makroskopické abnormality viditeľné v čase autopsie by sa mali zaznamenať.
However, the test(s) should be designed so as to fulfil two criteria.
Vzorky odobratých tkanív by mali reprezentovať všetky hlavné oblasti nervovej sústavy.
First, learning should be assessed either as a change across several repeated learning trials or sessions, or, in tests involving a single trial, with reference to a condition that controls for non-associative effects of the training experience.
Vzorky tkanív sa uchovávajú vo vhodnom fixačnom prostriedku a spracujú sa v súlade so štandardizovanými uverejnenými histologickými protokolmi (69)(70)(71) (103).
Second, the test(s) should include some measure of memory (short-term or long-term) in addition to original learning (acquisition), but this measure of memory cannot be reported in the absence of a measure of acquisition obtained from the same test.
Zaliatie do parafínu je v prípade tkanív CNS a PNS povolené, ak sa však požaduje vyšší stupeň rozlíšenia, môže byť vhodné použiť osmium po fixácii spolu so zaliatím do epoxidu (napr. v prípade periférnych nervov pri podozrení na periférnu neuropatiu a/alebo pri morfometrickej analýze periférnych nervov).
If the test(s) of learning and memory reveal(s) an effect of the test chemical, additional tests to rule out alternative interpretations based on alterations in sensory, motivational, and/or motor capacities may be considered.
Mozgové tkanivo odobraté na morfometrickú analýzu sa zaleje do vhodného prostriedku pri všetkých úrovniach dávky súčasne, aby sa predišlo zmenšeniu bunkových štruktúr, ktoré môže súvisieť s predĺženým skladovaním vo fixačnom prostriedku (6).
In addition to the above two criteria, it is recommended that the test of learning and memory be chosen on the basis of its demonstrated sensitivity to the class of chemical under investigation, if such information is available in the literature.
Neuropatologické vyšetrenie
In the absence of such information, examples of tests that could be made to meet the above criteria include:
Účelom kvalitatívneho vyšetrenia je:
passive avoidance (43)(56)(57), delayed-matching-to-position for the adult rat (58) and for the infant rat (59), olfactory conditioning (43)(60), Morris water maze (61)(62)(63), Biel or Cincinnati maze (64)(65), radial arm maze (66), T-maze (43), and acquisition and retention of schedule-controlled behaviour (26)(67)(68).
identifikovať oblasti v rámci nervovej sústavy, ktoré vykazujú známky neuropatologických zmien;
Additional tests are described in the literature for weanling (26)(27) and adult rats (19)(20).
identifikovať typy neuropatologických zmien, ktoré sú dôsledkom expozície účinkom testovanej chemikálie;
Post-mortem examination
stanoviť rozsah závažnosti neuropatologických zmien.
Maternal animals can be euthanised after weaning of the offspring.
Reprezentatívne histologické rezy zo vzoriek tkaniva pod mikroskopom preskúma na tento účel vyškolený patológ s cieľom zistiť neuropatologické zmeny.
Neuropathological evaluation of the offspring will be conducted using tissues from animals humanely killed at PND 22 or at an earlier time point between PND 11 and PND 22, as well as at study termination.
Všetkým neuropatologickým zmenám sa priradí subjektívna známka indikujúca závažnosť.
For offspring killed through PND 22, brain tissues should be evaluated;
Na hodnotenie rezov mozgu zo zvierat humánne usmrtených na 22. postnatálny deň alebo skôr môže postačovať farbenie hematoxylínom a eozínom.
for animals killed at termination, both central nervous system (CNS) tissues and peripheral nervous system (PNS) tissues should be evaluated.
Pre rezy tkanív CNS a PNS zo zvierat usmrtených na konci štúdie sa však odporúča farbenie myelínom (napr. luxol fast blue/kresyl violet) a striebrom (napr. Bielschowskeho alebo Bodianova metóda).
Animals killed on PND 22 or earlier may be fixed either by immersion or perfusion.
Na základe odborného posúdenia patológa a druhu pozorovaných zmien možno zvážiť iné farbenie vhodné na identifikáciu a charakterizáciu osobitných typov zmien (napr. gliový fibrilárny acidický proteín (GFAP) alebo lektínovú histochémiu na posúdenie gliových a mikrogliových zmien (72), farbenie farbivom Fluoro-Jade na detekciu nekrózy (73)(74) alebo farbenie striebrom špecifické pre nervovú degeneráciu (75)).
Animals killed at study termination should be fixed by perfusion.
Malo by sa vykonať morfometrické (kvantitatívne) hodnotenie, keďže tieto údaje môžu pomôcť pri detekcii účinkov spojených s ošetrením a majú význam pre interpretáciu rozdielov hmotnosti alebo morfológie mozgu súvisiacich s aplikáciou chemikálie (76)(77).
All aspects of the preparation of tissue samples, from the perfusion of animals, through the dissection of tissue samples, tissue processing, and staining of slides should employ a counterbalanced design such that each batch contains representative samples from each dose group.
Na účely morfometrického hodnotenia sa odoberie a pripraví nervové tkanivo.
Additional guidance on neuropathology can be found in OECD Guidance Document No 20(9), see also (103).
Súčasťou morfometrických hodnotení môžu byť napr. lineárne alebo plošné merania špecifických oblastí mozgu (78).
Processing of tissue samples
Na lineárne alebo plošné merania je potrebné použiť homologické rezy, ktoré sa uvážlivo zvolia na základe spoľahlivých mikroskopických medzníkov (6).
All gross abnormalities apparent at the time of necropsy should be noted.
Na zistenie účinkov v dôsledku ošetrenia v prípade parametrov, ako je objem alebo počet buniek konkrétnych neuroanatomických oblastí (79)(80)(81)(82)(83)(84), možno použiť stereológiu.
Tissue samples taken should represent all major regions of the nervous system.
Mozgy sa vyšetria, aby sa zistilo, či nevykazujú známky neuropatologických zmien súvisiacich s ošetrením, a na zabezpečenie dôkladného vyšetrenia sa vhodné vzorky odoberú zo všetkých hlavných oblastí mozgu (napr. čuchové bulby, mozgová kôra, hipokampus, bazálne gangliá, talamus, hypotalamus, stredný mozog (tectum, tegmentum a mozgové stopky), Varolov most, predĺžená miecha, mozoček).
The tissue samples should be retained in an appropriate fixative and processed according to standardised published histological protocols (69)(70)(71)(103).
Je dôležité, aby sa rezy u všetkých zvierat odobrali v rovnakej rovine.
Paraffin embedding is acceptable for tissues of the CNS and PNS, but the use of osmium in post-fixation, together with epoxy embedding, may be appropriate when a higher degree of resolution is required (e.g. for peripheral nerves when a peripheral neuropathy is suspected and/or for morphometric analysis of peripheral nerves).
U dospelých jedincov humánne usmrtených na konci štúdie sa odoberú reprezentatívne vzorky rezov miechy a PNS.
Brain tissue collected for morphometric analysis should be embedded in appropriate media at all dose levels at the same time in order to avoid shrinkage artefacts that may be associated with prolonged storage in fixative (6).
Vyšetria sa tieto oblasti: oko s očným nervom a sietnicou, zväčšená miecha na krčných a bedrových častiach, tkanivá chrbtové a dutiny, proximálny sedací nerv, proximálny tibiálny nerv (na kolene) a tibiálne vetvy nervu lýtkového svalu.
The purposes of the qualitative examination are:
Neuropatologické hodnotenie zahŕňa vyšetrenie príznakov vývojového poškodenia nervovej sústavy (6)(85)(86)(87)(88)(89), okrem bunkových zmien (napr. neuronálna vakuolizácia, degenerácia, nekróza) a zmeny tkanív (napr. glióza, leukocytová infiltrácia, tvorba cýst).
to identify regions within the nervous system exhibiting evidence of neuropathological alterations;
V tejto súvislosti je dôležité, aby sa účinky v dôsledku ošetrenia odlíšili od bežných vývojových udalostí, o ktorých je známe, že sa vyskytujú vo vývinovom štádiu, ktoré zodpovedá dobe utratenia (90).
to identify types of neuropathological alterations resulting from exposure to the test chemical;
Príklady významných zmien, ktoré svedčia o narušení vývoja, zahŕňajú nielen:
and
zmeny makroskopickej veľkosti alebo tvaru čuchových bulbov, mozgu alebo mozočka,
to determine the range of severity of the neuropathological alterations.
zmeny relatívnej veľkosti rôznych oblastí mozgu vrátane zmenšenia alebo zväčšenia oblastí v dôsledku straty alebo pretrvávania bežne prechodných populácií buniek alebo axonálnych projekcií (napr. vonkajšia zárodočná vrstva mozočka, kalózne teleso),
Representative histological sections from the tissue samples should be examined microscopically by an appropriately trained pathologist for evidence of neuropathological alterations.
zmeny proliferácie, migrácie a diferenciácie, ako indikujú oblasti nadmernej apoptózy alebo nekrózy, zhluky alebo rozptýlené populácie ektopických, dezorientovaných alebo poškodených neurónov alebo zmeny relatívnej veľkosti rôznych vrstiev kortikálnych štruktúr,
All neuropathologic alterations should be assigned a subjective grade indicating severity.
zmeny štruktúr myelinizácie vrátane celkového zmenšenia alebo zmeny zafarbenia myelinizovaných štruktúr,
A hematoxylin and eosin stain may be sufficient for evaluating brain sections from animals humanely killed at PND 22, or earlier.
známky hydrocefalu, najmä zväčšenie dutín, stenóza Sylviovho kanálika a stenčenie mozgových hemisfér.
However, a myelin stain (e.g. luxol fast blue/cresyl violet) and a silver stain (e.g. Bielschowsky's or Bodians stains) are recommended for sections of CNS and PNS tissues from animals killed at study termination.
Analýza vzťahu medzi dávkou a reakciou v prípade neuropatologických zmien
Subject to the professional judgement of the pathologist and the kind of alterations observed, other stains may be considered appropriate to identify and characterise particular types of alterations (e.g. glial fibrillary acidic protein (GFAP) or lectin histochemistry to assess glial and microglial alterations (72), fluoro-jade to detect necrosis (73)(74), or silver stains specific for neural degeneration (75)).
Na kvalitatívne a kvantitatívne neuropatologické analýzy sa odporúča tento postup.
Morphometric (quantitative) evaluation should be performed as these data may assist in the detection of a treatment-related effect and are valuable in the interpretation of treatment-related differences in brain weight or morphology (76)(77).
Najprv sa porovnajú rezy zo skupiny s vysokou dávkou s rezmi z kontrolnej skupiny.
Nervous tissue should be sampled and prepared to enable morphometric evaluation.
Ak zvieratá zo skupiny s vysokou dávkou nejavia známky neuropatologických zmien, ďalšia analýza nie je potrebná.
Morphometric evaluations may include e.g. linear or areal measurements of specific brain regions (78).
Ak sa v skupine s vysokou dávkou zistia neuropatologické zmeny, potom sa vyšetria zvieratá zo skupiny so stredne veľkou dávkou a s vysokou dávkou.
Linear or areal measurements require the use of homologous sections carefully selected based on reliable microscopic landmarks (6).
Ak je skupina s vysokou dávkou ukončená v dôsledku smrti alebo inej neobjasnenej toxicity, skupiny s vysokou a stredne veľkou dávkou sa podrobia analýze na neuropatologické zmeny.
Stereology may be used to identify treatment-related effects on parameters such as volume or cell number for specific neuroanatomic regions (79)(80)(81)(82)(83)(84).
Ak sa v skupinách s nižšími dávkami prejavia známky neurotoxicity, tieto skupiny sa podrobia neuropatologickej analýze.
The brains should be examined for any evidence of treatment-related neuropathological alterations and adequate samples should be taken from all major brain regions (e.g. olfactory bulbs, cerebral cortex, hippocampus, basal ganglia, thalamus, hypothalamus, midbrain (tectum, tegmentum, and cerebral peduncles), pons, medulla oblongata, cerebellum) to ensure a thorough examination.
Ak sa pri kvalitatívnom alebo kvantitatívnom vyšetrení zistia akékoľvek neuropatologické zmeny v dôsledku ošetrenia, určí sa výskyt v závislosti od dávky, frekvencia a stupeň závažnosti poškodení alebo morfometrických zmien, a to na základe hodnotenia všetkých zvierat zo všetkých dávkových skupín.
It is important that sections for all animals are taken in the same plane.
Do tohto hodnotenia sa zahrnú všetky oblasti mozgu, ktoré vykazujú známky neuropatologických zmien.
In adults humanely killed at study termination, representative sections of the spinal cord and the PNS should be sampled.
Pri každom type poškodenia sa uvedú charakteristiky používané na vymedzenie jednotlivých stupňov závažnosti a vlastnosti používané na rozlíšenie jednotlivých stupňov.
The areas examined should include the eye with optic nerve and retina, the spinal cord at the cervical and lumbar swellings, the dorsal and ventral root fibres, the proximal sciatic nerve, the proximal tibial nerve (at the knee), and the tibial nerve calf muscle branches.
Frekvencia jednotlivých typov poškodení a ich závažnosti sa zaznamená a vykoná sa štatistická analýza, ktorá vyhodnotí povahu vzťahov medzi dávkou a reakciou.
The spinal cord and peripheral nerve sections should include both cross or transverse and longitudinal sections.
Odporúča sa použiť kódované sklíčka (91).
Neuropathological evaluation should include an examination for indications of developmental damage to the nervous system (6)(85)(86)(87)(88)(89), in addition to the cellular alterations (e.g. neuronal vacuolation, degeneration, necrosis) and tissue changes (e.g. gliosis, leukocytic infiltration, cystic formation).
ÚDAJE A PODÁVANIE SPRÁV
In this regard, it is important that treatment-related effects be distinguished from normal developmental events known to occur at a developmental stage corresponding to the time of sacrifice (90).
Údaje
Examples of significant alterations indicative of developmental insult include, but are not restricted to:
Údaje sa do správy uvedú jednotlivo a zhrnú sa v tabuľke, pričom pri každej pokusnej skupine sa uvedú typy zmien a počet matiek, mláďatá podľa pohlavia a vrhy pri jednotlivých typoch zmien.
alterations in the gross size or shape of the olfactory bulbs, cerebrum or cerebellum;
Ak u mláďat došlo k priamej postnatálnej expozícii, do správy sa uvedie spôsob, trvanie a čas expozície.
alterations in the relative size of various brain regions, including decreases or increases in the size of regions resulting from the loss or persistence of normally transient populations of cells or axonal projections (e.g. external germinal layer of cerebellum, corpus callosum);
Hodnotenie a interpretácia výsledkov
alterations in proliferation, migration, and differentiation, as indicated by areas of excessive apoptosis or necrosis, clusters or dispersed populations of ectopic, disoriented or malformed neurons or alterations in the relative size of various layers of cortical structures;
Štúdia vývojovej neurotoxicity prinesie informácie o účinkoch opakovanej expozície účinkom chemikálie in utero a v počiatočnom postnatálnom vývojovom štádiu.
alterations in patterns of myelination, including an overall size reduction or altered staining of myelinated structures;
Keďže dôraz sa kladie tak na všeobecnú toxicitu, ako aj vývojovú neurotoxicitu, výsledky štúdie umožnia rozlíšenie medzi účinkami na neurologický vývoj, ktoré sa vyskytnú pri neprítomnosti všeobecnej toxicity u matky, a účinkami, ktoré sa prejavujú iba pri dávkach, ktoré sú toxické aj pre materské zviera.
evidence of hydrocephalus, in particular enlargement of the ventricles, stenosis of the cerebral aqueduct and thinning of the cerebral hemispheres.
Vzhľadom na zložité vzájomné súvislosti medzi plánom štúdie, štatistickou analýzou a biologickou významnosťou údajov je súčasťou primeranej interpretácie údajov o vývojovej neurotoxicite aj odborný posudok (107)(109).
Analysis of the dose-response relationship of neuropathological alterations
Interpretácia výsledkov testov by mala byť založená na prístupe váhy dôkazov (20)(92)(93)(94).
The following stepwise procedure is recommended for the qualitative and quantitative neuropathological analyses.
Schémy behaviorálnych alebo morfologických nálezov, ak existujú, ako aj dôkazy o vzťahu medzi dávkou a reakciou je potrebné podrobiť rozboru.
First, sections from the high dose group are compared with those of the control group.
Údaje zo všetkých štúdií, ktoré majú význam pre hodnotenie vývojovej neurotoxicity, vrátane epidemiologických štúdií u ľudí alebo kazuistík a experimentálnych štúdií na zvieratách (napr. toxikokinetické údaje, informácie o vzťahu medzi štruktúrou a aktivitou, údaje z iných štúdií toxicity) sa zahrnú do tejto charakterizácie.
If no evidence of neuropathological alterations is found in animals of the high dose group, no further analysis is required.
Sem patrí vzťah medzi dávkami testovanej chemikálie a prítomnosťou/neprítomnosťou, výskytom a rozsahom akýchkoľvek neurotoxických účinkov u každého pohlavia (20)(95).
If evidence of neuropathological alterations is found in the high dose group, then animals from the intermediate and low dose groups are examined.
Hodnotenie údajov musí zahŕňať aj rozbor biologickej a štatistickej významnosti.
If the high dose group is terminated due to death or other confounding toxicity, the high and intermediate dose groups should be analysed for neuropathological alterations.
Štatistickú analýzu treba vnímať ako nástroj, ktorý usmerňuje, nie určuje interpretáciu údajov.
If there is any indication of neurotoxicity in lower dose groups, neuropathological analysis should be performed in those groups.
Chýbajúca štatistická významnosť by nemala byť jediným dôvodom pre vyvodenie záveru o účinku v dôsledku nepodania chemikálie, rovnako ako by štatistická významnosť nemala byť jediným odôvodnením pre vyvodenie záveru o účinku v dôsledku podania chemikálie.
If any treatment-related neuropathological alterations are found in the qualitative or quantitative examination, the dose-dependence of the incidence, frequency and severity grade of the lesions or of the morphometric alterations should be determined, based on an evaluation of all animals from all dose groups.
S cieľom zabezpečiť sa proti možným falošným negatívnym zisteniam a vnútorným problémom pri ‚dokazovaní negatívneho vzťahu‘ je potrebné prediskutovať dostupné pozitívne a historické kontrolné údaje, najmä ak podanie chemikálie nevyvolá žiadne účinky (102)(106).
All regions of the brain that exhibit any evidence of neuropathologic alteration should be included in this evaluation.
Pravdepodobnosť falošných pozitívnych výsledkov by sa mala prediskutovať so zreteľom na celkové štatistické hodnotenie údajov (96).
For each type of lesion, the characteristics used to define each severity grade should be described, indicating the features used to differentiate each grade.
Do hodnotenia sa musí zahrnúť aj vzťah, ak existuje, medzi pozorovanými neuropatologickými zmenami a zmenami správania.
The frequency of each type of lesion and its severity grade should be recorded and a statistical analysis should be performed to evaluate the nature of a dose-response relationships.
Všetky výsledky sa analyzujú s využitím štatistických modelov, ktoré sú primerané experimentálnej schéme (108).
The use of coded slides is recommended (91).
Výber parametrickej alebo neparametrickej analýzy je potrebné odôvodniť vzhľadom na faktory, ako je povaha údajov (transformovaných alebo netransformovaných) a ich distribúcia, ako aj relatívna spoľahlivosť zvolenej štatistickej analýzy.
DATA AND REPORTING
Účel a plán štúdie by mali usmerňovať výber štatistických analýz, aby sa minimalizovali chyby typu I (falošné pozitívne) a typu II (falošné negatívne) (96)(97)(104)(105).
Data
V prípade vývojových štúdií využívajúcich multiparitné druhy, pri ktorých sa testuje viacero mláďat z jedného vrhu, by sa do štatistického modelu mal zahrnúť vrh, aby sa predišlo zvýšenej chybovosti typu I (98)(99)(100)(101).
Data should be reported individually and summarised in tabular form, showing for each test group the types of change and the number of dams, offspring by sex, and litters displaying each type of change.
Štatistickou mernou jednotkou by mal byť vrh, nie mláďa.
If direct postnatal exposure of the offspring has been performed, the route, duration and period of exposure should be reported.
Pokusy by mali byť navrhnuté tak, aby sa mláďatá z toho istého vrhu nevyšetrovali nezávisle od seba.
Evaluation and interpretation of results
Každý sledovaný parameter, ktorý sa u toho istého objektu nameria opakovane, sa podrobí analýze s využitím štatistických modelov, ktoré zaručia, že tieto merania nebudú od seba navzájom nezávislé.
A developmental neurotoxicity study will provide information on the effects of repeated exposure to a chemical during in utero and early postnatal development.
Správa z testu
Since emphasis is placed on both general toxicity and developmental neurotoxicity endpoints, the results of the study will allow for the discrimination between neurodevelopmental effects occurring in the absence of general maternal toxicity, and those which are only expressed at levels that are also toxic to the maternal animal.
Správa z testu by mala obsahovať tieto informácie:
Due to the complex interrelationships among study design, statistical analysis, and biological significance of the data, adequate interpretation of developmental neurotoxicity data will involve expert judgment (107)(109).
Testovaná chemikália:
The interpretation of test results should use a weight-of-evidence-approach (20)(92)(93)(94).
fyzikálny charakter a v prípade potreby fyzikálno-chemické vlastnosti,
Patterns of behavioural or morphological findings, if present, as well as evidence of dose-response should be discussed.
identifikačné údaje vrátane zdroja,
Data from all studies relevant to the evaluation of developmental neurotoxicity, including human epidemiological studies or case reports, and experimental animal studies (e.g. toxicokinetic data, structure-activity information, data from other toxicity studies) should be included in this characterisation.
čistota prípravku a známe a/alebo očakávané nečistoty.
This includes the relationship between the doses of the test chemical and the presence or absence, incidence, and extent of any neurotoxic effect for each sex (20)(95).
Nosič (v prípade potreby):
Evaluation of data should include a discussion of both the biological and statistical significance.
odôvodnenie výberu nosiča, ak je iný ako voda alebo fyziologický roztok.