natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The weighed sample portion must have a nitrogen content of about 10 mg.
Navážené množstvo vzorky musí mať obsah dusíka približne 10 mg.
Add carefully 25 ml of hydrolysis mixture (3.20) and mix with the sample.
Opatrne pridajte 25 ml hydrolyzačnej zmesi (3.20) a zmiešajte so vzorkou.
Proceed according to either 5.3.2.3 or 5.3.2.4.
Postupujte podľa bodu 5.3.2.3 alebo 5.3.2.4.
Open hydrolysis
Otvorená hydrolýza
Add 3 glass beads to the mixture in the flask (prepared in accordance with 5.3.2.1 or 5.3.2.2) and boil with continuous bubbling under reflux for 23 hours.
Pridajte 3 sklenené guľôčky k zmesi v banke (pripravenej v súlade s bodom 5.3.2.1 alebo 5.3.2.2) a varte pri stálom prebublávaní s refluxom 23 hodín.
On completion of hydrolysis, wash the condenser down with 5 ml of citrate buffer (3.24).
Po dokončení hydrolýzy chladič umyte 5 ml v citranového tlmivého roztoku (3.24).
Disconnect the flask and cool it in an ice bath.
Odpojte banku a ochlaďte v ľadovom kúpeli.
Proceed according to 5.3.3.
Postupujte podľa bodu 5.3.3.
Closed Hydrolysis
Uzavretá hydrolýza
Place the bottle containing the mixture prepared in accordance with 5.3.2.1 or 5.3.2.2 in an oven (4.3) at 110 oC.
Vložte fľašu s obsahom zmesi pripravenej v súlade s bodom 5.3.2.1 alebo 5.3.2.2 do sušiarne (4.3) pri teplote 110 oC.
During the first hour in order to prevent a build up of pressure (due to the evolution of gaseous substances) and to avoid explosion, place the screw cap over the top of the vessel.
Počas prvej hodiny len položte na vrch nádoby skrutkový uzáver, aby ste predišli vytvoreniu tlaku (v dôsledku vytvárania plynných látok) a zabránili výbuchu.
Do not close the vessel with the cap.
Nezatvárajte nádobu uzáverom.
After one hour close the vessel with the cap and leave in the oven (4.3) for 23 hours.
Po hodine uzatvorte nádobu uzáverom a nechajte na 23 hodín v sušiarni (4.3).
On completion of hydrolysis, remove the bottle from the oven, carefully open the cap of the bottle and place the bottle in an ice-water bath.
Po ukončení hydrolýzy vyberte fľašu zo sušiarne, opatrne otvorte uzáver fľaše a vložte ju do ľadového vodného kúpeľa.
Leave to cool.
Nechajte vychladnúť.
Depending on the procedure for pH adjustment (5.3.3), quantitatively transfer the contents of the bottle to a 250 ml beaker or a 250 ml round-bottom flask, using citrate buffer (3.24).
V závislosti od postupu na úpravu pH (5.3.3) preneste kvantitatívne obsah fľaše do 250 ml kadičky alebo 250 ml alebo 250 ml banky s guľatým dnom s použitím citranového tlmivého roztoku (3.24).
Adjustment of pH
Úprava pH
Depending on the sodium tolerance of the amino acid analyser (4.9) proceed according to 5.3.3.1 or 5.3.3.2 for the pH adjustment.
V závislosti od tolerancie analyzátora aminokyselín (4.9) voči sodíku postupujte pri úprave pH podľa bodov 5.3.3.1 alebo 5.3.3.2.
For Chromatographic Systems (4.9) requiring a low sodium concentration
Chromatografické systémy (4.9) vyžadujúce nízku koncentráciu sodíka.
It is advisable to use an internal stock standard solution (3.27.3) when amino acid analysers requiring a low sodium concentration are employed (when the acid volume has to be reduced).
Pri použití analyzátora, ktorý vyžaduje nízku koncentráciu sodíka (keď sa musí znížiť objem kyseliny), sa odporúča použiť zásobný roztok vnútorného štandardu (3.27.3).
In this case add 2,00 ml of the internal stock standard solution (3.27.3) to the hydrolysate before the evaporation.
V takomto prípade pridajte k hydrolyzátu pred odparovaním 2,00 ml zásobného roztoku vnútorného štandardu (3.27.3).
Add 2 drops of 1-octanol (3.15) to the hydrolysate obtained in accordance with paragraph 5.3.2.3 or 5.3.2.4.
Pridajte 2 kvapky 1-oktanolu (3.15) k hydrolyzátu získanému podľa ods. 5.3.2.3 alebo 5.3.2.4.
Using a rotary evaporator (4.7) reduce the volume to 5-10 ml under vacuum at 40 oC.
Použitím rotačnej odparky (4.7) znížte objem na 5 – 10 ml vo vákuu pri teplote 40 oC.
If the volume is accidentally reduced to less than 5 ml the hydrolysate must be discarded and the analysis recommenced.
Ak sa objem náhodou zníži na menej ako 5 ml, hydrolyzát sa musí znehodnotiť a analýza opakovať.
Adjust the pH to 2,20 with sodium hydroxide solution (3.18) and proceed to paragraph 5.3.4.
Upravte pH na 2,20 s roztokom hydroxidu sodného (3.18) a postupujte ďalej podľa odseku 5.3.4.
For all other Amino Acid Analysers (4.9)
Pre všetky ostatné analyzátory aminokyselín (4.9)
Take the hydrolysates obtained in accordance with 5.3.2.3 or 5.3.2.4 and partly neutralise them by carefully adding with stirring, 17 ml of sodium hydroxide solution (3.17), ensuring that the temperature is kept below 40 oC.
Vezmite hydrolyzáty získané podľa bodov 5.3.2.3 alebo 5.3.2.4 a čiastočne ich zneutralizujte opatrným pridávaním za miešania 17 ml roztoku hydroxidu sodného (3.17), pričom je potrebné zabezpečiť, aby sa teplota udržala pod 40 oC.
Adjust the pH to 2,20 at room temperature using sodium hydroxide solution (3.17) and finally sodium hydroxide solution (3.18).
Upravte pH na 2,20 pri izbovej teplote použitím roztoku hydroxidu sodného (3.17) a nakoniec roztoku hydroxidu sodného (3.18).
Proceed to 5.3.4.
Postupujte ďalej podľa bodu 5.3.4.
Sample solution for chromatography
Roztok vzorky na chromatografiu
Quantitatively transfer the pH adjusted hydrolysate (5.3.3.1 or 5.3.3.2) with citrate buffer (3.24) to a 200 ml graduated flask, and make up to the mark with buffer (3.24).
Kvantitatívne preneste hydrolyzát s upraveným pH (5.3.3.1 alebo 5.3.3.2) s citranovým tlmivým roztokom (3.24) do 200 ml odmernej banky a doplňte po značku tlmivým roztokom (3.24).
If an internal standard has not already been used, add 2,00 ml of internal standard (3.27.3) and make up to the mark with citrate buffer (3.24).
Ak ešte nebol použitý vnútorný štandard, pridajte 2,00 ml vnútorného štandardu (3.27.3) a doplňte po značku citranovým tlmivým roztokom (3.24).
Proceed to the chromatography step (5.4).
Pristúpte ďalej ku chromatografii (5.4).
If the sample solutions are not being examined the same day they must be stored below 5 oC.
Ak sa roztoky vzorky neanalyzujú v ten istý deň, musia sa uskladniť pri teplote pod 5 oC.
Before chromatography bring the extract (5.2) or hydrolysate (5.3.4) to room temperature.
Pred chromatografiou upravte teplotu extraktu (5.2) alebo hydrolyzátu (5.3.4) na laboratórnu teplotu.
Shake the mixture and filter a suitable amount through a 0,22 μm membrane filter (4.5).
Zmes potrepte a prefiltrujte vhodné množstvo cez 0,22 μm membránový filter (4.5).
The resulting clear solution is subjected to ion exchange chromatography, using an amino acid analyser (4.9).
Výsledný číry roztok sa podrobí iónovo-výmennej chromatografii s použitím analyzátora aminokyselín (4.9).
The injection may be performed manually or automatically.
Nastreknutie sa môže vykonať manuálne alebo automaticky.
It is important that the same quantity of solution ±0,5 % is added to the column for the analysis of standards and samples except when an internal standard is used, and that the sodium:amino acid ratios in the standard and sample solutions are as similar as is practicable.
Dôležité je, aby sa na kolónu nadávkovalo rovnaké analyzované množstvo roztoku štandardov a vzoriek s odchýlkou ±0,5 % s výnimkou prípadov používania vnútorného štandardu a aby boli pomery sodíka a aminokyselín v roztokoch štandardu a vzorky v najvyššej možnej miere podobné.
In general the frequency of calibration runs depends on the stability of the ninhydrin reagent and the analytical system.
Vo všeobecnosti závisí frekvencia kalibrácií od stability ninhydrínového činidla a analytického systému.
The standard or sample is diluted with citrate buffer (3.24) to give a peak area of the standard of 30 %-200 % of the sample amino acid peak area.
Štandard alebo vzorka sa rozriedi s citranovým tlmivým roztokom (3.24) tak, aby plocha píku štandardu predstavovala 30 – 200 % plochy píku aminokyseliny vzorky.
The chromatography of amino acids will vary slightly according to the type of analyser employed and resin used.
Chromatografia aminokyselín sa mierne odlišuje podľa typu použitého analyzátora a použitej živice.
The chosen system must be capable of separating the amino acids from each other and from the ninhydrin-positive materials.
Zvolený systém musí byť schopný oddeliť aminokyseliny navzájom, ako aj od iných ninhydrín-pozitívnych materiálov.
In the range of operation the chromatographic system must give a linear response to changes in the amounts of amino acids added to the column.
V pracovnom rozsahu musí chromatografický systém poskytnúť lineárnu odozvu na zmeny v množstvách aminokyselín pridaných do kolóny.
During the chromatography step the valley:peak height ratios mentioned below apply, when an equimolar solution (of the amino acids being determined) is analysed.
Počas chromatografie, keď sa analyzuje ekvimolárny roztok (aminokyselín, ktoré sa stanovujú), sa uplatňujú pomery výšky údolia k výške píku, ako sa uvádza nižšie.
This equimolar solution must contain at least 30 % of the maximum load of each amino acid which can be accurately measured with the amino acid analyser system (4.9).
Tento ekvimolárny roztok musí obsahovať najmenej 30 % maximálneho množstva každej aminokyseliny, ktorá sa dá presne odmerať pomocou systému analyzátora aminokyselín (4.9).
For all other amino acids the separation must be better than 1:10.
Pri všetkých ostatných aminokyselinách musí byť oddelenie v pomere lepšom ako 1 : 10.
The system must ensure that lysine is separated from ‘lysine artifacts’ and ornithine.
Systém musí zabezpečiť, aby sa lyzín oddelil od „lyzínových artefaktov“ a od ornitínu.
The area of the sample and standard peaks is measured for each individual amino acid and the amount (X), in g amino acid per kg sample, is calculated as follows:
Plochy píkov vzorky a štandardu sa merajú pre každú jednotlivú aminokyselinu a vypočíta sa množstvo (X) v g aminokyselín na kg vzorky.
If an internal standard is used multiply by: D
Ak sa použije vnútorný štandard, vynásobte: D
A peak area, hydrolysate or extract
A plocha píku, hydrolyzátu alebo extraktu,
B peak area, calibration standard solution
B plocha píku, kalibračný štandardný roztok,
C peak area, internal standard in hydrolysate or extract
C plocha píku, vnútorny štandard v hydrolyzáte alebo extrakte,
D peak area, internal standard, calibration standard solution
D plocha píku, vnútorny štandard, kalibračný štandardný roztok,
M molar weight of the amino acid being determined
M molekulová hmotnosť aminokyseliny, ktorá sa stanovuje,
c concentration of standard in μmol/ml
c koncentrácia štandardu v μmol/ml,
m sample weight (g) (corrected to original weight if dried or defatted)
m hmotnosť vzorky (g) (upravená na pôvodnú hmotnosť ak je sušená alebo odtučnená),
V ml total hydrolysate (5.3.4) or ml calculated total dilution volume of extract (6.1)
V celkový hydrolyzát v ml (5.3.4) alebo vypočítaný objem celkového zriedenia extraktu (6.1).
Cystine and cysteine are both determined as cysteic acid in hydrolysates of oxidised sample, but calculated as cystine (C6H12N2O4S2, M 240,30 g/mol) by using M 120,15 g/mol (= 0,5 x 240,30 g/mol).
Cystín a cysteín sa obidva stanovujú ako kyselina cysteová v hydrolyzátoch oxidovanej vzorky, no vypočítajú sa ako cystín (C6H12N2O4S2, M 240,30 g/mol) pomocou M 120,15 g/mol (= 0,5 × 240,30 g/mol).
Methionine is determined as methionine sulphone in hydrolysates of oxidised sample, but calculated as methionine by using M of methionine: 149,21 g/mol.
Metionín sa stanovuje ako metionín sulfón v hydrolyzátoch oxidovanej vzorky, no vypočíta sa ako metionín pomocou M metionínu: 149,21 g/mol.
Added free methionine is determined after extraction as methionine, for the calculation the same M is used.
Pridaný voľný metionín sa stanovuje po extrakcii ako metionín a výpočet sa vykoná pomocou toho istého MW.
The total dilution volume of extracts (F) for determination of free amino acids (5.2) is calculated as follows:
Celkový objem zriedených extraktov (F) na stanovenie voľných aminokyselín (5.2) sa vypočíta takto:
V Volume of final extract
V objem konečného extraktu
Evaluation of the method
Hodnotenie metódy
The method has been tested in an intercomparison made at international level in 1990 using four different feed (mixed pig feed, broiler compound, protein concentrate, premixture).
Metóda bola testovaná v rámci vzájomného porovnávania na medzinárodnej úrovni v roku 1990 pomocou štyroch rôznych krmív (kŕmna zmes pre ošípané, kŕmna zmes pre brojlery, bielkovinový koncentrát, premix).
The results, after elimination of outliers, of mean and standard deviation are given in the tables in this point:
Výsledky priemeru a smerodajnej odchýlky po eliminácii odľahlých hodnôt sú uvedené v atbuľkách v tomto bode:
Means in g/kg
Priemery v g/kg
n Number of participating laboratories.
n počet zúčastnených laboratórií
Reference material
Referenčný materiál
Amino Acid
Aminokyselina
Cyst(e)ine
Cyst(e)ín
Lysine
Lysín
Mixed Pig Feed
Kŕmna zmes pre ošípané
Broiler Compound
Kŕmna zmes pre brojlery
Protein Concentrate
Bielkovinový koncentrát
Premixture
Premix
The repeatability expressed as ‘within laboratory standard deviation’ of the abovementioned intercomparison is given in the tables below:
Opakovateľnosť vyjadrená ako „vnútrolaboratórna smerodajná odchýlka“ uvedeného vzájomného porovnávania je uvedená v nasledujúcich tabuľkách:
Within Laboratory Standard Deviation (Sr) in g/kg
Vnútrolaboratórna smerodajná odchýlka (Sr) v g/kg
Coefficient of Variation (%) for Within Laboratory Standard Deviation (Sr)
Variačný koeficient (%) vnútrolaboratórnej smerodajnej odchýlky (Sr)
The results for between laboratory standard deviation by the abovementioned intercomparison are given in the table below:
Výsledky medzilaboratórnej smerodajnej odchýlky na základe uvedeného vzájomného porovnávania sú uvedené v nasledujúcich tabuľkách:
Between Laboratory Standard Deviation (SR) in g/kg
Medzilaboratórna smerodajná odchýlka (SR) v g/kg
Coefficient of Variation (%) for Between Laboratory Standard Deviation (SR)
Variačný koeficient (%) medzilaboratórnej smerodajnej odchýlky (SR)
Use of reference materials
Využitie referenčných materiálov
The correct application of the method shall be verified by making replicate measurements of certified reference materials when available.
Správne uplatňovanie tejto metódy sa overí vykonaním opakovaných meraní certifikovaných referenčných materiálov, ak sú takéto materiály k dispozícii.
Calibration with certified amino acid calibration solution is recommended.
Odporúča sa kalibrácia certifikovaným kalibračným roztokom aminokyselín.
Because of differences between amino acid analysers the final concentrations of the calibration solutions of standard amino acids (see 3.27.4 and 3.27.5) and of the hydrolysate (see 5.3.4) shall be taken as a guideline.
V dôsledku rozdielov medzi analyzátormi aminokyselín sa berú za základ konečné koncentrácie kalibračných roztokov štandardných aminokyselín (pozri body 3.27.4 a 3.27.5) a hydrolyzátu (pozri 5.3.4).
The range of linear response of the apparatus has to be checked for all amino acids.
Rozsah lineárnej odozvy prístroja sa musí preveriť pre všetky aminokyseliny.
The standard solution is diluted with citrate buffer to give peak areas in the middle of the range.
Štandardný roztok sa zriedi s citranovým tlmivým roztokom tak, aby plochy píkov boli v strede rozsahu.
Where high performance liquid chromatographic equipment is used to analyse the hydrolysates, the experimental conditions must be optimised in accordance with the manufacturer's recommendations.
V prípade použitia zariadenia na vysoko účinnú kvapalinovú chromatografiu na analýzu hydrolyzátov sa musia optimalizovať experimentálne podmienky v súlade s odporúčaniami výrobcu.
By applying the method to feed containing more than 1 % chloride (concentrate, mineral feeds, supplementary feeds) underestimation of methionine could occur and special treatment has to be done.
Uplatňovaním tejto metódy na krmivá s obsahom viac ako 1 % chloridu (koncentrát, minerálne krmivá, doplnkové krmivá) môže dôjsť k podhodnoteniu metionínu a musí sa vykonať osobitná úprava.
DETERMINATION OF TRYPTOPHAN
STANOVENIE TRYPTOFÁNU
The method makes the determination possible of the total and free tryptophan in feed.
Metóda umožňuje stanovenie celkového a voľného tryptofánu v krmivách.
It does not distinguish between D- and L- forms.
Nerozlišuje medzi D a L formami.
For the determination of the total tryptophan, the sample is hydrolysed under alkaline conditions with saturated barium hydroxide solution and heated to 110 oC for 20 hours.
Na stanovenie celkového tryptofánu sa vzorka hydrolyzuje v alkalickom prostredí s nasýteným roztokom hydroxidu bárnatého a zahreje sa na 110 oC na 20 hodín.
After hydrolysis internal standard is added.
Po hydrolýze sa pridá vnútorný štandard.
For the determination of free tryptophan, the sample is extracted under mild acidic conditions in the presence of internal standard.
Na stanovenie voľného tryptofánu sa vzorka extrahuje v mierne kyslom prostredí v prítomnosti vnútorného štandardu.
The tryptophan and the internal standard in the hydrolysate or in the extract are determined by HPLC with fluorescence detection.
Tryptofán a vnútorný štandard v hydrolyzáte alebo v extrakte sa stanovujú pomocou HPLC s fluorescenčnou detekciou.
Double distilled water or water of equivalent quality must be used (conductivity < 10 μS/cm).
Musí sa použiť dvakrát destilovaná voda alebo voda rovnakej kvality (vodivosť < 10 μS/cm).
Standard substance: tryptophan (purity/content ≥ 99 %) dried under vacuum over phosphorous pentoxide.
Štandardná látka: tryptofán (čistota/obsah ≥ 99 %) vysušený vo vákuu nad oxidom fosforečným.
Internal standard substance: α-methyl-tryptophan (purity/content ≥ 99 %), dried under vacuum over phosphorous pentoxide.
Vnútorný štandard: α-metyl-tryptofán (čistota/obsah ≥ 99 %) vysušený vo vákuu nad oxidom fosforečným.
Barium hydroxide octa-hydrate (care shall be taken not to expose the Ba(OH)2 .8 H2O excessively to air in order to avoid formation of BaCO3, which could disturb the determination) (see observation 9.3).
Oktahydrát hydroxidu bárnatého Ba(OH)2 8H2O (ktorý sa nesmie nechať dlho na vzduchu, aby sa nevytváral BaCO3, ktorý môže narušiť proces stanovenia) (pozri poznámku 9.3).
Ortho-phosphoric acid, w (w/w) = 85 %.
Kyselina orto-fosforečná, w (w/w) = 85 %.
Hydrochloric acid, ρ201,19 g/ml.
Kyselina chlorovodíková, ρ201,19 g/ml.
Methanol, equivalent to HPLC grade.
Metanol, čistoty HPLC
Dissolve 40,0 g NaOH (3.5) in water and make up to 1 litre with water (3.1).
Rozpustite 40,0 g NaOH (3.5) vo vode a objem doplňte vodou na 1 liter (3.1).
Hydrochloric acid, c = 6 mol/l:
Kyselina chlorovodíková, c = 6 mol/l:
Take 492 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Vezmite 492 ml HCl (3.7) a objem doplňte vodou na 1 liter.
Hydrochloric acid, c = 1 mol/l:
Kyselina chlorovodíková, c = 1 mol/l:
Take 82 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Vezmite 82 ml HCl (3.7) a objem doplňte vodou na 1 liter.
Hydrochloric acid, c = 0,1 mol/l:
Kyselina chlorovodíková, c = 0,1 mol/l:
Take 8,2 ml HCl (3.7) and make up to 1 litre with water.
Vezmite 8,2 ml HCl (3.7) a objem doplňte vodou na 1 liter.
Ortho-phosphoric acid, c = 0,5 mol/l:
Kyselina orto-fosforečná, c = 0,5 mol/l.
Take 34 ml ortho-phosphoric acid (3.6) and make up to 1 litre with water (3.1).
Vezmite 34 ml kyseliny orto-fosforečnej (3.6) a objem doplňte vodou na 1 liter (3.1).
Concentrated solution of tryptophan (3.2), c = 2,50 μmol/ml:
Koncentrovaný roztok tryptofánu (3.2), c = 2,50 μmol/ml:
In a 500 ml volumetric flask dissolve 0,2553 g tryptophan (3.2) in hydrochloric acid (3.13) and make up to the mark with hydrochloric acid (3.13).
V 500 ml odmernej banke rozpustite 0,2553 g tryptofánu (3.2) v kyseline chlorovodíkovej (3.13) a doplňte kyselinou chlorovodíkovou (3.13) po značku.
Store at - 18 oC for a maximum of 4 weeks.
Skladujte pri teplote –18 oC po dobu maximálne 4 týždne.
Concentrated internal standard solution, c = 2,50 μmol/ml:
Koncentrovaný roztok vnútorného štandardu, c = 2,50 μmol/ml:
In a 500 ml volumetric flask dissolve 0,2728 g α-methyl-tryptophan (3.3) in hydrochloric acid (3.13) and make up to the mark with hydrochloric acid (3.13).
V 500 ml odmernej banke rozpustite 0,2728 g α-metyl-tryptofánu (3.3) v kyseline chlorovodíkovej (3.13) a doplňte kyselinou chlorovodíkovou (3.13) po značku.
Calibration standard solution of tryptophan and internal standard:
Kalibračný štandardný roztok tryptofánu a vnútorného štandardu:
Take 2,00 ml concentrated solution of tryptophan (3.15), and 2,00 ml of concentrated internal standard (α-methyl-tryptophan) solution (3.16).
Vezmite 2,00 ml koncentrovaného roztoku tryptofánu (3.15) a 2,00 ml koncentrovaného roztoku vnútorného štandardu (α-metyl-tryptofán) (3.16).
Dilute with water (3.1) and methanol (3.8) to approximately the same volume and to approximately the same concentration of methanol (10 %-30 %) as the finished hydrolysate.
Rozrieďte s vodou (3.1) a metanolom (3.8) na približne rovnaký objem a na približne rovnakú koncentráciu metanolu (10 – 30 %) ako hotový hydrolyzát.
This solution must be prepared freshly before use.
Tento roztok sa musí pripravovať čerstvo pred použitím.
Protect from direct sunlight during preparation.
Počas prípravy chráňte ho pred priamym slnečným svetlom.
1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol.
1,1,1-trichloro-2-metyl-2-propanol
Ethanolamine w (w/w) > 98 %.
Etanolamín w (w/w) > 98 %.
Solution of 1 g 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol (3.19) in 100 ml methanol (3.8).
Roztok 1 g 1,1,1-trichloro-2-metyl-2-propanolu (3.19) v 100 ml metanolu (3.8).
Mobile phase for HPLC: 3,00 g acetic acid (3.18) + 900 ml water (3.1) +50,0 ml solution (3.21) of 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanol (3.19) in methanol (3.8) (1g/100ml).
Mobilná fáza pre HPLC: 3,00 g kyseliny octovej (3.18) + 900 ml vody (3.1) +50,0 ml roztoku (3.21) 1,1,1-trichloro-2-metyl-2-propanolu (3.19) v metanole (3.8) (1g/100ml).
Adjust pH to 5,00 using ethanolamine (3.20).
Upravte pH na 5,00 pomocou tanolamínu (3.20).
Make up to 1000 ml with water (3.1).
Objem doplňte vodou (3.1) na 1000 ml.
HPLC equipment with a spectrofluorometric detector.
Zariadenie HPLC s fluorescenčným detektorom.
Liquid chromatographic column, 125 mm x 4 mm, C18, 3 μm packing, or equivalent.
Kolóna na kvapalinovú chromatografiu, 125 mm × 4 mm, s náplňou C18, 3 μm alebo ekvivalentná
Polypropylene flask, capacity 125 ml, with wide neck and screw cap.
Polypropylénová banka, objem 125 ml so širokým hrdlom a závitovým uzáverom.
Membrane filter, 0,45 μm.
Membránový filter, 0,45 μm
Autoclave, 110 (± 2) oC, 1,4 (±0,1) bar.
Autokláv, 110 (± 2) oC, 1,4 (±0,1) bar.
Vortex mixer.
Vírivý mixér.
Samples with high fat content shall be extracted with light petroleum (3.9) prior to grinding.
Vzorky s vysokým obsahom tuku sa pred mletím extrahujú petroléterom (3.9).
Determination of free tryptophan (extract)
Stanovenie voľného tryptofánu (extrakt)
Weigh to the nearest 1 mg an appropriate amount (1-5 g) of the prepared sample (5.1), into a conical flask.
Navážte s presnosťou na 1 mg primerané množstvo (1 – 5 g) pripravenej vzorky (5.1) do Erlenmayerovej banky.
Add 100,0 ml hydrochloric acid, (3.13) and 5,00 ml concentrated internal standard solution (3.16).
Pridajte 100,0 ml kyseliny chlorovodíkovej, (3.13) a 5,00 ml koncentrovaného roztoku vnútorného štandardu (3.16).
Shake or mix for 60 min. using a mechanical shaker or a magnetic stirrer (4.7).
Zmes trepte alebo miešajte 60 min. na mechanickej trepačke alebo na magnetickej miešačke (4.7).
Allow the sediment to settle and pipette 10,0 ml of the supernatant solution into a beaker.
Nechajte sediment usadiť a napipetujte 10,0 ml z roztoku nad sedimentom do kadičky.
Add 5 ml ortho-phosphoric acid (3.14).
Pridajte 5 ml kyseliny orto-fosforečnej (3.14).
Adjust the pH to 3 using sodium hydroxide (3.10).
Upravte pH na 3 pomocou hydroxidu sodného (3.10).
Add sufficient methanol (3.8) to give a concentration of between 10 % and 30 % of methanol in the final volume.
Pridajte dostatočné množstvo metanolu (3.8) na dosiahnutie koncentrácie medzi 10 a 30 % metanolu v konečnom objeme.