natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Simulation of sunlight with solar simulators is considered the optimal artificial light source.
Za optimálny zdroj umelého svetla sa pokladá simulácia slnečného svetla pomocou solárnych simulátorov.
The irradiation power distribution of the filtered solar simulator should be close to that of outdoor daylight given in (14).
Distribúcia ožarovacieho výkonu filtrovaného solárneho simulátora by mala byť blízka vonkajšiemu dennému svetlu uvedenému v (14).
Both, Xenon arcs and (doped) mercury-metal halide arcs are used as solar simulators (15).
V solárnych simulátoroch sa používajú jednak xenónové výbojky, a jednak vysokotlakové ortuťovo-kovové halogénové výbojky (15).
The latter has the advantage of emitting less heat and being cheaper, but the match to sunlight is less perfect compared to that of xenon arcs.
Druhá z nich má tú výhodu, že vyžaruje menej tepla a je lacnejšia, ale slnečné svetlo napodobňuje menej dokonale než xenónová výbojka.
Because all solar simulators emit significant quantities of UVB they should be suitably filtered to attenuate the highly cytotoxic UVB wavelengths.
Pretože všetky solárne simulátory vyžarujú významné množstvá UVB žiarenia, mali by byť vhodným spôsobom filtrované s cieľom stlmiť vysoko cytotoxické vlnové dĺžky UVB.
Because cell culture plastic materials contain UV stabilisers the spectrum should be measured through the same type of 96-well plate lid as will be used in the assay.
Vzhľadom na to, že bunkové kultúry plastových materiálov obsahujú UV stabilizátory, spektrum by sa malo merať pomocou rovnakého druhu veka 96-jamkovej doštičky, ako sa bude používať pri skúške.
Irrespective of measures taken to attenuate parts of the spectrum by filtering or by unavoidable filter effects of the equipment the spectrum recorded below these filters should not deviate from standardised outdoor daylight (14).
Bez ohľadu na opatrenia prijaté na stlmenie častí spektra pomocou filtrovania alebo filtračnými účinkami zariadenia, ktorým sa nemožno vyhnúť, spektrum zaznamenané pod týmito filtrami by sa nemalo líšiť od normalizovaného denného svetla vo vonkajšom prostredí (14).
An example of the spectral irradiance distribution of the filtered solar simulator used in the validation study of the in vitro 3T3 NRU phototoxicity test is given in (8)(16).
Príklad distribúcie spektrálneho vyžarovania filtrovaného solárneho simulátora použitého vo validačnej štúdii testu fototoxicity 3T3 NRU in vitro sa uvádza v literatúre (8), (16).
See also Appendix 2 Figure 1.
Pozri aj prílohu 2 obrázok 1.
The intensity of light (irradiance) should be regularly checked before each phototoxicity test using a suitable broadband UV-meter.
Intenzita svetla (intenzita ožarovania) by sa mala pravidelne kontrolovať pred každým testom fototoxicity s použitím vhodného širokopásmového UV-merača.
The intensity should be measured through the same type of 96-well plate lid as will be used in the assay.
Táto intenzita by sa mala merať cez rovnaký druh veka 96-jamkovej doštičky, aký sa použije počas skúšky.
The UV-meter must have been calibrated to the source.
Tento UV-merač musí byť kalibrovaný na zdroj.
The performance of the UV-meter should be checked, and for this purpose the use of a second, reference UV-meter of the same type and identical calibration is recommended.
Funkčnosť UV-merača by sa mala kontrolovať a na tento účel sa odporúča použiť druhý, referenčný UV-merač rovnakého druhu s totožnou kalibráciou.
Ideally, at greater intervals, a spectroradiometer should be used to measure the spectral irradiance of the filtered light source and to check the calibration of the broadband UV-meter.
V ideálnom prípade by sa mal v dlhších časových odstupoch použiť spektrorádiometer na zmeranie spektrálneho vyžarovania filtrovaného svetelného zdroja a na kontrolu kalibrácie širokopásmového UV-merača.
A dose of 5 J/cm2 (as measured in the UVA range) was determined to be non-cytotoxic to Balb/c 3T3 cells and sufficiently potent to excite chemicals to elicit phototoxic reactions, (6) (17) e.g. to achieve 5 J/cm2 within a time period of 50 min, irradiance was adjusted to 1,7 mW/cm2.
Dávka 5 J/cm2 (meraná v pásme UVA) bola stanovená ako necytotoxická pre bunky Balb/c 3T3 a ako dostatočne silná na excitáciu chemických látok tak, aby vyvolávali fototoxické reakcie (6), (17), napr. na dosiahnutie 5 J/cm2 počas 50 minút bolo vyžarovanie upravené na hodnotu 1,7 mW/cm2.
See Appendix 2 Figure 2.
Pozri prílohu 2 obrázok 2.
If another cell line or a different light source are used, the irradiation dose may have to be calibrated so that a dose regimen can be selected that is not deleterious to the cells but sufficient to excite standard phototoxins.
Ak sa používa iná bunková línia alebo odlišný svetelný zdroj, je možné, že dávka vyžarovania sa bude musieť kalibrovať tak, aby sa mohol zvoliť režim dávkovania, ktorý nebude mať zhubný účinok na bunky, ale bude dostatočný na excitovanie štandardných fototoxínov.
The time of light exposure is calculated in the following way:
Čas svetelnej expozície sa vypočíta týmto spôsobom:
t(min)=irradiation dose (J/cm
t (min)=dávka ožiarenia (J/cm
irradiance (mW/cm
ožiarenie (mW/cm
Test substance concentrations
Koncentrácie testovanej látky
The ranges of concentrations of a chemical tested in the presence (+Irr) and in the absence (-Irr) of light should be adequately determined in dose range-finding experiments.
Rozmedzia koncentrácií chemickej látky testovanej so svetlom (+Irr) a bez svetla (–Irr) by mali byť vhodne stanovené v rámci experimentov na zistenie rozsahu dávky.
The highest concentration of the test substance should be within physiological test conditions, e.g. osmotic and pH stress should be avoided.
Najvyššia koncentrácia testovanej látky by sa mala byť zlučiteľná s fyziologickými testovacími podmienkami, napr. mal by byť vylúčený osmotický stres a stres z pH.
Depending on the test chemical, it may be necessary to consider other physico-chemical properties as factors limiting the highest test concentration.
V závislosti od testovanej chemickej látky môže byť potrebné vziať do úvahy ďalšie fyzikálno-chemické vlastnosti ako sú faktory obmedzujúce najvyššiu testovaciu koncentráciu.
For relatively insoluble substances that are not toxic at concentrations up to the saturation point the highest achievable concentration should be tested.
V prípade relatívne nerozpustných látok, ktoré nie sú toxické pri koncentráciách až do bodu nasýtenia, mala by sa testovať najvyššia dosiahnuteľná koncentrácia.
In general, precipitation of the test chemical at any of the test concentrations should be avoided.
Vo všeobecnosti by sa malo vylúčiť zrážanie testovanej chemickej látky pri akýchkoľvek testovacích koncentráciách.
The maximum concentration of a test substance should not exceed 1000 μg/mL; osmolarity should not exceed 10 mmolar.
Maximálna koncentrácia testovanej látky by nemala presiahnuť 1000 μg/ml; osmolarita by nemala presiahnuť 10 mmol.
A geometric dilution series of eight test substance concentrations with a constant dilution factor should be used (See Section 2.1, second paragraph).
Mali by sa použiť geometrické rady riedenia 8 koncentrácií testovanej látky s konštantným faktorom riedenia (pozri časť 2.1 druhý odsek).
If there is information (from a range finding experiment) that the test chemical is not cytotoxic up to the limit concentration in the dark experiment (-Irr), but is highly cytotoxic when irradiated (+Irr), the concentration ranges to be selected for the (+Irr) experiment may differ from those selected for the (-Irr) experiment to fulfill the requirement of adequate data quality.
Ak existujú údaje (z experimentu na zistenie rozsahu), že testovaná chemická látka nie je cytotoxická až do limitnej koncentrácie pri pokuse v tme (–Irr), ale je vysoko cytotoxická pri ožiarení (+Irr), rozsahy koncentrácií, ktoré sa musia zvoliť na pokus (+Irr), sa môžu líšiť od rozsahov zvolených pre (–Irr) pokus, aby sa splnila požiadavka dostatočnej kvality údajov.
Radiation sensitivity of the cells, establishing of historical data:
Radiačná citlivosť buniek, zistenie doterajších údajov:
Cells should be checked regularly (about every fifth passage) for sensitivity to the light source by assessing their viability following exposure to increasing doses of irradiation.
Citlivosť buniek na svetelný zdroj by sa mala pravidelne kontrolovať (približne každý piata pasáž) pomocou posúdenia ich životaschopnosti po expozícii narastajúcim dávkam ožiarenia.
Several doses of irradiation, including levels substantially greater than those used for the 3T3 NRU Phototoxicity test should be used in this assessment.
Pri tomto posudzovaní by sa malo použiť niekoľko dávok ožiarenia vrátane úrovní podstatne vyšších, ako sú úrovne používané pri teste fototoxicity 3T3 NRU.
These doses are easiest quantitated by measurements of UV parts of the light source.
Tieto dávky sú najľahšie stanoviteľné meraniami UV častí svetelného zdroja.
Cells are seeded at the density used in the in vitro 3T3 NRU phototoxicity test and irradiated the next day.
Bunky sa nasadia pri hustote používanej pri teste fototoxicity 3T3 NRU in vitro a ožarujú sa nasledujúci deň.
Cell viability is then determined one day later using Neutral Red uptake.
Životaschopnosť bunky sa potom stanoví o deň neskôr s použitím absorpcie neutrálnej červene.
It should be demonstrated that the resulting highest non-cytotoxic dose (e.g. in the validation study: 5 J/cm2 [UVA]) was sufficient to classify the reference chemicals (Table 1) correctly.
Malo by preukázať, že výsledná najvyššia necytotoxická dávka (napr. v rámci validačnej štúdie: 5 J/cm2 [UVA]) bola dostatočná na správnu klasifikáciu referenčných chemických látok (tabuľka 1).
Radiation sensitivity, check of current test:
Radiačná citlivosť, kontrola prebiehajúceho testu:
The test meets the quality criteria if the irradiated negative/solvent controls show a viability of more than 80 % when compared with non-irradiated negative/solvent.
Test spĺňa kritériá kvality, keď ožiarené negatívne/rozpúšťadlové kontrolné vzorky vykazujú životaschopnosť vyššiu ako 80 % v porovnaní s experimentom v tme s neožiarenou negatívnou/rozpúšťadlovou kontrolnou vzorkou.
Viability of solvent controls:
Životaschopnosť kontrolných vzoriek rozpúšťadla:
The absolute optical density (OD540 NRU) of the Neutral Red extracted from the solvent controls indicates whether the 1×104 cells seeded per well have grown with a normal doubling time during the two days of the assay.
Absolútna optická hustota (OD540 NRU) neutrálnej červene extrahovanej z kontrolných vzoriek rozpúšťadla udáva, či 1 × 104 buniek nasadených do každej jamky vyrástlo v bežnom čase zdvojnásobenia počas dvoch dní skúšky.
A test meets the acceptance criteria if the mean OD540 NRU of the untreated controls is ≥ 0,4 (i.e. approximately 20 times the background solvent absorbance).
Test spĺňa kritériá prijateľnosti, ak je stredná hodnota OD540 NRU pre neexponované vzorky ≥ 0,4 (t. j. približne dvadsaťnásobok absorbancie rozpúšťadlového pozadia).
Positive control:
Pozitívna kontrola:
A known phototoxic chemical shall be tested concurrently with each in vitro 3T3 NRU phototoxicity test.
Známa fototoxická chemická látka sa testuje súbežne s každým testom fototoxicity 3T3 NRU in vitro.
Chlorpromazine (CPZ) is recommended.
Odporúča sa chlórpromazín (CPZ).
For CPZ tested with the standard protocol in the in vitro 3T3 NRU phototoxicity test, the following test acceptance criteria were defined: CPZ irradiated (+Irr): IC50 = 0,1 to 2,0 μg/ml, CPZ non-irradiated (-Irr): IC50 = 7,0 to 90,0 μg/mL.
Pre CPZ testovaný podľa štandardného protokolu pri teste fototoxicity 3T3 NRU in vitro sa definovali tieto kritériá prijateľnosti testu: pre CPZ ožiarený (+Irr): IC50 = 0,1 až 2,0 μg g/ml, pre CPZ neožiarený (–Irr): IC50 = 7,0 až 90,0 μg/ml.
The Photo Irritation Factor (PIF), should be > 6.
Koeficient svetelnej dráždivosti (PIF) by mal byť > 6.
The historical performance of the positive control should be monitored.
Mala by sa monitorovať predchádzajúca funkčnosť tejto pozitívnej kontroly.
Other phototoxic chemicals, suitable for the chemical class or solubility characteristics of the chemical being evaluated, may be used as the concurrent positive controls in place of chlorpromazine.
Namiesto chlórpromazínu sa môžu používať ako súbežné pozitívne porovnávacie vzorky aj iné fototoxické chemické látky, vhodné pre chemickú triedu alebo vlastnosti rozpustnosti vyhodnocovanej chemickej látky.
Test procedure (6)(7)(8)(16)(17):
Postup testovania (6), (7), (8), (16), (17):
day:
Tretí deň:
Dispense 100 μL culture medium into the peripheral wells of a 96-well tissue culture microtiter plate (= blanks).
Do obvodových jamiek 96-jamkovej mikrotitračnej doštičky tkanivových kultúr sa odpipetuje 100 μl kultivačného média (= slepé vzorky).
In the remaining wells, dispense 100 μL of a cell suspension of 1×105 cells/mL in culture medium (= 1×104 cells/well).
Do zostávajúcich jamiek sa nadávkuje 100 μl bunkovej suspenzie s koncentráciou 1 × 105 buniek/ml do kultivačného média (= 1 × 104 buniek/jamka).
Two plates should be prepared for each series of individual test substance concentrations, and for the solvent and positive controls.
Pre každú sériu koncentrácií jednotlivej testovanej látky a pre rozpúšťadlové a pozitívne porovnávacie vzorky by sa mali pripraviť dve doštičky.
Incubate cells for 24 h (See Section 1.4.1.2) until they form a half confluent monolayer.
Bunky sa inkubujú 24 hodín (pozri časť 1.4.1.2), až kým nevytvoria polosplývajúcu monomolekulovú vrstvu.
This incubation period allows for cell recovery, adherence, and exponential growth.
Táto doba inkubácie umožňuje regeneráciu buniek, ich priľnavosť a exponenciálny rast.
After incubation, decant culture medium from the cells and wash carefully with 150 μL of the buffered solution used for incubation.
Po inkubácii sa kultivačné médium z buniek dekantuje a opatrne premyje so 150 μl pufrovaného roztoku použitého na inkubáciu.
Add 100 μL of the buffer containing the appropriate concentration of test chemical or solvent (solvent control).
Pridá sa 100 μl pufira obsahujúceho vhodnú koncentráciu testovanej chemickej látky alebo rozpúšťadla (kontrola rozpúšťadlom).
Apply eight different concentrations of the test chemical.
Aplikuje sa 8 rôznych koncentrácií testovanej chemickej látky.
Incubate cells with the test substance in the dark for 60 minutes (See Section 1.4.1.2 and 1.4.1.4 second paragraph).
Bunky sa testovanou chemickou látkou inkubujú v tme počas 60 minút (pozri časť 1.4.1.2 a druhý odsek v časti 1.4.1.4).
From the two plates prepared for each series of test substance concentrations and the controls, one is selected, generally at random, for the determination of cytotoxicity (-Irr) (i.e., the control plate), and one (the treatment plate) for the determination of photocytotoxicity (+Irr).
Vyberie sa jedna z dvoch doštičiek pripravených na každú sériu koncentrácií testovanej látky a porovnávacích vzoriek, spravidla náhodne, na stanovenie cytotoxicity (–Irr) (t. j. kontrolná doštička), a jedna (expozičná doštička) na stanovenie fotocytotoxicity (+Irr).
To perform the +Irr exposure, irradiate the cells at room temperature for 50 minutes through the lid of the 96-well plate with the highest dose of radiation that is non-cytotoxic (see also Appendix 2).
Na vykonanie expozície +Irr sa bunky pri izbovej teplote počas 50 minút ožarujú cez veko 96-jamkovej doštičky najvyššou dávkou žiarenia, ktorá je necytotoxická (pozri taktiež prílohu 2).
Keep non-irradiated plates (-Irr) at room temperature in a dark box for 50 min (= light exposure time).
Neožiarené doštičky (–Irr) sa uchovávajú pri izbovej teplote v tmavej škatuli 50 minút (= doba expozície účinkom svetla).
Decant test solution and carefully wash twice with 150 μL of the buffered solution used for incubation, but not containing the test material.
Testovací roztok sa dekantuje a dôkladne dvakrát premyje so 150 ul pufrovaného roztoku použitého na inkubáciu, ale neobsahujúceho testovaný materiál.
Replace the buffer with culture medium and incubate (See Section 1.4.1.2.) overnight (18-22 h).
Pufer sa nahradí kultivačným médiom a inkubuje sa (pozri časť 1.4.1.2) cez noc (18 – 22 hodín).
Microscopic evaluation
Vyhodnotenie mikroskopom
Cells should be examined for growth, morphology, and integrity of the monolayer using a phase contrast microscope.
Bunky by sa mali preskúmať pomocou mikroskopu s fázovým kontrastom vzhľadom na ich rast, morfológiu a integritu monomolekulovej vrstvy.
Changes in cell morphology and effects on cell growth should be recorded.
Zmeny v morfológii bunky a účinky na rast bunky by sa mali zaznamenať.
Neutral Red uptake test
Test absorpcie neutrálnej červene
Wash the cells with 150 μL of the pre-warmed buffer.
Bunky sa premyjú so 150 μl predhriateho pufira.
Remove the washing solution by gentle tapping.
Premývací roztok sa odstráni jemným poklepávaním.
Add 100 μL of a 50 μg/mL Neutral Red (NR) (3-amino-7-dimethylamino-2-methylphenazine hydrochloride, EINECS number 209-035-8; CAS number 553-24-2; C.I.
Pridá sa 100 μl neutrálnej červene s koncentráciou 50 μg/ml neutrálnej červene (NR) (N8, N8, 3-trimetyl-2, 8-fenazíndiamín monohydrochlorid, EINECS číslo 209-035-8; CAS číslo 553-24-2; C.I.
in medium without serum (16) and incubate as described in paragraph 1.4.1.2., for 3 h. After incubation, remove the NR medium, and wash cells with 150 μL of the buffer.
do média bez séra (16) a 3 hodiny sa inkubuje spôsobom opísaným v časti 1.4.1.2. Po inkubácii sa médium NR odstráni a bunky sa premyjú so 150 μl pufra.
Decant and remove excess buffer by blotting or centrifugation.
Ten sa dekantuje a prebytočný pufer sa odstráni odsatím alebo odstredením.
Add exactly 150 μL NR desorb solution (freshly prepared 49 parts water + 50 parts ethanol + 1 part acetic acid).
Pridá sa presne 150 μl desorbčného roztoku NR (čerstvo pripravený v zložení 49 dielov vody + 50 dielov etanolu + 1 diel kyseliny octovej).
Shake the microtiter plate gently on a microtiter plate shaker for 10 min until NR has been extracted from the cells and has formed a homogeneous solution.
Mikrotitračná doštička sa jemne trepe na trepačke mikrotitračných doštičiek počas 10 minút, až do vy extrahovaní a NR z buniek a vytvorenia homogénneho roztoku.
Measure the optical density of the NR extract at 540 nm in a spectrophotometer, using blanks as a reference.
Spektrofotometrom sa zmeria optická hustota extraktu NR pri 540 nm, pričom sa na porovnanie použije slepá skúška.
Save data in an appropriate electronic file format for subsequent analysis.
Údaje sa uložia vo vhodnom formáte elektronického súboru na účely následnej analýzy.
QUALITY AND QUANTITY OF DATA
KVALITA A KVANTITA ÚDAJOV
The test data should allow a meaningful analysis of the concentration-response obtained in the presence and in the absence of irradiation, and if possible the concentration of test chemical by which cell viability is reduced to 50 % (IC50).
Údaje z testovania by mali umožniť zmysluplnú analýzu závislosti odozvy na koncentrácii získanej pri ožarovaní a bez neho, a pokiaľ je to možné, koncentrácii testovanej chemickej látky, pri ktorej je životaschopnosť buniek znížená na 50 % (IC50).
If cytotoxicity is found, both the concentration range and the intercept of individual concentrations shall be set in a way to allow the fit of a curve to the experimental data.
Ak sa zistí cytotoxicita, mal by sa rozsah koncentrácií a interval medzi jednotlivými koncentráciami nastaviť tak, aby to umožnilo zladiť krivku s experimentálnymi údajmi.
For both clearly positive and clearly negative results (See Section 2.3, first paragraph), the primary experiment, supported by one or more preliminary dose range-finding experiment(s), may be sufficient.
Pre jasne pozitívne ako aj pre jasne negatívne výsledky (pozri časť 2.3 prvý odsek) môže postačovať primárny experiment podporený jedným alebo viacerými predbežnými experimentmi na stanovenie rozsahu dávok.
Equivocal, borderline, or unclear results should be clarified by further testing (see also section 2.4, second paragraph).
Nepreukazné, hraničné alebo nejasné výsledky by sa mali objasniť ďalším testovaním (pozri aj časť 2.4 druhý odsek).
In such cases, modification of experimental conditions should be considered.
V takýchto prípadoch by sa mala zvážiť modifikácia experimentálnych podmienok.
Experimental conditions that might be modified include the concentration range or spacing, the pre-incubation time, and the irradiation-exposure time.
Medzi experimentálne podmienky, ktoré by sa možno mohli modifikovať, patrí rozsah či odstup koncentrácií, čas predinkubácie a čas expozície ožiareniu.
A shorter exposure time may be appropriate for water-unstable chemicals.
Pre chemické látky nestabilné vo vode môže byť vhodný kratší expozičný čas.
To enable evaluation of the data, a Photo-Irritation-Factor (PIF) or Mean Photo Effect (MPE) may be calculated.
Na umožnenie vyhodnotenia údajov sa môže vypočítať koeficient svetelnej dráždivosti (PIF) alebo stredný svetelný účinok (MPE).
For the calculation of the measures of photocytotoxicity (see below) the set of discrete concentration-response values has to be approximated by an appropriate continuous concentration-response curve (model).
Pri výpočte parametrov fotocytotoxicity (pozri ďalej) sa súbor diskrétnych hodnôt závislost odozvy na koncentrácii musí aproximovať s použitím vhodnej spojitej krivky koncentračnej závislosti odozvy (vhodným modelom).
Fitting of the curve to the data is commonly performed by a non-linear regression method (18).
Zladenie krivky s údajmi sa zvyčajne vykonáva metódou nelineárnej regresie (18).
To assess the influence of data variability on the fitted curve a bootstrap procedure is recommended.
Na posúdenie vplyvu variability údajov na zladenú krivku sa odporúča samozavádzací postup (bootstrap).
A Photo-Irritation-Factor (PIF) is calculated using the following formula:
Koeficient svetelnej dráždivosti (PIF) sa vypočíta pomocou tohto vzorca:
If an IC50 in the presence or absence of light cannot be calculated, a PIF cannot be determined for the test material.
Ak IC50 za prítomnosti alebo za neprítomnosti svetla nemožno vypočítať, nemožno pre testovaný materiál stanoviť PIF.
The mean photo effect (MPE) is based on comparison of the complete concentration-response curves (19).
Stredný svetelný účinok (MPE) je založený na porovnaní úplných kriviek závislosti odozvy na koncentrácii (19).
The photo effect PEc at any concentration C is defined as the product of the response effect REc and the dose effect DEc i.e. PEc = REc × DEc. The response effect REc is the difference between the responses observed in the absence and presence of light, i.e. REc = Rc (-Irr) - Rc (+Irr).
Svetelný účinok PEc pri každej koncentrácii C sa definuje ako súčin účinku odozvy REc a účinku koncentrácie DEc, t. j. PEc = REc × DEc. Účinok odozvy REc predstavuje rozdiel medzi odozvami pozorovanými za prítomnosti a za neprítomnosti svetla, t. j. REc = Rc (–Irr) – Rc (+Irr).
The dose-effect is given by
Účinok dávky je daný vzťahom
where C* represents the equivalence concentration, i.e. the concentration at which the +Irr response equals the –Irr response at concentration C. If C* cannot be determined because the response values of the +Irr curve are systematically higher or lower than RC(-Irr) the dose effect is set to 1.
pričom C* predstavuje koncentráciu ekvivalencie, t. j. koncentráciu, pri ktorej je odozva na +Irr rovnaká ako odozva na –Irr pri koncentrácii C. Ak C* nemožno stanoviť, pretože hodnoty odozvy krivky +Irr sú sústavne vyššie alebo nižšie ako hodnoty Rc (–Irr), tak hodnota účinku dávky sa stanoví na hodnotu 1.
The weighting factors wi are given by the highest response value, i.e. wi = MAX Ri (+Irr), Ri (-Irr) .
Váhové faktory wi sú dané najvyššou hodnotou odozvy, t. j. wi = MAX Ri (+Irr), Ri (–Irr) .
The concentration grid Ci is chosen such that the same number of points falls into each of the concentration intervals defined by the concentration values used in the experiment.
Súradnicová sieť pre koncentrácie C; sa zvolí tak, aby v koncentračnom intervale definovanom hodnotami koncentrácií použitými v rámci experimentu bol rovnaký počet bodov.