natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If lipid analysis cannot be conducted on the same fish as chemical analysis, and using control fish only for lipid analysis is also not feasible (cf. paragraph 56), an additional 15 fish would be required (three from the stock population at test start, three each from control and test groups at the start of depuration and three each from control and test groups at the end of the experiment).
În cazul în care acest lucru nu este posibil din cauza faptului că concentrațiile se află sub limita de cuantificare pentru al doilea eșantion de eliminare, se poate efectua o estimare conservatoare a k2 (a se vedea apendicele 7).
An example sampling schedule with fish numbers can be found in Appendix 4.
Se calculează varianțele în panta și ordonata la origine ale liniei utilizând proceduri statistice standard și se evaluează și se prezintă intervalele de încredere de 90 % (sau 95 %) în jurul acestor rezultate.
Similarly high water-to-fish ratios should be used as for the aqueous exposure method (cf. paragraphs 43 and 44).
Se calculează, de asemenea, concentrația medie măsurată a peștilor pentru ultima zi de absorbție (concentrația la timpul zero măsurată, C0,m) și se compară cu valoarea derivată C0,d.
Although fish-to-water loading rates do not have an effect on exposure concentrations in this test, a loading rate of 0,1-1,0 g of fish (wet weight) per litre of water per day is recommended to maintain adequate dissolved oxygen concentrations and minimise test organism stress.
În cazul în care valoarea derivată este mai mică decât valoarea măsurată, diferența poate sugera prezența de hrană îmbogățită nedigerată în intestine.
Test diet and Feeding
În cazul în care valoarea derivată este mult mai mare decât valoarea măsurată, aceasta ar putea fi o indicație a faptului că valoarea derivată din datele de eliminare prin regresie liniară este eronată și se efectuează evaluarea din nou (a se vedea apendicele 7).
During the acclimatisation period, fish should be fed an appropriate diet as described above (paragraph 117).
Viteza de eliminare și factorul de bioamplificare
If the test is being conducted under flow-through conditions, the flow should be suspended while the fish are fed.
Pentru a calcula factorul de bioamplificare din date, se obține mai întâi eficacitatea asimilării (absorbția substanței de testat în intestine, α).
During the test, the diet for the test group should adhere to that described above (paragraphs 116-121).
Pentru a efectua acest lucru, se utilizează ecuația A7.1 din apendicele 7, fiind necesar să se cunoască concentrația derivată în pește la timpul zero al fazei de eliminare (C0,d), constanta de viteză de eliminare (totală) (k2), concentrația în hrană (Chrană), constanta de viteză de ingestie (I) și durata perioadei de absorbție (t).
In addition to consideration of substance-specific factors, analytical sensitivity, expected concentration in the diet under environmental conditions and chronic toxicity levels/body burden, selection of the target spiking concentration should take into account palatability of the food (so that fish do not avoid eating).
Panta și ordonata la origine a relației liniare între ln(concentrație) și timpul de eliminare se raportează ca constanta de viteză de eliminare totală (k2 = panta) și concentrația la timpul zero (C0,d = eordonata la origine), așa cum se prezintă mai sus.
Nominal spiking concentration of the test substance should be documented in the report.
Valorile derivate se verifică pentru plauzibilitate biologică (de exemplu, eficacitatea de asimilare, ca fracție, nu este mai mare de 1).
Based on experience, spiking concentrations in the range of 1-1000 μg/g provide a practical working range for test substances that do not exhibit a specific toxic mechanism.
Se calculează (I) prin împărțirea masei alimentației la masa peștilor hrăniți în fiecare zi (dacă au fost hrăniți la 2 % din greutatea corporală, (I) va fi 0,02).
For substances acting via a non-specific mechanism, tissue residue levels should not exceed 5 μmol/g lipid since residues above this level are likely to pose chronic effects (19) (48) (50) [50].
Cu toate acestea, rata de alimentare utilizată la calcul ar putea necesita ajustare pentru creșterea peștilor (acest lucru poate fi realizat utilizând constanta de viteză de creștere cunoscută pentru a estima greutatea peștilor la fiecare moment în timpul fazei de absorbție; a se vedea apendicele 7).
For other substances care should be taken that no adverse effects occur from the accumulated exposure (cf. paragraph 127).
În cazurile în care k2 și C0,d nu pot fi stabilite deoarece, de exemplu, concentrațiile au scăzut sub limita de detecție pentru al doilea eșantion de eliminare, se poate efectua o estimare conservatoare a k2 și o „limită superioară” pentru BMFk (a se vedea apendicele 7).
This is especially true if more than one substance is being tested simultaneously (cf. paragraph 112).
După ce se obține eficacitatea asimilării (α), se poate calcula factorul de bioamplificare prin înmulțirea α cu constanta de viteză de ingestie (I) și împărțirea la constanta de viteză de eliminare (totală) (k2).
The appropriate amount of the test substance can be spiked to the fish food in one of three ways, as described in paragraph 119 and Appendix 7.
În aceeași modalitate se calculează factorul de bioamplificare corectat pentru creștere, dar utilizând constanta de viteză de eliminare corectată pentru creștere (k2c; a se vedea punctele 162 și 163).
The methods and procedures for spiking the feed should be documented in the report.
Se poate obține o estimare alternativă a eficacității de asimilare în cazul în care analiza tisulară a fost efectuată pe pești eșantionați în faza inițială, liniară a fazei de absorbție; a se vedea punctul 151 și apendicele 7.
Untreated food is fed to the control fish, containing an equivalent quantity of unspiked oil vehicle if this has been used in the spiked feed for the uptake phase, or having been treated with “pure” solvent if a solvent vehicle was used for test group diet preparation.
Această valoare reprezintă o estimare independentă a eficacității de asimilare pentru un organism în esență neexpus (și anume, peștii sunt aproape la începutul fazei de absorbție).
The treated and untreated diets should be measured analytically at least in triplicate for test substance concentration before the start and at the end of the uptake phase.
Eficacitatea de asimilare estimată din datele de eliminare este utilizată, de regulă, pentru a obține BMF.
After exposure to the treated feed (uptake phase), fish (both groups) are fed untreated food (depuration phase).
Corecția de lipide și corecția de diluție de creștere
Fish are fed at a fixed ration (dependent on species; e.g. approximately 1-2 % of wet body weight per day in the case of rainbow trout).
Creșterea peștilor în timpul fazei de eliminare poate conduce la o scădere a concentrațiilor chimice măsurate în pești, având ca efect faptul că constanta de viteză de eliminare totală k2 este mai mare decât ar rezulta numai din procesele de eliminare (de exemplu, metabolism, egestie) (a se vedea punctul 72).
The exact feeding rate set during the experiment should be recorded.
Conținutul lipidic al peștilor de testat (care este strâns legat de bioacumularea substanțelor hidrofobe) și conținutul lipidic al alimentelor pot varia suficient în practică astfel încât să fie necesară corecția acestora pentru a prezenta factorii de bioamplificare într-un mod semnificativ.
Initial feeding should be based on the scheduled weight measurements of the stock population just prior to the start of the test.
Factorul de bioamplificare se corectează pentru diluția de creștere ( precum se corectează BCF cinetică în metoda de expunere prin apă) și pentru conținutul lipidic al alimentelor în raport cu cel al peștilor (factorul de corecție lipidică).
The amount of feed should be adjusted based on the wet weights of sampled fish at each sampling event to account for growth during the experiment.
Ecuațiile și exemple pentru aceste calcule sunt disponibile în apendicele 5 și respectiv, apendicele 7.
Weights and lengths of fish in the test and control tanks can be estimated from the weights and total lengths of fish used at each sampling event; do not weigh or measure the fish remaining in the test and control tanks.
Pentru corectarea pentru diluția de creștere, se calculează constanta de viteză de eliminare corectată pentru creștere (k2c) (a se vedea ecuațiile din apendicele 5).
It is important to maintain the same set feeding rate throughout the experiment.
Acest lucru poate fi realizat cu ușurință, întrucât testele în conformitate cu această metodă trebuie să asocieze concentrațiile tisulare înregistrate de greutățile corporale individuale ale peștilor.
Feeding should be observed to ensure that the fish are visibly consuming all of the food presented in order to guarantee that the appropriate ingestion rates are used in the calculations.
Se remarcă faptul că k2 se estimează și se înregistrează în continuare, inclusiv în cazul în care se utilizează această abordare alternativă.
Preliminary feeding experiments or previous experience should be considered when selecting a feeding rate that will ensure that all food from once-daily feeding is consumed.
Pentru corectarea pentru conținutul lipidic al alimentelor și al peștilor atunci când nu a fost efectuată o analiză lipidică a peștilor eșantionați, se obțin raporturile medii de lipide (g/g) în pești și în alimente [52].
In the event that food is consistently being left uneaten, it may be advisable to spread the dose over an extra feeding period in each experimental day (e.g. replace once-daily feeding with feeding half the amount twice daily).
Se calculează ulterior factorul de corecție de lipide ( Lc) prin împărțirea raportului mediu de lipide din pește la raportul mediu de lipide din alimente.
If this is necessary, the second feeding should occur at a set time and be timed so that the maximum period of time possible passes before fish sampling (e.g. time for second feeding is set within the first half of an experimental day).
Factorul de bioamplificare, corectat sau nu pentru creștere, după caz, se împarte la factorul de corecție lipidică pentru a calcula factorul de bioamplificare corectat pentru lipide.
Although fish generally rapidly consume the food, it is important to ensure that the substance remains adsorbed to the food.
În cazul în care au fost efectuate analize chimice și lipidice pe aceiași pești la fiecare punct de eșantionare, se pot utiliza datele tisulare corectate pentru lipide pentru fiecare pește pentru a calcula un BMF corectat pentru lipide în mod direct (a se vedea punctul 37).
Efforts should be made to avoid the test substance becoming dispersed in water from the food, thereby exposing the fish to aqueous concentrations of the test substance in addition to the dietary route.
Reprezentarea grafică a datelor cu privire la concentrația corectată pentru lipide furnizează C0,d pe bază de lipide și k2.
This can be achieved by removing any uneaten food (and faeces) from the test and control tanks within one hour of feeding, but preferably within 30 minutes.
Se poate realiza ulterior analiza matematică utilizând aceleași ecuații din apendicele 7, dar eficacitatea asimilării (a) se calculează utilizând constanta de viteză de ingestie a alimentației corectată pentru lipide (Ilipid) și concentrația alimentară pe bază de lipide (Chrană-lipid).
In addition, a system where the water is continuously cleaned over an active carbon filter to absorb any ‘dissolved’ contaminant may be used.
Parametrii lipidici corectați sunt utilizați, de asemenea, ulterior pentru a calcula BMF (a se observa faptul că, de asemenea, constanta de corecție de creștere se aplică raportului lipidic, mai degrabă decât greutății umede a peștilor pentru a calcula BMF corectat pentru lipide, corectat pentru creștere BMFKcL).
Flow-through systems may help to flush away food particles and dissolved substances rapidly [51].
Se compară constantele de viteză de creștere sau curbele de creștere a celor două grupuri printr-o procedură adecvată [53].
In some cases, a slightly modified spiked food preparation technique can help to alleviate this problem (see paragraph 119).
Raport de testare
Light and Temperature
După încheierea studiului, se pregătește un raport final care conține informații privind substanța de testat, specia de testare și condițiile de testare, astfel cum sunt enumerate la punctul 81 (precum pentru metoda expunerii prin apă).
As for the aqueous exposure method (cf. paragraph 48), a 12 to 16 hour photoperiod is recommended and temperature (± 2 °C) appropriate for the test species used (cf. Appendix 3).
Suplimentar, se solicitată următoarele informații:
Type and characteristics of illumination should be known and documented.
Substanța de testat:
One control group should be used, with fish fed the same ration as the test group but without the test substance present in the feed.
Orice informații privind stabilitatea substanței de testat în hrană preparată;
If an oil or solvent vehicle has been used to spike the feed in the test group, the control group food should be treated in exactly the same way but with the absence of test substance so that the diets of the test group and control group are equivalent (cf. paragraphs 121 and 139).
Concentrația nominală a substanței în alimente, tehnica de îmbogățire, cantitatea de vehicul (lipidă) utilizată în procesul de îmbogățire (dacă este utilizat), măsurătorile concentrației de substanță de testat în hrană îmbogățită pentru fiecare analiză (în cel puțin trei exemplare înainte de începutul studiului și la sfârșitul absorbției) și valorile medii obținute;
The conditions described in the aqueous exposure method apply here also, except that TOC need only be measured before the test as part of the test water characterisation (cf. paragraph 53).
În cazul în care se utilizează, tipul și calitatea uleiului purtător sau solvent (clasa, furnizorul etc.), utilizat pentru îmbogățirea alimentelor;
Sampling and Analysis of Fish and Diet
Tipul de alimente utilizate (analiza proximă [54], clasa sau calitatea, furnizorul etc.), rata de alimentare în timpul fazei de absorbție, cantitatea de hrană administrată și frecvența (inclusiv orice modificări bazate pe greutatea peștilor eșantionați);
Analysis of Diet Samples
Ora la care peștii au fost colectați și eutanasiați pentru analiză chimică pentru fiecare punct de eșantionare (de exemplu, o oră înainte de hrănirea din următoarea zi);
Samples of the test and control diets should be analysed at least in triplicate for the test substance and for lipid content at least before the beginning and at the end of the uptake phase.
Rezultate din orice alte activități efectuate înainte de studiu;
The methods of analysis and procedures for ensuring homogeneity of the diet should be included in the report.
Informații cu privire la orice efecte adverse observate;
Samples should be analysed for the test substance by the established and validated method.
Descrierea completă a tuturor procedurilor utilizate, inclusiv limitele de detecție și cuantificare, variabilitatea și recuperarea;
Pre-study work should be conducted to establish the limit of quantification, percent recovery, interferences and analytical variability in the intended sample matrix.
Concentrațiile măsurate de lipide din hrană (îmbogățită și alimentația martor), valorile medii individuale și deviațiile standard;
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
Prezentarea sub formă de tabel a datelor cu privire la greutatea (și lungimea) peștilor, asociate cu fiecare pește, atât pentru grupul martor, cât și pentru grupul de expunere (de exemplu, utilizând identificatori unici pentru fiecare pește) și a calculelor, constanta (constantele) de viteză de creștere derivată(e) și intervalul (intervalele) de încredere de 95 %;
Analysis of Fish
Date prezentate sub formă de tabel cu privire la concentrația substanței de testat în pești, concentrația medie măsurată la sfârșitul absorbției (C0,m) și constanta de viteză de eliminare (totală) derivată (k2) și concentrația în pește la începutul fazei de eliminare (C0,e), împreună cu varianțele în aceste valori (pantă și ordonata la origine);
At each fish sampling event, 5-10 individuals will be sampled from exposure and control treatments (in some instances numbers of control fish can be reduced; cf. paragraph 134).
Date prezentate sub formă de tabel cu privire la conținutul lipidic în pești (listat în funcție de concentrații specifice substanței, dacă este cazul), valorile medii pentru grupul de testat și grupul martor la începutul testului, la finalul absorbției și la finalul eliminării;
Sampling events should occur at the same time on each experimental day (relative to feeding time), and should be timed so that the likelihood of food remaining in the gut during the uptake phase and the early part of the depuration phase is minimised to prevent spurious contributions to total test substance concentrations (i.e. sampled fish should be removed at the end of an experimental day, keeping in mind that an experimental day starts at the time of feeding and ends at the time of the next feeding, approximately 24 hours later.
Curbele (inclusiv toate măsurătorile efectuate), evidențiind următoarele elemente (dacă este cazul, concentrațiile pot fi exprimate în raport cu întregul corp al animalului sau cu țesuturi specifice ale acestora):
Depuration begins with the first feeding of unspiked food; cf. paragraph 128).
creșterea [și anume, greutatea (și lungimea) peștilor în funcție de timp] sau logaritmul natural de greutate transformată în funcție de timp;
The first depuration phase sample (taken shortly before the second feeding with unspiked food) is important as extrapolation back one day from this measurement is used to estimate the time zero concentration (C0,d, the concentration in the fish at the end of uptake/start of depuration).
eliminarea substanței de testat din pești; și
Optionally, the gastrointestinal tract of the fish can be removed and analysed separately at the end of uptake and at days 1 and 3 of depuration.
logaritmul natural de concentrație transformată (ln concentrație) în funcție de timpul de eliminare (inclusiv constanta de viteză de eliminare derivată k2 și logaritmul natural de concentrație derivată în pești la începutul fazei de eliminare, C0,e).
At each sampling event fish should be removed from both test vessels and treated in the same way as described in the aqueous method (cf. paragraphs 61-63).
Constanta de viteză de eliminare corectată pentru creștere și timpul de înjumătățire corectat pentru creștere calculate.
Optionally, an additional sampling point may be included after 1-3 days' uptake to estimate assimilation efficiency from the linear phase of uptake for the fish while still near the beginning of the exposure period.
Constantele de viteză de eliminare și factorii de bioamplificare (BMFK) ai substanței
Two main deviations from the schedule exist: i) if an extended uptake phase is employed for the purposes of investigating uptake kinetics, there will be additional sampling points during the uptake phase and so additional fish will need to be included (cf. paragraph 126); ii) if the study has been terminated at the end of the uptake phase owning to no measurable uptake (cf. paragraph 131).
A se introduce valoarea (95 % CI) [55]
Individual fish that are sampled should be weighed (and their total length measured) to allow growth rate constants to be determined.
k2 (constanta de viteză de eliminare totală; ziua– 1):
Concentrations of the substance in specific fish tissue (edible and non-edible portions) can also be measured at the end of uptake and selected depuration times.
A se introduce valoarea (95 % CI)
If a radiolabelled material is being tested, similar considerations as those for the aqueous exposure method should be considered with feed analysis replacing water analysis (cf. paragraph 65).
C0,m (concentrația măsurată la timpul zero, concentrația în pește la sfârșitul absorbției (μg/g):
For the periodic use of a reference substance (cf. paragraph 25), it is preferable that concentrations are measured in the test group at the end of uptake and at all depuration times specified for the test substance (whole fish); concentrations need only be analysed in the control group at end of uptake (whole fish).
A se introduce valoarea ± DS [56]
In certain circumstances (for example if analysis techniques for test substance and reference substance are incompatible, such that additional fish would be needed to follow the sampling schedule) another approach may be used as follows to minimise the number of additional fish required.
C0,e (concentrația la timpul zero derivată a fazei de eliminare; μg/g):
Concentrations of the reference substance are measured during depuration only on days 1, 3 and two further sampling points, selected such that reliable estimations of time zero concentration (C0,d) and k2 can be made for the reference substance.
I (rata de ingestie a alimentației stabulită; g alimentație/ g pește/zi):
If possible the lipid content of the individual fish should be determined on each sampling occasion, or at least at the start and end of the uptake phase and at the end of the depuration phase.
Ic (rația alimentară efectivă, ajustată pentru creștere; g alimentație/g pește/zi) [56]:
(cf. paragraphs 56 and 67).
Chrană (concentrația chimică în hrană; μg/g):
Depending on the analytical method (refer to paragraph 67 and to Appendix 4), it may be possible to use the same fish for both lipid content and test substance concentration determination.
α (eficacitatea de asimilare a substanței):
This is preferred on the grounds of minimising fish numbers.
BMFK(BMF cinetică alimentar):
However, should this not be possible, the same approach as described in the aqueous exposure method can be used (see paragraph 56 for these alternative lipid measurement options).
BMFKc (BMF cinetică alimentar corectat pentru creștere):
The method used to quantify the lipid content should be documented in the report.
t1/2c (timpul de înjumătățire corectat pentru creștere în zilele):
Quality of the analytical method
Lc (factor de corecție lipidică):
Experimental checks should be conducted to ensure the specificity, accuracy, precision and reproducibility of the substance-specific analytical technique, as well as recoveries of the test substance from both food and fish.
BMFKcL (BMF cinetică corectat pentru creștere corectat lipidic):
At the start of the test a sample of fish from the stock population need to be weighed (and their total length measured).
BMFSS-L (BMF orientativ în starea staționară corectat lipidic) [56]:
These fish should be sampled shortly before the first spiked feeding (e.g. one hour), and assigned to experimental day 0.
Capitolul A.24 din prezenta anexă, Coeficientul de partiție (n-octanol/apă), metoda HPLC.
The number of fish for this sample should be at least the same as that for the samples during the test.
Capitolul A.23 din prezenta anexă, Coeficientul de partiție (1Octanol/Apă): Metoda agitării lente.
Some of these can be the same fish used for lipid analysis before the start of the uptake phase (cf. paragraph 153).
Chapter C.29 of this Annex, Ready Biodegradability – CO2 in sealed vessels
At each sampling interval fish are first weighed and their length measured.
SAR QSAR Environ.
In each individual fish the measured weight (and length) should be linked to the analysed chemical concentration (and lipid content, if applicable), for example using a unique identifier code for each sampled fish.
Res.
The measurements of these sampled fish can be used to estimate the weight (and length) of fish remaining in the test and control tanks.
1: 29-39.
Experimental Evaluation
Ecotoxicological environmental risk limits for total petroleum hydrocarbons on the basis of internal lipid concentrations.
Observations of mortality should be performed and recorded daily.
OECD (2012), OECD Environmental Health and Safety Publications Series on Testing and Assessment No. 175: Part I – Validation Report of a ring test for the OECD TG 305 dietary exposure bioaccumulation fish test.