natgillin/translations-raw huggingface dataset:
It should be noted that the ln-transformation of the water concentration is suitable when exponential decay between renewal periods is expected, e.g. in a semi-static test design.
Incertitudinea BCF rezultată va fi diferită, prin urmare, între metodele simultane sau secvențiale de ajustare.
In a flow through system, ln-transformation of exposure concentrations may not be needed.
Apendicele 6
If TWA water concentrations are derived, they should be reported and used in subsequent calculations.
SECȚIUNEA DE ECUAȚII PENTRU TESTUL DE EXPUNERE PRIN APĂ: MODEL DE TESTARE MINIMIZAT
In a standard fish BCF test uptake and depuration can be described in terms of two first order kinetic processes.
În cazul în care se efectuează o măsurare a concentrației de substanță în țesuturi (Cp1) în momentul în care expunerea se încheie (t1) și concentrația în țesut (Cp2) se măsoară din nou după scurgerea unui anumit interval de timp (t2), se poate estima constanta de viteză de eliminare k2) utilizând ecuația A5.22 din apendicele 5.
Rate of uptake = k1 × Cw
Ulterior se poate determina algebric constanta de viteză de absorbție, k1, utilizând ecuația A5.23 din apendicele 5 (unde Cp = Cp1 și t = t1) (1).
[Equation A5.2]
Factorul de bioconcentrare cinetică pentru modelul minimizat (desemnat ca BCFKm pentru a se distinge de factorii de bioconcentrare determinați utilizând alte metode) este:
Overall loss rate = (k2 + kg + km + ke) × Cf
[Ecuația A6.1]
[Equation A5.3]
Se corectează concentrațiile și rezultatele pentru diluția de creștere și se normalizează la un conținut lipidic în pește de 5 %, astfel cum este descris în apendicele 5.
At steady-state, assuming growth and metabolism are negligible (i.e. the values for kg and km cannot be distinguished from zero), the rate of uptake equals the rate of depuration, and so combining Equation A5.2 and Equation A5.3 gives the following relationship:
BCFSS minimizat este BCF calculat la finalul fazei de absorbție, presupunând că starea staționară a fost atinsă.
[Equation A5.4]
Acest lucru nu poate fi decât presupus, întrucât numărul de puncte de eșantionare nu este suficient pentru a dovedi acest lucru.
Concentration in fish at steady-state (mg kg– 1 wet weight).
minimizatBCFSS
Concentration in water at steady-state (mg l– 1).
[Ecuația A6.2]
The ratio of k1/k2 is known as the kinetic BCF (BCFK) and should be equal to the steady-state BCF (BCFSS) obtained from the ratio of the steady-state concentration in fish to that in water, but deviations may occur if steady-state was uncertain or if corrections for growth have been applied to the kinetic BCF.
Concentrația în pește la starea staționară presupusă la sfârșitul absorbției (mg kg-1 greutate umedă).
However, as k1 and k2 are constants, steady-state does not need to be reached to derive a BCFK.
Concentrația în apă la starea staționară presupusă la sfârșitul absorbției (mg l-1).
Based on these first order equations, this Appendix 5 includes the general calculations necessary for both aqueous and dietary exposure bioaccumulation methods.
Apendicele 7
However, sections 5, 6 and 8 are only relevant for the aqueous exposure method but are included here as they are “general” techniques.
SECȚIUNEA DE ECUAȚII PENTRU TESTUL DE EXPUNERE PRIN ALIMENTAȚIE
The sequential (sections 4 and 5) and simultaneous (section 6) methods allow the calculation of uptake and depuration constants which are used to derive kinetic BCFs.
Exemplu de cantități constitutive ale unui furaj pentru pești comercial adecvat
The sequential method for determining k2 (section 4) is important for the dietary method as it is needed to calculate both assimilation efficiency and BMF.
Exemple de tehnici de îmbogățire a alimentelor
Appendix 7 details the calculations that are specific to the dietary method.
Calcularea eficacității asimilării și a factorului de bioamplificare
PREDICTION OF THE DURATION OF THE UPTAKE PHASE
Corecție lipidică
Before performing the test, an estimate of k2 and hence some percentage of the time needed to reach steady-state may be obtained from empirical relationships between k2 and the n-octanol/water partition coefficient (KOW) or k1 and BCF.
Evaluarea diferențelor dintre concentrația la momentul (C0,m) și concentrația determinată la momentul zero (C0,d)
It should be realised, however, that the equations in this section only apply when uptake and depuration follow first-order kinetics.
Orientări pentru substanțele de testat cu eliminare foarte rapidă
If this is clearly not the case it is advised to seek advice from a biostatistician and/or pharmacokineticist, if predictions of the uptake phase are desirable.
EXEMPLU DE CANTITĂȚI CONSTITUTIVE ALE UNEI HRANE COMERCIALE PENTRU PEȘTI ADECVATE
An estimate of k2 (day– 1) may be obtained by several methods.
Component principal
For example, the following empirical relationships could be used in the first instance [1]:
Făină de pește
(r2=0,95) [(3); Equation A5.5]
Proteină brută
[Equation A5.6]
Grăsimi brute
Where k1 = 520 × W– 0,32 (for substances with a log KOW > 3)
Fibră brută
(r2=0,85)[(4); Equation A5.7]
Umiditate
AndBCF
Cenușă
(r2=0,90)[(5); Equation A5.8]
EXEMPLE DE TEHNICI DE ÎMBOGĂȚIRE A ALIMENTELOR
W = mean treated fish weight (grams wet weight) at the end of uptake/start of depuration [2]
Generalități
For other related relationships see (6).
Hrana martor se pregătește în exact același mod ca hrana îmbogățită, dar cu absența substanței de testat.
If substantial growth occurs during the study, the estimations described below will not be reliable.
Se adaugă cantitatea adecvată (în masa molară sau radioactivitatea specifică) din substanța de testat pură la o masă cunoscută de hrană pentru pești într-un borcan din sticlă sau într-un balon de evaporator rotativ.
In such cases, it is better to use the growth corrected k2g as described later (see Section 7 of this Appendix):
Masa hranei pentru pești trebuie să fie suficientă pentru durata fazei de absorbție (luând în considerare necesitatea unor cantități din ce în ce mai mari de hrană la fiecare hrănire din cauza creșterii peștilor).
or, if Cw is constant:
Alimentele îmbogățite se păstrează în condiții care mențin stabilitatea substanței de testat în amestecul de hrană (de exemplu, refrigerare) până la utilizare.
[Equation A5.11]
Se dizolvă substanța de testat într-o cantitate cunoscută de ulei de porumb sau de pește (de exemplu de 5-15 ml).
Then BCF × Cw is an approximation to the concentration in the fish at steady-state (Cf-SS).
Flaconul utilizat la prepararea uleiului dozat se spală cu două părți mici de ulei și acestea se adaugă în balon pentru a se asigura că se transferă toată substanța de testat dizolvată.
[Equation A5.16]
(Se remarcă faptul că acest lucru nu este important pentru calculul total al BMF, întrucât termenii I se anulează efectiv între ecuația A7.1 și ecuația A7.4).
Similarly the time to reach 95 percent of steady-state is:
Rată de alimentare medie corectată pentru diluția de creștere, Ic, poate fi obținută în mai multe moduri, dar un mod simplu și riguros este utilizarea constantei de creștere cunoscută (kc) pentru a estima greutatea peștilor de testat la intervale stabilite în cursul fazei de absorbție, și anume:
[Equation A5.17] For example, the duration of the uptake phase (i.e. time to reach a certain percentage of steady-state, e.g. t80 or t95) for a test substance with log KOW = 4 would be (using Equation A5.5, Equation A5.16 and Equation A5.17):
[Ecuația A7.3]
logk2 = 1,47 – 0,414 · 4
Odată ce s-a obținut eficacitatea asimilării, se poate calcula BMF prin înmulțirea acesteia cu constanta de viteză de alimentare I (sau Ic, în cazul în care este utilizată pentru a calcula α) și prin împărțirea acestui rezultat la constanta de viteză de eliminare totală k2:
k2 = 0,652 day– 1
[Ecuația A7.4]
or t95
Se calculează, de asemenea, factorul de bioamplificare corectat pentru creștere în același mod, utilizând constanta de viteză de eliminare corectată pentru creștere (astfel cum a fost obținută la punctul 7 din apendicele 5).
Alternatively, the expression:
Din nou, în cazul în care s-a utilizat Ic pentru a calcula α, se utilizează, de asemenea, aici, în locul I:
[Equation A5.18]
[Ecuația A7.5]
may be used to calculate the time for effective steady-state (teSS) to be reached (12).
eficacitatea asimilării (absorbția substanței de testat de-a lungul intestinului);
For a test substance with log KOW = 4 this results in:
constanta de viteză de eliminare totală (nu corectată pentru creștere) calculată în conformitate cu ecuațiile din apendicele 5, punctul 3;
PREDICTION OF THE DURATION OF THE DEPURATION PHASE
constanta de viteză de eliminare corectată pentru creștere (ziua-1);
A prediction of the time needed to reduce the body burden to a certain percentage of the initial concentration may also be obtained from the general equation describing uptake and depuration (assuming first order kinetics, cf.
constanta de viteză de ingestie alimentară (g aliment g-1 pește ziua-1);
Equation A5.9 (1) (13).
Timpul de înjumătățire corectat pentru creștere (t1/2) se calculează după cum urmează:
For the depuration phase, Cw (or Cfood for the dietary test) is assumed to be zero.
[Ecuația A7.6]
The equation may then be reduced to:
Se poate estima, de asemenea, eficacitatea asimilării substanței din alimentație în cazul în care reziduurile tisulare sunt determinate în timpul fazei liniare ale fazei de absorbție (între zilele 1 și 3).
k 2 C f
În acest caz, se poate determina eficacitatea asimilării substanței (α) după cum urmează:
[Equation A5.19] or C f
[Ecuația A7.7]
C f,0
concentrația substanței de testat în pește la momentul t (mg kg-1 greutate umedă).
k 2
CORECȚIE LIPIDICĂ
[Equation A5.20]
În cazul în care conținutul lipidic a fost măsurat pe același pește precum analiza chimică pentru toate intervalele de eșantionare, atunci concentrațiile individuale se corectează pe o bază de lipide și se reprezintă grafic ln(concentrație, corectată lipidic) în funcție de eliminare (zi) pentru a furniza C0,d și k2.
where Cf,0 is the concentration at the start of the depuration period.
Se poate calcula ulterior eficacitatea asimilării (ecuația A7.1) pe o bază de lipide, utilizând Chrană pe o bază de lipide (și anume, se înmulțește Chrană cu raportul lipidic mediu din hrană).
50 percent depuration will then be reached at the time (t50):
Calcularea ulterioară utilizând ecuația A7.4 și ecuația A7.5 va furniza BMF corectat lipidic (și corectat pentru diluția de creștere) în mod direct.
Similarly 95 percent depuration will be reached at:
În caz contrar, se determină raportul lipidic mediu (g/g) în pești și în alimente pentru grupurile de tratament și martor (pentru hrană și grupul martor această valoare se obține, de regulă, din datele măsurate la începutul și finalul expunerii; pentru grupul de pești de tratament, această valoare se obține, de regulă, din datele măsurate numai la finalul expunerii).
If 80 % uptake is used for the first period (1,6/k2) and 95 % loss in the depuration phase (3,0/k2), then depuration phase is approximately twice the duration of the uptake phase.
În unele studii, conținutul lipidic al peștelui poate să crească semnificativ; în astfel de cazuri, este mai oportun să se utilizeze concentrația lipidică medie a peștilor de testat calculată pornind de la valorile măsurate la sfârșitul expunerii și la sfârșitul eliminării.
Note that the estimations are based on the assumption that uptake and depuration patterns will follow first order kinetics.
În general, datele provenite numai de la grupul de tratament se utilizează pentru a obține ambele raporturi lipidice.
If first-order kinetics is obviously not obeyed, these estimations are not valid.
Factorul de corecție lipidică (Lc) se calculează după cum urmează:
SEQUENTIAL METHOD: DETERMINATION OF DEPURATION (LOSS) RATE CONSTANT K2
[Ecuația A7.8]
Most bioconcentration data have been assumed to be ‘reasonably’ well described by a simple two-compartment/two-parameter model, as indicated by the rectilinear curve which approximates to the points for concentrations in fish (on an ln scale), during the depuration phase.
unde Lpește și Lhrană sunt raporturile lipidice medii în pește și respectiv, în hrană.
Note that deviations from a straight line may indicate a more complex depuration pattern than first order kinetics.
Factorul de corecție lipidică este utilizat pentru a calcula factorul de bioamplificare corectat lipidic (BMFL):
The graphical method may be applied for resolving types of depuration deviating from first order kinetics.
[Ecuația A7.9]
To calculate k2 for multiple time (sampling) points, perform a linear regression of ln(concentration) versus time.
EVALUAREA DIFERENȚELOR DINTRE CONCENTRAȚIA MĂSURATĂ LA MOMENTUL ZERO (C0,M) ȘI CONCENTRAȚIA DETERMINATĂ LA MOMENTUL ZERO (C0,D)
The slope of the regression line is an estimate of the depuration rate constant k2 [3].
Se compară concentrația măsurată la momentul zero (C0,m) și concentrația determinată la momentul zero (C0,d).
From the intercept the average concentration in the fish at the start of the depuration phase (C0,d; which equals the average concentration in the fish at the end of the uptake phase) can easily be calculated (including error margins) [3] In most programs that allow a linear regression, also standard errors and confidence interval (CI) of the estimates are given, e.g. in Microsoft Excel using the Data Analysis tool pack.
În cazul în care acestea sunt foarte similare, acest lucru sprijină modelul de ordin întâi utilizat pentru determinarea parametrilor de eliminare.
[Equation A5.21]
În unele studii, poate exista o diferență considerabilă între concentrația determinată la momentul zero C0,m și concentrația măsurată la momentul zero.
To calculate k2 when only two time (sampling) points are available (as in the minimised design), substitute the two average concentrations into the following equation
C0,m (a se vedea ultima liniuță de la punctul 159 din prezenta metodă de testare).
[Equation A5.22]
În cazul în care C0,d este în mod semnificativ mai scăzută decât C0,m (C0,d<<C0,m), diferența poate indică prezența unor produse alimentare îmbogățite nedigerate în intestin.
Where ln(Cf1) and ln(Cf2) are the natural logarithms of the concentrations at times t1 and t2, respectively, and t2 and t1 are the times when the two samples were collected relative to the start of depuration [4].
Acest lucru poate fi testat în mod experimental, prin efectuarea unei analize separate pe intestinul excizat în cazul în care au fost prelevate și depozitate eșantioane suplimentare (pește întreg) la finalul fazei de absorbție.
SEQUENTIAL METHOD: DETERMINATION OF UPTAKE RATE CONSTANT K1 (AQUEOUS EXPOSURE METHOD ONLY)
În caz contrar, dacă un test pentru detectarea valorilor aberante valid din punct de vedere statistic aplicat regresiei liniare a fazei de eliminare indică faptul că primul punct de eșantionare al eliminării este ridicat în mod eronat, ar putea fi adecvată efectuarea regresiei liniare pentru a determina k2, dar omițând prima concentrație de eliminare.
To find a value for k1 given a set of sequential time concentration data for the uptake phase, use a computer program to fit the following model:
În astfel de cazuri, dacă incertitudinea în ceea ce privește regresia liniară este foarte scăzută și este clar că au fost respectate cineticile de aproximativ ordinul întâi de eliminare, poate fi adecvată utilizarea valorilor rezultate C0,d și k2 la calcularea eficacității de asimilare.
[Equation A5.23]
Acest lucru se justifică în totalitate în raport.
Where k2 is given by the previous calculation, Cf(t) and Cw(t) are the concentrations in fish and water, respectively, at time t.
Este posibil, de asemenea, ca în faza de eliminare să nu fi operat cinetica de ordinul întâi.
To calculate k1 when only two time (sampling) points are available (as in the minimised design), use the following formula:
În cazul în care acest lucru este posibil (și anume, datele logaritmului natural transformat par să urmeze o curbă comparată cu graficul liniei drepte a regresiei liniare), atunci calculele pentru k2 și C0,d sunt puțin probabil să fie valabile și se solicită consiliere din partea unui biostatician.
[Equation A5.24]
În cazul în care C0,d este mult mai mare decât valoarea măsurată (C0,d>>C0,m), acest lucru poate indica: faptul că substanța a fost eliminată foarte rapid (și anume, punctele de eșantionare s-au apropiat de limita de cuantificare a metodei analitice foarte devreme în faza de eliminare, a se vedea punctul 6 de mai jos); faptul că a existat o abatere de la cinetică de ordinul întâi; faptul că regresia liniară pentru a determina k2 și C0,d este eronată; sau faptul că a existat o problemă cu concentrația măsurată în studiu la unele puncte de eșantionare.
Where k2 is given by the previous calculation, Cf is the concentration in fish at the start of the depuration phase, and Cw is the average concentration in the water during the uptake phase [5].
În astfel de cazuri, se verifică reprezentarea regresiei liniare pentru dovezi de eșantioane la nivelul sau aproape de limita de cuantificare, pentru valori aberante și pentru curbură evidentă (sugerând altă cinetică decât de ordinul întâi) și se evidențiază în raport.
Visual inspection of the k1 and k2 slopes when plotted against the measured sample point data can be used to assess goodness of fit.
Se descrie și se justifică orice reevaluare ulterioară a regresiei liniare pentru a îmbunătăți valorile estimate.
If it turns out that the sequential method has given a poor estimate for k1 then the simultaneous approach to calculate k1 and k2 should be applied (see next section 6).
În cazul în care este observă abateri semnificative de la cinetica de ordin întâi, atunci calculele pentru k2 și C0,d sunt puțin probabil să fie valabile și se solicită sfatul unui biostatistician.
Again, the resulting slopes should be compared against the plotted measured data for visual inspection of goodness of fit.
ORIENTĂRI PENTRU SUBSTANȚELE DE TESTAT CU ELIMINARE FOARTE RAPIDĂ
If the goodness of fit is still poor this may be an indication that first order kinetics do not apply and other more complex models should be employed.
Astfel cum s-a discutat la punctul 129 din metoda de testare, unele substanțe se pot elimina atât de rapid încât nu se poate determina o concentrație fiabilă la momentul zero C0,d, și k2 deoarece în eșantioanele prelevate foarte devreme în faza de eliminare (și anume, începând de la al doilea eșantion de eliminare) substanța nu mai este măsurată în mod efectiv (concentrații raportate la limita de cuantificare).
SIMULTANEOUS METHOD FOR CALCULATION OF UPTAKE AND DEPURATION (LOSS) RATE CONSTANTS (AQUEOUS EXPOSURE METHOD ONLY)
Această situație a fost observată în testul interlaboratoare efectuat în sprijinul acestei metode de testare cu benzo[a]piren și a fost documentată în raportul de validare pentru metodă.
Computer programs can be used to find values for k1 and k2 given a set of sequential time concentration data and the model:
În astfel de cazuri, o regresie liniară nu poate fi efectuată în mod fiabil și este susceptibilă să furnizeze o estimare nerealistic de mare a C0,d, având ca rezultat o eficacitate de asimilare aparentă mult mai mare de 1.
[Equation A5.25]
Este posibil să se calculeze o estimare conservatoare a k2 și un BMF de limită superioară în astfel de cazuri.
[Equation A5.26]
Utilizarea punctelor de date respective din faza de eliminare în cazul în care a fost măsurată o concentrare până și inclusiv la prima concentrație „nedetectată” (concentrația stabilită la limita de cuantificare), o regresie liniară (utilizând logaritmul natural transformat de date de concentrație în funcție de timp) va furniza o estimare a k2.
time at the end of the uptake phase.
Pentru astfel de cazuri, acest lucru este posibil să implice numai două puncte de date (de exemplu, eșantionarea zilelor 1și 2 de eliminare) și ulterior se poate estima k2 utilizând ecuația A 5.22 din apendicele 5.
This approach directly provides standard errors for the estimates of k1 and k2.
Această estimare k2 poate fi utilizată pentru a estima o eficacitate de asimilare în conformitate cu ecuația A7.1, înlocuind valoarea C0,d în ecuație cu concentrația măsurată la momentul zero (C0,m) în cazurile în care C0,d este în mod clar estimată a fi mult mai mare decât ar fi putut fi atinsă în cadrul testului.
When k1/k2 is substituted by BCF (cf.
În cazul în care C0,m nu a fost măsurabilă, se utilizează limita de detecție în țesuturile peștilor.
Equation A5.4) in Equation A5.25 and Equation A5.26, the standard error and 95 % CI of the BCF can be estimated as well.
În cazul în care, în anumite cazuri, acest lucru furnizează o valoare α > 1, atunci se presupune că eficacitatea asimilării ca 1 este „cel mai rău caz”.
This is especially useful when comparing different estimates due to data transformation.
Se poate estima ulterior BMFK maxim utilizând ecuația A7.4 și se desemnează ca o valoare „mult mai mică decât” (<<).
The dependent variable (fish concentration) can be fitted with or without ln transformation, and the resulting BCF uncertainty can be evaluated.
De exemplu, pentru un studiu efectuat cu o rată de alimentare de 3 % și un timp de înjumătățire al eliminării mai mic de 3 zile și α în „cel mai rău caz” de 1, BMFK este probabil sub aproximativ 0,13.
As a strong correlation exists between the two parameters k1 and k2 if estimated simultaneously, it may be advisable first to calculate k2 from the depuration data only (see above); k2 in most cases can be estimated from the depuration curve with relatively high precision. k1 can be subsequently calculated from the uptake data using non-linear regression [6].
Având în vedere scopul acestei estimări, precum și faptul că valorile vor fi conservatoare în natură, nu este necesară corecția acestora pentru diluția de creștere sau conținut lipidic în pește sau hrană.
It is advised to use the same data transformation when fitting sequentially.
În unele regiuni, se poate obține numai furaj pentru pești cu o concentrație lipidică care este departe de această limită superioară.
Visual inspection of the resulting slopes when plotted against the measured sample point data can be used to assess goodness of fit.
În astfel de cazuri, studiile se desfășoară cu cea mai scăzută concentrație lipidică în hrana astfel cum a fost furnizată și rata de alimentare se ajustează în mod corespunzător pentru a menține sănătatea peștilor.
If it turns out that this method has given a poor estimate for k1 then the simultaneous approach to calculate k1 and k2 can be applied.
Lipidele alimentare nu se măresc artificial prin adăugarea unui exces de ulei.
Again, the fitted model should be compared against the plotted measured data for visual inspection of goodness of fit and the resulting parameter estimates for k1, k2 and resulting BCF and their standard errors and/or confidence intervals should be compared between different types of fit.
Apendicele 8
If the goodness of fit is poor this may be an indication that first order kinetics does not apply and other more complex models should be employed.
ABORDĂRI PENTRU A ESTIMA POSIBILI BCF DIN DATELE COLECTATE ÎN STUDIUL DE EXPUNERE PRIN ALIMENTAȚIE
One of the most common complications is fish growth during the test.
Metoda alimentară este inclusă în prezenta metodă de testare pentru testarea bioacumulării substanțelor care nu pot fi testate în practică utilizând metoda expunerii prin apă.
7.
Metoda expunerii prin apă furnizează un factor de bioconcentrare, în timp ce metoda alimentară conduce direct la informații privind potențialul de bioamplificare prin alimentație.
GROWTH DILUTION CORRECTION FOR KINETIC BCF AND BMF
În numeroase regimuri de securitate chimică sunt necesare informații privind bioconcentrarea acvatică (de exemplu, pentru evaluarea riscurilor și Sistemul global armonizat de clasificare).
This section describes a standard method for correction due to fish growth during the test (so called ‘growth dilution’) which is only valid when first order kinetics applies.
Prin urmare, este necesar să se utilizeze datele generate în cadrul unui studiu alimentar pentru a estima un factor de bioconcentrare comparabil cu testele efectuate în conformitate cu metoda expunerii prin apă [1].