natgillin/translations-raw huggingface dataset:
It is recommended that a sub-sample of the stock of fish is weighed shortly before the start of the test in order to estimate the mean weight (cf. paragraph 61).
În cazul în care BCF pentru întreaga cantitate de pește în ceea ce privește reziduurile totale marcate radioactiv este ≥ 500, poate fi indicat – și pentru anumite categorii de substanțe, cum ar fi pesticidele, se recomandă cu fermitate – identificarea și cuantificarea metaboliților principali.
Loading
Cuantificarea acestor metaboliți poate fi solicitată de unele autorități de reglementare.
High water-to-fish ratios should be used in order to minimise the reduction in the concentration of the test compound in water caused by the addition of the fish at the start of the test and also to avoid decreases in dissolved oxygen concentration.
În cazul în care se identifică și se cuantifică produsele de degradare reprezentând ≥ 10 % din reziduuri totale marcate radioactiv în țesuturile peștilor, este recomandat ca acestea să fie identificate și cuantificate, de asemenea, în apa pentru experiment.
It is important that the loading rate is appropriate for the test species used.
În cazul în care acest lucru nu este fezabil, se furnizează explicații în cadrul raportului.
In any case, a fish-to-water loading rate of 0,1-1,0 g of fish (wet weight) per litre of water per day is normally recommended.
În general, concentrația substanței de testat trebuie să fie determinată pentru fiecare pește cântărit.
Higher fish-to-water loading rates can be used if it is shown that the required concentration of test substance can be maintained within ± 20 % limits, and that the concentration of dissolved oxygen does not fall below 60 % saturation (cf. paragraph 24).
În cazul în care acest lucru nu este posibil, se pot pune în comun eșantioanele la fiecare testare, însă această metodă limitează procedurile statistice care pot fi aplicate datelor, astfel încât ar trebui să se includă în cadrul testului un număr adecvat de pești pentru a face posibilă punerea în comun, procedura și precizia statistică.
In choosing appropriate loading regimes, take into account the normal habitat of the fish species.
Referințele (27) și (28) pot fi utilizate ca o introducere la procedurile de punere în comun relevante.
For example, bottom-living fish may demand a larger bottom area of the aquarium for the same volume of water compared to pelagic fish species.
BCF-ul va fi exprimat ca normalizat la o specie de pește cu un conținut de lipide de 5 % (pe baza greutății umede), în plus față de cel obținut în mod direct din studiu (a se vedea punctul 21), cu excepția cazului în care se poate argumenta faptul că substanța de testat nu se acumulează în special în lipide.
Feeding
Conținutul lipidic al peștilor se determină la fiecare prelevare de probe, dacă este posibil, preferabil pe același extract ca pentru analiza substanței de testat, întrucât adesea lipidele trebuie scoase din extract înainte de a putea fi analizate prin cromatografie.
During the acclimation and test periods, feed an appropriate diet of known lipid and total protein content to the fish in an amount sufficient to keep them in a healthy condition and to maintain body weight (some growth is allowed).
Cu toate acestea, analiza substanțelor de testat necesită adesea proceduri de extracție specifice care ar putea fi în contradicție cu metodele de testare pentru determinarea lipidelor.
Feed daily throughout the acclimation and test periods at a set level depending on the species used, experimental conditions and calorific value of the food (for example for rainbow trout between approximately 1 to 2 % of body weight per day).
În acest caz (până când sunt disponibile metode instrumentale nedistructive adecvate), se recomandă utilizarea altei strategii pentru determinarea conținutul lipidic al peștilor (a se vedea punctul 56).
The feeding rate should be selected such that fast growth and large increase of lipid content are avoided.
Se utilizează metode adecvate pentru determinarea conținutului lipidic (20).
To maintain the same feeding rate, the amount of feed should be re-calculated as appropriate, for example once per week.
Tehnici de extracție prin cloroform/metanol (29) pot fi recomandate ca metode standard (30), dar metoda Smedes (31) este recomandată ca o tehnică alternativă.
For this calculation, the weight of the fish in each test chamber can be estimated from the weight of the fish sampled most recently in that chamber.
Această ultimă metodă este caracterizată de o eficiență de extracție comparabilă, un nivel ridicat de acuratețe, utilizarea de solvenți organici mai puțin toxici, precum și ușurința realizării.
Do not weigh the fish remaining in the chamber.
Se pot utiliza alte metode a căror precizie poate fi comparată în mod favorabil cu metodele recomandate, în cazul în care acestea sunt justificate în mod corespunzător.
Uneaten food and faeces should be siphoned daily from the test chambers shortly after feeding (30 minutes to one hour).
Este important să se precizeze detaliile metodei utilizate.
The chambers should be kept as clean as possible throughout the test to keep the concentration of organic matter as low as possible (cf. paragraph 29), since the presence of organic carbon may limit the bioavailability of the test substance (12).
Măsurarea creșterii peștilor
A 12- to 16-hour photoperiod is recommended and the temperature (± 2 °C) should be appropriate for the test species (cf. Appendix 3).
Se măsoară greutatea și lungimea peștilor utilizați pentru fiecare eșantionare din grupul de testare și grupul martor înainte de efectuarea analizei chimice sau a lipidelor.
The type and characteristics of illumination should be known.
Măsurătorile peștilor incluși în eșantionare pot fi utilizate pentru a estima greutatea și lungimea peștilor rămași în bazinele de testare și martor (a se vedea punctul45).
Caution should be given to the possible phototransformation of the test substance under the irradiation conditions of the study.
Interpretarea rezultatelor
Appropriate illumination should be used avoiding exposure of fish to unnatural photoproducts.
Se obține curba de absorbție a substanței de testat din traseul concentrației sale în funcție de timp, la/în pești (sau în țesuturile specifice), în perioada fazei de absorbție, utilizând o scară aritmetică.
In some cases it may be appropriate to use a filter to screen out UV irradiation below 290 nm.
În cazul în care curba atinge un platou, și anume aceasta adoptă aproximativ un traseu asimptotic la axa timpului, se va calcula starea staționară BCF (BCFSS) după cum urmează:
Test concentrations
la starea staționarămedia
The test was originally designed for non-polar organic substances.
Dezvoltarea Cp poate fi influențată de creșterea peștelui (a se vedea punctele 72 și 73).
For this type of substance, the exposure of fish to a single concentration is expected to be sufficient, as no concentration effects are expected, although two concentrations may be required for the relevant regulatory framework.
Concentrația de expunere medie (Ca) este influențată de variația în timp.
If substances outside this domain are tested, or other indications of possible concentration dependence are known, the test should be run with two or more concentrations.
Se poate estima faptul că o concentrație medie ponderată este mai relevantă și mai precisă pentru studiile de bioacumulare, inclusiv în cazul în care variația se încadrează în plaja de valori de valabilitate corespunzătoare (a se vedea punctul 24).
If only one concentration is tested, justification for the use of one concentration should be given (cf. paragraph 79).
Se poate calcula o medie ponderată de timp (MPT) a concentrației de apă în conformitate cu apendicele 5, secțiunea 1.
Also, the tested concentration should be as low as is practical or technically possible (i.e. not close to the solubility limit).
Se determină factorul de bioconcentrare cinetică (BCFK) ca raportul k1/k2, cele două constante cinetice de ordinul întâi.
In some cases it can be anticipated that the bioconcentration of a substance is dependent on the water concentration (e.g. for metals, where the uptake in fish may be at least partly regulated).
Se obțin constantele de viteză k1 și k2 și BCFK prin montarea simultană atât a fazei de absorbție, cât și a fazei de eliminare.
In such a case it is necessary that at least two, but preferably more, concentrations are tested (cf. paragraph 49) which are environmentally relevant.
În mod alternativ, k1 și k2 se pot determina secvențial (a se vedea apendicele 5 pentru descrierea și compararea acestor metode).
Also for substances where the concentrations tested have to be near the solubility limit for practical reasons, testing at least two concentrations is recommended, because this can give insight into the reliability of the exposure concentrations.
Constanta de viteză de eliminare (k2) ar putea necesita ajustare pentru diluția de creștere (a se vedea punctele 72 și 73).
The choice of the test concentrations should incorporate the environmentally realistic concentration as well as the concentration that is relevant to the purpose of the specific assessment.
În cazul în care curba de absorbție și/sau de eliminare nu este în mod clar de ordinul întâi, se utilizează modele mai complexe (a se vedea referințele din apendicele 5) și se solicită consiliere din partea unui biostatistician și/sau a unui specialist în farmacocinetică.
The concentration(s) of the test substance should be selected to be below its chronic effect level or 1 % of its acute asymptotic LC50, within an environmentally relevant range and at least an order of magnitude above its limit of quantification in water by the analytical method used.
Date cu privire la greutatea/lungimea peștelui
The highest permissible test concentration can also be determined by dividing the acute 96 h LC50 by an appropriate acute/ chronic ratio (e.g. appropriate ratios for some substances are about three, but a few are above 100).
Se prezintă sub formă de tabel greutățile umede individuale ale peștilor pentru toate intervalele de eșantionare pentru grupurile de testare și martor în timpul fazelor de absorbție (inclusiv populația de pești la începutul absorbției) și de eliminare.
If a second concentration is used, it should differ from the one above by a factor of ten.
La fiecare pește, greutatea și lungimea măsurate trebuie să fie asociate concentrației chimice analizate, de exemplu utilizând un cod unic de identificare pentru fiecare pește eșantionat.
If this is not possible because of the toxicity criterion (that limits the upper test concentration) and the analytical limit (that limits the lower test concentration), a lower factor than ten can be used and use of radiolabelled test substance (of the highest purity, e.g. preferably > 98 %) should be considered.
Greutatea este măsura preferată de creștere pentru a corecta valorile BCF cinetică pentru diluția de creștere (a se vedea punctul 73 și apendicele 5 pentru metoda utilizată pentru a determina corectarea datelor pentru diluția de creștere).
Care should be taken that no concentration used is above the solubility limit of the test substance in the test media.
Corectarea diluției de creștere și normalizarea conținutului lipidic
One dilution water control or if relevant (cf. paragraphs 30 and 31), one control containing the solvent should be run in addition to the test series.
Creșterea peștelui în timpul fazei de eliminare poate conduce la o scădere a concentrației chimice măsurată în pești, având ca efect faptul că constanta de viteză de eliminare generală (k2) este mai mare decât cea care ar rezulta numai în urma proceselor de îndepărtare (de exemplu, respirație, metabolism, egestie).
Frequency of Water Quality Measurements
Factorii de bioconcentrare cinetică se corectează pentru a ține cont de diluția de creștere.
During the test, dissolved oxygen, TOC, pH and temperature should be measured in all test and control vessels.
Un BCFSS va fi influențat de creștere, de asemenea, dar nu este disponibilă o procedură convenită pentru corectarea unui BCFSS pentru creștere.
Total hardness and salinity (if relevant) should be measured in the control(s) and one vessel.
În caz unei creșteri semnificative, se obține, de asemenea, BCFK corectat pentru creștere (BCFKc), deoarece acesta poate fi o măsură mai relevantă a factorului de bioconcentrare.
If two or more concentrations are tested, measure these parameters at the higher (or highest) concentration.
Conținuturile lipidice ale peștilor de testat (care sunt strâns legate de bioacumularea substanțelor hidrofobe) pot varia suficient în practică astfel încât să fie necesară normalizarea la un ansamblu de pește a conținutului de lipide (5 % g/g) pentru a prezenta atât factorii de bioconcentrare cinetică, cât și cei de în stare staționară în mod semnificativ, cu excepția cazului în care se poate argumenta faptul că substanța de testat nu se acumulează în principal în lipide (de exemplu, unele substanțe perfluorinate se pot lega de proteine).
As a minimum, dissolved oxygen and salinity (if relevant) should be measured three times — at the beginning, around the middle and end of the uptake period — and once a week in the depuration period.
În apendicele 5 sunt disponibile ecuații și exemple pentru aceste calcule.
TOC should be measured at the beginning of the test (24 h and 48 h prior to test initiation of uptake phase) before addition of the fish and at least once a week during both uptake and depuration phases.
Pentru a corecta un BCF cinetică pentru creștere de diluție, se corectează constanta de viteză de eliminare pentru creștere.
Temperature should be measured and recorded daily, pH at the beginning and end of each period and hardness once each test.
Această constantă de viteză de eliminare corectată pentru creștere (k2c) se calculează scăzând constanta de viteză de creștere (kc, astfel cum a fost obținută din datele privind greutatea măsurată) din constanta de viteză de eliminare totală (k2).
Temperature should preferably be monitored continuously in at least one vessel.
De exemplu, pentru substanțele cu rată de eliminare foarte scăzută testate în pești cu creștere rapidă, k2c derivată poate fi foarte mică și, prin urmare, eroarea în calcularea constantelor de viteză utilizate la derivarea acesteia devine critică și, în unele cazuri, estimările kc pot fi mai mari decât estimările k2.
Sampling and Analysis of Fish and Water
O abordare alternativă care eludează necesitatea corecției de diluție implică utilizarea datelor de eliminare cu privire la masa de substanță de testat pe pește (pește întreg) în locul datelor cu privire la masa obișnuită de substanță de testat pe unitate de masă de pește (concentrație).
Fish and water sampling schedule
Acest lucru poate fi realizat cu ușurință având în vedere faptul că testele în conformitate cu prezenta metodă de testare asociază concentrațiile de țesuturi înregistrate cu greutățile corporale individuale ale peștilor.
Water should be sampled from the test chambers for the determination of test substance concentration before addition of the fish and during both uptake and depuration phases.
În apendicele 5 se prezintă procedura simplă de efectuare a acestui lucru.
The water should be sampled the before feeding, at the same time as the fish sampling.
Se remarcă faptul că k2 se raportează în continuare, inclusiv dacă se utilizează această abordare alternativă.
More frequent sampling may be useful to ensure stable concentrations after introduction of the fish.
Factorii de bioconcentrare cinetică și în stare staționară se raportează, de asemenea, în raport cu conținutul lipidic implicit al peștilor de 5 % (g/g), cu excepția cazului în care se poate argumenta faptul că substanța de testat nu se acumulează în principal în lipide.
During the uptake phase, the concentrations of test substance should be determined in order to check compliance with the validity criteria (paragraph 24).
Datele privind concentrația de pește sau BCF sunt normalizate, în conformitate cu raportul dintre 5 % și media reală (individuală) a conținutului lipidic (în % de greutate umedă) (a se vedea apendicele 5).
If water sample analyses at the beginning of the depuration phase show that the test substance is not detected, this can be used as a justification not to measure test and control water for the test substance for the remainder of the depuration phase.
În cazul în care au fost efectuate analizele chimice și lipidice pe aceiași pești, se utilizează ulterior datele normalizate privind conținutul lipidic al fiecărui pește pentru a calcula un BCF normalizat de lipide.
Fish should be sampled on at least five occasions during the uptake phase and on at least four occasions during the depuration phase for test substance.
În mod alternativ, în cazul în care creșterea este similară la peștii martor și la cei expuși, se poate utiliza conținutul lipidic al peștilor martori singur pentru corectarea lipidelor (a se vedea punctul 56).
Since on some occasions it will be difficult to calculate a reasonably precise estimate of the BCF value based on this number of samples (especially when other than simple first order uptake and depuration kinetics are indicated), it may be advisable to take samples at a higher frequency in both periods (cf. Appendix 4).
În apendicele 5 se prezintă o metodă de calculare a BCF normalizat de lipide.
The lipid content should be determined on the same biological material as is used to determine the concentration of the test substance at least at the start and end of the uptake phase and at the end of the depuration phase.
Interpretarea rezultatelor
Should this not be feasible, at least three independent fish should be sampled to determine lipid content at each of the same three time-points.
Rezultatele se vor interpreta cu precauție atunci când concentrațiile măsurate de soluție experimentală se află la valori apropiate de limita de detecție a metodei de analiză.
The number of fish per tank at the start of the experiment should be adjusted accordingly [33].
Creșterea medie în grupul de testare și în cel martor, în principiu, nu trebuie să fie diferită în mod semnificativ, pentru a exclude efecte toxice.
Alternatively, if no significant amounts of the test substance are detected in control fish (i.e. fish from the stock population), the control fish from the test can be analysed for lipid content only and test substance analysis in the test group(s) (and the related uptake rate constant, depuration rate constant and BCF values) can be corrected for changes according to control group lipid content during the test [34].
Se compară constantele de viteză de creștere sau curbele de creștere a celor două grupuri printr-o procedură adecvată [36].
Dead or diseased fish should not be analysed for test substance or lipid concentration.
Claritatea cu care sunt definite curbele de absorbție și de eliminare dovedește buna calitate a datelor de bioconcentrare.
An example of an acceptable sampling schedule is given in Appendix 4.
În cazul constantelor de viteză, rezultatul unui test de calitate a ajustării χ2 dovedește o ajustare de calitate [și anume, procent de eroare de mică măsură (32)] pentru modelul de bioacumulare, astfel încât constantele de viteză pot fi considerate fiabile (a se vedea apendicele 5).
Other schedules can readily be calculated using other assumed values of KOW to calculate the exposure time for 95 % uptake (refer to Appendix 5 for calculations).
În cazul în care se utilizează mai mult de o concentrație de testare, variația constantelor de absorbție/eliminare între cele două concentrații de testare trebuie să fie mai mică de 20 % [37].
Sampling should be continued during the uptake phase until a steady-state has been established (see Appendix 1, definitions and units) or the uptake phase is otherwise terminated (after 28 or 60 days, cf. paragraphs 37 and 38).
În caz contrar, se poate indica dependența de concentrație.
Before beginning the depuration phase, the fish should be transferred to clean vessels.
Se înregistrează diferențele considerabile observate la constantele de viteză de absorbție/eliminare între concentrațiile de testare aplicate și se furnizează posibile explicații.
Sampling and sample preparation
În general, limita de încredere de 95 % a BCF din studiile bine concepute se apropie de ± 20 %.
Water samples should be obtained for analysis e.g. by siphoning through inert tubing from a central point in the test chamber.
În cazul în care se testează două sau mai multe concentrații, se utilizează rezultatele ambelor sau tuturor concentrațiilor pentru a verifica dacă rezultatele sunt coerente și pentru a determina dacă există o dependență de concentrație.
Neither filtration nor centrifuging appears always to separate the non-bioavailable fraction of the test substance from that which is bioavailable.
În cazul în care se testează o singură concentrație pentru a reduce utilizarea animalelor și/sau a resurselor, se furnizează justificarea utilizării unei singure concentrații.
If a separation technique is applied, a justification for, or validation of, the separation technique should always be provided in the test report given the bioavailability difficulties (25).
BCFSS rezultat este îndoielnic în cazul în care BCFK este mult mai mare decât BCFSS, având în vedere faptul că acest lucru poate fi un indiciu că nu s-a ajuns la starea staționară sau că nu s-a luat în considerare diluția de creștere sau procesele de pierdere.
Especially for highly hydrophobic substances (i.e. those substances with a log KOW > 5) (12) (26), where adsorption to the filter matrix or centrifugation containers could occur, samples should not be subjected to those treatments.
În cazurile în care BCFSS este mult mai mare decât BCFK, se verifică de erori derivarea constantelor de viteză de absorbție și de eliminare și se reevaluează.
Instead, measures should be taken to keep the tanks as clean as possible (cf. paragraph 46) and the content of total organic carbon should be monitored during both the uptake and depuration phases (cf. paragraph 53).
O altă procedură de montare ar putea îmbunătăți estimarea BCFK (a se vedea apendicele 5).
To avoid possible issues with reduced bioavailability, sampling by solid phase microextraction techniques may be used for poorly soluble and highly hydrophobic substances.
În afară de informațiile privind substanța de testat indicate la punctul 3, raportul de testare include următoarele informații:
The sampled fish should be euthanised instantly, using the most appropriate and humane method (for whole fish measurements, no further processes than rinsing with water (cf. paragraph 28) and blot drying the fish should be done).
Substanța de testat:
Weigh and measure total length [35].
Natura fizică și, dacă sunt relevante, proprietățile fizico-chimice;
In each individual fish, the measured weight and length should be linked to the analysed substance concentration (and lipid content, if applicable), for example using a unique identifier code for each sampled fish.
Datele de identificare chimică, precum denumirea IUPAC sau CAS, numărul CAS sau codul InChI, formula structurală, puritatea, identitatea chimică a impurităților, după cum este adecvat și fezabil din punct de vedere practic etc., (inclusiv conținutul de carbon organic, dacă este necesar).
It is preferable to analyse fish and water immediately after sampling in order to prevent degradation or other losses and to calculate approximate uptake and depuration rate constants as the test proceeds.
Pentru substanțele multicomponente și UVCB (substanțele chimice cu compoziție necunoscută sau variabilă, produși de reacție complexă sau materiale biologice) descrierea, în măsura în care este posibil, a identității chimice a fiecărui compus și, pentru fiecare dintre aceștia, procentul său din masa totală a substanței.
Immediate analysis also avoids delay in determining when a plateau (steady-state) has been reached.
Se rezumă modalitatea prin care metoda analitică utilizată în test reflectă o măsură a concentrației substanței; se descriu toate procedurile analitice, inclusiv precizia metodei, limita de detectare a metodei și limita de cuantificare.