natgillin/translations-raw huggingface dataset:
evidence that controls met the overall survival acceptability standard of the test species (Appendix 2);
Cu excepția cazului în care există dovezi privind o lipsă semnificativă de monotonicitate, testul Jonckheere-Terpstra regresiv este foarte puternic pentru detectarea efectelor substanței chimice testate.
data on mortality at each stage (embryo, larval and juvenile) and cumulative mortality;
În caz contrar, se poate utiliza testul Dunn.
days to hatch, numbers of larvae hatched each day, and end of hatching;
Anomaliile larvelor
number of healthy fish at end of test;
Răspunsul este numărul de larve care s-au dovedit anormale într-un mod sau altul.
data for length (specify either standard or total) and weight of surviving animals;
Acest răspuns are adesea o incidență scăzută și prezintă uneori aceleași probleme precum prima zi de ecloziune, dar înregistrează uneori nereguli privind relația concentrație-răspuns.
incidence, description and number of morphological abnormalities, if any;
În cazul în care datele urmează aproximativ forma unei concentrații de tip monoton, testul Jonckheere-Terpstra regresiv este puternic pentru detectarea efectelor.
incidence, description and number of behavioural effects, if any;
RECOMANDĂRI STATISTICE PENTRU ESTIMĂRILE REGRESIEI
approach for the statistical analysis (regression analysis or analysis of the variance) and treatment of data (statistical test or model used);
Observațiile utilizate pentru ajustarea unui model reprezintă mediile duplicat (lungime și greutate) sau proporțiile duplicat (eclozarea ouălor și mortalitatea larvelor) (OCDE 2006).
no observed effect concentration for each response assessed (NOEC);
În general, se recomandă o analiză de regresie ponderată folosind ca pondere dimensiunea probei duplicat.
lowest observed effect concentration (at p = 0,05) for each response assessed (LOEC);
Sunt posibile, de asemenea, alte scheme de ponderare, cum ar fi analiza ponderată folosind răspunsul mediu estimat sau o combinație a acesteia cu dimensiunea probei duplicat.
ECx for each response assessed, if applicable, and confidence intervals (e.g. 90 % or 95 %) and a graph of the fitted model used for its calculation, the slope of the concentration-response curve, the formula of the regression model, the estimated model parameters and their standard errors.
Nu se recomandă ponderarea cu varianța reciprocă în cadrul aceleiași probe (Bunke et al.
Any deviation from the test method.
1999, Seber and Wild, 2003, Motulsky and Christopoulos 2004, Huet et al.
Discussion of the results, including any influence of deviations from the test method on the outcome of the test.
2003).
Fish species recommended for testing
Orice transformare a răspunsurilor înainte de a fi supuse analizei trebuie să păstreze independența observațiilor și ECx și limitele de încredere trebuie exprimate în unitățile de măsură inițiale, mai degrabă decât în unități transformate.
FRESHWATER
De exemplu, o schimbare de 20 % în logaritmul de lungime nu este echivalentă cu o schimbare de 20 % în lungime (Lyles et.al 2008, Draper and Smith 1999).
ESTUARINE and MARINE
Diagrama din figura 4 oferă o prezentare generală a estimărilor ECx.
Rainbow trout
Detaliile sunt descrise în textul de mai jos.
Fathead minnow
Figura 4
Zebrafish
Se selectează o valoare mai mare pentru x sau un model diferit Este (a) răspunsul estimat la CEx în cadrul CI pentru martor sau (b) răspunsul martor estimat în cadrul CI pentru răspunsul estimat la CEx sau (c) CI pentru CEx prea extins?
No. 23, OECD Paris.
Se compară modelele utilizând criteriile AIC sau opinii profesionale și se selectează cea mai bună ajustare.
Bailer, (2012), Baseline characteristics and statistical implications for the OECD 210 Fish Early Life Stage Chronic Toxicity Test, Environmental Toxicology and Chemistry 31; 2, 370 - 376.
De asemenea, se adaptează modelul Brain-Cousins Hormetic
Fork length (FL): refers to the length from the tip of the snout to the end of the middle caudal fin rays and is used in fishes in which it is difficult to tell where the vertebral column ends (www.fishbase.org)
De asemenea, se ajustează OCDE 4 & 5, Hill, Michaelis-Menton sau alt model cu 3-5 parametri
Standard length (SL): refers to the length of a fish measured from the tip of the snout to the posterior end of the last vertebra or to the posterior end of the midlateral portion of the hypural plate.
Considerații privind eclozarea ouălor și mortalitatea larvelor
Simply put, this measurement excludes the length of the caudal fin.
Cu alte cuvinte, trebuie să se modeleze proporția ouălor care nu eclozează sau a larvelor care nu supraviețuiesc.
Total length (TL): refers to the length from the tip of the snout to the tip of the longer lobe of the caudal fin, usually measured with the lobes compressed along the midline.
Motivul constă în faptul că ECx se referă la o concentrație la care există o schimbare egală cu x % din răspunsul mediei probelor de control.
It is a straight-line measure, not measured over the curve of the body (www.fishbase.org)
În cazul în care 5 % din ouăle de control nu eclozează și se modelează numărul celor care nu reușesc să eclozeze, EC20 se referă la o concentrație la care există o schimbare egală cu 20 % din procentul de 5 % din proba de control care a eșuat să eclozeze, ceea ce înseamnă o schimbare de 0,2 * 0,05 = 0,01 sau 1 punct procentual la 6 % de eșec al ecloziunii.
Description of the different lengths used
O astfel de modificare minoră nu poate fi estimată în mod semnificativ din datele disponibile și nu este importantă din punct de vedere biologic.
Standard length
Cu toate acestea, dacă se modelează proporția de ouă care eclozează, proporția probei de control va fi de 95 % în acest caz, iar o reducere de 20 % din media probei de control va însemna o schimbare de 0,95*0,2=0,18, ajungându-se astfel de la o rată de succes a eclozării de 95 % la una de 77 % (= 95-18), iar concentrația de efect poate fi estimată și prezintă probabil un interes major.
Fork length
Aceasta nu reprezintă o problemă în cazul măsurătorilor dimensionale, deși în general efectele adverse asupra dimensiunii echivalează cu o scădere a dimensiunii.
Total length
Modele pentru dimensiune (lungime sau greutate) și rata de succes a ecloziunii sau rata de supraviețuire a larvelor
Chemical: a substance or a mixture
Cu excepția modelului hormetic Brain-Cousens, toate aceste modele sunt descrise și recomandate de OCDE (2006).
ECx: (Effect concentration for x % effect) is the concentration that causes an x % of an effect on test organisms within a given exposure period when compared with a control.
Așa-numitele OCDE 2-5 sunt discutate, de asemenea, în Slob (2002) cu privire la testele de ecotoxicitate.
For example, an EC50 is a concentration estimated to cause an effect on a test end point in 50 % of an exposed population over a defined exposure period.
Există, bineînțeles, multe alte modele care ar putea fi utile.
Lowest observed effect concentration (LOEC) is the lowest tested concentration of a test chemical at which the chemical is observed to have a statistically significant effect (at p < 0,05) when compared with the control.
enumeră mai multe modele care nu sunt incluse aici și conține nenumărate referințe la alte modele.
Appendixes 5 and 6 provide guidance.
Modelele enumerate mai jos sunt propuse ca fiind deosebit de adecvate în testele de ecotoxicitate și foarte frecvent folosite.
No observed effect concentration (NOEC) is the test concentration immediately below the LOEC, which when compared with the control, has no statistically significant effect (p < 0,05), within a stated exposure period.
Cu 5 concentrații de testare plus control
Test chemical: Any substance or mixture tested using this test method
Exponențială simplă (OCDE 2)
UVCB: substances of unknown or variable composition, complex reaction products or biological materials.
Exponențială cu parametru de formă (OCDE 3)
IUPAC: International Union of Pure and Applied Chemistry.
Exponențială simplă cu limită inferioară (OCDE 4)
SMILES: Simplified Molecular Input Line Entry Specification.
Cu 6 sau mai multe concentrații de testare plus control
TEST CONDITIONS, DURATION AND SURVIVAL CRITERIA FOR RECOMMENDED SPECIES
Exponențială cu parametru de formă și limita inferioară (OCDE 5)
Key:
În cazul în care există probe vizuale de hormeză (puțin probabil în cazul eclozării reușite sau al larvelor supraviețuitoare, dar observate uneori în observațiile dimensionale)
SPECIES
Modele alternative pentru eșecul eclozării ouălor și mortalitatea larvelor
TEST CONDITIONS
Modele suplimentare pentru aceste răspunsuri pot fi ajustate utilizând modele probit (sau logistice), cu condiția să nu existe nicio dovadă de varianță extra-binomială, iar incidența controlului să fie menționată în corespondența modelului.
RECOMMENDED DURATION OF TEST
Aceasta nu este metoda preferată, întrucât folosește ca unitate de analiză probele individuale și nu proba duplicat (Morgan 1992, O'Hara Hines and Lawless 1993, Collett 2002, 2003).
Typical minimum mean total length of control fish at the end of the study (mm) [1]
Concordanța unui model unic
SURVIVAL OF CONTROLS (minimum)
Se compară vizual scăderea procentuală observată și preconizată pentru fiecare concentrație de testare (Motulsky and Christopoulos 2004, Draper și Smith 1999).
Temperature (°C)
Se compară eroarea pătratică medie regresivă cu eroarea pătratică medie pură folosind un test F (Draper and Smith 1999).
Salinity (0/00)
Se verifică dacă fiecare termen din model este semnificativ diferit de zero (și anume, se determină dacă toți termenii din model sunt importanți), (Motulsky și Christopoulos, 2004).
Photoperiod (hrs)
Diagramele reziduurilor provenite de la concentrația de testare vs. concentrația de regresie, posibil la o scară logaritmică (conc.).
Hatching success
Nu ar trebui să existe un tipar pentru această diagramă, punctele ar trebui să fie dispersate în mod aleatoriu de-a lungul unei linii orizontale la înălțime zero.
Post-hatch success
Datele trebuie evaluate din punct de vedere al normalității și omogeneității varianței, astfel cum este indicat în apendicele 5.
Freshwater:
În plus, normalitatea reziduurilor cu privire la modelul de regresie se evaluează folosind metodele indicate în apendicele 5 pentru reziduurile provenite de la analiza de varianță.
12 - 16 [3]
Compararea modelelor
2 weeks after controls are free-feeding (or 60 days post-hatch)
Se utilizează criteriul informațional Akiake (AIC).
12 - 16 [4]
Se compară vizual cele două modele evidențiind în ce proporție îndeplinesc criteriul modelului unic de mai sus.
30 days post-hatch
Se recomandă principiul parcimoniei, conform căruia se utilizează modelul cel mai simplu care corespunde datelor în mod rezonabil (Ratkowsky 1993, Lyles et.al 2008).
Japanese Ricefish or Medaka
Calitatea estimării ECx
22 - 25
Este necesară o apreciere statistică pentru a determina limitele intervalului de încredere astfel încât ECx să fie în continuare utilă.
28 days
Simulările privind modele regresive adecvate pentru eclozarea ouălor și datele dimensionale arată că aproximativ 75 % din intervalele de încredere pentru ECx (x = 10, 20 sau 30) nu calibrează mai mult de două concentrații de testare.
Typical minimum mean total length is not a validity criterion but deviations below the figure indicated should be carefully examined in relation to the sensitivity of the test.
Aceasta oferă un ghid general pentru ceea ce este acceptabil și un ghid practic pentru ceea ce este realizabil.
The minimum mean total length is derived from a selection of data available at the current time.
Numeroși autori afirmă necesitatea de a raporta intervalele de încredere pentru toți parametrii modelului, iar intervalele mari de încredere pentru parametrii modelului indică modele inacceptabile (Ott and Longnecker 2008, Alvord and Rossio 1993, Motulsky and Christopoulos 2004, Lyles et al.
The particular strain of rainbow trout tested may necessitate the use of other temperatures.
2008, Seber and Wild 2003, Bunke et al.
Brood stock must be held at the same temperature as that to be used for the eggs.
1999, Environment Canada 2005).
After receipt of eggs from a commercial breeder, a short adaptation (e.g. 1-2 h) to test temperature after arrival is necessary.
Intervalul de încredere pentru ECx (sau oricare alt parametru al modelului) nu trebuie să conțină cifra zero (Motulsky and Christopoulos 2004).
Darkness for larvae until one week after hatching except when they are being inspected, then subdued lighting throughout test (12-16 hour photoperiod) (4).
Aceasta este regresia echivalentă cu o diferență semnificativă minimă, citată adesea în abordările verificărilor de ipoteză (de exemplu Wang et al., 2000).
For any given test conditions, light regime should be constant.
Aceasta corespunde, de asemenea, intervalului de încredere pentru ca răspunsurile medii la LOEC să nu conțină media probelor de control.
For any given test this shall be performed to ± 2 0/00.
Trebuie să ne întrebăm dacă estimările parametrilor sunt plauzibile din punct de vedere științific.
FEEDING AND HANDLING GUIDANCE FOR BROOD AND TEST ANIMALS OF RECOMMENDED SPECIES
De exemplu, dacă intervalul de încredere pentru y0 este ± 20 %, nu este plauzibilă nicio estimare EC10.
FBS frozen brine shrimps; adults Artemia sp
În cazul în care modelul estimează un efect de 20 % la o concentrație C, iar efectul maxim observat la concentrația C și la concentrații mai mici este de 10 %, atunci EC20 nu este plauzibilă (Motulsky și Christopoulos 2004, Wang et al.
BSN brine shrimp nauplii; newly hatched
2000, Environment Canada 2005).
BSN48 brine shrimp nauplii; 48 hours old
ECx nu trebuie să necesite o extrapolare în afara intervalului de concentrații pozitive (Draper și Smith 1999, OCDE 2006).
FOOD [1]
De exemplu, o recomandare generală ar fi ca ECx să nu se situeze cu mai mult de 25 % sub cea mai scăzută concentrație testată sau deasupra celei mai mari concentrații testate.
POST-HATCH TRANSFER TIME
Brain P. and Cousens R. (1989); An equation to describe dose responses where there is stimulation of growth at low doses.
TIME TO FIRST FEEDING
Weed res.
Brood fish
29: 93-96.
Newly-hatched larvae
C.48 Test de reproducere de durată scurtă la pești
Juveniles
Această metodă de testare este echivalentă cu Orientarea privind testarea (TG) nr.
Type
229 a OCDE (2012).
Frequency
Necesitatea dezvoltării și a validării unui test pe pești capabil să detecteze anumite substanțe chimice active endocrin își are originea în preocupările referitoare la faptul că anumite niveluri de substanțe chimice din mediu pot cauza efecte adverse atât asupra oamenilor, cât și asupra faunei sălbatice din cauza interacțiunii respectivelor substanțe chimice cu sistemul endocrin.
None [2]
Un element al acestei activități a constat în elaborarea unei orientări de testare pentru screeningul substanțelor chimice active asupra sistemului endocrin al unor specii de pești.
trout starter BSN
Testul de reproducere cu durată scurtă pe pești a făcut obiectul unui amplu program de validare constând în studii interlaboratoare cu substanțe chimice selectate pentru a demonstra relevanța și fiabilitatea testului de detectare a substanțelor chimice care afectează reproducerea la pește prin diferite mecanisme, inclusiv endocrine (1, 2, 3, 4, 5).
2-4 feeds per day
Toate punctele finale ale Orientării de testare a OCDE au fost validate pentru Pimephales promelas și un subset de puncte finale a fost validat pentru Oryzias latipes (și anume, vitelogenina și caracteristicile sexuale secundare) și pentru peștele-zebră (și anume, vitelogenina).
14-16 days post-hatch or at swim-up (not essential)
Activitatea de validare a fost revizuită inter pares de către un grup de experți desemnați de coordonatorii naționali ai programului OCDE privind testarea (6), în parte, și de un grup independent de experți solicitat de Agenția pentru protecția mediului din Statele Unite (29).
19 days post hatch or at swim-up
Testul nu este conceput să identifice mecanisme specifice de perturbare hormonală deoarece animalele testate au axul hipotalamo-hipofizo-gonadal (HPG) intact, care poate reacționa la substanțele chimice care au efecte asupra axului HPG la diferite niveluri.
BSN
La finalul perioadei de expunere de 21 de zile, doi markeri biologici finali sunt măsurați la masculi și la femele, ca indicatori ai activității endocrine a substanței chimice testate; acești markeri sunt vitelogenine și caracteristicile sexuale secundare.
BSN48, flake food
Vitelogenina se măsoară la Pimephales promelas, la Oryziaslatipes și la peștele-zebră, în timp ce caracteristicile sexuale secundare se măsoară la Pimephales promelas și la Oryziaslatipes.
2-3 times a day
În plus, fecunditatea cantitativă este monitorizată zilnic, pe toată durata testului.
2 day post hatch
Acest test biologic servește drept test de screening in vivo asupra reproducerii, iar aplicarea sa trebuie considerată în contextul Cadrului conceptual al OCDE pentru testarea și evaluarea perturbatorilor endocrini (30).
BSN, flake food
În acest cadru conceptual, testul de reproducere pe termen scurt la pești este propus la nivelul 3 ca un test in vivo care furnizează date cu privire la mecanismul (mecanismele)/calea (căile) endocrin(e),
Commercial larvae food, protozoa [3], protein [4]
Vitelogenina (VTG) este produsă în mod normal de ficatul femelelor vertebrate ovipare ca răspuns la circulația estrogenului endogen.
BSN48, flake food,
Aceasta este un precursor al proteinelor din vitellus și, după ce este produsă în ficat, circulă prin sânge la ovar, unde este absorbită și modificată de ouăle în dezvoltare.
BSN once daily; flake food twice daily
Vitelogenina este aproape nedetectabilă în plasma peștilor imaturi, femele și masculi, deoarece aceștia nu au suficient estrogen circulant; cu toate acestea, ficatul are capacitatea de a sintetiza și a secreta vitelogenină ca răspuns la o stimulare estrogenică exogenă.
2 days post hatch
Măsurarea vitelogeninei contribuie la detectarea substanțelor chimice cu diferite moduri estrogenice de acțiune.
flake food
Detectarea substanțelor chimice estrogenice este posibilă prin măsurarea inducției vitelogeninei la peștii masculi și a fost amplu documentată în literatura științifică de specialitate revizuită inter-pares [de exemplu (7)].
BSN, flake food (or protozoa or rotifers)
Inducția vitelogeninei a fost demonstrată, de asemenea, în urma expunerii la androgeni aromatizabili (8, 9).
BSN48, flake food (or rotifers)
O reducere a nivelului de estrogen circulant la femele, de exemplu prin inhibarea aromatazei care transformă androgenul endogen în estrogenul natural 17β-estradiol, determină o reducere a nivelului de VTG, care se utilizează pentru detectarea substanțelor chimice cu proprietăți de inhibare a aromatazei (10, 11).
BSN once daily; flake food twice daily or flake food and rotifers once daily
Relevanța biologică a răspunsului vitelogeninei ca urmare a inhibării estrogenice/a aromatazei este bine stabilită și a fost amplu documentată.
not applicable
Cu toate acestea, este posibil ca producția de VTG la femele să fie afectată, de asemenea, de toxicitatea generală și de modurile de acțiune toxice non-endocrine, de exemplu de hepatotoxicitate.
6-7 days post spawn
Mai multe metode de măsurare au fost dezvoltate cu succes și standardizate pentru utilizarea de rutină.
Cyprinodon varieqatus
Acestea includ metodele cu specificitate de specie utilizând testul de imunoabsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA), în care se utilizează imunochimia pentru a cuantifica vitelogenina produsă în probe mici de sânge sau hepatice prelevate de la pești individuali (12, 13, 14, 15, 16, 17, 18).
2-3 feeds per day
Pentru măsurarea vitelogeninei, de la Pimephales promelas se prelevează probe de sânge, de la peștele-zebră se prelevează probe de sânge sau omogenat din cap/coadă, iar de la Oryzias latipes se prelevează probe hepatice.
1 day post hatch/swim-up
În cazul Oryzias latipes, există o bună corelație între vitelogenina măsurată în sânge și cea măsurată în ficat (19).
Food should be given to satiation.
În apendicele 6 sunt descrise procedurile recomandate pentru prelevările efectuate în scopul măsurării vitelogeninei.
Surplus food and faeces should be removed, as necessary to avoid accumulation of waste
Seturile pentru măsurarea vitelogeninei sunt disponibile pe scară largă; acestea trebuie să fie bazate pe o metodă ELISA validată, cu specificitate de specie.
granules from fermentation process.
În literatura de specialitate există mai multe studii pentru a documenta acest tip de răspuns în cazul Pimephales promelas (20) și Oryzias latipes (21).
STATISTICAL GUIDANCE FOR NOEC DETERMINATION
O atenuare a caracteristicilor sexuale secundare ale masculilor ar trebui interpretată cu prudență din cauza puterii statistice mici și ar trebui să fie bazată pe opiniile experților și pe greutatea dovezilor.
General
Există limitări în ceea ce privește utilizarea peștelui-zebră în acest test din cauza absenței caracteristicilor sexuale secundare cuantificabile sensibile la substanțe chimice cu efecte androgenice.
The replicate tank is the unit of analysis.
În cazul Pimephales promelas, principalul indicator al expunerii la androgeni exogeni este numărul de tuberculi nupțiali situați pe botul femelei.
Thus, for continuous measurements, such as size, the replicate mean or median should be calculated and these replicate values are the data for analysis.
În cazul femelelor de Oryzias latipes, numărul de procese papilare constituie principalul indicator al expunerii exogene la substanțe chimice cu efecte androgenice.
The power of the tests used should be demonstrated, preferably based on an adequate historical database for each lab.
Procedurile recomandate pentru evaluarea caracteristicilor sexuale ale Pimephales promelas și, respectiv, ale Oryzias latipes sunt indicate în apendicele 5A și în apendicele 5B.
The size effect that can be detected with 75-80 % power should be provided for each endpoint with the statistical test to be used.
Testul de 21 de zile pe pești include evaluarea cantitativă a producției de ouă și conservarea gonadelor pentru o eventuală examinare histopatologică.
The databases available at the time of development of this test method establish the power possible under the recommended statistical procedures.
Unele autorități de reglementare pot solicita acest punct final suplimentar pentru o evaluare mai completă a capacității de reproducere a animalelor testate sau în cazurile în care vitelogenina și caracteristicile sexuale secundare nu au răspuns la expunerea la substanțele chimice.
An individual lab should demonstrate its ability to meet this power requirement either by conducting its own power analysis or by demonstrating that the Coefficient of Variation (CV) for each response does not exceed the 90th percentile of CVs used in developing the TG.
Deși unele puncte finale pot reprezenta o metodă de diagnosticare foarte importantă (de exemplu, inducția VTG la masculi și formarea de tuberculi la femele), nu toate punctele finale (de exemplu, fertilitatea și histopatologia gonadei) ale acestui test sunt concepute pentru a identifica în mod clar mecanismele celulare specifice de acțiune.
Table 1 provides these CVs.
Mai degrabă, seria de puncte finale permite la nivel colectiv realizarea de interferențe în ceea ce privește posibilele perturbări endocrine și, prin urmare, oferă recomandări pentru teste suplimentare.
90th Percentile CVs for selected Freshwater Species
Cu toate acestea, în cazul în care fertilitatea este afectată, acest lucru va influența în mare măsură forța probatorie a interferențelor.
Species
Recomandări cu privire la interpretarea datelor de testare și acceptarea rezultatelor sunt prezentate în detaliu în această metodă de testare.
Response
Definițiile utilizate în cadrul acestei metode de testare sunt prezentate în apendicele 1.
CV_Between Replicates
În cadrul testului, masculii și femelele aflați în stadiu de reproducere sunt expuși împreună în vase de testare.
Fathead Minnow
O prezentare generală a condițiilor relevante de biotestare este redată în apendicele 2.
For almost all statistical tests used to evaluate laboratory toxicology studies, the comparisons of interest are of treatment groups to control.
Testul se efectuează în mod normal pe pești selectați dintr-o populație capabilă să elibereze gameți; nu trebuie utilizate animale senescente.