natgillin/translations-raw huggingface dataset:
direct or indirect evidence supportive of exposure of, or toxicity to, the target tissue(s) has been demonstrated.
De asemenea, pentru ficat, nu s-a ajuns la un acord privind stabilirea unei limite inferioare pentru valoarea martorului negativ.
The test chemical is then considered unable to induce DNA strand breakage in the tissues studied in this test system.
Cu toate că există mai multe publicații care demonstrează efectul de confuzie al citotoxicității in vitro, au fost publicate foarte puține date in vivo și, prin urmare, nu a fost recomandată nicio măsură unică de citotoxicitate.
In case the response is neither clearly negative nor clearly positive (i.e. not all the criteria listed in paragraphs 59 or 60 are met) and in order to assist in establishing the biological relevance of a result, the data should be evaluated by expert judgement and/or further investigations conducted, if scientifically justified.
Modificările histopatologice precum inflamarea, infiltrația celulară, modificările apoptotice sau necrotice au fost asociate cu creșteri ale migrației ADN-ului, cu toate că, astfel cum s-a demonstrat prin studiul de validare JaCVAM (OCDE, 2014), aceste modificări nu au întotdeauna ca efect constatări Comet pozitive și, prin urmare, nu este disponibilă nicio lista definitivă a modificărilor histopatologice care sunt asociate întotdeauna cu creșterea migrației ADN-ului.
Scoring additional cells (where appropriate) or performing a repeat experiment possibly using optimised experimental conditions (e.g. dose spacing, other routes of administration, other sampling times or other tissues) could be useful.
Celulele arici (sau nori, celule fantome) au fost sugerate anterior ca un indicator de citotoxicitate, însă etiologia celulelor arici este incertă.
In rare cases, even after further investigations, the data set will preclude making a conclusion of positive or negative results, and will therefore be concluded as equivocal.
Există date care sugerează faptul că acestea pot fi cauzate de citotoxicitatea dată de substanța chimică, lezarea indusă mecanic/enzimatic în cursul preparării probei (Guerard et al., 2014) și/sau un efect la niveluri extreme de genotoxicitate a substanței chimice de testat.
To assess the biological relevance of a positive or equivocal result, information on cytotoxicity at the target tissue is required (see paragraphs 54-55).
Alte date par să demonstreze că acestea se datorează lezării extensive, dar probabil reparabile a ADN-ului (Lorenzo et al., 2013).
Where positive or equivocal findings are observed solely in the presence of clear evidence of cytotoxicity, the study would be concluded as equivocal for genotoxicity unless there is enough information that is supportive of a definitive conclusion.
Țesuturile sau nuclee celulare au fost înghețate cu succes pentru a fi analizate mai târziu.
In cases of a negative study outcome where there are signs of toxicity at all doses tested, further study at non-toxic doses may be advisable.
În mod normal, acest lucru conduce la un efect măsurabil asupra răspunsului la vehiculul și martorul pozitiv (Recio et al., 2010; Recio at al., 2012; Jackson at al., 2013).
source, lot number if available;
În cazul în care se utilizează înghețarea, laboratorul trebuie să demonstreze competență în metodologiile de înghețare și să confirme plaje de valori scăzute acceptabile de % de ADN la coadă în țesuturile țintă ale animalelor tratate cu vehicul și faptul că răspunsuri pozitive pot fi încă detectate.
stability of the test chemical, limit date for use, or date for re-analysis if known.
În referințele bibliografice, înghețarea țesuturilor a fost descrisă utilizând diferite metode.
Solvent/vehicle:
Cu toate acestea, în prezent, nu există niciun acord cu privire la cele mai bune modalități de a îngheța și a dezgheța țesuturi, precum și la modul în care se evaluează dacă un eventual răspuns modificat poate afecta sensibilitatea testului.
justification for choice of solvent/vehicle;
Lucrările recente demonstrează că lista variabilelor esențiale se preconizează să devină mai scurtă în continuare și parametrii pentru variabilele esențiale, mai precis definiți (Guerard et al., 2014).
preparation of dose formulations;
Lorenzo, Y. et al.
analytical determinations on formulations (e.g. stability, homogeneity, nominal concentrations).
În partea C, capitolul C.13 se înlocuiește cu următorul text:
species/strain used and scientific and ethical justifications for the choice;
Bioacumularea la pești: Expunerea prin apă și prin alimentație
source, housing conditions, diet, enrichment, etc.;
Această metodă de testare (MT) este echivalentă cu Orientarea OCDE privind testarea (TG) nr.
individual weight of the animals at the start and at the end of the test, including body weight range, mean and standard deviation for each group.
305 (2012).
results from the range-finding study (if conducted);
Obiectivul major al actualei revizuiri a metodei de testare privește două aspecte.
rationale for route of administration;
În primul rând, aceasta este destinată să includă un test de bioacumulare alimentară [20] adecvat pentru a determina potențialul de bioacumulare al substanțelor cu solubilitate foarte scăzută în apă.
site of injection (for subcutaneous or intravenous studies);
În al doilea rând, aceasta urmărește să creeze o metodă de testare care, atunci când este cazul, utilizează mai puțini pești din motive de bunăstare a animalelor și care este mai eficientă din punct de vedere al costurilor.
methods for sample preparation, where available, histopathological analyses, especially for a chemical giving a positive comet response;
În anii de după adoptarea metodei de testare consolidate C.13 (1) au fost testate numeroase substanțe și s-a acumulat o experiență considerabilă atât de către laboratoare, cât și de autoritățile de reglementare.
rationale for tissue selection;
Acest lucru a condus la convingerea că poate fi redusă complexitatea testului dacă se îndeplinesc criterii specifice (a se vedea punctul 88) și că o abordare secvențială este posibilă.
methods for verifying that the test chemical reached the target tissue, or general circulation, if negative results are obtained;
Experiența a arătat, de asemenea, că factorii biologici precum rata de creștere și conținutul de lipide din pește pot avea un impact semnificativ asupra rezultatelor și ar putea fi necesară luarea lor în considerare.
details of diet and water quality;
În plus, s-a recunoscut faptul că testarea substanțelor cu solubilitate foarte scăzută în apă poate să nu fie fezabilă din punct de vedere tehnic.
detailed description of treatment and sampling schedules and justifications for the choices (e.g. toxicokinetic data, where available);
În plus, în cazul substanțelor cu solubilitate foarte scăzută în apă în mediul acvatic, expunerea prin apă poate avea o importanță limitată în comparație cu administrarea prin alimentație.
method of pain relief, analgesia;
Acest lucru a condus la elaborarea unei metode de testare în care peștii sunt expuși prin intermediul alimentației acestora (a se vedea punctele 7-14 și începând cu 97).
procedures for isolating and preserving tissues;
În anul 2010 a fost efectuată validarea (test interlaboratoare) testului de expunere prin alimentație (51).
methods for preparing single cell/nucleus suspension;
Principalele modificări includ:
source and lot numbers of all reagents (where possible);
Testarea unei singure concentrații de testare poate fi considerată suficientă atunci când este probabil ca factorul de bioconcentrare (BCF) să fie independent de concentrația de testare.
methods for evaluating cytotoxicity;
Un model minimizat al testului cu expunere prin apă în cadrul căruia există posibilitatea unui număr redus de puncte de eșantionare,dacă sunt îndeplinite criterii specifice.
electrophoresis conditions;
Se măsoară conținutul lipidic al peștelui astfel încât BCF să poată fi exprimat pe baza unui conținut lipidic al peștelui de 5 %.
staining techniques used; and
Un accent mai mare pe estimarea BCF cinetică (atunci când este posibil) pe lângă estimarea BCF în starea staționară.
methods for scoring and measuring comets.
Pentru anumite grupuri de substanțe va fi propus un test de expunere prin alimentație, în cazurile în care se consideră că acest lucru este mai adecvat decât un test de expunere prin apă.
General clinical observations, if any, prior to and throughout the test period for each animal;
Se măsoară greutatea peștelui astfel încât BCFk să poată fi corectat pentru diluția de creștere.
evidence of cytotoxicity if performed;
Înainte de a efectua oricare dintre testele de bioacumulare, următoarele informații privind substanța de testat trebuie să fie cunoscute:
for studies longer than one week: Individual body weights during the study, including body weight range, mean and standard deviation for each group; food consumption;
Sensibilitatea tehnicii analitice pentru măsurarea țesutului și a concentrațiilor tisulare și în apă sau în alimentație, atât pentru substanța de testat, cât și pentru posibilii metaboliți (a se vedea punctul 65).
dose-response relationship, where evident;
Solubilitatea în apă [MT A.6; (2)]; aceasta se determină în conformitate cu o metodă adecvată pentru plaja de valori (estimată) a solubilității pentru a obține o valoare fiabilă.
for each tissue/animal, the % tail DNA (or other measures, if chosen) and median values per slide, mean values per animal and mean values per group;
În cazul substanțelor hidrofobe, în general, aceasta va fi metoda eluției pe coloană.
concurrent and historical negative control data with ranges, means/medians and standard deviations for each tissue evaluated;
Coeficientul de partiție n-octanol-apă, KOW [21] [MT A.8 (4), A.24 (5), A.23 (6)]; sau alte informații relevante cu privire la comportamentul de partiționare (de exemplu, sorbția lipidelor, KOC); acesta se determină în conformitate cu o metodă adecvată pentru plaja de valori (estimată) a KOW pentru a obține o valoare fiabilă.
for tissues other than liver, a dose-response curve using the positive control.
Stabilitatea substanței în apă [hidroliză [MT C.7 (7)];
This can be from data collected during the demonstration of proficiency (see paragraphs 16-17) and should be accompanied by a justification, with citations to current literature, for the appropriateness of the magnitude and scatter of the responses to the controls in that tissue;
Stabilitatea substanței în alimente (în special în cazul în care se alege o abordare de testare a expunerii prin alimentație);
statistical analyses and methods applied; and criteria for considering a response as positive, negative or equivocal;
Informații cu privire la fototransformare, relevante pentru condițiile de iradiere din test (8);
frequency of hedgehogs in each group and per animal.
Tensiunea superficială (și anume, pentru substanțele la care nu se poate determina log KOW) [MT A.5 (9)];
Durand (1990), Heterogeneity in radiation-induced DNA damage and repair in tumor and normal cells using the “Comet” assay, Radiation Research, Vol.
Presiunea de vapori [MT A.4 (10)];
122/1, pp. 86-94.
Orice informații privind degradarea biotică sau abiotică în apă, precum (dar fără a se limita la) biodegradabilitatea rapidă [MT C.4 părțile de la II la VII(11), C.29 (12)], după caz;
Chapter B.8 of this Annex: Subacute Inhalation Toxicity: 28-Day Study.
Informații cu privire la metaboliți: structura, log KOW, formarea și degradabilitatea, după caz;
Chapter B.29 of this Annex: Subchronic Inhalation Toxicity: 90-day Study.
Constanta de disociere acidă (pKa) pentru substanțele care pot ioniza.
OECD (2002), “Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation”, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No. 19, OECD Publishing, Paris.
În cazul în care este necesar, se ajustează pH-ul apei de testare pentru a se asigura că substanța este în formă neionizată în cadrul testului, dacă este compatibilă cu speciile de pești.
Alkaline single cell gel electrophoresis
Independent de metoda de expunere selectată sau de schema de prelevare de probe, această metodă de testare descrie o procedură de caracterizare a potențialului de bioacumulare al substanțelor în pești.
Sensitive technique for the detection of primary DNA damage at the level of individual cell/nucleus.
Cu toate că sunt preferate testele în regim dinamic, sunt permise regimurile semistatice, cu condiția îndeplinirii criteriilor de validitate (a se vedea punctele 24 și 113).
Comet
În expunerea prin alimentație, sistemul dinamic nu este necesar pentru a menține concentrații apoase ale substanței de testat, dar contribuie la menținerea unui nivel adecvat de concentrații de oxigen dizolvat și la asigurarea apei curate și elimină influența, de exemplu, a produselor de excreție.
The shape that nucleoids adopt after submitted to one electrophoretic field, due to its similarity to comets: the head is the nucleus and the tail is constituted by the DNA migrating out of the nucleus in the electric field.
Independent de metoda de testare selectată, în această metodă de testare se furnizează suficiente detalii pentru efectuarea testului, permițând în același timp libertatea adecvată de a adapta modelul experimental la condițiile din laboratoare specifice și de a varia caracteristicile substanțelor de testat.
A critical variable/parameter
Testul de expunere prin apă se aplică cel mai adecvat substanțelor organice stabile cu valori log KOW între 1,5 și 6,0 (13), dar poate fi aplicat, de asemenea, substanțelor puternic hidrofobe (având log KOW> 6,0), în cazul în care se poate demonstra o concentrație stabilă și pe deplin dizolvată a substanței de testat în apă.
This is a protocol variable for which a small change can have a large impact on the conclusion of the assay.
În cazul în care nu se poate demonstra o concentrație stabilă a substanței de testat în apă, un studiu pe o soluție apoasă nu ar fi adecvat, prin urmare, ar fi necesară abordarea prin alimentație pentru testarea substanței în pește (cu toate că interpretarea și utilizarea rezultatelor testului de alimentație pot depinde de cadrul de reglementare).
Critical variables can be tissue-specific.
Estimările prealabile ale factorului de bioconcentrare (BCF, uneori denumit KB) pentru substanțele organice cu valori log KOW până la aproximativ 9,0 pot fi calculate utilizând ecuația lui Bintein et al.
Critical variables should not be altered, especially within a test, without consideration of how the alteration will alter an assay response, for example as indicated by the magnitude and variability in positive and negative controls.
Estimarea prealabilă a factorului de bioconcentrare pentru astfel de substanțe foarte hidrofobe poate fi mai mare decât valoarea factorului de bioconcentrare în stare staționară (BCFSS) preconizată a fi obținută din experimente de laborator, în special când se utilizează un model liniar simplu pentru estimarea prealabilă.
The test report should list alterations of critical variables made during the test or compared to the standard protocol for the laboratory and provide a justification for each alteration.
Parametrii care caracterizează potențialul de bioacumulare includ constanta de viteză de absorbție (k1) constante de viteză de eliminare, inclusiv constanta de viteză de eliminare (k2), factorul de bioconcentrare în stare staționară (BCFSS), factorul de bioconcentrare cinetică (BCFK) și factorul de bioamplificare prin alimentație (BMF) [22].
Tail intensity or % tail DNA
Substanțele de testat marcate radioactiv pot facilita analiza probelor de apă, de hrană și de pește și pot fi utilizate pentru a stabili dacă va fi necesară identificarea și cuantificarea metaboliților.
This corresponds to the intensity of the comet tail relative to the total intensity (head plus tail).
În cazul în care se măsoară totalul de reziduu radioactiv singur (de exemplu, prin combustia ori solubilizarea țesuturilor), BCF sau BMF se bazează pe valoarea totală a substanței mamă, toți metaboliții reținuți și, de asemenea, pe carbonul asimilat.
It reflects the amount of DNA breakage, expressed as a percentage.
Valorile BCF sau BMF care se bazează pe reziduurile radioactive totale nu pot fi comparați, prin urmare, în mod direct cu un factor BCF sau BMF derivat dintr-o analiză chimică particulară exclusiv a substanței mamă.
THE FACTORIAL DESIGN FOR IDENTIFYING SEX DIFFERENCES IN THE IN VIVO COMET ASSAY
Procedurile de separare, precum TLC, HPLC sau CG [23] pot fi utilizate înainte de analiză în cadrul studiilor cu markeri radioactivi pentru a determina BCF sau BMF pe baza substanței mamă.
In this design, a minimum of 5 males and 5 females are tested at each concentration level resulting in a design using a minimum of 40 animals (20 males and 20 females, plus relevant positive controls.)
Atunci când se aplică tehnici de separare, se efectuează identificarea și cuantificarea substanței mamă și a metaboliților relevanți [24] (a se vedea punctul 65) în cazul în care BCF sau BMF urmează să fie bazate pe concentrația substanței mamă în pești și nu pe total de reziduu marcat radioactiv.
The analysis partitions the variability in the dataset into that between the sexes, between the concentrations and that related to the interaction between the sexes and the concentrations.
De asemenea, este posibil să se combine un metabolism al peștilor sau un studiu in vivo de distribuție cu un studiu de bioacumulare prin analiza și identificarea reziduurilor tisulare.
Full details of the underlying methodology are available in many standard statistical textbooks (see references) and in the 'help' facilities provided with statistical packages.
Posibilitatea metabolismului poate fi prevăzută utilizând instrumente adecvate (de exemplu, OCDE, QSAR Toolbox (15) și programe QSAR care fac obiectul unui drept de proprietate).
CURRENT LIMITATIONS OF THE ASSAY
Decizia privind efectuarea unui test de expunere prin apă sau de expunere prin alimentație și tipul de configurație se bazează pe factorii de la punctul 3, luați în considerare împreună cu cadrul de reglementare relevant.
Due to the current status of knowledge, several limitations are associated with the in vivo comet assay.
De exemplu, în cazul substanțelor care au o valoare log KOW ridicată, dar care prezintă cu toate acestea o solubilitate în apă semnificativă în ceea ce privește sensibilitatea tehnicilor analitice disponibile, se ia în considerare în primă instanță un test de expunere prin apă.
It is expected that these limitations will be reduced or more narrowly defined as there is more experience with application of the assay to answer safety issues in a regulatory context.
Cu toate acestea, este posibil ca informațiile cu privire la solubilitatea în apă să nu fie definitive pentru aceste tipuri de substanțe hidrofobe, astfel încât posibilitatea de a pregăti concentrații apoase stabile, măsurabile dizolvate (nu se permit emulsii stabile), aplicabile unui studiu de expunere prin apă, se investighează înainte de a se lua o decizie cu privire la metoda de testare care trebuie să se utilizeze (16).
Some types of DNA damage may be short-lived, i.e. may be repaired too quickly to be observed 24 hours or more after the last dose.
Nu este posibil să se furnizeze indicații exacte prescriptive în ceea ce privește metoda care trebuie utilizată, pe baza solubilității în apă și a criteriilor de limitare a coeficientului de partiție octanol-apă, având în vedere faptul că alți factori (tehnici analitice, degradare, adsorbție etc.) pot avea o influență semnificativă asupra aplicabilității metodei pentru motivele prezentate anterior.
There is no identifiable list of the types of short-lived damages, nor of the chemicals which are likely to cause this type of damage, nor is it known over what time period this type of damage can be detected.
Cu toate acestea, o valoare log KOW mai mare de 5 și o solubilitate în apă mai mică de aproximativ 0,01-0,1 mg/l marchează plaja de valori a substanțelor la care testarea prin expunere prin apă poate deveni din ce în ce mai dificilă.
The optimum sampling time(s) may also be chemical- or route-specific and sampling times should be determined from kinetic data (for example the time, Tmax, at which the peak plasma or tissue concentration is achieved), when such data are available.
Se iau în considerare alți factori care pot influența alegerea testului, inclusiv aparatul și potențialul de absorbție al substanței în vasele de testare, stabilitatea acesteia în soluție apoasă în comparație cu stabilitatea acesteia în hrana pentru pești (17) (18) etc.
Most of the validation studies supporting this test method specified necropsy 2 or 3 hours following administration of the final dose.
Informații privind astfel de aspecte practice pot fi disponibile din alte studii efectuate pe apă.
Most studies in the published literature describe administration of the final dose between 2 and 6 hours prior to sacrifice.
Informații suplimentare privind evaluarea aspectelor legate de performanța studiilor de bioacumulare sunt disponibile în referințele bibliografice [de exemplu (19)].
Therefore, these experiences were used as the basis for the recommendation in the test method that, in the absence of data indicating otherwise, the final dose should be administered at a specified time point between 2 and 6 hours prior to necropsy.
În cazul substanțelor pentru care solubilitatea sau menținerea concentrației în apă, precum și analiza acestor concentrații nu reprezintă restricții în calea realizării unei metode cu expuneri prin apă, se preferă această metodă pentru determinarea potențialului de bioconcentrare al substanței.
There are no identifiable study data that examine the sensitivity of the test for the detection of short-lived DNA damage following administration in food or drinking water compared to administration by gavage.
În orice caz, se verifică dacă concentrația (concentrațiile) de expunere prin apă care urmează să fie aplicată (aplicate) se încadrează în solubilitatea apoasă în mediul de testare.
DNA damage has been detected following administration in feed and drinking water, but there are relatively few such reports compared to the much greater experience with gavage and i.p. administration.
Se pot utiliza diferite metode pentru menținerea stabilității concentrațiilor substanței de testat dizolvate, cum ar fi utilizarea de soluții mamă sau sisteme de dozare pasive (de exemplu, metoda eluției pe coloană), atât timp cât se poate demonstra că pot fi menținute concentrațiile stabile și mediile de testare nu sunt modificate față de cele recomandate la punctul 27.
Thus the sensitivity of the assay may be reduced for chemicals which induce short-lived damage administered through feed or drinking water.
În cazul substanțelor foarte hidrofobe (log KOW> 5 și solubilitate sub ~ 0,01-0,1 mg/l), testarea prin expunere prin apă poate deveni din ce în ce mai dificilă.
No inter-laboratory studies have been conducted in tissues other than liver and stomach, therefore no recommendation has been established for how to achieve a sensitive and reproducible response in tissues other than liver, such as expected positive and negative control ranges.
Motivele limitărilor pot fi faptul că o concentrație apoasă nu se poate menține la un nivel considerat a fi suficient de constant (de exemplu, din cauza sorbției la sticla recipientelor de expunere sau absorbției rapide de către pește) sau faptul că acele concentrații apoase care urmează să fie aplicate sunt atât de scăzute încât se află în plaja de valori sau sub limita analitică a cuantificării [25].
For the liver, agreement on setting a lower limit to the negative control value also could not be reached.
În cazul acestor substanțe foarte hidrofobe, se recomandă testul prin alimentație, cu condiția ca testul să fie în conformitate cu cadrul de reglementare relevant și cu necesitățile în materie de evaluare a riscurilor.