natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If no effects are observed at the highest concentration in the range-finding test (e.g. at 10 mg/l), or when the test chemical is highly likely to be of low/ no toxicity based on lack of toxicity to other organisms and/or low/no uptake, the reproduction test may be performed as a limit test, using a test concentration of e.g.10 mg/l and the control.
Nr. descendenți în viață (se bifează) [2]
Ten replicates should be used for both the treatment and the control groups.
Vasul 1
When a limit test might need to be done in a flow-through system less replicates would be adequate.
Moartea cumulativă a părinților [3]
A limit test will provide the opportunity to demonstrate that there is no statistically significant effect at the limit concentration, but if effects are recorded a full test will normally be required.
Se indică vasul care a fost utilizat pentru experiment
One test-medium control series and also, if relevant, one control series containing the solvent or dispersant should be run in addition to the test series.
Puii avortați se înregistrează cu „AB” în căsuța relevantă
When used, the solvent or dispersant concentration should be the same as that used in the vessels containing the test chemical.
Se înregistrează mortalitatea oricăror animale părinți cu „M” în căsuța relevantă
The appropriate number of replicates should be used (see paragraphs 23-24).
EXEMPLU DE FIȘĂ TEHNICĂ PENTRU ÎNREGISTRAREA REZULTATELOR ANALIZEI CHIMICE
Generally in a well-run test, the coefficient of variation around the mean number of living offspring produced per parent animal in the control(s) should be ≤ 25 %, and this should be reported for test designs using individually held animals.
Concentrațiile măsurate
Test medium renewal
Conc. nominală
The frequency of medium renewal will depend on the stability of the test chemical, but should be at least three times per week.
Proba din săptămâna 1
If, from preliminary stability tests (see paragraph 7), the test chemical concentration is not stable (i.e. outside the range 80 - 120 % of nominal or falling below 80 % of the measured initial concentration) over the maximum renewal period (i.e. 3 days), consideration should be given to more frequent medium renewal, or to the use of a flow-through test.
Proba din săptămâna 2
When the medium is renewed in semi-static tests, a second series of test vessels are prepared and the parent animals transferred to them by, for example, a glass pipette of suitable diameter.
Proba din săptămâna 3
The volume of medium transferred with the Daphnia should be minimised.
Proaspătă
The results of the observations made during the test should be recorded on data sheets (see examples in Appendixes 4 and 5).
Veche
If other measurements are required (see paragraph 44), additional observations may be required.
Concentrațiile măsurate sub formă de procente din cea nominală
Offspring
CALCULAREA MEDIEI PONDERATE DE TIMP
The offspring produced by each parent animal should preferably be removed and counted daily from the appearance of the first brood to prevent them consuming food intended for the parent.
Media ponderată de timp
For the purpose of this test method it is only the number of living offspring that needs to be counted, but the presence of aborted eggs or dead offspring should be recorded.
Având în vedere faptul că concentrația substanței chimice de testat poate să scadă în intervalul de timp dintre reînnoiri, este necesar să se aibă în vedere necesitatea alegerii unei concentrații reprezentative pentru domeniul de concentrații experimentate de părintele Daphnia.
Mortality
Alegerea se face pe bază de principii biologice, precum și statistice.
Mortality among the parent animals should be recorded preferably daily, or at least as frequently as offspring are counted.
De exemplu, dacă se consideră că reproducerea este afectată cel mai mult de concentrația de vârf experimentată, atunci se utilizează concentrația maximă.
Other parameters
Cu toate acestea, dacă se consideră că efectul acumulat sau pe termen lung al substanței chimice toxice este mai important, atunci o concentrație medie este mai relevantă.
Although this test method is designed principally to assess effects on reproductive output, it is possible that other effects may also be sufficiently quantified to allow statistical analysis.
În cazul respectiv, o medie potrivită pentru utilizare este concentrația medie ponderată de timp, întrucât aceasta ia în considerare variația concentrației instantanee în timp.
Reproductive output per surviving parent animal, i.e. number of living offspring produced during the test per surviving parent, may be recorded.
Exemplu de medie ponderată de timp
This may be compared with the main response variable (reproductive output per parent animal in the start of the test which did not inadvertently or accidentally die during the test).
Conc.
If parental mortality occurs in exposed replicates it should be considered whether or not the mortality follows a concentration-response pattern, e.g. if there is a significant regression of the response versus concentration of the test chemical with a positive slope (a statistical test like the Cochran-Armitage trend test may be used for this).
Figura 1 prezintă un exemplu de test (simplificat) cu durata de șapte zile cu reînnoirea mediului în zilele 0, 2 și 4.
If the mortality follows a concentration-response pattern, the parental mortality should be assigned as an effect of the test chemical and the replicates should not be excluded from the analysis of the test result.
Linia subțire în zig-zag reprezintă concentrația în orice punct în timp.
Growth measurements are highly desirable since they provide information on possible sublethal effects which may be useful in addition to reproduction measures alone; the measurement of the length of the parent animals (i.e. body length excluding the anal spine) at the end of the test is recommended.
Se consideră că scăderea concentrației este urmarea unui proces de descompunere exponențială.
Other parameters that can be measured or calculated include time to production of first brood (and subsequent broods), number and size of broods per animal, number of aborted broods, presence of male neonates (OECD, 2008) or ephippia and possibly the intrinsic rate of population increase (see Appendix 1 for definition and Appendix 7 for the identification of the sex of neonates).
Cele șase puncte reprezentate grafic arată concentrațiile observate, măsurate la începutul și la sfârșitul fiecărei perioade de reînnoire.
Frequency of analytical determinations and measurements
Linia continuă groasă indică poziția mediei ponderate de timp.
Oxygen concentration, temperature, hardness and pH values should be measured at least once a week, in fresh and old media, in the control(s) and in the highest test chemical concentration.
Media ponderată de timp se calculează, astfel încât aria de sub media ponderată de timp să fie egală cu aria de sub curba concentrațiilor.
During the test, the concentrations of test chemical are determined at regular intervals.
Calculul pentru exemplul anterior se prezintă în tabelul 1.
In semi-static tests where the concentration of the test chemical is expected to remain within ± 20 per cent of the nominal (i.e. within the range 80 - 120 per cent- see paragraphs 6, 7 and 39), it is recommended that, as a minimum, the highest and lowest test concentrations be analysed when freshly prepared and at the time of renewal on one occasion during the first week of the test (i.e. analyses should be made on a sample from the same solution — when freshly prepared and at renewal).
Calculul mediei ponderate de timp
These determinations should be repeated at least at weekly intervals thereafter.
Reînnoire Nr.
For tests where the concentration of the test chemical is not expected to remain within ± 20 per cent of the nominal, it is necessary to analyse all test concentrations, when freshly prepared and at renewal.
Zile
However, for those tests where the measured initial concentration of the test chemical is not within ± 20 per cent of nominal but where sufficient evidence can be provided to show that the initial concentrations are repeatable and stable (i.e. within the range 80 - 120 per cent of initial concentrations), chemical determinations could be reduced in weeks 2 and 3 of the test to the highest and lowest test concentrations.
0 Conc.
In all cases, determination of test chemical concentrations prior to renewal need only be performed on one replicate vessel at each test concentration.
Aria
If a flow-through test is used, a similar sampling regime to that described for semi-static tests is appropriate (but measurement of ‘old’ solutions is not applicable in this case).
Total zile:
However, it may be advisable to increase the number of sampling occasions during the first week (e.g. three sets of measurements) to ensure that the test concentrations are remaining stable.
Arie totală:
In these types of test, the flow-rate of diluent and test chemical should be checked daily.
Media PT:
If there is evidence that the concentration of the chemical being tested has been satisfactorily maintained within ± 20 per cent of the nominal or measured initial concentration throughout the test, then results can be based on nominal or measured initial values.
„Zile” este numărul de zile din perioada de reînnoire.
If the deviation from the nominal or measured initial concentration is greater than ± 20 per cent, results should be expressed in terms of the time-weighted mean (see guidance for calculation in Appendix 6).
„Conc 0” este concentrația măsurată la începutul fiecărei perioade de reînnoire.
The purpose of this test is to determine the effect of the test chemical on the reproductive output.
„Conc 1” este concentrația măsurată la sfârșitul fiecărei perioade de reînnoire.
The total number of living offspring per parent animal should be calculated for each test vessel (i.e. replicate).
„Ln(Conc 0)” este logaritmul natural al Conc 0.
In addition, the reproduction can be calculated based on the production of living offspring by the surviving parent organism.
„Ln (Conc 1)” este logaritmul natural al Conc 1.
However, the ecologically most relevant response variable is the total number of living offspring produced per parent animal which does not die accidentally [58] or inadvertently [59] during the test.
„Aria” este aria de sub curba exponențială pentru fiecare perioadă de reînnoire.
If the parent animal dies accidentally or inadvertently during the test, or turns out to be male, then the replicate is excluded from the analysis.
Se calculează cu:
The analysis will then be based on a reduced number of replicates.
Media ponderată de timp („media PT”) este „Aria totală” împărțită la „Total zile”.
In summary, when LOEC and NOEC or ECx are being used to express the effects, it is recommended to calculate the effect on reproduction by the use of both response variables mentioned above i.e.
Desigur, pentru testul de reproducere al Daphnia, tabelul trebuie mărit până la 21 de zile.
as the total number of living offspring produced per parent animal which does not die accidentally or inadvertently during the test and;
Este clar că, atunci când observațiile se fac numai la începutul și sfârșitul fiecărei perioade de reînnoire, nu se poate confirma că procesul de descompunere este, de fapt, exponențial.
as the number of living offspring produced per surviving parental animal;
O curbă diferită ar genera un calcul diferit pentru „Arie”.
and then to use as the final result the lowest NOEC and LOEC or ECx value calculated by using either of these two response variables.
Cu toate acestea, un proces de descompunere exponențială nu este neverosimil și este probabil cea mai bună curbă de utilizat în absența altor date.
Before employing the statistical analysis, e.g. ANOVA procedures, comparison of treatments to the control by Student t-test, Dunnett's test, Williams' test, or stepdown Jonckheere-Terpstra test, it is recommended to consider transformation of data if needed for meeting the requirements of the particular statistical test.
Este necesară însă o oarecare precauție în cazul în care analiza chimică nu reușește să identifice nicio substanță chimică la sfârșitul perioadei de reînnoire.
As non-parametric alternatives one can consider Dunn's or Mann-Whitney's tests.
Cu excepția cazului în care este posibil să se estimeze rapiditatea dispariției substanței chimice din soluție, este imposibil să se obțină o arie realistă sub curbă și, prin urmare, este imposibil să se obțină o medie ponderată de timp rezonabilă.
95 % confidence intervals are calculated for individual treatment means.
ORIENTĂRI PENTRU IDENTIFICAREA SEXULUI NOU-NĂSCUTULUI
The number of surviving parents in the untreated controls is a validity criterion, and should be documented and reported.
Producția de nou-născuți masculi poate avea loc în condiții de mediu modificate, cum ar fi scurtarea fotoperioadei, temperatura, scăderea concentrației de alimente și mărirea densității populației (Hobaek and Larson, 1990; Kleiven et al., 1992).
Also all other detrimental effects, e.g. abnormal behavior and toxicological significant findings, should be reported in the final report as well.
Producția masculilor de asemenea, este un răspuns cunoscut la anumiți regulatori de creștere a insectelor (Oda et al., 2005).
ECx
În condițiile în care factori de stres chimici determină o scădere a reproducerii descendenților de la femelele partenogenice, se preconizează un număr sporit de masculi (OCDE, 2008).
ECx-values, including their associated lower and upper confidence limits, are calculated using appropriate statistical methods (e.g. logistic or Weibull function, trimmed Spearman-Karber method, or simple interpolation).
Pe baza informațiilor disponibile, nu este posibil să se estimeze care dintre raportul dintre sexe sau parametrul de reproducere va fi mai sensibil; cu toate acestea, există indicații (referința „raport de validare”, partea 1) că o creștere a numărului de masculi ar putea fi mai puțin sensibilă decât descreșterea descendenților.
To compute the EC10, EC50 or any other ECx, the complete data set should be subjected to regression analysis.
Întrucât obiectivul principal al metodei de testare este evaluarea numărului de descendenți produși, apariția masculilor este o observație opțională.
NOEC/LOEC
În cazul în care acest parametru opțional este evaluat în cadrul unui studiu, se utilizează un criteriu suplimentar de validare a testului de nu mai mult de 5 % masculi în probele martor.
If a statistical analysis is intended to determine the NOEC/LOEC appropriate statistical methods should be used according to OECD Document 54 on the Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application (4).
Modul cel mai practic și ușor de a diferenția sexul Daphnia este prin utilizarea caracteristicilor fenotipice ale acestora, având în vedere faptul că masculii și femele sunt identice din punct de vedere genetic și sexul acestora este determinat de mediu.
In general, adverse effects of the test chemical compared to the control are investigated using one-tailed hypothesis testing at p ≤ 0,05.
Masculii și femelele sunt diferiți în ceea ce privește lungimea și morfologia primelor antene, care la masculi sunt mai lungi decât la femele (figura 1).
Normal distribution and variance homogeneity can be tested using an appropriate statistical test, e.g. the Shapiro-Wilk test and Levene test, respectively (p≤ 0,05).
Această diferență poate fi recunoscută imediat după naștere, cu toate că, pe măsură ce aceștia cresc, se dezvoltă alte caracteristici sexuale secundare (de exemplu, a se vedea figura 2 în Olmstead și LeBlanc, 2000).
One-way ANOVA and subsequent multi-comparison tests can be performed.
Pentru a observa sexul în mod morfologic, se transferă nou-născuții produși de fiecare animal de experiență cu o pipetă și se introduc într-o placă Petri cu mediu de testare.
Multiple comparisons (e.g. Dunnett's test) or step-down trend tests (e.g. Williams' test, or stepdown Jonckheere-Terpstra test) can be used to calculate whether there are significant differences (p ≤ 0,05) between the controls and the various test chemical concentrations (selection of the recommended test according to OECD Guidance Document 54 (4)).
Mediul este menținut la un nivel minim pentru a limita deplasarea animalelor.
Otherwise, non-parametric methods (e.g. Bonferroni-U-test according to Holm or Jonckheere-Terpstra trend test) could be used to determine the NOEC and the LOEC.
Observarea primelor antene se poate realiza cu ajutorul unui stereomicroscop (×10-60).
If a limit test (comparison of control and one treatment only) has been performed and the prerequisites of parametric test procedures (normality, homogeneity) are fulfilled, metric responses can be evaluated by the Student test (t-test).
Fig.
An unequal-variance t-test (such as Welch test) or a non-parametric test such as the Mann-Whitney-U-test may be used, if these requirements are not fulfilled.
Mascul de 24 de ore (stânga) și femelă (dreapta) de D. magna.
To determine significant differences between the controls (control and solvent or dispersant control), the replicates of each control can be tested as described for the limit test.
Masculii pot fi diferențiați de femele în funcție de lungimea și morfologia primelor antene, astfel cum se arată în cercuri (Tatarazako et al., 2004).
If these tests do not detect significant differences, all control and solvent control replicates may be pooled.
REFERINȚE BIBLIOGRAFICE
Otherwise all treatments should be compared with the solvent control.
În Partea C capitolul C.29, punctul 66 se înlocuiește cu următorul text:
The test report includes the following:
Un test este considerat valid în cazul în care:
physical nature and relevant physicochemical properties;
valoarea procentuală medie de degradare din vasele FC care conțin substanța chimică de referință este > 60 % în a 14-a zi de incubare; și
chemical identification data, including purity.
În cazul în care aceste limite nu sunt satisfăcute, se repetă testul cu un inocul din altă sursă și/sau se revizuiesc procedurile utilizate De exemplu, în cazul în care producția CI martor alb ridicată reprezintă o problemă, se urmărește procedura descrisă la punctele 27-32.”
the clone (whether it has been genetically typed), supplier or source (if known) and the culture conditions used.
În partea C, se adaugă următoarele capitole:
If a different species to Daphnia magna is used, this should be reported and justified.
Pești, test de toxicitate în stadii timpurii de viață
test procedure used (e.g. semi-static or flow-through, volume, loading in number of Daphnia per litre);
Această metodă de testare este echivalentă cu Orientarea privind testarea (TG) nr.
photoperiod and light intensity;
210 a OCDE (2013).
test design (e.g. number of replicates, number of parents per replicate);
Testele cu pești în stadii timpurii de viață sunt concepute să definească efectele letale și subletale ale substanțelor chimice asupra stadiilor și speciilor testate.
details of culture medium used;
Acestea oferă informații utile pentru estimarea efectelor cronice letale și subletale ale substanțelor chimice asupra altor specii de pești.
if used, additions of organic material including the composition, source, method of preparation, TOC/COD of stock preparations, estimation of resulting TOC/COD in test medium;
Orientarea privind testarea nr.
detailed information on feeding, including amount (in mg C/daphnia/day) and schedule (e.g. type of food(s), including, for algae the specific name (species) and, if known, the strain, the culture conditions);
210 se bazează pe o propunere formulată de Regatul Unit, care a fost discutată în cadrul unei reuniuni a experților OCDE convocată la Medmenham (Regatul Unit) în noiembrie 1988 și a fost actualizată în 2013 pentru a reflecta experiența acumulată în utilizarea testului și recomandările formulate în urma unui atelier de lucru al OCDE privind testarea toxicității la pești, desfășurat în septembrie 2010 (1).
method of preparation of stock solutions and frequency of renewal (the solvent or dispersant and its concentration should be given, when used).
Peștii aflați în stadii timpurii de viață sunt expuși la o serie de concentrații ale substanței de testat dizolvată în apă.
results from any preliminary studies on the stability of the test chemical;
Sunt preferate condiții de testare dinamică; cu toate acestea, dacă nu este posibil, sunt acceptate, de asemenea, condiții de testare semistatică.
the nominal test concentrations and the results of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels (see example data sheets in Appendix 5); the recovery efficiency of the method and the limit of determination should also be reported; water quality within the test vessels (i.e. pH, temperature and dissolved oxygen concentration, and TOC and/or COD and hardness where applicable) (see example data sheet in Appendix 4);
Pentru detalii suplimentare, a se consulta documentul de orientare al OCDE privind testarea toxicității acvatice a substanțelor și amestecurilor dificile (2).
the full record of the production of living offspring during the test by each parent animal (see example data sheet in Appendix 4);
Testul începe prin așezarea ouălor fertilizate în camere de testare și continuă pentru perioada de timp specifică fiecărei specii necesară pentru ca peștii de control să ajungă în stadiul de alevini.
the number of deaths among the parent animals and the day on which they occurred (see example data sheet in Appendix 4);
Efectele letale și subletale sunt evaluate și comparate cu valorile probelor de control pentru a determina concentrația cea mai scăzută pentru care este observat un efect (LOEC) în vederea stabilirii (i) concentrației la care nu se observă niciun efect (NOEC) și/sau (ii) ECx (de ex.
the coefficient of variation for control reproductive output (based on total number of living offspring per parent animal alive at the end of the test);
EC10, EC20) prin folosirea unui model de regresie în vederea estimării concentrației care ar determina o modificare de x % a efectului măsurat.
plot of total number of living offspring produced per parent animal in each replicate excluding any parent animal which may have accidentally or inadvertently died during the test vs. concentration of the test chemical;
Este posibil ca raportarea unor concentrații de efect și a unor parametri relevanți să depindă de un cadru de reglementare.
as appropriate plot of total number of living offspring produced per surviving parent animal in each replicate vs. concentration of the test chemical
Concentrațiile de testare trebuie să încadreze ECx astfel încât ECx să provină mai degrabă din interpolare decât din extrapolare (a se vedea apendicele 1 pentru definiții).
where appropriate, the ECx for reproduction and confidence intervals (e.g. 90 % or 95 %) and a graph of the fitted model used for its calculation, the slope of the concentration-response curve and its standard error;
Este necesară cunoașterea solubilității în apă (a se vedea capitolul A.6 din prezenta anexă) și a presiunii vaporilor substanței de testare (a se vedea capitolul A.4 din prezenta anexă).
other observed biological effects or measurements: report any other biological effects which were observed or measured (e.g. growth of parent animals) including any appropriate justification;
Trebuie să fie disponibilă o metodă analitică fiabilă de cuantificare a substanței din soluțiile de testat cu o precizie cunoscută și validată și cu o limită de cuantificare.
OECD (2000), Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures, Environmental Health and Safety Publications, Series on Testing and Assessment No. 23.
În cazul în care metoda de testare este utilizată pentru testarea unui amestec, compoziția acestuia trebuie să fie caracterizată pe cât posibil, de exemplu de identitatea chimică a constituenților săi, prezența lor cantitativă și proprietățile specifice substanței (precum cele menționate mai sus).
For the purposes of this test method the following definitions are used:
Înainte de a folosi această metodă de testare în scopul reglementării unui amestec, trebuie să se ia în considerare dacă aceasta va avea rezultate acceptabile în acest scop.