natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Following treatment and prior to sample collection, animals are injected intraperitoneally with an appropriate dose of a metaphase-arresting agent (e.g. colcemid or colchicine), and samples are collected at an appropriate interval thereafter.
Toate lamele, inclusiv cele de la martorii pozitivi și negativi, sunt codificate independent înainte de analiză și sunt randomizate astfel încât examinatorul să nu cunoască condiția de tratament.
For mice this interval is approximately 3-5 hours prior to collection and for rats it is 2-5 hours.
Se determină indicele mitotic ca o măsură a citotoxicității, pe cel puțin 1000 de celule pe animal pentru toate animalele tratate (inclusiv martorii pozitivi), netratate sau animalele martori negativi tratate cu un vehicul/solvent.
Cells are harvested from the bone marrow, swollen, fixed and stained, and analysed for chromosomal aberrations (12).
Pentru fiecare animal se analizează cel puțin 200 de celule în metafază pentru a evidenția aberații cromozomiale structurale, incluzând și excluzând lacunele (6).
Observations
Cu toate acestea, în cazul în care baza de date privind martorii negativi testați anterior indică faptul că valoarea medie a frecvenței aberațiilor cromozomiale structurale de fond este < 1 % în laboratorul de testare, se ia în considerare examinarea de celule suplimentare.
General clinical observations of the test animals should be made and clinical signs recorded at least once a day, preferably at the same time(s) each day and considering the peak period of anticipated effects after dosing.
Aberațiile de tip cromatidian și cromozomial se înregistrează separat și se clasifică în funcție de subtipuri (rupturi, schimburi).
At least twice daily during the dosing period, all animals should be observed for morbidity and mortality.
Recunoscând faptul că metodele de preparare a lamelor conduc adesea la scindarea unei fracții de celule în metafază cu pierdere de cromozomi, toate celulele examinate trebuie, prin urmare, să conțină un număr de centromeri nu mai mic de 2n±2, unde n este numărul haploid de cromozomi pentru specia respectivă.
All animals should be weighed at study initiation, at least once a week during repeated-dose studies, and at euthanasia.
Interpretarea rezultatelor
In studies of at least one-week duration, measurements of food consumption should be made at least weekly.
Se recomandă prezentarea sub formă de tabel a datelor pentru fiecare animal.
If the test chemical is administered via the drinking water, water consumption should be measured at each change of water and at least weekly.
Pentru fiecare animal, se evaluează indicele mitotic, numărul de celule în metafază examinate, numărul de aberații pentru fiecare celulă în metafază și procentul de celule cu aberație (aberații) cromozomială (cromozomiale) structurală (structurale).
Animals exhibiting non-lethal indicators of excessive toxicity should be humanely euthanised prior to completion of the test period (11).
Diferitele tipuri de aberații cromozomiale structurale se enumeră împreună cu numărul și frecvența acestora pentru grupurile tratate și pentru cele martor.
Target tissue exposure
Se înregistrează separat lacunele, precum și celulele poliploide și celulele cu cromozomi endoreduplicați.
A blood sample should be taken at appropriate time(s) in order to permit investigation of the plasma levels of the test chemicals for the purposes of demonstrating that exposure of the bone marrow occurred, where warranted and where other exposure data do not exist (see paragraph 44).
Se raportează frecvența lacunelor, dar, în general, aceasta nu se include în analiza frecvenței totale a aberațiilor structurale.
Bone marrow and chromosome preparations
În cazul în care nu există dovezi privind diferența de răspunsuri între sexe, datele se pot combina pentru analiza statistică.
Immediately after humane euthanasia, bone marrow cells are obtained from the femurs or tibias of the animals, exposed to hypotonic solution and fixed.
Datele cu privire la toxicitatea animală și semnele clinice trebuie, de asemenea, să fie raportate.
The metaphase cells are then spread on slides and stained using established methods (see (3) (12)).
Următoarele criterii determină acceptabilitatea testului:
All slides, including those of positive and negative controls, should be independently coded before analysis and should be randomised so the scorer is unaware of the treatment condition.
Datele privind martorii negativi testați în paralel sunt considerate acceptabile pentru adăugarea la baza de date cu privire la martorii testați anterior (a se vedea punctele 11-14);
The mitotic index should be determined as a measure of cytotoxicity in at least 1000 cells per animal for all treated animals (including positive controls), untreated or vehicle/solvent negative control animals.
Martorii pozitivi testați în paralel sau martorii examinați trebuie să inducă răspunsuri compatibile cu cele provenite din baza de date cu privire la martorii pozitivi testați anterior și să producă o creștere semnificativă din punct de vedere statistic în comparație cu martorul negativ (a se vedea punctele 20-21);
At least 200 metaphases should be analysed for each animal for structural chromosomal aberrations including and excluding gaps (6).
A fost analizat un număr corespunzător de doze și celule;
However, if the historical negative control database indicates the mean background structural chromosomal aberration frequency is < 1 % in the testing laboratory, consideration should be given to scoring additional cells.
Criteriile de selectare a dozei maxime sunt consecvente cu cele descrise la punctele 25-28.
Chromatid and chromosome-type aberrations should be recorded separately and classified by sub-types (breaks, exchanges).
Evaluarea și interpretarea rezultatelor
Recognising that slide preparation procedures often result in the breakage of a proportion of metaphases with a resulting loss of chromosomes, the cells scored should, therefore, contain a number of centromeres not less than 2n ± 2, where n is the haploid number of chromosomes for that species.
Cu condiția îndeplinirii tuturor criteriilor de acceptabilitate, o substanță chimică de testat este considerată în mod clar pozitivă în cazul în care:
Treatment of Results
cel puțin unul dintre grupurile tratate prezintă o creștere semnificativă din punct de vedere statistic a frecvenței de celule cu aberații cromozomiale structurale (excluzând lacunele) comparativ cu martorul negativ testat în paralel,
Individual animal data should be presented in tabular form.
b.
The mitotic index, the number of metaphase cells scored, the number of aberrations per metaphase cell and the percentage of cells with structural chromosomal aberration(s) should be evaluated for each animal.
Această creștere este raportată la doză cel puțin la un moment de prelevare de probe atunci când este evaluată prin intermediul unui test adecvat de stabilire a tendinței și
Different types of structural chromosomal aberrations should be listed with their numbers and frequencies for treated and control groups.
c.
Gaps, as well as polyploid cells and cells with endoreduplicated chromosomes are recorded separately.
Oricare dintre aceste rezultate se situează în afara distribuției de date cu privire la martorii negativi testați anterior (de exemplu, limite de control de 95 % pe baza distribuției Poisson).
The frequency of gaps is reported but generally not included in the analysis of the total structural aberration frequency.
În cazul în care se analizează doar doza maximă la un anumit moment de prelevare de probe, o substanță chimică de testat este considerată în mod clar pozitivă în cazul în care există o creștere semnificativă din punct de vedere statistic, comparativ cu martorul negativ testat în paralel, iar rezultatele se situează în afara distribuției de date cu privire la martorii negativi testați anterior (de exemplu, limite de control 95 % pe baza distribuției Poisson).
If there is no evidence for a difference in response between the sexes, the data may be combined for statistical analysis.
Referințele bibliografice prezintă recomandări privind metode statistice adecvate (13).
Data on animal toxicity and clinical signs should also be reported.
La efectuarea unei analize a relației doză-răspuns, se analizează cel puțin trei grupuri tratate de dozare.
The following criteria determine the acceptability of the test:
Testele statistice utilizează animalul ca unitate experimentală.
The concurrent negative control data are considered acceptable for addition to the laboratory historical control database (see paragraphs 11-14);
Rezultatele pozitive ale unui test de aberație cromozomială indică faptul că substanța chimică de testat induce aberații cromozomiale structurale în măduva osoasă a speciei testate.
The concurrent positive controls or scoring controls should induce responses that are compatible with those generated in the historical positive control database and produce a statistically significant increase compared with the negative control (see paragraphs 20-21);
Cu condiția ca toate criteriile de acceptabilitate să fie îndeplinite, o substanță chimică de testat este considerată în mod clar negativă în cazul în care, în toate condițiile experimentale examinate:
The appropriate number of doses and cells has been analysed;
Niciuna dintre grupele tratate nu prezintă o creștere semnificativă din punct de vedere statistic a frecvenței de celule cu aberații cromozomiale structurale (excluzând lacunele) în comparație cu martorul negativ testat în paralel,
The criteria for the selection of highest dose are consistent with those described in paragraphs 25-28.
b.
Evaluation and Interpretation of Results
Nu există nicio creștere raportată la doză indiferent de momentul prelevării, atunci când este evaluată prin intermediul unui test adecvat de stabilire a tendinței,
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered clearly positive if:
c.
At least one of the treatment groups exhibits a statistically significant increase in the frequency of cells with structural chromosomal aberrations (excluding gaps) compared with the concurrent negative control,
Toate rezultatele se situează în interiorul distribuției de date cu privire la martorii negativi testați anterior (de exemplu, limite de control de 95 % pe baza distribuției Poisson) și
This increase is dose-related at least at one sampling time when evaluated with an appropriate trend test, and
d.
Any of these results are outside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits).
Măduva osoasă a fost expusă la substanța (substanțele) chimică(e) de testat.
If only the highest dose is examined at a particular sampling time, a test chemical is considered clearly positive if there is a statistically significant increase compared with the concurrent negative control and the results are outside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits).
Referințele bibliografice prezintă recomandări privind cele mai adecvate metode statistice (13).
Recommendations for appropriate statistical methods can be found in the literature (13).
Dovezi ale expunerii măduvei osoase la o substanță chimică de testat pot include o diminuare a indicelui mitotic sau măsurarea concentrațiilor plasmatice sau sangvine din substanța (substanțele) chimică(e) de testat.
When conducting a dose-response analysis, at least three treated dose groups should be analysed.
În cazul administrării intravenoase, nu sunt necesare dovezi de expunere.
Statistical tests should use the animal as the experimental unit.
În mod alternativ, datele ADME, obținute în cadrul unui studiu independent utilizând aceeași cale și aceeași specie, pot fi utilizate pentru a demonstra expunerea măduvei osoase.
Positive results in the chromosomal aberration test indicate that a test chemical induces structural chromosomal aberrations in the bone marrow of the species tested.
Rezultatele negative indică faptul că, în condițiile de testare, substanța chimică de testat nu provoacă aberații cromozomiale structurale în măduva osoasă a speciei testate.
Providing that all acceptability criteria are fulfilled, a test chemical is considered clearly negative if in all experimental conditions examined:
În cazul unui răspuns clar pozitiv sau clar negativ, nu există nicio cerință referitoare la verificare.
None of the treatment groups exhibits a statistically significant increase in the frequency of cells with structural chromosomal aberrations (excluding gaps) compared with the concurrent negative control,
În cazul în care răspunsul nu este în mod clar negativ sau pozitiv și pentru a acorda asistență în stabilirea relevanței biologice a rezultatului (de exemplu, o creștere slabă sau de limită), datele se evaluează de către experți și/sau prin investigații suplimentare realizate pe experimentele existente.
There is no dose-related increase at any sampling time when evaluated by an appropriate trend test,
În unele cazuri, analizarea mai multor celule sau repetarea experimentului utilizând condițiile experimentale modificate ar putea fi utile.
All results are inside the distribution of the historical negative control data (e.g. Poisson-based 95 % control limits), and
În cazuri rare, inclusiv după efectuarea de investigații suplimentare, datele vor exclude posibilitatea unui rezultat pozitiv sau negativ al substanței chimice de testat și, prin urmare, studiul va fi concluzionat ca fiind echivoc.
Bone marrow exposure to the test chemical(s) occurred.
Frecvența celulelor poliploide și enderoduplicate în metafază în cadrul numărului total de celule în metafază se înregistrează separat.
Recommendations for the most appropriate statistical methods can be found in the literature (13).
O creștere a numărului de celule poliploide/enderoduplicate poate să indice faptul că substanța chimică de testat este capabilă să inhibe procesele mitotice sau avansarea ciclului celular (a se vedea punctul 3).
Evidence of exposure of the bone marrow to a test chemical may include a depression of the mitotic index or measurement of the plasma or blood levels of the test chemical(s).
Raport de testare
In the case of intravenous administration, evidence of exposure is not needed.
Rezumat
Alternatively, ADME data, obtained in an independent study using the same route and same species can be used to demonstrate bone marrow exposure.
sursa, numărul lotului, data limită de utilizare, dacă sunt disponibile;
Negative results indicate that, under the test conditions, the test chemical does not induce structural chromosomal aberrations in the bone marrow of the species tested.
stabilitatea substanței chimice de testat, dacă se cunoaște.
There is no requirement for verification of a clear positive or clear negative response.
Prepararea substanței chimice de testat:
In cases where the response is not clearly negative or positive and in order to assist in establishing the biological relevance of a result (e.g. a weak or borderline increase), the data should be evaluated by expert judgement and/or further investigations of the existing experiments completed.
justificarea alegerii vehiculului;
In some cases, analysing more cells or performing a repeat experiment using modified experimental conditions could be useful.
solubilitatea și stabilitatea substanței chimice de testat în solvent/vehicul, dacă se cunoaște;
In rare cases, even after further investigations, the data will preclude making a conclusion that the test chemical produces either positive or negative results, and the study will therefore be concluded as equivocal.
prepararea formulărilor hranei, a apei potabile sau a inhalărilor;
An increase in the number of polyploid/endoreduplicated cells may indicate that the test chemical has the potential to inhibit mitotic processes or cell cycle progression (see paragraph 3).
specia/șușă utilizată și justificarea utilizării;
Test Report
numărul, vârsta și sexul animalelor;
Summary
sursa, condițiile de adăpost, regimul alimentar etc.;
source, lot number, limit date for use if available;
metodă de identificare unică a animalelor;
stability of the test chemical, if known.
martori pozitivi și negativi (vehicul/solvent);
Test chemical preparation:
datele din studiul de stabilire a dozelor, dacă s-a realizat;
justification for choice of vehicle;
justificarea selecției nivelului de doză administrată;
solubility and stability of the test chemical in solvent/vehicle, if known;
detalii privind prepararea substanței chimice de testat;
preparation of dietary, drinking water or inhalation formulations;
detalii privind modalitatea de administrare a substanței chimice de testat;
analytical determinations on formulations (e.g. stability, homogeneity, nominal concentrations), when conducted.
justificarea căii și a duratei de administrare;
species/strain used and justification for use;
metodele de verificare pentru a constata dacă substanța (substanțele) chimică(e) de testat a (au) ajuns în circulația generală sau în măduva osoasă;
number, age and sex of animals;
doza efectivă (mg/kg greutate corporală/zi) calculată din concentrația substanței chimice de testat (ppm) în hrană/ apă potabilă și consum, dacă este cazul;
source, housing conditions, diet, etc.;
detalii cu privire la calitatea hranei și a apei;
method for uniquely identifying the animals;
metoda de eutanasiere;
for short-term studies: individual weight of the animals at the start and end of the test; for studies longer than one week: individual body weights during the study and food consumption.
metoda de analgezie (atunci când se utilizează);
Body weight range, mean and standard deviation for each group should be included.
descrierea amănunțită a schemelor de tratare și de prelevare a probelor și justificările alegerilor;
positive and negative (vehicle/solvent) controls;
metodele de preparare a lamelor;
data from range-finding study, if conducted;
metodele de măsurare a toxicității;
rationale for dose level selection;
identitatea substanței chimice de inhibare a metafazei, concentrația acesteia, doza și timpul de administrare înainte de prelevare;
details of test chemical preparation;
proceduri pentru izolarea și conservarea probelor;
details of the administration of the test chemical;
numărul de celule în metafază analizate per animal și numărul de celule analizate pentru determinarea indicelui mitotic;
rationale for route and duration of administration;
criterii de acceptabilitate a studiului;
methods for verifying that the test chemical(s) reached the general circulation or bone marrow;
criteriile utilizate pentru caracterizarea studiilor ca fiind pozitive, negative sau neconcludente.
actual dose (mg/kg body weight/day) calculated from diet/drinking water test chemical concentration (ppm) and consumption, if applicable;
starea animalelor înainte și pe toată durata testului, inclusiv semne de toxicitate;
details of food and water quality;
indicele mitotic, prezentat separat pentru fiecare animal;
method of euthanasia;
tipul și numărul aberațiilor și celulelor aberante, prezentat separat pentru fiecare animal;
method of analgesia (where used);
numărul total de aberații pentru fiecare grup împreună cu valoarea medie și deviațiile standard;
detailed description of treatment and sampling schedules and justifications for the choices;
numărul de celule cu aberații pentru fiecare grup împreună cu valoarea medie și deviațiile standard;
methods of slide preparation;
variațiile ploidiei, dacă există, inclusiv frecvența celulelor poliploide și/sau enderoduplicate;
methods for measurement of toxicity;
relația doză-răspuns, dacă este posibil;
identity of metaphase arresting chemical, its concentration, dose and time of administration before sampling;
analizele statistice și metodele aplicate;
procedures for isolating and preserving samples;
date care să demonstreze că măduva osoasă a fost expusă;
number of metaphase cells analysed per animal and the number of cells analysed for mitotic index determination;
date cu privire la martorii negativi și pozitivi testați anterior în paralel, cu intervale, valori medii și deviații standard;
criteria for acceptability of the study;
date cu privire la martorii negativi și pozitivi testați anterior, cu intervale, valori medii și deviații standard și limite de control de 95 % pentru distribuție, precum și perioada de timp acoperită și numărul de observații;
criteria for considering studies as positive, negative or inconclusive.
criteriile îndeplinite pentru un răspuns pozitiv sau negativ.
animal condition prior to and throughout the test period, including signs of toxicity;
Concluzie.
type and number of aberrations and of aberrant cells, given separately for each animal;
, „Cytogenetic Tests in Mammals”, in Mutagenicity Testing: A Practical Approach, Venittand, S., J.M.
total number of aberrations per group with means and standard deviations;
Parry (eds.), IRL Press, Washington, DC, p.
number of cells with aberrations per group with means and standard deviations;
275-306.
dose-response relationship, where possible;
(ed.), Cambridge University Press, Cambridge, p.
statistical analyses and method applied;
115-141.
data supporting that exposure of the bone marrow occurred;
OECD (2000), „Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation”, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No19, OECD Publishing, Paris.
concurrent negative control and positive control data with ranges, means and standard deviations;
, „Statistical Analysis of in vivo Cytogenetic Assays”, în Statistical Evaluation of Mutagenicity Test Data.
criteria met for a positive or negative response.
184-232.
Conclusion.
Orice deviere de la numărul diploid (sau haploid) normal de cromozomi, cu unul sau mai mulți cromozomi, dar nu prin multiplicarea unui (unor) set (seturi) întreg(i) de cromozomi (a se vedea poliploidie).
References.
Centromer
, “Cytogenetic Tests in Mammals”, in Mutagenicity Testing: A Practical Approach, Venittand, S., J.M.
Regiune (regiuni) dintr-un cromozom care, în timpul diviziunii celulare, este (sunt) legată(e) de fibrele fusului, ceea ce permite deplasarea ordonată a cromozomilor fiice către polii celulelor fiice.
Parry (eds.), IRL Press, Washington, DC, pp. 275-306.
Aberație de tip cromozomial
, “In Vivo Cytogenetics Assays”, in Basic Mutagenicity Tests, UKEMS Recommended Procedures.
Endoreduplicare
Part I revised, Kirkland, D.J.
Proces în care, după o perioadă S de replicare a ADN, nucleul nu intră în mitoză, ci începe o altă perioadă S. Rezultă cromozomi cu 4,8,16,... cromatide.
(ed.), Cambridge University Press, Cambridge, pp. 115-141.
Lacună
OECD (2000), “Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation”, OECD Environment, Health and Safety Publications (EHS), Series on Testing and Assessment, No19, OECD Publishing, Paris.
Leziune acromatică mai mică decât lățimea unei cromatide și cu o eroare minimă de aliniere a cromatidelor.
, “Statistical Analysis of in vivo Cytogenetic Assays”, in Statistical Evaluation of Mutagenicity Test Data.
Indice mitotic (MI)
UKEMS SubCommittee on Guidelines for Mutagenicity Testing, Report, Part III, Kirkland, D.J.
Raportul dintre numărul de celule în mitoză și numărul total de celule într-o populație, care este o măsură a statusului de proliferare a respectivei populații celulare.
(ed.), Cambridge University Press, Cambridge, pp. 184-232.
Modificare a numărului de cromozomi față de numărul normal caracteristic pentru animalele utilizate (aneuploidie).
Any deviation from the normal diploid (or haploid) number of chromosomes by one or more chromosomes, but not by multiples of entire set(s) of chromosomes (cf. polyploidy).
O aberație cromozomială numerică care implică o modificare a numărului întregului set de cromozomi, spre deosebire de o modificare numerică a unei părți a setului de de cromozomi (a se vedea aneuploidia).
Centromere
Aberație cromozomială structurală