natgillin/translations-raw huggingface dataset:
96 hrs
După această măsură preliminară, greutatea în stare proaspătă se va determina prin cântărire.
Coagulated embryos
Biomasa de la începutul testului (greutate în stare proaspătă) se determină pe baza unui eșantion din organismele de testare luate din același lot folosit pentru inocularea vaselor de testare.
Lack of somite formation
După efectuarea pregătirilor pentru determinarea greutății în stare proaspătă, organismele de testare se usucă la 60 °C până la o greutate constantă.
Non-detachment of the tail
Această masă reprezintă greutatea uscată.
Lack of heartbeat
Biomasa de la începutul testului (greutatea uscată) este determinată pe baza unui eșantion din organismele de testare din același lot folosit pentru inocularea vaselor de testare.
Coagulation of the embryo: Coagulated embryos are milky white and appear dark under the microscope (see Appendix 5, Fig.
Vor fi numărate toate vârtejurile de-a lungul lăstarului principal.
1).
Frecvența măsurătorilor și determinărilor analitice
The number of coagulated embryos is determined after 24, 48, 72 and 96 hrs.
Dacă se folosește un concept de test static, pH-ul fiecărui tratament se măsoară la începutul și la sfârșitul testului.
Lack of somite formation: At 26 ± 1 °C, about 20 somites have formed after 24 hrs (see Appendix 5, Figure 2) in a normally developing zebrafish embryo.
Dacă se folosește un concept de test semistatic, pH-ul se măsoară în fiecare lot de soluție de testare „proaspătă” înainte de fiecare reînnoire, precum și în soluțiile „uzate” corespunzătoare.
A normally developed embryo shows spontaneous movements (side-to-side contractions).
Intensitatea luminii se măsoară în încăperea, incubatorul sau camera de creștere în puncte aflate la aceeași distanță de sursa de lumină ca și organismele de testare.
If not, the embryos are considered dead.
În testele semistatice, în care nu se estimează menținerea concentrației substanței (substanțelor) chimice de testare în limita a ± 20 % din cea nominală, este necesar să se analizeze toate soluțiile de testare proaspăt preparate, precum și aceleași soluții la fiecare reînnoire.
Non-detachment of the tail: In a normally developing zebrafish embryo, detachment of the tail (seeAppendix 5, Figure 3) from the yolk is observed following posterior elongation of the embryonic body.
Cu toate acestea, pentru testele în care concentrațiile inițiale măsurate ale substanței (substanțelor) chimice de testare nu se situează în limita a ±20 % din cea nominală, dar unde se pot aduce dovezi suficiente care să indice repetabilitatea și stabilitatea concentrațiilor inițiale (și anume, în intervalul de 80-120 % din concentrațiile inițiale), determinările chimice se vor efectua doar la concentrațiile de testare cele mai mari și cele mai scăzute.
Absence of tail detachment is recorded after 24, 48, 72 and 96 hrs.
În toate cazurile, determinarea concentrațiilor substanței chimice de testare trebuie efectuată doar în unul dintre vasele conținând probe duplicat la fiecare concentrație de testare (sau în conținutul vaselor grupate în funcție de proba duplicat).
Lack of heartbeat: In a normally developing zebrafish embryo at 26 ± 1 °C, the heartbeat is visible after 48 hrs (see Appendix 5, Figure 4).
Dacă se poate dovedi menținerea satisfăcătoare, pe toată durata testului, a concentrației substanței chimice de testare în limita a ± 20 % din cea nominală sau măsurată inițial, atunci analiza rezultatelor poate avea loc pe baza valorilor nominale sau măsurate inițial.
Particular care should be taken when recording this endpoint, since irregular (erratic) heartbeat should not be recorded as lethal.
Dacă abaterea de la concentrația nominală sau măsurată inițial nu se află în limita a ±20 %, este necesar ca analiza rezultatelor să se bazeze pe media geometrică a concentrației în timpul expunerii sau pe modelele care descriu declinul concentrației substanței chimice de testare.
Moreover, visible heartbeat without circulation in aorta abdominalis is considered non-lethal.
(5)
To record this endpoint, embryos showing no heartbeat should be observed under a minimum magnification of 80x for at least one minute.
În anumite circumstanțe, de exemplu atunci când un test preliminar arată că substanța de testare nu are efecte toxice la concentrații de până la 100 mg/l sau până la limita sa de solubilitate în mediul de testare sau în cazul unei formulări până la limita sa de dispersie, se poate efectua un test la valori-limită care presupune o comparare a răspunsurilor unui grup de control și ale unui grup supus tratamentului (100 mg/l sau o concentrație egală cu limita solubilității).
Absence of heartbeat is recorded after 48, 72 and 96 hrs.
Se recomandă ca acest test să fie confirmat prin analiza concentrației de expunere.
Hatching rates of all treatment and control groups should be recorded from 48 hrs onwards and reported.
Pentru un test la valori-limită se aplică toate condițiile de testare și criteriile de validitate descrise anterior, cu excepția faptului că numărul de probe duplicat supuse tratamentului trebuie să fie dublu.
Although hatching is not an endpoint used for the calculation of the LC50, hatching ensures exposure of the embryo without a potential barrier function of the chorion, and as such may help data interpretation.
Creșterea la grupul de control și la cel supus tratamentului poate fi analizată folosind un test statistic pentru compararea mediilor, de exemplu un test-t Student.
Detailed descriptions of the normal (35) and examples of abnormal development of zebrafish embryos are illustrated in Appendixes 3 and 5.
Variabile de răspuns
Analytical measurements
Scopul testului este de a determina efectele substanței chimice de testare asupra creșterii vegetative a Myriophyllum spicatum.
At the beginning and at the end of the test, pH, total hardness and conductivity in the control(s) and in the highest test chemical concentration are measured.
Această metodă de testare descrie două variabile de răspuns.
In semi-static renewal systems the pH should be measured prior to and after water renewal.
Viteza medie specifică de creștere
The dissolved oxygen concentration is measured at the end of the test in the negative controls and highest test concentration with viable embryos, where it should be in compliance with the test validity criteria (see paragraph 8f).
Această variabilă de răspuns este calculată pe baza schimbărilor logaritmice ale lungimii lăstarului principal și, în plus, pe baza schimbărilor logaritmice ale altor parametri de măsurare, și anume lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată sau numărul vârtejurilor în timp (exprimată pe zi) în probele de control și în fiecare grup supus tratamentului.
If there is concern that the temperature varies across the 24-well plates, temperature is measured in three randomly selected vessels.
Notă: Pentru parametrul de măsurare exprimat de lungimea totală a ramurilor laterale și lungimea totală a rădăcinii, nu este posibilă calcularea vitezei medii specifice de creștere.
Temperature should be recorded preferably continuously during the test or, as a minimum, daily.
La începutul testului, organismul de testare nu are ramuri laterale și nici rădăcini (bazate pe pregătirea din precultură); începând cu valoarea zero, calcularea vitezei medii specifice de creștere nu este definită.
In a static system, the concentration of the test chemical should be measured, as a minimum, in the highest and lowest test concentrations, but preferably in all treatments, at the beginning and end of the test.
Randamentul
In semi-static (renewal) tests where the concentration of the test chemical is expected to remain within ± 20 % of the nominal values, it is recommended that, as a minimum, the highest and lowest test concentrations be analysed when freshly prepared and immediately prior to renewal.
Această variabilă de răspuns se calculează pe baza schimbărilor survenite în lungimea lăstarului principal și, în plus, pe baza schimbărilor survenite la alți parametri de măsurare – și anume, de preferință lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată sau numărul vârtejurilor, precum și la alți parametri dacă se consideră util – în probele de control și în fiecare grup de tratament până la sfârșitul testului.
For tests where the concentration of the test chemical is not expected to remain within ± 20 % of nominal, all test concentrations must be analysed when freshly prepared and immediately prior to renewal.
Estimările de toxicitate trebuie să se bazeze pe lungimea lăstarului principal și alte trei variabile de măsurare (de exemplu, de preferință lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată, greutatea în stare proaspătă sau numărul de vârtejuri, a se vedea punctul 37 și notele 2, 4 și 5 la prezentul punct), întrucât unele substanțe chimice pot afecta alte variabile de măsurare considerabil mai mult decât lungimea lăstarului principal.
In case of insufficient volume for analysis, merging of test solutions, or use of surrogate chambers being of the same material and having the same volume to surface area ratios as 24-well plates, may be useful.
Acest efect nu va putea fi detectat exclusiv în urma calculării lungimii lăstarului principal.
It is strongly recommended that results be based on measured concentrations.
Viteza medie specifică de creștere pentru o anumită perioadă se calculează ca fiind creșterea logaritmică a variabilelor de creștere – lungimea lăstarului principal și trei variabile suplimentare de măsurare (lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată și numărul de vârtejuri) – folosind formula de mai jos pentru fiecare probă duplicat a probelor de control și a probelor supuse tratamentului:
When the concentrations do not remain within 80-120 % of the nominal concentration, the effect concentrations should be expressed relative to the geometric mean of the measured concentrations; see Chapter 5 in the OECD Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures for more details (28).
viteza medie specifică de creștere de la i la j
LIMIT TEST
variabila de măsurare în vasul de testare sau de control la momentul i
Using the procedures described in this test method, a limit test may be performed at 100 mg/l of test chemical or at its limit of solubility in the test medium (whichever is the lower) in order to demonstrate that the LC50 is greater than this concentration.
variabila de măsurare în vasul de testare sau de control la momentul j
For calculation of the slopes of the curve, LC50 values and the confidence limits (95 %), appropriate statistical methods should be applied (38) and the OECD Guidance Document on Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data should be consulted (39).
% Ir inhibarea procentuală a vitezei medii specifice de creștere
chemical identification, such as IUPAC or CAS name, CAS number, SMILES or InChI code, structural formula, purity, chemical identity of impurities as appropriate and practically feasible, etc. (including the organic carbon content, if appropriate).
μC valoarea medie aμ în grupul de control
Test organisms:
μT valoarea medie a μ în grupul supus tratamentului
test procedure used (e.g., semi-static renewal);
Efectele asupra randamentului se determină pe baza variabilei de măsurare, și anume lungimea lăstarului principal și a altor trei variabile suplimentare de măsurare (de preferință lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată sau numărul de vârtejuri) prezente în fiecare vas de testare la începutul și la sfârșitul testului.
photoperiod;
În cazul greutății în stare proaspătă sau al greutății uscate, biomasa inițială se determină pe baza unui eșantion din organismele de testare prelevat din același lot folosit pentru inocularea vaselor de testare.
test design (e.g., number of test chambers, types of controls);
Pentru fiecare concentrație de testare și probă de control, se calculează o valoare medie a randamentului în paralel cu estimările varianței.
water quality characteristics in fish maintenance (e.g. pH, hardness, temperature, conductivity, dissolved oxygen);
Inhibarea procentuală medie a randamentului ( % Iy) se poate calcula pentru fiecare grup supus tratamentului, după cum urmează:
dissolved oxygen concentration, pH, total hardness, temperature and conductivity of the test solutions at the start and after 96 hrs;
procentajul de reducere a randamentului b C
method of preparation of stock solutions and test solutions as well as frequency of renewal;
biomasa finală minus biomasa inițială pentru grupul de control b T
justification for use of solvent and justification for choice of solvent, if other than water;
biomasa finală minus biomasa inițială în grupul supus tratamentului
the nominal test concentrations and the result of all analyses to determine the concentration of the test chemical in the test vessels; the recovery efficiency of the method and the limit of quantification (LoQ) should also be reported;
Timp de duplicare
evidence that controls met the overall survival validity criteria;
Pentru a determina timpul de duplicare (Td) al lungimii lăstarului principal și aderarea la acest criteriu de validitate (a se vedea punctul 8), se folosește următoarea formulă cu date obținute din vasele de control:
fertilisation rate of the eggs;
Unde μ este viteza medie specifică de creștere, astfel cum a fost descrisă la punctele 50-52.
hatching rate in treatment and control groups.
Reprezentare grafică a curbelor concentrație-răspuns
maximum concentration causing no mortality within the duration of the test;
Se reprezintă grafic curbele concentrație-răspuns care fac legătura între media procentajului de inhibare a variabilei de răspuns (Ir sau Iy calculată conform descrierii de la punctul 53) și logaritmul concentrației substanței chimice de testare.
minimum concentration causing 100 % mortality within the duration of the test;
Estimarea ECx
cumulative mortality for each concentration at the recommended observation times;
Estimările ECx trebuie să se bazeze atât pe viteza medie specifică de creștere (ErCx), cât și pe randament (EyCx), fiecare dintre acestea trebuind să se bazeze pe lungimea lăstarului principal și posibil pe variabile suplimentare de măsurare (de preferință lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată sau numărul de vârtejuri).
the LC50 values at 96 hrs (and optionally at 48 hrs) for mortality with 95 % confidence limits, if possible;
Aceasta se justifică deoarece există substanțe chimice care au un impact diferit asupra lungimii lăstarului principal și asupra altor variabile de măsurare.
graph of the concentration-mortality curve at the end of the test;
Parametrii de toxicitate doriți sunt, prin urmare, patru valori de ECx pentru fiecare nivel de inhibare x calculat: ErCx (lungimea lăstarului principal); ErCx (de preferință lungimea totală a lăstarilor, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată sau numărul de vârtejuri); EyCx (lungimea lăstarului principal); și EyCx (de preferință lungimea lăstarului principal, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată, numărul de vârtejuri).
mortality in the controls (negative controls, internal plate controls, as well as positive control and any solvent control used);
Trebuie remarcat că valorile ECx calculate folosind cele două variabile de răspuns nu sunt comparabile, iar această diferență este recunoscută atunci când se folosesc rezultatele testului.
data on the outcome of each of the four apical observations;
Valorile ECx bazate pe viteza medie specifică de creștere (ErCx) vor fi în cele mai multe cazuri mai mari decât rezultatele bazate pe randament (EyCx) – în cazul în care se aderă la condițiile de testare ale prezentei metode de testare – datorită bazei matematice a abordărilor respective.
incidence and description of morphological and physiological abnormalities, if any (see examples provided in Appendix 5, Figure 2);
Această diferență nu se va interpreta ca o diferență de sensibilitate între cele două variabile de răspuns, valorile fiind diferite din punct de vedere matematic.
statistical analysis and treatment of data (probit analysis, logistic regression model and geometric mean for LC50);
Obiectivul este de a obține o relație cantitativă concentrație-răspuns prin analiza regresiei.
slope and confidence limits of the regression of the (transformed) concentration-response curve.
Este posibilă folosirea unei regresii liniare ponderate după ce s-a efectuat o transformare de liniarizare a datelor de răspuns, de exemplu în unități probit, logit sau Weibull (7), dar procedurile de regresie neliniară sunt tehnici preferate, care tratează mai bine inexactitățile inevitabile ale datelor și abaterile de la distribuțiile regulate.
Any deviation from the test method and relevant explanations.
Atunci când se apropie de zero sau inhibiție totală, aceste inexactități se pot amplifica prin transformare, interferând cu analiza (7).
Discussion and interpretation of results.
Trebuie remarcat că metodele standard de analiză folosind transformările probit, logit sau Weibull se utilizează în cazul datelor binare (de exemplu, date despre mortalitate sau supraviețuire) și trebuie să fie modificate pentru a putea fi aplicate la datele privind viteza de creștere și randamentul.
OECD (2011) Validation Report (Phase 1) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II.
Procedurile specifice pentru determinarea valorilor ECx pe baza datelor continue se regăsesc în referințele (8) (9) (10).
Series on Testing and Assessment No. 157, OECD, Paris.
Pentru fiecare variabilă de răspuns de analizat, se utilizează relația concentrație-răspuns pentru calcularea estimărilor punctuale ale valorilor ECx.
OECD (2012) Validation Report (Phase 2) for the Zebrafish Embryo Toxicity Test: Part I and Part II (Annexes).
Dacă este posibil, se determină limitele de încredere de 95 % pentru fiecare estimare.
Series on Testing and Assessment No. 179, OECD, Paris.
Concordanța datelor de răspuns cu modelul de regresie se evaluează în mod grafic sau statistic.
Belanger, S. E., Rawlings J. M. and Carr G. J. (2013).
Analiza regresiei se efectuează folosind răspunsuri individuale ale probelor duplicat, nu medii ale grupului supus tratamentului.
Use of Fish Embryo Toxicity Tests for the Prediction of Acute Fish Toxicity to Chemicals.
Estimările și limitele de încredere ale EC50 pot fi obținute, de asemenea, folosind interpolarea liniară cu „bootstrap” (10), dacă modelele/metodele de regresie disponibile sunt inadecvate pentru date.
Environmental Toxicology and Chemistry 32: 1768-1783. .
Pentru estimarea LOEC și, prin urmare, a NOEC, este necesară compararea mediilor probelor supuse tratamentului folosind tehnici de analiză a varianței (ANOVA).
Pharmacol.: 149 (2), 196-209
Media pentru fiecare concentrație se compară ulterior cu media probei de control folosind o metodă de comparare multiplă adecvată sau de testare a tendinței.
Chapter C.4 of this Annex: Ready Biodegradability.
Testul lui Dunnett sau testul lui Williams pot fi utile în acest sens (12) (13) (14) (15) (16).
Chapter C.29 of this Annex: Ready Biodegradability, CO2 in sealed vessels.
Este necesar să se evalueze dacă ipoteza ANOVA de omogenitate a varianței se verifică.
Chapter C.48 of this Annex: Fish Short Term Reproduction Assay.. See Appendix 4a.
O astfel de evaluare se poate efectua grafic sau printr-un test formal (15).
35, 4097–4102.
Teste adecvate sunt cele ale lui Levene sau Bartlett.
Available: [http://www.iso.org].
Îndrumări suplimentare privind determinarea NOEC sunt prezentate în referința (10).
Series on Testing and Assessment No. 23, OECD, Paris.
Progresele științifice recente au condus la recomandarea de a renunța la conceptul de NOEC și de a-l înlocui cu estimări punctuale ale ECx bazate pe regresie.
European Commission (2007) Commission recommendation 2007/526/EC of 18 June 2007 on guidelines for the accommodation and care of animals used for experimental and other scientific purposes (notified under document number C(2007) 2525) [http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2007:197:0001:0089:EN:PDF]
Nu a fost stabilită o valoare adecvată a x pentru acest test cu Myriophyllum.
European Union (2010) Directive 2010/63/EU of the European Parliament and Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (OJ L 276, 20.10.2010, p.
Cu toate acestea, un interval de 10-20 % pare a fi adecvat (în funcție de variabilele de răspuns alese) și, de preferat, se raportează atât EC10, și EC20, cât și limitele lor de încredere.
33).
Raportare
http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2010:276:0033:0079:EN:PDF
Substanțe multi-constituent, UVCB sau amestecuri:
Chapter C.2 of this Annex: Daphnia sp., Acute Immobilistaion Test.
Speciile folosite pentru testare:
Series on Testing and Assessment No. 54.
Denumire științifică și sursa.
OECD, Paris.
Procedura de testare folosită (statică sau semistatică).
Detailed review paper “Fish embryo toxicity assays”.
Data de începere a testului și durata acestuia.
UBA report under contract no.
Mediul de testare.
20385422 German Federal Environment Agency, Berlin.
Descrierea conceptului experimental: vasele de testare și capacele, volumele soluțiilor, lungimea lăstarului principal per vas de testare la începutul testului.
Apical endpoint
Concentrațiile de testare (nominale și măsurate corespunzător) și numărul de duplicate per concentrație.
Causing effect at population level.
Metodele de preparare a soluțiilor stoc și a soluțiilor de testare, inclusiv folosirea oricărui solvent sau agent de dispersie.
Blastula
Temperatura în timpul testului.
A cellular formation around the animal pole that covers a certain part of the yolk.
Sursa de lumină, intensitatea luminii și omogenitatea.
A substance or a mixture
Valorile pH-ului mediilor de testare și de control.
Epiboly
Metoda de analiză a substanței chimice de testare cu date adecvate de evaluare a calității (studii de validare, deviații standard sau limite de încredere ale analizelor).
is a massive proliferation of predominantly epidermal cells in the gastrulation phase of the embryo and their movement from the dorsal to the ventral side, by which entodermal cell layers are internalised in an invagination-like process and the yolk is incorporated into the embryo.
Metode de determinare a lungimii medii a lăstarilor și a altor variabile de măsurare, de exemplu lungimea totală a ramurilor laterale, lungimea totală a lăstarilor, lungimea totală a rădăcinii, greutatea în stare proaspătă, greutatea uscată sau numărul de vârtejuri.
Flow-through test
Starea culturii (sterilă sau nesterilă) din fiecare vas de testare și de control, cu ocazia fiecărei observări.
A test with continued flow of test solutions through the test system during the duration of exposure.
Orice abatere de la această metodă de testare.
Internal Plate Control
Date brute: lungimea lăstarului principal și alte variabile de măsurare în fiecare vas de testare și de control cu ocazia fiecărei observații și cu ocazia analizei.
Internal control consisting of 4 wells filled with dilution water per 24-well plate to identify potential contamination of the plates by the manufacturer or by the researcher during the procedure, and any plate effect possibly influencing the outcome of the test (e.g. temperature gradient).
Media și abaterile standard pentru fiecare variabilă de măsurare.
International Union of Pure and Applied Chemistry
Curbele de creștere pentru fiecare variabilă de măsurare.
Maintenance water
Variabilele de răspuns calculate pentru fiecare probă duplicat supusă tratamentului, cu valori medii și coeficient de variație pentru probele duplicat.
Water in which the husbandry of the adult fish is performed.
Reprezentarea grafică a relației concentrație/efect.
Median Lethal Concentration (LC50)
Dacă s-a folosit ANOVA, dimensiunea efectului care poate fi detectat (de exemplu, diferența cea mai puțin semnificativă);
The concentration of a test chemical that is estimated to be lethal to 50 % of the test organisms within the test duration.
Orice stimulare a creșterii constatată în cazul oricărui tratament;
Semi-static renewal test
Orice indicii vizuale de fitotoxicitate, precum și observările soluțiilor de testare;