natgillin/translations-raw huggingface dataset:
If the parent animal dies during the test i.e. accidentally from mishandling or accident, or inadvertently due to unexplained incident not related to the effect of the test chemical or turns out to be male, then the replicate is excluded from the analysis (see more in paragraph 51).
numărul de decese printre animalele părinți și ziua în care au avut loc (a se vedea exemplul de fișă tehnică din apendicele 4);
The toxic effect of the test chemical on reproductive output is expressed as ECx by fitting the data to an appropriate model by non-linear regression to estimate the concentration that would cause x % reduction in reproductive output, respectively, or alternatively as the NOEC/LOEC value (4).
coeficientul de variație pentru controlul capacității de reproducere (pe baza numărului total de descendenți în viață per animal părinte în viață la sfârșitul testului);
The test concentrations should preferably bracket the lowest of the used effect concentrations (e.g. EC10) which means that this value is calculated by interpolation and not extrapolation.
reprezentarea grafică a numărului total de descendenți în viață produși per animal părinte în fiecare replică, excluzând orice animal părinte care au murit în mod accidental sau inadvertent în timpul testului în funcție de concentrația substanței chimice de testat;
The survival of the parent animals and time to production of first brood should also be reported.
după caz, reprezentarea grafică a numărului total de descendenți în viață produși per animal părinte supraviețuitor la fiecare replică în funcție de concentrația substanței chimice de testat după caz, concentrația la care se observă cele mai mici efecte (CMEO) pentru reproducere, inclusiv o descriere a metodelor statistice utilizate și o identificare a dimensiunii efectului care ar putea să fie detectat (în acest sens se poate efectua o analiză a puterii înainte de începerea experimentului) și concentrația la care nu se observă niciun efect (CFEO) pentru reproducere; informații cu privire la variabila de răspuns utilizată pentru a calcula valoarea CMEO și CFEO (fie pentru numărul total de descendenți în viață per organism matern care nu a decedat în mod accidental sau inadvertent în timpul testului sau ca numărul total de descendenți în viață per organism matern supraviețuitor), după caz, se raportează, de asemenea, CMEO sau CFEO pentru mortalitatea animalelor părinți;
Other chemical-related effects on parameters such as growth (e.g. length), and possibly intrinsic rate of population increase, can also be examined (see paragraph 44).
dacă este cazul, CEx pentru reproducere cu intervalele de încredere (de exemplu, 90 % sau 95 %) și reprezentarea grafică a modelului ajustat utilizat pentru calculul acesteia, panta curbei concentrație-răspuns și erorile standard ale acesteia;
INFORMATION ON THE TEST CHEMICAL
alte efecte biologice observate sau măsurători: se raportează orice alte efecte biologice care au fost observate sau măsurate (de exemplu, creșterea animalelor părinți), inclusiv o justificare corespunzătoare;
Results of an acute toxicity test (see chapter C.2 of this Annex: Daphnia sp. acute immobilisation test) performed with Daphnia magna may be useful in selecting an appropriate range of test concentrations in the reproduction tests.
explicarea oricărei abateri de la metoda de testare.
The water solubility and the vapour pressure of the test chemical should be known and a reliable analytical method for the quantification of the chemical in the test solutions with reported recovery efficiency and limit of determination should be available.
În scopul acestei metode de testare, se utilizează următoarele definiții:
Information on the test chemical which may be useful in establishing the test conditions includes the structural formula, purity of the chemical, stability in light, stability under the conditions of the test, pKa, Pow and results of a test for ready biodegradability (see chapters C.4 (determination of ‘ready’ biodegradability), and C.29 (ready biodegradability — CO2 in sealed vessels) of this Annex).
Mortalitate accidentală
For a test to be valid, the following performance criteria should be met in the control(s):
mortalitate care nu este legată de substanța chimică cauzată de un incident accidental (și anume, cauză cunoscută).
the mortality of the parent animals (female Daphnia) does not exceed 20 % at the end of the test;
o substanță sau un amestec.
the mean number of living offspring produced per parent animal surviving at the end of the test is ≥ 60.
concentrația substanței chimice de testat dizolvată în apă care generează o reducere de x la sută a reproducerii la Daphnia într-un timp de expunere stabilit.
Note: The same validity criterion (20 %) can be used for accidental and inadvertent parental mortality for the controls as well as for each of the test concentrations.
Mortalitate inadvertentă
Test vessels and other apparatus, which will come into contact with the test solutions, should be made entirely of glass or other chemically inert material.
mortalitate care nu este legată de substanța chimică, fără o cauză cunoscută.
The test vessels will normally be glass beakers.
Rata intrisecă de înmulțire
In addition, some or all of the following equipment will be required:
este o măsură a creșterii populației care cuprinde capacitatea de reproducere și mortalitatea specifică vârstei (1) (2) (3).
oxygen meter (with microelectrode or other suitable equipment for measuring dissolved oxygen in low volume samples);
La populațiile în stare staționară, aceasta va fi egală cu zero.
adequate apparatus for temperature control;
La populațiile în creștere, aceasta va fi pozitivă, iar la populațiile în scădere, aceasta va fi negativă.
pH-meter;
În mod clar, aceasta din urmă nu este sustenabilă și în final va conduce la extincție.
equipment for the determination of the hardness of water;
Limita de detecție
equipment for the determination of the total organic carbon concentration (TOC) of water or equipment for the determination of the chemical oxygen demand (COD);
este cea mai mică concentrație care se poate detecta, dar nu se poate măsura.
adequate apparatus for the control of the lighting regime and measurement of light intensity.
Limita de determinare
Test Organism
este cea mai mică concentrație care se poate determina cantitativ.
The species to be used in the test is Daphnia magna Straus [57].Preferably, the clone should have been identified by genotyping.
Concentrația la care se observă cele mai mici efecte (CMEO)
Research (1) has shown that the reproductive performance of Clone A (which originated from IRCHA in France) (5) consistently meets the validity criterion of a mean of ≥ 60 living offspring per parent animal surviving when cultured under the conditions described in this test method.
concentrația cea mai mică testată la care se observă un efect important al substanței chimice din punct de vedere statistic asupra reproducerii și mortalității părinților (la p < 0,05) în comparație cu martorul, într-o perioadă de expunere stabilită.
However, other clones are acceptable provided that the Daphnia culture is shown to meet the validity criteria for the test.
Cu toate acestea, toate concentrațiile de testare mai mari decât LOEC trebuie să aibă un efect nociv egal cu sau mai mare decât cele observate la LOEC.
At the start of the test, the animals should be less than 24 hours old and should not be first brood progeny.
Atunci când cele două condiții menționate nu pot fi satisfăcute, trebuie furnizată o explicație completă a modului de alegere a LOEC (și, prin urmare, NOEC).
They should be derived from a healthy stock (i.e. showing no signs of stress such as high mortality, presence of males and ephippia, delay in the production of the first brood, discoloured animals, etc.).
un animal se înregistrează ca mort atunci când este imobil, și anume atunci când nu poate să înoate sau dacă nu se observă o mișcare a apendicelui sau a post-abdomenului, în 15 secunde de la o ușoară agitare a recipientului de testare.
The stock animals should be maintained in culture conditions (light, temperature, medium, feeding and animals per unit volume) similar to those to be used in the test.
(În cazul în care se utilizează o altă definiție, aceasta se specifică împreună cu sursa bibliografică).
If the Daphnia culture medium to be used in the test is different from that used for routine Daphnia culture, it is good practice to include a pre-test acclimation period of normally about 3 weeks (i.e. one generation) to avoid stressing the parent animals.
Concentrația la care nu se observă niciun efect (CFEO)
Test medium
concentrația de testare imediat sub CMEO care, în comparație cu martorul, nu are un efect important din punct de vedere statistic (p < 0,05) într-o perioadă de expunere stabilită.
It is recommended that a fully defined medium be used in this test.
exemplarele tinere de Daphnia produse de animalele părinți în cursul testului.
This can avoid the use of additives (e.g. seaweed, soil extract), which are difficult to characterise, and therefore improves the opportunities for standardisation between laboratories.
Animale părinți
Elendt M4 (6) and M7 media (see Appendix 2) have been found to be suitable for this purpose.
femelele de Daphnia prezente la începutul testului și a căror capacitate de reproducere constituie obiectul studiului.
However, other media (e.g. (7) (8)) are acceptable provided the performance of the Daphnia culture is shown to meet the validity criteria for the test.
Capacitate de reproducere
If media are used which include undefined additives, these additives should be specified clearly and information should be provided in the test report on composition, particularly with regard to carbon content as this may contribute to the diet provided.
numărul de descendenți în viață produși de animalele părinți în perioada de testare.
It is recommended that the total organic carbon (TOC) and/or chemical oxygen demand (COD) of the stock preparation of the organic additive be determined and an estimate of the resulting contribution to the TOC/COD in the test medium made.
Orice substanță sau amestec testat utilizând această metodă de testare de testare.
It is further recommended that TOC levels in the medium (i.e. before addition of the algae) be below 2 mg/l (9).
REFERINȚE BIBLIOGRAFICE
When testing chemicals containing metals, it is important to recognise that the properties of the test medium (e.g. hardness, chelating capacity) may have a bearing on the toxicity of the test chemical.
PREPARAREA MEDIILOR ELENDT M7 ȘI M4 COMPLET DETERMINATE
For this reason, a fully defined medium is desirable.
Adaptarea la mediile Elendt M7 și M4
However, at present, the only fully defined media which are known to be suitable for long-term culture of Daphnia magna are Elendt M4 and M7.
Unele laboratoare au întâmpinat dificultăți la transferul direct al Daphnia în mediile M4 (1) și M7.
Both media contain the chelating agent EDTA.
Cu toate acestea, au fost obținute anumite succese printr-o adaptare treptată, și anume, prin mutarea din mediul propriu la 30 % Elendt, apoi 60 % Elendt și ulterior la 100 % Elendt.
Work has shown (2) that the ‘apparent toxicity’ of cadmium is generally lower when the reproduction test is performed in M4 and M7 media than in media containing no EDTA.
Poate fi necesar ca perioadele de adaptare să aibă durata de până la o lună.
This combination of ASTM reconstituted hard fresh water and seaweed extract (10) is suitable for long-term culturing of Daphnia magna (2).
Se prepară mai întâi soluții mamă separate (I) ale fiecărui microelement în apă de puritate corespunzătoare, de exemplu deionizată, distilată sau purificată prin osmoză inversă.
The dissolved oxygen concentration should be above 3 mg/l at the beginning and during the test.
Din soluțiile mamă menționate (I), se prepară o soluție mamă unică (II), care conține toate microelementele (soluție combinată), și anume:
The pH should be within the range 6 - 9, and normally it should not vary by more than 1,5 units in any one test.
Soluția (soluțiile) mamă I
Hardness above 140 mg/l (as CaCO3) is recommended.
(o singură substanță)
Tests at this level and above have demonstrated reproductive performance in compliance with the validity criteria (11) (12).
Cantitate adăugată la apă
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by dilution of a stock solution.
Concentrație (în funcție de mediul M4)
Stock solutions should preferably be prepared, without using any solvents or dispersants if possible, by mixing or agitating the test chemical in test medium using mechanical means such as agitating, stirring or ultrasonication, or other appropriate methods.
Pentru prepararea soluției mamă combinate II, se adaugă următoarea cantitate de soluție mamă I în apă
It is preferable to expose test systems to concentrations of the test chemical to be used in the study for as long as is required to demonstrate the maintenance of stable exposure concentrations prior to the introduction of test organisms.
vechi
If the test chemical is difficult to dissolve in water, procedures described in the OECD Guidance for handling difficult substances should be followed (13).
MnCl2ߦ4 H2O
The use of solvents or dispersants should be avoided, but may be necessary in some cases in order to produce a suitably concentrated stock solution for dosing.
SrCl2ߦ6 H2O
A dilution water control with adequate replicates and, if unavoidable, a solvent control with adequate replicates should be run in addition to the test concentrations.
Mo Na2O4ߦ2 H2O
Only solvents or dispersants that have been investigated to have no significant or only minimal effects on the response variable should be used in the test.
CuCl2ߦ2 H2O
Examples of suitable solvents (e.g. acetone, ethanol, methanol, dimethylformamide and triethylene glycol) and dispersants (e.g. Cremophor RH40, methylcellulose 0,01 % and HCO-40) are given in (13).
CoCl2ߦ6 H2O
Where a solvent or dispersant is used, its final concentration should not be greater than 0,1 ml/l (13) and it should be the same concentration in all test vessels, except the dilution water control.
EDTAߦ2 H2O
However, every effort should be made to keep the solvent concentration to a minimum.
FeSO4ߦ7 H2O
If volumes greater than 100 ml are used, the ration given to the Daphnia may need to be increased to ensure adequate food availability and compliance with the validity criteria.
Mediile M4 și M7
For semi-static tests, at least 10 animals individually held at each test concentration and at least 10 animals individually held in the control series.
Cantitatea de soluție mamă adăugată pentru prepararea mediului
For flow-through tests, 40 animals divided into four groups of 10 animals at each test concentration has been shown to be suitable (1).
Soluție mamă II
A smaller number of test organisms may be used and a minimum of 20 animals per concentration divided into two or more replicates with an equal number of animals (e.g. four replicates each with five daphnids) is recommended.
(microelemente combinate)
Note that for tests where animals are held in groups, it will not be possible to exclude any offspring from the statistical analysis if inadvertent/ accidental parental mortality occurs when the reproduction has begun, and hence in these cases the reproductive output should be expressed as total number of living offspring produced per parent present at the beginning of the test.
Soluții mamă cu macroelemente nutritive (o singură substanță)
Treatments should be allocated to the test vessels and all subsequent handling of the test vessels should be done in a random fashion.
CaCl2ߦ2 H2O
Failure to do this may result in bias that could be construed as being a concentration effect.
MgSO4ߦ7 H2O
In particular, if experimental units are handled in treatment or concentration order, then some time-related effect, such as operator fatigue or other error, could lead to greater effects at the higher concentrations.
SiO3ߦ9 H2O
Furthermore, if the test results are likely to be affected by an initial or environmental condition of the test, such as position in the laboratory, then consideration should be given to blocking the test.
Soluție combinată de vitamine
For semi-static tests, feeding should preferably be done daily, but at least three times per week (i.e. corresponding to media changes).
Soluția mamă combinată de vitamine se prepară prin adăugarea celor 3 vitamine la 1 litru de apă conform indicațiilor prezentate în continuare:
The possible dilution of the exposure concentrations by food addition should be taken into account and avoided as much as possible with well concentrated algae suspensions.
Clorhidrat de tiamină
Deviations from this (e.g. for flow-through tests) should be reported.
Cianocobalamină (B12)
During the test, the diet of the parent animals should preferably be living algal cells of one or more of the following: Chlorella sp., Pseudokirchneriella subcapitata (formerly Selenastrum capricornutum) and Desmodesmus subspicatus (formerly Scenedesmus subspicatus).
Biotină
The supplied diet should be based on the amount of organic carbon (C) provided to each parent animal.
Soluția combinată de vitamine se păstrează înghețată în părți mici.
Research (14) has shown that, for Daphnia magna, ration levels of between 0,1 and 0,2 mg C/Daphnia/day are sufficient for achieving the required number of living offspring to meet the test validity criteria.
Vitaminele se adaugă în medii cu puțin timp înainte de utilizare.
The ration can be supplied either at a constant rate throughout the period of the test, or, if desired, a lower rate can be used at the beginning and then increased during the test to take account of growth of the parent animals.
Pentru a evita precipitarea sărurilor în timpul preparării mediilor complete, se adaugă părțile de soluții mamă în aproximativ 500-800 ml apă deionizată și apoi se aduce la un litru.
In this case, the ration should still remain within the recommended range of 0,1 - 0,2 mg C/Daphnia/day at all times.
Prima semnalare a mediului M4 se poate găsi în Elendt, B.P.
If surrogate measures, such as algal cell number or light absorbance, are to be used to feed the required ration level (i.e. for convenience since measurement of carbon content is time consuming), each laboratory should produce its own nomograph relating the surrogate measure to carbon content of the algal culture (see Appendix 3 for advice on nomograph production).
ANALIZA CONȚINUTULUI DE CARBON ORGANIC TOTAL (COT) ȘI REALIZAREA UNEI NOMOGRAME PENTRU CONȚINUTUL COT DIN HRANA PE BAZĂ DE ALGE
Nomographs should be checked at least annually and more frequently if algal culture conditions have changed.
Se acceptă ca măsurarea conținutului de carbon din hrana pe bază de alge să nu se măsoare în mod normal direct, ci din corelările (și anume, nomogramele) cu măsurile înlocuitoare precum numărul celulelor de alge sau absorbanța luminii).
Light absorbance has been found to be a better surrogate for carbon content than cell number (15).
Este necesar ca măsurarea COT să se efectueze mai degrabă prin oxidare la temperatură mare decât prin metodele UV sau cu persulfat.
A concentrated algal suspension should be fed to the Daphnia to minimise the volume of algal culture medium transferred to the test vessels.
(Pentru consultanță, a se vedea: The Instrumental Determination of Total Organic Carbon, Total Oxygen Demand and Related Determinands 1979, HMSO 1980; 49 High Holborn, London WC1V 6HB).
Concentration of the algae can be achieved by centrifugation followed by re-suspension in Daphnia culture medium.
Pentru obținerea nomogramelor, algele se separă din mediul de cultură prin centrifugare urmată de resuspensie în apă distilată.
Light
Se determină parametrul înlocuitor și concentrația COT în fiecare probă de trei ori.
16 hours light at an intensity not exceeding 15-20 μE · m– 2 · s– 1 measured at the water surface of the vessel.
Se analizează probele martor în apă distilată și concentrația COT se scade din concentrația COT din proba de alge.
For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 1000-1500 lux for cool white light corresponds close to the recommended light intensity 15-20 μE · m-2 · s-1.
Nomogramele trebuie să fie liniare în intervalul necesar de concentrații ale carbonului.
The temperature of the test media should be within the range 18-22 °C.
Exemple sunt prezentate în continuare.
However, for any one test, the temperature should not, if possible, vary by more than 2 °C within these limits (e.g. 18-20, 19-21 or 20-22 °C) as daily range.
Acestea nu se utilizează pentru conversiune; este esențial ca laboratoarele să-și elaboreze propriile nomograme.
It may be appropriate to use an additional test vessel for the purposes of temperature monitoring.
Regresie a mg/l greutate uscată pe mg C/1.
Aeration
Datele din suspensiile concentrate de celule cultivate în loturi semicontinue, resuspendate în apă distilată în apă.
The test vessels should not be aerated during the test.
axa x: mg C/1 hrană concentrată din alge
Test design
axa y: mg/1 greutate uscată de hrană concentrată din alge
Range finding test
Coeficient de corecție – 0,980
When necessary, a range-finding test is conducted with, for example five test chemical concentrations and two replicates for each treatment and control.
Regresia numărului de celule pe mg C/1.
The duration of the range-finding test is 21 days or of a sufficient duration to reliably predict effect levels.
Coeficient de corecție – 0,926
At the end of the test, reproduction of the Daphnia is assessed.
Regresia absorbanței pe mg C/1 (1 cm lungime traseului).
The number of parents and the occurrence of offspring should be recorded.
axa y: Absorbanța la 440 mm pentru o diluție de 1/10 a hranei concentrate din alge
Definitive test
Coeficient de corecție – 0,998
Normally there should be at least five test concentrations, bracketing effective concentration (e.g. ECx), and arranged in a geometric series with a separation factor preferably not exceeding 3,2 An appropriate number of replicates for each test concentration should be used (see paragraphs 24-25).
EXEMPLU DE FIȘĂ TEHNICĂ PENTRU ÎNREGISTRAREA INFORMAȚIILOR PRIVIND REÎNNOIREA MEDIULUI, DATELE CONTROLULUI FIZIC/CHIMIC, ADMINISTRAREA HRANEI, REPRODUCEREA DAFNIEI ȘI MORTALITATEA PARENTALĂ
Justification should be provided if fewer than five concentrations are used.
Nr. experiment:
Chemicals should not be tested above their solubility limit in test medium.
Început la data:
Before conducting the experiment it is advisable to consider the statistical power of the tests design and using appropriate statistical methods (4).
Clon:
In setting the range of concentrations, the following should be borne in mind:
Mediu:
When ECx for effects on reproduction is estimated, it is advisable that sufficient concentrations are used to define the ECx with an appropriate level of confidence.
Tipul hranei:
Test concentrations used should preferably bracket the estimated ECx such that ECx is found by interpolation rather than extrapolation.
Substanța chimică de testare:
It is an advantage for the following statistical analysis to have more test concentrations (e.g. 10) and fewer replicates of each concentration (e.g. 5 thus holding the total number of vessels constant) and with 10 controls.
Conc. nominală:
When estimating the LOEC and/or NOEC, the lowest test concentration should be low enough so that the reproductive output at that concentration is not significantly lower than that in the control.
Ziua
If this is not the case, the test should be repeated with a reduced lowest concentration.
Reînnoirea mediului (se bifează)
When estimating the LOEC and/or NOEC, the highest test concentration should be high enough so that the reproductive output at that concentration is significantly lower than that in the control.
nou
If this is not the case, the test should be repeated with an increased highest concentration unless the maximum required test concentration for chronic effects testing (i.e., 10 mg/l) was used as the highest test concentration in the initial test.
Hrana administrată (se bifează)