natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For the elimination phase, a matching number of replicates is prepared with non-spiked sediment and overlying water, so that the treated worms can be transferred from designated treated vessels to non-treated vessels at the end of the uptake phase.
Pentru reținerea coconilor e necesară o sită de 0,5 mm, iar pentru viermii tineri, una de 0,25 mm.
The total number of treated replicates should be sufficient for both uptake and elimination phase.
Sitele pot fi introduse în apă reconstituită după ce sedimentul a fost cernut.
Alternatively, the worms designated for sampling during the elimination phase may be exposed in one large container containing spiked sediment of the same batch as used for uptake kinetics.
Viermii părăsesc sita și pot fi apoi preluați din apă folosind un forceps fin din oțel sau o pipetă cu margini finisate la foc.
It should be demonstrated that the test conditions (e.g. sediment depth, sediment water ratio, loading, temperature, water quality) are comparable to the replicates designated for the uptake phase.
Numai exemplarele intacte și clar identificate de Tubifex tubifex [de exemplu (64)] sunt utilizate pentru a începe un test sau noi culturi.
At the end of the uptake phase, water, sediment and worm samples should be taken from this container for analysis, and a sufficient number of large worms that show no sign of recent fragmentation, should be removed carefully and transferred to the replicates prepared for the elimination phase (e.g. ten organisms per replicate vessel).
Viermii bolnavi sau lezați, precum și coconii infestați cu hife fungice trebuie eliminați.
If no solvent other than water is used, at least 9 replicates of a negative control (at least 3 sampled at start, 3 at end of uptake and 3 at end of elimination) should be provided for biological and background analysis.
O cultură sincronizată poate furniza viermi de o anumită vârstă la intervale adecvate, atunci când se dorește.
If any solubilising agent is used for application of the test substance, a solvent control should be run (at least 3 replicates should be sampled at start, 3 at the end of the uptake phase, and 3 at the end of the elimination phase).
Noi vase de cultură sunt pregătite la intervalele alese (de exemplu, la fiecare două săptămâni), începând cu animale de o anumită vârstă (de exemplu, coconi).
In this case, at least 4 replicates of a negative control (no solvent) should be provided for sampling at the end of the uptake phase.
La condițiile de cultură descrise aici, viermii devin adulți după 8 – 10 săptămâni.
These replicates can be compared biologically with the solvent control in order to gain information on possible influence of the solvent on the test organisms.
Culturile pot fi recoltate, în cazul în care viermii au depus noi coconi, de exemplu, după zece săptămâni.
Details are given in Appendix 3.
Adulții prelevați pot fi utilizați în teste, iar cu coconii se pot iniția noi culturi.
Frequency of water quality measurements
Lumbriculus variegatus (Lumbriculidae, Oligochaeta) este, de asemenea, un locuitor al sedimentelor de apă dulce în întreaga lume și este utilizat pe scară largă în testarea ecotoxicologică.
As a minimum, the following water quality parameters should be measured in the overlying water during uptake and elimination phase:
Informații cu privire la biologia, condițiile de cultură și la sensibilitatea speciei pot fi obținute din (1) (6) (9) (36).
Temperature
Lumbriculus variegatus poate fi, de asemenea, cultivat în sedimentul artificial recomandate pentru T. tubifex în conformitate cu (8), în anumite limite.
in one vessel of each treatment level per sampling date, and in one control vessel once per week and at the start and the end of the uptake and elimination period;
Întrucât, în natură, L. variegatus preferă sedimente mai aspre decât T. tubifex (59), culturile în laborator cu sediment artificial folosit pentru T. tubifex pot înceta după 4 – 6 luni.
temperature in the surrounding medium (ambient air or water bath) or in one representative test vessel may also be recorded e.g. in continuous or hourly intervals;
Experiența practică a demonstrat că L. variegatus poate fi ținut într-un substrat nisipos (de exemplu, nisip de cuarț, pietriș fin) într-un sistem cu flux continuu utilizând peștele ca sursă de hrană de-a lungul mai multor ani fără a reînnoi substratul.
Dissolved oxygen content
Un avantaj major al L. variegatus față de alte specii de oligochete acvatice este reproducerea rapidă, rezultând o biomasă rapid crescătoare în populații cultivate în laborator (1)(6)(9)(10).
in one vessel of each treatment level, and in one control vessel per sampling date;
, ASTM (2000) (1), U.S.
expressed as mg/L and % ASV (air saturation value);
Viermii pot fi cultivați în acvarii de mari dimensiuni (57 – 80 l) la o temperatură de 23 °C cu o perioadă de expunere de 16 ore de lumină și 8 ore de întuneric (100 – 1000 lux) utilizând apă naturală reînnoită zilnic (45 – 50 l per acvariu).
Air supply
Noul substrat din bazin va dura în general aproximativ două luni.
controlled at least once per day (workdays) and adjusted if needed;
Fiecare cultură de viermi începe cu 500 – 1000 de viermi care sunt hrăniți cu o suspensie de 10 ml conținând 6 g de hrană de pornire pentru păstrăvi de 3 ori pe săptămână, în condiții de reînnoire sau cu flux continuu.
in one treated vessel of each treatment level per sampling date, and in one control vessel once per week and at the start and the end of the uptake and elimination period;
În cazul culturilor statice sau semistatice, vitezele de hrănire trebuie reduse pentru a preveni dezvoltarea de bacterii și de ciuperci.
Total water hardness
Hrana și substratul de hârtie trebuie analizat din punctul de vedere al substanțelor care trebuie folosite în testele de bioacumulare.
at least in one treated vessel and one control test vessel at the start and the end of the uptake and elimination period, expressed as mg/l CaCO3;
În aceste condiții, numărul de exemplare din cultură se dublează în general în aproximativ 10 – 14 zile.
Total ammonia content
Lumbriculus variegatus poate fi extras din culturi, de exemplu, prin transferul substratului într-un pahar de laborator separat cu ajutorul unei plase fine sau al organismelor cu ajutorul unei pipete din sticlă cu gura largă (cu diametrul de aproximativ 5 mm) finisată la foc.
at least in one treated vessel and one control test vessel at the start and the end of the uptake and elimination period;
Aceștia pot fi apoi introduși în bazine de cultură nou pregătite sau prelucrați ulterior pentru test conform descrierii din referințele (1) și (6).
Sampling and analysis of worms, sediment, and water
A se evita rănirea sau autotomia viermilor, de exemplu, prin utilizarea pipetelor cu margini finisate la foc sau a unor pensete din oțel inoxidabil pentru manipularea respectivilor viermi.
Sampling Schedule
Atunci când se utilizează L. variegatus în testele de bioacumulare în sediment trebuie acordată atenție modului său de reproducere (fragmentare urmată de regenerare).
Examples of sampling schedules for a 28-day uptake phase and a 10-day elimination phase are given in Appendix 3.
Acest mod de reproducere asexuată are ca rezultat două fragmente, care nu se hrănesc o anumită perioadă până ce segmentul capului sau al cozii se regenerează [de exemplu, (36), (37)].
Sample the water and sediment from the test chambers for determination of test substance concentration before adding the worms, and during both uptake and elimination phases.
Aceasta înseamnă că este posibil ca în cazul L. variegatus absorbția de sediment și de contaminanți să nu se realizeze continuu ca în cazul tubificidelor, care nu se reproduc prin fragmentare.
During the test the concentrations of test substance are determined in the worms, sediment, and water in order to monitor the distribution of the test substance in the compartments of the test system.
O astfel de variație poate apărea atunci când unele exemplare, care sunt fragmentate și care, în consecință, nu se hrănesc într-o anumită perioadă, sunt expuse mai puțin la substanța testată decât alte exemplare care nu se fragmentează pe parcursul testului, de exemplu (38).
Sample the worms, sediment, and water on at least six occasions during the uptake as well as the elimination phase.
Cu 10 – 14 zile înainte de expunere, viermii trebuie să fie fragmentați în mod artificial (sincronizare) (65).
Continue sampling until a plateau (steady state) has been established (see Appendix 1) or for 28 days.
Trebuie utilizați viermi mari, care, de preferință, nu prezintă semne de fragmentare recentă.
If the plateau has not been reached within 28 days, begin the elimination phase.
Aceasta înseamnă că, atunci când are loc regenerarea în cazul viermilor sincronizați pe parcursul testului, se estimează că practic toate animalele sunt expuse în aceeași măsură la sedimentul adiționat.
When beginning the elimination phase, transfer the designated worms to replicate chambers containing untreated sediment and water (see also paragraphs 17 and 18).
Hrănirea viermilor sincronizați trebuie să se realizeze imediat ce viermii încep să sape galerii în substrat sau după 7 zile de la disecție.
Sampling and sample preparation
După regenerare, trebuie utilizați pentru test viermii de dimensiune similară, întregi și intacți care înoată sau se târăsc activ după aplicarea unui stimul mecanic ușor.
Obtain water samples by decanting, siphoning or pipetting a volume sufficient for measuring the quantity of the test substance in the sample.
Când se utilizează Lumbriculus variegatus pentru testare, din cauza modului specific de reproducere a acestei specii, o creștere a numărului de viermi trebuie să apară în timpul testului, dacă condițiile sunt corespunzătoare (6).
The remaining overlying water is carefully decanted or siphoned from the test chamber(s).
Lipsa reproducerii în cadrul unui test de bioacumulare cu L. variegatus trebuie înregistrată și trebuie luată în considerare la interpretarea rezultatelor testelor.
Sediment samples should be taken carefully, causing minimal disturbance of the worms.
Branchiura sowerbyi (BEDDARD), Tubificide, Oligochete (nevalidate în teste interlaboratoare)
Remove all worms from the test replicate at the sampling time, e.g. by suspending the sediment with overlying water and spreading the contents of each replicate on a shallow tray and picking the worms using soft steel forceps.
Branchiura sowerbyi locuiește într-o varietate de tipuri de sedimente din bazine, lacuri, iazuri și râuri, fiind originară din zonele tropicale.
Rinse them quickly with water in a shallow glass or steel tray.
De asemenea, ea poate fi întâlnită și în acumulările de apă caldă din emisfera nordică.
Remove the excess water.
Cu toate acestea, ea este mai abundentă în sedimentele cu mâl argilos, cu un conținut mare de materie organică.
Transfer the worms carefully to a pre-weighed vessel and weigh them.
În plus, viermii trăiesc în stratul de sedimente.
Sacrifice the worms by freezing (e.g. ≤ – 18 °C).
Chiar și partea posterioară a viermilor este de obicei pătrunsă în galerie.
The presence and number of cocoons and/or juveniles should be recorded.
Această specie este ușor de identificat prin filamentele branhiale din partea lor posterioară.
In general, the worms should be weighed and sacrificed immediately after sampling without a gut purging phase to obtain a conservative BAF which includes contaminated gut content, and to avoid losses of body residues during any gut-purging period in water only (8).
Adulții pot ajunge la o lungime de 9 – 11 cm și la o greutate umedă de 40 – 50 mg.
Substances with log Kow above 5 are not expected to be eliminated significantly during any gut-purging period in water only, while substances with log Kow lower than 4 may be lost in notable amounts (47).
Adulții au o rată mare de reproducere, populația dublându-se în mai puțin de 2 săptămâni, în condițiile de temperatură și de hrănire descrise mai jos [Aston et al., 1982, (65)].
During the elimination phase, the worms purge their gut in clean sediment.
B. sowerbyi a fost folosită în studiile de toxicitate și de bioacumulare [Marchese & Brinkhurst 1996, (31) Roghair et al.
This means, measurements immediately before the elimination phase include contaminated gut sediment, while after the initial 4-24 h of the elimination phase, most of the contaminated gut content is assumed to be replaced by clean sediment (11)(47).
1996, respectiv (67)].
The concentration in the worms of this sample may then be considered as the tissue concentration after gut purge.
Un rezumat al condițiilor de cultură pentru Branchiura sowerbyi este oferit mai jos (pus la dispoziție de Mercedes R. Marchese, INALI, Argentina și Carla J. Roghair, RIVM, Țările de Jos).
To account for dilution of the test substance concentration by uncontaminated sediment during the elimination phase, the weight of the gut content may be estimated from worm wet weight/worm ash weight or worm dry weight/worm ash weight ratios.
Nu este necesară o singură tehnică pentru cultivarea organismelor de testare.
If the purpose of a specific study is to measure the bioavailability and true tissue residues in the test organisms, then at least a sub-sample of treated animals (e.g. from three additional replicate vessels), preferably sampled during steady state, should be weighed, purged in clean water for a period of 6 hours (47), and weighed again before analysis.
Organismele pot fi cultivate folosind sediment natural necontaminat (31).
Data on worm weight and body concentration of this sub-sample can then be compared to values obtained from un-purged worms.
De asemenea, pot fi utilizate prosoape de hârtie ca substrat pentru cultură, însă creșterea populației este mai mică decât în sedimentele naturale.
The worms designated for measurement of elimination should not be purged before the transfer to clean sediment to minimise additional stress for the animals.
În sistemele semistatice, stratul de apă în paharul de laborator este aerat ușor, iar apa acoperitoare trebuie reînnoită săptămânal.
Preferably analyse the water, sediment, and worm samples immediately (i.e. within 1-2 d) after removal in order to prevent degradation or other losses and to calculate the approximate uptake and elimination rates as the test proceeds.
Fiecare pahar conține la început 25 de viermi tineri.
Immediate analysis also avoids delay in determining when a plateau has been reached.
După două luni, viermii mari sunt colectați din sediment cu ajutorul unei pensete și sunt introduși într-un nou pahar cu mediu sediment/apă proaspăt preparat.
Failing immediate analysis, the samples should be stored under appropriate conditions.
Paharul vechi conține, de asemenea, coconi și viermi tineri.
Obtain information on the stability and proper storage conditions for the particular test substance before beginning the study, (e.g. duration and temperature of storage, extraction procedures, etc.).
Până la 400 de viermi tineri per pahar pot fi recoltați în acest mod.
If such information is not available and it is judged to be necessary, spiked control tissues can be run concurrently to determine storage stability.
Viermii adulți pot fi folosiți pentru reproducere timp de cel puțin un an.
Quality of analytical method
Culturile trebuie menținute la o temperatură de 21 până la 25 °C.
Since the whole procedure is governed essentially by the accuracy, precision and sensitivity of the analytical method used for the test substance, check experimentally that the precision and reproducibility of the chemical analysis, as well as the recovery of the test substance from water, sediment and worm samples are satisfactory for the particular method.
Variația temperaturii trebuie menținută sub ± 2 °C.
Also, check that the test substance is not detectable in the control chambers in concentrations higher than background.
Perioada necesară pentru dezvoltarea embrionară din ouăle care sunt depuse până când exemplarele tinere părăsesc coconul este de aproximativ trei săptămâni la 25 °C.
If necessary, correct the values of Cw, Cs and Ca for the recoveries and background values of controls.
Producția de ouă obținută per vierme supraviețuitor în cazul B. sowerbyi s-a constatat că este între 6,36 (31) și 11,2 (30) în nămol la 25 °C.
The overall recovery and the recovery of test substance in worms, sediment, water, and, if employed, in traps containing absorbents to retain evaporated test substance, should be recorded and reported.
Oxigenul dizolvat, duritatea apei, temperatura și pH-ul trebuie măsurate săptămânal.
Since the use of radiolabelled substances is recommended, it is possible to analyse for total radioactivity (i.e. parent and degradation products).
Hrana pentru pești (de exemplu, TetraMin®) poate fi adăugată sub formă de suspensie de două sau de trei ori pe săptămână ad libitum.
However, if analytically feasible, quantification of parent substance and degradation products at steady state or at the end of the uptake phase can provide important information.
Viermii pot fi hrăniți și cu salată verde decongelată ad libitum.
If it is intended to perform such measurements, the samples should then be subjected to appropriate extraction procedures so that the parent substance can be quantified separately.
Un avantaj major al acestei specii este biomasa individuală mare (până la 40 – 50 mg greutate umedă per individ).
Where a detected degradation product represents a significant percentage (e.g. > 10 %) of the radioactivity measured in the test organisms at steady state or at the end of the uptake phase, it is recommended to identify such degradation products (5).
Prin urmare, această specie poate fi utilizată pentru testarea bioacumulării substanțelor testate nemarcate radioactiv.
Due to low individual biomass, it is often not possible to determine the concentration of test substance in each individual worm, unless Branchiura sowerbyi (40-50 mg wet weight per worm) is used as test species (11).
Poate fi expusă în sistemele utilizate pentru T. tubifex sau L. variegatus cu un singur individ per replică (11).
Therefore, pooling of the individuals sampled from a given test vessel is acceptable, but it does restrict the statistical procedures which can be applied to the data.
Totuși, numărul de replici trebuie mărit, cu excepția situației în care sunt folosite camere de testare mai mari (11).
If a specific statistical procedure and power are important considerations, then an adequate number of test animals and/or replicate test chambers to accommodate the desired pooling, procedure and power, should be included in the test.
De asemenea, criteriul de validitate pentru comportamentul de săpare de galerii trebuie ajustat pentru această specie.
It is recommended that the BAF is expressed both as a function of total wet weight, total dry weight, and, when required (e.g. for highly lipophilic substances) as a function of the lipid content and the TOC of the sediment.
Part I – IV.
Suitable methods should be used for determination of lipid content (48)(49).
Workshop on «Bioaccumulation: Sediment test using benthic oligochaetes», 26.-27.04.1999, Hochheim/Main, Germany.
The chloroform/methanol extraction technique (50) may be recommended as standard method (48).
R. Nagel and R. Loskill (eds.):
However, to avoid the use of chlorinated solvents, a ring-tested modification of the Bligh & Dyer method (50) as described in (51) might be used.
Bioaccumulation of lipophilic compounds from sediments by oligochaetes.
Since the various methods do not give identical values (48), it is important to detail the method used.
Wat.
When possible, i.e. if sufficient worm tissue is available, the lipid content is measured in the same sample or extract as that produced for analysis for the test substance, since the lipids often have to be removed from the extract before it is analysed by chromatography (5).
Res.
However, it is practical to use acclimatised control animals at least at start or — preferably — at the end of the uptake phase to measure the lipid content, e.g. in three samples.
23, 1443-1450.
The uptake curve of the test substance is obtained by plotting in arithmetic scale the concentration of test substance in/on the worms during the uptake phase against time.
A kinetic model for bioconcentration of lipophilic compounds by oligochaetes.
If the curve has reached a plateau, calculate the steady state BAFss:
Wat.
at steady state or at day 28mean
24, 1225-1231.
Determine the kinetic bioaccumulation factor (BAFK) as the ratio ks/ke.
In Hutzinger, O. (editor), The Handbook of Environmental Chemistry, Vol.
The elimination constant (ke) is usually determined from the elimination curve (i.e. a plot of the concentration of the test substance in the worms during the elimination phase).
2 Part J (Vol. editor: B. Beek):
The uptake rate constant ks is then calculated from the uptake curve kinetics.
Influence of partition coefficient of lipophilic compounds on bioconcentration kinetics with fish.
The preferred method for obtaining BAFK and the rate constants, ks, and ke, is to use non-linear parameter estimation methods on a computer (see Appendix 2).
Wat.
If the elimination is obviously not first-order, then more complex models should be employed (25)(27)(52).
22, 701-707.
The biota-sediment accumulation factor (BSAF) is determined by normalising the BAFK for the worm lipid content and the sediment total organic carbon content.
A. Mudroch, J.M.
The results should be interpreted with caution where measured concentrations of test concentrations occur at levels close to the detection limit of the analytical method used.
Necesitatea de a realiza o fază de separație completă după ajustările echilibrului partiției și înainte de extragerea eșantioanelor pentru determinările analitice impune o limită superioară.
Clearly defined uptake and elimination curves are an indication of good quality bioaccumulation data.
Dacă se acordă atenția necesară, limita superioară poate fi extinsă la valori mai ridicate ale Pow.
Generally the confidence limits for the BAF values from well-designed studies should not exceed 25 % (5).
Directiva 91/271/CEE a Consiliului din 21 mai 1991 privind tratarea apelor urbane reziduale.
The test report must include the following information.
JO L 135, 30.5.1991, p.
physical nature and, physicochemical properties e.g. log Kow, water solubility;
40.
chemical identification data;
Trebuie urmată aceeași procedură cu substanța chimică de referință pentru prepararea flacoanelor FR1-3
source of the test substance, identity and concentration of any solvent used;
Dimensiunea recomandată este cuprinsă între 0,1 litri și 1 litru.
if radiolabelled, the precise position of the labelled atoms, the specific radioactivity, and the percentage of radioactivity associated with impurities.
Se recomandă utilizarea de septuri din silicon impermeabile la gaze.
scientific name, strain, source, any pre-treatment, acclimation, age, size-range, etc..
Se recomandă, de asemenea, testarea impermeabilității la gaze a dopurilor, în special septurile din butil-cauciuc, deoarece numeroase septuri disponibile pe piață nu sunt suficient de etanșe la metan, iar anumite septuri nu rămân etanșe atunci când sunt străpunse cu un ac în condițiile testului.Se recomandă septurile impermeabile la gaze și trebuie utilizate pentru substanțe chimice volatile (anumite septuri disponibile pe piață sunt destul de subțiri, având mai puțin de 0,5 cm și nu rămân etanșe la gaze după străpungerea lor cu un ac de seringă);Sunt recomandate septurile din butil-cauciuc (aproximativ 1 cm), în cazul în care substanțele de testare nu sunt volatile (acestea rămân în mod normal etanșe la gaze după străpungere.)Înainte de începerea testului, se recomandă examinarea cu atenție a capacității septurilor de a rămâne etanșe la gaze după străpungere.
type and characteristics of illumination used and photoperiod(s);
Manometrul trebuie utilizat și calibrat la intervale regulate, conform instrucțiunilor producătorului.