natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This ensures exposure of the test organisms to the test chemical via all possible uptake routes (e.g. contact with, and ingestion of contaminated sediment particles, but also via porewater and overlying water).
Metoda de îmbogățire poate fi adaptată la proprietățile fizico-chimice ale substanței chimice de testare, de exemplu, pentru a se evita pierderile cauzate de volatilizare pe parcursul procesului de îmbogățire sau de echilibrare.
This test method is designed to assess the effects of prolonged exposure of the endobenthic oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller) to sediment-associated chemicals.
Orientări suplimentare privind procedurile de îmbogățire sunt furnizate în Environment Canada (1995) (46).
It is based on existing sediment toxicity and bioaccumulation test protocols, e.g. (3), (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10).
După pregătirea sedimentului îmbogățit, distribuirea acestuia în vasele de testare duplicat și adăugarea de apă de testare, este de preferat să se permită distribuția substanței chimice de testare din sediment în faza apoasă [de exemplu, (3)(7)(9)].
The method is described for static test conditions.
De preferință, aceasta trebuie să se realizeze în condițiile de temperatură și aerare utilizate în test.
The exposure scenario used in this test method is spiking of sediment with the test chemical.
Perioada de echilibrare corespunzătoare depinde de sediment și de substanțele chimice și poate fi de ordinul orelor sau de ordinul zilelor, iar în cazuri rare poate ajunge la câteva săptămâni (4-5 săptămâni) [de exemplu, (27)(47)].
Using spiked sediment is intended to simulate a sediment contaminated with the test chemical.
În acest test nu este necesar să se aștepte un echilibru complet, însă se recomandă o perioadă de echilibrare cuprinsă între 48 de ore și 7 zile.
Chemicals that need to be tested towards sediment-dwelling organisms usually persist in this compartment over long time periods.
Astfel, timpul de degradare a substanței chimice de testare va fi redus la minimum.
Sediment-dwelling organisms may be exposed via several routes.
În funcție de scopul studiului, de exemplu, atunci când sunt reproduse condițiile de mediu, sedimentul îmbogățit poate fi echilibrat sau maturat pentru o perioadă mai mare.
The relative importance of each exposure route, and the time taken for each to contribute to the overall toxic effects, depends on the physical-chemical properties of the chemical concerned and its ultimate fate in the animal.
La finalul acestei perioade de echilibrare, trebuie prelevate probe cel puțin din apa acoperitoare și din masa de sediment, cel puțin la cea mai mare și la cea mai mică concentrație pentru analiza concentrației substanței chimice de testare.
For strongly adsorbing chemicals (e.g. with log Kow > 5) or for chemicals covalently binding to sediment, ingestion of contaminated food may be a significant exposure route.
Aceste determinări analitice ale substanței chimice de testare permit calculul bilanțului masic și exprimarea rezultatelor pe baza concentrațiilor inițiale măsurate.
In order not to underestimate the toxicity of such chemicals, the food necessary for reproduction and growth of the test organisms is added to the sediment before application of the test chemical (11).
În general, prelevarea de probe împiedică sau distruge sistemul sediment-apă.
The test method described is sufficiently detailed so that the test can be carried out whilst allowing for adaptations in the experimental design depending on the conditions in particular laboratories and the varied characteristics of test chemicals.
În consecință, nu este posibil de obicei să se utilizeze aceleași duplicate pentru prelevarea de probe de sediment și viermi.
The test method is aimed to determine effects of a test chemical on the reproduction and the biomass of the test organisms.
Trebuie pregătite vase«analitice» suplimentare de dimensiuni corespunzătoare, tratate în același mod (inclusiv prin prezența organismelor de testare), însă nu trebuie utilizate pentru observații biologice.
The measured biological parameters are the total number of surviving worms and the biomass (dry weight) at the end of the exposure.
Dimensiunile vaselor de testare trebuie selectate pentru a preleva cantitățile de probe impuse de metoda analitică.
These data are analysed either by using a regression model in order to estimate the concentration that would cause an effect of x % (e.g. EC50, EC25, and EC10), or by using statistical hypothesis testing to determine the No Observed Effect Concentration (NOEC) and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC).
Detalii privind prelevarea de probe sunt prezentate la punctul 53.
Chapter C.27 of this Annex, “Sediment-water chironomid toxicity test using spiked sediment” (6), provided many essential and useful details for the performance of the presented sediment toxicity test method.
EFECTUAREA TESTULUI
Hence, this document serves as a basis on which modifications necessary for conducting sediment toxicity tests with Lumbriculus variegatus were worked out.
În cazul în care nu este disponibilă nicio informație privind toxicitatea substanței chimice de testare pentru Lumbriculus variegatus, ar putea fi utilă realizarea unui test preliminar pentru a determina intervalul de concentrații care trebuie testate în cadrul testului final și pentru a optimiza condițiile de testare ale testului final.
Further documents that are referred to are e.g. the ASTM Standard Guide for Determination of the Bioaccumulation of Sediment-Associated Contaminants by Benthic Invertebrates (3), the U.S. EPA Methods for Measuring the Toxicity and Bioaccumulation of Sediment-Associated Contaminants with Freshwater Invertebrates (7), and the ASTM Standard Guide for Collection, Storage, Characterization, and Manipulation of Sediments for Toxicological Testing and for selection of samplers used to collect benthic invertebrates (12).
În acest scop, se utilizează o serie de concentrații ale substanței chimice de testare, distribuite la intervale mari.
In addition, practical experience obtained during ring-testing the test method (13), ring-test report), and details from literature are major sources of information for drawing up this document.
Viermii sunt expuși la fiecare nivel de concentrație a substanței chimice de testare pentru o perioadă (de exemplu, 28 de zile ca în cazul testului final) care permite estimarea concentrațiilor de testare corespunzătoare;
PREREQUISITE AND GUIDANCE INFORMATION
nu sunt necesare duplicate.
Information on the test chemical such as safety precautions, proper storage conditions and analytical methods should be obtained before beginning the study.
Comportamentul viermilor, de exemplu evitarea sedimentului, care poate fi cauzată de substanța chimică de testare și/sau de sediment, trebuie observat și înregistrat pe parcursul unui test preliminar.
Guidance for testing chemicals with physical-chemical properties that make them difficult to perform the test is provided in (14).
Concentrațiile mai mari de 1000 mg/kg de greutate uscată de sediment nu trebuie testate în cadrul testului preliminar.
Before carrying out a test, the following information about the test chemical should be known:
În cadrul testului final, trebuie utilizate și selectate cel puțin cinci concentrații, de exemplu pe baza rezultatului testului preliminar de stabilire a intervalului (punctul 31) și conform descrierii de la punctele 35, 36, 37 și 38.
common name, chemical name (preferably IUPAC name), structural formula, CAS registry number, purity;
Un vas de control (pentru duplicare, a se vedea punctele 36, 37 și 38) care conține toți constituenții, cu excepția substanței chimice de testare, este tratat în paralel cu seria de testare.
solubility in water.
În cazul în care nu se utilizează niciun agent de solubilizare pentru aplicarea substanței chimice de testare, acest lucru nu ar trebui să aibă niciun efect semnificativ asupra organismelor de testare, astfel cum se demonstrează cu ajutorul unui vas de control suplimentar care conține doar solvent.
The following additional information is considered useful before starting the test:
Proiectul testului se referă la selectarea numărului și a intervalelor de concentrații de testare, la numărul de vase pentru fiecare nivel de concentrație și la numărul de viermi adăugați pentru fiecare vas.
octanol-water partition coefficient, Kow;
Modelele pentru estimarea ECx, pentru estimarea NOEC și pentru efectuarea unui test la valori-limită sunt descrise la punctele 35, 36, 37 și 38.
organic carbon-water partitioning coefficient, expressed as Koc;
Concentrațiile efective (de exemplu, EC50 EC25, EC10) și intervalul de concentrații în care efectul substanței de testare prezintă interes trebuie să fie cuprinse în seria concentrațiilor incluse în test.
hydrolysis;
Trebuie evitată extrapolarea la valori mult sub cel mai mic nivel de concentrație care afectează organismele de testare sau la valori mai mari decât cel mai mare nivel de concentrație testată.
phototransformation in water;
Dacă – în cazuri excepționale – se realizează o astfel de extrapolare, trebuie furnizată o explicație completă în raport.
biodegradability;
Dacă trebuie estimată valoarea ECx, trebuie testate cel puțin cinci niveluri de concentrație și minimum trei probe duplicat pentru fiecare nivel de concentrație;
surface tension.
se recomandă utilizarea a șase probe duplicat pentru vasul de control sau – în cazul în care este utilizat – pentru vasul de control cu solvent pentru a îmbunătăți estimarea variabilității între vasele de control.
Information on certain characteristics of the sediment to be used should be acquired before the start of the test (7).
În orice caz, este recomandat să se utilizeze concentrații de testare suficiente, pentru a permite o bună estimare a modelului.
For details see paragraphs 22 to 25.
Factorul dintre concentrații nu trebuie să fie mai mare de doi (cu o posibilă excepție în cazurile în care curba de răspuns a concentrației are o înclinare mică).
Worms of similar physiological state (synchronised as described in Appendix 5) are exposed to a series of toxicant concentrations applied to the sediment phase of a sediment-water system.
Numărul de probe duplicat pentru fiecare tratament poate fi redus în cazul în care se crește numărul de concentrații de testare cu răspunsuri cuprinse în intervalul 5 – 95 %.
Artificial sediment and reconstituted water should be used as media.
La creșterea numărului de probe duplicat sau la reducerea mărimii intervalelor concentrațiilor de testare, intervalele de încredere pentru test au tendința de a se îngusta.
Test vessels without the addition of the test chemical serve as controls.
În cazul în care trebuie estimate valorile LOEC/NOEC, trebuie utilizate cel puțin cinci concentrații de testare cu cel puțin patru probe duplicat (se recomandă șase probe duplicat pentru vasul de control sau – în cazul în care este utilizat – pentru vasul de control cu solvent pentru a îmbunătăți estimarea variabilității între vasele de control), iar factorul dintre concentrații nu trebuie să fie mai mare de doi.
The test chemical is spiked into the sediment in bulk for each concentration level in order to minimise variability between replicates of each concentration level, and the test organisms are subsequently introduced into the test vessels in which the sediment and water concentrations have been equilibrated (see paragraph 29).
Anumite informații privind puterea statistică determinată pe parcursul testării ipotezei în cadrul ring testului metodei de testare sunt furnizate în apendicele 6.
The test animals are exposed to the sediment-water systems for a period of 28 days.
Se poate efectua un test la valori-limită (utilizând o concentrație de testare și vase de control), în cazul în care nu se preconizează niciun efect până la 1000 mg/kg de greutate uscată de sediment (de exemplu, în urma unui test preliminar de stabilire a intervalului) sau în cazul în care testarea la un singur nivel de concentrație va fi adecvată pentru confirmarea unei valori NOEC de interes.
In view of the low nutrient content of the artificial sediment, the sediment should be amended with a food source (see paragraphs 22 to 23, and Appendix 4) to ensure that the worms will grow and reproduce under control conditions.
În acest din urmă caz, trebuie inclus în raportul de testare o argumentație detaliată a selectării concentrației-limită.
In this way it is ensured that the test animals are exposed through the water and sediment as well as by their food.
Scopul testului la valori-limită este de a efectua un test la o concentrație suficient de mare pentru a permite factorilor de decizie să excludă efectele posibil toxice ale substanței chimice, iar limita este stabilită la o concentrație care nu este probabil să apară în nicio situație.
The preferred endpoint of this type of study is the ECx (e.g. EC50, EC25, and EC10; effect concentration, affecting x % of the test organisms) for reproduction and biomass, respectively, compared to the control.
Se recomandă 1000 mg/kg (greutate uscată).
It should however be noted, that considering the high uncertainty of low ECx (e.g. EC10, EC25) with extremely high 95 %-confidence limits (e.g. (15)) and the statistical power calculated during hypothesis testing, the EC50 is regarded the most robust endpoint.
De obicei, sunt necesare cel puțin șase probe duplicat atât pentru tratament, cât și pentru probele de control.
In addition, the No Observed Effect Concentration (NOEC), and the Lowest Observed Effect Concentration (LOEC) may be calculated for biomass, and reproduction, if the test design and the data support these calculations (see paragraphs 34 to 38).
Condiții de expunere
The purpose of the study, ECx or NOEC derivation, will determine the test design.
Testul se efectuează cu cel puțin 10 viermi pentru fiecare probă duplicat utilizată pentru determinarea parametrilor biologici.
REFERENCE TESTING
Acest număr de viermi corespunde cu aproximativ 50 – 100 mg de biomasă umedă.
Performance of the control organisms is expected to demonstrate sufficiently the ability of a laboratory to perform the test, and if historical data are available, the repeatability of the test.
EPA [2000 (7)] recomandă utilizarea unei rate de încărcare care să nu depășească 1:
In addition, reference toxicity tests may be conducted in regular intervals using a reference toxicant to assess the sensitivity of the test organisms.
50 (biomasă uscată: TOC).
96 h reference toxicity tests in water only may satisfactorily demonstrate the sensitivity and condition of the test animals (4)(7).
Pentru sedimentul preparat descris la punctul 22, această rată corespunde cu aproximativ 43 g de sediment (greutate uscată) pentru 10 viermi la un conținut TOC de 2,0 % de sediment uscat.
Information on the toxicity of pentachlorophenol (PCP) in complete tests (28 d exposure to spiked sediment) is included in Appendix 6, and in the report on the ring test of the Test Method (13).
În cazul utilizării unui număr mai mare de 10 viermi per recipient, cantitatea de sediment și de apă acoperitoare trebuie ajustată în consecință.
The acute, water-only toxicity of PCP is described e.g. in (16).
Viermii utilizați în cadrul unui test trebuie să provină toți din aceeași sursă și trebuie să se afle într-o stare fiziologică similară (a se vedea apendicele 5).
This information can be used for comparison of test organism sensitivity in reference tests with PCP as reference toxicant.
Trebuie selectați viermi de dimensiuni similare (a se vedea punctul 39).
Potassium chloride (KCl) or copper sulphate (CuSO4) have been recommended as reference toxicants with L. variegatus (4)(7).
Se recomandă ca un subeșantion din lotul sau stocul de viermi să fie cântărit înainte de test pentru estimarea greutății medii.
To date, establishment of quality criteria based on toxicity data for KCl is difficult due to lack of literature data for L. variegatus.
Viermii care urmează să fie utilizați în cadrul unui test sunt extrași din cultură (pentru detalii a se vedea apendicele 5).
Information on the toxicity of copper towards L. variegatus can be found in (17) to (21).
Animalele (adulte) de mari dimensiuni care nu prezintă semne de fragmentare recentă sunt transferate în recipiente din sticlă (de exemplu, vase Petri) care conțin apă curată.
For a test to be valid, the following requirements should be fulfilled:
Acestea sunt apoi sincronizate conform descrierii din apendicele 5.
A ring-test (13) has shown that for Lumbriculus variegatus, the average number of living worms per replicate in the controls should have increased by a factor of at least 1,8 at the end of exposure compared to the number of worms per replicate at the start of exposure.
După o perioadă de regenerare de 10-14 zile, trebuie utilizați pentru test viermii intacți și întregi de dimensiuni similare, care înoată sau se târăsc activ după aplicarea unui ușor stimul mecanic.
The pH of the overlying water should be between 6 and 9 throughout the test.
În cazul în care condițiile de testare diferă de condițiile de cultură (de exemplu, în ceea ce privește temperatura, lumina și apa acoperitoare), o etapă de aclimatizare, de exemplu, de 24 de ore cu parametri de temperatură, de lumină și de apă acoperitoare identici cu cei ai testului ar trebui să fie suficientă pentru adaptarea viermilor la condițiile de testare.
The oxygen concentration in the overlying water should not be below 30 % of air saturation value (ASV) at test temperature during the test.
Oligochetele adaptate trebuie distribuite aleatoriu în vasele de testare.
Static systems without renewal of the overlying water are recommended.
Întrucât hrana este adăugată la sediment înaintea (sau pe parcursul) aplicării substanței chimice de testare, viermii nu sunt hrăniți suplimentar pe parcursul testului.
If the sediment-to-water ratio (see paragraph 15) is appropriate, gentle aeration will normally suffice to keep the water quality at acceptable levels for the test organisms (e.g. maximise dissolved oxygen levels, minimise build-up of excretory products).
Lumina și temperatura
Semi-static or flow-through systems with intermittent or continuous renewal of overlying water should only be used in exceptional cases, since regular renewal of overlying water is expected to affect chemical equilibrium (e.g. losses of test chemical from the test system).
Perioada de expunere la lumină aplicată culturii și în cadrul testului este de obicei de 16 ore (3), (7).
The exposure should be conducted in glass beakers of e.g. 250 ml measuring 6 cm in diameter.
Intensitatea luminii trebuie menținută la un nivel scăzut (de exemplu, 100-500 lx) pentru a imita condițiile naturale la suprafața sedimentului și trebuie măsurată cel puțin o dată pe parcursul perioadei de expunere.
Other suitable glass vessels may be used, but they should guarantee a suitable depth of overlying water and sediment.
Temperatura trebuie să fie de 20 °C ± 2 °C pe tot parcursul testului.
Each vessel should receive a layer of approximately 1,5 – 3 cm of formulated sediment.
La o anumită dată de măsurare, diferența de temperatură dintre vasele de testare nu trebuie să fie mai mare de ± 1 °C.
The ratio of the depth of the sediment layer to the depth of the overlying water should be 1:4.
Vasele de testare trebuie așezate în incubatorul de testare sau în zona de testare într-un mod aleatoriu, de exemplu, pentru a reduse la minimum eroarea de reproducere determinată de locul vasului.
The vessels should be of suitable capacity in compliance with the loading rate, i.e. the number of test worms added per weight unit of sediment, (see also paragraph 39).
Aerarea
Test vessels and other apparatus that will come into contact with the test chemical should be made entirely of glass or other chemically inert material.
Apa acoperitoare din vasele de testare trebuie să fie supusă unui ușor proces de aerare (de exemplu, 2-4 bule pe secundă) cu ajutorul unei pipete Pasteur așezată la aproximativ 2 cm deasupra suprafeței sedimentului astfel încât să limiteze perturbațiile.
Care should be taken to avoid the use of materials, for all parts of the equipment that can dissolve, absorb test chemicals or leach other chemicals and have an adverse effect on the test animals.
Concentrația de oxigen dizolvat nu trebuie să scadă sub 30 % din valoarea de saturație din aer (VSA).
Polytetrafluoroethylene (PTFE), stainless steel and/or glass should be used for any equipment having contact with the test media.
Aportul de aer trebuie controlat și – dacă este necesar – ajustat cel puțin o dată pe zi în zilele lucrătoare.
For organic chemicals known to adsorb to glass, silanised glass may be required.
Măsurători ale calității apei
In these situations the equipment will have to be discarded after use.
Următorii parametri de calitate a apei trebuie măsurați în apa acoperitoare:
Test species
cel puțin într-un vas de testare cu fiecare nivel de concentrație și într-un vas de testare dintre vasele de control, o dată pe săptămână și la începutul și la încheierea perioadei de expunere;
The test species used in this type of study is the freshwater oligochaete Lumbriculus variegatus (Müller).
dacă este posibil, temperatura din mediul înconjurător (aerul înconjurător sau baia de apă) trebuie, de asemenea, înregistrată, de exemplu la intervale de o oră;
This species is tolerant to a wide range of sediment types, and is widely used for sediment toxicity and bioaccumulation testing [e.g. (3), (5), (7), (9), (13), (15), (16), (22), (23), (24), (25), (26), (27), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35)].
Conținutul de oxigen dizolvat:
The origin of the test animals, the confirmation of species identity (e.g. (36)) as well as the culture conditions should be reported.
exprimat în mg/l și % din VSA (valoarea de saturație din aer);
Identification of species is not required prior to every test if the organisms come from an in-house culture.
Aportul de aer:
Culturing of the test organisms
trebuie controlat cel puțin o dată pe zi în zilele lucrătoare și – dacă este necesar – trebuie ajustat;
In order to have a sufficient number of worms for conducting sediment toxicity tests, it is useful to keep the worms in permanent laboratory culture.
Duritatea totală a apei:
Guidance for laboratory culture methods for Lumbriculus variegatus, and sources of starter cultures are given in Appendix 5.
cel puțin într-o probă duplicat din vasele de control și într-un vas de testare cu cea mai mare concentrație la începutul și la încheierea perioadei de expunere;
For details on culturing this species see references (3), (7), (27).
exprimată în mg/l CaCO3;
To ensure that the tests are performed with animals of the same species, the establishment of single species cultures is strongly recommended.
Conținutul total de amoniac:
Ensure that the cultures and especially the worms used in the tests are free from observable diseases and abnormalities.
cel puțin într-o probă duplicat din vasele de control și într-un vas de testare cu fiecare nivel de concentrație la începutul și la încheierea perioadei de expunere și, ulterior, de 3 ori pe săptămână;
Reconstituted water according to Chapter C.1 of this Annex (37) is recommended for use as overlying water in the tests;
exprimat ca mg/l NH4+ sau NH3 sau total amoniac-N.
it can also be used for the laboratory cultures of the worms (see Appendix 2 for preparation).
În cazul în care parametrii de calitate a apei necesită prelevarea unor probe semnificative de apă din vase, se recomandă pregătirea unor vase separate pentru efectuarea măsurătorilor calității apei astfel încât să nu se modifice raportul volumic apă-sediment.
If required, natural water may be used.
Observații biologice
The chosen water must be of a quality that will allow the growth and reproduction of the test species for the duration of the acclimation and test periods without showing any abnormal appearance or behaviour.
Pe parcursul expunerii, vasele de testare trebuie observate în vederea evaluării vizuale a oricărei diferențe de comportament manifestată de viermi (de exemplu, evitarea sedimentului, granule de fecale vizibile pe suprafața sedimentului) comparativ cu vasele de control.