natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This means that in L. variegatus exposure via ingestion of contaminated sediment does not take place continuously.
Atunci când substanța de testare pare a fi toxică pentru pradă, trebuie luată în considerare o creștere a frecvenței hrănirii și/sau o sursă de hrană alternativă.
Therefore, a synchronisation should be performed to minimise uncontrolled reproduction and regeneration, and subsequent high variation in test results.
Informațiile anterioare cu privire la toxicitatea substanței chimice de testare, provenite, de exemplu, dintr-o serie de studii de stabilire a intervalului, ar trebui să faciliteze selectarea concentrațiilor de testare adecvate.
Such variation can occur, when some individuals, which have fragmented and therefore do not feed for a certain time period, are less exposed to the test chemical than other individuals, which do not fragment during the test (9), (10), (11).
Dacă este necesar, se realizează un test de stabilire a intervalului cu cinci concentrații ale substanței chimice de testare cuprinse între 0,1 și 1000 mg/kg de sol uscat, cu cel puțin o probă duplicat pentru tratamente și pentru vasul de control.
10 to 14 days before the start of exposure, the worms should be artificially fragmented (synchronisation).
Durata testului de stabilire a intervalului este de 14 zile, după care se stabilesc rata mortalității în rândul acarienilor adulți și numărul de exemplare tinere.
Large (adult) worms, which preferably do not show signs of recent morphallaxis should be selected for synchronisation.
Intervalul concentrațiilor în cadrul testului final trebuie să fie ales de preferință astfel încât să includă concentrații care să influențeze numărul de exemplare tinere, însă nu și supraviețuirea generației materne.
These worms can be placed onto a glass slide in a drop of culture water, and dissected in the median body region with a scalpel.
Cu toate acestea, acest lucru nu poate fi posibil în cazul substanțelor chimice care provoacă efecte letale și subletale în concentrații aproximativ similare.
Care should be taken that the posterior ends are of similar size.
Extrapolarea la valori cu mult sub cea mai scăzută concentrație care afectează organismele de testare sau cu mult peste cea mai mare concentrație testată trebuie realizată numai în cazuri excepționale și trebuie furnizată o explicație completă în raport.
The posterior ends should then be left to regenerate new heads in a culture vessel containing the same substrate as used in the culture and reconstituted water until the start of exposure.
Teste doză-răspuns
Regeneration of new heads is indicated when the synchronised worms are burrowing in the substrate (presence of regenerated heads may be confirmed by inspecting a representative subsample under a binocular microscope).
Sunt propuse trei modele de teste, pe baza recomandărilor formulate în cadrul unui alt ring test [Testul de reproducere a enchitreidelor (22)].
The test organisms are thereafter expected to be in a similar physiological state.
Caracterul adecvat general al tuturor acestor modele a fost confirmat de rezultatele validării privind H. aculeifer.
This means, that when reproduction by morphallaxis occurs in synchronised worms during the test, virtually all animals are expected to be equally exposed to the spiked sediment.
Pentru stabilirea valorii ECx (de exemplu, EC10, EC50), trebuie testate douăsprezece concentrații.
Feeding of the synchronised worms should be done once as soon as the worms are starting to burrow in the substrate, or 7 d after dissection.
În cazul în care nu este observat niciun efect la cea mai înaltă concentrație în cadrul testului de stabilire a intervalului (și anume 1000 mg/kg greutate uscată a solului), testul de reproducere final poate fi realizat sub forma unui test la valori-limită utilizând o concentrație de testare de 1000 mg/kg greutate uscată a solului.
The feeding regimen should be comparable to the regular cultures, but it may be advisable to feed the synchronised worms with the same food source as is to be used in the test.
Un test la valori-limită va oferi posibilitatea de a demonstra că NOEC sau EC10 pentru reproducere este mai mare decât concentrația-limită, diminuând în același timp numărul acarienilor utilizați în cadrul testului.
The worms should be held at test temperature, at 20 ± 2 °C.
Trebuie înregistrată orice diferență observată între comportamentul și morfologia acarienilor din vasele de control și cele tratate.
After regenerating, intact complete worms, which are actively swimming or crawling upon a gentle mechanical stimulus, should be used for the test.
În cea de a 14-a zi, acarienii supraviețuitori sunt extrași din sol prin extracție la căldură/lumină sau printr-o altă metodă corespunzătoare (a se vedea apendicele 5).
Injuries or autotomy in the worms should be prevented, e.g. by using pipettes with fire polished edges, or stainless steel dental picks for handling these worms.
Exemplarele tinere (și anume, larve, protonimfe și deutonimfe) și adulții sunt numărați separat.
Sources of starter cultures for Lumbriculus variegatus (addresses in the U.S. adopted from (4))
Toți acarienii adulți care nu sunt găsiți în acest stadiu sunt înregistrați ca morți, presupunându-se că respectivii acarieni au murit și s-au descompus înainte de evaluare.
U.S.A.
Eficiența trebuie să fie mai mare de 90 % în medie combinată pentru toate stadiile de dezvoltare (a se vedea apendicele 5).
Department of Fisheries and Wildlife
Numărul de adulți și de exemplare tinere nu este ajustat în funcție de eficiență.
No. 13 Natural Resources Building
Informațiile privind metodele statistice care pot fi utilizate pentru analiza rezultatelor testelor sunt furnizate la punctele 36-41.
Summary of the ring test results
În plus, trebuie consultat Documentul 54 al OCDE intitulat «Current Approaches in the Statistical Analysis of Ecotoxicity Data: a Guidance to Application» (31).
“Sediment Toxicity Test with Lumbriculus variegatus”
Principalul punct final de testare este rata de reproducere, în acest caz, numărul de exemplare tinere produse per vas de testare duplicat (cu 10 femele adulte incluse).
Results of individual ring test runs:
Analiza statistică necesită calcularea mediei aritmetice (X) și a varianței (s2) pentru rata de reproducere pentru fiecare tratament și pentru fiecare vas de control.
Mean worm numbers in the controls and solvent controls at the end of the test;
X și s2 sunt utilizate pentru procedurile ANOVA precum testul t Student, testul Dunnett sau testul Williams, precum și pentru calcularea intervalelor de încredere la 95 %.
SD = standard deviation;
acest punct final principal este echivalent cu rata de reproducere măsurată ca numărul de exemplare tinere supraviețuitoare produse pe parcursul testului împărțit la numărul de femele părinți incluse la începutul testului.
CV = coefficient of variation
Numărul de femele supraviețuitoare din vasele de control netratate reprezintă un criteriu de validitate important și trebuie documentat.
mean worm number in the controls
Ca și în cazul testului de stabilire a intervalului, toate celelalte semne nocive trebuie înregistrate și în raportul final.
mean worm number in the solvent controls
Valorile ECx, inclusiv limitele de încredere de 95 % inferioare și superioare corespunzătoare parametrului descris la punctul 34 se calculează utilizând metodele statistice adecvate (de exemplu, analiza probit, funcția logistică sau Weibull, metoda simplificată Spearman-Karber sau simpla interpolare).
interlaboratory mean
Pentru calcularea valorii EC50 sau a unei alte valori ECx, mediile per tratament (X) trebuie supuse unei analize de regresie.
Mean total dry weights of worms per replicate in the controls and solvent controls at the end of the test;
Distribuția normală a datelor poate fi testată, de exemplu cu ajutorul testului de calitate a ajustării Kolmogorov-Smirnov, al testului raportului interval/deviație standard (testul R/s) sau al testului Shapiro-Wilk (bilateral, p ≤ 0,05).
CV = coeff. of variation
În cazul în care a fost efectuat un test imită (compararea controlului cu un singur tratament) și au fost îndeplinite condițiile prealabile ale procedurilor de testare parametrice (normalitate, omogenitate), pot fi evaluate răspunsurile metrice prin intermediul testului Student (testul t).
total dry weight of worms per replicate (controls)
Raportul privind testul trebuie să includă cel puțin următoarele informații:
total dry weight of worms per replicate (solvent controls)
identitatea substanței chimice de testare, denumirea, lotul și numărul CAS, puritatea;
Toxicity of PCP:
proprietățile fizico-chimice ale substanței chimice de testare [de exemplu, log Kow, solubilitatea în apă, presiunea de vapori, constanta Henry (H) și, de preferință, informații privind evoluția substanței chimice de testare în sol).
Summary of endpoints in the ring test;
identificarea și furnizorul organismelor de testare, descrierea condițiilor de creștere;
interlaboratory means for EC50, NOEC and LOEC;
intervalul de vârstă al organismelor de testare.
minimum detectable difference from the control values during hypothesis testing;
specificații detaliate în cazul în care se utilizează sol natural (origine, istoric, distribuția dimensiunii particulelor, pH-ul, conținutul de materie organică și, dacă este disponibilă, clasificarea solului)
used as a measure of statistical power.
dimensiunea vaselor de testare și masa uscată de sol de testare pentru fiecare vas;
biological parameter
pH-ul și conținutul de apă din sol la începutul și pe parcursul testului (probă de control și fiecare tratament)
Inter- laboratory mean (mg/kg)
o descriere detaliată a metodei de extracție și eficiența extracției.
Inter- laboratory factor
Rezultatele testului
geometr. mean (mg/kg)
numărul de exemplare tinere determinat în fiecare vas de testare la sfârșitul testului;
total number of worms
numărul de femele adulte și rata mortalității în rândul exemplarelor adulte ( %) din fiecare vas de testare la finalul testului
total dry weight of worms
o descriere a simptomelor evidente sau schimbările clare de comportament;
mortality/survival
rezumatul statisticilor (ECx și/sau NOEC), inclusiv limitele de încredere de 95 % și o descriere a metodei de calcul;
reproduction (increase of number of worms per replicate)
un grafic al relației concentrație/răspuns;
growth (biomass increase per replicate)
abaterile de la procedurile descrise în prezenta metodă de testare și orice eveniment neobișnuit survenit pe parcursul testului.
C.36 PREDATORY MITE (HYPOASPIS (GEOLAELAPS) ACULEIFER) REPRODUCTION TEST IN SOIL
Capitolul C.8 din prezenta anexă – Toxicitatea la râme.
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 226 (2008).
Capitolul C.32 din prezenta anexă – Testul de reproducere a enchitreidelor.
This test method is designed to be used for assessing the effects of chemicals in soil on the reproductive output of the soil mite species Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer Canestrini (Acari: Laelapidae), hence allowing for the estimation of the inhibition of the specific population growth rate (1,2).
Diet-dependent female choice for males with «good genes» in a soil predatory mite.
Reproductive output here means the number of juveniles at the end of the testing period.
Următoarele definiții se aplică acestei metode de testare (în cadrul acestui test, toate concentrațiile pentru care se observă efecte sunt exprimate ca masă a substanței chimice testate raportată la masa uscată a solului de testare):
H. aculeifer represents an additional trophic level to the species for which test methods are already available.
«Substanța chimică» este o substanță sau un amestec.
A reproduction test without discrimination and quantification of the different stages of the reproductive cycle is considered adequate for the purpose of this test method.
LOEC (concentrația cea mai mică la care este observat un efect) reprezintă concentrația cea mai mică a substanței chimice testate care are un efect semnificativ din punct de vedere statistic (p < 0,05) pe parcursul unei perioade de expunere date comparativ cu controlul.
For chemicalsubstances with another exposure scenario than via the soil other approaches might be appropriate (3).
«ECx» (concentrația efectivă pentru un efect de x %) reprezintă concentrația care determină un efect de x % asupra organismelor de testare pe parcursul unei perioade de expunere date comparativ cu o probă de control.
Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer is considered to be a relevant representative of soil fauna and predatory mites in particular.
«Substanța chimică de testare» reprezintă orice substanță sau amestec testat utilizând prezenta metodă de testare.
It is worldwide distributed (5) and can easily be collected and reared in the laboratory.
Următoarea metodă pentru determinarea capacității maxime a solului de retenție a apei este considerată a fi una adecvată.
A summary on the biology of H. aculeifer is provided in Appendix 7.
Aceasta este descrisă în anexa C din ISO DIS 11268-2 [Soil Quality – Effects of pollutants on earthworms (Eisenia fetida).
Background information on the ecology of the mite species and the use in ecotoxicological testing is available (4), (5), (6), (7), (8), (9), (10), (11), (12).
Part 2: Determination of effects on reproduction (23)].
Adult females are exposed to a range of concentrations of the test chemical mixed into the soil.
Se acoperă fundul tubului cu o bucată de hârtie de filtru îmbibată cu apă și apoi se așează pe un suport într-o baie de apă.
The test is started with 10 adult females per replicate vessel.
Soil Quality – Determination of pH (16).
Males are not introduced in the test, because experience has shown that females mate immediately or shortly after hatching from the deutonymph stage, if males are present.
Creșterea acarianului Hypoaspis (Geolaelaps ) aculeifer, a acarienilor utilizați ca hrană și sincronizarea culturilor
In addition, inclusion of males would prolong the test in a way that the demanding discrimination of age stages would become necessary.
Creșterea acarianului Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer:
Thus, mating itself is not part of the test.
Culturile pot fi menținute în vase din plastic sau în borcane din sticlă umplute cu un amestec din ipsos de Paris și de pulbere de cărbune (9:1).
The females are introduced into the test 28-35 days after the start of the egg laying period in the synchronisation (see Appendix 4), as the females can then be considered as already mated and having passed the pre-oviposition stage.
Ipsosul poate fi menținut umed prin adăugarea a câtorva picături de apă distilată sau deionizată, dacă este necesar.
At 20 °C the test ends at day 14 after introducing the females (day 0), which allows the first control offspring to reach the deutonymph stage (see Appendix 4).
Temperaturile de creștere optime sunt cuprinse între 20 ± 2 °C, regimul lumină/întuneric nu este relevant pentru această specie.
For the main measured variable, the number of juveniles per test vessels and additionally the number of surviving females are determined.
Prada poate fi constituită din acarieni Typrophagus putrescentiae sau Caloglyphus sp. (acarienii utilizați ca hrană trebuie manipulați cu atenție întrucât ar putea provoca alergii la om), însă și nematodele, enchitreidele și colembolele sunt adecvate ca pradă.
The reproductive output of the mites exposed to the test chemical is compared to that of the controls in order to determine the ECx (e.g. EC10, EC50) or the no observed effect concentration (NOEC) (see Appendix 1 for definitions), depending on the experimental design (see paragraph 29).
Sursa lor trebuie înregistrată.
An overview of the test schedule is given in Appendix 8.
Dezvoltarea populației poate începe cu o singură femelă, deoarece masculii se dezvoltă în ouă nefecundate.
The water solubility, the log Kow, the soil water partition coefficient and the vapour pressure of the test chemical should preferably be known.
Generațiile se suprapun într-o mare măsură.
Additional information on the fate of the test chemical in soil, such as the rates of biotic and abiotic degradation, is desirable.
O femelă poate trăi cel puțin 100 de zile și poate depune aproximativ 100 de ouă pe parcursul întregii sale durate de viață.
The following criteria should be satisfied in the untreated controls for a test result to be considered valid:
La o temperatură de creștere de 20 °C, sincronizarea se realizează astfel:
Mean adult female mortality should not exceed 20 % at the end of the test;
Se transferă femelele într-un vas de creștere curat și se adaugă suficientă hrană
The mean number of juveniles per replicate (with 10 adult females introduced) should be at least 50 at the end of the test;
Se lasă femelele să depună ouă timp de două-trei zile și apoi se scot din vas
The coefficient of variation calculated for the number of juvenile mites per replicate should not be higher than 30 % at the end of the definitive test.
Se prelevează femelele adulte pentru testare între cea de a 28-a și a 35-a zi după introducerea femelelor adulte în vase de creștere curate.
Dimethoate (CAS 60-51-5) is a suitable reference chemical that has shown to affect population size (4).
Dezvoltarea acarienilor urmează aproximativ același tipar descris mai jos la o temperatură de 20 °C (figura):
Boric acid (CAS 10043-35-3) may be used as an alternative reference chemical.
ou 5 zile, larvă 2 zile, protonimfă 5 zile, deutonimfă 7 zile, perioada anterioară pontei ovulare a femelei 2 zile.
Less experience has been gained with this chemical.
Apoi, acarienii devin adulți.
Two design options are possible:
Figură
The reference chemical can be tested in parallel to the determination of the toxicity of each test chemical at one concentration, which has to be demonstrated beforehand in a dose response study to result in an effect of > 50 % reduction of offspring.
Dezvoltarea acarianului Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer la o temperatură de 20 °C.
In this case, the number of replicates should be the same as that in the controls (see paragraph 29).
(extracție = femele utilizate pentru test)
Alternatively, the reference chemical is tested 1 - 2 times a year in a dose-response test.
Animalele adulte pentru testare sunt extrase din cultura sincronizată și introduse în vasele de testare între cea de a 28-a zi și cea de a 35-a zi după începerea perioadei de pontă a femelelor părinți (și anume, 7-14 zile după trecerea la stadiul de adult).
Depending on the design chosen, the number of concentrations and replicates and the spacing factor differ (see paragraph 29), but a response of 10 - 90 % effect should be achieved (spacing factor of 1,8).
Aceasta garantează faptul că animalele pentru testare au trecut deja de perioada anterioară pontei ovulare și s-au împerecheat cu masculii prezenți, de asemenea, în vasul de cultură.
The EC50 for dimethoate based on the number of juveniles should fall in the range between 3,0 and 7,0 mg a.s./kg soil (dw).
Observațiile efectuate pe culturile de laborator sugerează că, dacă masculii sunt prezenți, femelele se împerechează imediat sau la scurt timp după trecerea în stadiul de adult (Ruf, Vaninnen, obs. pers.).
Based on the results obtained with boric acid so far, the EC50 based on the number of juveniles should fall in the range between 100 and 500 mg/kg dw soil.
Perioada de șapte zile este aleasă pentru a facilita integrarea în rutina de laborator și pentru a atenua variabilitatea de dezvoltare individuală în rândul acarienilor.
Test vessels and equipment
Ponta ovulară trebuie inițiată cu un număr de femele cel puțin egal cu cel care va fi în final necesar pentru test (Dacă, de exemplu, sunt necesare 400 de femele în cadrul testului, cel puțin 400 de femele trebuie lăsate să depună ouă timp de două-trei zile.
Screw lids are preferred and in that case, the vessels could be aerated twice a week.
Pentru a se evita canibalismul, este de preferat să nu se introducă într-un vas mai mult de 20-30 de femele aflate în perioada de pontă ovulară.
Alternatively, covers that permit direct gaseous exchange between the substrate and the atmosphere (e.g. gauze) can be used.
Metode de extracție
Since moisture content must be kept high enough during the test, it is essential to control the weight of each experimental vessel during the test and replenish water if necessary.
În cazul microartropodelor, o extracție la căldură reprezintă o metodă adecvată pentru separarea exemplarelor de sol/substrat (a se vedea figura de mai jos).
This may be especially important if no screw lids are available.
Metoda se bazează pe activitatea organismelor, astfel că doar exemplarele mobile vor avea șansa de a fi înregistrate.
If a non-transparent test vessel is used, the cover should be made of material that allows for access to light (e.g. by means of a perforated transparent cover) whilst preventing the mites from escaping.
Principiul extracției la căldură constă în degradarea progresivă a condițiilor pentru organismele din eșantion, astfel încât acestea vor părăsi substratul și vor cădea într-un lichid de fixare (de exemplu, etanol).
The size and type of the test vessel depends on the extraction method (see Appendix 5 for details).
Punctele esențiale sunt durata extracției și variația condițiilor pentru organisme de la bune la moderate și precare.
If heat extraction is applied directly to the test vessel, then a bottom mesh of appropriate mesh size could be added (sealed until extraction), and soil depth should be sufficient to allow for a temperature and moisture gradient.
Durata extracției pentru testele ecotoxicologice trebuie să fie cât mai scurtă posibil, deoarece orice creștere a populației pe parcursul perioadei de extracție ar vicia rezultatele.
Standard laboratory equipment is required, specifically the following:
Pe de altă parte, condițiile de temperatură și de umiditate din eșantion trebuie să se încadreze întotdeauna într-un interval care să permită deplasarea acarienilor.
preferably glass vessels with screw lids;
Încălzirea unui eșantion de sol conduce la o deshidratare a substratului.
brushes for transferring mites
Dacă deshidratarea este prea rapidă, anumiți acarieni ar putea să se deshidrateze la rândul lor înainte de a reuși să scape.
pH-meter and luxmeter;
etanol la 70 %
temperature-controlled incubator or small room;
Luați flaconul din sticlă care a fost utilizat pentru test.
equipment for extraction (see Appendix 5) (13)
Scoateți capacul și înfășurați gura flaconului cu o bucată de plasă sau de țesătură.
overhead light panel with light control
Țesătura trebuie să aibă o dimensiune a ochiurilor cuprinsă între 1,0 și 1,5 mm.
collection jars for extracted mites.
Fixați țesătura cu o bandă elastică.
For this test, an artificial soil is used.
Răsturnați cu atenție flaconul și așezați-l în aparatul de extracție.
The artificial soil consists of the following components (all values based on dry mass):
Țesătura împiedică substratul să se scurgă în lichidul de fixare, însă permite acarienilor să iasă din eșantion.
5 % sphagnum peat, air-dried and finely ground (a particle size of 2 ± 1 mm is acceptable);
Începeți procesul de încălzire după introducerea tuturor flacoanelor.
approximately 74 % air-dried industrial sand (depending on the amount of CaCO3 needed), predominantly fine sand with more than 50 % of the particles between 50 and 200 microns.
Încheiați extracția după 48 de ore.
The exact amount of sand depends on the amount of CaCO3 (see below), together they should add up to 75 %.
Îndepărtați flacoanele de fixare și numărați acarienii cu ajutorul unui microscop de disecție.
< 1,0 % calcium carbonate (CaCO3, pulverised, analytical grade) to obtain a pH of 6,0 ± 0,5;
Eficiența de extracție a metodei alese trebuie să fi fost demonstrată o dată sau de două ori pe an cu ajutorul unor vase care conțin un număr cunoscut de exemplare tinere și de acarieni adulți crescuți într-un substrat de testare netratat.
the amount of calcium carbonate to be added may depend principally on the quality/nature of the peat (see Note 1).
Eficiența trebuie să fie ≥ 90 % în medie combinată pentru toate stadiile de dezvoltare.
The amount of CaCO3 required will depend on the components of the soil substrate and should be determined by measuring the pH of soil sub-samples immediately before the test (14).
Dispozitivul de extracție de tip Tullgren