natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Determine (optionally) the number of colony-forming heterotrophs in the seawater test medium (and preferably also in the original seawater sample), e.g. by plate count using a marine agar.
Se recomandă utilizarea de flacoane de sticlă pentru ser cu un volum nominal de 125 ml și un volum total de aproximativ 160 ml, sigilate cu septuri pentru ser [15] și inele din aluminiu atunci când se eliberează presiunea în fiecare moment de prelevare;
Preparation of test bottles
c.
Perform all necessary manipulations including ageing and pre-treatment of the seawater at the chosen test temperature between 15 to 20 °C, ensuring cleanliness, but not sterility of all glassware.
Un dispozitiv de măsurare a presiunii [16] adaptat pentru a permite măsurarea și ventilarea gazelor produse, de exemplu, manometru de precizie manual conectat la un ac de seringă adecvat;
Prepare groups of BOD bottles for the determination of the BOD of the test and reference substances in simultaneous experimental series.
o supapă etanșă la gaze cu trei căi facilitează eliberarea presiunii în exces (apendicele 1).
Perform all analyses on duplicate bottles (blanks, reference and test substances), i.e. prepare two bottles for each determination.
Notă – Citirile presiunii sunt utilizate direct pentru a calcula cantitatea de carbon produsă în spațiul neumplut (punctele 42 – 44).
Perform analyses at least on days 0, 5, 15 and 28 (four determinations).
Ca alternativă, citirile presiunii pot fi convertite la volume (la 35 °C, presiune atmosferică) de gaze produse cu ajutorul unui grafic de conversie.
For oxygen analyses, four determinations require a total of 3 × 2 × 4 = 24 bottles (blank, reference and test substance), and thus about 8 litres of test medium (for one concentration of test substance).
Acest grafic este construit cu datele obținute prin injectarea unor volume cunoscute de azot gazos într-o serie de vase de testare (de exemplu, flacoane pentru ser) la at 35 °C +/– 2 °C și înregistrarea citirilor presiunii stabilizate rezultate (a se vedea apendicele 2).
Prepare separate solutions of test and reference substances in large bottles of sufficient volume (paragraph 11) by first adding test and reference substances either directly or by using a concentrated stock solution to the partly filled large bottles.
Modul de calculare este indicat în nota de la punctul 44.
Add further test medium to give the final desired concentrations.
Avertisment – Trebuie avut grijă să se evite leziunile cauzate de ace atunci când se utilizează microseringi.
If stock solutions of test and/or reference substances are used, ensure that the salinity of the seawater medium is not significantly altered.
d.
Select concentrations of test and reference substances by taking into account:
Analizor de carbon, adecvat pentru determinarea directă a carbonului anorganic în intervalul 1 mg/l – 200 mg/l;
the solubility of dissolved oxygen in seawater at the prevailing test temperature and salinity (see the enclosed nomogram — Appendix 4);
e.
the blank BOD of the seawater;
Seringi de precizie mare pentru eșantioanele gazoase sau lichide;
and
f.
the expected biodegradability of the test substance.
Agitatoare magnetici și piese auxiliare (opțional);
At 15 °C and 20 °C and 32 parts per thousand salinity (ocean water), the solubility of dissolved oxygen is about 8,1 and 7,4 mg/l respectively.
g.
The oxygen consumption of the seawater itself (blank respiration) may be 2 mg O2/l or more, if the seawater is not aged.
Cutie cu mănuși (recomandată).
Therefore in order to ensure a significant oxygen concentration remaining after oxidation of the test substance, use a starting concentration of test substance of about 2-3 mg/l (depending on the ThOD) for the substances that are expected to become completely degraded under the conditions of the test (such as reference substances).
Apă distilată sau deionizată (dezoxigenată prin barbotare cu azot gazos conținând sub 5 μl/l oxigen), care conține carbon organic dizolvat (DOC) într-o concentrație mai mică de 2 mg/l.
Test less degradable substances at higher concentrations, up to about 10 mg/l, provided that toxic effects do not occur.
Mediul de diluție se prepară astfel încât să conțină următorii constituenți în cantitățile specificate:
It can be advantageous to run parallel tests with a low (about 2 mg/l) and a high (about 10 mg/l) concentration of test substance.
Fosfat diacid de potasiu anhidru (KH2PO4)
An oxygen blank must be determined in parallel in bottles containing neither test or reference substance.
Fosfat acid disodic dodecahidrat [Na2HPO4 · 12H2O)]
If inhibitory effects are to be determined, prepare the following series of solutions in separate large bottles (paragraph 13):
Clorură de amoniu (NH4Cl)
2 mg per litre of an easily-degradable substance, e.g. any of the reference substances mentioned;
Clorură de calciu dihidrat (CaCl2 · 2H2O)
x mg per litre of test substance (x is usually 2);
0,075 g
2 mg per litre of the easily-degradable substance plus x mg per litre of test substance.
Clorură de magneziu hexahidrat (MgCl2 · 6H2O)
If the option of using specific analyses is used, a physical-chemical experiment may be performed in order to check whether the test substance is removed by abiotic mechanisms, such as hydrolysis or adsorption.
Clorură de fier(II) tetrahidrat (FeCl2 · 4H2O)
A physical-chemical control test may be performed by adding mercury (II) chloride (HgCl2) [11] (50-100 mg/l) to duplicate flasks with test substance in order to stop microbial activity.
Resazurin (indicator oxigen)
A significant decrease in specific substance concentration in the course of the test indicates abiotic removal mechanisms.
0,001 g
Number of BOD bottles in a typical run
Sulfură de sodiu nonahidrat (Na2S · 9H2O)
In a typical run the following bottles are used:
Soluții stoc de microelemente (opțional, punctul 18)
at least 8 containing test substance;
Se adaugă apa dezoxigenată (punctul 15)
at least 8 containing nutrient-fortified seawater only;
până la 1 litru
at least 8 containing reference substance, and when necessary
Se utilizează sulfură de sodiu proaspăt obținută sau se spală și se usucă înainte de utilizare, pentru a se asigura că este suficient de reductoare.
6 bottles containing test and reference substances (toxicity control).
Testul poate fi efectuat fără a se utiliza o cutie cu mănuși (a se vedea punctul 26).
After preparation, immediately siphon each solution, from the lower quarter (not from the bottom) of the appropriate large bottle, to fill the respective group of BOD bottles.
În acest caz, concentrația finală a sulfurii de sodiu în mediu trebuie să fie crescută la 0,2 g de Na2S · 9H2O per litru.
Immediately analyse the zero controls (time zero) for dissolved oxygen (paragraph 33) or preserve them for later chemical analysis by precipitation with MnCl2 (manganese (II) chloride) and NaOH (sodium hydroxide).
Sulfura de sodiu poate fi adăugată și dintr-o soluție stoc anaerobă corespunzătoare prin septul flacoanelor de testare închise, întrucât această procedură va reduce riscul de oxidare.
Incubate the remaining parallel BOD bottles at the test temperature (15-20 °C), keep in the dark, and remove from the incubation area at appropriate time intervals, (e.g. after 5, 15 and 28 days as a minimum) and analyse for dissolved oxygen (paragraph 33).
Sulfura de sodiu poate fi înlocuită cu citrat de titan (III), care se adaugă prin septul flacoanelor de testare închise la o concentrație finală de 0,8 – 1 mmol/l.
Membrane filter (0,2-0,45 μm) or centrifuge, for 15 minutes, samples for specific analyses (optional).
Citratul de titan (III) este un agent reductor foarte eficient și cu toxicitate mică, care este preparat după cum urmează:
Store for up to 48 hours at 2-4 °C, or for longer periods at – 18 °C, if not analysed immediately (if it is known that the test substance will remain unaffected, acidify to pH 2 before storing).
Se dizolvă 2,94 g de citrat trisodic dihidrat în 50 ml de apă dezoxigenată (rezultând o soluție de 200 mmol/l) și se adaugă 5 ml de soluție de clorură de titan (III) de 15 % (G/V).
Dissolved oxygen determination
Se neutralizează la pH de 7 ± 0,2 cu alcalin mineral și se distribuie într-un flacon corespunzător sub un curent de azot.
Determine the concentration of dissolved oxygen using a chemical or electrochemical method which is recognised nationally or internationally.
Concentrația de citrat de titan (III) din această soluție stoc este de 164 mmol/l.
Record analytical results on the attached data sheets (Appendix 5).
Apoi se adaugă volumul adecvat de soluție proaspăt preparată de agent reductor (preparat în apă dezoxigenată) chiar înainte de utilizarea mediului.
Calculate the BOD as the difference of the oxygen depletion between a blank and a solution of test substance under the conditions of the test.
Se ajustează pH-ul mediului, dacă este necesar, cu acid sau alcalin mineral diluat la 7 ± 0,2.
Divide the net oxygen depletion by the concentration (w/v) of the substance in order to express the BOD as mg BOD/mg test substance.
Soluțiile stoc de microelemente (opțional)
The degradation is defined as the ratio of the biochemical oxygen demand to either, preferably, the theoretical oxygen demand (ThOD) or the chemical oxygen demand (COD) and expressed as a percentage (see paragraph 36).
Se recomandă ca mediul de testare să conțină următoarele microelemente pentru a îmbunătăți procesele de degradare anaerobă, în special dacă sunt utilizate concentrații mici (de exemplu 1 g/l) de inocul (11).
Calculate the biodegradation values for each sampling time for both test and reference substances using one or other of the equations:
Clorură de mangan tetrahidrat (MnCl2 · 4H2O)
ThOD theoretical oxygen demand (calculation, Appendix 3)
50 mg
COD chemical oxygen demand, determined experimentally.
Acid boric acid (H3BO3)
Sometimes the two ways of calculation (percentage of the ThOD or percentage of the COD) do not give the same results;
5 mg
it is preferable to use ThOD, since some substances are not fully oxidised in the COD test.
Clorură de zinc (ZnCl2)
Illustrate the course of the degradation test graphically in a diagram (see example in section on “Validity and interpretation of results”.
Clorură de cupru (II) (CuCl2)
If there are sufficient data, calculate the lag phase (tL) and the time (t50) to reach 50 per cent removal from the end of the lag phase from the biodegradation curve.
3 mg
If specific analysis is used (optional), state the percentage of primary degradation as the percentage of specific substance removal within the test period (corrected for analytical blanks).
Molibdat disodic dihidrat (Na2MoO4 · 2H2O)
location and description of the sampling site:
Clorură de cobalt hexahidrat (CoCl2 · 6H2O)
characteristics of the sample (date of sampling, depth, appearance, temperature, salinity, DOC (optional), delay between collection and use in the test);
100 mg
method used for the COD determination (if performed);
Clorură de nichel hexahidrat (NiCl2 · 6H2O)
method used for the oxygen measurements;
10 mg
dispersion procedure for substances which are poorly soluble under the test conditions;
Selenit disodic (Na2SeO3)
method used for determining the number of heterotrophs in the seawater (plate count method or alternative procedure);
Se adaugă substanța testată ca soluție, suspensie sau emulsie stoc sau direct în formă solidă sau lichidă sau ca substanță absorbită pe filtru cu fibre din sticlă pentru a obține o concentrație de carbon organic de maximum 100 mg/l.
method used for determining DOC in seawater (optional);
Dacă se utilizează soluții stoc, se prepară o soluție adecvată cu apă (punctul 15) (dezoxigenată în prealabil prin barbotare cu azot gazos) cu o astfel de concentrație încât volumul adăugat să fie mai mic de 5 % din volumul total al amestecului de reacție.
other optional methods used to characterise the seawater (ATP measurements, etc.).
Se ajustează pH-ul soluției stoc la pH 7 ± 0,2, dacă este necesar.
analytical data reported on a data sheet (as attached, Appendix 5);
Pentru substanțele testate care nu sunt suficient de solubile în apă, a se consulta standardul ISO 10634 (13).
the course of the degradation test represented graphically in a diagram showing the lag phase, (tL), slope and time (starting from the end of the lag phase) to reach 50 per cent of the final oxygen uptake caused by oxidation of the test substance (t50).
Dacă se utilizează solvent, se prepară un control suplimentar, în mediul inoculat fiind adăugat numai solventul.
The lag phase may be estimated graphically as shown in the attached figure, or conveniently taken as the time needed for 10 per cent degradation;
A se evita solvenții organici precum cloroformul și tetraclorura de carbon, cunoscute ca fiind inhibitoare ale producției de metan.
per cent degradation measured after 28 days.
Avertisment – A se manipula cu grijă substanțele testate toxice și cele ale căror proprietăți sunt necunoscute.
The blank respiration should not exceed 30 per cent of the oxygen in the test bottle.
Substanțe de referință
If it is not possible to meet this criterion using freshly collected seawater, the seawater must be aged (stabilized) before use.
Substanțe de referință, precum benzoatul de sodiu, fenolul și polietilenglicol 400, au fost utilizate cu succes pentru a verifica procedura, fiind biodegradate în proporție de peste 60 % în 60 de zile.
The possibility that nitrogen-containing substances may affect the results should be considered.
Se prepară o soluție stoc (în apă dezoxigenată) a substanței de referință alese în același mod ca pentru substanța testată și se ajustează la pH 7 ± 0,2, dacă este necesar.
Results obtained with the reference substances sodium benzoate and aniline should be comparable to the results obtained in the ring-test (3) (paragraph 9).
Controlul pentru inhibiție (condițional)
The test substance can be considered to be inhibitory to bacteria (at the concentration used) if the BOD of the mixture of reference and test substances is less than the sum of the BOD of the separate solutions of the two substances.
Pentru a obține informații privind toxicitatea substanței testate pentru microorganisme anaerobe pentru a găsi cea mai adecvată concentrație de testare, se adaugă substanța testată și substanța de referință într-un vas care conține mediul de testare (a se vedea punctul 16), fiecare la aceleași concentrații ca cele adăugate, respectiv [a se vedea punctele 19 și 20 și, de asemenea, ISO 13641-1 (12)].
Owing to the relatively high test concentrations as compared with most natural systems, and consequently an unfavourable ratio between the concentrations of test substance and other carbon sources, the method is to be regarded as a preliminary test which can be used to indicate whether or not a substance is easily biodegradable.
Nămolul fermentat
Accordingly, a low result does not necessarily mean that the test substance is not biodegradable in marine environments, but indicates that more work will be necessary in order for this to be established.
Se colectează nămol fermentat dintr-un bazin de fermentare al unei stații de tratare a apelor uzate care tratează în special apele uzate menajere.
An example of a theoretical degradation experiment illustrating a feasible way of estimating the values of tL (length of “lag phase”) and t50, time interval (starting at tL), needed to reach 50 % of the final oxygen uptake caused by oxidation of the test substance, is given below:
Nămolul trebuie să fie caracterizat complet, iar informațiile de bază aferente trebuie raportate (a se vedea punctul 54).
Chapter C.4-B of this Annex:
În cazul în care se intenționează utilizarea unui inocul adaptat, poate fi luată în considerare utilizarea de nămol fermentat provenit de la o stație de tratare a apelor uzate industriale.
Determination of “Ready” Biodegradability Part III Modified OECD Screening Test
Pentru colectarea nămolului fermentat se utilizează flacoane cu gât larg fabricate din polietilenă cu densitate mare sau dintr-un material similar, care se pot dilata.
Biodegradation — Activated Sludge, Respiration Inhibition Test.
Se introduce nămol în flacoane până la aproximativ 1 cm distanță de partea lor superioară și se închid ermetic, de preferință cu o supapă de siguranță.
Chapter C.4-E of this Annex:
După transportul la laborator, nămolul colectat poate fi utilizat direct sau poate fi introdus într-un bazin de fermentare de laborator.
Determination of “Ready” Biodegradability, Part VI.
Biogazele în exces se eliberează prin deschiderea cu atenție a flacoanelor cu nămol.
Closed Bottle Test.
În mod alternativ, nămolul anaerob cultivat în laborator poate fi utilizat ca sursă de inocul, însă spectrul de activitate al acestuia poate să fi fost redus.
Determination of organic carbon in seawater
Avertisment – Nămolul fermentat produce gaze inflamabile care prezintă risc de incendiu și de explozie:
For the determination of organic carbon of a water sample, the organic compounds in the sample are oxidized to carbon dioxide using generally one of the following three techniques:
Pentru a reduce producția de gaze de fond și pentru a reduce influența martorilor de control, poate fi luată în considerare fermentarea prealabilă a nămolului.
wet-oxidation by persulphate/UV-irradiation;
În cazul în care fermentarea prealabilă este necesară, nămolul trebuie să poată fermenta fără adăugarea oricăror nutrienți sau substraturi la 35 °C ± 2 °C timp de maximum 7 de zile.
wet-oxidation by persulfate/elevated temperature (116-130 °C);
S-a constatat că fermentarea prealabilă timp de aproximativ 5 zile oferă, în mod uzual, o scădere optimă a producției de gaze a martorului fără creșteri inacceptabile ale perioadelor de latență sau de incubare în cursul fazei de testare sau pierdere de activitate în sensul unui număr mai mic de substanțe testate.
combustion.
Pentru substanțele testate care sunt sau care se preconizează că sunt puțin biodegradabile, se ia în considerare preexpunerea nămolului la substanța testată pentru a obține un inocul care este mai bine adaptat.
Evolved CO2 is quantified employing infra-red spectrometry or titrimetry.
Într-un astfel de caz, substanța testată se adaugă la o concentrație de carbon organic de 5 – 20 mg/l la nămolul digerat și se incubează timp de până la 2 săptămâni.
Alternatively, CO2 is reduced to methane, which is quantified on a flame ionization detector (FID).
Înainte de utilizare, nămolul preexpus se spală cu grijă (a se vedea punctul 25), iar în raportul privind testul se indică condițiile preexpunerii.
The persulfate/UV-method is commonly used for the analysis of “clean” water with low content of particulate matter.
Se spală nămolul (a se vedea punctele 22 – 24) chiar înainte de utilizare, pentru a reduce concentrația IC la mai puțin de 10 mg/l în suspensia finală de testat.
The latter two methods can be applied to most kinds of water samples, the persulfate/elevated temperature-oxidation being most suitable for low-level samples, and the combustion technique being applicable for samples with non-volatile organic carbon (NVOC) content well above 1 mg C/l.
Se centrifughează nămolul în eprubete închise ermetic (de exemplu, 3000 g timp de 5 minute) și se elimină supernatantul.
Interferences
Se suspendă granulele rezultate în mediu dezoxigenat (punctele 16, 17), se centrifughează din nou suspensia și se elimină lichidul supernatant.
All three methods are dependent on eliminating or compensating for inorganic carbon (IC) present in the sample.
În cazul în care IC nu a fost redusă suficient, procedura de spălare a nămolului se poate repeta de maximum două ori.
Purging of CO2 from the acidified sample is the most frequently used method to eliminate the IC, although this also results in a loss of volatile organic compounds (1).
Aceasta nu pare a avea un efect advers pentru microorganisme.
The complete elimination or compensation of IC must be ensured for each sample matrix, and volatile organic carbon (VOC) must be determined in addition to NVOC dependent on the sample type.
În final, se suspendă granulele din volumul necesar de mediu de testare și se determină concentrația totală a solidelor [de exemplu, ISO 11923 (15)].
High chloride concentrations result in decreased oxidation efficiency using the persulfate/UV-method (2).
Concentrația finală a solidelor totale din vasele de testare trebuie să fie situată în intervalul 1 g/l – 3 g/l (sau aproximativ 10 % din cea a nămolului fermentat nediluat).
Application of an oxidation reagent modified by the addition of mercury (II) nitrate may, however, remove this interference.
Operațiunile descrise mai sus se execută astfel încât să se asigure nămolului un contact minim cu oxigenul (de exemplu, se utilizează o atmosferă de azot).
It is recommended that the maximum tolerable sample volume be used to evaluate each type of chloride-containing sample.
Se efectuează următoarele proceduri inițiale folosind tehnici pentru a menține contactul dintre nămol fermentat și oxigen la un nivel cât mai mic posibil, de exemplu, poate fi necesar să se utilizeze o cutie cu mănuși într-o atmosferă de azot și/sau să se purjeze flacoanele cu azot (4).
High salt concentrations in sample analysed using the combustion method can cause salt coating of the catalyst and excessive corrosion of the combustion tube.
Pregătirea testării substanței de testat și a controalelor
Precautions should be taken according to the manufacturer's manual.
Se pregătesc câte cel puțin trei vase de testare (a se vedea punctul 13-b) pentru substanța testată, martorii de control, substanța de referință, controalele pentru inhibiție (condițional) și camerele de control al presiunii (procedură opțională) (a se vedea punctele 7, 19 – 21).
Highly turbid samples as well as samples containing particulate matter may be incompletely oxidized when employing the persulfate/UV-method.
Pot fi pregătite, de asemenea, vase suplimentare pentru evaluarea biodegradării primare folosind analize specifice substanței testate.
An example of a suitable method
Același set de martori de control poate fi folosit pentru mai multe substanțe testate în cadrul aceluiași test dacă volumele spațiului neumplut sunt concordante.
Non-volatile organic carbon is determined by oxidation with persulfate/UV-irradiation and subsequent quantification of evolved CO2 employing non-dispersive infra-red spectrometry.
Se prepară inoculul diluat înainte de adăugarea acestuia în vase, de exemplu cu ajutorul unei pipete cu orificiu larg.
8,2 g HgCl2 and 9,6 g Hg(NO3)2·H2O are dissolved in several hundred millilitres of low carbon concentration reagent water.
Se adaugă soluții stoc ale substanțelor testate și de referință după ajustarea pH-ului la 7 ± 0,2, dacă este necesar.
5 ml HNO3 (conc.) are added to the mixture.
Concentrația de testare a carbonului organic trebuie în mod normal să se situeze în intervalul 20 – 100 mg/l (punctul 4).
the reagent is diluted to 1000 ml.
Dacă substanța testată este toxică, concentrația de testare trebuie să fie redusă la 20 mg C/l sau chiar sub această valoare dacă se măsoară doar biodegradarea primară cu analize specifice.
The interference from chloride is removed using a 40 μl sample volume for 10 per cent chloride and 200 μl sample volume for 1,9 per cent chloride.
Trebuie remarcat faptul că variabilitatea rezultatelor testului crește la concentrații de testare mai mici
Samples of high chloride concentrations and/or larger sample volumes can be analysed according to this method provided that build-up of chloride in the oxidation vessel is prevented.
Pentru vasele martor, se adaugă o cantitate echivalentă din cărăușul utilizat pentru a doza substanța testată în locul unei soluții, suspensii sau emulsii stoc.
Determination of volatile organic carbon can subsequently be performed, if relevant, for the sample type in question.
Se ajustează pH-ul la 7 ± 0,2, dacă este necesar, cu mici cantități de acid sau alcalin mineral diluat.
Also of interest (gives a description of an autoanalysis system):
Aceleași cantități de agenți de neutralizare trebuie adăugate în toate vasele de testare.