natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Composition of the recommended reconstituted water
Acesta este răspândit în toată lumea (5) și poate fi colectat și înmulțit cu ușurință în laborator.
(adopted from Chapter C.1 of this Annex (1))
Un rezumat al biologiei speciei de H. aculeifer este prezentat în apendicele 7.
Dissolve 11,76 g CaCl2·2H2O in deionised water;
Femelele adulte sunt expuse la o serie de concentrații ale substanței chimice de testare amestecate în sol.
make up to 1 l with deionised water
La începutul testului, în fiecare vas duplicat sunt introduse câte 10 femele adulte.
Magnesium sulphate solution
Masculii nu sunt incluși în test deoarece experiența a demonstrat că femelele se împerechează imediat sau la scurt timp după ecloziune în stadiul de deutonimfă, în cazul în care masculii sunt prezenți.
Dissolve 4,93 g MgSO4·7H2O in deionised water;
În plus, includerea masculilor ar prelungi durata testului întrucât ar fi necesară o diferențiere laborioasă a stadiilor de dezvoltare.
Sodium bicarbonate solution
În consecință, împerecherea în sine nu constituie parte a testului.
Dissolve 2,59 g NaHCO3 in deionised water;
Femelele sunt incluse în test după 28-35 de zile de la începerea perioadei de pontă în cadrul procesului de sincronizare (a se vedea apendicele 4), deoarece se poate considera în acest caz că femelele deja s-au împerecheat și au trecut în etapa anterioară pontei ovulare.
Potassium chloride solution
La o temperatură de 20 °C, testul se încheie în cea de a 14-a zi după includerea femelelor (ziua 0), ceea ce permite primilor descendenți din grupurile de control să atingă stadiul de deutonimfă (a se vedea apendicele 4).
Dissolve 0,23 g KCl in deionised water;
Pentru calcularea principalei variabile măsurate, se stabilește numărul de exemplare tinere pentru fiecare vas de testare, precum și numărul de femele supraviețuitoare.
The conductivity of the distilled or deionised water should not exceed 10 μScm– 1.
Sunt de dorit informații suplimentare privind evoluția substanței chimice de testare în sol, precum viteza de degradare biotică și abiotică.
25 ml each of solutions (a) to (d) are mixed and the total volume made up to 1 l with deionised water.
Pentru ca un rezultat al testului să fie considerat valid, grupurile de control netratate trebuie să îndeplinească următoarele criterii:
The sum of the calcium and magnesium ions in these solutions is 2,5 mmol/l.
Rata medie a mortalității în rândul femelelor adulte nu trebuie să depășească 20 % la finalul testului;
The proportion Ca:Mg ions is 4:1 and Na:K ions 10:1.
Numărul mediu de exemplare tinere per vas duplicat (cu 10 femele adulte incluse) trebuie să fie de cel puțin 50 la finalul testului;
The acid capacity KS4.3 of this solution is 0,8 mmol/l.
Coeficientul de variație calculat pentru numărul de exemplare tinere de acarieni per vas duplicat nu trebuie să fie mai mare de 30 % la încheierea testului final.
Aerate the dilution water until oxygen saturation is achieved, then store it for approximately two days without further aeration before use.
Trebuie determinată valoarea ECx și/sau NOEC a unei substanțe chimice de referință pentru a garanta caracterul adecvat al condițiilor de testare din laborator și pentru a verifica regularitatea răspunsului organismelor de testare în timp.
REFERENCE
Dimetoatul (CAS 60-51-5) este o substanță chimică de referință corespunzătoare care și-a demonstrat efectul asupra dimensiunii populației (4).
Chapter C.1 of this Annex, Fish Acute Toxicity Test.
Acidul boric (CAS 10043-35-3) poate fi utilizat ca o substanță chimică de referință alternativă.
Physical-chemical characteristics of an acceptable dilution water
Experiența dobândită în cazul acestei substanțe chimice este limitată.
Adopted from OECD (1992) (1)
Sunt posibile două opțiuni conceptuale:
Concentrations
Substanța chimică de referință poate fi testată în paralel cu determinarea toxicității fiecărei substanțe de testare la o concentrație demonstrată în prealabil în cadrul unui studiu doză-răspuns pentru a provoca o reducere > 50 % a numărului descendenților.
Particulate matter
În acest caz, numărul probelor duplicat trebuie să fie același cu cel din vasele de control (a se vedea punctul 29).
Total organic carbon
Alternativ, substanța chimică de referință este testată de 1-2 ori pe an în cadrul unui test doză-răspuns.
< 2 μg/l
În funcție de modelul ales, numărul de concentrații și de probe duplicat și factorul de separare variază (a se vedea punctul 29), însă trebuie obținut un răspuns echivalent cu 10-90 % din efect (factor de separare de 1,8).
Unionised ammonia
Valoarea EC50 a dimetoatului calculată pe baza numărului de exemplare tinere trebuie să se încadreze în intervalul cuprins între 3,0 și 7,0 mg a.s./kg de sol (greutate uscată).
< 1 μg/l
Pe baza rezultatelor obținute până în prezent cu acidul boric, valoarea EC50 bazată pe numărul de exemplare tinere trebuie să se încadreze în intervalul cuprins între 100 și 500 mg/kg greutate uscată a solului.
Residual chlorine
Vasele și echipamentele de testare
< 10 μg/l
Trebuie utilizate vase de testare cu diametrul de 3-5 cm (înălțimea solului ≥1,5 cm), din sticlă sau dintr-un alt material chimic inert și prevăzute cu un capac corespunzător.
Total organophosphorous pesticides
A se utiliza de preferință capace cu filet și, în acest caz, vasele ar putea fi aerate de două ori pe săptămână.
< 50 ng/l
Alternativ, pot fi utilizate capace care permit un schimb direct de gaze între substrat și atmosferă (de exemplu, tifon).
Total organochlorine pesticides plus polychlorinated biphenyls
Întrucât gradul de umiditate trebuie să rămână suficient de mare pe parcursul testului, este esențial să se verifice greutatea fiecărui vas de control pe parcursul testului și să se adauge apă dacă este necesar.
Total organic chlorine
Acest lucru este important în special în cazul în care nu sunt disponibile capace cu filet.
< 25 ng/l
În cazul în care este utilizat un vas de testare opac, capacul trebuie să fie dintr-un material care să permită accesul luminii (de exemplu, printr-un capac transparent perforat) împiedicându-i în același timp pe acarieni să scape.
Recommended artificial sediment — guidance on preparation and storage
Dimensiunea și tipul vasului de testare depinde de metoda de extracție (pentru detalii, a se vedea apendicele 5).
Sediment constituents
În cazul aplicării unei extracții la căldură direct pe vasul de testare, ar putea fi adăugată pe fundul vasului o plasă cu ochiuri de dimensiuni corespunzătoare (sigilată până în momentul extracției), iar adâncimea solului trebuie să fie suficientă pentru a permite stabilirea unui gradient de temperatură și de umiditate.
Constituent
Sunt necesare echipamente de laborator standard, care să includă, în special, următoarele:
Characteristics
vase, de preferință din sticlă cu capace cu filet;
% of sediment dry weight
pensule pentru transferul acarienilor
Peat
pH-metru și luxmetru;
Sphagnum moss peat, degree of decomposition:
echipamente adecvate pentru controlul umidității aerului (neesențiale în cazul în care vasele de expunere sunt acoperite cu capace);
“medium”, air dried, no visible plant remains, finely ground (particle size ≤ 0,5 mm)
incubator sau o cameră mică cu temperatură controlată;
Quartz sand
echipamente de extracție (a se vedea apendicele 5) (13)
Grain size:
panou luminos suspendat cu sistem de control al luminii
≤ 2 mm, but > 50 % of the particles should be in the range of 50-200 μm
borcane de colectare pentru acarienii extrași.
75 - 76
Pentru prezentul test, se utilizează un sol artificial.
Kaolinite clay
Solul artificial include următoarele componente (toate valorile se bazează pe masa uscată):
Kaolinite content ≥ 30 %
5 % mușchi de turbă, uscat la aer și măcinat fin (dimensiuni ale particulelor de 2 ± 1 mm) sunt acceptabile);
Food source
aproximativ 74 % nisip industrial uscat la aer (în funcție de cantitatea de CaCO3 necesară), nisip predominant fin cu peste 50 % din particule măsurând între 50 și 200 de microni.
e.g. Urtica powder (Folia urticae), leaves of Urtica dioica (stinging nettle), finely ground (particle size ≤ 0,5 mm);
Cantitatea exactă de nisip depinde de cantitatea de CaCO3 (a se vedea mai jos), împreună trebuie să reprezinte 75 %.
in accordance with pharmacy standards, for human consumption; in addition to dry sediment
< 1,0 % carbonat de calciu (CaCO3, pulverizat, puritate analitică) pentru a obține un pH de 6,0 ± 0,5;
0,4 - 0,5 %
cantitatea de carbonat de calciu care trebuie adăugată poate depinde în principal de calitatea/natura turbei (a se vedea Nota 1).
Organic carbon
Cantitatea de CaCO3 necesară va depinde de componentele substratului de sol și trebuie determinată prin măsurarea pH-ului subeșantioanelor de sol chiar înainte de test (14).
Adjusted by addition of peat and sand
Conținutul de turbă din solul artificial diferă de cea recomandată în cadrul altor metode de testare a organismelor din sol pentru care se utilizează în cele mai multe cazuri un procent de 10 % turbă [de exemplu (15)].
Calcium carbonate
Cu toate acestea, conform OEPP (16), un sol agricol tipic nu conține mai mult de 5 % materie organică, iar diminuarea conținutului de turbă reflectă astfel posibilitățile reduse ale unui sol natural de sorbție a substanței chimice de testare în raport cu carbonul organic.
CaCO3, pulverised, chemically pure, in addition to dry sediment
Dacă este necesar, de exemplu în scopul unor testări specifice, solurile naturale provenite din locuri nepoluate pot servi, de asemenea, ca substrat de testare și/sau de cultură.
Deionised Water
Cu toate acestea, în cazul în care se utilizează sol natural, acesta trebuie să fie caracterizat cel puțin prin originea (locul colectării), pH-ul și textura sa (distribuția dimensiunii particulelor) și conținutul său de materie organică.
Conductivity ≤ 10 μS/cm, in addition to dry sediment
Dacă sunt disponibile, trebuie incluse tipul și denumirea solului conform clasificării solurilor, iar solul nu trebuie să fie contaminat.
30 - 50
În cazul în care substanța chimică de testare este un metal sau un compus organometalic, trebuie determinată, de asemenea, capacitatea de schimb cationic (CEC) a solului natural.
If elevated ammonia concentrations are expected, e.g. if the test chemical is known to inhibit nitrification, it may be useful to replace 50 % of the nitrogen-rich urtica powder by cellulose (e.g., α-Cellulose powder, chemically pure, particle size ≤ 0,5 mm; (1) (2)).
Trebuie acordată o atenție specială respectării criteriilor de validitate întrucât informațiile de referință privind solurile naturale sunt în general rare.
Preparation
Pentru determinarea pH-ului, se utilizează un amestec de sol și de soluție de clorură de potasiu 1 M (KCl) sau de clorură de calciu 0,01 M (CaCl2) într-un raport de 1:5 [a se vedea referința (14) și apendicele 3].
The peat is air dried and ground to a fine powder.
Dacă aciditatea solului este mai mare decât limita impusă (a se vedea punctul 10), aceasta poate fi ajustată prin adăugarea unei cantități corespunzătoare de CaCO3.
A suspension of the required amount of peat powder in deionised water is prepared using a high-performance homogenising device.
Dacă solul este prea alcalin, acest lucru poate fi ajustat prin adăugarea unei cantități suplimentare din amestecul care conține primele trei componente descrise la punctul 10, cu excepția CaCO3.
The pH of this suspension is adjusted to 5,5 ± 0,5 with CaCO3.
Cu două-șapte zile înainte de începerea testului, solul artificial uscat este umezit în prealabil prin adăugarea unei cantități suficiente de apă distilată sau deionizată pentru a obține aproximativ jumătate din conținutul final de apă, adică 40-60 % din WHC maximă.
The suspension is conditioned for at least two days with gentle stirring at 20 ± 2 °C, to stabilise pH and establish a stable microbial component. pH is measured again and should be 6,0 ± 0,5.
Gradul de umiditate este ajustat la 40-60 % din WHC maximă prin adăugarea soluției de substanță de testare și/sau prin adăugarea de apă distilată sau deionizată (a se vedea punctele 16-18).
Then the peat suspension is mixed with the other constituents (sand and kaolin clay) and deionised water to obtain an homogeneous sediment with a water content in a range of 30–50 per cent of dry weight of the sediment.
Se poate realiza o verificare suplimentară aproximativă a gradului de umiditate din sol strângând ușor solul în mână; în cazul în care gradul de umiditate este cel corect, trebuie să apară între degete picături mici de apă.
The pH of the final mixture is measured again and is adjusted to 6,5 to 7,5 with CaCO3 if necessary.
Gradul de umiditate din sol este determinat, la începutul și la finalul testului, prin uscare la o temperatură de 105 °C până la obținerea unei greutăți constante în conformitate cu standardul ISO 11465 (17) și a unui pH al solului în conformitate cu anexa 3 sau cu standardul ISO 10390 (14).
However, if ammonia development is expected, it may be useful to keep the pH of the sediment below 7,0 (e.g. between 6,0 and 6,5).
Gradul de umiditate trebuie să fie monitorizat pe întreaga perioadă a testului prin cântărirea periodică a vaselor (a se vedea punctele 20 și 24).
Samples of the sediment are taken to determine the dry weight and the organic carbon content.
Specia utilizată în cadrul testului este Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer (Canestrini, 1883).
If ammonia development is expected, the formulated sediment may be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test (e.g. sediment-water ratio 1 : 4, height of sediment layer as in test vessels) before it is spiked with the test chemical, i.e. it should be topped with water, which should be aerated.
Pentru începerea testului, sunt necesare femele adulte de acarieni, prelevate dintr-un grup sincronizat.
At the end of the conditioning period, the overlying water should be removed and discarded.
Acarienii trebuie incluși după aproximativ 7-14 zile de la trecerea la stadiul de adult, după 28-35 de zile de la începerea perioadei de pontă în cadrul procesului de sincronizare (a se vedea punctul 3 și apendicele 4).
Thereafter, the spiked quartz sand is mixed with the sediment for each treatment level, the sediment is distributed to the replicate test vessels, and topped with the test water.
Trebuie să se înregistreze sursa acarienilor sau furnizorul acestora și întreținerea culturii de laborator.
The vessels are then incubated at the same conditions which prevail in the subsequent test.
În cazul în care este menținută o cultură de laborator, se recomandă ca identitatea speciilor să fie confirmată cel puțin o dată pe an.
This is where the equilibration period starts.
O fișă de identificare este inclusă în anexa 6.
The overlying water should be aerated.
Substanța de testare este amestecată în sol.
It can be mixed initially with the peat suspension (see above).
Solvenții organici utilizați pentru facilitarea tratamentului solului cu substanța chimică de testare trebuie selectați pe baza toxicității lor scăzute pentru acarieni și trebuie inclus în proiectul de testare un vas de control cu solvent (a se vedea punctul 29).
However, excessive degradation of the food source prior to addition of the test organisms — e.g. in case of long equilibration period — can be avoided by keeping the time period between food addition and start of exposure as short as possible.
Se recomandă utilizarea unei cantități corespunzătoare de apă pentru a obține gradul de umiditate necesar, și anume 40-60 % din WHC maximă (a se vedea punctul 12).
In order to ensure that the food is spiked with the test chemical, the food source should be mixed with the sediment not later than on the day the test chemical is spiked to the sediment.
În cazul în care sunt utilizați astfel de dizolvanți, toate concentrațiile de testare și vasul de control trebuie să conțină aceeași cantitate minimă de dizolvant.
Storage
Dizolvantul este eliminat prin evaporare sub o hotă timp de cel puțin o oră.
Samples of spiked sediment may be stored under the conditions recommended for the particular test chemical until analysis.
Prin urmare, se recomandă utilizarea unui vas de control suplimentar cu apă fără dizolvant, în cazul în care nu se cunoaște toxicitatea solventului pentru acarieni.
In co-operation with R. Nagel and B. Karaoglan.
În cazul în care se demonstrează în mod corespunzător că solventul (în concentrațiile care trebuie aplicate) nu are niciun efect, vasul de control cu apă poate fi exclus.
Culture methods for Lumbriculus variegatus
Substanță chimică testată puțin solubilă în apă și în solvenți organici
Lumbriculus variegatus (MÜLLER), Lumbriculidae, Oligochaeta is an inhabitant of freshwater sediments and is widely used in ecotoxicological testing.
În cazul substanțelor chimice puțin solubile în apă și solvenți organici, echivalentul de 2,5 g de nisip cuarțos fin măcinat pentru fiecare vas de testare (de exemplu, 10 g de nisip cuarțos fin pentru patru duplicate) este amestecat cu cantitatea de substanță chimică pentru a obține concentrația de testare dorită.
It can easily be cultured under laboratory conditions.
Conținutul total de nisip din substrat trebuie corectat în funcție de această cantitate.
An outline of culture methods is given in the following.
Acest amestec de nisip de cuarț și de substanță chimică testată se adaugă la solul preumezit și se amestecă bine după ce a fost adăugată o cantitate corespunzătoare de apă deionizată pentru a se obține conținutul de umiditate dorit.
Culture methods
Pentru fiecare vas de control și de tratament, se recomandă utilizarea a zece femele adulte în 20 g de masă de sol artificial.
Culture conditions for Lumbriculus variegatus are outlined in detail in Phipps et al.
Organismele de testare trebuie adăugate într-un interval de două ore după pregătirea substratului de testare final (și anume, după aplicarea substanței de testare).
A short summary of these conditions is given below.
După adăugarea acarienilor în sol, aceștia sunt hrăniți, iar greutatea inițială a fiecărui vas de testare trebuie măsurată pentru a fi utilizată ca referință pentru monitorizarea gradului de umiditate a solului pe tot parcursul testului, conform descrierii de la punctul 24.
A major advantage of L. variegatus is its quick reproduction, resulting in rapidly increasing biomass in laboratory cultured populations (e.g. (1), (3), (4), (5)).
Vasele de testare sunt apoi acoperite conform descrierii de la punctul (8) și așezate în camera de testare.
The worms can be cultured in large aquaria (57 - 80 l) at 23 °C with a 16 L:8 D photoperiod (100 – 1000 lx) using daily renewed natural water (45 - 50 l per aquarium).
Sunt pregătite vase de control corespunzătoare pentru fiecare dintre metodele de aplicare a substanței chimice de testare descrise la punctele 15-18.
The substrate is prepared by cutting unbleached brown paper towels into strips, which may then be blended with culture water for a few seconds to result in small pieces of paper substrate.
Astfel, dacă este cazul, se adaugă în vasele de control solvenți organici, nisip cuarțos sau alți dizolvanți în concentrații/cantități echivalente cu cele din vasele de tratament.
This substrate can then directly be used in the Lumbriculus culture aquaria by covering the bottom area of the tank, or be stored frozen in deionised water for later use.
Atunci când se utilizează un solvent sau un alt dizolvant pentru a adăuga substanța chimică de testare, trebuie pregătit și testat, de asemenea, un vas de control fără dizolvant sau substanța chimică de testare în cazul în care nu se cunoaște toxicitatea solventului (a se vedea punctul 17).
New substrate in the tank will generally last for approximately two months.
Temperatura de testare trebuie să fie de 20 ± 2 °C.
Each worm culture is started with 500 – 1000 worms, and fed a 10 ml suspension containing 6 g of trout starter food 3 times per week under renewal or flow-through conditions.
Temperatura trebuie înregistrată cel puțin zilnic și ajustată, dacă este necesar.
Static or semi-static cultures should receive lower feeding rates to prevent bacterial and fungal growth. .
Testul este efectuat în cicluri de lumină și de întuneric controlate (de preferință, 16 ore de lumină și 8 ore de întuneric) cu o intensitate a luminii cuprinsă între 400 și 800 lux în apropiere de vasele de testare.
Under these conditions the number of individuals in the culture generally doubles in approximately 10 to 14 d.
Din motive de compatibilitate, aceste condiții sunt identice ca și în cazul celorlalte teste ecotoxicologice ale solului [de exemplu, referința (15)].
Alternatively Lumbriculus variegatus can also be cultured in a system consisting of a layer of quartz sand as used for the artificial sediment (1 - 2 cm depth), and reconstituted water.
Schimbul de gaze trebuie garantat prin aerarea vaselor de testare de două ori pe săptămână în cazul în care sunt utilizate capace cu filet.
Glass or stainless steel containers with a height of 12 to 20 cm can be used as culture vessels.
În cazul utilizării unor capace din tifon, trebuie acordată o atenție specială menținerii gradului de umiditate a solului (a se vedea punctele 8 și 24).
The water body should be gently aerated (e.g. 2 bubbles per second) via a pasteur pipette positioned approx.
Gradul de umiditate a substratului de sol din vasele de testare este menținut pe tot parcursul testului prin cântărire și, dacă este necesar, prin adăugarea periodică de apă în vasele de testare (de exemplu, o dată pe săptămână).
2 cm above the sediment surface.
Gradul de umiditate a solului pe parcursul testului nu trebuie să difere cu mai mult de 10 % din valoarea inițială.
To avoid accumulation e.g. of ammonia, the overlying water should be exchanged using a flow-through system, or, at least once a week, manually.
S-a demonstrat că acarienii de brânză [Tyrophagus putrescentiae (Schrank, 1781)] reprezintă o sursă de hrană adecvată.
The oligochaetes can be held at room temperature with a photo period of 16 hours light (intensity 100 – 1000 lx) and 8 hours dark.
Pot fi, de asemenea, adecvate colembolele de mici dimensiuni [de exemplu, exemplare tinere de Folsomia candida Willem, 1902 sau Onychiurus fimatus (19), (20), enchitreide (de exemplu, Enchytraeus crypticus Westheide & Graefe, 1992) sau nematode (de exemplu, Turbatrix silusiae de Man, 1913)] (21).
In the semi-static culture (water renewal once per week), the worms are fed with TetraMin twice a week (e.g. 0,6 - 0,8 mg per cm2 of sediment surface), which can be applied as a suspension of 50 mg TetraMin per ml de-ionized water.
Se recomandă verificarea hranei înainte de utilizarea sa în cadrul testului.
Lumbriculus variegatus can be removed from the cultures e.g. by transferring substrate with a fine mesh net, or organisms using a fire polished wide mouth (approximately 5 mm diameter) glass pipette, to a separate beaker.
Tipul și cantitatea de hrană trebuie să asigure obținerea unui număr adecvat de exemplare tinere pentru a îndeplini criteriile de validitate (punctul 6).
If substrate is co-transferred to this beaker, the beaker containing worms and substrate is left overnight under flow-through conditions, which will remove the substrate from the beaker, while the worms remain at the bottom of the vessel.
Pentru selectarea prăzii, trebuie luat în considerare modul de acțiune al substanței de testare (de exemplu, un acaricid poate fi toxic și pentru acarienii utilizați ca hrană; a se vedea punctul 26).
They can then be introduced to newly prepared culture tanks, or processed further for the test as outlined in (3) and (4), or in the following.
Hrana trebuie furnizată ad libitum [și anume, de fiecare dată într-o cantitate mică (vârful unei spatule)].
An issue to be regarded critically when using L. variegatus in sediment tests is its reproduction mode (architomy or morphallaxis, e.g. (6)).
În acest scop, poate fi utilizat și un aspirator cu aspirație ușoară astfel cum este propus în testul asupra colembolelor sau o pensulă de vopsit fină.
This asexual reproduction results in two fragments, which do not feed for a certain period until the head or tail part is regenerated (e.g., (7), (8)).
De obicei, va fi suficientă furnizarea de hrană la începutul testului și de două-trei ori pe săptămână.