natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Also, non-fortified, non-pre-treated seawater taken from the location of interest could be used and primary biodegradation could be followed by specific chemical analysis.
Se determină (opțional) numărul de heterotrofe care formează colonii în mediul de testare cu apă de mare (și, de preferință, și în eșantionul de apă de mare original), de exemplu, prin numărarea pe placă utilizând agar marin.
For ultimate biodegradability, 14C-labelled substances would be necessary in order that the rates of the disappearance of soluble organic 14C and the production of 14CO2 at environmentally realistic concentrations could be measured.
Pregătirea flacoanelor de testare
CHOICE OF METHODS
Se efectuează toate manipulările necesare, inclusiv învechirea și pretratarea apei de mare la temperatura de testare aleasă între 15 și 20 °C, asigurând curățenia, dar nu sterilitatea, tuturor vaselor din sticlă.
The selection of which method to use depends on a number of factors;
Se pregătesc grupuri de flacoane BOD pentru determinarea BOD cu substanțele testată și de referință în serii experimentale simultane.
the following Table is given to help the selection.
Se efectuează toate analizele pe flacoanele duplicat (martor, substanțe de referință și testată), adică se pregătesc două flacoane pentru fiecare determinare.
While substances of water solubility below the equivalent of about 5 mg C/l cannot be tested in the Shake Flask Method, at least, in principle, poorly soluble substances may be tested in the Closed Bottle Method.
Se efectuează analize cel puțin în zilele 0, 5, 15 și 28 (patru determinări).
Table
Pentru analizele oxigenului, patru determinări necesită un total de 3 × 2 × 4 = 24 de flacoane (martor, substanță de referință și substanță testată) și, prin urmare, aproximativ 8 litri de mediu de testare (pentru o concentrație de substanță testată).
Advantages and disadvantages of the shake flask and closed bottle test
Se prepară soluții separate pentru substanțele de referință și testată în flacoane mari cu un volum suficient (punctul 11) prin adăugarea mai întâi a substanțelor testată și de referință, fie direct, fie prin utilizarea unei soluții stoc concentrate în flacoanele mari parțial umplute.
METHOD
Se adaugă mediu de testare suplimentar pentru a se asigura concentrațiile dorite finale.
ADVANTAGES
În cazul în care sunt utilizate soluții stoc de substanță testată și/sau de referință, se asigură faptul că salinitatea mediului cu apă de mare nu este modificată în mod semnificativ.
DISADVANTAGES
Se selectează concentrațiile substanțelor testată și de referință ținând cont de:
SHAKE FLASK
solubilitatea oxigenului dizolvat în apa de mare la temperatura de testare predominantă și salinitatea (a se vedea nomograma anexată – apendicele 4);
simple apparatus except C analyser
valoarea BOD a apei de mare din martor;
60 d duration is not a problem
biodegradabilitatea preconizată a substanței testate.
no interference from nitrification
La 15 °C și 20 °C și la o salinitate de 32 de părți la mie (apă de ocean), solubilitatea oxigenului dizolvat este de aproximativ 8,1 și 7,4 mg/l, respectiv.
can be adapted for volatile substances
Consumul de oxigen al apei de mare înseși (respirație martor) poate fi de 2 mg O2/l sau mai mult, în cazul în care apa de mare nu este învechită.
needs C analyser
Prin urmare, în vederea asigurării unei concentrații semnificative de oxigen care să rămână după oxidarea substanței testate, se utilizează o concentrație inițială a substanței testate de aproximativ 2 – 3 mg/l (în funcție de ThOD) pentru substanțele pentru care se preconizează că se vor degrada complet în condițiile testului (precum substanțele de referință).
uses 5-40 mg DOC/1, could be inhibitory
Substanțele mai puțin degradabile se testează la concentrații mai mari, de până la aproximativ 10 mg/l, cu condiția să nu apară efecte toxice.
DOC determination is difficult at low concentrations in seawater (chloride effect)
Efectuarea de teste paralele cu o concentrație mică (aproximativ 2 mg/l) și mare (aproximativ 10 mg/l) a substanței testate poate fi avantajoasă.
DOC sometimes high in seawater
Un martor pentru oxigen trebuie să fie determinat în paralel în flacoanele care nu conțin nici substanță testată, nici substanță de referință.
CLOSED BOTTLE
Dacă trebuie determinate efecte inhibitorii, se pregătește următoarea serie de soluții în flacoane mari separate (punctul 13):
simple apparatus
2 mg/l de substanță ușor degradabilă, de exemplu orice substanță de referință menționată;
simple end determination
x mg/l de substanță testată (x este în general 2);
uses low concentration of test substance (2 mg/l) thus less chance of inhibition
2 mg/l de substanță ușor degradabilă plus x mg/l de substanță testată.
easily adapted for volatile substances
Dacă se recurge la opțiunea utilizării de analize specifice, poate fi realizat un experiment fizico-chimic pentru a verifica dacă substanța testată este îndepărtată prin mecanisme abiotice, precum hidroliza sau adsorbția.
could be difficult to maintain air-tightness of bottles
Un test fizico-chimic de control poate fi efectuat prin adăugarea de clorură de mercur (II) (HgCl2) [11] (50 – 100 mg/l) în flacoanele duplicat cu substanță testată pentru a opri activitatea microbiană.
wall growth of bacteria can lead to false values
O scădere semnificativă a concentrației substanței specifice în cursul testului indică prezența unor mecanisme de îndepărtare abiotice.
blank O2 uptake values can be high especially after 28 days;
Numărul de flacoane BOD într-o testare tipică
could be overcome by ageing the seawater
Într-o testare tipică sunt folosite următoarele flacoane:
possible interference from O2 uptake by nitrification
cel puțin 8 care conțin substanța testată;
SHAKE FLASK METHOD
cel puțin 8 care conțin numai apă de mare fortificată cu nutrienți;
This method is a seawater variant of the Modified OECD Screening Test described in Chapter C.4B of this Annex (2).
cel puțin 8 care conțin substanța de referință și dacă este necesar
It was finalised as a result of a ring test organized for the European Commission (EC) by the Danish Water Quality Institute (3).
6 flacoane care conțin substanță testată și de referință (control pentru toxicitate).
In common with the accompanying marine Closed Bottle Method, the results from this test are not to be taken as indicators of ready biodegradability, but are to be used specifically for obtaining information about the biodegadability of substances in marine environments.
După preparare, se sifonează imediat fiecare soluție, din sfertul inferior (nu din partea de jos) într-un flacon suficient de mare, pentru a umple respectivul grup de flacoane BOD.
A pre-determined amount of the test substance is dissolved in the test medium to yield a concentration of 5-40 mg dissolved organic carbon (DOC)/l.
Imediat se analizează controalele zero (timp zero) pentru oxigenul dizolvat (punctul 33) sau se conservă pentru analiză chimică ulterioară prin precipitare cu MnCl2 [clorură de mangan (II)] și NaOH (hidroxid de sodiu).
If the limits of sensitivity of organic carbon analyses are improved, the use of lower concentrations of test substance may be advantageous, particularly for inhibitory substances.
Se incubează flacoanele BOD paralele rămase la temperatura de testare (15 – 20 °C), se mențin în întuneric și se scot din zona de incubare la intervale de timp adecvate (de exemplu, după minimum 5, 15 și 28 zile) și se analizează oxigenul dizolvat (punctul 33).
The solution of the test substance in the test medium is incubated under agitation in the dark or in diffuse light under aerobic conditions at a fixed temperature (controlled to ± 2 °C) which will normally be within the range 15-20 °C.
Se filtrează cu filtru cu membrană (0,2 – 0,45 μm) sau se centrifughează, timp de 15 minute, eșantioanele pentru analize specifice (opțional).
In cases where the objective of the study is to simulate environmental situations, tests may be carried out beyond this normal temperature range.
Se depozitează timp de până la 48 de ore la 2 – 4 °C sau perioade mai lungi la – 18 °C, dacă nu sunt analizate imediat (dacă se știe că substanța testată nu va fi afectată, se acidifică la pH 2 înainte de depozitare).
The recommended maximum test duration is about 60 days.
Determinarea oxigenului dizolvat
Degradation is followed by DOC measurements (ultimate degradation) and, in some cases, by specific analysis (primary degradation).
Se determină concentrația oxigenului dizolvat folosind o metodă chimică sau electrochimică recunoscută la nivel național sau internațional.
In order to know whether the test may be applied to a particular substance, some of its properties must be known.
Prelucrarea rezultatelor
The organic carbon content of the substance must be established, its volatility must be such that significant losses do not occur during the course of the test and its solubility in water should be greater than the equivalent of 25-40 mg C/l.
Se înregistrează rezultatele analitice pe fișele de date anexate (apendicele 5).
Also, the test substance should not significantly adsorb onto glass surfaces.
Se calculează BOD ca diferența de depleție de oxigen între un martor și o soluție a substanței testate în condițiile de testare.
Information on the purity or the relative proportions of major components of the test substance is required in order that the results obtained can be interpreted, especially when the result lies close to the “pass” level.
Se împarte depleție netă de oxigen la concentrația (G/V) substanței pentru a exprima BOD ca mg BOD/mg substanță testată.
Information on the toxicity of the test substance to bacteria, for example as measured in short-term respiration rate tests (4), may be useful when selecting appropriate test concentrations and may be essential for the correct interpretation of low biodegradation values.
Degradarea este definită ca raportul dintre consumul biochimic de oxigen și, de preferință, consumul teoretic de oxigen (ThOD) sau consumul chimic de oxigen (COD) și se exprimă ca procent (a se vedea punctul 36).
However, such information is not always sufficient for interpreting results obtained in the biodegradation test and the procedure described in paragraph 18 is more suitable.
Se calculează valorile biodegradării pentru fiecare moment de eșantionare pentru substanța chimică testată și pentru substanța de referință, utilizând una dintre ecuațiile:
Suitable reference substances must be used to check the microbial activity of the seawater sample.
ThOD consumul teoretic de oxigen (calculare, apendicele 3)
Sodium benzoate, sodium acetate and aniline are examples of substances which may be used for this purpose.
COD consumul chimic de oxigen, determinat experimental.
The reference substances must be degraded within a reasonably short time span, otherwise it is recommended that the test be repeated using another seawater sample.
Uneori, cele două modalități de calculare (procent din ThOD sau procent din COD) nu furnizează aceleași rezultate;
In the EC ring test where seawater samples were taken at different locations and at different times of the year (3), the lag phase (tL) and time to achieve 50 per cent degradation (t50), excluding the lag phase, were 1 to 4 days and 1 to 7 days respectively for sodium benzoate.
se preferă să utilizeze ThOD, deoarece unele substanțe nu sunt complet oxidate în testul COD.
For aniline the tL ranged from 0 to 10 days, whilst the t50 ranged from 1 to 10 days.
Se ilustrează în mod grafic curba de degradare într-o diagramă (a se vedea un exemplu în secțiunea «Validitatea și interpretarea rezultatelor»).
REPRODUCIBILITY AND SENSITIVITY OF THE METHOD
Dacă există suficiente date, din această curbă se calculează faza de latență tL) și timpul necesar pentru a obține îndepărtarea în proporție de 50 % de la încheierea fazei de latență (t50).
The reproducibility of the method was established in the ring test (3).
Dacă se folosește analiza specifică (opțional), se precizează degradarea primară ca procent al îndepărtării substanței specifice în perioada de testare (corectată pentru martorii analitici).
The lowest concentration of test substance, for which this method can be used with DOC analysis, is largely determined by the detection limit of the organic carbon analysis (about 0,5 mg C/l, at present) and the concentration of dissolved organic carbon in the seawater used (usually of the order of 3-5 mg/l for water from the open sea).
locul prelevării de eșantioane și descrierea sa:
The background concentration of DOC should not exceed about 20 % of the total DOC concentration after addition of test substance.
caracteristicile eșantionului [data eșantionării, adâncimea, aspectul, temperatura, salinitatea, DOC (opțional), intervalul de timp dintre prelevare și utilizarea în test];
If this is not feasible, the background concentration of DOC may sometimes be reduced by ageing the seawater prior to testing.
metoda utilizată pentru determinarea COD (dacă este efectuată);
If the method is used with specific chemical analysis only (by which primary degradation is measured), the investigator must document, by supplying additional information, whether ultimate degradability can be expected.
metoda utilizată pentru măsurarea oxigenului;
This additional information may consist of the results from other tests for ready or inherent biodegradability.
procedura de dispersie pentru substanțele care sunt puțin solubile în condițiile de testare;
Normal laboratory apparatus and:
metoda utilizată pentru determinarea numărului de heterotrofe în apa de mare (metoda de numărare pe placă sau o procedură alternativă);
a.
metoda utilizată pentru determinarea DOC în apa de mare (opțional);
b.
datele analitice raportate în fișa de date (astfel cum este anexată, apendicele 5);
c.
Faza de latență poate fi estimată grafic astfel cum se indică în figura atașată sau considerată, în mod convențional, ca fiind timpul necesar pentru o degradare de 10 %;
Membrane filtration apparatus, or centrifuge;
procentul de degradare măsurat după 28 de zile.
d.
Respirația martor nu trebuie să depășească 30 % din oxigenul din flaconul de testare.
Membrane filters, 0,2-0,45 μm;
Dacă nu este posibil să se respecte acest criteriu folosind apă de mare proaspăt prelevată, apa de mare trebuie să fie învechită (stabilizată) înainte de utilizare.
e.
Trebuie luată în considerare posibilitatea ca substanțele care conțin azot să afecteze rezultatele.
Carbon analyser;
Rezultatele obținute cu substanțele de referință benzoat de sodiu și anilină trebuie să fie comparabile cu rezultatele obținute în testul interlaboratoare (3) (punctul 9).
f.
Substanța testată poate fi considerată inhibitoare pentru bacterii (la concentrația utilizată) dacă BOD a amestecului dintre substanța de referință și cea testată este mai mic decât suma BOD pentru soluțiile separate ale celor două substanțe.
Equipment for specific analysis (optional).
Ca urmare a concentrațiilor relativ mari utilizate în test față de cea mai mare parte a sistemelor naturale și, în consecință, a unui raport nefavorabil între concentrațiile substanțelor testate și a altor surse de carbon, metoda trebuie considerată ca test preliminar care poate fi utilizat pentru a indica dacă o substanță este sau nu ușor biodegradabilă.
Seawater
Prin urmare, un rezultat slab nu înseamnă în mod necesar că substanța testată nu este biodegradabilă în medii marine, ci indică faptul că pentru a stabili acest aspect vor fi necesare studii suplimentare.
Collect a sample of seawater in a thoroughly cleansed container and transport to the laboratory, preferably within one or two days of collection.
Mai jos este prezentat un exemplu de experiment de degradare teoretică ilustrând un mod fezabil de estimare a valorilor tL (durata «fazei de latență») și t50, intervalul de timp (începând de la tL) necesare pentru a atinge 50 % din absorbția finală de oxigen cauzată de oxidarea substanței testate:
During transport, do not allow the temperature of the sample to exceed significantly the temperature to be used in the test.
Determination of «Ready» Biodegradability Part III Modified OECD Screening Test
Identify the sampling location precisely and describe it in terms of its pollutional and nutrient status.
Determination of «Ready» Biodegradability, Part VI.
Especially for coastal waters, include in this characterization a heterotrophic microbial colony count and the determination of the concentrations of dissolved nitrate, ammonium and phosphate.
Determinarea carbonului organic din apa de mare
Provide the following information for the seawater sample itself:
Pentru determinarea carbonului organic dintr-un eșantion de apă, compușii organici din eșantion sunt oxidați la bioxid de carbon folosind în general una din următoarele trei tehnici:
date of collection;
oxidare umedă prin persulfat/iradiere UV;
depth of collection;
oxidare umedă prin persulfat/temperatură crescută (116-130 °C);
appearance of sample — turbid, etc.;
combustie.
temperature at the time of collection;
degajat este cuantificat folosind spectrometrie cu infraroșu sau titrimetrie.
salinity;
Alternativ, CO2 este redus la metan, care este cuantificat cu un detector cu ionizare în flacără (flame ionization detector – FID).
delay between collection and use in the test.
Metoda cu persulfat/UV este frecvent utilizată pentru analiza apei «curate», cu conținut mic de particule în suspensie.
If the DOC content of the seawater sample is found to be high (paragraph 8), it is recommended that the seawater be aged for about a week prior to use.
Ultimele două metode pot fi aplicate la cele mai multe tipuri de eșantioane de apă, metode cu persulfat/temperatură crescută-oxidare fiind cea mai potrivită pentru eșantioanele cu nivel mic, iar tehnica cu combustie fiind aplicabilă pentru eșantioane cu conținut de carbon organic nevolatil (non-volatile organic carbon – NVOC) mult peste 1 mg C/l.
Age by storing under aerobic conditions at the test temperature and in the dark or in diffuse light.
Interferențe
If necessary, maintain aerobic conditions by gentle aeration.
Toate cele trei metode sunt dependente de eliminarea sau de compensarea carbonului anorganic (inorganic carbon – IC) prezent în eșantion.
During ageing, the content of easily degradable organic material is reduced.
Epurarea CO2 eșantionul acidifiat este cea mai frecvent utilizată metodă de eliminare a IC, cu toate că aceasta determină și o pierdere de compuși organici volatili (1).
In the ring test (3), no difference was revealed between the degradation potential of aged and freshly collected seawater samples.
Eliminarea completă sau compensarea IC trebuie să se asigure pentru fiecare matrice de eșantion, iar carbonul organic volatil (volatile organic carbon – VOC) trebuie să fie determinat în plus față de NVOC, în funcție de tipul de eșantion.
Prior to use, pre-treat the seawater to remove coarse particles, e.g. by filtration through a nylon filter or coarse paper filter (not membrane or GF-C filters), or by sedimentation and decanting.
Concentrațiile mari de clorură au ca rezultat scăderea eficienței oxidării folosind metoda cu persulfat/UV (2).
The procedure used must be reported.
Aplicarea unui reactiv de oxidare modificat prin adăugarea de azotat de mercur (II) poate, totuși, să elimine această interferență.
Carry out pre-treatment after ageing, if used.
Se recomandă ca volumul maxim tolerabil al eșantionului să fie utilizat pentru a evalua fiecare tip de eșantion care conține clorură.
Stock solutions for mineral nutrients
Concentrațiile mari de sare din eșantionul analizat folosind metoda prin combustie poate provoca acoperirea cu sare a catalizatorului și coroziunea excesivă a tubului de ardere.
Prepare the following stock solutions, using analytical grade reagents:
Trebuie luate măsuri de precauție în conformitate cu manualul producătorului.
Potassium dihydrogen orthophosphate, KH2PO4
Eșantioanele de apă foarte tulburi, precum și eșantioanele care conțin particule poate fi oxidate incomplet atunci când se utilizează metoda persulfat/UV.
8,50 g
Un exemplu de metodă adecvată
Dipotassium hydrogen orthophosphate, K2HPO4
Carbonul organic nevolatil este determinat prin oxidarea cu persulfat/iradiere UV și cuantificarea ulterioară a emisiilor de CO2 degajate folosind spectrometrie nedispersivă cu infraroșu.
21,75 g
Reactivul de oxidare se modifică în conformitate cu sugestiile prezentate în referința (2), astfel cum se descrie în manualul producătorului:
Disodium hydrogen orthophosphate dihydrate, Na2HPO4·2H2O
8,2 g HgCl2 și 9,6 g Hg(NO3)2 · H2O se dizolvă în câteva sute de mililitri de apă de reacție cu o concentrație mică de carbon.
33,30 g
20 g K2S2O8 se dizolvă în soluție de sare mercurică.
Ammonium chloride, NH4Cl
5 ml HNO3 (conc.) se adaugă la amestec.
0,50 g
reactivul este diluat până la 1000 ml.
Dissolve and make up to 1 litre with distilled water.
Interferența clorurii este îndepărtată cu ajutorul unui volum de eșantion de 40 μl pentru clorură 10 % și al unui volum de eșantion de 200 μl pentru clorură 1,9 %.
Calcium chloride, CaCl2
Biodegradarea în apa de mare
27,50 g
FIȘA DE DATE
Magnesium sulphate heptahydrate, MgSO4·7H2O
LABORATOR:
Iron (III) chloride hexahydrate, FeCl3·6H2O
SUBSTANȚA TESTATĂ:
0,25 g
Denumire:
Precipitation in solution (d) may be prevented by adding one drop of concentrated HCl or 0,4 g ethylenediaminetetra-acetic acid (EDTA, disodium salt) per litre.
Concentrația soluției stoc:
If a precipitate forms in a stock solution, replace it with freshly made solution.
mg/l de substanță
Preparation of test medium
Concentrația inițială în mediu, to:
Add 1 ml of each of the above stock solutions per litre of pre-treated seawater.
APA DE MARE:
Do not add a specific inoculum in addition to the micro-organisms already present in the seawater.
Sursa:
Determine (optionally) the number of colony-forming heterotrophs in the seawater test medium (and preferably also in the original seawater samples) e.g. by plate count, using marine agar.
Data prelevării:
This is particularly desirable for samples from coastal or polluted sites.
Adâncimea de prelevare:
Check the heterotrophic microbial activity in the seawater by performing a test with a reference substance.
Aspectul la momentul prelevării (de exemplu, tulbure etc.):
Preparation of flasks
Salinitatea la prelevare:
Ensure that all glassware is scrupulously clean, not necessarily sterile, (e.g. using alcoholic hydrochloric acid), rinsed and dried before use in order to avoid contamination with residues from previous tests.
Temperatura la prelevare:
The flasks must also be cleaned before first use.
DOC «x» ore după prelevare:
Evaluate test substances in duplicate flasks simultaneously, together with a single flask for the reference substance.
Pretratare înainte de testare (de exemplu, filtrare, sedimentare, învechire, etc.):
Dissolve the test substances in the test medium — they may be conveniently added via a concentrated stock solution — to give the desired starting concentrations of normally 5-40 mg DOC/l.
eșantion inițial:
Test the reference substance normally at a starting concentration corresponding to 20 mg DOC/l.
colonii/ml
If stock solutions of test and/or reference substances are used, ensure that the salinity of the seawater medium is not greatly altered.
la începutul testului:
If toxic effects can be expected or cannot be ruled out, it may be advisable to include an inhibition experiment, in duplicate, in the test design.
Alte caracteristici:
Add the test and reference substances to the same vessel, the concentration of the reference substance being normally the same as in the control test (i.e. 20 mg DOC/l) in order to allow comparison.
DETERMINĂRILE CARBONULUI:
Dispense adequate amounts of test solutions into the Erlenmeyer flasks (up to about half the flask volume is a convenient amount) and subsequently provide each flask with a loose cover (e.g. aluminium foil) that makes gas exchange between the flask and the surrounding air possible.
Analizorul de carbon:
(Cotton wool plugs are unsuitable if DOC analysis is used).
Flacon nr.
Place the vessels on the shaker and shake continuously at a gentle rate (e.g. 100 rpm) throughout the test.
DOC după n zile (mg/l)
Control the temperature (15-20 °C and within ± 2 °C), and shield the vessels from light in order to avoid growth of algae.
apă de mare fortificată cu nutrienți cu substanță testată