natgillin/translations-raw huggingface dataset:
however, this route of exposure is not commonly used.
Evaluarea animalelor testate privind prezența unei dezvoltări accelerate în raport cu populația de control se va baza pe rezultatele analizelor statistice efectuate pentru următorii patru parametri:
The choice of method should be documented and analytically verified.
lungimea membrelor posterioare (normalizată prin lungimea bot-cloacă) în ziua de studiu 7
Establishing the High Test Concentration
lungimea membrelor posterioare (normalizată prin lungimea bot-cloacă) în ziua de studiu 21
For the purposes of this test, the high test concentration should be set by the solubility limit of the test chemical;
stadiul de dezvoltare în ziua de studiu 7
the maximum tolerated concentration (MTC) for acutely toxic chemicals;
stadiul de dezvoltare în ziua de studiu 21.
or 100 mg/l, whichever is lowest.
Analizele statistice ale lungimii membrelor posterioare trebuie efectuate pe baza măsurătorilor lungimii membrului posterior stâng.
The MTC is defined as the highest test concentration of the chemical which results in less than 10 % acute mortality.
Lungimea membrelor posterioare este normalizată prin stabilirea raportului dintre lungimea membrelor posterioare și lungimea bot-cloacă pentru un individ.
Using this approach assumes that there are existing empirical acute mortality data from which the MTC can be estimated.
Media valorilor normalizate pentru fiecare nivel de tratament sunt ulterior comparate.
Although the use of regression models may be the most technically sound approach to estimating the MTC, a useful approximation of the MTC can be derived from existing acute data by using 1/3 of the acute LC50 value.
Accelerarea dezvoltării este apoi indicată printr-o creștere semnificativă a mediei lungimii membrelor posterioare (normalizate) într-un grup de tratament chimic în raport cu grupul de control în ziua de studiu 7 și/sau în ziua de studiu 21 (a se vedea apendicele 3).
However, acute toxicity data may be lacking for the species on test.
Analizele statistice ale stadiului de dezvoltare trebuie efectuate pe baza determinării stadiilor de dezvoltare în conformitate cu criteriile morfologice descrise de Nieuwkoop și Faber (8).
If species specific acute toxicity data are not available, then a 96-hour LC50 test can be completed with tadpoles that are representative (i.e., same stage) of those on test in the AMA.
Accelerarea dezvoltării este indicată atunci când analiza multicuantică detectează o creștere semnificativă a valorilor stadiilor de dezvoltare într-un grup de tratament chimic în raport cu grupul de control în ziua de studiu 7 și/sau în ziua de studiu 21.
Optionally, if data from other aquatic species are available (e.g. LC50 studies in fish or other amphibian species), then professional judgment may be used to estimate a likely MTC based on inter-species extrapolation.
În ceea ce privește metoda de testare AMA, un efect semnificativ asupra oricăruia din cei patru parametri sus-menționați este considerat suficient pentru o detectare pozitivă a dezvoltării accelerate.
Alternatively, if the chemical is not acutely toxic and is soluble above 100 mg/l, then 100 mg/l should be considered the highest test concentration (HTC), as this concentration is typically considered “practically non-toxic.”
Aceasta înseamnă că efectele semnificative asupra lungimii membrelor posterioare într-un moment specific nu necesită coroborare nici cu efectele semnificative asupra lungimii membrelor posterioare la momentul alternativ și nici cu efectele semnificative asupra stadiului de dezvoltare în acest moment specific.
Although not the recommended procedure, static renewal methods may be used where flow-through methods are inadequate to achieve the MTC.
În schimb, efectele semnificative asupra stadiului de dezvoltare la un moment specific nu necesită coroborare nici cu efectele semnificative asupra stadiului de dezvoltare în momentul alternativ și nici cu efectele semnificative asupra lungimii membrelor posterioare în acest moment specific.
If static renewal methods are used, then the stability of the test chemical concentration should be documented and remain within the performance criteria limits.
Cu toate acestea, greutatea dovezilor privind dezvoltarea accelerată va crește dacă sunt detectate efecte semnificative la mai mult de un parametru.
Twenty-four hour renewal periods are recommended.
Dezvoltarea asincronă (determinată utilizând criteriile de determinare a stadiului de dezvoltare)
Renewal periods exceeding 72 hours are not acceptable.
Dezvoltarea asincronă este caracterizată prin perturbarea evoluției temporale a morfogenezei sau a dezvoltării diferitelor țesuturi într-un singur mormoloc.
Additionally, water quality parameters (e.g. DO, temperature, pH, etc.) should be measured at the end of each renewal period, immediately prior to renewal.
Incapacitatea de a stabili cu claritate stadiul de dezvoltare a unui organism utilizând setul de parametri morfologici considerați tipici pentru orice stadiu dat indică faptul că țesuturile se dezvoltă asincron prin metamorfoză.
Test Concentration Range
Dezvoltarea asincronă este un indicator al activității tiroidiene.
There is a required minimum of three test concentrations and a clean water control (and vehicle control if necessary).
Singurele modalități de acțiune cunoscute care conduc la dezvoltare asincronă sunt prin efecte ale substanțelor chimice asupra acțiunilor hormonilor tiroidieni la nivel periferic și/sau asupra metabolismului hormonilor tiroidieni în țesuturile în curs de dezvoltare astfel cum se observă în cazul inhibitorilor deiodinazei.
The minimum test concentration differential between the highest and lowest should be about one order of magnitude.
Evaluarea animalelor testate privind prezența dezvoltării asincrone în raport cu populația de control se va baza pe evaluarea morfologică macroscopică a animalelor testate în ziua de studiu 7 și în ziua de studiu 21.
The maximum dose separation is 0,1 and the minimum is 0,33.
Descrierea dezvoltării normale a Xenopus laevis de către Nieuwkoop și Faber (8) furnizează cadrul necesar identificării unei ordini secvențiale de remodelare a țesuturilor normale.
Test Initiation and Conduct
Termenul «dezvoltare asincronă» se referă în mod specific la abaterile de la dezvoltarea morfologică macroscopică a mormolocilor care nu permit stabilirea definitivă a unui stadiu de dezvoltare în conformitate cu criteriile stabilite de Nieuwkoop și Faber (8), deoarece reperele morfologice esențiale prezintă caracteristici ale unor stadii diferite.
The exposure should be initiated when a sufficient number of tadpoles in the pre-exposure stock population have reached developmental stage 51, according to Nieuwkoop and Faber (8), and which are less than or equal to 17 days of age post fertilisation.
Astfel cum implică termenul «dezvoltare asincronă», trebuie luate în considerare numai cazurile care prezintă abateri de la progresul remodelării țesuturilor specifice în raport cu progresul remodelării altor țesuturi.
For selection of test animals, healthy and normal looking tadpoles of the stock population should be pooled in a single vessel containing an appropriate volume of dilution water.
Unele fenotipuri clasice includ întârzierea sau absența apariției membrelor anteriore în pofida dezvoltării normale sau avansate a membrelor posterioare și a țesuturilor cozii, sau resorbția precoce a branhiilor în raport cu stadiul morfogenezei membrelor posterioare și resorbția cozii.
For developmental stage determination, tadpoles should be individually removed from the pooling tank using a small net or strainer and transferred to a transparent measurement chamber (e.g. 100 mm Petri dish) containing dilution water.
Un animal va fi înregistrat ca prezentând o dezvoltare asincronă dacă acesta nu poate fi atribuit unui stadiu deoarece nu îndeplinește majoritatea criteriilor-reper de dezvoltare pentru un anumit stadiu conform Niewkoop și Faber (8) sau dacă există întârziere sau accelerare extremă a uneia sau a mai multor caracteristici esențiale (de exemplu, coadă complet resorbită, dar fără apariția membrelor anterioare).
For stage determination, it is preferred not to use anaesthesia, however one may individually anaesthetise the tadpoles using 100 mg/l tricaine methanesulfonate (e.g. MS-222), appropriately buffered with sodium bicarbonate (pH 7,0), before handling.
Această evaluare se efectuează calitativ și trebuie să examineze setul complet de caracteristici-reper enumerate de Nieuwkoop și Faber (8).
If used, methodology for appropriately using e.g. MS-222 for anaesthesia should be obtained from experienced laboratories and reported with the test results.
Cu toate acestea, nu este necesară înregistrarea stadiului de dezvoltare a diferitelor caracteristici-reper ale animalelor observate.
Animals should be carefully handled during this transfer in order to minimise handling stress and to avoid any injury.
Animalelor înregistrate ca prezentând o dezvoltare asincronă nu li se atribuie un stadiu de dezvoltare Nieuwkoop și Faber (8).
The developmental stage of the animals is determined using a binocular dissection microscope.
Prin urmare, un criteriu central pentru desemnarea cazurilor de dezvoltare morfologică anormală ca «dezvoltare asincronă» este acela că momentul relativ al remodelării tisulare și al morfogenezei țesuturilor este perturbat în timp ce morfologia țesuturilor afectate nu este evident anormală.
To reduce the ultimate variability in developmental stage, it is important that this staging be conducted as accurately as possible.
Un exemplu pentru ilustrarea acestei interpretări a anomaliilor morfologice macroscopice este faptul că o întârziere a morfogenezei membrelor posterioare în raport cu dezvoltarea altor țesuturi va îndeplini criteriul de «dezvoltare asincronă» în timp ce cazurile care prezintă lipsa membrelor posterioare, degete anormale (de exemplu ectrodactilie, polidactilie), sau alte malformații evidente ale membrelor nu trebuie considerate drept «dezvoltare asincronă».
According to Nieuwkoop and Faber (8), the primary developmental landmark for selecting stage 51 organisms is hind limb morphology.
În acest context, principalele repere morfologice care trebuie evaluate din punctual de vedere al progresului lor metamorfic coordonat trebuie să includă morfogeneza membrelor posterioare, morfogeneza membrelor anterioare, apariția membrelor anterioare, stadiul de resorbție a cozii (în special resorbția înotătoarei caudale) și morfologia capului (de exemplu, dimensiunea branhiilor și stadiul resorbției branhiilor, morfologia maxilarului inferior, proeminența cartilajului Meckel).
The morphological characteristics of the hind limbs should be examined under the microscope.
În funcție de modul de acțiune al substanței chimice, pot apărea diferite fenotipuri morfologice macroscopice.
While the complete Nieuwkoop and Faber (8) guide should be consulted for comprehensive information on staging tadpoles, one can reliably determine stage using prominent morphological landmarks.
Unele fenotipuri clasice includ întârzieri sau absențe ale apariției membrelor anterioare în pofida dezvoltării normale sau avansate a membrelor posterioare și a țesuturi cozii, resorbția precoce a branhiilor în raport cu membrele posterioare și remodelarea cozii.
The following table can be used to simplify and standardise the staging process throughout the study by identifying those prominent morphological landmarks associated with different stages, assuming that development is normal.
Histopatologie
Prominent morphological staging landmarks based on Neuwkoop and Faber guidance
În cazul în care substanța chimică nu cauzează toxicitate evidentă și nu accelerează dezvoltarea sau nu conduce la dezvoltare asincronă, atunci histopatologia glandelor tiroide este evaluată pe baza documentului de orientare adecvat (9).
Prominent Morphological Landmarks
Întârzierea dezvoltării, în absența toxicității, reprezintă un indicator puternic al activității antitiroidiene, însă analiza stadiului de dezvoltare este mai puțin sensibilă și cu valoare diagnostică mai mică decât analiza histopatologică a glandei tiroide.
Developmental Stage
Prin urmare, efectuarea de analize histopatologice ale glandelor tiroide este necesară în acest caz.
Hindlimb
Efectele asupra histologiei glandei tiroide au fost demonstrate în absența unor efecte asupra dezvoltării.
Forelimb
În cazul în care apar modificări în histopatologia tiroidiană, substanța chimică este considerată a avea activitate tiroidiană.
Craniofacial structure
În cazul în care nu sunt observate întârzieri în dezvoltare sau leziuni histologice în glandele tiroide, substanța chimică este considerată a nu avea activitate tiroidiană.
Olfactory nerve morphology
Raționamentul acestei decizii este faptul că glanda tiroidă este sub influența TSH și orice substanță chimică care modifică hormonii tiroidieni circulanți suficient pentru a modifica secreția de TSH va conduce la modificări histopatologice ale glandelor tiroide.
Tail length
Diverse moduri și mecanisme de acțiune pot modifica hormonii tiroidieni circulanți.
For test initiation, all tadpoles should be at stage 51.
Așadar, în timp ce nivelul hormonilor tiroidieni indică un efect tiroidian, el este insuficient pentru a determina modul sau mecanismul de acțiune care determină răspunsul.
The most prominent morphological staging landmark for that stage is hind limb morphology, which is demonstrated in Figure 1.
Deoarece acest parametru nu poate fi analizat prin metode statistice de bază, determinarea unui efect asociat cu expunerea la o substanță chimică trebuie efectuată pe baza opiniei experte a unui patolog.
Hind limb morphology of a stage 51 X. laevis tadpole
Dezvoltarea întârziată (determinată utilizând stadiul de dezvoltare, HLL, BW, SVL)
In addition to the developmental stage selection, an optional size selection of the experimental animals may be used.
Dezvoltarea întârziată poate avea loc prin intermediul unor mecanisme antitiroidiene și prin toxicitate indirectă.
For this purpose, the whole body length (not SVL) should be measured at day 0 for a sub-sample of approximately 20 NF stage 51 tadpoles.
Ușoarele întârzieri de dezvoltare cuplate cu semne evidente de toxicitate indică un posibil efect toxic nespecific.
After calculation of the mean whole body length for this group of animals, minimum and maximum limits for the whole body length of experimental animals can be set by allowing a range of the mean value ± 3 mm (mean values of whole body length range between 24,0 and 28,1 mm for stage 51 tadpoles).
Evaluarea toxicității netiroidiene reprezintă un element esențial al testului pentru a reduce probabilitatea unor rezultate fals pozitive.
However, developmental staging is the primary parameter in determining the readiness of each test animal.
Mortalitatea excesivă reprezintă un indiciu evident că operează alte mecanisme toxice.
Tadpoles exhibiting grossly visible malformations or injuries should be excluded from the assay.
În mod similar, ușoare reduceri în creștere, astfel cum sunt stabilite prin greutatea umedă și/sau SVL sugerează, de asemenea, toxicitate netiroidiană.
Tadpoles that meet the stage criteria described above are held in a tank of clean culture water until the staging process is completed.
Creșteri aparente ale creșterii sunt de obicei observate în cazul substanțelor chimice care afectează negativ dezvoltarea normală.
Once the staging is completed, the larvae are randomly distributed to exposure treatment tanks until each tank contains 20 larvae.
În consecință, prezența unor animale mai mari nu indică neapărat o toxicitate netiroidiană.
Each treatment tank is then inspected for animals with abnormal appearance (e.g., injuries, abnormal swimming behaviour, etc.).
Totuși, toxicitatea tiroidiană nu trebuie stabilită niciodată doar pe baza creșterii.
Overtly unhealthy looking tadpoles should be removed from the treatment tanks and replaced with larvae newly selected from the pooling tank.
Mai degrabă, creșterea, în coroborare cu stadiul de dezvoltare și cu histopatologia tiroidiană, trebuie utilizată pentru a determina activitatea tiroidei.
For more in-depth information on test termination procedures and processing of tadpoles, refer to the OECD Guidance Document on Amphibian Thyroid Histology (9).
De asemenea, pentru determinarea toxicității evidente, trebuie să fie luați în considerare alți parametri incluzând edemul, leziunile hemoragice, letargia, consumul de produse alimentare redus, comportamentul anormal/modificare a înotului, etc. Dacă toate concentrațiile de testare determină semne de toxicitate evidentă, substanța chimică testată trebuie reevaluată la concentrații de testare mai mici înainte de a determina dacă substanța chimică este potențial activă la nivel tiroidian sau nu are activitate tiroidiană.
Day 7 Measurements
Întârzierile de dezvoltare semnificative din punct de vedere statistic, în absența altor semne de toxicitate evidentă, indică faptul că substanța chimică are activitate tiroidiană (antagonistă).
On day 7, five randomly chosen tadpoles per replicate are removed from each test tank.
În absența unor răspunsuri statistice solide, acest rezultat poate fi sporit cu rezultate obținute în urma histopatologiei tiroidiene.
The random procedure used should give each organism on test equal probability of being selected.
Analize statistice
Tadpoles not selected are returned to the tank of origin and the selected tadpoles are humanely euthanised in 150 to 200 mg/l e.g. MS-222, appropriately buffered with sodium bicarbonate to achieve pH 7,0.
Pentru toți parametri studiați cantitativi continui (HLL SVL, greutate umedă) care prezintă o relația doză-răspuns monotonă trebuie aplicat testul Jonckheere-Terpstra în manieră descrescătoare pentru a stabili existența unui efect semnificativ al tratamentului.
The euthanised tadpoles are rinsed in water and blotted dry, followed by body weight determination to the nearest milligram.
Ambele teste sunt efectuate pe reziduurile de la o ANOVA.
Hind limb length, snout to vent length, and developmental stage (using a binocular dissection microscope) are determined for each tadpole.
Se poate recurge la opinia experților în locul acestor teste formale privind normalitatea și omogenitatea varianței, deși sunt preferate testele formale.
Day 21 Measurements (Test Termination)
În cazul în care se constată o anormalitate sau o eterogenitate a varianței, trebuie căutată o normalizare, o transformare de stabilizare a varianței.
At test termination (day 21), the remaining tadpoles are removed from the test tanks and humanely euthanised in 150 to 200 mg/l e.g. MS-222, appropriately buffered with sodium bicarbonate, as above.
În cazul în care datele (probabil după o transformare) sunt distribuite în mod normal cu o varianță omogenă, un efect semnificativ al tratamentului este determinat prin testul Dunnett.
Tadpoles are rinsed in water and blotted dry, followed by body weight determination to the nearest milligram.
Nu se preconizează o mortalitate semnificativă, însă aceasta trebuie evaluată prin testul Cochran-Armitage regresiv dacă datele sunt compatibile o relație doză-răspuns monotonă, iar altfel, prin testul Exact al lui Fisher cu o ajustare Bonferroni-Holm.
Developmental stage, SVL, and hind limb lengths are measured for each tadpole.
Un efect semnificativ al tratamentului asupra stadiului de dezvoltare este determinat prin aplicarea regresivă a testului Jonckheere-Terpstra aplicat medianelor replicilor.
All larvae are placed in Davidson's fixative for 48 to 72 hours either as whole body samples or as trimmed head tissue samples containing the lower jaw for histological assessments.
În mod alternativ, și de preferat, testul Jonckheere multicuantic de la a 20-a la a 80-a procentilă trebuie să fie utilizat pentru determinarea efectului, deoarece ia în considerare modificările profilului distribuției.
For histopathology, a total of five tadpoles should be sampled from each replicate tank.
Unitatea de analiză corespunzătoare este replica, astfel încât datele constau în mediane ale replicilor dacă este utilizat testul Jonckheere-Terpstra sau testul Mann-Whitney U, sau mediile replicilor dacă este utilizat testul Dunnett.
Since follicular cell height is stage dependent (10), the most appropriate sampling approach for histological analyses is to use stage-matched individuals, whenever possible.
Relația monotonă doză-răspuns poate fi evaluată vizual cu ajutorul mediilor sau al medianelor replicilor și tratamentului sau cu ajutorul testelor formale, precum cele descrise anterior (11).
In order to select stage-matched individuals, all larvae should first be staged prior to selection and subsequent processing for data collection and preservation.
În condițiile în care se utilizează sub cinci replici per tratament sau control, versiunile de permutare exacte ale testelor Jonckheere-Terpstra și Mann-Whitney trebuie utilizate dacă sunt disponibile.
This is necessary because normal divergence in development will result in differential stage distributions within each replicate tank.
Semnificația statistică a tuturor testelor indicate este considerată la nivelul de 0,05.
Animals selected for histopathology (n = 5 from each replicate) should be matched to the median stage of the controls (pooled replicates) whenever possible.
Figura 4 reprezintă o organigramă pentru efectuarea de teste statistice asupra datelor continue.
If there are replicate tanks with more than five larvae at the appropriate stage, then five larvae are randomly selected.
Diagramă a metodelor statistice pentru datele privind răspunsuri continue.
If there are replicate tanks with less than five larvae at the appropriate stage, then randomly selected individuals from the next lower or upper developmental stage should be sampled to reach a total sample size of five larvae per replicate.
Considerații speciale privind analiza datelor
Preferably, the decision to sample additional larvae from either the next lower or upper developmental stage should be made based on an overall evaluation of the stage distribution in the control and chemical treatments.
Utilizarea nivelurilor de tratament compromise
That is, if the chemical treatment is associated with a retardation of development, then additional larvae should be sampled from the next lower stage.
O serie de factori trebuie luați în considerare pentru a determina dacă o replică sau întregul tratament demonstrează toxicitate evidentă și trebuie excluși din analiză.
In turn, if the chemical treatment is associated with an acceleration of development, then additional larvae should be sampled from the next upper stage.
Toxicitatea evidentă se caracterizează printr-o mortalitate > 2 indivizi în orice replică care nu poate fi explicată decât prin toxicitate și nu printr-o eroare tehnică.
In cases of severe alterations of tadpole development due to treatment with a test chemical, there might be no overlap of the stage distribution in the chemical treatments with the calculated control median developmental stage.
Alte semne ale toxicității evidente includ hemoragia, comportamentele anormale, modalitățile anormale de înot, anorexia și orice alt semn clinic de boală.
In only these cases, the selection process should be modified by using a stage different from the control median stage to achieve a stage-matched sampling of larvae for thyroid histopathology.
În ceea ce privește semnele subletale de toxicitate, pot fi necesare evaluări calitative care trebuie întotdeauna realizate în raport cu un grup de control dintr-un vas cu apă curată.
Furthermore, if stages are indeterminate (i.e., asynchrony), then 5 tadpoles from each replicate should be randomly chosen for histological analysis.
Vase de control cu solvent
The rationale underlying sampling of any larvae that are not at a stage equivalent to the control median developmental stage should be reported.
Utilizarea unui solvent trebuie avută în vedere ca ultimă soluție, după epuizarea tuturor celorlalte opțiuni de livrare a substanței chimice.
Determination of Biological Endpoints
În cazul utilizării unui solvent, este imperativă utilizarea unui grup de control într-un vas cu apă curată.