natgillin/translations-raw huggingface dataset:
mortality of adult worms after three weeks exposure and the full record of juveniles at the end of the definitive test;
durata testului de reproducere poate (dar nu trebuie) să fie mai mică, adică patru în loc de șase săptămâni;
any observed physical or pathological symptoms and behavioural changes in the test organisms;
cu toate acestea, durata testului de stabilire a intervalului nu trebuie modificată;
the LC50, the NOEC and/or ECx (e.g. EC50, EC10) for reproduction if some of them are applicable with confidence intervals, and a graph of the fitted model used for its calculation all information and observations helpful for the interpretation of the results.
având în vedere dimensiunea mică a viermilor tineri, utilizarea metodei de colorare este foarte recomandată pentru numărare;
Deviations from procedures described in this test method and any unusual occurrences during the test.
criteriul de validitate legat de «numărul de viermi tineri din fiecare vas de testare din proba de control» trebuie schimbat cu «50».
Frankfurt für das Umweltbundesamt (Berlin), FE-Vorhaben 106 03 051/01.
Apendicele 6
Chapter C.8 of this Annex, Toxicity for Earthworms.
Descriere detaliată a tehnicilor de extracție
Part 1:
Colorarea cu roșu Bengal
Part 2:
Această metodă, dezvoltată inițial în ecologia limnică (1) a fost propusă pentru prima dată în scopul numărării enchitreidelor tinere din testul de reproducere a enchitreidelor de W. de Coen (Universitatea din Ghent, Belgia).
Determination of effects on reproduction, No. 11268-2.
O versiune modificată (roșu Bengal amestecat cu formaldehidă în loc de etanol) a fost dezvoltată independent de RIVM Bilthoven (2)(3).
For the purpose of this test method the following definitions are applicable:
La sfârșitul testului final (adică după șase săptămâni), solul din vasele de testare se transferă într-un recipient cu adâncime mică.
In this test the effect concentrations are expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
În acest scop este util un vas Bellaplast sau un bazin fotografic cu fund canelat, cel din urmă, datorită canelurilor, împiedică deplasarea viermilor în câmpul de observație.
(No lethal concentration) is the concentration of a test chemical that does not kill any of exposed test organisms within a given time period.
Viermii tineri sunt fixați cu etanol (aproximativ 5 ml per probă duplicat).
In this test the LC0 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
Vasele se umplu apoi cu apă până la un strat de 1-2 cm.
(Median lethal concentration) is the concentration of a test chemical kills 50 % of exposed test organisms within a given time period.
Se adaugă câteva picături (200-300 μl) de roșu Bengal (soluție de 1 % în etanol) (0,5 % eozină este o altă opțiune) după care cele două componente se amestecă cu grijă.
In this test the LC50 is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
După 12 ore, viermii ar trebui să aibă pete de culoare roșiatică și ar trebui să fie ușor de numărat deoarece se vor afla pe suprafața substratului.
LOEC (Lowest Observed Effect Concentration) is the lowest test chemical concentration that has a statistically significant effect (p < 0,05).
Utilizarea unor lupe iluminate (dimensiune a lupei de 100 × 75 mm cu un factor de mărire de 2-3) va facilita, de asemenea, numărătoarea.
In this test the LOEC is expressed as a mass of test chemical per dry mass of the test soil.
Tehnica colorării reduce timpul de numărare la câteva minute pentru fiecare vas și, orientativ, ar trebui să fie posibil ca o singură persoană să evalueze toate vasele din cadrul unui test în maximum două zile.
All test concentrations above the LOEC should normally show an effect that is statistically different from the control.
Extracția umedă
Any deviations from the above in identifying the LOEC must be justified in the test report.
Extracția umedă trebuie începută imediat după încheierea testului.
NOEC (No Observed Effect Concentration) is the highest test chemical concentration immediately below the LOEC at which no effect is observed.
Solul din fiecare vas de testare se pune în site de plastic cu o dimensiune a ochiurilor de aproximativ 1 mm.
Reproduction rate is the mean number of juvenile worms produced per a number of adults over the test period.
Sitele se suspendă apoi în boluri de plastic, fără a atinge fundul.
Determination of the maximum water holding capacity
Bolurile se umplu atent cu apă până când probele din site se află în întregime sub suprafața apei.
Determination of the water holding capacity of the artificial soil
Pentru a asigura o rată de recuperare de peste 90 % dintre viermii prezenți, trebuie utilizată o perioadă de extracție de 3 zile la 20 ± 2 °C.
The following method has been found appropriate.
La finalul perioadei de extracție, sitele se scot, iar apa (cu excepția unei cantități mici) se decantează ușor, având grijă să nu se agite sedimentul de pe fundul bolurilor.
It is described in Annex C of the ISO DIS 11268-2.
Ulterior, bolurile de plastic se agită ușor pentru a pune sedimentul în suspensie în apa de deasupra.
Collect a defined quantity (e.g. 5 g) of the test soil substrate using a suitable device (auger tube etc.).
Apa se transferă într-o cutie Petri și, după ce particulele de sol se depun, enchitreidele pot fi identificate, scoase și numărate utilizând un stereomicroscop și o pensetă fină din oțel.
Cover the bottom of the tube with a piece of filter paper and, after filling with water, place it on a rack in a water bath.
Flotația
The tube should be gradually submerged until the water level is above to the top of the soil.
O metodă bazată pe flotație a fost descrisă într-o notă de R. Kuperman (4).
It should then be left in the water for about three hours.
După fixarea conținutului unui vas de testare cu etanol, solul se inundă cu Ludox (silice coloidală AM-30, suspensie apoasă de 30 % în greutate) până la 10-15 mm deasupra suprafeței solului.
Since not all water absorbed by the soil capillaries can be retained, the soil sample should be allowed to drain for a period of two hours by placing the tube onto a bed of very wet finely ground quartz sand contained within a closed vessel (to prevent drying).
După o amestecare completă a solului cu agentul de flotație timp de 2-3 minute, viermii tineri care plutesc la suprafață pot fi numărați cu ușurință.
The sample should then be weighed, dried to constant mass at 105 °C.
Apendicele 7
The water holding capacity (WHC) can then be calculated as follows:
Prezentare generală a evaluării statistice a datelor (determinarea NOEC)
WHCin % of dry mass
Testul Dunnett
Where:
Sunt ambele probe de control egale?
S water-saturated substrate + mass of tube + mass of filter paper
Se exclude proba de control fără solvent
T tare (mass of tube + mass of filter paper)
Se exclude proba de control fără solvent
D dry mass of substrate
Testul U-Bonferroni
REFERENCES:
Testul Dunn
Determination of soil pH
Ambele probe de control ar putea fi combinate
The following method for determining the pH of a soil sample is based on the description in ISO 10390 (Soil Quality — Determination of pH).
Probă de control suplimentară cu solvent?
A defined quantity of soil is dried at room temperature for at least 12 hours.
Testare statistică nerecomandată
A suspension of the soil (containing at least 5 grams of soil) is then made up in five times its volume of either 1 M of analytical grade potassium chloride (KCl) or a 0,01 M solution of analytical grade calcium chloride (CaCl2).
Cel puțin patru probe duplicat per tratament?
The suspension is then shaken thoroughly for five minutes.
Nereușită
After shaking, the suspension is left to settle for at least 2 hours but not for longer than 24 hours.
Variație omogenă?
The pH of the liquid phase is then measured using a pH-meter, that has been calibrated before each measurement using an appropriate series of buffer solutions (e.g. pH 4,0 and 7,0).
Distribuție normală?
Culturing conditions of Enchytraeus sp.
TEST DE REPRODUCERE A RÂMELOR (EISENIA FETIDA/EISENIA ANDREI)
Enchytraeids of the species Enchytraeus albidus (as well as other Enchytraeus species) can be cultured in large plastic boxes (e.g. 30 × 60 × 10 cm) filled with a 1:1 mixture of artificial soil and natural, uncontaminated garden soil.
Prezenta metodă de testare este echivalentă cu Orientarea OCDE privind testarea (TG) nr.
Compost material must be avoided since it could contain toxic chemicals such as heavy metals.
222 (2004).
Fauna should be removed from the soil before use (e.g. by deep-freezing).
Aceasta este concepută pentru evaluarea efectelor substanțelor chimice din sol asupra ratei de reproducere (și a altor puncte finale subletale) a speciei de râme Eisenia fetida (Savigny 1826) sau Eisenia andrei (Andre 1963) (1)(2).
A substrate comprising only of artificial soil can also be used but the reproduction rate may be lower than that obtained with a mixed soil substrate.
Testul a făcut obiectul unui ring test (3).
The substrate used for culturing should have a pH of 6,0 ± 0,5.
Există o metodă de testare a toxicității acute asupra râmelor (4).
The culture is kept in the dark at a temperature of 15 to 20 °C ± 2 °C.
S-au publicat numeroase alte orientări internaționale și naționale pentru testele de toxicitate acută și cronică asupra râmelor (5)(6)(7)(8).
Temperatures higher than 23 °C must be avoided.
Eisenia fetida /Eisenia andrei este considerat unul dintre reprezentanții faunei din sol și, în special, al râmelor.
The soil must be kept moist but not wet.
Sunt disponibile informații de referință privind ecologia râmelor și utilizarea acestora în cadrul testelor ecotoxicologice (7)(9)(10)(11)(12).
The correct soil moisture content is indicated when small drops of water appear between the fingers when the soil is gently squeezed.
Râmele adulte sunt expuse la o serie de concentrații ale substanței chimice de testare, fie amestecată în sol, fie, în cazul pesticidelor, aplicată în sau pe sol utilizând proceduri conforme cu modelul de utilizare a substanței chimice respective.
The production of anoxic conditions must be avoided by ensuring that covers to culture containers allow adequate gaseous exchange with the atmosphere.
Metoda de aplicare depinde de scopul testului.
The soil should be carefully broken up each week to facilitate aeration.
Seria de concentrații de testare este selectată pentru a include concentrațiile susceptibile de a cauza efecte subletale și letale pe parcursul unei perioade de opt săptămâni.
The worms can be fed on rolled oats.
Mortalitatea și efectele asupra creșterii la râmele adulte sunt determinate după 4 săptămâni de expunere.
The oats should be stored in sealed vessels and autoclaved or heated before use in order to avoid infestation with flour mites (e.g. Glyzyphagus sp., Astigmata, Acarina) or predacious mites [e.g. Hypoaspis (Cosmolaelaps) miles, Gamasida, Acarina].
Adulții sunt apoi extrași din sol, iar efectele asupra reproducerii sunt evaluate după alte 4 săptămâni prin calcularea numărului de descendenți prezenți în sol.
After a heat treatment, the food should be ground so that it can easily be strewn on the soil surface.
Rata de reproducere a râmelor expuse la substanța chimică de testare este comparată cu cea din proba (probele) de control în vederea determinării (i) concentrației la care nu se observă niciun efect (NOEC) și/sau a (ii) valorii ECx (de exemplu, EC10, EC50) utilizând un model de regresie pentru a estima concentrația care ar putea cauza o reducere cu x % a ratei de reproducere.
From time to time, the rolled oats can be supplemented by the addition of vitamins, milk and cod-liver oil.
Concentrațiile de testare trebuie să acopere valoarea ECx (de exemplu, EC10, EC50) astfel încât valoarea ECx să fie mai degrabă interpolată decât extrapolată (pentru definiții, a se vedea apendicele 1).
Other suitable food sources are baker's yeast and the fish food “Tetramin”.
Trebuie să fie disponibile următoarele informații privind substanța chimică de testare pentru a putea defini procedurile de testare corespunzătoare:
Feeding takes place approximately twice a week.
solubilitatea în apă;
An appropriate quantity of rolled oats is strewn on the soil surface or carefully mixed into the substrate when breaking up the soil to facilitate aeration.
presiunea de vapori;
The absolute amount of food provided depends on the number of worms present in the substrate.
și informații privind evoluția și comportamentul în mediu, dacă este posibil (de exemplu, viteza de fotoliză și viteza de hidroliză în cazul în care acestea sunt relevante pentru modelele de aplicare).
As a guide, the amount of food should be increased if it is all consumed within one day of being provided.
Această metodă de testare se aplică tuturor substanțelor chimice de testare, indiferent de solubilitatea lor în apă.
Conversely, if food still remains on the surface at the time of the second feeding (one-week later) it should be reduced.
Metoda de testare nu se aplică substanțelor chimice volatile, definite ca fiind substanțe chimice în cazul cărora constanta lui Henry sau coeficientul de partiție sol/apă este mai mare de unu sau substanțelor chimice în cazul cărora presiunea de vapori depășește 0,0133 Pa la o temperatură de 25 °C.
Food contaminated with fungal growth should be removed and replaced.
Prezenta metodă de testare nu ia în considerare posibila degradare a substanței chimice de testare pe parcursul testului.
After three months, the worms should be transferred into a freshly prepared substrate.
În consecință, nu se poate garanta menținerea concentrațiilor de expunere la valorile inițiale pe tot parcursul testului.
Culturing conditions are deemed satisfactory if the worms:
În acest caz, se recomandă efectuarea unei analize chimice a substanței chimice de testare la începutul și la finalul testului.
do not try to leave the soil substrate, (b) move quickly through the soil, (c) exhibit a shiny outer surface without adhering soil particles, (d) are more or less whitish in colour, (e) exhibit a variety of age ranges in the cultures and (f) reproduce continuously.
Trebuie determinată valoarea NOEC și/sau ECx a unei substanțe chimice de referință pentru a garanta caracterul adecvat al condițiilor de testare din laborator și pentru a verifica regularitatea în timp din punct de vedere statistic a răspunsului organismelor de testare.
Test performance with other Enchytraeus species
Este recomandabil ca o substanță chimică de referință să fie testată cel puțin o dată pe an sau, dacă testarea se desfășoară la o frecvență mai redusă, în paralel cu determinarea toxicității unei substanțe chimice de testare.
Selection of species
Carbendazimul și benomilul reprezintă substanțe chimice de referință corespunzătoare care au demonstrat că afectează reproducerea (3).
Species other than E. albidus may be used but the test procedure and the validity criteria should be adapted accordingly.
Trebuie observate efecte semnificative între (a) 1 și 5 mg de ingredient activ/kg de masă uscată sau (b) 250-500 g/ha sau 25-50 mg/m2.
Since many Enchytraeus-species are readily available and can be satisfactorily maintained in the laboratory, the most important criterion for selecting a species other than E. albidus is ecological relevance and, additionally, comparable sensitivity.
Pentru ca rezultatul unui test să fie considerat valid, probele de control trebuie să îndeplinească următoarele criterii:
There may also be formal reasons for a change of species.
fiecare probă duplicat (conținând 10 adulți) trebuie să fi produs ≥ 30 de exemplare tinere la finalul testului;
For example, in countries where E. albidus does not occur and cannot be imported (e.g. due to quarantine restrictions), it will be necessary to use another Enchytraeus species.
coeficientul de variație al reproducerii trebuie să fie ≤ 30 %;
Examples of suitable alternative species
rata mortalității în rândul adulților pe parcursul celor 4 săptămâni inițiale ale testului trebuie să fie ≤10 %.
In recent years, this species has often been used in ecotoxicological studies because of the simplicity of its breeding and testing.
Justificarea trebuie inclusă în raport.
However, it is small and this makes handling more difficult compared with E. albidus (especially at stages prior to use of the staining method).
Trebuie utilizate recipiente de testare din sticlă sau dintr-un alt material chimic inert cu o capacitate de aproximativ unu până la doi litri.
E. crypticus has not been found to exist with certainty in the field, having only been described from earthworm cultures.
Recipientele trebuie să aibă o secțiune orizontală de aproximativ 200 cm2 astfel încât să se obțină o adâncime a substratului umed de aproximativ 5-6 cm atunci când se adaugă 500-600 g de masă uscată de substrat.
Its ecological requirements are therefore not known.
Modelul capacului recipientului trebuie să permită schimbul de gaze între substrat și atmosferă și accesul luminii (de exemplu, prin intermediul unui capac transparent perforat) fără să permită ieșirea râmelor din recipient.
This name probably covers a group of closely related species that are morphologically difficult to distinguish.
În cazul în care cantitatea de substrat de testare utilizată este mult mai mare de 500-600 g per recipient de testare, numărul de râme trebuie crescut proporțional.
Its use for testing is not recommended until the individuals used in a test can be identified to species.
baie de apă.
E. buchholzi is usually found in meadows and disturbed sites such as roadsides.
În cadrul acestui test se utilizează un sol artificial (5)(7) având următoarea compoziție (pe baza greutății uscate, uscat la o temperatură de 105 C până la obținerea unei greutăți constante):
This species was originally known as E. “minutus”, but has been recently described (1).
10 % mușchi de turbă (cu pH-ul cât mai apropiat posibil de valoarea de 5,5-6,0, fără reziduuri vizibile de plante, fin măcinat, uscat până la atingerea unui grad de umiditate măsurat);
It was first found by U. Graefe (Hamburg) in a meadow close to St. Peter-Ording (Schleswig-Holstein, Germany).
20 % argilă caolinică (cu un conținut de caolinit de preferat mai mare de 30 %);
E. luxuriosus is approximately half the size of E. albidus but larger than the other species discussed here;
0,3-1,0 % carbonat de calciu (CaCO3, pulverizat, de puritate analitică) pentru a obține un pH inițial de 6,0 ± 0,5.
this could make it a good alternative to E. albidus.
70 % nisip cuarțos uscat cu aer (în funcție de cantitatea de CaCO3 necesară), nisip predominant fin cu peste 50 % din particule măsurând între 50 și 200 de microni.
This species has hitherto been reported from German and Spanish mineral soils, where it is common but not usually very abundant.
cantitatea de CaCO3 necesară va depinde de componentele substratului de sol, inclusiv hrana, și trebuie determinată prin măsurarea subeșantioanelor de sol chiar înainte de test. pH-ul este măsurat într-o probă amestecată într-o soluție 1 M de clorură de potasiu (KCl) sau într-o soluție de 0,01 M de clorură de calciu (CaCl2) (13).
In comparison to other small species of this genus, it is relatively easy to identify.
conținutul de carbon organic al solului artificial poate fi redus, de exemplu, prin scăderea conținutului de turbă la 4-5 % și prin creșterea în consecință a conținutului de nisip.
Nothing is known about its behaviour in laboratory tests or its sensitivity to chemicals.
S-a demonstrat că Eisenia fetida poate satisface criteriile de validitate privind reproducerea când este testată pe soluri naturale cu conținut mai scăzut de carbon organic (de exemplu 2,7 %) (14) și s-a constatat experimental că aceasta se poate obține și în soluri artificiale cu 5 % turbă.
It has, however, been found to be easy to culture (E. Belotti, personal communication).
Prin urmare, nu este necesar ca înainte de utilizarea unui astfel de sol în cadrul unui test final să se demonstreze caracterul adecvat al solului artificial pentru a permite conformitatea testului cu criteriile de validitate, cu excepția cazului în care conținutul de turbă este mai mic decât valorile specificate mai sus.
Breeding conditions
Nota 3:
All the Enchytraeus-species mentioned above can be cultured in the same substrates used for E. albidus.
când se utilizează sol natural în cadrul unui test suplimentar (de exemplu, la un nivel superior), trebuie, de asemenea, să se demonstreze caracterul adecvat al solului și îndeplinirea criteriilor de validitate.
Their smaller size means that the culture vessels can be smaller and that, while the same food can be used, the ration size must be adjusted.
Se amestecă bine constituenții uscați ai solului (de exemplu, într-un amestecător de laborator mare) într-un spațiu bine ventilat.
The life-cycle of these species is shorter than for E. albidus and feeding should be carried out more frequently.
Înainte de începerea testului, solul artificial uscat este umezit prin adăugarea de apă deionizată pentru a obține aproximativ jumătate din conținutul final de apă, reprezentând între 40 % și 60 % din capacitatea maximă de retenție a apei (corespunzând cu 50 ± 10 % din masa uscată umezită).
The test conditions are generally the same as those applying to E. albidus, except that:
Astfel, se obține un substrat din care nu se scurge apă stătătoare sau liberă atunci când este strâns în mână.
the size of the test vessel can (but need not) be smaller;
Capacitatea de retenție a apei (WHC) maximă a solului artificial este determinată conform procedurilor descrise în apendicele 2, ISO 11274 (15) sau un standard UE echivalent.
the duration of the reproduction test can (but need not) be shorter, i.e. four instead of six weeks;
În cazul în care substanța chimică de testare se aplică pe suprafața solului sau este amestecată în sol fără apă, cantitatea finală de apă poate fi amestecată în solul artificial în timpul pregătirii solului.
the validity criterion relating to “number of juveniles per test vessel in the control” should be changed to “50”.
Gradul de umiditate trebuie să fie monitorizat pe întreaga perioadă a testului prin cântărirea periodică a recipientelor (a se vedea punctele 26 și 30).
Appendix 6
Specia utilizată în cadrul testului este Eisenia fetida sau Eisenia andrei (1)(2).
Detailed description of extraction techniques
Pentru a începe testul sunt necesare râmele adulte cu vârsta între două luni și un an și cu un clitellum.
Staining with Bengal red
Râmele trebuie să fie selectate dintr-o cultură sincronizată cu o structură de vârstă relativ omogenă (apendicele 4).
At the end of the Definitive Test (i.e. after six weeks), the soil in the test vessels is transferred to a shallow container.
În această perioadă râmele trebuie să fie hrănite cu același tip de hrană care va fi utilizat în cadrul testului (a se vedea punctele 31-33).
The juveniles are fixed with ethanol (approx.
Râmele sunt spălate înainte de cântărire (cu apă deionizată), iar excesul de apă se îndepărtează prin așezarea pentru scurt timp a râmelor pe hârtie de filtru.
5 ml per replicate).
Masa umedă a fiecărei râme trebuie să fie cuprinsă între 250 și 600 mg.
A few drops (200 to 300 μl) of Bengal red (1 % solution in ethanol) are added (0,5 % eosin is an alternative) and the two components are mixed carefully.
amestecarea substanței chimice de testare în sol (a se vedea punctele 19-21) sau aplicarea pe suprafața solului (a se vedea punctele 22-24).
After 12 hours, the worms should be stained a reddish colour and should be easy to count because they will be lying on the substrate surface.
Selectarea metodei adecvate depinde de scopul testului.
Alternatively, the substrate/alcohol mixture can be washed through a sieve (mesh size: 0,250 mm) before counting the worms.
Alegerea metodei adecvate depinde de caracteristica substanței chimice și de scopul testului.
Using this procedure, the kaolinite, peat, and some of the sand will be washed out and the reddish coloured worms will be easier to see and count.
Cu toate acestea, se pot impune proceduri de aplicare conforme cu practica agricolă obișnuită (de exemplu, pulverizarea preparatelor lichide sau utilizarea de preparate speciale de pesticide precum granule sau produse de tratare a semințelor).