natgillin/translations-raw huggingface dataset:
In this case the provision of fresh substrate and/or a reduction in stocking density is recommended.
Avertisment – Nămolul de digestie produce gaze inflamabile care prezintă risc de incendiu și de explozie:
Techniques for counting juvenile worms hatched from cocoons
el conține și organisme potențial patogene, de aceea, trebuie luate măsuri de precauție corespunzătoare în momentul manipulării acestuia.
Hand sorting of worms from the soil substrate is very time-consuming.
Din motive de siguranță, a se evita utilizarea de vase din sticlă pentru colectarea nămolului.
Two alternative methods are therefore recommended:
Imediat înainte de utilizare, se amestecă nămolul prin agitare ușoară și se strecoară cu o strecurătoare cu ochiuri de 1 mm2 [a se vedea punctul 12 litera (f)] înainte de a se introduce într-un flacon corespunzător [punctul 12 litera (g)] al cărui spațiu superior este traversat de un curent de azot.
The test containers are placed in a water bath initially at a temperature of 40 °C but rising to 60 °C.
Se prelevează o probă pentru măsurarea concentrației materiilor solide uscate totale [a se vedea, de exemplu, ISO 11 923 (13) sau un standard UE echivalent].
After a period of about 20 minutes the juvenile worms should appear at the soil surface from which they can be easily removed and counted.
A se utiliza în general nămol fără diluție.
The test soil may be washed through a sieve using the method developed by van Gestel et al.
Concentrația solidelor este de obicei cuprinsă între 2 % și 4 % (g/v).
providing the peat and the manure or oatmeal added to the soil were ground to a fine powder.
Trebuie verificată valoarea pH-ului nămolului și, dacă este necesar, ajustată la 7 ± 0,5.
Two 0,5 mm mesh size sieves (diameter 30 cm) are placed on top of each other.
Substratul de testare
The contents of a test container are washed through the sieves with a powerful stream of tap water, leaving the young worms and cocoons mainly on the upper sieve.
Se dizolvă 10 g de bulion nutritiv (de exemplu oxid), 10 g de extract de drojdie și 10 g de D-glucoză în apa deionizată și se diluează la 100 ml.
It is important to note that the whole surface of the upper sieve should be kept wet during this operation so that the juvenile worms float on a film of water, thereby preventing them from creeping through the sieve pores.
Se sterilizează prin filtrare cu un filtru membranar de 0,2 μm [punctul 12 litera (h)] și se utilizează imediat sau se depozitează la o temperatură de 4 °C maximum 1 zi.
Best results are obtained when a showerhead is used.
Se pregătește o soluție stoc separată pentru fiecare substanță chimică de testare solubilă în apă astfel încât să conțină, de exemplu, 10 g/l din substanța chimică în apa de diluție fără oxigen (punctul 14).
Once all the soil substrate has been washed through the sieve, juveniles and cocoons can be rinsed from the upper sieve into a bowl.
Se utilizează volume corespunzătoare din aceste soluții stoc pentru a pregăti amestecurile de reacție cu concentrații crescătoare.
The contents of the bowl are then left to stand allowing empty cocoons to float on the water surface and full cocoons and young worms to sink to the bottom.
Alternativ, se pregătește o serie de soluții de diluare din fiecare soluție stoc astfel încât volumul adăugat la flacoanele de testare să fie identic cu cel pentru fiecare concentrație finală necesară.
The worms can be removed for counting using a needle or a pair of tweezers.
Pentru substanțele chimice care nu sunt suficient de solubile în apă, a se consulta standardul ISO 10 634 (12) sau un standard UE echivalent.
Experience has shown that method (a) is better suited to extraction of juvenile worms that might be washed through even a 0,5 mm sieve.
În cazul în care trebuie utilizat un solvent organic, a se evita solvenți precum cloroformul și tetraclorura de carbon cunoscute ca fiind inhibitoare puternice ale producției de metan.
The efficiency of the method used to remove the worms (and cocoons if appropriate) from the soil substrate should always be determined.
Se prepară o soluție cu o concentrație corespunzătoare de substanță chimică insolubilă în apă într-un solvent volatil adecvat, de exemplu, acetonă, eter dietilic.
If juveniles are collected using the hand sorting technique it is advisable to carry out the operation twice on all samples.
Se adaugă volumele necesare de soluție de solvent în flacoanele de testare goale [punctul 12 litera (b)] și se evaporă solventul înainte de adăugarea nămolului.
Are both controls equal?
Pentru alte tratamente, ase consulta standardul ISO 10 634 (12) sau un standard UE echivalent, însă a se avea în vedere faptul că orice agent tensioactiv utilizat pentru producere de emulsii poate fi inhibitor pentru producția anaerobă de gaze.
U-Test
Dacă se estimează că prezența unor solvenți organici și a unor emulsionanți cauzează artefacte, substanța chimică de testare ar putea fi adăugată direct la amestecul de testare sub formă de pudră sau sub formă lichidă.
t-Test Bonferroni — U-Test
Substanțele chimice volatile și substanțele chimice de testare lichide insolubile în apă pot fi injectate în flacoane de ser inoculat cu ajutorul unor microseringi [punctul 12 litera (i)].
Jonckheere-Terpstra Test
Se adaugă substanțele chimice de testare în flacoane pentru a obține o serie geometrică de concentrații, de exemplu, 500 mg/l, 250 mg/l, 125 mg/l, 62,5 mg/l, 31,2 mg/l și 15,6 mg/l.
Shirley Test
În cazul în care nu se cunoaște intervalul de toxicitate din soluții chimice similare, se efectuează mai întâi un test preliminar de stabilire a intervalului la concentrațiile de 1000 mg/l, 100 mg/l și 10 mg/l pentru determinarea intervalului corespunzător.
Transform data
Se prepară o soluție apoasă de 3,5-diclorfenol (10 g/l) adăugând treptat cantitatea minimă de 5 mol/l de soluție de hidroxid de sodiu la materia solidă, agitând în același timp până la dizolvare.
William Test
Se adaugă apoi apă de diluție deoxigenată (punctul 14) la volumul necesar;
Exclude control without solvent Both controls might be pooled
sonicarea poate favoriza diluarea.
C.34.
Pot fi utilizate și alte substanțe chimice de referință atunci când intervalul mediu al EC50 a fost obținut în cadrul a cel puțin trei teste cu inoculi diferiți (surse diferite sau momente diferite de colectare).
DETERMINATION OF THE INHIBITION OF THE ACTIVITY OF ANAEROBIC BACTERIA — REDUCTION OF GAS PRODUCTION FROM ANAEROBICALLY DIGESTING (SEWAGE) SLUDGE
INTERFERENȚĂ/ERORI
This test method is equivalent to the OECD test guideline (TG) 224 (2007).
Se pare că anumiți constituenți ai nămolului ar putea reacționa cu potențiali inhibitori anulându-le efectele asupra microorganismelor determinând o inhibare mai redusă sau nulă.
Chemicals discharged to the aquatic environment pass through both aerobic and anaerobic zones, where they may be degraded and/or can inhibit bacterial activity;
De asemenea, dacă nămolul conține deja o substanță chimică inhibitoare, ar putea fi obținute rezultate eronate atunci când substanța chimică respectivă este supusă testării.
in some cases they can remain in anaerobic zones undisturbed for decades or longer.
În afară de aceste posibilități, există o serie de factori identificați care pot conduce la rezultate false.
In waste water treatment the first stage, primary settlement, is aerobic in the supernatant liquid and anaerobic in the subnatant sludge.
Aceștia sunt enumerați în apendicele 3 împreună cu metodele pentru eliminarea sau cel puțin pentru reducerea erorilor.
This is followed in the secondary stage by an aerobic zone in the activated sludge aeration tank and an anaerobic zone in the subnatant sludge in the secondary settlement tank.
Numărul probelor duplicat necesare depinde de gradul de precizie necesar pentru indicii de inhibare.
Sludge from both of these stages is usually subjected to anaerobic treatment, producing methane and carbon dioxide which are normally used to produce electricity.
În cazul în care capacele flacoanelor sunt suficient de etanșe la gaze pe întreaga durată a testului, se pregătește un singur lot (cel puțin trei probe duplicat) de flacoane de testare la fiecare concentrație necesară.
In the wider environment, chemicals reaching sediments in bays, estuaries and the sea are likely to remain in these anaerobic zones indefinitely if they are not biodegradable.
Similar, se pregătește un lot de flacoane cu substanța chimică de referință și un set de probe de control.
Larger proportions of some chemicals will preferably reach these zones because of their physical properties, such as low solubility in water, high adsorption to suspended solids, as well as inability to be biodegraded aerobically.
Cu toate acestea, în cazul în care fiabilitatea capacelor flacoanelor este asigurată doar pentru o străpungere sau pentru câteva străpungeri, se pregătește un lot (de exemplu, trei probe duplicat) de flacoane de testare pentru fiecare interval (t) pentru care sunt necesare rezultate la toate concentrațiile unei substanțe chimice de testare care trebuie testate.
While it is desirable that chemicals discharged to the environment should be biodegradable under both aerobic and anaerobic conditions, it is essential that such chemicals do not inhibit the activity of microorganisms in either zone.
Similar, se pregătesc loturi «t» de flacoane pentru substanța chimică de referință și pentru probele de control.
In the UK there have been a few cases of complete inhibition of methane production caused by, for example, pentachlorophenol in industrial discharges, leading to very costly transportation of inhibited sludge from the digesters to “safe” sites and importation of healthy digesting sludge from neighbouring installations.
Se recomandă utilizarea unei boxe cu mănuși [punctul 12 litera (j)].
But there have been many cases of less severe disruption of digestion by several other chemicals, including aliphatic halohydrocarbons (dry-cleaning) and detergents, leading to significant impairment of digester efficiency.
Cu cel puțin 30 de minute înainte de începerea testului, se lasă să treacă un flux de azot gazos prin boxa cu mănuși care conține toate echipamentele necesare.
Only one test method, C.11 (1), deals with inhibition of bacterial activity (Respiration of activated sludge), which assesses the effect of test chemicals on the rate of oxygen uptake in the presence of substrate.
Temperatura nămolului trebuie să fie de 35 °C ± 2 °C pe parcursul manipulării și ermetizării flacoanelor.
The method has been widely used to give early warning of possible harmful effects of chemicals on the aerobic treatment of wastewaters, as well as indicating non-inhibitory concentrations of test chemicals to be used in the various tests for biodegradability.
Test preliminar
Test method C.43 (2) offers a limited opportunity for determining the toxicity of a test chemical to gas production by anaerobic sludge, diluted to one tenth of its normal concentration of solids to allow the required precision in the assessment of percentage biodegradation.
În cazul în care nu se cunoaște activitatea nămolului, se recomandă efectuarea unui test preliminar.
Because diluted sludge could be more sensitive to inhibitory chemicals, the ISO group decided to prepare a method using undiluted sludge.
Se pregătesc probe de control pentru a obține, de exemplu, concentrații ale materiilor solide de 10 g/l, 20 g/l și 40 g/l la care se adaugă substratul, însă nu se utilizează nicio substanță chimică de testare.
At least three texts were examined (from Denmark, Germany and the UK) and finally two ISO standards were prepared, one using undiluted sludge, ISO 13 641-1 (3) and the other using one hundredth diluted sludge, ISO 13 641-2 (4), to represent muds and sediments having low bacterial populations.
De asemenea, se utilizează volume diferite de amestec de reacție pentru a obține trei sau patru raporturi între volumul de spațiu superior și volumul de lichid.
Both methods were subjected to a ring-test (5);
Dintre rezultatele de volume de gaze produse la diferite intervale de timp, se aleg condițiile cele mai adecvate care permit două măsurători zilnice caracterizate de volume semnificative de gaze și care eliberează o presiune zilnică cu o sensibilitate [7] optimă fără risc de explozii.
part 1 was confirmed as an acceptable standard but there was disagreement over part 2.
Adăugarea substanțelor chimice de testare
The UK considered that, because a significant proportion of participants reported very little or no gas production, partly because the percentage gas space was too high (at 75 %) for optimal sensitivity, the method requires further investigation.
În flacoanele de testare goale se adaugă substanțe chimice de testare solubile în apă [punctul 12 litera (b)] sub formă de soluții apoase (punctul 18).
Earlier work in the UK (6)(7) described a manometric method using undiluted digesting sludge, plus raw sewage sludge as the substrate, in 500 ml flasks;
Se utilizează seturi de flacoane care conțin cel puțin trei probe duplicat pentru fiecare concentrație dintr-un interval (punctul 20).
the apparatus was cumbersome and the stench of the raw sludge was offensive.
În cazul unor substanțe chimice de testare insolubile sau puțin solubile, se injectează soluții din acestea în solvenți organici cu ajutorul unei microseringi în flacoanele goale pentru a obține seturi de probe duplicat cu cinci concentrații de substanță chimică de testare.
Later the more compact and convenient apparatus of Shelton and Tiedje (8) as developed by Battersby and Wilson (9) was successfully applied by Wilson et al.
Se evaporă solventul prin purjare cu un jet de azot gazos pe suprafața soluțiilor din flacoanele de testare.
(10).
Alternativ, se adaugă direct în flacoanele de testare cantități cântărite de substanțe chimice solide insolubile.
Kawahara et al (11) successfully prepared more standard sludges in the laboratory for use in tests for anaerobic biodegradability and inhibition on a number of chemicals.
Dacă substanțele chimice de testare lichide insolubile sau puțin solubile în apă nu se adaugă utilizând un solvent, acestea se adaugă direct cu ajutorul unei microseringi în flacoanele de testare după adăugarea inoculului și a substratului de testare (a se vedea punctul 30).
Also, raw sludge as the substrate was replaced to carry out a test either with one hundredth diluted anaerobic sludge or with muds, sediments etc. of low bacterial activity.
Substanțele chimice de testare volatile pot fi adăugate în același mod.
This method can provide information that is useful in predicting the likely effect of a test chemical on gas production in anaerobic digesters.
Adăugarea inoculului și a substratului
However, only longer tests simulating working digesters more closely can indicate whether adaptation of the microorganisms to the test chemical can occur or whether chemicals likely to be absorbed and adsorbed onto sludge can build up to a toxic concentration over a longer period than allowed in this test.
Se agită un volum corespunzător de nămol de digestie strecurat (a se vedea punctul 16) într-un flacon de 5 litri [punctul 12 litera (g)], lăsând în același timp să treacă prin spațiul superior un curent de azot gazos.
Aliquots of a mixture of anaerobically digesting sludge (20 g/l to 40 g/l total solids) and a degradable substrate solution are incubated alone and simultaneously with a range of concentrations of the test chemical.in sealed vessels for up to 3 days.
Flacoanele de testare, care conțin soluțiile apoase sau soluțiile dintr-un solvent evaporat de substanțe chimice de testare, sunt purjate cu un curent de azot gazos timp de aproximativ două minute pentru a elimina aerul.
The amount of gas (methane plus carbon dioxide) produced is measured by the increase in pressure (Pa) in the bottles.
Se repartizează în flacoanele de testare alicote, de exemplu 100 ml, de nămol amestecat bine utilizând o pipetă cu vârf larg sau o eprubetă gradată.
The percentage inhibition of gas production brought about by the various concentrations of the test chemical is calculated from the amounts produced in the respective test and control bottles.
Este esențial ca pipeta să fie umplută dintr-o singură încercare cu volumul exact de nămol deoarece materiile solide din nămol se sedimentează cu ușurință.
The EC50 and other effective concentrations are calculated from plots of percentage inhibition against the concentration of the test chemicals or, more usually, its logarithm.
În cazul în care se prelevează prea mult, pipeta se golește și se repetă operațiunea.
Test chemicals should normally be used in the purest form readily available, since impurities in some chemicals, e.g. chlorophenols, can be much more toxic than the test chemical itself.
Se adaugă apoi o cantitate suficientă de soluție de substrat (punctul 17) pentru a obține în amestec o concentrație de 2 g/l din fiecare dintre componentele bulionului nutritiv, și anume extractul de drojdie și D-glucoza, continuând în aceleași timp purjarea cu azot.
However, the needs to test chemicals in the form in which they are produced/made commercially available should be considered.
În continuare este prezentat un exemplu de loturi de testare.
The use of formulated products is not routinely recommended, but for poorly soluble test chemicals the use of formulated material may be appropriate.
Volumul total al flaconului = 160 ml.
Properties of the test chemical which should be available include solubility in water and some organic solvents, vapour pressure, adsorption coefficient, hydrolysis and biodegradability under anaerobic conditions.
Volumul de lichid = 103 ml
APPLICABILITY OF THE METHOD
Volumul de gaz = 57 ml sau 35,6 % din volumul total.
The test is applicable to chemicals which are soluble or insoluble in water, including volatile chemicals.
Concentrația masică finală a substanței chimice de testare din flacoanele de testare
But special care is necessary with materials of low water-solubility (see ref.
Volumul substanței chimice de testare
(12)) and of high volatility.
Reactivi și medii
Also, inocula from other anaerobic sites, e.g. muds, saturated soils, sediments, may be used.
Soluție stoc
Anaerobic bacterial systems that have previously been exposed to toxic chemicals may be adapted to maintaining their activity in the presence of xenobiotic chemicals.
punctul 18
Inocula from adapted bacterial systems may show a higher tolerance to the test chemicals compared to inocula obtained from non-adapted systems.
1 g/l
To check the procedure, a reference chemical is tested by setting up appropriate vessels in parallel as part of normal test runs;
Apa de diluție
3, 5-dichlorophenol has been shown to be a consistent inhibitor of anaerobic gas production, as well as of oxygen consumption by activated sludge and other biochemical reactions.
punctul 14
Two other chemicals have been shown to be more inhibitory to methane production than 3, 5-dichlorophenol, namely methylene bis-thiocyanate and pentachlorophenol but results with them have not been validated.
punctul 16
Pentachlorophenol is not recommended since it is not readily available in a pure form.
Substrat
REPRODUCIBILITY OF THE RESULTS
punctul 17
In an international ring test (5) there was only fair reproducibility in EC50 values between the 10 participating laboratories for 3, 5-dichlorophenol and 2-bromo-ethane sulphonic acid.
În mod similar, se purjează cu azot gazos un număr suficient de flacoane de testare goale pentru a elimina orice substanță chimică de testare volatilă și lichidă insolubilă (a se vedea punctul 27).
(The range for the former was 32 mg/l to 502 mg/l and for the latter 220-2190 mg/l.)
Probele de control și substanța chimică de referință
Number of laboratories
Se prepară seturi de flacoane conținând cel puțin trei probe duplicat, incluzând doar nămolul și substratul, pentru a fi utilizate ca probe de control.
As mg/l
Se prepară apoi flacoane duplicat care conțin nămolul și substratul, precum și o cantitate suficientă de soluție stoc a substanței chimice de referință, 3,5-diclorfenol (punctul 21) pentru a obține o concentrație finală de 150 mg/l.
As mg/g sludge
Această concentrație trebuie să inhibe producția de gaze cu aproximativ 50 %.
mean
Alternativ, se prepară un interval de concentrații pentru substanța chimică de referință.
3, 5-Dichlorophenol
În plus, se pregătesc patru flacoane suplimentare pentru măsurarea pH-ului care conțin nămol, apă deoxigenată și substrat.
romo-ethane sulphonic acid
Se adaugă substanța de testare în două flacoane cu cea mai mare concentrație de testare, iar apa deoxigenată se adaugă în cele două flacoane rămase.
data from ring test — undiluted sludge
Toate flacoanele – substanțele chimice de testare și de referință și probele de control – trebuie să conțină același volum (VR) de lichid;
The high coefficients of variation between laboratories to a large extent reflect differences in the sensitivity of the sludge microorganisms due to either pre-exposure or no pre-exposure to the test chemical or other chemically related chemicals.
dacă este necesar, se adaugă apă deionizată deoxigenată (punctul 14) pentru a ajusta volumul.
The precision with which the EC50 value based on the sludge concentration was determined was barely better than the “volumetric” value (mg/l).
Spațiul superior trebuie să fie între 10 % și 40 % din volumul flacoanelor, valoarea efectivă fiind selectată din datele obținute în urma testului preliminar.
The three laboratories which reported the precision of their EC50 values for 3,5-dichlorophenol showed much lower coefficients of variation (22, 9, and 18 % respectively for EC50 mg/g) than those of the means of all ten laboratories.
După adăugarea tuturor constituenților în flacoane, se îndepărtează acul de alimentare cu gaz și se etanșeizează fiecare flacon cu un dop din cauciuc și cu o capsulă din aluminiu [punctul 12 litera (b)] umezind dopul cu o picătură de apă deionizată pentru a facilita introducerea sa.
The individual means for the three laboratories were 3,1, 3,2 and 2,8 mg/g, respectively.
Se amestecă conținutul fiecărui flacon prin agitare.
The lower, acceptable coefficients of variation within laboratories compared with the much higher coefficients between laboratory values, namely 9-22 % cf.
Incubarea flacoanelor
92 %, indicate that there are significant differences in the properties of the individual sludges.
Flacoanele sunt transferate în incubatorul controlat termostatic, de preferință echipat cu un dispozitiv de agitare, și ținute la o temperatură de 35 °C ± 2 °C.
Usual laboratory equipment and the following are required:
Flacoanele sunt incubate la întuneric.
Incubator — spark-proof and controlled at 35 °C ± 2 °C;
După aproximativ 1 oră, se echilibrează presiunea în flacoane la presiunea atmosferică prin introducerea acului seringii, atașat la manometru [punctul 12 litera (c)], în capacul fiecărui flacon, se deschide supapa până ce manometrul afișează valoarea zero și, în final, se închide supapa.
Pressure-resistant glass test vessels of an appropriate nominal size [4], each fitted with a gas-tight coated septum, capable of withstanding about 2 bar or 2 × 105 Pa (for coating use e.g. PTFE = polytetrafluorethene).
Acul trebuie introdus la un unghi de 45° pentru a împiedica scurgerile de gaze din flacoane.
Glass serum bottles of nominal volume 125 ml, with an actual volume of around 160 ml, sealed with serum septa [5] and crimped aluminium rings are recommended;
Dacă flacoanele sunt incubate fără un dispozitiv de agitare, acestea trebuie agitate manual de două ori pe zi pe parcursul întregii perioade de incubare pentru a echilibra sistemul.
but bottles of total volume between 0,1 and 1 litre may be used successfully;
Flacoanele trebuie incubate în poziție răsturnată pentru a împiedica orice pierdere de gaze prin sept.
Precision pressure-meter [6] and needle attachment
Cu toate acestea, răsturnarea nu este recomandată în cazurile în care substanțele chimice de testare insolubile se pot lipi de fundul flaconului.
Total gas production (methane plus carbon dioxide) measured by means of a pressure-meter adapted to enable measurement and venting of the gas produced.
Măsurarea presiunii