natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Lumbriculus variegatus has been demonstrated to survive, grow, and reproduce in this type of water (30), and maximum standardisation of test and culture conditions is provided.
Observațiile trebuie înregistrate.
If a reconstituted water is used, its composition should be reported, and the water should be characterised prior to use at least by pH, oxygen content, and hardness (expressed as mg CaCO3/l).
La finalul testului, fiecare probă duplicat este examinată (pot fi excluse de la examinare vasele suplimentare destinate analizelor chimice).
Analysis of the water for micropollutants prior to use might provide useful information (see, e.g., Appendix 3).
Trebuie utilizată o metodă corespunzătoare pentru a recupera toți viermii din vasul de testare.
The pH of the overlying water should be in the range of 6,0 to 9,0 (see paragraph 13).
Trebuie avut grijă ca toți viermii să fie recuperați nevătămați.
If increased ammonia development is expected, it is considered useful to keep the pH between 6,0 and 8,0.
O metodă posibilă este strecurarea viermilor din sediment.
For testing of e.g. weak organic acids, it is advisable to adjust the pH by buffering the water to be used in the test, as described e.g. by (16).
Poate fi utilizată o plasă din oțel inoxidabil cu o dimensiune adecvată a ochiurilor.
The total hardness of the water to be used in the test should be between 90 and 300 mg CaCO3 per liter for natural water.
Apa acoperitoare este decantată la maximum cu atenție, iar reziduurile de sediment și de apă sunt agitate pentru a obține o suspensie consistentă care poate fi strecurată.
Appendix 3 summarises additional criteria for acceptable dilution water according to OECD Guideline No. 210 (38).
Dacă se utilizează o sită cu ochiuri de 500 μm, cea mai mare parte a particulelor de sediment vor trece foarte rapid prin aceasta;
Sediment
cu toate acestea, strecurarea trebuie efectuată rapid pentru a împiedica viermii să pătrundă în sită sau să treacă prin ochiurile acesteia.
Since uncontaminated natural sediments from a particular source may not be available throughout the year, and indigenous organisms as well as the presence of micropollutants can influence the test, a formulated sediment (also called reconstituted, artificial or synthetic sediment) should preferably be used.
Utilizarea unei site cu ochiuri de 250 μm va împiedica viermii să pătrundă în sită sau să treacă prin ochiurile acesteia;
Use of a formulated sediment minimises variability of test conditions as well as introduction of indigenous fauna.
cu toate acestea, a se avea grijă ca în sită să se rețină o cantitate cât mai mică posibil de particule de sediment.
The following formulated sediment is based on the artificial sediment according to (6), (39) and (40).
Suspensia strecurată din fiecare vas duplicat poate fi strecurată pentru a doua oară pentru a garanta recuperarea tuturor viermilor.
It is recommended for use in this type of test ((6), (10), (30), (41), (42), (43)):
O metodă alternativă ar putea fi încălzirea sedimentului prin așezarea vaselor de testare într-o baie de apă la o temperatură cuprinsă între 50 și 60 °C;
4-5 % (dry weight) sphagnum peat;
viermii vor părăsi sedimentul și pot fi colectați de pe suprafața sedimentului cu ajutorul unei pipete cu gura largă lustruită la foc.
it is important to use peat in powder form, degree of decomposition:
O altă metodă constă în obținerea unei suspensii de sediment și turnarea acesteia într-un recipient puțin adânc cu o dimensiune corespunzătoare.
“medium”, finely ground (particle size ≤ 0,5 mm), and only air-dried.
Viermii pot fi extrași din stratul subțire de suspensie cu ajutorul unui ac din oțel sau al unei pensete de ceasornicar (care trebuie utilizată mai degrabă ca o furculiță decât ca un clește pentru a se evita rănirea viermilor) și transferați în apă curată.
20 ± 1 % (dry weight) kaolin clay (kaolinite content preferably above 30 %).
După separarea lor de suspensia de sediment, viermii sunt clătiți în mediul de testare și numărați.
75-76 % (dry weight) quartz sand (fine sand, grain size: ≤ 2 mm, but > 50 % of the particles should be in the range of 50-200 μm).
Indiferent de metoda utilizată, laboratoarele trebuie să demonstreze că personalul lor poate recupera în medie cel puțin 90 % din organismele din întregul sediment.
Deionised water, 30–50 % of sediment dry weight, in addition to the dry sediment components.
De exemplu, ar putea fi adăugat la sedimentul de probă sau la sedimentele de testare un anumit număr de organisme de testare, iar recuperarea acestora ar putea fi stabilită după 1 oră (7).
Calcium carbonate of chemically pure quality (CaCO3) is added to adjust the pH of the final mixture of the sediment.
Numărul total de exemplare vii și moarte per probă duplicat trebuie înregistrat și evaluat.
The total organic carbon content (TOC) of the final mixture should be 2 % (± 0,5 %) of sediment dry weight and should be adjusted by the use of appropriate amounts of peat and sand, according to (a) and (c).
Sunt considerate moarte următoarele grupuri de viermi:
Food, e.g. powdered leaves of Stinging Nettle (Urtica sp., in accordance with pharmacy standards, for human consumption), or a mixture of powdered leaves of Urtica sp. with alpha-cellulose (1:1), at 0,4 - 0,5 % of sediment d.w., in addition to the dry sediment components;
nu există nicio reacție după un stimul mecanic ușor;
for details see Appendix 4.
există semne de descompunere (în combinație cu «a»)
The source of peat, kaolin clay, food material, and sand should be known.
mai mulți viermi lipsă
In addition to item g), Chapter C.27 of this Annex (6) lists alternative plant materials to be used as a source of nutrition:
În plus, viermii vii pot fi încadrați în una dintre următoarele trei categorii:
dehydrated leaves of mulberry (Morus alba), white clover (Trifolium repens), spinach (Spinacia oleracea), or cereal grass.
viermi compleți de mari dimensiuni (adulți) fără regiuni de corp regenerate
The chosen food source should be added prior to or during spiking the sediment with the test chemical.
viermi compleți cu regiuni de corp regenerate, de culoare mai deschisă (și anume cu o parte posterioară nouă, cu o parte anterioară nouă sau atât cu partea posterioară, cât și cu partea anterioară noi)
The chosen food source should allow for at least acceptable reproduction in the controls.
viermi incompleți (și anume, viermi fragmentați recent cu regiuni de corp neregenerate)
Analysis of the artificial sediment or its constituents for micro-pollutants prior to use might provide useful information.
Aceste observații suplimentare nu sunt obligatorii, însă pot fi utilizate pentru o interpretare suplimentară a rezultatelor biologice (de exemplu, un număr mare de viermi incluși în categoria c poate indica o întârziere a reproducerii sau a regenerării determinată de un anumit tratament).
An example for the preparation of the formulated sediment is described in Appendix 4.
În plus, dacă sunt observate eventuale diferențe de aspect (de exemplu, leziuni ale tegumentului, secțiuni de corp edematoase) între viermii tratați și cei din probele de control, acestea trebuie înregistrate.
Mixing of dry constituents is also acceptable if it is demonstrated that after addition of overlying water a separation of sediment constituents (e.g. floating of peat particles) does not occur, and that the peat or the sediment is sufficiently conditioned (see also paragraph 25 and Appendix 4).
Imediat după numărare/evaluare, viermii vii găsiți în fiecare probă duplicat sunt transferați în talere de balanță uscate, precântărite și etichetate (unul pentru fiecare probă duplicat) și eutanasiați cu o picătură de etanol pentru fiecare taler.
The artificial sediment should be characterised at least by origin of the constituents, grain size distribution (percent sand, silt, and clay), total organic carbon content (TOC), water content, and pH.
Talerele sunt introduse într-o etuvă la o temperatură de 100 ± 5 °C pentru a se usca peste noapte, apoi sunt cântărite după răcire într-un exsicator și este determinată greutatea uscată a viermilor (de preferință în g, cu cel puțin 4 zecimale).
Measurement of redox potential is optional.
În plus față de greutatea uscată totală, poate fi determinată greutatea uscată fără cenușă conform descrierii de la referința (49) pentru a număra componentele anorganice provenite din sedimentul ingerat, prezente în tractul alimentar al viermilor.
If required, e.g. for specific testing purposes, natural sediments from unpolluted sites may also serve as test and/or culture sediment (3).
Biomasa determinată este biomasa totală pentru fiecare probă duplicat, incluzând viermii adulți și cei tineri.
However, if natural sediment is used, it should be characterised at least by origin (collection site), pH and ammonia of the pore water, total organic carbon content (TOC) and nitrogen content, particle size distribution (percent sand, silt, and clay), and percent water content (7), and it should be free from any contamination and other organisms that might compete with, or prey on the test organisms.
Viermii morți nu trebuie luați în considerare pentru determinarea biomasei pentru fiecare probă duplicat.
Measurement of redox potential and cation exchange capacity is optional.
Verificarea concentrațiilor de substanță chimică de testare
It is also recommended that, before it is spiked with the test chemical, the natural sediment be conditioned for seven days under the same conditions which prevail in the subsequent test.
Eșantionarea
At the end of this conditioning period, the overlying water should be removed and discarded.
Probele pentru analiza chimică a substanței chimice de testare trebuie prelevate cel puțin la concentrația cea mai mare și la o concentrație inferioară, cel puțin la finalul fazei de echilibrare (înainte de adăugarea organismelor de testare) și la finalul testului.
The sediment to be used must be of a quality that will allow the survival and reproduction of the control organisms for the duration of the exposure period without showing any abnormal appearance or behaviour.
Trebuie prelevate pentru analiză cel puțin probe din masa sedimentului și din apa acoperitoare.
The control worms should burrow in the sediment, and they should ingest the sediment.
Trebuie prelevate cel puțin două probe per matrice și per tratament la fiecare dată de prelevare.
Reproduction in the controls should at least be according to the validity criterion as described in paragraph 13.
Una dintre probele duplicat poate fi păstrată ca rezervă (pentru a fi analizată, de exemplu, în cazul în care analiza inițială nu se încadrează în intervalul de ± 20 % al concentrației nominale).
The presence or absence of fecal pellets on the sediment surface, which indicate sediment ingestion by the worms, should be recorded and can be helpful for the interpretation of the test results with respect to exposure pathways.
În cazul unor proprietăți chimice specifice, de exemplu dacă se preconizează o degradare rapidă a substanței chimice de testare, calendarul analitic poate fi ajustat (de exemplu, prelevări de probe mai frecvente, analiza mai multor niveluri de concentrație) pe baza avizului experților.
Additional information on sediment ingestion can be obtained by using methods described in (24), (25), (44), and (45), which specify sediment ingestion or particle selection in the test organisms.
Probele pot fi apoi prelevate la date de prelevare intermediare (de exemplu, la șapte zile după începerea perioadei de expunere).
Manipulation procedures for natural sediments prior to use in the laboratory are described in (3), (7), and (12).
Trebuie prelevate probe din apa acoperitoare prin decantarea sau sifonarea acesteia astfel încât să se reducă la minimum perturbarea sedimentului.
The preparation and storage of the artificial sediment recommended to be used in the Lumbriculus test is described in Appendix 4.
Volumul probelor trebuie înregistrat.
The test chemical is to be spiked to the sediment.
După eliminarea apei acoperitoare, sedimentul trebuie să fie omogenizat și transferat într-un recipient corespunzător.
As most test chemicals are expected to have low water solubility, they should be dissolved in a suitable organic solvent (e.g. acetone, n-hexane, cyclohexane) at a volume as small as possible in order to prepare the stock solution.
Se înregistrează greutatea probei de sediment umed.
The stock solution should be diluted with the same solvent to prepare the test solutions.
În cazul în care este necesară a analiză suplimentară a substanței chimice de testare din apa interstițială, probele de sediment omogenizat și cântărit trebuie centrifugate pentru a obține apă interstițială.
Toxicity and volatility of the solvent, and the solubility of the test chemical in the chosen solvent should be the main criteria for the selection of a suitable solubilising agent.
De exemplu, aproximativ 200 ml de sediment umed pot fi introduse în pahare de laborator pentru centrifugare de 250 ml.
For each concentration level the same volume of the corresponding solution should be used.
Probele trebuie apoi centrifugate fără filtrare pentru a izola apa interstițială, de exemplu la 10000 ± 600 × g timp de 30 – 60 de minute la o temperatură care să nu depășească temperatura utilizată în cadrul testului.
The sediment should be spiked in bulk for each concentration level in order to minimise between-replicate variability of the test chemical concentration.
După centrifugare, supernatantul este decantat sau prelevat cu pipeta având grijă să nu se introducă nicio particulă de sediment, iar volumul este înregistrat.
Each of the test solutions is then mixed with quartz sand as described in paragraph 22 (e.g. 10 g of quartz sand per test vessel).
Se înregistrează greutatea granulelor de sediment rămas.
In order to soak the quartz sand completely, a volume of 0,20 - 0,25 ml per g of sand has been found sufficient.
Acest lucru poate contribui la estimarea bilanțului masic sau a recuperării substanței chimice de testare din sistemul apă-sediment, în cazul în care greutatea uscată a sedimentului este determinată la fiecare dată de prelevare.
Thereafter, the solvent must be evaporated to dryness.
În unele cazuri, nu se pot analiza concentrațiile în apa interstițială, pentru că dimensiunea eșantionului este prea mică.
In order to minimise losses of the test chemical through co-evaporation (e.g. depending on the chemical's vapour pressure), the coated sand should be used immediately after drying.
În cazul în care analiza nu se realizează imediat, toate probele trebuie depozitate printr-o metodă corespunzătoare, de exemplu, în condițiile de depozitare recomandate pentru degradarea minimă a substanței chimice de testare specifice (de exemplu, probele prelevate din mediu sunt de obicei depozitate la o temperatură de – 18 °C la întuneric).
The dry sand is mixed with the suitable amount of formulated sediment of the corresponding concentration level.
Trebuie obținute informații privind condițiile corespunzătoare de depozitare pentru substanța chimică de testare specifică – de exemplu, durata și temperatura de stocare, procedurile de extracție etc. – înainte de începerea studiului.
The amount of sand provided by the test-chemical-and-sand mixture has to be taken into account when preparing the sediment (i.e. the sediment should thus be prepared with less sand).
Metoda analitică
The major advantage of this procedure is that virtually no solvent is introduced to the sediment (7).
Întrucât întreaga procedură este determinată în esență de exactitatea, precizia și sensibilitatea metodei analitice utilizate pentru substanța chimică de testare, trebuie să se verifice în mod experimental dacă precizia și reproductibilitatea, precum și recuperarea substanței chimice de testare din apă și din probele de sediment sunt satisfăcătoare pentru metoda specifică cel puțin la concentrația de testare cea mai mare și la concentrația de testare cea mai scăzută.
Alternatively, e.g. for field sediment, the test chemical may be added by spiking a dried and finely ground portion of the sediment as described above for the quartz sand, or by stirring the test chemical into the wet sediment, with subsequent evaporating of any solubilising agent used.
De asemenea, trebuie să se verifice ca substanța chimică de testare să nu poată fi detectată în camerele de control la concentrații mai mari decât limita de cuantificare.
Care should be taken to ensure that the test chemical added to sediment is thoroughly and evenly distributed within the sediment.
Dacă este necesar, se ajustează concentrațiile nominale pentru a ține cont de recuperările din probele de control de calitate (de exemplu, în cazul în care recuperarea nu se încadrează în intervalul de 80 – 120 % din cantitatea introdusă).
If necessary, subsamples may be analysed to confirm the target concentrations in the sediment, and to determine degree of homogeneity.
Pe întreaga durată a testului, toate probele trebuie manipulate astfel încât să se reducă la minimum contaminarea și pierderile (rezultate, de exemplu, din absorbția substanței chimice de testare pe dispozitivul de prelevare a probelor).
It may also be useful to analyse subsamples of the test solutions to confirm the target concentrations in the sediment.
Trebuie înregistrate și raportate recuperarea substanței chimice de testare, limita de cuantificare și limita de detecție în sediment și în apă.
Since a solvent is used for coating the test chemical on the quartz sand, a solvent control should be employed which is prepared with the same amount of the solvent as the test sediments.
Principalele variabile de răspuns obligatorii ale testului care trebuie evaluate din punct de vedere statistic sunt biomasa și numărul total de viermi per probă duplicat.
The method used for spiking, and the reasons for choosing a specific spiking procedure other than described above should be reported.
Opțional, reproducerea (creșterea numărului de viermi) și creșterea (creșterea biomasei uscate) ar putea fi, de asemenea, evaluate.
Additional guidance on spiking procedures is given in Environment Canada (1995) (46).
Cu toate că mortalitatea nu reprezintă un punct final de testare în prezentul test, aceasta ar trebui evaluată în măsura posibilului.
Once the spiked sediment has been prepared, distributed to the replicate test vessels, and topped with the test water, it is desirable to allow partitioning of the test chemical from the sediment to the aqueous phase (e.g. (3)(7)(9)).
În scopul estimării mortalității, numărul de viermi care nu reacționează la un stimul mecanic ușor sau care prezintă semne de descompunere, precum și viermii lipsă ar trebui considerați morți.
This should preferably be done under the conditions of temperature and aeration used in the test.
Cazurile de mortalitate trebuie cel puțin înregistrate și luate în considerare în momentul interpretării rezultatelor.
Appropriate equilibration time is sediment and chemicals specific, and can be in the order of hours to days and in rare cases up to several weeks (4-5 weeks) (e.g. (27)(47)).
Concentrațiile efective trebuie exprimate în mg/kg de greutate uscată de sediment.
In this test, equilibrium is not awaited but an equilibration period of 48 hours to 7 days is recommended.
În cazul în care recuperarea substanței chimice de testare măsurată în sediment sau în sediment și în apa acoperitoare la începutul perioadei de expunere este cuprinsă între 80 și 120 % din concentrațiile nominale, concentrațiile efective (ECx, NOEC, LOEC) pot fi exprimate pe baza concentrațiilor nominale.
Thus, time for degradation of the test chemical will be minimised.
În cazul în care rata de recuperare se abate de la concentrațiile nominale cu un procent mai mare de ± 20 % din concentrațiile nominale, concentrațiile efective (ECx, NOEC, LOEC) trebuie să se bazeze pe concentrațiile măsurate inițial la începutul perioadei de expunere, de exemplu luând în considerare bilanțul masic al substanței chimice de testare în sistemul de testare (a se vedea punctul 30).
Depending on the purpose of the study, e.g., when environmental conditions are to be mimicked, the spiked sediment may be equilibrated or aged for a longer period.
În aceste cazuri, informații suplimentare pot fi obținute din analiza soluțiilor stoc și/sau a soluțiilor de aplicare în vederea confirmării pregătirii corecte a sedimentelor de testare.
At the end of this equilibration period, samples should be taken at least of the overlying water and the bulk sediment, at least at the highest concentration and a lower one, for analysis of the test chemical concentration.
Valorile ECx pentru parametrii descriși la punctul 60 se calculează utilizând metodele statistice adecvate (de exemplu, analiza probit, funcția logistică sau Weibull, metoda simplificată Spearman-Karber sau simpla interpolare).
These analytical determinations of the test chemical should allow for calculation of mass balance and expression of results based on measured initial concentrations.
Orientări privind evaluarea statistică sunt disponibile în referințele (15) și (50).
In general, sampling disturbs or destroys the sediment water system.
Pentru calcularea valorii EC50 sau a unei alte valori ECx, mediile per tratament ( X
Therefore it is usually not possible to use the same replicates for sampling of sediment and worms.
) trebuie supuse unei analize de regresie.
Additional “analytical” vessels of appropriate dimensions have to be set up, which are treated in the same way (including the presence of test organisms) but not used for biological observations.
În cazul în care se intenționează determinarea valorii NOEC/LOEC prin analiză statistică, sunt necesare statistici pentru fiecare vas (fiecare vas este considerat o replică).
The vessel dimensions should be selected to provide the sample amounts required by the analytical method.
Trebuie utilizate metode statistice corespunzătoare.
Details of sampling are described in paragraph 53.
În general, efectele adverse ale substanței de testare în raport cu proba de control sunt analizate cu ajutorul unei testări a ipotezei unilaterale (inferioare) la p ≤ 0,05.
PERFORMANCE OF THE TEST
Exemple sunt furnizate la punctele de mai jos.
If no information is available on the toxicity of the test chemical towards Lumbriculus variegatus, it may be useful to conduct a preliminary experiment in order to determine the range of concentrations to be tested in the definitive test, and to optimise the test conditions of the definitive test.
Orientări privind selectarea metodelor statistice adecvate sunt disponibile în referințele (15) și (50).
For this purpose a series of widely spaced concentrations of the test chemical are used.
Distribuția normală a datelor poate fi testată, de exemplu cu ajutorul testului de calitate a ajustării Kolmogorov-Smirnov, al testului raportului interval/deviație standard (testul R/s) sau al testului Shapiro-Wilk (bilateral, p ≤ 0,05).
The worms are exposed to each concentration of the test chemical for a period (e.g. 28 d as in the definitive test) which allows estimation of appropriate test concentrations;
Pentru testarea omogenității varianței, poate fi utilizat testul Cochran, testul Levene sau testul Bartlett (bilateral, p ≤ 0,05).
no replicates are required.
În cazul în care sunt îndeplinite condițiile prealabile ale procedurilor de testare parametrice (normalitate, omogenitatea varianței), se pot efectua o analiză de varianță (ANOVA) unilaterală și teste multicomparative ulterioare.
The behaviour of the worms, for example sediment avoidance, which may be caused by the test chemical and/or by the sediment, should be observed and recorded during a preliminary test.
Comparațiile pe perechi (de exemplu, testul t Dunnett) sau testele de stabilire a tendințelor (de exemplu, testul Williams) pot fi utilizate pentru calcularea eventualelor diferențe semnificative (p ≤ 0,05) între probele de control și diversele concentrații de substanță chimică de testare.
Concentrations higher than 1000 mg/kg sediment dry weight should not be tested in the preliminary test.
În caz contrar, trebuie utilizate metode neparametrice (de exemplu, testul U Bonferroni conform testului de Holm sau testului de stabilire a tendinței Jonckheere-Terpstra) pentru determinarea NOEC și a LOEC.