natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The precision of an EC20 estimate is often considerably better than that of an EC10, because the EC20 is usually positioned on the approximately linear part of the central concentration response curve.
Într-adevăr, absența inhibiției în acest test de respirație nu are ca rezultat automat condițiile neinhibitorii din testele de biodegradabilitate rapidă din capitolul C.4 A-F sau C.29 al prezentei anexe.
So while the EC10 is normally obtainable with a sufficient accuracy it is recommended to report always also the EC20.
Curbele de respirație în funcție de concentrație sunt uneori bifazice, graficele doză-răspuns au fost denaturate, iar valorile EC50 au fost neașteptat de scăzute (5).
Weighting factors
Cercetările au arătat că aceste rezultate apar atunci când nămolul activ utilizat pentru test este puternic nitrificant și când substanța chimică de testare are un efect mai puternic asupra oxidării amoniului decât asupra oxidării heterotrofe generale.
The experimental variance generally is not constant and typically includes a proportional component, and a weighted regression is therefore advantageously carried out routinely.
Prin urmare, aceste rezultate eronate pot fi evitate prin realizarea unui test suplimentar utilizând un inhibitor specific al nitrificării.
Weighting factors for a such analysis are normally assumed inversely proportional to the variance:
Prin măsurarea oxigenului consumat în prezența și în absența unui astfel de inhibitor, de exemplu N-aliltioureea (ATU), poate fi calculat separat consumul de oxigen total, heterotrof și legat de nitrificare (4) (7) (8).
Many regression programs allow the option of weighted regression analysis with weighting factors listed in a table.
Astfel efectele inhibitorii ale unei substanțe chimice de testare asupra celor două procese pot fi determinate și valorile EC50 atât pentru oxidarea carbonului organic (heterotrofă), cât și pentru oxidarea amoniului (nitrificare) pot fi calculate prin metoda clasică.
Conveniently weighting factors should be normalised by multiplying them by n/Σ wi (n is the number of datapoints) so their sum be one.
Trebuie avut în vedere că în anumite cazuri rare, efectul inhibitor al N-aliltioureei poate fi anulat parțial sau complet dacă aceasta formează complexe cu substanțele chimice de testare sau cu adjuvanții de mediu, de exemplu ioni Cu++ (6).
Normalising responses
Ionii Cu++ sunt esențiali pentru Nitrosomonas, dar sunt toxici în concentrații mai mari.
Normalising by the mean control response gives some principle problems and gives rise to a rather complicated variance structure.
Nevoia de nitrificare pentru epurarea aerobă a apelor uzate, ca etapă necesară a procesului de eliminare a compușilor de azot din apele uzate prin denitrificarea în produse gazoase, a devenit urgentă în special în țările europene;
Dividing the responses by the mean control response for obtaining the percentage of inhibition, one introduces an additional error caused by the error on the control mean.
UE a stabilit limite mai scăzute pentru concentrația de azot din efluenții tratați deversați în corpurile de apă receptoare [2].
Unless this error is negligibly small, weighting factors in the regression and confidence limits must be corrected for the covariance with the control (Draper and Smith, 1981).
În general metoda de evaluare doar a efectului asupra proceselor de oxidare a carbonului organic este adecvată.
Note that high precision on the estimated mean control response is important in order to minimise the overall variance for the relative response.
Totuși, în unele cazuri, pentru a interpreta rezultatele și a înțelege efectele este necesară o examinare a efectului doar asupra nitrificării sau a efectului asupra nitrificării și a oxidării carbonului organic separat.
This variance is as follows:
PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE
(Subscript i refers to concentration level i and subscript 0 to the controls)
Vitezele de respirație ale probelor de nămol activ alimentate cu apă uzată sintetică sunt măsurate într-o celulă ermetică care conține un electrod de oxigen după o perioadă de contact de 3 ore.
Yi = Relative response = ri/r0 = 1 – I = f(Ci)
În funcție de un scenariu de expunere realist, ar putea fi adecvat un timp de contact mai îndelungat.
with a variance Var(Yi) = Var (ri/r0) ≅ (∂ Yi/∂ ri) · Var(ri) + ((∂ Yi/∂ r0)2 · Var(r0)
Dacă substanța chimică de testare se degradează rapid, de exemplu abiotic prin hidroliză, sau este volatilă și concentrația nu poate fi menținută la un nivel adecvat, se poate utiliza suplimentar o perioadă de expunere mai scurtă, de exemplu de 30 de minute.
and since (∂ Yi/∂ ri) = 1/r0 and (∂ Y I/∂ r0) = ri/r02
Sensibilitatea fiecărui lot de nămol activ ar trebui verificată cu o substanță chimică de referință adecvată în ziua expunerii.
with normally distributed data and mi and m0 replicates:
Testul se utilizează în general pentru a determina ECx (de exemplu, EC50) a substanței chimice de testare și/sau a concentrației la care nu se observă niciun efect (NOEC).
Var(ri) = σ2/mi
Inhibarea consumului de oxigen al microorganismelor care oxidează carbonul organic poate fi exprimată separat de cea a microorganismelor care oxidează amoniul prin măsurarea vitezelor consumului de oxigen în absența și în prezența N-aliltioureei, un inhibitor specific al oxidării amoniului în nitrit de către bacteriile nitrificante din prima etapă.
the total variance of the relative response Yi thus becomes
În acest caz, procentajul de inhibare a vitezei consumului de oxigen se calculează prin compararea vitezei consumului de oxigen în prezența unei substanțe chimice de testare cu viteza medie a consumului de oxigen al probelor de control care nu conțin nicio substanță chimică de testare, atât în prezența, cât și în absența inhibitorului specific, N-aliltioureea.
The error on the control mean is inversely proportional to the square root of the number of control replicates averaged, and sometimes it can be justified to include historic data and in this way greatly reduce the error.
Orice consum de oxigen generat de procese abiotice poate fi detectat prin determinarea vitezei în amestecuri formate din substanța chimică de testare, apă uzată sintetică și apă, omițând nămolul activ.
An alternative procedure is not to normalise the data and fit the absolute responses including the control response data but introducing the control response value as an additional parameter to be fitted by non linear regression.
INFORMAȚII PRIVIND SUBSTANȚA CHIMICĂ DE TESTARE
With a usual 2 parameter regression equation, this method necessitates the fitting of 3 parameters, and therefore demands more data points than non-linear regression on data that are normalised using a pre-set control response.
Pentru o interpretare corectă a rezultatelor ar trebui să se cunoască identitatea (de preferat numărul CAS), numele (IUPAC), puritatea, solubilitatea în apă, presiunea de vapori, volatilitatea și caracteristicile de adsorbție ale substanței chimice de testare.
Inverse confidence intervals
În mod normal, substanțele chimice volatile nu pot fi testate în mod adecvat fără luarea unor măsuri de precauție speciale (a se vedea punctul 21).
The calculation of non-linear regression confidence intervals by inverse estimation is rather complex and not an available standard option in ordinary statistical computer program packages.
APLICABILITATEA METODEI DE TESTARE
Approximate confidence limits may be obtained with standard non-linear regression programs with re-parameterisation (Bruce and Versteeg, 1992), which involves rewriting the mathematical equation with the desired point estimates, e.g. the EC10 and the EC50 as the parameters to be estimated.
Metoda de testare poate fi aplicată substanțelor chimice solubile în apă, puțin solubile și volatile.
(Let the function be I = f (α, β, Concentration) and utilise the definition relationships f (α, β, EC10) = 0,1 and f (α, β, EC50 ) = 0,5 to substitute f (α, β, concentration ) with an equivalent function g( EC10, EC50, concentration).
Cu toate acestea, se poate să nu fie întotdeauna posibilă obținerea valorilor EC50 cu substanțe chimice cu solubilitate limitată, iar cu substanțe chimice volatile pot fi obținute rezultate valide numai cu condiția ca marea parte (de exemplu > 80 %) a substanței chimice de testare să rămână în amestecul de reacție la sfârșitul perioadei (perioadelor) de expunere.
A more direct calculation (Andersen et al, 1998) is performed by retaining the original equation and using a Taylor expansion around the means of ri and r0.
Atunci când există incertitudini referitoare la stabilitatea sau volatilitatea substanței chimice de testare, ar trebui prezentate date analitice suplimentare pentru a rafina concentrația ECx.
Recently “boot strap methods” have become popular.
SUBSTANȚELE CHIMICE DE REFERINȚĂ
Such methods use the measured data and a random number generator directed frequent re-sampling to estimate an empirical variance distribution.
Substanțele chimice de referință ar trebui testate periodic pentru a se garanta fiabilitatea metodei de testare și a condițiilor de testare și pentru a verifica sensibilitatea fiecărui lot de nămol activ utilizat ca inocul microbian în ziua expunerii.
REFERENCES
Substanța chimică recomandată ca substanță chimică inhibitoare de referință este 3,5-diclorfenolul (3,5-DCP), întrucât este un cunoscut inhibitor al respirației și este utilizat în multe tipuri de teste de inhibare/toxicitate (4).
Chapter C.11 is replaced by the following:
Sulfatul de cupru (II) pentahidrat poate fi, de asemenea, utilizat ca substanță chimică de referință pentru inhibarea respirației totale (9).
ACTIVATED SLUDGE, RESPIRATION INHIBITION TEST (CARBON AND AMMONIUM OXIDATION)
N-metilanilina poate fi utilizată ca inhibitor de referință specific al nitrificării (4).
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 209 (2010).
CRITERII DE VALIDITATE ȘI REPRODUCTIBILITATE
This test method describes a method to determine the effects of a chemical on micro-organisms from activated sludge (largely bacteria) by measuring their respiration rate (carbon and/or ammonium oxidation) under defined conditions in the presence of different concentrations of the test chemical.
Viteza consumului de oxigen al probelor de control neutre (fără substanță chimică de testare sau de referință) nu ar trebui să fie mai mică de 20 mg de oxigen per gram de nămol activ (greutatea uscată a solidelor în suspensie) pe oră.
The test method is based on the ETAD (Ecological and Toxicological Association of the Dyestuffs Manufacturing industry) test (1) ( 2), on the previous OECD TG 209 (3) and on the revised ISO Standard 8192 (4).
Dacă viteza este mai mică, testul ar trebui repetat cu nămol activ spălat sau cu nămol din altă sursă.
The purpose of the test is to provide a rapid screening method to assess the effects of chemicals on the microorganisms of the activated sludge of the biological (aerobic) stage of waste-water treatment plants.
Coeficientul de variație al vitezei consumului de oxigen la probele de control duplicate nu ar trebui să fie mai mare de 30 % la încheierea testului final.
The results of the test may also serve as an indicator of suitable non-inhibitory concentrations of test chemicals to be used in biodegradability tests (for example Chapters C.4 A-F, C.9, C.10, C12 and C.29 of this Annex, OECD TG302C).
În cadrul unui ring test internațional organizat în 2004 de ISO (4) utilizând nămol activ derivat din apele uzate menajere, s-a constatat că EC50 a 3,5-DCP este cuprinsă între 2 mg/l și 25 mg/l pentru respirația totală, între 5 mg/l și 40 mg/l pentru respirația heterotrofă și între 0,1 mg/l și 10 mg/l pentru respirația legată de nitrificare.
In this case, the test can be performed as a screening test, similar to a range-finding or limit test (see paragraph 39), considering the overall respiration only.
Dacă EC50 a 3,5-DCP nu se încadrează în intervalul așteptat, testul ar trebui repetat cu nămol activ din altă sursă.
However, this information should be taken with care for ready biodegradability tests (Chapter C.4 A-F and C.29 of this Annex) for which the inoculum concentration is significantly lower than the one used in this test method.
a sulfatului de cupru (II) pentahidrat ar trebui să se încadreze în intervalul 53-155 mg/l pentru respirația totală (9).
Indeed, an absence of inhibition in this respiration test does not automatically result in non-inhibitory conditions in the ready biodegradability test of Chapters C.4 A-F or C.29 of this Annex.
Vasele și aparatura de testare
Overall, the respiration inhibition test seems to have been applied successfully since it was first published, but on some occasions spurious results were reported, e.g. (2) (4) (5).
Trebuie utilizate echipamentele obișnuite de laborator și următoarele:
Concentration related respiration curves are sometimes bi-phasic, dose-response plots have been distorted and EC50 values have been unexpectedly low (5).
vase de testare – de exemplu, pahare Berzelius de 1000 ml care să conțină 500 ml de amestec de reacție (a se vedea punctul 5 din fig.
Investigations showed that such results are obtained when the activated sludge used in the test nitrifies significantly and the test chemical has a greater effect on the oxidation of ammonium than on general heterotrophic oxidation.
1);
Therefore, these spurious results may be overcome by performing additional testing using a specific inhibitor of nitrification.
celule și mijloace de fixare pentru măsurarea concentrației oxigenului dizolvat;
By measuring the oxygen uptake rates in the presence and absence of such an inhibitor, e.g. N-allylthiourea (ATU), the separate total, heterotrophic and nitrification oxygen uptake rates can be calculated (4) (7) (8).
un electrod de oxigen adecvat;
Thus, the inhibitory effects of a test chemical on the two processes may be determined and the EC50 values for both organic carbon oxidation (heterotrophic) and ammonium oxidation (nitrification) may be calculated in the usual way.
o celulă ermetică care să conțină proba, fără spațiu gol și dotată cu un înregistrator (de exemplu, punctele 7, 8, 9 din fig.
It should be noted that in some rare cases, the inhibitory effect of N-allylthiourea may be partially or completely nullified as a result of complexation with test chemicals or medium supplements, e.g. Cu++ ions (6).
1 din apendicele 2);
Cu++ ions are essential for Nitrosomonas, but are toxic in higher concentration.
alternativ, se poate utiliza un vas CBO cu adaptor de tip manșon pentru fixarea ermetică a electrodului de oxigen pe gâtul vasului (a se vedea fig.
The need for nitrification in the aerobic treatment of wastewaters, as a necessary step in the process of removing nitrogen compounds from wastewaters by denitrification to gaseous products, has become urgent particularly in European countries;
2 din apendicele 3).
the EU has now set lower limits for the concentration of nitrogen in treated effluents discharged to receiving waters [2].
Pentru a evita pierderea de lichid prin revărsare la introducerea electrodului de oxigen, se recomandă introducerea în prealabil a unei pâlnii sau a unui tub de sticlă prin manșon sau utilizarea unor vase cu margini evazate.
For most purposes, the method to assess the effect on organic carbon oxidation processes alone is adequate.
În ambele cazuri, ar trebui utilizat un agitator magnetic sau o altă metodă de agitare, de exemplu, o sondă autoagitatoare;
However, in some cases an examination of the effect on nitrification alone, or on both nitrification and organic carbon oxidation separately, are needed for the interpretation of the results and understanding the effects.
agitatoare și bare magnetice acoperite cu material inert, pentru utilizarea în camera de măsurare și/sau în vasele de testare;
PRINCIPLE OF THE TEST METHOD
dispozitiv de aerare:
The respiration rates of samples of activated sludge fed with synthetic sewage are measured in an enclosed cell containing an oxygen electrode after a contact time of 3 hours.
dacă este necesar, ar trebui să se utilizeze aer comprimat care să treacă printr-un filtru adecvat pentru a îndepărta praful și uleiul și prin pisetele care conțin apă pentru umidificarea aerului.
Under consideration of the realistic exposure scenario, longer contact times could be appropriate.
Conținutul vaselor trebuie aerat cu ajutorul pipetelor Pasteur sau al altor dispozitive de aerare care nu adsorb substanțele chimice.
If the test chemical is rapidly degraded e.g. abiotically via hydrolysis, or is volatile and the concentration cannot be adequately maintained, additionally a shorter exposure period e.g. 30 minutes can be used.
Se poate utiliza un agitator orbital cu o viteză orbitală cuprinsă între 150 și 250 rpm cu flacoane de 2000ml, de exemplu, pentru a satisface cererea de oxigen a nămolului și a depăși dificultățile create de substanțele chimice care produc spumă în exces, care sunt volatile și, prin urmare, pierdute, sau care sunt dificil de dispersat atunci când sunt aerate prin barbotare cu aer.
The sensitivity of each batch of activated sludge should be checked with a suitable reference chemical on the day of exposure.
Sistemul de testare este format în general dintr-o serie de pahare aerate continuu și pregătite secvențial (de exemplu, la intervale de cca 10-15 minute), apoi analizate în mod secvențial.
The test is typically used to determine the ECx (e.g. EC50) of the test chemical and/or the no-observed effect concentration (NOEC).
Poate fi utilizat, de asemenea, orice instrument care permite concomitent aerarea și măsurarea vitezei consumului de oxigen ale amestecurilor;
The inhibition of oxygen uptake by micro-organisms oxidising organic carbon may be separately expressed from that by micro-organisms oxidising ammonium by measurement of the rates of uptake of oxygen in the absence and presence of N-allylthiourea, a specific inhibitor of the oxidation of ammonium to nitrite by the first-stage nitrifying bacteria.
pH-metru;
In this case the percentage inhibition of the rate of oxygen uptake is calculated by comparison of the rate of oxygen uptake in the presence of a test chemical with the mean oxygen uptake rate of the corresponding controls containing no test chemical, both in the presence and absence of the specific inhibitor, N-allylthiourea.
centrifugă, centrifugă de laborator clasică pentru nămol cu capacitate de 10000 m/s2.
Any oxygen uptake arising from abiotic processes may be detected by determining the rate in mixtures of test chemical, synthetic sewage medium and water, omitting activated sludge.
Reactivi
INFORMATION OF THE TEST CHEMICAL
Pe parcursul întregului test se utilizează reactivi de puritate analitică.
The identification (preferably CAS number), name (IUPAC), purity, water solubility, vapour pressure, volatility and adsorption characteristics of the test chemical should be known to enable correct interpretation of results to be made.
Apă
Normally, volatile chemicals cannot be tested adequately unless special precautions are taken (see paragraph 21).
Se utilizează apă distilată sau deionizată care să conțină sub 1mg/l de COD, cu excepția cazurilor în care se specifică utilizarea de apă fără clor de la robinet.
APPLICABILITY OF THE TEST METHOD
Apă uzată sintetică
The test method may be applied to water-soluble, poorly soluble and volatile chemicals.
Mediul ar trebui preparat astfel încât să conțină următorii constituenți în cantitățile specificate:
However, it may not always be possible to obtain EC50 values with chemicals of limited solubility and valid results with volatile chemicals may only be obtained providing that the bulk (say > 80 %) of the test chemical remains in the reaction mixture at the end of the exposure period(s).
peptonă
Additional analytical support data should be submitted to refine the ECx concentration when there is any uncertainty regarding the stability of the test chemical or its volatility.
extract de carne (sau un extract vegetal comparabil)
REFERENCE CHEMICALS
uree
Reference chemicals should be tested periodically in order to assure that the test method and test conditions are reliable, and to check the sensitivity of each batch of activated sludge used as microbial inoculum on the day of exposure.
clorură de sodiu (NaCl)
The chemical 3,5-dichlorophenol (3,5-DCP) is recommended as the reference inhibitory chemical, since it is a known inhibitor of respiration and is used in many types of test for inhibition/toxicity (4).
clorură de calciu dihidrat (CaC12, 2H2O)
Also copper (II) sulphate pentahydrate can be used as a reference chemical for the inhibition of total respiration (9).
sulfat de magneziu heptahidrat (MgSO4, 7H2O)
N-methylaniline can be used as a specific reference inhibitor of nitrification (4).
fosfat acid de potasiu anhidru (K2HPO4)
VALIDITY CRITERIA AND REPRODUCIBILITY
apă distilată sau deionizată până la 1 litru.
The blank controls (without the test chemical or reference chemical) oxygen uptake rate should not be less than 20 mg oxygen per one gramme of activated sludge (dry weight of suspended solids) in an hour.
PH-ul acestei soluții trebuie să fie de 7,5 ± 0,5.
If the rate is lower, the test should be repeated with washed activated sludge or with the sludge from another source.
Dacă mediul preparat nu se utilizează imediat, acesta ar trebui depozitat la întuneric la o temperatură cuprinsă între 0 °C și 4 °C timp de cel mult 1 săptămână sau în condiții care nu îi modifică compoziția.
The coefficient of variation of oxygen uptake rate in control replicates should not be more than 30 % at the end of definitive test.
Trebuie avut în vedere că această apă uzată sintetică este de 100 de ori mai concentrată decât cea descrisă în raportul tehnic al OCDE «Metodă propusă pentru determinarea biodegradabilității agenților tensioactivi folosiți la detergenții sintetici» din 11 iunie 1976 și conține în plus fosfat acid dipotasic.
In a 2004 international ring test organised by ISO (4) using activated sludge derived from domestic sewage, the EC50 of 3,5-DCP was found to lie in the range 2 mg/l to 25 mg/l for total respiration, 5 mg/l to 40 mg/l for heterotrophic respiration and 0,1 mg/l to 10 mg/l for nitrification respiration.
În mod alternativ, componentele mediului pot fi sterilizate individual înainte de depozitare sau peptona și extractul de carne pot fi adăugate puțin înainte de efectuarea testului.
If the EC50 of 3,5-DCP does not lie in the expected range, the test should be repeated with activated sludge from another source.
Înainte de utilizare, mediul trebuie bine amestecat, iar pH-ul trebuie ajustat la 7,5 ± 0,5, dacă este cazul.
The EC50 of copper (II) sulphate pentahydrate should lie in the range of 53-155 mg/l for the total respiration (9).
Substanța chimică testată
Test vessels and apparatus
Trebuie pregătită o soluție stoc pentru substanțele de testare ușor solubile în apă numai până la solubilitatea maximă în apă (precipitatele nu sunt acceptate).
Usual laboratory equipment and the following should be used:
Substanțele puțin solubile în apă, amestecurile ale căror componente au solubilități diferite în apă și substanțele adsorbante trebuie cântărite direct în vasele de testare.
Test vessels — for example, 1000 ml beakers to contain 500 ml of reaction mixture (see 5 in Fig.1);
În aceste cazuri, utilizarea soluțiilor stoc poate fi o alternativă dacă concentrațiile dizolvate ale substanțelor chimice de testare sunt determinate analitic în vasele de testare (înainte de adăugarea nămolului activ).
Cell and attachments for measuring concentration of dissolved oxygen;
Dacă se prepară fracțiuni adaptate la apă (WAF), este esențială și determinarea analitică a concentrațiilor dizolvate ale substanțelor chimice de testare în vasele de testare.
a suitable oxygen electrode;
Trebuie evitată utilizarea de solvenți organici, agenți de dispersie/emulgatori pentru îmbunătățirea solubilității.
an enclosed cell to contain the sample with no headspace and a recorder (e.g. 7, 8, 9 in Fig.1 of Appendix 2);
Ultrasonicarea soluțiilor stoc și agitarea prealabilă a suspensiilor, de exemplu peste noapte, sunt posibile atunci când sunt disponibile informații adecvate privind stabilitatea substanței chimice de testare în astfel de condiții.