natgillin/translations-raw huggingface dataset:
This bridging validation study shows for the Uterotrophic Bioassay in young adult ovariectomised mice that, qualitatively and quantitatively, the data obtained in rats and mice correspond well with each other.
Abordarea comparativă s-a limitat la șoareci OVX și raportul nu furnizează un set solid de date pentru a valida modelul imatur, prin urmare, modelul imatur la șoareci nu este considerat în domeniul de aplicare a prezentei metode de testare.
Where the Uterotrophic Bioassay result may be preliminary to a long-term study, this allows animals from the same strain and source to be used in both studies.
În consecință, în anumite cazuri se pot utiliza șoareci în locul șobolanilor.
The bridging approach was limited to the OVX mice and the report does not provide a robust data set to validate the immature model, thus the immature model for mice is not considered under the scope of the current test method.
Trebuie oferită o justificare pentru utilizarea acestei specii, pe baza unor criterii toxicologice, farmacocinetice și/sau de alt tip.
Thus, in some cases mice may be used instead of rats.
Pentru șoareci, ar putea fi necesare modificări ale protocolului.
A rationale should be given for this species, based on toxicological, pharmacokinetic, and/or other criteria.
De exemplu, consumul de hrană al șoarecilor în funcție de greutatea corporală este mai mare decât cel al șobolanilor și, prin urmare, conținutul de fitoestrogen din hrană ar trebui să fie mai mic pentru șoareci decât pentru șobolani (9) (20) (22).
Modifications of the protocol may be necessary for mice.
Toate procedurile trebuie să fie în conformitate cu standardele locale de îngrijire a animalelor de laborator.
For example, the food consumption of mice on a body weight basis is higher than that of rats and therefore the phyto-oestrogen content in food should be lower for mice than for rats (9)(20)(22).
Descrierile îngrijirii și ale tratamentului sunt standarde minime și sunt prevalate de reglementări locale, cum ar fi Directiva 2010/63/UE a Parlamentului European și a Consiliului din 22 septembrie 2010 privind protecția animalelor utilizate în scopuri științifice (38).
All procedures should conform with local standards of laboratory animal care.
În spațiul pentru adăpostirea animalelor de experiență se asigură o temperatură de 22 °C (cu un interval aproximativ, ± 3 °C).
These descriptions of care and treatment are minimum standards and will be superseded by local regulations such as Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (38).
Se asigură o umiditate relativă cu valoarea minimă de 30 % și valoarea maximă de 70 %, cu excepția momentelor în care se curăță spațiul.
The temperature in the experimental animal room should be 22 °C (with an approximate range ± 3 °C).
Obiectivul ar fi o umiditate relativă de 50-60 %.
The relative humidity should be a minimum of 30 % and preferably should not exceed a maximum 70 %, other than during room cleaning.
Iluminatul trebuie să fie artificial.
The aim should be relative humidity of 50-60 %.
Alternanța zilnică a iluminatului trebuie să fie de 12 ore de lumină, 12 ore de întuneric.
Lighting should be artificial.
Hrana de laborator și apa potabilă se furnizează ad libitum.
The daily lighting sequence should be 12 hours light, 12 hours dark.
Animalele adulte tinere pot fi adăpostite individual sau în cuști în grupuri de până la trei animale.
Laboratory diet and drinking water should be provided ad libitum.
Din cauza vârstei fragede a animalelor imature, se recomandă adăpostirea în grup social.
Young adult animals may be housed individually or be caged in groups of up to three animals.
Se știe că nivelurile ridicate de fitoestrogeni în hrana de laborator au ca efect creșterea greutății uterului la rozătoare într-o măsură suficient de mare pentru a interfera cu biotestul uterotrofic (13) (14) (15).
Due to the young age of the immature animals, social group housing is recommended.
Nivelurile ridicate de fitoestrogeni și de energie metabolizabilă în tipurile de hrană de laborator pot conduce, de asemenea, la pubertate prematură, în cazul în care sunt utilizate animale imature.
High levels of phyto-oestrogens in laboratory diets have been known to increase uterine weights in rodents to a degree enough as to interfere with the Uterotrophic Bioassay (13)(14)(15).
Prezența fitoestrogenilor rezultă, în principal, din includerea de produse din soia și lucernă în tipurile de hrană de laborator și s-a dovedit că concentrațiile de fitoestrogeni variază de la un lot la altul de hrană standard de laborator (23).
High levels of phyto-oestrogens and of metabolisable energy in laboratory diets may also result in early puberty, if immature animals are used.
Greutatea corporală este o variabilă importantă deoarece cantitatea de hrană consumată este legată de greutatea corporală.
The presence of phyto-oestrogens results primarily from the inclusion of soy and alfalfa products in the laboratory diets and concentrations of phyto-oestrogens have been shown to vary from batch-to-batch of standard laboratory diets (23).
Prin urmare, nivelul real al dozei de fitoestrogen consumat din aceeași hrană poate varia în funcție de specie și de vârstă (9).
Body weight is an important variable, as the quantity of food consumed is related to body weight.
Pentru șobolanii femele imature, consumul de hrană în funcție de greutatea corporală poate fi aproximativ dublu față de cel al femelelor adulte tinere ovariectomizate.
Therefore, the actual phyto-oestrogen dose consumed from the same diet may vary among species and by age (9).
Pentru șoarecii adulți tineri, consumul de hrană în funcție de greutatea corporală poate fi de aproximativ patru ori cel al femelelor șobolan adulte tinere ovariectomizate.
For immature female rats, food consumption on a body weight basis may be approximately double that of ovariectomised young adult females.
Cu toate acestea, rezultatele biotestului uterotrofic (9) (17) (18) (19) arată că anumite cantități limitate de fitoestrogeni alimentari sunt acceptabile și nu reduc sensibilitatea biotestului.
For young adult mice, food consumption on a body weight basis may be approximately quadruple that of ovariectomised young adult female rats.
Ca orientare, nivelurile alimentare ale fitoestrogenilor nu trebuie să depășească 350 μg de echivalente de genistein/gram de hrană de laborator pentru femelele imature de șobolani Sprague Dawley și Wistar (6) (9).
Uterotrophic Bioassay results (9)(17)(18)(19), however, show that limited quantities of dietary phyto-oestrogens are acceptable and do not reduce the sensitivity of the bioassay.
Regimurile alimentare trebuie, de asemenea, să fie adecvate atunci când testarea are loc pe femele de șobolani ovariectomizate adulte tinere, întrucât consumul alimentar în funcție de greutatea corporală este mai mic la tinerii adulți decât la animalele imature.
As a guide, dietary levels of phyto-oestrogens should not exceed 350 μg of genistein equivalents/gram of laboratory diet for immature female Sprague Dawley and Wistar rats (6)(9).
Dacă se utilizează șoareci ovariectomizați sau șobolani mai sensibili la fitoestrogen, se analizează reducerea proporțională a nivelurilor de fitoestrogen alimentar (20).
Such diets should also be appropriate when testing in young adult ovariectomised rats because food consumption on a body weight basis is less in young adult as compared to immature animals.
De asemenea, diferențele între energia metabolică disponibilă din diferite regimuri alimentare pot conduce la schimbări temporale privind începerea pubertății (21) (22).
If adult ovariectomised mice or more phyto-oestrogen-sensitive rats are to be used, proportional reduction in dietary phyto-oestrogen levels must be considered (20).
Înainte de studiu, este necesară selecția atentă a unui regim alimentar fără un nivel ridicat de fitoestrogeni [pentru orientări, a se vedea (6) (9)] sau de energie metabolizabilă, care pot afecta rezultatele (15) (17) (19) (22) (36).
In addition, the differences in available metabolic energy from different diets may lead to time shifts for the onset of puberty (21)(22).
Asigurarea respectării corespunzătoare a sistemului de testare utilizat de laborator, astfel cum este specificat la punctele 26 și 27, este o metodă importantă de îndeplinire a ambilor factori.
Prior to the study, careful selection is required of a diet without an elevated level of phyto-oestrogens (for guidance see (6)(9)) or metabolisable energy, that can confound the results (15)(17)(19)(22)(36).
Ca măsură de protecție, în conformitate cu bunele practici de laborator (BPL), se realizează prelevarea de probe reprezentative din fiecare lot de hrană administrată în timpul studiului pentru eventuala analiză a conținutului de fitoestrogen (de exemplu, în cazul unei greutăți uterine ridicate în raport cu datele istorice privind grupurile martor sau un răspuns inadecvat la estrogenul de referință, 17 alfa-etinilestradiol).
Ensuring the proper performance of the test system used by the laboratory as specified in paragraphs 26 and 27 is an important check on both of these factors.
Alicotele se analizează ca parte a studiului sau congelate la – 20 °C sau astfel încât să se împiedice descompunerea probei înainte de analiză.
As a safeguard consistent with good laboratory practice (GLP) representative sampling of each batch of diet administered during the study should be conducted for possible analysis of phyto-oestrogen content (e.g. in the case of high uterine control weight relative to historic controls or an inadequate response to the reference oestrogen, 17 alpha ethinyl estradiol).
Unele materiale de așternut pot conține substanțe cu efect estrogenic care apar în mod natural sau substanțe chimice cu efect antiestrogenic (de exemplu, se știe că știuletele de porumb afectează ciclicitatea șobolanilor și pare să aibă efect antiestrogenic).
Aliquots should be analysed as part of the study or frozen at – 20 °C or in such a way as to prevent the sample from decomposing prior to analysis.
Materialele de așternut selectate trebuie să conțină un nivel minim de fitoestrogeni.
Some bedding materials may contain naturally occurring oestrogenic or antioestrogenic chemicals (e.g. corn cob is known to affects the cyclicity of rats and appears to be antioestrogenic).
Pregătirea animalelor
The selected bedding material should contain a minimum level of phyto-oestrogens.
Animalele de laborator fără semne de boală sau anormalități fizice se distribuie în mod aleatoriu în grupuri martor și grupuri de tratament.
Preparation of animals
Animalele trebuie identificate individual.
Experimental animals without evidence of any disease or physical abnormalities are randomly assigned to the control and treatment groups.
De preferință, animalele imature se plasează în cuști cu mame sau mame adoptive până la înțărcare în timpul aclimatizării.
The animals should be identified uniquely.
Perioada de aclimatizare înainte de începerea studiului ar trebui să fie de aproximativ 5 zile pentru animalele adulte tinere și pentru animalele imature livrate cu mame sau mame adoptive.
Preferably, immature animals should be caged with dams or foster dams until weaning during acclimatisation.
În cazul în care animalele imature sunt obținute ca pui înțărcați fără mame, este posibil să fie necesară o perioadă de aclimatizare mai scurtă, întrucât administrarea trebuie să înceapă imediat după înțărcare (a se vedea punctul 29).
The acclimatisation period prior to the start of the study should be about 5 days for young adult animals and for the immature animals delivered with dams or foster dams.
Verificarea competenței laboratorului
If immature animals are obtained as weanlings without dams a shorter duration of the acclimatisation period may become necessary as dosing should start immediately after weaning (see paragraph 29).
Pentru a verifica competența laboratorului, se pot utiliza două opțiuni diferite:
Verification of Laboratory Proficiency
verificarea periodică, pe baza unui studiu inițial de control pozitiv cu valori de referință (a se vedea punctul 27).
Two different options can be used to verify laboratory proficiency:
Cel puțin o dată la 6 luni și de fiecare dată când are loc o modificare care poate influența performanța testării (de exemplu, o nouă formulare a regimului alimentar, modificări la nivelul personalului care efectuează disecțiile, schimbarea sușei sau a furnizorului de animale etc.), se verifică capacitatea de reacție a sistemului de testare (modelul animal) utilizând o doză corespunzătoare (pe baza studiului de martor pozitiv de referință descris la punctul 27) a unui estrogen de referință:
Periodic verification, relying on an initial baseline positive control study (see paragraph 27).
etinilestradiol (CAS nr. 57-63-6) (EE);
ethinyl estradiol (CAS No 57-63-6) (EE).
În cazul în care sistemul nu reacționează astfel cum se preconizează, condițiile de experiență sunt examinate și modificate în consecință.
Use of concurrent controls, by including a group administered with an appropriate dose of reference oestrogen in each assay.
Se recomandă ca doza de estrogen de referință care va fi utilizată în cadrul ambelor metode să fie aproximativ ED 70-80.
If the system does not respond as expected, the experimental conditions should be examined and modified accordingly.
Studiul de martor pozitiv de referință — Înainte ca un laborator să efectueze un studiu utilizând pentru prima dată prezenta metodă de testare, trebuie să se demonstreze competența laboratorului prin testarea reactivității modelului animal, stabilind răspunsul la o doză de estrogen de referință:
It is recommended that the dose of reference oestrogen to be used in either approach be approximately the ED70 to 80.
etinilestradiol (CAS nr. 57-63-6) (EE) cu un număr minim de patru doze.
Baseline Positive Control Study — Before a laboratory conducts a study under this test method for the first time, laboratory proficiency should be demonstrated by testing the responsiveness of the animal model, by establishing the dose response of a reference oestrogen:
Numărul și starea animalelor
ethinyl estradiol (CAS No 57-63-6) (EE) with a minimum of four doses.
Fiecare grup tratat și fiecare grup martor trebuie să includă cel puțin 6 animale (atât pentru protocoalele metodei imature, cât și pentru metoda adult-OVX).
The uterine weight response will be compared to established historical data (see reference (5)).
Vârsta animalelor imature
If this baseline positive control study does not yield the anticipated results the experimental conditions should be examined and modified.
Pentru biotestul uterotrofic cu animale imature, se specifică ziua fătării.
Number and condition of animals
Administrarea trebuie să înceapă suficient de devreme pentru a se asigura că, la sfârșitul administrării substanței chimice de testat, nu a avut încă loc creșterea fiziologică a estrogenilor endogeni asociată cu pubertatea.
Each treated and control group should include at least 6 animals (for both immature and ovx-adult method protocols).
Pe de altă parte, există dovezi că animalele foarte tinere pot fi mai puțin sensibile.
Age of immature animals
Pentru definirea vârstei optime, fiecare laborator trebuie să ia în considerare propriile date generale privind maturarea.
For the Uterotrophic Bioassay with immature animals the day of birth must be specified.
De regulă, administrarea tratamentului la șobolani poate începe imediat după înțărcarea prematură în ziua 18 după fătare (ziua fătării fiind ziua 0 după fătare).
Dosing should begin early enough to ensure that, at the end of test chemical administration, the physiological rise of endogenous oestrogens associated with puberty has not yet taken place.
La șobolani, este preferabil ca administrarea să se efectueze în ziua 21 după fătare, dar, în orice caz, înainte de ziua 25 după fătare, întrucât, după această vârstă, axul hipotalamo-pituitar-ovarian devine funcțional, iar nivelurile de estrogen endogen pot începe să crească, cu o creștere concomitentă a greutății de referință a uterului și o creștere a deviațiilor standard ale grupului (2) (3) (10) (11) (12).
On the other hand, there is evidence that very young animals may be less sensitive.
Procedura pentru ovariectomie
For defining the optimal age each laboratory should take its own background data on maturation into consideration.
Pentru femele ovariectomizate de șobolani și de șoareci (grupurile martor și de tratament), ovariectomia se efectuează între 6 și 8 săptămâni.
As a general guide, dosing in rats may begin immediately after early weaning on postnatal day 18 (with the day of birth being postnatal day 0).
Pentru șobolani, trebuie să existe un interval de minimum 14 de zile între ovariectomie și prima zi de administrare pentru a permite uterului să se retragă până la un nivel de referință stabil minim.
Dosing in rats preferably should be completed on postnatal day 21 but in any case prior to postnatal day 25, because, after this age, the hypothalamic-pituitary-ovarian axis becomes functional and endogenous oestrogen levels may begin to rise with a concomitant increase in baseline uterine weight means and an increase in the group standard deviations (2)(3)(10)(11)(12).
Pentru șoareci, trebuie să treacă cel puțin 7 zile între ovariectomie și prima zi de administrare.
Procedure for ovariectomy
Întrucât cantități mici de țesut ovarian sunt suficiente pentru a produce niveluri semnificative de estrogeni aflate în circulație (3), animalele sunt testate înainte de utilizare prin observarea celulelor epiteliale prelevate prin tamponare din vagin pe parcursul a cel puțin cinci zile consecutive (de exemplu, pentru șobolani, zilele 10-14 după ovariectomie).
For the ovariectomised female rat and mouse (treatment and control groups), ovariectomy should occur between 6 and 8 weeks of age.
În cazul în care animalele manifestă semne că ar intra în ciclul estral, acestea nu sunt utilizate.
For rats, a minimum of 14 days should elapse between ovariectomy and the first day of administration in order to allow the uterus to regress to a minimum, stable baseline.
De asemenea, în momentul autopsiei, se examinează resturile ovariene pentru orice dovadă a existenței de țesut ovarian.
For mice, at least 7 days should elapse between ovariectomy and the first day of administration.
În acest caz, animalul nu se utilizează în calcule (3).
As small amounts of ovarian tissue are sufficient to produce significant circulating levels of oestrogens (3), the animals should be tested prior to use by observing epithelial cells swabbed from the vagina on at least five consecutive days (e.g. days 10-14 after ovariectomy for rats).
Începerea procedurii de ovariectomie se face cu animalul în poziție culcată ventrală, după ce acesta a fost anesteziat în mod corespunzător.
If the animals indicate any evidence entering oestrous, the animals should not be used.
Incizia de deschidere de aproximativ 1 cm a peretelui abdominal dorso-lateral se realizează longitudinal, la mijlocul distanței dintre marginea inferioară costală și creasta iliacă și câțiva milimetri lateral de marginea laterală a mușchiului lombar.
Further, at necropsy, the ovarian stubs should be examined for any evidence that ovarian tissue is present.
Ovarul se îndepărtează din cavitatea abdominală pe un câmp aseptic.
If so, the animal should not be used in the calculations (3).
Ovarul se separă la joncțiunea dintre oviduct și organismul uterin.
The ovariectomy procedure begins with the animal in ventral recumbency after the animal has been properly anesthetised.
După ce se confirmă că nu există o sângerare masivă, peretele abdominal se închide prin suturi și pielea este închisă cu autoclipsuri sau sutură corespunzătoare.
The incision opening the dorso-lateral abdominal wall should be approximately 1 cm lengthways at the mid-point between the costal inferior border and the iliac crest, and a few millimetres lateral to the lateral margin of the lumbar muscle.
Punctele de ligatură sunt prezentate schematic în figura 1.
The ovary should be removed from the abdominal cavity onto an aseptic field.
Se utilizează analgezice postoperatorii adecvate, conform recomandării unui medic veterinar cu experiență în îngrijirea rozătoarelor.
The ovary should be disconnected at the junction of the oviduct and the uterine body.
Greutate corporală
After confirming that no massive bleeding is occurring, the abdominal wall should be closed by a suture and the skin closed by autoclips or appropriate suture.
În metoda adult-OVX, greutatea corporală și greutatea uterului nu sunt corelate, deoarece greutatea uterului este afectată de hormoni precum estrogenii, dar nu și de factori de creștere care reglementează dimensiunea corporală.
The ligation points are shown schematically in Figure 1.
Dimpotrivă, greutatea corporală este legată de greutatea uterului în modelul imatur, în timp ce acesta se maturizează (34).
Appropriate post-operative analgesia should be used as recommended by a veterinarian experienced in rodent care.
Astfel, la începutul studiului, diferențele de greutate între animalele utilizate în modelul imatur trebuie să fie minime și să nu depășească ± 20 % din greutatea medie.
Body weight
Aceasta înseamnă că dimensiunea cuibului trebuie să fie standardizată de crescător, pentru a se asigura că puii de la diferite animale materne vor fi hrăniți aproximativ la fel.
In the ovx-adult method, body weight and uterine weight are not correlated because uterine weight is affected by hormones like oestrogens but not by the growth factors that regulate body size.
Animalele trebuie distribuite în grupuri (atât grupuri martor, cât și grupuri tratate) prin distribuirea aleatorie a greutății, astfel încât greutatea medie a fiecărui grup să nu fie diferită din punct de vedere statistic de cea a oricărui alt grup.
On the contrary, body weight is related to uterine weight in the immature model, while it is maturing (34).
Ar trebui să se acorde atenție pentru a evita, pe cât posibil, atribuirea unor pui din același cuib în același grup de tratament, fără a crește numărul de cuiburi care urmează să fie utilizate pentru investigație.
Thus, at the commencement of the study the weight variation of animals used, in the immature model, should be minimal and not exceed ± 20 % of the mean weight.
Pentru a stabili dacă o substanță chimică de testat poate avea efect estrogenic in vivo, două grupuri de tratament și un grup martor sunt în mod normal suficiente și, prin urmare, acest concept este preferat, din motive de bunăstare a animalelor.
This means that the litter size should be standardised by the breeder, to ensure that offspring of different mother animals will be fed approximately the same.
În cazul în care scopul este de a obține o curbă doză-răspuns sau pentru a extrapola la doze mai mici, sunt necesare cel puțin 3 grupuri de tratament.
Animals should be assigned to groups (both control and treatment) by randomised weight distribution, so that mean body weight of each group is not statistically different from any other group.
În cazul în care sunt necesare mai multe informații în afară de identificarea activității estrogenice (cum ar fi o estimare a potenței), ar trebui să fie luat în considerare un regim de administrare diferit.
Consideration should be given to avoid assignment of littermates to the same treatment group as far as practicable without increasing the number of litters to be used for the investigation.
Cu excepția tratamentului cu substanța de testat, animalele din grupul martor trebuie tratate în mod identic cu animalele din grupurile tratate.
In order to establish whether a test chemical can have oestrogenic action in vivo, two dose groups and a control are normally sufficient and this design is therefore preferred for animal welfare reasons.
Dacă se folosește un vehicul la administrarea substanței de testat, grupul martor trebuie să primească aceeași cantitate de vehicul utilizată la grupurile tratate (sau cel mai mare volum utilizat la grupurile tratate, dacă acesta diferă între grupuri).