natgillin/translations-raw huggingface dataset:
The following clinical observations may indicate systemic toxicity (35) (36) when used as part of an integrated assessment and therefore may indicate the maximum dose level to use in the main LLNA: changes in nervous system function (e.g. pilo-erection, ataxia, tremors, and convulsions); changes in behaviour (e.g. aggressiveness, change in grooming activity, marked change in activity level); changes in respiratory patterns (i.e. changes in frequency and intensity of breathing such as dyspnea, gasping, and rales), and changes in food and water consumption.
Următoarele observații clinice pot indica toxicitate sistemică (35) (36) atunci când sunt utilizate ca parte a unei evaluări integrate și, prin urmare, pot indica doza maximă utilizată în studiul LLNA principal: modificări ale funcției sistemului nervos (de exemplu, piloerecție, ataxie, tremor și convulsii); modificări ale comportamentului (de exemplu, agresivitate, modificări ale activității de curățare, modificare semnificativă a nivelului de activitate); tulburări respiratorii (de exemplu, modificări ale frecvenței și intensității respirației precum dispnee, respirație greoaie și zgomotoasă) și modificări legate de consumul de hrană și apă.
In addition, signs of lethargy and/or unresponsiveness and any clinical signs of more than slight or momentary pain and distress, or a > 5 % reduction in body weight from Day 1 to Day 6, and mortality should be considered in the evaluation.
În plus, semnele de letargie și/sau lipsa reacției și oricare semne clinice indicative ale unei dureri sau suferințe mai mari sau persistente sau o scădere a greutății corporale cu mai mult de 5 % din ziua 1 până în ziua 6, precum și mortalitatea trebuie incluse în evaluare.
Moribund animals or animals obviously in pain or showing signs of severe and enduring distress should be humanely killed (37).
Animalele muribunde sau cele care manifestă dureri evidente sau prezintă semne de suferință gravă și prelungită sunt eutanasiate (37).
Main study experimental schedule
Schema de tratament a studiului principal
The experimental schedule of the assay is as follows:
Pentru acest test, schema de tratament este următoarea:
Day 1 Individually identify and record the weight of each animal and any clinical observation.
Ziua 1 Se identifică și se înregistrează greutatea fiecărui animal în parte, precum și toate observațiile clinice.
Apply 25 μL of the appropriate dilution of the test substance, the vehicle alone, or the PC (concurrent or recent, based on laboratory policy in considering paragraphs 11-15), to the dorsum of each ear.
Se aplică 25 μL de substanță de test diluată în mod adecvat, doar din vehicul sau din PC (concomitent sau recent, în funcție de politica laboratorului cu privire la punctele 11-15), în regiunea dorsală a fiecărei urechi.
Days 2 and 3 Repeat the application procedure carried out on Day 1.
Zilele 2 și 3 Se repetă procedura de aplicare efectuată în ziua 1.
Days 4 and 5 No treatment.
Zilele 4 și 5 Nu se aplică tratament.
Day 6 Record the weight of each animal.
Ziua 6 Se înregistrează greutatea fiecărui animal.
Inject 250 μL of sterile phosphate-buffered saline (PBS) containing 20 μCi (7,4 × 105 Bq) of tritiated (3H)-methyl thymidine into all test and control mice via the tail vein.
Li se injectează 250 μL de ser fiziologic tamponat cu fosfat (PBS) conținând 20 μCi (7,4 × 105 Bq) de 3H-metil timidină tuturor șoarecilor de test și celor din grupul martor prin vena codală.
Alternatively, inject 250 μL sterile PBS containing 2 μCi (7,4 × 104 Bq) of 125I-iododeoxyuridine and 10–5M fluorodeoxyuridine into all mice via the tail vein.
Alternativ, tuturor șoarecilor li se injectează 250 μL de PBS steril conținând 2 μCi (7,4 × 104 Bq) de 125I-iododeoxiuridină și 10–5M fluorodeoxiuridină prin vena codală.
Five hours (5 h) later, humanely kill the animals.
După cinci ore, animalele sunt eutanasiate.
Excise the draining auricular lymph nodes from each mouse ear and process together in PBS for each animal (individual animal approach); alternatively excise and pool the lymph nodes from each ear in PBS for each treatment group (pooled treatment group approach).
Se excizează ganglionii limfatici auriculari de drenare de la fiecare ureche de la toate animalele și se prelucrează separat în PBS pentru fiecare animal (metodă individuală la nivel de animal); alternativ, se excizează ganglionii limfatici de la fiecare ureche și se păstrează împreună în PBS pentru fiecare grup experimental (metodă colectivă la nivel de grup tratat).
Details and diagrams of the lymph node identification and dissection can be found in reference (12).
Detalii și diagrame privind identificarea și disecția ganglionilor limfatici pot fi consultate în referință (12).
To further monitor the local skin response in the main study, additional parameters such as scoring of ear erythema or ear thickness measurements (obtained either by using a thickness gauge, or ear punch weight determinations at necropsy) may be included in the study protocol.
Pentru a monitoriza în continuare răspunsul dermic local în studiul principal, pot fi incluși în protocolul de studiu parametri adiționali precum punctarea eritemului din zona urechii sau măsurări ale grosimii urechii (obținute fie cu ajutorul unui instrument de măsurare a grosimii, fie prin determinări ale greutății eșantioanelor de urechi ulterior necropsiei).
Preparation of cell suspensions
Prepararea suspensiilor celulare
A single-cell suspension of lymph node cells (LNC) excised bilaterally using the individual animal approach or alternatively, the pooled treatment group approach is prepared by gentle mechanical disaggregation through 200 micron-mesh stainless steel gauze or another acceptable technique for generating a single-cell suspension.
Se prepară o singură suspensie celulară conținând celule din ganglioni limfatici (LNC) excizate bilateral prin metoda individuală la nivel de animal sau alternativ prin metoda colectivă la nivel de grup tratat, printr-o separare mecanică ușoară realizată cu ajutorul unei site din oțel inoxidabil cu ochiuri de 200 μm sau o altă tehnică acceptabilă de generare a unei singure suspensii celulare.
The LNC are washed twice with an excess of PBS and the DNA is precipitated with 5 % trichloroacetic acid (TCA) at 4 °C for 18h (3).
LNC se spală de două ori cu PBS în exces, iar ADN-ul se precipită cu o soluție de acid tricloracetic (TCA) de 5 % la 4 °C timp de 18h (3).
Pellets are either resuspended in 1 mL TCA and transferred to scintillation vials containing 10 mL of scintillation fluid for 3H-counting, or transferred directly to gamma counting tubes for 125I-counting.
Granulele se suspendă din nou în 1 mL de soluție de acid tricloracetic și se transferă în flacoane de scintilație conținând 10 mL de fluid de scintilație pentru determinarea tritiului 3H sau se transferă direct în tuburile cu raze gama pentru determinarea iodului 125I.
Determination of cellular proliferation (incorporated radioactivity)
Determinarea proliferării celulare (radioactivitate încorporată)
Incorporation of 3H-methyl thymidine is measured by β-scintillation counting as disintegrations per minute (DPM).
Încorporarea de 3H-metil timidină se măsoară prin determinarea β-scintilației, în dezintegrări pe minut (DPM).
Incorporation of 125I-iododeoxyuridine is measured by 125I-counting and also is expressed as DPM.
Încorporarea de 125I-iododeoxiuridină se măsoară prin determinarea iodului 125I și se exprimă, de asemenea, în DPM.
Depending on the approach used, the incorporation is expressed as DPM/mouse (individual animal approach) or DPM/treatment group (pooled treatment group approach).
În funcție de metoda utilizată, încorporarea se exprimă ca DPM/șoarece (metoda individuală la nivel de animal) sau DPM/grup tratat (metoda colectivă la nivel de grup).
Reduced LLNA
LLNA simplificată
In certain situations, when there is a regulatory need to confirm a negative prediction of skin sensitising potential, an optional rLLNA protocol (16) (17) (18) using fewer animals may be used, provided there is adherence to all other LLNA protocol specifications in this TM.
În anumite situații, atunci când există o necesitate de reglementare pentru a confirma o estimare negativă referitoare la potențialul de sensibilizare dermică, poate fi utilizat un protocol opțional rLLNA (16) (17) (18) cu mai puține animale, cu condiția să se respecte toate celelalte specificații de protocol LLNA din această metodă de testare.
If a positive or equivocal result is obtained, additional testing may be needed in order to interpret or clarify the finding.
În cazul în care se obțin rezultate pozitive sau echivoce, ar putea fi necesare teste adiționale pentru a interpreta sau clarifica rezultatele.
The reduction in number of dose groups is the only difference between the LLNA and the rLLNA test method protocols and for this reason the rLLNA does not provide dose-response information.
Reducerea numerică a grupurilor testate reprezintă singura diferență dintre protocoalele metodelor de testare LLNA și rLLNA, iar din acest motiv rLLNA nu furnizează informații referitoare la relația doză-răspuns.
Therefore, the rLLNA should not be used when dose-response information is needed.
Prin urmare, rLLNA nu trebuie utilizată dacă sunt necesare informații referitoare la relația doză-răspuns.
Like the multi-dose LLNA, the test substance concentration evaluated in the rLLNA should be the maximum concentration that does not induce overt systemic toxicity and/or excessive local skin irritation in the mouse (see paragraph 18).
Ca și în cazul dozelor multiple LLNA, concentrația substanței de test evaluată în cadrul rLLNA trebuie să fie concentrația maximă care nu induce toxicitate sistemică evidentă și/sau iritație dermică locală excesivă la șoarece (a se vedea punctul 18).
Clinical observations
Observații clinice
Each mouse should be carefully observed at least once daily for any clinical signs, either of local irritation at the application site or of systemic toxicity.
Fiecare șoarece se examinează atent cel puțin o dată pe zi pentru identificarea oricăror semne clinice, fie de iritații la locul aplicării, fie de toxicitate sistemică.
All observations are systematically recorded with records being maintained for each mouse.
Toate observațiile se consemnează sistematic în înregistrările individuale pentru fiecare șoarece.
Monitoring plans should include criteria to promptly identify those mice exhibiting systemic toxicity, excessive local skin irritation, or corrosion of skin for euthanasia (37).
Planurile de monitorizare trebuie să includă criterii pentru identificarea promptă a șoarecilor care prezintă toxicitate sistemică, iritație dermică locală excesivă sau coroziunea pielii, în vederea eutanasierii (37).
Body weights
Greutatea corporală
As stated in paragraph 25, individual animal body weights should be measured at the start of the test and at the scheduled humane kill.
Astfel cum se arată la punctul 25, greutatea corporală a fiecărui animal se măsoară la începutul testului și în momentul prevăzut pentru eutanasiere.
CALCULATION OF RESULTS
CALCULAREA REZULTATELOR
Results for each treatment group are expressed as the SI.
Rezultatele pentru fiecare grup testat se exprimă printr-un indice de stimulare (IS).
When using the individual animal approach, the SI is derived by dividing the mean DPM/mouse within each test substance group, and the PC group, by the mean DPM/mouse for the solvent/VC group.
Dacă se folosește metoda individuală la nivel de animal, IS se determină prin împărțirea valorii medii a DPM/șoarece din fiecare grup tratat cu substanța de test și a valorii medii pentru grupul martor pozitiv la valoarea medie a DPM/șoarece din grupul martor tratat cu solvent/vehicul.
The average SI for the VCs is then one.
IS mediu pentru VC este, prin urmare, egal cu 1.
When using the pooled treatment group approach, the SI is obtained by dividing the pooled radioactive incorporation for each treatment group by the incorporation of the pooled VC group; this yields a mean SI.
Dacă se folosește metoda colectivă la nivel de grup, IS se obține prin împărțirea încorporării radioactive colective înregistrate de fiecare grup tratat la încorporarea înregistrată de grupul martor tratat cu vehicul; astfel se calculează un IS mediu.
The decision process regards a result as positive when SI ≥ 3.
Un rezultat este considerat pozitiv atunci când IS ≥ 3.
However, the strength of the dose-response, the statistical significance and the consistency of the solvent/vehicle and PC responses may also be used when determining whether a borderline result is declared positive (4) (5) (6).
Cu toate acestea, intensitatea relației doză-răspuns, semnificația statistică și coerența răspunsurilor obținute cu solvent/vehicul și PC pot fi, de asemenea, utilizate în declararea unui rezultat limită ca fiind pozitiv (4)(5)(6).
If it is necessary to clarify the results obtained, consideration should be given to various properties of the test substance, including whether it has a structural relationship to known skin sensitisers, whether it causes excessive local skin irritation in the mouse, and the nature of the dose-response relationship seen.
Dacă rezultatele obținute nu sunt suficient de concludente, trebuie examinate diferitele proprietăți ale substanței de test, inclusiv dacă prezintă o relație structurală cu agenți cunoscuți de sensibilizare dermică și dacă provoacă iritații cutanate excesive la șoareci, precum și relația doză-răspuns observată.
These and other considerations are discussed in detail elsewhere (7).
Aceste considerații, precum și altele, sunt discutate în detaliu în alt document (7).
Collecting radioactivity data at the level of the individual mouse will enable a statistical analysis for presence and degree of dose-response relationship in the data.
Colectarea datelor de radioactivitate pentru fiecare animal permite analiza statistică a prezenței și a intensității relației doză-răspuns pe baza datelor.
Any statistical assessment could include an evaluation of the dose-response relationship as well as suitably adjusted comparisons of test groups (e.g. pair-wise dosed group versus concurrent VC comparisons).
Orice evaluare statistică poate include o evaluare a relației doză-răspuns, precum și comparări ale grupurilor testate adaptate corespunzător (de exemplu, comparări pe perechi de grupuri de doză cu grupul martor concomitent tratat cu solvent/vehicul).
Statistical analyses may include, e.g. linear regression or William’s test to assess dose-response trends, and Dunnett’s test for pair-wise comparisons.
Analizele statistice pot include, de exemplu, o regresie liniară sau testul William pentru evaluarea funcției doză-răspuns, precum și testul Dunnett pentru comparațiile pe perechi.
In choosing an appropriate method of statistical analysis, the investigator should maintain an awareness of possible inequalities of variances and other related problems that may necessitate a data transformation or a non-parametric statistical analysis.
Pentru alegerea metodei adecvate de analiză statistică, experimentatorul trebuie să aibă în vedere posibilele inegalități la nivelul varianțelor și alte probleme conexe care ar putea impune o transformare a datelor sau o analiză statistică non-parametrică.
In any case the investigator may need to carry out SI calculations and statistical analyses with and without certain data points (sometimes called “outliers”).
În orice caz, experimentatorul ar putea fi nevoit să calculeze indicii de stimulare și să efectueze analizele statistice cu sau fără anumite puncte de date (denumite câteodată «valori aberante»).
Data should be summarised in tabular form.
Datele se sistematizează în tabele.
When using the individual animal approach, show the individual animal DPM values, the group mean DPM/animal, its associated error term (e.g. SD, SEM), and the mean SI for each dose group compared against the concurrent VC group.
În cazul în care se utilizează metoda individuală la nivel de animal, se precizează valorile DPM pentru fiecare animal, media DPM/animal pentru fiecare grup, marja de eroare asociată (de exemplu, deviația standard, eroarea standard a mediei) și IS mediu pentru fiecare grup tratat în raport cu grupul martor concomitent tratat cu solvent/vehicul.
When using the pooled treatment group approach, show the mean/median DPM and the mean SI for each dose group compared against the concurrent VC group.
Dacă se utilizează metoda colectivă la nivel de grup, se indică media/mediana DPM și IS mediu pentru fiecare grup tratat comparativ cu grupul VC concomitent.
Test report
Raportul de testare
The test report should contain the following information:
Raportul de testare trebuie să includă următoarele informații:
Test and control substances:
Substanța de test și substanța martor:
identification data (e.g. CAS and EC numbers, if available; source; purity; known impurities; lot number);
date de identificare (de exemplu, numerele CAS și CE, dacă se cunosc; sursa; puritatea; impuritățile cunoscute; numărul lotului);
physical nature and physicochemical properties (e.g. volatility, stability, solubility);
starea fizică și proprietățile fizice și chimice (de exemplu, volatilitate, stabilitate, solubilitate);
if mixture, composition and relative percentages of components;
în cazul amestecurilor, compoziția și procentul relativ al fiecărui constituent;
Solvent/vehicle:
Solvent/vehicul:
identification data (purity; concentration, where appropriate; volume used);
date de identificare (puritate; concentrație, dacă este cazul; volumul utilizat);
justification for choice of vehicle;
justificarea alegerii vehiculului;
Test animals:
Animalele de experiență:
source of CBA mice;
proveniența șoarecilor de rasa CBA;
microbiological status of the animals, when known;
statutul microbiologic al animalelor, dacă se cunoaște;
number and age of animals;
numărul și vârsta animalelor;
source of animals, housing conditions, diet, etc.;
sursa animalelor, condițiile de adăpostire, regimul alimentar etc.;
Test conditions:
Condiții de testare:
details of test substance preparation and application;
detalii privind prepararea și aplicarea substanței de testat;
justification for dose selection (including results from pre-screen test, if conducted);
justificarea dozei alese (inclusiv rezultatele testării preliminare, dacă este cazul);
vehicle and test substance concentrations used, and total amount of test substance applied;
concentrațiile vehiculului și ale substanței de test utilizate și cantitatea totală de substanță aplicată;
details of food and water quality (including diet type/source, water source);
detalii privind calitatea hranei și a apei (inclusiv tipul/sursa regimului alimentar, sursele de apă);
details of treatment and sampling schedules;
detalii privind schemele de tratament și de eșantionare;
methods for measurement of toxicity;
metodele de măsurare a toxicității;
criteria for considering studies as positive or negative;
criteriile pentru stabilirea studiilor ca fiind pozitive sau negative;
details of any protocol deviations and an explanation on how the deviation affects the study design and results;
detalii privind oricare abateri de protocol și explicații referitoare la modul în care acestea afectează conceptul studiului și rezultatele;
Reliability check:
Verificarea fiabilității:
summary of results of latest reliability check, including information on test substance, concentration and vehicle used;
un rezumat al rezultatelor obținute la ultima verificare a fiabilității, inclusiv informații privind substanța de test, concentrația și vehiculul utilizat;
concurrent and/or historical PC and concurrent NC data for testing laboratory;
date concomitente și/sau istorice privind martorii pozitivi și negativi, utilizate de laboratorul de testare;
if a concurrent PC was not included, the date and laboratory report for the most recent periodic PC and a report detailing the historical PC data for the laboratory justifying the basis for not conducting a concurrent PC;
în cazul în care nu a fost inclus un grup PC concomitent, datele și raportul de laborator pentru cel mai recent grup PC periodic și un raport detaliind datele istorice privind PC specifice laboratorului astfel încât să se justifice de ce nu a fost realizat un grup PC concomitent;
individual weights of mice at start of dosing and at scheduled kill; as well as mean and associated error term (e.g. SD, SEM) for each treatment group;
greutatea fiecărui animal la începutul testului și în momentul prevăzut pentru eutanasiere, precum și media și marja de eroare asociată (de exemplu, deviația standard, eroarea standard asociată mediei) pentru fiecare grup tratat;
time course of onset and signs of toxicity, including dermal irritation at site of administration, if any, for each animal;
momentul declanșării și semnele de toxicitate, inclusiv iritația dermică la locul administrării, dacă este cazul, pentru fiecare animal;
a table of individual mouse (individual animal approach) or mean/median (pooled treatment group approach) DPM values and SI values for each treatment group;
tabloul valorilor individuale (metoda individuală) sau medii/mediane (metoda colectivă la nivel de grup tratat) exprimate ca DPM (dezintegrare pe minut), precum și valorile IS pentru fiecare grup tratat;
mean and associated error term (e.g. SD, SEM) for DPM/mouse for each treatment group and the results of outlier analysis for each treatment group when using the individual animal approach;
media și marja de eroare asociată (de exemplu deviația standard, eroarea standard asociată mediei) a DPM/animal pentru fiecare grup tratat și rezultatele analizei valorilor aberante pentru fiecare grup tratat, dacă se utilizează metoda individuală la nivel de animal;
calculated SI and an appropriate measure of variability that takes into account the inter-animal variability in both the test substance and control groups when using the individual animal approach;
indicii de stimulare obținuți și determinarea adecvată a variabilității ținând cont de variațiile dintre animale atât în cadrul grupurilor tratate cu substanța de test, cât și în cadrul grupurilor martor, dacă se utilizează metoda individuală la nivel de animal;
dose-response relationship;
relația doză-răspuns;
statistical analyses, where appropriate;
analize statistice, dacă este cazul;
Discussion of results:
Discutarea rezultatelor:
a brief commentary on the results, the dose-response analysis, and statistical analyses, where appropriate, with a conclusion as to whether the test substance should be considered a skin sensitiser.
un scurt comentariu privind rezultatele, analiza relației doză-răspuns și analize statistice, dacă este cazul, precum și o concluzie care să indice dacă substanța de test trebuie considerată agent de sensibilizare dermică.
LITERATURE
BIBLIOGRAFIE
Available at: [http://www.oecd.org/env/testguidelines]
Disponibil la: [http://www.oecd.org/env/testguidelines]
Available at: [http://iccvam.niehs.nih.gov/docs/immunotox_docs/llna-ps/LLNAPerfStds.pdf]
Disponibil la:[http://iccvam.niehs.nih.gov/docs/immunotox_docs/llna-ps/LLNAPerfStds.pdf]
Available at: [http://ecvam.jrc.it/ft_doc/ESAC26_statement_rLLNA_20070525-1.pdf]
Disponibil la: [http://ecvam.jrc.it/ft_doc/ESAC26_statement_rLLNA_20070525-1.pdf]
Available at: [http://iccvam.niehs.nih.gov/]
Disponibil la: [http://iccvam.niehs.nih.gov/]
Available at: [http://iccvam.niehs.nih.gov/docs/immunotox_docs/llna/llnarep.pdf]
Disponibil la: [http://iccvam.niehs.nih.gov/docs/immunotox_docs/llna/llnarep.pdf]
Assessment of the Validity of the LLNA for Testing Pesticide Formulations and Other Products, Metals, and Substances in Aqueous Solutions, NIH Publication Number 10-7512, Research Triangle Park, NC: National Institute of Environmental Health Sciences, Available at: [http://iccvam.niehs.nih.gov/]
Assessment of the Validity of the LLNA for Testing Pesticide Formulations and Other Products, Metals, and Substances in Aqueous Solutions, NIH Publication Number 10-7512, Research Triangle Park, NC: National Institute of Environmental Health Sciences, Disponibil la: [http://iccvam.niehs.nih.gov/]
OECD Guideline for Testing of Chemicals No 404, Paris, France.
OECD Guideline for Testing of Chemicals No. 404, Paris, France.