natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Cell cytoplasm should be retained to allow the detection of micronuclei and (in the cytokinesis-block method) reliable identification of binucleate cells.
Citoplasma celulară este conservată pentru a permite detectarea de eventuale nuclee și (în cadrul metodei blocării citocinezei) identificarea fiabilă a celulelor binucleate.
The slides can be stained using various methods, such as Giemsa or fluorescent DNA specific dyes (59).
Lamelele pot fi colorate prin metode diferite precum Giemsa sau coloranți fluorescenți specifici ai ADN (59).
All slides, including those of the solvent/vehicle and the controls, should be independently coded before the microscopic analysis.
Toate lamelele, inclusiv cele cu solvent/vehicul și cu substanțele martor, trebuie codate individual înainte de analiza la microscop.
Alternatively, coded samples can be analysed using a validated, automated flow cytometric or image analysis system.
De asemenea, eșantioanele codate pot fi analizate cu ajutorul unui sistem automat validat de citometrie în flux sau de analiză a imaginilor.
In cytoB-treated cultures, micronucleus frequencies should be analysed in at least 2000 binucleated cells per concentration (at least 1000 binucleated cells per culture; two cultures per concentration).
În culturile tratate cu citoB, frecvența micronucleelor se analizează în cel puțin 2000 de celule binucleate pe concentrație (cel puțin 1000 de celule binucleate pe cultură; două culturi pe concentrație).
If single cultures are used, at least 2000 binucleated cells per concentration should be scored from that culture.
În cazul culturilor unice, trebuie analizate cel puțin 2000 de celule binucleate pe concentrație din culturile respective.
If substantially fewer than 1000 binucleate cells per culture, or 2000 if a single culture is used, are available for scoring at each concentration, and if a significant increase in micronuclei is not detected, the test should be repeated using more cells, or at less toxic concentrations, whichever is appropriate.
Dacă numărul de celule binucleate disponibile într-o cultură pentru fiecare concentrație este considerabil mai mic de 1000 sau de 2000 în cazul culturilor unice și dacă nu este detectată nicio creștere semnificativă a numărului de micronuclee, testul trebuie reluat pe un număr mai mare de celule sau la concentrații mai puțin toxice, în funcție de situație.
Care should be taken not to score binucleate cells with irregular shapes or where the two nuclei differ greatly in size; neither should binucleate cells be confused with poorly spread multi-nucleate cells.
Se recomandă precauție pentru a nu număra celulele binucleate cu formă neregulată sau ale căror nuclee prezintă o diferență de mărime considerabilă; de asemenea, celulele binucleate nu trebuie confundate cu celulele multinucleate răspândite neuniform.
Cells containing more than two main nuclei should not be analysed for micronuclei, as the baseline micronucleus frequency may be higher in these cells (63) (64) Scoring of mononucleate cells is acceptable if the test substance is shown to interfere with cytoB activity.
Celulele care conțin mai mult de două nuclee principale nu sunt analizate deoarece frecvența de referință a micronucleelor poate fi mai mare în acest tip de celule (63) (64). Numărarea celulelor mononucleate este acceptabilă dacă substanța de test interferează cu activitatea citoB.
In cell lines assayed without cytoB treatment, micronuclei should be scored in at least 2000 cells per concentration (at least 1000 cells per culture; two cultures per concentration).
Pentru liniile celulare testate fără citoB, micronucleele trebuie analizate pentru cel puțin 2000 de celule pe concentrație (cel puțin 1000 de celule pe cultură; două culturi pe concentrație).
Where only one culture per concentration is used, at least 2000 cells should be scored from that culture.
Dacă se utilizează o singură cultură pe concentrație, sunt examinate cel puțin 2000 de celule din cultura respectivă.
When cytoB is used, a CBPI or an RI should be determined to assess cell proliferation (see Appendix 2) using at least 500 cells per culture.
Dacă se utilizează citoB, trebuie determinat un CBPI sau un RI pentru a evalua proliferarea celulară (a se vedea apendicele 2) utilizând cel puțin 500 de celule pe cultură.
When treatments are performed in the absence of cytoB, it is essential to provide evidence that the cells being scored have proliferated, as discussed in Paragraphs 24-27.
Atunci când tratamentele sunt efectuate în absența citoB, este esențial să se facă dovada că celulele analizate au făcut obiectul unei proliferări, conform punctelor 24-27.
Acceptability criteria
Criterii de acceptabilitate
A laboratory proposing to use the MNvit assay described in this TM should demonstrate its ability to reliably and accurately detect chemicals of known aneugenic and clastogenic activity, with and without metabolic activation, as well as known negative chemicals, using the reference chemicals in Appendix 3.
Orice laborator care propune utilizarea testului MNvit descris în prezenta MT trebuie să demonstreze capacitatea sa de a detecta în mod fiabil și precis substanțele chimice a căror activitate aneugenă și clastogenă este cunoscută, cu sau fără activare metabolică, precum și a substanțelor chimice negative, utilizând substanțele chimice de referință din apendicele 3.
As evidence of its ability to perform this TM correctly, the laboratory should provide evidence that the cells being scored for micronucleus formation have completed one nuclear division if the test is performed without the use of cytoB.
Pentru a atesta capacitatea sa de a efectua corect prezenta MT, laboratorul trebuie să demonstreze că celulele ale căror micronuclee au fost numărate au efectuat o diviziune celulară dacă testul este realizat fără utilizare de citoB.
The chemicals in Appendix 3 are recommended for use as reference chemicals.
Substanțele chimice din apendicele 3 sunt recomandate pentru utilizare ca substanțe chimice de referință.
Substitute or additional chemicals can be included if their activity is known and if they induce micronuclei by the same mechanisms of action, and if they are shown to be relevant to the chemicals that will be tested using the MNvit procedure.
Pot fi incluse substanțe de substituție sau suplimentare dacă activitatea acestora este cunoscută, dacă induc formarea de micronuclee prin intermediul acelorași mecanisme de acțiune și dacă relevanța acestora este dovedită pentru substanțele de test din cadrul procedurii MNvit.
Justification could include a validation study employing a broad variety of substances or focused on a narrower spectrum based on the chemical class of the test substance or the mechanism of damage being studied.
Justificarea poate include un studiu de validare acoperind o mare diversitate de substanțe sau axat pe un spectru mai restrâns, limitat la clasa chimică a substanței de test sau la mecanismul de leziune studiat.
Solvent/vehicle control and untreated cultures should give reproducibly low and consistent micronuclei frequencies (typically 5-25 micronuclei/1000 cells for the cell types identified in paragraph 11).
Martorii tratați cu solvent/vehicul și culturile netratate prezintă frecvențe reproductibile de micronuclee slabe și coerente (de regulă, 5-25 micronuclee/1000 de celule pentru tipurile de celule indicate la puncul 11).
Other cell types may have different ranges of responses which should be determined when validating them for use in the MNvit assay.
Alte tipuri de celule pot prezenta plaje de răspuns diferite, care trebuie determinate în momentul validării acestora pentru utilizare în cadrul testului MNvit.
Data from negative, solvent, and PC should be used to establish historical control ranges.
Datele provenite de la martori negativi, solvenți și martori pozitivi trebuie utilizate pentru a stabili plaje de valori de referință.
These values should be used in deciding the adequacy of the concurrent NC/PC for an experiment.
Aceste valori trebuie utilizate în stabilirea caracterului adecvat al martorilor pozitivi/negativi concomitenți pentru un experiment.
If minor changes to the protocol (e.g. use of automated instead of manual scoring techniques; use of a new cell type) are proposed for the assay, then the effectiveness of the change should be demonstrated before the modified protocol can be considered acceptable for use.
În cazul în care sunt propuse modificări minore la protocolul de test (de exemplu, utilizarea de tehnici de numărare automate și nu manuale; utilizarea unui nou tip de celulă), atunci eficacitatea modificărilor trebuie demonstrată pentru ca protocolul modificat să poată fi considerat acceptabil pentru utilizare.
Demonstration of effectiveness includes demonstration that the major mechanisms of chromosome breakage and gain or loss can be detected, and that appropriate positive and negative results can be achieved for the class of the individual substance, or the broad range of substances, to be tested.
Demonstrarea eficienței include demonstrarea faptului că pot fi detectate mecanismele majore de ruptură cromozomială, de pierdere sau de câștig cromozomial și că pot fi obținute rezultate pozitive și negative adecvate pentru clasa de substanțe în cauză sau pentru întreg spectrul de substanțe de test.
Treatment of results
Tratamentul rezultatelor
If the cytokinesis-block technique is used, only the frequencies of binucleate cells with micronuclei (independent of the number of micronuclei per cell) are used in the evaluation of micronucleus induction.
Dacă se utilizează tehnica blocării citocinezei, doar frecvențele celulelor binucleate prezentând micronuclee (independent de numărul de micronuclee dintr-o celulă) se utilizează pentru evaluarea inducției de micronuclee.
Scoring of the numbers of cells with one, two, or more micronuclei could provide useful information, but is not mandatory.
Numărarea celulelor prezentând unul, două sau mai multe micronuclee poate oferi informații utile, dar nu este obligatorie.
Concurrent measures of cytotoxicity and/or cytostasis for all treated and solvent/vehicle control cultures should be determined (58).
Trebuie efectuate măsurători paralele de citotoxicitate și/sau citostază pentru toate culturile martor tratate sau tratate cu solvent/vehicul (58).
The CBPI or the RI should be calculated for all treated and control cultures as measurements of cell cycle delay when the cytokinesis-block method is used.
De asemenea, trebuie calculat CBPI sau indicele de replicație (RI) pentru toate culturile tratate și cele martor, pentru a măsura întârzierea ciclului celular în cazul utilizării metodei blocării citocinezei.
In the absence of cytoB, the RPD or the RICC or PI should be used (see Appendix 2).
În absența citoB, trebuie măsurate dublarea relativă a populației (RPD) sau creșterea relativă a numărului de celule (RICC) sau indicele de proliferare (PI) (a se vedea apendicele 2).
Individual culture data should be provided.
Datele se indică individual pentru fiecare cultură.
Additionally, all data should be summarised in tabular form.
În plus, toate datele sunt sintetizate sub formă de tabele.
Chemicals that induce micronuclei in the MNvit assay may do so because they induce chromosome breakage, chromosome loss, or a combination of the two.
Substanțele chimice care induc micronuclee în testul MNvit pot face aceasta deoarece induc ruptură cromozomială, pierdere cromozomială sau o combinație a celor două.
Further analysis using anti-kinetochore antibodies, centromere specific in situ probes, or other methods may be used to determine whether the mechanism of micronucleus induction is due to clastogenic and/or aneugenic activity.
Alte analize utilizând anticorpi antikinetocori, sonde centrometrice in situ, sau alte metode permit să se determine dacă mecanismul inducției de micronuclee se datorează activității clastogene și/sau aneugene.
Evaluation and interpretation of results
Evaluarea și interpretarea rezultatelor
There is no requirement for verification by additional testing of a clear positive or negative response.
Nu există nicio cerință referitoare la verificarea cu ajutorul unor teste suplimentare a răspunsurilor pozitive sau negative clare.
Equivocal results may be clarified by analysis of another 1000 cells from all the cultures to avoid loss of blinding.
Rezultatele echivoce pot fi clarificate prin analiza a încă 1000 de celule din toate culturile pentru a păstra caracterul orb al testului.
If this approach does not resolve the result, further testing should be performed.
Dacă această abordare nu permite obținerea unor rezultate satisfăcătoare, trebuie efectuate teste suplimentare.
Modification of study parameters over an extended or narrowed range of conditions, as appropriate, should be considered in follow-up experiments.
În cadrul experimentelor suplimentare realizate astfel, se are în vedere modificarea parametrilor studiului pentru a lărgi sau pentru a restrânge condițiile, după caz.
Study parameters that might be modified include the test concentration spacing, the timing of treatment and cell harvest, and/or the metabolic activation conditions.
Parametrii de studiu care ar putea fi modificați includ spațierea dintre concentrațiile de test, calendarul privind tratamentele și recolta celulelor și/sau condițiile de activare metabolică.
There are several criteria for determining a positive result, such as a concentration-related increase or a statistically significant increase in the number of cells containing micronuclei.
Mai multe criterii permit determinarea unui rezultat pozitiv precum o creștere legată de concentrație sau o creștere semnificativă din punct de vedere statistic a numărului de celule conținând micronuclee.
The biological relevance of the results should be considered first.
Relevanța biologică a rezultatelor trebuie avută în vedere în primă instanță.
Consideration of whether the observed values are within or outside of the historical control range can provide guidance when evaluating the biological significance of the response.
Faptul că valorile observate sunt cuprinse sau nu în plaja de valori de referință poate furniza indicii utile în momentul evaluării semnificației biologice a răspunsului.
Appropriate statistical methods may be used as an aid in evaluating the test results (65).
Evaluarea rezultatelor testului se poate sprijini pe metode statistice adecvate (65).
However, the results of statistical testing should be assessed with respect to dose-response relationship.
Cu toate acestea, rezultatele testelor statistice se evaluează în raport cu relația doză-răspuns.
Reproducibility and historical data should also be taken into consideration.
Reproductibilitatea și datele istorice trebuie, de asemenea, luate în considerare.
Although most experiments will give clearly positive or negative results, in some cases the data set will preclude making a definite judgement about the activity of the test substance.
Deși majoritatea experimentelor oferă rezultate clare pozitive sau negative, în unele cazuri setul de date nu permite conturarea unei judecăți categorice cu privire la activitatea substanței de test.
These equivocal or questionable responses may occur regardless of the number of times the experiment is repeated.
Rezultatele echivoce sau discutabile pot surveni indiferent de numărul de repetări ale testului.
Positive results from the MNvit assay indicate that the test substance induces chromosome breakage or chromosome loss, in cultured mammalian cells.
Rezultatele pozitive în cadrul unui test MNvit indică faptul că substanța de test induce rupere sau ruptură cromozomială, în culturile de celule de mamifere.
Negative results indicate that, under the test conditions used, the test substance does not induce chromosome breaks and/or gain or loss in cultured mammalian cells.
Rezultatele negative indică faptul că, în condițiile de testare, substanța de test nu induce rupere și/sau câștig sau pierdere cromozomială în culturile de celule de mamifere.
The test report should include at least the following information, if relevant to the conduct of the study:
Raportul de testare trebuie să includă cel puțin următoarele informații, dacă acestea sunt relevante pentru efectuarea studiului:
Test chemical:
Substanța chimică de test:
identification data and Chemical Abstract Services Registry Number and EC Number;
date de identificare, numărul din registrul CAS și numărul CE;
physical nature and purity;
starea fizică și puritate;
physico-chemical properties relevant to the conduct of the study;
proprietățile fizice și chimice relevante pentru realizarea studiului;
reactivity of the test chemical with the solvent/vehicle or cell culture media;
reactivitatea substanței de test cu solventul/vehiculul sau mediul de cultură celulară;
Solvent/Vehicle:
Solvent/vehicul:
justification for choice of solvent/vehicle;
justificarea alegerii solventului/vehiculului;
solubility and stability of the test substance in solvent/vehicle;
solubilitatea și stabilitatea substanței de test în solvent/vehicul;
Cells:
Celule:
type and source of cells used;
tipul și sursa celulelor utilizate;
suitability of the cell type used;
caracterul adecvat al tipului de celulă utilizat;
absence of mycoplasma, if applicable;
absența micoplasmei, dacă este cazul;
information on cell cycle length, doubling time or proliferation index;
informații privind durata ciclului celular, timpul de dublare sau indicele de proliferare;
where lymphocytes are used, sex, age and number of blood donors, if applicable;
în cazul utilizării de limfocite, sexul, vârsta și numărul donatorilor de sânge, dacă se aplică;
where lymphocytes are used, whether whole blood or separated lymphocytes are exposed;
în cazul utilizării de limfocite, a se preciza dacă este expus sânge total sau limfocite izolate;
number of passages, if applicable;
numărul de pasaje, dacă se aplică;
methods for maintenance of cell cultures, if applicable;
metode de întreținere a culturilor celulare, dacă se aplică;
modal number of chromosomes;
numărul modal de cromozomi;
normal (negative control) cell cycle time;
durata normală a unui ciclu celular (martor negativ);
identity of cytokinesis blocking substance (e.g. cytoB), if used, and its concentration and duration of cell exposure;
identitatea substanței de blocare a citocinezei (de exemplu, citoB), dacă se utilizează, concentrația sa și durata de expunere a celulelor;
rationale for selection of concentrations and number of cultures, including cytotoxicity data and solubility limitations, if available;
justificarea selectării concentrațiilor și a numărului de culturi, inclusiv date privind citotoxicitatea și limitele de solubilitate, dacă acestea sunt disponibile;
composition of media, CO2 concentration, if applicable;
compoziția mediului, concentrația de CO2, dacă se aplică;
concentrations of test substance;
concentrațiile substanței de test;
concentration (and/or volume) of vehicle and test substance added;
concentrația (și/sau volumul) vehiculului și a substanței de test adăugate;
incubation temperature and time;
temperatura și timpul de incubație;
duration of treatment;
durata tratamentului;
harvest time after treatment;
perioada de recoltă după tratament;
cell density at seeding, if applicable;
densitatea celulară la momentul însămânțării, dacă se aplică;
type and composition of metabolic activation system, including acceptability criteria;
tipul și compoziția sistemului de activare metabolică, inclusiv criteriile de acceptabilitate;
positive control chemicals and negative controls;
substanțele martor pozitive și negative;
methods of slide preparation and staining technique used;
metodele de preparare a lamelelor și tehnica de colorare utilizată;
criteria for micronucleus identification;
criteriile de identificare a micronucleelor;
numbers of cells analysed;
numărul de celule analizate;
methods for the measurements of cytotoxicity;
metodele de măsurare a citotoxicității;
any supplementary information relevant to cytotoxicity;
orice alte informații suplimentare cu privire la citotoxicitate;
criteria for considering studies as positive, negative, or equivocal;
criteriile în funcție de care un studiu poate fi considerat ca fiind pozitiv, negativ sau echivoc;
method(s) of statistical analysis used;
metoda (metodele) de analiză statistică utilizate;
methods, such as use of kinetochore antibody, to characterise whether micronuclei contain whole or fragmented chromosomes, if applicable;
metode precum utilizarea de anticorpi kinetocori, pentru a determina dacă micronucleele conțin cromozomi întregi sau fragmentați, dacă se aplică;
measurement of cytotoxicity used, e.g. CBPI or RI in the case of cytokinesis-block method; RICC, RPD or PI when cytokinesis-block methods are not used; other observations when applicable, e.g. cell confluency, apoptosis, necrosis, metaphase counting, frequency of binucleated cells;
măsurarea citotoxicității utilizate, de exemplu CBPI sau RI în cazul metodei de blocare a citocinezei; RICC, RPD sau PI atunci când nu sunt utilizate metode de blocare a citocinezei; alte observații, dacă este cazul, de exemplu gradul de confluență celulară, apoptoză, necroză, numărarea celulelor în metafază, frecvența celulelor binucleate;
signs of precipitation;
semne de precipitare;
data on pH and osmolality of the treatment medium, if determined;
date privind pH-ul și osmolalitatea mediului de tratament, dacă acestea au fost determinate;
definition of acceptable cells for analysis;
definiția celulelor acceptabile pentru analiză;
distribution of mono-, bi-, and multi-nucleated cells if a cytokinesis block method is used;
distribuția celulelor mono-, bi- și multinucleate dacă se utilizează o metodă de blocare a citocinezei;
number of cells with micronuclei given separately for each treated and control culture, and defining whether from binucleate or mononucleate cells, where appropriate;
numărul de celule cu micronuclee, furnizat separat pentru fiecare cultură tratată și cultură martor, precizându-se dacă acestea provin din celule binucleate sau mononucleate, după caz;
concentration-response relationship, where possible;
relația concentrație-răspuns, dacă este posibil;
concurrent negative (solvent/vehicle) and positive control chemical data (concentrations and solvents);
date (concentrații și solvenți) privind substanțele martor negative (solvent/vehicul) și pozitive concomitente;
historical negative (solvent/vehicle) and positive control chemical data, with ranges, means and standard deviation and confidence interval (e.g. 95 %);
date istorice privind substanțele martor negative (solvent/vehicul) și pozitive, inclusiv intervale de valori, medii și devieri standard și intervalul de încredere (de exemplu, 95 %);
statistical analysis; p-values if any;
analiză statistică; valorile P, dacă este cazul.
Available at: [www.oecd.org/env/testguidelines]
Disponibil la: [www.oecd.org/env/testguidelines]
ESAC 25th meeting, 16-17 November, 2006, Available at: [http://ecvam.jrc.it/index.htm]
ESAC 25th meeting, 16-17 November 2006, Disponibil la: [http://ecvam.jrc.it/index.htm]
ESAC (2006), ECVAM Scientific Advisory Committee (ESAC) Peer Review, Retrospective Validation of the In Vitro Micronucleus Test, Summary and Conclusions of the Peer Review Panel, Available at: [http://ecvam.jrc.it/index.htm]
ESAC (2006), ECVAM Scientific Advisory Committee (ESAC) Peer Review, Retrospective Validation of the In Vitro Micronucleus Test, Summary and Conclusions of the Peer Review Panel, Disponibil la: [http://ecvam.jrc.it/index.htm]
Available at: [http://www.pops.int/]
Disponibil la: [http://www.pops.int/]
Kirsch-Volders, M., Sofuni, T., Aardema, M., Albertini, S., Eastmond, D., Fenech, M., Ishidate, M. Jr., Kirchner, S., Lorge, E., Morita, T., Norppa, H., Surralles, J., Vanhauwaert, A. and Wakata, A. (2004), Corrigendum to “Report from the in vitro micronucleus assay working group”, Mutation Res., 564, 97-100.
Kirsch-Volders, M., Sofuni, T., Aardema, M., Albertini, S., Eastmond, D., Fenech, M., Ishidate, M. Jr., Kirchner, S., Lorge, E., Morita, T., Norppa, H., Surralles, J., Vanhauwaert, A. and Wakata, A. (2004), Corrigendum to «Report from the in vitro micronucleus assay working group», Mutation Res., 564, 97-100.