natgillin/translations-raw huggingface dataset:
For the test to be valid, the following performance criteria should be met:
Pentru ca un test să fie valabil, trebuie să îndeplinească următoarele criterii de performanță:
The biomass in the control cultures should have increased exponentially by a factor of at least 16 within the 72-hour test period.
Biomasa din culturile de control trebuie să fi crescut exponențial cu un factor de cel puțin 16 pe durata de 72 ore a perioadei de testare.
This criterion may not be met when species that grow slower than those listed in Appendix 1 are used.
În cazul speciilor utilizate cel mai frecvent, viteza de creștere este de obicei considerabil mai mare (a se vedea apendicele 1). Este posibil ca acest criteriu să nu fie respectat atunci când sunt folosite specii care cresc mai lent decât cele prezentate în apendicele 1.
In this case, the test period should be extended to obtain at least a 16-fold growth in control cultures, while the growth has to be exponential throughout the test period.
În acest caz, perioada de testare se extinde pentru a fi obținută o creștere de cel puțin 16 ori în culturile de control, creșterea trebuind să fie exponențială pe durata perioadei de testare.
The test period may be shortened to at least 48 h to maintain unlimited exponential growth during the test, as long as the minimum multiplication factor of 16 is reached.
Atât timp cât factorul minim de multiplicare 16 este atins, perioada de testare poate fi redusă la cel puțin 48 de ore în scopul menținerii creșterii exponențiale nelimitate în timpul testului.
The coefficient of variation of average specific growth rates during the whole test period in replicate control cultures must not exceed 7 % in tests with Pseudokirchneriella subcapitata and Desmodesmussubspicatus.
A se vedea punctul 2.2.1 al doilea paragraf, pentru calcularea vitezei specifice de creștere pe secțiuni. Acest criteriu se aplică valorii medii a coeficienților de variație calculați pentru culturile de control duplicate.
For other less frequently tested species, the value should not exceed 10 %.
Coeficientul de variație al vitezelor medii specifice de creștere a culturilor de control duplicate nu trebuie să depășească 7 % la testele cu Pseudokirchneriella subcapitata și Desmodesmussubspicatus în timpul întregii perioade de testare.
The test vessels will normally be glass flasks of dimensions that allow a sufficient volume of culture for measurements during the test and a sufficient mass transfer of CO2 from the atmosphere (see the second paragraph in section 1.8.9).
Aparatură Vasele de testare și alte aparate care intră în contact cu soluțiile de testat trebuie să fie confecționate în întregime din sticlă sau alt material chimic inert. Vasele trebuie să fie spălate cu atenție pentru prevenirea efectelor contaminanților organici sau anorganici asupra creșterii algelor sau compoziției soluțiilor de testat.
Culturing apparatus: a cabinet or chamber is recommended, in which the chosen incubation temperature can be maintained at ±2 °C.
Trebuie reținut că volumul de lichid trebuie să fie suficient pentru efectuarea determinărilor analitice (a se vedea punctul 1.8.11 al cincilea paragraf). În afară de acestea, mai sunt necesare următoarele aparate:
Light measurement instruments: it is important to note that the method of measurement of light intensity, and in particular the type of receptor (collector), will affect the measured value.
Aparat pentru cultură: se recomandă un laborator sau o cameră în care se poate menține o temperatură controlată de incubație de ±2 °C. Instrumente de măsurare a luminii: este important de remarcat că metoda de măsurare a intensității luminii și, în special, tipul de receptor (colector) vor influența valoarea măsurată.
Measurements should preferably be made using a spherical (4 π) receptor (which responds to direct and reflected light from all angles above and below the plane of measurement), or a 2 π receptor (which responds to light from all angles above the measurement plane).
Măsurătorile se fac preferabil prin folosirea unui receptor sferic (4 π), care răspunde la lumina directă și reflectată provenită din toate unghiurile de deasupra și dedesubtul planului de măsurare, sau a unui receptor (2 π), care răspunde la lumina provenită din toate unghiurile de deasupra planului de măsurare.
Apparatus to determine algal biomass.
Aparat pentru determinarea biomasei de alge.
Cell count, which is the most frequently used surrogate parameter for algal biomass, may be made using an electronic particle counter, a microscope with counting chamber, or a flow cytometer.
Numărul celulelor, care este cel mai frecvent utilizat parametru înlocuitor pentru biomasa de alge, poate fi obținut prin folosirea unui contor electronic de particule, a unui microscop cu cameră de numărare sau a unui citometru de flux.
Other biomass surrogates can be measured using a flow cytometer, fluorimeter, spectrophotometer or colorimeter.
Alți înlocuitori de biomasă se pot măsura folosind un citometru de flux, fluorimetru, spectrofotometru sau colorimetru.
A conversion factor relating cell count to dry weight is useful to calculate.
Este utilă calcularea unui factor de conversie care să stabilească relația dintre numărul de celule și greutatea uscată.
In order to provide useful measurements at low biomass concentrations when using a spectrophotometer, it may be necessary to use cuvettes with a light path of at least 4 cm.
Pentru a se obține rezultate utile ale măsurătorilor la concentrații scăzute de biomasă poate fi necesară folosirea de cuve cu un traseu al razelor luminoase de cel puțin 4 cm.
Test organisms
Organismele testate
Several species of non-attached microalgae and cyanobacteria may be used.
Se pot folosi câteva specii de microalge și cianobacterii neatașate.
The strains listed in Appendix 1 have been shown to be suitable using the test procedure specified in this Testing Method.
S-a demonstrat că sușele descrise în apendicele 1 sunt adecvate prin folosirea procedurii de testare specificate în prezenta metodă de testare.
If other species are used, the strain and/or origin should be reported.
Dacă se folosesc alte specii, sușa și/sau originea se raportează.
It has to be confirmed that exponential growth of the selected test alga can be maintained throughout the test period under the prevailing conditions.
Trebuie să se confirme că creșterea exponențială a algelor de testat selectate poate fi menținută pe întreaga durată a perioadei de testare, în condițiile predominante.
Growth medium
Mediu de cultură
Two alternative growth media, the OECD and the AAP medium, are recommended.
Se recomandă două medii alternative de cultură, OECD și AAP.
The compositions of these media are shown in Appendix 2.
Compozițiile acestor medii sunt prezentate în apendicele 2.
Note that the initial pH value and the buffering capacity (regulating pH increase) of the two media are different.
Trebuie reținut că valoarea inițială a pH-ului și capacitatea de tamponare (care reglează creșterea pH-ului) pentru cele două medii sunt diferite.
Therefore the results of the tests may be different depending on the medium used, particularly when testing ionising substances.
Prin urmare, rezultatele testelor pot fi diferite, în funcție de mediul folosit, în special în cazul testării de substanțe ionizante.
Modification of the growth media may be necessary for certain purposes, e.g. when testing metals and chelating agents or testing at different pH values.
Modificarea mediilor de cultură poate fi necesară pentru anumite scopuri, cum ar fi situațiile în care se testează metale și agenți de chelare sau la valori diferite ale pH-ului.
Use of a modified medium must be described in detail and justified (3)(4).
Folosirea unui mediu modificat se descrie și se justifică în detaliu (3)(4).
Initial biomass concentration
Concentrația inițială a biomasei
The initial biomass in the test cultures must be the same in all test cultures and sufficiently low to allow exponential growth throughout the incubation period without risk of nutrient depletion.
Biomasa inițială din culturile testate trebuie să fie egală în toate aceste culturi și suficient de scăzută pentru a permite creșterea exponențială pe parcursul întregii perioade de incubare fără riscul de epuizare a nutrienților.
The initial biomass should not exceed 0,5 mg/l as dry weight.
Biomasa inițială nu trebuie să depășească 0,5 mg/l ca greutate uscată.
The following initial cell concentrations are recommended:
Se recomandă următoarele concentrații celulare inițiale:
cells/ml
celule/ml
Concentrations of test substance
Concentrațiile substanței de testat
The concentration range in which effects are likely to occur may be determined on the basis of results from range-finding tests.
Intervalul concentrațiilor în care pot apărea efectele se determină pe baza rezultatelor testelor de stabilire a intervalului.
For the final definitive test, at least five concentrations arranged in a geometric series with a factor not exceeding 3,2 should be selected.
Pentru testul final se aleg cel puțin cinci concentrații în serie geometrică cu o rație care nu depășește 3,2.
For test substances showing a flat concentration response curve, a higher factor may be justified.
O rație mai mare este justificată în cazul substanțelor de testat care au o curbă de răspuns a concentrației cu pantă lină.
The concentration series should preferably cover the range causing 5-75 % inhibition of algal growth rate.
Se preferă ca seriile de concentrație să acopere intervalul care provoacă 5-75 % inhibare a vitezei de creștere a algelor.
Replicates and controls
Duplicate și probe martor
The test design should include three replicates at each test concentration.
Concepția experimentală a testului trebuie să includă trei duplicate la fiecare concentrație de testare.
If determination of the NOEC is not required, the test design may be altered to increase the number of concentrations and reduce the number of replicates per concentration.
Dacă determinarea CFEO nu este necesară, testul poate fi modificat în sensul creșterii numărului de concentrații și reducerea numărului de duplicate per concentrație.
The number of control replicates must be at least three, and ideally should be twice the number of replicates used for each test concentration.
Numărul de duplicate de control trebuie să fie de cel puțin trei, recomandându-se să depășească de două ori numărul duplicatelor folosite pentru fiecare concentrație de testare.
A separate set of test solutions may be prepared for analytical determinations of test substance concentrations (see the fourth and sixth paragraphs in section 1.8.11).
Pentru determinările analitice ale concentrațiilor substanței de testare se poate pregăti un set separat de soluții de testat (a se vedea punctul 1.8.11 al patrulea și al șaselea paragraf).
When a solvent is used to solubilise the test substance, additional controls containing the solvent at the same concentration as used in the test cultures must be included in the test design.
Dacă se utilizează un solvent pentru solubilizarea substanței testate, în test se vor include probe martor suplimentare conținând solventul în aceeași concentrație cu cea folosită în cazul culturilor testate.
Preparation of inoculum culture
Pregătirea culturii de inocul
In order to adapt the test alga to the test conditions and ensure that the algae are in the exponential growth phase when used to inoculate the test solutions, an inoculum culture in the test medium is prepared 2-4 days before start of the test.
În scopul adaptării algei de testat la condițiile de testare și al asigurării că algele se află în fază de creștere exponențială când sunt folosite pentru inocularea soluțiilor de testat, se pregătește o cultură de inocul în mediul de testare cu 2-4 zile înainte de începerea testului.
The algal biomass should be adjusted in order to allow exponential growth to prevail in the inoculum culture until the test starts.
Biomasa de alge se ajustează pentru a favoriza o creștere exponențială în cultura de inocul până la începerea testului.
The inoculum culture shall be incubated under the same conditions as the test cultures.
Cultura de inocul se incubează în aceleași condiții ca și culturile testate.
Measure the increase in biomass in the inoculum culture to ensure that growth is within the normal range for the test strain under the culturing conditions.
Se măsoară creșterea biomasei în cultura de inocul pentru a se verifica dacă creșterea se încadrează în intervalul normal pentru sușa experimentală în condițiile de cultură.
An example of the procedure for algal culturing is described in Appendix 3.
Un exemplu al procedurii pentru cultura algelor este descris în apendicele 3.
To avoid synchronous cell divisions during the test, a second propagation step of the inoculum culture may be required.
Pentru a se evita diviziunile sincronizate ale celulelor în timpul testului, poate fi necesară o a doua etapă de propagare a culturii de inocul.
Preparation of test solutions
Pregătirea soluțiilor de testat
All test solutions must contain the same concentrations of growth medium and initial biomass of test algae.
Toate soluțiile de testat trebuie să conțină aceleași concentrații de mediu de cultură și de biomasă inițială a algelor testate.
Test solutions of the chosen concentrations are usually prepared by mixing a stock solution of the test substance with growth medium and inoculum culture.
Soluțiile de testat ale concentrațiilor alese se pregătesc de obicei prin amestecarea unei soluții mamă a substanței de testat cu mediu de cultură și cultură de inocul.
Stock solutions are normally prepared by dissolving the substance in test medium.
De obicei, soluțiile mamă se pregătesc prin dizolvarea substanței în mediul de testare.
Solvents, e.g. acetone, t-butyl alcohol and dimethyl formamide, may be used as carriers to add substances of low water solubility to the test medium (2)(3).
Solvenții, cum ar fi acetona, t-butil alcool și dimetil-formamida, pot fi folosiți ca purtători pentru adăugarea în mediul de testare de substanțe cu solubilitate scăzută în apă (2)(3).
The solvent concentration should not exceed 100 µl/l, and the same concentration of solvent should be added to all cultures (including controls) in the test series.
Concentrația solventului nu trebuie să depășească 100 µl/l, aceeași concentrație de solvent adăugându-se în toate culturile (inclusiv în probele martori) din seria de testare.
Incubation
Incubarea
Cap the test vessels with air-permeable stoppers.
Se acoperă vasele de testare cu capace care permit trecerea aerului.
The vessels are shaken and placed in the culturing apparatus.
Vasele se agită, după care se introduc în aparatul de cultură.
During the test it is necessary to keep the algae in suspension and to facilitate transfer of CO2.
Este necesar ca, în timpul testului, algele să fie menținute în suspensie și să se faciliteze transferul de CO2.
To this end, constant shaking or stirring should be used.
În acest scop, se vor folosi mișcări de agitare și amestecare constante.
The cultures should be maintained at a temperature in the range of 21 to 24 °C, controlled at ±2 °C.
Culturile se mențin la temperaturi între 21-24 °C, cu o marjă de ±2 °C.
For species other than those listed in Appendix 1, e.g. tropical species, higher temperatures may be appropriate, providing that the validity criteria can be fulfilled.
În cazul altor specii decât cele prezentate în apendicele 1, cum ar fi specii tropicale, pot fi utile temperaturi mai înalte, cu condiția îndeplinirii criteriilor de validitate.
It is recommended to place the flasks randomly and to reposition them daily in the incubator.
Se recomandă ca recipientele să fie așezate aleatoriu și repoziționate în fiecare zi în incubator.
The pH of the control medium should not increase by more than 1,5 units during the test.
pH-ul mediului de control nu trebuie să crească cu mai mult de 1,5 unități în timpul testului.
For metals and compounds that partly ionise at a pH around the test pH, it may be necessary to limit the pH drift to obtain reproducible and well defined results.
În cazul metalelor și compușilor care se ionizează parțial la un pH aproximativ egal cu pH-ul de test, poate fi necesară limitarea devierii pH-ului în scopul obținerii de rezultate reproductibile și bine definite.
A drift of < 0,5 pH units is technically feasible and can be achieved by ensuring an adequate CO2 mass transfer rate from the surrounding air to the test solution, e.g. by increasing the shaking rate.
O deviere de < 0,5 unități pH este posibilă din punct de vedere tehnic și poate fi obținută prin asigurarea unei viteze adecvate de transfer de masă CO2 din aerul înconjurător către soluția de testat, de exemplu prin creșterea vitezei de agitare.
Another possibility is to reduce the demand for CO2 by reducing the initial biomass or the test duration.
O altă metodă constă în reducerea necesarului de CO2 prin reducerea biomasei inițiale sau a duratei testului.
The surface where the cultures are incubated should receive continuous, uniform fluorescent illumination e.g. of ‘cool-white’ or ‘daylight’ type.
Suprafața unde sunt incubate culturile trebuie să primească iluminare fluorescentă continuă și uniformă, de tipul celei „alb-rece” sau „lumina zilei”.
Strains of algae and cyanobacteria vary in their light requirements.
Sușele de alge și cianobacterii sunt diferite din punctul de vedere al necesarului de lumină.
The light intensity should be selected to suit the test organism used.
Intensitatea luminii se selectează la un nivel adecvat pentru organismul folosit.
For the recommended species of green algae, the light intensity at the level of the test solutions shall be selected from the range of 60-120 µE·m–2·s–1 when measured in the photosynthetically effective wavelength range of 400-700 nm using an appropriate receptor.
În cazul speciilor recomandate de alge verzi, intensitatea luminii la nivelul soluțiilor de testat se selectează în domeniul 60-120 µE·m–2·s–1 când se măsoară în domeniul de lungimi de undă eficient din punct de vedere fotosintetic de 400-700 nm, folosindu-se un receptor corespunzător.
Some species, in particular Anabaena flos-aquae, grow well at lower light intensities and may be damaged at high intensities.
Unele specii, în special Anabaena flos-aquae, cresc bine la intensități scăzute ale luminii și pot fi afectate la intensități ridicate.
For such species an average light intensity in the range 40-60 µE·m–2·s–1 should be selected.
În cazul unor astfel de specii se selectează o intensitate luminoasă medie în intervalul 40-60 µE·m–2·s–1.
(For light-measuring instruments calibrated in lux, an equivalent range of 4440-8880 lux for cool white light corresponds approximately to the recommended light intensity 60-120 µE·m–2·s–1).
(În cazul instrumentelor de măsurare a luminii calibrate în lux, un interval echivalent de 4440-8880 lucși pentru lumină albă rece corespunde aproximativ intensității luminoase recomandate 60-120 µE·m–2·s–1).
The light intensity shall not vary more than ±15 % from the average light intensity over the incubation area.
Intensitatea luminii nu trebuie să varieze cu mai mult de ±15 % din intensitatea medie a luminii din zona de incubare.
Test duration
Durata testului
The test duration is normally 72 hours.
Durata normală a testului este de 72 de ore.
However, shorter or longer test durations may be used, provided that all validity criteria in section 1.7 can be met.
Cu toate acestea, pot fi folosite durate de test mai lungi sau mai scurte, cu condiția respectării tuturor criteriilor de validitate de la punctul 1.7.
Measurements and analytical determinations
Măsurători și determinări analitice
The algal biomass in each flask is determined at least daily during the test period.
Biomasa de alge din fiecare recipient se determină cel puțin o dată pe zi în timpul perioadei de testare.
If measurements are made on small volumes removed from the test solution by pipette, these should not be replaced.
Dacă măsurătorile se fac pe volume mici, extrase din soluția de testat cu o pipetă, acestea nu se înlocuiesc.
Measurement of biomass is done by manual cell counting by microscope or an electronic particle counter (by cell counts and/or biovolume).
Măsurarea biomasei are loc prin numărarea manuală a celulelor cu ajutorul unui microscop sau al unui contor electronic de particule (prin estimarea numărului celulelor și/sau a biovolumului).
Alternative techniques, e.g. flow cytometry, in vitro or in vivo chlorophyll fluorescence (6)(7), or optical density can be used providing a satisfactory correlation with biomass can be demonstrated over the range of biomass occurring in the test.
Tehnici alternative, cum ar fi citometria de flux, fluorescența clorofilei in vitro sau in vivo (6)(7) sau densitatea optică, pot fi folosite dacă se demonstrează o corelație satisfăcătoare cu biomasa pentru intervalul de cantități de biomasă utilizate în test.
The pH of the solutions shall be measured at the beginning and at the end of the test.
pH-ul soluțiilor se măsoară la începutul și la sfârșitul testului.
Provided an analytical procedure for determination of the test substance in the concentration range used is available, the test solutions should be analysed to verify the initial concentrations and maintenance of the exposure concentrations during the test.
Dacă este disponibilă o procedură analitică de determinare a substanței de testat în intervalul de concentrații utilizat, soluțiile de testat se analizează pentru a fi verificate concentrațiile inițiale și menținerea concentrațiilor de expunere în timpul testului.
Analysis of the concentration of the test substance at the start and end of the test of a low and high test concentration, and a concentration around the expected EC50 may be sufficient where it is likely that exposure concentrations will vary less than 20 % from nominal values during the test.
Analizarea concentrației substanței de testat la începutul și la sfârșitul testului unei concentrații de testare scăzute și înalte, precum și o concentrație în jurul valorii anticipate EC50, pot fi suficiente în cazurile în care este probabil ca variația concentrațiilor expunerilor să fie de mai puțin de 20 % din valorile nominale din timpul testului.
Analysis of all test concentrations at the start and end of the test is recommended where concentrations are unlikely to remain within 80-120 % of nominal.
Analizarea tuturor concentrațiilor de testare la începutul și sfârșitul testului este recomandată în cazul concentrațiilor care nu rămân în intervalul de 80-120 % din valoarea nominală.
For volatile, unstable or strongly adsorbing test substances, additional sampling for analysis at 24 hour intervals during the exposure period is recommended in order to better define loss of the test substance.
În cazul substanțelor de testat volatile, instabile sau puternic absorbante, se recomandă recoltarea suplimentară la intervale de 24 de ore în timpul perioadei de expunere în scopul definirii cu mai mare precizie a pierderii de substanță de testat.
For these substances, extra replicates will be needed.
Pentru aceste substanțe sunt necesare duplicate suplimentare.
In all cases, determination of test substance concentrations need only be performed on one replicate vessel at each test concentration (or on the contents of the vessels pooled by replicate).
În toate cazurile, concentrațiile substanței testate se determină doar la un vas dintre cele identice pentru fiecare concentrație de testat (sau la conținutul vaselor grupate în funcție de duplicat).
Test media prepared specifically for analysis of exposure concentrations during the test should be treated identically to those used for testing, i.e. they should be inoculated with algae and incubated under identical conditions.
Mediile de testare pregătite pentru analizarea concentrațiilor de expunere în timpul testului se tratează identic cu cele folosite pentru testare, adică se inoculează cu alge și sunt incubate în condiții identice.
If analysis of the dissolved test substance concentration is required, it may be necessary to separate algae from the medium.
Dacă este necesară analizarea concentrației substanței de test dizolvate, se poate impune separarea algelor de mediu.