natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Check that every term in the model is significantly different from zero (i.e., determine whether all model terms are important), (Motulsky and Christopoulos 2004).
Az összes lecentrifugált felülúszót szét kell osztani négy 0,5 ml-es mikrocsőbe a fent leírt eljárás szerint.
Plots of residuals from regression vs. test concentration, possibly on a log(conc) scale.
A felülúszó 0,5 ml-es mikrocsövekbe történő szétöntését követően az azonosító címkével ellátott mikrocsöveket a csőtartó állványba kell helyezni, majd fagyasztóban azonnal lefagyasztani.
There should be no pattern to this plot; the points should be randomly scattered about a horizontal line at zero height.
Ha a VTG koncentrációját az előkezelés után azonnal mérik, a csőtartó állványban egy 0,5 ml-es mikrocsövet (a 30 μl felülúszót tartalmazó csövet) hűvösen kell tartani, és át kell vinni arra a munkaállomásra, ahol az ELISA-vizsgálatot végzik.
The data should be evaluated for normality and variance homogeneity in the same way as indicated in Appendix 5.
Ebben az esetben a többi mikrocsövet csőtartó állványba kell helyezni, és le kell fagyasztani a fagyasztóban.
Smaller AICc values denote better fits and if AICc(B)-AICc(A)≥10, the model A is almost certainly better than model B (Motulsky and Christopoulos (2004).
eljárás:
Compare the two models visually by how well they meet the single model criteria above.
Zebradánió, vérvétel farokvénából/-artériából
The parsimony principal is advised, whereby the simplest model that fits the data reasonably well is used (Ratkowsky 1993, Lyles et.al 2008).
A faroktövet közvetlenül az érzéstelenítés után keresztben át kell vágni, és heparinnal kezelt mikrohematokrit kapilláriscsővel fel kell fogni a vért a farokvénából/-artériából.
Quality of ECx estimate
A vér térfogata a hal méretétől függően 5–15 μl.
The confidence interval (CI) for ECx should not be too wide.
A mikrokapilláris-csőbe azonos térfogatú aprotinin puffert (6 μg/ml PBS-ben) kell adni, és a vérplazmát centrifugálással (5 perc, 600 g) szeparálni a vérből.
Statistical judgment is needed in deciding how wide the confidence interval can be and ECx still be useful.
A vérplazmát a kémcsövekben kell összegyűjteni, és a vitellogenin vagy az egyéb vizsgált fehérjék analizálásáig – 20 °C-on kell tárolni.
Simulations for regression models fit to egg hatching and size data show that about 75 % of confidence intervals for ECx (x = 10, 20 or 30) span no more than two test concentrations.
eljárás:
This provides a general guide for what is acceptable and a practical guide for what is achievable.
Zebradánió, vérvétel szívpunkcióval
Numerous authors assert the need to report confidence intervals for all model parameters and that wide confidence intervals for model parameters indicate unacceptable models (Ott and Longnecker 2008, Alvord and Rossio 1993, Motulsky and Christopoulos 2004, Lyles et al.
A véralvadás és a fehérjék lebomlásának elkerülése érdekében a mintákat heparint (1000 egység/ml) és aprotinin proteázinhibitort (2 TIU/ml) tartalmazó foszfáttal pufferolt sóoldatban (PBS) kell gyűjteni.
2008, Seber and Wild 2003, Bunke et al.
A puffer összetevőjeként heparin, ammóniumsó és liofilizált aprotinin használata ajánlott.
1999, Environment Canada 2005).
A vérvétel céljára rögzített vékony tűvel (pl. Braun Omnikan-F) ellátott fecskendő (1 ml) használata javasolt.
The CI for ECx (or any other model parameter) should not contain zero (Motulsky and Christopoulos 2004).
A fecskendőt előre meg kell tölteni a pufferrel (körülbelül 100 μl), hogy teljesen feloldja a halakból származó kis vértérfogatokat.
This is the regression equivalent the minimum significant difference that is often cited in hypothesis testing approaches (e.g. Wang et al 2000).
A vérmintát szívpunkcióval kell venni.
It also corresponds to the confidence interval for the mean responses at the LOEC not contain the control mean.
Először a halat MS-222 oldattal (100 mg/l) érzésteleníteni kell.
One should wonder whether the parameter estimates are scientifically plausible.
Megfelelő érzéstelenítéssel kivehetővé válik a zebradánió szívverése.
E.g. if the confidence interval for y0 is ± 20 %, no EC10 estimate is plausible.
A szív megszúrása közben enyhe nyomást kell kifejteni a fecskendő dugattyújára.
If the model predicts a 20 % effect at a concentration C and the maximum observed effect at C and lower concentrations is 10 %, then the EC20 is not plausible (Motulsky and Christopoulos 2004, Wang et al.
A begyűjthető vértérfogat 20–40 mikroliter között van.
2000, Environment Canada 2005).
A szívpunkció után a vér-puffer keveréket a kémcsőbe kell tölteni.
ECx should not require extrapolation outside the range of positive concentrations (Draper and Smith 1999, OECD 2006).
A vérplazmát a vérből centrifugálással (20 perc, 5000 g) kell elkülöníteni, és az analízisig – 80 °C-on tárolni.
For example, a general guide might be for ECx to be no more than about 25 % below the lowest tested concentration or above the highest tested concentration.
eljárás
Brain P. and Cousens R. (1989); An equation to describe dose responses where there is stimulation of growth at low doses.
A halakat a vizsgálati leírásnak megfelelően érzésteleníteni kell, majd le kell ölni.
Weed res.
A halak fejét és farkát az 1. ábrának megfelelően le kell vágni.
29: 93-96.
Vágja ketté a hátúszó mögött
OECD (2006); Current approaches in the statistical analysis of ecotoxicity data: A guidance to application.
Vágja ketté
Series Testing and Assessment, No. 54, Organisation for Economic Co-operation and Development, OECD, Paris.
Ivarmirigy-szövettanra
C.48 Fish Short Term Reproduction Assay
VTG-analízisre
This test method is equivalent to OECD test guideline (TG) 229 (2012).
Az egyes halak fejének és farkának együttesen mért tömegét a legközelebbi mg-ra kell kerekíteni.
The need to develop and validate a fish assay capable of detecting endocrine active chemicals originates from the concerns that environmental levels of chemicals may cause adverse effects in both humans and wildlife due to the interaction of these chemicals with the endocrine system.
A mérés után a testrészek megfelelő (pl. 1,5 ml-es Eppendorf-) csövekbe kerülnek, és – 80 °C-on homogenizálódásig kell azokat fagyasztani, vagy jégen két műanyag mozsártörővel közvetlenül homogenizálni.
In 1998, the OECD initiated a high-priority activity to revise existing guidelines and to develop new guidelines for the screening and testing of potential endocrine disruptors.
(Más módszerek is használhatók, ha azokat jégen végezik, és homogén tömeget eredményeznek).
One element of the activity was to develop a test guideline for the screening of chemicals active on the endocrine system of fish species.
A homogén massza létrejöttét követően a szövet tömegének 4-szeresét kitevő mennyiségű jéghideg homogenizáló puffert [1] kell hozzáadni.
The Fish Short Term Reproduction Assay underwent an extensive validation programme consisting of inter-laboratory studies with selected chemicals to demonstrate the relevance and reliability of the assay for the detection of chemicals that impact reproduction in fish by various mechanisms including endocrine modalities (1, 2, 3, 4, 5).
A mozsártörővel addig kell dolgozni, amíg a keverék homogén nem lesz.
All endpoints of the OECD test guideline have been validated on the fathead minnow, and a subset of endpoints has been validated in the Japanese medaka (i.e. vitellogenin and secondary sex characteristics) and the zebrafish (i.e. vitellogenin).
A mintákat a 4 °C-on 50000 g-vel 30 percig zajló centrifugálásig jégre kell tenni.
The validation work has been peer-reviewed by a panel of experts nominated by the National Coordinators of the OECD Test Guideline Programme (6) in part, and by an independent panel of experts commissioned by the United States Environmental Protection Agency (29).
A felülúszóból pipettával 20 μl térfogatú adagokat át kell vinni legalább két csőbe úgy, hogy a pipetta hegyét a felületen lévő zsírréteg alá kell meríteni és a zsír- vagy pelletfrakció nélküli felülúszót óvatosan fel kell szívni.
The assay is not designed to identify specific mechanisms of hormonal disruption because the test animals possess an intact hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis, which may respond to chemicals that impact on the HPG axis at different levels.
A csöveket felhasználásig – 80 °C hőmérsékleten kell tárolni.
This test method describes an in vivo screening assay where sexually mature male and spawning female fish are held together and exposed to a chemical during a limited part of their life-cycle (21 days).
DÚSÍTOTT VITELLOGENINMINTÁK ÉS INTER-ASSAY (VIZSGÁLATKÖZI) REFERENCIASTANDARD
At termination of the 21-day exposure period, two biomarker endpoints are measured in males and females as indicators of endocrine activity of the test chemical; these endpoints are vitellogenin and secondary sexual characteristics.
Minden olyan napon, amikor VTG-vizsgálatot végeznek, egy inter-assay (vizsgálatközi) referenciastandard felhasználásával készült dúsított mintát is analizálni kell.
Vitellogenin is measured in fathead minnow, Japanese medaka and zebrafish, whereas secondary sex characteristics are measured in fathead minnow and Japanese medaka.
Az inter-assay referenciastandard készítéséhez használt VTG-nek az elvégzendő vizsgálat céljára készített kalibrációs standardokban használt vitellogenintől eltérő tételből kell származnia.
Additionally, quantitative fecundity is monitored daily throughout the test.
A dúsított minta ismert mennyiségű inter-assay standardnak egy kontrollhím vérplazmájából vett mintához történő hozzáadásával készül.
Gonads are also preserved and histopathology may be evaluated to assess the reproductive fitness of the test animals and to add to the weight of evidence of other endpoints.
A mintát úgy kell feldúsítani, hogy a VTG koncentrációja elérje a kontrollcsoportban lévő hím halakban várható vitellogeninszint 10–100-szorosát.
This bioassay serves as an in vivo reproductive screening assay and its application should be seen in the context of the “OECD Conceptual Framework for the Testing and Assessment of Endocrine Disrupting Chemicals” (30).
A kontrollhím vérplazmájából vett dúsítandó minta származhat egyetlen halból vagy lehet több halból származó kompozit minta is.
In this Conceptual Framework the Fish Short Term Reproduction Assay is proposed at Level 3 as an in vivo assay providing data about selected endocrine mechanism(s)/pathway(s).
A kontrollhímből vett vérplazma nem dúsított részmintáját legalább két lyukban analizálni kell.
Vitellogenin (VTG) is normally produced by the liver of female oviparous vertebrates in response to circulating endogenous oestrogen.
A dúsított mintát is legalább két lyukban kell analizálni.
It is a precursor of egg yolk proteins and, once produced in the liver, travels in the bloodstream to the ovary, where it is taken up and modified by developing eggs.
A várható koncentráció meghatározásához a VTG-nek a kontrollhím vérplazmájából vett két nem dúsított mintában mért átlagos mennyiségét hozzá kell adni a dúsított mintákhoz adott VTG számított mennyiségéhez.
Vitellogenin is almost undetectable in the plasma of immature female and male fish because they lack sufficient circulating oestrogen; however, the liver is capable of synthesising and secreting vitellogenin in response to exogenous oestrogen stimulation.
E várható koncentrációnak a mért koncentrációhoz viszonyított arányát az adott napon elvégzett valamennyi vizsgálat eredményeivel együtt jegyzőkönyvezni kell.
The detection of oestrogenic chemicals is possible via the measurement of vitellogenin induction in male fish, and it has been abundantly documented in the scientific peer-reviewed literature (e.g. (7)).
A párhuzamosok átlagai normál eloszlásúak
Vitellogenin induction has also been demonstrated following exposure to aromatisable androgens (8, 9).
Igen >=4 párhuzamos / koncentráció
A reduction in the circulating level of oestrogen in females, for instance through the inhibition of the aromatase converting the endogenous androgen to the natural oestrogen 17β-estradiol, causes a decrease in the VTG level which is used to detect chemicals having aromatase inhibiting properties (10, 11).
Dunn-féle próba a párhuzamosok átlagain
The biological relevance of the vitellogenin response following oestrogenic/aromatase inhibition is established and has been broadly documented.
>=4 párhuzamos / koncentráció
However, it is possible that production of VTG in females can also be affected by general toxicity and non-endocrine toxic modes of action, e.g. hepatotoxicity.
Normalizáló transzformáció?
Several measurement methods have been successfully developed and standardised for routine use.
A párhuzamosok átlagain nem mutatnak normalitást és homogenitást
This is the case of species-specific Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) methods using immunochemistry for the quantification of VTG produced in small blood or liver samples collected from individual fish (12, 13, 14, 15, 16, 17, 18).
Variancia-stabilizátó transzformáció?
Fathead minnow blood, zebrafish blood or head/tail homogenate, and medaka liver are sampled for VTG measurement.
Dunnett-féle próba a beágyazott ANOVA-n
In medaka, there is a good correlation between VTG measured from blood and from liver (19).
Tamhane-Dunnett-féle próba Normalizáló transzformáció?
Appendix 6 provides the recommended procedures for sample collection for VTG analysis.
Variancia-stabilizátó transzformáció?
Kits for the measurement of VTG are widely available; such kits should be based on a validated species-specific ELISA method.
Nem egyenlő varianciák
Secondary sex characteristics in male fish of certain species are externally visible, quantifiable and responsive to circulating levels of endogenous androgens; this is the case for the fathead minnow and the medaka — but not for zebrafish which does not possess quantifiable secondary sex characteristics.
Dunnett-féle próba Egyenlő varianciák
Females maintain the capacity to develop male secondary sex characteristics, when they are exposed to androgenic chemicals in water.
Lefelé lépegető Jonckheere-féle próba
Several studies are available in the scientific literature to document this type of response in fathead minnow (20) and medaka (21).
A párhuzamosok átlagain végzett lefelé lépegető trendpróba
A decrease in secondary sex characteristics in males should be interpreted with caution because of low statistical power, and should be based on expert judgement and weight of evidence.
Nem monoton
There are limitations to the use of zebrafish in this assay, due to the absence of quantifiable secondary sex characteristics responsive to androgenic acting chemicals.
Monoton
In the medaka, the number of papillary processes constitutes the main marker of exogenous exposure to androgenic chemicals in female fish.
A halembriók akut toxicitási vizsgálatát (FET) zebradániókon (Danio rerio) mutatja be.
Appendix 5A and Appendix 5B indicate the recommended procedures to follow for the evaluation of sex characteristics in fathead minnow and in medaka, respectively.
E vizsgálat célja a vegyi anyagok halak embrionális életszakaszaira gyakorolt akut toxicitásának megállapítása.
The 21-day fish assay includes the evaluation of quantitative egg production and preservation of gonads for optional histopathology examination.
Az FET-vizsgálat a zebradániókon végzett vizsgálatokon és validálási tevékenységeken alapul (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)(8)(9)(10)(11)(12)(13)(14).
Although some endpoints may be highly diagnostic (e.g. VTG induction in males and tubercle formation in females), not all endpoints (e.g. fecundity and gonad histopathology) in the assay are intended to unequivocally identify specific cellular mechanisms of action.
Újonnan megtermékenyített zebradánióikrákat 96 órára kiteszik a vizsgálati vegyi anyagnak.
Although not endocrine specific, fecundity, due to its demonstrated sensitivity across known endocrine active chemicals (5), is an important endpoint to include because when it and other endpoints are unaffected one is more confident that a compound is not likely endocrine active.
Az anyagspecifikus tulajdonságokkal kapcsolatos hasznos információk többek között a szerkezeti képlet, a molekulatömeg, a tisztaság, a vízben és a fény hatására tanúsított stabilitás, a pKa és a Kow, a vízoldékonyság, a gőznyomás, továbbá az azonnali biológiai lebonthatóságra irányuló vizsgálat eredményei (C.4. vizsgálati módszer (17) vagy C.29.
However, when fecundity is affected it will contribute heavily in weight of evidence inferences.
(18) vizsgálati módszer).
Guidance on data interpretation and acceptance of test results is provided further in this test method.
A vízoldékonyságból és a gőznyomásból meghatározható a Henry-állandó, amely megmutatja, hogy előfordulhat-e a vizsgálati vegyi anyag párolgás miatt eltávozása.
Definitions used in this test method are given in Appendix 1.
Olyan megbízható analitikai módszerrel kell rendelkezni a vizsgálati oldatokban lévő anyag számszerűsítésére, amelynek pontossága és érzékelési határa ismert és dokumentált.
In the assay, male and female fish in a reproductive status are exposed together in test vessels.
Ha a vizsgálati módszert keverék vizsgálatára alkalmazzák, annak összetételét lehetőség szerint jellemezni kell, pl. az alkotóelemeinek kémiai azonosításával, azok mennyiségi előfordulásával, továbbá anyagspecifikus tulajdonságaival (lásd a 4. pontot).
Their adult and reproductive status enables a clear differentiation of each sex, and thus a sex-related analysis of each endpoint, and ensures their sensitivity towards exogenous chemicals.
Az anyagcsere során aktiválható anyagokat érintően bizonyított, hogy a zebradánió embriói rendelkeznek biotranszformációs képességgel (19)(20)(21)(22).
At test termination, sex is confirmed by macroscopic examination of the gonads following ventral opening of the abdomen with scissors.
Ugyanakkor az embrióállapotú halak anyagcsere-képessége nem mindig hasonló egy növendékéhez vagy felnőtt egyedéhez.
An overview of the relevant bioassay conditions are provided in Appendix 2.
Például az allilalkoholt (9), mint metabolikus prekurzort az FET-vizsgálattal nem lehetett kimutatni.
The assay is normally initiated with fish sampled from a population that is in spawning condition; senescent animals should not be used.
Ezért amennyiben arra utaló jelek tapasztalhatók, hogy a metabolitok vagy más releváns transzformációs termékek toxikusabbak lehetnek az anyavegyületnél, javasolt továbbá a vizsgálatot e metabolitokkal/transzformációs termékekkel lefolytatni, és ezeket az eredményeket felhasználni a vizsgálati vegyi anyag toxicitásával kapcsolatos következtetésekhez, vagy pedig egy másik vizsgálatot lefolytatni, amely nagyobb mértékben figyelembe veszi az anyagcserét.
Guidance on the age of fish and on the reproductive status is provided in the section on Selection of fish.
A ≥ 3kDa molekulatömegű (igen terjedelmes molekulaszerkezetű) anyagok, illetve a kikelést késleltető anyagok esetében, amelyek kizárhatják vagy mérsékelhetik a kikelést követő expozíciót, az embriók várhatóan nem lesznek érzékenyek az anyag korlátozott biológiai hasznosíthatósága miatt, és más toxicitási vizsgálatok megfelelőbbek lehetnek.
The assay is conducted using three chemical exposure concentrations as well as a water control, and a solvent control if necessary.
A következő feltételeknek kell teljesülniük ahhoz, hogy a vizsgálat eredményei érvényesek legyenek:
Two vessels or replicates per treatment are used for zebrafish (each vessel containing 5 males and 5 females).
A begyűjtött peték általános megtermékenyítési aránya ≥ 70 % kell legyen a vizsgált tételben.
This is to accommodate the territorial behaviour of male fathead minnow while maintaining sufficient power of the assay.
A negatív (hígítóvizes) kontrollban és adott esetben az oldószeres kontrollban az embriók általános túlélésének ≥ 90 %-nak kell lennie a 96 órás expozíció végéig.
Four vessels or replicates per treatment are used for medaka (each vessel containing 3 males and 3 females).
A pozitív kontrollnak való expozíció (pl. 4,0 mg/l 3,4-diklór-anilin a zebradánió esetében) eredményeként a 96 órás expozíció végén a mortalitásnak legalább 30 %-nak kell lennie.
The exposure is conducted for 21-days and sampling of fish is performed at day 21 of exposure.
A negatív (hígítóvizes) kontrollban és adott esetben az oldószeres kontrollban a kikelési aránynak ≥ 80 %-nak kell lennie a 96 órás expozíció végéig.
Quantitative fecundity is monitored daily.
A 96 órás expozíció végén az oldottoxigén-koncentrációnak a negatív kontrollban és a legmagasabb vizsgálati koncentrációnak ≥ 80 %-os telítettségűnek kell lennie.
Secondary sex characteristics are measured in fathead minnow and medaka (see Appendix 5A and Appendix 5B); blood samples are collected for determination of VTG in zebrafish and fathead minnow, alternatively head/tail can be collected for the determination of VTG in zebrafish (Appendix 6); liver is collected for VTG analysis in medaka (Appendix 6); gonads are fixed either in whole or dissected for potential histopathological evaluation (22).
A következő berendezésekre van szükség:
TEST ACCEPTANCE CRITERIA
kémiailag semleges anyagból (pl. üvegből) készült és az ajánlott betelepítési aránynak megfelelő kapacitású tartályok (lásd a tenyészhalak tartására vonatkozó részt a 14. pontban);
For the test results to be acceptable the following conditions apply:
inverz mikroszkóp és/vagy binokuláris mikroszkóp, amely legalább 80-szoros nagyításra képes.
the mortality in the water (or solvent) controls should not exceed 10 per cent at the end of the exposure period;
Amennyiben a megfigyelések dokumentálására használt helyiséget nem lehet 26 ± 1 °C-ra szabályozni, szabályozott hőmérsékletű, keresztirányban eltolható tárgyasztal vagy más, a hőmérséklet fenntartását szolgáló módszerek szükségesek;
the dissolved oxygen concentration should be at least 60 per cent of the air saturation value (ASV) throughout the exposure period;
öntapadó fólia pl. a 24 lyukú lemezek lefedésére;
the water temperature should not differ by more than ± 1,5 °C between test vessels at any one time during the exposure period and be maintained within a range of 2 °C within the temperature ranges specified for the test species (Appendix 2);
inkubátor, vagy szabályozott hőmérsékletű légkondicionált helyiség, amely lehetővé teszi a lyukakban (vagy a vizsgálati kamrákban) a 26 ± 1 °C fenntartását.
evidence should be available to demonstrate that the concentrations of the test chemical in solution have been satisfactorily maintained within ±20 % of the mean measured values;
oxigénmérő,
evidence that fish are actively spawning in all replicates prior to initiating chemical exposure and in control replicates during the test.
vízkeménység és vezetőképesség meghatározására szolgáló berendezés,
oxygen and pH meters;
a különböző vizsgálati koncentrációk és hígítóvíz készítésére használt üvegedények (főzőpohár, mérőlombik, mérőhenger, mérőpipetták), vagy a zebradániópeték összegyűjtésére szolgáló eszközök (pl. főzőpoharak, kristályosító csészék);
equipment for determination of water hardness and alkalinity;
ha alternatív expozíciós rendszereket, pl. átfolyásos (24) vagy passzív adagoló rendszert (25) használnak a vizsgálat lefolytatásához, ehhez megfelelő eszközök és felszerelések szükségesek.
adequate apparatus for temperature control and preferably continuous monitoring;
Üveg vagy polisztirol vizsgálati kamrákat kell használni (pl. 24 lyukú lemezeket, lyukanként 2,5–5 ml töltési kapacitással).
tanks made of chemically inert material and of a suitable capacity in relation to the recommended loading and stocking density (see Appendix 2);
Ha gyanítható a polisztirolhoz való adszorpció (pl. a nem poláris, kétdimenziós anyagok esetében, amelyek KOW értéke magas) semleges anyagokat (üveget) kell használni az adszorpcióból eredő veszteség mérséklésére (26).
spawning substrate for fathead minnow and zebrafish, Appendix 4 gives the necessary details.
A vizsgálati kamrákat véletlenszerűen kell az inkubátorban elhelyezni.
suitably accurate balance (i.e. accurate to ± 0,5 mg).
A vízre és a vizsgálatra vonatkozó körülmények