natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Chapter B.50 of this Annex: Skin Sensitisation: Local Lymph Node Assay: DA.
Loldószer
Chaper B.51 of this Annex: Skin Sensitisation: Local Lymph Node Assay BrdU-ELISA
ahol:
Available at: https://eurl-ecvam.jrc.ec.europa.eu/eurl-ecvam-recommendations/eurl-ecvam-recommendation-on-the-direct-peptide-reactivity-assay-dpra
L minta
Accessible at: http://ihcp.jrc.ec.europa.eu/our_labs/eurl-ecvam/eurl-ecvam-recommendations/eurl-ecvam-recommendation-on-the-direct-peptide-reactivity-assay-dpra
a vizsgálati vegyi anyagot tartalmazó lyukban leolvasott lumineszcencia-érték
Accessible at: http://ecvam-dbalm.jrc.ec.europa.eu/
L vakpróba
OECD Series on Testing and Assessment, No. 34.
a sejtek és kezelés nélküli vakpróbalyukban leolvasott lumineszcencia-érték
Organisation for Economic Cooperation and Development, Paris, France.
L oldószer
Accessible at: www.fda.gov/downloads/drugs/guidancecomplianceregulatoryinformation/guidance/ucm070107.pdf - 138
a sejteket és az oldószeres (negatív) kontrollt tartalmazó lyukakban leolvasott átlagos lumineszcencia-érték
The term is often used interchangeably with “concordance”, to mean the proportion of correct outcomes of a test method (21).
Az EC1,5 értéket a 2. egyenlet szerinti lineáris interpolációval, az általános EC1,5 értéket pedig az egyes ismétlések mértani középértékeként kell kiszámítani.
AOP (Adverse Outcome Pathway)
egyenlet:
Sequence of events from the chemical structure of a target chemical or group of similar chemicals through the molecular initiating event to an in vivo outcome of interest (2).
a μM-ben kifejezett legalacsonyabb koncentráció 1,5-szeres indukciónál magasabb indukció mellett
The relationship between the experimental response value and the analytical concentration (also called standard curve) of a known substance.
a 1,5-szeres indukciónál magasabb indukció melletti legalacsonyabb koncentrációnál mért valahányszoros indukció (három párhuzamos lyuk átlaga)
Coefficient of variation
a 1,5-szeres indukciónál alacsonyabb indukció melletti legmagasabb koncentrációnál mért valahányszoros indukció (három párhuzamos lyuk átlaga)
A measure of variability that is calculated for a group of replicate data by dividing the standard deviation by the mean.
Az életképességet a 3. egyenlettel kell kiszámítani:
It can be multiplied by 100 for expression as a percentage.
Életképesség
IATA (Integrated Approach to Testing and Assessment)
Vminta
A structured approach used for hazard identification (potential), hazard characterisation (potency) and/or safety assessment (potential/potency and exposure) of a chemical or group of chemicals, which strategically integrates and weights all relevant data to inform regulatory decision regarding potential hazard and/or risk and/or the need for further targeted and therefore minimal testing.
Vvakpróba
Molecular Initiating Event
Voldószer
A mixture or a solution composed of two or more substances in which they do not react (1).
a sejtek és kezelés nélküli vakpróbalyukban leolvasott MTT-abszorbanciaérték
A substance, defined by its quantitative composition, in which one main constituent is present to at least 80 % (w/w).
a sejteket és az oldószeres (negatív) kontrollt tartalmazó lyukakban leolvasott átlagos MTT-abszorbanciaérték
Multi-constituent substance
Az IC50 és az IC30 értéket a 4. egyenlet szerinti lineáris interpolációval, az általános IC50 és IC30 értéket pedig az egyes ismétlések mértani középértékeként kell kiszámítani.
A substance, defined by its quantitative composition, in which more than one main constituent is present in a concentration ≥ 10 % (w/w) and < 80 % (w/w).
X a kiszámítandó %-os csökkenés az adott koncentrációnál (50, illetve 30 az IC50 és az IC30 esetén)
A multi-constituent substance is the result of a manufacturing process.
a μM-ben kifejezett legalacsonyabb koncentráció x %-ot meghaladó életképesség-csökkenés mellett
The difference between mixture and multi-constituent substance is that a mixture is obtained by blending of two or more substances without chemical reaction.
a μM-ben kifejezett legmagasabb koncentráció x %-ot el nem érő életképesség-csökkenés mellett
A multi-constituent substance is the result of a chemical reaction.
az x %-ot meghaladó életképesség-csökkenés melletti legalacsonyabb koncentrációnál várható %-os életképesség
A replicate containing all components of a test system and treated with a substance known to induce a positive response.
az x %-ot el nem érő életképesség-csökkenés melletti legmagasabb koncentrációnál várható %-os életképesség
Reference control
A 1,5-szeresnél magasabb luciferáz-aktivitás indukciót mutató koncentrációknál oly módon kell kiszámítani a statisztikai szignifikanciát (például kétvégű Student-féle t-próbával), hogy a három párhuzamos minta lumineszcencia-értékeit össze kell vetni az oldószeres (negatív) kontrollként szolgáló lyukakban leolvasott lumineszcencia-értékekkel annak meghatározásához, hogy a luciferáz-aktivitás indukciója statisztikailag szignifikáns-e (p <0 ,05).
An untreated sample containing all components of a test system, including the solvent or vehicle that is processed with the test chemical treated and other control samples to establish the baseline response for the samples treated with the test chemical dissolved in the same solvent or vehicle.
A 1,5-szeresnél magasabb luciferáz-aktivitás indukció melletti legalacsonyabb koncentráció az EC1,5 értéket meghatározó érték.
Relevance
Minden esetben ellenőrizni kell, hogy ez az érték az IC30 érték alatt van-e, ami arra utal, hogy az EC1,5 értéket meghatározó koncentráció mellett 30 %-nál kisebb mértékű a sejtéletképesség csökkenése.
Description of relationship of the test to the effect of interest and whether it is meaningful and useful for a particular purpose.
Az adatokat ajánlott szemrevételezéssel ellenőrizni grafikonok segítségével.
It is the extent to which the test correctly measures or predicts the biological effect of interest.
Ha nem figyelhető meg egyértelmű dózis-válasz görbe, vagy ha a kapott dózis-válasz görbe kétfázisú (azaz kétszer lépi túl a másfélszeres küszöbértéket), a kísérletet meg kell ismételni annak ellenőrzése érdekében, hogy ez a vizsgálati vegyi anyagra jellemző-e vagy kísérleti műhibának tulajdonítható-e.
It is assessed by calculating intra- and inter-laboratory reproducibility and intra-laboratory repeatability (21).
Azon ritka esetekben, ha 1,5-szeres küszöbérték feletti, statisztikailag nem szignifikáns indukció figyelhető meg, majd statisztikailag szignifikáns indukció magasabb koncentráció mellett, ezen ismétlések eredményei csak akkor minősülnek érvényesnek és pozitívnak, ha a 1,5-szeres küszöbérték feletti statisztikailag nem szignifikáns indukció nem citotoxikus koncentráció esetén következett be.
Reproducibility
Végezetül azon vizsgálati vegyi anyagok esetében, amelyek már a 0,98 μM legalacsonyabb vizsgálati koncentrációnál 1,5-szeres vagy magasabb indukciót idéznek elő, a 0,98-nál kisebb EC1,5 értéket a dózis-válasz görbe szemrevételezéses ellenőrzése alapján kell meghatározni.
The agreement among results obtained from testing the same chemical using the same test protocol (see reliability) (21).
A KeratinoSensTM vizsgálat alkalmazásakor az alábbi elfogadhatósági kritériumoknak kell teljesülniük.
The proportion of all positive/active chemicals that are correctly classified by the test method.
Először is a pozitív kontrollanyaggal, a fahéjaldehiddel elért luciferáz-aktivitás indukciónak a 1,5-szeres küszöbérték felett statisztikailag szignifikánsnak kell lennie (például t-próba alkalmazásával) legalább a vizsgált koncentrációk egyikében (4-64 μM között).
It is a measure of accuracy for a test method that produces categorical results, and is an important consideration in assessing the relevance of a test method (21).
Másodszor, az EC1,5 értéknek a vizsgálatot végző létesítmény történeti átlagát magában foglaló két szórás intervallumában kell lennie (például a validációs adatkészlet alapján 7 μM és 30 μM közötti értéknek), amit rendszeresen frissíteni kell.
The proportion of all negative/inactive chemicals that are correctly classified by the test method.
Ezen túlmenően a fahéjaldehidre vonatkozó három párhuzamosban az átlagos indukciónak 64 μM koncentráció mellett 2 és 8 között kell lennie.
It is a measure of accuracy for a test method that produces categorical results and is an important consideration in assessing the relevance of a test method (21).
Ha az utóbbi kritérium nem teljesül, a fahéjaldehid dózis-válaszát körültekintően kell ellenőrizni, és a vizsgálatok kizárólag akkor elfogadhatóak, ha a luciferáz-aktivitás indukció és a pozitív kontrollanyag koncentrációja együttes növekedése mellett egyértelmű dózis-válasz van.
Chemical elements and their compounds in the natural state or obtained by any production process, including any additive necessary to preserve the stability of the product and any impurities deriving from the process used, but excluding any solvent which may be separated without affecting the stability of the substance or changing its composition (1).
Végezetül a negatív (oldószeres) DMSO-tartalmú kontroll esetében leolvasott lumineszcencia-értékek átlagos variációs koefficiensének minden ismétlésben (három példányban vizsgált 6 lyukban) 20 %-nál alacsonyabbnak kell lennie.
Determination of instrument performance (e.g. sensitivity) by analysis of a reference standard prior to running the analytical batch (22).
Ha magasabb a variabilitás, az eredményeket el kell vetni.
The term “test chemical” is used to refer to what is being tested.
Az eredmények értelmezése és az előrejelzési modell
A test method considered to have sufficient relevance and reliability for a specific purpose and which is based on scientifically sound principles.
az EC1,5 érték kisebb, mint (<) 1000 μM (vagy < 200 μg/ml a nem meghatározott MW értékű vizsgálati vegyi anyagok esetében);
Recommended proficiency substances for demonstrating technical proficiency with the Direct Peptide Reactivity Assay
Ritka esetekben a citotoxikus szintekhez nagyon közel luciferáz-aktivitást indukáló vizsgálati vegyi anyagok egyes ismétlésekben és nem citotoxikus szinteknél pozitívak lehetnek (azaz az EC1,5 értéket meghatározó koncentráció alacsonyabb, mint (<) az IC30 érték), más ismétlésekben pedig csak a citotoxikus szinteknél (azaz az EC1,5 értéket meghatározó koncentráció magasabb, mint (>) az IC30 érték).
Proficiency substances
Az ilyen vizsgálati vegyi anyagokat szűkebb körű dózis-válasz elemzéssel és alacsonyabb hígítási tényezővel (például 1,33-szoros vagy Ö2 (=1,41)-szeres hígítással a lyukak között) újra meg kell vizsgálni annak meghatározásához, hogy az indukció citotoxikus szinten történt-e vagy sem (9).
Physical state
fizikai megjelenés, vízoldékonyság, DMSO-ban való oldhatóság, molekulatömeg, valamint további releváns fizikai-kémiai tulajdonságok, amennyiben rendelkezésre állnak;
DPRA prediction [2]
Fizikai megjelenés, vízoldékonyság, DSMO-ban való oldhatóság, molekulatömeg, valamint további releváns fizikai-kémiai tulajdonságok, amennyiben rendelkezésre állnak és szükség szerint;
Range [3] of % cysteine peptide depletion
Negatív (vivőanyagos) kontroll:
Range [3] of % lysine peptide depletion
kémiai azonosítás, például IUPAC- vagy CAS-név (nevek), CAS-szám(ok) és/vagy más azonosítók;
2,4-Dinitrochlorobenzene
fizikai megjelenés, molekulatömeg, valamint további releváns fizikai-kémiai tulajdonságok, amennyiben a vizsgálati módszerben említett negatív kontrolloktól eltérő negatív kontrollok használatosak, és amennyiben rendelkezésre állnak;
Sensitiser
az oldószer kiválasztásának indoklása minden egyes vizsgálati vegyi anyag esetében.
(extreme)
A vizsgálati módszer körülményei
Formaldehyde
használt sejtvonal, tárolási feltételei és eredete (például az a létesítmény, ahonnan azt beszerezték);
(strong)
a vizsgálathoz használt sejtek passzálásának száma és konfluenciájának szintje;
Benzylideneacetone
a vizsgálat előtt a leoltáshoz alkalmazott sejtszámlálási módszer és a homogén sejtszám-eloszlás biztosítása érdekében hozott intézkedések (lásd a 20. pontot);
(moderate)
az alkalmazott luminométer (például modell), beleértve a műszer beállításait, a használt luciferáz szubsztrátot, valamint a megfelelő lumineszcencia-mérések szemléltetése a 3. függelékben ismertetett kontrollvizsgálat alapján;
Farnesal
a vizsgálati módszer végrehajtásában való laboratóriumi jártasság bizonyítására alkalmazott eljárás (például jártassági tesztanyagok vizsgálatával) vagy a vizsgálati módszer idővel reprodukálható végrehajtásának bizonyítására alkalmazott eljárás.
(weak)
Vizsgálati eljárás
2,3-Butanedione
az alkalmazott ismétlések és párhuzamosok száma;
utanol
a vizsgálati vegyi anyag koncentrációi, alkalmazási eljárása és az igénybe vett expozíciós idő (ha eltér az ajánlottól);
Non-sensitizer
minden ismétlésben a vizsgálati vegyi anyag és a pozitív kontroll esetében kapott Imax, EC1,5 értékek és életképességre vonatkozó értékek (azaz az IC50, IC30 értékek), valamint átlagok (Imax: átlagérték; EC1,5 és az életképességre vonatkozó értékek: mértani középérték), továbbá az összes ismétlésből származó adatok felhasználásával kiszámított szórás és a vizsgálati vegyi anyagnak az előrejelzési modell szerinti minősítése;
ethylcoumarin
az egyes kísérleteknél a negatív kontroll esetében leolvasott lumineszcencia-értékekkel kapott variációs koefficiens;
Lactic Acid
a luciferáz-aktivitás indukciójára és az életképességre vonatkozó dózis-válasz görbéket ábrázoló grafikon;
Reference control B: included at the beginning and at the end of the analysis sequence to verify stability of reference controls over the analysis time.
1,5-szeres luciferáz-indukció esetén interpolált koncentráció.
Reference control C: included in the analysis sequence to verify that the solvent used to dissolve the test chemical does not impact the percent peptide depletion.
a sejtéletképesség 30 %-os csökkenését kiváltó koncentráció.
Calibration standards and reference controls
a luciferáz-aktivitásnak az oldószeres (negatív) kontrollhoz viszonyított maximális indukciós tényezője, amelyet a vizsgálati vegyi anyag bármely koncentrációjánál mérnek.
STD1
Kelch-like ECH-associated protein 1, az Nrf2-aktivitást szabályozó szenzorfehérje.
STD2
Nem indukált feltételek mellett a Keap1 szenzorfehérje az Nrf2 transzkripciós faktort célozza meg a proteaszómán belüli ubikvitináció és fehérjebomlás céljából.
STD3
A Keap1 reaktív ciszteinmaradékainak kis molekulákkal végbemenő kovalens módosítása az Nrf2 transzkripciós faktornak a Keap1 szenzorfehérjétől való szétválásához vezethet (8) (10) (11).
STD4
Nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2, az antioxidáns válaszelem útvonalában érintett transzkripciós faktor.
STD5
Ha az Nrf2-ben nem megy végbe ubikvitináció, felépíti a citoplazmát és transzlokálódik a sejtmagba, ahol számos citoprotektív gén felfelé tartó promóter régiójában kapcsolódik az ARE válaszelemhez, elindítva e gének transzkripcióját (8) (10) (11).
Reference control A, rep 1
Az ugyanabban az oldószerben feloldott vizsgálati vegyi anyaggal kezelt minták esetében a kiindulási érték létrehozásához használatos.
Reference control A, rep 3
E vizsgálati módszer rutinszerű alkalmazása előtt a laboratóriumoknak igazolniuk kell szakmai jártasságukat oly módon, hogy az 1. táblázatban javasolt 10 jártassági tesztanyagra vonatkozóan a KeratinoSens™ vizsgálattal várható előrejelzést helyesen kapják meg, továbbá a 10 jártassági tesztanyag közül 8 esetében a referenciatartományba eső EC1,5 és IC50 értékeket kapják meg.
Co-elution controls
E jártassági tesztanyagok kiválasztása oly módon történt, hogy az a bőrszenzibilizáció veszélye esetén bekövetkező különféle válaszreakciók tartományát illetően reprezentatív legyen.
Co-elution control 1 for test chemical 1
További kiválasztási kritérium volt, hogy a jártassági tesztanyagok kereskedelmi forgalomban kaphatóak legyenek, azokra vonatkozóan kiváló minőségű in vivo referenciaadatok és a KeratinoSensTM vizsgálatból származó, kiváló minőségű in vitro adatok álljanak rendelkezésre.
Co-elution control 2 for test chemical 2
A KeratinoSensTM vizsgálatban való szakmai jártasság bizonyításához ajánlott anyagok
Reference controls
Jártassági tesztanyagok
Reference control B, rep 1
In vivo előrejelzés [1]
Reference control B, rep 2
KeratinoSensTM előrejelzés [2]
Reference control B, rep 3
,5 (μM) referenciatartomány [3]
First set of replicates
(μM) referenciatartomány [3]
Reference control C, rep 1
Izopropanol
Cinnamic aldehyde, rep 1
Nem szenzibilizáló
Sample 1, rep 1
Szalicilsav
Sample 2, rep 1
Tejsav
Second set of replicates
Fahéjalkohol
Reference control C, rep 2
Szenzibilizáló (enyhén)
Cinnamic aldehyde, rep 2
25–175
Sample 1, rep 2
Etilén-glikol-dimetakrilát
Sample 2, rep 2
erkapto-benzotiazol
Third set of replicates
Szenzibilizáló (mérsékelten)
Reference control C, rep 3
Metil-dibróm-glutár-nitril
Cinnamic aldehyde, rep 3
Szenzibilizáló (erősen)
Sample 1, rep 3
etil-amino-fenol-szulfát
Sample 2, rep 3
2,4-dinitro-klórbenzol
Reference control B, rep 4
Szenzibilizáló (szélsőségesen)
Reference control B, rep 5
Az in vivo veszélyekre és (a hatáserősségre vonatkozó) előrejelzések LLNA-adatokon alapulnak (13).
Reference control B, rep 6
Az in vivo hatáserősség levezetése az ECETOC által javasolt kritériumok segítségével történik (24).
B.60 In Vitro Skin Sensitisation: ARE-Nrf2 Luciferase Test Method
A KeratinoSensTM előrejelzést integrált értékelési és vizsgálati megközelítés keretében, valamint e vizsgálati módszer 9. és 11. pontjának rendelkezéseivel összhangban kell figyelembe venni.
This test method (TM) is equivalent to OECD test guideline (TG) 442D (2015).
A megfigyelt történeti értékek alapján (12).
A skin sensitiser refers to a substance that will lead to an allergic response following skin contact as defined by the United Nations Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (UN GHS) (1) and Regulation (EC) No 1272/2008 of the European Parliament and of the Council on Classification, Labelling and Packaging of Substances and Mixtures (CLP) [18].
A LUMINESZCENCIA-MÉRÉSEK MINŐSÉG-ELLENŐRZÉSE
This test method provides an in vitro procedure (the ARE-Nrf2 luciferase assay) to be used for supporting the discrimination between skin sensitisers and non-sensitisers in accordance with the UN GHS (1) and CLP.
A KeratinoSensTM vizsgálat során optimális lumineszcencia-mérések biztosításához kapcsolódó alapkísérlet
The existing knowledge of the chemical and biological mechanisms associated with skin sensitisation has been summarised in the form of an Adverse Outcome Pathway (AOP) (2), going from the molecular initiating event through the intermediate events up to the adverse health effect, i.e. allergic contact dermatitis in humans or contact hypersensitivity in rodents (2) (3).
Ahhoz, hogy a luminométerrel megbízható eredmények szülessenek, az alábbi három paraméter kritikus jelentőségű:
The molecular initiating event is the covalent binding of electrophilic substances to nucleophilic centres in skin proteins.
a kontroll-lyukakban stabil hátteret biztosító, kellő érzékenység legyen;
The second key event in this AOP takes place in the keratinocytes and includes inflammatory responses as well as gene expression associated with specific cell signalling pathways such as the antioxidant/electrophile response element (ARE)-dependent pathways.
a szomszédos lyukakban ne legyen az erősen aktív lyukak felől érkező fényszennyezés.
The third key event is the activation of dendritic cells, typically assessed by expression of specific cell surface markers, chemokines and cytokines.
A vizsgálat előtt a kontroll-lemez alábbiakban ismertetett beállítás melletti vizsgálatával (hármas elemzéssel) ajánlott meggyőződni a lumineszcencia-mérések megfelelőségéről.
The fourth key event is T-cell proliferation, which is indirectly assessed in the murine Local Lymph Node Assay (4).
A lemez beállítása az első kísérlethez
The classical methods based on guinea-pigs, the Magnusson Kligman Guinea Pig Maximisation Test (GMPT) and the Buehler Test (TM B.6 (5)), study both the induction and elicitation phases of skin sensitisation.
Vakpróba
A murine test, the Local Lymph Node Assay (LLNA) (TM B.42 (4)) and its two non-radioactive modifications, LLNA: DA (TM B.50 (6)) and LLNA: BrdU-ELISA (TM B.51 (7)), which all assess the induction response exclusively, have also gained acceptance since they provide advantages over the guinea pig tests in terms of both animal welfare and objective measurement of the induction phase of skin sensitisation.
EGDMA etilén-glikol-dimetakrilát (CAS-szám: 97-90-5), erős indukciót kiváltó vegyi anyag
More recently, mechanistically-based in chemico and in vitro test methods have been considered scientifically valid for the evaluation of the skin sensitisation hazard of chemicals.
A minőségellenőrzés céljából végzett elemzésnek a következőket kell bebizonyítania:
However, combinations of non-animal methods (in silico, in chemico, in vitro) within Integrated Approaches to Testing and Assessment (IATA) will be needed to be able to fully substitute for the animal tests currently in use given the restricted AOP mechanistic coverage of each of the currently available non-animal test methods (2) (3).
egyértelmű dózis-válasz a D sorban, Imax a háttérértékeknek több mint 20-szorosa (a legtöbb esetben 100 és 300 közötti Imax értékek kaphatók);
This test method (ARE-Nrf2 luciferase assay) is proposed to address the second key event as explained in paragraph 2.
dózis-válasz hiánya a C és az E sorban (nincs 1,5 feletti – ideális esetben 1,3 feletti – indukciós érték) különösen az EGDMA-t tartalmazó sorban lévő erősen aktív lyukak mellett lehetséges fényszennyezés miatt;
Skin sensitisers have been reported to induce genes that are regulated by the antioxidant response element (ARE) (8) (9).
az A, B, C, E, F és G sor bármelyikében és a H sorban, DMSO-t tartalmazó lyukakban a variabilitás alacsonyabb 20 %-nál (azaz stabil háttér).
Small electrophilic substances such as skin sensitisers can act on the sensor protein Keap1 (Kelch-like ECH-associated protein 1), by e.g. covalent modification of its cysteine residue, resulting in its dissociation from the transcription factor Nrf2 (nuclear factor-erythroid 2-related factor 2).
Ez a vizsgálati módszer egyenértékű az OECD 460. vizsgálati iránymutatásában (2012) leírt módszerrel.
The dissociated Nrf2 can then activate ARE-dependent genes such as those coding for phase II detoxifying enzymes (8) (10) (11).
A fluoreszcein-szivárgáson alapuló vizsgálati módszer bizonyos körülmények között és konkrét korlátok mellett alkalmazható a vegyi anyagok (anyagok és keverékek) szemkorróziót és súlyos szemirritációt okozóként történő besorolására, amely kategóriákat a vegyi anyagok osztályozásának és címkézésének az Egyesült Nemzetek Szervezete (ENSZ) által globálisan harmonizált rendszere (GHS) (1. kategória), az anyagok és keverékek osztályozásáról, címkézéséről és csomagolásáról szóló 1272/2008/EK rendelet [19] (CLP-rendelet) (1. kategória), valamint az USA Környezetvédelmi Ügynöksége (EPA) (I. kategória) határozta meg (1) (2).
Currently, the only in vitro ARE-Nrf2 luciferase assay covered by this test method is the KeratinoSensTM assay for which validation studies have been completed (9) (12) (13) followed by an independent peer review conducted by the European Union Reference Laboratory for Alternatives to Animal Testing (EURL ECVAM) (14).
E vizsgálati módszer alkalmazásában a súlyos szemirritációt okozó anyagok olyan vegyi anyagok, amelyek a vizsgálati vegyi anyag beadását követően 21 napon belül vissza nem fordítható szövetkárosodást okoznak a szemben, vagy amelyek a látás súlyos fizikai romlását okozzák, míg a szemkorróziót okozó anyagok olyan vegyi anyagok, amelyek visszafordíthatatlan szövetkárosodást okoznak a szemben.