natgillin/translations-raw huggingface dataset:
After 10 days the eggs are carefully collected with a needle and spatula and moved to “egg-paper” (small pieces of filter paper dipped in plaster of Paris/charcoal slurry) which is placed in a container with fresh plaster/charcoal substrate.
E kiegyensúlyozódási idő elteltével meg kell mérni a vizsgált vegyi anyag koncentrációját a fedővízben, a pórusvízben és az üledékben, legalább a vegyi anyag legnagyobb és egy alacsonyabb koncentrációja esetében (lásd a 38. pontot).
A few grains of yeast are added to the substrate to attract the juveniles and make them leave the egg-paper.
Ezek a vizsgált vegyi anyagra vonatkozó analitikai meghatározások lehetővé teszik a tömegegyensúly kiszámítását és az eredmények mért koncentrációk alapján történő kifejezését.
It is important that the egg-paper and substrate are humid, or the eggs will dehydrate.
A vizsgálati edényeket le kell fedni (például üveglappal).
As an alternative, adult animals may be removed from the synchronisation culture boxes after producing eggs for 2 or 3 days.
Az eredeti vízszint fenntartása érdekében a vizsgálat során elpárolgott vizet szükség esetén pótolni lehet.
After three days most of the eggs on the egg-paper will have hatched, and some juveniles may be found under the egg-paper.
A sófelhalmozódás elkerülése érdekében desztillált vagy ioncserélt vizet kell használni.
To have evenly aged juveniles, the egg-paper with un-hatched eggs is removed from the Petri dish with forceps.
A tenyésztőketrecekben található kristályosító csészék nincsenek lefedve, és nem szükséges (de lehet) pótolni bennük a vizsgálati időszak alatt bekövetkezett vízveszteséget, mivel a petecsomók mindössze körülbelül egy napig érintkeznek a vízzel, és a csészéket a vizsgálatnak csak egy rövid szakaszában használjuk.
The juveniles, now 0-3 days, stay in the dish and are fed baker's yeast.
A vizsgálathoz használt organizmusok hozzáadása
Un-hatched eggs are discharged.
A petecsomókat négy-öt nappal az első fejlődési stádiumban lévő 1. generációs lárvák hozzáadása előtt ki kell venni a tenyészetből, és kis edényekben előkészített tenyésztőközegbe kell helyezni.
Eggs and hatched juveniles are cultured in the same manner as the adults.
A törzstenyészetből vett vagy frissen készített tenyésztőközeg egyaránt használható.
In particular for F. fimetaria the following measures should be taken:
Minden esetben kis mennyiségű táplálékot (például finomra őrölt pelyhesített haleledel leszűrt szuszpenziójának néhány cseppjét) kell hozzáadni a tenyésztőközeghez (lásd a 2. függeléket).
ensuring sufficient fresh food, old moulding food is removed, after 1 week the juveniles are divided into new Petri dishes provided that the density is above 200.
Csak a frissen lerakott petecsomókat szabad használni.
Handling collembolans at test initiation
A lárvák rendszerint a peterakást követő egy-két napon belül kezdenek kikelni (a C. riparius esetében 20 °C-on 2–3 napon belül, míg a C. dilutus esetében 23 °C-on, illetve a C. yoshimatsui esetében 25 °C-on 1–4 napon belül), és fejlődésük négy lárvastádiumban következik be, amelyek mindegyike 4–8 nap időtartamú.
9-12 days old F. candida or the 23-26 days old F. fimetaria are collected, e.g. by suction, and released into a small container with moist plaster/charcoal substrate and their physical condition is checked under the binocular (injured and damaged animals are disposed).
A vizsgálatban első fejlődési stádiumban lévő (a kikelés utáni maximum 48 órás korú) lárvákat kell használni.
Static electricity should be neutralised, otherwise the animals may just fly into the air, or stick to the side of the test container and dry out.
A víz levegőztetését a lárvák vizsgálati edényekhez történő hozzáadása közben szüneteltetjük, és nem is indítjuk újra az ezt követő 24 órában (lásd a 32. pontot).
An ioniser or a moist cloth below the container may be used for neutralisation.
Az alkalmazott vizsgálati tervtől függően (lásd a 19. és 20. pontot) a koncentrációnként felhasznált lárvák száma legalább 120 (koncentrációnként 6 ismétlés) az ECx értékének pontosítása esetében és 160 (koncentrációnként 8 ismétlés) a NOEC értékének pontosítása esetében.
The food should be spread all over the soil surface and not just in one lump.
A szennyezett üledékes forgatókönyvben az expozíció a lárvák hozzáadásával kezdődik.
During transportation and during the testing period it should be avoided to knock or otherwise physically disturb the test containers, as this may increase the compaction of the soil, and hamper the interaction between the collembolans.
A fedővíz szennyezése
A number of prerequisites should be fulfilled in advance before using alternative species:
Ezt követően a fedővizet megkeverjük, ügyelve arra, hogy az üledék ne kavarodjon fel.
They should be unequivocally identified;
A szennyezett vizes vizsgálati tervben az expozíció a víz szennyezésével kezdődik (azaz egy nappal a lárvák hozzáadása után).
The rationale for the selection of the species should be given;
A kikelt, kifejlett példányok összegyűjtése
It should be ensured that the reproductive biology is included in the testing phase so it will be a potential target during the exposure;
A kikelt 1. generációs szúnyogokat a vizsgálati edényekből naponta legalább egyszer, de inkább kétszer gyűjtjük össze (lásd a 36. pontot) aspirátorral, szippantóval vagy hasonló eszközzel (lásd az 5. függeléket).
The life-history should be known:
Különös gondot kell fordítani arra, hogy a felnőtt egyedek ne sérüljenek meg.
age at maturation, duration of egg development, and instars subject to exposure;
Az egy kezeléshez tartozó négy vizsgálati edényből összegyűjtött szúnyogok abba a tenyésztőketrecbe kerülnek, amelyhez korábban hozzárendeltük őket.
Optimal conditions for growth and reproduction should be provided by the test substrate and food supply;
Az első (hím) egyed kikelésének napján a kristályosító csészéket beszennyezzük a vizsgált vegyi anyag kis mennyiségű törzsoldatával, amelyet pipettával a vízfelszín alá juttatunk (szennyezett vizes vizsgálati terv).
Variability should be sufficiently low for precise and accurate toxicity estimation.
A vizsgált vegyi anyag koncentrációja a kristályosító csészében névlegesen megegyezik az adott tenyésztőketrechez rendelt kezelési edényekben lévő koncentrációval.
Extraction and counting of animals
A szennyezett üledékes vizsgálati terv esetében a kristályosító csészéket körülbelül 11 nappal az expozíció kezdete (azaz az 1. generációs lárvák hozzáadása) után készítjük el, hogy körülbelül 48 óra kiegyensúlyozódási idő telhessen el az első petecsomók lerakása előtt.
Two methods of extraction can be performed.
A petecsomókat csipesszel vagy tompa pipettával gyűjtjük be a tenyésztőketrecben lévő kristályosító csészéből.
First method:
A petecsomókat egy olyan edénybe helyezzük, amely abból a kristályosító csészéből származó tenyésztőközeget tartalmaz, amelyikből az adott petecsomót gyűjtöttük (pl. egy lyuk a 12-lyukú mikrotiterlemezen legalább 2,5 ml közeggel).
A controlled temperature gradient extractor based on principles by MacFadyen can be used (1).
A petecsomókat tartalmazó edényt lefedjük, hogy megakadályozzuk a jelentős mértékű párolgást.
The heat coming from a heating element at the top of the extraction box (regulated through a thermistor placed on the surface of the soil sample).
A petecsomókat a lerakásuk után legalább hat napig megfigyelés alatt tartjuk annak megállapítására, hogy termékenynek vagy terméketlennek minősülnek-e.
The temperature in the cooled liquid surrounding the collecting vessel is regulated through a thermistor situated at the surface of the collection box (placed below the soil core).
A 2. generációhoz legalább három, de lehetőleg hat termékeny petecsomót választunk ki az egyes tenyésztőketrecekből, és bizonyos mennyiségű táplálékot biztosítva hagyjuk őket kikelni.
The thermistors are connected to a programmable controlling unit which raises the temperature according to a pre-programmed schedule.
Ezeknek a petecsomóknak a peterakás csúcsán lerakott petecsomók közül kell származniuk, amely a kontrollok esetében rendszerint körülbelül a vizsgálat 19. napjára esik.
Animals are collected in the cooled collecting box (2 °C) with a bottom layer of plaster of Paris/charcoal.
Ideális esetben ugyanazon a napon kezdjük az összes kezelés 2. generációjának vizsgálatát, de a lárvák fejlődésére gyakorolt – a vegyi anyaggal összefüggő – hatások miatt ez nem mindig lehetséges.
Extraction is started at 25 °C and the temperature is increased automatically every 12 h by 5 °C and has a total duration of 48 hours.
Ilyen esetben a magasabb koncentrációkkal való vizsgálat később kezdhető, mint az alacsonyabb koncentrációjú kezelések és a (oldószeres) kontroll.
After the experimental incubation period the number of juvenile Collembola present is assessed by flotation.
Pipettával kis mennyiségeket juttatunk a vizsgált vegyi anyag oldatából a vízfelszín alá.
For that purpose the test is performed in the vessels of approximately 250 ml volume.
A szennyezést követően enyhe levegőztetést biztosítunk.
At the end of the test approx.
b.
200 ml of distilled water are added.
A szennyezett üledékes vizsgálati terv esetében a 2. generáció üledék-víz rendszerét befogadó expozíciós edényeket az 1. generációval megegyező módon készítjük el.
The soil is gently agitated with a fine paintbrush to allow Collembola to float to the water surface.
Tompa pipettával 20–20 darab első stádiumban lévő (a kikelés utáni maximum 48 órás korú) 2. generációs lárvát helyezünk el véletlenszerűen a szennyezett üledék-víz rendszert tartalmazó vizsgálati edényekbe.
A small amount, approx.
A víz levegőztetését a lárvák vizsgálati edényekhez történő hozzáadása közben szüneteltetjük, és nem is indítjuk újra az ezt követő 24 órában.
0,5 ml, of black Kentmere photographic dye may be added to the water to aid counting by increasing the contrast between the water and the white Collembola.
Az alkalmazott vizsgálati tervtől függően (lásd a 19. és 20. pontot) a koncentrációnként felhasznált lárvák száma legalább 120 (koncentrációnként 6 ismétlés) az ECx értékének pontosítása esetében és 160 (koncentrációnként 8 ismétlés) a NOEC értékének pontosítása esetében.
The dye is not toxic to Collembola.
A vizsgálati edényekben a lárvákat lehetőleg naponta vagy legalább hetente háromszor meg kell etetni.
Counting:
Napi 0,25–0,5 mg (0,35–0,5 mg a C. yoshimatsui esetében) haleledel (vizes szuszpenzió vagy finomra őrölt eledel, pl. Tetra-Min vagy Tetra-Phyll; a részleteket lásd a 2. függelékben) lárvánként megfelelő mennyiségű táplálék a fiatal lárvák számára fejlődésük első 10 napjában.
Counts of numbers may be carried out by eye or under a light microscope using a grid placed over the floatation vessel or by photographing the surface of each vessel and later counting the Collembola on enlarged prints or projected slides.
Valamivel több táplálékra lehet szükség az idősebb lárvák esetében:
Counts may also be performed using digital image processing techniques (12).
lárvánként napi 0,5–1,0 mg mennyiségnek elegendőnek kell lennie a vizsgálat hátralévő részében.
All techniques should be validated.
Gombaképződés vagy a lárvák pusztulása esetén a táplálékadagot valamennyi kísérleti és kontrolledényben csökkenteni kell.
Determination of the maximum WHC of the soil
Ha a gombák szaporodása nem állítható meg, akkor a vizsgálatot meg kell ismételni.
The following method for determining the maximum water holding capacity (WHC) of the soil has been found to be appropriate.
A lenyeléssel történő expozíció toxikológiai jelentősége általában nagyobb a szerves szénnel nagy affinitást mutató vegyi anyagok és az üledékhez kovalensen kötődő vegyi anyagok esetében.
It is described in Annex C of ISO DIS 11268-2 (Soil Quality — Effects of pollutants on earthworms (Eisenia fetida).
Ezért az ilyen tulajdonságokkal rendelkező vegyi anyagok vizsgálatakor a lárvák túléléséhez és természetes növekedéséhez szükséges táplálékmennyiség – a szabályozási követelménytől függően – a stabilizációs időszak előtt is hozzáadható a formulázott üledékhez.
Part 2: Determination of effects on reproduction).
A vízminőség romlásának megelőzése érdekében haleledel helyett növényi anyagot kell használni, például 0,5 % (száraz tömeg) finomra őrölt nagy csalán (Urtica dioica), fehér eperfa (Morus alba), fehér here (Trifolium repens) vagy paraj- (Spinacia oleracea) levelet vagy más növényi anyagot (Cerophyl-t vagy alfa-cellulózt).
Cover the bottom of the tube with a wet piece of filter paper and then place it on a rack in a water bath.
A teljes organikus forrásból származó táplálékadag szennyezés előtti hozzáadása az üledékhez – a vízminőséget és a biológiai teljesítőképességet tekintetbe véve – nem triviális eljárás (21) és nem is szabványosított módszer, de a legújabb vizsgálatok azt mutatják, hogy működik (19) (26).
The water holding capacity (WHC) should be calculated as follows:
A tenyésztőketrecben elhelyezett felnőtt szúnyogoknak alapesetben nincs szükségük táplálékra, de a fertilitás és a termékenység növekszik, ha a kikelt felnőtt egyedeknek telített szacharóz oldatba áztatott vattát biztosítunk táplálékforrásként (34).
Soil Quality — Determination of pH.
A vizsgálati edényekben 24 órával mindkét generáció első stádiumú lárváinak hozzáadása után biztosítjuk a fedővíz enyhe levegőztetését, és a levegőztetést a vizsgálat végéig folytatjuk (ügyelni kell arra, hogy az oldott oxigén koncentrációja ne essen az ASV 60 %-a alá).
C.40.
A levegőztetést üveg Pasteur-pipettával oldjuk meg, amelynek kimenetét 2–3 cm-rel az üledékréteg felett rögzítjük, és amely néhány buborékot bocsát ki másodpercenként.
SEDIMENT-WATER CHIRONOMID LIFE-CYCLE TOXICITY TEST USING SPIKED WATER OR SPIKED SEDIMENT
Illékony vegyi anyagok vizsgálatakor meg kell fontolni az üledék-víz rendszer levegőztetésének elhagyását, ugyanakkor azonban teljesítsük az ASV minimum 60 %-ára vonatkozó érvényességi kritériumot (10. pont).
This test method is equivalent to OECD Testing Guideline (TG) 233 (2010).
További útmutatás a (16) szakirodalomban olvasható.
It is designed to assess the effects of life-long exposure of chemicals on the freshwater dipteran Chironomus sp., fully covering the 1st generation (P generation) and the early part of the 2nd generation (F1 generation).
A C. riparius vizsgálatát 20 °C (± 2 °C) állandó hőmérsékleten kell végezni.
It is an extension of the existing test methods C.28 (1) or C.27 (15) using a spiked-water exposure scenario or a spiked sediment scenario, respectively.
C. dilutus használata esetén az ajánlott hőmérséklet 23 °C, C. yoshimatui esetén pedig 25 °C (± 2 °C).
It takes into account existing toxicity test protocols for Chironomus riparius and Chironomus dilutus (previously named C. tentans (2)) that have been developed in Europe and North America (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) and subsequently ring-tested (1) (7) (10) (11) (12).
16 órás megvilágítási időszakot alkalmazunk, 500–1000 lux fényerővel.
Other well documented chironomid species may also be used, e.g. Chironomus yoshimatsui (13) (14).
A tenyésztőketrecek esetében egyórás hajnali és alkonyati fázist is be lehet iktatni.
The complete exposure duration is ca.
Expozíciós időtartam
44 days for C. riparius and C. yoshimatsui, and –ca.
Szennyezett vizes vizsgálati terv:
100 days for C. dilutus.
Az 1. generáció expozíciós időszaka akkor kezdődik, amikor a vizsgálati edényekben lévő fedővizet beszennyezzük a vizsgált vegyi anyaggal (ami egy nappal a lárvák elhelyezése után történik – az expozíciós terv esetleges módosításával kapcsolatban lásd a 7. pontot).
The water exposure scenario, spiking of the water column, is intended to simulate a pesticide spray drift event and covers the initial peak concentration in surface waters.
Az átfedést is figyelembe véve a vizsgálat teljes időtartama kb. 44 nap.
Water spiking is also useful for other types of exposure (including chemical spills), but not for accumulation processes within the sediment lasting longer than the test period.
A C. dilutus esetében az expozíció maximális időtartama az 1. és a 2. generáció esetében 64, illetve 65 nap.
In that case, and also when run-off is the main entry route of pesticides into water bodies, a spiked sediment design may be more appropriate.
A vizsgálat teljes időtartama körülbelül 100 nap.
If other exposure scenarios are of interest, the test design may be readily adapted.
Szennyezett üledékes vizsgálati terv:
For example, if the distribution of the test chemical between the water phase and the sediment layer is not of interest and adsorption to the sediment has to be minimised, the use of surrogate artificial sediment (e.g. quartz sand) may be considered.
az expozíció a lárvák hozzáadásával kezdődik, és az időtartama maximum 28 nap a C. riparius és a C. yoshimatsui mindkét generációja esetében, illetve legfeljebb 65 nap a C. dilutus mindkét generációja esetében.
Chemicals that require testing of sediment-dwelling organisms may persist in sediment over long periods.
Kikelés
Sediment-dwelling organisms may be exposed via a number of routes.
Mindkét generáció esetében meghatározzuk a fejlődési időt és a kifejlett, élő hím és nőstény szúnyogok teljes számát.
The relative importance of each exposure route, and the time taken for each to contribute to the overall toxic effect, is dependent on the physical-chemical properties of the chemical.
A hímek könnyen azonosíthatók tollas antennájuk és vékony testalkatuk alapján.
For strongly adsorbing chemicals or for chemicals covalently binding to sediment, ingestion of contaminated food may be a significant exposure route.
A vizsgálati edényeket mindkét generáció esetében legalább hetente háromszor meg kell figyelni a lárvák kontrollal összehasonlítva mutatott abnormális viselkedésének (pl. üledék elhagyása, szokatlan úszómozgás) szemrevételezéses ellenőrzése céljából.
In order not to underestimate the toxicity of highly lipophilic chemicals, the use of food added to the sediment before application of the test chemical may be considered (see paragraph 31).
A kikelési időszak alatt – amely kb. 12 nappal a C. riparius és C. yoshimatsui (illetve 20 nappal a C. dilutus) lárvák edénybe helyezése után kezdődik – a kikelt szúnyogokat naponta legalább egyszer, de inkább kétszer (kora reggel és késő délután) megszámoljuk, és megállapítjuk az ivarukat.
Therefore, it is possible to include all routes of exposure and all life stages.
Azonosítás után az 1. generációba tartozó szúnyogokat óvatosan eltávolítjuk az edényekből, és áthelyezzük egy tenyésztőketrecbe.
Measured endpoints are the total number of adults emerged (for both 1st and 2nd generations), development rate (for both 1st and 2nd generations), sex ratio of fully emerged and alive adults (for both 1st and 2nd generations), number of egg ropes per female (1st generation only) and fertility of the egg ropes (1st generation only).
A 2. generációs szúnyogokat azonosítás után eltávolítjuk és elpusztítjuk.
Formulated sediment is strongly recommended.
A vizsgálati edényekben lerakott 1. generációs petecsomókat külön-külön kell összegyűjteni, és legalább 2,5 ml eredeti közegükből származó vízzel együtt 12-lyukú mikrotiterlemezre (vagy más alkalmas edénybe) kell áthelyezni, amelyet a jelentős mértékű párolgás megelőzése érdekében fedéllel kell lefedni.
Formulated sediment has several advantages over natural sediments:
Az elhullott lárvák és a látható, ki nem kelt bábok számát is fel kell jegyezni.
experimental variability is reduced because it forms a reproducible “standardised matrix” and the need to source uncontaminated clean sediment is eliminated;
A tenyésztőketrec, a vizsgálati edény és a szippantó szemléltetése az 5. függelékben található.
tests can be initiated at any time without encountering seasonal variability in the test sediment and there is no need to pre-treat the sediment to remove indigenous fauna;
Szaporodás
reduced cost compared to field collection of sufficient quantities required for routine testing;
A szaporodásra kifejtett hatást az 1. generációs szúnyogok által lerakott petecsomók száma és termékenysége alapján értékeljük.
formulated sediment allows for comparisons of toxicity across studies and ranking chemicals accordingly (3).
A petecsomókat naponta egyszer gyűjtjük össze az egyes tenyésztőtartályokba helyezett kristályosító csészékből.
First instar chironomid larvae are exposed to a concentration range of the test chemical in a sediment-water system.
A petecsomókat legalább 2,5 ml eredeti közegükből származó vízzel együtt kell begyűjteni és áthelyezni egy 12-lyukú mikrotiterlemezre (egy petecsomót minden lyukba) vagy más alkalmas edénybe, amelyet a jelentős mértékű párolgás megelőzése érdekében fedéllel kell lefedni.
The test starts by placing first instar larvae (1st generation) into test beakers containing spiked sediment or alternately the test chemical is spiked into the water after addition of the larvae.
Az egyes petecsomók esetében az alábbi jellemzőket dokumentáljuk:
Chironomid emergence, time to emergence and sex ratio of the fully emerged and alive midges are assessed.
a lerakás napja, méret (normál, azaz 1,0 ± 0,3 cm vagy kisebb; jellemzően ≤ 0,5 cm), szerkezet (normál, azaz banán alakú, spirális petelánccal vagy abnormális, pl. nem spirális petelánc) és termékenység (termékeny vagy terméketlen).
Emerged adults are transferred to breeding cages, to facilitate swarming, mating and oviposition.
A lerakást követő hat nap során értékeljük a petecsomó termékenységét.
The number of egg ropes produced and their fertility are assessed.
A petecsomót termékenynek tekintjük, ha a peték legalább egyharmada kikel.
From these egg ropes, first instar larvae of the 2nd generation are obtained.
A nőstényenként lerakott petecsomók és a nőstényenkénti termékeny petecsomók számának kiszámításához a tenyésztőketrechez adott összes nőstény számát használjuk.
These larvae are placed into freshly prepared test beakers (spiking procedure as for the 1st generation) to determine the viability of the 2nd generation through an assessment of their emergence, time to emergence and the sex ratio of the fully emerged and alive midges (a schematic presentation of the life-cycle test is provided in Appendix 5).
A petecsomóban lévő peték számát szükség esetén roncsolásmentesen is meg lehet becsülni a gyűrűszámlálási módszer segítségével (részletek a 32. és 33. pontban).
All data are analysed either by a regression model to estimate the concentration that would cause X % reduction in the relevant endpoint, or by using hypothesis testing to determine a No Observed Effect Concentration (NOEC).
Analitikai mérések
The latter requires a comparison of treatment responses with the appropriate control responses using statistical tests.
A vizsgált vegyi anyag koncentrációja
It should be noted that in the spiked water scenario, in case of fast degrading chemicals, the later life stages of each generation (e.g. pupal phase) might be exposed to a considerably lower concentration level in the overlying water than the 1st instar larvae.
A fedővíz, a pórusvíz és az üledék legnagyobb és egy kisebb koncentrációnál vett mintáit legalább az expozíció kezdetén (szennyezett víz esetében lehetőleg egy órával a szennyezést követően) és végén analizáljuk.
If this is a concern, and a comparable exposure level for each life stage is needed, the following amendments of the test method might be considered:
Ezt mindkét generáció edényei esetében el kell végezni.
parallel runs with spiking at different life stages, or
A tenyésztőketrecekben lévő kristályosító csészékből csak a fedővizet elemezzük, mivel a petecsomók ezzel kerülnek érintkezésbe (a szennyezett üledékes vizsgálati terv esetében meg lehet fontolni az üledékkoncentráció analitikus módszerrel való megerősítését).
repeated spiking (or overlying water renewal) of the test system during both test phases (1st and 2nd generation), whereby the spiking (renewal) intervals should be adjusted to the fate characteristics of the test chemical.
Ha szükségesnek ítéljük, a vizsgálat alatt további méréseket lehet végezni az üledékkel, a pórusvízzel vagy a fedővízzel.
Such amendments are only feasible in the spiked water scenario, but not in the sediment spiked scenario.
A vizsgált vegyi anyag koncentrációjának meghatározása tájékoztatást nyújt a vizsgált vegyi anyag viselkedéséről/megoszlásáról a víz-üledék rendszerben.