natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Following a 48-hour settling-in period, mortalities are recorded and the following criteria applied:
Ha a laboratórium korábban még nem végezte a vizsgálatot vagy jelentős változások történtek (pl. a haltörzsben vagy a szállítóban), célszerű lefolytatni egy technikai jártassági vizsgálatot.
mortalities of greater than 10 % of population in seven days:
Olyan vegyi anyagokat javasolt használni, amelyek különböző hatásmechanizmussal rendelkeznek vagy több vizsgálati végpontra is hatással vannak.
reject the entire batch;
A gyakorlatban a laboratóriumokat arra ösztönzik, hogy építsenek fel saját adatbázist a hímekre és a nőstényekre vonatkozó korábbi kontrolladatokból úgy, hogy pozitív kontrollvizsgálatot végeznek egy ösztrogénhatású vegyi anyaggal (pl. 17β-ösztradiol 100 μg/l koncentrációban, vagy egy ismert gyenge agonista), amely megnöveli a VTG szintjét a hím halakban, továbbá pozitív kontrollvizsgálatot végeznek egy aromatázgátló vegyi anyaggal (pl. fadrozol vagy prokloraz 300 μg/l koncentrációban), amely csökkenti a VTG szintjét a nőstény halakban, és pozitív kontrollvizsgálatot végeznek egy androgénhatású vegyi anyaggal (pl. 17β-trenbolon 5 μg/l koncentrációban), amely a másodlagos nemi jellegek megjelenését eredményezi a nőstény amerikai csellében és a fogaspontyban.
mortalities of between 5 % and 10 % of population:
Ezeket az adatokat a laboratórium jártasságának igazolása céljából össze lehet hasonlítani a validációs vizsgálatokból (1, 2, 3) származó adatokkal.
acclimation for seven additional days;
A vitellogeninméréseket általában akkor kell pozitívnak tekinteni, ha – legalább a legmagasabb vizsgált dózisban – a VTG statisztikailag szignifikáns növekedése (p < 0,05) figyelhető meg a hímeknél vagy statisztikailag szignifikáns csökkenése (p < 0,05) figyelhető meg a nőstényeknél a kontrollcsoporttal összehasonlítva, általános toxicitásra utaló jelek nélkül.
if more than 5 % mortality during second seven days, reject the entire batch;
A pozitív eredményt még inkább alátámaszthatja a dózis és a hatásgörbe közötti biológiai szempontból hihető kapcsolat.
mortalities of less than 5 % of population in seven days:
Mint korábban említettük, a vitellogenin csökkenése nem feltétlenül teljesen endokrin eredetű;
accept the batch
a pozitív eredményt azonban általában az in vivo endokrin hatás bizonyítékaként kell értelmezni, és rendszerint az eredmény tisztázása érdekében tett további intézkedések követik.
Fish should not receive treatment for disease during the acclimation period, in the pre-exposure period, or during the exposure period.
Vitellogenin induction by 17ß-estradiol and 17ß-ethinylestradiol in male zebrafish (Danio rerio).
Pre-exposure and selection of fish
Screening and testing for endocrine disruption in fish-biomarkers as »signposts«, not »traffic lights«, in risk assessment.
A one-week pre-exposure period is recommended, with animals placed in vessels similar to the actual test.
Effects of waterborne exposure to 17B-estradiol on secondary sex characteristics and gonads of the fathead minnow (Pimephales promelas).
Fish should be fed ad libitum throughout the holding period and during the exposure phase.
RÖVIDÍTÉSEK ÉS FOGALOMMEGHATÁROZÁSOK
The exposure phase is started with sexually dimorphic adult fish from a laboratory supply of reproductively mature animals (e.g. with clear secondary sexual characteristics visible as far as fathead minnow and medaka are concerned), and actively spawning.
Vegyi anyag
For general guidance only (and not to be considered in isolation from observing the actual reproductive status of a given batch of fish), fathead minnows should be approximately 20 (± 2) weeks of age, assuming they have been cultured at 25 ± 2 °C throughout their lifespan.
anyag vagy keverék.
Japanese medaka should be approximately 16 (± 2) weeks of age, assuming they have been cultured at 25 ± 2 °C throughout their lifespan.
relatív szórás.
TEST DESIGN
Betelepítési arány
Three concentrations of the test chemical, one control (water) and, if needed, one solvent control are used.
a halak nedvesen mért tömege egységnyi mennyiségű vízben.
The data may be analysed in order to determine statistically significant differences between treatment and control responses.
Betelepítési egyedsűrűség
These analyses will inform whether further longer term testing for adverse effects (namely, survival, development, growth and reproduction) is required for the chemical, rather than for use in risk assessment (24).
a halak száma egységnyi mennyiségű vízben.
For zebrafish and medaka, on day 21 of the experiment, males and females from each treatment level (5 males and 5 females in each of the two replicates) and from the control(s) are sampled for the measurement of vitellogenin and secondary sex characteristics, where applicable.
az ikra sárgájában található foszfo-, lipo- és glikoproteinek prekurzora, amely alapesetben az ikrarakó fajok szexuálisan aktív nőstényeiben fordul elő.
For fathead minnow, on day 21 of exposure, males and females (2 males and 4 females in each of the four replicates) and from the control(s) are sampled for the measurement of vitellogenin and secondary sex characteristics.
HPG-tengely
For the purposes of this test, the highest test concentration should be set by the maximum tolerated concentration (MTC) determined from a range finder or from other toxicity data, or 10 mg/l, or the maximum solubility in water, whichever is lowest.
hypothalamusz-hipofízis-gonád tengely.
The MTC is defined as the highest test concentration of the chemical which results in less than 10 % mortality.
legnagyobb elviselhető koncentráció, amely az LC50 körülbelül 10 %-a.
Using this approach assumes that there are existing empirical acute toxicity data or other toxicity data from which the MTC can be estimated.
A halakban végzett endokrin szűrővizsgálat kísérleti körülményei
Estimating the MTC can be inexact and typically requires some professional judgment.
Ajánlott fajok
Three test concentrations, spaced by a constant factor not exceeding 10, and a dilution-water control (and solvent control if necessary) are required.
Amerikai cselle
A range of spacing factors between 3,2 and 10 is recommended.
Zebradánió
Selection and weighing of test fish
A vizsgálat típusa
It is important to minimise variation in weight of the fish at the beginning of the assay.
Átfolyásos
Suitable size ranges for the different species recommended for use in this test are given in Appendix 2.
Vízhőmérséklet
For the whole batch of fish used in the test, the range in individual weights for male and female fish at the start of the test should be kept, if possible, within ± 20 % of the arithmetic mean weight of the same sex.
Megvilágítás minősége
It is recommended to weigh a subsample of the fish stock before the test in order to estimate the mean weight.
Fluoreszcens izzók (széles spektrum)
Conditions of exposure
10–20 μE/m2/s, 540–1000 lux vagy 50–100 ft-c (környezeti laboratóriumi szintek)
The test duration is 21 days, following a pre-exposure period.
Megvilágítási időszak (hajnali/alkonyati átmeneti időszakok is alkalmazhatók, de nem feltétlenül szükségesek)
The recommended pre-exposure period is one week.
16 óra világos, 8 óra sötét
Fish should be fed ad libitum with an appropriate food (Appendix 2) at a sufficient rate to maintain body condition.
12–16 óra fény, 12–8 óra sötét
Care should be taken to avoid microbial growth and water turbidity.
< 5 g/l
As a general guidance, the daily ration may be divided into two or three equal portions for multiple feeds per day, separated by at least three hours between each feed.
Vizsgálati kamra mérete
A single larger ration is acceptable particularly for weekends.
Vizsgálati oldat térfogata
Food should be withheld from the fish for 12 hours prior to sampling/necropsy.
1,5 l (minimum)
Fish food should be evaluated for the presence of contaminants such as organochlorine pesticides, polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), polychlorinated biphenyls (PCBs).
Vizsgálati oldatok térfogatának cseréje
Food with an elevated level of phytoestrogens that would compromise the response of the assay to known oestrogen agonist (e.g. 17-beta estradiol) should be avoided.
Vizsgálati oldatok térfogatának cseréje
Uneaten food and faecal material should be removed from the test vessels at least twice weekly, e.g. by carefully cleaning the bottom of each tank using a siphon.
Naponta legalább 5x
The photoperiod and water temperature should be appropriate for the test species (see Appendix 2).
Lásd a 20. pontot.
Frequency of analytical determinations and measurements
Hímek:
Prior to initiation of the exposure period, proper function of the chemical delivery system should be ensured.
Nőstények:
All analytical methods needed should be established, including sufficient knowledge on the chemical stability in the test system.
Halak száma vizsgálati edényenként
During the test, the concentrations of the test chemical are determined at regular intervals, as follows:
10 (5 hím és 5 nőstény) 10 (5 hím és 5 nőstény)
the flow rates of diluent and toxicant stock solution should be checked preferably daily but as a minimum twice per week, and should not vary by more than 10 % throughout the test.
Kezelések száma
It is recommended that the actual test chemical concentrations be measured in all vessels at the start of the test and at weekly intervals thereafter.
= 3 (plusz megfelelő kontrollok)
It is recommended that results be based on measured concentrations.
Edények száma kezelésenként
However, if concentration of the test chemical in solution has been satisfactorily maintained within ± 20 % of the nominal concentration throughout the test, then the results can either be based on nominal or measured values.
Minimum 4
Samples may need to be filtered (e.g., using a 0,45 μm pore size) or centrifuged.
Minimum 2
If needed, then centrifugation is the recommended procedure.
Halak száma vizsgálati koncentrációnként
However, if the test material does not adsorb to filters, filtration may also be acceptable.
10 felnőtt nőstény és 10 hím (5 nőstény és 5 hím minden ismétlésben) 10 felnőtt nőstény és 10 hím (5 nőstény és 5 hím minden ismétlésben)
During the test, dissolved oxygen, temperature, and pH should be measured in all test vessels at least once per week.
Etetési rend
Total hardness and alkalinity should be measured in the controls and one vessel at the highest concentration at least once per week.
Naponta két-három alkalommal (ad libitum) élő vagy fagyasztott felnőtt vagy sós nauplius rák, kereskedelmi forgalomban kapható eledel vagy ezek kombinációja
Temperature should preferably be monitored continuously in at least one test vessel.
Naponta két-három alkalommal (ad libitum) sós nauplius rák, kereskedelmi forgalomban kapható eledel vagy ezek kombinációja
A number of general (e.g. survival) and core biological responses (e.g. vitellogenin levels) are assessed over the course of the assay or at termination of the assay.
Nincs, kivéve ha a DO-koncentráció a 60 %-os levegőtelítettség alá esik
Measurement and evaluation of these endpoints and their utility are described below.
Tiszta felszíni víz, kútvíz, mesterséges víz vagy klórmentesített csapvíz
Survival
Expozíciót előkészítő időszak
Fish should be examined daily during the test period and any mortality should be recorded and the dead fish removed as soon as possible.
7 nap ajánlott
Dead fish should not be replaced in either the control or treatment vessels.
Vizsgált vegyi anyaggal történő expozíció időtartama
Sex of fish that die during the test should be determined by macroscopic evaluation of the gonads.
Biológiai végpontok
Behaviour and appearance
túlélési arány
Any abnormal behaviour (relative to controls) should be noted;
viselkedés
this might include signs of general toxicity including hyperventilation, uncoordinated swimming, loss of equilibrium, and atypical quiescence or feeding.
másodlagos nemi jellegek
Additionally external abnormalities (such as haemorrhage, discoloration) should be noted.
A vizsgálat elfogadhatósága
Such signs of toxicity should be considered carefully during data interpretation since they may indicate concentrations at which biomarkers of endocrine activity are not reliable.
Az oldott oxigén a telítettség > 60 %-a;
Such behavioural observations may also provide useful qualitative information to inform potential future fish testing requirements.
az átlagos hőmérséklet 25 ± 2 °C;
For example, territorial aggressiveness in normal males or masculinised females has been observed in fathead minnows under androgenic exposure;
a halak 90 %-os túlélési aránya a kontrollokban;
in zebrafish, the characteristic mating and spawning behaviour after the dawn onset of light is reduced or hindered by oestrogenic or anti-androgenic exposure.
a mért vizsgálati koncentrációk a kezelési szintek átlagos mért értékeinek 20 %-os tartományán belül helyezkednek el.
Because some aspects of appearance (primarily colour) can change quickly with handling, it is important that qualitative observations be made prior to removal of animals from the test system.
az átlagos hőmérséklet 24 ± 2 °C;
Experience to date with fathead minnows suggests that some endocrine active chemicals may initially induce changes in the following external characteristics:
az átlagos hőmérséklet 26 ± 2 °C;
body colour (light or dark), coloration patterns (presence of vertical bands), and body shape (head and pectoral region).
Az elfogadható minőségű hígítóvíz néhány fontosabb kémiai tulajdonsága
Therefore observations of physical appearance of the fish should be made over the course of the test, and at conclusion of the study
Összes szerves foszfort tartalmazó növényvédő szer
Humane killing of fish
függelék
At day 21, i.e. at termination of the exposure, the fish should be euthanized with appropriate amounts of Tricaine (Tricaine methane sulfonate, Metacain, MS-222 (CAS 886-86-2), 100-500 mg/l buffered with 300 mg/l NaHCO3 (sodium bicarbonate, CAS 144-55-8) to reduce mucous membrane irritation; blood or tissue is then sampled for vitellogenin determination, as explained in the Vitellogenin section.
Ívási aljzat a zebradánió részére
Observation of secondary sex characteristics
Ívási tálca
Some endocrine active chemicals may induce changes in specialised secondary sex characteristics (number of nuptial tubercles in male fathead minnow, papillary processes in male medaka).
bármilyen, üvegből készült eszköztartó edény, például 22x15x5,5 cm méretű (hosszúság x szélesség x mélység), eltávolítható rozsdamentes acél ráccsal fedve (2 mm-es lyukbőség).
Notably, chemicals with certain modes of action may cause abnormal occurrence of secondary sex characteristic in animals of the opposite sex;
A rácsnak a perem alatti magasságban kell fednie az eszköztartó edény nyílását.
for example, androgen receptor agonists, such as trenbolone, methyltestosterone and dihydrotestosterone, can cause female fathead minnows to develop pronounced nuptial tubercles or female medaka to develop papillary processes (11, 20, 21).
A rácsra ívási aljzatot kell rögzíteni.
It also has been reported that oestrogen receptor agonists can decrease nuptial tubercle numbers and size of the dorsal nape pad in adult males (25, 26).
A közegnek olyan szerkezetet kell biztosítania a halak részére, amelybe beköltözhetnek.
Such gross morphological observations may provide useful qualitative and quantitative information to inform potential future fish testing requirements.
A zöld műanyagból készült mesterséges akváriumnövények például alkalmasak erre a célra (megjegyzés: figyelembe kell venni a vizsgált vegyi anyagnak a műanyaghoz való lehetséges adszorpcióját).
The number and size of nuptial tubercles in fathead minnow and papillary processes in medaka can be quantified directly or more practically in preserved specimens.
A műanyagot elegendő ideig megfelelő mennyiségű meleg vízben kell áztatni, hogy ne bocsásson ki vegyi anyagokat a vizsgálati vízbe.
Recommended procedures for the evaluation of secondary sex characteristics in fathead minnow and medaka are available from Appendix 5A and Appendix 5B, respectively.
Ha üvegből készült anyagokat használunk, biztosítani kell, hogy a halak intenzív mozgásuk során ne sérüljenek meg vagy szoruljanak be.
Vitellogenin (VTG)
A tálca és az üvegfalak közötti távolság legalább 3 cm legyen, hogy az ívás ne történhessen a tálcán kívül.
Blood is collected from the caudal artery/vein with a heparinised microhematocrit capillary tubule, or alternatively by cardiac puncture with a syringe.
A tálcára lerakott ikrák átesnek a rácson, és 45–60 perccel a megvilágítás kezdete után mintát lehet venni belőlük.
Depending upon the size of the fish, collectable blood volumes generally range from 5 to 60 μl per individual for fathead minnows and 5-15 μl per individual for zebrafish.
Az átlátszó ikrák nem tapadnak, és keresztirányú fény segítségével könnyen meg lehet számolni őket.
Plasma is separated from the blood via centrifugation, and stored with protease inhibitors at – 80 °C, until analysed for vitellogenin.
Ha öt nőstényt használunk edényenként, a legfeljebb 20 ikra/nap mennyiség alacsonynak, a legfeljebb 100 ikra/nap mennyiség közepesnek, a több mint 100 ikra/nap mennyiség pedig magasnak számít.
Alternatively, in medaka the liver will be used, and in zebrafish the head/tail homogenate can be used as tissue-source for vitellogenin determination (Appendix 6).
Az ívási tálcát – a lehető legkésőbbi esti időpontban vagy kora reggel – el kell távolítani, az ikrákat össze kell gyűjteni, majd az ívási tálcát újra be kell helyezni a vizsgálati edénybe.
The measurement of VTG should be based upon a validated homologous ELISA method, using homologous VTG standard and homologous antibodies.
Az újrabehelyezésig eltelt idő nem haladhatja meg az egy órát, különben az ívási aljzat hatása szokatlan időben jelentkező egyedi párzást és ívást válthat ki.
It is recommended to use a method capable to detect VTG levels as low as few ng/ml plasma (or ng/mg tissue), which is the background level in unexposed male fish.
Ha valamilyen körülmény az ívási tálca későbbi behelyezését teszi szükségessé, ezt legalább 9 órával a megvilágítás kezdete után kell megtenni.
Quality control of vitellogenin analysis will be accomplished through the use of standards, blanks and at least duplicate analyses.
E késői napszakban a tálca behelyezése már nem vált ki ívást.
For each ELISA method, a test for matrix effect (effect of sample dilution) should be run to determine the minimum sample dilution factor.
függelék
Each ELISA plate used for VTG assays should include the following quality control samples:
Ívási aljzat az amerikai cselle részére
at least 6 calibration standards covering the range of expected vitellogenin concentrations, and at least one non-specific binding assay blank (analysed in duplicate).
Két vagy három kombinált műanyag/kerámia/üveg vagy rozsdamentes acél ívási lemezt és tálcát helyezünk mindegyik vizsgálati kamrába (pl. 80 mm hosszú szürke, félkör alakú ereszcsatorna-darab egy 130 mm hosszú peremes tálcára helyezve) (lásd a képet).
Absorbance of these blanks should be less than 5 % of the maximum calibration standard absorbance.
A megfelelően előkészített PVC- vagy kerámialemezek megfelelő ívási aljzatnak bizonyultak (Thorpe és munkatársai, 2007.).
At least two aliquots (well-duplicates) of each sample dilution will be analysed.
A jobb tapadás érdekében ajánlott a lemezeket megcsiszolni.
Well-duplicates that differ by more than 20 % should be re-analysed.
Emellett a tálcát célszerű ráccsal lefedni, hogy megakadályozzuk a halak hozzáférését a lehullott ikrákhoz, kivéve, ha igazoltuk az ikráknak a használt ívási aljzathoz való hatékony tapadását.
The correlation coefficient (R2) for calibration curves should be greater than 0,99.
Az alaplap célja, hogy felfogja azokat az ikrákat, amelyek nem tapadnak meg a lemez felületén és ezért a tartály aljára esnének (vagy azokat az ikrákat, amelyeket a halak közvetlenül a lapos műanyag alaplapra raktak le).
If the nominal concentrations trend away from the calibration regression line (e.g. at lower concentrations), it may be necessary to split the calibration curve into low and high ranges or to use a nonlinear model to adequately fit the absorbance data.
A másodlagos nemi jellegek vizsgálata az amerikai csellében bizonyos endokrin rendszerre ható vegyi anyagok kimutatása céljából
If the curve is split, both line segments should have R2 > 0,99.
Áttekintés
The ratio of the expected concentration to the measured concentration will be reported along with the results from each set of assays performed on that day.
A kontrollnőstényeken, illetve a fiatal hímeken és nőstényeken nem figyelhető meg a tuberkulumok kifejlődése (Jensen és munkatársai, 2001).
Evaluation of Biomarker Responses by Analysis of Variance (ANOVA)
A hímek szeme körül és orrlyukai között akár nyolc egyedi tuberkulum is lehet.
To identify potential endocrine activity of a chemical, responses are compared between treatments and control groups using analysis of variance (ANOVA).
A legtöbb és legnagyobb tuberkulum közvetlenül az orrlyukak alatt és a száj fölött, két párhuzamos vonalban található.
Where a solvent control is used, an appropriate statistical test should be performed between the dilution water and solvent controls for each endpoint.
Számos halban tuberkulumcsoportok helyezkednek el az alsó állkapocs alatt;
Guidance on how to handle dilution water and solvent control data in the subsequent statistical analysis can be found in OECD, 2006c (27).
ezek közül a szájhoz legközelebb elhelyezkedők általában egy különálló párt alkotnak, míg a ventrálisabb csoportok akár négy tuberkulumból is állhatnak.
All biological response data should be analysed and reported separately by sex.
A gyakorlatban a tuberkulumok száma ritkán haladja meg a 30-at (tartomány: 18–28; Jensen és munkatársai, 2001).
If the required assumptions for parametric methods are not met — non-normal distribution (e.g. Shapiro-Wilk's test) or heterogeneous variance (Bartlett's test or Levene's test), consideration should be given to transforming the data to homogenise variances prior to performing the ANOVA, or to carrying out a weighted ANOVA.
A (számuk tekintetében) domináns tuberkulumok különálló, viszonylag kerek képződmények, amelyek magassága körülbelül megegyezik a sugarukkal.
Dunnett's test (parametric) on multiple pair-wise comparisons or a Mann-Whitney with Bonferroni adjustment (non-parametric) may be used for non-monotonous dose-response.
A szaporodásbiológiailag leginkább aktív hímek többségének van legalább néhány olyan tuberkuluma, amely olyan mértékben megnagyobbodott és hangsúlyossá vált, hogy az egyes struktúrákat nem lehet megkülönböztetni.
Other statistical tests may be used (e.g. Jonckheere-Terpstra test or Williams test) if the dose-response is approximately monotone.
A hormonháztartást zavaró anyagok bizonyos típusai egyes másodlagos nemi jellegek rendellenes előfordulását okozhatják a másik nemben;
Additional information can also be obtained from the OECD Document on Current Approaches to Statistical Analysis of Ecotoxicity Data (27).
Az alábbiakban az Egyesült Államok Környezetvédelmi Ügynökségének (US Environmental Protection Agency) duluth-i (Minnesota állam) laboratóriumában alkalmazott eljárások alapján ismertetjük a nuptiális tuberkulumok jellemzését az amerikai cselle esetében.
Reporting of test results
Az egyes termékek és/vagy berendezések hasonló rendelkezésre álló anyagokkal is helyettesíthetők.
Study data should include:
A tuberkulumok megfigyelésére leginkább megvilágított nagyító vagy 3X nagyítású megvilágított preparálómikroszkóp alkalmas.
Responsible personnel and their study responsibilities
A halat anterior részével előre és ventrális részével lefelé helyezzük kis (pl. 100 mm átmérőjű) Petri-csészébe.
Each laboratory should have demonstrated proficiency using a range of representative chemicals
Fókuszáljuk a keresőt, hogy a tuberkulumok beazonosíthatók legyenek.
Characterisation of test chemical
A halat lassan, finoman forgassuk egyik oldaláról a másikra a tuberkulumterületek beazonosítása érdekében.
Physical nature and relevant physicochemical properties
Számoljuk meg és pontozzuk a tuberkulumokat.
Solvent:
A tuberkulumok megszámlálása és értékelése