natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Flow-through methods however, introduce constraints on the types of chemicals that can be tested, as determined by the physicochemical properties of the chemical.
A hátsó végtagok hosszának a 21. napon történő mérése azonban a végtagban lévő hajlatok miatt bonyolultabb.
Therefore, prior to using this protocol, baseline information about the chemical should be obtained that is relevant to determining the testability, and the OECD Guidance Document on Aquatic Toxicity Testing of Difficult Substances and Mixtures (4) should be consulted.
Ezért a hátsó végtagok hosszának a 21. napon történő mérését a test falánál kezdjük, és szögeltérések esetén is végig a végtag középvonalát követjük.
Characteristics which indicate that the chemical may be difficult to test in aquatic systems include:
A hátsó végtagok hosszának 7. napon megfigyelhető eltéréseit – akkor is, ha a 21. napon nem nyilvánvalóak – szignifikánsnak kell tekinteni a potenciális pajzsmirigy-aktivitás szempontjából.
high octanol water partitioning coefficients (log Kow), high volatility, susceptibility to hydrolysis, and susceptibility to photolysis under ambient laboratory lighting conditions.
A hosszméréseket digitális fényképeken, képelemző szoftver segítségével végezzük »A kétéltűek pajzsmirigyszövettana« című OECD-iránymutatásban leírtak szerint (9).
Other factors may also be relevant to determining testability and should be determined on a case by case basis.
Testhossz és nedves tömeg
If a successful test is not possible for the chemical using a flow-through test system, a static renewal system may be employed.
A farok nélküli testhossz (2. ábra) és a nedves tömeg meghatározása a vizsgált vegyi anyagoknak az ebihalak – kontrollcsoporttal összehasonlított – növekedési ütemére gyakorolt lehetséges hatásainak értékelése céljából szerepel a vizsgálati protokollban, és hasznos a vizsgált vegyi anyag általános toxicitásának kimutatásában is.
If neither system is capable of accommodating the test chemical, then the default is to not test it using this protocol.
Mivel a rátapadó víz eltávolítása a testtömeg meghatározása érdekében stresszt okozhat az ebihalaknak, illetve bőrkárosodást is előidézhet, ezeket a méréseket csak az ebihalak a 7. napon kiválasztott kisebb mintáján végezzük el, a többi ebihalon pedig csak a vizsgálati befejezésekor (21. nap).
Exposure System
A következetesség kedvéért a végbélnyílás cranialis vége legyen a mérés caudalis határa.
A flow-through diluter system is preferred, when possible, over a static renewal system.
A farok nélküli testhosszt az ebihalak növekedésének 2. ábra szerinti értékeléséhez használjuk.
If physical and/or chemical properties of any of the test chemicals are not amenable to a flow-through diluter system, then an alternative exposure system (e.g., static-renewal) can be employed.
A testhossz mérésének típusai és (B) Az X. laevis ebihalak hátsó végtagja hosszának mérése (1).
The system components should have water-contact components of glass, stainless steel, and/or Polytetrafluoroethylene.
Míg a fejlődési stádium és a hátsó végtagok hossza fontos végpont az átalakulásos fejlődés expozícióval összefüggő változásainak értékelésében, a fejlődésben jelentkező késedelem önmagában nem tekinthető a pajzsmirigyműködést gátló aktivitás diagnosztikai indikátorának.
However, suitable plastics can be utilised if they do not compromise the study.
Egyes változások csak rutin kórszövettani vizsgálattal figyelhetők meg.
Exposure tanks should be glass or stainless steel aquaria, equipped with standpipes that result in an approximate tank volume between 4,0 and 10,0 l and minimum water depth of 10 to 15 cm.
A súlyossági fokot (4 fokozat) jegyzőkönyvezni kell.
The system should be capable of supporting all exposure concentrations and a control, with four replicates per treatment.
A szövettani elemzés céljára történő mintavételre és a minták feldolgozására, valamint a szövetminták szövettani elemzésére vonatkozó információk a következő kiadványban találhatók:
The flow rate to each tank should be constant in consideration of both the maintenance of biological conditions and chemical exposure (e.g. 25 ml/min).
»Kétéltű-átalakulási vizsgálat: 1. rész – A morfológiai mintavételre és szövettani feldolgozásra vonatkozó technikai iránymutatás« és »Kétéltű-átalakulási vizsgálat: 2. rész – A vizsgálatok, a diagnosztikai kritériumok, a súlyossági besorolás és az atlasz értelmezésére vonatkozó megközelítés« (9).
The treatment tanks should be randomly assigned to a position in the exposure system in order to reduce potential positional effects, including slight variations in temperature, light intensity, etc.
A vizsgálatot első alkalommal végző laboratóriumoknak a pajzsmirigy szövettani elemzése és értékelése előtt képzési célból tanácsot kell kérniük tapasztalt kórboncnokoktól.
Fluorescent lighting should be used to provide a photoperiod of 12 hr light:
Az apikális végpontoknak a fejlődés felgyorsulását vagy aszinkróniáját jelző egyértelmű és jelentős változásai feleslegessé tehetik a pajzsmirigy kórszövettani elemzését.
12 hr dark at an intensity that ranges from 600 to 2000 lux (lumen/m2) at the water surface.
Ugyanakkor a nyilvánvaló morfológiai elváltozások hiánya vagy a fejlődési késedelemre utaló bizonyíték indokolttá teszi a szövettani elemzést.
Water temperature should be maintained at 22° ± 1 °C, pH maintained between 6,5 to 8,5, and the dissolved oxygen (DO) concentration > 3,5 mg/l (> 40 % of the air saturation) in each test tank.
Naponta ellenőrizni kell, hogy a vizsgálati tartályokban vannak-e elpusztult ebihalak, és a kapott számot minden tartály esetében fel kell jegyezni.
As a minimum water temperature, pH and dissolved oxygen should be measured weekly;
Minden mortalitási eseménynél fel kell jegyezni a dátumot, a koncentrációt és a tartály számát.
temperature should preferably be measured continuously in at least one test vessel.
Az elhullott állatokat észrevételüket követően azonnal el kell távolítani a vizsgálati tartályból.
Appendix 1 outlines the experimental conditions under which the protocol should be executed.
A 10 %-ot meghaladó mortalitási arány egyaránt jelezhet nem megfelelő vizsgálati körülményeket vagy a vizsgált vegyi anyag toxikus hatását.
Any water that is locally available (e.g. springwater or charcoal-filtered tap water) and permits normal growth and development of X. laevis tadpoles could be used.
Bármilyen abnormális viselkedés és szabad szemmel látható fejlődési rendellenesség vagy elváltozás esetében fel kell jegyezni a dátumot, a koncentrációt és a tartály számát.
Because local water quality can differ substantially from one area to another, analysis of water quality should be undertaken, particularly, if historical data on the utility of the water for raising Xenopus is not available.
A normális viselkedést a következők jellemzik: az ebihalak a vízoszlopban lebegnek, farkuk a fejük fölé emelkedik, a farokúszójuk egyenletesen, ritmikusan mozog, időszakonként a felszínre emelkednek, a kopoltyúfedőjük mozog, és reagálnak az ingerekre.
Iodide Concentration in Test Water
Ezek minőségi megállapítások, amelyeket a betegségek vagy stressz okozta klinikai tünetekhez hasonlóan kell mérlegelni, és a kontrollállatokkal összehasonlításban kell megtenni.
In order for the thyroid gland to synthesise TH, sufficient iodide needs to be available to the larvae through a combination of aqueous and dietary sources.
Ha a rendellenességek előfordulása vagy előfordulási aránya nagyobb az expozíciós tartályokban, mint a kontrollokban, akkor ezt a nyilvánvaló toxicitás bizonyítékának kell tekinteni.
Currently, there are no empirically derived guidelines for minimal iodide concentrations.
Adatgyűjtés
However, iodide availability may affect the responsiveness of the thyroid system to thyroid active agents and is known to modulate the basal activity of the thyroid gland, an aspect that deserves attention when interpreting the results from thyroid histopathology.
Minden adatot a helyes laboratóriumi gyakorlatnak megfelelő elektronikus vagy manuális rendszerek segítségével kell összegyűjteni.
Therefore, measured aqueous iodide concentrations from the test water should be reported.
A vizsgált vegyi anyag jellemzése:
Based on the available data from the validation studies, the protocol has been demonstrated to work well when test water iodide (I-) concentrations ranged between 0,5 and 10 μg/l.
fizikai-kémiai tulajdonságok;
Ideally, the minimum iodide concentration in the test water should be 0,5 μg/l.
stabilitással és biológiai lebomlással kapcsolatos információk;
If the test water is reconstituted from deionised water, iodine should be added at a minimum concentration of 0,5 μg/l.
Kémiai információk és adatok:
Any additional supplementation of the test water with iodine or other salts should be noted in the report.
A vizsgált vegyi anyag mérésére lehet szükség a törzsoldatok, valamint a vizsgálati oldatok esetében;
Holding of animals
Oldószer (ha az nem víz):
Adult Care and Breeding
az oldószer kiválasztásának indoklása, az oldószer jellemzői (jelleg, alkalmazott koncentráció);
Adult care and breeding is conducted in accordance with standard guidelines and the reader is directed to the standard guide for performing the Frog Embryo Teratogenesis Assay (FETAX) (6) for more detailed information.
Operatív feljegyzések:
Such standard guidelines provide an example of appropriate care and breeding methods, but strict adherence is not required.
ide kell sorolni a vizsgálati rendszer működésére, illetve a támogató környezetre és infrastruktúrára vonatkozó megfigyeléseket.
To induce breeding, pairs (3-5) of adult females and males are injected with human chorionic gonadotropin (hCG).
Tipikus feljegyzések:
Female and male specimens are injected with approximately 800 IU-1000 IU and 600 IU-800 IU, respectively, of hCG dissolved in 0,6-0,9 % saline solution.
környezeti hőmérséklet, vizsgálati hőmérséklet, megvilágítási időszak, az expozíciós rendszer kritikus komponenseinek állapota (pl. szivattyúk, ciklusszámlálók, nyomás), áramlási sebesség, vízszint, a törzsállomány változásai, és etetési feljegyzések.
Breeding pairs are held in large tanks, undisturbed and under static conditions in order to promote amplexus.
Az általános vízminőségi paraméterek a következők:
The bottom of each breeding tank should have a false bottom of stainless steel or plastic mesh which permits the egg masses to fall to the bottom of the tank.
pH, DO, vezetőképesség, összes jód, lúgosság és keménység;
Frogs injected in the late afternoon will usually deposit most of their eggs by mid morning of the next day.
A vizsgálati módszertől való eltérések:
After a sufficient quantity of eggs are released and fertilised, adults should be removed from the breeding tanks.
a megadott információnak tartalmaznia kell a vizsgálati módszertől való eltérésekre vonatkozó minden információt, illetve azok szöveges leírását;
Larval Care and Selection
Biológiai megfigyelések és adatok:
After the adults are removed from the breeding tanks, the eggs are collected and evaluated for viability using a representative sub-set of the embryos from all breeding tanks.
ide tartozik a napi mortalitás, a táplálékfogyasztás, az abnormális úszó viselkedés, a levertség, az egyensúly elvesztése, a fejlődési rendellenességek, elváltozások stb.
The best individual spawn(s) (2-3 recommended to evaluate the quality of the spawns) should be retained based upon embryo viability and the presence of an adequate number (minimum of 1500) of embryos.
Az előre meghatározott időközönként összegyűjtött megfigyelések és adatok a következők:
All the organisms used in a study should originate from a single spawning event (i.e., the spawns should not be co-mixed).
fejlődési stádium, hátsó végtagok hossza, farok nélküli testhossz és nedves tömeg;
The embryos are transferred into a large flat pan or dish and all obvious dead or abnormal eggs (see definition in (5)) are removed using a pipette or eyedropper.
Statisztikai elemzési technikák és az alkalmazott technikák indoklása;
The sound embryos from each of the three spawns are transferred into three separate hatching tanks.
a statisztikai elemzés eredményei lehetőleg táblázatos formában;
Four days after being placed in the hatching tanks, the best spawn, based on viability and hatching success, is selected and the larvae are transferred into an appropriate number of rearing tanks at 22° ± 1 °C.
Szövettani adatok:
In addition, some additional larvae are moved into extra tanks for use as replacements in the event that mortalities occur in the rearing tanks during the first week.
ide tartoznak a szöveges leírások, valamint az egyes megfigyelések súlyosságának és előfordulási gyakoriságának osztályozása a kórszövettani iránymutatásban részletezettek szerint;
This procedure maintains consistent organism density and thereby reduces developmental divergence within the cohort of a single spawn.
Ad hoc megfigyelések:
All rearing tanks should be siphoned clean daily.
ezek közé a megfigyelések közé tartoznak a vizsgálathoz fűzött olyan szöveges leírások, amelyek nem illenek bele az előzőleg ismertetett kategóriákba.
As a precaution, vinyl or nitrile gloves are preferred to latex gloves.
Adatszolgáltatás
Mortalities should be removed daily and replacement larvae should be added back to maintain the organism density during the first week.
A 2. függelék napi adatgyűjtési táblázatokat tartalmaz, amelyek iránymutatásként használhatóak a nyers adatok beviteléhez és az azokat összesítő statisztikai számításokhoz.
Feeding should occur at least twice per day.
Ezenkívül rendelkezésre állnak a jelentéshez használható táblázatok is, amelyek megkönnyítik a végponti adatokról készített összefoglalók közlését.
During the pre-exposure phase, tadpoles are acclimated to the conditions of the actual exposure phase, including the type of food, temperature, light-dark cycle and the culture medium.
A szövettani vizsgálatok jelentésére szolgáló táblázatok a 2. függelékben találhatók.
Therefore, it is recommended that the same culture/dilution water be used during the pre-exposure phase and the exposure phase.
Teljesítménykritériumok és a vizsgálat elfogadhatósága/érvényessége
If a static culture system is used for maintaining tadpoles during the pre-exposure phase, the culture medium should be replaced completely at least twice per week.
A vizsgálati módszertől való jelentős eltérés általában olyan adatokat eredményez, amelyek értelmezhetetlenek vagy a jelentés céljára alkalmatlanok.
Crowding, caused by high larval densities during the pre-exposure period, should be avoided because such effects could markedly affect tadpole development during the subsequent testing phase.
Ezért iránymutatásként kifejlesztették a 4. táblázatban található kritériumokat, amelyek az elvégzett vizsgálat minőségének és a kontrollorganizmusok általános teljesítményének meghatározására vonatkoznak.
Therefore, the rearing density should not exceed approximately four tadpoles/l culture medium (static exposure system) or 10 tadpoles/l culture medium (with e.g. 50 ml/min flow rate in the pre-exposure or culturing system).
táblázat
Under these conditions, tadpoles should develop from stages 45/46 to stage 51 within twelve days.
Elfogadható határok
Representative tadpoles of this stock population should be inspected daily for developmental stage in order to estimate the appropriate time point for initiation of exposure.
Kritérium
Care should be used to minimise stress and trauma to the tadpoles, especially during movement, cleaning of aquaria, and manipulation of larvae.
Elfogadható határok
Stressful conditions/activities should be avoided such as loud and/or incessant noise, tapping on aquaria, vibrations in the aquaria, excessive activity in the laboratory, and rapid changes in environmental media (light availability, temperature, pH, DO, water flow rates, etc.)
Vizsgálati koncentrációk
If tadpoles do not develop to stage 51 within 17 days after fertilisation, excessive stress should be considered as a potential culprit.
≤ 20 % KV (a mért vizsgálati koncentráció változékonysága) értéken kell tartani a 21 napos vizsgálat alatt
Larval Culture and Feeding
Mortalitás a kontrollokban
Tadpoles are fed with e.g. the commercial tadpole feed used in the validation studies (see also appendix 1) throughout the pre-exposure period (after Nieuwkoop and Faber (NF) stage 45/46 (8)) and during the entire test period of 21 days, or other diet that has demonstrated to allow equal performance of the Amphibian Metamorphosis Assay.
≤ 10 % – a mortalitás egyik kontrollismétlésben sem haladhatja meg a 2 ebihalat
The feeding regime during the pre-exposure period should be carefully adjusted to meet the demands of the developing tadpoles.
A kontrollok fejlődési stádiumának minimális mediánja a vizsgálat végén
That is, small portions of food should be provided to the newly hatched tadpoles several times per day (at least twice).
A fejlődési stádium szórása a kontrollcsoportban
Excess food should be avoided in order i) to maintain water quality and ii) to prevent the clogging of gill filters with food particles and detritus.
A fejlődési stádium eloszlásának 10. és 90. percentilise közötti különbség nem lehet több 4 szakasznál
For the tadpole feed used in the validation studies, the daily food rations should be increased along with tadpole growth to approximately 30 mg/animal/day shortly before test initiation.
Oldott oxigén
This commercially available feed has been shown in the validation studies to support proper growth and development of X. laevis tadpoles, and is a fine particulate that stays suspended in the water column for a long period of time and is subject to washing out with the flow.
A levegőtelítettség [8] ≥ 40 %-a
Therefore, the total daily amount of food should be divided into smaller portions and fed at least twice daily.
A pH-t 6,5–8,5 között kell tartani.
For this feed the feeding regime is outlined in Table 1.
Az ismétlések/kezelések közötti különbség értéke nem haladhatja meg a 0,5-öt.
Feeding rates should be recorded.
22 ± 1 °C – az ismétlések/kezelések közötti különbség nem haladhatja meg a 0,5 °C-ot
It can be fed dry or as a stock solution prepared in dilution water.
Vizsgálati koncentrációk nyilvánvaló toxicitás nélkül
Such a stock solution should be freshly prepared every other day and stored at 4 °C when not in use.
Ismétlések teljesítménye
Feeding regime with commercial tadpole feed used in the validation studies for X. laevis tadpolesduring the in-life portion of the AMA in flow-through conditions
≤ 2 ismétlés lehet érvénytelen az egész vizsgálat során
Study Day
Oldószer használatára vonatkozó különleges feltételek
Food ration (mg feed/animal/day)
Ha hordozó oldószert alkalmazunk, oldószeres kontrollt és tiszta vizes kontrollt is használni kell, a kapott eredményeket pedig jegyzőkönyvezni kell.
Analytical Chemistry
Az oldószeres és a vizes kontrollcsoportok közötti statisztikailag szignifikáns különbségeket külön kezeljük.
Prior to conducting a study, the stability of the test chemical should be evaluated using existing information on its solubility, degradability and volatility.
Lásd alább a részletes leírást.
Test solutions from each replicate tank at each concentration should be sampled for analytical chemistry analyses at test initiation (day 0), and weekly during the test for a minimum of four samples.
A statikus megújítási rendszerre vonatkozó különleges feltételek
It is also recommended that each test concentration be analysed during system preparation, prior to test initiation, to verify system performance.
A megújítás előtti és utáni reprezentatív kémiai elemzéseket jegyzőkönyvezni kell
In addition, it is recommended that stock solutions be analysed when they are changed, especially if the volume of the stock solution does not provide adequate amounts of chemical to span the duration of routine sampling periods.
Az ammónia szintjét közvetlenül a vízcsere előtt ellenőrizni kell
In the case of chemicals which cannot be detected at some or all of the concentrations used in a test, stock solutions should be measured and system flow rates recorded in order to calculate nominal concentrations.
Az 1. függelék 1. táblázatában felsorolt valamennyi vízminőségi paramétert közvetlenül a vízcsere előtt meg kell mérni
Chemical Delivery
A megújítási időszak nem haladhatja meg a 72 órát
The method used to introduce the test chemical to the system can vary depending on its physicochemical properties.
Megfelelő etetési rend (a kereskedelmi ebihaltápból álló napi fejadag 50 %-a)
Water soluble chemicals can be dissolved in aliquots of test water at a concentration which allows delivery at the target test concentration in a flow-through system.
A vizsgálat érvényessége
Chemicals which are liquid at room temperature and sparingly soluble in water can be introduced using liquid:liquid saturator methods.
A vizsgálat elfogadhatóságához/érvényességéhez az alábbi követelményeknek kell teljesülniük:
Chemicals which are solid at room temperature and are sparingly soluble in water can be introduced using glass wool column saturators (7).
Érvényes, a pajzsmirigyre kifejtett aktivitás szempontjából negatívnak tekintett kísérlet egy vizsgálat során:
The preference is to use a carrier-free test system, however different test chemicals will possess varied physicochemical properties that will likely require different approaches for preparation of chemical exposure water.
Bármely kezelés esetében (ideértve a kontrollokat is) a mortalitás nem haladhatja meg a 10 %-ot.
It is preferred that effort be made to avoid solvents or carriers because:
A mortalitás egyik ismétlés esetében sem haladhatja meg a három ebihalat, ellenkező esetben az ismétlést érvénytelennek kell tekinteni
certain solvents themselves may result in toxicity and/or undesirable or unexpected endocrinological responses, ii) testing chemicals above their water solubility (as can frequently occur through the use of solvents) can result in inaccurate determinations of effective concentrations, and iii) the use of solvents in longer-term tests can result in a significant degree of “biofilming” associated with microbial activity.
Legalább két – mind a négy érvényes ismétlést bevonó – kezelési szintnek kell rendelkezésre állnia az elemzéshez
For difficult to test chemicals, a solvent may be employed as a last resort, and the OECD Guidance Document on aquatic toxicity testing of difficult substances and mixtures should be consulted (4) to determine the best method.
Legalább két – nyilvánvaló toxicitást nem mutató – kezelési szintnek kell rendelkezésre állnia az elemzéshez
Solvents which have been found to be effective for aquatic toxicity testing include acetone, ethanol, methanol, dimethyl formamide and triethylene glycol.
Érvényes, a pajzsmirigyre kifejtett aktivitás szempontjából pozitívnak tekintett kísérlet egy vizsgálat során:
In case a solvent carrier is used, solvent concentrations should be below the chronic No Observed Effect Concentration (NOEC);
A kontrollcsoportban a mortalitás legfeljebb két ebihal/ismétlés lehet
the OECD Guidance Document recommends a maximum of 100 μl/l;
Döntési diagram az AMA végrehajtásához
a recent review recommends that solvent concentrations as low as 20 μl/l of dilution water be used (12).
Az AMA számára kifejlesztettek egy döntési diagramot, amely logikai segítséget nyújt a biológiai vizsgálat végrehajtásához és az eredmények értelmezéséhez (lásd a 3. ábrán látható folyamatábrát).
If solvent carriers are used, appropriate solvent controls should be evaluated in addition to non-solvent controls (clean water).
A döntési diagram lényegében a végpontokat súlyozza:
If it is not possible to administer a chemical via the water, either because of physicochemical characteristics (low solubility) or limited chemical availability, introducing it via the diet may be considered.
a felgyorsult fejlődés, az aszinkron fejlődés, valamint a pajzsmirigy-kórszövettan nagyobb súlyt kap, míg az általános toxicitással is befolyásolható paraméterek: a késleltetett fejlődés, a farok nélküli testhossz és a nedves testtömeg kisebb súllyal kerülnek beszámításra.
Preliminary work has been conducted on dietary exposures;
Felgyorsult fejlődés (a fejlődési stádium, az farok nélküli testhossz és a hátsó végtagok hosszának segítségével meghatározva)