natgillin/translations-raw huggingface dataset:
Now the respective PCR-programmes can be started.
Az érdeklődésre számot tartó helyről vett, ásványi sók hozzáadása nélküli, nem előkezelt tengervizet is lehet használni, és az elsődleges biológiai lebomlást specifikus kémiai elemzés követheti.
Additionally a positive control (exemplary DNA sample with known activity and clear results) and a negative control (1 μl dest.
A biológiai lebonthatóság végső vizsgálatához14C-vel jelzett anyagokra lenne szükség, hogy az oldható szerves14C eltűnése és a14CO2 termelése valósághű környezeti koncentrációkon legyen mérhető.
H2O) will be used in each PCR-programme.
AZ ALKALMAZOTT MÓDSZER MEGVÁLASZTÁSA
Preparation of the agarose gel (1 %) — During running PCR-programmes:
Az alkalmazandó módszer kiválasztása számos tényezőtől függ;
Solve 3 g agarose in 300 ml 1 × TAE-buffer (1 % agarose gel)
az alábbi táblázat célja, hogy segítsen a választásban.
This solution should be boiled using an microwave (ca.
Míg a körülbelül 5 mg C/l alatti vízoldhatóságú anyagokat – legalábbis elvben – nem lehet a lombikrázásos módszerrel vizsgálni, a zárt palack módszerrel a rosszul oldódó anyagok is vizsgálhatók.
2-3 min)
Táblázat
Transfer the hot solution into a special casting box, which lies on ice
A lombikrázásos és a zárt palack módszer előnyei és hátrányai
After ca.
MÓDSZER
Actin-PCR-programme:
LOMBIKRÁZÁS
Special primer:
a 60 napos időtartam nem probléma
“Mact1(upper/forward)” → TTC AAC AGC CCT GCC ATG TA
nem zavarja a nitrifikáció
Cycle (35-times):
5–40 mg DOC/1-t használ fel, gátló hatású lehet
Annealing
ZÁRT PALACK
→ 1 min at 68 °C
a vizsgált anyag alacsony koncentrációját használja (2 mg/l), így kisebb a gátlás esélye
The samples with intact DNA will be used in this PCR-programme to detect the X- and Y-Genes.
a baktériumok falon való növekedése hamis értékekhez vezethet
Male DNA should show one double-band and female DNA should show one single band (after staining and gel-electrophoresis).
a vak O2-felvételi értékek magasak lehetnek, különösen 28 nap elteltével;
For this programme-run one positive control for males (XY-sample) and one for females (XX-sample) should be included.
a tengervíz érlelésével megoldható
“PG 17,6” (lower/reverse) → GAT CGT CCC TCC ACA GAG AAG AGA
LOMBIKRÁZÁSOS MÓDSZER
→ 45 sec at 55 °C
A módszert a Danish Water Quality Institute által az Európai Bizottság (EB) részére szervezett körvizsgálat eredményeként véglegesítették (3).
Y-Gene-PCR-programme as “control” for X- and Y-Gene-PCR-programme:
A vizsgált anyag előre meghatározott mennyiségét feloldjuk a vizsgálati közegben, hogy 540 mg/l oldott szerves szén (DOC) koncentrációt kapjunk.
This PCR-programme verifies the results of the “X- and Y-Gene-PCR-programme”.
Ha a szerves szén elemzések érzékenységi határa javul, előnyös lehet a vizsgált anyagok alacsonyabb koncentrációinak használata, különösen a gátló hatású anyagok esetében.
The “male-samples” should show one band and the “female-samples” shouldn't show any band (after staining and gel-electrophoresis).
A vizsgált anyag vizsgálati közegben készített oldatát rázás közben, sötétben vagy szórt fényben, aerob körülmények mellett, állandó (± 2 °C sávban szabályozott), általában a 15–20 °C tartományon belüli hőmérsékleten inkubáljuk.
“DMTYa (upper/forward)” → GGC CGG GTC CCC GGG TG
Olyan esetekben, amikor a vizsgálat célja a környezeti feltételek szimulálása, a vizsgálatok ezen a normál hőmérsékleti tartományon kívül is végezhetők.
“DMTYd (lower/reverse)” → TTT GGG TGA ACT CAC ATG G
A vizsgálat ajánlott leghosszabb időtartama mintegy 60 nap.
Staining of the PCR-samples:
A lebomlást a DOC mérése (végső lebomlás), illetve bizonyos esetekben specifikus elemzés (elsődleges lebomlás) követi.
Staining solution:
Annak kiderítéséhez, hogy a vizsgálat alkalmazható-e egy adott anyagra, ismerni kell az anyag egyes tulajdonságait.
50 % Glycerol
Meg kell állapítani az anyag szerves széntartalmát, az anyag illékonyságának olyan mértékűnek kell lennie, hogy a vizsgálat során ne következzen be jelentős veszteség, valamint a vízoldékonyságának nagyobbnak kell lennie 25–40 mg C/l egyenértékénél.
0,25 % Bromphenolblue
Továbbá a vizsgált anyag nem adszorbeálódhat jelentős mértékben üvegfelületeken.
0,25 % Xylenecyanol
Az elért eredmények értelmezéséhez szükség van a vizsgált anyag tisztaságára, illetve a főbb összetevők egymáshoz viszonyított arányára vonatkozó információkra, különösen, ha az eredmény közel van az »elégséges« szinthez.
Pipette 1 μl of the staining solution into each single tube
A vizsgált anyag baktériumokkal szembeni toxicitására vonatkozó információk – például a rövid távú légzési sebesség vizsgálatban mért eredmények (4) – hasznosak lehetnek a megfelelő vizsgálati koncentrációk kiválasztásakor, és nélkülözhetetlenek az alacsony biológiai lebomlási értékek helyes értelmezéséhez.
Start of the Gel-Electrophoresis:
Ez az információ azonban nem mindig elegendő a biológiai lebonthatósági vizsgálatban kapott eredmények értelmezéséhez, és ilyenkor a 18. pontban leírt eljárás a megfelelőbb.
The prepared 1 % agarose gel will be transferred into a gel-electrophoresis-chamber filled with 1 × TAE-Buffer
A tengervízminta mikrobiális aktivitásának ellenőrzésére megfelelő referenciaanyagokat kell használni.
10 - 15 μl of each stained PCR-sample will be pipetted into an agarose gel slot
A nátrium-benzoát, a nátrium-acetát és az anilin például felhasználható erre a célra.
Also 5 - 15 μl of the 1kb-“Ladder”(Invitrogen) will be pipetted into a separate slot
A referenciaanyagoknak ésszerűen rövid időn belül le kell bomlaniuk, különben ajánlott a vizsgálatot másik tengervízmintával megismételni.
Start the electrophoresis by 200 V
Az EK körvizsgálatban, amelyben tengervíz mintákat vettek különböző helyeken és különböző évszakokban (3), a lappangási fázis (tL) és az 50 százalékos lebomlás eléréséhez szükséges idő (t50) – a lappangási fázist nem számítva – 1–4 nap, illetve 1–7 nap volt nátrium-benzoát esetében.
Stop after 30-45 min
Az anilin esetében a tL 0–10 nap között, míg a t50 1–10 nap között volt.
Determination of the bands:
A MÓDSZER ISMÉTELHETŐSÉGE ÉS ÉRZÉKENYSÉGE
Clean the agarose gel in distilled H2O
A körvizsgálatban megállapították a módszer ismételhetőségét (3).
Now transfer the agarose gel into Ethidium bromide for 15 - 30 min
A vizsgált anyagnak azt a legalacsonyabb koncentrációját, amelyre ez a módszer DOC-elemzéssel használható, javarészt a szerves szén kimutatási határa (jelenleg kb. 0,5 mg C/l), illetve a használt tengervízben oldott szerves szén koncentrációja (általában nagyságrendileg 3–5 mg/l nyílttengeri víz esetében) határozza meg.
After that, a picture of the agarose gel should be taken in an UV-light-box
A DOC háttérkoncentrációja a vizsgált anyag hozzáadása után nem haladhatja meg az összes DOC-koncentráció körülbelül 20 %-át.
Finally the samples are analysed in comparison to the positive control-band (or bands) and the ladder
Ha ez nem megoldható, a DOC háttérkoncentrációját esetenként a tengervíz vizsgálat előtti érlelésével lehet csökkenteni.
Appendix 10
Ha ezt a módszert csak specifikus kémiai elemzéssel használják (amellyel elsődlegesen lebomlást mérnek), a vizsgálónak kiegészítő információkkal dokumentálnia kell, hogy végső lebonthatóságra lehet számítani.
Guidance on tissue sampling for genetic sex determination by PCR method in the three-spined stickleback
Ezek a kiegészítő információk más gyors vagy inherens biológiai lebonthatósági vizsgálatok eredményei is lehetnek.
Tissue sampling and DNA extraction
A szokásos laboratóriumi készülékek és:
DNA can be extracted using a variety of commercially available reagents and both manual and automated extraction systems.
a.
The protocol used at the Cefas Weymouth laboratory is outlined below, and the alternative approaches have been added where appropriate.
Rázógép 0,5–2 literes Erlenmeyer-lombikok részére, automatikus hőmérsékletszabályozással vagy állandó, 15–20 °C hőmérsékletű (± 2 °C tartományon belül szabályozott) helyiségben használva;
With fine scissors, a small piece of tissue (10-20 mg) from the dorsolateral area (after removing the head and tail for VTG analysis), is removed from each individual fish.
b.
The tissue is added into a tube and either placed directly in liquid nitrogen (for storage at – 80 °C) or filled with 70 % ethanol (for transport and subsequent storage at 4 °C).
Szűknyakú, 0,5–2 literes Erlenmeyer-lombikok;
The scissors are cleaned after each single fish in 70 % ethanol then in distilled water and dried with tissue paper.
c.
The ethanol (if present) is removed by aspiration and the tissue is digested overnight with proteinase K in 400 μl of ATL buffer (Qiagen).
Membránszűrő készülék vagy centrifuga;
An aliquot (200 μl) of the digest is transferred to a 96-well S-block (Qiagen) and the DNA extracted in a 96-well format using the Qiagen Universal BioRobot and the QIamp Investigator BioRobot kit.
d.
The DNA is eluted in a 50 μl of DNase and RNase free water.
Membránszűrők, 0,2–0,45 μm;
If using hard tissues to extract DNA (such as a spine or a pectoral fin) it may be necessary to homogenise the sample in the lysis buffer using a FastPrep® tissue lyser or equivalent tissue disruption system.
e.
Alternatively,
Szénanalizátor;
the tissue is digested overnight with proteinase K in 400 μl of G2 lysis buffer (Qiagen) and DNA is extracted from 200 μl of the digest using either the EZ-1 DNA easy tissue kit and the EZ-1 biorobot or the DNA easy tissue mini kit.
f.
The DNA is eluted in a 50 μl volume.
Berendezés specifikus elemzésekhez (választható).
The tissues are processed using the DNAzol reagent.
Tengervíz
Briefly, tissue samples are lysed in 1ml of DNAzol for 10 minutes in a 1,5 ml micro centrifuge tube and then centrifuged at 13000 rpm for 5 minutes to remove any particulate matter.
Gyűjtsünk tengervízmintát egy alaposan megtisztított tartályba és lehetőleg a gyűjtéstől számított egy-két napon belül szállítsuk el a laboratóriumba.
The lysed sample is then transfered to a new 1,5 ml micro centrifuge tube containing 500 μl of 100 % molecular grade ethanol and then centrifuged at 13000 rpm for 10 minutes to precipitate the DNA.
Szállítás közben ne engedjük, hogy a minta hőmérséklete jelentősen meghaladja a vizsgálathoz használt hőmérsékletet.
The ethanol is removed and replaced with 400 μl of 70 % molecular grade ethanol, centrifuged at 13000 rpm for 5 minutes and the DNA pellet is dissolved in 50 μl molecular DNase and RNase free water.
Pontosan azonosítsuk be a mintavételi helyet és írjuk le a szennyezettségi és tápanyagállapotát.
Again, when using the hard tissues (pectoral fin) it may be necessary to homogenise the sample in the lysis buffer using a FastPrep® tissue lyser or equivalent tissue disruption system prior to extracting the DNA.
Különösen a part menti vizek esetében, a jellemzés tartalmazza a heterotróf mikrobiális telepek számát és az oldott nitrát, ammónium és foszfát koncentrációjának meghatározását.
The DNA is stored at – 20 °C until required.
Adjuk meg a következő információkat a tengervíz mintára:
gloves must be worn during the procedures.
a gyűjtés dátuma;
Polymerase chain reaction (PCR) analysis
mintavételi mélység;
Amplifications were performed using 2,5 μl of the DNA extract in a 50 μl reaction volume using the Idh locus primers (as described by Peichel et al., 2004.
a minta megjelenése: zavaros, stb.;
Current Biology 1:1416-1424):
hőmérséklet a gyűjtés időpontjában;
Forward primer
sótartalom;
Reverse primer
a gyűjtés és a vizsgálatban történő felhasználás közötti időtartam;
There are numerous suppliers of suitable PCR reagents.
Ha a tengervízminta DOC-tartalma magasnak bizonyul (8. pont), használat előtt ajánlott a tengervizet körülbelül egy hétig érlelni.
The method outlined below is that currently used at the Cefas Weymouth laboratory.
A mintát aerob körülmények között, vizsgálati hőmérsékleten és sötétben vagy szórt fényben történő tárolással lehet érlelni.
Preparation of the “Reaction Mix” (50 μl per sample):
Szükség esetén enyhe levegőztetéssel tartsuk fenn az aerob körülményeket.
A mastermix is prepared as follows.
Az érlelés alatt a könnyen lebomló szerves anyagok mennyisége csökken.
This can be prepared in advance and stored frozen at – 20 °C until required.
A körvizsgálatban (3) nem találtak kimutatható különbséget az érlelt és a frissen gyűjtött tengervízminták lebontási potenciálja között.
Make sufficient mastermix for a negative control (molecular biology grade water only).
Használat előtt a tengervizet a durva részecskék eltávolítása céljából előkezelni kell, pl. nejlon szűrőn vagy durva papírszűrőn keresztüli szűréssel (ne használjunk membrán- vagy GFC-szűrőt), illetve ülepítéssel és dekantálással.
Volume (stock conc.)/ sample
Az eljárást jegyzőkönyvezni kell.
® Reaction Buffer
Az előkezelést az esetleges érlelés után végezzük.
Nucleotides (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
Az ásványi tápanyagok törzsoldatai
0,5 μl (25 mM each)
A következő törzsoldatokat kell készíteni analitikai tisztaságú reagensek segítségével:
250 μM each
Kálium-dihidrogén-ortofoszfát, KH2PO4
Forward Primer
Dikálium-hidrogén-ortofoszfát, K2HPO4
0,5μl (0,1 nmol/μl)
Dinátrium-hidrogén-ortofoszfát-dihidrát, Na2HPO4.2H2O
Reverse Primer
Ammónium-klorid, NH4Cl
2,0μM
Oldjuk fel és töltsük fel desztillált vízzel 1 literre.
Molecular biology grade water
Kalcium-klorid, CaCl2
GoTaq polymerase
Magnézium-szulfát-heptahidrát, MgSO4.7H2O
Dispense 47,5 μl to a labelled 0,5 ml thin walled PCR tube.
Vas(III)klorid-hexahidrát, FeCl3.6H2O
Add 2,5 μl of the purified DNA to the appropriately labelled tube.
A d) oldatban való csapadékképződést úgy lehet megakadályozni, hogy literenként egy csepp tömény HCl-t vagy 0,4 g etilén-diamin-tetraecetsavat (EDTA, dinátrium-só) adunk hozzá.
Repeat for all samples and the negative control.
Ha egy törzsoldatban csapadék képződik, helyettesítsük frissen készített oldattal.
Over lay with 2 drops of mineral oil.
A vizsgálati közeg elkészítése
Alternatively, use a thermal cycler with a heated lid.
Adjunk a fenti törzsoldatok mindegyikéből 1 ml-t egy liter előkezelt tengervízhez.
Close the lids.
Ne adjunk hozzá semmilyen konkrét oltóanyagot a tengervízben már jelen lévő mikroorganizmusokhoz.
Samples were denatured in a Peltier PTC-225 thermal cycler at 94 ± 2 °C for 5 minutes followed by 39 cycles of 94 ± 2 °C for 1 minute, 55 ± 2 °C for 1 minute, 72 ± 2 °C for 1 minute, and a final extension of 72 ± 2 °C for 10 minutes.
Határozzuk meg (választható) a telepképző heterotrófok számát a tengervíz vizsgálati közegben (és lehetőleg az eredeti tengervízmintákban is), pl. a csíraszám segítségével, tengeri agar használatával.
Preparation of the agarose gel (2 %):
Ez különösen kívánatos a parti vagy szennyezett területekről származó minták esetében.
Traditionally the PCR products are resolved on a 20 % agarose gel containing ethidium bromide.
A tengervíz heterotróf mikrobiális aktivitását egy referenciaanyaggal végzett vizsgálattal ellenőrizzük.
Capillary based electrophoresis systems can also be used.
A lombikok előkészítése
Weigh 2 g agarose in 100 ml 1 × TAE-buffer
Győződjünk meg arról, hogy használat előtt minden üvegeszközt lelkiismeretesen megtisztítottunk (pl. alkoholos sósavval), de nem kell feltétlenül sterilizálni, illetve az üvegeszközöket leöblítettük és megszárítottuk annak érdekében, hogy ne következzen be a korábbi vizsgálatokból származó maradványok okozta szennyeződés.
Heat in a microwave (ca.
A lombikokat az első használat előtt is meg kell tisztítani.
2-3 min) to dissolve the agarose.
A vizsgált anyagokat két lombikban értékeljük egyidejűleg, együtt a referenciaanyagot tartalmazó egyetlen lombikkal.
Add 2 drops of ethidium bromide final concentration 0,5 μg/ml
Végezzünk el egy vakpróbát is két példányban – amely sem a vizsgált anyagot, sem a referenciaanyagot nem tartalmazza – az analitikai vak meghatározására.
Transfer the hot solution into the gel casting equipment.
Oldjuk fel a vizsgált anyagokat a vizsgálati közegben – a vizsgált anyagokat kényelmesen hozzáadhatjuk egy tömény törzsoldat segítségével, hogy a kívánt kiindulási koncentrációja kapjuk, amely általában 5–40 mg DOC/l.
Allow the gel to harden
A referenciaanyagot a szokásos módon vizsgáljuk 20 mg DOC/l-nek megfelelő kiindulási koncentráción.
Gel-Electrophoresis:
Ha a vizsgált és/vagy referenciaanyagok törzsoldatait használjuk, gondoskodni kell arról, hogy a tengervíz közeg sótartalma nem változott meg nagymértékben.
Transferred the agarose gel to the electrophoresis equipment and submerge in 1 × TAE-buffer
Ha toxikus hatások várhatók vagy azok nem zárhatók ki, tanácsos lehet egy gátlási vizsgálatot is végezni, két példányban, a vizsgálati tervnek megfelelően.
Load 20 μl of each sample to a separate well, adding a molecular weight marker (100 bp DNA ladder, Promega) to a spare well.
Adjuk hozzá a vizsgált és a referenciaanyagot ugyanahhoz az edényhez, és az összehasonlíthatóság érdekében a referenciaanyag koncentrációja általában ugyanaz legyen, mint a kontroll vizsgálatban (azaz 20 mg DOC/l).
Electrophoresis is performed at 120 V for 30-45 minutes.
Adagoljunk megfelelő mennyiségű vizsgálati oldatot Erlenmeyer-lombikokba (a lombik térfogatának legfeljebb körülbelül fele a kényelmes mennyiség), és ezt követően minden lombikot fedjünk le egy laza fedéllel (pl. alumíniumfóliával), amely lehetővé teszi a gázcserét a lombik és a környező levegő között.
Visualisation of the amplification products
(A vattadugók nem alkalmasak, ha DOC-elemzést végzünk).
If the ethidium bromide was incorporated in to the agarose gel as described above, the DNA products are visualised under a UV source.
Helyezzük az edényeket a rázógépre, és a vizsgálat során óvatos sebességgel (pl. 100 rpm) folyamatosan rázzassuk.
Alternatively the agarose gel is stained by covering the gel in a dilute solution of ethidium bromide (0,5 μg/ml in water) for 30 minutes prior to visualisation.
Szabályozzuk a hőmérsékletet (15–20 °C és legfeljebb ± 2 °C), és az edényeket az algák növekedésének elkerülése érdekében óvjuk a fénytől.
Appendix 11
Gondoskodjunk róla, hogy a levegő toxikus anyagoktól mentes legyen.
Guidance for artificial fertilisation procedure for the three-spined stickleback
Fizikai-kémiai kontroll vizsgálat (választható)
The purpose of this section is to describe the procedures to obtain fertilised eggs from the three-spined stickleback in view of using them in the FSDT.
Ha abiotikus lebomlási vagy veszteségmechanizmusok – mint például hidrolízis (csak a specifikus elemzésnél jelent problémát), párolgás vagy adszorpció – gyanúja merül fel, célszerű elvégezni egy fizikai-kémiai kontroll vizsgálatot.
Procedures
Ez úgy történik, hogy a vizsgált anyaggal együtt higany(II)-kloridot (HgCl2) [10] (50–100 mg/l) adunk hozzá az edényekhez, hogy leállítsuk a mikrobiális aktivitást.
Obtaining sperm from the males
A DOC vagy a specifikus anyag koncentrációjának jelentős csökkenése a fizikai-kémiai kontroll vizsgálatban abiotikus eltávolítási mechanizmusokat jelez.
A well-coloured male of the desired population is euthanised.
(Ha higany-kloridot használunk, a DOC-elemzésben figyelembe kell venni az interferenciákat vagy a katalizátormérgezést is.)
The testes are dissected from each side of the fish.
A lombikok száma
The testes are generally heavily pigmented, rod shaped structures that are readily apparent at the lateral midline of the body.
Egy tipikus vizsgálatsorozatban a következő lombikokra van szükség:
Use either of the following methods:
és 2. lombik a vizsgált anyagot (vizsgált szuszpenziót) tartalmazza;
Using a pair of fine scissors, begin at the cloaca and make a 1-1,5 cm incision with a single snip angled at about 45 degrees.
és 4. lombik csak tengervizet tartalmaz (vak);
Use a scalpel to make a small incision in the side of the fish slightly posterior to the pelvis and just ventral of the lateral plates.
lombik a referenciaanyagot tartalmazza (eljárási kontroll);
The testes are removed using fine forceps and placed into a petri dish.
lombik a vizsgált és a referencianyagot tartalmazza (toxicitási kontroll) – választható;
Each testis is covered with 100 μl freshly made Hank's final solution.
lombik a vizsgált anyagot és a sterilizálószert tartalmazza (abiotikus steril kontroll) – választható.
The testes are finely diced by using a razor blade or scalpel.
DOC-elemzés
This will release sperm and give the Hank's solution a milky appearance.
A vizsgálat során megfelelő időközönként mintákat kell venni a DOC-elemzéshez (1. függelék).
The fluid containing sperm is added into a tube, while trying not to include any pieces of testes tissue when pipetting.
A vizsgálat elején (0. nap) és a 60. napon mindig mintát kell venni.
800 μl of Hank's final solution are added into the tube and mixed well.
Összesen legalább öt mintára van szükség a lebomlás időbeli lefolyásának leírásához.
If required, the male can be preserved by fixing in 100 % ethanol or other desired fixative.
Rögzített menetrend nem állítható fel a mintavételre, mivel a biológiai lebomlás sebessége eltérő lehet.
This is particularly important if the study is assigning parental origin of offsprings.
A DOC-meghatározást minden mintán kétszer végezzük el.
Although most of the stock solutions required can be made in advance, stock 5 and subsequently the final solution, should be made up fresh on the day of use.
A minták szükséges térfogata az analitikai módszertől (specifikus elemzés), a szén-dioxid-elemző készüléktől, és attól az eljárástól (membránszűrés vagy centrifugálás) függ, amelyet a minta szénmeghatározás előtti kezelésére választottunk (lásd a 25. és 26. pontot).
Stock 1
A mintavétel előtt gondoskodjunk a vizsgálati közeg alapos összekeveréséről és a lombik falára tapadt bármely anyag leoldásáról vagy szuszpendálásáról.
8,00 g
A mintavétel után azonnal végezzünk membránszűrést vagy centrifugálást.
0,40 g
Szükség esetén a szűrt vagy centrifugált mintákat 2–4 °C-on legfeljebb 48 órán át, vagy – 18 °C alatt hosszabb ideig tárolhatjuk (ha az anyagról ismert, hogy ettől nem módosul, a pH-t tárolás előtt savasítsuk 2-re).
Distilled water (DW)
A membránszűrők (0,2–0,45 μm) akkor megfelelők, ha biztosan nem bocsátanak ki szenet és nem is adszorbeálják a szűrési lépés során, pl. polikarbonát membránszűrők.
100 ml
Egyes membránszűrőket a hidrofilizáció érdekében felületaktív anyagokkal impregnálnak, ezért jelentős mennyiségű oldott szenet bocsáthatnak ki.
Stock 2
Az ilyen szűrőket ioncserélt vízben három egymást követő perióduson – periódusonként egy órán – át történő forralással kell előkészíteni.
HPO4 (anhydrous)
Forralás után a szűrőket ioncserélt vízben tároljuk.
0,358 g
A szűrlet első 20 ml-ét el kell önteni.
0,60 g
A membránszűrés alternatívájaként a minták centrifugálása választható.
Stock 3
A mintát 40000 ms– 2-en (~ 4000 g) centrifugáljuk 15 percig, lehetőleg hűtött centrifugában.
0,72 g
Úgy tűnik, hogy az összes szerves szén (TOC) DOC feletti részének (TOC/DOC) centrifugálással történő elkülönítése nagyon kis koncentrációk esetén nem működik, mert a centrifugálás vagy nem távolít el minden baktériumot, vagy a bakteriális plazma részét képező szenet újra feloldja.
50 ml
Magasabb tesztkoncentrációk (> 10 mg C/l) esetén a centrifugálási hiba viszonylag kicsinek tűnik.
Stock 4
A mintavétel gyakorisága
MgSO4.7H2O
Ha az elemzésekre a mintavétel után azonnal sor kerül, a következő mintavételi időpontot az analitikai meghatározás eredményének figyelembevételével becsüljük meg.
1,23 g
Ha a mintákat egy későbbi időpontban történő elemzés céljából megőrizzük (24. pont), az előírt minimum ötnél több mintát vegyünk.
Stock 5 (freshly prepared)
Először az utolsó mintákat elemezzük, és az elemzéshez a megfelelő mintáknak lépésenként »visszafelé« történő kiválasztásával viszonylag kisszámú analitikai meghatározással jó leírást kaphatunk a biológiai lebomlási görbéről.
0,35 g
Ha a vizsgálat végéig nem történt lebomlás, további minták elemzésére nincs szükség, és ebben a helyzetben a »visszafelé« irányuló stratégiával jelentős elemzési költségeket lehet megtakarítani.
10 ml
Ha a lebomlási görbén a 60. nap előtt plató figyelhető meg, fejezzük be a vizsgálatot.
If you already have some of the above salts but with different water content (i.e. 2H2O instead of anhydrous) you can still use it but first adjust weight based on molecular weight).
Amennyiben a lebomlás a 60. napig nyilvánvalóan megkezdődött, de még nem tetőzött, hosszabbítsuk meg a vizsgálatot egy újabb időszakra.