natgillin/translations-raw huggingface dataset:
In the absence of historical or published control data showing that no deleterious or mutagenic effects are induced by the chosen solvent/vehicle, untreated controls should also be included for every sampling time in order to establish acceptability of the vehicle control.
Ez az időtartam szövetspecifikus, és úgy tűnik, hogy kapcsolatban áll a sejtpopuláció kicserélődési idejével, amelynek szempontjából a csontvelő és a belek gyors reagálású, a máj viszont sokkal lassabb reagálású szervnek számít.
Verification of laboratory proficiency
Amennyiben a lassan osztódó szövetek különösen fontosak, a 28 napos adagolási időtartam után 28 nappal történő későbbi mintavétel megfelelőbb lehet (16) (29).
and 2) transgene recovery from genomic DNA (e.g. packaging efficiency).
A TGR-vizsgálatok alkalmasak a génmutáció indukciójának tanulmányozására hím csírasejtekben (7) (8) (27), amelyekben a spermatogenezis időzítését és kinetikáját már pontosan meghatározták (27).
Sequencing of mutants
Az elemzés céljára még szuperovuláció után is alacsony számban rendelkezésre álló petesejtek, valamint az a tény, hogy a petesejtekben nincs DNS-szintézis, kizárják a mutáció transzgenikus vizsgálattal való meghatározását a női csírasejtekben (31).
For regulatory applications, DNA sequencing of mutants is not required, particularly where a clear positive or negative result is obtained.
A hím csírasejtek mintavételi időpontjait úgy kell megválasztani, hogy a kitett sejttípusok széles tartományából lehessen mintát venni a csírasejt-fejlődés teljes folyamatában, illetve úgy, hogy a mintavételben megcélzott szakasz kellő expozícióban részesüljön.
However, sequencing data may be useful when high inter-individual variation is observed.
A fejlődő csírasejteknek a spermatogoniális őssejtből az érett, az ondóvezetéket/mellékhere farkát elérő spermiummá való progressziójához szükséges időtartam ~49 nap egérben (36) és ~70 nap patkányban (34) (35).
In these cases, sequencing can be used to rule out the possibility of jackpots or clonal events by identifying the proportion of unique mutants from a particular tissue.
Az ondóvezetékből/mellékhere farkából a 28 napos expozíció és a rákövetkező háromnapos mintavételi időszak szerint gyűjtött felhalmozódott sperma (7) (8) fogja képviselni a spermatogenesis nagyjából második felében kitett sejtpopulációt, amely magában foglalja a meiotikus és posztmeiotikus időszakot is, de nem tartalmazza a spermatogoniális vagy őssejt időszakot.
Sequencing approximately 10 mutants per tissue per animal should be sufficient for simply determining if clonal mutants contribute to the mutant frequency;
Annak érdekében, hogy megfelelően tudjunk mintát venni az ondóvezetékből/mellékhere farkából azokból a sejtekből, amelyek az expozíciós idő alatt még spermatogoniális őssejtek voltak, egy további mintavételi időpontra is szükség van legalább 7 héttel (egér) vagy 10 héttel (patkány) a kezelés befejezését követően.
sequencing as many as 25 mutants may be necessary to correct mutant frequency mathematically for clonality.
A herecsatornácskákból a 28 + 3 napos kezelési és mintavételi menetrend szerint kinyert sejtek egy kevert populációt tartalmaznak, amelyben a csírasejtek fejlődésének minden szakasza képviselve van (7) (8).
Sequencing of mutants also may be considered when small increases in mutant frequency (i.e. just exceeding the untreated control values) are found.
Ezeknek a sejteknek a génmutáció kimutatása céljából történő mintavétele nem ad olyan pontos értékelést azokról a szakaszokról, amelyekben a csírasejt-mutációkat előidézték, mint a spermiumoknak az ondóvezetékből/mellékhere farkából való mintavétele (hiszen a tubulusokból vett mintában többféle csírasejt-típus fordul elő, és lesz néhány szomatikus sejt is, amely szennyezi a sejtpopulációt).
Differences in the mutant spectrum between the mutant colonies from treated and untreated animals may lend support to a mutagenic effect (29).
Ha azonban a herecsatornácskákból való sejtmintavételt az ondóvezetékből/mellékhere farkából származó ondósejtekkel kombinálják, és a mintavételre a 28 + 3 napos mintavételi rend szerint kerül sor, az bizonyos szinten lefedi a csírasejt-fejlődés fázisainak többségében kitett sejteket, és hasznos lehet néhány csírasejt-mutagén kimutatására.
Also, mutation spectra may be useful for developing mechanistic hypotheses.
Naponta legalább egyszer, lehetőleg minden nap ugyanazon időpont(ok)ban általános klinikai megfigyelést kell végezni, figyelembe véve az adagolást követően várható hatások érvényesülésének csúcsidőszakát.
When sequencing is to be included as part of the study protocol, special care should be taken in the design of such studies, in particular with respect to the number of mutants sequenced per sample, to achieve adequate power according to the statistical model used (see paragraph 43).
Fel kell jegyezni a kísérleti állatok klinikai állapotát.
Number and Sex of Animals
Naponta legalább kétszer meg kell vizsgálni az összes állatot megbetegedés és elhullás szempontjából.
The number of animals per group should be predetermined to be sufficient to provide statistical power necessary to detect at least a doubling in mutant frequency.
Minden állat tömegét hetente legalább egyszer, illetve elpusztításkor is le kell mérni.
Group sizes will consist of a minimum of five animals;
A felvett táplálék mennyiségét heti rendszerességgel le kell mérni.
however, if the statistical power is insufficient, the number of animals should be increased as required.
Amennyiben a vizsgált vegyi anyagot az ivóvízzel adjuk be, a vízfogyasztást minden vízcsere alkalmával és legalább hetente le kell mérni.
Male animals should normally be used.
A túlzott toxicitás nem halálos jeleit mutató állatokat a vizsgálati időszak befejezése előtt el kell altatni (23).
There may be cases where testing females alone would be justified;
A szövetek gyűjtése
for example, when testing human female-specific drugs, or when investigating female-specific metabolism.
A szövetek gyűjtését világosan meg kell indokolni.
If there are significant differences between the sexes in terms of toxicity or metabolism, then both males and females will be required.
Mivel a mutációk indukcióját gyakorlatilag bármilyen szövetben tanulmányozni lehet, a begyűjtendő szövetek kiválasztását a vizsgálat lefolytatásának okára, illetve a vizsgálat alatt álló vegyi anyaggal kapcsolatban rendelkezésre álló mutagenitási, karcinogenitási vagy toxicitási adatokra kell alapozni.
Administration Period
A megfontolandó lényeges tényezők közé kell tartoznia a beadás útjának (a valószínű emberi expozíciós útvonal(ak)ra alapozva), a becsült szöveti megoszlásnak, valamint a lehetséges hatásmechanizmusnak.
Based on observations that mutations accumulate with each treatment, a repeated-dose regimen is necessary, with daily treatments for a period of 28 days.
A háttérinformációk hiányában többféle érdekesnek tűnő szomatikus szövetet is kell gyűjteni.
This is generally considered acceptable both for producing a sufficient accumulation of mutations by weak mutagens, and for providing an exposure time adequate for detecting mutations in slowly proliferating organs.
Ezeknek gyorsan osztódó, lassan osztódó és az érintkezés helyén található szöveteket is képviselniük kell.
Alternative treatment regimens may be appropriate for some evaluations, and these alternative dosing schedules should be scientifically justified in the protocol.
Ezenkívül az ondóvezetékből/mellékhere farkából származó ondósejteket és a herecsatornácskákból származó fejlődő csírasejteket (a 32. és 33. bekezdésben leírtak szerint) is össze kell gyűjteni és el kell tárolni arra az esetre, ha a jövőben a csírasejt-mutagenitás elemzésére lenne szükség.
Treatments should not be shorter than the time required for the complete induction of all the relevant metabolising enzymes, and shorter treatments may necessitate the use of multiple sampling times that are suitable for organs with different proliferation rates.
A szervek tömegét meg kell mérni, és a nagyobb szervek esetében ugyanazokat a területeket kell begyűjteni az összes állatból.
In any case, all available information (e.g. on general toxicity or metabolism and pharmacokinetics) should be used when justifying a protocol, especially when deviating from the above standard recommendations.
A szövetek és a DNS tárolása
While it may increase sensitivity, treatment times longer than 8 weeks should be explained clearly and justified, since long treatment times may produce an apparent increase in mutant frequency through clonal expansion (29).
A szöveteket (vagy szövethomogenizátumokat) – 70 °C-on vagy az alatt kell tárolni és 5 éven belül fel kell használni DNS-izolálásra.
Dose Levels
A hűtőszekrényben 4 °C-on, megfelelő pufferben tárolt izolált DNS-t optimálisan 1 éven belül kell felhasználni mutációanalízisre.
Dose levels should be based on the results of a dose range-finding study measuring general toxicity that was conducted by the same route of exposure, or on the results of pre-existing sub-acute toxicity studies.
A szövetek kiválasztása mutációanalízisre
Non-transgenic animals of the same rodent strain may be used for determining dose ranges.
A szövetek kiválasztásának megfelelő megfontolásokon kell alapulnia, például:
In the main test, in order to obtain dose response information, a complete study should include a negative control group (see paragraph 22) and a minimum of three, appropriately-spaced dose levels, except where the limit dose has been used (see paragraph 28).
Ha a vizsgálatokat a karcinogenitási vizsgálatok nyomonkövetése céljából végezzük el, a karcinogenitás célszöveteit figyelembe kell venni.
The top dose should be the Maximum Tolerated Dose (MTD).
A szövetek elemzésre való kiválasztásának maximalizálnia kell azoknak a vegyi anyagoknak a kimutatását, amelyek közvetlenül ható in vitro mutagének, gyorsan metabolizálódnak, nagyon reaktívak vagy rosszul szívódnak fel, vagy azokét a vegyi anyagokét, amelyek esetében a beadás módja határozza meg a célszövetet (6).
The MTD is defined as the dose producing signs of toxicity such that higher dose levels, based on the same dosing regimen, would be expected to produce lethality.
Háttérinformációk hiányában és figyelembe véve az érintkezés helyét a beadás módja alapján, a májat és legalább egy gyorsan osztódó szövetet (pl. mirigyes gyomor, csontvelő) kell értékelni mutagenitás szempontjából.
Chemicals with specific biological activities at low non-toxic doses (such as hormones and mitogens), and chemicals which exhibit saturation of toxicokinetic properties may be exceptions to the dose-setting criteria and should be evaluated on a case-by-case basis.
A legtöbb esetben a fenti követelményeket már két gondosan kiválasztott szövet elemzésével teljesíteni lehet, de bizonyos esetekben három vagy több szövetre lehet szükség.
If dose range-finding experiments, or existing data from related rodent strains, indicate that a treatment regime of at least the limit dose (see below) produces no observable toxic effects,and if genotoxicity would not be expected based upon data from structurally related chemicals, then a full study using three dose levels may not be considered necessary.
A mutációk kimutatására szabványos laboratóriumi vagy publikált módszerek állnak rendelkezésre az ajánlott transzgenikus modellekhez:
For an administration period of 28 days (i.e. 28 daily treatments), the limit dose is 1000 mg/kg body weight/day.
lacZ-lambda bakteriofág és plazmid (30);
For administration periods of 14 days or less, the limit dose is 2000 mg/kg/body weight/day (dosing schedules differing from 28 daily treatments should be scientifically justified in the protocol; see paragraph 26).
lacI-egér (2) (18);
Administration of Doses
gpt-delta egér (22);
The test chemical is usually administered by gavage using a stomach tube or a suitable intubation cannula.
gpt-delta patkány (28);
In general, the anticipated route of human exposure should be considered when designing an assay.
A módosításokat meg kell indokolni és megfelelően dokumentálni kell.
Therefore, other routes of exposure (such as drinking water, subcutaneous, intravenous, topical, inhalation, intratracheal, dietary, or implantation) may be acceptable where they can be justified.
Több csomagolás adatait összesíteni lehet és a plakkok vagy telepek megfelelő számának elérésére lehet használni.
Intraperitoneal injection is not recommended since it is not a physiologically relevant route of human exposure.
Ha azonban nagyszámú csomagolási reakcióra van szükség, hogy elérjük a plakkok megfelelő számát, az rossz minőségű DNS jele lehet.
The maximum volume of liquid that can be administered by gavage or injection at one time depends on the size of the test animal.
Ilyen esetekben az adatokat óvatosan kell kezelni, mert megbízhatatlanok lehetnek.
The volume should not exceed 2 ml/100 g body weight.
Az DNS-mintánkénti plakkok vagy telepek optimális száma szempontjából a kellő számú mutáció adott spontán mutációs gyakoriság melletti felderítésének statisztikai valószínűsége az irányadó.
The use of volumes greater than this should be justified.
Általában legalább 125000–300000 plakkra van szükség, ha a spontán mutációs gyakoriság nagyságrendje 3 × 10–5 (15).
Except for irritating or corrosive chemicals, which will normally reveal exacerbated effects at higher concentrations, variability in test volume should be minimised by adjusting the concentration to ensure a constant volume at all dose levels.
A Big Blue® lacI-vizsgálat esetében fontos annak igazolása, hogy a mutáns szín fenotípusok teljes körét ki lehet mutatni megfelelő színkontrolloknak az egyes vizsgálati lemezekkel párhuzamos alkalmazásával.
Sampling Time
A szöveteket és a kapott mintákat (elemeket) blokk elrendezés segítségével kell feldolgozni és elemezni, ahol a vivőanyag/oldószer kontrollcsoport elemeit, a pozitív kontrollcsoportot (ha van) vagy a pozitív kontroll DNS-t (adott esetben), valamint minden egyes kezelési csoportot együtt dolgoznak fel.
Somatic Cells
Az eredmények feldolgozása
The sampling time is a critical variable because it is determined by the period needed for mutations to be fixed.
Az egyes állatok adatait táblázatban kell összefoglalni.
This period is tissue-specific and appears to be related to the turnover time of the cell population, with bone marrow and intestine being rapid responders and the liver being much slower.
A kísérleti egység maga az állat.
A suitable compromise for the measurement of mutant frequencies in both rapidly and slowly proliferating tissues is 28 consecutive daily treatments (as indicated in paragraph 26) and sampling three days after the final treatment;
A jegyzőkönyvnek tartalmaznia kell az összes plakk-képző egység (PFU) vagy telepképző egység (cfu) számát, a mutációk számát, valamint a mutációs gyakoriságot az összes állatból származó valamennyi szövet esetében.
although the maximum mutant frequency may not manifest itself in slowly proliferating tissues under these conditions.
Ha több csomagolási/tartalék reakciót végeztek, a DNS-mintánkénti reakciók számát jegyzőkönyvezni kell.
If slowly proliferating tissues are of particular importance, then a later sampling time of 28 days following the 28 day administration period may be more appropriate (16) (29).
Noha minden egyes reakció adatait meg kell őrizni, csak a teljes pfu- vagy CFU-értéket szükséges jegyzőkönyvezni.
In such cases, the later sampling time would replace the 3 day sampling time, and would require scientific justification.
A toxicitásra és a klinikai tünetekre vonatkozó adatokat a 34. bekezdés alapján jegyzőkönyvezni kell.
Germ Cells
A mutációk szekvenálásának eredményeit, valamint az ebből eredő, az egyes állatokra és szövetekre vonatkozó mutációs gyakorisági számításokat be kell mutatni.
TGR assays are well-suited for the study of gene mutation induction in male germ cells (7) (8) (27), in which the timing and kinetics of spermatogenesis have been well-defined (27).
Statisztikai értékelés és az eredmények értelmezése
The low numbers of ova available for analysis, even after super-ovulation, and the fact that there is no DNA synthesis in the oocyte, preclude the determination of mutation in female germ cells using transgenic assays (31).
Különböző kritériumok léteznek a pozitív eredmény meghatározására, ilyen például a mutációs gyakoriság növekedése a dózis függvényében vagy a mutációs gyakoriság egyértelmű növekedése egy meghatározott dóziscsoportban az oldószer/vivőanyag kontrollcsoporthoz viszonyítva.
The sampling times for male germ cells should be selected so that the range of exposed cell types throughout germ cell development is sampled, and so that the stage targeted in the sampling has received sufficient exposure.
Legalább három kezelt dóziscsoportot kell megvizsgálni annak érdekében, hogy elegendő adat álljon rendelkezésre a dózis-válasz elemzéshez.
The time for the progression of developing germ cells from spermatogonial stem cells to mature sperm reaching the vas deferens/cauda epididymisis ~ 49 days for the mouse (36) and ~70 days for the rat (34) (35).
Bár az eredmények biológiai jelentőségének kell az elsődleges szempontnak lennie, megfelelő statisztikai módszereket is lehet alkalmazni a vizsgálati eredmények értékelése során (4) (14) (15) (25) (26).
Following a 28-day exposure with a subsequent three day sampling period, accumulated sperm collected from the vas deferens/cauda epididymis (7)(8) will represent a population of cells exposed during approximately the latter half of spermatogenesis, which includes the meiotic and postmeiotic period, but not the spermatogonial or stem cell period.
Az alkalmazott statisztikai teszteknek az állatot kell kísérleti egységnek tekinteniük.
In order to adequately sample cells in the vas deferens/cauda epididymis that were spermatogonial stem cells during the exposure period, an additional sampling time at a minimum of 7 weeks (mice) or 10 weeks (rat), after the end of treatment is required.
E vizsgálatban nem mutagén anyagnak tekintendő az a vizsgált vegyi anyag, amely esetében a hozzá tartozó eredmények egyetlen szövetben sem elégítik ki a fenti kritériumokat.
Cells extruded from seminiferous tubules after a 28 + 3 day regimen comprise a mixed population enriched for all stages of developing germ cells (7) (8).
A negatív eredmény biológiai jelentőségéhez a szövet expozícióját igazolni kell.
Sampling these cells for gene mutation detection does not provide as precise an assessment of the stages at which germ cell mutations are induced as can be obtained from sampling spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis (since there is a range of germ cell types sampled from the tubules, and there will be some somatic cells contaminating this cell population).
A DNS-szekvenálási elemzések esetében számos statisztikai megközelítés áll rendelkezésre az eredmények értelmezéséhez (1) (5) (9) (19).
However, sampling cells from seminiferous tubules in addition to spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis following only a 28 + 3 day sampling regimen would provide some coverage of cells exposed across the majority of phases of germ cell development, and may be useful for detecting some germ cell mutagens.
A válaszreakció biológiai jelentőségének értékelésekor támpontot adhat annak mérlegelése, hogy a megfigyelt értékek a kontrollokkal kapott régebbi eredmények tartományába esnek-e (32).
General clinical observations should be made at least once a day, preferably at the same time(s) each day and considering the peak period of anticipated effects after dosing.
azonosítási adatok és CAS-szám, ha ismert,
The health condition of the animals should be recorded.
forrás és rendelkezésre állás esetén a tételszám,
Measurements of food consumption should be made at least weekly.
a vizsgált vegyi anyag stabilitása, ha ismert.
If the test chemical is administered via the drinking water, water consumption should be measured at each change of water and at least weekly.
Oldószer/vivőanyag:
Animals exhibiting non-lethal indicators of excess toxicity should be euthanatised prior to completion of the test period (23).
a vivőanyag kiválasztásának indoklása,
Tissue Collection
a vizsgált vegyi anyag oldhatósága és stabilitása az oldószerben/vivőanyagban, ha ismert,
The rationale for tissue collection should be defined clearly.
a takarmány-, ivóvíz- vagy inhalációs készítmények előkészítése,
Since it is possible to study mutation induction in virtually any tissue, the selection of tissues to be collected should be based upon the reason for conducting the study and any existing mutagenicity, carcinogenicity or toxicity data for the chemical under investigation.
a készítmények analitikai vizsgálatai (pl. stabilitás, homogenitás, névleges koncentráció).
Important factors for consideration should include the route of administration (based on likely human exposure route(s)), the predicted tissue distribution, and the possible mechanism of action.
a felhasznált faj/törzs és megválasztásuk indokolása,
In the absence of any background information, several somatic tissues as may be of interest should be collected.
az állatok száma, kora és neme,
These should represent rapidly proliferating, slowly proliferating and site of contact tissues.
az állatok származása, tartási körülmények, takarmány stb.,
In addition, spermatozoa from the vas deferens/cauda epididymis and developing germ cells from the seminiferous tubules (as described in paragraphs 32 and 33) should be collected and stored in case future analysis of germ cell mutagenicity is required.
az állatok tömege a vizsgálat kezdetekor, az egyes csoportok esetében a testtömegtartományt, átlagértéket és a szórást is ideértve.
Organ weights should be obtained, and for larger organs, the same area should be collected from all animals.
a pozitív és negatív (vivőanyag/oldószer) kontrollok adatai,
Storage of Tissues and DNA
a dózisbehatároló vizsgálat adatai,
Tissues (or tissue homogenates) should be stored at or below – 70 °C and be used for DNA isolation within 5 years.
a vizsgált vegyi anyag előkészítésére vonatkozó részletek,
Isolated DNA, stored refrigerated at 4 °C in appropriate buffer, should be used optimally for mutation analysis within 1 year.
a beadási mód indoklása,
Selection of Tissues for Mutant Analysis
az állati toxicitás mérésére szolgáló módszerek, beleértve adott esetben a kórszövettani vagy hematológiai elemzéseket, illetve az állatok megfigyelésének és a testtömeg mérésének gyakorisága,
The choice of tissues should be based on considerations such as:
az annak ellenőrzésére szolgáló módszerek, hogy a vizsgált vegyi anyag elérte-e a célszövetet vagy az általános keringési rendszert, ha negatív eredményt kaptak,
the route of administration or site of first contact (e.g. glandular stomach if administration is oral, lung if administration is through inhalation, or skin if topical application has been used);
tényleges dózis (mg/testtömeg kg/nap) a vizsgált vegyi anyagnak a takarmányban/ivóvízben meglévő koncentrációjából (ppm) és a fogyasztásból számítva, ha alkalmazható,
and 2) pharmacokinetic parameters observed in general toxicity studies, which indicate tissue disposition, retention or accumulation, or target organs for toxicity.
a táplálék és a víz minőségére vonatkozó adatok,
If studies are conducted to follow up carcinogenicity studies, target tissues for carcinogenicity should be considered.
a kezelési és mintavételi menetrendek részletes leírása és kiválasztásuk indoklása,
The choice of tissues for analysis should maximise the detection of chemicals that are direct-acting in vitro mutagens, rapidly metabolised, highly reactive or poorly absorbed, or those for which the target tissue is determined by route of administration (6).
az eutanázia módja,
In the absence of background information and taking into consideration the site of contact due to route of administration, the liver and at least one rapidly dividing tissue (e.g. glandular stomach, bone marrow) should be evaluated for mutagenicity.
a szövetek izolálására és tartósítására használt eljárások,